(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式Ｖ：
【化１】
0004359859.tif 000070
〔上式中、
Ｅは、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）2ＮＨ2、−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−ＣＨ2Ｃ（ＣＨ3）2ＮＨ2、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）2−ＮＨ（ＣＨ3）または
【化２】
0004359859.tif 000071
であり；
Ｒ5は、水素またはメチルであり；
Ｇは、
【化３】
0004359859.tif 000072
であり；
ここで、Ｒ28は水素またはフェニルであり；
Ｊは、
【化４】
0004359859.tif 000073
であり；
ここで、Ｒ29は水素であり；
ａは１であり；
ｂは１であり；
Ｒ1はメチルであり；
Ｒ6は水素またはメチルである〕
により表される化合物、または医薬上許容されるその塩。
【請求項２】
（２Ｅ）−５−アミノ−５−メチルヘキサ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−１−（（２Ｒ）−２−ベンジル−３−オキソピペラジン−１−カルボニル）−２−（２−ナフチル）エチル）−Ｎ−メチルアミド、
（２Ｅ）−５−メチル−５−（メチルアミノ）ヘキサ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−１−（（２Ｒ）−２−ベンジル−３−オキソピペラジン−１−カルボニル）−２−（２−ナフチル）エチル）−Ｎ−メチルアミド、
（２Ｅ）−５−アミノ−５−メチルヘキサ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−２−（（２Ｒ）−２−ベンジル−３−オキソピペラジン−１−イル）−１−（（ビフェニル−４−イル）メチル）−２−オキソ−エチル）−Ｎ−メチルアミド、
（２Ｅ）−５−アミノ−３，５−ジメチルヘキサ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−１−（（２Ｒ）−２−ベンジル−３−オキソピペラジン−１−カルボニル）−２−（２−ナフチル）エチル）−Ｎ−メチルアミド、
（２Ｅ）−５−メチル−５−メチルアミノヘキサ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−１−（（２Ｒ，５Ｒ）−２−ベンジル−５−メチル−３−オキソピペラジン−１−カルボニル）−２−（２−ナフチル）エチル）−Ｎ−メチルアミド、
（２Ｅ）−５−アミノ−５−メチルヘキサ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−２−（（２Ｒ）−２−ベンジル−４−メチル−３−オキソピペラジン−１−イル）−１−（（２−ナフチル）メチル）−２−オキソエチル）−Ｎ−メチルアミド、
（２Ｅ）−５−メチル−５−アミノヘキサ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−１−（（２Ｒ，５Ｒ）−２−ベンジル−５−メチル−３−オキソピペラジン−１−カルボニル）−２−（２−ナフチル）エチル）−Ｎ−メチルアミド、
（２Ｅ）−４−（１−アミノシクロブチル）ブタ−２−エン酸Ｎ−メチル−Ｎ−（（１Ｒ）−２−（２−ナフチル）−１−（（２Ｒ）−３−オキソ−２−（（２−チエニル）メチル）ピペラジン−１−カルボニル）エチル）アミド、
（２Ｅ）−４−（１−アミノシクロブチル）ブタ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−２−（（２Ｒ，５Ｒ）−２−ベンジル−５−メチル−３−オキソピペラジン−１−イル）−１−（（２−ナフチル）メチル）−２−オキソエチル）−Ｎ−メチルアミド、および
（２Ｅ）−５−メチル−５−メチルアミノヘキサ−２−エン酸Ｎ−メチル−Ｎ−（（１Ｒ）−１−（２−ナフチル）メチル−２−オキソ−２−（（２Ｒ）−３−オキソ−２−（（２−チエニル）メチル）ピペラジン−１−イル）エチル）アミド
から成る群より選ばれる請求項１記載の化合物、または医薬上許容されるその塩。
【請求項３】
（２Ｅ）−５−アミノ−５−メチルヘキサ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−２−（（２Ｒ）−２−ベンジル−４−メタンスルホニルピペラジン−１−イル）−１−（ナフタ−２−イルメチル）−２−オキソエチル）−Ｎ−メチルアミド、または医薬上許容されるその塩。
【発明の詳細な説明】
発明の分野
本発明は、新規化合物、それらを含有する組成物および成長ホルモンの欠乏に起因する身体障害を治療するためのそれらの使用に関する。
発明の背景
成長ホルモンは成長することのできるあらゆる組織の成長を刺激するホルモンである。その上、成長ホルモンは、代謝過程に対して多数の作用、例えばタンパク質合成および遊離脂肪酸動員の刺激を果たすこと並びに炭水化物代謝から脂肪酸代謝へのエネルギー代謝の変換を引き起こすことが知られている。成長ホルモンの欠乏は様々な深刻な身体障害、例えば小人症を引き起こし得る。
成長ホルモンは下垂体から放出される。この放出は直接的にまたは間接的に多数のホルモンと神経伝達物質の厳重な制御下にある。成長ホルモンの放出は、成長ホルモン放出ホルモン（GHRH）により刺激されそしてソマトスタチンにより阻害される。どちらの場合も該ホルモンは視床下部から放出されるが、それらの作用は下垂体にある特異的な受容体によって主に媒介される。下垂体からの成長ホルモンの放出を刺激する別の化合物も記載されている。例えば、アルギニン、Ｌ−３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン（Ｌ−ドーパ）、グルカゴン、バソプレッシン、PACAP（下垂体アデニリルシクラーゼ活性化ペプチド）、ムスカリン性受容体アゴニストおよび合成ヘキサペプチドGHRP（成長ホルモン放出ペプチド）は、下垂体への直接作用によるかまたは視床下部からのGHRHおよび／またはソマトスタチンの放出に影響を及ぼすことにより、内因性成長ホルモンを放出させる。
成長ホルモンのレベルを高めることが望まれるような障害または状態では、成長ホルモンのタンパク質性が非経口投与以外は全て実行不可能にする。更に、他の直接作用する天然分泌促進物質、例えばGHRHおよびPACAPは長鎖のポリペプチドであり、その理由のために経口投与が有効でない。
哺乳類における成長ホルモンのレベルを増加させるための或る種の化合物の使用は、例えば欧州特許第18 072号、欧州特許第83 864号、国際公開89/07110号、同第89/01711号、同第89/10933号、同第88/9780号、同第83/02272号、同第91/18016号、同第92/01711号、同第93/04081号、同第95/17422号、同第95/17423号および同第95/14666号公報において既に提案されている。
成長ホルモン放出化合物の組成は、それらの成長ホルモン放出活性およびそれらの生物学的利用能（バイオアベイラビリティ）にとって重要である。従って、本発明の目的は、この種の既知化合物に対して改善された性質を有する、成長ホルモン放出特性を有する新規化合物を提供することである。
発明の要約
本発明によれば、試験管内で標準実験条件下で下垂体細胞に直接作用してそこから成長ホルモンを放出させる化合物が提供される。
それらの成長ホルモン放出化合物は、特に、成長ホルモンの分泌がどのように下垂体レベルで調節されるのかを理解するためのユニークな研究手段として試験管内で利用することができる。
更に、本発明の成長ホルモン放出化合物は、成長ホルモンの放出を増加させるために生体内に投与することもできる。
従って、本発明は、一般式Ｉ
0004359859.tif 000002
〔上式中
Ｒ1は水素であるか、またはアリールにより置換されることがあるＣ1-6アルキルであり；
ａおよびｂは独立に１または２であり；
ｃおよびｄは独立に０，１または２であり；
ｃ＋ｄは０，１または２であり；
Ｒ2，Ｒ3，Ｒ4，Ｒ6，Ｒ7，Ｒ8，Ｒ9，Ｒ10およびＲ11は独立に水素であるか、ハロゲンにより、アミノにより、Ｃ3-6シクロアルキルにより、ヒドロキシにより、アリールにより、
−ＣＯＯＲ22によりもしくは−ＣＯＮＲ23Ｒ24により置換されることがあるアリールであるか、またはハロゲンにより、アミノにより、Ｃ3-6シクロアルキルにより、ヒドロキシにより、アリールにより、−ＣＯＯＲ22によりもしくは−ＣＯＮＲ23Ｒ24により置換されることがあるＣ1-6アルキルであり；
Ｒ3とＲ4は一緒になって＝Ｏまたは＝Ｓを形成することができ；
Ｒ8とＲ9は一緒になって＝Ｏまたは＝Ｓを形成することができ；
Ｒ5は水素、
0004359859.tif 000003
またはアリールにより、ヒドロキシにより、Ｃ3-6シクロアルキルにより、アミノにより、−ＣＯＯＲ25により、−ＣＯＮＲ26Ｒ27により、−ＮＲ’Ｒ’’により、
0004359859.tif 000004
によりもしくは
0004359859.tif 000005
により置換されることがあるＣ1-6アルキルであり；
Ｒ，Ｒ’およびＲ’’は独立に水素またはＣ1-6アルキルであり；
Ｒ30およびＲ31は独立にアリールにより、ヒドロキシにより、Ｃ3-6シクロアルキルによりもしくはアミノにより置換されることがあるＣ1-6アルキルであり；
Ｒ22，Ｒ23，Ｒ24，Ｒ25，Ｒ26およびＲ27は独立に水素またはＣ1-6アルキルであり；
Ｒ3とＲ4が一緒になって＝Ｏまたは＝Ｓを形成する時、Ｅは
0004359859.tif 000006
またはR17−NH−（CR18R19）p−（CH2）m−Ｍ−（CHR20）o−（CH2）n−であり；
Ｒ3またはＲ4が水素であるか、ハロゲンにより、アミノにより、Ｃ3-6シクロアルキルにより、ヒドロキシにより、アリールにより、−ＣＯＯＲ22によりもしくは−ＣＯＮＲ23Ｒ24により置換されることがあるアリールであるか、またはハロゲンにより、アミノにより、Ｃ3-6シクロアルキルにより、ヒドロキシにより、アリールにより、−ＣＯＯＲ22によりもしくは−ＣＯＮＲ23Ｒ24により置換されることがあるＣ1-6アルキルである時、Ｅは
0004359859.tif 000007
またはR17−NH−（CR18R19）p−（CH2）m−Ｑ−（CHR20）o−（CH2）n−であり；
Ｒ12，Ｒ13，Ｒ14，Ｒ15，Ｒ16，Ｒ17，Ｒ18，Ｒ19およびＲ20は独立に水素であるか、またはハロゲンにより、アミノにより、ヒドロキシルによりもしくはアリールにより置換されることがあるＣ1-6アルキルであり；
Ｒ17，Ｒ18およびＲ19のいずれか２つが独立に一緒になってＣ1-6アルキレン橋形成することができ；
ｎ，ｍおよびｑは独立に０，１，２または３であり；
ｏおよびｐは独立に０または１であり；
Ｍは−ＣＨ＝ＣＲ21−，−Ｏ−，−Ｓ−または原子価結合であり；
Ｑは−ＣＨ＝ＣＲ21−，−Ｏ−または−Ｓ−であり；
Ｒ21は水素であるか、またはハロゲンにより、アミノにより、ヒドロキシルによりもしくはアリールにより置換されることがあるＣ1-6アルキルであり；
