(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の一般式（Ｉ）
0004376319.tif 000008
（ここで、
ｎは２又は３に等しい整数であり、
Ｒ1及びＲ2は同一であっても異なっていてもよく、水素原子又は１〜４個の炭素原子を含有するアルキル基を表わすか、或いは
Ｒ1とＲ2はそれらが結合している窒素原子と共に、置換され又は置換されていない５〜１５員の芳香族又は非芳香族の飽和又は不飽和の単環式又は多環式の複素環（酸素、硫黄及び窒素原子から選択される１〜３個の追加の複素原子を含有し得る）を形成するかのいずれかであり、
Ｘはエステル化されていてよいヒドロキシル基であり、
Ｙは置換され又は置換されていない１〜４個の炭素原子を含有するアルキル基を表わす）
の化合物並びにそれらの製薬上許容できる酸との付加塩。
【請求項２】
ｎが２に等しい請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物並びにそれらの製薬上許容できる酸との付加塩。
【請求項３】
ｎが２に等しく、
Ｒ1及びＲ2が同一であっても異なっていてもよく、１〜４個の炭素原子を含有するアルキル基を表わすか、或いは
Ｒ1とＲ2はそれらが結合している窒素原子と共にピペリジノ、ピロリジノ又は２−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタ−２−イル基を形成するかのいずれかであり、
Ｘがヒドロキシル基を表し、
Ｙがメチル又はエチル基を表す
請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項４】
下記の化合物名：
・１１β−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］−１９−ノル−１７α−プレグナ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７β−ジオール、
・１７α−メチル−１１β−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７β−ジオール、
・１７α−メチル−１１β−［４−［２−（ジエチルアミノ）エトキシ］フェニル］エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７β−ジオール、
・１７α−メチル−１１β−［４−［２−（１−ピロリジニル）エトキシ］フェニル］エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７β−ジオール、
・１７α−メチル−１１β−［４−［２−（２−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタ−２−イル）エトキシ］フェニル］エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７β−ジオール、
・１７α−（トリフルオルメチル）−１１β−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７β−ジオール
である請求項１〜３のいずれかに記載の上記の式（Ｉ）の化合物並びにそれらの製薬上許容できる酸との付加塩。
【請求項５】
請求項１に記載の一般式（Ｉ）の化合物を製造するにあたり、次の一般式（II）
0004376319.tif 000009
（ここで、ｎ、Ｒ1及びＲ2は請求項１で定義した通りである）
の化合物に１〜４個の炭素原子を含有する有機金属化合物を作用させて、Ｘがヒドロキシル基であり且つＹが１〜４個の炭素原子を含有するアルキル基である式（Ｉ）の化合物を形成し、この式（Ｉ）の化合物を要すれば１７−ＯＨのエステル化反応及び（又は）塩形成反応に付することを特徴とする、上記の一般式（Ｉ）の化合物の製造方法。
【請求項６】
Ｙが２〜４個の炭素原子を含有するアルキル基を表わす請求項１に記載の一般式（Ｉ）の化合物を製造するにあたり、次の一般式（III）
0004376319.tif 000010
（ここで、ｎ、Ｒ1及びＲ2は上で定義した通りであり、Ｙ’は２〜４個の炭素原子を含有するアルケニル又はアルキニル基を表わす）
の化合物に二重結合又は三重結合の還元剤を作用させて、Ｘがヒドロキシル基であり且つＹが２〜４個の炭素原子を含有するアルキル基である式（Ｉ）の化合物を得、この式（Ｉ）の化合物を要すれば１７−ＯＨのエステル化反応及び（又は）塩形成反応に付することを特徴とする、上記の一般式（Ｉ）の化合物の製造方法。
【請求項７】
請求項１に記載の一般式（Ｉ）の化合物を含有する薬剤。
