(57)【要約】  本発明は、ウラシルヌクレオチド類縁体、それらの製造方法およびそれらの用途に関する。具体的には、本発明は、次の式（I）のウラシルヌクレオチド類縁化合物、それらの立体異性体または薬学的に許容される塩、それらの製造方法および用途を提供する。これらの化合物は、RNA-依存性RNAウィルス複製の阻害剤であり、HIV NS5Bポリメラーゼの阻害剤として、HCV複製の阻害剤として、そして哺乳動物におけるC型肝炎感染症の治療に有用である。化合物は幅広い適用の見込みがあり、抗ウィルス薬の新しい出現に展開することが期待される。【選択図】なし
2017502975.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩：
【化１】
2017502975.tif 000129
式中：
Zは、酸素およびイオウから成る群から選択され；
Yは、水素およびアセチルから成る群から選択され；
R1は、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C1-8ハロアルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5、-N(R5)-C(O)OR5、-C0-8-S-R5、-SiR5R6R7および-GeR5R6R7から成る群から選択されるか、
またはR1はフェニル環に隣接する結合した炭素原子と一緒になって５〜７員炭素環または５〜７員複素環を形成し、
該C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、C5-10アリール、５〜１０員ヘテロアリール、５〜７員炭素環および５〜７員複素環は、それぞれ任意に、ハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 および-N(R5)-C(O)OR5から成る群から独立して選択される１以上の基でさらに置換されていてもよく；
R２は、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 および-N(R5)-C(O)OR5から成る群から選択され、
該C1-8アルキル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、C5-10アリールおよび５〜１０員ヘテロアリールは、それぞれ任意に、ハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 および-N(R5)-C(O)OR5から成る群から独立して選択される１以上の基でさらに置換されていてもよく；
R３は、任意に、ハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 および-N(R5)-C(O)OR5から成る群から独立して選択される１以上の基で置換されていてもよい、水素、C1-8アルキル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、C5-10アリールおよび５〜１０員ヘテロアリールから成る群から選択され；
R４は、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C1-8ハロアルキル、C３-8シクロアルキル、C３-8シクロアルキルメチル、C1-8ハロアルコキシ、C1-8ハロアルキルチオ、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 および-N(R5)-C(O)OR5から成る群から選択され；
R５、R６、R７は、水素、C1-４アルキルおよびC３-8シクロアルキルから成る群から選択され；
mは、０，１，２，３または４であり；
ｒは、０，１または２である。
【請求項２】
Zが酸素から選択され、式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体が式（II）のウラシルヌクレオチド類縁体：
【化２】
2017502975.tif 000130
である、請求項１に記載のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩。
【請求項３】
R1が、C1-8アルキル、C1-8ハロアルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5、-N(R5)-C(O)OR5、-C0-8-S-R5、-SiR5R6R7および-GeR5R6R7から成る群から選択され、
該C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、C5-10アリールおよび５〜１０員ヘテロアリールは、それぞれ任意に、ハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 および-N(R5)-C(O)OR5から成る群から独立して選択される１以上の基でさらに置換されていてもよく；
Y、R2、R3、R4、R5、R6、R7、m、rは、請求項１で定義した通りであることを特徴とする、請求項２に記載のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩。
【請求項４】
R1が、C1-8アルキル、C1-8ハロアルキル、C２-8アルケニルおよびC２-8アルキニルから成る群から選択され、
該C1-8アルキル、C1-8ハロアルキル、C２-8アルケニルおよびC２-8アルキニルは、それぞれ任意に、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシおよび５〜１０員ヘテロアリールチオから成る群から独立して選択される１以上の基でさらに置換されていてもよく；
Y、R2、R3、R4、R5、R6、R7、m、rは、請求項１で定義した通りであることを特徴とする、請求項３に記載のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩。
【請求項５】
化合物が、
【化３】
2017502975.tif 000131
から成る群から選択されることを特徴とする、請求項４に記載のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩。
【請求項６】
化合物が、
【化４】
2017502975.tif 000132
から成る群から選択されることを特徴とする、請求項５に記載のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩。
【請求項７】
R1が、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシおよび５〜１０員ヘテロアリールチオから成る群から選択され、
該C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、C5-10アリールおよび５〜１０員ヘテロアリールは、それぞれ任意に、ハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 および-N(R5)-C(O)OR5から成る群から独立して選択される１以上の基でさらに置換されていてもよく；
Y、R2、R3、R4、R5、R6、R7、m、rは、請求項１で定義した通りであることを特徴とする、請求項３に記載のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩。
【請求項８】
化合物が、
【化５】
2017502975.tif 000133
から成る群から選択されることを特徴とする、請求項７に記載のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩。
【請求項９】
化合物が、
【化６】
2017502975.tif 000134
から成る群から選択されることを特徴とする、請求項８に記載のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩。
【請求項１０】
R1が、-C0-8-S-R5、-SiR5R6R7および-GeR5R6R7から成る群から選択され、
Y、R2、R3、R4、R5、R6、R7、m、rは、請求項１で定義した通りであることを特徴とする、請求項３に記載のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩。
【請求項１１】
化合物が、
【化７】
2017502975.tif 000135
から成る群から選択されることを特徴とする、請求項１０に記載のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩。
【請求項１２】
化合物が、
【化８】
2017502975.tif 000136
から成る群から選択されることを特徴とする、請求項１１に記載のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩。
【請求項１３】
R１が、フェニル環に隣接する結合した炭素原子と一緒になって５〜７員炭素環または５〜７員複素環を形成し、
該５〜７員炭素環および５〜７員複素環は、それぞれ任意に、ハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 および-N(R5)-C(O)OR5から成る群から独立して選択される１以上の基でさらに置換されていてもよく；
Y、R3、R4、R5、R6、R7、m、rは、請求項１で定義した通りであることを特徴とする、
請求項２に記載のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩。
【請求項１４】
R1が、フェニル環に隣接する結合した炭素原子と一緒になって：
【化９】
2017502975.tif 000137
から成る群から選択される５〜７員炭素環または５〜７員複素環を形成し、
該５〜７員炭素環および５〜７員複素環は、それぞれ任意に、ハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 および-N(R5)-C(O)OR5から成る群から独立して選択される１以上の基でさらに置換されていてもよく；
Y、R3、R4、R5、R6、R7、m、rは、請求項１で定義した通りであることを特徴とする、
請求項１３に記載のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩。
【請求項１５】
R1が、フェニル環に隣接する結合した炭素原子と一緒になって５〜７員炭素環および５〜７員複素環を形成し、且つ、該化合物が；
【化１０】
2017502975.tif 000138
から成る群から選択されることを特徴とする、請求項１４に記載のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩。
【請求項１６】
Zが、イオウから選択され、そして式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体が式（III）の化合物であって、
【化１１】
2017502975.tif 000139
式中、Y、R１、R２、R3、R4、R5、R6、R7、m、rは、請求項１で定義した通りであることを特徴とする、
請求項１に記載のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩。
【請求項１７】
R4が、ハロゲン、ヒドロキシ、チオール、C1-8アルキル、C1-8ハロアルキル、C３-8シクロアルキル、C３-8シクロアルキルメチル、C1-8ハロアルコキシおよびC1-8ハロアルキルチオから成る群から選択されることを特徴とする、請求項１６に記載のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩。
【請求項１８】
R3が、任意に、ハロゲン、ヒドロキシ、チオール、C1-8アルキル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5および-C0-8-O-C(O)R5から成る群から独立して選択される１以上の基でさらに置換されていてもよい、水素、C1-8アルキル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、C5-10アリールおよび５〜１０員ヘテロアリールから成る群から選択され；R4が、フッ素、メチル、トリフルオロメチル、シクロプロピルおよびシクロプロピルメチルから成る群から選択され；Y、R１、R２、R5、R6、R7、m、rは、請求項１で定義した通りであることを特徴とする、
請求項１７に記載のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩。
【請求項１９】
R3が、任意に、ハロゲン、ヒドロキシ、チオール、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5および-C0-8-O-C(O)R5から成る群から独立して選択される１以上の基でさらに置換されていてもよい、水素、C1-4アルキル、シクロプロピル、シクロヘキシルおよびフェニルから成る群から選択され；R4が、メチルから選択され；Y、R１、R２、R5、R6、R7、m、rは、請求項１で定義した通りであることを特徴とする、
請求項１８に記載のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩。
【請求項２０】
R１が、水素、C1-8アルキル、C1-8ハロアルキル、C２-8アルケニルおよびC２-8アルキニルから成る群から選択され、該C1-8アルキル、C1-8ハロアルキル、C２-8アルケニルおよびC２-8アルキニルは、それぞれ任意に、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシおよび５〜１０員ヘテロアリールチオから成る群から独立して選択される１以上の基でさらに置換されていてもよく；Y、R2、R5、R6、R7、m、rは、請求項１で定義した通りであることを特徴とする、
請求項１９に記載のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩。
【請求項２１】
化合物が、
【化１２】
2017502975.tif 000140
から成る群から選択されることを特徴とする、請求項２０に記載のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩。
【請求項２２】
R１が、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシおよび５〜１０員ヘテロアリールチオから成る群から選択され、該C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、C5-10アリールおよび５〜１０員ヘテロアリールは、それぞれ任意に、ハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 および-N(R5)-C(O)OR5から成る群から独立して選択される１以上の基でさらに置換されていてもよく；Y、R2、R5、R6、R7、m、rは、請求項１で定義した通りであることを特徴とする、
請求項１９に記載のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩。
【請求項２３】
化合物が、
【化１３】
2017502975.tif 000141
から成る群から選択されることを特徴とする、請求項２２に記載のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩。
【請求項２４】
R１が、-C0-8-S-R5、-SiR5R6R7および-GeR5R6R7から成る群から選択され；Y、R2、R5、R6、R7、m、rは、請求項１で定義した通りであることを特徴とする、
請求項１９に記載のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩。
【請求項２５】
化合物が、
【化１４】
2017502975.tif 000142
から成る群から選択されることを特徴とする、請求項２４に記載のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩。
【請求項２６】
R１が、フェニル環に隣接する結合した炭素原子と一緒になって５〜７員炭素環および５〜７員複素環を形成し、
該５〜７員炭素環および５〜７員複素環は、それぞれ任意に、ハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 および-N(R5)-C(O)OR5から成る群から独立して選択される１以上の基でさらに置換されていてもよく；
Y、R2、R5、R6、R7、m、rは、請求項１で定義した通りであることを特徴とする、
請求項１９に記載のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩。
【請求項２７】
R１が、フェニル環に隣接する結合した炭素原子と一緒になって、
【化１５】
2017502975.tif 000143
から成る群から選択される、５〜７員炭素環および５〜７員複素環を形成し、
該５〜７員炭素環および５〜７員複素環は、それぞれ任意に、ハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 および-N(R5)-C(O)OR5から成る群から独立して選択される１以上の基でさらに置換されていてもよく；
Y、R2、R5、R6、R7、m、rは、請求項１で定義した通りであることを特徴とする、
請求項２６に記載のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩。
【請求項２８】
化合物が、
【化１６】
2017502975.tif 000144
から成る群から選択されることを特徴とする、請求項２７に記載のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩。
【請求項２９】
立体異性体がS-配置であり、その構造が次の通り：
【化１７】
2017502975.tif 000145
であることを特徴とする、請求項１６〜２８のいずれか１項に記載のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩。
【請求項３０】
化合物が、
【化１７】
2017502975.tif 000146
から成る群から選択されることを特徴とする、請求項２９に記載のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩。
【請求項３１】
製造方法が、ステップ：
【化１８】
2017502975.tif 000147
を含み、
Yがアセチルから選択されるとき、該製造方法は、ステップ：
【化１９】
2017502975.tif 000148
を含んでいてもよく、該ステップはその立体異性体を得るためにカラムクロマトグラフィーのステップをさらに含んでいてもよいか、またはその立体異性体を得るために次のステップ：
【化２０】
2017502975.tif 000149
を含んでいてもよく、
Yがアセチルから選択されるとき、該製造方法は、ステップ：
【化２１】
2017502975.tif 000150
をさらに含んでいてもよく、
式中、Y、R１、R２、R3、R4、R5、R6、R7、mおよびrは、請求項１で定義した通りであることを特徴とする、
請求項１に記載のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩の製造方法。
【請求項３２】
請求項１に記載のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体または薬学的に許容される塩の治療上の有効量、および薬学的に許容される担体を含有する医薬組成物。
【請求項３３】
C型肝炎ウィルス、A型肝炎ウィルス、西ナイルウィルス、黄熱病ウィルス、デングウィルス、ライノウィルス、ポリオウィルス、ウシウィルス性下痢症ウィルスまたは日本脳炎ウィルスから成る群から選択されるウィルスの感染による疾患の治療薬の製造における請求項１に記載のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体または薬学的に許容される塩、または請求項３２に記載の医薬組成物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は薬物合成分野に属し、具体的にはウラシルヌクレオチド類縁体、製造方法およびそれらの医学的応用に関する。
【背景技術】
【０００２】
フラビウィルス科ファミリーのウィルスは、少なくとも異なる３つの属：ウシやブタに疾病を引き起こす、ペスチウィルス；デング熱や黄熱などの病気の主原因となるフラビウィルス；およびC型肝炎ウィルス（HCV）が唯一のメンバーであるヘパシウィルスから成る。フラビウィルスファミリーは６８以上のメンバーを含み、これらは更に血清学的血縁/関連に基づいて異なるグループに分類される。感染は、発熱、脳炎、および出血熱などの種々の臨床症状を引き起こす。フラビウィルスファミリーの中で、デング出血熱ウィルス（DHF）、黄熱ウィルス、ショック症候群ウィルスおよび日本脳炎ウィルスは世界的な注目を引く人間の疾患に関係している。HCVのゲノム構造や表現型特性/特徴はヒトフラビウィルスおよびペスチウィルスに類似しているので、HCVは、またフラビウィルス科の１つとして分類されている。C型肝炎ウィルスは、ヌクレオカプシドの外側を覆っているシストメンブランを含む脂質によって包まれたRNAゲノムを持つ、プラス鎖RNAウィルスである。いくつかのfurcellaが、シストメンブランから突出している。これまでに、Huh7、Huh7.5およびHuh7.5.1などのin vitro HCV複製について３つの細胞培養系か確立されている。C型肝炎ウィルスは１９７４年に初めて発見された。Michael Houghton とその同僚がC型肝炎ウィルスをクローン化して、１９８９年にウィルスの配列を特定し、彼らはウィルスをC型肝炎ウィルス（HCV）として、疾患をC型肝炎として命名した。
【０００３】
HCVのウィルス粒子は、ヌクレオカプシドとシストメンブランで包まれたプラス鎖RNAゲノムから成る。HCV RNAゲノムは、約9500‐10000のヌクレオシドから成る。5`と3’の非コード領域（NCR）は、それぞれ319‐341塩基対と27−55塩基対を含んでいる。NCRには、複製に関係している幾つかの前方および逆方向反復配列がある。HCVのゲノム構造は5'-C-E1-E2-p7-NS2-NS3-NS4-NS5-3'であり、約3014のアミノ酸残基のポリタンパク質前駆体をコードしている。前駆体のポリタンパク質は宿主細胞のプロテアーゼとウィルスのプロテアーゼにより切断されて、３種類の構造タンパクと７つの非構造タンパク（NSタンパク）を含む１０の異なるタンパクを生成する。構造タンパクのうち、ヌクレオカプシドタンパク（コアタンパクとも呼ばれる）は約19kDaであり、E1タンパク（33kDa）とE2タンパク（72kDa）は糖タンパクであり、p7はイオンチャンネルとして機能する膜タンパクをコードしている。非構造タンパクにはNS2、NS3、NS4A、NS5A、およびNS5Bがある。これらの非構造タンパクは、HCVウィルスのライフサイクルで重要な役割を果たしている。NS2とNS3タンパクはプロテアーゼ活性を有していて、前駆体ポリタンパク質の切断に関与している。さらに、NS3タンパクはヘリカーゼ活性を有しており、それ故HCV-RNA分子の巻き戻しに関与していてRNA複製をアシストする。NS4タンパクの機能は、まだ明らかでない。NS5Aタンパクは、種々の宿主細胞と相互作用でき、そしてウィルス複製で重要な役割を果たすことができるリン酸化タンパク質である。NS5BタンパクはRNA依存性RNAポリメラーゼ活性を有し、それ故HCVゲノム複製に関与している。従って、NS5BポリメラーゼはHCV複製において本質的な成分であると考えられる。HCV NS5Bポリメラーゼの阻害は、二重鎖HCV RNAの生成を阻害し、それ故NS5B阻害剤はHCV特異的抗ウィルス療法を開発する魅力的な方法と考えられる。
【０００４】
HCVは高異種性で変異性である。公知のHCVウィルス株の配列解析は、ゲノムヌクレオシド配列と対応するアミノ酸配列が著しい可変性を示すことを説明した。変異性はHCV配列に沿って均一ではない。5’-CRは９２−１００％の相同性を持つ最も保存された領域であり、3’-NCRは高度の変異を有する。HCVゲノムのコード配列において、C領域が最も保存的であり、次いで非構造（NS）領域であって、E2/NS1領域をコードするシストメンブランタンパク質が最も変異性が高く、高頻度可変領域と呼ばれている。疫学研究は、西欧の国々ではHCV-1が最も一般的な感染タイプであることを明らかにしている；一方、アジアの国々ではII型が最も多い感染タイプであり、III型が続く。Okomotoは、日本の慢性C型肝炎患者と健康なドナーは主にII型感染であり、それぞれ59.3%と82.4%を占める；しかしながら、約50%の血友病患者がI型の感染であり、原因は米国から輸入した凝固第VIII因子の適用であることを報告している。Wangは、北京では86.2%の慢性C型肝炎患者はII型感染であり、III型感染は13.8%であることを報告している。しかしながら、新疆におけるIII型感染患者は50%であり、HCVの異なるタイプは地域や住民の異なる分布特性を有することを示している。さらに、異なる遺伝子型によって引き起こされる臨床経過とインターフェロン療法に対する応答も、異なった挙動を取り、III型感染の臨床症状は肝疾患を起こす傾向があってより重篤である；II型感染（Simmonds 1b）はインターフェロン療法に感受性がなく、効果が弱い、III型感染（Simononds 2a）はインターフェロンを用いることにより治療効果はよい。
【０００５】
C型肝炎ウィルス（HCV）は既に重大に人の健康を危険にさらしており、多数の感染者（世界人口の2-15%と推定されている）に肝硬変や肝細胞がんなどの慢性肝疾患に導く。US Center for Disease Controlは、450万の人々が米国だけで感染していると見積もっている。世界保健機関は世界中に2億人以上の感染者が合い、300-400万人以上の人が毎年感染していると見積もっている。一度感染すると、約20%の感染者はウィルスを排除することができるが、残りの人達は彼らの残りの人生においてHCVを保有することになる。10-20%の慢性的に感染した人たちは、最終的に肝臓を破壊する硬化症や癌に進展する。このウィルス性疾患は、汚染した血液、血液製剤、または汚染自他注射針によって非経口的に伝染し；またはセックスにより伝染し；または感染した母親または保菌者の母親から彼らの出生児に母子感染する。現在ではHCV感染の治療は、遺伝子組換えインターフェロン-α単独またはリバビリンなどのヌクレオシド類縁体との組み合わせを用いた免疫療法に限られており、それ故臨床上の利点も非常に限られている。
【０００６】
C型肝炎の原因はまだ非常に明確ではなく、肝細胞でHCVの複製が肝細胞の構造及び機能変化を起こすか、または肝細胞のタンパク合成を妨害したとき、肝細胞の変性および壊死を生じ、これはHCVが肝臓を直接傷害して、疾患に導く役割を果たしていることを示している。しかしながら、大抵の学者は細胞の免疫病態形成反応が重要な役割を果たしていると考えており、彼らはC型肝炎がB型肝炎と同じであって、組織浸潤細胞は主としてCD3+であり、細胞傷害性T細胞がHCVに感染した標的細胞を特異的に攻撃して肝細胞の障害に導くことを見いだした。急性C型肝炎であれ、慢性C型肝炎であれ、リバビリンと組み合わせたポリエチレングリコールインターフェロン（αnteまたはαore）が標準の治療法として用いられている。それはまたC型肝炎に対する唯一の有効な治療法と考えられている。ポリエチレングリコールインターフェロンは週に一度投与されるので、投与頻度は大きく減少し、患者にとって好都合である。ポリエチレングリコールインターフェロンは、週３回または一日おきの通常のインターフェロンに比べて長時間持続するペグインターフェロンとしても知られている。臨床試験において２種類のリバビリンと組み合わせた長時間持続のペグインターフェロンの直接比較は：12KDのポリエチレングリコールインターフェロン（αn2b）の再発率は40KDのポリエチレングリコールインターフェロン（ol2a）のものより明らかに低く、その理由は抗ウィルス活性と分子サイズに起因する薬物分布に関係していることを示している。一般に、ポリエチレングリコールの分子量が大きければ大きい程、抗ウィルス活性は低く、12KDのポリエチレングリコールインターフェロンの活性は40KDのペグインターフェロンのものより著しく高い；さらに、12KDのペグインターフェロンは体中に分布して、肝臓の主なウィルスを除去するのみならず、リンパ節、腎臓、脾臓、副腎および唾液腺などの他の肝臓外のウィルスも除去することができ、それ故休薬後の再発率が低くなると考えられている。40KDの巨大分子ポリエチレングリコールインターフェロンの分子は大き過ぎるので、血管と肝臓での分布に限られ、肝臓外ウィルスの除去には不利である。それは肝臓の負担を増加させて排泄を遅らせるだけでなく、腎臓から排泄されないことにより副作用が生じたときに中止することも困難になる。一般に、直接比較によるIDEAL試験結果の刊行物により、12KDポリエチレングリコールインターフェロン（α-2b）がC型肝炎の治療に好ましく用いられると考えられている。
【０００７】
現在、C型肝炎ウィルスに感染した人たちは限られた治療チョイスを有している。今では承認されている治療法は、遺伝子組換えインターフェロン-α単独またはリバビリンなどのヌクレオシド類縁体との組み合わせを用いた免疫療法である。この治療法は臨床効果が限定されていて、治療された患者の５０％だけがこの治療法に応答している。従って、新規でより効果のある治療法を開発し、HCV感染によって引き起こされたいまだ対処されていない医療ニーズを解決する必要がある。
【０００８】
抗HCV治療剤の開発ターゲットとして現在認定されている、可能性のある分子ターゲットとしては、これらに限定されないが、NS2-NS3自己プロテアーゼ、N3プロテアーゼ、N3巻き戻し酵素およびNS5Bポリメラーゼが挙げられる。RNA依存性RNAポリメラーゼは一本鎖RNAゲノム複製にとって絶対的に重要であって、このポリメラーゼは製薬化学者の著しい関心を引きつけている。NS5Bポリメラーゼのヌクレオシド阻害剤は、連鎖停止に導く非天然基質として使用することができる、またはポリメラーゼに競合的に結合するヌクレオチドの競合的阻害剤として使用することができる。連鎖停止剤として作用するために、ヌクレオシド類縁体は細胞に取り入れられて、in vivoで三リン酸エステルに転換し、ポリメラーゼヌクレオシドの結合サイト獲得のために争わなければならない。三リン酸エステルのこの転換は、通常細胞のキナーゼによって媒介される。細胞のキナーゼは、有望なヌクレオシドポリメラーゼ阻害剤に対して更なる構造上の要件を提唱する。残念ながら、これはHCV複製阻害剤としてのヌクレオシドの直接評価をin situリン酸化ができる細胞の分析に限られる。
【０００９】
一定の場合、ヌクレオシドの生物活性が１以上のキナーゼに対する貧弱な基質の性質によって妨害されるが、該基質の性質はヌクレオシドの活性三リン酸エステル形への転換に必要である。ヌクレオシドキナーゼによる一リン酸エステル類縁体の生成が、一般に三リン酸エステル化過程の律速段階と考えられている。ヌクレオシドから活性三リン酸エステル類縁体への代謝の第一ステップにおけるリン酸エステル化を避けるために、安定なリン酸エステルプロドラッグ生成物が報告されている。ヌクレオシドアミノリン酸エステルプロドラッグは、活性ヌクレオシド三リン酸の前駆体であり、全細胞がウィルスに感染したときに、ウィルス複製の阻害に用いることができる。
【００１０】
実行可能な治療剤としてのヌクレオシドを制限する因子は、また、貧弱な物理化学および薬物動態の性質にある。これらの不十分な性質は薬物の腸管吸収を限定し、標的組織や細胞への取り込みを制限する。それらの性質を改善するために、ヌクレオシドのプロドラッグが用いられる。ヌクレオシドアミノリン酸エステルプロドラッグが、ヌクレオシドの全身の吸収を改善したことが実証されている。さらに、これらの「オリジナルのヌクレオチド」のアミノリン酸エステルは、中性の脂溶性基で部分的にマスクされているため細胞への取り込みと輸送を最適化する適当な分配係数を持つことができ、それにより、単一の親ヌクレオシド単独に比べてヌクレオシド類縁体の細胞内濃度を改善することができる。リン酸エステル部分の加水分解を媒介する酵素はヌクレオシド一リン酸エステルをもたらすが、最初のモノリン酸化律速段階を必要としない。
最近では、ヌクレオシド一リン酸エステル類縁体に関する特許は、主としてPHARMASSETの特許文献１および２、CHIMERIXの特許文献３、ALIOS BIOPHARMAの特許文献４および５、MERCK SHARP & DOHME CORPの特許文献６〜８である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１１】
【特許文献１】WO2008121634A2
【特許文献２】WO2010075517A2
【特許文献３】WO2010135520A1
【特許文献４】WO2012040127A1
【特許文献５】WO2012088155A1
【特許文献６】WO2012142075A1
【特許文献７】WO2012142085A1
【特許文献８】WO2013009737A1
【００１２】
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
本発明者らは、研究中に一群のウラシルヌクレオチド類縁体を見い出した。これらの新規化合物は、RNA依存性のRNAウィルス複製阻害剤であり、HCV NS5Bポリメラーゼ阻害剤、HCV複製阻害剤として使用することができ、そして哺乳類のC型肝炎感染症の治療に使用できる。それは広い応用への展望を有し、新しい抗ウィルス薬の出現に発展することが期待されている。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本発明の目的は、式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体、立体異性体、またはそれらの薬学的に許容される塩を提供することである：
【化１】
2017502975.tif 000003
式中：
Zは、酸素およびイオウから成る群から選択され；
Yは、水素およびアセチルから成る群から選択され；
R1は、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C1-8ハロアルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5、-N(R5)-C(O)OR5、-C0-8-S-R5、-SiR5R6R7および-GeR5R6R7から成る群から選択されるか、
またはR1はフェニル環に隣接する結合した炭素原子と一緒になって５〜７員炭素環および５〜７員複素環を形成し、
該C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、C5-10アリール、５〜１０員ヘテロアリール、５〜７員炭素環および５〜７員複素環は、それぞれ任意に、ハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 および-N(R5)-C(O)OR5から成る群から独立して選択される１以上の基でさらに置換されていてもよく；
R２は、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 および-N(R5)-C(O)OR5から成る群から選択され、
該C1-8アルキル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、C5-10アリールおよび５〜１０員ヘテロアリールは、それぞれ任意に、ハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 および-N(R5)-C(O)OR5から成る群から独立して選択される１以上の基でさらに置換されていてもよく；
R３は、任意に、ハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 および-N(R5)-C(O)OR5から成る群から独立して選択される１以上の基でさらに置換されていてもよい、水素、C1-8アルキル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、C5-10アリールおよび５〜１０員ヘテロアリールから成る群から選択され；
R４は、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C1-8ハロアルキル、C３-8シクロアルキル、C３-8シクロアルキルメチル、C1-8ハロアルコキシ、C1-8ハロアルキルチオ、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 および-N(R5)-C(O)OR5から成る群から選択され；
R５、R６、R７は、それぞれ独立して、水素、C1-４アルキルおよびC３-8シクロアルキルから成る群から選択され；
mは、０，１，２，３および４であり；
ｒは、０，１および２である。
【００１５】
本明細書において、「５〜７員炭素環」とは、５〜７の炭素原子を含む全て炭素の環をいい、これらに限定されないが、シクロアルキル基やアリール基がふくまれる。本明細書において、「５〜７員複素環」とは、窒素、酸素、またはS(O)r（式中、ｒは、０，１，２の整数である）のヘテロ原子から選択される１以上の環原子と、残りの環原子が炭素である、５〜７個の環原子を含む環状基をいう。
【００１６】