Ｇは水素、
0004359859.tif 000008
であり；
ここでＲ28は水素、ハロゲン、Ｃ1-6アルキル、Ｃ1-6アルコキシまたはアリールであり；
ｒは０，１または２であり；
Ｊは水素、
0004359859.tif 000009
であり；
ここでＲ29は水素、ハロゲン、Ｃ1-6アルキル、Ｃ1-6アルコキシまたはアリールであり；
ｔは０，１または２である〕
により表される化合物、または医薬上許容されるその塩に関する。
式Ｉの化合物は、分割された、純粋なもしくは部分的に精製された光学異性体の形またはそれらのラセミ体混合物の形の、任意の光学異性体を包含する。
式II〜Ｖの化合物は独立に式Ｉの化合物の好ましい態様であるので、本明細書中における式Ｉへの言及は式II〜Ｖへの言及も意味する。
上記式Ｉの化合物の第一態様では、Ｒ1は好ましくはＣ1-6アルキル、より好ましくはＣ1-4アルキル、例えばメチルである。
上記式Ｉの化合物の第二態様では、ａは好ましくは１である。
上記式Ｉの化合物の別の態様では、ｂは好ましくは１である。
上記式Ｉの化合物の更に別の態様では、ｃは好ましくは０または１である。
上記式Ｉの化合物の別の態様では、ｄは好ましくは０または１である。
上記式Ｉの化合物の更に別の態様では、ｃ＋ｄは好ましくは１である。
上記式Ｉの化合物の別の態様では、Ｒ2は好ましくは水素またはＣ1-4アルキルであり、より好ましくは水素である。
上記式Ｉの化合物の更に別の態様では、Ｒ3とＲ4は好ましくは一緒になって＝Ｏまたは＝Ｓを形成し、より好ましくは＝Ｏを形成する。
上記式Ｉの化合物の別の態様では、Ｒ3およびＲ4は互いに独立に水素である。
上記式Ｉの化合物の更なる態様では、Ｒ5は好ましくは水素、Ｃ1-6アルキルスルホニル、例えばメチルスルホニル、またはＣ1-6アルキル、より好ましくはＣ1-4アルキル、例えばメチルである。
上記式Ｉの化合物の更なる態様では、Ｒ6，Ｒ7，Ｒ8およびＲ9は互いに独立に好ましくは水素またはＣ1-6アルキルであり、より好ましくはＣ1-4アルキル、例えばメチルである。
上記式Ｉの化合物の更なる態様では、Ｒ10およびＲ11は互いに独立に好ましくは水素またはＣ1-4アルキルであり、より好ましくは水素である。
上記式Ｉの化合物の更に別の態様では、Ｅは好ましくは
R17−NH−（CR18R19）p−（CH2）m−Ｍ−（CHR20）o−（CH2）n−
〔ここで、
Ｒ17は水素またはＣ1-4アルキル、好ましくはメチルであり、
Ｒ18は水素またはＣ1-4アルキル、好ましくはメチルであり、そして
Ｒ19は水素またはＣ1-4アルキル、好ましくはメチルであるか、あるいは
Ｒ18とＲ19が一緒になってＣ1-6アルキレン橋、好ましくはＣ1-4アルキレン橋、例えばトリメチレン橋を形成し、
ｎは０または１、好ましくは０であり、
ｐは１であり、
ｍは１であり、そして
Ｍは−ＣＨ＝ＣＲ21であり、ここでＲ21は水素またはＣ1-4アルキル、好ましくはメチルである〕
であり、より好ましくは、Ｅは-CH=CH-CH2-C(CH3)2NH2，-CH=C(CH3)-CH2-C(CH3)2NH2，-CH=CH-CH2-C(CH3)2-NH(CH3)または
0004359859.tif 000010
である。
上記式Ｉの化合物の別の態様では、Ｇは好ましくは
0004359859.tif 000011
（ここでＲ28は水素またはアリール、好ましくはフェニルである）であり、より好ましくはＧは２−ナフチルまたはビフェニル−４−イルである。
上記式Ｉの化合物の更に別の態様では、Ｊは好ましくは
0004359859.tif 000012
（ここでＲ29は水素またはＣ1-6アルキルであり、好ましくは水素である）であり、より好ましくはＪはフェニルまたは２−チエニルである。
本発明の好ましい化合物は下記のものである：
（２Ｅ）−５−アミノ−５−メチルヘキサ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−１−（（２Ｒ）−２−ベンジル−３−オキソピペラジン−１−カルボニル）−２−（２−ナフチル）エチル）−Ｎ−メチルアミド：
0004359859.tif 000013
（２Ｅ）−５−アミノ−５−メチルヘキサ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−１−（（２Ｒ）−２−ベンジル−４−（シクロプロピルメチル）−３−オキソピペラジン−１−カルボニル）−２−（２−ナフチル）エチル）−Ｎ−メチルアミド：
0004359859.tif 000014
（２Ｅ）−５−アミノ−５−メチルヘキサ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−１−（（２Ｒ，５Ｒ）−２−ベンジル−５−（ヒドロキシメチル）−３−オキソピペラジン−１−カルボニル）−２−（２−ナフチル）エチル）−Ｎ−メチルアミド：
0004359859.tif 000015
（２Ｅ）−５−アミノ−５−メチルヘキサ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−１−（（２Ｒ）−２−ベンジル−３−オキソ−１，４−ジアゼパン−１−カルボニル）−２−（２−ナフチル）エチル）−Ｎ−メチルアミド：
0004359859.tif 000016
ピペラジン−４−カルボン酸Ｎ−メチル−Ｎ−（（１Ｒ）−２−（２−ナフチル）−１−（（２Ｒ）−２−（（２−ナフチル）メチル）−３−オキソピペラジン−１−カルボニル）エチル）アミド：
0004359859.tif 000017
（２Ｅ）−５−アミノ−５−メチルヘキサ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−１−（（２Ｒ）−２−ベンジル−４−（ジメチルカルバモイルメチル）−３−オキソピペラジン−１−カルボニル）−２−（２−ナフチル）エチル）−Ｎ−メチルアミド：
0004359859.tif 000018
（２Ｅ）−５−メチル−５−（メチルアミノ）ヘキサ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−１−（（２Ｒ）−２−ベンジル−３−オキソピペラジン−１−カルボニル）−２−（２−ナフチル）エチル）−Ｎ−メチルアミド：
0004359859.tif 000019
（２Ｅ）−５−アミノ−５−メチルヘキサ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−１−（（２Ｒ，６Ｓ）−２−ベンジル−６−メチル−３−オキソピペラジン−１−カルボニル）−２−（２−ナフチル）エチル）−Ｎ−メチルアミド：
0004359859.tif 000020
（２Ｅ）−５−アミノ−５−メチルヘキサ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−１−（（２Ｒ）−２−ベンジル−３−オキソピペラジン−１−カルボニル）−２−（ビフェニル−４−イル）エチル）−Ｎ−メチルアミド：
0004359859.tif 000021
（２Ｅ）−５−アミノ−５−メチルヘキサ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−１−（（２Ｒ）−２−ベンジル−４−メタンスルホニルピペラジン−１−カルボニル）−２−（２−ナフチル）エチル）−Ｎ−メチルアミド：
0004359859.tif 000022
（２Ｅ）−５−アミノ−５−メチルヘキサ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−１−（（２Ｒ）−２−ベンジル−４−メタンスルホニルピペラジン−１−カルボニル）−２−ベンジルオキシエチル）−Ｎ−メチルアミド：
0004359859.tif 000023
（２Ｅ）−５−アミノ−３，５−ジメチルヘキサ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−１−（（２Ｒ）−２−ベンジル−３−オキソピペラジン−１−カルボニル）−２−（２−ナフチル）エチル）−Ｎ−メチルアミド：
0004359859.tif 000024
（２Ｅ）−５−メチル−５−メチルアミノヘキサ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−１−（（２Ｒ，５Ｒ）−２−ベンジル−５−メチル−３−オキソピペラジン−１−カルボニル）−２−（２−ナフチル）エチル）−Ｎ−メチルアミド：
0004359859.tif 000025
（２Ｅ）−５−アミノ−５−メチルヘキサ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−２−（（２Ｒ）−２−ベンジル−４−メチル−３−オキソピペラジン−１−イル）−１−（（２−ナフチル）メチル）−２−オキソエチル）−Ｎ−メチルアミド：
0004359859.tif 000026
（２Ｅ）−５−メチル−５−アミノヘキサ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−１−（（２Ｒ，５Ｒ）−２−ベンジル−５−メチル−３−オキソピペラジン−１−カルボニル）−２−（２−ナフチル）エチル）−Ｎ−メチルアミド：
0004359859.tif 000027
（２Ｅ）−４−（１−アミノシクロブチル）ブタ−２−エン酸Ｎ−メチル−Ｎ−（（１Ｒ）−２−（２−ナフチル）−１−（（２Ｒ）−３−オキソ−２−（（２−チエニル）メチル）ピペラジン−１−カルボニル）エチル）アミド：
0004359859.tif 000028
（２Ｅ）−４−（１−アミノシクロブチル）ブタ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−２−（（２Ｒ，５Ｒ）−２−ベンジル−５−メチル−３−オキソピペラジン−１−イル）−１−（（２−ナフチル）メチル）−２−オキソエチル）−Ｎ−メチルアミド：
0004359859.tif 000029
（２Ｅ）−５−メチル−５−メチルアミノヘキサ−２−エン酸Ｎ−メチル−Ｎ−（（１Ｒ）−１−（２−ナフチル）メチル−２−オキソ−２−（（２Ｒ）−３−オキソ−２−（（２−チエニル）メチル）ピペラジン−１−イル）エチル）アミド：
0004359859.tif 000030
（２Ｅ）−５−アミノ−５−メチルヘキサ−２−エン酸（２−（（２Ｒ）−２−ベンジル−４−メタンスルホニルピペラジン−１−イル）−（１Ｒ）−１−（ナフタ−２−イルメチル）−２−オキソエチル）メチルアミド：
0004359859.tif 000031
式Ｉの化合物は、それらが天然のペプチド結合を欠いているため、先行文献中に提案されているペプチドのものに比べて酵素によるタンパク質分解に対して高められた耐性を示すと思われる。既知の成長ホルモン放出ペプチドと比べて本発明の化合物が縮小されたサイズと高められたタンパク質分解に対する耐性を合わせ持つことは、先行文献中に提案されているペプチドのものに比べてそれらの生物学的利用能を高めると期待される。
上記構造式中と本明細書全体を通して、下記の用語は指摘のような意味を有する：
