(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
0004257383.tif 000064
（式中、Ｒ１はアミノ酸残基を示し、Ｒ２は水素原子又はアルキル基を示し、Ｒ３は水素原子、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アルコキシ基、ハロゲン原子、ニトリル基又は水酸基を示し、Ｒ４は水素原子、ハロゲン原子又は水酸基を示す。また、前記アミノ酸残基はグリシル、サルコシル、アラニル、１−アミノシクロプロパン−１−カルボニル、１−アミノシクロブタン−１−カルボニル、β−アラニル、γ−アミノブチロイル、α−アミノブチリル、バリル、ノルバリル、ロイシル、イソロイシル、ノルロイシル、tert−ロイシル、フェニルアラニル、ホモフェニルアラニル、アスパルチル、グルタミル、α，β−ジアミノプロピオニル、α，γ−ジアミノブチロイル、オルニチル、リジル、アルギニル、ホモアルギニル、セリル、スレオニル、チロシル、プロリル、トリプトフィル、及びヒスジチルから選ばれる基であって、不斉炭素を有する場合はＬ−体、Ｄ−体、またはラセミ体である。）
で表されるホモピペラジン誘導体、その酸付加塩又はそれらの溶媒和物。
【請求項２】
アミノ酸残基がグリシル及びサルコシルから選ばれる基である請求項１記載のホモピペラジン誘導体、その酸付加塩又はそれらの溶媒和物。
【請求項３】
Ｒ２が２−(Ｓ)−メチルである請求項１または２に記載のホモピペラジン誘導体、その酸付加塩又はそれらの溶媒和物。
【請求項４】
２−(Ｓ)−１−(４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル)−４−グリシル−２−メチルホモピペラジン；２−(Ｓ)−１−(４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル)−２−メチル−４−(Ｎ−メチルグリシル)ホモピペラジン；２−(Ｓ)−４−(Ｌ−アラニル)−１−(４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル)−２−メチルホモピペラジン；２−(Ｓ)−４−（Ｄ−アラニル）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン；２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチル−４−（Ｌ−バリル）ホモピペラジン；２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチル−４−（Ｄ−バリル）ホモピペラジン；２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−４−（Ｌ−ロイシル）−２−メチルホモピペラジン；２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−４−（Ｄ−ロイシル）−２−メチルホモピペラジン；２−（Ｓ）−４−（β−アラニル）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン；２−（Ｓ）−４−（１−アミノシクロプロパン−１−カルボニル）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン；２−（Ｓ）−４−（Ｌ−α−アミノブチリル）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン；２−（Ｓ）−４−（Ｄ−α−アミノブチリル）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン；２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチル−４−（Ｌ−ノルロイシル）ホモピペラジン；２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチル−４−（Ｄ−ノルロイシル）ホモピペラジン；４−（グリシル）−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン；４−（β−アラニル）−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン；４−（Ｌ−アラニル）−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン；４−（Ｄ−アラニル）−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン；１−（イソキノリン−５−スルホニル）−４−（Ｌ−バリル）ホモピペラジン；１−（イソキノリン−５−スルホニル）−４−（Ｄ−バリル）ホモピペラジン；４−（Ｌ−α，β−ジアミノプロピオニル）−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン；４−（Ｄ−α，β−ジアミノプロピオニル）−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン；２−（Ｓ）−４−（Ｌ−α，β−ジアミノプロピオニル）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン；２−（Ｓ）−４−（Ｄ−α，β−ジアミノプロピオニル）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン；４−（グリシル）−１−（４−メチルイソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン；２−（Ｓ）−４−（グリシル）−１−（４−メチルイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン；２−（Ｓ）−１−（４−ブロモイソキノリン−５−スルホニル）−４−（グリシル）−２−メチルホモピペラジン；又は２−（Ｓ）−１−（４−エテニルイソキノリン−５−スルホニル）−４−（グリシル）−２−メチルホモピペラジン、それらの酸付加塩及びそれらの溶媒和物から選ばれる化合物。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物、その酸付加塩又はそれらの溶媒和物を有効成分として含有する医薬。
【請求項６】
Rhoキナーゼの活性化に起因する疾患の治療薬である請求項５記載の医薬。
【請求項７】
疾患が高血圧症、肺高血圧症、脳血管攣縮、狭心症、心不全、動脈硬化症、動脈硬化症、緑内障、排尿障害、喘息、及び勃起不全から選ばれるものである請求項６記載の医薬。
【請求項８】
請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物、その酸付加塩又はそれらの溶媒和物、及び薬学的に許容される担体を含有する医薬組成物。
【請求項９】
Rhoキナーゼの活性化に起因する疾患の治療薬医薬組成物である請求項８記載の医薬組成物。
【請求項１０】
高血圧症、肺高血圧症、脳血管攣縮、狭心症、心不全、動脈硬化症、緑内障、排尿障害、喘息、又は勃起不全の治療薬医薬組成物である請求項８記載の医薬組成物。
【請求項１１】
請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物、その酸付加塩又はそれらの溶媒和物の、医薬製造のための使用方法。
【請求項１２】
医薬が、Rhoキナーゼの活性化に起因する疾患の治療薬である請求項１１記載の使用方法。
【請求項１３】
医薬が、高血圧症、肺高血圧症、脳血管攣縮、狭心症、心不全、動脈硬化症、緑内障、排尿障害、喘息、又は勃起不全の治療薬である請求項１１記載の使用方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、高選択的Ｒｈｏキナーゼ阻害作用を有し、高血圧症、肺高血圧症、脳血管攣縮、狭心症、心不全、動脈硬化症、緑内障、排尿障害、喘息、及び勃起不全等の疾患治療薬として有用な化合物及びそれを含有する医薬に関する。
【背景技術】
【０００２】
低分子量ＧＴＰ結合タンパク質の一つであるＲｈｏは、細胞内において活性型のＲｈｏ−ＧＴＰ又は不活性型のＲｈｏ−ＧＤＰとして存在し、種々の細胞膜受容体からのシグナルによって活性化されたＲｈｏキナーゼにより、不活性型のＲｈｏ−ＧＤＰから活性型のＲｈｏ−ＧＴＰへと変換される。活性型のＲｈｏ−ＧＴＰは、アクトミオシン系を介した平滑筋収縮、細胞運動、細胞接着、細胞の形態変化、細胞増殖等の多彩な細胞現象の分子スイッチとして機能していることが明らかにされている。従って、Ｒｈｏキナーゼを阻害すれば、Ｒｈｏを介する情報伝達経路の下流に存在する各種細胞現象の応答を抑制し、Ｒｈｏが関与する疾患の治療に役立つことができると考えられている。
例えば、Ｒｈｏキナーゼが活性化されると平滑筋は収縮するが、この酵素を阻害すると、平滑筋は弛緩する。この作用機序は、Ｇタンパク質（グアニンヌクレオチド結合性調節タンパク質）を介したＣａイオン感受性亢進が選択的に阻害され、細胞内Ｃａイオン感受性が低下するためと考えられている。Ｒｈｏキナーゼが、細胞内のＣａイオン濃度に依存しない平滑筋収縮機構の一つであるＣａイオン感受性亢進機構に選択的に働いていることは論文等により報告されている（例えば非特許文献１参照）。そのため、Ｒｈｏキナーゼを阻害する化合物は、Ｃａイオン感受性を低下させることにより効果を発揮する新しい機序の疾患治療剤、例えば高血圧症等の疾患治療剤として有望視されている。【０００３】
さらに近年の研究により、Ｒｈｏキナーゼを阻害することによる血圧降下作用（例えば非特許文献２、３参照）のみならず、肺高血圧症に有効である事例（例えば非特許文献４〜６参照）、脳血管攣縮に有効である事例（例えば非特許文献７、８参照）、狭心症に有効である事例（例えば非特許文献９〜１１参照）、緑内障に有効である事例（例えば非特許文献１２〜１４参照）、排尿障害に有効である事例（例えば非特許文献１５参照）、喘息治療薬として有効である事例（例えば非特許文献１６〜１９参照）、勃起不全に有効である事例（例えば非特許文献２０、２１参照）等も報告されている。【０００４】
現在、Ｒｈｏキナーゼ阻害剤として知られている化合物は、例えば特許文献１及び２に開示されている。しかしながら、これらの化合物はＲｈｏキナーゼ阻害活性のみならず、他のキナーゼ、例えばプロテインキナーゼＡ（ＰＫＡ）やプロテインキナーゼＧ（ＰＫＧ）等に対する阻害活性も有している。ＰＫＡは、多くのシグナル伝達過程でｃＡＭＰの作用を伝達する重要な役割を担っている。例えばホルモンが受容体に結合すると、細胞内の促進性Ｇタンパク質が活性化され、アデニル酸シクラーゼが活性化される。ついで、ｃＡＭＰが生成され、ＰＫＡにより細胞内の物質代謝や物質輸送に拘わる酵素やタンパク質のセリン・スレオニンがリン酸化され、生理機能が発現する。また、ＰＫＧも多くのシグナル伝達過程でｃＧＭＰの作用を伝達する重要な役割を担っている。例えば心血管系においては、血管内皮細胞由来の弛緩物質によりグアニル酸シクラーゼが活性化されｃＧＭＰが生成される。次いで、ＰＫＧにより細胞内のタンパク質のセリン・スレオニンがリン酸化され細胞内Ｃａ濃度が低下し、血管弛緩・血圧降下に至る。神経細胞においても、同様の経路が活性化され、アポトーシスが阻害される。このように、ＰＫＡやＰＫＧは細胞や生体の生存に重要な役割を担っており、活性が阻害されると重篤な副作用が発生する可能性が示唆される。【０００５】
従って、Ｒｈｏキナーゼ阻害剤を疾患治療薬として用いることを想定すると、疾患に関与するＲｈｏキナーゼのみを選択的に阻害し、その他のキナーゼの活性にはあまり影響を及ぼさない化合物が望まれていた。
【特許文献１】特開平１１−３４９４８２号公報
【特許文献２】国際公開第９０／５７２３号パンフレット
【非特許文献１】Ｎａｔｕｒｅ  ３８９（１９９７）：９９０
【非特許文献２】Ｊ．Ｃｅｒｅｂ．Ｂｌｏｏｄ  Ｆｌｏｗ  ２１（２００１）：８７６
【非特許文献３】Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ  ３８（２００１）：１３０７
【非特許文献４】Ａｔｈｅｒｏｓｃｉｅｒｏｓｉｓ  Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｓ  ４（２００３）：１７０
【非特許文献５】Ｉｒ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｓｃｉ．１７２（２００３）：２０
【非特許文献６】Ｃｉｒｃ．Ｒｅｓ．９４（２００４）：３８５
【非特許文献７】Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１３０（２０００）：２１９
【非特許文献８】Ｓｔｒｏｋｅ  ３２（２００１）：２９１３
【非特許文献９】Ｊｐｎ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．８７（２００１）：３４
【非特許文献１０】Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１３４（２００１）：１７２４
【非特許文献１１】Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  １０５（２００２）：１５４５
【非特許文献１２】Ｉｎｖｅｓｔ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．Ｖｉｓｕａｌ  Ｓｃｉ．４２（２００１）：１３７
【非特許文献１３】Ａｒｃｈ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．１１９（２００１）
【非特許文献１４】１１７１、Ｉｎｖｅｓｔ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．Ｖｉｓｕａｌ  Ｓｃｉ．４２（２００１）：１０２９
【非特許文献１５】Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１４３（２００４）：４３１
【非特許文献１６】Ｊｐｎ．Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｏｌ．４８（１９９９）：１０７９
【非特許文献１７】Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．３８９（２０００）：１０３