本発明の好ましい実施態様において、Zが酸素から選択される場合、式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体は式（II）のウラシルヌクレオチド類縁体であり、
【化２】
2017502975.tif 000004
式中、Y、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、mおよびrは、式（I）で定義した通りである。
【００１７】
本発明のさらに好ましい実施態様、式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体、立体異性体、またはそれらの薬学的に許容される塩において、R1は、C1-8アルキル、C1-8ハロアルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5、-N(R5)-C(O)OR5、-C0-8-S-R5、-SiR5R6R7および-GeR5R6R7から成る群から選択され、
該C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、C5-10アリールおよび５〜１０員ヘテロアリールは、それぞれ任意に、ハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 または-N(R5)-C(O)OR5から成る群から独立して選択される１以上の基でさらに置換されていてもよく；Y、R2、R3、R4、R5、R6、R7、mおよびrは、式（I）で定義した通りである。
【００１８】
本発明のさらに好ましい実施態様、式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体、立体異性体、またはそれらの薬学的に許容される塩において、R1は、C1-8アルキル、C1-8ハロアルキル、C２-8アルケニルおよびC２-8アルキニルから成る群から選択され、
該C1-8アルキル、C1-8ハロアルキル、C２-8アルケニルおよびC２-8アルキニルは、それぞれ任意に、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシおよび５〜１０員ヘテロアリールチオから成る群から独立して選択される１以上の基でさらに置換されていてもよく；Y、R2、R3、R4、R5、R6、R7、mおよびrは、式（I）で定義した通りである。
【００１９】
本発明のさらに好ましい実施態様において、式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体または薬学的に許容される塩は；
【化３】
2017502975.tif 000005
から成る群から選択される。
【００２０】
本発明の最も好ましい実施態様において、式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体または薬学的に許容される塩は；
【化４】
2017502975.tif 000006
から成る群から選択される。
【００２１】
本発明のさらに好ましい実施態様、式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩において、R1は、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオから成る群から選択され、
該C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、C5-10アリールおよび５〜１０員ヘテロアリールは、それぞれ任意に、ハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 および-N(R5)-C(O)OR5から成る群から独立して選択される１以上の基でさらに置換されていてもよく；
Y、R2、R3、R4、R5、R6、R7、mおよびrは、式（I）で定義した通りである。
【００２２】
本発明のさらに好ましい実施態様において、式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体または薬学的に許容される塩は；
【化５】
2017502975.tif 000007
から成る群から選択される。
【００２３】
本発明の最も好ましい実施態様において、式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体または薬学的に許容される塩は；
【化６】
2017502975.tif 000008
から成る群から選択される。
【００２４】
本発明のさらに好ましい実施態様、式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩において、R1は、-C0-8-S-R5、-SiR5R6R7および-GeR5R6R7から成る群から選択され、
Y、R2、R3、R4、R5、R6、R7、mおよびrは、式（I）で定義した通りである。
【００２５】
本発明のさらに好ましい実施態様において、式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体または薬学的に許容される塩は；
【化７】
2017502975.tif 000009
から成る群から選択される。
【００２６】
本発明の最も好ましい実施態様において、式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体または薬学的に許容される塩は；
【化８】
2017502975.tif 000010
から成る群から選択される。
【００２７】
本発明のさらに好ましい実施態様、式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩において、R1は、フェニル環に隣接する結合した炭素原子と一緒になって５〜７員炭素環および５〜７員複素環を形成し、
該５〜７員炭素環および５〜７員複素環は、それぞれ任意に、ハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 および-N(R5)-C(O)OR5から成る群から独立して選択される１以上の基でさらに置換されていてもよく；
Y、R3、R4、R5、R6、R7、mおよびrは、式（I）で定義した通りである。
【００２８】
本発明のさらに好ましい実施態様、式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩において、R1は、フェニル環に隣接する結合した炭素原子と一緒になって：
【化９】
2017502975.tif 000011
から成る群から選択される５〜７員炭素環、５〜７員複素環を形成し、
該５〜７員炭素環および５〜７員複素環は、それぞれ任意に、ハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 および-N(R5)-C(O)OR5から成る群から独立して選択される１以上の基でさらに置換されていてもよく；
Y、R3、R4、R5、R6、R7、mおよびrは、式（I）で定義した通りである。
【００２９】
本発明の最も好ましい実施態様、式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩において、R1は、フェニル環に隣接する結合した炭素原子と一緒になって５〜７員炭素環および５〜７員複素環を形成し、そして該化合物は；
【化１０】
2017502975.tif 000012
から成る群から選択される。
【００３０】
本発明のさらに好ましい実施態様、式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩において、Zはイオウから選択され、そして式（I）の化合物は式（III）の化合物であり、
【化１１】
2017502975.tif 000013
Y、R１、R２、R3、R4、R5、R6、R7、mおよびrは、式（I）で定義した通りである。
【００３１】
本発明のさらに好ましい実施態様、式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体、または薬学的に許容される塩において、R4はハロゲン、ヒドロキシ、チオール、C1-8アルキル、C1-8ハロアルキル、C３-8シクロアルキル、C３-8シクロアルキルメチル、C1-8ハロアルコキシおよびC1-8ハロアルキルチオから成る群から選択され；
Y、R１、R２、R3、R5、R6、R7、mおよびrは、式（I）で定義した通りである。
【００３２】
本発明のさらに好ましい実施態様、式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体または薬学的に許容される塩において、R3は、任意に、ハロゲン、ヒドロキシ、チオール、C1-8アルキル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5または-C0-8-O-C(O)R5から成る群から独立して選択される１以上の基でさらに置換されていてもよい、水素、C1-8アルキル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、C5-10アリールおよび５〜１０員ヘテロアリールから成る群から選択され；R4は、フッ素、メチル、トリフルオロメチル、シクロプロピルおよびシクロプロピルメチルから成る群から選択され；Y、R１、R２、R5、R6、R7、mおよびrは、式（I）で定義した通りである。
【００３３】
本発明のさらに好ましい実施態様、式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体または薬学的に許容される塩において、R3は、任意に、ハロゲン、ヒドロキシ、チオール、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5および-C0-8-O-C(O)R5から成る群から独立して選択される１以上の基でさらに置換されていてもよい、水素、C1-4アルキル、シクロプロピル、シクロヘキシル、およびフェニルから成る群から選択され；R4は、メチルから成る群から選択され；Y、R１、R２、R5、R6、R7、mおよびrは、式（I）で定義した通りである。
【００３４】
本発明のさらに好ましい実施態様、式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体または薬学的に許容される塩において、R１は、水素、C1-8アルキル、C1-8ハロアルキル、C２-8アルケニルおよびC２-8アルキニルから成る群から選択され、該C1-8アルキル、C1-8ハロアルキル、C２-8アルケニルおよびC２-8アルキニルは、それぞれ任意に、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシおよび５〜１０員ヘテロアリールチオから成る群から独立して選択される１以上の基でさらに置換されていてもよく；Y、R2、R5、R6、R7、mおよびrは、式（I）で定義した通りである。
【００３５】
本発明のさらに好ましい実施態様において、式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体または薬学的に許容される塩は：
【化１２】
2017502975.tif 000014
から成る群から選択される。
【００３６】
本発明のさらに好ましい実施態様、式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体または薬学的に許容される塩において、R１は、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオから成る群から選択され、該C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、C5-10アリールおよび５〜１０員ヘテロアリールは、それぞれ任意に、ハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 および-N(R5)-C(O)OR5から成る群から独立して選択される１以上の基でさらに置換されていてもよく；Y、R2、R5、R6、R7、mおよびrは、式（I）で定義した通りである。
【００３７】
本発明のさらに好ましい実施態様において、式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体または薬学的に許容される塩は：
【化１３】
2017502975.tif 000015
から成る群から選択される。
【００３８】
本発明のさらに好ましい実施態様、式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体または薬学的に許容される塩において、R１は、-C0-8-S-R5、-SiR5R6R7および-GeR5R6R7から成る群から選択され；Y、R2、R5、R6、R7、mおよびrは、式（I）で定義した通りである。
【００３９】
本発明のさらに好ましい実施態様において、式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体または薬学的に許容される塩は：
【化１４】
2017502975.tif 000016
から成る群から選択される。
【００４０】
本発明のさらに好ましい実施態様、式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体または薬学的に許容される塩において、R１は、フェニル環に隣接する結合した炭素原子と一緒になって５〜７員炭素環および５〜７員複素環を形成し、該５〜７員炭素環および５〜７員複素環は、それぞれ任意に、ハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 または-N(R5)-C(O)OR5から成る群から独立して選択される１以上の基でさらに置換されていてもよく；Y、R2、R5、R6、R7、mおよびrは、式（I）で定義した通りである。
【００４１】
本発明のさらに好ましい実施態様、式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体または薬学的に許容される塩において、R１は、フェニル環に隣接する結合した炭素原子と一緒になって：
【化１５】
2017502975.tif 000017
から成る群から選択される５〜７員炭素環および５〜７員複素環を形成し、
該５〜７員炭素環および５〜７員複素環は、それぞれ任意に、ハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 および-N(R5)-C(O)OR5から成る群から独立して選択される１以上の基でさらに置換されていてもよく；
Y、R2、R5、R6、R7、mおよびrは、式（I）で定義した通りである。
【００４２】
本発明のさらに好ましい実施態様において、式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体または薬学的に許容される塩は、：
【化１６】
2017502975.tif 000018
から成る群から選択される。
【００４３】
本発明のさらに好ましい実施態様、式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体または薬学的に許容される塩において、該立体異性体はS-配置であり、その構造は：
【化１７】
2017502975.tif 000019
である。
【００４４】
本発明のさらに好ましい実施態様において、式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体または薬学的に許容される塩は：
【化１８】
2017502975.tif 000020
から成る群から選択される。
【００４５】
さらに、本発明の他の目的は、以下のステップを含む、式（I）のウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体または薬学的に許容される塩の製造方法を提供することである：
【化１９】
2017502975.tif 000021
Yがアセチルから選択されるとき、該製造方法は、さらに次のステップ：
【化２０】
2017502975.tif 000022
を含んでいてもよく、このステップはその立体異性体を得るためにカラムクロマトグラフィーの工程を含んでいてもよいか、またはその立体異性体を得るために次のステップ：
【化２１】
2017502975.tif 000023
を含んでいてもよく、
Yがアセチルから選択されるとき、該製造方法は、さらにステップ：
【化２２】
2017502975.tif 000024
を含んでいてもよく、
式中、Y、R１、R２、R3、R4、R5、R6、R7、mおよびrは、式（I）で定義した通りである。
【００４６】
本発明の他の態様は、ウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体または薬学的に許容される塩の治療上の有効量、および薬学的に許容される担体を含有する医薬組成物を提供することである。
【００４７】
本発明の他の態様は、C型肝炎ウィルス、A型肝炎ウィルス、西ナイルウィルス、黄熱病ウィルス、デングウィルス、ライノウィルス、ポリオウィルス、ウシウィルス性下痢症ウィルスまたは日本脳炎ウィルスの感染による疾患の治療薬の製造におけるウラシルヌクレオチド類縁体、それらの立体異性体または薬学的に許容される塩、および上記医薬組成物の使用を提供することである。
本発明の詳細な説明
【００４８】
特に言及しない限り、本明細書および特許請求の範囲で使用される用語は以下の意味を有する。
「C1-8アルキル」は、１〜８個の炭素原子を含む脂肪族直鎖または分岐鎖炭化水素基をいい、該炭化水素基は、飽和脂肪族炭化水素基をいう。「C0-8アルキル」は、０個の炭素原子またはC1-8アルキルをいう。例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｎ−ペンチル、１，１−ジメチルプロピル、１，２−ジメチルプロピル、２，２−ジメチルプロピル、１−エチルプロピル、２−メチルブチル、３−メチルブチル、ｎ−ヘキシル、１−エチル−２−メチルプロピル、１，１，２−メチルプロピル、１，１−ジメチルブチル、１，２−ジメチルブチル、２，２−ジメチルブチル、１，３−ジメチルブチル、２−エチルブチル、２−メチルペンチル、３−メチルペンチル、４−メチルペンチル、２，３−ジメチルブチル、ｎ−ヘプチル、２−メチルヘキシル、３−メチルヘキシル、４−メチルヘキシル、５−メチルヘキシル、２，３−ジメチルペンチル、２，４−ジメチルペンチル、２，２−ジメチルペンチル、３，３−ジメチルペンチル、２−エチルペンチル、３−エチルペンチル、ｎ−オクチル、２，３−ジメチルヘキシル、２，４−ジメチルヘキシル、２，５−ジメチルヘキシル、２，２−ジメチルヘキシル、３，３−ジメチルヘキシル、４，４−ジメチルヘキシル、２−エチルヘキシル、３−エチルヘキシル、４−エチルヘキシル、２−メチル−２−エチルペンチル、２−メチル−３−エチルペンチルおよびそれらの種々の分岐鎖異性体などが挙げられる。
該アルキル基は置換されていても、無置換であってもよい。置換されている場合、置換基はどの置換可能な位置で置換されてもよく、好ましくは置換基は、任意にハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 および-N(R5)-C(O)OR5から成る群から独立して選択される１以上の基である。
【００４９】
「シクロアルキル」は、飽和または部分的に不飽和の単環式または多環式炭化水素基をいい、「C3-8シクロアルキル」は３〜８個の炭素原子を含有するシクロアルキル基をいい、「５〜１０員シクロアルキル」は５〜１０個の炭素原子を含有するシクロアルキル基をいい、例えば、単環式シクロアルキル基の非限定的な例としてはシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、シクロヘキサジエニル、シクロヘプチル、シクロヘプタトリエニル、シクロオクチル等が挙げられる。
多環式シクロアルキル基としては、スピロ環、縮合環および架橋環を持つシクロアルキルが挙げられる。「スピロシクロアルキル」は、１つの共通の炭素原子（スピロ原子と呼ばれる）を通じて接続する環を持つ多環式基をいい、これらの環は１以上の二重結合を有してもよいが、環のどれも完全に共役したπ-電子系は持たない。環の間で共有されたスピロ原子の数により、スピロシクロアルキルはモノ-スピロシクロアルキル、ジ-スピロシクロアルキルおよびポリ-スピロシクロアルキルに分けられ、モノ-スピロシクロアルキルの非限定的な例としては：
2017502975.tif 000025
が挙げられる。
【００５０】
「縮合シクロアルキル」は、系内の各環が他の環と隣り合った炭素原子対を共有している全て炭素の多環式基をいい、１以上の環は１以上の二重結合を有してもよいが、環のどれも完全に共役したπ-電子系は持たない。環の数により、縮合シクロアルキルは二環式、三環式、四環式および多環式縮合シクロアルキルに分けられ、縮合シクロアルキルの非限定的な例としては：
2017502975.tif 000026
が挙げられる。
【００５１】
「架橋シクロアルキル」は、系内のどの２つの環も２つの離れた炭素原子を共有している全て炭素の多環式基をいい、これらの環は１以上の二重結合を有していてもよいが、環のどれも完全に共役したπ電子系は持たない。環の数により、架橋シクロアルキルは二環式、三環式、四環式および多環式架橋シクロアルキルに分けられ、縮合シクロアルキルの非限定的な例としては：
2017502975.tif 000027
が挙げられる。
【００５２】
シクロアルキルはアリール、ヘテロアリールまたはヘテロシクリルの環に縮合してもよく、親構造と結合した環がシクロアルキルであり、非限定的な例としてはインダニル、テトラヒドロナフチル、ベンゾシクロヘプチル等が挙げられる。
【００５３】
シクロアルキルは置換されていても、無置換であってもよい。置換されている場合、好ましくは置換基は、任意にハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 および-N(R5)-C(O)OR5から成る群から独立して選択される１以上の基である。
【００５４】
「ヘテロシクリル」は、飽和または部分的に不飽和の単環式または多環式炭化水素基をいい、１以上の環原子が窒素、酸素およびS(O)r（式中、rは０、１または２である）から成る群から選ばれるヘテロ原子であるが、環状部分は-O-O-、-O-S-または-S-S-を含まず、残りの環原子は炭素である。「５〜１０員ヘテロシクリル」は５〜１０個の環原子を含むシクリル基をいい、「３〜８員ヘテロシクリル」は３〜８個の環原子を含むシクリル基をいう。
単環式ヘテロシクリルの例としては、限定されるわけではないが、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ホモピペラジニルなどが挙げられる。
多環式ヘテロシクリルとしてはスピロ環、縮合環および架橋環を有するヘテロシクリルが挙げられる。「スピロヘテロシクリル」は、環の間で共有される１つの共通の原子（スピロ原子と呼ばれる）を通じて接続する環を持つ多環式ヘテロシクリル基をいい、１以上の環原子が窒素、酸素およびS(O)r（式中、rは０、１または２である）から成る群から選ばれるヘテロ原子であり、残りの環原子は炭素である。これらの環は１以上の二重結合を含んでいてもよいが、環のどれも完全に共役したπ電子系は持たない。環の間で共有するスピロ原子の数により、スピロヘテロシクリルはモノスピロヘテロシクリル、ジスピロヘテロシクリルおよびポリスピロヘテロシクリルに分けられ、スピロヘテロシクリルの非限定的な例としては： 
2017502975.tif 000028
が挙げられる。
【００５５】
「縮合ヘテロシクリル」は、系内の各環が他の環と隣り合った原子対を共有している多環式ヘテロシクリル基をいい、１以上の環は１以上の二重結合を有していてもよいが、環のどれも完全に共役したπ電子系を持たず、そして１以上の環原子は窒素、酸素およびS(O)r式中、ｒは０〜２の整数である）から成る群から選ばれるヘテロ原子であり、残りの環原子は炭素である。環の数により、縮合ヘテロシクリルは二環式、三環式、四環式および多環式縮合ヘテロシクリルに分けられ、縮合ヘテロシクリルの非限定的な例としては： 
2017502975.tif 000029
が挙げられる。
【００５６】
「架橋ヘテロシクリル」は、系内のどの２つの環も２つの離れた炭素原子を共有している多環式ヘテロシクリル基をいう。該環は１以上の二重結合を有してもよいが、環のどれも完全に共役したπ電子系を持たず、１以上の環原子は窒素、酸素およびS(O)r（式中、rは、０、１または２である）から成る群から選ばれるヘテロ原子であり、残りの環原子は炭素である。環の数により、架橋ヘテロシクリルは二環式、三環式、四環式および多環式架橋ヘテロシクリルに分けられ、架橋ヘテロシクリルの非限定的な例としては：
2017502975.tif 000030
が挙げられる。
【００５７】
ヘテロシクリルはアリール、ヘテロアリールまたはシクロアルキルの環に縮合してもよく、親構造と結合した環がヘテロシクリルであり、非限定的な例としては
2017502975.tif 000031
が挙げられる。
ヘテロシクリルは置換されていても、無置換であってもよい。置換されている場合、好ましくは置換基は、任意にハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 および-N(R5)-C(O)OR5から成る群から独立して選択される１以上の基である。
【００５８】
「アリール」は、共役π電子系を持った全て炭素の単環式環または多環式縮合環（すなわち、系内の環は隣り合った炭素原子対を共有している）をいう。「５〜７員アリール」はフェニルやナフチルなどの５〜７個の炭素原子を含む全て炭素のアリールをいう。該アリールはヘテロアリール、ヘテロシクリルまたはシクロアルキルの環に縮合してもよく、親構造に結合した環がアリールであり、非限定的な例としては：
2017502975.tif 000032
が挙げられる。
アリールは置換されていても、無置換であってもよい。置換されている場合、好ましくは置換基は、任意にハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 および-N(R5)-C(O)OR5から成る群から独立して選択される１以上の基である。
【００５９】
「ヘテロアリール」は、１〜４個のヘテロ原子を含むヘテロ芳香族系をいい、ヘテロ原子は窒素、酸素またはS(O)ｒ（式中、ｒは０、１または２である）から成る。「５〜７員ヘテロアリール」は５〜７個の環原子を含むヘテロ芳香族系をいい、「５〜１０員ヘテロアリール」は５〜１０個の環原子を含むヘテロ芳香族系をいい、フリル、チエニル、ピリジル、ピロリル、N-アルキルピロリル、ピリミジニル、ピラジニル、イミダゾリル、テトラゾリルなどである。ヘテロアリールはアリール、ヘテロシクリルまたはシクロアルキルの環に縮合してもよく、親構造に結合した環がヘテロアリールであり、非限定的な例としては：
2017502975.tif 000033
が挙げられる。
ヘテロアリールは置換されていても、無置換であってもよい。置換されている場合、好ましくは置換基は、任意にハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 および-N(R5)-C(O)OR5から成る群から独立して選択される１以上の基である。
【００６０】
「アルケニル」は少なくとも２つの炭素原子と少なくとも１つの炭素-炭素二重結合を有する上記で定義したアルキル基をいい、「C2-8アルケニル」は２〜８個の炭素原子を含む直鎖および分岐鎖アルケニル、例えばビニル、１‐プロペニル、２‐プロペニル、１‐、２‐および３‐ブテニル等をいう。
アルケニルは置換されていても、無置換であってもよい。置換されている場合、好ましくは置換基は、任意にハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 および-N(R5)-C(O)OR5から成る群から独立して選択される１以上の基である。
【００６１】
「アルキニル」は少なくとも２つの炭素原子と少なくとも１つの炭素-炭素三重結合を有する上記で定義したアルキル基をいい、「C2-8アルキニル」は２〜８個の炭素原子を含む直鎖および分岐鎖アルキニル、例えばエチニル、１‐プロピニル、２‐プロピニル、１‐、２‐および３‐ブチニル等をいう。
アルキニルは置換されていても、無置換であってもよい。置換されている場合、好ましくは置換基は、任意にハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 および-N(R5)-C(O)OR5から成る群から独立して選択される１以上の基である。
【００６２】
「アルコキシ」は、−O−（アルキル）をいい、該アルキルは上記で定義した通りであり、「C1-8アルコキシ」は１〜８個の炭素原子を含むアルコキシをいい、非限定的な例としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ等が挙げられる。
アルコキシは置換されていても、無置換であってもよい。置換されている場合、好ましくは置換基は、任意にハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 および-N(R5)-C(O)OR5から成る群から独立して選択される１以上の基である。
【００６３】
「シクロアルコキシ」は、−O−（無置換シクロアルキル）をいい、該シクロアルキルは上記で定義した通りであり、「C3-8シクロアルコキシ」は３〜８個の炭素原子を含むシクロアルコキシをいい、非限定的な例としては、シクロプロピルオキシ、シクロブチルオキシ、シクロペンチルオキシ、シクロヘキシルオキシ等が挙げられる。
シクロアルコキシは置換されていても、無置換であってもよい。置換されている場合、好ましくは置換基は、任意にハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、ニトロ、アジド、C1-8アルキル、C２-8アルケニル、C２-8アルキニル、C３-8シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、３〜８員ヘテロシクリルオキシ、３〜８員ヘテロシクリルチオ、C5-10アリール、C5-10アリールオキシ、C5-10アリールチオ、５〜１０員ヘテロアリール、５〜１０員ヘテロアリールオキシ、５〜１０員ヘテロアリールチオ、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R5)-C(O)R5 および-N(R5)-C(O)OR5から成る群から独立して選択される１以上の基である。
【００６４】
Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル基とは、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素で任意に置換されている炭素原子数が１〜８のアルキル基を意味し、例えば、ジフルオロメチル基、ジクロロメチル基、ジブロモロメチル基、トリフルオロメチル基、トリクロロメチル基、トリブロモロメチル基等が挙げられる。
Ｃ１〜Ｃ８ハロアルコキシ基とは、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素で任意に置換されている炭素原子数が１〜８のアルコキシ基を意味し、例えば、ジフルオロメトキシ基、ジクロロメトキシ基、ジブロモロメトキシ基、トリフルオロメトキシ基、トリクロロメトキシ基、トリブロモロメトキシ基等が挙げられる。
「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素をいう。
「任意の」または「任意に」は、続いて記載した出来事や状況が生じても、生じなくてもよいことを意味し、その記載は出来事や状況の事例が生じても、生じなくてもよいことを含んでいる。例えば、「アルキルで任意に置換されたヘテロシクリル」は、アルキル基が存在しても、しなくてもよいことを意味し、その意味はヘテロシクリルがアルキルで置換されているかまたは置換されていない場合を含んでいる。
「置換された」は、基内の１以上の水素原子、好ましくは５まで、より好ましくは１〜３の水素原子が、相当する数の置換基で独立して置換されていることをいう。置換基は可能な位置にのみ存在することは言うまでもない。当業者は過剰な努力を払うことなく経験や理論により置換が可能かどうか判断することができる。例えば、フリーの水素を持つアミノまたはヒドロキシル基と不飽和結合を持つ炭素原子（例、オレフィン）の組合せは不安定である。
【００６５】
「医薬組成物」は、本発明記載の１以上の化合物またはそれらの生理学的/薬学的に許容される塩またはプロドラッグおよび生理学的/薬学的に許容される担体や賦形剤などの他の成分を含む合物をいう。医薬組成物の目的は、生体への薬物投与を容易にすることであり、これにより活性成分の吸収を助け、生物活性を実現する。
【００６６】
以下の実施例は本発明をさらに説明するためのものであって、これらの実施例は本発明の範囲を限定するものではない。
化合物の構造は、核磁気共鳴（NMR）および/または液体クロマトグラフィー‐マススペクトル（LC-MS）で同定した。
NMRケミカルシフト（δ）は１０−６（ｐｐｍ）で示した。NMRはBruker AVANCE-400で測定した。溶媒は重水素化ジメチルスルホキシド（DMSO-d6）、重水素化メタノール（ＣＤ３ＯＤ）および重水素化クロロホルム（ＣＤＣｌ３）であった。内部標準はテトラメチルシラン（ＴＭＳ）であった。
LC-MSはAgilent 1200 Infinity Series 質量分析計で測定した。高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）はAgilent 1200DAD高圧液体クロマトグラフィー装置（Sunfire C18 150×4.6 mmクロマトグラフィーカラム）およびWaters  2695-2996高圧液体クロマトグラフィー装置(Gimini C18 150×4.6 mm  クロマトグラフィーカラム)で測定した。
薄層シリカゲルクロマトグラフィー（ＴＬＣ）には、プレートは、Yantai Huanghai HSGF254 または Qingdao GF254シリカゲルプレートを使用した。ＴＬＣで使用したプレートの寸法は０．１５ｍｍ−０．２ｍｍで、生成物の精製で使用したプレートの寸法は０．４ｍｍ−０．５ｍｍであった。カラムクロマトグラフィーでは、担体としてYantai Huanghai２００−３００メッシュのシリカゲルを用いた。
本発明の実施例で用いた公知の出発物質は、市場から購入できるか、先行技術における公知の方法により合成できる。
特に明記しない限り、本発明の反応は、連続機械撹拌および乾燥した窒素またはアルゴン雰囲気下で行った。
アルゴンまたは窒素雰囲気は、反応フラスコが約１Ｌのアルゴンまたは窒素の風船を備えていることをいう。水素雰囲気は、反応フラスコが約１Ｌの水素の風船を備えていることをいう。
実施例で特に明記しない限り、溶液は水溶液をいい、反応温度は室温である。室温は適当な反応温度で、２０℃−３０℃の範囲である。
実施例における反応の進行は薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）または液体クロマトグラフィー -質量分析  （LC-MS）でモニターし、展開溶媒の系は：ジクロロメタンとメタノール系、ｎ−ヘキサンと酢酸エチル系、石油エテールと酢酸エチル系、およびアセトンである。溶媒の容積比は化合物の極性により調節した。カラムクロマトグラフィーおよび薄層クロマトグラフィーによる化合物精製の溶出系としては：Ａ：ジクロロメタンとメタノール系、Ｂ：ｎ−ヘキサンと酢酸エチル系、Ｃ： ジクロロメタンと酢酸エチル系、Ｄ： 酢酸エチルとメタノール系が挙げられる。溶媒の容積比は化合物の極性により調節し、そして少量のアンモニアおよび酢酸が添加できる。
【実施例１】
【００６７】
ステップ１  
イソプロピル（（2-シクロプロピルフェノキシ）（4-ニトロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000034
4-ニトロフェニルホスホロジクロリデート(320 mg, 1.25 mmol)をCH2Cl2(2.5 mL)に溶解した。この溶液を-78℃まで冷却した後、2-シクロプロピルフェノール(185 mg, 1.38 mmol)及びTEA(192 μL, 1.38 mmol)のCH2Cl2溶液(2.5 mL)を滴下した。この混合物を同温度で30分間撹拌した後、徐々に0℃まで加熱した。L-アラニンイソプロピルエステル塩酸塩(210 mg, 1.25 mmol)のCH2Cl2溶液(2.5 mL)を0℃に冷却し、前記の混合物を滴下した後、TEA(366 μL, 2.63 mmol)を滴下した。この反応混合物を0℃で1 時間撹拌した。反応溶液を減圧下で濃縮し、残渣にEtOAc(20 mL)を加えた。生成した白色固体を濾過し、濾液を濃縮し、黄色の油状液体を得た。これをカラムクロマトグラフィー (溶離液:PE:EtOAc=5:1)で精製し、生成物イソプロピル（（2-シクロプロピルフェノキシ）（4-ニトロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(395 mg, 70%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.16-8.23 (m, 2H), 7.33-7.42 (m, 3H), 7.05-7.15 (m, 2H), 6.86-6.93 (m, 1H), 4.95-5.04 (m, 1H), 3.95-4.18 (m, 2H), 2.02-2.11 (m, 1H), 1.34-1.43 (m, 3H), 1.17-1.30 (m, 6H), 0.83-0.98 (m, 2H), 0.61-0.72 (m, 2H).