上述したＣ1-6アルキルまたはＣ1-4アルキル基は、直鎖または枝分かれまたは環状構造のいずれかである表示の長さのアルキル基を包含するものである。直鎖アルキル基の例は、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチルおよびヘキシルである。枝分かれアルキル基の例はイソプロピル、sec−ブチル、tert−ブチル、イソペンチルおよびイソヘキシルである。環状アルキルの例はＣ3-6シクロアルキル、例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルである。
上述したＣ1-6アルコキシ基は、直鎖または枝分かれまたは環状構造のいずれかである表示の長さのアルコキシ基を包含するものである。直鎖アルコキシ基の例は、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ペントキシおよびヘキソキシである。枝分かれアルコキシ基の例はイソプロポキシ、sec−ブトキシ、tert−ブトキシ、イソペントキシおよびイソヘキソキシである。環状アルコキシの例はシクロプロピルオキシ、シクロブチルオキシ、シクロペンチルオキシおよびシクロヘキシルオキシである。
本明細書中、「アリール」なる語は、芳香族環、例えばフェニル、ナフチル、ピリジル、１Ｈ−テトラゾール−５−イル、チアゾリル、イミダゾリル、インドリル、ピリミジニル、チアジアゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、オキサジアゾリル、チオフェネイル、キノリニル、ピラジニルまたはイソチアゾリルから成る群より選択された炭素環式および複素環式芳香族環であって、場合により１または複数のＣ1-6アルキル、Ｃ1-6アルコキシ、ハロゲン、アミノまたはアリールにより置換されることがある芳香族環を包含する。アリールは好ましくは、ハロゲンにより、アミノにより、ヒドロキシにより、Ｃ1-6アルキルによりもしくはＣ1-6アルコキシにより置換されることがある、フェニル、チエニル、イミダゾリル、オキサジアゾリル、ピリジル、インドリル、キノリニルまたはナフチルである。
「ハロゲン」なる語は塩素（Cl）、フッ素（Ｆ）、臭素（Br）およびヨウ素（Ｉ）を包含する。
本発明の化合物は１または複数の不斉中心を有することができ、分離された、純粋なもしくは部分精製された立体異性体としての立体異性体またはそれのラセミ体混合物は本発明の範囲内に含まれる。
本発明の化合物は、場合により式Ｉの化合物の医薬上許容される塩の形、例えば医薬上許容される酸付加塩の形であってもよく、そのような塩としては式Ｉの化合物を無機または有機酸と、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、酢酸、リン酸、乳酸、マレイン酸、フタル酸、クエン酸、グルタル酸、グルコン酸、メタンスルホン酸、サリチル酸、コハク酸、酒石酸、トルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸、スルファミン酸またはフマル酸と反応させることによって調製されるものが挙げられる。
式Ｉの化合物は医薬上許容される酸付加塩の形で、または適当ならばアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩もしくは低級アルキルアンモニウム塩として、投与することができる。
別の面では、本発明は、医薬上許容される担体（キャリヤー）または希釈剤と共に、一般式Ｉの化合物またはそれの医薬上許容される塩を活性成分として含んで成る医薬組成物に関する。
本発明の化合物を含有する医薬組成物は、常用技術により、例えばRemington’s Pharmaceutical Sciences，1985またはRemington:The Science and Practice of Pharmacy，第19版（1985）に記載されたようにして、調製することができる。該組成物は常用の剤形、例えばカプセル剤、錠剤、エアゾール剤、液剤、懸濁液剤または局所投与用剤形であることができる。
使用される医薬担体または希釈剤は、常用の固形または液状担体であることができる。固形担体の例は乳糖、石膏、ショ糖、シクロデキストリン、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アラビアガム、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸またはセルロースの低級アルキルエーテルである。液状担体の例は、シロップ、落花生油、オリーブ油、リン脂質、脂肪酸、脂肪酸アミン、ポリオキシエチレンまたは水である。
同様に、担体または希釈剤として、当該技術分野において知られている任意の持効性材料、例えば単独のまたはワックスと混合したグリセリルモノステアレートもしくはグリセリルジステアレートを挙げることができる。
固形担体を経口投与用に使う場合、組成物は錠剤に成形するか、粉末もしくはペレットの形で硬質ゼラチンカプセル中に入れるか、またはそれをトローチもしくはロゼンジの形態にすることができる。固形担体の量は広範囲に異なるだろうが、通常は約25mg〜約１ｇであろう。液状担体を使う場合、組成物はシロップ剤、乳剤、軟質ゼラチンカプセル剤または無菌注射液剤、例えば水性もしくは非水性の液体懸濁液もしくは溶液の形態であることができる。
常用の錠剤成形技術により製造することができる典型的な錠剤は下記の成分を含有することができる：
コア：
活性化合物（遊離化合物またはその塩として）      100mg
コロイド状二酸化ケイ素（Aerosil）               1.5mg
微結晶セルロース（Avicel）                       70mg
改質セルロースガム（Ac-Di-Sol）                 7.5mg
ステアリン酸マグネシウム
コーティング：
HPMC                                          約  9mg
*Mywacett 9-40 T                              約0.9mg
*フィルムコーティング用の可塑剤として使われるアシル化モノグリセリド。
経鼻投与用には、製剤はエアゾール投与用の液状担体、特に水性担体中に溶解または懸濁された式Ｉの化合物を含有することができる。担体は添加剤、例えば可溶化剤、例えばプロピレングリコール、界面活性剤、吸収促進剤、例えばレシチン（ホスファチジルコリン）もしくはシクロデキストリン、または保存剤、例えばパラベンを含んでもよい。
一般に、本発明の化合物は１回量あたり50〜200mgの活性成分と医薬上許容される担体とを含んで成る１回量剤形に調剤される。
本発明の化合物の用量は、薬剤として患者（例えばヒト）に投与される時、好ましくは0.1〜500mg／日、例えば約５〜約50mg、例えば約10mg／分量である。
一般式Ｉの化合物が生体内で内因性成長ホルモンを放出させる能力を有することが証明された。従って、該化合物は、増加された血漿成長ホルモンレベルを必要とする状態の処置に、例えば成長ホルモンを欠損しているヒトにまたは高齢患者にまたは家畜に、使用することができる。
よって、特定の面によれば、本発明は、下垂体からの成長ホルモンの放出を刺激するための医薬組成物であって、医薬上許容される担体または希釈剤と共に、活性成分として一般式Ｉの化合物またはそれの医薬上許容される塩を含んで成る組成物に関する。
別の面では、本発明は下垂体からの成長ホルモンの放出を刺激する方法であって、それを必要とする被検者に一般式Ｉの化合物またはそれの医薬上許容される塩の有効量を投与することを含んで成る方法に関する。
更に別の面では、本発明は、下垂体からの成長ホルモンの放出を刺激する薬剤の調製のための、一般式Ｉの化合物またはそれの医薬上許容される塩の使用に関する。
ヒトにおける成長ホルモンの現在のおよび潜在的用途が多様であり且つ無数であることは、当業者にとって周知であろう。よって、式Ｉの化合物は下垂体からの成長ホルモンの放出を刺激する目的で投与することができ、成長ホルモンそれ自体と同様な効果または用途を有するであろう。成長ホルモンの使用目的は次のように要約することができる：高齢者における成長ホルモン放出の刺激；糖質コルチコイドの異化副作用の予防、オステオポローシスの予防と治療、免疫系の刺激、損傷治癒の促進、骨折修復の促進、複雑骨折修復の促進、例えば散乱骨形成、骨折に続いて起こるるいそうの治療、成長遅滞の治療、成長遅滞に起因する腎不全もしくは機能不全の治療、心筋症の治療、慢性肝臓病の治療、血小板減少症の治療、クローン病の治療、短腸症候群の治療、慢性閉塞性肺疾患（COPD）の治療、移植に関連した合併症の治療、成長ホルモン欠損児童を含む生理学的低成長および慢性疾患に関連した低成長の治療、肥満または肥満に関連した成長遅滞の治療、プラーダー−ヴィリ症候群およびターナー症候群に関連した成長遅滞の治療；火傷患者の回復の促進および入院期間の削減；子宮内発育遅滞、骨格形成異常、高コルチコイド症およびクッシング症候群の治療；拍動性成長ホルモン放出の誘導；ストレス患者における成長ホルモンの置換、骨軟骨形成異常、ヌーナン症候群、精神分裂病、うつ病、アルツハイマー病、遅延損傷治癒および心理社会的剥奪の治療、肺機能不全および呼吸器依存症の治療、大手術後のタンパク質異化反応の減衰、癌やエイズ(AIDS)のような慢性疾患によるタンパク質低下および悪液質の減少の治療；膵島細胞症を含む高インスリン血症の治療、排卵誘発のためのアジュバント療法；胸腺の発育を刺激するためおよび加齢に伴う胸腺機能の衰退を防ぐため、免疫抑制患者の治療、筋肉強度、運動性の向上、高齢者における皮膚の厚さ、代謝恒常性、腎恒常性の維持、骨芽細胞、骨再造形および軟骨成長の刺激、伴生動物における免疫系の刺激、伴生動物における高齢疾患の治療、家畜の成長促進並びにヒツジにおける羊毛成長の刺激。
上記適用のための用量は、使用する式Ｉの化合物、投与の形式、および所望する療法に依存して異なるだろう。しかしながら、一般に、内因性成長ホルモンの効果的放出を得るために0.0001〜100mg／kg体重／日の用量レベルが患者および動物に投与される。普通、経口、経鼻、肺または経皮投与に適する剤形は、医薬上許容される担体または希釈剤と混合した約0.0001mg〜約100mg、好ましくは約0.001mg〜約50mgの式Ｉの化合物を含んで成る。
所望により、本発明の医薬組成物は、別の活性を示す１または複数の化合物（例えば抗生物質または別の薬理活性物質）と組み合わせて式Ｉの化合物を含んで成ることができる。
投与経路は、活性化合物を適当なまたは所望の作用部位に効率的に運ぶ任意の経路、例えば経口、経鼻、肺、経皮または非経口であることができるが、経口経路が好ましい。
式Ｉの化合物は医薬用途の他に、成長ホルモンの放出の制御を研究するための有用な試験管内手段であることができる。
式Ｉの化合物は、下垂体の成長ホルモン放出能力を評価するための有用な生体内手段であることもできる。例えば、それらの化合物をヒトに投与する前と後に採取した血清試料を、成長ホルモンについてアッセイすることができる。各血清試料中の成長ホルモンの比較はそのまま、成長ホルモンを放出する患者の下垂体の能力を決めるだろう。
式Ｉの化合物は、それらの成長の速度および度合いを増加させるために、並びに乳生産を増加させるために、商業的に重要な動物に投与することができる。
