(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
化学式（２）で表される２−クロマノン誘導体（２）を含有することを特徴とする皮膚外用剤。
【化１】
0004285939.tif 000023
【請求項２】
化学式（２）で表される２−クロマノン誘導体（２）を含有することを特徴とする抗老化剤。
【請求項３】
化学式（２）で表される２−クロマノン誘導体（２）を含有することを特徴とする美白剤。
【請求項４】
化学式（２）で表される２−クロマノン誘導体（２）を含有することを特徴とする一重項酸素消去剤。
【請求項５】
化学式（２）で表される２−クロマノン誘導体（２）を含有することを特徴とするメラニン生成抑制剤。
【請求項６】
化学式（２）で表される２−クロマノン誘導体（２）を含有することを特徴とするチロシナーゼ生合成抑制剤。
【請求項７】
化学式（２）で表される２−クロマノン誘導体（２）を含有することを特徴とするグルタチオン産生促進剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、特定の構造を有する化合物を配合して成る、安全性及び安定性が高い一重項酸素消去剤、メラニン生成抑制剤、グルタチオン産生促進剤、および、美白効果、抗老化効果の改善効果の高い皮膚外用剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
加齢，紫外線曝露等により生体内に発生する活性酸素種は、皮膚のシワ形成、真皮構成成分の変成等、皮膚の老化に深くかかわることが示唆されている。そこで、ヒドロキシラジカル、一重項酸素、スーパーオキシド等の活性酸素種、脂質過酸化物等の消去あるいは生成抑制作用を有する成分に関する検討が行われているが、中でも一重項酸素は、最も反応性が高く、老化、炎症、皮膚黒化、蛋白質変性、サンバーンセル形成、脂質過酸化、ＤＮＡ損傷などの一因となるといわれている。
【０００３】
したがって、かかる活性酸素種を消去する物質を皮膚外用剤に配合することが、皮膚の老化を防止、改善に有効であると考えられ、植物由来のタンニン、フラボノイド、ポリフェノール化合物等をはじめとして、種々の薬用植物抽出物を活性酸素消去剤として皮膚外用剤に配合する試みがなされている。しかしながら、研究されている植物成分の多くは、活性酸素種としてスーパーオキシド、ＯＨラジカル、ハイドロパーオキシドから発生するラジカル等を対象としたスーパーオキシドディスムターゼ（ＳＯＤ）やＳＯＤ様の物質がほとんどであり、一重項酸素を対象としたものは、その種類が限定されており、さらなる新しい一重項酸素消去剤の開発が要望されていた。
【０００４】
また、上述の活性酸素消去剤以外に、皮膚の老化、特にシワ形成に対して予防もしくは改善効果が有る成分として、レチン酸及びその誘導体、アスコルビン酸誘導体、ビタミンＥ、α−アミノ酪酸誘導体等が抗老化皮膚外用剤の有効成分として提案されている。
【０００５】
また、従来から、日焼けに等による皮膚の色黒やしみ、そばかすなどの改善を目的とする美白剤の開発がなされており、メラニン生成抑制剤、チロシナーゼ抑制剤、チロシナーゼ生合成抑制剤、還元剤、およびグルタチオンなどの還元剤を細胞内で生成させる成分などが提案されている。その有効成分として、アスコルビン酸その誘導体、コウジ酸、アルブチン、ゲラニイン、没食子酸、およびコロイドイオウやグルタチオンのような含硫黄化合物、および種々の薬用植物抽出物等が使用されている。
【０００６】
しかしながら、活性酸素消去剤、抗老化剤、美白剤の有効成分として従来用いられてきた植物抽出成分の中には、皮膚の老化症状の防止、改善作用が十分ではなく、美白用もしくは抗老化用皮膚外用剤に配合する場合、多量を用いる必要のある場合があった。また、植物由来の成分に関しては、安定かつ一定の品質の物が得られない場合がある。
【０００７】
また、アスコルビン酸やその誘導体やコウジ酸は酸化されやすく不安定でり、グルタチオンやコロイドイオウは特有の異臭や沈澱が生じることが知られているように、植物由来の原料以外の有効成分を用いる場合も、製剤化に際して、解決しなければならない問題があることが多い。その他にも、連用により副作用の発生が懸念される有効成分もあった。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】
そこで、本発明においては、安全で有効な一重項酸素消去剤、メラニン生成抑制剤、チロシナーゼ生合成抑制剤、細胞内グルタチオン産生促進剤、並びにこれら配合してなる美白および抗老化に有効な皮膚外用剤を提供することを目的とする。
【０００９】
【課題を解決するための手段】
