(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式［１］
0004370164.tif 000117
「式中、Ｒ１は、水素原子またはピラジン環の置換基を；Ｒ２は、水素原子、アシル基または置換されていてもよいカルバモイルアルキルもしくはカルボキシアルキル基を；Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、同一または異なって、水素原子、置換もしくは保護されていてもよいヒドロキシル基を；Ａは、酸素原子またはメチレン基を；Ｙは、酸素原子またはイミノ基を；ｎは、０〜３の整数を示す。」で表されるピラジンヌクレオチド類似体またはその塩を利用することを特徴とするウイルス増殖阻害および／または殺ウイルス方法であって、
但し、ヒトを治療する方法を除く、
ウイルス増殖阻害および／または殺ウイルス方法。
【請求項２】
一般式［１］で表されるピラジンヌクレオチド類似体において、Ｙが酸素原子である化合物またはその塩を利用することを特徴とする請求項１に記載のウイルス増殖阻害および／または殺ウイルス方法。
【請求項３】
一般式［１］で表されるピラジンヌクレオチド類似体において、ｎが１〜３である化合物またはその塩を利用することを特徴とする請求項１または２に記載のウイルス増殖阻害および／または殺ウイルス方法。
【請求項４】
一般式［１］で表されるピラジンヌクレオチド類似体において、ピラジン環の置換基が、ハロゲン原子；ヒドロキシル、アルコキシ、アルキルチオ、アリール、アミノまたはアルキルアミノ基で置換されていてもよいアルキル基；ハロゲン原子で置換されていてもよいアルキルまたはアルケニル基；シクロアルキル基；ヒドロキシル基；アルコキシ基；シクロアルキルオキシ基；アルコキシカルボニル基；メルカプト基；アリール基で置換されてもよいアルキルチオ基；アリール基；アリールオキシ基；アリールチオ基；アリールアミノ基；シアノ基；ニトロ基；アシル基で置換されていてもよいアミノ基；アルキルアミノ基；シクロアルキルアミノ基；アシル基；カルボキシル基；カルバモイル基；チオカルバモイル基；アルキルカルバモイル基および複素環式基から選ばれる一つ以上の基である化合物またはその塩を利用することを特徴とする請求項１〜３のいずれか一項に記載のウイルス増殖阻害および／または殺ウイルス方法。
【請求項５】
一般式［１］で表されるピラジンヌクレオチド類似体において、ｎが３である化合物またはその塩を利用することを特徴とする請求項１〜４のいずれか一項に記載のウイルス増殖阻害および／または殺ウイルス方法。
【請求項６】
キナーゼによって生成される一般式［１］のピラジンヌクレオチド類似体またはその塩を利用することを特徴とする請求項１〜５のいずれか一項に記載のウイルス増殖阻害および／または殺ウイルス方法。
【請求項７】
ヌクレオチドキナーゼによって生成される一般式［１］のピラジンヌクレオチド類似体またはその塩を利用することを特徴とする請求項１〜５のいずれか一項に記載のウイルス増殖阻害および／または殺ウイルス方法。
【請求項８】
一般式［１］のピラジンヌクレオチド類似体またはその塩が、一般式［２］
0004370164.tif 000118
「式中、Ｒ１は、水素原子またはピラジン環の置換基を；Ｒ２は、水素原子、アシル基または置換されていてもよいカルバモイルアルキルもしくはカルボキシアルキル基を；Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、同一または異なって、水素原子、置換もしくは保護されていてもよいヒドロキシル基を；Ｒ７およびＲ８はそれぞれ独立して生理的条件下に分解されるリン酸もしくはホスホン酸の保護または置換されていてもよいヒドロキシル基を；Ａは、酸素原子またはメチレン基を；Ｙは、酸素原子またはイミノ基を示す。」で表されるピラジンヌクレオチド類似体またはその塩から誘導されたものである請求項１〜７のいずれか一項に記載のウイルス増殖阻害および／または殺ウイルス方法。
【請求項９】
一般式［１］のピラジンヌクレオチド類似体またはその塩が、一般式［３］
0004370164.tif 000119
「式中、Ｒ１は、水素原子またはピラジン環の置換基を；Ｒ２は、水素原子、アシル基または置換されていてもよいカルバモイルアルキルもしくはカルボキシアルキル基を；Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、同一または異なって、水素原子、置換もしくは保護されていてもよいヒドロキシル基を；Ｒ７およびＲ８はそれぞれ独立して生理的条件下に分解されるリン酸もしくはホスホン酸の保護または置換されていてもよいヒドロシキル基；Ａは、酸素原子またはメチレン基を示す。」で表されるピラジンヌクレオチド類似体またはその塩から誘導されたものである請求項１〜８のいずれか一項に記載のウイルス増殖阻害および／または殺ウイルス方法。
【請求項１０】
一般式［３ｚ］
0004370164.tif 000120
「式中、Ｒ１は、水素原子またはピラジン環の置換基を；Ｒ２は、水素原子、アシル基または置換されていてもよいカルバモイルアルキルもしくはカルボキシアルキル基を；Ｒ３、Ｒ４Ｚ、Ｒ５およびＲ６Ｚは、同一または異なって、水素原子、置換もしくは保護されていてもよいヒドロキシル基またはＲ４ＺおよびＲ６Ｚが一緒になって置換されていてもよい−Ｏ−アルキレン−Ｏ−で表される基を；ＲＺは、生理的条件下に分解される保護または置換されていてもよいヒドロキシル基を；Ｙは、酸素原子またはイミノ基を示す。」で表されるピラジンヌクレオシド類似体またはその塩を利用することを特徴とするウイルス増殖阻害および／または殺ウイルス方法であって、
但し、ヒトを治療する方法を除く、
ウイルス増殖阻害および／または殺ウイルス方法。
【請求項１１】
一般式［３ｚ］のピラジンヌクレオチド類似体またはその塩において、Ｙが、イミノ基である請求項１０に記載のウイルス増殖阻害および／または殺ウイルス方法。
【請求項１２】
ポリメラーゼ阻害作用を利用すること特徴とする請求項１に記載のウイルス増殖阻害および／または殺ウイルス方法。
【請求項１３】
ウイルスが、インフルエンザウイルス、ＲＳウイルス、エイズウイルス、パピローマウイルス、アデノウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、Ｅ型肝炎ウイルス、ポリオウイルス、エコーウイルス、コクサッキーウイルス、エンテロウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、ニューカッスル病ウイルス、ムンプスウイルス、水疱性口内炎ウイルス、狂犬病ウイルス、ラッサ熱ウイルス、麻疹ウイルス、フィロウイルス、日本脳炎ウイルス、黄熱病ウイルス、デング熱ウイルスまたは西ナイルウイルスである請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
ウイルスがインフルエンザウイルスまたはＣ型肝炎ウイルスである請求項１記載の方法。
【請求項１５】
一般式［１ｚ］
0004370164.tif 000121
「式中、Ｒ１は、水素原子またはハロゲン原子を；Ｒ２は、水素原子を；Ｒ３およびＲ５は、水素原子を；Ｒ４およびＲ６は、ヒドロキシル基を；Ｒは、ヒドロキシル基を；Ａは、酸素原子を；ｎは、１〜３の整数を示す。」で表されるピラジンヌクレオチド類似体またはその塩。
【請求項１６】
一般式［３ｚ］
0004370164.tif 000122
「式中、Ｒ１は、水素原子またはハロゲン原子を；Ｒ２は、水素原子を；Ｒ３およびＲ５は、水素原子を；Ｒ４ＺおよびＲ６Ｚは、ヒドロキシル基を；ＲＺは、ヒドロキシル基を；Ｙは、酸素原子を示す。」で表されるピラジンヌクレオシド類似体またはその塩。
【請求項１７】
生体内で一般式［１ｙ］
0004370164.tif 000123
「式中、Ｒ１は、水素原子またはハロゲン原子を；Ｚ１０およびＺ１２は、水素原子を；Ｚ１１およびＺ１３は、ヒドロキシル基を示す。」で表されるピラジントリリン酸ヌクレオチド類似体に変換され、ＲＮＡポリメラーゼ阻害作用を発揮する一般式［１ｘ］
0004370164.tif 000124
「式中、Ｒ１は、水素原子またはハロゲン原子を；Ｒ２は、水素原子を；Ｒ３およびＲ５は、水素原子を；Ｒ４およびＲ６は、ヒドロキシル基を；Ａは、酸素原子を；Ｙは、酸素原子を；ｍは、０〜２の整数を示す。」で表されるピラジンヌクレオチド類似体構造を有するＲＮＡポリメラーゼ阻害前駆体。
【請求項１８】
一般式［１ｙ］のピラジントリリン酸ヌクレオチド類似体がキナーゼで生成されるものである請求項１７に記載のＲＮＡポリメラーゼ阻害前駆体。
【請求項１９】
一般式［１ｙ］のピラジントリリン酸ヌクレオチド類似体がヌクレオチドキナーゼによって生成されるものである請求項１７または１８に記載のＲＮＡポリメラーゼ阻害前駆体。
【請求項２０】
宿主由来ＲＮＡポリメラーゼに対して２００倍以上の選択性でウイルス由来ＲＮＡポリメラーゼを阻害することを特徴とする請求項１７〜１９のいずれか一項に記載のＲＮＡポリメラーゼ阻害前駆体。
【請求項２１】
ＲＮＡポリメラーゼ阻害前駆体のウイルス由来ＲＮＡポリメラーゼ阻害作用とＲＮＡポリメラーゼ阻害前駆体の宿主細胞由来のイノシンモノフォスフェートデヒドロゲナーゼ阻害作用の比が、９００倍以上であることを特徴とする一般式［１ｗ］
0004370164.tif 000125
「式中、Ｒ１は、水素原子またはハロゲン原子を；Ｒ２は、水素原子を；Ｒ３およびＲ５は、水素原子を；Ｒ４およびＲ６は、ヒドロキシル基を；Ｙは、酸素原子を；ｐは、０または１を示す。」で表されるピラジンヌクレオシドまたはピラジンモノヌクレオチド類似体構造である請求項１７〜１９のいずれか一項に記載のＲＮＡポリメラーゼ阻害前駆体。
【請求項２２】
ウイルス由来ＲＮＡポリメラーゼが、インフルエンザウイルス、ＲＳウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、Ｅ型肝炎ウイルス、ポリオウイルス、エコーウイルス、コクサッキーウイルス、エンテロウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、ニューカッスル病ウイルス、ムンプスウイルス、水疱性口内炎ウイルス、狂犬病ウイルス、ラッサ熱ウイルス、麻疹ウイルス、フィロウイルス、日本脳炎ウイルス、黄熱病ウイルス、デング熱ウイルスまたは西ナイルウイルス由来のＲＮＡポリメラーゼである請求項２１に記載のＲＮＡポリメラーゼ阻害前駆体。
【請求項２３】
ウイルス由来ＲＮＡポリメラーゼが、インフルエンザウイルスまたはＣ型肝炎ウイルス由来ポリメラーゼである請求項２２記載のＲＮＡポリメラーゼ阻害前駆体。
【請求項２４】
一般式［１ｗ］で表されるピラジンヌクレオシドまたはピラジンモノヌクレオチド類似体構造において、ｐが０である請求項２１記載のＲＮＡポリメラーゼ阻害前駆体。
【請求項２５】
ＲＮＡポリメラーゼ阻害作用を発揮する一般式［１ｙ］
0004370164.tif 000126
「式中、Ｒ１は、水素原子またはハロゲン原子を；Ｚ１０およびＺ１２は、水素原子を；Ｚ１１およびＺ１３は、ヒドロキシル基を示す。」で表されるピラジントリリン酸ヌクレオチド類似体構造を有するＲＮＡポリメラーゼ阻害剤。
【請求項２６】
ＲＮＡポリメラーゼ阻害作用が、宿主由来ＲＮＡポリメラーゼに対して２００倍以上の選択性でウイルス由来ＲＮＡポリメラーゼを阻害する作用であることを特徴とする請求項２５に記載のピラジントリリン酸ヌクレオチド類似体構造を有するＲＮＡポリメラーゼ阻害剤。
【請求項２７】
ウイルス由来のＲＮＡポリメラーゼが、インフルエンザウイルス、ＲＳウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、Ｅ型肝炎ウイルス、ポリオウイルス、エコーウイルス、コクサッキーウイルス、エンテロウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、ニューカッスル病ウイルス、ムンプスウイルス、水疱性口内炎ウイルス、狂犬病ウイルス、ラッサ熱ウイルス、麻疹ウイルス、フィロウイルス、日本脳炎ウイルス、黄熱病ウイルス、デング熱ウイルスまたは西ナイルウイルス由来のＲＮＡポリメラーゼである請求項２６に記載のピラジントリリン酸ヌクレオチド類似体構造を有するＲＮＡポリメラーゼ阻害剤。
【請求項２８】
ウイルス由来のＲＮＡポリメラーゼが、インフルエンザウイルスＲＮＡポリメラーゼまたはＣ型肝炎ウイルスＲＮＡポリメラーゼである請求項２７に記載のピラジントリリン酸ヌクレオチド類似体構造を有するＲＮＡポリメラーゼ阻害剤。
【請求項２９】
抗ウイルス剤の製造のための、
一般式［１］
0004370164.tif 000127
「式中、Ｒ１は、水素原子またはピラジン環の置換基を；Ｒ２は、水素原子、アシル基または置換されていてもよいカルバモイルアルキルもしくはカルボキシアルキル基を；Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、同一または異なって、水素原子、置換もしくは保護されていてもよいヒドロキシル基を；Ａは、酸素原子またはメチレン基を；Ｙは、酸素原子またはイミノ基を；ｎは、０〜３の整数を示す。」で表されるピラジンヌクレオチド類似体またはその塩の使用。
【請求項３０】
Ｒ１が水素原子、Ｒ２が水素原子、Ｒ３およびＲ５が水素原子、Ｒ４およびＲ６がヒドロキシル基、Ａが酸素原子、Ｙが酸素原子、ｎが０である請求項２９に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は、キナーゼで生成させたピラジンヌクレオチド・ピラジンヌクレオシド類似体またはその塩を利用することを特徴とするウイルス増殖阻害および／または殺ウイルス方法、新規なピラジンヌクレオチド・ピラジンヌクレオシド類似体またはその塩並びにそれらを利用するウイルス感染症の治療方法に関する。
背景技術
感染性のウイルス疾患（インフルエンザ感染症、ヘルペスウイルス系感染症、エイズ（ＡＩＤＳ）、ウイルス性肝炎、ウイルス性出血熱など）は医学上重要な問題として認識されており、ワクチンなどによる予防から、薬剤を用いる治療法まで幅広く検討されている。薬剤を用いるウイルス感染症の治療に使用される薬剤として、これまでにプリン塩基およびピリミジン塩基を有する核酸並びにそれらの誘導体が数多く開発されいる。それらの作用機序は、細胞内でトリリン酸化されウイルスポリメラーゼを阻害するものであり、アジドチミジンやアシクロビルが例として挙げられる［プロシーディング・オブ・ナショナル・アカデミー・オブ・サイエンス・オブ・ザ・ユナイテッド・ステート・オブ・アメリカ（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ）、第８３巻、第８３３３−８３３７頁（１９８６年）；同第７４巻、第５７１６−５７２０頁（１９７７年）］
また、核酸の塩基相当部位を非天然型の化学構造に変換して、抗ウイルス作用を有する化合物は、それらが細胞内で変換されたモノリン酸体が活性本体であり、細胞内のイノシンモノフォスフェートデヒドロゲナーゼ（ＩＭＰＤＨ）を阻害して効果を示すことが報告されている。例としては、リバビリンやエイカー（ＥＩＣＡＲ）などが挙げられる［プロシーディング・オブ・ナショナル・アカデミー・オブ・サイエンス・オブ・ザ・ユナイテッド・ステート・オブ・アメリカ（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ）、第７０巻、第１１７４−１１７８頁（１９７３年）；ザ・ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリー（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．）、第２６８巻、第２４５９１−２４５９８頁（１９９３年）］。
また、塩基としてピラジン環を有するヌクレオシドおよびヌクレオチド類似体は、例えば、次の一般式
0004370164.tif 000002
「式中、Ｒ１６は、水素原子、メチル基およびデシル基を示す。」が知られている。しかし、この化合物は、抗ウイルス活性［抗ビスナウイルス（Ｖｉｓｎａ  ｖｉｒｕｓ）活性］を示さない［ヌクレオシズ・アンド・ヌクレオチズ（Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ  ＆  Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ）、第１５巻、第１１・１２号、第１８４９−１８６１頁（１９９６年）］。
一方、カルバモイル基で置換されたピラジン環を有するヌクレオシドおよびヌクレオチド類似体は、知られていない。
発明の開示
本発明は、核酸の塩基相当部位に非天然型の化学構造を有する毒性が低く、安全性の高い抗ウイルス剤およびこれを用いる新たなウイルス増殖阻害および／または殺ウイルス方法を提供することを目的とする。
本発明者らは、一般式［１］
0004370164.tif 000003
「式中、Ｒ１は、水素原子もしくはピラジン環の置換基を；Ｒ２は、水素原子、アシル基または置換されていてもよいカルバモイルアルキルもしくはカルボキシアルキル基を；Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、同一または異なって、水素原子、置換もしくは保護されていてもよいヒドロキシル基を；Ａは、酸素原子またはメチレン基を；Ｙは、酸素原子またはイミノ基を；ｎは、０〜３の整数を示す」で表されるピラジンヌクレオチド・ピラジンヌクレオシド類似体またはその塩、特に、トリリン酸化されたピラジンヌクレオチド類似体またはその塩が、それ自体またはそれらの生体内で変換を受けた物質として、ウイルスポリメラーゼ、とりわけ、ＲＮＡポリメラーゼを阻害し毒性が低く、安全性の高い優れたウイルス増殖阻害作用および／または殺ウイルス作用を発揮することを見出した。
さらに、本発明者らは、一般式［２］
0004370164.tif 000004
「式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、ＡおよびＹは、前記したと同様の意味を；Ｒ７およびＲ８はそれぞれ独立して生理的条件下に分解されるリン酸もしくはホスホン酸中の保護または置換されていてもよいヒドロシキル基を示す。」
で表されるピラジンヌクレオチド類似体またはその塩を、生体内あるいは細胞内で加水分解もしくは分解させ、次いでヌクレオチドキナーゼなどのキナーゼにより一般式［１］のピラジンヌクレオチド・ピラジンヌクレオシド類似体またはその塩に誘導させることによって、ウイルスの増殖阻害作用および／または殺ウイルス作用を発揮させる新規な方法を見い出した。
さらに、本発明者らは、一般式［１ｚ］
0004370164.tif 000005
「式中、Ｒ１は、水素原子またはピラジン環の置換基を；Ｒ２は、水素原子、アシル基または置換されていてもよいカルバモイルアルキルもしくはカルボキシアルキル基を；Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、同一または異なって、水素原子、置換もしくは保護されていてもよいヒドロキシル基を；Ｒは、生理的条件下に分解される基で保護または置換されていてもよいヒドロキシル基を；Ａは、酸素原子またはメチレン基を；ｎは、１〜３の整数を示す。」で表されるピラジンヌクレオチド類似体またはその塩で表される化合物が、生理的条件下に変換を受け、一般式［１］と同様にしてウイルスのＲＮＡポリメラーゼを阻害することでウイルス増殖阻害および／または殺ウイルス作用を発揮する化合物であることを見出した。
上記の化合物は、いずれも生体内あるいは細胞内で一般式［１ｙ］
0004370164.tif 000006
「式中、Ｒ１は、水素原子またはピラジン環の置換基を；Ｚ１０、Ｚ１１、Ｚ１２およびＺ１３は、同一または異なって、水素原子またはヒドロキシル基を示す。」で表されるピラジントリリン酸ヌクレオチド類似体に変換され、ＲＮＡポリメラーゼ阻害作用を発揮する。また、一般式［１ｘ］
0004370164.tif 000007
「式中、Ｒ１は、水素原子またはピラジン環の置換基を；Ｒ２は、水素原子、アシル基または置換されていてもよいカルバモイルアルキルもしくはカルボキシアルキル基を；Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、同一または異なって、水素原子、置換もしくは保護されていてもよいヒドロキシル基を；Ａは、酸素原子またはメチレン基を；Ｙは、酸素原子またはイミノ基を；ｍは、０〜２の整数を示す。」で表される化合物は、生体内あるいは細胞内での一般式［１ｙ］の化合物に変換されるＲＮＡポリメラーゼ阻害前駆体である。
本発明のＲＮＡポリメラーゼ阻害前駆体は、宿主由来ＲＮＡポリメラーゼに対してウイルス由来ＲＮＡポリメラーゼの阻害の選択性が極めて高く、好ましくは、２００倍以上、より好ましくは、１０００倍以上、より更に好ましくは、２０００倍以上の選択性で阻害することができる。さらに、本発明のＲＮＡポリメラーゼ阻害前駆体は、イノシンモノフォスフェートデヒドロゲナーゼをほとんど阻害せず、生体内で変換を受けてトリリン酸体になった後、ウイルスのポリメラーゼを阻害する。よって、イノシンモノフォスフェートデヒドロゲナーゼの阻害が原因となる細胞毒性が極めて低く押さえられる一方、生体内での変換後のウイルスポリメラーゼ阻害作用は極めて強く、その選択性が高いことが特徴である。この高い選択性を利用することでより安全性の高い薬剤を得ることができる。
本発明のＲＮＡポリメラーゼ阻害前駆体のＲＮＡポリメラーゼとＲＮＡポリメラーゼ阻害前駆体のイノシンモノフォスフェートデヒドロゲナーゼに対する選択性は、極めて高く、一般式［１ｗ］
0004370164.tif 000008
「式中、Ｒ１は、水素原子またはピラジン環の置換基を；Ｒ２は、水素原子、アシル基または置換されていてもよいカルバモイルアルキルもしくはカルボキシアルキル基を；Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、同一または異なって、水素原子、置換もしくは保護されていてもよいヒドロキシル基を；Ｙは、酸素原子またはイミノ基を；ｐは、０または１を示す。」で表されるピラジンヌクレオシドまたはピラジンモノヌクレオチド類似体構造においては、生体内変換後のウイルス由来ＲＮＡポリメラーゼ阻害作用と前駆体における宿主細胞由来のイノシンモノフォスフェートデヒドロゲナーゼ阻害作用の比は、好ましくは、９００倍以上、より好ましくは、５０００倍以上、より更に好ましくは、１００００倍以上である。
本発明者らは、一般式［３ｚ］
0004370164.tif 000009
「式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５およびＹは、前記と同様の意味を；ＲＺは、生理的条件下に分解される保護または置換されていてもよいヒドロキシル基を；Ｒ４ＺおよびＲ６Ｚは、同一または異なって、水素原子、置換もしくは保護されていてもよいヒドロキシル基またはＲ４ＺおよびＲ６Ｚが一緒になって置換されていてもよい−Ｏ−アルキレン−Ｏ−で表される基を示す。」で表されるピラジンヌクレオチド誘導体で、たとえば、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５が水素原子、Ｒ４Ｚ、Ｒ６ＺおよびＲＺがヒドロキシル基の場合の化合物を投与した動物の血漿中で４−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２−フラニル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミド（置換式命名：３，４−ジヒドロ−３−オキソ−４−β−Ｄ−リボフラノシル−２−ピラジンカルボキサミド）が生成していることを確認した。
さらに、本発明者らは、一般式［３ｚ］で表されるピラジンヌクレオシド類似体またはその塩で、たとえば、４−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２−フラニル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミドを投与した動物の臓器内で、｛（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロ−２−フラニル｝メチルトリフォスフェートが生成していることを確認した。
従って、一般式［３ｚ］の化合物またはその塩の哺乳動物への投与、あるいは、一般式［２］の化合物またはその塩の哺乳動物への投与により、生体内で一般式［１］のピラジンヌクレオチド・ピラジンヌクレオシド類似体またはその塩を誘導させる方法は、新規なウイルス増殖阻害作用および／または殺ウイルス作用を発揮させる方法であることを見出し、本発明を完成するに至った。
本発明方法は、上記のピラジンヌクレオチド・ピラジンヌクレオシド類似体またはその塩、たとえば、一般式［３ｚ］の化合物またはその塩を、ウイルス感染患者に投与するステップを含む、ウイルス感染患者の治療方法として有用であり、更に一般式［１ｙ］で表されるピラジントリリン酸ヌクレオチド類似体に転化せしめるステップを含むことが好ましい。
また、更に一般式［３ｚ］をウイルス感染患者の体内において、一般式［１ｖ］
0004370164.tif 000010
「式中、Ｒ１は、水素原子またはピラジン環の置換基を；Ｚ１０、Ｚ１１、Ｚ１２およびＺ１３は、同一または異なって、水素原子、ヒドロキシル基を示す。」で表されるピラジンヌクレオチド類似体を経由して、一般式［１ｙ］のピラジントリリン酸ヌクレオチド類似体に転化せしめることが好ましい。一般式［１ｖ］のピラジンヌクレオチド類似体が宿主細胞由来のイノシンモノフォスフェートデヒドロゲナーゼを実質的に阻害しないことが特徴であり、さらに一般式［１ｙ］のピラジントリリン酸ヌクレオチド類似体が宿主由来のＲＮＡポリメラーゼに対するよりもウイルス由来のＲＮＡポリメラーゼを選択的に阻害することを特徴とする。
さらに、本発明の代表的化合物の一つである４−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２−フラニル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミドの無水物について、本発明者らは、研究を進めた結果、製剤工程中での安定性に優れた４−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２−フラニル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミド・一水和物を見出した。この水和物は、常法の製剤過程で安定な結晶であり、無水物に比べ、製剤工程中での飛散性や器具への付着がなく良好な混合・造粒が行うことができる。
また、製剤工程における造粒には湿式造粒が汎用されているが、この時、水および結合剤の水溶液を使用することが汎用されている。しかしながらが、無水物を利用した際には、条件により一部の無水物が水和物への変換を起こすことが知られている。そしてこの過程で生じる無定型の物質が製剤の製造上あるいは安定性の観点から問題となる。そのため、結晶多形として水和物が存在する場合、無水物の製剤化には、製剤条件の厳密さが要求されることになる。しかしながら、一水和物は、通常の製剤過程で安定な結晶であり、上記の点が問題とならない優れた化合物である。
加えて、この一水和物は、その製造の最終工程において有機溶媒を使用せず、水から晶出を行うことができる。よって、最終的に得られる結晶に有機溶媒が残留する恐れが少ない。また、有機溶媒を用いないため防爆設備が不要であり、製造工程上、メリットの大きい化合物である。
以下、本発明化合物について詳述する。
発明を実施するための最良の方法
本明細書において特に断らない限り、ハロゲン原子とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子およびヨウ素原子を；アルキル基とは、低級アルキル基を意味し、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチルおよびペンチルなどのＣ１−５アルキル基を；アルコキシ基とは、低級アルコキシ基を意味し、例えば、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシおよびペンチルオキシなどのＣ１−５アルコキシ基を；アルコキシカルボニル基とは、低級アルコキシカルボニル基を意味し、例えば、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ｎ−プロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ｎ−ブトキシカルボニル、イソブトキシカルボニル、ｓｅｃ−ブトキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、４−ヒドロキシブトキシカルボニルおよびペンチルオキシカルボニルなどのＣ１−５アルコキシカルボニル基を；アルキルアミノ基とは、例えば、メチルアミノ、エチルアミノ、プロピルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノおよびメチルエチルアミノなどのモノまたはジ−Ｃ１−５アルキルアミノ基を；ハロゲノアルキル基とは、例えば、フルオロメチル、クロロメチル、ブロモメチル、ジクロロメチル、トリフルオロメチル、トリクロロメチル、クロロエチル、ジクロロエチル、トリクロロエチルおよびクロロプロピルなどのハロゲノ−Ｃ１−５アルキル基を；カルバモイルアルキル基とは、例えば、カルバモイルメチル、カルバモイルエチル、カルバモイルｎ−プロピル、カルバモイルイソプロピル、カルバモイルｎ−ブチル、カルバモイルイソブチルおよびカルバモイルペンチルなどのＣ１−５カルバモイルアルキル基を；カルボキシアルキル基とは、例えば、カルボキシメチル、カルボキシエチル、カルボキシｎ−プロピル、カルボキシイソプロピル、カルボキシｎ−ブチル、カルボキシイソブチルおよびカルボキシペンチルなどのＣ１−５カルボキシアルキル基を；アルケニル基とは、例えば、ビニルおよびアリルなどのＣ２−５アルケニル基を；シクロアルキル基とは、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルなどのＣ３−６シクロアルキル基を；シクロアルキルオキシ基とは、例えば、シクロプロピルオキシ、シクロブチルオキシ、シクロペンチルオキシおよびシクロヘキシルオキシなどのＣ３−６シクロアルキルオキシ基を；アリール基とは、例えば、フェニルおよびナフチルなどの基を；複素環式基とは、例えば、アゼチジニル、チエニル、フリル、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、フラザニル、ピロリジニル、ピロリニル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、ピラゾリジニル、ピラゾリニル、１，３，４−オキサジアゾリル、１，２，３−チアジアゾリル、１，２，４−チアジアゾリル、１，３，４−チアジアゾリル、１，２，３−トリアゾリル、１，２，４−トリアゾリル、チアトリアゾリル、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、ピラニル、モルホリニル、１，２，４−トリアジニル、ベンゾチエニル、ナフトチエニル、ベンゾフリル、イソベンゾフリル、クロメニル、インドリジニル、イソインドリル、インドリル、インダゾリル、プリニル、キノリル、イソキノリル、フタラジニル、ナフチリジニル、キノキサリニル、キナゾリニル、シノリニル、フテリジニル、イソクロマニル、クロマニル、インドリニル、イソインドリニル、ベンゾオキサゾリル、トリアゾロピリジル、テトラゾロピリダジニル、テトラゾロピリミジニル、チアゾロピリダジニル、チアジアゾロピリダジニル、トリアゾロピリダジニル、ベンズイミダゾリル、ベンズチアゾリル、１，２，３，４−テトラヒドロキノリル、イミダゾ「１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジニルおよびキヌクリジニルなどのような酸素原子、窒素原子および硫黄原子から選ばれる少なくとも１つの異項原子を含有する４〜６員または縮合複素環式基を；アルキレン基とは、たとえば、メチレン、エチレンおよびプロピレン基などの直鎖状もしくは分枝鎖状のＣ１−５アルキレン基を；アルキルチオ基とは、たとえば、メチルチオ、エチルチオ、ｎ−プロピルチオ、イソプロピルチオ、ｎ−ブチルチオ、イソブチルチオ、ｓｅｃ−ブチルチオ、ｔｅｒｔ−ブチルチオおよびペンチルチオなどの直鎖状または分枝鎖状Ｃ１−５アルキルチオ基を；アリールオキシ基とは、たとえば、フェノキシおよびナフトキシなどのアリール−Ｏ−で表される基を；アリールチオ基とは、たとえば、フェニルチオおよびナフチルチオなどのアリール−Ｓ−で表される基を；アリールアミノ基とは、たとえば、フェニルアミノおよびナフチルアミノなどのアリールアミノ基を；シクロアルキルアミノ基とは、例えば、シクロプロピルアミノ、シクロブチルアミノ、シクロペンチルアミノおよびシクロヘキシルアミノなどのＣ３−６シクロアルキルアミノ基を；アシル基とは、たとえば、ホルミル基、アセチルもしくはプロピオニルなどのＣ２−６アルカノイル基、ベンゾイルもしくはナフトイルなどのアロイル基およびニコチノイル、テノイル、ピロリジノカルボニルもしくはフロイル基などの複素環カルボニル基などのアシル基を；アシロキシ基とは、たとえば、アセチロキシもしくはプロピオニルオキシなどのＣ２−６アルカノイルオキシ基、ベンゾイルオキシもしくはナフトイルオキシなどのアロイルオキシ基およびニコチノイルオキシ、テノイルオキシ、ピロリジノカルボニルオキシもしくはフロイルオキシ基などの複素環カルボニルオキシ基などのアシロキシ基を；アリールスルホニルオキシ基とは、たとえば、フェニルスルホニルオキシおよびｐ−トルエンスルホニルオキシなどの基を；アルキルスルホニルオキシ基とは、たとえば、メチルスルホニルオキシ、エチルスルホニルオキシ、ｎ−プロピルスルホニルオキシ、イソプロピルスルホニルオキシ、ｎ−ブチルスルホニルオキシ、イソブチルスルホニルオキシ、ｓｅｃ−ブチルスルホニルオキシ、ｔｅｒｔ−ブチルスルホニルオキシ、ペンチルスルホニルオキシなどの直鎖状または分枝鎖状Ｃ１−５アルキルスルホニルオキシ基をそれぞれ意味する。
本明細書記載の一般式中、Ｒ１のピラジン環の置換基としては、ハロゲン原子；ヒドロキシル、アルコキシ、アルキルチオ、アリール、アミノまたはアルキルアミノ基で置換されていてもよいアルキル基；ハロゲン原子で置換されていてもよいアルキルまたはアルケニル基；シクロアルキル基；ヒドロキシル基；アルコキシ基；シクロアルキルオキシ基；アルコキシカルボニル基；メルカプト基；アリール基で置換されてもよいアルキルチオ基；アリール基；アリールオキシ基；アリールチオ基；アリールアミノ基；シアノ基；ニトロ基；アシル基で置換されていてもよいアミノ基；アルキルアミノ基；シクロアルキルアミノ基；アシル基；カルボキシル基；カルバモイル基；チオカルバモイル基；アルキルカルバモイル基および複素環式基から選ばれる基が挙げられ、それらの基は、一つ以上置換していてもよい。
ＲＺのヒドロキシル基の保護基または置換基としては、たとえば、置換されていてもよいアシル基、低級アルコキシカルボニル基およびアシルオキシアルキル基などが挙げられ、より具体的には、アセチル、プロピオニル、バレリル、ベンゾイル、ピバロイル、２−アミノアセチル、２−アミノプロピオニル、２−アミノバレリル、２−アミノカプロイルなどの置換されていてもよいアシル基；メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ｎ−プロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ｎ−ブトキシカルボニル、イソブトキシカルボニル、ｓｅｃ−ブトキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、４−ヒドロキシブトキシカルボニルなどの低級アルコキシカルボニル基；アセチルオキシメチル、プロピオニルオキシメチル、イソプロピオニルオキシメチル、ブチリルオキシメチル、イソブチリルオキシメチル、バレリルオキシメチル、イソバレリルオキシメチル、ピバロイルオキシメチル、１−ピバロイルオキシエチルなどのアシルオキシアルキル基などが挙げられる。
Ｒ７およびＲ８の生理的条件下に分解されるリン酸もしくはホスホン酸中のヒドロキシル基の保護または置換基およびＲの生理的条件下に分解される基としては、例えば、プログレス  イン  メディシナルケミストリー（Ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ｉｎ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）、第３４巻、第１１１−１４７頁（１９９７年）、エルセバー・サイエンス・ビー・ヴイ（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｂ．Ｖ．）およびカレントメディシナルケミストリー（Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）、第７巻、第９９５−１０３９頁（２０００年）に記載されているようなリン酸もしくはホスホン酸の保護基または置換基が挙げられる。それらの具体例として、フェニル、クロロフェニル、ニトロフェニル、シアノフェニル、ナフチルなどのアリール基；シクロサリゲニル、５−メチルシクロサリゲニルなどのシクロサリゲニル基；メトキシアラニニル、フェノキシアラニニルなどのアミデート基；トリクロルエチルなどのハロエチル基；アセチルオキシメチル、プロピオニルオキシメチル、イソプロピオニルオキシメチル、ブチリルオキシメチル、イソブチリルオキシメチル、バレリルオキシメチル、イソバレリルオキシメチル、ピバロイルオキシメチル、１−ピバロイルオキシエチルなどのアシルオキシアルキル基；アセチルオキシベンジル、プロピオニルオキシベンジル、イソプロピオニルオキシベンジル、ブチリルオキシベンジル、イソブチリルオキシベンジル、バレリルオキシベンジル、イソバレリルオキシベンジル、ピバロイルオキシベンジルなどのアシルオキシベンジル基；アセチルチオエチル、プロピオニルチオエチル、イソプロピオニルチオエチル、ブチリルチオエチル、イソブチリルチオエチル、バレリルチオエチル、イソバレリルチオエチル、ピバロイルチオエチル、ピバロイルチオブチルなどのｓ−低級アシルチオアルキル基；ラウロイルチオエチルなどのｓ−高級アシルチオアルキル基、ベンゾイルチオエチル、ナフトイルチオエチルなどのｓ−アロイルチオアルキル基；ジチオジエチル基などが挙げられる。
