(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
薬物粉末と、それらの担体としての実質的に水不溶性の結晶セルロース粉末とを含んでなる粒状経鼻投与用組成物であって、該薬物が修飾もしくは改変がなされていてもよい分子量３０，０００以下の生理活性ペプチドから選ばれ、そして該結晶セルロース粉末が２０〜５３μｍの篩過粒径に８５重量％以上の粒子が分布した粒径範囲を有し、かつ該結晶セルロース粉末が０．２２〜０．４０ｇ／ｃｍ3のかさ密度を有することを特徴とする組成物。
【請求項２】
結晶セルロース粉末が篩過粒径で表した場合に、
２５μｍ未満の粒子が１０重量％以下、
２５〜３８μｍの粒子が２０〜６０重量％、
３８μｍを超え５３μｍまでの粒子が２０〜６０重量％および
５３μｍを超える粒子が残余
の粒子分布を有する請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
薬物が、修飾もしくは改変がなされていてもよい成長ホルモン、カルシトニン、グルカゴン、グルカゴン様ペプチド−１、インターフェロン、インターロイキン、エリスロポエチン、黄体形成ホルモン放出ホルモン、ソマトスタチン、バソプレシン、オキシトシン、エンケファリン、副腎皮質刺激ホルモン、成長ホルモン放出ホルモン、顆粒球コロニー形成刺激因子、副甲状腺ホルモン、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン、アンジオテンシン、プロラクチンおよび黄体形成ホルモンからなる群より選ばれる請求項１〜２のいずれかに記載の組成物。
【請求項４】
薬物が、成長ホルモンである請求項３記載の組成物。
【請求項５】
薬物が、黄体形成ホルモン放出ホルモンである請求項３記載の組成物。
【請求項６】
薬物が、グルカゴン様ペプチド−１である請求項３記載の組成物。
【請求項７】
薬物が、バソプレシンである請求項３記載の組成物。
【請求項８】
薬物が、副甲状腺ホルモンである請求項３記載の組成物。
【請求項９】
薬物が、修飾もしくは改変がなされた成長ホルモンである請求項３記載の組成物。
【請求項１０】
薬物が、修飾もしくは改変がなされた黄体形成ホルモン放出ホルモンである請求項３記載の組成物。
【請求項１１】
薬物が、修飾もしくは改変がなされたグルカゴン様ペプチド−１である請求項３記載の組成物。
【請求項１２】
薬物が、修飾もしくは改変がなされたバソプレシンである請求項３記載の組成物。
【請求項１３】
薬物が、修飾もしくは改変がなされた副甲状腺ホルモンである請求項３記載の組成物。
【請求項１４】
結晶セルロース粉末が２５〜５３μｍの篩過粒径範囲に８５重量％以上の粒子が分布した粒径範囲を有している、請求項１〜１３のいずれかに記載の組成物。
【請求項１５】
結晶セルロース粉末が２０〜２５０の平均重合度を有している、請求項１〜１４のいずれかに記載の組成物。
【請求項１６】
結晶セルロース粉末が３０〜５０の平均重合度を有している、請求項１〜１４のいずれかに記載の組成物。
【請求項１７】
結晶セルロース粉末が０．２２ｇ／ｃｍ3のかさ密度を有している、請求項１〜１６のいずれかに記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、投与形態が粒状でありかつ鼻粘膜を介することにより特徴付けられる医薬組成物に関する。より具体的には、本発明は、インスリンを初めとする生理活性ペプチドの経鼻投与用粒状組成物に関する。
【０００２】
【従来の技術】
現在のところ、糖尿病治療薬としてのインスリンは、注射用製剤が臨床で使用されており、比較的簡便な皮下注射用製剤が主として自己注射に使用されている。しかし、その注射用製剤としての性格から、患者は、生涯、１日に１〜４回、食前に自己注射をしなければならず、その煩雑さなどが糖尿病治療の問題点の１つとなっている。同様に、インスリン以外のペプチド系薬物も多くは注入剤として投与されており、簡易な投与剤型の開発も行われている。
