(57)【要約】本開示は、ポリガラクツロナンラムノガラクツロナン（ＰＧＲＧ１）組成物、ならびに前記組成物を医学的に有用であり薬学的に有用な形態で作製する方法および使用する方法に関する。具体的には、本開示はＡｓｔｒａｇａｌｕｓ属の植物の根から、さらに具体的には、種Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓから単離された精製ＰＧＲＧ１組成物、ならびに少なくとも４０キロダルトン（ｋＤａ）の重量平均分子量を有するＰＧＲＧ１組成物を提供する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓの根から得られる単離されたポリガラクツロナンラムノガラクツロナン１（ＰＧＲＧ１）組成物であって、前記組成物中のＰＧＲＧ１が、１０ｋＤａから５０ｋＤａの重量平均分子量（ｗａＭＷ）および少なくとも０．０６のラムノース対ガラクツロン酸（Ｒｈａ対ＧａｌＡ）モルパーセント比を有する、組成物。
【請求項２】
前記組成物中のＰＧＲＧ１が、［１，４−結合ＧａｌＡＧａｌＡ］ｎが点在した［１，４および１，２−結合ＲｈａＧａｌＡ］ｍの骨格構造を有する、請求項１に記載の単離されたＰＧＲＧ１組成物。
【請求項３】
前記Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓの変種が、Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ（Ｆｉｓｃｈ．）Ｂｇｅ．およびＡｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ（Ｆｉｓｃｈ．）ｖａｒ．ｍｏｎｇｈｏｌｉｃｕｓ（Ｂｇｅ．）Ｈｓｉａｏ種から選択される、請求項１に記載の単離されたＰＧＲＧ１組成物。
【請求項４】
前記Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓが、山西省、内モンゴル、甘粛省、河北省および遼寧省から選択される中華人民共和国の省で育った、請求項１から３のいずれかに記載の単離されたＰＧＲＧ１組成物。
【請求項５】
前記根が、２年ものから３年ものの間の栽培されたＡｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ植物由来である、請求項１から４のいずれかに記載の単離されたＰＧＲＧ１組成物。
【請求項６】
前記根が、３年ものから１０年ものの間の野生型Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ植物由来である、請求項１から４のいずれかに記載の単離されたＰＧＲＧ１組成物。
【請求項７】
前記根が、２年ものまでの栽培されたＡｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ植物由来である、請求項１から４のいずれかに記載の単離されたＰＧＲＧ１組成物。
【請求項８】
４０から１２０ｋＤａの重量平均分子量範囲を有し、請求項１から７のいずれかに記載のＰＧＲＧ１組成物から精製される、ＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物。
【請求項９】
（ａ）治療有効量の請求項１から７のいずれか一項に記載の単離されたＰＧＲＧ１組成物または請求項８に記載のＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物、および任意選択で
（ｂ）薬学的に適切な賦形剤
を含む、経口ＰＧＲＧ１製剤。
【請求項１０】
請求項１に記載の精製されたＰＧＲＧ１組成物を生産する方法であって、
（ａ）Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓの乾燥根を約１００℃の水溶液中、合計で９時間にわたり抽出するステップと、
（ｂ）ステップ（ａ）由来の抽出物に、前記ＰＧＲＧ１組成物を沈殿させるのに十分な低級アルカノールを添加し、沈殿した前記ＰＧＲＧ１組成物を単離するステップと
を含む、方法。
【請求項１１】
請求項８に記載の単離されたＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物を生産する方法であって、
（ａ）請求項１から７のいずれか一項に記載の単離されたＰＧＲＧ１組成物の水溶液を、分子量カットオフが５ｋＤａのフィルターを通して限外濾過にかけるステップと、
（ｂ）ステップ（ａ）由来の保持液から前記ＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物を単離するステップと
を含む、方法。
【請求項１２】
血液クレアチニンレベルを減少させることにより哺乳動物における腎臓疾患を処置する方法であって、非処置の哺乳動物中の血液クレアチニンレベルと比べて、血液クレアチニンレベルを減少させるのに有効な量の請求項１から７のいずれかに記載の単離されたＰＧＲＧ１組成物、請求項６に記載のＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物、または請求項８に記載の経口ＰＧＲＧ１製剤を前記哺乳動物に経口的に投与するステップを含む、方法。
【請求項１３】
造血を誘導するのに有効な量の請求項１から７のいずれかに記載の精製されたＰＧＲＧ１組成物、請求項６に記載のＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物、または請求項８に記載の経口ＰＧＲＧ１製剤を哺乳動物に経口的に投与することにより、増加した血液細胞数として測定される前記哺乳動物における造血を誘導する方法。
【請求項１４】
免疫系機能不全を処置するのに有効な量の請求項１から７のいずれかに記載の精製されたＰＧＲＧ１組成物、請求項６に記載のＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物、または請求項８に記載の経口ＰＧＲＧ１製剤を哺乳動物に経口的に投与することにより、免疫系機能不全を処置する方法。
【請求項１５】
前記哺乳動物がヒトである、請求項１２から１４に記載の方法。
【請求項１６】
腎臓疾患を処置するまたは改善することができる少なくとも１つの追加の治療剤を投与するステップをさらに含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１７】
造血を誘導することができる少なくとも１つの追加の治療剤を投与するステップをさらに含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１８】
免疫機能を向上させることができる少なくとも１つの追加の治療剤を投与するステップをさらに含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１９】
請求項１から７のいずれかに記載の精製されたＰＧＲＧ１組成物、または請求項８に記載のＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物を含む栄養補助食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は、一般的には、植物組成物および天然の植物材料をポリガラクツロナンラムノガラクツロナン（ＰＧＲＧ１）を含む医学的に有用であり薬学的に許容される組成物に変えるための方法、ならびに前記組成物を作製する方法および使用する方法に関する。具体的には、本開示はＡｓｔｒａｇａｌｕｓ属の植物の根から、さらに詳細には、種Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓから単離された精製ＰＧＲＧ１組成物、ならびに少なくとも４０キロダルトン（ｋＤａ）の重量平均分子量を有するＰＧＲＧ１組成物を提供する。
【背景技術】
【０００２】
Ａｓｔｒａｇａｌｕｓは、世界中に広く分布しているのが見られる１年生および多年生顕花草本ならびに小灌木の大きな属（マメ科）である。Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ植物は伝統的な中国およびペルシャ医学において何世紀もの間使用され、１９８０年代には合衆国で人気を集めた。中国では、Ａｓｔｒａｇａｌｕｓは伝統的な中国医学の体系で使用された５０の基本的な薬草のうちの１つであり、
【化１】
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として公知である。Ａｓｔｒａｇａｌｕｓは、免疫系を支援し増強するために人参、アンゼリカ、および甘草などの他の薬草と組み合わせて使用されることが多く、慢性肝炎のためにおよびがんの補助的療法として中国ではまだ広く使用されている。Ａｓｔｒａｇａｌｕｓは、風邪および上気道感染症のために、ならびに心臓病のためにも民間または伝統療法として使用されている。
【０００３】
Ａ．ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ（同義語Ａ．ｐｒｏｐｉｎｑｕｕｓ）の一般名はレンゲソウ、ロコ草およびヤギのトゲ（ｇｏａｔ’ｓ  ｔｈｏｒｎ）（Ａ．ｇｕｍｍｉｆｅｒ、Ａ．ｔｒａｇａｃａｎｔｈｕｓ）を含む。Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｏｎｇｈｏｌｉｃｕｓ（「Ｈｕａｎｇｑｉ」）の乾燥根の調製物は中国医学では最も一般的に使用されているＡｓｔｒａｇａｌｕｓ種である。
【０００４】
２０００を超える種のＡｓｔｒａｇａｌｕｓが存在するが、医学的に最も一般的に使用される２つの種はＡｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓおよびＡｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｏｎｇｈｏｌｉｃｕｓである。例えば、Ａ．ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓは肺および胃疾患を処置するために、ならびに制汗剤および利尿剤として使用されてきた。Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓの根は、代謝および発汗を増加させ、治癒を促進し、疲労を低減し、肺、副腎および消化管の機能を向上させると主張されている強壮剤として使用されている。Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓは、クロアチアで季節性アレルギー性鼻炎の処置に使用される栄養補助食品Ｌｅｃｔｒａｎａｌ（登録商標）として登録されている植物とミネラルの複合体中の活性成分でもある。Ｒａｄｉｘ  Ａｓｔｒａｇａｌｉは、Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｏｎｇｈｏｌｉｃｕｓ  Ｂｕｎｇｅ  ｖａｒ．Ｄａｈｕｒｉｃｕｓ（ＤＣ．）Ｐｏｄｌｅｃｈおよびｖａｒ．Ｍｏｎｇｈｏｌｉｃｕｓの全乾燥根である。Ｒａｄｉｘ  Ａｓｔｒａｇａｌｉの構成要素は、多糖、トリテルペノイド（アストラガロシド）ならびにイソフラボン（クマタケニン、カリコシンおよびホルモノネチンを含む）をそのグリコシドおよびマロネートと併せて含む。Ｒａｄｉｘ  Ａｓｔｒａｇａｌｉ抽出物の多糖組成物は解析され特徴付けられている（Ｘｕら、２００８年、「Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｗｅｉｇｈｔ  ａｎｄ  ｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ．」Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ．１３巻（１０号）：２４０８〜２４１５頁）。
【０００５】
Ａｓｔｒａｇａｌｕｓの調製物はがん治療にも使用されており、例えば、トラガント、レンゲソウ根の粘着性樹液、およびスウェインソニン、レンゲソウを含むロコ草として公知のいくつかの植物により生成される水溶性インドールアルカロイドは薬学的に使用されてきた。医薬品および織物に使用されている天然のトラガカントゴムは、Ａ．ａｄｓｃｅｎｄｅｎｓ、Ａ．ｇｕｍｍｉｆｅｒ、Ａ．ｂｒａｃｈｙｃａｌｙｘ、およびＡ．ｔｒａｇａｃａｎｔｈｕｓを含む中東に発生するいくつかの種のＡｓｔｒａｇａｌｕｓから作られる。Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｂｒａｃｈｙｐｔｅｒｕｓ、Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｃｅｐｈａｌｏｔｅｓ、Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｉｃｒｏｃｅｐｈａｌｕｓおよびＡｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｔｒｏｊａｎｕｓを含むトルコ種などの他のＡｓｔｒａｇａｌｕｓ種はその抗がん特性について調査中である。Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｔｏｎｇｏｌｅｎｓｉｓおよびＡｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｓｃａｂｅｒｒｉｍｕｓは、下痢、筋肉痺れ、血行不足、弱い肺、喘息、神経質、梅毒、瘰癧および胆汁障害を治療するのに使用されてきた。Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｕｌｔｉｃｅｐｓおよびＡｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｈａｒｍｏｓｕｓの種子は、疝痛、ハンセン病、皮膚軟化薬および粘滑薬のために使用されている。
【０００６】
バイオテクノロジー企業もＡｓｔｒａｇａｌｕｓ中の活性成分を同定しようと試みてきた。Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｐｒｏｐｉｎｑｕｕｓ（同義語Ａ．ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ）の抽出物はヒト使用のための延命抽出物として市場に出されており、例えば、サポニン「シクロアストラゲノール（ｃｙｃｌｏａｓｔｒａｇｅｎｏｌ）」（ａ．ｋ．ａ．「ＴＡＴ２」）を含有するＴＡ−６５と呼ばれる乾燥根の専売抽出物は、「それが６から１２か月使用後の老化した細胞障害性Ｔ細胞およびナチュラルキラー細胞のパーセンテージの低下をもたらしたという点で、免疫系における重大な年齢逆転効果と関連付けて考えられた」（Ｈａｒｌｅｙら、２０１１年、Ｒｅｊｕｖｅｎａｔｉｏｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  １４巻（１号）：４５〜５６頁）。さらに、シクロアストラゲノールはＨＩＶ、ならびに慢性疾患または加齢と関連する感染症との戦いにおける助けとなるように研究中である。ＵＣＬＡエイズ研究所での研究では、免疫細胞の老化過程におけるシクロアストラゲノールの機能およびウイルス感染への細胞応答に対するその効果に重点が置かれていた。シクロアストラゲノールは、染色体の末端を保護しがん過程を含む細胞複製において重要な役割を果たす、テロメアとして公知のＤＮＡの短片の置換を媒介する酵素であるテロメラーゼの産生を増加させると思われる（Ｆａｕｃｅら、２００８年、Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  １８１巻（１０号）：７４００〜７４０６頁）。
【０００７】
植物のいくつかの部分は活性構成要素を含有しているように思われるが、植物処方で使用されるのはその根であることが最も多い。Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ植物は多糖、サポニン、イソフラボノイドおよびフラボノイドの豊富な供給源である。Ａｓｔｒａｇａｌｕｓに起源をもつ多糖は「アストラガラン（ａｓｔｒａｇａｌａｎ）」と呼ばれている。サポニン（またはトリテルペングリコシド、「アストラガロシド」とも呼ばれる）、イソフラボノイド、およびフラボノイドはアグリコンまたはグリコシドからなる。乾燥根のアストラガロシド、トリゴノシド（ｔｒｉｇｏｎｏｓｉｄｅ）、およびフラボノイド構成要素の量は、根の年齢、サイズおよび生育条件に応じて変化しうる。植物由来のサポニンは、おそらく先天免疫を誘発することにより広範囲のサイトカインの分泌を刺激すると報告されているので、Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ種はワクチン用のアジュバンドを開発するためのその有用性についても調査中である（ＳｏｎｇおよびＨｕ、２００９年、「Ａｄｊｕｖａｎｔ  ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ  ｏｆ  ｓａｐｏｎｉｎｓ  ｆｒｏｍ  ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ  Ｃｈｉｎｅｓｅ  ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  ｈｅｒｂｓ．」Ｖａｃｃｉｎｅ．２７巻（３６号）：４８８３〜９０頁）。
【０００８】
細胞壁成分ペクチンは植物において普遍的である。ペクチンは、植物細胞壁に豊富にある高度に不均一なクラスのＧａｌＡ含有多糖である。ペクチン多糖には、構造クラスのホモガラクツロナン（ＨＧ）、キシロガラクツロナン（ｘｙｌｏｇａｌａｃｔｕｒｏｎａｎ）（ＸＧＡ）、アピオガラクツロナン（ＡＧＡ）、およびラムノガラクツロナン（ＲＧ）と呼ばれる分岐鎖多糖が含まれる。ペクチン多糖のうち、最も豊富なのがホモガラクツロナン（ＨＧ）、メチルエステル化およびアセチル化されていることがある（１−４）−α−Ｄ−ガラクツロン酸（ＧａｌＡ）残基のホモポリマーであり、ＨＧはペクチンの約７０％を構成し、ＲＧ−Ｉはペクチンのおおよそ３５％およびＲＧ−ＩＩは約１０％を構成する。
【０００９】
ＲＧは密接に関係する細胞壁ペクチン多糖の群であり、２種類のＲＧはラムノガラクツロナンＩ型（「ＲＧ−Ｉ」または「ＲＧＩ」としても公知である）およびラムノガラクツロナンＩＩ型（「ＲＧ−ＩＩ」または「ＲＧＩＩ」）である（Ｚａｋｈａｒｏｖａら、（２０１３年）Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  １５巻（８号）：１８２６〜１８２９頁）。ＲＧ−Ｉの化学構造は複雑であり、繰り返し交互になったα結合ＬラムノースとＤ−ガラクツロン酸二糖単位からなる骨格を有し、アラビナン、ガラクタン、またはアラビノガラクタンの数多くの分岐がラムノース残基のＣ−４に位置している（ＭｃＮｅｉｌら、１９８０年、Ｐｌａｎｔ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．、６６巻：１１２８〜１１３４頁；Ｚａｋｈａｒｏｖａら、２０１３年、Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  １５巻（８号）：１８２６〜１８２９頁）。したがって、ラムノガラクツロナンＩ（ＲＧ−Ｉ）の骨格構造は繰り返し二糖単位：［→α−Ｄ−ＧａｌｐＡ−１，２−α−Ｌ−Ｒｈａｐ−１，４→］ｎを含有する（Ｃａｆｆａｌｌら、２００９年、Ｃａｒｂ．  Ｒｅｓ．  ３４４巻：１８７９〜１９００頁）。
【００１０】
ペクチンの構造的複雑さは、ある特定の興味深い生物学的および産業的機能に関連する多種多様な物理的および生化学的特性を付与する。ペクチンおよび他の壁多糖の質と量を遺伝子操作および従来の育種技法ならびに化学合成を通じて操作することにかなりの努力が向けられてきた（Ｂａｃｉｃ、２００６年、Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．１０２巻（１５号）：５６３９〜５６４０頁）。
【００１１】
しかし、多くの植物組成物の複雑な化学的性質のせいで、植物組成物は制御され予測可能な様式で使用するのは困難になることがある。植物材料から生成される生薬には、医薬品に要求される制御、再現性、および規格化を望んでいる製造業者にとって、特有の問題を呈した。原料の生育および収穫条件に起因する生薬に含有される複数の成分ならびに組成および効力の大きな変動のせいで、得られる植物調製物の異なるバッチの化学組成の変動を予測できないことがあり、そのような調製物は臨床状況での使用には適さなくなる。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１２】
【非特許文献１】Ｘｕら、Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ．（２００８年）１３巻（１０号）：２４０８〜２４１５頁
【非特許文献２】Ｈａｒｌｅｙら、Ｒｅｊｕｖｅｎａｔｉｏｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ（２０１１年）１４巻（１号）：４５〜５６頁
【非特許文献３】Ｆａｕｃｅら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（２００８年）１８１巻（１０号）：７４００〜７４０６頁
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
したがって、医薬としてのＡｓｔｒａｇａｌｕｓ種の調製物は使用の長い歴史があるが、本明細書に記載される請求項に係わる医学的に有用な組成物の必要性が残っている。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
関連技術およびそれに関係する制限の前述の例は説明目的であり、排他的なものではない。関連技術の他の制限は、明細書を読み、図を検討すれば当業者には明らかになるであろう。
【００１５】
一態様では、Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓの根から得られる単離されたポリガラクツロナンラムノガラクツロナン１（ＰＧＲＧ１）組成物であって、組成物中のＰＧＲＧ１が、１０ｋＤａから５０ｋＤａの重量平均分子量および少なくとも０．０６のラムノース対ガラクツロン酸（Ｒｈａ対ＧａｌＡ）モルパーセント比を有する組成物が提供される。
