(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
水性媒体の存在下で穏やかに攪拌することにより自己乳化する経口投与用の薬剤組成物であって、(i) トコトリエノール、トコフェロール、ビタミンA、D、K及びβ‐カロチンからなる群より選ばれた少なくとも一種の脂溶性薬剤、(ii) パームオレイン及び大豆油からなる群より選ばれた少なくとも一種のオイル、及び(iii) PEG-8カプリル酸／カプリン酸グリセリドと、ポリオキシエチレン20ソルビタン・モノオレートの組み合わせである界面活性剤を含み、前記ポリオキシエチレン20ソルビタン・モノオレートに対する前記PEG-8カプリル酸／カプリン酸グリセリドの比率は9：1〜7：3であることを特徴とする薬剤組成物。
【請求項２】
請求項１に記載の薬剤組成物において、前記界面活性剤と、前記脂溶性薬剤及び前記オイルの混合物との質量比が１：５であることを特徴とする薬剤組成物。
【請求項３】
請求項１又は２に記載の薬剤組成物において、前記脂溶性薬剤はトコトリエノールであることを特徴とする薬剤組成物。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれかに記載の薬剤組成物において、前記脂溶性薬剤はトコトリエノール、前記オイルはパームオレインであることを特徴とする薬剤組成物。
【請求項５】
請求項１〜３のいずれかに記載の薬剤組成物において、前記オイルが大豆油であることを特徴とする薬剤組成物。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれかに記載の薬剤組成物において、前記薬剤組成物は、水性媒体中で自己乳化性であることを特徴とする薬剤組成物。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれかに記載の薬剤組成物において、前記薬剤組成物は、生物学的利用性及び脂溶性薬剤の吸収性が向上していることを特徴とする薬剤組成物。
【請求項８】
請求項１に記載の薬用組成物の調合方法において、(a) 前記脂溶性薬剤を前記オイルと混合し、(b) 工程(a)で得た混合物を前記界面活性剤に添加することを特徴とする薬剤組成物の調合方法。
【請求項９】
請求項８に記載の薬剤組成物の調合方法において、前記脂溶性薬剤はトコトリエノールであることを特徴とする薬剤組成物の調合方法。
【請求項１０】
請求項４に記載の薬剤組成物において、経口投与用薬剤の調合に使用することを特徴とする薬剤組成物。
【請求項１１】
請求項10に記載の薬剤組成物において、請求項７に記載の調合方法により調合されたことを特徴とする薬剤組成物。
【請求項１２】
請求項10に記載の薬剤組成物において、前記経口投与用薬剤は、ソフトゼラチンカプセルに充填されていることを特徴とする薬剤組成物。
【請求項１３】
請求項12に記載の薬剤組成物において、請求項８に記載の調合方法によって調合されたことを特徴とする薬剤組成物。
【請求項１４】
請求項１〜６及び請求項10〜13のいずれかに記載の薬剤組成物からなることを特徴とする脂溶性薬剤用経口デリバリ薬剤組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、水性媒体の存在下で、わずかに攪拌することにより自己乳化する脂溶性薬剤（トコトリエノール、トコフェロール、ビタミンＡ、ビタミンＤ及びβ‐カロチンを含む）の新規薬剤組成物に関する。
【０００２】
本発明は、特に脂溶性薬剤の新たな投薬形態、すなわち内容物が流出し、胃腸内の液体と混ざると直ちに乳化液となるソフトゼラチンカプセル入りの薬剤組成物に関する。乳化液は、脂溶性薬剤の吸収を促進することが知られている。すなわち、この投薬形態によってより効率的かつより安定した薬剤の吸収が可能となる。本発明は、上記薬剤組成物が胃腸内で自己乳化可能であることを発見するとともに、この薬剤組成物を適切なオイル及び界面活性剤と混合することによって達成されたものである。
【０００３】
【従来の技術】
トコトリエノールやトコフェロールのような脂溶性薬剤は、トリグリセリドやコレステロールのような、他の無極性リピドと同じ経路で吸収される（KaydenとTraber, 1993年, J. Lipid Res., 34:343-358）。肝臓は、吸収を促進するために、他の脂溶解性化合物と共にミセルに取り入れられたトコフェロールを乳化するための胆汁を生成する。従って、脂肪分解酵素リパーゼと胆汁の生成を促進する飲食物の脂肪は、ビタミンＥの吸収に不可欠である。しかしながら、飲食物の脂肪が十分な胆汁の分泌を促進するのに不充分な場合、あるいは胆汁の分泌が胆管閉塞等の病理学上の症状に影響を受ける場合には、脂溶性薬剤の吸収が不規則になり、低下する。また絶食中または胃が空の場合には、脂溶性薬剤の吸収は不規則になり、低下する傾向があることが知られている。
