(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
血漿およびアネキシンＶを含む、ループス血液凝固阻止因子をシミュレートする血液凝固試験に使用するための対照および／または検量血漿。
【請求項２】
アネキシンＶが、
−血液凝固診断の少なくとも２種の異なる試験における血液凝固時間が正常範囲を越えて延長され、
−この延長は反応バッチ中のリン脂質含量に依存し、
−正常ヒト血漿との血漿交換実験における対照として使用される場合には、意図された試験における血液凝固時間が正常範囲を越える
ような濃度で天然の血漿に添加される、請求項１に記載の対照および／または検量血漿。
【請求項３】
用いられるアネキシンＶは、天然起源または組換え起源から単離できる、請求項１または２に記載の対照および／または検量血漿。
【請求項４】
添加されるアネキシンＶの濃度は、使用が意図される血液凝固試験において標準範囲の外側の血液凝固時間または活性が達成されるように選択される、請求項１〜３のいずれかに記載の対照および／または検量血漿。
【請求項５】
添加されるアネキシンＶの濃度は、使用が意図される血液凝固試験に使用される場合、異なるリン脂質濃度における血液凝固時間または活性の商が同一の血液凝固試験において正常ヒト血漿で得られる商の外側の値として得られるように選択される、請求項４に記載の対照および／または検量血漿。
【請求項６】
添加されるアネキシンＶの濃度は、正常血漿との血漿交換実験における混合物中への使用が意図される場合、対照１部と正常血漿１部の混合比の場合にもなお病的結果が得られるように選択される、請求項４または５に記載の対照および／または検量血漿。
【請求項７】
活性化部分トロンボプラスチン時間（ＡＰＴＴ）、部分トロンボプラスチン時間（ＰＴ）、ラッセルヘビ毒時間（ＲＶＶＴ）またはカオリン血液凝固時間（ＫＣＴ）を含み、請求項４〜６のいずれかに記載の対照および／または検量血漿を用いる、ループス血液凝固阻止因子の測定のための血液凝固試験の方法。
【請求項８】
第VIIａ因子、第IXａ因子、第Ｘａ因子、トロンビンまたはプロテインＣａの添加の結果としての血液凝固因子のリン脂質依存性反応を含み、請求項４〜６のいずれかに記載の対照および／または検量血漿を用いる、ループス血液凝固阻止因子の測定のための血液凝固試験の方法。
【請求項９】
ヒトおよび／または非ヒト起源の血漿である、請求項１に記載の対照および／または検量血漿。
【請求項１０】
正常動物および／またはドナーからの血漿である、請求項１または９に記載の対照および／または検量血漿。
【請求項１１】
血漿は、天然起源または親和性および／またはイムノクロマトグラフィーによって人工的に製造された体液系の因子を欠いている、請求項１、９および１０のいずれかに記載の対照および／または検量血漿。
【請求項１２】
安定化または望ましくない副作用の回避のために、糖、アミノ酸、アルコール、プロテアーゼの天然および合成阻害剤、ならびにキレート剤、抗酸化剤、抗体およびアジドを添加できる、請求項１および９〜１１のいずれかに記載の対照および／または検量血漿。
【請求項１３】
リン脂質を、試験バッチに試薬を介して、サンプルの添加により、またはサンプルをリン脂質と予めインキュベーションしてまたはしないで別個に添加して加える、請求項１または２に記載の対照および／または検量血漿を用いる、リン脂質依存性の測定方法。
【請求項１４】
リン脂質として、合成または天然のリン脂質を使用できる、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
試薬のリン脂質含有量は、組織トロンボプラスチン阻害試験（ＴＴＩ）における溶媒で希釈して減少させる、請求項１３に記載の方法。
【請求項１６】
血液凝固活性の検出を、凝血形成の機械的、電気的もしくは光学的検出または適当な発色原基質の添加によるある種の血液凝固プロテアーゼの活性化の検出により実施することを含み、請求項７または８に記載の、ループス血液凝固阻止因子の測定のための血液凝固試験の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、ループス血液凝固阻止因子の検出のために使用されるすべての機能性血液凝固試験において対照または標準として使用するための血漿の製造方法に関する。
