(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
０乃至４０℃の温度において、認識できる殺真菌活性を有しないが、４０乃至６５℃の温度に加熱したときに殺真菌活性を示す少なくとも１つの低温殺菌添加剤を飲料に添加する工程及び低温殺菌添加剤の殺真菌活性を活性化させるために前記飲料の温度を４０乃至６５℃の温度に上昇させる工程を含む、冷間充填に適する、環境に安定な飲料を製造する方法であって、低温殺菌添加剤が、アリルシクロヘキサンプロピオネート、ヘキサン酸アミル、オクタン酸アミル、ベンゾイン、安息香酸ベンジル、サリチル酸ベンジル、酢酸ボルニル、ヘプタン酸ブチル、ラウリン酸ブチル、ブチル−１０−ウンデセノエート、プロピオン酸カルビル、β−カリオフィレン、酢酸デシル、酪酸デシル、プロピオン酸デシル、２−ドデセナール、デカン酸エチル、エチル−２−デセノエート、ラウリン酸エチル、ノナン酸エチル、トリデカン酸エチル、ウンデカン酸エチル、エチル−１０−ウンデセノエート、酢酸ゲラニル、ゲラニルアセトン、酪酸ゲラニル、プロピオン酸ゲラニル、酪酸ヘプチル、ω−６−ヘキサデカラクトン、ヘキサデカノール、ヘキサン酸ヘキシル、オクタン酸ヘキシル、ヘキサン酸イソアミル、ラウリン酸イソアミル、サリチル酸イソアミル、ラウリン酸、ラウリンアルコール、ラウリンアルデヒド、酢酸ラウリル、酢酸リナリル、プロピオン酸リナリル、デカン酸メチル、ラウリン酸メチル、ミリスチン酸メチル、ノナン酸メチル、ウンデカン酸メチル、メチル−９−ウンデセノエート、ミリスチンアルデヒド、ミリスチン酸、ネロリドール、酪酸ネリル、イソ酪酸ネリル、酢酸ノニル、酪酸オクチル、ω−ペンタデカラクトン、ペンタデカン酸、ペンタデカノール、ヘキサン酸フェネチル、オクタン酸フェネチル、２−フェノキシルエチルイソブチレート、テトラデカノール、トリデカナール、トリデカン酸、トリデカノール、２−トリデセナール及び２−ウンデカノンから成る群から選ばれる、方法。
【請求項２】
低温殺菌添加剤が、０乃至４０℃の温度において、認識できる殺真菌活性を有しない物質である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
低温殺菌添加剤が、２０乃至３５℃の温度において、認識できる殺真菌活性を有しない、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
低温殺菌添加剤が、４０乃至６５℃の温度に加熱したときに殺真菌活性を示す、請求項２に記載の方法。
【請求項５】
低温殺菌添加剤が、４５乃至５５℃の温度に加熱したときに殺真菌活性を示す、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
低温殺菌添加剤が、アリルシクロヘキサンプロピオネート、ヘキサン酸アミル、ヘプタン酸ブチル、酢酸デシル、プロピオン酸デシル、２−ドデセナール、デカン酸エチル、エチル−２−デセノエート、ノナン酸エチル、エチル−１０−ウンデセノエート、酢酸ゲラニル、ゲラニルアセトン、酪酸ゲラニル、プロピオン酸ゲラニル、酪酸ヘプチル、ヘキサン酸ヘキシル、ヘキサン酸イソアミル、ラウリン酸、ラウリンアルコール、ラウリンアルデヒド、デカン酸メチル、ラウリン酸メチル、ノナン酸メチル、ウンデカン酸メチル、メチル−９−ウンデセノエート、ミリスチン酸、ネロリドール、イソ酪酸ネリル、酢酸ノニル、酪酸オクチル、ヘキサン酸フェネチル、２−フェノキシルエチルイソブチレート、トリデカナール、トリデカン酸、トリデカノール、２−トリデセナール及び２-ウンデカノンから成る群から選ばれる、請求項１乃至５のいずれか１請求項に記載の方法。
【請求項７】
低温殺菌添加剤が、酢酸デシル、ラウリン酸、ラウリンアルデヒド、ラウリンアルコール、２−ドデセナール、エチル−２−デセノエート、ゲラニルアセトン及び酢酸ゲラニルから成る群から選ばれる、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
低温殺菌添加剤が、１７０乃至２３０ダルトンの分子量及び３.５乃至５.５のｌｏｇＰｏｃｔ値を有する化合物である、請求項１乃至５のいずれか１請求項に記載の方法。
【請求項９】
低温殺菌添加剤の濃度が１ミリモル以下、好ましくは０.１ミリモル以下である、請求項１乃至８のいずれか１請求項に記載の方法。
【請求項１０】
飲料が茶系飲料である、請求項１乃至９のいずれか1請求項に記載の方法。
【請求項１１】
飲料が、０．０１乃至３％の茶固体を含有する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
低温殺菌添加剤が、熱により活性化されたときに抗菌性にもなり、酢酸デシル及びラウリン酸から選ばれる、請求項１乃至１１のいずれか１請求項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の分野
本発明は、熱により活性化したときに殺真菌性になる1つ以上の低温殺菌添加剤を飲料に添加することを含む、環境に安定な飲料、特に茶系飲料(ｔｅａ  ｂａｓｅｄ  ｂｅｖｅｒａｇｅ)を製造する方法に関する。
【０００２】
先行技術の背景
近年、インスタント飲料でのどの渇きをいやすことを望む消費者にとっては、選択が増大している。多くの消費者は、現在、よく知られたソフトドリンクから、それが炭酸化されたものであろうと炭酸化されていないものであろうと茶系飲料、及びそれらが提供することができる「天然の」リフレッシュ物質に関心を変えている。
【０００３】
茶は、酵素、生化学的中間体、及び植物の生長及び光合成に通常関連する構造的要素の複雑な組み合わせを含有する。又、独特な味、渋み、芳香及び色を茶に与える多くの天然物質が存在する。それらの多くは、紅茶製造のいわゆる発酵工程中に生じる酸化反応により生成される。茶製造は、長い間、関与する化学の基本的理解のみを有する伝統的な処理方法により行なわれてきた。その結果、製造業者は、より伝統的なソフトドリンクと競争するのに必要な大量において、環境に安定な茶系飲料を製造することは単にソフトドリンクに茶で風味付けをするという問題ではないことを見出した。
【０００４】
