(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
次式：
【化１】
0004323802.tif 000126
からなる群から選択される、化合物。
【請求項２】
薬剤として許容される賦形剤中に請求項１に記載の化合物を含む、哺乳動物でＰＡＲＰ活性を阻害するための薬剤組成物。
【請求項３】
壊死またはアポトーシスによる細胞損傷または細胞死に由来する組織損傷、ニューロン仲介組織損傷または疾患、虚血および再灌流障害に由来する神経組織損傷、年齢依存性黄斑変性、ＡＩＤＳおよび他の免疫老化疾患、関節炎、痛風、悪液質、ガン、複製老化を伴う骨格筋の変性疾患、糖尿病、免疫老化、筋ジストロフィ、変形性関節症、骨粗しょう症、神経痛、神経損傷、末梢神経損傷、腎不全、網膜虚血、敗血症性ショック、および皮膚加齢、細胞の寿命または増殖能力に関連する疾患または障害、ならびに細胞老化により惹起または悪化される疾患または疾患状態からなる群から選択される疾患または状態を治療するための、請求項１に記載の化合物を含む薬剤組成物。
【請求項４】
薬剤として許容される担体および請求項１に記載の少なくとも１種の化合物を含有する、薬剤組成物。
【請求項５】
治療的に有効な量の請求項１に記載の化合物を含む、哺乳動物でＰＡＲＰを阻害するための薬剤組成物。
【請求項６】
虚血または再灌流障害の結果として損傷を受けた少なくとも１つの哺乳動物の神経組織あるいは神経疾患または神経変性疾患を治療するための；血管発作を治療するための；心臓血管障害を治療するための；年齢依存性筋変性、ＡＩＤＳ、免疫老化疾患、炎症、痛風、関節炎、アテローム硬化症、悪液質、ガン、複製老化を伴う骨格筋の変性疾患、糖尿病、頭部外傷、免疫老化、炎症、痛風、炎症性腸障害（大腸炎およびクローン病など）、筋ジストロフィ、変形性関節症、骨粗しょう症、慢性および／または急性疼痛（神経痛など）、腎不全、網膜虚血、敗血症性ショック（内毒素性ショックなど）または皮膚加齢から選択される少なくとも１つの症状を治療するための；細胞の寿命および／または増殖能力を伸ばすための；老化細胞の遺伝子発現を変えるための；低酸素腫瘍細胞を放射線増感するための；または狭心症、心筋梗塞、心臓血管虚血またはＰＡＲＰ活性に関連した心臓血管組織損傷などの動物の心臓血管疾患を治療するための薬剤組成物であって、請求項１に記載の化合物を含む薬剤組成物。
【請求項７】
前記の神経疾患が、物理的損傷またはギラン−バレー症候群などの疾患状態により惹起される末梢神経障害、外傷性脳損傷、脊髄の物理的損傷、脳損傷を伴う発作、焦点性虚血、全体虚血、再灌流障害、多発性硬化症などの脱髄疾患ならびにアルツハイマー病、パーキンソン病および筋萎縮性側索硬化症などの神経変性に関する神経疾患からなる群から選択され、前記の再灌流障害が血管発作である、請求項６に記載の薬剤組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、2000年12月1日に提出された米国仮出願第60/250132号および2001年8月9日に提出された米国仮出願第60/310274号による利益を要求するものであり、これらの内容を全て、ここで参照して援用する。
【０００２】
本発明は、ADPRT (NAD: タンパク質 (ADP-リボシルトランスフェラーゼ (重合性の)) およびPARS (ポリ (ADP-リボース) 合成酵素) とも称される核酵素ポリ (アデノシン5'-ジホスホ-リボース) ポリメラーゼ ["ポリ (ADP-リボース) ポリメラーゼ"または"PARP"の阻害剤に関し、化合物および開示の化合物を含有する組成物を提供する。さらに、本発明は、開示のPARP阻害剤を使用して、壊死またはアポトーシスによる細胞損症または細胞死に由来する組織損傷; 例えば、脳虚血発作、頭部外傷または脊髄損傷などの虚血および再灌流障害に由来する神経組織損傷; 例えば、パーキンソン病またはアルツハイマー病および多発性硬化症などの神経疾患および神経変性疾患を予防および/または治療する方法; 血管発作を予防または治療する方法; 例えば、心筋梗塞などの心臓血管疾患を予防または治療する方法; 例えば、年齢依存性筋変性、AIDSおよび他の免疫老化疾患、炎症、関節炎、痛風、アテローム硬化症、悪液質、ガン、複製老化を伴う骨格筋の変性疾患、糖尿病 (真性糖尿病など)、炎症性腸障害 (大腸炎およびクローン病など)、急性膵炎、粘膜炎、出血性ショック、内臓動脈閉塞ショック、多臓器不全 (腎臓、肝臓、腎臓、肺、網膜、すい臓および/または骨格筋系など)、急性自己免疫性甲状腺炎、筋ジストロフィ、変形性関節症、骨粗しょう症、慢性および/または急性疼痛 (神経痛など)、腎不全、網膜虚血、敗血症性ショック (内毒素性ショックなど)、局所および/または遠隔内皮細胞機能障害 (内皮依存性 (endo-dependent) 弛緩応答および接着分子のアップレギュレーションにより認識されるようなもの)、炎症および皮膚加齢などの他の症状および/または疾患を治療する方法; 例えば、オキシダントの発生での一般メディエイタ、炎症前 (proinflammatory) メディエイタおよび/またはサイトカインおよび白血球浸潤の一般メディエイタ、カルシウムイオン過負荷、リン脂質過酸化、一酸化窒素代謝損傷および/またはATP産生低減などとして、細胞の寿命および増殖能力を延長する方法; 老化細胞の遺伝子発現を変化させる方法; または低酸素腫瘍細胞を放射線増感する方法を提供する。
【背景技術】
【０００３】
PARS (ポリ (ADP-リボース) 合成酵素に対して) またはADPRT (NAD: タンパク質 (ADP-リボシル) トランスフェラーゼ (重合性の)) としても知られているPARP (EC.2.4.2.30) は、116kDaの主要な核タンパク質である。これは、ほとんど全ての真核細胞に、主として存在する。この酵素は、NADからのADP-リボース単位200個以上からなる分枝鎖ポリマーであるポリ (ADP-リボース) を合成する。ポリ (ADP-リボース) のタンパク質受容体は直接的に、または間接的に、DNAの統合性維持に関与している。これらには、ヒストン、トポイソメラーゼ、DNAおよびRNAポリメラーゼ、DNAリガーゼおよびCa２＋-およびMg２＋-依存性エンドヌクレアーゼが含まれる。PARPタンパク質は、多くの組織で、特には免疫系、心臓、脳および生殖細胞系で高レベルで発現される。正常な生理学的条件下では、最低限のPARP活性しか存在しない。しかしながら、DNA損傷により、500倍までのPARPの即時活性が惹起される。PARPによる多くの機能のうち、その主要な役割は、ADP-リボシル化によりDNA修復を容易にして、多くのDNA修復タンパク質を協調させることにある。PARP活性化の結果として、NADレベルが著しく低下する。多くの内在性および外来性物質が、DNAを損傷させ、PARPを活性化させることが判明している一方で、一酸化窒素 (NO) および超酸化物の組合せから生じるペルオキシニトリトは、例えばショック、発作および炎症などの報告されているインビボでの様々な疾患症状をもたらす主な加害物質 (perpetrator) であることが分かっている。
【０００４】
広範囲なPARP活性は、大規模なDNA損傷を被っている細胞にNADの深刻な消耗をもたらす。ポリ (ADP-リボース) の短い寿命 (半減期<1分) により、迅速な代謝回転速度が生じる。ポリ (ADP-リボース) がいったん生じると、これは、構造的に活性なポリ (ADP-リボース) グリコヒドロラーゼ (PARG)、さらにホスホジエステラーゼおよび (ADP-リボース) タンパク質リアーゼにより迅速に、分解される。PARPおよびPARGにより、大量のNADをADP-リボースに変換するサイクルが生じる。1時間未満で、PARPの過刺激は、NADおよびATPを正常レベルの20%未満にまで低下させうる。酸素の妨害が細胞エネルギー出力を既に劇的に損なっている虚血では、このようなシナリオは特に有害である。再灌流では、後続のフリーラジカル産生が、組織損傷の主な原因と考えられている。虚血および再灌流の際に多くの臓器で有意な一部のATP低下は、ポリ (ADP-リボース) 代謝回転によるNAD消耗につながりうる。したがって、PARPまたはPARG阻害は、細胞エネルギーレベルを維持して、損傷後の虚血組織の生存を強化すると予測される。
【０００５】
ポリ (ADP-リボース) 合成は、炎症応答に必須の数多くの遺伝子の誘導発現にも関与している。PARP阻害剤は、内皮細胞中のマクロファージ、P型セレクチンおよび細胞内接着分子-1 (ICAM-1) での誘導性一酸化窒素合成酵素 (iNOS) の産生を抑制する。このような活性が、PARP阻害剤により示される強力な抗炎症効果の基礎となる。好中球が損傷組織へと移動し、浸潤することを妨げることにより、PARP阻害は、壊死を低減することができる。(Zhang, J. "PARP inhibition: a novel approach to treat ischaemia/reperfusion and inflammation-related injuries"、Chapter 10 in Emerging Drugs (1999) 4: 209-221 Ashley Publications Ltd.、およびここに記載されている参考文献)。
【０００６】
PARP産生は、損傷を受けたDNAフラグメントにより活性化され、これは、いったん活性化されると、100個までのADP-リボース単位の、ヒストンおよびPARP自体を含む様々な核タンパク質への接着を触媒する。主な細胞ストレスでは、PARPの広範囲な活性化は、エネルギー貯蔵の消耗を介して、細胞損傷または細胞死を迅速にもたらしうる。NAD分子 (ADP-リボースおよびPARP基質の源) を1個再生する度に、4個のATP分子が消費されるので、大量のPARP活性化によりNADが枯渇して、NADを再合成しようとすると、ATPも枯渇しうる。
【０００７】
PARP活性化は、NMDA-およびNO惹起神経毒性の両方で、鍵となる役割を果たすことが報告されている。皮質培養および海馬スライスで、このことは証明されていて、その際、毒性の妨害は直接的に、PARP阻害能に相関している (Zhang et al.、"Nitric Oxide Activation of Poly (ADP-Ribose) Synthetase in Neurotoxicity"、Science、263: 687-89 (1994) and Wallis et al.、"Neuroprotection Against Nitric Oxide Injury with Inhibitors of ADP-Ribosylation"、Neuro Report、5: 3、245-48 (1993))。したがって、作用の正確なメカニズムは未だ解明されていないが、神経変性疾患および頭部外傷を治療する際の、PARP阻害の潜在的な役割が認められている (Endres et al.、"Ischemic Brain Injury is Mediated by the Activation of Poly (ADP-Ribose) Polymerase"、J. Cereb. Blood Flow Metabol.、17: 1143-51 (1997) およびWallis et al.、"Traumatic Neuroprotection with Inhibitors of Nitric Oxide and ADP-Ribosylation、Brain Res.、710: 169-77 (1996))。
【０００８】
同様に、PARP阻害剤の一回注入が、ウサギの心臓または骨格筋の虚血および再灌流により惹起された梗塞サイズを低減するということが証明されている。これらの研究では、3-アミノ-ベンズアミド (10mg/kg) の一回注入は、閉塞の1分前でも、再灌流の1分前でも、心臓で梗塞サイズの同様の低減 (32〜42%) をもたらし、他方で、別のPARP阻害剤である1,5-ジヒドロキシイソキノリン (1mg/kg) は、匹敵する程度 (38〜48%) で梗塞サイズを低減した。Thiemermannet et al.、"Inhibition of the Activity of Poly (ADP Ribose) Synthetase Reduces Ischemia-Reperfusion Injury in the Heart and Skeletal Muscle"、Proc. Natl. Acad. Sci. USA、94: 679-83 (1997)。これらの結果により、PARP阻害剤は、虚血心臓または骨格筋組織を前もって治療することができると考えることは妥当である。
【０００９】
PARP活性化はさらに、発作、アルツハイマー病およびパーキンソン病などの病的症状に関与する何らかのグルタミン酸塩 (NMDA受容体刺激)、反応性酸素中間体、アミロイドβ-タンパク質、N-メチル-4-フェニル-1,2,3,6-テトラヒドロピリジン (MPTP) またはその活性代謝産物N-メチル-4-フェニルピリジン (MPP＋) に過剰に暴露された後の、神経毒損傷後の損傷の尺度として使用することができる。Zhang et al.、"Poly (ADP-Ribose) Synthetase Activation: An Early Indicator of Neurotoxic DNA Damage"、J. Neurochem.、65: 3、1411-14 (1995)。インビトロおよびMPTP神経毒性での小脳顆粒細胞でのPARP活性化の役割を調査するために、他の研究が継続されている。Cosi et al.、"Poly (ADP-Ribose) Polymerase (PARP) Revisited. A New Role for an Old Enzyme: PARP Involvement in Neurodegeneration and PARP Inhibitors as Possible Neuroprotective Agents"、Ann. N. Y. Acad. Sci.、825: 366-79 (1997); およびCosi et al.、"Poly (ADP-Ribose) Polymerase Inhibitors Protect Against MPTP-induced Depletions of Striatal Dopamine and Cortical Noradrenaline in C57B1/6 Mice"、Brain Res.、729: 264-69 (1996)。主な中枢神経系神経伝達物質として役立ち、N-メチル-D-アスパルテート (NMDA) 受容体および他の亜型受容体で作用するグルタミン酸塩に対する過剰な神経暴露は往々にして、発作または他の神経変性プロセスの結果として生じる。酸素欠乏ニューロンは、発作または心臓発作などの虚血性脳損傷で大量にグルタミン酸塩を放出する。次いで、グルタミン酸塩の過剰な放出は、N-メチル-D-アスパルテート (NMDA)、AMPA、カイニン酸およびMGR受容体の過刺激 (興奮毒性) をもたらし、これらは、イオンチャネルを開き、ニューロンの過刺激をもたらす無制御のイオンフロー (例えば、Ca２＋およびNa＋が細胞内へ、K＋が細胞外へ) を可能にする。過刺激されたニューロンは、さらなるグルタミン酸塩を分泌して、フィードバックループまたはドミノ効果を生じ、その結果、最終的にプロテアーゼ、リパーゼおよびフリーラジカルの産生による細胞損傷または細胞死が生じる。グルタミン酸塩受容体の過剰な活性化は、てんかん、発作、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症 (ALS)、ハンチントン病、精神分裂病、慢性疼痛、虚血、低酸素症後のニューロン損失、低血糖、虚血、外傷および神経損傷を含む様々な神経疾患および症状に関与している。さらに、グルタミン酸塩暴露および刺激は、強迫性疾患、特に薬物依存のためのベースとして関与している。証拠には、多くの動物種で、さらに、グルタミン酸塩またはNMDAで処理された大脳皮質培養での所見が含まれており、この際、グルタミン酸塩受容体アンタゴニスト (即ち、グルタミン酸塩がその受容体に結合するか、それを活性化することをブロックする化合物) は、血管発作後の神経損傷をブロックする。Dawson et al.、"Protection of the Brain from Ischemia"、Cerebrovascular Disease、319-25 (H. Hunt Batjer ed.、1997)。NMDA、AMPA、カイニン酸およびMGR受容体をブロックすることにより、興奮毒性を阻止する試みは、困難であることが判明している。それというのも、各受容体は、グルタミン酸塩が結合しうる複数の部位を有し、したがって、全ての受容体へのグルタミン酸塩の結合を阻止し、この理論を試験することを可能にするアンタゴニストの有効な混合物または万能アンタゴニストを発見することが難しいためである。さらに、受容体をブロックするために有��な多くの組成物は、動物に対しても毒性である。このように、現在のところ、グルタミン酸塩異常のための有効な治療法は知られていない。
【００１０】
グルタミン酸塩によるNMDA受容体の刺激は例えば、酵素ニューロン一酸化窒素合成酵素 (nNOS) を活性化して、一酸化窒素 (NO) の形成をもたらし、これは、さらに神経毒性を仲介する。NMDA神経毒性は、一酸化窒素合成酵素 (NOS) 阻害剤での治療により、またはインビトロでのnNOSのターゲット化遺伝子分解により予防することができる。Dawson et al.、"Nitric Oxide Mediates Glutamate Neurotoxicity in Primary Cortical Cultures"、Proc. Natl. Acad. Sci. USA、88: 6368-71 (1991); およびDawson et al.、"Mechanisms of Nitric Oxide-mediated Neurotoxicity in Primary Brain Cultures"、J. Neurosci.、13: 6、2651-61 (1993)、Dawson et al.、"Resistance to Neurotoxicity in Cortical Cultures from Neuronal Nitric Oxide Synthase-Deficient Mice"、J. Neurosci.、16: 8、2479-87 (1996)、Iadecola、"Bright and Dark Sides of Nitric Oxide in Ischemic Brain Injury"、Trends Neurosci.、20: 3、132-39 (1997)、Huange et al.、"Effects of Cerebral Ischemia in Mice Deficient in Neuronal Nitric Oxide Synthase"、Science、265: 1883-85 (1994)、Beckman et al.、"Pathological Implications of Nitric Oxide、Superoxide and Peroxynitrite Formation"、Biochem. Soc. Trans.、21: 330-34 (1993) およびSzabo et al.、"DNA Strand Breakage, A
ctivation of Poly (ADP-Ribose) Synthetase, and Cellular Energy Depletion are Involved in the Cytotoxicity in Macrophages and Smooth Muscle Cells Exposed to Peroxynitrite"、Proc. Natl. Acad. Sci. USA、93: 1753-58 (1996)。
【００１１】
3-アミノベンズアミドなどのPARP阻害剤は、通常は例えば、過酸化水素またはγ線に応答して、DNA修復にも影響を及ぼすことが知られている。Cristovao et al.、"Effect of a Poly (ADP-Ribose) Polymerase Inhibitor on DNA Breakage and Cytotoxicity Induced by Hydrogen Peroxide and γ-Radiation," Terato., Carcino., and Muta.、16: 219-27 (1996)。特に、Cristovaoらは、過酸化水素で処理された白血球でのDNA鎖切断のPARP-依存修復を観察した。
【００１２】
PARP阻害剤は、酸素欠乏腫瘍細胞の放射線増感に有効であり、かつ、おそらくDNA修復を予防するその能力により、放射線治療後のDNAのほぼ致命的な損傷から腫瘍細胞が再生することを防ぐ際に有効であることが報告されている。米国特許第5032617号; 同5215738号および同5041653号。
【００１３】
大腸炎などの炎症性腸疾患を治療するために、PARP阻害剤を使用することができることの証拠も存在している。Salzman et al.、"Role of Peroxynitrite and Poly (ADP-Ribose) Synthase Activation Experimental Colitis," Japanese J. Pharm.、75、Supp. I: 15 (1997)。特に、50%エタノール中のハプテントリニトロベンゼンスルホン酸を管腔内に投与して、ラットで大腸炎を惹起させた。処置されたラットに、PARP活性の特異的阻害剤である3-アミノベンズアミドを与えた。PARP活性の阻害により、炎症応答が低減され、遠位結腸の形態およびエネルギー状態が維持された。例えば、Southan et al.、"Spontaneous Rearrangement of Aminoalkylithioureas into Mercaptoalkylguanidines, a Novel Class of Nitric Oxide Synthase Inhibitors with Selectivity Towards the Inducible Isoform"、Br. J. Pharm.、117: 619-32 (1996); およびSzabo et al.、"Mercaptoethylguanidine and Guanidine Inhibitors of Nitric Oxide Synthase React with Peroxynitrite and Protect Against Peroxynitrite-induced Oxidative Damage"、J. Biol. Chem.、272: 9030-36 (1997) 参照。
【００１４】
PARP阻害剤が、関節炎の治療に有効であることの証拠も存在する。Szabo et al.、"Protective Effects of an Inhibitor of Poly (ADP-Ribose) Synthetase in Collagen-Induced Arthritis," Japanese J. Pharm.、75、Supp. I: 102 (1997); Szabo et al.、"DNA Strand Breakage, Activation of Poly (ADP-Ribose) Synthetase, and Cellular Energy Depletion are Involved in the Cytotoxicity in Macrophages and Smooth Muscle Cells Exposed to Peroxynitrite," Proc. Natl. Acad. Sci. USA、93: 1753-58 (March 1996); およびBauer et al.、"Modification of Growth Related Enzymatic Pathways and Apparent Loss of Tumorigenicity of a ras-transformed Bovine Endothelial Cell Line by Treatment with 5-Iodo-6-amino-1,2-benzopyrone (INH2BP)"、Intl. J. Oncol.、8: 239-52 (1996) およびHughes et al.、"Induction of T Helper Cell Hyporesponsiveness in an Experimental Model of Autoimmunity by Using Nonmitogenic Anti-CD3 Monoclonal Antibody"、J. Immuno.、153: 3319-25 (1994)。
【００１５】
さらに、糖尿病を治療するために、PARP阻害剤を使用することができることが分かっている。Heller et al.、"Inactivation of the Poly (ADP-Ribose) Polymerase Gene Affects Oxygen Radical and Nitric Oxide Toxicity in Islet Cells," J. Biol. Chem.、270: 19、11176-80 (May 1995)。Hellerらは、不活性化PARP遺伝子を有するマウスからの細胞を使用して、これらの突然変異細胞が、DNA損傷性ラジカルに暴露した後にも、NAD＋消耗を示さないことを発見した。突然変異細胞は、NOの毒性に対して耐性を有することも判明した。
【００１６】
エンドトキシックショックまたは敗血症性ショックを治療するために、PARP阻害剤を使用することができることが判明している。Zingarelli et al. "Protective Effects of Nicotinamide Against Nitric Oxide-Mediated Delayed Vascular Failure in Endotoxic Shock: Potential Involvement of Poly ADP Ribosyl Synthetase," Shock、5: 258-64 (1996) は、ポリ (ADPリボース) 合成酵素により惹起されるDNA修復サイクルの阻害は、エンドトキシックショックでの欠陥損傷に対して保護効果を有すると示唆している。Zingarelli et al.は、ニコチンアミドは、エンドトキシックショックでの遅発性NO仲介血管障害から守ることを発見した。Zingarelli et al. はさらに、ニコチンアミドの作用は、ポリ (ADPリボース) 合成酵素により惹起されるエネルギー消耗性DNA修復サイクルのNO仲介活性の阻害に関与していることを発見した。Cuzzocrea、"Role of Peroxynitrite and Activation of Poly (ADP-Ribose) Synthetase in the Vascular Failure Induced by Zymosan-activated Plasma," Brit. J. Pharm.、122: 493-503 (1997)。
【００１７】
PARP阻害剤は、ガンを治療するために使用されている。Suto et al.、"Dihydroisoquinolinones: The Design and Synthesis of a New Series of Potent Inhibitors of Poly (ADP-Ribose) Polymerase"、Anticancer Drug Des.、7: 107-17 (1991)。加えて、Sutoらの米国特許第5177075号は、腫瘍細胞に対する電離放射線または化学療法薬の致命的効果を増大させるために使用されるいくつかのイソキノリンを検討している。Weltin et al.、"Effect of 6 (5H)-Phenanthridinone, an Inhibitor of Poly (ADP-ribose) Polymerase, on Cultured Tumor Cells"、Oncol. Res.、6: 9、399-403 (1994) は、腫瘍細胞の増殖を低減するPARP活性の阻害および、腫瘍細胞をアルキル化薬で同時処置する場合の有意な相乗効果を検討している。
【００１８】
PARP阻害剤のさらに別の使用は、普通型坐骨神経の慢性収縮性障害 (CCI; chronic constriction injury) により惹起され、細胞質および核質の過染色 (いわゆる「ダーク」ニューロン) により特徴付けられる脊髄背角の経シナプス変化が生じるもののような末梢神経損傷および、神経痛としても知られているその結果としての病的疼痛症候群の治療である。Mao et al.、Pain、72: 355-366 (1997)。
【００１９】
PARP阻害剤は、皮膚加齢、アルツハイマー病、アテローム硬化症、変形性関節症、骨粗しょう症、筋ジストロフィ、複製老化を伴う骨格筋の変性疾患、年齢依存性筋変性、免疫老化、AIDSおよび他の免疫老化疾患などの疾患の治療を含む細胞の寿命および増殖能を延長するために; かつ、老化細胞の遺伝子発現を変化させるために、使用されている。WO98/27975号。
【００２０】
数多くの知られているPARP阻害剤が、Banasik et al.、"Specific Inhibitors of Poly (ADP-Ribose) Synthetase and Mono (ADP-Ribosyl)-Transferase"、J. Biol. Chem.、267: 3、1569-75 (1992) およびBanasik et al.、"Inhibitors and Activators of ADP-Ribosylation Reactions"、Molec. Cell. Biochem. 138: 185-97 (1994) に記載されている。しかしながら、前記で検討されているように、これらのPARP阻害剤の有効な使用は、望ましくない副作用の同時発生により限られている (Milam et al.、"Inhibitors of Poly (Adenosine Diphosphate-Ribose) Synthesis: Effect on Other Metabolic Processes"、Science、223: 589-91 (1984))。
【００２１】
前記に加えて、PARP阻害剤が、次の国際特許出願に開示および記載されている: WO00/42040号; WO00/39070号; WO00/39104号; WO99/11623号; WO99/11628号; WO99/11622号; WO99/59975号; WO99/11644号; WO99/11945号; WO99/11649号; およびWO99/59973号。
【００２２】
先行技術の最近の包括的な概観が、LiおよびZhangにより、IDrugs 2001、4 (7): 804-812 (PharmaPress Ltd ISSN 1369-7056) で刊行されている。
【００２３】
副作用を最小限しかもたらさない有効で強力なPARP阻害剤に対する必要性は、存続している。本発明は、例えば、壊死またはアポトーシスによる細胞損傷または細胞死に由来する細胞、組織および/または臓器損傷を治療および/または予防するために、PARP活性を阻害するための化合物、組成物および方法を提供する。本発明の化合物および組成物は特に、焦点性虚血および再灌流障害後のものを含む神経組織または細胞損傷を改善、治療および/または予防する際に使用することができる。通常、PARP活性の阻害は、細胞をエネルギー損失から免れさせて、ニューロンの不可逆的な脱分極を予防し、したがって、神経保護をもたらす。機械論に結びつけられることは望んでいないが、本発明の化合物、組成物および方法を使用することによるPARP活性の阻害は、反応性フリーラジカルおよび一酸化窒素の有害作用に対して保護することにより、細胞、組織および臓器を保護すると考えられる。したがって本発明は、反応性フリーラジカルおよび/または一酸化窒素により惹起される損傷または障害から、細胞、組織および/または臓器を治療および/または予防する方法も提供する。
【非特許文献１】Zhang, J. "PARP inhibition: a novel approach to treat ischaemia/reperfusion and inflammation-related injuries"、Chapter 10 in Emerging Drugs (1999) 4: 209-221 Ashley Publications Ltd.
