(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
気体含有造影剤を連続的注入によって投与するのに使用するための装置であって、
（１）造影剤を含有する実質的に垂直に配置された輸送容器を受容し、前記容器の上端又は下端から造影剤を制御可能に輸送するのに適合した輸送装置と、
（２）前記輸送された造影剤と噴流剤との混合を実施するのに適合した混合手段と、
（３）前記混合した造影剤と噴流剤を投与装置に導入するのに適合した導管手段と
を備える装置。
【請求項２】
前記輸送装置が、実質的に垂直に配置されたシリンジを受容するのに適合したシリンジ駆動部である、請求項１記載の装置。
【請求項３】
前記混合手段が、前記輸送容器と噴流剤供給源とを前記導管手段に接続するのに適合した三方活栓又は栓を含む、請求項１又は請求項２記載の装置。
【請求項４】
前記噴流剤の流速を制御するための流速制御手段をさらに備える、請求項１乃至請求項３のいずれか１項記載の装置。
【請求項５】
前記輸送容器の位置を反転させる手段をさらに備える、請求項１乃至請求項４のいずれか１項記載の装置。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、動的な（すなわち、重力によって分離した）微粒子分散系の投与、例えば気体を含有する診断用造影剤に関し、より詳細には、注入によってこのような分散剤を制御して、実質的に定常状態で投与するための装置及び方法に関する。
【０００２】
超音波検査の分野では、微小気泡の分散物を含む造影剤は、微小気泡の密度が低く、圧縮が容易であるため、特に効率的な超音波の後方散乱であることが周知である。このような微小気泡分散物は、適切に安定化できれば、しばしば低用量の造影剤で簡便に、非常に効率よく、例えば脈管系及び組織の微小血管を超音波で視覚化することができる。
【０００３】
気体を含有する造影剤は、核磁気共鳴（ＭＲ）イメージングに有効であることも知られており、例えば感受性造影剤はＭＲシグナル強度を減じる働きをする。酸素を含む造影剤は、有用な常磁性ＭＲ造影剤としての可能性も秘めている。
【０００４】
Ｘ線イメージングの分野では、二酸化炭素などの気体を血管造影剤として使用し得る。さらに、放射性の気体、例えばキセノンなどの不活性ガスの放射性アイソトープをシンチグラフィにおいて、例えば血液プールイメージングのために使用することが提案されている。
【０００５】
気体を含有する超音波造影剤は、通常単独で、又は複数のボーラス調剤として静脈内に投与され、このボーラスは周囲の血液と混合して循環系を通じて運ばれるので、血管が走行する組織や器官に、迅速かつ顕著ではあるが、比較的短期間の後方散乱強度の上昇を引き起こす。従って、後方散乱強度を時間に対してプロットすると、比較的狭くて強いシグナル強度のピークが認められる。後方散乱は通常このピークが存在する間に測定されるが、例えば、より深部の組織や器官のイメージングでは、重なり合った組織からの強い後方散乱によってピーク中に過剰な陰影が生じる可能性があるという問題が浮上するかもしれない。
【０００６】
ＷＯ−Ａ−９７４８３３７で論じられているように、陰影などの診断上のアーチファクトは、造影剤の投与速度を制御することによって、及び／又は造影剤投与後に通常生理食塩水などの噴流（ｆｌｕｓｈ）を投与することによって減少し得る。造影剤の投与速度は１〜８×１０６ｖｅｓｉｃｌｅｓ／ｋｇ−ｓｅｃ又は１×１０−７から１×１０−３ｃｃガス／ｋｇ−ｓｅｃで、噴流速度は０．０１〜２．４ｍＬ／ｓｅｃが推奨されている。造影剤は一般的に５〜２０秒をかけて投与され、その後の噴流は一般に１０秒から１０分にわたる時間をかけて投与される。