ステップ２
イソプロピル ((2-シクロプロピルフェノキシ)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)ホスホリル)-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000035
1-（（2R、3R、4R、5S）-3-フルオロ-4-ヒドロキシ-5-（ヒドロキシメチル）-3-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）ピリミジン-2,4(1H,3H）-ジオン(58 mg, 0.22 mmol)をTHF(2 mL)及びNMP(0.6 mL)の混合溶媒に溶解した。水浴の中でtBuMgCl溶液(1 M, 0.45 mL, 0.45 mmol)を滴下し、この混合物を室温で10 分間撹拌した。イソプロピル（（2-シクロプロピルフェノキシ）（4-ニトロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(200 mg, 0.45 mmol)のTHF溶液(1.5 mL)を滴下し、反応混合物を55℃で終夜撹拌した。反応混合物を室温まで冷却し後、メタノール(1 mL)を加え、反応を停止させた。反応溶液を減圧下で濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: CH2Cl2: MeOH=30:1)で精製し、生成物イソプロピル ((2-シクロプロピルフェノキシ)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)ホスホリル)-L-アラニネート(15 mg, 12%, エピマー比SP/RP = 4.1:1)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.80 (s, 1H), 7.44 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.06-7.18 (m, 2H), 6.89-6.95 (m, 1H), 6.17 (d, J = 19.6 Hz, 1H), 5.67 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.95-5.07 (m, 1H), 4.43-4.60 (m, 2H), 3.81-4.16 (m, 4H), 2.04-2.15 (m, 1H), 1.18-1.41 (m, 12H), 0.93-1.02 (m, 2H), 0.64-0.77 (m, 2H);
31P NMR (162 MHz, CDCl3): δ 4.40, 3.50;
MS m/z (ESI): 570.1 [M+H]+.
【実施例２】
【００６８】
ステップ１ 
イソプロピル（（3-シクロプロピルフェノキシ）（4-ニトロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000036
4-ニトロフェニルホスホロジクロリデート(1.950 g, 7.62 mmol)をCH2Cl2(15 mL)に溶解した。この溶液を-78℃まで冷却した後、3-シクロプロピルフェノール(1.124 g, 8.38 mmol)及びTEA(1.17 mL, 8.39 mmol)のCH2Cl2溶液(15 mL)を滴下した。この混合物を同温度で30分間撹拌した後、徐々に0℃まで加熱した。L-アラニンイソプロピルエステル塩酸塩(1.279 g, 7.63 mmol)のCH2Cl2溶液(15 mL)を0℃まで冷却し、前記混合物を滴した後、TEA(2.23 mL, 16.0 mmol)を滴下した。この反応混合物を0℃で1時間撹拌した。反応溶液を減圧下で濃縮し、残渣にEtOAc(30 mL)を加えた。生成した白色固体を濾過し、濾液を濃縮し、黄色の油状液体を得た。これをカラムクロマトグラフィー(溶離液:PE:EtOAc=4.5:1)で精製し、生成物イソプロピル（（3-シクロプロピルフェノキシ）（4-ニトロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(2.905 g, 85%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.17-8.26 (m, 2H), 7.33-7.44 (m, 2H), 7.15-7.23 (m, 1H), 6.96-7.04 (m, 1H), 6.86-6.94 (m, 2H), 4.93-5.05 (m, 1H), 3.92-4.18 (m, 2H), 1.80-1.91 (m, 1H), 1.38 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.18-1.28 (m, 6H), 0.93-0.99 (m, 2H), 0.63-0.69 (m, 2H).
ステップ２
イソプロピル((3-シクロプロピルフェノキシ)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)ホスホリル)-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000037
1 -（（2R、3R、4R、5S）-3-フルオロ-4-ヒドロキシ-5-（ヒドロキシメチル）-3-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）ピリミジン-2,4（1H,3H）-ジオン(272 mg, 1.05 mmol)をTHF(8 mL)及びNMP(2.7 mL)の混合溶媒に溶解した。水浴の中でtBuMgCl 溶液(1 M, 2.1 mL, 2.10 mmol)を滴下し、この混合物を室温で10分間撹拌した。イソプロピル（（3-シクロプロピルフェノキシ）（4-ニトロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(938 mg, 2.09 mmol)のTHF溶液(6 mL)を滴下し、反応混合物を55℃で終夜撹拌した。この反応混合物を室温まで冷却した後、メタノール(3 mL)を加え、反応を停止させた。反応溶液を減圧下で濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー (溶離液: CH2Cl2:MeOH = 30:1)で精製し、生成物イソプロピル((3-シクロプロピルフェノキシ)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)ホスホリル)-L-アラニネート(20 mg, 3%, エピマー比 SP/RP = 3.8:1)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.74 (s, 1H), 7.46 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.15-7.25 (m, 1H), 6.82-7.07 (m, 3H), 6.09-6.27 (m, 1H), 5.51-5.75 (m, 1H), 4.94-5.10 (m, 1H), 4.37-4.59 (m, 2H), 3.70-4.16 (m, 4H), 1.79-1.95 (m, 1H), 1.18-1.41 (m, 12H), 0.93-1.10 (m, 2H), 0.63-0.72 (m, 2H);
31P NMR (162 MHz, CDCl3): δ 4.08, 3.40;
MS m/z (ESI): 570.1 [M+H]+.
【実施例３】
【００６９】
ステップ１
イソプロピル（（2-シクロプロピル-6-メチルフェノキシ）（4-ニトロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000038
4-ニトロフェニルホスホロジクロリデート(1.950 g, 7.62 mmol)をCH2Cl2(15 mL)に溶解した。この溶液を-78℃まで冷却した後、2-シクロプロピル-6-メチルフェノール(1.129 g, 7.62 mmol)及びTEA(1.17 mL, 8.39 mmol)のCH2Cl2 溶液(15 mL)を滴下した。この混合物を同温度で30分間撹拌した後、0℃まで徐々に加熱した。L-アラニンイソプロピルエステル塩酸塩(1.279 g, 7.63 mmol)のCH2Cl2溶液(15 mL)を0℃まで冷却し、前記混合物を滴下した後、TEA(2.23 mL, 16.0 mmol) を滴下した。反応混合物を0℃で1 時間撹拌した。反応溶液を減圧下で濃縮し、残渣にEtOAc(30 mL)加えた。生成した白色固体を濾過し、濾液を濃縮し、黄色の油状液体を得た。これをカラムクロマトグラフィー (溶離液:PE:EtOAc=5:1〜3:1)で精製し、生成物イソプロピル（（2-シクロプロピル-6-メチルフェノキシ）（4-ニトロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(2.880 g, 82%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.18 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 7.32 (dd, J = 8.4, 7.2 Hz, 2H), 7.00 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 6.68-6.75 (m, 1H), 4.91-5.05 (m, 1H), 4.05-4.21 (m, 1H), 3.89-4.05 (m, 1H), 2.39 (s, 3H), 2.17-2.31 (m, 1H), 1.13-1.42 (m, 12H), 0.90-1.06 (m, 2H), 0.59-0.75 (m, 2H).
ステップ２
イソプロピル((2-シクロプロピル-6-メチルフェノキシ)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)ホスホリル)-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000039
1-（（2R、3R、4R、5S）-3-フルオロ-4-ヒドロキシ-5-（ヒドロキシメチル）-3-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）ピリミジン-2,4（1H,3H）-ジオン(272 mg, 1.05 mmol)をTHF(8 mL)及びNMP(2.7 mL)の混合溶媒に溶解した。水浴の中でtBuMgCl溶液(1 M, 2.1 mL, 2.10 mmol)を滴下し、この混合物を室温で10分間撹拌した。イソプロピル（（2-シクロプロピル-6-メチルフェノキシ）（4-ニトロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(967 mg, 2.09 mmol)のTHF溶液(6 mL)を滴下し、反応混合物を55℃で終夜撹拌した。この反応混合物を室温まで冷却した後、メタノール(3 mL)を加え、反応を停止させた。反応溶液を減圧下で濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液:CH2Cl2:MeOH=30:1)で精製し、生成物イソプロピル((2-シクロプロピル-6-メチルフェノキシ)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)ホスホリル)-L-アラニネート(20 mg, 3%, エピマー比 SP/RP > 10:1)を得た。
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.53 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.98-7.06 (m, 2H), 6.69-6.77 (m, 1H), 6.01-6.08 (m, 1H), 5.59 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.57 (s, 2H), 4.41-4.50 (m, 1H), 4.31-4.40 (m, 1H), 4.03-4.11 (m, 1H), 3.80-4.02 (m, 2H), 2.38 (s, 3H), 2.24-2.35 (m, 1H), 1.26-1.40 (m, 6H), 1.22 (d, J = 6.0 Hz, 6H), 0.95-1.02 (m, 2H), 0.59-0.71 (m, 2H);
31P NMR (162 MHz, CD3OD): δ 3.81;
MS m/z (ESI): 584.1 [M+H]+.
【実施例４】
【００７０】
ステップ１
イソプロピル（（4-シクロプロピルフェノキシ）（4-ニトロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000040
4-ニトロフェニルホスホロジクロリデート(1.260 g, 4.92 mmol)をCH2Cl2(10 mL)に溶解した。この溶液を-78℃まで冷却した後、4-シクロプロピルフェノール(726 mg, 5.41 mmol)及びTEA(0.76 mL, 5.45 mmol)のCH2Cl2溶液(10 mL)を滴下した。この混合物を同温度で30分間撹拌した後、0℃まで徐々に加熱した。 L-アラニンイソプロピルエステル塩酸塩(826 mg, 4.93 mmol)のCH2Cl2溶液(10 mL)を0℃まで冷却し、前記混合物を滴下した後、TEA(1.44 mL, 10.33 mmol)を滴下した。反応混合物を0℃で1時間撹拌した。反応溶液を減圧下で濃縮し、残渣にEtOAc(30 mL)加えた。生成した白色固体を濾過し、濾液を濃縮し、黄色の油状液体を得た。これをカラムクロマトグラフィー (溶離液: PE: EtOAc=5:1)で精製し、生成物イソプロピル（（4-シクロプロピルフェノキシ）（4-ニトロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(1.48 g, 67%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.00-8.28 (m, 2H), 7.32-7.45 (m, 2H), 6.71-7.18 (m, 4H), 4.91-5.02 (m, 1H), 3.93-4.19 (m, 2H), 1.77-1.92 (m, 1H), 1.39 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.17-1.26 (m, 6H), 0.90-0.98 (m, 2H), 0.58-0.66 (m, 2H).
ステップ２
イソプロピル((4-シクロプロピルフェノキシ)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)ホスホリル)-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000041
1-（（2R、3R、4R、5S）-3-フルオロ-4-ヒドロキシ-5-（ヒドロキシメチル）-3-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）ピリミジン-2,4（1H,3H）-ジオン(272 mg, 1.05 mmol)をTHF(8 mL)及びNMP(2.70 mL)の混合溶媒に溶解した。水浴の中でtBuMgCl溶液 (1 M, 2.1 mL, 2.10 mmol)を滴下し、この混合物を室温で10分間撹拌した。イソプロピル（（4-シクロプロピルフェノキシ）（4-ニトロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(938 mg, 2.09 mmol)のTHF溶液(6 mL)を滴下し、反応混合物を55℃で終夜撹拌した。反応混合物を室温まで冷却した後、メタノール(3 mL)を加え、反応を停止させた。反応溶液を減圧下で濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー (溶離液: CH2Cl2: MeOH=30:1)で精製し、生成物イソプロピル((4-シクロプロピルフェノキシ)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)ホスホリル)-L-アラニネート(62 mg, 10%, エピマー比 SP/RP = 3.1:1)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 9.26-9.45 (m, 1H), 7.25-7.52 (m, 1H), 7.05-7.12 (m, 2H), 6.97-7.04 (m, 2H), 6.16 (d, J = 18.4 Hz, 1H), 5.54-5.75 (m, 1H), 4.94-5.05 (m, 1H), 4.36-5.57 (m, 2H), 3.70-4.24 (m, 4H), 1.17-1.91 (m, 1H), 1.15-1.39 (m, 12H), 0.88-0.98 (m, 2H), 0.55-0.65 (m, 2H);
31P NMR (162 MHz, CDCl3): δ 4.05, 3.58;
MS m/z (ESI): 570.1 [M+H]+.
【実施例５】
【００７１】
ステップ １
（4-ブロモ-2-メチルフェノキシ）（tert-ブチル）ジメチルシランの調製
2017502975.tif 000042
4-ブロム-2-メチルフェノール(2.1 g, 11 mmol)及びイミダゾール(2.2 g, 33 mmol)をDMF(10 mL)に溶解した。この溶液を0℃まで冷却した後、撹拌しながらtert-ブチルブチルクロロジメチルシラン(2.0 g, 14 mmol)を加えた。反応混合物を撹拌しながら室温まで加熱し、さらに3時間撹拌した。LC-MSにより反応の完了を確認した後、反応混合物を水(40 mL)に注ぎ入れ、そしてEtOAc(20 mL × 3)で抽出した。EtOAc層を水(20 mL × 3) 及び飽和鹹水(30 mL × 2)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、濾過した。濾液を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液:PE)で精製し、生成物（4-ブロモ-2-メチルフェノキシ）(tert-ブチル）ジメチルシラン(2.4 g, 73%)を得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.05 (m, 1H), 6.94 (m, 1H), 6.43 (d，J = 8.4 Hz, 1H), 1.97 (s, 3H), 0.81 (s, 9H), 0.00 (s, 6H).
ステップ ２  
tert-ブチル（4-シクロプロピル-2-メチルフェノキシ）ジメチルシランの調製
2017502975.tif 000043
リン酸カリウム(6.6 g, 32 mmol)を水(10 mL)に溶解した後、撹拌しながらシクロプロピルボロン酸(2.1 g, 24 mmol)及びPd(OAc)2(290 mg, 1.28 mmol)を加えた。次に、この混合物に（4-ブロム-2-メチルフェノキシ）（tert-ブチル）ジメチルシランのトルエン溶液(50 mL)を加えた。反応混合物をN2で45分間パージした後、トリシクロヘキシルリン(0.9 g, 3.2 mmol)を加えた。95℃、N2雰囲気下で反応混合物を終夜撹拌した。LC-MSにより反応の完了を確認した後、反応混合物をEtOAc(50 mL)及び水(20 mL)で希釈した。有機層を水(40 mL)及び飽和鹹水(40 mL)で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液:PE)で精製し、生成物tert-ブチル（4-シクロプロピル-2-メチルフェノキシ）ジメチルシラン(1.1 g, 粗生成物の収率50%,  純度85%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 6.65 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.57 (m, 1H), 6.46 (d，J = 8.0 Hz，1H), 1.98 (s, 3H), 1.61 (m,1H), 0.81 (s, 9H), 0.68 (m, 2H), 0.41 (m, 2H), 0.00 (s, 6H).
ステップ３  
4-シクロプロピル-2-メチルフェノールの調製
2017502975.tif 000044
フッ化テトラブチルアンモニウム(1 M THF溶液, 12 mL, 12 mmol)溶液を tert-ブチル（4-シクロプロピル-2-メチルフェノキシ）ジメチルシラン(1.1 g,純度：85%，4 mmol)に加えた。反応混合物を室温で2時間撹拌した。LC-MSにより反応の完了を確認した後、反応混合物を10% 塩化アンモニウム水溶液(30 mL)で希釈し、そしてEtOAc(60 mL)で抽出した。EtOAc層を飽和鹹水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: PE〜PE: EtOAc = 5:1)で精製し、粗生成物4-シクロプロピル-2-メチルフェノール(0.64 g, 粗生成物の収率 80%)を得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.98 (s, 1H), 6.79 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.75 (m, 1H), 6.67 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.77 (m, 1H), 0.84 (m, 2H), 0.55 (m, 2H).
ステップ４
イソプロピル（（4-シクロプロピル-2-メチルフェノキシ）（4-ニトロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000045
4-ニトロフェニルホスホロジクロリデート(900 mg, 3.6 mmol)をCH2Cl2(7.5 mL)に溶解した。この溶液を-78℃まで冷却した後、4-シクロプロピル-2-メチルフェノール(600 mg, 4.0 mmol)及びTEA(0.39 g, 3.9 mmol)のCH2Cl2溶液(7.5 mL)を10分間かけて滴下した。この混合物を撹拌しながら室温まで加熱した。 L-アラニンイソプロピルエステル塩酸塩(600 mg, 3.6 mmol)のCH2Cl2溶液(7.5 mL)を0℃まで冷却し、前記混合物を滴下した後、TEA(0.75 g, 7.5 mmol)を5分間かけて滴下した。反応混合物を0℃で1時間撹拌した。この反応溶液を減圧下で濃縮し、残渣にEtOAc (50 mL)を加えた。生成した白色固体を濾過し、EtOAc(20 mL)で洗浄した。濾液を濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液:PE:EtOAc=9:1〜7:3)で精製し、生成物イソプロピル（（4-シクロプロピル-2-メチルフェノキシ）(4-ニトロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(550 mg, 33%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.22 (m, 2H), 7.37 (m, 2H), 7.20 (m, 1H), 6.90 (s, 1H), 6.84 (m, 1H), 5.02 (m, 1H), 4.09 (m, 1H), 3.89 (m, 1H), 2.21 (m, 3H), 1.82 (m, 1H), 1.40 (m, 3H), 1.23 (m, 6H), 0.93 (m, 2H), 0.62 (m, 2H).
ステップ５
イソプロピル((4-シクロプロピル-2-メチルフェノキシ)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)ホスホリル)-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000046
室温で1-（（2R,3R,4R,5R）-3-フルオロ-4-ヒドロキシ-5-（ヒドロキシメチル）-3-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）ピリミジン-2,4（1H,3H）-ジオン(145 mg, 0.56 mmol)をTHF(5 mL)及びNMP(1.45 mL)の混合溶媒に溶解した。これを撹拌しながらtBuMgCl溶液(1 M, 0.45 mL, 0.45 mmol)を5分間かけて滴下した。この混合物を室温で10分間撹拌した。イソプロピル（（4-シクロプロピル-2-メチルフェノキシ）（4-ニトロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(550 mg, 1.15 mmol)のTHF溶液(3 mL)を5分間かけて滴下した。この反応混合物を55℃で終夜撹拌した。反応混合物を室温まで冷却した後、メタノール(3 mL)を加え、反応を停止させた。反応溶液の半量を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: CH2Cl2:MeOH = 50:1 〜 10:1)で精製し、生成物イソプロピル((4-シクロプロピル-2-メチルフェノキシ)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)ホスホリル)-L-アラニネート(29 mg, 9%, エピマー比 SP/RP = 9.3:1)を得た。
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.57 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.21 (m, 1H), 6.97 (s, 1H), 6.88 (m, 1H), 6.13 (d, J = 19.6 Hz, 1H), 5.59-5.64 (m, 1H), 4.93-5.01 (m, 1H), 4.49-4.54 (m, 1H), 4.36-4.41 (m, 1H), 4.09-4.13 (m, 1H), 3.89-3.97 (m, 2H), 2.30 (s, 3H), 1.83-1.89 (m, 1H), 1.31-1.40 (m, 7H), 1.23-1.26 (m, 6H), 0.92-0.96 (m, 2H), 0.62-0.66 (m, 2H);
31P NMR (162 MHz, CD3OD): δ 4.09, 3.99;
MS m/z (ESI): 584.2 [M+H]+.
【実施例６】
【００７２】
ステップ１
3-（4-（ベンジルオキシ）フェニル）オキセタンの調製
2017502975.tif 000047
4-（ベンジルオキシ）フェニル）ボロン酸(684 mg, 3.00 mmol)、NiI2 (28.0 mg, 90 mmol)及びトランス-2-アミノシクロヘキサノール塩酸塩(11.0 mg, 90.0 mmol）をiPrOH(10 mL)に溶解し、NaHMDS(1 M, 3.0 mL, 3.0 mmol)を滴下した。 この混合物をN2で10分間パージした後、3-ヨード-オキセタン(276 mg, 1.50 mmol)を加えた。得られた混合物をN2でさらに5分間パージした。この反応混合物を80℃、マイクロ波で30分間撹拌した。平行反応を３回行った。３回分の反応溶液を冷却し、合わせた後、EtOHで希釈し、セライトで濾過した。濾液を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: PE:EA = 50:1)で精製し、生成物3-（4-（ベンジルオキシ）フェニル）オキセタン(400 mg, 56%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.32 (m, 7H), 6.91 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 4.97 (m, 4H), 4.68 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 4.08 (m, 1H).
