(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
全血を遠心分離して得た血清をそのまま凍結もしくは凍結乾燥し、これをそのまま融解しあるいは水を加えて復元して、乾式分析素子を用いた乾式法による血液成分の分析における管理血清として用い、該血液成分がＢＵＮ、ＵＡ、ＴＣＨＯ、ＣＲＥ、ＡＬＢ、ＨＤＬ-Ｃ、Ｍｇ、ＧＰＴ、ＬＤＨ、ＡＬＰまたはＣＫＭＢであることを特徴とする分析方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、乾式分析素子を使用する臨床検査分野において有用な管理血清に関する。
【０００２】
【従来の技術】
血液、尿等を検体として分析し、人の病気を診断する方法は古くから行なわれているが、この分析方法は大きく２つに分けられる。即ち、設計した分析に必要な試薬類と検体を水中に添加して水溶液とし、この液中で反応を起こさせる湿式法と、試薬類を予め乾燥状態で保持した層（例えばゼラチン層）に検体を供給して層中で反応を起こさせる乾式法である。
【０００３】
これらのいずれの方法を実施する場合にも、検量線の作成や精度管理のために管理血清が使用される。通常、管理血清はヒトや牛の脱フィブリンした血清を原料として、一度これらを透析にかけて脱フィブリン処理に用いたＣａイオンを除去するが、その際低分子量成分も同時に失われる。その後、必要成分（純物質、酵素）を添加して濃度調整している。更に、界面活性剤、防腐剤（抗生物質等）、活性化剤（ＣＫにおけるＮＡＣ等）を加える場合もある。
【０００４】
従来、上記２つの分析方法のいずれにおいても、一度透析にかけた後の血清を基礎とする管理血清が使用されている。これらの管理血清は概略以下の工程で製造される。抗凝固剤入りの採血管を使用して血漿のみを成分採血し、複数の血漿を混合してプール血漿とする。このプール血漿にＣａ２＋を添加して脱フィブリン処理をすると、Ｃａ２＋の多いプール血清が得られる。次に、過剰なＣａ２＋を除くために透析処理をして、これを管理血清の原料用のプール血清とする。
【０００５】
しかし、このような管理血清を使用すると、同一検体の測定結果が湿式法と乾式法で乖離する項目があり、問題となっていた。ＵＡに関する実例を図１に示す。図１において▲は医師会精度管理試料を用いた場合の、○はヒト生血清を用いた場合の結果であり、精度管理試料を用いた場合には、乾式法は湿式法より高い値を示している。図示してはいないが、ＢＵＮ、ＣＲＥについても同様であった。
【０００６】
このような問題を解決する一つの方法が特開２０００−１３１３２３に開示されている。この方法では、市販の管理血清等に重炭酸塩、６−アミノカプロン等の緩衝剤を添加して、ヒト新鮮血清と同様な反応性を確保している。しかし、この方法では、市販の管理血清が変わると処方を変えなければならない可能性がある、余分な処理を必要とする、臨床検査に必要な全項目に対する有効性が確認されているとは言い難い等の問題点がある。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、臨床検査に必要な多くの検査項目において、湿式法と乾式法で同じ定量結果が得られる管理血清を提供することを課題とする。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
本発明の課題は、プール血清（採血した複数の全血を遠心分離して得た血清を混合した血清）を凍結若しくは凍結乾燥した管理血清によって解決された。
【０００９】
【発明の実施の形態】
本発明に係る管理血清は、プール血清を、凍結又は凍結乾燥して得られる。凍結条件は−２０℃以下、好ましくは−４０℃以下である。凍結乾燥における乾燥条件は処理すべき凍結血清の量に依るが、短時間で処理できる方が好ましい。
【００１０】
先ず、本発明の実施形態ではないが、血清を透析した影響について説明する。本発明者等は、透析の影響を実証するため、プール血清を透析し、次いで失われた低分子成分を添加して濃度を調整した透析血清を調整した。透析等の詳細な条件は後に参考例として記す。管理血清としてこの透析血清を使用した場合の、乾式法と湿式法の測定値の同一性は表１に示す通りであり、多くの項目について測定値が異なっている。即ち、透析によりいわゆるマトリックス効果（化学的には測定原理、試薬組成、試料の変性、添加物等による、測定に干渉して何らかの影響をもたらす効果）が生じていることが判る。
【００１１】
上記の結果は、乾式法と湿式法で同一の定量結果を得るためには、透析をしない血清を管理血清として使用することが重要であることを示唆しており、本発明はこの知見に基づいて成された。
【００１２】
