(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
0004219553.tif 000021
（式中、
Ｘは、水素又は＝ＣＨ2であり；
Ｒ1とＲ2は、Ｃ２０と一緒になって、（Ｃ3−Ｃ6）シクロアルキル又は（Ｃ3−Ｃ6）シクロフルオロアルキルを形成し；
Ｒ3及びＲ4は、互いに独立して、（Ｃ1−Ｃ4）アルキル又は（Ｃ1−Ｃ4）フルオロアルキルであるか、あるいはＲ3とＲ4は、Ｃ２５と一緒になって、（Ｃ3−Ｃ9）シクロアルキル又は（Ｃ3−Ｃ9）シクロフルオロアルキルを形成し；
Ａは、単結合であり；そして
Ｂは、三重結合である）
で示される化合物の群から選択される化合物。
【請求項２】
Ｒ1及びＲ2が、Ｃ２０と一緒になって、（Ｃ3−Ｃ6）シクロアルキルを形成し；
Ｒ3及びＲ4が、互いに独立して、（Ｃ1−Ｃ4）アルキル又は（Ｃ1−Ｃ4）フルオロアルキルであり；
Ｘが、＝ＣＨ2である、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
１，２５−ジヒドロキシ−２３−イン−２０，２１，２８−シクロプロピル−コレカルシフェロール及び１，２５−ジヒドロキシ−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−２０，２１，２８−シクロプロピル−コレカルシフェロールから選択される、請求項２記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ1及びＲ2が、Ｃ２０と一緒になって、（Ｃ3−Ｃ6）シクロアルキルを形成し；
Ｒ3及びＲ4が、互いに独立して、（Ｃ1−Ｃ4）アルキル又は（Ｃ1−Ｃ4）フルオロアルキルであり；
Ｘが、水素である、請求項１記載の化合物。
【請求項５】
１，２５−ジヒドロキシ−２３−イン−２０，２１，２８−シクロプロピル−１９−ノル−コレカルシフェロール及び１，２５−ジヒドロキシ−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−２０，２１，２８−シクロプロピル−１９−ノル−コレカルシフェロールから選択される、請求項４記載の化合物。
【請求項６】
骨粗しょう症を治療するための医薬の製造のための、請求項１記載の式（Ｉ）で示される化合物の使用。
【請求項７】
二次上皮小体機能亢進症を治療するための医薬の製造のための、請求項１記載の式（Ｉ）で示される化合物の使用。
【請求項８】
請求項１〜５のいずれか１項記載の化合物を含む、医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、１，３−ジヒドロキシ−２０，２０−ジアルキル−ビタミンＤ3類似体、該類似体を含む組成物、並びにそのような類似体を用いて、骨粗しょう症、二次上皮小体機能亢進症、癌及び自己免疫病を治療する方法に関する。
【０００２】
骨粗しょう症は、最も一般的な形態の代謝性骨疾患であり、骨損失（骨減少症）の症候上の骨折期と考えてよい。骨粗しょう症は、その根底にある多くの疾患に副次的に発生し得るが、全症例の９０％は、特発性であるように思われる。閉経後の女子は、特発性骨粗しょう症（閉経後又はＩ型骨粗しょう症）の危険性があり；特発性骨粗しょう症に関するもう一つの特に高い危険度の群は、両性の高齢者である（老年性又はII型骨粗しょう症）。骨粗しょう症は、コルチコステロイドの使用、固定又は長期床上安静、アルコール中毒、糖尿病、性腺毒性化学療法、高プロラクチン血症、神経性食欲不振、原発性及び続発性無月経、移植片免疫抑制、並びに卵巣摘出にも関係付けられている。閉経後骨粗しょう症は、脊椎の骨折を特徴とするが、大腿骨頚骨折は、老年性骨粗しょう症の支配的特徴である。
【０００３】
骨粗しょう症患者で骨が損失する機序は、骨格がそれ自体を更新する過程での不均衡が関与すると考えられる。この過程は、骨再建とよばれている。それは、活性の一連の不連続な落ち込みの際に発生する。これらの落ち込みは、骨吸収の部位としての、与えられた骨表面の骨基質内で自発的に出現する。破骨細胞（骨溶解又は吸収細胞）は、概して一定である寸法の骨の一部の吸収の原因となる。この吸収過程の後に、造骨細胞（骨形成細胞）が出現し、次いで、これが、破骨細胞が残した空洞に新たな骨を再充填する。
【０００４】
健康な成人の対象者では、造骨細胞及び破骨細胞は、骨形成と骨吸収とが均衡するように機能する。しかし、骨粗しょう症患者では、骨再建過程に不均衡が発生し、失われるより遅い速度で骨が置き換えられるのを招く。この不均衡は、ある程度は、大部分の個人で加齢につれて発生するが、閉経後骨粗しょう症患者でか、又は卵巣摘出後にか、あるいはコルチコステロイド療法、又は臓器移植の際に実施される免疫抑制から生じるそれのような医原性状況では、はるかに重篤であり、比較的若年で発生する。
【０００５】
骨粗しょう症に苦しむヒトの骨質量を増加させるために、男性ホルモン、フッ化物塩類、並びに副甲状腺ホルモン、及び副甲状腺ホルモンの改良形の投与を包含する、様々な取組み方が示唆されている。単独でか、又は併用での、ビスホスホン酸塩、カルシトニン、カルシウム、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3、及びその類似体のいくつか、並びに／若しくは女性ホルモンが、既存の骨質量を保つのに役立ち得ることも示唆されている。
【０００６】
ビタミンＤ3は、カルシウムの代謝に決定的に重要な要素であって、カルシウム及びリンの腸内吸収を促進し、カルシウム及びリンの適切な血清レベルを維持し、骨内外へのカルシウムの流束を刺激する。Ｄ群ビタミンは、in vivoでヒドロキシル化されて、生じる１α，２５−ジヒドロキシ代謝物が、活性物質となる。１，２５−（ＯＨ)2ビタミンＤ3による動物研究は、骨の同化活性を示唆している。Aerssensらは、Calcif. Tissue Int., 55: 443-450 (1994)で、コルチコステロイド投与あり又はなしの成長中のラットでの、骨の強度及び組成に対する１α−ヒドロキシビタミンＤ3の効果について報告した。しかし、ヒトでの使用は、治療比が良くない（高カルシウム尿症及び高カルシウム血症、並びに腎毒性）ために吸収防止に限定されている。
【０００７】
Dechant及びGoaは、「Calcitriol.  A review of its use in the treatment of postmenopausal osteoporosis and its potential in corticosteroid-induced osteoporosis」、Drugs Aging〔NEW ZEALANDS 5(4): 300-17 (1994)〕で、閉経後骨粗しょう症の女子６２２名での臨床試験に基づいて、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3（カルシトリオール）が、閉経後骨粗しょう症の治療に薬効（及びコルチコステロイド誘発骨粗しょう症に見込み）を有することを報告した。カルシトリオール（毎日２回の０．２５μg）を摂取した、軽症ないし中程度の疾患の（しかし、より重い疾患のない）患者は、１，０００mg／日の元素状カルシウムを摂取する患者に比して、治療３年後の新たな脊椎骨折の率が有意に３倍も低かった。プレドニゾン又はプレドニゾロンの長期投与を開始した患者では、４００IU／日の鼻内カルシトニンの投与あり又はなしでの、０．５〜１．０μg／日のカルシトリオール＋１，０００mg／日のカルシウムは、ステロイド誘発骨損失を防止した。全体として、カルシトリオールは、十分に容認された。推奨された投与量で、高カルシウム血症は、概してカルシウム摂取及び／又はカルシトリオール投与量の削減に応じて、低頻度かつ軽症であった。カルシトリオールの狭い治療ウィンドーから、その使用を適切に管理して、血清カルシウム及びクレアチニンレベルを周期的に監視することが必要とされた。この研究は、治療的用量及び有毒用量が極めて接近しているとしての、カルシトリオール療法の重大な限度を明確に特定した。
【０００８】
本発明は、より好都合な治療的用量を有する新規ビタミンＤ3誘導体を提供する。
【０００９】
疫学的研究は、日光又はＵＶ光の露光と、胸部、結腸及び前立腺の癌を包含する様々な悪性疾患の比較的低い発生率とを相関させた。受容体研究からの証拠は、古典的な標的器官、例えば腸、腎臓及び骨に加え、ビタミンＤ受容体（ＶＤＲ）が、ヒトの非常に多様な正常及び癌細胞系や新鮮組織に存在することを立証した。ビタミンＤ又は１，２５−ジヒドロキシコレカルシフェロールによる成長阻害は、in vivoでは必ずしも潜在的治療薬効へと直進しない。初期のin vivo研究は、マウス白血病モデル系での１，２５−ジヒドロキシコレカルシフェロール及びその類似体の抗増殖効果に集中したが、この系では、１，２５−ジヒドロキシコレカルシフェフェロールは、抗増殖効果ばかりでなく、分化促進効果も誘発することが示されている。in vivoでの治療薬効は、親１，２５−ジヒドロキシコレカルシフェロールの高用量投与によって観察される高カルシウム血症のため、限度がある。その結果、高カルシウム血症なしに有意な抗腫瘍効果を生じる、多数の類似体が開発されている。
【００１０】
Steinmeyerらは、米国特許第５，５８５，３６８号明細書で、皮膚の過増殖疾患、白血病のような悪性腫瘍、結腸及び乳癌、糖尿病のような自己免疫病の治療、並びに汗腺疾患の治療のための１α，２５−ジヒドロキシ−２０−ジ置換ビタミンＤ3類似体を開示している。Danielsson, Cらは、J. Cell Biochem., 63, No.2, 199-206 (1996)中で、過増殖疾患の治療のための、１α，２５−ジヒドロキシ−２０−メチル−２３（Ｅ）−エンコレカルシフェロールを包含する１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3の２０−メチル類似体を開示している。この発明は、皮膚の過増殖疾患、白血病のような悪性腫瘍、結腸及び乳癌、糖尿病のような自己免疫病の治療、並びにより好都合な治療比又はマージンを有する、汗腺疾患の治療のための新規ビタミンＤ3誘導体を提供する。
【００１１】
二次上皮小体機能亢進症は、慢性腎不全の患者では通常である。腎の１，２５−（ＯＨ)2ビタミンＤ3（カルシトリオール）合成の低下は、これらの患者における二次上皮小体機能亢進症へと導く主要な機序の一つであることが確定されており、カルシトリオールは、ＰＴＨ合成に対して直接的抑制作用を有することが示されている。したがって、カルシトリオールの投与は、これらの患者における二次上皮小体機能亢進症の治療に推奨されている。しかし、上記のとおり、カルシトリオールは、強力な高カルシウム血症効果を有して、狭い治療ウィンドーを与え、それが、特に高用量での、その使用を限定している。そのため、上皮小体機能亢進症を治療し、これらの望ましくない高カルシウム血症効果を招くことなしに、循環ビタミンＤ3活性を補充する代替手段を有することが望ましいと思われる。
【００１２】
本発明は、より好都合な治療用量を有する新規ビタミンＤ3誘導体を提供する。
【００１３】
本発明の一態様は、式（Ｉ）：
【００１４】
【化５】
0004219553.tif 000002
【００１５】
〔式中、
Ｘは、水素又は＝ＣＨ2であり；
Ｒ1及びＲ2は、互いに独立して、（Ｃ1〜Ｃ4）アルキル又は（Ｃ1〜Ｃ4）フルオロアルキルであるか、あるいは
Ｒ1とＲ2は、Ｃ２０と一緒になって、（Ｃ3〜Ｃ6）シクロアルキル又は（Ｃ3〜Ｃ6）シクロフルオロアルキルを形成するか、あるいは
Ｒ1とＲ2は、一緒になって、＝ＣＨ2を形成し；
Ｒ3及びＲ4は、互いに独立して、（Ｃ1〜Ｃ4）アルキル又は（Ｃ1〜Ｃ4）フルオロアルキルであるか、あるいは
Ｒ3とＲ4は、Ｃ２５と一緒になって、（Ｃ3〜Ｃ9）シクロアルキル又は（Ｃ3〜Ｃ9）シクロフルオロアルキルを形成し；
Ａは、単結合又は二重結合であり；そして
Ｂは、単結合、二重結合又は三重結合であるが、但し
（ｉ）Ｒ1及びＲ2が（Ｃ1〜Ｃ4）アルキルであるか、又はＲ1とＲ2がＣ２０と一緒になって、シクロプロピル基若しくは＝ＣＨ2を形成し、Ｒ3及びＲ4が（Ｃ1〜Ｃ4）アルキル、トリフルオロメチルであるか、又はＲ3とＲ4がＣ２５と一緒になって（Ｃ3〜Ｃ6）シクロアルキルを形成し、そしてＡが単結合であるとき、そのときＢは、トランス二重結合ではなく；
（ii）Ｂが単結合であるとき、そのときＲ1及びＲ2は、Ｃ２０と一緒になって、（Ｃ3〜Ｃ6）シクロアルキル又は（Ｃ3〜Ｃ6）シクロフルオロアルキル基を形成し；そして
（iii）Ｒ1及びＲ2が（Ｃ1〜Ｃ4）アルキルであり、Ｒ3及びＲ4が（Ｃ1〜Ｃ4）アルキルであり、Ｘが＝ＣＨ2であり、そしてＡが単結合であるとき、そのときＢは、二重結合ではない〕で示されるビタミンＤ3類似体、及びそのプロドラッグに関する。
【００１６】
本発明の第二の態様は、高カルシウム尿症、高カルシウム血症又は腎毒性を誘発することなしに、骨密度を症候的レベルまで回復するのに治療上効果的である量の式（Ｉ）の化合物〔式中、Ｘは、水素又は＝ＣＨ2であり；
Ｒ1及びＲ2は、互いに独立して、（Ｃ1〜Ｃ4）アルキル又は（Ｃ1〜Ｃ4）フルオロアルキルであるか、あるいはＲ1とＲ2は、Ｃ２０と一緒になって、（Ｃ3〜Ｃ6）シクロアルキル又は（Ｃ3〜Ｃ6）シクロフルオロアルキルを形成するか、あるいはＲ1とＲ2は、一緒になって、＝ＣＨ2を形成し；
Ｒ3及びＲ4は、互いに独立して、（Ｃ1〜Ｃ4）アルキル又は（Ｃ1〜Ｃ4）フルオロアルキルであるか、あるいはＲ3とＲ4は、Ｃ２５と一緒になって、（Ｃ3〜Ｃ9）シクロアルキル又は（Ｃ3〜Ｃ9）シクロフルオロアルキルを形成し；
Ａは、単結合又は二重結合であり；そして
Ｂは、単結合、二重結合又は三重結合である〕
及びそのプロドラッグの投与による、骨粗しょう症又は二次上皮小体機能亢進症を治療する方法に関する。
【００１７】
本発明の第三の態様は、高カルシウム尿症、高カルシウム血症又は腎毒性を誘発することなしに、治療上効果的である量の式（Ｉ）の化合物〔式中、Ｘは、水素又は＝ＣＨ2であり；
Ｒ1及びＲ2は、互いに独立して、（Ｃ1〜Ｃ4）アルキル又は（Ｃ1〜Ｃ4）フルオロアルキルであるか、あるいはＲ1とＲ2は、Ｃ２０と一緒になって、（Ｃ3〜Ｃ6）シクロアルキル又は（Ｃ3〜Ｃ6）シクロフルオロアルキルを形成するか、あるいはＲ1及びＲ2は、一緒になって、＝ＣＨ2を形成し；
Ｒ3及びＲ4は、互いに独立して、（Ｃ1〜Ｃ4）アルキル又は（Ｃ1〜Ｃ4）フルオロアルキルであるか、あるいはＲ3とＲ4は、Ｃ２５と一緒になって、（Ｃ3〜Ｃ9）シクロアルキル又は（Ｃ3〜Ｃ9）シクロフルオロアルキルを形成し；
Ａは、単結合又は二重結合であり；そして
Ｂは、単結合、二重結合又は三重結合であるが、但し
（ｉ）Ｒ1及びＲ2が（Ｃ1〜Ｃ4）アルキルであるか、又はＲ1とＲ2が、Ｃ２０と一緒になって、シクロプロピル基若しくは＝ＣＨ2を形成し、Ｒ3及びＲ4が、（Ｃ1〜Ｃ4）アルキル、トリフルオロメチルであるか、又はＲ3とＲ4が、Ｃ２５と一緒になって、（Ｃ3〜Ｃ6）シクロアルキルを形成し、そしてＡが単結合であるとき、そのときＢは、トランス二重結合ではなく；
（ii）Ｂが単結合であるとき、そのときＲ1とＲ2は、Ｃ２０と一緒になって、（Ｃ3〜Ｃ6）シクロアルキル又は（Ｃ3〜Ｃ6）シクロフルオロアルキル基を形成し；そして