【請求項８】
請求項２、３又は４に記載の一般式（Ｉ）の化合物を含有する薬剤。
【請求項９】
骨粗鬆症の予防又は治療のための請求項７又は８に記載の薬剤。
【請求項１０】
心臓血管の保護に使用するための請求項７又は８に記載の薬剤。
【請求項１１】
請求項１に記載の一般式（Ｉ）の化合物を含有する、閉経又は閉経関連症のホルモン補充療法のための薬剤。
【請求項１２】
子宮に対するエストロゲン活性をほとんど示さず又は全く示さない、骨粗鬆症の予防又は治療のための請求項１１に記載の薬剤。
【請求項１３】
乳房腫瘍の恐れある女性における骨粗鬆症の予防又は治療のための請求項１１に記載の薬剤。
【発明の詳細な説明】
本発明は、１１位が置換されたステロイド化合物、それらの製造方法、それらの薬剤としての用途及びそれらを含有する製薬組成物に関する。
骨粗鬆症は、無意識のうちに又は最小の障害に起因する場合に、脊椎又はその周辺部の骨折を生じさせるのに充分な骨物質の定量的及ぴ定性的な減少を特徴とする病状である。この疾病はその発端で多くの因子を有するが、女性の場合に骨の損失又はオステオペニアにおいて支配的な因子を構成するのは閉経である。
このオステオペニアは、それ自体、海綿状骨の構造の希薄化及び変性によって示され、その結果が骨格の脆弱性及び骨折の危険を増大させることである。骨の損失は、卵巣機能の停止に起因する閉経後に強く増加し、６５才の年齢後に前の年より毎年３〜５％の衰えとなる。
治療のためには、閉経後のホルモンの欠乏は、エストロゲンが骨質量を保存するのに主な役割を果たすホルモン補充療法によって補うことができる。しかし、長期間のエストロゲン療法は、ときとして生殖器にとって望ましくない効果（子宮内膜過形成、乳癌など）を伴い、これが主たる欠点となり、その使用を制約させている。
従って、エストラジオール以外の解離したエストロゲン活性、即ち、骨のレベルでエストロゲン活性を有するが、子宮内膜過形成活性をほとんど有しないか又は全く有せず、また乳房腫瘍増殖活性も有しない化合物を見出すことが好都合である。仏国特許出願ＦＲ２６４０９７７Ａ（１９９０年６月２９日）は、抗エストロゲン及び（又は）エストロゲン活性を有するステロイドを記載している。これらの分子は、それらがアルキニル基により置換されているか又は１７α位が置換されていないという点で本発明のものとは相違する。また、文献のＳｔｅｒｏｉｄｓ（リュ・ジャン他、Ｖｏｌ．６０，Ｎｏ．８，５１２−５１８，１９９５年８月）は、１７α位が置換されていない類似体（ＲＵ３９４１１）であって、混成のエストロゲン／抗エストロゲン活性を有し、ＭＣＦ−７乳房腫瘍細胞の増殖を阻止し、従って乳癌を治療するのに有用であるものを開示している。
従って、本発明の主題は、次の一般式（Ｉ）
0004376319.tif 000002
（ここで、
ｎは２又は３に等しい整数であり、
Ｒ1及びＲ2は同一であっても異なっていてもよく、水素原子又は１〜４個の炭素原子を含有するアルキル基を表わすか、或いは
Ｒ1とＲ2はそれらが結合している窒素原子と共に、置換され又は置換されていない５〜１５員の芳香族又は非芳香族の飽和又は不飽和の単環式又は多環式の複素環（酸素、硫黄及び窒素原子から選択される１〜３個の追加の複素原子を含有し得る）を形成するかのいずれかであり、
Ｘはエステル化されていてよいヒドロキシル基を表わし、
Ｙは置換され又は置換されていない１〜４個の炭素原子を含有するアルキル基を表わす）
の化合物並びにそれらの製薬上許容できる酸との付加塩にある。
１〜４個の炭素原子を含有するアルキル基とは、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル基を意味する。
Ｙが置換されたアルキル基を表わすときは、それは特に１個以上のハロゲン原子により置換されているアルキル基である。好ましくは、Ｙはトリフルオルメチル基を表わすことができる。
Ｒ1及びＲ2がそれらが結合している窒素原子と共に複素環を形成するときは、それは、特に、随意に酸素及び窒素原子から選択される別の複素原子を含有し得る単環式又は二環式の飽和複素環、例えば、ピロリル、イミダゾリル、インドリル、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、チアゾリル、オキサゾリル、フラゾリニル、ピラゾリニル、チアゾリニルから選択される複素環であり、さらに詳しくは下記の飽和複素環である。
0004376319.tif 000003
この複素環が置換されているときは、それは特に窒素原子のレベルでの１〜４個の炭素原子を含有するアルキル基による。
