(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の式（１）：
【化１】
0004361228.tif 000007
（式中、Ｒは水素原子又はアルキル基を表わす。）で表わされる化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する、糖尿病患者に対する体重増加抑制剤。
【請求項２】
前記アルキル基が炭素原子数１〜６のアルキル基である請求項１の体重増加抑制剤。
【請求項３】
前記薬学的に許容される塩がアルカリ金属塩又はアンモニウム塩である請求項１の体重増加抑制剤。
【請求項４】
前記アルカリ金属塩がナトリウム塩又はカリウム塩である請求項３の体重増加抑制剤。
【請求項５】
前記体重増加抑制剤が、Ｉ型糖尿病及びII型糖尿病の患者に対して有効である請求項１ないし４のいずれか１項の体重増加抑制剤。
【請求項６】
経口投与用の請求項１ないし５のいずれか１項の体重増加抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、血糖値降下剤に関するものであり、詳細には、フェルラ酸、その薬学的に許容される塩およびフェルラ酸エステルからなる群から選択されるフェルラ酸又はその誘導体を有効成分として含有する血糖値降下剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
近年の食生活により、糖尿病患者は増加し続けている。わが国では、約７００万人の糖尿病患者がいるといわれている。
【０００３】
糖尿病はインスリン依存型（Ｉ型）と非インスリン依存型（II型）に分類される。Ｉ型糖尿病患者に対してはインスリン投与が行われている。しかしながら、インスリン投与は、注射のような非経口投与しかできないことが患者や看護者の負担になっている。また、II型糖尿病患者に対しては運動療法や食事制限が行われているのが現状である。これらに対して、スルホニウムウレア等の薬剤が用いられているが、未だに根本的な薬物療法は確立されていない。
【０００４】
高血糖値が持続すると視力障害、血管等の障害、腎不全等各種の疾病を引き起こすことから、有効な薬物が望まれている。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、上記の点に鑑みてなされたものであり、血糖値降下剤、特にＩ型糖尿病及びII型糖尿病の両者に対して有効な血糖値降下剤を提供することを課題とする。
また、本発明は、安全性が高い血糖値降下剤を提供することも課題とする。
さらに、本発明は、経口投与が可能な血糖値降下剤を提供することも課題とする。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究した結果、フェルラ酸及びその誘導体が血糖値降下作用を有し、しかもこれらがＩ型糖尿病及びII型糖尿病の両者に対して有効であること、さらに、経口投与し得ることを見出し、本発明を完成した。即ち、本発明は、次の血糖値降下剤を提供する。
【０００７】
（ｉ）  下記の式（１）：
【化２】
0004361228.tif 000002
（式中、Ｒは水素原子又はアルキル基を表わす。）で表わされる化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する血糖値降下剤。
【０００８】
（ii）  前記アルキル基が炭素原子数１〜６のアルキル基である上記（ｉ）の血糖値降下剤。
【０００９】
（iii）  前記薬学的に許容される塩がアルカリ金属塩又はアンモニウム塩である上記（ｉ）の血糖値降下剤。
【００１０】