（iii）Ｒ1及びＲ2が（Ｃ1〜Ｃ4）アルキルであり、Ｒ3及びＲ4が（Ｃ1〜Ｃ4）アルキルであり、Ｘが＝ＣＨ2であり、そしてＡが単結合であるとき、そのときＢは、二重結合ではない〕の化合物及びそのプロドラッグの投与による癌を治療する方法に関する。
【００１８】
本発明の第四の態様は、製薬上許容し得る担体と、式（Ｉ）のビタミンＤ3類似体とを含む製剤組成物に関する。
【００１９】
本明細書に用いられる限りで、用語（Ｃ1〜Ｃ4）アルキルは、１〜４個の炭素原子を有する完全に飽和された炭化水素の基を意味し；（Ｃ1〜Ｃ4）フルオロアルキルは、炭素骨格に結合した１個又はそれ以上の水素原子が、１個又はそれ以上のフッ素原子で置換されている、上記に定義されたとおりのアルキル基である。（Ｃ3〜Ｃ6）シクロアルキルは、３〜６個の環炭素原子を有する環状の飽和炭化水素の基であり；（Ｃ3〜Ｃ6）シクロフルオロアルキルは、炭素骨格に結合した１個又はそれ以上の水素原子が、１個又はそれ以上のフッ素原子で置換されている、上記に定義されたとおりのシクロアルキル基である。（Ｃ3〜Ｃ9）シクロアルキルは、３〜９個の環炭素原子を有する環状の飽和炭化水素の基である。（Ｃ3〜Ｃ9）シクロフルオロアルキルは、炭素骨格に結合した１個又はそれ以上の水素原子が、１個又はそれ以上のフッ素原子で置換されている、３〜９個の環炭素原子を有する環状の飽和炭化水素の基である。
【００２０】
更に本明細書に用いられる限りで、二重結合とは、２対の電子が等しく共有される２個の隣接炭素原子間の不飽和結合であって、各炭素原子が、二つの単結合された置換基を、該二重結合に関してシス（Ｚ）又はトランス（Ｅ）のいずれかの立体配置で有する結合を意味する。
【００２１】
「プロドラッグ」は、そのようなプロドラッグを哺乳動物の対象に投与したとき、式（Ｉ）による活性親薬物をin vivoで放出するいかなる化合物をも意味する。式（Ｉ）の化合物のプロドラッグは、式（Ｉ）の化合物に存在する官能基を、修飾物がin vivoで切断されて、親化合物を放出するように修飾することによって調製される。プロドラッグは、化合物（Ｉ）のヒドロキシル基が、in vivoで切断されて、遊離のヒドロキシル基を再生し得る何らかの基に結合された、式（Ｉ）の化合物を包含する。プロドラッグの例は、式（Ｉ）の化合物のヒドロキシル官能基のエステル（例えば、酢酸エステル、ギ酸エステル及び安息香酸エステル誘導体）、カーバマート（例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノカルボニル）、及びエーテルなどを包含するが、これらに限定されない。そのような化合物は、当業者によって、親分子のヒドロキシル基をアシル化又はエーテル化することによって常套的に製造される。
【００２２】
「治療上有効量」は、疾病を治療又は予防するために哺乳動物に投与したとき、該疾病に対してそのような治療又は予防を達成するのに十分である、化合物の量を意味する。この「治療上有効量」は、化合物、疾病及びその重篤度、並びに治療しようとする哺乳動物の年齢、体重等々に応じて変動することになる。
【００２３】
本発明の化合物は、一般的には、ビタミンＤ3の１α，２５−ジヒドロキシ２０，２０−ジアルキル及び１α，２５−ジヒドロキシ−２０，２０−ジアルキル−１９−ノル類似体として記載し得る。
【００２４】
本発明の化合物は、下記のFig.(1)に示される記数体系を用いて命名される：
【００２５】
【化６】
0004219553.tif 000003
【００２６】
例えば、Ｘが＝ＣＨ2であり、Ｒ1とＲ2が、一緒になって、シクロアルキル基を形成し、Ａが単結合であり、そしてＢが三重結合である本発明の化合物は、１α，２５−ジヒドロキシ−２３−イン−２０，２１，２８−シクロプロピルコレカルシフェロールと命名される。
【００２７】
下記の表Ｉは、本発明の化合物のいくつかの代表的な例を与え、
【００２８】
【表１】
0004219553.tif 000004
【００２９】
下記のように命名される：
１．  １，２５−ジヒドロキシ−２３−イン−２０，２１，２８−シクロプロピル−コレカルシフェロール、
２．  １，２５−ジヒドロキシ−２３−イン−２０，２１，２８−シクロプロピル−１９−ノル−コレカルシフェロール、
３．  １，２５−ジヒドロキシ−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−２０，２１，２８−シクロプロピル−コレカルシフェロール、
４．  １，２５−ジヒドロキシ−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−２０，２１，２８−シクロプロピル−コレカルシフェロール、
５．  １，２５−ジヒドロキシ−２３−（Ｚ）−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−２０，２１，２８−シクロプロピル−コレカルシフェロール、
６．  １，２５−ジヒドロキシ−２３−（Ｚ）−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−２０，２１，２８−シクロプロピル−１９−ノル−コレカルシフェロール。
【００３０】
化合物の好適な群は、
Ａが、単結合又は二重結合、好ましくは単結合であり；そして
Ｂが、三重結合である
ものである。
【００３１】
化合物のもう一つの好適な群は、
Ａが、単結合であり；そして
Ｂが、二重結合である
ものである。
【００３２】
化合物の更にもう一つの好適な群は、
Ａが、単結合又は二重結合、好ましくは単結合であり；そして
Ｂが、シス二重結合である
ものである。
【００３３】
化合物のこれらの好適な群内で、より好ましい群は、
Ｒ1及びＲ2が、Ｃ２０と一緒になって、（Ｃ3〜Ｃ6）シクロアルキル、好ましくはシクロプロピルを形成し、そして
Ｒ3及びＲ4が、互いに独立して、（Ｃ1〜Ｃ4）アルキル又は（Ｃ1〜Ｃ4）フルオロアルキル、好ましくはメチル、エチル、トリフルオロメチル、１，１−ジフルオロエチル又は２，２，２−トリフルオロエチル、より好ましくはメチル又はトリフルオロメチルである
ものである。
【００３４】
本発明の類似体は、一般的には、ビタミンＤ3分子の断片の反応及び結合によって製造してよい〔例えば、Shiuey et al., J. Org. Chem., 55: 243 (1990); Wovkulich, P. M. et al., Tetrahedron, 40, 2283 (1984); Bagiolini, E.B. et al., J. Org. Chem., 51, 3098-3108 (1986)、及びSteinmeyerら、米国特許第５，５８５，３６８号明細書を参照されたい〕。
【００３５】
これらの化合物を製造する際に用いられる、出発材料及び試薬は、Aldrich Chemical Co.、（Milwaukee, WI）若しくはSigma（St. Louis, MO）のような商業的供給者から入手できるか、又は当業者に既知の方法により、Fieser及びFieserのReagents for Organic Synthesis, Vol. 1-15（John Wiley and Sons, 1991）；MarchのAdvanced Organic Chemistry（John Wiley and Sons第４版）並びにLarockのComprehensive Organic Transformations（VCH Publishers Inc., 1989）のような参考文献に記載された手順を追って製造できるかのいずれかである。
【００３６】
反応の出発材料及び中間体は、所望ならば、濾過、蒸留、晶出、クロマトグラフィーなどを包含するが、これらに限定されない慣用の手法を用いて、単離かつ精製してよい。そのような材料は、物理的定数及び分光データを包含する慣用の手段を用いて、特徴付け得る。
【００３７】
式（Ｉ）の化合物、及びその製造に用いられる中間体の製造を、下記の反応スキームに例示する。
【００３８】
一般的には、式（Ｉ）の化合物は、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ａ及びＢが発明の要約に記載されたとおりであり、下記のスキームＩに示したとおり、Ｒ5が水素又はヒドロキシル保護基（例えばトリアルキルシリル、好ましくはトリメチルシリル）である、式（II）の４Ｈ−インデン−４−オン誘導体を、Ｘが水素又は＝ＣＨ2である、式（III）の化合物のジフェニルホスフィンオキシド誘導体とカップリングさせることによって製造される。
【００３９】
【化７】
0004219553.tif 000005
【００４０】
カップリング反応は、ｎ−ブチルリチウムなどのアルキルリチウムのような強塩基の存在下、ヘキサンとテトラヒドロフランとの混合物中で−７８℃で実施して、式（Ｉ）の化合物のトリシリル誘導体を得る。テトラヒドロフランのような適切な極性有機溶媒中での、フッ化テトラブチルアンモニウムによるシリル保護基の除去が、式（Ｉ）の化合物を与える。
【００４１】
留意すべきことに、示された中間体は、代表的にはシリルエーテルとして保護された、ヒドロキシル基を有するが、本発明の範囲は、T. W. Greene「Protective Groups in Organic Synthesis」Wiley New York (1991)及びJ. F. McOmie「Protective Groups in Organic Chemistry」Plenum Press, London (1973)に記載されたとおりの、当技術に既知の代替的ヒドロキシル保護基を、脱保護の代替的方法とともに用いることを包含する。
【００４２】
式（III）の化合物の合成は、当技術に既知かつ慣用的である。例えば、Steinmeyerらへの米国特許第５，５８５，３６８号、Doranらへの同第５，３８４，３１４号、Doranらへの同第５，４２８，０２９号、Baggioliniらへの同第５，４５１，５７４号明細書；係属中の米国特許願第６０／０１８，２１９号明細書；Shiuey et al., J. Org. Chem., 55: 243-247 (1990)、Kiegel, J. et al., Tetr. Lett., 32: 6057-6060 (1991)、Perlman, K.L. et al., Tetr. Lett., 32: 7663-7666 (1991)を参照されたい。
【００４３】
式（II）の化合物の合成は、下記のスキームIIに説明されている。
【００４４】
Ｒ1及びＲ2がＣ２０と一緒になってシクロプロピル環を形成し、Ｘが＝ＣＨ2又はＨ2であり、Ａが単結合であり、Ｂが三重結合であり、Ｒ3及びＲ4がメチル又はトリフルオロメチルである、式（Ｉ）の化合物の合成の詳しい説明は、実施例２、３、５及び６に述べられている。
【００４５】
Ｒ1とＲ2が一緒になってシクロプロピル環を形成し、Ｘが＝ＣＨ2又はＨ2であり、Ａが単結合であり、Ｂがシス二重結合であり、Ｒ3及びＲ4がメチル又はトリフルオロメチルである、式（Ｉ）の化合物の合成の詳しい説明は、実施例８及び９に述べられている。
【００４６】
【化８】
0004219553.tif 000006
【００４７】
上記のとおり、式（Ｉ）の化合物の製造は、それぞれ方法（ａ）又は方法（ｂ）に従うことによって、共通の中間体１−〔（５−ヒドロキシ）−３−アルキニル〕インデン−４−オール誘導体（VII）を製造し、次いで、Ｂが二重又は三重の結合のいずれかである式（II）の化合物へと転化することを要する。
【００４８】
化合物（VII）は、１−（３−アルキニル）−４−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−７ａ−メチルインデン誘導体（IV）から誘導されるリチウムアセチリドと、Ｒ3及びＲ4が発明の要約に定義されたとおりである、式（Ｖ）のケトンとを縮合させて、１−〔（５−ヒドロキシ）−３−アルキニル〕−４−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−７ａ−メチルインデン誘導体（VI）を得ることによって製造される。この縮合反応は、ｎ−ブチルリチウムのような強塩基の存在下、テトラヒドロフランのような非プロトン性有機溶媒中、かつ−５０〜−１００℃にわたる低温で実施される。テトラヒドロフランのような適切な有機溶媒中での、フッ化テトラブチルアンモニウムによるシリル保護基の除去が、１−〔（５−ヒドロキシ）−３−アルキニル〕インデン−４−オール誘導体（VII）を与える。
【００４９】
Ｒ1及びＲ2が、一緒になって、シクロプロピル環を形成し、Ａが単結合である、式（IV）の化合物の合成の詳しい説明は、実施例１に述べられる。その他の式（IV）の化合物の合成、及び式（VII）の化合物製造の代替的方法は、係属中の米国特許願第０８／８５７，５６９号明細書（ヨーロッパ特許第０  ８０８，８３２号公報として公開）に記載されており、その開示を、参考として本明細書に援用する。
【００５０】
Ｂが三重結合であり、Ｒ5が水素である、式（II）の化合物は、方法（ａ）に示したとおり、化合物（VII）の４位のヒドロキシル基をケト基へと、二クロム酸ピリジニウムのような適切な酸化剤によって室温で酸化することによって製造される。この酸化反応は、塩化メチレン、クロロホルムなどのような塩素化炭化水素溶媒中で実施される。Ｒ5が水素である式（II）の化合物は、Ｒ5がトリアルキルシリル、好ましくはトリメチルシリルである、対応する式（II）の化合物へと、テトラヒドロフラン、塩化メチレン（好ましくは塩化メチレン）などのような非アルコール系有機溶媒中で、１−トリメチルシリルイミダゾールのような適切なシリル化剤と反応させることによって転化する。
【００５１】
Ａが単結合であり、Ｂが三重結合であり、Ｒ1及びＲ2が、一緒になって、シクロプロピル環を形成し、Ｒ5がトリメチルシリル又は水素であり、Ｒ3及びＲ4がメチル又はトリフルオロメチルである、式（II）の化合物の合成は、実施例１及び４に記載されている。
【００５２】
代替的には、Ｂが二重結合である式（II）の化合物は、方法（ｂ）に示したとおり、化合物（VII）中の三重結合を適切な還元剤で部分的に還元して、式（VIII）の３−アルケン−４Ｈ−インデン−４−オールを得ることによって製造される。還元剤の選択は、二重結合の周囲の立体配置に依存する。Ｅの立体配置が望みならば、アルカリ金属アルコキシド、例えばナトリウムメトキシドの存在下、かつエーテル、より好ましくはテトラヒドロフランのような非プロトン性有機溶媒中で、水素化アルミニウムリチウムで還元を実施する。Ｚの立体配置が望みならば、リンドラー触媒で還元を実施する。そうして、化合物（VIII）を、上記のとおりの酸化及びシリル化工程を実施することによって、Ｂが二重結合であり、Ｒ5が水素又はシリル基である、式（II）の化合物へと転化する。Ａが単結合であり、Ｂがシス二重結合であり、Ｒ1及びＲ2が、一体となって、シクロプロピル環を形成し、Ｒ5がトリメチルシリルであり、Ｒ3及びＲ4がトリフルオロメチルである、式（II）の化合物の合成は、実施例７に記載されている。
【００５３】
Ａが単結合であり、Ｂが単結合であり、Ｒ1及びＲ2がシクロプロピル環を形成し、Ｘが＝ＣＨ2である、式（Ｉ）の化合物の製造を示す反応スキームは、下記のスキームIIIに示され、実施例１０で更に説明されている。
【００５４】