【０００３】
特に、投与方法の煩雑さを解消すべく鼻腔内投与用製剤が提案されている。例えば、かような投与剤型としては特公昭６２−４２８８８号公報によれば、基材として結晶セルロースを用い、９０重量％粒子径が２０〜１５０μｍの範囲にあるインスリン製剤が記載されている。この製剤では、「生理活性ポリペプチド類は鼻粘膜からの吸収を考慮すれば、水可溶性であることが好ましい。」との示唆の下、現に該公報に記載されている実施例では、インスリンを０.１ＮＨＣｌ水溶液を用いて溶解してから凍結乾燥して得られる可溶性インスリン粉末が結晶セルロースと混合され、篩分けした後、９０重量％以上の粒子が７５〜１４９μｍである組成物が得られている。
【０００４】
特開平１０−５９８４１号公報（ＥＰ−Ａ１−９４３３２６に相当する）には、上述の特公昭６２−４２８８８号公報に記載の組成物に比し、水溶性の高い薬物、脂溶性の高い薬物や、分子量の大きいペプチド性の薬物についても、鼻腔からの吸収性に優れ、最高血中濃度が増加することが例証された組成物が記載されている。この公報によれば上記のような作用効果は、水吸収性でかつゲル形成性の基材（例、ヒドロキシプロピルセルロース等）を、特公昭６２−４２８８８号公報の示唆するところとは逆に、積極的に１５０μｍを超える粒子を含む結晶セルロース集合物と組み合わせ使用することにより達成できると主張されている。
【０００５】
しかしながら、これらの先行技術を初め、インスリンの経鼻投与用製剤が実用化されているとの情報が存在することを、本発明者は知らない。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
以上の従来技術によれば、薬物の生体内吸収性の向上、血中濃度の向上について一定の成果が得られている。しかしながら、さらに高い薬物の生体内吸収性および／または薬物の効能を効率よく発揮する組成剤の提供について依然として強い要望がある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上述の特公昭６２−４２８８８号公報および特開平１０−５９８４１号公報の示唆するところとは逆に、篩過粒径が１５０μｍ未満の特定の粒度分布をもつ結晶セルロース粉末を使用すること、また、かような粉末と組み合わせて、もしくは単独で一定の粒度の部分アルファー化デンプン粉末を用いて調製された経鼻投与用組成物が意外にも、薬物の吸収性および効能を、先行技術の組成物に比べ有意に高めうることを見出した。
【０００８】
本発明はこのような知見に基くものである。
【０００９】
したがって、本発明によれば、薬物粉末と、それらの担体としての実質的に水不溶性多糖類粉末とを含んでなる粒状経鼻投与用組成物であって、該薬物が分子量３０，０００以下の生理活性ペプチドから選ばれ、そして該水不溶性多糖類が２０〜６０μｍの篩過粒径範囲内の一部または全域にわたって８５重量％以上の粒子が分布した結晶セルロース粉末および平均粒径が２０〜１００μｍにある部分アルファー化デンプン粉末から選ばれる少なくとも１種であることを特徴とする組成物が提供される。なお、かような組成物のうち、薬物がインスリンであり、水不溶性多糖類が上記結晶セルロースのみからなる組成物は、本出願人の特願２００１−２０４７８４号明細書における発明でもある。
【００１０】
【発明の実施の形態】
本発明の薬物としては、本発明の目的、すなわち経鼻投与により高い生体内吸収性が得られ、しかも効能を効率よく発揮しうる分子量３０，０００以下の生理活性ペプチドを挙げることができる。
【００１１】
