(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１】
0004350898.tif 000009
（式中、
Xは、MeBmt、又は6，7-ジヒドロ-MeBmt-であり；
Uは、-Abu、Nva、Val、Thrであり；
Yは、Sar、又は(D)-MeSer、又は(D)-MeAla、又は(D)-MeSer(OAcyl)であり；
Zは、Ｎ-エチル-バリンである）
により特徴づけられる合成シクロスポリン。
【請求項２】
Ｙが(D)-MeAlaであり、XがMeBmtであり、かつ、Uが-Abuであることを特徴とする請求項１に記載のシクロスポリン。
【請求項３】
請求項１又は２に記載のシクロスポリンを含有する薬学的組成物。
【請求項４】
薬学的に許容される溶液と組み合わされることを特徴とする請求項３に記載の薬学的組成物。
【請求項５】
請求項１または２に記載のシクロスポリンの、エイズの処置及び予防するための医薬品の製造のための使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、新規なシクロスポリン(Cs)、その薬学的使用、及びそれを含んだ薬学的組成物に関する。
【０００２】
【従来技術】
Csは、複数の薬理学的活性を有する環状ポリ-N-メチル化ウンデカペプチドの一つのクラスであるが、具体的にはこれらは免疫抑制性、抗-炎症性、抗−寄生虫性の薬剤、薬剤耐性抑制剤(抗-MDR)、及び抗ウイルス剤である。真菌の培養物から最初に単離されたシクロスポリンは、自然な状態でみられ、そして以下の式で表されるシクロスポリンＡである：
【０００３】
【化３】
0004350898.tif 000002
【０００４】
ここで、
Abu=L-α-アミノ酪酸
Ala=L-アラニン
MeBmt=Ｎ-メチル-(4R)-4-[(E)-2-ブテニル]-4-メチル-L-スレオニン
Leu =L-ロイシン
MeLeu =Ｎ-メチル-L-ロイシン
MeVal=Ｎ-メチル-Lバリン
Nva=L-ノルバリン
Sar=サルコシン
Thr=L-スレオニン
Val=L-バリン
である。
【０００５】
通常の略語で記述されるアミノ酸は、特に断らない限りL型の立体配置を有する。
【０００６】
このシクロスポリンが最初に発見されて以来、数多くの他の変異体が、単離されて同定されているが、これは非天然の変異体が合成又は半合成の方法により、又は改変培養技術の適用によって得られているためである。シクロスポリンAの産生が、文献に記載されている[Kobel et al. European Journal of Applied Microbiology and Biotechnology14,237-240(1982)]。R.Wengerにより開発された合成方法のみによって産生される人工のシクロスポリンの産生もまた、記載されている。Traber et al.1、Traber et al.2、及びKobel et al.、US 4、108、985; 4、210、581; 4、220、641; 4、288、431; 4、554、351、及び4、396、542; EP34567、及び54782; WO86/02080; Wenger 2、Angew.Chem.Int.Ed.,24,77(1985)；及びWenger 3、Progress in the Chemistry of Organic Natural Products 50、123(1986)を参照されたし。
【０００７】
トリポクラジウム・インフラタム（Tolypocladium inflatum ）から20年前に単離されたシクロスポリンA(CsA)には、かなりの免疫抑制活性がある。これによって、臓器移植が大変革を遂げ、そして自己免疫の処置においてよく使用されている。CsAの使用、及びその作用機構についての最近のレビューについては、Wenger et al: Cyclosporin Chemistry,Structure-activity relationships and Mode of Action、Progress in Clinical Biochemistry and Medicine、Vol.2,176(1986)を参照されたし。
【０００８】
CsAの治療効果は、主にTリンパ球の活性化を選択的に抑制することである。この免疫抑制性の活性は、CsAが細胞内蛋白質受容体である、シクロフィリンA(Cyp)に結合し、カルシニュリン(CaN)と相互作用してその脱リン酸酵素活性を阻害するCyp-CsA複合体を形成するという事実により説明される。したがって、早期の活性化を呈する遺伝子ファミリー転写が遮断されるであろう。（cf. O'Keefe,S.J; Tamura,J; Nature 1992、357、692-634)。