Ｘが場合によりエステル化されていてよいヒドロキシ基であるときは、−ＯＣＯ−ａｌｋ1基（ここで、ａｌｋ1は１〜８個の炭素原子を含有するアルキル基である）、好ましくは−ＯＣＯＭｅ又はＯＣＯＥｔ基を意味する。
製薬上許容できる酸との付加塩とは、アミン上で無機又は有機酸により形成された付加塩を意味する。酸は、下記の酸：塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、りん酸、酢酸、ぎ酸、プロピオン酸、安息香酸、マレイン酸、フマル酸、こはく酸、酒石酸、くえん酸、しゅう酸、グリオキシル酸、アスパラギン酸、アスコルビン酸、アルキルモノスルホン酸、例えばメタンスルホン酸、エタンスルホン酸、プロパンスルホン酸、アリールスルホン酸、例えばベンゼンスルホン酸、ｐ−トルェンスルホン酸及びアリールカルボン酸の一つであってよい。
本発明のさらに特定の主題は、ｎが２に等しい上記の式（Ｉ）の化合物並びにそれらの製薬上許容できる酸との付加塩にある。
本発明のさらに特定の主題は、
ｎが２に等しく、
Ｒ1及びＲ2が同一であっても異なっていてもよく、１〜４個の炭素原子を含有するアルキル基を表わすか、或いは
Ｒ1とＲ2はそれらが結合している窒素原子と共にピペリジノ、ピロリジノ又は２−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタ−２−イル基を形成するかのいずれかであり、
Ｘがヒドロキシル基を表し、
Ｙがメチル又はエチル基を表す
上記の式（Ｉ）の化合物にある。
本発明の特別の主題は、下記の化合物名：
・１１β−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］−１９−ノル−１７α−プレグナ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７β−ジオール、
・１７α−メチル−１１β−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７β−ジオール、
・１７α−メチル−１１β−［４−［２−（ジエチルアミノ）エトキシ］フェニル］エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７β−ジオール、
・１７α−メチル−１１β−［４−［２−（１−ピロリジニル）エトキシ］フェニル］エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７β−ジオール、
・１７α−メチル−１１β−［４−［２−（２−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタ−２−イル）エトキシ］フェニル］エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７β−ジオール、
・１１β−［４−［２−（２−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタ−２−イル）エトキシ］フェニル］−１９−ノル−１７α−プレグナ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７β−ジオール
・１７α−（トリフルオルメチル）−１１β−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７β−ジオール
である上記の式（Ｉ）の化合物並びにそれらの製薬上許容できる酸との付加塩にある。
また、本発明の主題は、上記の式（Ｉ）の化合物を製造するにあたり、次の一般式（II）
0004376319.tif 000004
（ここで、ｎ、Ｒ1及びＲ2は上で定義した通りである）
の化合物に１〜４個の炭素原子を含有する有機金属化合物を作用させて、Ｘがヒドロキシル基であり且つＹが１〜４個の炭素原子を含有するアルキル基である式（Ｉ）の化合物を形成し、この式（Ｉ）の化合物を要すれば１７−ＯＨのエステル化反応及び（又は）塩形成反応に付することを特徴とする、上記の式（Ｉ）の化合物の製造方法にある。
１７−ケト基への有機金属化合物の作用は、Ｘがヒドロキシル基であり且つＹが１〜４個の炭素原子を含有するアルキル基である式（Ｉ）の化合物への道筋を提供する。
１〜４個の炭素原子を含有するアルキル基から誘導される有機金属化合物は、式：Ｙ−ＭｇＨａｌのマグネシウム化合物及び式：Ｙ−Ｌｉのリチウム化合物（両化合物において、Ｙは上で定義した通りであり、Ｈａｌはハロゲン原子を表わす）うちから選択される。本法を実施するのに好ましい態様では、Ｈａｌは塩素、臭素又は沃素原子、好ましくは臭素原子を表わす。