（iv）  前記アルカリ金属塩がナトリウム塩又はカリウム塩である上記（iii）の血糖値降下剤。
【００１１】
（ｖ）  前記血糖値降下剤が、Ｉ型糖尿病及びII型糖尿病の治療及び／又は予防に対して有効である上記（ｉ）ないし（iv）のいずれか１の血糖値降下剤。
【００１２】
（vi）  経口投与用の上記（ｉ）ないし（ｖ）のいずれか１の血糖値降下剤。
【００１３】
【発明の実施の形態】
以下、本発明の血糖値降下剤について詳細に説明する。
本発明の血糖値降下剤の有効成分である上記式（１）において、Ｒは、水素原子又はアルキル基を表わす。Ｒが水素原子であるものは、フェルラ酸ともよばれる。
【００１４】
Ｒがアルキル基の場合のアルキル基には、直鎖、分岐および環状のアルキル基が含まれる。アルキル基の炭素原子数は本発明の血糖値降下剤を患者に投与した際に血糖値降下作用を奏すれば特に制限はない。本発明の血糖値降下剤を経口投与したときの胃酸等によるエステル結合の加水分解や毒性等を考慮すると、アルキル基の炭素原子数は、１〜６が好ましい。これらのアルキル基の具体例には、メチル、エチル、炭素数３のアルキル基（ｎ−プロピル、iso−プロピル及びシクロプロピル）、炭素数４のアルキル基（ｎ−ブチル、iso−ブチル、sec−ブチル、tert−ブチル及びシクロブチル）、炭素数５のアルキル基（ｎ−アミル、iso−アミル、sec−アミル、活性アミル（２−メチルブチル）、tert−アミル及びシクロペンチル）、炭素数６のアルキル基（例えば、ｎ−ヘキシル、１−メチルペンチル、２−メチルペンチル、シクロヘキシル基等）等が含まれる。
【００１５】
式（１）において、−ＣＯＯＲ基が結合する炭素原子から伸びる二重結合における立体配置は、trans体でもcis体でもよいが、米糠等に含まれる天然物由来のフェルラ酸は、trans体である。
【００１６】
本発明の血糖値降下剤の有効成分には、上記式（１）により表わされる化合物の薬学的に許容される塩も含まれる。そのような塩の一例には、式（１）のＲがアルカリ金属塩（例えば、ナトリウム及びカリウム）、アンモニウム塩であるものが含まれるがこれらに限定されない。
【００１７】
本発明の式（１）の化合物それ自体は既知の化合物であり、文献等に記載の方法に従い製造することができる。例えば、フェルラ酸は、本出願の共願人である築野食品工業（株）の出願に係る特公平７−７８０３２号（特許第２０９５０８８号）に記載の方法に従い製造することができる。即ち、米糠からサラダ油を製造する際に排出される黒色で粘性の高い米糠ピッチから容易にかつ安価に製造することができる。式（１）のＲがアルキル基であるものは、例えば、本出願の共願人である築野食品工業（株）により出願された特開平９−４０６１３号公報に記載の方法に準じてエステル化することにより、容易に製造することができる。
【００１８】
本発明の血糖値降下剤は、経口投与及び非経口投与することができる。
【００１９】
本発明の血糖値降下剤は、式（１）の化合物をそのまま投与することもできるが、各投与経路に応じて、適切な薬学的に許容される賦形剤又は希釈剤等と組み合わせることにより薬学的製剤にすることもできる。
【００２０】
経口投与に適した剤型としては、固体、半固体、液体又は気体等の状態のものが含まれ、具体的には、錠剤、カプセル剤、粉末剤、顆粒剤、溶液剤、懸濁剤、シロップ剤、エリキシル剤等を挙げることができるが、これらに限定されるものではない。
【００２１】
