(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式［I］
0004228398.tif 000007
で表される化合物を有効成分とする神経ペプチドＹ受容体拮抗剤。
【請求項２】
式［I］
0004228398.tif 000008
で表される化合物を有効成分とする神経ペプチドＹが関与する疾患の処置剤。
【請求項３】
式［I］
0004228398.tif 000009
で表される化合物を有効成分とする高血圧、腎臓病、心疾患、血管攣縮、過食症、うつ病、てんかん、痴呆、肥満症、糖尿病、ホルモン異常又は緑内障の処置剤。
【請求項４】
式［I］
0004228398.tif 000010
で表される化合物を有効成分とする過食症、肥満症又は糖尿病の処置剤。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は医薬の分野において有用である。更に詳しくは、本発明の式［I］で表される化合物を有効成分とする薬剤は、神経ペプチドＹ受容体拮抗剤として、各種の循環器系疾患、中枢神経系疾患、代謝系疾患等の処置剤として有用である。
背景技術
神経ペプチドＹ（以下NPYと称す）は36アミノ酸からなるペプチドであり、1982年、立元等によりブタ脳より初めて単離された［ネイチャー（Nature）、296巻、659頁（1982年）］。NPYは中枢神経系及び末梢神経系に広く分布し、神経系における最も多量に存在するペプチドの一つとして、生体において多様な機能を司っている。即ち、NPYは中枢においては食欲促進物質として働くとともに、各種ホルモンの分泌又は神経系の作用を介して基礎代謝量の低下を伴う脂肪蓄積を顕著に促進する。NPYの脳室内連続投与はこれらの作用に基づき、肥満及びインスリン抵抗性を誘発することが知られている。また、遺伝性又は食事性の肥満を呈するげっ歯類において、脳内のNPY濃度が上昇していることが知られているとともに、NPY受容体の発現量の亢進も報告されている。更に、感情の制御や中枢自律神経系の機能等にも関係しているとともに、末梢においては交感神経終末にノルエピネフリンと共存し、交感神経系の緊張性と関係している。［インターナショナル・ジャーナル・オブ・オベシティー（International journal of obesity）、19巻、517頁（1995年）；エンドクリノロジー（Endocrinology）、133巻、1753頁（1993年）；ニュウロペプタイドＹ・アンド・ドラッグ・ディブロップメント（Neuropeptide Y and drug development）、15頁（1997年）；ブレイン・リサーチ（Brain research）、774巻、１頁（1997年）；ザ・バイオロジー・オブ・ニュウロペプタイドＹ（The biology of neuropeptide Y）、315頁（1993年）］。
NPYの機能は中枢又は末梢神経系に存在するNPY受容体と結合することにより発現される。したがって、NPYのNPY受容体との結合を阻害すれば、NPYの作用発現を阻止することができる。その結果、NPYのNPY受容体結合に拮抗する物質はNPYが関与する各種の疾患、例えば高血圧、腎臓病、心疾患、血管攣縮等の循環器系疾患、例えば過食症、うつ病、てんかん、痴呆等の中枢性疾患、例えば肥満症、糖尿病、ホルモン異常等の代謝性疾患又は緑内障等の予防又は治療における有用性が期待できる［トレンド・イン・ファーマコロジカル・サイエンス（Trends in Pharmacological Sciences）、15巻、153頁（1994年）］。
本発明に係る化合物と構造的に関連する化合物は、ヨーロピアン・ジャーナル・オブ・メディシナル・ケミストリー（Eur.J.Med.Chem.）、23巻、２号、111頁（1988年）；ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（J.Organic Chemistry）、31巻、５号、1639頁（1966年）；特開昭49−125364号公報、米国特許3414587号公報、米国特許3454577号公報、米国特許3536757号公報及び米国特許3539590号公報等に開示されている。特に、ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（J.Organic Chemistry）、31巻、５号、1639頁（1966年）には、本発明に係る化合物が具体的に記載されている。
しかしながら、当該化合物のNPY拮抗作用については全く開示も示唆もされていない。
発明の開示
本発明の目的は、NPY拮抗作用を有する新規な薬剤を提供することにある。
本発明者らは、式［I］
0004228398.tif 000002
