(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（１）で示される、
一般式（１）
【化１】
0004210744.tif 000006
（式中、Ｒ１はアルキレン基を、Ｒ２とＲ３はアルケニル基を、Ｒ４とＲ５はホスホコリン残基を、Ｒ６とＲ７は水素原子またはアルキル基をそれぞれ示す。）
で表されるスフィンゴ脂質誘導体。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、抗腫瘍剤、抗インフルエンザ剤等の医薬、保湿剤、育毛剤等の化粧品、農薬、工業薬品などの幅広い用途に応用可能な新規なスフィンゴ脂質誘導体に関する。
【０００２】
【従来の技術】
従来より、スフィンゴ脂質誘導体は、抗腫瘍剤、抗インフルエンザ剤等の医薬、保湿剤、育毛剤等の化粧品、農薬、工業薬品などに幅広く用いられている重要な化合物として知られている。
このようなスフィンゴ脂質誘導体の人工的合成法としては、セリンもしくはセリン誘導体を出発原料とするスフィンゴミエリンの合成法の開発が主として行われ、特に、スフィンゴミエリンの中間体であるガーナーアルデヒド、スフィンゴシン、セラミドなどの合成に関してはほぼ合成経路が確立されおり（非特許文献１）、また、Ｓｌｏｔｔｅらの報告論文（非特許文献２）には、スフィンゴミエリンの全合成法が報告されている。
【０００３】
しかしながら、スフィンゴ脂質関連化合物はその興味ある特性、物性が注目されているにも拘わらず、研究途中の段階にあり、未だ文献未載の化合物が多く存在し、たとえば同一分子内にセラミド誘導体を２分子有するスフィンゴ脂質誘導体は知られていなかった。
【０００４】
【非特許文献１】
Ｃｈｅｍ．Ｐｈｙｓ．Ｌｉｐｉｄｓ，１９９９，３頁
【非特許文献２】
Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９９１，１０７４６頁
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は医薬、化粧品等として有用な、同一分子内にセラミド誘導体を２分子有する新規なスフィンゴ脂質誘導体を提供することを目的とする。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、前記課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明によれば、下記一般式（１）で示される同一分子内にセラミド誘導体を２分子有する新規なスフィンゴ脂質誘導体が提供される。
一般式（１）
【化２】
0004210744.tif 000002
（式中、Ｒ１はアルキレン基を、Ｒ２とＲ３はアルケニル基を、Ｒ４とＲ５はホスホコリン残基を、Ｒ６とＲ７は水素原子またはアルキル基をそれぞれ示す。）
【０００７】
【発明の実施の形態】
本発明の目的生成物である新規なスフィンゴ脂質誘導体は、下記一般式（１）で表すことができる。
一般式（１）
【化３】
0004210744.tif 000003
（式中の各記号は前記と同じ。）
【０００８】
前記Ｒ１はアルキレン基を示す。アルキレン基としては、その主鎖を構成する炭素数が、１〜６０、好ましくは１〜２５のアルキレン基が挙げられる。このようなアルキレン基の具体例としては、後記するアルキル基から水素原子を１個除いたものが例示される。
また前記Ｒ２とＲ３はアルケニル基を示す。アルケニル基としては、その主鎖を構成する炭素数が、２〜５０、好ましくは２〜２５のアルケニル基が挙げられる。このようなアルケニル基の具体例としては、たとえば、ビニル、プロペニル、ブテニル、アクリル、メタクリル、オクチニル、ドデセニル、ウンデセニルなどが例示される。
また、前記Ｒ４とＲ５はホスホコリン残基を示す。
更に前記Ｒ６とＲ７は、水素原子またはアルキル基を示す。アルキル基としては、その主鎖を構成する炭素数が１〜６０、好ましくは１〜２５のものが挙げられる。このようなアルキル基としては、たとえば、メチル、エチル、n−プロピル、イソプロピル、n−ブチル、イソブチル、ｓeｃ−ブチル、t−ブチル、n−ペンチル、イソペンチル、2−メチルブチル、1−メチルブチル、n−へキシル、イソヘキシル、3−メチルペンチル、2−メチルペンチル、1−メチルペンチル、ヘプチル、オクチル、イソオクチル、2−エチルヘキシル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、テトラデシル、ヘキサデシル、オクタデシル、エイコシルなどが例示される。
【００２７】
本発明の一般式（１）で示されるスフィンゴ脂質誘導体は、たとえば、次のようにして合成することができる。