【００１６】
一態様では、４０から１２０ｋＤａの重量平均分子量範囲を有し、ＰＧＲＧ１組成物から精製されるＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物が提供される。
【００１７】
いくつかの実施形態では、ＰＧＲＧ１組成物またはＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物中の単離されたＰＧＲＧ１は、［１，４−結合ＧａｌＡＧａｌＡ］ｎが点在した［１，４および１，２−結合ＲｈａＧａｌＡ］ｍの骨格構造を有する。
【００１８】
いくつかの実施形態では、単離されたＰＧＲＧ１組成物またはＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物は、Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ（Ｆｉｓｃｈ．）Ｂｇｅ．およびＡｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ（Ｆｉｓｃｈ．）ｖａｒ．ｍｏｎｇｈｏｌｉｃｕｓ（Ｂｇｅ．）Ｈｓｉａｏ変種から選択されるＡｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ変種から単離される。
【００１９】
いくつかの実施形態では、ＰＧＲＧ１組成物またはＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物は、山西（Ｓｈａｎｘｉ）省、内モンゴル、甘粛省、河北省および遼寧省から選択される中華人民共和国の省で育ったＡｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓの根から単離される。
【００２０】
いくつかの実施形態では、ＰＧＲＧ１組成物またはＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物は、２年ものまたはそれよりも若い栽培されたＡｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ植物から単離される。いくつかの実施形態では、ＰＧＲＧ１組成物またはＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物は、２年ものから３年ものの間である栽培されたＡｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ植物から単離される。いくつかの実施形態では、ＰＧＲＧ１組成物またはＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物は、約３年ものから１０年ものの間である野生型Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ植物から単離される。
【００２１】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＰＧＲＧ１組成物は、Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ種のみに、例えば、Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ  Ｂｇｅ．に由来しており、Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  Ｄｉｅｌｓ、Ａｎｇｅｌｉｃ  ａｒｃｈａｎｇｅｌｉｃａまたはＬｅｖｉｓｔｉｃｕｍ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ  Ｋｏｃｈ由来の多糖などのＤａｎｋｕｅｉの抽出物に由来していないし、それを含んでもいない。
【００２２】
一態様では、治療有効量の単離されたＰＧＲＧ１組成物またはＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物および、任意選択で、薬学的に適切な賦形剤を含む、経口ＰＧＲＧ１製剤が提供される。
【００２３】
いくつかの実施形態では、組成物または製剤は、医薬効能を増強させることができる（またはできない）賦形剤または他の植物抽出物と組み合わせて投与される。
【００２４】
一態様では、血液クレアチニンレベルを減少させることにより哺乳動物における腎臓疾患を処置する方法であって、非処置の哺乳動物中の血液クレアチニンレベルと比べて、血液クレアチニンレベルを減少させるのに有効な量の単離されたＰＧＲＧ１組成物またはＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物を哺乳動物に経口的に投与するステップを含む方法が提供される。一態様では、哺乳動物においてクレアチニン血液レベルを維持するまたは減少させることにより、測定される慢性腎臓疾患（ＣＫＤ）の進行を阻害するための方法が提供される。
【００２５】
一態様では、造血を誘導するのに有効な量の精製されたＰＧＲＧ１組成物またはＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物を哺乳動物に経口的に投与するステップを含む、増加した血液細胞数として測定される哺乳動物における造血を誘導する方法が提供される。
【００２６】
一態様では、免疫系を調節する方法が提供される。
【００２７】
一態様では、免疫系機能不全を処置するのに有効な量の精製されたＰＧＲＧ１組成物またはＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物を哺乳動物に経口的に投与するステップを含む、免疫系機能不全を処置する方法が提供される。
【００２８】
いくつかの実施形態では、哺乳動物はヒトである。
【００２９】
いくつかの実施形態では、方法は、少なくとも１つの追加の治療剤をＰＧＲＧ１組成物またはＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物と組み合わせて投与するステップをさらに含む。
【００３０】
一態様では、ＰＧＲＧ１組成物またはＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物を生産する方法であって、Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓの乾燥根を約１００℃の水溶液中、合計で９時間にわたり抽出するステップと、ＰＧＲＧ１組成物を沈殿させるのに十分な量で低級アルカノールを抽出物に添加し、単離され沈殿したＰＧＲＧ１またはＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物を生じるステップを含む方法が提供される。
【００３１】
一態様では、単離されたＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物を生産する方法であって、単離されたＰＧＲＧ１組成物の水溶液を分子量カットオフが５ｋＤａのフィルターを通して限外濾過にかけるステップと、保持液（ｒｅｔｅｎｔａｔｅ）からＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物を単離するステップを含む方法が提供される。
【００３２】
一態様では、精製ＰＧＲＧ１組成物またはＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物を含む栄養補助食品（ｄｉｅｔａｒｙ  ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ）が提供される。
【００３３】
本開示の方法および組成物の追加の実施形態ならびに同類のものは、以下の説明、図、実施例、および特許請求の範囲から明らかになるであろう。前述のおよび以下の説明から認識することが可能であるように、本明細書に記載されるいずれの特長も皆、およびそのような特長のうちの２つまたはそれ超のいずれの組み合わせも皆、そのような組み合わせに含まれる特長が相互に矛盾していない限り、本開示の範囲内に含まれる。さらに、いかなる特長もまた特長の組み合わせも本開示のいかなる実施形態からも明確に除外される場合がある。特に、添付の実施例および図と併せて考慮した場合、本開示の追加の態様および利点は以下の説明および特許請求の範囲に明らかにされている。
【図面の簡単な説明】
【００３４】
【図１】図１は、多糖において見出される代表的な糖残基を示す。
【００３５】
【図２】図２は、代表的なＰＧＲＧ１化学構造を示す。
【００３６】
【図３】図３は、ＨＰＬＣ−ＲＩによって分析された、ＰＧＲＧ１およびＰＧＲＧ１−５Ｋの分子量分布を示す。
【００３７】
【図４Ａ】図４Ａ〜４Ｃは、ＨＰＬＣ−ＲＩによるＰＧＲＧ１の３つの重みつき平均分子量（Ｗｅｉｇｈｔｅｄ  Ａｖｅｒａｇｅ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｗｅｉｇｈｔ）（ｗａＭＷ）分析を示す。
【図４Ｂ】図４Ａ〜４Ｃは、ＨＰＬＣ−ＲＩによるＰＧＲＧ１の３つの重みつき平均分子量（ｗａＭＷ）分析を示す。
【図４Ｃ】図４Ａ〜４Ｃは、ＨＰＬＣ−ＲＩによるＰＧＲＧ１の３つの重みつき平均分子量（ｗａＭＷ）分析を示す。
【００３８】
【図５Ａ】図５Ａ〜５Ｃは、ＨＰＬＣ−ＲＩによるＰＧＲＧ１−５Ｋの３つのｗａＭＷ分析を示す。
【図５Ｂ】図５Ａ〜５Ｃは、ＨＰＬＣ−ＲＩによるＰＧＲＧ１−５Ｋの３つのｗａＭＷ分析を示す。
【図５Ｃ】図５Ａ〜５Ｃは、ＨＰＬＣ−ＲＩによるＰＧＲＧ１−５Ｋの３つのｗａＭＷ分析を示す。
【００３９】
【図６】図６は、血液クレアチニンレベルに対するＰＧＲＧ１の効果を示す。
【００４０】
【図７−１】図７Ａ〜７Ｄは、それぞれ、血小板、白血球、好中球、赤血球に対するＰＧＲＧ１の効果を示す。
【図７−２】図７Ａ〜７Ｄは、それぞれ、血小板、白血球、好中球、赤血球に対するＰＧＲＧ１の効果を示す。
【発明を実施するための形態】
【００４１】
本開示の種々の態様および実施形態は以下でさらに完全に明らかにされ説明される。そのような態様は、範囲が限定的ではなく、見本となり説明的であるように意図されており、多くの異なる形態で具体化することができ、これらの態様および実施形態を、本明細書に明示的に記載されている態様および実施形態に限定されると解釈するべきではない。むしろ、これらの態様および実施形態は、本開示が徹底していて完全であり、その範囲を当業者に十分に伝達するように提供される。
【００４２】
本開示の実施には、他の方法で指示されていなければ、当技術分野の範囲内の化学、生化学、および薬理学の従来の方法を用いることになる。そのような技法は文献において十分に説明されている。例えば、Ａ．Ｌ．  Ｌｅｈｎｉｎｇｅｒ、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  （Ｗｏｒｔｈ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，  Ｉｎｃ．、現行版）；ＭｏｒｒｉｓｏｎおよびＢｏｙｄ、Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  （Ａｌｌｙｎ  ａｎｄ  Ｂａｃｏｎ，  Ｉｎｃ．、現行版）；Ｊ．  Ｍａｒｃｈ、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  （ＭｃＧｒａｗ  Ｈｉｌｌ、現行版）；Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：  Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、Ａ．  Ｇｅｎｎａｒｏ編、第２０版；Ｇｏｏｄｍａｎ  ＆  Ｇｉｌｍａｎ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、Ｊ．  Ｇｒｉｆｆｉｔｈ  Ｈａｒｄｍａｎ、Ｌ．  Ｌ．  Ｌｉｍｂｉｒｄ、Ａ．  Ｇｉｌｍａｎ、第１０版「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃｓ」Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  ｏｒｇａｎｉｃ  ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  （Ｈｏｕｂｅｎ−Ｗｅｙｌ）：第４版に対する追加の補巻、２００４年、Ｇｏｏｄｍａｎ，  Ｍｕｒｒａｙ；Ｔｏｎｉｏｌｏ，  Ｃｌａｕｄｉｏ；Ｍｏｒｏｄｅｒ，  Ｌｕｉｓ；Ｆｅｌｉｘ，  Ａｕｒｔｈｕｒ；Ｔｈｉｅｍｅ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ  Ｉｎｃ．を参照されたい。
【００４３】
Ｉ．定義
他の方法で定義されていなければ、本明細書で使用される技術用語および科学用語はすべて、当業者が一般的に理解しているのと同じ意味を有する。本明細書に記載される方法、デバイスおよび材料に類似するまたは相当するいかなる方法、デバイスおよび材料も、本発明の実施または試験において使用することが可能である。本明細書で言及される出版物はすべて、本開示に関連して使用することがある出版物に報告されている方法論および材料を説明し開示する目的で、参照により本明細書に組み込まれる。
【００４４】
本明細書においておよび添付の特許請求の範囲において使用されるように、単数形「１つ（ａ）」、「１つ（ａｎ）」、および「その（ｔｈｅ）」は、文脈が他の方法で明確に指示していなければ、複数の参照対象を含む。したがって、例えば、「１つの炭水化物」への言及は単一の炭水化物分子ならびに２つまたはそれ超の同じまたは異なる炭水化物を含み、「１つのペクチン」への言及は単一種類のペクチンならびに２つまたはそれ超の同じまたは異なる種類のペクチンを含み、１つの「賦形剤」への言及は単一の賦形剤ならびに２つまたはそれ超の同じまたは異なる賦形剤を含む、などである。
【００４５】
ある範囲の値が提供される場合、その範囲の上限と下限の間のそれぞれの介在する値およびその言明された範囲中の他の任意の言明されたまたは介在する値は本開示内に包含することが意図されており、言明された範囲内の任意の言明された値または介在する値とその言明された範囲中の他の任意の言明されたまたは介在する値の間のそれぞれのさらに小さな範囲が包含される。これらのさらに小さな範囲の上限と下限はその範囲に独立して含まれるまたは除外されることがあり、限界のいずれかが、どちらもないまたは両方がさらに小さな範囲に含まれるそれぞれの範囲も包含され、言明された範囲中の任意の具体的に除外される制限を受ける。言明された範囲がその限界のうちの１つまたは両方を含む場合、その含まれる限界のいずれかまたは両方を除外する範囲も含まれる。例えば、１％から８％までの範囲が言明されている場合、２％、３％、４％、５％、６％、および７％、ならびに１％よりも大きいまたはそれに等しい範囲の値および８％よりも少ないまたはそれに等しい範囲の値も明示的に開示されることが意図されている。同様に、１μｍから８μｍまでの範囲が言明されている場合、２μｍ、３μｍ、４μｍ、５μｍ、６μｍ、および７μｍ、ならびに１μｍよりも大きいまたはそれに等しい範囲の値および８μｍよりも少ないまたはそれに等しい範囲の値も明示的に開示されることが意図されている。
【００４６】
Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓの根から得られる単離されたポリガラクツロナンラムノガラクツロナン１（ＰＧＲＧ１）組成物であって、組成物中のＰＧＲＧ１が１０ｋＤａから５０ｋＤａの重量平均分子量および少なくとも０．０６のラムノース対ガラクツロン酸（Ｒｈａ対ＧａｌＡ）モルパーセント比を有する組成物が本明細書で提供される。言い換えると、組成物中のＰＧＲＧ１は、モルパーセントで測定される少なくとも０．０６のラムノース対ガラクツロン酸の比で存在する。
【００４７】
ＰＧＲＧ１組成物から精製され、４０から１２０ｋＤａの重量平均分子量範囲を有するＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物も提供される。
【００４８】
いくつかの実施形態では、単離されたＰＧＲＧ１組成物またはＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物は、Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ（Ｆｉｓｃｈ．）Ｂｇｅ．およびＡｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ（Ｆｉｓｃｈ．）ｖａｒ．ｍｏｎｇｈｏｌｉｃｕｓ（Ｂｇｅ．）Ｈｓｉａｏ種から選択されるＡｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ変種から単離される。
【００４９】
いくつかの実施形態では、ＰＧＲＧ１組成物またはＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物は、山西省、内モンゴル、甘粛省、河北省および遼寧省から選択される中華人民共和国の省で育ったＡｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓから単離される。
【００５０】
いくつかの実施形態では、ＰＧＲＧ１組成物またはＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物は、２年ものまたはそれよりも若い栽培されたＡｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ植物から単離される。いくつかの実施形態では、ＰＧＲＧ１組成物またはＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物は、２年ものから３年ものの間である栽培されたＡｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ植物から単離される。いくつかの実施形態では、ＰＧＲＧ１組成物またはＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物は、約３年ものから１０年ものの間である野生型Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ植物から単離される。
【００５１】
いくつかの実施形態では、ＰＧＲＧ１組成物またはＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物中のＰＧＲＧ１は［１，４−結合ＧａｌＡＧａｌＡ］ｎが点在した［１，４および１，２−結合ＲｈａＧａｌＡ］ｍの骨格構造を有する。
【００５２】
治療有効量の単離されたＰＧＲＧ１組成物またはＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物および任意選択で薬学的に適切な賦形剤を含む経口ＰＧＲＧ１製剤も提供される。
【００５３】
（ａ）Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓの乾燥根を約１００℃の水溶液中、合計で９時間にわたり抽出するステップと、抽出物にＰＧＲＧ１組成物を沈殿させるのに十分な低級アルカノールを添加して、単離されたＰＧＲＧ１組成物を生じるステップを含む、ＰＧＲＧ１組成物を生産する方法も提供される。
【００５４】
ＰＧＲＧ１組成物の水溶液を分子量カットオフが５ｋＤａのフィルターを通して限外濾過にかけるステップと、保持液からＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物を単離するステップを含む、ＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物を生産する方法も提供される。
【００５５】
非処置の哺乳動物中の血液クレアチニンレベルと比べて、血液クレアチニンレベルを減少させるのに有効な量でＰＧＲＧ１組成物、ＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物、またはその経口製剤を哺乳動物に経口的に投与するステップを含む、血液クレアチニンレベルを減少させることにより哺乳動物における腎臓疾患を処置する方法も提供される。
【００５６】
造血を誘導するのに有効な量でＰＧＲＧ１組成物、ＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物、またはその経口製剤を哺乳動物に経口的に投与することにより、増加した血液細胞数として測定される哺乳動物における造血を誘導する方法も提供される。
【００５７】
免疫系機能不全を処置するのに有効な量でＰＧＲＧ１組成物、ＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物、またはその経口製剤を哺乳動物に経口的に投与することにより、免疫系機能不全を処置する方法も提供される。
【００５８】
いくつかの実施形態では、哺乳動物はヒトである。
【００５９】
いくつかの実施形態では、方法は少なくとも１つの追加の治療剤を投与するステップをさらに含む。
【００６０】
精製されたＰＧＲＧ１組成物またはＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物を含む栄養補助食品も提供される。
【００６１】
いくつかの実施形態では、変種はＡｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓである。いくつかの実施形態では、組成物を調製するのに使用される植物組織はもっぱら植物の根から採取される。いくつかの実施形態では、骨格構造は［１，４−結合ＧａｌＡＧａｌＡ］ｎが点在した［１，４および１，２−結合ＲｈａＧａｌＡ］ｍである。いくつかの実施形態では、生物活性は造血および腎臓保護である。いくつかの実施形態では、ＰＧＲＧ１は５ｋ透析により精製される。
【００６２】
本明細書で使用されるように、以下の用語は以下の意味を有するように意図されている。
【００６３】