【０００２】
【従来技術】
ループス血液凝固阻止因子は、免疫グロブリンであり、後天性の自己抗体のタイプに属する。それらは、リン脂質またはリン脂質／タンパク質複合体に対して向けられていて、慣用の診断的血液凝固試験における血液凝固時間を延長させる（Triplett D.ら、Hematologic Pathology 1988; 2: 121-143参照）。これらの免疫グロブリンは、同様に、脂質、とくにカルジオリピンに向けられた他の自己抗体から識別されなければならない。いずれの群も臨床的に、それ自体で血栓症を発症し、出産異常（流産）を増大させる抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）の原因とされる。ループス血液凝固阻止因子の病原性機構はいくつかの理由によってまだ明確ではない。第一に、存在する抗体の特異性、したがってその作用機構が患者間で個々に異なることである。第二に、免疫グロブリンのサブクラス（ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＡ）および抗体力価が変動する。第三に、ループス血液凝固阻止因子の測定結果と臨床的表出の間の矛盾である。すなわち、ループス血液凝固阻止因子によって生じるインビトロ試験における血液凝固時間の延長は、出血傾向の増大を示すが、しかしながら、インビボにおいては血栓の傾向の増大として表出される。
【０００３】
したがって、ループス血液凝固阻止因子の診断は、国際委員会の推薦に従った様々の血液凝固試験における血漿サンプルの挙動を現象的に記述するに止まっている（Brandt，J.T.ら, Trombosis Haemostasis 1995; 74: 1185-1190）。これらの試験は、活性化部分トロンボプラスチン時間（ＡＰＴＴ）、カオリン血液凝固時間（ＫＣＴ）、希釈トロンボプラスチン時間（ｄＰＴ）およびラッセルヘビ毒時間（ＲＶＶＴ）である。これらの試験の血液凝固時間の延長は、しかしながら、いわゆる血漿交換試験において、病的サンプルを正常血漿と混合し、一般的にはＡＰＴＴで測定される理由である因子の欠損によっても得られる。一般に、因子の欠損は正常血漿との混合により５０％が置換された時点ですでに補償されているが、ループス血液凝固阻止因子の存在下には依然として病的な結果が得られる。しかもリン脂質依存性をチェックしなければならず、これは同一試薬を使用するがリン脂質の濃度は変えて実施される。さらに、同様に正常血漿との１：１混合によっては補償されない個々の血液凝固因子に対する自己抗体も識別しなければならない。しかしながら一般的に、これらの因子抗体は、血液凝固系の２つの経路の一方のみに作用して（とくに、いわゆる第VIII因子阻害剤）、様々な経路の比較、すなわち上述の試験（内因性経路についてはＡＰＴＴ、外因性経路についてはＰＴ）の比較によって認識される。
【０００４】
ループス血液凝固阻止因子に対する上述の試験の試薬の感度は極めて異なっている（Messmore，H.ら, Thrombosis and Hemostasis 1994; 20: 79-94）。さらに、ループス血液凝固阻止因子はすべての試験において病的な結果を生じない。これが、少なくとも２種類の機能試験の使用が推薦される理由である（たとえばＡＰＴＴとＰＶＶＴ；Brandt，J.T.ら, Trombosis Haemostasis 1995; 74: 1185-1190 参照）。たとえば、臨床試験におけるデータの比較または交換には、したがって、標準の参照ならびに試験結果の規則的なチェックが、たとえば治療のモニタリングに有用である。しかしながら、個々の血漿ドナーの使用は、ループス血液凝固阻止因子の不均一な特異性、低い再現性および貧弱な安定性により、このような標準または市販用の対照の調製には不適当である。したがって、現時点では、ループス血液凝固阻止因子の明確な測定値も、またループス血液凝固阻止因子の定量に対する対照も存在しない。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、したがって、サンプルたとえば血漿中のループス血液凝固阻止因子を、この修飾された血漿が、すべての慣用の機能性血液凝固試験において天然のループス血液凝固阻止因子の存在に匹敵する病的結果を生じ、したがって作用の定量化のために（標準）および対照として適当な様式で再現性よく定量的にシミュレートできる方法を見出すことを目的とするものである。