Ｘがヒドロキシル基であり、ＹがＣＦ3基を有する式（Ｉ）の化合物を得るためには、反応は、１７−ケト基にＣＦ3ＳｉＭｅ3を作用させ、次いで弗化テトラブチルアンモニウムのような脱保護剤を作用させることにより実施される。
また、本発明は、Ｙが２〜４個の炭素原子を含有するアルキル基を表わす上記の一般式（Ｉ）の化合物を製造するにあたり、次の一般式（III）
0004376319.tif 000005
（ここで、ｎ、Ｒ1及びＲ2は上で定義した通りであり、Ｙ’は２〜４個の炭素原子を含有するアルケニル又はアルキニル基を表わす）
の化合物に二重結合又は三重結合の還元剤を作用させて、Ｘがヒドロキシル基であり且つＹが１〜４個の炭素原子を含有するアルキル基である式（Ｉ）の化合物を形成し、この式（Ｉ）の化合物を要すれば１７−ＯＨのエステル化反応及び（又は）塩形成反応に付することを特徴とする、上記の式（Ｉ）の化合物の製造方法にある。
完全な還元反応は、炭素に担持したパラジウムのような触媒又はウイルキンソン試薬のようなロジウム触媒の存在下に水素を作用させて実施することができる。
エステル化及び塩形成の反応は当業者に知られた通常の方法によって実施される。
一般式（Ｉ）の化合物並びにそれらの製薬上許容できる酸との付加塩はエストロゲン活性、抗エストロゲン活性及び抗増殖活性を持っている。
これに基づいて、式（Ｉ）の化合物は、低フォルクリン症と結び付いた障害、例えば無月経、月経困難症、反復性流産、月経前障害の治療に、ある種のエストロゲン依存性病状、例えば前立腺の腺腫及び癌、乳房の癌及びそれらの転移の治療に又は良性乳房腫瘍の治療に、抗子宮栄養剤として、並びに閉経又は閉経関連症の復帰療法に使用することができる。
閉経と関連する徴候及び結果とは、より正確には、顔面紅潮、発汗、膣の萎縮（ａｔｒｏｐｈｙ）及び乾き（ｄｒｙｎｅｓｓ）、尿の症状、長期間にわたっては骨質量の低下及び骨折の危険の増大並びにエストロゲンにより提供される心臓血管保護の損失を意味する。
しかして、特に、一般式（Ｉ）の化合物並びにそれらの製薬上許容できる酸との付加塩は、骨粗鬆症の予防又は治療に使用することができる。
また、一般式（Ｉ）の化合物並びにそれらの製薬上許容できる酸との付加塩は人の骨粗鬆症の予防又は治療に使用することができる。
さらに、それらは、二次的な骨粗鬆症（例えば、不動化と関連したコルチゾン関係骨粗鬆症）の予防又は治療に使用することができる。
一般式（Ｉ）の化合物並びにそれらの製薬上許容できる酸との付加塩は、特に、解離したエストロゲン活性を持っている。
「解離したエストロゲン活性」とは、骨のレベルではエストロゲン活性を明らかに示すが、子宮のレベルでは最低の活性しか示さず、従って子宮内膜の増殖をもたらさないような活性（エストラジオールの活性よりもはるかに低い活性）を意味する。
さらに、本発明の化合物は、下記の利点を有する。
・それらは、乳房のレベルで抗エストロゲン活性を示す。エストラジオールとは反対に、それらは、ヒト乳房腫瘍細胞の増殖を刺激せず、その増殖を抑止さえし得る。従って、本発明の化合物は、乳癌の危険にさらされ（家系履歴）、従ってエストラジオールを使用する復帰治療から外れる女性の閉経を治療するのに特に有益である。それらは乳癌の治療に使用することができる。
・それらは、エストラジオールにより誘発されるレベルに等しいレベルまで血清コレステロールレベルを低下させる。従って、それらは心臓血管の保護を強化させる。
・最後に、本発明に従う化合物は、子宮レベルでエストロゲン活性を有しない。このことは、それらを黄体ホルモン様化合物と併用投与することを要求しない。
従って、本発明は、一般式（Ｉ）の化合物並びにそれらの製薬上許容できる酸との付加塩よりなる薬剤に関する。
さらに詳しくは、本発明は、一般式（Ｉ）の化合物並びにそれらの製薬上許容できる酸との付加塩よりなる骨粗鬆症の予防又は治療のための薬剤に関する。
特に、本発明は、一般式（Ｉ）の化合物並びにそれらの製薬上許容できる酸との付加塩よりなる、子宮に対するエストロゲン活性をほとんど示さず又は全く示さない、骨粗鬆症の予防又は治療のための薬剤に関する。
最後に、本発明は、一般式（Ｉ）の化合物並びにそれらの製薬上許容できる酸との付加塩よりなる、乳房腫瘍の恐れある女性における骨粗鬆症の予防又は治療を意図した薬剤に関する。
本発明は、上記の薬剤の少なくとも１種を活性成分として含有する製薬組成物まで及ぶ。
式（１）の化合物並びにそれらの製薬上許容できる酸との付加塩は、消化器経路で、非経口的に又は局所的に、例えば皮下経路で投与することができる。それらは、無味の若しくは糖衣錠剤、カプセル、顆粒、座薬、丸薬、注射用調合剤、軟膏、クリーム、ゲル、微小球、インプラント、膣内リング、パッチ、スプレーの剤形で提供できる。これらは通常の方法により製剤化される。
