(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ミューオピオイド受容体に対する親和力の少なくとも１０００倍の親和力をカッパオピオイド受容体に対して有し、ｉｎ  ｖｉｖｏで投与されたときに長い作用持続時間を示す合成オピオイドペプチドアミド、または薬剤として許容されるそれらの塩であって、前記ペプチドは次式を有し、
Ｈ−Ｘａａ1−Ｘａａ2−Ｘａａ3−Ｘａａ4−Ｑ
上式で、Ｘａａ1は（Ａ）Ｄ−Ｐｈｅ、（ＣαＭｅ）Ｄ−Ｐｈｅ、Ｄ−Ｔｙｒ、Ｄ−Ｔｉｃ、またはＤ−Ａｌａ（シクロペンチル、またはチエニル）であって、ＡはＨ、ＮＯ2、Ｆ、Ｃｌ、またはＣＨ3であり；Ｘａａ2は（Ａ’）Ｄ−Ｐｈｅ、Ｄ−１Ｎａｌ、Ｄ−２Ｎａｌ、Ｄ−Ｔｙｒ、またはＤ−Ｔｒｐであって、Ａ’はＡ、または３，４Ｃｌ2であり；Ｘａａ3はＤ−Ｎｌｅ、（Ｂ）Ｄ−Ｌｅｕ、Ｄ−Ｈｌｅ、Ｄ−Ｍｅｔ、Ｄ−Ｖａｌ、Ｄ−Ｐｈｅ、またはＤ−Ａｌａ（シクロペンチル）であって、ＢはＨ、またはＣαＭｅであり；Ｘａａ4はＤ−Ａｒｇ、Ｄ−Ｈａｒ、Ｄ−ｎＡｒｇ、Ｄ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｉｌｙ、Ｄ−Ａｒｇ（Ｅｔ2）、Ｄ−Ｈａｒ（Ｅｔ2）、Ｄ−Ａｍｆ、Ｄ−Ｇｍｆ、Ｄ−Ｄｂｕ、Ｄ−Ｏｒｎ、またはＤ−Ｉｏｒであり；ＱはＮＲ1Ｒ2、モルホリニル、チオモルホリニル、（Ｃ）ピペリジニル、ピペラジニル、４−一置換、もしくは４，４−二置換ピペラジニル、またはε−リシルであって、Ｒ1は低級アルキル、置換低級アルキル、ベンジル、置換ベンジル、アミノシクロヘキシル、２−チアゾリル、２−ピコリル、３−ピコリル、４−ピコリル、ω−（アシルアミノ）ポリメチレン、またはポリ（オキシエチレン）基であり、Ｒ2はＨ、または低級アルキルであり、ＣはＨ、４−ヒドロキシ、または４−オキソであることを特徴とする合成オピオイドペプチドアミド、または薬剤として許容されるそれらの塩。
【請求項２】
Ｘａａ2がＤ−Ｐｈｅであり、Ｘａａ3がＤ−Ｌｅｕ、またはＤ−Ｎｌｅであり、Ｘａａ4がＤ−Ａｒｇ、またはＤ−Ｏｒｎであることを特徴とする請求項１に記載の合成ペプチド。
【請求項３】
ＱがＮＨＲ1、Ｒ1がエチル、プロピル、ブチル、シクロプロピル、またはシクロブチルであることを特徴とする請求項１または２に記載の合成ペプチド。
【請求項４】
Ｑがモルホリニル、またはチオモルホリニルであることを特徴とする請求項１または２に記載の合成ペプチド。
【請求項５】
ＱがＮＨＲ1であり、Ｒ1が４−ピコリルであることを特徴とする請求項１または２に記載の合成ペプチド。
【請求項６】
ＱがＮ（Ｅｔ）2、ＮＨ（Ａｅｂ）、Ｐｐｚ、またはＰｃｐであることを特徴とする請求項１または２に記載の合成ペプチド。
【請求項７】
ＱがＮＨＲ1であり、Ｒ1がＡａｏ、Ａｏｏ、Ｈｏｈ、Ｇｈｘ、またはＧａｏであることを特徴とする請求項１または２に記載の合成ペプチド。
【請求項８】
Ｘａａ1がＤ−Ｐｈｅ、Ｄ−Ａｌａ（２−チエニル）、またはＤ−４Ｆｐａであることを特徴とする請求項１から７のいずれか一項に記載の合成ペプチド。
【請求項９】
Ｘａａ4がＤ−Ｇｍｆであることを特徴とする請求項１に記載の合成ペプチド。
【請求項１０】
Ｘａａ2がＤ−４Ｃｐａ、またはＤ−３，４Ｃｐａであることを特徴とする請求項１に記載の合成ぺプチド。
【請求項１１】
抗侵害受容量の請求項１から１０のいずれか一項に記載の合成ペプチドと、薬剤として許容される液体または固体のその担体とを含む医薬組成物。
【請求項１２】
０．５ｍｇ／ｋｇ以下のＷＴ−ＥＤ50を有する合成オピオイドペプチドであって、前記ペプチドは次式を有し、
Ｈ−Ｘａａ1−Ｘａａ2−Ｘａａ3−Ｘａａ4−Ｑ
上式で、Ｘａａ1はＤ−Ｐｈｅ（非置換、またはＣαＭｅ、２Ｆ、４Ｆ、もしくは４Ｃｌで置換）またはＤ−Ａｌａ（シクロペンチル、またはチエニル）であり；Ｘａａ2は（Ａ’）Ｄ−Ｐｈｅ、Ｄ−１Ｎａｌ、Ｄ−２Ｎａｌ、またはＤ−Ｔｒｐであって、Ａ’はＨ、４Ｆ、４Ｃｌ、４ＮＯ2、または３，４Ｃｌ2であり；Ｘａａ3はＤ−Ｎｌｅ、Ｄ−Ｌｅｕ、Ｄ−ＣＭＬ、Ｄ−Ｍｅｔ、またはＤ−Ａｃｐであり；Ｘａａ4はＤ−Ａｒｇ、Ｄ−Ａｒｇ（Ｅｔ2）、Ｄ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｉｌｙ、Ｄ−Ｈａｒ、Ｄ−Ｈａｒ（Ｅｔ2）、Ｄ−ｎＡｒｇ、Ｄ−Ｏｒｎ、Ｄ−Ｉｏｒ、Ｄ−Ｄｂｕ、Ｄ−Ａｍｆ、およびＤ−Ｇｍｆであり；ＱはＮＲ1Ｒ2、Ｍｏｒ、Ｔｍｏ、Ｐｉｐ、４−Ｈｙｐ、ＯｘＰ、またはＰｐｚであって、Ｒ1はＭｅ、Ｅｔ、Ｐｒ、Ｂｕ、ｈＥｔ、Ｃｙｐ、Ｂｚｌ、または４−ピコリルであり、Ｒ2はＨ、またはＥｔであることを特徴とする請求項１に記載の合成オピオイドペプチド。
【請求項１３】
Ｘａａ2がＤ−Ｐｈｅ、Ｄ−４Ｃｐａ、またはＤ−３，４Ｃｐａであり；Ｘａａ3がＤ−Ｌｅｕ、またはＤ−Ｎｌｅであり；Ｘａａ4がＤ−Ａｒｇ、Ｄ−Ｏｒｎ、またはＤ−Ｇｍｆであることを特徴とする請求項１２に記載の合成ペプチド。
【請求項１４】
ＱがＮＨＲ1であり、Ｒ1がＥｔ、ｈＥｔ、Ｐｒ、または４−ピコリルであることを特徴とする請求項１２または１３に記載の合成ペプチド。
【請求項１５】
ＱがＮ（Ｅｔ2）、またはＮＨ（Ａｅｂ）であることを特徴とする請求項１２または１３に記載の合成ペプチド。
【請求項１６】
Ｑがモルホリニル、またはチオモルホリニルであることを特徴とする請求項１２または１３に記載の合成ペプチド。
【請求項１７】
ＱがＮＨＲ1、Ｒ1がエチル、または４−ピコリルであることを特徴とする請求項１２または１３に記載の合成ペプチド。
【請求項１８】
ＱがＰｐｚ、Ｐｃｐ、またはＮＨ（Ｈｏｈ）であることを特徴とする請求項１２または１３に記載の合成ペプチド。
【請求項１９】
Ｘａａ1がＤ−Ｐｈｅ、またはＤ−Ａｌａ（２−チエニル）、またはＤ−Ｆｐａであることを特徴とする請求項１２から１８のいずれか一項に記載の合成ペプチド。
【請求項２０】
次式、
Ｈ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｎｌｅ−Ｄ−Ａｒｇ−ＮＨＥｔ、
Ｈ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｎｌｅ−Ｄ−Ａｒｇ−モルホリニル、
Ｈ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｎｌｅ−Ｄ−Ａｒｇ−ＮＨ−４−ピコリル、
Ｈ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｎｌｅ−Ｄ−Ａｒｇ−ＮＨＰｒ、
Ｈ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｎｌｅ−Ｄ−Ａｒｇ−チオモルホリニル、
Ｈ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｎｌｅ−Ｄ−Ａｒｇ−ＮＥｔ2、
Ｈ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｎｌｅ−Ｄ−Ａｒｇ−ＮＨＭｅ、
Ｈ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｏｒｎ−モルホリニル、
Ｈ−Ｄ−４Ｆｐａ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｎｌｅ−Ｄ−Ａｒｇ−ＮＨ−４−ピコリル、
Ｈ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｎｌｅ−Ｄ−Ａｒｇ−ＮＨ−シクロプロピル、
Ｈ−Ｄ−Ａｌａ（２Ｔｈｉ）−Ｄ−３，４Ｃｐａ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ａｒｇ−モルホリニル、
