(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）  反応に対して特定的な初期の閾値ｄ0および最大の閾値ｄmax（＞ｄ0）ならびにステップ数ｎ、従ってステップの大きさｄs＝（ｄmax−ｄ0）／ｎに関する値と比率Ｑに関する限界値Ｑ0を決定し；
ｂ）  ｄ＝ｄ0〜ｄmaxの範囲について、それぞれのｄi＝（ｄ0＋(ｄs)＊ｉ）（ここでｉ＝０、・・・、ｎ）に対してＴiの値を測定し、
ｃ）  Ｔ0からＴmaxへと順序のついた系列から、ｉ＝１，・・・・，ｎに対して差Ｄi＝Ｔi−Ｔi-1をとり、そしてＤ1、・・・・、Ｄnの集合のうちから最大値Ｄmaxと最小値Ｄminを決定し、そして比率Ｑ＝Ｄmax／Ｄminを算出し、
ｄ）  さらに評価を進めるためにＱ≦Ｑ0である反応動力学のみを用い、Ｑ＞Ｑ0である反応動力学は非定常性が大きすぎるとして棄却する
段階が遂行される、反応に依存する変数（Ｓ）の変化を測定しそして限界値(ｄ)を越える時についての時間（Ｔ）を測定することにより反応の動力学が評価される、閾値法を用いて反応動力学を正確に評価する方法。
【請求項２】
非定常的であるとみなされる反応動力学が、ｄmaxに該当する時間Ｔmaxを現在の測定結果として採用することによっても評価される請求項１記載の方法。
【請求項３】
生物学的パラメータまたは分析目的物質を検出しまたは測定するために反応が用いられる、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
生物学的パラメータが凝固パラメータである請求項３記載の方法。
【請求項５】
凝固パラメータがプロトロンビン時間である請求項４記載の方法。
【請求項６】
請求項１から５のいずれか１項に記載の方法を用いて凝固パラメータを測定する方法。
【請求項７】
変数（Ｓ）にパラメータ依存性の変化を導く反応パートナーを生物学的物質の試料に添加し、請求項１から５のいずれか１項に記載の方法を用いて反応動力学が評価される、凝固パラメータを測定する方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は反応動力学（reaction kinetics）を正確に評価する方法に関し、いわゆる閾値法を用いて反応動力学を評価するものである。この種の曲線プロフィルは、周囲条件が制御されている際に、反応に依存する変数が初期状態から終末状態へと時間の経過に従って遷移するのが観察される場合に常に認められる。
閾値法はしばしば実用される方法である。このタイプの一つの方法は例えばＫＯＬＤＥによって述べられている（Behring Inst. Mitt. 78巻 (1985年), 176〜187ページ）。
【０００２】
２段階法を採用することにより、測定すべき対象に関して、特定の測定装置によって特性把握を行う方法がすでに説述されている。この場合、
ａ）  測定されるべき対象におけるある種の賦活成分を加えることにより、規定された検出原理に基づいて時間の経過に従って信号を発する過程が開始される。これによって一連の測定値（Ｔi，Ｓi)，ｉ＝１，・・・・，ｎが得られる。この場合、Ｔiは第１番目の瞬間の時間を表し、またＳiは時間Ｔiでの信号を表す。
ｂ）  測定系列（Ｔi，Ｓi)，ｉ＝１，・・・・，ｎは変換ｆの助けをかりて生な値Ｒへと転換される：
【数１】
0004256948.tif 000002
閾値法は段階ｂ）で必要とされるような変換ｆである。この方法は実際に使用すべき閾値を確定するパラメータによって本質的に特徴づけられる。この場合、生の値は、基底の値から出発する測定値が始めて閾値を一貫して超える時間と規定される。
【０００３】
この既知の方法では図１に示すような非定常的な曲線プロフィルを正確に評価することができない。この図で示す例では正確な生の値は約３８秒であろう（予め決めた閾値を一貫して超えている）が、この既知の方法を用いると実際には約２５秒と測定された。応用の分野によっては、この種の計算ミスは重大な結果を生むかも知れず、また極端な場合には、生命を脅かす状況にさえ至るかも知れない（実施例参照）。
従って本発明の目的は、上記した欠点の取り除かれた方法を提供することである。このことは、上述した方法を用いる時に起こりうる計算ミスを、技術的に可能であるかぎり、あり得なくすることができることを意味する。
【０００４】
この問題は本特許の請求範囲に記載する態様によって解決が図られる。この問題は上記した方法における段階ｂ）を変更することにより解決可能であることが図らずも確かめられた。そこで述べた段階すなわち、測定値の系列に固定された演算子ｆを適用する段階は、異なる演算子がつねに使用され、そしてこのようにして得られる生の値がもっともらしさの検定にかけられる一連の段階によっておき代えられるべきである。演算子の入れ換え、およびそれに伴う演算子の正しい評価は、予め設定に特定のパラメータを用いて計測装置のデータ処理機能を自動的に使用することによって実施される。これらのパラメータは装置および反応にとって特有のものであり、また簡単な予備試験を用いて技術上熟達する者により決定することができる。以下のパラメータ構成は、それが多くの装置／反応の組み合わせにとって使用可能であるので、特に有利であることが図らずも確かめられた。
ｄmax＝１.５〜１０×ｄ0、一層望ましくは約２×ｄ0
ｎ＝５〜３０、一層望ましくは約１０
Ｑ0＝５〜５０、一層望ましくは１５〜３０、特に一層望ましくは約２０
この場合は従って、ｄ0のみが測定装置に直接的に依存する。
【０００５】