【０００７】
例えば１分から１時間にわたる超音波造影剤の連続的注入は、陰影などの診断アーチファクトを最小限に留める速度で造影剤を投与することを可能にし、造影剤ボーラスの通過によって生じる後方散乱シグナルピークの比較的短い持続時間を超えるように、イメージングに有用な時間枠を延長することを可能にするので興味が持たれる。
【０００８】
従って、例えばＲａｄｉｏｌｏｇｙ  ２０７、ｐｐ．３３９〜３４７（１９９８）でＡｌｂｒｅｃｈｔ  ｅｔ  ａｌ．は、ドップラーシグナル増強の持続をもたらす持続的造影剤注入は、腎動脈又は下肢末梢血管の研究など長時間のイメージング操作を完成させ、造影剤の用量効果を最適にすると共にサチュレーションアーチファクトを減少させることが可能であることを報告している。
【０００９】
注入による造影剤の投与は、ＷＯ−Ａ−９９０８７１４に記載されているように、引き続き血液プールとの混合を行う、再循環相における造影剤のイメージングに基づく技法においても有用であり得る。
【００１０】
微小気泡などの気体含有成分には浮遊する傾向があり、造影剤の投与に使用し得る動力シリンジなどの管内に不均一な状態を形成せしめるので、気体を含有する診断用造影剤の連続的注入にともなう問題が生じる。これによって、例えばこのような管の上部の微小気泡濃度が上昇し、及び／又は大きな微小気泡は小さな微小気泡よりも迅速に浮遊するので、管内の様々な箇所で大きさの分布に変化が生じる。
【００１１】
ＷＯ−Ａ−９９２７９８１はこの問題を解決できる方法を提案しており、シリンジの内容物の均一性を維持するために回転又は揺動運動を行わせるシリンジを含む動力注入系を開示している。具体的の実施形態では、シリンジの円筒部はシリンジをその縦軸（すなわち、水平）軸に対して反対方向に交互に回転することができる歯車又は移動可能な軸と接触して水平に配置されている。
【００１２】
このような回転手段又はその他の揺動手段をシリンジ器具に組み込むと必然的に設計が複雑になり、このような器具の費用は著しく増加するので、造影剤又はその他の分散物の実質的な均質性を維持しながら、気体を含有する超音波用造影剤又は重力によって分離する分散物を連続的注入させる器具が常に必要とされていることが理解されよう。
【００１３】
本発明は、実質的に垂直に配置した輸送容器、例えばシリンジ、チューブ類又はその他の円柱状貯蔵器の上端又は下端から分散物を輸送し、患者に投与する前に噴流剤と混合することによって、重力により分離する実質的に均質な分散物を制御して輸送することが可能であるという発見に基づいている。
【００１４】
シリンジ駆動部など輸送装置で通常使用されている水平方向とは異なり、実質的に垂直に配置したシリンジなどの円柱輸送容器を使用すると、容器内の分散試料の高さが著しく増加することにより、重力分離の生じ得る距離が延長される。微小気泡又は所与の大きさのその他の気体を含む成分など比較的低密度で分散した部分は一定速度で担体液体の中を上昇するので、浮遊分離効果が著しく減弱し、これによって、一定の期間にわたって投与の制御が改善される。時間をかけて沈殿する傾向のある比較的高密度の微粒子、エマルジョン小滴などの分散物についても同様の考察が当てはまる。
【００１５】
分散物と混合する噴流剤とを同時投与することによって、例えば連結チューブなどにおける分散物の滞留時間が減少し、これによって重力による分離を受けにくくなり、さらに生成物の均質性が高められる。噴流剤と混合することによっても、分散物及び噴流剤の両者の流速を独立して制御することができるので、特に分散剤投与の効果的な制御が可能となる。
【００１６】
