(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
癒着防止バリヤーとして使用するための生体再吸収性の酸化セルロース多層フィルムを形成する方法であって、
セルロースフィルムを表面上に広げる工程と、
少なくとも１層のセルロース織布材料を、生体再吸収性材料を形成するために酸化可能な接着剤材料を用いて前記セルロースフィルムと結合させて、多層フィルムを形成する工程と、
前記多層フィルムを酸化する工程と、
前記多層フィルムを滅菌する工程と、
を含む、酸化セルロース多層フィルムを形成する方法。
【請求項２】
癒着防止バリヤーとして使用するための生体再吸収性の酸化セルロース多層フィルムを形成する方法であって、
セルロースフィルムを表面上に広げる工程と、
少なくとも１層のセルロース織布材料を、生体再吸収性材料を作るために酸化が可能な被酸化性炭水化物接着剤材料を使用しながら前記セルロースフィルムと結合させて多層フィルムを形成する工程と、
二酸化窒素の存在の下で４時間〜４８時間、２０℃〜３５℃の温度で、１気圧〜５気圧の圧力で、前記多層フィルムを酸化する工程と、
前記多層フィルムを滅菌する工程と、
を含む、酸化セルロース多層フィルムを形成する方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は癒着を防止するための物理的バリヤーに関し、さらに詳細には、手術後の癒着を防止するための酸化セルロースフィルムからなる生体再吸収性の酸化セルロース複合材料に関する。
【０００２】
【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】
癒着あるいは傷組織ブリッジは内に伸びる線維芽細胞に関連した繊維素によって２つ以上の体の表面の異常な結合である。特定の病原は十分に理解されないが、そのような癒着は手術に関連した手先による外傷と化学的外傷の結果として生じる傾向がある。そのような癒着は手術後の罹患率と死亡率の主な原因となる。実際には、全ての手術の９０％までがそのような癒着を起こし、これらの癒着の約１０％が患者に対し重い合併症を引き起す。Ellis,H., 腸癒着の原因と防止、Br.J.Surg. 69, 241■43, 1982, Weibel, M.A.,Majino,G.,腹膜癒着と腹部手術に対するその関係、Am.J.Surg.126,345■53,1973 。そのような合併症は場所が特定され、不妊症、腸閉塞、関節移範囲の縮小などが含まれる。例えば、心臓手術後に癒着が形成されると、次の胸骨切除の危険がさらに増大する。Dobell,A.R.C. とJain,A.K.,再胸骨切除時の大出血、 Ann.Teac.Surg.273■278、 1984。
【０００３】
患者にとって潜在的に危険で外科医にとって厄介な癒着は１００年もの間、研究の対象になっている。これまでの癒着防止の試みは以下のように分けることができる。すなわち、（１）繊維素の沈着の防止、（２）繊維素浸出液の除去、（３）繊維芽細胞の増殖の抑制及び（４）表面の分離である。
これらの各アプローチはわずかに成功をみたが、今までのところ治療期間中に組織の並置を制限するための物理的バリヤーの使用によって最も確実な結果がもたらされている。Wiseman, D.M.,のPolimer Site Specific Pharmacotherapy での手術癒着の防止、369■421頁（A. Domb ed. 1994）（John Wiley, Chichester,出版社）。物理的バリヤーの使用に対する早期のアプローチでは魚の膀胱膜から銀箔と金箔まで全てを使用した。しかしながら、これらの試みは癒着の形成を防止するのに必要な長期的効果がないことが直ぐにわかった。最新のアプローチではゲルと液体を使用しているが、これまでで最も見込みのあるアプローチでは固体物理的バリヤーを利用するものであった。
【０００４】