まず、表１に示されるように、前記非特許文献２に記載の方法に準じてセリンもしくはセリン誘導体を出発原料とし、中間体であるガーナ−アルデヒドまで合成する。つぎにこのガーナ−アルデヒドにＲ２もしくはＲ３をカップリングさせ、脱アセトナイド、脱Ｂｏｃを行い、スフィンゴシン誘導体に導く。引き続き、Ｒ４もしくはＲ５を１級水酸基と反応させた後、Ｒ６もしくはＲ７を２級水酸基と反応させ、化合物ＡおよびＢを合成する。ついで両者をＲ１とカップリング反応させることにより所望とするスフィンゴ脂質誘導体を得ることができる。また、後記表２に示すようにスフィンゴシン誘導体とＲ１を反応させた後、Ｒ４もしくはＲ５を１級水酸基と反応させ、引き続きＲ６もしくはＲ７を２級水酸基と反応させることにより所望のスフィンゴ脂質誘導体を得ることもできる。
【００２８】
【表１】
0004210744.tif 000004
【００２９】
本発明の一般式（１）で示されるスフィンゴ脂質誘導体は、同一分子内にセラミド誘導体を２分子有するので、セラミド１分子からなるスフィンゴ脂質誘導体は、細胞膜の外膜や内膜に集積するが、内膜と外膜の位置は異なる。同一分子内にセラミド誘導体を２分子有するスフィンゴ脂質誘導体は、細胞膜での集積時、外膜と内膜とを貫通した状態で存在すると考えられ、膜貫通型の界面活性としての性質を有することから、抗腫瘍剤、抗インフルエンザ剤等の医薬、保湿剤、育毛剤等の化粧品、農薬、工業薬品などに幅広く利用することができる。
【００３０】
【実施例】
以下、本発明につき実施例を挙げて説明するが、その要旨を越えない限り以下に限定されるものではない。
【００３１】
表２に示す合成スキームにしたがって、本発明のスフィンゴ脂質誘導体（化合物１２）を合成した。
【００３２】
［化合物１の合成］
化合物１は下記文献を参考に合成した。
Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ．，１９８８，３５４、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１９９９，２６８７、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，１９９８，１７９
【００３３】
［化合物２の合成］
窒素雰囲気下、１−ヘプチン（３．８７ｍＬ，２９．４ｍｍｏｌ）を脱水テトラヒドロフランに溶解し−４０度で攪拌した。この溶液に、ｎ−ブチルリチウムのヘキサン溶液（１ｇ／ｍＬ，１８．９ｍＬ）を滴下し、同温度で１５分間攪拌させた。この反応溶液に、化合物１（２．２５ｇ，９．８２ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液を滴下し、−２０度まで１時間かけてゆっくりと加温した。この溶液に塩化アンモニウム飽和水溶液を加えた後、酢酸エチルで３回抽出操作を行った。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。有機層を減圧留去して得られたシロップ状の粗生成物（３．２１５ｇ）を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（n-ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１）で精製し、化合物２（２．３ｇ,、７２．１％）を得た。
【００３４】
［化合物３の合成］
化合物２（1．5ｇ，４．６１ｍｍｏｌ）をメタノールに溶かし、p-トルエンスルホン酸１水和物（１０ｍｇ）を加えて窒素雰囲気下室温で攪拌した。２５時間後、p-トルエンスルホン酸１水和物（２０ｍｇ）を加えてさらに２４時間攪拌した。メタノールを減圧留去して得られた残渣に、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液と酢酸エチルを加えて分液した。水層をさらに酢酸エチルで２回抽出し、得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。有機層を減圧留去して得られたシロップ状の粗生成物（１．３０５ｇ）を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（n-ヘキサン：酢酸エチル＝３：１から１：１）で精製し、化合物３（１．２５ｇ，９４．９％）を得た。
【００３５】
［化合物４の合成］
窒素雰囲気下、脱アセタール体（７２６ｍｇ，２．５５ｍｍｏｌ）を脱水エチルエーテルに溶かし、−２０度で攪拌させた。この溶液に、Ｒｅｄ−Ａｌのトルエン溶液（濃度６５％，３．８２ｍＬ，１２．７ｍｍｏｌ）を脱水エチルエーテルで希釈した溶液を滴下し、−２０度から室温まで１時間かけてゆっくりと加温した。この反応溶液を、さらに室温で２４時間攪拌させたのち、メタノール、飽和のロッシェル塩水溶液（５０ｍＬ）を加え、酢酸エチルで３回抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した。有機層を減圧留去して得られた粗生成物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（n-ヘキサン：酢酸エチル＝２：１から１：２）で精製し、化合物５（４８８ｍｇ，６６．７％）を得た。