患者へ投与するほぼ直前に分散物と噴流剤を混合することは、希釈形態で保存すると（例えばシリンジ又はその他の輸送容器に移す前に希釈すると）不安定性を示すことが多い気体微小気泡を含む造影剤などの分散物の投与に特に有利である。
【００１７】
さらに投与が血管内（例えば、静脈内）注射による場合、１カ所の注射部位から混合した噴流剤を同時投与すると、分散物流及び局所的血流の変動に左右されない開放注射経路を維持するのが容易となる。
【００１８】
従って、本発明の一態様によれば、重力によって分離する分散物、例えば気体を含有する造影剤を連続的注入によって患者に投与する方法であって、前記分散物が実質的に垂直に配置された輸送容器、例えばシリンジの上端又は下端から制御可能に輸送され、その後患者に投与する前に噴流剤と混合される方法が提供される。
【００１９】
本発明のさらなる態様によれば、重力によって分離する分散物、例えば気体を含有する造影剤の連続的注入による投与に有用な装置であって、（ｉ）実質的に垂直に配置された分散物を含有する輸送容器を保持し、前記容器の上端又は下端から分散物を制御可能に放出するように適合された輸送装置、（ｉｉ）前記放出された分散物と噴流剤の混合を実施するように適合された混合手段、及び（ｉｉｉ）前記混合した分散物と噴流剤を投与装置に導入するように適合された導管手段を備えた装置が提供される。
【００２０】
本明細書では「実質的に垂直」という用語は、輸送容器の縦軸を垂直の約３０度以内、好ましくは１５度以内、より好ましくは５度以内になるように配置することを意味する。この容器は分散物を上端又は下端のいずれかから輸送するために、すなわちそれぞれ上方輸送又は下方輸送のために配置し得る。
【００２１】
比較的低密度の分散相を含む分散物の場合、分散物の投与中に生じ得るこのような浮遊は、上方輸送用に輸送容器を配置した場合には投与が進行するにつれて分散相濃度の減少をもたらす傾向があり、下方輸送用に輸送容器を配置した場合には同等の濃度の増加をもたらす傾向がある。沈殿しやすい比較的高密度の分散相を含む分散物では逆のことが当てはまることが理解されよう。このような濃度変化は、所望するならば、分散物及び噴流剤を同時投与する速度を適切に調節することによって阻止し得る。これに加え、又はこれに代えて、注入中に適切な段階で前記輸送容器を反転させてもよい。
【００２２】
投与中に分散物内で分散相の濃度勾配が形成されるのを相殺しやすくするので、前記輸送容器は、放出に際しての分散物のバルク流方向が分散相の分離方向と同一になるように配置することが好ましい。従って、例えば気体を含有する造影剤などの分散相が浮遊しやすい分散物の場合、下方輸送用に配置した輸送容器を使用することが好ましい。
【００２３】
本発明による器具で使用できる輸送装置には、シリンジプランジャが適切な自動機構、例えば制御された電動式の螺旋型スクリュ又は押し棒によって、制御可能に駆動される電動注射システムなどのシリンジ駆動手段が含まれる。
【００２４】
注入した分散物が気体を含有する造影剤の場合、例えば０．００１〜０．５ｍＬ／分、好ましくは０．０１〜０．２５ｍＬ／分の範囲の速度で投与することが可能であり、気体濃度、及び、超音波研究の場合には望ましい減衰度などの因子を考慮して選択し得る。注入速度は患者の体重に左右されるが、典型的には、約０．０６μＬ／ｋｇ／時間である。このような造影剤は、例えば１時間を超えない期間、一般的には１５〜２０分の注入時間で投与し得る。インビボにおける造影剤の定常的分配は一般に１〜２分後に達成されるだろう。
【００２５】
