(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の一般式（ＩＩ）：
【化１】
0004354016.tif 000052
（式中、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3はそれぞれ独立に、水素原子であるか、あるいは低級アルキルオキシ基またはアシル基で置換されていてもよいＣ1〜Ｃ6のアルキル基を示し、そしてＸ＝ＸはＣＨ＝ＣＨまたはＮ＝Ｎを示し、ここで低級アルキルオキシ基はメトキシ基、エトキシ基、ｎ−プロポキシ基、イソプロポキシ基、ｎ−ブトキシ基、イソブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、ｔｅｒｔ−ブトキシ基から選択され、アシル基はアセチル基、プロピオニル基、ブチリル基、ペンタノイル基、ヘキサノイル基から選択される）
で表される化合物またはその薬理学的に許容しうる塩。
【請求項２】
請求項１記載の化合物（ただし、6-プロピル-5,6-ジヒドロ-7(9)H-テトラゾロ[5,1-i]プリン-5-オンを除く）またはその薬理学的に許容しうる塩を含む医薬組成物。
【請求項３】
気管支拡張剤である請求項２記載の医薬組成物。
【請求項４】
骨疾患治療剤である請求項２記載の医薬組成物。
【請求項５】
以下の一般式（Ｉ）：
【化２】
0004354016.tif 000053
（式中、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3はそれぞれ独立に、水素原子であるか、あるいは低級アルキルオキシ基またはアシル基で置換されていてもよいＣ1〜Ｃ6のアルキル基を示し、そしてｎは２、３または４を示し、ここで低級アルキルオキシ基はメトキシ基、エトキシ基、ｎ−プロポキシ基、イソプロポキシ基、ｎ−ブトキシ基、イソブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、ｔｅｒｔ−ブトキシ基から選択され、アシル基はアセチル基、プロピオニル基、ブチリル基、ペンタノイル基、ヘキサノイル基から選択される）
で表される化合物（ただし、4-プロピル-4,5,7,8-テトラヒドロ-1(3)H-イミダゾ[1,2-i]プリン-5-オンを除く）またはその薬理学的に許容しうる塩を含む、気管支拡張剤または骨疾患治療剤として用いる医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、新規なプリン誘導体またはその薬理学的に許容しうる塩、およびこれを有効成分として含む医薬組成物に関する。
【０００２】
【従来の技術】
ホスホジエステラーゼ（以下においてＰＤＥと記載することもある）はリン酸ジエステルを加水分解してリン酸モノエステルとする酵素の総称であり、タイプI  ＰＤＥ（カルシウム−カルモジュリン依存性サイクリックＡＭＰ  ＰＤＥ）、タイプIII  ＰＤＥ（サイクリックＧＭＰ抑制性サイクリックＡＭＰ  ＰＤＥ）およびタイプIV  ＰＤＥ（サイクリックＡＭＰ特異的ＰＤＥ）などに大別される。このうち、タイプIV  ＰＤＥはサイクリックＡＭＰに特異的に作用するＰＤＥであり、従ってタイプIV  ＰＤＥの抑制は細胞内サイクリックＡＭＰを増加し、この結果として血管および気管平滑筋を弛緩することが知られている（Shahid et al., Br. J. Pharmacol., 104:471-477, 1991; Lugmier et al., Eur. J. Med. Chem., 29:723-734, 1994）。
【０００３】
現在ＰＤＥ  IV阻害剤として知られているものには、キサンチン誘導体（Nicholson, C.D. et al., Br. J. Pharmacol., 97:889-897, 1989; Miyamoto et al., Eur. J. Pharmacol., 267:317-322, 1994; Miyamoto et al., Biochem. Pharmacol., 48:1219-1223, 1994; Miyamoto et al., Biol. Pharm. Bull., 18:431-434, 1995; Sanae et al., Jpn. J. Pharmacol., 69:75-82, 1995）、ロリプラムを初めとするフェニルピロリドン誘導体（Wachtel, H., Psychopharmacology, 77:309, 1982; Reeves, M.L. et al., Biochem. J., 241:535-541, 1987）およびピリドピリミジンジオン誘導体（Lowe, III. J.A. et al., J. Med. Chem., 34:624, 1991; Suzuki F. et al., J. Med. Chem., 35:4866, 1994; Matsuura, A. et al., Biol. Phar. Bull., 17:498, 1994）などが挙げられる。
【０００４】
【発明が解決すべき課題】
本発明者らはアルキルキサンチン誘導体の構造−活性相関研究の中で、Ｎ−１位アルキル基をエチル基からプロピル基に延長することでＰＤＥ  IV阻害作用および気管弛緩作用が共に顕著に増大することを見いだした（Sakai et al., J. Med. Chem., 35:4039-4044, 1992; Miyamoto et al., Biol. Pharm. Bull., 18:431-434, 1995）。このことは、１位アルキル基と２位または６位のオキソ基との相互作用が活性発現に何らかの関与をしていることを示唆する。本発明の目的は新規なプリン誘導体を合成し、選択的にＰＤＥ  IVを阻害する化合物を見いだし、さらにこれら化合物を有効成分として含む医薬組成物を提供することにある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明は、以下の一般式（Ｉ）：
【化３】
0004354016.tif 000002
（式中、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3はそれぞれ独立に、水素原子であるか、あるいは低級アルキルオキシ基またはアシル基で置換されていてもよいＣ1〜Ｃ6のアルキル基を示し、そしてｎは２、３または４を示す）
で表される化合物またはその薬理学的に許容しうる塩を提供する。
【０００６】
本発明はまた、以下の一般式（ＩＩ）：
【化４】
0004354016.tif 000003
（式中、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3はそれぞれ独立に、水素原子であるか、あるいは低級アルキルオキシ基またはアシル基で置換されていてもよいＣ1〜Ｃ6のアルキル基を示し、そしてＸ＝ＸはＣＨ＝ＣＨまたはＮ＝Ｎを示す）
で表される化合物またはその薬理学的に許容しうる塩を提供する。
【０００７】
本発明の一般式（Ｉ）または（ＩＩ）において、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3で示されるＣ1〜Ｃ6のアルキル基に置換していてもよい低級アルキルオキシ基としては、例えば、メトキシ基、エトキシ基、ｎ−プロポキシ基、イソプロポキシ基、ｎ−ブトキシ基、イソブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、ｔｅｒｔ−ブトキシ基等が挙げられ、アシル基としては、例えば、アセチル基、プロピオニル基、ブチリル基、ペンタノイル基、ヘキサノイル基等が挙げられる。また、Ｃ1〜Ｃ6のアルキル基としては、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、ｎ−ヘキシル基等が挙げられる。
【０００８】