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００２４】
本発明は、ポリ (ADP-リボース) ポリメラーゼ ("PARP") を阻害するためのここに記載の化合物、その誘導体およびその使用、これらの化合物を含有する組成物およびここに記載の症状の作用を治療、予防および/または改善するために、これらのPARP阻害剤を製造および使用するための方法を提供する。
【００２５】
本発明の化合物は広くは、次の式Iにより記載される:
【化１９】
0004323802.tif 000002
[上式中、
Aは、N、C、CH２またはCHであり;
Bは、C、N、NH、S、SOまたはSO２であり;
Wは、SまたはOであり;
Xは、C、CHまたはNであり;
Yは、炭素またはNであり;
Zは、C、CH２、N、C =Oであり;
好ましくは、X、YまたはZの少なくとも1個は、窒素であり;
R１、R２、R３およびR５は、存在する場合には独立に、H、-OH、=Oまたは置換されていてもよいアルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、カルボキシシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロゲン、アミン、-COR８ (ここで、R８は、H、-OH、置換されていてもよいアルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、カルボキシシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールである) またはOR６または-NR６R７ (ここで、R６およびR７はそれぞれ独立に、水素または置換されていてもよいアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールである) であり; かつ
R１、R２、R３およびR５のいずれかは、付加的に1個または2個の二重結合または三重結合を含んでもよい直鎖または分枝鎖C１〜C４アルキルを介して環に付加的に結合していてよく; かつ
A、XまたはZのいずれかが炭素である場合には、結合しているR１、R２およびR３のいずれかは付加的に、ハロゲン、シアノまたは酸素から独立に選択されていてよく; かつ
R４は、存在する場合、水素、ハロゲンまたはアルキルから独立に選択されていてよい1〜3個の置換基である]。
【００２６】
好ましい実施形態では、本発明は、次の化合物、組成物ならびにこれを製造および使用する方法を提供する:
【化２０−１】
0004323802.tif 000003
【化２０−２】
0004323802.tif 000004
【化２０−３】
0004323802.tif 000005
[上式中、R１〜R５は、前記と同様に記載される]。
【課題を解決するための手段】
【００２７】
本発明は、化合物、これを含有する薬剤組成物、これを使用する方法、これを製造するプロセスに関し、前記の方法で使用するためにここに記載の化合物を含有する薬剤を製造する方法を含み、この際、このような化合物は、ポリ (ADP-リボース) ポリメラーゼ (PARP) の阻害剤として使用することができる。このように、これらは、動物での壊死またはアポトーシス、脳虚血および再灌流障害または神経変性疾患による細胞損傷または細胞死に由来する神経組織損傷を治療または予防し; 細胞の寿命および増殖能を延長するので、これらが関与する疾患を治療または予防するために使用することができ; 老化細胞の遺伝子発現を変化させ; かつ低酸素性腫瘍細胞を放射線増感する。好ましくは、本発明の化合物は、壊死またはアポトーシスによる細胞損傷または細胞死に由来する組織損傷を治療または予防し、および/またはNMDA毒性に仲介されるか、仲介されないニューロン活性に効果を及ぼす。これらの化合物は、特にグルタミン酸塩神経毒性およびNO-仲介生体経路を妨げると考えられる。さらに、本発明の化合物は、PARP活性が関与する他の組織損傷を治療または予防することもできる。本発明は、ポリ (ADP-リボース) ポリメラーゼ ("PARP") を阻害する化合物、これらの化合物を含有する組成物および、ここに記載の症状の作用を治療、予防および/または改善するためにこれらのPARP阻害剤を使用する方法を提供する。
【００２８】
一実施形態では、本発明は、式Iの化合物を提供する:
【化２１】
0004323802.tif 000006
[上式中、
Aは、N、C、CH２またはCHであり;
Bは、C、N、NH、S、SOまたはSO２であり;
Wは、SまたはOであり;
Xは、C、CHまたはNであり;
Yは、炭素またはNであり;
Zは、C、CH２、N、C =Oであり;
好ましくは、X、YまたはZの少なくとも1個は、窒素であり;
R１、R２、R３およびR５は、存在する場合には独立に、H、-OH、=Oまたは置換されていてもよいアルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、カルボキシ、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロゲン、アミン、-COR８ (ここで、R８は、H、-OH、置換されていてもよいアルキル、アルケニル、アルコキシ、カルボキシ、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールである) または-OR６または-NR６R７ (ここで、R６およびR７はそれぞれ独立に、水素または置換されていてもよいアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールである) であり; かつ
R１、R２、R３およびR５のいずれかは、付加的に1個または2個の二重結合または三重結合を含んでもよい直鎖または分枝鎖C１〜C４アルキルを介して環に付加的に結合していてよく; かつ
A、XまたはZのいずれかが炭素である場合には、結合しているR１、R２およびR３のいずれかは付加的に、ハロゲン、シアノまたは酸素から独立に選択されていてよく; かつ
R４は、存在する場合、水素、ハロゲンまたはアルキルから独立に選択される1〜3個の置換基である]。
【００２９】
別の実施形態では、R１、R２、R３およびR５の少なくとも1個は、可溶化基を含まない式Iの化合物に比較して、25℃の水への式Iの化合物の可溶性を10倍に高める可溶化基であり、X、YおよびZは全て、N以外であってよいか、X、YまたはZの少なくとも1個は、Nであってもよい。
【００３０】
さらに別の実施形態では、本発明は、次式の化合物を提供する:
【化２２】
0004323802.tif 000007
[上式中、
R１、R２およびR３は、存在する場合には独立に、H、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、ハロゲン置換アミノ、-O-アルキル、-O-アリールまたは置換されていてもよいアルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、カルボキシ、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、-COR８ (ここで、R８は、H、-OH、置換されていてもよいアルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはへテロアリールである) または-OR６または-NR６R７ (ここで、R６およびR７はそれぞれ独立に、水素または置換されていてもよいアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールである) であり; かつR４は、存在する場合には、水素、ハロゲン、アルコキシまたはアルキルから独立に選択される]。一実施形態では、R４は、フッ素などのハロゲンであり、場合によって、1個のみのR４が、環の上に存在する。
【００３１】
本発明の他の実施形態では、次式の化合物を提供する:
【化２３】
0004323802.tif 000008
[上式中、
R１、R２およびR３は、存在する場合には独立に、H、アミノ、ヒドロキシ、ハロゲン置換アミノ、-O-アルキル、-O-アリールまたは置換されていてもよいアルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、カルボキシ、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、-COR８ (ここで、R８は、H、-OH、置換されていてもよいアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはへテロアリールである) または-OR６または-NR６R７ (ここで、R６およびR７はそれぞれ独立に、水素または置換されていてもよいアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールである) であり; かつ
R４は、存在する場合には、水素、ハロゲン、アルコキシまたはアルキルから独立に選択される]。一実施形態では、R４は、フッ素などのハロゲンであり、場合によって、1個のみのR４が、環の上に存在する。
【００３２】
本発明はさらに、薬剤として許容される担体または賦形剤ならびにここに記載の少なくとも1種の化合物を含有する、組成物、好ましくは薬剤組成物を提供する。
【００３３】
好ましい実施形態では、本発明は、次の化合物、組成物およびこれを製造および使用する方法を提供する:
【化２４】
0004323802.tif 000009
[好ましくは、上式中、R１は、存在しない];
【化２５】
0004323802.tif 000010
[好ましくは、上式中、R３は、存在しないか、もしくは好ましくは、R３が存在しない場合、R２は、=Oであるか、かつ/またはR５は、Hである];
【化２６】
0004323802.tif 000011
[好ましくは、上式中、R３は、存在しない];
【化２７】
0004323802.tif 000012
[好ましくは、上式中、R２およびR３のいずれか、または両方が、存在しない];
【化２８】
0004323802.tif 000013
[好ましくは、上式中、R４は、存在しない];
【化２９】
0004323802.tif 000014
[好ましくは、上式中、R３は、存在しない];
【化３０】
0004323802.tif 000015
[好ましくは、上式中、R２、R３およびR５のいずれか1個は、存在しない]; かつ
【化３１】
0004323802.tif 000016
[上式中、R１〜R５は、前記と同様である]。R１、R２、R３および/またはR５のいずれか1個は付加的に、R９C (O) OR９、R９C (O) OR１０、R９OR９N (R９R９)、R９OR９N (R９ (R９R１０))、R９OR９、R９OR１０、R９R１０C (O) OR９、R１０C (O) OR１０、R９R１０OR９N (R９R９)、R９R１０OR９N (R９ (R９R１０))、R９R１０OR９、R９R１０OR１０、R９N (R９R９) R９N (R９R９)、R９N (R９R９) R９N (R９R１０)、R９N (R９R９) R９N (R１０R１０) のいずれかとして規定することができ、ここで、R９は、存在する場合、H、結合、直鎖または分枝鎖アルキル (C１〜C６) または直鎖または分枝鎖アルケニル (C２〜C６) から個々に選択されてよく、R１０は、H、直鎖または分枝鎖アルキル (C１〜C６) または直鎖または分枝鎖アルケニル (C１〜C６) または個々に置換または非置換のアリール、ヘテロアリール、シクロアルキルまたはへテロシクロアルキルであってよい。
【００３４】
本発明は、式中のR２およびR５が水素であり、R１が水素または臭素またはハロゲンではない式I-1の化合物を含む。本発明は、式中のR１、R２、R３およびR５の全てが水素になることはない式I-2の化合物を含む。本発明は、式中のR５およびR３が水素であり、R２が水素である場合に、R１がハロゲンでなく、かつR１が水素である場合に、R２がフェニルではない式I-2の化合物を含む。本発明は、式中のR２およびR３が水素である場合に、R１がメチルまたはエチルではない式I-4の化合物を含む。本発明は、式中のR１、R２およびR４の全てが水素になることはない式II-5、II-9およびII-10の化合物を含む。本発明は、式中のR１、R２およびR４の全てが水素になることはない式II-6の化合物を含む。本発明は、R１、R２、R３およびR５の全てが水素になることはない式I-8の化合物を含む。
【００３５】
ここに記載されているようなこれらの好ましい実施形態および別の実施形態を含む組成物およびこれらを製造および使用する方法が、好ましい。
【００３６】
本発明の好ましい化合物は、式中のR１およびR２が個々に、存在しないか、ハロゲン、アルコキシ、カルボキシ、アミン、エステル、エーテル; 直鎖または分枝鎖アルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルアミノアルキルアミノ、アルコキシ、アリールオキシ、置換されていてもよいシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、-COR８ (ここで、R８は、置換されていてもよいアルキル、アリールまたはヘテロアリールである); 直鎖または分枝鎖アルキル、アルケニルまたはアルキニル、直鎖または分枝鎖アルキルアリール、1個または2個の縮合アリールまたはアリールを含有する置換されていてもよいアリールおよびシクロアルキル環; および1、2または3個のヘテロ原子および1または2個の縮合環を含有する置換されていてもよいヘテロアリールまたはへテロ環式環 (ここで、ヘテロ原子は、O、SおよびNから選択され、アリール、ヘテロアリールまたは複素環は場合によって、直鎖また分枝鎖アルキル、アルケニルまたはアルキニルによって式I-1の化合物に場合によって結合していてもよい) から選択される式I-1の化合物を含む。R５は、場合によって存在しないか、H、直鎖または分枝鎖アルキル、カルボニル、アルコキシ、カルボキシ、アミン、アルケニルまたはアルキニル、エステル、エーテル、1または2個の縮合したアリールまたはアリールを含有する置換されていてもよいアリールおよびシクロアルキル環; 置換されていてもよいシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、-COR８ (ここで、R８は、置換されていてもよいアルキル、アリールまたはヘテロアリールである); 1、2または3個のヘテロ原子および1または2個の縮合環を含有する置換されていてもよいヘテロアリールまたは複素環式環 (ここで、ヘテロ原子は、O、SおよびNから選択される) であり、ここで、本開示中に記載のアリール、シクロアルキル、ヘテロアリールまたは複素環は、場合によって、直鎖または分枝鎖アルキルまたは結合を介して式I-1の化合物に、または相互に結合していてよい。ここに記載されている付加的な置換基には、ハロゲン、アミノ、カルボニル、ヒドロキシル、ニトロ、ニトロソ、直鎖または分枝鎖アルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルアミノアルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルチオアルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルチオアルキルアリール、アルコキシ、アリールオキシ、直鎖または分枝鎖アルキル、直鎖または分枝鎖アルキルアリール、直鎖または分枝鎖アルキルへテロアリール、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキルおよび直鎖または分枝鎖アルキル複素環が含まれる。
【００３７】
本発明の好ましい化合物には、式中のR２が =Oまたは-OHあるいはメトキシ、エトキシ、プロポキシなどのアルコキシであり; R１およびR３がそれぞれ、存在しないか、またはハロゲン; 直鎖または分枝鎖アルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルアミノアルキルアミノ、アルコキシ、アリールオキシ、直鎖または分枝鎖アルキル、直鎖または分枝鎖アルキルアリール、1または2個の縮合アリールまたはアリールを含有する置換されていてもよいアリールおよびシクロアルキル環; および1、2または3個のヘテロ原子および1または2個の縮合環を含有する置換されていてもよいヘテロアリールまたはへテロ環式環 (ここで、ヘテロ原子は、O、SおよびNから選択され、アリール、ヘテロアリールまたは複素環は、直鎖または分枝鎖アルキル、アルケニルまたはアルキニルにより、式I-2の化合物に場合によって結合していてよい) から選択され; R５が場合によって存在しないか、H、直鎖または分枝鎖アルキル、カルボニル、1または2個の縮合アリールまたはアリールを含有する置換されていてもよいアリールおよびシクロアルキル環; 1、2または3個のヘテロ原子および1または2個の縮合環を含有する置換されていてもよいヘテロアリールまたは複素環式環 (ここで、ヘテロ原子は、O、SおよびNから選択され、アリール、ヘテロアリールまたは複素環は、直鎖または分枝鎖アルキルにより、式I-2の化合物に場合によって結合していてよい) である、式I-2の化合物が含まれる。ここに記載されている付加的な置換基には、ハロゲン、アミノ、カルボニル、ヒドロキシル、ニトロ、ニトロソ、直鎖または分枝鎖アルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルアミノアルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルチオアルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルチオアルキルアリール、アルコキシ、アリールオキシ、直鎖または分枝鎖アルキル、直鎖または分枝鎖アルキルアリール、直鎖または分枝鎖アルキルへテロアリール、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキルおよび直鎖または分枝鎖アルキル複素環が含まれる。
【００３８】
本発明の好ましい化合物には、式中のR１、R２およびR３が個々に、存在しないか、または個々に、ハロゲン; 直鎖または分枝鎖アルキルアミノ、直鎖または分枝鎖のアルキルアミノアルキルアミノ、アルコキシ、アリールオキシ、直鎖または分枝鎖アルキル、直鎖または分枝鎖アルキルアリール、1個または2個の縮合アリールまたはアリールを含有する置換されていてもよいアリールおよびシクロアルキル環; および1、2または3個のヘテロ原子および1または2個の縮合環を含有する置換されていてもよいヘテロアリールまたはへテロ環式環 (ここで、ヘテロ原子は、O、SおよびNから選択され、アリール、ヘテロアリールまたは複素環は場合によって、直鎖また分枝鎖アルキル、アルケニルまたはアルキニルによって式I-3aおよびI-3bの化合物に場合によって結合していてもよい) から選択される式I-3aおよびI-3bの化合物が含まれる。R５は、場合によって存在しないか、H、直鎖または分枝鎖アルキル、カルボニル、1または2個の縮合アリールまたはアリールを含有する置換されていてもよいアリールおよびシクロアルキル環; 1、2または3個のヘテロ原子および1または2個の縮合環を含有する置換されていてもよいヘテロアリールまたは複素環式環 (ここで、ヘテロ原子は、O、SおよびNから選択され、アリール、ヘテロアリールまたは複素環は、直鎖または分枝鎖アルキルにより、式I-3aまたはI-3bの化合物に場合によって結合していてよい) である。環の付加的な置換基には、ハロゲン、アミノ、カルボニル、ヒドロキシル、ニトロ、ニトロソ、直鎖または分枝鎖アルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルアミノアルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルチオアルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルチオアルキルアリール、アルコキシ、アリールオキシ、直鎖または分枝鎖アルキル、直鎖または分枝鎖アルキルアリール、直鎖または分枝鎖アルキルへテロアリール、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキルおよび直鎖または分枝鎖アルキル複素環が含まれる。
【００３９】
本発明の好ましい化合物には、式中のBがS、SOまたはSO２であり; R１が置換されていてもよいアルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、カルボキシ、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロゲン、-COR８ (ここで、R８は、H、-OH、置換されていてもよいアルキル、アルコキシである) または-OR６ (ここで、R６は、水素または置換されていてもよいアルキルである) であり; かつAが、N、C、CHまたはCH２である式I-3cの化合物が含まれる。式I-3cのAは好ましくは、NまたはCH２である。ここに記載されている付加的な置換基には、ハロゲン、アミノ、カルボニル、ヒドロキシル、ニトロ、ニトロソ、直鎖または分枝鎖アルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルアミノアルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルチオアルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルチオアルキルアリール、アルコキシ、アリールオキシ、直鎖または分枝鎖アルキル、直鎖または分枝鎖アルキルアリール、直鎖または分枝鎖アルキルへテロアリール、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキルおよび直鎖または分枝鎖アルキル複素環が含まれる。
【００４０】
本発明の好ましい化合物には、式中のR１、R２およびR５が独立に、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、置換されていてもよいアルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、カルボキシ、エステル、エーテル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール;-COR８ (ここで、R８は、H、-OH、置換されていてもよいアルキル、アルコキシである) または-OR６ (ここで、R６は独立に、水素または置換されていてもよいアルキルである) であり; Aが、C、CHまたはCH２である式I-3dの化合物が含まれる。ここに記載されている付加的な置換基には、ハロゲン、アミノ、カルボニル、ヒドロキシル、ニトロ、ニトロソ、直鎖または分枝鎖アルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルアミノアルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルチオアルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルチオアルキルアリール、アルコキシ、アリールオキシ、直鎖または分枝鎖アルキル、直鎖または分枝鎖アルキルアリール、直鎖または分枝鎖アルキルへテロアリール、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキルおよび直鎖または分枝鎖アルキル複素環が含まれる。
【００４１】
本発明の好ましい化合物には、式中のR１および/またはR５が独立に、ハロゲン、H、OH、=Oまたは置換されていてもよいアルキル、アルケニル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、-COR８ (ここで、R８は、H、-OH、置換されていてもよいアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはへテロアリールである) または-OR６または-NR６R７ (ここで、R６およびR７はそれぞれ独立に、水素または置換されていてもよいアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールである) である式I-3eの化合物が含まれる。ここに記載されている付加的な置換基には、ハロゲン、アミノ、カルボニル、ヒドロキシル、ニトロ、ニトロソ、直鎖または分枝鎖アルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルアミノアルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルチオアルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルチオアルキルアリール、アルコキシ、アリールオキシ、直鎖または分枝鎖アルキル、直鎖または分枝鎖アルキルアリール、直鎖または分枝鎖アルキルへテロアリール、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキルおよび直鎖または分枝鎖アルキル複素環が含まれる。
【００４２】
本発明の好ましい化合物には、式中のR１、R２およびR３が個々に、存在しないか、または個々に、ハロゲン; 直鎖または分枝鎖アルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルアミノアルキルアミノ、アルコキシ、アリールオキシ、直鎖または分枝鎖アルキル、直鎖または分枝鎖アルキルアリール、1または2個の縮合アリールまたはアリールを含有する置換されていてもよいアリールおよびシクロアルキル環; 1、2または3個のヘテロ原子および1または2個の縮合環を含有する置換されていてもよいヘテロアリールまたはへテロ環式環 (ここで、ヘテロ原子は、O、SおよびNから選択され、アリール、ヘテロアリールまたは複素環は、直鎖または分枝鎖アルキル、アルケニルまたはアルキニルにより、式I-4の化合物に場合によって結合していてよい) から選択される式I-4の化合物が含まれる。ここに記載されている付加的な置換基には、ハロゲン、アミノ、カルボニル、ヒドロキシル、ニトロ、ニトロソ、直鎖または分枝鎖アルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルアミノアルキルアミノ、アルコキシ、アリールオキシ、直鎖または分枝鎖アルキル、直鎖または分枝鎖アルキルアリール、直鎖または分枝鎖アルキルへテロアリール、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキルおよび直鎖または分枝鎖アルキル複素環が含まれる。
【００４３】
本発明の好ましい化合物には、式中のR１およびR２が個々に、存在しないか、または個々に、ハロゲン; 直鎖または分枝鎖アルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルアミノアルキルアミノ、アルコキシ、アリールオキシ、直鎖または分枝鎖アルキル、直鎖または分枝鎖アルキルアリール、1または2個の縮合アリールまたはアリールを含有する置換されていてもよいアリールおよびシクロアルキル環; 1、2または3個のヘテロ原子および1または2個の縮合環を含有する置換されていてもよいヘテロアリールまたはへテロ環式環 (ここで、ヘテロ原子は、O、SおよびNから選択され、アリール、ヘテロアリールまたは複素環は、直鎖または分枝鎖アルキル、アルケニルまたはアルキニルにより、式II-5、II-9、II-10またはII-6の化合物に場合によって結合していてよい) から選択される式II-5、II-9、II-10およびII-6の化合物が含まれる。R４は、前記のように定義される。ここに記載されている付加的な置換基には、ハロゲン、アミノ、カルボニル、ヒドロキシル、ニトロ、ニトロソ、直鎖または分枝鎖アルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルアミノアルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルチオアルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルチオアルキルアリール、アルコキシ、アリールオキシ、直鎖または分枝鎖アルキル、直鎖または分枝鎖アルキルアリール、直鎖または分枝鎖アルキルへテロアリール、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキルおよび直鎖または分枝鎖アルキル複素環が含まれる。
【００４４】
本発明の好ましい化合物には、式中のR１、R２およびR３が個々に、存在しないか、または個々に、ハロゲン; 直鎖または分枝鎖アルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルアミノアルキルアミノ、アルコキシ、アリールオキシ、直鎖または分枝鎖アルキル、直鎖または分枝鎖アルキルアリール、1または2個の縮合アリールまたはアリールを含有する置換されていてもよいアリールおよびシクロアルキル環; 1、2または3個のヘテロ原子および1または2個の縮合環を含有する置換されていてもよいヘテロアリールまたはへテロ環式環 (ここで、ヘテロ原子は、O、SおよびNから選択され、アリール、ヘテロアリールまたは複素環は、直鎖または分枝鎖アルキル、アルケニルまたはアルキニルにより、式I-7aおよびI-7bの化合物に場合によって結合していてよい) から選択される式I-7aおよびI-7bの化合物が含まれる。R５は、場合によって存在しないか、または、H、直鎖または分枝鎖アルキル、カルボニル、1または2個の縮合アリールまたはアリールを含有する置換されていてもよいアリールおよびシクロアルキル環; 1、2または3個のヘテロ原子および1または2個の縮合環を含有する置換されていてもよいヘテロアリールまたはへテロ環式環 (ここで、ヘテロ原子は、O、SおよびNから選択され、アリール、ヘテロアリールまたは複素環は、直鎖または分枝鎖アルキルにより、式I-7aおよびI-7bの化合物に場合によって結合していてよい) である。ここに記載されている付加的な置換基には、ハロゲン、アミノ、カルボニル、ヒドロキシル、ニトロ、ニトロソ、直鎖または分枝鎖アルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルアミノアルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルチオアルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルチオアルキルアリール、アルコキシ、アリールオキシ、直鎖または分枝鎖アルキル、直鎖または分枝鎖アルキルアリール、直鎖または分枝鎖アルキルへテロアリール、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキルおよび直鎖または分枝鎖アルキル複素環が含まれる。
【００４５】
本発明の好ましい化合物には、式中のR１、R２およびR３が個々に、存在しないか、または個々に、ハロゲン; 直鎖または分枝鎖アルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルアミノアルキルアミノ、アルコキシ、アリールオキシ、直鎖または分枝鎖アルキル、直鎖または分枝鎖アルキルアリール、1または2個の縮合アリールまたはアリールを含有する置換されていてもよいアリールおよびシクロアルキル環; 1、2または3個のヘテロ原子および1または2個の縮合環を含有する置換されていてもよいヘテロアリールまたはへテロ環式環 (ここで、ヘテロ原子は、O、SおよびNから選択され、アリール、ヘテロアリールまたは複素環は、直鎖または分枝鎖アルキル、アルケニルまたはアルキニルにより、式I-8の化合物に場合によって結合していてよい) から選択される式I-8の化合物が含まれる。R５は、場合によって存在しないか、または、H、直鎖または分枝鎖アルキル、カルボニル、1または2個の縮合アリールまたはアリールを含有する置換されていてもよいアリールおよびシクロアルキル環; 1、2または3個のヘテロ原子および1または2個の縮合環を含有する置換されていてもよいヘテロアリールまたはへテロ環式環 (ここで、ヘテロ原子は、O、SおよびNから選択され、アリール、ヘテロアリールまたは複素環は、直鎖または分枝鎖アルキルにより、式I-8の化合物に場合によって結合していてよい) である。ここに記載されている付加的な置換基には、ハロゲン、アミノ、カルボニル、ヒドロキシル、ニトロ、ニトロソ、直鎖または分枝鎖アルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルアミノアルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルチオアルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルチオアルキルアリール、アルコキシ、アリールオキシ、直鎖または分枝鎖アルキル、直鎖または分枝鎖アルキルアリール、直鎖または分枝鎖アルキルへテロアリール、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキルおよび直鎖または分枝鎖アルキル複素環が含まれる。
【００４６】
本発明の好ましい化合物には、R２が、ハロゲン、アミン、-COR８ (ここで、R８は、置換されていてもよいアルキル、アリールまたはヘテロアリールである) または置換されていてもよいアルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、カルボキシ、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールである式I-11の化合物が含まれる。ここに記載されている付加的な置換基には、ハロゲン、アミノ、カルボニル、ヒドロキシル、ニトロ、ニトロソ、直鎖または分枝鎖アルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルアミノアルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルチオアルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルチオアルキルアリール、アルコキシ、アリールオキシ、直鎖または分枝鎖アルキル、直鎖または分枝鎖アルキルアリール、直鎖または分枝鎖アルキルへテロアリール、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキルおよび直鎖または分枝鎖アルキル複素環が含まれる。
【００４７】
本発明の好ましい化合物には、式中のR１が、ハロゲン、アミンまたは置換されていてもよいアルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、カルボキシ、シクロアルコキシ、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールである式I-12の化合物が含まれる。ここに記載されている付加的な置換基には、ハロゲン、アミノ、カルボニル、ヒドロキシル、ニトロ、ニトロソ、直鎖または分枝鎖アルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルアミノアルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルチオアルキルアミノ、直鎖または分枝鎖アルキルチオアルキルアリール、アルコキシ、アリールオキシ、直鎖または分枝鎖アルキル、直鎖または分枝鎖アルキルアリール、直鎖または分枝鎖アルキルへテロアリール、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキルおよび直鎖または分枝鎖アルキル複素環が含まれる。
【００４８】
好ましくは、本発明の化合物は、ここに記載されている方法により測定して、インビトロでのPARPの阻害に関して、約100μMまたはそれ未満、好ましくは約50μM未満、さらに好ましくは約10μM未満あるいは1μM未満、最も好ましくは約0.1μMのIC５０を示す。
【００４９】
本発明の特殊な実施形態には、実施例および表IIIで下記に示す化合物およびその中性および/または塩の形、さらに、適切な場合には、その鏡像異性体およびラセミ混合物が含まれる。
【００５０】
概して、本発明の化合物および組成物は、ヒトなどの動物での壊死またはアポトーシス、脳虚血および再灌流障害または神経変性疾患による細胞損傷または細胞死を治療または予防するために使用することができる。本発明の化合物および組成物は、細胞の寿命および増殖能を延長するために使用することができるので、これらが関与する疾患を治療または予防するために使用することができ、老化細胞の遺伝子発現を変化させ、かつ低酸素腫瘍細胞を放射線増感する。好ましくは、本発明の化合物および組成物は、壊死またはアポトーシスによる細胞損傷または細胞死に由来する組織損傷を治療または予防し、および/またはNMDA毒性に仲介されるか、仲介されないニューロン活性に効果を及ぼす。本発明の化合物は、グルタミン酸塩仲介神経毒および/またはNO仲介生体経路を治療する際に使用することができるだけではない。さらに、本発明の化合物は、ここに記載するように、PARP活性が関与する他の組織損傷を治療または予防するために使用することもできる。
【００５１】
本発明は、ポリ (ADP-リボース) ポリメラーゼ (PARP) のインビトロおよび/またはインビボでのポリメラーゼ活性を阻害する化合物および開示されている化合物を含有する組成物を提供する。
【００５２】
本発明は、溶液、細胞、組織、臓器または臓器系のいずれかでの、ポリ (ADP-リボース) ポリメラーゼ (PARP) のインビトロおよび/またはインビボでのポリメラーゼ活性を阻害、制限および/または制御する方法を提供する。一実施形態では、本発明は、局所的または全身的に、ヒトなどの哺乳動物でPARP活性を制限または阻害する方法を提供する。
【００５３】
本発明は、PARPの生産の増大により増悪するか、またはこれが関与する疾患、症候群および/または症状を治療および/または予防する方法を提供する。これらの方法は、本発明の化合物を、このような治療または予防を必要とするヒトの細胞、組織、臓器または臓器系に適用または投与することを伴う。
【００５４】
一実施形態では、本発明は、脳虚血または再灌流障害に由来する脳血管組織損傷を治療および/または予防する方法を提供する。再灌流障害は例えば、心臓バイパス手術の終了時に、または心停止で血液を受けられなかった心臓が再灌流し始める際に生じ、これらの方法は、本発明の化合物および組成物を、好ましくは再灌流の前またはその直後に投与して、再灌流障害が予防、治療または低減されるようにすることを含む。さらに本発明は、血管発作、心臓血管疾患を予防および/または治療する方法も提供する。
【００５５】
別の実施形態では、本発明は、細胞の寿命および/または増殖能を延長または増大させるインビトロまたはインビボ方法を、したがってさらに、これらが関与する疾患および、皮膚加齢、アテローム硬化症、変形性関節症、骨粗しょう症、筋ジストロフィ、複製老化を伴う骨格筋の変性疾患、年齢依存性筋変性、免疫老化、AIDSおよび他の免疫老化疾患を含む細胞老化により惹起または増悪される疾患ならびに細胞老化および加齢に伴う他の疾患を治療および/または予防する方法、さらに、老化細胞の遺伝子発現を変える方法を提供する。
【００５６】
さらなる実施形態では、本発明は、ガンの作用を治療または予防または改善する方法および/または放射線治療に対して腫瘍細胞をより感受性があるようにするために低酸素症腫瘍細胞を放射線増感して、放射線治療後のDNAのほぼ致命的な損傷から、腫瘍細胞が再生することを予防する方法を提供する。この実施形態の方法は、特に、そして優先的には、腫瘍細胞を放射線増感して、非腫瘍細胞よりも腫瘍細胞が放射線治療に対して感受性があるようにすることを対象としている。
【００５７】
さらに別の実施形態では、本発明は、血管発作、心臓血管障害を予防および/または治療するための; 年齢依存性筋変性、AIDSおよび他の免疫老化疾患、炎症、関節炎、痛風、アテローム硬化症、悪液質、ガン、複製老化を伴う骨格筋の変性疾患、糖尿病、頭部外傷、脊髄損傷、免疫老化、痛風、炎症、炎症性腸障害 (大腸炎およびクローン病など)、急性膵炎、粘膜炎、出血性ショック、内臓動脈閉塞ショック、多臓器不全 (腎臓、肝臓、腎臓、肺、網膜、すい臓および/または骨格筋系など)、急性自己免疫性甲状腺炎、筋ジストロフィ、変形性関節症、骨粗しょう症、慢性および/または急性疼痛 (神経痛など)、腎不全、網膜虚血、敗血症性ショック (内毒素性ショックなど)、局所および/または遠隔内皮細胞機能障害 (内皮依存性 (endo-dependent) 弛緩応答および接着分子のアップレギュレーションにより認識されるようなもの)、炎症および皮膚加齢などの他の症状および/または疾患を治療する方法を提供する。
【００５８】
本発明の化合物は、例えば非経口的に、急性網膜虚血または急性血管発作と診断されたヒトに、間欠的または継続的な静脈投与により、一回用量で、または一連の分割された用量により投与することができる。本発明の化合物は、組み合わせて、または連続的に使用することができる。式I、I-1、I-2、I-3a、I-3b、I-3c、I-3d、I-3e、I-4、II-5、II-6、II-9、II-10、I-7a、I-7b、I-8、I-11またはI-12の化合物を含有する生体親和性で、生分解性のポリマーマトリックス輸送システムの体内移植を介するか、脳の梗塞領域に直接的に化合物を投与するために挿入された硬膜下ポンプを介して、間欠的または継続的に投与することにより、本発明の化合物は、投与することができる。