固体物理的バリヤーを使用する伝統的なアプローチの一つは、ポリテトラフルオロエチレン（「ＰＴＦＥ」）を使用するもので、Hubbelらによる米国特許第５，４６８，５０５号に記載されているように所定の分離が達成された。Haney, A.F., Hesla,J., Hurt,B., Kettle,L.M., Murphy,A.A., Rock,J.A., Rowe G & Schelaff,W.D.,骨盤側壁癒着矯正手術バリヤー：広げられたポリテトラフルオロエチレン（ゴアテックス（商標）手術膜）は酸化再生セルロース（Interceed: TC7）、Fertil Steril(Prog Supp),p265 ,$210(1994）。組織を所定通り物理的に分離できるが、上記ＰＴＦＥは非吸収性であり、そのため好ましくない。体内に残した異材（異物）が原因で起きる感染の可能性が高いことは当業界でよく知られている。ポリラクチド、ポリグリコリドとそれらのコポリマーなどの吸収性材料から作られた物理的バリヤーを利用する試みは、その吸収性材料の多孔性と繊維特性が異物に対する体の防御機構を悪化させるため、部分的にだけ成功した。Wiseman, D.M.のPolimer Site Specific Pharmacotherapy での手術癒着の防止、369■421頁（A. Domb ed. 1994年）（John Wiley, Chichester, 出版社）。ジョンソン＆ジョンソンが商標名INTERCEED （ＴＣ７）吸収性癒着バリヤーで市販するバリヤーのようなバリヤーは、そのバリヤーが、組織と反応しにくい酸化再生セルロース（「ＯＲＣ」）からなるためそれ以上に成功を納めた。しかしながら、Linskyらによる米国特許第４，８４０，６２６号に記載されたＯＲＣからなるバリヤーでも、（１）その材料が、繊維素がバリヤーの一端から他端まで通過しないようには水和時に十分素早く閉鎖しない孔があるという点により幾分、制限された使用だけが行なわれた。癒着の形成を開始するのは一組織から他の組織へのこの繊維素のブリッジによるものである。本発明の複合材料の発明者らは、心膜癒着の防止のためなどに適用する場合や炎症による長い繊維素沈着が生じる状況において、より実際的な小さな孔のバリヤーが癒着防止に要求され、また、（２）そのバリヤーは、臓器が動いて分解と強制移動が簡単になるある解剖部位（例えば心臓周囲）で余りに早くその保全性と位置が守れないことに気がついた。
【０００５】
酸化セルロースからなる材料は小さな組織反応を引き起こすことが知られている。このことはイーストマンコダック研究所でW.Kenyonによって１９３６年に最初に発見された。Kenyon氏のセルロースの酸化に関する基本的な研究中に、新種の製品が二酸化窒素を使用するセルロースの酸化によって製造できることが発見された。その新しい材料はアリカリに溶解し、通常のもろい材料とは対照的に、セルロースを酸化する別の方法によって製造され、新しい材料はその元の形状とその元の引張り強さそのものを維持した。その新製品は無水グルコースと無水グルクロン酸のコポリマーであることが示された。この新しい酸化セルロース材料は、後に、パークデービスとジョンソン＆ジョンソンによって生体吸収性織布止血鉗子に開発された。そのプロセスの優れた議論は以下の参考文献で見ることができる。その文献の全てを本明細書に参考として含める。その文献は、Kenyon,R.,セルロースの酸化、INDUS.&ENGIN. CHEM. vol. 41(1)2-8,1949、米国特許第２，２３２，９９０号、第２，２９８，３８７号、第３，３６４，２００号、及び第５，１８０，３９８号及びその外国対応特許（出願）ＥＰ０，４９２，９９０号、及び日本出願第３６１０８３／９１である。
【０００６】
従って、（１）従来の織られたあるいは編まれた織布材料より非常に多孔性が低く、（２）所定の場所に容易に、確実に取り付け可能で、また（３）繊維素の沈着と細胞質の内部への伸長が可能になる孔を含まない手術後の癒着防止用生体再吸収性物理的バリヤーが要請されている。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明の１つの態様によれば、酸化セルロースの連続的な複合材フィルムを物理的バリヤーとして使い、組織の並置を制限し、それにより、手術後の癒着を減らすか略防止する。この連続的な複合材フィルムの使用により現在使用されている多孔質織布を使用することにより生じた問題を解消する。