ステップ２
4-（オキセタン-3-イル）フェノールの調製
2017502975.tif 000048
3-（4-（ベンジルオキシ）フェニル）オキセタン(400 mg, 1.67 mmol)及びPd/C (10 wt%, 50 mg)をEtOH(20 mL)に懸濁させた。水素雰囲気下で反応混合物を3時間撹拌した後、短いシリカゲルカラムを用いて濾過した。濾液を濃縮し、生成物4-（オキセタン-3-イル）フェノール(250 mg, 100%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.29 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.83 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 5.05 (m, 2H), 4.74 (m, 2H), 4.19 (m, 1H).
ステップ３
イソプロピル（（4-ニトロフェノキシ）（4-（オキセタン-3-イル）フェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000049
4-ニトロフェニルホスホロジクロリデート(427 mg, 1.67 mmol)をCH2Cl2(6 mL)に溶解した。この溶液を-78℃まで冷却した後、4-（オキセタン-3-イル）フェノール(250 mg, 1.67 mmol)及びTEA(233 μL, 1.67 mmol)のCH2Cl2溶液(3 mL)を滴下した。この混合物を室温で40分間撹拌した後、再び-78℃まで冷却した。L-アラニンイソプロピルエステル塩酸塩(280 mg, 1.67 mmol)のCH2Cl2溶液(2.5 mL)及びTEA(466 μL, 3.34 mmol)のCH2Cl2溶液(2 mL)を順次に滴下した。この反応混合物を室温まで加熱し、終夜撹拌した。反応溶液を減圧下で濃縮し、EtOAc(15 mL)を加えた。生成した白色固体を濾過した後、濾液を濃縮し、黄色の油状液体を得た。これをカラムクロマトグラフィー (溶離液: PE:EtOAc=2:1)で精製し、生成物イソプロピル（（4-ニトロフェノキシ）（4-（オキセタン-3-イル）フェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(540 mg, 70%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.11 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.30 (m, 4H), 7.16 (m, 2H), 4.92 (m, 3H), 4.62 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 4.47 (m, 1H), 4.11 (m, 1H), 1.30 (m, 3H), 1.30 (m, 6H);
ステップ４
イソプロピル((((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(4-(オキセタン-3-イル)フェノキシ)ホスホリル)-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000050
1 -（（2R、3R、4R、5S）-3-フルオロ-4-ヒドロキシ-5-（ヒドロキシメチル）-3-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）ピリミジン-2,4（1H,3H）-ジオン (152 mg, 0.584 mmol)をTHF(4 mL)及びNMP(1 mL)の混合溶媒に溶解した。水浴の中でtBuMgCl溶液(1 M, 1.17 mL, 1.17 mmol)を滴下し、この混合物を室温で20分間撹拌した。イソプロピル（（4-ニトロフェノキシ）（4-（オキセタン-3-イル）フェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(542 mg, 1.17 mmol)のTHF溶液(2 mL)を滴下し、反応混合物を55℃で終夜撹拌した。この反応混合物を室温まで冷却した後、メタノール(2 mL)を加え、反応を停止させた。反応溶液を減圧下で濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー (溶離液: CH2Cl2:MeOH=20:1)で精製し、生成物イソプロピル((((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(4-(オキセタン-3-イル)フェノキシ)ホスホリル)-L-アラニネート(35 mg, 10%, エピマー比 SP/RP = 2.5:1)を得た。
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.51 (m, 1H), 7.33 (m, 2H), 7.16 (m, 2H), 6.03 (m, 1H), 5.46-5.56 (m, 1H), 4.97 (m, 2H), 4.88 (m, 1H), 4.61 (m, 2H), 4.45 (m, 1H), 4.30 (m, 1H), 4.18 (m, 1H), 4.01 (m, 1H), 3.83 (m, 2H), 1.25 (m, 6H), 1.11 (m, 6H);
31P NMR (162 MHz, CD3OD): δ 3.93, 3.89;
MS m/z (ESI): 586.2 [M+H]+.
【実施例７】
【００７３】
ステップ１
4-（シクロプロピルメチル）フェノール の調製
2017502975.tif 000051
水浴の中でボランのTHF 溶液(1 M, 31 mL, 31 mmol)を4-ヒドロキシフェニルシクロプロピルケトン(4.2 g, 26 mmol)のTHF溶液(15 mL)に加えた。この反応混合物を室温で1時間撹拌した後、三フッ化ホウ素のエチルエーテル溶液を加え、さらに1時間撹拌した。TLCにより反応の完了を確認した後、反応混合物を氷-水に注ぎ入れた。有機層を分離し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた後、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: PE: EtOAc = 20:1)で精製し、生成物4-（シクロプロピルメチル）フェノール(3.7 g, 96%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.13 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.80 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 5.35 (brs, 1H), 2.48 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 0.94 (m, 1H), 0.51 (m, 2H), 0.18 (m, 2H).
ステップ２
イソプロピル（（4-（シクロプロピルメチル）フェノキシ）（4-ニトロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000052
ドライアイス-アセトン浴の中でL-アラニンイソプロピルエステル塩酸塩 (982 mg, 5.86 mmol)及びTEA(1.63 mL, 11.7 mmol)のCH2Cl2溶液(15 mL)を4-ニトロフェニルホスホロジクロリデート(1.50 g, 5.86 mmol)のCH2Cl2溶液(30 mL) に滴下した。この混合物を室温まで加熱し、1 時間撹拌した。ドライアイス-アセトン浴の中で混合物を-78℃まで冷却した後、4-（シクロプロピルメチル）フェノール(868 mg，5.86 mmol)のCH2Cl2溶液(5 mL)及びTEA(0.82 mL, 5.86 mmol) を順次に滴下した。この反応混合物を室温まで加熱し、終夜撹拌した。反応溶液を水及び飽和鹹水で順次に洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、濾過した。濾液を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: PE:EtOA = 6:1)で精製し、淡い黄色の油状生成物イソプロピル（（4-（シクロプロピルメチル）フェノキシ）（4-ニトロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(180 mg, 6.7%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.17 (m, 2H), 7.32 (m, 2H), 7.17 (m, 2H), 7.07 (m, 2H), 4.96 (m, 1H), 4.00 (m, 1H), 2.44 (m, 2H), 1.36 (m, 3H), 1.17 (m, 6H), 0.85 (m, 1H), 0.47(m, 2H), 0.12(m, 2H);
MS m/z (ESI): 463.0 [M+H]+.
ステップ３
イソプロピル((4-(シクロプロピルメチル)フェノキシ)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)ホスホリル)-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000053
1-（（2R、3R、4R、5S）-3-フルオロ-4-ヒドロキシ-5-（ヒドロキシメチル）-3-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）ピリミジン-2,4（1H,3H）-ジオン(51 mg, 0.20 mmol)をTHF(2 mL)及びNMP(0.5 mL)の混合溶媒に溶解した。水浴の中でtBuMgCl溶液(1 M, 0.39 mL, 0.39 mmol)を滴下し、この混合物を室温で20分間撹拌した。イソプロピル（（4-（シクロプロピルメチル）フェノキシ）（4-ニトロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(180 mg, 0.39 mmol)のTHF 溶液(1 mL)を滴下し、反応混合物を55℃で終夜撹拌した。この反応混合物を室温まで冷却した後、メタノール(1 mL)を加え、反応を停止させた。この反応溶液の大部分を濃縮した。残渣をCHCl3及びiPrOHの混合溶媒(v:v = 3:1, 20 mL)に溶解し、飽和鹹水で数回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、濾過した。濾液を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー (溶離液: CH2Cl2: MeOH=40:1)で精製し、無色の泡状生成物イソプロピル((4-(シクロプロピルメチル)フェノキシ)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)ホスホリル)-L-アラニネート(54 mg, 47%, エピマー比 SP/RP = 3.9:1)を得た。
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.42 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.97 (m, 2H), 5.94 (d, J = 19.2 Hz, 1H), 5.41 (m, 1H), 4.78 (m, 1H), 3.92 (m, 1H), 3.74 (m, 2H), 2.33 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 1.18 (m, 3H), 1.03 (m, 3H), 0.75 (m, 1H), 0.32 (m, 2H), 0.01 (m, 2H);
31P NMR (162 MHz, CD3OD): δ 3.99, 3.90;
MS m/z (ESI): 584.2 [M+H]+.
【実施例８】
【００７４】
ステップ１
イソプロピル（（4-ニトロフェノキシ）（4-（フェニルエチニル）フェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000054
ドライアイス-アセトン浴の中で4-（フェニルエチニル）フェノール(700 mg, 3.61 mmol)及びトリエチルアミン(0.833 mL, 3.61 mmol)のCH2Cl2溶液(7 mL)を   4-ニトロフェニルホスホロジクロリデート(924 mg, 3.61 mmol)のCH2Cl2溶液(10 mL)に加えた。 この混合物を室温まで加熱し、40分間撹拌した。そして混合物を-78℃まで冷却し、L-アラニンイソプロピルエステル塩酸塩(605 mg, 3.61 mmol)のCH2Cl2溶液(5 mL)及びTEA(1.67 mL, 7.22 mmol)のCH2Cl2 溶液(5 mL)を順次に滴下した。この反応混合物を室温まで加熱し、終夜撹拌した。反応溶液を濃縮し、EtOAcで希釈し、濾過した。濾過ケーキをEtOAcで洗浄し、濾液を飽和鹹水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、濾過し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: PE:EtOAc = 5:1)で精製し、生成物イソプロピル（（4-ニトロフェノキシ）（4-（フェニルエチニル）フェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(1.0 g, 55%)を得た。
1H NMR (400 Hz, CDCl3): δ 8.17 (dd, J = 8.8, 2.0 Hz, 2H), 7.45 (m, 4H), 7.31 (m, 5H), 7.16 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 4.95 (m, 1H), 4.01 (m, 1H), 3.86 (m, 1H), 1.33 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.17 (m, 6H);
MS m/z (ESI): 509.0 [M+H]+.
ステップ２
イソプロピル((((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(4-(フェニルエチニル)フェノキシ)ホスホリル)-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000055
1-（（2R、3R、4R、5S）-3-フルオロ-4-ヒドロキシ-5-（ヒドロキシメチル）-3-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）ピリミジン-2,4（1H,3H）-ジオン (26.0 mg, 0.100 mmol)をTHF(2 mL)及びNMP(0.5 mL)の混合溶媒に溶解した。水浴の中でtBuMgCl(1.0 M の THF溶液, 0.2 mL, 0.2 mmol) を滴下し、この混合物を室温で20 分間撹拌した。イソプロピル（（4-ニトロフェノキシ）（4-（フェニルエチニル）フェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(102 mg, 0.200 mmol)のTHF溶液(1 mL)を滴下し、反応混合物を55℃で終夜撹拌した。この反応混合物を室温まで冷却した後、メタノール(1 mL)を加え、反応を停止させた。反応溶液の大部分を濃縮した。残渣を水で洗浄した後、濾過した。濾過ケーキをCH2Cl2に溶解した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣を調製用TLC(溶離液: CH2Cl2:iPrOH = 17:1)で精製し、無色の泡状生成物イソプロピル ((((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(4-(フェニルエチニル)フェノキシ)ホスホリル)-L-アラニネート(14 mg, 22%, エピマー比 SP/RP = 3.8: 1)を得た。
1H NMR (400 Hz, CD3OD): δ 7.53 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.41 (m, 4H), 7.27 (m, 3H), 7.20 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 6.01 (m, 1H), 5.56-5.80 (m, 1H), 4.88 (m, 1H), 4.42 (m, 1H), 4.30 (m, 1H), 4.03 (m, 1H), 3.83 (m, 2H), 1.26 (m, 6H), 1.06 (m, 6H);
MS m/z (ESI): 630.1 [M+H]+.
【実施例９】
【００７５】
ステップ１
4-（シクロプロピルエチニル）フェノールの調製
2017502975.tif 000056
4-ヨードフェノール(5.00 g, 22.7 mmol)及びDIPEA(18.0 mL, 109 mmol)をDMF(80 mL)に溶解した。この混合物をN2で３回パージし、氷浴の中でエチニルシクロプロパン(2.50 mL, 29.5 mmol)、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム(1.00 g, 0.866 mmol)及びCuI(900 mg, 109 mmol)を順次に加えた。 この反応混合物を室温までゆっくり加熱し、 N2雰囲気下で終夜攪拌した。反応混合物をセライトで濾過し、不溶物を除去した後、EtOAcで希釈し、0.5 M 薄い塩酸で１回、そして飽和鹹水で８回洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: PE: EtOAc = 8: 1)で精製し、生成物4-（シクロプロピルエチニル）フェノール(3.50 g, 97%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.28 (dd, J = 7.2, 2.0 Hz, 2H), 6.75 (dd, J = 7.2, 2.0 Hz, 2H), 5.21 (s, 1H), 1.45 (m, 1H), 0.78-0.89 (m, 4H).
ステップ２
イソプロピル（（4-（シクロプロピルエチル）フェノキシ）（4-ニトロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000057
4-ニトロフェニルホスホロジクロリデート(2.50 g, 9.77 mmol)をCH2Cl2(20 mL)に溶解した。この溶液を-78℃まで冷却した後、4-（シクロプロピルエチニル）フェノール(1.55 g, 9.77 mmol)及びTEA(1.36 mL, 9.77 mmol)のCH2Cl2溶液(8 mL) を滴下した。この反応混合物を室温で40分間撹拌した後、-78℃まで冷却した。 L-アラニンイソプロピルエステル塩酸塩(1.64 g, 9.77 mmol)のCH2Cl2 溶液(5 mL)及びTEA(2.72 mL, 19.5 mmol)のCH2Cl2溶液(7 mL)を順次に滴下した。反応混合物を室温下まで加熱し、終夜撹拌した。 反応溶液を減圧下で濃縮し、EtOAc(50 mL)を加えた。生成した白色固体を濾過し、濾液を濃縮し、黄色の油状液体を得た。これをカラムクロマトグラフィー(溶離液: PE:EtOAc=5:1)で精製し、生成物イソプロピル（（4-（シクロプロピルエチル）フェノキシ）（4-ニトロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(3.30 g, 72%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.24 (dd, J = 8.8, 2.0 Hz, 2H), 7.36 (m, 4H), 7.14 (m, 2H), 5.00 (m, 1H), 4.12 (m, 1H), 1.42 (m, 1H), 1.38 (m, 3H), 1.24 (m, 6H), 0.78-0.89 (m, 4H);
MS m/z (ESI): 473.1 [M+H]+.
ステップ３
イソプロピル((4-(シクロプロピルエチニル)フェノキシ)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)ホスホリル)-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000058
1-（（2R、3R、4R、5S）-3-フルオロ-4-ヒドロキシ-5-（ヒドロキシメチル）-3-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）ピリミジン-2,4（1H,3H）-ジオン (52 mg, 0.20 mmol)をTHF(2 mL)及びNMP(0.5 mL)の混合溶媒に溶解した。水浴の中でtBuMgCl溶液(1 M, 0.40 mL, 0.40 mmol)を滴下し、この混合物を室温で20分間撹拌した。イソプロピル（（4-（シクロプロピルエチニル）フェノキシ）（4-ニトロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(189 mg, 0.40 mmol)のTHF溶液(1 mL)を滴下し、反応混合物を55℃で終夜撹拌した。反応混合物を室温まで冷却した後、メタノール(1 mL)を加え、反応を停止させた。反応溶液を減圧下で濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液:CH2Cl2:MeOH=30:1)で精製し、生成物イソプロピル ((4-(シクロプロピルエチニル)フェノキシ)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)ホスホリル)-L-アラニネート(45 mg, 38%, エピマー比 SP/RP = 3.4:1)を得た。
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.50 (m, 1H), 7.24 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.08 (m, 2H), 6.02 (m, 1H), 5.57 (m, 1H), 4.86 (m, 1H), 4.42 (m, 1H), 4.30 (m, 1H), 4.01 (m, 1H), 3.80 (m, 2H), 1.34 (m, 1H), 1.28 (m, 6H), 1.11 (m, 6H), 0.77 (m, 2H), 0.62 (m, 2H);
MS m/z (ESI): 594.3 [M+H]+.
【実施例１０】
【００７６】
ステップ １
4-（プロピルチオ）フェノールの調製 
2017502975.tif 000059
室温で炭酸カリウム(28 g, 200 mmol)、p-ヒドロキシチオフェノール(2.5 g, 20 mmol)及び1-ブロモプロパン(3.1 g, 25 mmol)をDMF(40 mL)に加えた。この反応混合物を室温で3日間撹拌した。LC-MSにより反応の完了を確認した後、反応混合物を水(200 mL)に注ぎ入れ、EtOAc(50 mL × 3)で抽出した。有機層を水(50 mL × 3)及び飽和鹹水(50 mL × 2)で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: PE〜PE: EtOAc = 4:1)で精製し、生成物4-（プロピルチオ）フェノール(0.9 g, 27%)を得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.52 (s, 1H), 7.21(d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.73 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 2.76 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.49 (m, 2H), 0.93 (t, J = 7.2 Hz, 1H).
ステップ２
イソプロピル（（4-ニトロフェノキシ）（4-（プロピルチオ）フェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000060
室温で4-ニトロフェニルホスホロジクロリデート(1.3 g, 5 mmol)をCH2Cl2(10 mL)溶液に溶解した。この溶液を-78℃まで冷却した後、4-（プロピルチオ）フェノール(900 mg, 5.6 mmol)及びTEA(0.56 g, 5.6 mmol)のCH2Cl2溶液(10 mL)を10分間かけて滴下した。この反応混合物を撹拌しながら室温まで加熱した。L-アラニンイソプロピルエステル塩酸塩(840 mg, 5 mmol)のCH2Cl2溶液(10 mL)を0℃まで冷却し、前記混合物を滴下した後、TEA(1.05 g, 10.5 mmol)を5分間かけて滴下した。この反応混合物を0℃で1時間撹拌した。反応溶液を濃縮し、EtOAc(50 mL)を加えた。生成した白色固体を濾過し、EtOAc(20 mL)で洗浄した後、濾液を濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー (溶離液: PE: EtOAc =9:1〜7:3)で精製し、生成物イソプロピル（（4-ニトロフェノキシ）（4-（プロピルチオ）フェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(1.5 g, 60%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.16 (m, 2H), 7.33 (m, 2H), 7.24 (m, 2H), 7.08 (m, 2H), 4.94 (m, 1H), 4.02 (m, 1H), 3.86 (m, 1H), 2.78 (m, 2H), 1.58 (m, 2H), 1.33 (m, 3H), 1.16 (m, 6H), 0.94 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
ステップ３
イソプロピル((((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(4-(プロピルチオ)フェノキシ)ホスホリル)-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000061
室温で1-（（2R,3R,4R,5R）-3-フルオロ-4-ヒドロキシ-5-（ヒドロキシメチル）-3-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）ピリミジン-2,4（1H,3H）-ジオン(130 mg, 0.5 mmol)をTHF(5 mL)及びNMP(1.3 mL)の混合溶媒に溶解した。これを撹拌しながらtBuMgCl(1.0 M THF溶液, 1.0 mL, 1.0 mmol)を5分間かけて滴下した。この混合物を室温で10分間撹拌した。イソプロピル（（4-ニトロフェノキシ）（4-（プロピルチオ）フェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(484 mg, 1 mmol)のTHF溶液(3 mL)を5分間かけて滴下した。反応混合物を55℃で終夜撹拌した。反応混合物を室温まで冷却し、メタノール(3 mL)を加え、反応を停止させた。反応溶液の半量を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液:CH2Cl2:MeOH=50:1〜10:1)で精製し、生成物イソプロピル((((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(4-(プロピルチオ)フェノキシ)ホスホリル)-L-アラニネート(66 mg, 22%, エピマー比 SP/RP = 3.5:1)を得た。
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.63 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.36 (m, 2H), 7.22 (m, 2H), 6.12 (m, 1H), 5.65-5.72 (m, 1H), 4.54 (m, 1H), 4.40-4.42 (m, 1H), 4.12-4.14 (m, 1H), 3.91-3.95 (m, 2H), 2.87-2.92 (m, 2H), 1.61-1.66 (m, 2H), 1.31-1.40 (m, 7H), 1.23-1.26 ( m, 6H), 1.02 (m, 3H);
31P NMR (162 MHz, CD3OD): δ 3.97, 3.91;
MS m/z (ESI): 604.2 [M+H]+.
【実施例１１】
【００７７】
ステップ１
4-（tert-ブチルチオ）フェノールの調製
2017502975.tif 000062
室温でP-ヒドロキシチオフェノール(3.1 g, 25 mmol)をtert-ブチルクロライド(25 g)に加えた後、三塩化アルミニウム(4 g, 30 mmol) を数回に分けて加えた。この反応混合物を室温で1時間撹拌した。LC-MSで反応の完了を確認した後、反応混合物を水(200 mL)に注ぎ入れ、EtOAc(200 mL)で抽出した。EtOAc層を飽和鹹水(100 mL)で洗浄し、そして無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、濾過し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: PE〜PE: EtOAc = 4: 1)で精製し、生成物4-（tert-ブチルチオ）フェノール(3.0 g, 65%)を得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.76 (s, 1H), 7.28 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.77 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 1.19 (s, 9H). 
ステップ２
イソプロピル（（4-ニトロフェノキシ）（4-（tert-ブチルチオ）フェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000063
室温で4-ニトロフェニルホスホロジクロリデート(3.8 g, 15 mmol)をCH2Cl2 (30 mL)に溶解した。この溶液を-78℃に冷却した後、4-（tertブチルチオ）フェノール(3.0 g, 16 mmol)及びTEA(1.6 g, 16 mmol)のCH2Cl2溶液(30 mL)を10分間かけて滴下した。反応混合物を撹拌しながら室温まで加熱した。L-アラニンイソプロピルエステル塩酸塩(2.5 g, 15 mmol)のCH2Cl2溶液(30 mL)を0℃まで冷却した後、前記混合物を滴下し、そしてTEA(3.2 g, 32 mmol)を5分間かけて滴下した。反応混合物を0℃で1時間撹拌した。反応溶液を濃縮し、EtOAc(100 mL)を加えた。生成した白色固体を濾過し、EtOAc(20 mL)で洗浄した後、濾液を濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: PE: EtOAc=9:1〜6:4)で精製し、生成物イソプロピル（（4-ニトロフェノキシ）（4-（tert-ブチルチオ）フェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(3.0 g, 40%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.23 (m, 2H), 7.50 (m, 2H), 7.40 (m, 2H), 7.19 (m, 2H), 5.01 (m, 1H), 4.07 (m, 1H), 3.96 (m, 1H), 1.40 (m, 3H), 1.22-1.28 (m, 15H).
ステップ３
イソプロピル((((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(4-(tert-ブチルチオ)フェノキシ)ホスホリル)-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000064
室温で1-（（2R,3R,4R,5R）-3-フルオロ-4-ヒドロキシ-5-（ヒドロキシメチル）-3-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）ピリミジン-2,4（1H,3H）-ジオン (130 mg, 0.5 mmol)をTHF(5 mL)及びNMP(1.3 mL)の混合溶媒に溶解した。これを撹拌しながらtBuMgCl(1.0 M THF溶液, 1.0 mL, 1.0 mmol)を5分間かけて滴下した。この混合物を室温で10分間撹拌した。イソプロピル（（4-ニトロフェノキシ）（4-（tert-ブチルチオ）フェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(500 mg, 1 mmol)のTHF溶液(3 mL)を5分間かけて滴下した。反応混合物を55℃で終夜撹拌した。この反応混合物を室温まで冷却した後、メタノール(3 mL)を加え、反応を停止させた。反応溶液を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: CH2Cl2:MeOH=50:1〜10:1)で精製し、生成物イソプロピル((((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(4-(tert-ブチルチオ)フェノキシ)ホスホリル)-L-アラニネート(126 mg, 41%, エピマー比 SP/RP = 2.2:1)を得た。
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.66 (m, 1H), 7.53 (m, 2H), 7.28 (m, 2H), 6.14 (m, 1H), 5.67-5.73 (m, 1H), 4.96 (m, 1H), 4.57 (m, 1H), 4.39-4.44 (m, 1H), 4.13-4.15 (m, 1H), 3.90-4.00 (m, 2H), 1.30-1.43 (m, 7H), 1.20-1.27( m, 14H);
31P NMR (162 MHz, CD3OD): δ 3.79, 3.74;
MS m/z (ESI): 618.2 [M+H]+.
【実施例１２】
【００７８】
ステップ１
エチル（4-メトキシベンジル）スルファンの調製 
2017502975.tif 000065
4-メトキシベンジルメルカプタン(5.0 g, 32.5 mmol)をDMF(100 mL)に溶解し、DIPEA(5.2 g, 39 mmol)及びヨードエタン(6.0 g, 39 mmol)を順次に加えた。この反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物をEtOAc(200 mL)で希釈し、水(600 mL)、HCl(1 N, 400 mL)及び飽和鹹水(200 mL)で順次に洗浄した。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、濾過し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: PE 〜 PE: EtOAc = 20:1)で精製し、生成物エチル（4-メトキシベンジル）スルファン(3.9 g, 67%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.26 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.87 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 3.82 (s, 3H), 3.71 (s, 2H), 2.45 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 1.25 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
ステップ２
4 -（（エチルチオ）メチル）フェノールの調製
2017502975.tif 000066
250 mLのフラスコにエチル(4-メトキシベンジル）スルファン(3.9 g, 22 mmol) を加えた後、BBr3(1 M, 55 mL, 55 mmol)のCH2Cl2溶液(55 mL)を滴下した。この反応混合物を室温で1時間撹拌した。LC-MSにより反応の完了を確認した後、重炭酸ナトリウム飽和溶液を加え、CH2Cl2(50 mL)で希釈した。有機層を飽和鹹水(100 mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、濾過し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: PE: EtOAc = 9:1〜 6:4)で精製し、生成物4 -（（エチルチオ）メチル）フェノール(2.5 g, 67%)を得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.31 (s, 1H), 7.09 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.88 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 3.82 (s, 2H), 2.37 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 1.15 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
ステップ３
イソプロピル（（4-ニトロフェノキシ）（4-（（メチルチオ）メチル）フェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000067
室温で4-ニトロフェニルのホスホロジクロリデート(3.5 g, 13.5 mmol)をCH2Cl2(27 mL)に溶解した。この溶液を-78℃まで冷却した後、4 -（（エチルチオ）メチル）フェノール(2.5 g, 15 mmol)及びTEA(1.5 g, 15 mmol)のCH2Cl2溶液(27 mL)を10分間かけて滴下した。この混合物を撹拌しながら室温まで加熱した。L-アラニンイソプロピルエステル塩酸塩(2.3 g, 13.5 mmol)のCH2Cl2溶液(27 mL)を0℃まで冷却し、前記混合物を滴下した後、TEA(3.0 g, 30 mmol)を5分間かけて滴下した。反応混合物を室温まで加熱し、終夜撹拌した。反応溶液を濃縮し、EtOAc(50 mL)を加えた。白色固体を濾過し、EtOAc(20 mL)で洗浄した後、濾液を濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: PE: EtOAc = 9:1 〜 6:4)で精製し、生成物イソプロピル（（4-ニトロフェノキシ）（4-（（メチルチオ）メチル）フェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(1.7 g, 25%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.23 (m, 2H), 7.41 (m, 2H), 7.29 (m, 2H), 7.16 (m, 2H), 5.01 (m, 1H), 4.11 (m, 1H), 3.97 (m, 1H), 3.68 (m, 2H), 2.41 (m, 2H), 1.40 (m, 3H), 1.22 (m, 9H).
