(57)【要約】  ミロバラン、ウコンおよびボスウェリアセラータの抽出物または留分と、選択的に植物由来の抗炎症剤、薬学的または栄養補助食品的または食品的に許容される担体／賦形剤から選択される少なくとも１つの成分と、を含む、炎症またはその関連症状の予防または治療に有用な、新規な相乗的食品補助組成物を開示する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ミロバラン（Ｔｅｒｍｉｎａｌｉａ  ｃｈｅｂｕｌａ）、ウコン（Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ）抽出物、およびボスウェリアセラータ（Ｂｏｓｗｅｌｌｉａ  ｓｅｒｒａｔａ）非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）由来の抽出物または画分の治療上有効な組み合わせを含み、炎症、関節炎、関節痛、関節リウマチ、若年性関節リウマチ、乾癬性関節炎、変形性関節炎、難治慢性関節リウマチ、慢性非関節リウマチ、骨粗しょう症／骨吸収コラーゲン分解の治療に有用な、新規な相乗的組成物。
【請求項２】
前記組成物は、植物由来の抗炎症剤並びに薬学的、栄養補助食品的または食品的に許容される担体／賦形剤から選択される少なくとも１つの成分を選択的に含む、請求項１に記載の新規な相乗的組成物。
【請求項３】
前記ミロバラン抽出物は、乾燥したミロバランの果実から調製され、前記ウコン抽出物は、乾燥したウコンの根茎から調製され、前記ボスウェリアセラータ酸性および非酸性樹脂抽出物は、ボスウェリアセラータのゴム樹脂から調製される、請求項１に記載の新規な相乗的組成物。
【請求項４】
前記薬学的、栄養補助食品的または食品的に許容される担体／賦形剤は、界面活性剤、賦形剤、結合剤、希釈剤、崩壊剤、滑沢剤、防腐剤、安定化剤、緩衝剤、懸濁剤および薬物送達システムから選択される、請求項２に記載の新規な相乗的組成物。
【請求項５】
前記抽出物は、（ａ）ミロバラン抽出物２０〜７５％、（ｂ）ウコン抽出物１０〜４０％、および（ｃ）のボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物１０〜４０％の範囲の量で前記組成物中に存在する、請求項１に記載の新規な相乗的組成物。
【請求項６】
前記抽出物は、（ａ）ミロバラン抽出物２５〜６５％、（ｂ）ウコン抽出物１２〜３０％、および（ｃ）ボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物１２〜３０％の範囲の量で前記組成物に存在する、請求項６に記載の新規な相乗的組成物。
【請求項７】
前記組成物は、ミロバラン抽出物２５〜４５％、ウコン抽出物１５〜２５％、ボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）１５〜２５％、少なくとも５％の３−Ｏ−アセチル−１１−ケト−β−ボスウェリア酸（ＡＫＢＡ）を含む体積アッセイにより総酸の７５〜８５％に標準化されたボスウェリアセラータ抽出物１５〜２５％、および賦形剤５〜１５％を含む、請求項１に記載の新規な相乗的組成物。
【請求項８】
前記組成物は、ミロバラン抽出物３６％、ウコン抽出物１８％、ボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）１８％、少なくとも５％の３−Ｏ−アセチル−１１−ケト−β−ボスウェリア酸（ＡＫＢＡ）を含む体積アッセイにより総酸の７５〜８５％に標準化されたボスウェリアセラータ抽出物１８％、および賦形剤１０％を含む、請求項１に記載の新規相乗的組成物。
【請求項９】
ミロバラン、ウコンおよびボスウェリアセラータ抽出物は、水性、アルコール性またはヒドロアルコール性抽出物である、請求項１に記載の新規相乗的組成物。
【請求項１０】
前記組成物は、経口的、局所的、経皮的または非経口的に投与される製剤である、請求項１に記載の新規相乗的組成物。
【請求項１１】
ミロバラン抽出物、ウコン抽出物およびボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）の組み合わせを含み、選択的に植物由来抗炎症剤および薬学的、栄養補助食品的または食品的に許容される担体／賦形剤から選択される少なくとも１つの成分を選択的に含む新規な相乗的組成物の有効量を患者に投与することを含む、必要とする患者の炎症、関節炎および関節疾患を治療する方法。
【請求項１２】
前記疾患は、関節リウマチ、乾癬性関節炎、変形性関節炎、難治性関節リウマチ、慢性非リウマチ性関節炎、骨粗鬆症／骨吸収、コラーゲン分解、痛風性関節炎、狼瘡または若年性関節炎および関節痛である、請求項１２に記載の炎症、関節炎および関節疾患を治療する方法。
【請求項１３】
ミロバラン抽出物、ウコン抽出物およびボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）の組み合わせを含み、選択的に植物由来抗炎症剤および薬学的、栄養補助食品的または食品的に許容される担体／賦形剤から選択される少なくとも１つの成分を選択的に含む新規な相乗的組成物の、炎症、関節炎および関節疾患を治療するための使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、炎症及び関節炎の治療のための相乗的組成物に関する。該組成物は、ボスウェリアセラータ（Ｂｏｓｗｅｌｌｉａ  ｓｅｒｒａｔａ）由来のボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）と、ミロバラン及びウコン（Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ）等の医療用ハーブ由来の抽出物又は留分との治療上効果的な組み合わせを含む。前記相乗的組成物は、薬学的又は栄養補助食品的に許容される活性剤、賦形剤、担体又は希釈剤を更に含んでもよい。本発明は更に、関節炎、変形性関節炎及び関節痛を含む炎症に関連する疾患症状の治療のための組成物の使用方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ミロバラン（Ｔｅｒｍｉｎａｌｉａ  ｃｈｅｂｕｌａ）は、緩やかな下剤、収斂剤（未熟果実はより強い下剤であり、熟したものはより収斂的である）、健胃剤、抗胆汁症薬、潰瘍剤である。これは、鼓腸、便秘、下痢、赤痢、嚢胞、消化器疾患、嘔吐、肝腫大及び脾腫、咳及び気管支喘息を治療のための処方、並びに代謝の調和のための処方に使用されている。樹皮は利尿剤として使用される。インドのアーユルヴェーダ薬局方では、他の治療用途とともに、断続的な発熱、慢性発熱、貧血及び多尿における熟した果実の粉末の使用を示した。ミロバランの果実は、肝臓及び腎臓機能障害の治療においてマラッカノキ（Ｅｍｂｌｉｃａ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）及びＴ．ベリリカ（Ｔ．ｂｅｌｌｅｒｉｃａ）（トリファラの名前の下）と組み合わせて用いられる。トリファラの主な下剤成分は、ミロバランである。ミロバランの果実から、シキミ酸、没食子酸、トリアコンタン酸及びパルミチン酸、β−シトステロール、ダウコステロール、チェブリック酸（ｃｈｅｂｕｌｉｃ  ａｃｉｄ）のトリエチルエステル、並びに没食子酸のエチルエステル；プニカラギン及びテアフラビンＡと一緒の新規エラジタンニン、ｔｅｒｃｈｅｂｕｌｉｎが単離されている。新規トリテルペン、チェブペントール（ｃｈｅｂｕｐｅｎｔｏｌ）、並びにアルジュンゲニン（Ａｒｊｕｎｇｅｎｉｎ）、テルミン酸（ｔｅｒｍｉｎｏｉｃ  ａｃｉｄ）及びアルジュノール酸もまた、該果実から単離された。
【０００３】
国際公開ＷＯ２０１０１１９２９４号公報では、アンドログラフィスパニクラータ（Ａｎｄｒｏｇｒａｐｈｉｓ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ）、ティノスポラコルディフォリア（Ｔｉｎｏｓｐｏｒａ  ｃｏｒｄｉｆｏｌｉａ）、アメリカタカサブロウ（Ｅｃｌｉｐｔａ  ａｌｂａ）、ナンバンクサフジ（Ｔｅｐｈｒｏｓｉａ  ｐｕｒｐｕｒｅａ）、ニンジンボク（Ｖｉｔｅｘ  ｎｅｇｕｎｄｏ）、ショウガ（Ｚｉｎｚｉｂｅｒ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ）、ミロバラン及びアシュワガンダ（Ｗｉｔｈａｎｉａ  ｓｏｍｎｉｆｅｒａ）由来の物質の組み合わせを有効成分として含む、経口投与のための組成物を提供されている。そのような組成物の調製方法及び動物の治療におけるそのような組成物の使用もまた提供される。組成物は、動物において例えば関節炎、呼吸器感染症の治療のために使用される。
【０００４】
