(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ
【化１】
0004256095.tif 000065
〔式中、
Ｂは４位、５位、または６位がトリフルオロメチルによって一置換された２−ピリジル基；
Ｘは炭素または窒素原子；
Ｒ１は３−クロロフェニル、４−クロロフェニル、３−ピリジル、２−ピリジルプロピル、２−または４−ピリミジニルエチル(所望によりフッ素により一置換)、２−または４−ピリミジニルプロピル、２−(２−ピリミジニル)プロピル(所望によりフッ素により一置換)から選択される〕
の化合物、またはそれらの薬学的に許容される塩。
【請求項２】
Ｘが窒素原子である、請求項１に記載の化合物、またはそれらの薬学的に許容される塩。
【請求項３】
Ｂが５−トリフルオロメチル−２−ピリジルである、請求項１に記載の化合物、またはそれらの薬学的に許容される塩。
【請求項４】
Ｒ１が２−ピリミジニルプロピル、２−(２−ピリミジニル)プロピル(所望によりフッ素により一置換)または５−フルオロ−２−ピリミジニルエチルである、請求項１記載の化合物、またはそれらの薬学的に許容される塩。
【請求項５】
化合物が
Ｎ−[(１Ｓ)−１−({[４−(５−トリフルオロメチルピリジン−２−イル)ピペラジノ]スルホニル}メチル)−３−(ピリミジン−２−イル)プロピル]−Ｎ−ヒドロキシホルムアミド、
Ｎ−[(１Ｒ)−１−({[４−(５−トリフルオロメチルピリジン−２−イル)ピペラジノ]スルホニル}メチル)−３−(ピリミジン−２−イル)プロピル]−Ｎ−ヒドロキシホルムアミドおよび
Ｎ−[(１Ｓ)−１−({[４−(５−トリフルオロメチルピリジン−２−イル)ピペラジノ]スルホニル}メチル)−４−(ピリミジン−２−イル)ブチル]−Ｎ−ヒドロキシホルムアミド
から選択される、請求項１に記載の化合物、またはそれらの薬学的に許容される塩。
【請求項６】
式IIの化合物と、式Ｒ１ＣＨＯの化合物を反応させ、式IIIのアルケンを得、該アルケンを式IVの化合物に変換し、次いで式IVの化合物を式Ｉの化合物に変換し、そして所望によりその後式Ｉの化合物の薬学的に許容される塩を形成することを含む、請求項１に記載の式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に許容される塩の製造法：
【化２】
0004256095.tif 000066
【請求項７】
式IIの化合物を、式Ｒ１ＣＯＯＲの化合物と反応させ、式VIIIの化合物を得、式VIIIの化合物を式IXの化合物に変換し、式IXの化合物を式IIIのアルケンに変換し、該アルケンを式IVの化合物に変換し、次いで式IVの化合物を式Ｉの化合物に変換し、所望により、その後式Ｉの化合物の薬学的に許容される塩を形成させることを含む、請求項１に記載の式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に許容される塩の製造法：
【化３】
0004256095.tif 000067
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、メタロプロテイナーゼの阻害に有用な化合物と、特にこれらの化合物を含む医薬組成物と、その使用に関する。
【０００２】
本発明の化合物は、１もしくはそれ以上のメタロプロテイナーゼの阻害剤である。メタロプロテイナーゼは、近年急激にその数が増加しているプロテイナーゼ(酵素)のスーパーファミリーである。構造的および機能的な考察に基づいて、これらの酵素は、N.M. Hooper (1994) FEBS Letters 354:1-6 で記載されたように、ファミリーとサブファミリーに分類される。メタロプロテイナーゼの例は、コラゲナーゼ(ＭＭＰ１、ＭＭＰ８、ＭＭＰ１３)、ゼラチナーゼ(ＭＭＰ２、ＭＭＰ９)、ストロメライシン(ＭＭＰ３、ＭＭＰ１０、ＭＭＰ１１)、マトリライシン(ＭＭＰ７)、メタロエラスターゼ(ＭＭＰ１２)、エナメライシン(ＭＭＰ１９)、ＭＴ−ＭＭＰ(ＭＭＰ１４、ＭＭＰ１５、ＭＭＰ１６、ＭＭＰ１７)のような、マトリックスメタロプロテイナーゼ(ＭＭＰ)；ＴＮＦコンバターゼ(ＡＤＡＭ１０、ＴＡＣＥ)のような、セクレターゼおよびシェダーゼを含むレプロリシン、アダマライシン、またはＭＤＣファミリー；コラーゲン前駆体プロセッシングプロテイナーゼ(ＰＣＰ)のような酵素を含むアスタシン・ファミリー；およびアグリカナーゼのような他のメタロプロテイナーゼ、エンドセリンコンバターゼファミリー、およびアンジオテンシンコンバターゼファミリーを含む。
【０００３】
メタロプロテイナーゼは、胎児の発育、骨形成、月経の間の子宮の再構成のような、組織の再構成を含む、多血症の生理学的な疾患のプロセスに重要であると信じられている。これは、メタロプロテイナーゼが、コラーゲン、プロテオグリカン、フィブロネクチンのような広範囲のマトリックス基質の開裂を行い得ることに基づく。メタロプロテイナーゼはまた、腫瘍壊死因子(ＴＮＦ)のような生物学的に重要な細胞の媒介物のプロセッシングまたは分泌；および親和性の低いＩｇＥ受容体ＣＤ２３のような、生物学的に重要な膜タンパク質(より完全なリストは N. M. Hooper ら、(1997) Biochem J. 321:265-279 参照のこと)の翻訳後のタンパク質分解過程または切断において、重要であると信じられている。
【０００４】
メタロプロテイナーゼは、多くの病状と関連している。１もしくはそれ以上のメタロプロテイナーゼの活性の阻害は、これらの病状、例えば：関節の炎症(特にリウマチ性関節炎、骨関節炎、痛風)、胃腸管の炎症(特に炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、潰瘍性胃炎)、皮膚の炎症(特に乾癬、湿疹、皮膚炎)のような様々な炎症性およびアレルギー性疾患；腫瘍の転移または浸潤；骨関節炎のような細胞外マトリックスの無制御の分解；骨の再吸収性疾患(骨粗鬆症、ページェット病)；侵入性血管新生と関連した疾患；糖尿病、歯周病(歯肉炎など)と関連した、コラーゲンの再構築の亢進；角膜の潰瘍、皮膚の潰瘍、手術後の状態(結腸の吻口など)、皮膚の創傷治療；中枢および末梢神経系の髄鞘を破壊する疾患(多発性硬化症など)；アルツハイマー病；再狭窄、アテローム性動脈硬化症などの心血管疾患において観測される、細胞外マトリックスの再構成；慢性閉塞性肺疾患、ＣＯＰＤ(例えば、ＭＭＰ１２が、Anderson & Shinagawa, 1999, Current Opinion in Anti-inflammatory and Immunomodulatory Investigational Drugs, 1(1): 29-38 で議論されているような、ＭＭＰの役割)；において、十分有益になり得る。
【０００５】
メタロプロテイナーゼの阻害剤の多くが知られている；異なるクラスの化合物は、様々なメタロプロテイナーゼの阻害において、異なる程度の効果と選択性を有し得る。我々はメタロプロテイナーゼの阻害剤である新しいクラスの化合物と、その化合物がＭＭＰ−１３とＭＭＰ−９を阻害する際、特に興味深いことを見出した。本発明の化合物は、有利な効力および／または薬物動力学的な性質を有する。
【０００６】
ＭＭＰ１３、またはコラゲナーゼ３は、胸部の腫瘍から得たｃＤＮＡライブラリーから初めてクローン化された [J. M. P. Freije ら、(1994) Journal of Biological Chemistry 269(24):16766-16773]。広範囲の組織由来のＲＮＡのＰＣＲ−ＲＮＡ分析は、胸部繊維腺腫、正常もしくは休止乳腺、胎盤、肝臓、卵巣、子宮、前立腺、耳下腺または乳癌細胞腺(Ｔ４７−Ｄ、ＭＣＦ−７、ＺＲ７５−１)では発見されなかったことから、ＭＭＰ１３の発現が胸部の癌に限定されることを示した。観察の結果、ＭＭＰ１３は、形質転換した表皮のケラチン生成細胞 [N. Johansson ら、(1997) Cell Growth Differ. 8(2):243-250]、扁平上皮細胞癌 [N. Johansson ら、(1997) Am. J. Pathol. 151(2):499-508]、および表皮細胞の腫瘍 [K. Airola ら、(1997) J. Invest. Dermatol. 109(2):225-231]において検出された。これらの結果は、ＭＭＰ１３が形質転換した上皮細胞によって分泌され、特に胸部の癌の損傷や、皮膚の発癌における悪性の上皮細胞成長において観測されるような、転移に関連している細胞外マトリックスの分解と、細胞−マトリックス相互作用に関与し得ることを示唆する。
【０００７】
近年発表されたデータは、ＭＭＰ１３が、他の結合組織の入替え(turnover)に役割を果たすことを示唆している。例えば、タイプIIコラーゲンの分解において、ＭＭＰ１３の基質特異性と優先性に一致して [P. G. Mitchell ら、(1996) J. Clin. Invest. 97(3):761-768; V. Knauper ら、(1996) The Biochemical Journal 271:1544-1550]、ＭＭＰ１３は、一次骨形成と骨格の再構築の間に [M. Stahle-Backdahl ら、(1997) Lab. Invest. 76(5):717-728; N. Johansson ら、(1997) Dev. Dyn. 208(3):387-397]；リウマチ性関節炎や骨関節炎のような破壊的関節疾患において [D. Wernicke ら、(1996) J. Rheumatol. 23:590-595; P. G. Mitchell ら、(1996) J. Clin. Invest. 97(3):761-768; O. Lindy ら、(1997) Arthritis Rheum 40(8):1391-1399]；および人工股関節の無菌状態の緩和の間に [S. Imai ら、(1998) J. Bone Joint Surg. Br. 80(4):701-710]、ある役割を果たすと推定された。ＭＭＰ１３はまた、慢性的に炎症を起こしている歯肉組織の粘膜の上皮細胞に局在する [V. J. Uitto ら、(1998) Am. J. Pathol 152(6):1489-1499] ことから、成人の慢性歯周炎および慢性的な損傷を受けているコラーゲン・マトリックスの再構成 [M. Vaalamo ら、(1997) J. Invest. Dermatol. 109(1):96-101] に関する。
【０００８】
ＭＭＰ９(ゼラチナーゼ Ｂ；９２ｋＤａ タイプ IV コラゲナーゼ；９２ｋＤａ ゼラチナーゼ)は、始めに単離され、クローン化され、１９８９年に配列決定された、分泌性タンパク質である(S.M. Wilhelmら、(1989) J. Biol Chem. 264(29): 17213-17221、訂正の発表 J. Biol Chem. (1990) 265(36): 22570)。ＭＭＰ９の近年のレビューは、このタンパク質についての詳細な情報と参考文献の、優れた情報源である：T.H. Vu & Z. Werb (1998) (Matrix Metalloproteinases (1998) W.C. Parks & R.P. Mecham 編  pp115-148.  Academic Press. ISBN 0-12-545090-7)。下記の事項は、T.H. Vu & Z. Werb (1998) によるレビューから引用する。
【０００９】
ＭＭＰ９の発現は、一般的に、トロホブラスト、破骨細胞、好中球、マクロファージを含む幾つかの細胞のタイプに制限される。しかし、それらの発現は、同じおよび他の細胞タイプにおいて、成長因子またはサイトカイニンに細胞が曝されることを含み、幾つかの媒体によって誘発される。これらは、しばしば炎症応答の発生に関するものと同じ媒体である。他の分泌されたＭＭＰと同様に、ＭＭＰ９は、不活性な酵素前駆体として放出され、続いて切断され、酵素的に活性な酵素を形成する。このインビボでの活性化に要するプロテアーゼは、知られていない。活性なＭＭＰ９と不活性な酵素のバランスは、さらに天然に生じたタンパク質である、ＴＩＭＰ−１(メタロプロテイナーゼ−１の組織阻害剤)との相互作用によって調節される。ＴＩＭＰ−１は、ＭＭＰ９のＣ末端領域に結合し、ＭＭＰ９の触媒ドメインの阻害を引き起こす。ＭＭＰ９前駆体の誘発発現のバランス、前駆体の活性なＭＭＰ９への切断、およびＴＩＭＰ−１の存在が組み合わさって、局所に存在する触媒的に活性なＭＭＰ９の量を決定する。タンパク質分解的に活性なＭＭＰ９は、ゼラチン、エラスチン、および野生型のタイプ IV コラーゲンおよびタイプＶコラーゲンを含む基質を攻撃し；野生型のタイプＩコラーゲン、プロテオグリカン、またはラミニンに対して活性を持たない。
【００１０】
様々な生理学的な、および病理学的なプロセスにおいて、ＭＭＰ９の役割に関わるデータは増大している。生理学的な役割は、胚の着床の初期段階における、子宮の上皮を通じての胚のトロホブラストの浸潤；骨の成長と発達における幾つかの役割；および炎症性の細胞の、血管から組織への移動を含む。ＭＭＰ９の発現の増大は、特定の治療の条件において観測され、それによって関節炎、腫瘍の転移、アルツハイマー病、多発性硬化症、および心筋梗塞のような急性の冠動脈の状態を引き起こすような、アテローム性動脈硬化症における血小板破壊などの病気の進行においてＭＭＰ９が関与している。
【００１１】
ＷＯ−９９／３８８４３は、一般式
Ｂ−Ｘ−(ＣＨ２)ｍ−(ＣＲ１Ｒ２)ｎ−Ｗ−ＣＯＹ