語句「核酸配列」（または核酸分子）とは、一本または二本鎖形態のＤＮＡまたはＲＮＡ分子、特に本開示に従ったタンパク質またはタンパク質断片をコードするＤＮＡを指す。「単離された核酸配列」とは、もはやそれが単離された天然環境にはない核酸配列、例えば、細菌宿主細胞中または植物の核またはプラスチドゲノム中の核酸配列を指す。
【００６４】
用語「タンパク質」または「ポリペプチド」は互換的に使用され、アミノ酸の鎖からなる分子を指し、特定の作用形式、サイズ、三次元構造または起源は関係がない。したがって、タンパク質の「断片」または「部分」をそれでも「タンパク質」と呼んでもよく、または「ポリペプチド」もしくは「ペプチド」と呼んでもよい。「単離されたタンパク質」は、もはやその天然環境にない、例えば、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにまたは組換え細菌もしくは植物宿主細胞にあるタンパク質を指すのに使用される。酵素は酵素活性を含むタンパク質である。
【００６５】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＰＧＲＧ１またはＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物は、Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓの葉、茎および／または根から得られる抽出物から少なくとも部分的に精製される。
【００６６】
本明細書で使用される用語「精製された」、「実質的に精製された」、および「単離された」とは、ＰＧＲＧ１またはＰＧＲＧ１−５Ｋが通常その自然状態において会合している他の異なる化合物がない状態を指す。好ましくは、「精製された」、「実質的に精製された」、および「単離された」は、その組成物が所与の試料の質量のうち、重量で少なくとも０．５％、１％、５％、１０％、２０％、３０％、もしくは４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、または少なくとも９０％を構成することを意味する。いくつかの実施形態では、これらの用語はＰＧＲＧ１またはＰＧＲＧ１−５Ｋが所与の試料の質量のうち、重量で少なくとも９５％を構成する組成物を指す。本明細書で使用されるように、用語「精製された」、「実質的に精製された」、および「単離された」は、ＰＧＲＧ１またはＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物を指す場合、植物供給源中に天然に存在することがあるものとは異なる精製または濃縮の状態も指す。（１）他の会合している構造物もしくは化合物とは離れた精製、または（２）植物供給源中では通常は会合していない構造物もしくは化合物との会合を含む、供給源中で天然に存在するものよりも大きい精製または濃縮のいかなる度合も「単離された」の意味内である。本明細書に記載されるＰＧＲＧ１またはＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物は、当業者には公知の種々の方法および過程に従って、単離されていてもよく、あるいは天然では通常会合していない構造物もしくは化合物と会合していてもよい。
【００６７】
さらに、本明細書で使用される用語「実質的に精製された」とは、その天然環境から取り除かれ、単離されまたは分離されており、かつその少なくとも６０％が、時には７５％が、時には９０％が、および時には９５％が、実質的に精製されていなければ天然に会合していることがあるまたは精製過程中に会合してしまった他の成分を含まないＰＧＲＧ１またはＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物を指す。
【００６８】
いくつかの実施形態では、ＰＧＲＧ１またはＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物は、例えば、熱、光、ｐＨ変化、自動酸化、溶液での平衡のシフト、または濃度もしくはイオン強度の変化を用いた処理により他の植物成分から少なくとも部分的に精製されるまたは遊離される。したがって、本明細書に記載される組成物中のＰＧＲＧ１またはＰＧＲＧ１−５Ｋは、その天然に存在する植物状況における元のＰＧＲＧ１またはＰＧＲＧ１−５Ｋと比べて化学的にまたは熱的に改変されていることがある。
【００６９】
タンパク質に類似して、多糖には一次、二次、三次および四次レベルの構造組織化（ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ）が存在し、したがって、多糖は分子、クラスター（凝集体）、ネットワークまたは相互作用のレベルで記載することが可能である。多糖の三次元分子構造解析は急激に研究が進んでいる分野である。さらに、多糖は、（１）その一次構造、すなわち、ポリマー鎖中の単糖残基の共有結合による連なり、（２）一次配列が取ることがある空間での任意の幾何学的に規則正しい配置を規定するその二次「秩序」構造、（３）二次配置が一緒に充填する方式を規定するその三次構造、および（４）多糖と多糖の相互作用を規定するより高次の四次構造により記載することが可能である。カラギーナン、アルギネート、ペクチン、およびジェランでは、多糖クラスターおよびゲルネットワークが観察されている。ガラクトマンナンまたはコンニャクグルコマンナンとヘリックス形成藻類多糖またはキサンタンの相乗的相互作用では、より高いレベルの構造組織化（多糖と多糖の相互作用）が解明されてきた（ＥｇｇｌｅｓｔｏｎおよびＤｏｙｌｅ、「Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ：  Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ、Ｃｌｕｓｔｅｒｓ、Ｎｅｔｗｏｒｋｓ、ａｎｄ  Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ」、第２章、１９〜３４頁、９３５巻、２００６年８月２８日発行、Ｍａｒｓｈａｌｌ  Ｌ．  Ｆｉｓｈｍａｎ、Ｐｈｏｅｂｅ  Ｘ．  Ｑｉ、およびＬｏｕｉｓｅ  Ｗｉｃｋｅｒ編）。
【００７０】
本明細書で同定された例となる糖残基は、アラビノシル（Ａｒａ）、ラムノシル（Ｒｈａ）、ガラクツロン酸（ＧａｌＡ）、ガラクトシル（Ｇａｌ）、およびグルコシル（Ｇｌｃ）残基である［図１］。
【００７１】
用語「医薬品グレード」とは、植物性薬物中のある特定の生物学的に活性なおよび／もしくは不活性な成分がある特定の絶対および／もしくは相対濃度範囲内でなければならないことならびに／または成分は、疾患、障害もしくは状態特異的生理活性アッセイによって測定した場合、ある活性レベルを示さなければならないことを意味する。疾患、障害または状態はヒトまたは動物に罹患することがある。
【００７２】
本明細書で使用されるように、「成分」とは、植物組成物中に天然に存在するまたは規定された生理活性範囲（複数可）および／もしくは組成範囲内の成分を有する医薬品グレードの植物性薬物を調製するように、植物性薬物に添加されている別々の化合物（すなわち、化学物質）を意味する。
【００７３】
「活性成分（複数可）」とは、疾患特異的バイオアッセイにおける個々の成分（複数可）活性の合計が植物材料の観察される生物活性の実質的な部分を占める１つまたは複数の成分（複数可）を意味する。いくつかの実施形態では、活性成分の活性の合計が観察される生物活性の大多数（５０％を超える）を占める。
【００７４】
本明細書で使用されるように、「画分」とは典型的には、溶解度、分子量範囲、極性範囲、吸着係数、結合特徴、化学反応性または選択的溶解度（ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ）などの定義されたパラメータを有する成分の群または構造的に類似する成分のクラスを意味する。最も多くは、画分は、クロマトグラフィー分離技法、すなわち、フラッシュクロマトグラフィー、分取高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、分取ガスクロマトグラフィー、分取薄層クロマトグラフィー、アフィニティークロマトグラフィー、サイズ排除クロマトグラフィー、液液クロマトグラフィー、例えば、向流分配クロマトグラフィーまたは求心クロマトグラフィー（ｃｅｎｔｒｉｐｅｔａｌ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）の生成物になる。
【００７５】
アセトゲニン、アルカロイド、炭水化物、カロテノイド、桂皮酸誘導体、脂肪酸、脂肪酸エステル、フラボノイド、グリコシド、イソプレノイド、大環状抗生物質、核酸、ペニシリン、ペプチド、フェノール類（ｐｈｅｎｏｌｉｃ）、ポリアセチレン、ポリケタイド、ポリフェノール、多糖、タンパク質、プロスタグランジン、ステロイドおよびテルペノイドは単独でまたは組み合わせて、本明細書に記載されるＰＧＲＧ１組成物の活性成分（複数可）であり得る。
【００７６】
これらの方法では、アリコートは生物学的に活性な成分と不活性な成分の両方に分離することができる。さらに、画分は関連する成分のクラスを含むことができる。
【００７７】
「重量平均分子量（ｗａＭＷ）」は、組成物中のポリマー（すなわち、多糖）の重量分布に基づいている。第１に、数平均分子量が計算され、これは試料中の分子の総重量を試料中の分子の総数で割る、すなわちΣＮｉＭｉ／ΣＮｉと定義されており、Ｎｉは分子の数でありＭｉはそれぞれの分子の質量である。次に、重量平均分子量（ｗａＭＷ）はそれぞれの種類の分子の重量分率から計算される（Ｗｉはそれぞれの種類の分子により表される全重量の割合を表す）。したがって、重量平均分子量（ｗａＭＷ）はΣＷｉＭｉに等しい。
【００７８】
植物についての生理活性／臨床適応症は、ヒトまたは他の動物の任意の疾患、障害または状態に関連していることがある。したがって、ヒトおよび／または動物疾患、障害もしくは状態の処置および／または改善および／または予防のための医薬品グレードの植物性薬物を生成する方法は有用である。例となる適応症には、アレルギー／炎症性障害、心血管疾患、がんもしくは中枢神経系障害、胃腸障害、代謝障害、悪心または微生物もしくはウイルスにより誘導される障害が含まれるが、これらに限定されない。
【００７９】
「哺乳動物」には、ヒトならびにコンパニオンアニマル（ネコ、イヌ、および同類のもの）および家畜（ウシ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、および同類のもの）などの非ヒト哺乳動物が含まれる。
【００８０】
「病的状態」とは、動物などの生物の健康および幸福を損なう疾患または障害などの状態を指す。病的状態感受性または病的状態関連遺伝子とは、例えば、ヌクレオチド配列の変動により改変された場合、特定の疾患臨床表現型の発現を促進する遺伝子のことである。したがって、病的状態感受性遺伝子は、改変されると、生物が特定の疾患を発症させる可能性または一般的危険を増加させる潜在力を有する。
【００８１】
「死亡率」とは、生物、特に動物が全予想寿命を生き延びることがない統計上の尤度を指す。したがって、増大した死亡率と関連のある多型などの形質またはマーカーは、集団の若いほうの区分よりも年配の区分でのほうが観察される頻度は低い。
【００８２】
「疾患」は、医学治療から生じる健康に有害な状態（「副作用」）を含む、動物の任意の不健康状態を含み、自己免疫疾患および、例えば、腎臓などの内臓の状態を含むことが可能である。
【００８３】
「疾患または障害を発症する素因」とは、特定の遺伝子型および／またはハプロタイプを有する被験体が、そのような遺伝子型および／またはハプロタイプを持たない被験体よりも特定の疾患または障害を発症する可能性が高いことを意味する。
【００８４】
「改善すること（ａｍｅｌｉｏｒａｔｉｎｇ）」または「改善する（ａｍｅｌｉｏｒａｔｅ）」とは、症状の緩和、寛解もしくは減少または患者の身体的もしくは精神的幸福感の向上などの任意の客観的または主観的パラメータを含む、病理または状態の処置における成功の任意の指標を指す。症状の改善は、身体検査および／または精神医学的評価の結果を含む、客観的または主観的パラメータに基づくことが可能である。
【００８５】
疾患の「処置すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」または「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」は、疾患に罹りやすいがまだ疾患の症状を経験していないし示していない動物において疾患が生じるのを予防する（予防的処置）、疾患を阻害する（疾患の発症を遅くするまたは停止する）、疾患の症状または副作用から救済する（対処療法を含む）、および疾患を緩和する（疾患の後退を引き起こす）ことを含む。
【００８６】
「治療有効量」とは、疾患の処置のために動物に投与された場合、その疾患に処置をもたらすのに十分である量を意味する。
【００８７】
本開示の活性化合物（複数可）および組成物（複数可）は一般的には、処置されている特定の疾患を処置するまたは予防するのに有効な量で使用されることになる。組成物は、治療的利益を達成するために治療的にまたは予防的利益を達成するために予防的に投与することができる。治療的利益とは、患者が基礎障害にまだ罹患することはあるにしても、患者が感情または状態の向上を報告するような、処置している基礎障害の根絶または改善、例えば、基礎疾患、障害もしくはアレルギーの根絶もしくは改善、および／または基礎疾患、障害もしくはアレルギーに関連する症状のうちの１つもしくは複数の根絶もしくは改善を意味する。例えば、アレルギーに罹っている患者に活性化合物を投与すると、基礎にあるアレルギー応答が根絶されるまたは改善されるときだけではなく、患者が、アレルゲンへの曝露に続くアレルギーに関連する症状の重症度または持続時間の低減を報告するときも治療的利益をもたらす。治療的利益には、向上が実現されるかどうかにかかわらず、状態、障害、疾患またはアレルギーの進行を止めるまたは遅くすることも含まれる。
【００８８】
投与される活性化合物（複数可）の量は、例えば、処置されている特定の適応症、投与形式、所望の利益が予防的であるのか治療的であるのか、処置されている適応症の重症度および患者の年齢と体重、特定の活性化合物の生物学的利用能等を含む種々の要因に依存することになる。有効投与量の決定は十分当業者の能力の範囲内である。最初の投与量は、最初はｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイから見積もることができる。最初の投与量は、動物モデルなどのｉｎ  ｖｉｖｏデータから見積もることも可能である。
【００８９】
組成物中の抽出物の量は、疾患の種類、被験体の年齢、性別、および体重などの要因に応じて変更することが可能である。投与レジメンは治療応答を最適化するように調整することができる。いくつかの実施形態では、当業者には公知である治療状況および要因の緊急性により指示される通りに、単回ボーラスを施してもよく、数個の分割量を、時間をかけて投与してもよく、用量は比例的に減少させるもしくは増加させてもよく、またはその任意の組み合わせでもよい。投与量値（ｄｏｓａｇｅ  ｖａｌｕｅ）は軽減させる状態の重症度によって変化してよいことは注目すべきである。投与レジメンは個体の必要性および組成物を投与しているまたはその投与を監督している人物の専門的判断に従って時間をかけて調整することができ、本明細書に記載される投与量範囲は例にすぎず医療従事者が選択することができる投与量範囲を限定するものではない。
【００９０】
用語「投与」または「投与すること」とは、疾患の症状を診断する、予防する、処置する、または改善するために、組成物を被験体の細胞または組織内にｉｎ  ｖｉｖｏでまたはｅｘ  ｖｉｖｏで取り込む方法を指す。一例では、化合物はｉｎ  ｖｉｖｏで非経口的に被験体に投与することが可能である。別の例では、化合物は、組成物の有用性および効能を決定するためのアッセイを含むがこれに限定されない目的のために化合物を被験体由来の細胞組織とｅｘ  ｖｉｖｏで組み合わせることにより、被験体に投与することが可能である。化合物が１つまたは複数の活性薬剤と組み合わせて被験体に取り込まれる場合、用語「投与」または「投与すること」は、例えば、上記の任意の薬剤などのその他の薬剤と一緒の化合物の逐次または同時の取り込みを含むことが可能である。本開示の医薬組成物は、その意図された投与経路と適合するように製剤化される。投与経路の例には、例えば、静脈内、皮内、筋肉内、および皮下注射などの非経口；経口；吸入；鼻腔内；経皮；経粘膜；ならびに直腸投与を含むが、これらに限定されない。
【００９１】
本開示の化合物の「有効量」は、治療有効量または予防有効量を記載するために使用することが可能である。有効量は、疾患の症状を改善する量であっても可能である。「治療有効量」とは、所望の治療結果を達成するのに必要な投与量および期間で有効である量を指し、研究者、獣医、医師または他の臨床医が探究している応答であって、所望の効果をもたらす処置計画の一部でもある任意の生物学的または医学的応答を組織、系、または被験体において誘発する活性化合物、プロドラッグまたは医薬品の量のことも指す。いくつかの実施形態では、治療有効量は、障害の１つもしくは複数の症状の改善、障害の前進の予防、または障害の後退を生じるのに十分な量で投与する必要があり得る。一例では、炎症により特徴付けられる炎症障害または自己免疫障害の処置では、治療有効量とは、好ましくは、組成物の所望の作用の少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも１００％の測定可能な応答を与える治療剤の量を指す。用語「処置すること」とは、本明細書で教示される１つまたは複数の治療剤または予防剤を投与することである。
【００９２】
「予防有効量」とは、血小板もしくは白血球数低下の重症度を予防するもしくは阻害する、または低下の底（ｎａｄｉｒ）を減らすなどの所望の予防結果を達成するのに必要な投与量および期間で有効である量を指す。典型的には、予防用量は、疾患の発症または疾患の症状を予防するまたは阻害するために、疾患の発症に先立って、または疾患の発症の初期段階で被験体において使用される。予防有効量は治療有効量よりも少ない、よりも多い、または等しくてもよい。
【００９３】
いくつかの実施形態では、投与は経口で可能である。他の実施形態では、投与は皮下注射で可能である。いくつかの実施形態では、投与は無菌等張水性緩衝液を使用する静脈内注射で可能である。いくつかの実施形態では、投与は、可溶化剤および注射部位での不快感を和らげるリグノカインなどの局所麻酔薬を含むことが可能である。他の実施形態では、投与は、例えば、投与の容易さおよび均一性を得るために非経口的であってもよい。
【００９４】
いくつかの実施形態では、組成物の治療または予防有効量は、約０．００１ｎＭから約０．１０Ｍまで；約０．００１ｎＭから約０．５Ｍまで；約０．０１ｎＭから約１５０μＭまで；約０．０１ｎＭから約５００μＭまで；約０．０１ｎＭから約１０００μＭまで、またはその中の任意の範囲の濃度に及ぶことができる。いくつかの実施形態では、組成物は、約０．００１ｍｇ／ｋｇから約５００ｍｇ／ｋｇまで；約０．００５ｍｇ／ｋｇから約４００ｍｇ／ｋｇまで；約０．０１ｍｇ／ｋｇから約３００ｍｇ／ｋｇまで；約０．０１ｍｇ／ｋｇから約２５０ｍｇ／ｋｇまで；約０．１ｍｇ／ｋｇから約２００ｍｇ／ｋｇまで；約０．２ｍｇ／ｋｇから約１５０ｍｇ／ｋｇまで；約０．４ｍｇ／ｋｇから約１２０ｍｇ／ｋｇまで；約０．１５ｍｇ／ｋｇから約１００ｍｇ／ｋｇまで；約０．１５ｍｇ／ｋｇから約５０ｍｇ／ｋｇまで；約０．５ｍｇ／ｋｇから約１０ｍｇ／ｋｇまで、またはそのなかの任意の範囲に及ぶ量で投与することができ、ヒト被験体は平均して約７０ｋｇと想定されている。
【００９５】
投与量は、典型的には、約１ｍｇ／ｋｇ／日から約１００ｍｇ／ｋｇ／日、２００ｍｇ／ｋｇ／日、３００ｍｇ／ｋｇ／日、４００ｍｇ／ｋｇ／日、または５００ｍｇ／ｋｇ／日までの範囲になるが、要因の中でもとりわけ、活性化合物の活性、その生物学的利用能、投与の形式および上で考察された種々の要因に応じて、それよりも高くても低くてもよい。投与量および間隔は、治療または予防効果を維持するのに十分である活性化合物（複数可）の血漿レベルを提供するように個々に調整することができる。局所表面（ｔｏｐｉｃａｌ）投与などの、局所投与または選択的取り込みの場合、活性化合物（複数可）の有効局所濃度は血漿濃度に関係がなくてもよい。当業者であれば、過度の実験を行わなくとも有効な局所投与量を最適化することができるであろう。
【００９６】
化合物は投与量単位で投与することが可能である。用語「投与量単位」とは、被験体への単位投与量として投与することが可能である化合物の別々の所定量を指す。活性化合物の所定量は所望の治療効果を生じるように選択することが可能であり、薬学的に許容される担体と一緒に投与することが可能である。それぞれの単位投与量中の所定量は、（ａ）活性化合物の独特な特徴および達成される特定の治療効果、ならびに（ｂ）そのような投与量単位を作り出し投与する技術に固有の限界を含むが、これらに限定されない要因に依存することが可能である。
【００９７】
化合物（複数可）は、とりわけ、処置されている適応症および処方する医師の判断に応じて、１日あたり１回、１日あたり２、３回もしくは数回、または１日あたり多数回でさえ投与することができる。
【００９８】
好ましくは、活性化合物（複数可）は、実質的な毒性を引き起こすことなく治療的または予防的利益を与えることになる。活性化合物（複数可）の毒性は標準医薬手順を使用して決定することができる。毒性と治療（または予防）効果の間の用量比は治療指数である。高い治療指数を示す活性化合物（複数可）が好ましい。
【００９９】
「経粘膜的な」または類似する用語は、薬物の有効な治療血液レベルまたは深部組織レベルを達成するための浸透剤の粘膜内へのおよび粘膜を通る通過を意味する。
【０１００】
「化学的増強剤」、「透過増強剤」、「浸透増強剤」、および同類のものは、浸透剤、薬物、または他の分子が粘膜を横切るフラックスを増加させる全ての増強剤を含むものとし、これらは、機能性によってのみ制限される。言い換えると、細胞膜無秩序化化合物（ｃｅｌｌ  ｅｎｖｅｌｏｐｅ  ｄｉｓｏｒｄｅｒｉｎｇ  ｃｏｍｐｏｕｎｄ）、溶剤、ステロイド系洗剤、胆汁酸塩、キレート剤、界面活性剤、非界面活性剤、脂肪酸、および任意の他の化学的増強剤すべてが含まれるように意図されている。薬物または分析物が粘膜を横切るフラックスは、抵抗（拡散係数）または推進力（拡散のための勾配）のいずれかを変化させることにより増加させることが可能である。フラックスは、いわゆる透過または浸透または化学的増強剤の使用により増強することができる。
