(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ラセミのアズレントリフルオロエタノール誘導体を有機溶媒中キャンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属のリパーゼである「キラザイム（登録商標）Ｌ−５」（ロッシュ  ダイアグノスティクス社製）の存在下アシル化剤で一方の鏡像体のみを選択的にエステル化し、精製の後得られた光学活性エステル化合物を加水分解する、二段反応からなる光学活性アズレントリフルオロエタノール誘導体の両鏡像体の製造方法。
【請求項２】
光学活性エステル化合物の加水分解をキャンジダ属のリパーゼである「キラザイム（登録商標）Ｌ−５」（ロッシュ  ダイアグノスティクス社製）で加水分解する請求項１記載の光学活性アズレントリフルオロエタノール誘導体の両鏡像体の製造方法。
【請求項３】
ラセミのアズレントリフルオロエタノール誘導体を有機溶媒中キャンジダ属のリパーゼである「キラザイム（登録商標）Ｌ−５」（ロッシュ  ダイアグノスティクス社製）の存在下アシル化剤で一方の鏡像体のみを選択的にエステル化し、エステル化合物を分離精製した後、残留化合物を該リパーゼの存在下さらにアシル化剤でエステル化し、エステル化されなかった他方の光学活性アルコール化合物を回収する、二段反応からなる請求項１の光学活性アズレントリフルオロエタノール誘導体の両鏡像体の製造方法。
【請求項４】
ラセミのアズレントリフルオロエタノール誘導体を有機溶媒中キャンジダ属のリパーゼである「キラザイム（登録商標）Ｌ−５」（ロッシュ  ダイアグノスティクス社製）の存在下アシル化剤で一方の鏡像体のみを選択的にエステル化し、精製の後
（i）得られた光学活性エステル化合物をキャンジダ属のリパーゼである「キラザイム（登録商標）Ｌ−５」（ロッシュ  ダイアグノスティクス社製）で加水分解し、
（ii）前記精製後の残留化合物をさらに該リパーゼの存在下さらにアシル化剤でエステル化し、エステル化されなかった光学活性アルコールを回収する、二段反応からなる請求項１の光学活性アズレントリフルオロエタノール誘導体の両鏡像体の製造方法。
【請求項５】
アズレントリフルオロエタノール誘導体が
【化１】
0004336011.tif 000007
で表せるものであり、アシル化剤がＲ8ＣＯＯＣＨ＝ＣＨ2で示されるものである請求項１、２、３又は４記載の光学活性アズレントリフルオロエタノール誘導体の両鏡像体の製造方法。
〔式中、Ｒ1〜Ｒ7は、水素、炭素数が１以上１２で置換基を有しても良いアルキル基およびハロゲン基を示し、Ｒ8は、炭素数が１以上１８で置換基を有してもよいアルキル基を示す。〕
【請求項６】
アズレントリフルオロエタノール誘導体が以下の（１）ないし（７）の化合物の群から選択されることからなる請求項１、２、３、４又は５記載の光学活性アズレントリフルオロエタノール誘導体の両鏡像体の製造方法。
（１）１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）アズレン
（２）１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）−５−メチルアズレン
（３）１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）−３−クロルアズレン
（４）１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）−４，６，８−トリメチルアズレン
（５）１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）−６−ｎ−ブチルアズレン
（６）１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）−６−ｔ−ブチルアズレン
（７）１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）−３，８−ジメチル−５−イソプロピルアズレン
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、リパーゼを利用して医薬品、農薬あるいは機能性材料の分野で必要とされる高い鏡像体純度を有するアズレントリフルオロエタノール誘導体の（＋）、（−）両鏡像体の製造方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
高い鏡像体純度を有するアズレントリフルオロエタノール誘導体の（＋）、（−）両鏡像体の製造はこれまでなされたことがなかった。ラセミの１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）アズレンの合成については、例えば、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，２７，３５７８（１９６２）に報告があるが光学活性体への誘導は行なっていない。。