で表される化合物がNPY拮抗作用を有することを見出し、本発明を完成した。
本発明に係る化合物［I］は、NPY拮抗作用を有するため、NPYが関与する各種の疾患、例えば高血圧、腎臓病、心疾患、血管攣縮等の循環器系疾患、例えば過食症、うつ病、てんかん、痴呆等の中枢性疾患、例えば肥満症、糖尿病、ホルモン異常等の代謝性疾患又は緑内障等の処置剤として有用である。
特に、本発明に係る化合物［I］は、例えば過食症、肥満症、糖尿病等の処置剤として有用である。
本発明は、式［I］で表される化合物を有効成分とする神経ペプチドＹ受容体拮抗剤及び過食症、肥満症又は糖尿病の処置剤に関する。
本発明において、処置剤とは各種疾患に対して治療及び／又は予防の目的で供せられる薬剤を意味する。
式［I］で表される化合物は、光学異性体又は互変異性体が存在するが、本発明に係る化合物はこれら全ての光学異性体及び互変異性体並びにそれらの混合物をも包含する。
当該互変異性体としては、例えば式［I−1］
0004228398.tif 000003
で表される化合物を挙げることができる。
本発明に係る化合物は、例えば前記文献［ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（J.Organic Chemistry）、31巻、５号、1639頁（1966年）参照］記載の方法又は製造例に示す方法により製造することができる。
また、式［I］で表される化合物の光学活性体は、ラセミ化合物を光学活性カラムに通すか、又は、ラセミ化合物に、例えばシンコニジン等の光学活性アミンを加えて塩を形成させ、分別再結晶を行うことにより製造できる。
本発明に係る化合物の医薬としての有用性は、例えば下記の薬理試験例においてNPY拮抗活性を示すことにより証明される。
薬理試験例１（NPY結合阻害試験）
ヒトNPY Y5受容体をコードするcDNA配列［国際特許出願WO96／16542号明細書参照］を、発現ベクターpcDNA3、pRc／RSV（インビトロジェン社製）及びpCI−neo（プロメガ社製）にクローニングした。得られた発現ベクターをカチオン性脂質法［プロシーディング・オブ・ザ・ナショナル・アカデミー・オブ・サイエンス・オブ・ザ・ユナイテッド・ステーツ・オブ・アメリカ（Proceedings of the national academy of sciences of the united states of America）、84巻、7413頁（1987年）参照］を用いて宿主細胞COS−７、CHO及びLM（tk−）（アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション）にトランスフェクトし、NPY Y5受容体発現細胞を得た。
NPY Y5受容体を発現させた細胞から調製した膜標品を被検化合物及び20,000cpmの［125I］ペプタイドYY（アマーシャム社製）とともに、アッセイ緩衝液（10mM 塩化マグネシウム、１mM フェニルメチルスルホニルフルオリド、0.1％バシトラシンを含む25mM HEPES緩衝液、pH7.4）中で25℃、２時間インキュベーションした後、グラスフィルターGF／Cにて濾過した。0.3％BSAを含む50mM Tris緩衝液、pH7.4にて洗浄後ガンマカウンターにてグラスフィルター上の放射活性を求めた。非特異的結合は１μMペプタイドYY存在下で測定し、特異的ペプタイドYY結合に対する被検化合物の50％阻害濃度（IC50値）を求めた［エンドクリノロジー（Endocrinology）、131巻、2090頁（1992年）参照］ところ、その値は27nMであった。
上記に示すとおり、本発明に係る化合物はNPY Y5受容体に対するペプタイドYY（NPYと同族物質）の結合を強力に阻害した。
薬理試験例２（bPPにより誘発される摂食行動に対する拮抗試験）
ペントバルビタール麻酔下（50mg／kg腹腔内単回投与）、雄性SDラット（７−８週令、200−300g）の右側脳室に脳定位固定的に慢性ガイドカニューレ（外径0.8mm、内径0.5mm、長さ10mm）を挿入、歯科用レジンで固定した。ガイドカニューレの先端の位置はbregmaより後方0.9mm、正中線より右に1.2mm、脳表面より深さ1.5mmとし、内針を挿入した際にその先端約２mmがガイドカニューレの先端から出て、側脳室に達するようにした。約１週間の回復期間の後、ウシパンクレアチックポリペプタイド（bPP、５μg／head／10μl）を側脳室内に投与した。被検化合物はbPPを投与する１時間前に経口投与し、bPP投与後２時間の摂餌量を測定した。なお、被検化合物は0.5％メチルセルロース水溶液に懸濁し、またbPPは10mMりん酸緩衝生理食塩水に溶解して投与した。
本発明の化合物はbPP（NPYと同族物質）による摂食量の増加を有意に抑制した。
薬理試験例３（急性毒性試験）