【０００６】
ループス血液凝固阻止因子に必須の特性は、その凝血時間延長作用がリン脂質の利用性に依存することである。この挙動をシミュレートする１つの可能性は、Babcock & McGlasson（US 4,877,741号）によって記載されている。彼らは、スフィンゴミエリナーゼＤ活性を有する酵素を含む蜘蛛（Loxosceles reclusa）からのエキスを使用している。彼らは、ＡＰＴＴ中におけるこのエキスが様々な試薬に凝血時間の延長を招来し、リン脂質の添加によって中和可能なことを示すことができた（McGlasson，D.L.ら, Am. J. Clin. Pathol. 1993; 100: 576-578）。しかしながら、この延長はわずかな弱いものでしかない。すなわち達成される延長は標準範囲の上限で最高６３％であった（Pacific Hemostasis からのＡＰＴＴ試薬、表２；McGlasson，D.L.ら、 Am. J. Clin. Pathol. 1993; 100: 576-578）。高濃度のループス血液凝固阻止因子によって起こるような１００％を越える典型的な延長を生じさせるためには、これは低すぎて、したがって広い測定範囲で使用される標準には適当ではない。
【０００７】
ある種の環境下にはアネキシンがＡＰＴＴの延長を招来できることも記載されている。細胞内タンパク質のこのファミリーには、現時点では、新しい命名法でアネキシンＩ〜VIIIと呼ばれる少なくとも８種の特徴的なタンパク質が包含される（Roemisch，J.ら, Biol. Chem. Hoppe Seyler 1990; 5: 383-388）。これらのタンパク質は、炎症時に細胞から放出されて膜表面に結合し、それによって炎症活性を有するアラキドン酸誘導体の形成に重要な工程であるホスホリパーゼＡ2の結合を阻害する炎症修飾作用を有する。このリン脂質表面へのカルシウム依存性結合によって、この表面で起こる凝血過程も妨害され、そのために、これらのタンパク質は「血管性血液凝固阻止因子」とも呼ばれる。典型的には、アネキシンの存在は濃度依存性様式でＡＰＴＴの延長を招来する（Roemisch，J.ら，Thrombosis Haemostasis 1995; 74: 1185-1190）。
【０００８】
しかしながら現在まで、アネキシンが天然の血液凝固阻止因子と同等にすべての基準を満たすかどうかは知られていなかった。ループス血液凝固阻止因子の機能的診断には以下の基準を使用する（Brandt．J.T.ら, Trombosis Haemostasis 1995; 74: 1185-1190）。
１．少なくとも２種類の試験とくにＡＰＴＴおよびＲＶＶＴにおいて正常範囲を越える血液凝固時間の延長。
２．この延長がリン脂質依存性であり、リン脂質の添加、または１と同じ試薬をより高濃度のリン脂質と使用するのみのいずれかで中和できる証拠。
３．可能な因子欠損の血漿交換実験による識別。この場合、正常血漿との３＋１、１＋１および１＋３混合物では、凝血試験好ましくはＡＰＴＴにおいて、この延長は特徴的に高希釈（１＋３）によってのみ中和され、一方、因子欠損の場合にはこれはもっと早くから明瞭である。
４．後天性阻害剤（凝血因子に対する自己抗体）、とくに第IX因子および第VIII因子に対する後天性阻害剤（後天性血友病ＡまたはＢ）の識別。この場合、これは２つの血液凝固経路（内因性および外因性経路）の一方のみに作用し、一方、ループス血液凝固阻止因子は非特異的に血液凝固試験のすべてのリン脂質依存性段階に影響する。
【０００９】
【課題を解決するための手段】
驚くべきことに、アネキシンの適当な使用によって、上述の基準すべてを満足するループス血液凝固阻止因子の標準または対照プレパレーションを製造できることを示すことができたのである。
【００１０】
【発明の実施の形態】