ステップ４
イソプロピル((((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(4-((エチルチオ)メチル)フェノキシ)ホスホリル)-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000068
室温で1-（（2R,3R,4R,5R）-3-フルオロ-4-ヒドロキシ-5-（ヒドロキシメチル）-3-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）ピリミジン-2,4（1H,3H）-ジオン(130 mg, 0.5 mmol)をTHF(4 mL)及びNMP(1.3 mL)の混合溶媒に溶解した。これを撹拌しながらtBuMgCl(1.0 M THF溶液, 1.0 mL, 1.0 mmol)を5分間かけて滴下した。この混合物を室温で10分間撹拌した。イソプロピル（（4-ニトロフェノキシ）（4 -（（メチルチオ）メチル）フェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(480 mg, 1 mmol)のTHF溶液(3 mL)を5分間かけて滴下した。反応混合物を55℃で終夜撹拌した。この反応混合物を室温まで冷却した後、メタノール(3 mL)を加え、反応を停止させた。反応溶液を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: CH2Cl2:MeOH=50:1〜10:1)で精製し、生成物イソプロピル((((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(4-((エチルチオ)メチル)フェノキシ)ホスホリル)-L-アラニネート(150 mg, 50%, エピマー比 SP/RP = 2.2:1)を得た。
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.63 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.22 (m, 2H), 6.16 (m, 1H), 5.64-5.71 (m, 1H), 4.95-5.02 (m, 1H), 4.52-4.57 (m, 1H), 4.37-4.42 (m, 1H), 4.12 (m, 1H), 3.89-3.98 (m, 2H), 3.73 (m, 2H), 2.39-2.46 (m, 2H), 1.31-1.40 (m, 7H), 1.20-1.27( m, 9H);
31P NMR (162 MHz, CD3OD): δ 3.93, 3.83;
MS m/z (ESI): 604.2 [M+H]+.
【実施例１３】
【００７９】
ステップ１
イソプロピル（（4-ニトロフェノキシ）（4-（トリメチルシリル）フェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000069
室温で4-ニトロフェニルホスホロジクロリデート(1.02 g, 4 mmol)をCH2Cl2(8 mL)に溶解した。この溶液を-78℃まで冷却した後、4-（トリメチルシリル）フェノール(750 mg, 4.5 mmol)及びTEA(0.45 g, 4.5 mmol)のCH2Cl2溶液(8 mL)を10分間かけて滴下した。この混合物を撹拌しながら室温まで加熱した。L-アラニンイソプロピルエステル塩酸塩(690 mg, 4 mmol)のCH2Cl2溶液(8 mL)を0℃まで冷却し、前記混合物を滴下した後、TEA(800 mg, 8 mmol)を5分間かけて滴下した。反応混合物を0℃で1時間撹拌した。反応溶液を濃縮し、EtOAc(50 mL)を加えた。白色固体を濾過し、EtOAc(20 mL)で洗浄した後、濾液を濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: PE 〜 PE: EtOAc = 3:2) で精製し、生成物イソプロピル（（4-ニトロフェノキシ）（4-（トリメチルシリル）フェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(1.2 g, 60%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.13 (m, 2H), 7.39 (m, 2H), 7.31(m, 2H), 7.11(m, 2H), 4.90 (m, 1H), 4.01 (m, 1H), 3.79 (m, 1H), 1.30 (m, 3H), 1.13 (m, 6H), 0.15 (m, 9H).
ステップ２
イソプロピル((((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(4-(トリメチルシリル)フェノキシ)ホスホリル)-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000070
室温で1-（（2R,3R,4R,5R）-3-フルオロ-4-ヒドロキシ-5-（ヒドロキシメチル）-3-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）ピリミジン-2,4（1H,3H）-ジオン(130 mg, 0.5 mmol)をTHF(5 mL)及びNMP(1.3 mL)の混合溶媒に溶解した。これを撹拌しながらtBuMgCl(1.0 M THF溶液, 1.0 mL, 1.0 mmol)を5分間かけて滴下し、この混合物を室温で10分間撹拌した。イソプロピル（（4-ニトロフェノキシ）（4-（トリメチルシリル）フェノキシ）ホスホリル）-L-アラニン(480 mg, 1 mmol)のTHF 溶液(3 mL)を5分間かけて滴下した。反応混合物を55℃で終夜撹拌した。反応混合物を室温まで冷却した後、メタノール(3 mL)を加え、反応を停止させた。反応溶液の半量を濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液:CH2Cl2:MeOH = 50:1〜10:1)で精製し、生成物イソプロピル((((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(4-(トリメチルシリル)フェノキシ)ホスホリル)-L-アラニネート(38 mg, 13%, エピマー比 SP/RP > 10:1)を得た。
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.49 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.43 (m, 2H), 7.15 (m, 2H), 6.03 (d, J = 20.0 Hz, 1H), 5.48 (m, 1H), 4.83-4.89 (m, 1H), 4.41-4.46 (m, 1H), 4.25-4.31 (m, 1H), 4.00-4.03 (m, 1H), 3.78-3.86 (m, 2H), 1.19-1.28 (m, 7H), 1.10-1.14 ( m, 6H), 0.14(s, 9H);
31P NMR (162 MHz, CD3OD): δ 3.77;
MS m/z (ESI): 602.2 [M+H]+.
【実施例１４】
【００８０】
ステップ１
イソプロピル（（（2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル）オキシ）（4-ニトロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000071
4-ニトロフェニルホスホロジクロリデート(2.0 g, 8.0 mmol)をCH2Cl2(16 mL)に溶解した。この溶液を-78℃まで冷却した後、2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-オール(1.2 g , 9.0 mmol)及びTEA(0.9 g, 9 mmol)のCH2Cl2溶液(16 mL)を10分間かけて滴下した。この混合物を撹拌しながら室温まで加熱した。L-アラニンイソプロピルエステル塩酸塩(1.35 g, 8 mmol)のCH2Cl2溶液(16 mL)を0℃まで冷却した後、前記混合物を滴下し、そしてTEA(1.7 g, 17 mmol)を5分間かけて滴下した。反応混合物を0℃で1時間撹拌した後、反応溶液を濃縮し、EtOAc(50 mL)を加えた。生成した白色固体を濾過し、EtOAc(20 mL)で洗浄した後、濾液を濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: PE 〜PE:EtOAc=3:2)で精製し、生成物イソプロピル（（（2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル）オキシ）（4-ニトロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(1.9 g, 50%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.15 (m, 2H), 7.33(m, 2H), 7.07 (m, 1H), 7.01 (m, 1H), 6.89 (m, 1H), 4.94 (m, 1H), 4.02 (m, 1H), 3.87 (m, 1H), 2.80 (m, 4H), 2.00 (m, 2H), 1.33 (m, 3H), 1.16 (m, 6H).
ステップ２
イソプロピル (((2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル)オキソ)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)ホスホリル)-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000072
室温で1-（（2R,3R,4R,5R）-3-フルオロ-4-ヒドロキシ-5-（ヒドロキシメチル）-3-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）ピリミジン-2,4（1H,3H）-ジオン(260 mg, 1.0 mmol)をTHF(8 mL)及び無水NMP(2.6 mL)の混合溶媒に溶解した。これを撹拌しながらtBuMgCl(1.0 M THF溶液, 2.0 mL, 2.0 mmol)を5分間かけて滴下した。この混合物を室温で10分間撹拌した。イソプロピル（（（2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル）オキシ）（4-ニトロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(900 mg, 2 mmol)のTHF溶液(6 mL)を5分間かけて滴下した。反応混合物を55℃で終夜撹拌した後、室温まで冷却し、メタノール(3 mL)を加え、反応を停止させた。反応溶液の半量を濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: CH2Cl2: MeOH = 50:1〜10:1)で精製し、生成物イソプロピル (((2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル)オキソ)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)ホスホリル)-L-アラニネート(40 mg, 7%, エピマー比 SP/RP = 3.3:1)を得た。
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.61 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 7.01 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.14 (d, J = 18.8 Hz, 1H), 5.57-5.67 (m, 1H), 4.95-5.02 (m, 1H), 4.52-4.56 (m, 1H), 4.35-4.40 (m, 1H), 4.12 (d, J = 3.0Hz, 1H), 3.89-3.98 (m, 2H), 2.86-2.92 (m, 4H), 2.06-2.14 (m, 2H), 1.31-1.39 (m, 7H), 1.23-1.27( m, 6H);
31P NMR (162 MHz, CD3OD): δ 3.96, 3.90;
MS m/z (ESI): 570.2 [M+H]+.
【実施例１５】
【００８１】
ステップ１
イソプロピル（（4-ニトロフェノキシ）（（5,6,7,8-テトラヒドロピリジン-2-イル）オキシ）ホスホリル）-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000073
4-ニトロフェニルホスホロジクロリデート(600 mg, 2.4 mmol)をCH2Cl2(5 mL)に溶解した。この溶液を-78℃まで冷却した後、5,6,7,8-テトラヒドロ-2-オール(400 mg, 2.6 mmol)及びTEA(0.26 g, 2.6 mmol)のCH2Cl2溶液(5 mL)を10分間かけて滴下した。この混合物を撹拌しながら室温まで加熱した。L-アラニンイソプロピルエステル塩酸塩(400 mg, 2.4 mmol)のCH2Cl2溶液(5 mL)を0℃まで冷却した後、前記混合物を滴下し、そしてTEA(500 mg, 5 mmol)を5分間かけて滴下した。反応混合物を0℃で1時間撹拌した後、反応溶液を濃縮し、EtOAc(50 mL)を加えた。白色固体を濾過し、EtOAc(20 mL)で洗浄した後、濾液を濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: PE 〜 PE:EtOAc=1:1)で精製し、生成物 イソプロピル（（4-ニトロフェノキシ）（（5,6,7,8-テトラヒドロピリジン-2-イル）オキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(480 mg, 44%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.16 (m, 2H), 7.33 (m, 2H), 6.94 (m, 1H), 6.87 (m, 2H), 4.94 (m, 1H), 4.02 (m, 1H), 3.79 (m, 1H), 2.65 (m, 4H), 1.69 (m, 4H), 1.33 (m, 3H), 1.16 (m, 6H).
ステップ２
イソプロピル((((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)((5,6,7,8-テトラヒドロナフタレン-2-イル)オキソ)ホスホリル)-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000074
室温で1-（（2R,3R,4R,5R）-3-フルオロ-4-ヒドロキシ-5-（ヒドロキシメチル）-3-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）ピリミジン-2,4（1H,3H）-ジオン(130 mg, 0.5 mmol)をTHF(4 mL)及び無水NMP(1.3 mL)の混合溶媒に溶解した。これを撹拌しながらtBuMgCl(1.0 M THF溶液, 1.0 mL, 1.0 mmol)を5分間かけて滴下した。この混合物を室温で10分間撹拌した。イソプロピル（（4-ニトロフェノキシ）（（5,6,7,8-テトラヒドロピリジン-2-イル）オキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(480 mg, 1 mmol)のTHF溶液(3 mL)を5分間かけて滴下した。反応混合物を55℃で終夜撹拌した後、室温まで冷却し、メタノール(3 mL)を加え、反応を停止させた。反応溶液の半量を濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: CH2Cl2:MeOH = 50:1〜10:1)で精製し、生成物イソプロピル ((((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)((5,6,7,8-テトラヒドロナフタレン-2-イル)オキソ)ホスホリル)-L-アラニネート(25 mg, 9%, エピマー比 SP/RP = 4.0:1)を得た。
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.59 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.04 (m, 1H), 6.96 (m, 2H), 6.14 (d, J = 18.8 Hz, 1H), 5.55-5.65 (m, 1H), 4.95-5.02 (m, 1H), 4.52-4.60 (m, 1H), 4.35-4.40 (m, 1H), 4.11-4.13 (m, 1H), 3.89-3.98 (m, 2H), 2.74 (m, 4H), 1.77-1.81 (m, 4H), 1.31-1.39 (m, 7H), 1.23-1.28 (m, 6H);
31P NMR (162 MHz, CD3OD): δ 3.91, 3.86;
MS m/z (ESI): 584.2 [M+H]+.
【実施例１６】
【００８２】
ステップ１
イソプロピル（（（2,3-ジヒドロベンゾ[b][1,4]ジオキサン-6-イル）オキソ）（4-ニトロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000075
4-ニトロフェニルホスホロジクロリデート(600 mg, 2.4 mmol)をCH2Cl2(5 mL)に溶解した。この溶液を-78℃まで冷却した後、2,3-ジヒドロベンゾ[b] [1,4]ジオキシン-6-オール(400 mg, 2.6 mmol)及びTEA(0.26 g, 2.6 mmol)のCH2Cl2溶液(5 mL)を10分間かけて滴下した。この混合物を撹拌しながら室温まで加熱した。L-アラニンイソプロピルエステル塩酸塩(400 mg, 2.4 mmol)のCH2Cl2 溶液(5 mL)を0℃まで冷却し、前記混合物を滴下した後、TEA(500 mg, 5 mmol)を5分間かけて滴下した。反応混合物を0℃で1時間撹拌した後、反応溶液を濃縮し、EtOAc(50 mL)を加えた。生成した白色固体を濾過し、EtOAc(20 mL)で洗浄した後、濾液を濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: PE 〜 PE:EtOAc=1:1)で精製し、生成物イソプロピル（（（2,3-ジヒドロベンゾ[b][1,4]ジオキサン-6-イル）オキソ）（4-ニトロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(580 mg, 53%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.25 (m, 2H), 7.41 (m, 2H), 6.80 (m, 2H), 6.74 (m, 1H), 5.03 (m, 1H), 4.24 (m, 4H), 4.11 (m, 1H), 3.89 (m, 1H), 1.42 (m, 3H), 1.25 (m, 6H).
ステップ２
イソプロピル (((2,3-ジヒドロベンゾ[b][1,4]ジオキシン-6-イル)オキソ)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)ホスホリル)-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000076
室温で1-（（2R,3R,4R,5R）-3-フルオロ-4-ヒドロキシ-5-（ヒドロキシメチル）-3-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）ピリミジン-2,4（1H,3H）-ジオン(150 mg, 0.6 mmol)をTHF(5 mL)及びNMP(1.5 mL)の混合溶媒に溶解した。これを撹拌しながらtBuMgCl(1.0 M THF溶液, 1.2 mL, 1.2 mmol)を5分間かけて滴下した。この混合物を室温で10分間撹拌した。 イソプロピル（（（2,3-ジヒドロベンゾ[b][1,4]ジオキサン-6-イル）オキソ）（4-ニトロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(580 mg, 1.2 mmol)のTHF 溶液(3 mL)を5分間かけて滴下した。反応混合物を55℃で終夜撹拌した。この反応混合物を室温まで冷却し、メタノール(3 mL)を加え、反応を停止させた。反応溶液の半量を濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: CH2Cl2:MeOH=50:1〜10:1) で精製し、少量のNMPを含む生成物(40 mg)を得た。この生成物をさらに調製用TLCで精製し、生成物 イソプロピル (((2,3-ジヒドロベンゾ[b][1,4]ジオキシン-6-イル)オキソ)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)ホスホリル)-L-アラニネート(20 mg, 6%, エピマー比 SP/RP = 1.9:1)を得た。
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.58-7.61 (m, 1H), 6.75-6.81 (m, 2H), 6.69-6.72 (m, 2H), 6.12-6.17 (m, 1H), 5.61-5.69 (m, 1H), 4.94-5.00 (m, 1H), 4.48-4.53 (m, 1H), 4.32-4.37 (m, 1H), 4.19-4.24 (m, 4H), 4.08-4.11 (m, 1H), 3.86-3.94 (m, 2H), 1.29-1.38 (m, 7H), 1.22-1.26 (m, 6H);
31P NMR (162 MHz, CD3OD): δ 4.16, 4.08;
MS m/z (ESI): 588.1 [M+H]+.
【実施例１７】
【００８３】
ステップ１
S-イソプロピル（2S）-2-（（（4-ニトロフェノキシ）（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパンチオエートの調製
2017502975.tif 000077
室温でフェニルホスホロジクロリデート(1.0 g, 4.7 mmol)をCH2Cl2(10 mL)に溶解した。この溶液を-78℃まで冷却し、4-ニトロフェノール(750 mg, 5.4 mmol)及びTEA(0.54 g, 5.4 mmol)のCH2Cl2溶液(10 mL) 10分間かけて滴下した。この混合物を撹拌しながら室温まで加熱した。S-イソプロピル（S）-2-アミノプロパンチオール塩酸塩(1.2 g, 4.7 mmol)のCH2Cl2溶液(10 mL)を0℃まで冷却した後、前記混合物を滴下し、そしてTEA(1.0 g, 10 mmol)を5分間かけて滴下した。 反応混合物を0℃で1時間撹拌した後、反応溶液を濃縮し、EtOAc(50 mL)を加えた。生成した白色固体を濾過し、EtOAc(20 mL)で洗浄した後、濾液を濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: PE:EtOAc=9:1〜3:1)で精製し、生成物S-イソプロピル（2S）-2 -（（（4-ニトロフェノキシ）（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパンチオエート(1.03 g, 50%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.16 (m, 2H), 7.33 (m, 2H), 7.28 (m, 2H), 7.16 (m, 3H), 4.09 (m, 1H), 3.86 (m, 1H), 3.53 (m, 1H), 1.33 (m, 3H), 1.21 (m, 6H).
ステップ２
S-イソプロピル(2S)-2-(((((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(フェノキシ)ホスホリル)アミノ)プロパンチオエートの調製
2017502975.tif 000078
室温で1-（（2R,3R,4R,5R）-3-フルオロ-4-ヒドロキシ-5-（ヒドロキシメチル）-3-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）ピリミジン-2,4（1H,3H）-ジオン(130 mg, 0.5 mmol)をTHF(5 mL)及びNMP(1.3 mL)の混合溶媒に溶解した。 これを撹拌しながらtBuMgCl(1.0 M THF溶液, 1.0 mL, 1.0 mmol)を5分間かけて滴下した。この混合物を室温で10分間撹拌した。 S-イソプロピル（2S）-2 -（（（4-ニトロフェノキシ）（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパンチオエート(424 mg, 1.0 mmol)のTHF溶液(3 mL)を5分間かけて滴下した。反応混合物を55℃で終夜撹拌した後、室温まで冷却した。この反応混合物にメタノール(3 mL)を加え、反応を停止させた後、反応溶液の半量を濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液:CH2Cl2:MeOH=50:1〜10:1)で精製し、生成物 S-イソプロピル (2S)-2-(((((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(フェノキシ)ホスホリル)アミノ)プロパンチオエート(66 mg, 24%, エピマー比 SP/RP = 2.2:1)を得た。
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.62-7.66 (m, 1H), 7.38-7.42 (m, 2H), 7.21-7.31 (m, 3H), 6.15 (d, J = 18.8 Hz, 1H), 5.64-5.71 (m, 1H), 4.55-4.59 (m, 1H), 4.40-4.45 (m, 1H), 4.12-4.15 (m, 1H), 3.94-4.02 (m, 2H), 3.49-3.58 (m, 1H), 1.26-1.40 (m, 12H);
31P NMR (162 MHz, CD3OD): δ 3.66, 3.55;
MS m/z (ESI): 546.1 [M+H]+.
【実施例１８】
【００８４】
ステップ１
S-メチル（S）-2-（（tert-ブトキシカルボニル）アミノ）プロパンチオエートの調製 
2017502975.tif 000079
密封したチューブの中でN-tert-ブチルオキシカルボニル-L-アラニン(5.7 g, 30 mmol)及びTEA(3.0 g, 30 mmol)をTHF(100 mL)に溶解した。次に、この混合物を-20℃まで冷却し、クロロギ酸イソブチル(4.0 g, 30 mmol)を加えた。 この混合物を-20℃で1時間撹拌した後、ナトリウムチオメトキシド(1.7g, 24 mmol)を加えた。反応混合物を室温まで加熱し、密封したチューブの中で終夜撹拌した。反応混合物を濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液:PE〜PE:EtOAc=9:1)で精製し、生成物S-メチル（S）-2 -（（tert-ブトキシカルボニル）アミノ）プロパンチオエート(3.4 g, 67%)を得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 4.97 (s, 1H), 4.40 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 2.29 (s, 3H), 1.46 (s, 9H), 1.37 (d, 3H).
ステップ２
S-メチル（S）-2-アミノプロパンチオエート塩酸塩の調製
2017502975.tif 000080
S-メチル（S）-2 -（（tert-ブトキシカルボニル）アミノ）プロパンチオエート(3.4 g, 16 mmol)をフラスコに入れた後、HCl(4 N ジオキサン溶液, 20 mL)を加えた。反応混合物を室温で3時間撹拌した。LC-MSにより反応の完了を確認した後、反応混合物を濃縮し、粗生成物S-メチル（S）-2-アミノプロパンチオエート塩酸塩(2.5 g, 粗生成物の収率 100%)を得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.59 (s, 3H), 4.29 (q, J = 7.2Hz, 1H), 2.37 (s, 3H), 1.45(d, J = 7.2 Hz, 3H).
ステップ３
S-メチル（2S）-2-（（（4-ニトロフェノキシ）（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパンチオエートの調製
2017502975.tif 000081
室温でフェニルホスホロジクロリデート(3.15 g, 15 mmol)をCH2Cl2(30 mL)に溶解した。この溶液を-78℃まで冷却し、4-ニトロフェノール(2.3 g, 16.5 mmol)及びTEA(1.6 g , 16 mmol)のCH2Cl2溶液(30 mL)を10分間かけて滴下した。この混合物を撹拌しながら室温まで加熱した。S-メチル（S）-2-アミノプロパンチオエート塩酸塩(2.3 g, 15 mmol)のCH2Cl2溶液(30 mL)を0℃まで冷却した後、前記混合物を滴下し、そしてTEA(3.3 g, 33 mmol)を5分間かけて滴下した。反応混合物を0℃で1時間撹拌した後、反応溶液を濃縮し、EtOAc (100 mL)を加えた。生成した白色固体を濾過し、EtOAc(20 mL)で洗浄した後、濾液を濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液:PE: EtOAc=6:1〜1:1)で精製し、生成物S-メチル（2S）-2-（（（4-ニトロフェノキシ）（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパンチオエート(2.7 g, 45%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.23 (m, 2H), 7.50 (m, 2H), 7.40 (m, 2H), 7.19 (m, 2H), 5.01 (m, 1H), 4.07 (m, 1H), 3.96 (m, 1H), 1.40 (m, 3H), 1.22-1.28 (m, 15H).
ステップ４
S-メチル (2S)-2-(((((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(フェノキシ)ホスホリル)アミノ)プロパンチオエートの調製
2017502975.tif 000082
室温で1-（（2R,3R,4R,5R）-3-フルオロ-4-ヒドロキシ-5-（ヒドロキシメチル）-3-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）ピリミジン-2,4（1H,3H）-ジオン(130 mg, 0.5 mmol)をTHF(5 mL)及びNMP(1.3 mL)の混合溶媒に溶解した。これを撹拌しながらtBuMgCl(1.0 M THF溶液, 1.0 mL, 1.0 mmol)を 5分間かけて滴下した。この混合物を室温で10分間撹拌した。 S-メチル（2S）-2 -（（（4-ニトロフェノキシ）（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパンチオエート(400 mg, 1 mmol)のTHF溶液(3 mL)を5分間かけて滴下した。反応混合物を55℃で終夜撹拌した後、室温まで冷却し、メタノール(3 mL)を加え、反応を停止させた。反応溶液を濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液:CH2Cl2:MeOH=50:1〜10:1)で精製し、生成物 S-メチル (2S)-2-(((((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(フェノキシ)ホスホリル)アミノ)プロパンチオエート(130 mg, 50%, エピマー比 SP/RP = 2.2:1)を得た。
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.60-7.65 (m, 1H), 7.38-7.42 (m, 2H), 7.21-7.31 (m, 3H), 6.15 (m, 1H), 5.62-5.69 (m, 1H), 4.55-4.59 (m, 1H), 4.40-4.45 (m, 1H), 4.12-4.15 (m, 1H), 3.94-4.06 (m, 2H), 2.25-2.29 (m, 3H), 1.30-1.40 (m, 6H);
31P NMR (162 MHz, CD3OD): δ 3.83, 3.54;
MS m/z (ESI): 518.0 [M+H]+.