【０００９】
１型のHIVの感染様式は、レトロウイルスの中でも独特であるが、それはこのウイルスが細胞性蛋白質であって、Gagポリ蛋白質と相互作用するCypを、そのウイルス粒子中に特異的に取り込む必要があるからである。（cf.Eltaly Kara Franks、Bi-Xing Chem.Journal of Virology、Sept.1995、vol.69 no.9)。CyPが、三次元複合体にあるCsA及びCaNに結合することは周知である。しかしながら、CyPの天然の機能は、ペプチジル-プロリル結合の異性化を触媒することであるが、これは蛋白質が一定の三次元構造を有するようにするプロセスにおける制限的且つ重要な工程である。Cypはまた、熱ショックから細胞を保護するか、又はシャペロン蛋白質として作用する。CsAとは異なり、HIV-1のGag遺伝子の産物は、CyP及びCaNとの三次元構造の形成を阻害する。実際に、HIVは、Gag 遺伝子の産物に結合して、そのウイルス粒子を形成するためにCypが必要である(cf.Franke、E.K;1994 Nature 372,359-362)。CsAが存在する場合、HIV-1のGag 遺伝子の産物に由来する蛋白質との直接的な競合が、Cypへの結合に関して存在する。このCsAは、ウイルスの複製サイクルにおいて二つのレベルで作用するが、まず、予め組み込まれた複合体のコアへの転位レベルにおいてであり、次に感染性ウイルス粒子の産生においてである。
【００１０】
【発明が解決しようとする課題】
米国特許第4、814、323号は、CsAの抗-HIV活性についてすでに記述しているが、これはまた、かなりの免疫抑制性の活性を有していて、これはHIVに感染した患者の処置において望ましくない。最近になって、別のタイプのシクロスポリンすなわち４位における誘導体、例えば最も抗-HIV性があり、そして最も免疫抑制性のない物質のみをあげると、MeIle4Cs、MeVal4Csや、(4-OH)MeLeu4-Csなどが開発された。誘導体[(4-OH)MeLeu4-Cs]は、微生物を使用してシクロスポリンAを酸化することにより合成される。別の特許、WO97/04005においては、特許EP48428の調製方法、及びSeebachにより開発されたEP194972の方法が使用されて、３位における誘導体、例えば(D)-MeSer3(4-OH)MeLeu4シクロスポリン等が産生される。この物質は、基準の誘導体であるMeIle4-Cs(NIM811)と比較して、Cypに対する良好な親和性があるが、抗-HIV活性は限定的である。この物質はより親水性であるために、細胞及び器官内への浸透が防止される。このことは、この物質の抗-HIV活性が減少することにおいて直接的に反映されている。(cf.Christos Papageorgiou、J.J.Sanglier、and Rene Traber -Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters、Vol、6、No.1、pp.23-26、1996)。
【００１１】
【課題を解決するための手段】
本発明は、かなりのHIV-l (ヒト免疫不全症ウイルス)抑制性活性を有し、CsAの免疫抑制性活性を有しない新規のシクロスポリンの産生を提供する。
【００１２】
本発明に記載される物質には、[(4-OH)MeLeu4]-Cs、又はシクロスポリンAにおいて観察されるものと同等の、Cypに対する親和性を保持しつつも、基準誘導体である(MeVal4-Cs、又はMeIle4-Cs)のものと同等か又はより大きい抗-HIV活性を有し、そしてシクロスポリンA又は(4-OH)MeLeu4-Csよりもかなり大きい抗-HIV活性を有するといった二重の利点を有している。本発明の目的は、新規なシクロスポリンであって、CsAの免疫抑制性の活性を有せず、そして活性の特徴が改善されたものを提供することである。Csのこの新規のファミリーは、式(I)：
【００１３】
【化４】
0004350898.tif 000003
【００１４】
（式中、
Xは、MeBmt、又は6，7-ジヒドロ-MeBmt-；
Uは、-Abu、Nva、Val、Thr；
Yは、Sar、又は(D)-MeSer、又は(D)-MeAla、又は(D)-MeSer (OAcyl)；