Ｈ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｎｌｅ−Ｄ−Ｇｍｆ−モルホリニル、
Ｈ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｏｒｎ−ＮＨ（Ａｅｂ）、
Ｈ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−モルホリニル、
Ｈ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｎｌｅ−Ｄ−Ａｒｇ−ピペラジニル、および
Ｈ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｎｌｅ−Ｄ−Ａｒｇ−ＮＨ（Ｈｏｈ）
のうちの一式を有する請求項１に記載の合成ペプチド。
【請求項２１】
０．５ｍｇ／ｋｇ以下のＥＤ50を有する合成オピオイドペプチドであって、前記ペプチドは次式を有し、
Ｈ−Ｘａａ1−Ｘａａ2−Ｘａａ3−Ｘａａ4−Ｑ
上式で、Ｘａａ1はＤ−Ｐｈｅ、Ｄ−４Ｆｐａ、Ｄ−２Ｆｐａ、Ｄ−Ａｃｐ、またはＤ−Ａｌａ（２Ｔｈｉ）であり；Ｘａａ2は（Ａ）Ｄ−Ｐｈｅ、Ｄ−１Ｎａｌ、Ｄ−２Ｎａｌ、またはＤ−Ｔｒｐであって、Ａは４Ｆ、または４Ｃｌであり；Ｘａａ3はＤ−Ｎｌｅ、Ｄ−Ｍｅｔ、またはＤ−Ｌｅｕであり；Ｘａａ4はＤ−Ａｒｇ、Ｄ−Ｈａｒ、Ｄ−ｎＡｒｇ、Ｄ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｏｒｎ、またはＤ−Ｇｍｆであり；ＱはＮＨＲ1、Ｍｏｒ、Ｔｍｏ、Ｐｉｐ、またはＰｐｚであって、Ｒ1はＥｔ、Ｐｒ、または４Ｐｉｃであることを特徴とする請求項１に記載の合成オピオイドペプチド。
【請求項２２】
０．５ｍｇ／ｋｇ以下のＥＤ50を有する合成オピオイドペプチドであって、前記ペプチドは次式を有し、
Ｈ−Ｘａａ1−Ｘａａ2−Ｘａａ3−Ｘａａ4−Ｑ
上式で、Ｘａａ1はＤ−Ｐｈｅ、Ｄ−４Ｆｐａ、Ｄ−２Ｆｐａ、またはＤ−Ａｌａ（２Ｔｈｉ）であり；Ｘａａ2は（Ａ）Ｄ−Ｐｈｅ、Ｄ−１Ｎａｌ、Ｄ−２Ｎａｌ、またはＤ−Ｔｒｐであって、Ａは３，４Ｃｌ2、または４Ｃｌであり；Ｘａａ3はＤ−Ｎｌｅ、またはＤ−Ｌｅｕであり；Ｘａａ4はＤ−Ａｒｇ、Ｄ−Ｏｒｎ、またはＤ−Ｇｍｆであり；ＱはＮＨＲ1、Ｍｏｒ、Ｔｍｏ、Ｐｃｐ、Ｐｐｚ、またはＮ（Ｅｔ）2であって、Ｒ1はＥｔ、Ｐｒ、Ｃｙｐ、４Ｐｉｃ、Ａｅｂ、またはＨｏｈであることを特徴とする請求項１に記載の合成オピオイドペプチド。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は概して合成オピオイドペプチドに関し、詳細には高選択的カッパ受容体ゴニストであるオピオイドペプチドに関し、より詳細には（ａ）脳に浸透せず、（ｂ）生体内で長期持続性の抗侵害受容活性（antinociceptive activity）を示す前記アゴニストに関する。
【０００２】
（発明の背景）
カッパオピオイド受容体（ＫＯＲ）は、免疫細胞上のみならず、脳内、脊髄内、一次感覚求心路（primary sensory afferents）（体性および臓性）の中枢および末梢末端ならびに細胞体上に存在する。ＫＯＲを活性化する分子は、通例カッパアゴニストと呼ばれる。
【０００３】
脳内に位置するＫＯＲの活性化によって、鎮痛効果が生じることが示されてきた。この発見が、ミューオピオイド受容体（ＭＯＲ）に作用するモルヒネアナログの好ましくない副作用（便秘、呼吸低下、依存症、および嗜癖）を持たない独創的な鎮痛薬として用いる、脳浸透性、非ペプチドカッパアゴニストを開発する試みへとつながった。この種の化合物の鎮痛活性、ならびに「ミューオピオイド様」副作用の欠如は、動物とヒトの両方において確証されてきた。しかしながら、全身性カッパアゴニストが脳に位置するカッパ受容体に仲介されて、利尿、鎮静、および不快気分などの特有の副作用を誘発することも示されたために、全身性カッパアゴニストの開発は中断された。
【０００４】
さらに、脊柱上ＫＯＲ、末梢または脊髄のいずれかに位置するＫＯＲも痛覚欠如を引き起こす可能性がある。しかしながら、末梢ＫＯＲと脊髄ＫＯＲのいずれも、全身性カッパアゴニストのいずれの副作用とも関連していなかった。したがって、（末梢または脊髄投与に続き）脳に入らないカッパ受容体オピオイドアゴニストを作ることが可能であれば、安全で独創的な鎮痛薬を得ることができるはずである。
【０００５】
カッパアゴニストは、軽度の局部炎症により誘発される腸管ならびに結腸痛覚過敏モデルにおいて末梢性抗侵害受容を生み出し、また局部炎症と関連している可能性のある内臓過敏症による肥大内臓痛を含む過敏性大腸症候群（ＩＢＳ）も末梢カッパアゴニストの標的である。胃腸管に加えて、一次感覚求心路の活性化および／または感作（すなわち局部炎症）を含む病的状況を示す他の内臓もまた、そのようなカッパ受容体オピオイドに適した標的であると考えられる。カッパアゴニストはまた、一次感覚求心路からのサブスタンスＰの放出を阻害することによって、体組織において神経性炎症を遮断し、さらにカッパアゴニストは免疫機構に作用し、免疫細胞上で主として抑制的役割を有することも知られている。
【０００６】
脳に入らず、ＭＯＲに比べてＫＯＲに対して高い親和性を示し、高い効力および効能を有し、生体内で長い作用持続時間を示すペプチドが特に望ましい。米国特許第５６１０２７１号は、ＫＯＲに結合する、４個のＤ異性体アミノ酸残基を含むテトラペプチドを開示しているが、そのようなペプチドは前に述べた望ましい特性のすべてを示すものではない。
【０００７】
（発明の概要）
ＫＯＲに対して高い選択性を示し、生体内で長い作用持続時間を示し、著しい脳への浸透を示さない、ペプチドの一属（genus）が発見された。これらのペプチドは、一、または二置換アミドであるＣ末端を有する４個のＤ異性体アミノ酸の配列を含む。これらの化合物は下記の一般式を有し、
Ｈ−Ｘａａ1−Ｘａａ2−Ｘａａ3−Ｘａａ4−置換アミド
上式で、Ｘａａ1は（Ａ）Ｄ−Ｐｈｅ、（ＣαＭｅ）Ｄ−Ｐｈｅ、Ｄ−Ｔｙｒ、Ｄ−Ｔｉｃ、またはＤ−Ａｌａ（シクロペンチル、またはチエニル）であって、ＡはＨ、ＮＯ2、Ｆ、Ｃｌ、またはＣＨ3であり；Ｘａａ2は（Ａ’）Ｄ−Ｐｈｅ、Ｄ−１Ｎａｌ、Ｄ−２Ｎａｌ、Ｄ−Ｔｙｒ、またはＤ−Ｔｒｐであって、Ａ’はＡ、または３，４Ｃｌ2であり；Ｘａａ3はＤ−Ｎｌｅ、（Ｂ）Ｄ−Ｌｅｕ、Ｄ−Ｈｌｅ、Ｄ−Ｍｅｔ、Ｄ−Ｖａｌ、Ｄ−Ｐｈｅ、またはＤ−Ａｌａ（シクロペンチル）であって、ＢはＨ、またはＣαＭｅであり；Ｘａａ4はＤ−Ａｒｇ、Ｄ−Ｈａｒ、Ｄ−ｎＡｒｇ、Ｄ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｉｌｙ、Ｄ−Ａｒｇ（Ｅｔ2）、Ｄ−Ｈａｒ（Ｅｔ2）、Ｄ−Ａｍｆ、Ｄ−Ｇｍｆ、Ｄ−Ｄｂｕ、Ｄ−Ｏｒｎ、またはＤ−Ｉｏｒである。好ましいアミドには、エチルアミド、モルホリド、チオモルホリド、４−ピコリルアミド、ピペラジド、プロピルアミド、シクロプロピルアミド、ジエチルアミド、および置換ベンジルアミドが含まれる。
【０００８】
特定の一態様において、本発明は、ミューオピオイド受容体に対する親和力の少なくとも１０００倍の親和力をカッパオピオイド受容体に対して有し、ｉｎ  ｖｉｖｏで投与されたときに長い作用持続時間を示す、合成オピオイドペプチドアミド、または薬剤として許容されるそれらの塩を提供し、そのペプチドは以下の式を有し、
Ｈ−Ｘａａ1−Ｘａａ2−Ｘａａ3−Ｘａａ4−Ｑ