【００５９】
他の実施形態では、本発明は、例えば、オキシダントの発生での一般メディエイタ、炎症前メディエイタおよび/またはサイトカインおよび/または白血球浸潤の一般メディエイタ、カルシウムイオン過負荷、リン脂質過酸化、一酸化窒素代謝損傷および/またはATP産生低減として本発明の化合物を使用するような、細胞の寿命および増殖能力を延長する方法を提供する。
【００６０】
例えば、本発明の化合物は、心臓虚血または再灌流障害に由来する心臓血管組織損傷を治療または予防することができる。再灌流障害は例えば、心臓バイパス手術の終了時に、または心停止で、血液を受けられなかった心臓が、再灌流を開始する際に生じる。
【００６１】
本発明の化合物はさらに、本発明は、細胞の寿命または増殖能を延長または増大させるために、したがって、これらが関与する疾患および、皮膚加齢、アテローム硬化症、変形性関節症、骨粗しょう症、筋ジストロフィ、複製老化を伴う骨格筋の変性疾患、年齢依存性筋変性、免疫老化、AIDSおよび他の免疫老化疾患を含む細胞老化により惹起または増悪される疾患ならびに細胞老化および加齢に伴う他の疾患を治療および/または予防するために、さらに、老化細胞の遺伝子発現を変えるために使用することができる。これらの化合物は、ガンを治療するために、かつ放射線治療に対して腫瘍細胞をより感受性があるようにするために低酸素症腫瘍細胞を放射線増感するために、さらに、おそらくDNA修復を予防するその能力により、放射線治療後のDNAのほぼ致命的な損傷から、腫瘍細胞が再生することを予防するために使用することができる。本発明の化合物は、血管発作を予防または治療するために; 心臓血管障害を予防および/または治療するために; 年齢依存性筋変性、AIDSおよび他の免疫老化疾患、炎症、関節炎、痛風、アテローム硬化症、悪液質、ガン、複製老化を伴う骨格筋の変性疾患、糖尿病、頭部外傷、免疫老化、痛風、炎症性腸障害 (大腸炎およびクローン病など)、筋ジストロフィ、変形性関節症、骨粗しょう症、慢性および/または急性疼痛 (神経痛など)、腎不全、網膜虚血、敗血症性ショック (内毒素性ショックなど)、および皮膚加齢などの他の症状および/または疾患を治療するために使用することができる。
【００６２】
好ましくは、本発明の化合物は、壊死またはアポトーシスによる細胞死または細胞損傷に由来する組織損傷を治療または予防するための; 動物での脳虚血および再灌流障害に由来する神経組織損傷または神経変性疾患を治療または予防するための; 細胞の寿命および増殖能を延長または増大させるための; 老化細胞の遺伝子発現を変えるための; 腫瘍細胞を放射線増感させるためのPARP阻害剤として作用する。
【００６３】
本発明の他の特に好ましい実施形態は、(i) 治療的に有効な量の式I、I-1、I-2、I-3a、I-3b、I-3c、I-3d、I-3e、I-4、II-5、II-6、II-9、II-10、I-7a、I-7b、I-8、I-11またはI-12の化合物および (ii) 薬剤として許容される担体を含む薬剤組成物である。
【００６４】
ここで使用する場合、「アルキル」は、特に記載のない限り、所定の数の炭素原子を含む分枝鎖または非分枝鎖飽和炭化水素鎖を意味する。例えば、C１〜C６直鎖または分枝鎖アルキル炭化水素鎖は、1から6個の炭素原子を含有し、特に記載のない限り、これらに限らないが、メチル、エチル、プロピル、イソ-プロピル、ブチル、イソ-ブチル、t-ブチル、n-ペンチル、n-ヘキシルなどの置換基を含有する。
【００６５】
アルキル鎖の付加的な置換基には、メルカプト、カルボキシ、ヒドロキシまたはフェニル、ベンジルまたはフェニルエチルが含まれ、これら自体も、ヒドロキシ、ハロ、メトキシ、C１〜C６アルキル、アミンおよびカルボキシで置換されていてもよい。
【００６６】
「アルケニル」は、特に記載のない限り、所定の数の炭素原子を含む分枝鎖または非分枝鎖不飽和炭化水素鎖を意味する。例えば、C２〜C６直鎖または分枝鎖アルケニル炭化水素鎖は、少なくとも1個の二重結合を有する2から6個の炭素原子を含有し、特に記載のない限り、これらに限らないが、エテニル、プロペニル、イソプロペニル、ブテニル、イソ-ブテニル、t-ブテニル、n-ペンテニル、n-ヘキセニルなどの置換基が含まれる。
【００６７】
「アルコキシ」は、基-ORを意味し、ここで、Rは、前記のようなアルキルである。好ましくは、Rは、1から6個の炭素原子を含有する分枝鎖または非分枝鎖飽和炭化水素鎖である。
【００６８】
「シクロ」は、ここで接頭辞として使用する場合、閉環により特徴付けられる構造のことである。
【００６９】
「ハロ」は、特に記載のない限り、少なくとも1個のフルオロ、クロロ、ブロモまたはヨード成分を意味する。
【００７０】
「アミノ」化合物には、アミン (NH２)、さらに1から6個の炭素からなるアルキルを含む置換されているアミノ基が含まれる。アルキルアミノ化合物には、例えばC１〜C６アルキルのアルキル基で置換されている2級および3級アミンが含まれる。アルキルアミノアルキルおよびアルキルアミノアルキルアミノは、2級および3級アミノ基およびアルキル鎖内に複数のアミノ基を有するアルキル鎖である。
【００７１】
「アリール」または「ヘテロアリール」は、置換または非置換の成分、特に、環式または縮合環を意味し、3、4、5、6、7または8員の環などの単環式、二環式または三環式、炭素環式または複素環式環が含まれ、ここで、環は、非置換であるか、または1から5個の位置で、ハロ、ハロアルキル、ヒドロキシル、ニトロ、トリフルオロメチル、C１〜C６直鎖または分枝鎖アルキル、C２〜C６直鎖または分枝鎖アルケニル、C１〜C６アルコキシ、-C (O)-O (C１〜C６アルキル)、カルボキシ、C２〜C６アルケニルオキシ、フェノキシ、ベンジルオキシ、アミノ、チオカルボニル、エステル、チオエステル、シアノ、イミノ、アルキルアミノ、アミノアルキル、スルフヒドリル、チオアルキルおよびスルホニルで置換されており; 個々の環サイズは、好ましくは5〜8員であり; 複素環は、O、NまたはSまたはこれらの混合物からなる群から選択される1〜4個のヘテロ原子を含有し; 芳香族または3級アルキルアミンは、場合によって酸化されて、対応するN-酸化物になる。ヘテロアリールは、他の環に結合しているか、環のヘテロ原子および/または炭素原子により置換されていてよく、アリールおよびヘテロアリールは、複数回、2および/または3個相互に、例えば、アルキルまたはアルケニル (C１〜C６などの直鎖または分枝鎖) 鎖を介して架橋しているか、これとは逆に、さらに縮合している。同様に、アリールおよびヘテロアリールは、例えばアルキルまたはアルケニル (C１〜C６などの直鎖または分枝) 鎖を介して核化合物に結合していてもよい。特に好ましいアリールまたはへテロアリール成分には、これらに限らないが、フェニル、ベンジル、ナフチル、ピペリジノ、ピロリル、ピロリジニル、ピリジニル、ピリミジニル、プリニル、キノリニル、イソキノリニル、フリル、チオフェニル、イミダゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、ピラゾリルおよびチエニルが含まれる。
【００７２】
「フェニル」には、アミノ、カルボキシ、トリフルオロメチル、C１〜C６直鎖または分枝鎖アルキル、C２〜C６直鎖または分枝鎖アルケニル、カルボニル、チオカルボニル、エステル、チオエステル、アルコキシ、アルケノキシ、シアノ、ニトロ、イミノ、アルキルアミノ、アミノアルキル、スルフヒドリル、チオアルキル、スルホニル、ヒドロキシ、ハロ、ハロアルキル、NR２ (ここで、R２は、水素、(C１〜C６)直鎖または分枝鎖アルキル、(C３〜C６)直鎖または分枝鎖アルケニルまたはアルキニルからなる群から選択される) および2、3または4個の縮合フェニル環からなる群から選択される置換基でモノ置換またはマルチ置換されていてもよい全ての可能な異性体フェニルラジカルが含まれる。
【００７３】
場合によって、複素環を生じる少なくとも1個のヘテロ原子を含有するシクロアルキルには、飽和C３〜C８環、好ましくはC５またはC６環が含まれ、ここで、O、NまたはSから選択される1、2、3または4個のヘテロ原子が場合によって、環炭素原子と代わっている。場合によって、前記のような少なくとも1個のヘテロ原子を含有するシクロアルキルは、少なくとも1個の5員または6員のアリールまたはヘテロアリールで置換または縮合されていてよいか、かつ/または、少なくとも1個のアミノ、C１〜C５直鎖または分枝鎖アルキル、C１〜C６アルカノール、C１〜C６直鎖または分枝鎖アルキルアミノ、C１〜C６アルコキシまたはC１〜C６アルケニルまたはベンジルまたはフェニルまたはフェニルエチルで置換されていてよく、ここで、環は、「フェニル」の置換基に関する前記のように、置換されていてよい。ヘテロシクロアルキルは、他の環に結合しているか、環のヘテロ原子および/または炭素原子で置換されていてよく、シクロアルキルおよびへテロシクロアルキルは、複数回、2および/または3個相互に、例えば、アルキルまたはアルケニル (C１〜C６などの直鎖または分枝) 鎖を介して架橋しているか、これとは逆に、さらに縮合している。同様に、シクロアルキルおよびへテロシクロアルキルは、例えばアルキルまたはアルケニル (C１〜C６などの直鎖または分枝) 鎖を介して核化合物に結合していてもよい。
【００７４】
少なくとも1個または2個のヘテロ原子を含有する好ましいシクロアルキルには、
【化３２】
0004323802.tif 000017
ピロリジニル、イミダゾリジニル、ピラゾリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、モルホリノおよびチオモルホリノが含まれる。
【００７５】
本発明の化合物は、1個または複数の不斉中心を有することもあり、したがって、立体異性体の混合物 (ラセミおよび非ラセミ) として、または個々の鏡像異性体またはジアステレオ異性体として生じうる。光学的に活性な出発物質を使用することにより、合成のいくつかの適切な段階で中間体のラセミまたは非ラセミ混合物を分離することにより、または式I、I-1、I-2、I-3a、I-3b、I-3c、I-3d、I-4、II-5、II-6、II-9、II-10、I-7a、I-7b、I-8、I-11またはI-12のいずれかの化合物を分解することにより、個々の立体異性体を得ることができる。個々の立体異性体も、立体異性体の混合物 (ラセミおよび非ラセミ) も、本発明の範囲内に包含されることは、理解されるであろう。
【００７６】
本発明の化合物は、遊離塩基の形で、薬剤として許容される塩、薬剤として許容される水和物、薬剤として許容されるエステル、薬剤として許容される溶媒和物、薬剤として許容されるプロドラッグ、薬剤として許容される代謝産物の形で、かつ薬剤として許容される立体異性体の形で使用することができる。これらの形態は全て、本発明の範囲内である。実際には、これらの形態の使用は、中性化合物の使用と同然である。
【００７７】
「薬剤として許容される塩」、「水和物」、「エステル」または「溶媒和物」とは、所望の薬理学的活性を有し、生物学的にも、その他にも不所望ではない本発明の化合物の塩、水和物、エステルまたは溶媒和物のことである。塩、水和物、エステルまたは溶媒和物を製造するために、酢酸、アジピン酸、アルギン酸、アスパラギン酸、安息香酸、ベンゼンスルホン酸、p-トルエンスルホン酸、重硫酸、スルファミン酸、硫酸、ナフチル酸、酪酸、クエン酸、樟脳酸、樟脳スルホン酸、シクロペンタン-プロピオン酸、ジグルコン酸、ドデシル硫酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコヘプタン酸、グリセロリン酸、ヘミ硫酸、ヘプタン酸、ヘキサン酸、2-ヒドロキシエタンスルホン酸、乳酸、マレイン酸、メタンスルホン酸、2-ナフタレンスルホン酸、ニコチン酸、シュウ酸、トシル酸およびウンデカン酸などの有機酸を使用することができる。塩、水和物、エステルまたは溶媒和物を製造するために、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸およびチオシアン酸などの無機酸を使用することができる。
【００７８】
適切な塩基塩、水和物、エステルまたは溶媒和物の例には、アンモニアの水酸化物、炭酸塩および重炭酸塩、ナトリウム、リチウムおよびカリウム塩などのアルカリ金属塩、カルシウムなどのアルカリ土類金属塩およびマグネシウム塩、アルミニウム塩および亜鉛塩が含まれる。
【００７９】
塩、水和物、エステルまたは溶媒和物は、有機塩基を用いて生じさせることもできる。本発明の化合物の薬剤として許容される塩基付加塩、水和物、エステルまたは溶媒和物を生じさせるために適した有機塩基には、毒性が無く、このような塩、水和物、エステルまたは溶媒和物を生じさせるに十分に強力なものが含まれる。詳細には、このような有機塩基の群には、メチルアミン、ジメチルアミン、トリエチルアミンおよびジシクロヘキシルアミンなどのモノ-、ジ-およびトリアルキルアミン; モノ-、ジ-およびトリエタノールアミンなどのモノ-、ジ-およびトリヒドロキシアルキルアミン; アルギニンおよびリシンなどのアミノ酸; グアニジン; N-メチル-グルコサミン; N-メチル-グルカミン; L-グルタミン; N-メチル-ピペラジン; モルホリン; エチレンジアミン; N-ベンジル-フェネチルアミン; (トリヒドロキシ-メチル) アミノエタン; などが含まれてよい。例えば、"Pharmaceutical Salts," J. Pharm. Sci.、66: 1、1-19 (1977) 参照。したがって、塩基性窒素含有基を、塩化、臭化およびヨウ化メチル、エチル、プロピル、およびブチルなどのハロゲン化低級アルキル; 硫酸ジメチル、ジエチル、ジブチルおよびジアミルなどの硫酸ジアルキル; 塩化、臭化およびヨウ化デシル、ラウリル、ミリスチルおよびステアリルなどの長鎖ハロゲン化物、および臭化ベンジル、フェネチルなどのハロゲン化アラルキルを含む薬剤で四級化することもできる。
【００８０】
塩基性化合物の酸付加塩、水和物、エステルまたは溶媒和物は、本発明のPARP阻害剤の遊離塩基を、適切な酸または塩基を含有する水性または水性アルコール溶液または他の適切な溶剤に溶かし、溶液を蒸発させることにより塩を単離することにより調製することができる。もしくは、反応を有機溶剤中で行うように、本発明のPARP阻害剤の遊離塩基を、酸と反応させるか、その上に酸基を有するPARP阻害剤を塩基と反応させることができ、この際、塩をそのまま分離するか、または溶液を濃縮することにより得ることができる。
【００８１】
「薬剤として許容されるプロドラッグ」とは、その薬理学的効果を示す前に、生体内変化を受ける本発明の化合物の誘導体のことである。化学的安定性の改善、患者の受容および服薬順守の改善、生体親和性の改善、作用期間の延長、臓器選択性の改善、処方の改善 (例えば、水溶性の上昇) および/または副作用 (例えば、毒性) の低下を目的として、プロドラッグは処方される。Burger's Medicinal Chemistry and Drug Chemistry、Fifth Ed、Vol. 1、pp. 172-178、949-982 (1995) に記載されているような先行技術で知られている方法を使用して、本発明の化合物から、プロドラッグは容易に調製することができる。例えば、1個または複数のヒドロキシまたはカルボキシ基をエステルに変えることにより、本発明の化合物をプロドラッグに変えることができる。
【００８２】
「薬剤として許容される代謝産物」は、代謝変換を受ける薬剤のことである。体内に入った後では、大抵の薬剤は、その物理的特性および生物学的作用を変化させうる化学的反応のための基質である。通常は、化合物の極性に作用を及ぼすこれらの代謝変換は、薬物が、体内に分布し、体内から排泄される様式を変更する。しかしながら、ある場合には、薬物の代謝が、治療効果に必要とされる。例えば、代謝拮抗物質群の抗ガン剤は、ガン細胞に輸送された後に、その活性形に変換されるべきである。大抵の薬物は、ある種の代謝変換を受けるので、薬物代謝に一定の役割を果たす生体化学反応は、多く、かつ多様である。薬物代謝の主な部分は、肝臓であるが、他の組織も関与しうる。
【００８３】
「神経変性疾患」という用語には、アルツハイマー病、パーキンソン病およびハンチントン病が含まれる。
【００８４】
「神経損傷」という用語は、神経組織の損傷およびそれにより生じる障害または死のことである。神経損傷の原因は、代謝、毒性、神経毒性、医原性、熱的または化学的なものであり、これらに限らないが、虚血、低酸素症、脳血管障害、外傷、外科手術、圧力、質量作用、出血、放射線、血管痙攣、神経変性疾患、感染、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症 (ALS)、髄鞘形成/脱髄プロセス、てんかん、認識障害、グルタミン酸異常およびその二次的作用が含まれる。
【００８５】
「神経保護」という用語は、神経障害を低減、阻止または改善し、神経障害を受けた神経組織を保護、蘇生または復活させる作用に関する。
【００８６】
「神経変性の予防」という用語には、神経変性疾患を有すると診断されているか、神経変性疾患が進行するリスクを負っている患者において、神経変性を阻止する能力が含まれる。この用語はさらに、既に神経変性疾患の症状を患っているか、その症状を有する患者において、さらなる神経変性を阻止することも包含する。
【００８７】
「治療する」という用語は:
(i) 疾患、障害および/または症状にかかりやすいが、未だ、それらを有するとは診断されていない動物で疾患、障害または症状が起こることを予防すること;
(ii) 疾患、障害または症状を阻害する、即ちその進行を阻止すること; および
(iii) 疾患、障害または症状を軽減する、即ち、疾患、障害および/または症状を後退させることである。
【００８８】
「虚血および再灌流障害および神経変性疾患に由来する神経組織損傷」という用語には、血管発作および全身および焦点性虚血に見られるような神経毒性が含まれる。
【００８９】
多くのこれらの変換の特徴は、代謝産物が、親薬物よりも極性であることを特徴とするが、極性薬剤は時折、より低い極性の生成物をもたらす。膜を容易に通過する高い脂質/水-分配係数を有する物質は、尿細管の尿から尿細管性細胞を通って、血漿へと容易に逆拡散する。したがって、このような物質は、低い腎クリアランスおよび体内での長期残存性を有する傾向がある。薬物が代謝されて、より極性な化合物、比較的低い分配係数を有する化合物になると、その尿細管再吸収は、著しく低下する。さらに、近位尿細管および実質肝細胞でのアニオンおよびカチオンに関する特異的分泌メカニズムは、高い極性物質に作用を及ぼす。
【００９０】
特異的な例として、フェナセチン (アセトフェネチジン) およびアセトアニリドは両方とも、穏やかな鎮痛薬および解熱薬であるが、いずれも、体内で変換されて、より極性で、より有効な代謝産物、p-ヒドロキシアセトアニリド (アセトアミノフェン) になり、今日では、広く使用されている。アセトアニリド用量をヒトに与えると、連続的な代謝産物ピークおよび低下が、連続的に血漿中で生じる。初めの1時間内では、アセトアニリドは、主要な血漿成分である。次の1時間では、アセトアニリドレベルが低下して、代謝産物アセトアミノフェン濃度が、ピークに達する。最後に、数時間後には、主な血漿成分は、不活性で、体内から排泄されうるさらなる代謝産物である。したがって、1種または複数の代謝産物、さらに薬物自体の血漿濃度は、薬理学的に重要となりうる。
【００９１】
薬物代謝産物に関わる反応は、表IIに示されているように、2つの群に分類される。第I期 (または官能化) 反応は通常、(1) 官能基を変えて、新たな官能基を作る酸化および還元反応および (2) マスクされている官能基を開放するために、エステルおよびアミドを分離する加水分解反応からなる。これらの変化は通常、極性上昇を対象としている。
【００９２】
第II期反応は、薬物またはしばしば薬物の代謝産物が、グルクロン酸、酢酸または硫酸などの内在基質に結合する結合反応である。
【００９３】
表II
第I期反応 (官能化反応):
(1) 肝ミクロソームP450系による酸化:
脂肪族酸化
芳香族水酸化
N-脱アルキル
O-脱アルキル
S-脱アルキル
エポキシ化
酸化脱アミノ
スルホキシド形成
脱硫化
N-酸化およびN-水酸化
脱ハロゲン
(2) 非ミクロソームメカニズムによる酸化:
アルコールおよびアルデヒド酸化
プリン酸化
酸化脱アミノ (モノアミンオキシダーゼおよびジアミンオキシダーゼ)
(3) 還元:
アゾおよびニトロ還元
(4) 加水分解:
エステルおよびアミド加水分解
ペプチド結合加水分解
エポキシド水和
第II期反応 (結合反応):
(1) グルクロン化 (Glucuronidation)
(2) アセチル化
(3) メルカプト酸形成
(4) 硫酸塩結合
(5) N-、O-およびS-メチル化
(6) トランス-硫化。
【００９４】
本発明の化合物は、薬理学的活性を示し、したがって、薬剤として使用することができる。特に、本化合物は、中枢神経および心臓血管系活性を示す。
【００９５】
可能な場合には、互変異性形も、本発明に含まれる。
【００９６】
本発明のPARP阻害剤の多くは、知られている出発物質から、知られている方法により合成することができる。
【００９７】
通常、本発明の組成物中で使用されるPARP阻害剤は、インビトロでのポリ (ADP-リボース) ポリメラーゼの阻害に関して、約20μMまたはそれ未満、好ましくは約10μM未満、さらに好ましくは約1μM未満あるいは好ましくは0.1μM未満、最も好ましくは約0.01μM未満のIC５０を示す。
【００９８】
PARP阻害剤3,4-ジヒドロ-5-[4-(1-ピペリジニル) ブトキシ]-1(2H)-イソキノリンは例えば、前記のSuto et al. により、40nMのIC５０で、PARPを阻害すると報告されている。
【発明を実施するための最良の形態】
【００９９】
本発明の化合物は、次のように調製することができる。
【０１００】
実施例1
次の一般式I-1の化合物は、例えば次の方法により調製することができる。
【化３３】
0004323802.tif 000018
スキームI-1
下記のスキーム1は、実施例化合物1から6の調製を概略的に示している。
【０１０１】
スキーム1
【化３４】
0004323802.tif 000019
【０１０２】
ステップ1
インドール-4-カルボン酸メチル1 (7.2g、41.09mmol、市販) を、無水CH２Cl２ (220mL) に溶かした。この攪拌溶液に、ZnCl２ (11.53g、84.64mmol) を加えた。この混合物を0℃に冷却し、CH３MgBr (5.39g、45.19mmol) を徐々に加えた。0℃で15分間、室温で1時間攪拌した。この混合物に、塩化クロロアセチルを加え、2時間攪拌した。次いで、AlCl３を加え、この混合物を、付加的に18時間攪拌した。反応混合物を0℃に冷却し、冷水 (60mL) で洗浄し、かつ付加的なCH２Cl２ (2×60mL) で抽出した。有機層をブラインで洗浄し、MgSO４上で乾燥させ、乾燥するまで濃縮した。粗製の固体残留物をエーテル中で粉砕すると、良好なオフホワイト色の固体2 (5.1g) が得られ、これを、さらに精製することなく、次のステップで使用した。１H NMR (300Hz, d６-DMSO) 12.3 (s, 1H)、8.5 (m, 1H)、7.66 (m, 1H)、7.32 (m, 2H)、4.89 (s, 2H)、3.78 (s, 3H)。
【０１０３】
ステップ2
α-クロロケトン2 (10mmol) のエタノール (50mL) 懸濁液に、K２CO３ (10mmol) および2級アミン (30mmol) を加えた。この混合物を攪拌しながら、40〜70℃に1.5時間加熱した。溶液を室温まで冷却し、溶剤を真空除去した。混合物を水およびEtOAcで抽出した。有機層を集め、ブラインで洗浄し、MgSO４上で乾燥させ、真空濃縮した。粗製物を、結晶化により精製すると、所望の生成物がさらに精製せずに得られた。例えば、モルホリン誘導体3は、次のように調製した: α-クロロケトン (2.50g、9.93mmol) のエタノール (50ml) 懸濁液に、K２CO３ (1.51g、10.92mmol) およびモルホリン (2.59g、29.79mmol) を加えた。この混合物を攪拌しながら、70℃に1.5時間加熱した。溶液を室温まで冷却し、真空蒸発器により濃縮した。混合物を水 (30ml) で洗浄し、EtOAc (3×50mL) で抽出した。有機層をブラインで洗浄し、MgSO４上で乾燥させ、乾燥濃縮した。粗製生成物をエーテル中で粉砕すると、良好な白色の固体 (1.72g) が得られた。この物質を、次のステップでさらに精製することなく使用した。MS ES+ = 303、ES-= 301。１H NMR (300Hz, d６-DMSO) 12.1 (bs, 1H)、8.48 (s, 1H)、7.63 (m, 1H)、7.28 (m, 2H)、3.75 (s, 3H)、3.58 (m, 6H)、3.38 (m, 4H)。
【０１０４】
ステップ3
最終生成物4は、化合物3とヒドラジンとを縮合することにより容易に調製することができる。例えば、エタノール (8mL) およびヒドラジン (8mL) を含有する溶液に、ケトモルホリン3を加えた。溶液を110℃に1時間加熱した。溶液から真空蒸発器により溶媒除去した。オイルを、水 (25mL) で洗浄し、EtOAc (3×30mL) で抽出した。有機層をブラインで洗浄し、MgSO４上で乾燥させ、乾燥するまで濃縮した。粗製の生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、溶離剤5〜10%MeOH/CH２Cl２を使用して精製した。生成物を、エーテル中で粉砕することによりさらに澄明にすると、澄明な黄色の固体4 (0.41g) が得られた。１H NMR (300Hz, d６-DMSO) 11.84 (s, 1H)、10.22 (s, 1H)、7.87 (s, 1H)、7.54 (m, 2H)、7.19 (t, 1H, J = 7.7Hz)、3.57 (m, 4H)、3.34 (m, 2H)、2.44 (bs, 4H)。
【０１０５】
実施例1-1
【化３５】
0004323802.tif 000020
この化合物を、スキーム1の記載と同様に調製した。１H NMR (400Hz, d６-DMSO) 11.84 (s, 1H)、10.22 (s, 1H)、7.87 (s, 1H)、7.54 (m, 2H)、7.19 (t, 1H, J = 7.7Hz)、3.57 (m, 4H)、3.34 (m, 2H)、2.44 (bs, 4H)、元素分析(C１５H１６N４O２)、CHN。
【０１０６】
HCl塩形: 環式モルホリン (0.35g、1.23mmol) をTHF (10mL) に溶かした。この溶液にジオキサン中4MのHCl (1.41mmol、0.35mL) を徐々に加えた。アミン塩が溶液から析出し (crashed out)、これを真空濾過により集めた。その吸湿特性により、固体物質をすばやく貯蔵バイアルに移した。生成物は、良好な黄色の固体 (0.16g) である。融点 = 238〜240℃。１H NMR (400Hz, d６-DMSO) 12.33 (s, 1H)、10.53 (s, 1H)、10.30 (s, 1H)、7.98 (d, 1H, J = 2.9Hz)、7.60 (m, 2H)、7.25 (t, 1H, J = 7.8Hz)、4.29 (s, 2H)、3.95 (s, 2H)、3.80 (bs, 2H)、3.56 (bs, 2H)、3.25 (bs, 2H)。元素分析(C１５H１６N４O２ 1HCl)、CHN。
【０１０７】
実施例2-1
【化３６】
0004323802.tif 000021
この化合物を、スキーム1の記載と同様に調製した。融点 = 232〜236℃。１H NMR (400Hz, d６-DMSO) 11.88 (s, 1H); 10.27 (s, 1H); 7.91 (s, 1H); 7.60〜7.58 (m, 2H); 7.23 (t, 1H, J = 7.84Hz); 3.36 (s, 2H); 2.56 (s, 4H); 2.38 (s, 4H); 2.20 (s, 3H); 元素分析(C１６H１９N５O)、CHN。
【０１０８】
実施例3-1
【化３７】
0004323802.tif 000022
この化合物を、スキーム1の記載と同様に調製した。融点 = 168〜170℃。１H NMR (400Hz, d６-DMSO) 11.85 (s, 1H); 10.24 (s, 1H); 8.10 (d, 1H, J = 4.7Hz); 7.92 (s, 1H); 7.55〜7.49 (m, 3H); 7.18 (t, 1H, J = 7.8Hz); 6.81 (d, 1H, J = 8.6Hz); 6.62 (t, 1H, J = 7.0Hz); 3.37 (s, 2H); 3.47 (s, 4H); 2.56 (s, 4H); 元素分析(C２０H２０N６O 0.5H２O)、CHN。
【０１０９】
実施例4-1
【化３８】
0004323802.tif 000023
この化合物を、スキーム1の記載と同様に調製した。融点 = 78〜81℃。１H NMR (400Hz, d６-DMSO) 10.93 (s, 1H); 10.19 (s, 1H); 8.00 (s, 1H); 7.53 (d, 2H); 7.17 (t, 1H, J = 7.8Hz); 3.34 (s, 4H); 2.39 (s, 2H); 2.18 (s, 3H); 2.14 (s, 6H); 元素分析(C１６H２１N５O 0.3H２O)、CHN。
【０１１０】
実施例5-1
【化３９】
0004323802.tif 000024
この化合物を、スキーム1の記載と同様に調製した。融点 = 174〜177℃。１H NMR (400Hz, d６-DMSO) 11.78 (s, 1H); 10.20 (s, 1H); 7.85 (s, 1H); 7.54 (d, 2H); 7.16 (t, 1H, J = 7.8Hz); 3.38 (s, 2H); 2.52 (m, 4H); 1.00 (t, 6H, J = 7.0Hz); 分析(C１５H１８N４O 0.5H２O)、CHN。
【０１１１】
実施例6-1
【化４０】
0004323802.tif 000025
この化合物を、スキーム1の記載と同様に調製した。融点 = 171〜173℃。１H NMR (400Hz, d６-DMSO) 11.81 (s, 1H); 10.19 (s, 1H); 7.87 (s, 1H); 7.52 (d, 2H); 7.17 (t, 1H, J = 7.8Hz); 3.27 (s, 2H); 2.89 (d, 2H); 2.43 (s, 4H); 2.00〜21.89 (m, 3H); 1.79 (d, 2H); 1.63 (s, 4H); 1.33 (m, 2H); 元素分析(C２０H２５N５O 0.6H２O)、CHN。
【０１１２】
実施例2
次の一般式I-2の化合物は、例えば、前記のように合成することができる。
【化４１】
0004323802.tif 000026
【０１１３】
実施例1-2
【化４２】
0004323802.tif 000027
この化合物を、スキーム1のステップ4の記載と同様に調製した。濃水酸化アンモニウム (5mL) および1,4ジオキサン (15mL) 中のα-クロロケトン2 (10mmol) の溶液を、攪拌しながら70℃に3時間加熱した。白色の沈殿物が生じ、これを、濾過により集めると、さらに精製しなくても所望の生成物5が得られた (収率40%)。融点 = 300〜305℃。１H NMR (400Hz, d６-DMSO) 12.2 (s, 1H); 8.24 (s, 1H); 8.07 (bt, 1H); 7.92 (d, 1H, J = 7.5Hz); 7.76 (d, 1H, J = 8.1Hz)、7.38 (t, 1H, J = 7.8Hz)、3.93 (d, 2H); 元素分析(C１１H８N２O２)、CHN。
【０１１４】
実施例2-2
【化４３】
0004323802.tif 000028
実施例7に記載の手順と同様に、濃水酸化アンモニウム (5mL) および1,4ジオキサン (15mL) 中のN-メチルα-クロロケトン (10mmol) の溶液を、攪拌しながら70℃で3時間加熱した。溶液を室温まで冷却し、真空蒸発器により、10mLまで濃縮した。この混合物を水 (10mL) の間に分配し、EtOAc (50mL) で抽出した。有機層を集め、ブラインで洗浄し、MgSO４上で乾燥させ、乾燥するまで濃縮した。粗製生成物をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると、白色の固体が得られた (収率60%)。融点 = 215〜217℃。１H NMR (400Hz, d６-DMSO) 8.27 (s, 1H); 8.07 (bt, 1H); 7.96 (d, 1H, J = 7.5Hz); 7.85 (m, 1H)、7.46 (t, 1H, J = 7.9Hz)、3.93 (m, 5H); 元素分析(C１２H１０N２O２ 0.3C４H８O２)、CHN。
【０１１５】
実施例3
次の一般式I-3の化合物は例えば、前記のように合成することができる。
【化４４】
0004323802.tif 000029
【０１１６】
スキーム1-3
【化４５】
0004323802.tif 000030
5,6-ジヒドロ-1H-アゼピノ[5,4,3-cd]インドール-6-オン (2) 1［１］  (450mg、2.42mmol) のキシレン (10mL) 懸濁液を、90℃まで加熱し、次いで、Pd/Cを加えた。生じた混合物を3時間還流させ、次いで、室温まで冷却させた。濾過した後に、濾液を真空濃縮すると、オレンジ色の固体が得られた。カラムクロマトグラフィー (CH２Cl２中、1%から3%のMeOH) により固体を精製すると、生成物2がオレンジ色の固体として得られた (40mg、9%)。融点>154℃ (分解)。１H NMR (CD３OD) d 7.69 (d, J = 7.5Hz, 1H)、7.48 (d, J = 8.0Hz, 1H)、7.16 (t, J = 8.0Hz, 1H)、7.09 (s, 1H)、5.77 (d, J = 9.5Hz, 1H)、5.53 (d, J = 9.5Hz, 1H); 分析C１１H８N２O１ 0.4MeOHでの計算値: C, 69.50; H, 4.91; N, 14.22。実測値: C, 69.53; H, 4.58; N, 14.03。J. Med. Chem. 1990、33、633-641参照。
【０１１７】
スキーム2-3
【化４６】
0004323802.tif 000031
5,6-ジヒドロ-1-テテル (teter) ブトキシカルバメート-アゼピノ[5,4,3-cd]インドール-6-オン (3)。1 (340mg、1.83mmol) のCH３CN (20mL) 懸濁液に、N２下に、室温で (BOC)２OおよびDMAPを加えた。この混合物を継続的に一晩攪拌した。溶剤を除去した。残留物をEtOAcに溶かした。溶液を、1NのHCl (2×15mL) およびブラインで洗浄し、MgSO４中で乾燥させ、濾過した。有機層を真空濃縮すると、黄色の固体が得られた。カラムクロマトグラフィー (CH２Cl２中、1%から3%のMeOH) により固体を精製すると、3が白色の固体として得られた (440mg、84%)。融点167〜168℃。１H NMR (CDCl３) d 8.33 (d, J = 7.5Hz, 1H)、8.08 (d, J = 8.0Hz, 1H)、8.02 (t, J = 5.5, 6.0Hz, 1H)、7.44 (s, 1H)、7.42 (t, J = 8.0Hz, 1H); 3.58 (q, J = 6.0, 10, 5.5, 9.5Hz, 2H)、3.01 (t, J = 4.5, 4.0Hz, 2H)、1.66 (s, 9H)。
【０１１８】
3-ブロモ-5,6-ジヒドロ-1-テテルブトキシカルバメート-アゼピノ[5,4,3-cd]インドール-6-オン (4)。3 (400mg、1.40mmol) のCCl４ (20ml) の溶液に、N２下に、室温でNBS (261mg、1.47mmol) およびAIBN (20mg) を加えた。生じた混合物を3時間還流させた。室温まで冷却させた後に、スクシンアミドを濾別し、CCl４で洗浄した。濾液を真空濃縮した。生じた残留物をカラムクロマトグラフィー (ヘキサン中、20%から50%EtOAc) により精製すると、4が淡黄色の固体として得られた (130mg、26%)。１H NMR (CDCl３) d 8.24 (d, J = 8.5Hz, 1H)、7.99 (d, J = 8.0Hz, 1H)、7.45 (s, 1H)、7.31 (t, J = 8.0Hz, 1H); 6.11 (d, J = 7.5Hz, 1H)、1.61 (s, 9H)。
【０１１９】
3-ブロモ-5,6-ジヒドロ-1H-アゼピノ[5,4,3-cd]インドール-6-オン (5)。4 (130mg、0.358mmol) のCH２Cl２ (2ml) 溶液に、N２下に、室温でTFA (2mL) を滴加した。生じた混合物を3時間、連続的に攪拌した。溶剤を除去した。残留物をカラムクロマトグラフィー (CH２Cl２中、0.5%から2%MeOH) により精製すると、オレンジ色の固体が得られた (10mg、10%)。融点160〜162℃ (分解)。１H NMR (CD３OD, 400MHz) 7.57 (d, J = 8.0Hz, 1H)、7.35 (d, J = 8.0Hz, 1H)、7.06 (s, 1H)、7.05 (t, J = 8.0Hz, 1H)、5.80 (s, 1H); 分析: C１１H７BrN２O・(0.12EtOAc) での算出値: C, 50.38; H, 2.93; N, 10.24。実測値: C, 50; H, 3.01; N, 9.85。
【０１２０】
実施例4
次の一般式I-4の化合物は、例えば、前記のように合成することができる。
【化４７】
0004323802.tif 000032
【０１２１】
スキーム1-4。イミダゾベンゾジアゼピンの一般合成。
【化４８】
0004323802.tif 000033
ニトロアミド3の合成。文献 (Kukla, M. J.; Breslin, H. J.; Pawels, R.; Fedde, C. L.; Miranda, M.; Scott, M, K.; Sherrill, R. G.; Taeymaekers, A.; Van Gelder, J.; Andries, K.; Janssen, M. A. C.; De Clerq, E.; Jannsen, P. A. J.、J. Med. Chem. 1991、34、746-751) により調製されたエステル2 (1.0g、4.7mmol) をn-ブタノール (5mL) に溶かした。この溶液に、炭酸ナトリウム (0.50g、4.7mmol) を、続いてエチレンジアミン (282mg、4.7mmol) を加えた。80℃に数時間加熱した後に、オレンジ色の固体が、溶液から沈殿し始めた。16時間後に反応を止め、オレンジ色の固体を濾別し、水で数回洗浄し、EtOAcから再結晶させた。最終的なオレンジ色の結晶の乾燥収量は、810mg (84%) であった。融点 = 187〜190℃ (分解)。１H NMR (d６-DMSO) δ8.72 (t、1H)、8.42 (t, 1H)、8.23 (d, 1H)、8.15 (d, 1H)、6.75 (t, 1H)、3.64 (m, 2H)、3.35 (m, 2H)。分析: C９H９N３O３での算出値: C, 52.17; H, 4.38; N, 20.28。実測値: C, 52.25; H, 4.59; N, 20.19。
【０１２２】
3 (4a) をアシル化するための一般的手順。化合物3の溶液 (460mg、2.22mmol) を、THF (10mL) に溶かした。この溶液に、トリエチルアミン (340μL、2.44mmol) を、続いて塩化アセチル (175μL、2.44mmol) を加えた。穏やかに加熱しながら (50℃)、溶液を、一晩攪拌した。反応を、水 (10mL) でクエンチし、引き続き、EtOAc (3×10mL) で抽出した。合わせた有機物を乾燥させ、濃縮し、シリカゲル上でクロマトグラフィー処理すると、化合物4aが収率30% (160mg) で得られた。１H NMR (CDCl３) δ8.13 (d, 1H)、8.06 (d, 1H)、7.72 (t, 1H)、6.96 (t, 1H)、4.97 (m, 2H)、3.36 (m, 2H)、2.25 (s, 3H)。この物質を、さらに精製することなく使用した。
【０１２３】
R = フェニル (4b)。１H NMR (CDCl３)δ8.63 (bs, 1H)、8.40 (d, 1H)、8.06 (d, 1H)、7.60 (d, 2H)、7.52 (t, 1H)、7.42 (t, 2H)、6.85 (t, 1H)、4.29 (m, 2H)、3.84 (m, 2H)。
【０１２４】
R = m-トリル (4c)。１H NMR (CDCl３) δ8.65 (bs, 1H)、8.40 (d, 1H)、8.05 (d, 1H)、7.44 (s, 1H)、7.30 (m, 3H)、6.85 (t, 1H)、4.30 (m, 2H)、3.84 (m, 2H)、2.38 (s, 3H)。
【０１２５】
R = p-トリル (4d)。１H NMR (CDCl３) δ8.64 (bs, 1H)、8.40 (d, 1H)、8.06 (d, 1H)、7.50 (d, 2H)、7.23 (d, 2H)、6.85 (t, 1H)、4.27 (m, 2H)、3.84 (m, 2H)。
