(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
脂溶性成分を含有する微生物菌体から、その菌体内に含有される脂溶性成分を抽出する方法において、該微生物菌体の乾燥物を二軸のエクストルーダーで破砕・成形処理した後、有機溶剤を用いて該微生物菌体内の脂溶性成分を抽出することを特徴とする微生物菌体内脂溶性成分の抽出方法。
【請求項２】
該微生物菌体の乾燥物の水分含有量が２０重量％以下である請求項１記載の方法。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は、微生物菌体内に含まれる脂溶性成分の抽出方法に関し、詳しくは極めて効率良く、しかも安全に微生物菌体中の脂溶性成分を抽出、回収することができる方法に関する。
背景技術
糸状菌，酵母，藻類等の微生物は、脂質生産能を有するため、このような脂質生産能を有する微生物菌体から、脂質を抽出する方法が行なわれている。
一般に脂質は、微生物菌体内に蓄積するため、菌体から直接、或いは細胞壁を機械的又は酵素的に破壊し、抽出する方法が知られている。
このような技術として、例えば、油脂生産能を有する微生物菌体をエタノールに懸濁し、破砕後、ろ過，遠心分離によってエタノールを分離した後、これらに抽出溶剤を加えて、懸濁し、破砕抽出する方法が提案されている（特開昭６１−１７０３９７号公報，同６１−２２７７９０号公報，同６２−４４１７０号公報，同６２−１７９５９８号公報など）。
これらの方法のうち、特に特開昭６１−１７０３９７号公報記載の発明は、多段抽出方法に関するものであるが、各工程において、アルコール溶媒及び炭化水素溶媒という種類の異なる溶媒を使用しなければならず、その上、各工程において、菌体と有機溶剤との分離操作をその都度行なう必要があるため、操作が煩雑であるという欠点があった。
また、いずれの方法においても、充分な量の油脂を回収するためには、相当の時間が必要であり、効率良く抽出を行なうことができなかった。
しかも、菌体の破砕を有機溶剤中で行なうため、火災などの恐れがあり、安全性に欠けるものであった。さらに、このような安全面での欠点を克服するために、防火設備を設置するとなると、過大な設備費用が必要となり、経済性の面でも不充分なものであった。
これらの問題を解決した方法として、菌体を水に分散させた状態で機械的に破砕し、その乾燥物をカラムに充填させ、溶剤で油脂を抽出する方法が提案されている（特開平５−１７７９６号公報）。
この方法によれば、抽出率が高く、しかも安全に微生物菌体中の脂溶性成分を抽出、回収することができるものの、破砕された微粉が抽出カラムを詰まらせるため、抽出に長時間を要してしまうという問題があった。
発明の開示
本発明者らは、このような従来の問題点を解決すべく鋭意研究を進めた結果、脂溶性成分を含有する微生物菌体の乾燥物をエクストルーダー、特に二軸のエクストルーダーで破砕・成形処理した後、溶剤抽出することにより、極めて効率良く、短時間で微生物菌体中の脂溶性成分を抽出、回収することができることを見い出し、この知見に基づいて本発明を完成するに到った。
すなわち本発明は、脂溶性成分を含有する微生物菌体から、その菌体内に含有される脂溶性成分を抽出する方法において、該微生物菌体の乾燥物をエクストルーダー、特に二軸のエクストルーダーで破砕・成形処理した後、有機溶剤を用いて該微生物菌体内の脂溶性成分を抽出することを特徴とする微生物菌体内脂溶性成分の抽出方法を提供するものである。
【図面の簡単な説明】
【図１】第１図は、実施例で用いたカラムを示す説明図である。
【符号の説明】
ａ  菌体
ｂ  脱脂綿
ｃ  コック弁
発明を実施するための最良の形態
