(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗腫瘍剤の心臓毒性を減少させるのに用いられる治療剤の製造に、エチレンジアミンテトラ酢酸、ジエチレントリアミンペンタ酢酸又は以下の式Ｉのキレート化合物の生理的に許容されるマンガンキレート又はその塩を使用する方法。
【化１】
0004359651.tif 000009
式Ｉにおいて、
各Ｒ1は独立して、水素又は−ＣＨ2ＣＯＲ5を示し；
Ｒ5はヒドロキシ、ヒドロキシル化されていてもよいアルコキシ、アミノ又はアルキルアミドを示し；
各Ｒ2は独立して、基ＸＹＲ6を示し；
Ｘは単結合、あるいは基Ｒ7で置換されていてもよいＣ1-3アルキレン又はオキソアルキレン基を示し；
Ｙは単結合、酸素原子又は基ＮＲ6を示し；
Ｒ6は水素原子、基ＣＯＯＲ8、あるいはＣＯＯＲ8、ＣＯＮＲ82、ＮＲ82、ＯＲ8、＝ＮＲ8、＝Ｏ、ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ8）Ｒ7及びＯＳＯ3Ｍから選択された１個以上の基で置換されていてもよいアルキル、アルケニル、シクロアルキル、アリール又はアラルキル基であり；
Ｒ7はヒドロキシ、あるいはヒドロキシル化されていてもよく、アルコキシル化されていてもよいアルキル又はアミノアルキル基であり；
Ｒ8は水素原子、あるいはヒドロキシル化されていてもよく、アルコキシル化されていてもよいアルキル基であり；
Ｍは水素原子、又は生理的に許容されるカチオンの１当量であり；
Ｒ3はＣ1-8アルキレン基、１，２−シクロアルキレン基又は１，２−アリーレン基を示し；
各Ｒ4は独立して、水素原子又はＣ1-3アルキルを示す。
【請求項２】
上記治療剤がアントラサイクリン薬及び／又はパクリタキセルと一緒に用いられるものである、請求項１に記載の使用方法。
【請求項３】
上記アントラサイクリン薬がドキソルビシン又はダウノマイシンである、請求項２に記載の使用方法。
【請求項４】
上記キレートが１０9〜１０25の範囲のＫａを有する、請求項１〜３のいずれか１項に記載の使用方法。
【請求項５】
上記式Ｉにおいて、
Ｒ5がヒドロキシ、Ｃ1-8アルコキシ、エチレングリコール、グリセロール、アミノ又はＣ1-8アルキルアミドであり；
Ｘが単結合、又はＣＨ2、（ＣＨ2）2、ＣＯ、ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ2ＣＨ2ＣＯ又はＣＨ2ＣＯＣＨ2から選択される基であり；
Ｙが単結合であり；
Ｒ6がモノ−又はポリ（ヒドロキシ又はアルコキシル化）アルキル基又は式ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ8）Ｒ7の基であり；
Ｒ7がヒドロキシ、又は非置換のアルキル基又はアミノアルキル基である、請求項１に記載の使用方法。
【請求項６】
上記式Ｉにおいて、Ｒ3がエチレンであり、各Ｒ1が−ＣＨ2ＣＯＲ5を示し、ここでＲ5がヒドロキシである、請求項１又は請求項５に記載の使用方法。
【請求項７】
上記式Ｉの化合物がＮ，Ｎ’−ビス−（ピリドキサール−５−ホスフェート）−エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ’−ジ酢酸である、請求項１、５及び６のいずれか１項記載の使用方法。
【請求項８】
請求項１及び４〜７のいずれか１項で定義された化合物を、少なくとも１つのアントラサイクリン及び／又はパクリタキセルと一緒に、抗腫瘍剤療法において同時に、別個に又は続いて投与することによって抗腫瘍剤の心臓毒性を減少させるのに用いられる薬剤の製造に使用する方法。
【請求項９】
請求項１及び４〜７のいずれか１項で定義された化合物を、少なくとも１つのアントラサイクリン及び／又はパクリタキセル、及び少なくとも１つの製剤上許容される担体又は賦形剤と一緒に含有する、抗腫瘍剤の心臓毒性を減少させるのに用いられる製剤組成物。
【請求項１０】
請求項１及び４〜７のいずれか１項で定義された化合物、及びこれとは別個に、抗腫瘍剤療法において同時に、別個に又は続いて投与するための少なくとも１つのアントラサイクリン及び／又はパクリタキセルを含む、抗腫瘍剤の心臓毒性を減少させるのに用いられるパック。
【発明の詳細な説明】
