(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ゴナドトロピンならびに安定化有効量のクエン酸またはその塩およびメチオニンを含むことを特徴とする液体ゴナドトロピン含有組成物。
【請求項２】
クエン酸ナトリウムの濃度が25〜100 mMであり、メチオニンの濃度が 1〜10 mM であることを特徴とする請求項１に記載の液体ゴナドトロピン含有組成物。
【請求項３】
組成物がさらに非還元糖を含むことを特徴とする請求項１又は２に記載の液体ゴナドトロピン含有組成物。
【請求項４】
非還元糖が25〜300 mMの濃度のショ糖であることを特徴とする請求項３に記載の液体ゴナドトロピン含有組成物。
【請求項５】
組成物がさらに非イオン界面活性剤を含むことを特徴とする請求項１〜４のいずれか一項に記載の液体ゴナドトロピン含有組成物。
【請求項６】
組成物のｐＨが 6.5〜7.2 であることを特徴とする請求項１〜５のいずれか一項に記載の液体ゴナドトロピン含有組成物。
【請求項７】
ゴナドトロピンが黄体形成ホルモン（ＬＨ）、ヒト絨毛性ゴナドトロピン（ｈＣＧ）、卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）またはそれらの誘導体およびそれらの混合物から選択されることを特徴とする請求項１〜６のいずれか一項に記載の液体ゴナドトロピン含有組成物。
【請求項８】
ゴナドトロピンが組換えヒトＦＳＨ（ｒｅｃＦＳＨ）または組換えＦＳＨ−ＣＴＰであることを特徴とする請求項７に記載の液体ゴナドトロピン含有組成物。
【請求項９】
少なくとも１種のゴナドトロピンを、安定化有効量のクエン酸またはその塩、および安定化有効量のメチオニンと水溶液中で混合し；得られた溶液のｐＨを 6.5〜7.2 の値に調整することを含む、液体ゴナドトロピン組成物の製造法。
【請求項１０】
少なくとも１種のゴナドトロピンを、25〜100 mMの濃度になる量のクエン酸ナトリウムおよび 1〜10 mM の濃度になる量のメチオニンと水溶液中で混合し；該混合物に25〜300 mMの濃度になる量のショ糖を溶解し、非イオン界面活性剤を該混合物に溶解し；得られた溶液のｐＨを 6.5〜7.2 の値に調整することを含む、液体ゴナドトロピン組成物の製造法。
【請求項１１】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の滅菌液体ゴナドトロピン含有組成物を含むカートリッジ。
【請求項１２】
請求項１１に記載のカートリッジを含む、投与装置。
【請求項１３】
不妊症治療用の直接注入可能な液体薬物を製造するための請求項１〜８のいずれか一項に記載のゴナドトロピン含有組成物の使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、液体ゴナドトロピン含有組成物(formulation)、該組成物の製造法、該組成物を含むカートリッジ、および該カートリッジを含む投与装置に関する。
【０００２】
【従来の技術】
ゴナドトロピンは、構造的に関連する糖タンパク質ホルモンのファミリーを形成する。典型的なメンバーとしては、絨毛性ゴナドトロピン（ＣＧ）、卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ；ホリトロピン）、黄体形成ホルモン（ＬＨ；ルトロピン）および甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ；チロトロピン）が挙げられる。ＦＳＨ、ＬＨおよびＴＳＨは、ほとんどの脊椎動物に存在し、下垂体によって合成され、分泌される。ＣＧは、これまで、ヒトを含む霊長類およびウマでのみ見いだされており、胎盤組織により合成される。ＦＳＨおよびＬＨは、雌での卵胞成熟および黄体形成ならびに雄での精巣成熟および精子形成に必須の下垂体ホルモンである。中でも、精製したＦＳＦの単独またはＦＳＨおよびＬＨの混合物を含む半精製したヒト閉経期ゴナドトロピンとの併用投与は、ＩＶＦ（体外受精）法などの人工生殖技術(assisted reproduction technique)に必要な卵胞発生の刺激に使用されている。尿から部分的に精製したヒトＦＳＨも、慢性無排卵症候群または黄体機能不全の無排卵性女性の卵胞成熟を刺激するために臨床的に使用される。雄の場合は、ＦＳＨおよびＬＨの併用が、雄の不妊症に関する種々の症状に使用されている。