【０１２６】
R = シンナモイル (4e)。１H NMR (CDCl３) δ8.47 (bs, 1H)、8.40 (d, 1H)、8.15 (d, 1H)、7.85 (d, 1H)、7.63 (m, 3H)、7.40 (m, 3H)、6.88 (t, 1H)、4.30 (m, 2H)、3.79 (m, 2H)。
【０１２７】
R = シクロヘキシル (4f)。１H NMR (CDCl３) δ8.36 (d, 1H)、8.34 (s, 1H)、8.10 (d, 1H)、6.87 (t, 1H)、4.16 (m, 2H)、3.69 (m, 2H)、3.47 (m, 1H)、1.96 (m, 2H)、1.81 (m, 2H)、1.70 (m, 2H)、1.34 (m, 4H)。
【０１２８】
R = 1-ナフトイル (4g)。１H NMR (CDCl３) δ8.60 (bs, 1H)、8.36 (d, 1H)、8.04 (m, 1H)、7.91 (d, 1H)、7.85 (m, 2H)、7.50 (m, 2H)。7.44 (m, 2H)、6.77 (t, 1H)、4.45 (m, 2H)、3.93 (m, 2H)。
【０１２９】
R = 2-ナフトイル (4h)。１H NMR (CDCl３) δ8.69 (bs, 1H)、8.41 (d, 1H)、8.17 (s, 1H)、8.03 (d, 1H)、7.87 (m, 3H)、7.54 (m, 3H)、6.85 (t, 1H)、4.34 (m, 2H)、3.89 (m, 2H)。
【０１３０】
アミド4a〜h (5a) を環化するための一般的な手順。酢酸塩4a (100mg、0.40mmol) を、EtOAc: MeOHの1: 1混合物 (10mL) に溶かした。この溶液を脱ガスし、10%Pd/C (25mg) を伴う窒素含有Parr Bombに加えた。この溶液を、30psiで4時間水素化した。充填したセライトを通して混合物を濾過し、濃縮した。粗製物質を、沸騰トルエンに溶かし、12時間還流させ、環化させた。冷却させた後に、溶液を濃縮し、生成物をEtOAcから再結晶させると、最終生成物5a 35mg (44%) が得られた。融点 = >300℃ (分解)。１H NMR (d６-DMSO) δ8.35 (bt, 1H)、7.79 (d, 1H)、7.73 (d, 1H)、7.25 (t, 1H)、4.28 (m, 2H)、3.58 (m, 2H)、2.53 (s, 3H)。分析C１１H１１N３O での算出値: C, 62.84; H, 5.75; N, 19.99。実測値: C, 62.43; H, 5.54; N, 19.43。
【０１３１】
R = フェニル (5b)。融点 = 253〜257℃; １H NMR (d６-DMSO) δ8.48 (bt, 1H)、7.89 (m, 4H)、7.59 (m, 3H)、7.37 (t, 1H)、4.47 (m, 2H)、3.54 (m, 2H)。分析C１６H１３N３O での算出値: C, 72.97; H, 4.98; N, 15.96。実測値: C, 72.32 ; H, 5.06; N, 15.88。
【０１３２】
R = m-トリル (5c)。融点 = 234〜238℃;１H NMR (d６-DMSO) δ8.47 (bt, 1H)、7.89 (m, 2H)、7.70 (s, 1H)、7.65 (d, 1H)、7.47 (t, 1H)、7.36 (m, 2H)、4.47 (m, 2H)、3.54 (m, 2H)、2.43 (s, 3H)。分析C１７H１５N３O(0.5 H２O) での算出値: C, 72.68; H, 5.53; N, 14.96。実測値: C, 72.88; H, 5.58; N, 14.91。
【０１３３】
R = p-トリル (5d)。融点 = 258〜263℃;１H NMR (d６-DMSO) δ8.44 (t, 1H)、7.88 (m, 2H)、7.76 (d, 1H)、7.37 (m, 3H)、4.45 (m, 2H)、3.53 (m, 2H)、2.42 (s, 3H)。分析C１７H１５N３O での算出値: C, 73.63; H, 5.45; N, 15.15。実測値: C, 73.13; H, 5.49; N, 15.10。
【０１３４】
R = フェニルプロピオニル (5e)。融点 = 195〜200℃;１H NMR (d６-DMSO) δ8.37 (t, 1H)、7.86 (t, 2H)、7.34 (m, 3H)、7.25 (m, 3H)、4.22 (m, 2H)、3.55 (m, 6H)。分析C１８H１７N３O での算出値: C, 74.20; H, 5.88; N, 14.42。実測値:C, 73.05; H, 6.04; N, 14.49。
【０１３５】
R = シクロヘキシル (5f)。融点 = 263〜266℃; １H NMR (d６-DMSO) δ8.35 (t, 1H)、7.77 (m, 2H)、7.25 (t, 1H)、4.35 (m, 2H)、3.57 (m, 2H)、2.94 (m, 1H)、1.94 (m, 2H)、1.81 (m, 2H)、1.71 (m, 1H)、1.58 (m, 2H)、1.41 (m, 1H)、1.29 (m, 1H)。分析C１６H１９N３O での算出値: C, 70.18; H, 7.18; N, 15.34。実測値: C, 70.73; H, 7.13; N, 15.22。
【０１３６】
R = 1-ナフトイル (5g)。融点 = 226〜229℃; １H NMR (d６-DMSO) δ8.43 (t, 1H)、8.18 (d, 1H)、8.09 (d, 1H)、7.98 (m, 2H)、7.91 (d, 1H)、7.83 (d, 1H)、7.71 (t, 1H)、7.59 (m, 2H)、7.43 (t, 1H)、4.13 (m, 2H)、3.53 (m, 2H)。分析C２０H１５N３O(0.25 H２O) での算出値: C, 75.57; H, 4.92; N, 13.22。実測値: C, 75.46; H, 4.87; N, 13.19。
【０１３７】
R = 2-ナフトイル (5h)。融点 = 261〜265℃; １H NMR (d６-DMSO) δ8.52 (t, 1H)、8.47 (s, 1H)、8.11 (m, 2H)、8.03 (m, 2H)、7.95 (d, 1H)、7.91 (d, 1H)、7.65 (m, 1H)、7.40 (t, 1H)、4.59 (m, 2H)、3.57 (m, 2H)。分析C２０H１５N３O(1 H２O) での算出値: C, 72.49; H, 5.14; N, 12.68。実測値: C, 72.23; H, 5.17; N, 12.65。
【０１３８】
スキーム2-4。アミノベンゾジアゼピン誘導体5a-vの一般的な合成。
【化４９】
0004323802.tif 000034
アニリン (4) の合成。ニトロアミド3 (1.8g、8.7mmol) を、MeOH (125mL) に溶かし、40℃に加熱した。ラネーニッケル (200mg) を、溶液に加え、引き続き、ヒドラジン一水和物 (5mL、xs) を滴加した。反応を、30分間還流加熱するか、または出発物質が全て無くなるまで、混合物を、充填したセライトを通して温時濾過して、残留ニッケルを除去した。セライトを沸騰MeOH (100mL) で洗浄し、濾液を濃縮し、真空乾燥させた。生じた空気不安定性の固体 (1.45g、94%) を、窒素下に貯蔵し、ジエチルエーテルで粉砕して、分析サンプルを得た。１H NMR (d６-DMSO) δ7.91 (t, 1H)、7.03 (d, 1H)、6.69 (d, 1H)、6.47 (t, 1H)、4.97 (s, 2H)、4.64 (m, 2H)、3.20 (m, 2H)。
【０１３９】
ベンズイミダゾール5a-dddを合成するための、一般的な手順。アミン4 (200mg、1.13mmol)、アルデヒド (1.1当量) および炭素に担持されているパラジウム (50mg) を全て、MeOH (10mL) 中で混合し、一晩還流させた。反応を、充填したセライトを通して温時濾過し、濾液を真空濃縮した。生じた固体をジエチルエーテルまたはEtOAc (5mL) で粉砕し、濾過した。EtOAcまたはEtOAc/MeOH中で再結晶させることにより、最終生成物の分析サンプルを得た。
【０１４０】
R = H (5a)。収率 = 32%; 融点 = 225〜235℃ (分解);１H NMR (d６-DMSO) δ8.45 (bt, 1H)、8.37 (s, 1H)、7.95 (m, 2H)、7.39 (t, 1H)、4.50 (m, 2H)、3.65 (m, 2H)。分析C１０H９N３O(0.75 H２O) での算出値 C, 59.84; H, 5.27; N, 20.94。実測値: C, 59.69; H, 5.16; N, 20.73。
【０１４１】
R = ベンジル (Sb)。収率 = 52%; 融点 = 224〜227℃; １H NMR (d６-DMSO) δ8.53 (t, 1H)、8.02 (m, 2H)、7.47 9m, 6H)、4.51 (m, 2H)、3.75 (m, 2H)、2.70 (m, 2H)。分析C１７H１５N３O(0.25 H２O) での算出値 C, 72.45; H, 5.54; N, 14.91。実測値: C, 72.89; H, 5.55; N, 14.86。
【０１４２】
R = 4-フルオロフェニル (5c)。収率 = 47%; 融点 = 252〜256℃;１H NMR (d６-DMSO) δ8.39 (t, 1H)、7.82 (m, 4H)、7.36 (t, 2H)、7.28 (t, 1H)、4.36 (m, 2H)、3.45 (m, 2H)。分析C１６H１２FN３O(0.2 H２O) での算出値: C, 67.46; H, 4.39; N, 14.75。実測値: C, 67.31; H, 4.27; N, 14.74。
【０１４３】
R = 3-クロロフェニル (5d)。収率 = 50%; 融点 = 265〜267℃;１H NMR (d６-DMSO) δ8.47 (t, 1H)、7.87 (m, 4H)、7.63 (m, 2H)、7.38 (t, 1H)、4.48 (m, 2H)、3.35 (m, 2H)。分析C１６H１２ClN３O での算出値: C, 64.54; Cl, 11.91; H, 4.06; N, 14.11。実測値: C, 64.30; Cl, 11.64; H, 4.13; N, 13.92。
【０１４４】
R = 4-ブロモフェニル (5e)。収率 = 13%; 融点 = 264〜268℃; １H NMR (d６-DMSO) δ8.57 (t, 1H)、8.00 (m, 2H)、7.90 (m, 4H)、7.47 (t, 1H)、4.54 (m, 2H)、3.62 (m, 2H)。分析C１６H１２BrN３O での算出値: C, 55.00; H, 3.69; N, 12.03。実測値: C, 55.42; H, 3.67; N, 11.97。
【０１４５】
R = 3,5-ジフルオロフェニル (5f)。収率 = 9% ; 融点 = 325〜328℃; １H NMR (d６-DMSO) δ8.49 (s, 1H)、7.93 (t, 2H)、7.62 (d, 2H)、7.53 (m, 1H)、7.40 (m, 1H)、4.51 (m, 2H)、3.51 (m, 2H)。分析C１６H１１F２N３O(0.3 H２O) での算出値: C, 63.07; H, 3.84; N, 13.79。実測値: C, 63.09; H, 3.86; N, 13.65。
【０１４６】
R = 2,4-ジヒドロキシフェニル (5g)。収率= 61% ; 融点 = 325〜330 (分解)℃;１H NMR (d６-DMSO) δ11.02 (s, 1H)、9.93 (s, 1H)、8.45 (t, 1H)、7.85 (t, 2H)、7.43 (d, 1H)、7.35 (t, 1H)、6.48 (s, 1H)、6.43 (d, 1H)、4.32 (m, 2H)、3.53 (m, 2H)。分析C１０H９N３O２ (0.5 H２O) での算出値: C, 63.15; H, 4.64; N, 13.81。実測値: C, 63.02; H, 4.78; N, 13.55。
【０１４７】
R = 3,5-ジヒドロキシフェニル (5h)。収率 = 38%; 融点 = 235〜245℃;１H NMR (d６-DMSO) δ9.82 (s, 2H)、8.47 (t, 1H)、7.92 (m, 2H)、7.40 (t, 1H)、6.72 (s, 2H)、6.46 (s, 1H)、4.47 (m, 2H)、3.59 (m, 2H)。分析C１０H９N３O２(H２O) での算出値: C, 61.34; H, 4.83; N, 13.41。実測値: C, 61.56; H, 4.99; N, 13.36。
【０１４８】
R = 3,4,5-トリヒドロキシフェニル (5i)。収率 = 22%; 融点 = 340〜345℃; １H NMR (d６-DMSO) δ9.25 (s, 2H)、8.73 (s, 1H)、8.41 (t, 1H)、7.82 (t, 2H)、7.31 (t, 1H)、6.78 (s, 2H)、4.41 (m, 2H)、3.52 (m, 2H)。分析C１０H９N３O２ (0.5 H２O) での算出値: C, 60.00; H, 4.41; N, 13.12。実測値: C, 59.92; H, 4.20; N, 12.92。
【０１４９】
R = ヒドロキシ (5j)。収率 = 65%; 融点 = 255〜259℃;１H NMR (d６-DMSO) δ8.24 (t, 1H)、7.57 (d, 1H)、7.27 (d, 1H)、6.78 (t, 1H)、4.50 (m, 2H)、3.24 (m, 2H)。分析C１０H９N３O２ (2 H２O) での算出値: C, 50.21; H, 5.48; N, 17.56。実測値: C, 50.27; H, 5.60; N, 19.22。
【０１５０】
R = 4-カルボキシフェニル (5k)。収率 = 32%; 融点 = 300〜320 (分解) ℃;１H NMR (d６-DMSO) δ13.5 (bs, 1H)、8.66 (t, 1H)、8.23 (d, 2H)、8.10 (d, 2H)、8.06 (m, 2H)、7.57 (t, 1H)、4.58 (m, 2H)、3.64 (m, 2H)。分析C１０H９N３O２ (1.5 H２O) での算出値: C, 60.75; H, 4.71; N, 12.33。実測値: C, 60.05; H, 4.86; N, 12.50。
【０１５１】
R = 3-N-メチルインドール (51)。収率 = 64%; 融点 = 270〜275℃;１H NMR (d６-DMSO) δ8.52 (t, 1H)、8.43 (d, 1H)、8.14 (s, 1H)、7.94 (d, 1H)、7.86 (d, 1H)、7.65 (d, 1H)、7.38 (m, 2H)、7.31 (t, 1H)、4.62 (m, 2H)、4.00 (s, 3H)、3.65 (m, 2H)。分析C１９H１６N４O での算出値: C, 67.07; H, 5.63; N, 17.38。実測値: C, 67.65; H, 5.64; N, 17.39。
【０１５２】
R = 3-メチル-3-フェニルエチル (5m)。収率 = 35%; 融点 = 163〜167℃;１H NMR (CDCl３) δ8.04 (d, 1H)、7.93 (d, 1H)、7.36 (t, 1H)、7.23 (m, 4H)、7.11 (d, 1H)、6.91 (s, 1H)、3.90 (m, 1H)、3.60 (m, 1H)、3.42 (m, 1H)、3.01 (m, 1H) 1.75 (m, 2H)、1.48 (d, 3H)。分析C１９H１９N３O (0.5 EtOAc) での算出値: C, 72.18; H, 6.63; N, 12.03。実測値:C, 71.73; H, 6.84; N, 12.15。
【０１５３】
R = トランス-シクロプロピルカルボキシエチル (5n)。収率 = 65% ; 融点 = 274〜277℃;１H NMR (d６-DMSO) δ8.37 (t, 1H)、7.80 (d, 1H)、7.73 (d, 1H)、7.26 (t, 1H)、4.42 (m, 2H)、4.13 (q, 2H)、3.60 (m, 2H)、2.70 (m, 1H)、2.30 (m, 1H)、1.58 (m, 2H)、1.22 (t, 3H)。分析C１６H１７N３O３ (0.25 H２O) での算出値: C, 63.25; H, 5.81; N, 13.83。実測値: C, 63.52; H, 5.78; N, 13.61。
【０１５４】
R = N,N-ジメチルアミノプロポキシフェノール (5o)。収率 = 46% ; 融点 = 105〜108℃;１H NMR (CDCl３) δ8.09 (d, 1H)、8.00 (d, 1H)、7.70 (d, 2H)、7.41 (t, 1H)、7.06 (d, 2H)、6.95 (t, 1H)、4.50 (m, 2H)、4.11 (t, 2H)、3.73 (m, 2H)、2.52 (t, 2H)、2.30 (s, 6H)、2.02 (m, 2H)。分析C２１H２４N４O２ (1.5 H２O) での算出値: C, 64.43; H, 6.95; N, 14.31。実測値: C, 64.74; H, 6.91; N, 14.07。
【０１５５】
R = メトキシメチル (5p)。融点 = 300〜320℃;１H NMR (d６-DMSO) δ8.39 (t, 1H)、7.83 9d, 1H)、7.77 (d, 1H)、7.28 (t, 1H)、4.31 (m, 2H)、3.38 (s, 2H)、2.56 (s, 3H)。分析C１２H１３N３O２ での算出値: C, 63.19; H, 5.67; N, 18.19。実測値: C, 62.33; H, 5.44; N, 18.86。
【０１５６】
R = 4-メトキシシンナモイル (5q)。収率 = 48%; 融点 = 225〜228℃; １H NMR (d６-DMSO) δ8.36 (t, 1H)、7.84 (m, 2H)、7.41〜7.20 (m, 5H)、7.01 (d, 1H)、6.88 (t, 1H)、4.25 (m, 2H)、3.81 (s, 3H)、3.54 (m, 2H)。分析C１９H１７N３O２ (0.5 H２O) での算出値: C, 69.12; H, 5.56; N, 12.62。実測値: C, 70.00; H, 5.87; N, 12.73。
【０１５７】
R = 3-ピリジル (5r)。収率 = 54% ; 融点 = 276〜279℃;１H NMR (d６-DMSO) δ9.06 (s, 1H)、8.77 (d, 1H)、8.49 (t, 1H)、8.29 (d, 1H)、7.95 (d, 1H)、7.91 (d, 1H)、7.64 (t, 1H)、7.39 (t, 1H)、4.49 (m, 2H)、3.56 (m, 2H)。分析C１５H１２N４O (0.25 H２O) での算出値: C, 67.03; H, 4.69; N, 20.84。実測値: C, 67.07; H, 4.70; N, 20.71。
【０１５８】
R = o-フルオロフェニル (5s)。収率 = 51%。融点 = 237〜244℃; １H NMR (d６-DMSO) δ8.16 (m, 1H)、8.04 (m, 1H)、7.79 (t, 1H)、7.58 (m, 1H)、7.45 (t, 1H)、7.37 (t, 1H)、7.26 (t, 1H)、7.18 (t, 1H)、4.37 (m, 2H)、3.75 (m, 2H)。分析C１６H１２FN３O (0.25 H２O) での算出値: C, 67.24; H, 4.41 ; N, 14.70。実測値: C, 67.52; H, 4.46; N, 14.45。
【０１５９】
R = 2-キノリニル (5t)。収率 = 66%。融点 = 291〜295℃;１H NMR (d６-DMSO) δ8.58 (d, 1H)、8.51 (t, 1H)、8.47 (d, 1H)、8.19 (d, 1H)、8.09 (d, 1H)、8.01 (d, 1H)、7.98 (d, 1H)、7.87 (t, 1H)、7.71 (t, 1H)、7.43 (t, 1H)、4.50 (m, 2H)、3.68 (m, 2H)。分析C１９H１４N４O での算出値: C, 72.60; H, 4.49; N, 17.82。実測値: C, 72.47; H, 4.61; N, 17.70。
【０１６０】
R = 2-メチル-3-(4-メトキシ)フェネチル (5u)。収率 = 78 %。融点 = 148〜152℃;１H NMR (CDCl３) δ8.05 (d, 1H)、7.98 (d, 1H)、7.37 (t, 1H)、7.14 (t, 1H)、6.89 (d, 1H)、6.71 (d, 1H)、4.03 (m, 1H)、3.73 (s, 3H)、3.47 (m, 2H)、3.21 (m, 1H)、3.06 (m, 2H)、1.55 (d, 3H)。分析C２０H２１N３O２ (0.2 H２O) での算出値: C, 70.86; H, 6.36; N, 12.39。実測値: C, 70.84; H, 6.30; N, 12.57。
【０１６１】
R = 2-フリル (5v)。収率 = 75%。融点 = 271〜275℃; １H NMR (d６-DMSO) δ8.46 (t, 1H)、8.02 (s, 1H)、7.86 (d, 2H)、7.36 (t, 1H)、7.25 (d, 1H)、6.79 (d, 1H)、4.60 (m, 2H)、3.61 (m, 2H)。分析C１４H１１N３O２ (0.6 H２O) での算出値: C, 63.68; H, 4.66; N, 15.91。実測値: C, 63.76; H, 4.54; N, 15.93。
【０１６２】
R = ベンジルオキシ (5w)。収率 = 85%。融点 = 215〜220℃;１H NMR (d６-DMSO) δ7.93 (m, 2H)、7.39 (m, 6H)、4.48 (s, 2H)、4.44 (m, 2H)、3.65 (m, 2H)。分析C１８H１７N３O２ (1 H２O) での算出値 C, 66.45; H, 5.89; N, 12.91。実測値 : C, 66.70; H, 5.90; N, 12.81。
【０１６３】
R = フェニルプロパルギル (5x)。収率 = 75%。融点 = 261〜263℃;１H NMR (d６-DMSO) δ8.46 (t, 1H)、7.96 (d, 1H)、7.90 (d, 1H)、7.76 (d, 2H)、7.55 (m, 3H)、7.41 (t, 1H)、4.56 (m, 2H)、3.68 (m, 2H)。分析C１８H１３N３O (0.3 H２O) での算出値 C, 73.86; H, 4.68; N, 14.35。実測値: C, 73.92; H, 4.67; N, 14.27。
【０１６４】
R = 2-ニトロフリル (5y)。収率 = 65%。融点 = 315〜319℃; １H NMR (d６-DMSO) δ8.53 (t, 1HO, 7.96 (m, 3H)、7.57 (d, 1H)、7.45 (t, 1H)、4.69 (m, 2H)、3.65 (m, 2H)。分析C１４H１０N４O４ (0.45 H２O) での算出値 C, 54.89; H, 3.59; N, 18.29。実測値: C, 54.88; H, 3.49; N, 18.24。
【０１６５】
R = 2-メチルアセトキシフリル (5z)。収率 = 67%。融点 = 261〜263℃; １H NMR (d６-DMSO) δ8.48 (t, 1H)、7.88 (d, 2H)、7.38 (t, 1H)、7.23 (d, 1H)、6.84 (d, 1H)、5.18 (s, 2H)、4.59 (m, 2H)、3.61 (m, 2H)、2.09 (s, 3H)。分析Cｌ７H１５N３O４ (0.35 H２O) での算出値 C, 61.57; H, 4.77; N, 12.67。実測値: C, 61.58; H, 4.58; N, 12.66。
【０１６６】
R = シンナモイル (5aa)。収率 = 72%。融点 = 300〜305℃;１H NMR (d６-DMSO) δ8.40 (t, 1H)、7.85 (m, 5H)、7.35 (m, 5H)、4.58 (m, 2H)、3.64 (m, 2H)。分析C１８H１５N３O (0.1 H２O) での算出値 C, 74.26; H, 5.26; N, 14.43。実測値: C, 74.17; H, 5.36; N, 14.38。
【０１６７】
R = β-フェニルシンナモイル (5bb)。収率 = 79%。融点 = 210〜215℃;１H NMR (d６-DMSO) δ8.34 (t, 1H)、7.86 (d, 1H)、7.78 (d, 1H)、7.38 (m, 4H)、714 (d, 2H)、7.10 (s, 1H)、4.20 (m, 2H)、3.40 (m, 2H)。分析C２４H１９N３O での算出値 C, 78.88; H, 5.24; N, 11.50。実測値 : C, 78.54; H, 5.25; N, 11.45。
【０１６８】
R = 3-ブロモフェニル (5cc)。収率 = 57%。融点 = 265〜270℃;１H NMR (d６-DMSO) δ8.55 (t, 1H)、8.13 (s, 1H)、7.96 (m, 3H)、7.84 (d, 1H)、7.63 (t, 1H)、7.46 (t, 1H)、4.54 (m, 2H)、3.52 (m, 2H)。分析C１６H１２BrN３O (0.5 H２O) での算出値 C, 54.72; H, 3.73; N, 11.96。実測値: C, 55.36; H, 3.77; N, 11.83。
【０１６９】
R = 2-(p-クロロフェニル)フリル (5dd)。収率 = 64%。融点 = 342〜344℃;１H NMR (d６-DMSO) δ8.52 (t, 1H)、7.93 (m, 4H)、7.57 (d, 2H)、7.37 (m, 3H)、4.73 (m, 2H)、3.66 (m, 2H)。分析C２０H１４ClN３O２ での算出値 C, 66.03; H, 3.88; N, 11.55。実測値: C, 65.73; H, 4.05; N, 11.44。
【０１７０】
R = 2(-m-クロロフェニル)フリル (5ee)。収率 = 63%。融点 = 253〜256℃; １H NMR (d６-DMSO) δ8.52 (t, 1H)、7.96 (s, 1H)、7.89 (m, 3H)、7.54 (t, 1H)、7.46 (m, 4H)、4.71 (m, 2H)、3.66 (m, 2H)。分析C２０H１４ClN３O２ (0.1 H２O) での算出値 C, 65.70; H, 3.91; N, 11.49。実測値: C, 65.61 ; H, 3.96; N, 11.33。
【０１７１】
R = 2-(o-クロロフェニル)フリル (5ff)。収率 = 70%。融点 = 264〜267℃; １H NMR (d６-DMSO) δ8.51 (t, 1H)、8.04 (d, 1H)、7.91 (t, 2H)、7.64 (d, 1H)、7.54 (t, 1H)、7.40 (m, 4H)、4.75 (m, 2H)、3.67 (m, 2H)。分析C２０H１４ClN３O２ (0.2 H２O) での算出値 C, 65.38; H, 3.95; N, 11.44。実測値: C, 65.20; H, 3.91; N, 11.45。
【０１７２】
R = 2-ブロモチオフェニル (5gg)。収率 = 53%。融点 = 260〜263℃; １H NMR (d６-DMSO) δ8.49 (t, 1H)、7.87 (m, 2H)、7.56 (d, 1H)、7.44 (d, 1H)、7.37 (t, 1H)、4.57 (m, 2H)、3.61 (m, 2H)。分析C１４H１０BrSN３O での算出値 C, 48.29; H, 2.89; N, 12.07。実測値: C, 48.00; H, 2.99; N, 11.88。
【０１７３】
R = CH２CH２COOH (5hh)。収率 = 45%。融点 = 298〜304℃; １H NMR (d６-DMSO) δ12.28 (s, 1H)、8.36 (t, 1H)、7.80 (m, 2H)、7.26 (t, 1H)、4.32 (m, 2H)、3.57 (m, 2H)、3.07 (t, 2H)、2.83 (t, 2H)。分析C１３H１３N３O３ での算出値 C, 60.23; H, 5.05; N, 16.21。実測値: C, 60.39; H, 5.21; N, 15.98。
【０１７４】
R = 3-カルボキシフェニル (5ii)。収率 = 82%。融点 = 300〜320℃;１H NMR (d６-DMSO) δ13.28 (s, 1H)、8.48 (t, 1H)、8.41 (s, 1H)、8.11 (m, 2H)、7.90 (m, 2H)、7.72 (t, 1H)、7.37 (t, 1H)、4.47 (m, 2H)、3.54 (m, 2H)。分析C１７H１３N３O３ (0.25 H２O) での算出値 C, 65.48; H, 4.36; N, 13.48。実測値: C, 65.46; H, 4.51; N, 13.43。
【０１７５】
R = p-カルボキシエチルジヒドロシンナモイル (5jj)。収率 = 82%; 融点 = 230〜233℃;１H NMR (DMSO-d６) δ8.34 (bt, 1H)、7.89 (d, 2H)、7.80 (m, 2H)、7.46 (d, 2H)、7.27 (t, 1H)、4.50 (m, 2H)、4.30 (q, 2H)、3.53 (m, 2H)、3.21 (m, 4H)、1.31 (t, 3H)。MS (ES+ = 364.23)。分析C２１H２ｌN３O３ (0.25 H２O) での算出値: C, 68.56; H, 5.89; N, 11.42。実測値: C, 68.30; H, 5.84; N, 11.52。
【０１７６】
R = 1-(t-ブトキシカルボニル)アミノ-2-フェニルエタン (5kk)。収率 = 27%; 融点 = 175〜179℃.１H NMR (DMSO-d６) δ8.35 (bt, 1H)、7.85 (m, 2H)、7.58 (d, 1H)、7.31 (t, 1H)、7.23 (m, 5H)、5.09 (m, 1H)、4.14 (m, 2H)、3.45 (m, 2H)、1.29 (s, 9H)。分析C２３H２６N４O３ (0.5 H２O) での算出値: C, 66.49; H, 6.55; N, 13.48。実測値: C, 66.33; H, 6.45; N, 13.55。
【０１７７】
R = 1-アミノ-2-フェニルエタン (5II)。5kk (500mg、2. 82mmol) を、10%TFA/DCM (5mL) で脱保護することにより、この化合物を製造した。16時間攪拌した後に、溶剤を除去し、残留物をHCl/ジエチルエーテル (1.0M、5mL) で粉砕し、濾過した。結晶を、ジエチルエーテルで数回洗浄し、乾燥させると、405mg (47%) が得られた。融点 = 155〜160℃ (分解)。１H NMR (DMSO-d６) δ7.93 (d, 1H)、7.85 (d, 1H)、7.40 (t, 2H)、7.13 (m, 3H)、6.89 (d, 1H)、5.01 (m, 1H)、4.15 (m, 2H)、3.48 (m, 2H)、3.21 (t, 2H)。分析C１８H１８N４O HCl (2 H２O) での算出値: C, 51.64; H, 5.86; N, 13.02。実測値: C, 52.09; H, 5.74; N, 12.94。
【０１７８】
R = 4-カルボキシメチルフェニル (5mm)。収率 = 85%; 融点 = 260〜265℃;１H NMR (DMSO-d６) δ8.51 (bt, 1H)、8.14 (d, 2H)、8.04 (d, 2H)、7.93 (m, 2H)、7.40 (t, 1H)、4.50 (m, 2H)、3.92 (s, 3H)、3.56 (m, 2H)。MS (ES+ = 322.19)℃。分析C２３H２６N４O３ (1.5 H２O) での算出値: C, 62.06; H, 5.21; N, 12.06。実測値: C, 61.75; H, 5.08; N, 12.19。
【０１７９】
R = 4-ヒドロキシメチルフェニル (5nn)。この化合物を、アルコール9と同様の方法でエステル5mmから調製した。収率 = 84%; 融点 = 243〜248℃; １H NMR (DMSO-d６) δ8.47 (t, 1H)、7.85 (m, 4H)、7.53 (d, 2H)、7.36 (t, 1H)、5.38 (t, 1H)、4.61 (m, 2H)、4.46 (m, 2H)、3.54 (m, 2H)。分析C１７H１５N３O２ (0.4 H２O) での算出値: C, 67.94; H, 5.30; N, 13.98。実測値: C, 68.30; H, 5.27; N, 13.90。
【０１８０】
R = 4-クロロメチルフェニル (5oo)。この化合物を、塩化ベンジル10と同様の方法でアルコール5nnから調製した。収率 = 78%; １H NMR (DMSO-d６) δ8.84 (t, 1H)、8.16 (m, 2H)、8.03 (d, 2H)、7.76 (m, 3H)、4.95 (s, 2H)、4.58 (m, 2H)、3.65 (m, 2H)。MS (ES+ = 300.03)。
【０１８１】
R = 2-N-メチルピロール (5pp)。収率 = 56%; 融点 = 244〜248℃;１H NMR (DMSO-d６) δ8.45 (t, 1H)、7.87 (d, 1H)、7.84 (d, 1H)、7.33 (t, 1H)、7.10 (dd, 1H)、6.67 (dd, 1H)、6.24 (dd, 1H)、4.46 (m, 2H)、3.94 (s, 3H)。分析C１５H１４N４O での算出値: C, 67.65; H, 5.30; N, 21.04。実測値: C, 67.59; H, 5.36; N, 21.14。
【０１８２】
R = 2-ピロール (5qq)。収率 = 48%; 融点 = 323〜330℃;１H NMR (DMSO-d６) δ11.93 (s, 1H)、8.45 (t, 1H)、7.79 (t, 2H)、7.31 (t, 1H)、7.04 (s, 1H)、6.77 (s, 1H)、6.29 (m, 1H)、4.53 (m, 2H)、3.59 (m, 2H); MS (ES+ = 253.21)。分析C１４H１２N４O (0.4 H２O)での算出値: C, 64.80; H, 4.97; N, 21.59。実測値: C, 64.78; H, 4.82; N, 21.75。
【０１８３】
R = 2-イミダゾール (5rr)。収率 = 61% ; 融点 = 334〜348℃;１H NMR (DMSO-d６) δ13.37 (s, 1H)、8.47 (t, 1H)、7.91 (t, 2H)、7.39 (m, 2H)、7.23 (s, 1H)、4.50 (m, 2H)、3.65 (m, 2H) ; MS (ES-= 252.01)。分析C１３H１１N５O (0.15 H２O) での算出値: C, 61.00; H, 4.45; N, 27.36。実測値: C, 60.95; H, 4.42; N, 27.44。
【０１８４】
R = 2-N-メチルイミダゾール (5ss)。収率 = 78% ; 融点 = 206〜210℃;１H NMR (DMSO-d６) δ8.46 (t, 1H)、7.95 (dd, 2H)、7.51 (s, 1H)、7.39 (t, 1H)、7.20 (s, 1H)、4.50 (m, 2H)、4.09 (s, 3H)、3.60 (m, 2H) ; MS (ES+ = 268.31)。分析C１４H１３N５O での算出値: C, 62.91; H, 4.90; N, 26.20。実測値: C, 62.79; H, 5.06; N, 25.91。
【０１８５】
R = 2-(5-m-ニトロフェニル)フリル (5tt)。収率 = 86%; 融点 = 290〜296℃; １H NMR (DMSO-d６) δ8.62 (s, 1H)、8.52 (t, 1H)、8.33 (d, 1H)、8.21 (d, 1H)、7.93 (d, 1H)、7.90 (d, 1H)、7.80 (t, 1H)、7.61 (d, 1H)、7.45 (d, 1H)、7.39 (t, 1H)、4.73 (m, 2H)、3.66 (m, 2H) ; MS (ES+ = 375.23)。分析C２０H１４N４O４ での算出値: C, 63.56; H, 3.84; N, 14.82。実測値: C, 63.63; H, 3.80; N, 14.88。
【０１８６】
R = 2-(4,5-ジメチル)フリル (5uu)。収率 = 50%; 融点 = 305〜310℃;１H NMR (DMSO-d６) δ8.44 (t, 1H)、7.83 (d, 2H)、7.33 (t, 1H)、7.05 (s, 1H)、4.56 (m, 2H)、3.61 9d, 2H)、2.34 (s, 3H)、2.03 (s, 3H); MS (ES+ = 282.32)。分析C１６H１５N３O２ (0.2 H２O) での算出値: C, 64.45; H, 5.45; N, 14.75。実測値: C, 67.50; H, 5.40; N, 14.90。
【０１８７】
R = 2-(5-カルボキシ)フリル (5vv)。収率 = 93%; 融点 = 301〜302℃; １H NMR (DMSO-d６) δ8.49 (t, 1H)、7.94 (d, 2H)、7.43 (m, 3H)、4.66 (m, 2H)、3.63 (m, 2H)。分析C１５H１１N３O４ (1 H２O) での算出値: C, 57.14; H, 4.16; N, 13.33。実測値: C, 57.08; H, 4.19; N, 13.31。
【０１８８】
R = 2-(5-N-メチルピペラジンアミド)フリル (5ww)。この化合物を、実施例7a-nで概説したようにEDC/DMAPを使用してN-メチルピペラジンを5vvと結合させて調製した。収率 = 16%。融点 = 261〜265℃。１H NMR (DMSO-d６) δ8.48, (t, 1H)、7.93 (d, 1H)、7.90 (d, 1H)、7.39 (t, 1H)、7.35 (d, 1H)、7.26 (d, 1H)、4.64 (m, 2H)、3.65 (m, 6H)、2.39 (t, 4H)、2.22 (s, 3H)。MS (ES+ = 282.32)。分析C２０H２１N５O３ (0.6 H２O) での算出値: C, 61.56; H, 5.73; N, 17.95。実測値: C, 61.52; H, 5.67; N, 18.01。
【０１８９】
R = 3-(5-ニトロ)チオフェン (5xx)。MS (ES+ = 315.21)。
【０１９０】
R = 2-チオフェン (5yy)。MS (ES+ = 270.31)。
【０１９１】
R = 2-(N-メチル)-5-ホルミルピロール (5zz)。この化合物を、ピロール5ppをホルミル化することにより調製した。(J. Med. Chem. 1989、32、896参照)。その異性体を、カラムクロマトグラフィーにより分離した(DCM→2%MeOH/DCM)。5zzの収率 = 10%。融点 = 241〜247℃; １H NMR (DMSO-d６) δ9.73 (s, 1H)、8.50 (t, 1H)、7.97 (d, 1H)、7.94 (d, 1H)、7.41 (t, 1H)、7.23 (d, 1H)、6.87 (d, 1H)、4.46 (t, 2H)、4.15 (s, 3H)、3.58 (t, 2H)。分析C１６H１４N４O２ (0.3 H２O) での算出値: C, 64.12; H, 4.91; N, 18.69。実測値: C, 64.29; H, 4.91; N, 18.65。
【０１９２】
R = 2-(N-メチル)-4-ホルミルピロール (5aaa)。収率 = 5%; 融点 = 228〜230℃;１H NMR (DMSO-d６) δ9.76 (s, 1H)、8.48 (t, 1H)、8.00 (s, 1H)、7.90 (t, 2H)、7.37 (t, 1H)、7.12 (s, 1H)、4.49 (s, 2H)、3.99 (s, 3H)、3.57 (t, 2H)。分析C１６H１４N４O２ での算出値: C, 65.30; H, 4.79; N, 19.04。実測値: C, 65.32; H, 4.93; N, 19.01。
【０１９３】
R = 2-(5-アミノ)フリル (5bbb)。このアミンを、ニトロフリル5yをPd/C/H２で還元することにより調製した。MS (ES+ = 269.21)。
【０１９４】
R = CH２CH２C(O)NCH２CH２(m-MeOC６H４) (5ccc)。化合物5cccおよび5dddを、実施例7a-nで前に述べたとおりに標準のEDCカップリング条件により調整した。収率 = 43%; 融点 = 165〜167℃; １H NMR (DMSO-d６) δ8.36 (s, 1H)、8.07 (s, 1H)、7.81 (d, 1HO, 7.75 (d, 1H)、7.26 (t, 1H)、7.15 (t, 1H)、6.76 (m, 3H)、4.31 (m, 2H)、3.72 (s, 3H)、3.58 (s, 2H)、3.27 (d, 2H)、3.06 (s, 2H)、2.67 (s, 4H)。分析C２２2H２４N４O３ (0.5 H２O) での算出値: C, 65.82; H, 6.28; N, 13.96。実測値: C, 65.80; H, 6.08; N, 13.95。
【０１９５】