【非特許文献１８】Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４０６（２０００）：２７３
【非特許文献１９】Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１３２（２００１）：１１１
【非特許文献２０】Ｉｎｔ．Ｊ．Ｉｍｐｏｔ．Ｒｅｓ．１３（２００１）：６７
【非特許文献２１】Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１３３（２００１）：４５５
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、強力かつ高選択的なＲｈｏキナーゼ阻害活性を有する化合物及びそれを含有する医薬を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者等は、かかる実情に鑑み鋭意研究を行なった結果、下記一般式（１）で表される化合物が、優れたＲｈｏキナーゼ阻害活性を有し、かつ他のキナーゼをほとんど阻害せず、高血圧症、肺高血圧症、脳血管攣縮、狭心症、心不全、動脈硬化症、緑内障、排尿障害、喘息、及び勃起不全等の疾患治療薬として有用であることを見出し、本発明を完成させた。
すなわち、本発明は、次の一般式（１）【０００８】
【化１】
0004257383.tif 000002
【０００９】
（式中、Ｒ１はアミノ酸残基を示し、Ｒ２は水素原子又はアルキル基を示し、Ｒ３は水素原子、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アルコキシ基、ハロゲン原子、ニトリル基又は水酸基を示し、Ｒ４は水素原子、ハロゲン原子又は水酸基を示す。）
で表されるホモピペラジン誘導体、その酸付加塩又はそれらの溶媒和物を提供するものである。【００１０】
また、本発明は上記一般式（１）で表わされる化合物、その酸付加塩又はそれらの溶媒和物を有効成分とする医薬を提供するものである。
また、本発明は上記一般式（１）で表わされる化合物、その酸付加塩又はそれらの溶媒和物を有効成分とするＲｈｏキナーゼの活性化に起因する疾患の治療薬を提供するものである。
また、本発明は上記一般式（１）で表される化合物、その酸付加塩又はそれらの溶媒和物、及び薬学的に許容される担体を含有する医薬組成物を提供するものである。
また、本発明は上記一般式（１）で表される化合物、その酸付加塩又はそれらの溶媒和物の医薬製造のための使用を提供するものである。
さらにまた、本発明は、上記一般式（１）で表される化合物、その酸付加塩又はそれらの溶媒和物を投与するＲｈｏキナーゼの活性化に起因する疾患の処置方法を提供するものである。
【発明の効果】
【００１１】
本発明の化合物（１）は、Ｒｈｏキナーゼを高選択的に阻害する作用を有し、高血圧症、肺高血圧症、脳血管攣縮、狭心症、心不全、動脈硬化症、緑内障、排尿障害、喘息、及び勃起不全等の疾患治療薬として有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
一般式（１）中、Ｒ１で示されるアミノ酸残基としては、中性アミノ酸、酸性アミノ酸、塩基性アミノ酸のいずれの残基でもよい。例えばグリシル、サルコシル、アラニル、１−アミノシクロプロパン−１−カルボニル、１−アミノシクロブタン−１−カルボニル、β−アラニル、γ−アミノブチロイル、α−アミノブチリル、バリル、ノルバリル、ロイシル、イソロイシル、ノルロイシル、ｔｅｒｔ−ロイシル、フェニルアラニル、ホモフェニルアラニル、アスパルチル、グルタミル、α，β−ジアミノプロピオニル、α，γ−ジアミノブチロイル、オルニチル、リジル、アルギニル、ホモアルギニル、セリル、スレオニル、チロシル、プロリル、トリプトフィル、ヒスジチル等が挙げられる。また、上記のアミノ酸残基中、不斉炭素のあるものに関してはＬ−体、Ｄ−体いずれでもよく、ラセミ体も許容される。このうち、グリシル、サルコシルが特に好ましい。【００１３】
一般式（１）中、Ｒ２で示されるアルキル基としては、Ｃ１−Ｃ６の直鎖または分岐鎖のアルキル基が挙げられ、例えばメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル等が挙げられる。【００１４】
一般式（１）中、Ｒ３で示されるアルキル基としては、Ｃ１−Ｃ６の直鎖または分岐鎖のアルキル基が挙げられ、例えば前記のアルキル基等が挙げられる。これらのうち、メチル基が特に好ましい。
一般式（１）中、Ｒ３で示されるアルケニル基としては、Ｃ２−Ｃ６の直鎖または分岐鎖のアルケニル基が挙げられ、例えばビニル、アリル、ブテニル、ペンテニル、ヘキセニル等が挙げられる。
一般式（１）中、Ｒ３で示されるアルキニル基としては、Ｃ２−Ｃ６の直鎖または分岐鎖のアルキニル基が挙げられ、例えばエチニル、プロパルギル、ブチニル等が挙げられる。これらのうち、エチニル基が特に好ましい。
一般式（１）中、Ｒ３で示されるアルコキシ基としては、Ｃ１−Ｃ６の直鎖または分岐鎖のアルコキシ基が挙げられ、例えばメトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ等が挙げられる。これらのうち、メトキシ基が特に好ましい。
一般式（１）中、Ｒ３で示されるハロゲン原子としては、例えばフッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子が挙げられる。これらのうち、フッ素原子が特に好ましい。
Ｒ３のホモピペラジン環上の置換位置に関しては、２−位、３−位、５−位、６−位、７−位いずれでも良く、又置換基の立体配置は（Ｓ）、（Ｒ）いずれでも良い。これらのうち２−（Ｓ）−メチルが特に好ましい。【００１５】
一般式（１）中、Ｒ４で示されるハロゲン原子としては、Ｒ３で示される前記ハロゲン原子が挙げられる。【００１６】
本発明化合物（１）の酸付加塩としては、薬学上許容される塩であれば特に制限されないが、例えば塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩のような鉱酸の酸付加塩；安息香酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、シュウ酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、酢酸塩のような有機酸の酸付加塩を挙げることができる。
また、本発明化合物（１）は、水和物に代表される溶媒和物の形態で存在し得るが、当該溶媒和物も本発明に包含される。更に、本発明化合物は、シス、トランスの幾何異性体や光学異性体が存在する場合もあるが、これらの異性体も本発明に含まれる。【００１７】
本発明化合物のうち、Ｒｈｏキナーゼ選択性が高くより好ましい化合物としては、２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−４−グリシル−２−メチルホモピペラジン；２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチル−４−（Ｎ−メチルグリシル）ホモピペラジン；２−（Ｓ）−４−（Ｌ−アラニル）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン；２−（Ｓ）−４−（Ｄ―アラニル）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン；２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチル−４−（Ｌ−バリル）ホモピペラジン；２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチル−４−（Ｄ−バリル）ホモピペラジン；２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−４−（Ｌ−ロイシル）−２−メチルホモピペラジン；２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−４−（Ｄ−ロイシル）−２−メチルホモピペラジン；２−（Ｓ）−４−（β−アラニル）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン；２−（Ｓ）−４−（１−アミノシクロプロパン−１−カルボニル）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン；２−（Ｓ）−４−（Ｌ−α−アミノブチリル）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン；２−（Ｓ）−４−（Ｄ−α−アミノブチリル）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン；２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチル−４−（Ｌ−ノルロイシル）ホモピペラジン；２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチル−４−（Ｄ−ノルロイシル）ホモピペラジン；４−（グリシル）−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン；４−（β−アラニル）−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン；４−（Ｌ−アラニル）−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン；４−（Ｄ−アラニル）−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン；１−（イソキノリン−５−スルホニル）−４−（Ｌ−バリル）ホモピペラジン；１−（イソキノリン−５−スルホニル）−４−（Ｄ−バリル）ホモピペラジン；４−（Ｌ−α，β−ジアミノプロピオニル）−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン；４−（Ｄ−α，β−ジアミノプロピオニル）−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン；２−（Ｓ）−４−（Ｌ−α，β−ジアミノプロピオニル）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン；２−（Ｓ）−４−（Ｄ−α，β−ジアミノプロピオニル）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン；４−（グリシル）−１−（４−メチルイソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン；２−（Ｓ）−４−（グリシル）−１−（４−メチルイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン；２−（Ｓ）−１−（４−ブロモイソキノリン−５−スルホニル）−４−（グリシル）−２−メチルホモピペラジン；又は２−（Ｓ）−１−（４−エテニルイソキノリン−５−スルホニル）−４−（グリシル）−２−メチルホモピペラジン、それらの酸付加塩及びそれらの溶媒和物から選ばれる化合物が挙げられる。【００１８】
本発明化合物（１）は、例えば次に示す方法に従って製造することができる。すなわち、化合物（２）と保護アミノ酸（３）を縮合反応させて化合物（４）を得、これを適当な脱保護法で処理することにより本発明化合物（１）を得ることができる。なお、本発明の化合物の出発原料である化合物（２）はＷＯ９７／２８１３０号公報記載の方法、特開昭６１−２２７５８１号公報記載の方法、またはそれらの類似の方法によって合成することができる。【００１９】
【化２】
0004257383.tif 000003
【００２０】
（式中、Ｒ１〜Ｒ４は前記と同じ意味を示し、Ｘはアミノ保護基を示す。）
上記式中、Ｘで示されるアミノ保護基としては、例えばベンジルオキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基等、９−フルオレニルメトキシカルボニル基、ホルミル基、アセチル基、トリフルオロアセチル基、トリチル基等が挙げられ、また、アミノ酸Ｒ１の側鎖に官能基がある場合は、適当な保護基で保護されているものとする。
以下、上記各反応工程毎に説明する。【００２１】
化合物（２）と保護アミノ酸（３）との縮合反応は、例えばジクロロメタン、クロロホルム等のハロゲン化炭化水素類；テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジエチルエーテル等のエーテル類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、アセトニトリル等の溶媒中、冷却下に必要量のジシクロヘキシルカルボジイミド又は塩酸Ｎ−エチル−Ｎ’−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド等の水溶性カルボジイミド（ＷＳＣ／ＨＣｌ）等の縮合剤を反応させる公知の方法で行われる。本反応においては、必要量の炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸セシウム等の無機塩基；トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、トリエチレンジアミン等の有機塩基の存在下に行うのが好ましい。
保護アミノ酸（３）の使用割合は、化合物（２）に対して、１．０〜１．５当量使用するのが好ましい。
反応は０℃〜溶媒の沸点で１時間〜２４時間、好ましくは１０℃〜３０℃で６〜１２時間反応させることにより行なわれる。【００２２】
得られた化合物（４）の脱保護反応は、保護基に応じた既知の方法、例えば酸処理、アルカリ処理又は接触還元により行われる。例えばｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基で保護されている場合は塩化水素の酢酸エチル溶液等で処理することで、本発明化合物（１）を得ることができる。
なお、アミノ酸Ｒ１の側鎖の官能基が保護基で保護されている場合も同様である。【００２３】
本発明化合物（１）は、さらに必要に応じて再結晶法、カラムクロマトグラフィー等の通常の精製手段を用いて精製することができる。また、常法によって前記した所望の塩又は溶媒和物とすることもできる。【００２４】