【０００３】
近年、ゴナドトロピンの非常に純粋な調製が、組換えＤＮＡ技術の使用によって可能になってきた（例えば、Boime ら、Seminars in Reproductive Endocrinology 10, 45-50, 1992: 「組換えヒトＦＳＨ、ＬＨおよびＣＧの哺乳類細胞における発現」を参照）。組換えゴナドトロピンは、品質が一定である、すなわち、再現性ある生化学的・生物学的性質を有する。ゲノムＤＮＡクローンおよびｃＤＮＡクローンが全サブユニットに対して作製されており、それらの一次構造が解明されている。さらに、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞がヒトゴナドトロピンサブユニット遺伝子でトランスフェクションされ、これらの細胞は、完全な二量体を分泌し得ることが示されている（例えば、Keene ら (1989), J. Biol. Chem. 264, 4769-4775; Van Wezenbeek ら (1990), in From Clone to Clinic (Crommelin D.J.A.および Schellekens H. 編), 245-251）。例えば組換えＦＳＨの生化学的・生物学的特徴は、天然のＦＳＨとほとんど同じであることが示されている(Mannaertsら (1991), Endocrinology, 129, 2623-2630) 。さらに、組換えＦＳＨを使用して制御された卵巣過排卵後に妊娠が得られた(Germondら (1992), Lancet, 339, 1170; Devroey ら (1992), Lancet, 339, 1170-1171)。
【０００４】
ゴナドトロピンは、構造的には、２個の異なるサブユニットであるαおよびβが非共有結合によって結合して構成されるヘテロ二量体である。一つの種の中では、α−サブユニットは、ゴナドトロピンファミリーの各メンバーに対して本質的に同一である。また、種から種へかなり保存される。β−サブユニットは、各メンバー、すなわちＣＧ、ＦＳＨ、ＴＳＨおよびＬＨに対して異なるが、構造的にはかなり相同性が認められる。さらに、β−サブユニットも種から種へかなり保存される。ヒトでは、α−サブユニットは、92個のアミノ酸残基から成るが、β−サブユニットは、各メンバーに対して大きさが異なり、ｈＦＳＨでは111 残基、ｈＬＨでは121 残基、ｈＴＳＨでは118 残基およびｈＣＧでは145 残基である(Combarnous, Y. (1992), Endocrine Reviews, 13, 670-691; Lustbader, J.W. ら (1993), Endocrine Reviews, 14, 291-311)。ｈＣＧのβ−サブユニットは、Ｃ−末端に約34個のアミノ酸残基（本明細書では、カルボキシ末端タンパク質（ＣＴＰ）と言う）をさらに含む点で、他のβ−サブユニットよりもかなり大きい。
【０００５】
比較的純粋なゴナドトロピン製剤が市販されている。例えば、約１：１の比でＦＳＨおよびＬＨ活性を有する、天然のヒト閉経期ゴナドトロピン（ｈＭＧ）を含む組成物、および天然のヒト絨毛性ゴナドトロピン（ｈＣＧ）は、例えば、各々、Humegon（登録商標）およびPregnyl（登録商標）の商標で凍結乾燥製剤として N.V. Organon Oss （オランダ）から市販されている。凍結乾燥した組換えヒトＦＳＨ（ recＦＳＨ）製剤は、例えば、同じ会社からPuregon（登録商標）の商標で市販されている。組換えＦＳＨは、同様に、排卵誘発および制御された卵巣過刺激に対して使用される。
【０００６】