R = CH２CH２C(O)NHCH２CH２-ピペラジン (5ddd)。収率 = 16% ;１H NMR (DMSO-d６) δ8.35 (t, 1H)、7.87 (t, 1H)、7.80 (d, 1H)、7.74 (d, 1H)、7.25 (t, 1H)、4.32 (m, 2H)、3.56 (s, 2H)、3.12 (m, 4H)、2.67 (t, 2H)、2.25 (m, 6H)、1.42 (m, 6H)。分析C２０H２７N５O２ での算出値: C, 65.02 ; H, 7.37; N, 18.96。実測値: C, 65.00; H, 7.24; N, 19.10。
【０１９６】
スキーム3-4  イミダゾベンゾジアゼピンアミン6a-ddの合成。
【化５０】
0004323802.tif 000035
塩化物5nの合成。アミン4 (200mg、1.13mmol)、炭素に担持されているパラジウム (50mg) を、CH３CN (10mL) に懸濁した。クロロアセトアルデヒドの50%水溶液 (215μL、1.31mmol) を、この混合物に加え、反応を3時間攪拌した。反応混合物は粗いフリットであり、これを、濃縮した。粗製の濾液を分析したところ、5n 95%であり、これを、さらに精製することなく、アミノ化ステップで使用した。収率 = 69%、173mg; １H NMR (d６-DMSO) δ8.43 (t, 1H)、7.92 (d, 1H)、7.87 (d, 1H)、7.35 (t, 1H)、5.08 (s, 2H)、4.41 (m, 2H)、3.63 (m, 2H)。
【０１９７】
塩化物5nをアミノ化するための一般的な手順 (6a、R = ピペラジン)。塩化物5n (150mg、0.64mmol) を、CH３CN (5mL) に懸濁し、ピペリジン (108mg、1.3mmol) を加え、引き続き、12時間還流させた。溶液を水 (1mL) でクエンチし、続いて、EtOAc (2×5mL) で抽出した。合わせた有機物を、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、生じた残留物をジエチルエーテルまたはヘキサンで粉砕し、乾燥させると、粗製生成物6a-ddが得られた。生じた固体 (96mg、53%) は、所望のアミン6aであった。１H NMR (d６-DMSO) δ8.35 (t, 1H)、7.82 (d, 1H)、7.76 (d, 1H)、7.27 (t, 1H)、4.31 (m, 2H)、3.61 (m, 2H)、3.35 (s, 2H)、3.03 (s, 2H)、2.55 (s, 2H)、1.68 (m, 4H)、1.59 (m, 2H)。MS (ES+ = 285.07)。
【０１９８】
スキーム3-4a。イミダゾベンゾジアゼピンアミン6a-kkの別の合成。
【化５１】
0004323802.tif 000036
塩化物5nの別の合成。アミン4 (12.5g、70.6mmol)、炭素に担持されているパラジウム (500mg) およびt-ブチルジメチルシリルオキシアセトアルデヒド (15.0g、84.7mmol) を、THF500mLに懸濁し、一晩還流させた。反応を、TLC (EtOAc) により監視し、アミンが消費された後に (16時間)、パラジウムを濾別し、濾液を、フッ化テトラブチルアンモニウム (75mL、THF中、1.0M) で処理した。溶剤を除去し、生じた残留物をジエチルエーテル75mLおよびMeOH75mLで粉砕し、濾過した。固体を乾燥させると、中間体アルコール (13.6g、89%、純度>95%) と同定された。この化合物を、さらに精製することなく、塩素化した。このアルコールを、塩化チオニル (25mL) に滴加し、一晩攪拌した。次いで、塩化チオニルを真空除去し、残留物をジエチルエーテルで数回粉砕した。粗製の固体を、アセトニトリルから再結晶させた (12.2g、全体収率74%)。１H NMR (DMSO-d６) δ8.44 (t, 1H)、7.92 (d, 1H)、7.87 (d, 1H)、7.36 (t, 1H)、5.08 (s, 2H)、4.42 (m, 2H)、3.63 (m, 2H) ; MS (ES+ = 392.34)。分析C１１H１０ClN３O での算出値: C, 56.06; H, 4.28; N, 17.83。実測値: C, 56.06; H, 4.27; N, 17.83。アミン6ee-kkをこの化合物から調製した。
【０１９９】
6b, R=N-ベンジルメチルアミン。１H NMR (d６-DMSO) δ8.44 (t, 1H)、7.89 (m, 2H)、7.35 (m, 6H)、4.45 (m, 2H)、3.90 (s, 2H)、3.65 (m, 2H)、3.62 (s, 2H)、2.17 (s, 3H)。MS (ES+ = 321.01)。
【０２００】
6c,R = イミダゾール。MS (ES+ = 267.93)。
【０２０１】
6d,R = ピロリドン。MS (ES+ = 270.97)。
【０２０２】
6e,R = テトラヒドロキノリン。MS (ES+ = 332.98)。
【０２０３】
6f,R = N-メチルアニリン。MS (ES+ = 306.98)。
【０２０４】
6g,R = N-メチルピペラジン。MS (ES+ = 300.02)。
【０２０５】
6h,R = N,N,N-トリメチルエチレンジアミン。MS (ES+ = 302.03)。
【０２０６】
6i,R = N-メチルシクロヘキシルアミン。MS (ES+ = 313.04)。
【０２０７】
6j,R = N-フェニルピペラジン。MS (ES+ = 361.97)
【０２０８】
6k,R = N,N-ジブチルアミン。MS (ES+= 329.04)
【０２０９】
61,R = N,N,N-トリメチルプロパンジアミン。MS (ES+= 316.03)。
【０２１０】
6m,R = 4-ピペリドン。MS (ES+ = 298.97)。
【０２１１】
6n,R = 3-メチルカルボキシ-4-ピペリドン。MS (ES+=356.96)。
【０２１２】
6o,R = 2-ピペリジン-メタノール。MS (ES+ = 315.03)。
【０２１３】
6p,R = ヘキサメチレンイミン。MS (ES+ = 299.05)。
【０２１４】
6q,R = モルホリン。MS (ES+ = 287.02)。
【０２１５】
6r,R = N-ベンジルピペラジン。MS (ES+ = 377.05)。
【０２１６】
6s,R = ヘプタメチレンイミン。MS (ES+ = 313.08)。
【０２１７】
6t,R = N,N-ジペンチルアミン。MS (ES+ = 357.14)。
【０２１８】
6u,R = N,N-ジヘキシルアミン。MS (ES+ = 385.17)。
【０２１９】
6v,R = N,N-ジイソプロピルアミン。MS (ES+ = 301.10)。
【０２２０】
6w,R = N,N-ジエチルアミン。MS (ES+ = 273.10)。
【０２２１】
6x,R = N-メチル-p-アニシジン。MS (ES+ = 337.06)。
【０２２２】
6y,R = N-ベンジル-[2.2.1]-ジアザビシクロヘプタン。MS (ES+ = 388.10)。
【０２２３】
6z,R = N,N-ジプロピルアミン。MS (ES+ = 301.10)。
【０２２４】
6aa,R = N,N-ジメチルアミン。MS (ES+ = 245.02)。
【０２２５】
6bb,R = N,N-ジベンジルアミン。MS (ES+ = 397.09)。
【０２２６】
6cc,R = N-tert-ブトキシカルボニルピペラジン。MS (ES+ = 386.11)。
【０２２７】
6dd,R = ピペロニルピペラジン。MS (ES+ = 420.09)。
【０２２８】
R = N-ベンジル-(N,N-ジメチルアミノエチル)アミン (6ee)。１H NMR (CDCl３) δ8.57 (bt, 1H)、8.05 (t, 2H)、7.50 (t, 1H)、7.39 (m, 5H)、5.12 (s, 2H)、4.50 (bs, 2H)、3.80 (bs, 2H)、3.60 (m, 4H)、3.36 (s, 6H)、3.10 (m, 2H)。MS (ES+ = 377.99)。
【０２２９】
R = N-ベンジル-N-フェネチルアミン (6ff)。MS (ES+ = 410.98)。
【０２３０】
R = テトラヒドロイソキノリン (6gg)。MS (ES+ = 332.98)。
【０２３１】
R = 4,5-ジメトキシテトラヒドロイソキノリン (6hh)。MS (ES+ = 392.96)。
【０２３２】
R = L-プロリン O-t-ブチルエステル (6ii)。MS (ES+ = 371.01)。
【０２３３】
R = [2.2.1]ジアザビシクロヘプタン (6jj)。MS (ES+ = 298.30)。
【０２３４】
R = (N-3-フルオロフェニル)[2.2.1]ジアザビシクロヘプタン (6kk)。１H NMR (DMSO-d６) δ8.38 (bt, 1H)、7.79 (m, 2H)、7.25 (t, 1H)、7.15 (m, 1H)、6.48 (m, 3H)、4.45 (s, 2H)、4.50 (m, 2H)、3.95 (m, 2H)、3.70 (m, 2H)、3.45 (m, 2H)、2.76 (dd, 2H)、1.87 (dd, 2H)。MS (ES+ = 392.34)。分析C２２H２２FN５O (0.75 H２O) での算出値: C, 65.25; H, 5.85; N, 17.29。実測値: C, 65.63; H, 5.77; N, 16.88。
【０２３５】
スキーム4-4。アミド7a-nの一般的な合成。
【化５２】
0004323802.tif 000037
アミド7a-nを合成するための一般的な手順。カルボン酸 (5ii) (80mg、0.26mmol)、EDC (94mg、0.52mmol)、DMAP (5mg) および必須アミン (0.52mmol) を、DCM/NMP (10: 1、5mL) の溶液中で相互に混合した。反応混合物を一晩攪拌した。処理は、水 (3mL) での洗浄および硫酸ナトリウム層を通す有機相の乾燥を含んだ。有機相を濃縮することにより、粗製アミド7a-nを全て単離した。
【０２３６】
7a,N-(アミノエチル)-モルホリン。MS (ES+ = 419.94)。
【０２３７】
7b,N-(アミノエチル)-ピロリジン。MS (ES+ = 403.96)。
【０２３８】
7c,N-アミノエチル-ピペリジン。MS (ES+ = 417.98)。
【０２３９】
7d,N-メチルピペラジン。MS (ES+ = 389.98)。
【０２４０】
7e,N-ベンジルピペラジン。MS (ES+ = 465.98)。
【０２４１】
7f,ピペロニルピペラジン。MS (ES+ = 509.94)。
【０２４２】
7g,N-boc-ピペラジン。MS (ES+ = 475.98)。
【０２４３】
7h,N,N,N-トリメチルプロパンジアミン。MS (ES+ = 406.02)。
【０２４４】
7i,2-(アミノエチル)-N-メチルピロリジン。MS (ES+ = 418.01)。
【０２４５】
7j,N,N-ジエチルエチレンジアミン。MS (ES+ = 406.02)。
【０２４６】
7k,N,N-ジメチルエチレンジアミン。MS (ES+ = 378.00)。
【０２４７】
71,N,N-ジエチルプロパンジアミン。MS (ES+ = 420.04)。
【０２４８】
7m,N-ベンジル-ジアザ[2.2.1]ビシクロヘプタン。MS (ES- = 475.90)。
【０２４９】
7n,3-カルボキシメチル-4-ピペリジノン。MS (ES+ = 446.96)。
【０２５０】
二環式アミン8a-tの合成。
【化５３】
0004323802.tif 000038
R = H (8a)。１H NMR (DMSO-d６) δ8.38 (bt, 1H)、7.85 (d, 1H)、7.80 (d, 1H)、7.32 (m, 6H)、4.50 (m, 2H)、4.00 (d, 1H)、3.92 (d, 1H)、3.70 (d, 1H)、3.63 (m, 3H)、3.25 (m, 2H)、2.81 (d, 1H)、2.59 (m, 3H)、1.67 (m, 2H)。MS (ES+ = 377.99)。分析C２３H２５N５O (0.2 H２O) での算出値: C, 70.64; H, 6.40; N, 17.91。実測値: C, 70.86; H, 6.55; N, 17.95。
【０２５１】
R = 2,5-ジメチル (8b)。MS (ES+ = 416.35)。
【０２５２】
R = 3-メトキシ (8c)。MS (ES+ = 418.33)。
【０２５３】
R = 4-メトキシ (8d)。MS (ES+ = 418.33)。
【０２５４】
R = 4-O-アセチル (8e)。MS (ES+ = 446.33)。
【０２５５】
R = 3,4-ジメチル (8f)。MS (ES+ = 416.37)。
【０２５６】
R = 3,4-ジクロロ (8g)。MS (ES+ = 456.24)。
【０２５７】
R = 4-t-ブチル (8h)。MS (ES+ = 444.41)。
【０２５８】
R = 4-メチル (8i)。MS (ES+ = 402.38)。
【０２５９】
R = 4-フルオロ (8j)。MS (ES+ = 406.37)。
【０２６０】
R = 3-クロロ (8k)。MS (ES+ = 422.65)。
【０２６１】
R = 2-フルオロ (81)。MS (ES+ = 406.30)。
【０２６２】
R = 3-メチル (8m)。MS (ES+ = 402.32)
【０２６３】
R = 2-メチル (8n)。MS (ES+ = 402.35)。
【０２６４】
R = 3-フルオロ (8o)。MS (ES+ = 406.33)。
【０２６５】
R = 2-クロロ (8p)。MS (ES+ = 422.30)。
【０２６６】
R = 4-トランス-スチルベン (8q)。MS (ES+ = 489.62)。
【０２６７】
R = 4-O-ベンジル (8r)。MS (ES+ = 494.36)。
【０２６８】
R = 2-クロロピペロニル (8s)。MS (ES+ = 466.30)。
【０２６９】
R = 4-クロロ (8t)。MS (ES+ = 422.34)。
【０２７０】
スキーム6-4。アミンlla-fの合成。
【化５４】
0004323802.tif 000039
アルコール9。エチルエステル5jj (500mg、1.38mmol) をTHF (20mL) に懸濁させ、0℃に冷却した。水素化アルミニウムリチウム (100mg、2.74mmol) を、さらに30分間かけて滴加した。反応混合物を室温で一晩攪拌した。反応をEtOAc10mLでクエンチし、水 (10mL) で洗浄した。有機層を分配し、水性層をEtOAc (4×10mL) で繰り返し抽出した。合わせた有機層をNa２SO４で乾燥させ、真空濃縮した。生じた粗製の固体を、ジエチルエーテル (10mL) で粉砕し、濾過した。生じた固体は、アルコール9と同定された。収率 = 400mg (96%); １H NMR (DMSO-d６) δ8.32 (bt, 1H)、7.78 (t, 2H)、7.25 (t, 1H)、7.22 (m, 4H)、5.11 (t, 1H)、4.45 (m, 2H)、4.44 (d, 2H)、3.49 (m, 2H)、3.12 (m, 2H)、3.08 (m, 2H); MS (ES+ = 322.40)。分析C１９H１９N５O２ (0.75H２O) での算出値: C, 68.14; H, 6.08; N, 12.55.実測値: C, 68.59; H, 6.08; N, 12.27。
【０２７１】
塩化ベンジル10。アルコール9 (350mg、1.09mmol) を少量ずつ、塩化チオニル (3mL) の冷却された攪拌溶液 (0℃) に加えた。3時間攪拌した後に、塩化チオニルを真空除去し、粗製塩化物をジエチルエーテルで粉砕し、濾過すると、粗製塩化物295mgが得られた (純度>95%)。この物質を、さらに精製することなく、アミノ化した。１H NMR (DMSO-d６) δ8.46 (bt, 1H), 7.88 (m, 2H), 7.35 (m, 4H), 4.74 (s, 2H), 4.30 (bs, 2H), 3.53 (bs, 2H), 3.27 (m, 2H), 3.17 (m, 2H); MS (ES+ = 340.30)。
【０２７２】
塩化物10をアミノ化するための一般的な手順。塩化物10 (20mg、0.058mmol) をCH３CN (1mL) に溶かした。この混合物 (16mg、0.12mmol) に、炭酸カリウムを、続いて必須アミン (0.12mmol) を加えた。反応を、60℃に一晩加熱した。次いで、反応を1MのHCl (1mL) でクエンチし、EtOAc (2mL) で抽出した。水性層を、K２CO３で塩基性にし、EtOAc (2×2mL) で抽出した。EtOAcを真空濃縮し、粗製アミンを、MSで同定した。
【０２７３】
NR２ = ジメチルアミン (11a)。MS (ES+ = 349.35)。
【０２７４】
NR２ = ピペリジンメタノール (11b)。MS (ES+ = 419.38)。
【０２７５】
NR２ = N-メチルピペラジン (11c)。MS (ES+ = 404.38)。
【０２７６】
NR２ = テトラヒドロイソキノリン (11d)。MS (ES+ = 437.36)。
【０２７７】
NR２ = N,N,N-トリメチルプロピレンジアミン (11e)。MS (ES+ = 420.42)。
【０２７８】
NR２ = ピロリジン (11f)。EtOAc中に遊離塩基を懸濁させ、1.1当量のHCl/Et２Oを加え、1時間攪拌することにより、11fのHCl塩を調製した。生じた固体を濾過すると、吸湿性の固体が生じた。収率 = 72%; １H NMR (CDCl３) δ7.93 (d, 1H)、7.79 (d, 1H)、7.49 (t, 1H)、7.22 (d, 2H)、7.11 (d, 2H)、4.50 (m, 5H)、4.17 (s, 2H)、3.40 (m, 2H)、3.25 (m, 4H)、3.13 (m, 2H)、2.99 (m, 2H)、2.00 (m, 2H)、1.83 (m, 2H); MS (ES+ = 375.38)。分析C２３H２７CIN４O１ (4H２O) での算出値: C, 57.19; H, 7.30; N, 11.60.実測値: C, 56.93; H, 7.46; N, 11.74。
【０２７９】
スキーム7-4。アミド13a-kの合成。
【化５５】
0004323802.tif 000040
カルボン酸12。エステル5jj (1.0g、2.75mmol) を、1MのNaOHに懸濁させ、溶解が生じるまで、100℃に加熱した。反応混合物を冷却し、pH7まで酸性化し、固体を濾別した。固体を乾燥させ、同定すると、所望の物質12であった。乾燥収率 = 761mg (82%); 融点 = 300〜320℃; １H NMR (DMSO-d６) δ12.86 (bs, 1H)、8.35 (bt, 1H)、7.87 (d, 2H)、7.81 (m, 2H)、7.43 (d, 2H)、7.28 (t, 1H)、4.27 (m, 2H)、3.53 (m, 2H)、3.21 (m, 4H)。分析C１９H１７N３O３ (3H２O) での算出値: C, 58.76; H, 4.71; N, 10.82.実測値: C, 58.74; H, 4.85; N, 10.81。
【０２８０】
アミド13a-kを合成するための一般的な手順。カルボン酸12 (20mg、0.060mmol) を、DCM/NMP (1mL、4/1混合物) に懸濁させた。EDC (18mg、0.094mmol)、DMAP (触媒量) および必須アミン (1.2当量) を加え、反応を一晩攪拌した。反応を、水 (2mL) でクエンチし、DCM (2×2mL) で分配した。合わせた有機物を乾燥させ、濃縮すると、粗製アミドが得られた。アミドを、MSにより同定した。
【０２８１】
NR２ = N-ベンジル-[2.2.1]ジアザビシクロヘプタン (13a)。MS (ES+ = 506.26)。
【０２８２】
NR２ = N-ベンジルピペラジン (13b)。MS (ES+ = 494.28)。
【０２８３】
NR２ = N-アミノエチルピロリジン (13c)。MS (ES+ = 432.31)。
【０２８４】
NR２ = N-アミノエチルピペリジン (13d)。MS (ES+ = 446.31)。
【０２８５】
NR２ = 4-カルボキシメチルピペリジン (13e)。MS (ES+ = 461.29)。
【０２８６】
NR２ = N,N-ジエチルエチレンジアミン (13f)。MS (ES+ = 434.33)。
【０２８７】
NR２ = N-メチルピペラジン (13g)。MS (ES+ = 418.31)。
【０２８８】
NR２ = 3-カルボキシメチル-4-オキソピペリジン (13h)。MS (ES+ = 475.27)。
【０２８９】
NR２ = N,N,N-トリメチルエチレンジアミン (13i)。MS (ES+ = 420.36)。
【０２９０】
NR２ = グリシンt-ブチルエステル (13j)。MS (ES+ = 447.29)。
【０２９１】
NR２ = グリシン (13k)。グリシンt-ブチルエステル13j (300mg、1.0mmol) をDCM中10%のTFAを用いて脱保護することにより、この化合物を調製した。16時間攪拌した後に、溶剤を除去し、残留物を、10%Na２CO３に入れた。この塩基性混合物を抽出し、続いて、酸性化し、EtOAc (3×5mL) で再抽出すると、所望の酸13kの溶液が生じた。EtOAcを真空除去し、粗製の固体を、MeOH/EtOAc (75mg、20%) から再結晶させた。１H NMR (DMSO-d６) δ12.75 (bs, 1H)、9.13 (bt, 1H)、8.51 (bt, 1H)、8.39 (s, 1H)、8.07 (m, 2H)、7.94 (m, 2H)、7.72 (t, 1H)、7.39 (t, 1H)、4.51 (m, 2H)、3.98 (m, 2H)、3.56 (m, 2H)。分析C１９H１６N４O４での算出値: C, 62.63; H, 4.43; N, 15.38.実測値: C, 62.28; H, 4.49; N, 15.34。
【０２９２】
スキーム8-4。アミド14a-jの合成。
【化５６】
0004323802.tif 000041
アミン14a-jを合成するための一般的な手順。14a-jを合成するための手順は、アミン6a-kkの合成と同様である。
【０２９３】
NR２ = ジメチルアミン (14a)。MS (ES+ = 321.26)。
【０２９４】
NR２ = ピロリジン (14b)。MS (ES+ = 347.27)。
【０２９５】
NR２ = 4-カルボキシメチルピペリジン (14c)。MS (ES+ = 419.26)。
【０２９６】
NR２ = N-メチルグリシン (14d)。MS (ES+ = 367.21)。
【０２９７】
NR２ = テトラヒドロイソキノリン (14e)。MS (ES+ = 407.26)。
【０２９８】
NR２ = N-メチル-ベンジルアミン (14f)。MS (ES+ = 397.26)。
【０２９９】
NR２ = N,N,N-トリメチルエチレンジアミン (14g)。MS (ES+ = 378.33)。
【０３００】
NR２ = N-メチルピペラジン (14h)。MS (ES+ = 376.32)。
【０３０１】
NR２ = 2-ピペリジンメタノール (14i)。MS (ES+ = 391.31)。
【０３０２】
NR２ = N-メチルグリシンt-ブチルエステル (14j)。収率 = 70%; 融点 = 180〜185℃; １H NMR (DMSO-d６) δ8.37 (t, 1H)、7.82 (m, 2H)、7.29 (t, 1H)、4.48 (m, 2H)、3.94 (s, 2H)、3.58 (m, 2H)、3.26 (s, 2H)、2.30 (s, 3H)、1.38 (s, 9H)。分析C１８H２４N４O３での算出値: C, 62.77; H, 7.02; N, 16.27.実測値: C, 62.73; H, 7.05; N, 16.22。
【０３０３】
実施例5
次の一般式II-5の化合物は、例えば、次の方法により合成することができる。
【化５７】
0004323802.tif 000042
【０３０４】
スキーム1-5。アザフェナントリドン (azaphenanthridone) 4a-cを合成するための一般的なスキーム。
【化５８】
0004323802.tif 000043
アミン3a-cを合成するための一般的な手順。Brimble, M. A.; Chan, S. H. Aust. J. Chem. 1998、51、235-242により調製されたボロン酸1 (2.0g、8.0mmol) を、トルエン/EtOH (8: 1) 100mL中の炭酸カリウム (H２O 8mL中の2.2g) および2-クロロ-3-アミノピリジン (0.94g、7.3mmol) の溶液に加えた。この混合物を、真空中で脱酸素化し、窒素で再び満たした。窒素下に30分間、混合物を攪拌した後に、パラジウムテトラキストリフェニルホスフィン (250mg) を、この混合物に加えた。TLC (ヘキサン/EtOAc  50/50) により、完全に変換するまで、溶液を80℃に加熱した。次いで、反応を水で抽出し、トルエン層を乾燥させ、濃縮すると、粗製の固体が得られ、これを、ジエチルエーテル (10〜20mL) で粉砕すると、所望のアミン3aが1.84g (85%) 得られる。１H NMR (CDCl３) δ8.05 (d, 1H)、7.45 (m, 3H)、7.28 (d, 1H)、7.06 (m, 1H)、7.00 (d, 1H)、4.01 (s, 2H)、3.78 (m, 1H)、3, 31 (m, 1H)、1.48 (d, 3H)、1.13 (d, 3H)、1.01 (d, 3H)、0.84 (d, 3H)。
【０３０５】
R = 5-クロロアミン3b。最少量のシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーによる精製を除き (10%EtOAc/ヘキサン→50%EtOAc/ヘキサン)、アミド3bを、前記のように3-アミノ-2,5-ジクロロ-ピリジン2b (X = Cl、R = 5-Cl) から合成した。乾燥収率は、1.40g (70%) であった。１H NMR (CDCl３) δ7.98 (s, 1H)、7.45 (m, 2H)、7.26 (m, 2H)、7.00 (d, 1H)、3.76 (m, 1H)、3.35 (m, 1H)、1.48 (d, 3H)、1.19 (d, 3H)、1.04 (d, 3H)、0.91 (d, 3H)。
【０３０６】
R = 6-メトキシアミン3c。アミド3cを、前記のように、3-アミノ-2-ブロモ-6-メトキシピリジン2cおよびボロン酸1から合成した。乾燥収率は、74%であった。１H NMR (CDCl３) δ7.43 (m, 3H)、7.27 (m, 1H)、7.08 (d, 1H)、6.61 (d, 1H)、3.83 (s, 3H)、3.70 (m, 1H)、3.30 (m, 1H)、1.49 (d, 3H)、1.15 (d, 3H)、0.99 (d, 3H)、0.75 (d, 3H)。
【化５９】
0004323802.tif 000044
【０３０７】
アザフェナントリドン4a。アミド3a (1.74g、5.8mmol) を、無水テトラヒドロフラン (25mL) に溶かし、窒素下に-78℃に冷却した。リチウムジイソプロピルアミド (2.0M、7.6mL) を、この溶液に滴加し、この混合物を、数時間攪拌し、室温まで一晩加温した。反応を水 (50mL) でクエンチし、10%MeOH/DCMで抽出した。合わせた有機物を乾燥させ、濃縮すると、粗製の固体が得られ、これを、沸騰ジエチルエーテルで粉砕すると、純粋な物質4a  0.95g (89%) が得られた。融点 = 300〜320℃ (分解); １H NMR (d６-DMSO) δ11.78 (s, 1H)、8.77 (d, 1H)、8.55 (d, 1H)、8.32 (d, 1H)、7.93 (d, 1H)、7.74 (m, 2H)、7.54 (m, 1H)。分析C１２H８N２Oでの算出値: C, 73.46; H, 4.11; N, 14.28.実測値: C, 72.80; H, 4.19; N, 14.06。
【化６０】
0004323802.tif 000045
【０３０８】
クロロアザフェナントリドン4b。塩化物4bを、化合物4aと同様の方法で調製した。収率 = 74%; 融点 = 295〜300℃、１H NMR (d６-DMSO) δ11.80 (bs, 1H)、8.69 (d, 1H)、8.56 (s, 1H)、8.31 (d, 1H)、7.94 (t, 1H)、7.78 (m, 2H)。分析C１２H７ClN２Oでの算出値: C, 62.49; H, 3.06; N, 12.15.実測値: C, 61.53; H, 3.21; N, 11.87。
【化６１】
0004323802.tif 000046
【０３０９】
メトキシアザフェナントリドン4c。化合物4cを、4aと同様の方法でアミド3cから調製した。収率99%; 融点 = 290〜300℃; １H NMR (d６-DMSO) δ11.67 (bs, 1H)、8.69 (d, 1H)、8.30 (d, 1H)、7.93 (t, 1H)、7.72 (m, 2H)、7.03 (d, 1H)、4.01 (s, 3H)。分析C１３H１０N２O２での算出値: C, 69.02; H, 4.46; N, 12.38.実測値: C, 67.89; H, 4.49; N, 12.08。
【化６２】
0004323802.tif 000047
【０３１０】
ヒドロキシアザフェナントリドン4d。メチルエステル4c (500mg、2.2mmol) を、封管中で、HBr10mL (HOAc中、48%) に溶かした。反応を、100℃に10時間加熱した。冷却した後に、反応を濾過し、酢酸 (3×10mL) で洗浄し、真空乾燥させた。臭化水素酸塩4dの乾燥重量は、421mg (90%) であった。１H NMR (d６-DMSO) δ11.61 (bs, 1H)、10.50 (bs, 1H)、8.62 (d, 1H)、8.30 (d, 1H)、7.89 (t, 1H)、7.71 (t, 1H)、7.65 (d, 1H)、6.81 (d, 1H)。分析C１２H９BrN２O２での算出値: C, 49.17; H, 3.09; N, 9.56.実測値: C, 48.75; H, 3.15; N, 9.36。
【化６３】
0004323802.tif 000048
【０３１１】
ベンジルオキシアザフェナントリドン4e。臭化水素酸塩4d (100mg、0.34mmol) を、DMF3mLに溶かした。炭酸カリウム (100mg) および臭化ベンジル (60μL、0.50mmol) を、この溶液に加え、混合物を60℃に14時間加熱した。溶剤を真空除去し、残留物を水 (5mL) および沸騰MeOH (10mL) で洗浄し、濾過した。固体4e (47mg、46%) は、純粋であったが、濾液は、異性体の混合物を含有した。融点 = 271〜276℃。１H NMR (d６-DMSO) δ11.68 (bs, 1H)、8.71 (d, 1H)、8.30 (d, 1H)、7.93 (t, 1H)、7.74 (m, 2H)、7.55 (d, 2H)、7.40 (t, 2H)、7.32 (t, 1H)、7.09 (d, 1H)、5.54 (s, 2H)。分析C１９H１４N２O２ (H２O) での算出値: C, 71.24; H, 5.03; N, 8.74.実測値: C, 71.28; H, 4.83; N, 8.38。
【０３１２】
スキーム2-5。アミノアザフェナントリドン4fの合成。
【化６４】
0004323802.tif 000049
【０３１３】
ジニトロアミド3f。2-クロロ-3,5-ジニトロピリジン2fとボロン酸1とのカップリングを、3a-cの手順での記載と同様に行った。１H NMR (CDCl３) δ9.55 (s, 1H)、9.04 (s, 1H)、7.41 (m, 2H)、7.39 (t, 1H)、7.28 (d, 1H)、3.99 (m, 1H)、3.40 (m, 1H)、1.58 (bd, 3H)、1.50 (bd, 3H)、1.33 (bd, 3H)、1.20 (bd, 3H)。
【０３１４】
アミノアザフェナントリドン4f。ジニトロアミド3f (700mg、1.88mmol) を、MeOH25mLに溶かし、窒素下に、炭素に担持されているパラジウム100mgと共にParrフラスコに加えた。この混合物を、水素30psiの雰囲気下に、2時間還元した。パラジウムを、充填したセライトを通して濾過し、濾液を真空濃縮し、粗製ジアミン (550mg、94%) を、さらに精製することなく、再結晶で使用した。このジアミンを、無水テトラヒドロフランに再溶解させ、アミド3a-cと同様の方法で、LDA (3当量) で環化させた。化合物4fを、収率56% (227mg) で単離した。融点 = >300℃ (分解); １H NMR (d６-DMSO) δ11.46 (bs, 1H)、8.49 (d, 1H)、8.17 (d, 1H)、7.95 (s, 1H)、7.77 (t, 1H)、7.51 (t, 1H)、6.79 (s, 1H)、5.92 (d, 2H)。分析C１２H９N３O２での算出値: C, 62.87; H, 4.84; N, 18.33.実測値: C, 62.18; H, 4.74; N, 18.17。
【０３１５】
スキーム3-5。クロロアザフェナントリドン4gの合成。
【化６５】
0004323802.tif 000050
クロロアザフェナントリドン4g。アミド5を、DCM中の市販の試薬、塩化ベンゾイルおよび3-アミノ-2,6-ジクロロピリジンから、高い収率で調製した。アミド5 (4.45g、16.7mmol) をDMA (35mL) に溶かし、炭酸ナトリウム (1.8g、16.7mmol) および酢酸パラジウム (400mg、触媒量) を加えることにより、所望の生成物4gを調製した。TLCにより、出発物質がもはや存在しなくなるまで、反応混合物を、125℃に数時間加熱した。次いで、反応を室温まで冷却し、真空濃縮させ、粗製残留物を、沸騰EtOAc (100mL) に懸濁させ、充填したセライトを通して濾過した。濾液を濃縮し、析出した固体を濾別し、化合物4gであると決定した (520mg、収率13%)。融点 = 285〜295 (分解) ℃; １H NMR (d６-DMSO) δ11.92 (bs, 1H)、8.62 (d, 1H)、8.32 (d, 1H)、7.95 (t, 1H)、7.77 (m, 2H)、7.62 (d, 1H)。分析C１２H７ClN２Oでの算出値: C, 62.49; H, 3.06; N, 12.15.実測値: C, 61.40; H, 3.19; N, 11.77。
【０３１６】
スキーム4-5。アザフェナントリドンアミン4h-xを合成するための一般的スキーム。
【化６６】
0004323802.tif 000051
ニトロ化合物3gを合成するための一般的な手順。文献により調製されたボロン酸1 (2.0g、8.0mmol) を、トルエン/EtOH (8: 1) 100mL中の炭酸カリウム (H２O 8mL中の2.2g) および2,5-ジクロロ-3-ニトロピリジン2g (1.4g、7.3mmol) の溶液に加えた。この混合物を真空中で脱酸素化し、窒素を再び満たした。窒素下に30分間混合物を攪拌した後に、パラジウムテトラキストリフェニルホスフィン (250mg) を混合物に加えた。TLC (ヘキサン/EtOAc 50/50) により、完全に変換するまで (出発物質がなくなるまで)、溶液を80℃に加熱した。次いで、反応を水で抽出し、トルエン層を乾燥させ、濃縮して、粗製オイルを得て、これを、シリカゲルでカラム処理すると、所望の異性体3gが収率45% (1.20g) で得られた。１H NMR (CDCl３) δ8.26 (d, 1H)、7.45 (m, 3H)、7.34 (m, 2H)、3.99 (m, 1H)、3.41 (m, 1H)、1.38 (bs, 9H)、1.21 (d, 3H)。
【０３１７】
アミン6a-xを合成するための一般的な手順。塩化物3g (300mg、0.83mmol) をTHF (5mL) に溶かし、引き続き、ジイソプロピルエチルアミン (160μL、0.91mmol) および2-(4-アミノエチル) モルホリン (220μL、1.66mmol) を加えた。反応を65℃に一晩加熱すると、TLC分析は、ベースライン上 (EtOAc) に低位置スポットを示した。水 (5mL) を混合物に加え、DCM (3×10mL) で抽出した。合わせた有機物を乾燥させ、濃縮させると、粗製のフォームが得られ、これを、真空乾燥させて、固体化した。固体を、ヘキサンで粉砕し、濾過すると、所望のアミン6a 320mg (85%) が得られた。
【０３１８】
NR２ = アミノエチルモルホリン (6a)。収率 = 85%; １H NMR (DMSO-d６) δ8.21 (m, 1H), 7.40 (m, 5H), 6.36 (d, 1H), 3.97 (m, 1H), 3.70 (m, 6H), 3.47 (m, 2H), 3.31 (m, 1H), 2.45 (m, 6H), 1.48 (bs, 3H), 1.24 (bs, 3H), 1.06 (bs, 3H), 0.87 (bs, 3H)。
【０３１９】
NR２ = N-メチルピペラジン (6b)。収率 = 72%; MS (ES+) = 426.21。
【０３２０】
NR２ = N-boc-[2.2.1]ジアザビシクロヘプタン (6c)。収率 = 72%; MS (ES+) = 486.43。
【０３２１】
NR２ = N-boc-ピペラジン (6d)。収率 = 72%; MS (ES+) = 473.23。
【０３２２】
NR２ = アミノ (6e)。収率 = 72%; MS (ES+) = 343.31。
【０３２３】
アニリン7a-xを合成するための一般的な手順。ニトロ化合物6a (300mg、0.66mmol) を、Pd/C (100mg) を有するMeOH (20mL) に溶かし、30psiで2時間水素化した。TLCは、ニトロ化合物の完全な変換を示した (10%MeOH/EtOAc)。反応混合物を充填したセライトを通して濾過し、濾液を濃縮し、乾燥させた。粗製フォームを、さらに精製することなく、環化ステップで使用した。アニリン7aの乾燥収率は、275mg (99%) であった。１H NMR (CDCl３) δ7.41 (m, 3H)、6.98 (d, 1H)、6.31 (d, 1H)、4.75 (bs, 2H)、3.78 (m, 1H)、3.70 (m, 4H)、3.28 (m, 3H)、2.56 (m, 2H)、2.47 (m, 4H)、1.50 (d, 3H)、1.19 (d, 3H)、1.00 (d, 3H)、0.83 (d, 3H)。
【化６７】
0004323802.tif 000052
【０３２４】
アニリン7a-xを環化するための一般的な手順。粗製アニリン7a (270mg、0.64mmol) をTHF (20mL) に溶かし、-78℃に冷却した。LDA (1mL) の2.0M溶液をアニリンに加え、反応を徐々に室温まで一晩加熱した。混合物を、水 (10mL) でクエンチし、EtOAc (3×15mL) で数回抽出した。合わせた有機物を乾燥させ、濃縮し、生じた固体を、EtOAc (3mL) で粉砕し、濾過すると、所望のアミン4h 125mg (58%) が得られた。１H NMR (DMSO d６) δ11.46 (s, 1H)、8.70 (d, 1H)、8.32 (d, 1H)、7.92 (t, 1H)、7.71 (t, 1H)、7.49 (d, 1H)、6.82 (d, 1H)、6.63 (t, 1H)、3.66 (m, 4H)、3.58 (m, 2H)、2.60 (m, 4H)。MS (ES+ = 324.97)。融点= 250〜255℃。分析C１８H２０N４O２ (0.5 H２O) での算出値 C, 64.85; H, 6.35; N, 16.81。実測値 C, 65.44; H, 6.27; N, 16.71。
【化６８】
0004323802.tif 000053
【０３２５】
NR２ = N-メチルピペラジン (4i)。収率 = 46%; 融点 = 285〜288℃; １H NMR (CDCl３) δ11.50 (s, 1H)、8.65 (d, 1H)、8.27 (d, 1H)、7.88 (t, 1H)、7.69 (t, 1H)、7.56 (d, 1H)、7.14 (d, 1H)、3.56 (t, 4H)、2.46 (t, 4H)、2.24 (s, 3H)。分析C１７H１８N４O での算出値: C, 69.37: H, 6.16: N, 19.03; 実測値: C, 69.38 : H, 6.15: N, 18.84。
【化６９】
0004323802.tif 000054
【０３２６】
NR２ = (S,S)-N-Boc-[2.2.1]ジアザビシクロヘプタン (4j)。収率 = 36%; 融点 = 259〜261℃;１H NMR (DMSO-d６) δ11.44 (s, 1H)、8.65 (d, 1H)、8.26 (d, 1H)、7.67 (t, 1H)、7.45 (d, 1H)、6.85 (t, 1H)、4.92 (dd, 2H)、3.38 (m, 2H)、3.30 (s, 1H)、3.23 (m, 1H)、1.96 (d, 2H)、1.60 (s, 9H)。分析C２２H２４N４O３ での算出値: C, 67.33; H, 6.16; N, 14.28。実測値: C, 67.30; H, 6.19; N, 14.21。
【化７０】
0004323802.tif 000055
【０３２７】