式Ｉの成長ホルモン分泌性化合物の更なる使用は、別の分泌促進薬、例えばＧＨＲＰ（２または６）、ＧＨＲＨおよびそれの類似体、成長ホルモンおよびそれの類似体、またはソマトメジン（ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２を含む）、との併用である。
薬理学的方法
式Ｉの化合物は、ラット下垂体初代培養物において成長ホルモンを放出させるそれらの効力および活力について試験管内で評価することができる。
ラット下垂体細胞の単離は、O．Sartor他，Endocrinology 116，1985，952-957頁の変形である。雄のAlbino Sprague-Dawleyラット（250±25グラム）を
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から購入した。それらのラットをグループに分けてカゴに入れ（４匹／カゴ）、12時間の光周期で室内に置いた。室温は19〜24℃であり、湿度は30〜60％であった。
ラットを断頭し、下垂体を切除した。神経中葉を除去し、残りの組織を氷冷した単離緩衝液〔0.25％Ｄ−グルコース、２％非必須アミノ酸（Gibco 043-01140）および１％ウシ血清アルブミン（BSA）（Sigma A-4503）を補足したゲイ培地（Gibco 041-04030）〕中に即座に入れた。組織を小片に切り、3.8mg／mlのトリプシン（Worthington #3707 TRL-3）と330μｇ／mlのＤＮアーゼ（Sigma D-4527）を補足した単離緩衝液に移した。この混合物をO2／CO2の95/5％雰囲気下で37℃にて35分間、70回転／分でインキュベートした。次いでこの組織を上記緩衝液中で３回洗浄した。標準パスツールピペットを使って、該組織を吸引して単一細胞にした。分散後、ナイロンフィルター（160μｍ）を通して細胞を濾過し、未消化の組織を除去した。細胞懸濁液をトリプシンインヒビター（0.75mg／ml、Worthington #2829）が補足された単離緩衝液で３回洗浄し、最後に25mM HEPES（Sigma H-3375）、4mMグルタミン（Gibco 043-05030H）、0.075％炭酸水素ナトリウム（Sigma S-8875）、0.1％非必須アミノ酸、2.5％ウシ胎児血清（ＦＣＳ，Gibco 011-06290）、３％ウマ血清（Gibco 034-06050）、10％新鮮ラット血清、１nM Ｔ3（Sigma T-2752）および40μｇ／ｌデキサメタゾン（Sigma D-4902）pH7.3が補足されたＤＭＥＭ（Gibco 041-01965）培地中に、２×１０5細胞／mlの密度で再懸濁した。細胞をマイクロタイタープレート（Nunc，デンマーク）中に200-μｌ／ウエルで接種し、そして37℃および８％CO2において３日間培養した。
化合物の試験
培養後、細胞を刺激緩衝液〔１％ＢＳＡ（Sigma A-4503）、0.25％Ｄ−グルコース（Sigma G-5250）および25mM HEPES（Sigma H-3375）が補足されたハンクス平衡塩類溶液（Gibco 041-04020），pH7.3〕で２回洗浄し、次いで37℃で１時間予備インキュベートした。緩衝液を90μｌの刺激緩衝液（37℃）と交換した。10μｌの試験化合物溶液を添加し、プレートを37℃および５％CO2で15分間インキュベートした。培地をデカンテーションし、rGH SPA試験システムにおいてＧＨ含量について分析した。
全ての化合物を10pM〜100μMの範囲の用量で試験した。ヒルの等式を使って用量応答関係を作成した（Fig P，Biosoft）。効力（最大ＧＨ放出，Ｅmax）はＧＨＲＰ−６のＥmaxの％で表した。活力（ＥＣ50）は、ＧＨ放出の最大刺激の半量を誘導する濃度として決定した。
式Ｉの化合物はそれらの代謝安定性について評価することができる。
化合物を１μｇ／μｌの濃度で水に溶かした。この溶液25μｌを175μｌの各酵素溶液に添加した（酵素：基質比（w/w）が約１：５になるように）。得られた溶液を37℃で一晩放置した。様々な分解溶液10μｌを、分子イオンの特定イオンモニタリングを用いるフローインジェクション電子衝撃質量分析法（ESMS）を使って、対応するゼロ試料に対して分析した。ゼロ試料に比べて20％より大きくシグナルが減少したならば、分解の程度および部位を正確に同定するために、この溶液の残りをHPLCと質量分析法により分析した。
ペプチドを分解する種々の溶液の能力を確かめるために、幾つかの標準ペプチド（ACTH 4-10、アンギオテンシン1-14およびグルカゴン）を安定性試験に含めた。
標準ペプチド（アンギオテンシン1-14、ACTH 4-10およびグルカゴン）はSigma（MO，USA）から購入した。
酵素（トリプシン、キモトリプシン、エラスターゼ、アミノペプチダーゼＭ、並びにカルボキシペプチダーゼＹおよびＢ）は全て、Boehringer Mannheim GmbH（Mannheim，Germany）から購入した。
膵酵素混合物：100mM炭酸水素アンモニウムpH8.0中のトリプシン、キモトリプシンおよびエラスターゼ（全て0.025μｇ／μｌの濃度）。
カルボキシペプチダーゼ混合物：50mM酢酸アンモニウムpH4.5中のカルボシキペプチダーゼＹおよびＢ（各酵素の濃度0.025μｇ／μｌ）。
アミノペプチダーゼＭ溶液：100mM炭酸水素アンモニウムpH8.0中のアミノペプチダーゼＭ（0.025μｇ／μｌ）。
質量分析は２つの異なる質量分析計を使って実施した。電子射撃イオン源を装着したSciex API III三重四極子LC-MS機器（Sciex Instruments，Thornhill，Ontario）、およびBio-lon 20飛行時間型プラズマ脱着機器（Bio-lon Nordic AB，Uppsala，Sweden）。
化合物の定量（分解前後の）は、分析物のフローインジェクションを使って問題の分子イオンの単一イオンモニタリングによりAPI III機器上で行った。100μｌ／分の液体流量（MeOH：水＝1:1）をABI 140B HPLC装置（Perkin-Elmer Applied Biosystems Divisions，Foster City，CA）により制御した。機器パラメーターを標準作業条件に設定し、最強の分子イオン（多くは、二価の分子イオンに相当する）を使ってＳＩＭモニタリングを行った。
分解生成物の同定は更にプラズマ脱着式質量分析法（PDMS）の使用を含み、これにはニトロセルロースコーティングしたターゲット上への試料の適用と標準の機器セッティングを使った。これによって決定された質量の正確度は通常0.1％より良であった。
分解生成物の分離と単離は、HY-TACH C-18逆相4.6mm×105mm HPLCカラム（Hewlett-Packard Company，Palo Alto，CA）を使って標準アセトニトリル：ＴＦＡ分離勾配を使って実施した。使用したHPLCシステムはHP 1090M（Hewlett-Packard Company，Palo Alto，CA）であった。
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本明細書中に記載されるいずれかの新規特徴または特徴の組合せは本発明にとって不可欠であると考えられる。
化学的方法
式Ｉの幾つかの化合物または中間体は下記に示す反応順序の１つにより合成することができる。化合物の種類によって、別の例では異なる合成アプローチを必要とし得る。従って、各例の具体的な合成はその各例の説明の中に与えられる。
方法Ａ
スキーム１
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アルデヒド１を還元条件下で、例えば水素化シアノホウ素ナトリウムの存在下でエステル２と反応させてエステル３を与える。アミノ基の脱保護の後、閉環を行ってピペラジノン４を与える。当業界で周知のカップリング試薬、例えば１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩または１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩と１−ヒドロキシベンゾトリアゾールまたは１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾールとの組合せを使った、適当な溶媒、例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドまたはジクロロメタン中での適当な保護アミノ酸５との反応は、ピペラジノン６を与える。当業界で既知であり例えばT.W．Greene（Protective Groups in Organic Synthesis，第２版，John Wiley and Sons，New York，1991）により記載されている方法を使って、例えば酢酸エチル中の塩化水素またはトリフルオロ酢酸を使って脱保護を行った後、得られたアミン７を、適当な溶媒、例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドまたはジクロロメタン中で、当業界で既知のカップリング試薬、例えば１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩または１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩と１−ヒドロキシベンゾトリアゾールまたは１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾールとの組合せを使って、適当な保護アミノ酸８とカップリングせしめ、次いで当業界で既知であり例えばT.W．Greene（Protective Groups in Organic Synthesis，第２版，John Wiley and Sons，New York，1991）により記載されている方法を使って、例えば酢酸エチル中の塩化水素またはトリフルオロ酢酸を使って脱保護を行うことにより、式Ｉの化合物である９を与えることができる。
方法Ｂ
スキーム２
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スキーム２に記載の通りにジアゼピノンを合成し、そしてスキーム１と同様なやり方で、溶媒、例えばメタノール中で、脱水条件下で、例えば分子篩および水素化シアノホウ素ナトリウムの存在下で、カルボニル化合物１１をアミノエステル１０により還元アルキル化し、続いて１２から保護基を除去することによりペプチドに組み込むことができる。この中間体を環化せしめて１３を得ることができる。１３を中間体として用い、それを中間体４についてスキーム１に記載したのと同様に反応させて、式Ｉの化合物を与えることができる。
実施例：
式Ｉの化合物およびそれらを含有する製剤の調製方法を下記の実施例において更に説明する。しかしながら、この実施例は限定であると解釈してはならない。