活性成分は、これらの製薬組成物に通常使用される補助剤、例えばタルク、アラビアゴム、ラクトース、でんぷん、ステアリン酸マグネシウム、ココアバター、水性若しくは非水性のビヒクル、動物性若しくは植物性の脂肪物質、パラフィン誘導体、グリコール類、各種の湿潤、分散若しくは乳化剤、保存剤と配合することができる。
通常の薬用量は、治療すべき障害及び投与経路によって変わる。それは、例えば成人について経口投与で１日当たり０．５〜１００ｍｇであってよい。
式（II）及び式（III）の化合物は、次の特許：ＥＰ−Ｂ−００９７５７２、ＦＲ−Ｂ−２６４０９７７及びＥＰ−Ｂ−３０５９４２に記載されている既知の化合物である。
以下に示す実施例は、本発明を例示するもであって、それを何ら制限するものではない。
例１：１７α−メチル−１１β−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７β−ジオール
１．０５６ｇのＣｅＣｌ3（III）・７Ｈ2Ｏを減圧下に１４０℃で脱水し、次いで不活性雰囲気下に室温で１０．６ｍｌのテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）を添加し、次いで２時間撹拌した後に−７０℃で８９ｍｌのメチルリチウムのエーテル溶液（１．６Ｍ）を添加し、−７５℃で３０分間撹拌する。次いで、この懸濁液に２６８ｍｇの３−ヒドロキシ−１１β−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−１７−オンを３ｍｌのＴＨＦ／シリポライトに加えてなる溶液を添加し、この温度で１時間撹拌する。１５ｍｌの塩化アンモニウム飽和溶液及び２０ｍｌの酢酸エチルを添加した後、ろ過し、洗浄し、乾燥し、減圧下に蒸発させて２７７ｍｇの所期の粗生成物を得た。この生成物をシリカカラムでクロマトグラフィーし、塩化メチレン９０／メタノール１０／水酸化アンモニウム０．５の混合物で溶離することによって精製する。２３２ｍｇの生成物を得た。これをジクロルメタン／イソプロピルエーテル混合物で再結晶して１８０ｍｇの所期の純生成物を得た。
Ｍｐ＝１５５℃。
ＩＲ（ＣＨＣｌ3）
−ＯＨ：３６０２ｃｍ-1＋一般的吸収
芳香族：１６１０ｃｍ-1、１５８０ｃｍ-1、１５１２ｃｍ-1
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）
０．５１（ｓ）      １８位のＭｅ
１．２９（ｓ）      １７位のＭｅ
３．９８（ｍ）      Ｏ−ＣＨ2−ＣＨ2−Ｎ、ＣＨ−Ｐｈ（Ｈ1）
６．４１            環ＡのＨ2、Ｈ4、１１位のフェニルのＨ’3、Ｈ’5
６．７８（ｄ）      環ＡのＨ1
６．９４            １１位のフェニルのＨ’2、Ｈ’6
例２：１１β−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］−１９−ノル−１７α−プレグナ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７β−ジオール
１９２ｍｇの１１β−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］−１９−ノル−１７α−プレグナ−１，３，５（１０）−トリエン−２０−イン−３，１７β−ジオールを６ｍｌのエタノールに溶解してなる溶液に不活性雰囲気下に２０ｍｇの活性炭に担持したパラジウム（９．５％）を添加し、１６６０ミリバールの水素の圧力下に１時間４５分撹拌する。懸濁液をろ過し、減圧下に蒸発させる。１９３ｍｇの粗生成物を得た。これを付属シリカカラム（リクロソルブＲＰ１８）でクロマトグラフィーし、メタノール９０／水１０の混合物で溶離することによって精製する。１３７ｍｇの生成物を得た。これをジクロルメタン／イソプロピルエーテル混合物により再結晶して１１４ｍｇの所期の純生成物を得た。
Ｍｐ＝２３１℃。
ＩＲ（ＣＨＣｌ3）
−ＯＨ：３６００ｃｍ-1＋一般的吸収
芳香族：１６１０ｃｍ-1、１５８１ｃｍ-1、１５１２ｃｍ-1
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3＋２滴のＣ5Ｄ5Ｎ）
０．４７（ｓ）      １８位のＭｅ
１．０１（ｔ）      ＣＨ2−ＣＨ3
２．４７            −ＣＨ2−Ｎ−ＣＨ2−（ピペリジノ）
２．７１            Ｏ−ＣＨ2−ＣＨ2−Ｎ
３．９９（ｍ）      Ｏ−ＣＨ2−ＣＨ2−Ｎ、ＣＨ−Ｐｈ（Ｈ11）
６．４８（ｄｄ）    Ｈ2