茶系飲料の風味及びその安定性は、全体として飲料の安定性に依存する。茶系飲料及び他のソフトドリンクにおいて増殖し得る酵母菌及び糸状菌を含む真菌は、熱処理により殺菌され得るか又は防腐剤の使用により少なくとも制御され得る。従って、いくつかの茶系飲料は、低温殺菌され、次にガラス又は特別な熱安定性のＰＥＴ容器に詰められる。この操作は、「熱間充填」として知られている。残念なことに、この操作は、環境に良くない多量の廃棄物を生じる、高価な操作であり得る。従って、一回給与単位から多回給与パックまでの範囲を有し得て、かつ注文通りの風味剤系及び防腐剤系を用いて製品の安定性を維持することができる標準PET容器にそれらの茶系製品を充填することが、製造業者にとって、より魅力的になっている。この操作は「冷間充填」として知られている。この操作は、茶の濃縮体又は粉末を容易に使用することができることにおいても有用である。
【０００５】
残念なことに、通常の防腐剤は、茶系飲料の風味に影響を与え得る。このことは、亜硫酸塩及びソルビン酸塩では特にそうである。レモンのような強力な風味剤の添加により、防腐剤の味は相殺される。しかし、消費者は、他の風味剤を経験することに対して鋭敏である。さらに、ソフトドリンクに代わる、より健康的で天然の代替物として茶系製品に引きつけられる消費者のいくらかは、防腐剤を、どちらかといえば避けている、合成添加剤として考える場合がある。
【０００６】
多くの国は、いくつかの殺真菌剤及び防腐剤を含む特定の食品添加剤の、食品及び飲料における使用を禁じる法律を有している。その法律は広範に相違し得るが、食品に対して、化学的殺真菌剤及び防腐剤、特に合成のものをより少ない数で、より少量しか含有しないという明らかな傾向がある。
【０００７】
従って、合成防腐剤を少量しか含有しない、好まれる風味付けをされた、環境に安定な飲料を製造する方法に対する需要が存在する。
【０００８】
その需要に応じて、本願発明者らは、合成の殺真菌剤又は防腐剤を含有しない茶系飲料のための殺真菌性系を開発した。その殺真菌性系は、果物飲料及びソフトドリンクを含む非茶系飲料を安定化するのにも用いられ得る。
【０００９】
発明の記載
本発明は、広範な意味において、０乃至４０℃の温度において、認識できる殺真菌活性を有しないが、４０乃至６５℃の温度に加熱したときに殺真菌活性を示す少なくとも１つの低温殺菌添加剤を飲料に添加する工程、及び低温殺菌添加剤の殺真菌活性を活性化させるために前記飲料の温度を４０乃至６５℃の温度に上昇させる工程を含む、冷間充填に適する、環境に安定な飲料を製造する方法に関する。その飲料が茶系飲料である場合、その茶系飲料は、好ましくは０．０１乃至３％の茶固体、特に約０．１４％の茶固体を含有する。
【００１０】
好ましくは、低温殺菌添加剤は０乃至４０℃の温度において、特に２０乃至３５℃の温度において、認識できる殺真菌活性を有しないが、４０乃至６５℃の温度に、特に４５℃乃至５５℃の温度に加熱したときに殺真菌活性を示す物質である。
【００１１】
特に好ましい低温殺菌添加剤には、好ましくは１ミリモル以下、より好ましくは０.１ミリモル以下の濃度で存在する、酢酸デシル、ラウリン酸、ラウリンアルデヒド、ラウリンアルコール、２-ドデセナール、エチル−２−デセノエート、ゲラニルアセトン及び酢酸ゲラニルが含まれる。
【００１２】
飲料を安定化させるための低温殺菌に基づく方法とは異なり、本発明の方法は、時間及び温度に対して依存性ではない。
【００１３】
本発明の目的のために、「飲料」は水以外の他のすべての飲み物を意味し、ソフトドリンク、果物飲料、コーヒー系飲料及び茶系飲料を含む。
【００１４】
本発明の目的のために、「茶」は、Ｃａｍｅｌｌｉａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  ｖａｒ．  ｓｉｎｅｎｓｉｓ又はＣａｍｅｌｌｉａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  ｖａｒ．  ａｓｓａｍｉｃａからの葉物質を意味する。「茶」は、それらの茶の2つ以上をブレンドした生成物を含むことも意図する。
【００１５】
疑義を避けるために、「含む(ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ)」という用語は、含むことを意味し、必ずしも「から成る(ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ)」又は「から構成される(ｃｏｍｐｏｓｅｄ  ｏｆ)」ことを意味しない。換言すれば、挙げられた工程又は選択は、限定的である必要はない。
【００１６】
操作例中及び比較例中を除いて又は他に明らかに示されている場合を除いて、本記載における、物質の量又は濃度を示す全ての数は、「約」という用語により修飾されると理解すべきである。
【００１７】
発明の詳細な記載
本発明は、環境に安定な飲料を製造する方法に関する。本方法は、０乃至４０℃の温度において、認識できる殺真菌活性を有しないが、４０乃至６５℃の温度に加熱したときに殺真菌活性を示す少なくとも１つの低温殺菌添加剤を飲料に添加する工程、及び低温殺菌添加剤の殺真菌活性を活性化させるために前記飲料の温度を４０乃至６５℃の温度に上昇させる工程を含む。
【００１８】
低温殺菌は、飲料が６２.５乃至１００℃の最低温度まで所定の時間、加熱されたときに生じる、酵素を不活性化し、微生物の個体群を低減させる方法をいう。より高い温度及びより長い処理時間を用いることにより、より良好な低温殺菌が達成される。これとは対照的に、本発明は、室温において又はその付近において、認識できる殺真菌活性を有すると一般的に考えられていない特定の化学物質が、実際は、約５０℃に加熱されたときに殺真菌活性を示すという発見から得られた。このことは、そのような化合物を含有する飲料が６５℃よりいくらか低い温度に加熱され得て、さらに低温殺菌により達成することが予測される程度まで微生物個体群を低減させることを意味する。従って、その化学的化合物は、低温殺菌添加剤として記載され得る。しかし、飲料を安定化させるための低温殺菌に基づく方法とは異なり、本方法の性能は、時間又は温度依存性ではない。
【００１９】
本願発明者らは、最初、酢酸デシル、ラウリン酸、デセノン酸メチルのような化合物は、３０℃において殺真菌活性を有しないが、５０℃に加熱したときに有意な殺真菌活性を示すことを見出した。
【００２０】