上式で、Ｘａａ1は（Ａ）Ｄ−Ｐｈｅ、（ＣαＭｅ）Ｄ−Ｐｈｅ、Ｄ−Ｔｙｒ、Ｄ−Ｔｉｃ、またはＤ−Ａｌａ（シクロペンチル、またはチエニル）であって、ＡはＨ、ＮＯ2、Ｆ、Ｃｌ、またはＣＨ3であり；Ｘａａ2は（Ａ’）Ｄ−Ｐｈｅ、Ｄ−１Ｎａｌ、Ｄ−２Ｎａｌ、Ｄ−Ｔｙｒ、またはＤ−Ｔｒｐであって、Ａ’はＡ、または３，４Ｃｌ2であり；Ｘａａ3はＤ−Ｎｌｅ、（Ｂ）Ｄ−Ｌｅｕ、Ｄ−Ｈｌｅ、Ｄ−Ｍｅｔ、Ｄ−Ｖａｌ、Ｄ−Ｐｈｅ、またはＤ−Ａｌａ（シクロペンチル）であって、ＢはＨ、またはＣαＭｅであり；Ｘａａ4はＤ−Ａｒｇ、Ｄ−Ｈａｒ、Ｄ−ｎＡｒｇ、Ｄ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｉｌｙ、Ｄ−Ａｒｇ（Ｅｔ2）、Ｄ−Ｈａｒ（Ｅｔ2）、Ｄ−Ａｍｆ、Ｄ−Ｇｍｆ、Ｄ−Ｄｂｕ、Ｄ−Ｏｒｎ、またはＤ−Ｉｏｒであり；ＱはＮＲ1Ｒ2、モルホリニル、チオモルホリニル、（Ｃ）ピペリジニル、ピペラジニル、４−一置換、もしくは４，４−二置換ピペラジニル、またはε−リシルであって、Ｒ1は低級アルキル、置換低級アルキル、ベンジル、置換ベンジル、アミノシクロヘキシル、２−チアゾリル、２−ピコリル、３−ピコリル、４−ピコリル、ω−（アシルアミノ）−ポリメチレン、またはポリ（オキシエチレン）基であり、Ｒ2はＨ、または低級アルキルであり、ＣはＨ、４−ヒドロキシ、または４−オキソである。
【０００９】
他の態様において、本発明は、内臓痛および同種のもの、不安定膀胱または同種のもの、またはＩＢＤもしくは自己免疫疾患に罹患しているヒトの患者の治療、ならびにヒト以外の哺乳動物における同様の治療において、これらの化合物を使用することを含む。
【００１０】
（好ましい実施形態の簡単な説明）
ペプチドを定義するために用いた命名法は、ＳｃｈｒｏｄｅｒとＬｕｂｋｅ著「Ｔｈｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ」、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ、１９６５年に規定されたもので、通常の表示のとおりに、Ｎ末端が左に、Ｃ末端が右に示される。アミノ酸残基が異性体形を有する場合には、特に指示のない限り、本明細書ではアミノ酸のＬ異性体形を表す。
【００１１】
前述のとおり、本発明はＫＯＲに対して選択的であり、ＫＯＲに対して強い親和性を示すだけでなく、ｉｎ  ｖｉｖｏで長い生物活性持続時間を示すペプチドを提供する。これらのカッパ選択的オピオイドペプチドは、ＭＯＲに比べてＫＯＲに対して、少なくとも１０００倍高い結合親和力を有し、多くの化合物は少なくとも１００００倍高い親和力を有し、いくつかの化合物は２００００倍以上高い親和力を示す。しかしながら、多くの適応症にとって重要なのは、そのような高い選択性に加えて、カッパアゴニストが脳への浸透の著しい欠如およびｉｎ  ｖｉｖｏでの長期の抗侵害受容活性持続時間の両方を示さなければならないことである。したがって、上述の選択性に加えて、好ましい化合物は脳への著しい浸透を示さないと同時に、少なくとも約１時間実質的な活性が持続し、より好ましい化合物では少なくとも約２時間実質的に活性なままであり、もっとも好ましい化合物ではそのような実質的な活性を３時間以上示す。
【００１２】
本明細書全体を通して以下に述べる省略形を用いる。Ｄ−ＮｌｅはＤ−ノルロイシンを意味し、Ｄ−ＨｌｅはＤ−ホモロイシンを表す。Ｄ−ＨａｒはＤ−ホモアルギニンを表し、Ｄ−ｎＡｒｇはＤ−Ａｒｇより炭素が１つ短いＤ−ノルアルギニンを表す。Ｄ−Ｎａｌはβ炭素がナフチルで置換されたアラニンのＤ異性体を意味する。好ましくは、Ｄ−２Ｎａｌ、すわなち環構造の２位でナフタレンに結合しているものを用いるが、Ｄ−１Ｎａｌを用いることもできる。Ｄ−Ｃｐａ、およびＤ−Ｆｐａはそれぞれ、クロロ−Ｄ−Ｐｈｅ、およびフルオロ−Ｄ−Ｐｈｅを表すために用いられ、Ｄ−４Ｃｐａ、Ｄ−２Ｆｐａ、Ｄ−３Ｆｐａ、およびＤ−４Ｆｐａが好ましい。Ｄ−Ｎｐａはニトロ−Ｄ−Ｐｈｅを意味し、Ｄ−Ｍｐａはメチル−Ｄ−Ｐｈｅを表すために用いる。Ｄ−３，４Ｃｐａは３，４−ジクロロ−Ｄ−Ｐｈｅを意味する。Ｄ−ＡｃｐはＤ−Ａｌａ（シクロペンチル）である。Ｄ−ＯｒｎはＤ−オルニチンを表し、Ｄ−Ｄｂｕはα，γ−ジアミノ酪酸を表す。ＣＭＬはＣαメチルＬｅｕを表し、ＣＭＰはＣαＭｅＰｈｅを表す。Ｄ−４ＡｍｆはＤ−４（ＮＨ2ＣＨ2）Ｐｈｅを意味し、Ｄ−Ｇｍｆは４位がＣＨ2ＮＨＣ（ＮＨ）ＮＨ2で置換されたＤ−Ｐｈｅを表すＤ−Ａｍｆ（アミジノ）を意味する。Ｄ−ＴｉｃはＤ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３−カルボン酸を意味する。Ａｌａ（Ｔｈｉ）において、Ｔｈｉはチエニル基を表し、好ましくはその２位でアラニンに結合しているが、３−チエニルも同等物である。Ｉｌｙ、およびＩｏｒはそれぞれ、側鎖アミノ基がイソプロピルでアルキル化されたイソプロピルＬｙｓ、およびイソプロピルＯｒｎを意味する。
【００１３】
低級アルキルとはＣ1からＣ6を意味し、シクロアルキルを含み、シクロプロピルおよびシクロブチルを含むＣ1〜Ｃ4が好ましい。Ｍｅ、Ｅｔ、Ｐｒ、Ｉｐｒ、Ｂｕ、Ｐｎ、およびＢｚｌは、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ペンチル、およびベンジルを表すために用いる。Ｃｙｐはシクロプロピルを意味し、Ｃｙｂはシクロブチルを意味する。結合は、好ましくはアルキル鎖の一端であるが、鎖の他の位置でもよい。たとえばエチルプロピルと呼ぶこともできる３−ペンチル。Ａｈｘは６−アミノ−ヘキシル、すなわち（ＣＨ2）6−ＮＨ2である。４Ａｃｘは４−アミノシクロヘキシルを表すために用い、ｈＥｔはヒドロキシエチル、すなわち−ＣＨ2ＣＨ2ＯＨを表すために用いる。置換ベンジルは４Ｎｂｚ、および４Ａｂｚを含み、これらは４−ニトロベンジル、および４−アミノベンジルを表し、Ａｅｂは４−（２−アミノ−２−カルボキシエチル）ベンジル、すなわち
【００１４】
【化１】
0004275852.tif 000002
【００１５】
を表すために用いる。２−、３−、および４−ピコリル（２Ｐｉｃ、３Ｐｉｃ、および４Ｐｉｃ）は２位、３位、または４位のメチレンを介して結合しているメチルピリジン基を意味する。Ｍｏｒはモルホリニル、すなわち
【００１６】
【化２】
0004275852.tif 000003
【００１７】
を意味し、Ｔｍｏはチオモルホリニル
【００１８】
【化３】
0004275852.tif 000004
【００１９】
を意味する。Ｐｉｐはピペリジニル（ピペリジル）を意味し、４−ＨｙＰ、およびＯｘＰは４−ヒドロキシピペリジン−１−イル、および４−オキソ−ピペリジン−１−イルを意味する。Ｐｐｚはピペラジニルを意味する。Ｅｃｐは４−エチルカルバモイル−ピペラジン−１−イルを表し、Ｐｃｐは４−フェニルカルバモイルピペラジン−１−イルを表す。４級アンモニウム部分、たとえば４，４−ジメチルピペラジン−１−イル（Ｄｍｐ）、または他のジ−低級アルキル置換なども用いることができる。２−Ｔｚｌは２−チアゾリル、すなわち
【００２０】
【化４】
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【００２１】
を意味する。ＥｌｙはＬ−リシンの側鎖アミノ基がアミド結合によってＣ末端に結合しているε−リシルを意味する。
【００２２】