Zは、(N-R)aaであり、
ここで、aa={Val、Ile、Thr、Phe、Tyr、Thr (OAc)、Thr (OG1)、Phe(G2)、PheCH2(G3)、Tyr (OG3)}であって、更にここでR={アルキル>CH3}であり；
G1={フェニル-COOH、フェニル-COOMe、フェニル-COOEt }；
G2={CH2COOH、CH2COOMe (Et)、CH2PO(OMe)2、CH2PO(OH)2}；
G3={PO(OH)2、PO(OCH2CH=CH2)2、CH2COOH、CH2COOMe (Et)}である。）
によって特徴づけられる。
【００１５】
したがって、４位にある天然のMeLeu基を、N-(アルキル)aa基(ここで、アルキル>CH3)で置換することにより、この誘導体の抗-HIV1活性が改善される。
【００１６】
したがってこの得られた新規のシクロスポリン分子は、これまでに知られる他の全てのシクロスポリンよりも、かなり安定性が高いといった予想外の、そして驚くべきほどの利点を提供する。
【００１７】
この新規の分子は、細胞内において生じる酸化や分解といった現象に対してのよりすぐれた抵抗性を有する。したがって、この新規のＮ-アルキルaa Csの「生体内（in vivo）」寿命は、特に長くなる。
【００１８】
更に、この新規のN-アルキルaa4シクロスポリンには、CyPに対する高親和性があり、そして既存のシクロスポリンと同等か又はより優れた抗-HIV活性がある。
【００１９】
図１は、この新規のシクロスポリンの全体的構造を示すものである。R1基、R2基、R3基、及びR4基は、表３において詳しく記載する。したがって、これらの４つの、鍵となる位置を変換（transform）することにより、シクロスポリンに対しての非常に良好な親和性を保持し、そしてCaNとの三次元複合体の形成を防止し、そしてとりわけ、特に有益な方法において、その酵素的酸化に対する安定性と、結果としての抗-HIV活性とを増大させることが可能となった。
【００２０】
したがってこの新規のシクロスポリンは主に、R>CH3且つR<C10H21である残基が４位において存在することにより特徴づけられる。用いた、窒素の置換基は例えば、エチル、プロピル、ブチル、又はペンチルであろうが、これらの例は、制限性のものではない。この新規なシクロスポリンは、４位の残基が、N-エチル化アミノ酸(図２及び３を参照されたし)である場合には活性が特に高い。
【００２１】
本発明はまた、式（Ｉ）に記載される物質の薬学的組成物を請求するものである。これは、薬学的に許容される溶液と組み合わせることができる。したがってこの薬学的調剤により、水への溶解度を上昇させるか、又は当該組成物を、水中懸濁状態にあるマイクロエマルジョンの形態で保持することが可能になる。本発明の目的はまた、新規の医薬品であって、例えば、エイズ(後天性免疫不全症候群)の処置及び予防に使用することができるものを提供することである。この４位において残基Ｚで修飾されたシクロスポリン、即ちN-エチル-バリンは、特にエイズの処置及び予防を意図した医薬品の産生のために使用されるであろう。エイズ予防への適用は、制限性のものではない。この物質はまた、例えばその抗-炎症性の特徴が故に使用されることが可能である。
【００２２】
この新規のシクロスポリンの産生のための方法に関しては、本願では通常の技術であって文献に記載されるもの及び研究室で開発されたある特定の方法が使用された。
【００２３】
CsAの合成方法は、R.Wenger (Helv.Chim.Acta Vol.67、p.502-525(1984)）に記載されている。この保護されたシクロスポリンA(OAc)を開く方法は、Peptides 1996に記載されている。CsA分子を、ミーアウェイン（Meerwein's ）試薬である(CH3)3OBF4で処理し、次にメタノール中の酸で処置するか又は水で加水分解して、これを１１アミノ酸残基の直鎖状のペプチド：H-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal-MeBmt (OAc)-Abu-SarOCH3に変換した。この方法は、エジンバラでのヨーロッパペプチド協会（European Society of Peptides）の国際会議において、1996年9月8-13日に発表され、そしてR.WengerのPeptides 1996において刊行された。この直鎖状のペプチドを次に、通常のエドマン法で処理して、その最後のアミノ酸残基（MeLeu)において開裂させて、そして本願における出発産物であるH-Val-MeLeu-Alan-(D)Ala-MeLeu-Meval-MeBmt (OAc)-Abu-Sar-OMeを提供した。この産物を次に、以下の工程において使用した。