皮膚の外観を美しく見せるために用いる皮膚外用剤は日常的に連用されるものであるため、これに配合する有効成分としては、作用が穏和で連用により十分な効果を現わし、しかも連用による副作用のないものが望まれる。
【００１０】
かかる観点からは、天然物由来物質及びそれらと類似の構造を有する化合物が有効成分として好ましいものであるが、上記した作用の有効性，品質の安定性等における問題点を解決するため、われわれは、数ある候補物質に関して鋭意検討を行った。
【００１１】
その結果、次にあげる特定の構造を有した化合物が有効且つ穏和な皮膚美白作用及び抗老化作用を有し、さらに安定性も高いということを見出し、発明を完成するに至った。
【００１２】
すなわち、本発明は下記一般式（１）で表される化合物３，４−ジヒドロ−２Ｈ−１−ベンゾピラン−２−オン誘導体（以下、２−クロマノン誘導体）の１種又は２種以上を有効成分として含有する皮膚外用剤である。これらの２−クロマノン誘導体のうち、（２）、（４）、（６）、（７）の合成方法、およびラジカル消去作用に関しては、本発明者らが既に開示している（Ｂｉｏｓｃｉ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，６５（５），１１２７−１１３３（２００１））。また（３）および（５）に関しては、別の文献にて開示されている（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，６４，１５６−１６１（１９９９））。しかし、２−クロマノン誘導体の一重項酸素消去作用、メラニン生成抑制作用、チロシナーゼ抑制作用、細胞内グルタチオン生成促進作用の作用は、本発明によりはじめて見出され、皮膚外用剤に配合することにより、優れた美白効果および抗老化効果を発揮することははじめて見出された。
【００１３】
【化２】
0004285939.tif 000002
〔式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５は水素原子、同一または異なっていても良い直鎖もしくは分岐鎖を有する飽和もしくは不飽和の炭素数１〜６の炭化水素基を示し、Ｒ４は水素原子、水酸基、直鎖もしくは分岐鎖を有する飽和もしくは不飽和の炭素数１〜６の炭化水素基、直鎖もしくは分岐鎖を有する飽和もしくは不飽和の炭素数１〜６のアルコール基、アルデヒド基、またはケトン基を示す。〕
【００１４】
【発明の実施の形態】
本発明にかかる一般式（１）で表される２−クロマノン誘導体の具体例としては、次のものが挙げられる。
【００１５】
【化３】
0004285939.tif 000003
〔２−クロマノン誘導体（２）：Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｒ５＝ＣＨ３、Ｒ４＝ＯＨ〕
【００１６】
【化４】
0004285939.tif 000004
〔２−クロマノン誘導体（３）：Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｒ５＝ＣＨ３、Ｒ４＝Ｈ〕
【００１７】
【化５】
0004285939.tif 000005
〔２−クロマノン誘導体（４）：Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｒ４＝Ｒ５＝ＣＨ３〕
【００１８】
【化６】
0004285939.tif 000006
〔２−クロマノン誘導体（５）：Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｒ５＝ＣＨ３、Ｒ４＝−ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２〕
【００１９】
【化７】
0004285939.tif 000007
〔２−クロマノン誘導体（６）：Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｒ５＝ＣＨ３、Ｒ４＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ〕
【００２０】
【化８】
0004285939.tif 000008
〔２−クロマノン誘導体（７）：Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｒ５＝ＣＨ３、Ｒ４＝プロピル基〕
【００２１】
本発明にかかる一般式（１）で表される化合物の配合量としては、一般的に０．０００１重量％〜１０．０重量％であり、好ましくは、０．００１重量％〜５．０容量％、さらに好ましくは、０．００１重量％〜１．０重量％である。
【００２２】