の化合物の、マトリックスメタロプロテイナーゼが関連する状態の処置または要望のための医薬の製造における使用を請求している。具体的に記載されているのは、化合物Ｎ−{１Ｓ−[４−(４−クロロフェニル)ピペラジン−１−スルホニルメチル]−２−メチルプロピル}−Ｎ−ヒドロキシホルムアミドである。
【００１２】
我々は、新規のＭＭＰ１３の阻害剤であり、かつ望ましい活性プロフィールを有する化合物を見出した。
【００１３】
本発明の第１の態様は、式Ｉ：
【化４】
0004256095.tif 000002
〔式中、Ｂは、３位または４位が、ハロゲンまたはトリフルオロメチルによって、一置換されたフェニル基、または３位および４位が、ハロゲン(同じであっても異なっていてもよい)によって、二置換されたフェニル基を表すか；
またはＢは、４位、５位、または６位が、ハロゲン、トリフルオロメチル、シアノ、もしくはＣ１−４アルキルによって、一置換された２−ピリジル基もしくは２−ピリジルオキシ基を表すか；
またはＢは、６位がハロゲンまたはＣ１−４アルキルによって任意に置換された４−ピリミジニル基を表し；
Ｘは、炭素原子または窒素原子を表し；
Ｒ１は、トリメチル−１−ヒダントイン Ｃ２−４アルキル、またはトリメチル−３−ヒダントイン Ｃ２−４アルキル基；３位または４位が、ハロゲン、トリフルオロメチル、チオもしくはＣ１−３アルキル、またはＣ１−３アルコキシによって、一置換されたフェニル基もしくはＣ２−４アルキルフェニル基；フェニル−ＳＯ２ＮＨＣ２−４アルキル；２−ピリジルまたは２−ピリジル Ｃ２−４アルキル；３−ピリジルまたは３−ピリジル Ｃ２−４アルキル；２−ピリミジン−ＳＣＨ２ＣＨ２；ハロゲン、トリフルオロメチル、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルキルオキシ、ハロゲンまたはハロゲンによって任意に置換された２−ピラジニル Ｃ２−４アルキルによって任意に置換された２−ピラジニルのうちの一つによって、任意に一置換された２−または４−ピリミジニル Ｃ２−４アルキルを表す〕
の化合物を提供する。
【００１４】
上記の何れかのアルキル基は、直鎖または枝分かれしていてもよい。
【００１５】
本発明の好ましい化合物は、式中、
Ｂは、４−クロロフェニル、４−フルオロフェニル、４−ブロモフェニルまたは４−トリフルオロフェニル；４位または５位が置換された２−ピリジルまたは２−ピリジルオキシ、例えば５−クロロ−２−ピリジル、５−ブロモ−２−ピリジル、５−フルオロ−２−ピリジル、５−トリフルオロメチル−２−ピリジル、５−シアノ−２−ピリジル、５−メチル−２−ピリジルなど；特に４−フルオロフェニル、５−クロロ−２−ピリジルまたは５−トリフルオロメチル−２−ピリジルを表し；
Ｘは窒素原子を表し；
Ｒ１は３−クロロフェニル、４−クロロフェニル、３−ピリジル、２−ピリジルプロピル、２−または４−ピリミジニルエチル(所望によりフッ素により一置換)、２−または４−ピリミジニルプロピル、２−(２−ピリミジニル)プロピル(所望によりフッ素により一置換)；特に２−ピリミジニルプロピル、２−(２−ピリミジニル)プロピル(所望によりフッ素により一置換)または５−フルオロ−２−ピリミジニルエチルである
の１個以上が当てはまるものである。
【００１６】
式Ｉの化合物において、特定のサブグループは、
Ｂは、３位または４位が、ハロゲンまたはトリフルオロメチルによって、一置換されたフェニル基、または３位および４位が、ハロゲン(同じであっても異なっていてもよい)によって、二置換されたフェニル基であるか；
またはＢは、５位または６位が、ハロゲン、トリフルオロメチル、またはシアノによって一置換された２−ピリジル基もしくは２−ピリジルオキシ基であるか；
またはＢは、６位がハロゲンまたはＣ１−４アルキルによって、任意に置換された４−ピリミジニル基であり；
Ｘは、炭素原子または窒素原子であり；
Ｒ１は、トリメチル−１−ヒダントイン Ｃ２−４アルキル基、またはトリメチル−３−ヒダントイン Ｃ２−４アルキル基であるか；
またはＲ１は、３位または４位が、ハロゲン、トリフルオロメチル、チオもしくはＣ１−３アルキル、またはＣ１−３アルコキシによって、一置換されたフェニル基もしくはＣ２−４アルキルフェニル基であるか；
またはＲ１は、フェニル−ＳＯ２ＮＨＣ２−４アルキルであるか；
またはＲ１は、２−ピリジル、または２−ピリジル Ｃ２−４アルキルであるか;
またはＲ１は、３−ピリジル、または３−ピリジル Ｃ２−４アルキルであるか;
またはＲ１は、２−ピリミジン−ＳＣＨ２ＣＨ２であるか；
またはＲ１は、ハロゲン、トリフルオロメチル、Ｃ１−３ アルキル、Ｃ１−３アルキルオキシ、２−ピラジニルまたは２−ピラジニル Ｃ２−４アルキルのうちの一つによって、任意に一置換された２−または４−ピリミジニル Ｃ２−４アルキルであり；
何れのアルキルも直鎖または枝分かれしている
によって表される化合物である。
【００１７】
Ｂおよび／またはＲ１での特定の置換基と置換基の数は、立体的に望ましくない結合を避けるように選ばれる。
各々の例示された化合物は、本発明の特定の態様および独立の態様である。
【００１８】
式Ｉの化合物に光学活性な中心が存在する場合、我々は、本発明の個々の特定の具体的態様として、全ての個々の光学活性な形態と結合、および相当するラセミ体を開示している。ラセミ体は、既知の方法(Advanced Organic Chemistry：第３版：著者 J. March, p104-107 参照)、例えば、次に補助の種が分離し次いで切断するのに便利な光学活性な種を有する、ジアステレオマー誘導体の形成を含む方法を用いて個々の光学活性な形態に分離してもよい。
【００１９】
本発明による化合物は、１個またはそれ以上の不斉に置換された炭素原子を含み得る。式Ｉの化合物における１個またはそれ以上の不斉中心(キラル中心)は、立体異性体を生じ得、各々の場合において本発明は全てのエナンチオマーおよびジアステレオマーを含む立体異性体と、ラセミ体を含む混合物に広がると解する。
【００２０】
実施例において、我々はあるエナンチオマーの単離および特徴付けを記載する。エナンチオマーは、キラル補助基とのラセミ体物質の反応、クロマトグラフィーを使用した形成されたジアステレオマーの分離、続くキラル補助基の開裂により製造し得る。カラム(本明細書に記載の条件で)から２番目に溶出され、続いて開裂させたジアステレオマーが、試験した場合、より活性である。各場合、我々は、活性エナンチオマーがＳ立体化学を有すると考えるが、この最初の決定に制限されることは望まない。活性エナンチオマーは、分離カラムから２番目に溶出されることにより特徴付けられる。異なる式Ｉの化合物、別のカラムおよび／または異なる溶媒の使用は最も活性なエナンチオマーの溶出順序に影響し得る。
【００２１】
実施例において、我々はあるジアステレオマーの単離および特徴付けを記載する。クロマトグラフィー分離および続く試験は、より活性なジアステレオマーが最初に分離カラムから溶出することを確認する(すなわち、より活性なジアステレオマーは、分離カラムから最初に溶出されることにより特徴付けられる)。異なる式Ｉの化合物、別のカラムおよび／または異なる溶媒の使用は最も活性ジアステレオマーの溶出順序に影響し得る。
【００２２】
二つのキラル中心を有する式Ｉの化合物に関して、我々は活性エナンチオマーがＳ,Ｓ立体化学を有すると考えるが、この最初の決定に制限されることは望まない。
【００２３】
式Ｉの化合物に互変異性体が存在する場合、我々は、本発明の個々の特定の具体的態様として、全ての個々の互変異性体の形態とこれらの組み合わせを開示する。
【００２４】
前述で概略したように、本発明の化合物はメタロプロテイナーゼの阻害剤、特にＭＭＰ１３の阻害剤である。式Ｉの化合物における上記の適応症は、それぞれ本発明の独立の具体的態様および特定の具体的態様を表す。我々が理論的考察によって拘束されることを望んでいないが、本発明の化合物は、何れのＭＭＰ１の阻害活性と比較しても、上記の適応症の何れか一つに選択的な阻害を示すと考えられ、実施例に制限されないで、何れのＭＭＰ１の阻害活性よりも１００−１０００倍の選択性を示し得る。
【００２５】
本発明の特定の化合物は、アグリカナーゼ阻害剤、すなわちアグリカンの分解の阻害剤として、特定の用途を有する。本発明の特定の化合物は、ＭＭＰ９および／またはＭＭＰ１２の阻害剤として特定の用途を有する。
【００２６】
本発明の化合物は、薬学的に許容され得る塩として提供してもよい。これらは、塩酸塩、臭化水素酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、およびリン酸や硫酸と形成される塩などの酸付加塩を含む。別の態様において、適切な塩は、例えばナトリウム塩、カリウム塩などのアルカリ金属塩、例えばカルシウム塩、マグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩、例えばトリエチルアミンなどの有機アミン塩といった塩基性塩である。
【００２７】
本発明の化合物はまた、インビボで加水分解されるエステルとして提供してもよい。これらは、ヒトの体内で加水分解されて親化合物となる、薬学的に許容され得るエステルである。該エステルは、例えば試験動物に、試験する化合物を静脈に投薬し、次に試験動物の体の体液を調べることによって同定し得る。適切なインビボで加水分解され得るカルボキシは、メトキシメチルを含み、ヒドロキシは、ホルミルおよびアセチル、特にアセチルを含む。
【００２８】
式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、またはそのインビボで加水分解し得るエステルを、ヒトを含む哺乳類の治療上の処置(予防的処置を含む)に使用するためには、通常、医薬組成物として標準的な製薬手段に従って製剤される。
【００２９】
従って、別の態様において、本発明は式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、またはそのインビボで加水分解され得るエステルと、薬学的に許容され得る担体を含む医薬組成物を提供する。
【００３０】
本発明の医薬組成物は、処置が望まれる病状に対して、例えば経口、局所、非経腸、口内、鼻、膣、または直腸の投薬によって、または吸入によってなどの、標準的な方法で投薬し得る。これらの目的のために、本発明の化合物は、例えば、錠剤、カプセル、水溶液または油溶液、懸濁液、乳液、クリーム、軟膏、ゲル、鼻用スプレー、坐薬、微粉砕した粉末、または吸入用エアゾールの形態で、および非経腸(静脈、筋肉、または点滴)の使用のための滅菌処理した水溶液または油溶液または懸濁液、または滅菌処理した乳液の形態で、当業界で既知の方法によって処方され得る。
【００３１】
本発明の化合物に加え、本発明の医薬組成物はまた、ここで記載の１またはそれ以上の病状を処置する際に、重要な１個またはそれ以上の薬理学的薬剤を含んでもよく、またはそれと共に(同時または連続して)投薬してもよい。
【００３２】
本発明の医薬組成物は、通常ヒトに投薬され、例えば一日の用量は、０.５から７５mg／kg体重(好ましくは０.５から３０mg／kg体重)を摂取する。１日の用量は、必要があれば分割して与えてもよく、投薬を受けた本化合物の正確な量と投薬方法は、当業界で既知の方針に従って、処置すべき患者の体重、年齢、性別に依存し、かつ処置すべき特定の病状に依存する。
【００３３】
典型的な単位投与系は、約１mgから５００mgの本発明の化合物を含む。
従って、さらなる態様において、本発明は、ヒトまたは動物の治療上の処置方法において使用するために、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、またはそのインビボで加水分解されたエステルを提供する。特に、我々はＭＭＰ１３および／またはアグリカナーゼおよび／またはＭＭＰ９および／またはＭＭＰ１２が介在する疾患または状態の処置における使用を開示する。
【００３４】
さらなる態様において、本発明は、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、またはそのインビボで加水分解され得るエステルを、恒温動物に治療上効果的な量投薬することからなる、メタロプロテイナーゼが介在する病状を処置する方法を提供する。メタロプロテイナーゼ介在疾患は、関節炎(骨関節炎など)、アテローム性動脈硬化症、慢性閉塞性肺疾患(ＣＯＰＤ)を含む。
【００３５】
他の態様において、本発明は、下記のような、式IIの化合物と、式Ｒ１ＣＨＯの適当な化合物を反応させ、式IIの化合物を得、それを次いで式Ｉの化合物の前駆体である式IVの化合物に変換し、所望によりその後式Ｉの化合物の薬学的に許容される塩またはインビボ加水分解可能エステルを形成することを含む、式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に許容される塩またはインビボ加水分解可能エステルの製造法を提供する：
【化５】
0004256095.tif 000003
【００３６】
式IIの化合物は、簡便には、式Ｖの化合物と式VIの化合物(式中、Ｂ'はＢの前駆体およびＸ'はＸまたはＸの前駆体である、またはＢ'との反応に適当なＸの活性形である)の反応により製造できる。IIはまた、下記のように、化合物VIIから製造し得る：
【化６】
0004256095.tif 000004
【００３７】
多くの関連する出発物質が商品として入手可能であることは認められる。加えて、以下の表はアルデヒド中間体の詳細およびChemical Abstractsにおける対応する記載番号を示す。