本発明の縮合プリン誘導体（Ｉ）または（ＩＩ）は、例えば、ナトリウム、カリウムなどのアルカリ金属や、カルシウム、マグネシウムなどのアルカリ土類金属のような無機金属；リジン、アルギニンなどの塩基性アミノ酸；またはアンモニウムなどの有機アミンなどとの薬理学的に許容される無毒性の塩の形で使用することができる。
【０００９】
さらに、本発明の縮合プリン誘導体（Ｉ）または（ＩＩ）は、薬理学的に許容される無毒性の酸付加塩の形で使用することができる。そのような酸付加塩としては、例えば塩酸塩、硫酸塩、臭化水素酸塩、リン酸塩などの無機酸塩；ギ酸塩、酢酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、フマール酸塩、リンゴ酸塩、マンデル酸塩、グルタミン酸塩、アスパラギン酸塩、メタンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、などの有機酸塩を挙げることができるが、これらに限定されない。
【００１０】
【発明を実施するための最良の形態】
本発明の縮合プリン誘導体（Ｉ）または（ＩＩ）は、以下に示す一般合成法（Ａ）〜（Ｅ）のいずれかを用いて合成することができる。
【００１１】
【化５】
0004354016.tif 000004
【化６】
0004354016.tif 000005
なお、上記合成法のいくつかにおいて出発原料となる3-アルキル-4-(1,2,4-トリアゾール-4-イル)プリン-2-オンは、 以下の方法によって合成することができ、参考例１〜４に具体的に示す（J. Org. Chem., 60:7066, 1995）。
【００１２】
【化７】
0004354016.tif 000006
また、その他の出発原料の製造方法は参考例５〜１０に示す。
【００１３】
本発明の一般式（Ｉ）または（ＩＩ）で表される新規縮合プリン誘導体の好ましい具体例を以下に列挙するが、本発明の範囲はこれに限定されない。
【００１４】
化合物１：6-プロピル-5,6-ジヒドロ-7(9)H-テトラゾロ[5,1-i]プリン-5-オン
化合物２：6,9-ジプロピル-5,6-ジヒドロ-9H-テトラゾロ[5,1-i]プリン-5-オン
化合物３：6,7-ジプロピル-5,6-ジヒドロ-7H-テトラゾロ[5,1-i]プリン-5-オン
化合物４：4-プロピル-4,5-ジヒドロ-1(3)H-イミダゾ[1,2-i]プリン-5-オン
化合物５：1,4-ジプロピル-4,5-ジヒドロ-1H-イミダゾ[1,2-i]プリン-5-オン
化合物６：3,6-ジプロピル-4,5-ジヒドロ-3H-イミダゾロ[1,2-i]プリン-5-オン
化合物７：4-プロピル-4,5,7,8-テトラヒドロ-1(3)H-イミダゾ[1,2-i]プリン-5-オン
化合物８：1,4-ジプロピル-4,5,7,8-テトラヒドロ-1H-イミダゾ[1,2-i]プリン-5-オン
化合物９：3,4-ジプロピル-4,5,7,8-テトラヒドロ-3H-イミダゾ[1,2-i]プリン-5-オン
化合物１０：4-プロピル-4,7,8,9-テトラヒドロ-1(3)H-ピリミド[1,2-i]プリン-5-オン
化合物１１：1,4-ジプロピル-4,7,8,9-テトラヒドロ-1H-ピリミド[1,2-i]プリン-5-オン
化合物１２：3,4-ジプロピル-4,7,8,9-テトラヒドロ-3H-ピリミド[1,2-i]プリン-5-オン
化合物１３：4-プロピル-4,5,7,8,9,10-ヘキサヒドロ-1(3)H-1,3-ジアゼピノ[1,2-i]プリン-5-オン
化合物１４：1,4-ジプロピル-4,5,7,8,9,10-ヘキサヒドロ-1H-1,3-ジアゼピノ[1,2-i]プリン-5-オン
化合物１５：3,4-ジプロピル-4,5,7,8,9,10-ヘキサヒドロ-3H-1,3-ジアゼピノ[1,2-i]プリン-5-オン。
【００１５】
本発明の新規縮合プリン誘導体を用いて、モルモット大脳および心臓から分離したタイプＩ  ＰＤＥ（カルシウム−カルモジュリン依存性サイクリックＡＭＰＰＤＥ）、タイプIII  ＰＤＥ（サイクリックＧＭＰ抑制性サイクリックＡＭＰ  ＰＤＥ）およびタイプIV  ＰＤＥ（サイクリックＡＭＰ特異的ＰＤＥ）活性に対する阻害作用を試験した。
【００１６】
また、モルモットを用いて摘出気管弛緩作用、摘出右心房興奮作用、摘出左心房でのアデノシン拮抗作用を試験した。
【００１７】
なお、これらの試験では、タイプIV  ＰＤＥ阻害剤であることが示されているＸＴ−０４４（対照１）（Miyamoto et al., Biochem. Pharmacol., 48:1219-1223, 1994）、Ｒｏ２０−１７２４（対照２）（Reeves, M.L. et al., Biochem. J., 241:535-541, 1987）、ならびにタイプIII  ＰＤＥ阻害剤であることが知られているアムリノン（Amrinone）（対照３）を対照化合物として用いた。対照化合物の構造を以下に示す。
【００１８】
【化８】
0004354016.tif 000007
その結果、本発明の化合物はいずれもタイプIII  ＰＤＥに対してはほとんど阻害作用を示さず、タイプI  ＰＤＥに対しても化合物５および６が弱い阻害作用を示したのみである。一方、化合物４、６、８、９、１２はタイプIV  ＰＤＥ阻害剤である対照化合物１および２に匹敵する阻害活性を示し、これらがタイプIV  ＰＤＥ活性に特異的な阻害剤であることが明らかとなった。
【００１９】
気管弛緩作用では、本発明の化合物４、５、６、８、９、１２、１３、１４、１５が対照化合物１と同等かやや弱い作用を示した。また、化合物５、６を除く全ての本発明化合物は右心房興奮作用を示さなかった。さらに、全ての化合物はキサンチン誘導体で見られるアデノシン拮抗作用を示すことはなかった。すなわち、本発明の化合物は選択的気管弛緩作用を示すことより、副作用の少ない気管支拡張剤、気管支喘息治療薬として応用可能であることが判明した。
【００２０】
さらに、本発明者らはＰＤＥ  IV阻害活性を有するキサンチン誘導体が骨形成作用および骨密度低下抑制作用を有しており、骨粗鬆症治療剤として有用であることを見いだした（特願平７−３５４８５０号）。そこで、本発明のプリン誘導体についても骨形成関連細胞を用いて、骨形成促進作用ならびに破骨細胞形成抑制作用を試験した。
【００２１】
その結果、本発明の化合物９は、濃度に依存して有意に石灰化促進作用を示した。これに対して、ＰＤＥ  III阻害剤のアムリンにはこのような作用はなく、このことは化合物９に強い骨形成細胞（骨芽細胞）の分化、増殖促進作用のあることを示す。また、化合物９は、濃度に依存して有意にＴＲＡＰ染色陽性細胞（破骨細胞）数を減少させた。これに対して、ＰＤＥ  III阻害剤のアムリンにはこのような作用はなく、このことは化合物９には、破骨細胞の分化、増殖を抑制する作用のあることを示す。従って、本発明の化合物は骨形成を促進し、骨吸収を抑制する作用を有しており、骨粗鬆症やリュウマチによる骨疾患治療剤として有用である。
【００２２】
本発明の新規プリン誘導体またはその薬理学的に許容しうる塩は医薬組成物として種々の形態で投与される。これらには散剤、細粒剤、顆粒剤、錠剤、被覆錠剤、カプセル剤、シロップ剤などの経口製剤、軟膏、貼付剤等の外用剤、および注射製剤を含む。製剤化は通常の製剤担体を用いて常法により製造することができる。
【００２３】
経口製剤を製造するには、本発明の化合物と賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味矯臭剤等を加えた後、常法により散剤、細粒剤、顆粒剤、錠剤、被覆錠剤、カプセル剤、シロップ剤等とする。
【００２４】