また、本発明にかかる化合物を配合する皮膚外用剤の剤型としては、クリームや乳液などの乳化物や、化粧水やジェル状化粧料などの水性化粧料、石鹸や洗顔フォームなどの洗浄用化粧料、あるいはピールオフ型や洗い流し型のパック剤などがあげられる。
【００２３】
このような剤型中に組み合わせて使用できる原料としては、油分、保湿剤、界面活性剤、増粘剤、中和剤、防腐剤、粉体成分、色素、キレート剤、香料、紫外線吸収剤、薬効剤、細胞賦活剤、本発明以外の美白剤、殺菌剤、抗酸化剤などが挙げられ、これらを目的に応じて組み合わせて使用することができる。当然のことであるが、本発明は、併用できる原料は上記の原料に限るものではなく、発明の効果を損なわない範囲で種々の原料と併用することができる。
【００２４】
【実施例】
次に実施例に用いる一重項酸素消去剤、メラニン産生抑制剤、チロシナーゼ生合成抑制剤、グルタチオン産生促進剤としての２−クロマノン誘導体の製造例、有効性を評価するための試験、皮膚外用剤としての実施例とその有効性の確認試験を用いて、本発明を、さらに詳細に説明するが、本発明の技術範囲はこれによって何ら限定されるものではないことは言うまでもない。
【００２５】
＜製造例＞  既に開示している合成方法を用いて、以下の化９に示すように、前駆体として、対応するポリフェノール誘導体（８）と、アクリル酸誘導体（９）を混合し、溶媒中、加熱することで目的の２−クロマノン誘導体が得られる。また、（６）に関しては前駆体としてメトキシメチル誘導体（１３）を調製して（化１０）、これをパラジウム−カーボン触媒を用いた還元により脱保護して得られる（化１３）。
【００２６】
【化９】
0004285939.tif 000009
【００２７】
【化１０】
0004285939.tif 000010
【００２８】
【化１１】
0004285939.tif 000011
【００２９】
次いで、これらの化合物の有効性について行った検討項目について説明する。
【００３０】
＜一重項酸素消去作用＞
本発明にかかる２−クロマノン誘導体の一重項酸素消去作用の評価を行った。評価法は、テトラメチルパラフェニレンジアミン（ＴＭＰＤ）をスピントラップ剤としたＥＳＲスピントラップ法により測定した。まず、２．０ｍＭの濃度に調製した２−クロマノン誘導体の５０容量％エタノール水溶液０．０１ｍＬを、０．０５ｍＭのＴＭＰＤ０．１ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）０．０５ｍＬ、０．１ｍＭのヘマトポルフィリン０．１ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）０．０５ｍＬと混合し、更に、０．１ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）を加え０．２ｍＬの混合液とし、２−クロマノン誘導体の試料中の濃度を０．１ｍＭに調製した。この混合液をＥＳＲ用扁平水溶液セルに移し、これに長波長紫外線（ＵＶＡ）を１分間照射して一重項酸素を発生させ、ＥＳＲスペクトルを測定した。ＥＳＲスペクトル強度から、一重項酸素消去率を求めた。また、構造が類似しており、抗酸化剤として知られているα−トコフェロールの一重項酸素消去率と併せて、結果を表１に示した。
【００３１】
【表１】
0004285939.tif 000012
【００３２】
表１から明らかなように、２−クロマノン誘導体の一重項酸素消去能が認められ、また、その効果は抗酸化剤として汎用されている類似の構造を有するα−トコフェロールよりもはるかに優れていることが明らかとなった。この結果は、構造の類似性からは用意には想到できない結果である。
【００３３】
＜Ｂ１６メラノーマ細胞を用いたメラニン産生抑制能の評価＞
Ｂ１６マウスメラノーマ細胞（Ｆ０株）を３５ｍｍディッシュに１ディッシュあたり２０００個にて播種した。２４時間培養後、試験用試料（２−クロマノン誘導体（３）および（４））を任意の濃度となるように添加した５重量％ウシ胎児血清（ＦＣＳ）添加ダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）に交換した。７日間静置培養後、０．２５％トリプシンにて細胞を収獲し、１．５ｍＬマイクロチューブに移して遠心操作して細胞沈殿物を得た。最後に沈殿物の色を表２に示す判定基準を基に、肉眼判定により５段階評価を実施した。なお、培地に対して５０ｍＭの濃度で乳酸ナトリウムを加えたものをポジティブコントロールとし、何も加えなかったものをコントロールとした。
【００３４】
【表２】
0004285939.tif 000013
【００３５】
【表３】
0004285939.tif 000014