【表１】
0004256095.tif 000005
【００３８】
Chemical Abstracts記載番号無しのアルデヒド
３−(２−ピリミジル)プロピオンアルデヒド。２−ブロモピリミジン(７.９５ｇ、０.０５Ｍ)のアセトニトリル(１５０ｍＬ)に、プロパルギルアルコール(４.２ｇ、０.０７５Ｍ)、ビス−(トリフェニルホスフィン)−パラジウム(II)クロライド(７５０mg、１ｍＭ)、ヨウ化銅(１００mg、０.５ｍＭ)およびトリエチルアミン(２５ｍＬ、０.２５Ｍ)を添加し、混合物を撹拌し、７０℃で２時間加温した。更なる量のプロパルギルアルコール(２.１ｇ、０.０３８Ｍ)、ビス−(トリフェニルホスフィン)−パラジウム(II)クロライド(３７５mg、０.５mil)およびヨウ化銅(５０mg、０.２５mil)を次いで反応混合物に添加し、それを撹拌し、７０℃で更に１時間撹拌した。
【００３９】
反応混合物を蒸発乾固し、シリカに予備吸着させた残渣をクロマトグラフィーした。酢酸エチルでの溶出により、３−(２−ピリミジル)プロパ−２−イン−３−オールを黄色固体４.４５ｇ(６６％)として得た。ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)２.９(１Ｈ、ｔ)、４.５(２Ｈ、ｄ)、７.３(１Ｈ、ｄ)、８.８(２Ｈ、ｔ)、ＭＳ実測値ＭＨ＋  １３５。
【００４０】
３−(２−ピリミジル)プロパ−２−イン−１−オール(４.４５ｇ、０.０３３Ｍ)を酢酸エチル(１４０ｍＬ)に溶解し、１０％Ｐｄ／Ｃ(８９０mg)を添加し、混合物を水素雰囲気下で６時間撹拌した。反応混合物をセライトを通して濾過し、濾液を蒸発させて３−(２−ピリミジル)プロパン−１−オールを黄色油状物、４.１５ｇ(９１％)として得た。ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)２.１(２Ｈ、Ｍ)、３.２(２Ｈ、ｔ)、３.８(２Ｈ、ｔ)、７.２(１Ｈ、ｔ)、８.７(２Ｈ、ｄ)ＭＳ実測値ＭＨ＋  １３９。
【００４１】
３−(２−ピリミジル)プロパン−１−オールを、以下のＳｗｅｒｎ条件を使用して酸化して３−(２−ピリミジル)プロピオンアルデヒドを得た。ジクロロメタン(７００ml)に溶解した塩化オキサリル(１４.３ml)にＤＭＳＯ(２１.３ml)を添加し、−６０℃以下の温度を維持した。１５分後、ジクロロメタン(２０ml)に溶解したそのアルコール(２０.８ｇ)を、ゆっくり添加し、３０分後、トリエチルアミン(１２５ml)を続いて添加した。１５分反応混合物室温に暖め、そのとき水(１００ml)を添加した。溶媒を分離し、有機層を水(３×１５０ml)で洗浄し、乾燥(ＭｇＳＯ４)させ、蒸発させて油状物とし、それを酢酸エチル／メタノール(５％)で溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製し、生成物(８.７１ｇ、４３％)を油状物として得る。ＮＭＲ  ＣＤＣｌ３  ３.０(２Ｈ、ｔ)、３.４(２Ｈ、ｔ)、７.１(１Ｈ、ｔ)、８.７(２Ｈ、ｄ)、９.９(１Ｈ、ｓ)。
【００４２】
上記の方法を使用して、以下のアルデヒドを製造した：
４−(２−ピリミジル)ブチルアルデヒド、３−ブチン−１−オールをプロパルギルアルコールの代わりに使用して
ＮＭＲ  ＣＤＣｌ３  ９.８(１Ｈ、ｓ)、８.６(２Ｈ、Ｍ)、７.１５(１Ｈ、Ｍ)、３.０(２Ｈ、Ｍ)、２.５(２Ｈ、Ｍ)、２.２(２Ｈ、Ｍ)。
【００４３】
３−(２−ピラジニル)プロピオンアルデヒド、２−ブロモピラジンを２−ブロモピリミジンの代わりに使用して
ＮＭＲ(ｄ６−ＤＭＳＯ)９.７７(ｓ、１Ｈ)、８.６１(ｄ、１Ｈ)、８.５４(ｄｄ、１Ｈ)、８.４６(ｄ、１Ｈ)、３.１０(ｔ、２Ｈ)、２.９２(ｔ、２Ｈ)。
【００４４】
４−(２−ピラジニル)ブチルアルデヒド、２−ブロモピラジンを２−ブロモピリミジンの代わりにおよび３−ブチン−１−オールをプロパルギルアルコールの代わりに使用して
ＮＭＲ(ｄ６−ＤＭＳＯ)９.６８(ｓ、１Ｈ)、８.５６(ｍ、２Ｈ)、８.４９(ｍ、１Ｈ)、２.８０(ｔ、２Ｈ)、２.５(ｍ、２Ｈ)、１.９６(ｍ、２Ｈ)。
【００４５】
４−(４−トリフルオロメチルピリミジン−２−イル)ブタナール、２−クロロ−４−トリフルオロピリミジン[ＣＡＳ記載番号３３０３４−６７−２]を２−ブロモピリミジンの代わりにおよび３−ブチノ−１−オールをプロパルギルアルコールの代わりに使用して
１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)：９.８０(ｓ、１Ｈ)、８.９２(ｄ、１Ｈ、Ｊ＝５.０Ｈｚ)、７.４７(ｄ、１Ｈ、Ｊ＝５.０Ｈｚ).３.１１(ｄｄ、２Ｈ、Ｊ＝７.５、７.５Ｈｚ)、２.６０(ｄｄ、２Ｈ、Ｊ＝６.１、６.１Ｈｚ)、２.２１(ｍ、３Ｈ)。
【００４６】
４−(５−フルオロピリミジン−２−イル)ブタナール、２−クロロ−５−フルオロ−ピリミジン[ＣＡＳ記載番号６２８０２−４２−０]を２−ブロモピリミジンの代わりにおよび３−ブチノ−１−オールをプロパルギルアルコールの代わりに使用して
１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)：９.９０(ｓ、１Ｈ)、８.５２(ｓ、２Ｈ、Ｊ＝５.０Ｈｚ)、７.４７、.３.４７(ｍ、２Ｈ)、３.３３(ｄｄ、２Ｈ、Ｊ＝６.８、６.８Ｈｚ)、３.０２(ｍ、２Ｈ)。
【００４７】
４−(４−メトキシピリミジン−２−イル)ブタナール、２−クロロ−４−メトキシ−ピリミジン[ＣＡＳ記載番号２２５３６−６３−６]を２−ブロモピリミジンの代わりにおよび３−ブチノ−１−オールをプロパルギルアルコールの代わりに使用して
１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)：９.８０(ｓ、１Ｈ)、８.３４(ｄ、１Ｈ、Ｊ＝５.０Ｈｚ)、６.５５(ｄ、１Ｈ、Ｊ＝５.０Ｈｚ)、３.９７(ｓ、３Ｈ)、２.９１(ｄｄ、２Ｈ、Ｊ＝６.８、６.８Ｈｚ)、２.５８(ｍ、２Ｈ)、２.２０(ｍ、２Ｈ)
【００４８】
４−(５−エチルピリミジン−２−イル)ブタナール、２−クロロ−５−エチル−ピリミジン[ＣＡＳ記載番号１１１１９６−８１−７]を２−ブロモピリミジンの代わりにおよび３−ブチノ−１−オールをプロパルギルアルコールの代わりに使用して
１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)：９.７９(ｓ、１Ｈ)、８.５１(ｓ、２Ｈ)、２.９９(ｄｄ、２Ｈ、Ｊ＝７.４、７.４Ｈｚ)、２.５４(ｍ、４Ｈ)、２.１７(ｐ,１Ｈ、Ｊ＝７.４Ｈｚ)、１.０４(ｔ、２Ｈ、Ｊ＝７.２Ｈｚ)。
【００４９】
５−(２−ピリミジル)ペンタナール、２−ブロモピリミジンおよび４−ペンチン−１−オールをプロパルギル(propargul)アルコールの代わりに使用して：ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)９.８(１Ｈ、ｓ)、８.６５(２Ｈ、Ｍ)、７.１(１Ｈ、Ｍ)、３.０(２Ｈ、Ｍ)、２.５(２Ｈ、Ｍ)、１.９(２Ｈ、Ｍ)、１.７(２Ｈ、Ｍ)。
【００５０】
３−(５−ブロモピリミジン−２−イル)プロパナール、２−ヨード−５−ブロモピリミジンを２−ブロモピリミジンの代わりに使用して
１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)：９.９０(ｓ、１Ｈ)、８.７０(ｓ、２Ｈ)、３.３０(ｄｄ、２Ｈ)、３.０(ｄｄ、２Ｈ)。
【００５１】
４−(４−ピリミジル)−ブタン−１−アール。２,４−ジクロロ(Dicloro)ピリミジン(４.４７ｇ、０.０３Ｍ)をトリエチルアミン(２５０ml)にアルゴン下で溶解する。(Ｐｈ３Ｐ)２ＰｄＣｌ２(４２０mg、０.００６Ｍ、ＣｕＩ(２８mg、０.０００１５Ｍ)および３−ブチン−１−オール(２.３６ml、０.０３Ｍ)を添加し、混合物を環境温度で１８時間撹拌した。蒸発乾固の後、水(２５０ml)を添加し、ジクロロメタンで抽出した。合わせた有機相を乾燥させ、蒸発乾固した。残った油をクロマトグラフィーにかけ、イソヘキサン／酢酸エチル１：１で溶出して、４−(２  クロロ−４−ピリミジル)−３−ブチン−１−オールを油状物(３.３ｇ)として得た。ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)ｄ  ８.５、(ｄ  １Ｈ)；７.３、(ｄ  １Ｈ)；３.９、(ｔ  ２Ｈ)；２.８、(ｍ  ２Ｈ)；１.６、(ｓ  １Ｈ)。マススペクトル実測値ＭＨ＋  １８３。この物質を上記のように、しかし、１当量のトリエチルアミンの存在下で水素化し、必要な飽和アルコールを得、それを先に記載のＳｗｅｒｎ酸化により酸化して、必要な４−(４−ピリミジル)−ブタン−１−アールを得た。ＮＭＲ  ＣＤＣｌ３  ｄ  ９.８、(ｓ  １Ｈ)；９.１；(ｓ  １Ｈ)；８.５、(ｄ  １Ｈ)；７.１、(ｄ  １Ｈ)；２.８、(ｔ  ２Ｈ)；２.５、(ｔ  ２Ｈ)；２.１、(ｍ  ２Ｈ)。マススペクトル実測値ＭＨ−  １４９。
【００５２】
３−(５−フルオロピリミジン−２−イル)プロパナール。(Ｅ)−１−エトキシ−３−(５−フルオロピリミジン−２−イル)プロパ−２−エニルエチルエーテルおよび(Ｚ)−１−エトキシ−３−(５−フルオロピリミジン−２−イル)プロパ−２−エニルエチルエーテル(９.７ｇ、４３mmol)の乾燥エタノール(１００ml)中の撹拌した溶液に、室温でアルゴンの雰囲気下、１０％パラジウム活性化炭素(１.０ｇ)を添加した。反応フラスコを次いで排気し、水素ガスを充たした。混合物を次いで１８時間室温で撹拌した。反応物を次いでセライトのパッドを通して濾過し、減圧下で蒸発させて黄色油状物(８.７ｇ、８９％)を得た。この油状物(１５ｇ、６６mmol)のＴＨＦ(２００ml)溶液に、室温で塩酸(２Ｍ溶液３６ml、７２mmol)の水溶液を添加し、反応物を室温で３時間撹拌した。反応物を次いで酢酸エチル(１００ml)で希釈し、混合物のｐＨを、炭酸水素ナトリウム溶液(飽和、１００ml)水溶液の添加によりｐＨ＝９にした。層を次いで分離し、水性相を酢酸エチル(３×１００ml)で抽出した。合わせた有機抽出物を次いで乾燥(Ｎａ２ＳＯ４)させ、濾過し、減圧下で蒸発させて３−(５−フルオロピリミジン−２−イル)プロパナール(１６ｇ)を得、それを更に精製することなく使用した。１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)：９.９０(ｓ、１Ｈ)、８.５０(ｓ、２Ｈ)、３.３３(ｄｄ、２Ｈ、Ｊ＝６.９、６.９Ｈｚ)、３.００(ｄｄ、２Ｈ、Ｊ＝６.９、６.９Ｈｚ)。
【００５３】
出発物質を以下の方法で得た：２−クロロ−５−フルオロ−ピリミジン[ＣＡＳ記載番号６２８０２−４２−０](９.０ｇ、６８mmol)および１−トリブチルスタニル−３,３−ジエトキシプロパ−１−エン(４２.８ｇ、１０２mmol、Ｅ：Ｚ異性体の５：１混合物)の乾燥ＤＭＦ(１４０ml)溶液に、乾燥アルゴンの雰囲気下、連続的に固体炭酸カリウム(９.４ｇ、６８mmol)、テトラエチルアンモニウムクロライド(１１.２ｇ、６８mmol)およびビス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(II)クロライド(２.４ｇ、３.４mmol)を添加した。得られた混合物を次いで１２０℃に３時間加熱した。反応物を次いで室温に冷却し、水(１００ml)およびジエチルエーテル(１５０ml)で希釈した。この混合物を次いでセライトのパッドを通して濾過した。層を分離し、水性相をジエチルエーテル(３×１００ml)で抽出した。合わせた有機抽出物を次いで乾燥(ＭｇＳＯ４)させ、濾過し、減圧下で蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、ヘキサン中１０％酢酸エチル)により、次いで生成物を明黄色油状物およびＥ：Ｚ異性体の３：１混合物として(９.７ｇ、６３％)得た。
【００５４】
Ｅ−異性体：１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)：８.５３(ｓ、２Ｈ)、６.９９(ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝１５.４、４.１Ｈｚ)、６.８６(ｄ、１Ｈ、Ｊ＝１５.４Ｈｚ)、５.１４(ｄ、１Ｈ、Ｊ＝４.１Ｈｚ)、３.５６(ｍ、４Ｈ)、１.２４(ｔ、６  Ｈ、Ｊ＝７.１Ｈｚ)
Ｚ−異性体：１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)：８.５７(ｓ、２Ｈ)、６.６５(ｄ、１Ｈ、Ｊ＝１２.１Ｈｚ)、６.４９(ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７.５Ｈｚ)、６.０９(ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝１２.１、７.５Ｈｚ)、３.７０(ｍ、４Ｈ)、１.２１(ｔ、６  Ｈ、Ｊ＝７.１Ｈｚ)
【００５５】
同様の方法を使用して、以下のアルデヒドを適当に置換した２−クロロ−ピリミジンを使用して製造した：