化合物の構造は元素分析（ＭＡ）、核磁気共鳴分析（ＮＭＲ）または質量分析（ＭＳ）のいずれかにより確認される。ＮＭＲシフト（δ）は百万分率（ppm）で与えられ、抜粋したピークだけが与えられる。ｍｐは融点であり、℃で与えられる。カラムクロマトグラフィーはW.C．Still他，J．Org．Chem．1978，43，2923-2925により記載された技術を使って、Merck製シリカゲル60（Art 9385）上で実施した。出発物質として使用した化合物は既知の化合物であるか、またはそれ自体既知の方法により容易に調製することができる化合物である。
略号：
ＴＬＣ：薄層クロマトグラフィー
DMSO：ジメチルスルホキシド
min：分
ｈ：時間
HPLC分析：
方法Ａ１。
Vydac 218TP54 4.6mm×250mm 5μ C-18シリカカラム（The Separation Group，Hesperia）上で214，254，276および301nmでのＵＶ検出を使って、42℃にて１ml／分で溶出させることによりRP分析を行った。４Ｍ硫酸でpH2.5に調整した、0.1M硫酸アンモニウムから成る緩衝液中の５％アセトニトリルを使って、カラムを平衡化した。試料注入後、50分間に渡る同緩衝液中の５％→60％アセトニトリルの勾配により試料を溶出させた。
実施例１
（２Ｅ）−５−アミノ−５−メチルヘキサ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−１−（（２Ｒ）−２−ベンジル−３−オキソピペラジン−１−カルボニル）−２−（２−ナフチル）エチル）−Ｎ−メチルアミド：
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（２Ｒ）−２−（２−（tert−ブトキシカルボニルアミノ）エチルアミノ）−３−フェニルプロピオン酸メチルエステル：
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（２Ｒ）−２−アミノ−３−フェニルプロピオン酸メチルエステル（3.2g，15.0ミリモル）と（２−オキソエチル）カルバミン酸tert−ブチルエステル（3.2g，20.0ミリモル）〔Dueholm他、Org．Prep．Proced．Int．25（4），457-61（1993）の通りに調製〕をメタノール（100ml）と酢酸（５ml）の混合物に溶かした。そこに分子篩（３Å；100g）を加え、反応混合物を０℃に冷却した。水素化シアノホウ素ナトリウム（1.38g，22.0ミリモル）を分割して添加し、反応混合物を攪拌せずに12時間置いておいた。反応混合物を濾過し、そして水（100ml）、水性炭酸水素ナトリウム／炭酸ナトリウム（10％，100ml，pH９）および塩化メチレン（50ml）を濾液に加えた。水性相を塩化メチレン（２×50ml）で抽出し、合わせた有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥した。有機相を真空中で蒸発せしめた残渣を、溶離剤として酢酸エチル／ヘプタン（3:2）を用いたシリカ（４×40cm）上でのクロマトグラフィーにより精製して、2.07gの（２Ｒ）−２−（２−（tert−ブトキシカルボニルアミノ）エチルアミノ）−３−フェニルプロピオン酸メチルエステルを得た。
1H-NMR（CDCl3）：δ1.44（s，9H）；2.55（m，1H）；2.72（m，1H）；2.90（dd，1H）；2.97（dd，1H）；3.11（m，2H）；3.47（t，1H）；3.68（s，3H）；7.15-7.32（芳香族，5H）。
（２Ｒ）−２−（２−アミノエチルアミノ）−３−フェニルプロピオン酸メチルエステル：
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（２Ｒ）−２−（２−（tert−ブトキシカルボニルアミノ）エチルアミノ）−３−フェニルプロピオン酸メチルエステル（1.32g，4.094ミリモル）を塩化メチレン（10ml）に溶かし、そこにトリフルオロ酢酸（10ml）を加え、反応混合物を室温で１時間攪拌した。溶媒を真空中で蒸発させ、残渣を塩化メチレン（５ml）に溶かし、再び真空中で蒸発させた。塩化メチレン（５ml）を加え、再度真空中で蒸発させると、トルフルオロ酢酸塩として（２Ｒ）−２−（２−アミノエチルアミノ）−３−フェニルプロピオン酸メチルエステル1.14gを得た。
1H-NMR（DMSO-d6）：δ3.03-3.39（m，6H）；3.66（s，3H）；4.45（dd，1H）；7.21-7.39（芳香族，5H）。
（３Ｒ）−３−ベンジルピペラジン−２−オン：
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（２Ｒ）−２−（２−アミノエチルアミノ）−３−フェニルプロピオン酸メチルエステル（0.67g，1.49ミリモル）とトリエチルアミン（１ml）を塩化メチレン（10ml）に溶かし、そして室温で48時間攪拌した。反応混合物を蒸発させ、その残渣を、溶離剤としてエタノール／塩化メチレン（1:9）中の７％アンモニア溶液を使ったシリカ（2.5×30cm）上でのクロマトグラフィーにより精製して、0.18gの（３Ｒ）−３−ベンジルピペラジン−２−オンを得た。
1H-NMR（CDCl3）：δ1.72（s（br），1H）；2.81-3.48（m，6H）；3.62（dd，1H）；6.92（s（br），1H）；7.19-7.36（芳香族，5H）。
Ｎ−（（１Ｒ）−２−（（２Ｒ）−２−ベンジル−３−オキソピペラジン−１−イル）−１−（（２−ナフチル）メチル）−２−オキソエチル）−Ｎ−メチルカルバミン酸tert−ブチルエステル：
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（２Ｒ）−２−（tert−ブトキシカルボニルメチルアミノ）−３−（２−ナフチル）プロピオン酸〔J.R．Coggins，N.L．Benoitory，Can．J．Chem.49，1968（1971）に記載の通りに調製〕（0.327g，0.995ミリモル）を塩化メチレン（10ml）中に溶かした。そこに１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（0.135g，0.995ミリモル）とＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ′−エチルカルボジイミド塩酸塩（0.199g，1.042ミリモル）を添加し、反応混合物を室温で10分間攪拌した。次いで（３Ｒ）−３−ベンジルピペラジン−２−オン（0.180g，0.947ミリモル）とジイソプロピルエチルアミン（0.134g，1.042ミリモル）を加え、反応混合物を室温で12時間攪拌した。反応混合物を10％硫酸水素ナトリウム（20ml）、飽和炭酸水素ナトリウム（20ml）で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、そして真空中で蒸発させた。得られた残渣を、溶離剤として酢酸エチルを使ったシリカ（2.5×25cm）上でのクロマトグラフィーにより精製して、0.405gのＮ−（（１Ｒ）−２−（（２Ｒ）−２−ベンジル−３−オキソピペラジン−１−イル）−１−（（２−ナフチル）メチル）−２−オキソエチル）−Ｎ−メチルカルバミン酸tert−ブチルエステルを得た。
1H-NMR（CDCl3）：δ1.12，1.25，1.38（3 s，9H）；2.54，2.55，2.78（3 s，3H）；4.07，4.42，4.65，4.79，5.01，5.30（6 m，2H）；7.10-7.78（芳香族，12H）（回転異性体の混合物、抜粋したピーク）。
（３Ｒ）−３−ベンジル−４−（（２Ｒ）−２−メチルアミノ−３−（２−ナフチル）プロピオニル）ピペラジン−２−オン：
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Ｎ−（（１Ｒ）−２−（（２Ｒ）−２−ベンジル−３−オキソピペラジン−１−イル）−１−（（２−ナフチル）メチル）−２−オキソエチル）−Ｎ−メチルカルバミン酸tert−ブチルエステル
（0.405g，0.808ミリモル）を塩化メチレン（５ml）とトリフルオロ酢酸（５ml）に溶かし、室温で10分間攪拌した。水（10ml）と炭酸水素ナトリウムを加えてpH８に調整した。反応混合物を塩化メチレン（２×30ml）で抽出し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、そして真空中で蒸発させて、0.302gの（３Ｒ）−３−ベンジル−４−（（２Ｒ）−２−メチルアミノ−３−（２−ナフチル）プロピオニル）ピペラジン−２−オンを得た。
1H-NMR（CDCl3）：δ2.19，2.28（2 s，3H）；3.72，4.66（2 dd，1H）；4.96，5.32（2 dd，1H）（回転異性体の混合物、抜粋したピーク）。
３−ヒドロキシ−１，１−ジメチルプロピルカルバミン酸tert−ブチルエステル：
0004359859.tif 000042
０℃において、テトラヒドロフラン（10ml）中の３−tert−ブトキシカルボニルアミノ−３−メチルブタン酸（2.50g，11.5ミリモル）〔Schoen他、J．Med．Chem.，1994,第37巻，897-906頁およびその中に引用された文献を参照のこと〕とトリエチルアミン（1.92ml，13.8ミリモル）の溶液に、クロロ蟻酸エチル（1.10ml，11.5ミリモル）を滴下添加した。該溶液を０℃で40分間攪拌した。生成した沈澱を濾過し、テトラヒドロフラン（20ml）で洗浄した。濾液を即座に０℃に冷却し、そこにテトラヒドロフラン中の２Ｍ水素化ホウ素リチウム溶液（14.4ml，28.8ミリモル）を滴下添加した。得られた溶液を０℃で２時間攪拌し、次いで４時間に渡り室温にまで温めた。それを０℃に冷却し、メタノール（５ml）を加えた。１Ｎ塩酸（100ml）を添加した後、該溶液を酢酸エチル（２×100ml，３×50ml）で抽出した。合わせた有機抽出液を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（100ml）で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥した。溶媒を真空中で留去せしめた。溶離剤として酢酸エチル／ヘプタン（1:2）を用いたシリカ（110g）上でのクロマトグラフィーにより粗生成物を精製して、1.84gの３−ヒドロキシ−１，１−ジメチルプロピルカルバミン酸tert−ブチルエステルを得た。
1H-NMR（CDCl3）：δ1.33（s，6H）；1.44（s，9H）；1.88（t，2H）；1.94（br，1H）；3.75（q，2H）；4.98（br，1H）。
３−（tert−ブトキシカルボニルアミノメチル）−３−メチルブタナール：
0004359859.tif 000043
−78℃において、ジメチルスルホキシド（1.22ml，17.2ミリモル）をジクロロメタン（15ml）中の塩化オキサリル（1.1ml，12.9ミリモル）の溶液に添加した。混合物を−78℃で15分間攪拌し、そこにジクロロメタン（10ml）中の３−ヒドロキシ−１，１−ジメチルプロピルカルバミン酸tert−ブチルエステル（1.75g，8.6ミリモル）の溶液を15分間に渡り滴下添加した。生じた溶液を−78℃で更に15分間攪拌し、次いでトリエチルアミン（6.0ml，43ミリモル）を加えた。該溶液を−78℃で５分間攪拌した後、室温に温めた。この溶液をジクロロメタン（100ml）で希釈し、１Ｎ塩酸（100ml）で抽出した。水性相をジクロロメタン（50ml）で抽出した。合わせた有機相を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（100ml）で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、真空中で溶媒を留去した。得られた粗生成物を、酢酸エチル／ヘプタン（1:3）を用いたシリカゲル（140g）上でのカラムクロマトグラフィーにより精製して、1.10gの３−（tert−ブトキシカルボニルアミノメチル）−３−メチルブタナールを得た。