このことは、３０℃において殺真菌活性を有しない他の化合物を試験することに本願発明者らを導いた。本願発明者らは、表１に挙げられた化合物が、５０℃に加熱されたときに、実際に、有意な殺真菌活性を示すことを見出した。表1において、各化合物についての最小阻止濃度(ＭＩＣ)が分子量(Ｍ．Ｗ．)、ｌｏｇＰｏｃｔ及びその重要性のランク付けと同様に与えられている。実質的な殺真菌活性を示すのに低濃度しか要しない場合は、化合物は高い重要性であると考えられる。オクタノールにおける該当化合物の分配係数の対数であり、従って、その殺真菌活性の尺度であるｌｏｇＰｏｃｔは、ＣａｍｂｒｉｄｇｅＳｏｆｔから市販されているＣＨＥＭＯＦＦＩＣＥ  ＵＬＲＡ  ＥＮＨＡＮＣＥＤ  ２０００(商標)ソフトウェアパッケージ(バージョン５.５)からのＣＨＥＭＤＲＡＷ(商標)ソフトウェアを用いて決定された。
【００２１】
【表１】
0004327401.tif 000002
0004327401.tif 000003
0004327401.tif 000004
【００２２】
多くのいわゆる低温殺菌添加剤は、５０℃又は６５℃より低い他の温度に加熱されたときに、有効な殺真菌活性を与える。しかし、ある化合物は、他の化合物よりも、茶系飲料の味における影響に関して、より適していることを証明し得る。従って、本願発明者らは、下記の化合物を本発明の方法における使用のための好ましい低温殺菌添加剤であると特定した：アリルシクロヘキサンプロピオネート、ヘキサン酸アミル、ヘプタン酸ブチル、酢酸デシル、プロピオン酸デシル、２-ドデセナール、デカン酸エチル、エチル−２−デセノエート、ノナン酸エチル、エチル−１０−ウンデセノエート、酢酸ゲラニル、ゲラニルアセトン、酪酸ゲラニル、プロピオン酸ゲラニル、酪酸ヘプチル、ヘキサン酸ヘキシル、ヘキサン酸イソアミル、ラウリン酸、ラウリンアルコール、ラウリンアルデヒド、デカン酸メチル、ラウリン酸メチル、ノナン酸メチル、ウンデカン酸メチル、メチル-9-ウンデセノエート、ミリスチン酸、ネロリドール、イソ酪酸ネリル、酢酸ノニル、酪酸オクチル、ヘキサン酸フェネチル、２-フェノキシルエチルイソブチレート、トリデカナール、トリデカン酸、トリデカノール、２-トリデセナール及び２-ウンデカノン。それらの低温殺菌添加剤は、好ましくは１ミリモル以下、特に０.１ミリモル以下の濃度で存在する。
【００２３】
そのリストから、酢酸デシル、ラウリン酸、ラウリンアルデヒド、ラウリンアルコール、２-ドデセナール、エチル−２−デセノエート、ゲラニルアセトン及び酢酸ゲラニルが特に好ましい。
【００２４】
理論にしばられることを欲しないが、少なくとも茶系飲料におけるこれらの低温殺菌添加剤の殺真菌性作用の様式は、微生物の膜の破裂に関すると考えられる。高温度において、これらの化合物は、膜の中に入ることができ、細胞溶解により微生物の死をもたらすと考えられる。
【００２５】
本願発明者らは先に記載した化合物のみが、低温殺菌添加剤としてこのように機能し得る化合物ではないことを前提とした。それらの定量的構造活性関係(ＱＳＡＲ)パラメーターに基づいて有効な低温殺菌添加剤が定義され得る。この定義は、公知の又は現在まで知られていない化学的化合物を包含する。上記の試験された低温殺菌添加剤の完全なリストを図１１においてそれらの分子量及びｌｏｇＰｏｃｔに関してプロットした。その図から、本願発明者らは、好ましい低温殺菌添加剤は、１７０乃至２３０ダルトンの分子量及び３.５乃至５.５のｌｏｇＰｏｃｔ値を有する化合物と定義されることができると予測する。
【００２６】
水質は、飲料の安定性を非常に害し得る。水質は、冷間充填用の飲料、特に茶系飲料を製造するときに重要な因子である。その目的のために、生産のすべての工程において用いられる水の酵母菌含量を最少にすることがしばしば重要である。技術が知られている方法には塩素化／脱塩素化及びＵＶ照射が含まれる。
【００２７】
本願発明の方法により製造される、環境に安定な飲料は、炭酸化されていないもの又は炭酸化されたものであることができる。炭酸化は、それ自体、防腐効果を与えるようであり、従って、炭酸化製品の配合は、炭酸化されていないものと同じである必要はない。
【００２８】
茶は、それ自体、ある抗菌性及び抗ウィルス性を有することが知られている。茶が酵母菌及び糸状菌の増殖を抑制し始めることを証明するためには約３％の濃度を超えなければならない。茶系飲料について典型的な、これより低い濃度において、茶は、微生物損傷に対する潜在力を増大する栄養分として作用する。
【００２９】
茶系飲料中で典型的に増殖し得るほとんどの微生物は、糖、窒素源、酸素、亜鉛、マグネシウム、カリウム、リン酸塩及びビタミン類で増殖する。従って、糖含量を８乃至１０ブリックス度に制限することは有利であるが、しかし、その製品が茶配合物である場合に６０ブリックス度まで使用することができる。酸素含量は、予備低温殺菌又はいくらかの熱処理又は窒素散布により最小にされ得る。茶系飲料の無機質含量は、ＥＤＴＡ、クエン酸塩、又は硬水軟化剤を用いて最小にされ得る。例えば、マグネシウムイオンの濃度が０．２ｐｐｍを超える場合、微生物は、茶中で増殖し得て、亜鉛は痕跡量しか必要でない。クエン酸塩は味に影響を与えるので、この目的のためにはクエン酸塩を注意深く使用しなくてはならない。
【００３０】
本発明を図面を参照して下記の実施例において記載する。
【００３１】
実施例１
インスタント茶飲料実験
図１は、茶０．１４％のインスタント茶飲料(Ｒｅａｄｙ  ｔｏ  Ｄｒｉｎｋ  ｔｅａ)において、０乃至２００ｐｐｍで用いられた、低温殺菌添加剤である酢酸デシルを示す。ｐＨ３．４の１０ｍｌのインスタント茶飲料を含有する３０ｍｌの管の列を水浴中、所定の温度で７分間平衡にし、その後、酵母菌、Ｓａｃｃａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ  Ｘ２１８０−１Ｂの１０４細胞／ｍｌを接種した。それらの管を２分間その温度で保ち、その後、冷水中で５分間、迅速に冷却した。次にそれらの管を２５℃において１４日間、インキュベーションし、生存している酵母菌を増殖させた。１４日目に、ｘ１１の稀釈試料において６００ｎｍでの光学濃度により増殖を測定した。低温殺菌添加剤は低温において、低温殺菌添加剤なしで６０℃まで加熱したときと同様に、酵母菌増殖においてほとんど効果を有しなかった。加熱＋低温殺菌添加剤は、顕著な組み合わされた相乗的効果を示した。
【００３２】
