(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
熱可塑性ポリビニルアルコールからなる不織布層と、該不織布層と積層された水溶性高分子化合物層とからなる培地用器材であって、前記熱可塑性ポリビニルアルコールの粘度平均重合度が２３０〜４７０であることを特徴とする培地用器材。
【請求項２】
前記不織布層がメルトブロー不織布からなることを特徴とする請求項１に記載の培地用器材。
【請求項３】
熱可塑性ポリビニルアルコールが、鹸化度９０〜９９．９９モル％、ビニルアルコールユニットに対するトライアッド表示による水酸基３連鎖の中心水酸基のモル分率６６〜９９．９モル％、融点１５５℃〜２３０℃であるポリビニルアルコールである請求項１または２に記載の培地用器材。
【請求項４】
ポリビニルアルコールが、炭素数４以下のα−オレフィン単位および／またはビニルエーテル単位を０．１〜６０モル％含有する変性ポリビニルアルコールである請求項１〜３のいずれか1項に記載の培地用器材。
【請求項５】
α−オレフィン単位としてエチレン単位を３〜５０モル％含有する変性ポリビニルアルコールである請求項４に記載の培地用器材。
【請求項６】
不織布層が、平均繊維径が２０μｍ以下の極細繊維不織布からなる請求項１〜５のいずれか１項に記載の培地用器材。
【請求項７】
水溶性高分子化合物層がフィルムである請求項１〜６のいずれか１項に記載の培地用器材。
【請求項８】
水溶性高分子化合物がポリビニルアルコールである請求項１〜７のいずれか１項に記載の培地用器材。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか１項に記載の培地用器材を構成する不織布層または水溶性高分子化合物層の少なくとも１層に、微生物の生育に必要な栄養成分を含有させてなる微生物培地。
【請求項１０】
ポリエステルフィルム上に前記水溶性高分子化合物層が積層されてなる
請求項９に記載の微生物培地。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、培地用器材および微生物培地に関するものであり、さらに詳しくは微生物の培養に好適であり、かつ衛生面に優れた培地用器材および微生物培地に関する。
【０００２】
【従来の技術】
従来、微生物培養検査には寒天培地が使用されてきたが、この方法では使用に先立って、培地の調製、滅菌に加え、寒天培地が固化しない温度に保つ必要があるなど、非常に手間と時間がかかるため、培地調製の手間を省いた簡易培地が提案されている。
例えば、特許第３１１５００２号には、繊維層と発色剤および選択剤を含まない高分子化合物層と発色剤および／または選択剤を含む高分子化合物層とを重層してなる培地用器材が開示されており、食品や環境の微生物検査が簡便に行えることが記載されている。
【０００３】
しかしながら、上記培地用器材は、親水性が十分でないため、被験液と繊維層の馴染みが不十分となり、微生物の育成により生じたコロニーの分散性が悪くなるといった不都合を生じる場合がある。これら欠点を補うため、上記繊維を親水化処理などの変性処理により親水性を付与する方法が記載されているが、この方法では繊維素材の製造プロセスが複雑になるという欠点がある。また、使用済み培地用器材および培地は通常焼却処分を要するが、処分するまでの間、廃棄袋等に詰めて一時的に保管しなくてはならないので、保管場所を要する上に衛生上の問題がある。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は上記課題を解決するものであり、微生物の培養に好適であるだけでなく、培地自体が熱水により容易に溶解し、微生物培養後、ただちに滅菌および溶解処理が可能である、衛生面に優れ、廃棄物の発生量が少ない培地用器材および培地を提供することにある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