本発明の方法で抽出する脂溶性成分とは、水に溶けにくく、有機溶剤に溶けやすい、生体に存在する物質であり、例えば、（１）中性脂質（トリグリセリドなど）、ろう、グリセリド、脂溶性色素、ステロールやビタミンのエステルなどの単純脂質、（２）リン脂質や糖脂質などの複合脂質、（３）上記２つに属するものの前駆物質や代謝産物と考えられる脂肪酸、高級アルコール、ステロール、又は炭化水素と考えられるカロテノイドやスクアレンなど、及び脂溶性ビタミン等からなる誘導脂質が挙げられる。
本発明の方法で用いる脂溶性成分を含有する微生物菌体とは、脂溶性成分生産能を有する微生物を、常法により培養して得られるものである。
ここで脂溶性成分生産能を有する微生物としては、糸状菌や藻類、酵母、細菌など、種々のものが挙げられる。
例えば、γ−リノレン酸含有油脂生産能を有する微生物としては、モルティエレラ（Mortierella）属に属する微生物、ムコール（Mucor）属に属する微生物、リゾプス（Rhizopus）属に属する微生物などが挙げられる。
また、ジホモγ−リノレン酸含有油脂及びアラキドン酸含有油脂の生産能を有する微生物としては、例えばモルティエレラ（Mortierella）属に属する微生物、コニディオボラス（Conidiobolus）属に属する微生物などが挙げられる。
また、リノール酸含有油脂生産能を有する微生物としては、ヤロイヤ（Yarrowia）属に属する微生物などが挙げられる。
また、ドコサヘキサエン酸含有油脂生産能を有する微生物としては、クリプセコディニウム（Crypthecodinium）属、スキゾキトリウム（Schizochytrium）属に属する微生物などが挙げられる。
より具体的には、モルティエレラ（Mortierella）属に属する微生物としては、例えば、モルティエレラ・イサベリナ（Mortierella isabellina）ＩＦＯ ７８２４、モルティエレラ・ラマニアナ（Mortierella ramaniana var.angrispora）ＩＦＯ  ８１８７、モルティエレラ・エロンガタ（Mortierella elongata）ＩＦＯ  ８５７０、モルティエレラ・エキシグア（Mortierella exigua）ＩＦＯ  ８５７１、モルティエレラ・ヒグロフィラ（Mortierella hygrophila）ＩＦＯ  ５９４１およびモルティエレラ・アルピナ（Mortierella alpina）ＩＦＯ  ８５６８、ＩＦＯ  ３２２８１、ＡＴＣＣ８９７９、ＡＴＣＣ１６２６６、ＡＴＣＣ３２２２１、ＡＴＣＣ３２２２２、ＡＴＣＣ３２２２３、ＡＴＣＣ３６９６５、ＡＴＣＣ４２４３０、ＣＢＳ２５０．５３、ＣＢＳ３４３．６６、ＣＢＳ５２７．７２、ＣＢＳ５２９．７２、ＣＢＳ６０８．７０、ＣＢＳ７５４．６８などが挙げられる。
また、ムコール（Mucor）属に属する微生物としては、例えば、ムコール・シルシネロイデス（Mucor circinelloides）ＨＵＴ １１２１（微工研菌寄ＦＥＲＭ  ＢＰ−３８８３）や、ムコール・ジャバニクス（Mucor javanicus）ＨＵＴ １１６２（微工研菌寄ＦＥＲＭ  ＢＰ−３８８４）などが挙げられる。
リゾプス（Rhizopus）属に属する微生物としては、例えば、リゾプス・オリゼー（Rhizopus oryzae）ＩＦＯ ５４１８などが挙げられる。
次に、コニディオボラス（Conidiobolus）属に属する微生物としては、例えばコニディオボラス・ヘテロスポラス（Conidiobolus heterosporus）ＡＴＣＣ １２９４１、コニディオボラス・ナノデス（Conidiobolus nanodes）ＣＢＳ １８３／６２、コニディオボラス・ランプラウジェス（Conidiobolus lamprauges）ＡＴＣＣ  １２５８５などが挙げられる。