【００３６】
［化合物５の合成］
化合物４（４８５ｍｇ，１．６９ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸（１．０ｍＬ）に溶かし、氷冷下１５分間攪拌後、室温にて３０分攪拌した。さらに、トリフルオロ酢酸（０．５ｍＬ）を加え、室温にて１時間攪拌した。トリフルオロ酢酸を減圧留去させ、２Mの水酸化ナトリウム水溶液（５ｍＬ）を加えエチルエーテルで５回抽出した。得られた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、エチルエーテルを減圧留去して化合物５（３１０ｍｇ，９８％）を得た。
【００３７】
［化合物６の合成］
化合物５（１９ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の脱水テトラヒドロフラン溶液に、調製したヘキサデカン二酸スクシンイミドエステル（１５ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を加え、窒素雰囲気下室温で攪拌した。この溶液に脱水トリエチルアミン（０．０１４ｍＬ、０．１ｍｍｏｌ）を加え、窒素雰囲気下室温で２４時間攪拌した。その後、溶媒を減圧留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（n-ヘキサン：酢酸エチル：メタノール＝１０：１０：１）で精製し、化合物６（２３．１ｍｇ、７３．９％）を得た。
【００３８】
生成物は、１Ｈ−ＮＭＲスペクトルにより同定した。
【００３９】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＴＭＳ、ＣＤＣｌ３）：６．２８（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝７．７Ｈｚ）、５．７９（２Ｈ、ｄｔｄ、Ｊ＝１５．３、６．７、1．０Ｈｚ）、５．５３（２Ｈ、ｄｄｔ、Ｊ＝１５．３、６．４、１．０Ｈｚ）、４．３２（２Ｈ、ｂｒｓ）、３．９５（２Ｈ、ｂｒｄ、Ｊ＝１１．９Ｈｚ）、３．９１（２Ｈ、ｍ）、３．７１（２Ｈ、ｍ）、２．８５（４Ｈ、ｂｒｓ）、２．２３（４Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．４Ｈｚ）、２．０６（４Ｈ、ｄｔ、Ｊ＝７．５、６．７Ｈｚ）、１．６４（４Ｈ、ｔｔ、Ｊ＝７．４、７．４Ｈｚ）、１．３８（４Ｈ、ｔｔ、Ｊ＝７．４、７．４Ｈｚ）、１．２５−１．３０（１４Ｈ、ｍ）、０．８９（６Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ）。
【００４０】
［化合物７の合成］
化合物６（１０ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）の無水ピリジン溶液に、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（０．０３２ｍｇ、０．００２６ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間攪拌後、塩化ベンゾイル（０．００６ｍｌ、０．０５２ｍｍｏｌ）を加え、同温度で２０時間攪拌した。飽和塩化アンモニウム水溶液を加え激しく攪拌した後、クロロホルムで３回抽出した。得られた有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水した。有機層を減圧留去して得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（n-ヘキサン：酢酸エチル＝２：１からn-ヘキサン：酢酸エチル：メタノール＝６：６：１）で精製し、化合物７（７．３ｍｇ、５４．８％）を得た。
【００４１】
生成物は、１Ｈ−ＮＭＲスペクトルにより同定した。