【００３６】
表３より明らかなように、２−クロマノン誘導体（３）および（４）の両方とも、培地に対する添加濃度が１００μＭの時に、Ｂ１６マウスメラノーマ細胞におけるメラニンの産生を抑制することがわかった。
【００３７】
＜チロシナーゼ生合成抑制効果＞
試験サンプルとして、２−クロマノン誘導体（５）と、ポジティブコントロールとしてα−トコフェロールを用いて試験を行った。正常ヒトメラノサイトを９６穴マイクロプレートに、各ウェル当たり５．０×１０４個づつ播種し、５％ウシ胎仔血清（ＦＣＳ）を含むＤＭＥＭ培地を用いて３７℃で２４時間培養する。その後、各試料を１００μＭを添加したＤＭＥＭ培地で２４時間培養したのち、ＰＢＳで２回洗浄し、０．１％トライトン−Ｘを含んだ０．０５ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ６．８）５０μＬで３０分間処理して細胞を溶解させる。各ウェルに０．１％Ｌ−３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン（ＤＯＰＡ）を含む０．１ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ６．８）を１００μＬ加えて３７℃で３時間反応させ，生成したメラニン量を単位タンパク量当たりで比較することで，チロシナーゼ生合成量を求めた。試験サンプル無添加の場合のチロシナーゼ量を１００とした相対知を算出し、チロシナーゼ生合成抑制効果の指標とした。その結果を表４に示す。
【００３８】
【表４】
0004285939.tif 000015
【００３９】
表４から明らかなように、ポジティブコントロールであるα−トコフェロールと同様に２−クロマノン誘導体（５）は、コントロールに対して危険率５％で有意にチロシナーゼの量が少ないことがわかり、チロシナーゼの生合成を抑制することがわかった。
【００４０】
＜細胞内グルタチオン産生促進効果＞
正常ヒトメラノサイトをコラーゲンコートした９６穴マイクロプレートに、各ウェル当たり３．０×１０４個づつ播種し、２％ＦＣＳ、線維芽細胞増殖因子（以下ＦＧＦ）（３ｎｇ／ｍＬ）、インシュリン（５μｇ／ｍＬ）、ハイドロコルチゾン（０．１８μｇ／ｍＬ）を加えたＭＧＭ培地で３７℃で２４時間、５％ＣＯ２雰囲気下で培養した。その後、それぞれのサンプルをＤＭＳＯに溶解させたのち培地に最終濃度１００μＭとなるように添加して４８時間培養した。培養後、フェニルメチルスルフォニルフロリド（（ＰＭＳＦ）０．１ｍＭ）を含むリン酸緩衝化生理食塩水（以下ＰＢＳ）（ｐＨ７．５）で洗浄後、ＰＭＳＦ（０．１ｍＭ）を含むＰＢＳ１００ｍＬを加えて５秒間超音波破砕処理を行った。処理液を他のプレートに移し、２ｍＭのＮＡＤＰＨを含む５％炭酸水素ナトリウム水溶液２５μＬとエチレンジアミン四酢酸（０．５ｍＭ）、ＢＳＡ（１ｍｇ／ｍＬ）とグルタチオンリダクターゼ（１２．５／ｍＬ）を含む０．１Ｍリン酸緩衝液２５μＬを添加した０．５ｍＭのエチレンジアミン四酢酸を含むリン酸緩衝液１２５μＬを加え、３７℃で１０分間放置後、０．５ｍＭのエチレンジアミン四酢酸と１０ｍＭの５，５’−ジチオビス（２−ニトロ安息香酸）を含む０．１Ｍリン酸緩衝液２５μＬをそれぞれのウェルに加えて、４５０ｎｍの吸光度からグルタチオン濃度を測定した。グルタチオン量はタンパク質分析キットＢＣＡ−２００で測定したタンパク量と比較することで求めた。コントロール（サンプル無添加）のグルタチオン量を１００とし、それぞれのサンプル添加時のグルタチオン量の相対量を求め、細胞内グルタチオン産生促進効果の指標とした。その結果を表５に示した。
【００４１】
【表５】
0004285939.tif 000016
【００４２】
表５より、明らかなように全ての試料において、グルタチオンの量がコントロールよりも増加する傾向にあり、特に２−クロマノン誘導体（２）、２−クロマノン誘導体（４）、２−クロマノン誘導体（５）の場合は、コントロールに対して５％の危険率で有意にグルタチオン量が増加していた。すなわち、これらのサンプルには、細胞内グルタチオン産生促進効果があることが明らかとなった。
【００４３】
次に、２−クロマノン誘導体を有効成分として含有する皮膚外用剤に関する実施例を示す。
【００４４】
0004285939.tif 000017
製造方法：（１）から（８）までを８０℃まで加熱し均一に溶解もしくは分散し、油相とする。また、（９）、（１０）および（１２）を８０℃まで加熱し、水相とする。水相に油相を撹拌しながら加え、予備乳化を行った後、（１１）を加えてホモミキサーを用いて均一に乳化する。乳化終了後、冷却を行い４５℃で（１３）を加え、実施例１〜実施例６とし、（１３）を精製水に置き換えたものを比較例１とした（表６）。