【化９】
0004219553.tif 000007
【００５５】
本発明の化合物は、骨質量の損失によって表われる、哺乳動物の様々な状態の予防及び治療に有用である。特に、本発明の化合物は、同化作用剤であり、哺乳動物における骨粗しょう症及び骨減少症の、高カルシウム尿症、高カルシウム血症又は腎毒性を誘発することのない予防かつ治療的な投与のために指示される。本明細書に用いられる限りで、「高カルシウム尿症」は、約４mg/kg/日より多い排出に相当する、尿中の過剰なカルシウムである。これは、しばしば、腎結石症（腎臓の結石）を招く。「高カルシウム血症」は、血清中のカルシウムの過剰な濃度であり；ヒト（及びラット）では、これは、約１０．５mg/dlより多くに相当する。「容認され得ない高カルシウム血症」は、通常、約１２mg/dlより高い血清カルシウム濃度で発生し、情緒不安定、錯乱、譫妄、精神病、意識混濁及び昏睡に関連する。
【００５６】
本発明の化合物は、臓器移植に用いられる免疫抑制薬物に関連するそれを包含する、Ｉ型（閉経後の）、II型（老年性の）及びIII型（医原性の）骨粗しょう症の治療はもとより、腎透析及び二次上皮小体機能亢進症による骨ジストロフィーの治療にも役立つと期待される。
【００５７】
本発明の化合物は、副甲状腺ホルモンのレベル上昇によって生じる疾病を治療するのにも有用である。一態様においては、本発明の化合物は、腎不全に関連する二次上皮小体機能亢進症を、特に腎機能不全に関連する骨損失を逆転又は軽減することで治療する際に有用である。その他の態様は、後期二次上皮小体機能亢進症に関連する腎性骨ジストロフィーの治療を包含する。その他の態様は、原発性上皮小体機能亢進症の治療を包含する。
【００５８】
式（Ｉ）の化合物は、白血病、結腸癌、乳癌及び前立腺癌のような新生物性疾患を治療するのにも有用である。
【００５９】
式（Ｉ）の化合物は、免疫抑制性病及び自己免疫疾患を治療するのにも有用である。そのような疾患は、多発性硬化症、全身性紅斑性狼瘡、糖尿病、甲状腺炎及び同種移植片拒絶を包含するが、これらに限定されない。特に、式（Ｉ）の化合物は、ビタミンＤ3受容体（ＶＤＲ）の活性の変調による疾患を治療するのに有用である。これらの化合物の効用は、当技術に周知のとおり、これらの疾患のためのマウスモデルを用いて、in vivoで立証されている。例えば、Lemire et al., Autoimmunity, 12: 143-148 (1992); Lemire et al., J. Clin. Invest., 87: 1103-1107 (1991); Lemire et al., Endocrinology, 135: 2818 (1994)及びLemire et al., J. Cellular Biochem., 49: 26-31 (1992)を参照されたい。
【００６０】
本発明の化合物の骨同化活性は、実施例１０に詳述されるとおり、卵巣摘出ラットのモデルでin vivoで立証された。本発明の化合物の抗細胞増殖活性は、実施例１２及び１３に詳述されるとおり、in vivoで立証された。本発明の化合物の副甲状腺ホルモン抑制活性は、実施例１４に詳述されるとおり、in vivoで立証された。
【００６１】
一般的には、本発明の化合物は、１日あたり約０．０００２〜５μg、好ましくは１日あたり約０．００１〜約２μg、最も好ましくは１日あたり約０．００２〜約１μgの量で投与してよい。５０kgのヒトである対象者に対しては、活性成分の日次用量は、１日あたり約０．０１〜約２５０μg、好ましくは約０．０５〜約１００μg、最も好ましくは約０．１〜約５０μgであってよい。他の哺乳動物、例えばウマ、イヌ及びウシでは、他の用量が必要であり得る。この投与量は、慣用の製剤組成物として、最も効果的な結果を達成する必要に応じて、一回投与若しくは複数回投与によってか、又は制御下放出によって、好ましくは経口的に１日１若しくは２回送達してよい。一定の状況では、隔日投与が、望みの治療的応答を達成するのに適切であると証明し得る。
【００６２】
厳密な用量及び組成の選択、並びに最も適切な送達方式は、とりわけ、配合物の薬理学的特性、治療しようとする病状の性質及び重篤度、並びに受容者の肉体的条件及び精神的鋭敏度によって影響されることになる。コルチコステロイド誘発骨減少症の治療においては、所要用量は、コルチコステロイドの比較的高い用量に対しては、より多くなることになる。
【００６３】
代表的な送達方式は、経口、非経口（皮下、筋内及び静脈内を包含）、経直腸、口内（舌下を包含）、肺内、経皮及び鼻内、最も好ましくは経口投与を包含する。
【００６４】
本発明の別の一つの態様は、活性成分として、本発明の化合物を、製薬上許容し得る無害の担体との混合物中に含む製剤組成物に関する。上記のとおり、そのような組成物は、非経口（皮下、筋内又は静脈内）投与のために、特に液体溶液若しくは懸濁液の形態で；経口又は口内投与のために、特に錠剤若しくはカプセル剤の形態で；肺内又は鼻内投与のために、特に散剤、点鼻剤若しくはエアゾルの形態で；また経直腸又は経皮投与のために調製してよい。
【００６５】
該組成物は、好都合には、単位投与量形態として投与してよく、製薬業界に周知の方法のいずれによっても、例えばRemington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, (1985)に記載のとおり、調製してよい。非経口投与のための配合物は、賦形剤として、無菌水又は生理食塩水、プロピレングリコールのようなアルキレングリコール、ポリエチレングリコールのようなポリアルキレングリコール、植物起源の油、水素化されたナフタレンなどを含有してよい。経鼻投与のための配合物は、固体であってよく、賦形剤、例えば乳糖若しくはデキストランを含有してよいか、又は点鼻剤若しくは計量噴霧剤の形態での使用のための、水性若しくは油性溶液であってよい。口内投与のためには、代表的な賦形剤は、ショ糖、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、あらかじめゼランチン化された澱粉などを包含する。
【００６６】
経口投与できる組成物は、生理学的に適合し得る一種類若しくはそれ以上の担体及び／又は賦形剤を含んでよく、例えば錠剤、被覆錠剤、カプセル剤、トローチ剤、水性若しくは油性懸濁液、溶液、エマルション、エリキシル剤、及び使用前に水その他の適切な液体担体で再構成するのに適した散剤を包含する、固体又は液体形態であってよい。錠剤及びカプセル剤は、結合剤、例えばシロップ、アラビアゴム、ゼラチン、ソルビトール、トラガカント又はポリビニルピロリドン；充填剤、例えば乳糖、ショ糖、トウモロコシ澱粉、リン酸化し、ソルビトール又はグリシン；潤滑剤、例えばステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレングリコール又はシリカ；及び界面活性剤、例えばラウリル硫酸ナトリウムとともに調製してよい。液体組成物は、懸濁剤、例えばソルビトールシロップ、メチルセルロース、ショ糖シロップ、ゼラリン、カルボキシメチルセルロース又は食用脂肪；乳化剤、例えばレシチン又はアラビアゴム；植物油、例えばアーモンド油、ココナツ油、冷肝油又はラッカセイ油；防腐剤、例えばブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）及びブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）のような慣用の添加物を含有してよい。液体組成物は、例えばゼラチン内に封入して、単位投与量形態を与えてよい。
【００６７】
好適な固体の経口投与量形態は、錠剤、二片硬殻カプセル剤、及び軟ゼラチン（ＳＥＧ）カプセル剤を包含する。ＳＥＧカプセル剤は、他の２形態に優る明確な利点を与えるため、特に興味深い〔例えば、Seager, H.「Soft gelatin capusules: a solution to many tableting problems」; Pharmaceutical Technology, 9 (1985)を参照されたい〕。ＳＥＧカプセル剤を用いる利点のうちいくつかは、（ａ）ＳＥＧカプセル剤では、カプセル内に正確に投薬できる液体に薬物を溶解又は分散するため、用量内容均一性が最適化される；（ｂ）ＳＥＧカプセル剤として配合された薬物は、水混和性若しくは油状の液体に溶解又は分散され、そのため、体内で放出されたとき、高い表面積の薬物の分散を生じるため、優れた生体利用能を示す；（ｃ）長期の保存中の酸化に敏感である薬物の分解は、軟ゼラチンの乾燥した外殻が酸素の拡散に対する障壁を与えるため、防止される：ことである。
【００６８】
乾燥した外殻の配合物は、代表的には、約４０〜６０％の濃度のゼラチン、約２０〜３０％の濃度の（グリセリン、ソルビトール又はプロピレングリコールのような）可塑剤、及び約３０〜４０％の濃度の水を含む。防腐剤、染料、乳白剤及び香味剤のようなその他の材料も、存在してよい。液体充填材料は、溶解、可溶化若しくは（蜜ろう、水素化ヒマシ油又はポリエチレングリコール４０００のような懸濁剤で）分散された固体の薬物、又は鉱油、植物油、トリグリセリド、グリコール、ポリオール及び界面活性剤のような担体、若しくは担体の組合せ中の液体の薬物を含む。
【００６９】
【実施例】
以下の実施例は、当業者が本発明をより明確に理解し、実施することができるように提供されるものである。それらは、発明の範囲を制限するものとみなされるべきではなく、単にその例示及び代表例であるものとみなされるべきである。
【００７０】
実施例１
〔１Ｒ−（１α，３ａβ，７ａα）〕−オクタヒドロ−７ａ−メチル−１−〔１−〔４−メチル−４−〔トリメチルシリルオキシ〕−２−ペンチニル〕シクロプロピル〕−４Ｈ−インデン−４−オン
【００７１】
【化１０】
0004219553.tif 000008
【００７２】
工程１
冷却したジメチルアルミニウム塩化物（３４．５ml、３４．５mmol、ヘキサン中の１M溶液）を、ジクロロメタン（９０ml）中の〔１Ｒ−（１α，３ａβ，４α，７ａα）〕（１，１−ジメチルエチル）ジメチル−〔〔（オクタヒドロ−７ａ−メチル−１−（１−メチルエテニル）−１Ｈ−インデン−４−イル〕オキシ〕シラン（９．２５ｇ、３０mmol）及びパラホルムアルデヒド（１．０３ｇ、３４．５mmol）の懸濁物に、−２０℃にて滴下添加した。該反応混合物を１０℃にて１時間攪拌し、次いで氷上に注ぎ、０．１N塩酸（１００ml）にて酸性化した。１５分後、該反応混合物をヘキサン中に抽出し、抽出物を食塩水にて洗浄し、硫酸マグネシウムにて乾燥させ、真空下で濃縮して９．６７ｇの無色ゴム状物を与えた。２５％酢酸エチル／ヘキサンを溶出液として用いるシリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィーは、８．９３ｇの無色ゴム状物を与えた。１．０ｇのこの物質をＨＰＬＣにより精製して、〔１Ｒ−（１α，３ａβ，４α，７ａα）〕−４−〔〔（１，１−ジメチルエチル）ジメチルシリル〕オキシ〕オクタヒドロ−７ａ−メチル−γ−メチレン−１Ｈ−インデン−１−プロパノール（０．９３ｇ）を与えた：融点  ３８〜４０℃；[α]25D＝＋２６．７°；ＩＲ（ＣＨＣｌ3）  ３６３０及び１６３５cm-1； 1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3) δ 0.01 (3 H, s), 0.011 (3 H, s), 0.80 (3 H, s), 0.88 (9 H, s), 1.15 (1 H, m), 1.3-1.63 (5 H, m), 1.65-1.76 (6 H, m), 2.0 (1 H, m), 2.27 (2 H, m), 3.68 (2 H, t, J = 6.0 Hz), 4.01 (1 H, s), 4.91 (1 H, s), 4.95 (1 H, s); ＭＳ  ｍ／ｚ  ３３９（Ｍ+＋Ｈ，４０）．Ｃ20Ｈ38Ｏ2Ｓｉの分析計算値：Ｃ, 70.94；Ｈ, 11.31；Ｓｉ, 8.29．実測値：Ｃ, 70.95；Ｈ, 11.62，Ｓｉ, 8.30．
【００７３】
工程２
−１０℃のジクロロメタン（４５ml）中の〔１Ｒ−（１α，３ａβ，４α，７ａα）〕−４−〔〔（１，１−ジメチルエチル）ジメチルシリル〕オキシ〕オクタヒドロ−７ａ−メチル−γ−メチレン−１Ｈ−インデン−１−プロパノール（５．０７ｇ、１５mmol）〔上記工程１に記述したように調製〕及びジアイオドメタン（１３．３９ｇ、５０mmol）の混合物に、冷却した（−１℃）ジエチル亜鉛溶液（４５ml、４５mmol、トルエン中の１M溶液）を添加した。該反応混合物を５−７℃にて４．２５時間攪拌し、次いでヘキサン（２５ml）及び０．１N硫酸（１５０ml）の混合物に注入した。生成物をヘキサン中に抽出し、硫酸マグネシウムにて乾燥させ、真空下で蒸発させて５．３４ｇの淡黄色ゴム状物を与えた。３０％酢酸エチル／ヘキサンを溶出液として用いるシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーは、４．９１ｇの粗生成物を与え、これをヘキサン中の２０％酢酸エチルを溶出液として用いるＨＰＬＣ（１５〜３０μmメッシュシリカ、５０×５０mmカラム、７０ml／分、流速）により更に精製して、純粋な〔１Ｒ−（１α，３ａβ，４α，７ａα）〕−１−〔４−〔〔（１，１−ジメチルエチル）ジメチルシリル〕オキシ〕オクタヒドロ−７ａ−メチル−１Ｈ−インデン−１−イル〕シクロプロパンエタノール（４．１３ｇ）を与えた：融点  ６５〜６６℃；[α]25D＝＋６９．１７°（ＣＨＣｌ3，ｃ＝１．３３）；ＩＲ（ＣＨＣｌ3）  ３６２０cm-1； 1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3) δ 0.04 (3 H, s), 0.06 (3 H, s), 0.80 (1 H, m), 0.22 (2 H, m), 0.69 (1 H, m), 0.88 (9 H, s), 0.92 (2 H, m), 0.94 (3 H, s). 1.20-1.55 (8 H, m), 1.64 (1 H, br d), 1.78-1.92 (2 H, m), 2.02 (1 H, d, J = 12 Hz), 2.30 (1 H, m), 3.76 (2 H, br, t of t), 3.97 (1 H, s); ＭＳ  ｍ／ｚ  ３５３（Ｍ+＋Ｈ，７０）．Ｃ21Ｈ40Ｏ2Ｓｉの分析計算値：Ｃ, 71.53；Ｈ, 11.43；Ｓｉ, 7.96．実測値：Ｃ, 71.48；Ｈ, 11.67，Ｓｉ, 7.93．
【００７４】
工程３