図２は、茶０．１４％のインスタント茶飲料において、０乃至２００ｐｐｍで用いられた、低温殺菌添加剤であるラウリン酸を示す。ｐＨ３．４の１０ｍｌのインスタント茶飲料を含有する３０ｍｌの管の列を水浴中、所定の温度で７分間平衡にし、その後、酵母菌、Ｓａｃｃａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ  Ｘ２１８０−１Ｂの１０４細胞／ｍｌを接種した。それらの管を２分間その温度で保ち、その後、冷水中で５分間、迅速に冷却した。次にそれらの管を２５℃において１４日間、インキュベーションし、生存している酵母菌を増殖させた。１４日目に、ｘ１１の稀釈試料において６００ｎｍでの光学濃度により増殖を測定した。低温殺菌添加剤は低温において、低温殺菌添加剤なしで６０℃まで加熱したときと同様に、酵母菌増殖においてほとんど効果を有しなかった。加熱＋低温殺菌添加剤は、顕著な組み合わされた相乗的効果を示した。
【００３３】
図３は、茶０．１４％のインスタント茶飲料において、０乃至２００ｐｐｍで用いられた、低温殺菌添加剤であるラウリンアルコールを示す。ｐＨ３．４の１０ｍｌのインスタント茶飲料を含有する３０ｍｌの管の列を水浴中、所定の温度で７分間平衡にし、その後、酵母菌、Ｓａｃｃａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ  Ｘ２１８０−１Ｂの１０４細胞／ｍｌを接種した。それらの管を２分間その温度で保ち、その後、冷水中で５分間、迅速に冷却した。次にそれらの管を２５℃において１４日間、インキュベーションし、生存している酵母菌を増殖させた。１４日目に、ｘ１１の稀釈試料において６００ｎｍでの光学濃度により増殖を測定した。低温殺菌添加剤は低温において、低温殺菌添加剤なしで６０℃まで加熱したときと同様に、酵母菌増殖においてほとんど効果を有しなかった。加熱＋低温殺菌添加剤は、顕著な組み合わされた相乗的効果を示した。
【００３４】
図４は、茶０．１４％のインスタント茶飲料において、０乃至２００ｐｐｍで用いられた、低温殺菌添加剤であるラウリンアルデヒドを示す。ｐＨ３．４の１０ｍｌのインスタント茶飲料を含有する３０ｍｌの管の列を水浴中、所定の温度で７分間平衡にし、その後、酵母菌、Ｓａｃｃａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ  Ｘ２１８０−１Ｂの１０４細胞／ｍｌを接種した。それらの管を２分間その温度で保ち、その後、冷水中で５分間、迅速に冷却した。次にそれらの管を２５℃において１４日間、インキュベーションし、生存している酵母菌を増殖させた。１４日目に、ｘ１１の稀釈試料において６００ｎｍでの光学濃度により増殖を測定した。低温殺菌添加剤は低温において、低温殺菌添加剤なしで６０℃まで加熱したときと同様に、酵母菌増殖においてほとんど効果を有しなかった。加熱＋低温殺菌添加剤は、顕著な組み合わされた相乗的効果を示した。
【００３５】
図５は、茶０．１４％のインスタント茶飲料において、０乃至２００ｐｐｍで用いられた、低温殺菌添加剤である酢酸ゲラニルを示す。ｐＨ３．４の１０ｍｌのインスタント茶飲料を含有する３０ｍｌの管の列を水浴中、所定の温度で７分間平衡にし、その後、酵母菌、Ｓａｃｃａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ  Ｘ２１８０−１Ｂの１０４細胞／ｍｌを接種した。それらの管を２分間その温度で保ち、その後、冷水中で５分間、迅速に冷却した。次にそれらの管を２５℃において１４日間、インキュベーションし、生存している酵母菌を増殖させた。１４日目に、ｘ１１の稀釈試料において６００ｎｍでの光学濃度により増殖を測定した。低温殺菌添加剤は低温において、低温殺菌添加剤なしで６０℃まで加熱したときと同様に、酵母菌増殖においてほとんど効果を有しなかった。加熱＋低温殺菌添加剤は、顕著な組み合わされた相乗的効果を示した。
【００３６】
図６は、茶０．１４％のインスタント茶飲料において、０乃至２００ｐｐｍで用いられた、低温殺菌添加剤であるゲラニルアセトンを示す。ｐＨ３．４の１０ｍｌのインスタント茶飲料を含有する３０ｍｌの管の列を水浴中、所定の温度で７分間平衡にし、その後、酵母菌、Ｓａｃｃａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ  Ｘ２１８０−１Ｂの１０４細胞／ｍｌを接種した。それらの管を２分間その温度で保ち、その後、冷水中で５分間、迅速に冷却した。次にそれらの管を２５℃において１４日間、インキュベーションし、生存している酵母菌を増殖させた。１４日目に、ｘ１１の稀釈試料において６００ｎｍでの光学濃度により増殖を測定した。低温殺菌添加剤は低温において、低温殺菌添加剤なしで６０℃まで加熱したときと同様に、酵母菌増殖においてほとんど効果を有しなかった。加熱＋低温殺菌添加剤は、顕著な組み合わされた相乗的効果を示した。
【００３７】
図７は、茶０．１４％のインスタント茶飲料において、０乃至２００ｐｐｍで用いられた、低温殺菌添加剤であるエチル−２−デセノエートを示す。ｐＨ３．４の１０ｍｌのインスタント茶飲料を含有する３０ｍｌの管の列を水浴中、所定の温度で７分間平衡にし、その後、酵母菌、Ｓａｃｃａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ  Ｘ２１８０−１Ｂの１０４細胞／ｍｌを接種した。それらの管を２分間その温度で保ち、その後、冷水中で５分間、迅速に冷却した。次にそれらの管を２５℃において１４日間、インキュベーションし、生存している酵母菌を増殖させた。１４日目に、ｘ１１の稀釈試料において６００ｎｍでの光学濃度により増殖を測定した。低温殺菌添加剤は低温において、低温殺菌添加剤なしで６０℃まで加熱したときと同様に、酵母菌増殖においてほとんど効果を有しなかった。加熱＋低温殺菌添加剤は、顕著な組み合わされた相乗的効果を示した。
【００３８】
図８は、茶０．１４％のインスタント茶飲料において、０乃至２００ｐｐｍで用いられた、低温殺菌添加剤である、酢酸デシル：ラウリン酸の９：１混合物を示す。ｐＨ３．４の１０ｍｌのインスタント茶飲料を含有する３０ｍｌの管の列を水浴中、所定の温度で７分間平衡にし、その後、酵母菌、Ｓａｃｃａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ  Ｘ２１８０−１Ｂの１０４細胞／ｍｌを接種した。それらの管を２分間その温度で保ち、その後、冷水中で５分間、迅速に冷却した。次にそれらの管を２５℃において１４日間、インキュベーションし、生存している酵母菌を増殖させた。１４日目に、ｘ１１の稀釈試料において６００ｎｍでの光学濃度により増殖を測定した。低温殺菌添加剤は低温において、低温殺菌添加剤なしで６０℃まで加熱したときと同様に、酵母菌増殖においてほとんど効果を有しなかった。加熱＋低温殺菌添加剤は、顕著な組み合わされた相乗的効果を示した。
