(57)【要約】  本発明は、一般式(Ｉ)2017534657.tif 000069を有する新規シチジン誘導体およびその適用を提供する。腫瘍担持ヌードマウスにおけるＨＣＴ−１１６結腸癌移植に対する本発明の新規シチジン誘導体の増殖阻害効果実験により、本発明の化合物は高抗腫瘍活性を有し、ヒト結腸癌ＨＣＴ−１１６を担持するヌードマウスの体重に対する影響のデータおよび死亡率のデータは、本化合物の毒性が比較的低いことを示した。
2017534657.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の一般式(Ｉ)
【化１】
2017534657.tif 000065
〔式中、
Ｒ１はＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ１−Ｃ１０置換アルキル、−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈまたは置換−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈであり、ここで、該−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈにおいて、ｎ＝０、１、２、３〜１０であり、Ｐｈはベンゼンであり；該置換アルキルの炭素鎖は、１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、ヒドロキシル基またはカルボキシル基で独立して置換されており；該置換−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈにおいて、ｎ＝０、１、２、３〜１０であり、その炭素鎖またはベンゼン環は、１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、ヒドロキシル基またはカルボキシル基で独立して置換されている；
Ｒ２はＨ、ハロゲンまたは
【化２】
2017534657.tif 000066
であり、ここで、Ｘ１はＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ１−Ｃ１０置換アルキル、Ｃ１−Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１０置換アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキルスルホニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオール、−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈまたは置換−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈであり、ここで、該置換アルキルの炭素鎖は、１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、ヒドロキシル基またはカルボキシル基で独立して置換され、該置換アルコキシの炭素鎖は、１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、ヒドロキシル基またはカルボキシル基で独立して置換され、該−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈにおいて、ｎ＝０、１、２、３〜１０であり、該置換−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈにおいて、ｎ＝０、１、２、３〜１０であり、その炭素鎖またはベンゼン環は１個もしくは２個もしくは３個のＨ、ハロゲン、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、ヒドロキシル基またはカルボキシル基で置換され；
Ｒ３はＨまたは
【化３】
2017534657.tif 000067
であり、ここで、Ｘ３はベンゼン環、ヘテロ環式環、縮合ヘテロ環式環、１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、ヒドロキシル基またはカルボキシル基で独立して置換される置換ベンゼン、１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、ヒドロキシル基またはカルボキシル基で独立して置換される置換ヘテロ環式環または１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、ヒドロキシル基またはカルボキシル基で独立して置換される置換縮合ヘテロ環式環であり、ここで、該ヘテロ環式環はイミダゾール、ピリジン、フラン、チオフェン、チアゾール、ピリミジン、ピペラジンまたはピペリジンであり、該縮合ヘテロ環式環はキノリンまたはインドールであり、Ｘ２は−(ＣＨ２)ｎ−であり、ここで、ｎ＝１、２、３であるかまたはＸ２は−Ｏ−(ＣＨ２)ｎ−であり、ここで、ｎ＝０、１、２、３である。〕
を有する、新規シチジン誘導体。
【請求項２】
Ｒ２がＨであることを特徴とする、請求項１に記載の新規シチジン誘導体。
【請求項３】
Ｒ２がＨではなく、Ｒ３がＨではないことを特徴とする、請求項１に記載の新規シチジン誘導体。
【請求項４】
Ｒ２がハロゲンまたは
【化４】
2017534657.tif 000068
であり、Ｘ１が−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈまたは置換−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈであることを特徴とする、請求項３に記載の新規シチジン誘導体。
【請求項５】
Ｒ１がＣ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４置換アルキル、ベンジルまたは置換ベンジルであり、Ｒ３のＸ３が１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、ヒドロキシル基またはカルボキシル基で独立して置換されている置換イミダゾール、１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、ヒドロキシル基またはカルボキシル基で独立して置換されている置換ピリジンまたは１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、ヒドロキシル基またはカルボキシル基で独立して置換されている置換ベンゼン環であることを特徴とする、請求項４に記載の新規シチジン誘導体。
【請求項６】
抗腫瘍剤の製造における、請求項１に記載のシチジン誘導体またはその塩形態の適用。
【請求項７】
腫瘍が血液腫瘍または悪性固形腫瘍であることを特徴とする、請求項６に記載の抗腫瘍剤の製造におけるシチジン誘導体の適用。
【請求項８】