【０００４】
また乳化液状だと、脂溶性薬剤が吸収されやすいことが知られているが、従来の乳化液は、量が嵩張りかつ安定性の問題から保存期間が短いだけでなく摂取も困難であったため、望ましい服用形態ではなかった。近年、高い生物学的利用性(bioavailability)、血漿形質再現精度の向上、検体間および検体内の変動の減少等、多くの利点をもたらす自己乳化薬剤デリバリシステム（SEDDS）への関心が非常に高まっている。SEDDSは、１種またはそれ以上の適切な非イオン系界面活性剤とオイルを混合することにより、水の不存在下でも形成される。このデリバリシステムには、オイル／界面活性剤混合物中で適度に溶解する薬剤を配合することができる。水による希釈又は生体内へ経口投与すると、この薬剤は穏やかに攪拌されて、微細な水中油滴型のエマルジョンを生成する。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
従って本発明の目的は、わずかな攪拌により水性媒体中で自己乳化性である脂溶性薬剤のための新規薬剤組成物を提供することである。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
上記目的は、水性媒体の存在下で、わずかな攪拌により自己乳化する以下のような経口投薬用組成物を提供することにより達成される。
(i) 脂溶性薬剤；
(ii) 適切なオイル；および、
(iii) 適切な界面活性剤
【０００７】
すなわち、本発明は、高い生物学的利用性／吸収性を有する薬剤組成物とするために、以下の３つの条件；
(i) 吸収性を高めるために、パームオレインと大豆油を、トコトリエノールのような脂溶性薬剤の媒体として使用すること、
(ii) 自己乳化を促進することによってトコトリエノールの吸収率をさらに向上させるために、脂溶性薬剤／オイル混合物中に、PEG-8カプリル酸／カプリン酸グリセリド（Labrasol（登録商標）（カプリロカプロイル・マクロゴルグリセリド））とTween 80（登録商標）（ポリオキシエチレン20ソルビタン・モノオレート）を適切に組み合わせて添加すること、
(iii) 脂溶性薬剤の吸収性を最も向上させるために、界面活性剤（Labrasol（登録商標）（カプリロカプロイル・マクロゴルグリセリド）とTween 80（登録商標）（ポリオキシエチレン20ソルビタン・モノオレート））と、脂溶性薬剤／オイル混合物を適切に組み合わせること
が重要であるという発見に基づく。
【０００８】
【発明の実施の形態】
現在の研究において、中連鎖トリグリセリド混合物中のトコトリエノールの生物学的利用性と比較して、パームオレイン混合物中のδ‐、γ‐およびα‐トコトリエノールの生物学的利用性は、ラットでそれぞれおよそ2.7倍、2.8倍及び1.9倍であり、大豆油混合物中では、それぞれおよそ2.2倍、2.1倍及び1.6倍であることが分かっている。これは、トコトリエノールのリンパ液への吸収を促進するパームオレインおよび大豆油の長連鎖脂肪酸に起因する可能性が高い。多くの研究（Sieber等, 1974年, Xenobiotica 4, 265-284およびPalin等, 1984年, J. Pharm. Pharmacol. 36, 641-643）は、長連鎖脂肪酸（＞C14）（パーム油および大豆油中に存在）が、リンパ組織を通じた脂溶性薬剤の吸収を増進させる傾向があるという結果を示している。
【０００９】
また、研究の結果パームオレイン又は大豆油を、適切な界面活性剤混合物すなわちLabrasol（登録商標）（カプリロカプロイル・マクロゴルグリセリド）及びTween 80（登録商標）（ポリオキシエチレン20ソルビタン・モノオレート）と適切に混交することによって得られる本発明の薬剤組成物を発見した。Tween 80（登録商標）（ポリオキシエチレン20ソルビタン・モノオレート）に対するLabrasol（登録商標）（カプリロカプロイル・マクロゴルグリセリド）の比率は、9：1〜7：3である。
【００１０】
自己乳化薬剤デリバリシステムは、穏やかな攪拌（胃／小腸の動き等）によって液体中で容易に自己乳化される。従って、本発明の薬剤組成物は、量が嵩張り、摂取しにくい従来の乳化液のような調合をする必要がない。その代わりに薬剤組成物をソフトゼラチンカプセルに充填する。胃の中で、カプセルの外壁は分解・崩壊し、乳化液形成準備がなされた内容物を流出する。乳化液の表面積をより広くすることによって、トコトリエノールのような脂溶性薬剤の吸収性が向上する。