タンパク質の水性組成物中における安定性は、一般に、医薬産業における問題点である。同様に、ゴナドトロピンの水溶液の安定性は、長期間の保存には不十分である。これは、組換えＤＮＡ法を使用して調製した非常に純粋なゴナドトロピンを比較的希薄な溶液として含む製剤に対して特にそうである。従って、通常は、それらの製剤は、凍結乾燥後に得られる乾燥形態で保存する。安定化したゴナドトロピンを含む凍結乾燥した医薬組成物は、欧州特許 No.448,146 (Akzo N.V.) に開示されている。これらの製剤は、有機カルボン酸、特にクエン酸、および所望によりショ糖などの非還元糖を含む。安定剤としてショ糖を含む、別の固体ゴナドトロピン含有医薬組成物は、国際特許出願 WO93/11788 (Applied Research Systems ARS Holding N.V.) に開示されている。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
これらの凍結乾燥した製剤は、十分な貯蔵期間を保証するのに十分安定であるが、それらは、投与の前に再形成が必要であるという欠点がある。従って、患者は、必ず、使用する前に乾燥した糖タンパク質を溶媒に入れて再形成しなければならず、これは不利であり、患者にとって不便である。さらに、ゴナドトロピンの凍結乾燥製剤とともに溶媒を提供しなければならない。
【０００８】
決まった時間にゴナドトロピンの注入を必要とする患者、例えば排卵誘発のために recＦＳＨの投与を毎日受ける患者の場合、ゴナドトロピン組成物は、取扱い、投薬および注入が容易であることが重要である。凍結乾燥したゴナドトロピン製剤の再形成は、慎重さと注意深さが要求され、できるだけ避けるべきである。これらの糖タンパク質が、安定な溶液として製造され、患者に分配されて、患者が再形成することなく直接薬物を注入することができるならば、ゴナドトロピンの使用は容易になるであろう。さらに、凍結乾燥過程はコストも時間もかかる工程であり、ゴナドトロピン組成物の製造の際にこの工程が回避され得るならば、有利である。
【０００９】
従って、適切な貯蔵期間を保証するのに十分な安定性を有する、すぐに使用できる注入製剤が必要とされている。
【００１０】
WO 93/22335 (COR Therapeutics Inc.) には、実質的に純粋なポリペプチドの貯蔵安定液体組成物が開示されており、それは、ポリペプチドをｐＨ 5.0〜5.5 のクエン酸緩衝液に溶解することにより製造される。非還元糖、好ましくはマンニトールで安定化した、ｐＨ７のリン酸緩衝液における水溶液のゴナドトロピン組換え−ｈＣＧを含む液体組成物が、WO 96/29095 (Applied Research Systems ARS Holding N.V.) に開示されている。ゴナドトロピンおよびポリカルボン酸塩を含む溶液は、欧州特許 448,146 (Akzo N.V.)から公知である。これらの、例えばクエン酸を含む溶液は、安定化した凍結乾燥ゴナドトロピン組成物の製造に対して記載されている。該溶液自体を長期（室温で数カ月）にわたって保存すると、ゴナドトロピンは十分に安定ではない。
【００１１】
【課題を解決しようとする手段】
本発明は、ゴナドトロピンならびに安定化する量のポリカルボン酸またはその塩およびチオエーテル化合物を含む液体ゴナドトロピン含有組成物に関する。本発明のゴナドトロピン含有組成物は、チオエーテル化合物を含まない組成物と比較して、長期保存に対する安定性が改善されている。
【００１２】
本明細書で使用するポリカルボン酸とは、２個以上のカルボン酸部分を有する有機酸を意味する。典型的なポリカルボン酸は、クエン酸、イソクエン酸、酒石酸、アスパラギン酸、グルタミン酸またはこれらの酸の混合物である。薬剤的に許容され得る塩も使用でき、特に、ナトリウム、カリウムおよびカルシウムなどのアルカリまたはアルカリ土類金属の塩が挙げられる。好ましい塩は、ナトリウム塩である。
【００１３】