前述のとおり、Ｒ1はω（アシルアミノ）ポリメチレン基、またはポリ（オキシエチレン）基、たとえばＡａｏ、Ａｏｏ、Ｈｏｈ、Ｇｈｘ、またはＧａｏなどであることができる。Ａａｏは８−（アセチルアミノ）−３，６−ジオキサオクタ−１−イル、すなわちＣＨ2ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ2ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ2ＣＨ2−ＮＨ−Ａｃを表す。Ａｏｏは８−アミノ−３，６−ジオキサオクタ−１−イル、すなわちＣＨ2ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ2ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ2ＣＨ2−ＮＨ2である。Ｈｏｈは６−（Ｌ−ヒドロオロチルアミノ）−ヘキサ−１−イル、すなわち（ＣＨ2）6−ＮＨ−（Ｌ−ヒドロオロチル）を表し、Ｌ−ヒドロオロチン酸はＣ4Ｎ2Ｈ5（Ｏ）2−ＣＯＯＨである。Ｇｈｘは６−（Ｄ−グルコニルアミノ）−ヘキシル、すなわち（ＣＨ2）6−ＮＨ−ＣＯ−（ＣＨＯＨ）4−ＣＨ2ＯＨを表す。Ｇａｏは６−（Ｄ−グルコニルアミノ）−３，６−ジオキサオクタ−１−イル、すなわちＣＨ2ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ2ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ2ＣＨ2−ＮＨ−ＣＯ（ＣＨＯＨ）4−ＣＨ2ＯＨを表す。
【００２３】
Ｄ−Ｐｈｅまたは置換Ｄ−Ｐｈｅは１位であることが好ましい。フェニル環は２位、３位、および／または４位で置換されることができるが、通例２位または４位での塩素またはフッ素による置換が好ましい。α炭素原子はメチル化されてもよい。Ｄ−Ｐｈｅに類似している他の同等の残基も用いることができ、これにはＤ−Ａｌａ（チエニル）、Ｄ−Ａｌａ（シクロペンチル）、Ｄ−Ｔｙｒ、およびＤ−Ｔｉｃが含まれる。さらに２位残基は、好ましくはＤ−Ｐｈｅ、または置換Ｄ−Ｐｈｅで、そのような置換には、好ましくはフェニル環の４位炭素、または３位と４位の置換基を含む。あるいは、ナフチルで置換されたＤ−アラニン、ならびにＤ−Ｔｒｐ、およびＤ−Ｔｙｒを用いることができる。３位は、好ましくはたとえばＤ−Ｎｌｅ、Ｄ−Ｌｅｕ、Ｄ−ＣＭＬ、Ｄ−Ｈｌｅ、Ｄ−Ｍｅｔ、またはＤ−Ｖａｌなどの残基で占められる。しかしながら、Ｄ−Ａｌａ（シクロペンチル）またはＤ−Ｐｈｅも用いることができる。Ｄ−Ａｒｇ（ジエチルで置換されていてもよい）およびＤ−Ｏｒｎ（デルタ−アミノ基が、イソプロピルのようなものでアルキル化されていてもよい）が一般に４位として好ましい。しかしながら、Ｄ−ｎＡｒｇ、および他の同等の残基、たとえばＤ−Ｌｙｓ（イプシロン−アミノ基をアルキル化することができる）およびＤ−Ｈａｒ（ジエチルで置換されていてもよい）なども用いることができる。さらに、Ｄ−Ｇｍｆ、Ｄ−Ｄｂｕ、Ｄ−４Ａｍｆ、およびＤ−Ｈｉｓも用いることができる。
【００２４】
４個のＤ異性体アミノ酸配列を用いることで、生物学的作用の持続時間が良好となることが期待されるかもしれないが、驚くことに非置換アミドに関しては一般に作用持続時間がかなり短いこと、長い作用持続時間はＣ末端に置換アミドを組み込むことによってのみ得られることがわかった。単一置換はエチル、メチル、プロピル、シクロプロピル、およびピコリルの形であることができ、ならびに他の同等の残基、たとえばヒドロキシエチル、チアゾリル、アミノシクロヘキシル、ベンジル、および置換ベンジルなどであることもできる。一般に、低級アルキルまたはピコリル置換基が単一置換アミドに関して好ましい。単一置換アミドの代わりに、ジアルキル置換、たとえばジエチルアミノが代替となる。しかしながら好ましくは、そのような二置換Ｃ末端はモルホリニル、チオモルホリニル、またはピペリジニル部分で占められ、後者は非置換、または４−ヒドロキシもしくは４−オキソで置換されている。ピペラジニル、４−一置換、または４，４−二置換ピペラジニル部分を用いてもよく、ε−リシルも用いることができる。
【００２５】
結合は一般にテトラペプチドのアミノ酸配列の属性であることがわかっており、好ましくは、選択的カッパ受容体オピオイドペプチドはカッパ受容体に対しＫｉが約２ｎＭ以下であるような結合親和性を示さなければならない。長期の作用持続時間は、主としてＣ末端に結合しているアミドの構造の属性であると考えられており、以下に述べる抗侵害受容アッセイによって有効に試験することができ、もっとも好ましいペプチドは実質的な生物活性を２時間、または３時間示し、脳に著しい作用を及ぼさない。
【００２６】
これまでに述べたオピオイドペプチド一属の好ましい亜属は以下の式を有し、
Ｈ−Ｘａａ1−Ｘａａ2−Ｘａａ3−Ｘａａ4−Ｑ
上式で、Ｘａａ1はＤ−Ｐｈｅ（非置換、またはＣαＭｅ、２Ｆ、４Ｆ、もしくは４Ｃｌで置換）、またはＤ−Ａｌａ（シクロペンチル、またはチエニル）であり；Ｘａａ2は（Ａ’）Ｄ−Ｐｈｅ、Ｄ−１Ｎａｌ、Ｄ−２Ｎａｌ、またはＤ−Ｔｒｐであって、Ａ’はＨ、４Ｆ、４Ｃｌ、４ＮＯ2、または３，４Ｃｌ2であり；Ｘａａ3はＤ−Ｎｌｅ、Ｄ−Ｌｅｕ、Ｄ−ＣＭＬ、Ｄ−Ｍｅｔ、またはＤ−Ａｃｐであり；Ｘａａ4はＤ−Ａｒｇ、Ｄ−Ａｒｇ（Ｅｔ2）、Ｄ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｉｌｙ、Ｄ−Ｈａｒ、Ｄ−Ｈａｒ（Ｅｔ2）、Ｄ−ｎＡｒｇ、Ｄ−Ｏｒｎ、Ｄ−Ｉｏｒ、Ｄ−Ｄｂｕ、Ｄ−Ａｍｆ、およびＤ−Ｇｍｆであり；ＱはＮＲ1Ｒ2、Ｍｏｒ、Ｔｍｏ、Ｐｉｐ、４−ＨｙＰ、ＯｘＰ、またはＰｐｚであって、Ｒ1はＭｅ、Ｅｔ、Ｐｒ、Ｂｕ、ｈＥｔ、Ｃｙｐ、Ｂｚｌ、または４−ピコリルであり、Ｒ2はＨ、またはＥｔである。
【００２７】
さらにカッパオピオイドペプチドの好ましい亜属は次式を有し、
Ｈ−Ｘａａ1−Ｘａａ2−Ｘａａ3−Ｘａａ4−Ｑ
上式で、Ｘａａ1はＤ−Ｐｈｅ、Ｄ−４Ｆｐａ、Ｄ−２Ｆｐａ、Ｄ−４Ｃｐａ、Ｄ−Ａｃｐ、またはＤ−Ａｌａ（Ｔｈｉ）であり；Ｘａａ2はＤ−Ｐｈｅ、Ｄ−４Ｆｐａ、Ｄ−４Ｃｐａ、Ｄ−３，４Ｃｐａ、Ｄ−１Ｎａｌ、Ｄ−２Ｎａｌ、またはＤ−Ｔｒｐであり；Ｘａａ3はＤ−Ｎｌｅ、Ｄ−Ｍｅｔ、Ｄ−ＣＭＬ、またはＤ−Ｌｅｕであり；Ｘａａ4はＤ−Ａｒｇ、Ｄ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｈａｒ、Ｄ−ｎＡｒｇ、Ｄ−Ｏｒｎであり；ＱはＮＲ1Ｒ2、Ｍｏｒ、Ｔｍｏ、Ｐｉｐ、４−ＨｙＰ、またはＰｐｚであって、Ｒ1はＥｔ、Ｐｒ、Ｂｕ、Ｃｙｐ、ｈＥｔ、Ｂｚｌ、または４−Ｐｉｃ、Ｒ2はＨ、またはＥｔである。
【００２８】
カッパオピオイドペプチドのさらなる好ましい亜属は次式を有し、
Ｈ−Ｘａａ1−Ｘａａ2−Ｘａａ3−Ｘａａ4−Ｑ
上式で、Ｘａａ1はＤ−Ｐｈｅ、Ｄ−４Ｆｐａ、Ｄ−２Ｆｐａ、Ｄ−Ａｃｐ、またはＤ−Ａｌａ（２Ｔｈｉ）であり；Ｘａａ2は（Ａ）Ｄ−Ｐｈｅ、Ｄ−１Ｎａｌ、Ｄ−２Ｎａｌ、またはＤ−Ｔｒｐであって、Ａは４Ｆ、または４Ｃｌであり；Ｘａａ3はＤ−Ｎｌｅ、Ｄ−Ｍｅｔ、またはＤ−Ｌｅｕあり、Ｘａａ4はＤ−Ａｒｇ、Ｄ−Ｈａｒ、Ｄ−ｎＡｒｇ、Ｄ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｏｒｎ、またはＤ−Ｇｍｆであり；ＱはＮＨＲ1、Ｍｏｒ、Ｔｍｏ、Ｐｉｐ、またはＰｐｚであって、Ｒ1はＥｔ、Ｐｒ、または４−Ｐｉｃである。
【００２９】
カッパオピオイドペプチドの他の好ましい亜属は次式を有し、
Ｈ−Ｘａａ1−Ｘａａ2−Ｘａａ3−Ｘａａ4−Ｑ
上式で、Ｘａａ1はＤ−Ｐｈｅ、Ｄ−４Ｆｐａ、Ｄ−２Ｆｐａ、またはＤ−Ａｌａ（２Ｔｈｉ）であり；Ｘａａ2は（Ａ）Ｄ−Ｐｈｅ、Ｄ−１Ｎａｌ、Ｄ−２Ｎａｌ、またはＤ−Ｔｒｐであって、Ａは３，４Ｃｌ2、または４Ｃｌであり；Ｘａａ3はＤ−Ｎｌｅ、またはＤ−Ｌｅｕであり；Ｘａａ4はＤ−Ａｒｇ、Ｄ−Ｏｒｎ、またはＤ−Ｇｍｆであり；ＱはＮＨＲ1、Ｍｏｒ、Ｔｍｏ、Ｐｃｐ、Ｐｐｚ、またはＮ（Ｅｔ）2であって、Ｒ1はＥｔ、Ｐｒ、Ｃｙｐ、４Ｐｉｃ、Ａｅｂ、またはＨｏｈである。
【００３０】