酸化セルロース複合材はセルロースフィルムと、レーヨン、セルロース織布あるいは不織布あるいはセルロース紙のような内部引き裂きストッパー材料のサンドイッチ状多層を形成することによって構成される。そのセルロースフィルムと織布あるいは紙を、酸化により再吸収性になる澱粉、メチルセルロースあるいは微結晶性セルロースペーストのようなセルロース接着剤と接着させる。同時係属出願の米国出願第    号を参照のこと。その複合材は、複合材を再吸収性にする二酸化窒素で酸化される。続いて、その複合材はガンマ照射で滅菌することができる。この酸化工程にりセルロースポリマーのヒドロキシル基がカルボキシル基に変えられ、水性及び酵素加水分解を受けやすいポリマーになる。そのため得られる材料は外科移植用再吸収性医療品の製造に有益である。得られた酸化セルロース多層複合材フィルムは、滑らかでつるつるした連続的な非多孔性表面が組織と接触するという利点が加わった酸化セルロースからなる再吸収性織布の望ましい特性（例えば再吸収性、縫合性、低組織反応性など）のすべてを備えている。この複合材フィルムは引き裂きストッパー材料を含むため、例えば心膜パッチとして所定の場所で縫合することができる。
【０００８】
また、細胞と分子の付着は、吸収に有効な表面領域が少ないため織布表面の場合と比較して滑らかなフィルム面では少なくなる。この特徴は物理的バリヤーの成功率を大きく改良するものである。複数の基質に対する細胞の癒着は、それらの機能の多くに影響を与え、そのため成長、食作用、止血及び移植材料に対する組織の反応を含む多種の生物学的プロセスにおいて重要な役割を果たしている。１９８６年９月のアメリカ化学  学会（American Chemical Society ）後援の生体適合材の表面特性に関するシンポジウムにおいて、Buddy Ratnerらは、生体適合材の移植組織の滑らかな表面は粗い表面より細胞反応と組織炎症が少ないことを示した。
【０００９】
さらに、酸化セルロース多層フィルムは、フレキシブルで耐久性があり、最も重要なことに縫合性がある。この材料のフレキシビリティ（柔軟性）は、使用直前に食塩水かその他、生理的に受け入れられる流体で濡らすことによって改良される。従って、この多層フィルムは所定の場所に容易にしかも確実に（例えば縫合で）取り付けることができる。酸化セルロース多層フィルムはまた、粘着性がなく、そのため手袋や手術用器具に付着しない。
【００１０】
本発明の他の態様では、酸化セルロースフィルムは引き裂きストッパー材と結合せずに使用できる。その酸化セルロースフィルムだけでは縫合した際、破れるために、繊維素接着剤かシアノアクリレートベースの接着剤のような生理的に受け入れられる組織接着剤で酸化セルロースフィルムを所定位置に固定することができる。酸化セルロースフィルムのみで適切な物理的バリヤーとして作用し、それでそのフィルムの滑らかな性質によりその表面に対する細胞と分子の付着が少なくなる。
【００１１】
本発明の別の態様では、酸化セルロース複合フィルム材料は、ヘパリンのような薬治療と組み合わせてこの物理的バリヤーの効力を増大することができる。そのような薬は表面吸収か、酸化後と仕上げ乾燥前に薬の溶液中に複合材に浸すことによって複合材に接着してもよい。関連する応用では、酸化セルロース複合フィルム材料は傷用の包帯として使用することができる。そのフレキシビリティと薬吸収特性により酸化セルロース複合フィルム材料は独特の傷用包帯として使用される。さらに、そのような傷用包帯は１種以上の薬を傷の部位に投与してその傷の治療に当てることができる。
【００１２】
そのプロセスの態様では本発明は本発明の酸化セルロース複合フィルム材料を形成する方法を含む。さらに、本発明の別のプロセスの態様は、本発明の酸化セルロース複合フィルム材料からなる物理的バリヤーとして手術部位とその隣接組織の間に配置して組織の並置を制限することによって手術後の癒着を防止することにある。
その酸化セルロース複合材フィルム多層物理的バリヤーを使用することによって取り付けの容易性と安全性とその材料に対して減少した生体反応性は勿論、組織並置を制限するのに必要な物理的バリヤーとＯＲＣ材料の生体吸収性が与えられる。
【００１３】