【０１０１】
浸透増強剤は、２つの主要な範疇の成分、すなわち、細胞膜無秩序化化合物および溶剤または細胞膜無秩序化化合物と溶剤の両方を含有する二元系を含む。しかし、上で考察されたように、ステロイド系洗剤、胆汁酸塩、キレート剤、界面活性剤、非界面活性剤、および脂肪酸などの他の範疇の浸透増強剤は公知である。
【０１０２】
ジエチレングリコールモノエチルまたはモノメチルエーテルからなる増強剤とプロピレングリコールモノラウエートおよびメチルラウエートの組み合わせは米国特許第４，９７３，４６８号に、プロゲストゲンおよびエストロゲンなどのステロイドの経皮送達を増強すると開示されている。薬物の経皮送達のためのグリセロールモノラウエートとエタノールからなる二重増強剤は米国特許第４，８２０，７２０号に明らかにされている。米国特許第５，００６，３４２号は、Ｃ２からＣ４アルカンジオールの脂肪酸エステルまたは脂肪アルコールエーテルからなる経皮薬物投与のための数多くの増強剤を収載しており、エステル／エーテルのそれぞれの脂肪酸／アルコール部分は約８から２２個の炭素原子である。米国特許第４，８６３，９７０号は、オレイン酸、オレイルアルコール、およびオレイン酸のグリセロールエステルなどの１つまたは複数の細胞膜無秩序化化合物の指定された量を含有する透過増強ビヒクルに含有される活性浸透剤；Ｃ２またはＣ３アルカノールならびに水などの不活性希釈剤を含む表面適用のための透過増強組成物を明らかにしている。
【０１０３】
他の浸透増強剤には、必ずしも二元系に関連しているわけではないが、Ｈｅｒｓｃｈｌｅｒ、米国特許第３，５５１，５５４号；Ｈｅｒｓｃｈｌｅｒ、米国特許第３，７１１，６０２号；およびＨｅｒｓｃｈｌｅｒ、米国特許第３，７１１，６０６号に教示されているなどのＤＭＳＯまたはＤＭＳＯの水溶液、ならびにＣｏｏｐｅｒ、米国特許第４，５５７，９４３号に記述されているなどのアゾン（ｎ−置換−アルキル−アザシクロアルキル−２−オン）が含まれる。
【０１０４】
「浸透剤」、「薬物」、もしくは「薬理学的に活性な薬剤」または他の任意の類似する用語は、所望の生物学的もしくは薬理学的効果を誘導する当技術分野ではすでに公知の方法によるおよび／または本開示に教示される方法による経粘膜投与に適した、ペプチドを含む、任意の化学的または生物学的材料または化合物を意味し、効果には（１）生物に対して予防効果を有し、感染を予防するなど望ましくない生物学的効果を予防する、（２）疾患により引き起こされる状態を軽減する、例えば、疾患の結果として引き起こされる疼痛または炎症を軽減する、および／または（３）生物から疾患を軽減する、低減する、もしくは完全に排除するのいずれかを含むことができるが、これらに限定されない。効果は、局所的麻酔効果を提供するなど、局所的でもよく、または全身的でもよい。本開示は、新規の浸透剤または活性薬剤にまで及ぶものではない。むしろ、本開示は、現行の技術において存在するまたは本開示の化合物および組成物と組み合わせて使用するための活性薬剤として後に確立される可能性のある薬剤または浸透剤に限定されている。そのような物質には、皮膚を含む、身体表面および膜を通じてを含む、身体に正常に送達される広範なクラスの化合物が含まれる。一般に、これには、抗生物質および抗ウイルス剤などの抗感染症薬（ａｎｔｉｉｎｆｅｃｔｉｖｅ）；鎮痛剤および鎮痛剤組み合わせ；食欲減退薬（ａｎｏｒｅｘｉｃ）；駆虫薬；関節炎治療薬（ａｎｔｉａｒｔｈｒｉｔｉｃ）；抗喘息薬；抗痙攣薬；抗鬱薬；抗糖尿病薬；止痢薬；抗ヒスタミン薬；抗炎症薬；抗片頭痛調製物；制吐薬；抗腫瘍薬；抗パーキンソン病薬；鎮痒薬；抗精神病薬；解熱薬；鎮痙薬：抗コリン作用薬；交感神経作動薬（ｓｙｍｐａｔｈｏｍｉｍｅｔｉｃ）；キサンチン誘導体；カリウムとカルシウムチャネル遮断薬、ベータ遮断薬、アルファ遮断薬および抗不整脈薬を含む心血管調製物；降圧薬；利尿剤および抗利尿剤；全体的冠動脈、末梢および大脳を含む血管拡張薬；中枢神経系興奮薬；血管収縮薬；鬱血除去薬を含む咳および風邪調製物；コルチコステロイドを含むエストラジオールおよび他のステロイドなどのホルモン；催眠薬；免疫抑制薬；筋肉弛緩薬；副交感神経遮断薬；精神刺激薬；鎮静薬；ならびに精神安定薬が含まれるが、これらに限定されない。本開示の方法により、高分子量または低分子量のいずれの薬物が送達できるように、イオン化薬物と非イオン化薬物の両方を送達することができる。
【０１０５】
「頬側」薬物送達とは、頬粘膜を通って血流中への薬物の通過による薬物の送達を意味する。好ましくは、頬側薬物送達は、本明細書では、頬側投与量単位を、薬物治療を受けている個体の上歯肉または反対の内唇領域に置くことにより成し遂げられる。
【０１０６】
本明細書で使用される「賦形剤」または「ビヒクル」とは経口または頬側薬物投与に適した任意の賦形剤またはビヒクルを指し、当技術分野で公知の任意のそのような材料、例えば、非毒性であり組成物の他の成分と有害な様式で相互作用しない任意の液体、ゲル、溶剤、液体希釈剤、可溶化剤、または同類のものが含まれる。
【０１０７】
「薬学的に許容される賦形剤」とは、医薬組成物を調製するおよび／または投与するのに有用であり、一般に安全で、無毒で、望ましい希釈剤、アジュバンド、賦形剤またはビヒクルを意味し、ヒト医薬使用にならびに動物使用に許容される賦形剤を含む。そのような賦形剤は固体、液体、半固体、またはエアロゾル組成物の場合は、気体でもよい。これらの医薬担体には、ありとあらゆる生理的に適合する溶剤、分散媒、コーティング、抗菌および抗真菌薬、等張および吸収遅延剤、ならびに同類のものが含まれる。
【０１０８】
医薬担体の例には、水、油などの無菌液体、ならびに、例えば、リン脂質および糖脂質などの脂質が含まれるが、これらに限定されない。これらの無菌液体には、例えば、ピーナッツ油、ダイズ油、鉱油、ゴマ油、および同類のものなどの石油、動物、植物または合成起源由来の無菌液体が含まれるが、これらに限定されない。水は静脈内投与に好ましい担体であってよい。食塩溶液、水性デキストロースおよびグリセリン溶液も、特に注射用溶液のための液体担体であってよい。担体は、州または連邦規制機関による承認または米国薬局方協会もしくは被験体において使用するための他の一般的に認知された供給源への収載後は薬学的に許容される。
【０１０９】
適切な医薬賦形剤には、デンプン、糖、不活性ポリマー、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、麦芽、コメ、小麦粉、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、グリセロールモノステアレート、タルク、塩化ナトリウム、脱脂粉乳、グリセロール、プロピレン、グリコール、水、エタノール、および同類のものが含まれるが、これらに限定されない。組成物は少量の湿潤剤、乳化剤、ｐＨ緩衝剤、またはその組み合わせも含有することが可能である。
【０１１０】
組成物は溶液、懸濁物、エマルジョン、錠剤、丸剤、カプセル、粉末、徐放性製剤および同類のものの形態を取ることが可能である。経口製剤は、例えば、医薬品グレードのマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、セルロース、炭酸マグネシウム、および同類のものなどの標準担体を含むことが可能である。Ｍａｒｔｉｎ，  Ｅ．  Ｗ．  Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓを参照されたい。補助活性化合物も組成物に組み込むことが可能である。いくつかの実施形態では、担体は非経口投与に適している。他の実施形態では、担体は静脈内、腹腔内、筋肉内、舌下または経口投与に適することが可能である。他の実施形態では、薬学的に許容される担体は薬学的に許容される塩を含むことができる。
【０１１１】
非経口投与のための医薬製剤はリポソームを含むことができる。リポソームおよびエマルジョンは、特に疎水性薬物に有用である送達ビヒクルまたは担体である。治療試薬の生物学的安定性に応じて、タンパク質安定化のための追加の戦略を用いてもよい。さらに、例えば、標的特異的抗体でコーティングされたリポソームで、などの標的化薬物送達システムで薬物を投与することができる。リポソームは標的タンパク質に結合し、標的タンパク質を発現している細胞により選択的に吸収される。
【０１１２】
治療組成物は典型的には、製造および貯蔵条件下で無菌であり安定していなければならない。組成物は、溶液、マイクロエマルジョン、リポソーム、または高い薬物濃度に適した他の秩序化構造（ｏｒｄｅｒｅｄ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ）として製剤化することが可能である。いくつかの実施形態では、担体は、水；エタノール；例えば、グリセロール、ポリプロピレングリコール、液体ポリエチレングリコール、および同類のものなどのポリオール；ならびにその組み合わせを含むがこれらに限定されない溶剤または分散媒であってよい。適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティングを使用する、分散物中で必要な粒子サイズを維持する、および界面活性剤を使用するなどの種々の方式で維持することが可能である。
【０１１３】
いくつかの実施形態では、例えば、糖；マンニトール、ソルビトール、グリセロール、およびその組み合わせを含むが、これらに限定されないポリアルコール；ならびに塩化ナトリウムなどの等張剤を使用することが可能である。例えば、モノステアリン酸塩、ゼラチン、および緩徐放出ポリマーなどの吸収を遅延する薬剤を含むことにより、持続性の吸収特徴を組成物中に導入することが可能である。担体を使用すれば活性化合物を急速放出から保護することができ、そのような担体には、移植片中の制御放出製剤およびマイクロカプセル化送達システムが含まれるが、これらに限定されない。例えば、エチレン酢酸ビニル、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、ポリ乳酸、ポリカプロラクトン、ポリグリコール共重合体（ＰＬＧ）、および同類のものなどの生分解性および生体適合性ポリマーを使用することが可能である。そのような製剤は一般的に、当業者には公知の方法を使用して調製することが可能である。
【０１１４】
化合物は、例えば、注射のための油性懸濁物などの懸濁物として投与することができる。親油性溶剤またはビヒクルには、例えば、ゴマ油などの脂肪油；オレイン酸エチルまたはトリグリセリドなどの合成脂肪酸エステル；およびリポソームが含まれるが、これらに限定されない。注射のために使用することが可能な懸濁物は、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトール、またはデキストランなどの懸濁物の粘度を増加させる物質も含有することができる。任意選択で、懸濁物は化合物の溶解度を増加させ高濃縮溶液の調製を可能にする安定化剤または薬剤を含有することができる。
【０１１５】
いくつかの実施形態では、無菌で注射可能な溶液は、有効量の活性化合物を上記の所望の追加の構成成分のいずれか１つまたは任意の組み合わせと一緒に溶剤に取り込み、濾過し、次に溶液を無菌化することにより調製することが可能である。別の実施形態では、分散物は、分散媒および上記の所望の追加の構成成分のいずれか１つまたは任意の組み合わせを含有する無菌ビヒクル中に活性化合物を取り込むことにより調製することが可能である。無菌粉末は、活性構成成分および任意の所望の追加の構成成分からなり得る粉末をもたらすように、真空乾燥、凍結乾燥、またはその組み合わせにより無菌で注射可能な溶液で使用するために調製することが可能である。さらに、追加の構成成分は別々に調製された無菌で濾過された溶液に由来することが可能である。別の実施形態では、抽出物は、抽出物の溶解度を増強する１つまたは複数の追加の化合物と組み合わせて調製することができる。
【０１１６】
いくつかの実施形態では、化合物は、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロジフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素、またはその組み合わせなどの適切な噴霧体を含むことができるエアロゾルスプレーまたはネブライザーを通じての吸入により投与することが可能である。一例では、加圧エアロゾル用の投与量単位は計量バルブを通じて送達することができる。別の実施形態では、例えば、ゼラチンのカプセルおよびカートリッジは吸入器で使用することができ、例えば、デンプンまたはラクトースなどの適切な粉末基剤との化合物の粉末化混合物を含有するように製剤化することが可能である。
【０１１７】
「栄養補助食品」とは、以下の食事構成成分；ビタミン、ミネラル、草本もしくは他の植物、アミノ酸、総食事摂取量を増加させることにより食事を補充するために人間が使用するための食事物質、または前述の構成成分のいずれかの濃縮物、代謝産物、構成要素、抽出物もしくは組み合わせのうちの１つまたは複数を含有する食事を補充することを意図した産物を意味する。
【０１１８】
「低級アルカノール」とは、１から６個の炭素原子を有するアルコールを指す。低級アルカノールの例は、メタノール、エタノール、ブタノール、およびイソプロパノールである。
【０１１９】
いくつかの実施形態では、低級アルカノールは、およそ室温で約７０％低級アルカノールの濃度まで溶剤に添加して沈殿物を作り出すことが可能である。いくつかの実施形態では、先ず第１の沈殿ステップではより低い濃度の約３５％低級アルカノールを使用して、次に第２の沈殿ステップではより高い濃度の約７０％低級アルカノールを使用することにより沈殿は実行される。沈殿で使用される低級アルカノールの濃度は、例えば、２０％〜３０％、３０％〜４０％、４０％〜５０％、５０％〜６０％、６０％〜７０％、７０％〜８０％、８０％〜９０％、またはそのなかの任意の濃度に及ぶことが可能である。
【０１２０】
植物の進化は絶えず発生している遺伝子変異に基づいており、多くの場合、種のうちの特定の個体が異なる色、サイズ、または成長習性に変異する。遺伝子変異とその表現型は後代（子孫）に伝えられる。植物でこれが起こると、同じ学名を有する集団が存在し得るが、亜群は変動する特徴を示すことが可能である。変異した亜群がその親と著しく異なっており安定しているならば（形質は代々伝えられる）、植物のこの新しい群は変種名が割り当てられることが多い。変種名は変異が自然界で起こる場合に与えられる。
【０１２１】
したがって、Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ種の「変種」（「ｖａｒ．」）とは、特定のＡｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ亜群、株、変異または品種を指す。Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓの例となる変種は、Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ（Ｆｉｓｃｈ．）Ｂｕｎｇｅ；Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ（Ｆｉｓｃｈ．）Ｂｕｎｇｅ  ｖａｒ．ｍｏｎｇｈｏｌｉｃｕｓ（Ｂｕｎｇｅ）Ｐ．Ｋ．Ｈｓｉａｏ；Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｐｒｏｐｉｎｑｕｕｓ  Ｓｃｈｉｓｃｈｋｉｎ；Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｐｒｏｐｉｎｑｕｕｓ  Ｓｃｈｉｓｃｈｋｉｎ  ｖａｒ．ｇｌａｂｒａ  Ｖｙｄｒ．；およびＰｈａｃａ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅａ  Ｆｉｓｃｈである。同様に、品種名はヒトの影響のせいで変異が起こる場合に与えられ、品種名はｃｖ．の後でまたは一重引用符内に書かれ、例えば、Ｐｉｎｇｕｉｃｕｌａ  ｍｏｒａｎｅｎｓｉｓ  ｃｖ．ＳｕｐｅｒｂａまたはＰｉｎｇｕｉｃｕｌａ  ｍｏｒａｎｅｎｓｉｓ  ‘Ｓｕｐｅｒｂａ’である。
【０１２２】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＰＧＲＧ１組成物はＡｓｔｒａｇａｌｕｓ種のみに、例えば、Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ  Ｂｇｅ．に由来し、Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  Ｄｉｅｌｓ、Ａｎｇｅｌｉｃ  ａｒｃｈａｎｇｅｌｉｃａまたはＬｅｖｉｓｔｉｃｕｍ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ  Ｋｏｃｈ由来の多糖などのＤａｎｋｕｅｉの抽出物に由来しておらずまたはこれを含まない。
【０１２３】
多糖または糖残基の「修飾」とは、例えば、メチルエステル化および／またはアセチル化多糖または糖を指す。多糖または糖残基は、天然に存在していてもよいし、または合成類似体であってもよい。
【０１２４】
「ペクチン」は一次細胞壁におよび全ての植物細胞間の中層に豊富に存在する分岐ヘテロ多糖の複雑な群である。ペクチンポリマーは、α−１，４グリコシド結合により繋がった高比率のＤ−ガラクツロン酸残基を含有する化学的に多様な酸性分子である。このペクチンα−（１−４）ポリガラクツロン酸骨格は無作為にアセチル化しメチル化することが可能である。ペクチンは３つの主要な多糖：ポリガラクツロナン（ｐｏｌｙｇａｌａｃｔｕｒｏｎａｎ）、ラムノポリガラクツロナンＩ（ＲＧ−Ｉ）およびラムノポリガラクツロナンＩＩ（ＲＧ−ＩＩ）で構成されている。ガラクツロネート（ｇａｌａｃｔｕｒｏｎａｔｅ）のカルボン酸の一部はメタノールにエステル化されている。Ｌ−ラムノース（６−デオキシヘキソース）残基は通常、鎖全体に点在している。Ｄ−ガラクツロン酸のＬ−ラムノースへの結合はα−１，２であり、Ｄ−ガラクツロン酸から鎖中の次のガラクツロン酸への結合はα−１，４である。Ｌ−アラビノースまたはＤ−ガラクトースなどのモノマーを含有する中性の糖ポリマーの側鎖は、多くの場合、ラムノース残基に付着されている。したがって、ＲＧ−Ｉ骨格（ラムノシルおよびＤ−ガラクツロノシル（ｇａｌａｃｔｕｒｏｎｏｓｙｌ））部分は、アラビノースおよびガラクトースの側鎖を有する「毛様」分岐点を含有する（Ｂａｃｉｃ、２００６年、Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  １０２巻（１５号）：５６３９〜５６４０頁）。
【０１２５】
ペクチンは、動物用飼料産業においておよび食品工業においてゲル化剤として使用されている。反芻動物では、消化管中の細菌酵素および真菌酵素はその消化を助けている。柑橘果皮およびテンサイの加工に由来するペクチン豊富な副産物をもっと価値の高い材料に変換するペクチン分解酵素に、商業的関心がもたれている。エステラーゼ、ヒドロラーゼおよびリアーゼなどのペクチン分解性酵素は、ペクチン加工を必要とするほかの産業でも使用されている。
【０１２６】
天然のペクチンでは、Ｄ−ガラクツロネートのカルボキシル基の大多数がメチルエステルである。一部の植物はアセチル化ガラクツロネート残基も含有している。非エステル化カルボキシル基は、ペクチンにゲルを形成させるＭｇ２＋またはＣａ２＋などの二価カチオンを通じて結合することができる。
ラムノポリガラクツロナンＩ（ＲＧ−Ｉ）の例は以下に示されている。
【化２】
2017525702.tif 000004
【０１２７】
本明細書に開示される組成物のＰＧＲＧ１の一般的構造は図２に図示されており、下に示されている。
【化３】
2017525702.tif 000005
【０１２８】
ＰＧＲＧ１およびＰＧＲＧ−５Ｋでは、ポリＧａｌＡＧａｌＡがＲｈａＧａｌＡ１ポリマー中に点在している。図２からは、ＰＧＲＧ１が骨格および側鎖において二糖、ラムノースガラクツロン酸（ＲｈａＧａｌＡ）およびガラクツロン酸ガラクツロン酸（ＧａｌＡＧａｌＡ）で作られた多糖であることを観察できる。骨格糖モノマーはピラノース形態である。二糖のそれぞれ中の個々の糖は、アルファ１，４共有結合（ｃｏｖａｌｅｎｔ  ｂｏｎｄ）を介して立体化学的におよび位置化学的に結合され（ｒｅｇｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｌｙ  ｌｉｎｋｅｄ）ている。個々の骨格の二糖二糖結合はアルファ１，２結合またはアルファ１，４結合されることが可能である。ＰＧＲＧ１中の側鎖は単糖、ガラクトース（Ｇａｌ）およびアラビノース（Ａｒａ）で作られている。ＧａｌおよびＡｒａはそれぞれピラノース形態およびフラノース形態である。ＧａｌはＲｈａＧａｌＡ骨格中のＲｈａにベータ（１，４）結合されており、ＡｒａはＧａｌにアルファ（１，４）結合されている。側鎖には著しい分岐が存在し得る。Ｇａｌ分岐は２，３，および／または６結合されることが可能であり、Ａｒａは２，３，および／または５結合されることが可能である。
【０１２９】
図２および上で示されるＰＧＲＧ１構造では、下付き文字のｎ、ｍ、ｐ、ｑ、ａ、ｂ、およびｚは、結果として得られるその構造が分子量に変換された場合、１０〜５０ｋＤａの範囲内に収まる任意の整数であってよい。ＰＧＲＧ１−５Ｋでは、下付き文字のｎ、ｍ、ｐ、ｑ、ａ、ｂ、およびｚは、結果として得られるその構造が分子量に変換された場合、４０〜１２０ｋＤａの範囲内に収まる任意の整数であってよい。ＰＧＲＧ１とＰＧＲＧ１−５Ｋの両方では、整数ｎ、ｍ、ｐ、ｑ、ａ、およびｂは、２つの連続する整数が０に等しくなることはできないという条件で、０に等しくなることが可能である。
【０１３０】
前述の当技術分野では公知の多糖、ペクチンおよびラムノガラクツロナンＩ組成物は本明細書に記載されるＰＧＲＧ１およびＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物とは著しく異なることは当業者には明らかであろう。例えば、当技術分野では公知の組成物は、ほとんど必ず植物の多数の種に由来しており、これらの植物は不確定の期間および／または制御を受けていない条件下で成長しており、種々の不特定の生育時間後に収穫されており、化学組成に予測できない変動が生じている。さらに、当技術分野で公知の組成物は、一般に植物の根と葉の両方から単離されている。本開示のＰＧＲＧ１組成物はＡｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓの根から単離されており、少なくとも４０キロダルトン（ｋＤａ）の重量平均分子量を有する。