本発明の血糖値降下剤を錠剤、カプセル剤、粉末剤、顆粒剤、溶液剤、懸濁剤等に製剤化するためには、それ自体は既知の方法を用いて、本発明の式（１）の化合物をバインダー、錠剤崩壊剤、潤滑剤等と混合し、さらに、必要に応じて、希釈剤、緩衝剤、浸潤剤、保存剤、フレーバー剤等と混合することにより行うことができる。一例を挙げると、上記バインダーには、結晶セルロース、セルロース誘導体、コーンスターチ、ゼラチン等が、錠剤崩壊剤には、コーンスターチ、馬鈴薯デンプン、カルボキシメチルセルロースナトリウム等が、潤滑剤には、タルク、ステアリン酸マグネシウム等が含まれ、さらには、ラクトース、マンニトール等のような従来用いられている添加剤等を用いることができる。
【００２２】
また、本発明の血糖値降下剤は、液体、微細粉末の形態のものを、気体又は液体の噴霧剤と共に、又は必要に応じて浸潤性付与剤のような既知の助剤と共に、エアロゾル容器、ネブライザーのような非加圧容器に充填し、エアロゾル剤又は吸入剤の形態で投与することもできる。噴霧剤としては、ジクロロフルオロメタン、プロパン、窒素等の加圧ガスを用いることができる。
【００２３】
本発明の血糖値降下剤を非経口投与する場合、例えば、直腸投与および注射等により投与することができる。
【００２４】
直腸投与の場合には、例えば、坐薬として投与することができる。坐薬は、それ自体は既知の方法により、本発明の式（１）の化合物を、体温で融解するが室温では固化しているカカオバター、カーボンワックス、ポリエチレングリコールのような賦形剤と混合し、成形することにより製剤化することができる。
【００２５】
注射による投与としては、皮下、皮内、静脈内、筋肉内等に投与することができる。これらの注射用製剤は、それ自体は既知の方法により、本発明の式（１）の化合物を、植物性油、合成樹脂酸グリセリド、高級脂肪酸のエステル、プロピレングリコールのような水性又は非水性の溶媒中に溶解、懸濁又は乳化し、さらに、所望により、可溶化剤、浸透圧調節剤、乳化剤、安定剤および保存料のような従来用いられている添加剤と共に製剤化することができる。
【００２６】
本発明の血糖値降下剤を溶液、懸濁液、シロップ、エリキシル等の形態にするためには、注射用滅菌水や規定生理食塩水、エタノール等のアルコールのような薬学的に許容される溶媒を用いることができる。
【００２７】
本発明の血糖値降下剤は、単一の式（１）の化合物を用いることも、複数種併用することもできる。また、本発明の血糖値降下剤は、本発明の血糖値降下剤の薬効に悪影響を及ぼさない範囲で薬学的に許容される他の活性を有する化合物と併用して薬学的製剤とすることもできる。本発明の血糖値降下剤と併用し得る化合物の一例には、イノシトール、フィチン、γ−オリザノールなど米糠由来の化合物が含まれる。
【００２８】
本発明の血糖値降下剤は、投与形態、投与経路、対象とする疾病の程度や段階等に応じて適宜設定、調節することができる。一例を挙げると、経口投与する場合は、有効成分として、１００〜６００ｍｇ／ｋｇ体重／日、注射剤として投与する場合は、有効成分として、５０〜３００ｍｇ／ｋｇ体重／日、直腸投与する場合は、有効成分として、５０〜５００ｍｇ／ｋｇ体重／日に設定することができるが、これらに限定されるものではない。
【００２９】
本発明の血糖値降下剤は、血糖値上昇を伴ういずれもの疾病に有効である。最も代表的な疾病には、糖尿病（Ｉ型及びII型）が含まれるが、これらに限定されるものではない。
本発明の血糖値降下剤は、血糖値の上昇を防ぐ作用及び上昇してしまった血糖値を降下させる作用を有する。
また、本発明の式（１）の化合物は、体重増加抑制作用も有する。
【００３０】
【実施例】
以下、本発明の実施例を説明するが、本発明は、これらの例に限定されるものではない。
【００３１】
＜実施例１＞ストレプトゾシン（ＳＴＺ）誘発糖尿病マウスに対するフェルラ酸投与、投与後の影響