本発明のさらに別の態様では、酸化セルロースフィルムは傷の包帯として使用される。そして本発明のさらに別の態様では、傷の包帯として使用される酸化セルロースフィルムは薬の投与装具として利用され、それにより１種以上の薬を傷の部位に投与して傷の治療の一躍を担う。
【００１４】
【発明の実施の形態】
本発明の好ましい態様では、酸化セルロース多層フィルムを物理的バリヤーとして手術の部位とその隣接組織との間に配置して組織の並置を制限し、それにより手術後の癒着の形成を減少させる。酸化セルロース多層フィルムを、そのような酸化セルロース多層フィルムを形成する本発明の方法の好ましい態様に従って形成する。この酸化セルロース多層フィルムは、（２）２枚のセルロースフィルムシートの間に挟まれ、（３）メチルセルロースあるいは澱粉糊（スターチペースト）の接着剤で共に接着された（１）繊維セルロース層からなる。次に、この複合材料を酸化して酸化セルロース多層フィルムを製造する。
【００１５】
ダウケミカル社製のMETHOCEL A4M（商標）ブランドメチルセルロースのような約１ｇのメチルセルロース（溶解度１．６５ないし１．９２）を約１４０°Ｆの約５０ｍｌの蒸留水に懸濁させることによってメチルセルロース接着剤を用意した。その懸濁液を室温まで冷却させながら撹拌する。透明で低粘度のメチルセルロース溶液が得られる。次に、セルロースフィルムを蒸留水中で湿らせ、ガラス板あるいは別の滑らかで平らな、一般に非付着面上に平らに置く。適切なセルロースフィルムをインヂアナ州のコビングトンのフレキセル（Flexel）社から得ることもできる。次に、予め用意した少量のメチルセルロース溶液か、あるいは澱粉糊をそのセルロースフィルムの表面に塗る。
【００１６】
次に、ジョンソン＆ジョンソン製のサージセル（商標）あるいはインターシード（INTERCEED ）バリヤー（商標）の製造で使用される編物あるいは織物レーヨン先駆物質のような繊維質セルロース材料をそのセルロースフィルムの新鮮な接着面上に置く。第二セルロースフィルムの一方の表面にメチルセルロース接着剤と澱粉糊を軽く塗り、上記織布の反対側に配置しサンドイッチ状の物を作る。次に、非接着剥離紙その複合材料上に置き、重りを被せて数日間乾燥させた。
【００１７】
２層のみのセルロースフィルムと１層の繊維質セルロース材料を前に説明したが、繊維質セルロース材料の組み合わせの中ではセルロースフィルムあるいは繊維質セルロース材料が何層でも必要なら使用することができることに留意されたい。
限定はしないが例示のみによって本実施例では５ｋｇの重りを、少なくとも数日の間乾燥した複合材料上に載せた。さらに、本明細書では重りと空気乾燥を使用することを説明したが、必要なら、乾燥は、当業者に知られている標準方法を使用する重り、時間、温度及び空気圧をどのように組み合わせて行なってもよい。乾燥の後、サンドイッチ状多層複合材を秤量し、水酸化ナトリウムトラップベントを備えた重合がまに入れた。その容器を窒素ガスでフラッシュして空気を置換する。酸化窒素を約１０℃に冷やし、複合材の重さの３倍に等しい量を、サイドアームアダプターで重合がまに取り付けた小さなErlenmeyerフラスコに入れた。二酸化窒素を室温に温め、多層複合材が入った重合がま内に拡散させた。多層フィルムを、約２０℃と３５℃の間の温度で二酸化窒素ガス中にその重さの１倍ないし４倍までさらすことによって酸化する。多層フィルム材料は周囲の大気圧で４時間から４８時間の間、二酸化窒素ガスにさらすことが望ましい。二酸化窒素ガスにさらしたのに続き、その容器（重合がま）を純粋な窒素でパージし、得られた酸化セルロース多層複合材フィルムを９０％イソプロプロパノールで洗い空気乾燥する。
【００１８】
その多層複合材フィルムを、グリセロールあるいはポリプロピレングリコール（１０％溶液）を洗浄媒体に添加することにより可塑化してフレキシビリティを与えることができる。酸化の後、酸化セルロースフィルムを酸化レーヨン織布にしっかり付着する。