塩が塩酸塩、リン酸塩、硫酸塩、炭酸塩、硝酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩、スルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、メシル酸塩、安息香酸塩またはフマル酸塩であることを特徴とする、請求項６に記載の化合物の薬学的に許容される塩。
【請求項９】
活性成分として請求項１に記載の一般式(Ｉ)で示される誘導体またはその薬学的に許容される塩および１以上の医薬担体または添加物を含む、医薬組成物。
【請求項１０】
組成物の投与形態が注射剤または経口製剤であることを特徴とし、ここで、注射剤は溶液タイプ注射剤、懸濁液タイプ注射剤、エマルジョンタイプ注射剤または注射用滅菌粉末剤をいい、経口製剤は錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、ペレット剤、溶液剤、懸濁液剤、エマルジョン剤、シロップ剤またはエリキシル剤をいう、請求項９に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
技術分野
本発明は、新型シチジン誘導体および抗腫瘍剤の製造における誘導体の適用に関する。
【背景技術】
【０００２】
背景技術
悪性腫瘍は、ヒトの健康を脅かす一般的な疾患の一つであり、死亡率の点では全疾患の中で一位である。現在の臨床適用で利用可能な抗腫瘍剤に関して、その毒性が、腫瘍化学療法における格別な問題である。腫瘍処置の有効性の改善と、同時に薬物毒性の低減が、現在の癌薬物に対する重要な研究課題である。
【０００３】
抗腫瘍効果を有するシチジン誘導体は、シタラビンおよびゲムシタビンを含む。シタラビンは、体内でその後活性トリホスフェートシタラビンに変わり、抗癌効果を発揮する。トリホスフェートシタラビンはＤＮＡ合成を阻止し、ＤＮＡポリメラーゼを阻害し、少量のＤＮＡを挿入することにより細胞増殖を阻害し、これは、主に急性骨髄芽球性白血病の処置に使用される。しかしながら、シタラビンは比較的大きな毒性副作用を有し、これが造血系に骨髄抑制、白血球減少および血小板減少症を引き起こし得る。再生不良性貧血または巨赤芽球性貧血が重度の症例で起こり得る。高尿酸血症が、白血病またはリンパ腫を有する患者で処置初期に起こり得て、尿酸腎症が重度の症例で起こり得る。
【０００４】
ゲムシタビンは、デオキシシチジンの誘導体であり、構造および代謝はシタラビンに類似する。ゲムシタビンは、細胞のヌクレオシド一リン酸キナーゼにより、活性化ジフルオロシチジン二リン酸(ｄＦｄＣＤＰ)およびジフルオロシチジン三リン酸(ｄＦｄＣＴＰ)に触媒され、ｄＦｄＣＴＰは、ＤＮＡポリメラーゼ阻害によりＤＮＡ合成を阻止する。ＤＮＡ鎖は、ＤＮＡへの取り込みにより伸長を中断し、それにより腫瘍細胞増殖を阻止する。
【０００５】
ゲムシタビンは、膵臓癌(一次および二次処置)、非小細胞性肺癌、乳癌、卵巣癌および頭頚部扁平上皮細胞癌に適用可能である。しかしながら、ゲムシタビンはまた毒性が比較的大きい。その有害反応は、白血球減少、血小板減少および貧血のような骨髄抑制；軽度悪心、嘔吐および肝機能異常のような消化器反応；発熱、インフルエンザ様症状、疲労、粘膜炎などである。
【０００６】
上記シチジン誘導体がヒト体内に入った後、腫瘍細胞は、多剤耐性遺伝子を産生する。さらに、環上のアミノは容易にアセチル化され、化合物抗癌活性喪失および他の耐性因子を生じる。上記シチジン誘導体は大きな毒性副作用を有し、薬物耐性を生じる傾向にある。
【０００７】
シタラビンおよびゲムシタビンの毒性を軽減し、抗腫瘍有効性を改善または維持するために、研究者らはシチジン誘導体の化学構造を修飾している。
【０００８】
例えば、Synthesis and Biological Activity of a Gemcitabine Phosphoramidate Prodrug(J. Med. Chem 2007, 50, 3743-3746; Weidong Wu)は、ある種のゲムシタビンホスフェートプロドラッグを報告する。
【０００９】
米国特許７２６５０９６Ｂ２号(出願番号１０／７０１９６５)は、ゲムシタビンプロドラッグ、その医薬組成物および使用を開示する。この文献では、ゲムシタビンのアミノ、リボフラノースのヒドロキシルの水素原子およびヒドロキシメチルの水素原子が置換された。ボフラノースのヒドロキシメチルの水素原子は、Ｈ、アシル、置換アシル、アシルオキシ−カルボニル、置換アシルオキシ−カルボニル、オキシ−カルボニルおよび置換オキシ−カルボニルにより置換され、リボフラノースのヒドロキシルの水素原子はＨ、アシル、置換アシル、アシルオキシ−カルボニル、置換アシルオキシ−カルボニル、オキシ−カルボニルおよび置換オキシ−カルボニルにより置換され、アミノは−Ｎ＝Ｃ(Ｒ１０)(Ｒ１１)または−ＮＨＲ１２(式中、Ｒ１２はＣ５−Ｃ９アシルまたはＣ５−Ｃ９置換アシルである)で置換された。該特許により製造された化合物は、体内で変換後にしか抗腫瘍活性を発揮しないプロドラッグである。さらに、臨床試験で、該ゲムシタビンプロドラッグが、高毒性および低抗腫瘍活性を有することが判明し、医薬としてまだ開発されてない。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
発明の要約
本発明により解決すべき課題は、新型シチジン誘導体および抗腫瘍剤の製造におけるこのような誘導体の適用を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明の目標を達成するための技術的解決は、次の一般式(Ｉ)
【化１】
2017534657.tif 000003
を有する新型シチジン誘導体であり、
式中、Ｒ１はＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ１−Ｃ１０置換アルキル、−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈまたは置換−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈであり、ここで、該−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈにおいて、ｎ＝０、１、２、３〜１０であり、Ｐｈはベンゼンであり；該置換アルキルの炭素鎖は、１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、ヒドロキシル基またはカルボキシル基で独立して置換されており；該置換−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈにおいて、ｎ＝０、１、２、３〜１０であり、その炭素鎖またはベンゼン環は、１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、ヒドロキシル基またはカルボキシル基で独立して置換されている。
【００１２】
Ｒ２はＨ、ハロゲンまたは
【化２】
2017534657.tif 000004