すなわち本発明は、熱可塑性ポリビニルアルコールからなる不織布層と、該不織布層と積層された水溶性高分子化合物層とからなる培地用器材であって、前記熱可塑性ポリビニルアルコールの粘度平均重合度が２３０〜４７０であることを特徴とする培地用器材である。
【０００６】
【発明の実施の形態】
本発明の培地用器材の不織布層に用いる熱可塑性ポリビニルアルコール（以下、ＰＶＡと略記する場合がある）とは、ポリビニルアルコールのホモポリマーおよび、共重合、末端変性、および後反応により官能基を導入した変性ポリビニルアルコールも含むものである。
【０００７】
ＰＶＡの粘度平均重合度（以下、重合度と略記する場合がある）は２３０〜４７０であって、２５０〜４５０が特に好ましい。なお、ＰＶＡの重合度（Ｐ）はＪＩＳ  Ｋ６７２６に準じて測定される。すなわち、ＰＶＡを再鹸化し、精製した後、３０℃の水中で測定した極限粘度［η］（ｄｌ／ｇ）から次式により求められるものである。
Ｐ＝（［η］×１０３／８．２９）（１／０．６２）
重合度が上記範囲にある時、本発明の目的がより好適に達せられる。
【０００８】
また、ＰＶＡの鹸化度は溶融紡糸時の熱安定性、後述する不織布の熱水溶解性等の観点から９０〜９９．９９モル％が好ましく、９２〜９９．９８モル％がより好ましく、９３〜９９．９７モル％がさらに好ましく、９４〜９９．９６モル％が特に好ましい。
【０００９】
特に本発明においては、不織布層に使用するＰＶＡのトライアッド表示による水酸基３連鎖の中心水酸基の含有率は溶融紡糸時の曳糸性、熱安定性等の観点から、６６〜９９．９モル％が好ましく、７０〜９９モル％がより好ましく、７４〜９７モル％がさらに好ましく、７５〜９６モル％が特に好ましく、７６〜９５モル％が最も好ましい。
【００１０】
なお、トライアッド表示による水酸基３連鎖の中心水酸基とは、ＰＶＡのｄ６−ＤＭＳＯ溶液での５００ＭＨｚ  １ＨＮＭＲ（ＪＥＯＬ  ＧＸ−５００）装置、６５℃測定による水酸基プロトンのトライアッドのタクティシティを反映するピーク（Ｉ）を意味する。ピーク（Ｉ）はＰＶＡの水酸基のトライアッド表示のアイソタクティシティ連鎖（４．５４ｐｐｍ）、ヘテロタクティシティ連鎖（４．３６ｐｐｍ）およびシンジオタクティシティ連鎖（４．１３ｐｐｍ）の和で表され、全てのビニルアルコールユニットにおける水酸基に由来するピーク（ＩＩ）はケミカルシフト４．０５〜４．７０ｐｐｍの領域に現れることから、本発明においてビニルアルコールユニットに対するトライアッド表示による水酸基３連鎖の中心水酸基のモル分率は、１００×（Ｉ）／（ＩＩ）で表されるものである。
【００１１】
また、ＰＶＡの融点（Ｔｍ）は１５５〜２３０℃が好ましく、１７０〜２２７℃がより好ましく、１７５〜２２４℃がさらに好ましく、１８０〜２２０℃が特に好ましい。ＰＶＡの融点が上記範囲にある場合、所望の不織布層が安定して得られ、培地用器材としてより好適なものとなる。
【００１２】
ＰＶＡの融点は、ＤＳＣを用いて、窒素中、昇温速度１０℃／分で２５０℃まで昇温後、室温まで冷却し、再度昇温速度１０℃／分で２５０℃まで昇温した場合のＰＶＡの融点を示す吸熱ピークのピークトップの温度を意味する。
【００１３】