最後に、多層フィルム材料をパッケージに密封し、ガンマ線照射（１％ＭＲａｄ）により滅菌する。得られた酸化セルロース多層複合材フィルムは０．５ＮのＮａＯＨで完全に溶解して希釈水溶液を得ることがわかった。このことは多層フィルム材料が恐らく生体再吸収性があることを示している。酸化セルロース多層フィルムのカルボキシル含有量を、重量で１０％ないし２２％の間になるように滴定で測定した。可能なその最大％のカルボキシル含有量が２５．５％であるため、これは出発セルロース材料の３７％と８６％の間の第一アルコール基がカルボキシル形態に変わったことを示している。
【００１９】
上記望ましい態様は、ジョンソン＆ジョンソン製のサージセル（商標）あるいはインターシード（INTERCEED ）バリヤー（商標）酸化織布の製造に使用されるレーヨン織布のような繊維質セルロース織布を利用するが、必要なら別の適切な繊維質セルロース織布あるいは材料であれば何でも使用できることに留意されたい。さらに、メチルセルロース接着剤を説明したが、澱粉、ガール、デキストラン、エチルセルロース（溶解度１．６５ないし１．９２）、セルロースモノアセテート（溶解度０．３ないし１．０）、カルボキシメチルセルロース（溶解度０．３８ないし１．４５）、ヒドロキシエチルセルロース（ヘルクレスによりナローゾル（Narrosol ）として商業的に入手可能）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（溶解度１．６５ないし１．９２）、ヒドロキシブチルメチルセルロース（溶解度１．６５ないし１．９２）、ヒドロキシプロピルセルロース（溶解度１．６５ないし１．９２）などの生体吸収可能な材料を製造するための酸化が可能な適切な接着剤あるいは微結晶性セルロース接着剤も必要なら使用できるだろう。酸化セルロース誘導体は同時係属の米国出願第      号に十分論じられている。カルボキシメチルセルロースはアクアロンから入手でき、また０．３８ないし１．４５の溶解度の種々のグレードで入手できる。ヘルクレスから商業的に入手できるエチルセルロースポリマーは２４６の溶解度を有する。この溶解度は非常に高いのでセルロース主鎖の一次及び二次ヒドロキシル基が十分酸化されず、０．５Ｎの水酸化ナトリウムの溶解で明かなように生体再吸収性を示さない。しかしながら、溶解度が０．３ないし１．０の溶解度のエチルセルロースを四酸化窒素で酸化すると、エチルセルロースは変態して生体吸収性の酸化セルロース誘導体になる。
【００２０】
セルロースフィルムは本発明で使用できる材料だけでないことに留意されたい。酸化が可能で、セルロースモノアセテートフィルム（溶解度０．５ないし１．０）、カルボキシメチルセルロースフィルム（溶解度０．３８ないし１．４５）、エチルセルロースフィルム（溶解度０．３ないし１．０）、及びメチルセルロースフィルム（溶解度１．６５ないし１．９２）などの別の生体吸収性のフィルムは、本発明の方法で使用する場合、手術後の癒着に対する適切なバリヤーとしても作用する。同時係属の米国出願第      号では、ＯＲＣ織布に含浸した酸化メチルセルロースの使用を開示している。
この酸化セルロース多層フィルムの比較的滑らかな性質を有する表面は、伝統的なＯＲＣ材料の多孔性繊維質と比べて細胞と巨大分子と他の組織と付着しにくい利点をもたらすと思われる。
【００２１】
使用した試験手順
本発明の種々の酸化セルロース多層フィルムの効力は、兎の心膜癒着と兎の側壁癒着で以下のように判断できる。全ての動物をやみくもにしかもランダムに治療のグループに割り当て皮剥きの完了時にのみ外科医に示す。
心膜癒着モデル
この心膜癒着モデルを、Wiseman,D.M., Kamp,L., Linsky,C.B., Jochen,R.F., Pang,R.H.I., Scholz,P., 繊維素溶解薬は兎の心膜癒着を防止する、I Surg. Res.53, 362■68, 1992 に記載してあるように実施した。麻酔技術と無菌技術の下で、ニュージーランドの白兎の胸郭に胸骨の中央を切開して入る。切開によって心膜を同様に開け、心臓の前面を外科医の人差指に巻いた１枚のガーゼを使用しながら剥いだ。心臓の前面をガーゼを用いて制御した方法で４０回ストロークする。
【００２２】
次に、本方法の生体吸収性癒着バリヤーを使用する場合、必要なら、約２インチ×１インチの軸を有する長円片のバリヤー材料を心臓の前面に配置し、その心膜に縫合する。動物が対照標準動物であれば、物理的癒着バリヤーを使わず、以下に説明するように外科医は次の段階（ステップ）に飛ばす。動物の心膜と胸郭を続けて層に重ねて閉じる。