であり、ここで、Ｘ１はＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ１−Ｃ１０置換アルキル、Ｃ１−Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１０置換アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキルスルホニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオール、−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈまたは置換−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈであり、ここで、該置換アルキルの炭素鎖は、１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、ヒドロキシル基またはカルボキシル基で独立して置換され、該置換アルコキシの炭素鎖は、１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、ヒドロキシル基またはカルボキシル基で独立して置換され、該−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈにおいて、ｎ＝０、１、２、３〜１０であり、該置換−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈにおいて、ｎ＝０、１、２、３〜１０であり、その炭素鎖またはベンゼン環は１個もしくは２個もしくは３個のＨ、ハロゲン、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、ヒドロキシル基またはカルボキシル基で置換される。
【００１３】
Ｒ３はＨまたは
【化３】
2017534657.tif 000005
であり、ここで、Ｘ３はベンゼン環、ヘテロ環式環、縮合ヘテロ環式環、１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、ヒドロキシル基またはカルボキシル基で独立して置換される置換ベンゼン、１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、ヒドロキシル基またはカルボキシル基で独立して置換される置換ヘテロ環式環または１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、ヒドロキシル基またはカルボキシル基で独立して置換される置換縮合ヘテロ環式環であり、ここで、該ヘテロ環式環はイミダゾール、ピリジン、フラン、チオフェン、チアゾール、ピリミジン、ピペラジンまたはピペリジンであり、該縮合ヘテロ環式環はキノリンまたはインドールであり、Ｘ２は−(ＣＨ２)ｎ−であり、ここで、ｎ＝１、２、３であるかまたはＸ２は−Ｏ−(ＣＨ２)ｎ−であり、ここで、ｎ＝０、１、２、３である。
【００１４】
場合により、Ｒ２はＨである。
好ましくは、Ｒ２はＨではなく；Ｒ３はＨではない。
【００１５】
Ｒ２がＨではないとき、Ｒ２はハロゲンまたは
【化４】
2017534657.tif 000006
であり、Ｘ１は−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈまたは置換−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈである。
【００１６】
好ましくは、Ｒ１はＣ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４置換アルキル、ベンジルまたは置換ベンジルであり、Ｒ３のＸ３は１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、ヒドロキシル基またはカルボキシル基で独立して置換されている置換イミダゾール、１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、ヒドロキシル基またはカルボキシル基で独立して置換されている置換ピリジンまたは１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、ヒドロキシル基またはカルボキシル基で独立して置換されている置換ベンゼン環である。
【００１７】
上記化合物またはその塩の抗腫瘍剤の製造における適用。
【００１８】
腫瘍は、血液腫瘍または悪性固形腫瘍をいう。
【００１９】
塩は、塩酸塩、リン酸塩、硫酸塩、炭酸塩、硝酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩、スルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、メシル酸塩、安息香酸塩またはフマル酸塩をいう。
【００２０】
医薬組成物は、活性成分として式(Ｉ)により示されるシチジン誘導体またはその薬学的に許容される塩および１以上の医薬担体または添加物を含む。
【００２１】
上記組成物の投与形態は注射剤または経口製剤であり、ここで、注射は溶液タイプ注射剤、懸濁液タイプ注射剤、エマルジョンタイプ注射剤または注射用滅菌粉末剤をいい、経口製剤は錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、ペレット剤、溶液剤、懸濁液剤、エマルジョン剤、シロップ剤またはエリキシル剤をいう。
【００２２】
本発明は、有益な効果を有し、腫瘍担持ヌードマウスにおけるＨＣＴ−１１６結腸癌異種移植に対する本発明において開示する化合物の増殖阻害効果の実験により証明されるように、本発明において開示する化合物は、ヒト結腸癌ＨＣＴ−１１６担持ヌードマウスに高抗腫瘍活性を有し、体重にはほとんど影響せず、これは本化合物の毒性が比較的低いことを示す。
【００２３】
詳細な記載
本発明における新規シチジン誘導体は、次の構造式(Ｉ)
【化５】
2017534657.tif 000007
を有し、
式中、Ｒ１はＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ１−Ｃ１０置換アルキル、−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈまたは置換−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈであり、該−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈにおいて、ｎ＝０、１、２、３〜１０であり、Ｐｈはベンゼンであり、該置換アルキルの炭素鎖は１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシルまたはカルボキシルで独立して置換されており、該置換−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈにおいて、ｎ＝０、１、２、３〜１０であり、その炭素鎖またはベンゼン環は１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシルまたはカルボキシルで独立して置換されている。