〔１Ｒ−（１α，３ａβ，４α，７ａα）〕−１−〔４−〔〔（１，１−ジメチルエチル）ジメチルシリル〕オキシ〕オクタヒドロ−７ａ−メチル−１Ｈ−インデン−１−イル〕シクロプロパンエタノール（１．０５６ｇ、３．０mmol）〔上記工程２に記述したように調製〕を、ジクロロメタン（１５ml）中のピリジニウムクロロホルメート（１．１３２ｇ、５．２４６mmol）及び無水酢酸ナトリウム（０．４３０ｇ、５．２４４mmol）の懸濁物に添加し、該反応混合物を室温にて攪拌した。２時間後、該反応混合物をエーテル（３５ml）にて希釈し、更に１５分間攪拌し、次いでフロリシル（Florisil）パッドを通して濾過した。フロリシルパッドをエーテルにて洗浄し、合わせた濾液を真空下で濃縮して０．９３ｇの固体を与えた。固体の、ヘキサン中の１０％酢酸エチルを溶出液として用いるシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーは、〔１Ｒ−（１α，３ａβ，４α，７ａα）〕−１−〔４−〔〔（１，１−ジメチルエチル）ジメチルシリル〕オキシ〕オクタヒドロ−７ａ−メチル−１Ｈ−インデン−１−イル〕シクロプロパンアセトアルデヒド（０．８６ｇ）を与えた：融点  ７４〜７５℃；[α]25D＝９３．７３°（ＣＨＣｌ3，ｃ＝１．１８）；ＩＲ（ＣＨＣｌ3）  １７２０cm-1； 1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3) δ 0.00 (3 H, s), 0.01 (3 H, s), 0.27 (1 H, m), 0.32 (1 H, m), 0.50 (1 H, m), 0.80 (1 H, m), 0.88 (9 H, s), 0.97 (3 H, s),  1.03 (1 H, m), 1.15 (1 H, m), 1.20-1.55 (6 H, m), 1.60-1.75 (2 H, m), 1.80 (1 H, d, J = 16 Hz), 1.95 (1 H, d, J = 12 Hz), 2.89 (1 H, d, J = 16 Hz), 3.97 (1 H, s), 9.81 (1 H, d, J = 3 Hz); ＭＳ  ｍ／ｚ  ３５１（Ｍ+＋Ｈ，２０）．Ｃ21Ｈ38Ｏ2Ｓｉの分析計算値：Ｃ, 71.94；H, 10.92；Ｓｉ, 8.01．実測値：Ｃ, 71.71；Ｈ, 11.15，Ｓｉ, 8.23．
【００７５】
工程４
無水テトラヒドロフラン（６ml）中のジエチルジアゾメチルホスホネート（１．７８ｇ、１０mmol）の溶液を、無水テトラヒドロフラン（２０ml）中のカリウムｔ−ブトキシド（１．２３４ｇ、１０．９mmol）の溶液に−７０℃にて添加した。２５分後に、テトラヒドロフラン（６．０ml）中の〔１Ｒ−（１α，３ａβ，４α，７ａα）〕−１−〔４−〔〔（１，１−ジメチルエチル）ジメチルシリル〕オキシ〕オクタヒドロ−７ａ−メチル−１Ｈ−インデン−１−イル〕シクロプロパンアセトアルデヒド（２．１０３ｇ、６．０mmol）〔上記工程３に記述したように調製〕を添加した。１時間後に冷却浴を除き、攪拌を更に１．５時間継続した。飽和塩化アンモニウム溶液（１０ml）を添加した。１５分後、反応混合物をエーテル（１００ml）及び飽和塩化ナトリウム（６０ml）の混合物中に注入した。有機層を分離し、食塩水にて洗浄し、硫酸マグネシウムにて乾燥させ、真空下で蒸発させて２．１８ｇにゴム状物を与えた。ヘキサン中の２．５％酢酸エチルを溶出液として用いるシリカゲルカラム上でのフラッシュクロマトグラフィーによる精製は、結晶性固体を与え、これをメタノール中にスラリー化し、濾過して〔１Ｒ−（１α，３ａβ，４α，７ａα）〕〔（１，１−ジメチルエチル）ジメチル〔〔オクタヒドロ−７ａ−メチル−１−〔１−（２−プロピニル）−シクロプロピル〕−１Ｈ−インデン−４−イル〕オキシ〕シラン（１．７７ｇ）を与えた：融点  ４９〜５０℃；[α]25D＝５８．６４°（ＣＨＣｌ3，ｃ＝１．０３）；ＩＲ（ＣＨＣｌ3）  ３３０７cm-1； 1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3) δ -0.01 (3 H, s), 0.00 (3 H, s), 0.22 (2 H, m), 0.38 (1 H, m), 0.69 (1 H, m), 0.87 (9 H, s), 0.94 (3 H, s), 0.96 (1 H, m), 1.25-1.55 (7 H, m), 1.64 (1 H, br d, J = 12 Hz), 1.75-1.90 (3 H, m), 1.95 (1 H, d, J = 16 Hz), 1.96 (1 H, s), 2.69 (1 H, d, J = 16 Hz), 3.98 (1 H, s); ＭＳ  ｍ／ｚ  ３４６（Ｍ+，２０）．Ｃ21Ｈ38ＯＳｉの分析計算値：Ｃ, 76.23；Ｈ, 11.05；Ｓｉ, 8.10．実測値：Ｃ, 76.03；Ｈ, 10.84；Ｓｉ, 8.12．
【００７６】
工程５
ｎ−ブチルリチウム（５．５ml、８．８mmol、ヘキサン中の１．６M溶液）を、無水テトラヒドロフラン（１８ml）中の〔１Ｒ−（１α，３ａβ，４α，７ａα）〕〔（１，１−ジメチルエチル）ジメチル〔〔オクタヒドロ−７ａ−メチル−１−〔１−（２−プロピニル）−シクロプロピル〕−１Ｈ−インデン−４−イル〕オキシ〕シラン（１．７３ｇ、５．０mmol）〔上記工程４に記述したように調製〕の溶液に−７８℃にて添加した。３０分後、アセトン（５．８ｇ、１００mmol）を添加し、攪拌を更に３０分間継続した。冷却浴を除き、３時間後に追加量のアセトン（２．９ｇ、５０mmol）を添加した。１．５時間後に、該反応混合物を飽和塩化アンモニウム（１５ml）により反応停止させ、次いでエーテル（１００ml）及び飽和塩化アンモニウム（６０ml）の混合物に注入した。有機層を分離し、食塩水にて洗浄し、硫酸ナトリウムにて乾燥させ、真空下で蒸発させて２．１２ｇの無色ゴム状物を与えた。ヘキサン中の１５％酢酸エチルを溶出液として用いるシリカゲルカラム上でのフラッシュクロマトグラフィーによる精製は、〔１Ｒ−（１α，３ａβ，４α，７ａα）〕−５−〔１−〔４−〔〔（１，１−ジメチルエチル）ジメチルシリル〕オキシ〕オクタヒドロ−７ａ−メチル−１Ｈ−インデン−１−イル〕シクロプロピル〕−２−メチル−３−ペンチン−２−オールを無色ゴム状物（１．６７ｇ）として与えた：[α]25D＝＋３９．０９°（ＥｔＯＨ，ｃ＝１．０３６）；ＩＲ（ＣＨＣｌ3）  ３６０２cm-1； 1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3) δ -0.01 (3 H, s), 0.00 (3 H, s), 0.20 (2 H, m), 0.40 (1 H, m), 0.62 (1 H, m), 0.87 (9 H, s), 0.93 (3 H, s), 1.00 (1 H, m), 1.2-1.4 (13 H, m), 1.49 (6 H, s), 1.62-1.95 (5 H, m), 2.03 (1 H, d, J = 17 Hz), 2.62 (1 H, d, J = 17 Hz), 3.97 (1 H, s); ＭＳ  ｍ／ｚ  ４０４（Ｍ+，１８）．Ｃ25Ｈ44Ｏ2Ｓｉの分析計算値：Ｃ, 74.28；Ｈ, 10.96；Ｓｉ, 6.94．実測値：Ｃ, 73.92；Ｈ, 11.22；Ｓｉ, 6.87．
【００７７】
工程６
フルオロケイ酸（３．７５ml、Pilcher, A.S.及びDeShong, P.,J. Org. Chem.,58, 5130 (1993)に記述されるように調製された３０％水溶液）を、アセトニトリル（１２ml）中の〔１Ｒ−（１α，３ａβ，４α，７ａα）〕−５−〔１−〔４−〔〔（１，１−ジメチルエチル）ジメチルシリル〕オキシ〕オクタヒドロ−７ａ−メチル−１Ｈ−インデン−１−イル〕シクロプロピル〕−２−メチル−３−ペンチン−２−オール（０．８ｇ、２．０mmol）〔上記工程５に記述したように調製〕の溶液に０℃にて添加し、該反応混合物を１５℃まで昇温させた。３．５時間後、反応混合物を水（１０ml）及び酢酸エチル（１０ml）にて希釈し、次いで酢酸エチル（５０ml）及び水（５０ml）の混合物に注入した。有機層を分離し、食塩水、飽和重炭酸ナトリウムで洗浄し、硫酸ナトリウムにより乾燥させ、真空下で蒸発させてゴム状物を与えた。ヘキサン中の２５％酢酸エチルを溶出液として用いるシリカゲルカラム上でのフラッシュクロマトグラフィーによる精製は、〔１Ｒ−（１α，３ａβ，４α，７ａα）〕オクタヒドロ−１−〔１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−２−ペンチニル）シクロプロピル〕−７ａ−メチル−４Ｈ−インデン−４−オールを結晶性固体（０．５ｇ）として与えた：融点  ９７〜９８℃；[α]25D＝３６°（ＭｅＯＨ，ｃ＝１．０３）；ＩＲ（ＣＨＣｌ3）  ３６０４，２２３０cm-1； 1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3) δ 0.22 (2 H, m), 0.39 (1 H, m), 0.63 (1 H, m), 0.97 (3 H, s), 1.07 (1 H, m), 1.2-1.45 (8 H, m), 1.50 (6 H, s), 1.79-1.90 (3 H, m), 2.01 (1 H, m), 2.03 (1 H, d, J = 17 Hz), 2.62 (1 H, d, J = 17 Hz), 4.06 (1 H, s); ＭＳ  ｍ／ｚ  ５８１（２ｘＭ+＋Ｈ）．Ｃ19Ｈ30Ｏ2：の分析計算値Ｃ, 78.57；Ｈ, 10.41．実測値：Ｃ, 78.54；Ｈ, 10.54．
【００７８】
工程７
ピリジニウムジクロメート（３．３０ｇ、８．７７mmol）を、ジクロロメタン（１６ml）中の〔１Ｒ−（１α，３ａβ，４α，７ａα）〕オクタヒドロ−１−〔１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−２−ペンチニル）シクロプロピル〕−７ａ−メチル−４Ｈ−インデン−４−オール（０．８ｇ、２．７５mmol）〔上記工程６に記述されるように調製〕の溶液に添加し、該反応混合物を室温にて攪拌した。３．５時間後、追加量のジクロロメタン（２．５ml）及びピリジニウムジクロメート（２．０ｇ、５．３mmol）を添加し、攪拌を更に２．５時間継続した。該反応混合物をエーテル（２５ml）にて希釈し、３０分間攪拌し、次いでセライト（Celite）パッドを通して濾過した。セライトパッドをエーテルにより洗浄し、濾液を真空下で濃縮して０．７５ｇの淡黄色ゴム状物を与えた。ヘキサン中の５０％酢酸エチルを溶出液として用いるシリカゲルカラム上でのフラッシュクロマトグラフィーによる精製は、〔１Ｒ−（１α，３ａβ，７ａα）〕オクタヒドロ−１−〔１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−２−ペンチニル）シクロプロピル〕−７ａ−メチル−４Ｈ−インデン−４−オン（０．７０ｇ）を無色ゴム状物として与えた：[α]25D＝−５．５°（ＭｅＯＨ，ｃ＝１．２）；ＩＲ（ＣＨＣｌ3）  ３６０２，２２３２，１７０６cm-1； 1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3) δ 0.31 (2 H, m), 0.44 (1 H, m), 0.62 (1 H, m), 0.68 (3 H, s), 1.14 (1 H, m), 1.53 (6 H, s), 1.73 (2 H, m), 1.83 (1 H, s, OH), 1.96 (1 H, m), 2.04 (1 H, m), 2.05 (1 H, d, J = 17 Hz), 2.16-2.29 (4 H, m), 2.50 (1 H, dd, J = 7.6 Hz), 2.62 (1 H, d, J = 17 Hz); ＭＳ（Ｅ／Ｉ）  ｍ／ｚ  ２８８．２０９２．Ｃ19Ｈ28Ｏ2の分析計算値：Ｃ, 79.12；Ｈ, 9.78．実測値：Ｃ, 78.93；Ｈ, 9.80．
【００７９】
工程８
メチレンクロライド（１５ml）中の〔１Ｒ−（１α，３ａβ，７ａα）〕オクタヒドロ−１−〔１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−２−ペンチニル）シクロプロピル〕−７ａ−メチル−４Ｈ−インデン−４−オン（０．７ｇ、２．４２６mmol）〔上記工程７に記述したように調製〕及び１−（トリメチルシリル）イミダゾール（２．６ml、１７．７mmol）の溶液を、アルゴン雰囲気下、室温にて１８時間攪拌し、次いで水（１０ml）にて反応停止させた。２５分間後、該反応混合物をエーテル（１００ml）及び水（５０ml）の混合物に注入した。有機相を集め、水性相をエーテルにて再抽出した。合わせた有機抽出物を食塩水にて洗浄し、硫酸ナトリウムにて乾燥させ、蒸発させて０．８２ｇの無色油状物を与えた。ヘキサン中の２０％酢酸エチルを溶出液として用いるシリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィーによる精製は、〔１Ｒ−（１α，３ａβ，７ａα）〕オクタヒドロ−７ａ−メチル−１−〔１−〔４−メチル−４−〔トリメチルシリルオキシ〕−２−ペンチニル〕シクロプロピル〕−４Ｈ−インデン−４−オン（０．７９ｇ、９０％）を油状物として与えた：[α]25D＝−１０．６９°（ＥｔＯＨ，ｃ＝０．８１５１）；ＩＲ（ＣＨＣｌ3）  ２２５０及び１７０６cm-1； 1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3) δ 0.18 (9 H, s), 0.28 (2 H, m), 0.32 (1 H, m), 0.62 (1 H, m), 0.69 (3 H, s), 1.13 (1 H, m), 1.47 (3 H, s), 1.48 (3 H, s) 1.50-1.58 (2 H, m), 1.70-1.76 (2 H, m), 1.92-1.99 (1 H, m), 2.00 (1 H, d, J = 17 Hz), 2.05 (1 H, m), 2.51 (1 H, m), 2.64 (1 H, d, J = 17 Hz); ＭＳ  ｍ／ｚ  ３６１（１１）．Ｃ22Ｈ36Ｏ2Ｓｉの分析計算値：Ｃ, 73.28；Ｈ, 10.06；Ｓｉ, 7.79．実測値：Ｃ, 73.28；Ｈ, 10.10；Ｓｉ, 7.79．
【００８０】
実施例２
１，２５−ジヒドロキシ−２３−イン−２０，２１，２８−シクロプロピル−コレカルシフェロール
【００８１】
【化１１】
0004219553.tif 000009
【００８２】
工程１
ｎ−ブチルリチウム（０．５ml、０．８mmol、ヘキサン中の１．６M溶液）を、無水テトラヒドロフラン（５．０ml）中の〔３Ｓ−（１Ｚ，３α，５β）〕−〔２−〔３，５−ビス〔（１，１−ジメチルエチル）ジメチルシリル〕オキシ〕−２−メチレン−シクロヘキシリデン〕エチル〕ジフェニルホスフィンオキシド（１．７３ｇ、５．０mmol）（Kiegel, J.ら、Tetr. Lett., 32: 6057-6060 (1991)参照）の溶液に−７８℃にて添加した。得られた深紅の溶液を−７２℃にて７分間攪拌し、次いで無水テトラヒドロフラン（４．０ml）中の〔１Ｒ−（１α，３ａβ，７ａβ）〕オクタヒドロ−７ａ−メチル−１−〔１−〔４−メチル−４−〔（トリメチルシリル）オキシ〕−２−ペンチニル〕シクロプロピル〕−４Ｈ−インデン−４−オン（０．１８ｇ、０．５mmol）〔実施例１に記述したように調製〕の溶液により処理した。３時間後、該反応混合物を、２Nロッシェル塩溶液及び２N重炭酸カリウム溶液の１：１混合物（１０ml）により反応停止させた。該反応混合物を室温まで昇温させ、次いで酢酸エチル（１００ml）及びロッシェル塩溶液及び２N重炭酸カリウム溶液の１：１混合物（５０ml）に注入した。有機相を分離し、水性相を酢酸エチルにて抽出した。合わせた有機抽出物を食塩水にて洗浄し、硫酸ナトリウムにて乾燥させ、蒸発させて０．８９ｇの残渣を与えた。５％酢酸エチル−ヘキサンを溶出液として用いるシリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィーによる精製は、トリシリル中間体（０．３４ｇ）を与え、これを次の工程に直接に使用した。