６．５９            Ｈ’3、Ｈ’5（１１位のフェニル）
６．６３（ｄ）      Ｈ4（環Ａ）
６．８０（ｄ）      Ｈ1（環Ａ）
６．９６            １１位のフェニルのＨ’2、Ｈ’6
９．９４            ３−ＯＨ
例３：１１β−［４−［２−（２−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタ−２−イル）エトキシ］フェニル］−１７α−メチルエストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７β−ジオール
出発時に３．７０ｇのＣｅＣｌ3・７Ｈ2Ｏ及び３７ｍｌのテトラヒドロフランと６．７ｍｌのメチルリチウムのエーテル溶液（１．６Ｍ）を使用して、例１におけるように操作する。得られた懸濁液を−７８℃に冷却し、これに９６６ｍｇの１１β−［４−［２−（２−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタ−２−イル）エトキシ］フェニル］−３−ヒドロキシエストラ−１，３，５（１０）−トリエン−１７−オンを８ｍｌのテトラヒドロフランに溶解してなる溶液をゆっくりと添加し、４５分間撹拌し、例１におけるように合成を続ける。８７４ｍｇの粗生成物を得た。シリカでクロマトグラフィー（溶離剤：ＣＨ2Ｃｌ2−ＮＨ4ＯＨ９０−１０−０．７ＡｃＯＥｔ−ＴＥＡ８８−１２）した後、４４２ｍｇの所期の生成物を得た。
Ｍｐ＝１６３〜１６４℃。
ＩＲ（ＣＨＣｌ3）
−ＯＨ：３６０２ｃｍ-1＋一般的吸収
芳香族：１６１０ｃｍ-1、１５８１ｃｍ-1、１５１２ｃｍ-1
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）
０．５１（ｓ）      １８位のＭｅ
１．２９（ｓ）      １７位のＭｅ
３．８５〜４．０５  Ｏ−ＣＨ2−ＣＨ2−Ｎ、ＣＨ−Ｐｈ（Ｈ11）
６．４１            環ＡのＨ2、Ｈ4
６．７７            環ＡのＨ1
６．４６−６．９５  １１位のフェニルのＨ
例３の出発時に使用した１１β−［４−［２−（２−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタ−２−イル）エトキシ］フェニル］−３−ヒドロキシエストラ−１，３，５（１０）−トリエン−１７−オンの製造
１．１ｇの３−ヒドロキシ−１１β−［４−（ヨードメトキシ）フェニル］エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−１７−オンを２０ｍｌのテトラヒドロフランに溶解してなる溶液を１．０３ｇの２−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタンと混合し、窒素雰囲気下に乾留温度で１時間半撹拌する。テトラヒドロフランを蒸発させ、残留物を酢酸エチルで溶解させ、水を添加し、酢酸エチルで抽出し、乾燥し、溶媒を蒸発させ、次いでシリカでクロマトグラフィー（溶離剤：ＣＨ2Ｃｌ2−ＣＨ3ＯＨ−ＮＨ4ＯＨ９０−１０−０．５）した後、０．９７ｇの所期の生成物を得た。
Ｒｆ＝０．２７。
例４：１７α−メチル−１１β−［４−［２−（１−ピロリジニル）エトキシ］フェニル］エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７β−ジオール
出発時に３．２４ｇのＣｅＣｌ3・７Ｈ2Ｏ、３０ｍｌのテトラヒドロフラン、５．８５ｍｌのメチルリチウム、次いで８５０ｍｇの３−ヒドロキシ−１１β−［４−［２−（１−ピロリジニル）エトキシ］フェニル］エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−１７−オンを８．５ｍｌのテトラヒドロフランに溶解してなる溶液を使用して、例１におけるように操作する。シリカでクロマトグラフィー（溶離剤：ＣＨ2Ｃｌ2−ＣＨ3ＯＨ−ＮＨ4ＯＨ９２−８−０．２）した後、６１５ｍｇの所期の生成物を得た。
Ｍｐ＝１５５〜１５７℃。
ＩＲ（ＣＨＣｌ3）
−ＯＨ：３６０３ｃｍ-1＋一般的吸収
芳香族：１６１０ｃｍ-1、１５８１ｃｍ-1、１５１２ｃｍ-1
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）
０．５１（ｓ）      １８位のＭｅ
１．２９（ｓ）      １７位のＭｅ
３．９９            Ｏ−ＣＨ2−ＣＨ2−Ｎ、ＣＨ−Ｐｈ（Ｈ11）
６．３８（ｄｄ）    環ＡのＨ2
６．４０（ｄ）      環ＡのＨ4
６．７７（ｄ）      環ＡのＨ1