また本発明者等は、現在までにトリフルオロメチル基を有する脂肪族およびベンゼン環を有する芳香族のラセミ２−アルカーノ類に対してキャンジダ属のリパーゼ  ノボザイム４３５（ノボノルディスク社製）、キラザイムＬ−２およびアシル化剤として酢酸ビニルを使用することによりエナンチオ選択的にエステル化し、高い鏡像純度を有する光学活性アルカノールの（＋）、（−）両鏡像体の製造方法を報告してきた〔Ｊ．Ｍｏｌ．Ｃａｔａｌ．，Ｂ：Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ，４，５３（１９９８）。第４３回香料・テンペルおよび精油化学に関する討論会講演要旨集ｐ３８１（１９９９）〕。さらに加藤等によりアズレンの異性体であるナフタレンのトリフルオロエタノール誘導体のラセミ２−アルカーノ類に対してシュードモナス属のリパーゼ  ＬＩＰ（東洋紡績社製）および酢酸ビニルを使用することによりエナンチオ選択的にエステル化し、高い鏡像体純度を有する光学活性アルカノールの（＋）、（−）両鏡像体の製造方法が報告がある〔Ｂｉｏｓｃｉ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，５８，１３５３（１９９４）〕。
しかしアズレントリフルオロエタノール誘導体の場合、これまで検討してきた手法では満足できるような高い鏡像体純度を有する光学活性体を製造するには至らなかった。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
従来、高い鏡像体純度を有するアズレントリフルオロエタノール誘導体の（＋）、（−）両鏡像体の製造に関しては知られていない。また有機化学的方法を検討したとしても、高価な触媒を必要とし、廃液処理などにも問題があり実用性に乏しい。したがって、安全な操作によりかつ環境に悪影響を及ぼす廃棄物も出ず、しかも高収率で高い鏡像体純度を有するアズレントリフルオロエタノール誘導体の（＋）、（−）両鏡像体を製造する方法の開発が望まれるところである。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意検討の結果、ラセミのアズレントリフルオロエタノール誘導体を有機溶媒中リパーゼの存在下アシル化剤で一方の鏡像体のみを選択的にエステル化し、精製の後得られた光学活性エステル化合物を加水分解後、その際鏡像体純度を上げるためにリパーゼで加水分解するという二段反応、あるいはラセミのアズレントリフルオロエタノール誘導体を有機溶媒中リパーゼの存在下アシル化剤で一方の鏡像体のみを選択的にエステル化してエステル化合物を精製分離し、残留しているエステル化されなかったアズレントリフルオロエタノール化合物についてさらに（鏡像体純度を上げるために）リパーゼによりアシル化剤でエステル化して、エステル化されていない他方の光学活性アズレントリフルオロエタノール誘導体を単離するという二段反応により光学活性アズレントリフルオロエタノール誘導体の（＋）、（−）両鏡像体を、安全な操作によりかつ環境に悪影響を及ぼす廃棄物も出ず、しかも高収率で高い両鏡像体純度を有する光学活性アズレントリフルオロエタノール誘導体の（＋）、（−）両鏡像体として製造する方法を見い出し本発明に到達したものである。
【０００５】
即ち、本発明は（１）ラセミのアズレントリフルオロエタノール誘導体をリパーゼを利用して光学分割することを特徴とする光学活性アズレントリフルオロエタノール誘導体の両鏡像体の製造方法、（２）ラセミのアズレントリフルオロエタノール誘導体を有機溶媒中リパーゼの存在下アシル化剤で一方の鏡像体のみを選択的にエステル化し、精製の後得られた光学活性エステル化合物を加水分解する、二段反応からなる（１）の光学活性アズレントリフルオロエタノール誘導体の両鏡像体の製造方法、（３）光学活性エステル化合物をリパーゼで加水分解する請求項２記載の光学活性アズレントリフルオロエタノール誘導体の両鏡像体の製造方法、（４）ラセミのアズレントリフルオロエタノール誘導体を有機溶媒中リパーゼの存在下アシル化剤で一方の鏡像体のみを選択的にエステル化し、エステル化合物を分離精製した後、残留化合物をリパーゼの存在下さらにアシル化剤でエステル化し、エステル化されなかった他方の光学活性アルコール化合物を回収する、二段反応からなる（１）の光学活性アズレントリフルオロエタノール誘導体の両鏡像体の製造方法、（５）ラセミのアズレントリフルオロエタノール誘導体を有機溶媒中リパーゼの存在下アシル化剤で一方の鏡像体のみを選択的にエステル化し、精製の後（ｉ）得られた光学活性エステル化合物をリパーゼで加水分解し、（ii）前記精製後の残留化合物をさらにリパーゼの存在下さらにアシル化剤でエステル化し、エステル化されなかった光学活性アルコールを回収する、二段反応からなる（１）の光学活性アズレントリフルオロエタノール誘導体の両鏡像体の製造方法、（６）アズレントリフルオロエタノール誘導体が
【化２】
0004336011.tif 000002