【００３９】
実施例２
合成ソフトドリンク実験
図９は、茶含量０の合成ソフトドリンクにおいて、０乃至１００ｐｐｍで用いられた、低温殺菌添加剤の効果を示す。合成ソフトドリンクは、グルコースを８％ｗ／ｖ、クエン酸を３ｇ／ｌ、オルト燐酸カリウムを１ｇ／ｌ、塩化マグネシウムを０．１ｇ／ｌ及び酵母菌抽出物を０．１ｇ／ｌ含有した。ｐＨ３．４の１０ｍｌの合成ソフトドリンクを含有する３０ｍｌの管の列を水浴中、所定の温度で７分間平衡にし、その後、酵母菌、Ｓａｃｃａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ  Ｘ２１８０−１Ｂの１０４細胞／ｍｌを接種した。それらの管を２分間その温度で保ち、その後、冷水中で５分間、迅速に冷却した。次にそれらの管を２５℃において１４日間、インキュベーションし、生存している酵母菌を増殖させた。１４日目に、ｘ１１の稀釈試料において６００ｎｍでの光学濃度により増殖を測定した。低温殺菌添加剤は低温においては酵母菌増殖においてほとんど効果を有しなかった。５０℃の温度＋低温殺菌添加剤は、顕著な組み合わされた相乗的効果を示した。
【００４０】
実施例３
細菌実験
図１０は、茶０．１４％のインスタント茶飲料において又は合成ソフトドリンクにおいて、加熱＋０乃至１００ｐｐｍで用いられた、低温殺菌添加剤である、酢酸デシル又はラウリン酸の９：１混合物を示す。ｐＨ３．４の１０ｍｌの茶０．１４％のインスタント茶飲料又はソフトドリンクを含有する３０ｍｌの管の列を水浴中、所定の温度で７分間平衡にし、その後、Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ種２２２の１０４細胞／ｍｌを接種した。それらの管を２分間その温度で保ち、その後、冷水中で５分間、迅速に冷却した。次にそれらの管を２５℃において１４日間、インキュベーションし、生存している細菌を増殖させた。１４日目に、視覚で増殖を測定した。低温殺菌添加剤は低温において、低温殺菌添加剤なしで６０℃まで加熱したときと同様に、細菌増殖においてほとんど効果を有しなかった。加熱＋低温殺菌添加剤は、顕著な組み合わされた相乗的効果を示した。
【００４１】
実施例４
好ましい低温殺菌添加剤の特定
図１１は、低温殺菌添加剤として機能できる化合物の分子量／分配係数のスキャッター(Ｓｃａｔｔｅｒ)プロットである。それらの化合物は、表１に、ｌｏｇＰｏｃｔ(分配係数)及び分子量(Ｍ．Ｗ．)とともに挙げられている。化合物を低温殺菌添加剤として、高い、中位又は低いと評価した。最も好ましい、高い効果を有する化合物は、一般的に、３０℃と比較して５０℃においては、ＭＩＣ、最小阻止濃度で少なくとも５分の１の低減を示した。
【００４２】
実施例５
高い効果を有する低温殺菌添加剤を用いる実験
図１２乃至４７は、ｐＨ３．４のＹＥＰＤ培地において試験した表１に挙げられた高い効果を有する低温殺菌添加剤を示す。ＹＥＰＤは、グルコースを２０ｇ／ｌ、ペプトンを２０ｇ／ｌ及び酵母菌抽出物を１０ｇ／ｌ含有した。ｐＨ３．４の１０ｍｌのＹＥＰＤを含有する３０ｍｌの管の列を水浴中、所定の温度で７分間平衡にし、その後、酵母菌、Ｓａｃｃａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ  Ｘ２１８０−１Ｂの１０４細胞／ｍｌを接種した。それらの管を１０分間その温度で保ち、その後、冷水中で５分間、迅速に冷却した。次にそれらの管を２５℃において４８時間、インキュベーションし、生存している酵母菌を増殖させ、個別のコロニーを形成させた。低温殺菌添加剤は低温において、酵母菌生存においてほとんど効果を有しなかった。５０℃の温度＋低温殺菌添加剤は、迅速に酵母菌接種物を殺す作用をする、顕著な組み合わされた相乗的効果を示した。
【００４３】
実施例６
中位の効果を有する低温殺菌添加剤を用いる実験
図４８乃至６３は、ｐＨ３．４のＹＥＰＤ培地において試験した表１に挙げられた中位の効果を有する低温殺菌添加剤を示す。ＹＥＰＤは、グルコースを２０ｇ／ｌ、ペプトンを２０ｇ／ｌ及び酵母菌抽出物を１０ｇ／ｌ含有した。ｐＨ３．４の１０ｍｌのＹＥＰＤを含有する３０ｍｌの管の列を水浴中、所定の温度で７分間平衡にし、その後、酵母菌、Ｓａｃｃａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ  Ｘ２１８０−１Ｂの１０４細胞／ｍｌを接種した。それらの管を１０分間その温度で保ち、その後、冷水中で５分間、迅速に冷却した。次にそれらの管を２５℃において４８時間、インキュベーションし、生存している酵母菌を増殖させ、個別のコロニーを形成させた。低温殺菌添加剤は低温において、酵母菌生存においてほとんど効果を有しなかった。５０℃の温度＋低温殺菌添加剤は、迅速に酵母菌接種物を殺す作用をする、顕著な組み合わされた相乗的効果を示した。
【００４４】
実施例７
低い効果を有する低温殺菌添加剤を用いる実験
図６４乃至７７は、ｐＨ３．４のＹＥＰＤ培地において試験した表１に挙げられた低い効果を有する低温殺菌添加剤を示す。ＹＥＰＤは、グルコースを２０ｇ／ｌ、ペプトンを２０ｇ／ｌ及び酵母菌抽出物を１０ｇ／ｌ含有した。ｐＨ３．４の１０ｍｌのＹＥＰＤを含有する３０ｍｌの管の列を水浴中、所定の温度で７分間平衡にし、その後、酵母菌、Ｓａｃｃａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ  Ｘ２１８０−１Ｂの１０４細胞／ｍｌを接種した。それらの管を１０分間その温度で保ち、その後、冷水中で５分間、迅速に冷却した。次にそれらの管を２５℃において４８時間、インキュベーションし、生存している酵母菌を増殖させ、個別のコロニーを形成させた。低温殺菌添加剤は低温において、酵母菌生存においてほとんど効果を有しなかった。５０℃の温度＋低温殺菌添加剤は、迅速に酵母菌接種物を殺す作用をする、顕著な組み合わされた相乗的効果を示した。
【００４５】
実施例８
対照実験
図７８乃至８２は、ｐＨ３．４のＹＥＰＤ培地において試験した低温殺菌添加剤としてほとんど効果を示さない対照化合物を示す。ＹＥＰＤは、グルコースを２０ｇ／ｌ、ペプトンを２０ｇ／ｌ及び酵母菌抽出物を１０ｇ／ｌ含有した。ｐＨ３．４の１０ｍｌのＹＥＰＤを含有する３０ｍｌの管の列を水浴中、所定の温度で７分間平衡にし、その後、酵母菌、Ｓａｃｃａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ  Ｘ２１８０−１Ｂの１０４細胞／ｍｌを接種した。それらの管を１０分間その温度で保ち、その後、冷水中で５分間、迅速に冷却した。次にそれらの管を２５℃において４８時間、インキュベーションし、生存している酵母菌を増殖させ、個別のコロニーを形成させた。対照化合物は低温において、酵母菌生存において標準の効果を有し、５０℃の温度において、活性における非常にわずかな改良しか示さなかった。
