(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ゲンチオビオースを有効成分として含有することを特徴とするカルシウム吸収促進剤。
【請求項２】
ゲンチオビオースを少なくとも含有するβ−グルコシド結合を有するβ−グルコ２糖画分を有効成分として含有することを特徴とするカルシウム吸収促進剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、ゲンチオビオースを有効成分とするカルシウム吸収促進剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
β−グルコオリゴ糖は、β−グルコシド結合からなる化合物で、グルコースをβ−１，６結合及び／又はβ−１，４結合させて得られる糖質であり、これらのβ−グルコシド結合は、体内酵素で分解できないため、低カロリーの糖質として利用できることが知られており、各種の飲食物への添加剤として利用することができる。
【０００３】
また、本出願人による特開平３−２６２４６０号には、β−グルコオリゴ糖がビフィズス菌及び乳酸菌に対する増殖促進効果を有していることを見出し、β−グルコオリゴ糖からなる腸内フローラ（腸内における細菌叢）改善物質が開示されている。更に、β−グルコオリゴ糖は保湿性に富むことから、食品の保湿剤の他、結晶防止剤、照り、ボディなどの付与剤などとしての効果も確認され、医薬品としても利用することができる。
【０００４】
一方、カルシウム吸収促進剤としては、ビタミンＤがよく知られている。しかしながら、ビタミンＤは、カルシウムの吸収促進効果はあるものの、その発現機構ではホルモンによる恒常性を受け、目的とするカルシウム量を吸収する効果が乏しいという問題があった。
【０００５】
また、乳糖などの糖質にカルシウム吸収促進効果が認められており、また、ビフィズス菌の増殖促進因子として知られているが、ガラクトオリゴ糖やフラクトオリゴ糖にもミネラルの吸収を促進する効果のあること（日本栄養・食糧学会誌、第４４巻、２８７−２９１頁、１９９１年）が報告されており、更に、特開平４−１３４０３１号には、ガラクトオリゴ糖を有効成分とするカルシウム吸収促進剤が、特開平６−２０５６５３には、ラクチュロースオリゴ糖を有効成分とするミネラル吸収促進剤が、特開平６−２０５６５４には、分岐ガラクトオリゴ糖を有効成分とするミネラル吸収促進剤が、特開平５−６７には、食物繊維、カルシウム、及びマルチトールを含有する飲食物がそれぞれ開示されている。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、乳糖や、マルチトールなどの糖質は、大量に摂取すると下痢などの症状が現れるという問題があった。
【０００７】
したがって、本発明の目的は、カルシウムの吸収促進効果を有しており、上記糖質のように下痢症状を起こしにくい、カルシウム吸収促進剤を提供することにある。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、カルシウムの吸収を促進する物質について鋭意検討を進め、β−グルコシド結合を有するβ−グルコ２糖画分がカルシウムの吸収性を促進し、中でも、ゲンチオビオースが優れていることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００９】
すなわち、本発明の第１は、ゲンチオビオースを有効成分として含有することを特徴とするカルシウム吸収促進剤を提供することである。また、本発明の第２は、ゲンチオビオースを少なくとも含有するβ−グルコシド結合を有するβ−グルコ２糖画分を有効成分として含有することを特徴とするカルシウム吸収促進剤を提供することである。
【００１１】
本発明の有効成分であるゲンチオビオース、並びにゲンチオビオースを少なくとも含有するβ−グルコシド結合を有するβ−グルコ２糖画分（以下、これらを総称して「β−グルコオリゴ糖」とする）は、カルシウムの吸収性を促進する効果がある。このため、上記β−グルコオリゴ糖を配合した医薬品及び飲食物は、カルシウムの補給に有用であり十分量のカルシウムを高い効率で摂取することができ、しかも、β−グルコオリゴ糖は小腸では消化、吸収されないが、大腸において腸内細菌、特にビフィズス菌、乳酸菌により資化され、一部有機酸として吸収されるので下痢症状が起きない。