かくして得られる本発明化合物（１）、その酸付加塩又はそれらの溶媒和物は、後記試験例１に示すように、ＰＫＡ、ＰＫＧ等の他のキナーゼに対する阻害活性が極めて弱く、Ｒｈｏキナーゼに高選択的な阻害活性を有し、高血圧症、肺高血圧症、脳血管攣縮、狭心症、心不全、動脈硬化症、緑内障、排尿障害、喘息、及び勃起不全等の疾患治療のための医薬として有用である。【００２５】
本発明の医薬は、本発明化合物（１）、その塩又はその水和物を有効成分とするものであり、この投与形態は、特に限定されず治療目的に応じて適宜選択でき、例えば経口剤、注射剤、坐剤、軟膏剤、吸入剤、点眼剤、点鼻剤、貼付剤のいずれでも良く、これらの投与形態に適した組成物は、薬学的に許容される担体を配合し、当業者に公知慣用の製剤方法により製造できる。【００２６】
経口用固形製剤を調製する場合は、本発明化合物（１）に賦形剤、必要に応じて結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味剤、矯臭剤等を加えた後、常法により錠剤、被覆錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等を製造することができる。そのような添加剤としては、当該分野で一般的に使用されているものでよく、例えば、乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、微結晶セルロース、珪酸等の賦形剤；水、エタノール、プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン液、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、メチルセルロース、エチルセルロース、シェラック、リン酸カルシウム、ポリビニルピロリドン等の結合剤；乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、乳糖等の崩壊剤；精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ砂、ポリエチレングリコール等の滑沢剤；白糖、橙皮、クエン酸、酒石酸等の矯味剤が挙げられる。【００２７】
経口用液体製剤を調製する場合は、本発明化合物（１）に矯味剤、緩衝剤、安定化剤、矯臭剤等を加えて常法により内服液剤、シロップ剤、エリキシル剤等を製造することができる。この場合矯味剤としては上記に挙げられたもので良く、クエン酸ナトリウム等の緩衝剤；トラガント、アラビアゴム、ゼラチン等の安定化剤が挙げられる。【００２８】
注射剤を調製する場合は、本発明化合物（１）にｐＨ調節剤、緩衝剤、安定化剤、等張化剤、局所麻酔剤等を添加し、常法により皮下、筋肉及び静脈内注射剤を製造することができる。この場合のｐＨ調製剤及び緩衝剤としてはクエン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、リン酸ナトリウム等が挙げられる。安定化剤としてはピロ亜硫酸ナトリウム、ＥＤＴＡ、チオグリコール酸、チオ乳酸等が挙げられる。局所麻酔剤としては塩酸プロカイン、塩酸リドカイン等が挙げられる。等張化剤としては、塩化ナトリウム、ブドウ糖等が挙げられる。【００２９】
坐薬を調製する場合は、本発明化合物（１）に当業界において公知の製剤用担体、例えば、ポリエチレングリコール、ラノリン、カカオ脂、脂肪酸トリグリセライド等を、さらに必要に応じてツイーン（登録商標）のような界面活性剤等を加えた後、常法により製造することができる。【００３０】
軟膏剤を調製する場合は、本発明化合物（１）に通常使用される基剤、安定剤、湿潤剤、保存剤等が必要に応じて配合され、常法により混合、製剤化される。基剤としては、流動パラフィン、白色ワセリン、サラシミツロウ、オクチルドデシルアルコール、パラフィン等が挙げられる。保存剤としては、ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチル、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチル、ｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピル等が挙げられる。
上記以外に、常法により吸入剤、点眼剤、点鼻剤とすることもできる。【００３１】
本発明の医薬の投与量は年齢、体重、症状、投与形態及び投与回数などによって異なるが、通常は成人に対して本発明化合物（１）として１日１〜１０００ｍｇを１回又は数回に分けて経口投与又は非経口投与するのが好ましい。
【実施例】
【００３２】
以下、本発明について実施例をあげて具体的に説明するが、本発明はこれらによって何等限定されるものではない。【００３３】
［製造例１］
２−（Ｓ）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシル］−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジンの合成：【００３４】
【化３】
0004257383.tif 000004
【００３５】
２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（３９６ｍｇ）、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシン（２１０ｍｇ）、トリエチルアミン（３３５μＬ）をクロロホルム（５ｍＬ）に溶解し、氷冷下塩酸Ｎ−エチル−Ｎ’−（３―ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（２３０ｍｇ）を加えた。混合物を０℃で１時間、次いで室温で一夜撹拌した。混合物に水を加えて有機層を分離した後、水槽にクロロホルムを加えて抽出し、有機層を併せて飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶媒：酢酸エチル）で精製し標記化合物を無色油状物として得た。
収量：４４５ｍｇ（９６％）【００３６】
［製造例２］
２−（Ｓ）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メチルグリシル］−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジンの合成：【００３７】
【化４】
0004257383.tif 000005
【００３８】
２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（３９６ｍｇ）とＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−（メチル）グリシン（２４５ｍｇ）とを製造例１と同様に反応させ、標記化合物を無色油状物として得た。
収量：３９３ｍｇ（８０％）【００３９】
［製造例３］
２−（Ｓ）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−アラニル］−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジンの合成：【００４０】
【化５】
0004257383.tif 000006
【００４１】
２−（Ｓ）−１−（４―フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（８０ｍｇ）とＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−アラニン（４６ｍｇ）とを製造例１と同様に反応させ、標記化合物を無色油状物として得た。
収量：７５ｍｇ（６３％）【００４２】
［製造例４］
２−（Ｓ）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−アラニル］−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジンの合成：【００４３】
【化６】
0004257383.tif 000007
【００４４】
２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（８０ｍｇ）とＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−アラニン（４６ｍｇ）とを製造例１と同様に反応させ、標記化合物を無色油状物として得た。
収量：８３ｍｇ（６９％）【００４５】
［製造例５］
２−（Ｓ）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−バリル］−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジンの合成：【００４６】
【化７】
0004257383.tif 000008
【００４７】
２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（８０ｍｇ）とＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−バリン（５３ｍｇ）とを製造例１と同様に反応させ、標記化合物を無色油状物として得た。
収量：８３ｍｇ（６６％）【００４８】
［製造例６］
２−（Ｓ）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−バリル］−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジンの合成：【００４９】
【化８】
0004257383.tif 000009
【００５０】
２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（８０ｍｇ）とＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−バリン（５３ｍｇ）とを製造例１と同様に反応させ、標記化合物を無色油状物として得た。
収量：９２ｍｇ（７３％）【００５１】
［製造例７］
２−（Ｓ）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−ロイシル］−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジンの合成：【００５２】
【化９】
0004257383.tif 000010
【００５３】
２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（８０ｍｇ）とＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−ロイシン（５６ｍｇ）とを製造例１と同様に反応させ、標記化合物を無色油状物として得た。
収量：１１５ｍｇ（８９％）【００５４】
［製造例８］
２−（Ｓ）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−ロイシル］−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジンの合成：【００５５】
【化１０】
0004257383.tif 000011
【００５６】
２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（８０ｍｇ）とＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−ロイシン（５６ｍｇ）とを製造例１と同様に反応させ、標記化合物を無色油状物として得た。
収量：１１０ｍｇ（８５％）【００５７】
［製造例９］
２−（Ｓ）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−β−アラニル］−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジンの合成：【００５８】
【化１１】
0004257383.tif 000012
【００５９】
２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（８０ｍｇ）とＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−β−アラニン（４６ｍｇ）とを製造例１と同様に反応させ、標記化合物を無色油状物として得た。
収量：７８ｍｇ（６５％）【００６０】
［製造例１０］
２−（Ｓ）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−１−アミノシクロプロパン−１−カルボニル］−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジンの合成：【００６１】
【化１２】
0004257383.tif 000013
【００６２】
２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（８０ｍｇ）とＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−１−アミノシクロプロパン−１−カルボン酸（４９ｍｇ）とを製造例１と同様に反応させ、標記化合物を無色油状物として得た。
収量：７１ｍｇ（５８％）【００６３】
［製造例１１］
２−（Ｓ）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−α−アミノブチリル］−１−（４―フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジンの合成：【００６４】
【化１３】
0004257383.tif 000014
【００６５】
２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（８０ｍｇ）とＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−α−アミノ酪酸（４９ｍｇ）とを製造例１と同様に反応させ、標記化合物を無色油状物として得た。
収量：６３ｍｇ（５１％）【００６６】
［製造例１２］
２−（Ｓ）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−α−アミノブチリル］−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジンの合成：【００６７】