チオエーテル化合物とは、式Ｒ1−Ｓ−Ｒ2−（式中、Ｒ1は低級アルキルであり、Ｒ2は低級アルキレンである。）を有するアルキルチオアルキル基を含む化合物を意味する。低級アルキルとは、炭素数１〜６の分岐した、またはしていないアルキル基を意味し、ヘキシル、ペンチル、ブチル、ｔ−ブチル、プロピル、イソプロピル、エチルまたはメチルなどである。好ましい低級アルキル基はメチルである。低級アルキレンとは、炭素数１〜６のアルキレン基を意味し、１，６−ヘキサンジイル、１，５−ペンタンジイル、１，４−ブタンジイル、１，３−プロパンジイル、プロピリデン、１，２−エタンジイル、エチリデンまたはメチレンなどである。好ましくは、チオエーテル化合物は、アミノ酸のメチオニン、ホモ−およびノル−メチオニン（Ｄ−もしくはＬ−エナンチオマーまたはラセミ混合物）などにおける、α−アミノ酸の側鎖に対応するアルキルチオアルキル官能基を有する。好ましいチオエーテル化合物は、アミノ酸のメチオニン（Ｒ1はメチルであり、Ｒ2は１，２−エタンジイルである。）である。
【００１４】
本発明の液体ゴナドトロピン含有組成物は、ゴナドトロピンを特定の安定剤との混合物として溶液中に含む。当該組成物は、溶液中のゴナドトロピンを所望の温度で所望の時間安定化させるのに十分な量のポリカルボン酸またはその塩およびチオエーテル化合物を含む。
【００１５】
【発明の実施の形態】
本発明の組成物の定義で使用するゴナドトロピンまたはゴナドトロピン誘導体は、上記したタンパク質、例えば、卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）、ヒト絨毛性ゴナドトロピン（ｈＣＧ）、黄体形成ホルモン（（ＬＨ）、または誘導体、または類似体、およびそれらの混合物であり、他のタンパク質成分を含んでいてもいなくてもよい。
【００１６】
ゴナドトロピンは、天然原、例えば、ヒトの尿から単離することができ、あるいは、ゴナドトロピンは、（生）合成法、例えば組換えＤＮＡ技術によって合成することもできる。組換えゴナドトロピンは、例えば、Keene ら (1989) 「チャイニーズハムスター卵巣細胞における生物学的に活性なヒトホリトロピンの発現」、The Journal of Biological Chemistry, 264, 4769-4775 の記載、または Reddyら、国際特許出願 WO 86/04589 (Applied Research Systems ARS Holding N.V.)の記載に従って合成できる。
【００１７】
本明細書で使用するゴナドトロピン、例えば卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）は、該化合物類似体ならびにその組換え、天然、脱グリコシル化、未グリコシル化、修飾グリコシル化、および他の形態を含む。一例として、欧州特許 0,461,200 (Washington University)に記載されている、タンパク質のカルボキシ末端がカルボキシ末端ペプチド（ＣＴＰ）によって延長され、その配列がヒト絨毛性ゴナドトロピンのβサブユニットから誘導される（ＣＴＰ配列は、ｈＣＧβサブユニットの 112〜118 から145 のアミノ酸残基またはその変形を表す。）ゴナドトロピンの修飾形態は、ゴナドトロピンの定義に含まれる。そのような修飾形態の例としては、組換えＦＳＨ−ＣＴＰおよび組換えＬＨ−ＣＴＰが挙げられる。最も好ましいゴナドトロピンは、組換えＤＮＡ技術によって産生される、単独またはＬＨもしくはｈＣＧとの混合物のＦＳＨ（recＦＳＨ）である。天然源から精製されるＦＳＨは、一般には、部分的に精製されるにすぎない。（タンパク質）不純物は、それを幾分か安定化させるために作用していると考えられる。しかし、rec ＦＳＨでは、不純物は存在しないので、タンパク質に対して比較的低い濃度で存在するＦＳＨは、急速な分解をより受けやすい。
【００１８】
本明細書で使用する「安定化」は、相対的用語である。安定剤または安定化化合物を含む液体ゴナドトロピン含有組成物の安定化とは、ゴナドトロピンの活性の低下を安定剤により防止し、または遅らせる能力を意味する。例えば、製剤が、安定化化合物（安定剤）の添加により、安定剤を含まない製剤と比較して、設定温度での分解に要する時間が長くなり（例えば、１週間の代わりに２週間）、その in vivoおよび／または in vitro活性のいくらかを放出する場合、「安定化された」とみなされる。ゴナドトロピン活性は、個々のゴナドトロピンに関する公知方法により測定できる。