【００１１】
また、界面活性剤の混合物と良く混ぜ合わせたパームオレイン又は大豆油から成る自己乳化系は、トコトリエノール、トコフェロール、ビタミンA、ビタミンDおよびβ‐カロチン等の脂溶性薬剤と共に摂取された場合に、水中で自己乳化性であることを特徴とする。
【００１２】
健康な12名のボランティアに対して本発明の薬剤組成物を用いたところ、δ‐、γ‐およびα‐トコトリエノールの吸収を、従来の通常のソフトゼラチンカプセル入り薬剤のおよそ２〜３倍に高めることができた。またオイルと脂溶性薬剤の混合物に対する界面活性剤の比率が、薬剤の吸収性を向上させるために非常に重要であることも実証された。
【００１３】
例えば、界面活性剤対オイルと脂溶性薬剤の混合物の比率が１対１であると吸収性が低下し、一方界面活性剤対脂溶性薬剤とオイルの混合物の比率が１対５であると自己乳化が良好なだけでなく任意に薬剤の吸収も高まった。
【００１４】
本発明は、トコトリエノールをパームオレイン−界面活性剤系に配合して自己乳化系としたトコトリエノールの薬剤組成物を提供する。本発明の薬剤組成物をソフトゼラチンカプセルに充填し、胃の中で内容物が流出すると、乳化液を生成し吸収性が向上する。
【００１５】
本発明のトコトリエノールの薬剤組成物は、従来の薬剤と比較すると生物学的利用性が高まっている。
【００１６】
【実施例】
以下、本発明の好ましい例を具体的に示すが、これにはさまざまな変更・調節・改良をなすことが可能であると解釈されるべきである。従ってこの発明は、発明の詳細に限定されず、細部についての変更は同分野の技術者にとって明らかであると解されるべきである。
【００１７】
フィトトコトリエノール／トコフェロール錯体を少なくとも50.0％含む、トコミン（登録商標）50％のトコトリエノールは、Carotech（マレーシア国イポー市）から購入した。
【００１８】
研究の第１段階として、異なるオイルがトコトリエノールの吸収性に対して及ぼす影響を、３種類のオイル媒体を用いて比較調査した。用いたオイル媒体は、以下の通りである。
（i）パームオレインとしてパルミチン酸46.5％、オレイン酸37.1％、およびリノール酸9.9％のトリグリセリド、
（ii）大豆油としてリノール酸50〜57％、リノレン酸5〜10％、オレイン酸17〜26％、パルミチン酸9〜13％およびステアリン酸3〜6％のグリセリド；および、
（iii）トリカプリリンとして全体の95％以上が飽和脂肪酸、オクチル酸（カプリル酸）、およびデカン酸（カプリン酸）のトリグリセリドからなるもの。
【００１９】
まずトコミン（登録商標）50％のうち10％を、これら３種類のオイル媒体に溶解した。また実験を３期間、３手順に分け、これらを組み合わせて９匹のラットに対し均等の服用量（10mg）を投与した。９匹のラットを、無作為に３匹ずつ３つのグループに分け、下記のスケジュールに従って薬剤投与を行った。
【表１】
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【００２０】
実験用ラットは吸収実験の開始前12時間およびその後12時間絶食させた。ただし、実験中いつでも自由に水を飲めるようにしておいた。檻に入れ、投与後１、２、３、４、６、８および12時間経過した後に、尾の静脈から約0.5mlの血液サンプルを、血液凝固を防ぐためへパリンを加えた管に採取した。次に、この血液サンプルを、12800Gで10分間遠心分離機にかけ、得られた0.2〜0.3mlの血漿部分標本を新しいエッペンドルフ管に移した。分析までの間、すべての血漿サンプルは直ちに−20℃で冷凍した。
【００２１】
1999年Yap等（Journal of Chromatography B, 735:279-283）により報告された手法をやや改良した手法を使用して、高性能液体クロマトグラフィー（HPLC）により、血漿中のα‐、δ‐およびγ‐トコトリエノールを測定した。
【００２２】
3種類のオイルベース、すなわちパームオレイン、大豆油および中連鎖トリグリセリド中のトコミン（登録商標）50％とともに得られた血漿中のα‐、δ‐およびγ‐トコトリエノールの平均濃度の経時変化を、図１、図２および図３に示す。これらの図から明らかなように、パームオレイン中のトコミン（登録商標）50％から得られたα‐、δ‐およびγ‐トコトリエノールの吸収率が最も高く、次いで、大豆油中のトコミン（登録商標）50％、そして、トリカプリリン中のトコミン（登録商標）50％は最も低い吸収率を示した。異なるオイル媒体に対するα‐、δ‐およびγ‐トコトリエノールの生物学的利用性の差異は、統計上有意であった。