【化１４】
0004257383.tif 000015
【００６８】
２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（８０ｍｇ）とＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−α−アミノ酪酸（４９ｍｇ）とを製造例１と同様に反応させ、標記化合物を無色油状物として得た。
収量：８８ｍｇ（７１％）【００６９】
［製造例１３］
２−（Ｓ）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−ノルロイシル］−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジンの合成：【００７０】
【化１５】
0004257383.tif 000016
【００７１】
２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（８０ｍｇ）とＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−ノルロイシン（５６ｍｇ）とを製造例１と同様に反応させ、標記化合物を無色油状物として得た。
収量：９７ｍｇ（７５％）【００７２】
［製造例１４］
２−（Ｓ）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−ノルロイシル］−１−（４―フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジンの合成：【００７３】
【化１６】
0004257383.tif 000017
【００７４】
２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（８０ｍｇ）とＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−ノルロイシン（５６ｍｇ）とを製造例１と同様に反応させ、標記化合物を無色油状物として得た。
収量：１１２ｍｇ（８６％）【００７５】
［製造例１５］
４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシル］−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジンの合成：【００７６】
【化１７】
0004257383.tif 000018
【００７７】
１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン（８０ｍｇ）とＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシン（５２ｍｇ）とを製造例１と同様に反応させ、表記化合物を無色油状物として得た。
収量：１２０ｍｇ（９１％）【００７８】
［製造例１６］
４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−β−アラニル］−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジンの合成：【００７９】
【化１８】
0004257383.tif 000019
【００８０】
１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン（８０ｍｇ）とＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−β−アラニン（５５ｍｇ）とを製造例１と同様に反応させ、表記化合物を無色油状物として得た。
収量：１０２ｍｇ（７５％）【００８１】
［製造例１７］
４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−アラニル］−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジンの合成：【００８２】
【化１９】
0004257383.tif 000020
【００８３】
１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン（８０ｍｇ）とＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−アラニン（５５ｍｇ）とを製造例１と同様に反応させ、表記化合物を無色油状物として得た。
収量：８５ｍｇ（６３％）【００８４】
［製造例１８］
４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−アラニル］−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジンの合成：【００８５】
【化２０】
0004257383.tif 000021
【００８６】
１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン（８０ｍｇ）とＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−アラニン（５５ｍｇ）とを製造例１と同様に反応させ、表記化合物を無色油状物として得た。
収量：８４ｍｇ（６２％）【００８７】
［製造例１９］
４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−バリル］−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジンの合成：【００８８】
【化２１】
0004257383.tif 000022
【００８９】
１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン（８０ｍｇ）とＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−バリン（６４ｍｇ）とを製造例１と同様に反応させ、表記化合物を無色油状物として得た。
収量：６０ｍｇ（４２％）【００９０】
［製造例２０］
４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−バリル］−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジンの合成：【００９１】
【化２２】
0004257383.tif 000023
【００９２】
１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン（８０ｍｇ）とＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−バリン（６４ｍｇ）とを製造例１と同様に反応させ、表記化合物を無色油状物として得た。
収量：６８ｍｇ（４７％）【００９３】
［製造例２１］
４−［Ｎα，Ｎβ−ジ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−α，β−ジアミノプロピオニル］−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジンの合成：【００９４】
【化２３】
0004257383.tif 000024
【００９５】
１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン（８０ｍｇ）とＮα，Ｎβ−ジ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−α，β−ジアミノプロピオン酸（８８ｍｇ）とを製造例１と同様に反応させ、表記化合物を無色油状物として得た。
収量：５９ｍｇ（４２％）【００９６】
［製造例２２］
４−［Ｎα，Ｎβ−ジ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−α，β−ジアミノプロピオニル］−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジンの合成：【００９７】
【化２４】
0004257383.tif 000025
【００９８】
１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン（８０ｍｇ）とＮα，Ｎβ−ジ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−α，β−ジアミノプロピオン酸（８８ｍｇ）とを製造例１と同様に反応させ、表記化合物を無色油状物として得た。
収量：５９ｍｇ（４２％）【００９９】
［製造例２３］
２−（Ｓ）−４−［Ｎα，Ｎβ−ジ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−α，β−ジアミノプロピオニル］−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジンの合成：【０１００】
【化２５】
0004257383.tif 000026
【０１０１】
２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−４−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（８０ｍｇ）とＮα，Ｎβ−ジ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−α，β−ジアミノプロピオン酸（８２ｍｇ）とを製造例１と同様に反応させ、表記化合物を無色油状物として得た。
収量：４２ｍｇ（３１％）【０１０２】
［製造例２４］
２−（Ｓ）−４−［Ｎα，Ｎβ−ジ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−α，β−ジアミノプロピオニル］−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジンの合成：【０１０３】
【化２６】
0004257383.tif 000027
【０１０４】
２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−４−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（８０ｍｇ）とＮα，Ｎβ−ジ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−α，β−ジアミノプロピオン酸（８２ｍｇ）とを製造例１と同様に反応させ、表記化合物を無色油状物として得た。
収量：３４ｍｇ（２５％）【０１０５】
［製造例２５］
４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシル］−１−（４−メチルイソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジンの合成：【０１０６】
【化２７】
0004257383.tif 000028
【０１０７】
１−（４−メチルイソキノリン−４−スルホニル）ホモピペラジン（４０ｍｇ）とＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシン（２２ｍｇ）とを製造例１と同様に反応させ、表記化合物を無色油状物として得た。
収量：４９ｍｇ（８４％）【０１０８】
［製造例２６］
２−（Ｓ）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシル］−１−（４−メチルイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジンの合成：【０１０９】
【化２８】
0004257383.tif 000029
【０１１０】
２−（Ｓ）−１−（４−メチルイソキノリン−４−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（４０ｍｇ）とＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシン（２２ｍｇ）とを製造例１と同様に反応させ、表記化合物を無色油状物として得た。
収量：４６ｍｇ（７９％）【０１１１】
［製造例２７］
２−（Ｓ）−１−（４−ブロモイソキノリン−５−スルホニル）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシル］−２−メチルホモピペラジンの合成：【０１１２】
【化２９】
0004257383.tif 000030
【０１１３】
２−（Ｓ）−１−（４−メチルイソキノリン−４−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（４０ｍｇ）とＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシン（１９ｍｇ）とを製造例１と同様に反応させ、表記化合物を無色油状物として得た。
収量：４０ｍｇ（７０％）【０１１４】
［製造例２８］
２−（Ｓ）−１−（４−エテニルイソキノリン−５−スルホニル）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシル］−２−メチルホモピペラジンの合成：【０１１５】
【化３０】
0004257383.tif 000031
【０１１６】
２−（Ｓ）−１−（４−エテニルイソキノリン−４−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（２０ｍｇ）とＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシン（１１ｍｇ）とを製造例１と同様に反応させ、表記化合物を無色油状物として得た。
収量：９．７ｍｇ（３３％）【０１１７】
［実施例１］
２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−４−グリシル−２−メチルホモピペラジン・二塩酸塩の合成：【０１１８】
【化３１】
0004257383.tif 000032
【０１１９】
２−（Ｓ）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシル］−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（４４５ｍｇ）をメタノール（２ｍＬ）に溶解し、４Ｍ塩化水素の酢酸エチル溶液（１ｍＬ）を加えた。混合物を室温で４時間撹拌し、減圧濃縮した。生じた沈殿をろ取し、酢酸エチルで洗い標記化合物を白色粉末として得た。