【００４２】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＴＭＳ、ＣＤＣｌ３）：８．０２（４Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ）、７．５８（２Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、７．４５（４Ｈ、ｔ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）、５．９８（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝７．９ Ｈｚ）、５．７７（２Ｈ、ｄｔ、Ｊ＝１５．５、６．７Ｈｚ）、５．５３（２Ｈ、ｄｄｔ、Ｊ＝１５．５、６．７、１．０Ｈｚ）、４．５６（２Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１２．５、８．３ Ｈｚ）、４．４１（４Ｈ、ｍ）、４．２７（２Ｈ、ｂｒｓ）、２．８７（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝５．０Ｈｚ）、２．１９（４Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、２．０１（４Ｈ、ｍ）、１．５８（４Ｈ、ｍ）、１．３４（４Ｈ、ｍ）、１．３４−１．２０（２８Ｈ、ｍ）、０．８７（６Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ）。
【００４３】
［化合物８の合成］
氷冷下、化合物７（２０ｍｇ、０．０２４ｍｍｏｌ）の脱水ジクロロメタン溶液に２，６−ルチジン（０．０１１ｍｌ、０．０９６ｍｍｏｌ）を加え、同温度で１時間攪拌した。この溶液にｔ−ブチルジメチルシラントリフラート（０．０７２ｍｍｏｌ）をゆっくり滴下後、室温までゆっくり上昇させ、さらに室温で１時間攪拌した。飽和食塩水を加え攪拌し、ジクロロメタンで３回抽出を行った。得られた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧留去して化合物８を得た。
【００４４】
［化合物９の合成］
化合物８（２０ｍｇ、０．０２４ｍｍｏｌ）の脱水ジクロロメタン：脱水メタノール溶液（１：１）に炭酸カリウム（２０ｍｇ）を加え、冷蔵庫で３日間静置させ、化合物９を定量的に得た。
【００４５】
［化合物１０の合成］
５当量の２−ブロモエチルジクロロホスフェートの無水ジエチルエーテル溶液に、氷冷下、当量のトリエチルアミン、化合物９の無水ジエチルエーテル溶液を滴下した。同温にて３．５時間撹拌した後、０．５Ｎ塩化カリウム水溶液を加え、ジエチルエーテルで希釈し１時間撹拌した。ジエチルエーテルで抽出した後、水、飽和食塩水の順で洗浄した。分離した有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥、濾過した後、溶媒を減圧下にて留去し、化合物１０を得た。
【００４６】
[化合物１１の合成]
化合物１０をクロロホルム：イソプロピルアルコール：アセトニトリル（３：３：５）に溶解させ、３０％トリメチルアミン水溶液を加えて、５０℃にて４時間撹拌した。冷後、減圧下にて濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝１０：１）で精製し、化合物１１を７４％で得た。
【００４７】
[化合物１２の合成]
化合物１１の無水テトラヒドロフラン溶液に氷冷下、２当量のテトラn-ブチルアンモニウムフルオリド（１．０Ｍテトラヒドロフラン溶液）を加え、室温にて４時間撹拌した。反応溶液を減圧下にて濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝５：１）で精製し、化合物１２を収率８８％で得た。
【００４８】
生成物は１Ｈ−ＮＭＲスペクトルにより同定した。
【００４９】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３−ＣＤ３ＯＤ、ＴＭＳ）：７．１９（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ）、５．６４（２Ｈ、ｄｔｄ、Ｊ＝１５．３、６．７、1．０Ｈｚ）、５．４０（２Ｈ、ｄｄｔ、Ｊ＝１５．３、６．４、１．０Ｈｚ）、４．３２（２Ｈ、ｂｒｓ）、３．９２−３．８１（８Ｈ、ｍ）、３．７１（２Ｈ、ｍ）、３．４３（４Ｈ、ｍ）、３．２０（１８Ｈ、ｓ）、２．８５（２Ｈ、ｂｒｓ）、２．２３（４Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．４Ｈｚ）、２．０６（４Ｈ、ｄｔ、Ｊ＝７．５、６．７Ｈｚ）、１．６４（４Ｈ、ｔｔ、Ｊ＝７．４、７．４Ｈｚ）、１．３８（４Ｈ、ｔｔ、Ｊ＝７．４、７．４Ｈｚ）、１．２５−１．３０（２８Ｈ、ｍ）、０．８９（６Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ）。
【００５０】
【表２】
0004210744.tif 000005
【００５１】
【発明の効果】
本発明によれば、同一分子内にセラミド誘導体を２分子有する新規スフィンゴ脂質誘導体が提供される。
本発明方法で得られるスフィンゴ脂質誘導体は、抗腫瘍剤、抗インフルエンザ剤等の医薬、保湿剤、育毛剤等の化粧品、農薬、工業薬品などに幅広く用いられる。