【実施例１９】
【００８５】
ステップ１
S-（tert-ブチル）（S）-2-（（tert-ブトキシカルボニル）アミノ）プロパンチオエートの調製
2017502975.tif 000083
N-tert-ブチルオキシカルボニル-L-アラニン(9.0 g, 48 mmol）及びDCC(10.0 g, 48 mmol)をCH2Cl2 (60 mL)に溶解した。この溶液を35℃で15分間撹拌した後、t-ブチルメルカプタン(3.6 g, 40 mmol)及びHOBt(650 mg, 5 mmol)を加えた。反応混合物を35℃で終夜撹拌した。この懸濁液を濾過し、濾過ケーキをCH2Cl2(60 mL)で洗浄した。濾液を減圧下で濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: PE:EtOAc = 20:1 〜 6:1)で精製し、生成物S-（tert-ブチル）（S）-2-（（tert-ブトキシカルボニル）アミノ）プロパンチオエート(2.2 g, 17%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 5.05 (d, J = 6.8Hz, 1H), 4.31 (m, 1H), 1.49 (s, 9H), 1.45 (s, 9H), 1.35 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
ステップ２
S-（tert-ブチル）（S）-2-アミノプロパンチオエート塩酸塩の調製
2017502975.tif 000084
S-（tert-ブチル）（S）-2-（（tert-ブトキシカルボニル）アミノ）プロパンチオエートをHClのジオキサン溶液(4N, 20 mL)に溶解した。反応混合物を30℃で2 時間撹拌した。LC-MSにより反応の完了を確認した後、反応混合物を減圧下で濃縮し、粗生成物S-（tert-ブチル）（S）-2-アミノプロパンチオエート塩酸塩(1.7 g, 粗生成物の収率 100%)を得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.59 (s, 3H), 4.14 (m, 1H), 1.48 (s, 9H), 1.43 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
ステップ３
S-（tert-ブチル）（2S）-2-（（（4-ニトロフェノキシ）（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパンチオエートの調製
2017502975.tif 000085
室温でフェニルホスホロジクロリデート(1.7 g, 8.0 mmol)をCH2Cl2(15 mL)に溶解した。この溶液を-78℃まで冷却した後、4-ニトロフェノール(1.25 g, 9.0 mmol)及びTEA(0.9 g, 9.0 mmol)のCH2Cl2溶液(15 mL)を10分間かけて滴下した。この混合物を撹拌しながら室温まで加熱した。S-（tert-ブチル）（S）-2-アミノプロパンチオエート塩酸塩(1.7 g, 8.5 mmol)のCH2Cl2溶液(15 mL)を0℃まで冷却した後、前記混合物を滴下し、そしてTEA (1.8 g, 18 mmol)を5分間かけて滴下した。この反応混合物を0℃で1時間撹拌した後、反応溶液を濃縮し、EtOAc(50 mL)を加えた。生成した白色固体を濾過し、EtOAc(20 mL)で洗浄し、そして濾液を濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: PE:EtOAc=9:1〜6:4)で精製し、生成物S-（tert-ブチル）（2S）-2 -（（（4-ニトロフェノキシ）（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパンチオエート(1.9 g, 53%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.22 (m, 2H), 7.40 (m, 4H), 7.22 (m, 3H), 4.11 (m, 1H), 3.93 (m, 1H), 1.42 (m, 9H), 1.37 (m, 3H).
ステップ４
S-(tert-ブチル)(2S)-2-(((((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(フェノキシ)ホスホリル)アミノ)プロパンチオエートの調製
2017502975.tif 000086
室温で1-（（2R,3R,4R,5R）-3-フルオロ-4-ヒドロキシ-5-（ヒドロキシメチル）-3-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）ピリミジン-2,4（1H,3H）-ジオン(130 mg, 0.5 mmol)をTHF(5 mL)及びNMP(1.3 mL)の混合溶媒に溶解した。これを撹拌しながらtBuMgCl (1.0 M THF溶液, 1.0 mL, 1.0 mmol)を5分間かけて滴下した。この混合物を室温で10分間撹拌した。S-（tert-ブチル）（2S）-2 -（（（4-ニトロフェノキシ）（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパンチオエート(400 mg, 1 mmol)のTHF溶液(3 mL)を5分間かけて滴下した。この反応混合物を55℃で終夜撹拌した後、室温まで冷却し、メタノール(3 mL)を加え、反応を停止させた。反応溶液を濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー (溶離液:CH2Cl2:MeOH=50:1〜10:1)で精製し、生成物 S-(tert-ブチル) (2S)-2-(((((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(フェノキシ)ホスホリル)アミノ)プロパンチオエート(134 mg, 49%, エピマー比 SP/RP = 2.2:1)を得た。
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.64-7.66 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.38-7.42 (m, 2H), 7.21-7.30 (m, 3H), 6.17 (m, 1H), 5.64-5.71 (m, 1H), 4.54-4.59 (m, 1H), 4.38-4.45 (m, 1H), 4.12-4.15 (m, 1H), 3.88-3.96 (m, 2H), 1.28-1.50 (m, 15H);
31P NMR (162 MHz, CD3OD): δ 3.49；
MS m/z (ESI): 560.0 [M+H]+.
【実施例２０】
【００８６】
ステップ１
S - シクロヘキシル（2S）-2-（（（4-ニトロフェノキシ）（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパンチオエートの調製
2017502975.tif 000087
室温でフェニルホスホロジクロリデート(1.7 g, 8.0 mmol)をCH2Cl2(15 mL)に溶解した。この溶液を-78℃まで冷却し、4-ニトロフェノール(1.25 g, 9.0 mmol)及びTEA(0.9 g, 9.0 mmol)のCH2Cl2溶液(15 mL)を10分間かけて滴下した。この混合物を撹拌しながら室温まで加熱した。塩酸S - シクロヘキシル（S）-2-アミノプロパンチオエート(1.8 g, 8.0 mmol)のCH2Cl2溶液(15 mL)を0℃まで冷却した後、前記混合物を滴下し、そしてTEA(1.8 g, 18 mmol)を5分間かけて滴下した。この反応混合物を0℃で1時間撹拌した後、反応溶液を濃縮し、EtOAc(50 mL)を加えた。生成した白色固体を濾過し、EtOAc(20 mL)で洗浄した後、濾液を濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: PE: EtOAc=9:1〜6:4)で精製し、生成物S-シクロヘキシル（2S）-2-（（（4-ニトロフェノキシ）（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパンチオエート(2.5 g, 70%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.22 (m, 2H), 7.40 (m, 4H), 7.22 (m, 3H), 4.18 (m, 1H), 3.88 (m, 1H), 3.47 (m, 1H), 1.84 (m, 2H), 1.67 (m, 2H), 1.57 (m, 1H), 1.24-1.45 (m, 8H).
ステップ２
S-シクロヘキシル(2S)-2-(((((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(フェノキシ)ホスホリル)アミノ)プロパンチオエートの調製
2017502975.tif 000088
室温で1-（（2R,3R,4R,5R）-3-フルオロ-4-ヒドロキシ-5-（ヒドロキシメチル）-3-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）ピリミジン-2,4（1H,3H）-ジオン(130 mg, 0.5 mmol)をTHF(5 mL)及びNMP(1.3 mL)の混合溶媒に溶解した。これを撹拌しながらtBuMgCl (1.0 M THF溶液, 1.0 mL, 1.0 mmol)を5分間かけて滴下した。この混合物を室温で10分間撹拌した。S-シクロヘキシル（2S）-2-（（（4-ニトロフェノキシ）（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパンチオエート(424 mg, 1.0 mmol)のTHF(3 mL)溶液を5分間かけて滴下した。この反応混合物を55℃で終夜撹拌した後、室温まで冷却し、メタノール(3 mL)を加え、反応を停止させた。この反応溶液を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液:CH2Cl2:MeOH=50:1〜10:1)で精製し、生成物S-シクロヘキシル (2S)-2-(((((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(フェノキシ)ホスホリル)アミノ)プロパンチオエート(122 mg, 42%, エピマー比 SP/RP = 2.2:1)を得た。
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.62-7.66 (m, 1H), 7.38-7.42 (m, 2H), 7.21-7.31 (m, 3H), 6.15 (d, J = 18.8 Hz, 1H), 5.65-5.71 (m, 1H), 4.55-4.59 (m, 1H), 4.40-4.45 (m, 1H), 4.12-4.15 (m, 1H), 3.94-4.02 (m, 2H), 3.40-3.43 (m, 1H), 1.87 (m, 2H), 1.71 (m, 2H), 1.48 (m, 1H), 1.29-1.48 (m, 11H);
31P NMR (162 MHz, CD3OD): δ 3.64, 3.51;
MS m/z (ESI): 586.2 [M+H]+.
【実施例２１】
【００８７】
ステップ１
S-イソプロピル（2S）-2-（（（4-ニトロフェノキシ）（4-シクロプロピルフェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパンチオエートの調製
2017502975.tif 000089
4-ニトロフェニルホスホロジクロリデート(1.75 g, 6.75 mmol)をCH2Cl2(15 mL)に溶解した。この溶液を-78℃まで冷却した後、4-シクロプロピルフェノール(1.0 g, 7.5 mmol)及びTEA(0.75 g, 7.5 mmol)のCH2Cl2溶液(15 mL)を滴下した。この混合物を同温度で30分間撹拌した後、徐々に0℃まで加熱した。S-イソプロピル（S）-2-アミノプロパンチオラート塩酸塩(1.3 g, 6.75 mmol)のCH2Cl2溶液(15 mL)を0℃まで冷却した後、前記混合物を滴下し、そしてTEA(1.5 g, 15 mmol)を滴下した。この反応混合物を0℃で1時間撹拌した後、反応溶液を減圧下で濃縮し、EtOAc(100 mL)を加えた。生成した白色固体を濾過し、濾液を濃縮し、黄色の油状液体を得た。これをカラムクロマトグラフィー(溶離液:PE:EtOAc=9:1〜1.5:1)で精製し、生成物S-イソプロピル（2S）-2-（（（4-ニトロフェノキシ）（4-シクロプロピルフェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパンチオエート(2.1 g, 70%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.20-8.23 (m, 2H), 7.36-7.41 (m, 2H), 7.09-7.13 (m, 2H), 7.01-7.04 (m, 2H), 4.13-4.17 (m, 1H), 3.89-3.93 (m, 1H), 3.57-3.61 (m, 1H), 1.86-1.88 (m, 1H), 1.28-1.40 (m, 3H), 1.24-1.28 (m, 6H), 0.92-0.98 (m, 2H), 0.62-0.66 (m, 2H).
ステップ２
S-イソプロピル (2S)-2-(( (((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(4-シクロプロピルフェノキシ)ホスホリル)アミノ)プロパンチオエートの調製
2017502975.tif 000090
室温で1-（（2R,3R,4R,5R）-3-フルオロ-4-ヒドロキシ-5-（ヒドロキシメチル）-3-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）ピリミジン-2,4（1H,3H）-ジオン(130 mg, 0.5 mmol)をTHF(5 mL)及びNMP(1.3 mL)の混合溶媒に溶解した。これを撹拌しながらtBuMgCl (1.0 M THF溶液, 1.0 mL, 1.0 mmol) 5分間かけて滴下した。この混合物を室温で10分間撹拌した。 S-イソプロピル（2S）-2 -（（（4-ニトロフェノキシ）（4-シクロプロピルフェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパンチオエート(464 mg, 1.0 mmol)のTHF溶液(3 mL)を5分間かけて滴下した。この反応混合物を55℃で終夜撹拌した後、室温まで冷却し、メタノール(3 mL)を加え、反応を停止させた。この反応溶液を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液:CH2Cl2:MeOH=50:1〜10:1)で精製し、生成物S-イソプロピル (2S)-2-(((((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(4-シクロプロピルフェノキシ)ホスホリル)アミノ)プロパンチオエート(60 mg, 20%, エピマー比 SP/RP = 4.7:1)を得た。
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.59-7.62 (m, 1H), 7.16-7.18 (m, 2H), 7.07-7.10 (m, 2H), 6.15 (d, J = 19.2 Hz, 1H), 5.62-5.69 (m, 1H), 4.54-4.58 (m, 1H), 4.38-4.43 (m, 1H), 4.12-4.14 (m, 1H), 3.93-3.99 (m, 2H), 3.48-3.55 (m, 1H), 1.89-1.93 (m, 1H), 1.26-1.40 (m, 12H), 0.93-0.99 (m, 2H), 0.63-0.67 (m, 2H);
31P NMR (162 MHz, CD3OD): δ 3.80, 3.71;
MS m/z (ESI): 586.2 [M+H]+.
【実施例２２】
【００８８】
ステップ１
S-イソプロピル（2S）-2 -（（（4-ニトロフェノキシ）（（5,6,7,8-テトラヒドロナフタレン-2-イル）オキソ）ホスホリル）アミノ）プロパンチオエートの調製
2017502975.tif 000091
4-ニトロフェニルホスホロジクロリデート(1.75 g, 7.0 mmol)をCH2Cl2(15 mL)に溶解した。この溶液を-78℃まで冷却した後、5,6,7,8-テトラヒドロ-2-ナフトール(1.4 g, 8.0 mmol)及びTEA(0.8 g, 8.0 mmol)のCH2Cl2溶液(15 mL)を滴下した。この混合物を同温度で30分間撹拌した後、徐々に0℃まで加熱した。S-イソプロピル（S）-2-アミノプロパンチオラート塩酸塩(1.4 g, 8.0 mmol)のCH2Cl2溶液(15 mL) 0℃まで冷却した後、前記混合物を滴下し、そしてTEA(1.5 g, 15 mmol)を滴下した。この反応混合物を0℃で1時間撹拌した後、反応溶液を減圧下で濃縮し、EtOAc(100 mL)を加えた。生成した白色固体を濾過し、濾液を濃縮し、黄色の油状液体を得た。これをカラムクロマトグラフィー(溶離液: PE:EtOAc=9:1〜1.5:1)で精製し、生成物S-イソプロピル（2S）-2-（（（4-ニトロフェノキシ）（（5,6,7,8-テトラヒドロナフタレン-2-イル）オキソ）ホスホリル）アミノ）プロパンチオエート(2.2 g, 65%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.20-8.24 (m, 2H), 7.38-7.42 (m, 2H), 6.99-7.03 (m, 1H), 6.92-7.00 (m, 2H), 4.10-4.17 (m, 1H), 3.79-3.82 (m, 2H), 3.58-3.62 (m, 1H), 2.72 (m, 4H), 1.76-1.78 (m, 4H), 1.39 (m, 3H), 1.24-1.28 (m, 6H).
ステップ２
S-イソプロピル(2S)-2-(((((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)((5,6,7,8-テトラヒドロナフタレン-2-イル)オキソ)ホスホリル)アミノ)プロパンチオエートの調製
2017502975.tif 000092
室温で1-（（2R,3R,4R,5R）-3-フルオロ-4-ヒドロキシ-5-（ヒドロキシメチル）-3-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）ピリミジン-2,4（1H,3H）-ジオン(130 mg, 0.5 mmol)をTHF(5 mL)及びNMP(1.3 mL)の混合溶媒に溶解した。これを撹拌しながらtBuMgCl(1.0 M  THF溶液, 1.0 mL, 1.0 mmol) を5分間かけて滴下した。この混合物を室温で10分間撹拌した。 S-イソプロピル(2S）-2 -(((4-ニトロフェノキシ）((5,6,7,8-テトラヒドロナフタレン-2-イル）オキソ）ホスホリル）アミノ）プロパンチオエート(480 mg, 1.0 mmol)のTHF溶液 (3 mL)を5分間かけて滴下した。この反応混合物を55℃で終夜撹拌した後、室温まで冷却し、メタノール(3 mL)を加え、反応を停止させた。反応溶液を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: CH2Cl2:MeOH=50:1〜10:1)で精製し、生成物S-イソプロピル(2S)-2-(((((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)((5,6,7,8-テトラヒドロナフタレン-2-イル)オキソ)ホスホリル)アミノ)プロパンチオエート(148 mg, 50%, エピマー比 SP/RP = 2.7:1)を得た。
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.57-7.60 (m, 1H), 7.03-7.06 (m, 1H), 6.95-7.00 (m, 2H), 6.15 (d, J = 20.4 Hz, 1H), 5.57-5.64 (m, 1H), 4.55-4.59 (m, 1H), 4.38-4.45 (m, 1H), 4.12-4.14 (m, 1H), 3.93-3.99 (m, 2H), 3.51-3.56 (m, 1H), 2.74 (m, 4H), 1.80 (m, 4H), 1.27-1.39 (m, 12H);
31P NMR (162 MHz, CD3OD): δ 3.69;
MS m/z (ESI): 600.1 [M+H]+.
【実施例２３】
【００８９】
ステップ１
S-イソプロピル（2S）-2-（（（4-ニトロフェノキシ）（4-（プロピルチオ）フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパンチオエートの調製
2017502975.tif 000093
4-ニトロフェニルホスホロジクロリデート(1.75 g, 7.0 mmol)をCH2Cl2(15 mL)に溶解した。この溶液を-78℃まで冷却した後、4-（プロピルチオ）フェノール (1.4 g, 8.0 mmol)及びTEA(0.8 g, 8.0 mmol)のCH2Cl2溶液(15 mL)を滴下した。この混合物を同温度で30分間撹拌した後、0℃まで徐々に加熱した。S-イソプロピル（S）-2-アミノプロパンチオラート塩酸塩(1.4 g, 8.0 mmol)のCH2Cl2溶液(15 mL)を0℃まで冷却した後、前記混合物を滴下し、そしてTEA(1.5 g, 15 mmol)を滴下した。この反応混合物を0℃で1時間撹拌した後、反応溶液を減圧下で濃縮し、EtOAc(100 mL)を加えた。生成した白色固体を濾過し、濾液を濃縮し、黄色の油状液体を得た。これをカラムクロマトグラフィー(溶離液:PE:EtOAc=9:1〜1.5:1)で精製し、生成物 S-イソプロピル（2S）-2 -（（（4-ニトロフェノキシ）（4-（プロピルチオ）フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパンチオエート(2.5 g, 70%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.21-8.24 (m, 2H), 7.37-7.41 (m, 2H), 7.291-7.32 (m, 2H), 7.14-7.18 (m, 2H), 4.10-4.15 (m, 1H), 3.89-3.92 (m, 1H), 3.58-3.62 (m, 1H), 2.84-2.88 (m, 2H), 1.61-1.67 (m, 2H), 1.39 (m, 3H), 1.24-1.28 (m, 6H), 0.99-1.02 (m, 3H).
ステップ２
S-イソプロピル(2S)-2-(((((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(4-(プロピルチオ)フェノキシ)ホスホリル)アミノ)プロパンチオエートの調製
2017502975.tif 000094
室温で1-（（2R,3R,4R,5R）-3-フルオロ-4-ヒドロキシ-5-（ヒドロキシメチル）-3-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）ピリミジン-2,4（1H,3H）-ジオン(130 mg, 0.5 mmol)をTHF(5 mL)及びNMP(1.3 mL)の混合溶媒に溶解した。これを撹拌しながらtBuMgCl(1.0 M THF溶液, 1.0 mL, 1.0 mmol)を5分間かけて滴下した。この混合物を室温で10分間撹拌した。 S-イソプロピル（2S）-2 -（（（4-ニトロフェノキシ）（4-（プロピルチオ）フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパンチオエート(500 mg, 1.0 mmol)のTHF溶液(3 mL)を5分間かけて滴下した。この反応混合物を55℃で終夜撹拌した後、室温まで冷却し、メタノール(3 mL)を加え、反応を停止させた。反応溶液を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液:CH2Cl2:MeOH=50:1〜10:1)で精製し、生成物 S-イソプロピル(2S)-2-(((((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(4-(プロピルチオ)フェノキシ)ホスホリル)アミノ)プロパンチオエート(141 mg, 46%, エピマー比 SP/RP = 1.5:1)を得た。
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.61-7.63 (m, 1H), 7.36-7.38 (m, 2H), 7.20-7.25 (m, 2H), 6.17 (d, J = 17.2 Hz, 1H), 5.66-5.71 (m, 1H), 4.55-4.59 (m, 1H), 4.40-4.45 (m, 1H), 4.12-4.15 (m, 1H), 3.94-4.00 (m, 2H), 3.48-3.58 (m, 1H), 2.88-2.92 (m, 2H), 1.60-1.67 (m, 2H), 1.26-1.40 (m, 12H), 1.00-1.05 (m, 3H);
31P NMR (162 MHz, CD3OD): δ 3.70;
MS m/z (ESI): 620.2 [M+H]+.
【実施例２４】
【００９０】
ステップ１
4-シクロプロピルフェニルホスホロジクロリデートの調製
2017502975.tif 000095
4-シクロプロピルフェノール(2.6 g, 19.39 mmol)をEt2O(15 mL)に溶解し、室温でTEA(2.7 mL, 19.39 mmol)をゆっくり滴下した。この混合物を15分間撹拌した。
オキシ塩化リン(3.0 g, 19.39 mmol)をEt2O(100 mL)に溶解した後、-55℃まで冷却しながら前記混合物にゆっくり滴下した。白色固体が析出した。添加終了後、反応混合物を同温度でさらに2時間撹拌し、そして室温までゆっくり加熱し、さらに終夜撹拌した。N2雰囲気下で白色固体を濾過し、濾液を濃縮し、生成物4-シクロプロピルフェニルホスホロジクロリデート(4.4 g, 91%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.18-7.14 (m, 2H), 7.12-7.08 (m, 2H), 1.94-1.86 (m, 1H), 1.03-0.96 (m, 2H), 0.71-0.65 (m, 2H); 
31P NMR (162 MHz, CDCl3) δ 3.99.
ステップ２
イソプロピル（（4-シクロプロピルフェノキシ）（パーフルオロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000096
L-アラニンイソプロピルエステル塩酸塩(2.5 g, 14.97 mmol)をCH2Cl2(30 mL) に溶解した。この溶液を-78℃まで冷却した後、N2雰囲気下でTEA(4.3 mL, 31.44 mmol)をゆっくり滴下した。この混合物を15分間撹拌した。4-シクロプロピルフェニルホスホロジクロリデートのCH2Cl2溶液(5 mL)をゆっくり滴下した。反応混合物を30分間撹拌した後、0℃までゆっくり加熱し、さらに同温度で1時間撹拌した。
ペンタフルオロフェノール(2.72 g, 14.82 mmol)をCH2Cl2(10 mL)に溶解し、0℃でTEA(2.3 mL, 16.46mmol)をゆっくり滴下した。この混合物を5分間撹拌した後、前記混合物に添加した。この反応混合物を0℃で終夜撹拌した。固体を濾過し、濾液を濃縮した。残渣をMTBE(30 ml)に溶解し、室温で30分間撹拌した後、固体を濾過した。濾液を濃縮し、生成物イソプロピル（（4-シクロプロピルフェノキシ）（パーフルオロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(6.03 g, 82%, エピマー比 SP/RP = 1:1)を得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.16-7.08 (m, 4H), 6.80-6.73 (m, 1H), 4.91-4.84 (m, 1H), 3.97-3.87 (m, 1H), 1.95-1.89 (m, 1H), 1.33-1.23 (m, 3H), 1.18-1.14 (m, 6H), 0.96-0.90 (m, 2H), 0.65-0.59 (m, 2H);    
31P NMR (162 MHz, DMSO-d6) δ 0.52.
ステップ３
イソプロピル（（S） -（4-シクロプロピルフェノキシ）（パーフルオロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000097
ステップ２で得た生成物イソプロピル（（4-シクロプロピルフェノキシ）（パーフルオロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(エピマー比 SP/RP = 1:1)をPE:EtOAc = 5:1で粉砕した。この固体を濾過し、PEで洗浄した後、オイルポンプで乾燥させ、生成物イソプロピル（（S） -（4-シクロプロピルフェノキシ）（パーフルオロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(2.99 g, 40%, HPLC純度:97%)を得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.09 (s, 4H), 6.80 (dd, J = 14.0, 10.0 Hz, 1H), 4.89-4.83 (m, 1H), 3.96-3.87 (m, 1H), 1.95-1.89 (m, 1H), 1.26 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.16-1.14 (m, 6H), 0.96-0.90 (m, 2H), 0.65-0.60 (m, 2H); 
31P NMR (162 MHz, DMSO-d6) δ 0.52.
ステップ４
イソプロピル ((S)-(4-シクロプロピルフェノキシ)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)ホスホリル)-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000098
1-（（2R,3R,4R,5R）-3-フルオロ-4-ヒドロキシ-5-（ヒドロキシメチル）-3-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）ピリミジン-2,4（1H,3H）-ジオン(440 mg, 1.69 mmol)をTHF(10 mL)に溶解した。この溶液を-5℃まで冷却した後、N2雰囲気下でtBuMgCl(1 M THF溶液, 3.6 mL, 3.6 mmol)を滴下した。この混合物を同温度で30分間撹拌した後、室温まで加熱し、さらに30分間撹拌した。この反応混合物を氷-水浴の中に放置し、イソプロピル（（S） -（4-シクロプロピルフェノキシ）（パーフルオロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニン(1.0 g, 2.03 mmol)のTHF溶液(3.6 mL)をゆっくり滴下した。この反応混合物を同温度で終夜撹拌した後、1 N HCl(2 mL)を加え、反応を停止させた。この反応溶液を濃縮し、CH2Cl2(50 mL)及び1 N HCl(20 mL)を加えた。有機層を分離し、水層をCH2Cl2(50 mL × 2)で抽出した。有機層を合わせ、重炭酸ナトリウム飽和溶液(30 mL)及び飽和鹹水(30 mL)で順次に洗浄した。その後、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、 濾過した。濾液を濃縮し、粗生成物を得た。得られた固体をCH2Cl2の中で再結晶し、生成物イソプロピル((S)-(4-シクロプロピルフェノキシ)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)ホスホリル)-L-アラニネート(680 mg, 70%, HPLC純度: 98%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.25 (brs, 1H), 7.48 (d, J = 7.6, 1H), 7.11-7.08 (m, 2H), 7.03-7.01 (m, 2H), 6.18 (d, J = 18.4 Hz, 1H), 5.70 (d, J = 8.0, 1H), 5.03-4.99 (m, 1H), 4.55-4.43 (m, 2H), 4.13-4.08 (m, 2H), 3.96-3.91 (m, 2H), 1.90-1.81 (m, 1H), 1.45-1.32 (m, 6H), 1.31-1.19 (m, 6H), 0.98-0.91 (m, 2H), 0.66-0.61 (m, 2H); 
31P NMR (162 MHz, CDCl3) δ 3.65; 
19F NMR (376 MHz, CDCl3) δ -161.79; 
MS m/z (ESI): 570.1 [M+H]+.