本発明の培地用器材の不織布層を構成するＰＶＡは、ビニルエステル系共重合体のビニルエステル単位を鹸化することにより得られる。ビニルエステル単位をポリマー中に導入するためのビニル化合物単量体としては、ギ酸ビニル、酢酸ビニル、プロピオン酸ビニル、バレリン酸ビニル、カプリン酸ビニル、ラウリン酸ビニル、ステアリン酸ビニル、安息香酸ビニル、ピバリン酸ビニルおよびバーサティック酸ビニル等が挙げられ、これらの中でもＰＶＡを得る点からは酢酸ビニルが好ましい。
【００１４】
また、ＰＶＡはビニルアルコール単位およびビニルエステル単位以外の単量体単位を含有していることが好ましいが、入手のしやすさ、共重合性、ブローン時の曳糸性、繊維の水溶解性、吸水性、水膨潤性等水に対して優れた親和性を示す等の観点から、エチレン、プロピレン、１−ブテン、イソブテンの炭素数４以下のα−オレフィン類、メチルビニルエーテル、エチルビニルエーテル、ｎ−プロピルビニルエーテル、ｉ−プロピルビニルエーテル、ｎ−ブチルビニルエーテル等のビニルエーテル類がより好ましい。
炭素数４以下のα−オレフィン類および／またはビニルエーテル類に由来する単位は、ＰＶＡ中に０．１〜６０モル％存在していることが好ましく，４〜１５モル％がより好ましく、６〜１３モル％が特に好ましい。さらに、α−オレフィンがエチレンである場合は、曳糸性が良好となり、平均繊維径２０μｍ以下の極細繊維が安定して形成されることから、特にエチレン単位が３〜２０モル％、より好ましくは６〜１３％導入された変性ＰＶＡを使用することが好ましい。
【００１５】
また、ＰＶＡの重合方法としては、溶液重合、バルク重合、パール重合乳化重合等をあげることができる。その中でも、無溶媒あるいはアルコールなどの溶媒中で重合する塊状重合法や溶液重合法が通常採用される。溶液重合時に溶媒として使用されるアルコールとしては、メチルアルコール、エチルアルコール、プロピルアルコールなどの低級アルコールが挙げられる。
共重合に使用される開始剤としては、α，α’−アゾイソブチロニトリル、２，２−アゾビス（２，４−ジメチル−バレロニトリル）、過酸化ベンゾイル、ｎ−プロピルパーオキシジカーボネートなどのアゾ系開始剤または過酸化物系開始剤などの公知の開始剤が挙げられる。重合温度については特に制限はないが、０〜２００℃の範囲が適当である。
【００１６】
また、本発明の不織布層を構成するＰＶＡは、アルカリ金属イオンを含有していてもよい。アルカリ金属イオンの含有割合は、ＰＶＡ１００質量部に対して０．０００３〜１質量部であることが、ブローン時に良好な繊維化が可能になる点で好ましい。
なお、アルカリ金属の含有量は、原子吸光法により求めることができる。
【００１７】
アルカリ金属イオンとしては、カリウムイオン、ナトリウムイオン等が挙げられる。アルカリ金属イオンをＰＶＡ中に含有させる方法は特に制限されないが、ビニルエステルの重合体を溶媒中において鹸化する際に、鹸化触媒としてアルカリイオンを含有するアルカリ性物質を使用する方法が好適に用いられる。鹸化触媒として使用するアルカリ性物質としては、水酸化カリウムまたは水酸化ナトリウムが挙げられる。
【００１８】
また本発明の目的や効果を損なわない範囲で、必要に応じて可塑剤、銅化合物等の安定剤、着色剤などを重合反応時、またはその後の工程で添加してもよい。
【００１９】
本発明の培地用器材に使用する不織布の製造方法としては、原料ポリマーを一旦繊維化して短繊維を得た後、カードマシンによりシート化したウェブを接着剤で熱接着するケミカルボンド法、連続フィラメントをエアーサッカー等で高速牽引し、移動する捕集ネットコンベアーで捕集してウェブを形成するスパンボンド法、熱可塑性ポリマーを細孔から吐出すると同時に、高速のエアーにより吹き飛ばし、捕集ネット上で捕集するメルトブロー法などが挙げられる。