米国特許第７，６５８，９５７号公報及び第７，３３８，６７４号公報、並びに国際公開ＷＯ０６／０６１６７５号公報は、関節炎及び炎症の治療のための新規ハーブ組成物を提供する。該ハーブ組成物は、必要に応じて薬学的に許容される添加物と共に、植物ミロバラン、ラスナ（Ｐｌｕｃｈｅａ  ｌａｎｃｅｏｌａｔａ）、タマツナギ（Ｄｅｓｍｏｄｉｕｍ  ｇａｎｇｅｔｉｃｕｍ）、ニンジンボク（Ｖｉｔｅｘ  ｎｅｇｕｎｔｏ）、及びショウガ（Ｚｉｎｇｉｖｅｒ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ）から得られた抽出物の治療的に有効な組み合わせを含む。この発明は、該ハーブ組成物の製造方法並びに関節炎及び炎症の治療のための使用方法を更に含む。
【０００５】
米国特許公開２００８／０１６６４３２号公報は、抽出物の抗酸化作用による、循環器疾患、糖尿病、神経変性疾患、癌、アミロイドーシスのような加齢関連疾患、急性膵炎、関節炎、アテローム性動脈硬化症、癌、心疾患、炎症性腸疾患、心筋梗塞、老人性認知症、網膜変性及び老人性白内障のような加齢に関連疾患を管理するための方法において用いられ得るモモタマナ（Ｔｅｒｍｉｎａｌｉａ）属からの抽出物に関する。該’４３２号公報はまた、様々な感染症を管理するための方法において使用され得るモモタマナ属からの抽出物に関する。
【０００６】
ウコン、即ち、クルクマ  ロンガＬ（ショウガ科）の粉末根茎は、インド料理、アジア料理で広く使用され、それはまた着色料及び香味料として使用される。粉末ウコン又はその抽出物は、多数の市販の植物サプリメントに見受けられる。アーユルヴェーダ医学において、ウコンは、伝統的に炎症、皮膚創傷及び腫瘍を治療するために使用されている（Ａｍｍｏｎ  ａｎｄ  Ｗａｈｌ，１９９１，Ｐｌａｎｔａ  Ｍｅｄ．，５７：１−７）。ウコン抽出物は、抗菌、抗炎症、抗酸化及び抗癌作用を有することが報告されている。前臨床動物試験においてウコンは、抗炎症、癌化学予防及び抗悪性腫瘍特性を示す（Ｋｅｌｌｏｆｆ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９６，  Ｊ．  Ｃｅｌｌ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ  ２６：５４−７１）。ウコンにおいて見出された化合物の最も良い特性は、炎症を低減することが示されているクルクミノイドである。
【０００７】
米国特許公開２００４／００８６５８１号公報は、関節及び関節の疼痛に関し、より具体的には関節炎の症状を治癒することを促進する及び緩和する組成物に関する。組成物は、ＣＭＯ−セチルミリストレインの治療上有効な組み合わせを含む；ＭＳＭ−有機硫黄；コラーゲン；グルコサミン；ＯＰＣプロアントシアニジン；ブロメラインボスウェリア；ウコン；ナツシロギク；ショウガ；白ヤナギ抽出物；マンガン錯体；甘味料；マルトデキストリン；緩衝化ビタミンＣ。
【０００８】
国際公開ＷＯ２０１１／１２５０７０号公報は、予防、治療、維持療法のためのクルクミンのバイオアベイラビリティを増大するために、及び癌、心疾患、糖尿病、関節リウマチ、変形性関節症、アルツハイマー病、炎症性腸疾患等の疾患症状の追加治療としてのウコンの精油を含むクルクミノイドの経口補給に関する。
【０００９】
植物ボスウェリアセラータ（Ｂｏｓｗｅｌｌｉａ  ｓｅｒｒａｔａ）（カンラン科）のゴム樹脂は、インドの医療システムにおけるアーユルヴェーダ医学の開業医により関節リウマチ及び痛風の治療に長く使用されている。ゴム樹脂の様々な抽出物は、動物実験において強力な抗炎症及び抗動脈硬化作用を示した（Ｃｕａｚ−Ｐｅｒｏｌｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ  Ｔｈｒｏｍｂ  Ｖａｓｃ  Ｂｉｏｌ  Ｆｅｂｒｕａｒｙ  ２００８）。インセンソールアセテート、単離されたボスウェリア化合物は、ＮＦ−ｋａｐｐａ  Ｂ阻害剤及び抗炎症性化合物として有用であることが証明された（Ｍｏｕｓｓａｉｅｆｆ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｍｏｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  ７２，１６５７−１６６４，２００７）。Ｂ．セラータのゴム樹脂のエタノール抽出物は、ウサギ腹膜好中球におけるロイコトリエンＢ４の形成を阻害する。ロイコトリエンＢ４は、炎症反応の重要なメディエーターの１つである（Ａｍｍｏｎ，Ｈ．Ｐ．Ｔ．ｅｔ  ａｌ．；Ｐｌａｎｔａ  Ｍｅｄｉｃａ，  ５７，  ２０３  （１９９１））。ボスウェリア抽出物は、強力な抗関節炎剤（Ｋｉｍｍａｔｋａｒ  ｅｔ  ａｌ；Ｐｈｙｔｏｍｅｄｉｃｉｎｅ．２００３  Ｊａｎｕａｒｙ；１０（１）：３−７）及び免疫調節剤（Ｐｕｎｇｌｅ  ｅｔ  ａｌ；Ｉｎｄｉａｎ  Ｊ  Ｅｘｐ  Ｂｉｏｌ．２００３  Ｄｅｃｅｍｂｅｒ；４１（１２）：１４６０−１４６２）であることが見出された。ボスウェリアセラータのコレステロール低下作用も証明された（Ｚｕｔｓｈｉ  Ｕ  ｅｔ  ａｌ，Ｉｎｄｉａｎ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃ．  １８，１８２−１８３，１９８６）。実際、膝の変形性関節症を有する患者のグループにおけるボスウェリア抽出物での無作為化二重盲検プラセボ対照クロスオーバー臨床試験は、疼痛の低減に関して統計的に有意な平均改善を示し、腫れを低減し膝の屈曲を増大した（Ｋｉｍｍａｔｋａｒ  Ｎ，ｅｔ．ａｌ．，Ｐｈｙｔｏｍｅｄｉｃｉｎｅ  ２００３；  １０：３−７）。慢性大腸炎（Ｇｕｐｔａ  Ｉ，ｅｔ．ａｌ．，Ｐｌａｎｔａ  Ｍｅｄ．  ２００１；６７：３９１−３９５）、クローン病（Ｇｅｒｈａｒｄｔ  Ｈ，ｅｔ．ａｌ．，  Ｚ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ  ２００１；３９：１１−１７）及び気管支喘息（Ｇｕｐｔａ  Ｉ，ｅｔ．ａｌ．，Ｅｕｒ  Ｊ  Ｍｅｄ  Ｒｅｓ  １９９８；３：５１１−５１）に対するボスウェリア抽出物の効果も報告された。
【００１０】
多くの異なるボスウェリアゴム樹脂の抽出物が調製され、それらの中で最も主要なものは、ボスウェリアセラータ酸性抽出物、ボスウェリアセラータ非酸性抽出物及び多糖類を含む水溶性抽出物である。
【００１１】
米国特許第５，６２９，３５１号公報は、抗炎症及び抗潰瘍活性を示す、ボスウェリア酸の混合物を含む新規留分、並びにボスウェリア酸留分及びそこから個々のボスウェリア酸を単離するための方法に関する。
【００１２】
国際公開ＷＯ０８／０３６９３２号公報は、特異的に増加した揮発油、ボスウェル酸、及び多糖類化合物、特にヒト経口送達製剤を有するボスウェリア種（乳香（ｆｒａｎｋｉｎｃｅｎｓｅ又はｏｌｉｂａｎｕｍ））から誘導された組成物を作る方法、並びに、例えば、関節炎、炎症性疾患、変形性関節症、リウマチ性疾患、及び腰痛を治療／予防するためにそのような組成物の使用方法を提供する。
【００１３】
米国特許第５，８８８，５１４号公報は、骨又は関節炎により特徴づけられた症状を有する哺乳動物の治療のための組成物に関し、ボスウェリアセラータの抽出物が材料の１つとして使用されている。
【００１４】
米国特許公開２０１２／３０１４３２号公報は、糖尿病、肥満、メタボリック症候群、過剰な体重、炎症、喘息、アルツハイマー病、認知障害、神経疾患、軟骨破壊、老化、皮膚障害、高トリグリセリド血症、高脂血症、高コレステロール血症、コレステロール障害、高血圧、高血圧、免疫障害、癌、冠状動脈性心臓病、感染症、骨粗鬆症、変形性関節症、関節リウマチ、関節痛、関節の不快感及びいくつかそれらに関連する他の症状のような疾患の予防、制御及び治療のための新規植物化学組成物を単独で有する及びその組成物（複数）を有するボスウェリア低極性ゴム樹脂抽出物（ＢＬＰＲＥ）を提供する。
【００１５】
国際公開ＷＯ２０１０／２９５７８号公報は、ボスウェリアセラータ及びボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）由来の３?Ｏ?アセチル?１１?ケト?β−ボスウェル酸（ＡＫＢＡ）において選択的に濃縮した抽出物の治療上有効な組み合わせを含む相乗的な栄養補助食品抗炎症組成物を開示する。組成物は、炎症及び喘息、変形性関節症、関節リウマチ、内皮機能不全等を含むいくつかの炎症関連疾患を予防、制御及び治療するために用いられ得る。この発明は更に、炎症誘発バイオマーカータンパク質又は分子の改善を開示し、その発現／産生は炎症性疾患の間に変更される。
【００１６】