活性の可能な一つの目安は、時間とともに生成されるα−およびβ−サブユニットの（不活性）オリゴマーまたは変異（例えば、酸化）モノマーの量の測定によって得られる。サンプル中のオリゴマーの生成は、ＨＰＳＥＣ（高性能サイズ排除クロマトグラフィー）によって測定できる。例えば recＦＳＨの残留活性を測定する他の方法としては、米国特許再発行 No. 32,696 (Schuursら）に記載の酵素免疫活性アッセイ（ＥＩＡ）；ＦＳＨＥＩＡの商標で市販されている BioMerieux (Marcy l'Etoile 69260 Charbonnieres-les-Bains, France)製のＦＳＨ用キット；および Mannaertsら、「ゴナドトロピンに対する in vitro バイオアッセイの応用」 Neuroendocrinology of Reproduction, pp. 49-58 (Elsevier Science Publishers BV, Amsterdam, NL 1987) に記載のＦＳＨ、ＦＳＨ−ＣＴＰおよびＬＨに対する in vitro バイオアッセイが挙げられる。
【００１９】
本発明の好ましい態様では、液体ゴナドトロピン含有組成物は、安定剤として、十分な量のクエン酸塩、好ましくはクエン酸ナトリウム、および十分な量のチオエーテル化合物のメチオニン（ＤＬラセミ混合物）を含む。
【００２０】
クエン酸ナトリウムおよびメチオニンが本発明に係る液体組成物において選択された安定剤である場合、クエン酸ナトリウムの適切な濃度は25〜100 mMであり、メチオニンの適切な濃度は 1〜10 mM である。
【００２１】
すでに安定剤としてポリカルボン酸またはその塩およびチオエーテル化合物を含む組成物に、ショ糖またはトレハロースなどの非還元二糖類を混入すると、液体組成物におけるゴナドトロピンの安定性がさらに増すことが見いだされた。本発明に係る組成物では、ショ糖が好ましい二糖類である。ショ糖は、約25〜300 mMの濃度が適する量である。特に好ましいのは、組換えＦＳＨまたはその誘導体、安定剤としてのクエン酸ナトリウムおよびメチオニン、ならびにさらにショ糖を含む液体ゴナドトロピン含有組成物である。 recＦＳＨ−ＣＴＰの recＦＳＨが液体組成物において安定化させたいゴナドトロピンである場合、ショ糖の好ましい量は、50 mg/mlである。
【００２２】
本発明の組成物は、好ましくは、１種以上の非イオン界面活性剤も含む。これらの界面活性剤は吸着防止剤として作用し、組成物を保存している容器の壁にタンパク質が吸着する結果としてのゴナドトロピンの損失が防止される。吸着防止剤の本発明の組成物への添加は、組成物が組換えゴナドトロピンを低濃度で含む場合に特に必要である。好ましい非イオン界面活性剤は、Polysorbate 20, NF (Atlas Chemical Comapny製のTween 20) 、Polysorbate 80, NF (Atlas Chemical Comapny製のTween 80) 、Brij 35 (ICI Pharmaceuticals製) および Pluronic F123 (BASF製) である。Polysorbate 20, NF (Tween 20) が特に好ましい。Polysorbate は、好ましくは、"National Formulary", p.1763および p.1967, Official from 1 Jan. 1990 (第22版、US Pharmacopeial Convention, Inc. 1989) として発行されるUSP/NF XXII の仕様に合う Polysorbateを意味するものとして理解される。
【００２３】
吸着防止剤は、タンパク質の容器壁、または入れ物の壁、または処理中に使用されるガラス器具への吸着が減少するような量で存在させる。例えば、使用する最終的な組成物に約 0.1〜0.2 mg/ml の濃度を形成するのに十分な Polysorbate 20 の量が好ましい。
【００２４】
本発明の液体組成物のｐＨは６〜８、好ましくは 6.5〜7.2 である。最も好ましくは、約 7.0のｐＨを有する溶液である。本発明の液体組成物は、これらのｐＨ範囲で最も安定であることが見いだされた。