本発明は、キレート化剤およびその金属キレートの使用、および特定のマンガン含有化合物、特にマンガンキレートの医療への使用に関する。本発明は特に、このような化合物の抗腫瘍剤療法への使用に関する。
多数の抗腫瘍剤は、その広範囲の用途を制限する不利な副作用を伴う。パクリタキセル(paclitaxel)またはタキソール(taxol)は、胸、結腸、肺および卵巣を含む様々な悪性組織に対して、並びに悪性黒色腫において抗新生物性を示した、このような剤の一つである。しかしながら、抗新生物性効果を有することに要求される高い投与量において、パクリタキセルは、多数の不利な副作用を有し、その例としては、心血管の不規則、並びに血液毒性および胃腸管毒性を挙げることができる。
アントラサイクリン(anthracycline)抗生物質、例えばドキソルビシン（(doxorubicin)、アドリアマイシン(adriamycin)）は、中でも最も重要な抗腫瘍剤である。しかしながら、その臨床的価値は、その心臓毒性によって制限され、この毒性自体は、治療を受けている患者の15〜40%において充血性心不全を示す。その毒性にとって最も可能性のある機構は、心臓における酸素由来のフリーラジカルの生成であると信じられており、これは、代謝活性組織、例えば心筋および腸粘膜における膜損傷およびミトコンドリア損傷を引き起こす。
アントラサイクリン治療中の心臓損傷は、鉄キレート化剤であるデキストラゾキサン(dexrazoxane)の同時投与によって減少させ得ることを示唆する証拠がある(Goodman & Gilman, 9th ed. 1233-1287(1996))。しかしながら、デキストラゾキサンおよびその類似体は毒性であることが認められており、その結果、比較的に低い投与量でしか使用できない。
従って、抗癌剤治療中の化学保護剤として作用することの可能な化合物に対する持続した要求が存在するということが認識されよう。
特に、抗腫瘍剤の毒性副作用を減少させる際に、抗腫瘍剤をより高い、より有効な投与量で投与することを可能にする効果的な化学保護剤に対する要求が存在する。
キレート化剤およびその金属キレートの医学的使用は、例えばＸ線、磁気共鳴造影(MRI)、超音波造影またはシンチグラフィー等のような診断技術において、よく確立されている。多種多様なキレート化剤およびその金属キレートは公知であるか、または文献に記載されている。
アミノポリ（カルボン酸またはカルボン酸誘導体）キレート化剤およびその金属キレートはよく知られており、例えばEP-A-299795、EP-A-71564、DE-A-3401052、EP-A-203962およびEP-A-436579に記載されている。
ジピリドキシルを基礎としたキレート化剤およびその３価金属とのキレートは、Taliaferroにより記載されている(Inorg. Chem. 23: 1183-1192(1984))。化合物N,N′-ジピリドキシルエチレンジアミン-N,N′-ジ酢酸(PLED)は、ガリウムまたはインジウムを含有する放射線治療剤の製造用キレート化剤として評価された(Green et al. Int. J. Nucl. Med. Biol, 12(5): 381-386(1985))。
また、多数のPLED誘導体および類似体が、特にキレート化剤N,N′-ビス-(ピリドキサール-5-ホスフェート)-エチレンジアミン-N,N′-ジ酢酸(DPDP)およびそのマンガン(II)キレート、Mn DPDPが、MRIコントラスト媒体中での使用に関して記載されている（EP-A-290047およびEP-A-292761参照）。
我々は、特定のキレート化剤、特にジピリドキシルおよびアミノポリカルボン酸を基礎としたキレート化剤、およびその金属キレートが、抗腫瘍剤、特にアントラサイクリン類およびパクリタキセルの毒性を減少させるのに特に効果的であることを見出した。
我々はまた、特定のマンガン含有化合物が抗腫瘍剤の毒性を減少させるのに効果的であることも見出した。
一つの観点において、本発明は、好ましくは5000未満、より好ましくは1000未満、例えば800未満の分子量を有する生理的に許容されるマンガン化合物またはその塩を、抗腫瘍剤、例えばアントラサイクリン薬および／またはパクリタキセルの心臓毒性を減少させるのに用いられる治療剤の製造に使用する方法を提供する。