賦形剤としては、例えば、乳糖、コーンスターチ、白糖、ブドウ糖、マンニトール、ソルビット、結晶セルロース、二酸化ケイ素等が、結合剤としては、例えば、ポリビニルアルコール、ポリビニルエーテル、メチルセルロース、エチルセルロース、アラビアゴム、タラガント、ゼラチン、シュラック、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリプロピレングリコール・ポリオキシエチレン・ブロックポリマー、メグルミン等が、崩壊剤としては、例えば、澱粉、寒天、ゼラチン末、結晶セルロース、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、クエン酸カルシウム、デキストリン、ペクチン、カルボキシメチルセルロースカルシウム等が、滑沢剤としては、例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレングリコール、シリカ、硬化植物油等が、着色剤としては、例えば医薬品に添加しうるものが、矯味矯臭剤としては、例えば、ココア末、ハッカ脳、芳香散、ハッカ油、竜脳、桂皮末等が用いられる。これらの製剤には糖衣、その他必要に応じて適宜コーティングすることもできる。
【００２５】
また、注射剤を製剤するには、本発明の化合物にｐＨ調整剤、溶解剤、等張化剤等と、必要に応じて溶解補助剤、安定化剤等を加えて、常法により製剤化することができる。
【００２６】
外用剤を製造する方法は特に限定されず、常法により製造することができ、基剤原料としては、各種医薬品、医薬部外品、化粧品等に通常使用される原料を使用できる。基剤原料としては、例えば、動植物油、鉱物油、エステル油、ワックス類、高級アルコール、脂肪酸類、シリコン油、界面活性剤、リン脂質、アルコール、水溶性高分子、粘土鉱物、精製水等を挙げることができる。さらに必要に応じてｐＨ調整剤、抗酸化剤、キレート剤、防腐防禁剤、着色料、香料等を添加することができる。
【００２７】
本発明の化合物の投与量は症状、年齢、体重、投与方法などにより変更でき、適正な投与量は医師により決定されるが、通常は成人に対して経口投与で１０〜１０００ｍｇ／日程度、非経口投与で１〜５０ｍｇ／日程度である。
【００２８】
【実施例】
本発明を以下の参考例および実施例によってさらに詳しく説明するが、本発明の範囲はこれに限定されない。
【００２９】
参考例１：4(5)-プロピルアミノ-1H-イミダゾール-5(4)カルボニトリル
１）4(5)-アミノー1H-イミダゾール-5(4)カルボニトリル 20g、 プロピオンアルデヒド 20g、 ＥｔＯＨ 100mlの溶液を、 外油６０〜７０℃の油浴上で、２時間撹拌する。反応後、ＥｔＯＨを減圧濃縮し、析出沈殿を吸引濾取、ベンゼンで洗浄する。
【００３０】
２）ＥｔＯＨ 300ml中に、氷冷撹拌下、ＮａＢＨ4 4.5gを徐々に加え、同温度で１）で得たイミンの固形物を徐々に加える。さらに４時間還流し、反応後、水を加え、析出固形物を除き、濾液を減圧濃縮し、残留物は乾燥後、ＡｃＯＥｔ：ＣＨ3ＣＮ（１：１）の溶液に溶解し、シリカゲルカラムで分離し、ＣＨ2Ｃｌ2で再結晶することにより、標題化合物4(5)-プロピルアミノ-1H-イミダゾール-5(4)カルボニトリルを１８．５ｇ（６７％）得る。
【００３１】
0004354016.tif 000008
Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）：1.00 (3H, t, J=8), 1.60 (2H, sep, J=8)、 3.27 (2H, t, J=8), 7.23 (1H, s)
ＩＲ（ＫＢｒ−ＴＡＢ：ｃｍ-1）：3348, 2200, 1626
【００３２】
参考例２：4(5)-3N-ベンゾイル-1N-プロピルウレイド-1H-イミダゾール-5(4)カルボニトリル
参考例１で得た4(5)-プロピルアミノ-1H-イミダゾール-5(4)カルボニトリル 0.5g(0.0033mol)をＡｃＯＥｔ 10mlに溶解し、 室温で撹拌下、ＰｈＣＯＮＣＯ 0.5g(0.0034mol)を加え、２０時間撹拌する。反応後、析出沈殿を吸引濾取、イソプロピルエーテルで洗浄後、ＭｅＯＨで再結晶することにより標題化合物4(5)-3N-ベンゾイル-1N-プロピルウレイド-1H-イミダゾール-5(4)カルボニトリルを０．８２ｇ（８３％）得る。
【００３３】
0004354016.tif 000009
Ｈ−ＮＭＲ（6ｄ−ＤＭＳＯ）：0.89 (3H, t, J=7.3), 1.56 (2H, sep, J=7.3), 3.75 (2H, t, J=7.3), 7.40 〜 7.90 (5H, m), 8.30 (1H, s)
ＩＲ（ＫＢｒ−ＴＡＢ：ｃｍ-1）：3072, 2220, 1732
【００３４】
参考例３：6-アミノ-3-プロピルプリン-2-オン
参考例２で得た4(5)-3N-ベンゾイル-1N-プロピルウレイド-1H-イミダゾール-5(4)カルボニトリル 5.90g(0.02mol)をＥｔＯＨ 60ml、 濃アンモニア水 60mlの溶液中に溶解し、 室温で２日間撹拌する。反応後、減圧下に溶媒を留去し、残留物をＭｅＯＨで再結晶することにより標題化合物6-アミノ-3-プロピルプリン-2-オンを３．４０ｇ（８９％）得る。
【００３５】
0004354016.tif 000010
Ｈ−ＮＭＲ（6ｄ−ＤＭＳＯ）：0.86 (3H, t, J=7.3), 1.65 (2H, sep, J=7.3), 3.90 (2H, t, J=7.3), 7.85 (1H, s), 7.50 (1H, br.s)
ＩＲ（ＫＢｒ−ＴＡＢ：ｃｍ-1）：3328, 3128, 1662, 1606, 1498
【００３６】
参考例４：3-プロピル-4-(1,2,4-トリアゾール-4-イル)プリン-2-オン
参考例３で得た6-アミノ-3-プロピルプリン-2-オン 1.20g(0.0053mol)をピリジン 20mlに懸濁し、 ジホルミルヒドラジン 1.4g(0.016mol)、 トリメチルシリルクロリド 8.6g(0.08mol)、 トリエチルアミン 3.7g(0.037mol)を順次加え、 １００〜１１０℃で２０時間撹拌する。反応後、減圧下に溶媒を留去し、残留物に水 30ml、 ＣＨＣｌ3 20mlを加え、 不溶物を吸引濾取する。得られる粗生成物をＭｅＯＨ−Ｈ2Ｏから再結晶することにより標題化合物3-プロピル-4-(1,2,4-トリアゾール-4-イル)プリン-2-オン（無色プリズム晶）を０．６ｇ（４６％）得る。
【００３７】
0004354016.tif 000011
Ｈ−ＮＭＲ（6ｄ−ＤＭＳＯ）：0.93 (3H, t, J=7.3), 1.72 (2H, sext, J=7.3), 4.05 (2H, t, J=7.3), 8.30 (1H, s), 9.44 (2H, s)
ＩＲ（ＫＢｒ−ＴＡＢ：ｃｍ-1）：3500, 1666
【００３８】
参考例５：6-(2-ヒドロキシエチル)アミノ-3-プロピルプリン-2-オン
参考例４で得た3-プロピル-4-(1,2,4-トリアゾール-4-イル)プリン-2-オン 3.0g(0.012mol)をＣＨ3ＣＮ 20mlに溶解し、 ２−アミノエタノール 15mlを加え、２４時間還流する。反応後、溶媒を留去し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製（ＣＨＣｌ3：ＭｅＯＨ（３：１）の展開溶媒）する。得られる粗生成物をＭｅＯＨから再結晶することにより標題化合物6-(2-ヒドロキシエチル)アミノ-3-プロピルプリン-2-オン（無色針状晶）を１．６０ｇ（５５％）得る。
【００３９】
0004354016.tif 000012
Ｈ−ＮＭＲ（6ｄ−ＤＭＳＯ）：0.85 (3H, t, J=7.0), 1.59 (2H, sext, J=7.0), 3.18 〜 3.96 (6H, m), 5.05 (1H, br.s), 7.55 (1H, br.s), 7.89 (1H, s), 12.20 (1H, br.s)
ＩＲ（ＫＢｒ−ＴＡＢ：ｃｍ-1）：3304, 1644
【００４０】
参考例６：6-(3-ヒドロキシプロピル)アミノ-3-プロピルプリン-2-オン