実施例１は、正常血液ドナーからの血漿プール（標準ヒト血漿）にアネキシン（アネキシンＶ）を添加した場合の、慣用の診断的凝血試験、ＡＰＴＴ、ＰＴおよびＲＶＶＴの延長を示す。１２５μｇのアネキシンＶの添加により、それぞれの試薬の上限正常範囲の４７０％、３１％および２００％の凝血時間の延長が達成された。これは、現在の技術水準（McGlasson, D.L.ら, Am. J. Clin. Pathol. 1993; 100: 576-578）に比較して凝血時間の著しく高い延長であり、したがって標準の製造、すなわち、さらに検量範囲の改善が達成される可能性を示している。ＰＴにおいては、この延長はそれ程著しくはない。ＡＰＴＴおよびＲＶＶＴに比べて、ＰＴはループス血液凝固阻止因子の診断試験としては薦められない。
【００１１】
実施例１はすなわち、ループス診断の基準１、すなわち少なくとも２種類の機能性凝血試験とくにＡＰＴＴおよびＲＶＶＴにおける病的結果を満足する。２つの天然のループス血液凝固阻止因子陽性血漿は同等に挙動する。
実施例１においては、たとえば、因子欠損を有する血漿、または後天性阻害剤を有する血漿も試験した。第VIII因子の欠損または第VII因子に対する後天性阻害剤の欠損のみがＡＰＴＴで病的な結果を招来し、アネキシン含有血漿または天然のループス血液凝固阻止因子陽性血漿と同様、ＰＴまたはＲＶＶＴにおいては招来しない。すなわち、ループス血液凝固阻止因子診断の基準４も満足される。
【００１２】
実施例２は、ＡＰＴＴ、ＰＴおよびＲＶＶＴにおけるリン脂質依存性の試験の結果を示す。実施例１で使用した試薬と比較して修飾したリン脂質含量を有する試薬を用いた。低リン脂質濃度での凝血時間を高リン脂質濃度の場合と比較した比は、ループス血液凝固阻止因子が疑われる血漿において、正常血漿と比較して上昇する。この挙動は、天然およびシミュレートしたループス血液凝固阻止因子含有血漿の場合、必要なＡＰＴＴおよびＲＶＶＴにおいてのみ記録された。ＰＴはこの場合も病的である。すなわち、ループス診断の基準２が満足される。正常血漿プール、ならびに因子欠損血漿は病的ではないようにみえる。後天性因子阻害剤を有する血漿のみがＡＰＴＴに基づく過程で依然として延長を示す。
【００１３】
実施例３は、血漿交換実験を用い、ＡＰＴＴでの因子欠損の試験結果を示す。正常血漿プールとの１＋３の混合物の場合、すべての病的血漿、ならびにシミュレートしたループス血液凝固阻止因子陽性血漿で延長が認められる。１＋１希釈の場合、因子欠損血漿における欠損はすでに適切に補償されている。凝血時間は正常範囲内である。アネキシン含有血漿、天然のループス血液凝固阻止因子陽性血漿、ならびに因子阻害剤含有血漿で試験は依然として病的である。これは他方では、ループス血液凝固阻止因子の診断のための第３および最後の基準の満足、すなわち機能性凝血試験における基準または対照として使用するため、ループス血液凝固阻止因子のシミュレーションにアネキシンを使用できる可能性を示している。
【００１４】
実施例３はさらに、第３の基準、血漿交換実験を満足するためには、対照中におけるアネキシンの抗血液凝固活性濃度を、正常血漿との１＋３希釈においてもＡＰＴＴでなお病的な結果が得られるように調整しなければならない。非希釈状態ではこれは、これらの例における少なくとも７mg／mlのアネキシンＶの添加に相当する。この最小量の場合でさえ、非希釈血漿においては正常範囲の上限を８７％越えた凝血時間の延長が達成される（実施例１参照、表１、ＡＰＴＴ、ＰＬ少量）。この要求は、以前に記載された方法（McGlasson，D.L.ら, Am. J. Clin. Pathol. 1993; 100: 576-578）によっては不可能で、すなわち、この従来の方法で調製された血漿では、血漿交換実験においてループス血液凝固阻止因子様挙動を生じさせることはできなかった。したがって、本発明の方法は従来の方法より明らかに優れている。
【００１５】
実施例に示した機能性凝血試験とは別に、本発明における対照または検量血漿は本技術分野の熟練者には既知の機能性凝血試験（Messmore，H.ら, Thrombosis Hemostasis 1994;710: 220-224；Brandt, J.T.ら, Trombosis Haemostasis 1991; 66: 453-458；Arnout, J.ら, Brit.J.Haematol. 1994; 87: 94-99；Rauch, J.ら, Trombosis Haemostasis 1989; 62: 892-896）においても使用できる。