生理的条件下に分解されるとは、エステラーゼ、フォスフォジエステラーゼ、フォスフォンアミダーゼ、ヒドロラーゼ、アミノヒドロラーゼ、トランスアミナーゼもしくはレダクターゼなどの酵素、生理的酸化反応、加水分解反応および／または還元反応で分解されることを意味する。
また、キナーゼとは、たとえば、ヌクレオチドキナーゼ、ヌクレオシドキナーゼ、ヌクレオシドホスホトランスフェラーゼ、５’−ヌクレオチダーゼなどのキナーゼが挙げられる。
前駆体とは、生体内で変換・分解を受けて薬理活性本体に変換される物質を意味する。
カルボキシル基の保護基としては、通常のカルボキシル基の保護基として使用し得るすべての基を含み、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、１，１−ジメチルプロピル、ｎ−ブチルおよびｔｅｒｔ−ブチルなどの低級アルキル基；フェニルおよびナフチルなどのアリール基；ベンジル、ジフェニルメチル、トリチル、ｐ−ニトロベンジル、ｐ−メトキシベンジルおよびビス（ｐ−メトキシフェニル）メチルなどのアル−低級アルキル基；アセチルメチル、ベンゾイルメチル、ｐ−ニトロベンゾイルメチル、ｐ−ブロモベンゾイルメチルおよびｐ−メタンスルホニルベンゾイルメチルなどのアシル−低級アルキル基；２−テトラヒドロピラニルおよび２−テトラヒドロフラニルなどの含酸素複素環式基；２，２，２−トリクロロエチルなどのハロゲノ−低級アルキル基；２−（トリメチルシリル）エチルなどの低級アルキルシリルアルキル基；アセトキシメチル、プロピオニルオキシメチルおよびピバロイルオキシメチルなどのアシルオキシアルキル基；フタルイミドメチルおよびスクシンイミドメチルなどの含窒素複素環式−低級アルキル基；シクロヘキシルなどのシクロアルキル基；メトキシメチル、メトキシエトキシメチルおよび２−（トリメチルシリル）エトキシメチルなどの低級アルコキシ−低級アルキル基；ベンジルオキシメチルなどのアル−低級アルコキシ−低級アルキル基；メチルチオメチルおよび２−メチルチオエチルなどの低級アルキルチオ−低級アルキル基；フェニルチオメチルなどのアリールチオ−低級アルキル基；１，１−ジメチル−２−プロペニル、３−メチル−３−ブチニルおよびアリールなどの低級アルケニル基；ならびにトリメチルシリル、トリエチルシリル、トリイソプロピルシリル、ジエチルイソプロピルシリル、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル、ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル、ジフェニルメチルシリルおよびｔｅｒｔ−ブチルメトキシフェニルシリルなどの置換シリル基などが挙げられる。
アミノ基およびイミノ基の保護基としては、通常のアミノ保護基として使用し得るすべての基を含み、例えば、トリクロロエトキシカルボニル、トリブロモエトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、ｐ−ニトロベンジルオキシカルボニル、ｏ−ブロモベンジルオキシカルボニル、（モノ−、ジ−、トリ−）クロロアセチル、トリフルオロアセチル、フェニルアセチル、ホルミル、アセチル、ベンゾイル、ｔｅｒｔ−アミルオキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、ｐ−メトキシベンジルオキシカルボニル、３，４−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、４−（フェニルアゾ）ベンジルオキシカルボニル、２−フルフリルオキシカルボニル、ジフェニルメトキシカルボニル、１，１−ジメチルプロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、フタロイル、スクシニル、アラニル、ロイシル、１−アダマンチルオキシカルボニルおよび８−キノリルオキシカルボニルなどのアシル基；ベンジル、ジフェニルメチルおよびトリチルなどのアル−低級アルキル基；２−ニトロフェニルチオおよび２，４−ジニトロフェニルチオなどのアリールチオ基；メタンスルホニルおよびｐ−トルエンスルホニルなどのアルカン−もしくはアレーン−スルホニル基；Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノメチレンなどのジ−低級アルキルアミノ−低級アルキリデン基；ベンジリデン、２−ヒドロキシベンジリデン、２−ヒドロキシ−５−クロロベンジリデンおよび２−ヒドロキシ−１−ナフチルメチレンなどのアル−低級アルキリデン基；３−ヒドロキシ−４−ピリジルメチレンなどの含窒素複素環式アルキリデン基；シクロヘキシリデン、２−エトキシカルボニルシクロヘキシリデン、２−エトキシカルボニルシクロペンチリデン、２−アセチルシクロヘキシリデンおよび３，３−ジメチル−５−オキシシクロヘキシリデンなどシクロアルキリデン基；ジフェニルホスホリルおよびジベンジルホスホリルなどのジアリール−もしくはジアル−低級アルキルホスホリル基；５−メチル−２−オキソ−２Ｈ−１，３−ジオキソール−４−イル−メチルなどの含酸素複素環式アルキル基；ならびにトリメチルシリルなどの低級アルキル置換シリル基などが挙げられる。
ヒドロキシル基の保護基としては、通常のヒドロキシル保護基として使用し得るすべての基を含み、例えば、ベンジルオキシカルボニル、４−ニトロベンジルオキシカルボニル、４−ブロモベンジルオキシカルボニル、４−メトキシベンジルオキシカルボニル、３，４−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、１，１−ジメチルプロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、イソブチルオキシカルボニル、ジフェニルメトキシカルボニル、２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル、２，２，２−トリブロモエトキシカルボニル、２−（トリメチルシリル）エトキシカルボニル、２−（フェニルスルホニル）エトキシカルボニル、２−（トリフェニルホスホニオ）エトキシカルボニル、２−フルフリルオキシカルボニル、１−アダマンチルオキシカルボニル、ビニルオキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、Ｓ−ベンジルチオカルボニル、４−エトキシ−１−ナフチルオキシカルボニル、８−キノリルオキシカルボニル、アセチル、ホルミル、クロロアセチル、ジクロロアセチル、トリクロロアセチル、トリフルオロアセチル、メトキシアセチル、フェノキシアセチル、ピバロイルおよびベンゾイルなどのアシル基；メチル、ｔｅｒｔ−ブチル、２，２，２−トリクロロエチルおよび２−トリメチルシリルエチルなどの低級アルキル基；アリルなどの低級アルケニル基；ベンジル、ｐ−メトキシベンジル、３，４−ジメトキシベンジル、ジフェニルメチルおよびトリチルなどのアル−低級アルキル基；テトラヒドロフリル、テトラヒドロピラニルおよびテトラヒドロチオピラニルなどの含酸素および含硫黄複素環式基；メトキシメチル、メチルチオメチル、ベンジルオキシメチル、２−メトキシエトキシメチル、２，２，２−トリクロロエトキシメチル、２−（トリメチルシリル）エトキシメチルおよび１−エトキシエチルなどの低級アルコキシ−および低級アルキルチオ−低級アルキル基；メタンスルホニルおよびｐ−トルエンスルホニルなどのアルキル−およびアリール−スルホニル基；ならびにトリメチルシリル、トリエチルシリル、トリイソプロピルシリル、ジエチルイソプロピルシリル、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル、ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル、ジフェニルメチルシリルおよびｔｅｒｔ−ブチルメトキシフェニルシリルなどの置換シリル基などが挙げられ、ジヒドロキシル基の場合は、さらにメチレン、ベンジリデンおよびイソプロピリデンなどの低級アルキリデン基、メトキシメチレンなどの低級アルコキシ−低級アルキリデン基、１，１，３，３−テトライソプロピルジシロキサニリデンなどの低級アルキル置換シリル基などが挙げられる。
Ｒ２のカルバモイルアルキル基およびカルボキシアルキル基は、ハロゲン原子；ヒドロキシル、アルコキシ、アルキルチオ、アリール、アミノまたはアルキルアミノ基で置換されていてもよいアルキル基；ハロゲノアルキル基；アルケニル基；シクロアルキル基；ヒドロキシル基；アルコキシ基；シクロアルキルオキシ基；アルコキシカルボニル基；メルカプト基；アリール基で置換されていてもよいアルキルチオ基；アリール基；アリールオキシ基；アリールチオ基；アリールアミノ基；シアノ基；ニトロ基；アシル基で置換されていてもよいアミノ基；アルキルアミノ基；シクロアルキルアミノ基；アシル基；カルボキシル基；カルバモイル基；チオカルバモイル基；アルキルカルバモイル基および複素環基から選ばれる一つ以上の置換基で置換されていてもよい。
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６におけるヒドロキシル基は、保護されていてもよいカルボキシル基、アルキル基、アルコキシカルボニル基、アリール基、シクロアルキル基、アルケニル基、ハロゲノアルキル基および複素環式基から選ばれる一つ以上の置換基で置換されていてもよい。
一般式［１］および一般式［２］の化合物の塩としては、通常知られているアミノ基などの塩基性基またはヒドロキシル、ホスホリル、ホスホニルもしくはカルボキシル基などの酸性基における塩を挙げることができる。塩基性基における塩としては、例えば、塩酸、臭化水素酸および硫酸などの鉱酸との塩；酒石酸、ギ酸、クエン酸などの有機カルボン酸との塩；ならびにメタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、メシチレンスルホン酸およびナフタレンスルホン酸などのスルホン酸との塩を、また、酸性基における塩としては、例えば、ナトリウムおよびカリウムなどのアルカリ金属との塩；カルシウムおよびマグネシウムなどのアルカリ土類金属塩との塩；アンモニウム塩；ならびにトリメチルアミン、トリエチルアミン、トリブチルアミン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン、Ｎ−メチルピペリジン、Ｎ−メチルモルホリン、ジエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、プロカイン、ジベンジルアミン、Ｎ−ベンジル−β−フェネチルアミン、１−エフェナミンおよびＮ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミンなどの含窒素有機塩基との塩などを挙げることができる。
また、一般式［１］、［１ｖ］、［１ｗ］、［１ｘ］、［１ｙ］、［１ｚ］、［２］および［３ｚ］の化合物またはその塩において、異性体（例えば、光学異性体、幾何異性体および互変異性体など）が存在する場合、本発明は、それらの異性体を包含し、また、溶媒和物、水和物および種々の形状の結晶を包含するものである。
本発明のウイルス増殖阻害および／または殺ウイルス方法の対象となるウイルスとしては、ウイルスが、インフルエンザウイルス、ＲＳウイルス、エイズウイルス、パピローマウイルス、アデノウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、Ｅ型肝炎ウイルス、ポリオウイルス、エコーウイルス、コクサッキーウイルス、エンテロウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、ニューカッスル病ウイルス、ムンプスウイルス、水疱性口内炎ウイルス、狂犬病ウイルス、ラッサ熱ウイルス、麻疹ウイルス、フィロウイルス、日本脳炎ウイルス、黄熱病ウイルス、デング熱ウイルスまたは西ナイルウイルスが挙げられ、好ましくは、ウイルスが、インフルエンザウイルス、ＲＳウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、Ｅ型肝炎ウイルス、ポリオウイルス、エコーウイルス、コクサッキーウイルス、エンテロウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、ニューカッスル病ウイルス、ムンプスウイルス、水疱性口内炎ウイルス、狂犬病ウイルス、ラッサ熱ウイルス、麻疹ウイルス、フィロウイルス、日本脳炎ウイルス、黄熱病ウイルス、デング熱ウイルスまたは西ナイルウイルスが挙げられ、特に好ましくは、インフルエンザウイルスおよびＣ型肝炎ウイルスが挙げられる。
本発明化合物の好ましい化合物としては、以下に挙げる置換基を有する化合物が挙げられる。
本発明記載の各一般式について、Ｒ１における好ましい置換基としては、水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基、ヒドロキシル基が挙げられ、より好ましくは、水素原子、フッ素原子、塩素原子が挙げられ、よりさらに好ましくは、水素原子が挙げられる。
Ｒ２における好ましい置換基としては、水素原子、アセチル基、ベンゾイル基、ピバロイル基、カルバモイルメチル基、カルボキシメチル基が挙げられ、より好ましくは、水素原子、アセチル基、カルボキシメチル基が挙げられ、よりさらに好ましくは、水素原子が挙げられる。
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６における好ましい置換基としては、水素原子および低級アルコキシカルボニル、アセチル、ベンゾイルまたはピバロイルオキシメチル基で置換されていてもよいヒドロキシル基が挙げられ、より好ましくは、水素原子およびアセチルまたはベンゾイル基で置換されていてもよいヒドロシキル基が挙げられ、よりさらに好ましくは、水素原子、ヒドロキシル基が挙げられる。
Ｒ４ＺおよびＲ６Ｚにおける好ましい置換基としては、Ｒ４およびＲ６で記載したと同様の置換基に加え、Ｒ４ＺおよびＲ６Ｚが一緒になって置換されていてもよいメチレン基が挙げられる。
ＲＺにおける好ましい置換基としては、置換されていてもよいアシル、低級アルコキシカルボニルまたはアシルオキシアルキル基で置換されていてもよいヒドロキシル基が挙げられ、より好ましくは、保護されていてもよいアミノ基で置換されていてもよいイソバレリル、アセチル、プロピオニル基、ベンゾイル基、ピバロイル基、エトキシカルボニル基、イソプロピルオキシカルボニル基またはピバロイルオキシメチル基で置換されていてもよいヒドロキシル基が挙げられ、よりさらに好ましくは、アミノ基で置換されていてもよいイソバレル、アセチルまたはベンゾイル基で置換されていてもよいヒドロキシル基が挙げられる。
Ｒ７およびＲ８における好ましい置換基としては、シクロサリゲニル、ピバロイルオキシメチル、１−ピバロイルオキシエチルまたはＳ−ピバロイル−２−チオエチル基で置換されているヒドロシキル基が挙げられる。
Ｙにおける好ましい置換基としては、酸素原子が挙げられる。Ａにおける好ましい置換基としては、酸素原子が挙げられる。
また、とりわけ、一般式［３ｚ］で表される化合物において、好ましい化合物としては、一般式［３ｚ’］
0004370164.tif 000011
「式中、Ｒａは、水素またはハロゲン原子を；ＲｂおよびＲｃは、同一または異なって水素原子もしくはヒドロキシル保護基またはＲｂおよびＲｃが一緒になって置換されていてもよいアルキレン基を示す。」で表される化合物が挙げられ、より好ましくは、一般式［３ｚ’］においてＲａ、ＲｂおよびＲｃが水素原子である化合物が挙げられる。
本発明の代表的化合物としては、たとえば、以下の化合物が挙げられる。なお、図中、略号はそれぞれ以下の意味を有する。
Ａｃ：アセチル、Ｂｚ：ベンゾイル、Ｍｅ：メチル、Ｅｔ：エチル
また、以下の代表的化合物の図における糖鎖は、慣用表現で記載されており、たとえば、式
0004370164.tif 000012
で表される化合物の立体配置は、式
0004370164.tif 000013
で表される化合物を意味する。
0004370164.tif 000014
0004370164.tif 000015
0004370164.tif 000016
つぎに、本発明化合物の製造法について説明する。
一般式［２］で表されるピラジンヌクレオチド類似体またはその塩は、公知の方法もしくはそれに準じた方法並びにそれらを組み合わせることにより製造することができる。製造方法が記載されている文献としては、例えば、アンチバイラル・リサーチ（Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ）、第２４巻、第６９−７７頁（１９９４年）；アンチバイラル・ケミストリー（Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）、第９巻、第３８９−４０２頁（１９９８年）；ジャーナル・オブ・ケミカル・ソサエティー・パーキン・トランザクション（Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．ＰＥＲＫＩＮ  ＴＲＡＮＳ．）、第１巻、第１２３９−１２４５頁（１９９３年）；米国特許第５７７０７２５号などが挙げられる。また、本発明化合物は、例えば、つぎに示す製造法１〜５のルートに従って製造することができる。
［製造法１］
0004370164.tif 000017
「式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ７およびＲ８は、前記と同様の意味を；Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３およびＺ４は、同一または異なって、水素原子、保護されているヒドロキシル基を示す。但し、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３およびＺ４において２個以上の異なった炭素原子に結合するヒドロキシル基を有する場合は、各ヒドロキシル基の酸素原子および各ヒドロキシル基の結合する炭素原子が保護基と一緒になって環を形成することによって保護されていてもよい。」
（ａ）一般式［２ａ］の化合物またはその塩は、一般式［３ａ］の化合物またはその塩を、例えば、第４版実験化学講座、第２２巻、第３１３〜４３８頁（１９９２年）に記載の方法に準じて、（１）添加剤の存在下あるいは不存在下、リン酸化剤と反応させることにより、または、（２）添加剤の存在下あるいは不存在下、亜リン酸化剤と反応した後に、酸化剤と反応することにより得ることができる。
（１）の方法において、この反応で使用される溶媒としては、反応に悪影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、例えば、ベンゼン、トルエンおよびキシレンなどの芳香族炭化水素類；ジオキサン、テトラヒドロフラン、アニソール、ジエチレングリコールジエチルエーテルおよびジメチルセロソルブなどのエーテル類；アセトニトリルなどのニトリル類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドおよびＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドなどのアミド類；ジメチルスルホキシドなどのスルホキシド類；リン酸トリメチルなどのリン酸エステル類ならびにピリジンなどが挙げられ、これらの溶媒を一種または二種以上混合して使用してもよい。
この反応で用いられるリン酸化剤は、ヒドロキシル基のリン酸化に一般的に用いられる試薬を使用すればよく、例えば、リン酸ジベンジルなどのリン酸ジエステル類；Ｓ，Ｓ’−ジフェニルホスホロジチオエート・モノシクロヘキシルアンモニウムなどのリン酸ジチオエステル類；塩化ホスホリルやメチルクロロフェニルホスホリルＰ→Ｎ−Ｌ−アラニネートなどのリン酸塩化物などが挙げられる。リン酸化剤の使用量は、一般式［３ａ］の化合物またはその塩に対して、等モル以上、好ましくは、１．０〜５．０倍モルであればよい。
この反応で用いられる添加剤としては、例えば、アゾジカルボン酸ジエチルまたはアゾジカルボン酸ジイソプロピルなどのアゾ化合物、トリフェニルホスフィンなどのホスフィン類、２，４，６−トリイソプロピルベンゼンスルホン酸クロリドなどのアレンスルホン酸塩化物およびピリジンやｔｅｒｔ−ブチルマグネシウムクロリドなどの塩基類などが挙げられ、これらは組み合せて使用してもよい。添加剤の使用量は、一般式［３ａ］の化合物またはその塩に対して、等モル以上であればよく、好ましくは、１．０〜５．０倍モルであればよい。
この反応は、通常、−５０〜１７０℃、好ましくは、０〜１００℃で、１分〜７２時間、好ましくは、５分〜２４時間実施すればよい。
（２）の方法において、この反応で使用される溶媒としては、反応に悪影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、例えば、ベンゼン、トルエンおよびキシレンなどの芳香族炭化水素類；ジオキサン、テトラヒドロフラン、アニソール、ジエチレングリコールジエチルエーテルおよびジメチルセロソルブなどのエーテル類；アセトニトリルなどのニトリル類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドおよびＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドなどのアミド類；ジメチルスルホキシドなどのスルホキシド類ならびにピリジンなどが挙げられ、これらの溶媒を一種または二種以上混合して使用してもよい。
この反応で用いられる亜リン酸化剤は、ヒドロキシル基の亜リン酸化に一般的に用いられる試薬を使用すればよく、例えば、ジアリルジイソプロピルホスホルアミダイトやビス（Ｓ−ピバロイル−２−チオエチル）Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルホスホルアミダイトなどのホスホルアミダイト類およびジアリルホスホロクロリダイトなどの亜リン酸塩化物が挙げられる。亜リン酸化剤の使用量は、一般式［３ａ］の化合物またはその塩に対して、等モル以上、好ましくは、１．０〜３．０倍モルであればよい。
この反応で用いられる添加剤としては、例えば、１Ｈ−テトラゾール、４−ジメチルアミノピリジン、ピリジン、コリジンなどの含窒素複素環類が挙げられ、これらは組み合せて使用してもよい。添加剤の使用量は、一般式［３ａ］の化合物またはその塩に対して、等モル以上であればよく、好ましくは、１．０〜５．０倍モルであればよい。
この反応で用いられる酸化剤としては、例えば、メタクロロ過安息香酸、ｔｅｒｔ−ブチルヒドロペルオキシドなどの過酸化物およびヨウ素などのハロゲン化合物が挙げられる。酸化剤の使用量は、一般式［３ａ］の化合物またはその塩に対して、等モル以上であればよく、好ましくは、１．０〜５．０倍モルであればよい。
この反応は、通常、−７８〜１００℃、好ましくは、−５０〜５０℃で、１分〜２４時間、好ましくは、５分〜６時間実施すればよい。
［製造法２］
0004370164.tif 000018
「式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３およびＺ４は前記と同様の意味を；Ｒ１０およびＲ１１は同一もしくは異なって、生理的条件下に分解されるリン酸の保護基を；Ｘはハロゲン原子を示す。」
一般式［２ｂ］の化合物またはその塩は、一般式［３ｂ］の化合物またはその塩を一般式［６ａ］で示される化合物と、例えば、ジャーナル・オブ・メディシナルケミストリー（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）、第３７巻、第３９０２〜３９０９頁（１９９４年）に記載の方法に準じて、反応することにより得ることができる。
この反応で使用される溶媒としては、反応に悪影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、例えば、ベンゼン、トルエンおよびキシレンなどの芳香族炭化水素類；塩化メチレン、クロロホルムなどのハロゲン化炭化水素類；ジオキサン、テトラヒドロフラン、アニソール、ジエチレングリコールジエチルエーテルおよびジメチルセロソルブなどのエーテル類；アセトニトリルなどのニトリル類；Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドなどのアミド類；メタノール、エタノールおよびプロパノールなどのアルコール類；ジメチルスルホキシドなどのスルホキシド類ならびに水などが挙げられ、これらの溶媒を一種または二種以上混合して使用してもよい。
一般式［６ａ］の化合物は、一般式［３ｂ］の化合物またはその塩に対して、等モル以上であればよく、好ましくは１．０〜３．０倍モルであればよい。
この反応は、通常、０〜１７０℃、好ましくは、２０〜１２０℃で、５分〜２４時間、好ましくは、１〜１０時間実施すればよい。
［製造法３］
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「式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３およびＺ４は、前記と同様の意味を示す。」
一般式［２ｃ］の化合物またはその塩は、一般式［２ａ］の化合物またはその塩を脱保護反応に付すことにより得ることができる。
この反応で使用される溶媒としては、反応に悪影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、例えば、ベンゼン、トルエンおよびキシレンなどの芳香族炭化水素類；ジオキサン、テトラヒドロフラン、アニソール、ジエチレングリコールジエチルエーテルおよびジメチルセロソルブなどのエーテル類；アセトニトリルなどのニトリル類；Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドなどのアミド類；メタノール、エタノールおよびプロパノールなどのアルコール類；ジメチルスルホキシドなどのスルホキシド類ならびに水などが挙げられ、これらの溶媒を一種または二種以上混合して使用してもよい。
この反応で用いられる脱保護剤は、ヒドロキシル基の脱保護に一般的に用いられる試薬を使用すればよく、好ましくは、ナトリウムメトキシド、アンモニアガス、アンモニア水、ブチルアミン、ヒドラジンなどの塩基類；ギ酸、酢酸水溶液、トリフルオロ酢酸水溶液、塩酸、ブロモトリメチルケイ素、ダウエックス５０ＷＸ４−２００イオン交換樹脂、アンバーライトＩＲ−１２０イオン交換樹脂などの酸類；テトラキストリフェニルホスフィンパラジウム（Ｏ）などのパラジウム触媒およびトリフェニルホスフィンなどのホスフィン類が挙げられ、これらは組合せて使用しても、反応系内で製造してもよい。脱保護剤の使用量は、一般式［２ａ］の化合物またはその塩に対して、それぞれ、０．０１倍モル以上であればよく、溶媒として使用してもよい。
この脱保護反応は、通常、−５０〜１７０℃、好ましくは、−２０〜１００℃で、１分〜１００時間、好ましくは、５分〜５０時間実施すればよい
［製造法４］
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「式中、Ｒ１、Ｒ７、Ｒ８、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３およびＺ４は、前記と同様の意味を；Ｒ２ａは、アシル基を示す。」
一般式［２ｄ］の化合物またはその塩は、一般式［２ａ’］の化合物またはその塩を、例えば、第４版実験化学講座、第２２巻、第１３７〜１５１、１６６〜１６９頁（１９９２年）、ジャーナル・オブ・メディシナルケミストリー（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）、第４４巻、第７７７〜７８６頁（２００１年）、特開平１０−１９５０７５号に記載の方法に準じて、脱酸剤の存在下、添加剤の存在下あるいは非存在下、アシル化反応に付すことにより得ることができる。
この反応で使用される溶媒としては、反応に悪影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、例えば、ジオキサン、テトラヒドロフラン、アニソール、ジエチレングリコールジエチルエーテルおよびジメチルセロソルブなどのエーテル類；ベンゼン、トルエンおよびキシレンなどの芳香族炭化水素類；ジクロロメタン、クロロホルムおよびジクロロエタンなどのハロゲン化炭化水素類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドおよびＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドなどのアミド類および水などが挙げられ、これらの溶媒は混合して使用してもよい。
この反応で使用されるアシル化剤としては、例えば、酢酸などのカルボン酸類；Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−バリンなどの保護されたアミノ酸類；ピバリン酸塩化物などの酸ハロゲン化物類；無水酢酸などの酸無水物類；１，１’−カルボニルジイミダゾールなどのイミダゾール類；酢酸メチルなどのカルボン酸エステル類ならびにＮ，Ｎ−ジメチルアセタミドジメチルアセタールなどのアミドアセタール類が挙げられる。これらは、反応系内で製造してもよい。アシル化剤の使用量は、一般式［２ａ’］の化合物に対して、等モル以上、好ましくは、１．０〜２．０倍モル使用すればよい。
この反応で使用される脱酸剤としては、例えば、ピリジン、トリエチルアミン、水素化ナトリウム、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド、炭酸カリウムおよび炭酸水素ナトリウムなどが挙げられる。脱酸剤の使用量は、一般式［２ａ’］の化合物に対して等モル以上、好ましくは、１．０〜２．０倍モル使用すればよい。
この反応で使用される添加剤としては、例えば、１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド、アゾジカルボン酸ジエチル、トリフェニルホスフィンなどが挙げられる。添加剤の使用量は、一般式［２ａ’］の化合物に対して等モル以上、好ましくは、１．０〜２．０倍モル使用すればよい。
この反応は、通常、０〜１００℃、好ましくは、２０〜６０℃で５分〜２４時間、好ましくは、３０分〜１０時間実施すればよい。
［製造法５］
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「式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、前記と同様の意味を示す。」
一般式［２ｅ］の化合物またはその塩は、一般式［７ｂ］の化合物またはその塩を、例えば、第４版実験化学講座、第２２巻、第３７１−４２４頁（１９９２年）およびジャーナル・オブ・メディシナルケミストリー（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．）、第３８巻、第１３７２−１３７９頁（１９９５年）に記載の方法に準じて、添加剤の存在下あるいは不存在下、反応剤と反応することにより得ることができる。
この反応で使用される溶媒としては、反応に悪影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、例えば、ベンゼン、トルエンおよびキシレンなどの芳香族炭化水素類；ジオキサン、テトラヒドロフラン、アニソール、ジエチレングリコールジエチルエーテルおよびジメチルセロソルブなどのエーテル類；アセトニトリルなどのニトリル類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドおよびＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドなどのアミド類；Ｎ、Ｎ’−ジメチルプロピレンウレアなどのウレア類；ジメチルスルホキシドなどのスルホキシド類ならびにピリジンなどが挙げられ、これらの溶媒を一種または二種以上混合して使用してもよい。
この反応で用いられる反応剤は、リン酸基の置換反応に一般的に用いられる反応剤を使用すればよく、例えば、ピバロイルオキシメチルクロリドおよび１−（ピバロイルオキシ）エチルクロリドなどのハロゲン化アルキル化合物類；４−ブロモフェノール、４−クロロフェノール、Ｓ−（２−ヒドロキシエチル）チオピバロエートおよびＳ−（４−ヒドロキシブチル）チオイソブチレートなどのアルコールおよびフェノール類；アラニンメチルエステルなどのアミン類が挙げられる。反応剤の使用量は、一般式［７ｂ］の化合物またはその塩に対して、等モル以上、好ましくは、１．０〜５．０倍モルであればよい。
この反応で用いられる添加剤としては、例えば、五塩化リン、ヨウ化ナトリウムなどのハロゲン化合物；１−メチルイミダゾールや１，１’−カルボニルジイミダゾールなどの含窒素複素環化合物；アゾジカルボン酸ジエチルまたはアゾジカルボン酸ジイソプロピルなどのアゾ化合物；トリフェニルホスフィンなどのホスフィン類；２，４，６−トリイソプロピルベンゼンスルホン酸クロリドなどのアレンスルホン酸塩化物およびトリエチルアミン、ピリジン、ｔｅｒｔ−ブチルマグネシウムクロリドなどの塩基類が挙げられ、これらは組み合せて使用してもよい。添加剤の使用量は、一般式［７ｂ］の化合物またはその塩に対して、０．０１〜１０倍モルであればよく、好ましくは、０．０５〜５．０倍モルであればよい。
この反応は、通常、−５０〜１７０℃、好ましくは、０〜１００℃で、１分〜７２時間、好ましくは、５分〜２４時間実施すればよい。
［製造法６］
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「式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ７、Ｒ８、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３、Ｚ４およびＹは、前記と同様の意味を示す。」
一般式［２ｉ］の化合物またはその塩は、一般式［３ｉ］の化合物またはその塩を用いて、製造法１の方法に従って反応させることにより得ることができる。
［製造法７］
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「式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３、Ｚ４、Ｒ１０、Ｒ１１、ＸおよびＹは、前記と同様の意味を示す。」
一般式［２ｊ］の化合物またはその塩は、一般式［３ｊ］の化合物またはその塩を用いて、製造法２の方法に従って反応させることにより得ることができる。
［製造法８］
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「式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３、Ｚ４およびＹは、前記と同様の意味を示す。」
一般式［２ｋ］の化合物またはその塩は、一般式［２ｉ］の化合物またはその塩を用いて、製造法３の方法に従って反応させることにより得ることができる。
［製造法９］
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「式中、Ｒ１、Ｒ２ａ、Ｒ７、Ｒ８、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３、Ｚ４およびＹは、前記と同様の意味を示す。」
一般式［２ｍ］の化合物またはその塩は、一般式［２ｌ］の化合物またはその塩を用いて、製造法４の方法に従って反応させることにより得ることができる。
次に、一般式［３ａ］、［３ｅ］および［３ｆ］の化合物またはそれらの塩の製造法について説明する。
［製造法Ａ］
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「式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３およびＺ４は、前記と同様の意味を；Ｒ１２は低級アルキル、アリール基を；Ｒ１３は、ハロゲン原子、アシロキシ基、アルキルスルホニルオキシおよびアリールスルホニルオキシ基を；Ｚ５、Ｚ６、Ｚ７およびＺ８は、同一または異なって水素原子もしくは保護されたヒドロキシル基を；Ｚ９は水素原子もしくはヒドロキシル基の保護基を；Ｚ１０、Ｚ１１、Ｚ１２およびＺ１３は、同一または異なって、水素原子もしくはヒドロキシル基を示す。」
（ａ）一般式［３ｆ］の化合物またはその塩は、一般式［４ｂ］の化合物またはその塩を、（１）通常利用されるシリル化法により、添加剤の存在下あるいは非存在下、一般式［４ａ］の化合物またはその塩に誘導した後、（２）一般式［６ｂ］の化合物またはその塩と、ルイス酸の存在下あるいは不存在下、反応を行うことにより得ることができる。
これらの反応で使用される溶媒としては、反応に悪影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、例えば、ベンゼン、トルエンおよびキシレンなどの芳香族炭化水素類；ジオキサン、テトラヒドロフラン、アニソール、ジエチレングリコールジエチルエーテルおよびジメチルセロソルブなどのエーテル類；アセトニトリルなどのニトリル類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドおよびＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドなどのアミド類；ジメチルスルホキシドなどのスルホキシド類；塩化メチレン、クロロホルムおよびジクロロエタンなどのハロゲン化炭化水素類が挙げられ、これらの溶媒を一種または二種以上混合して使用してもよい。