中でも特にメルトブロー法は、通常の紡糸では製造困難なレベルの極細繊維を比較的容易に紡糸し、不織布化することが可能であるという特徴を有しており、培地用器材とした場合に被験液が拡散しやすくなる点で好ましい。
【００２０】
メルトブロー不織布は、例えば、インダストリアル・アンド・エンジニアリング・ケミストリー，４８巻，第８号（ｐ１３４２〜ｐ１３４６），１９５６年において既に公知のメルトブロー装置を用いて製造することができる。すなわち、溶融押出機でＰＶＡペレットを溶融混練し、溶融したポリマーをギヤポンプで計量し、メルトブロー紡糸ノズルに導いて吐出させ、これを過熱化した空気流で吹き飛ばすことで紡糸し、これを捕集装置上に堆積させ不織布化し、これを巻き取ることで得られる。
【００２１】
メルトブロー不織布の製造条件は、ブローン温度をＰＶＡの融点（Ｔｍ）に対して、（Ｔｍ＋１０℃）〜（Ｔｍ＋８０℃）でメルトブロー紡糸することが重要である。ブローン温度が（Ｔｍ＋１０℃）より低いとポリマーの溶融粘度が高すぎて、高速ブローンエアによる樹脂の細化ができず、非常に粗な不織布になってしまい、培地用器材とした場合に被験液が拡散しにくくなる。一方、（Ｔｍ＋８０℃）を超えるとＰＶＡの熱分解が起こり安定した紡糸ができない場合がある。
【００２２】
上記方法により得られる熱可塑性ポリビニルアルコール系メルトブロー不織布は、微生物培養の観点から、不織布を構成する繊維の平均繊維径が２０μｍ以下であることが好ましく、１０μｍ以下がさらに好ましい。平均繊維径が２０μｍを超える不織布を用いると、被験液が拡散しにくくなり、コロニーの分散性が悪くなる場合がある。
【００２３】
また、得られた不織布はこのままでは冷水に溶解しやすいので、微生物培地における不織布層として用いるためには、該不織布に熱処理を施すことで、繊維を構成している樹脂の結晶化を促進させ、水への溶解温度を上げる必要がある。不織布の熱処理温度を８０℃〜（Ｔｍ−５℃）の範囲で行うことで、冷水には溶解しないが、熱水には容易に溶解するといった特性を付与することができる。
【００２４】
熱処理の方法は、熱風、熱板、熱ローラー等によって行うことができるが、工業的に連続処理のしやすい熱ローラーを用いて処理する方法が好ましい。この熱ローラを用いる場合には、不織布を熱ローラーにタッチさせる方法を用いる。この熱処理は、不織布の片面のみ行ってもよいし、両面を処理してもよい。また、必要に応じて熱だけでなく圧力も同時に加えてもよい。また、熱処理そのものは、メルトブロー不織布製造工程中でもよいし、一旦巻き取った後に改めて熱処理する方法でも差し支えない。
【００２５】
本発明の培地用器材は、熱可塑性ポリビニルアルコールからなる不織布層と水溶性高分子化合物層からなるが、水溶性高分子化合物層としては、４質量％水溶液の粘度が２０℃で１０ｃｐｓ以上であり、微生物の育成を阻害しない高分子化合物からなる層を用いることが好ましい。そして、培地用器材を構成する不織布層、水溶性高分子化合物層の少なくとも1層に、微生物の生育に必要な栄養成分を含有させることで微生物用培地とすることができる。
【００２６】
水溶性高分子化合物層はフィルムまたはシート状の形態で微生物の生育を阻害しないものが好ましい。例えば、ポリビニルアルコール、変性ポリビニルアルコールおよびポリビニルアルコールまたは変性ポリビニルアルコールの架橋物、セルロース誘導体、ポリアクリル酸誘導体、でんぷん誘導体、蛋白質、蛋白質誘導体、多糖類などからなる層が使用できる。中でも、吸水性や微生物の育成により生じるコロニーの分散性等の点からポリビニルアルコールからなる層を用いることが好ましい。