実施例で用いられるアネキシンＶとは別に、アネキシンファミリーからの他のタンパク質も、対照および／または検量血漿の調製のために、個々にまたは様々なアネキシンの混合物として使用することができる。この場合、既知の天然起源から精製されたアネキシン（EP 0 123 307）または組換え技術によって調製されたアネキシン（たとえばEP 0 271 885）の両者が使用される。
【００１６】
対照血漿においては、これらのアネキシンの濃度は好ましくは、この対照血漿の正常血漿による１＋３希釈時にさえ正常範囲以上のＡＰＴＴが依然として得られるように選択される。他の凝血試験の調整の場合には、これらの閾値濃度は、試薬および試験特異的な様式で互いに変えることができる。
検量血漿の場合には、アネキシンの濃度はそれにより得られる凝血時間が使用されるそれぞれの試験および試薬以上であるように選択するのが理想である。
凝血時間の延長を生じるための特定量のアネキシンの使用から、ループス血液凝固阻止因子陽性血漿の抗体力価の可能性がたとえばmg／ｌのアネキシン当量で得られる。
【００１７】
【実施例】
以下の実施例は本発明を例示するものである。とくに指示のない限り、以下の実施例では Behringwerke からの試薬および血漿を使用する。
実施例１
様々な正常および病的血漿と比較した診断的凝血試験におけるアネキシン含有血漿の挙動
正常血漿プール（標準ヒト血漿）を組換えアネキシンV（EP 0 271 885に従って調製）４〜５００mg／Ｌと混合し、ＡＰＴＴ（試薬：Pathromtin SLA またはPathromtin SLAの場合よりも１０倍高いリン脂質濃度の Pathromtin SL）、ＰＴ（試薬：Thromborel S）、およびＲＶＶＴ（試薬：ＬＡスクリーン；製造業者：Gradipore、 Australia）における血液凝固時間を、自動血液凝固装置（Amelung,Germany)で測定した。
【００１８】
表１は、正常血漿プールへのアネキシン（アネキシンV）の添加時の、慣用の診断的凝血試験、ＡＰＴＴ、ＰＴおよびＲＶＶＴの延長を示す。１２５μｇのアネキシンVの添加により凝血時間はそれぞれの試薬の正常範囲の上限以上に＞４００％、３１％および２００％まで（ＡＰＴＴ：３８秒または４９秒；ＰＴ：１３秒；ＲＶＶＴ：４５秒；製造業者の指示による）延長した。
【表１】
0004242950.tif 000002
【００１９】
さらに、これらの診断試験を用いて以下の病的血漿の凝血時間を測定。
−因子欠損のシミュレーションのための第VIII因子欠損血漿(製品番号：OTXW)
−後天性第VIII因子阻害剤を有する患者の加クエン酸血漿(George King, USA)
−ループス血液凝固阻止因子が証明された患者の２加クエン酸血漿（Trinta, Sw  itzerland）
【００２０】
表２は様々な血漿におけるＡＰＴＴ、ＰＴおよびＲＶＶＴの測定結果を示す。正常血漿プールは３つの試験のすべてで正常範囲内である。しかしながら、第VIII因子欠損血漿ならびに後天性第VIII因子阻害剤を有する血漿はＡＰＴＴで病的である。両血漿ともＰＴではわずかに病的であったが、ＲＶＶＴでは病的ではなかった。これに反し、２つの天然のループス血液凝固阻止因子陽性血漿は、相異なる高程度にマークしても、すべての試験で病的である。診断的凝血試験における凝血時間のこの非特異的延長は、正常血漿プールへのアネキシンの添加によるのと同じ様式で生成される。
【００２１】
表２
正常血漿プール（ＮＰＰ）、因子欠損（ＦVIII−ＭＰ）または第VIII因子に対する阻害剤（抗−ＦVIII−Ｐ）を有する血漿、天然のループス血液凝固阻止因子陽性血漿（ＬＡ１；ＬＡ２）およびシミュレートされたループス血液凝固阻止因子（ＮＰＰ＋アネキシン）の診断的凝血試験、ＡＰＴＴ、ＰＴおよびＲＶＶＴにおける挙動。使用された試薬でのこれらの試験の正常範囲をさらに指示する。
【表２】
0004242950.tif 000003
【００２２】
実施例２
各種正常および病的血漿と比較して、診断的凝血試験におけるアネキシン含有血漿の挙動のリン脂質依存性