【０１３１】
例証となる出版物（それぞれその全体が、参照により本明細書に組み込まれる）：米国特許第８，１３７，７１０号：米国特許出願公開第２０１２０１４１４１２号および同第２０１００１５８８６１号；ならびにＰＣＴ出願公開ＷＯ２０１００７７８６７には、特発性血小板減少性紫斑病を処置するためのＡｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓの抽出物を含む組成物の調製および使用が開示される。抽出物は、例えば、約３．５対１より大きいアラビノース対ガラクトース比；約５％〜約１０％のラムノース；約１５％〜約２０％のガラクトース；約１０％〜約２０％のガラクツロン酸；および約１０％〜約１５％のグルコースを有するＡｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓの高収量の抽出物を含むことができる。記載されるいくつかの抽出物は、約３．５対１〜約５．０対１の範囲のアラビノース対ガラクトース比；約５％〜約１０％のラムノース、約１５％〜約２０％ガラクトース、および約１０％〜約１５％のグルコースを有する酸修飾アラビノガラクタンタンパク質組成物を含む。組成物は、特発性血小板減少性紫斑病の処置およびそのような処置のための医薬の製剤化に使用できる。また、中華人民共和国の内モンゴルまたは山西省で生育し得るＡ．ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ  Ｂｇｅ．ｖａｒ．ｍｏｎｇｈｏｌｉｃｕｓ（Ｂｇｅ．）ＨｓｉａｏまたはＡ．ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ（Ｆｉｓｃｈ．）Ｂｇｅ．も開示される。一部の実施形態では、根は約二年もののＡｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ植物由来である。一部の実施形態では、組成物は少なくとも１００ｋＤａの重量平均分子量を有する。一部の実施形態では、組成物は少なくとも８０重量％の炭水化物および２重量％以下のタンパク質を有する。一部の実施形態では、組成物は約４．０対１〜約５．０対１の範囲のアラビノース対ガラクトース比を有する。
【０１３２】
ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２００１０００６８２号および米国特許第６，９９１，８１７号は、Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ、特に根から単離されたアラビノガラクタン組成物を開示し、前記組成物は少なくとも１００ｋＤａの重量平均分子量を有し、静脈注射可能な水性製剤へと再構成することができ、哺乳動物に静脈投与した場合、哺乳動物において、造血を刺激し、巨核球の増殖もしくは成熟を誘導し、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＴＮＦ−α、ＩＦＮ−γ、ＧＭ−ＣＳＦもしくはＧ−ＣＳＦの産生を刺激し、好中球の産生もしくは作用を刺激し、好中球減少症、貧血症、もしくは血小板減少症を処置し、細胞毒性（例えば、化学）剤もしくは放射線への曝露（偶発的もしくは非治療的曝露、および治療的曝露）からの回復を加速し、悪液質、嘔吐、もしくは薬物禁断症状を処置し、または生物学的応答を改変し、またはＢ型肝炎の肝細胞を保護するのに有用である。
【０１３３】
ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１００９５８０８号は、糖尿病または肥満の予防または軽減のため、Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓをアミラーゼおよび／またはセルラーゼを使用する加水分解に供することによって不溶性物質の抽出および回収の速度が増加することを特徴とする、酵素分解を用いるＡｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ抽出物の生産方法、ならびにその方法によって生産される組成物を記載する。酵素分解を使用して生産されるＡｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ抽出物は、血中の糖、コレステロール、およびトリグリセリドを低下させ、糖尿病（２型糖尿病を含む）、脂肪肝、高脂血症、動脈硬化症、および肥満を予防または軽減するのに有利であると言われている。
【０１３４】
米国特許出願公開第ＵＳ２０１０１７３０２６号は、マメ科のＡｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ  Ｆｉｓｃｈ．Ｂｇｅ．Ｖａｒ．ｍｏｎｇｏｌｉｃｕｓ  Ｂｇｅ．のエストロゲン様抽出物、および前記抽出物を使用して、特にヒト女性においてエストロゲン様作用を達成する方法を記載する。一部の実施形態では、方法は更年期症候群の処置を含む。一部の実施形態では、方法はエストロゲン応答性乳がんなどエストロゲン受容体陽性がんの処置を含む。一部の実施形態では、方法は骨粗鬆症の処置または予防を含む。
【０１３５】
米国特許第７，４９８，０４８号；同第７，５５３，５０１号；および同第７，６０４，８２３号は、Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ（いくつかの他の植物抽出物の中で）を含む植物機能性食品の混合物を開示する。
【０１３６】
米国特許第７，３６４，７６０号は、哺乳動物における免疫不全ウイルス感染と関連する疾患状態または病状の処置のための方法であって、Ｒａｄｉｘ  Ｇｅｎｔｉａｎａｅ  Ｌｏｎｇｄａｎｃａｏ（Ｇｅｎｔｉａｎａｅ  ｌｏｎｇｄａｎｃａｏ）、Ｆｒｕｃｔｕｓ  Ｘａｎｔｈｉｉ  Ｓｉｂｉｒｉｃｉ（Ｘａｎｔｈｉｉ  ｓｉｂｉｒｉｃｉ）、Ｒａｄｉｘ  Ｂｕｐｌｅｕｒｉ（Ｂｕｐｌｅｕｒｕｍ  ｃｈｉｎｅｎｓｅ）、Ｒａｄｉｘ  Ａｓｔｒａｇａｌｉ（Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ）、およびＣｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｕｍ  Ｍｏｒｉｆｏｌｉｕｍ（Ｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｕｍ  ｍｏｒｉｆｏｌｉｕｍ）の治療有効量の草本抽出物を含む治療有効量の医薬組成物を、それを必要とする哺乳動物に投与するステップを含み、前記組成物が少なくとも８０から４００の間の治療指数を有する方法を開示する。
【０１３７】
米国特許第４，８４３，０６７号は、免疫機能を増大させるための多糖含有医薬組成物ｈｕａｎｇ−ｑｉ（Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ  Ｂｇｅ．またはＡｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｇｕｍｍｉｆｅｒ  Ｌａｂｉｌｌａｒｄのいずれかから抽出した）およびＡｎｇｅｌｉｃａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  Ｄｉｅｌｓ、Ａｎｇｅｌｉｃ  ａｒｃｈａｎｇｅｌｉｃａまたはＬｅｖｉｓｔｉｃｕｍ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ  Ｋｏｃｈ由来のＤａｎｋｕｅｉの多糖を開示する。このｈｕａｎｇ−ｑｉとＤａｎｋｕｅｉ多糖のｈｕａｎｇ−ｑｉ多糖組み合わせは、根の粉末の水抽出およびエタノール沈殿により抽出可能であると述べられている。
【０１３８】
米国特許第４，９４４，９４６号は、同様に、ウイルスを阻害し、免疫機能を増大させるための４つの活性成分（（１）Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ  ＢｇｅまたはＡｓｔｒａｇａｌｕｓの他の種由来のＷａｎｇ  Ｑｉの多糖；（２）Ｉｓａｔｉｓ  ｔｉｎｃｔｏｒｉａ  Ｌ、Ｉ．ｉｎｄｉｇｏｔｉｃａ  ＦｏｒｔまたはＢａｐｈｉｃａｃａｎｔｈｕｓ  ｃｕｓｉａ  Ｂｒｅｍｅｋの中に由来するＢａｎｌａｎｋｅｎｓｕ；（３）Ｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍ  Ｌ由来のＹｅｊｕｈｕａフラボノイド；および（４）Ｄｒｙｏｐｔｅｒｉｓ  ｃｒａｓｓｉｒｈｉｚｏｍａ  Ｎａｋａｉ、Ｏｓｍｕｎｄａ  ｊａｐｏｎｉｃａ  Ｔｈｕｎｂ、Ｌｕｎａｔｈｙｒｉｕｍ  ａｃｒｏｓｔｉｃｈｏｉｄｅｓ  ｃｈｉｎｇまたはＭａｔｔｅｕｃｃｉａ  ｓｔｕｔｈｉｏｐｔｅｒｉｓ  Ｔｏｄａｒｏの中に由来するＧｕａｎｚｈｏｎｈｓｕ）の医薬組成物を記載する。
【０１３９】
欧州特許出願公開第ＥＰ０４４１２７８号は、免疫調節特性を有するＡｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓのゴム状滲出物から抽出された多糖（１２０００〜５０００００ダルトン）、およびこれらを含有する医薬組成物を記載する。
【０１４０】
欧州特許出願公開第ＥＰ０１３７４８８１号は、以下の漢方生薬：Ｍａ  Ｈｕａｎｇ（Ｅｐｈｅｄｒａ  ｓｉｎｉｃａ）、Ｘｉｎｇ  Ｒｅｎ（Ｐｒｕｎｕｓ  ａｒｍｅｎｉａｃａ）、Ｇａｎ  Ｃａｏ（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ  ｕｒａｌｅｎｓｉｓ  ｌｉｃｏｒｉｃｅ）、Ｈｕａｎｇ  Ｑｉｎ（Ｓｃｕｔｅｌｌａｒｉａ  ｂａｉｃａｌｅｎｓｉｓ）、Ｈｕａｎｇ  Ｌｉａｎ（Ｃｏｐｔｉｓ  ｃｈｉｎｅｓｉｓ）、Ｈｕａｎｇ  Ｂａｉ（Ｐｈｅｌｌｏｄｒｏｎ  ｃｈｉｎｅｎｓｅ）、Ｋｕａｎｇ  Ｄｏｎｇ  Ｈｕａ（Ｔｕｓｉｌａｇｏ  ｆａｒｆａｒａ）、Ｂａｉ  Ｂｕ（Ｓｔｅｍｏｎａ  ｓｅｓｓｉｌｉｆｏｌｉａ）、Ｃｈｕａｎ  Ｂｅｉ  ＭＵまたはＢｅｉ  ＭＵ（Ｆｒｉｔｌｌａｒｉａ  ｃｉｒｒｈｏｓａ）、Ｄｉ  Ｌｏｎｇ（Ｐｈｅｒｅｔｉｍａ  ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｍ）、Ｂｕ  Ｇｕ  Ｚｈｉ（Ｐｓｏｒａｌｅａ  ｃｏｒｙｌｉｆｏｌｉａ）、Ｄａｎｇ  Ｓｈｅｎ（Ｃｏｄｏｎｏｐｓｉｓ  ｐｉｌｏｓｕｌａ）、Ｓｈａｎ  Ｚｈａ（Ｃｒａｔａｅｇｒｕｓ  ｐｉｎｎａｔｉｆｉｄａ）、Ｍａ  Ｙａ（Ｈｏｒｄｅｕｍ  ｖｕｌｇａｒａ）、Ｓｈｅｎ  Ｑｕ（Ｍａｓｓａ  ｆｅｒｍｅｎｔａｔａ  ｍｅｄｉｃａｌｉｓ）、Ｗｕ  Ｗｅｉ  Ｚｉ（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ  ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）、Ｓｈｉ  Ｇａｏ（Ｇｙｐｓｕｍ）、Ｓｕ  Ｚｉ（Ｐｅｒｉｌｌａ  ｆｒｕｔｅｓｃｅｎｓ）、Ｚｉ  Ｗａｎ（Ａｓｔｅｒ  ｔａｔａｒｉｃｕｓ）、Ｂａｉ  Ｓｈａｏ（Ｐａｅｏｎｉａ  ｌａｃｔｉｆｌｏｒａ）、Ｊｉｎ  Ｙｉｎ  Ｈｕａ（Ｌｏｎｉｃｅｒａ  ｊａｐｏｎｉｃａ）、Ｌｉａｎ  Ｑｉａｏ（Ｆｏｒｓｙｔｈｉａ  ｓｕｓｐｅｎｓａ）、Ｊｉｎｇ  Ｊｉｅ（Ｓｃｈｉｚｏｎｅｐｅｔａ  ｔｅｎｕｉｆｏｌｉａ）、Ｈｕａｎｇ  Ｑｉ（Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ）、Ｆａｎｇ  Ｆｅｎｇ（Ｌｅｄｅｂｏｕｒｉｅｌｌａ  ｄｉｖａｒｉｃａｔａ）の一部または全てから作製される喘息のための医薬製剤を開示する。
【０１４１】
ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２００２０７８７２２および欧州特許第ＥＰ１３７４８８０は、実質的に漢方薬用草本：Ｐａｎａｘ  ｇｉｎｓｉｎｇ、Ｐｏｒｉａ  ｃｏｃｏｓ、Ａｔｒａｃｔｙｌｏｄｅｓ  ｍａｃｒｏｃｅｐｈａｌａ、Ａｎｇｅｌｉｃ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ、Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｚｅｄｏａｒｉａ、Ｓｃｕｔｅｌｌａｒｉａ  ｂａｉｃａｌｅｎｓｉｓ、Ｃｏｐｔｉｓ  ｃｈｉｎｅｎｉｓｉｓ、Ｐｈｅｌｌｏｄｒｏｎ  ｃｈｉｎｅｎｓｅ、Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ  ｕｒａｌｅｎｉｓｉｓ、Ｃｒａｔａｅｇｕｓ  ｐｉｎａｔｉｆｉｄａ、Ｈｏｒｄｅｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅ、Ｓａｌｖｉａ  ｍｉｌｔｉｏｒｒｈｉｚａ、Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ  ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ、Ｈｅｄｙｏｔｉｓ  ｄｉｆｆｕｓａ、Ｏｐｈｉｏｐｈｏｇｏｎ  ｊａｐｏｎｉｃｕｓ、Ｌｏｂｅｌｉａ  ｃｈｉｎｅｓｉｓ  ｌｏｕｒ、Ｓｃｕｔｅｌｌａｒｉａ  ｂａｒｂａｂａ、Ｍａｓｓａ  ｆｅｒｍｅｎｔａｔａ  ｍｅｄｉｃａｌｉｓ、Ｂｕｐｌｅｕｒｕｍ  ｓｃｏｒｚｏｎｅｒｉｆｏｌｉｕｍ、Ｐｉｎｅｌｌｉａ  ｔｅｒｎａｔａ、Ｃｉｔｒｕｓ  ｒｅｔｉｃｕｌａｒａ、Ｍｅｌｉａ  ｔｏｏｓｅｎｄａｎ、Ｐａｅｏｎｉａ  ｌａｃｔｉｆｌｏｒａ、Ｇａｎｏｄｅｒｍａ  ｌｕｃｉｕｍおよびＺｉｎｇｉｂｅｒ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅからなる腫瘍の処置のための抗腫瘍組成物を開示する。
【０１４２】
ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２００９１２６６５２号は、感染性疾患、がん、自己免疫疾患、アレルギー、炎症、毒性、肥満ならびに／またはヒト、動物、植物および他の生物の他の障害の生物学的マーカーおよび治療標的、特にグリカン関連標的の迅速な同定のためのグリカンまたは炭水化物ベースの方法を開示する。
【０１４３】
ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２００００５９５２０号は、限定はされないが、呼吸器障害など、アレルギーおよび炎症反応の処置または予防のための草本組成物ならびに使用を記載する。組成物は、草本または草本の植物学上もしくは園芸学上の等価物または草本抽出物の化学的もしくは機能的等価物を含み、前記組成物がアレルギーまたは炎症反応の予防または処置に有効であり、組成物の有効性がプラセボ対照試験と関連し、組成物中の前記草本が：（ｉ）気道を開いたままに保つ；（ｉｉ）脾臓および消化系を活気づける；（ｉｉｉ）腎臓ならびに尿路および生殖管の機能を強化する；（ｉｖ）炎症を除去する；ならびに（ｖ）血液循環を促進しうっ血を取り除くために選択され、組成物中の草本が、草本の５つの群のうち少なくとも１つを含むリストから選択され、第１の群が、Ｍａｈｕａｎｇ、Ｇｕｉｚｈｉ、Ｃａｎｇｅｒｚｉ、Ｘｉｎｙｉ、Ｂｏｈｅ、Ｘｉｘｉｎ、Ｘｉｎｇｒｅｎ、Ｃｈａｉｈｕ，Ｙｉｎｘｉｎｇｙｅ、ＢａｉｚｉおよびＦａｎｇｆｅｎｇを含み、第２の群が、Ｂａｉｚｈｕ、Ｓｈａｎｙａｏ、Ｄａｎｇｓｈｅｎ，Ｄａｚａｏ、Ｇａｎｃａｏ、ＨｕａｎｇｑｉおよびＨｕａｎｇｊｉｎｇを含み、第３の群が、Ｔｕｓｉｚｉ、Ｒｏｕｃｏｎｇｒｏｎｇ、Ｆｕｚｉ，Ｙｉｎｙａｎｇｈｕｏ、Ｂｕｇｕｚｈｉ、ＤｉｈｕａｎｇおよびＸｉａｎｍａｏを含み、第４の群が、Ｈｕａｎｇｑｉｎ、ＷｕｍｅｉおよびＷｕｗｅｉｚｉを含み、第５の群が、Ｔａｏｒｅｎ、Ｃｈｕａｎｘｉｏｎｇ、ＤａｎｐｉおよびＣｈｉｓｈａｏを含む。
【０１４４】
ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２００６１２２４５４号は、糖尿病を処置するための医薬組成物およびその調製方法を記載し、医薬組成物はＲｅｈｍａｎｎｉａ  ｇｌｕｔｉｎｏｓａ  Ｌｉｂｏｓｃｈの根、Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ（Ｆｉｓｃｈ．）Ｂｇｅ．ｖａｒ．ｍｏｎｇｈｏｌｉｃｕｓ（Ｂｇｅ．）Ｈｓｉａｏ、Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ（Ｆｉｓｃｈ．）Ｂｇｅの根、Ｄｉｏｓｃｏｒｅａ  ｏｐｐｏｓｉｔａ  Ｔｈｕｎｂの根茎、Ｐｕｅｒａｒｉａ  ｌｏｂａｔａ（Ｗｉｌｌｄ．）Ｏｈｗｉ  Ｐｕｅｒａｒｉａ  ｔｈｏｍｓｏｎｉｉ  Ｂｅｎｔｈの根、Ｔｒｉｃｈｏｓａｎｔｈｅｓ  ｋｉｒｉｌｏｗｉｉ  Ｍａｘｉｍ、Ｔｒｉｃｈｏｓａｎｔｈｅｓ  ｒｏｓｔｈｏｒｎｉｉ  Ｈａｒｍｓの根、Ｚｅａ  ｍａｙｓ  Ｌの柱頭、Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ  ｓｐｈｅｎａｎｔｈｅｒａ  Ｒｅｈｄ．Ｅｔ  Ｗｉｌｓ．の果実（ｆｒｕｃｔｕｓ）、およびグリベンクラミドを含む原料薬からなる。医薬組成物は、腎臓陰（ｋｉｄｎｅｙ−Ｙｉｎ）を養い、気（ｖｉｔａｌ  ｅｎｅｒｇｙ）に役立ち、唾液の分泌を促進する機能を有し、気および陰の両方において欠乏のある糖尿病、すなわち、インスリン非依存性糖尿病の処置において使用される。
【０１４５】
日本特許第ＪＰ０１０６１４１１号は、ＫＡＮＫＹＯ（Ｚｉｎｇｉｂｅｒ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅの根茎）からなるＯＮＲＩ−ＹＡＫＵ（温化薬（ｗａｒｍｉｎｇ  ｄｒｕｇ））、ＫＯＫＡ（Ｃａｒｔｈａｍｕｓ  ｔｉｎｃｔｏｒｉｕｓの花）からなるＫＡＫＫＥＴＳＵ−ＫＹＯＹＯ−ＹＡＫＵ（血液活性化薬）、ＮＩＮＪＩＮ（Ｐａｎａｘ  ｇｉｎｓｅｎｇの根茎）およびＯＵＧＩ（Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓの根）からなるＨＯＫＩ−ＹＡＫＵ（活性化薬）、ＴＯＫＩ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ａｃｕｔｉｌｏｂａの根（ｒｏｔ））からなるＨＯＫＥＴＳＵ−ＹＡＫＵ（造血薬）およびＨＯＫＯＴＳＵＳＨＩ（Ｐｓｏｒａｌｅａ  ｃｏｒｙｌｉｆｏｌｉａの豆）からなるＨＯＹＯ−ＹＡＫＵ（中枢神経興奮薬）を使用することによって、血液循環の改善、育毛および発毛の促進、ならびに抜け毛の予防に有効な発毛剤（ｈａｉｒ−ｒｅｓｔｏｒａｔｉｏｎ  ａｇｅｎｔ）を開示する。発毛薬は、基本成分として、（ａ）脾臓、胃および心臓を温め、頭皮のはげたまたは毛髪がまばらな部分で血液循環を促進し、血液循環を改善するのに有効なＫＡＮＫＹＯからなるＯＮＲＩ−ＹＡＫＵ、（ｂ）血流の停滞を除くおよび防ぐのに有効なＫＯＫＡ、ＴＯＮＩＮ（Ｐｒｕｎｕｓ  ｐｅｒｓｉｃａの種（ｓｔｏｎｅ））およびＴＡＮＪＩＮ（Ｓｃｈｉｎｏｐｓｉｓ  ｌｏｒｅｎｔｚｉｉの樹皮）からなるＫＡＫＫＥＴＳＵ−ＫＹＯＹＯ−ＹＡＫＵ、（ｃ）活力の欠乏を補充する、血液の生成を刺激する、ならびに脾臓および胃を活気づけるのに有効なＮＩＮＪＩＮおよびＯＵＧＩからなるＨＯＫＩ−ＹＡＫＵ、（ｄ）血液を補充するおよび活性化するのに有効なＴＯＫＩからなるＨＯＫＥＴＳＵ−ＹＡＫＵ、ならびに（ｅ）エネルギーおよび生命力を活気づけるおよび養うのに有効な、ならびに頭皮のはげたおよび毛髪の喪失した部分を刺激し、脾臓および胃を温め活性化し、血流の停滞を除いて血液の循環を滑らかに維持するのに有効なＨＯＫＯＴＳＵＳＨＩからなるＨＯＹＯ−ＹＡＫＵを含有する。
【０１４６】
日本特許第ＪＰ０６０７０２１７号は、Ａ．ｍｏｎｇｈｏｌｉｃｕｓ  ＢｕｎｇｅおよびＡ．ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓの地上部分由来の多糖および生体防御活性化剤を開示する。生体防御活性化剤は、Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｏｎｇｈｏｌｉｃｕｓおよびＡｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓの地上部分に由来するアラビノース、ラムノース、フコース、キシルロース、マンノース、ガラクトース、グルコース、グルクロン酸、およびガラクツロン酸から選択される多糖組成物を含む有効成分を含有する。
【０１４７】
研究刊行物：
Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｏｎｇｈｏｌｉｃｓ  Ｂｕｎｇｅの空中部分の抽出物から単離された１３種類の多糖は、パイエル板免疫担当細胞に対して免疫調節活性を有することが報告された。末端ベータ−Ｄ−ＧｌｃＡを有するベータ−Ｄ−（１−−＞３，６）−ガラクトシル側鎖を有するラムノガラクツロナンＩ（ＲＧ−Ｉ）は、ペクチンに富んだ画分において活性を示した。興味深いことに、末端ＧｌｃＡは、アラビノガラクタンに富んだ画分の活性に必要ではなく、少なくとも２つの異なる免疫調節構造を示唆している。（Ｈｉｒｏａｋｉ  Ｋｉｙｏｈａｒａら、２０１０年、「Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ  ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｓｉｄｅ−ｃｈａｉｎｓ  ｉｎ  ｂｅｔａ−Ｄ−（１−−＞３，６）−ｇａｌａｃｔａｎｓ  ｏｎ  ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  Ｐｅｙｅｒ’ｓ  ｐａｔｃｈ−ｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ  ｂｙ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ  ｆｒｏｍ  Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｏｎｇｈｏｌｉｃｓ  Ｂｕｎｇｅ．」Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、７１巻（２〜３号）：２８０〜２９３頁）。