【００２４】
Ｒ２はＨ、ハロゲンまたは
【化６】
2017534657.tif 000008
であり、ここで、Ｘ１はＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ１−Ｃ１０置換アルキル、Ｃ１−Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１０置換アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキルスルホニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオール、−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈまたは置換−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈであり、該置換アルキルの炭素鎖は１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシルまたはカルボキシルで独立して置換されており；該置換アルコキシの炭素鎖は１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシルまたはカルボキシルで独立して置換されており、該−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈにおいて、ｎ＝０、１、２、３〜１０であり、該置換−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈにおいて、ｎ＝０、１、２、３〜１０であり、その炭素鎖またはベンゼン環は１個もしくは２個もしくは３個のＨ、ハロゲン、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシルまたはカルボキシルで置換されている。
【００２５】
Ｒ３はＨまたは
【化７】
2017534657.tif 000009
であり、ここで、Ｘ３はベンゼン環、ヘテロ環式環または縮合ヘテロ環式環、１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシルまたはカルボキシルで独立して置換されている置換ベンゼン、１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシルまたはカルボキシルで独立して置換されている置換ヘテロ環式環または１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシルまたはカルボキシルで独立して置換されている置換縮合ヘテロ環式環であり、該ヘテロ環式環はイミダゾール、ピリジン、フラン、チオフェン、チアゾール、ピリミジン、ピペラジンまたはピペリジンであり、該縮合ヘテロ環式環はキノリンまたはインドールであり、Ｘ２は−(ＣＨ２)ｎ−であり、ここで、ｎ＝１、２、３であるかまたはＸ２は−Ｏ−(ＣＨ２)ｎ−であり、ここで、ｎ＝０、１、２、３である。
【００２６】
本発明のシチジン誘導体に関して、表１に次の化合物を挙げる。しかしながら、本発明のシチジン誘導体はこれらの化合物に限定されない。
【表１】
2017534657.tif 000010
【表２】
2017534657.tif 000011
【００２７】
上記表の化合物を製造するとき、合成工程で使用する固形試薬は、さらなる処理をせずに直接用い、液体試薬は再蒸留および乾燥後に使用する。
【実施例】
【００２８】
(実施例１)
本実施例のシチジン誘導体は、４−Ｎ−(ｎ−ブトキシカルボニル)−２’−デオキシ−２’,２’−ジフルオロシチジン(構造式：４、コード：Ｇ２)であり、これは、３工程反応により製造できる。反応式を下に示す(反応式において、ＨＭＤＳはヘキサメチルジシラザンであり、ｒｔは室温であり、ＴＥＡはトリエチルアミンであり、これら略語は下においても同一である)。
【化８】
2017534657.tif 000012
【００２９】
３００mg(１mmol)の２’−デオキシ−２’,２’−ジフルオロシチジン塩酸塩(構造式：１、コード：Ｇ１)、５mL(０.０２３mmol)のビス(トリメチルシリル)アミンＨＭＤＳおよび５mgの硫酸アンモニウム(触媒量)を５mLの１,４−ジオキサンに溶解し、２時間加熱還流した。反応生成物の化学構造式は２であった。還流下の反応が完了した後、反応液を濃縮し、トルエンを添加し、２回濃縮乾固した。濃縮後得られた生成物を１０mLのジクロロメタンに溶解した。
０.２４mL(３mmol)のＮ−メチルイミダゾールおよび０.３２mL(３mmol)のクロロギ酸ｎ−ブチルを上記ジクロロメタン溶液に添加し、反応させるために、室温で４時間撹拌した。反応生成物の化学構造式は３であり、反応液を濃縮して粘性油状生成物を得た。
粘性油状生成物を３mLのトリエチルアミンと２０mLのメタノールの混液に溶解し、室温で４時間撹拌した。溶媒を、減圧下の蒸留により除去した。シリカゲルクロマトグラフィーを実施して、粗製の生成物を精製し、ジクロロメタン／メタノール(２０：１)溶出により２３０mgのＧ２を得た。三工程反応収率は５５.５％であった。
【００３０】
Ｇ２のＮＭＲ特徴付け：
1H-NMR (MeOD-d4, 400 MHz) δ: 8.30 (d, 1H, J = 7.68Hz, H6), 7.34 (d, 1H, J = 7.68Hz, H5), 6.28 (t, 1H, J = 7.08Hz, H1'), 4.33 (m, 1H, H5a'), 4.0 (m, 2H, O-CH2-CH2-), 3.81 (m, 1H, H5b'), 3.79 (m, 1H, H4'), 1.68 (m, 2H, O-CH2-CH2-), 1.45 (m, 2H, O-CH2-CH2-CH2), 0.98 (t, 3H, J = 7.4Hz, -CH2-CH3)
13C-NMR (MeOD-d4, 100 MHz) δ: 164.28, 156.27, 153.50, 144.39, 128.33, 122.72, 95.81, 84.90, 81.71, 74.87, 68.88, 63.69, 59.15, 30.66, 32.40, 18.81, 11.23, 8.06
【００３１】
上記製造法を、反応原料を変えることにより適用できる。ｎ−ブチル以外に、Ｒ１はＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ１−Ｃ１０置換アルキル、−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈ(ｎ＝０、１、２、３〜１０)または置換−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈ(ｎ＝０、１、２、３〜１０であり、Ｐｈはベンゼンである)のような他の基であってよく、ここで、置換アルキルの炭素鎖は１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシルまたはカルボキシルで独立して置換されており、該置換−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈの炭素鎖またはベンゼン環は１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシルまたはカルボキシルで独立して置換されている。