【００８３】
工程２
無水テトラヒドロフラン（３．３ml）中のトリシリル中間体（０．３３ｇ、０．４５５mmol）〔上記工程１に記述したように調製〕及びテトラブチルアンモニウムフルオライド（３．３ml、３．３mmol、テトラヒドロフラン中の１．０M溶液）の溶液を、室温にてアルゴン雰囲気下で攪拌した。１７時間後、該反応混合物を水（１０ml）にて希釈した。１０分間後、該反応混合物を食塩水及び水の１：１混合物に注ぎ、有機相を集めた。水性相を酢酸エチルにて再抽出し、合わせた有機抽出物を食塩水にて洗浄し、硫酸ナトリウムにて乾燥させ、蒸発させて０．１９ｇのゴム状物を与えた。酢酸エチルを溶出液として用いるシリカゲルカラム上でのフラッシュクロマトグラフィーは、０．１４４ｇの無色残渣を与え、これを無水メチルホルメート（５ml）に溶解し、０．４５μmフィルターを通して濾過した。濾液を４０℃にて蒸発させ、残渣を高真空下（０．２mmHg）に４時間保持して、１，２５−ジヒドロキシ−２３−イン−２０，２１，２８−シクロプロピル−コレカルシフェロール（０．１３ｇ）を無色泡状物として与えた：[α]D23＝−１０．２３°（ＥｔＯＨ，ｃ＝０．３８）；λmax（ＭｅＯＨ）  ２６４（ε＝１６８５９），２４８（ｓｈ，１５１９８），２１２（ε＝１５１２７）； 1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3) δ 0.26 (2 H, m), 0.41 (1 H, m), 0.56 (1 H, m), 0.59 (3 H, s), 1.1 (1 H, m), 1.40-1.49 (8 H, m), 1.50 (6 H, s), 1.70 (2 H, m), 1.84 (1 H, s, OH), 1.96 (1 H, m), 2.0 (4 H, m), 2.05 (1 H, d, J = 17 Hz), 2.31 (1 H, m), 2.60 (1 H, d, J = 17 Hz), 2.61 (1 H, m), 2.80 (1 H, m), 4.23 (1 H, br s), 4.42 (1 H, br s), 4.99 (1 H, s), 5.33 (1H, s), 5.98 (1 H,d, J = 11 Hz), 6.37 (1 H, d, J = 11 Hz); ＭＳ（ＦＡＢ）  ｍ／ｚ  ４２４（Ｍ+  ５２）．
【００８４】
実施例３
１，２５−ジヒドロキシ−２３−イン−２０，２１，２８−シクロプロピル−１９−ノル−コレカルシフェロール
【００８５】
【化１２】
0004219553.tif 000010
【００８６】
工程１
ｎ−ブチルリチウム（０．５５ml、０．８１mmol、ヘキサン中の１．６M溶液）を、無水テトラヒドロフラン（５ml）中の〔３Ｒ−（３α，５β，Ｚ）−３，５−ビス〔〔１，１−ジメチルエチル）ジメチルシリル〕オキシ〕シクロヘキシリデン〕エチル〕ジフェニルホスフィンオキシド（０．５１ｇ、０．７９mmol）（Perlman, K. L.ら、Tetr. Lett., 32: 7663-7666 (1991)参照）の溶液に、−７８℃にてアルゴン雰囲気下で添加した。得られた深紅の溶液を−６８℃にて１０分間攪拌し、次いで無水テトラヒドロフラン（４．０ml）中の〔１Ｒ−（１α，３ａβ，７ａα）〕オクタヒドロ−７ａ−メチル−１−〔１−〔４−メチル−４−〔トリメチルシリル−オキシ〕−２−ペンチニル〕シクロプロピル〕−４Ｈ−インデン−４−オン（０．１８ｇ、０．５mmol）〔実施例１に記述したように調製〕の溶液により処理した。該反応混合物を−７８℃にて４時間攪拌し、次いで２０℃まで昇温させ、１Nロッシェル塩溶液及び２N重炭酸カリウム溶液の１：１混合物（１０ml）により反応停止させた。１０分間後、該反応混合物を酢酸エチル（１００ml）及びロッシェル塩溶液及び１N重炭酸カリウム溶液の１：１混合物（５０ml）に注入した。有機相を集め、水性相を酢酸エチルにて抽出した。合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムにて乾燥させ、蒸発させて０．５９ｇのゴム状物を与えた。５％酢酸エチル−ヘキサンを溶出液として用いるシリカゲルカラム上でのフラッシュクロマトグラフィーによる精製は、トリシリル中間体（０．３１ｇ）を与え、これを次の工程に更に精製することなく使用した。
【００８７】
工程２
トリシリル中間体（０．３０ｇ、０．４２mmol）〔上記工程１に記述したように調製〕を無水テトラヒドロフラン（３．０ml）中に溶解し、テトラブチルアンモニウムフルオライド（３．５ml、３．５mmol、テトラヒドロフラン中の１M溶液）にて処理した。該反応混合物を、室温にてアルゴン雰囲気下で４８時間攪拌し、次いで水（１０ml）にて希釈し、更に１０分間攪拌した。該反応混合物を酢酸エチル（７５ml）及び食塩水／水の１：１混合物（５０ml）に注入した。有機相を集め、水性相を酢酸エチルにて再抽出した。合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムにて乾燥させ、蒸発させて０．２４ｇの残渣を与えた。酢酸エチルを溶出液として用いるシリカゲルカラム上での、残渣のフラッシュクロマトグラフィーは、粗生成物を与え、これをメチルホルメート（５．０ml）に溶解し、０．４５μmフィルターを通して濾過した。有機物質を４０℃にて蒸発させ、残渣を室温にて高真空下（０．２トリチェリ）で５時間乾燥させ、１，２５−ジヒドロキシ−２３−イン−２０，２１，２８−シクロプロピル−１９−ノル−コレカルシフェロール（０．１５ｇ）を無色泡状物として与えた：[α]D23＝＋５２．３°（ＥｔＯＨ，ｃ＝０．４５）；λmax（ＭｅＯＨ）  ２６１（ε＝２５９２９），２５１（ε＝３８２６３），２４３（ε＝２２０１１），２２７（ｓｈ，ε＝１３３９６）； 1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3) δ 0.28 (2 H, m), 0.40 (1 H, m), 0.55 (1 H, m), 0.58 (3 H, s), 1.11 (1 H, m), 1.40-1.48 (2 H, m), 1.50 (6 H, s), 1.55-1.60 (5 H, m), 1.68 (2 H, m), 1.80 (2 H, m), 1.90-2.05 (4 H, m), 2.10 (1 H, d, J = 17 Hz), 2.20 (2 H, m), 2.50 (1 H,d, J = 16 Hz), 2.60 (1 H,d, J = 17 Hz), 4.06 (1 H, br s), 4.11 (1 H, br s), 5.82 (1 H,d, J = 11 Hz), 6.30 (1 H,d, J = 11 Hz); ＭＳ（ＦＡＢ）  ｍ／ｚ  ４１２（Ｍ+）．
【００８８】
実施例４
〔（１Ｒ−（１α，３ａβ，７ａα）〕オクタヒドロ−７ａ−メチル−１−〔１−〔５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−２−ペンチニル〕シクロプロピル〕−４Ｈ−インデン−４−オン
【００８９】
【化１３】
0004219553.tif 000011
【００９０】
工程１
ｎ−ブチルリチウム（７．５ml、１２mmol、ヘキサン中の１．６M溶液）を、無水テトラヒドロフラン（２５ml）中の〔１Ｒ−（１α，３ａβ，４α，７ａα）〕〔（１，１−ジメチルエチル）ジメチル〔〔オクタヒドロ−７ａ−メチル−１−〔１−（２−プロピル）シクロプロピル〕−１Ｈ−インデン−４−イル〕オキシ〕シラン（２．３６ｇ、６．２５mmol）〔上記実施例１、工程４に記述したように調製〕の溶液に−７０℃にて添加した。４５分後、ドライアイス凝縮器を被せた添加ロート中に凝縮されたヘキサフルオロアセトン（５．８ml、１００mmol）を添加し、攪拌を継続した。１．５時間後に、該反応混合物を２Nロッシェル塩溶液（２０ml）により反応停止させ、該反応混合物を室温まで昇温させ、次いでエーテル（１２５ml）及び５０％食塩水（７５ml）の混合物に注入した。有機層を分離し、食塩水にて洗浄し、硫酸ナトリウムにて乾燥させ、真空下で蒸発させて５．８ｇの無色ゴム状物を与えた。ヘキサン中の１５％酢酸エチルを溶出液として用いるシリカゲルカラム上でのフラッシュクロマトグラフィーによる精製は、〔１Ｒ−（１α，３ａβ，４α，７ａα）〕−５−〔１−〔４−〔〔（１，１−ジメチルエチル）ジメチルシリル〕オキシ〕オクタヒドロ−７ａ−メチル−１Ｈ−インデン−１−イル〕シクロプロピル〕−１，１，１−トリフルオロ−２−（トリフルオロメチル）−３−ペンチン−２−オールを無色油状物（３．６ｇ）として与えた：[α]25D＝＋７．６９°（ＥｔＯＨ，ｃ＝４．０）；ＩＲ（ＣＨＣｌ3）  ３５８８，２２４１cm-1； 1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3) δ -0.04 (6 H, s), 0.19 (1 H, m), 0.28 (1 H, m), 0.36 (1 H, m), 0.70 (1 H, m), 0.86 (9 H, s), 0.93 (3 H, s), 1.00 (1 H, q, J = 11 Hz), 1.2-1.59 (7 H, m), 1.64-1.92 (4 H, m), 2.06 (1 H, d, J = 17 Hz), 2.75 (1 H, d, J = 17 Hz), 3.13 (1 H, s, OH), 3.96 (1 H, s); ＭＳ  ｍ／ｚ  ５１２（Ｍ+，１８）．Ｃ25Ｈ38Ｆ6Ｏ2Ｓｉの分析計算値：Ｃ, 58.57；Ｈ, 7.47；Ｆ, 22.24，Ｓｉ, 5.48．実測値：Ｃ, 58.39；Ｈ, 7.57，Ｆ, 22.34，Ｓｉ, 5.41．
【００９１】
工程２
フルオロケイ酸（６．０ml、Pilcher, A. S. 及びDeShong, P., J. Org. Chem.,58, 5130 (1993)に記述されるように調製された３０％水溶液）を、アセトニトリル（１８ml）中の〔１Ｒ−（１α，３ａβ，４α，７ａα）〕−５−〔１−〔４−〔〔（１，１−ジメチルエチル）ジメチルシリル〕オキシ〕オクタヒドロ−７ａ−メチル−１Ｈ−インデン−１−イル〕シクロプロピル〕−１，１，１−トリフルオロ−２−（トリフルオロメチル）−３−ペンチン−２−オール（１．２４ｇ、２．４mmol）〔上記工程１に記述したように調製〕の溶液に添加し、該反応混合物を室温にてアルゴン雰囲気下で攪拌した。２．５時間後、反応混合物を酢酸エチル（１００ml）及び飽和重炭酸ナトリウム（５０ml）の混合物に注入した。有機層を分離し、食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムにより乾燥させ、真空下で蒸発させて０．９ｇの部分的に結晶性の固体を与えた。ヘキサン中の２５％酢酸エチルを溶出液として用いるシリカゲルカラム上でのフラッシュクロマトグラフィーによる精製は、〔１Ｒ−（１α，３ａβ，４α，７ａα）〕オクタヒドロ−７ａ−メチル−１−〔１−〔５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−２−ペンチニル）シクロプロピル〕−４Ｈ−インデン−４−オールを結晶性固体（０．６５ｇ）として与えた：融点  ９６〜９７℃；[α]25D＝２５．３９°（ＥｔＯＨ，ｃ＝０．９５７）；ＩＲ（ＣＨＣｌ3）  ３５９０，２２６６，２２４１cm-1； 1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3) δ 0.22 (1 H, m), 0.32 (1 H, m), 0.42 (1 H, m), 0.71 (1 H, m), 0.98 (3 H, s), 1.04 (1 H, m), 1.26-1.33 (2 H, m), 1.40-1.60 (6 H, m), 1.84-1.98 (4 H, m), 2.01 (1 H, d, J = 17 Hz), 2.76 (1 H, d, J = 17 Hz), 3.86 (1 H, s, OH), 4.08 (1 H, s); ＭＳ  ｍ／ｚ  ３９７（Ｍ+−Ｈ）．Ｃ19Ｈ24Ｆ6Ｏ2の分析計算値：Ｃ, 57.28；Ｈ, 6.07；Ｆ, 28.61．実測値：Ｃ, 57.34；Ｈ, 5.97；Ｆ, 28.66．
【００９２】
工程３
ジクロロメタン（１４ml）中の〔１Ｒ−（１α，３ａβ，４α，７ａα）〕オクタヒドロ−７ａ−メチル−１−〔５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−２−ペンチニル）シクロプロピル〕−４Ｈ−インデン−４−オール（０．６６ｇ、１．６５mmol）〔上記工程２に記述されるように調製〕の攪拌される溶液に、ピリジニウムジクロメート（４．０ｇ、１０．６３mmol）を添加し、該反応混合物を室温にて４時間攪拌した。追加量のピリジニウムジクロメート（０．５ｇ、１．３２mmol）を添加し、攪拌を更に３０分間継続した。ジエチルエーテル（２５ml）を添加し、該反応混合物をセライトパッドを通して濾過し、次いでセライトパッドをジエチルエーテルにより洗浄した。合わせた濾液及び洗浄液を１N重炭酸ナトリウム（１００ml）、続いて食塩水／水１：１混合物により洗浄した。水性洗浄液を酢酸エチルにより逆抽出し、合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムにより乾燥させ、蒸発させて０．６４ｇの部分的結晶性物質を与えた。ヘキサン中の２５％酢酸エチルを溶出液として用いるシリカゲルカラム上でのフラッシュクロマトグラフィーによる精製は、〔１Ｒ−（１α，３ａβ，７ａα）〕オクタヒドロ−７ａ−メチル−１−〔１−〔５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−２−ペンチニル）シクロプロピル〕−４Ｈ−インデン−４−オン（０．５６ｇ、８６％）を無色結晶として与えた。６５mgの生成物の、ヘキサン中の５０％エーテルからの結晶化は、〔１Ｒ−（１α，３ａβ，７ａα）〕オクタヒドロ−７ａ−メチル−１−〔１−〔５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−２−ペンチニル）シクロプロピル〕−４Ｈ−インデン−４−オン（５１mg）を無色針状晶として与えた：融点  １４５〜１４６℃；[α]26D＝−８．５２°（ＥｔＯＨ，ｃ＝０．７０４）；ＩＲ（ＣＨＣｌ3）  ３５８８，２２６８，２２４２及び１７０７cm-1；1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3） δ 0.30 (1 H, m), 0.38 (1 H, m), 0.45 (1 H, m), 0.68 (3 H, s), 1.13 (1 H, q, J = 14 Hz), 1.55 (2 H, m), 1.73 (2 H, m), 1.95 (1 H, m), 2.11-2.31 (4 H, m), 2.13 (1 H, d, J = 17 Hz), 2.50 (1 H, m), 2.75 (1 H, d, J = 17 Hz), 3.88 (1 H, s, OH); ＭＳ  ｍ／ｚ  ３９６．Ｃ19Ｈ22Ｆ6Ｏ2の分析計算値：Ｃ, 57.47；Ｈ, 5.59；Ｆ, 28.76．実測値：Ｃ, 57.60，Ｈ, 5.65；Ｆ, 28.66．