参考例４で得た3-プロピル-4-(1,2,4-トリアゾール-4-イル)プリン-2-オン 3.0g(0.012mol)をＣＨ3ＣＮ 20mlに懸濁し、 ３−アミノプロパノール 15mlを加え、一夜還流する。反応後、減圧留去し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製（ＣＨＣｌ3：ＭｅＯＨ（３：１）の展開溶媒）する。得られる粗生成物をＭｅＯＨから再結晶することにより標題化合物6-(3-ヒドロキシプロピル)アミノ-3-プロピルプリン-2-オン（吸湿性結晶）を１．８４ｇ（６０％）得る。
【００４１】
0004354016.tif 000013
Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）：0.96 (3H, t, J=7.3), 1.64 〜 2.00 (4H, m), 3.56〜 4.11 (6H, m), 7.89 (1H, s)
ＩＲ（ＫＢｒ−ＴＡＢ：ｃｍ-1）：3304, 1646, 1618, 1592
【００４２】
参考例７：6-(4-ヒドロキシブチル)アミノ-3-プロピルプリン-2-オン
参考例４で得た3-プロピル-4-(1,2,4-トリアゾール-4-イル)プリン-2-オン 4.0g(0.016mol)をＣＨ3ＣＮ 25mlに溶解し、 ２−アミノブタノール 15mlを加え、２４時間還流する。反応後、溶媒を留去し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製（ＣＨＣｌ3：ＭｅＯＨ（３：１）の展開溶媒）する。得られる粗生成物をＭｅＯＨから再結晶することにより標題化合物6-(4-ヒドロキシブチル)アミノ-3-プロピルプリン-2-オン（無色針状晶）を３．６ｇ（８３％）得る。
【００４３】
0004354016.tif 000014
Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：0.96 (3H, t, J=7.4), 1.64 〜 1.89 (6H, m), 3.49〜 3.67 (4H, m), 4.02 (2H, t, J=7.4), 7.89 (1H, s)
ＩＲ（ＫＢｒ−ＴＡＢ：ｃｍ-1）：3320, 1646, 1616
【００４４】
参考例８：6-クロロ-3,7-ジプロピルプリン-2-オン
3,7-ジプロピルキサンチン 13.6gをＰＯＣｌ3 60ml中に加え、２時間還流する。反応後、ＰＯＣｌ3を減圧下に留去し、残留物を氷水に注ぎ、ＮａＨＣＯ3でアルカリとし、ＣＨ2Ｃｌ2可溶部を抽出、水洗、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥した後、溶媒を留去する。残留物を（ＣＨ2Ｃｌ2＋ＩＰＥ）で再結晶することにより標題化合物6-クロロ-3,7-ジプロピルプリン-2-オン（無色針状晶）を１３．５ｇ（９２％）得る。
【００４５】
0004354016.tif 000015
Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：1.0 (3H, t, J=8), 1.05 (3H, t, J=8), 2.0 (4H, sex, J=8), 4.50 (4H, t, J=8), 8.0 (1H, s)
ＩＲ（ＫＢｒ−ＴＡＢ：ｃｍ-1）：1664, 1598
【００４６】
参考例９：6-(2-ヒドロキシエチル)アミノ-3,7-ジプロピルプリン-2-オン
参考例８で得た6-クロロ-3,7-ジプロピルプリン-2-オン 2.68g(0.0105mol)、 ２−アミノエタノール 0.775g(0.0127mol)、 Ｅｔ3Ｎ 2.40g(0.0238mol)、 ＣＨ2Ｃｌ2 15mlの溶液を７時間還流する。反応後、水を加えて、ＣＨ2Ｃｌ2可溶部を抽出、水洗、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥した後、溶媒を留去し、残留物をアルミナカラムクロマトグラフィーで精製する（ＣＨＣｌ3−ＡｃＯＥｔ（３：１）の展開溶媒）ことにより標題化合物6-(2-ヒドロキシエチル)アミノ-3,7-ジプロピルプリン-2-オン（吸湿性の粘性物質）を９５０ｍｇ（３２．４％）得る。
【００４７】
Ｍａｓｓ  ｍ／ｚ（Ｃ13Ｈ21Ｎ5Ｏ2）
理論値        279.1695
実測値        279.1696
Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：0.90 (6H, t, J=8), 1.90 (4H, sext, J=8), 3.80 (4H, br.s), 4.20 (1H, t, J=8), 4.30 (1H, t, J=8), 5.30 (1H, br.s), 7.10 (1H, br.s), 7.50 (1H, s)
ＩＲ（ＫＢｒ−ＴＡＢ：ｃｍ-1）：3424, 1624
【００４８】
参考例１０：6-(3-ヒドロキシピロピル)アミノ-3,7-ジプロピルプリン-2-オン
参考例８で得た6-クロロ-3,7-ジプロピルプリン-2-オン 2.0g(0.0079mol)、 ３−アミノ−１−プロパノール 0.7g(0.0093mol)、 Ｅｔ3Ｎ 1.8g(0.018mol)、 ＣＨ2Ｃｌ2 10mlの溶液を４時間還流する。反応後、水を加えて、ＣＨ2Ｃｌ2可溶部を抽出、水洗、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥した後、溶媒を留去し、残留物をアルミナカラムクロマトグラフィーで精製する（ＣＨ2Ｃｌ2−ＡｃＯＥｔ（１：１）の展開溶媒）ことにより標題化合物6-(3-ヒドロキシピロピル)アミノ-3,7-ジプロピルプリン-2-オン（吸湿性の粘性物質）を１０００ｍｇ（４８％）得る。
【００４９】
Ｍａｓｓ  ｍ／ｚ（Ｃ14Ｈ23Ｎ5Ｏ2）
理論値        293.1852
実測値        293.1865
Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：0.90 (3H, t, J=8), 0.92 (3H, t, J=8), 1.90 (6H, m), 3.75 (4H, m), 4.25 (2H, t, J=8), 4.35 (2H, t, J=8), 7.30 (1H, br.s),  7.60 (1H, s)
ＩＲ（ＫＢｒ−Ｄｉｒｅｃｔ：ｃｍ-1）：3320, 1612
【００５０】
参考例１１：6-(4-ヒドロキシブチル)アミノ-3,7-ジプロピルプリン-2-オン
参考例８で得た6-クロロ-3,7-ジプロピルプリン-2-オン 5.36g(0.021mol)、 ４−アミノ−１−ブタノール 2.24g(0.025mol)、 Ｅｔ3Ｎ 4.8g(0.048mol)、 ＣＨ2Ｃｌ2 30mlの溶液を４時間還流する。反応後、水を加えて、ＣＨ2Ｃｌ2可溶部を抽出、水洗、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥した後、溶媒を留去し、残留物をアルミナカラムクロマトグラフィーで精製する（ＡｃＯＥｔの展開溶媒）ことにより標題化合物6-(4-ヒドロキシブチル)アミノ-3,7-ジプロピルプリン-2-オン（吸湿性の粘性物質）を１８００ｍｇ（２８％）得る。
【００５１】
Ｍａｓｓ  ｍ／ｚ（Ｃ15Ｈ25Ｎ5Ｏ2）
理論値        307.2008
実測値        307.2006
Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：0.90 (3H, t, J=8), 1.0 (3H, t, J=8), 1.4 〜 2.1 (8H, m), 3.3 〜 3.9 (4H, m), 4.0 〜 4.5 (4H, m), 4.80 (1H, br.s), 7.20 (1H, br.s),  7.60 (1H, s)
ＩＲ（ＫＢｒ−ＴＡＢ：ｃｍ-1）：3400, 1620
【００５２】
実施例１：4-プロピル-4,5,7,8-テトラヒドロ-1H-イミダゾ[1,2-i]プリン-5-オン