別の観点において、本発明は、ヒトまたはヒト以外の動物の身体に、抗腫瘍剤を投与し、これと同時に、別個にまたは続いて、好ましくは5000未満、より好ましくは1000未満、例えば800未満の分子量を有する生理的に許容されるマンガン化合物またはその塩を投与することを含む、ヒトまたはヒト以外の動物の身体に投与された抗腫瘍剤の心臓毒性を減少させる方法を提供する。
好都合には、マンガン化合物は、好ましくは１０9〜１０25、より好ましくは１０10〜１０24、よりいっそう好ましくは１０11〜１０23、例えば１０12〜１０22の範囲のＫaを有するキレートとして存在することができる。特に好ましいキレートは、対応する鉄（Fe3+）キレートのＫa値の少なくとも千分の一のより小さいＫa値を有するものである。
第二の観点において、本発明は、下記式Ｉ：
0004359651.tif 000002
の化合物、またはその金属キレートまたは塩を、抗腫瘍剤、例えばアントラサイクリン薬および／またはパクリタキセルの心臓毒性を減少させるのに用いられる治療剤の製造に使用する方法を提供する
（式Ｉにおいて、
各Ｒ1は独立して、水素または-CH2COR5を示し；
Ｒ5はヒドロキシ、所望によりヒドロキシル化されたアルコキシ、アミノまたはアルキルアミドを示し；
各Ｒ2は独立して、基ＸＹＲ6を示し；
Ｘは単結合、あるいは所望により基Ｒ7で置換されたＣ1-3アルキレンまたはオキソアルキレン基を示し；
Ｙは単結合、酸素原子または基ＮＲ6を示し；
Ｒ6は水素原子、基COOR8、あるいは所望によりCOOR8、CONR82、NR82、OR8、=NR8、=O、OP(O)(OR8)R7およびOSO3Mから選択された１個以上の基により置換されたアルキル、アルケニル、シクロアルキル、アリールまたはアラルキル基であり；
Ｒ7はヒドロキシ、または所望によりヒドロキシル化され、所望によりアルコキシル化されたアルキルまたはアミノアルキル基であり；
Ｒ8は水素原子、または所望によりヒドロキシル化され、所望によりアルコキシル化されたアルキル基であり；
Ｍは水素原子、または生理的に許容されるカチオンの１当量、例えばアルカリ金属、アルカリ土類金属カチオン、アンモニウムイオンまたは有機アミンカチオン、例えばメグルミンイオンの１当量であり；
Ｒ3はＣ1-8アルキレン基、好ましくはＣ1-6、例えばＣ2-4アルキレン基、1,2-シクロアルキレン基または1,2-アリーレン基を示し；
各Ｒ4は独立して、水素またはＣ1-3アルキルを示す）。
本発明に使用するのに好適な他のキレート化剤としては、EP-A-299795、EP-A-71564、DE-A-3401052、EP-A-203962、EP-A-436579の巨大環状の、およびより好ましくは直鎖状または分岐状のアミノポリカルボン酸キレート化剤、およびリンオキシ酸類似体である。好ましいキレート化剤としては、DTPAおよびEDTA、およびアミド基の窒素が１個以上のＣ1-18アルキル基により置換されていてもよいそのアミド、例えばDTPA.BMAおよびEDTA.BMAが挙げられる。
ここで使用されるとおり、「アルキル」および「アルキレン」という用語は、直鎖状および分岐状の両方の、飽和および不飽和の炭化水素を包含する。「1,2-シクロアルキレン」という用語は、シスおよびトランスの両方の、５〜８個の炭素原子を有するシクロアルキレン基およびアルキル置換シクロアルキレン基を包含する。「1,2-アリーレン」という用語は、フェニルおよびナフチル基、および６〜１０個の炭素原子を有するそのアルキル置換誘導体を包含する。
特にことわらない限り、全てのアルキル、アルキレンおよびアルケニル部分は、好都合には１〜２０個、好ましくは１〜８個、より好ましくは１〜６個、特に好ましくは１〜４個の炭素原子を含有することができる。
シクロアルキル、アリールおよびアラルキル部分は、好都合には３〜１８個、好ましくは５〜１２個、特に好ましくは５〜８個の環原子を含有することができる。フェニルおよびナフチル基を含むアリール部分が好ましい。アラルキル基としては、フェニルＣ1-3アルキル、特にベンジルが好ましい。
所望によりヒドロキシ基により置換されていてもよい基の場合は、これはモノ置換であってもポリ置換であってもよく、ポリ置換の場合には、アルコキシおよび／またはヒドロキシ置換基はアルコキシ基によって担われていてもよい。