炎症は、体液及びタンパク質の血管外漏出並びに炎症部位における白血球の蓄積の結果として、浮腫形成をもたらす補体因子の活性によるものと同様に、白血球、マクロファージ及び肥満細胞によって産生される様々なシグナリング分子によって媒介された複雑な病態生理学的プロセスである。関節炎は、筋骨格系、特に関節を冒す疾患である。炎症は一般的な臨床症状であり、慢性関節リウマチ（ＲＡ）は、約３００万のインド人及び５０００万のアメリカ人等を冒す慢性的衰弱自己免疫疾患（ｃｈｒｏｎｉｃ  ｄｅｂｉｌｉｔａｔｉｎｇ  ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  ｄｉｓｏｒｄｅｒ）である。変形性関節症は、最も一般的な関節変成疾患であり、結果として老化、関節の摩耗及び裂けが広まる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１７】
【特許文献１】国際公開ＷＯ２０１０／１１９２９４号公報
【特許文献２】米国特許第７，６５８，９５７号公報
【特許文献３】米国特許第７，３３８，６７４号公報
【特許文献４】国際公開ＷＯ０６／０６１６７５号公報
【特許文献５】米国特許公開２００８／０１６６４３２号公報
【特許文献６】米国特許公開２００４／００８６５８１号公報
【特許文献７】国際公開ＷＯ２０１１／１２５０７０号公報
【特許文献８】米国特許第５，６２９，３５１号公報
【特許文献９】国際公開ＷＯ０８／０３６９３２号公報
【特許文献１０】米国特許第５，８８８，５１４号公報
【特許文献１１】米国特許公開２０１２／３０１４３２号公報
【特許文献１２】国際公開ＷＯ２０１０／２９５７８号公報
【非特許文献】
【００１８】
【非特許文献１】Ｐｌａｎｔａ  Ｍｅｄ．，５７：１−７（１９９１）
【非特許文献２】Ｊ．  Ｃｅｌｌ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ  ２６：５４−７１（１９９６）
【非特許文献３】Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ  Ｔｈｒｏｍｂ  Ｖａｓｃ  Ｂｉｏｌ  Ｆｅｂｒｕａｒｙ  ２００８
【非特許文献４】Ｍｏｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  ７２，１６５７−１６６４，２００７
【非特許文献５】Ｐｌａｎｔａ  Ｍｅｄｉｃａ，５７，２０３（１９９１）
【非特許文献６】Ｐｈｙｔｏｍｅｄｉｃｉｎｅ．２００３  Ｊａｎｕａｒｙ；１０（１）：３−７
【非特許文献７】Ｉｎｄｉａｎ  Ｊ  Ｅｘｐ  Ｂｉｏｌ．２００３  Ｄｅｃｅｍｂｅｒ；４１（１２）：１４６０−１４６２
【非特許文献８】Ｉｎｄｉａｎ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃ．１８，１８２−１８３，１９８６
【非特許文献９】Ｐｈｙｔｏｍｅｄｉｃｉｎｅ  ２００３；１０：３−７
【非特許文献１０】Ｐｌａｎｔａ  Ｍｅｄ．２００１；６７：３９１−３９５
【非特許文献１１】Ｚ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ  ２００１；３９：１１−１７
【非特許文献１２】Ｅｕｒ  Ｊ  Ｍｅｄ  Ｒｅｓ  １９９８；３：５１１−５１
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１９】
従って、炎症及び関節炎を治療するための安全且つコスト効果の高い薬に対する必要性が本分野において事実継続してある。よって、本発明の目的は、相乗的組成物、特に望ましくない副作用がない炎症及び関節炎を治療するためのハーブ抽出物及び／又は生物活性留分を含む相乗的組成物を開発することである。特に、本発明は、ミロバラン、ウコン及びボスウェリアセラータ由来の抽出物又は留分を含む組成物を提供することである。
【００２０】
しかしながら、発明者らの知る限り、炎症症状及び関節疾患の予防、制御及び治療のためのボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）と組み合わせたミロバラン及びウコン由来の抽出物を含む組成物に関する先行技術はない。
【００２１】
従って、本発明の主な目的は、ミロバラン、ウコン及びボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）由来の抽出物又は留分と、選択的に他の天然材料と、を含む治療上有効な組み合わせを含む相乗的補助食品又は栄養補助食品を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００２２】
上記目的により、本発明は、喘息、アテローム性動脈硬化症、内皮機能障害、変形性関節症、関節リウマチ等を含む炎症をに関連する若しくは関する炎症及び／又は疾患症状の予防、制御及び治療のための相乗的組成物を開示する。
【００２３】
他の態様において、本発明は、関節炎又は関節性リウマチを含む他の炎症性疾患の１以上の要素を予防、制御及び治療するためのミロバラン、ウコン及びボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）からの抽出物又は留分の治療上有効な組み合わせを含む相乗的組成物を提供する。関節炎の非限定的な例は、リウマチ（例えば、軟部組織リウマチ及び非関節リウマチ、線維筋痛症、結合組織炎、筋肉リウマチ、筋筋膜痛、上腕骨上顆炎、五十肩、ティーツェ症候群、筋膜炎、腱炎、腱鞘炎、滑液包炎）、若年性慢性関節障害、脊椎関節症（強直性脊椎炎）、変形性関節症並びに急性痛風に関連した高尿酸血症及び関節炎、慢性痛風及び全身性エリテマトーデス並びに変形性関節症を含む。
【００２４】
更なる態様において、本発明は、限定されないが、哺乳動物中の５?リポキシゲナーゼ（５−ＬＯＸ）、５−リポキシゲナーゼ活性化タンパク質（ＦＬＡＰ）、マクロファージ／脂肪細胞脂肪酸結合タンパク質−２（ａＰ２／ＦＡＢＰ）、インターフェロン−ガンマ（ＩＦＮ−γ）、インターロイキン−４（ＩＬ−４）、細胞間接着分子（ＩＣＡＭ）−１、血管細胞接着分子（ＶＣＡＭ）−１、マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）−３、ＴＮＦ−α及びＩＬ−１βを含む、炎症、変形性関節症、関節リウマチ、軟骨破壊に関連する炎症及び／又は疾患症状に関連する生体分子又はバイオマーカーの発現及び／又は産生の改善のための相乗的組成物を提供する。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
本発明は、特定の好ましい及び選択的な実施形態と関連して詳細に説明され、その様々な態様がより完全に理解され及び認識されよう。
【００２６】
植物材料のソース：
本発明で使用されるミロバラン、ウコン及びボスウェリアセラータハーブは、東インド、アンドラ・プラデシュ及びマディヤ・プラデシュからそれぞれ収集される。
【００２７】
炎症は、体内に入る病原体、損傷した細胞又はアレルギー剤のような刺激に対する血管組織の反応である。有害な病原体又は薬剤を除去及び組織を保護することは、生物による保護機構である。ＴＮＦα、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＧＭ−ＣＳＦ及びＣＤ４＋のような炎症性サイトカイン、ＩＬ−４、ＩＬ−５及びＩＬ−１３リンホカイン由来のＴｈ２サブセットは、炎症性疾患の免疫病因の重要な要因として考えられている（Ｋｎｉｇｈｔ  Ｄ  Ａ，ｅｔ．ａｌ．，Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００１；１０８：７９７−８０３）。５?リポキシゲナーゼは、アラキドン酸からのロイコトリエン合成のための重要な酵素であり、炎症過程における重要ステップである。ロイコトリエンは、炎症性疾患の重要なメディエーターである。
【００２８】
本発明者らは、活性酸素種（ＲＯＳ）補足アッセイを用いて抗酸化活性のためのいくつかの植物抽出物を調製し及びそれらを試験し、活性抽出物同定のために抗炎症活性（５−リポキシゲナーゼ阻害及び細胞モデルにおけるサイトカインの阻害）を試験した。ミロバラン果実抽出物、ウコン根抽出物、ボスウェリアセラータ非酸性ゴム樹脂抽出物及びボスウェリアセラータ酸性ゴム樹脂抽出物を含むいくつかの植物抽出物は、スクリーニング中に有望な活性を示した。本発明者らは、炎症プロセスの改善及び炎症性疾患に関連する重要バイオマーカー分子の発現又は産生において、より良い効果を示し得る組成物を見出し、並びに炎症性疾患症状を制御、治療及び予防するためのより良い薬剤を識別するために努力して、いくつかの抽出物と組み合わせたミロバラン果実の抽出物をランダムに調整し試験した。いくつかの酵素系及び細胞を用いたインビトロ抗炎症研究は、いくつかの植物抽出物と組み合わせたミロバランを含む広範な組成物で行われた。ウコン及びボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）由来の抽出物又は濃縮留分と組み合わせたミロバラン由来の抽出物又は留分又は濃縮留分又は化合物を含む組成物が強力に５−リポキシゲナーゼ酵素（５−ＬＯＸ）活性を阻害することは、驚くべき発見であった。メチルイソブチルケトンのようなボスウェリアセラータゴム樹脂の水不溶性有機溶媒抽出物からの酸性化合物及び揮発性化合物を除去／分離した後に得られたミロバラン果実の水抽出物、ウコン根及びボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）のメタノール抽出物を、本発明を実証するために用いた。しかしながら、ジクロロメタン、ジクロロエタン、エタノール、メタノール、水及びその混合物、エチルアセテート、Ｃ１からＣ７の炭化水素、ヒドロアルコール及び混合物のような他の溶媒を用いて得られた抽出物もまた５?リポキシゲナーゼ酵素（５−ＬＯＸ）活性を阻害するために用いられ得る。