雄性SDラット（10週令、300−400g）に500mg／kgの被検化合物を経口投与し、投与直後、投与５分、30分、１時間、２時間、４時間、６時間、８時間及び24時間後にラットの症状観察を行った。また、24時間後に頸動脈より脱血致死せしめ、開腹し、肉眼的に腹部臓器の異常の有無を観察した。なお、被検化合物は0.5％メチルセルロース水溶液に懸濁して、５ml／kgの用量で投与した。
その結果、被検化合物の投与後24時間までのいずれの時間においても、ラットの一般症状に異常は見られなかった。また、腹部臓器の異常も見られなかった。
以上の結果、本発明に係る化合物はNPYが関与する各種の疾患、例えば高血圧、腎臓病、心疾患、血管攣縮等の循環器系疾患、例えば過食症、うつ病、てんかん、痴呆等の中枢性疾患、例えば肥満症、糖尿病、ホルモン異常等の代謝性疾患又は緑内障等の処置剤、特に例えば過食症、肥満症、糖尿病等の処置剤として有用である。
本発明に係る化合物は、経口又は非経口的に投与することができ、そしてそのような投与に適する形態に製剤化することにより、高血圧、腎臓病、心疾患、血管攣縮等の循環器系疾患、例えば過食症、うつ病、てんかん、痴呆等の中枢性疾患、例えば肥満症、糖尿病、ホルモン異常等の代謝性疾患又は緑内障等の処置剤として供することができる。本発明に係る化合物を臨床的に用いるにあたり、その投与形態に合わせ、薬剤学的に許容される添加剤を加えて各種製剤化の後投与することも可能である。その際の添加剤としては、製剤分野において通常用いられる各種の添加剤が使用可能であり、例えばゼラチン、乳糖、白糖、酸化チタン、デンプン、結晶セルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、トウモロコシデンプン、マイクロクリスタリンワックス、白色ワセリン、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム、無水りん酸カルシウム、クエン酸、クエン酸三ナトリウム、ヒドロキシプロピルセルロース、ソルビトール、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリソルベート、ショ糖脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン、硬化ヒマシ油、ポリビニルピロリドン、ステアリン酸マグネシウム、軽質無水ケイ酸、タルク、植物油、ベンジルアルコール、アラビアゴム、プロピレングリコール、ポリアルキレングリコール、シクロデキストリン又はヒドロキシプロピルシクロデキストリン等が挙げられる。
これらの添加剤との混合物として製剤化される剤形としては、例えば錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤若しくは坐剤等の固形製剤；又は例えばシロップ剤、エリキシル剤若しくは注射剤等の液体製剤等が挙げられ、これらは、製剤分野における通常の方法に従って調製することができる。なお、液体製剤にあっては、用時に水又は他の適当な媒体に溶解又は懸濁させる形であってもよい。また、特に注射剤の場合、必要に応じて生理食塩水又はブドウ糖液に溶解又は懸濁させてもよく、更に緩衝剤や保存剤を添加してもよい。
これらの製剤は、本発明に係る化合物を全薬剤1.0〜100重量％、好ましくは1.0〜60重量％の割合で含有することができる。これらの製剤は、また、治療上有効な他の化合物を含んでいてもよい。
本発明に係る化合物を例えば臨床の場で使用する場合、その投与量及び投与回数は、患者の性別、年齢、体重、症状の程度及び目的とする処置効果の種類と範囲等により異なるが、一般に経口投与の場合、成人１日あたり、0.1〜100mg／kgを１〜数回に分けて、また非経口投与の場合は、0.001〜10mg／kgを１〜数回に分けて投与するのが好ましい。
上記の如く、本発明により、NPYが関与する各種の疾患、例えば高血圧、腎臓病、心疾患、血管攣縮等の循環器系疾患、例えば過食症、うつ病、てんかん、痴呆等の中枢性疾患、例えば肥満症、糖尿病、ホルモン異常等の代謝性疾患又は緑内障等の処置剤、特に例えば過食症、肥満症、糖尿病等の処置剤を提供することができ、また、いうまでもなくこれらを用いる当該疾患の新たな処置方法を提供することもできる。
発明を実施するための最良の形態
実施例及び製造例を挙げて本発明を更に具体的に説明するが、本発明はこれらによって何ら限定されるものではない。
実施例１
式［I］で表される化合物10部、重質酸化マグネシウム15部及び乳糖75部を均一に混合して、350μm以下の粉末状又は細粒状の散剤とする。この散剤をカプセル容器に入れカプセル剤とした。
実施例２
式［I］で表される化合物45部、澱粉15部、乳糖16部、結晶性セルロース21部、ポリビニルアルコール３部及び蒸留水30部を均一に混合した後、破砕造粒して乾燥し、次いで篩別して直径1410〜177μmの大きさの顆粒剤とした。