式Ｉにおいて、Ｒ5は好ましくはヒドロキシ、Ｃ1-8アルコキシ、エチレングリコール、グリセロール、アミノまたはＣ1-8アルキルアミドである。好ましくは、各Ｒ1は-CH2COR5を示し、ここでＲ5はヒドロキシである。
式Ｉの化合物において、Ｘは好ましくは単結合、またはCH2、(CH2)2、CO、CH2CO、CH2CH2COまたはCH2COCH2である。好ましくは、Ｙは単結合を示す。
式Ｉの化合物は、二つのピリジル環上に同一または異なったＲ2基を有していてよく、これらは同一または異なった環の位置に結合していてよい。しかしながら、置換が5-位および6-位に、最も特別には6-位に、すなわちヒドロキシ基に対してパラ-位にあることが特に好ましい。Ｒ2基が同一であり、かつ同じ位置に、例えば6,6′にある化合物が特に好ましい。
基Ｒ6として好ましいものは、モノ-またはポリ（ヒドロキシまたはアルコキシル化）アルキルまたは式OP(O)(OR8)R7の基である。
Ｒ7は、好ましくはヒドロキシ、または非置換のアルキルまたはアミノアルキル基である。
基Ｒ2のために特に好ましいものとしては、CHR7OCO(CH2)xPhおよびCHR7OCO(CH2CO)xPh（ここで、ｘは１〜３である）、CHR7OCOBut、CH2N(H)R6′、CH2N(R6′)2、N(H)R6′、N(R6′)2、CH2OH、CH2OR6′、COOR6′、CON(H)R6′、CON(R6′)2またはOR6′（ここで、R6′はモノ-またはポリ-ヒドロキシル化された、好ましくはＣ1-4、特に好ましくはＣ1-3アルキル基である）、(CH2)nCOOR7′（ここで、ｎは１〜６である）、COOR7′（ここで、R7′はＣ1-4、好ましくはＣ1-3アルキル基、特に好ましくはメチル基である）、CH2OSO3-M、CH2CH2COOH、CH2OP(O)(OH)(CH2)3NH2、CH2OP(O)(OH)CH3またはCH2OP(O)(OH)2基である）が挙げられる。よりいっそう好ましくは、Ｒ2は式CH2OP(O)(OH)2の基を示す。
Ｒ3がエチレンであり、Ｒ2が上記に列挙したものの何れかである式Ｉの化合物は、特に好ましい。
本発明の方法に使用される化合物の好ましい金属キレートは、金属イオンがアルカリ金属およびアルキル土類金属から、および原子番号２２〜３１，４２、４４および５８〜７０を有する金属から選択されたものであり、より特別には、１０9〜１０25、好ましくは１０10〜１０24、より好ましくは１０11〜１０23、例えば１０12〜１０22の範囲のＫaを有するキレートである。特に好ましいキレートは、鉄以外の金属とのキレートであり、これらは、対応する鉄（Fe3+）キレートのＫa値よりも小さく、好ましくは少なくとも千分の一のより小さいＫa値を有する。好適なイオンとしては、Ｎａ+、Ｍｎ2+、Ｃｕ+、Ｃｕ2+、Ｍｇ2+、Ｇｄ3+、Ｃａ2+およびＺｎ2+が挙げられる。Ｍｎ2+が特に好ましい。
アミノポリカルボン酸のキレートとしては、MnDTPA、MnEDTA、Mn DTPA.BMAおよびMn EDTA.BMAが、本発明に係る使用のために特に好ましい。
本発明に係る使用のためにより特別に好ましいものは、化合物N,N′-ビス-（ピリドキサール-5-ホスフェート）-エチレンジアミン-N,N′-ジ酢酸またはN,N′-ビス（3-ヒドロキシ-2-メチル-5-ホスホノメチル-4-ピリジルメチル）-エチレンジアミン-N,N′-ジ酢酸（以下、DPDPという）、およびそのマンガン(II)キレート、Mn(DPDP)である。
キレートの全ての不安定な水素が、錯化金属イオンにより置換されているわけではない場合は、残りの不安定な水素原子を、無機および／または有機塩基またはアミノ酸の生理的に生物適合性のカチオンにより置換することによって、キレートの生物許容性および／または溶解性を増加させることができる。好適な無機カチオンとしては、Ｌｉ+、Ｋ+、Ｎａ+および特にＣａ2+が挙げられる。好適な有機カチオンとしては、アンモニウム、置換アンモニウム、エタノールアミン、ジエタノールアミン、モルホリン、グルカミン、N,N-ジメチルグルカミン、リジン、アルギニンまたはオルニチンが挙げられる。