５週齢ＩＣＲ雄性マウスにストレプトゾシン（ＳＴＺ）を腹腔内に注射によって投与し、糖尿病を誘発させた。具体的には、５週齢ＩＣＲマウスにストレプトゾシン（ＳＴＺ）を１５０ｍｇ／ｋｇ腹腔内に注射によって投与した。
【００３２】
フェルラ酸（ＦＡ）の投与量はマウスに対して６００ｍｇ／ｋｇとし、ＳＴＺ投与の１時間前のマウス（４匹）に投与する方法（前投与）と、ＳＴＺ投与により血糖値が上昇し、その値が５００ｍｇ／ｄｌに達したマウス（３匹）に対して、ＳＴＺ投与後１６日目及び２３日目に投与（後投与）する方法の二種類の投与方法について検討した。フェルラ酸は、エチルアルコールに溶解した溶液の状態で、腹腔内に注射により投与した。対照群のマウス（４匹）には、ＳＴＺ、フェルラ酸投与の代わりにフェルラ酸溶液と同量の生理食塩水を投与した。
【００３３】
血糖値の測定は、松下寿電子工業株式会社製の小型血糖値測定機、グルテストＥ（以下の実施例において同じ）を使用して行った。
得られた結果を図１のグラフに示す。
【００３４】
図１のグラフ結果から明らかなように、ＳＴＺ投与により約２週間で血糖値は５００ｍｇ／ｄｌに急上昇し、２週間以降も実験終了の５週間まで除々に上昇を続けた。
【００３５】
フェルラ酸前投与群では、ＳＴＺ投与群と同様に血糖値の上昇が見られたが、２９日以降から血糖値の低下が認められた。
フェルラ酸後投与群では、フェルラ酸を投与すると直ちに血糖値の低下が認められた。
【００３６】
＜実施例２＞ストレプトゾシン（ＳＴＺ）誘発糖尿病マウスに対するフェルラ酸エステル及び塩投与の影響
使用動物
ＩＣＲ系マウス  ５週齢  雄性  １群  ５匹（日本クレアより購入した）
実験方法
３日間の予備飼育を終えたマウスに、ＳＴＺ（１５０ｍｇ／ｋｇ（０．１Ｍ  クエン酸緩衝液（ｐＨ  ４．５）溶液として））を投与した。
【００３７】
２週間後、血糖値５００ｍｇ／ｄｌ以上になったマウスに、精製水（対照群）、試験化合物（４５０ｍｇ／ｋｇ（９５％エタノール水溶液として））、フェルラ酸ナトリウム（４５０ｍｇ／ｋｇ（蒸留水溶液として））を腹腔内投与し、次の日より血糖値の測定を行った。
【００３８】
投与した試験化合物は、フェルラ酸エチル、フェルラ酸ヘキシルおよびフェルラ酸ナトリウムである。
【００３９】
得られた結果を以下の表１に示す。
【００４０】
【表１】
0004361228.tif 000003
【００４１】
上記表１の結果から明らかなように、フェルラ酸エチル、フェルラ酸ヘキシル及びフェルラ酸ナトリウムの何れを用いた場合でも、血糖降下が確認された。
【００４２】
＜実施例３＞ＳＴＺ誘発糖尿病マウスに対するフェルラ酸、ビタミンＥ初期連続投与の影響
実験条件は、次の通りである。
実験動物：５週齢ＩＣＲ雄性マウス
（１）ＳＴＺ投与群：１５０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内に１回注射（エタノール溶液）
（２）フェルラ酸投与群：６００ｍｇ／ｋｇ、３００ｍｇ／ｋｇ、エタノール溶液、腹腔内に１回注射
フェルラ酸の投与方法：ＳＴＺ投与の１時間前、５日目、７日目
（３）ビタミンＥ投与群：２０ｍｇ／ｋｇ、エタノール溶液、腹腔内に１回注射
ビタミンＥの投与方法：ＳＴＺ投与の１時間前、５日目、７日目
（４）対照群：フェルラ酸又はビタミンＥの代わりに等量の生理食塩水をＳＴＺ投与の１時間前、５日目、７日目に投与
血糖値測定：グルテストＥを使用
結果を図２のグラフに示す。
図２のグラフから明らかなように、フェルラ酸３００ｍｇ投与群、６００ｍｇ投与群とも血糖値の上昇は認められなかった。ビタミンＥ投与群では、５日目で２００ｍｇ／ｄｌに上昇し、さらに９日目以降は急激に上昇し、実験終了の２７日目には、４００ｍｇ／ｄｌを超える高血糖状態に至った。
【００４３】