（１）の反応において反応に用いられるシリル化剤は、カルボニル基のシリルエノールエーテル化に一般的に使用されるシリル化剤であればよく、例えば、１，１，１，３，３，３−ヘキサメチルジシラザン、Ｎ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル）アセトアミドおよび塩化トリメチルシリルなどが挙げられる。その使用量は、一般式［４ｂ］の化合物またはその塩に対して、それぞれ、等モル以上であればよく、好ましくは、１．０〜１０．０倍モルであればよい。
この反応で必要に応じて使用される添加剤は、例えば、硫酸アンモニウムなどが挙げられる。その使用量は、一般式［４ｂ］の化合物またはその塩に対して、それぞれ、０．０１〜１０．０倍モルであればよく、好ましくは、０．０５〜５．０倍モルであればよい。
この反応は、通常、０〜２００℃、好ましくは、０〜１５０℃で、５分〜２４時間、好ましくは、５分〜１２時間実施すればよい。
（２）の反応において使用される一般式［６ｂ］の化合物またはその塩の使用量は、一般式［４ａ］の化合物またはその塩に対して、０．５〜１０倍モルであればよく、好ましくは、０．５〜５倍モルである。
この反応で必要に応じて使用されるルイス酸としては、例えば、トリメチルシリルトリフルオロメタンスルホン酸、塩化スズ（ＩＶ）、塩化チタン（ＩＶ）および塩化亜鉛などが挙げられ、その使用量は、一般式［４ａ］の化合物またはその塩に対して、それぞれ、０．５モル以上であればよく、好ましくは、０．５〜１０倍モルであればよい。
この反応は、通常、０〜１００℃、好ましくは、０〜５０℃で、１分〜７２時間、好ましくは、５分〜２４時間実施すればよい。
（ｂ）一般式［３ｅ］の化合物またはその塩は、一般式［３ｆ］の化合物またはその塩を用いて、製造法３の方法にしたがって反応させることにより得ることができる。
（ｃ）一般式［３ａ］の化合物またはその塩は、一般式［３ｅ］の化合物またはその塩を酸触媒または塩基の存在下あるいは不存在下、試薬を用いて保護することにより得ることができる。
この反応で使用される溶媒としては、反応に悪影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、例えば、ベンゼン、トルエンおよびキシレンなどの芳香族炭化水素類；ジオキサン、テトラヒドロフラン、アニソール、ジエチレングリコールジエチルエーテルおよびジメチルセロソルブなどのエーテル類；アセトニトリルなどのニトリル類；Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドなどのアミド類；メタノール、エタノールおよびプロパノールなどのアルコール類；ジメチルスルホキシドなどのスルホキシド類；アセトンなどのケトン類ならびに水などが挙げられ、これらの溶媒を一種または二種以上混合して使用してもよい。
この反応で用いられる試薬は、ヒドロキシル基の保護に一般的に用いられる試薬を使用すればよく、好ましくは、２，２−ジメトキシプロパン、塩化アセチルまたは塩化ベンゾイルが挙げられ、これらは反応系内で製造してもよい。その使用量は、一般式［３ｅ］の化合物またはその塩に対して、等モル以上、好ましくは、１．０〜１０倍モルであればよい。
この反応で用いられる酸触媒または塩基としては、例えば、パラトルエンスルホン酸ピリジニウム塩、パラトルエンスルホン酸およびトリエチルアミンなどが挙げられ、その使用量は、一般式［３ｅ］の化合物またはその塩に対して、それぞれ、０．０１〜１０倍モル、好ましくは、０．０５〜１０倍モルであればよい。
この反応は、通常、−５０〜１７０℃、好ましくは、０〜１５０℃で、１分〜２４時間、好ましくは、５分〜１０時間実施すればよい。
一般式［４ｂ］で表される化合物またはそれらの塩は、市販品の購入により入手するか、公知の方法もしくはそれに準じた方法並びにそれらを組み合わせることにより製造することができる。製造方法が記載されている文献としては、例えば、ジャーナル・オブ・アメリカン・ケミカル・ソシエティー（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．）、第７１巻、第７８頁（１９４９年）；同第７８巻、第２４２−２４４頁（１９５６年）；ジャーナル・オブ・ヘテロサイクリック・ケミストリー（Ｊ．Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌ．Ｃｈｅｍ．）、第１５巻第４号、第６６５−６７０頁（１９７８年）；ジャーナル・オブ・ケミカル・ソシエティー（Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．）、第１３７９頁（１９５５年）；米国特許第５５９７８２３号；国際特許第ＷＯ００／１０５６９号などが挙げられる。
次に、一般式［３ｂ］の化合物またはそれらの塩の製造法について説明する。
［製造法Ｂ］
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「式中、Ｒ９はアルキル基を；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３、Ｚ４、Ｚ５、Ｚ６、Ｚ７、Ｚ８、Ｚ９、Ｚ１０、Ｚ１１、Ｚ１２、Ｚ１３およびＸは、前記と同様の意味を示す。」
（ａ）一般式［３ｈ］の化合物またはその塩は、一般式［４ｄ］の化合物またはその塩を用いて、製造法Ａ（ａ）の方法に従って反応させることにより得ることができる。
（ｂ）一般式［３ｇ］の化合物またはその塩は、一般式［３ｈ］の化合物またはその塩を用いて、製造法３の方法に従って反応させることにより得ることができる。
（ｃ）一般式［３ｄ］の化合物またはその塩は、一般式［３ｇ］の化合物またはその塩を用いて、製造法Ａ（ｃ）の方法に従って反応させることにより得ることができる。
（ｄ）一般式［３ｃ］の化合物またはその塩は、一般式［３ｄ］の化合物またはその塩を例えば、第４版実験化学講座、第１９巻、第４１６〜４８２頁（１９９２年）に記載の方法に準じて、（１）添加剤の存在下あるいは不存在下、ハロゲン化剤と反応させることにより、または、（２）脱酸剤の存在下、スルホン酸エステル化剤と反応した後に、ハロゲン化剤と反応することによって得ることができる。
（１）の方法において、この反応で使用される溶媒としては、反応に悪影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、例えば、ベンゼン、トルエンおよびキシレンなどの芳香族炭化水素類；塩化メチレン、クロロホルムなどのハロゲン化炭化水素類；ジオキサン、テトラヒドロフラン、アニソール、ジエチレングリコールジエチルエーテルおよびジメチルセロソルブなどのエーテル類；アセトニトリルなどのニトリル類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドおよびＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドなどのアミド類；メタノール、エタノールおよびプロパノールなどのアルコール類；ジメチルスルホキシドなどのスルホキシド類ならびに水などが挙げられ、これらの溶媒を一種または二種以上混合して使用してもよい。
この反応で使用されるハロゲン化剤は、ヒドロキシル基のハロゲン化反応に通常使用される試薬であれば特に限定されないが、好ましくは、例えば、ヨウ素、臭素、塩素、ヨウ化水素酸、臭化水素酸、臭化ナトリウム、ヨウ化カリウム、塩化スルフリル、Ｎ−ブロモスクシミド、Ｎ−クロルスクシミド、四臭化炭素ならびにホスホン酸トリフェニルヨウ素などのリン化合物などが挙げられる。ハロゲン化剤の使用量は、一般式［３ｄ］の化合物またはその塩に対して、１〜５０倍モル、好ましくは、１〜２０倍モルであればよい。
この反応で必要に応じて使用される添加剤は、ヒドロキシル基のハロゲン化反応に通常使用される試薬であれば特に限定されないが、好ましくは、例えば、トリフェニルホスフィンなどのホスフィン類；アゾジカルボン酸ジエチルなどのアゾ化合物；塩化トリメチルケイ素、ヘキサメチルジシロキサンなどのケイ素類が上げられ、これらは一種または二種以上混合して使用してもよい。この反応で用いられる添加剤の使用量は、一般式［３ｄ］の化合物またはその塩に対して、それぞれ、０．０１〜１０倍モル、好ましくは、０．１〜１０倍モルであればよい。
この反応は、通常、−８０〜１７０℃、好ましくは、−８０〜１００℃で、１分〜７２時間、好ましくは、５分〜４８時間実施すればよい。
（２）の方法において、スルホン酸エステル化の反応で使用される溶媒としては、反応に悪影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、例えば、ベンゼン、トルエンおよびキシレンなどの芳香族炭化水素類；塩化メチレン、クロロホルムなどのハロゲン化炭化水素類；ジオキサン、テトラヒドロフラン、アニソール、ジエチレングリコールジエチルエーテルおよびジメチルセロソルブなどのエーテル類；アセトニトリルなどのニトリル類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドおよびＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドなどのアミド類；メタノール、エタノールおよびプロパノールなどのアルコール類；ジメチルスルホキシドなどのスルホキシド類ならびに水などが挙げられ、これらの溶媒を一種または二種以上混合して使用してもよい。
この反応で使用されるスルホン酸エステル化剤は、ヒドロキシル基のスルホン酸エステル化反応に通常使用される試薬であれば特に限定されないが、好ましくは、塩化メタンスルホニル、塩化ｐ−トルエンスルホニルなどのハロゲン化スルホニル類；トリフルオロメタンスルホン酸無水物などのスルホン酸無水物類ならびにトリフルオロメタンスルホン酸などのスルホン酸類などが挙げられる。スルホン酸エステル化剤の使用量は、一般式［３ｄ］の化合物またはその塩に対して、１〜２０倍モル、好ましくは、１．０〜５．０倍モルであればよい。
この反応で必要に応じて使用される脱酸剤は、ヒドロキシル基のスルホン酸エステル化反応に通常使用される試薬であれば特に限定されないが、好ましくは、例えば、ピリジン、２，６−ルチジン、トリエチルアミン、ナトリウムメトキシドなどの塩基が挙げられ、これらは一種または二種以上混合して使用してもよい。この反応で用いられる脱酸剤の使用量は、一般式［３ｄ］の化合物またはその塩に対して、それぞれ、０．０１〜２０倍モル、好ましくは、０．１〜１０倍モルであればよい。
この反応は、通常、−８０〜１００℃、好ましくは、−２０〜５０℃で、１分〜２４時間、好ましくは、５分〜１２時間実施すればよい。
ハロゲン化の反応で使用される溶媒としては、反応に悪影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、例えば、ベンゼン、トルエンおよびキシレンなどの芳香族炭化水素類；塩化メチレン、クロロホルムなどのハロゲン化炭化水素類；ジオキサン、テトラヒドロフラン、アニソール、ジエチレングリコールジエチルエーテルおよびジメチルセロソルブなどのエーテル類；アセトニトリルなどのニトリル類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドおよびＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドなどのアミド類；アセトンなどのケトン類；メタノール、エタノールおよびプロパノールなどのアルコール類；ジメチルスルホキシドなどのスルホキシド類ならびに水などが挙げられ、これらの溶媒を一種または二種以上混合して使用してもよい。
この反応で使用されるハロゲン化剤は、スルホン酸エステル基のハロゲン化反応に通常使用される試薬であれば特に限定されないが、好ましくは、例えば、臭化ナトリウム、ヨウ化ナトリウム、ヨウ化カリウム、ヨウ化マグネシウムなどが挙げられる。ハロゲン化剤の使用量は、一般式［３ｄ］の化合物またはその塩に対して、１〜５０倍モル、好ましくは、１〜２０倍モルであればよい。
この反応は、通常、−８０〜１７０℃、好ましくは、−８０〜１００℃で、１分〜７２時間、好ましくは、５分〜１２時間実施すればよい。
（ｅ）一般式［３ｂ］の化合物またはその塩は、一般式［３ｃ］の化合物またはその塩を触媒の存在下あるいは不存在下、カルボン酸エステルのアンモノリシス反応に付すことによって得ることができる。
この反応で使用される溶媒としては、反応に悪影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、例えば、ベンゼン、トルエンおよびキシレンなどの芳香族炭化水素類；塩化メチレン、クロロホルムなどのハロゲン化炭化水素類；ジオキサン、テトラヒドロフラン、アニソール、ジエチレングリコールジエチルエーテルおよびジメチルセロソルブなどのエーテル類；アセトニトリルなどのニトリル類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドおよびＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドなどのアミド類；メタノール、エタノールおよびプロパノールなどのアルコール類；ジメチルスルホキシドなどのスルホキシド類ならびに水などが挙げられ、これらの溶媒を一種または二種以上混合して使用してもよい。この反応は、芳香族カルボン酸エステルのアンモノリシス反応に通常、使用される試薬および条件で実施すればよく、好ましくは、アンモニアガス、液体アンモニアまたはアンモニア水を使用すればよく、これらの使用量は、一般式［３ｃ］の化合物またはその塩に対して、それぞれ、等モル以上であればよい。また、これらの試薬は、溶媒として使用してもよい。この反応に必要に応じて使用される触媒としては、塩化アンモニウムなどの酸アンモニウム塩；ナトリウムメトキシドおよびブチルリチウムなどの塩基；ならびにナトリウムアミドなどのアルカリ金属アミドが挙げられ、触媒の使用量は、一般式［３ｃ］の化合物またはその塩に対して、０．０１〜１００倍モル、好ましくは、０．０１〜２０倍モルであればよい。
この反応は、通常、−１００〜２５０℃、好ましくは、−７８〜１００℃で、１分〜７２時間、好ましくは、３０分〜５０時間実施すればよい。
一般式［４ｄ］で表される化合物またはそれらの塩は、市販品の購入により入手するか、公知の方法もしくはそれに準じた方法並びにそれらを組み合わせることにより製造することができる。また、製造方法が記載されている文献としては、例えば、一般式［４ｂ］の製造方法で示した文献が挙げられる。
次に、一般式［７ｂ］の化合物またはその塩の製造法について説明する。
［製造法Ｃ］
0004370164.tif 000028
「式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ９、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３およびＺ４は、前記と同様の意味を示す。」
（ａ）一般式［８ｄ］の化合物またはその塩は、一般式［８ａ］の化合物またはその塩を用いて、製造法３の方法にしたがって反応させることにより得ることができる。
（ｂ）一般式［７ｂ］の化合物またはその塩は、一般式［８ｄ］の化合物またはその塩を用いて、（１）製造法３の方法にしたがって脱保護した後に、製造法Ｂ（ｅ）の方法にしたがってアミド化させる、もしくは、（２）製造法Ｂ（ｅ）の方法にしたがってアミド化させた後に、製造法３の方法にしたがって脱保護することにより得ることができる。
（ｃ）一般式［８ｂ］の化合物またはその塩は、一般式［８ｃ］の化合物またはその塩を用いて、製造法４の方法にしたがって反応させることにより得ることができる。
（ｄ）一般式［８ｆ］の化合物またはその塩は、一般式［８ｂ］の化合物を用いて、製造法３の方法に従って脱保護することにより得ることができる。
次に、一般式［８ａ］および一般式［８ｂ’］の化合物またはそれらの塩の製造法について説明する。
［製造法Ｄ］
0004370164.tif 000029
「式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ９、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３およびＺ４は、前記と同様の意味を示す。」
（ａ）一般式［８ａ］の化合物またはその塩は、一般式［９ａ］の化合物またはその塩を用いて、製造法Ｂ（ａ）の方法に従って、一般式［１０ａ］の化合物またはその塩と反応させることにより得ることができる。
（ｂ）一般式［８ｂ’］の化合物またはその塩は、一般式［９ｃ］の化合物またはその塩を用いて、製造法Ｂ（ａ）の方法に従って、一般式［１０ａ］の化合物またはその塩と反応させることにより得ることができる。
次に、一般式［１０ａ］の化合物またはその塩の製造法について説明する。
［製造法Ｅ］
0004370164.tif 000030
「式中、Ｒ９、Ｒ１３、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３、Ｚ４、Ｚ１０、Ｚ１１、Ｚ１２およびＺ１３は、前記と同様の意味を示す。」
（ａ）一般式［１０ｃ］の化合物またはその塩は、一般式［１０ｂ］の化合物またはその塩を用いて、製造法Ａ（ｃ）の方法に従って反応させることにより得ることができる。
（ｂ）一般式［１０ａ］の化合物またはその塩は、一般式［１０ｃ］の化合物またはその塩を、例えば、ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．）、第５５巻、第３８５３−３８５７頁（１９９０年）に記載の方法に準じて置換反応することにより得ることができる。
この反応で使用される溶媒としては、反応に悪影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、例えば、ベンゼン、トルエンおよびキシレンなどの芳香族炭化水素類；塩化メチレン、クロロホルムなどのハロゲン化炭化水素類；ジオキサン、テトラヒドロフラン、アニソール、ジエチレングリコールジエチルエーテルおよびジメチルセロソルブなどのエーテル類；アセトニトリルなどのニトリル類；Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドなどのアミド類；メタノール、エタノールおよびプロパノールなどのアルコール類；ジメチルスルホキシドなどのスルホキシド類ならびに水などが挙げられ、これらの溶媒を一種または二種以上混合して使用してもよい。
この反応において反応に用いられる反応剤は、ラクトールの酸性条件下での置換反応に一般的に使用される反応剤であればよく、例えば、酢酸、無水酢酸などの有機酸および酸無水物；塩化水素ガス、塩酸、臭化水素酸、硫酸、フッ化水素酸などの無機酸；塩素、臭素などのハロゲン化合物；四臭化チタン、クロロトリメチルケイ素などのルイス酸およびチオフェノール、メチルチオトリメチルケイ素などのチオ化合物が挙げられる。その使用量は、一般式［１０ｃ］の化合物またはその塩に対して、それぞれ、１〜２０倍モルであればよく、好ましくは、１〜１０倍モルであればよく、溶媒として使用してもよい。
この反応は、通常、０〜２００℃、好ましくは、０〜１００℃で、５分〜４８時間、好ましくは、３０分〜２４時間実施すればよい。
一般式［１０ｂ］の化合物は、ジャーナル・オブ・ケミカル・ソサエティー・ケミカルコミュニケーション（Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．）第４０−４１頁（１９８９年）に記載された方法に準じて得ることができる。
次に、一般式［１］で表されるピラジンヌクレオチド類似体において、Ａが酸素原子である化合物の化学的合成法について説明する。
［製造法Ｆ］
0004370164.tif 000031
「式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３、Ｚ４は、前記と同様の意味を；Ｒ１４は、保護されてもよいモノリン酸基およびモノリン酸塩化物を；Ｒ１５は、保護されてもよいジリン酸またはトリリン酸基を示す。」
（ａ）一般式［５ｃ］の化合物またはその塩は、一般式［３ｖ］の化合物またはその塩を用いて、製造法１の方法に従って反応させることにより得ることができる。
（ｂ）一般式［５ｂ］の化合物またはその塩は、一般式［５ｃ］の化合物またはその塩を用いて、製造法３の方法に従って反応させることにより得ることができる。
（ｃ）一般式［５ａ］の化合物またはその塩は、一般式［５ｂ］の化合物またはその塩を、例えば、ケミカル・レビュー（Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．）、第１００巻、第２０４７−２０５９頁（２０００年）；ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．）、第５５巻、第１８３４−１８４１頁（１９９０年）；アクタ・バイオキミカ・バイオフィジカ・アカデミア・サイエンチアルム・ハンガリカエ（Ａｃｔａ  Ｂｉｏｃｈｉｍ．ｅｔ  Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｈｕｎｇ．）、第１６巻、第１３１−１３３頁（１９８１年）の方法に準じて、縮合剤の存在下あるいは不存在下、リン酸化剤と反応させることにより得ることができる。
この反応で使用される溶媒としては、反応に悪影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、例えば、ベンゼン、トルエンおよびキシレンなどの芳香族炭化水素類；ジオキサン、テトラヒドロフラン、アニソール、ジエチレングリコールジエチルエーテルおよびジメチルセロソルブなどのエーテル類；アセトニトリルなどのニトリル類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドおよびＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドなどのアミド類；ジメチルスルホキシドなどのスルホキシド類；リン酸トリメチルなどのリン酸エステル類ならびにピリジンなどが挙げられ、これらの溶媒を一種または二種以上混合して使用してもよい。
この反応で用いられるリン酸化剤は、モノリン酸基のリン酸化に一般的に用いられる試薬を使用すればよく、例えば、トリｎ−ブチルアンモニウムホスフェートやトリｎ−ブチルアンモニウムピロホスフェートなどのリン酸塩類が挙げられ、これらは反応系内で製造してもよい。リン酸化剤の使用量は、一般式［５ｂ］の化合物またはその塩に対して、等モル以上、好ましくは、１〜１０倍モルであればよい。縮合剤としては、例えば、１，１’−カルボニルジイミダゾール、Ｎ−メチルイミダゾールなどのイミダゾール類、モルホリン、ジイソプロピルアミンなどのアミン類が挙げられ、これらは組み合せて使用してもよい。縮合剤の使用量は、一般式［５ｂ］の化合物またはその塩に対して、等モル以上であればよく、好ましくは、１〜５倍モルであればよい。
この反応は、通常、−５０〜１００℃、好ましくは、０〜５０℃で、１分〜７２時間、好ましくは、５分〜２４時間実施すればよい。
（ｄ）一般式［５ａ］の化合物またはその塩は、一般式［５ｃ］の化合物またはその塩を用いて、製造法Ｆ（ｃ）の方法に従って反応させることにより得ることができる。
（ｅ）一般式［５ａ］の化合物またはその塩は、一般式［３ｖ］の化合物またはその塩を用いて、製造法１の方法に従って反応させることにより一般式［５ｃ］の化合物またはその塩に導いた後、同じ系内で、引き続いて製造法Ｆ（ｄ）の方法に従って反応させることにより得ることができる。
［製造法Ｇ］
0004370164.tif 000032
「式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ１２、Ｒ１３、ＲＺ、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３、Ｚ４、Ｚ５、Ｚ６、Ｚ７、Ｚ８、Ｚ９、Ｚ１０、Ｚ１１、Ｚ１２、Ｚ１３およびＹは、前記と同様の意味を示す。」
（ａ）一般式［３ｌ］、［３ｍ］および［３ｉ］の化合物またはそれらの塩は、一般式［４ｆ］の化合物またはその塩を用いて、製造法Ａの方法に従って反応させることにより得ることができる。
（ｂ）一般式［３ｎ］の化合物またはその塩は、一般式［３ｉ］の化合物またはその塩を用いて、製造法４の方法に従って反応させるか、あるいは、例えば、新実験化学講座、第１４巻、第５６７〜５８７頁（社団法人  日本化学会編１９７７年）に記載の方法に準じて、酸または塩基の存在下あるいは非存在下、アルキル化反応に付すことにより得ることができる。
この反応で使用される溶媒としては、反応に悪影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、例えば、ジオキサン、テトラヒドロフラン、アニソール、ジエチレングリコールジエチルエーテルおよびジメチルセロソルブなどのエーテル類；ベンゼン、トルエンおよびキシレンなどの芳香族炭化水素類；ジクロロメタン、クロロホルムおよびジクロロエタンなどのハロゲン化炭化水素類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドおよびＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドなどのアミド類；ジメチルスルホキシドなどのスルホキシド類および水などが挙げられ、これらの溶媒は混合して使用してもよい。
この反応で使用されるアルキル化剤としては、例えば、ベンジルブロミドなどのハロゲン化アルキル類；硫酸ジエチルなどのエステル類；ジフェニルジアゾメタンなどのジアゾ化合物類；２−メチルプロペンなどのオレフィン類；ならびにＮ，Ｎ−ジメチルアセタミドジメチルアセタールなどのアミドアセタール類が挙げられる。アルキル化剤の使用量は、一般式［３ｉ］の化合物に対して、等モル以上、好ましくは、１．０〜２．０倍モル使用すればよい。
この反応で使用される酸としては、例えば、ｐ−トルエンスルホン酸、硫酸などが挙げられる。この反応で使用される塩基としては、例えば、トリエチルアミン、ナトリウムメトキシド、水素化ナトリウム、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド、炭酸カリウムおよび金属ナトリウムなどが挙げられる。酸または塩基の使用量は、一般式［３ｉ］の化合物に対して等モル以上、好ましくは、１．０〜２．０倍モル使用すればよい。
この反応は、通常、０〜１００℃、好ましくは、２０〜６０℃で５分〜２４時間、好ましくは、３０分〜１０時間実施すればよい。
（ｃ）一般式［３ｏ］の化合物またはその塩は、一般式［３ｎ］の化合物またはその塩を用いて、製造法３の方法に従って反応させることにより得ることができる。
（ｄ）一般式［３ｊ’］の化合物またはその塩は、一般式［３ｍ］の化合物またはその塩を用いて、製造法Ｂ（ｄ）の方法に従って反応させることにより得ることができる。
［製造法Ｈ］
0004370164.tif 000033
「式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｚ５、Ｚ６、Ｚ７、Ｚ８、Ｚ１０、Ｚ１１、Ｚ１２、Ｚ１３およびＹは、前記と同様の意味を；Ｚ１４は、アミノ基の保護基を；Ｒ１８は、保護されていてもよいアミノ酸残基を示す。」
（ａ）一般式［３ｐ］の化合物またはその塩は、一般式［３ｎ’］の化合物またはその塩を常法、たとえば、プロテクティブ・グループス・イン・オーガニック・シンセシス第３版（ＰＲＯＴＥＣＴＩＶＥ  ＧＲＯＵＰＳ  ＩＮ  ＯＲＧＡＮＩＣ  ＳＹＮＴＨＥＳＩＳ  Ｔｈｉｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ）、セオドラ・ダブリュー・グリーン（Ｔｈｅｏｄｏｒａ  Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ）著、第４９４〜６５３頁（１９９９年）に記載の方法に準じて、触媒の存在下あるいは不存在下、脱保護剤を用いて反応させることにより得ることができる。
この反応で使用される溶媒としては、反応に悪影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、たとえば、水；メタノール、エタノールおよびプロパノールなどのアルコール類；エタンチオールおよびチオフェノールなどのチオアルコール類；ベンゼン、トルエンおよびキシレンなどの芳香族炭化水素類；塩化メチレン、クロロホルムおよび１，２−ジクロロエタンなどのハロゲン化炭化水素類；ジオキサン、テトラヒドロフラン、アニソール、ジエチレングリコールジエチルエーテルおよびジメチルセロソルブなどのエーテル類；ジメチルスルフィドなどのチオエーテル類；アセトンおよびメチルエチルケトンなどのケトン類；アセトニトリルなどのニトリル類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドおよびＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドなどのアミド類；ジメチルスルホキシドなどのスルホキシド類；硫酸および塩酸などの無機酸；酢酸およびトリフルオロ酢酸などのカルボン酸類；トリフルオロメタンスルホン酸などのスルホン酸類；ニトロメタンなどのニトロアルカン類；ピリジンおよびトリエチルアミンなどの有機塩基などが挙げられ、これらの溶媒を一種または二種以上混合して使用してもよい。
この反応で使用される脱保護剤は、保護されたアミノ基の脱保護に通常使用されるものであれば特に限定されないが、好ましくは、たとえば、水素ガス；ギ酸アンモニウム；亜鉛；ナトリウム；ビニルクロロホルメートおよび塩化アセチルなどの酸クロリド類；トリエチルシランおよびトリメチルシリルヨージドなどの有機シラン類；トリブチルチンヒドリド；カリウムｔｅｒｔ−ブトキシドなどのアルカリ金属アルコキシド；ナトリウムチオメトキシドなどのアルカリ金属チオアルコキシド；２，３−ジクロロ−５，６−ジシアノ−１，４−ベンゾキノン；水素化ホウ素ナトリウム；フッ化カリウムおよびヨウ化ナトリウムなどのアルカリ金属塩；三臭化ホウ素、塩化アルミニウム、塩化ルテニウムおよび塩化亜鉛などのルイス酸；塩酸、臭化水素酸および硫酸などの無機酸；トリフルオロ酢酸、メタンスルホン酸およびパラトルエンスルホン酸などの有機酸；炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウムおよび水酸化ナトリウムなどの無機塩基；ピペリジンなどの有機塩基；アンモニアおよびヒドラジンなどのアミン類；メチルリチウムなどの有機リチウム；硝酸二アンモニウムセリウム；過酸化水素、オゾンおよび過マンガン酸などの過酸化物などが挙げられる。脱保護剤の使用量は、一般式［３ｎ’］の化合物またはその塩に対して０．０１〜１０００倍モル、好ましくは、０．１〜１００倍モルであればよい。
この反応で必要に応じて使用される触媒は、保護されたアミノ基の脱保護に通常使用されるものであれば特に限定されないが、好ましくは、たとえば、パラジウム−炭素などのパラジウム触媒；ロジウム；ラネーニッケル並びに酸化白金（ＩＶ）などが挙げられる。たとえば、パラジウム−炭素およびラネーニッケルの使用量は、重量比で一般式［３ｎ’］の化合物またはその塩に対して、０．０１〜１０倍、好ましくは、０．０１〜５倍であればよい。パラジウム−炭素およびラネーニッケルを除く触媒の使用量は、一般式［３ｎ’］の化合物またはその塩に対して、０．０１〜１０倍モル、好ましくは、０．０１〜５倍モルであればよい。
この反応は、通常、−８０〜２００℃、好ましくは、０〜１６０℃で、１分〜４８時間、好ましくは、５分〜１２時間実施すればよい。
（ｂ）一般式［３ｏ’］の化合物またはその塩は、一般式［３ｐ］の化合物またはその塩を用いて、製造法３の方法に従って反応させることにより得ることができる。
（ｃ）一般式［３ｑ］の化合物またはその塩は、一般式［３ｎ’］の化合物またはその塩を用いて、製造法３の方法に従って反応させることにより得ることができる。
（ｄ）一般式［３ｏ’］の化合物またはその塩は、一般式［３ｑ］の化合物またはその塩を用いて、製造法Ｈ（ａ）の方法に従って反応させることにより得ることができる。
（ｅ）一般式［３ｏ’］の化合物またはその塩は、一般式［３ｎ’］の化合物またはその塩を用いて、製造法３の方法もしくは製造法Ｈ（ａ）の方法に従って反応させることにより得ることができる。
［製造法Ｉ］
0004370164.tif 000034
「式中、Ｒ１、Ｒ２ａ、Ｚ５、Ｚ６、Ｚ７、Ｚ８、Ｚ９、Ｚ１０、Ｚ１１、Ｚ１２、Ｚ１３およびＹは、前記と同様の意味を示す。」
（ａ）一般式［３ｌ’］の化合物またはその塩は、一般式［３ｒ］の化合物またはその塩を用いて、製造法４の方法に従って反応させることにより得ることができる。
（ｂ）一般式［３ｍ’］の化合物またはその塩は、一般式［３ｌ’］の化合物またはその塩を用いて、製造法３の方法に従って反応させることにより得ることができる。
［製造法Ｊ］
0004370164.tif 000035
「式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ１２は、前記と同様の意味を示す。」
（ａ）一般式［４ｈ］の化合物またはその塩は、たとえば、新実験化学講座、第１４巻、第１５９９〜１６０２頁（１９７８年）に記載の方法に準じて、一般式［４ｇ］の化合物またはその塩を酸触媒もしくは塩基の存在下あるいは非存在下、アルコール類と反応させることにより得ることができる。
この反応で使用される溶媒としては、反応に悪影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、たとえば、ベンゼン、トルエンおよびキシレンなどの芳香族炭化水素類；塩化メチレン、クロロホルムおよびジクロロエタンなどのハロゲン化炭化水素類；ジオキサン、テトラヒドロフラン、アニソール、ジエチレングリコールジエチルエーテルおよびジメチルセロソルブなどのエーテル類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドおよびＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドなどのアミド類；ならびにジメチルスルホキシドなどのスルホキシド類などが挙げられ、これらの溶媒を一種または二種以上混合して使用してもよい。
この反応で使用されるアルコール類としては、たとえば、メタノール、エタノール、フェノールなどが挙げられる。この反応で使用されるアルコール類の使用量は、一般式［４ｇ］の化合物またはその塩に対して、等モル以上であればよく、また、溶媒として用いてもよい。
この反応で使用される酸触媒としては、ニトリルのイミダート化に一般的に用いられる試薬を用いればよく、たとえば、塩化水素などが挙げられる。この反応で使用される酸触媒の使用量は、一般式［４ｇ］の化合物またはその塩に対して、０．１倍モル以上であればよい。
この反応で使用される塩基としては、たとえば、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、ナトリウムフェノキシドなどの金属アルコキシド類が挙げられ、これらは反応系内で製造してもよい。この反応で使用される塩基の使用量は、一般式［４ｇ］の化合物またはその塩に対して、０．０１倍モル以上であればよく、好ましくは、１．０〜５．０倍モルであればよい。
この反応は、通常、−７８〜１７０℃、好ましくは、−４０〜１２０℃で、１分〜７２時間、好ましくは、５分〜２４時間実施すればよい。
（ｂ）一般式［４ｆ’］の化合物またはその塩は、たとえば、新実験化学講座、第１４巻、第１６１４〜１６１７頁（１９７８年）に記載の方法に準じて、一般式［４ｈ］の化合物またはその塩を試薬と反応させることにより得ることができる。
この反応で使用される溶媒としては、反応に悪影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、たとえば、ベンゼン、トルエンおよびキシレンなどの芳香族炭化水素類；塩化メチレン、クロロホルムおよびジクロロエタンなどのハロゲン化炭化水素類；ジオキサン、テトラヒドロフラン、アニソール、ジエチレングリコールジエチルエーテルおよびジメチルセロソルブなどのエーテル類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドおよびＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドなどのアミド類；ならびにジメチルスルホキシドなどのスルホキシド類などが挙げられ、これらの溶媒を一種または二種以上混合して使用してもよい。
この反応で使用される試薬としては、イミダートのアミジン化に一般的に用いられる試薬を用いればよく、たとえば、アンモニアガス、アンモニア性アルコール溶液、アンモニア水、塩化アンモニウムなどの酸アンモニウム塩、グリシンエチルエステルなどの保護されていてもよいアミノ酸もしくはその塩が挙げられる。この反応で使用される試薬の使用量は、一般式［４ｈ］の化合物またはその塩に対して、等モル以上であればよく、また、溶媒として用いてもよい。
この反応は、通常、−７８〜１７０℃、好ましくは、０〜１２０℃で、１分〜７２時間、好ましくは、５分〜２４時間実施すればよい。
［製造法Ｋ］
0004370164.tif 000036
「式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、前記と同様の意味を示す。」
一般式［４ｂ］の化合物またはその塩は、一般式［４ｉ］の化合物またはその塩を触媒の存在下あるいは不存在下、カルボン酸エステルおよびアンモニアまたは一級アミンなどのアミン類との縮合反応に付すことによって得ることができる。