分子量３０，０００以下の生理活性ペプチドとしては、例えば、インスリン、成長ホルモン、カルシトニン、グルカゴン、グルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）、インターフェロン、インターロイキン、エリスロポエチン、黄体形成ホルモン放出ホルモン、ソマトスタチン、バソプレシン、オキシトシン、エンケファリン、副腎皮質刺激ホルモン、成長ホルモン放出ホルモン、顆粒球コロニー形成刺激因子、副甲状腺ホルモン、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン、アンジオテンシン、プロラクチン、黄体形成ホルモン等が挙げられる。これらの薬物は、起源や調製法等によって限定されるものでなく、所期の効能を有する限り、ある程度の修飾もしくは改変のなされたものであってもよい。インスリンを例にすれば、現在、臨床的に使用されているヒトインスリン、ウシ精製インスリン、ブタ精製インスリン、半合成ヒトインスリン、ヒトイソインスリン、等、ならびに遺伝子操作技術を利用して得られるヒトインスリンおよびその改変体であって、ヒトインスリンと同様の活性を有するもののすべが上記にいうインスリンに包含される。本発明では、これらのインスリンは粉末状態として使用されるのが好ましく、また、かりに、インスリンの改変体であっても、インスリン粉末は、水に極めて溶けにくいか、または殆ど溶けない（相当するインスリン粉末１ｇを溶かすに要する溶媒量が１０００ｍＬ以上でかつ１００００ｍＬ未満、または１００００ｍＬ以上；第１３改正日本薬局方解説書通則Ａ−５１参照）ものを好ましくは使用できる。上述したインスリン類は、そのままでは多くが水に極めて溶けにくいか、または殆ど溶けないのがそのまま、本発明にいうインスリン粉末となりうる。
【００１２】
以上に述べたインスリンを初めとする薬物粉末は、結晶または非晶質の微粉末であることができ、後述する結晶セルロース粉末を構成するセルロース粒子および部分アルファー化デンプン粒子に比し、微細であり、一般的に、これらの粒子表面上または表面の微細構造（例えば、細孔）中に複数の薬物粉末が付着するか、または封入されうるサイズであることができる。一般的に医薬原末の形態で市販されている各種薬物をそのまま使用することができる。
【００１３】
本発明にいう「結晶セルロース粉末（または粒子）」とは、一般的に、繊維性植物からパルプとして得られるα−セルロースを酸で部分的に解重合し、水に不溶性の部分を精製したものをあげることができる。レーヨン繊維等から得られる結晶セルロース粉末をも本発明の目的に沿う限り使用できる。より具体的には、例えば、特公昭３９−１２４６９号、特公昭５６−３８１２８号、特公昭６１−２１２０１号および特公平５−３８７３２号公報に記載されているようなアビセル（商標）（Avicel（商標））類およびそれらの改変体から、必要があれば高速回転衝撃粉砕機もしくは気流式粉砕機で処理してサイズを低下し、そして／または嵩密度を高めるとともに微粉砕し、次いで所望のサイズをもつ粒子の集合物に分級または篩分けして得られる結晶セルロース粉末を本発明で使用できる。
【００１４】
かような結晶セルロース粉末は、通常上記のように解重合でもたらされるものであるが、それらの平均重合度は本発明の目的に沿うものである限り、限定されるものでない。しかし、本発明では、一般的に１５〜４００、好ましくは２０〜２５０、より好ましくは３０〜５０の平均重合度の結晶セルロースから選ぶことができる。また、結晶セルロース粉末は、限定されるものでないが、かさ密度が０.２０〜０.６５ｇ／ｃｍ3のものを使用できるが、好ましくは０.２２〜０.４０ｇ／ｃｍ3であることができる。なお、かようなかさ密度は、Scott Volumeterを用いて測定した場合の値である。
【００１５】
本発明で使用できる結晶セルロース粉末に要求される重要なファクターは、粉末を構成する結晶セルロース粒子のサイズおよび分布様式にある。これらを篩過粒径範囲で表すと、２０〜６０μｍの範囲内の一部または全域にわたって約８５重量％以上の粒子が存在していることが必要である。
【００１６】
なお、本明細書において、以後粒径を表すときは、特記しない限り、「篩過粒径」を意味する。
【００１７】