（実施例４）肥満型糖尿病マウスの血糖値に対するフェルラ酸投与の影響
遺伝的に肥満になりやすいマウスでは、体重増加に伴って血糖値の上昇がみられ、いわゆるII型の糖尿病の発症が報告されている。
【００４４】
そこで、ｋｋＡｙ／Ｔａｊｃ、５週齢の雄性マウスにゾンデを用いてフェルラ酸（３００ｍｇ／ｋｇ）を胃中に投与した。フェルラ酸の投与は、飼育開始時の１回のみとした。飼育中の体重増加、血糖値の変化、飼育終了時に尿糖の検出、飼育終了後、摘出した肝臓と腎臓の過酸化脂質量を測定した。
【００４５】
実験条件
実験動物：ｋｋＡｙ／ＴａＪｃ雄性マウス  ５週齢
（１）フェルラ酸投与群（ｎ＝４、４匹中２匹は飼育途中に死亡）
３００ｍｇ／ｋｇ（エタノール溶液）をゾンデを胃に挿入し１回投与
（２）ビタミンＥ投与群（ｎ＝４、４匹中２匹は飼育中に死亡）
（３）対照群（ｎ＝５）、フェルラ酸溶液と等量の生理食塩水を投与
血糖値測定：グルテストエースを使用
過酸化脂質量測定：ＴＢＡＲＳを大川らの方法（ANALYTICAL BIOCHEMISTRY 95, 351-358(1978)）に準じて測定
得られた結果を以下の表２〜４並びに図３及び４に示す。
【表２】
0004361228.tif 000004
【００４６】
上記表２及び図３の結果から明らかなように、対照群に比べフェルラ酸投与群の体重増加量は、少ない。トコフェロール投与群よりもフェルラ酸投与群の方が、肥満抑制的である。餌は自由摂取であるから、摂取量が少なかったのか、食欲を抑える何らかの因子があったのか不明であるが、II型糖尿病においては、体重の増加を抑えることが最も重要であることから、この結果には興味が持たれる。
【００４７】
【表３】
0004361228.tif 000005
【００４８】
上記表３及び図４の結果から、フェルラ酸投与後直ちに血糖値の低下が認められ、さらに血糖値上昇抑制作用も明らかである。
ビタミンＥ投与群においても血糖値の上昇は、抑制されているが、フェルラ酸投与群ほどではない。
対照群においては、体重増加に伴って血糖値の上昇が認められた。
【００４９】
フェルラ酸の血中グルコース制御に関与する作用機序は明確には判明していない。しかしながら、飼育開始前日に１回、胃中に投与したが、胃から小腸に送られ腸内細菌による代謝を受け、あるいは、直ちに吸収され肝臓において糖の代謝に関与したことが推測される。
【００５０】
詳細には、肝臓において貯蔵されていたグリコーゲンが代謝され、グルコースが血中に分泌される際、グルコース−６−リン酸（Ｇ−６−Ｐ）が最終生成物となる。肝臓において、Ｇ−６−Ｐからグルコースが排出される工程は、グルコース−６−ホスファターゼが触媒する。グルコース−６−ホスファターゼは、グルコース−６−ホスファターゼトランスロカーゼ（Ｇ−６−Ｐ−Ｔ１）、グルコース−６−ホスファターゼ及びホスフェートトランスロカーゼから構成される酵素複合体である。これらの酵素のうち、Ｇ−６−Ｐ−Ｔ１は高い選択性を有するため、肝臓のグルコース分泌を制御するための適切な標的である。
【００５１】
クロロゲン酸は、Ｇ−６−Ｐ−Ｔ１の弱い阻害剤であることが報告されている（Journal of Medicinal Chemistry 40, 137-145(1997)）。合成クロロゲン酸誘導体は、グルコース−６−リン酸トランスロカーゼをｍＭ又はμＭの濃度範囲で阻害することが報告されている（Journal of Medicinal Chemistry 40, 137-145(1997)、ARCHIVES OF BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICA, 373, 418-428(2000)）。