【００３２】
(実施例２)
本実施例のシチジン誘導体は、４−Ｎ−(ｔ−ブチルオキシカルボニル)−２’−デオキシ−２’,２’−ジフルオロシチジン(構造式：６、コード：Ｇ３)であり、これは、３工程反応により製造できる。反応式は下記のとおりである。
【化９】
2017534657.tif 000013
【００３３】
３００mg(１mmol)の２’−デオキシ−２’,２’−ジフルオロシチジン塩酸塩、５mL(０.０２３mmol)のＨＭＤＳおよび５mgの硫酸アンモニウム(触媒量)を５mLの１,４−ジオキサンに溶解し、２時間加熱還流した。還流下の反応が完了した後、反応液を濃縮し、トルエンを添加し、２回濃縮乾固した。濃縮後得られた生成物を１０mLのジクロロメタンに溶解した。
０.２４mL(３mmol)のＮ−メチルイミダゾールおよび４１６mg(３mmol)の二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルを上記ジクロロメタン溶液に添加し、室温で４時間撹拌して反応させた。反応生成物の化学構造式は５であり、反応液を濃縮して粘性油状生成物を得た。
粘性油状生成物を３mLのトリエチルアミンと２０mLのメタノールの混液に溶解し、室温で一夜撹拌した。次いで溶媒を、減圧下の蒸留により除去した。シリカゲルクロマトグラフィーを実施して、粗製の生成物を精製し、ジクロロメタン／メタノール(２０：１)溶出により１９９mgのＧ３を得た。三工程反応収率は５４％であった。
【００３４】
Ｇ３のＮＭＲ特徴付け：
1H-NMR (MeOD-d4, 400 MHz) δ: 8.27 (d, 1H, J = 7.68 Hz, H6), 7.32 (d, 1H, J = 7.68 Hz, H5), 6.28 (t, 1H, J = 7.08 Hz, H1'), 4.25 (m, 1H, H5a'), 3.93 (m, 2H, H5b', H4'), 3.78 (m, 1H, H3'), 1.52 (s, 9H, t-Bu)
13C-NMR (MeOD-d4, 100 MHz) δ: 164.36, 152.17, 144.24, 125.29, 122.71, 120.13, 109.98, 95.78, 82.17, 81.60, 70.45, 69.30, 68.90, 65.57, 55.90, 27.12, 23.57
【００３５】
(実施例３)
本実施例のシチジン誘導体は、４−Ｎ−(カルボキシベンジル)−２’−デオキシ−２’,２’−ジフルオロシチジン(構造式：８、コード：Ｇ４)であり、これは、３工程反応により製造できる。反応式は下記のとおりである。
【化１０】
2017534657.tif 000014
【００３６】
３００mg(１mmol)の２’−デオキシ−２’,２’−ジフルオロシチジン塩酸塩、５mL(０.０２３mmol)のＨＭＤＳおよび５mgの硫酸アンモニウム(触媒量)を５mLの１,４−ジオキサンに溶解し、２時間加熱還流した。還流下の反応が完了した後、反応液を濃縮し、トルエンを添加し、２回濃縮乾固した。濃縮後得られた生成物を１０mLのジクロロメタンに溶解した。
０.２４mL(３mmol)のＮ−メチルイミダゾールおよび３４０mg(３mmol)のクロロギ酸ベンジルを上記ジクロロメタン溶液に添加し、反応させるために、室温で４時間撹拌した。反応生成物の化学構造式は７であり、反応液を濃縮して粘性油状生成物を得た。
粘性油状生成物を３mLのトリエチルアミンと２０mLのメタノールの混液に溶解し、室温で一夜撹拌した。次いで溶媒を、減圧下の蒸留により除去した。シリカゲルクロマトグラフィーを実施して、粗製の生成物を精製し、ジクロロメタン／メタノール(２０：１)溶出により１６２mgのＧ４を得た。三工程反応収率は４１％であった。
【００３７】
Ｇ４のＮＭＲ特徴付け：
1H-NMR (MeOD-d4, 400 MHz) δ: 8.31 (d, 1H, J = 7.64 Hz, H6), 7.39 (m, 5H, J = 7.68 Hz, Ph), 6.25 (t, 1H, J = 7.12 Hz, H1'), 5.21 (s, 2H. CH2-Ph), 4.31 (m, 1H, H5a'), 3.82 (m, 2H, H5b, H4'), 3.79 (m, 1H, H3')
13C-NMR (MeOD-d4, 100 MHz) δ: 164.22, 156.22, 153.27, 144.48, 135.87, 128.42, 128.10, 125.31, 122.74, 120.16, 95.89, 85.35, 84.91, 81.7, 81.66, 68.87, 67.54, 58.31
【００３８】
(実施例４)
本実施例のシチジン誘導体は、４−Ｎ−(４−ニトロカルボキシベンジル)−２’−デオキシ−２’,２’−ジフルオロシチジン(構造式：１０、コード：Ｇ５)であり、これは、３工程反応により製造できる。反応式は下記のとおりである。
【化１１】
2017534657.tif 000015
【００３９】
３００mg(１mmol)の２’−デオキシ−２’,２’−ジフルオロシチジン塩酸塩、５mL(０.０２３mmol)のＨＭＤＳおよび５mgの硫酸アンモニウム(触媒量)を５mLの１,４−ジオキサンに溶解し、２時間加熱還流した。還流下の反応が完了した後、反応液を濃縮し、トルエンを添加し、２回濃縮乾固した。濃縮後得られた生成物を１０mLのジクロロメタンに溶解した。
０.２４mL(３mmol)のＮ−メチルイミダゾールおよび４３０mg(３mmol)のクロロギ酸４−ニトロベンジルを上記ジクロロメタン溶液に添加し、反応させるために、室温で４時間撹拌した。反応生成物の化学構造式は９であり、反応液を濃縮して粘性油状生成物を得た。
粘性油状生成物を３mLのトリエチルアミンと２０mLのメタノールの混液に溶解し、室温で一夜撹拌した。次いで溶媒を、減圧下の蒸留により除去した。シリカゲルクロマトグラフィーを実施して、粗製の生成物を精製し、ジクロロメタン／メタノール(２０：１)溶出により１６０mgのＧ５を得た。三工程反応収率は３６％であった。
【００４０】
Ｇ５のＮＭＲ特徴付け：
1H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ: 11.11(s, 1H), 8.25 (m, 3H, Ph), 7.68 (d, 2H, J = 8.64 Hz, Ph), 7.08 (d, 1H, J = 7.44 Hz, H6), 6.29 (d, 1H, J = 7.44 Hz, H5), 6.17 (t, 1H, J = 7.4 Hz, H1'), 5.33 (s, 2H, CH2-Ph), 5.29 (t, 1H, J = 5.44 Hz), 4.19 (m, 1H, H5a'), 3.66 (m, 1H, H5b'), 3.61 (m, 1H, H4'), 3.29 (m, 1H, H3')