オピオイドペプチドの前述の属および亜属は、位置４のアミノ酸残基のＣ末端に置換アミドが組み込まれた結果、ｉｎ  ｖｉｖｏでの抗侵害受容活性の持続時間が延長されたことがわかった。そのようなペプチドのいくつかはｉｎ  ｖｉｖｏで３時間およびそれ以上の時間活性なままであり、この予期しない特有の属性によりそのようなペプチドはとりわけ有用となる。前述の配列を有するが、単純なＣ末端アミドを有するいくつかのテトラペプチドは、ＭＯＲに比べてＫＯＲに対して高い選択性を示す。しかしながら、それらは一般に短時間の作用持続時間しか示さない。そのようなオピオイドペプチドは、Ｃ末端に、たとえばモルホリドなどの置換アミドを有するように合成すると、持続時間が延長されるであろうことが十分に予期される。テトラペプチドの第一アミドがＫＯＲに対して高く選択的な結合を示すとき、対応する置換アミド、たとえばエチルアミドおよびモルホリドなどは、合成されたとき、脳に著しく浸透することなく、時間単位で測定される延長された時間、すなわち少なくとも１時間、抗侵害受容活性を示すことが矛盾なく見出された。
【００３１】
好ましいアミノ酸配列は前述の式で説明したとおりであるが、列挙したアミノ酸残基の１つまたは複数が、保存的アミノ酸置換によって置換、たとえば、ある塩基性アミノ酸が別のものに、ある疎水性アミノ酸が別のものに、たとえばＤ−ＩｌｅをＤ−Ｌｅｕに置換されうることは、ペプチド化学分野の技術者に理解されるはずである。同様に、種々の残基は当該技術分野で一般に知られているように変性することもできる。たとえば、（前に述べたように）Ｄ−Ｐｈｅは、通例は３位または４位、またはその両方にハロゲンまたはニトロ基を組み込むことによって変性することができ、アルファ−炭素はメチル化することができる。そのような変性によっても同等のカッパ受容体オピオイドペプチドが生成されると考えられる。
【００３２】
このペプチドは、固相法のみもしくは古典的溶液添加によって、または代替的に部分固相法またはフラグメント縮合法によってなど、適切ないかなる方法によっても合成できる。たとえば、固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）のみによる手法は、ＳｔｅｗａｒｔとＹｏｕｎｇ著「Ｓｏｌｉｄ−Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、第２版、Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、Ｉｌｌｉｎｏｉｓ、１９８４年の教科書に説明されており、米国特許第４１０５６０３号の開示によって例示されている。フラグメント縮合の合成方法は米国特許第３９７２８５９号に例示されており、他の利用可能な合成は米国特許第３８４２０６７号および第３８６２９２５号に例示されている。古典的溶液添加合成は、Ｂｏｄａｎｚｓｋｙ等著「Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、第２版、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９７６年に詳しく記載されている。
【００３３】
ペプチドのカップリング型化学合成に共通なのは、カップリングするアミノ酸のあらゆる不安定な側鎖の保護であり、通例はα−アミノ基も保護され、そのため付加される個々のアミノ酸、またはジペプチド、トリペプチドのカルボキシル基で付加が起こる。そのような保護基は当該技術分野でよく知られており、ｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ベンジルオキシカルボニル（Ｚ）、および９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）が、ＳＰＰＳまたは古典的溶液合成において好ましいα−アミノ保護基としてしばしば用いられるが、他の多種多様なα−アミノ保護基を別法として用いることができる。
【００３４】
ＳＰＰＳを用いるとき、Ｃ末端アミノ酸残基を、たとえばＯ−ＣＨ2−ポリスチレン支持体、Ｏ−ＣＨ2−ベンジル−ポリアミド樹脂支持体、−ＮＨ−ベンズヒドリルアミン（ＢＨＡ）樹脂支持体、または−ＮＨ−パラメチルベンズヒドリルアミン（ＭＢＨＡ）樹脂支持体などの、固体樹脂支持体にカップリングする。非置換アミドが所望であるときは、開裂によって直接にＣ末端アミドが与えられるので、多くの場合ＢＨＡまたはＭＢＨＡ樹脂の使用が好ましい。Ｎ−メチルアミドが所望であるときは、Ｎ−メチルＢＨＡ樹脂から生成できる。他の単一置換アミドは、Ｗ．Ｋｏｒｎｒｅｉｃｈ等の「Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｒｅｓ．」、２５：４１４〜４２０、１９８５年、および米国特許第４７０１４９９号に記載の手順で合成できる。Ｃ末端に二置換アミドを有するペプチド、たとえばＮ−モルホリニル、またはＮ−ピペリジニルなどは、好ましくは古典的溶液合成を経由し、または溶液中のフラグメント縮合により調整される。
【００３５】
ひとたび合成されると、これらのテトラペプチドは、短鎖ペプチドの精製としてよく知られる現況技術の方法、たとえば逆相高速液体クロマトグラフィー（ＲＰ−ＨＰＬＣ）、または他の適切な方法を用いて、容易に精製される。そのような精製については、Ｊ．Ｒｉｖｉｅｒ等の「Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ」、２８８：３０３〜３２８、１９８４年、およびＣ．ＭｉｌｌｅｒとＪ．Ｒｉｖｉｅｒの「Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ、Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ」、４０：２６５〜３１７、１９９６年に詳しく述べられており、固相合成などによる精製の特定の例は米国特許第５０９８９９５号に示されている。
【００３６】
テトラペプチドが、ＫＯＲに対する高い選択性、強い抗侵害受容生物活性、ｉｎ  ｖｉｖｏでの長い生物活性持続時間、および脳への浸透の欠如を示すかどうかを試験するために、種々のアッセイを用いることができる。受容体アッセイは当該技術分野でよく知られており、マウス、ラット、モルモット、およびヒトのＫＯＲが最近クローン化された。ｇｐ（モルモット）ＫＯＲを除いて、クローン化ＫＯＲは非常に類似しており、いずれも約３８０のアミノ酸を含有している。ｈ（ヒト）ＫＯＲのアミノ酸配列は、ｒ（ラット）ＫＯＲ、およびｍ（マウス）ＫＯＲとそれぞれ、９３．９％、および９３．４％の相同性を有している。対照的に、ｈＫＯＲは、ｈＭＯＲおよびヒトデルタオピオイド受容体（ｈＤＯＲ）と著しく異なっており、アミノ酸配列の同一性はそれぞれ６０．２％、および５９．１％にすぎない。ＫＯＲならびに他のオピオイド受容体は、古典的な、７膜内外にわたる（seven-transmembrane spanning）、Ｇタンパク質共役受容体（Ｇｉ）である。これらのクローン化受容体は、特定の候補ペプチドを容易にスクリーニングすることを可能にし、たとえば、選択性を判定するためにＫＯＲとＭＯＲとの両方に対してスクリーニングを行うことができる。ヒトＫＯＲ、ＭＯＲ、およびＤＯＲは、海馬神経芽細胞腫由来のマウス癌細胞系（ＨＮ．９．１０）に安定に発現し、ｉｎ  ｖｉｔｒｏのスクリーニングで用いるために利用できる。一般にオピオイド化合物の抗侵害受容活性を判定する標準となってきた、十分に認められている多くのｉｎ  ｖｉｖｏ試験もある。これらの試験は一般にマウスを使い、テールフリック試験、足圧迫（ｐａｗ−ｐｒｅｓｓｕｒｅ）試験、酢酸ライジング試験、テールピンチ試験、テール浸漬（ｔａｉｌ−ｉｍｍｅｒｓｉｏｎ）試験が含まれる。オピオイド化合物に関するいくつかのそのような試験は、Ｐ．Ｆ．Ｖｏｎｖｏｉｇｔｌａｎｄｅｒ等の「Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｅｘｐｅｒ．Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ」、２２４：７〜１２、１９８３年に記載されている。
【００３７】