【００２４】
調製（１）（保護）
Boc-Val-MeLeu-Ala-(D)-Ala-MeLeu-MeLeu-MeValMeBmt (OAc)-Abu-Sar-OMe (1)
0.72ml (4.18mmole)の、ジイソプロピルエチルアミンの溶液、及び50mlのジオキサン中の0.65g (2.95mmole）の無水Bocを、120mlのジオキサン中にある2.83g (2.46mmole)のデカペプチドであるH-Val MeLee-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeVal-MeBmt (OAc)-Abu-Sar-Omeに添加した。17ml の水を、常温で２時間混合したこの溶液に添加した。次にこの溶媒を蒸発させて、そして得られる反応混合物を300mlの酢酸エチルに溶解し、飽和したNaHCO3の５％溶液で３回洗浄し、そして最後にNaCl溶液で３回洗浄した。有機相を無水Na2SO4で乾燥させ、濾過し、そして溶媒を減圧下で蒸発させた。３g (98%)の、保護済デカペプチド(Boc-デカペプチドメチルエステル)が得られた。
【００２５】
この産物は次に、付加的精製段階を得ることなく以下の合成経路に使用した。この物質を加水分解して、次に活性化し、そして１の対応するアミノ酸で縮合して、１１残基の新規のペプチドを得たが、これが所望の特徴を有する新規のシクロスポリンの環状化及び産生のための出発産物である。
【００２６】
調製（２）（エステルの加水分解）
Boc-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeLeu-MeValMeBmt (OAc)-Abu-Sar-OH(2)
192mg (4.56mmole)のLiOH/H2Oを36mlの水に溶解したものを、一滴ずつ(15℃で)、146mlのテトラヒドロフラン中にある4.08g (3.26mmole)の上述の化合物(1)に添加した。この混合物全体を15℃で攪拌した。反応は、それぞれがLiOH/H2Oの1.4当量であるものの５部を連続して添加した後120時間で完了した。この得られた溶液を、0.1NのHClで中和して、そして溶媒を蒸発させた。回収された固体の産物を次に500mlの酢酸エチルに溶解し、クエン酸の5%溶液で２回洗浄し、塩水溶液で２回洗浄した。この水相を、50mlの酢酸エチルで抽出し、併せた有機相を次に無水Na2SO4で乾燥させ、濾過し、そして蒸発させた。3.84g （95%）の化合物(2)が得られた。
【００２７】
調製（３）(新アミノ酸の添加)：
Boc -Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal-MeBmt (OAc)-Abu-Sar-EtVal-OtBu (3)
6.18g (5mmole)の化合物（２）を、250ml の無水ジクロロメタン中にアルゴン気流下で溶解した。この溶液を次に、冷却して、3.9mlのN-メチルモルホリン(10mmole;pH8.5)、及び1.1ml (10mmole)のイソブチルクロロホルメートをアルゴン気流下でゆっくりと添加した。この溶液を、-15℃で15分間にわたって攪拌した。次に40mlの無水のジクロロメタン中に溶解した2.4g (12mmole)のH-NEt Val-OtBuの溶液を、20分の時間内に添加した。この混合物を次に-15℃で1時間、そして0℃で1時間攪拌し、最終的に常温で一晩攪拌した。400mlのジクロロメタンを次に添加し、そしてクエン酸の5%溶液で３回抽出し、最後に飽和NaCl溶液で３回抽出した。有機相を無水Na2SO4で乾燥し、次に濾過し、そして最後に溶媒を蒸発させた。クロマトグラフィーにかけた後、4.42g (62%)の純粋なウンデカペプチドを回復した。
【００２８】
調製（４）（脱保護）：
H-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal-MeBmt (OAc)-Abu-Sar-EtVal-OH(4)
830mg (0.58mmole)の保護済みウンデカペプチド（４）を15ml の純粋なジクロロメタン中に溶解した。3.2ml のトリフルオロ酢酸をこの溶液に、常温で3分の時間内に添加した。反応はＨＰＬＣでモニターしたが、これにより、1時間30分後には完了したことを証明した。溶媒を蒸発させ、そして残りのトリフルオロ酢酸は、酢酸エチルの存在下で２回蒸発させた。