13C-NMR (DMSO-d6, 100 MHz) δ: 163.93, 153.47, 147.86, 144.38, 128.97, 126.72, 126.19, 124.26, 123.62, 95.57, 84.82, 83.99, 81.77, 71.91, 69.13, 68.42, 66.06, 62.34, 59.52
【００４１】
異なる置換基の種々の誘導体を、Ｇ５−１およびＧ５−２のような上記合成法により合成できる。
【００４２】
(実施例５)
本実施例のシチジン誘導体は、５−Ｂｒ−４−Ｎ−(ｎ−ブトキシカルボニル)−２’−デオキシ−２’,２’−ジフルオロシチジン(構造式：１１、コード：Ｇ６)であり、その反応式は次のとおりである。
【化１２】
2017534657.tif 000016
【００４３】
Ｇ２を実施例１の方法により製造後、１ｇ(２.７５mmol)のＧ２を１５０mLのジメチルホルムアミドに溶解し、ここで、５００mg(１.７５mmol)のＤＢＤＭＨを撹拌しながら添加した。得られた淡黄色溶液を、室温で１時間撹拌した。ＬＣＭＳ試験により反応が完了したと測定されたとき、Ｇ２はＧ６に完全に変換した。溶媒を除去するために減圧下回転蒸発を実施し、アセトニトリルをさらなる濃縮に使用した。シリカゲルクロマトグラフィーを実施して、粗製の生成物を精製し、ジクロロメタン／メタノール(２０：１)溶出により２６３mgのＧ６を得た。Ｇ１からＧ６の総反応収率は５１％であった。
【００４４】
Ｇ６のＮＭＲ特徴付け：
1H-NMR (MeOD-d4, 400 MHz) δ: 8.62 (s, 1H, H5), 6.18 (t, 1H, J = 6.52 Hz, H1'), 4.19 (m, 1H, H5a'), 4.15 (m, 2H, H5b', H4'), 3.95 (m, 2H, O-CH2-CH3), 3.17 (m, 1H, H3'), 1.36 (m, 2H, -O-CH2-CH2-CH2-CH3), 1.31 (m, 2H, -O-CH2-CH2-CH2-CH3), 0.98 (m, 2H, -O-CH2-CH2-CH2-CH3)
13C-NMR (MeOD-d4, 100 MHz) δ: 143.05, 124.56, 84.59, 81.91, 75.45, 66.17, 58.74, 58.42, 32.96, 30.64, 28.32, 18.84, 12.79, 8.17
ESIMS: C14H18BrF2N3O6 m/z計算値 442.03 (M+H)+, 実測値442.02
【００４５】
(実施例６)
本実施例のシチジン誘導体は、５−Ｂｒ−４−Ｎ−(カルボキシベンジル)−２’−デオキシ−２’,２’−ジフルオロシチジン(構造式：１２、コード：Ｇ７)であり、その反応式は下記のとおりである(反応式のＤＭＦはＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミドであり、下記においても同様である)。
【化１３】
2017534657.tif 000017
【００４６】
実施例３の方法によりＧ４を製造後、１ｇ(２.７５mmol)のＧ４を１５０mLのＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解し、ここで、５００mg(１.７５mmol)のＤＢＤＭＨを撹拌しながら添加した。得られた淡黄色溶液を、室温で１時間撹拌して反応させた。ＬＣＭＳ試験により反応完了が確認され、Ｇ４はＧ７に変換された。溶媒を除去するために減圧下回転蒸発を実施し、アセトニトリルを濃縮に使用した。シリカゲルクロマトグラフィーを実施して、粗製の生成物を精製し、ジクロロメタン／メタノール(２０：１)溶出により２８３mgのＧ７を得た。Ｇ１からＧ７の総反応収率は３２％であった。
【００４７】
Ｇ７のＮＭＲ特徴付け：
1H-NMR (MeOD-d4, 400 MHz) δ: 8.60 (s, 1H, H5), 7.45 (m, 2H, Ph), 7.36 (m, 3H, Ph), 6.18 (t, 1H, J = 6.52 Hz, H1'), 5.24 (s, 2H, CH2-Ph), 4.33 (m, 1H, H5a'), 4.0 (m, 2H, H5b', H4'), 3.81 (m, 1H, H3')
13C-NMR (MeOD-d4, 100 MHz) δ: 143.23, 135.93, 128.37, 128.27, 125.22, 122.63, 120.05, 85.41, 85.08, 84.76, 81.85, 68.77, 68.53, 68.31, 67.93, 58.76
ESIMS: C17H16BrF2N3O6の計算値 m/z 476.02 (M+H)+, 実測値477.09
【００４８】
同様に、実施例１の合成経路によりアミノ基を置換後、５位水素を実施例６によりＢｒに置換し、Ｇ７−１およびＧ７−２を得ることができる。
【００４９】
上記製造法により、Ｒ２上に他の基を有する誘導体を製造できる。
【００５０】
(実施例７)
本実施例のシチジン誘導体は、５’−Ｏ−[３,５−ジニトロサリチレート]−４−Ｎ−(ｎ−ブトキシカルボニル)−２’−デオキシ−２’,２’−ジフルオロシチジン(構造式：１４、コード：Ｇ８)である。
反応式は下記のとおりである(反応式において、(Ｂｏｃ)２Ｏは二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルであり、ジオキサンは１,４−ジオキサンであり、ＤＭＡＰは４−ジメチルアミノピリジンであり、ＥＤＣＬは１−(３−ジメチルアミノプロピル)−３−エチルカルボジイミド塩酸塩であり、ＤＣＭはジクロロメタンであり、ＴＦＡはトリフルオロ酢酸であり、この略語は以下も同じである)：
【化１４】
2017534657.tif 000018
【００５１】
化合物１３をまず製造した。実施例１で製造した６０mg(０.１６mmol)のＧ２および１０６mg(１mmol)の炭酸ナトリウムを混合し、５mLの１,４−ジオキサンおよび水の混液(体積で４：１)に添加した。４４mg(０.２mmol)の(Ｂｏｃ)２Ｏを溶液に添加し、２４℃で撹拌して反応させた。ＴＬＣ試験を反応中行い、Ｇ２が完全に反応したか否かを確認した。反応完了後、２mLの水を希釈のために系に添加し、次いで酢酸エチルで２回、各回３０mLで抽出した。抽出により得られた有機相を５mLの水および５mLの飽和食塩水溶液で連続的に洗浄し、洗浄完了後無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、次いで減圧下濃縮乾固した。濃縮後、シリカゲルクロマトグラフィーを精製のために実施して、ジクロロメタン／アセトン／メタノール(１：１：０.０２)で溶出して、５１mgの化合物１３を得た。上記反応の収率は７６％であった。