で表せるものであり、アシル化剤がＲ8ＣＯＯＣＨ＝ＣＨ2で示されるものである（１）、（２）、（３）、（４）又は（５）記載の光学活性アズレントリフルオロエタノール誘導体の両鏡像体の製造方法〔式中、Ｒ1〜Ｒ7は、水素、炭素数が１以上１２で置換基を有しても良いアルキル基およびハロゲン基を示し、Ｒ8は、炭素数が１以上１８で置換基を有してもよいアルキル基を示す。〕、（６）アズレントリフルオロエタノール誘導体が以下の（１）ないし（７）の化合物の群から選択されることからなる（１）、（２）、（３）、（４）、（５）又は（６）記載の光学活性アズレントリフルオロエタノール誘導体の両鏡像体の製造方法：
【化３】
0004336011.tif 000003
（１）１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）アズレン
（２）１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）−５−メチルアズレン
（３）１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）−３−クロルアズレン
（４）１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）−４，６，８−トリメチルアズレン
（５）１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）−６−ｎ−ブチルアズレン
（６）１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）−６−ｔ−ブチルアズレン
（７）１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）−３，８−ジメチル−５−イソプロピルアズレン、および（８）使用するリパーゼがキャンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属などの微生物起源であることを特徴とする（１）、（２）、（３）、（４）、（５）、（６）又は（７）記載の光学活性アズレントリフルオロエタノール誘導体の両鏡像体の製造方法、に関するものである。
【０００６】
本発明について詳細に説明する。
本発明の光学活性アズレントリフルオロエタノール誘導体の両鏡像体の製造方法において、第１の方法では、以下の反応式に示すように、（１）アズレントリフルオロエタノール誘導体のラセミ体を有機溶媒中リパーゼの存在下アシル化剤、例えばＲ8ＣＯＯＣＨ＝ＣＨ2で一方の鏡像体のみ選択的にエステル化し、（２）精製の後得られた光学活性エステル化合物をさらに鏡像体純度を上げるためにリパーゼの存在下で加水分解するという、二段反応を採る。最初にエステル化されなかった他方の鏡像体については、後述の第２の方法の〔化５〕式（２）の原料となる。また、〔化４〕式（２）で得られる鏡像体純度の低いエステル化合物は、カセイソーダ水溶液で加水分解した後、ラセミ体のアズレントリフルオロエタノール誘導体と同様の扱いに再使用できる。
【化４】
0004336011.tif 000004
式中、Ｒ1〜Ｒ7は、水素、炭素数が１以上１２で置換基を有しても良いアルキル基およびハロゲン基を示し、Ｒ8は、炭素数が１以上１８で置換基を有してもよいアルキル基を示し、具体的にはＲ1〜Ｒ8の置換基は、メチル基、エチル基、イソプロピル基などのアルキル基あるいは、メトキシ基、エトキシ基などのアルコキシ基、クロル、ブロム、のようなハロゲン基などが挙げられる。
【０００７】
本発明の光学活性アズレントリフルオロエタノール誘導体の両鏡像体の製造方法において、第２の方法では、以下の反応式に示すように、（１）アズレントリフルオロエタノール化合物のラセミ体を有機溶媒中リパーゼの存在下アシル化剤で一方の鏡像体のみ選択的にエステル化してエステル化合物を分離した後、（２）残留物をリパーゼの存在下、アシル化剤で更にアシル化し、エステル化されていない他方の光学活性アズレントリフルオロエタノール誘導体を純度高く単離するという、二段反応を採る。最初にエステル化された一方の鏡像体については、前述の通り第１の方法の〔化４〕式（２）の原料となる。また、第２の方法における（２）で得られる鏡像体純度の低いエステル化合物は、カセイソーダ水溶液で加水分解した後、ラセミ体のアズレントリフルオロエタノール誘導体と同様に扱い再使用できる。
【化５】
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式中、Ｒ1〜Ｒ7およびＲ8については、上記と同様である。
【０００８】
本発明のアズレントリフルオロエタノール誘導体は、アズレン誘導体の１位にα−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル基を有し、その位置において光学活性を有する化合物であればどのようなものも含むが、具体的な例として以下の（１）から（７）の化合物が挙げられるが、本発明はこれらの化合物に限定されるものではない。