本発明に係る、プール血清を凍結又は凍結乾燥処理した管理血清を使用すると、後に実施例に示す通り、通常乾式法で分析が可能なほぼ全項目において、乾式法と湿式法で同一の結果が得られる。
【００１３】
本発明において好ましく使用できるプール血清は、概略以下の工程で製造される。先ず抗凝固剤を使用しない採血管を用いて採血する。これを、遠心分離により血清と血餅に分離する。このようにして得た複数種の血清を混合する。この様なプール血清は、当業者の間でトゥルー血清と呼ばれている。以下、実施例により本発明に係る管理血清の性能を実証する。
【００１４】
【実施例】
参考例
１．透析した血清の調製
複数の正常人より血清分離材入り採血管に採血し、遠心分離して得た血清を混合してプール血清を作製した。このプール血清を、透析用カセット（Ｓｌｉｄｅ−Ａ−Ｌｙｚｅｒ；米 Ｐｉｅｒｃｅ社、分画分子量１０，０００）に３ｍＬ注入し、０．０１Ｍ燐酸緩衝生理的食塩水（ｐＨ７．４）５００ｍＬを透析液として、４℃の冷蔵庫中で１１４時間攪拌しながら透析した。なお、透析開始１８時間後に透析液を交換した。透析後カセットよりプール血清を取り出し、透析によって水分が増加したので、濃縮用カセット（ＶＩＶＡＰＯＲＥ；米 ＶＩＶＡＳＣＩＥＮＣＥ社）を用いて濃縮処理を行い、体積を約３ｍＬとした。この血清は、透析により低分子成分が失われていたので、ブドウ糖、尿素、尿酸、クレアチニン、塩化マグネシウム、及び塩化カルシウムを添加して、元のプール血清中の濃度とほぼ同等となるように調整した。なお、未使用のプール血清は冷蔵庫に保管した。
【００１５】
２．試料の測定
上記１で調製した透析血清と、ヒト生血清２０検体を以下の機器を用いて測定した。
▲１▼  乾式法
富士ドライケムオートスライド（以下、「ＦＤＣ」と記す）及び富士ドライケム専用測定機ＡＵＴＯ５（いずれも商標、富士写真フイルム製）。
▲２▼  湿式法
日立７１７０型生化学自動分析装置（商標、日立製作所製）および専用試薬。Ｋについては，日立７１０型電解質測定装置（商標、同）。
【００１６】
３．評価法
湿式法で測定した値をＸに、乾式法で測定した値をＹにとって、相関分析を行い反応性を検討した。相関図において、正常ヒト血清群と乖離した試料については、乾式法と湿式法で反応性が異なると評価した。
【００１７】
４．測定結果のまとめ
結果を表１に示す。また、ＵＡとＡＬＰに関する測定値の乖離を図２に示す。表１から、多くの項目において、乾式法と湿式法で測定結果に乖離を生じていることが判る。また、乖離を生じない例として、ＧＬＵとＧＧＴの測定値を図３に示す。なお、項目の略号は当業者に周知であり、詳細は記載しない。
【００１８】
実施例１
参考例において調製したプール血清を−８０℃の冷凍庫に保管して凍結した。使用の際には室温で融解した。以下、参考例の２と同様にして測定を行い、参考例の３と同様に評価した。結果を表１に示す。これから、測定した全項目において、乾式法と湿式法で同じ測定結果が得られることが判る。参考例において測定結果が乖離していたＵＡとＡＬＰで一致している例を図４に示す。
【００１９】
実施例２
参考例において調製したプール血清３ｍＬをナス型フラスコ（容量５０ｍＬ）にとり、液体窒素で急速に凍結させた後、真空ポンプで約２０時間減圧乾燥した。乾燥後の血清は、使用に際し精製水３ｍＬを添加して溶解した。以下、実施例１と同様にして、測定及び評価を行った。結果を表１に示す。これから、測定した全項目において、乾式法と湿式法で同じ測定結果が得られることが判る。参考例において測定結果が乖離していたＵＡとＡＬＰで一致している例を図４に示す。
【００２０】
【表１】
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【００２１】
【発明の効果】
本発明に係る管理血清を使用すると、乾式分析素子を用いた測定において、湿式法と同じ測定値を得ることができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】  図１は、医師会精度管理試料を用いた場合の、乾式法と湿式法による測定値の乖離を示す。測定項目はＵＡである。
【図２】  図２は、透析血清を用いたときの、ＵＡとＡＬＰの測定値の乖離を示す。
【図３】  図３は、透析血清を用いたときの、ＧＬＵとＧＧＴの測定値の一致性を示す。
【図４】  図４は、凍結血清及び凍結乾燥血清を用いたときの、ＵＡとＡＬＰの測定値の一致性を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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