【化９】
0004354016.tif 000016
参考例５で得た6-(2-ヒドロキシエチル)アミノ-3-プロピルプリン-2-オン 1.55g(0.0065mol)をＣＨ2Ｃｌ2 50mlに懸濁し、 トリエチルアミン 0.79g(0.008mol)、 メタンスルホニルクロリド 0.9g(0.008mol)を加え、室温で８時間撹拌する。反応後、減圧下で溶媒を留去し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製（ＣＨＣｌ3：ＭｅＯＨ（６：１）の展開溶媒）する。得られる粗生成物をＡｃＯＥｔ−ＭｅＯＨから再結晶することにより標題化合物4-プロピル-4,5,7,8-テトラヒドロ-1(3)H-イミダゾ[1,2-i]プリン-5-オン（化合物７）（無色針状晶）を０．９ｇ（６３％）得る。
【００５３】
0004354016.tif 000017
Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：0.99 (3H, t, J=7.5), 1.83 (2H, sex, J=7.5), 3.94 〜 4.34 (6H, m), 7.72 (1H, s), 12.20 (1H, br.s)
ＩＲ（ＫＢｒ−ＴＡＢ：ｃｍ-1）：3400, 1720, 1652
【００５４】
実施例２：4-プロピル-4,7,8,9-テトラヒドロ-1(3)H-ピリミド[1,2-i]プリン-5-オン
【化１０】
0004354016.tif 000018
参考例６で得た6-(3-ヒドロキシプロピル)アミノ-3-プロピルプリン-2-オン 1.8g(0.0072mol)をＣＨ2Ｃｌ2 50mlに懸濁し、 トリエチルアミン 0.87g(0.0086mol)、 メタンスルホニルクロリド 0.99g(0.0086mol)を順次加え、室温で８時間撹拌する。反応後、減圧下で溶媒を留去し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製（ＣＨＣｌ3：ＭｅＯＨ（６：１）の展開溶媒）する。得られる粗生成物をＡｃＯＥｔ−ＭｅＯＨから再結晶することにより標題化合物4-プロピル-4,7,8,9-テトラヒドロ-1(3)H-ピリミド[1,2-i]プリン-5-オン（化合物１０）（無色針状晶）を１．０５ｇ（６３％）得る。
【００５５】
0004354016.tif 000019
Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：0.99 (3H, t, J=7.3), 1.84 (2H, sex, J=7.3), 2.26 (2H, qu, J=5.7), 3.72 (2H, t, J=5.7), 4.06 〜 4.23 (4H, m), 7.93 (1H, s), 12.23 (1H, br.s)
ＩＲ（ＫＢｒ−ＴＡＢ：ｃｍ-1）：3448, 1700, 1636
【００５６】
実施例３：4-プロピル-4,5,7,8,9,10-ヘキサヒドロ-1(3)H-1,3-ジアゼピノ[1,2-i]プリン-5-オン
【化１１】
0004354016.tif 000020
参考例７で得た6-(4-ヒドロキシブチル)アミノ-3-プロピルプリン-2-オン 1.4g(0.005mol)をＣＨ2Ｃｌ2 50mlに懸濁し、 トリエチルアミン 0.61g(0.006mol)、 メタンスルホニルクロリド 0.70g(0.006mol)を順次加え、室温で８時間撹拌する。反応後、減圧下で溶媒を留去し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製（ＣＨＣｌ3：ＭｅＯＨ（６：１）の展開溶媒）する。得られる粗生成物をＡｃＯＥｔから再結晶することにより標題化合物4-プロピル-4,5,7,8,9,10-ヘキサヒドロ-1(3)H-1,3-ジアゼピノ[1,2-i]プリン-5-オン（化合物１３）（無色針状晶）を０．４ｇ（３１％）得る。
【００５７】
0004354016.tif 000021
Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：1.01 (3H, t, J=7.5), 1.86 (2H, sex, J=7.5), 2.00 〜 2.23 (4H, m), 3.63 〜 3.81 (2H, m), 4.13 (2H, t, J=7.5), 4.37 〜 4.56 (2H, m), 7.70 (1H, s)
ＩＲ（ＫＢｒ−ＴＡＢ：ｃｍ-1）：3680, 1692, 1624
【００５８】
実施例４：3,4-ジプロピル-4,5,7,8-テトラヒドロ-3H-イミダゾ[1,2-i]プリン-5-オン
【化１２】
0004354016.tif 000022
実施例１で得た4-プロピル-4,5,7,8-テトラヒドロ-1(3)H-イミダゾ[1,2-i]プリン-5-オン（化合物７） 0.29g(0.0013mol)をジメチルホルムアミド 5mlに溶解し、 ６０％ＮａＨ 0.080g(0.002mol)を加え、室温で１時間撹拌した後、ｎ−プロピルブロミド 0.244g(0.002mol)を加え、 室温で一夜撹拌する。反応後、反応液に水を加えＡｃＯＥｔで抽出、水洗、乾燥後、ＡｃＯＥｔを留去し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製（ＡｃＯＥｔ：ＭｅＯＨ（１０：１）の展開溶媒）する。得られる粗生成物を石油エーテルから再結晶することにより標題化合物3,4-ジプロピル-4,5,7,8-テトラヒドロ-3H-イミダゾ[1,2-i]プリン-5-オン（化合物９）（無色針状晶）を０．２２ｇ（６４％）得る。
【００５９】
0004354016.tif 000023
Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：0.94 (3H, t, J=7.5), 0.97 (3H, t, J=7.5), 1.77 (2H, sext, J=7.5), 1.85 (2H, sext, J=7.5), 3.75 〜 4.25 (8H, m), 7.42 (1H, s)
ＩＲ（ＫＢｒ−ＴＡＢ：ｃｍ-1）：1698, 1652
【００６０】
実施例５：3,4-ジプロピル-4,7,8,9-テトラヒドロ-3H-ピリミド[1,2-i]プリン-5-オン
【化１３】
0004354016.tif 000024
実施例２で得た4-プロピル-4,7,8,9-テトラヒドロ-1(3)H-ピリミド[1,2-i]プリン-5-オン（化合物１０） 0.65g(0.0028mol)をジメチルホルムアミド 5mlに溶解し、 Ｋ2ＣＯ3 0.58g(0.004mol)、ｎ−プロピルブロミド 0.51g(0.004mol)を加え、 ６５℃で一夜撹拌する。反応後、減圧下に溶媒を留去し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製（ＣＨ3ＣＮの展開溶媒）する。得られる粗生成物を石油エーテルから再結晶することにより標題化合物3,4-ジプロピル-4,7,8,9-テトラヒドロ-3H-ピリミド[1,2-i]プリン-5-オン（化合物１２）（無色針状晶）を０．２９ｇ（３８％）得る。
【００６１】
0004354016.tif 000025
Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）：0.90 (3H, t, J=7.5), 0.94 (3H, t, J=7.5), 1.51 〜 1.95 (6H, m), 3.51 (2H, t, J=5.5), 3.77 〜 3.97 (4H, m), 4.27 (2H, t, J=7.5), 7.66 (1H, s)
ＩＲ（ＫＢｒ−ＴＡＢ：ｃｍ-1）：1674, 1646
【００６２】
実施例６：3,4-ジプロピル-4,5,7,8,9,10-ヘキサヒドロ-3H-1,3-ジアゼピノ[1,2-i]プリン-5-オン