【化６】
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【０００９】
本発明で用いられるアシル化剤は、Ｒ8ＣＯＯＣＨ＝ＣＨ2で表わされ、Ｒ8は炭素数が１以上１８の置換基および二重結合、ｔｈｉｒｔｙ結合を有しても良いアルキル基を示し、具体的には、プロピオン酸ビニル、ブタン酸ビニル、カプロン酸ビニル、カプリル酸ビニル、カプリン酸ビニル、ラウリン酸ビニル、ミリスチン酸ビニル、パルミチン酸ビニル、ステアリン酸ビニル、ピバリン酸ビニル、オクチル酸ビニル、クロル酸ビニル、ブロム酸ビニル等が挙げられる。なお、本発明はこれらの化合物に限定されるものではない。
本発明で使用するリパーゼは、どのようなものを用いても良いが、（＋）、（−）両鏡像体の内一方のみを選択的にエステル化する必要がある点で、キャンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属の微生物起源であり、具体的には、キラザイムＬ−５（ロシュ・ダイアグノスティックス（株）製）が挙げられる。なお、本発明はこのリパーゼに限定されるものではない。
本発明の製造方法で用いられる溶媒はエステル化の場合、例えばペンタン、ヘキサン、ヘプタン、オクタン等の炭化水素系、ジエチルエーテル、メチル−ｔ−ブチルエーテル、ジブチルエーテル、テトラヒドロフラン等のエーテル系、トルエン、キシレン、ベンゼン等の芳香族系、ジクロルメタン、クロロホルム等のハロゲン系のいずれかないしは混合系であることができる。また加水分解の場合基本的には水であるが、例えばペンタン、ヘキサン、ヘプタン、オクタン等の炭化水素系、ジエチルエーテル、メチル−ｔ−ブチルエーテル、ジブチルエーテル、テトラヒドロフラン等のエーテル系、トルエン、キシレン、ベンゼン等の芳香族系、ジクロルメタン、クロロホルム等のハロゲン系、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール等のアルコール系、アセトン、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトン等のケトン系のいずれかないしは複数の溶媒との混合系であることができる。
これらの溶媒の使用量は、エステル化の場合少なくとも原料のラセミのアズレントリフルオロエタノール誘導体を完全に溶解させる量が必要であり、例えば、ラセミのアズレントリフルオロエタノール誘導体の３〜５０重量倍、好ましくは５〜３０重量倍である。また加水分解の場合、反応に必要な水の量はラセミのアズレントリフルオロエタノール誘導体の１〜５０重量倍、溶媒全体量としては、ラセミのアズレントリフルオロエタノール誘導体の１〜１００重量倍、好ましくは５〜３０重量倍である。
エステル化の場合、ラセミのアズレントリフルオロエタノール誘導体およびアシル化剤の混合溶媒系にリパーゼを懸濁して、ゆるく振盪あるいは撹拌することにより行なわれる。このとき（＋）、（−）いずれか一方の鏡像体のみが選択的にエステル化される。この際エステル化の交換率は、鏡像体純度を高くするために４０〜５０％にとどめておく。
（＋）、（−）のどちらかが選択されるかは、用いたアズレントリフルオロエタノール誘導体の構造による。エステル化合物は、分別抽出、分別蒸留、カラムクロマト等により分離し、このものを更にリパーゼで加水分解する。この加水分解は３−ハロゲンアズレン誘導体等の場合はリパーゼを用いないで通常の水酸化カリウム、水酸化ナトリウム等の水溶液で加水分解することも可能である。リパーゼを用いるこの加水分解の場合、光学活性アズレントリフルオロエタノールのエステル化合物および水の混合溶媒系にリパーゼを懸濁して、ゆるく振盪あるいは撹拌することにより行なわれる。鏡像体純度を１００％ｅｅ近くにするために加水分解の変換率は、７０〜８０％にとどめる。加水分解された光学活性アズレントリフルオロエタノール化合物を前述と同様に分離する。これにより光学活性アズレントリフルオロエタノール誘導体の一方の鏡像体が高純度で得られる。
【００１０】
本発明の第２の方法は、上記の第１の方法におけるエステル化の際エステル化されずに残った他方の鏡像体のアズレントリフルオロエタノール化合物について、これを分離した後このものを更にアシル化剤との混合溶媒系にリパーゼを懸濁して、ゆるく振盪あるいは撹拌することによりエステル化反応処理する。この際エステル化の変換率は、鏡像体純度を１００％ｅｅ近くにするために３０〜４０％にとどめる。エステル化されなかったアズレントリフルオロエタノール化合物を前述と同様に分離する。得られたエステル化されなかった化合物がもう一方の鏡像体である光学活性アズレントリフルオロエタノール誘導体であり、高純度で得られる。