ここに記載された化合物、特にキレート化剤およびその金属キレートの特に好ましい使用は、心臓保護剤としての使用であり、このような使用は、心臓毒性副作用を有する薬物と一緒の使用にのみならず、心臓が危険な状態にある病理学的な状態の処置または予防にも拡張する。従って、例えば本発明に係る化合物は、抗腫瘍剤の心臓毒性副作用、特にアントラサイクリン類、例えばドキソルビシンの毒性、およびパクリタキセルの毒性の予防または処置に使用することかできる。これに関して、本発明の化合物は、抗腫瘍薬と組み合わせた調製物として投与することができる。あるいは、これらの化合物は、抗腫瘍薬の投与とは別個に、その前に、その間に、またはそれに続いて投与することができる。
ここで使用されるとおり、「アントラサイクリン類」という用語は、天然または半合成のアントラサイクリン類、例えばエピルビシン(epirubicin)、イダルビシン(idarubicin)、ダウノルビシン(daunorubicin)、特にドキソルビシン(doxorubicin)およびこれらの塩、並びに合成アントラサイクリン類、例えばミトキサントロン(mitoxantrone)およびこれらの塩を包含する。
従って、もう一つの観点からみて、本発明は、本発明に係るキレート化剤、またはその金属キレートまたは塩を、１種以上のアントラサイクリン類、例えばドキソルビシン、および／またはパクリタキセル、および少なくとも１種の製薬上許容される担体または賦形剤と一緒に含む製剤組成物を提供する。
さらにもう一つの観点からみて、本発明は、本発明に係るキレート化剤、またはその金属キレートまたは塩、およびこれとは別個に、抗腫瘍剤療法において同時に、別個にまたは引き続いて使用するためのアントラサイクリンおよび／またはパクリタキセルを含有するパックを提供する。
別の観点において、本発明は、本発明に係るキレート化剤、またはその金属キレートまたは塩を、１種以上のアントラサイクリンおよび／またはパクリタキセルと一緒に、抗腫瘍剤療法において同時に、別個にまたは引き続いて投与するための薬剤の製造に使用する方法を提供する。
抗腫瘍剤としてのパクリタキセルの使用に関して、患者をステロイド剤、抗ヒスタミン剤および／またはＨ2-拮抗剤で予め薬剤処置して、過敏反応、特にアナフィラキシー反応を防止することが好ましい。さらに、パクリタキセルの投与、特に高い投与量での投与に伴う骨髄毒性は、顆粒球-コロニー刺激因子(G-CSF)を共-投与することにより、好ましくはパクリタキセル投与後２４時間までに毎日の注射として与えることにより、減少させることかできる。
本発明の化合物は、この技術分野で公知の方法により製造することができる。アミノポリカルボン酸を基礎とするキレート化剤の製造に好適な方法は、EP-A-299795、EP-A-71564、DE-A-3401052、EP-A-203962およびEP-A-436579に記載されている。
ジピリドキシル化合物の製造に際して、化合物PLEDを出発材料として使用して、また、従来の手法を用いて適切に誘導体化して、式Ｉの化合物を得ることができる。
式Ｉの化合物を製造するのに好適な方法は、例えばEP-A-290047に記載されている。
あるいは、式Ｉの化合物は、対応するピリドキサール化合物を、アルキレンジアミンと、Taliaferro（上記）により記載されたPLEDの製造手法に従って反応させることによって製造することができる。
あるいは、本発明に係る化合物は、下記の工程の一つ以上を含む方法により製造することができる：
(a)下記式IIの化合物
0004359651.tif 000003
を下記式(III)のジアミン
H2N-R3-NH2                  (III)
（これらの式中、Ｒ3およびＲ4は上記で定義したとおりであり、Ｒ2′は所望により保護された上記で定義したとおりのＲ2である）と反応させる；
(b)工程(a)で得られた式(IV)の化合物
0004359651.tif 000004
（式中、Ｒ3、Ｒ4およびＲ2′は上記で定義したとおりである）を水素化する；
(c)式(v)の化合物
0004359651.tif 000005
（式中、Ｒ3、Ｒ4およびＲ2′は上記で定義したとおりである）を、ハロ酢酸、好ましくはブロモ酢酸と反応させ、必要に応じ、使用した保護基を除去する；
および
(d)式Iの化合物を、そのキレート錯体または塩に変換する。