【００９３】
実施例５
１，２５−ジヒドロキシ−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−２０，２１，２８−シクロプロピル−コレカルシフェロール
【００９４】
【化１４】
0004219553.tif 000012
【００９５】
工程１
ｎ−ブチルリチウム（０．５２ml、０．８１mmol、ヘキサン中の１．６M溶液）を、無水テトラヒドロフラン（５．０ml）中の〔３Ｓ−（１Ｚ，３α，５β）〕−〔２−〔３，５−ビス〔〔（１，１−ジメチルエチル）ジメチルシリル〕オキシ〕−２−メチレン−シクロヘキシリデン〕エチル〕ジフェニルホスフィンオキシド（０．４７５ｇ、０．８１mmol）の溶液に、−７８℃にて添加した。得られた深紅の溶液を−７８℃にて８分間攪拌し、次いで無水テトラヒドロフラン（４．０ml）中の〔１Ｒ−（１α，３ａβ，７ａα）〕オクタヒドロ−７ａ−メチル−１−〔１−〔５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−２−ペンチニル）シクロプロピル〕−４Ｈ−インデン−４−オン（０．１６ｇ、０．４mmol）〔実施例４に記述したように調製〕の溶液により処理した。３時間後、該反応混合物を１０℃まで昇温させ、次いで１Nロッシェル塩溶液及び１N重炭酸カリウム溶液の１：１混合物（１０ml）により反応停止させた。１０分間後、反応混合物を酢酸エチル（１００ml）及びロッシェル塩溶液及び１N重炭酸カリウム溶液の１：１混合物（５０ml）に注入した。有機相を集め、水性相を酢酸エチルにて再抽出した。合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムにて乾燥させ、蒸発させて０．５５ｇのゴム状物を与えた。ヘキサン中の２０％酢酸エチルを溶出液として用いるシリカゲルカラム上でのフラッシュクロマトグラフィーによる精製は、０．１５ｇのトリシリル中間体を無色ゴム状物として与え、これを次の工程に更に精製することなく使用した。
【００９６】
工程２
テトラブチルアンモニウムフルオライド（２．５ml、２．５mmol、テトラヒドロフラン中の１M溶液）を、無水テトラヒドロフラン（３．０ml）中のトリシリル中間体（０．１４５ｇ、０．１９mmol）の溶液に添加し、該反応混合物を室温にてアルゴン雰囲気下で攪拌した。１９時間後、反応混合物を水（１０ml）にて希釈し、更に１０分間攪拌し、次いで酢酸エチル（７５ml）及び食塩水／水の１：１混合物（５０ml）に注入した。有機相を集め、水性相を酢酸エチルにて再抽出した。合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムにて乾燥させ、蒸発させて０．１６ｇの残渣を与えた。酢酸エチルを溶出液として用いるシリカゲルカラム上でのフラッシュクロマトグラフィーは、固体を与え、これをメチルホルメート（２．０ml）に溶解し、０．４５μmフィルターを通して濾過した。濾液を４０℃にて蒸発させ、残渣を室温にて高真空下に６時間維持して、１，２５−ジヒドロキシ−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−２０，２１，２８−シクロプロピル−コレカルシフェロール（９３mg）を無色泡状物として与えた：[α]D25＝−１．１２（ＥｔＯＨ，ｃ＝０．５０）；λmax（ＭｅＯＨ）  ２６４（ε＝１６７６２），２４７（ｓｈ，ε＝１４７４６），２１３（ε＝１３７２７）； 1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3) δ 0.28 (1 H, m), 0.35 (1 H, m), 0.41 (1 H, m), 0.59 (3 H, s), 0.64 (1 H, m), 1.09 (1 H, m), 1.40-1.60 (7 H, m), 1.65-1.78 (2 H, m), 1.90-2.05 (5 H, m), 2.18 (2 H, d, J = 17 Hz), 2.31 (1 H, dd, J = 14, 7 Hz), 2.63 (1 H, d, J = 14 Hz), 2.73 (1 H, d, J = 17 Hz), 2.85 (1 H, m), 3.45 (1 H, s, OH), 4.23 (1 H, br s), 4.43 (1 H, br s), 5.00 (1 H, s), 5.32 (1 H, s), 6.00 (1 H, d, J = 11 Hz), 6.37 (1 H, d, J = 11 Hz); ＭＳ（ＦＡＢ）  ｍ／ｚ  ５３２（Ｍ+  ５０）．
【００９７】
実施例６
１，２５−ジヒドロキシ−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−２０，２１，２８−シクロプロピル−１９−ノル−コレカルシフェロール
【００９８】
【化１５】
0004219553.tif 000013
【００９９】
工程１
ｎ−ブチルリチウム（０．５ml、０．８０mmol、ヘキサン中の１．６M溶液）を、無水テトラヒドロフラン（５．０ml）中の〔３Ｒ−（３α，５β，Ｚ）−３，５−ビス〔〔１，１−（ジメチルエチル）ジメチルシリル〕オキシ〕シクロヘキシリデン〕エチル〕ジフェニルホスフィンオキシド（０．４５ｇ、０．７９mmol）の溶液に、−７８℃にて添加した。得られた深紅の溶液を−７８℃にてアルゴン下で８分間攪拌し、次いで無水テトラヒドロフラン（３．０ml）中の〔１Ｒ−（１α，３ａβ，７ａα）〕オクタヒドロ−７ａ−メチル−１−〔５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−２−ペンチニル）シクロプロピル〕−４Ｈ−インデン−４−オン（０．１６ｇ、０．４０mmol）〔実施例４に記述したように調製〕の溶液により処理した。該反応混合物を−７８℃にて３時間攪拌し、次いで１０℃まで昇温させ、１Nロッシェル塩溶液及び１N重炭酸カリウム溶液の１：１混合物（１０ml）により反応停止させた。１０分間後、該反応混合物を酢酸エチル（１００ml）及びロッシェル塩溶液及び１N重炭酸カリウム溶液の１：１混合物（５０ml）に注入した。有機相を集め、水性相を酢酸エチルにて再抽出した。合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムにて乾燥させ、蒸発させて０．５４ｇの残渣を与えた。ヘキサン中の２０％酢酸エチルを溶出液として用いるシリカゲルカラム上でのフラッシュクロマトグラフィーによる精製は、０．１５ｇのトリシリル中間体を無色ゴム状物として与え、これを次の工程に更に精製することなく使用した。
【０１００】
工程２
テトラブチルアンモニウムフルオライド（２．５ml、２．５mmol、テトラヒドロフラン中の１M溶液）を、無水テトラヒドロフラン（３．０ml）中の上記トリシリル中間体（０．１５ｇ、０．２０mmol）の溶液に添加した。該反応混合物を室温にてアルゴン雰囲気下で４０時間攪拌し、次いで、水（１０ml）にて希釈し、酢酸エチル（７５ml）及び食塩水／水の１：１混合物（５０ml）に注入した。有機相を集め、水性相を酢酸エチルにて再抽出した。合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムにて乾燥させ、蒸発させて０．１０ｇの粗生成物を与えた。酢酸エチルを溶出液として用いるシリカゲルカラム上でのフラッシュクロマトグラフィーは、残渣を与え、これをメチルホルメート（５．０ml）に溶解し、０．４５μmフィルターを通して濾過した。濾液を４０℃にて蒸発させ、室温にて高真空下（０．２トール）にて６時間乾燥させて、１，２５−ジヒドロキシ−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−２０，２１，２８−シクロプロピル−１９−ノル−コレカルシフェロール（９５mg）を無色泡状物として与えた：[α]D23＝＋３６．２０°（ＥｔＯＨ，ｃ＝０．３２）；λmax（ＭｅＯＨ）  ２４３（ε＝３１３２２），２５１（ε＝３７３１６），２６０（ε＝２５４３０）nm；ＩＲ（ＣＨＣｌ3）  ３６０３，２２４２cm-1； 1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3) δ 0.28 (1 H, m), 0.35 (1 H, m), 0.42 (1 H, m), 0.60 (3 H, s), 0.65 (1 H, m), 1.10 (1 H, m), 1.40-1.72 (9 H, m), 1.80 (1 H, m), 1.97 (4 H, m), 2.19 (1 H, d, J = 17 Hz), 2.49 (1 H, m), 2.72 (1 H, d, J = 17 Hz), 2.75 (2 H, m), 3.40 (1 H, br s, OH), 4.05 (1 H, br, s), 4.12 (1 H, br s), 5.82 (1 H, d, J = 11 Hz), 6.30 (1 H, d, J = 11 Hz); ＭＳ（ＦＡＢ）  ｍ／ｚ  ５２０（Ｍ+  ８０）．
【０１０１】
実施例７
〔（１Ｒ−（１α（Ｚ），３ａβ，７ａα）〕オクタヒドロ−７ａ−メチル−１−〔１−〔５，５，５−トリフルオロ−４−（トリフルオロメチル）−４−〔（トリメチルシリル）オキシ〕−２−ペンテニル〕シクロプロピル〕−４Ｈ−インデン−４−オン
【０１０２】
【化１６】
0004219553.tif 000014
【０１０３】
工程１
酢酸エチル（１２ml）、ヘキサン（３０．０ml）、無水エタノール（１．２ml）及びキノリン（６０ml）中の〔１Ｒ−（１α，３ａβ，４α，７ａα）〕オクタヒドロ−７ａ−メチル−１−〔１−〔５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−２−ペンチニル〕シクロプロピル〕−４Ｈ−インデン−４−オール（１．１９５ｇ）の溶液を、リンドラー（Lindlar）触媒（２４０mg）により大気圧下、室温にて水素添加した。２．０時間後、反応混合物をセライトのパッドを通して濾過した。セライトパッドを酢酸エチルにて洗浄し、合わせた濾液を１．０N塩酸（５０ml）、食塩水にて洗浄し、硫酸マグネシウムにて乾燥させ、蒸発させて１．１６ｇの無色ゴム状残渣を与えた。該残渣をヘキサン中の４０％酢酸エチルを溶出液に用いるシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、１．０９ｇの無色ゴム状物を与え、これをヘキサンにて破砕して〔（１Ｒ−（１α（Ｚ），３ａβ，４α，７ａα）〕オクタヒドロ−７ａ−メチル−１−〔１−〔５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−２−ペンテニル〕シクロプロピル〕−４Ｈ−インデン−４−オール（８４mg）を与えた：融点  ９９〜１００℃；[α]D25＝＋２４．４９°（ＭｅＯＨ，ｃ＝１．０３）；ＩＲ（ＣＨＣｌ3）  ３６１９，３５６９，１６５９cm-1； 1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3) δ 0.09 (1 H, m), 0.23 (1 H, m), 0.34 (1 H, m), 0.67 (1 H, m), 1.00 (3 H, s), 1.11 (1 H, m), 1.19-1.30 (2 H, m), 1.37-1.56 (6 H, m), 1.76 - 1.88 (3 H, m), 2.03 (1 H, d, J = 16 Hz), 2.17 (1 H, ddd, J = 16,7,6 Hz), 2.95 (1 H, ddd, J = 16,7,6), 3.13 (1 H, s, OH), 4.06 (1 H, s), 5.40 (1H, d, J = 12 Hz), 6.10 (1H, ddd, J = 12, 7, 6 Hz); ＭＳ  ｍ／ｚ  ４００（Ｍ+，１０）．Ｃ19Ｈ26Ｆ6Ｏ2の分析計算値：Ｃ, 56.99；Ｈ, 6.55；Ｆ, 28.47．実測値：Ｃ, 57.10；Ｈ, 6.57；Ｆ, 28.31．
【０１０４】
工程２
ピリジニウムジクロメート（３．３ｇ、８．７mmol）を、ジクロロメタン（２５ml）中の〔１Ｒ−（１α（Ｚ），３ａβ，４α，７ａα）〕オクタヒドロ−７ａ−メチル−１−〔１−〔５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−２−ペンテニル〕シクロプロピル〕−４Ｈ−インデン−４−オール（１．００ｇ、２．５mmol）の攪拌される溶液に添加し、得られた不均質混合物を室温にて攪拌した。５時間後、該反応混合物をジイソプロピルエーテル（３０ml）にて希釈し、更に１５分間攪拌し、次いでセライトパッドを通して濾過した。濾液を蒸発させて０．９８４ｇの淡黄色固体を得た。ヘキサン中の３０％酢酸エチルを溶出液として用いるシリカゲルカラム上でのフラッシュクロマトグラフィーによる精製は、０．８４ｇの無色固体を与えた。固体をジクロロメタン（４ml）に溶解し、０．４５mmフィルター（Millex-HV）を通して濾過した。濾液をヘキサン（７．０ml）にて希釈し、次いで約６mlまで濃縮し、−２℃にて一夜静置した。固体を濾別して〔１Ｒ−（１α（Ｚ），３ａβ，７ａα）〕オクタヒドロ−７ａ−メチル−１−〔１−〔５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−２−ペンテニル〕シクロプロピル〕−４Ｈ−インデン−４−オン（０．８ｇ）を無色結晶として与えた：融点  １２４〜１２５℃；[α]D25  −２．６°（ＥｔＯＨ，ｃ＝１．００）；ＩＲ（ＣＨＣｌ3）３５６８，１７０６cm-1； 1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3) δ 0.15 (1 H, m), 0.36 (2 H, m), 0.60 (1 H, m), 0.65 (3 H, s), 1.15 (1 H, m), 1.50 - 1.80 (4 H, m), 1.85-2.3 (4 H, m), 2.45 (1 H, dd, J = 7.6, 6.8 Hz), 2.91 (1 H, ddd, J = 16,7.6, 5.9 Hz), 2.98 (1 H, s, OH), 5.42 (1 H, d, J = 12 Hz), 6.10 (1 H, ddd, J = 12, 7.6, 6.8 Hz). ＭＳ  ｍ／ｚ  ３９８（Ｍ+，２２）．Ｃ19Ｈ24Ｆ6Ｏ2の分析計算値：Ｃ, 57.28；Ｈ, 6.07；Ｆ, 28.61．実測値：Ｃ, 57.39；Ｈ, 6.01；Ｆ, 28.75．
【０１０５】
工程３