さらに、ヤロイア（Yarrowia）属に属する微生物としては、例えばヤロイア・リポリティカ（Yarrowia lipolytica）ＩＦＯ  ０７４６などが、クリプセコディニウム属に属する微生物としては、例えばクリプセコディニウム コーニー（Crypthecodinium cohnii）では、ＡＴＣＣ３００２１、同３０３３４、同３０３３６、同３０５４３、同３０５５６、同３０５７１、同３０５７２、同３０７７５、同５００５１、同５００５２、同５００５３、同５００５５、同５００５６、同５００５８、同５００６０など、トラウストキトリウム アウレウム（Thraustochytrium aureum）では、ＡＴＣＣ２８２１、同３４３０４などが挙げられる。
これらの微生物は、いずれも脂溶性成分を生産する能力を有し、菌体内に著量の脂溶性成分（例えば、トリグリセリドなど）を蓄積することが知られている。
このような微生物の培養は、常法により行なえばよい。すなわち、上記微生物を培養するための培地は、該微生物がよく成育して、目的とする脂溶性成分を生産しうるものであればよく、例えば、炭素源としてグルコース，澱粉を用い、窒素源として硫安，尿素の他、脱脂大豆粉，脱脂米糖などの有機窒素源を用いたものが挙げられる。その他、必要に応じて、リン酸塩、マグネシウム塩，マンガン塩，カルシウム塩などの金属塩を添加した培地で、ｐＨ，温度を制御しながら培養すればよい。
このようにして脂溶性成分を含有する微生物菌体が得られる。脂溶性成分は通常、微生物菌体中に蓄積されるので、微生物の培養終了後、培養液から濾過や遠心分離によって菌体を回収する。
次に、回収した菌体を乾燥して、脂溶性成分含有微生物菌体の乾燥物を得る。回収した菌体の乾燥は、ドラムドライヤーやスプレードライヤー、パドルドライヤー等で行なえばよい。
ここで乾燥は、菌体の含水率が２０重量％以下、好ましくは１５重量％以下になるように行なえばよく、菌体の含水率が０重量％となるまで、すなわち完全に乾燥するまで行なう必要は必ずしもない。ここで、菌体の含水率が２０重量％を超えると、抽出率が低下してしまう。
本発明の方法においては、このようにして得られた脂溶性成分含有微生物菌体の乾燥物を、エクストルーダー、特に二軸のエクストルーダー（二軸の押出成形機）を用いて破砕・成形処理する。即ち、脂溶性成分含有微生物菌体の乾燥物をエクストルーダー、特に二軸のエクストルーダーを用いて破砕すると共にペレット化する。
エクストルーダー、特に二軸のエクストルーダーで処理することにより、微生物菌体の機械的破砕（破壊）とペレット状成形とを同時に実施することができ、工程を短縮することができる。またエクストルーダー、特に二軸のエクストルーダー（二軸の押出成形機）を用いて破砕・成形処理することにより、後述するカラムを用いた抽出及び抽出溶剤と抽出後の菌体破砕物（菌体破砕物）の濾過分離において、詰まりを防止し、抽出時間を短縮することができる。
ここで脂溶性成分の含有量が高い微生物菌体の乾燥物を処理する場合には、ペレットの成形性を上げるために、該微生物菌体の乾燥物に脱脂胚芽等のバインダーを添加してもよい。
エクストルーダーの運転条件（処理条件）は、処理する菌に応じて適宜選択すべきであり、一概に規定することはできない。一般的に言うと、処理温度は２０〜１２０℃、圧力は１〜１００kg/cm2、処理時間は１〜１２０秒程度で、好ましくは５０〜１２０℃、圧力は５〜１００kg/cm2、処理時間は５〜１２０秒程度である。