【００２９】
個々の抽出物及び組成物について、酵素系アッセイにおける５?リポキシゲナーゼ酵素（５−ＬＯＸ）活性を阻害するそれらの有効性を試験した。個々の抽出物及び組成物についても、インビトロ細胞モデルにおけるＩＬ?β、ＴＮＦ−α及びＭＭＰ−３のような数個の重要な炎症誘発サイトカイン／ケモカインの産生を阻害するそれらの効果を試験した。ミロバラン及びウコンからの抽出物又は留分及びボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）の治療上有効な組み合わせを含む組成物が５−ＬＯＸ活性の相乗的阻害を示すことは非常に驚くべき発見である。
【００３０】
ミロバラン及びウコンからの抽出物又は留分、ボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）及び少なくとも５％の３−Ｏ−アセチル−１１−ケト−β−ボスウェル酸（ＡＫＢＡ）を含む体積アッセイにより総酸の７５％−８５％に標準化されたボスウェリアセラータ抽出物の治療上有効な組み合わせを含む個々の抽出物及び組成物について、５−リポキシゲナーゼ酵素（５−ＬＯＸ）活性を阻害するためのそれらの有効性並びにＩＬ−１β、ＴＮＦ−α及びＭＭＰ−３のような重要な炎症性サイトカイン／ケモカインの産生を試験した。ミロバラン及びウコンからの抽出物又は留分、ボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）及び少なくとも５％の３−Ｏ−アセチル−１１−ケト−β−ボスウェル酸（ＡＫＢＡ）を含む体積アッセイにより総酸の７５％−８５％に標準化されたボスウェリアセラータ抽出物の治療上有効な組み合わせを含む組成物が５−ＬＯＸ活性及びサイトカイン／ケモカイン産生の相乗的阻害を示したことは、非常に驚くべき発見であった。
【００３１】
好ましい実施形態において、本発明は、ミロバラン及びウコン由来の抽出物又は留分、並びにボスウェリアセラータ由来の非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）の治療上有効な組み合わせを含む相乗的抗炎症性組成物を提供する。
【００３２】
他の重要な実施形態において、ミロバラン及びウコン由来の抽出物又は留分、並びにボスウェリアセラータ由来の非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）の治療上有効な組み合わせを含む組成物は、炎症に関する若しくは関連する炎症及び／又は炎症に関する１以上の疾患症状を予防、治癒又は治療するために用いることができる。
【００３３】
他の態様において、本発明は、個々の抽出物又は留分が与えられた場合に得られる効果よりもよりよい効果、即ち、炎症性プロセスの相乗的改善及び／又は炎症誘発生物分子／タンパク質マーカーの発現又は産生を得るために、特定の割合でミロバラン及びウコン由来の抽出物又は留分、並びにボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）を組み合わせることにより得られる相乗的非炎症性組成物を提供する。
【００３４】
別の好ましい実施形態において、ミロバラン及びウコン由来の抽出物又は留分、並びにボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）の治療上有効な組み合わせを含む相乗的抗炎症性組成物は、１以上のボスウェリン酸化合物に標準化されたボスウェリアセラータ酸性抽出物を選択的に含む。
【００３５】
更に別の好ましい実施形態において、本発明は、２０質量％〜７５質量％の範囲のミロバラン抽出物又は留分、１０質量％〜４０質量％の範囲のウコン抽出物又は留分及び１０質量％〜４０質量％の範囲のボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）からなる相乗的組成物を提供する。
【００３６】
更なる態様において、本発明は、必要とする哺乳動物における、これらに限定されないが、５−リポキシゲナーゼ（５−ＬＯＸ）、５−リポキシゲナーゼ活性化タンパク質（ＦＬＡＰ）、マクロファージ／脂肪細胞脂肪酸結合タンパク質（ａＰ２／ＦＡＢＰ）、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−４、ＩＣＡＭ−１、ＶＣＡＭ−１、ＭＭＰ−１３、ＭＭＰ−３及びＭＭＰ−１等のマトリックスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）、ＮＦκＢ、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１β、ＩＬ−１３、ＩＬ−６、並びにＩＬ−２を含む炎症に関する又は関連する生物分子／バイオマーカー／特定の酸化還元感受性炎症誘発遺伝子の発現又は産生の改善のための、ミロバラン及びウコン由来の抽出物又は留分、並びにボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）を含む相乗的組成物を提供する。
【００３７】
更に別の態様において、本発明は、これらに限定されないが、喘息、関節炎、変形性関節炎、関節リウマチ、アテローム性動脈硬化症、内皮機能障害、アレルギー性鼻炎、皮膚炎、乾癬、嚢胞性線維症、炎症性腸疾患、間質性膀胱炎、偏頭痛、狭心症、慢性前立腺炎、日焼け、歯周疾患、多発性硬化症、ブドウ膜炎、血管形成術後の再狭窄、糸球体腎炎、消化管アレルギー、腎炎、結膜炎、慢性閉塞性肺疾患、職業性喘息、湿疹、気管支炎、花粉症、蕁麻疹、アレルギー性疾患及び喘鳴等の症状、呼吸困難、乾性咳嗽、胸の圧迫感、首の筋肉の緊張、急速な心拍、胸痛、関節痛、関節障害、ＵＶ照射によるコラーゲン分解、皮膚しわ及び皮膚老化、並びに哺乳動物のそれらに関連したいくつかの他の症状を含む炎症に関する又は関連する１以上の疾患症状を予防、制御及び治療するための、ミロバラン及びウコン由来の抽出物又は留分、並びにボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）を含む相乗的組成物を提供する。
【００３８】
関節炎の非限定的な例は、リウマチ（例えば、軟部組織リウマチ及び非関節リウマチ、線維筋痛症、結合組織炎、筋肉リウマチ、筋膜痛、上腕骨上顆炎、五十肩、ティーツェ症候群、筋膜炎、腱炎、腱鞘炎、滑液包炎）、若年性慢性関節障害、脊椎関節症（強直性脊椎炎）、変形性関節症、急性痛風、慢性痛風及び全身性エリテマトーデスに関連する高尿酸血症及び関節炎並びに変形性関節症を含む。
【００３９】
更なる実施形態において、本発明は、これらに限定されないが、樹皮、根、茎、葉、果実、ゴム樹脂及び根茎、並びにそれらの混合物を含むミロバラン、ウコン及びボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）からの抽出物又は留分、並びにそれらの組成物を製造するためのプロセスを提供する。
【００４０】
別の実施形態において、ハーブの抽出物又は留分を調製するために用いることができる溶媒は、ジクロロメタン及びジクロロエタン等の塩素系溶媒、エタノール及びメタノール等のＣ１−Ｃ５アルコール；水及びそれらとの混合物；酢酸エチル等のエステル；Ｃ１〜Ｃ７炭化水素；ヒドロアルコール及びそれらとの混合物からなる群から選択することができる。
【００４１】
更に本発明の別の実施形態において、相乗的組成物は、ミロバラン及びウコン由来の抽出物又は留分並びにボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）と、選択的に１以上の薬学的、機能性食品的又は食品的に許容される賦形剤、希釈剤、塩又は添加物と、を含む。
【００４２】
本発明の更に別の実施形態において、相乗的組成物は、水性、アルコール性又はヒドロアルコール性抽出物から製造されるミロバラン、ウコン及びボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）に由来する。
【００４３】