この反応で使用される溶媒としては、反応に悪影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、例えば、ベンゼン、トルエンおよびキシレンなどの芳香族炭化水素類；塩化メチレン、クロロホルムなどのハロゲン化炭化水素類；ジオキサン、テトラヒドロフラン、アニソール、ジエチレングリコールジエチルエーテルおよびジメチルセロソルブなどのエーテル類；アセトニトリルなどのニトリル類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドおよびＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドなどのアミド類；メタノール、エタノールおよびプロパノールなどのアルコール類；ジメチルスルホキシドなどのスルホキシド類ならびに水などが挙げられ、これらの溶媒を一種または二種以上混合して使用してもよい。この反応は、芳香族カルボン酸エステルおよびアミン類との縮合反応に通常、使用される試薬および条件で実施すればよく、ここで用いるアミン類としては、好ましくは、アンモニアガス、液体アンモニア、アンモニア水などのアンモニア、Ｌ−アスパラギン酸ジエチルエステルなどの一級アミンを使用すればよく、これらの使用量は、一般式［４ｉ］の化合物またはその塩に対して、それぞれ、等モル以上であればよい。また、これらの試薬は、溶媒として使用してもよい。この反応に必要に応じて使用される触媒としては、塩化アンモニウムなどの酸アンモニウム塩；トリエチルアミン、ナトリウムメトキシドおよびブチルリチウムなどの塩基；ならびにナトリウムアミドなどのアルカリ金属アミドが挙げられ、触媒の使用量は、一般式［４ｉ］の化合物またはその塩に対して、０．０１〜１００倍モル、好ましくは、０．０１〜２０倍モルであればよい。
この反応は、通常、−１００〜２５０℃、好ましくは、−７８〜１００℃で、１分〜７２時間、好ましくは、３０分〜５０時間実施すればよい。
［製造法Ｌ］
0004370164.tif 000037
「式中、Ｒ１、Ｒ２ａおよびＹは、前記と同様の意味を示す。」
一般式［４ｆ’’］の化合物またはその塩は、一般式［４ｊ］の化合物またはその塩を用いて、製造法４の方法に従って反応させることにより得ることができる。
［製造法Ｍ］
0004370164.tif 000038
「式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ９、ＲＺ、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３およびＺ４は、前記と同様の意味を示す。」
（ａ）一般式［３ｔ］の化合物またはその塩は、一般式［３ｄ］の化合物またはその塩を用いて、製造法Ｇ（ｂ）の方法に従って反応させることにより得ることができる。
（ｂ）一般式［３ｓ］の化合物またはその塩は、一般式［３ｔ］の化合物またはその塩を用いて、製造法３の方法に従って反応させることにより得ることができる。
（ｃ）一般式［３ａ’］の化合物またはその塩は、一般式［３ｓ］の化合物またはその塩を用いて、製造法Ｋの方法に従って反応させることにより得ることができる。
［製造法Ｎ］
0004370164.tif 000039
「式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｚ５、Ｚ６、Ｚ７、Ｚ８、Ｚ９、Ｚ１０、Ｚ１１、Ｚ１２、Ｚ１３およびＹは、前記と同様の意味を示す。」
一般式［３ｕ］の化合物またはその塩は、一般式［３ｌ］の化合物またはその塩を用いて、製造法３の方法に従って反応させることにより得ることができる。
また、上記した製造法における化合物において、異性体（例えば、光学異性体、幾何異性体および互変異性体など）が存在する場合、これらの異性体も使用することができ、また、溶媒和物、水和物および種々の形状の結晶も使用することができる。また、反応終了後、反応目的物は単離せずに、そのまま、つぎの反応に用いてもよい。
また、上記した製造法における化合物において、アミノ基、ヒドロキシル基またはカルボキシル基を有する化合物は、予めこれらの基を通常の保護基で保護しておき、反応後、自体公知の方法でこれらの保護基を脱離することもできる。
一般式［１］の化合物またはその塩は、抽出、晶出および／またはカラムクロマトグラフィーなどの常法に従って単離精製または再結晶することができる。
本発明の化合物を医薬品として用いる場合および本発明の剤は、通常の製剤化に使用される製剤用担体を用いて通常の方法に従い、製剤組成物として調製することができる。担体としては、通常の薬剤に汎用される各種の担体、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味剤、矯臭剤または界面活性剤等を使用することができる。
これらの投与形態は、特に限定されず、治療目的に応じて適宜選択することができる。具体的には、注射剤、坐剤、外用剤（軟膏剤、貼付剤等）等の非経口剤；エアゾール剤等；錠剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、カプセル剤、液剤、丸剤、懸濁剤、シロップ剤、乳剤等の経口剤を挙げることができる。
前記各種薬剤は、通常の方法により製剤化することができる。
錠剤、散剤、細粒剤または顆粒剤等の経口用固形製剤の形態に成形するに際しては、担体として、例えば、賦形剤（乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、無水第二リン酸カルシウム、アルギン酸等）；結合剤（単シロップ、ブドウ糖液、デンプン溶液、ゼラチン溶液；、ポリビニルアルコール、ポリビニルエーテル、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロース、セラック、メチルセルロース、エチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、アラビアゴム、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース並びにこれらの水および／またはエタノール溶液等）；崩壊剤（デンプン、アルギン酸、架橋ポリビニルピロリドン、架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、デンプングリコール酸ナトリウム等）；放出制御剤（高級脂肪酸、高級脂肪族アルコール、カカオ脂、水素添加油、水溶性高分子、胃溶性高分子、腸溶性高分子等）；吸収促進剤（第４級アンモニウム塩、ラウリル硫酸ナトリウム、ソルビタンモノオレエート等の界面活性剤等）；吸着剤（デンプン、乳糖、カオリン、ベントナイト、無水ケイ酸、含水二酸化ケイ素、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム、コロイド状ケイ酸等）；滑沢剤（精製タルク、ステアリン酸塩、ケイ酸類、ポリエチレングリコール等）を使用することができる。
錠剤は、必要に応じ、通常の剤皮を施した錠剤、例えば、糖衣錠、ゼラチン被包錠、胃溶性被覆錠、腸溶性被覆錠または水溶性フィルムコーティング錠とすることができる。
カプセル剤は、上記で例示した各種の担体と混合し、硬質ゼラチンカプセルまたは軟質カプセル等に充填して調製することができる。
液体製剤は、水性または油性の懸濁液、溶液、シロップまたはエリキシル剤であることができ、これらは通常の添加剤を用いて常法に従い、調製することができる。
注射剤の形態に成形するに際しては、担体として、例えば、希釈剤（水、エチルアルコール、マクロゴール、プロピレングリコール等）；ｐＨ調整剤または緩衝剤（クエン酸、酢酸、リン酸、乳酸、およびこれらの塩；硫酸、水酸化ナトリウム等）；安定化剤（ピロ亜硫酸ナトリウム、エチレンジアミン四酢酸、チオグリコール酸、チオ乳酸等）を使用することができる。なお、この場合、等張性の溶液を調整するに充分な量の食塩、ブドウ糖、マンニトールまたはグリセリンを医薬製剤中に含有することができ、通常の溶解補助剤、無痛化剤または局所麻酔剤等を添加することもできる。
また投与方法、投与量および投与回数は、患者の年齢、体重および症状に応じて適宜選択することができ、通常成人に対しては、経口または非経口（例えば、注射、点滴および直腸部位への投与など）的投与により、１日、０．１〜１０００ｍｇ／ｋｇを１回から数回に分割して投与すればよい。
本発明のウイルス増殖阻害および／または殺ウイルス方法は、次の過程を経ることを特徴とする。
0004370164.tif 000040
「式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、ＲＺ、ＡおよびＹは、前記と同様の意味を示す。」
ステップＡ：一般式［２］で表されるピラジンヌクレオチド類似体またはその塩が生体内で変換され、一般式［２ａ］で表される化合物またはその塩に変換される。
ステップＢ：一般式［３ｚ］で表されるピラジンヌクレオシド類似体またはその塩が生体内で変換され、一般式［２ａ］で表される化合物またはその塩に変換される。
ステップＣ：（１）一般式［３ｚ］で表されるピラジンヌクレオシド類似体またはその塩が生体内のヌクレオシダーゼ等の酵素で変換され、一般式［４ｆ］となった後、（２）生体内のホスホリボシルトランスフェラーゼ等の酵素で変換され、一般式［２ａ］で表される化合物またはその塩に変換される。
さらに、ステップＢ、ステップＣ（１）およびステップＣ（２）については、その逆の変換も生体内で起こる。
上記ステップで生成した一般式［２ａ］で表される化合物またはその塩が、更に生体内でヌクレオチドキナーゼ［アドバンスィズ・イン・アンチバイラル・ドラッグ・デザイン（Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ）、第２巻、第１６７−１７２頁（１９９６年）］等の酵素で変換され、一般式［１ｂ］で表される化合物（ピラジンヌクレオチド・トリリン酸体）またはその塩となり、ウイルスポリメラーゼを阻害することによりウイルス増殖阻害および／または殺ウイルス作用が発揮される。さらに、この逆の変換も生体内で起こる。
また、上記のステップにおいてＹがイミノ基である化合物については生体内で酸素原子である化合物への変換が行われ、薬理効果を発揮する。
実施例
次に、本発明を試験例で説明するが本発明はそれら限定されるものではない。なお、試験例中、化合物Ａは、実施例２９で得られた化合物であり、４−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２−フラニル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミドを；化合物Ｂは、参考例７で得られた化合物であり、６−クロロ−４−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２−フラニル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミドを；各結果の表中の化合物は、各参考例・実施例で得られた生成物を意味する。
試験例１
［細胞内リン酸化合物の検出］
５５ｃｍ２の培養皿上で単層培養したＭＤＣＫ細胞に、ピラジン環２位１４Ｃ標識化合物：６−フルオロ−３−ヒドロキシ−２−［２−１４Ｃ］ピラジンカルボキサミドを添加したＥ’−ＭＥＭ培養液（１％牛血清アルブミン、３％ビタミン溶液含有）５ｍＬを加えた。３５℃、５％ＣＯ２条件下で２０時間培養後、細胞画分より６６．６％アセトニトリル溶液で６−フルオロ−３−ヒドロキシ−２−［２−１４Ｃ］ピラジンカルボキサミドおよび変換化合物を抽出した。抽出溶液を凍結乾燥濃縮し、以下のＨＰＬＣ分析条件で分析を実施した。
その結果、モノリン酸体（参考例１５の化合物：回収時間；２３．３分）およびトリリン酸体（参考例１６の化合物：回収時間；３４．０分）を検出した。
ＨＰＬＣ分析条件
機器
ポンプ：ＨＩＴＡＣＨＩ  Ｌ−６２００
検出器：ＨＩＴＡＣＨＩ  Ｌ−４０００
放射能検出器：Ｐａｃｋａｒｄ  ＦＬＯ−ＯＮＥ５００
分析条件
分離カラム：Ｄｅｖｅｌｏｓｉｌ  ＯＤＳ−ＭＧ−５（４．６×２５０ｍ
ｍ）
移動相Ａ：０．２Ｍ  ＴＥＡＡ，ｐＨ６．６
移動相Ｂ：１０％アセトニトリル，０．２Ｍ  ＴＥＡＡ  ｐＨ６．６
混合比：  ０−１０分；Ｂ  ５％
１０−３５分；Ｂ  ５−７５％（直線的）
３５−５０分；Ｂ  ７５％
試験例２
［細胞内脱保護基化合物の検出］
ハンクス液に懸濁したＭＤＣＫ細胞に、実施例２の化合物を添加後、３７℃で１時間インキュベートした後、シリコン油（ＫＦ−９９）に重層し、４℃で遠心した。沈査の細胞画分を以下に記載した移動相に懸濁・凍結融解した液について、以下のＨＰＬＣ分析条件にて分析を実施した。
その結果、脱保護基化合物であるモノリン酸体（回収時間；１４．３分）を検出した。
ＨＰＬＣ分析条件
機器
ポンプ：ＨＩＴＡＣＨＩ  Ｌ−６０００
検出器：ＨＩＴＡＣＨＩ  Ｌ−７５００
分析条件
分離カラム：Ｄｅｖｅｌｏｓｉｌ  ＯＤＳ−ＭＧ−５（４．６×２５０ｍ
ｍ）
移動相：０．０２Ｍ  リン酸緩衝液，ｐＨ３．０
試験例３−１
［ポリメラーゼ阻害試験（インフルエンザウイルス）］
インフルエンザウイルス粒子を溶解溶液（１００ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ  ｐＨ８、１００ｍＭ  ＫＣｌ、５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１．５ｍＭ  ＤＴＴ、５％Ｇｌｙｃｅｒｏｌ、１．５％ＴｒｉｔｏｎＮ１０１、１％ＬＰＣ）で処理したものをポリメラーゼ粗酵素として用いた。反応緩衝液（１００ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ  ｐＨ８．０、１００ｍＭ  ＫＣｌ、５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１ｍＭ  ＤＴＴ、０．２５％ＴｒｉｔｏｎＮ１０１、０．２５ｍＭ  ＡｐＧ、０．１ｍＭ  ＡＴＰ、０．０５ｍＭ  ＣＴＰ、０．０５ｍＭ  ＵＴＰ、０．０００５ｍＭ  ＧＴＰ，３２Ｐ−ＧＴＰ、粗酵素）に各種濃度の試験化合物を添加し、３０℃で６０分インキュベーションした。次いで、１０％トリクロロ酢酸（ＴＣＡ）を添加し、氷中に６０分間保持後、ＧＦ／Ｃフィルター上に滴下し、５％ＴＣＡにて洗浄した。フィルターを乾燥し、シンチレーションカクテルを加え、液体シンチレーションカウンターにて放射能活性を測定し、試験化合物非添加群を１００％として、５０％阻害濃度で表わした。結果を表１に示す。
0004370164.tif 000041
0004370164.tif 000042
試験例３−２
［ポリメラーゼ阻害試験（Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ））］
ＨＣＶポリメラーゼは、ＮＳ５Ｂ領域を大腸菌で生産させたものを試験に用いた。
ＲＮＡ  ｔｅｍｐｌａｔｅは、ＨＣＶ  ３’領域の配列をｉｎ  ｖｉｔｒｏ転写法により調製し、試験に用いた。
反応緩衝液（２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ  ｐＨ８．０、０．０５ｍＭ  ＭｎＣｌ２、１ｍＭ  ＤＴＴ、２０Ｕｎｉｔｓ  ＲＮａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ、［α−３２Ｐ］ＧＴＰ、各々０．０５ｍＭのＡＴＰ、ＣＴＰ、ＵＴＰおよび２μｇ／ｍＬ  ＲＮＡ  ｔｅｍｐｌａｔｅ）に各種濃度の試験化合物を添加し、３０℃で２時間インキュベーションした。次いで１０％ＴＣＡを加え、反応を停止後、ＤＥ８１フィルター上に滴下し、５％ＴＣＡにて洗浄した。フィルターを乾燥し、シンチレーションカクテルを加え、液体シンチレーションカウンターにて放射能活性を測定し、試験化合物非添加群を１００％として、５０％阻害濃度で表わした。結果を表１−２に示す。
0004370164.tif 000043
試験例３−３
［ヒトＲＮＡポリメラーゼ阻害試験］
ヒトＲＮＡポリメラーゼは、Ｈｅｌａ細胞核抽出液（Ｐｒｏｍｅｇａ社）を試験に用いた。
ＤＮＡ  ｔｅｍｐｌａｔｅは、ｐＣＭＰ  ｓｃｒｉｐｔを制限酵素で切断し、精製した後、試験に用いた。
反応緩衝液（Ｈｅｌａ細胞核抽出液、３ｍＭ  ＭｇＣｌ２、各々０．４ｍＭのＡＴＰ、ＵＴＰ、ＣＴＰ、０．０１６ｍＭ  ＧＴＰ、１６μｇ／ｍＬ  ＤＮＡ  ｔｅｍｐｌａｔｅ、０．４ｍＣｉ／ｍＬ［α−３２Ｐ］ＧＴＰ）に各種濃度の試験化合物を添加し、３０℃で１時間インキュベーションした。反応終了後、反応液をＤＥ８１フィルターに滴下し、５％Ｎａ２ＨＰＯ４溶液にて３０分３回、更に蒸留水で１分１回洗浄した。フィルターを乾燥し、シンチレーションカクテルを加え、液体シンチレーションカウンターにて放射能活性を測定し、試験化合物非添加群を１００％として、５０％阻害濃度で表わした。結果を表１−３に示す。
0004370164.tif 000044
試験例４
［抗インフルエンザ作用］
６穴の培養プレート中で十分増殖したＭＤＣＫ細胞にインフルエンザウイルスＡ／ＰＲ／８／３４株を７０ＰＦＵ／穴で感染させる。６０分後に感染液を除去し、１００μｇ／ｍＬの試験化合物を含有させた０．６％アガーノーブル、１％牛血清アルブミンおよび３μｇ／ｍＬアセチルトリプシンを含むＥ’−ＭＥＭ培養液を添加し、十分に凝固後、倒置して、３５℃、湿度１００％および５％ＣＯ２の条件下で３日間培養した。培養終了後、１％ニュートラルレッドにて生細胞染色し、１０％ホルマリンにて細胞を固定後、流水にて寒天培地を除き、プラーク数を数えた。プラーク抑制率は、試験化合物非添加の対照と比較して百分率で表した。その結果を表２に示す。
0004370164.tif 000045
試験例５
［抗ＢＶＤＶ作用］
６穴の培養プレート中で十分増殖したＭＤＢＫ細胞にウシ下痢症ウイルス（ＢＶＤＶ）ＮＡＤＬ株を７０ＰＥＵ／穴で感染させる。６０分後に感染液を除去し、１００μｇ／ｍＬの試験化合物を含有させた５％ウマ血清および１％寒天（ＳｅａＰｌａｑｕｅ  Ａｇａｒ）を含む試験培養液（Ｅ’−ＭＥＭ）を添加し、十分に凝固後、３７℃、湿度１００％および５％ＣＯ２の条件下で３日間培養した。培養終了後、試験プレートを３％ホルムアルデヒド溶液で固定し、流水で寒天培地を除いた後、１％クリスタルバイオレット溶液で染色し、プラーク数を数えた。プラーク抑制率は、試験化合物非添加の対照と比較して百分率で表した。その結果を表３に示す。
0004370164.tif 000046
試験例６
［化合物Ａを投与したマウス肝臓内各リン酸体の確認試験］
化合物Ａを３００ｍｇ／ｋｇの用量でマウスに尾静脈内投与した。投与３０分後、肝臓１．６ｇを摘出し、氷冷下、−２０℃に冷却した７０％メタノール２２．５ｍＬを加えながらすりつぶし、化合物Ａおよびリン酸体を抽出した。４℃で１０分間遠心分離した抽出液の上澄み１０ｍＬをメタノール１２ｍＬ、１．０Ｍおよび０．００５Ｍ  ＫＣｌ  １２ｍＬで前処理した固相抽出カートリッジ（Ｖａｒｉａｎ  ＢＯＮＤ  ＥＬＵＴ  ＳＡＸ  ＨＦ  ２ｇ／１２ｍＬ；０．０１Ｍ〜１．０Ｍ  ＫＣｌで溶出）を用いて下記の条件で精製した。
０．０５Ｍ  ＫＣｌ  Ｎｏ．３溶出液５ｍＬに含まれるリン酸体とモノリン酸体合成品（参考例３０で得られた化合物）は、ＨＰＬＣ条件に記載のＨＰＬＣ分析（ＨＰＬＣ−１）においてＨＰＬＣ保持時間およびＵＶスペクトラムが一致した。また、０．５Ｍ  ＫＣｌ  Ｎｏ．１溶出液５ｍＬに含まれるリン酸体とジリン酸体合成品（参考例３１で得られた化合物）は、ＨＰＬＣ条件に記載のＨＰＬＣ分析（ＨＰＬＣ−２）において、ＨＰＬＣ保持時間が一致した。さらに、０．５Ｍ  ＫＣｌ  Ｎｏ．２溶出液５ｍＬに含まれるリン酸体とトリリン酸体合成品（参考例２２の化合物）は、ＨＰＬＣ条件に記載のＨＰＬＣ分析（ＨＰＬＣ−３）において、ＨＰＬＣ保持時間が一致した。
上記の０．０５Ｍ  ＫＣｌ  Ｎｏ．３溶出液４ｍＬに０．５Ｍ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ８．０）０．５ｍＬおよび０．１Ｍ  ＭｇＣｌ２０．５ｍＬ、次いで仔ウシ腸製アルカリホスファターゼ（ＥＣ３．１．３．１．，２０Ｕ／ｍＬ）０．５ｍＬを加え、３７℃で１時間インキュベートした。同様に、上記の０．５Ｍ  ＫＣｌ  Ｎｏ．１溶出液４ｍＬに、０．５Ｍ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ８．０）０．５ｍＬおよび０．１Ｍ  ＭｇＣｌ２０．５ｍＬ、次いで仔ウシ腸製アルカリホスファターゼ（ＥＣ３．１．３．１．，２０Ｕ／ｍＬ）０．５ｍＬを加え、３７℃で１時間インキュベートした。また同様に、上記の０．５Ｍ  ＫＣｌ  Ｎｏ．２溶出液１．６ｍＬに０．５Ｍ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ８．０）０．２ｍＬおよび０．１Ｍ  ＭｇＣｌ２  ０．２ｍＬ、次いで仔ウシ腸製アルカリホスファターゼ（ＥＣ３．１．３．１．，２０Ｕ／ｍＬ）０．１ｍＬを加え、３７℃で１時間インキュベートした。
ＨＰＬＣ条件に記載のＨＰＬＣ分析（ＨＰＬＣ−４）で０．０５Ｍ  ＫＣｌ  Ｎｏ．３溶出液中のモノリン酸体の消失が確認され、新たに生成した化合物と化合物ＡのＨＰＬＣ保持時間およびＵＶスペクトラムが一致した。同様に、ＨＰＬＣ条件に記載のＨＰＬＣ分析（ＨＰＬＣ−４）において、０．５Ｍ  ＫＣｌ  Ｎｏ．１溶出液中のジリン酸体の消失が確認され、新たに生成した化合物と化合物ＡのＨＰＬＣ保持時間およびＵＶスペクトラムが一致した。また同様に、ＨＰＬＣ条件に記載のＨＰＬＣ分析（ＨＰＬＣ−４）において、０．５Ｍ  ＫＣｌ  Ｎｏ．２溶出液中のトリリン酸体の消失が確認され、新たに生成した化合物と化合物ＡのＨＰＬＣ保持時間およびＵＶスペクトラムが一致した。
以上の結果より、化合物Ａがモノリン酸体、ジリン酸体およびトリリン酸体へ生体内変換されることを確認した。
固相抽出カートリッジによる精製条件
洗浄：下記の３溶媒にて順に洗浄を行った。
水（氷冷）１２ｍＬ
６０％メタノール（氷冷）１２ｍＬ
水（氷冷）１２ｍＬ
溶出：下記の濃度条件で順に溶出を行った。（溶出は５ｍＬを単位として行った。×２、×３は、各濃度で５ｍＬを２回、３回溶出させたことを意味し、各々フラクションを順にＮｏ．１溶出液、Ｎｏ．２溶出液、Ｎｏ．３溶出液とする。）
０．０１Ｍ  ＫＣｌ  （５ｍＬ×２）
０．０５Ｍ  ＫＣｌ  （５ｍＬ×３）
０．１Ｍ    ＫＣｌ  （５ｍＬ×３）
０．５Ｍ    ＫＣｌ  （５ｍＬ×２）
１．０Ｍ    ＫＣｌ  （５ｍＬ×２）
ＨＰＬＣ分析条件
ＨＰＬＣ−１
カラム：４．６×２５０ｍｍ  野村化学  Ｄｅｖｅｌｏｓｉｌ  ＯＤＳ−ＭＧ
−５
移動相：０．０２Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）
検出：ＵＶ２００−４００ｎｍ
ＨＰＬＣ−２
カラム：４．６×２５０ｍｍ  Ｗｈａｔｍａｎ  Ｐａｒｔｉｓｉｌ  １０−Ｓ
ＡＸ
移動相：０．２Ｍ  リン酸緩衝液（ｐＨ３．５）
検出：ＵＶ２００−４００ｎｍ
ＨＰＬＣ−３
カラム：４．６×２５０ｍｍ  Ｗｈａｔｍａｎ  Ｐａｒｔｉｓｉｌ  １０−Ｓ
ＡＸ
移動相：０．６Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ３．５）
検出：ＵＶ２００−４００ｎｍ
ＨＰＬＣ−４
カラム：４．６×２５０ｍｍ  野村化学  Ｄｅｖｅｌｏｓｉｌ  ＯＤＳ−ＭＧ
−５
移動相：２％アセトニトリル  ０．０２Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ５．０）
検出：ＵＶ２００−４００ｎｍ
使用した測定機器
Ｄｉｏｄｅ  Ａｒｒａｙ  Ｄｅｔｅｃｔｏｒ  Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｓｅｒｉｅｓ
Ｑｕａｔｅｍａｒｙ  Ｐｕｍｐ  Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｓｅｒｉｅｓ
Ａｕｔｏｓａｍｐｌｅｒ  Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｓｅｒｉｅｓ
ＣｈｅｍＳｔａｔｉｏｎ  Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｓｅｒｉｅｓ
試験例７
［経口投与後のマウス血漿中における化合物Ａの濃度測定］
一群２匹よりなるマウス（ＩＣＲ）に、試験化合物を１回経口投与し、投与３０分後に採血した。遠心分離した血漿２００μＬにアセトニトリル４００μＬを加え、遠心分離により沈殿したタンパク質を除去した。得られた上清を減圧下に濃縮した後、下記の条件のＨＰＬＣにより化合物Ａの血漿中濃度を測定した。結果を表４に示す。
ＨＰＬＣ条件
カラム：Ｄｅｖｅｌｏｓｉｌ  ＯＤＳ−ＭＧ−５，４．６×２５０ｍｍ（野村
化学）
ガードカラム：Ｄｅｖｅｌｏｓｉｌ  ＯＤＳ−ＭＧ−５，４．６×１０ｍｍ（
野村化学）
検出：ＵＶ  ３５０ｎｍ
移動相：２％アセトニトリル  ０．０２Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ５．０）
測定機器
検出器：Ｓｈｉｍａｚｕ  ＳＰＤ−６Ａ
ポンプ：ＨＩＴＡＣＨＩ  Ｌ−６０００
0004370164.tif 000047
試験例８
［経口投与後のマウス血漿中における化合物Ｂの濃度測定］
一群２匹よりなるＩＣＲマウスに参考例６の化合物２００ｍｇ／ｋｇを１回経口投与し、投与３０、６０分後にそれぞれ採血し、試験例７と同様の操作を行い、ＨＰＬＣにより化合物Ｂの濃度を測定した。結果を表５に示す。
ＨＰＬＣ条件
カラム：Ｄｅｖｅｌｏｓｉｌ  ＯＤＳ−ＭＧ−５，４．６×２５０ｍｍ，（野
村化学）
ガードカラム：Ｄｅｖｅｌｏｓｉｌ  ＯＤＳ−ＭＧ−５，４．６×１０ｍｍ，
（野村化学）
検出波長：ＵＶ３５０ｎｍ
移動相  ：５％アセトニトリル０．０４Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．０）
0004370164.tif 000048
試験例９
［３−ヒドロキシ−２−ピラジンカルボキサミド添加時の細胞内リン酸化合物の検出］
５５ｃｍ２の培養皿上で単層培養したＭＤＣＫ細胞に３−ヒドロキシ−２−ピラジンカルボキサミド（最終濃度５０００μＭ）を添加したＥ’−ＭＥＭ培養液（１％牛血清アルブミン、３％ビタミン溶液含有）５ｍＬを加え、３７℃、５％ＣＯ２条件下で２４時間培養した。氷冷下、細胞画分に−２０℃に冷却した７０％メタノール１ｍＬを加え、３−ヒドロキシ−２−ピラジンカルボキサミド、化合物Ａおよびリン酸体を抽出した。４℃で１０分間遠心分離した抽出液の上澄み０．７ｍＬをメタノール１ｍＬ、１．０Ｍおよび０．００５Ｍ  ＫＣｌ  １ｍＬで前処理した固相抽出カートリッジ（Ｖａｒｉａｎ  ＢＯＮＤ  ＥＬＵＴ  ＳＡＸ  ＨＦ  １００ｍｇ／１ｍＬ；０．０１Ｍ〜１．０Ｍ  ＫＣｌで溶出）を用いて下記の条件で精製した。
０．０５Ｍ  ＫＣｌ溶出液１ｍＬに含まれるリン酸体とモノリン酸体合成品（参考例３０で得られた化合物）は、ＨＰＬＣ分析（ＨＰＬＣ−５）において、ＨＰＬＣ保持時間およびＵＶスペクトラムが一致した。また、０．２５Ｍ  ＫＣｌ溶出液１ｍＬに含まれるリン酸体とジリン酸体合成品（参考例３１で得られた化合物）は、ＨＰＬＣ分析（ＨＰＬＣ−６）において、ＨＰＬＣ保持時間が一致した。さらに、０．５Ｍ  ＫＣｌ溶出液１ｍＬに含まれるリン酸体とトリリン酸体合成品（参考例２２で得られた化合物）は、ＨＰＬＣ分析（ＨＰＬＣ−６）において、ＨＰＬＣ保持時間が一致した。
上記の各ＫＣｌ溶出液０．８ｍＬに０．５Ｍ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ８．０）０．１ｍＬおよび０．１Ｍ  ＭｇＣｌ２  ０．１ｍＬを加え、そのうち０．８ｍＬを分取し、仔ウシ腸製アルカリホスファターゼ（ＥＣ３．１．３．１．，２０Ｕ／ｍＬ）０．０８ｍＬを加え、３７℃で１時間インキュベートした。
ＨＰＬＣ分析（ＨＰＬＣ−７）において、０．０５Ｍ  ＫＣｌ溶出液中のモノリン酸体の消失が確認され、新たに生成した化合物と化合物ＡのＨＰＬＣ保持時間が一致した。さらに、ＨＰＬＣ分析（ＨＰＬＣ−８）において、新たに生成した化合物と化合物ＡのＵＶスペクトラムが一致した。同様に、ＨＰＬＣ分析（ＨＰＬＣ−７）において、０．２５Ｍ  ＫＣｌ溶出液中のジリン酸体の消失が確認され、新たに生成した化合物と化合物ＡのＨＰＬＣ保持時間が一致した。さらに、ＨＰＬＣ分析（ＨＰＬＣ−８）において、新たに生成した化合物と化合物ＡのＵＶスペクトラムが一致した。また同様に、ＨＰＬＣ分析（ＨＰＬＣ−７）において、０．５Ｍ  ＫＣｌ溶出液中のトリリン酸体の消失が確認され、新たに生成した化合物と、化合物ＡのＨＰＬＣ保持時間が一致した。
以上の結果より、３−ヒドロキシ−２−ピラジンカルボキサミドが化合物Ａ、モノリン酸体（参考例３０で得られた化合物）、ジリン酸体（参考例３１で得られた化合物）およびトリリン酸体（参考例２２で得られた化合物）へ細胞内変換されることを確認した。
固相抽出カートリッジによる精製条件
洗浄：下記の３溶媒にて順に洗浄を行った。
水（氷冷）１ｍＬ
６０％メタノール（氷冷）１ｍＬ
水（氷冷）１ｍＬ
溶出：下記の濃度条件で順に溶出を行った。（溶出は１ｍＬを単位とした）
０．０１Ｍ  ＫＣｌ  （１ｍＬ）
０．０５Ｍ  ＫＣｌ  （１ｍＬ）
０．１Ｍ    ＫＣｌ  （１ｍＬ）
０．２５Ｍ  ＫＣｌ  （１ｍＬ）
０．５Ｍ    ＫＣｌ  （１ｍＬ）
１．０Ｍ    ＫＣｌ  （１ｍＬ）
ＨＰＬＣ分析条件
ＨＰＬＣ−５
カラム：４．６×２５０ｍｍ  野村化学  Ｄｅｖｅｌｏｓｉｌ  ＯＤＳ−ＭＧ
−５
移動相：０．０２Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）
検出  ：ＵＶ２００−４００ｎｍ
使用した測定機器
Ｄｉｏｄｅ  Ａｒｒａｙ  Ｄｅｔｅｃｔｏｒ  Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｓｅｒｉｅｓ
Ｑｕａｔｅｍａｒｙ  Ｐｕｍｐ  Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｓｅｒｉｅｓ
Ａｕｔｏｓａｍｐｌｅｒ  Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｓｅｒｉｅｓ
ＣｈｅｍＳｔａｔｉｏｎ  Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｓｅｒｉｅｓ
ＨＰＬＣ−６
カラム：４．６×２５０ｍｍ  Ｗｈａｔｍａｎ  Ｐａｒｔｉｓｉｌ  １０−Ｓ
ＡＸ
移動相：０．７５Ｍ  リン酸緩衝液（ｐＨ３．５）
検出  ：ＵＶ３５０ｎｍ
使用した測定機器
Ｓｈｉｍａｄｚｕ  ＳＰＤ−６Ａ  ＵＶ  Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃ  Ｄｅｔｅｃｔｏｒ
ＨＩＴＡＣＨＩ  Ｌ−６０００  Ｐｕｍｐ
ＨＰＬＣ−７
カラム：４．６×２５０ｍｍ  野村化学  Ｄｅｖｅｌｏｓｉｌ  ＯＤＳ−ＭＧ
−５
移動相：５％アセトニトリル  ０．０２Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ５．０）
検出  ：ＵＶ３５０ｎｍ
使用した測定機器
Ｓｈｉｍａｄｚｕ  ＳＰＤ−６Ａ  ＵＶ  Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃ  Ｄｅｔｅｃｔｏｒ
ＨＩＴＡＣＨＩ  Ｌ−６０００  Ｐｕｍｐ
ＨＰＬＣ−８
カラム：４．６×２５０ｍｍ  野村化学  Ｄｅｖｅｌｏｓｉｌ  ＯＤＳ−ＭＧ
−５
移動相：２％アセトニトリル  ０．０２Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ５．０）
検出：ＵＶ２００−４００ｎｍ
使用した測定機器
Ｄｉｏｄｅ  Ａｒｒａｙ  Ｄｅｔｅｃｔｏｒ  Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｓｅｒｉｅｓ
Ｑｕａｔｅｍａｒｙ  Ｐｕｍｐ  Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｓｅｒｉｅｓ    Ａｕｔｏｓａｍｐｌｅｒ  Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｓｅｒｉｅｓ
ＣｈｅｍＳｔａｔｉｏｎ  Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｓｅｒｉｅｓ
試験例１０
［化合物Ａ添加時の細胞内トリリン酸化合物の検出］
５５ｃｍ２の培養皿上で単層培養したＭＤＢＫ細胞に化合物Ａを添加したＥ’−ＭＥＭ培養液（５％牛胎児血清含有）１０ｍＬを加えた。３７℃、５％ＣＯ２条件下で２４時間培養後、セルスクレーパーにて剥がし、遠心により培養液を除去した細胞画分に５％トリクロロ酢酸を加え、変換化合物を抽出した。抽出溶液に等量の２０％トリオクチルアミン含有ペンタンを加え、得られた水層を遠心濃縮器により濃縮した。上記の濃縮液中に、トリリン酸体合成品（参考例２２で得られた化合物）のＨＰＬＣ保持時間と一致する成分を検出した。
ＨＰＬＣ条件
機器
ポンプ：ＨＩＴＡＣＨＩ  Ｌ−６０００
検出器：ＨＩＴＡＣＨＩ  Ｌ−４０００
分析条件
分離カラム：Ｄｅｖｅｌｏｓｉｌ  ＯＤＳ−ＭＧ−５（４．６×２５０ｍｍ
）
移動相：７％アセトニトリル、５ｍＭ臭化テトラブチルアンモニウム
０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）
測定波長：３５０ｎｍ
試験例１１
［化合物Ａ添加時の細胞内モノおよびジリン酸化合物の検出］
５５ｃｍ２の培養皿上で単層培養したＭＤＣＫ細胞に、化合物Ａ（最終濃度５０００μＭ）を添加したＥ’−ＭＥＭ培養液（１％牛血清アルブミン、３％ビタミン溶液含有）５ｍＬを加え、３７℃、５％ＣＯ２条件下で２４時間培養した。氷冷下、細胞画分に−２０℃に冷却した７０％メタノール１ｍＬを加え、化合物Ａおよびリン酸体を抽出した。４℃で１０分間超遠心分離した抽出液の上澄み０．７ｍＬは、メタノール１ｍＬ、１．０Ｍおよび０．００５Ｍ  ＫＣｌ  １ｍＬで前処理した固相抽出カートリッジ（Ｖａｒｉａｎ  ＢＯＮＤ  ＥＬＵＴ  ＳＡＸ  ＨＦ１００ｍｇ／１ｍＬ；０．０１Ｍ〜１．０Ｍ  ＫＣｌで溶出）を用いて下記の条件で精製した。
ＨＰＬＣ分析（ＨＰＬＣ−９）において、０．０５Ｍ  ＫＣｌ  Ｎｏ．１溶出液１ｍＬに含まれるリン酸体とモノリン酸体合成品（参考例３０で得られた化合物）のＨＰＬＣ保持時間およびＵＶスペクトラムが一致した。また、ＨＰＬＣ分析（ＨＰＬＣ−１０）において、０．５Ｍ  ＫＣｌ溶出液１ｍＬに含まれるリン酸体とジリン酸体合成品（参考例３１で得られた化合物）のＨＰＬＣ保持時間が一致した。
上記の０．０５Ｍ  ＫＣｌ  Ｎｏ．１溶出液０．８ｍＬに、０．５Ｍ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ８．０）０．１ｍＬおよび０．１Ｍ  ＭｇＣｌ２０．１ｍＬを加え、そのうち０．５ｍＬを分取し、仔ウシ腸製アルカリホスファターゼ（ＥＣ３．１．３．１．，２０Ｕ／ｍＬ）０．０６ｍＬを加え、３７℃で１時間インキュベートした。ＨＰＬＣ分析（ＨＰＬＣ−１１）において、０．０５Ｍ  ＫＣｌ溶出液中のモノリン酸体の消失が確認され、新たに生成した化合物と、化合物ＡのＨＰＬＣ保持時間およびＵＶスペクトラムが一致した。
以上の結果より、化合物Ａがモノリン酸体（参考例３０で得られた化合物）およびジリン酸体（参考例３１で得られた化合物）へ細胞内変換されることを確認した。
固相抽出カートリッジによる精製条件
洗浄：下記の３溶媒にて順に洗浄を行った。
水（氷冷）１ｍＬ
６０％メタノール（氷冷）１ｍＬ
水（氷冷）１ｍＬ
溶出：下記の濃度条件で順に溶出を行った。（溶出は１ｍＬを単位として行った。×２は、各濃度で１ｍＬを２回溶出させたことを意味し、各々フラクションを順にＮｏ．１溶出液、Ｎｏ．２溶出液とする。）
０．０１Ｍ  ＫＣｌ  （１ｍＬ）
０．０５Ｍ  ＫＣｌ  （１ｍＬ×２）
０．１Ｍ    ＫＣｌ  （１ｍＬ）
０．５Ｍ    ＫＣｌ  （１ｍＬ）
１．０Ｍ    ＫＣｌ  （１ｍＬ）
ＨＰＬＣ分析条件
ＨＰＬＣ−９
カラム：４．６×２５０ｍｍ  野村化学  Ｄｅｖｅｌｏｓｉｌ  ＯＤＳ−ＭＧ
−５
移動相：０．０２Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）
検出：ＵＶ２００−４００ｎｍ
使用した測定機器
Ｄｉｏｄｅ  Ａｒｒａｙ  Ｄｅｔｅｃｔｏｒ  Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｓｅｒｉｅｓ
Ｑｕａｔｅｍａｒｙ  Ｐｕｍｐ  Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｓｅｒｉｅｓ    Ａｕｔｏｓａｍｐｌｅｒ  Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｓｅｒｉｅｓ
ＣｈｅｍＳｔａｔｉｏｎ  Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｓｅｒｉｅｓ
ＨＰＬＣ−１０
カラム：４．６×２５０ｍｍ  Ｗｈａｔｍａｎ  Ｐａｒｔｉｓｉｌ  １０−Ｓ
ＡＸ
移動相：０．２Ｍ  リン酸緩衝液（ｐＨ３．５）
検出  ：ＵＶ３５０ｎｍ
使用した測定機器
Ｓｈｉｍａｄｚｕ  ＳＰＤ−６Ａ  ＵＶ  Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃ  Ｄｅｔｅｃｔｏｒ
ＨＩＴＡＣＨＩ  Ｌ−６０００  Ｐｕｍｐ
ＨＰＬＣ−１１
カラム：４．６×２５０ｍｍ  野村化学  Ｄｅｖｅｌｏｓｉｌ  ＯＤＳ−ＭＧ
−５
移動相：２％アセトニトリル０．０２Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ５．０）
検出  ：ＵＶ２００−４００ｎｍ
使用した測定機器
Ｄｉｏｄｅ  Ａｒｒａｙ  Ｄｅｔｅｃｔｏｒ  Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｓｅｒｉｅｓ
Ｑｕａｔｅｍａｒｙ  Ｐｕｍｐ  Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｓｅｒｉｅｓ    Ａｕｔｏｓａｍｐｌｅｒ  Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｓｅｒｉｅｓ
ＣｈｅｍＳｔａｔｉｏｎ  Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｓｅｒｉｅｓ
試験例１２
［イノシンモノホスフェートデヒドロゲナーゼ（ＩＭＰＤＨ）阻害試験］