ペレットの形状としては、球状、凝球状、円柱状などが挙げられるが、特に制限はない。成形は、球状の場合には、直径が１〜１０mmの範囲になるまで行うことが好ましく、特に溶剤の浸透性を考慮すると、得られるペレットの直径が１〜２mmの範囲になるまで行うことが望ましい。また、球状以外の場合には、得られるペレットの長径が１．０〜１００mmの範囲に、短径が０．５〜５mmの範囲になるまで行うことが好ましく、特に溶剤の浸透性を考慮すると、得られるペレットの長径が２〜５０mmの範囲に、短径が１〜４mmの範囲になるまで成形することが望ましい。
以上のようにして破砕・成形処理して、ペレット成形された微生物菌体が得られる。
本発明では、このようにして得られるペレット成形された微生物菌体から、有機溶剤を用いて該微生物菌体内の脂溶性成分を抽出（抽出乃至回収）する。
脂溶性成分の抽出は、有機溶剤を用いて行なう。ここで、抽出溶剤の例としては、ｎ−ヘキサン，エタノール，アセトン，メチルエチルケトン，シクロヘキサン，ジエチルエーテル，酢酸エチル等が挙げられる。これらのうち、抽出率，食品への応用の観点より、特にｎ−ヘキサンが好ましい。
有機溶剤を用いての抽出方法には、特に制限はないが、特に充填塔（カラム）を用いて抽出を行なうことが好ましい。
充填カラムを用いて、微生物菌体内の脂溶性成分を抽出，回収する場合の一例を示すと、次の通りである。
まず、ペレット成形された微生物菌体（ペレット状成形物）を円筒状の充填カラムに詰め、上部より抽出溶剤を流下させる。続いて、充填カラム底部より流出する溶剤を回収し、再度、充填カラム上部より再び流下させる。この操作を繰り返すことにより、脂溶性成分の抽出を進める。このように溶剤を還流させ、再利用することにより、溶剤使用量の低減を図ることが可能である。
なお、充填カラムの底部には、微生物菌体（ペレット状成形物）の洩出を防止するため、適当なサイズの金網を張ったり、或いは珪藻土等の濾過助剤を充填しておくことが好ましい。
抽出時の有機溶剤の使用量は、微生物菌体（ペレット成形物）１ｋｇ当たり、２〜１２リットルの割合とすることが好ましい。特に、抽出率や経済性を考慮すると、微生物菌体（ペレット成形物）１ｋｇ当たり、３〜５リットルの割合とすることがより好ましい。
充分に脂溶性成分を抽出した後、充填カラム底部から流出した溶剤の留去を行なうことにより、目的とする微生物菌体内脂溶性成分を得る（回収する）ことができる。
溶剤の留去は、減圧濃縮等の常法により行なうことができる。
得られた微生物菌体内脂溶性成分は、必要により、さらに常法によって精製することもできる。
本発明は、以上のようにして実施することができる。但し、必要に応じて、微生物の培養終了後、培養液から濾過や遠心分離によって回収された微生物菌体を乾燥処理する前に、破砕を行なってもよい。
微生物菌体の破砕は、微生物菌体が水に分散した状態で行なうとよい。すなわち、微生物菌体を再度水に分散、懸濁させながら、或いは、水に分散、懸濁させた状態で行なう。乳化、微粉末懸濁液の均質化に用いられている高圧ホモゲナイザー型の機器等を使用することにより、菌体の分散、懸濁及び破砕の一連の処理を連続的に行なうことができる。
次に、本発明を、菌体中の油脂抽出を目的とした実施例により詳しく説明するが、本発明の範囲はこれによって何ら制限されるものではない。
参考例（菌体中の全油脂量の測定）
以下の実施例，比較例において、全油脂の抽出率を算出する基準となる菌体中の全油脂量は、次の方法により測定した。
ムコール・シルシネロイデス（Mucor circinelloides）ＨＵＴ １１２１（微工研菌寄  ＦＥＲＭ  ＢＰ−３８８３）の菌体を、第１表に示す条件下、発酵槽で培養し、得られたγ−リノレン酸含有菌体を、濾過によって回収した。
この回収した菌体を１２％の濃度になるように、再度、水に分散させ、この一部をダブルドラムドライヤーで脱水して、含水率４重量％の乾燥菌体を得た。