他方、本発明に従うもう一方の担体として用いることのできる部分アルファー化デンプン粉末（または粒子）は、本発明の目的に沿う限り、いかなるデンプンから、いかなる手段により部分アルファー化されたものであってもよい。しかし、限定されるものでないが、トウモロコシデンプンを物理的、すなわち加熱、変成させたものが好ましい。また、かような部分アルファー化デンプンは実質的に水不溶性のものを用いる。「実質的に水不溶性」とは、常温において水可溶性の成分の含有量が５％以下、好ましくは２．５％以下であることを意味する。また、「部分アルファー化」は、純水中、約２０℃の温度において測定した場合の膨潤度が約８〜９ｃｍ3／ｇになるように調整されたものが好ましい。
【００１８】
そして、かようなデンプンは、平均粒径が２０〜１００μｍ、好ましくは約３２μｍ以下のものに分級したものを用いる。代表的なものとしては、旭化成工業からＰＣＳ（商標）の下に入手できる部分アルファー化デンプン（膨潤度８〜９ｃｍ3／ｇ）を必要により、分級して用いる。
【００１９】
上記粉末において、「一部または全域にわたって」語のもとに粒度分布を表わす場合には、例えば結晶セルロース粉末では粒径の範囲が２０〜６０μｍの全域にわたるか、その一部領域、例えば、２０〜約４０μｍ、２０〜約５５μｍ、約２５〜約３８μｍ、約２５〜約５３μｍ、または約３８〜約５３μｍ等に約８５重量％以上の粒子が分布する結晶セルロース粉末を意味する。したがって、このような具体的なものとしては、アビセル（商標）ＰＨ−Ｆ２０またはＰＨ−Ｍ１５を分級するか、市販のまま使用することもできる。好ましい、粒度分布をもつ結晶セルロース粉末としては、限定されるものでないが、
２５μｍ未満の粒径の粒子が１０重量％以下、
２５〜３８μｍの粒径の粒子が２０〜６０重量％、
３８μｍを超え５３μｍまでの粒径の粒子が２０〜６０重量％および
５３μｍを超える粒径の粒子が残余（総粒子を１００重量％にする割合）
となるような粒子分布を有するものをあげることができる。
【００２０】
本発明に従えば、インスリン粉末と結晶セルロース粉末または部分アルファー化デンプンとの配合割合は、重量基準で、１：１〜５００、より好ましくは１：２〜１００とすることができる。
【００２１】
本発明に従う組成物は、粉末状の薬物と固体担体とを均質に混合するのに常用されている手段（例えば、混合機、ミキサー）により上記インスリン粉末と結晶セルロース集合体とを、均質に混合することにより調製できる。必要があれば、その後、１０μｍ未満の粒子または１００μｍを超える粒子を除去する段階を加えてもよいが、本発明者らの経験によれば、そのような除去操作は殆ど必要としなかった。
【００２２】
また、本発明に従う組成物は、上記成分に加えて、本発明の目的上悪影響を及ぼさない限り、他の担体または基材、賦形剤、保存剤、防腐剤、吸収促進剤等を含めることができる。例えば、他の担体としては、特開平１０−５９８４１号公報に記載されているような、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース等のセルロース誘導体を挙げることができる。また、吸収促進剤としては、米国特許第５，７３１，３０３に記載されているように、精油（エッセンシャルオイル）であるアンゼリカ、その成分であるシクロペンタデカノリド等のようなものであることもできる。このような他の担体または吸収促進剤等を使用した場合には、得られた組成物を粒径が７０μｍ〜１００μｍ、好ましくは２０μｍ〜６０μｍのものが８０％を超えるように篩分けするのが好ましい。
【００２３】
【実施例】
以下、本発明に従う生理活性ペプチドの経鼻吸収用組成物の具体例を参照しながら本発明をさらに説明するが、これらに本発明を限定することを意図するものではない。なお、経鼻吸収用組成物はカニクイザル（体重３〜７ｋｇ）に単回経鼻投与した。投与方法は、各組成物をカプセルに充填し、鼻腔内投与デバイス（ジェットライザー、株式会社ユニシアジェックス）を用いて、鼻腔内に投与する方法によった。