ＩＭＰＤＨ酵素液として、培養皿上で単層培養したＭＤＣＫ細胞を０．０５Ｍ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ８．０）に懸濁し、ダウンスホモジナイザーにて得た細胞破砕液を１６０００×ｇで遠心して得られた上清を用いた。
反応組成として、０．１Ｍ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ８．０）、０．１Ｍ  ＫＣｌ、３０ｍＭ  ＥＤＴＡ、５ｍＭ  ＮＡＤ、５ｍｇ／ｍＬ牛血清アルブミン、０．０４ｍＭ［８−１４Ｃ］−イノシン５’−モノフホスフェートを用いた。３７℃、１時間反応後、２容量のアセトニトリルを加え、反応を停止し、濃縮した。得られた濃縮液を以下に示すＨＰＬＣ条件にて分析し、反応基質（［１４Ｃ］−イノシン５’−モノフホスフェート）と反応生成物（［１４Ｃ］−キサントシン５’−モノホスフェート）の割合を求め、反応率を算出した。なお、対照化合物としてリバビリンモノリン酸を用いた。その結果を表６に示す。
ＨＰＬＣ条件
分離カラム：Ｄｅｖｅｌｏｓｉｌ  ＯＤＳ−ＭＧ−５（４．６×２５０ｍｍ）
移動相    ：２０％アセトニトリル
５ｍＭ臭化ブチルアンモニウム、０．０２Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ
７．０）
放射能検出器：Ｐａｃｋａｒｄ  ＦＬＯ−ＯＮＥ５００
0004370164.tif 000049
次に本発明化合物を参考例および実施例で説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
溶離液における混合比は、すべて容量比である。また、カラムクロマトグラフィーにおける担体は、シリカゲルＢＷ−１２７ＺＨ（富士シリシア化学社製）；逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィーにおける担体は、ＹＭＣ・ＧＥＬ  ＯＤＳ−ＡＭ  １２０−Ｓ５０（ＹＭＣ  ＣＯ．，ＬＴＤ．）；イオン交換カラムクロマトグラフィーにおける担体はＤＥＡＥ  セルロース（和光純薬工業）を用いた。なお、参考例および実施例中で用いられる記号は、次の意味を有する。
ＤＭＳＯ−ｄ６：重ジメチルスルホキシド、Ｍｓ：メタンスルホニル基、Ｐｈ：フェニル基、Ｅｔ：エチル基
参考例１
0004370164.tif 000050
メチル３−ヒドロキシ−２−ピラジンカルボキシレート１．５２ｇを１，１，１，３，３，３−ヘキサメチルジシラザン１２．２ｍＬに懸濁させ、１時間加熱還流した。放冷後、減圧下に溶媒を留去し、得られた残留物を窒素雰囲気下、ジクロロエタン３０ｍＬに溶解させ、β−Ｄ−リボフラノース−１−アセテート−２，３，５−トリベンゾエート４．９８ｇおよび塩化スズ（ＩＶ）１．７３ｍＬを順次添加し、室温でさらに１４時間攪拌した。反応混合物をクロロホルム３０ｍＬおよび飽和炭酸水素ナトリウム水溶液３０ｍＬで希釈し、沈殿物を濾去し、有機層を分取した。得られた有機層を水および飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下に溶媒を留去した。得られた残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー［溶離液；ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：１］で精製し、白色固形物のメチル４−｛（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，４−ビス（ベンゾイルオキシ）−５−［（ベンゾイルオキシ）メチル］テトラヒドロ−２−フラニル｝−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキシレート３．４ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１７３４，１６６０
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ値：３．９６（３Ｈ，ｓ），４．７１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．０，１２．４Ｈｚ），４．８−４．９（２Ｈ，ｍ），５．８−５．９（２Ｈ，ｍ），６．４５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），７．３４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ），７．３−７．６（９Ｈ，ｍ），７．７０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ），７．９−８．０（４Ｈ，ｍ），８．０−８．１（２Ｈ，ｍ）
参考例２
0004370164.tif 000051
メチル４−｛（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，４−ビス（ベンゾイルオキシ）−５−［（ベンゾイルオキシ）メチル］テトラヒドロ−２−フラニル｝−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキシレート３６．３ｇをメタノール４００ｍＬに懸濁させ、氷冷下、２８％ナトリウムメトキシドメタノール溶液１１．７ｇを添加し、同温度で一時間撹拌した。反応液を２Ｍ−塩酸でｐＨ４に調整した後、減圧下に溶媒を留去した。得られた残留物を逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィー［溶離液；アセトニトリル：水＝１：４］で精製し、淡黄色固体のメチル４’−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２−フラニル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキシレート１２．６ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１７４０
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ値：３．６−３．６５（１Ｈ，ｍ），３．７５−３．８（１Ｈ，ｍ），３．８３（３Ｈ，ｓ），３．９−４．０（３Ｈ，ｍ），５．１３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ），５．２９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ），５．６４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ），５．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ），７．４８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），８．３１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ）．
参考例３
0004370164.tif 000052
メチル４−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２−フラニル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキシレート０．５ｇをアセトン５ｍＬに懸濁させ、オルトギ酸トリメチル１ｍＬおよびパラトルエンスルホン酸一水和物３３ｍｇを順次添加し、１時間加熱還流した後、減圧下に溶媒を留去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー［溶離液；酢酸エチル］で精製し、白色固形物のメチル４−［（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（ヒドロキシメチル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキシレート０．４９ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１７２８
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ値：１．３５（３Ｈ，ｓ），１．６０（３Ｈ，ｓ），２．５５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．６Ｈｚ），３．８−３．９（１Ｈ，ｍ），３．９７（３Ｈ，ｓ），３．９５−４．０（１Ｈ，ｍ），４．４−４．５（１Ｈ，ｍ），４．９７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．２，６．３Ｈｚ），５．０１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．４，６．３Ｈｚ），５．８０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ），７．４９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．３Ｈｚ），７．６９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．３Ｈｚ）．
参考例４
0004370164.tif 000053
メチル４−［（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（ヒドロキシメチル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキシレート６．７８ｇをメタノール６８ｍＬに溶解させ、氷冷下、アンモニアガスを導入し、飽和させた。同温度で１．５時間反応後、析出した固形物を濾取し、淡黄色固体の４−［（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（ヒドロキシメチル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミド２．３４ｇを得た。濾液を濃縮することによって上記化合物をさらに２．５４ｇ得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１７０１，１６５４
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ値：１．２９（３Ｈ，ｓ），１．５１（３Ｈ，ｓ），３．５−３．６（１Ｈ，ｍ），３．６−３．７（１Ｈ，ｍ），４．３−４．４（１Ｈ，ｍ），４．７−４．８（１Ｈ，ｍ），４．８−４．９（１Ｈ，ｍ），５．２２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．７Ｈｚ），５．９８（１Ｈ，ｓ），７．５５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），７．７６（１Ｈ，ｂｒｓ），８．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），８．３６（１Ｈ，ｂｒｓ）．
参考例５
0004370164.tif 000054
３−ヒドロキシ−２−ピラジンカルボキサミド２０ｇのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド８０ｍＬの懸濁液に、８０−９０℃で、スルフリルクロリド１５ｍＬを滴下した。９５−１００℃で１時間撹拌後、氷水２００ｍＬおよび酢酸エチル２００ｍＬの混合液に投入した。有機層を分取し、水層を酢酸エチル１００ｍＬで５回抽出し、有機層を合わせ飽和食塩水で洗浄した。活性炭処理後、減圧下に溶媒を留去した。得られた残渣を水５０ｍＬに懸濁し、炭酸水素ナトリウム３．２ｇを加えて溶解した。次いで、濃塩酸を加えてｐＨ２に調整した。析出物を濾取し、白色固体の６−クロロ−３−ヒドロキシ−２−ピラジンカルボキサミド４．８ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１６６０
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ値：８．５１（２Ｈ，ｂｒｓ），８．７３（１Ｈ，ｓ），１３．６０（１Ｈ，ｂｒｓ）
参考例６
0004370164.tif 000055
６−クロロ−３−ヒドロキシ−２−ピラジンカルボキサミド１．５ｇの１，１，１，３，３，３−ヘキサメチルジシラザン７．５ｍＬ懸濁液を３０分間加熱還流した。冷却後、減圧下で濃縮した。トルエン５ｍＬを加えて減圧下溶媒を留去後、再度トルエン５ｍＬを加えて減圧下に溶媒を留去した。得られた残渣にアセトニトリル１５ｍＬを加えて溶解させ、氷冷下、β−Ｄ−リボフラノース−１，２，３，５−テトラアセテートおよび塩化スズ（ＩＶ）を順次加えた後、室温で５時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル３０ｍＬおよび水２０ｍＬで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液でｐＨ７に調整した後、沈殿物を濾去し、有機層を分取した。水層を酢酸エチル１０ｍＬで３回抽出し、有機層を合わせ、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下に溶媒を留去した。得られた残渣にジエチルエーテルを加えて濾取し、淡黄色固体の（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−４−（アセチルオキシ）−２−［（アセチルオキシ）メチル］−５−［３−（アミノカルボニル）−５−クロロ−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］テトラヒドロ−３−フラニル  アセテート２．８ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１７５６，１７３３，１７０１，１６４８
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ値：２．０９（３Ｈ，ｓ），２．１８（３Ｈ，ｓ），２．２３（３Ｈ，ｓ），４．４５（２Ｈ，ｓ），４．５−４．６（１Ｈ，ｍ），５．２−５．３（１Ｈ，ｍ），５．４５−５．５（１Ｈ，ｍ），６．１４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ），６．２２（１Ｈ，ｂｒｓ），８．０６（１Ｈ，ｓ），８．８４（１Ｈ，ｓ）．
参考例７
0004370164.tif 000056
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−４−（アセチルオキシ）−２−［（アセチルオキシ）メチル］−５−［３−（アミノカルボニル）−５−クロロ−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］テトラヒドロ−３−フラニルアセテート１．８ｇをメタノール２７ｍＬに懸濁させ、氷冷下、２８％ナトリウムメトキシドメタノール溶液２．４ｇを添加し、同温度で３０分間撹拌した。酢酸０．９５ｍＬを添加した後、減圧下に溶媒を留去した。得られた残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー［溶離液；クロロホルム：メタノール＝３：１］で精製し、淡黄色固体の６−クロロ−４−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２−フラニル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミド０．７３ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１６９３
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ値：３．３５（３Ｈ，ｂｒｓ），３．６５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ），３．８−３．９（１Ｈ，ｍ），３．９−４．０（３Ｈ，ｍ），５．８１（１Ｈ，ｓ），７．９２（１Ｈ，ｂｒｓ），８．４４（１Ｈ，ｂｒｓ），８．７０（１Ｈ，ｓ）．
参考例８
0004370164.tif 000057
６−クロロ−４−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２−フラニル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミド０．３ｇを、アセトン０．６ｍＬおよびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１．５ｍＬの混合溶媒に溶解し、２，２−ジメトキシプロパン３ｍＬおよびｐ−トルエンスルホン酸ピリジニウム塩０．１２ｇを順次加え、５０℃で５時間撹拌した。冷却後、酢酸エチル５ｍＬおよび水５ｍＬの混合溶媒を加え、有機層を分取した。水、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。得られた残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー［溶離液；クロロホルム：メタノール＝１０：１］で精製し、淡黄色固体の４−［（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（ヒドロキシメチル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル］−６−クロロ−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミド０．１８ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１７００
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ値：１．２９（３Ｈ，ｓ），１．５０（３Ｈ，ｓ），３．５−３．６（１Ｈ，ｍ），３．７−３．８（１Ｈ，ｍ），４．３−４．４（１Ｈ，ｍ），４．７４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．９，６．１Ｈｚ），４．８８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．０，６．１Ｈｚ），５．３７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．６Ｈｚ），５．９５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ），７．９３（１Ｈ，ｂｒｓ），８．３２（１Ｈ，ｓ），８．４１（１Ｈ，ｂｒｓ）．
参考例９
0004370164.tif 000058
メチル４−［（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（ヒドロキシメチル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキシレート１．０ｇをピリジン５．０ｍＬに溶解させ、１０℃でメタンスルホニルクロリド０．３６ｍＬを加え、室温で０．５時間攪拌した。反応混合物を酢酸エチル２０ｍＬおよび水２０ｍＬの混合液に注ぎ、有機層を分取し、水層を酢酸エチル２０ｍＬで３回抽出した。得られた有機層を合わせて飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下に溶媒を留去し、無色油状物のメチル４−［（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−２，２−ジメチル−６−［［（メチルスルホニル）オキシ］メチル］テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキシレート１．２ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１７３４，１６６９
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ値：１．３５（３Ｈ，ｓ），１．５８（３Ｈ，ｓ），３．０２（３Ｈ，ｓ），３．９８（３Ｈ，ｓ），４．５１（２Ｈ，ｓ），４．８−５．２（３Ｈ，ｍ），５．７３（１Ｈ，ｂｒｓ），７．４３（２Ｈ，ｂｒｓ）
参考例１０
0004370164.tif 000059
メチル４−［（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−２，２−ジメチル−６−［［（メチルスルホニル）オキシ］メチル］テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキシレート１．２ｇをアセトン１２ｍＬに溶解させ、ヨウ化ナトリウム２．３ｇを加え、２時間加熱還流した。反応混合物を室温まで冷却した後、酢酸エチル２０ｍＬおよび水２０ｍＬの混合液に注入した。有機層を分取し、さらに水層を酢酸エチル２０ｍＬで抽出した。得られた有機層を合わせてチオ硫酸ナトリウム水溶液および飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下に溶媒を留去した。得られた残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー［溶離液；トルエン：酢酸エチル＝２：１］で精製し、黄色油状物のメチル４−［（３ａＲ，４Ｒ，６Ｓ，６ａＲ）−６−（ヨードメチル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキシレート１．０ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１７３４，１６７０，１６５４
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ値：１．３６（３Ｈ，ｓ），１．５９（３Ｈ，ｓ），３．３−３．７（２Ｈ，ｍ），３．９８（３Ｈ，ｓ），４．３−４．５（１Ｈ，ｍ），４．９−５．１（２Ｈ，ｍ），５．７６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ），７．５−７．６（２Ｈ，ｍ）
参考例１１
0004370164.tif 000060
メチル４−［（３ａＲ，４Ｒ，６Ｓ，６ａＲ）−６−（ヨードメチル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキシレート０．５５ｇをメタノール５ｍＬに溶解させ、氷冷下、アンモニアガスを導入し、飽和させた。同温度で１時間攪拌した後、減圧下に溶媒を留去した。得られた残留物にジイソプロピルエーテルを加え、沈殿物を濾取し、黄色固形物の４−［（３ａＲ，４Ｒ，６Ｓ，６ａＲ）−６−（ヨードメチル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミド０．４５ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１６８４，１６５４
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ値：１．３０（３Ｈ，ｓ），１．５１（３Ｈ，ｓ），３．３−３．５（２Ｈ，ｍ），４．３−４．４（１Ｈ，ｍ），４．７９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．６，６．４Ｈｚ），５．１３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１．２，６．０Ｈｚ），６．００（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ），７．５３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），７．７６（１Ｈ，ｂｒｓ），７．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），８．２０（１Ｈ，ｂｒｓ）
参考例１２
0004370164.tif 000061
６−フルオロ−３−ヒドロキシ−２−ピラジンカルボキサミド５．３ｇを窒素気流下アセトニトリル５３ｍＬに懸濁させ、氷冷下、Ｎ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル）アセタミド８．４ｍＬを加え、室温で１．５時間撹拌した。反応混合物に氷冷下にて別途、カルボヒドレートリサーチ（Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．）第２０３巻、第９号、第３２４〜３２９頁（１９９０年）に記載の方法に準じて調製した（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−４，５−ビス（アセチロキシ）−２−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−３−フラニルアセテート９．４ｇのアセトニトリル５３ｍＬ溶液、塩化スズ（ＩＶ）７．２ｍＬを順次添加し、室温で２０分撹拌した。反応混合物を酢酸エチル１００ｍＬおよび飽和炭酸水素ナトリウム水溶液３００ｍＬの混合液に注入した。有機層を分取し、次いで水層を酢酸エチル７００ｍＬで抽出した。有機層を集め、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下に溶媒を留去した。得られた残留物をメタノール２００ｍＬに溶解させ、８０％酢酸水溶液１００ｍＬを加え、室温で２時間撹拌した。減圧下に溶媒を留去し、得られた残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー［溶離液；クロロホルム：メタノール＝４０：１］で精製後、クロロホルムおよびジイソプロピルエーテルを加え、濾取し、淡黄色固形物の（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−４−（アセチロキシ）−２−［３−（アミノカルボニル）−５−フルオロ−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−３−フラニル  アセテート９．３ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１７５２，１６８６
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ値：２．０４（３Ｈ，ｓ），２．１０（３Ｈ，ｓ），３．６４（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝２．５，５．０，１３Ｈｚ），３．８６（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝２．５，５．０，１３Ｈｚ），４．２９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），５．３５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），５．４９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．０，５．０Ｈｚ），５．６５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ），６．１１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ），７．９６（１Ｈ，ｂｒｓ），８．４２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．０Ｈｚ），８．４９（１Ｈ，ｂｒｓ）
参考例１３
0004370164.tif 000062
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−４−（アセチロキシ）−２−［３−（アミノカルボニル）−５−フルオロ−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−３−フラニル  アセテート１．５ｇおよび１Ｈ−テトラゾール０．８４ｇを窒素気流下、アセトニトリル３０ｍＬに溶解させ、氷冷下、ジアリルジイソプロピルホスホルアミダイト１．４ｍＬのアセトニトリル２０ｍＬ溶液を添加し、２０分間撹拌した。反応混合物にｍ−クロロ過安息香酸１．４ｇのアセトニトリル１０ｍＬ溶液を添加し、１０分間撹拌した。反応混合物に酢酸エチル６０ｍＬを加え、水６０ｍＬに注入した。有機層を分取し、水層を酢酸エチル９０ｍＬで抽出した。有機層を集め、水３０ｍＬを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液でｐＨ８に調整し、水層を分離した。有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下に溶媒を留去した。得られた残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー［溶離液；クロロホルム：メタノール＝４０：１］で精製し、黄色固形物の（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−４−（アセチロキシ）−２−［３−（アミノカルボニル）−５−フルオロ−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−５−（［［ビス（アリロキシ）ホスホリル］オキシ］メチル）テトラヒドロ−３−フラニルアセテート１．３ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１７５３，１６９４，
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ値：２．１１（３Ｈ，ｓ），２．１５（３Ｈ，ｓ），４．３２−４．３５（１Ｈ，ｍ），４．４７−４．５２（２Ｈ，ｍ），４．５８−４．６４（４Ｈ，ｍ），５．２７（２Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１．０，１０．５Ｈｚ），５．３７−５．４４（４Ｈ，ｍ），５．９０−６．００（２Ｈ，ｍ），６．２８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），６．３２（１Ｈ，ｂｒｓ），７．９９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），９．０２（１Ｈ，ｂｒｓ）
参考例１４
0004370164.tif 000063
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−４−（アセチロキシ）−２−［３−（アミノカルボニル）−５−フルオロ−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−５−（［［ビス（アリロキシ）ホスホリル］オキシ］メチル）テトラヒドロ−３−フラニル  アセテート０．２３ｇをメタノール４．０ｍＬに溶解させ、氷冷下、２８％ナトリウムメトキシドメタノール溶液０．１７ｇを添加し、５分間撹拌した。酢酸０．１５ｍＬを加え、減圧下に溶媒を留去した。（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−４−（アセチロキシ）−２−［３−（アミノカルボニル）−５−フルオロ−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−５−（［［ビス（アリロキシ）ホスホリル］オキシ］メチル）テトラヒドロ−３−フラニル  アセテート１．０ｇを用い、同様に反応を行ったものと合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィー［溶離液；クロロホルム：メタノール＝４０：１］で精製し、黄色固形物の［（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−５−フルオロ−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロ−２−フラニル］メチル  ジアリル  ホスフェート０．３５ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１６８４
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，Ｄ２Ｏ）δ値：３．１−４．７（９Ｈ，ｍ），５．１−５．５（４Ｈ，ｍ），５．７−６．２（３Ｈ，ｍ），７．９４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ）
参考例１５
0004370164.tif 000064
［（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−５−フルオロ−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロ−２−フラニル］メチル  ジアリル  ホスフェート０．８２ｇを窒素気流下、メタノール８．２ｍＬおよびテトラヒドロフラン８．２ｍＬの混合液に溶解させ、テトラキストリフェニルホスフィンパラジウム（Ｏ）０．１１ｇおよびトリフェニルホスフィン０．２８ｇを順次加え、室温で３０分間撹拌した。反応混合物に、水冷下、ギ酸０．６８ｍＬのテトラヒドロフラン１．９ｍＬ溶液とｎ−ブチルアミン１．１ｍＬのテトラヒドロフラン８．２ｍＬ溶液を順次加え、３０−３５℃で１時間、４０−４５℃で２時間撹拌した。反応混合物を水１０ｍＬで希釈し、減圧下に有機溶媒を留去した。得られた水溶液をクロロホルム２０ｍＬで洗浄し、洗浄液を水３０ｍＬで抽出した。すべての水層を合わせ、減圧下に溶媒を留去した。得られた残留物を逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィー［溶離液；水］で精製し、黄色固形物の［（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−５−フルオロ−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロ−２−フラニル｝メチル  ジヒドロゲン  ホスフェートのｎ−ブチルアンモニウム塩０．２９ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１６８５
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ値：０．７５−０．９０（３Ｈ，ｍ），１．２５−１．４０（２Ｈ，ｍ），１．４５−１．７０（２Ｈ，ｍ），２．７０−２．８０（２Ｈ，ｍ），３．３−４．７（８Ｈ，ｍ），５．３３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０Ｈｚ），５．４２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１７Ｈｚ），５．９０（２Ｈ，ｂｒｓ），７．９５（１Ｈ，ｂｒｓ），８．３４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．０Ｈｚ），８．６３（１Ｈ，ｂｒｓ）
参考例１６
0004370164.tif 000065
［（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−５−フルオロ−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロ−２−フラニル｝メチル  ジヒドロゲン  ホスフェートのｎ−ブチルアンモニウム塩０．２１ｇをアセトニトリル４．２ｍＬおよびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド８．４ｍＬの混合液に懸濁させ、１，１’−カルボニルジイミダゾール０．１５ｇを加え、室温で２時間撹拌した。反応混合物に、メタノール１９μＬを加え、３０分間撹拌した。反応混合物にトリｎ−ブチルアンモニウムピロホスフェート０．８６ｇのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド２．０ｍＬ溶液を加え、さらに１４時間撹拌した。減圧下に溶媒を留去し、得られた残留物をイオン交換カラムクロマトグラフィー［溶離液；０．１０ｍｏｌ／Ｌ炭酸水素トリエチルアンモニウム溶液］、逆相カラムクロマトグラフィー［溶離液；水］で順次精製した。得られた固形物にメタノール０．９０ｍＬを加え、過塩素酸ナトリウム０．１７ｇのアセトン４．５ｍＬ溶液を添加した。沈殿物を遠心分離後、アセトンで洗浄し、淡黄色固形物の［［２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ］−５−［３−（アミノカルボニル）−５−フルオロ−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロ−２−フラニル］メチル  トリホスフェートのナトリウム塩６０ｍｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：３４２２，１６８６，１２５２，１１０８
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ値：４．３−４．５（５Ｈ，ｍ），６．０９（１Ｈ，ｓ），８．４１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ）
参考例１７
0004370164.tif 000066