実施例３
実施例２と同様の方法で顆粒剤を作製した後、この顆粒剤96部に対してステアリン酸カルシウム３部を加えて圧縮成形し直径10mmの錠剤を作製した。
実施例４
実施例２の方法で得られた顆粒剤90部に対して結晶性セルロース10部及びステアリン酸カルシウム３部を加えて圧縮成形し、直径８mmの錠剤とした後、これにシロップゼラチン、沈降性炭酸カルシウム混合懸濁液を加えて糖衣錠を作製した。
実施例５
式［I］で表される化合物0.6部、非イオン系界面活性剤2.4部及び生理的食塩水97部を加温混合してからアンプルに入れ、滅菌を行なって注射剤を作製した。
製造例１
３，３−ジメチル−９−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソ−シクロヘキシル）−１−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロキサンテン（式［I］の化合物）の製造
サリチルアルデヒド1.83gとジメドン4.21gを酢酸22.5ml及び水30mlに懸濁し、100℃にて1.5時間攪拌した。反応混合物を室温まで放冷し、析出した固体をろ過することにより、表題化合物を無色粉末として5.06g（収率92％）得た。
融点210−212℃
1H−NMR（CDCl3）δ：0.99（3H,s）,0.99（3H,s）,1.03（3H,s）,1.12（3H,s）,1.92（1H,d,J＝16.5Hz）,2.00（1H,d,J＝16.5Hz）,2.33（2H,s）,2.37（2H,s）,2.47（1H,d,J＝17.7Hz）,2.60（1H,d,J＝17.7Hz）,4.67（1H,s）,7.00−7.04（3H,m）,7.13−7.19（1H,m）,10.47（1H,brs）.
製造例２
（＋）−及び（−）−３，３−ジメチル−９−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソ−シクロヘキシル）−１−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロキサンテン（式［I］の化合物の（＋）−及び（−）−異性体）の製造
式［I］の化合物のラセミ体100mgをイソプロパノール10mlに溶解し、分取用高速液体クロマトグラフィー用光学活性カラム（CHIRALPAK AD，５cmID×50cmL，粒子径：20μm）に注入した。該カラムをヘキサン／イソプロパノール（９：１）にて溶出（100ml／min）し、溶出液は236nmの紫外線で検出した。比較的初期のフラクションを集め、減圧濃縮することにより式［I］の化合物の（−）−異性体を白色固体として26mg得た。
0004228398.tif 000004
比較的後期のフラクションを集め、減圧濃縮することにより式［I］の化合物の（＋）−異性体を白色固体として19mg得た。
0004228398.tif 000005
製造例３
（Ｓ)−３，３−ジメチル−９−(４，４−ジメチル−２，６−ジオキソ−シクロヘキシル)−１−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロキサンテン(式［I］の化合物の（Ｓ）−異性体）の製造
式［I］の化合物のラセミ体（５g,13.66mmol）とシンコニジン（4.02g,13.66mmol）を350mLのアセトニトリルに懸濁し、加熱攪拌して溶解した。室温まで放冷した後一晩放置し、得られた結晶を濾取した。その一部をクロロホルムと10％クエン酸水溶液の二層に懸濁し、激しく攪拌することにより溶解させた。有機層を分取した後、水層を再びクロロホルムで抽出した。有機層と抽出液をあわせて10％クエン酸水溶液で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を留去することによりアモルファス状の粗生成物を得た。それを熱をかけずに最小量のメタノールに溶解し、冷凍庫に一晩放置して得られた結晶を濾取することにより、式［I］の化合物の（Ｓ）−異性体を結晶性固形物として得た。光学純度99.5％、融点172−174℃、
0004228398.tif 000006
絶対配置はシンコニジン塩のＸ線結晶構造解析により決定した。光学純度はHPLC（CHIRALPAK AD column，ヘキサン／イソプロパノール（９：１））を用いて決定した。
産業上の利用可能性
本発明に係る化合物は、NPY拮抗作用を有するため、NPYが関与する各種の疾患、例えば高血圧、腎臓病、心疾患、血管攣縮等の循環器系疾患、例えば過食症、うつ病、てんかん、痴呆等の中枢性疾患、例えば肥満症、糖尿病、ホルモン異常等の代謝性疾患又は緑内障等の処置剤として有用である。