上記光学分割時の温度は、リパーゼの作用温度であれば良いが、好ましくは１５〜４０℃である。反応の進行は、反応液の一部について、ガスクロマトグラフィーあるいは高速液体クロマトグラフィーによる分析を行なって追跡することができる。反応終了後、反応液からの光学活性アズレントリフルオロエタノールと光学活性アズレントリフルオロエタノールのエステルとの分離は、分別抽出、分別蒸留、カラムクロマト等のいずれかないしは組み合わせることにより行なう。製造した（＋）、（−）両光学活性アズレントリフルオロエタノール誘導体の鏡像体の鏡像体純度は、光学活性体分割カラムを用いて、高速液体クロマトグラフィーで分析することにより行なう。
【００１１】
【発明の実施の形態】
（１）ラセミ１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）アズレン、アシル化剤（Ｒ8ＣＯＯＣＨ＝ＣＨ2、例えばプロピオン酸ビニル、クロル酢酸ビニル等）およびリパーゼ（例えばキラザイムＬ−５）を有機溶媒（炭化水素系、エーテル系、芳香族系等）に加え、ガスクロマトグラフィーにより、変換率を確認しながら撹拌する。吸引濾過後、濾液を減圧下有機溶媒（炭化水素系、エーテル系、芳香族系等）を留去し、粗生成物を得る。例えばアルミナでのカラムクロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１）により１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）アズレンのアシル化物および１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）アズレンを得る。
得られた１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）アズレンのアシル化物およびリパーゼをリン緩衝液（ｐＨ７．８）に加え、途中ガスクロマトグラフィーにより変換率を確認しながら撹拌する。吸引濾過、濾液を有機溶媒（炭化水素系、エーテル系、芳香族系等）で抽出、減圧下有機溶媒を留去し、粗生成物を得る。例えばアルミナでのカラムクロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１）により精製し、高純度の（−）−１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）アズレンおよび１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）アズレンのアシル化物を得る。
なお、得られたアシル化物が１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）−３−ハロゲンアズレン・プロピオネートの場合では、水酸化カリウム水溶液で加水分解し、例えばアルミナでのカラムクロマトグラフィにより精製し、高純度の（−）−１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）−３−ハロゲンアズレンを得る。
（２）上記（１）でエステル化されなかった（＋）−１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）アズレン、アシル化剤（Ｒ8ＣＯＯＣＨ＝ＣＨ2、例えばプロピオン酸ビニル、クロル酢酸ビニル等）およびリパーゼ（例えばキラザイムＬ−５）を有機溶媒（炭化水素系、エーテル系、芳香族系等）に加え、ガスクロマトグラフィーにより、変換率を確認しながら撹拌する。吸引濾過後、濾液を減圧下有機溶媒（炭化水素系、エーテル系、芳香族系等）を留去し、粗生成物を得る。アルミナでのカラムクロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１）により（＋）−１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）アズレンおよび１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）アズレンのアシル化物を分離した。精製して得た（＋）−１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）アズレンは、高純度のものである。
【００１２】
【発明の効果】
本発明において、ラセミのアズレントリフルオロエタノール誘導体をリパーゼを用い有機溶媒の存在下アシル化剤で一方の鏡像体のみを選択的にエステル化後、（ｉ）生成した光学活性エステル化合物をリパーゼの存在下加水分解するか、（ii）エステル化されずに残ったアズレントリフルオロエタノール化合物をリパーゼにより更にアシル化剤でエステル化する二段階法を適用することによって、安全な操作によりかつ環境に影響を及ぼす廃棄物も出ず、しかも高収率で高い鏡像体純度を有する光学活性アズレントリフルオロエタノール誘導体の（＋）、（−）両鏡像体が製造できるものである。
【００１３】
【実施例】
実施例１  〔（−）−１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）アズレン  式（１）の製造〕