結合親和力とは、リガンドと受容体との間の、相互作用の強さを言う。オピオイド受容体の結合親和力を実証するために、競合結合試験を用いて本発明のペプチドを評価した。これらの試験は、安定にトランスフェクトされた細胞系（ＨＮ．９．１０、マウス海馬神経芽細胞腫由来）に発現した、クローン化ヒトカッパオピオイド受容体（ｈＫＯＲ）およびミューオピオイド受容体（ｈＭＯＲ）を用いて行った。これらの試験において、試験化合物（非標識またはコールドリガンド）は増加濃度で用いられ、試験対象の受容体に対して高親和性と選択性を有する放射性標識リガンドの特定結合に置換する。3Ｈ−Ｕ−６９，５９３、および3Ｈ−ＤＡＭＧＯを、ｈＫＯＲ、およびｈＭＯＲの試験にそれぞれリガンドとして用いた。このリガンドは共に市販されている（ＮＥＮ−Ｄｕｐｏｎｔ）。ＤＡＭＧＯは［Ｄ−Ａｌａ2、ＭｅＰｈｅ4、Ｇｌｙ−ｏｌ5］−エンケファリンの頭字語である。放射性リガンドの親和力は、飽和試験において半−最大特定結合となる放射性リガンドの濃度（ＫD）によって定義する。ｈＫＯＲでの3Ｈ−Ｕ−６９，５９３のＫD、およびｈＭＯＲでの3Ｈ−ＤＡＭＧＯのＫDは、それぞれ約０．３ｎＭ、３．０ｎＭである。試験化合物（非標識またはコールドリガンド）の親和力は、競合結合試験において、次式に従って阻害定数（Ｋi）を算出することによって求める。
Ｋi＝ＩＣ50／１＋（Ｆ／ＫD）
上式で、
ＩＣ50＝放射性リガンドの特定結合の５０％を阻害するコールドリガンドの濃度であり、
Ｆ＝遊離放射性リガンドの濃度であり、
ＫD＝飽和試験において求められた放射性リガンドの親和力である。
【００３８】
これらのアッセイが特定の条件下で比較的低濃度の受容体を用いて実施されるとき、試験化合物に関して算出されたＫiは、結合部位の二分の一（５０％）を占めるために必要なリガンドの濃度を表す解離定数ＫDの良好な近似となる。ナノモル、およびナノモル以下の範囲の低いＫi値は、オピオイド分野において高い親和性のリガンドを同定するものであるとみなされる。好ましいアナログは、ＫＯＲに関して約２ナノモル（ｎＭ）以下のＫiを有し、より好ましいアナログは約１ｎＭ以下のＫiを有する。ＫＯＲ受容体は身体全体に広く分布するので、カッパ受容体オピオイドペプチドは多くの末梢作用の変調に著しい影響を及ぼし、高いＫＯＲ選択性があれば、副作用は最小となり、生理学的に良好な薬剤となるはずである。
【００３９】
ＫＯＲおよびＭＯＲを用いるこれらの結合アッセイは実施が容易であり、そのようなペプチドがＫＯＲ選択性であるか、高い親和力を有するかどうか判定するために、初めに同定または合成されたペプチドを用いてすぐに実施することができる。そのような結合アッセイは当分野の技術者によく知られている種々の方法で行うことができ、この一般的なタイプのアッセイに関する１つの詳細な例が、Ｍ．Ｐｅｒｒｉｎ等の「Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ」、１１８：１１７１〜１１７９、１９８６年に説明されている。
【００４０】
本発明は以下の実施例によってさらに記述される。しかしながら、そのような実施例は、本明細書の請求の範囲によって記述される本発明の精神および範囲をいかなる点においても制限するよう解釈してはならない。
【００４１】
（実施例１）
以下の式を有するペプチド
Ｈ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｎｌｅ−Ｄ−Ａｒｇ−ＮＨＥｔをペプチド合成分野でよく知られているように適切に合成する。たとえば、トリペプチド、（α−アミノ保護基）Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｎｌｅ（カルボキシル保護基）を古典的な溶液化学を用いて初めに合成する。たとえば、Ｈ−Ｄ−Ｎｌｅ−ＯＭｅをＤＭＦに溶解し、Ｎ−エチルモルホリン（ＮＥＭ）などを添加してｐＨを調節することによって、トリペプチドを調整することができる。次にこの溶液を、ＮＥＭを含有するＤＭＦ中のＢｏｃ保護Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ溶液と化合させる。この反応混合物に、たとえばベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス−（ジメチルアミノ）−ホスホニウムヘキサフルオロ−ホスフェート（ＢＯＰ）、またはＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）とＮ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）との混合物などの、活性化剤またはカップリング剤を添加する。反応の完了に続いて、媒質を蒸発して乾燥させ、その生成物を適切に精製、再結晶する。次にトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を用いてＢｏｃ保護基を除去し、そのジペプチドをＤＭＦに再び溶解する。ＮＥＭを含むＤＭＦにＢｏｃ保護Ｄ−Ｐｈｅを溶解した溶液を添加する。上述したとおりに、ＢＯＰを用いてこの反応を繰り返し、トリペプチドを生成し、溶液を蒸発して乾燥させたのち、精製、再結晶する。結果として得られる生成物はＢｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｎｌｅ−ＯＣＨ3である。次にこのメチルエステルを、ジオキサンまたはＤＭＳＯと水との混合物に溶解し、水酸化ナトリウムを添加することによって、適切に遊離酸に変える。反応の完了に続いて、分離、精製、再結晶により、トリペプチドＢｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｎｌｅ−ＯＨを得る。
【００４２】
このトリペプチドを、ＮＥＭを含有するＤＭＦに溶解し、再びカップリング剤としてＢＯＰを用いて、Ｄ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＮＨＥｔと反応させる。別法として、所望であれば、トリペプチドメチルエステルをヒドラジン水化物の８０％溶液で処理して、ヒドラジドを生成し、それを単離し、次にＤＭＦ中の亜硝酸ナトリウムおよび鉱酸で処理することによりアジドに変換することもできる。このアジドを直ちに、トリエチルアミンを含む、Ｄ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＮＨＥｔのＤＭＦ溶液と反応させる。反応の完了に続いて、その混合物を蒸発させて乾燥し、次に適切に精製、再結晶する。Ｎ末端およびＤ−Ａｒｇの側鎖を次に脱保護し、再び精製、再結晶を行い、所望のテトラペプチドエチルアミド（ペプチド番号１）を生成する。
【００４３】
このペプチドは、２種の異なる移動相、０．１％のトリフルオロ酢酸を含む水中アセトニトリルのグラジエント、およびｐＨ７のトリエチルアミンリン酸緩衝液中アセトニトリルのグラジエントを用いる逆相ＨＰＬＣによって、さらにｐＨ２．５のリン酸緩衝液を用いる石英ガラス、キャピラリー電気泳動によって均質性を測定する。これらの方法によってペプチドの純度は＞９８％であると評価される。エレクトロスプレーイオン化およびイオントラップ分析を用いる質量分析では、ｍ／ｚ６０９．４で擬分子イオン［ＭＨ］+を示したが、これは、このテトラペプチドの算出された質量ｍ／ｚ６０９．５と一致する。擬分子イオンのフラグメンテーション分析では、調製された構造に期待されるアミノ酸配列に一致するｍ／ｚ比で一連のイオンを示した。
【００４４】