（１）インスリンのカニクイザルにおける薬物動態および薬理試験
水難溶性インスリン粉末（インタージェン社、２８．７ＩＵ／ｍｇ）３５ｍｇ（入手したままのインスリン）と結晶セルロース（旭化成社製：Ａｖｉｃｅｌ（商標）ＰＨ−１０１、Ａｖｉｃｅｌ（商標）ＰＨ−Ｆ２０）、それぞれ９６５ｍｇとを乳鉢内で、よく混合することにより経鼻吸収用組成物を調製した。また、水難溶性インスリン粉末１００ｍｇを０．１Ｎ塩酸１ｍＬに溶解した後、精製水４０ｍＬを加えたインスリン溶液を凍結乾燥することにより水可溶性インスリンを調製し、こうして得られた水可溶性インスリン粉末（２７．７ＩＵ／ｍｇ）３６ｍｇと上記の結晶セルロース９６４ｍｇとを乳鉢内でよく混合することにより調製した経鼻吸収用組成物を、カニクイザル（ｎ＝６）に経鼻投与した。投与後の血清インスリン濃度および血清グルコース濃度を測定した。
【００２４】
インスリンおよびグルコース濃度の測定は、それぞれ、ＥＩＡ法（酵素免疫法）およびＧｌｃｋ・Ｇ−６−ＰＤＨ法によった。
【００２５】
血清インスリン濃度から求めた薬物動態学的パラメーター（平均値±標準偏差）を下記表１に示す。
【００２６】
図１および図２に、それぞれ上記の経鼻吸収用組成物の血清インスリン濃度およびグルコース濃度の経時変化を示す。また、図１に関する生データを表２〜５に示す。
【００２７】
【表１】
0004212019.tif 000002
【００２８】
【表２】
0004212019.tif 000003
【００２９】
【表３】
0004212019.tif 000004
【００３０】
【表４】
0004212019.tif 000005
【００３１】
【表５】
0004212019.tif 000006
【００３２】
表１より、一匹当り１６ＩＵのインスリンを鼻腔内投与した場合、インスリンの吸収性は、水難溶性インスリンのＡｖｉｃｅｌ（商標）ＰＨ−Ｆ２０が最も優れ、順次、水可溶性インスリンのＡｖｉｃｅｌ（商標）ＰＨ−Ｆ２０、水難溶性インスリンのＡｖｉｃｅｌ（商標）ＰＨ−１０１、水可溶性インスリンのＡｖｉｃｅｌ（商標）ＰＨ−１０１であった。即ち、水難溶性インスリンのＡｖｉｃｅｌ（商標）ＰＨ−Ｆ２０とＡｖｉｃｅｌ（商標）ＰＨ−１０１、および水可溶性インスリンのＡｖｉｃｅｌ（商標）ＰＨ−Ｆ２０組成物は、水可溶性インスリンのＡｖｉｃｅｌ（商標）ＰＨ−１０１組成物に比べて高いインスリン吸収性を達成することがわかった。
（２）ヒト成長ホルモンのカニクイザルにおける薬物動態試験
ヒト成長ホルモン粉末（ヒト成長ホルモンを１４．３％含有、和光純薬工業株式会社）１７．５ｍｇと結晶セルロース（旭化成社製：Ａｖｉｃｅｌ（商標）ＰＨ−Ｆ２０）６２．５ｍｇを乳鉢内でよく混合することにより調製した経鼻投与用組成物を、他方、対照として、結晶セルロース（旭化成社製：Ａｖｉｃｅｌ（商標）ＰＨ−１０１）を担体として上記と同様に調製した経鼻投与用組成物を、カニクイザル（ｎ＝３）に単回経鼻投与した後の血清中ヒト成長ホルモン濃度を測定した。
【００３３】
ヒト成長ホルモン濃度の測定は、ＥＩＡ法（酵素免疫法）によった。
【００３４】
ヒト成長ホルモン濃度（初期値からの差）から求めた薬物動態学的パラメーター（平均値±標準偏差）を下記表６に示す。
【００３５】
図３に、ヒト成長ホルモン濃度（初期値からの差）の経時変化を示す。また、図３に関する生データを表７、８に示す（各薬物動態学的パラメーターは、表１のものと同義である。）。
【００３６】
【表６】
0004212019.tif 000007
【００３７】
【表７】
0004212019.tif 000008
【００３８】
【表８】
0004212019.tif 000009
【００３９】
表６より、Ａｖｉｃｅｌ（商標）ＰＨ−Ｆ２０を担体としたヒト成長ホルモンの経鼻投与用組成物は、Ａｖｉｃｅｌ（商標）ＰＨ−１０１の場合と比較し、明かに高い吸収性を示すことが判明した（図３も参照）。