【００２７】
次に、本発明の微生物培地に含有させる栄養成分は、培養する微生物に適したものであればよく、特に限定はされない。例えば、一般生菌検査用としては肉エキス・ペプトン混合物、酵母エキス・ペプトン、酵母エキス・トリプトン、酵母エキス・ペプトン・ブドウ糖混合物、ペプトン・大豆ペプトン・ブドウ糖混合物などやこれらにリン酸1水素カリウムおよび／または塩化ナトリウムを加えたものなどが、大腸菌・大腸菌群検査用としてはペプトン・クエン酸鉄アンモニウム・塩化ナトリウム・リン酸1水素カリウム・乳糖混合物、ペプトン・乳糖・リン酸1水素カリウム混合物などが、ブドウ球菌用としては肉エキス・ペプトン、塩化ナトリウム・マンニット・卵黄混合物、ペプトン・肉エキス・酵母エキス・ピルビン酸ナトリウム混合物などが挙げられる。
【００２８】
本発明の微生物用培地の製法としては、まずポリエステルなどのフィルム状の支持体上に、ＰＶＡ等の高分子化合物の水溶液を塗布し、水溶性高分子化合物層を形成する。この時、必要に応じて水溶液中に微生物の培養に必要な栄養成分を含ませていてもよい。次に、熱可塑性ポリビニルアルコールからなる不織布を積層して不織布層を形成するが、水溶性高分子化合物層と不織布層は密着しているほうが好ましい。このため、熱可塑性ポリビニルアルコール不織布の積層は水溶性高分子化合物層が乾燥しないうちに行うか、あるいは、水溶性高分子化合物層を乾燥させた後、水または栄養成分を含んだ水溶液により予め湿らせた不織布を重層させる方法を採用するのが望ましい。その後、十分に乾燥させた後、フィルム状の支持体を剥離し、または剥離しないで適当な大きさに切断して、ガス滅菌や放射線照射滅菌を施し、培地用器材または培地とする。培地用器材または培地の厚みは、１０μｍ〜５ｍｍが好ましい。また、培地用器材または培地には、培養中の乾燥防止、あるいは被験液の漏洩防止のためプラスチックフィルム等によるカバーを備えていてもよい。
【００２９】
微生物を培養した後の培地を滅菌、溶解処理する方法としては、熱水や高圧蒸気を用いる方法が挙げられる。熱水により溶解処理する場合、水温は高いほど処理時間が短くなり、７０℃以上で処理するのが好ましく、８０℃以上がさらに好ましく、９０℃以上が最も好ましい。また、不織布の溶解処理は該繊維の分解を伴うものであっても良い。
【００３０】
上記方法により得られる本発明の培地用器材または培地は、不織布層に親水性に優れた熱可塑性ポリビニルアルコール系不織布を用いているため、被験液の吸水性に優れ、微生物の育成により生じたコロニーの分散性が良く、微生物の培養に好適に使用できる。また、不織布層および水溶性高分子化合物層はいずれも熱水に溶解するので、該微生物培地にて微生物を培養した後、直ちに熱水により滅菌すると同時に、培地それ自体の溶解処理が可能であるため、衛生面に優れ、廃棄物の発生量が少ないという利点を有している。
【００３１】
【実施例】
次に実施例をあげて本発明を具体的に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
【００３２】
［平均繊維径の測定］
走査型電子顕微鏡を用いて、不織布の表面を１０００倍に拡大した写真を撮影し、この写真に２本の対角線を引き、この対角線と交わった繊維の太さを倍率換算した値を用いた。そして、それら繊維の１００本の平均値を平均繊維径として用いた。
ただし、該当する繊維が不鮮明であったり、複数本重なるなどして１本の繊維径を測定できない場合には、測定対象から除外した。
【００３３】
［使用済培地の溶解処理］