手術後、２３日ないし３０日間、その動物を生けにえにし、手術後の癒着を評価する。幅１ｃｍで前心臓面の頂から前心臓面のベースまで延在する癒着の百分率に関連する細長い部分（ストリップ）を評価する。その細長い部分は胸骨と密着している心臓の表面部分を示し、その領域は癒着を最も形成し易く、外科医がその胸郭に再び入れようとするには最も困難である。
【００２３】
薬溶液を使用せずに上記心膜テスト手順から得られた結果を以下の表に示す。
0004275204.tif 000002
【００２４】
上に示した治療テスト結果からわかったように、本発明の酸化セルロース多層フィルム癒着バリヤーで治療した動物は、手術後の癒着の形成が著しく減少する（学生のＴテストｐ＜０．００１）。さらに、心臓表面の目視検査では酸化セルロース多層材料によりほとんど炎症が生じないことがわかった。
【００２５】
兎側壁癒着モデル
この兎側壁癒着モデルはDiamond,M.P., Linsky,C.B., Cunningham,T., Constatine B., Dizerega,G.S., Decherney,A.H., 兎における側壁癒着のモデル；吸収性バリヤーによる減少、Microsurgery 8;197-200, 1987。適切な麻酔技術と無菌技術の下で、ニュージーランドの雌の白兎（２−６ｋｇ）を使用して、腹の小さな中線切口を介して腹に入る。１０番のメスを使用し、子宮分岐から約１ｃｍを切り始め、各子宮の角質の両側２ｃｍの長さを各々２０回傷を付ける。止血はタンポン挿入法で行なった。さらに、腹膜筋側壁を十分な厚さ（２×２ｃｍ）で切除し、傷付けた側壁と子宮角質の端部から３〜５ｍｍに配した６−０縫合糸を使用して、傷を付けた子宮角質をそれに接合する。続いてその傷を複数の層で塞ぐ。手術後２週間で動物を安楽死させ、手術部位を目隠しした観察者が検査してその部分の癒着形成を評価する。癒着の形成と特性を、癒着の範囲、種類及び引張り強さを留意する標準システムに従って評価する。
【００２６】
本発明の好ましい態様を先の詳細な説明で述べたが、本発明はその開示された態様に限定されず、本発明の趣旨から逸脱しないで部品と要素の再配列、改良が多数行なうことができることが理解できよう。
なお本発明の具体的な実施態様は以下の通りである。
（Ａ）癒着防止バリヤーとして使用するための酸化セルロース多層フィルムを形成する方法であって、
セルロースフィルムを表面上に広げる工程と、
少なくとも１層のセルロース織布材料を前記セルロースフィルムと結合させて多層フィルムを形成する工程と、
前記多層フィルムを酸化する工程と、
前記多層フィルムを滅菌する工程とを含む酸化セルロース多層フィルムを形成する方法。
（１）少なくとも１層のセルロース織布フィルムを前記セルロースフィルムと結合させて多層フィルムを形成する工程は接着剤の使用を含む実施態様（Ａ）に記載の方法。
（２）前記接着剤は、澱粉、ガール、デキストラン、エチルセルロース、セルロースモノアセテート、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシブチルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース及び微結晶性セルロースからなる群から選択された、生体再吸収性材料を形成するために酸化可能な材料である実施態様（１）に記載の方法。
（３）前記セルロースフィルムは、セルロースフィルム、セルロースアセテートフィルム、カルボキシメチルセルロースフィルム、ガールフィルム、コニャックフィルム、デキストランフィルム及びメチルセルロースフィルムからなる群から選択される実施態様（Ａ）に記載の方法。
【００２７】
（４）前記酸化工程は前記多層フィルムを二酸化窒素にさらすことを含む実施態様（Ａ）に記載の方法。
（５）前記多層フィルムを二酸化窒素に４ないし４８時間さらす実施態様（４）に記載の方法。
（６）前記多層フィルムを二酸化窒素に１ないし５気圧の圧力でさらす実施態様（４）に記載の方法。
（７）前記多層フィルムを二酸化窒素に２０℃ないし３５℃の温度でさらす実施態様（４）に記載の方法。