（３）アルファー化デンプンを担体あるいは添加剤として使用した場合のインスリンのカニクイザルにおける薬理作用試験
水難溶性インスリン粉末（インタージェン社、２８．７ＩＵ／ｍｇ）を用い、（１）のＡｖｉｃｅｌ（商標）ＰＨ−Ｆ２０を担体とした組成物（以下、Ｆ２０）と下記組成物との比較を行った。
【００４０】
部分アルファー化デンプン（旭化成社製：ＰＣＳ（商標）を３２μｍ以下に分級したもの、以下、ｓ−ＰＣＳ）を担体として、水難溶性インスリン粉末（インタージェン社、２８．７ＩＵ／ｍｇ）３５ｍｇ（入手したままのインスリン）とｓ−ＰＣＳ  ９６５ｍｇとを乳鉢内でよく混合することにより得たインスリン組成物（以下、ｉｎ−ＰＣＳ）、該ｉｎ−ＰＣＳとＡｖｉｃｅｌ（商標）ＰＨ−Ｆ２０を担体として、水難溶性インスリン粉末（インタージェン社、２８．７ＩＵ／ｍｇ）３５ｍｇ（入手したままのインスリン）と結晶セルロース（旭化成社製：Ａｖｉｃｅｌ（商標）ＰＨ−Ｆ２０）９６５ｍｇとを乳鉢内でよく混合することにより得たインスリン組成物（以下、Ｆ２０）を１：１に混合した組成物（以下、ｉｎ−ＰＣＳ＋Ｆ２０（１：１））、Ｆ２０に１％および１０％のｓ−ＰＣＳを添加した組成物（以下、Ｆ２０＋１％ｓ−ＰＣＳ、Ｆ２０＋１０％ｓ−ＰＣＳ）を用いて、一匹当り１６ＩＵのインスリンをカニクイザル（ｎ＝３〜６）に経鼻投与した。投与後の血清インスリン濃度および血清グルコース濃度を測定した。
【００４１】
インスリンおよびグルコース濃度の測定は、それぞれ、ＥＩＡ法（酵素免疫法）およびＧｌｃｋ・Ｇ−６−ＰＤＨ法によった。
【００４２】
血清インスリン濃度から求めた薬物動態学的パラメーター（平均値±標準偏差）および血清グルコース濃度から求めた薬理学的パラメータを下記表９に示す。
【００４３】
図４および図５に、それぞれ上記の経鼻吸収用組成物の血清インスリン濃度およびグルコース濃度の減少率（％）の経時変化を示す。また、図５に関する生データを表１０〜１４に示す。
【００４４】
【表９】
0004212019.tif 000010
【００４５】
【表１０】
0004212019.tif 000011
【００４６】
【表１１】
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【００４７】
【表１２】
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【００４８】
【表１３】
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【００４９】
【表１４】
0004212019.tif 000015
【００５０】
表９より、ＡＡＣ0.4／ＡＵＣ0.4がＦ２０の０．５に対し、ｉｎ−ＰＣＳ、ｉｎ−ＰＣＳ＋Ｆ２０（１：１）、Ｆ２０＋１０％ｓ−ＰＣＳでは０．９〜１．６と有意に高く、ＰＣＳを担体あるいは添加剤として使用することで、Ｆ２０を担体とした組成物に比べて、インスリンの吸収性は劣るものの、効率良く血糖を低下させることが示唆された（図４、５も参照）。
【図面の簡単な説明】
【図１】図１はカニクイザルにおける各組成物の鼻腔内投与後の血清インスリン濃度の推移を示すグラフ。
【図２】図２はカニクイザルにおける各組成物の鼻腔内投与後の血清グルコース濃度の推移を示すグラフ。
【図３】図３はカニクイザルにおける組成物の鼻腔内投与後の血清ヒト成長ホルモン濃度（初期値との差）の推移を示すグラフ。
【図４】図４はカニクイザルにおける各組成物の鼻腔内投与後の血清インスリン濃度の推移を示すグラフ。
【図５】図５はカニクイザルにおける各組成物の鼻腔内投与後の血清グルコース濃度の減少率（％）の推移を示すグラフ。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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