３−(４−メトキシピリミジン−２−イル)プロパナール  １Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)：９.８２(ｓ、１Ｈ)、８.３４(ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８.４Ｈｚ)、６.５５(ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７.４Ｈｚ)、３.９１(ｓ、３Ｈ)、３.２８(ｄｄ、２Ｈ、Ｊ＝７.４、７.４Ｈｚ).２.９９(ｄｄ、２Ｈ、Ｊ＝７.４、７.４Ｈｚ)。
【００５６】
３−(４−トリフルオロメチルピリミジン−２−イル)プロパナール  １Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)：９.９２(ｓ、１Ｈ)、８.９０(ｄ、１Ｈ、Ｊ＝５.０Ｈｚ)、７.４７(ｄ、１Ｈ、Ｊ＝５.０Ｈｚ)、３.４３(ｄｄ、２Ｈ、Ｊ＝６.８、６.８Ｈｚ)、３.０７(ｄｄ、２Ｈ、Ｊ＝６.８、６.８Ｈｚ)。
【００５７】
３−(５−エチルピリミジン−２−イル)プロパナール  １Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)：９.９１(ｓ、１Ｈ)、８.４９(ｓ、２Ｈ)、３.３１(ｄｄ、２Ｈ、Ｊ＝６.９、６.９Ｈｚ).２.９８(ｄｄ、２Ｈ、Ｊ＝６.９、６.９Ｈｚ)、２.６１(ｑ、２Ｈ、Ｊ＝７.６Ｈｚ)、１.２６(ｔ、３  Ｈ、Ｊ＝７.６Ｈｚ)。
【００５８】
３,５,５−トリメチル−１−プロパナールヒダントイン
【化７】
0004256095.tif 000006
３,５,５−トリメチルヒダントイン[ＣＡＳ(６３４５−１９−３)](３.５ｇ、０.０２５mol)、２−(２−ブロモエチル)−１,３−ジオキソラン(４.８ml、０.０４１mol)、Ｋ２ＣＯ３(８.５ｇ、０.０６２mol)、ベンジルトリメチルアンモニウムクロライド(２.２３ｇ、０.０１２mol)のＭｅＣＮ(１００ml)溶液を、共に２４時間還流した。反応物をＲＴに冷却させ、濾過し、濾液を真空で蒸発させた。残渣をＤＣＭに取り、次いで水(×３)で洗浄し、その後真空で蒸発させた。残渣をトルエン(×３)と共沸させ、黄色油状物(５.４ｇ)を得た。油状物を次いでＴＨＦ(３０ml)中、濃ＨＣｌ(４ml)とＲＴで２０時間撹拌した。水性ＮａＨＣＯ３で中和し、ＤＣＭ(×８)で抽出した。合わせた有機物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空で蒸発させて黄色油状物(４.３ｇ)を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)：９.８２(ｓ、１Ｈ)、３.６２(ｔ、２Ｈ)、３.０４(ｓ、３Ｈ)、２.９０(ｍ、２Ｈ)、１.３７(ｓ、６Ｈ)。
【００５９】
１,５,５−トリメチル−３−プロパナールヒダントイン
【化８】
0004256095.tif 000007
１,５,５−トリメチルヒダントイン[ＣＡＳ(６８５１−８１−６)](５.０ｇ、３５.０mol)を、ＮａＯＥｔ(０.０２ｇ、０.２９８mmol、触媒的)およびＥｔＯＨ(８ml)の混合物に添加し、アルゴン下で撹拌した。混合物を３０℃に暖め、その後アクロレイン(２.３５ml)をゆっくり添加し、反応は４５℃に発熱した。反応物をＲＴに冷却させ、更に２時間撹拌した。ＡｃＯＨ(ｏ.１３６ml、２.４mmol)およびシリカゲル(３.５ｇ)を混合物に添加し、その後真空で蒸発させた。シリカ上の生成物をシリカカラム(溶離剤：５％アセトン／ＤＣＭ)でクロマトグラフィーし、透明油状物(６.２ｇ)を得た。残渣のアルミナ(溶離剤：ＤＣＭ)での更なる精製により、透明油状物(２.７ｇ)を得た、１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)：９.７８(ｓ、１Ｈ)、３.８８(ｔ、２Ｈ)、２.８６(ｓ、３Ｈ)、２.８２(ｍ、２Ｈ)、１.３７(ｓ、６Ｈ)。
【００６０】
同様の方法で、１,５,５−トリメチル−３−ブタナールヒダントインを製造した[Ｍ＋Ｈ  ２１３]。
【００６１】
３−(３−クロロフェニル)ブチルアルデヒド。３−クロロヨードベンゼン(２.３８ｇ)、酢酸パラジウム(２０mg)、炭酸水素ナトリウム(１.０１ｇ)およびクロチルアルコール(１.２８ml)の混合物のＮ−メチルピロリドン(４ml)溶液を、１３０℃で２時間、撹拌し、加熱した。反応混合物を冷却させ、水(５０ml)を添加し、混合物をジエチルエーテル(２×５０ml)で抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥させ溶媒の除去により得られた残渣を酢酸エチルおよび塩化メチレン(１：２０)の混合物で溶出するシリカを通したクロマトグラフィーにより精製した、収量５１９mg、Ｍ−Ｈ＝１８１
【００６２】
３−(２−ピリジル)ブチルアルデヒド。対応するアルコールのＳｗｅｒｎ酸化により製造(ＣＡＳ９０６４２−８６−７)。
【００６３】
３−(５−フルオロピリミジン−２−イル)ブタナール
【化９】
0004256095.tif 000008
濃塩酸(１ml)を、撹拌した２−[２−(１,３−ジオキソラン−２−イル)−１−メチルエチル]−５−フルオロピリミジン(１.１ｇ)のテトラヒドロフラン(１０ml)溶液に環境温度で添加し、３時間撹拌し、次いで固体炭酸水素ナトリウムを中性ｐＨまで添加した。混合物をChemeluteカートリッジ(carrtridge)上に注ぎ、酢酸エチル(３×２０ml)で洗浄し、合わせた有機物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空で蒸発させて３−(５−フルオロピリミジン−２−イル)ブタナール(３００mg、３５％)を得、それを更に精製することなく使用した。
【００６４】
出発物質は下記のように製造した：
２−[２−(１,３−ジオキソラン−２−イル)−１−メチルエチル]−５−フルオロピリミジン
【化１０】
0004256095.tif 000009
撹拌した活性化“Ｒｉｅｋｅ”亜鉛のテトラヒドロフラン(２１ml、１.５３Ｍ)懸濁液に、２−(２−ブロモプロピル)−１,３−ジオキソラン(６.６ｇ)のテトラヒドロフラン(５０ml)を添加し、温度の２１℃から４０℃への上昇が観察され、４０℃で１時間加熱し、次いで環境温度に冷却し、その後２−クロロ−５−フルオロピリミジン(３ｇ)および[１,２−ビス(ジフェニルホスフィノ)−プロパン]ジクロロニッケル(II)クロライド(３６８mg)を添加した。混合物を環境温度で４時間撹拌し、次いでセライトのパッドを通して濾過し、濾液を減圧下で蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、ヘキサン−ヘキサン中２５％酢酸エチル)で、次いで生成物を明黄色油状物(１.１ｇ)として得た；１Ｈ  ＮＭＲ(ｄ６−ＤＭＳＯ)：８.８１(ｓ、２Ｈ)、４.７３(ｄｄ、１Ｈ)、３.６６−３.８７(ｍ、４Ｈ)、３.２１−３.３０(ｍ、１Ｈ)、２.１９(ｄｄｄ、１Ｈ)、１.８３(ｄｄｄ、１Ｈ)、１.２７(ｄ、３Ｈ)；ｍ／ｚ  ２１３(Ｍ＋１)。
【００６５】
２−(２−ブロモプロピル)−１,３−ジオキソラン
【化１１】
0004256095.tif 000010
クロトンアルデヒド(９.１８ｇ、１０８mmol)を、撹拌したブロモトリメチルシラン(２４ｇ、１５６mmol)の溶液に０℃で滴下し、１時間、０℃で撹拌し、次いで室温に暖め、更に１時間撹拌した。エチレングリコール(９.５ｇ、１５６mmol)およびｐ−トルエンスルホン酸(１００mg)を添加し、溶液を加熱還流し、水をディーン・スターク装置の使用により除去した。完了したら、混合物を室温に冷却し、炭酸水素ナトリウム水溶液(飽和、２×５０ml)で洗浄した。残渣を真空蒸留により精製し、２−(２−ブロモプロピル)−１,３−ジオキソラン(１８.８ｇ、４０−４２℃＠１ｍｍＨｇ、８９％)を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)：５.０５(ｄｄ、１Ｈ)、４.１８−４.３３(ｍ、１Ｈ)、３.８４−４.０(ｍ、４Ｈ)、２.２５(ｄｄｄ、１Ｈ)、２.０３(ｄｄｄ、１Ｈ)、１.７５(ｄ、３Ｈ)。
【００６６】
類似の方法を使用して、以下のアルデヒドを適当に置換された２−クロロ−ピリミジンおよび１,３−ジオキソランを使用して製造した：
３−(５−クロロピリミジン−２−イル)プロパナール
【化１２】
0004256095.tif 000011
１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)：９.９０(ｓ、１Ｈ)、８.６０(ｓ、２Ｈ)、３.３２(ｄｄ、２Ｈ)、３.０４(ｄｄ、２Ｈ)。
【００６７】
３−(５−クロロピリミジン−２−イル)ブタナール
【化１３】
0004256095.tif 000012
１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)：９.８５(ｓ、１Ｈ)、８.６０(ｓ、２Ｈ)、３.６５(ｍ、１Ｈ)、３.１４(ｄｄ、１Ｈ)、２.７５(ｄｄ、１Ｈ)、１.３９(ｄ、３Ｈ)。
【００６８】
３−[２−(６−クロロピラジニル)]プロパナール
【化１４】
0004256095.tif 000013
３−[２−(６−クロロピラジニル)]プロパナールジエチルアセタール(２００mg、０.８２mmol)を２Ｎ塩酸(４５０μｌ)のテトラヒドロフラン(２.５ml)溶液で、室温で１８時間処理した。ｐＨを８に飽和水性炭酸水素ナトリウムを使用して調節した後、反応物を酢酸エチル(×３)で抽出し、有機物を乾燥させ(無水硫酸ナトリウム)、濾過し、真空で濃縮して表題化合物を暗褐色油状物として得た(１３７mg、９８％)。この物質を更に精製することなく使用した。
１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)δ９.８５(１Ｈ、ｓ)；８.４(２Ｈ、２×ｓ)；３.５(２Ｈ、ｔ)；３.０(２Ｈ、ｔ)。
【００６９】
出発物質を以下の方法で得た：
３−[２−(６−クロロピラジニル)]プロパナールジエチルアセタール
【化１５】
0004256095.tif 000014
３−[２−(６−クロロピラジニル)]プロピナールジエチルアセタール、(５.５ｇ、２２.９mmol)のエタノール(５５ml)溶液を、アルゴンで脱気し、酸化プラチナ(IV)(５２mg、０.２３mmol)を添加した。反応容器を排気し、水素の雰囲気を入れた。２日後、反応混合物を真空で濃縮し、フラッシュクロマトグラフィーで精製し、０−５０％酢酸エチルのイソヘキサン溶液で溶出して、３−[２−(６−クロロピラジニル)]プロパナールジエチルアセタールを明黄色油状物(１.１７ｇ、２１％)として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)δ８.４(１Ｈ、ｓ)；８.３５(１Ｈ、ｓ)；４.５(１Ｈ、ｔ)；３.７５−３.５５(２Ｈ、Ｍ)；３.５５−３.４(２Ｈ、Ｍ)；２.９(２Ｈ、ｄｄ)；２.１(２Ｈ、ｄｄ)；１.２(６Ｈ、ｔ)。
【００７０】
３−[２−(６−クロロピラジニル)]プロピナールジエチルアセタール
【化１６】
0004256095.tif 000015
２,６−ジクロロピラジン(１ｇ、６.７mmol)およびプロピオンアルデヒドジエチルアセタール(１.１ml、７.４mmol)のアセトニトリル(１０ml)溶液に、室温でアルゴン雰囲気下、ビス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(II)ジクロライド(９４mg、０.１３mmol)およびヨウ化銅(Ｉ)(５１mg、０.２７mmol)、続いてトリエチルアミン(４.７ml、３３.６mmol)を添加した。反応物を室温で一晩撹拌した。溶媒を真空で除去し、残渣をフラッシュクロマトグラフィーで精製し、１０−２０％酢酸エチルのイソヘキサン溶液で溶出し、３−[２−(６−クロロピラジニル)]プロピナールジエチルアセタールを黄色油状物(６６０mg、４１％)として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)δ８.６(１Ｈ、ｓ)；８.５５(１Ｈ、ｓ)；５.５(１Ｈ、ｓ)；３.９−３.７５(２Ｈ、Ｍ)；３.７−３.４(２Ｈ、Ｍ)；１.２５(６Ｈ、ｔ)ｍ／ｓ(ＥＩ＋)２４１／２４３(ＭＨ＋)。
【００７１】
式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に許容される塩またはインビボ加水分解可能エステルを製造するための別法は、式IIの化合物を、式Ｒ１ＣＯＯＲの化合物と反応させ、式VIIIの化合物を得、これを式IXの化合物に変換し、式IXの化合物を式IIIのアルケンに変化させ、次いでそれを式Ｉの化合物の前駆体である式IVの化合物に変換し、所望により、その後式Ｉの化合物の薬学的に許容される塩またはインビボ加水分解可能エステルを形成させることを含む。
【００７２】
式Ｒ１ＣＯＯＲの適当なエステルは商品として入手可能であるか、他に入手可能であるか、または例えば、実施例１０に記載のものと類似の方法を使用して製造し得る。任意の式Ｒ１ＣＯＯＲ(式中、Ｒ１は先に定義の通り)：−Ｒは、例えば、アルキル、アラルキル、ヘテロアリール等を含む任意の基であり得る)のエステルを使用できることが認められる。
【化１７】
0004256095.tif 000016
本発明の化合物は、例えば、以下のアッセイにより評価し得る：
【００７３】
単離した酵素のアッセイ
例えばＭＭＰ１３を含むマトリックスメタロプロテイナーゼのファミリー
ヒトのリコンビナントのＭＭＰ１３前駆体は、Knauper らに記載されたように発現し精製し得る [V. Knauper ら、(1996) The Biochemical Journal 271:1544-1550 (1996)]。精製した酵素は、下記のように阻害剤の活性をモニターするのに使い得る：