【００４５】
【表６】
0004285939.tif 000018
【００４６】
＜紫外線によるシワ形成予防効果＞
ヘアレスマウス５匹を一群とし、各群について実施例１〜実施例６および比較例１をそれぞれ１日１回背部に塗布し、１Ｊ／ｃｍ２／Ｗｅｅｋの長波長紫外線（ＵＶＡ）を５０週間照射し、表７に示した判定基準にしたがって点数化して評価を行った。この際精製水のみを塗布した群を対照とした。結果は各群の平均値を算出し、ＵＶＡ照射日数との関係を表８に示した。
【００４７】
【表７】
0004285939.tif 000019
【００４８】
【表８】
0004285939.tif 000020
【００４９】
表８より明らかなように、対照群においては、ＵＶＡ照射日数が４０週をこえるころには皮膚に形成されたシワの深さは中程度にまで達し、５０週後には深いシワの形成が認められた。これに対し、本発明にかかる実施例塗布群は、５０週後に微細あるいは軽微なシワの形成をみとめた程度あった。以上の結果より実施例塗布群に於いては、シワの形成は顕著に抑制されたことがわかった。
【００５０】
＜美白効果＞
上記実施例１〜実施例６および比較例１を用いて、使用試験を行った。パネラーは、皮膚のシミ、ソバカス、日焼け等の色素沈着を主な症状とする２０名を一群として選んだ。各群にそれぞれ実施例と比較例をブラインドにて顔面及び手の甲に連続３ヶ月間使用させた。使用試験開始前および使用試験終了後の肌の状態を写真撮影し、色素沈着状態の変化を専門の判定員に「改善」、「やや改善」、「変化なし」の３段階で判定させた。その結果を表９に示した。
【００５１】
【表９】
0004285939.tif 000021
【００５２】
表９から明らかなように、２−クロマノン誘導体を配合した実施例を使用したパネラーでは、一人を除いた全員に色素沈着の改善傾向が認められた。これに対し、比較例１を使用したパネラーでは、「改善」と認められるほどの色素沈着の状態が変化したパネラーはおらず、「やや改善」も一人しかいなかった。以上の結果より、本発明にかかる２−クロマノン誘導体を配合した皮膚外用剤に非常に優れた美白効果があることが明らかとなった。
【００５３】
続いて、本発明の他の実施例について示す。
【００５４】
［実施例７］  化粧水
（１）エタノール                                    １０．００（重量％）
（２）ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（６０Ｅ．Ｏ．）  ０．３０
（３）２−クロマノン誘導体（２）                      ０．２０
（４）パラオキシ安息香酸メチル                        ０．０２
（５）濃グリセリン                                    ３．００
（６）１、３−ブチレングリコール                      １．００
（７）精製水                              全量を１００とする量
製法：（１）に（２）、（３）、（４）を順次添加し、均一に溶解しアルコール相とする。これを、あらかじめ（７）に（５）及び（６）を添加して均一にした水相に撹拌しながら均一に混合する。
【００５５】
［実施例８］  クリーム
（１）スクワラン                                    １０．００（重量％）
（２）ステアリン酸                                    ２．００
（３）水素添加パーム核油                              ０．５０
（４）水素添加大豆リン脂質                            ０．１０
（５）セタノール                                      ３．６０
（６）親油型モノステアリン酸グリセリン                ２．００
（７）グリセリン                                    １０．００
（８）パラオキシ安息香酸メチル                        ０．１０
（９）１重量％カルボキシビニルポリマー水溶液        １５．００
（１０）１０重量％Ｌ−アルギニン水溶液                １．００
（１１）２−クロマノン誘導体（３）                    ０．５０
（１２）精製水                            全量を１００とする量