1H-NMR（CDCl3）：δ1.39（s，6H）；1.45（s，9H）；2.85（d，2H）；4.73（br，1H）；9.80（t，1H）。
（２Ｅ）−５−（tert−ブトキシカルボニルアミノ）−５−メチルヘキサ−２−エン酸エチルエステル：
0004359859.tif 000044
トリエチルホスホノアセテート（1.96ml，9.8ミリモル）をテトラヒドロフラン（30ml）に溶かし、そこにカリウムtert−ブトキシド（1.10g，9.8ミリモル）を加えた。生じた溶液を室温で40分間攪拌した。テトラヒドロフラン（６ml）中の３−（tert−ブトキシカルボニルアミノメチル）−３−メチルブタナール（1.10g，5.5ミリモル）の溶液をゆっくり加えた。該溶液を室温で75分間攪拌し、酢酸エチル（100ml）と１Ｎ塩酸（100ml）で希釈した。二相を分離し、水性相を酢酸エチル（２×50ml）で抽出した。合わせた有機相を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（60ml）で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、溶媒を真空中で留去した。得られた粗生成物を、酢酸エチル／ヘプタン（1:4）を用いたシリカ（90g）上でのカラムクロマトグラフィーにより精製して、1.27gの（２Ｅ）−５−（tert−ブトキシカルボニルアミノ）−５−メチルヘキサ−２−エン酸エチルエステルを得た。
1H-NMR（CDCl3）：δ1.30（s，6H）；1.30（t，3H）；1.46（s，9H）；2.62（d，2H）；4.27（q，2H）；4.42（br，1H）；5.88（d，1H）；6.94（td，1H）。
（２Ｅ）−５−（tert−ブチルオキシカルボニルアミノ）−５−メチルヘキサ−２−エン酸：
0004359859.tif 000045
（２Ｅ）−５−（tert−ブトキシカルボニルアミノ）−５−メチルヘキサ−２−エン酸エチルエステル（1.23g，4.54ミリモル）をジオキサン（20ml）に溶かし、そこに水酸化リチウム（0.12g，5.00ミリモル）を固体のまま添加した。透明溶液が得られるまで水（10ml）を加えた。その溶液を室温で16時間攪拌し、水（70ml）で希釈し、そしてtert−ブチルメチルエーテル（２×100ml）で抽出した。水性相を１Ｎ硫酸水素ナトリウム溶液で酸性にし（pH１）、tert−ブチルメチルエーテル（３×70ml）で抽出した。これらの有機相を合わせ、硫酸マグネシウム上で乾燥した。溶媒を真空中で留去して、1.05gの（２Ｅ）−５−（tert−ブチルオキシカルボニルアミノ）−５−メチルヘキサ−２−エン酸を得た。粗生成物をそのまま次の合成に使用した。
1H-NMR（DMSO-d6）：δ1.15（s，6H）；1.35（s，9H）；2.53（d，2H）；5.75（d，1H）；6.57（br，1H）；6.75（td，1H）；12.15（s，1H）。
（（３Ｅ）−４−（Ｎ−（（１Ｒ）−２−（（２Ｒ）−２−ベンジル−３−オキソピペラジン−１−イル）−１−（（２−ナフチル）メチル）−２−オキソエチル）−Ｎ−メチルカルバモイル）−１，１−ジメチルブタ−３−エニル）カルバミン酸tert−ブチルエステル：
0004359859.tif 000046
（２Ｅ）−５−（tert−ブチルオキシカルボニルアミノ）−５−メチルヘキサ−２−エン酸（0.145g，0.599ミリモル）を塩化メチレンに溶かした。そこに１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（0.081g，0.599ミリモル）とＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ′−エチルカルボジイミド塩酸塩（0.126g，0.658ミリモル）を添加し、反応混合物を15分間攪拌した。次いで（３Ｒ）−３−ベンジル−４−（（２Ｒ）−２−メチルアミノ−３−（２−ナフチル）プロピオニルピペラジン−２−オン（0.24g，0.599ミリモル）とジイソプロピルエチルアミン（0.077g，0.599ミリモル）を加え、反応混合物を室温で12時間攪拌した。反応混合物を硫酸水素ナトリウム（100ml）と炭酸水素ナトリウム（100ml）で洗浄し、有機相を真空中で蒸発させた。得られた残渣を、溶離剤として酢酸エチルを使ったシリカ（2.5×20cm）上でのクロマトグラフィーにより精製して、0.332gの（（３Ｅ）−４−（Ｎ−（（１Ｒ）−２−（（２Ｒ）−２−ベンジル−３−オキソピペラジン−１−イル）−１−（（２−ナフチル）メチル）−２−オキソエチル）−Ｎ−メチルカルバモイル）−１，１−ジメチルブタ−３−エニル）カルバミン酸tert−ブチルエステルを得た。
1H-NMR（CDCl3）（回転異性体の混合物、主回転異性体についての抜粋したピーク）：δ1.24（s，3H）；1.27（s，3H）；1.42（s，9H）；2.72（s，3H）；5.30（dd，1H）；5.81（dd，1H）；6.18（d，1H）；6.82（m，1H）。
（（３Ｅ）−４−（Ｎ−（（１Ｒ）−２−（（２Ｒ）−２−ベンジル−３−オキソピペラジン−１−イル）−１−（（２−ナフチル）メチル）−２−オキソエチル）−Ｎ−メチルカルバモイル）−１，１−ジメチルブタ−３−エニル）カルバミン酸tert−ブチルエステル（0.32g，0.511ミリモル）を塩化メチレン（４ml）に溶かし、そこにトリフルオロ酢酸（４ml）を加えた。反応混合物を室温で12時間攪拌した後、塩化メチレン（50ml）と水（50ml）を加えた。次いでpH８になるまで炭酸水素ナトリウムを加えた。有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥し、真空中で蒸発せしめて、0.232gの表題化合物を得た。
1H-NMR（CDCl3）：δ1.14，1.15，1.22，1.23（4 s，6H）；4.05，4.60，4.76，5.12，5.38，5.81（6 dd，2H）；6.18，6.22（d，1H）；6.70，6.81（2 m，1H）（回転異性体の混合物、抜粋したピーク）。
ESMS：m/z＝527（M+H）+
HPLC（Ａ１）：ｒt＝31.03分。
実施例２
（２Ｅ）−５−アミノ−３，５−ジメチルヘキサ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−１−（（２Ｒ）−２−ベンジル−３−オキソピペラジン−１−カルボニル）−２−（２−ナフチル）エチル）−Ｎ−メチルアミド：
0004359859.tif 000047
（１，１−ジメチル−３−オキソブチル）カルバミン酸tert−ブチルエステル：
0004359859.tif 000048
ジアセトンアミンシュウ酸水素塩（30.0g，146ミリモル）をテトラヒドロフラン（400ml）に懸濁した。そこに水酸化ナトリウム水溶液（１Ｎ，146ml）を加えた。ジ−tert−ブチルジカーボネート（38.3g，175ミリモル）をテトラヒドロフラン（100ml）に溶かし、この溶液を反応混合物に滴下添加した。反応混合物を室温で２時間攪拌し、水酸化ナトリウム（１Ｎ，146ml）を加え、反応混合物を室温で12時間攪拌した。水（200ml）と酢酸エチル（200ml）を加えた。水性相を酢酸エチル（４×200ml）で抽出し、合わせた有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥し、真空中で溶媒を留去した。得られた残渣を、溶離剤として酢酸エチル／ヘプタン（1:3）を用いたシリカ（６×40cm）上でのクロマトグラフィーにより精製して、28.4gの（１，１−ジメチル−３−オキソブチル）カルバミン酸tert−ブチルエステルを得た。
1H-NMR（CDCl3）：δ1.34（s，6H）；1.42（s，9H）；2.14（s，3H）；2.86（s，2H）；4.85（s，1H）。
（Ｅ）−５−tert−ブトキシカルボニルアミノ−３，５−ジメチルヘキサ−２−エン酸エチルエステル：
0004359859.tif 000049
トリエチルホスホノアセテート（4.7g，20.9ミリモル）をテトラヒドロフラン（36ml）に溶かし、そこにカリウムtert−ブトキシド（2.3g，20.9ミリモル）を加え、反応混合物を室温で40分間攪拌した。（１，１−ジメチル−３−オキソブチル）カルバミン酸tert−ブチルエステル（2.5g，11.6ミリモル）をテトラヒドロフラン（15ml）に溶かし、その溶液を反応混合物に滴下添加し、反応混合物を加熱して12時間還流させた。酢酸エチル（100ml）と塩酸（１Ｎ，100ml）を加え、相を分離した。水性相を酢酸エチル（３×50ml）で抽出した。合わせた有機相を炭酸水素ナトリウム水溶液（飽和、100ml）で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、真空中で蒸発させた。得られた残渣を、溶離剤として酢酸エチル／ヘプタン（1:2）を用いたシリカ（３×40cm）上でのクロマトグラフィーにより精製して、2.0gの（Ｅ）−５−tert−ブトキシカルボニルアミノ−３，５−ジメチルヘキサ−２−エン酸エチルエステルを得た。
1H-NMR（CDCl3）：δ1.25（t，3H）；1.30（s，6H）；1.44（s，9H）；2.21（s，3H）；2.58（s，2H）；4.14（q，2H）；4.48（s，1H）；5.65（s，1H）。
（２Ｅ）−５−tert−ブトキシカルボニルアミノ−３，５−ジメチルヘキサ−２−エン酸：
0004359859.tif 000050
（Ｅ）−５−tert−ブトキシカルボニルアミノ−３，５−ジメチルヘキサ−２−エン酸エチルエステル（1.95g，6.83ミリモル）を１，４−ジオキサン（25ml）と水（15ml）に溶かした。そこに水酸化リチウム（0.18g，7.52ミリモル）を添加し、反応混合物を室温で12時間攪拌した。水（150ml）とtert−ブチルメチルエーテル（150ml）を加え、水性相を硫酸水素ナトリウム水溶液（10％）でpH2.5になるまで希釈した後、tert−ブチルメチルエーテル（３×100ml）で抽出した。合わせた有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥し、真空中で蒸発させた。得られた残渣をヘプタン（20ml）から再結晶して、0.6gの（２Ｅ）−５−tert−ブトキシカルボニルアミノ−３，５−ジメチルヘキサ−２−エン酸を得た。
1H-NMR（CDCl3）：δ1.29（s，6H）；1.44（s，9H）；2.23（s，3H）；2.62（s，2H）；4.45（s，1H）；5.66（s，1H）。
