(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
表面に非イオン性親水性基を有する繊維からなる白血球除去材において、表面の非イオン性親水性基が２−ヒドロキシエチルメタアクリレート及びメトキシジエチレングリコールメタアクリレートの共重合体であり、メトキシジエチレングリコール基のモル百分率が２０モル％以上８０モル％未満であることを特徴とする白血球選択除去材。
【請求項２】
表面の非イオン性親水性基が２−ヒドロキシエチルメタアクリレート及びメトキシジエチレングリコールメタアクリレートのランダム共重合体であって、メトキシジエチレングリコールメタクリレートのモル百分率が３０モル％以上８０モル％未満であり、且つ水不溶性であるランダム共重合体であることを特徴とする請求項１記載の白血球選択除去材。
【請求項３】
表面の非イオン性親水性基が２−ヒドロキシエチルメタアクリレート及びメトキシジエチレングリコールメタアクリレートのブロック共重合体であって、メトキシジエチレングリコールメタクリレートのモル百分率が２０モル％以上５０モル％未満であり、且つ水不溶性であるブロック共重合体であることを特徴とする請求項１記載の白血球選択除去材。
【請求項４】
表面に上記ブロック共重合体を有し、その基材部分が疎水性高分子材料である繊維からなることを特徴とする請求項３記載の白血球選択除去材。
【請求項５】
繊維の平均直径が０．５μｍ以上５μｍ未満であることを特徴とする請求項１乃至４記載の白血球選択除去材。
【請求項６】
繊維が不織布であることを特徴とする請求項１乃至５記載の白血球選択除去材。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、白血球を選択的に除去し、赤血球、血小板を通過させる白血球選択除去材に関する。詳しくは、輸血や体外循環時に、血液中の白血球を選択的に除去したり、多血小板血漿を調製する際に混入する白血球を選択的に除去したりする目的に用いられる白血球除去材に関する。
【０００２】
【従来の技術】
近年、輪血分野において、白血球の混入による副作用が数多く知られている。この副作用予防のため、ポリエステル製の不織布やコットン綿などの材料を用いた白血球除去が行われている。また、血小板製剤を輸血する場合血小板の材料への粘着性を抑制するために親水性のポリマー等を材料表面に被覆する技術が用いられている。
一方、全身性エリトマトーデス、悪性関節リウマチ、多発性硬化症、潰瘍性大腸炎、クローン病等の自己免疫性疾患、白血病、癌などの治療、或いは移植前の免疫抑制の目的で白血球を白血球除去器を用いて選択的に除去する技術が進歩してきた。
従来、不織布等をフィルターとして用いた白血球除去器が開発されており、これら白血球除去器においては高い白血球の除去能力が要求されている。一方、同時に他の血液成分、特に有用な血小板の粘着を低く抑え、主目的の白血球のみを選択的に除去する能力が要求されている。血小板は特に粘着性が高く一般的なフィルター材料表面では白血球以上に粘着し、除去されやすく、フィルターの白血球除去効率と血小板粘着抑制のバランスをとることが困難であった。
そこで特開平４−１８７２０６号公報では、表面にエチレングリコール多量体を被覆した白血球分離材料が提案されているが、血小板の粘着は抑制出来るが、白血球除去能力が低下してしまうので好ましくなかった。
一方、ヒドロキシエチルメタアクリレート（ＨＥＭＡ）及びメチルメタアクリレート（ＭＭＡ）からなるブロック重合体上に（ポリオキシエチレン）−ポリ（オキシプロピレン）ブロックポリマーを被覆した材料が特許２８２６１１５号公報で開示されているが、疎水性の高いモノマーを用いて材料表面をコーティングし、これに第２のポリマーを被覆するため、構成が複雑で且つ、ＭＭＡ由来の疎水的な部分が存在するため、材料自体の親水性が低下し、充分な生体適合性、血小板粘着抑制性が得られるとは言えない。
以上のような理由から、高い親水性を有し且つ血小板等の粘着性の低い生体適合性の高い白血球選択除去材の開発が望まれていた。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、上記従来技術の問題点に鑑み、白血球に対する高い除去能は維持した状態でなおかつ血小板の粘着を抑制する白血球選択除去材を提供することを目的とするものである。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