６−クロロ−４−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２−フラニル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミド０．１２ｇをリン酸トリメチル１．２ｍＬに懸濁させ、氷冷下、オキシ塩化リン３８μＬを加え、同温度で１時間撹拌した。氷冷下、反応混合物をｎ−トリブチルアミン０．３０ｍＬおよびｎ−トリブチルアンモニウムピロホスフェート０．７２ｇのジメチルホルムアミド３．０ｍＬ溶液に注ぎ、同温度で５分間撹拌した。反応混合物に０．１ｍｏｌ／Ｌ炭酸水素トリエチルアンモニウム溶液、水をそれぞれ１０ｍＬ順次加え、イオン交換カラムクロマトグラフィー［溶離液；０．０７ｍｏｌ／Ｌ炭酸水素トリエチルアンモニウム溶液］および逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィー［溶離液；水］で精製し、｛（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−５−クロロ−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロ−２−フラニル｝メチル  トリホスフェートのトリエチルアンモニウム塩の固形物４１ｍｇを得た。得られた｛（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−５−クロロ−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロ−２−フラニル｝メチル  トリホスフェートのトリエチルアンモニウム塩４１ｍｇをメタノール０．４３ｍＬに溶解させ、過塩素酸ナトリウム７８ｍｇのアセトン２．２ｍＬ溶液を添加した。固形物を遠心分離後、アセトン２．２ｍＬで洗浄し、白色固形物の｛（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−５−クロロ−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロ−２−フラニル｝メチル  トリホスフェートのナトリウム塩２６ｍｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１７００，１６５４
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ値：４．２５−４．５（５Ｈ，ｍ），６．０８（１Ｈ，ｓ），８．４４（１Ｈ，ｓ）
参考例１８
0004370164.tif 000067
ジャーナル・オブ・ケミカル・ソサエティー・ケミカルコミュニケーション（Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．）第４０−４１頁（１９８９年）に記載の方法に準じて調製した、ジエチル２−［（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−メトキシテトラヒドロ−２−フラニル］エチルホスホネート４３ｍｇとトリエチルアミン８２μＬをジクロロメタン１ｍＬに溶解し、ベンゾイルクロリド０．２１ｍＬ、４−ジメチルアミノピリジン１０ｍｇを順次加え、室温で１時間攪拌した。同様に、ジエチル２−［（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−メトキシテトラヒドロ−２−フラニル］エチルホスホネート０．８０ｇを処理し、得られた反応混合物に水１０ｍＬを加え、有機層を分取し、水層をクロロホルム２０ｍＬで２回抽出した。有機層を集め、水、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下に溶媒を留去した。得られた残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー［溶離液；クロロホルム］で精製し、無色油状物の（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−４−（ベンゾイロキシ）−５−［２−（ジエトキシホスホリル）エチル］−２−メトキシテトラヒドロ−３−フラニル  ベンゾエート１．３８ｇを得た。
ＩＲ（ｎｅａｔ）ｃｍ−１：１７２９
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ値：１．３−１．３５（６Ｈ，ｍ），１．８−２．２（４Ｈ，ｍ），３．４６（３Ｈ，ｓ），４．０−４．２（４Ｈ，ｍ），４．３−４．４５（１Ｈ，ｍ），５．１０（１Ｈ，ｓ），５．５２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），５．５９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），７．３３（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．４１（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．５−７．６（２Ｈ，ｍ），７．９０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），７．９９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）
参考例１９
0004370164.tif 000068
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−４−（ベンゾイロキシ）−５−［２−（ジエトキシホスホリル）エチル］−２−メトキシテトラヒドロ−３−フラニル  ベンゾエート１．３４ｇと無水酢酸１．３０ｍＬを酢酸２０ｍＬに溶解し、氷冷下、濃硫酸０．１３ｍＬを加え、昇温後、室温で１６時間放置した。得られた反応混合物を、酢酸エチル５０ｍＬ、氷５０ｍＬ、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液１００ｍＬの混合液に注入した。有機層を分取し、水層を酢酸エチル５０ｍＬで２回抽出した。有機層を集め、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下に溶媒を留去した。得られた残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー［溶離液；トルエン：酢酸エチル＝１：１］で精製し、無色油状物の（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（アセチロキシ）−４−（ベンゾイロキシ）−５−［２−（ジエトキシホスホリル）エチル］テトラヒドロ−３−フラニル  ベンゾエート１．１９ｇを得た。
ＩＲ（ｎｅａｔ）ｃｍ−１：１７２９
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ値：１．３−１．３５（６Ｈ，ｍ），１．８−２．２（４Ｈ，ｍ），２．１１，２．１６（３Ｈ，２ｓ），４．０５−４．２（４Ｈ，ｍ），４．４５−４．５（１Ｈ，ｍ），５．４５−５．７（２Ｈ，ｍ），６．３７，６．６２（１Ｈ，２ｄ，Ｊ＝１．０，３．９Ｈｚ），７．３−７．５（４Ｈ，ｍ），７．５−７．６（２Ｈ，ｍ），７．８５−７．９（２Ｈ，ｍ），７．９５−８．０５（２Ｈ，ｍ）
参考例２０
0004370164.tif 000069
メチル３−ヒドロキシ−２−ピラジンカルボキシレート５０ｍｇを１，１，１，３，３，３−ヘキサメチルジシラザン１．６ｍＬに懸濁させ、窒素雰囲気下、１時間加熱還流した。放冷後、減圧下に溶媒を留去し、（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（アセチロキシ）−４−（ベンゾイロキシ）−５−［２−（ジエトキシホスホリル）エチル］テトラヒドロ−３−フラニル  ベンゾエート０．１７ｇのアセトニトリル溶液を加え、減圧下に溶媒を留去した。得られた残留物を窒素雰囲気下、アセトニトリル２．００ｍＬに懸濁させ、氷冷下、塩化スズ（ＩＶ）６７μＬを添加し、室温で２４時間放置した。同様に、メチル３−ヒドロキシ−２−ピラジンカルボキシレート３００ｍｇを処理し、得られた反応混合物を、酢酸エチル５０ｍＬ、氷５０ｍＬ、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液１００ｍＬの混合液に注ぎ、沈殿物を濾去後、有機層を分取した。水層を酢酸エチル５０ｍＬで抽出し、有機層を集め、得られた有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下に溶媒を留去した。得られた残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー［溶離液；酢酸エチル：メタノール＝１００：１］で精製し、無色油状物のメチル４−｛（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，４−ビス（ベンゾイルオキシ）−５−［２−（ジエトキシホスホリル）エチル］テトラヒドロ−２−フラニル｝−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキシレート０．７６ｇを得た。
ＩＲ（ｎｅａｔ）ｃｍ−１：１７３４，１６７０
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ値：１．３−１．３５（６Ｈ，ｍ），１．８５−２．３（４Ｈ，ｍ），３．９７（３Ｈ，ｓ），４．０５−４．２（４Ｈ，ｍ），４．４５−４．５５（１Ｈ，ｍ），５．６５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ），５．７４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．６，５．９Ｈｚ），６．２４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ），７．３−７．４（４Ｈ，ｍ），７．５−７．６（４Ｈ，ｍ），７．８５−７．９５（４Ｈ，ｍ）．
参考例２１
ジエチル［２−１４Ｃ］マロネートを出発原料とし、公知の方法もしくはそれに準じた方法並びにそれらを組み合わせることにより、６−フルオロ−３−ヒドロキシ−２−［２−１４Ｃ］ピラジンカルボキサミド（放射化学的純度９９．０％）を得た。製造方法が記載されている文献としては、例えば、国際特許ＷＯ００／１０５６９が挙げられる。
参考例２２
0004370164.tif 000070
４−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２−フラニル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミド１３６ｍｇから参考例１７と同様にして、白色固体の｛（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロ−２−フラニル｝メチルトリフォスフェートのナトリウム塩１４０ｍｇを得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ値：４．３０−４．３９（４Ｈ，ｍ），４．４５−４．４８（１Ｈ，ｍ），６．１４（１Ｈ，ｓ），７．８６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ），８．３４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ）
参考例２３
0004370164.tif 000071
４−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２−フラニル］−６−メチル−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミド０．１ｇから参考例１７と同様にして、白色固体の｛（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−５−メチル−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロ−２−フラニル｝メチルトリフォスフェートのナトリウム塩０．０６ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１６８４，１６５４
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ値：２．４４（３Ｈ，ｓ），４．３１−４．４７（５Ｈ，ｍ），６．１２（１Ｈ，ｓ），８．２０（１Ｈ，ｓ）
参考例２４
0004370164.tif 000072
４−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２−フラニル］−３−オキソ−６−フェニル−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミド０．０６ｇから参考例１７と同様にして、黄色固体の｛（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−２−オキソ−５−フェニル−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロ−２−フラニル｝メチルトリフォスフェートのナトリウム塩０．０２ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１６８４，１６５４
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ値：４．０７−４．４１（５Ｈ，ｍ），６．２２（１Ｈ，ｓ），７．４７−７．６０（３Ｈ，ｍ），７．９９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），８．５８（１Ｈ，ｓ）
参考例２５
0004370164.tif 000073
４−［（２Ｒ，３Ｒ，５Ｓ）−３−ヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２−フラニル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミド１２８ｍｇから参考例１７と同様にして、白色固体の｛（２Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−４−ヒドロキシテトラヒドロ−２−フラニル｝メチルトリフォスフェートのナトリウム塩１４６ｍｇを得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ値：２．０４−２．１８（２Ｈ，ｍ），４．２３−４．２９（１Ｈ，ｍ），４．５０−４．５８（２Ｈ，ｍ），４．７８−４．８８（１Ｈ，ｍ），６．０３（１Ｈ，ｓ），７．８６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．８Ｈｚ），８．４１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．８Ｈｚ）
参考例２６
0004370164.tif 000074
メチル４−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２−フラニル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキシレート０．９ｇをＮ，Ｎ−ジメチルアセタミド９ｍＬに懸濁し、ベンズアルデヒドジメチルアセタール２．３ｍＬおよびピリジニウム−ｐ−トルエンスルフォネート１６０ｍｇを加えて６５℃で７時間撹拌した。次いで反応液を酢酸エチル１０ｍＬおよび水５ｍＬの混合液に注ぎ、析出した固体を濾取することによって、白色固体のメチル４−［（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（ヒドロキシメチル）−２−フェニルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキシレート０．２４ｇを得た。さらに濾液を分液し、得られた有機層を水５ｍＬおよび飽和塩化ナトリウム水溶液５ｍＬで順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下で溶媒を留去し、残渣を酢酸エチルで洗浄することによって、さらに白色固体のメチル４−［（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（ヒドロキシメチル）−２−フェニルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキシレート０．４０ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：３４４０，１７３１
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ値：３．６１−３．７１（２Ｈ，ｍ），３．８３（３Ｈ，ｓ），４．５０−４．５３（１Ｈ，ｍ），４．８６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．２，６．６Ｈｚ），５．０１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．０，６．３Ｈｚ），５．２３（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．９Ｈｚ），５．９５（１Ｈ，ｓ），６．０７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ），７．４５−７．４７（３Ｈ，ｍ），７．４９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），７．５４−７．５７（２Ｈ，ｍ），８．０９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ）
参考例２７
0004370164.tif 000075
メチル３−ヒドロキシ−２−ピラジンカルボキシレート０．３０ｇをジメチルスルホキシド１．５ｍＬに溶解させ、トリエチルアミン０．７０ｍＬ、Ｌ−アスパラギン酸ジエチルエステル塩酸塩０．５４ｇを順次添加し、室温で８時間攪拌した。クロロホルム、水を加えた後、２ｍｏｌ／Ｌ塩酸でｐＨ２に調整し、有機層を分取した。得られた有機層を水で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下に溶媒を留去した。得られた残留物にトルエンおよびｎ−ヘキサンを加え、沈殿物を濾取し、ジエチル（２Ｓ）−２−｛［（３−ヒドロキシ−２−ピラジニル）カルボニル］アミノ｝ブタンジオエート０．１８ｇを得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ値：１．２７（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），１．３０（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ），２．９４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．４，１７．２Ｈｚ），３．１５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．８，１７．２Ｈｚ），４．１４−４．２３（２Ｈ，ｍ），４．２４−４．３２（２Ｈ，ｍ），４．９９−５．０２（１Ｈ，ｍ），８．１５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．６Ｈｚ），８．４０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ），８．７８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），１２．４（１Ｈ，ｂｒｓ）
参考例２８
0004370164.tif 000076
３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボニトリル２．０ｇをメタノール２０ｍＬに溶解させ、氷冷下、塩化水素ガスを導入し、飽和させた。同温度で６時間攪拌した後、酢酸エチルを加え、沈殿物を濾取し、黄色固体のメチル３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキシミドエート塩酸塩２．３ｇを得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ値：４．２７（３Ｈ，ｓ），７．８８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．４Ｈｚ），７．９１（１Ｈ，ｂｒｓ），８．０７（１Ｈ，ｂｒｓ），８．１５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．４Ｈｚ），８．７１（１Ｈ，ｂｒｓ）
参考例２９
0004370164.tif 000077
メチル３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキシミドエート塩酸塩０．４０ｇを２５％アンモニア水４ｍＬに溶解させ、室温で２時間攪拌した。メタノールを加え、析出物を濾取し、淡黄色固体の３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキシミダミド０．２１ｇを得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，Ｄ２Ｏ）δ値：７．６０（１Ｈ，ｓ），８．１９（１Ｈ，ｓ）
参考例３０
0004370164.tif 000078
４−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２−フラニル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミド０．２ｇをアセトニトリル４ｍＬに懸濁させ、氷冷下、ジホスホリルクロリド０．２ｍＬを加え同温度で２０分間撹拌した。１ｍｏｌ／Ｌ炭酸水素トリエチルアンモニウム溶液でｐＨを７に調整し、減圧下濃縮した。得られた残留物を逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィー［溶離液；水］で精製し、固体の｛（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロ−２−フラニル｝メチルホスフェートのトリエチルアンモニウム塩０．２９を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ値：１．２８（９Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），３．２０（６Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），４．１５−４．２０（１Ｈ，ｍ），４．２８−４．４０（４Ｈ，ｍ），６．１１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ），７．８０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ），８．３４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ）
上記モノリン酸・トリエチルアンモニウム塩０．２８ｇのメタノール１．４ｍＬ懸濁液に、室温で過塩素酸ナトリウム０．３５ｇのアセトン７ｍＬ溶液を加え、同温度で１時間撹拌した。析出物を濾取し、アセトンで洗浄することによって白色固体の｛（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロ−２−フラニル｝メチルホスフェートのナトリウム塩０．１９ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１６６２
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ値：４．１５−４．１９（１Ｈ，ｍ），４．２９−４．３８（４Ｈ，ｍ），６．１２（１Ｈ，ｓ），７．８０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．８Ｈｚ），８．３５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．８Ｈｚ）
参考例３１
0004370164.tif 000079
４−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２−フラニル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミド０．１１ｇをリン酸トリメチル２．０ｍＬに懸濁させ、氷冷下、オキシ塩化リン０．１１ｍＬを加え、同温度で２時間撹拌した。反応混合物にトリブチルアミン１．２ｍＬおよびトリブチルアンモニウムホスフェート１．１２ｇのジメチルホルムアミド６．０ｍＬ溶液を加え、同温度で１時間撹拌した。反応混合物に０．１ｍｏｌ／Ｌ炭酸水素トリエチルアンモニウム溶液を加え、室温で１２時間放置した。減圧下に溶媒を留去し、得られた残留物をイオン交換カラムクロマトグラフィー［溶離液；０．０７ｍｏｌ／Ｌ炭酸水素トリエチルアンモニウム溶液］で精製し、｛（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロ−２−フラニル｝メチル  ジホスフェートのトリエチルアンモニウム塩を含む分画および｛（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロ−２−フラニル｝メチル  トリホスフェートのトリエチルアンモニウム塩を含む分画をそれぞれ集め、固形物１４３ｍｇおよび１１３ｍｇを得た。得られた｛（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロ−２−フラニル｝メチル  ジホスフェートのトリエチルアンモニウム塩１４３ｍｇの１１０ｍｇをメタノール３．０ｍＬに溶解させ、過塩素酸ナトリウム０．２８ｇのアセトン７．５ｍＬ溶液を添加した。固形物を遠心分離後、アセトンで洗浄し、白色固形物の｛（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロ−２−フラニル｝メチル  ジホスフェートのナトリウム塩６４ｍｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：３４１８，１６８２，１２３６，９８３，９０５
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ値：４．２−４．５（５Ｈ，ｍ），６．１２（１Ｈ，ｓ），７．８３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．７Ｈｚ），８．３５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．７Ｈｚ）
実施例１
0004370164.tif 000080
４−［（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（ヒドロキシメチル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミド６５ｍｇ、１Ｈ−テトラゾール４４ｍｇおよびモレキュラーシーブス４Ａ１０ｍｇをアセトニトリル２．０ｍＬに懸濁させ、氷冷下、別途、ジャーナル・オブ・メディシナル・ケミストリー（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．）第３８巻、第２０号、第３９４１−３９５０頁（１９９５年）に記載の方法に準じて調製したビス（Ｓ−ピバロイル−２−チオエチル）−Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルホスホルアミダイト０．１６ｇのアセトニトリル３．０ｍＬ溶液を分割添加し、同温度で４０分間撹拌した。反応混合物にｍ−クロロ過安息香酸７８ｍｇのアセトニトリル１．０ｍＬ溶液を添加し、同温度でさらに１０分間撹拌した。反応混合物に酢酸エチル１０ｍＬおよび水１０ｍＬを加え、有機層を分取し、水層を酢酸エチル２０ｍＬで抽出した。すべての有機層を集め、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下に溶媒を留去した。得られた残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー［溶離液；クロロホルム：メタノール＝５０：１］で精製し、黄色油状物の２，２−ジメチル−チオプロピオニックアシッドＳ−（２−｛［（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（３−カルバモイル−２−オキソ−２Ｈ−ピラジン−１−イル）−２，２−ジメチル−テトラヒドロ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イルメトキシ］−［２−（２，２−ジメチル−プロピオニルスルファニル）−エトキシ］−ホスホリロキシ｝−エチル）−エステル６８ｍｇを得た。
ＩＲ（ｎｅａｔ）ｃｍ−１：１６８４
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ値：１．２２（９Ｈ，ｓ），１，２３（９Ｈ，ｓ），１．４０（３Ｈ，ｓ），１．６５（３Ｈ，ｓ），３．０８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝，６．９Ｈｚ），３．１０（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），４．０４−４．１２（４Ｈ，ｍ），４．２９−４．３６（１Ｈ，ｍ），４．３９−４．４５（１Ｈ，ｍ），４．５９−４．６４（１Ｈ，ｍ），４．８６−４．８８（２Ｈ，ｍ），６．０２（１Ｈ，ｂｒｓ），６．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ），７．８４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．３Ｈｚ），７．８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．３Ｈｚ），９．１７（１Ｈ，ｂｒｓ）
実施例２
0004370164.tif 000081
２，２−ジメチル−チオプロピオニックアシッドＳ−（２−｛［（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（３−カルバモイル−２−オキソ−２Ｈ−ピラジン−１−イル）−２，２−ジメチル−テトラヒドロ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イルメトキシ］−［２−（２，２−ジメチル−プロピオニルスルファニル）−エトキシ］−ホスホリロキシ｝−エチル）−エステル６０ｍｇを水２．４ｍＬおよびメタノール２．４ｍＬの混合溶媒に溶解させ、ダウエックス５０ＷＸ４−２００イオン交換樹脂（Ｈ＋ｆｏｒｍ）１．２ｇを分割添加し、室温で３時間撹拌した。反応混合物を濾過し、除いた樹脂をメタノールで洗浄後、濾液と洗浄液を合わせて減圧下に有機溶媒を留去した。析出物を濾取することにより白色固形物の２，２−ジメチル−チオプロピオニックアシッドＳ−（２−［［（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（３−カルバモイル−２−オキソ−２Ｈ−ピラジン−１−イル）−３，４−ジヒドロキシ−テトラヒドロ−フラン−２−イルメトキシ］−［２−（２，２−ジメチル−プロピオニルスルファニル）−エトキシ］−ホスホリロキシ］−エチル）エステル３６ｍｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１６７７，１６６０
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ値：１．２２（９Ｈ，ｓ），１，２３（９Ｈ，ｓ），３．１１（４Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），３．６７（１Ｈ，ｂｒｓ），４．０５−４．１５（４Ｈ，ｍ），４．２５−４．３８（３Ｈ，ｍ），４．４４−４．５２（２Ｈ，ｍ），４．６７（１Ｈ，ｂｒｓ），６．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．７Ｈｚ），６．１０（１Ｈ，ｂｒｓ），７．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．１Ｈｚ），８．０８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．１Ｈｚ），８．９５（１Ｈ，ｂｒｓ）
実施例３
0004370164.tif 000082
４−［（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（ヒドロキシメチル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル］−６−クロロ−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミド４０ｍｇから、実施例１と同様にして黄色油状物の２，２−ジメチル−チオプロピオニックアシッドＳ−（２−｛［（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（３−カルバモイル−５−クロロ−２−オキソ−２Ｈ−ピラジン−１−イル）−２，２−ジメチル−テトラヒドロ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イルメトキシ］−［２−（２，２−ジメチル−プロピオニルスルファニル）−エトキシ］−ホスホリロキシ｝−エチル）エステル１２ｍｇを得た。
ＩＲ（ｎｅａｔ）ｃｍ−１：１６８７
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ値：１．２１（９Ｈ，ｓ），１，２２（９Ｈ，ｓ），１．４０（３Ｈ，ｓ），１．６４（３Ｈ，ｓ），３．０７（２Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝７．０，１．５Ｈｚ），３．１４（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），４．０６−４．１６（４Ｈ，ｍ），４．３４−４．３９（１Ｈ，ｍ），４．４２−４．４７（１Ｈ，ｍ），４．６３−４．６５（１Ｈ，ｍ），４．８５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．４，２．２Ｈｚ），４．８９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．２，２．８Ｈｚ），６．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ），６．１７（１Ｈ，ｂｒｓ），７．９８（１Ｈ，ｓ），９．０７（１Ｈ，ｂｒｓ）
実施例４
0004370164.tif 000083
２，２−ジメチル−チオプロピオニックアシッドＳ−（２−｛［（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（３−カルバモイル−５−クロロ−２−オキソ−２Ｈ−ピラジン−１−イル）−２，２−ジメチル−テトラヒドロ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イルメトキシ］−［２−（２，２−ジメチル−プロピオニルスルファニル）−エトキシ］−ホスホリロキシ｝−エチル）エステル１２ｍｇから、実施例２と同様にして黄色油状物の２，２−ジメチル−チオプロピオニックアシッドＳ−（２−｛［（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（３−カルバモイル−５−クロロ−２−オキソ−２Ｈ−ピラジン−１−イル）−３，４−ジヒドロキシ−テトラヒドロ−フラン−２−イルメトキシ］−［２−（２，２−ジメチル−プロピオニルスルファニル）−エトキシ］−ホスホリロキシ｝−エチル）エステル７ｍｇを得た。
ＩＲ（ｎｅａｔ）ｃｍ−１：１６８６，１６５４
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ値：１．２１（９Ｈ，ｓ），１，２３（９Ｈ，ｓ），３．００（１Ｈ，ｂｒｓ），３．１０−３．１６（４Ｈ，ｍ），３．８３（１Ｈ，ｂｒｓ），４．０５−４．２０（４Ｈ，ｍ），４．２５−４．５５（５Ｈ，ｍ），６．０２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ），６．４０（１Ｈ，ｂｒｓ），８．１５（１Ｈ，ｓ），８．８１（１Ｈ，ｂｒｓ）
実施例５
0004370164.tif 000084
４−［（３ａＲ，４Ｒ，６Ｓ，６ａＲ）−６−（ヨードメチル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミド０．０５ｇをトルエン２ｍＬに懸濁させ、別途、ジャーナル・オブ・メディシナル・ケミストリー（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．）第３７巻、第３９０２−３９０９頁（１９９４年）に記載の方法に準じて調製したビス（２，２−ジメチル−プロピオニルオキシメチル）ホスフェートの銀塩７０ｍｇを加え、６０℃で２時間攪拌した。同様に、４−［（３ａＲ，４Ｒ，６Ｓ，６ａＲ）−６−（ヨードメチル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１．３］ジオキソール−４−イル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミド０．１５ｇを処理し、得られた反応混合物を合わせて、減圧下に溶媒を留去した。得られた残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー［溶離液；クロロホルム：メタノール＝１０：１］で精製し、黄色固形物の２，２−ジメチル−プロピオニックアシッド［（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（３−カルバモイル−２−オキソ−２Ｈ−ピラジン−１−イル）−２，２−ジメチル−テトラヒドロ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イルメトキシ］−（２，２−ジメチル−プロピオニルオキシメトキシ）−ホスホリロキシメチルエステル０．１２ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１７５０，１６８４，１６５４