【００２５】
本発明の安定な組成物は、選択したゴナドトロピンを水溶液中で、タンパク質を安定化するのに十分な量のポリカルボン酸または塩安定剤およびチオエーテル化合物安定剤と混合し、所望により、その後、非還元二糖類および／または非イオン界面活性剤を混合物に溶解することにより調製できる。得られる溶液のｐＨは、次いで、 6.5〜7.2 の値に調整し、溶液を（滅菌）濾過する。本明細書で使用する水溶液は、主として、しかし必ずしも唯一の溶媒ではないが、水、好ましくは非経口投与に適する品質の水（注射用の水、ＵＳＰ）を含む溶液である。エタノールなどの医薬的に許容され得る水混和性溶媒を共溶媒として少量存在させてもよい。
【００２６】
本発明の好ましい態様では、液体ゴナドトロピン組成物の製造法を提供する。該方法は、少なくとも１種のゴナドトロピンを25〜100 mMの濃度となる量のクエン酸ナトリウムおよび 1〜10 mM の濃度となる量のメチオニンと水溶液中で混合し；所望により25〜300 mMの濃度となる量のショ糖を該混合物に溶解し、所望により非イオン界面活性剤、好ましくは Polysorbate 20 を該混合物に溶解し；得られた溶液のｐＨを 6.5〜7.2 の値に調整することを含み、それから溶液は滅菌濾過することができる。非経口用組成物の一般的な製造法は、特に、組成物が無菌であることに対して採用すべき規準に関しては、当技術分野で公知であり、例えば、Gennaro ら、Remington's Pharmaceutical Sciences （第18版、Mack Publishing Company, 1990,  第８部 "Pharmaceutical Preparations and their Manufacture"、特に "Parenteral Preparations" pp 1545-1569 の章を参照。）に記載されている。
【００２７】
使用するどのゴナドトロピンも、好ましくは、非経口（例えば、皮下、筋肉内または静脈内）投与に対して治療的に有用な濃度のタンパク質を形成するのに十分な量で組成物に存在させる。
【００２８】
ゴナドトロピンの有用な用量は、開業医には公知であり、１回の投薬に含まれる量は、一般には、治療する病状および個々の患者に依存する。例えば、ＦＳＨの場合、有用な用量は、約25〜1500国際単位 (IU) 、特に50〜225 の範囲である。約75 IU が治療量であると考えられる。実例として、ＨＣＧは、10,000国際単位と高い量および15国際単位と低い量が投与されている。ＬＨは、20〜225 国際単位の範囲の注射が使用されている。本発明の液体組成物におけるゴナドトロピンの濃度は、ゴナドトロピンの溶解度および所与の投薬の治療量に依存する。
【００２９】
本発明の好ましい液体組成物は、ゴナドトロピンとして組換えタンパク質 recＦＳＨまたはその recＦＳＨ−ＣＴＰ誘導体を含む組成物である。 recＦＳＨの適する濃度は、約20〜2000 IU/mlの範囲であり、これは大体、 2〜200 μg/mlの濃度に相当する（ＦＳＨ比活性が 10,000 IU/mg タンパク質である製剤の場合）。
【００３０】
一つの好ましい態様では、ＦＳＨおよびＬＨまたはＦＳＨおよびＨＣＧの組み合わせで共に溶解して、選択した両方のゴナドトロピンを治療量で有する組成物を形成する。
【００３１】
本発明の液体ゴナドトロピン含有組成物は、ゴナドトロピンの生物学的活性および物理的安定性を保持しながら、種々の温度で長期間、液体状態で保存することができる。好ましくは、保存温度は30℃以下、凍結温度以上である。好ましい保存温度範囲は、約２℃〜８℃である。
【００３２】
本発明の液体ゴナドトロピン含有組成物は、所望により、凍結乾燥することができる。
【００３３】
本発明のさらに別の面では、本発明に係る滅菌液体組成物を含むカートリッジが提供される。本明細書で使用するカートリッジは、アンプル、バイアル、ビンまたはバッグなどの密閉容器を意味する。
【００３４】
カートリッジは、１治療用量以上の量のゴナドトロピンに相当する量の液体ゴナドトロピン組成物を含み得る。