式IIのピリドキシルホスフェート、ピリドキサールおよびその他の化合物、および式IIIのアルキレンジアミン、シクロアルキレンジアミンおよびアリーレン化合物は、容易に入手できる公知の化合物であるか、あるいはこの技術分野で公知の手法により合成することができる。
工程(a)の反応は、好適な溶剤、例えばアルコール（例えばメタノール）中で０〜６０℃の範囲の温度で行うことが好都合であろう。
Ｒ2基が同一である式Ｉの化合物を得るためには、式IIIのジアミンを２モル当量の式IIの化合物と反応させてもよい。Ｒ2基が異なる式Ｉの化合物を製造するためには、式IIIのジアミンを、先ず、所望のＲ2′基を有する式IIの第一化合物と反応させ、次いで、こうして得られた反応生成物を、異なるＲ2′基を有する式IIの第二化合物と反応させる。
工程(b)の水素化は、従来の手法を用いて、例えばパラジウムまたは白金触媒を用いて行うことができる。
本発明に係る使用のための金属キレートは、この技術分野で公知の従来の手法により形成することができる。一般的に、このような方法は、金属酸化物または金属塩（例えば硝酸塩、塩化物または硫酸塩）を、水または低級アルコール、例えばメタノール、エタノールまたはイソプロパノールに溶解または懸濁させることを伴う。この溶液または懸濁液に、水または低級アルコール中の等モル量のキレート化剤を加え、混合物を、必要に応じて穏やかにまたは沸点まで加熱しながら、反応が完結するまで攪拌する。形成されたキレート塩が使用した溶剤に不溶性であるならば、反応生成物は濾過により単離される。反応生成物が可溶性であるならば、これは例えば噴霧乾燥または凍結乾燥により蒸発乾固することにより単離される。
生成したキレートに酸基、例えばリン酸基がまだ存在しているならば、酸性キレート塩を、生理的に許容されるカチオンを生じさせる無機および／または有機塩基またはアミノ酸との反応によって中性キレート塩に変換し、これを単離することが有利である。
キレート化剤のカルボン酸基およびリン酸基は、エステル化してカルボキシレートおよびホスフェートエステルを生成することによって中和することもできる。このようなエステルは、対応するアルコールから、この技術分野で公知の従来の手法によって製造することができる。好適なエステルとしては、例えば１〜１８個の炭素原子を有する直鎖状または分岐状アルコール、１〜１８個、好ましくは１〜６個の炭素原子を有する１価または多価のアルキルアミノアルコール、例えばセリノールまたはジエタノールアミン、および１〜１８個の炭素原子を有する多価アルコール、例えばエチレングリコールまたはグリセロールのエステルが挙げられる。
金属キレートが全体的な電荷を担っている場合は、生理的に許容されるカウンターイオン、例えばアンモニウム、置換アンモニウム、アルカリ金属またはアルカリ土類金属（例えばカルシウム）カチオン、あるいは無機酸または有機酸から誘導されるアニオンとの塩の形態で使用することが好都合であろう。これに関して、メグルミン塩が特に好ましい。
本発明の治療剤は、従来の医薬または獣医薬用の処方助剤、例えば安定剤、抗酸化剤、オスモラリティー調節剤、緩衝剤、ｐＨ調節剤などを用いて処方することができ、また、非経口投与または経小腸投与、例えば注射または注入、あるいは外部排泄管を有する体腔、例えば胃腸菅、膀胱または子宮内への直接投与に適する形態であってよい。従って、本発明の剤は、従来の製剤投与形態、例えばタブレット、カプセル、散剤、溶液、懸濁液、分散液、シロップ、坐剤などであってよい。しかしながら、生理的に許容される担体媒質、例えば注射用水中の溶液、懸濁液または分散液が一般的に好ましい。
従って、本発明に係る化合物は、生理的に許容される担体または賦形剤を用いて当業者によく知られた方法により、投与のために処方することができる。例えば、本化合物を、所望により製剤上許容される賦形剤を添加して、水性媒質中に懸濁または溶解させ、次いで得られた溶液または懸濁液を滅菌することができる。好適な添加剤としては、例えば生理的に生物適合性の緩衝剤（例えばトロメタミン塩酸塩）、キレート化剤（例えばDTPA、DTPA-ビスアミドまたは式Ｉの非錯化キレート化剤）またはカルシウムキレート錯体（例えばカルシウムDTPA、CaNaDTPA-ビスアミド、式Ｉのキレート化剤のカルシウム塩またはキレート）の添加（例えば0.01〜10モル％）、あるいは、所望により、カルシウムまたはナトリウム塩（例えば、本発明に係るキレート化剤などの金属キレート錯体と組み合わせた、塩化カルシウム、アルコルビン酸カルシウム、グルコン酸カルシウムまたは乳酸カルシウム）の添加（例えば1〜50モル％）が挙げられる。