【００２９】
粗製の生成物(900mg)は、クロマトグラフィー[150g のシリカゲル(0.4-0.63)]で、ジクロロメタン/メタノール/トリエチルアミン(17:3:0.05)を溶離液として使用して、700mg (95%)の純粋な、脱保護されたウンデカペプチド（４）を溶出して精製した。
【００３０】
調製（５）(環状化)：
MeBmt (OAc)l-EtVal4Cs(5)
275mg のTFFH(1.04mmole)をアルゴン気流下で3.45lの無水ジクロロメタン中に溶解した。脱保護されたウンデカペプチド（４）[438mg (0.347mmole)]を次に、40ml の無水ジクロロメタン中に溶解し、0.52ml (3.82mmole)のコリジンをこれに添加した。このわずかに塩基性のペプチド溶液を、一滴ずつTFFH溶液に20分の時間内でアルゴン気流下で激しく撹拌しながら添加した。1時間30分後、全ての出発物質が環状化された。過剰のTFFHをトラップするため、5ml の水を添加し、次にこの溶液を蒸発した。200mlのジクロロメタンを添加し、次に全混合物を、0.1NのHCl水溶液でそれぞれ３回、塩水溶液で３回洗浄し、そしてNa2SO4で乾燥させ、濾過し、そして溶媒を蒸発させた。360mgの黄色がかった油が得られた。この粗製の生成物は、100g のシリカゲル(0.04-0.0063mm)を使用したシリカクロマトグラフィーで、溶離液として酢酸エチル中の1%メタノールを使用して精製した。230mg (54%)の純粋な誘導体（５）がこのようにして産生した。
【００３１】
MeBmt (OAc)-EtVal4Cs (5)酢酸エステル基の切断及びEtVal4Cs (6)の産生：
MeOH中の0.45モル濃度のNaOCH3溶液の1.44ml (0.647mmole)を、一滴ずつ、アルゴン気流下で、28ml メタノール中にある700mg (0.562mmole)のCs (5)誘導体の溶液に添加した[このメタノール中のNaOCH3溶液は、純粋なメタノール中にナトリウムを添加して調製する］。この反応は、常温で45時間攪拌した後に完了した。この混合物は、50%の酢酸水溶液を添加してｐＨを5に調節した。溶媒は、減圧下で除去した。この粗製の生成物を、200ml の酢酸エチルに溶解し、水で２回抽出した。水相を50ml の酢酸エチルで再抽出し、次に有機相を併せたものを塩水溶液で２回洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、そして溶媒を蒸発させた。
【００３２】
得られた産物(750g)は、アセトン/ヘキサンの1:1の溶液(20ml 画分)を使用して、180gのシリカゲル［0.04-0.063mm］のクロマトグラフィーにかけた。550mg (82%)の(EtVal4)Cs (6)が得られた。
【００３３】
H-EtVal-Ot-Buの調製：
4.1ml (23.83mmole)のジイソプロピルエチルアミンをアルゴン気流下で、1lのトリメチルオキソホルメート中の5g (23.8mmole)のH-ValOtBu x HCl懸濁液へ添加した。10分の後、この懸濁液は透明になった。30ml のトリメチルオキシホルメート中に溶解された13.5ml (0.24mmole)のアセトアルデヒドを、一滴ずつ無水条件下で添加した。この反応混合物を45分間、常温でアルゴン気流下で攪拌した。
【００３４】
低圧で1時間30分間蒸発させて、過剰なアセトアルデヒドを除去した。30.25g (0.112mmole)の固形のNaBH(OAc)3をアルゴン気流下でこの溶液へ添加した。15分後、この溶液を0℃に冷却し、500ml の2%HCl水溶液をゆっくりと添加した。
【００３５】
トリメチルオキソホルメートを減圧下で蒸発させて、残りの水溶液を300ml の水で希釈した。この溶液を100ml のジエチルエーテルで２回抽出した。有機相を0.1NのHCl水溶液で３回抽出した。水相を併せたものを0℃に冷却して、pHを、
(2N)NaOHで９に調整した。そうするとこの溶液は濁った。水性懸濁液を100mlのジエチルエーテルで４回抽出した。有機相を併せたものを、次にNa2SO4で乾燥させ、濾過し、そしてこの溶液を最終的に蒸発させた。
【００３６】
この工程に由来する4.2g の黄色油は、900gのシリカゲル(0.04-0.063mm)、及びヘキサン/酢酸エチル混合物（8：2）を使用してクロマトグラフィーで精製した。最後に、3.13g (65%)の純粋なH-EtLeu-OtBuが得られた。