NR２ = [2.2.1]-ジアザビシクロヘプタン (4k)。この化合物を、10% TFA/DCM (16h)でboc基を脱保護することにより調製した。収率 = 98%; 融点 = 160〜165℃;１H NMR (DMSO-d６) δ11.54 (s, 1H)、8.68 (d, 1H)、8.59 (d, 1H)、7.90 (t, 1H)、7.72 (t, 1H)、7.61 (d, 1H)、6.92 (d, 1H)、5.04 (s, 1H)、4.53 (s, 1H)、3.68 (m, 2H)、3.29 (m, 2H)、2.19 (d, 1H)、2.00 (d, 1H)。分析C１７H１６N４O (1.1 C２HF３O２)(0.4 H２O) での算出値: C, 54.41 ; H, 4.00 ; N, 13.22。実測値: C, 54.12; H, 4.26 ; N, 12.98。
【化７１】
0004323802.tif 000056
【０３２８】
NR２ = Boc-ピペラジン (41)。収率 = 48%; 融点 = 231〜235℃;１H NMR (DMSO-d６) δ11.52 (s, 1H)、8.67 (d, 1H)、8.27 (d, 1H)、7.89 (t, 2H)、7.70 (t, 2H)、7.58 (d, 1H)、3.50 (dd, 8H)、1.44 (s, 9H)。分析C２１H２４N４O３ (0.5 H２O) での算出値: C, 64.77; H, 6.47; N, 14.39。実測値 : C, 64.83; H, 6.39; N, 14.23。
【化７２】
0004323802.tif 000057
【０３２９】
NR２ = ピペラジン (4m)。この化合物を、10% TFA/DCM (16h)でboc基を脱保護することにより調製した。収率 = 99%。; 融点 = 250〜252℃; １H NMR (DMSO-d６) δ11.56 (s, 1H)、8.93 (bs, 1H)、8.65 (d, 1H)、8.27 (d, 1H)、7.87 (t, 1H)、7.70 (t, 1H)、7.61 (d, 1H)、7.21 (d, 1H)、3.61 (t, 4H)、3.26 (bs, 4H)。分析C１６H１６N４O (0.5 H２O) (1.9 TFA) での算出値: C, 47.18; H, 3.40; N, 11.11。実測値: C, 47.39; H, 3.64; N, 11.18。
【化７３】
0004323802.tif 000058
【０３３０】
NR２ = アミノ (4n)。収率 = 50%; 融点 = 310〜315℃; １H NMR (DMSO-d６) δ11.42 (s, 1H)、8.50 (d, 1H)、8.26 (d, 1H)、7.85 (t, 1H)、7.66 (t, 1H)、7.44 (d, 1H)、6.70 (d, 1H)、6.02 (d, 2H)。分析C１２H９N３O (0.11 EtOAc) での算出値: C, 67.64; H, 4.51; N, 19.02。実測値: C, 67.98; H, 4.57; N, 18.67。
【化７４】
0004323802.tif 000059
【０３３１】
NR２ = N,N-ジエチルアミノプロピル (4o)。収率 = 45% ; 融点 = 114〜116℃;１H NMR (DMSO-d６) δ300 MHz 0.96 (t. 6H, J = 7.07,7.73)、1.72 (m, 2H)、2.49 (m, 6H)、3.39 (m, 2H)、6.70 (d, 1H, J=8.84)、7.41 (d, 1H, J = 8.84)、7.65 (t, 1H, J = 8.08,8.09)、7.84 (t, 1H, J = 8.09, 8.34)、8.24 (d, 1H, J = 7.83)、8.83 (d, 1H, J = 7.83)、11.4 (s, 1H)。
【化７５】
0004323802.tif 000060
【０３３２】
NR２ = N-イソプロピルピペラジン (4p)。融点 = 260〜264℃;１H NMR (DMSO-d６) δ300 MHz 11.48 (s, 1H)、8.63 (d, J = 7.44Hz, 1H)、8.25 (d, J = 7.25Hz, 1H)、7.86 (t, J = 8.2,8.39Hz, 1H)、7.67 (t, J = 8.20,6.87Hz, 1H)、7.53 (d, J = 9.15Hz, 1H)、7.10 (d, J = 9.16Hz, 1H)、3.55 (t, J = 4.96,4.58Hz, 4H)、2.68 (m, 1H)、2.56 (t, J = 4.77, 4.77Hz, 4H)、1.00 (d, J = 6.48Hz, 6H)。分析C１９H２４N４O での算出値: C, 70.8 ; H, 6.9; N, 17.2。実測値: C, 70.9; H, 6.9 ; N, 17.2。
【化７６】
0004323802.tif 000061
【０３３３】
NR２ = ピロールイルピペリジン (4q)。融点 = 170〜175℃;１H NMR (D２O) δ300 MHz 7.89 (d, J = 7.63Hz, 1H)、7.80 (d, J = 7.82Hz, 1H)、7.54 (t, J = 7.06,7.63Hz, 1H)、7.43 (t, J = 6.48,7.44Hz, 1H)、6.94 (d, J = 8.21Hz, 1H)、6.54 (d, J = 7.25Hz, 1H)、4.08 (d, J = 12.21Hz, 2H)、3.63 (t, J = 9.72,8.01Hz, 2H)、3.31 (m, 1H)、3.13 (m, 2H)、2.70 (t, J = 9.92,12.02Hz, 2H)、2.11〜2.2 (m, 4H)、1.94 (q, 2H)、1.63 (q, 2H)。分析C２１H２４N４O (1 H２O) (1.4HCl) での算出値: C, 58.4; H, 6.4; N, 13.0; Cl, 11.5。実測値: C, 58.7; H, 6.8; N, 12.8; Cl, 11.1。
【化７７】
0004323802.tif 000062
【０３３４】
NR２ = N-シクロペンチルピペラジン (4r)。融点 = 285〜290℃;１H NMR (DMSO-d６) δ300 MHz 11.50 (s, 1H)、8.65 (d, J = 7.82Hz, 1H)、8.28 (d, J = 8.01Hz, 1H)、7.88 (t, J = 7.06,6.86Hz, 1H)、7.70 (t, J = 7.06,7.06Hz, 1H)、7.56 (d, J = 8.96Hz, 1H)、7.13 (d, J = 9.16Hz, 1H)、3.58 (t, J = 4.96,4.20Hz, 4H)、2.57 (t, J = 4.58,4.57Hz, 4H)、1.83 (m, 2H)、1.64 (m, 2H)、1.57 (m, 1H)、1.50 (m, 2H)、1.37 (m, 2H)。分析C２１H２４N４O (0.2 H２O) での算出値: C, 71.7; H, 7.0; N, 15.9。実測値: C, 71.6; H, 7.0; N, 15.7。
【化７８】
0004323802.tif 000063
【０３３５】
NR２ = N-オキソ-N-メチルピペリジン (4s)。過剰なmCPBAで4iを酸化することにより、この化合物および4t合成した。１H NMR (D２O) δ300 MHz 7.62 (d, J = 6Hz, 1H)、7.52 (d, J = 9Hz, 1H)、7.33 (m, 2H)、6.59 (d, J = 9Hz, 1H)、6.14 (d, J = 9Hz, 1H)、3.73 (m, 4H)、3.62 (t, 2H)、3.55 (s, 3H)、3.08 (t, 2H)。
【化７９】
0004323802.tif 000064
【０３３６】
NR２ = N-オキソ-メチルピペリジン-N-オキシド (4t)。融点 = 230〜235℃; １H NMR (D２O) δ300 MHz 7.97 (m, 2H)、7.51 (d, J = 9Hz, 1H)、7.43 (d, J = 9Hz, 1H)、7.36 (t, J = 9Hz, 1H)、7.27 (t, J = 9Hz, 1H)、4.88 (bt, 2H)、4.56 (bt, 2H)、3.96 (bd, 2H)、3.69 (s, 3H)、3.64 (bd, 2H)。分析C１７H１８N４O３ (1.25 H２O) での算出値: C, 50.1; H, 5.1 ; N, 13.8。実測値: C, 50.7; H, 5.2; N, 13.8。
【化８０】
0004323802.tif 000065
【０３３７】
NR２ = N-メチルフラニルピペラジン (4u)。融点 = 270〜275℃; １H NMR (DMSO-d６) 300 MHz 11.49 (s, 1H)、6.63 (d, J = 8.01Hz, 1H)、8.25 (d, J = 7.82Hz, 1H)、7.86 (t, J = 8.20,8.21Hz, 1H)、7.67 (t, J = 7.06, 7.06Hz, 1H)、7.53 (d, J= 8.96,1H)、7.11 (d, J = 8.96Hz, 1H)、3.96 (m, 1H)、3.73 (q, 1H)、3.59 (q, 1H)、3.55 (t, J= 4.96, 3.44Hz, 4H)、2.61 (m, 2H)、2.55 (m, 2H)、2.41 (m, 2H)、1.86〜1.98 (m, 1H)、1.75〜1.82 (m, 2H)、1.43〜1.47 (m, 1H)。分析C２１H２４N４O２(0.3 H２O) での算出値: C, 68.2 ; H, 6.7; N, 15.2。実測値: C, 68.2; H, 6.7; N, 15.0。
【化８１】
0004323802.tif 000066
【０３３８】
NR２ = N-シクロプロピルメチルピペラジン (4v)。１H NMR (DMSO-d６) 300 MHz 11.38 (bs, 1H)、8.55 (d, 1H)、8.17 (d, 1H)、7.76 (t, 1H)、7.58 (t, 1H)、7.46 (d, 1H)、7.05 (d, 1H)、3.49 (m, 4H)、2.40 (m, 4H)、2.12 (m, 2H)、0.77 (m, 1H)、0.39 (m, 2H)、0.00 (m, 2H)。
【化８２】
0004323802.tif 000067
【０３３９】
NR２ = N-メチル-[2.2.1]-ジアザビシクロヘプタン (4w)。１H NMR (DMSO-d６) 300 MHz 11.43 (bs, 1H)、8.66 (d, 1H)、8.27 (d, 1H)、7.84 (t, 1H)、7.70 (t, 1H)、7.53 (d, 1H)、6.81 (d, 1H)、4.73 (m, 1H)、3.52 (m, 1H)、3.48 (m, 1H)、3.37 (m, 1H)、3.34 (m, 1H)、2.87 (d, 1H)、2.28 (s, 3H)、1.86 (dd, 2H)。
【化８３】
0004323802.tif 000068
【０３４０】
NR２ = N-シクロプロピルメチル-[2.2.1]-ジアザビシクロヘプタン (4x)。MS (ES+) = 347.28。
【０３４１】
スキーム5-5。アミン8a-rの合成。
【化８４】
0004323802.tif 000069
アミン4kをアルキル化するための一般的な手順。アミン4k (10mg)、過剰なK２CO３および対応する塩化ベンジルを、試験管中でCH３CN 1mL中に入れた。これらの混合物をヒートブロック上で60℃に一晩加熱した。EtOAcおよび10%HClを加えた。有機層を除去し、水性層を10%NaOHで塩基性にした。EtOAcで抽出し、次いで、減圧下に蒸発させた。化合物8a〜rを、こうして製造した。
【０３４２】
R = CH２CN (8a)。MS (ES+) = 332.41。
【０３４３】
R = CH２COOEt (8b)。MS (ES+) = 378.45。
【０３４４】
R = CH２-(2,5-ジメチルフェニル) (8c)。MS (ES+) = 311.51。
【０３４５】
R = CH２-(4-フルオロフェニル) (8d)。MS (ES+) = 401.45。
【０３４６】
R = CH２-(4-メトキシフェニル (8e)。MS (ES+) = 413.49。
【０３４７】
R = CH２-(3,4-ジメチルフェニル (8f)。MS (ES+) = 411.23。
【０３４８】
R = CH２-(3,4-ジクロロフェニル) (8g)。MS (ES+) = 451.36。
【０３４９】
R = CH２-(2-フルオロフェニル) (8h)。MS (ES+) = 401.42。
【０３５０】
R = CH２-(3-メチルフェニル) (8i)。MS (ES+) = 397.49。
【０３５１】
R = CH２-(3-クロロフェニル) (8j)。MS (ES+) = 417.83。
【０３５２】
R = CH２-(2-メチルフェニル) (8k)。MS (ES+) = 397.41。
【０３５３】
R = CH２-(2-クロロフェニル) (8l)。MS (ES+) = 417.73。
【０３５４】
R = CH２-(4-カルボキシフェニル) (8m)。MS (ES+) = 427.43。
【０３５５】
R = CH２-(3-カルボキシフェニル) (8n)。MS (ES+) = 427.41。
【０３５６】
R = CH２-(4-メチルフェニル) (8o)。MS (ES+) = 397.42。
【０３５７】
R = CH２-(4-ベンジルオキシフェニル) (8p)。MS (ES+) = 489.44。
【０３５８】
R = CH２-(3-フルオロフェニル) (8q)。MS (ES+) = 400.42。
【０３５９】
R = CH２-(3-メチルフェニル) (8r)。MS (ES+) = 412.43。
【０３６０】
スキーム6-5。アミン9a-cの合成。
【化８５】
0004323802.tif 000070
アミン9a-cを平行合成するための一般的な手順。アミン4m、過剰のK２CO３および対応するブロモメチルピリジンの混合物に、CH３CN 1mLを加えた。この反応混合物を、90℃に4時間加熱した。トリス (2-アミノエチル) アミン樹脂を加え、70℃に1時間加熱して、過剰のブロモメチルピリジンを除去した。混合物を濾過し、水 (2mL) を加えた。EtOAcで抽出した。有機層を、Na２SO４上で乾燥させ、減圧下に蒸発させた。
【０３６１】
R = CH２-(o-ピリジン) (9a)。MS (ES+) = 372.41。
R = CH２-(m-ピリジン) (9b)。MS (ES+) = 372.40。
R = CH２-(o-ピリジン) (9c)。MS (ES+) = 372.41。
【０３６２】
スキーム7-5。アミン11a〜xの合成。
【化８６】
0004323802.tif 000071
【０３６３】
クロロアセチル誘導体 (10) を合成するための手順。アミン4nを、N,N'-ジメチルアセトアミドに溶かし、氷浴中で0℃に冷却した。トリエチルアミン (1.1当量) および塩化クロロアセチル (0.44mL、5.5mmol) を加えた。反応混合物を、窒素下に、室温で一晩攪拌した。溶剤を減圧下に蒸発させ、残留した褐色の残留物に、水および10%NaHCO３を加えた。濾過により固体を集めると、1.03g (収率84%) が得られた。融点 = 287〜290℃;  １H NMR (DMSO-d６) δ300 MHz 11.81 (s, 1H)、10.94 (s, 1H)、8.66 (d, J = 8.39, 1H)、8.31 (d, J = 7.63, 1H)、8.20 (d, J = 8.01, 1H)、7.96 (t, J = 7.82, 7.44, 1H)、7.77 (m, 2H)、4.42 (s, 2H)。分析C１４H１０ClN３O２ での算出値: C, 58.5; H, 3.5; N, 14.6; CL 14.6。実測値: C, 58.5; H, 3.6; N, 14.6; Cl, 14.6。
【化８７】
0004323802.tif 000072
【０３６４】
塩化物10をアミノ化するための一般的な手順。アミノ化を、8a-rと同様の方法で実施した。NR２ = ジメチルアミノアセチル (11a)。融点 = 195〜198℃;１H NMR (DMSO-d６) δ300 MHz 7.87 (d, J = 7.44Hz, 1H)、7.76 (d, J = 7.82Hz, 1H)、7.56 (t, J = 7.24,7.25Hz, 1H)、7.47 (m, 2H)、7.06 (d, J = 8.96Hz, 1H)、4.15 (s, 2H)、3.00 (s, 6H)。分析C１６H１６N４O２ (1.7 H２O) (1.2HC1) での算出値: C, 50.8; H, 5.5; N, 14.8; Cl, 11.3。実測値: C, 50.8; H, 5.5; N, 14.7; Cl, 11.2。
【化８８】
0004323802.tif 000073
【０３６５】
NR２ = ピペリジニルアセチル (11b)。融点 = 175〜180℃;１H NMR (DMSO-d６) δ400 MHz 8.03 (bd, J = 8.33Hz, 1H)、7.90 (d, J = 8.09Hz, 1H)、7.66 (t, J = 7.33, 7.32Hz, 1H)、7.59 (d, J = 7.83Hz, 1H)、7.54 (t, J = 7.58, 7.33Hz, 1H)、7.22 (d, J = 8.59Hz, 1H)、4.12 (s, 2H)、3.63 (s, 2H)、3.13 (s, 2H)、1.86 (m, 6H)。分析C１９H２０N４O２ (2 H２O) (HCl) での算出値: C, 54.4; H, 6.3; N, 13.4; Cl, 8.4。実測値: C, 54.2; H, 6.0; N, 13.1; Cl, 8.6。
【化８９】
0004323802.tif 000074
【０３６６】
NR２ = ピロリジルピペリジニルアセチル (11c)。300 MHz 7.61 (m, 2H)、7.47 (t, J = 9Hz, 1H)、7.38 (m, 2H)、6.90 (d, J = 9Hz, 1H)、3.68 (m, 2H)、3.50 (s, 2H)、3.33 (m, 4H)、2.68 (m, 2H)、2.39 (m, 3H)、1.87〜2.12 (m, 6H)。分析C２３H２７N５O２ (2 H２O) (HCl) での算出値: C, 57.8; H, 6.8 N, 14.7。実測値: C, 57.8; H,6.7 N, 14.6。
【０３６７】
NR２ = 2,3 テトラヒドロピリジン (11d)。MS (ES-) = 333。
【０３６８】
NR２ = イソインドール (11e)。MS (ES-) = 369。
【０３６９】
NR２ = ジフェニルアミン (11f)。MS (ES-) = 407。
【０３７０】
NR２ = N-メチルアニソール (11g)。MS (ES-) = 387。
【０３７１】
NR２ = N-メチルベンジルアミン (11h)。MS (ES-) = 371。
【０３７２】
NR２ = N-ベンジル-N-フェネチルアミン (11i)。MS (ES-) = 461。
【０３７３】
NR２ = N-ヒドロキシエチルピペラジン (11j)。MS (ES-) = 381。
【０３７４】
NR２ = N,N-ジプロピルアミン (11k)。MS (ES-) = 351。
【０３７５】
NR２ = 4-オキソピペリジン (11l)。MS (ES-) = 349。
【０３７６】
NR２ = N,N-ジブチルアミン (11m)。MS (ES-) = 379。
【０３７７】
NR２ = モルホリン (11n)。MS (ES-) = 337。
【０３７８】
NR２ = イミダゾール (11o)。MS (ES-) = 318。
【０３７９】
スキーム8-5。アニリン4fのアミド誘導体。
【化９０】
0004323802.tif 000075
塩化物12。塩化物12を、塩化物10と同様に合成した。１H NMR (d６-DMSO, 300MHz): 11.81 (bs, 1H)、10.94 (s, 1H)、8.66 (s, 1H)、8.31 (s, 1H)、8.20 (d, 1H)、7.94 (t, 1H)、7.77 (m, 2H)、4.44 (s, 2H)。
【０３８０】
塩化物12をアミノ化するための一般的な手順。アミノ化を、上記で述べた塩化物10のアミノ化と同様の方法で実施した。
【化９１】
0004323802.tif 000076
【０３８１】
NR２ = ジメチルアミン塩酸塩 (13a)。１H NMR (D２O, 300MHz): 7.82 (d, J = 7.44Hz, 1H)、7.76 (d, J = 7.63Hz, 1H)、7.70 (d, J = 2.10Hz)、7.63 (t, J = 7.05, 7.63Hz, 1H)、7.50 (t, J = 7.06, 7.82Hz, 1H)、7.40 (d, J = 2.29Hz, 1H)、4.16 (s, 2H)、3.03 (s, 6H)。
【化９２】
0004323802.tif 000077
【０３８２】
NR２ = ピペリジン塩酸塩 (13b)。１H NMR (D２O, 300MHz): 400 MHz 8.03 (bd, J = 8.33Hz, 1H)、7.90 (d, J = 8.09Hz, 1H)、7.66 (t, J = 7.33, 7.32Hz, 1H)、7.59 (d, J = 7.83Hz, 1H)、7.54 (t, J = 7.58, 7.33Hz, 1H)、7.22 (d, J= 8.59Hz, 1H)、4.12 (s, 2H)、3.63 (s, 2H)、3.13 (s, 2H)、1.86 (m, 6H)。
【化９３】
0004323802.tif 000078
【０３８３】
NR２ = ピロリルピペリジン (13c)。１H NMR (D２O, 300MHz) δ7.48 (d, J = 9Hz, 1H)、7.31 (d, J = 9Hz, 1H)、7.29 (m, 2H)、7.17 (t, J = 9Hz, 1H)、6.99 (s, 1H)、3.58 (s, 2H)、3.43〜3.31 (m, 5H)、3.22 (m, 2H)、2.91 (m, 2H)、2.74 (m, 2H)、2.48 (s, 6H)、2.14 (m, 2H)、1.89〜1.65 (m, 6H)。分析C２３H２７N５O２ (2 H２O) (2 MsOH) での算出値: C, 50.2; H, 5.9 N, 11.7。実測値: C, 50.2; H, 6.0 N, 11.6。
【０３８４】
NR２ = N-イソプロピルピペリジン (13d)。１H NMR (D２O, 300MHz) δ300 MHz 7.78 (d, J = 9Hz, 1H)、7.60 (m, 3H)、7.50 (t, J = 9Hz, 1H)、7.23 (s, 1H)、3.74 (m, 3H)、3.47 (s, 2H)、3.40 (m, 4H)、2.90 (m, 2H)、1.55 (d, J = 6Hz, 6H)。分析C２１H２５N５O２ (2.25 H２O) (1 HCl) での算出値: C, 55.4; H, 6.5; N, 15.4。実測値: C, 55.4; H, 6.6; N, 15.4。
【０３８５】
NR２ = アミノエチルピロリジン (13e)。MS (ES+) = 366.35。
【０３８６】
NR２ = 2-アミノプロピル-N-メチルピロリジン (13f)。MS (ES+) = 394.41。
【０３８７】
NR２ = o-アミノエチルピリジン (13g)。MS (ES+) = 374.30。
【０３８８】
NR２ = m-アミノエチルピリジン (13h)。MS (ES+) = 374.25。
【０３８９】
NR２ = N-ベンジルピペラジン (13i)。MS (ES+) = 428.42。
【０３９０】
NR２ = アミノエチルモルホリン (13j)。MS (ES+) = 382.32。
【０３９１】
NR２ = N,N-ジエチルエチレンジアミン (13k)。MS (ES+) = 368.31。
【０３９２】
NR２ = N,N-ジメチルエチレンジアミン (13l)。MS = (ES+) = 340.21。
【０３９３】
NR２ = N,N-ジエチルプロピレンジアミン, (13m)。MS (ES+) = 382.41。
【０３９４】
NR２ = N,N,N-トリメチルプロピレンジアミン (13n)。MS (ES+) = 368.32。
【０３９５】
NR２ = ホモピペラジン (13o)。MS (ES+) = 352.23。
【０３９６】
NR2= N-メチルピペラジン (13p)。MS (ES+) = 352.32。
【０３９７】
NR２ = ピペロニルピペラジン (13q)。MS (ES+) = 472.44。
【０３９８】
NR２ = アミノエチルピロリジン-2-オン (13r)。MS (ES+) = 394.40。
【０３９９】
NR２ = アミノエチルピペリジン (13s)。MS (ES+) = 380.32。
【０４００】
スキーム9-5。アミン4a-xの別の合成。
【化９４】
0004323802.tif 000079
アミン4a-xの一般的な別の合成 (実施例4i)。下記で提案する合成は、増産により適している。ボロン酸エステル14を、参考文献 (Kristense, J. et al. Org. Lett. 2001、3 (10)、1435-1437) により大量 (20g) で調製することができる。この合成は、1つのステップ、LDA環化を省略することができる。それというのも、還元/環化を、同じステップで処理することができるためである。
【０４０１】
塩化ニトロ15の合成。ボロン酸エステル14 (16.0g、61.0mmol)、塩化ジニトロ2g (11.7g、61mmol) および炭酸カリウム (21g、152mmol) を、トルエン/EtOH (20: 1、300mL) に溶かした。この混合物を排出させ、窒素を複数回、再び満たした。次いで、テトラキス-パラジウムトリフェニルホスフィン (〜2g) を加え、続いて、混合物を80℃に一晩加熱した。次いで、反応を真空濃縮し、EtOAc (200mL) とH２O (200mL) との間に分配した。有機層を硫酸ナトリウムを用いて乾燥させ、真空濃縮させた。勾配系 (5%EtOAc/ヘキサン→20%EtOAc/ヘキサン) を用いて、粗製残留物をクロマトグラフィー処理した。最終生成物 (Rｆ = 0.3、10%EtOAc/ヘキサン) を、低融点固体/フォーム (7.12g、38%) として単離した。さらなる異性体混合物1.3g (7.0%) (他の異性体Rｆ = 0.25、10%EtOAc/ヘキサン) を、カラムから単離した。１HNMR (CDC1３, 300 MHz) δ8.40 (d, 1H)、8.14 (d, 1H)、7.65 (t, 1H)、7.55 (m, 2H)、7.32 (d, 1H)、4.16 (q, 2H)、1.19 (t, 3H)。
【０４０２】
ジアミン16の合成。塩化物14 (7.12g、23.2mmol) を、DCM (250mL) に溶かした。この溶液に、ジイソプロピルエチルアミン (3.3g、25.5mmol) を、続いて、N-メチルピペラジン (4.6g、46.4mmol) を加えた。塩化物の完全な変換が、TLCにより証明されるまで、混合物を、一晩攪拌した (ジアミンのRｆ = 0.1、EtOAc)。水 (2×100mL) で抽出することにより、反応を処理した。有機層を、硫酸ナトリウムを用いて乾燥させ、真空濃縮すると、粗製のジアミン16 (6.56g、77%) が得られた。１H NMR (CDCl３, 300MHz) δ8.32 (d, 1H)、8.07 (d, 1H)、7.58 (t, 1H)、7.48 (t, 1H)、7.26 (d, 1H)、6.60 (d, 1H)、4.13 (q, 2H)、3.73 (t, 4H)、2.46 (t, 4H)、2.33 (s, 3H)、1.13 (t, 3H)。
【０４０３】
(4i) を生じさせるための還元/環化。粗製ジアミン16をMeOH (300mL) に溶かした。湿ったラネーニッケル (500mg、触媒量) を加え、続いてヒドラジン水和物 (4.1g、82mmol) を滴加した。消耗されるまで混合物を還流に加熱し、TLCにより監視した (約3時間)。生成物Rｆ値は、10%MeOH/EtOAc中、0.1であった。次いで、ラネーニッケルを濾別し、濾液を濃縮し、1NのHCl/EtOAc (150mL/100mL) に懸濁させ、生じた固体を濾別し、CH３CN 50mLで粉砕し、濾過した。生じた淡黄色の固体を高真空下に2時間乾燥させると、GPI 16539 4.1g (収率84%) が得られた。１H NMR (DMSO-d６, 300MHz) δ11.50 (bs, 1H)、8.67 (d, 1H)、8.28 (d, 1H)、7.88 (t, 1H)、7.69 (t, 1H)、7.58 (d, 1H)、7.15 (d, 1H)、3.58 (t, 4H)、2.46 (t, 4H)、2.24 (s, 3H)。
【０４０４】
メタンスルホン酸塩の形成 (4i')。ジアミン4i (2.85g、9.7mmol) の無水THF500mL溶液に、メタンスルホン酸 (0.65mL、10mmol) を加えた。反応混合物を、N２下に、室温で一晩攪拌した。オフホワイト色の固体を、濾過により集め、エーテルで洗浄した。固体を真空乾燥させると、3.2g (収率85%) が得られた。
【０４０５】
実施例6
次の一般式II-6の化合物は、例えば、次の方法により合成することができる。
【化９５】
0004323802.tif 000080
【０４０６】
スキーム1-6
【化９６】
0004323802.tif 000081
3-ブロモ-4-アミノピリジン (1)。4-アミノピリジン (3.0g、31.9mmol) を、DCM100mLおよびCH３CN60mLに溶かした。臭素 (5.1g、31.9mmol) を、この溶液に滴加し、溶液を2時間攪拌した。炭酸ナトリウム (6.2g、73.8mmol) を、混合物に加え、反応を一晩攪拌した。反応混合物のTLC (EtOAc) 分析により、2つの主なスポットが示され、高位置スポットは、4-アミノ-3,5-ジブロモピリジンであり、低位置スポットは、所望の生成物 (Rｆ = 0.4、EtOAc) であった。反応混合物を濾過し、濾液を濃縮し、最少量のシリカゲルでクロマトグラフィー処理すると、所望の生成物1.4g (26%) が得られた。１H NMR (CDC1３): δ8.39 (s, 1H)、8.10 (d, 1H)、6.60 (d, 1H)、4.74 (bs, 2H)。
【０４０７】
N,N-ジイソプロピルベンズアミド-ボロン酸 (2)。ジイソプロピルベンズアミド (10.0g、48.7mmol) を、無水THF200mLに溶かした。この反応混合物を、不活性雰囲気下に置き、-78℃に冷却した。n-ブチルリチウム (20.5mL、2.5M) を、15分かけて滴加した。この反応混合物を、この温度で4時間攪拌すると、リチウム塩の有意な沈殿が生じた。トリメトキシボラン (5.8mL、51.2mmol) を10分間かけて滴加し、反応を室温まで加温し、一晩攪拌した。反応混合物を氷300gに注ぎ、放置して室温まで加温した。この混合物を分離漏斗で分配し、水性層をDCM100mLで一回抽出した。有機層を濃HClで酸性にし、DCM (3×100mL) で抽出した。合わせた有機層を乾燥させ、真空濃縮した。残留したフォームを高真空下に、数時間乾燥させた。生じた物質5.8g (48%) は、分光学的に同定されるように、所望の生成物2であった (シス: トランスアミド): １H NMR (CDCl３): δ8.04 (d, 0.7H)、7.94 (d, 0.3H)、7.35 (m, 3H)、4.11 (m, 0.7H)、3.74 (m, 0.3H)、3.54 (m, 0.3H)、3.37 (m, 0.7H)、1.57 (d, 1.8H)、1.26 (m, 6H)、1.08 (d, 4.2H)。
【０４０８】
2-(4-アミノ-3-ピリジニル)-N,N-ビス (1-メチルエチル) ベンズアミド (3)。ブロモピリジン1 (1.4g、8.1mmol)、ボロン酸2 (2.0g、8.9mmol) および炭酸カリウム (2.2g、15.9mmol) を、トルエン80mL、EtOH 8mLおよびH２O 8mLに溶かした。この混合物を排気して、再び窒素を数回満たした。次いで、テトラキストリフェニルホスフィンパラジウム (O) (350mg、0.30mmol) を混合物に加え、混合物を80℃に一晩加熱した。次いで、水 (100mL) を反応に加え、有機層を分配した。水性層をEtOAc (2×100mL) で抽出し、合わせた有機物を、Na２CO３を用いて乾燥させ、濃縮した。粗製反応生成物をジエチルエーテル (25mL) で粉砕し、濾過した。生じた固体 (2.0g、83%) を集め、ビフェニルアミン3と同定した。１H NMR (CDCl３): δ8.17 (d, 1H)、8.03 (s, 1H)、7.45 (m, 2H)、7.25 (m, 2H)、6.55 (d, 1H)、4.50 (bs, 2H)、3.61 (m, 1H)、3.31 (m, 1H)、1.49 (d, 3H)、1.16 (d, 3H)、1.03 (d, 3H)、0.83 (d, 3H)。
【０４０９】
ベンゾ[c]1,6-ナフチリジン-6-(5H)-オン (4)。リチウムジイソプロピルアミドの溶液 (LDA、2.0M、Aldrich、10mL) をTHF90mLに溶かし、-78℃に冷却した。アミン3 (2.0g、6.73mmol) のTHF (25mL) 溶液を、LDAに15分かけて滴加した。反応を室温に加温し、一晩攪拌した。反応を真空濃縮させ、水100mLに懸濁させた。固体を濾別し、酢酸エチル (100mL) で粉砕した。生じた固体を乾燥させると、所望の化合物4が1.24g (94%) 得られた。大量のメタノールを用いて再結晶させることにより、分析サンプルを得ることができる。１H NMR (DMSO): δ9.57 (s, 1H)、8.65 (d, 1H)、8.50 (d, 1H)、8.33 (d, 1H)、7.90 (t, 1H)、7.71 (t, 1H)、7.28 (d, 1H)。分析: C１２H８N２0での算出値: C, 73.46; H, 4.11; N 14.28。実測値: C, 73.53; H, 4.26; N, 14.37。
【０４１０】
実施例7
次の一般式I-7aおよびI-7bの化合物は、例えば、次のように合成することができる。
【化９７】
0004323802.tif 000082
【０４１１】
スキーム1-7  イミダゾロベンズ-1,3,4-トリアゼピン-5-オンの合成
【化９８】
0004323802.tif 000083
2,3-ジアミノ安息香酸メチルエステル (2) の合成。2-アミノ-3-ニトロ安息香酸メチルエステル1 (1.0g、5.1mmol) および炭素に担持されているパラジウム (10%、0.5g) を、EtOH (20mL) 中で混合し、15psiで1時間水素化した。触媒を濾別し、濾液を真空濃縮した。生じた固体を乾燥させると、純粋な2が0.73g (86%) 得られた。１H NMR (CDCl３) δ7.47 (d, 1H, J = 8.0Hz)、6.85 (d, 1H, J = 6.5Hz)、6.60 (t, 1H, J = 8.0Hz)、3.87 (s, 3H)。
【０４１２】
ベンズイミダゾール-7-カルボン酸メチルエステル (R１ = H) (3) の合成。エステル2 (1.7g、10.2mmol)、オルトギ酸トリエチル (2.5mL) およびp-トルエンスルホン酸 (10mg) を「Performance Fluid」 (3M Co.、40mL) 中で混合し、逆相ディーンスタークトラップを用いて、90℃で3時間還流させた。反応混合物を室温まで冷却し、生じた固体を濾過し、ヘキサンで洗浄し、乾燥させると、純粋な3 1.65g (92%) が得られた。１H NMR (DMSO-d６) δ12.59 (br, s, 1H)、8.32 (s, 1H)、7.97 (d, 1H, J = 8.0Hz)、7.86 (d, 1H, J = .6.5Hz)、7.32 (t1, 1H, J = 8.0Hz)、3.95 (s, 3H)。
【０４１３】
ベンズイミダゾール-7-カルボン酸ヒドラジド (R１ = H) (4) の合成。ベンズイミダゾールエステル3 (1.65g、9.36mmol)、ヒドラジン一水和物 (10mL) および水 (3mL) を、EtOH (60mL) 中で24時間還流させた。反応混合物を室温まで冷却し、生じた固体を濾過し、EtOHで洗浄し、乾燥させると、純粋な4が1.13g (68%) 得られた: 1H NMR (DMSO-d６) δ12.31 (br.s, 1H)、10.59 (s, 1H)、8.44 (s, 1H)、7.86 (d, 1H, J = 6.5Hz)、7.76 (d, 1H, J = 8.0Hz)、7.34 (t, 1H, J = 8.0Hz)、4.68 (s, 2H)。
【０４１４】
イミダゾロベンズ-1,3,4-トリアゼピン-5-オン (R１ = R２ = H) (5) の合成。ヒドラジド4 (0.25g、1.42mmol) および酢酸ジエトキシメチル (10mL) を混合し、3時間還流させた。反応混合物を室温まで冷却させ、生じた白色の固体を濾過し、ヘキサン (10mL) で洗浄し、乾燥させると、純粋な5が0.109g (42%) 得られた: 融点 = 266〜268℃; １H NMR (DMSO-d６) δ12.80 (br.s, 1H)、9.45 (s, 1H)、8.35 (s, 1H)、7.93 (d, 1H, J = 8.0Hz)、7.89 (d, 1H, J = 8.0Hz)、7.42 (t, 1H, J = 8.0Hz)。
【０４１５】
実施例8
次の一般式I-8の化合物は、例えば次の方法で合成することができる。
【化９９】
0004323802.tif 000084
【０４１６】
スキーム1-8
【化１００】
0004323802.tif 000085
インドール-7-カルボン酸メチル (0.56g、3.2mmol) 1の無水DMF (4mL) 溶液を、水素化ナトリウム (鉱油中60%分散液0.18g、4.5mmol) の攪拌されている氷冷無水DMF (3mL) 懸濁液に、N２雰囲気下に滴加した。添加の後に、混合物を0℃で、30分間攪拌し、次いで、ブロモアセトニトリル (0.31mL、4.5mmol) を滴加した。生じた混合物を、室温で一晩攪拌し、次いで、氷水に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。有機相を、水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空濃縮すると、残留物が得られ、これを、フラッシュカラムクロマトグラフィー (シリカゲル: ヘキサン/酢酸エチル、8: 2) により精製すると、化合物2 (0.18g、26%) が得られ、一方で、多少の出発物質1 (0.25g) が回収された。2の１H NMR (400MHz, CDCl３): 7.90 (dd, 1H)、7.83 (dd, 1H)、7.21 (t, 1H)、7.11 (d, 1H)、6.67 (d, 1H)、5.51 (s, 2H)、4.00 (s, 3H)。
【０４１７】
化合物2 (0.10g、0.47mmol) のMeOH (20mL) 溶液を、酸化白金 (PtO２、10mg) 上で、H２ 40psiで、室温で15時間水素化した。触媒をセライトで濾過し、濾液を真空濃縮した。残留物を、フラッシュクロマトグラフィー (シリカゲル; 酢酸エチル/アセトン、9: 1) により精製すると、表題の化合物3 (43mg、49%) が得られた。MS: (M+1): 187、１H NMR (CDCl３, 400MHz) 8.13 (dd, 1H)、7.84 (dd, 1H)、7.25 (t, 1H)、7.10 (d, 1H)、6.85 (s, br, 1H)、6.62 (d, 1H)、4.45 (m, 2H)、3.82 (m, 2H)。分析: (C11H10N2O+0.11EtOAc) での算出値: C, 70.14; H, 5.60; N, 14.30。実測値: C, 70.53; H, 5.65; N, 14.74。融点: 164〜167℃。物理的形態: オフホワイト色の固体。
【０４１８】
実施例9
次の一般式II-9の化合物は例えば、次の一般的なスキームにより調製することができる。
【化１０１】
0004323802.tif 000086
【０４１９】
スキーム1-9。4-アザフェナントリドン14の一般的な合成。
【化１０２】
0004323802.tif 000087
アニリン13の合成。このカップリング手順は、アミン3a〜cの合成と同様であった。収率 = 13%; １H NMR (DMSO-d６, 300MHz) δ7.95 (m, 1H)、7.44 (m, 2H)、7.29 (m, 2H)、6.58 (m, 2H)、5.49 (bs, 2H)、3.56 (m, 1H)、3.29 (m, 1H)、1.39 (d, 3H)、1.05 (d, 3H)、0.93 (d, 3H)、0.64 (d, 3H)。
【０４２０】
4-アザフェナントリドン14を生じさせるためのアニリン13の環化。環化を、化合物4aと同様の方法で実施した。収率 = 76%; MS (ES+) = 197.21; １H NMR (DMSO-d６, 300MHz) 12.05 (bs, 1H)、8.85 (d, 1H)、8.56 (d, 1H)、8.51 (d, 1H)、8.37 (d, 1H)、7.91 (m, 1H)、7.71 (t, 1H)、7.33 (m, 1H)。分析: C１２H８N２Oでの算出値: C, 73.46: H, 4.07: N, 14.12。実測値: C, 73.06: H, 4.07: N, 14.12。
【０４２１】
実施例10
次の一般式II-10の化合物は、次の一般的なスキームにより調製することができる。
【化１０３】
0004323802.tif 000088
【０４２２】
スキーム1-10。3-アザフェナントリドンの一般的な合成。
【化１０４】