噴流剤は、任意の適切な生体適合的な液体であり得るが、好ましくは、通常の（すなわち、０．９％）生理食塩水である。例えば適切な流速制御手段を使用して重力流によって投与するか、又は制御可能なポンプを用いて輸送することが可能である。流速は０．５〜２ｍＬ／分が適切であることがわかったが、より速い流速（例えば５ｍＬ／分まで）も有用であり得る。
【００２６】
分散物と噴流剤との混合は、例えば三方活栓、例えばＴ型、Ｙ型又は三方栓などの栓内で実施され、この栓は適切な容器を介して投与装置、例えば針又はカテーテルなどの注入装置にも連結されている。分散物の通過時間を最小限にして、従って分散相が分離する可能性を最小限にするために、連結は最小限に留めて少容量の容器を使用することが好ましい。
【００２７】
本発明によって投与される、気体を含有する造影剤に存在し得る気体には、通常のヒトの体温３７℃で、少なくとも部分的に、例えば実質的に又は完全に気体状又は蒸気状である混合物を含む生体適合的な物質が含まれる。従って、代表的な気体には、空気、窒素、酸素、二酸化炭素、水素、ヘリウム、アルゴン、キセノン又はクリプトンなどの不活性ガス、六フッ化硫黄、十フッ化二硫黄又は五フッ化トリフルオロメチル硫黄などのフッ化硫黄、六フッ化セレニウム、メチルシラン又はジメチルシランなどの必要に応じてハロゲン化されたシラン、（例えば、７個までの炭素原子を含む）低分子量の炭化水素、例えばメタン、エタン、プロパン、ブタン又はペンタンなどのアルカン、シクロプロパン、シクロブタン又はシクロペンタンなどのシクロアルカン、エチレン、プロペン、プロパジエン又はブテンなどのアルケン、アセチレン又はプロピンなどのアルキン、
ジメチルエーテルなどのエーテル、ケトン、エステル、ハロゲン化された（例えば、７個までの炭素原子を含む）低分子量炭化水素、及び前記のいずれかの混合物が含まれる。有利には、ハロゲン化された気体のハロゲン原子の少なくとも一部はフッ素原子であり、従って生体適合的なハロゲン化炭化水素ガスは、例えば、ブロモクロロジフルオロメタン、クロロジフルオロメタン、ジクロロジフルオロメタン、ブロモトリフルオロメタン、クロロトリフルオロメタン、クロロペンタフルオロエタン、ジクロロテトラフルオロエタン、クロロトリフルオロエチレン、フルオロエチレン、エチルフルオリド、１，１−ジフルオロエタン及びペルフルオロカーボンから選択し得る。代表的なペルフルオロカーボンには、ペルフルオロメタン、ペルフルオロエタン、ペルフルオロプロパン、ペルフルオロブタン（例えば、必要に応じてペルフルオロ−イソ−ブタンなどのその他の異性体と混合されたペルフルオロ−ｎ−ブタン）、ペルフルオロペンタン、ペルフルオロヘキサン、又はペルフルオロヘプタンなどのペルフルオロアルカン、ペルフルオロプロペン、ペルフルオロブテン（例えば、ペルフルオロブト−２−エン）、ペルフロロブタジエン、ペルフルオロペンテン（例えば、ペルフルオロペント−１−エン）又はペルフルオロ−４−メチルペント−２−エンなどのペルフルオロアルケン、ペルフルオロブト−２−インなどのペルフルオロアルキン、及びペルフルオロシクロブタン、ペルフロオロメチルシクロブタン、ペルフルオロジメチルシクロブタン、ペルフルオロトリメチルシクロブタン、ペルフルオロシクロペンタン、ペルフルオロメチルシクロペンタン、ペルフルオロジメチルシクロペンタン、ペルフルオロシクロヘキサン、ペルフルオロメチルシクロヘキサン、又はペルフルオロシクロヘプタンなどのペルフルオロシクロアルカンが含まれる。その他のハロゲン化された気体には、塩化メチル、ペルフルオロアセトンなどのフッ化（例えば、ペルフルオロ化）ケトン及びペルフルオロジエチルエーテルなどのフッ化（例えばペルフルオロ化）エーテルが含まれる。ペルフルオロ化された気体、例えば六フッ化硫黄とペルフルオロプロパン、ペルフルオロブタン、ペルフルオロペンタン及びペルフルオロヘキサンなどのペルフルオロカーボンの使用は、このような気体を含有する微小気泡が血流中で安定性が高いことが認識されたことを考えると特に有利であり得る。血流中で安定性が非常に高い微小気泡を形成させる物理化学的特性を有するその他の気体も同様に有用である。