【００３７】
表１の結果は、Quesniauxの記載した（Eur.J.Immunology 1987、17、1259-1365）競合的ＥＬＩＳＡ試験における、Cs誘導体のシクロフィリンに対する親和性を示している。この試験では、シクロフィリンとのインキュベーション中に、BSA(血清アルブミン)に結合したCsを、試験するCsに加えた。競合物が存在しない基準反応について50%の抑制を得るのに必要な濃度(IC50)を計算した。結果は誘導体のIC50とCsAのIC50との比率である結合指標BIにより表した。結合指標(BI)が1.0であることは、試験した化合物がCsAなみに結合することを示す。1.0未満の値は、誘導体がCsAよりも良好に結合することを示し、そして1.0より大きい値は、Cypに対しては、誘導体CsAよりもよく結合しないことを示す。
【００３８】
【表１】
0004350898.tif 000004
【００３９】
Csは、混合リンパ球反応(MLR)におけるその活性が5%を越える場合には、免疫抑制性であると見なされる。この反応(MLR)は、T.Meoにより、"Immunological Methods"、Lefkovits and B.Davis、Eds、Acadimie Prev.N.Y.pp:227-239(1979)において記載されている。
【００４０】
Balb/cマウス(メス、8乃至10週齢)に由来する脾臓細胞(0.5.106)を、CBAマウス(メス、8乃至10週齢)由来の処理済み脾臓細胞存在下で、5日間共培養した。これらの細胞は、マイトマイシンCで処理するか、又は2000radで照射した。非照射の同種脾臓細胞は、Balb/c細胞で増殖性応答を示したが、これはＤＮＡ内への標識済前駆物質の取り込みにより測定することができる。刺激細胞を照射する場合(又はマイトマイシンCで処理する場合)、Balb/c細胞はもはや増殖応答を示さないが、その抗原性は保持していた。MLR試験において計算されたIC50を、平行した実験でのCsAの対応するIC50と比較した。このようにしてIR指標が分かったが、これは誘導体についてのMLR試験でのIC50の、シクロスポリンAのIC50に対する比率である。
【００４１】
上述の結合指標(BI)のように、1.0のIR値は、CsAと同様の活性を意味する。同様に、より低い値は、より良好な活性を意味し、そして1.0より大きい値は、当該化合物の活性がCsAのものよりもさらに低いことを示す。
【００４２】
>20のIR値は、当該物質が免疫抑制性ではないことを示す。誘導体の免疫抑制値を表１に示す。
【００４３】
表２は、CEM-SS細胞株のHIV感染における保護割合を記載したものである。この細胞株の、Cs誘導体存在下での保護を、Csを存在させないで培養した株における感染のもの（基準対照）と比較した。2.10-6モル濃度の誘導体濃度である平均値が確立された。この抗-HIV活性は、米国ワシントンのNCI(国立癌研究所（National Cancer Institute）)で測定した。
【００４４】
【表２】
0004350898.tif 000005
【００４５】
化合物EtVal4-Csにおいて、（CsAよりも１０倍良好であることが知られる他の二つの基準と比較して）HIV感染に対する保護割合が良好であることは、４位におけるＮ-エチル置換の利点を示している。このことはそれぞれの物質のCyPに対する親和性を比較したときには更にしっくりとくるものである。CsAのものと同様のCyPへの親和性がEtVal4-Csにおいて得られたが、一方、誘導体MeVal4-Cs 及びMeIle4-Csでは、CyPに対するより高い親和性（それぞれBI=0.6、0.5）を示した。より大きい抗−HIV活性は、EtVal4-CsのCtPに対するより低い親和性に対応する。
【００４６】
【表３】
0004350898.tif 000006
0004350898.tif 000007
0004350898.tif 000008
【００４７】
【図面の簡単な説明】
【図１】  この図は、本発明の新規のシクロスポリンの全体構造を示す。
【図２】  この図は、４位をＮ-エチル化アミノ酸にしたときのスペクトルである。
【図３】  この図は、４位をＮ-エチル化アミノ酸にしたときのスペクトルである。
【図１】
0004350898.tif 000010
【図２】
0004350898.tif 000011
【図３】
0004350898.tif 000012