【００３５】
本発明のさらに別の面では、本発明に係る滅菌液体組成物を含むカートリッジを含む投与装置が提供される。好ましい投与装置は、ペン型注射器である。それは、注射したい組成物の量を容易に調整するための手段を含む。そのようなペン型注射器は自体公知であり、例えば、インスリン注射系として周知の B-Dペン（Becton Dickinson and Companyの商標）などが挙げられる。
【００３６】
上記したように、本発明によって利用できる液体ゴナドトロピン組成物は、当技術分野の状況とは全く反対に、直接、すなわち、患者が使用前に乾燥物質を再形成する必要なく注入できる製剤が提供される点で、問題を解決するものである。これに関して、本発明はまた、不妊症を治療するための直接注入可能な液体薬物の製造に対するゴナドトロピンの使用にも関する。
【００３７】
そのような製剤は、存在していないし、現在の複雑な注射製剤から自明でもないので、該使用は、当技術分野に鑑みて予想されたものではなく、患者の治療において明らかに利点を有する。
【００３８】
直接注入可能な液体薬物は、バイアルまたはアンプルなどの容器、すなわち、直接吸収して注入装置に吸引することができる型の容器に入れておくことができる。また、カートリッジを受け入れるために適合させた注入装置にそのまま置くことができるカートリッジに入れることもでき、その例は、上記で挙げた型のペン型注射器である。なお、液体薬物を複数回使用のためにカートリッジの形態にすることができることは本発明の別の利点である。適切な目盛りのついた注射器を使用すると、患者は、必要な量を毎回簡単に注入することができる。通常はインスリン用に使用される上記した B-Dペン型注射器は、注射したい量を調整するための便利な系を有しており、液体ゴナドトロピン含有薬物に合わせた目盛りを比較的容易に付けることができる。
【００３９】
上記に関して、本発明はまた、ゴナドトロピンの投与による不妊症の治療法にも存し、該投与は、液体ゴナドトロピンを、ゴナドトロピンの安定な液体組成物を含むカートリッジを詰めた、ペン型注射器などの投与装置から直接注入することにより行われる。
【００４０】
【実施例】
本発明を、下記実施例を参照してさらに説明する。
【００４１】
実施例１
組換えＦＳＨを含む組成物
表Ｉに示すＡ〜Ｊの組成を有する組換えＦＳＨを含む液体組成物を調製した。各組成物の 0.5 mlのアリコートを密閉した 2 mlのバイアルに入れて、各々、８℃、30℃および40℃で２ヵ月間まで保存した。次いで、保存した recＦＳＨサンプルの in vitro対生物活性を、ヒトＦＳＨ受容体が発現される細胞の刺激の度合いを調べることにより測定した。活性は、ＦＳＨのＦＳＨ受容体での結合により放出される環式ＡＭＰの量として測定する。表IIに、指示した温度で指示した時間保存したＦＳＨサンプルの対生物活性を、同様のサンプルのゼロ時間での活性に対する割合（％）として表す。表IIのデータは、チオエーテル化合物であるメチオニンを含まない recＦＳＨ組成物の方が、特に室温以上の温度で延長された時間保存した後は、メチオニンを含む recＦＳＨ組成物より安定性が小さいことを示している。
【００４２】
実施例２
組換えＦＳＨ−ＣＴＰを含む組成物
表III に示すＡ〜Ｊの組成を有する組換えＦＳＨ−ＣＴＰを含む液体組成物を調製した。各組成物の0.5 mlのアリコートを密閉した2 mlのバイアルに入れて、各々、８℃、20℃、30℃および40℃で２ヵ月間まで保存した。in vitro対生物活性を実施例１に記載したように測定し、表IVに示す。
【００４３】
表IVのデータは、チオエーテル化合物であるメチオニンを含まない recＦＳＨ−ＣＴＰ組成物の方が、特に室温以上で保存した後は、メチオニンを含む recＦＳＨ−ＣＴＰ組成物より安定性が小さいことを示している。
【００４４】
【表１】
0004353549.tif 000002
【００４５】
【表２】
0004353549.tif 000003
【００４６】
【表３】
0004353549.tif 000004
【００４７】
【表４】
0004353549.tif 000005