ステップ５
イソプロピル((R)-(4-シクロプロピルフェノキシ)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)ホスホリル)-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000099
1-（（2R,3R,4R,5R）-3-フルオロ-4-ヒドロキシ-5-（ヒドロキシメチル）-3-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）ピリミジン-2,4（1H,3H）-ジオン(220 mg, 0.845 mmol)をTHF(5 mL)に溶解した。この溶液を-5℃まで冷却した後、N2雰囲気下でtBuMgCl(1 M THF溶液, 1.8 mL, 1.8 mmol)を滴下した。この混合物を同温度で30分間撹拌した後、室温まで加熱し、さらに30分間撹拌した。この混合物を氷-水浴の中に放置し、イソプロピル（（4-シクロプロピルフェノキシ）（パーフルオロフェノキシ）ホスホリルイル）-L-アラニン(500 mg, 1.02 mmol, 実施例21のステップ 2 で得た生成物)のTHF溶液(3 mL)をゆっくり滴下した。この反応混合物を同温度で終夜撹拌した後、1 N HCl(1 mL)を加え、反応を停止させた。反応溶液を減圧下で濃縮し、残渣をCH2Cl2(30 mL)及び1 N HCl(15 mL)に溶解した。有機層を分離し、水層をCH2Cl2(30 mL × 2)で抽出した。有機層を合わせ、重炭酸ナトリウム飽和溶液(20 mL)及び飽和鹹水(20 mL)で順次に洗浄した。その後、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、粗生成物を得た。これをカラムクロマトグラフィー(溶離液:CH2Cl2:iPrOH=20:1)で精製し、生成物イソプロピル((R)-(4-シクロプロピルフェノキシ)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)ホスホリル)-L-アラニネート(118 mg, 24%, HPLC純度: 98%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.95 (s, 1H), 7.26-7.24 (m, 1H), 7.11-7.09 (m, 2H), 7.03-7.00 (m, 2H), 6.17 (d, J = 18.8 Hz, 1H), 5.59 (d, J = 8.0, 1H), 5.05-4.99 (m, 1H), 4.51-4.45 (m, 2H), 4.10 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.06-3.88 (m, 2H), 3.76 (dd, J = 24.0, 9.2, 1H), 1.87-1.82 (m, 1H), 1.39-1.28 (m, 6H), 1.27-1.21 (m, 6H), 0.98-0.91 (m, 2H), 0.66-0.55 (m, 2H); 
31P NMR (162 MHz, CDCl3) δ 4.31; 
19F NMR (376 MHz, CDCl3) δ -162.04; 
MS m/z (ESI): 570.1 [M+H]+.
【実施例２５】
【００９１】
イソプロピル((S)-(((2R,3R,4R,5R)-3-アセトキシ-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(4-シクロプロピルフェノキシ)ホスホリル)-L-アラニネート
2017502975.tif 000100
イソプロピル（S）-（4-シクロプロピルフェノキシ）（（（2R,3R,4R,5R）
-5-（2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1（2H）-イル）-4-フッ素-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）メトキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(57 mg, 0.10 mmol)をTHF(7 mL)に溶解した。この溶液に塩化アセチル(0.035 mL, 0.50 mmol)及びDMAP(61 mg, 0.50 mmol)を順次に加えた。この反応混合物を室温で3時間撹拌した後、EtOAcで希釈した。有機層を分離し、水及び飽和鹹水で順次に洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。残渣を調製用TLC(溶離液: CH2Cl2:iPrOH = 20:1)で精製し、生成物イソプロピル((S)-(((2R,3R,4R,5R)-3-アセトキシ-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(4-シクロプロピルフェノキシ)ホスホリル)-L-アラニネート(45 mg, 74%, HPLC純度：98%)を得た。
1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.55 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.06 (m, 4H), 6.03 (d, J = 18.4 Hz, 1H), 5.55 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.22 (m, 1H), 4.91 (m, 1H), 4.38 (m, 1H), 4.27 (m, 2H), 3.85 (m, 1H), 3.26 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.83 (m, 1H), 1.30 (m, 6H), 1.17 (m, 6H), 0.89 (m, 2H), 0.58 (m, 2H);
31P NMR (162 MHz, MeOD) δ 3.83; 
19F NMR (376 MHz, MeOD) δ -157.42;
MS m/z (ESI): 612.2 [M+H]+.
【実施例２６】
【００９２】
ステップ１
イソプロピル（（S）-（（2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル）オキシ）（パーフルオロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラネートの調製
2017502975.tif 000101
2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-オール(20.0 g, 150 mmol)をEt2O (150 mL)に溶解し、室温でDIPEA (19.4 g, 150 mmol) をゆっくり滴下した。この混合物を15分間撹拌した。
オキシ塩化リン(23.0 g, 150 mmol)をEt2O(300 mL)に溶解し、-78℃まで冷却しながら前記混合物を1.5時間かけてゆっくり滴下した。白色固体が析出した。この反応混合物を室温までゆっくり加熱し、終夜撹拌した。LC-MSにより（2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル）ホスホロジクロリデートの生成を確認した。
L-アラニンイソプロピルエステル塩酸塩(24.0 g, 143 mmol)をCH2Cl2(400 ml) に溶解し、DIPEA(39.0 g, 300 mmol)を加えた後、混合物を均一に撹拌した。この溶液を予め-78℃に2時間冷却した（2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル）ホスホロジクロリデート溶液に滴下した。次に、この反応混合物を0℃までゆっくり加熱した。
ペンタフルオロフェノール(30.3 g, 165 mmol)をCH2Cl2(100 mL)に溶解した。この溶液を氷-水浴の中に放置した後、撹拌しながらDIPEA(21.5g, 165mmol)をゆっくり滴下した。0℃でこの溶液をL-アラニンイソプロピルエステル塩酸塩を含有する前記溶液に0.5 時間かけてゆっくり滴下した後、室温で終夜撹拌した。
前記溶液を水(2 L)、0.2 N HCl(2 L × 2)及び飽和鹹水(300 mL)で順次に洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。回転蒸発により溶媒を除去し、粗生成物(67.5 g)を得た。
前記粗生成物にPE(1.25 L)及びEtOAc(40 mL)を加えた。この懸濁液を室温で終夜撹拌した後、濾過した。濾過ケーキをPE(50 mL)で洗浄した後、固体を真空ポンプで乾燥させ、生成物イソプロピル（（S）-（（2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル）オキシ）（パーフルオロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラネート(14.5 g, 20%)を得た。
1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.20 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 7.01 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.97 (m, 1H), 4.02 (m, 1H), 2.90 (m, 4H), 2.12 (m, 2H), 1.38 (dd, J = 7.2, 1.0 Hz, 3H), 1.23 (m, 6H); 
19F NMR (376 MHz, MeOD) δ -155.35 (d, J = 22.4 Hz, 2F), -163.11 (t, J = 23.2 Hz, 1F), -165.78 (t, J = 23.2 Hz, 3F).
ステップ２
イソプロピル((S)-((2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル)オキソ)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)ホスホリル)-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000102
1-（（2R,3R,4R,5R）-3-フルオロ-4-ヒドロキシ-5-（ヒドロキシメチル）-3-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）ピリミジン-2,4（1H,3H）-ジオン(2.95 g, 11.36 mmol)をTHF (100 mL)に溶解した。この溶液を0℃まで冷却した後、N2雰囲気下でtBuMgCl(1 M THF溶液, 22.72 mL, 22.72 mmol)を滴下した。この混合物を同温度で30分間撹拌した後、室温まで加熱し、さらに30分間撹拌した。次に、この混合物を氷-水浴の中に放置し、イソプロピル（（S）-（（2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル）オキシ）（パーフルオロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラネート (5.6 g, 11.36 mmol)のTHF溶液(50 mL)をゆっくり滴下した。この反応混合物を同温度で終夜撹拌した。LC-MSにより目的生成物のメインピークを確認した。反応溶液に1 N HCl(20 mL)を加え、反応を停止させた後、濃縮した。残渣をCH2Cl2(300 mL)及び1 N HCl(100 mL)に溶解した。有機層を分離し、水層をCH2Cl2(50 mL × 2)で抽出した。有機層を合わせ、重炭酸ナトリウム飽和溶液(100 mL)及び飽和鹹水(100 mL)で順次に洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。濾液をシリカゲルで濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: CH2Cl2:iPrOH = 60:1〜12:1)で精製し、生成物 イソプロピル((S)-((2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル)オキソ)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)ホスホリル)-L-アラニネート(3.9 g, 67%)を得た。
1H NMR (400 MHz, MeOD) 7.61 (d, J = 8.0Hz, 1H), 7.18 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 7.01 (dd, J = 8.4Hz, 0.8 Hz, 1H), 6.14 (d, J = 19.6 Hz, 1H), 5.57 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.98 (m, 1H), 4.54 (m, 1H), 4.38 (m, 1H), 4.12 (m, 1H), 3.95 (m, 2H), 2.88(m, 4H), 2.10 (m, 2H), 1.39-1.33 (m, 6H), 1.24 (m, 6H); 
31P NMR (162 MHz, MeOD) δ 3.89; 
19F NMR (376 MHz, CDCl3) δ -161.97; 
MS m/z (ESI): 570.1 [M+H]+.
【実施例２７】
【００９３】
イソプロピル((S)-(((2R,3R,4R,5R)-3-アセトキシ-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(4-シクロプロピルフェノキシ)ホスホリル)-L-アラニネート
2017502975.tif 000103
イソプロピル((S)-((2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル)オキソ)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)ホスホリル)-L-アラニネート(57 mg, 0.10 mmol)をTHF(7 mL)に溶解した。この溶液に塩化アセチル(0.035 mL, 0.50 mmol)及びDMAP (61 mg, 0.50 mmol)を順次に加えた。この反応混合物を室温で3時間撹拌した後、EtOAcで希釈した。有機層を分離し、水及び飽和鹹水で順次に洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。残渣を調製用TLC(溶離液: CH2Cl2:PrOH=20:1)で精製し、生成物イソプロピル((S)-(((2R,3R,4R,5R)-3-アセトキシ-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(4-シクロプロピルフェノキシ)ホスホリル)-L-アラニネート
(40 mg, 65%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.37 (s, 1H), 7.48 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 8.0Hz, 1H), 7.01 (s, 1H), 6.88 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.13 (d, J = 18.4 Hz, 1H), 5.46 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.12 (dd, J = 20.4, 8.0 Hz, 1H), 4.94 (m, 1H), 4.47 (m, 1H), 4.17 (m, 1H), 3.90 (m, 2H), 2.78 (m, 4H), 2.11 (s, 3H), 2.01 (m, 2H), 1.29 (m, 6H), 1.16 (m, 6H);
31P NMR (162 MHz, CDCl3) δ 2.97; 
19F NMR (376 MHz, CDCl3) δ -157.52;
MS m/z (ESI): 612.3 [M+H]+.
【実施例２８】
【００９４】
ステップ１
イソプロピル（（S）-（（5,6,7,8-テトラヒドロナフタレン-2-イル）オキソ）（パーフルオロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニンの調製
2017502975.tif 000104
5,6,7,8-テトラヒドロナフタレーン-2-オール(23.0 g, 150 mmol)をEt2O (150 mL)に溶解し、室温でDIPEA(19.4 g, 150 mmol)をゆっくり滴下した。この混合物を15分間撹拌した。
オキシ塩化リン(23.0 g, 150 mmol)をEt2O(300 mL)に溶解し、-78℃まで冷却しながら前記混合物を1.5時間かけてゆっくり滴下した。白色固体が析出した。この反応混合物を室温までゆっくり加熱し、終夜撹拌した。LC-MSにより （5,6,7,8-テトラヒドロナフタレーン-2-イル）ホスホロジクロリデートの生成を確認した。
L-アラニンイソプロピルエステル塩酸塩(24.0 g, 143 mmol)をCH2Cl2(400ml)に溶解し、DIPEA(39.0 g, 300 mmol)を加えた後、混合物を均一に撹拌した。この溶液を予め-78℃に2 時間冷却された（5,6,7,8-テトラヒドロナフタレーン-2-イル）ホスホロジクロリデート溶液に滴下した後、反応混合物を0℃までゆっくり加熱した。
ペンタフルオロフェノール(30.3 g, 165 mmol)をCH2Cl2(100 mL)に溶解した。この溶液を氷浴の中に放置した後、撹拌しながらDIPEA(21.5g, 165mmol)をゆっくり滴下した。得られた溶液を0℃でL-アラニンイソプロピルエステル塩酸塩を含有する前記溶液に0.5時間かけてゆっくり滴下し、室温で終夜撹拌した。
前記溶液を水(2 L)、0.2 N HCl(2 L × 2)及び飽和鹹水(300 mL)で順次に洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮し、粗生成物(72.4 g)を得た。
前記粗生成物にPE(500 L)及びEtOAc(15 mL)を加えた。この懸濁液を室温で3時間撹拌した後、0℃まで冷却し、0℃で1時間撹拌した。この溶液を濾過した後、濾過ケーキを予め0℃に冷却したPE(50 mL)で洗浄した。回転蒸発により固体中の溶媒を除去し、生成物(32.4 g)を得た。MeODを用いた19FNMRによりエピマー比が4:1であることを確認した。この固体をPE (250 mL)中で終夜撹拌した後、濾過した。溶媒を除去し、生成物(23.4 g)を得た。そのエピマー比は15:1であった。この固体を予めに0℃ に冷却されたPE (300 mL)中で再度に1時間撹拌した後、濾過した。溶媒を除去し、生成物イソプロピル（（S）-（（5,6,7,8-テトラヒドロナフタレン-2-イル）オキソ）（パーフルオロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニン(22.0 g, 28%)を得た。
1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.06 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 6.97 (m, 2H), 4.95 (m, 1H), 4.02 (m, 1H), 2.76 (m, 4H), 1.81 (m, 4H), 1.39 (dd, J = 7.2, 1.2 Hz, 3H), 1.23 (m, 6H); 
19F NMR (376 MHz, MeOD) δ -155.33 (d, J = 18.8 Hz, 2F), -163.14 (t, J = 23.2 Hz, 1F), -165.80 (t, J = 20.2 Hz, 3F).
ステップ２
イソプロピル（（S）-（（（2R,3R,4R,5R）-5-（2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1（2H）-イル）-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）メトキシ）（（5,6,7,8-テトラヒドロナフタレン-2-イル）オキシ）ホスホリル）-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000105
1-（（2R,3R,4R,5R）-3-フルオロ-4-ヒドロキシ-5-（ヒドロキシメチル）-3-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）ピリミジン-2,4（1H,3H）-ジオン(2.95 g, 11.36 mmol)をTHF (100 mL)に溶解した後、この溶液を0℃まで冷却し、N2雰囲気下でtBuMgCl(1 M THF溶液, 22.72 mL, 22.72 mmol)を滴下した。この混合物を同温度で30分間撹拌した後、氷-水浴の中に放置した。 イソプロピル（（S） -（（5,6,7,8-テトラヒドロナフタレン-2-イル）オキソ）（パーフルオロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニン(5.6 g, 11.36 mmol)のTHF溶液(50 mL)を滴下した。この反応混合物を同温度で終夜撹拌した後、1 N HCl(20 mL)を加え、反応を停止させた。反応溶液を濃縮し、残渣をCH2Cl2(300 mL)及び1 N HCl(100 mL)に溶解した。有機層を分離し、水層をCH2Cl2(50 mL × 2)で抽出した。有機層を合わせ、重炭酸ナトリウム飽和溶液(100 mL)及び飽和鹹水(100 mL)で順次に洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: CH2Cl2:iPrOH = 60:1〜12:1)で精製し、生成物イソプロピル（（S）-（（（2R,3R,4R,5R）-5-（2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1（2H）-イル） -4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）メトキシ）（（5,6,7,8-テトラヒドロナフタレン-2-イル）オキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(2.2 g, 34%)を得た。
1H NMR (400 MHz, MeOD) 7.59 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.04 (m, 1H), 6.97 (m, 1H), 6.14 (d, J = 18.8 Hz, 1H), 5.55 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.96 (m, 1H), 4.55 (m, 1H), 4.38 (m, 1H), 4.12 (m, 1H), 3.94 (m, 2H), 2.74 (m, 4H), 1.79 (m, 4H), 1.39-1.33 (m, 6H), 1.24 (m, 6H); 
31P NMR (162 MHz, MeOD) δ 3.87; 
19F NMR (376 MHz, MeOD) δ -162.11; 
MS m/z (ESI): 584.0 [M+H]+.
【実施例２９】
【００９５】
イソプロピル((S)-(((2R,3R,4R,5R)-3-アセトキシ-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)((5,6,7,8-テトラヒドロナフタレン-2-イル)オキソ)ホスホリル)-L-アラニネート
2017502975.tif 000106
イソプロピル（S）-（（5,6,7,8-テトラヒドロナフタレン-2-イル）オキソ）
（（（2R,3R,4R,5R）-5-（2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1（2H）-イル）-4-フッ素-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）メトキシ）ホスホリル）-L-アラニネオエート(60 mg, 0.10 mmol)をTHF(7 mL)に溶解した。この溶液に塩化アセチル(0.07 mL, 0.10 mmol)、DMAP(122 mg, 1.0 mmol)及びDIPEA(260 mg, 2.0 mmol)を順次に加えた。この反応混合物を室温で3時間撹拌した後、EtOAcで希釈した。有機層を分離し、水及び飽和鹹水で順次に洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。残渣を調製用TLC(溶離液: CH2Cl2:iPrOH = 60:1〜12:1)で精製し、生成物 イソプロピル((S)-(((2R,3R,4R,5R)-3-アセトキシ-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)((5,6,7,8-テトラヒドロナフタレン-2-イル)オキソ)ホスホリル)-L-アラニネート(29 mg, 40%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.14 (s, 1H), 7.54 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.99 (m, 1H), 6.92 (m, 2H), 6.20 (d, J = 18.4 Hz, 1H), 5.51 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.17 (dd, J = 20.4, 9.2 Hz, 2H), 5.00 (m, 1H), 4.55 (m, 1H), 4.31 (m, 1H), 4.22 (m, 1H), 3.92 (m, 2H), 2.70 (m, 4H), 2.17 (s, 3H), 1.76 (m, 4H), 1.34 (m, 6H), 1.24 (m, 6H);
31P NMR (162 MHz, CDCl3) δ 2.87; 
19F NMR (376 MHz, CDCl3) δ -157.54;
MS m/z (ESI): 626.3 [M+H]+.
【実施例３０】
【００９６】
ステップ１
イソプロピル（（S）-（4-（プロピルチオ）フェノキシ）（パーフルオロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000107
4-（プロピルチオ）フェノール(14.7 g, 87.5 mmol)をEt2O(100 mL)に溶解し、室温でDIPEA(11.3 g, 87.5 mmol)をゆっくり滴下した。この混合物を15分間撹拌した。
オキシ塩化リン(14.0 g, 91.9 mmol)をEt2O(200 mL)に溶解し、-78℃まで冷却しながら前記混合物を1.5時間かけてゆっくり滴下した。白色固体が析出した。添加後、混合物を室温までゆっくり加熱し、終夜撹拌した。LC-MSにより（4-（プロピルチオ）フェニル）ホスホロジクロリデートの生成を確認した。
L-アラニンイソプロピルエステル塩酸塩(14.0 g, 83.8 mmol)をCH2Cl2(180 ml)に溶解し、DIPEA(22.8 g, 177 mmol)を加えた。この混合物を均一に撹拌した。（4-（プロピルチオ）フェニル）ホスホロジクロリデート溶液を-78℃まで冷却し、前記混合物に2 時間かけて滴下した。次に、この混合物を0℃までゆっくり加熱した。
ペンタフルオロフェノール(17.7 g, 96 mmol)をCH2Cl2(120 mL)に溶解した。この溶液を氷-水浴の中に放置し、撹拌しながらDIPEA(12.4 g，96 mmol)をゆっくり滴下した。得られた溶液を予め0℃に冷却したL-アラニンイソプロピルエステル塩酸塩を含有する前記混合物の中に0.5時間かけてゆっくり滴下した。次に、この反応混合物を室温で終夜撹拌した。
前記溶液を水(2 L)、0.2 N HCl(2 L × 2)及び飽和鹹水(200 mL)で順次に洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮し、粗生成物(40.0 g)を得た。
前記生成物にPE(650 L)及びEtOAc(130 mL)を加えた。この懸濁液を室温で終夜撹拌した。溶液を濾過し、濾過ケーキをPE(50 mL)で洗浄し、生成物イソプロピル（（S） -（4-（プロピルチオ）フェノキシ）（パーフルオロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(10.9 g, 27%)を得た。
1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.39 (m, 2H), 7.22 (m, 2H), 4.97 (m, 1H), 4.03 (m, 1H), 2.92 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.84 (m, 2H), 1.39 (dd, J = 7.2, 1.2 Hz, 3H), 1.23 (m, 6H), 1.03 (t, J = 7.2Hz, 3H); 
19F NMR (376 MHz, MeOD) δ -155.40 (d, J = 22.0 Hz, 2F), -162.95 (t, J = 22.0 Hz, 1F), -165.78 (t, J = 20.2 Hz, 3F).
ステップ２
イソプロピル(S)-4-(プロピルチオ)フェノキシ)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)ホスホリル)-L-アラニネートの調製
2017502975.tif 000108
1-（（2R,3R,4R,5R）-3-フルオロ-4-ヒドロキシ-5-（ヒドロキシメチル）-3-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）ピリミジン-2,4（1H,3H）-ジオン(1.56 g, 6.0 mmol)をTHF(50 mL)に溶解した。この溶液を0℃まで冷却した後、N2雰囲気下でtBuMgCl(1 M THF溶液, 12.0 mL, 12.0 mmol)を滴下した。この混合物を同温度で30分間撹拌した後、氷-水浴の中に放置した。 イソプロピル（（S）-（4-（プロピルチオ）フェノキシ）（パーフルオロフェノキシ）ホスホリル）-L-アラニネート(3.32 g, 6.3 mmol)のTHF溶液(25 mL)を滴下した。この反応混合物を同温度で終夜撹拌した。LC-MSにより生成物のメインピークを確認した。反応溶液に1 N HCl (12 mL)加え、反応を停止させた後、濃縮した。残渣をCH2Cl2(150 mL) 及び1 N HCl(50 mL)に溶解した。有機層を分離し、水層をCH2Cl2(25 mL × 2)で抽出した。有機層を合わせ、重炭酸ナトリウム飽和溶液(50 mL)及び飽和鹹水(50 mL)で順次に洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: CH2Cl2:iPrOH = 60:1〜12:1)で精製し、生成物イソプロピル(S)-4-(プロピルチオ)フェノキシ)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)ホスホリル)-L-アラニネート(1.9 g, 53%)を得た。
1H NMR (400 MHz, MeOD) 7.63 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.22 (dd, J = 8.8, 0.8 Hz, 2H), 6.16 (d, J = 20.0 Hz, 1H), 5.66 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.96 (m, 1H), 4.55 (m, 1H), 4.40 (m, 1H), 4.14 (m, 1H), 3.95 (m, 2H), 2.90 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 1.64 (m, 2H), 1.39-1.33 (m, 6H), 1.24 (m, 6H), 1.03 (t, J = 8.0 Hz, 3H); 
31P NMR (162 MHz, MeOD) δ 3.89; 
19F NMR (376 MHz, MeOD) δ -161.87; 
MS m/z (ESI): 604.0 [M+H]+.
【実施例３１】
【００９７】
イソプロピル((S)-(((2R,3R,4R,5R)-3-アセトキシ-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(4-(プロピルチオ)フェノキシ)ホスホリル)-L-アラニネート
2017502975.tif 000109
イソプロピル(S)-4-(プロピルチオ)フェノキシ)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)ホスホリル)-L-アラニネート(60 mg, 0.10 mmol)をTHF(7 mL)に溶解した。この溶液に塩化アセチル(0.035 mL, 0.50 mmol)及びDMAP(61 mg, 0.50 mmol)を順次に加えた。反応混合物を室温で3時間撹拌した後、有機層を水及び飽和鹹水で順次に洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。残渣EtOAcで希釈した。を調製用TLC(溶離液: CH2Cl2:iPrOH=20:1)で精製し、生成物イソプロピル ((S)-(((2R,3R,4R,5R)-3-アセトキシ-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(4-(プロピルチオ)フェノキシ)ホスホリル)-L-アラニネート(50 mg, 77%)を得た。
1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.53 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.25 (dd, J = 11.6, 2.8 Hz, 2H), 7.10 (dd, J = 8.8, 1.2 Hz, 2H), 6.01 (d, J = 20.4 Hz, 1H), 5.54 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.17 (dd, J = 20.4, 8.0 Hz, 2H), 4.85 (m, 1H), 4.38 (m, 1H), 4.22 (m, 2H), 3.83 (m, 1H), 2.78 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.50 (m, 2H), 1.26 (m, 6H), 1.17 (m, 6H), 0.96 (t, J = 7.2 Hz, 3H);
31P NMR (162 MHz, MeOD) δ 3.85; 
19F NMR (376 MHz, MeOD) δ -157.38;
MS m/z (ESI): 646.2 [M+H]+.
【実施例３２】
【００９８】
ステップ１
S-イソプロピル（S）-2-（（（S）-（パーフルオロフェノキシ）（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパンチオエート
2017502975.tif 000110
フェノール(9.4 g, 100 mmol)をEt2O(100 ml)に溶解し、室温でDIPEA (12.9 g, 100 mmol)をゆっくり滴下した。この混合物を15分間撹拌した。
オキシ塩化リン(16.0 g, 105 mmol)をEt2O(200 mL)に溶解し、-78℃まで冷却しながら前記混合物を1.5時間かけてゆっくり滴下した。白色固体が析出した。添加後、混合物を室温までゆっくり加熱し、終夜撹拌した。LC-MSによりフェニルホスホロジクロリデートの生成を確認した。
S-イソプロピル（S）-2-アミノプロパンチオラート塩酸塩(16.5 g, 90 mmol)をCH2Cl2(200 ml)に溶解し、DIPEA(23.2 g，180 mmol)を加えた。この混合物を均一に撹拌し、-78℃に2 時間冷却したフェニルホスホロジクロリデート溶液にゆっくり滴下した。この溶液を0℃までゆっくり加熱した。
ペンタフルオロフェノール(20.2 g, 110 mmol)をCH2Cl2(100 mL)に溶解した。この溶液を氷-水浴の中に放置し、撹拌しながらDIPEA(14.2 g, 110 mmol)をゆっくり滴下した。得られた溶液を予め0℃に冷却したS-イソプロピル（S）-2-アミノプロパンチオラート塩酸塩を含有する溶液に0.5時間かけてゆっくり滴下した。この混合物を室温で終夜撹拌した。
前記溶液を水(1 L)、0.2 N HCl(1 L × 2)及び飽和鹹水(200 mL)で順次に洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮し、粗生成物(46 g)を得た。
前記生成物にPE(300 L)及びEtOAc(30 mL)を加えた。この懸濁液を室温で終夜撹拌した。この溶液を濾過し、濾過ケーキをPE(50 mL)で洗浄した。固体を真空ポンプで乾燥させ、エピマーペアーを含有する粗生成物(13.5 g)を得た。この粗生成物を(PE:EtOAc = 20:1)の混合溶液中で５回パルプ化し、生成物S-イソプロピル（S）-2-（（（S）-（パーフルオロフェノキシ）（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパンチオエート(7.1 g, 15%)を得た。
1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.42 (m, 2H), 7.28 (m, 3H), 4.08 (m, 1H), 3.52 (m, 1H), 1.38 (dd, J = 7.2, 0.8 Hz, 3H), 1.26 (m, 6H); 
19F NMR (376 MHz, MeOD) δ -154.86 (d, J = 20.0 Hz, 2F), -162.92 (t, J = 21.2 Hz, 1F), -165.65 (t, J = 18.4 Hz, 3F);
31P NMR (162 MHz, MeOD) δ 0.07.