【図面の簡単な説明】
【図１】  茶０.１４％のインスタント茶飲料(Ｒｅａｄｙ  ｔｏ  Ｄｒｉｎｋ  ｔｅａ)において、０乃至２００ｐｐｍで用いられた、低温殺菌添加剤である酢酸デシルを示す。
【図２】  茶０.１４％のインスタント茶飲料において、０乃至２００ｐｐｍで用いられた、低温殺菌添加剤であるラウリン酸を示す。
【図３】  茶０.１４％のインスタント茶飲料において、０乃至２００ｐｐｍで用いられた、低温殺菌添加剤であるラウリンアルコールを示す。
【図４】  茶０.１４％のインスタント茶飲料において、０乃至２００ｐｐｍで用いられた、低温殺菌添加剤であるラウリンアルデヒドを示す。
【図５】  茶０.１４％のインスタント茶飲料において、０乃至２００ｐｐｍで用いられた、低温殺菌添加剤である酢酸ゲラニルを示す。
【図６】  茶０.１４％のインスタント茶飲料において、０乃至２００ｐｐｍで用いられた、低温殺菌添加剤であるゲラニルアセトンを示す。
【図７】  茶０.１４％のインスタント茶飲料において、０乃至２００ｐｐｍで用いられた、低温殺菌添加剤であるエチル-２-デセノエートを示す。
【図８】  ０.１４％茶のインスタント茶飲料において、０乃至２００ｐｐｍで用いられた、低温殺菌添加剤である、酢酸デシル：ラウリン酸の９：１混合物を示す。
【図９】  茶含量０の合成ソフトドリンクにおいて、０乃至１００ｐｐｍで用いられた低温殺菌添加剤の効果を示す。
【図１０】  茶０.１４％のインスタント茶飲料又は合成ソフトドリンクにおいて、０乃至１００ｐｐｍで用いられた、低温殺菌添加剤である酢酸デシル又はラウリン酸＋熱の、細菌における効果を示す。
【図１１】  低温殺菌添加剤として機能することができる化合物の分子量／分配係数のスキャッター(Ｓｃａｔｔｅｒ)プロットである。
【図１２】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図１３】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図１４】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図１５】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図１６】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図１７】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図１８】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図１９】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図２０】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図２１】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図２２】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図２３】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図２４】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図２５】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図２６】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図２７】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図２８】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図２９】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図３０】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図３１】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図３２】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図３３】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図３４】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図３５】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図３６】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図３７】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図３８】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図３９】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図４０】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図４１】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図４２】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図４３】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図４４】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図４５】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図４６】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図４７】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、高効果の低温殺菌添加剤を示す。