２１℃で、１mM アミノフェニル水銀酸(ＡＰＭＡ)を用いて、精製したＭＭＰ１３前駆体を２０時間活性化する；活性化したＭＭＰ１３(アッセイ当たり１１.２５ｎｇ)は、３５℃で、０.１Ｍ ＮａＣｌ、２０mM ＣａＣｌ２、０.０２mM ＺｎＣｌ、０.０５％(ｗ／ｖ) ブリジ３５を含む、緩衝液のアッセイ(０.１Ｍ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７.５)中で、合成基質７−メトキシクマリン−４−イル)アセチル．Ｐｒｏ．Ｌｅｕ．Ｇｌｙ．Ｌｅｕ．Ｎ−３−(２,４−ジニトロフェニル)−Ｌ−２,３−ジアミノプロピオニル．Ａｌａ．Ａｒｇ．ＮＨ２ を用いて、阻害剤の存在下または非存在下で、４−５時間インキュベートする。活性は、λex ３２８nm、λem ３９３nmの蛍光を測定することによって決定する。パーセント阻害は下記のように計算する：
％阻害は、 [蛍光阻害剤添加−蛍光バックグラウンド] を、[蛍光阻害剤非添加 −蛍光バックグラウンド] で割ったものと等しい。
同様のプロトコルは、特定のＭＭＰに最適の基質と緩衝液の条件、例えば C. Graham Knight ら、 (1992) FEBS Lett. 296(3):263-266 で記載されたような条件を用いて、他の発現し単離したＭＭＰ前駆体に使い得る。
【００７４】
例えばＴＮＦコンバターゼを含むアダマライシン(adamalysin)・ファミリー
本化合物がＴＮＦαコンバターゼ前駆体を阻害することができるかは、K. M. Mohler ら、(1994) Nature 370:218-220 に記載されたように、ＴＨＰ−１の膜から得られた、一部精製し単離した酵素のアッセイを用いて評価し得る。精製した酵素の活性とその阻害は、試験化合物の存在下または非存在下、緩衝液(０.１％(ｗ／ｖ)トリトン Ｘ−１００および２mM ＣａＣｌ２を含む５０mM Ｔｒｉｓ ＨＣｌ、ｐＨ７.４)のアッセイ中の、基質４',５'−ジメトキシフルオレセイニル Ｓｅｒ．Ｐｒｏ．Ｌｅｕ．Ａｌａ．Ｇｌｎ．Ａｌａ．Ｖａｌ．Ａｒｇ．Ｓｅｒ．Ｓｅｒ．Ｓｅｒ．Ａｒｇ．Ｃｙｓ(４−(３−スクシンイミド−１−イル)−フルオレセイン)−ＮＨ２を用いて、一部精製した酵素を１８時間２６℃でインキュベートすることによって測定される。阻害の量は、λex ４９０nm、λem ５３０nmを用いた他は、ＭＭＰ１３と同様に測定される。基質は、下記のように合成される。基質のペプチド部分は、少なくとも４倍または５倍過剰なＦｍｏｃ−アミノ酸とＨＢＴＵと共に、Ｆｍｏｃ−アミノ酸とＯ−ベンズトリアゾール−１−イル−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウム ヘキサフルオロリン酸(ＨＢＴＵ)をカップリング試薬として用いることを含む標準的な方法によって、手動で、または自動ペプチド合成装置でのどちらかで、Ｆｍｏｃ−ＮＨ−リンク−ＭＢＨＡ−ポリスチレン樹脂で集めた。Ｓｅｒ１とＰｒｏ２を二重にカップリングする。下記の側鎖の保護方法を用いた；Ｓｅｒ１(But)、Ｇｌｎ５(Trityl)、Ａｒｇ８,１２(Pmc またはPbf)、Ｓｅｒ９,１０,１１(Trityl)、Ｃｙｓ１３(Trityl)。結合後、Ｎ末端のＦｍｏｃ保護基は、Ｆｍｏｃ−ペプチドの樹脂をＤＭＦで処理することによって除いた。得られたアミノ−ペプチド−樹脂は、１.５−２当量の、ＤＭＦ中のジイソプロピルカルボジイミドと、１−ヒドロキシベンゾトリアゾールで予め活性化した、４',５'−ジメトキシフルオレセイン−４(５)−カルボン酸 [Khanna & Ullman, (1980) Anal Biochem. 108:156-161] で、１.５−２時間７０℃で処理することによって、アシル化した。ジメトキシフルオレセイニル−ペプチドは、水とトリエチルシランを各々５％ずつ含む、トリフルオロ酢酸で処理して、脱保護し、同時に樹脂から切断した。ジメトキシフルオレセイニル−ペプチドを蒸留し、ジエチルエーテルで研磨し、濾過することによって単離した。単離したペプチドは、ジイソプロピルエチルアミンを含むＤＭＦ中の、４−(Ｎ−マレイミド)−フルオレセインと反応させ、生成物をＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し、最後に酢酸水溶液から凍結乾燥法によって単離した。生成物は、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ ＭＳとアミノ酸分析によって特性決定した。
【００７５】
天然基質
アグリカンの分解の阻害剤としての、本発明の化合物は、例えば E. C. Arner ら、(1998) Osteoarthritis and Cartilage 6:214-228; (1999) Journal of Biological Chemistry, 274 (10), 6594-6601 の開示に基づく方法と、そこで記載された抗体を用いて評価してもよい。コラゲナーゼに対して阻害剤として作用する化合物の効力は、T. Cawston and A. Barrett (1979) Anal. Biochem. 99:340-345 に記載されたように決定し得る。
【００７６】
活性に基づく細胞／組織におけるメタロプロテイナーゼ活性の阻害
ＴＮＦコンバターゼのような膜シェダーゼを阻害する薬剤としてのテスト
本発明の化合物がＴＮＦαの生成の細胞内のプロセッシングを阻害することができるかは、本質的に、ＴＨＰ−１細胞において、ＥＬＩＳＡを用いて、K. M. Mohler ら、(1994) Nature 370:218-220 に記載されたように、遊離したＴＮＦを検出することによって査定し得る。似た方法で、N. M. Hooper ら、(1997) Biochem. J. 321:265-279 に記載されたような他の膜分子のプロセッシングまたはシェディングを、適切な細胞腺と、シェッドタンパク質を検出するための適切な抗体を用いてテストし得る。
【００７７】
細胞性侵潤を阻害する薬剤としてのテスト
浸潤アッセイにおいて、本発明の化合物が細胞の転移を阻害することができるかは、A. Albini ら、(1987) Cancer Research 47:3239-3245 に記載されたように測定し得る。
【００７８】
全血液のＴＮＦシェダーゼ活性を阻害する薬剤としてのテスト
本発明の化合物がＴＮＦα生成を阻害することができるかは、ＴＮＦαの放出を刺激するために、ＬＰＳを用いたヒトの全血液アッセイにおいて査定する。ボランティアから得たヘパリン処理した(１０単位／ｍｌ)ヒトの血液を、溶媒(ＲＰＭＩ１６４０＋炭酸水素イオン、ペニシリン、ストレプトマイシン、グルタミン)で、１：５に希釈し、試験化合物２０μｌ(３組)と、ＤＭＳＯまたは適当な賦形剤中で、加湿(５％ＣＯ２／９５％空気)インキュベーター中で、３０分間３７℃でインキュベートした後、２０μｌのＬＰＳ(E. coli. 0111:B4; 最終濃度１０μｇ／ｍｌ)を加える(１６０μｌ)。各アッセイは、溶媒のみ(６ウェル／プレート)と、または標準として既知のＴＮＦα阻害剤とインキュベートした、希釈した血液のコントロールを含む。次いで、プレートは３７℃で６時間インキュベートし(加湿インキュベーター)、遠心分離し(２０００rpm、１０分間；４℃)、血漿を採取し(５０−１００μｌ)、９６ウェルプレート中で−７０℃で保存し、次にＴＮＦαの濃度をＥＬＩＳＡによって分析する。
【００７９】
インビトロでの軟骨の分解を阻害する薬剤としてのテスト
本発明の化合物がアグリカンまたは軟骨のコラーゲン構成成分の分解を阻害することができるかは、本質的に K. M. Bottomley ら、(1997) Biochem J. 323:483-488 に記載されたように評価し得る。
【００８０】
薬動力学テスト
本発明の化合物のクリアランス性と生物学的利用可能性を評価するために、エキソビボでの薬力学テストを、合成基質アッセイ、またはＨＰＬＣもしくはマス・スペクトル分析を利用して行った。これは、化合物のクリアランス速度を、ある範囲の種にわたって推定するために用い得る一般的なテストである。動物(例えばラット、マーモセット)は、化合物の可溶性の製剤(２０％ w/v ＤＭＳＯ、６０％ w/v ＰＥＧ４００など)で、静脈でまたは経口で投薬され、連続した時間点(例えば５、１５、３０、６０、１２０、２４０、４８０、７２０、１２２０分)で、血液のサンプルを適切な容器から１０Ｕへパリン採る。次に遠心分離にかけて血漿のフラクションを得て、血漿タンパク質をアセトニトリル(最終濃度８０％ w/v)で沈殿させた。３０分間−２０℃で、遠心分離によって血漿タンパク質を沈殿させ、上清のフラクションを、Savant speed vac を用いて減圧乾固する。沈殿物を緩衝液のアッセイ中で再構成し、次に合成基質アッセイを用いて、化合物の含有量を分析する。簡単に言えば、化合物濃度−応答曲線を化合物の受けた査定に対して構成する。再構成した血漿抽出物の連続希釈液の活性を査定し、元の血漿試料中に存在する化合物の量を、全血漿の希釈因子を考慮して、濃度−応答曲線を用いて計算する。
【００８１】
インビボでの査定
抗ＴＮＦ薬としてのテスト
本発明の化合物がエキソビボでＴＮＦα阻害剤となり得るかは、ラットにおいて評価する。簡単には、オスの Wistar Alderley Park (AP) ラット(１８０−２１０ｇ)のグループに、化合物(ラット６匹)、または薬剤の賦形剤(ラット１０匹)を、適切な経路、例えば経口(p.o.)、腹腔内(i.p.)、皮下(s.c.)によって投薬する。９０分後、ラットをＣＯ２濃度を上げて殺し、５単位のヘパリン ナトリウム／ml 血液へ、下大静脈を介して採血する。血液試料はすぐに氷上に置き、４℃で２０００rpm、１０分間遠心分離し、ＬＰＳで刺激したヒトの血液によるＴＮＦα生産への効果を、次に分析するために、得られた血漿を−２０℃で凍らせた。ラットの血漿の試料を解凍し、９６Ｕウェルプレート中のフォーマット・パターンのセットに、各試料を１７５μｌずつ加える。５０μｌのヘパリン処理した人の血液を、各ウェルに加え、混合し、プレートを３７℃で３０分間インキュベート(加湿インキュベーター)する。ＬＰＳ(２５μｌ；最終濃度１０μｇ／ｍｌ)を、ウェルに加え、さらに５.５時間インキュベーションを続ける。コントロール・ウェルは、２５μｌの溶媒のみでインキュベートする。次に、プレートを１０分間２０００rpmで遠心分離し、２００μｌの上清を９６ウェルプレートに移し、次にＥＬＩＳＡによってＴＮＦの濃度を分析するために、−２０℃で凍らせた。
【００８２】
提供されたソフトウェアによって、データの分析は、各化合物／用量に対して計算された：
【式１】
0004256095.tif 000017
【００８３】
抗関節炎薬としてのテスト
抗関節炎薬としての本発明の化合物は、D. E. Trentham ら、(1977) J. Exp. Med. 146,:857 で定義された通りに、コラーゲン誘発関節炎(ＣＩＡ)で試験する。このモデルは、酸に可溶なタイプIIコラーゲンが、フロインド不完全アジュバントで投薬したときに、ラットにおいて多発性関節炎を引き起こす。同条件下で、マウスと霊長類の関節炎を誘発するために使い得る。
【００８４】
抗癌剤としてのテスト
本発明の化合物の、抗癌剤としての活性は、本質的に I. J. Fidler (1978) Methods in Cancer Research 15:399-439 で記載されたように、Ｂ１６細胞腺を用いて(B. Hibner ら、Abstract 283 p75 10th NCI-EORTC Symposium, Amsterdam 1998年6月16日−19日に記載)、査定し得る。
【００８５】
実施例１
Ｎ−[１−([４−(４−ブロモフェニル)ピペラジノ]スルホニルメチル)−４−ピリミジン−２−イルブチル]−Ｎ−ヒドロキシホルムアミド
【化１８】
0004256095.tif 000018
ＴＨＦ(５.０ml)と蟻酸(２.５ml)中の、Ｎ−[１−([４−(４−ブロモフェニル)ピペラジノ]スルホニルメチル)−４−ピリミジン−２−イルブチル]ヒドロキシルアミン(４９７mg、１.０mmol)を、撹拌しながら０℃に冷却し、予め作っておいた無水酢酸(５６６μｌ、６.０mmol)と蟻酸(２.０ml)の混合物を加えた。混合物を０℃で１時間撹拌し、室温まで昇温させた。溶媒をロータリーエバポレーターによって除去し、残渣をクロマトグラフィー(５０ｇ、Silica Bond Elute、溶出：０→１５％メタノール／ジクロロメタン)で精製し、純粋なフラクションを蒸留し、熱酢酸エチルで結晶化し、Ｎ−[１−([４−(４−ブロモフェニル)ピペラジノ]スルホニルメチル)−４−ピリミジン−２−イルブチル]−Ｎ−ヒドロキシホルムアミドを、白色の結晶状の粉末として得た(２６２mg、５１％)。
ＮＭＲ(３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６)  δ／ｐｐｍ：9.87 (s，1H*)，9.55 (s，1H*)，8.70 (m，2H)，8.29 (s，1H*)，7.98 (s，1H*)，7.33 (m，3H)，6.92 (dd，2H)，4.68 (m，1H*)，4.13 (m，1H*)，3.55−3.31 (m，5H，一部妨害されている)，3.25−3.09 (m，7H，一部妨害されている)，1.80−1.50 (m，4H)