収量３４７ｍｇ（８１％）
１Ｈ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．９５（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．５Ｈｚ），１．７８（ｂｒ．ｓ，２Ｈ），３．３６−３．５０（ｍ，３Ｈ），３．７０−３．７９（ｍ，３Ｈ），４．１８−４．２５（ｍ，１Ｈ），７．９０（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），８．４９−８．５３（ｍ，２Ｈ），８．６４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．９Ｈｚ），９．３１（ｓ，１Ｈ）．【０１２０】
［実施例２］
２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチル−４−（Ｎ−メチルグリシル）ホモピペラジン・二塩酸塩の合成：【０１２１】
【化３２】
0004257383.tif 000033
【０１２２】
２−（Ｓ）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メチルグリシル］−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（３９３ｍｇ）を実施例１と同様に処理し、標記化合物を白色粉末として得た。
収量：３６５ｍｇ（９８％）
１Ｈ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．９２（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），１．８２（ｂｒ．ｓ，２Ｈ），２．６４（ｓ，３Ｈ），３．３７−３．５０（ｍ，３Ｈ），３．７３−３．８６（ｍ，３Ｈ），４．１５−４．２５（ｍ，１Ｈ），７．９０（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），８．５０−８．５３（ｍ，２Ｈ），８．６５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．４Ｈｚ），９．３２（ｓ，１Ｈ）．【０１２３】
［実施例３］
２−（Ｓ）−４−（Ｌ−アラニル）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン・二塩酸塩の合成：【０１２４】
【化３３】
0004257383.tif 000034
【０１２５】
２−（Ｓ）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−アラニル］−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（７５ｍｇ）を実施例１と同様に処理し、標記化合物を白色粉末として得た。
収量：６５ｍｇ（９２％）
１Ｈ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．９６（ｂｒ．ｓ，３Ｈ），１．４４（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），１．８６（ｂｒ．ｓ，２Ｈ），３．３５−３．７８（ｍ，６Ｈ），４．２０−４．３２（ｍ，２Ｈ），７．８９（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），８．４５−８．５１（ｍ，２Ｈ），８．６２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．４Ｈｚ），９．３１（ｓ，１Ｈ）．【０１２６】
［実施例４］
２−（Ｓ）−４−（Ｄ―アラニル）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン・二塩酸塩の合成：【０１２７】
【化３４】
0004257383.tif 000035
【０１２８】
２−（Ｓ）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−アラニル］−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（８３ｍｇ）を実施例１と同様に処理し、標記化合物を白色粉末として得た。
収量：６８ｍｇ（８７％）
１Ｈ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．９５（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．５Ｈｚ），１．４０（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．５Ｈｚ），１．８６（ｂｒ．ｓ，２Ｈ），３．４３−３．５５（ｍ，３Ｈ），３．７７−３．８３（ｍ，３Ｈ），４．１５−４．３５（ｍ，２Ｈ），７．８９（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），８．４８−８．５１（ｍ，２Ｈ），８．６１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），９．３１（ｓ，１Ｈ）．【０１２９】
［実施例５］
２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチル−４−（Ｌ−バリル）ホモピペラジン・二塩酸塩の合成：【０１３０】
【化３５】
0004257383.tif 000036
【０１３１】
２−（Ｓ）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−バリル］−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（８３ｍｇ）を実施例１と同様に処理し、標記化合物を白色粉末として得た。
収量：６１ｍｇ（７８％）
１Ｈ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．９８（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），１．０５（ｄ，６Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），１．９０（ｂｒ．ｓ，２Ｈ），２．１１−２．２３（ｍ，１Ｈ），３．３７−３．７８（ｍ，６Ｈ），４．１３（ｂｒ，２Ｈ），７．９０（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），８．４４−８．５２（ｍ，２Ｈ），８．６１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．９Ｈｚ），９．３１（ｓ，１Ｈ）．【０１３２】
［実施例６］
２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチル−４−（Ｄ−バリル）ホモピペラジン・二塩酸塩の合成：【０１３３】
【化３６】
0004257383.tif 000037
【０１３４】
２−（Ｓ）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−バリル］−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（９２ｍｇ）を実施例１と同様に処理し、標記化合物を白色粉末として得た。
収量：７９ｍｇ（９１％）
１Ｈ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：１．０１（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．７Ｈｚ），１．０５（ｄ，６Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），１．９０（ｂｒ．ｓ，２Ｈ），２．１３−２．１９（ｍ，１Ｈ），３．５９−３．６９（ｍ，６Ｈ），４．１６（ｂｒ，２Ｈ），７．８９（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），８．４９−８．５２（ｍ，２Ｈ），８．６２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．９Ｈｚ），９．３１（ｓ，１Ｈ）．【０１３５】
［実施例７］
２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−４−（Ｌ−ロイシル）−２−メチルホモピペラジン・二塩酸塩の合成：【０１３６】
【化３７】
0004257383.tif 000038
【０１３７】
２−（Ｓ）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−ロイシル］−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（１１５ｍｇ）を実施例１と同様に処理し、標記化合物を白色粉末として得た。
収量：９７ｍｇ（８９％）
１Ｈ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．９３（ｄ，６Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），０．９６（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．５Ｈｚ），１．１５−１．９２（ｍ，３Ｈ），３．４３−３．７５（ｍ，６Ｈ），４．１９−４．２７（ｍ，２Ｈ），７．９０（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），８．４５−８．５３（ｍ，２Ｈ），８．６２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．４Ｈｚ），９．３１（ｓ，１Ｈ）．【０１３８】
［実施例８］
２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−４−（Ｄ−ロイシル）−２−メチルホモピペラジン・二塩酸塩の合成：【０１３９】
【化３８】
0004257383.tif 000039
【０１４０】
２−（Ｓ）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−ロイシル］−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（１１０ｍｇ）を実施例１と同様に処理し、標記化合物を白色粉末として得た。
収量：９５ｍｇ（９１％）
１Ｈ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．９１（ｄ，６Ｈ，Ｊ＝６．５Ｈｚ），０．９６（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．５Ｈｚ），１．５７−１．９２（ｍ，３Ｈ），３．４５−３．５８（ｍ，３Ｈ），３．７３−３．８１（ｍ，３Ｈ），４．１６−４．２５（ｍ，２Ｈ），７．８９（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），８．４８−８．５２（ｍ，２Ｈ），８．６１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），９．３１（ｓ，１Ｈ）．【０１４１】
［実施例９］
２−（Ｓ）−４−（β−アラニル）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン・二塩酸塩の合成：【０１４２】
【化３９】
0004257383.tif 000040
【０１４３】
２−（Ｓ）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−β−アラニル］−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（７８ｍｇ）を実施例１と同様に処理し、標記化合物を白色粉末として得た。
収量：６４ｍｇ（８７％）
１Ｈ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．８８（ｂｒ．ｓ，３Ｈ），１．７８（ｂｒ，２Ｈ），２．８１（ｂｒ，２Ｈ），３．０７（ｂｒ，２Ｈ），３．２５−３．５０（ｍ，３Ｈ），３．７６−４．０１（ｍ，３Ｈ），４．１１−４．２４（ｍ，１Ｈ），７．８９（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），８．４９−８．５３（ｍ，２Ｈ），８．６１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．９Ｈｚ），９．３１．【０１４４】
［実施例１０］
２−（Ｓ）−４−（１−アミノシクロプロパン−１−カルボニル）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン・二塩酸塩の合成：【０１４５】
【化４０】
0004257383.tif 000041
【０１４６】
２−（Ｓ）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−１−アミノシクロプロパン−１−カルボニル］−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（７１ｍｇ）を実施例１と同様に処理し、標記化合物を白色粉末として得た。
収量：６０ｍｇ（８９％）
１Ｈ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．８８（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．５Ｈｚ），１．１６−１．２３（ｍ，２Ｈ），１．３３−１．４７（ｍ，２Ｈ），１．８１−１．８４（ｍ，２Ｈ），３．２７−３．５３（ｍ，３Ｈ），３．７５−３．８４（ｍ，１Ｈ），３．９２−４．０６（ｍ，２Ｈ），４．１１−４．２１（ｍ，１Ｈ），７．８９（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），８．４６−８．５２（ｍ，２Ｈ），８．６１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．７Ｈｚ），９．３１（ｓ，１Ｈ）．【０１４７】