本発明は、上記目的を達成するために、下記の構成を有する。即ち、本発明は表面に非イオン性親水性基を有する繊維からなる白血球除去材において、表面の非イオン性親水性基が少なくとも水酸基とメトキシジエチレングリコール基を有する重合体であり、メトキシジエチレングリコール基のモル百分率が２０モル％以上８０モル％未満であることを特徴とする白血球選択除去材である。
本発明の非イオン性親水性基とは、体液、血液等の白血球含有液のｐＨでほとんどイオン化しない中性の親水性を有する官能基である。本発明では水酸基及びメトキシジエチレングリコール基を必須の構成要件とする。
水酸基を含む官能基とは末端に水酸基を有している官能基であり、水酸基単独で用いられることはもとより、ヒドロキシエチル基、ヒドロキシメチル基、ヒドロキシプロピル基等のアルキルヒドロキシル基等が重合体主鎖より適度なスペーサー効果を有する点で、更に好ましく用いられる。ヒドロキシエチル基が最も好ましく用いられる。
本発明の白血球選択除去材において、水酸基を含む官能基とメトキシジエチレングリコール基を有する重合体は、メトキシジエチレングリコール基のモル百分率が２０モル％以上８０モル％未満である必要がある。
メトキシジエチレングリコール基のモル百分率が２０モル％以上８０モル％未満であるとき最も血小板の吸着を抑制し、効率的に白血球を除去出来る。モル百分率が２０モル％未満であると、血小板の粘着が増加するため、好ましくない。一方、モル百分率が８０モル％以上であると、白血球の除去能力が低下するため好ましくない。
本発明の白血球選択除去材は、非イオン性親水性基を表面に有する繊維よりなる。本発明の白血球選択除去材は、表面と基材部分とが別に形成され、表面が前記非イオン性親水性基を有する重合体からなっていてもよいし、繊維全体が前記重合体からなっていても良い。機械的強度面、或いは経済性の観点より、表面と基材部分とが別に形成され、表面が前記非イオン性親水性基を有する重合体からなっていることが好ましい。最も好ましくは、基材部分の表面に、コーティング等の手法により、前記非イオン性親水性基を有する重合体が物理的或いは化学的に結合していることが好ましい。
上記コーティングによる方法は、基材部分の表面が物理的又は化学的に不均一であっても、上記の化学組成を有する表面を安定的に形成させることができるので好ましい。
基材部分と表面の化学的組成が異なる場合、表面は非常に薄い層で、繊維の直径に比較すればほとんど無視しうる程度でも充分用いることができる。
白血球選択除去材の重量当たりの非イオン性親水性基を有する重合体の重量の割合は、０．０１重量％以上１０重量％未満が好ましい。更に安定性及び経済性の面より好ましい割合は、０．０５％以上５％未満、最も好ましくは、０．１％以上３％未満である。
【０００５】
本発明の白血球除去材の表面の化学組成は、重合体が溶解し、基材部分が溶解しない適当な溶媒を用いて抽出し、公知の核磁気共鳴スペクトル、赤外吸収スペクトル、元素分析等の手段を用いて解析することができる。
また、重合体が溶解しない場合には、上記記載の方法に加えて、Ｘ線光電子分光分析装置（ＥＳＣＡ）、電子線プローブＸ線マイクロアナライザー（ＥＰＭＡ）等の公知の表面分析法により解析可能である。
本発明の重合体がランダム共重合体の場合、水酸基を含む官能基とメトキシジエチレングリコール基がランダムに分布できるため、広い範囲のモル百分率で、目的とする効果が得られる。即ち、メトキシジエチレングリコール基を有するモノマーのモル百分率が３０モル％以上８０モル％未満であるとき最も血小板の吸着を抑制し、効率的に白血球を除去できる。更に上記の観点より、より好ましいメトキシジエチレングリコール基を有するモノマーのモル百分率は３５モル％以上７５モル％未満、最も好ましくは３５モル％以上７０モル％未満である。