この乾燥菌体１０ｇに、直径０．６mmのガラスビーズ１００mlとｎ−ヘキサン１００mlとを加え、ホモゲナイザー（日本精機（株）製，エクセルオートホモゲナイザー  ＤＸ−３）により、回転数１０，０００rpmにて３分間ホモゲナイズした後、濾過によってガラスビーズと菌体断片を除去した。その後、再度、菌体にｎ−ヘキサン１００mlを加え、前記と同様のホモゲナイズを２回繰り返した。得られた濾液を集め、減圧濃縮することにより、黄色油脂３．６ｇを得た。この結果、菌体には３６％の割合で油脂が含まれていることが分かった。
実施例１
ムコール・シルシネロイデス（Mucor circinelloides）ＨＵＴ １１２１（微工研菌寄  ＦＥＲＭ  ＢＰ−３８８３）の菌体を、第１表に示す条件下、発酵槽で培養し、得られたγ−リノレン酸含有菌体を、濾過によって回収した。
この回収した菌体を１２％の濃度になるように、再度、水に分散させ、この一部をダブルドラムドライヤーで脱水して、含水率４重量％の乾燥菌体を得た。
この乾燥菌体の一部を、二軸のエクストルーダー（（株）神戸製鋼所製、ＴＣＯ−７５Ｌ）で破砕・成形処理した。成形は、ペレットの大きさが、長径２〜５０mm、短径１〜４mm程度になるまで行なった。
このペレット化された菌体１０ｇを、第１図のような内径２０mmのガラス製カラムに充填した。カラム上部より、ｎ−ヘキサン１００mlを加え、３０分保持後、底部の栓を開き、流出してきたｎ−ヘキサン・油脂混合物（ミセラ）を回収した。その後、再度、カラムにｎ−ヘキサン１００mlを加え、前記と同様にミセラを回収した。このミセラを濾過した後、減圧濃縮によってｎ−ヘキサンを留去した結果、３．３ｇの油脂を得た。
このとき、２００mlの溶剤がカラムから流出する合計時間（溶剤流下時間）を調べた。この溶剤流下時間、並びに油脂の抽出率を第２表に示す。
比較例１
実施例１において、二軸のエクストルーダーによる破砕・成形処理を行なわなかった他は、実施例１と同様にして行なった。結果を第２表に示す。
実施例１と比較例１の結果の対比から、次のようなことが分かる。
まず、実施例１では、溶剤流下時間が僅か６分で、しかも９４％という高い抽出率を得ている。一方、実施例１と同様の条件で、二軸のエクストルーダーによる破砕・成形処理のみを行なわなかった比較例１では、溶剤がカラムを流下するのに１６分も要しているにもかかわらず、抽出率は僅か４２％に過ぎない。
この結果から、菌体を二軸のエクストルーダーにより破砕・成形処理することによって、溶剤の菌体への浸透性が向上し、かつ、抽出効率も著しく向上することが証明された。
実施例２
ムコール・シルシネロイデス（Mucor circinelloides）ＨＵＴ １１２１（微工研菌寄  ＦＥＲＭ  ＢＰ−３８８３）の菌体を、第１表に示す条件下、発酵槽で培養し、得られたγ−リノレン酸含有菌体を、濾過によって回収した。
この回収した菌体を１２％の濃度になるように、再度、水に分散させ、菌体懸濁液を作成した。
得られた菌体懸濁液を、高圧ホモゲナイザー（イズミフードマシナリ社製、ＨＶ−ＯＨ−０．７−３．７Ｓ）を用いて、圧力７００kg/cm2，流量６０リット／ｈｒの条件下で破砕した。この破砕された菌体を、ダブルドラムドライヤーで脱水し、含水率４重量％の乾燥菌体を得た。
この乾燥菌体を、実施例１と同様にして破砕・成形処理し、油脂の抽出を行ない、３．４ｇの油脂を得た。結果を第２表に示す。
比較例２
実施例２において、二軸のエクストルーダーによる破砕・成形処理を行なわなかった他は、実施例２と同様にして行なった。結果を第２表に示す。
実施例２と比較例２の結果の対比から、次のようなことが分かる。