使用済の微生物培地を９８℃に調整した１０００ｃｃの蒸留水に投入し、時々かき混ぜながら、３０分間放置した。その後、培地の状態を観察し、目視により繊維状物または塊状物が認められなくなった場合、溶解したと判断した。
【００３４】
実施例１
攪拌機、窒素導入口、エチレン導入口および開始剤添加口を備えた１００Ｌ加圧反応槽に酢酸ビニル２９．０ｋｇおよびメタノール３１．０ｋｇを仕込み、６０℃に昇温した後、３０分間窒素バブリングにより系中を窒素置換した。次いで反応層圧力が５．９ｋｇ／ｃｍ２となるようにエチレンを導入仕込みした。開始剤として２，２’−アゾビス（４−メトキシ−２，４−ジメチルバレロニトリル）（ＡＭＶ）をメタノールに溶解した濃度２．８ｇ／Ｌ溶液を調製し、窒素ガスによるバブリングを行って窒素置換した。上記の重合層内温を６０℃に調製した後、上記開始剤溶液１７０ｍＬを注入し重合を開始した。重合中はエチレンを導入して反応圧力を５．９ｋｇ／ｃｍ２に、重合温度を６０℃に維持し、上記の開始剤溶液を用いて６１０ｍＬ／ｈｒでＡＭＶを連続添加して重合を実施した。１０時間後に重合率が７０％となったところで冷却して重合を停止した。反応槽を開放して脱エチレンした後、窒素ガスをバブリングして脱エチレンを完全に行った。次いで、減圧下に未反応酢酸ビニルモノマーを除去し、ポリ酢酸ビニルのメタノール溶液とした。得られた該ポリ酢酸ビニル溶液にメタノールを加えて濃度が５０％となるように調製したポリ酢酸ビニルのメタノール溶液２００ｇ（溶液中の酢酸ビニルユニットに対してモル比（ＭＲ）０．１０）のアルカリ溶液（ＮａＯＨの１０％メタノール溶液）を添加して鹸化を行った。アルカリ添加後約２分の後、系がゲル化したものを粉砕機にて粉砕し、６０℃で１時間放置して鹸化を進行させた後、酢酸メチル１０００ｇを加えて残存するアルカリを中和した。フェノールフタレイン指示薬を用いて中和の終了を確認後、濾別して得られた白色固体のＰＶＡにメタノール１０００ｇを加えて室温で３時間放置洗浄した。上記洗浄操作を３回繰り返した後、遠心脱液して得られたＰＶＡを乾燥機中７０℃で２日間放置して乾燥ＰＶＡを得た。
【００３５】
得られたエチレン変性ＰＶＡの鹸化度は９８．４モル％であった。また、該変性ＰＶＡを灰化させた後、酸に溶解したものを用いて原子吸光光度計により測定したナトリウムの含有量は、変性ＰＶＡ１００質量部に対して０．０３質量部であった。
また、重合後未反応酢酸ビニルモノマーを除去して得られたポリ酢酸ビニルのメタノール溶液をｎ−ヘキサンに溶解させ、再度ｎ−ヘキサンに添加して沈殿させる再沈精製を３回行った後、８０℃で３日間減圧乾燥を行って精製ポリ酢酸ビニルを得た。該ポリ酢酸ビニルをｄ６−ＤＭＳＯに溶解し、５００ＭＨｚ  １HＮＭＲ（ＪＥＯＬ  ＧＸ−５００）装置を用いて８０℃で測定したところ、エチレンの含有量は１０モル％であった。上記のポリ酢酸ビニルのメタノール溶液をアルカリモル比０．５で鹸化した後、粉砕したものを６０℃で５時間放置して鹸化を進行させた後、メタノールソックスレーを３日間実施し、次いで８０℃で３日間減圧乾燥を行って精製されたエチレン変性ＰＶＡを得た。該ＰＶＡの粘度平均重合度を常法のＪＩＳ  Ｋ６７２６に準じて測定したところ３３０であった。該精製ＰＶＡについて水酸基３連鎖の水酸基の含有量を５００ＭＨｚ  １ＨＮＭＲ（ＪＥＯＬ  ＧＸ−５００）装置による測定から前述の通り求めたところ、８３モル％であった。
さらに、精製された変性ＰＶＡの５％水溶液を調製し厚み１０μｍのキャスト製フィルムを作製した。該フィルムを８０℃で１日間減圧乾燥を行った後に、ＤＳＣ（メトラー社、ＴＡ３０００）を用いて、前述の方法によりＰＶＡの融点を測定したところ２０６℃であった。