0004323802.tif 000089
ヨードピリジン16。3-(ピバロイルアミノ)ピリジン15 (1.9g、11mmol) およびテトラメチルエチレン-ジアミン (4.0mL、26mmol) を、無水THF (60mL) に溶かし、-78℃に冷却した。温度を-78℃から-65℃に維持しつつ、nBuLi (ヘキサン中の2.5M溶液、10.6mL、26.5mmol) を滴加した。反応を放置して、-10℃まで2時間加温し、次いで、-78℃に再冷却した。無水THF (20mL) に溶けたヨウ素 (6.73g、26.5mmol) を、徐々に加えた。-78℃で2時間攪拌した後に、反応を氷でクエンチした。飽和チオ硫酸カリウムを加えることにより、過剰のヨウ素を駆除した。生成物を、CH２Cl２で抽出し、有機層をブラインで洗浄した。混合物を真空濃縮すると、黒色のオイルになり、これを、クロマトグラフィー処理 (EtOAc/ヘキサン 1: 1; EtOAc/ヘキサン 2: 1) すると、2,2-ジメチル-N-(4-ヨード-3-ピリジニル)プロパンアミド700mg (23%) が黄色の固体として得られた。１H NMR (DMSO-d６300MHz) δ9.24 (s, 1H)、8.35 (s, 1H)、8.04 (d, 1H)、7.95 (d, 1H)、1.26 (s, 9H)。MS (ES+) = 305。
【０４２３】
ビスアミド17。2,2-ジメチル-N-(4-ヨード-3-ピリジニル)プロパンアミド (700mg、2.3mmol) および2-ジイソプロピルベンズアミドボロン酸 (1.3g、5.2mmol) を、DMEに溶かした。テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム (133mg、0.11mmol) および2Mの炭酸ナトリウム溶液 (2.2mL) を加えた。反応を、83℃で18時間還流させた。混合物を真空濃縮し、BtOAcで抽出し、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムを用いて乾燥させた。粗製のオイルをクロマトグラフィー処理 (CH２Cl２、1%〜5%MeOH/CH２Cl２) すると、2-[3-(2,2-ジメチル-プロピオニルアミノ)-ピリジン-4-イル]-N,N-ジイソプロピルベンズアミドが白色の固体として得られた。１H NMR (DMSO-d６, 300MHz) δ9.08 (s, 1H)、8.64 (s, 1H)、8.43 (d, 1H)、7.58〜7.48 (m, 2H)、7.40 (dd, 1H)、7.33 (d, 1H)、7.24 (dd, 1H)、3.53〜3.36 (m, 2H)、1.38 (d, 3H)、1.01 (d, 3H)、0.97 (s, 9H)、0.91 (d, 3H)、0.77 (d, 3H); MS (ES+) = 382。
【０４２４】
3-アザフェナントリドン18の合成。前のステップからの全ての2-[3-(2,2-ジメチル-プロピオニルアミノ)-ピリジン-4-イル]-N,N-ジイソプロピルベンズアミドを維持して、メタノール (20mL) に溶かした。濃HCl (1mL) を加え、引き続き、24時間還流させた。溶液から沈殿した白色の固体を濾過し、H２Oに溶かした。15分間攪拌した後に、遊離塩基が溶液から生じた (crashed out)。固体を濾過し、乾燥させると、所望の最終生成物150mg (2ステップで33%) が白色の固体として得られた。融点 = 303〜309℃; １H NMR (DMSO-d６, 300MHz) δ8.70 (s, 1H)、8.60 (d, 1H)、8.41 (t, 2H)、8.31 (d, 1H)、7.95 (t, 1H)、7.80 (t, 1H); C１２H８N２0・(0.3H２0)・(0.2ClH)。分析: 算出値: C, 68.99; H, 4.25; N, 13.41。実測値: C, 68.83; H, 3.99; N, 13.26。
【０４２５】
実施例11
一般式I-3cの化合物は、例えば次の一般的なスキームにより調製することができる。
【化１０５】
0004323802.tif 000090
【０４２６】
3-クロロメチル-2-メチルベンゾ[b]チオフェン1。クロロメチルメチルエーテル (30.0g) のジクロロエタン (250mL) 溶液に、2-メチルベンゾチオフェン (2.0g、0.014mol) およびZnCl２ (200mg) を加えた。生じた混合物を、1時間攪拌した。反応混合物を水に注ぎ、クロロホルムで抽出した。有機層を乾燥させ (MgSO４)、濃縮すると化合物1 (2.4g、収率90%) が得られ、これをそのまま次のステップで使用した。
【０４２７】
3-アセトニトリル-2-メチルベンゾ[b]チオフェン2。1 (1.4g、7.7mmol) のベンゼン (10mL) 溶液に、水 (10mL) 中のNaCN (2.5g) および臭化テトラブチルアンモニウム (7.7mmol) を加えた。溶液を、60℃で2時間激しく攪拌した。反応混合物を水に注ぎ、ベンゼンで抽出した。有機層を乾燥させ (MgSO４)、濾過し、濃縮した。カラムクロマトグラフィー (ヘキサン中2%EtOAcから10%) により精製すると、化合物2が白色の固体として得られた (1.07g、収率74%): １H NMR (CDCl３) δ7.77 (d, J = 8.0Hz, 1H)、7.67 (d, J = 8.0Hz, 1H)、7.41 (dt, J = 1.0, 7.0, 8.0Hz, 1H)、7.33 (dt, J = 1.0, 7.0, 8.0Hz, 1H)、3.81 (s, 1H)、2.58 (s, 1H)。
【０４２８】
塩化水素3-エチルアミノ-2-メチルベンゾ[b]チオフェン3。LAH (Et２O中1N、5.13mL、5.13mmol) の攪拌Et２O (20mL) 溶液に、AlCl３ (684mg、5.13mmol) を徐々にN２下に室温で加えた。5分後に2 (960mg、5.13mmol) のEt２O (10mL) 溶液を10分で滴加した。生じた混合物を一晩還流させた。反応の後に、反応混合物を室温に冷却し、ロシェル塩の20%水溶液で中和し、EtOAcで抽出した。有機層を乾燥させ (Na２SO４)、濾過し、濃縮した。生じた残留物を、MeOH (15mL) に溶かし、1,4-ジオキサン (2.5mL) 中4NのHCl溶液を滴加した。溶剤を除去し、白色の固体として生じた生成物3 (1.16g、当量) をそのまま、次のステップで使用した: １H NMR (CD３0D) δ7.64 (d, J = 8.1Hz, 1H)、7.59 (d, J = 7.8Hz, 1H)、7.25 (dt, J = 1.0, 7.1, 8.1 Hz, 1H)、7.16 (dt, J = 1.0, 7.1, 8.1Hz, 1H)、2.94-3.09 (m, 4H)。
【０４２９】
[2-(2-メチルベンゾ[b]チエン-3-イル) エチル]-カルバミン酸メチル4。3 (1.16g、5.13mmol) のCH２Cl２ (30mL) の懸濁液に、クロロ蟻酸メチル (0.43mL、5.5mmol) およびEt３N (2.1mL、15.3mmol) をN２下に、室温で加えた。生じた混合物を連続的に一晩攪拌した。反応の後に、水を加え、CH２Cl２で抽出した。有機層を乾燥させ (MgSO４)、濾過し、濃縮した。カラムクロマトグラフィー (ヘキサン中10%EtOAcから20%) により精製すると、化合物4が白色の固体として得られた (1.0g、収率79%): １H NMR (CDCl３) δ7.74 (d, J = 7.8Hz, 1H)、7.65 (d, J = 7.8Hz, 1H)、7.84 (dt, J = 1.3, 8.3, 7.1, 6.8, 8.1Hz, 1H)、7.26 (dt, J = 1.3, 8.1, 6.8, 7.1, 8.3, 1H)、3.67 (s, 3H)、3.39 (q, J = 6.8, 13Hz, 2H)、3.01 (t, J = 7.1, 6.8Hz, 2H)、2.50 (s, 3H)。
【０４３０】
4,5-ジヒドロ-2-メチルチエノ[4,3,2-ef][2]ベンズアゼピン-6(3H)-オン5。4 (170mg、0.68mmol) およびPPA (1mL) の混合物を、180℃に2時間加熱した。次いで、反応混合物を室温まで冷却し、水を添加した。生じた混合物を、3NのNaOH水溶液を用いて、pH〜5に中和し、EtOAcで抽出した。有機層を、乾燥させ (MgSO４)、濾過し、濃縮した。カラムクロマトグラフィー (CH２Cl２中、2%MeOH) により精製すると、化合物5が黄色の固体として得られた (20mg、収率14%): 融点195〜197℃; １H NMR (CDCl３) δ8.21 (dd, J = 1.0, 7.6Hz, 1H)、7.91 (dd, J = 1.0, 7.8Hz, 1H)、7.37 (t, J = 7.6, 7.8Hz, 1H)、3.60 (q, J = 5.6, 9.6Hz, 2H)、3.01-3.08 (m, 2H)、2.48 (s, 3H); MS: 218 (ES＋); 分析: C１２H１１NOSでの算出値: C, H, N。
【０４３１】
実施例12
一般式I-11の化合物は、次のように調製することができる:
2,7-ジヒドロ-1,2,7,8-テトラアザ-ベンゾ[cd]アズレン-6-オンの調製
【化１０６】
0004323802.tif 000091
前記のスキームは、市販のインドール-4-カルボン酸メチルエステルから出発する、所望のPARP阻害剤2,7-ジヒドロ-1,2,7,8-テトラアザ-ベンゾ[cd]アズレン-6-オンの調製を示している。
【０４３２】
3-ホルミル-1H-インダゾール-4-カルボン酸メチルエステル: インドール-4-カルボン酸メチル (4.0g、22.85mmol) を、酢酸 (60mL) に懸濁させた。混合物を10℃に冷却した。これを攪拌し、亜硝酸ナトリウム (3.2g、45.71mmol) を加えた。反応を、室温まで1時間徐々に上昇させた。この期間が過ぎた後に、反応溶剤を乾燥するまで蒸発させた。水 (300mL) で洗浄し、EtOAc (3×150mL) で抽出した。有機層をブラインで洗浄し、MgSO４中で乾燥させ、濃縮した。粗製混合物をシリカゲルカラムにより、ヘキサン中の40%EtOAcで溶離して精製すると、所望のインドール-3-カルボキサルデヒド-4-メチルエステル (Rｆ = 0.4、ヘキサン中40%EtOAc)、(0.40g、白色の固体) が得られた。１H NMR (d-6 DMSO) d 14.50 (bs, 1H)、10.33 (s, 1H)、7.94 (d, 1H, J = 8.39Hz)、7.68 (m, 1M)、7.58 (t, 1H, J = 7.25 Hz)、3.87 (s, 3H)。
【０４３３】
2,7-ジヒドロ-1,2,7,8-テトラアザ-ベンゾ[cd]アズレン-6-オン: 3-ホルミル-1H-インダゾール-4-カルボン酸メチルエステル (0.10g、0.53mmol) をEtOH (6mL) に懸濁させた。混合物に、ヒドラジン5滴を加えた。これを、5時間攪拌および還流させた。生成物が生じ、これは、温溶液中で沈殿した。反応を、室温に冷却した。生成物を真空濾過により集め、それ以上精製は行わなかった (0.025g、白色の固体)。１H NMR (d-6 DMSO) d13.4 (bs, 1H)、11.01 (s, 1H)、7.87 (s, 1H)、7.70 (d, 1H, J = 8.20Hz)、7.67 (d, 1H, J = 7.06Hz)、7.54 (t, 1H, J = 8.20Hz)。分析; C９H６N４0１-lH２0。
【０４３４】
本発明の化合物を調製する他の方法、変化または順序は、当技術分野の専門家には、容易に分かるであろう。
【０４３５】
本発明の化合物は、遊離塩基の形で、可能な場合には塩基塩の形で、付加塩の形で、さらに、遊離酸の形で使用することができる。これらの形態の全てが、本発明の範囲内である。実際には、塩形の使用は、塩基形の使用と等しい。本発明の範囲内の薬剤として許容される塩は、塩酸、硫酸などの鉱酸; エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、p-トルエンスルホン酸などの有機酸に由来するものであり、塩酸塩、スルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、p-トルエンスルホン酸塩などが生じ、あるいは、個々には、適切な有機および無機塩基などの塩基から由来するものである。本発明の化合物との薬剤として許容される塩基付加塩の例には、非毒性で、このような塩を生じさせるために十分に強力なな有機塩基が含まれる。これらの有機塩基およびその使用は、当技術分野の専門家には、容易に理解されるであろう。単なる詳述の目的であるが、このような有機塩基には、メチルアミン、ジエチルアミンおよびトリエチルアミンなどのモノ-、ジ-およびトリアルキルアミン; モノ-、ジ-およびトリエタノールアミンなどのモノ-、ジ-またはトリヒドロキシアルキルアミン; アルギニンおよびリシンなどのアミノ酸; グアニジン; N-メチルグルコサミン; N-メチルグルカミン; L-グルタミン; N-メチルピペラジン; モルホリン; エチレンジアナン; N-ベンジルフェネチルアミン; トリス (ヒドロキシメチル) アンチノエタンなどが含まれる。
【０４３６】
本発明の化合物の遊離塩基を、適切な酸または塩基を含有する水性または水性アルコールまたは他の適切な溶剤に溶かし、溶剤を蒸発させることにより塩を単離することにより、または本発明の化合物の遊離塩基と酸とを反応させるか、さらに、酸基をその上に有する本発明の化合物を、有機溶剤中で塩基と反応させることにより (この際、そのまま分離するか、溶液を濃縮することにより、塩を得ることができる)、塩基性化合物の酸付加塩を調製することができる。
【０４３７】
本発明の化合物は、1個または複数の不斉炭素原子を含有する。したがって、本発明には、個々の立体異性体およびこれらの混合物、さらにラセミ化合物が含まれる。個々の異性体は、当技術分野で知られている方法により、調製または単離することができる。
【０４３８】
本発明の化合物は、薬理学的活性を示し、したがって、薬剤として使用することができる。特に、本化合物は、中枢神経および心臓血管系活性を示す。
【０４３９】
前記に記載の合成経路を使用する本発明の他のバリエーションおよび変更は、当技術分野の通常の専門家には明白であろう。
【０４４０】
本発明の化合物を使用する方法
本発明の化合物は、壊死またはアポトーシスによる細胞損傷または細胞死に由来する組織損傷を治療または予防することができ; 局部虚血後のもの、心筋梗塞および再灌流障害を含む、神経または心臓血管組織損傷を改善することができ; PARP活性により惹起されるか、増悪される様々な疾患および症状を治療することができ; 細胞の寿命または増殖能を延長または上昇させることができ; 老化細胞の遺伝子発現を変えることができ; かつ、細胞を放射線増感させることができる。通常、PARP活性の阻害は、細胞をエネルギー損失から免れさせ、神経細胞の場合には、ニューロンの不可逆的な脱分極を予防し、したがって、神経保護をもたらす。特定の理論には結びつけられないが、PARP活性は、フリーラジカルおよびNOの産生に加えて、未だ発見されていないが、他の興奮毒性メカニズムでも総合的な役割を果たしていると考えられる。
【０４４１】
前記の理由により、本発明はさらに、PARP活性を阻害するために、壊死またはアポトーシスによる細胞損傷または細胞死に由来する組織損傷を治療または予防するために、NMDA毒性に仲介されないニューロン活性に影響を及ぼすために、NMDA毒性に仲介されるニューロン活性に影響を及ぼすために、虚血、再灌流障害、神経疾患および神経変性疾患に由来する神経組織損傷を治療するために; 血管発作を治療または予防するために; 心臓血管疾患を治療または予防するために; 年齢依存性筋変性、AIDSおよび他の免疫老化疾患、炎症、痛風、関節炎、アテローム硬化症、悪液質、ガン、複製老化を伴う骨格筋の変性疾患、糖尿病、頭部外傷、免疫老化、炎症、痛風、炎症性腸障害 (大腸炎およびクローン病など)、筋ジストロフィ、変形性関節症、骨粗しょう症、慢性および/または急性疼痛 (神経痛など)、腎不全、網膜虚血、敗血症性ショック (内毒素性ショックなど)、および皮膚加齢などの他の症状および/または疾患を治療するために; 細胞の寿命および増殖能を延長するために; 老化細胞の遺伝子発現を変えるために; または低酸素腫瘍細胞を放射線増感するために、十分な量で、治療に有効な量の前記で同定された化合物を投与する方法に関する。本発明はさらに、前記で同定された化合物を治療に有効な量で動物に投与することを含む、動物での疾患および症状を治療することに関する。
【０４４２】
特に、本発明は、治療的に有効な量の前記で同定された化合物を、動物に投与することを含む、動物での神経疾患を治療、予防または阻害する方法に関する。特に、好ましい実施形態では、神経疾患は、物理的損傷または疾患状態により惹起される末梢神経疾患、外傷性脳損傷、脊髄の物理的損傷、脳損傷を伴う発作、焦点性虚血、全体虚血、再灌流障害、脱髄疾患ならびに神経変性疾患に関する神経疾患からなる群から選択される。他の好ましい実施形態では、再灌流障害は、血管発作である。さらに他の好ましい実施形態では、末梢神経疾患は、ギラン-バレー症候群により惹起される。さらに他の好ましい実施形態では、脱髄疾患および神経疾患は、神経変性に関する。他の好ましい実施形態では、再灌流障害は、血管発作である。さらに他の好ましい実施形態では、脱髄疾患は、多発性硬化症である。他の好ましい実施形態では、神経変性を伴う神経疾患は、アルツハイマー病、パーキンソン病および筋萎縮性側索硬化症からなる群から選択される。
【０４４３】
さらに他の好ましい実施形態は、有効量の本発明の化合物を動物に投与することによる、狭心症、心筋梗塞、心臓血管虚血およびPARP活性に関連した心臓血管組織損傷などの動物での心臓血管疾患を治療、予防または阻害する方法である。
【０４４４】
本発明はさらに、PARP活性を阻害するために、壊死またはアポトーシスによる細胞損傷または細胞死に由来する組織損傷を治療、予防または阻害するために、動物での神経疾患を治療、予防または阻害するために、式I、I-1、I-2、I-3a、I-3b、I-3c、I-3d、I-3e、I-4、II-5、II-6、I-7a、I-7b、I-8、II-9、II-10、I-11またはI-12の化合物を使用することを企図している。
【０４４５】
特に好ましい実施形態では、神経疾患は、物理的損傷または疾患状態により惹起される末梢神経疾患、外傷性脳損傷、脊髄の物理的損傷、脳損傷を伴う発作、焦点性虚血、全体虚血、再灌流障害、脱髄疾患ならびに神経変性疾患に関する神経疾患からなる群から選択される。
【０４４６】
他の好ましい実施形態では、再灌流障害は、血管発作である。さらに他の好ましい実施形態では、末梢神経疾患は、ギラン-バレー症候群により惹起される。さらに他の好ましい実施形態では、脱髄疾患は、多発性硬化症である。他の好ましい実施形態では、神経変性を伴う神経疾患は、アルツハイマー病、パーキンソン病および筋萎縮性側索硬化症からなる群から選択される。
【０４４７】
本発明はさらに、前記の動物での疾患および障害のいずれかを治療するための薬剤を調製する際に、式I、I-1、I-2、I-3a、I-3b、I-3c、I-3d、I-3e、I-4、II-5、II-6、II-9、II-10、I-7a、I-7b、I-11またはI-12またはI-8の化合物を使用することを企図している。
【０４４８】
特別な実施形態では、疾患または障害は、神経疾患である。
【０４４９】
特に好ましい実施形態では、神経疾患は、物理的損傷または疾患状態により惹起される末梢神経疾患、外傷性脳損傷、脊髄の物理的損傷、脳損傷を伴う発作、焦点性虚血、全体虚血、再灌流障害、脱髄疾患ならびに神経変性疾患に関する神経疾患からなる群から選択される。他の好ましい実施形態では、再灌流障害は、血管発作である。さらに他の好ましい実施形態では、末梢神経疾患は、ギラン-バレー症候群により惹起される。
【０４５０】
さらに他の好ましい実施形態では、脱髄疾患は、多発性硬化症である。他の好ましい実施形態では、神経変性を伴う神経疾患は、アルツハイマー病、パーキンソン病および筋萎縮性側索硬化症からなる群から選択される。
【０４５１】
「神経変性の予防」という用語には、神経変性疾患を有すると新たに診断されたか、神経変性疾患が進行するリスクを負っている患者において、神経変性を予防するか、既に神経変性疾患の症状を患っている患者において、さらなる神経変性を予防する能力が含まれる。
【０４５２】
ここで使用する場合、「治療」という用語は、動物、特にヒトでの疾患および/または症状の何らかの治療を包含し:
(i) 疾患および/または症状にかかりやすいが、未だ、それらを有するとは診断されていない患者で疾患および/または症状が起こることを予防すること;
(ii) 疾患および/または症状を阻害する、即ちその進行を阻止すること; または
(iii) 疾患および/または症状を軽減する、即ち、疾患および/または症状を後退させることを含む。
【０４５３】
ここで使用する場合、「虚血および再灌流障害に由来する神経組織損傷」という用語には、血管発作および全体および焦点性虚血で見られるような神経毒性が含まれる。ここで使用する場合、「神経変性疾患」という用語には、アルツハイマー病、パーキンソン病およびハンチントン病が含まれる。
【０４５４】
「虚血」という用語は、動脈血の流入が閉塞することによる局所的な組織貧血に関する。心停止などにより、脳全体への血流が一時停止する状況で、全体虚血は生じる。脳血管の血栓梗塞、頭部外傷、水腫および脳腫瘍などにより、脳の一部が、その正常な血液供給を受けられない状況で、焦点性虚血は生じる。
【０４５５】
「心臓血管疾患」という用語は、心筋梗塞、狭心症、血管または心筋虚血および、当技術分野の専門家には知られているような、心臓または血管系の機能不全または組織損傷、特に、これらに限らないが、PARP活性が関与する組織損傷を含む関連症状に関する。
【０４５６】
ここで使用する場合、「放射線増感剤」という用語は、電磁放射線に対して放射線増感されるべき細胞の感度を高めるか、かつ/または電磁放射線で治療可能な疾患の治療を促進するために治療的に有効な量で、動物に投与される分子、好ましくは低分子量の分子と定義される。電磁放射線で治療可能な疾患には、新生物疾患、良性および悪性腫瘍およびガン性細胞が含まれる。ここに挙げていない他の疾患の電磁放射線治療も、本発明では企図される。ここで使用する場合、「電磁放射線」および「放射線」という用語には、これらに限らないが、10−２０から10０メートルの波長を有する放射線が含まれる。本発明の好ましい実施形態は、γ線 (10−２０から10−１３m)、x線 (10−１１から10−９m)、紫外線 (10nmから400nm)、可視光線 (400nmから700nm)、赤外線 (700nmから1.0mm) またはマイクロ波放射線 (1mmから30cm) の電磁放射線を使用する。
【０４５７】
ニューロン活性に効果を及ぼす組成物および方法
好ましくは、本発明の化合物は、PARP活性を阻害し、したがって、神経組織損傷、特に、動物での脳虚血および再灌流障害または神経変性疾患に由来する損傷を治療するために使用することができると考えられる。「神経組織」という用語は、これらに限らないが、ニューロン、神経支持細胞、膠細胞、シュヴァン細胞、これらの構造内に含まれ、これに供給する血管系を含む神経系、中枢神経系、脳、脳幹、脊髄、中枢神経と末梢神経系との接合部、末梢神経系および類似構造を構成する様々なコンポーネントのことである。
【０４５８】
さらに、本発明では、前記の化合物および組成物の有効な治療量を動物に投与して、ニューロン活性に、特に、NMDA神経毒性に仲介されない活性に影響を及ぼす。このようなニューロン活性は、損傷を受けているニューロンの刺激、ニューロン再生の促進、神経変性の予防および神経疾患の治療からなりうる。したがって、本発明はさらに、有効量の式I、I-1、I-2、I-3a、I-3b、I-3c、I-3d、I-3e、I-4、II-5、II-6、II-9、II-10、I-7a、I-7b、I-8、I-11またはI-12の化合物を動物に投与することを含む、動物でのニューロン活性に影響を及ぼす方法に関する。
【０４５９】
本発明を使用する方法により治療することができる神経疾患の例には、これらには限らないが、三叉神経痛; 舌咽神経痛; ベル麻痺; 重症筋無力症; 筋ジストロフィ; 筋萎縮側索硬化症; 進行性筋萎縮症; 進行性球遺伝性筋萎縮症; 脱出、破裂または無脊椎ディスク症候群 (herniated, ruptured of prolapsed invertebrate disk syndromes); 頚椎症; 神経叢疾患 (plexus disorders); 胸郭出口破壊症候群; 鉛、ダプソン、ダニ、ポルフィリン症またはギラン-バレー症候群により惹起されるような末梢神経障害; アルツハイマー病; ハンチントン病およびパーキンソン病が含まれる。
【０４６０】
本発明の方法は特に、物理的損傷または疾患状態により惹起される末梢神経疾患; 外傷性脳損傷のような頭部外傷; 脊髄の物理的損傷; 低酸素症および脳損傷を伴う血管発作、焦点性脳虚血、全体脳虚血および脳再灌流障害のような、脳損傷を伴う発作; 多発性硬化症などの脱髄疾患; およびアルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病および筋萎縮性側索硬化症 (ALS) などの神経変性に関与する神経疾患からなる群から選択される神経疾患を治療するために使用することができる。
【０４６１】
他のPARP関連疾患の治療
本発明の化合物、組成物および方法は特に、壊死またはアポトーシスによる細胞死または細胞損傷に由来する組織損傷を治療または予防するために使用することができる。
【０４６２】
さらに、本発明の化合物、組成物および方法は、有効量の式I、I-1、I-2、I-3a、I-3b、I-3c、I-3d、I-3e、I-4、II-5、II-6、II-9、II-10、I-7a、I-7b、I-8、I-11またはI-12の化合物を動物に投与することにより、動物での心臓血管疾患を治療するために使用することができる。ここで使用する場合、「心臓血管疾患」という用語は、虚血を惹起するか、心臓の再灌流により惹起される疾患のことである。例には、これらに限らないが、冠状動脈疾患、狭心症、心筋梗塞、心停止により惹起される心臓血管組織損傷、心臓バイパスにより惹起される心臓血管組織損傷、心原性ショックおよび、当技術分野の専門家に知られているか、心臓または血管系の不全または組織損傷を伴う関連症状、特に、これらに限らないが、PARP活性化に関与する組織損傷が含まれる。
【０４６３】
例えば、本発明の方法は、動物での心臓組織損傷、特に心臓虚血に由来するか、再灌流障害により惹起された損傷を治療するために使用することができると考えられる。本発明の方法は特に、アテローム硬化症などの冠状動脈疾患、狭心症、心筋梗塞、心筋虚血および心停止、心臓バイパス、および心原性ショックからなる群から選択される心臓血管疾患を治療するために使用することができる。本発明の方法は特に、前記の心臓血管疾患の急性型を治療する際に有効である。
【０４６４】
さらに、本発明の方法は、壊死またはアポトーシスによる細胞損傷または細胞死に由来する組織損傷、虚血および再灌流障害に由来する神経組織損傷、神経疾患および神経変性疾患を治療するために; 血管発作を予防または治療するために; 心臓血管疾患を治療または予防するために; 年齢依存性筋変性、AIDSおよび他の免疫老化疾患、炎症、痛風、関節炎、アテローム硬化症、悪液質、ガン、複製老化を伴う骨格筋の変性疾患、糖尿病、頭部外傷、免疫老化、炎症性腸障害 (大腸炎およびクローン病など)、筋ジストロフィ、変形性関節症、骨粗しょう症、慢性および/または急性疼痛 (神経痛など)、腎不全、網膜虚血、敗血症性ショック (内毒素性ショックなど) および皮膚加齢などの他の症状および/または疾患を治療するために; 細胞の寿命および増殖能を延長するために; 老化細胞の遺伝子発現を変えるために; または腫瘍細胞を放射線増感するために使用することができる。
【０４６５】
さらに、本発明の方法は、ガンを治療するために、かつ腫瘍細胞を放射線増感するために使用することができる。「ガン」という用語は、幅広く解釈される。本発明の化合物は、「抗ガン剤」であってもよく、この用語には、「抗腫瘍細胞成長剤」および「抗新生物剤」も包含される。例えば、本発明の方法は、ACTH産生腫瘍、急性リンパ性白血病、急性非リンパ性白血病、副腎皮質のガン、膀胱ガン、脳のガン、乳ガン、子宮頚ガン、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、結腸直腸ガン、皮膚T細胞リンパ腫、子宮内膜ガン、食道ガン、ユーイング肉腫、胆嚢ガン、ヘアリーセル白血病、頭頚部ガン、ホジキンリンパ腫、カポジ肉腫、腎臓ガン、肝臓ガン、肺ガン (小細胞および/または非小細胞)、悪性腹水、悪性胸水、黒色腫、中皮腫、多発性骨髄腫、神経芽腫、非ホジキンリンパ腫、骨肉腫、卵巣ガン、卵巣 (胚細胞) ガン、前立腺ガン、すい臓ガン、陰茎ガン、網膜芽細胞腫、皮膚ガン、軟部組織肉腫、扁平上皮癌、胃ガン、睾丸ガン、甲状腺ガン、絨毛性腫瘍、子宮ガン、膣ガン、外陰ガンおよびウィルムス腫瘍などのガンで、ガンの治療および腫瘍細胞の放射線増感のために使用することができる。
【０４６６】
ここで使用する場合、「放射線増感剤」という用語は、電磁放射線に対して、放射線増感されるべき細胞の感度を高めるか、かつ/または電磁放射線で治療可能な疾患の治療を促進するために治療的に有効な量で、動物に投与される分子、好ましくは低分子量の分子と定義される。電磁放射線で治療可能な疾患には、新生物疾患、良性および悪性腫瘍およびガン性細胞が含まれる。ここに挙げていない他の疾患の電磁放射線治療も、本発明では企図される。ここで使用する場合、「電磁放射線」および「放射線」という用語には、これらに限らないが、10−２０から10０メートルの波長を有する放射線が含まれる。本発明の好ましい実施形態は、γ線 (10−２０から10−１３m)、x線 (10−１１から10−９m)、紫外線 (10nmから400nm)、可視光線 (400nmから700nm)、赤外線 (700nmから1.0mm) またはマイクロ波放射線 (1mmから30cm) の電磁放射線を使用する。
【０４６７】
放射線増感剤は、電磁放射線の毒性作用に対するガン細胞の感度を高めると知られている。放射線増感剤の作用機序に関するいくつかのメカニズムが、文献中で示唆されており、これには、次のメカニズムが含まれる: 低酸素細胞放射線増感剤 (例えば、2-ニトロイミダゾール化合物および二酸化ベンゾトリアジン化合物) は、低酸素組織の再酸化を促進するか、かつ/または損傷性酸素ラジカルの発生を触媒する; 非低酸素細胞放射線増感剤 (例えば、ハロゲン化ピリミジン) は、DNA塩基の同族体であり、好ましくは、ガン細胞のDNAに入り込んで、DNA分子の放射線惹起破壊を促進するか、かつ/または正常なDNA修復メカニズムを阻止する; 作用の様々な他の強力なメカニズムが、疾患を治療する際の放射線増感剤に関して、仮定されている。
【０４６８】
多くのガン治療プロトコルが近年では、x線の電磁放射線により活性化される放射線増感剤を使用する。x線活性化放射線増感剤の例には、これらに限らないが、次のものが含まれる: メトロニダゾール、ミソニダゾール、デスメチルイソニダゾール、ピモニダゾール、エタニダゾール、ニモラゾール (nimorazole)、マイトマイシンC、RSU1069、SR4233、EO9、RB6145、ニコチンアミド、5-ブロモデオキシウリジン (BUdR)、5-ヨードデオキシウリジン (IUdR)、ブロモデオキシシチジン、フルオロデオキシウリジン (FudR)、ヒドロキシウレア、シスプラチンおよびこれらの治療的に有効な同族体および誘導体。
【０４６９】
ガンの光力学治療 (PDT) は、増感剤の放射線活性化体として、可視光線を使用する。光力学放射線増感剤の例には、これらに限らないが、次のものが含まれる: ヘマトポルフィリン誘導体、フォトフリン (Photofrin)、ベンゾポルフィリン誘導体、NPe6、スズエチオポルフィリンSnET2、フェオボーバイド (Pheoborbide)-a、バクテリオクロロフィル-a、ナフタロシアニン、フタロシアニン、亜鉛フタロシアニンおよびこれらの治療的に有効な同族体および誘導体。
【０４７０】
放射線増感剤は、これらに限らないが、ターゲット細胞の放射線増感剤の取り込みを促進する化合物; ターゲット細胞への治療薬、栄養素および/または酸素の流れを調整する化合物; 付加的な放射線を伴い、または伴わずに、腫瘍に作用する化学療法薬; またはガンまたは他の疾患のために治療的に有効な他の化合物を含む、治療的に有効な量の1種または複数の他の化合物と共に、投与することができる。放射線増感剤と共に使用することができる付加的な治療薬の例は、これらに限らないが、5-フルオロウラシル、ロイコボリン、5'-アミノ-5'デオキシチミジン、酸素、炭素、赤血球輸血、過フッ化炭化水素 (例えば、フルオゾルDA)、2,3-DPG、BW12C、カルシウムチャネルブロッカー、ペントキシフィリン、抗血管形成化合物、ヒドララジンおよびLBSOが含まれる。放射線増感剤と共に使用することができる化学治療薬の例は、これらに限らないが、アドリアマイシン、カンプトテシン、カルボプラチン、シスプラチン、ダウノルビシン、ドセタキセル (docetaxel)、ドキソルビシン、インターフェロン (α、β、γ)、インターロイキン2、イリノテカン、パクリタクセル、トポテカン (topotecan)、これらの治療的に有効な同族体および誘導体が含まれる。
【０４７１】
本発明の薬剤組成物
さらに本発明は、(i) 治療的に有効な量の式I、I-1、I-2、I-3a、I-3b、I-3c、I-3d、I-3e、I-4、II-5、II-6、II-9、II-10、I-7a、I-7b、I-8、I-11またはI-12の化合物および (ii) 薬剤として許容される担体を含有する薬剤組成物に関する。
【０４７２】
本発明の化合物の好ましい実施形態の利用および投与に関する前記の検討は、本発明の薬剤組成物にも当てはまる。
【０４７３】
ここで使用する場合、「薬剤として許容される担体」という用語は、担体、希釈剤、賦形剤、懸濁剤、滑剤、補助剤、溶剤、輸送系、乳化剤、崩壊剤、吸着剤、防腐剤、界面活性剤、着色剤、着香剤または甘味剤のことである。
【０４７４】
これらの目的では、本発明の組成物は、経口で、非経口で、吸入スプレー、吸着、吸収により、局所的に、直腸で、鼻で、バッカルで、膣で、心室内で、慣用の非毒性の薬剤として許容される担体を含有する用量処方の埋込み貯蔵体を介して、または他の慣用の剤形で投与することができる。ここで使用する場合、非経口という用語には、皮下、静脈内、筋肉内、腹腔内、くも膜下、心室内、胸骨内および頭蓋内注入または注射技術が含まれる。
【０４７５】
非経口投与する場合には、組成物は通常、単位剤の無菌注入可能な形 (溶液、懸濁液またはエマルション) であり、これは、好ましくは、薬剤として許容される担体を伴い、受容者の血液と等張性である。このような無菌注入可能な形の例は、無菌注入可能な水性または油性懸濁液である。これらの懸濁液は、適切な分散剤または湿潤剤および懸濁剤を使用する当技術分野で知られている技術により処方することができる。無菌注入可能な形態はさらに、非毒性非経口的に許容される希釈剤または溶剤中の無菌注入可能な溶液または懸濁液、例えば、1,3-ブタンジオール中の溶液としてであってよい。使用することができる許容される溶剤および溶剤は、水、生理食塩水、リンガー液、デキストロース液、等張食塩液およびハンクス溶液である。加えて、無菌の不揮発性油を、通常は溶剤または懸濁媒体として使用する。この目的では、無刺激不揮発性油を使用することができ、合成モノ-またはジ-グリセリド、トウモロコシ油、綿実油、ラッカセイ油およびゴマ油が含まれる。オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピルおよびオレイン酸および、特にそのポリオキシエチル化形のオリーブ油およびヒマシ油を含むそのグリセリド誘導体などの脂肪酸を、注入可能剤の調製で使用することができる。これらの油性溶液または懸濁液はさらに、長鎖アルコール希釈剤または分散剤を含んでよい。
【０４７６】
無菌生理食塩水が、好ましい担体であり、化合物は往々にして、予見しうる全ての必要のための溶液にするために、十分に水溶性である。担体は、可溶性、等張性および化学的安定性を高める物質、例えば酸化防止剤、緩衝剤および防腐剤などの少量の添加剤を含有してもよい。
【０４７７】
鼻またはバッカル投与 (自己噴射粉末分散処方) に適した処方は、活性成分約0.1w/w%から約5w/w%、例えば約1w/w%を含有してよい。ヒト用医療使用のための本発明の処方物は、活性成分と共に、薬剤として許容される担体および付加的に他の治療成分を含有する。
【０４７８】
経口投与する場合、組成物は通常、当技術分野で知られている慣用の装置および技術を使用して、錠剤、カシェ剤、粉末、顆粒、ビーズ、チュアブルロゼンジ、カプセル、液体、水性懸濁液または溶液などの単位剤形または同様の剤形で処方する。このような処方物は通常、固体、半固体または液体担体を含有する。代表的な担体には、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、デンプン、アラビアゴム、リン酸カルシウム、鉱油、カカオバター、カカオ脂、アルギン酸塩、トラガカント、ゼラチン、シロップ、メチルセルロース、モノラウリン酸ポリオキシエチレンソルビタン、ヒドロキシ安息香酸メチル、ヒドロキシ安息香酸プロピル、タルク、ステアリン酸マグネシウムなどが含まれる。
【０４７９】
本発明の組成物を好ましくは、阻害剤の単一用量または分配用量を含有するカプセルまたは錠剤として投与する。好ましくは、組成物を、単一用量または分配用量で、無菌溶液、懸濁液またはエマルションとして投与する。錠剤は、ラクトースおよびコーンスターチおよび/またはステアリン酸マグネシウムなどの滑剤などの担体を含有してよい。カプセルは、ラクトースおよび乾燥コーンスターチを含む希釈剤を含有してよい。
【０４８０】
活性成分を場合によって1種または複数の副成分と共に、圧縮または成形することにより、錠剤を製造することができる。適切な装置中で、場合によって結合剤、滑剤、不活性希釈剤、界面活性剤または分散剤と混合して、活性成分を圧縮し、粉末または顆粒などの易流動性形にすることにより、圧縮された錠剤を調製することができる。適切な装置中で、不活性液体希釈剤で湿潤させた粉末化活性成分および適切な担体からなる混合物を成形することにより、成形された錠剤を調製することができる。
【０４８１】
本発明の化合物は、座薬の形で直腸で投与することもできる。薬剤と、室温では固体だが、直腸温度では液体であり、したがって、直腸では溶けて薬剤を放出する適切な非刺激賦形剤とを混合することにより、これらの組成物を調製することができる。このような物質には、カカオバター、蜜ロウおよびポリエチレングリコールが含まれる。
【０４８２】
本発明の組成物および方法は、制御放出技術を使用することができる。したがって、例えば、本発明の化合物を、数日間にわたって制御放出するための疎水性ポリマーマトリックスに導入することができる。さらに、本発明の組成物を、頻繁に再投与する必要なしに、長期間にわたってPARP阻害剤の有効濃度を提供するために適した固体インプラントまたは外部適用パッチに成形することもできる。このような制御放出フィルムは、当技術分野ではよく知られている。経皮輸送系が、特に好ましい。本発明で使用することができるこの目的のために通常使用されるポリマーの他の例には、外部または内部的に使用することができる非分解性エチレン-酢酸ビニルコポリマー、分解性乳酸-グリコール酸コポリマーが含まれる。しかし、前記のような他のポリマー放出系よりも短い放出サイクルでは、ポリ (ヒドロキシエチルメタクリレート) またはポリ (ビニルアルコール) などの一定のヒドロゲルを使用することもできる。
【０４８３】
好ましい実施形態では、担体は、適切な限時放出特性および放出動態を有する固体生分解性ポリマーまたは生分解性ポリマーの混合物である。さらに、本発明の組成物を、頻繁に再投与する必要なしに、長期間にわたって本発明の化合物の有効濃度を提供するために適した固体インプラントに成形することもできる。本発明の組成物を、当技術分野の専門家に知られている適切な方法で、生分解性ポリマーまたはポリマー混合物に導入することもでき、かつ生分解性ポリマーを用いて均一なマトリックスを生じさせることもでき、ポリマー内にカプセル封入することもでき、固体インプラントに成形することもできる。
【０４８４】
一実施形態では、生分解性ポリマーまたはポリマー混合物を、本発明の薬剤組成物を含有する軟質「デポー剤」を生じさせるために使用し、これは、例えば注入により流動性液体として投与することができるが、注入部位周辺の限られたエリア内に薬剤組成物を維持するに十分な粘度を保持している。こうして生じさせたデポー剤の分解時間を、選択されたポリマーおよびその分子量よって、数日から数年までの範囲で変動させることができる。注入可能な形のポリマー組成物を使用することにより、切開する必要性も省くことができる。いずれにしろ、柔軟または流動性輸送「デポー剤」は、周辺組織に対して最小限の外傷で、それが体で占めている空間の形に合う。本発明の薬剤組成物を、治療的に有効な量で使用するが、これは、所望の放出プロファイル、増感効果に必要な薬剤組成物の濃度、および治療のために薬剤組成物が放出されるべき期間に依存している。
【０４８５】
PARP阻害剤を、治療的に有効な量で、組成物中で使用する。この組成物は、滅菌されていてよく、かつ/または防腐剤、安定剤、ウェリング剤 (welling agent)、乳化剤、溶解促進剤、浸透圧を調整するための塩および/または緩衝剤などの補助剤を含有してもよい。加えて、これらは、他の治療的に有効な物質を含有してもよい。慣用混合、顆粒化またはコーティング方法により、組成物を調製し、これは、活性成分約0.1から75重量%、好ましくは、約1から50重量%を含有する。