ジクロロメタン（２０ml）中の〔１Ｒ−（１α（Ｚ），３ａβ，７ａα）〕オクタヒドロ−７ａ−メチル−１−〔１−〔５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−２−ペンテニル〕シクロプロピル〕−４Ｈ−インデン−４−オン（０．７５ｇ、１．８８mmol）及び１−（トリメチルシリル）イミダゾール（２．６ml、１７．７５mmol）の溶液をアルゴン下で７時間攪拌し、次いで水（１０ml）にて希釈した。１５分間攪拌後、該反応混合物をジクロロメタン（６９ml）及び水（５０ml）に注入した。有機相を集め、水性相をジクロロメタンにより再抽出した。合わせた有機抽出物を水にて洗浄し、硫酸マグネシウムにより乾燥させ、蒸発させて０．８７ｇの部分的結晶性固体を与えた。ヘキサン中の２０％酢酸エチルを溶出液として用いるシリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィーによる精製は、０．８３ｇの無色結晶を与えた。結晶をエーテル（５ml）に溶解し、０．４５mmフィルター（Millex-HV）を通して濾過し、濾液をヘキサン（５ml）にて希釈した。エーテルを蒸発させ、溶液を−１℃にて一夜静置した。固体を濾別して〔１Ｒ−（１α（Ｚ），３ａβ，７ａα）〕オクタヒドロ−７ａ−メチル−１−〔１−〔５，５，５−トリフルオロ−４−（トリフルオロメチル）−４−〔（トリメチルシリル）オキシ〕−２−ペンテニル〕シクロプロピル〕−４Ｈ−インデン−４−オン（０．８０ｇ）を無色結晶として与えた：融点  ７０〜７１℃；[α]D25  ＋０．９°（ＭｅＯＨ，ｃ＝１．００）；ＩＲ（ＣＨＣｌ3）１７０６cm-1； 1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3) δ 0.11 (1 H, m); 0.22 (9 H, s), 0.32 (2 H, m), 0.65 (1 H, m), 0.69 (3 H, s), 1.12 (1 H, m), 1.50-1.73 (4 H, m), (1.90 -2.30 (7 H m), 2.47 (1 H, dd, J = 17, 7 Hz), 2.94 (1 H, ddd, J = 12, 7, 6 Hz), 5.41 (1H, d, J = 12 Hz), 6.05 (1 H, ddd, J = 12,7, 6 Hz). ＭＳ  ｍ／ｚ  ４７１（Ｍ+＋Ｈ，１００）．Ｃ22Ｈ32Ｆ6Ｏ2Ｓｉの分析計算値：Ｃ, 56.15；Ｈ, 6.85；Ｆ, 24.22；Ｓｉ, 5.97．実測値：Ｃ, 56.26；Ｈ, 6.72；Ｆ, 24.29；Ｓｉ, 5.80．
【０１０６】
実施例８
１，２５−ジヒドロキシ−２３−（Ｚ）−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−２０，２１，２８−シクロプロピル−コレカルシフェロール
【０１０７】
【化１７】
0004219553.tif 000015
【０１０８】
工程１
ｎ−ブチルリチウム（０．５ml、０．８mmol、ヘキサン中の１．６M溶液）を、無水テトラヒドロフラン（４ml）中の〔３Ｓ−（１Ｚ，３α，５β）〕−２−〔３，５−ビス〔〔１，１−ジメチルエチル）ジメチルシリル〕オキシ−２−メチレン−シクロヘキシリデン〕エチル〕ジフェニルホスフィンオキシド（０．４７ｇ、０．８mmol）の溶液に、−７８℃にて添加した。得られた深紅の溶液を−７８℃にて７分間攪拌し、次いで無水テトラヒドロフラン（３ml）中の〔１Ｒ−（１α（Ｚ），３ａβ，７ａα）〕オクタヒドロ−７ａ−メチル−１−〔１−〔５，５，５−トリフルオロ−４−（トリフルオロメチル）−４−〔（トリメチルシリル）オキシ〕−２−ペンテニル〕シクロプロピル〕−４Ｈ−インデン−４−オン（０．１９ｇ、０．４mmol）の溶液により処理した。２時間後、該反応混合物を−１０℃まで昇温させ、次いで２Nロッシェル塩溶液及び２N重炭酸カリウム溶液の１：１混合物（１０ml）により反応停止させた。２０分間後、該反応混合物を、酢酸エチル（６０ml）及び２Nロッシェル塩溶液と２N重炭酸カリウム溶液の１：１混合物（５０ml）に注入した。有機相を集め、水性相を酢酸エチルにて再抽出した。合わせた有機抽出物を５０％食塩水（１００ml）にて洗浄し、硫酸ナトリウムにて乾燥させ、蒸発させてゴム状物を与えた。ヘキサン中の２０％酢酸エチルを溶出液として用いるシリカゲルカラム上でのフラッシュクロマトグラフィーによる精製は、０．１１ｇのトリシリル中間体を無色ゴム状物として与え、これを次の工程に更に精製することなく使用した。
【０１０９】
工程２
テトラブチルアンモニウムフルオライド（３．０ml、３．０mmol、テトラヒドロフラン中の１．０M溶液）を、テトラヒドロフラン（３ml）中のトリシリル中間体（０．１１ｇ）の溶液に添加し、該反応混合物を室温にて攪拌した。１７時間後、反応混合物を水（５ml）にて希釈し、更に１５分間攪拌し、次いで酢酸エチル（７５ml）及び５０％食塩水（４０ml）の混合物に注入した。有機相を集め、水性相を酢酸エチルにて再抽出した。合わせた有機抽出物を水にて洗浄し、硫酸ナトリウムにて乾燥させ、蒸発させて８６mgのゴム状物を与えた。酢酸エチルを溶出液として用いるシリカゲルカラム上でのフラッシュクロマトグラフィーは、ゴム状物を与え、これを無水メチルホルメート（７ml）に溶解し、０．４μmフィルターを通して濾過し、蒸発させて、１，２５−ジヒドロキシ−２３（Ｚ）−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−２０，２１，２８−シクロプロピル−コレカルシフェロール（６９mg）を無色泡状物として与えた：[α]D25＝−４．０°（ＭｅＯＨ，ｃ＝０．３５）；λmax（ＭｅＯＨ）  ２６５（ε  １５８３７），２１１（ε＝１４４５８）nm；ＩＲ（ＣＨＣｌ3）  ３５９８，１６５１cm-1； 1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3) δ 0.11 (1 H, m), 0.29 (2 H, m), 0.60 (3H, s), 0.61 (1 H, m), 1.10 (1 H, m), 1.21-1.35 (1H, m), 1.50 (6 H m), 1.70 (2 H, m), 1.90 (2 H, m), 2.00 (3 H, m), 2.30 (2 H, m), 2.60 (1 H, d, J = 12 Hz), 2.85 (2 H, m), 2.90 (1 H, s, OH), 4.22 (1 H, s), 4.42 (1 H, s), 4.99 (1 H, s), 5.32 (1 H, s), 5.42 (1 H, d, J = 12 Hz), 5.99 (1 H, d = 11 Hz), 6.10 (1 H, ddd, J = 12,7,6), 6.36 (1 H, d, J = 11 Hz); ＭＳ（ＦＡＢ）  ｍ／ｚ  ５３５（Ｍ+＋Ｈ）．
【０１１０】
実施例９
１，２５−ジヒドロキシ−２３−（Ｚ）−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−２０，２１，２８−シクロプロピル−１９−ノル−コレカルシフェロール
【０１１１】
【化１８】
0004219553.tif 000016
【０１１２】
工程１
ｎ−ブチルリチウム（０．３２ml、０．５mmol、ヘキサン中の１．６M溶液）を、無水テトラヒドロフラン（３ml）中の〔３Ｒ−（３α，５β，Ｚ）〕−３，５−ビス〔〔１，１−ジメチルエチル）ジメチルシリル〕オキシ〕シクロヘキシリデン〕エチル〕ジフェニルホスフィンオキシド（０．２８５ｇ、０．５mmol）の溶液に、−７８℃にて添加した。得られた深紅の溶液を−７８℃にて６分間攪拌し、次いで無水テトラヒドロフラン（２ml）中の〔１Ｒ−（１α（Ｚ），３ａβ，７ａα）〕オクタヒドロ−７ａ−メチル−１−〔１−〔５，５，５−トリフルオロ−４−（トリフルオロメチル）−４−〔（トリメチルシリル）オキシ〕−２−ペンテニル〕シクロプロピル〕−４Ｈ−インデン−４−オン（０．１２ｇ、０．２５mmol）の溶液により処理した。３．０時間後、該反応混合物を１５℃まで昇温させ、２Nロッシェル塩溶液及び２N重炭酸カリウム溶液の１：１混合物（５ml）により反応停止させた。２０分間後、該反応混合物を、酢酸エチル（１５ml）にて希釈し、酢酸エチル（５０ml）及び２Nロッシェル塩溶液と２N重炭酸カリウム溶液の１：１混合物（５０ml）の混合物中に注入した。有機相を集め、水性相を酢酸エチルにて再抽出した。合わせた有機抽出物を５０％食塩水（１００ml）にて洗浄し、硫酸ナトリウムにて乾燥させ、蒸発させて０．５８ｇのゴム状物を与えた。ヘキサン中の２０％酢酸エチルを溶出液として用いるシリカゲルカラム上でのフラッシュクロマトグラフィーによる精製は、０．１８ｇのトリシリル中間体を無色ゴム状物として与え、これを次の工程に更に精製することなく使用した。
【０１１３】
工程２
テトラブチルアンモニウムフルオライド（３．０ml、３．０mmol、テトラヒドロフラン中の１．０M溶液）を、テトラヒドロフラン（３ml）中のトリシリル中間体（０．１１ｇ）の溶液に添加し、該反応混合物を室温にて攪拌した。４２時間後、反応混合物を水（５ml）にて希釈し、更に１５分間攪拌し、次いで酢酸エチル（５０ml）及び５０％食塩水（４０ml）の混合物に注入した。有機相を集め、水性相を酢酸エチルにて再抽出した。合わせた有機抽出物を水にて洗浄し、硫酸ナトリウムにて乾燥させ、蒸発させて０．１２ｇのゴム状物を与えた。酢酸エチルを溶出液として用いるシリカゲルカラム上でのフラッシュクロマトグラフィーは、ゴム状物を与え、これを無水メチルホルメート（８ml）に溶解し、０．４μmフィルターを通して濾過し、蒸発させて、１，２５−ジヒドロキシ−２３（Ｚ）−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−２０，２１，２８−シクロプロピル−１９−ノル−コレカルシフェロール（９８mg）を無色泡状物として与えた：[α]D25  ＋４７．４°［ＭｅＯＨ，ｃ＝０．３５）；λmax（ＭｅＯＨ）  ２６０（ε＝２８２００），２５１（ε＝４１７６０），２４３（ε＝３４７４７），２３５（ｓｈ，ε＝２３５９４）nm；ＩＲ（ＣＨＣｌ3）  ３６０３cm-1； 1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3) δ 0.12 (1 H, m), 0.32 (2 H, m), 0.60 (3 H, s), 0.62 (1 H, m), 1.14 (1 H, m), 1.35 (1H, m), 1.41 (2 H m), 1.52 (4 H, m), 1.70 (2 H, m), 1.82 (1 H, m), 1.88 - 2.00 (2 H, m), 2.04 (2 H, m), 2.23 (3 H, m), 2.47 (1 H, d, J = 12 Hz), 2.82 (3 H, m), 2.96 (1 H, s, OH), 4.04 (1 H, s), 4.12 (1 H, s), 5.42 (1 H, d, J = 12 Hz), 5.82 (1 H, d = 11 Hz), 6.12 (1 H, ddd, J = 12,7,6), 6.30 (1 H, d, J = 11 Hz); ＭＳ（ＥＩ）  ｍ／ｚ  ５２２（Ｍ+，６０）．
【０１１４】
実施例１０
１，２５−ジヒドロキシ−２０，２１，２８−シクロプロピル−コレカルシフェロール
【０１１５】
工程１
〔１Ｒ−（１α，３ａβ，４α，７ａα）〕−オクタヒドロ−１−〔１−（４−ヒドロキシ−４−メチルペンチル）シクロプロピル〕−７ａ−メチル−４Ｈ−インデン−４−オール
【０１１６】
４．０mLの酢酸エチル、１０mLのヘキサン、０．５mLのエタノール、及び２０μＬのキノリン中の２５０mg（０．８６mmol）の〔１Ｒ−（１α，３ａβ，４α，７ａα）〕−オクタヒドロ−１−〔１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−２−ペンチニル）−シクロプロピル〕−７ａ−メチル−４Ｈ−インデン−４−オールの溶液を、７５mgのリンドラー触媒（５％Ｐｄ＋ＣａＣＯ3上の３．５％Ｐｄ）により室温及び大気圧にて２．５時間水素添加した。該混合物を５０mLの酢酸エチルにより希釈し、セライトパッドにより濾過し、これを３×２０mLの酢酸エチルにより洗浄した。合わせた濾液及び洗浄液を５０mLの０．１N ＨＣｌ、次いで５０mLの水にて洗浄し、乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、蒸発させて２４４mgの無色ゴム状物を与えた。５０％酢酸エチルを用いる５０ｇのシリカゲル（４０−６５μm；直径３．５cmカラム）でのフラッシュクロマトグラフィーは、１２mLの分画を取って分画１０−１８の蒸発後に、２３０mgの無色ゴム状物を与えた。1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）は、標記化合物と２３，２４（Ｚ）−エン生成物の混合物であることを示した。該混合物を、２５mLのＣＨ2Ｃｌ2に溶解し、４０mgの〔１，４−ビス（ジフェニルホスフィノ）ブタン〕（１，５−シクロオクタジエン）ロジウム（１）テトラフルオロボレートを触媒として用い、１滴の水銀の存在下でパール（Parr）水素添加装置内にて、室温、及び５０psiで３時間水素添加した。３０mLのＣＨ2Ｃｌ2にて希釈後、該混合物をセライトパッドにて濾過し、これを３×４０mLの酢酸エチルにより洗浄した。濾液及び洗浄液を蒸発させ、オレンジ色ゴム状物を与え、これをヘキサン中の５０％酢酸エチルを溶出液として用いる４５ｇのシリカゲル（４０−６５μm；直径３．５cmカラム）でのフラッシュクロマトグラフィーにより、１２mLの分画を取って精製した。分画１３−１７を合わせ、蒸発させて部分的結晶性固体を与え、これをヘキサンにて破砕して２０４mgの標記化合物を無色結晶として与えた：融点  １２６〜１２８℃；[α]D25＝＋４２．６°（ＭｅＯＨ，ｃ＝０．３）；ＩＲ  ３６１１cm-1； 1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3) δ -0.06 (1 H, m) 0.18 (2 H, m), 0.54 (1 H, m), 0.59 (1 H, m), 0.98 (3 H, m), 1.21 (6 H, s), 1.2-1.6 (15 H, m), 1.75-2.10 (5 H, m), 4.06 (1 H, s); ＭＳ（＋ＦＡＢ）  ｍ／ｚ（２９５，Ｍ＋＋１，１０）．Ｃ19Ｈ34Ｏ2の分析計算値：Ｃ, 77.50；Ｈ, 11.64．実測値  Ｃ：77.40；Ｈ, 11.89．
【０１１７】
工程２
〔１Ｒ−（１α，３ａβ，７ａα）〕−オクタヒドロ−７ａ−メチル−１−〔１−〔５−メチル−５−〔（トリメチルシリル）オキシ〕ペンチル〕シクロプロピル〕−４Ｈ−インデン−４−オン
【０１１８】