【００２８】
造影剤製剤の代表的な例には、凝集耐性表面膜（例えば、ＷＯ−Ａ−８００２３６５で記載されているようなゼラチン）、薄膜形成（ｆｉｌｍｏｇｅｎｉｃ）タンパク質（例えば、ＵＳ−Ａ−４７１８４３３、ＵＳ−Ａ−４７７４９５８、ＵＳ−Ａ−４８４４８８２、ＥＰ−Ａ−０３５９２４６、ＷＯ−Ａ−９１１２８２３、ＷＯ−Ａ−９２０５８０６、ＷＯ−Ａ−９２１７２１３、ＷＯ−Ａ−９４０６４７７、ＷＯ−Ａ−９５０１１８７、又はＷＯ−Ａ−９６３８１８０に記載されているようなヒト血清アルブミンなどのアルブミン）、ポリマー物質（例えば、ＥＰ−Ａ−０３９８９３５に記載されているような生体分解性の合成ポリマー、ＥＰ−Ａ−０４５８７４５に記載されているような弾性界面合成ポリマー膜、ＥＰ−Ａ−０４４１４６８に記載されているような微粒子生体分解性ポリアルデヒド、ＥＰ−Ａ−０４５８０７９に記載されているようなポリアミノ酸−多環式イミドの微粒子Ｎ−ジカルボン酸誘導体、又はＷＯ−Ａ−９３１７７１８又はＷＯ−Ａ−９６０７４３４に記載されているような生体分解性ポリマー）、（例えばＷＯ−Ａ−９５２１６３１に記載されているような）非重合又は重合不可能な壁形成物質、又は界面活性剤（例えばＰｌｕｒｏｎｉｃなどのポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンブロックコポリマー界面活性剤、ＷＯ−Ａ−９５０６５１８に記載されているようなポリマー界面活性剤、又は、例えばＷＯ−Ａ−９２１１８７３、ＷＯ−Ａ−９２１７２１２、ＷＯ−Ａ−９２２２２４７、ＷＯ−Ａ−９４０９８２９、ＷＯ−Ａ−９４２８７８０、ＷＯ−Ａ−９５０３８３５、又はＷＯ−Ａ−９７２９７８３に記載されているようなリン脂質などのフィルム形成界面活性剤）によって安定化された（例えば、少なくとも部分的に被包された）気体の微小気泡が含まれる。例えば、ＷＯ−Ａ−９３０５８１９に記載されているような選択された気体の遊離微小気泡を含むか、又は、例えばＷＯ−Ａ−９４１６７３９に記載されているような、分散相の沸点がイメージングを受けるべき患者の体温を下回る液−液エマルジョンを含む造影剤製剤も使用できる。
【００２９】
その他の有用な気体含有造影剤製剤には、気体を含有する固体系、例えばその中に気体を含むか、そうでなければ気体と結合された（例えば、ＥＰ−Ａ−０１２２６２４、ＥＰ−Ａ−０１２３２３５、ＥＰ−Ａ−０３６５４６７、ＷＯ−Ａ−９２２１３８２、ＷＯ−Ａ−９３００９３０、ＷＯ−Ａ−９３１３８０２、ＷＯ−Ａ−９３１３８０８、又はＷＯ−Ａ−９３１３８０９に記載されているように、その表面上に吸着され、及び／又は間隙、空隙又は孔隙内に含有された）微粒子（特に微粒子凝集物）が含まれる。このような微粒子造影剤のエコー発生性は、含有された／結合された気体から直接、及び／又は（例えば、微粒子構造の分解の際に）固体物質から遊離した気体（例えば、微小気泡）から得られることが理解されよう。本発明は、例えば、ＷＯ−Ａ−９８５１２８４及びＷＯ−Ａ−９９２７９８１に記載されているような、治療化合物を含むミクロスフェアをベースとした造影剤系と併用しても有用であり得る。
【００３０】
気体を含有する造影剤製剤に関する前述の全文献の開示内容を本明細書に参考として援用する。
【００３１】