本化合物を、例えば経口投与のために水または生理食塩水中の懸濁液形態に処方しようとする場合は、少量の可溶性キレートを、経口溶液中に伝統的に存在する不活性成分および／または界面活性剤および／または矯味矯臭用芳香剤の１種以上と混合することができる。
本発明に係る金属キレートの好ましい投与方式は、非経口投与、例えば静脈内投与である。非経口投与可能な形態、例えば静脈内溶液は、滅菌されているべきであり、生理的に許容できない物質を含んでいてはならず、また、投与に際して刺激または他の不利な効果を最小限にするために、低いオスモラリティーを有するべきであり、従って組成物は、好ましくは等張性であるか、または僅かに高張性であるべきである。好適なベヒクルとしては、非経口溶液の投与に慣習的に用いられる水性ベヒクル、例えば塩化ナトリウム注射液、リンゲル注射液、デキストロース注射液、デキストロースおよび塩化ナトリウム注射液、乳酸添加リンゲル注射液、およびRemington′s Pharmaceutical Sciences, 15th ed., Easton: Mack Publishing Co., pp. 1405-1412および1461-1487(1975)およびThe National Formulary XIV, 14th ed. Washington: American Pharmaceutical Association(1975)に記載されているような他の溶液が挙げられる。これらの溶液は、非経口溶液に普通に用いられる保存剤、抗微生物剤、緩衝剤および抗酸化剤、および、キレートと共存可能であり、かつ製品の製造、保存および使用に支障をきたさない賦形剤および他の添加剤を含有することができる。
本発明に係る治療剤は、溶液、懸濁液または分散液の形態にある場合は、キレート化剤または金属キレートを、一般的に１リットル当たり0.0001〜5.0モル、好ましくは１リットル当たり0.01〜0.1モルの範囲の濃度で含有する。しかしながら、好都合ならば、治療剤は、投与に先立って希釈するための、より濃厚な形態で供給することもできる。
本発明に係る治療剤は、好都合には体重１kg当たり10-2〜100μmolの化合物、例えば体重１kg当たり約10μmolの量で投与することができる。
本発明を、以下の非限定的実施例により、添付の図面を参照して、さらに説明する。
図１〜４は、MnDPDPで前処理した後のマウス心筋の収縮力に対するドキソルビシンの効果を示す。
図５は、MnPLEDで前処理した後のマウス心筋の収縮力に対するドキソルビシンの効果を示す。
図６は、MnDPDPで前処理した後のマウス心筋の収縮力に対するダウノマイシンの効果を示す。
実施例１
ドキソルビシンに対するデキスラゾキサン、塩化マンガン、DPDP、MnDPDPおよびZnDPDPの保護効果を、マウス左心房モデルにおいて試験した。
方法
雄マウスを殺し、左心房を注意深く摘出し、３７℃のクレブス・ヘンゼライト(Krebs Henseleit)溶液を満たした臓器浴中に吊した。収縮性はvan Acker et al.(Phlebology Suppl. 1: 31-32(1993))により記載されたようにして、力変換器を用いて測定した。平衡化したのち、心房を塩水または種々の濃度のMnDPDPと共に３０分間予備インキュベートした。続いて、塩水または120μMのドキソルビシンを添加し、収縮性を６０分間測定した。その後、イソプレナリン(isoprenaline)を添加して、正変力作用に対する能力を試験した。
別の実験シリーズにおいて、雄マウスに種々の投与量の塩水、デキスラゾキサン、塩化マンガン、MnDPDP、ZnDPDPおよびDPDPを静脈内注射した。１５分後または３０分後にマウスを殺し、実験のインビトロ部分を前記のように行った。
結果
典型的な結果は、添付の図１〜４に示されており、下記の表１および２にまとめられている。
未処理のコントロール（塩水の添加）は、６０分間の測定期間中に最初の力のほとんど１００％まで収縮するが、ドキソルビシンで処理した心房は著しい負変力を示し、これは恐らく単離した心房筋の損傷のためであり、６０分間以内に約６０％の収縮力減少に至ることが分かる。