重合体がブロック共重合体の場合、水酸基を含む官能基とメトキシジエチレングリコール基が規則的に局在化して分布しているため、より低い範囲のメトキシジエチレングリコール基を有するモノマーのモル百分率で、目的の効果が得られる。また、ブロック共重合体では、モル百分率が５０モル％以上になると重合体の水に対する溶解性が高まり、好ましくない。ブロック共重合体では、メトキシジエチレングリコール基を有するモノマーのモル百分率が２０モル％以上５０モル％未満であるとき最も血小板の吸着を抑制し、効率的に白血球を除去できることがわかった。更に上記の観点より、より好ましいメトキシジエチレングリコール基を有するモノマーのモル百分率は２５モル％以上５０モル％未満、最も好ましくは３０モル％以上４５モル％未満である。
【０００６】
上記重合体を構成する単量体を例示すると、水酸基を有する単量体としては、ヒドロキシエチルメタクリレート、ヒドロキシメチルメタクリレート、ヒドロキシプロピルメタクリレート、ヒドロキシブチルメタクリレート等のヒドロキシアルキルメタクリレート或いは同様のアクリレート、ビニルアルコール等が挙げられる。中でも適度なスペーサーを有する点で、ヒドロキシアルキルメタアクリレートが更に好ましく用いられる。最も好ましくは、ヒドロキシエチルメタアクリレートが良好に用いられる。
一方、メトキシジエチレングリコール基を有する単量体としては、メトキシジエチレングリコールメタクリレート、メトキシジエチレングリコールアクリレート、メトキシジエチレングリコールビニルエーテル等が用いられるが、好ましくは、メトキシジエチレングリコールメタクリレート、メトキシジエチレングリコールアクリレートが良好に用いられ、最も好ましくは、メトキシジエチレングリコールメタクリレートが良好に用いられる。
本発明でいうメトキシジエチレングリコールメタクリレートのモル百分率とは、重合体中のメトキシジエチレングリコールメタクリレートの占めるモル百分率である。
また、上記記載の共重合体を基材表面に被覆して用いる場合、共重合体が血液等の体液と接触するため、基材表面に被覆した状態で、水不溶性である必要がある。従って、水への溶解度は低いことが好ましい。
本発明の白血球選択除去材は、繊維からなっているので、重量当たりの表面積が大きく、効率よく白血球を除去でき、且つ除去材として用いる上で好ましい物理的形状を有している。好ましい形状を例示すると、織布、不織布等が効果的に用いられる。特に不織布では、重量当たりの表面積を大きく、高精度に制御できる点より最も好ましい。
本発明の繊維は、その平均繊維直径が０．５μｍ以上５μｍ未満であることが好ましい。白血球選択除去材当たりの白血球除去性能は、繊維の平均直径が小さいほど高い。しかしながら、０．５μｍ未満になると除去材が目詰まりしやすくなり、また、同時に血小板の粘着性も高まり選択性の低下を引き起こすため好ましくない。平均繊維直径は０．５μｍ以上４．５μｍ未満が更に好ましく、１μｍ以上４μｍ未満が最も好ましい。
本発明にいう繊維の平均直径は、例えば繊維集合体の走査型電子顕微鏡写真を撮り、無作為に選択した１００本以上の繊維の直径を測定し、それらを数平均する方法で求められる。
【０００７】
本発明の白血球選択除去材において、不織布を使用する場合、不織布の目付はその物理的性質上重要である。不織布の目付は、公知の試験方法により測定でき、強度の面より出来るだけ大きい方が好ましく１５ｇ／ｍ２以上の時良好に用いられる。一方、目付が大きすぎると血液の流れ抵抗が増加し、流れ性が不良になるためこの上限は２００ｇ／ｍ２未満であることが好ましい。不織布のより好ましい目付は２０ｇ／ｍ２以上１５０ｇ／ｍ２であり、最も好ましくは、２０ｇ／ｍ２以上１００ｇ／ｍ２である。不織布は、単一の不織布を用いても良いし、更に目付或いは平均繊維直径の異なる不織布を２層以上重ねた構造においても良好に用いられる。
また、本発明の実施態様において、繊維の表面と基材部分とが別に形成される場合、基材部分としては、ポリエチレンテレフタレート、ポリブチレンテレフタレート等のポリエステル、ポリプロピレン、ポリエチレン等のポリオレフィン、ポリアクリロニトリル、ポリメチルメタクリレート等のポリアクリレート或いはポリメタクリレート、ポリスルホン、ポリアミド等の合成繊維、セルロースアセテート等の半合成繊維、キュプラアンモニアレーヨン、ビスコースレーヨン等の再生繊維、ガラス繊維等が例示できる。これらの中でも特に合成繊維が好ましく用いられる。紡糸性、繊維の均一性等の面より合成繊維の中でもポリエチレンテレフタレート、ポリブチレンテレフタレート等のポリエステル、ポリプロピレン、ポリエチレン等のポリオレフィンが最も有効に用いられる。