【化１４】
0004354016.tif 000026
実施例３で得た4-プロピル-4,5,7,8,9,10-ヘキサヒドロ-1(3)H-1,3-ジアゼピノ[1,2-i]プリン-5-オン（化合物１３） 0.33g(0.0013mol)をジメチルホルムアミド 5mlに溶解し、 Ｋ2ＣＯ3 0.26g(0.002mol)、ｎ−プロピルブロミド 0.26g(0.002mol)を加え、 ６５℃で一夜撹拌する。反応後、減圧下に溶媒を留去し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製（ＣＨ3ＣＮの展開溶媒）することにより標題化合物3,4-ジプロピル-4,5,7,8,9,10-ヘキサヒドロ-3H-1,3-ジアゼピノ[1,2-i]プリン-5-オン（化合物１５）（粘性オイル）を０．１８ｇ（４６％）得る。
【００６３】
0004354016.tif 000027
Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：0.904 (3H, t, J=7.3), 0.964 (3H, t, J=7.3), 1.56 〜 2.00 (8H, m), 3.84 〜 4.30 (8H, m), 7.31 (1H, s)
ＩＲ（ＫＢｒ−Ｄｉｒｅｃｔ：ｃｍ-1）：1676, 1640
【００６４】
実施例７：1,4-ジプロピル-4,5,7,8-テトラヒドロ-1H-イミダゾ[1,2-i]プリン-5-オン
【化１５】
0004354016.tif 000028
参考例９で得た6-(2-ヒドロキシエチル)アミノ-3,7-ジプロピルプリン-2-オン 0.65g(0.0023mol)をＰＯＣｌ3 5ml中で１時間還流する。反応後、減圧下に溶媒を留去し、残留物を氷中に注ぎ、ＮａＨＣＯ3アルカリ性とし、ＣＨ2Ｃｌ2で抽出、水洗、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し溶媒を留去する。残留物をアルミナカラムクロマトグラフィーで精製（ＣＨ2Ｃｌ2−ＡｃＯＥｔ（２０：１）の展開溶媒）する。得られる粗生成物をジエチルエーテルから再結晶することにより標題化合物1,4-ジプロピル-4,5,7,8-テトラヒドロ-1H-イミダゾ[1,2-i]プリン-5-オン（化合物８）（無色針状晶）を０．３１ｇ（５１％）得る。
【００６５】
0004354016.tif 000029
Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：0.90 (3H, t, J=8), 0.95 (3H, t, J=8), 1.90 (4H, sex, J=8), 3.80 〜 4.50 (8H, m), 7.52 (1H, s)
ＩＲ（ＫＢｒ−ＴＡＢ：ｃｍ-1）：1686, 1642
【００６６】
実施例８：1,4-ジプロピル-4,7,8,9-テトラヒドロ-1H-ピリミド[1,2-i]プリン-5-オン
【化１６】
0004354016.tif 000030
参考例１０で得た6-(3-ヒドロキシエチル)アミノ-3,7-ジプロピルプリン-2-オン 0.33g(0.0011mol)をＰＯＣｌ3 2ml中で１時間還流する。反応後、減圧下に溶媒を留去し、残留物を氷中に注ぎ、ＮａＨＣＯ3アルカリ性とし、ＣＨ2Ｃｌ2で抽出、水洗、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し溶媒を留去する。残留物をアルミナカラムクロマトグラフィーで精製（ＣＨ2Ｃｌ2−ＡｃＯＥｔ（６：１）の展開溶媒）する。得られる粗生成物を（ＣＨ2Ｃｌ2＋ＩＰＥ）から再結晶することにより標題化合物1,4-ジプロピル-4,7,8,9-テトラヒドロ-1H-ピリミド[1,2-i]プリン-5-オン（化合物１１）（無色針状晶）を０．２６ｇ（７４％）得る。
【００６７】
0004354016.tif 000031
Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：1.0 (6H, t, J=8), 1.6 〜 2.2 (6H, m), 3.6 (2H, t, J=8), 3.80 〜 4.35 (6H, m), 7.42 (1H, s)
ＩＲ（ＫＢｒ−ＴＡＢ：ｃｍ-1）：1670, 1632
【００６８】
実施例９：1,4-ジプロピル-4,5,7,8,9,10-ヘキサヒドロ-1H-1,3-ジアゼピノ[1,2-i]プリン-5-オン
【化１７】
0004354016.tif 000032
参考例１１で得た6-(4-ヒドロキシブチル)アミノ-3,7-ジプロピルプリン-2-オン 1.31g(0.0043mol)をＰＯＣｌ3 10ml中で１時間還流する。反応後、減圧下に溶媒を留去し、残留物を氷中に注ぎ、ＮａＨＣＯ3アルカリ性とし、ＣＨ2Ｃｌ2で抽出、水洗、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し溶媒を留去する。残留物をアルミナカラムクロマトグラフィーで精製（ＰｈＨ−ＣＨ2Ｃｌ2（１：１）の展開溶媒）することにより標題化合物1,4-ジプロピル-4,5,7,8,9,10-ヘキサヒドロ-1H-1,3-ジアゼピノ[1,2-i]プリン-5-オン（化合物１４）（粘性物質）を０．８ｇ（６５％）得る。
【００６９】
0004354016.tif 000033
Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：0.87 (3H, t, J=8), 0.90 (3H, t, J=8), 1.50 〜 2.30 (8H, m) 3.60 (4H, t, J=8), 4.16 (2H, t, J=8), 4.34 (2H, t, J=8), 7.52 (1H, s)
ＩＲ（ＫＢｒ−Ｄｉｒｅｃｔ：ｃｍ-1）：1630
【００７０】
実施例１０：4-プロピル-4,5-ジヒドロ-1(3)H-イミダゾ[1,2-i]プリン-5-オン
【化１８】
0004354016.tif 000034
参考例３で得た6-アミノ-3-プロピルプリン-2-オン 212mg(0.001mol)、４０％ＣｌＣＨ2ＣＨＯ 250mg(0.0013mol)、ＥｔＯＨ 5mlを封管中、外温８０〜９０℃の油浴中で３時間撹拌する。反応後、不溶の沈殿を除きＥｔＯＨ溶液を留去し、残留物をＭｅＯＨから再結晶することにより標題化合物4-プロピル-4,5-ジヒドロ-1(3)H-イミダゾ[1,2-i]プリン-5-オン（化合物４）（無色針状晶）を１１２ｍｇ（４７％）得る。
【００７１】
0004354016.tif 000035
Ｈ−ＮＭＲ（6ｄ−ＤＭＳＯ）：0.93 (3H, t, J=8), 1.80 (2H, sex, J=8), 4.19 (2H, t, J=8), 7.41 (1H, d, J=1.6), 7.80 (1H, d, J=1.6), 8.00 (1H, s)
ＩＲ（ＫＢｒ−ＴＡＢ：ｃｍ-1）：1696, 1660
【００７２】
実施例１１：3,6-ジプロピル-4,5-ジヒドロ-3H-イミダゾ[1,2-i]プリン-5-オン
【化１９】
0004354016.tif 000036
実施例１０で得た4-プロピル-4,5-ジヒドロ-1(3)H-イミダゾ[1,2-i]プリン-5-オン 460mg(0.002mol)をＤＭＦ 4mlに溶解し、Ｋ2ＣＯ3 325mgを加え撹拌しつつ、ｎ−プロピルブロミド 295mg(0.0024mol)を加える。室温下２０時間反応後、氷水とジエチルエーテルを加え、エーテル可溶部を抽出、水洗、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥後、溶媒を留去する。残留物をアルミナカラムクロマトグラフィーで精製（ＣＨ2Ｃｌ2の展開溶媒）することにより標題化合物3,6-ジプロピル-4,5-ジヒドロ-3H-イミダゾ[1,2-i]プリン-5-オン（化合物６）（粘性物質）を２３０ｍｇ（４２％）得る。