【００５２】
５１mg(０.１１mmol)の製造した化合物、１３、９８mg(０.４２mmol)の３.５−ジニトロサリチル酸および６０mg(０.３１mmol)のＥＤＣＬを混合し、１５mLのジクロロメタンに添加した。２mgのＤＭＡＰをジクロロメタンに添加し、２４℃で２４時間撹拌して反応させた。薄層クロマトグラフィーＴＬＣ試験を反応中行い、化合物１３が完全に反応したか否かを確認した。
反応完了後、５０mLのジクロロメタンを反応後物質に添加し、次いで、１０mLの水および２０mLの飽和食塩水溶液を使用して連続的に洗浄した。洗浄完了後、無水硫酸ナトリウムを使用して乾燥させ、濃縮乾固した。５mLのトリフルオロ酢酸(ＴＦＡ)を濃縮物質に添加し、室温で１２時間撹拌し、次いで濃縮乾固した。濃縮後、シリカゲルクロマトグラフィーを精製のために実施し、ジクロロメタン／メタノール(２０：１)で溶出して、１８mgのＧ８を得た。化合物１３から化合物１４を製造する反応の収率は２８％であった。
【００５３】
３,５−ジニトロサリチル酸を他の酸に変えて、Ｒ３が
【化１５】
2017534657.tif 000019
を有する化合物を製造でき、ここでＸ３はベンゼン環、ヘテロ環式環または縮合ヘテロ環式環、ならびに１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシルまたはカルボキシルで独立して置換されている置換ベンゼン、置換ヘテロ環式環または置換縮合ヘテロ環式環であり、該ヘテロ環式環はイミダゾール、ピリジン、フラン、チオフェン、チアゾール、ピリミジン、ピペラジンおよびピペリジンを含み、該縮合ヘテロ環式環はキノリンおよびインドールを含み、Ｘ２はＣ１−Ｃ３−(ＣＨ２)ｎ−またはＣ０−Ｃ３−Ｏ−(ＣＨ２)ｎ−を有する化合物である。
【００５４】
(実施例８)
本実施例のシチジン誘導体は、５’−Ｏ−[２−(４−ニトロ−１Ｈ−イミダゾール)アセテート]−４−Ｎ−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)−２’−デオキシ−２’,２’−ジフルオロシチジン(構造式：１６、コード：Ｇ９)である。
反応式は下記のとおりである：
【化１６】
2017534657.tif 000020
【００５５】
化合物１５をまず製造した。６０mg(０.１６mmol)の実施例２で製造した化合物６(Ｇ３)および１０６mg(１mmol)の炭酸ナトリウムを混合し、５mLの１,４−ジオキサンおよび水の混液(体積で４：１)に添加した。４４mg(０.２mmol)の(Ｂｏｃ)２Ｏを溶液に添加し、２４℃で撹拌して反応させた。ＴＬＣ試験を反応中行い、Ｇ２が完全に反応したか否かを確認した。反応完了後、２mLの水を希釈のために系に添加し、次いで酢酸エチルで２回、各回３０mLで抽出した。抽出により得られた有機相を５mLの水および５mLの飽和食塩水溶液で連続的に洗浄し、洗浄完了後無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、次いで減圧下濃縮乾固した。濃縮後、シリカゲルクロマトグラフィーを精製のために実施し、ジクロロメタン／アセトン／エタノール(１：１：０.０２)で溶出して、４８mgの化合物１５を得た。上記反応の収率は６４％であった。
５１mg(０.１１mmol)の製造した化合物１５、９８mg(０.５７mmol)の２−(４−ニトロ−１Ｈ−イミダゾール)酢酸および６０mg(０.３１mmol)のＥＤＣＬを混合し、１５mLのジクロロメタンに添加した。２mgのＤＭＡＰをジクロロメタンに添加し、２４℃で２４時間撹拌して反応させた。ＴＬＣ試験を反応中行い、化合物１５が完全に反応したか否かを確認した。
反応完了後、５０mLのジクロロメタンを反応後物質に添加し、次いで、１０mLの水および２０mLの飽和食塩水溶液を使用して連続的に洗浄した。洗浄完了後、無水硫酸ナトリウムを使用して乾燥させ、濃縮乾固した。５mLのトリフルオロ酢酸(ＴＦＡ)を濃縮物質に添加し、室温で１２時間撹拌し、次いで濃縮乾固した。濃縮後、シリカゲルクロマトグラフィーを精製のために実施し、ジクロロメタン／メタノール(２０：１)で溶出して、１８mgのＧ９を得た。化合物１５から化合物１６を製造する反応の収率は３１％であった。
【００５６】
(実施例９)
本実施例のシチジン誘導体は、Ｇ１０としてコード化され、次の反応式(式中、ＤＣＣはＮ,Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミドである)を用いる。
【化１７】
2017534657.tif 000021
【００５７】
化合物２２をまず製造した。反応式は下記のとおりである(式中、ＤＭＦはＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミドである)。
【化１８】
2017534657.tif 000022
【００５８】
化合物２０、すなわち３,５,６−トリクロロ−２−ピリドール(５ｇ、２５.２mmol)、炭酸カリウム(７ｇ、５０.６mmol)およびＤＭＦ(３０ml)を反応フラスコに添加し、１５分撹拌した。０℃に冷却後、ブロモ酢酸エチル(２.７８ml、２５.２mmol)を滴下し、室温で４時間反応させた。水(１５ml)を添加し、ジクロロメタン(１５ml×３)で抽出した。回転蒸発を実施して溶媒を留去し、得られた化合物２１を次反応工程で直接使用した。
化合物２１(５.４ｇ、１８.８mmol)を５４mLの水に添加し、そこに、水酸化ナトリウム(０.８６４ｇ、２１.６mmol)を添加し、８０℃で４時間撹拌した。濃塩酸を滴下してｐＨを１に調節した。濾過後、３.３ｇ(７０％)の化合物２２を得た。
化合物１２、すなわち、５−Ｂｒ−４−Ｎ−(ベンジルオキシカルボニル)−２’−デオキシ−２’,２’−ジフルオロシチジン(２ｇ、４.２１mmol)および炭酸ナトリウム(３.３ｇ、３１.１mmol)を混合し、１,４−ジオキサンおよび水(体積で４：１、２００mL)の系に添加した。(Ｂｏｃ)２Ｏ(１.８ｇ、８.２５mmol、二炭酸ジ−ｔ−ブチル)を添加し、２５℃で４８時間撹拌した。反応中、ＴＬＣ試験を実施した。反応完了後、２０mLの水を希釈のために添加し、２×１００mLの酢酸エチルを２回の抽出に使用した。有機相を５０mLの水および５０mLの飽和塩溶液で洗浄した。無水硫酸ナトリウムを使用して乾燥させ、カラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン／アセトン／メタノール、１：１：０.０２)を実施して、化合物１７を６９０mg、２９％の収率で得た。
ESIMS: C22H24BrF2N3O8の計算値 m/z 576.07 (M+H)+, 実測値576.16
【００５９】