本発明の更に別の実施形態において、相乗的組成物は、ミロバラン、ウコン、ボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）及び少なくとも５％の３−Ｏ−アセチル−１１−ケト−β−ボスウェル酸（ＡＫＢＡ）を含む体積アッセイにより総酸の７５％〜８５％に標準化されるボスウェリアセラータ抽出物に由来する。
【００４４】
本発明の更に別の実施形態において、相乗的組成物は、ミロバラン２５〜４５％、ウコン１５〜２５％、ボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）１５〜２５％、少なくとも５％の３−Ｏ−アセチル−１１−ケト−β−ボスウェル酸（ＡＫＢＡ）を含む体積アッセイにより総酸の７５％〜８５％に標準化されたボスウェリアセラータ抽出物１５〜２５％、及び賦形剤５〜１５％を含む。
【００４５】
本発明の更に別の実施形態において、相乗的組成物は、ミロバラン抽出物３６％、ウコン抽出物１８％、ボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）１８％、少なくとも５％の３−Ｏ−アセチル−１１−ケト−β−ボスウェル酸（ＡＫＢＡ）を含む体積アッセイにより総酸の７５％〜８５％に標準化されたボスウェリアセラータ抽出物１８％、及び賦形剤１０％を含む。
【００４６】
本発明の他の実施形態は、そのまま、又は細かく砕いた形態及び／若しくは顆粒、粉末、ペースト、通常の生物的若しくは薬学的に許容される塩、添加物又は賦形剤を加えることにより固体、半固体又は液体剤形に製剤化された有効成分としての未改変形態での前記相乗的組成物の利用を更に提供する。
【００４７】
更なる実施形態において、本発明は、経口、局所、経皮、非経口的糖の特定の剤形又はキットの形態でそれを必要とする対象又は患者に投与することができる本発明の治療的有効量の新規組成物を提供する。本発明の組成物の製剤のための特定剤形は、限定されないが、錠剤、軟カプセル剤、硬カプセル剤、丸剤、顆粒剤、散剤、輸液、注射溶液、クリーム、ゲル、エマルジョン、軟膏、浣腸、薬用パック、食品サプリメント、乳剤、懸濁剤、シロップ剤、ペレット、吸入薬及び口内スプレー等の経口剤、並びに注射剤、点滴剤及び坐剤等の非経口剤を含む。
【００４８】
他の好ましい実施形態において、本発明は、これらに限定されないが、喘息、関節炎、炎症性腸疾患、関節リウマチ、若年性関節リウマチ、乾癬性関節炎、変形性関節炎、難治性関節リウマチ、慢性非リウマチ性関節炎、アテローム性動脈硬化症、内皮機能不全、アレルギー性鼻炎、皮膚炎、乾癬、嚢胞性線維症、炎症性腸疾患、間質性膀胱炎、偏頭痛、狭心症、慢性前立腺炎、日焼け、歯周病、多発性硬化症、ブドウ膜炎、血管形成後の再狭窄、糸球体腎炎、消化管アレルギー、腎炎、結膜炎、慢性閉塞性肺疾患、職業性喘息、アトピー性皮膚炎、気管支炎、花粉症、蕁麻疹、アレルギー性疾患及び喘鳴、呼吸困難、非生産的な咳、胸の圧迫感、首の筋肉の緊張、急速な心拍数、胸の疼痛、関節痛、ＵＶ照射によるコラーゲン分解、皮膚しわ及び皮膚老化、並びに哺乳動物におけるそれに関連する他のいくつかの症状を含む、炎症に関する又は関連する１以上の疾患症状を予防、管理及び治療する方法を提供し、該方法は、ミロバラン果実及びウコン根由来の抽出物又は留分並びにボスウェリアセラータ由来の非酸性抽出物を含む相乗的組成物の有効量を前記哺乳動物に補充することを含む。
【００４９】
本発明の更なる実施形態において、組成物は、上記記載の方法のいずれかを利用して投与することができる製剤を形成するために、これらに限定されないが、酸化防止剤、アダプトゲン、抗炎症薬剤、抗糖尿病剤、抗肥満剤、抗アテローム性動脈硬化剤、生物保護剤及び／若しくはバイオアベイラビリティ増強剤、微量金属、賦形剤、薬学的に許容される塩、及び添加剤、並びにこれらの混合物を包含する、１以上の薬学的、栄養補助食品的又は食品的に許容される薬剤の有効量を更に含んでもよい。
【００５０】
本発明において採用される薬学的に許容される抗炎症剤の例は、限定されないが、プレドニゾロン、ヒドロコルチゾン、メトトレキサート、スルファサラジン、ナプロキセン、ジクロフェナク及びイブプロフェンを含む。
【００５１】
本発明において採用される生物学的又は薬学的に許容される担体の例は、限定されないが、界面活性剤、賦形剤、結合剤、希釈剤、崩壊剤、滑沢剤、防腐剤、安定化剤、緩衝剤、懸濁剤及び薬物送達システムを含む。
【００５２】
固体担体、希釈剤又は賦形剤の好ましい例は、限定されないが、グルコース、フルクトース、スクロース、マルトース、黄色デキストリン、白色デキストリン、エアロゾル、微結晶性セルロース、サイロイド、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、ソルビトール、ステビオサイド、コーンシロップ、乳糖、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、コハク酸、乳酸、Ｌ−アスコルビン酸、ｄｌ−α−トコフェロール、グリセリン、プロピレングリコール、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル、アラビアゴム、カラギーナン、カゼイン、ゼラチン、ペクチン、寒天、ビタミンＢ群、ニコチン酸アミド、パントテン酸カルシウム、アミノ酸、カルシウム塩、顔料、香料及び防腐剤を含む。
【００５３】
液状担体の好ましい例は、蒸留水、生理食塩水、水性グルコース溶液、アルコール（例えば、エタノール）、プロピレングリコール及びポリエチレングリコール；様々な動植物油等の油性担体、白色軟パラフィン、パラフィン及びワックスを含む。
【００５４】
本発明の代替的態様において、本発明の発明的組成物は、ナノテクノロジー、マイクロカプセル、コロイド担体系及び本分野で公知の他の薬物送達システムを含む技術によるポリマー系制御放出コーティングを用いて、制御放出錠剤の形態で送達される。前記組成物は、１日１回投与又は１日当たり複数回投与するために設計することができる。
【００５５】
本発明によると、本発明の組成物はまた、シリアル等の固体食物、ベビーフード、チョコレート、栄養バー、クリーム若しくはジャム等の半固体食品、清涼飲料水、コーヒー、紅茶、ミルク含有飲料、乳製品、乳酸菌飲料、スープ、ドロップ、キャンディー、ガム、チョコレート、グミキャンディ、ヨーグルト、アイスクリーム、プリン、水羊羹、ゼリー、クッキー、パン製品等の既存の若しくは新規な食物及び飲料形態に製剤化又は追加することができる。これらの様々な組成物、調製物、食物及び飲料は、炎症及び／又はこれらに限定されないが、喘息、関節炎、炎症性腸疾患、関節リウマチ、若年性関節リウマチ、乾癬性関節炎、変形性関節炎、難治性関節リウマチ、慢性非リウマチ関節炎、骨粗鬆症／骨吸収、冠動脈心疾患、アテローム性動脈硬化症、血管炎、潰瘍性大腸炎、乾癬、成人呼吸窮迫症候群、糖尿病、代謝性疾患、皮膚疾患及びアルツハイマー病における遅延型過敏症疾患を含む、炎症に関連する又は関する１以上の疾患症状の治療及び／又は予防のための健康食品として有用である。
【００５６】
本発明の様々な典型的実施形態では、ヒト又は哺乳動物に投与又は補充する本相乗的組成物の量は均一ではあり得ず、製剤の性質及び提案された抽出物又は留分のヒト又は動物用量に依存して変化するが、好ましくは１日当たり０．１〜７５０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲内であり、より好ましくは約０．５〜５００ｍｇ／ｋｇ体重であることを提供する。
【００５７】
本発明の別の実施形態では、上述した各種製剤、食物及び飲料組成物における本発明の組成物の量は、均一でなくてもよく、製剤の性質及び提案される組成物のヒト用量又は動物用量に依存して変化し、例えば約０．００１％〜９９％、より好ましくは約０．１重量％〜９０重量％であることを提供する。
【００５８】
好ましい実施形態の１つにおいて、ミロバラン抽出物の濃度は、２０質量％〜７５質量％の範囲で変化する。
【００５９】
別の好ましい実施形態において、ウコン抽出物の濃度は、１０質量％〜４０質量％の範囲で変化する。
【００６０】
更に別の実施形態において、ボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）の濃度は、１０質量％〜４０質量％の範囲で変化する。
【００６１】
更に別の実施形態において、相乗的組成物は、２０質量％〜７５質量％の範囲のミロバラン、１０質量％〜４０質量％の範囲のウコン及び１０質量％〜４０質量％の範囲のボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）を含む。
【００６２】
更に別の実施形態において、相乗的組成物は、２５質量％〜６５質量％の範囲のミロバラン、１２質量％〜３０質量％の範囲のウコン及び１２質量％〜３０質量％の範囲のボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）を含む。