１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）アズレン１０ｇ、プロピオン酸ビニル４４．３ｇおよびキラザイムＬ−５（ロッシュ・ダイアグノスティクス（株）製）１０ｇをｔ−ブチルメチルエーテル２００ｍｌに加え３０℃で途中ガスクロマトグラフィーにより変換率を確認しつつ４時間撹拌（１分間に１２０回転）した。吸引濾過後、濾液より減圧下ｔ−ブチルメチルエーテルを留去し粗生成物１１ｇを得た。交換率は、ガスクロマトグラフィーより４７％であった。アルミナ５０ｇでカラムクロマト（ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１）を行い、１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）アズレン・プロピオネート５．０ｇ（収率４０．１％）、１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）アズレンを４．１ｇ（収率４１．０％）を得た。
得られた１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）アズレン・プロピオネートの極少量を鏡像体純度および旋光度を調べるために水酸化カリウム水溶液で加水分解した。鏡像体純度は、高速液体クロマトグラフィー（キラルセルＯＢＨ；ヘキサン：イソプロピルアルコール＝９５：５）で分析し、９４％ｅｅであった。旋光度：［α］20435nm−５２．２゜（Ｃ＝０．２５、ペンタン）。
次に９４％ｅｅの１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）アズレン・プロピオネート４．５ｇおよびキラザイムＬ−５（ロッシュ・ダイアグノスティクス（株）製）４．５ｇをリン酸緩衝液（ｐＨ７．８）５４ｍｌおよびメタノール３６ｍｌの混合液に加え、３０℃で途中ガスクロマトグラフィーにより変換率を確認しつつ４時間撹拌（１分間に１２０回転）した。吸引濾過後、濾液をｔ−ブチルメチルエーテルで抽出、ついで抽出溶媒を減圧下留去し粗生成物４．２ｇを得た。変換率は、ガスクロマトグラフィーより８５％であった。アルミナ２２．５ｇでカラムクロマト（ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１）を行ない、（−）−１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）アズレンを２．９ｇ（収率８０．６％）、１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）アズレン・プロピオネートを１．０ｇ得た。得られた（−）−１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）アズレンの鏡像体純度は、高速液体クロマトグラフィー（キラルセルＯＢＨ；ヘキサン：イソプロピルアルコール＝９５：５）で分析し、９９．３％ｅｅであった。旋光度：［α］20435nm−５９．１゜（Ｃ＝０．１１、ペンタン）。
【００１４】
実施例２  〔（＋）−１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）アズレン  式（１）の製造〕
実施例１でエステル化されなかった１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）アズレンより（＋）−１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）アズレンを製造する。このものの鏡像体純度は、高速液体クロマトグラフィー（キラルセルＯＢＨ；ヘキサン：イソプロピルアルコール＝９５：５）で分析し、８４％ｅｅであった。旋光度：［α］20435nm＋４１．４゜（Ｃ＝０．２５、ペンタン）。
８４％ｅｅの（＋）−１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）アズレン３．８ｇ、プロピオン酸ビニル２５．３ｇおよびキラザイムＬ−５（ロッシュ・ダイアグノスティクス（株）製）７．６ｇをｔ−ブチルメチルエーテル７６ｍｌに加え３０℃で途中ガスクロマトグラフィーにより変換率を確認しつつ１３時間撹拌（１分間に１２０回転）した。吸引濾過後、濾液より減圧下ｔ−ブチルメチルエーテルを留去し粗生成物４ｇを得た。交換率は、ガスクロマトグラフィーより１９％であった。アルミナ１９ｇでカラムクロマト（ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１）を行い、（＋）−１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）アズレンを２．７ｇ（収率７１．１％）、１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）アズレン・プロピオネートを１．０ｇ得た。得られた（＋）−１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）アズレンの鏡像体純度は、高速液体クロマトグラフィー（キラルセルＯＢＨ；ヘキサン：イソプロピルアルコール＝９５：５）で分析し、９９．５％ｅｅであった。旋光度：［α］20435nm＋５９．８゜（Ｃ＝０．１８、ペンタン）。