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ値：１．１４（１８Ｈ，ｓ），１．２９（３Ｈ，ｓ），１．５１（３Ｈ，ｓ），３．５−３．７（２Ｈ，ｍ），４．３４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．０，７．２Ｈｚ），４．７５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．８，６．０Ｈｚ），４．８６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．０，６．０Ｈｚ），５．２３（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ），５．３１（２Ｈ，ｓ），５．３４（２Ｈ，ｓ），５．９７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ），７．５６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），７．８３（１Ｈ，ｂｒｓ），８．０６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），８．４３（１Ｈ，ｂｒｓ）
実施例６
0004370164.tif 000085
２，２−ジメチル−プロピオニックアシッド［（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（３−カルバモイル−２−オキソ−２Ｈ−ピラジン−１−イル）−２，２−ジメチル−テトラヒドロ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イルメトキシ］−（２，２−ジメチル−プロピオニルオキシメトキシ）−ホスホリロキシメチルエステル０．１ｇを、メタノール１．５ｍＬおよび水１．５ｍＬの混合液に溶解させ、ダウエックス５０ＷＸ４−２００イオン交換樹脂（Ｈ＋ｆｏｒｍ）５ｍＬを加え、室温で１．５時間攪拌した。樹脂を濾去し、アセトニトリル２．５ｍＬおよび水２．５ｍＬの混合液で樹脂を洗浄した。得られた洗浄液と濾液を合わせ、減圧下に有機溶媒を留去した。得られた残留物を凍結乾燥し、淡黄色固形物の２，２−ジメチル−プロピオニックアシッド［（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（３−カルバモイル−２−オキソ−２Ｈ−ピラジン−１−イル）−３，４−ジヒドロキシ−テトラヒドロ−フラン−２−イルメトキシ］−（２，２−ジメチル−プロピオニルオキシメトキシ）−ホスホリロキシメチルエステル０．０７ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１７５１，１６７０
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ値：１．１６（１８Ｈ，ｓ），３．６４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．０，１２．４Ｈｚ），３．８１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．０，１２．４Ｈｚ），３．９−４．０（３Ｈ，ｍ），５．４６（２Ｈ，ｓ），５．４９（２Ｈ，ｓ），５．９２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ），７．５４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），７．７５（１Ｈ，ｂｒｓ），８．２９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），８．３５（１Ｈ，ｂｒｓ）
実施例７
0004370164.tif 000086
４−［（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（ヒドロキシメチル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミド０．５０ｇをピリジン５０ｍＬに懸濁させ、別途、アンチヴァイラル・リサーチ（Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ）第４３巻、第３７−５３頁（１９９９年）に記載の方法に準じて調製したメチル  クロロ  フェニルホスホリルＰ→Ｎ−Ｌ−アラニネート２．２ｇのテトラヒドロフラン溶液４３ｍＬとＮ−メチルイミダゾール１．３ｍＬを順次添加し、同温度で３時間撹拌した。反応混合物から減圧下に溶媒を留去し、得られた残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー［溶離液；クロロホルム：メタノール＝４０：１］で精製し、淡黄色固形物の（２Ｓ）−［［（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（３−カルバモイル−２−オキソ−２Ｈ−ピラジン−１−イル）−２，２−ジメチル−テトラヒドロ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イルメトキシ］−フェノキシ−ホスホリルアミノ］−プロピオニックアシッド  メチルエステル０．４３ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１７４９，１６８４
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ値：１．２２，１．２３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），１．２８，１．３０（３Ｈ，ｓ），１．５０，１．５１（３Ｈ，ｓ），３．５８，３．６０（３Ｈ，ｓ），３．８０−３．８８（１Ｈ，ｍ），４．１５−４．３４（２Ｈ，ｍ），４．４２−４．４５，４．５０−４．５４（１Ｈ，ｍ），４．７４，４．８１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．０，６．３Ｈｚ），４．６７，４．９３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．０，６．１Ｈｚ），５．９４−５．９７（１Ｈ，ｍ），６．０９−６．１５（１Ｈ，ｍ），７．０８−７．２０（３Ｈ，ｍ），７．３２−７．３９（２Ｈ，ｍ），７．４６，７．５１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），７．７５−７．８０（１Ｈ，ｂｒｓ），７．８４−７．８７（１Ｈ，ｍ），８．２６−８．３２（１Ｈ，ｍ）
実施例８
0004370164.tif 000087
（２Ｓ）−｛［（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（３−カルバモイル−２−オキソ−２Ｈ−ピラジン−１−イル）−２，２−ジメチル−テトラヒドロ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イルメトキシ］−フェノキシ−ホスホリルアミノ｝−プロピオニックアシッド  メチルエステル１９０ｍｇから、実施例２と同様にして白色固形物の（２Ｓ）−｛［（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（３−カルバモイル−２−オキソ−２Ｈ−ピラジン−１−イル）−３，４−ジヒドロキシ−テトラヒドロ−フラン−２−イルメトキシ］−フェノキシ−ホスホリルアミノ｝−プロピオニックアシッド  メチルエステル４９ｍｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１７３５，１６７６，１６６１
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ値：１．２１，１，２３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），３．５７，３．５８（３Ｈ，ｓ），３．８１−３．９８（２Ｈ，ｍ），４．０２−４．０４（１Ｈ，ｍ），４．１２−４．４１（３Ｈ，ｍ），５．６０（２Ｈ，ｂｒｓ），５．９１−５．９４（１Ｈ，ｍ），６．１０−６．２０（１Ｈ，ｍ），７．１５−７．２４（３Ｈ，ｍ），７．３４−７．４５（３Ｈ，ｍ），７．７３（１Ｈ，ｂｒｓ），７．８１，７．８６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ），８．２９（１Ｈ，ｂｒｓ）
実施例９
0004370164.tif 000088
メチル４−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，４−ビス（ベンゾイルオキシ）−５−［２−（ジエトキシホスホリル）エチル］テトラヒドロ−２−フラニル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキシレート０．２０ｇをアセトニトリル２．０ｍＬに溶解させ、氷冷下、ブロモトリメチルケイ素０．３３ｍＬを加え、０℃で３０分、室温で１時間撹拌した。反応混合物から減圧下に溶媒を留去し、得られた固形物にメタノール２．０ｍＬを加え溶解後、氷冷下、アンモニアガスを吹き込み飽和させ、室温で３時間攪拌した。反応混合物から減圧下に溶媒を留去し、水１０ｍＬを加え、クロロホルムで洗浄した。不溶物を濾過後、減圧下に溶媒を留去し、得られた残留物を逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィー［溶離液；水］で精製し、淡黄色固形物の２−［（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロ−２−フラニル］エチルホスホリック  アシッド２８ｍｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１６７６
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ値：１．７−１．９５（２Ｈ，ｍ），２．０−２．２（２Ｈ，ｍ），３．９５−４．０（１Ｈ，ｍ），４．２−４．２５（１Ｈ，ｍ），４．３３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．６Ｈｚ），６．０６（１Ｈ，ｓ），７．７９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），８．０３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ）
実施例１０
0004370164.tif 000089
３−ヒドロキシ−６−メチル−２−ピラジンカルボキサミド０．４３ｇから参考例６と同様にして、黄色油状の［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−５−メチル−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ビス（ベンゾイロキシ）テトラヒドロ−２−フラニル］メチル  ベンゾエート１．２ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１７２７，１６８６，１６５４
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ値：２．１５（３Ｈ，ｓ），４．６７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．４，１２．７Ｈｚ），４．８５−４．８８（１Ｈ，ｍ），４．９９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．４，１２．７Ｈｚ），５．８８−５．９５（２Ｈ，ｍ），６．０３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ），６．４７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．９Ｈｚ），７．３６−７．６５（１０Ｈ，ｍ），７．９３−８．００（４Ｈ，ｍ），８．１０−８．１３（２Ｈ，ｍ），９．１２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．９Ｈｚ）
実施例１１
0004370164.tif 000090
［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−５−メチル−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ビス（ベンゾイロキシ）テトラヒドロ−２−フラニル］メチル  ベンゾエート１．０５ｇから参考例７と同様にして、淡黄色固体の４−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２−フラニル］−６−メチル−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミド０．４ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１６９８，１６５４
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ値：２．２４（３Ｈ，ｓ），３．６２−３．６７（１Ｈ，ｍ），３．８０−３．８５（１Ｈ，ｍ），３．９４−４．０１（３Ｈ，ｍ），５．１０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），５．３２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ），５．６２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ），５．９２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ），７．７６（１Ｈ，ｂｒｓ），８．１６（１Ｈ，ｓ），８．４８（１Ｈ，ｂｒｓ）
実施例１２
0004370164.tif 000091
３−ヒドロキシ−６−フェニル−２−ピラジンカルボキサミド０．３５ｇから参考例６と同様にして、黄色油状の［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−２−オキソ−５−フェニル−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ビス（ベンゾイロキシ）テトラヒドロ−２−フラニル］メチル  ベンゾエート０．５ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１７２０，１７１７，１６８４，１６５４
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ値：４．７７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．６，１２．４Ｈｚ），４．９０−４．９７（２Ｈ，ｍ），５．９３−５．９９（２Ｈ，ｍ），６．０３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．７Ｈｚ），６．５８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ），７．３２−７．６８（１４Ｈ，ｍ），７．９５−８．０５（６Ｈ，ｍ），８．１１（１Ｈ，ｓ），８．９３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．４Ｈｚ）
実施例１３
0004370164.tif 000092
［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−２−オキソ−５−フェニル−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ビス（ベンゾイロキシ）テトラヒドロ−２−フラニル］メチル  ベンゾエート０．４８ｇから参考例７と同様にして、黄色固体の４−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２−フラニル］−３−オキソ−６−フェニル−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミド０．１２ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１６８５，１６７０，１６５４
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ値：３．７１−３．７５（１Ｈ，ｍ），３．９３−３．９７（１Ｈ，ｍ），４．０２−４．１５（３Ｈ，ｍ），５．１０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），５．６７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），５．７３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．６Ｈｚ），５．９６（１Ｈ，ｓ），７．３２−７．４６（３Ｈ，ｍ），７．８２（１Ｈ，ｂｒｓ），７．８８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），８．４３（１Ｈ，ｂｒｓ），９．０７（１Ｈ，ｓ）
実施例１４
0004370164.tif 000093
３−ヒドロキシ−２−ピラジンカルボキサミド０．２４ｇを１，１，１−３，３，３−ヘキサメチルジシラザン５ｍＬに懸濁させ、２時間還流した。冷却後、減圧下で溶媒を留去した後、キシレン５ｍＬを加え、減圧下溶媒を留去した。得られた残留物にアセトニトリル１２．５ｍＬ、［（２Ｓ，４Ｒ）−４，５−ビス（アセチロキシ）テトラヒドロ−２−フラニル］メチル  ベンゾエート０．５０ｇ、塩化スズ（ＩＶ）０．２９ｍＬを順次添加し、室温で３０分攪拌した。反応液に水を加え、減圧下で有機溶媒を留去した後、残留物に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、酢酸エチルを加え、不溶物を濾去した後、有機層を分取し、さらに水層を酢酸エチルで抽出した。得られた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下に溶媒を留去した。得られた残留物をシリカゲルクロマトグラフィー［溶離液；クロロホルム：メタノール＝１６：１］で精製し、淡黄色固体の｛（２Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−４−（アセチロキシ）−５−［３−（アミノカルボニル）−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］テトラヒドロ−２−フラニル｝メチル  ベンゾエート０．６１ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１７４３，１７０６，１６６７
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ値：２．１３−２．２３（５Ｈ，ｍ），４．６７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．０，１２．８Ｈｚ），４．７８−４．８５（２Ｈ，ｍ），５．４８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），６．０５（１Ｈ，ｓ），６．６１（１Ｈ，ｂｒｓ），７．４７−７．５１（２Ｈ，ｍ），７．５８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），７．６２−７．６６（１Ｈ，ｍ），７．９６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），８．０２−８．０４（２Ｈ，ｍ），９．０６（１Ｈ，ｂｒｓ）
実施例１５
0004370164.tif 000094
｛（２Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−４−（アセチロキシ）−５−［３−（アミノカルボニル）−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］テトラヒドロ−２−フラニル｝メチル  ベンゾエート１．２１ｇをメタノール３６ｍＬに溶解させ、氷冷下で、２８％ナトリウムメトキシドメタノール溶液１．２８ｇを添加し、同温度で１時間攪拌した。反応液に１ｍｏｌ／Ｌ塩酸を加え、ｐＨ５に調整した後、減圧下に溶媒を留去した。得られた残留物をシリカゲルクロマトグラフィー［溶離液；ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝４：１］で精製後、２−プロパノール、酢酸エチルの混合溶媒を加え、沈殿物を濾取し、白色固体の４−［（２Ｒ，３Ｒ，５Ｓ）−３−ヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２−フラニル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミド０．４７ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１６８２，１６５４
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ値：１．７２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．２，１３．２Ｈｚ），１．８６−１．９３（１Ｈ，ｍ），３．６１−３．６６（１Ｈ，ｍ），３．８８−３．９３（１Ｈ，ｍ），４．２５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），４．４３−４．４８（１Ｈ，ｍ），５．２８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ），５．７７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），５．８２（１Ｈ，ｓ），７．５６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），７．７６（１Ｈ，ｂｒｓ），８．３７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），８．４２（１Ｈ，ｂｒｓ）
実施例１６
0004370164.tif 000095
４−［（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（ヒドロキシメチル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミド０．５ｇをＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド５ｍＬに溶解させ、１，１’−カルボニルジイミダゾール０．２９ｇを加え、室温で１時間攪拌した後、１，４−ブタンジオール０．２１ｍＬを添加し、室温で１時間、６０℃で１時間攪拌し、さらに１，４−ブタンジオール０．２９ｍＬを添加し、６０℃で３時間攪拌した。減圧下に反応液を濃縮した後、酢酸エチル３０ｍＬ、水３０ｍＬ、飽和食塩水５ｍＬを加え、有機層を分取し、次いで、水層を酢酸エチル２０ｍＬで抽出した。有機層を集め、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下溶媒を留去した。得られた残留物をシリカゲルクロマトグラフィー［溶離液；酢酸エチル：メタノール＝１０：１］で精製し、淡黄色油状物の｛（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−［３−（アミノカルボニル）−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル｝メチル４−ヒドロキシブチル  カーボネート０．３１ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１７５０，１６８４，１６５４
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ値：１．４１（３Ｈ，ｓ），１．４７−１．５４（２Ｈ，ｍ），１．６２−１．６８（５Ｈ，ｍ），３．６０−３．６６（２Ｈ，ｍ），４．０４−４．１６（２Ｈ，ｍ），４．３２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．２，１２．４Ｈｚ），４．４８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．２，１２．２Ｈｚ），４．７３−４．７６（１Ｈ，ｍ），４．７９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．４，６．０Ｈｚ），４．９２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１．８，６．２Ｈｚ），５．９８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ），６．３１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２３．６Ｈｚ），７．７７（１Ｈ，ｓ），７．７５（１Ｈ，ｓ），８．７８（１Ｈ，ｂｒ），９．２５（１Ｈ，ｂｒｓ）
実施例１７
0004370164.tif 000096
｛（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−［３−（アミノカルボニル）−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル｝メチル４−ヒドロキシブチル  カーボネート１．２ｇをメタノール８ｍＬ、水６０ｍＬの混合溶媒に溶解させ、ダウエックス５０ＷＸ４−２００イオン交換樹脂（Ｈ＋ｆｏｒｍ）１９ｇを添加し、室温で３時間攪拌した後、樹脂を濾去し、メタノール次いで水で樹脂を洗浄した。得られた濾液と洗浄液を合わせ、減圧下溶媒を留去した。残留物を水に溶解させ、凍結乾燥させた後、得られた固体をアセトニトリル、次いでクロロホルムで洗浄し、無色固体の｛（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロ−２−フラニル｝メチル４−ヒドロキシブチル  カーボネート０．１６ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１７４５，１６６４
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ値：１．４５−１．５１（２Ｈ，ｍ），１．６４−１．６７（２Ｈ，ｍ），３．４０−３．４２（２Ｈ，ｍ），３．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ），４．０８−４．１５（４Ｈ，ｍ），４．３６−４．４７（３Ｈ，ｍ），５．３８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ），５．７４（１Ｈ，ｂｒｓ），５．９２（１Ｈ，ｓ），７．５０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ），７．７５（１Ｈ，ｂｒｓ），７．８１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ），８．３０（１Ｈ，ｂｒｓ）
実施例１８
0004370164.tif 000097
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−４−（アセチロキシ）−２−［（アセチロキシ）メチル］−５−［３−（アミノカルボニル）−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］テトラヒドロ−３−フラニル  アセテート２００ｍｇをピリジン２ｍＬに溶解させ、ヒドラジン一水和物０．１ｍＬを加え、室温で１時間攪拌した。アセトンを加えた後、減圧下で溶媒を留去した。得られた残留物をシリカゲルクロマトグラフィー［溶離液；酢酸エチル：メタノール＝１０：１］で精製し、白色固体の｛（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロ−２−フラニル｝メチル  アセテート４２ｍｇを得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ値：３．２０（３Ｈ，ｓ），３．９０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．８，１１．５），４．０６−４．０９（１Ｈ，ｍ），４．１２−４．１７（１Ｈ，ｍ），４．３１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．６，１２．７），４．３５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．４，１２．７），５．３３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６），５．７３，（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．１），５．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０），７．５７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４），７．７５（１Ｈ，ｂｒｓ），７．８５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４），８．３１（１Ｈ，ｂｒｓ）
実施例１９
0004370164.tif 000098
４−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２−フラニル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミド５ｇを無水酢酸２５ｍＬおよびピリジン１２．５ｍＬに懸濁し、５０℃で１時間さらに７０℃で１時間撹拌した。室温まで冷却後、不溶物を濾去した。減圧下に濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー［溶離液；酢酸エチル］で精製し、淡黄色固形物の（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−［３−［（アセチルアミノ）カルボニル］−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−４−（アセチロキシ）−５−［（アセチロキシ）メチル］テトラヒドロ−３−フラニルアセテート１．２６ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１７５０，１７０９
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ値：２．０６（６Ｈ，ｓ），２．０９（３Ｈ，ｓ），２．１７（３Ｈ，ｓ），４．２６−４．４２（３Ｈ，ｍ），５．３５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ），５．５０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．７，６．１Ｈｚ），６．０６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．４Ｈｚ），７．５０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），７．８３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），１１．４４（１Ｈ，ｓ）
実施例２０
0004370164.tif 000099
４−［（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（ヒドロキシメチル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミド０．２ｇを無水酢酸１ｍＬおよびピリジン４ｍＬに懸濁させ、室温で１時間撹拌した。反応液を減圧下で濃縮し、残留物に水５ｍＬを加え、酢酸エチル５ｍＬで１０回抽出した。有機層を合わせ、水１ｍＬを加え、２ｍｏｌ／Ｌ塩酸を用いてｐＨ３に調整した。有機層を分取し、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧で溶媒を留去した。得られた残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー［溶離液；クルロホルム：メタノール＝１０：１］で精製し、淡黄色油状の｛（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−［３−（アミノカルボニル）−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル｝メチル  アセテート０．１５ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１７４３，１６８５
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ値：１．４１（３Ｈ，ｓ），１．６５（３Ｈ，ｓ），１．９４（３Ｈ，ｓ），４．３２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．４，１２．５Ｈｚ），４．４０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．９，１２．５Ｈｚ），４．６８−４．７１（１Ｈ，ｍ），４．７６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．９，６．１Ｈｚ），４．８７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．１，６．２Ｈｚ），５．９５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ），６．１７（１Ｈ，ｂｒｓ），７．７０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ），７．８０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ），９．１３（１Ｈ，ｂｒｓ）
実施例２１
0004370164.tif 000100
メチル４−［（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（ヒドロキシメチル）−２−フェニルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキシレート０．５ｇを約５ｍｏｌ／Ｌ乾燥アンモニアメタノール溶液１５ｍＬに懸濁させ、室温で３時間撹拌した。析出物を濾取し、メタノールで洗浄し、無色固体の４−［（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（ヒドロキシメチル）−２−フェニルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミド０．３４ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１６８４
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ値：３．６１−３．７５（２Ｈ，ｍ），４．５２−４．５４（１Ｈ，ｍ），４．８７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．４，６．３Ｈｚ），５．００（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．２，６．６Ｈｚ），５．２５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．９Ｈｚ），５．９６（１Ｈ，ｓ），６．１０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ），７．４５−７．４８（３Ｈ，ｍ），７．５４−７．５７（３Ｈ，ｍ），７．７６（１Ｈ，ｂｒｓ），８．０６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），８．３４（１Ｈ，ｂｒｓ）
実施例２２
0004370164.tif 000101