【０４８６】
中枢神経系ターゲットとして治療的に有効であるためには、本発明の化合物は、末梢系に投与されたら容易に、血液脳関門を通過しなければならない。脳室内経路または脳に投与するために適した他の適切な輸送系により、血液脳関門を通過しえない化合物を有効に投与することができる。
【０４８７】
化合物の用量は好ましくは、活性化合物の有効量を含有する薬剤用量単位を含む。有効量とは、1個または複数の薬剤用量単位の投与により、PARPを阻害して、その有効な効果をもたらすに十分な量のことである。好ましくは、用量は、血管発作または他の神経変性疾患の作用を予防または低減するために十分である。
【０４８８】
医療用途では、治療効果を達成するために必要な活性成分の量は、特定の化合物、投与経路、治療中の哺乳動物および治療される特定の障害または疾患に応じて変動する。前記の症状を患っているか、患っていると思われる哺乳動物のための、本発明の化合物またはその薬剤として許容される塩の適切な全身用量は、活性化合物約0.1mg/kgから約100mg/kgの範囲内であり、最も好ましい用量は、約1から約10mg/kgである。
【０４８９】
しかしながら、特定の患者に対する特定の用量レベルは、使用される特異的化合物の活性、年齢、体重、全身的健康状態、性別、食事、投与時間、排泄速度、薬剤の組合せおよび治療される特定疾患の重度および投与方法を含む様々なファクターに左右されることは、理解されるであろう。
【０４９０】
通常の医師または獣医師ならば、治療を行う症状を予防的または治療的に処置するための化合物の有効量を容易に決定および処方することができることは理解されるであろう。このように、医師または獣医師は、静脈内ボーラス、さらに、適切と考えられる静脈注入および非経口または経口での繰り返し投与を使用することができる。活性成分を単独で投与することもできるが、処方物として与えるのが好ましい。
【０４９１】
本発明の組成物を導入して、剤形を調製する場合には、化合物を、ゼラチン、α-デンプンなどを含む結合剤などの慣用の賦形剤; 水素化植物油、ステアリン酸などの滑剤; ラクトース、マンノースおよびスクロースなどの希釈剤; カルボキシメチルセルロースおよびデンプングリコール酸ナトリウムなどの崩壊剤; ポビドン、ポリビニルアルコールなどの懸濁剤; 二酸化ケイ素などの吸収剤; メチルパラベン、プロピルパラベンおよび安息香酸ナトリウムなどの防腐剤; ラウリル硫酸ナトリウム、ポリソルベート80などの界面活性剤; F. D. & C. 染料およびレーキなどの着色剤; 着香剤; および甘味剤と混合することもできる。
【０４９２】
本発明は、前記の動物での疾患または障害を治療するための薬剤を調製する際に、式I、I-1、I-2、I-3a、I-3b、I-3c、I-3d、I-3e、I-4、II-5、II-6、II-9、II-10、I-7a、I-7b、I-8、I-11またはI-12の化合物を使用することに関する。
【０４９３】
PARPアッセイ
IC５０
PARP阻害剤化合物のIC５０を測定する慣用の方法は、次のようなTrevigan (Gaithersburg、MD) からの精製された組換えヒトPARPを使用するPARPアッセイである。PARP酵素アッセイは、氷上で、100mMのトリス-HCl (pH8.0)、1mMのMgCl２、28mMのKCl、28mMのNaCl、DNアーゼI活性化へリング精子 (herring sperm) DNA (Sigma、MO) 3.0μg/ml、30μMの [3H]ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド (62.5mci/mmol)、PARP酵素15μg/mlおよび様々な濃度の試験すべき化合物からなる100マイクロリットルの容量で行う。酵素を加え、混合物を25℃でインキュベーションすることにより、反応が開始される。2分間インキュベーションした後に、氷冷30% (w/v) トリクロロ酢酸500マイクロリットルを加えることにより、反応を終了させる。生じた沈殿物を、ガラス繊維フィルター (Packard Unifilter-GF/C) に移し、70%エタノールで3回洗う。フィルターを乾燥させた後に、放射能を、シンチレーションカウントにより測定する。本発明の化合物は、この阻害アッセイでは、数nMから20mMの範囲のIC５０で、強力な酵素活性を有することが判明した。
【０４９４】
本発明の化合物の特異的実施形態を含む次の表IIIで示すように、前記のPARPアッセイを使用して、およそのIC５０ (μM) 値を得た。
【０４９５】
【表１−１】
0004323802.tif 000092
【０４９６】
【表１−２】
0004323802.tif 000093
【０４９７】
【表１−３】
0004323802.tif 000094
【０４９８】
【表１−４】
0004323802.tif 000095
【０４９９】
【表１−５】
0004323802.tif 000096
【０５００】
【表１−６】
0004323802.tif 000097
【０５０１】
【表１−７】
0004323802.tif 000098
【０５０２】
【表１−８】
0004323802.tif 000099
【０５０３】
【表１−９】
0004323802.tif 000100
【０５０４】
【表１−１０】
0004323802.tif 000101
【０５０５】
【表１−１１】
0004323802.tif 000102
【０５０６】
【表１−１２】
0004323802.tif 000103
【０５０７】
【表１−１３】
0004323802.tif 000104
【０５０８】
【表１−１４】
0004323802.tif 000105
【０５０９】
【表１−１５】
0004323802.tif 000106
【０５１０】
【表１−１６】
0004323802.tif 000107
【０５１１】
【表１−１７】
0004323802.tif 000108
【０５１２】
【表１−１８】
0004323802.tif 000109
【０５１３】
【表１−１９】
0004323802.tif 000110
【０５１４】
【表１−２０】
0004323802.tif 000111
【０５１５】
本発明の例示的実施形態である他の化合物には、次のものが含まれる。
【化１０７−１】
0004323802.tif 000112
【化１０７−２】
0004323802.tif 000113
【化１０７−３】
0004323802.tif 000114
【化１０７−４】
0004323802.tif 000115
【化１０７−５】
0004323802.tif 000116
【化１０７−６】
0004323802.tif 000117
【化１０７−７】
0004323802.tif 000118
【化１０７−８】
0004323802.tif 000119
【化１０７−９】
0004323802.tif 000120
【化１０７−１０】
0004323802.tif 000121
【化１０７−１１】
0004323802.tif 000122
【０５１６】
焦点性脳虚血
次の焦点性脳虚血アッセイは、本発明の化合物のPARP阻害効果を求めるために使用することができる。次の実施例により、本発明の化合物に該当する化合物は、PARP活性の阻害に有効であることが証明される。
【０５１７】
オスのLong-Evansラットで、90分間の両側での一時的な総頸動脈閉塞を伴う右遠位MCA (中大脳動脈) の焼灼術により、焦点性脳虚血を生じさせる。動物で行う全ての手順は、ペンシルバニア大学のUniversity Institutional Animal Care and Use Committeeにより認められている。Charles Riverから得た全部で42匹のラット (体重: 230〜340g) を、この研究では使用した。外科手術前に、動物を一晩絶食させたが、水は自由に摂取させた。
【０５１８】
MCA閉塞の2時間前に、様々な量 (対照、n = 14; 5mg/kg、n = 7; 10mg/kg、n = 7; 20mg/kg、n = 7; および40mg/kg、n = 7) の化合物、3,4-ジヒドロ-5-[4-(1-ピペリジニル)-ブトキシ]-1(2H)-イソキノリノン ("DPQ") を、超音波発生装置を用いて、ジメチルスルホキシド (DMSO) に溶かした。生じた溶液の容量1.28ml/kgを、14匹のラットに、腹腔内注入した。
【０５１９】
次いで、一酸化窒素70%および酸素30%からなる混合物中のハロタン (導入では4%、外科的手術では0.8〜1.2%) を用いて、ラットに麻酔をかけた。直腸プローブにより体温を監視し、定温ブランケットコントロールユニット (Harvard Apparatus Limited、Kent、U. K.) により調節される加熱ブランケットを用いて、37.5±0.5℃に維持した。カテーテル (PE-50) を、尾動脈に設置し、動脈圧を継続的に監視し、Grass polygraph recorder (Model 7D、Grass Instruments、Quincy、Massachusetts) で記録した。血液ガス分析(動脈pH、PaO２およびPaCO２) のためのサンプルを、尾動脈カテーテルから採取し、血液ガス測定装置 (ABL 30、Radiometer、Copenhagen、Denmark) で測定した。動脈血液サンプルを、MCA閉塞の30分後に得た。
【０５２０】
動物の頭部を、定位フレームに設置し、右側眼角と外耳道との間に右頭頂切開を作った。生理食塩水で常に冷却されている歯科用ドリルを使用し、3mm穿孔を、右MCA、矢状縫合に対して4mm側方および冠状縫合に対して5mm尾方により規定される皮質にわたって調製した。硬膜および薄い内部骨層を維持したが、大きな血管のない組織領域上にプローブを位置させるようにした。フロープローブ (チップ直径1mm、線維分離 (fiber separation) 0.25mm) を、極微操作装置を使用して、頭蓋穿孔の下に下げる。プローブを、歯科用セメントで頭蓋に固定されているプローブホルダーにより固定した。右頭頂皮質中の微小血管血流を連続的に、レーザドップラー流量計 (FloLab、Moor、Devon、U. K.、およびPeriflux 4001、Perimed、Stockholm、Sweden) で監視した。
【０５２１】
いずれも参照して援用することができるChen et al.、"A Model of Focal Ischemic Stroke in the Rat: Reproducible Extensive Cortical Infarction"、Stroke 17: 738-43 (1986) および/またはLiu et al.、"Polyethylene Glycol-conjugated Superoxide Dismutase and Catalase Reduce Ischemic Brain Injury"、Am. J. Physiol. 256: H589-93 (1989) の手順による、両側での一時的な総頸動脈 (CCA) 閉塞を伴う右MCAの遠位ポーションの焼灼術により、焦点性脳虚血を生じさせた。
【０５２２】
特に、両側のCCAを単離し、後の遠隔閉塞のために慎重に、CCAの回りにポリエチレン (PE-10) カテーテルからなるループを通した。レーザドップラープローブの設置のために予め作っておいた切開を、歯科用ドリルを使用して延長して、融合ポイントの所の頬骨弓頭側末端の観察ができるようにし、かつMCAの上に位置する硬膜を切除した。下大脳静脈とのその交叉に対して遠位のMCAを、極微操作装置に備えられているステンレス鋼フックにより持ち上げ、両側でのCCA閉塞の後に、MCAを、電気凝固装置を用いて焼灼した。Gelformの小片で穿孔をカバーし、縫合して、正常または正常付近の範囲に脳温度を維持した。
【０５２３】
90分間閉塞させた後に、頚動脈ループを開放し、尾動脈カテーテルを除去し、創傷を全て縫合した。硫酸ゲンタマイシン (10mg/ml) を局所的に、創傷に投与して、感染を防いだ。麻酔を止め、覚醒した後に、動物をケージに戻した。水およびエサを自由に採らせた。
【０５２４】
MCA閉塞の2時間後に、動物に、処置前と同じ容量のPARP阻害剤を与えた。MCA閉塞の24時間後に、ペントバルビタールナトリウム (150mg/kg) を腹腔内注射することにより、ラットを殺した。頭蓋から、脳を慎重に切除し、氷冷人工CSFで5分間冷却した。次いで、冷却された脳を、げっ歯類脳マトリックス (RBM-4000C、ASI Instruments、Warren、Michigan) を使用して、2mm間隔で、前頭面で切断した。この脳スライスを、塩化2,3,5-トリフェニルテトラゾリウム (TTC) 2%を含有するリン酸緩衝生理食塩水中、37℃で10分間インキュベーションした。着色されたスライスの後面から、カラー写真を撮り、これを使用して、コンピュータ式画像解析器 (NIH Image 1.59) を使用して、各横断面レベルでの損傷領域を決定した。水腫によるアーチファクトを回避するために、Swanson et al.、"A Semiautomated Method for Measuring Brain Infarct Volume"、J. Cereb. Blood Flow Metabol. 10: 290-93 (1990) (この開示を、ここで参照して援用することができる) の方法により、発作に対して半球同側の正常組織の面積を、発作に対して半球対側の面積から引くことにより、損傷面積を算出した。脳スライスの損傷容量の総和により、梗塞の全容量を算出した。
【０５２５】
両側での一時的なCCA閉塞を伴う右側MCAの遠位ポーションの焼灼術は一貫して、各試験動物の右MCA領域に、明瞭に認識される皮質梗塞をもたらした。図1で分かるように、各群で、TTC染色により測定される損傷領域の分布に、明らかな規則性が存在した。
【０５２６】
図1では、頭尾軸 (rostrocaudal axis) に沿った典型的なレベルでの横断面梗塞領域の分布を、処置されていない動物および3,4-ジヒドロ-5-[4-(1-ピペリジニル)-ブトキシ]-1(2H)-イソキノリノン10mg/kgで処置された動物の両耳系から測定した。損傷面積を、平均値±標準偏差として表した。10mg処置群と対照群との間で著しい差異が示された (＊p<0.02、＊＊p<0.01、＊＊p<0.001)。5mg/kgおよび20mg/kg曲線は、対照と10mg/kg曲線とのほぼ中間に低下する一方で、40mg/kg曲線は、対照に近かった。5、20および40mg/kg曲線は、明快にするために省略した。
【０５２７】
PARP阻害は、対照群 (165.2±34.0mm３) に比較して、5mg/kg処置群 (106.7±23.2mm３、p<0.001) で、10mg/kg処置群 (76.4±16.8mm３、p<0.001) で、および20mg/kg処置群 (110.2±42.0mm３、p<0.01) で、損傷容量に著しい低下をもたらした。データは、平均値±標準偏差として表した。群の間での差異の有意性は、分散分析(ANOVA)、続いて、個々の比較に関するスチューデントのt検定を使用して求めた。
【０５２８】
対照と40mg/kg処置群 (135.6±44.8mm３) との間に著しい差異はなかった。しかしながら、図2に示すように、5mg/kg処置群と10mg/kg処置群との間に (p<0.02)、かつ10mg/kg処置群と40mg/kg処置群との間に (p<0.01)、著しい差異があった。
【０５２９】
図2では、梗塞容量に対する、3,4-ジヒドロ-5-[4-(1-ピペリジニル)-ブトキシ]-1(2H)-イソキノリノンの腹腔内投与の効果を、グラフで示している。梗塞の容量は、平均値±標準偏差として表した。処置群と対照群との間で著しい差異が示された (＊p<0.01、＊＊p<0.001)。なぜ、高用量 (40mg/kg) のPARP阻害剤、3,4-ジヒドロ-5-[4-(1-ピペリジニル)-ブトキシ]-1(2H)-イソキノリノンの方が神経保護性が劣るのかは、明らかではない。U形用量-応答曲線は、化合物の二相性効果を示している。
【０５３０】
しかしながら、総じて、阻害剤のインビボ投与により、ラットでの焦点性脳虚血モデルの梗塞容量の相当な低減が生じた。この結果は、脳虚血での脳損傷の病因で、PARPの活性化が、重要な役割を果たしていることを示していた。
【０５３１】
動脈血ガス (PaO２、PaCO２およびpH) の値は、対照および処置群で生理的範囲内で、下記の表IVに示されているように、5つの群の中で、これらのパラメーターに著しい差異は無かった。「定常状態」MABPは、外科的調製の完了後、閉塞の直前に生じ、「虚血」MABPは、閉塞の間の平均MABPとして生じた。
【表２】
0004323802.tif 000123
【０５３２】
5つの群で、MCAおよびCCA閉塞の前には、平均動脈血圧 (MABP) を含む生理学的パラメーターに著しい差異はなかった。MABPが、5つの群全てで、閉塞後に上昇したが、5つの群の内では、閉塞期間の間、MABPに著しい差異はなかった。
【０５３３】
レーザドップラーから得られた血流値は、任意単位による値であったので、ベースライン (閉塞前) からのパーセント変化のみを報告した。右MCAおよび両側CCA閉塞は、対照群 (n = 5) ではベースラインに対して20.8±7.7%まで、5mg/kg処置群 (n = 7) では18.7±7.4%まで、10mg/kg処置群 (n = 7) で21.4±7.7%まで、および40mg/kg処置群 (n = 7) で19.3±11.2%まで、右頭頂皮質中の相対血流の著しい低下をもたらした。4つの群の内では、閉塞に対する血流応答に著しい差異はなかった。加えて、血流は、いずれの群でも、全閉塞期間を通して著しい変化を示さなかった。
【０５３４】
頚動脈閉塞の解放後に、血流の良好な回復 (時折、充血) が、全ての動物の右MCA領域で観察された。虚血組織の再灌流は、NOおよびペルオキシニトリルの生成を、加えて、酸素由来フリーラジカルをもたらした。これらのラジカルの全てが、DNA鎖切断を惹起し、PARPを活性化すると判明している。
【０５３５】
この実施例により、放出された本発明の化合物は、PARP活性化の阻害に有効であるという証拠が得られた。
【０５３６】
代表的な本発明の化合物を、次の簡単な手順で、焦点性脳虚血を低減するためのその能力に関して試験することができる。外科手術まで、ラットに自由に、水およびラット用固形飼料 (Wayne、Chicago、IL) を摂らせた。ハウジングおよび麻酔は、the institutional Animal Studies Committeeにより作成された指針に沿っており、PHS Guide for the Care and Use of Laboratory Animals、USDA Regulationsおよびthe AVMA Panel on Euthanasiaの指針に従っている。
【０５３７】
動物に、O２30%およびNO２70%の混合物中のイソフルオラン (導入、3%; 維持、1.25%) により、マスクを介して麻酔をかける。直腸温度を、定温ブランケット (Harvard Apparatus、South Natick、MA) で37℃に維持する。初めに、ivカテーテルを左大腿静脈に挿入し、そのラインを係留されているスイベル (Instech Laboratories、Plymouth Meeting、PA) と遠隔注入ポンプ (Stoelting Inc.、Wood Dale、IL) とを接続するために首筋に通す。場合によって、動脈血圧および心拍数を監視し、動脈血ガスのための血液サンプルを得るために、右大腿動脈をカニューレ処理する。
【０５３８】
次いで、右の眼と耳との間に垂直皮膚切開を作ることにより、右中大脳動脈 (MCA) を露出させ、上に位置する頭蓋を、歯科用ドリル (Chen et al、1986) で除去した。硬膜を切開した後に、動脈を、下大脳静脈のレベルで両極性焼灼器ユニット (Valleylab NS2000、Boulder、CO) で凝固させ、自発的な再灌流を防ぐために切断する (Takahashi et al.、1997)。予め単離され、軟部組織を除去されている両方の総頸動脈 (CCA) を次いで、非外傷性動脈瘤クリップを使用して結紮する。外科用クリップで創傷を閉じた後に、動物を麻酔から回復させ、加熱水アンダーパッドおよび吸湿加温テントを用いて27℃に加温されているケージに戻す。
【０５３９】
試験すべきPARP阻害剤を初め、MCAOの30分後に、5分間にわたって注入されるivボーラス10mg/kgとして投与し、引き続き、2mg/kg/時 (0.3ml/時) の注入を12時間継続する。MCAOの90分後に、動物から、注入テーテルを外し、イソフルオランで一時的に麻酔をかけ、頚動脈クリップを外す。動物を温かいケージに戻し、実験期間の間iv注入ポンプに再接続した。
【０５４０】
永久的MCAO後の24時間目に、動物を、ケタミンで沈静化して、頭部を、ギロチンで切除する。脳を切除し、氷冷生理食塩水中で冷却し、ラット脳マトリックス (Harvard Bioscience、South Natick、MA) を使用して、2mm冠状セクションにスライスする。この脳スライスを、TTC2%を含有するリン酸緩衝生理食塩水 (pH7.4) 中、37℃で10分間インキュベーションし、次いで、10%中性緩衝ホルマリン中で貯蔵する。各脳スライスでのTTC未着色の横断面面積を画像解析器 (MetaMorph、Universal Imaging Corp.、West Chester、PA) を使用して求める。構成している脳スライス中の梗塞面積の直接的 (TTC-ネガ) および間接的測定の総和により、右半球での梗塞の全容量を算出する。溶剤および薬剤処置群 (n = 8) での梗塞容量を、不対スチューデントのt検定を使用して、重要な統計的差異に関して試験する。
【０５４１】
本発明の化合物の様々な用量を、このモデルで試験することができる。化合物を、一回用量または一連の複数用量で、i. p. またはi. v. で、様々な時間に虚血開始の前まは後に投与する。本発明の化合物は、約0から80%の範囲で、虚血に対する保護をもたらすと予想される。
【０５４２】
心臓虚血/再灌流障害
心臓虚血/再灌流モデルの実験を、腹腔内で用量65mg/kgでペントバルビタールナトリウムで麻酔をかけられている体重250〜300gのメスのSDラットを使用して行う。直腸温度を、定温ブランケットシステム (Harvard Apparatus、South Natick、MA) で37℃に維持する。気管をカニューレ処理し、Harvard Rodent Ventilator (Harvard Apparatus、South Natick、MA) を使用することにより、ラットに室内空気を通気した。左頚静脈を、薬物輸送のために、PE-50でカニューレ処理する。右頚動脈を、BP測定のためにカニューレ処理する。第4左肋間隙の所で胸を開くことにより、心臓を露出させる。冠状動脈の主な左側の枝(LAD)を、30分間の虚血のために4-0シルク結紮により梗塞させ、90分間の再灌流のために開放する。実験の間、動脈BPおよびEKGを、Micro-Med Cardiovascular System (Louisville、KY) により監視する。
【０５４３】
再灌流の終了時に、LAD冠状動脈を再梗塞させ、5%エバンスブルー染料約2mLを、i. v. 線を介して注入して、心臓の虚血領域と非虚血領域とを区別する。次いで、心臓を直ちに取り出し、冷凍庫で凍結させる。少なくとも30分凍結させた後に、心臓を、2mm厚で5枚のセクションにスライスし、1%TTC溶液中、37℃で30分間染色する。右心室を、裁断 (trimmed off) する。セクションの各面での梗塞領域、危険領域および全左心室領域を、画像解析システム (BIOQUANT、Nashville、TN) を使用して、測定する。全危険容量に対する全体梗塞容量パーセントとして、梗塞サイズを算出する。
【０５４４】
薬物処置群では、化合物を、次の3つのプロトコルに従い投与する: 1. 化合物の一回用量を、虚血の開始の60分前に、i. p. 注入により投与する。2. 化合物を、虚血の開始の1分前からi. v. ボーラスで、続いて、再灌流が終了するまで、i. v. 注入により輸送する。3. 化合物を、再灌流の開始の1分前からi. v. ボーラスで、続いて、再灌流が終了するまで、i. v. 注入により輸送する。各薬物処置群には、n = 6またはn = 8での対応する溶剤処置群が存在する。溶剤と薬物処置群との間の差は、不対t-試験を使用して、p<0.05で比較する。様々な用量の化合物を、このモデルで試験する。化合物を、一回または複数回用量で、i. p. またはi. v. で、虚血の開始前後の様々な時間に投与する。本発明の化合物は、このアッセイでは、10から40パーセントの範囲内で虚血/再灌流障害保護を有すると予測される。
【０５４５】
PARP阻害活性の結果として、本発明の化合物は、インビトロでラットの皮質ニューロンの虚血により惹起される変性に対する保護をもたらすと予測され、したがって、発作、敗血症性ショックまたはCNS変性疾患などの脳虚血から生じる疾患で使用することができる。さらにこれらは、外傷後に脊髄を保護するために使用することもできる。ラットでの虚血/再灌流障害の実験結果として、さらに本発明は、心臓発作、心停止、心臓バイパス、糖尿病の予防または損傷のリスクを予防または治療する方法を対象としており、これは、PARP阻害のために有効量の本発明の化合物を単位剤形で投与することを含む。
【０５４６】
インビトロ放射線増感
6ウェルディッシュに播種され、10%FCS補充RPMI1640中の単層培養として増殖しているヒト前立腺ガン細胞系PC-3sを使用することにより、インビトロ放射線増感を測定することができる。細胞を、37℃で、CO２5%および空気95%中に維持する。細胞を致死量未満のレベルでの照射の前に、3種の異なるPARP阻害剤の用量応答 (0.1mMから0.1μM) に暴露する。全ての処置群で、6ウェルプレートを室温で、Cu0.5mm/1mmを伴うSeifert 250kV/15mA照射器に暴露する。0.4%トリパンブルーの排除により、細胞生存率を試験する。染料排除を、顕微鏡により視覚的に評価し、生存細胞数を、生存細胞数から細胞数を引き、細胞の全体数で割ることにより、算出した。照射後の３H-チミジン導入量により、細胞増殖率を算出する。PARP阻害剤は、細胞を放射線増感すると予測される。
【０５４７】
mRNA老化細胞での遺伝子発現変化の測定
遺伝子発現変化を、Population Doubling (PDL) 94で、通常の成長培地中で平板培養され、次いで、Linskens, et al.、Nucleic Acids Res. 23: 16: 3244-3251 (1995) に記載されている生理学的条件を反映するために低血清培地に移されているヒト線維芽BJ細胞で測定することができる。0.5%子ウシ血清補充DMEM/199の培地を使用する。細胞を毎日、13日間処置する。対照細胞を、PARP阻害剤を施すために使用される溶剤を用いて、および用いずに処置する。未処置の老いた対照細胞および若い対照細胞を、比較のために試験した。PCT公開96/13610号に記載されている技術に従い、処置細胞および対照細胞から、RNAを調製し、ノーザンブロットを行う。老化関連遺伝子に特異的なプローブを分析し、処置細胞および対照細胞を比較する。結果の分析で、遺伝子発現の最も低いレベルを任意に、1と設定して、比較のためのベースとする。皮膚における年齢関連変化に特に関与している3つの遺伝子は、コラーゲン、コラゲナーゼおよびエラスチンである。West, Arch. Derm. 130: 87-95 (1994)。PARP阻害剤で処置された細胞のエラスチン発現は、対照細胞と比較して、著しい増大が予測されている。エラスチン発現は、老化細胞に比較して、若い細胞で著しく高くなるはずで、したがって、PARP阻害剤での処置は、老化細胞でのエラスチン発現レベルを、より若い細胞で見られるレベルと同様のレベルまで変化させる。同様に、薬効は、PARP阻害剤での処置を伴うコラゲナーゼおよびコラーゲン発現でも見られるはずである。
【０５４８】
ラットでの慢性収縮性障害 (Chronic Constriction Injury; CCI) に対するPARP阻害剤の神経保護効果
300〜350gのオスの成体SDラットに、ペントバルビタールナトリウム腹腔内50mg/kgで麻酔をかける。ラットの坐骨神経の片方を露出させ、5〜7mm長の神経セグメントを切開し、4本のゆるい結紮で1.0〜1.5mmの所で閉じ、引き続き、くも膜下カテーテルをインプラントし、大槽の所での切開によりクモ膜下腔中に、硫酸ゲンタマイシンをフラッシュされたポリエチレン (PE-10) を挿入することにより、神経結紮を行う。カテーテルの尾端を穏やかに、腰部拡大部に通し、頭端を、歯科用セメントを用いて、頭蓋に埋没しているねじに固定し、皮膚創傷を、創傷クリップで閉じる。
【０５４９】
放射熱に対する熱痛覚過敏を、足引っ込み (paw-withdrawal) 試験により評価する。ラットの後足足底の真下に置かれた映写用電球からの放射熱源を備えた3mm厚のガラスプレート上のプラスチック製シリンダ内に、ラットを置く。足引っ込み潜伏時間を、放射熱刺激を開始してから、ラットの後ろ足が引っ込むまでの時間と定義する。
【０５５０】
多くの小さな正方形の穴を備えた貫通金属シートからなる底を有するケージにラットを置くことにより、機械的な熱痛覚過敏を評価する。ケージの底を通して挿入される安全ピンの先端で、ラットの後ろ足の中央足底を刺した後の、足-引っ込み期間を記録する。
【０５５１】
前記の試験と同様のケージにラットを入れ、0.07から76gの範囲内での曲げ力上昇で、von Frey filamentをラットの後ろ足の中央足底に適用することにより、メカノ異痛 (mechano-allodynia) を評価する。von Frey filamentを、皮膚に対して垂直に適用し、これが曲がるまで、ゆっくりと押す。応答のしきい力を、5回の適用の中で、少なくとも1回の明らかな足引っ込みを惹起する一連の最初のフィラメントとして定義する。
【０５５２】
両側で、ラットの脊髄背角内、特に、薄膜I-IIで、一側性坐骨神経結紮の8日後に、暗ニューロンを観察し、偽処置ラットと比較する。様々な用量のPARP阻害剤を、このモデルで試験すると、CCIラットでの暗ニューロンおよび神経障害性疼痛行動の両方の発生率が低減することが示される。
【０５５３】
痛風および痛風徴候の治療および予防
関節窩での尿酸一ナトリウムの結晶 (MSU結晶) の沈積が、痛風および偽痛風などの炎症性病理の病因である。臨床では、これらの炎症性疾患は、結果として深刻な疼痛を伴う関節の水腫および紅斑を伴う。1) 急性偶発性関節および間接周囲炎症および2) 慢性関節をもたらす、関節内および関節周囲空間への白血球の強い浸潤も、この病理の特徴である。好中球が、これらの炎症関節から回収される主な細胞タイプであることは以前から、判明している (Dieppe et al.、(1979)。Synovial fluid crystals. Q. J. Med. XLVIII: 533-553; Terkletaub、(1991)。単球由来好中球走化性因子/インターロイキン-8は、結晶惹起炎症の強力な仲介剤である。Arth. Rheum. 34: 894-903)。MSU結晶に誘導される炎症性プロセスおよびこれらの結晶と痛風性関節炎との間に明瞭な関連が存在するという事実のより良好な理解により、結晶惹起炎症の代表的なモデルの特徴同定が得られている。結晶変化が特異的な空洞への細胞補充をもたらすモデルの例は、イヌ関節 (Phelps & McCarty、1966、Ann Int Med 9: 115-125)、ラット胸膜炎 (Deporter et al.、1979、Br. J. Pharmacol. 65: 163-165; Sedgwick et al.、1985、Agents Actions 17: 209-213) および予め生成されたラットエアパウチの利用 (Brookes et al.、1987) である。後者の実験系により、好中球蓄積が、後にコルヒチンにより阻害されるLTB４などの化学誘引物質の発生に関連していることが示されている (Brooks et al、1987、Br. J. Pharmacol. 90: 413-419)。
【０５５４】
好中球は、MSU結晶により活性化されて、結晶惹起関節疾患で見られる局所および全身炎症性症状発現の原因の一つとなりうる多くのメディエイタを放出すると示されている。結晶は、好中球と相互作用して、リソーム (lysomal) 酵素の放出 (Hoffstein et al.、1975、Arth. Rheum. 18: 153-165)、酸素誘導フリーラジカルの放出 (Simchowitz et al.、1982、Arth. Rheum. 25: 181-188; Abramson et al.、1982、Arthr Rheum. 25: 174-180)、白血球へのホスホリパーゼA２ (PLA２) の導入 (Bomalaski et al.、1990、J. Immunol. 145: 3391-3397) および5-リポキシゲナーゼ生成物の合成の活性化 (Poubelle et al.、1987、Blochem. Biophys. Res. Commun. 149: 649-657) をもたらす。
【０５５５】
インビトロでは、MSU結晶は、ヒト好中球からサイトカインインターロイキン-1β (IL-1β) を放出し、この刺激をチモサン、LPS、ホルボールエステル、顆粒球マクロファージコロニー形成刺激ホルモン (GM-CSF) およびTNF-αなどのこのサイトカインも放出する一連の他のものに加えることが判明している。さらに、ヒト単球および滑膜細胞は、IL-6およびIL-8などの様々なサイトカインを合成および放出することが判明している (Guerne et al.、1989、Arth. Rheum. 32: 1443-1452; Terkeltaub et al.、1991、Arth. Rheum. 34: 894-903)。加えて、コルヒチン選択性は、IL-1βのMSU結晶-およびTNF-α惹起放出を阻害する (Roberge et al.、1994、J. Immunol. 152: 5485-5494)。
【０５５６】
痛風の実験モデルでは、IL-8などの好中球に選択的なCXCケモカイン (chemokine) の合成を観察するが、CCケモカイン単球化学誘引物質タンパク質-1 (MCP-1) の合成ではない (Hachicha et al.、1995、J. Exp. Med. 182: 2019-2025)。これらの結果は、理論的には、好中球の補充は存在するが、単核細胞の補充は存在しないという現象を、IL-8の産生およびMCP-1の放出の停止がもたらすことを示している。この仮説は、主な炎症細胞は好中球である痛風および偽痛風の病的段階に応じている (Hachicha et al.、1995)。MSU結晶に加えて、関節窩に通常存在する単核食細胞の活性化も、IL-8の分泌を惹起する (Terkeltaub et al.、1991)。この病理でのIL-8の重要性は、量が増していく急性痛風性関節炎の患者の滑液において判明している (Terkeltaub et al.、1991; di Giovine et al.、1991、J. Clin. Invest. 87: 1375-1381)。IL-8に対する中和抗体の使用は、ウサギモデルで、12hでの結晶惹起関節膨潤を、かつ12および24hでの関節炎の関節への好中球浸潤を緩和するために重要であることが判明している (Nishimura et al.、1997、J. Leukoc. Biol. 62: 444-449)。
【０５５７】
これらの研究により、痛風を治療する際の遊出好中球およびケモカインIL-8の両方の重要性、さらに、滑膜細胞、マクロファージおよびマスト細胞などの定住細胞からのこの、および他のサイトカインの放出が証明されている。正常な滑液中に、好中球は存在しないか、極めて稀であるので、高い好中球-内皮接着は、痛風が起こるためには必須である (Terkeltaub、1996、In. Koopman, W. J. editor. Arthritis and allied conditions: a textbook of rheumatology. Baltimore: Williams and Wilkins: pp. 2085-2102, and Terkeltaub、1992、In Inflammation. Basic Principles and Clinical Correlates, ed. by J. I. Gallin、I. M. Goldstein and R. Snyderman、pp 977-981、Raven Press、New York)。IL-1βおよびTNF-αは、好中球のための主な内皮リガンドの迅速なアップレギュレーションを仲介する際に決定的である。例えば、尿酸塩結晶の注入に応答してのE-セレクチンの迅速かつ長期の発現は、ブタ皮で証明されている (Chapman et al.、1996、Br. J. Rheumatol. 35: 323-334)。サイトカイン、ケモカインおよびアラキドン酸カスケードの生成物の放出は、この病理での好中球の補充をもたらし、これらの阻害は、病理の減衰をもたらす。
【０５５８】
次の痛風モデルを使用して、本発明によるPARP阻害剤を試験することができる。
【０５５９】
オスの非近交系Swissアルビノマウス (体重20〜22g) を、Banton and Kingsman (T. O. strain; Hull、Humberside) から購入し、自由に摂取できる通常の固形飼料ペレットと水道水ならびに12時間昼夜サイクルで維持した。全ての動物を、実験前1週間飼育すると、体重は28〜30gになった。
【０５６０】
PARP阻害剤の例としての1,11b-ジヒドロベンゾピラノ[4,3,2-de]イソキノリン-1-オンを室温で、2ml中45mgの濃度で、100%DMSOに溶かした。次いで、各マウスに、45mg/2ml/kgに対応する一回用量 (例えば、30gのマウスでは、例えば60μl) を与えるように、化合物を腹腔に注入した。対照マウスには、DMSOを2ml/kgでi. p. で与えた。溶剤の潜在的な効果に関する対照のために、未処置のままのマウス第3群を加えた。したがって、この研究は、次の3つの群を含む: A群、未処置マウス、n = 6; B群、DMSO処置マウス、n = 8; およびC群、1,11b-ジヒドロベンゾピラノ[4,3,2-de]イソキノリン-1-オンで処置されたマウス、n = 8。
【０５６１】
MSU結晶惹起好中球補充を、次のように試験した。いずれのケースでも、前記の処置の1時間後に、マウスを、MSU結晶で処置した。30分間回転させることにより、MSU結晶の均一系懸濁液を得た。PBS 0.5ml (0.1M、pH7.4) 中のMSU結晶3mgを注入することにより、腹膜炎を惹起させ、腹腔内への好中球の補充を、6時間目に評価した (Getting et al.、1997、J. Pharmacol. Exp. Ther. 283: 123-130)。次いで、CO２暴露により、動物を安楽死させ、腹腔を3mMのEDTAおよびヘパリン25U/mlで補充したPBS3mlで洗浄した。
【０５６２】
次いで、洗浄液の分量 (100μl) を、チュルク液 (3%酢酸中のクリスタルバイオレット0.01%) 中で、1: 10に希釈した。次いで、サンプルを攪拌し、着色された細胞溶液10μlを、ノイバウエル血液波長計に置き、好中球数を、光学顕微鏡 (Olympus B061) を使用してカウントした。遠心分離により細胞不含上澄みを調製し、後にあり得る分析を予想して貯蔵した。
【０５６３】
データを、単一のマウスで示し、さらに、各群当たりの平均±標準偏差として示す。ANOVAおよびBonferroni試験により、統計的差異を求めた。<0.05のP値を、有意とみなした。
【０５６４】
表Vは、3つの実験群でMSU結晶注入の6時間後に測定された好中球の数を報告している。
【表３】
0004323802.tif 000124
【０５６５】
表VIは、これらのデータを、平均±標準偏差として示している。DMSOは、細胞移動の僅かで有意でない増加 (+7%) をもたらしたことが分かる。対照的に、本発明の代表的な化合物は45mg/kgの用量で、細胞流入を著しく低減し、溶剤群に対して55%の阻害と算出された。
【表４】
0004323802.tif 000125
【０５６６】
これらの結果は、本発明の化合物および組成物は、尿酸塩結晶により惹起される好中球補充を低減するか、除くことなどにより、痛風の治療および/または予防で使用することができることを証明している。
【０５６７】
このように、本発明を記載したが、本発明を様々に変更することができることは明らかである。このような変更は、本発明の意図および範囲から逸脱しているとはみなされず、このような変更の全てが、本発明の請求項の範囲内に含まれると考えられる。ここに記載されている全ての参照文献は全て、参照して援用することができる。
【図面の簡単な説明】
【０５６８】
【図１】未処置の動物および3,4-ジヒドロ-5-[4-(1-ピペリジニル)-ボトキシル]-1(2H)-イソキノリノン10mg/kgで処置された動物の両耳線から測定された、頭尾軸に沿った一般的なレベルでの横断面梗塞面積の分布を示すグラフである。
【図２】梗塞容量に対する3,4-ジヒドロ-5-[4-(1-ピペリジニル)-ブトキシ]-1(2H)-イソキノリノンの腹腔内投与の効果を示すグラフである。
【図１】
0004323802.tif 000127
【図２】
0004323802.tif 000128