【００１５】
実施例３  〔（−）−１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）−３−クロル−アズレン  式（３）の製造〕
１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）−３−クロルアズレン１０ｇ、プロピオン酸ビニル１９．２ｇおよびキラザイムＬ−５（ロッシュ・ダイアグノスティクス（株）製）１０ｇをｔ−ブチルメチルエーテル２００ｍｌに加え３０℃で途中ガスクロマトグラフィーにより変換率を確認しつつ４時間撹拌（１分間に１２０回転）した。吸引濾過後、濾液より減圧下ｔ−ブチルメチルエーテルを留去し粗生成物１１ｇを得た。変換率は、ガスクロマトグラフィーより４９％であった。アルミナ５０ｇでカラムクロマト（ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１）を行い、１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）−３−クロルアズレン・プロピオネート５．４ｇ（収率４４．４％）、１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）−３−クロルアズレンを４．５ｇ（収率４５．０％）得た。
得られた１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）−３−クロルアズレン・プロピオネート５．０ｇを５％水酸化カリウム水溶液５ｇおよびメタノール１０ｍｌの混合溶液に加え室温で３０分加水分解した。常法により後処理した後、アルミナ２５ｇでカラムクロマト（ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１）を行い、１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）−３−クロルアズレンを４．０ｇ（収率９７．２％）得た。鏡像体純度は、高速液体クロマトグラフィー（キラルセルＯＢＨ；ヘキサン：イソプロピルアルコール＝９５：５）で分析し、９８％ｅｅであった。旋光度：［α］20435nm−４５．８゜（Ｃ＝０．０８２、ペンタン）。
実施例４  〔（＋）−１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）−３−クロルアズレン  式（３）の製造〕
実施例３でエステル化されなかった１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）−３−クロルアズレンより（＋）−１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）−３−クロルアズレンを製造する。このものの鏡像体純度は、高速液体クロマトグラフィー（キラルセルＯＢＨ；ヘキサン：イソプロピルアルコール＝９５：５）で分析し、９２％ｅｅであった。旋光度：［α］20435nm＋３９．５゜（Ｃ＝０．０７６、ペンタン）。
９２％ｅｅの（＋）−１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）−３−クロルアズレン４．５ｇ、プロピオン酸ビニル１７．３ｇおよびキラザイムＬ−５（ロッシュ・ダイアグノスティクス（株）製）９．０ｇをｔ−ブチルメチルエーテル９０ｍｌに加え３０℃で途中ガスクロマトグラフィーにより変換率を確認しつつ１５時間撹拌（１分間に１２０回転）した。吸引濾過後、濾液より減圧下ｔ−ブチルメチルエーテルを留去し粗生成物４．８ｇを得た。変換率は、ガスクロマトグラフィーより９％であった。アルミナ２３ｇでカラムクロマト（ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１）を行ない、（＋）−１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）−３−クロルアズレンを４．０ｇ（収率８８．９％）、１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）−３−クロルアズレン・プロピオネートを０．６ｇ得た。得られた（＋）−１−（α−ヒドロキシ−β，β，β−トリフルオロエチル）−３−クロルアズレンの鏡像体純度は、高速液体クロマトグラフィー（キラルセルＯＢＨ；ヘキサン：イソプロピルアルコール＝９５：５）で分析し、１００％ｅｅであった。旋光度：［α］20435nm＋４８．３゜（Ｃ＝０．０８５、ペンタン）。