気体の微小気泡及び微粒子などのその他の気体含有物質は、例えば静脈注射によって、投与後に肺循環系を自由に通過させるために、最初の平均サイズは１０μｍを超えないこと（例えば、７μｍ以下）が好ましい。しかしながら、例えば、これらが空気、酸素、窒素又は二酸化炭素などの比較的血液に溶解性があるか、そうでなければ拡散性のある一以上の気体と、一以上のペルフルオロカーボンなどの実質的に不溶性及び非拡散性の気体との混合物を含有する場合には、より大きな微小気泡を使用することが可能である。投与後の前記溶解性／拡散性気体成分の外部への拡散は、このような微小気泡のサイズを急速に縮小せしめ、この縮小は存在する不溶性／非拡散性気体の量によって決定され、生じた微小気泡が肺循環系の肺毛細血管を通過可能なように選択することができる。
【００３２】
本発明に従って、例えばリン脂質によって安定化された気体微小気泡の形態で、リン脂質を含有する造影剤製剤を用いる場合、有用なリン脂質の代表例には、レシチン（すなわち、ホスファチジルコリン）、例えば卵黄レシチン又はダイズレシチンなどの天然レシチン、半合成（例えば部分的又は完全に水素化した）レシチン及びジミリストイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルコリン、又はジステアロイルホスファチジルコリンなどの合成レシチン、ホスファチジン酸、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルイノシトール、カルジオリピン、スフィンゴミエリン、前記の何れかのフッ化誘導体、前記の何れかの混合物、及びコレステロールなどの他の脂質との混合物が含まれる。正味の電荷、例えば負電荷を個別に有する分子を主として（例えば、少なくとも７５％）含むリン脂質、例えばＷＯ−Ａ−９７２９７８３に記載されているような、天然に存在する（例えば、ダイズ又は卵黄由来）、半合成の（例えば、部分的に、又は完全に水素化された）及び合成のホスファチジルセリン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジン酸及び／又はカルジオリピンの使用は、特に有利であり得る。
【００３３】
気体を含有する造影剤微粒子に有用な物質の代表例には、炭水化物（例えば、グルコース、フルクトース又はガラクトースなどのヘキソース、スクロース、ラクトース又はマルトースなどの二糖、アラビノース、キシロース、又はリボースなどのペントース、α−、β−及びγ−シクロデキストリン、デンプン、ヒドロキシエチルデンプン、アミロース、アミロペクチン、グリコーゲン、イヌリン、プルラン、デキストラン、カルボキシメチルデキストラン、デキストランリン酸、ケトデキストラン、アミノエチルデキストラン、アルギン酸塩、キチン、キトサン、ヒアルロン酸又はヘパリンなどの多糖、及び（マンニトール又はソルビトールなどのアルジトールを含む）糖アルコール、無機塩（例えば、塩化ナトリウム）、有機塩（例えば、クエン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、又は酒石酸ナトリウム）、Ｘ線造影剤（典型的には、例えば、メトリゾ酸、ジアトリゾ酸、イオタラミック酸、イオキサグル酸、イオヘキソール、イオペントール、イオパミドール、イオジキサノール、イオプロミド、メトリザミド、ヨージパミド、メグルミンヨージパミド、メグルミンアセトリゾエート、及びメグルミンジアトリゾエートにおけるような３位及び／又は５位にカルボキシル、カルバモイル、Ｎ−アルキルカルバモイル、Ｎ−ヒドロキシアルキルカルバモイル、アシルアミノ、Ｎ−アルキルアシルアミノ又はアシルアミノメチルなどの置換基を有する２，４，６−トリヨードフェニル基を少なくとも１つ含有する市販のカルボン酸及び非イオン性アミド造影剤のいずれか）、ポリペプチド及び蛋白質（例えば、ゼラチン又はヒト血清アルブミンなどのアルブミン）及び前記の何れかの混合物が含まれる。