ポリプロピレン、ポリエチレン等のポリオレフィン、ポリアクリロニトリル、ポリメチルメタクリレート等のポリアクリレート或いはポリメタクリレート、ポリスルホン等の水と接触しても含浸しない疎水性の高い材料を基材部分として用いる場合、表面部分としては本発明のブロック共重合体が特に有効に用いられる。
本発明の白血球選択除去材は、入口と出口を有する容器或いはバッグに充填して、白血球選択除去フィルターとして有効に用いられる。この場合、本発明の白血球選択除去材を単独で或いはプレフィルターと共に充填して用いることができる。プレフィルターを用いる場合、プレフィルターも本発明の非イオン性親水性基を表面に有していても良い。
【０００８】
以下、実施例により本発明をより詳細に説明する。
【実施例１〜３、比較例１〜３】
２−ヒドロキシエチルメタアクリレート（以下ＨＥＭＡと略す）及びメトキシジエチレングリコールメタアクリレート（以下ＭＤＧと略す）のブロック共重合体を通常のラジカル開始剤を用いて合成した。重合条件としては、エタノール３００ｍＬに対し、ＭＤＧモノマーのみを（０ｇ〜１６．５ｇの範囲で変えて）、開始剤として２、２′−アゾビス（２、４−ジメチルバレロニトリル）（Ｖ−６５）０．１ｇ存在下、７０℃で３０分間重合反応を行った後、ＨＥＭＡモノマーを添加し（モノマー重量が合計で３０ｇとなるように仕込み量をそれぞれ１３．５ｇ〜３０ｇの範囲で変えた）、更に６時間重合を行った。得られた重合溶液は、５ｇの塩化ナトリウムを加えた水５Ｌ中に攪拌しながら滴下し、共重合体を析出させて水不溶分を回収した。重合結果を表１に示す。
0004219041.tif 000002
平均繊維直径１．９μｍのポリプロピレン繊維よりなる不織布（目付６０ｇ／ｍ２）１ｇを上記したそれぞれの重合体の１％エタノール溶液に浸した後、不織布に吸収された溶液を圧縮空気により除去し、６０℃の真空乾燥機中で１２時間乾燥した。
【０００９】
（実験例）
このようにして得られた不織布を直径６．８ｍｍの円形に切断し、５枚をカラムにセットし血小板粘着性の評価を行った。
それぞれのカラムに抗凝固剤としてＡＣＤ−Ａを添加したヒト新鮮血液（白血球数：４，５００〜８，４００／μＬ、血小板数：１５０，０００〜４４０，０００／μＬ）（血液：ＡＣＤ−Ａ＝８：１）１．５ｍＬをシリンジポンプを用いて０．５ｍＬ／分の一定流速で室温にて流し、不織布通過前後の血液中の白血球濃度及び血小板の濃度を測定し、白血球の除去率及び血小板の回収率を下式により求めた。
白血球除去率（％）＝（１−出口側血液の白血球濃度／入口側血液の白血球濃度）×１００
血小板回収率（％）＝出口側血液の血小板濃度×１００／入口側血液の血小板濃度  結果を表２に示す。
0004219041.tif 000003
【００１０】
【実施例４〜７、比較例４〜５】
２−ヒドロキシエチルメタアクリレート（以下ＨＥＭＡと略す）及びメトキシジエチレングリコールメタアクリレート（以下ＭＤＧと略す）のランダム共重合体を通常のラジカル重合で合成した。重合条件としては、エタノール３００ｍＬに対し、モノマー合計３０ｇ（ＨＥＭＡ仕込み重量を６ｇ〜３０ｇの範囲で変え、ＭＤＧはそれぞれ３０ｇ−（ＨＥＭＡ仕込み重量）とした）、開始剤として２、２′−アゾビス（２、４−ジメチルバレロニトリル）（Ｖ−６５）０．１ｇ存在下、７０℃で６時間重合反応を行った。得られた重合溶液は、５ｇの塩化ナトリウムを加えた水５Ｌ中に攪拌しながら滴下し、共重合体を析出させて水不溶分を回収した。収率を表３に示す。
0004219041.tif 000004
平均繊維直径１．２μｍのポリエチレンテレフタレート繊維よりなる不織布（目付４０ｇ／ｍ２）１ｇを上記したそれぞれの重合体の１％エタノール溶液に浸した後、不織布に吸収された溶液を圧縮空気により除去し、６０℃の真空乾燥機中で１２時間乾燥した。
（実験例）
このようにして得られた不織布を直径６．８ｍｍの円形に切断し、５枚をカラムにセットし実施例１の実験例と同様の方法で白血球除去率と血小板回収率を求めた。コーティングなしの不織布を比較例５とした。結果を表４に示す。
0004219041.tif 000005
【００１１】
【発明の効果】
本発明の白血球選択除去材は、白血球を選択的に除去でき、更に、血小板等の粘着を抑制できる有用な白血球選択除去材である。