【００１２】
【発明の実施の形態】
以下、本発明について好ましい態様を挙げて、更に詳細に説明する。
本発明のカルシウム吸収促進剤の有効成分であるβ−グルコオリゴ糖は、その製造方法を特に限定するものではなく、例えばセルロース、ラミナラン、プスツラン等のβ−グルコシド結合よりなる多糖類の分解によって得る方法や、β−グルコシダーゼなどの縮合・糖転移反応を利用して得る方法などを採用することができる。
【００１３】
しかし、先に本発明者らが提案した特開平１−２２２７７９号、特開平２−２１９５８４号に詳細に説明されている微生物起源のβ−グルコシダーゼをグルコース及び／又はβ−グルコオリゴ糖に作用させ、β−グルコシダーゼが具備する縮合・糖転移反応を利用することにより、容易に高収率で製造する方法を採用することが好ましい。
【００１４】
この製造方法の概略を説明すると、β−グルコシダーゼとしては、各種微生物起源のものを用いることが可能であり、例えば、糸状菌のトリコデルマ・ビリディ（Trichoderma viride) 、 トリコデルマ・リーサイ(Trichoderma reesei) 、トリコデルマ・コニンギー(Trichoderma koningii)、アスペルギルス・ニガー（Aspergillus niger)、ペニシリウム・フリクエンタンス（Penicillium frequentans)等、 木材腐朽菌のポリポラス・トゥリピフェリー(Polypolus tulipiferae) 、クリソスポリウム・リグノルム(Chrysosporium lignorum)、 シゾフィラム・コミューン  (Shizophyllum commune)等、また、細菌のシュードモナス・フルオレッセンス(Pseudomonas fluorescens var.cellulosa)、セルロモナス・ウダ（Cellulomonasuda) 、 クロストリディウム・サーモセラム（Clostridium thermocellum) 、ルミノコッカス・アルバス(Ruminococcus albus)等の微生物起源の酵素が好ましく用いられる。これらの微生物は、いずれも公知のものであり容易に入手し、酵素を調製することができる。
【００１５】
また、基質としては、D-グルコ−ス及び／又はβ−グルコオリゴ糖が用いられる。ここで、基質となるβ−グルコオリゴ糖は、セロビオース、ゲンチオビオース、あるいはそれ以上の重合度のゲンチオオリゴ糖などを意味している。基質としてβ−グルコオリゴ糖を用いた場合には、本酵素反応によってより高重合度のβ−グルコオリゴ糖を得ることができる。特に好ましくは、基質としてグルコースが用いられる。
【００１６】
β−グルコシダーゼをグルコース及び／又はβ−グルコオリゴ糖に作用させると、反応生成物として、セロビオース、ゲンチオビオース、4-O-β-D- ゲンチオリゴシル-D- グルコース、6-O-β-D- ゲンチオオリゴシル-D- グルコースなどの各種β−グルコオリゴ糖が得られる。ここで、4-O-β-D- ゲンチオリゴシル-D- グルコースとは、4-O-β-D- ゲンチオビオシル-D- グルコース、4-O-β-D- ゲンチオトリオシル-D- グルコースあるいはそれ以上の重合度のものを意味する。また、6-O-β-D- ゲンチオオリゴシル-D- グルコースとは、6-O-β-D- ゲンチオビオシル-D- グルコース（ゲンチオトリオース）、6-O-β-D- ゲンチオトリオシル-D- グルコース（ゲンチオテトラオース）あるいはそれ以上の重合度のゲンチオオリゴ糖を意味する。
【００１７】
本発明のカルシウム吸収促進剤は、上記反応生成物として得られるβ−グルコオリゴ糖のうち、ゲンチオビオース、又はゲンチオビオースを少なくとも含有するβ−グルコシド結合を有するβ−グルコ２糖画分を有効成分として含有するものである。
【００１８】