まず、実施例２と同様の条件で、破砕・成形処理のみを行なわなかった比較例２では、抽出率は９０％とまずまずであったが、溶剤がカラムを流下するのに３８分もかかっている。このことは、ホモゲナイズにより微細に破砕された菌体がカラムに詰まってしまったことを示している。
一方、ホモゲナイズ後に、破砕・成形処理を行なった実施例２では、溶剤の流下時間が僅か７分で、しかも９６％という高い抽出率を得ている。すなわち、実施例２においてペレット化された菌体は、比較例２の菌体のようにカラムに詰まることはなく、溶剤がカラム中を効率よく流下したことが分かる。
この結果から、ホモゲナイズ後に、二軸のエクストルーダーにより破砕・成形処理することによって、溶剤の菌体への浸透性が向上し、かつ、抽出効率も著しく向上することが証明された。
実施例３
実施例１において、ムコール・シルシネロイデス（Mucor circinelloides）ＨＵＴ １１２１（微工研菌寄  ＦＥＲＭ  ＢＰ−３８８３）の代わりに、モルティエレラ・ラマニアナ（Mortierella ramaniana var.angrispora）ＩＦＯ ８１８７を使用し、かつ第１表に示す条件で培養した他は、実施例１と同様して行なった。結果を第２表に示す。
第２表によれば、実施例３では、溶剤流下時間が８分で、しかも９４％という高い抽出率を得ており、実施例１とほぼ同等の数値を示している。
このことから、菌体としてモルティエレラ・ラマニアナ（Mortierella ramaniana var.angrispora）ＩＦＯ ８１８７を用いた場合にも、効率良く菌体内に含まれる油脂を抽出することができることが分かった。
比較例３
実施例３において、二軸のエクストルーダーによる破砕・成形処理を行なわなかった他は、実施例３と同様にして行なった。結果を第２表に示す。
比較例３の結果を実施例３と比較すると、次のようなことが分かる。
実施例３と同様の条件で、破砕・成形処理のみを行わなかった比較例３では、溶剤がカラムを流下するのに２１分もかかっているにもかかわらず、抽出率は僅か３７％に過ぎない。
この結果から、菌体としてモルティエレラ・ラマニアナ（Mortierella ramaniana var.angrispora）ＩＦＯ ８１８７を用いた場合にも、菌体を二軸のエクストルーダーにより破砕・成形処理することによって、溶剤の菌体への浸透性が向上し、かつ、抽出効率も著しく向上することが証明された。
実施例４
実施例１において、ムコール・シルシネロイデス（Mucor circinelloides）ＨＵＴ １１２１（微工研菌寄  ＦＥＲＭ  ＢＰ−３８８３）の代わりに、コニディオボラス・ナノデス（Conidiobolus nanodes）ＣＢＳ １８３／６２を使用し、かつ第１表に示す条件で培養した他は、実施例１と同様して行なった。結果を第２表に示す。
第２表によれば、実施例４では、溶剤の流下時間が７分で、しかも９２％という高い抽出率を得ており、実施例１に近い数値を示している。
このことから、菌体としてコニディオボラス・ナノデス（Conidiobolus nanodes）ＣＢＳ １８３／６２を用いた場合でも、実施例１と同様に効率良く菌体内に含まれる脂溶性成分を抽出することができることが分かった。
比較例４
実施例４において、二軸のエクストルーダーによる破砕・成形処理を行なわなかった他は、実施例４と同様にして行なった。結果を第２表に示す。
比較例４の結果を実施例４と比較すると、次のようなことが分かる。
実施例４と同様の条件で、破砕・成形処理のみを行わなかった比較例４では、溶剤がカラムを流下するのに１９分もかかっているにもかかわらず、抽出率は僅か３９％に過ぎない。
この結果から、菌体としてコニディオボラス・ナノデス（Conidiobolus nanodes）ＣＢＳ １８３／６２を用いた場合でも、菌体を二軸のエクストルーダーにより破砕・成形処理することにより、溶剤の菌体への浸透性が向上し、かつ、抽出効率も著しく向上することが証明された。