６．４９−６．９５  １１位のフェニルのＨ
例４の開始時に使用した３−ヒドロキシ−１１β−［４−［２−（１−ピロリジニル）エトキシ］フェニル］エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−１７−オンの製造
１．１ｇのヨードステロイド誘導体を２０ｍｌのテトラヒドロフランに溶解してなる溶液及び１ｍｌのピロリジンを使用して、例３の出発物質の製造におけるように操作する。シリカでクロマトグラフィー（溶離剤：ＣＨ2Ｃｌ2−ＣＨ3ＯＨ−ＮＨ4ＯＨ９２−８−０．２）した後、８６４ｍｇの所期の生成物を得た。
Ｒｆ＝０．２９。
例５：１１β−［４−［２−（ジエチルアミノ）エトキシ］フェニル］−１７α−メチルエストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７β−ジオール
出発時に３．６２ｇのＣｅＣｌ3・７Ｈ2Ｏ、３６ｍｌのテトラヒドロフラン及び６．５ｍｌのメチルリチウムのエーテル溶液（１．６Ｍ）、次いで８９８ｍｇの３−ヒドロキシ−１１β−［４−［２−（ジエチルアミノ）エトキシ］フェニル］エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−１７−オンを９ｍｌのテトラヒドロフランに溶解してなる溶液を使用して、例１におけるように操作する。シリカでクロマトグラフィー（溶離剤：ＣＨ2Ｃｌ2−ＣＨ3ＯＨ−ＮＨ4ＯＨ９２−８−０．５）した後、６８６ｍｇの所期の生成物を得た。
Ｍｐ＝１５９〜１６０℃。
ＩＲ（ＣＨＣｌ3）
−ＯＨ：３６０２ｃｍ-1＋一般的吸収
芳香族：１６１０ｃｍ-1、１５８１ｃｍ-1、１５１２ｃｍ-1（Ｆ）、１５００ｃｍ-1（ｅｐ）
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）
０．４７（ｓ）      １８位のＭｅ
１．０５（ｔ）      −Ｎ−（ＣＨ2−ＣＨ3）2
１．２８（ｓ）      １８位のＭｅ
２．６５（ｍ）      −Ｎ−（ＣＨ2−ＣＨ3）2
３．９５（ｔ）      Ｏ−ＣＨ2−ＣＨ2−Ｎ
６．３１（ｄ）      環ＡのＨ4
６．３８（ｄｄ）    環ＡのＨ2
６．８０（ｄ）      環ＡのＨ1
６．５６及び６．９３  １１位のフェニルのＨ
例５の開始時に使用した３−ヒドロキシ−１１β−［４−［２−（ジエチルアミノ）エトキシ］フェニル］エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−１７−オンの製造
１．１ｇのヨードステロイド誘導体を２０ｍｌのテトラヒドロフランに溶解してなる溶液及び２ｍｌのジエチルアミンを使用して、例３の出発物質の製造におけるように操作する。シリカでクロマトグラフィー（溶離剤：ＣＨ2Ｃｌ2−ＣＨ3ＯＨ−ＮＨ4ＯＨ９２−８−０．２）した後、８９８ｍｇの所期の生成物を得た。
Ｒｆ＝０．２４。
例６：１７α−（トリフルオルメチル）−１１β−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７β−ジオール
８３ｍｇの弗化テトラブチルアンモニウム（Ｂｕ4ＮＦ・４Ｈ2Ｏ）を１０-2ミリバールの圧力下に１２０℃に２時間加熱し、次いで不活性雰囲気下に周囲温度に戻す。次いで、２３７ｍｇの３−ヒドロキシ−１１β−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−１７−オンを３ｍｌのテトラヒドロフランに溶解してなる溶液に添加し、＋４℃に冷却し、０．３ｍｌのトリメチル（トリフルオルメチル）シランを添加し、次いでこの温度で２時間攪拌する。４ｍｌのテトラヒドロフランを添加し、周囲温度で３時間半攪拌し、水を添加し、塩化メチレンで抽出し、水洗し、溶媒を減圧下に蒸発させる。残留物をシリカでクロマトグラフィー（溶離剤：ＣＨ2Ｃｌ2−ＭｅＯＨ−ＮＨ4ＯＨ９−１０−０．１）し、１２７ｍｇの所期の生成物を得た。
ＩＲ（ＣＨＣｌ3）
−ＯＨ：３５９８ｃｍ-1＋一般的吸収
芳香族：１６１０ｃｍ-1、１５８０ｃｍ-1、１５１２ｃｍ-1
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）
０．５６（ｓ）      １８位のＭｅ
４．００（ｍ）      Ｏ−ＣＨ2−ＣＨ2−Ｎ、ＣＨ−Ｐｈ（Ｈ11）
６．３７（ｄｄ）    Ｈ2（環Ａ）
６．４１−６．９３  Ｈ’2、Ｈ’3（１１位のフェニル）
６．４１（ｄ）      Ｈ4（環Ａ）
６．７７（ｄ）      Ｈ1（環Ａ）
薬理学的研究
１）乳房細胞の増殖に対する効果