本発明のカルシウム補給飲食物は、上記β−グルコオリゴ糖（ゲンチオビオース、又はゲンチオビオースを少なくとも含有するβ−グルコシド結合を有するβ−グルコ２糖画分）と、カルシウム原料とを含有するものである。カルシウム原料としては、食品に使用することができる天然物及び食品添加物であれば特に限定されるものではないが、クエン酸カルシウム、炭酸カルシウム、乳酸カルシウム、リン酸三カルシウム、リン酸一水素カルシウム、リン酸二水素カルシウム、塩化カルシウム、骨焼成カルシウム、未焼成カルシウム、貝殻焼成カルシウム、卵殻焼成カルシウムを単独、あるいは適宜組み合わせて使用することが好ましい。
【００１９】
本発明のカルシウム吸収促進剤は、以下に例示する各種飲食物や嗜好品に使用することができる。
醤油、みりん、マヨネーズ、ドレッシング、食酢、中華の素、天つゆ、ソース、ケチャップ、焼き肉のタレ、カレールー、シチューの素、スープの素、ダシの素、複合調味料、味噌などの各種調味料類。せんべい、あられ、餅類、まんじゅう、ういろう、あん類、羊羮、ゼリー、カステラ、飴玉などの各種和菓子類。パン、ビスケット、クラッカー、クッキー、パイ、プリン、バタークリーム、シュークリーム、スポンジケーキ、ドーナッツ、チョコレート、チューインガム、キャラメル、ハードキャンディーなどの各種洋菓子類。アイスクリーム、シャーベットなどの氷菓子類。果実のシロップ漬け、氷蜜などのシロップ類。フラワーペースト、ピーナッツペースト、フルーツペーストなどのペースト類。ジャム、ママレード、シロップ漬、糖果などの果実加工品、福神漬、千枚漬、らっきょう漬などの漬物類。ハム、ソーセージなどの畜産製品類。かまぼこ、竹輪などの魚肉製品、各種珍味、佃煮類。ビール、リキュール、酒等のアルコール飲料類。コーヒー、ココア、ジュース、炭酸飲料、スタミナドリンク、乳酸飲料、乳酸菌飲料などの清涼飲料水類。インスタントジュース、インスタントコーヒーなどの即席飲食品類。
【００２０】
本発明のカルシウム補給飲食物におけるβ−グルコオリゴ糖（ゲンチオビオース、又はゲンチオビオースを少なくとも含有するβ−グルコシド結合を有するβ−グルコ２糖画分）と、カルシウム原料との配合量は、β−グルコオリゴ糖が０．１〜５０重量部、カルシウム原料が０．００５〜２．５重量部であることが好ましい。
【００２１】
β−グルコオリゴ糖の配合量が０．１重量部未満では、期待するカルシウム吸収促進効果が得られず、５０重量部を超えると、特有の苦みが飲食物の風味、嗜好性を損ねるので好ましくない。
【００２２】
また、カルシウム原料の配合量が０．００５重量部未満では、飲食物を摂取することによるカルシウム強化効果が乏しくなり、２．５重量部を超えると、カルシウムの標準所要量を上回わり、カルシウムに由来するエグ味を感じるので好ましくない。
【００２３】
次に、本発明のカルシウム吸収促進剤の効果の発現機構は、まだよくわかってはいないが、本発明のカルシウム吸収促進剤を飲食することにより、小腸腸管の細胞間のすきま、いわゆるタイトジャンクションを開けられ、そのためカルシウムが受動拡散により生体内に取り込まれるものと考えられ、これはマルチトールなどの機構と同様であると考えられる（T ．Godaelal．J ．Nutr．Sci.  Vitaminol., 39，589-595 （1993），K.Kishi et al.，Lifc Sci.,59，1133−1140（1 996) )。また、本発明によるカルシウム吸収促進剤の効果の発現機構を考えると、カルシウムのみではなく、鉄などの様々なミネラル吸収を促進するものと考えられる。
【００２４】
また、β−グルコオリゴ糖が、本発明の効果でもある下痢症状を引き起こさない理由については、前述したように小腸では消化、吸収されないが、大腸において腸内細菌、特にビフィズス菌、乳酸菌により資化され、一部有機酸として吸収されるためと考えられる。なお、この点に関してより詳しくは、特開平３−２６２４６０号や、澱粉科学、第４０巻、第１号、２１−２７頁、１９９３に記載されている。
【００２５】
このように、本発明のカルシウム吸収促進剤は、医薬品、飲食物、嗜好品、飼料、餌料など経口使用するもの全般に添加して使用することができ、その形態も特に限定されず、例えば、医薬品に使用する場合において、錠剤、顆粒剤、カプセル剤、液剤等のいずれの形態とすることも可能である。