【００３４】
本発明の方法及び装置は、とりわけＬｅｖｏｖｉｓｔ、Ａｌｂｕｎｅｘ、Ｏｐｔｉｓｏｎ、Ｄｅｆｉｎｉｔｙ、Ｉｍａｇｅｎｔ、Ｓｏｎｏｖｕｅ、Ｅｃｈｏｇｅｎ、Ｓｏｎｏｇｅｎ及びＳｏｎａｚｏｉｄとして知られている超音波造影剤の注入に有用である。
【００３５】
本発明の方法及び装置は、逐次イメージング技法、例えば、第１段階として患者に造影剤注入及びイメージングを実施し、次いで（例えば、アデノシン、ドブタミン、ジピリダモール、又はアルブタミンのような薬理学的ストレス物質を使用するか、又は投与して）ストレスを与え、第２段階としてこのストレスを与えている間、又は与えた後に造影剤注入及びイメージングを実施する技法にも有用であり得る。
【００３６】
以下の非限定的な例によって、本発明を説明する。
【００３７】
調製法１−水素化ホスファチジルセリンに封入されたペルフルオロブタン微小気泡
水素化ホスファチジルセリン（精製水中のプロピレングリコール１％ｗ／ｖ溶液中に５ｍｇ／ｍＬ）及びペルフルオロブタンガスをインラインで７８００ｒｐｍ、約４０℃で均質化して乳白色の微小気泡分散物を得た。該分散物を分画して、所望しない微小気泡（＜２μｍ）を実質的に除去し、所望する微小気泡濃度になるように前記分散物の容量を調節した。次いで、９２ｍｇ／ｍＬの濃度になるまでショ糖を添加した。凍結乾燥用に特別に設計した１０ｍＬの平底バイアルに、得られた分散物の一部２ｍＬを充填し、内容物を凍結乾燥して白色の多孔性固形物を得た。次いで、この凍結乾燥容器にペルフルオロブタンを充填し、このバイアルを密封した。特記しない限り、使用に先立ち、凍結乾燥した産物を含有するバイアルに水２ｍＬを添加し、内容物を数秒間手で振って、５〜２０ｘ１０８微小気泡／ｍＬ（７〜１３μＬ／ｍＬ）の濃度範囲で、ペルフルオロブタン微小気泡分散物を得た。
【００３８】
例１〜６−インビトロ実験
調製法１のように調製したバイアル内容物に、シリンジから水（５ｍＬ）を加えて混合して、穏やかに手で振って、濃度約３μ／ｍＬの微小気泡を有するペルフルオロブタン微小気泡分散物を得た（例１〜５）。例６の操作では、３つのバイアルの内容物をそれぞれ水２ｍＬと混合した後、得られた分散物をプールした。図１に示したように、モジュールＤＰＣシリンジポンプ内に垂直に配置され、三方活栓を具備した低容量延長管及び注入ミニバッグからの通常の生理食塩水を輸送するための投与装置に連結したシリンジに、このようにして得られた各微小気泡分散物を引き込んだ。表１に示したように、このシリンジポンプ速度及び生理食塩水速度を変動させ、微小気泡濃度の計算値と測定値、及び（注入開始からの計時として測定した）定常的な注入が維持した期間の測定値も記録する。
【００３９】
【表１】
0004305603.tif 000002
【００４０】
図２は、例６の方法で測定した（初期濃度のパーセントとして表した）微小気泡濃度を時間に対してプロットした図である。比較のために、水平に配置したシリンジで同等の操作を使用して測定した微小気泡濃度の経時的変動も示されている。本発明の操作では実質的に一定の微小気泡濃度が維持されるのに対して、比較試験では微小気泡濃度は注入が進行するにつれて迅速に減少することを容易に認めることができる。
【００４１】
シリンジの中に存在する対照剤の容量が一定であれば、シリンジポンプの速度が上がるほど、投与ウインドウの長さが短くなり得ることが理解できるであろう。