実施例１に記載したのと同様にして残りの合成を進めて、表題化合物を得た。最後のカップリング段階において（２Ｅ）−５−tert−ブトキシカルボニルアミノ−５−メチルヘキサ−２−エン酸の代わりに（２Ｅ）−５−tert−ブトキシカルボニルアミノ−３，５−ジメチルヘキサ−２−エン酸を使った。
1H-NMR（CDCl3）（主回転異性体についての抜粋したピーク）：δ1.37（s，6H）；2.09（s，2H）；2.50（s，3H）；2.78（s，3H）；4.67（dd，1H）；5.05（dd，1H）；5.89（s，1H）。
ESMS：m/z＝541.7（M+H）+
HPLC（Ａ１）：ｒt＝32.40分。
実施例３
（２Ｅ）−５−メチル−５−（メチルアミノ）ヘキサ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−１−（（２Ｒ）−２−ベンジル−３−オキソピペラジン−１−カルボニル）−２−（２−ナフチル）エチル）−Ｎ−メチルアミド：
0004359859.tif 000051
（２Ｅ）−５−（Ｎ−（tert−ブチルオキシカルボニル）−Ｎ−メチルアミノ）−５−メチルヘキサ−２−エン酸：
0004359859.tif 000052
（２Ｅ）−５−（tert−ブトキシカルボニルアミノ）−５−メチルヘキサ−２−エン酸（5.00g，20.6ミリモル）をテトラヒドロフラン（70ml）に溶かした。そこにヨウ化メチル（10.3ml，164ミリモル）を加え、溶液を０℃に冷却した。水素化ナトリウム（油中60％）（2.07g，61.6ミリモル）を分割して添加し、溶液を室温で４日間攪拌した。酢酸エチル（70ml）と水（60ml）を滴下添加し、溶媒を真空中で留去した。得られた粗生成物を水（40ml）とジエチルエーテル（40ml）に溶かした。有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（30ml）で洗浄した。水性相を混合し、そして５％水性クエン酸を加えてpH3に調整した。水性相を酢酸エチル（４×50ml）で抽出した。合わせた有機抽出液を水（２×40ml）、チオ硫酸ナトリウム水溶液（５％，40ml）、および水（40ml）で順次洗浄し、MgSO4上で乾燥し、そして溶媒を真空中で留去した。残渣を酢酸エチル（45ml）に溶かし、硫酸水素ナトリウム水溶液（10％，３×30ml）で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、真空中で濃縮して、4.00ｇの（２Ｅ）−５−（Ｎ−（tert−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メチルアミノ）−５−メチルヘキサ−２−エン酸を得た。
1H-NMR（CDCl3）：δ1.38（s，6H）；1.45（s，9H）；2.80（d，2H）；2.85（s，3H）；5.88（d，1H）；7.01（q，1H）。
実施例１に記載したのと同様にして残りの合成を進めて、表題化合物を得た。ただし最後のカップリング段階において（２Ｅ）−５−（tert−ブチルオキシカルボニルアミノ）−５−メチルヘキサ−２−エン酸の代わりに（２Ｅ）−５−（Ｎ−（tert−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メチルアミノ）−５−メチルヘキサ−２−エン酸を使った。
1H-NMR（CDCl3）（主回転異性体についての抜粋したピーク）：δ1.38（s，3H）；1.44（s，3H）；2.69（s，3H）；2.88（s，3H）；4.44（dd，1H）；4.52（dd，1H）；6.34（d，1H）。
ESMS：m/z＝541.9（M+H）+
HPLC（Ａ１）：ｒt＝31.37分。
実施例４
（２Ｅ）−５−メチル−５−メチルアミノヘキサ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−１−（（２Ｒ，５Ｒ）−２−ベンジル−５−メチル−３−オキソピペラジン−１−カルボニル）−２−（２−ナフチル）エチル）−Ｎ−メチルアミド：
0004359859.tif 000053
この化合物は実施例１および３に記載の手順を使って調製した。Boc-グリシナールの代わりにL-Boc-アラニナールを使った。
1H-NMR（CDCl3）（主回転異性体についての抜粋したピーク）：δ1.21（d，3H）；1.32（s，3H）；1.40（s，3H）；2.63（s，3H）；2.88（s，3H）；4.42（dd，1H）；4.60（dd，1H）；6.26（d，1H）。
ESMS：m/z＝555.9（M+H）+
HPLC（Ａ１）：ｒt＝32.30分。
実施例５
（２Ｅ）−５−アミノ−５−メチルヘキサ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−２−（（２Ｒ）−２−ベンジル−４−メチル−３−オキソピペラジン−１−イル）−１−（（２−ナフチル）エチル）−２−オキソエチル）−Ｎ−メチルアミド：
0004359859.tif 000054
（３Ｒ）−４−tert−ブチルオキシカルボニル−３−ベンジルピペラジン−２−オン：
0004359859.tif 000055
（３Ｒ）−３−ベンジルピペラジン−２−オン（実施例１から）（1.3g）をＴＨＦ（20ml）に溶かし、そこに水性水酸化ナトリウム（１Ｍ，７ml）を加えた。Boc-無水物（1.8ｇ）をＴＨＦ（10ml）に溶かし、それを滴下添加した。生じた混合物を一晩攪拌した。ＴＨＦを真空中で留去し、残渣に水（10ml）を加え、水性相を酢酸エチル（２×50ml）で抽出した。合わせた有機相を乾燥し（硫酸マグネシウム）、溶媒を真空中で留去し、得られた残渣を、溶離剤として酢酸エチルを使ったシリカ上でのクロマトグラフィーにより精製して、750mgの（３Ｒ）−４−tert−ブチルオキシカルボニル−３−ベンジルピペラジン−２−オンを得た。
1H-NMR（CDCl3）（主回転異性体）：δ1.31（s，9H）；2.85（t，1H）；3.10（m，2H）；3.25（m，2H）；3.42（t，2H）；4.80（m，1H）；6.40（s，1H）；7.12-7.35（芳香族，5H）。
（３Ｒ）−４−tert−ブチルオキシカルボニル−１−メチル−３−ベンジルピペラジン−２−オン：
0004359859.tif 000056
（３Ｒ）−４−tert−ブチルオキシカルボニル−３−ベンジルピペラジン−２−オン（実施例１参照）（400mg，1.4ミリモル）をKOH(300mg，5.5ミリモル）とDMSO（３ml）の混合物に添加した。ヨウ化メチル（400mg，2.7ミリモル）を加え、混合物を１時間攪拌した。塩化メチレン（20ml）を加え、有機相を水（５×10ml）で洗浄した。真空中で溶媒を留去して、220mgの（３Ｒ）−４−tert−ブチルオキシカルボニル−１−メチル−３−ベンジルピペラジン−２−オンを得た。
1H-NMR（CDCl3）：δ1.21（s，9H）；2.97（s，3H）；4.13（dd，1H）。
実施例１と同様にして残りの段階を実施して表題化合物を得た。
1H-NMR（CDCl3）（主回転異性体についての抜粋したピーク）：δ1.15（s，6H）；2.30（d，2H）；2.54（s，3H）；2.74（s，3H）；4.05（dd，1H）；5.72（dd，1H）；6.19（d，1H）。
ESMS：m/z＝541.9（M+H）+
HPLC（Ａ１）：ｒt＝27.70分。
実施例６
（２Ｅ）−５−メチル−５−アミノヘキサ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−１−（（２Ｒ，５Ｒ）−２−ベンジル−５−メチル−３−オキソピペラジン−１−カルボニル）−２−（２−ナフチル）エチル）−Ｎ−メチルアミド：
0004359859.tif 000057
表題化合物は実施例１および４に記載の手順を使って調製した。
1H-NMR（CDCl3）：δ1.09（d，3H）；1.31（s，6H）；2.74（s，3H）；5.12（dd，1H）；6.18（d，1H）。
ESMS：m/z＝541.7（M+H）+
HPLC（Ａ１）：ｒt＝32.12分。
実施例７
（２Ｅ）−４−（１−アミノシクロブチル）ブタ−２−エン酸Ｎ−メチル−Ｎ−（（１Ｒ）−２−（２−ナフチル）−１−（（２Ｒ）−３−オキソ−２−（（２−チエニル）メチル）ピペラジン−１−カルボニル）エチル）アミド：
0004359859.tif 000058
表題化合物はSchoen他、J．Med．Chem.，1994，第37巻，897-906頁の手順を使って、イソブチレンの代わりにメチレンシクロブタンをそしてＤ−フェニルアラニンの代わりにＤ−チエニルアラニンを用いて調製した。
表題化合物は実施例１および４に記載の手順を使って調製した。
1H-NMR（CDCl3）：δ3.01（s，3H）；4.76（dd，1H）；5.15（t，1H）；6.34（d，1H）。
ESMS：m/z＝546.0（M+H）+
HPLC（Ａ１）：ｒt＝31.05分。
実施例８
（２Ｅ）−５−アミノ−５−メチルヘキサ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−２−（（２Ｒ）−２−ベンジル−３−オキソピペラジン−１−イル）−１−（（ビフェニル−４−イル）メチル）−２−オキソエチル）−Ｎ−メチルアミド：
0004359859.tif 000059
表題化合物は実施例１に記載の手順を使って、２−ナフチルアラニンの代わりに４，４′−ビフェニルアラニンを使って調製した。
1H-NMR（CDCl3）：δ1.18（s，6H）；2.77（s，1H）；5.31（dd，1H）；5.72（dd，1H）；6.21（dd，1H）。
ESMS：m/z＝554.1（M+H）+
HPLC（Ａ１）：ｒt＝34.62分。
実施例９
（２Ｅ）−４−（１−アミノシクロブチル）ブタ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−２−（（２Ｒ，５Ｒ）−２−ベンジル−５−メチル−３−オキソピペラジン−１−イル）−１−（（２−ナフチル）メチル）−２−オキソエチル）−Ｎ−メチルアミド：
0004359859.tif 000060
表題化合物はSchoen他、J．Med．Chem.，1994，第37巻，897-906頁の手順を使って、ただしイソブチレンの代わりにメチレンシクロブタンをそしてBoc-グリシナールの代わりにBoc-D-アラニナールを用いて調製した。
1H-NMR（CDCl3）（抜粋したピーク）：δ1.11（d，3H）；2.66（s，3H）；4.97（dd，1H）；5.85（dd，1H）；6.24（d，1H）；6.86（m，1H）。
ESMS：m/z＝554.0（M+H）+
HPLC（Ａ１）：ｒt＝32.3分。
実施例10
（２Ｅ）−５−メチル−５−メチルアミノヘキサ−２−エン酸Ｎ−メチル−Ｎ−（（１Ｒ）−１−（２−ナフチル）メチル−２−オキソ−２−（（２Ｒ）−３−オキソ−２−（（２−チエニル）メチル）ピペラジン−１−イル）エチル）アミド：
0004359859.tif 000061
表題化合物は実施例１に記載したのと同様にして、Ｄ−フェニルアラニンの代わりにＤ−チエニルアラニンを用いて調製した。
1H-NMR（CDCl3）：δ1.38（s，3H）；1.41（s，3H）；2.65（s，3H）；2.91（s，3H）；4.47（dd，1H）。