【０１４８】
モノクローナル抗体ＣＣＲＣ−Ｍ７は、免疫原としてＲＧ−Ｉを使用して生成した同様の結合特異性を有する抗体の群の代表例である。ＣＣＲＣ−Ｍ７によって認識されるエピトープはいくつかの植物多糖および膜糖たんぱく質に存在する。ＲＧ−Ｉからのアラビノシル残基の選択的な酵素的または化学的除去は、ＣＣＲＣ−Ｍ７の多糖への結合能を減少させるが、消失はしない。対照的に、ＲＧ−Ｉからのアラビノシルとガラクトシル残基両方の酵素的除去は、ＣＣＲＣ−Ｍ７の生じる多糖への結合を完全に消失する。ＣＣＲＣ−Ｍ７結合部位と競合する化学的に定義されたオリゴ糖類を使用する競合ＥＬＩＳＡ法によって、（１→６）−結合ベータ−Ｄ−ガラクトシル残基を含有するオリゴ糖類が、試験したものの中で最良の競合物であり、三糖類、五糖類、および六糖類は等しく有効であることを示した。間接ＥＬＩＳＡ法および競合ＥＬＩＳＡ法の合わせた結果は、ＣＣＲＣ−Ｍ７によって認識される最小エピトープは、少なくとも１つのアラビノシル残基が付加された少なくとも３つのガラクトシル残基を含有する（１→６）−結合ベータ−ガラクタンを包含することを示唆している。（Ｓｔｅｆｆａｎら、「Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｔｈａｔ  ｒｅｃｏｇｎｉｚｅｓ  ａｎ  ａｒａｂｉｎｏｓｙｌａｔｅｄ  （１→６）−ｂｅｔａ−Ｄ−ｇａｌａｃｔａｎ  ｅｐｉｔｏｐｅ  ｉｎ  ｐｌａｎｔ  ｃｏｍｐｌｅｘ  ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅｓ．」、Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ｒｅｓ．  ２７５巻（２号）２９５〜３０７頁）。
【０１４９】
６種のＩｒａｎｉａｎ  Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ「ヤギの角」低木植物（Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｐａｒｒｏｗｉａｎｕｓ、Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｆｌｕｃｃｏｓｕｓ、Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｒａｈｅｎｓｉｓ、Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｇｏｓｓｙｐｉｎｕｓ、Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｉｃｒｏｃｅｐｈａｌｕｓ、およびＡｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｃｏｍｐａｃｔｕｓ）由来のトラガントゴム試料は、トラガントゴムの構成とエマルジョン安定化特性の間の何らかの可能性のある相関関係を調べるために、それらの詳細な化学組成に関して、粘弾特性およびエマルジョン安定化効果について評価した。６種のゴムの単糖類構成も多様であるが、全てのゴムが比較的高レベルのガラクツロン酸（およそ１００〜３３０ｍｇ／ｇ）、アラビノース（５０〜３６０ｍｇ／ｇ）、キシロース（およそ１５０〜２７０ｍｇ／ｇ）、およびガラクトース（およそ４０〜１４０ｍｇ／ｇ）を含有し、ならびにフコース、ラムノースおよびグルコースもまた含有する。ホエイタンパク質単離物ベースのエマルジョンにおける、安定化剤として作用するゴムの能力は多様であり、Ａ．ｆｌｕｃｃｏｓｕｓゴムが最高のエマルジョン安定化効果を示した。エマルジョン安定化効果はメトキシ化度およびゴムのガラクツロン酸含量と直線的かつ正に相関するが、アセチルまたはフコース含量とは相関しなかった。特に高い相関は、可溶性ゴム部分におけるメトキシルレベルとエマルジョン安定化の間に見出される。（Ｅｂｒａｈｉｍｄａｚｅｈら、「Ｍｕｃｉｌａｇｅ  ｃｏｎｔｅｎｔ  ａｎｄ  ｉｔｓ  ｓｕｇａｒ  ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ  ｉｎ  Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｓｐｅｃｉｅｓ  ｆｒｏｍ  Ｉｒａｎ．」２０００年、Ｐａｋｉｓｔａｎ  Ｊ．  ｏｆ  Ｂｏｔ．、３２巻（１号）：１３１〜１４０頁；Ｂａｌａｇｈｉら、「Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎａｌ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ａｎｄ  ｒｈｅｏｌｏｇｉｃａｌ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｇｕｍ  ｔｒａｇａｃａｎｔｈ  ｅｘｕｄａｔｅｓ  ｆｒｏｍ  ｓｉｘ  ｓｐｅｃｉｅｓ  ｏｆ  Ｉｒａｎｉａｎ  Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ．」２０１１年、Ｆｏｏｄ  Ｈｙｄｒｏｃｏｌｌｏｉｄｓ．２５巻（７号）：１７７５〜１７８４頁；Ｇａｖｌｉｇｈｉら、「Ｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｅｍｕｌｓｉｏｎｓ  ｂｙ  ｇｕｍ  ｔｒａｇａｃａｎｔｈ  （Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｓｐｐ．）  ｃｏｒｒｅｌａｔｅｓ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｇａｌａｃｔｕｒｏｎｉｃ  ａｃｉｄ  ｃｏｎｔｅｎｔ  ａｎｄ  ｍｅｔｈｏｘｙｌａｔｉｏｎ  ｄｅｇｒｅｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｇｕｍ．」２０１３年、Ｆｏｏｄ  Ｈｙｄｒｏｃｏｌｌｏｉｄｓ．３１巻（１号）：５〜１４頁）。
【０１５０】
以下の参考文献には、Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ種の成分の研究に使用される様々な技術、例えば、限定はされないが、ＤＥＡＥ−Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ  Ｆａｓｔ  ＦｌｏｗおよびＳｅｐｈａｃｒｙｌ  Ｓ−３００クロマトグラフィー、１Ｈおよび１３Ｃ  ＮＭＲ分光法、ＮＯＥＳＹおよびＨＭＢＣ実験が記載される：
Ｋｕｌｉｅｖ，  Ｖ．  Ｂ．およびＫａｓｕｍｏｖ，  Ｋ．  Ｎ．「Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｇｕｍ  −  Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｉｃｒｏｃｅｐｈａｌｕｓ  −  ｉｎ  ｔｈｅ  Ａｚｅｒｂａｉｊａｎ−ＳＳＲ  ＵＳＳＲ．」１９８２年、Ｒａｓｔｉｔ  Ｒｅｓｕｒ．１８巻（３号）：３９０〜３９４頁；
Ｓｖｅｃｈｎｉｋｏｖａら、「Ｔｒｉｔｅｒｐｅｎｅ  Ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ  ｏｆ  Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  Ｇｅｎｉｎｓ  ＸＩ．  Ｃｙｃｌｏｓｉｖｅｒｓｉｏｓｉｄｅ  Ｇ−Ａ  Ｔｒｉｇｌｙｃｏｓｉｄｅ  ｆｒｏｍ  Ａｓｔａｇａｌｕｓ  ｓｉｅｖｅｒｓｉａｎｕｓ．」１９８３年、Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ  １９巻（３号）：２９６〜２９９頁；
Ｗａｎｇら、「Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ａｎ  ａｃｉｄｉｃ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ｆｒｏｍ  Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ  （Ｆｉｓｃｈ．）  Ｂｕｎｇｅ．」２００６年、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｇｒａｔｉｖｅ  Ｐｌａｎｔ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、４８巻（１１号）：１３７９〜１３８４頁；
Ｔｕｒｓｋａ−Ｓｚｅｗｃｚｕｋ、「Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  ｓｔｕｄｉｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｏ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ｏｆ  Ｍｅｓｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍ  ｈｕａｋｕｉｉ  ｓｔｒａｉｎ  Ｓ−５２，  ｔｈｅ  ｓｙｍｂｉｏｔｉｃ  ｐａｒｔｎｅｒ  ｏｆ  Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｓｉｎｉｃｕｓ．」２０１１年、Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、３４６巻（８号）：１０６５〜１０６９頁；
Ｋｉｍら、「Ｖａｒｉａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ａｓｔｒａｇａｌｏｓｉｄｅｓ  Ｃｏｎｔｅｎｔｓ  ｉｎ  Ｃｕｌｔｉｖａｔｅｄ  Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ．」２０１２年、Ｋｏｒｅａｎ  Ｊ．  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｒｏｐ  Ｓｃｉ．  ２０巻（５号）：３７２〜３８０頁；および
Ｆｕら、「Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  ｆｅａｔｕｒｅｓ  ｏｆ  ａ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ｆｒｏｍ  Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ  （Ｆｉｓｃｈ．）  Ｂｇｅ．  ｖａｒ．  ｍｏｎｇｈｏｌｉｃｕｓ  （Ｂｇｅ．）  Ｈｓｉａｏ．」２０１３年、Ｊ．  Ａｓｉａｎ  Ｎａｔ．  Ｐｒｏｄ．  Ｒｅｓ．  １５巻（６号）：６８７〜６９２頁。
【０１５１】
一部の実施形態では、本明細書に記載のＰＧＲＧ１組成物はＡｓｔｒａｇａｌｕｓ種のみ、例えばＡｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ  Ｂｇｅ．に由来し、Ａｎｇｅｌｉｃａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  Ｄｉｅｌｓ、Ａｎｇｅｌｉｃ  ａｒｃｈａｎｇｅｌｉｃａまたはＬｅｖｉｓｔｉｃｕｍ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ  Ｋｏｃｈ由来の多糖など、Ｄａｎｋｕｅｉの抽出物に由来しないまたは含まない。
【０１５２】
ＰＧＲＧ１組成物
本明細書に開示および記載される単離されたＰＧＲＧ１組成物は水溶性であり、１０〜５０ｋＤａの重量平均分子量を有する。それは主に、ガラクツロン酸、ラムノシル、アラビノシル、ガラクトシル、グルコシル残基からなり、少なくとも２０％のラムノース＋ガラクツロン酸総モル％および少なくとも０．０６％のラムノース対ガラクツロン酸の比を有する。このＰＧＲＧ１組成物の代表的な糖組成を以下の表１に示す。
【表１】
2017525702.tif 000006
【０１５３】
Ｒｈａ対ＧａｌＡ比（１．８／２４．１）＝０．０７４７。
【０１５４】
ＰＧＲＧ１は、Ａｓｔｒａｇｕｌａｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓから抽出された約５０％の小分子を含有する。
【０１５５】
ＰＧＲＧ１組成物の調製
単離および精製されたＰＧＲＧ１多糖組成物は、第１に、Ａｓｔｒａｇｕｌａｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓを熱水で抽出するステップにより調製した。典型的には、乾燥根を刈り込み、清潔な水および７０％エタノールなどの消毒液で洗浄し、薄い切片に切断し、ほぼ無菌条件下で乾燥し、「根チップ」と呼ばれるものを得ることにより、加工し、チップにしたまたは薄片にした清潔な乾燥根を調製した。熱水は典型的には８０℃以上であり、しばしば９０℃以上であり、一部の実施形態では約１００℃である。さらに、根からのＰＧＲＧ１の実質的なおよび／または最適な抽出をもたらすために多くの抽出サイクルを使用することができ、典型的には、各サイクル１００℃で３時間にわたり少なくとも３サイクルを実施した。細かく砕いた乾燥根の調製に続く全てのステップは、典型的には、清潔な装置を用いるほぼ無菌条件下で行った。６０〜７０℃の減圧下での蒸発によるなど、「根チップ」約１Ｌ／ｋｇの濃度まで熱水抽出物を濃縮し、次いで高濃度の低級アルカノール（例えば、４０〜８０％エタノール、またはより具体的には６０〜７０％エタノール）での沈殿によるなど、水溶性ではない材料を除去するために処理し、ＰＧＲＧ１多糖組成物を沈殿させた。沈殿物は、次いで水に再溶解させ、低級アルカノール濃度、例えば２０〜４０％エタノールで再び沈殿させ、デンプンを除去した。上清は次いで、高濃度の低級アルカノール、例えば６０〜８０％エタノールで沈殿させた。沈殿物を、結果生じる典型的には黄色粉末のＰＧＲＧ１多糖組成物まで乾燥した（典型的には、噴霧乾燥、減圧乾燥、または凍結乾燥による）。
【０１５６】
ＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物
「ＰＧＲＧ１−５Ｋ」は、ＭＷが５０００より小さい分子を除去する５０００ＭＷカットオフ限界濾過後、上記のＰＧＲＧ１組成物の多糖画分から得る。ＰＧＲＧ１−５Ｋは重量でＰＧＲＧ１のおよそ５２％である。
【０１５７】
ＰＧＲＧ１のように、ＰＧＲＧ１−５Ｋは主に、ガラクツロン酸、ラムノシル、アラビノシル、ガラクトシル、グルコシル残基からなり、少なくとも２０％の総モル％のラムノース＋ガラクツロン酸および少なくとも０．０６％のラムノース対ガラクツロン酸比を有する。このＰＧＲＧ１組成物の代表的な糖組成を以下の表２に示す。
【表２】
2017525702.tif 000007
【０１５８】
Ｒｈａ対ＧａｌＡ（２．０／２７．３）の比＝０．０７３３
【０１５９】
単離されたＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物の調製
ＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物は、ＰＧＲＧ１沈殿物が５Ｋ  ＭＷＣＯ  ＵＦシステムを使用して単離および限外濾過されたことを除いて、上記のＰＧＲＧ１組成物と同じ方法で調製された。この５Ｋ限外濾過の保持液をさらに濃縮し、濃縮物を７０％エタノール沈殿後、噴霧乾燥機により、または６０〜７０℃の減圧オーブンを介して乾燥し、このＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物を生成した。
【０１６０】
骨格構造
本明細書に記載のように、ＰＧＲＧ１およびＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物の骨格構造は以下の一般的な構造を有する。
【０１６１】
［１，４−結合ＧａｌＡＧａｌＡ］ｎが点在した［１，４および１，２−結合ＲｈａＧａｌＡ］ｍ
【０１６２】
腎臓疾患
腎臓は、血液からの廃棄物および過剰体液の除去、血液中の塩およびミネラルの維持、血圧の調節を含むいくつかの生命維持の役割を実施する。腎臓が損傷した場合、体内に老廃物および体液が蓄積し、足首の腫れ、嘔吐、衰弱、浅眠、および息切れを引き起こす。未処置のままにした場合、病的腎臓は、最終的には機能を完全に停止することがある。腎臓機能の喪失は、深刻であり潜在的に致命的である。腎臓は、血圧の調節を助ける酵素レニン、赤血球産生を刺激するエリスロポエチンおよび骨健康に必要なビタミンＤの活性形態も産生する。腎臓疾患は本質的に、急性または慢性であり得る。急性腎不全は、失血を伴う外傷性損傷、腎臓への血流の突然の減少、敗血症と呼ばれる重症感染症中のショックによる腎臓への損傷、前立腺肥大によるなど尿流の閉塞、特定の薬物もしくは毒素による損傷、または妊娠合併症の結果として起こり得る。
【０１６３】
慢性腎臓疾患（ＣＫＤ）
慢性腎臓疾患（ＣＫＤ）は、数カ月または数年の期間にわたる腎機能の進行性の欠損である。悪化する腎臓機能の症状は、非特異的であり、通常具合が悪く、食欲低下を経験することを含む場合がある。しばしば、慢性腎臓疾患は、高血圧もしくは糖尿病を患うヒト、または慢性腎臓疾患を患う親族がいるヒトなど、腎臓の疾患または障害を患うリスクがあると分かっている人々のスクリーニングの結果として診断される。ＣＫＤは、心血管疾患、貧血症または心膜炎など、その認識された合併症の１つをもたらす場合にも同定され得る。ＣＫＤは、腎臓機能の低下が３カ月にわたり存在するはずの急性腎臓疾患と区別される。（全米腎臓基金  ＫＤＯＱＩ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ  ｆｏｒ  Ｃｈｒｏｎｉｃ  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｄｉｓｅａｓｅ：Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ，  Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｓｔｒａｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ．  Ａｍ．  Ｊ．  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｄｉｓ．  ３９巻：Ｓ１〜Ｓ０００頁、２００２年（補遺１））。
Ｇ−ＣＳＦは、動物モデルにおけるシスプラチン誘発急性腎不全において腎損傷の減少をもたらす尿細管上皮細胞の再生を加速し、アポトーシスを防ぐことが報告された。（Ｎｉｓｈｉｄａら、２００４年、Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ．  ３２４巻（１号）：３４１〜７頁）。腎機能における造血サイトカインのプラスの効果は、マウスにおけるシスプラチン誘発ＡＲＦにおいて観察された。理論に縛られることなく、本明細書においては、ＰＧＲＧ１がヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）においてＧ−ＣＳＦ産生を刺激するため、ＰＧＲＧ１誘発のＧ−ＣＳＦレベルの上昇によりＣＫＤを患うヒトにおいてみられるＰＧＲＧ１の保護効果を（少なくとも一部は）説明できると考えられる。ＣＫＤにおいて、エリスロポエチン（ＥＰＯ）は、二次処置として、それが低い赤血球（ＲＢＣ）レベルを上昇するので、十分支持的であるが、厳密には、ＥＰＯが基礎疾患を処置する例は少ない。したがって、ＰＧＲＧ１および／またはＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物の治療効果を、本明細書において企図する。
【０１６４】
ＣＫＤはクレアチニンの血液検査によって同定される。高レベルのクレアチニンは、低い糸球体濾過率および結果として老廃物を排出する腎臓の能力の減少を示す。ＣＫＤの初期ステージではクレアチニンレベルは正常であり、尿検査（尿試料の試験）により腎臓が尿中へのタンパク質または赤血球の喪失を示す場合、状態が発見される。腎臓損傷の基礎原因を完全に調べるため、様々な形態の医療画像化、血液検査、およびしばしば腎生検（腎臓組織の小さい試料を取り出す）を、腎臓機能不全の可逆的原因があるか見つけ出すために用いる。（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ  ＫＤＯＱＩ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ  ｆｏｒ  Ｃｈｒｏｎｉｃ  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｄｉｓｅａｓｅ：Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ，  Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｓｔｒａｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ．  Ａｍ．  Ｊ．  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｄｉｓ．  ３９巻：Ｓ１〜Ｓ０００頁、２００２年（補遺１））。最近の診療ガイドラインは慢性腎臓疾患の重症度を５つのステージに分類し、ステージ１は軽度であり通常ほとんど症状を引き起こさず、ステージ５は未処置の場合平均余命がわずかな重病である。ステージ５のＣＫＤは、しばしば末期腎疾患（ＥＳＲＤ）または末期腎不全（ＥＳＲＦ）と呼ばれ、現在では古い用語、慢性腎臓不全（ＣＫＦ）または慢性腎不全（ＣＲＦ）と同義である。
【０１６５】
腎機能
腎臓病学において、腎機能は、腎臓の状態および腎生理学におけるその役割の指標である。糸球体濾過率（ＧＦＲ）は腎臓を通る濾過液の流量を記載する。クレアチニンクリアランス率（ＣＣｒまたはＣｒＣｌ）は、単位時間あたりのクレアチニンが排除された血漿の体積であり、ＧＦＲを概算するための有用な尺度である。クレアチニンクリアランスはクレアチニン分泌に起因してＧＦＲを超える。