各分子の増殖活性を培地中での乳房細胞ＭＣＦ−７ヒトに対するエストラジオールの増殖活性と比較して研究する。
エストラジオール及び（又は）被検分子の作働剤効果を明らかにするために、細胞維持用培地（増殖因子及ぴステロイドに富む）を、中でもステロイドを含まない弱体化した培地（ステロイドを除いた血清を５％補給し、そしてフェノールレッドを含まないＤＭＥＭ）で置き換える。細胞は、試験の開始の２日前にこの剥奪（デプリベーション）を受ける。
被検化合物の存在下に７日間培養した後に、細胞増殖をＤＮＡの決定により評価する。それぞれの試験では、１０-10Ｍでのエストラジオールの効果（溶媒の存在下での細胞増殖よりも少ない、エストラジオールの存在下での細胞増殖）によって１００％の作働剤活性が定まる。分子の活性をこの内部標準と比較して評価する。溶媒のみによって観察される細胞増殖と同等の細胞増殖を与える分子は“不活性”として評価し、溶媒によって観察される細胞増殖よりも低い細胞増殖を与えるものは“阻止”として評価する。
0004376319.tif 000006
２）生後３か月で卵巣摘出術を受けた雌ラットのモデルにおける骨質量及び形成−吸収の活性に対する効果を決定するために試験した。動物は予防的処理を受ける。
動物：
種                          ラット
株                          スプラーグ・ダウレイ
性別                        雌
体重                        ２５０ｇ〜２８０ｇ
１グループ当たりの動物数    ８
物質
１．被検化合物：例１の化合物
＊ビヒクル：コーンオイル、０．５％メチルセルロース
＊投与量：被検化合物当たり１回の投与（０．３ｍｇ／ｋｇ／日）
＊投与回数：１回／日、５日／週として４週間
＊投与経路：物質について経口
＊容量：５ｍｌ／ｋｇ（ｐ．ｏ．）
＊最後の投与と犠牲にするときとの期間：２４時間
＊投与回数：２０
２．参照物質：１７β一エストラジオール
１７β−エストラジオールを、コーンオイル−ベンジルアルコール混合物（９９：１、ｖ／ｖ）の溶液として０．２ｍｌ／ｋｇの容量で０．１ｍｇ／ｋｇ／日の投与量で皮下経路で投与する。
実験操作
動物
研究は生後３か月で卵巣摘出術を受けた雌のラットについて行う。動物を空調した部屋（温度２０℃±２℃）に保持し、箱に４頭づつグループ分けする。動物は、脱塩水及び圧縮飼料（ペレット：Ａ０４ＣＲ−１０ＵＡＲ）を任意に受け取る。
外科術
体重がほぼ２５０ｇの生後３か月の雌ラットを、腹腔内経路（ｉ．ｐ．）により１００ｍｇ／ｋｇの薬量及び１ｍｌ／ｋｇの容量でのイマルゲン１０００による麻酔の下で卵巣摘出術に付す。また、動物はネンブタールも受ける（０．３ｍｌ／ｋｇの容量で３ｍｇ／ｋｇのｉ．ｐ．）。側方切開の後、皮膚及び筋肉の層を切開する。卵管を結紮した後にそれぞれの卵巣を切除する。“ＳＨＡＭ”対照例ラットを同じ条件下で麻酔させる。皮膚及び筋肉の層を切除した後、それぞれの卵巣を露出させ、次いでその場に戻す。
処理
化合物の効果を予防的な処理において決定する。卵巣摘出術の後、化合物を直ちに投与する。動物を８頭のグループに分配する。
グループ１：ビヒクルを受ける“ＳＨＡＭ”対照例ラット
グループ２：ビヒクルを受ける“ＯＶＸ”対照例ラット
グループＸ：それぞれ定められた薬量の被検化合物を受ける“ＯＶＸ”ラット
血液試料
４週間（研究期間）の終了後、動物をギロチンにより断頭する。遠心分離後に集めた血清を−２０℃で保存する。
５００μ１量の血清についての総コレステロール、トリグリセリド及び燐脂質の血清定量から脂質バランスが定まる。血清コレステロールの低下は、溶媒のみを受ける卵巣摘出術を受けた動物により示されるレベルと比較して％で表わされる。
臓器試料
試料動物を犠牲にした後に、下記の臓器を採り出す。
・生殖器
子宮を切除する。これを秤量する。重量増加を溶媒のみを受けた卵巣摘出術を受けた動物の子宮の重量の％として表わす。
・骨
骨の質量（ＢＭＤ、即ち骨無機質密度）を双光子ダブルエネルギーＸ線吸収測定法（ＤＥＸＡ）により測定する。測定は、切除後であって全ての軟質組織を取り除いた後の骨について行う。ＢＭＤ（骨無機質密度）を全ての骨並びに左脛骨の中心近い末端の変質部分について測定する。この帯域は、小柱骨に最も富んだ領域であると定められており、従って、骨の容積及び骨鉱物質密度の変化に最も敏感である。
結果は、次式
0004376319.tif 000007
結論
本発明に従う化合物は、有効な骨保護率（＝７５％）を与えると共に、エストラジオールに起因する活性と比較して最低の子宮親和活性を示す。さらに、総コレステロールレベルの有意の低下が観察される。