【００６３】
本発明の更なる実施形態は、本発明の相乗的組成物の量が、組成物の全量に基づき１質量％〜１００質量％の範囲に変化することを提供する。
【００６４】
別の実施形態において、本発明は、喘息、アテローム性動脈硬化及び関節炎等を含むいくつかの炎症に関連する疾患又は関する疾患並びに炎症を治癒、予防又は治療する目的のために、動物用飼料で使用される様々な成分と本発明の組成物とを混合することを更に含む。
【００６５】
動物用飼料に加えられる組成物又は製剤の形態は、特に限定されず、そのままの形態で、又は組成物として、様々な調理された及び処理された食物製品に加えてもよい。その量は、食物製品で使用される場合と同じとすることができる。同様に、その成分はまた、動物用飼料の調製中又は後に加えられてもよい。
【００６６】
本発明によれば、本発明の組成物はまた、ヒト用途及び動物用途のための任意の栄養補助食品、食物及び飲料の形態に処方され得る。
【００６７】
別の好ましい実施形態において、本発明は、ミロバラン抽出物、ウコン抽出物及びボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）の組み合わせを含み、且つ、植物由来抗炎症剤及び薬学的、栄養補助食品的又は食事的に許容される担体／賦形剤から選択される少なくとも１つの材料を選択的に含む新規な相乗的組成物の有効量を患者に投与する、それが必要な患者の炎症、関節炎及び関節疾患を治療する方法を提供する。
【００６８】
炎症、関節炎及び関節疾患を治療する方法は、関節リウマチ、乾癬性関節炎、変形性関節炎、難治性関節リウマチ、慢性非リウマチ性関節炎、骨粗鬆症／骨吸収、コラーゲン分解、痛風性関節炎、狼瘡又は若年性関節炎及び関節痛から選択される。
【００６９】
限定されないが、関節リウマチ、乾癬性関節炎、変形性関節炎、難治性関節リウマチ、慢性非リウマチ性関節炎、骨粗鬆症／骨吸収、コラーゲン分解、痛風性関節炎、狼瘡又は若年性関節炎、及び哺乳動物における関節痛を含む炎症症状を治療する方法であって、該方法は、必要とする哺乳動物に、ミロバラン２５〜４５％、ウコン１５〜２５％、ボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）１５〜２５％、少なくとも５％の３−Ｏ−アセチル−１１−ケト−β−ボスウェリア酸（ＡＫＢＡ）を含む体積アッセイにより総酸の７５％〜８５％に標準化されたボスウェリアセラータ抽出物１５〜２５％、及び賦形剤５〜１５％を含む相乗的組成物を補充することを含む。
【００７０】
別の好ましい実施形態において、本発明は、ミロバラン抽出物、ウコン抽出物及びボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）を含み、且つ植物由来の抗炎症剤及び薬学的、補助栄養食品的又は食事的に許容される担体／賦形剤から選択される少なくとも１つの成分を選択的に含む、炎症、関節炎及び関節疾患を治療するための新規相乗的組成物の使用を提供する。
【実施例】
【００７１】
好ましい実施態様を含む次の実施例は、本発明の実施の説明の便宜を与えるものであり、記載事項は本発明の例示であり、且つ本発明の好ましい実施態様の実証となる議論をするためのものと理解され、本発明を限定するものではない。
【００７２】
実施例１：ミロバラン水抽出物の調製
植物ミロバラン（１ｋｇ）の乾燥果実を粗粉末に砕き、水（５Ｌ）により８０℃で１．５時間抽出した。抽出工程は、植物材料に対して１：３〜１：５（ｗ／ｖ）の割合で、水（５Ｌ、３．５Ｌ、及び３．５Ｌ）を用いて３回繰り返した。全ての抽出物を合わせ、合わせた水性抽出物を微細ろ過し、清澄な抽出物を、５０〜６０℃で上昇薄膜型蒸発缶により乾燥するまで蒸発させ、３００ｇのミロバラン抽出物を得た。
【００７３】
実施例２：ミロバランアルコール抽出物の調製
植物ミロバラン（０．１ｋｇ）の乾燥果実を粗粉末に砕き、アルコールにより室温／還流温度で１時間抽出した。抽出工程は、植物材料に対して１：１２−１：１７（ｗ／ｖ）の割合でアルコールを用いて３回繰り返した。全ての抽出物を合わせ、合わせたアルコール抽出物を微細ろ過し、清澄な抽出物を、真空下、４０℃で蒸発させて乾燥粉末（２９０ｍｇ）を得た。
【００７４】
実施例３：ウコンアルコール抽出物の調製
植物ウコン（１ｋｇ）の乾燥地下茎を粗粉末に砕き、エタノール、メタノール又はこれらの混合物等のアルコール（５Ｌ）により、６０〜６５℃の範囲で２〜３時間抽出した。抽出工程は、植物材料に対して１：４−１：５（ｗ／ｖ）の割合でアルコールを用いて３回繰り返した。３つの抽出物の全てを合わせて微細ろ過した。ろ液を減圧下、４０〜５０℃で乾燥するまで蒸発させ、メタノールが抽出媒体である場合、７０ｇのウコン抽出物を得た。
【００７５】
実施例４：ボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）の調製
ボスウェリアセラータゴム樹脂（１００ｇ）を６００ｍＬのメチルイソブチルケトン（ＭＩＢＫ）溶媒に分散させ、室温で６．０分間撹拌した。不溶性ゴム物質はろ過により分離した。ＭＩＢＫ溶液を２％ＫＯＨ溶液（３×２００ｍＬ）で繰り返し抽出して酸性化合物を除去した。そして、ＭＩＢＫ層を水（４００ｍＬ）及び塩水（２００ｍＬ）で連続して洗浄した。ＭＩＢＫ層を減圧下、６０〜７０℃で蒸発させ、真空下、１２０−１５０℃で揮発性成分を油残渣から除去し、ボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物又はＢＮＲＥを粘性油状物として得た（１２ｇ）。
【００７６】
酸性化合物を含む水性アルカリ溶液を、濃ＨＣｌ溶液を用いて酸性化した。得られた沈殿物をろ過して、真空下で固体乾燥して、体積アッセイにより総酸の７５％−８５％を示すボスウェリアセラータ酸性抽出物を得た。
【００７７】
上記手順はまた、非酸性樹脂抽出物及び酸性樹脂抽出物を得るために、ＭＩＢＫに代えて酢酸エチルを用いて行うこともできる。
【００７８】
代わりに、ボスウェリアセラータから収集したゴム樹脂（２５０ｇ）をメタノール（３００ｍＬ×３）で抽出し、合わせたメタノール抽出物を濃縮した。残渣（５０ｇ）を酢酸エチル（４００ｍＬ）に溶解させて２Ｎ  ＫＯＨ（３×１００ｍＬ）で３回抽出した。有機層を水（２×２００ｍＬ）及び塩水（２００ｍＬ）で洗浄し、蒸発させてボスウェリアオイルを得た。該オイルから揮発性化合物を１２０〜１５０℃真空下で蒸発させて、ボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）２２ｇを得た。
【００７９】
実施例５：ボスウェリアセラータ酸性抽出物の調製
原材料０．１ｋｇを３時間還流下、８００ｍＬの酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）で抽出した。抽出プロセスは、植物材料に関して１：６ｗ／ｖの割合で、ＥｔＯＡｃを用いて２回繰り返した。ＥｔＯＡｃ溶解抽出成分を２．８％のＫＯＨ水溶液（ＥｔＯＡｃ抽出物に対して３×１：１ｖ／ｖ）で処理した。混合物を３０分間撹拌し、２時間静置した。上層のＥｔＯＡｃ層を分離し、続いてＥｔＯＡｃ抽出物に対してそれぞれ水及び塩水１：４ｖ／ｖ及び１：２ｖ／ｖで洗浄した。上層（酢酸エチル）を７０〜７５℃で３〜４時間濃縮し、更に高真空下、１４０℃で２時間濃縮した（ＨＰＲ５：１）。
【００８０】
下層（塩基層）を真空下、７０〜７５℃で３時間濃縮し、水で希釈した。１０％ＨＣｌでｐＨを１．４５に調整し、沈殿物をろ過して水で中性ｐＨまで洗浄した。湿ったケーキを真空下で２０時間乾燥し、酸性ゴム樹脂抽出物を得た（１３０ｍｇ）。
【００８１】
実施例６：組成物−１
ミロバランの水抽出物、ウコンのメタノール抽出物、及びボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）を２：１：１（５０％：２５％：２５％）の割合で合わせることにより、組成物−１を調製した。
【００８２】
実施例７：組成物−２
ミロバランの水抽出物、ウコンのメタノール抽出物、及びボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）を７．５：１．５：１．０（７５％：１５％：１０％）の割合で合わせることにより、組成物−２を調製した。
【００８３】
実施例８：組成物−３
ミロバランの水抽出物、ウコンのメタノール抽出物、及びボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）を７．５：１．０：１．５（７５％：１０％：１５％）の割合で合わせることにより、組成物−３を調製した。
【００８４】
実施例９：組成物−４