図１〜３から、マンガン化合物MnDPDPは、臓器浴に直接添加すると、心筋をドキソルビシンの有毒効果から保護しないことが明らかである。しかしながら、図４から、MnDPDPは、心筋を摘出して臓器浴に入れる前に注射した場合に、予想外にも、心筋をドキソルビシンの有毒効果から保護することが明らかである。表１および２から、１５分間または３０分間の動物の前処理は、いずれも収縮性の４０〜４８％の保護を生じさせることが分かる。マンガン（塩化物として）またはDPDPの何れか単独は、等モル量の投与量では有効性は低いが、それでもなお、ある程度の心房筋保護を与えることが分かる。亜鉛錯体ZnDPDPもまた、保護効果を引き起こした。
対照化合物のデキスラゾキサンもまた、この試験においてドキソルビシン誘発心臓毒性に対して保護したが、必要な量は、MnDPDPの有効投与量(1〜10μmole/kg）と比較して、遙かに多量であった(25〜50mg/kgデキスラゾキサン=93〜186μmole/kg）。
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実施例2
ドキソルビシンに対する塩水、MnPLED、MnEDTA、MnDPTA.BMA、MnDTPA、EDTAおよびDTPAの保護効果を、別の実験セットにおいて試験した。
方法
雄マウスに塩水、0.1μmol/kgのMnPLED、10μmol/kgのMnEDTA、10μmol/kgのMnDPTA.BMA、10μmol/kgのMnDTPA、10μmol/kgのEDTAおよび10μmol/kgのDTPAを静脈内注射した。
３０分後にマウスを殺し、左心房を注意深く摘出し、３７℃のクレブス・ヘンゼライト溶液を満たした臓器浴中に吊した。収縮性は実施例１に記載したようにして測定した。平衡化したのち、塩水または60μMのドキソルビシンを添加し、収縮性を６０分間測定した。
結果
典型的な結果は、添付の図５に示されており、下記の表３にまとめられている。
ドキソルビシンで処理した心房は著しい負変力効果を示し、これは恐らく単離した心房筋の損傷のためであり、６０分間以内に約６０％の収縮力減少に至ることが分かる。
図５から、0.1μmol/kgのMnPLDEは、心筋を摘出して臓器浴に入れる前に注射した場合、心筋をドキソルビシンの有毒効果から保護することが明らかである。表３から、0.1μmol/kgのMnPLDEによる３０分の前処理は、心房筋の５６％の保護を生じさせることが分かり、すなわちMnPLDEはMnDPDPよりも約100倍も強い保護剤である（実施例１参照）。MnEDTA、MnDTPA、MnDPTA.BMA、EDTAおよびDTPAでの前処理は、それぞれ４２、１００、１２、９および０％の保護を与えた。試験したマンガン化合物のほとんどは効果的な保護を与えたが、EDTAまたはDTPAの何れか単独は、等モル量の投与量では保護をほとんど、または全く与えなかったことが分かる。
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実施例３
ダウノマイシンに対するMnDPDPの保護効果を、マウス左心房モデルにおいて試験した。
方法
雄マウスに塩水または10μmol/kgのMnDPDPを静脈内注射した。
３０分後にマウスを殺し、左心房を注意深く摘出し、３７℃のクレブス・ヘンゼライト溶液を満たした臓器浴中に吊した。収縮性は実施例１に記載したようにして測定した。平衡化したのち、塩水または60μmolのダウノマイシンを臓器浴に添加し、収縮性を６０分間測定した。続いてイソプレナリンを添加して、正変力作用に対する組織能力を試験した。
結果
結果は添付の図６に示されている。
未処理のコントロール（塩水の添加）は、６０分間の測定期間中に最初の力のほとんど１００％まで収縮したが、ダウノマイシンで処理した筋は負変力効果を示し、６０分間以内に約４０％の収縮力減少に至ったことが分かる。10μmol/kgのMnDPDPで前処理した結果、約１００％の保護となった。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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