［実施例１１］
２−（Ｓ）−４−（Ｌ−α−アミノブチリル）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン・二塩酸塩の合成：【０１４８】
【化４１】
0004257383.tif 000042
【０１４９】
２−（Ｓ）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−α−アミノブチリル］−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（６３ｍｇ）を実施例１と同様に処理し、標記化合物を白色粉末として得た。
収量：４８ｍｇ（８２％）
１Ｈ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．９５−１．００（ｍ，６Ｈ），１．７５−１．９２（ｍ，４Ｈ），３．４０−３．７６（ｍ，６Ｈ），４．１９−４．２４（ｍ，２Ｈ），７．９０（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），８．４４−８．４９（ｍ，２Ｈ），８．６２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．４Ｈｚ），９．３１（ｓ，１Ｈ）．【０１５０】
［実施例１２］
２−（Ｓ）−４−（Ｄ−α−アミノブチリル）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン・二塩酸塩の合成：【０１５１】
【化４２】
0004257383.tif 000043
【０１５２】
２−（Ｓ）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−α−アミノブチリル］−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（８８ｍｇ）を実施例１と同様に処理し、標記化合物を白色粉末として得た。
収量：７０ｍｇ（８４％）
１Ｈ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．９３−１．０１（ｍ，６Ｈ），１．７９−１．９２（ｍ，４Ｈ），３．４９−３．８１（ｍ，６Ｈ），４．１７−４．２７（ｍ，２Ｈ），７．８９（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），８．４８−８．５２（ｍ，２Ｈ），８．６１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），９．３１（ｓ，１Ｈ）．【０１５３】
［実施例１３］
２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチル−４−（Ｌ−ノルロイシル）ホモピペラジン・二塩酸塩の合成：【０１５４】
【化４３】
0004257383.tif 000044
【０１５５】
２−（Ｓ）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−ノルロイシル］−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（８７ｍｇ）を実施例１と同様に処理し、標記化合物を白色粉末として得た。
収量：７５ｍｇ（８１％）
１Ｈ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．８６−０．９９（ｍ，６Ｈ），１．１３−１．４７（ｍ，４Ｈ），１．６９−１．１９（ｍ，４Ｈ），３．４３−３．７７（ｍ，６Ｈ），４．２１−４．２４（ｍ，２Ｈ），７．９０（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），８．４４−８．５２（ｍ，２Ｈ），８．６３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．９Ｈｚ），９．３１（ｓ，１Ｈ）．【０１５６】
［実施例１４］
２−（Ｓ）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチル−４−（Ｄ−ノルロイシル）ホモピペラジン・二塩酸塩の合成：【０１５７】
【化４４】
0004257383.tif 000045
【０１５８】
２−（Ｓ）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−ノルロイシル］−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（１１２ｍｇ）を実施例１と同様に処理し、標記化合物を白色粉末として得た。
収量：９６ｍｇ（９０％）
１Ｈ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．８９（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），０．９５（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），１．２９−１．４２（ｍ，４Ｈ），１．７４−１．９３（ｍ，４Ｈ），３．４５−３．５３（ｍ，３Ｈ），３．７５−３．８３（ｍ，３Ｈ），４．２１−４．２８（ｍ，２Ｈ），７．８９（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），８．４９−８．５２（ｍ，２Ｈ），８．６１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），９．３１（ｓ，１Ｈ）．【０１５９】
［実施例１５］
４−（グリシル）−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン・二塩酸塩の合成：【０１６０】
【化４５】
0004257383.tif 000046
【０１６１】
４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシル］−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン（１２０ｍｇ）を実施例１と同様に処理し、表記化合物を白色粉末として得た。
収量：８２ｍｇ（７３％）
１Ｈ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：１．８５（ｂｒ，２Ｈ），３．４２−３．６１（ｍ，８Ｈ），３．７８（ｓ，２Ｈ），７．８９（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），８．３９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１．１Ｈｚ），８．４５−８．５２（ｍ，２Ｈ），８．７１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），９．５７（ｓ，１Ｈ）．【０１６２】
［実施例１６］
４−（β−アラニル）−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン・二塩酸塩の合成：【０１６３】
【化４６】
0004257383.tif 000047
【０１６４】
４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−β−アラニル］−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン（１０２ｍｇ）を実施例１と同様に処理し、表記化合物を白色粉末として得た。
収量：６７ｍｇ（７０％）
１Ｈ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：１．８２（ｂｒ，２Ｈ），２．７４（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），３．４４−３．６２（ｍ，１０Ｈ），８．４１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，１．１Ｈｚ），８．４７−８．５３（ｍ，２Ｈ），８．７１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），９．５８（ｓ，１Ｈ）．【０１６５】
［実施例１７］
４−（Ｌ−アラニル）−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン・二塩酸塩の合成：【０１６６】
【化４７】
0004257383.tif 000048
【０１６７】
４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−アラニル］−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン（８５ｍｇ）を実施例１と同様に処理し、表記化合物を白色粉末として得た。
収量：５４ｍｇ（６８％）
１Ｈ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：１．３５（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），１．８７（ｂｒ，２Ｈ），３．４１−３．６２（ｍ，８Ｈ），４．２３（ｑ，１Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），７．８５（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），８．３６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１．４Ｈｚ），８．４２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），８．４６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），８．６９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），９．５１（ｓ，１Ｈ）．【０１６８】
［実施例１８］
４−（Ｄ−アラニル）−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン・二塩酸塩の合成：【０１６９】
【化４８】
0004257383.tif 000049
【０１７０】
４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−アラニル］−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン（８４ｍｇ）を実施例１と同様に処理し、表記化合物を白色粉末として得た。
収量：５７ｍｇ（７２％）
１Ｈ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：１．３６（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），１．８７（ｂｒ，２Ｈ），３．４９−３．６１（ｍ，８Ｈ），４．２３（ｑ，１Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），７．８５（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），８．３７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，０．８Ｈｚ），８．４２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），８．４６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），８．６９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），９．５１（ｓ，１Ｈ）．【０１７１】
［実施例１９］
１−（イソキノリン−５−スルホニル）−４−（Ｌ−バリル）ホモピペラジン・二塩酸塩の合成：【０１７２】
【化４９】
0004257383.tif 000050
【０１７３】
４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−バリル］−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン（６０ｍｇ）を実施例１と同様に処理し、表記化合物を白色粉末として得た。
収量：４４ｍｇ（７８％）
１Ｈ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．９５（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），０．９９（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），１．９０（ｂｒ，２Ｈ），２．００−２．１５（ｍ，１Ｈ），３．５２−３．７９（ｍ，８Ｈ），４．０７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．４Ｈｚ），７．８５（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），８．３７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１．１Ｈｚ），８．４２−８．４８（ｍ，２Ｈ），８．６９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），９．５１（ｓ，１Ｈ）．【０１７４】
［実施例２０］
１−（イソキノリン−５−スルホニル）−４−（Ｄ−バリル）ホモピペラジン・二塩酸塩の合成：【０１７５】
【化５０】
0004257383.tif 000051
【０１７６】
４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−バリル］−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン（６８ｍｇ）を実施例１と同様に処理し、表記化合物を白色粉末として得た。
収量：４３ｍｇ（６７％）