ステップ２
S-イソプロピル(S)-2-(((S)-(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(フェノキシ)ホスホリル)アミノ)プロパンチオエートの調製
2017502975.tif 000111
1-（（2R,3R,4R,5R）-3-フルオロ-4-ヒドロキシ-5-（ヒドロキシメチル）-3-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）ピリミジン-2,4（1H,3H）-ジオン(1.56 g, 6.0 mmol)をTHF(50 mL)に溶解した。この溶液を0℃まで冷却した後、N2雰囲気下でtBuMgCl(1 M THF溶液, 12.0 mL, 12.0 mmol)を滴下した。この混合物を同温度で30分間撹拌下後、室温まで加熱し、さらに30分間撹拌した。反応混合物を氷-水浴に放置した後、S-イソプロピル（S）-2-（（（S）-（パーフルオロフェノキシ）（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパンチオエート(2.96 g, 6.3 mmol)のTHF溶液(50 mL)を滴下した。反応混合物を同温度で終夜撹拌した後、1 N HCl(12 mL)を加え、反応を停止させた。反応溶液を濃縮した。残渣をCH2Cl2(150 mL)及び1 N HCl(30 mL)に溶解した。有機層を分離し、水層をCH2Cl2(25 mL × 2)で抽出した。有機層を合わせ、重炭酸ナトリウム飽和溶液(30 mL)及び飽和鹹水(30 mL)で順次に洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー (溶離液: CH2Cl2:iPrOH = 60:1〜12:1) で精製し、粗生成物(0.93 g)を得た。これをPE/EtOAcの中で再結晶し、生成物S-イソプロピル (S)-2-(((S)-(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(フェノキシ)ホスホリル)アミノ)プロパンチオエート(0.5 g, 15%)を得た。
1H NMR (400 MHz, MeOD) 7.63 (d, J = 8.0Hz, 1H), 7.40 (m, 2H), 7.28 (m, 2H), 7.21(m, 1H), 6.15 (d, J = 20.0 Hz, 1H), 5.65 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.57 (m, 1H), 4.42 (m, 1H), 4.13 (m, 1H), 3.98 (m, 2H), 3.52 (m, 1H), 1.39-1.33 (m, 6H), 1.27 (m, 6H); 
31P NMR (162 MHz, MeOD) δ 3.53; 
19F NMR (376 MHz, MeOD) δ -161.97; 
MS m/z (ESI): 546.0 [M+H]+.
【実施例３３】
【００９９】
(2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-2-((((S)-(((S)-1-(イソプロピルチオ)-1-カルボニルプロパン-2-イル)アミノ)(フェノキシ)ホスホリル)オキソ)メチル)-4-メチルテトラヒドロフラン-3-イルアセテート
2017502975.tif 000112
S-イソプロピル(S)-2-(((S)-(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)(フェノキシ)ホスホリル)アミノ)プロパンチオエート(54 mg, 0.10 mmol)をTHF(7 mL)に溶解した。この溶液に塩化アセチル(0.035 mL, 0.50 mmol)及びDMAP(61 mg, 0.50 mmol)を順次に加えた。反応混合物を室温で3時間撹拌した後、EtOAcで希釈した。有機層を分離し、水及び飽和鹹水で順次に洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: CH2Cl2:iPrOH=60:1〜12:1)で精製し、生成物(2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-2-((((S)-(((S)-1-(イソプロピルチオ)-1-カルボニルプロパン-2-イル)アミノ)(フェノキシ)ホスホリル)オキソ)メチル)-4-メチルテトラヒドロフラン-3-イルアセテート(52 mg, 90%)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.92 (s, 1H), 7.49 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.34 (m, 2H), 7.19 (m, 3H), 6.18 (d, J = 18.8 Hz, 1H), 5.50 (m, 1H), 5.18 (dd, J = 20.8, 9.2 Hz, 1H), 4.56 (m, 1H), 4.31 (m, 1H), 4.24 (m, 1H), 4.06 (m, 1H), 3.96 (m, 1H), 3.61 (m, 1H), 2.19 (s, 3H), 1.39-1.33 (m, 6H), 1.28 (m, 6H); 
31P NMR (162 MHz, CDCl3) δ 2.36; 
19F NMR (376 MHz, CDCl3) δ -157.20;
MS m/z (ESI): 588.0 [M+H]+.
【実施例３４】
【０１００】
ステップ 1
S-イソプロピル（2S）-2-（（（4-シクロプロピルフェノキシ）（パーフルオロフェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパンチオエートの調製
2017502975.tif 000113
4-シクロプロピルフェノール(4.4 g, 32.8 mmol)をEt2O(30 ml)に溶解し、室温でDIPEA(4.23 g, 32.8 mmol)をゆっくり滴下した。この混合物を15分間撹拌した。
オキシ塩化リン(5.0 g, 32.8 mmol)をEt2O(60 mL)に溶解し、-78℃まで冷却しながら前記混合物を1.5時間かけてゆっくり滴下した。白色固体が析出した。反応混合物を室温までゆっくり加熱し、終夜撹拌した。LC-MSにより4-シクロプロピルフェニルホスホロジクロリデートの生成を確認した。
S-イソプロピル（S）-2-アミノプロパンチオラート塩酸塩(5.67 g, 31 mmol) をCH2Cl2(80 ml)に溶解した後、DIPEA(8.5 g，66 mmol)を加えた。この混合物を均一に撹拌し、-78℃に2 時間冷却したフェニルホスホロジクロリデート溶液にゆっくり滴下した。その後、この溶液を0℃までゆっくり加熱した。
ペンタフルオロフェノール(6.62 g, 36 mmol)をCH2Cl2 (40 mL)に溶解した。この溶液を氷-水浴の中に放置した後、撹拌しながらDIPEA(4.6 g, 36 mmol)をゆっくり滴下した。得られた溶液を予め0℃に冷却したS-イソプロピル（S）-2-アミノプロパンチオラート塩酸塩を含有する溶液に0.5時間かけてゆっくり滴下した。その後、反応混合物を室温で終夜撹拌した。
前記溶液を水(300 mL)、0.2 N HCl(300 mL × 2)及び飽和鹹水(100 mL)で順次に洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、カラムクロマトグラフィー (溶離液: PE:EtOAc = 6:1)で精製し、粗生成物(7.0 g)を得た。
前記粗生成物にPE(100 L)及びEtOAc(10 mL)を加えた。この懸濁液を室温で終夜撹拌した。溶液を濾過し、濾過ケーキをPE(20 mL)で洗浄し、生成物S-イソプロピル（2S）-2-（（（4-シクロプロピルフェノキシ）（パーフルオロフェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパンチオエート(1.07 g, 6%, エピマー比 SP/RP = 2.5:1)を得た。
1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.2-6.4 (m, 4H), 4.2-3.8 (m, 1H), 3.5-3.3 (m, 1H), 1.9-1.6 (m, 1H), 1.4-1.2 (m, 6H), 0.9-0.4 (m, 4H)を得た。
ステップ２  
S-イソプロピル(S)-2-(((S)-4-シクロプロピルフェノキシ) (((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシル)ホスホリル)アミノ)プロパンチオエートの調製
2017502975.tif 000114
1-（（2R,3R,4R,5R）-3-フルオロ-4-ヒドロキシ-5-（ヒドロキシメチル）-3-メチルテトラヒドロフラン-2-イル）ピリミジン-2,4（1H,3H）-ジオン(0.60 g, 2.4 mmol)をTHF(20 mL)に溶解した。この溶液を0℃まで冷却した後、N2雰囲気下で tBuMgCl(1 M THF溶液, 4.8 mL, 4.8 mmol)を滴下した。この混合物を同温度で30分間撹拌した後、室温まで加熱し、さらに30分間撹拌した。反応混合物を氷-水浴の中に放置し、 S-イソプロピル（2S）-2-（（（4-シクロプロピルフェノキシ）（パーフルオロフェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパンチオエート(1.0 g, 1.9 mmol)のTHF溶液(10 mL)を滴下した。反応混合物を同温度で終夜撹拌した後、1 N HCl(4 mL)を加え、反応を停止させた。反応溶液を濃縮した。残渣をCH2Cl2(50 mL)及び1 N HCl(10 mL)に溶解した。有機層を分離し、水層をCH2Cl2(10 mL × 2)で抽出した。有機層を合わせ、重炭酸ナトリウム飽和溶液(10 mL)及び飽和鹹水(10 mL)で順次に洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。残渣をカラムクロマトグラフィー(溶離液: CH2Cl2:iPrOH =  50:1〜12:1)で精製し、生成物S-イソプロピル(S)-2-(((S)-4-シクロプロピルフェノキシ)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-ジオキソ-3,4-ジヒドロピリミジン-1(2H)-イル)-4-フルオロ-3-ヒドロキシ-4-メチルテトラヒドロフラン-2-イル)メトキシル)ホスホリル)アミノ)プロパンチオエート(0.28 g, 25% )を得た。
1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.16 (m, 2H), 7.08 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.14 (d, J = 19.6 Hz, 1H), 5.62 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.55 (m, 1H), 4.42 (m, 1H), 4.13 (m, 1H), 3.98 (m, 2H), 3.52(m, 1H), 1.93 (m, 1H), 1.39-1.33 (m, 6H), 1.27 (m, 6H), 0.96 (m, 2H), 0.65 (m, 2H);
31P NMR (162 MHz, MeOD) δ 3.68;
19F NMR (376 MHz, MeOD) δ -161.62;
MS m/z (ESI): 586.2 [M+H]+.
【０１０１】
生物学的評価
１．HCV阻害活性試験
本発明化合物のHCV複製に対する阻害活性は、HCV複製レポーター・ルシフェラーゼアッセイにより測定した。HCVルシフェラーゼ・レポーター遺伝子で安定に遺伝子導入したHuh-7細胞株を試験モデルとして用いた。試験化合物の保存溶液をジメチルスルホキシド（DMSO）中，10mMとした。通常、８−１０の異なる濃度である試験の際に、培地で一連の希釈を行った。シクロスポリンを内部標準として用いた。
【０１０２】
試験方法は次の通りであった：安定に遺伝子導入したHuh-7細胞を９６穴プレートで２４時間培養した；次いで、異なる濃度の試験化合物と内部標準化合物を培養した細胞に添加した；処置の４８時間後、ルシフェラーゼ活性をマイクロプレートリーダーで測定した；化合物のIC50は、一連の異なる濃度でのルシフェラーゼ活性に対する化合物の阻害値を用いて計算することができる。
【０１０３】
２．本発明化合物の細胞毒性試験
本発明化合物の細胞毒性は、MTT細胞毒性試験により測定した。HCVルシフェラーゼ・レポーター遺伝子で安定に遺伝子導入したHuh-7細胞株を試験モデルとして用いた。試験化合物の保存溶液をジメチルスルホキシド（DMSO）中，10mMとした。通常、８−１０の異なる濃度である試験の際に、培地で一連の希釈を行った。シクロスポリンを内部標準として用いた。
【０１０４】
試験方法は次の通りであった：安定に遺伝子導入したHuh-7細胞を９６穴プレートで２４時間培養した；次いで、異なる濃度の試験化合物と内部標準化合物を培養した細胞に添加した；処置の４８時間後、MTTを培養した細胞に添加して４時間、次いで、吸光度をマイクロプレートリーダーで測定した；化合物のCC50（５０％細胞毒性）は、一連の異なる濃度での細胞に対する化合物の阻害値を用いて計算することができる。
【０１０５】
３．本発明の代表的化合物の生物活性データは以下の通りである：
【表１】
2017502975.tif 000115
2017502975.tif 000116
2017502975.tif 000117
2017502975.tif 000118
2017502975.tif 000119
2017502975.tif 000120
【０１０６】
【表２】
2017502975.tif 000121
2017502975.tif 000122
2017502975.tif 000123
2017502975.tif 000124
2017502975.tif 000125
** ここで、PSI-7851 
2017502975.tif 000126
は、文献 J. Med Chem. 2010, 53, 7202 に従って製造し、その光学的にブビ純粋な形態ソホスル（光学的に純粋なSP）は文献 J. Org Chem. 2011, 76, 8311 に従って製造した。
【０１０７】
我々は、光学的に純粋なSp配置異性体の細胞活性はRp配置異性体のものよりも優れていることを表２の実施例２４の一対の異性体の試験結果から知ることができる。
【０１０８】
４．本発明の好ましい化合物のPK試験
HCV NS5Bは、HCVウィルスの複製に必須であるRNAポリメラーゼである。HCVウィルス複製に用いられる基質は、ヌクレオシド三リン酸である。本発明化合物は、ホスホロアミド酸ヌクレオチド類縁体のプロドラッグであり、肝細胞でヌクレオシド三リン酸類縁体の活性薬物に代謝されるのでHCV NS5Bポリメラーゼ活性とHCVウィルスの複製を阻害することができる。プロドラッグとして、in vivoでのヌクレオシド三リン酸生成の能力はNS5Bに対する阻害活性に直接関係している。それ故、発明者らはin vitroとin vivoの両方でPK（薬物動態）試験を行い、三リン酸ウリジン類縁体の活性薬物生成に対する本発明の好ましい化合物の能力を測定した。
【０１０９】
１）in vitro PK試験モデル：Huh細胞およびヒト初代培養肝細胞試験。具体的な試験方法は以下の通りである。
ヒト肝細胞におけるプロドラッグの活性フルオロウリジン三リン酸への代謝のin vitro PK試験は、Huh細胞およびヒト初代培養肝細胞で行った。Huh細胞またはヒト初代培養肝細胞が２４時間播かれた。化合物を最終濃度50μMになるように培養溶液に添加した。２４時間の処理後、細胞をトリプシン処理によって集め、カウントし、遠心分離して、一度D-PBSで洗浄し、そして再度遠心分離して細胞をペレットにした。細胞ペレットは液体窒素で急速凍結し、そして液体窒素中か、または−８０℃で保存した。
【０１１０】
活性フルオロウリジン三リン酸の細胞内濃度は、液体クロマトグラフィー‐マススペクトロメトリー（LC/MS/MS）により測定した。簡単に、1 mLの60%冷メタノールを細胞の沈降塊に加えて細胞を分散させ、細胞混合物を−20℃で終夜保った。翌日、細胞混合物は10分間遠心分離（11,000rpm）して、100 μLの上澄み液を各サンプルから取り出した。100 μLの上澄み液に100 μLの水を加え、2分間ボルテックスし、次いで5分間遠心分離（3,500rpm）した。次いで、10 μLの上澄み液を、ウリジン三リン酸の濃度をLC/MS/MSで測定するために取り出した。
【０１１１】
AB Sciex API 400をウリジン三リン酸の濃度を測定するために使用した。液体クロマトグラフィーの条件は、次の通りであった：島津LC-20ADポンプ、Ultimate X8-C8 カラム4.6 * 250 mm、5 μmカラム、移動相（A）は10 mM酢酸アンモニウム（pH=7.8）であり、移動相（B）はアセトニトリルであり、流速は0.56mL/分、そして溶出時間は0-12.1分であって、0.01分で、移動相は９５％（A）と５％（B）；4.2分で、移動相は１００％（A）；4.5分で、移動相は２０％（A）と８０％（B）；6分で、移動相は２０％（A）と８０％（B）；6.1分で、移動相は９５％（A）と５％（B）；12分で、移動相は９５％（A）と５％（B）；そして12.1分で終了した。MS分析器の条件は、次の通りであった：負イオンエレクトロスプレーイオン化（ESI）法を用いた、そして検体フルオロウリジン三リン酸の多重反応モニタリングは499.2/158.7であった。薬物動態パラメータはWinNonlin 6.1を用いて計算した。
【０１１２】
本発明の好ましい化合物は、実施例２４、実施例２８、および実施例３２の化合物である。主なin vitro PKパラメータとソホスブビルとの比較を表３に示す。
本発明化合物の主なin vitro PKパラメータとソホスブビルとの比較
【表３】
2017502975.tif 000127
表３に示したこれらのPKデータから、実施例２４、実施例２８、および実施例３２の化合物などの本発明の好ましい化合物が、ソホスブビルに匹敵する活性三リン酸ウリジン類縁体に効率的に代謝されることが判る。
【０１１３】
活性ウリジン三リン酸類縁体に代謝される本発明の好ましい化合物の能力をさらに示すために、in vivo PK試験も活性三リン酸ウリジン類縁体への代謝の本発明の好ましい化合物の能力を測定するために行った。in vivo PK試験モデルは：１）ラット肝臓でのPK分析；２）イヌ肝臓でのPK分析である。具体的な試験方法は、次の通りである：
１）ラット肝臓におけるPK分析
ラット肝臓で活性フルオロウリジン三リン酸に代謝されるプロドラッグの薬物動態評価は、SDラット（Shanghai SLAC）で行った。SDラットに50 mg/10 mL/kgの用量で胃内経管栄養法により一度に投与した。ソホスブビルは20％PEG200と0.5％カルボキシメチルセルロースナトリウムに溶解した。実施例２４、実施例２８、および実施例３２の化合物は30％PEG200と0.5％カルボキシメチルセルロースナトリウムに溶解した。動物は、投与前および投与後0.5、1、2、4、6 および12時間に、CO2で屠殺して肝臓サンプルを収集した。肝臓は、まず肝門脈を通して前もって冷却した生理食塩水を注入して洗浄した。肝臓の下大静脈を洗い流す（flush）ためにカットした。肝臓左葉の遠位2/3部を刃物で0.2ｇ断片にカットし、液体窒素で急速凍結して、液体窒素中または−80℃で保存した。
【０１１４】
肝臓の活性フルオロウリジン三リン酸の濃度を測定するために、フルオロウリジン三リン酸を固相抽出により肝臓サンプルから先ず抽出し、次いで三リン酸基を除去するためにアルカリホスファターゼで処理してウリジンを生成させた。ウリジンの濃度は、液体クロマトグラフィー‐マススペクトロメトリー（LC/MS/MS）により測定した。肝臓サンプルに５倍容積の６０％メタノールを加えて、ホモジナイズした；標準サンプルと品質管理サンプルをブランク肝臓サンプルで調製した。アジドチミジン三リン酸（AZT-TP）を内部標準として肝臓ホモジネートに添加した。Watersの活性化弱陰イオン交換カラムを固相抽出に用いた。カラムは、連続して１mLメタノール、１mL水、１％メタン酸を含む１mLの塩化カリウム、１mLの１％メタン酸で洗浄することにより活性化した。肝臓サンプルをホモジナイズした後、ホモジネートを２分間ボルテックスし、次いで4000 rpmで１０分間遠心分離した。次いで、遠心分離後の上澄部を活性化したカラムにロードして、カラムを１％メタン酸を含む１mLのKClで洗浄した。カラムは、次いで５％アンモニア水を含む0.3mLのメタノールで２度洗浄して、ヌクレオシド三リン酸を放出させた。溶出物は３７℃で窒素で乾燥し、次いで160μLの酢酸アンモニウム（5mM）に再溶解した。60μLのアルカリホスファターゼを添加し、３７℃で３０分間インキュベートして、ヌクレオシドを生成させた。20μLのサンプルをLC/MS/MS分析のために取り、ヌクレオシドの濃度を測定した。
【０１１５】
AB Sciex API 5500 QtrapをLC/MS/MS分析に使用した。液体クロマトグラフィーの条件は、次の通りであった：島津LC-20ADポンプ、Luna 5 μm C18 30 x 2.0 mmカラム、移動相（A）は5mM酢酸アンモニウムであり、移動相（B）は5mM酢酸アンモニウム/95%アセトニトリル/5%水であり、流速は0.5mL/分、そして溶出時間は0-4.5分であって、0.01分で、移動相は１００％（A）；0.5分で、移動相は１００％（A）；1.2分で、移動相は５％（A）と９５％（B）；2.4分で、移動相は５％（A）と９５％（B）；2.5分で、移動相は１００％（A）；4.5分で、移動相は１００％（A）であった。MS分析器の条件は、次の通りであった：負イオンエレクトロスプレーイオン化（ESI）法を用い、検体フルオロウリジンの多重反応モニタリングは259.20/239.20であり、内部標準AZTの多重反応モニタリングは266.140/223.10であった。主な薬物動態パラメータはWinNonlin 6.1を用いて計算した。試験フルオロウリジンの測定データは、内部標準AZTの測定データに基づいて標準化した。
【０１１６】
２）イヌ肝臓におけるPK分析
イヌ肝臓で活性フルオロウリジン三リン酸に代謝されるプロドラッグの薬物動態評価は、ビーグル犬（Beijing Marshall）で行った。薬物は、連続して４日間、50 mg/10 mL/kgで胃内経管栄養法により１日１回投与した。ソホスブビルと実施例２４、実施例２８、および実施例３２の化合物は、20％ヒドロキシプロピル-β-シクロデキストリンで調製した。イヌは、最後の投与後4時間で、フェノバルビタールで屠殺し、肝臓サンプルを収集して、前もって冷却した生理食塩水で洗浄した。肝臓サンプルは、0.2ｇ断片にスライスし、液体窒素で急速凍結して、液体窒素中または−80℃で保存した。
【０１１７】
肝臓の活性フルオロウリジン三リン酸の濃度を測定するために、フルオロウリジン三リン酸を固相抽出により肝臓サンプルから先ず抽出し、次いで三リン酸基を除去するためにアルカリホスファターゼで処理してウリジンを生成させた。ウリジンの濃度は、液体クロマトグラフィー‐マススペクトロメトリー（LC/MS/MS）により測定した。肝臓サンプルに５倍容積の６０％メタノールを加えて、ホモジナイズした；標準サンプルと品質管理サンプルをブランク肝臓サンプルで調製した。アジドチミジン三リン酸（AZT-TP）を内部標準として肝臓ホモジネートに添加した。Watersの活性化弱陰イオン交換カラムを固相抽出に用いた。カラムは、連続して１mLメタノール、１mL水、１％メタン酸を含む１mLの塩化カリウム、１mLの１％メタン酸で洗浄することにより活性化した。肝臓サンプルをホモジナイズした後、ホモジネートを２分間ボルテックスし、次いで4000 rpmで１０分間遠心分離した。次いで、遠心分離後の上澄部を活性化したカラムにロードして、カラムを１％メタン酸を含む１mLのKClで洗浄した。カラムは、次いで５％アンモニア水を含む0.3mLのメタノールで２度洗浄して、ヌクレオシド三リン酸を放出させた。溶出物は３７℃で窒素で乾燥し、次いで160μLの酢酸アンモニウム（5mM）に再溶解した。60μLのアルカリホスファターゼを添加し、３７℃で３０分間インキュベートして、ヌクレオシドを生成させた。20μLのサンプルをLC/MS/MS分析のために取り、ヌクレオシドの濃度を測定した。
【０１１８】
AB Sciex API 5500 QtrapをLC/MS/MS分析に使用した。液体クロマトグラフィーの条件は、次の通りであった：島津LC-20ADポンプ、Luna 5 μm C18 30 x 2.0 mmカラム、移動相（A）は5mM酢酸アンモニウムであり、移動相（B）は5mM酢酸アンモニウム/95%アセトニトリル/5%水であり、流速は0.5mL/分、溶出時間は0-4.5分であって、0.01分で、移動相は１００％（A）；0.5分で、移動相は１００％（A）；1.2分で、移動相は５％（A）と９５％（B）；2.4分で、移動相は５％（A）と９５％（B）；2.5分で、移動相は１００％（A）；4.5分で、移動相は１００％（A）であった。MS分析器の条件は、次の通りであった：負イオンエレクトロスプレーイオン化（ESI）法を用い、検体フルオロウリジンの多重反応モニタリングは259.20/239.20であり、内部標準AZTの多重反応モニタリングは266.140/223.10であった。主な薬物動態パラメータはWinNonlin 6.1を用いて計算した。試験フルオロウリジンの測定データは、内部標準AZTの測定データに基づいて標準化した。
【０１１９】
本発明の好ましい化合物は、実施例２４、実施例２８、および実施例３２の化合物である。主なin vivo PKパラメータとソホスブビルとの比較を表４に示す。
本発明化合物の主なin vivo PKパラメータとソホスブビルとの比較
【表４】
2017502975.tif 000128
【０１２０】
表４のデータから、実施例２４、実施例２８、および実施例３２の化合物などの本発明の好ましい化合物が、ソホスブビルに匹敵する活性三リン酸ウリジン類縁体に効率的に代謝されることが判る。注目されるのは、ソホスブビルに比べて、ラットの肝臓とイヌの肝臓の両方で三リン酸ウリジン類縁体に代謝される実施例３２の化合物の能力が２０％以上増加したことである。ラットの肝臓とイヌの肝臓の両方で三リン酸ウリジン類縁体に代謝される実施例２４の化合物の能力は３５％以上増加した。肝細胞におけるin vitro PK試験と違って、in vivo PK試験は薬物吸収、血漿タンパク結合、組織および器官分布、代謝等の過程を含んでおり、従ってin vivo PKパラメータは、より臨床上重要である。
【０１２１】
最後に、上記実施例は単に本発明の技術的解決を記載するために提供するものであって、本発明を限定することを意図しないことに注意すべきである。本発明は好ましい実施態様を参照して詳細に記載されているが、例えば実施例１〜実施例２３の化合物はカラムクロマトグラフィーを経て分離して(S)‐異性体を得ることができるか、または(S)‐異性体は実施例２４の方法に従って合成することができるなど、技術的解決の改変や等価置換が本発明に対してできること、そしてその技術的解決は本発明の特許請求の範囲でカバーされている本発明の精神および範囲から離れないことを当業者は理解すべきである。
【国際調査報告】
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