【００７３】
0004354016.tif 000037
Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：1.00 (3H, t, J=8), 1.02 (3H, t, J=8), 1.93 (2H, sex, J=8), 2.10 (2H, sex, J=8), 4.40 (4H, q, J=8), 7.30 (1H, d, J=1.8), 7.65 (1H, s), 7.85 (1H, d, J=1.8)
ＩＲ（ＫＢｒ−Ｄｉｒｅｃｔ：ｃｍ-1）：1706, 1650
【００７４】
実施例１２：6,9-ジプロピル-5,6-ジヒドロ-9H-テトラゾロ[5,1-i]プリン-5-オン
【化２０】
0004354016.tif 000038
6-クロロ-3,7-ジプロピルプリン-2-オン 607mg(0.0024mol)、ＮａＮ3 416mg(0.0064mol)、ＥｔＯＨ 30mlの溶液を封管し、外温９０〜１００℃の油浴中で９０分撹拌する。不溶物を除き、濾液を乾固し、残留物をＥｔＯＨから再結晶することにより標題化合物6,9-ジプロピル-5,6-ジヒドロ-9H-テトラゾロ[5,1-i]プリン-5-オン（化合物２）（無色針状晶）を５５０ｍｇ（８８％）得る。
【００７５】
0004354016.tif 000039
Ｈ−ＮＭＲ（6ｄ−アセトン）：0.96 (3H, t, J=8), 1.00 (3H, t, J=8), 1.98 (4H, sex, J=8), 4.49 (4H, t, J=8), 8.28 (1H, s)
ＩＲ（ＫＢｒ−ＴＡＢ：ｃｍ-1）：1717, 1605
【００７６】
実施例１３：1,4-ジプロピル-4,5-ジヒドロ-1H-イミダゾ[1,2-i]プリン-5-オン
（１）6-アミノ-3,7-ジプロピルプリン-2-オン
【化２１】
0004354016.tif 000040
実施例１２で得た6,9-ジプロピル-5,6-ジヒドロ-9H-テトラゾロ[5,1-i]プリン-5-オン 490mg(0.0019mol)をＥｔＯＨ 60ml中に溶解し、１０％Ｐｄ／Ｃ 74mgを加え、水素気流下で２１時間撹拌する。反応後、触媒を除き、溶液を減圧下に留去し、残留物を（ＣＨ2Ｃｌ2＋ＩＰＥ）から再結晶することにより標題化合物6-アミノ-3,7-ジプロピルプリン-2-オン（無色針状晶：吸湿性物質）を４００ｍｇ（９１％）得る。
【００７７】
0004354016.tif 000041
Ｍａｓｓ  ｍ／ｅ：２３５
Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：0.90 (3H, t, J=8), 0.95 (3H, t, J=8), 1.93 (2H, sex, J=8), 1.98 (2H, sex, J=8), 4.20 (2H, t, J=8), 4.30 (2H, t, J=8), 7.50 (1H, s)
ＩＲ（ＫＢｒ−ＴＡＢ：ｃｍ-1）：3400, 1626
【００７８】
（２）1,4-ジプロピル-4,5-ジヒドロ-1H-イミダゾ[1,2-i]プリン-5-オン
【化２２】
0004354016.tif 000042
（１）で得た6-アミノ-3,7-ジプロピルプリン-2-オン 118mg(0.0005mol)、４０％ＣｌＣＨ2ＣＨＯ 300mg(0.0015mol)、ＥｔＯＨ 5mlを封管中、外温１２０℃の油浴中で４時間反応させる。反応後、溶媒を留去し、残留物をアルミナカラムクロマトグラフィーで精製（ＣＨ2Ｃｌ2の展開溶媒）することにより標題化合物1,4-ジプロピル-4,5-ジヒドロ-1H-イミダゾ[1,2-i]プリン-5-オン（化合物５）（粘性物質）を８８ｍｇ（６８％）得る。
【００７９】
0004354016.tif 000043
Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：1.03 (3H, t, J=8), 1.04 (3H, t, J=8), 2.03 (4H, sex, J=8), 4.30 〜 4.70 (4H, m), 7.23 (1H, d, J=1.8), 7.70 (1H, d, J=1.8), 7.80 (1H, s)
ＩＲ（ＫＢｒ−Ｄｉｒｅｃｔ：ｃｍ-1）：1698, 1588
【００８０】
実施例１４：6-プロピル-5,6-ジヒドロ-7(9)H-テトラゾロ[5,1-i]プリン-5-オン
【化２３】
0004354016.tif 000044
3-プロピル-6-(1,2,4-トリアゾール-4-イル)プリン-2-オン 470mg(0.002mol)、ＮａＮ3 333mg(0.005mol)を、ＥｔＯＨ 30ml中で８時間還流する。反応後、減圧下に溶媒を留去し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製（ＡｃＯＥｔ−ＥｔＯＨ（１００：５）の展開溶媒）する。得られる粗生成物をＭｅＯＨから再結晶することにより標題化合物6-プロピル-5,6-ジヒドロ-7(9)H-テトラゾロ[5,1-i]プリン-5-オン（化合物１）（無色棒状晶）を３３６ｍｇ（８２％）得る。
【００８１】
0004354016.tif 000045
Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）：1.04 (3H, t, J=8), 1.92 (2H, sex, J=8), 4.34 (2H, t, J=8), 8.16 (1H, s)
ＩＲ（ＫＢｒ−ＴＡＢ：ｃｍ-1）：1724, 1658
【００８２】
実施例１５：6,7-ジプロピル-5,6-ジヒドロ-7H-テトラゾロ[5,1-i]プリン-5-オン
【化２４】
0004354016.tif 000046
実施例１４で得た6-プロピル-5,6-ジヒドロ-7(9)H-テトラゾロ[5,1-i]プリン-5-オン 386mg(0.00176mol)をＤＭＦ 5mlに溶解し、Ｋ2ＣＯ3 300mgを加え撹拌しつつ、ｎ−プロピルブロミド 260mg(0.00176 x 1.2 mol)を加える。室温中で２４時間反応させた後、水とＣＨ2Ｃｌ2を加え、ＣＨ2Ｃｌ2可溶部を抽出、水洗、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥後、溶媒を留去する。残留物を（ＣＨ2Ｃｌ2＋ＩＰＥ）で再結晶することにより標題化合物6,7-ジプロピル-5,6-ジヒドロ-7H-テトラゾロ[5,1-i]プリン-5-オン（化合物３）（無色針状晶）を１８４ｍｇ（４０％）得る。
【００８３】
0004354016.tif 000047
Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：1.03 (3H, t, J=8), 1.17 (3H, t, J=8), 1.97 (2H, sex, J=8), 2.03 (2H, sex, J=8), 4.30 (2H, t, J=8), 4.53 (1H, t, J=8), 8.0 (1H, s)
ＩＲ（ＫＢｒ−ＴＡＢ：ｃｍ-1）：1719, 1653
【００８４】
実施例１６：ＰＤＥ阻害作用
本発明化合物のタイプI  ＰＤＥ（カルシウム−カルモジュリン依存性サイクリックＡＭＰ  ＰＤＥ）、タイプIII  ＰＤＥ（サイクリックＧＭＰ抑制性サイクリックＡＭＰ  ＰＤＥ）およびタイプIV  ＰＤＥ（サイクリックＡＭＰ特異的ＰＤＥ）活性に対する阻害作用を試験した。
【００８５】
１）本発明化合物１〜１５、ならびにＰＤＥ  IV阻害剤である前記ＸＴ−０４４（対照１）、ＰＤＥ  IV阻害剤である前記Ｒｏ  ２０−１７２４（対照２）、ＰＤＥ  III阻害剤である前記アムリノン（対照３）を被験化合物（以下の実施例においても同じ）とし、これらをそれぞれジメチルスルホキシドに溶解し、用時、使用培養液にて希釈して用いた。なお、ジメチルスルホキシドの最終濃度は０．１％以下とした。
【００８６】