１Ｈ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．９５（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），０．９９（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），１．９０（ｂｒ，２Ｈ），２．０３−２．１３（ｍ，１Ｈ），３．５３−３．７９（ｍ，８Ｈ），４．０７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．７Ｈｚ），７．８７（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），８．３９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），８．４５−８．５０（ｍ，２Ｈ），８．７０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），９．５３（ｓ，１Ｈ）．【０１７７】
［実施例２１］
４−（Ｌ−α，β−ジアミノプロピオニル）−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン・三塩酸塩の合成：【０１７８】
【化５１】
0004257383.tif 000052
【０１７９】
４−［Ｎα，Ｎβ−ジ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−α，β−ジアミノプロピオニル］−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン（５９ｍｇ）を実施例１と同様に処理し、表記化合物を白色粉末として得た。
収量：４０ｍｇ（８０％）
１Ｈ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：１．９１（ｂｒ，２Ｈ），３．２１−３．７５（ｍ，１０Ｈ），４．６７−４．７１（ｍ，１Ｈ），７．８６（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），８．３７−８．４８（ｍ，３Ｈ），８．７０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），９．５１（ｓ，１Ｈ）．【０１８０】
［実施例２２］
４−（Ｄ−α，β−ジアミノプロピオニル）−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン・三塩酸塩の合成：【０１８１】
【化５２】
0004257383.tif 000053
【０１８２】
４−［Ｎα，Ｎβ−ジ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−α，β−ジアミノプロピオニル］−１−（イソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン（６０ｍｇ）を実施例１と同様に処理し、表記化合物を白色粉末として得た。
収量：４０ｍｇ（７９％）
１Ｈ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：１．９２（ｂｒ，２Ｈ），３．２４−３．７３（ｍ，１０Ｈ），４．６８−４．７３（ｍ，１Ｈ），７．８８（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），８．３９−８．５１（ｍ，３Ｈ），８．７１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），９．５４（ｓ，１Ｈ）．【０１８３】
［実施例２３］
２−（Ｓ）−４−（Ｌ−α，β−ジアミノプロピオニル）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン・三塩酸塩の合成：【０１８４】
【化５３】
0004257383.tif 000054
【０１８５】
２−（Ｓ）−４−［Ｎα，Ｎβ−ジ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−α，β−ジアミノプロピオニル］−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（４２ｍｇ）を実施例１と同様に処理し、表記化合物を白色粉末として得た。
収量：２９ｍｇ（８１％）
１Ｈ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．９２（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），１．８８（ｂｒ，２Ｈ），３．２９−３．５７（ｍ，５Ｈ），３．７８−３．８６（ｍ，３Ｈ），４．１９−４．２６（ｍ，１Ｈ），４．７５−４．７８（ｍ，１Ｈ），７．９０（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），８．４９−８．５３（ｍ，２Ｈ），８．６２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），９．３１（ｓ，１Ｈ）．【０１８６】
［実施例２４］
２−（Ｓ）−４−（Ｄ−α，β−ジアミノプロピオニル）−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン・三塩酸塩の合成：【０１８７】
【化５４】
0004257383.tif 000055
【０１８８】
２−（Ｓ）−４−［Ｎα，Ｎβ−ジ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−α，β−ジアミノプロピオニル］−１−（４−フルオロイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（３４ｍｇ）を実施例１と同様に処理し、表記化合物を白色粉末として得た。
収量：２３ｍｇ（８０％）
１Ｈ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．８６（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），１．９３（ｂｒ，２Ｈ），３．２２−３．４５（ｍ，５Ｈ），３．８１−３．８７（ｍ，３Ｈ），４．０８−４．１８（ｍ，１Ｈ），４．７８（ｂｒ，１Ｈ），７．８９（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），８．５０−８．５３（ｍ，２Ｈ），８．６２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），９．３１（ｓ，１Ｈ）．【０１８９】
［実施例２５］
４−（グリシル）−１−（４−メチルイソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン・二塩酸塩の合成：【０１９０】
【化５５】
0004257383.tif 000056
【０１９１】
４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシル］−１−（４−メチルイソキノリン−５−スルホニル）ホモピペラジン（４９ｍｇ）を実施例１と同様に処理し、表記化合物を白色粉末として得た。
収量：２８ｍｇ（６１％）
１Ｈ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：１．９３（ｂｒ，２Ｈ），２．９７（ｓ，３Ｈ），３．５８−３．６９（ｍ，８Ｈ），３．８６（ｓ，２Ｈ），７．７７（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），８．０８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），８．３９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１．１Ｈｚ），８．５２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．１Ｈｚ），９．２９（ｓ，１Ｈ）．【０１９２】
［実施例２６］
２−（Ｓ）−４−（グリシル）−１−（４−メチルイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン・二塩酸塩の合成：【０１９３】
【化５６】
0004257383.tif 000057
【０１９４】
２−（Ｓ）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシル］−１−（４−メチルイソキノリン−５−スルホニル）−２−メチルホモピペラジン（４６ｍｇ）を実施例１と同様に処理し、表記化合物を白色粉末として得た。
収量：３４ｍｇ（７８％）
１Ｈ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：１．１４（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），１．８３−２．０１（ｍ，２Ｈ），２．９６（ｓ，３Ｈ），３．４２−３．７１（ｍ，７Ｈ），３．８７（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝１４．６Ｈｚ，５．１Ｈｚ），７．８０（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），８．２７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１．１Ｈｚ），８．４０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１．４Ｈｚ），８．５２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝０．５Ｈｚ），９．２９（ｓ，１Ｈ）．【０１９５】
［実施例２７］
２−（Ｓ）−１−（４−ブロモイソキノリン−５−スルホニル）−４−（グリシル）−２−メチルホモピペラジン・二塩酸塩の合成：【０１９６】
【化５７】
0004257383.tif 000058
【０１９７】
２−（Ｓ）−１−（４−ブロモイソキノリン−５−スルホニル）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシル］−２−メチルホモピペラジン（４０ｍｇ）を実施例１と同様に処理し、表記化合物を白色粉末として得た。
収量：３２ｍｇ（８４％）
１Ｈ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：１．０６−１．１０（ｍ，３Ｈ），１．８６（ｂｒ，２Ｈ），３．４２−３．５５（ｍ，３Ｈ），３．６８−３．８８（ｍ，３Ｈ），４．１８−４．２４（ｍ，３Ｈ），７．８６（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．６），８．３８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１．４Ｈｚ），８．４５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１．４Ｈｚ），８．９０（ｓ，１Ｈ），９．３７（ｓ，１Ｈ）．【０１９８】
［実施例２８］
２−（Ｓ）−１−（４−エテニルイソキノリン−５−スルホニル）−４−（グリシル）−２−メチルホモピペラジン・二塩酸塩の合成：【０１９９】
【化５８】
0004257383.tif 000059
【０２００】
２−（Ｓ）−１−（４−エテニルイソキノリン−５−スルホニル）−４−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシル］−２−メチルホモピペラジン（９．７ｍｇ）を実施例１と同様に処理し、表記化合物を白色粉末として得た。
収量：５．０ｍｇ（５５％）
Ｍ／Ｚ：３８６［Ｍ＋］【０２０１】
試験例１  キナーゼ阻害活性の測定
＜ＲＯＣＫＩＩ：  Ｒｈｏ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｃｏｉｌｅｄ−ｃｏｉｌ  ｆｏｒｍｉｎｇ  ｋｉｎａｓｅ−ＩＩ（Ｒｈｏキナーゼ）＞
特許文献１に記載の方法により、Ｒｈｏキナーゼアッセイを行い、Ｒｈｏキナーゼに対する５０％阻止濃度の値（以下「ＩＣ５０値」という）を算出した。【０２０２】
＜ＰＫＡ：  Ｐｒｏｔｅｉｎ  ｋｉｎａｓｅ  Ａ（プロテインキナーゼＡ）＞
ウシ由来精製ＰＫＡ（触媒サブユニット、Ｐｒｏｍｅｇａ社）を用いて、基質ペプチド（ＬＲＲＡＳＬＧ、Ｐｒｏｍｅｇａ社）へのリン酸化を評価した。
全量５０μＬの系において、４３ｎｇの上記酵素を４０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ  （ｐＨ７．５）、２０ｍＭ  塩化マグネシウム、１ｍｇ／ｍＬ  ＢＳＡ、５μＭ  上記ペプチドおよび１μＭ  ＡＴＰ存在下において、室温で２０分間反応させた。キナーゼ反応後、ルシフェラーゼ試薬（Ｋｉｎａｓｅ−Ｇｌｏ  Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ  Ｋｉｎａｓｅ  Ａｓｓａｙ  キット、Ｐｒｏｍｅｇａ社）を用いて、反応系内のＡＴＰ量に由来する発光強度を化学発光測定装置（ＭｉｃｒｏＬｕｍａｔ、Ｂｅｒｔｈｏｌｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社）を用いて測定し、キナーゼ未反応系における発光強度と比較することで、リン酸化反応により消費されたＡＴＰ量を算出した。
この系を用いて、各濃度の化合物存在下においてキナーゼ反応を行い、算出したＡＴＰ消費量の化合物濃度依存曲線からＩＣ５０値を算出した。【０２０３】
＜ＰＫＣ：Ｐｒｏｔｅｉｎ  ｋｉｎａｓｅ  Ｃ（プロテインキナーゼＣ）＞
ラット由来精製ＰＫＣ（ＰＫＣα、β、γおよび少量のδ、ζアイソフォームを含む、Ｐｒｏｍｅｇａ社）を用いて、基質ペプチド（ＡＡＫＩＱＡＳＦＲＧＨＭＡＲＫＫ、Ｐｒｏｍｅｇａ社）へのリン酸化を評価した。