ヒトＫＯＲおよびＭＯＲを発現している細胞を用いた結合アッセイを、本明細書に前述したとおりに実施する。マウス海馬神経芽細胞腫（ＨＮ．９．１０）セルに安定に発現したｈＫＯＲおよびｈＭＯＲに対する試験ペプチドの親和力を、前述のとおり、ｈＫＯＲに対する3Ｈ−Ｕ−６９，５９３、またはｈＭＯＲに対する3Ｈ−ＤＡＭＧＯの競合置換によって測定する。少なくとも３回の実験データをプールして、たとえばＭｕｎｓｏｎとＲｏｄｂａｒｄのＬＩＧＡＮＤプログラム、「Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ」、１０７：２２０〜２３９、１９８０年などの適切なプログラムを用いて阻害解離定数（Ｋi）値（信頼限界９５％）を算出する。クローン化ＫＯＲは、結合放射性リガンドの競合置換によって求められたとおり、ペプチド番号１に高い親和力で結合し、Ｋiは約０．０５±０．０２ｎＭであると求められる。親和力の相違は、Ｋiが１８９０±９９０ｎＭであるヒトＭＯＲを発現している安定にトランスフェクトされた類似の癌細胞と比べて劇的である。このように、ペプチド番号１はｈＭＯＲに比べてｈＫＯＲに対して、約３８０００倍、より強く結合する。
【００４５】
マウスの酢酸ライジングアッセイ（以下に記載）によるペプチド試験は、ＥＤ50が約０．０９ｍｇ／ｋｇであることを示し、このペプチドが３時間後に５０％を超える抗侵害受容を示し続けていることがわかる。したがって、ペプチド番号１は非常に長い作用持続時間を示すとみなされる。
【００４６】
（実施例２）
表Ａに示すとおり、一般式Ｈ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｎｌｅ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｑを有するオピオイドペプチドを合成し、実施例１に記載のとおり試験をする。
【００４７】
【表１】
0004275852.tif 000006
【００４８】
ペプチド２から１５は、長い抗侵害受容生物活性持続時間を示すとみなされる。
【００４９】
（実施例３）
表Ｂに示すとおり、一般式Ｈ−Ｘａａ1−Ｘａａ2−Ｘａａ3−Ｘａａ4−Ｑを有するオピオイドペプチドを合成し、実施例１に記載のとおり試験をする。
【００５０】
【表２】
0004275852.tif 000007
【００５１】
ペプチド１６から３９は、長い抗侵害受容生物活性持続時間を示すとみなされる。
【００５２】
（実施例４）
表Ｃに示すとおり、一般式Ｈ−Ｘａａ1−Ｘａａ2−Ｘａａ3−Ｘａａ4−Ｑを有するオピオイドペプチドを合成し、実施例１に記載のとおり試験をする。
【００５３】
【表３】
0004275852.tif 000008
【００５４】
ペプチド４０から５３は、長い抗侵害受容生物活性持続時間を示すとみなされる。
【００５５】
（実施例５）
表Ｄに示すとおり、一般式Ｈ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｘａａ2−Ｘａａ3−Ｘａａ4−Ｑを有するオピオイドペプチドを合成し、実施例１に記載のとおり試験をする。
【００５６】
【表４】
0004275852.tif 000009
【００５７】
ペプチド５４から５８は、長い抗侵害受容生物活性持続時間を示すとみなされる。
【００５８】
（実施例６）
表Ｅに示すとおり、一般式Ｈ−Ｘａａ1−Ｘａａ2−Ｘａａ3−Ｄ−Ａｒｇ−Ｑを有するオピオイドペプチドを合成し、実施例１に記載のとおり試験をする。
【００５９】
【表５】
0004275852.tif 000010
【００６０】
ペプチド５９から６５は、長い抗侵害受容生物活性持続時間を示すとみなされる。
【００６１】
（実施例７）
表Ｆに示すとおり、一般式Ｈ−Ｘａａ1−Ｘａａ2−Ｘａａ3−Ｘａａ4−Ｑを有するオピオイドペプチドを合成し、実施例１に記載のとおり試験をする。
【００６２】
【表６】
0004275852.tif 000011
【００６３】
表Ｆのオピオイドペプチドは、ＭＯＲに比べてＫＯＲに対して高い選択性を示し、ｉｎ  ｖｉｖｏで抗侵害受容生物活性を示すとみなされる。
【００６４】
（実施例８）
表Ｇに示すとおり、一般式Ｈ−Ｘａａ1−Ｘａａ2−Ｘａａ3−Ｘａａ4−Ｑを有するオピオイドペプチドを合成し、実施例１に記載のとおり試験をする。
【００６５】
【表７】
0004275852.tif 000012
【００６６】
ペプチド８８から１０８は、長い抗侵害受容生物活性持続時間を示すとみなされる。
【００６７】
（実施例９）
表Ａ〜Ｇで特定したペプチドを選択し、オピオイド特性の作用持続時間を測定するために、さらにそれらを特にｉｎ  ｖｉｖｏ試験にかけ、その結果を以下の表Ｈに示す。ペプチドの番号は前出の表の番号に対応しており、μ／κ比に関する数値は参照の目的でそのまま移した。このｉｎ  ｖｉｖｏ試験は、抗侵害受容生物活性の持続時間の長さを測定するのに適しているマウスライジング試験（ＷＴ）を用いて行う。この試験はＧ．Ａ．Ｂｅｎｔｌｅｙ等による論文「Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃ．」、７３：３２５〜３３２、１９８１年に詳しく記載されているが、この試験では、Ｈａｒｌａｎより購入し、体重が２０ｇから３０ｇの間の、意識のある雄のＩＣＲマウスを用いる。マウスは試験開始前、１２時間から１６時間絶食させる。観察する侵害受容行動、すなわちライジングを、希酢酸を腹腔内（ｉ．ｐ．）に投与することにより誘発する。体重１ｋｇ当たり、０．６％酢酸水溶液１０ｍｌを用いる。酢酸を投与した後、１５分間ライジングを記録する。第１段階では、化合物を静脈内経路により３回から４回の増量投与で、ある決まった処置前時間（酢酸注入前、−５分）に試験する。この段階は、効力（ＷＴ−ＥＤ50）、ならびに最大未満（ｓｕｂｍａｘｉｍａｌ）有効量（抗侵害受容約８０〜９０％）を求めるために用いる。第２段階では、作用の持続時間を測定するために、酢酸の投与に先立ってさまざまな処置前時間（すなわち、−５分、−６０分、−１２０分、および−１８０分）に、特定のペプチドそれぞれの最大未満有効量を投与する。この試験を通じてマウスの対照群を用い、それらには候補ペプチドなしにビヒクルのみを投与する。ライジングの回数を、酢酸を注入した時間から開始して１５分にわたって数え、生物活性、すなわち抗侵害受容をパーセントで表し、次のように算出する。
１００×（対照群のライジング−処置群のライジング）／対照群のライジング
【００６８】
各最大未満量は直接に比較できないほど多様である可能性が高いので、比較できる数値を得るために、当該技術分野で知られているとおりに結果を数学的に正規化し、それを表Ｈに示す。表Ｈでは、１、２、および３時間後に残存している抗侵害受容活性を、−５分で得られた活性のパーセントとして表す。１００％より高い数値は、実験の開始時点よりも抗侵害受容が高いことを示している。オピオイドペプチドがｉｎ  ｖｉｖｏで長い作用持続時間を有するとみなされるためには、１時間において少なくとも約２５％ライジングを減じる効果がなければならないと思われる。
【００６９】
抗侵害受容活性の持続時間を求めるためにこの試験を用いることに加えて、この試験はペプチドのｉｎ  ｖｉｖｏ生物作用能（短期）を測定するためにも用いられる。その値は表中のＷＴ−ＥＤ50の項目に、体重１ｋｇ当たりのｍｇで示す。数値は、試験されるマウスの１５分間のライジングの回数を５０％減少させる（対照マウスと比べて）ために必要な投与量である。
【００７０】
【表８】
0004275852.tif 000013
【００７１】
【表９】
0004275852.tif 000014
【００７２】
このオピオイドペプチドは、ＫＯＲ系に関わる病変を治療するために、鎮痛薬としてまたは他の薬理学的適用に有用である。これらは、μアゴニスト鎮痛剤、たとえば、便秘、呼吸低下、かゆみなどの望ましくない作用を有するモルヒネ、に対して利点を示す。これらのオピオイドペプチドが著しく血液脳関門を越えず、結果として生じる可能性のある副作用を防ぐことは非常に望ましい。脳への浸透に関するこれらの化合物の安全性は、末梢効果を引き出す効力と、中枢効果を引き出す効力を比較することによって評価する。末梢効果は前述のマウスのライジング試験（ＷＴ）を用いて測定する。脳に位置するカッパ受容体への作用による中枢効果は、マウステールフリック試験（ＴＦ）を用いて測定する。