【００３６】
上記で得られたＰＶＡを溶融押出機にて２５０℃で溶融混練し、溶融したポリマー流をメルトブローダイヘッドに導き、ギヤポンプで計量し、直径０．３ｍｍφの孔を０．７５ｍｍピッチで一列に並べたメルトブローノズルから吐出させ、同時にこの吐出ポリマーに２５０℃の熱風を噴射して、吐出した繊維状物を成形コンベア上に捕集し、目付５０ｇ／ｍ２のメルトブロー不織布を得た。このときの樹脂の単孔吐出量は０．２ｇ／分／孔であり、熱風量は０．１５Ｎｍ３／分／ｃｍ幅であり、ノズルと捕集コンベア間の距離は１５ｃｍであった。また、この時メルトブロー装置のノズル直下に二次エアー吹き付け装置を設置し、メルトブロー繊維流中に、１ｍ３／分／ｃｍ幅の流量で、１５℃の空気流を吹き付けた。
【００３７】
得られたＰＶＡメルトブロー不織布の平均繊維径は９．６μｍであった。引き続き、上記方法で得たメルトブロー不織布を、表面速度５ｍ／分、表面温度が１８０℃で回転している金属製フラットロールに接触させながら走行させ、続いて同条件のロールに反対の面を接触させることにより熱処理を行った。このとき、ロールと不織布が接触状態にある時間は、表、裏共に約８秒であった。
熱処理後の不織布層は目付４６．２ｇ／ｍ２、厚さ０．４６１ｍｍであった。
【００３８】
次に、以下の手順により培地を製造した。まず、水５００ｍＬに鹸化度８８％、平均重合度１８００のポリビニルアルコール２０ｇ、肉エキス１．０ｇ、ペプトン３．０ｇ、塩化ナトリウム１．０ｇ、リン酸１水素カリウム１．０ｇを加え、加熱溶解後、２０μｍ厚５０×５０ｃmポリエステルフィルム上に塗布し乾燥させ、水溶性高分子化合物層を形成した。次に、先述のポリビニルアルコール系メルトブロー不織布を３質量％ペプトン水に浸して軽く脱水した後、水溶性高分子化合物層上に張り合わせ、乾燥させて本発明の培地を形成した。これを直径５０ｍｍの円形に切断し、エチレンオキサイドガス滅菌を行った。
食肉、カット野菜、惣菜などの各種食品１０ｇを滅菌済袋に入れ、１００ｍＬの水を加えてストマッカーでホモジナイズして作製した溶液の１０倍希釈列を滅菌水で作製し、希釈した液１ｍＬを微生物培地に加えた後、滅菌したポリプロピレンフィルムで微生物培地を覆い、３５℃で１６時間培養した。
【００３９】
比較例１
不織布層に、ナイロン６からなるメルトブロー不織布（目付５０ｇ／ｍ２、厚さ０．４３ｍｍ、平均繊維径３．８μｍ）を用いたこと以外は実施例１と同様の条件にて培地を作製し、微生物の培養を行った。
【００４０】
実施例１および比較例１で得られた微生物培地について、培養試験を行ったところ、実施例１で得られた微生物培地は、培地に対する被験液の吸収速度が明らかに速く、また、微生物の育成により生じたコロニーの分散均一性が向上していることが認められた。
【００４１】
また実施例1の培地は、使用後の培地を９８℃の熱水の入ったビーカーに投入すると、ポリエステルフィルム支持体以外の不織布層、水溶性高分子化合物層は全て溶解した。
【００４２】
【発明の効果】
本発明の培地用器材または培地は、不織布層に親水性の優れた熱可塑性ポリビニルアルコール系不織布を用いているため、被験液の吸水性に優れ、微生物の培養により生じたコロニーの分散性が良く、微生物の培養に好適に使用できる。また、本発明の微生物培地を構成する不織布層および水溶性高分子化合物層はいずれも熱水に溶解するので、微生物の培養後、直ちに熱水により滅菌すると同時に、培地それ自体の溶解処理が可能である。よって、衛生面に優れ、廃棄物の発生量が少ないという利点も有している。