【０１６６】
ＧＦＲは典型的には、時間あたりの体積の単位、例えば、分あたりのミリリットルｍＬ／ｍｉｎで記録される。濾過画分と比較する。
【化４】
2017525702.tif 000008
【０１６７】
しかし、臨床上の実施では、血清のクレアチニンレベルに基づくクレアチニンクリアランスまたはクレアチニンクリアランスの推定値が、ＧＦＲの測定に使用される。一般に使用されるクレアチニンクリアランスの推定値のための代替マーカーは、コッククロフト−ゴールト（ＣＧ）式であり、順に、ｍｌ／ｍｉｎでのＧＦＲを推定する：それは式を最初に発表した科学者に因んで名づけられ、クレアチニンクリアランスを予測するために、血清クレアチニン測定値および患者の体重を用いる。最初に発表された式は、以下である：
【化５】
2017525702.tif 000009
【０１６８】
ＧＦＲを算出する１つの推定ツールは、メイヨーの二次方程式である。この式は、腎臓機能が保存された患者においてＧＦＲをより良好に推定するための試みにおいてＲｕｌｅによって開発された。ＭＤＲＤ式は、腎臓機能が保存された患者においてＧＦＲを過小評価しがちであると十分に認識されている。
【０１６９】
方程式は、以下である：
ｅＧＦＲ＝ｅｘｐ（１．９１１＋５．２４９／血清クレアチニン−２．１１４／血清クレアチニン２−０．００６８６×年齢−［女性の場合、０．２０５］）
【０１７０】
白血球減少症、貧血症、血小板減少症
血液は多面的な体液であり、それにより必須栄養素が体中の組織へと送達される媒体である。平均して、成人の身体は５リットル超の血液を含有する。血液は、その半分超が液体の血漿であるため、静脈および動脈を自由に流れ、血液体積の残りは、大部分が血漿中に懸濁された固体細胞および細胞断片からなる。３つの主要な血液障害は貧血症、白血球減少症、および血小板減少症である。
【０１７１】
白血球減少症
白血球減少症は、血液中に見出される白血球（ＷＢＣ）の数の減少であり、それは個体を感染のリスクが増加した状態にする。好中球減少症は、白血球減少症のサブタイプであり、最も豊富な白血球である循環する好中球顆粒球の数の減少を指す。白血球減少症および好中球減少症という用語は、好中球数が最も重要な感染リスクの指標であるため、時折交換可能に使用され得る。低い白血球数は、風邪またはインフルエンザなど、急性ウイルス感染による場合がある。それは化学療法、放射線療法、骨髄線維症および再生不良性貧血と関連し得る。ＨＩＶおよびＡＩＤＳも、白血球への脅威である。低い白血球数の他の原因は、全身性エリテマトーデス、ホジキンリンパ腫、いくつかの種類のがん、腸チフス、マラリア、結核、デング熱、リケッチア感染症、脾臓の肥大、葉酸欠乏症、オウム病、および敗血症を含む。銅および亜鉛など、特定のミネラルの欠乏など、多くの他の原因が存在する。白血球の数および機能に影響し得る薬物は、クロザピン、ブプロピオン、ミノサイクリン、バルプロ酸、ラモトリジン、メトロニダゾールを含む。ＷＢＣ数を抑制する他の薬物は、シロリムス、ミコフェノール酸モフェチル、タクロリムス、シクロスポリンおよびＴＮＦ阻害剤などの免疫抑制剤である。Ｒｅｂｉｆ、ＡｖｏｎｅｘおよびＢｅｔａｓｅｒｏｎなど、多発性硬化症の処置に使用されるインターフェロンも、白血球減少症を引き起こす場合がある。化学療法は、腫瘍など、急速に増殖する細胞を標的化するが、急速な増殖として骨髄によって特徴付けられるため、白血球にも影響を及ぼすことがある。がん処置の一般的な副作用は、好中球（特定の種類の白血球）が減少する好中球減少症である。
【０１７２】
貧血症
貧血症は、赤血球（ＲＢＣ）の数の減少である。その広範な意味において貧血症はまた、血液中のヘモグロビンの正常な量または質よりも少ないものである。数値的な発生における変形または欠如により各ヘモグロビン分子の酸素結合能の減少を含む。全てのヒト細胞が生存のために酸素に依存するため、貧血症の様々な程度は広範な臨床的帰結を有することができる。貧血症は、最も一般的な血液疾患であり、多くの人々で未確定なままであり、症状は軽症であり得る。最も一般的には、人々は労作時に疲労または息切れを報告する。非常に重症な貧血症では、身体は心拍出量を増加し得る。貧血症は、典型的には、ＲＢＣの数およびヘモグロビンレベルを報告する全血球算定で診断される。４００種類超の貧血症があり、それらは３つの原因に分けられる：失血、ＲＢＣ産生の減少、またはＲＢＣの破壊。ＲＢＣは出血によって失われ、長期にわたってゆっくり起こり、しばしば未検出なままであり得る。この種の慢性出血は、一般的に、潰瘍、痔、胃炎（胃の炎症）、およびがんなどの胃腸状態、アスピリンまたはイブプロフェンなど非ステロイド抗炎症薬（ＮＳＡＩＤＳ）の使用、または女性の月経および出産、特に月経出血が過剰である場合、および多胎妊娠の場合から生じる。減少したまたは不完全なＲＢＣ産生により生じる貧血では、身体はほとんど血液細胞を産生せず、血液細胞は正しく機能しない。いずれの場合も、貧血症が生じ得る。ＲＢＣは、異常なＲＢＣまたはＲＢＣが適切に働くために必要なミネラルおよびビタミンの欠乏により、不完全でありまたは減少され得る。貧血症のこれらの原因と関連する状態は、鎌状赤血球貧血、鉄欠乏性貧血、ビタミン欠乏、骨髄および幹細胞の問題を含む。
【０１７３】
血小板減少症
血小板減少症は、低い血小板数の医学用語である。血小板（栓球）は血液凝固において重要な役割を果たす無色の血液細胞である。血小板は、血管の穴に凝集および栓を形成することにより失血を止める。血小板減少症は、軽症であり、徴候および症状をほとんど引き起こさない。稀なケースでは、血小板の数が少ないため、危険な内出血が起こり得る。血小板減少症は、通常、基礎原因が処置される場合に改善する。時には、薬物適用、外科手術、または輸血が慢性血小板減少症の処置を手助けし得る。低い血小板数、血小板減少症は様々な理由で引き起こされ、血小板産生の減少、血小板破壊もしくは消費の増加、または脾臓血球貯蔵の増加に分けることができる。血小板産生の減少は、通常骨髄の問題と関係する。これらの状態のいくつかでは、赤血球および白血球産生も影響され得る。骨髄に影響するウイルス感染は、例えば、パルボウイルス、風疹、おたふく風邪、水痘（水疱瘡）、Ｃ型肝炎、エプステインバーウイルス、およびＨＩＶである。再生不良性貧血は、骨髄が任意の血液細胞の産生に失敗した場合に使用される一般用語である。これは、いくつかのウイルス感染（パルボウイルスまたはＨＩＶ）、薬物適用（金、クロラムフェニコール、ジランチン、バルプロ酸（デパコート））、または放射線によって引き起こされ得る。化学療法薬は、頻繁に血小板減少症を引き起こす。チアジド系利尿薬など、いくつかの他の薬物は、血小板産生を抑制し得る。骨髄および血液のがんまたはリンパ節のがんは、様々な程度の血小板減少症を引き起こし得る。長期のアルコールは、骨髄の直接毒性を引き起こし得る。ビタミンＢ１２および葉酸の欠乏は、骨髄による低い血小板産生をもたらす。血小板破壊または消費の増加は、いくつかの医学的状態において見られ得る。多くの薬物適用は、血小板に対する免疫反応を引き起こすことにより、低い血小板数を引き起こし、スルホンアミド抗生物質、カルバマゼピン、ジゴキシン、キニン、キニジン、アセトアミノフェン、リファンピン、およびヘパリンを含み得る。特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）は、免疫系が血小板を攻撃する状態である。全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）または他の自己免疫疾患など、いくつかのリウマチ状態は、血液産物の輸血および臓器移植、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）および溶血性尿毒症症候群（ＨＵＳ）、ヘルプ症候群、ならびに播種性血管内凝固障害（ｄｉｓｓｅｍｉｎａｔｅｄ  ｉｎｔｒａｖａｓｃｕｌａｒ  ｃｏａｇｕｌｏｐａｔｈｙ）（ＤＩＣ）を含む血小板破壊を引き起こし得る。脾臓血球貯留は、様々な理由のために脾臓の肥大または機能における変化の結果として低い血小板数ももたらす。脾臓肥大による血小板減少症の一般的な原因は、門脈圧亢進症（肝硬変、例えば慢性Ｂ型肝炎または慢性Ｃ型肝炎）を伴う進行した肝臓疾患および血液のがん（白血病またはリンパ腫）を含み得る。
【０１７４】
免疫障害
免疫障害は免疫系の機能障害である。これらの障害は、影響される免疫系の成分（複数可）によってか、免疫系が過活動であるか不活発であるかによってか、または状態が先天的であるか後天的であるかによって特徴付けることができる。国際免疫連合によると、１５０超の原発性免疫不全疾患（ＰＩＤ）が特徴付けられている。しかし、後天性免疫不全の数はＰＩＤの数を超える。ほとんどの人々が少なくとも１つの原発性免疫不全を有することが示唆されてきた（ＣａｓａｎｏｖａおよびＡｂｅｌ．２００７年、「Ｐｒｉｍａｒｙ  ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｉｅｓ：  ａ  ｆｉｅｌｄ  ｉｎ  ｉｔｓ  ｉｎｆａｎｃｙ．」Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３１７巻（５８３８号）：６１７〜９頁）。しかし、免疫系の冗長性により、これらの多くは未検出のままである。
【０１７５】
自己免疫疾患は、身体に通常存在する物質および組織に対する身体の異常な免疫反応から生じる。これは、特定の臓器（例えば、自己免疫性甲状腺炎）に限られ、または異なる場所の特定の組織（例えば、肺と腎臓両方における基底膜に影響し得るグッドパスチャー病）を含み得る。自己免疫疾患の処置は、典型的には、免疫抑制−免疫反応を低下する薬物適用を伴う。多くの自己免疫疾患が認識されている。自己免疫疾患の基礎病態生理学の主な理解は、自己免疫疾患間の遺伝的共有の著しい程度を同定したゲノムワイド関連走査（ｇｅｎｏｍｅ  ｗｉｄｅ  ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｓｃａｎ）の適用であった。いくつかの自己免疫障害の一部のリストは、ループス、強皮症、特定の種類の溶血性貧血、血管炎、Ｉ型糖尿病、グレーブス病、関節リウマチ、多発性硬化症、グッドパスチャー症候群、悪性貧血、いくつかの型のミオパシー、および後期ライム病を含む。
【０１７６】
自己免疫の臨床的特徴および実験室的特徴を表す多くの免疫不全症候群がある。感染を除去する免疫系の能力の低下は、免疫系の恒久的な活性化により自己免疫を引き起こす要因となり得る。例としては、複数の自己免疫疾患がみられる分類不能型免疫不全症（ＣＶＩＤ）、例えば、炎症性腸疾患、自己免疫性血小板減少症、および自己免疫性甲状腺疾患、ならびに汎血球減少、発疹、リンパ節腫脹、および肝脾腫大が一般的にみられる家族性血球貪食性リンパ組織球症（ＦＨＬ）（常染色体劣勢原発性免疫不全症）が挙げられる。
【０１７７】
慢性腎臓疾患（ＣＫＤ）および有用性
本開示の有用性は、ＣＫＤプロセスを遅らせることを示す、動物においてクレアチニンレベルを減少することである。慢性腎臓疾患の悪化を遅らせることを明解に示す具体的な処置は存在しない。血管炎など、ＣＫＤの基礎原因がある場合、これは損傷を遅らせるために直接処置され得る。より進んだステージでは、処置は貧血症および骨疾患に必要とされ得る。重症ＣＫＤでは、透析の形態を含み得るが、理想的には腎臓移植を構成する、腎置換療法を必要とする。（全米腎臓基金ＫＤＯＱＩ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ  ｆｏｒ  Ｃｈｒｏｎｉｃ  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｄｉｓｅａｓｅ：  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ，  Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｓｔｒａｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ．  Ａｍ  Ｊ  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｄｉｓ  ３９巻：Ｓ１〜Ｓ０００頁、２００２年（補遺１））。
【０１７８】
白血球減少症、貧血症、血小板減少症、および有用性
本開示の有用性は、それぞれ白血球減少症、貧血症、および血小板減少症を有する動物においてＷＢＣ、ＲＢＣ、および血小板を増加することである。これらの血液障害の従来の処置は、しばしば重大な副作用によって妨げられ、いくつかの重症なケースでは、患者は侵襲的手法を行うか、または彼らの残りの人生の間、薬物適用を受ける。しかし、遺伝子治療など新興の治療技術は、近い将来貧血症の予後を改善し得る。さらに、いくつかの血液障害は、容易に処置可能な状態によって引き起こされ得るが、しばしば正当に評価されない。例えば、男性において、低テストステロンは貧血症を引き起こし得、テストステロン置換療法は、この集団において健康な赤血球産生を促進することが示された。
【０１７９】
自己免疫疾患および有用性
本開示の有用性は、過活動であるか不活発である免疫系を調節することである。処置の目的は、症状を低減し、自己免疫プロセスを制御し、疾患と戦う身体の能力を維持することである。特定の疾患および症状に応じて、いずれかの処置が使用される。何人かの患者は、身体が欠如しているホルモンまたはビタミンを置き換えるために栄養補助剤（ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ）を必要とする場合がある。例としては、甲状腺栄養補助剤、Ｂ１２などのビタミン、またはインスリン注射が挙げられる。自己免疫障害が血液に影響する場合、輸血が必要な場合がある。免疫系の反応を制御または減少させるために処方される医薬には、コルチコステロイド（プレドニゾンなど）、およびアザチオプリン、シクロフォスファミド、ミコフェノール酸、シロリムス、またはタクロリムスなどの非ステロイド薬が挙げられる。
【０１８０】
１９９４年の栄養補助食品健康教育法（Ｄｉｅｔａｒｙ  Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ  Ｈｅａｌｔｈ  Ａｎｄ  Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ  Ａｃｔ）（「ＤＳＨＥＡ」）
１９９４年の栄養補助食品健康教育法（「ＤＳＨＥＡ」）は、栄養補助食品を定義および規制するアメリカ合衆国連邦規約の１９９４年の法令である。ＤＳＨＥＡは、用語「栄養補助食品」が、以下の食用成分：ビタミン、ミネラル、草本、または他の植物、アミノ酸、全食事摂取量を増加させることによって食事を補うためのヒトによる使用のための食用物質、または先に述べた成分のいずれかの濃縮物、代謝物、構成成分、抽出物、もしくは組み合わせのうちの１または複数を保持するまたは含有する、食事を補うことを意図する生産物（タバコ以外）を意味するように規定する。さらに、栄養補助食品は、栄養補助食品と表示しなければならず、かつ摂取を意図し、かつ従来の食品として、または一回分の食事（ｍｅａｌ）もしくは食事の単一の品目としての使用を表してはならない。さらに栄養補助食品は、認可または許可前に食品または栄養補助食品として市販されていなければ、新薬、抗生物質または生物製剤として調査のために認可または許可することはできない。ＤＳＨＥＡのもと、栄養補助食品は、薬物定義の目的を除いて、食品であると考えられる。
【０１８１】
医薬製剤および投与
一般に、本開示の第１の態様の精製されたＰＧＲＧ１組成物および本開示の第２の態様のＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物は、経口投与により治療有効量で、単独でまたは慢性腎臓疾患を阻害することができる少なくとも１つの他の治療剤と組み合わせて投与される。治療有効量は、疾患、その重症度、処置される動物の年齢および相対的健康ならびに他の因子によって広く異なり得る。当業者は過度の実験を行うことなく、その技量および本開示を考慮して、所与の疾患のための本開示の組成物の治療有効量を決定することができる。
【０１８２】
一般に、本開示の第１の態様の精製されたＰＧＲＧ１組成物および本開示の第２の態様のＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物は、単独でまたは医薬製剤として投与され、一部の実施形態では経口投与され得る。医薬製剤において、本開示の第１の態様の精製されたＰＧＲＧ１組成物および本開示の第２の態様のＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物は、別の活性剤および／または経口賦形剤と組み合わせて生じ得る。適切な経口賦形剤は、当業者に周知である。
【０１８３】
典型的には、抗腎炎剤として投与された場合、本開示の精製されたＰＧＲＧ１組成物およびＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物は経口投与される。製剤化された場合、本開示の組成物における化合物の量は、組成物の種類、単位投与量のサイズ、賦形剤の種類、および当業者に周知の他の因子によって広く異なり得る。一般に、単独で投与された場合、化合物の量は４００ｍｇ〜４グラムまで変わり得る。
【０１８４】
本開示の精製されたＰＧＲＧ１組成物およびＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物は、任意選択により、リンシノプリル（ｌｉｎｓｉｎｏｐｒｉｌ）など、例えばアンジオテンシン変換酵素阻害剤（ＡＣＥＩ）から選択される腎炎を改善することができる少なくとも１つの他の治療剤と組み合わせて投与され得る。
【実施例】
【０１８５】
以下の非限定的な例は本発明（複数可）の特徴を強調する。しかし、本開示は、以下に記載の特定の実施形態に限定されると考えられるべきではない。
【０１８６】
全ての市販されている材料は、受け取ったままで使用される。全ての単離された材料は、タンパク質含量、糖含量、糖残基分析、分子量分布、および糖結合分析によって特徴付けられる。
【０１８７】
（実施例１）
ＰＧＲＧ１組成物の調製
ステップＡ．根チップ加工
【０１８８】
乾燥Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ原材料（根）（２２０ｋｇ）を限外濾過水によって無菌洗浄し、汚染部位を除去し、７０％エタノールに一晩漬け、０．３〜０．５ｍｍの厚さのチップに切断し、ほぼ無菌のオーブンで６０〜７０℃で乾燥して根チップに加工した。１０％未満の乾燥減量（ｌｏｓｓ  ｏｎ  ｄｒｙｉｎｇ）で、およそ２００ｋｇの乾燥チップが得られる。
【０１８９】
ステップＢ．多糖組成物抽出および精製
【０１９０】
乾燥根チップ（２００ｋｇ）を、約１００℃で３回、それぞれ３時間、限外濾過水によって抽出する。第１の抽出に添加した水は２０００Ｌ、第２の抽出は１６００Ｌ、および第３の抽出は１２００Ｌであった。約４５００Ｌの合わせた全水抽出物が得られ、６０〜８０Ｃで減圧濃縮システムを使用して濃縮し、体積約２００Ｌの濃縮物を得た。２００Ｌの抽出物を７０％エタノールで沈殿させ、水不溶性小分子を除去した。得られた沈殿は、次いで水に懸濁させ、３０〜３５％エタノールで沈殿させて水溶性の低い多糖、タンパク質、および他の大きな分子を除去した。上清を７０％エタノールで再沈殿させ、水溶性の高い多糖またはＰＧＲＧ１を回収した。沈殿を水に溶解させ、噴霧乾燥してＰＧＲＧ１を得た（７ｋｇまたは３．５％の乾燥飲料チップ（ｄｒｉｎｋ  ｃｈｉｐ））。得られたＰＧＲＧ１組成物は黄色粉末、水溶性、ｐＨ５〜６であり、乾燥減量は６％未満である。
【０１９１】
フローチャート１
【０１９２】
乾燥Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ根（２２０ｋｇ）
【０１９３】
−  飲料チップ加工
【０１９４】
乾燥根チップ（２００ｋｇ）
【０１９５】
−  １００℃で水により３回抽出した（第１の抽出  水２０００Ｌ、第２の抽出  水１６００Ｌ、第３の抽出  水１２００Ｌ）。
【０１９６】
水抽出物（４５００Ｌ）
【０１９７】
−  ６０〜８０Ｃで濃縮し、水を除去した
【０１９８】
濃縮された抽出物（２００Ｌ）
【０１９９】
−  ７０％エタノール沈殿−１、水不溶性分子を除去する
【０２００】
−  ３０％エタノール沈殿、水不溶性多糖を除去する
【０２０１】
−  ７０％エタノール沈殿−２、ＲＧＩ多糖を沈殿させる
【０２０２】
−  噴霧乾燥、乾燥ＲＧｉ多糖を回収する
【０２０３】
ＰＧＲＧ１収量（７ｋｇ、根チップから３．５％）
【０２０４】
（実施例２）
ＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物の調製
ステップＡ．根チップ加工−実施例１、ステップＡ．参照
【０２０５】
ステップＢ．多糖組成物抽出および精製
【０２０６】
乾燥根チップ（２００ｋｇ）を、約１００℃で３回、それぞれ３時間、限外濾過水によって抽出した。第１の抽出に添加した水は２０００Ｌ、第２の抽出は１６００Ｌ、および第３の抽出は１２００Ｌであった。約４５００Ｌの合わせた全水抽出物が得られ、６０〜８０Ｃで減圧濃縮システムを使用して濃縮し、体積約２００Ｌの濃縮物を得た。２００Ｌの抽出物を７０％エタノールで沈殿させ、水不溶性小分子を除去した。得られた沈殿は、次いで水に懸濁させ、３０〜３５％エタノールで沈殿させて水溶性の低い多糖、タンパク質、および他の大きな分子を除去した。上清を７０％エタノールで再沈殿させ、水溶性の高い多糖またはＰＧＲＧ１を回収した。沈殿を水に溶解させ、噴霧乾燥してＰＧＲＧ１を得た（７ｋｇまたは３．５％の乾燥飲料チップ）。
【０２０７】
ステップＣ．多糖組成物単離
【０２０８】
ＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物を得るために、３．５ｋｇのＰＧＲＧ１を単離し、ＭＷＣＦ５０００ダルトンのメンブレンを有するＵＦシステムを使用して限外濾過した。限外濾過は５サイクル循環し、各サイクルにより体積約５０％まで濃縮し、小分子を除去した。濃縮物を７０％エタノールで沈殿させ、水に懸濁後、減圧オーブン乾燥または噴霧乾燥機乾燥し、ＰＧＲＧ１−５Ｋ（１．８２ｋｇ）を得た。このさらに精製されたＰＧＲＧ１多糖組成物（ＰＧＲＧ１−５Ｋ）は淡黄色粉末、水溶性、ｐＨ５〜６であり、乾燥減量は６％未満である。