【００４２】
例７〜１４−インビトロ実験
様々な注入方法のために微小気泡用量を調節できることを示すために、前記の実施例６の一般的方法に従って、食塩水注入速度２ｍＬ／分使用し、シリンジポンプ速度を表２に示したように変化させて実験を実施し、微小気泡濃度の計算値及び測定値も記録した。
【００４３】
【表２】
0004305603.tif 000003
【００４４】
例１５−インビボ実験
６匹のイヌ（１５〜２５ｋｇ、雄雌）の開胸モデルに対して、ＡＴＬ  ＨＤＩ  ３０００を使用して、照射音圧（ｍｅｃｈａｎｉｃａｌ  ｉｎｄｅｘ）０．６及びトリガーリング１：４で前心筋層の第二調波イメージング（ｈａｒｍｏｎｉｃ  ｉｍａｇｉｎｇ）を実施した。３０ｎｌペルフルオロブタン／ｋｇの濃度で、調製法１のように調製した造影剤ボーラスを、５、１５、４５及び１３５ｎｌペルフルオロブタン／ｋｇ／分に対応する速度で注入した後、本発明の方法によって造影剤を注入する間、画像を記録した。対象領域の造影効果が図３に示されている。
【００４５】
例１６
ＷＯ−Ａ−９７４８３３７の例１のように、微小気泡懸濁物を調製し、本発明の方法によって投与する。
【００４６】
例１７
商標Ｏｐｔｉｓｏｎとして市販されている超音波製品を本発明の方法によって投与する。
【００４７】
例１８
ＷＯ−Ａ−９９２７９８１の例２のように、造影剤を調製し、本発明の方法に従って投与する。
【００４８】
例１９
正常な心動脈を有する患者の誘発式超高調波心イメージングを心拍毎、２心拍毎、４心拍毎、８心拍毎にトリガーリングして実施した。ジピリダモールによる負荷の間、先端の２室及び４室を観察することによって心臓を画像化した。イメージング期間全体を通じて、調製法１のように調製した造影剤を１０μＬ／ｋｇ／分の速度で注入した。
【００４９】
各心筋区分（心筋はＡｍｅｒｉｃａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  Ｅｃｈｏｃａｒｄｉｏｇｒａｐｈｙの定義によって１６区分に分けた）につき、各トリガーリング間隔についてビデオ密度の増加が観察された。最も高いトリガーリング間隔では（８心拍）異なる心筋セグメントで、強度の増加は８から１０ｄＢの範囲であった。
【図面の簡単な説明】
【図１】  本発明に有用な装置の一実施形態の概略図である。
図１をより詳細に説明すると、シリンジ駆動部１（詳細は示していない）は、垂直に配置されたシリンジ２を受容し、分散物４をシリンジ上端の送出口５から放出するために上向きに置かれたシリンジプランジャ３を制御可能に駆動するように適合されている。三方活栓６は、ルアーロック１０を介して、送出口５及び食塩水注入ミニバッグ８からの供給７を、注入供給ライン１１に接続された導管９に連結し、次いでこれは注射針又はカテーテル（図示せず）に接続することが可能である。分散物の流速は、シリンジ駆動部１を調節することによって制御可能である。ミニバッグ８からの生理食塩水の流速は、１以上の栓６、バルブ１２及びミニバッグの高さを調節することによって制御することが可能である。
【図２】  以下の例６で説明されるインビトロ試験系で、及び水平に配置したシリンジを使用した比較実験で微小気泡濃度を注入時間に対してプロットしたものである。
【図３】  以下の例１５で説明されるインビボ実験によって得られた、エコー発生性を時間に対してプロットしたものである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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