２）サイクリックヌクレオチドＰＤＥイソ酵素阻害活性の測定
モルモット大脳からＰＤＥ  I、IVを、心臓からＰＤＥ  IIIを分離（Reeves et al., Biochem. J., 241:535-541, 1987; Nicholson et al., Br. J. Pharmacol., 97:889-897, 1989）し、ＤＥＡＥ−ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ−６Ｂを充填したカラムを通すことにより調製した。
【００８７】
被験化合物の存在下、または非存在下に、各イソ酵素のサイクリックＡＭＰ加水分解活性をThompsonとApplemanの方法（Biochemistry, 10:311-316, 1971）に従って測定し、各被験物質の５０％活性阻害濃度を求めた。
【００８８】
３）試験結果
得られた結果を表１に示す。
【００８９】
【表１】
0004354016.tif 000048
【００９０】
本発明化合物はいずれもタイプIII  ＰＤＥに対しては見るべき阻害作用を示さず、タイプI  ＰＤＥに対しても化合物６および５が弱い阻害作用を示すが、他の化合物の阻害作用は著しく弱いものであった。一方、化合物４、６、８、９、１２は対照１、対照２に匹敵するタイプIV  ＰＤＥ阻害作用を示し、これらの化合物がタイプIV  ＰＤＥに特異的な阻害剤であることを示唆した。
【００９１】
実施例１７：気管および心臓に対する薬理作用
実施例１７〜１９の試験では、体重３００〜５００ｇの雄性Hartley系モルモット（日本ＳＣＬ）を用いた。モルモットは放血死させた後、速やかに組織を摘出した。
【００９２】
１）摘出気管弛緩作用
化合物の気管弛緩作用の評価は、気管鎖状標本を用いて検討した。１０ｍｌのKrebs-Henseleit液［組成：ｍＭ：ＮａＣｌ，１１８；ＫＣｌ，４．７；ＣａＣｌ2・２Ｈ2Ｏ，２．５５；ＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ，１．１８；ＮａＨＣＯ3，２４．８８；ＫＨ2ＰＯ4，１．１８；グルコース，１１．１（ｐＨ７．４）］を入れ、ＣＯ2：Ｏ2（５：９５）混合ガスを通気し、３７℃に維持したorgan bath内に０．５ｇの負荷をかけて、標本を懸垂した。張力の変化は、等尺性トランスデューサー（T 7-30-240、Orientec Japan）を介して記録計（Multicorder MC662、 Watanabe P.O.C）上に記録した。標本は１５分毎に４回洗浄し、張力が安定した時点で１μＭイソプレナリンを適用し、弛緩が最大となったところで、洗浄した後、発生してくる自然張力が安定したところで実験を開始した。被験化合物１０ｎＭ−１００μＭを累積的に投与し、それぞれの弛緩作用を、１μＭイソプレナリンを適用して得られた弛緩を１００％とし、５０％弛緩を起こす濃度としてＥＣ50で表した。
【００９３】
２）摘出右心房興奮作用
Krebs-Henseleit液中にＣＯ2：Ｏ2（５：９５）混合ガスを通気し、２５℃に維持したorgan bath内に、０．５ｇの負荷をかけて摘出右心房標本を懸垂した。自発的律動が安定したところで累積的に化合物１ｎＭ〜１００μＭを適用し、自発的律動の変化を、等尺性トランスデューサー（UL-10GR、 Shinkoh）を介して、律動数を心拍数計（AT601G、 Nihon Kouden）で測定し、記録計（Servocorder SR6221、 Graphtech）に記録した。化合物の作用は、適用前より心拍数が２０％上昇した濃度をＥＣ20として表した。
【００９４】
３）摘出左心房でのアデノシン拮抗作用
Krebs-Henseleit液中にＣＯ2：Ｏ2（５：９５） 混合ガスを通気し、２５℃に維持したorgan bath中で、摘出左心房の一端を双極白金電極に固定し、他端を等尺性トランスデューサーに装着し、０.５ｇの静止張力をかけた。標本を電気刺激装置（Nihon Koden, SEN-7203）を用いて、1 Hz にて持続時間 1 msec の矩形波で閾値の１．５倍の電圧で経壁刺激した。発生した張力はトランスデューサーを介して記録計に描記させた。０．１μＭジピリダモールの存在下、アデノシン０．１〜１００μＭを累積的に投与した。次に、標本を洗浄後、適当濃度の被験化合物を添加し、１５分後に、再度アデノシンを累積的に投与した。そして、被験化合物存在下と非存在下におけるアデノシンの用量反応曲線よりｐＡ２を算出した。
【００９５】
４）試験結果
得られた結果を表２に示す。
【００９６】
【表２】
0004354016.tif 000049
【００９７】
気管弛緩作用については、本発明の化合物４、５、６、８、９、１２、１３、１４、１５等が対照化合物１、２と同等かやや弱い作用を示した。
【００９８】
また、化合物５、６を除く全ての本発明化合物は、右心房興奮作用を示さなかった。
【００９９】
さらに、全ての本発明化合物は、キサンチン誘導体で見られるアデノシン拮抗作用を示すことはなかった。
【０１００】
即ち、化合物４、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５は、選択的気管弛緩作用を示すことより、例えば、副作用の少ない気管支喘息治療薬として応用可能である。
【０１０１】
実施例１８：骨形成関連細胞に対する作用
１）骨形成促進作用（in vitro 骨髄細胞培養系での骨形成に対する作用）
（１）試験方法
Wistar系ラット（５〜６週令）の大腿骨から骨髄細胞を分離し、細胞密度１０6/ｃｍ2で１２ウエル培養プレートにまき、10％牛胎児血清、60 μg/ml カナマイシン、10 nMデキサメサゾン、0.2 mM アスコルビン酸リン酸エステル、β-グリセロフォスフェートを添加したα-MEM中、37℃の炭酸ガスインキュベーターにて培養した。被験化合物は、培養開始３日目に２４時間、細胞に添加した後、洗浄除去し、さらに１０日間培養した。培養終了後、メタノール固定し、アリザリンレッドＳにて染色し、石灰化部位の面積を測定した（春日井ら、Bone, 17:1-4,1995; 小沢、春日井、Biomaterials, 17:23-29, 1996）。
【０１０２】
（２）試験結果
表３で示すように、化合物９は、濃度に依存して、有意に石灰化促進作用を示した。これに対して、ＰＤＥ III阻害剤のアムリノンにはこのような作用はなかった。このことは、化合物９には、強い骨形成細胞（骨芽細胞）の分化・増殖促進作用のあることを示している。
【０１０３】
【表３】
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【０１０４】
２）破骨細胞形成抑制作用（in vitro 骨髄細胞培養系での破骨細胞形成に対する作用）
（１）試験方法
ddY系マウス（８週令）の大腿骨から骨髄細胞を分離し、細胞密度1.5 x１０6/ｃｍ2で２４ウエル培養プレートにまき、10％牛胎児血清、60 μg/ml カナマイシン、10 nM １α，２５-ジヒドロキシビタミンＤ３を添加したα-MEM中、37℃の炭酸ガスインキュベーターにて培養した。被験化合物は、培養開始１日目に添加し、８日間培養した。培養終了後、メタノール固定し、酒石酸抵抗性酸性フォスファターゼ（TRAP）染色を施し、TRAP染色陽性の多核細胞数を計数した（高橋ら、Endocrinology, 122：1373-1382, 1988）。
【０１０５】
（２）試験結果
表４で示すように、化合物９は、濃度に依存して、有意にTRAP染色陽性細胞（破骨細胞）数を減少させた。これに対して、ＰＤＥ III阻害剤のアムリノンにはこのような作用はなかった。このことは、化合物９には、破骨細胞の分化・増殖を抑制する作用のあることを示す。
【０１０６】
【表４】
0004354016.tif 000051
【０１０７】
以上の結果から、化合物９は、骨形成を促進し、骨吸収を抑制するため、骨粗鬆症やリュウマチによる骨疾患への有効性が示された。