実施例５
実施例１において、ムコール・シルシネロイデス（Mucor circinelloides）ＨＵＴ １１２１（微工研菌寄  ＦＥＲＭ  ＢＰ−３８８３）の代わりに、ヤロイア・リポリティカ（Yarrowia lipolytica）ＩＦＯ ０７４６を使用し、かつ第１表に示す条件で培養した他は、実施例１と同様して行なった。結果を第２表に示す。
第２表によれば、実施例５では、溶剤の流下時間が８分で、９２％という高い抽出率を得ており、実施例１に近い数値を示している。
このことから、菌体としてヤロイア・リポリティカ（Yarrowia lipolytica）ＩＦＯ ０７４６を用いた場合でも、実施例１と同様に効率良く菌体内に含まれる脂溶性成分を抽出することができることが分かった。
比較例５
実施例５において、二軸のエクストルーダーによる破砕・成形処理を行なわなかった他は、実施例５と同様にして行なった。結果を第２表に示す。
比較例５の結果を実施例５と比較すると、次のようなことが分かる。
実施例５と同様の条件で、破砕・成形処理のみを行なわなかった比較例５では、溶剤がカラムを流下するのに２６分もかかっているにもかかわらず、抽出率は僅か２８％に過ぎない。
この結果から、菌体としてヤロイア・リポリティカ（Yarrowia lipolytica）ＩＦＯ ０７４６を用いた場合でも、菌体を二軸のエクストルーダーにより破砕・成形処理することにより、溶剤の菌体への浸透性が向上し、かつ、抽出効率も著しく向上することが証明された。
0004294099.tif 000002
0004294099.tif 000003
実施例６
実施例１で得られたムコール・シルシネロイデス（Mucor circinelloides）ＨＵＴ １１２１（微工研菌寄  ＦＥＲＭ  ＢＰ−３８８３）の含水率４重量％の乾燥菌体に、水を加えて水分含有量が、それぞれ１０重量％、１５重量％、２０重量％、２５重量％、３０重量％の各菌体を作成した。
それぞれの菌体について、実施例１と同様の条件下で破砕・成形処理と油脂の抽出とを行なった。得られた各菌体の油脂抽出率を第３表に示す。
0004294099.tif 000004
第３表の実施例６の結果より、以下のことが分かる。
菌体の水分含有率が、それぞれ４重量％、１０重量％、１５重量％、２０重量％の場合は、溶剤流下時間が、それぞれ６分、６分、６分、７分であり、抽出率が、それぞれ９４％、９５％、９２％、８７％であることから、菌体内の油脂を効率よく抽出できていることが分かる。
一方、菌体の水分含有率が２５重量％、３０重量％の場合には、溶剤流下時間はいずれの場合も６分と短いものの、抽出率はそれぞれ６５％、６１％と低いものであった。
これらのことから、菌体内の油脂を効率よく抽出するためには、菌体の水分含有率を２０重量％以下とする必要があることが分かる。
産業上の利用分野
本発明の方法によれば、乾燥菌体を微細に粉砕するのではなく、二軸のエクストルーダーでペレット状に成形するため、カラムを用いた抽出及び抽出溶剤と抽出後の菌体破砕物（菌体破砕物）の濾過分離において、目詰まりを防止し、しかも抽出時間の短縮を図ることができる。
本発明の方法によれば、エクストルーダー、特に二軸のエクストルーダーで処理することにより、微生物菌体の機械的破砕（破壊）とペレット状成形とを同時に実施することができ、簡略なプロセスとなっている。
さらに、本発明の方法によれば、少量の使用溶剤で、かつ、安全な操作により、微生物菌体中の脂溶性成分を効率良く抽出、回収することができる。
【図１】
0004294099.tif 000005