【００２６】
【実施例】
実施例１
β−グルコオリゴ糖を含有するシラップ（商品名「ゲントース＃８０」：日本食品化工株式会社製）を、内径２ｃｍ、長さ１２０ｃｍのジャケット付（６０℃）カラムにカチオン交換樹脂「Dowex99 」（Na+ 型、ダウケミカル社製）を充填した後、樹脂量あたり５〜７％（w/ v）の固形分となるように上記シラップを負荷し、空間速度（SV，hr-1）０．３５で分画し、β−グルコ２糖の画分（Gentose G2）を得た。この操作を１０回繰り返して１００ｇのβ−グルコ２糖の画分（Gentose G2）を得た。なお、上記においてβ−グルコ２糖とは、セロビオース、ソホロース、ラミナリビオース、ゲンチオビオースなどのβ−グルコシド結合からなる２糖類を意味する。
【００２７】
試験例１
体重約４００ｇのWistar系の雄ラットをネンブタール麻酔下で開腹し、回盲部より１０ｃｍ口側から上部の１５ｃｍの組織（回腸）を摘出した。２．５ｃｍずつの反転回腸片を作製し、穴をあけた円錐形のポリプロピレン管に固定した。漿膜側（内側）を０．３ｍｌの標準緩衝液（140mM NaCl，10mM KHCO3，0.4mM KH2PO4，2.4mM K2HPO4，pH7.4 ）で満たした。粘膜側（外側）の溶液には、ゲンチオビオース、セロビオース、乳糖あるいは実施例１で得られたGentose G2を100mM 添加し、更に10mMのCaCl2 を添加した標準緩衝液を用いた。本実施例で用いたゲンチオビオース、セロビオース、乳糖は市販の特級試薬を用いた。対照の粘膜側溶液には糖類を入れずにCaのみを添加した緩衝液を用いた。
【００２８】
粘膜側の溶液は３７℃に温置し、常に95％O2／5 ％CO2 の気泡を通した。経上皮Ca輸送速度は３０分後に一定になることが明らかにされているので、組織を溶液に浸漬してから３０分後に漿膜側溶液を新しいものに替え、更に３０分経過後に漿膜側溶液を採取した。漿膜側溶液中のCa濃度をオルトクレゾールフタレインコンプレクソンを用いる方法（商品名「カルシウム  Ｃテスト」、和光純薬製）で測定した。経上皮Ca輸送速度は、粘膜表面積１cm2 あたり３０分間に輸送されるCaの量をnmolで表した。
これらの結果を表１に示す。
【００２９】
【表１】
0004305685.tif 000002
【００３０】
ゲンチオビオース、セロビオース、Gentose G2のいずれも、糖質無添加のコントロールに比較してカルシウムの輸送を促進し、ゲンチオビオースでは約２．１倍、セロビオースでは約１．６倍、Gentose G2では約１．９倍の値を示した。特にゲンチオビオースは乳糖よりも高い輸送速度を示した。
【００３１】
実施例２
以下の表２に示す配合でカルシウム吸収促進効果を高めたヨーグルトゼリーを常法により製造した。
【００３２】
【表２】
0004305685.tif 000003
【００３３】
実施例３
以下の表３に示す配合でカルシウム吸収促進効果を高めた練りあんを常法により製造した。
【００３４】
【表３】
0004305685.tif 000004
【００３５】
実施例４
以下の表４に示す配合でカルシウム吸収促進効果を高めたココアケーキを常法により製造した。
【００３６】
【表４】
0004305685.tif 000005
【００３７】
実施例５
以下の表５に示す配合でカルシウム吸収促進効果を高めたココア風味のクッキーを常法により製造した。
【００３８】
【表５】
0004305685.tif 000006
【００３９】
実施例６
以下の表６に示す配合でカルシウム吸収促進効果を高めたパンプキンスープを常法により製造した。
【００４０】
【表６】
0004305685.tif 000007
【００４１】
【発明の効果】
以上説明したように、本発明によれば、上記β−グルコオリゴ糖（ゲンチオビオース、又はゲンチオビオースを少なくとも含有するβ−グルコシド結合を有するβ−グルコ２糖画分）によりカルシウム吸収促進効果を付与することができ、このβ−グルコオリゴ糖を配合した医薬品及び飲食物は、カルシウムの補給に有用であり、十分量のカルシウムを高い効率で摂取することができ、しかも、下痢症状を引き起こさない。