リン脂質依存性を試験するためには、実施例１に述べた病的血漿、正常血漿、および正常血漿プールおよび１２５または６３mg／mlのアネキシンＶから構成されるシミュレートされたループス血液凝固阻止因子対照のＡＰＴＴ、ＰＴおよびＲＶＶＴを、実施例１の場合と比較して他のリン脂質含量を有する試薬を用いて測定した。ＡＰＴＴでは、これは Pathromtin SL のリン脂質濃度を実施例１に比較して９０％まで低下させた試薬Pathromtin SLAとした。ＰＴの測定の場合には、Thromborel S １：５０を１２.５mMの塩化カルシウム溶液でBrauer（J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1990; 28: 701）に従い希釈した。これに反して、ＲＶＶＴでは、ループス感受性試薬、すなわち、すでにリン脂質がわずかに定常的に使用されている。ＬＡを確認するこの実施例における陰性対照には、したがって、高リン脂質濃度を有する試薬を使用した。結果は表３に示す。
【００２３】
表３
正常血漿プール（ＮＰＰ）、因子欠損（ＦVIII−ＭＰ）または第VIII因子に対する阻害剤（抗−ＦVIII−Ｐ）を有する血漿、天然のループス血液凝固阻止因子陽性血漿（ＬＡ１；ＬＡ２）およびシミュレートされたループス血液凝固阻止因子（ＮＰＰ＋アネキシン）の診断的凝血試験、ＡＰＴＴ、ＰＴおよびＲＶＶＴにおける挙動をリン脂質（ＰＬ）含量を変化させて実施例１の場合と比較。
【表３】
0004242950.tif 000004
【００２４】
多くのリン脂質の存在下には、ループス血液凝固阻止因子による凝血の障害が低下するので、多くのリン脂質の存在下における凝血時間に対するわずかなリン脂質の存在下における凝血時間の商を表２（実施例１）および表３（実施例４）で得られた凝血時間から生成させた。ループス血液凝固阻止因子の阻害作用の中和による凝血時間の短縮は商の増加として表現される。これらの試薬によって測定され、それ以下ではループス血液凝固阻止因子の疑いがない許容最高限界は、用いられた試薬について表４に示す。
【００２５】
正常血漿プールは因子欠損の存在下でも、すべての試験で正常範囲の商を生じることがわかる。他方、特異的阻害剤を含有する血漿はＡＰＴＴ比においてのみなお病的である。天然のループス血液凝固阻止因子含有血漿ならびに本発明によってシミュレートされたループス血液凝固阻止因子血漿については、リン脂質との非特異的反応は３つのすべての試験で正常範囲と比較して明らかに上昇した商の結果として得られた。
【００２６】
表４
診断的血液凝固試験、ＡＰＴＴ、ＰＴおよびＰＶＶＴにおける正常血漿プール（ＮＰＰ）、因子欠損血漿（ＦVIII−ＭＰ）、または第VIII因子に対する阻害剤（抗−ＦVIII−Ｐ）、天然のループス血液凝固阻止因子陽性血漿（ＬＡ１；ＬＡ２）およびシミュレートしたループス血液凝固阻止因子（ＮＰＰ＋アネキシン）のリン脂質依存性の、多くのリン脂質の存在下における凝血時間に対するわずかなリン脂質の存在下における凝血時間の商の形成による計算。それ以上ではループス血液凝固阻止因子が疑われる商の許容閾値も示す。
【表４】
0004242950.tif 000005
【００２７】
実施例３
血漿交換実験におけるアネキシン含有血漿および様々な病的血漿の挙動
血漿交換実験はPathromtin SLを使用しＡＰＴＴで実施した。この目的では実施例１に記載の病的血漿ならびにシミュレートしたループス血液凝固阻止因子陽性血漿３＋１、１＋１および１＋３を正常血漿プールと混合し、ＡＰＴＴを測定した。結果を表５に示す。
【００２８】
表５
血漿交換実験における因子欠損（ＦVIII−ＭＰ）または第VIII因子に対する阻害剤（抗−ＦVIII−Ｐ）を有する血漿、天然のループス血液凝固阻止因子陽性血漿（ＬＡ１；ＬＡ２）およびシミュレートしたループス血液凝固阻止因子（ＮＰＰ＋アネキシン）の挙動。ＡＰＴＴは、正常血漿プール（ＮＰＰ）との様々な混合物（３＋１、１＋１、１＋３；サンプル＋ＮＰＰ）中における秒（Pathromtin SLA）で示す。
【表５】
0004242950.tif 000006
【００２９】
正常血漿プール１部と血漿３部の混合物（表５における「３＋１」）の場合、すべての病的血漿およびシミュレートしたループス血液凝固阻止因子陽性血漿が病的に反応する。１＋１希釈の場合には因子欠損血漿中の欠損は、すでに完全に補償されている（正常範囲の上限：50秒）。２つの天然のループス血液凝固阻止因子陽性血漿、およびアネキシン含有血漿、ならびに因子阻害剤含有血漿は、高い希釈度（１＋３）においてもなお高度に病的である。