＊  旋光性異性体のシグナル
ＭＳ：ＥＳ＋，(Ｍ＋Ｈ)＋＝５１２，５１４(Ｂｒ同位体パターン)
【００８６】
出発物質は、以下のように合成した：
ｉ)ジクロロメタン(１００ml)中の、１−(４−ブロモフェニル)ピペラジン塩酸塩(５.０９ｇ、１８.３mmol)と、トリエチルアミン(７.６７ml)に、塩化メタンスルホニル(２.８３ml、３６.３mmol)を滴下した。混合物を１時間室温で撹拌し、次いでジクロロメタン(１００ml)を加えた。有機物を水で(２×)と、塩水で洗浄し、乾燥(Ｎａ２ＳＯ４)し、真空下で蒸留し、黄色の固体を得た。これをエタノールで結晶化しジエチルエーテルで洗浄し、１−(４−ブロモフェニル)−４−(メタンスルホニル)ピペラジン(４.７４ｇ、収率８１％)を、白色の綿状の粉末として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ(３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３)：δ／ｐｐｍ：7.38 (d，2H)，6.91 (d，2H)，3.21 (m，8H)，2.89 (s，3H)
ＭＳ：ＥＳ＋，(Ｍ＋Ｈ)＋＝３１８，３２０(Ｂｒ同位体パターン)
【００８７】
ii)窒素下で、１−(４−ブロモフェニル)−４−(メタンスルホニル)ピペラジン(９０２mg、２.０mmol)を、無水ＴＨＦ(１５ml)に懸濁し、−２０から−３０℃の間まで冷却し、続いてリチウム ビス(トリメチルシリル)アミド(１.０ＭＴＨＦ溶液、４.０ml)と、クロロトリメチルシラン(２１７mg、２.０mmol、２５３μｌ)と、４−ピリミジン−２−イルブタナール(butanal)(３００mg、２.０mmol)を加えた。混合物を−２０℃で１時間撹拌し、飽和塩化アンモニウム溶液でクエンチし、環境温度で一晩放置した。溶媒を真空下で除去し、残渣をジクロロメタン(１５ml)と、水(５ml)の層間に分配し、有機層を分離し、クロマトグラフィー(５０ｇ、Silica Bond Elute、溶出：０→１００％酢酸エチル／ヘキサン濃度勾配)にかけ、２−(５−[４−(４−ブロモフェニル)ピペラジノ]スルホニルペンタ−４−エニル)ピリミジンを、白色結晶として得た(７５９mg、収率８４％)。
ＭＳ：ＥＳ＋，(Ｍ＋Ｈ)＋＝４５１，４５３(Ｂｒ同位体パターン)
【００８８】
iii)ＴＨＦ(１０ml)中で、２−((Ｅ)−５−[４−(４−ブロモフェニル)ピペラジノ]スルホニルペンタ−４−エニル)ピリミジン(４５１mg、１.０mmol)に、撹拌しながらヒドロキシルアミン(５０％水溶液、５００μｌ)を加え、混合物を一晩撹拌した。溶媒を真空下で除去し、トルエンで共沸し(３×)、Ｎ−[１−([４−(４−ブロモフェニル)ピペラジノ]スルホニルメチル)−４−ピリミジン−２−イルブチル]ヒドロキシルアミン(４９７mg、定量的)を得た。
ＭＳ：ＥＳ＋，(Ｍ＋Ｈ)＋＝４８４，４８６(Ｂｒ同位体パターン)
【００８９】
実施例２
Ｎ−[１−([４−(５−クロロピリジン−２−イル)ピペラジノ]スルホニルメチル)−３−(５−フルオロピリミジン−２−イル)プロピル]−Ｎ−ヒドロキシホルムアミド
【化１９】
0004256095.tif 000019
無水酢酸(０.５１ml)を、直接０℃に冷却した蟻酸(２.０ml)に加え、次いでテトラヒドロフラン(１１ml)中の、２−[４−[４−(５−クロロピリジン−２−イル)ピペラジノ]スルホニル−３−(ヒドロキシアミノ)ブチル]−５−フルオロピリミジン(０.４８５ｇ)を加えた。溶液を室温で３時間撹拌し、次いで真空下で乾固し、得られた残渣をトルエンで共沸し、次いでメタノールに溶解し、４０℃で３０分間加熱した。溶液を蒸留して乾固し、次いでジエチルエーテルを加え、室温で１０分間撹拌し、固体を濾過し、真空下で乾燥し、Ｎ−[１−([４−(５−クロロピリジン−２−イル)ピペラジノ]スルホニルメチル)−３−(５−フルオロピリミジン−２−イル)プロピル]−Ｎ−ヒドロキシホルムアミドを得た (０.２１８ｇ)、融点：１５４−１５５℃。
ＮＭＲ(ｄ６−ＤＭＳＯ，３７３°Ｋ)：2.20 (m，2H)，2.95 (m，2H)，3.23 (dd，1H)，3.30 (m，4H)，3.49 (dd，1H)，3.60 (m，4H)，4.42 (vbs，1H)，6.88 (d，1H)，7.59 (dd，1H),8.05 (vbs，1H)，8.12 (dd，1H)，8.71 (s，2H)，9.40 (vbs，1H)；
ｍ／ｚ：４７３(Ｍ＋１)
【００９０】
出発物質は、以下のように合成した：
(ｉ)アルゴン下で、無水テトラヒドロフラン(２２ml)中の、１−(５−クロロピリジン−２−イル)−４−(メチルスルホニル)ピペラジン(０.６００ｇ)を撹拌し、−１０℃に冷却した後、リチウム ビス(トリメチルシリル)アミド(４.８ml、１.０Ｍテトラヒドロフラン溶液)を加えた。混合物を−１０℃で３０分間撹拌し、ジエチルクロロリン酸(０.３４５ml)の溶液を加えた。混合物を−１０℃で１５分間撹拌し、３−(５−フルオロピリミジン−２−イル)プロパナール(propanal)(０.３３４ｇ)を加え、−１０℃でさらに３０分間撹拌した。混合物を室温まで温め、次いで塩化アンモニウム水溶液で洗浄し、酢酸エチルで抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。
残渣は、シリカで、７０％酢酸エチル／３０％ヘキサンで溶出して精製し、２−((Ｅ)−４−[４−(５−クロロピリジン−２−イル)ピペラジノ]スルホニルブタ−３−エニル)−５−フルオロピリミジンと、２−((Ｚ)−４−[４−(５−クロロピリジン−２−イル)ピペラジノ]スルホニルブタ−３−エニル)−５−フルオロピリミジンの、６：４の混合物を得た(０.４４ｇ)。
１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)：8.55 (d，1H)，8.48，(s，1H)，7.46，(dd，1H)，6.85，(m，1H)，6.60，(d，1H)，*6.45，(m，1H)，6.15，(d，1H)，*6.03，(d，1H)，3.61，(m，4H)，3.28，(m，2H)，3.15，(m，4H)，*2.81，(m，2H)；
ＭＳ(ＥＳ＋)：４１２.３(ＭＨ＋)
＊  少ない方の同位体を表す
【００９１】
(ii)テトラヒドロフラン(５ml)中の、２−((Ｅ)−４−[４−(５−クロロピリジン−２−イル)ピペラジノ]スルホニルブタ−３−エニル)−５−フルオロピリミジンと、２−((Ｚ)−４−[４−(５−クロロピリジン−２−イル)ピペラジノ]スルホニルブタ−３−エニル)−５−フルオロピリミジン(０.４４ｇ)に、ヒドロキシルアミン(１.０ml、５０％水溶液)を加えた。混合物を１８時間撹拌し、ついでＥｔＯＡｃ(１０ml)で希釈し、飽和塩化アンモニウム溶液(１０ml)で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、真空下で蒸留し、２−[４−[４−(５−クロロピリジン−２−イル)ピペラジノ]スルホニル−３−(ヒドロキシアミノ)ブチル]−５−フルオロピリミジンを得た(０.４８３ｇ)。
１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)：8.45 (s，2H)，8.08 (d，1H)，7.39 (dd，1H)，6.55 (d，1H)，5.76 (bs，2H)，3.59 (m，4H)，3.46 (m，1H)，3.42 (m，2H)，3.33 (m，4H)，3.10 (m，4H)，2.82 (m，1H)，2.15 (m，1H)，2.01 (m，1H)；
ＭＳ(ＥＳ＋)：４４５.３(ＭＨ＋)
【００９２】
実施例３
下記の化合物を合成した。
【化２０】
0004256095.tif 000020
【表２】
0004256095.tif 000021
【００９３】
【表３】
0004256095.tif 000022
【００９４】
【表４】
0004256095.tif 000023
【００９５】
【表５】
0004256095.tif 000024
【００９６】
【表６】
0004256095.tif 000025
【００９７】
【表７】
0004256095.tif 000026
【００９８】
【表８】
0004256095.tif 000027
【００９９】
【表９】
0004256095.tif 000028
【０１００】
【表１０】
0004256095.tif 000029
【０１０１】
【表１１】
0004256095.tif 000030
【０１０２】
【表１２】
0004256095.tif 000031
【０１０３】
【表１３】
0004256095.tif 000032
【０１０４】
【表１４】
0004256095.tif 000033
【０１０５】
【表１５】
0004256095.tif 000034
【０１０６】
【表１６】
0004256095.tif 000035
【０１０７】
化合物の合成に要した出発のピペラジンとピペリジン スルホンアミドは、市販されていたか、下記のように合成した：
【０１０８】
１−(４−フルオロフェニル)−４−(メタンスルホニル)ピペラジン
【化２１】
0004256095.tif 000036
０℃で、乾燥ジクロロメタン(２００ml)中の、１−(４−フルオロフェニル)ピペラジン(３５ｇ、１９４mmol)と、ピリジン(１７.５ml)に、塩化メタンスルホニル(２０ml、２５８mmol)を滴下した。混合物を室温で３時間撹拌した。混合物を水で洗浄し、ジクロロメタン(２×１００ml)で抽出した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、真空下で蒸留した。残渣を研磨し、メタノールで洗浄し、１−(４−フルオロフェニル)−４−(メタンスルホニル)ピペラジン(３９.３５ｇ)を、白色結晶として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)：7.00 (m，2H)，6.90 (m，2H)，3.40 (m，4H)，3.20 (m，4H)，2.83 (s，3H)
【０１０９】
出発物質として用いたアリール／ヘテロアリールピペラジンおよびピペリジンは、市販されていたか、科学文献に記載されている。
【０１１０】
１−(６−クロロピリミジン−４−イル)−４−メシルピペラジン
エタノール(５００ml)中の、４,６−ジクロロピリミジン(３９.４ｇ)と、１−メシルピペラジン塩酸塩(５５.７ｇ)と、トリエチルアミン(１１６ml)を、還流が起こる温度で４時間撹拌した。次いで、混合物を室温で１２時間撹拌した。分離した固体を濾過して集め、スラリーをエタノール(２×８０ml、１６０ml)で、次にジエチルエーテル(１５０ml)で洗浄し、乾燥し、１−(６−クロロピリミジン−４−イル)−４−メシルピペラジンを、クリーム状の固体として得た(７１.９ｇ)、融点：２００−２０２℃。
ＮＭＲ  (ｄ６−ＤＭＳＯ)：2.88 (s，3H)，3.18 (m，4H)，3.80 (m，4H)，7.04 (s，1H)，8.38 (m，1H)；
ｍ／ｚ：２７７.３(Ｍ＋１)
【０１１１】
類似の製法を用いて、１−メシルピペラジン塩酸塩 CAS(161357-89-7) を適当なクロロピリジンと反応させ、下記の化合物を得た：
【化２２】
0004256095.tif 000037
【表１７】
0004256095.tif 000038
【０１１２】
２−(４−ピペリジニルオキシ)−５−クロロピリジン
ｉ)アルゴン下で、ＮａＨ(２.８８ｇ、６６mmol、５５％、ミネラル・オイル中に分散)を、乾燥ＤＭＥ(２００ml)中で撹拌した。２,５−ジクロロピリジン(８.８７ｇ、６０mmol)と、４−ヒドロキシピペリジン(６.６７ｇ、６６mmol)の混合物を、乾燥ＤＭＥ(２００ml)に溶解し、ＮａＨ懸濁液に３０分にわたって滴下した。加え終わった後、反応物を８２℃で４８時間加熱し、アルゴン気流中に保持した。反応物を水でゆっくりとクエンチした後、ＴＨＦをほとんど除去した。水層をＤＣＭ(ｘ３)で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、真空下で蒸留し、２−(４−ピペリジニルオキシ)−５−クロロピリジンを、黄色の油状物として得た(１２.７ｇ、定量的)。
１Ｈ  ＮＭＲ(ＤＭＳＯ)：8.17 (d，1H)，7.76 (dd，1H)，6.81 (d，1H)，4.96 (m，1H)，2.93 (m，2H)，2.53 (m，2H)，1.91 (m，2H)，1.46 (m，2H)；
ＭＳ(ＥＳ＋)：２１３.３(ＭＨ＋)，２２５.３(ＭＮａ＋)
類似の方法で、２−(４−ピペリジニルオキシ)−５−ブロモピリジンを合成した(ＭＨ＋：２５７.３)。
【０１１３】
実施例４−分析
Ｎ−[(１Ｓ)−１−({[４−(５−クロロピリジン−２−イル)ピペラジノ]スルホニル}メチル)−４−(ピリミジン−２−イル)ブチル]−Ｎ−ヒドロキシホルムアミド
【化２３】
0004256095.tif 000039
ＴＨＦ(７６ml)に溶解したカルバメート(１)(３.８ｇ、５.６６mmol)に、メタノール(７６ml)と、次に水(３８ml)を加え、そしてこの溶液に水酸化リチウム一水和物(２.３７ｇ、５６.６mmol)を加えた。室温で２時間撹拌した後、溶媒を減圧下で除去し、残渣を水(２５０ml)に溶解し、酢酸エチル(２００ml)でと、ジエチルエーテル(２×２５０ml)で洗浄した。飽和塩化アンモニウム水溶液を水層が約ｐＨ８になるまで加え、ついでジクロロメタン(３×２５０ml)で抽出した。合わせたジクロロメタン抽出液を、乾燥(ＭｇＳＯ４)し、蒸留し、白色粉末として生成物を得た(２.２ｇ、８３％)。Chiralpak ASカラムを用いて、キラルなＨＰＬＣにかけ、９６％ｅｅの生成物を単離した(Ｓ配置のものだと考えられる)。