【００２３】
対数変換したAUC0-∞値の割合の90％信頼区間より、トリカプリリンに比べ、パームオレインおよび大豆油中のトコミン（登録商標）50％は高い吸収率を示し、トリカプリリン中のトコミン（登録商標）50％のδ‐トコトリエノール値と比較しておよそ2.7倍の2.2、γ‐トコトリエノール値はおよそ2.8倍の2.1、およびα‐トコトリエノール値はおよそ1.9倍の1.6であった。従ってこの研究の第1段階において、パームオレインおよび／または大豆油をトコトリエノールの媒体とすると、その吸収性を顕著に向上できることが分かった。
【００２４】
研究の第２段階では、自己乳化薬剤デリバリシステム（SEDDS）の形成のために、さまざまな割合の異なる界面活性剤を試した。この段階の研究の狙いは、トコトリエノールを適切な界面活性剤に配合して、自己乳化又は胃／腸の動きのような穏やかな攪拌で容易に乳化液となる薬剤（オイル媒体中のトコトリエノール）とすることである。研究に用いたSEDDSは、以下の系を含むものであった。
(i) Tween 85（登録商標）−中連鎖トリグリセリド（MCT）
(ii) Tween 80（登録商標）−Span 80（登録商標）−パームオレイン
(iii) Labrasol（登録商標）−Tween 80（登録商標）−パームオレイン／大豆油
【００２５】
SEDDSは、水の不存在下で非イオン系界面活性剤、リピド基および脂質溶解性薬剤とオイルとを混合することにより得られる。ここでトコトリエノールは、均一な油溶液を生成するためのものである。この系は、水で希釈したり経口投与する場合、微細な水中油滴型のエマルジョンを生成する。Labrasol（登録商標）（カプリロカプロイル・マクロゴルグリセリド）−Tween 80（登録商標）（ポリオキシエチレン20ソルビタン・モノオレート）−パームオレイン／大豆油が、最適な系であることが、下記の理由により判明した。
(i) 他の２つのシステムと比較して、乳化特性を損なわず、より大量のトコトリエノールを取り入れることができる。
(ii) 研究の第１段階で、中連鎖トリグリセリドからのトコトリエノールの吸収は、パームオレインからのものより少ないことが明らかであるので、Tween 85（登録商標）−中連鎖トリグリセリドは望ましくない。そして、
(iii) Tween 80（登録商標）−Span 80（登録商標）−パームオレインと、Labrasol（登録商標）−Tween 80（登録商標）−パームオレインでは、後者の方が乳化速度が速く、安定性がよい。
【００２６】
本発明における最終的な基本配合は、下記の通りである。
【表２】
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【００２７】
界面活性剤に対するオイルの比率は、最終薬剤組成物の±10％の範囲内であった。オイル対界面活性剤の比率は、溶解化防止のために5対1に保った。界面活性剤の臨界ミセル濃度を超えると、トコトリエノールのミセル性錯化が起こる可能性がある。ミセル中に取り入れられた薬剤の吸収率は、ごく微量であることが知られている。ミセル相中の薬剤は吸収に利用できないため、薬剤の有効濃度は、外見上の濃度より低く、また吸収率の低下も観察されている。(Gibaldi およびFeldman, 1970年, J. Pharm. Sci., 59:579-589)
【００２８】
トコミン（登録商標）50％はパームオレインと、またLabrasol（登録商標）（カプリロカプロイル・マクロゴルグリセリド）はTween 80（登録商標）（ポリオキシエチレン20ソルビタン・モノオレート）と均一になるまで混合する。界面活性剤とオイル合剤の混合物も、同様に混合する。最終混合物は、均一になるまで混合し、ソフトゼラチンカプセルに充填する。
【００２９】
第３段階では、トコトリエノール200mgの投与量で、本発明の薬剤組成物におけるトコトリエノールの生物学的利用性と、従来の薬剤の生物学的利用性について、生体内での比較研究を行った。本発明の薬剤組成物は、上記基本配合と同様の割合のトコトリエノール、パームオレイン、Labrasol（登録商標）（カプリロカプロイル・マクロゴルグリセリド）およびTween 80（登録商標）（ポリオキシエチレン20ソルビタン・モノオレート）により構成した。通常の従来の薬剤は、トコトリエノールと大豆油から構成した。どちらの製品もソフトゼラチンカプセルに入れた。
【００３０】
健康な成年男子のボランティア12名が、書面によるインフォームド・コンセントの後に、標準２期間、２手順を組み合わせた実験に参加した。このボランティアを、無作為に６人ずつ２グループに分け、下記のスケジュールに従って薬剤投与を行った。