３−ヒドロキシ−２−ピラジンカルボキサミド１．３９ｇを１，１，１，３，３，３−ヘキサメチルジシラザン１０ｍＬに懸濁させ、１時間還流した。冷却後、減圧下で溶媒を留去した後、トルエン５ｍＬを加え、減圧下溶媒を留去した。得られた残留物にアセトニトリル１５ｍＬ、β−Ｄ−リボフラノース１，２，３，５−テトラアセテート４．１４ｇ、トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル１．９９ｍＬを順次添加し、室温で２時間攪拌した後、β−Ｄ−リボフラノース１，２，３，５−テトラアセテート０．９５ｇを加え、さらに室温で１時間攪拌した。減圧下で溶媒を留去した後、クロロホルム、水を加え、有機層を分取し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下溶媒を留去し、得られた残留物に酢酸エチルを加え、沈殿物を濾取し、（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−４−（アセチロキシ）−２−［（アセチロキシ）メチル］−５−［３−（アミノカルボニル）−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］テトラヒドロ−３−フラニル  アセテート１．７３ｇを得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ値：２．１０（３Ｈ，ｓ），２．１６（３Ｈ，ｓ），２．１７（３Ｈ，ｓ），４．４０−４．５２（３Ｈ，ｍ），５．２９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），５．４８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．２，５．１Ｈｚ），６．０５（１Ｈ，ｂｒｓ），６．１６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ），７．７９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ），７．８１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ），８．９８（１Ｈ，ｂｒｓ），
実施例２３
0004370164.tif 000102
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−４−（アセチロキシ）−２−［（アセチロキシ）メチル］−５−［３−（アミノカルボニル）−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］テトラヒドロ−３−フラニル  アセテート０．４０ｇをテトラヒドロフランに懸濁させ、氷冷下、水素化ナトリウム（６０％ミネラルオイル懸濁液）０．０６ｇ、ピバロイルクロリド０．１４ｍＬを順次添加し、室温で２時間攪拌した後、水素化ナトリウム（６０％ミネラルオイル懸濁液）０．０６ｇ、ピバロイルクロリド０．１４ｍＬを添加し、室温で１時間攪拌し、さらに、水素化ナトリウム（６０％ミネラルオイル懸濁液）０．０６ｇ、ピバロイルクロリド０．１４ｍＬを添加し、室温で１時間攪拌した。反応液に酢酸エチル、水を加え、有機層を分取した後、水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下溶媒を留去し、得られた残留物をシリカゲルクロマトグラフィー［溶離液；ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝３：１］で精製し、黄色固体の（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−４−（アセチロキシ）−２−［（アセチロキシ）メチル］−５−［３−｛［（２，２−ジメチルプロパノイル）アミノ］カルボニル｝−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］テトラヒドロ−３−フラニル  アセテート０．１４ｇを得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ値：１．３０（９Ｈ，ｓ），２．１３（３Ｈ，ｓ），２．１６（６Ｈ，ｓ），４．３９−４．４９（２Ｈ，ｍ），４．５２−４．５５（１Ｈ，ｍ），５．２９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），５．４８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．７，５．６Ｈｚ），６．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．４Ｈｚ），７．８４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ），７．８６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ），１１．８２（１Ｈ，ｂｒｓ）
実施例２４
0004370164.tif 000103
ジエチル（２Ｓ）−２−｛［（３−ヒドロキシ−２−ピラジニル）カルボニル］アミノ｝ブタンジオエート０．１６ｇを１，１，１，３，３，３−ヘキサメチルジシラザン２ｍＬに懸濁させ、１時間還流した。冷却後、減圧下で溶媒を留去した後、トルエン１ｍＬを加え、減圧下溶媒を留去した。得られた残留物にアセトニトリル２ｍＬ、β−Ｄ−リボフラノース１，２，３，５−テトラアセテート０．２４ｇ、トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル０．１１ｍＬを順次添加し、室温で１時間攪拌した。クロロホルム、水を加え、有機層を分取した。得られた有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下に溶媒を留去した。得られた残留物をシリカゲルクロマトグラフィー［溶離液；クロロホルム：メタノール＝４０：１］で精製し、淡黄色固体のジエチル（２Ｓ）−２−｛［（４−｛（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，４−ビス（アセチロキシ）−５−［（アセチロキシ）メチル］テトラヒドロ−２−フラニル｝−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジニル）カルボニル］アミノ｝ブタンジオエート０．２５ｇを得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ値：１．２５（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），１．２８（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），２．１０（３Ｈ，ｓ），２．１５（３Ｈ，ｓ），２．１７（３Ｈ，ｓ），２．９８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．８，１７．２Ｈｚ），３．１１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１７．２Ｈｚ），４．１３−４．１８（２Ｈ，ｍ），４．２１−４．２８（２Ｈ，ｍ），４．４０−４．４７（２Ｈ，ｍ），４．４９−４．５１（１Ｈ，ｍ），５．０９−５．１２（１Ｈ，ｍ），５．２６−５．２８（１Ｈ，ｍ），５．４３−５．４４（１Ｈ，ｍ），６．２７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．３Ｈｚ），７．７７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），７．７９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），１０．１３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）
実施例２５
0004370164.tif 000104
ジエチル（２Ｓ）−２−｛［（４−｛（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，４−ビス（アセチロキシ）−５−［（アセチロキシ）メチル］テトラヒドロ−２−フラニル｝−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジニル）カルボニル］アミノ｝ブタンジオエート０．２１ｇをエタノールに溶解させ、氷冷下、ナトリウムエトキシド７５ｍｇを添加し、室温で１時間攪拌した後、攪拌を停止して、室温で一晩放置した。酢酸０．１３ｍＬ、水１ｍＬを順次添加した後、減圧下溶媒を留去し、得られた残留物をシリカゲルクロマトグラフィー［溶離液；クロロホルム：メタノール＝４０：１］で精製し、得られた残留物に酢酸エチル、ｎ−ヘキサンを加え、沈殿物を濾取し、黄色固体のジエチル（２Ｓ）−２−｛［（４−｛（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−５−［（アセチロキシ）メチル］−３，４−ジヒドロキシテトロラヒドロ−２−フラニル｝−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジニル）カルボニル］アミノ｝ブタンジオエート３９ｍｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１７３９，１６７０
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ値：１．１８（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），２．１０（３Ｈ，ｓ），２．８９（２Ｈ，ｂｒｓ），３．９０（１Ｈ，ｂｒｓ），４．０７−４．１５（６Ｈ，ｍ），４．３０−４．３８（２Ｈ，ｍ），４．８７−４．９２（１Ｈ，ｍ），５．３０−５．３４（１Ｈ，ｍ），５．７７−５．７９（１Ｈ，ｍ），５．９１（１Ｈ，ｓ），７．７０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．４Ｈｚ），７．９６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．４Ｈｚ），９．８３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）
実施例２６
0004370164.tif 000105
４−［（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（ヒドロキシメチル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミド０．３１ｇをＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド２ｍＬに溶解させ、Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−バリン０．３３ｇ、４−ジメチルアミノピリジン１２ｍｇ、１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド０．４１ｇを順次添加し、室温で２時間攪拌した。酢酸０．５ｍＬを添加し、室温で３０分攪拌した後、酢酸エチル、水を加え、不溶物を濾去した。有機層を分取し、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下溶媒を留去した。得られた残留物をシリカゲルクロマトグラフィー［溶離液；酢酸エチル］で精製し、黄色固体の｛（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−［３−（アミノカルボニル）−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル｝メチル（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−３−メチルブタノエート０．４０ｇを得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ値：０．８３−０．８６（６Ｈ，ｍ），１．３０（３Ｈ，ｓ），１．３８（９Ｈ，ｓ），１．５２（３Ｈ，ｓ），１．８６−１．９５（１Ｈ，ｍ），３．７９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），４．２７−４．３４（２Ｈ，ｍ），４．４６（１Ｈ，ｂｒｓ），４．７８−４．８０（１Ｈ，ｍ），５．０３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ），６．００（１Ｈ，ｓ），７．２４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），７．５４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．３Ｈｚ），７．７７（１Ｈ，ｂｒｓ），７．８６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．３Ｈｚ），８．２８（１Ｈ，ｂｒｓ）
実施例２７
0004370164.tif 000106
｛（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−［３−（アミノカルボニル）−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル｝メチル（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−３−メチルブタノエート０．２６ｇをメタノール３ｍＬ、水３ｍＬの混合溶媒に溶解させ、ダウエックス５０ＷＸ４−２００イオン交換樹脂（Ｈ＋ｆｏｒｍ）２．６ｇを添加し、室温で３時間攪拌した後、樹脂を濾去し、メタノール、次いで水で樹脂を洗浄した。得られた濾液と洗浄液を合わせ、減圧下溶媒を留去した後、トルエン２ｍＬを加え、減圧下溶媒を留去し、淡黄色固体の｛（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロ−２−フラニル｝メチル（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−３−メチルブタノエート７０ｍｇを得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ値：０．８７−０．９１（６Ｈ，ｍ），１．３８（９Ｈ，ｓ），１．９７−２．０５（１Ｈ，ｍ），３．５３（２Ｈ，ｂｒ），３．８５−３．９３（２Ｈ，ｍ），４．０７（１Ｈ，ｂｒｓ），４．１９（１Ｈ，ｂｒｓ），４．３１−４．３５（１Ｈ，ｍ），４．３９−４．４２（１Ｈ，ｍ），５．９２（１Ｈ，ｓ），７．３２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），７．６０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．１Ｈｚ），７．７６（１Ｈ，ｂｒｓ），７．８７（１Ｈ，ｄ，＝４．１Ｈｚ），８．３２（１Ｈ，ｂｒｓ）
実施例２８
0004370164.tif 000107
３−ヒドロキシ−２−ピラジンカルボキサミド１４．１ｇをトルエン１５０ｍＬ懸濁させ、還流下１時間撹拌し、共沸脱水した。室温まで冷却後、減圧下溶媒を留去した。得られた残留物に１，１，１，３，３，３−ヘキサメチルジシラザン４２．３ｍＬを加え、２時間加熱還流した。反応混合物を減圧下に濃縮した後、トルエン４５ｍＬを加え、減圧下に溶媒を留去した。さらにトルエン４５ｍＬで同じ操作を二回繰り返した。得られた残留物をアセトニトリル４０ｍＬに溶解させβ−Ｄ−リボフラノース１−アセテート２，３，５−トリベンゾエート４８．４ｇのアセトニトリル１００ｍＬ溶液に加え、室温で塩化スズ（ＩＶ）２５ｇを滴下した。５０℃で４．５時間撹拌し、室温まで冷却後、炭酸水素ナトリウム１００ｇ、水５００ｍＬおよび塩化メチレン２８０ｍＬの混合液に加えた。不溶物を濾過した後、有機層を分取した。得られた有機層を水５０ｍＬ飽和塩化ナトリウム水溶液５０ｍＬで順次洗浄後、減圧下に溶媒を留去した。得られた残留物に酢酸エチル２８０ｍＬおよび水３０ｍＬを加え、５０℃に加熱し、次いで５℃まで冷却し、析出物を濾取することによって、灰白色固体の［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ビス（ベンゾイロキシ）テトラヒドロ−２−フラニル］メチル  ベンゾエート４０．９ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１７２９，１６８３
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ値：４．６９−４．７８（２Ｈ，ｍ），４．８８−４．９２（１Ｈ，ｍ），５．９７−６．０５（２Ｈ，ｍ），６．３４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ），７．４０−７．５４（７Ｈ，ｍ），７．６２−７．７１（３Ｈ，ｍ），７．８０（１Ｈ，ｂｒｓ），７．８４−７．８６（２Ｈ，ｍ），７．９５−８．０３（５Ｈ，ｍ），８．２２（１Ｈ，ｍ）
実施例２９
0004370164.tif 000108
［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ビス（ベンゾイロキシ）テトラヒドロ−２−フラニル］メチル  ベンゾエート３５ｇのメタノール３３０ｍＬ懸濁液に室温で水酸化ナトリウム２．２ｇの水１７．５ｍＬ溶液を加えた。同温度で２時間撹拌した後、５℃まで冷却した。得られた析出物を濾取することによって、淡黄色固体の４−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２−フラニル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミド１２．５ｇ（水分０．４％）を得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：３４０６，１６５４
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ値：３．６５（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝２．６，５．１，１２．５Ｈｚ），３．８１（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝２．２，４．８，１２．１Ｈｚ），３．９６−４．００（２Ｈ，ｍ），４．０１−４．０３（１Ｈ，ｍ），５．１０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），５．２８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．９Ｈｚ），５．６４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ），５．９３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．６Ｈｚ），７．５４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），７．７４（１Ｈ，ｓ），８．２９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），８．３６（１Ｈ，ｓ）
実施例２９（２）
実施例２９で得られた４−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２−フラニル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミド１１ｇを水３００ｍＬ（４５℃）に溶解させ、活性炭１．１ｇを添加し、１０分間撹拌した。活性炭を濾過し、水２０ｍＬで二回洗浄した。濾液と洗液を合わせ、活性炭１．１ｇを添加し、１０分間撹拌した。活性炭を濾過し、水２０ｍＬで二回洗浄後、減圧下で濃縮した。水９０ｍＬを加えた後、濾取することによって、無色結晶の４−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２−フラニル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミド・一水和物９．３５ｇ（水分６．８％）を得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：３５７８，３３９９，３０９１，２９２９，１６７４１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ値：３．６５（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝２．６，５．１，１２．５Ｈｚ），３．８１（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝２．２，４．８，１２．１Ｈｚ），３．９６−４．００（２Ｈ，ｍ），４．０１−４．０３（１Ｈ，ｍ），５．１０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），５．２８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．９Ｈｚ），５．６４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ），５．９３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．６Ｈｚ），７．５４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），７．７４（１Ｈ，ｓ），８．２９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），８．３６（１Ｈ，ｓ）
実施例３０
0004370164.tif 000109
６−フルオロ−３−ヒドロキシ−２−ピラジンカルボキサミド０．２３ｇから参考例６と同様にして淡黄色固体の［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−５−フルオロ−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ビス（ベンゾイロキシ）テトラヒドロ−２−フラニル］メチル  ベンゾエート０．４７ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１７２６，１６９０
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ値：４．６−５．０（３Ｈ，ｍ），５．９−６．１（２Ｈ，ｍ），６．３３（１Ｈ，ｓ），７．３−８．２（１７Ｈ，ｍ），８．５３（１Ｈ，ｂｒｓ）
実施例３１
0004370164.tif 000110
６−フルオロ−３−ヒドロキシ−２−ピラジンカルボキサミド４．０ｇから、参考例６と同様にして、淡黄色固体の（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−４−（アセチロキシ）−２−［（アセチロキシ）メチル］−５−［３−（アミノカルボニル）−５−フルオロ−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］テトラヒドロ−３−フラニルアセテート７．３７ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１７４８，１７１５，１６６２
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ値：２．０４（３Ｈ，ｓ），２．０８（３Ｈ，ｓ），２．１８（３Ｈ，ｓ）４．４７−４．５８（３Ｈ，ｍ），５．２０−５．３４（１Ｈ，ｍ），５．５１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．３，５．０Ｈｚ），６．１６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ），６．４１（１Ｈ，ｂｒｓ），７．９５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ），８．９４（１Ｈ，ｂｒｓ）
実施例３２
0004370164.tif 000111
［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−５−フルオロ−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ビス（ベンゾイロキシ）テトラヒドロ−２−フラニル］メチル  ベンゾエート０．１５ｇをメタノール２．０ｍＬに溶解させ、氷冷下、２８％ナトリウムメトキシドメタノール溶液０．１４ｇを添加し、同温度で２０分間、室温で３０分間撹拌した。反応混合物に１ｍｏｌ／Ｌ塩酸０．７５ｍＬを加え、減圧下に溶媒を留去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー［溶離液；クロロホルム：メタノール＝５：１］で精製後、イソプロパノールおよびジエチルエーテルを加え、濾取し、４−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２−フラニル］−６−フルオロ−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミド４０ｍｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１６８６
実施例３３
0004370164.tif 000112
３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキシミダミド０．２０ｇおよび硫酸アンモニウム１０ｍｇを１，１，１，３，３，３−ヘキサメチルジシラザン２．０ｍＬに懸濁させ、窒素気流下、１０分間加熱還流した。硫酸アンモニウム９．０ｍｇを加え、さらに２時間加熱還流した。反応混合物を放冷後、減圧下に溶媒を留去した。得られた残留物をアセトニトリル４．０ｍＬに溶解させ、β−Ｄ−リボフラノース−１，２，３，５−テトラアセテート０．４６ｇおよび塩化スズ（ＩＶ）０．３４ｍＬを順次添加し、室温で３時間撹拌した。反応混合物にトリフルオロ酢酸１０μＬ、水１．０ｍＬを加え、減圧下に溶媒を留去した。３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキシミダミド０．０５ｇを用いて同様の反応を繰り返して得た反応混合物と合わせ、逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィー［溶離液；アセトニトリル：水＝１：４］で精製し、淡黄色固形物の（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−４−（アセチロキシ）−２−［（アセチロキシ）メチル］−５−［３−［アミノ（イミノ）メチル］−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］テトラヒドロ−３−フラニル  アセテート０．３４ｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：３３９２，１７５０，１６８５
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ値：２．１１（３Ｈ，ｓ），２．１６（６Ｈ，ｓ），４．４−４．７（３Ｈ，ｍ），５．３１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ），５．５−５．６（１Ｈ，ｍ），６．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ），７．８−８．０（１Ｈ，ｍ），８．１−８．３（１Ｈ，ｍ），８．６７（１Ｈ，ｂｒｓ），１０．４５（２Ｈ，ｂｒｓ）
実施例３４
0004370164.tif 000113
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−４−（アセチロキシ）−２−［（アセチロキシ）メチル］−５−［３−［アミノ（イミノ）メチル］−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］テトラヒドロ−３−フラニル  アセテート０．１０ｇを氷冷下、２５％アンモニア水５．０ｍＬを加え、同温度で２時間撹拌した。反応混合物に酢酸４．９ｍＬを加え、減圧下に溶媒を留去した。（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−４−（アセチロキシ）−２−［（アセチロキシ）メチル］−５−［３−［アミノ（イミノ）メチル］−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］テトラヒドロ−３−フラニル  アセテート２０ｍｇを用いて同様に反応を行ったものと合わせ、逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィー［溶離液；水］で精製した。得られた固形物に１ｍｏｌ／Ｌ塩酸５．０ｍＬを加え、減圧下に溶媒を留去し、さらに１ｍｏｌ／Ｌ塩酸５．０ｍＬを加え、減圧下に溶媒を留去した。得られた残留物にエタノールを加え、固形物を濾取し、淡黄色固形物の４−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２−フラニル］−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキシイミダミドの塩酸塩３０ｍｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：３３７４，３２８１，１６９０
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ値：３．７−３．９（２Ｈ，ｍ），３．９−４．２（３Ｈ，ｍ），５．１−５．３（１Ｈ，ｍ），５．３−５．６（１Ｈ，ｍ），５．６−５．８（１Ｈ，ｍ），５．９０（１Ｈ，ｓ），７．８６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），８．７６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），９．４４（４Ｈ，ｂｒｓ）
実施例３５
0004370164.tif 000114
｛（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ビス（ベンゾイロキシ）テトラヒドロ−２−フラニル｝メチル  ベンゾエート２００ｍｇから、実施例１８と同様にして｛（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロ−２−フラニル｝メチル  ベンゾエート３７ｍｇを得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ値：４．０６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．６，１２．７），４．１２−４．１５（１Ｈ，ｍ），４．２８−４．３２（１Ｈ，ｍ），４．５９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．１，１２．２），４．６７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．７，１２．５），５．４０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．３），５．７６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．９），５．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０），７．３７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４），７．５７（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８），７．７１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．１，７．６），７．７５（１Ｈ，ｂｒｓ），７．８５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．２），８．０１（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１．０，７．４），８．３０（１Ｈ，ｂｒｓ）
実施例３６
0004370164.tif 000115
｛（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロ−２−フラニル｝メチル（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−３−メチルブタノエート１００ｍｇをトリフルオロ酢酸１ｍＬと水０．１ｍＬの混合溶媒に溶解させ、室温で１時間攪拌した。減圧下でトリフルオロ酢酸を留去し、水を加えた後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液でｐＨ８に調整し、逆相シリカゲルクロマトグラフィー［溶離液；１０％アセトニトリル水溶液］で精製した後、エタノールで共沸し、白色固体の｛（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロ−２−フラニル｝メチル（２Ｓ）−２−アミノ−３−メチルブタノエート５９ｍｇを得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１：１７２４，１６７０，１６５３
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，Ｄ２Ｏ）δ値：０．８４（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），０．８９（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），１．８２−１．９０（１Ｈ，ｍ），３．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ），３．８８−３．９４（１Ｈ，ｍ），４．０９（１Ｈ，ｓ），４．１７−４．２０（１Ｈ，ｍ），４．３６−４．３８（２Ｈ，ｍ），５．９１（１Ｈ，ｓ），７．５８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），７．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０）
実施例３７
0004370164.tif 000116
４−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）］−３，４−ジヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２−フラニル］−６−フルオロ−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２−ピラジンカルボキサミド５８ｍｇをりん酸トリメチル１ｍＬに懸濁させ、氷冷下、ピリジン３７μＬ、オキシ塩化リン４９μＬを順次添加し、同温度で１時間攪拌した。１ｍｏｌ／Ｌ炭酸水素トリエチルアンモニウム水溶液３ｍＬを加え、１５分攪拌した後、減圧下で溶媒を留去し、イオン交換カラムクロマトグラフィー［溶離液；０．１ｍｏｌ／Ｌ炭酸水素トリエチルアンモニウム水溶液］、次いで、逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィー［溶離液；水］で精製し、固体の［（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−５−フルオロ−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロ−２−フラニル］メチルホスフェートのトリエチルアンモニウム塩３９ｍｇを得た。
上記で得られたモノリン酸・トリエチルアンモニウム塩３６ｍｇのメタノール０．５ｍＬ懸濁液に、室温で過塩素酸ナトリウム０．１４ｇのアセトン３ｍＬ溶液を加え、３０分攪拌した。析出物を濾取し、アセトンで洗浄することにより、淡黄色固体の［（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−［３−（アミノカルボニル）−５−フルオロ−２−オキソ−１（２Ｈ）−ピラジニル］−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロ−２−フラニル］メチルホスフェートのナトリウム塩２７ｍｇを得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ値：４．１３−４．１８（１Ｈ，ｍ），４．２９−４．４０（４Ｈ，ｍ），６．１０（１Ｈ，ｓ），８．４６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．９Ｈｚ）
産業上の利用可能性
上記の試験例により、ピラジンヌクレオチド・トリリン酸類似体が、ウイルスポリメラーゼ阻害試験において、ウイルスポリメラーゼを特異的に阻害する活性を示すこと、また、一般的にヌクレオチドは細胞膜を透過して細胞内に移行できないことが知られているが、本発明で示す置換基で修飾したピラジンカルボキサミドヌクレオチドは細胞内に移行し、抗ウイルス活性を示すこと、さらに、ピラジンヌクレオシドは、投与した動物の生体内でピラジンヌクレオチド・トリリン酸類似体に変換されることが明らかとなった。従って、本発明のヌクレオチドキナーゼなどのキナーゼで生成させたピラジンヌクレオチド・ピラジンヌクレオシド類似体またはその塩を利用することを特徴とするウイルス増殖阻害および／または殺ウイルス方法は、ウイルス感染症の治療法として有用である。また、本発明の新規なピラジンヌクレオチド・ピラジンヌクレオシド類似体またはその塩はウイルス感染症の予防・治療薬として有用である。