ミロバランの水抽出物、ウコンのメタノール抽出物、及びボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）を１：２：２（２０％：４０％：４０％）の割合で合わせることにより、組成物−４を調製した。
【００８５】
実施例１０：組成物−５
ミロバランの水抽出物、ウコンのメタノール抽出物、ボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）、及び５％の３−Ｏ−アセチル−１１−ケト−β−ボスウェリン酸（ＡＫＢＡ）を含む体積アッセイにより総酸の７５％〜８５％に標準化されたボスウェリアセラータ抽出物を２：１：１：１（４０％：２０％：２０％：２０％）の割合で合わせることにより、組成物−５を調製した。
【００８６】
実施例１１：組成物−６
ミロバランの水抽出物、ウコンのメタノール抽出物、ボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）、及び賦形剤（微結晶質セルロース（ＭＣＣ）及び「サイロイド」）を２：１：１：２（３４％：１７％：１７％：３２％）の割合で合わせることにより、組成物−６を調製した。
【００８７】
実施例１２：組成物−７
組成物−７を、ミロバランの水抽出物３６ｇ、ウコンのメタノール抽出物１８ｇ、ボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）１８ｇ、５％の３−Ｏ−アセチル−１１−ケト−β−ボスウェリン酸（ＡＫＢＡ）を含む体積アッセイにより総酸の７５％〜８５％に標準化されたボスウェリアセラータ抽出物１８ｇ、及び賦形剤（微結晶質セルロース（ＭＣＣ）及び「サイロイド」）１０ｇを、その割合が組成物において３６％、１８％、１８％、１８％及び１０％とそれぞれなるように合わせて、組成物−７を調製した。
【００８８】
実施例１３：５−リポキシゲナーゼ酵素（５−ＬＯＸ）阻害活性
５−リポキシゲナーゼ酵素（５−ＬＯＸ）阻害活性は、Ｌｉｐ  Ｙｏｎｇ  Ｃｈｕｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．４７（１２），  １１４２−１１４８，２００９）の方法を用いて測定した。アッセイ混合物は、５０ｍＭのＴｒｉｓＨＣｌ緩衝液（ｐＨ７．４）中に８０μＭのリノール酸及び十分な量のジャガイモ５−リポキシゲナーゼを含む。５μＬの５−ＬＯＸ酵素を５０ｍＭのＴｒｉｓＨＣｌ緩衝液１７５μＬに加えた。５０ｍＭのＴｒｉｓＨＣｌ緩衝液に５μＬのリノール酸（最終濃度、１４０μＭ）を加えることにより反応を開始し、続いて暗所において２５℃で２０分間インキュベーションした。反応混合物の全体積は１８５μＬである。６５μＬの新鮮に調製したフォックス剤（ｆｏｘ  ｒｅａｇｅｎｔ）を添加することにより、アッセイを終了した。２０分間のインキュベーション後、５９５ｎｍでＸｍａｒｋ  Ｍｉｃｒｏ  ｐｌａｔｅ  ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒ（ＢＩＯ−ＲＡＤ）を用いて、吸光度を測定した。反応を１２０秒監視し、試験物質、即ち、抽出物及び組成物の阻害ポテンシャルは、リノール酸を加える前に、様々な濃度の試験物質を２分間インキュベートすることにより測定した。全てのアッセイを３回行った。試験物質について得られた曲線の傾きと対照のそれと比較して、５−リポキシゲナーゼ活性の阻害割合を計算した。ミロバラン抽出物、ウコン抽出物、ボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）、５％の３−Ｏ−アセチル−１１−ケト−β−ボスウェル酸（ＡＫＢＡ）を含む体積アッセイにより総酸の７５％〜８５％に標準化されたボスウェリアセラータ酸性抽出物、及び各組成物の５０％阻害濃度（ＩＣ５０）を表１にまとめた。
【００８９】
【表１】
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【００９０】
表１の上記５−リポキシゲナーゼ阻害活性は、５−リポキシゲナーゼ酵素活性において、ミロバラン抽出物、ウコン抽出物及びボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）、並びにこれらの選択的な総酸の７５−８５％に標準化されたボスウェリアセラータ酸性抽出物及び／又は５％の３−Ｏ−アセチル−１１−ケト−β−ボスウェル酸（ＡＫＢＡ）を含む組成物の相乗効果を明確に示す。この知見は、抽出物の組成物が個々の抽出物よりもより大きな５−リポキシゲナーゼ阻害活性を示したことを示唆する。例えば、ミロバラン抽出物、ウコン抽出物、ＢＮＲＥ及びボスウェリアセラータ酸性抽出物のＩＣ５０値は、それぞれ２５．４１μｇ／ｍｌ、１９．５３μｇ／ｍｌ、１６．４０μｇ／ｍｌ及び＞１００μｇ／ｍｌであり、一方、組成物−１、組成物−２、組成物−３、組成物−４及び組成物−７は、それぞれ１４．８４μｇ／ｍｌ、１２．８９μｇ／ｍｌ、２３．４３μｇ／ｍｌ、１４．４５μｇ／ｍｌ及び１２．３５μｇ／ｍｌのＩＣ５０値を有する５−リポキシゲナーゼ阻害活性を示した。該組成物の５−リポキシゲナーゼ阻害活性は、個々の抽出物のそれよりも高い。
【００９１】
実施例１４：インターロイキン１（ＩＬ−１β）阻害活性
抽出物及び組成物によるリポ多糖（ＬＰＳ）−誘発ＩＬ−１β生成物の阻害は、ホルボール１２−ミリステート１３−アセタート（ＰＭＡ）分化ＴＨＰ−１ヒト単球にて評価した。簡潔には、ＴＨＰ−１細胞は、２０ｎＭのＰＭＡで分化され、更に５％ＣＯ２インキュベーターにより、３７℃で４８時間インキュベートした。細胞を、１０％ウシ胎児血清（ＦＣＳ）を含有する新鮮なＤＭＥＭで洗浄し、抽出物又は組成物の種々の濃度で前処理した。その後、細胞を、リポ多糖（ＬＰＳ）（１０ｎｇ／ｍｌ）で処理し、更に５％ＣＯ２インキュベーターにより３７℃で４時間インキュベートした。上清を回収し、無細胞培養上清中に分泌されたＩＬ−１βの割合を、ヒトＩＬ−１βのＥＬＩＳＡキット（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍ，Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，Ｍｉｎｎ．，ＵＳＡ）を用いて測定した。抽出物又は組成物のＩＬ−１β阻害の割合は、式：｛（誘発ＩＬ−ｌβの濃度−試験した抽出物又は組成物におけるＩＬ−ｌβの濃度）×１００｝÷ＬＰＳ誘発ＴＨＰ−１ヒト単球におけるＩＬ−１βの濃度から計算した。抽出物又は組成物によるＩＬ−１β生成物の阻害のデータを表２に示す。
【００９２】
【表２】
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【００９３】
相乗効果は、バイオマーカーであるインターロイキン−１β（ＩＬ−１β）の評価により実証された。組成物−１、組成物−２、組成物−４及び組成物−７を補充した処置群は、表２に示すように、個々のミロバラン抽出物、ウコン抽出物、ＢＮＲＥ及びボスウェリアセラータ酸性抽出物により寄与した付加的効果と比較して、血清バイオマーカーであるＩＬ−１βの低減において非常に良い活性を示した。この予期せぬ結果は、バイオマーカーであるインターロイキン−１β（ＩＬ−１β）阻害におけるミロバラン抽出物、ウコン抽出物、ボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）及び３−Ｏ−アセチル−１１−ケト−β−ボスウェル酸（ＡＫＢＡ）を含む組成物の相乗活性を明確に示唆し、組成物が、個々の抽出物と比べて、炎症誘発を介して仲介した炎症及び／又は免疫関連疾患を予防、治療、阻害又は制御するのに有用であることを示唆する。
【００９４】
実施例１５：インビトロでの腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）の阻害
抽出物及び組成物の抗炎症活性は、細胞を用いたインビトロアッセイにおいて評価した。簡潔には、ＴＨＰ−１ヒト単球を洗浄し、フェノールレッドを含まず、１％ウシ胎児血清を添加したダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）に再懸濁した。９６ウェル細胞培地プレートの各ウェルに等しい数の細胞を追加し、細胞を２時間、様々な濃度の試験物質の抽出物又は組成物で前処理した（０．５〜５０μｇ／ｍｌの範囲；溶液は、各試験サンプルの５０ｍｇ／ｍＬＤＭＳＯを含有するストック溶液から培地において調製された。）。炎症性反応は、５％ＣＯ２の存在下、３７℃で４時間、１００ｎｇ／ｍｌのＬＰＳで処理することにより誘発された。ビヒクル対照培地ウェルは、培地において０．１％ＤＭＳＯを受けた。無細胞培養上清を収集し、セクレタリー炎症性サイトカイン（ｓｅｃｒｅｔａｒｙ  ｐｒｏ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｃｙｔｏｋｉｎｅ）であるＴＮＦαを評価した。ＴＮＦ−α濃度は、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍ（ＵＳＡ）により提供された高感受性度酵素免疫検定法（ＥＩＡ）キットにより定量的に測定した。酵素免疫測定法は、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍが提供するプロトコルに基づいて実施した。ＴＮＦ−αの５０％阻害濃度（ＩＣ５０）は、ＴＮＦ−αレベルに対する成分濃度として描かれたプロットから決定した。