融点(ＥｔＯＨ由来)  １２４.５−１２６.５℃；
[ａ]Ｄ２５ ＝−１７.２(ＭｅＯＨ)；
ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)：ｄ  9.9 (br s，1H)*；8.7 (m，2H)；8.5 (s，1H)*；8.1 (br s，1H)；8.0 (s，1H)*；7.5 (dd，1H)；7.2 (m，1H)；6.6 (d，1H)；4.9 (m，1H)*；4.2 (m，1H)*；3.7−3.5 (m，4H)；3.5 (m，1H)*；3.4−3.2 (m，4H)；3.3 (m，1H)*；3.1−2.9 (m，3H)；2.0−1.6 (m，4H)
＊  旋光性異性体のシグナル
ＭＳ(Ｍ＋Ｈ)：計算値４６９(Ｃ１９Ｈ２５ＣｌＮ６Ｏ４Ｓ)，実測値４６９
【０１１４】
段階Ａ
【化２４】
0004256095.tif 000040
ジクロロメタン(３００ml)に溶解し、０℃に冷却したヒドロキサム酸(２)(１８.７６ｇ、４０mmol)に、トリエチルアミン(１０.４ml、７５mmol)と、次に (４Ｓ)−４−ベンジル−２−オキサゾリジノン−３−カルボニル塩化物(１０.５５ｇ、４４mmol)[ＣＡＳ番号139149-49-8]を加えた。−３〜０℃で３時間撹拌した後、水(２５０ml)で洗浄し、乾燥し(ＭｇＳＯ４)、蒸留し、ベージュ色の泡沫を得た(２７.１ｇ)。ジアステレオマーは、分取用ｈｐｌｃを用い、酢酸エチル／ＥｔＯＨ(５％)で溶出した。より極性の高いジアステレオマーを収率３５％で単離した。
ＭＳ(Ｍ＋Ｈ)：計算値６７２(Ｃ３０Ｈ３４ＣｌＮ７Ｏ７Ｓ)、実測値６７２
【０１１５】
化合物(２)は、実施例２の製法を用いて合成した：
(Ｍ＋Ｈ：４６９)、融点：１３１−１３４℃；
ＮＭＲ(ＤＭＳＯ)：9.8 (1H，br)，8.7 (2H，m)，8.3 and 7.9 (1H，s)，8.1 (2H，s)，7.6 (1H，m)，6.9 (1H，m)，4.1 (1H，br m)，3.6 (4H，m)，3.2 (6H，m)，2.8 (2H，m)，1.8 (4H，m)
【０１１６】
実施例５
実施例４に記載の製法と類似した製法で、下記の化合物を製造した：
Ｎ−[(１Ｓ)−１−({[４−(５−ブロモピリジン−２−イル)ピペラジノ]スルホニル}メチル)−４−(ピリジン−２−イル)ブチル]−Ｎ−ヒドロキシホルムアミド
【化２５】
0004256095.tif 000041
ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)：ｄ  11.9 (br s，1H)*；8.5 (s，1H)*；8.5−8.4 (m，1H)；8.2 (m，1H)；8.1 (s，1H)*；7.8−7.7 (m，1H)；7.6 (m，1H)；7.3−7.2 (m，2H)；6.6 (m，1H)；5.0−4.9 (m，1H)*；4.3−4.2 (m，1H)*；3.7−3.6 (m，4H)；3.6 (m，1H)*；3.4−3.3 (m，4H)；3.3 (m，1H)*；3.1 (dd，1H)*，2.9 (m，1H)*，2.9−2.8 (m，2H)；2.1−1.6 (m，4H)
＊  旋光性異性体のシグナル
ＭＳ(Ｍ＋Ｈ)：計算値５１４(Ｃ２０Ｈ２６ＢｒＮ５Ｏ４Ｓ)，実測値５１４
[α]Ｄ２５ ＝−１４(ｃ＝２.３，ＭｅＯＨ)
ラセミ体の出発物質は、実施例２に記載の方法を用いて合成した。
Ｍ＋Ｈ＝５１２／５１４
【０１１７】
Ｎ−[(１Ｓ)−１−({[４−(５−クロロピリジン−２−イル)ピペラジノ]スルホニル}メチル)−３−(５−フルオロピリミジン−２−イル)プロピル]−Ｎ−ヒドロキシホルムアミド
【化２６】
0004256095.tif 000042
１Ｈ  ＮＭＲ(ＤＭＳＯ，３７３Ｋ)：9.44 (br s，1H)，8.70 (s，2H)，8.10 (d，1H，J = 2.6Hz)，8.05 (br s，1H)，7.57 (dd，1H， J = 9.1，2.6Hz)，6.86 (d，1H，J = 9.1Hz)，4.40 (br s，1H)，3.59 (dd，4H，J = 5.3，5.0Hz)，3.47 (dd，1H，J = 14.6，7.4Hz)，3.28 (dd，4H，J = 5.3，5.0Hz)，3.24 (dd，1H，J = 14.6，4.3Hz)，2.93 (m，2H)，2.16 (m，2H)
ＭＳ(ＥＳＩ)：４７３(ＭＨ＋)
αｄ＝−１１.０３(ＭｅＯＨ，ｃ＝１.２４２)
ラセミ体の出発物質は、実施例２で合成した。
【０１１８】
Ｎ−[(１Ｓ)−１−({[４−(４−フルオロフェニル)ピペラジノ]スルホニル}メチル)−４−(ピリミジン−２−イル)ブチル]−Ｎ−ヒドロキシホルムアミド
【化２７】
0004256095.tif 000043
Ｍ＋Ｈ：４５２.４４；
ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)：d 9.9 (br s，1H)*；8.7 (m，2H)；8.5 (s，1H)*； 8.05 (s，1H)*；7.2 (m，1H)；7.0−6.9 (m，4H)；4.9 (m，1H)*；4.2 (m，1H)*；3.5−3.4 (m，4H)；3.5 (m，1H)*；3.2−3.1(m，4H)；3.3 (m，1H)*；3.1−2.9 (m，3H)；2.0−1.6 (m，4H)
＊  旋光性異性体のシグナル
ラセミ体の出発物質は、実施例３に記載の方法を用いて合成した。
ＮＭＲ(ＤＭＳＯ)：10.0 (1H，br s)，8.6 (2H，m)，8.2 (1H，d)，7.2 (1H，m)，6.9 (4H，m)，4.9 と 4,2 (1H，br)，3.4 (6H，m)，3.0 (6H，m)，1.9 (4H，m)
【０１１９】
実施例６−クロマトグラフによる分析
Ｎ−[(１Ｓ)−１−({[４−(５−クロロピリジン−２−イル)ピペラジノ]スルホニル}メチル)−３−(ピリミジン−２−イル)プロピル]−Ｎ−ヒドロキシホルムアミドと、Ｎ−[(１Ｒ)−１−({[４−(５−クロロピリジン−２−イル)ピペラジノ]スルホニル}メチル)−３−(ピリミジン−２−イル)プロピル]−Ｎ−ヒドロキシホルムアミド
【化２８】
0004256095.tif 000044
ラセミ体の形態で合成した、Ｎ−[１−({[４−(５−クロロピリジン−２−イル)ピペラジノ]スルホニル}メチル)−３−(ピリミジン−２−イル)プロピル]−Ｎ−ヒドロキシホルムアミドを、充填済から無(Chiralpak AD No. AD00CJ−HK002)によるクロマトグラフィーの分離によって、一方のエナンチオマーに分離し、エタノールで溶出した。生物学的活性は、二番目にカラムから溶出した化合物(Ｓ配置であると推定される)において見られた。
１番目に溶出したエナンチオマー：ＭＨ＋  ４５５
１番目に溶出したエナンチオマー：ＭＨ＋  ４５５
ラセミ体の出発物質は、実施例２に記載の方法を用いて合成した。
ＭＨ＋＝４５５
ＮＭＲ(ＤＭＳＯ)：9.9，9.6 (1H br s)，8.6 (2H，m)，8.3 and 7.9 (1H，s)，8.1 (1H，dd)，7.3 (1H，m)，6.9 (1H，d)，4.7 と 4.2 (1H，ブロード m)，3.6 (4H，m)，3.4-3.2 (6H，m)，2.8 (2H，m)，2.1 (2H，m)
【０１２０】
実施例７−クロマトグラフによる分析のさらなる実施例
下記の化合物は、実施例６に記載の条件を用いて分析した：
Ｎ−[(１Ｓ)−１−({[４−(５−トリフルオロメチルピリジン−２−イル)ピペラジノ]スルホニル}メチル)−３−(ピリミジン−２−イル)プロピル]−Ｎ−ヒドロキシホルムアミドと、Ｎ−[(１Ｒ)−１−({[４−(５−トリフルオロメチルピリジン−２−イル)ピペラジノ]スルホニル}メチル)−３−(ピリミジン−２−イル)プロピル]−Ｎ−ヒドロキシホルムアミド
【化２９】
0004256095.tif 000045
１番目に溶出したエナンチオマー：Ｍ＋Ｈ  ４８９.５
２番目に溶出したエナンチオマー：Ｍ＋Ｈ  ４８９.５
ラセミ体の出発物質は、実施例３で合成した。
【０１２１】
Ｎ−[(１Ｓ)−１−({[４−(５−ブロモピリジン−２−イル)ピペラジノ]スルホニル}メチル)−４−(ピリミジン−２−イル)ブチル]−Ｎ−ヒドロキシホルムアミドと、Ｎ−[(１Ｒ)−１−({[４−(５−ブロモピリジン−２−イル)ピペラジノ]スルホニル}メチル)−４−(ピリミジン−２−イル)ブチル]−Ｎ−ヒドロキシホルムアミド
【化３０】
0004256095.tif 000046
１番目に溶出したエナンチオマー：Ｍ＋Ｈ  ５１３／５１５
２番目に溶出したエナンチオマー：Ｍ＋Ｈ  ５１３／５１５
ラセミ体の出発物質は、実施例２に概略した方法を用いて合成した：
Ｍ＋Ｈ  ５１３／５１５
【０１２２】
実施例８
下記の化合物を合成した。
【化３１】
0004256095.tif 000047
【表１８】
0004256095.tif 000048
【０１２３】
【表１９】
0004256095.tif 000049
【０１２４】
【表２０】
0004256095.tif 000050
【０１２５】
上記の表において：
＊＊：化合物(Ｓ配置のエナンチオマー)は、実施例６に記載の方法を用いて合成し、Chiralpak AD (250mm×4.6mm) No. ADooCE−JJ122 のカラムを用いて、ＭｅＯＨ／ＭｅＣＮ１５／８５で溶出したことを示す；
ジアステレオマーＡとＢは、シリカゲルのカラムから、ジクロロメタン中、３−５％のエタノールで溶出した順番を言う(ジアステレオマーＡは、１番目に溶出したフラクション、ジアステレオマーＢは２番目に溶出したフラクションである)
【０１２６】
実施例９
我々は、実施例８でリストに挙げた下記の化合物のＮＭＲデータを提供する：
Ｎ−[(１Ｓ)−１−({[４−(５−トリフルオロメチルピリジン−２−イル)ピペラジノ]スルホニル}メチル)−４−(ピリミジン−２−イル)ブチル]−Ｎ−ヒドロキシホルムアミド
【化３２】
0004256095.tif 000051
ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)：δ 10.1(br s，1H)*;8.7 (m，2H)；8.5 (s，1H)*；8.4 (br s，1H)；8.1 (s，1H)*；7.7 (dd，1H)；7.2 (m，1H)；6.7 (d，1H)；4.9 (m，1H)*；4.2 (m，1H)*；3.9−3.7 (m，4H)；3.6 (m，1H)*；3.4−3.2 (m，4H)；3.3 (m，1H)*；3.1−2.9 (m，3H)；2.0−1.6 (m，4H)
＊  旋光性異性体のシグナル
【０１２７】
Ｎ−({[４−フルオロフェニルピペラジノ]スルホニル}メチル)−３−[(５−フルオロピリミジン−２−イル)プロピル]−Ｎ−ヒドロキシホルムアミド
【化３３】
0004256095.tif 000052
１Ｈ  ＮＭＲ(ＤＭＳＯ，３７３Ｋ)：9.46 (br s，1H)，8.73 (s，2H)，7.08-6.96 (m，4H)，4.42 (br s，1H)，3.50 (dd，J = 14.8，7.5 Hz，1H)，3.35 (m，4H)，3.28 (dd，J = 14.8，4.4 Hz，1H)，3.18 (m，4H)，2.97 (m，2H)，2.21 (m，2H)
【０１２８】
Ｎ−[(１Ｒまたは１Ｓ)−({[４−クロロフェニルピペラジノ]スルホニル}メチル)−３−[(３Ｒまたは３Ｓ)−(５−フルオロピリミジン−２−イル)ブチル]−Ｎ−ヒドロキシホルムアミド(ジアステレオマーＡ単独)
【化３４】
0004256095.tif 000053
１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)(２つの旋光性異性体は、ほぼ等しい割合であった)：8.72 (s，0.5H)，8.57 (d，2H)，8.25 (s，0.5H)，7.89 (s，0.5H)，7.23 (dd，2H)，6.83 (dd，2H)，4.94 (sext，0.5H)，4.30 (m，0.5H)，3.57 (dd，0.5H)，3.44 (m，2H)，3.37 (m，2.5H)，3.16 (m，5.5H)，3.02 (dd，0.5H)，2.52 (ddd，0.5H)，2.35 (ddd，0.5H)，2.02 (dt，0.5H)，1.89 (ddd，0.5H)，1.40 (dd，3H)；
【０１２９】
Ｎ−[(１Ｒまたは１Ｓ)−({[４−ブロモフェニルピペラジノ]スルホニル}メチル)−３−[(３Ｒまたは３Ｓ)−(５−フルオロピリミジン−２−イル)ブチル]−Ｎ−ヒドロキシホルムアミド(ジアステレオマーＡ単独)
【化３５】
0004256095.tif 000054
１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)(２つの旋光性異性体は、ほぼ等しい割合)：8.72 (s，0.5H)，8.57 (d，2H)，8.25 (s，0.5H)，7.89 (s，0.5H)，7.38 (dd，2H)，6.80 (dd，2H)，4.94 (sext，0.5H)，4.30 (m，0.5H)，3.57 (dd，0.5H)，3.44 (m，2H)，3.37 (m，2.5H)，3.16 (m，5.5H)，3.02 (dd，0.5H)，2.52 (ddd，0.5H)，2.35 (ddd，0.5H)，2.02 (dt，0.5H)，1.89 (dt，0.5H)，1.40 (dd，3H)；