【００５２】
クロロゲン酸の代謝には、２つの重要な画分が存在する。第１は、吸収されたクロロゲン酸及びその吸収された結腸代謝物に生体内トランスホーメーション酵素が作用する肝臓のような組織である。第２は、微生物が未吸収のクロロゲン酸を分解する結腸である。クロロゲン酸の摂取後のヒト尿を検査すると、最も重要な代謝物は、カフェ酸、ｍ−ヒドロキシ馬尿酸、ｍ−クマル酸クルクロニド、及びジヒドロフェルラ酸であることが分かる。クロロゲン酸の代謝の第１段階は、カフェ酸及びキナ酸への加水分解であり、両生成物がさらに代謝されるといわれている。ヒトの尿中代謝物を測定することにより算定されるカフェ酸の吸収は、２０〜３０％であった。カフェ酸は、１０以上の代謝生成物を発生させる。ヒトのカフェ酸の代謝トランスホーメーションのスキームは、Ｂｏｏｔｈにより提案されている（J. Biol. Chem., 229, 51-59(1957)）。フェルラ酸は、ヒトのカフェ酸の代謝経路における中心的物質である。
【００５３】
このような状況に鑑み、フェルラ酸およびその誘導体は、肝臓における糖代謝経路に作用することにより、血中グルコースの制御における重要な役割を果たしていると考えている。
【００５４】
【表４】
0004361228.tif 000006
【００５５】
上記表４の結果から、腎臓における酸化的ストレスの進行が著しいことがうかがえる。糖尿病の合併症として腎障害が恐れられているが、過血糖の酸化によるものであることが推測されるデータである。ビタミンＥよりもフェルラ酸の方が、抗酸化活性が高いことも明らかになった。
【００５６】
（実施例５）
以下の処方で本発明の血糖値降下剤を錠剤として製造した。
フェルラ酸（trans）               ４  ｍｇ
イノシトール                  １５２  ｍｇ
フィチン                      １５２  ｍｇ
γ−オリザノール                １２  ｍｇ
麦芽糖                          ８０  ｍｇ
【００５７】
【発明の効果】
以上説明したように、本発明の血糖値降下剤は、Ｉ型糖尿病のモデルであるストレプトゾトシン（ＳＴＺ）マウスに対して血糖値を降下させる作用および血糖値の上昇を抑制する作用を有する。
【００５８】
また、本発明の血糖値降下剤は、II型糖尿病のモデルであるｋｋＡｙ／ＴａＪｃマウスに対しても血糖値上昇を抑制する作用を有する。
また、本発明の血糖値降下剤は、Ｉ型及びII型いずれの糖尿病モデルマウスに対しても経口投与することが可能である。
【００５９】
さらに、本発明の血糖値降下剤の有効成分は、天然物であり、食品である米糠中に含有される成分またはそれから誘導される物質である。したがって、本発明の血糖値降下剤は、安全性の高いことが予測される。また、フェルラ酸は、従来は廃棄されることもあった米糠から製造することができるので、本発明の血糖値降下剤のコストを抑えることも可能である。
【図面の簡単な説明】
【図１】ストレプトゾシン（ＳＴＺ）誘発糖尿病マウスに対する本発明の血糖値降下剤の影響を示すグラフ。
【図２】ストレプトゾシン（ＳＴＺ）誘発糖尿病マウスに対する本発明の血糖値降下剤の影響を示すグラフ。
【図３】ｋｋＡｙ／ＴａＪｃマウスの体重に対する本発明の血糖値降下剤の影響を示すグラフ。
【図４】ｋｋＡｙ／ＴａＪｃマウスの血糖値に対する本発明の血糖値降下剤の影響を示すグラフ。
【図１】
0004361228.tif 000008
【図２】
0004361228.tif 000009
【図３】
0004361228.tif 000010
【図４】
0004361228.tif 000011