本方法は例えば以下のように実施することができる。
ａ）  反応に対して特定的な初期値ｄ0および最大値ｄmax（＞ｄ0）ならびにステップ数ｎ、従ってステップの大きさｄs＝（ｄmax−ｄ0）／ｎに関する値を決定し；
ｂ）  ｄ＝ｄ0〜ｄmaxの範囲について、それぞれのｄn＝（ｄ0＋(ｄs)＊ｎ）に対してＴnの値を測定し、
ｃ）  Ｔ0からＴmaxへと順序のついた系列から、ｉ＝１，・・・・，ｎに対して差Ｄi＝Ｔi−Ｔi-1をとり、そしてＤ1，・・・・，Ｄnの集合のうちから最大値Ｄmaxと最小値Ｄminを決定し、そして比率Ｑ＝Ｄmax／Ｄminを算出し、
ｄ）  さらに評価を進めるためにＱ≦Ｑ0である測定値のみを用い、Ｑ＞Ｑ0である測定値は非定常性が大きすぎるとして棄却する。
【０００６】
この方法において設定すべきパラメータは以下のとおりである：
ｄ0−初期の閾値
ｄmax−最大の閾値
ｎ−ステップ数（正の整数）
Ｑ0−比率Ｑに関する限界値（Ｑ0＞０）
多くの状況で使用できるであろう一つのパラメータ構成は以下のとおりである：
ｄmax＝２・ｄ0
ｎ＝１０
Ｑ0＝２０
適切なパラメータ構成を用いることにより、本発明の方法では「閾値法」の演算子を用いることにより生の値の計算ミスを技術的に達成し得る最大の確かさで避けることができる。従って測定対象に対する正確な特性把握という点から信頼性の改善が図られる。
【０００７】
本発明の方法はｄ0＞０およびｄ0＜０の双方の場合について採用できる。ｄ0＜０の場合（減少する動的過程（kinetic process）、図２）、ｄ0＞０の場合（図３）と同一の境界条件が妥当する。
図１から図１７に示す実施例は専ら凝固診断の分野から採用した。閾値６０を用いる慣用の閾値法による時、すべての例で誤った評価がなされた。この場合、曲線プロフィルの最小値が基底値と規定された。グラフの表題は上記に規定した典型的パラメータ構成で得られた該当する比Ｑを示す。この場合、比率に関する限界が２０と規定されるなら、それに伴って、すべてのプロフィルは臨界的と分類されたであろう。誤った生の値に基づいて採用される引き続いての治療上の手段は、対応する患者にとって生命を脅かす状況をほとんど間違いなく現出していたであろう。
【０００８】
曲線のプロフィルの評価に関係する他の分野において熟達する然るべき人々にとって、本発明の方法がこれらの他の分野において直接実施されうることは容易に明らかとなろう。測定すべき対象の時間とともに変化する状態が上昇するあるいは下降する反応曲線によって特徴づけられ、興味の対象となる時間が、曲線プロフィルについて予め決められた経路に系が沿うことをやめる時間である場合、本発明の方法は測定対象の時間とともに変化する状態のあらゆる測定に応用することができる。
【０００９】
本発明の方法は診断法として特に有利に用いられることができる。該当する例として以下が挙げられる：
・特定の状態に入った時間が興味の対象である診断法（例えば血漿タンパクの測定、酵素反応（例えばＥＬＩＳＡ））。
・特定の状態に入った時間が興味の対象である化学反応プロフィル。
図面はさまざまな患者の血清に対する一連のＰＴ（プロトロンビン時間）測定の結果を示す。左側の縦の鎖線は慣用の閾値法を用いて得た生の値（Ｘ軸との交点）を示す。右側の縦の鎖線はそれぞれの動的過程についての正しい生の値を示す。
【実施例】
【００１０】
臨床的集団に属する１４人の患者についてプロトロンビン時間を測定した。Behring Coagulation System BCS (Behring Diagnostics GmbH）と共に、Thromborel S (Behring Diagnostics GmbH、注文番号、ＯＵＨＰ）を使用した。反応剤は製造者の指示通りに使用した。
【図面の簡単な説明】
【図１】  患者の血清に対する一連のプロトロンビン時間測定の結果を示す。
【図２】  減少する動的過程の曲線プロフィルを有する閾値法で用いられる反応動力学曲線を示す。
【図３】  増大する動的過程の曲線プロフィルを有する閾値法で用いられる反応動力学曲線を示す。
【図４】  患者の血清に対する一連のプロトロンビン時間測定の結果を示す。
【図５】  患者の血清に対する一連のプロトロンビン時間測定の結果を示す。
【図６】  患者の血清に対する一連のプロトロンビン時間測定の結果を示す。
【図７】  患者の血清に対する一連のプロトロンビン時間測定の結果を示す。
【図８】  患者の血清に対する一連のプロトロンビン時間測定の結果を示す。
【図９】  患者の血清に対する一連のプロトロンビン時間測定の結果を示す。
【図１０】  患者の血清に対する一連のプロトロンビン時間測定の結果を示す。
【図１１】  患者の血清に対する一連のプロトロンビン時間測定の結果を示す。
【図１２】  患者の血清に対する一連のプロトロンビン時間測定の結果を示す。
【図１３】  患者の血清に対する一連のプロトロンビン時間測定の結果を示す。
【図１４】  患者の血清に対する一連のプロトロンビン時間測定の結果を示す。
【図１５】  患者の血清に対する一連のプロトロンビン時間測定の結果を示す。
【図１６】  患者の血清に対する一連のプロトロンビン時間測定の結果を示す。
【図１７】  患者の血清に対する一連のプロトロンビン時間測定の結果を示す。
【図１】
0004256948.tif 000003
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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