【０１３０】
Ｎ−[(１Ｒまたは１Ｓ)−({[４−クロロフェニルピペリジノ]スルホニル}メチル)−３−[(３Ｒまたは３Ｓ)−(５−フルオロピリミジン−２−イル)ブチル]−Ｎ−ヒドロキシホルムアミド(ジアステレオマーＡ単独)
【化３６】
0004256095.tif 000055
１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)(２つの旋光性異性体は、はぼ等しい割合)：8.69 (s，0.5H)，8.57 (d，2H)，8.25 (s，0.5H)，7.89 (s，0.5H)，7.27 (妨害されている)，7.13 (dd，2H)，4.91 (sext，0.5H)，4.30 (m，0.5H)，3.87 (m，2H)，3.57 (dd，0.5H)，3.35 (dd，0.5H)，3.18 (m，1.5H)，3.00 (dd，0.5H)，2.85 (m，2H)，2.55 (m，1.5H)，2.35 (ddd，0.5H)，2.06 (dt，0.5H)，1.88 (m，2.5H)，1.7 (妨害されている)，1.40 (dd，3H)；
【０１３１】
Ｎ−[(１Ｒまたは１Ｓ)−({[３,４−ジクロロフェニルピペラジノ]スルホニル}メチル)−３−[(３Ｒまたは３Ｓ)−(５−フルオロピリミジン−２−イル)ブチル]−Ｎ−ヒドロキシホルムアミド(ジアステレオマーＡ単独)
【化３７】
0004256095.tif 000056
１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)(２つの旋光性異性体は、ほぼ等しい割合)：8.62 (s，0.5H)，8.55 (d，2H)，8.22 (s，0.5H)，7.86 (s，0.5H)，7.28 (m，1H)，6.95 (m，1H)，6.73 (m，1H)，4.92 (sext，0.5H)，4.30 (m，0.5H)，3.57 (dd，0.5H)，3.44 (m，2H)，3.37 (m，2.5H)，3.16 (m，5.5H)，3.02 (dd，0.5H)，2.52 (ddd，0.5H)，2.37 (ddd，0.5H)，2.04 (dt，0.5H)，1.89 (dt，0.5H)，1.40 (dd，3H)；
【０１３２】
Ｎ−[(１Ｒまたは１Ｓ)−({[４−(５−シアノピリジン−２−イル)ピペラジノ]スルホニル}メチル)−３−[(３Ｒまたは３Ｓ)−(５−フルオロピリミジン−２−イル)ブチル]−Ｎ−ヒドロキシホルムアミド(ジアステレオマーＡ単独)
【化３８】
0004256095.tif 000057
１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)(２つの旋光性異性体は、ほぼ等しい割合)：8.72 (s，0.5H)，8.55 (s，2H)，8.41 (s，1H)，8.22 (s，0.5H)，7.86 (s，0.5H)，7.65 (m，1H)，6.61 (dd，1H)，4.92 (m，0.5H)，4.30 (m，0.5H)，3.78 (m，4H)，3.57 (dd，0.5H)，3.38 (m，2H)，3.30 (m，2.5H)，3.16 (m，1.5H)，3.02 (dd，0.5H)，2.52 (m，0.5H)，2.37 (m，0.5H)，2.04 (dt，0.5H)，1.84 (dt，0.5H)，1.40 (dd，3H)；
【０１３３】
Ｎ−[(１Ｓ)−({[４−(４−フルオロフェニルピペラジノ]スルホニル}メチル)−３−[(３Ｓ)−(５−フルオロピリミジン−２−イル)ブチル]−Ｎ−ヒドロキシホルムアミド
【化３９】
0004256095.tif 000058
１Ｈ  ＮＭＲ(ＤＭＳＯ−ｄ６)：9.9，9.53 (2s，1H)，8.78 (s，2H)，7.98 (d，1H)，7.12-6.91 (m，4H)，4.8，4.17 (2s，1H)，3.13 (m，4H)，3.0 (m，1H)，1.86 (m，1H)，1.22 (m，3H)
【０１３４】
実施例１０
１−({[４−(４−クロロフェニル)ピペラジン−１−イル]スルホニル}メチル)−３−(５−クロロピリジン−３−イル)プロピル(ヒドロキシ)ホルムアミド
【化４０】
0004256095.tif 000059
０℃で、蟻酸(４００μｌ、１０.８mmol)に、無水酢酸(１０２μｌ、１.１mmol)を加え、混合物を室温で１５分間撹拌した。混合物を、０℃に冷却し、ＴＨＦ中の１−(４−クロロフェニル)−４−{[４−(５−クロロピリジン−３−イル)−２−(ヒドロキシアミノ)ブチル]スルホニル}ピペラジン(１００mg、０.２２mmol)を、シリンジで滴下した。室温で１.５時間撹拌した後、揮発性成分を真空下で除去し、残渣をトルエン(２ｍＬ)で共沸した。次いで残渣をメタノール(５ｍＬ)に溶解し、４０℃で１時間撹拌した。室温に冷却した後、溶媒を蒸留し、残渣をメタノール(０.５ｍＬ)に溶解した。次いでジエチルエーテル(５ｍＬ)を加え、濁った懸濁液を室温で１時間撹拌した。沈殿した固体を濾過し、ジエチルエーテルで洗浄し、真空下で乾燥し、灰白色の固体として表題化合物を得た(４８mg、０.０９９mmol)。
１Ｈ  ＮＭＲ(ＤＭＳＯ，３７３Ｋ)：9.55 (br s，1H)，8.43 (d，1H)，8.41 (d，1H)，8.17 (br s，1H)，7.76 (dd，1H)，7.25 (m，2H)，6.96 (m，2H)，4.35 (br s，1H)，3.49 (dd，1H)，3.34 (m，4H)，3.25 (m，5H)，2.67 (m，2H)，2.02 (m，2H)
ＭＳ(ＥＳＩ)：４８７.０６，４８９.０４，４９０.０８(ＭＨ＋２×Ｃｌ)
【０１３５】
出発物質は、下記のように合成した：
(ｉ)３−(５−クロロピリジン−３−イル)プロパン酸エチル
【化４１】
0004256095.tif 000060
アルゴン雰囲気下、０℃で、乾燥エタノール(１０ｍＬ)中の、(２Ｅ)−３−(５−クロロピリジン−３−イル)プロパ−２−エン酸エチル(３３８mg、１.６mmol)[ＣＡＳ番号 163083-45-2] に、固体の水素化ホウ素ナトリウム(６７mg、１.７５mmol)を、撹拌しながら加えた。反応混合物を室温まで温め、４時間撹拌し、さらに水素化ホウ素ナトリウム(６７mg、１.７５mmol)を加えた。さらに１８時間撹拌した後、飽和塩化アンモニウム水溶液(５ｍＬ)を加えた。揮発性成分を真空下で除去し、残渣を水(１０ｍＬ)と酢酸エチル(１０ｍＬ)の層間に分配した。層を分離し、水相を酢酸エチル(３×１０ｍＬ)で抽出した。次いで、合わせた有機抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、濾過し、真空下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、ヘキサン中２０％から１００％の酢酸エチル)によって、表題化合物(１３２mg、０.６２mmol)と、飽和アルコール(７０mg)を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)：8.43 (m，1 H)，8.34 (m，1H)，7.55 (m，1H)，4.16 (q，2H)，2.96 (dd，2H)，2.63 (dd，2H)
【０１３６】
(ii)１−{[４−(４−クロロフェニル)ピペラジン−１−イル]スルホニル}−４−(５−クロロピリジン−３−イル)ブタン−２−オン
【化４２】
0004256095.tif 000061
アルゴン雰囲気下、−１０℃で、乾燥ＴＨＦ(７.５ｍＬ)中の１−(４−クロロフェニル)−４−(メチルスルホニル)ピペラジン(２３５mg、０.８５mmol)に、ＬｉＨＭＤＳ(１.０ＭＴＨＦ溶液１.７１ｍＬ、１.７１mmol)を、撹拌しながら４分間にわたって滴下した。この温度で溶液を４０分間撹拌した。次に、ＴＨＦ(１ｍＬ)中の、３−(５−クロロピリジン−３−イル)プロパン酸エチル(２０１mg、０.９４mmol)を、カニューレで５分間にわたって滴下した。−１０℃で反応物をさらに３０分間撹拌した後、飽和塩化アンモニウム水溶液(５ｍＬ)でクエンチした。揮発性成分を真空下で除去し、残渣をＣＨ２Ｃｌ２(３×５ｍＬ)で抽出した。合わせた有機抽出液を、水(１０ｍＬ)でと、塩水(１０ｍＬ)で洗浄した後、乾燥し(ＭｇＳＯ４)濾過し、真空下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、ヘキサン中５０％酢酸エチル)にかけ、表題化合物を得て(２２８mg、０.５２mmol)、３−(５−クロロピリジン−３−イル)プロパン酸エチル(７４mg、０.３５mmol)を回収した。
１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)：8.46 (m，1H)，8.38 (m，1H)，7.58 (m，1H)，7.21 (m，2H)，6.83 (m，2H)，3.96 (s，2H)，3.37 (m，4H)，3.17 (m，6H)，2.95 (dd，2H)
ＭＳ(ＥＳＩ)：４４２.０７，４４４.０６，４４５.１(ＭＨ＋２×Ｃｌ)
【０１３７】
(iii)１−{[４−(４−クロロフェニル)ピペラジン−１−イル]スルホニル}−４−(５−クロロピリジン−３−イル)ブタン−２−オール
【化４３】
0004256095.tif 000062
室温で、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ(１：１、５ｍＬ)の混合溶媒中の、１−{[４−(４−クロロフェニル)ピペラジン−１−イル]スルホニル}−４−(５−クロロピリジン−３−イル)ブタン−２−オン(２２８mg、０.５１mmol)に、固体の水素化ホウ素ナトリウムを、撹拌しながら一度に加えた。反応物を４０分間撹拌した後、塩酸(１Ｍ、２ｍＬ)でクエンチした。層を分離し、水層をＣＨ２Ｃｌ２(３×５ｍＬ)で抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、濾過し、真空下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルのプラグで濾過し、ヘキサン中５０％の酢酸エチルで溶出し、表題化合物を得た(１１１mg、０.２５mmol)。
１Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)：8.47 (m，1H)，8.40 (m，1H)，7.59 (m，1H)，7.21 (m，2H)，6.86 (m，2H)，4.21 (m，1H)，3.45 (m，4H)，3.24 (m，4H)，3.11 (m，2H)，2.88 (m，2H)，1.89 (m，2H)
【０１３８】
(iv)１−(４−クロロフェニル)−４−{[(１Ｅ)−４−(５−クロロピリジン−３−イル)ブタ−１−エニル]スルホニル}ピペラジン
【化４４】
0004256095.tif 000063
アルゴン雰囲気下、室温で、乾燥ＣＨ２Ｃｌ２(２.５ｍＬ)中の、１−{[４−(４−クロロフェニル)ピペラジン−１−イル]スルホニル}−４−(５−クロロピリジン−３−イル)ブタン−２−オール(１１１mg、０.２５mmol)に、トリメチルアミン塩酸塩(２mg、０.０２mmol)と、トリエチルアミン(５２μｌ、０.２５mmol)と、次いで塩化メタンスルホニル(２１μｌ、０.２５mmol)を、撹拌しながら加えた。反応物を室温で３０分間撹拌し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液(５ｍＬ)を加えてクエンチした。層を分離し、水相を酢酸エチル(３×６ｍＬ)で抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、濾過し、真空下で濃縮した。残渣をＣＨ２Ｃｌ２(２.５ｍＬ)に溶解し、トリエチルアミン(１００μｌ、１.３６mmol)で処理した。３０分後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液(５ｍＬ)を加えて、反応をクエンチした。層を分離し、水相を酢酸エチル(３×６ｍＬ)で抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、濾過し、真空下で濃縮した。粗生成物を次の段階に用いた。
ＭＳ(ＥＳＩ)：４４６.０６，４２８.０６，４３０.０７(ＭＨ＋２×Ｃｌ)
【０１３９】
(ｖ)１−(４−クロロフェニル)−４−{[４−(５−クロロピリジン−３−イル)−２−(ヒドロキシアミノ)ブチル]スルホニル}ピペラジン
【化４５】
0004256095.tif 000064
室温で、ＴＨＦ(１０ｍＬ)中の、１−(４−クロロフェニル)−４−{[(１Ｅ)−４−(５−クロロピリジン−３−イル)ブタ−１−エニル]スルホニル}ピペラジン(段階ivの粗生成物)に、ヒドロキシルアミン(２ｍＬ、５０％水溶液)を加えた。反応物を室温で３時間撹拌した後、飽和塩化アンモニウム水溶液(５ｍＬ)でクエンチした。層を分離し、水相を酢酸エチル(３×１０ｍＬ)で抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、濾過し、真空下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、１００％酢酸エチル)で生成し、表題化合物を得た(１００mg、０.２２mmol)。