【表３】
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【００３１】
第1試験期間において、グループ１の各ボランティアには、従来の薬剤のカプセル（Y）４個を与え、一方、グループ２には、同量のトコトリエノールを含む本発明の薬剤組成物のカプセル（X）４個を与えた。１週間の洗い出し期間後、各ボランティアに、前回とは逆の製品を与えた。製品はすべて１晩絶食したのち、午前中（午前10時）に、240mlの水と共に与えた。食物及び飲物は、服用後最低4時間は控えさせ、水のみを随意与えた。鶏肉と米飯の昼食と夕食を、服用の４時間後と10時間後に提供した。服用直前及び服用後それぞれ１、２、３、４、５、６、７、８、10、12、14、18及び24時間経過した後に、5mlの血液サンプルを、前腕に装着した管から真空容器（抗凝血剤としてナトリウムへパリン入り）に収集した。この血液サンプルを、2000Gで15分間遠心分離機にかけ、血漿を別々のガラス容器に移し、分析までの間冷凍保存した。
【００３２】
研究のためのプロトコルは、マレーシア科学大学薬学部とペナン総合病院合同生物学的利用能学会により承認された。実験に先立って、ボランティアには、薬剤と研究の本質についての情報を提供した。
【００３３】
α−、γ−およびδ−トコトリエノールの血漿中のレベルは、Yap等（1999年, Journal of Chromatography B, 735:279-283）により報告された逆位相高性能液体クロマトグラフィーの手法を使用して分析した。
【００３４】
従来の薬剤と本発明の薬剤組成物を投与した場合の血漿中のδ−、γ−およびα−トコトリエノールの平均濃度の経時変化を、図４、図５および図６に示す。これらの図から明らかなように、３種類のトコトリエノールの平均濃度は全て、本発明の薬剤組成物を投与した場合の方が従来の薬剤を投与した場合より著しく高い。また本発明の薬剤組成物は、従来の薬剤より早く吸収を開始することが明らかになった。さらに従来の薬剤を投与した被験者のうち数人からは、δ−およびγ−トコトリエノールが検出されなかった（δ−トコトリエノールにつき３名およびγ−トコトリエノールにつき１名）。これに対し、本発明の薬剤組成物を投与したすべての被験者からはどちらのトコトリエノールも検出されており、これは本発明の薬剤組成物を用いると吸収性がより向上することを示している。
【００３５】
対数変換したAUC0-∞(p<0.01)における差異は、Cmax (p<0.01)値と同様、２種類の薬剤の全同族化合物に対して、統計上有意であった。
【００３６】
さらに、対数変換したAUC0-∞値の割合の90％信頼区間より、本発明の薬剤組成物（X）の平均δ−、γ−、およびα−トコトリエノール値は、従来の薬剤（Y）のそれぞれ2.6、2.9、および3.0倍であった。パラメータTmaxについては、本発明の薬剤組成物は、従来の薬剤と比べて小さい数値となっている。これは、前者における薬剤の吸収の開始／率がより速いことを示唆している。この２種類の薬剤のTmax値には、統計上有意な差異(p<0.05)があった。
【００３７】
【発明の効果】
上記の研究結果から、本発明の薬剤組成物によって従来の薬剤よりもトコトリエノールの吸収性が著しく向上したと結論付けられる。さらに本発明の薬剤組成物は、より速く吸収を開始し、吸収速度がより大きいことも明らかになった。
【図面の簡単な説明】
【図１】  それぞれ3種類のオイルを投与した場合における血漿中のα‐トコトリエノールの平均濃度の経時変化を示すグラフである。
【図２】  それぞれ3種類のオイルを投与した場合における血漿中のδ‐トコトリエノールの平均濃度の経時変化を示すグラフである。
【図３】  それぞれ3種類のオイルを投与した場合における血漿中のγ‐トコトリエノールの平均濃度の経時変化を示すグラフである。
【図４】  それぞれ従来の薬剤と本発明の薬剤組成物の血漿中のδ−トコトリエノールの平均濃度の経時変化を示すグラフである。
【図５】  それぞれ従来の薬剤と本発明の薬剤組成物の血漿中のγ−トコトリエノールの平均濃度の経時変化を示すグラフである。
【図６】  それぞれ従来の薬剤と本発明の薬剤組成物の血漿中のα−トコトリエノールの平均濃度の経時変化を示すグラフである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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