（８）前記酸化工程後、前記滅菌工程前に前記多層フィルムを洗浄する工程を含む実施態様（Ａ）に記載の方法。
（９）前記多層フィルムをイソプロパノール溶液で洗浄する実施態様（８）に記載の方法。
（１０）前記多層フィルムの滅菌はガンマ照射を含む実施態様（Ａ）に記載の方法。
（１１）実施態様（Ａ）に記載の酸化セルロース多層フィルム。
（１２）前記多層フィルムを少なくとも１種のポリヒドロキシアルコールで可塑性を与えて前記多層フィルムにフレキシビリティを与える実施態様（Ａ）に記載の方法。
【００２８】
（１３）前記少なくとも１種のポリヒドロキシアルコールがグリセロールとプロピレングリコールからなる群から選択される実施態様（１２）に記載の方法。
（１４）少なくとも１層のセルロース織布材料を前記セルロースフィルムと結合して多層フィルムを形成する工程が引き裂きストッパー材料の使用を有する実施態様（Ａ）に記載の方法。
（Ｂ）癒着防止バリヤーとして使用するための酸化セルロース多層フィルムを形成する方法であって、
セルロースフィルムを表面上に広げる工程と、
少なくとも１層のセルロース織布材料を、被酸化性炭水化物接着剤材料を使用しながら前記セルロースフィルムと結合させて多層フィルムを形成する工程と、
二酸化窒素の存在の下で４時間ないし４８時間、２０℃ないし３５℃の温度で、１気圧ないし５気圧の圧力で前記多層フィルムを酸化する工程と、
前記多層フィルムを滅菌する工程とを含む酸化セルロース多層フィルムを形成する方法。
（１５）前記セルロースフィルムは、セルロースフィルム、セルロースアセテートフィルム、澱粉フィルム、ガールフィルム、コニャックフィルム、デキストランフィルム、カルボキシメチルセルロースフィルム及びメチルセルロースフィルムからなる群から選択される実施態様（Ｂ）に記載の方法。
（１６）前記接着剤は、生体再吸収性材料を作るための酸化が可能な材料であり、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、澱粉、ガール、デキストラン、コニャック及び微結晶性セルロースからなる群から選択された、生体再吸収性材料を形成するために酸化可能な材料である実施態様（Ｂ）に記載の方法。
（１７）前記酸化工程後、前記滅菌工程前に前記多層フィルムをイソプロパノール溶液で洗浄する工程を含む実施態様（Ｂ）に記載の方法。
（１８）前記多層フィルムの滅菌は照射を含む実施態様（Ｂ）に記載の方法。
（１９）実施態様（Ｂ）に記載の酸化セルロース多層フィルム。
【００２９】
（２０）前記多層フィルムを少なくとも１種のポリヒドロキシアルコールで可塑性を与えて前記多層フィルムにフレキシビリティを与える実施態様（Ｂ）に記載の方法。
（２１）前記少なくとも１種のポリヒドロキシアルコールがグリセロールとプロピレングリコールからなる群から選択される実施態様（２０）に記載の方法。
（２２）少なくとも１層のセルロース織布材料を前記セルロースフィルムと結合して多層フィルムを形成する工程が引き裂きストッパー材料の使用を有する実施態様（Ｂ）に記載の方法。
（Ｃ）手術部位と隣接組織の間の物理的バリヤーとして酸化セルロース多層フィルムを配置して手術後の癒着を防止する工程を含む手術癒着を防止するための方法。
（２３）薬溶液を前記酸化セルロース多層フィルムと関連して使用して手術後の癒着を防止する実施態様（Ｃ）に記載の方法。
（２４）前記薬溶液を前記酸化セルロース多層フィルム内に入れて手術後の癒着を防止する実施態様２３に記載の方法。
（２５）前記酸化セルロースフィルムを実施態様（Ａ）に記載の方法で形成する実施態様（Ｃ）に記載の方法。
（Ｄ）酸化セルロースフィルムを傷の包帯として配置する工程を含む傷の治療方法。
（２６）前記傷の包帯としての酸化セルロース多層フィルムは傷に少なくとも１種の薬を投与して傷の治療に役立てる実施態様（Ｄ）に記載の方法。
【００３０】
【発明の効果】
以上、説明したように本発明によれば、非常に多孔性が低く、所定の場所に容易に、確実に取り付け可能で、また繊維素の沈着と細胞質の内部への伸長が可能になる孔を含まない物理的バリヤーが得られるため、手術後の癒着を良好に防止することができる。