８．０mLのＣＨ2Ｃｌ2中の１９０mg（０．６４mmol）の〔１Ｒ−（１α，３ａβ，４α，７ａα）〕−オクタヒドロ−１−〔１−（４−ヒドロキシ−４−メチルペンチル）シクロプロピル〕−７ａ−メチル−４Ｈ−インデン−４−オールの攪拌される溶液に、２．０ｇ（５．３mmol）のピリジニウムジクロメートを添加し、該混合物を室温にて５．０時間攪拌した。それを２０mLのジイソプロピルエーテルにより希釈し、１５分間攪拌し、セライトパッドにて濾過し、これを４×２５mLのジイソプロピルエーテルにより洗浄した。濾液及び洗浄液の蒸発は、１８４mgの淡黄色ゴム状物を与え、これをヘキサン中の４５％酢酸エチルを溶出液として用いる４５ｇのシリカゲル（４０〜６５μm；直径３．５cmカラム）でのフラッシュクロマトグラフィーにより、１２mLの分画を取って精製した。分画１９−２５を合わせ、蒸発させて１５８mgの無色ゴム状物を与えた。後者をＣＨ2Ｃｌ2に溶解し、１．０mL（６．８mmol）の１−トリメチルシリルイミダゾールにより処理し、該混合物を室温にて２．０時間攪拌した。それを１５mLの水及び１５mLのＣＨ2Ｃｌ2にて希釈し、更に１５分間攪拌し、４０mLのＣＨ2Ｃｌ2及び２０mLの１０％食塩水の混合物中に注入した。有機相を分離し、水性相を３×５０mLのＣＨ2Ｃｌ2にて再抽出した。合わせた有機抽出物を３×６０mLの１０％食塩水にて洗浄し、乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、蒸発させて１８０mgの無色ゴム状物を与え、これをヘキサン中の１５％酢酸エチルを溶出液として用いる４５ｇのシリカゲル（４０〜６５μm；直径３．５cmカラム）でのフラッシュクロマトグラフィーにより、１２mLの分画を取って精製した。分画１０−１４を合わせ、蒸発させて１３７mgの無色ゴム状物を与え、これをヘキサン中の７．５％酢酸エチルを溶出液として用いるシリカゲル（１５＝３０μm；５０mm×５０cmカラム；７０mL／分）でのＨＰＬＣにより更に精製した。１８．５分に溶出する物質を集め、蒸発させて１１４mgの標記化合物をゴム状物として与え、これは０℃にて一夜維持することにより固化した：[α]D25  ＋７．８°（ＣＨＣｌ3，ｃ＝０．４１）；ＩＲ１７０７cm-1； 1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3) δ 0.00 (1 H, m), 0.11 (9 H, s), 0.20 (2 H, m), 0.63 (2 H, m), 0.68 (3 H, s), 1.01 (1 H m), 1.21 (6 H, s), 1.30-1.72 (7 H, m), 1.90-2.10 (3 H, m), 2.15-2.3 (5 H, m), 2.5 (1 H, m); ＭＳ（＋ＦＡＢ）  ｍ／ｚ  ３４９．２５２（Ｍ+−１５，４８）．
【０１１９】
工程３
１，２５−ジヒドロキシ−２０，２１，２８−シクロプロピル−コレカルシフェロール
【０１２０】
４．０mL中の無水ＴＨＦ中の３３５mg（０．５７mmol）の〔３Ｓ−（１Ｚ，３α，５β）〕−〔２−〔３，５−ビス〔（１，１−ジメチルエチル）ジメチルシリル〕オキシ−２−メチレンシクロヘキシリデン〕エチル〕ジフェニルホスフィンオキシドの冷却され（−７８℃）攪拌される溶液に、ヘキサン中のｎ−ブチルリチウムの１．６M溶液、０．３５mL（０．５６mmol）を添加し、得られた深紅の溶液を−７８℃にて７分間攪拌した。１．５mLの無水ＴＨＦ中の、１０５mg（０．２８mmol）の〔１Ｒ−（１α，３ａβ，７ａα）〕オクタヒドロ−７ａ−メチル−１−〔１−〔５−メチル−５−〔（トリメチルシリル）オキシ〕ペンチル〕シクロプロピル〕−４Ｈ−インデン−４−オンの溶液を添加し、該混合物を−７８℃にて３時間、次いで室温にて１５分間攪拌した。該混合物に、１．０Mロッシェル塩溶液と１．０N ＫＨＣＯ3溶液の１：１混合物を５mL添加した。１５分間後、該混合物を、５０mLの酢酸エチル及び４０mLの１．０Mロッシェル塩溶液と１．０N ＫＨＣＯ3溶液の１：１混合物に注入した。有機相を分離し、水性相を３×５０mLの酢酸エチルにて再抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、蒸発させて４４０mgのゴム状物を与え、これをヘキサン中の５％酢酸エチルを溶出液として用いる４０ｇのシリカゲル（４０〜６５μm；直径３．５cmカラム）でのフラッシュクロマトグラフィーにかけ、１２mLの分画を取った。分画５−８を合わせ、蒸発させて１３１mgの無色ゴム状物を与えた。後者を３．０mLのＴＨＦに溶解し、ＴＨＦ中のテトラ−ｎ−ブチルアンモニウムフルオライドの１．０M溶液、１．５mL（１．５mmol）により処理し、室温にて１７時間攪拌した。該混合物を１０mLの水にて希釈し、１５分間攪拌し、６０mLの酢酸エチル及び４０mLの１０％食塩水の混合物に注入した。有機相を分離し、水性相を３×６０mLの酢酸エチルにて再抽出した。合わせた有機抽出物を４×１００mLの水にて洗浄し、乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、蒸発させて７８mgの無色ゴム状物を与え、これを酢酸エチルを溶出液として用いる４０ｇのシリカゲル（４０〜６５μm；直径３．２cmカラム）でのフラッシュクロマトグラフィーにより、１０mLの分画を取って精製した。分画１０−１２を合わせ、蒸発させてゴム状物を与え、これを１０mLの無水メチルホルメートに溶解した。溶液を０．４μmフィルターを通して濾過し、濾液を蒸発させて６４mgの標記化合物を無色ゴム状物として与えた：[α]D25  ＋１８．３°（ＭｅＯＨ，ｃ＝０．１８）；ＩＲ（ＣＨＣｌ3）  ３６０８cm-1； 1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3) δ 0.00 (2 H, m), 0.20 (2 H, m), 0.59 (3 H, s), 0.63 (2 H, m), 0.90 (2 H, m), 1.22 (6 H, s), 1.30-1.70 (20 H, m), 1.90-2.12 (5 H, m), 2.60 (1 H, d), 2.81 (1 H, d), 4.22 (1 H, br s), 4.43 (1 H, br s), 4.99 (1 H, s), 5.32 (1 H, s), 5.99 (1 H, d, J = 11 Hz) 6.37 (1 H, d, J = 11 Hz); ＭＳ（ＥＩ）  Ｃ28Ｈ44Ｏ3の計算値：ｍ／ｚ  ４２８．３２９０．実測値  ｍ／ｚ  ４２８．３２９７．
【０１２１】
実施例１１
ラットにおける骨同化作用
本発明の化合物は、骨増加（骨付着）において１，２５−ジヒドロキシ−ビタミンＤ3より有効であり、高カルシウム尿症、腎細胞毒性又は高カルシウム血症を治療的有効量においては誘発しない。このことは以下のように例示される：
３月齢のラットを、卵巣摘出（Ovx）し、１，２５−ジヒドロキシ−ビタミンＤ3（表中のｖｉｔＤ）又は本発明の化合物の一つのいずれかを、卵巣摘出後３週間から開始し、卵巣摘出後６週にて最終的に犠牲にするまで継続して投与した。擬似（卵巣摘出されないラット）及びOvxの両者の対照群は、ベヒクルのみを投与された。血液及び尿試料を、卵巣摘出後４週、及び６週水準に再度採取し、血清及び尿カルシウム量を決定した。最終大腿カルシウムを、卵巣摘出後６週の犠牲時に測定した。
【０１２２】
右大腿の骨無機質密度を、QDR-1000W骨密度計（QDR-1000W Bone DensitometerTM）（Hologic, Walthan, MA）にて高分解能ソフトウエアパッケージを使用して測定した。動物を、右脚部が胴体に直角となり、頸骨が大腿に直角となるように背臥位において走査ブロック上に置き、走査した。
【０１２３】
このアッセイにおける本発明の化合物のいくつかについての骨無機質密度の増加、並びに尿及び血清中カルシウム量を下記表に示す：
【０１２４】
【表２】
0004219553.tif 000017
【０１２５】
実施例１２
ＭＣＦ−７乳癌細胞における細胞増殖アッセイ
ＭＣＦ−７細胞は、エストロゲン受容体について陽性のヒト乳房腫瘍細胞である。乳癌に対するビタミンＤ3類似体の潜在的活性を、培養物中のＭＤＦ−７細胞の増殖阻害から評価した。
【０１２６】
ＭＣＦ−７細胞を２４ウエルプレートに９０００細胞／ウエルを以て蒔き、３７℃において５％ＣＯ2／９５％空気中で、１０％ウシ胎児血清、７００nMインシュリン、２mMグルタミン、０．１mM ＭＥＭ非必須アミノ酸及び１mMピルビン酸ナトリウムを含むダルベッコ修飾イーグル培地中で培養した。ビタミンＤ3類似体の保存溶液を、無水エタノール中に１０mMの濃度で調製し、アルゴン下で−２０℃にて保存した。播種後４日目に、８個のウエルの培地を除去し、細胞をＣａ／Ｍｇを含まない０．５mlＰＢＳにてすすぎ、次いで細胞を０．３mlのトリプシン−ＥＤＴＡにて培養することにより、ＭＣＦ−７の個数を計数した。１５分後に、トリプシン分解を０．３mlの培地添加により停止させた。０．２mlの分別量を各ウエルから、１０mlのアイソトン（isoton）を含む希釈バイアルに移し、細胞数をクールターカウンタ（Coulter CounterTM、Coulter, Miami, FI）にて計数した。
【０１２７】
残るウエル中のＭＣＦ−７細胞に、対照培地又はビタミンＤ3類似体を種々の濃度で含む培地のいずれかを再度与えた。更に７日間の培養後、各ウエルのＭＣＦ−７の個数を、培地を除去し、細胞をＣａ／Ｍｇを含まない０．５mlＰＢＳにてすすぎ、次いで細胞を０．５mlのトリプシン−ＥＤＴＡにて１５分間培養することにより評価した。トリプシン分解を０．５mlの培地添加により停止させ、各ウエルからの０．１mlの分別量を、１０mlのアイソトンを含む希釈バイアルに移し、細胞数をクールターカウンタTMにて計数した。
【０１２８】
本発明のいくつかの化合物及び比較対照としての１，２５−ジヒドロキシ−コレカルシフェロールの抗細胞増殖活性（培養物中のＭＣＦ−７細胞成長を５０％低減させる濃度であるＩＣ50として表される）は次のとおり：
【０１２９】
【表３】
0004219553.tif 000018
【０１３０】
上記試験結果は、本発明の化合物が、培養物中のＭＣＦ−７乳癌細胞の成長阻害において、１，２５−ジヒドロキシ−コレカルシフェロールより能力を有することを示している。
【０１３１】
実施例１３
ＺＲ−７５乳癌細胞における細胞増殖アッセイ
ＺＲ−７５細胞は、エストロゲン受容体について陽性のヒト乳房腫瘍細胞である。乳癌に対するビタミンＤ3類似体の潜在的活性を、培養物中のＺＲ−７５細胞の増殖阻害から評価した。
【０１３２】
ＺＲ−７５細胞を２４ウエルプレートに１２，５００細胞／ウエルを以て蒔き、３７℃において５％ＣＯ2／９５％空気中で、１０％ウシ胎児血清及び２mM  Ｌ−グルタミンを含むＲＰＭＩ培地中で培養した。ビタミンＤ3類似体の保存溶液を、無水エタノール中に１０mMの濃度で調製し、アルゴン下で−２０℃にて保存した。播種後１日目に、ＺＲ−７５細胞に対照培地又はビタミンＤ3類似体を種々の濃度で含む培地のいずれかを再度与えた。更に１０日間の培養後、各ウエルのＺＲ−７５の個数を、F. Denizot及びR. Lang, J. Immunological Methods, Vol. 89: 271-277 (1986)に記述されるように染料ＭＴＴ（３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロマイド）の還元から評価した。ＭＴＴを各ウエルに最終濃度１mg/mlまで添加し、該細胞を３時間培養し、その後、還元されたＭＴＴを９５％エタノールを用いて抽出し、光学密度を５７０nmの波長にて測定した。
【０１３３】
各ビタミンＤ3類似体について、ＩＣ50値を使用される濃度に対する５７０nmの光学密度に関するグラフから決定した。
【０１３４】
本発明のいくつかの化合物及び比較対照としての１，２５−ジヒドロキシ−コレカルシフェロールの抗細胞増殖活性（５７０nm吸光度における最大低減の半値に対応するビタミンＤ3類似体濃度であるＩＣ50として表される）は次のとおり：
【０１３５】
【表４】
0004219553.tif 000019
【０１３６】
上記試験結果は、本発明の化合物が、培養物中のＺＲ−７５乳癌細胞の成長阻害において、１，２５−ジヒドロキシ−コレカルシフェロールより能力を有することを示している。
【０１３７】
実施例１４
ラット腎不全モデルにおける二次上皮小体亢進症へのビタミンＤ3類似体の効果
本発明のビタミンＤ3類似体の副甲状腺ホルモン抑制活性が、ラットにおいて腎不全の７／８腎摘出誘導マウスモデルを使用して、腎不全による続発正上皮小体亢進症により例示された（Kidney International, M. Fukugawaら, 39: 874-881 (1991)）。
【０１３８】
試験物質：
式（Ｉ）の化合物
１，２５（ＯＨ）2ビタミンＤ3（対照）
ベヒクル−ミグリオール（Miglyol）８１２
【０１３９】
雌スプラグドウリーラットを麻酔し、それらの右腎臓を除去し、左腎臓動脈の２〜３枝を結紮し、７／８腎摘出を達成した。それらを高亜リン酸食事療法（０．６％Ｃａ及び０．８亜リン酸）に付した。術後約３〜６週において、血清ＰＴＨ濃度をスクリーニングするためにラットから採血し、１００〜５００pg/mlの間のＰＴＨ濃度を持ったラットを研究のために選択した。
【０１４０】
あらかじめの採血（Ｔ＝０）があり、各群は式（Ｉ）の化合物（０．１μg/kg/日）、ベヒクル対照又は１，２５−（ＯＨ)2ビタミンＤ3正対照のいずれかを、経口洗浄により、７日間、毎日投与された。化合物はエタノール中にあらかじめ溶解され、ベヒクル（ミグリオール８１２）にて希釈され、次いでエタノールを蒸発させた。
【０１４１】
投与の最終日の後、動物は再度採血され（Ｔ＝１）、犠牲にされた。血清ＰＴＨアッセイは、ニコルス・インスティチュート・ダイアグノスティク・キット＃４０−２２４０を用いて行った。血清カルシウムアッセイは、ｏ−クレソフタレインを用いてシグマ・ダイアグノスティク・キット＃５８７により行った。血清クレアチニンアッセイは、モリブデン酸アンモニウムを用いてシグマ・ダイアグノスティク・キット＃１６００−３２０により行った。
【０１４２】
【表５】
0004219553.tif 000020
【０１４３】
結果は、式（Ｉ）の化合物が、副甲状腺ホルモンの上昇した濃度の抑制において、１，２５（ＯＨ）2ビタミンＤ3より有効であることを示している。
【０１４４】
実施例１５
経口投与形態軟ゼラチンカプセル
経口投与のためのカプセルは、軟ゼラチンカプセルに充填される１５０mgの分別ココナツ油中の０．０１〜２５．０mgの本発明の化合物の一つから、０．０１５mgのブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）及び０．０１５mgのブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）を伴って、窒素下にて暗室灯下で製剤化された。
【０１４５】
上記本発明は、明確化及び理解を目的として例示及び実施例により有る程度詳細に記述された。当業者には、変更及び修飾が、添付される請求項の範囲内において、実施され得ることは明らかであろう。したがって、先の記述は例示的であって限定的ではないことを意図するものと理解されるべきである。したがって、本発明の範囲は、上記記述を参照して決定されるべきものではなく、以下に添付される請求項を参照して、このような請求項に与えられる均等の全範囲と共に決定されるべきである。
【０１４６】
この出願において引用される特許、特許出願及び刊行物は、個々の特許、特許出願及び刊行物が全く別個に示された場合と同程度に、すべての目的についてそれらの全体を参考としてここに取り入れる。