【００９５】
表３は、細胞を用いたインビトロモデルにおける、組成物のＴＮＦ−αの５０％阻害濃度（ＩＣ５０）を示す。
【００９６】
【表３】
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【００９７】
ＴＮＦα誘発ＳＷ９８２ヒト骨液細胞により、抽出物及び組成物によるＭＭＰ−３生成物の阻害を評価した。簡潔には、ＳＷ９８２細胞を、２ｍＭグルタミン、１００Ｕ／ｍＬペニシリン、１００ｍｇ／ｍＬストレプトマイシン及び１０％ウシ胎児血清（Ｈｙｃｌｏｎｅ、Ｌｏｇａｎ、Ｕｔａｈ）を備えるＤＭＥＭで培養した。実験１日前に９６ウェル細胞培養プレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ、ＵＳＡ）にウェル当たり５０００細胞を播種した。培地は、１％ウシ胎児血清を含む新鮮なＤＭＥＭと置き換えた。抽出物又は組成物は、培地において連続して希釈されて５〜１００ｎｇ／ｍｌであり、５％ＣＯ２の存在下３７℃で２時間細胞と共にプレインキュベートされ、次いで２４時間１０ｎｇ／ｍｌのヒト組換えＴＮＦα（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍ、Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ、Ｍｉｎｎ）で刺激された。無細胞培養上清は、ＥＬＳＡ開発キット（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍ、Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ、Ｍｉｎｎ、ＵＳＡ）によりＭＭＰ−２生成物を測定するために回収され使用された。無細胞培養上清におけるＭＭＰ−３濃度は、ＭＭＰ−３の既知濃度から生じた標準曲線に光学密度を当てはめて定量的に見積った。ＭＭＰ−３の５０％阻害濃度（ＩＣ５０）は、濃度に対して阻害割合をプロットして構築されたプロットから計算した（表４）。
【００９８】
【表４】
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【００９９】
実施例１７：組成物−１のインビボ抗炎症性活性
ミロバラン水抽出物５０ｇ、ウコンメタノール抽出物２５ｇ、ボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）２５ｇを含み、それら組成物における割合がそれぞれ５０％、２５％及び２５％となる組成物−１のインビボ抗炎症性活性を、Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）ラットのフロイント完全アジュバント関節炎モデルにおけるインビボ研究により評価した。
【０１００】
プレドニゾロンを陽性対照として使用した。健康な雄ＳＤラットを選択し、無作為に群当たり６匹の動物を含む４つの群に分けた。治療群のラットには、３５日間、２００ｍｇ／ｋｇ体重の組成物−１を毎日補充した。陽性対照群には、１０ｍｇ／ｋｇ体重でプレドニゾロンを毎日補充した。全てのサプリメントを投与のために１０ｍＬの１％ＣＭＣに希釈した。対照群の動物には１％のＣＭＣの同じ量を与えた。７日目に、フロイント完全アジュバント（ＦＣＡ）に各動物の左後足のサブ足底領域に皮下注射した。足の体積及び耐荷重能は、それぞれＦＣＡ注射の日及び治療の３５日目に、脈波計測機器及び両足圧力差痛覚測定器を用いて測定した。足浮腫の容積の差は炎症反応であると考えられる。ＣＭＣ補充対照と比較した場合、組成物−１のインビボ抗炎症反応は、足浮腫の阻害割合を計算することによって推測された。
【０１０１】
組成物−１を２００ｍｇ／ｋｇ体重で補充した治療群は、足浮腫において４０．３５％の低減を示した（表５）。
【０１０２】
【表５】
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【０１０３】
耐荷重能における改善は、有効性における改善と考えられ、結果を表６に示す。
【０１０４】
【表６】
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【０１０５】
表５及び表６に示す３５日間の組成物−１（３００ｍｐｋ）の補充による上記インビボ抗炎症性活性値は、ＡＩＡ対照と比べて３５日の終わりまでに４０．３５％の足浮腫の統計学的に有意な（ｐ＜０．０５）阻害を示した。
【０１０６】
組成物−１（３００ｍｐｋ）の補充は、アジュバント関節炎ラットにおける耐荷重能割合において緩やかな改善を示した。
【０１０７】
これらの結果はともに、組成物−１の経口投与により足浮腫を低減し、また、Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラットのアジュバンド誘発関節炎における耐荷重能を改善することを示唆している。
【０１０８】
実施例１８：組成物−７のインビボ抗炎症性活性
組成物−７は、ミロバラン水抽出物３６ｇ、ウコンのメタノール抽出物１８ｇ、ボスウェリアセラータ非酸性樹脂抽出物（ＢＮＲＥ）１８ｇ、５％の３−Ｏ−アセチル−１１−ケト−β−ボスウェル酸（ＡＫＢＡ）を含む体積アッセイにより総酸の７５％−８５％に標準化されたボスウェリアセラータ抽出物１８ｇ、及び１０ｇの賦形剤（微結晶質セルロース（ＭＣＣ）及びサイロイド）を含み、それら組成物におけるの割合がそれぞれ３６％、１８％、１８％、１８％及び１０％となる組成物−７のインビボ抗炎症性活性を、Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）ラットのフロイント完全アジュバント関節炎モデルにおけるインビボ研究により評価した。
【０１０９】
プレドニゾロンを陽性対照として使用した。健康な雄ＳＤラットを選択し、無作為に群当たり６匹の動物を含む４つの群に分けた。治療群のラットには、３５日間、２００ｍｇ／ｋｇ体重の組成物−７を毎日補充した。陽性対照群には、１０ｍｇ／ｋｇ体重でプレドニゾロンを毎日補充した。すべてのサプリメントは、投与のために１０ｍＬの１％ＣＭＣに希釈した。対照群の動物には１％ＣＭＣの同じ量を与えた。７日目に、フロイント完全アジュバント（ＦＣＡ）に各動物の左後足のサブ足底領域に皮下注射した。足の体積及び耐荷重能は、それぞれＦＣＡ注射の日及び治療の３５日目に脈波機器及び両足圧力差痛覚測定器を用いて測定した。足浮腫の容積の差は、炎症反応であると考えられる。ＣＭＣ補充対照と比較した場合、組成物−７のインビボ抗炎症反応は、足浮腫の阻害割合を計算することによって推測された。
【０１１０】
組成物−７を２００ｍｇ／ｋｇ体重の量で補充した治療群は、足浮腫において４４．３４％の低減を示した（表７）。
【０１１１】
【表７】
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【０１１２】
耐荷重能における改善は、効果における改善と考えられ、結果を表８に示す。
【０１１３】
【表８】
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【０１１４】
表７及び表８における上記インビボ抗炎症性活性値は、組成物−７（２００ｍｐｋ経口投与）を投与された動物は、足浮腫において４４．３４％低減を示し、動物ＡＩＡ対照と比べて、この低減は、統計的に有意である（ｐ＜０．０５）。組成物−７（２００ｍｐｋ経口投与）の投与もまた、耐荷重能における４５．３３％の改善の結果を示し、耐荷重能におけるこの改善は、ＡＩＡ対照と比べて統計的に有意である（ｐ＜０．０５）。これらの結果は共に、組成物−７の経口投与は足浮腫を低減し、Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラットにおけるアジュバンド誘発関節炎による耐荷重能を改善することを示唆する。
【０１１５】
改変が、実施形態の広範な発明的概念から逸脱することなく、上記に記載された実施形態になされ得ることは当業者にとって理解されよう。それ故、本発明は開示された特定の実施形態又は実施例に限定されないが、本発明の目的及び範囲内の改変例をカバーすることを意図することが理解される。
【国際調査報告】
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