【０２０９】
フローチャート２
【０２１０】
乾燥Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ根（２２０ｋｇ）
【０２１１】
−  飲料チップ加工
【０２１２】
乾燥飲料チップ（２００ｋｇ）
【０２１３】
−  １００℃で水により３回抽出した（第１の抽出  水２０００Ｌ、第２の抽出  水１６００Ｌ、第３の抽出  水１２００Ｌ）。
【０２１４】
水抽出物（４５００Ｌ）
【０２１５】
−  ６０〜８０Ｃで濃縮し、水を除去した
【０２１６】
濃縮された抽出物（２００Ｌ）
【０２１７】
−  ７０％エタノール沈殿−１、水不溶性分子を除去する
【０２１８】
−  ３０％エタノール沈殿、水不溶性多糖を除去する
【０２１９】
−  ７０％エタノール沈殿−２、ＲＧＩ多糖を沈殿させる
【０２２０】
−  噴霧乾燥、乾燥ＲＧｉ多糖を回収する
【０２２１】
ＲＧＩ組成物（７ｋｇ、飲料チップの３．５％）
【０２２２】
−  ５０００ＭＷＣＦ、各サイクル５０％体積で５サイクル限外濾過し、水溶性小分子を除去する
【０２２３】
−  ７０％エタノール沈殿
【０２２４】
−  減圧オーブン乾燥、または噴霧乾燥
【０２２５】
ＰＧＲＧ１−５Ｋ組成物（１．８２ｋｇ）
【０２２６】
単離され、精製されたＰＧＲＧ１組成物の分析：
ＰＧＲＧ１は、水溶性多糖組成物であり、バイオラッド法によりタンパク質含量について分析し結果２．２８ｗｔ％を提供し、糖含量はＰｈ−Ｈ２ＳＯ４法によって分析し結果４２．２ｗｔ％を得て、ＴＭＳ誘導体−ＧＣ法の結果により糖組成を以下の表３に要約し、図３にＧＰＣ−ＨＰＬＣ−ＲＩＤによるＭＷ分布および決定を、メチル化ＧＣ−ＭＳによるグリコシル結合組成を以下に述べる。
【表３】
2017525702.tif 000010
【０２２７】
ＰＧＲＧ１タンパク質含量は２．２８ｗｔ％、およびその糖含量は４２．２ｗｔ％である。
【０２２８】
ＰＧＲＧ１糖組成を表３に示す。その中では、少なくとも５つの糖残基を同定し、それらは、アラビノシル（Ａｒａ）、ラムノシル（Ｒｈａ）、ガラクツロン酸（ＧａｌＡ）、ガラクトシル（Ｇａｌ）、およびグルコシル（Ｇｌｃ）残基であった。
【０２２９】
図３に示すように、ＰＧＲＧ１分子量（ＭＷ）または重量平均分子量（ｗａＭＷ）をＧＰＣ／ＨＰＬＣによって決定した。多糖は１０ｋＤａより大きく、１０ｋＤａ〜５０ｋＤａの範囲である。プルラン標準を用いて、これらの多糖は２つのＭＷ範囲に分けることができ：多糖の１つの型は約１００ｋＤａを中心とし、他の型は約１２ｋＤａを中心とする。要約すると、ＰＧＲＧ１における多糖は、分子量分布に基づいておよそ５０％を占め、ＰＧＲＧ１は１０ｋＤａ〜５０ｋＤａの重量平均分子量（ｗａＭＷ）を有する。
【０２３０】
多糖のＰＧＲＧ１のグリコシル結合は、部分的にメチル化されたアルジトールアセテートの誘導体によって決定した。ウロン酸残基のカルボキシル基は、Ｓｕｐｅｒ  Ｄｅｕｔｅｒｉｄｅによって還元し、続いてアセチル化した。ＧＣ−ＭＳシステムを分析に使用した。主なグリコシル結合は、以下の通りである：末端結合に加えて、Ａｒａｆ：５−、２，５−、および３，５−結合；Ｇａｌｐ：６−および３，６−結合；Ｇｌｃ：ｐ４−、４，６−結合；Ｇｌｃｐ：４−および４，６−結合；Ｒｈａｐ：２−および２，４−結合；ＧａｌＡｐ：４−、および２，４−結合。
【０２３１】
ＰＧＲＧ１−５Ｋの分析：
ＰＧＲＧ１−５Ｋもまた、水溶性多糖組成物であり、バイオラッド法により２．９７ｗｔ％と分析されたタンパク質含量、Ｐｈ−Ｈ２ＳＯ４法によって４４．９ｗｔ％と分析された糖含量、表４に示すようにＴＭＳ誘導体−ＧＣ法による糖組成、図３の下のパネルにＧＰＣ−ＨＰＬＣ−ＲＩＤによるＭＷ分布および決定、ならびにメチル化ＧＣ−ＭＳによるグリコシル結合組成について分析した。
【０２３２】
そのタンパク質含量は２．９７ｗｔ％であり、その糖含量は４４．９ｗｔ％である。
【０２３３】
以下の表４に示すように、その糖組成に関して、５つの糖残基が同様に同定され、それらは、アラビノシル、ラムノシル、ガラクツロン酸、ガラクトシル、およびグルコシル残基である。
【０２３４】
ＰＧＲＧ１−５Ｋ分子量または重量平均分子量は、図３に示すように５０〜１２０ｋであるとＧＰＣ−ＨＰＬＣによって決定された。ＰＧＲＧ１−５Ｋは、小分子が除去された後のＰＧＲＧ１の多糖部分であるため、高い分子量（＞５Ｋ）曲線は、ＰＧＲＧ１と同じである。同じメチル化−ＧＣ／ＭＳ法によって決定されたそのグリコシル結合組成にも当てはまる。
【表４】
2017525702.tif 000011
【０２３５】
ＰＧＲＧ１およびＰＧＲＧ１−５Ｋ多糖の構造：
ＰＧＲＧ１およびＰＧＲＧ１−５Ｋの分析に基づいて、特にグリコシル残基組成、グリコシル結合組成、およびＭＷ分布、ＰＧＲＧ１およびＰＧＲＧ１−５Ｋにおける多糖は、主に多糖ポリガラクツロナンラムノガラクツロナンおよびグルカンからなる。ＰＧＲＧ１およびＰＧＲＧ１−５Ｋに存在するポリガラクツロナンラムノガラクツロナンは、［１，４−結合ＧａｌＡＧａｌＡ］ｎが点在した［１，４および１，２−結合ＲｈａＧａｌＡ］ｍからなる骨格、および主にＲｈａの４位に結合するＧａｌ、Ａｒａ、およびＧｌｃからなる中性糖残基の中から作製される様々なサイズの側鎖から構成される。グルカンは、［１，４−結合Ｇｌｃ］ｎの骨格を有するα−１，４（１，６）−グルカンであり、Ｇｌｃからなる側鎖は骨格Ｇｌｃにたいてい６位を介して結合する。
【０２３６】
（実施例３）
ＣＫＤ臨床データ
患者は、高血圧を提示し、血液分析は、正常よりも高いクレアチニンレベル（＞１．１ｍｇ／ｄｌ）を示した。ＡＣＥ阻害剤を用いて患者の血圧を正常範囲内に安定化した後、ＰＧＲＧ１による処置を開始した（実施例６参照）。
【０２３７】
結果の調査により、ＰＧＲＧ１による最初の処置時（毎日、経口で９００ｍｇ）にクレアチニンレベルのその後の降下があったことを示す。ＰＧＲＧ１処置の中断は、高いクレアチニンレベルを結果としてもたらす。処置の再開は、結果としてクレアチニンの高い正常範囲を低下させる（＜１．４ｍｇ／ｄｌ）。
【０２３８】
このデータを調べる別の方法は、計算されたゲル濾過率（ｃＧＦＲ）を使用する。
【０２３９】
（実施例４）
ｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイ
ｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイは、免疫機能および造血機能を増強するＰＧＲＧ１の能力を評価するために使用できる。これらのアッセイは、標準化された薬理活性を有する精製された、活性ＰＧＲＧ１画分の開発のための便利なアッセイシステムを提供するためにも使用できる。ｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイにおいて活性であると示されたＰＧＲＧ１抽出物は、次いでその有効性を評価する適切なｉｎ  ｖｉｖｏモデルでチェックすることができる（添付のｉｎ  ｖｉｖｏ活性を参照）。マウス脾臓細胞増殖およびヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）によるサイトカイン産生は、ＰＧＲＧ１抽出物が、潜在的な免疫刺激活性および造血活性を有するかどうか示すために使用することができる。測定されたサイトカインは、これらのサイトカインが造血および免疫機能に含まれるため、ＩＬ−６、およびＧ−ＣＳＦであった。ＰＢＭＣは調製が容易であり、ならびに免疫および造血機能の研究に適している。
【０２４０】
Ｃ３Ｈ／ＨｅＪマウス脾臓細胞増殖
６〜８週齢の雌のＣ３Ｈ／ＨｅＪマウス由来の脾臓細胞（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｂａｒ  Ｈａｒｂｏｒ、Ｍａｉｎｅ）を、以下のように調製した。脾臓をマウスから取り出し、無菌のペトリディッシュ中１０ｍｌの冷ＨＢＳＳに置いた。脾臓を半分に切断し、２枚の無菌のマイクロスライドの艶消し側の間でおだやかに圧縮した。細胞懸濁物は、次いで無菌のナイロンメッシュ（Ｎｙｔｅｘ、Ｔｅｔｃｏ  ＃ＨＤ−３−８５）を通して１５ｍｌの円錐形のポリプロピレン遠心チューブへと濾過し、Ｂｅｃｋｍａｎ  ＧＰＲ卓上遠心機（ＧＨ−３．７ローター）で１０分間２００×ｇで遠心分離した。ＨＢＳＳ中でのさらなる洗浄後、脾臓細胞は、５０μＭ  ２−メルカプトエタノール、２ｍＭ  グルタミン、１ｍＭ  ピルビン酸ナトリウム、非必須アミノ酸、１００Ｕ／ｍｌ  ペニシリン、１００μｇ／ｍｌ  ストレプトマイシン、および１０％の熱不活化ウシ胎仔血清（Ｓｉｇｍａ、＃Ｆ１４４２）を含有するＲＰＭＩ１６４０培地（Ｇｉｂｃｏ）中に２．５×１０６個の細胞／ｍｌとなるように再懸濁させた。
【０２４１】
様々な濃度で１００μｌの細胞および１００μｌの試験試料を含有する三連のアリコートを、丸底９６ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ  ＃３７９９）中、３日間５％ＣＯ２インキュベーター内で３７℃でインキュベートした。１００μｌの細胞および１００μｌの培地を含有する６個のウェルは、対照として働いた。１μＣｉの［３Ｈ］チミジンを含有する５０マイクロリットルの培地（Ａｍｅｒｓｈａｍ、４９Ｃｉ／ｍｍｏｌ）を、インキュベーションの最後の１８時間の前に各ウェルに添加した。次いで、製造業者の指示によってセルハーベスター（Ｈａｒｖｅｓｔｅｒ９６、Ｔｏｍｔｅｃ  Ｉｎｃ．）を使用して、細胞をフィルターマット（ガラス繊維フィルター、Ｗａｌｌａｃ）上で回収した。液体シンチレーションカウンタ（１２０５Ｂｅｔａｐｌａｔｅ、Ｐｈａｒｍａｃｉａ  ＬＫＢ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．）で試料を加工および計数し、結果を２．５×１０５個の細胞につき分あたりの計数（ｃｐｍ）として報告した。
【０２４２】
結果は、三連の決定値の平均＋／−標準偏差（ＳＤ）として表した。対照値は６つの別々の決定値の平均を表す。値は、増殖指数（ＰＩ）としても表され、試料培養物の分あたりの計数（ｃｐｍ）の平均数を対照培養物の平均ｃｐｍによって割った。典型的な対照値は、２０００〜６０００ｃｐｍの範囲であった。
【０２４３】
Ｃ３Ｈ／ＨｅＪ増殖アッセイにおいて、結果を、三連の決定値の平均＋／−標準偏差（ＳＤ）として表した。対照値は、６つの別々の決定値の平均を表す。有意性は、独立スチューデントのｔ検定を使用して決定した。
【０２４４】
活性化されたヒトＰＢＭＣによるサイトカイン産生
ヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）は確立された方法を使用して調製した。およそ２５ｍｌ／ドナーの、ヒト血液バフィーコート試料は、スタンフォード大学医療センターの血液バンクから入手した。無菌技術を使用して、バフィーコート試料を、室温でカルシウムおよびマグネシウムを含まないハンクス平衡塩類溶液（ＨＢＳＳ、Ｇｉｂｃｏ）の添加によって、総体積１００ｍｌにおだやかに再懸濁した。体積２５ｍｌの細胞懸濁物は、次いで５０ｍｌの円錐形の遠心チューブ内で１５ｍｌのＦｉｃｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ  ＬＫＢ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．）上に重ねた。チューブをＢｅｃｋｍａｎ  ＧＰＲ卓上遠心機（ＧＨ−３．７ローター）で、１５℃で３０分間４００×ｇにて遠心分離した。
【０２４５】
遠心分離後、界面におけるＰＢＭＣ懸濁物を新しい５０ｍｌチューブに移し、総体積４５ｍｌのＨＢＳＳに再懸濁させ、１５℃で１０分間３５４×ｇにて遠心分離した。
【０２４６】
上清を捨て、細胞ペレットをＨＢＳＳにより総体積４５ｍｌになるように再懸濁させ、１５℃で１０分間２６５×ｇにて再び遠心分離した。細胞ペレットは１０ｍｌのＸ−Ｖｉｖｏ組織培養培地（Ｂｉｏ  Ｗｈｉｔｔａｋｅｒ、ＭＤ）中に再懸濁させ、血球計算板を使用して計数した。ポリスチレンチューブ（Ｆａｌｃｏｎ  ＃２０５７、Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）および２人の異なるドナー由来のＰＢＭＣを以下の設定に使用した。ＰＢＭＣ懸濁物を４×１０  ６／ｍｌに希釈し、１ｍｌを最終濃度３μｇ／ｍｌの０．５ｍｌのフィトヘマグルチニンＰ（ＰＨＡ−Ｐ、Ｐｈａｒｍａｃｉａ２７−３７０７−０１）の存在下で様々な濃度の０．５ｍｌの試験試料とともにインキュベートした。チューブあたりの総体積は２ｍｌであった。ＰＨＡ単独で処理した細胞の別のアリコートは対照として働いた。７％ＣＯ２のインキュベーター内で３７℃で２４時間インキュベーション後、チューブを１５℃で１０分間１６００×ｇにてＢｅｃｋｍａｎ  ＧＰＲ卓上遠心機（ＧＨ−３．７ローター）で遠心分離し、上清を回収し、アッセイの前に−７０℃で保存した。細胞ペレットをトリパンブルーで染色し、以下に記載のように生存度を評価した。
【０２４７】
サイトカイン測定値は、ヒトサイトカインＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＴＮＦ−α、ＧＭ−ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦ（Ｒ＆Ｄ  ｓｙｓｔｅｍｓ、ＭＮ）およびヒトＩＦＮ−γ（Ｅｎｄｏｇｅｎ、ＭＡ）のための市販されているＥＬＩＳＡアッセイキットを使用して製造業者のプロトコールにしたがって行った。光学濃度は、マイクロプレートリーダーを使用して決定した（Ｔｈｅｒｍｏ  ｍａｘ、Ｍｏｌｅｄｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ、ＣＡ）。結果はマイクロプレートリーダーに備えられたソフトウェアを使用して算出し、上清中の産生されたサイトカインのｐｇ／ｍｌとして表した。結果は試料対対照（Ｓ／Ｃ）の比として表し、ＳはＰＨＡプラス試験試料で刺激したＰＢＭＣにおいて産生されたサイトカインの量であり、ＣはＰＨＡ単独で刺激したＰＢＭＣにおいて産生されたサイトカインの量である。Ｓ／Ｃ値は測定された各サイトカインについて算出した。いくつかのデータを以下の表５に示し、示した各Ｓ／Ｃ値は単回の決定を表す。
【０２４８】
ＰＧＲＧ１およびＰＧＲＧ１−５Ｋの脾臓細胞増殖およびサイトカイン産生のｉｎ  ｖｉｔｒｏ刺激を以下の表５に示す。
【表５】
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【０２４９】
ＰＧＲＧ１は、マウス脾臓細胞およびヒト末梢血単核細胞の両方を刺激し、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）およびＩＬ−６など他のサイトカインを産生することが観察された。Ｇ−ＣＳＦはまた、尿細管の上皮細胞の再生を加速し、マウスの急性腎不全のシスプラチン誘発モデルにおいてそれらのアポトーシスを防ぐことが示されたため、ＰＧＲＧ１は、その腎保護効果の少なくとも一部の要因であり得るＧ−ＣＳＦの上昇を誘発すると考えられる。
【０２５０】
（実施例５）
骨髄抑制は、特定のがんまたは移植拒絶反応を防ぐための放射線療法または化学療法を受ける患者が直面する深刻な問題である。白血球減少症／好中球減少症、血小板減少症、貧血症、および頻繁に凝固障害、細菌、ウイルス、または真菌感染、全身疲労、および倦怠感など、二次的な合併症をもたらす状態である。ＰＧＲＧ１を調べ、マウスモデルにおける末梢血細胞の放射線誘発性の欠乏から異なる血液成分の回収を増強するかどうか決定した。
【０２５１】
動物
１０〜１２週齢の雌のＢＡＬＢ／ｃマウス（１９〜２１ｇ）をＣｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ、ＭＡ）から入手し、標準的な食品ペレットおよびネオマイシン（８０ｍｇ／Ｌ、Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．、Ｓｔ．  Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）を含有する水で維持した。ネオマイシン処置は、実験開始の５〜７日前に開始した。
【０２５２】
対照
顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ；ニューポジェン、フィルグラスチム）をＡｍｇｅｎ（Ｔｈｏｕｓａｎｄ  Ｏａｋｓ、ＣＡ）から入手し、使用直前の各日に１０μｇ／ｍｌで無菌食塩水中に希釈した。それは、先の研究（２３）で記載した最小有効用量、１００μｇ／ｋｇ／日（およそ２μｇ／マウス／日）で使用した。対照動物に使用した無菌食塩水（０．９％塩化ナトリウム注射、ＵＳＰ、ＮＤＣ００７４−４８８８−９９）および薬物調製物は、Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｎｏｒｔｈ  Ｃｈｉｃａｇｏ、ＩＬ）から入手した。
【０２５３】
処置プロトコール
０日目、それぞれ５〜６匹のマウスの群は、Ｐｈｉｌｉｐｓ  ２５０ｋｖｐ  Ｘ線装置（スタンフォード大学、Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ、ＣＡ）において４５０ｃＧｙのＸ線照射を受けた。処置は同じ日（０日目）の分割投薬レジメン開始４〜５時間後に、次いでその後、１〜４、７〜９、１４〜１６、２１〜２３、および２８日目に各日およそ同じ時間に与えた。動物がこの分割レジメンに従って投薬されるかまたは２８日間毎日投薬されるかで、有意差は観察されなかった（実験／コンピューターファイルＨＥＭ４およびＮｏｔｅｂｏｏｋ＃１６０における比較データ）。対照群は、（ａ）正常、非照射、非処置マウス（重量比較のベースライン対照、データは示さない）、（ｂ）食塩水の皮下注射を受けた照射マウス（陰性対照）、または（ｃ）１００μｇ／ｋｇ／日のＧ−ＣＳＦの皮下注射を受けた照射マウス（陽性対照）を含み、Ｇ−ＣＳＦが有効であることを実証した（データは示さない）。
【０２５４】
全ての動物は、各注射の前に秤量し、２０〜５０μｌの血液を注射後４日目に開始し、４週間、週２回尾静脈から得た。動物は、実験期間を通して正常体重（正常、非照射、非処置マウスに対して）を維持した。
【０２５５】
末梢血計数
血小板（ＰＬＴ）、白血球（ＷＢＣ）、および赤血球（ＲＢＣ）を含む末梢血パラメータは、Ｓｅｒｏｎｏ  Ｓｙｓｔｅｍ  ９０００自動セルカウンタ（Ｂａｋｅｒ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ、Ａｌｌｅｎｔｏｗｎ、ＰＡ）を使用して測定した。血液塗抹標本をガラススライド上に作成し、Ｌｅｕｋｏｓｔａｔ  Ｓｔａｉｎ  Ｋｉｔ（Ｎｏ．ＣＳ−４３０、Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ、ＰＡ）により染色し、Ｎｉｋｏｎ  Ｌａｂｏｐｈｏｔ−２顕微鏡下でＷＢＣ分画を行った。統計分析を独立ｔ−検定またはマンホイットニーのノンパラメトリック検定を使用して行った。血小板（ＰＬＴ）、白血球（ＷＢＣ）、好中球、および赤血球（ＲＢＣ）に対するＰＧＲＧ１の効果の結果を図７Ａ〜７Ｄに要約する。
（実施例６）
【表６】
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【０２５６】
患者１は、２回目の化学療法後毎日、朝の５時および夕方の５時に、ＰＧＲＧ１（カプセルにつき４５０ｍｇのＰＧＲＧ１）の１０個のカプセルを摂取した。１回目および２回目の化学療法後およびＰＧＲＧ１の摂取前、患者１は衰弱を感じ、食欲がなく、胃が不快であることを報告した。ＰＧＲＧ１の摂取後、患者１は衰弱、食欲不振、および胃の不快感が、処置の６週目までに正常に戻ったことを報告した。
【０２５７】
患者２は、１回目の化学療法後毎日、朝の４時および夕方の４時に、ＰＧＲＧ１（カプセルにつき４５０ｍｇのＰＧＲＧ１）の８個のカプセルを摂取した。１回目の化学療法後およびＰＧＲＧ−１の摂取前、患者２は衰弱を感じ、汗ばみ、食欲がないと報告した。ＰＧＲＧ−１の摂取後、患者は衰弱、食欲不振、および体の発汗が、６週目までに正常に戻ったことを示した。
【０２５８】
様々な特定の実施形態が例示され記載されたが、具体的に開示された材料および技術の等価物が適用可能であり、様々な変更が本発明（複数可）の精神および範囲から逸脱することなく行うことができることを認識されたい。そのような等価物は以下の請求項に含まれることを意図するものである。したがって、本開示は、本明細書に開示の特定の実施形態に限定されるものではなく、例として提示されるものであることを理解されたい。本明細書において特定の用語が用いられるが、それらは一般的なおよび記述的な意味においてのみ使用され、限定を目的としない。
【０２５９】
本開示に引用される特許、特許出願、記事、書籍、論文、インターネットウェブページ、および他の出版物を含むがこれに限定されない本出願に引用される全ての文献および類似の材料は、そのような文献および類似の材料の形式に関わらず、それぞれが個々に参照により組み込まれることを意図する場合と同程度に、任意の目的のために、その全体が参照により明確に組み込まれる。定義された用語、用語の使用、記載された技術、などを含むが、これに限定されない１または複数の組み込まれた文献および類似の材料が、本開示と異なるまたは矛盾する場合には、本開示を優先する。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図４Ｃ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図５Ｃ】
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【図６】
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【図７−１】
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【図７−２】
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【国際調査報告】
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