ESMS：m/z＝547.0（M+H）+
HPLC（Ａ１）：ｒt＝31.15分。
実施例11
（２Ｅ）−５−アミノ−５−メチルヘキサ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−２−（（２Ｒ）−２−ベンジル−４−メタンスルホニルピペラジン−１−イル）−１−（ナフタ−２−イルメチル）−２−オキソエチル）−Ｎ−メチルアミド：
0004359859.tif 000062
（３Ｒ）−３，４−ジベンジルピペラジン−２−オン：
0004359859.tif 000063
（３Ｒ）−３−ベンジルピペラジン−２−オン（4.1g，21.6ミリモル；実施例１に記載の通りに調製）をメタノール（40ml）に溶かした。そこにベンズアルデヒド（2.3g，21.6ミリモル）に続いて４Åの分子篩（２ｇ）を添加し、混合物を窒素雰囲気下で0.5時間攪拌した。酢酸（1.2ml）を加えた後、水素化シアノホウ素ナトリウム（2.0ｇ，32.4ミリモル）を20分間に渡り分割して添加した。反応混合物を一晩攪拌し、次いで濾過した。濾液から溶媒を蒸発させ、残渣を酢酸エチル（15ml）に溶かし、溶離剤として酢酸エチルを使ってシリカゲル上で精製して、2.6gの（３Ｒ）−３，４−ジベンジルピペラジン−２−オンを得た。
1H-NMR（CDCl3）：δ2.50（m，1H）；2.95（m，1H）；3.08（m，1H）；3.15-3.45（m，4H）；3.48（d，1H）；3.96（d，1H）；6.18（s，1H）；7.1-7.3（m，10H）。
（２Ｒ）−１，２−ジベンジルピペラジン：
0004359859.tif 000064
乾燥テトラヒドロフラン（30ml）中の（３Ｒ）−３，４−ジベンジルピペラジン−２−オン（2.5g，9.0ミリモル）の溶液を窒素雰囲気下に置き、そして氷浴上で攪拌した。そこに水素化リチウムアルミニウム（5.0ml，テトラヒドロフラン中1.0Ｍ）を15分間に渡り滴下添加した。次いで混合物を還流温度で２時間加熱した後、冷却した。水素化リチウムアルミニウムの別の部分（4.0ml，テトヒドロフラン中1.0Ｍ）を加え、混合物を１時間還流させた。混合物を放冷し、次いで水と４Ｎ水酸化ナトリウム溶液を使ってクエンチングした。酢酸エチル（50ml）を添加し、混合物を濾過した。溶媒を真空中で蒸発させて、2.0gの（２Ｒ）−１，２−ジベンジルピペラジンを得た。
1H-NMR（CDCl3）：δ2.20（m，1H）；2.55-2.82（m，7H）；3.15（dd，1H）；3.42（d，1H）；4.10（d，1H）；7.1-7.4（m，10H）。
（２Ｒ）−１，２−ジベンジル−４−メタンスルホニルピペラジン：
0004359859.tif 000065
ジクロロメタン（30ml）中の（２Ｒ）−１，２−ジベンジルピペラジン（2.0g，7.5ミリモル）の攪拌溶液に、メタンスルホニルクロリド（0.86g，7.5ミリモル）を加え、生じた混合物を周囲温度で１時間攪拌した。次いで炭酸カリウム（1.1g）を加え、攪拌を更に１時間続けた。ジクロロメタン（20ml）と水（10ml）を加えて相を分離した。有機相を水（10ml）で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥した。溶媒を真空中で留去して、2.2gの（２Ｒ）−１，２−ジベンジル−４−メタンスルホニルピペラジンを得た。
1H-NMR（CDCl3）：δ2.58（m，1H）；2.72（s，3H）；2.85-3.10（m，6H）；3.27（m，1H）；3.45（m，1H）；3.72（d，1H）；3.95（m，1H）；7.1-7.4（m，10H）。
（３Ｒ）−３−ベンジル−１−メタンスルホニルピペラジン塩酸塩：
0004359859.tif 000066
（２Ｒ）−１，２−ジベンジル−４−メタンスルホニルピペラジン（2.2g，6.4ミリモル）を窒素雰囲気下で乾燥１，２−ジクロロエタン（20ml）に溶かした。この混合物を氷浴上に置き、温度を０〜５℃に維持しながら乾燥１，２−ジクロロエタン（10ml）中のα−クロロエチルクロロホルメート（1.0g，7.04ミリモル）の溶液を添加した。添加が終了したら、氷浴上で15分間攪拌を続けた。反応混合物を油浴上でゆっくりと90℃に加熱し、還流温度で１時間加熱した。溶媒の大部分を蒸発させ、残渣を氷浴上で冷やした。メタノール（20ml）を加え、混合物を還流温度で１時間加熱した。周囲温度に冷却した後、ジエチルエーテル（30ml）をゆっくり添加し、混合物を30分間攪拌した。濾過により固体を単離し、ジエチルエーテルで洗浄し、そして乾燥して0.78gの（３Ｒ）−３−ベンジル−１−メタンスルホニルピペラジン塩酸塩を得た。m.p．204-208℃。
1H-NMR（DMSO-d6）：δ2.87-3.25（m，8H）；3.55-3.65（m，4H）；7.25-7.40（m，5H）。
１−〔（１Ｒ）−２−（（２Ｒ）−２−ベンジル−４−メタンスルホニルピペラジン−１−イル）−１−（ナフタ−２−イルメチル）−２−オキソエチル〕−Ｎ−メチルカルバミン酸tert−ブチルエステル：
0004359859.tif 000067
（２Ｒ）−（tert−ブトキシカルボニルメチルアミノ）−３−（２−ナフチル）プロピオン酸（0.86g，2.6ミリモル）をジクロロメタン（25ml）に溶かし、窒素雰囲気下に置いた。そこに（３Ｒ）−３−ベンジル−１−メタンスルホニルピペラジン塩酸塩（0.75g，2.6ミリモル）、Ｎ−メチルモルホリン（0.26g，2.6ミリモル）、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（0.39g，2.9ミリモル）およびＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ′−エチルカルボジイミド塩酸塩（0.55g，2.9ミリモル）を添加し、混合物を周囲温度で一晩攪拌した。ジクロロメタン（25ml）を加え、混合物を水（３×15ml）で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥した。溶媒を真空中で蒸発させて1.3gの油状残渣を得、溶離剤としてヘプタンと酢酸エチルの混合物（1:1）を使ったシリカゲル上でのクロマトグラフィーにより該残渣を精製し、0.65gのＮ−〔（１Ｒ）−２−（（２Ｒ）−２−ベンジル−４−メタンスルホニルピペラジン−１−イル）−１−（ナフタ−２−イルメチル）−２−オキソエチル〕−Ｎ−メチルカルバミン酸tert−ブチルエステルを固体として得た。m.p．76-80℃。
（２Ｒ）−１−（（２Ｒ）−２−ベンジル−４−メタンスルホニルピペラジン−１−イル）−２−メチルアミノ−３−（ナフタ−２−イル）プロパン−１−オン：
0004359859.tif 000068
Ｎ−〔（１Ｒ）−２−（（２Ｒ）−２−ベンジル−４−メタンスルホニルピペラジン−１−イル）−（１Ｒ）−１−（ナフタ−２−イルメチル）−２−オキソエチル〕−Ｎ−メチルカルバミン酸tert−ブチルエステル（0.63g，1.1ミリモル）を攪拌しながらジクロロメタン（10ml）に溶かし、窒素雰囲気下に置いた。そこにトリフルオロ酢酸（10ml）を添加し、15分間攪拌した。反応混合物をジクロロメタン（75ml）で希釈し、氷浴上に置き、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に次いで炭酸カリウム水溶液をpH10まで加えた。相を分離し、水性相をジクロロメタン（50ml）で抽出した。合わせた有機抽出液を硫酸マグネシウム上で乾燥し、溶媒を真空中で留去した。この結果、固体として0.51gの（２Ｒ）−１−（（２Ｒ）−２−ベンジル−４−メタンスルホニルピペラジン−１−イル）−２−メチルアミノ−３−（ナフタ−２−イル）プロパン−１−オンを得た。m.p．165-168℃。
（（３Ｅ）−４−（Ｎ−（（１Ｒ）−２−（（２Ｒ）−２−ベンジル−４−メタンスルホニルピペラジン−１−イル）−１−（ナフタ−２−イルメチル）−２−オキソエチル）−Ｎ−メチルカルバモイル）−１，１−ジメチルブタ−３−エニル）カルバミン酸tert−ブチルエステル：
0004359859.tif 000069
（２Ｅ）−５−（tert−ブチルオキシカルボニルアミノ）−５−メチルヘキサ−２−エン酸（0.49g，2.0ミリモル）をジクロロメタン（10ml）に溶かし、窒素雰囲気下に置いた。そこに１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（2.0ミリモル）とＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ′−エチルカルボジイミド塩酸塩（2.0ミリモル）を加え、混合物を15分間攪拌した。ジクロロメタン（10ml）中の１−（（２Ｒ）−２−ベンジル−４−メタンスルホニルピペラジン−１−イル）−（２Ｒ）−２−メチルアミノ−３−ナフタ−２−イルプロパン−１−オン（0.51g，1.1ミリモル）の溶液を加え、混合物を一晩攪拌した。次いでジクロロメタン（50ml）を加えた後、混合物を水で洗浄した（２×50ml）。合わせた水性相をジクロロメタン（50ml）で抽出した。合わせた有機抽出液を硫酸マグネシウム上で乾燥し、溶媒を真空中で留去し、1.0gの残渣を得た。この残渣を、溶離剤としてヘプタンと酢酸エチルの混合物（3:7）を用いたシリカゲル上でのクロマトグラフィーにより精製して、0.55gの（（３Ｅ）−４−（Ｎ−（（１Ｒ）−２−（（２Ｒ）−２−ベンジル−４−メタンスルホニルピペラジン−１−イル）−１−（ナフタ−２−イルメチル）−２−オキソエチル）−Ｎ−メチルカルバモイル）−１，１−ジメチルブタ−３−エニル）カルバミン酸tert−ブチルエステルを得た。
ＴＬＣ：Ｒf＝0.33（ヘプタン／酢酸エチル＝3:7）。
（（３Ｅ）−４−（Ｎ−（（１Ｒ）−２−（（２Ｒ）−２−ベンジル−４−メタンスルホニルピペラジン−１−イル）−１−（ナフタ−２−イルメチル）−２−オキソエチル）−Ｎ−メチルカルバモイル）−１，１−ジメチルブタ−３−エニル）カルバミン酸tert−ブチルエステル（0.54g，0.78ミリモル）を攪拌しながら乾燥ジクロロメタン（10ml）に溶かし、そこにトリフルオロ酢酸（10ml）を加えた。混合物を周囲温度で８分間攪拌した後、ジクロロメタン（50ml）で希釈した。混合物を氷浴上に置き、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、次いで炭酸カリウム水溶液をpH10まで加えた。相を分離し、水性相をジクロロメタン（20ml）で抽出した。合わせた有機抽出液を硫酸マグネシウム上で乾燥し、溶媒を真空中で留去した。この結果、0.33gの（２Ｅ）−５−アミノ−５−メチルヘキサ−２−エン酸Ｎ−（（１Ｒ）−２−（（２Ｒ）−２−ベンジル−４−メタンスルホニルピペラジン−１−イル）−１−（ナフタ−２−イルメチル）−２−オキソエチル）−Ｎ−メチルアミドを得た。
1H-NMR（CDCl3）：δ1.17（s，3H）；1.20（s，3H）；1.8-3.65（複合m）；4.10（d，1H）；4.55+4.88（d+m，1H）；5.82+6.03（t+dd，1H）；6.28（dd，1H）；6.81+6.95（dt+dt，1H）；7.15-7.80（m 12H）。