全量５０μＬの系において、５ｎｇの上記酵素を２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ  （ｐＨ７．５）、２０ｍＭ  塩化マグネシウム、０．４ｍＭ  塩化カルシウム、０．１ｍｇ／ｍＬ  ＢＳＡ、０．２５ｍＭ  ＥＧＴＡ、０．５ｍｇ／ｍＬ  ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｓｅｒｉｎｅ（シグマ社）、０．０５ｍｇ／ｍＬ  １，２−Ｄｉｏｃｔａｎｏｙｌ−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏｌ（シグマ社）、１０μＭ  上記ペプチドおよび１μＭ  ＡＴＰ存在下において、室温で８０分間反応させた。キナーゼ反応後、ルシフェラーゼ試薬（Ｋｉｎａｓｅ−Ｇｌｏ  Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ  Ｋｉｎａｓｅ  Ａｓｓａｙ  キット、Ｐｒｏｍｅｇａ社）を用いて、反応系内のＡＴＰ量に由来する発光強度を化学発光測定装置（ＭｉｃｒｏＬｕｍａｔ、Ｂｅｒｔｈｏｌｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社）を用いて測定し、キナーゼ未反応系における発光強度と比較することで、リン酸化反応により消費されたＡＴＰ量を算出した。
この系を用いて、各濃度の化合物存在下においてキナーゼ反応を行い、算出したＡＴＰ消費量の化合物濃度依存曲線からＩＣ５０値を算出した。【０２０４】
＜ＰＫＧ：Ｐｒｏｔｅｉｎ  ｋｉｎａｓｅ  Ｇ（プロテインキナーゼＧ）＞
ウシ由来精製ＰＫＧα（Ｐｒｏｍｅｇａ社）を用いて、基質ペプチド（ＲＫＩＳＡＳＥＦ、Ｐｒｏｍｅｇａ社）へのリン酸化を評価した。
全量５０μＬの系において、６４ｎｇの上記酵素を４０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ  （ｐＨ７．５）、２０ｍＭ  塩化マグネシウム、１０μＭ  ｃＧＭＰ（シグマ社）、１００μＭ  上記ペプチドおよび１μＭ  ＡＴＰ存在下において、室温で８０分間反応させた。キナーゼ反応後、ルシフェラーゼ試薬（Ｋｉｎａｓｅ−Ｇｌｏ  Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ  Ｋｉｎａｓｅ  Ａｓｓａｙ  キット、Ｐｒｏｍｅｇａ社）を用いて、反応系内のＡＴＰ量に由来する発光強度を化学発光測定装置（ＭｉｃｒｏＬｕｍａｔ、Ｂｅｒｔｈｏｌｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社）を用いて測定し、キナーゼ未反応系における発光強度と比較することで、リン酸化反応により消費されたＡＴＰ量を算出した。
この系を用いて、各濃度の化合物存在下においてキナーゼ反応を行い、算出したＡＴＰ消費量の化合物濃度依存曲線からＩＣ５０値を算出した。【０２０５】
＜ＭＬＣＫ：Ｍｙｏｓｉｎ  ｌｉｇｈｔ  ｃｈａｉｎ  ｋｉｎａｓｅ（ミオシン軽鎖キナーゼ）＞
ニワトリ由来精製ＭＬＣＫ（Ｍ．  Ａｎｎｅ  Ｃｏｎｔｉらの方法（Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．  １９６，  ３４−４７）により精製）を用いて、基質ペプチド（ＡＫＲＰＱＲＡＴＳＮＶＦＳ、Ｓｉｇｍａ社）へのリン酸化を評価した。
全量５０μＬの系において、１００ｎｇの上記酵素を２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ  （ｐＨ７．５）、５ｍＭ  塩化マグネシウム、０．２ｍＭ  塩化カルシウム、０．０２ｍｇ／ｍＬ  ＢＳＡ、８μｇ／ｍＬ  ウシ脳由来精製カルモジュリン（Ｓｉｇｍａ社）、５０μＭ  上記ペプチドおよび１μＭ  ＡＴＰ存在下において、室温で８０分間反応させた。キナーゼ反応後、ルシフェラーゼ試薬（Ｋｉｎａｓｅ−Ｇｌｏ  Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ  Ｋｉｎａｓｅ  Ａｓｓａｙ  キット、Ｐｒｏｍｅｇａ社）を用いて、反応系内のＡＴＰ量に由来する発光強度を化学発光測定装置（ＭｉｃｒｏＬｕｍａｔ、Ｂｅｒｔｈｏｌｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社）を用いて測定し、キナーゼ未反応系における発光強度と比較することで、リン酸化反応により消費されたＡＴＰ量を算出した。
この系を用いて、各濃度の化合物存在下においてキナーゼ反応を行い、算出したＡＴＰ消費量の化合物濃度依存曲線からＩＣ５０値を算出した。【０２０６】
＜ＣａＭＫＩＩ：Ｃａｌｃｉｕｍ／ｃａｌｍｏｄｕｌｉｎ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｋｉｎａｓｅ−ＩＩ（カルシウム／カルモジュリン依存性キナーゼ）＞
ラット由来精製ＣａＭＫＩＩ（ＣａＭＫＩＩα、および少量のβ、γ、δアイソフォームを含む、Ｕｐｓｔａｔｅ社）を用いて、基質ペプチド（ＫＫＡＬＲＲＱＥＴＶＤＡＬ、Ｕｐｓｔａｔｅ社）へのリン酸化を評価した。
全量５０μＬの系において、３３ｎｇの上記酵素を５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ  （ｐＨ７．５）、１０ｍＭ  塩化マグネシウム、２ｍＭ  塩化カルシウム、０．０４ｍｇ／ｍＬ  ＢＳＡ、１６μｇ／ｍＬ  ウシ脳由来精製カルモジュリン（Ｓｉｇｍａ社）、０．５ｍＭ  ＤＴＴ、５０μＭ  上記ペプチドおよび１μＭ  ＡＴＰ存在下において、室温で６０分間反応させた。キナーゼ反応後、ルシフェラーゼ試薬（Ｋｉｎａｓｅ−Ｇｌｏ  Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ  Ｋｉｎａｓｅ  Ａｓｓａｙ  キット、Ｐｒｏｍｅｇａ社）を用いて、反応系内のＡＴＰ量に由来する発光強度を化学発光測定装置（ＭｉｃｒｏＬｕｍａｔ、Ｂｅｒｔｈｏｌｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社）を用いて測定し、キナーゼ未反応系における発光強度と比較することで、リン酸化反応により消費されたＡＴＰ量を算出した。
この系を用いて、各濃度の化合物存在下においてキナーゼ反応を行い、算出したＡＴＰ消費量の化合物濃度依存曲線からＩＣ５０値を算出した。【０２０７】
＜ＡｕｒｏｒａＡ：Ａｕｒｏｒａ  ｋｉｎａｓｅ  Ａ（オーロラキナーゼＡ）＞
ヒト組換え型ＡｕｒｏｒａＡ（Ｕｐｓｔａｔｅ社）を用いて、基質ペプチド（ＬＲＲＡＳＬＧ、Ｐｒｏｍｅｇａ社）へのリン酸化を評価した。
全量５０μＬの系において、４０ｎｇの上記酵素を４０ｍＭ  ＭＯＰＳ−ＮａＯＨ（ｐＨ７．０）、２０ｍＭ  塩化マグネシウム、２００μＭ  上記ペプチドおよび１μＭ  ＡＴＰ存在下において、室温で８０分間反応させた。キナーゼ反応後、ルシフェラーゼ試薬（Ｋｉｎａｓｅ−Ｇｌｏ  Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ  Ｋｉｎａｓｅ  Ａｓｓａｙ  キット、Ｐｒｏｍｅｇａ社）を用いて、反応系内のＡＴＰ量に由来する発光強度を化学発光測定装置（ＭｉｃｒｏＬｕｍａｔ、Ｂｅｒｔｈｏｌｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社）を用いて測定し、キナーゼ未反応系における発光強度と比較することで、リン酸化反応により消費されたＡＴＰ量を算出した。
この系を用いて、各濃度の化合物存在下においてキナーゼ反応を行い、算出したＡＴＰ消費量の化合物濃度依存曲線からＩＣ５０値を算出した。【０２０８】
＜ＭＳＫ１：Ｍｉｔｏｇｅｎ−  ａｎｄ  ｓｔｒｅｓｓ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｋｉｎａｓｅ−１（マイトジェンストレス活性化プロテインキナーゼ）＞
ヒト組換え型ＭＳＫ１（アミノ酸２〜８３２、Ｕｐｓｔａｔｅ社）を用いて、基質ペプチド（ＬＲＲＡＳＬＧ、Ｐｒｏｍｅｇａ社）へのリン酸化を評価した。
全量５０μＬの系において、４０ｎｇの上記酵素を４０ｍＭ  ＭＯＰＳ−ＮａＯＨ（ｐＨ７．０）、２０ｍＭ  塩化マグネシウム、２００μＭ  上記ペプチドおよび１μＭ  ＡＴＰ存在下において、室温で８０分間反応させた。キナーゼ反応後、ルシフェラーゼ試薬（Ｋｉｎａｓｅ−Ｇｌｏ  Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ  Ｋｉｎａｓｅ  Ａｓｓａｙ  キット、Ｐｒｏｍｅｇａ社）を用いて、反応系内のＡＴＰ量に由来する発光強度を化学発光測定装置（ＭｉｃｒｏＬｕｍａｔ、Ｂｅｒｔｈｏｌｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社）を用いて測定し、キナーゼ未反応系における発光強度と比較することで、リン酸化反応により消費されたＡＴＰ量を算出した。
この系を用いて、各濃度の化合物存在下においてキナーゼ反応を行い、算出したＡＴＰ消費量の化合物濃度依存曲線からＩＣ５０値を算出した。【０２０９】
＜ＭＫＫ４：Ｍｉｔｏｇｅｎ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｋｉｎａｓｅ  ｋｉｎａｓｅ  ４（マイトジェン活性化プロテインキナーゼキナーゼ４）＞
マウス組換え型ＭＫＫ４（アミノ酸３４〜３９７、Ｕｐｓｔａｔｅ社）を用いて、ヒト組換え型ＪＮＫ１α１（不活性型、Ｕｐｓｔａｔｅ社）へのリン酸化を評価した。
全量５０μＬの系において、４００ｎｇの上記酵素を２５ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ  （ｐＨ７．５）、１０ｍＭ  塩化マグネシウム、０．０２ｍｇ／ｍＬ  上記ＪＮＫ１α１、および１μＭ  ＡＴＰ存在下において、室温で８０分間反応させた。キナーゼ反応後、ルシフェラーゼ試薬（Ｋｉｎａｓｅ−Ｇｌｏ  Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ  Ｋｉｎａｓｅ  Ａｓｓａｙ  キット、Ｐｒｏｍｅｇａ社）を用いて、反応系内のＡＴＰ量に由来する発光強度を化学発光測定装置（ＭｉｃｒｏＬｕｍａｔ、Ｂｅｒｔｈｏｌｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社）を用いて測定し、キナーゼ未反応系における発光強度と比較することで、リン酸化反応により消費されたＡＴＰ量を算出した。
この系を用いて、各濃度の化合物存在下においてキナーゼ反応を行い、算出したＡＴＰ消費量の化合物濃度依存曲線からＩＣ５０値を算出した。【０２１０】
＜Ａｂｌ：（癌遺伝子産物）＞
ヒト組換え型Ａｂｌ（アミノ酸２７〜１１４９、Ｕｐｓｔａｔｅ社）を用いて、基質ペプチド（ＥＡＩＹＡＡＰＦＡＫＫＫ、Ｕｐｓｔａｔｅ社）へのリン酸化を評価した。
全量５０μＬの系において、２０ｎｇの上記酵素を５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ  （ｐＨ７．５）、１０ｍＭ  塩化マグネシウム、５０μＭ  上記ペプチド、および１μＭ  ＡＴＰ存在下において、室温で８０分間反応させた。キナーゼ反応後、ルシフェラーゼ試薬（Ｋｉｎａｓｅ−Ｇｌｏ  Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ  Ｋｉｎａｓｅ  Ａｓｓａｙ  キット、Ｐｒｏｍｅｇａ社）を用いて、反応系内のＡＴＰ量に由来する発光強度を化学発光測定装置（ＭｉｃｒｏＬｕｍａｔ、Ｂｅｒｔｈｏｌｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社）を用いて測定し、キナーゼ未反応系における発光強度と比較することで、リン酸化反応により消費されたＡＴＰ量を算出した。
この系を用いて、各濃度の化合物存在下においてキナーゼ反応を行い、算出したＡＴＰ消費量の化合物濃度依存曲線からＩＣ５０値を算出した。【０２１１】
＜Ｓｒｃ：（癌遺伝子産物）＞
ヒト組換え型Ｓｒｃ（Ｕｐｓｔａｔｅ社）を用いて、基質ペプチド（ＫＶＥＫＩＧＥＧＴＹＧＶＶＹＫ、Ｕｐｓｔａｔｅ社）へのリン酸化を評価した。
全量５０μＬの系において、６Ｕｎｉｔの上記酵素を４０ｍＭ  ＭＯＰＳ−ＮａＯＨ（ｐＨ７．０）、１０ｍＭ  塩化マグネシウム、２５ｍＭ  塩化マンガン、３００μＭ  上記ペプチドおよび０．５μＭ  ＡＴＰ存在下において、室温で８０分間反応させた。キナーゼ反応後、ルシフェラーゼ試薬（Ｋｉｎａｓｅ−Ｇｌｏ  Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ  Ｋｉｎａｓｅ  Ａｓｓａｙ  キット、Ｐｒｏｍｅｇａ社）を用いて、反応系内のＡＴＰ量に由来する発光強度を化学発光測定装置（ＭｉｃｒｏＬｕｍａｔ、Ｂｅｒｔｈｏｌｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社）を用いて測定し、キナーゼ未反応系における発光強度と比較することで、リン酸化反応により消費されたＡＴＰ量を算出した。
この系を用いて、各濃度の化合物存在下においてキナーゼ反応を行い、算出したＡＴＰ消費量の化合物濃度依存曲線からＩＣ５０値を算出した。【０２１２】
上記の各キナーゼに対する、特許文献１に記載の化合物４及び前記実施例化合物の阻害活性の結果を表１に示す。
（略称）
ＢＳＡ：  ウシ血清アルブミン
ＥＧＴＡ：  グリコールエーテルジアミン四酢酸
ＣＧＭＰ：  環状グアノシン一リン酸
ＭＯＰＳ：  ３−モルホリノプロパンスルホン酸【０２１３】
【表１】
0004257383.tif 000060
【０２１４】
前記評価系を用いて算出したＩＣ５０値を基に、試験化合物のＲＯＣＫＩＩ阻害活性を１．０としたときの、他のキナーゼ（ＰＫＡ、ＰＫＧ、ＣａＭＫＩＩ、ＡｕｒｏｒａＡ）の相対阻害活性比を算出し、比較した。その結果を表２に示す。【０２１５】
【表２】
0004257383.tif 000061
【０２１６】
表中、ＲＯＣＫＩＩ、ＰＫＡ、ＰＫＧ、ＣａＭＫＩＩ、ＡｕｒｏｒａＡは前記と同じ意味を示す。【０２１７】
以下に具体的な製剤例を示す。
製剤例１（カプセル剤）
0004257383.tif 000062
上記成分を常法により混合した後ゼラチンカプセルに充填し、カプセル剤を得た。【０２１８】
製剤例２（錠剤）
0004257383.tif 000063
上記成分を常法により混合し錠剤を得た。【０２１９】
製剤例３（注射剤）
実施例１の化合物（１００ｍｇ）及び塩化ナトリウム（９００ｍｇ）を約８０ｍＬの注射用蒸留水に溶かし、次いで得られた溶液に注射用蒸留水を加え、総量１００ｍＬにする。これを無菌濾過した後アンプル１０本に分注、シールし、無菌の注射剤を得た。