【００７３】
テールフリック試験は、中枢作用鎮痛薬の効力および作用持続時間を評価するために設計された、急性体性痛のアッセイである。温水（５２℃）に尾を浸漬することによって誘発される侵害受容により、尾が迅速に引っ込められるが、これはテールフリックとも呼ばれる。中枢作用鎮痛化合物は、尾を引っ込めることに関する刺激潜伏性を投与量と相関的に増大させると期待される。この試験はＴ．Ｗ．Ｖａｎｄｅｒａｈ等の「Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｅｘｐｅｒ．Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ」、２６２：１９０〜１９７、１９９２年に記載されている。
【００７４】
安全性は脳浸透指数（ＢＰＩ）を用いて評価するが、ＢＰＩは以下のように定義され、
ＢＰＩ＝（ＴＦ−ＥＤ50）／（ＷＴ−ＥＤ50）
上式で、ＥＤ50値はそれぞれ、静脈内経路で投与されたときに、マウスライジング試験（ＷＴ−ＥＤ50）およびマウステールフリック試験（ＴＦ−ＥＤ50）において半−最大効果を生じる投与量である。高いＢＰＩ値は脳への浸透が少ないことを示し、その化合物を本明細書に記載した目的に使用したとき、化合物が広い安全限界（脳への副作用の欠如）を示すであろうことを示唆している。好ましいオピオイドペプチドは１００以上のＢＰＩ値を有し、より好ましいオピオイドペプチドは３００を超えるＢＰＩ値を有する。全身性非ペプチドカッパアゴニスト（たとえば、Ｅｎａｄｏｌｉｎｅ、およびＵ−６９，５９３）は５未満のＢＰＩ値を有し、臨床的に使用されたときに生じる副作用（利尿、不快気分、および鎮静）によっても明証されているように、著しい脳への浸透が起こっていることを示している。いくつかの代表的なオピオイドペプチドのＢＰＩ値を以下の表Ｉに示す。
【００７５】
【表１０】
0004275852.tif 000015
【００７６】
これらのペプチドはＫＯＲに強く結合するので、受容体の研究や、ある特定の組織試料にどの受容体が存在しうるのかを判断するためのｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイにも有用である。したがって、この点において診断に有用であり、さらに潜在的にｉｎ  ｖｉｖｏの診断にも有用である。
【００７７】
一般に、これらのオピオイドペプチドは、内臓痛の治療において抗侵害受容を得るために、さらには慢性関節リウマチの治療のために用いることができる。これらのオピオイドペプチドは、腹部術後症状、たとえば消化障害および痛みなどの治療に特に有用である。さらに、ＩＢＳ、不安定膀胱、失禁、および局部炎症によって消化管や他の内臓器官に疼痛状態が起こる他の適応症、たとえば炎症性腸疾患（ＩＢＤ）および月経困難症の治療に有効であると考えられる。免疫応答を低下させるこのオピオイドペプチドの能力は、ＩＢＤ、および他の適応症、たとえば自己免疫疾患などとの闘いにおいて有利であるかもしれない。このペプチドの投与は、急性および慢性の炎症状態に関して、局所鎮痛活性を引き起こすために用いることができる。このペプチドは、たとえば鼓脹、悪心、または痛みに関連する腸管通過阻害、たとえば痙攣性収縮が原因でありうる腸管閉塞などの症状を有する消化性イレウスの治療に用いることができる。このオピオイドペプチドはさらに末梢痛覚欠如を生じさせるのに効果的であり、また手術後の痛みやたとえば胃腸組織および内臓組織の炎症などが原因で起こる慢性痛を軽減すること、さらに薬物嗜癖からの禁断症状中に苦痛を緩和することを目標とすることもできる。
【００７８】
本発明の化合物は、当該技術分野でよく知られているとおり、薬剤として許容される無毒性塩、たとえば酸付加塩などの形で投与することができる。そのような酸付加塩の例には、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、タンニン酸塩、パモエート、マレイン酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、安息香酸塩、コハク酸塩、アルギン酸塩、リンゴ酸塩、アスコルビン酸塩、酒石酸塩などがある。この有効成分を錠剤の形で投与する場合には、錠剤は、たとえばトラガカント、コーンスターチ、またはゼラチンなどの結合剤を含む、薬剤として許容される無毒性希釈剤を含有することができる。等張食塩水、リン酸緩衝液、マンニトールまたはグルコース溶液中の静脈内投与も行うことができる。
【００７９】
この薬剤組成物は通例、薬剤として許容される通常の担体または希釈剤と共に、有効量のペプチドを含む。一般に、この組成物は抗侵害受容量、すなわち痛みを遮断する効果のある量を含む。通例、用量は、静脈内に与えられるとき、宿主の体重１ｋｇ当たりペプチド約１μｇから約１０ｍｇである。この組成物は必要に応じて投与することができ、たとえば、３〜６時間の間隔で繰り返し投与できる。これらの化合物の特質により有効な経口投与を行える可能性があるが、しかしながら経口用量は高くなるかもしれない。オピオイドペプチドを長時間、たとえば単回投与で１週間またはそれ以上の期間に渡って送達することが望ましいならば、徐放剤形、デポー剤形またはインプラント剤形を用いることができる。たとえば、注射に適した徐放性デポー処方には、分解の遅い無毒性または非抗原性のポリマー、たとえば米国特許第３７７３９１９号に記載のポリ酢酸／ポリグリコール酸ポリマーなどに、分散または被包されたペプチドまたはそれらの塩を含むことができる。徐放性投与は、シラスティックインプラントを介して達成できることも知られている。
【００８０】
これらの化合物は、ヒトを含む哺乳動物に、静脈内、皮下、筋肉内、経皮、鼻腔内、肺内、経口、局所、直腸内、膣内に、または脊髄投薬によって、抗侵害受容を達成するために、たとえば腹膜刺激によって誘発された胃腸通過阻害をくつがえすために投与できる。これらの化合物は術後の痛みを軽減するために用いることもできる。有効用量は、投与の形態、および処置される哺乳動物の種によって異なる。ある典型的な投薬形態の例は、ペプチドを含むｐＨ約３から８、たとえば６の静菌性水溶液で、この水溶液を非経口的に、１日当たり、体重１ｋｇ当たり約０．３μｇから３ｍｇの範囲の用量を供給するように連続して投与する。これらの化合物はｉｎ  ｖｉｖｏで十分に耐性であると考えられ、特に静菌性水溶液中などの皮下注射による投与に十分に適していると考えられる。
【００８１】
本発明を好ましい実施形態に関して述べてきたが、当業者には明らかなように、添付の特許請求の範囲に述べる本発明の範囲から逸脱することなく変更および修正を加えられることを理解されたい。たとえば、このペプチドの有効性を著しく損なわない、当該技術分野で知られる他の置換を、本発明のペプチド内に用いることができる。他の置換Ｄ−Ｐｈｅ残基、たとえば（４Ｂｒ）Ｄ−Ｐｈｅ、または（２，４Ｃｌ2）Ｄ−Ｐｈｅなどを２位に用いることができる。Ｄ−Ｌｙｓ（Ｂｕ）とＤ−Ｌｙｓ（Ｅｔ2）は共に、Ｄ−ＩｌｙおよびＤ−Ａｒｇ（Ｅｔ2）の等価物であるとみなされる。テトラペプチドのＮ末端は、所望であれば、当該技術分野で知られているとおり過メチル化することができる。２つのテトラペプチドアミドのダイマーを作るためにジアミノ化合物をリンカーとして用いることができる。首尾よく用いられてきたリンカーには、１，６−ジアミノヘキサン、１，５−ジアミノ−３−オキサペンタン、および１，８−ジアミノ−３，６−ジオキサオクタンが含まれる。結果として生じるダイマーは、それぞれのモノマーの等価物であるとみなされる。