【図４８】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、中度の効果を示す低温殺菌添加剤を示す。
【図４９】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、中度の効果を示す低温殺菌添加剤を示す。
【図５０】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、中度の効果を示す低温殺菌添加剤を示す。
【図５１】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、中度の効果を示す低温殺菌添加剤を示す。
【図５２】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、中度の効果を示す低温殺菌添加剤を示す。
【図５３】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、中度の効果を示す低温殺菌添加剤を示す。
【図５４】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、中度の効果を示す低温殺菌添加剤を示す。
【図５５】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、中度の効果を示す低温殺菌添加剤を示す。
【図５６】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、中度の効果を示す低温殺菌添加剤を示す。
【図５７】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、中度の効果を示す低温殺菌添加剤を示す。
【図５８】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、中度の効果を示す低温殺菌添加剤を示す。
【図５９】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、中度の効果を示す低温殺菌添加剤を示す。
【図６０】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、中度の効果を示す低温殺菌添加剤を示す。
【図６１】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、中度の効果を示す低温殺菌添加剤を示す。
【図６２】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、中度の効果を
示す低温殺菌添加剤を示す。
【図６３】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、中度の効果を示す低温殺菌添加剤を示す。
【図６４】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、低効果を示す低温殺菌添加剤を示す。
【図６５】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、低効果を示す低温殺菌添加剤を示す。
【図６６】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、低効果を示す低温殺菌添加剤を示す。
【図６７】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、低効果を示す低温殺菌添加剤を示す。
【図６８】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、低効果を示す低温殺菌添加剤を示す。
【図６９】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、低効果を示す低温殺菌添加剤を示す。
【図７０】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、低効果を示す低温殺菌添加剤を示す。
【図７１】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、低効果を示す低温殺菌添加剤を示す。
【図７２】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、低効果を示す低温殺菌添加剤を示す。
【図７３】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、低効果を示す低温殺菌添加剤を示す。
【図７４】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、低効果を示す低温殺菌添加剤を示す。
【図７５】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、低効果を示す低温殺菌添加剤を示す。
【図７６】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、低効果を示す低温殺菌添加剤を示す。
【図７７】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、低効果を示す低温殺菌添加剤を示す。
【図７８】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、ほとんど効果を示さない低温殺菌添加剤を示す。
【図７９】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、ほとんど効果を示さない低温殺菌添加剤を示す。
【図８０】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、ほとんど効果を示さない低温殺菌添加剤を示す。
【図８１】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、ほとんど効果を示さない低温殺菌添加剤を示す。
【図８２】  ｐＨ３.４のＹＥＰＤ培地において試験した、表１に挙げられた、ほとんど効果を示さない低温殺菌添加剤を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【図３７】
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【図３８】
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【図３９】
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【図４０】
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【図４１】
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【図４２】
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【図４３】
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【図４４】
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【図４５】
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【図４６】
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【図４７】
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【図４８】
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【図４９】
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【図５０】
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【図５１】
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【図５２】
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【図５３】
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【図５４】
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【図５５】
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【図５６】
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【図５７】
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【図５８】
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【図５９】
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【図６０】
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【図６１】
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【図６２】
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【図６３】
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【図６４】
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【図６５】
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【図６６】
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【図６７】
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【図６８】
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【図６９】
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【図７０】
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【図７１】
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【図７２】
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【図７３】
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【図７４】
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【図７５】
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【図７６】
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【図７７】
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【図７８】
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【図７９】
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【図８０】
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【図８１】
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【図８２】
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