製法：（１）〜（６）の油相成分を加熱溶解し、８０℃とする。一方（７）〜（９）及び（１２）を加熱溶解し、８０℃とする。これに前記油相を攪拌しながら加えたあと、（１０）を加えて、ホモジナイザーにより均一に乳化する。３０℃まで冷却した後、（１１）を添加し混合、均一化する。
【００５６】
0004285939.tif 000022
製法：（１）〜（５）の油相成分を加熱溶解し、８０℃とする。一方（６）〜（８）および（１０）を８０℃まで加熱し溶解させる。水相を前記油相に攪拌しながら加えたあと、（９）を加え、ホモジナイザーにより均一に乳化した後、冷却し、４５℃で（１１）を加える。
【００５７】
［実施例１０］  ゲル状化粧料
（１）ジプロピレングリコール                        １０．００（重量％）
（２）パラオキシ安息香酸メチル                        ０．１０
（３）１重量％カルボキシビニルポリマー水溶液        ５０．００
（４）２−クロマノン誘導体（６）                      ０．１０
（５）１０重量％水酸化カリウム水溶液                  １．００
（６）精製水                              全量を１００とする量
製法：（１）に（２）を加熱溶解した後、（３）、（４）、（６）を溶解して添加し、次いで（５）を加えて増粘させる。
【００５８】
［実施例１１］  ピールオフ型パック
（１）ポリビニルアルコール                          １０．００（重量％）
（２）エタノール                                      ２．００
（３）精製水                                        ５０．００
（４）ポリエチレングリコール１５００                  １．５０
（５）１，３−ブチレングリコール                      ５．００
（６）パラオキシ安息香酸メチル                        ０．１０
（７）２−クロマノン誘導体（５）                      ０．３０
（８）ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（５０Ｅ．Ｏ．）  ０．２０
（９）エタノール                                      ８．００
（１０）精製水                            全量を１００とする量
製法：（１）に（２）を加え湿らせておいたものに、常温の（３）を加え、ゆっくりと撹拌しながら８０℃まで加熱する。（１）が均一に溶解したことを確認後、５０℃まで冷却し、（４）、（５）を加え撹拌する。（４）の溶解を確認後、３０℃まで冷却し、あらかじめ（９）に（６）〜（８）を溶解したアルコール相と（１０）を順次添加して、均一に撹拌する。
【００５９】
［実施例１２］  洗顔料
（１）ミリスチン酸                                  ２４．００（重量％）
（２）ステアリン酸                                  １２．００
（３）親油型モノステアリン酸グリセリン                ３．００
（４）濃グリセリン                                  １５．００
（５）精製水                                        ３０．００
（６）水酸化カリウム                                  ７．８０
（７）２−クロマノン誘導体（４）                      ０．２５
（８）精製水                              全量を１００とする量
製法:（１）、（２）、（３）、（４）を順次量りこみ、８０℃まで加熱する。これに、（６）を溶解させた（５）を８０℃まで加熱したものをゆっくりと撹拌しながら加える。均質になるまで撹拌後、４５℃まで冷却し、（７）および（８）を加えて均質になるまで撹拌する。
【００６０】
［安定性試験］
これらの実施例１〜実施例１２に関して、５０℃にて１ヶ月静置した場合における製剤の安定性を評価したが、これらの実施例の皮膚外用剤に於いては製剤の変色、変臭などが見られず、安定性には大きな問題はなかった。
【００６１】
【発明の効果】
以上、詳細に述べたように、本発明により、一般式（１）で表される２−クロマノン誘導体を有効成分として配合することを特徴とする皮膚外用剤が提供でき、製剤として優れた美白効果および抗老化効果を発揮することがわかった。