化合物１７(３５０mg、０.６１mmol)、化合物２２(１８６mg、０.７３mmol)およびＤＣＣ(２５０mg、１.２１mmol、ジシクロヘキシルカルボジイミド、Ｎ,Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド)を混合し、７mLのジクロロメタンに添加し、そこに、ＤＭＡＰ(１５mg、０.１２mmol、４−ジメチルアミノピリジン)を次いで添加した。反応物を、一夜、室温で撹拌した。ＴＬＣ試験を実施した。反応完了後、５mLの水を希釈のために添加した。２×２０mLのジクロロメタンを抽出に使用した。有機相を５０mLの水および５０mLの飽和塩溶液で洗浄した。無水硫酸ナトリウムを使用して乾燥させ、カラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン／メタノール、４５：１)を実施して、中間体１８(２６０mg、収率７０％)を得た。本中間体をＴＦＡ(トリフルオロ酢酸)のジクロロメタンで直接処理して、生成物Ｇ１０(１７５mg、収率７７％)を得た。
【００６０】
Ｇ１０のＮＭＲ特徴付け：
1H-NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 7.81 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.35 (m, 5H), 6.24 (m, 1H), 5.27 (s, 2H), 5.22 (s, 2H), 5.03 (m, 2H), 4.67 (m, 1H), 4.47 (m, 1H), 4.30 (s, 2H)
13C NMR (CDCl3, 100 MHz) δ 167.80, 162.56, 157.21, 155.57, 143.28, 140.91, 128.90, 128.78, 124.55, 123.44, 118.57,117.47, 72.61, 68.68, 64.94, 63.83, 63.37, 62.84
ESIMS: C24H18BrCl3F2N4O8の計算値 m/z 712.93 (M+H)+, 実測値712.99
【００６１】
(実施例１０)
本実施例のシチジン誘導体は、Ｇ１１とコード化された。
化合物２４をまず製造した。反応式は下記のとおりである：
【化１９】
2017534657.tif 000023
【００６２】
２’−デオキシ−２’,２’−ジフルオロシチジン(５ｇ、１６mmol)を酢酸(５６mL)に溶解し、３５℃で２時間撹拌し、トリクロロメタン(１７mL)を添加し、０℃で１５分撹拌した。クロロホルム／アセチルクロライド(２８ml／３３ml)を混合溶液に滴下し、５０℃で２４時間撹拌した。回転蒸発を実施して、溶媒を留去した。メタノール(３５ml)をさらに加えて回転蒸発を行い、次工程で直接使用するための生成物２３を得た。
単体ヨウ素(２.８ｇ、１１mmol)、ヨウ素酸(０.８３ｇ、４.７mmol)、酢酸(３７.５mL)、四塩化炭素(２５.５mL)、水(２５.５mL)および化合物２３を反応フラスコに入れ、４０℃で２４時間撹拌した。回転蒸発を実施して、溶媒を留去した。ジクロロメタンおよび水を添加した。ｐＨを６〜７に調節し、有機相をチオ硫酸ナトリウムおよび水で洗浄した。有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。回転蒸発を実施して、濾過後に溶媒を留去した。得られた５ｇ生成物の化合物２４は使用に適した(２工程収率は５５％であった)。
ESIMS: C13H14F2N3O6の計算値 m/z 473.99 (M+H)+, 実測値474.14
【００６３】
化合物Ｇ１１の製造のための反応式は次のとおりである。
【化２０】
2017534657.tif 000024
【００６４】
化合物２４(２.５ｇ、５.３mmol)およびピリジン(１.２４ｇ、１５.８mmol)をジクロロメタン(３５mL)に溶解し、ここで、クロロギ酸ブチル(２.１５ｇ、１５.８mmol)を０℃で滴下し、１０℃で一夜反応させた。回転蒸発を実施して、溶媒を留去した。カラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン：メタノール＝６０：１)を実施して、１.９ｇ(収率６３％)の化合物２５を得た。
ESIMS: C18H22F2N3O8の計算値 m/z 574.04 (M+H)+, 実測値574.14
【００６５】
化合物２５(２.５ｇ、４.３mmol)をメタノール(４０mL)に溶解し、５分撹拌し、ここで、炭酸カリウム(２.１ｇ、１５.２mmol)を添加し、室温で一夜撹拌した。回転蒸発を実施して、濾過後に溶媒を留去し、１.５ｇ(収率７０.４％)の化合物２６を得た。
ESIMS: C14H18F2N3O6の計算値 m/z 490.02 (M+H)+, 実測値490.07
【００６６】
化合物２６(３.９ｇ、８mmol)および炭酸ナトリウム(４.２４ｇ、４０mmol)を１,４−ジオキサン(２２.５mL)と水(４.５mL)の混合物に溶解し、１０分撹拌し、ここで、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(２.１ｇ、９.６mmol)を添加し、室温で少なくとも２４時間反応させた。回転蒸発を実施して、溶媒を留去した。ジクロロメタン(７０mL)および水(１００mL)を添加し、ジクロロメタン(７０mL×３)を抽出に使用した。回転蒸発を実施して、有機相を留去した。カラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン：メタノール＝８０：１)を実施して、２.８ｇ(収率６０％)の化合物２７を得た。
ESIMS: C19H26F2IN3O8の計算値 m/z 590.07 (M+H)+, 実測値590.02
【００６７】
化合物２７(５０mg、０.６１mmol)、化合物２２(３２.４mg、０.１３mmol)およびＤＣＣ(３５mg、０.１７mmol)を混合し、２mLのジクロロメタンに添加し、ここで、ＤＭＡＰ(２mg、０.０１６mmol)を次いで添加した。反応物を、一夜、室温で撹拌した。ＴＬＣ試験を実施した。反応完了後、５mLの水を希釈のために添加した。２×２０mLのジクロロメタンを２回の抽出に使用した。有機相を５mLの水および５mLの飽和塩溶液で洗浄した。無水硫酸ナトリウムを使用して乾燥させ、カラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン／メタノール、１５０：１)を実施して、中間体(５０mg、収率７１％)を得た。本中間体をＴＦＡのジクロロメタン溶液で直接処理して、Ｇ１１(３５mg、収率８０％)を得た。
【００６８】
Ｇ１１の特徴付けは次のとおりである。
ESIMS: C21H20Cl3F2IN4O8の計算値 m/z 726.94 (M+H)+, 実測値727.12
1H-NMR (MeOD-d4, 400 MHz) δ 8.06 (s, 1H), 5.49 (s, 1H), 5.07 (m, 3H), 4.51 (s, 1H), 4.48 (m, 1H), 4.21 (s, 5H), 1.69 (m, 3H), 1.44 (m, 3H), 0.97 (m, 3H)
13C-NMR (MeOD-d4, 100 MHz) δ 168.06, 141.08, 140.91, 122.67, 81.73, 66.15, 63.85, 63.54, 59.38, 58.64, 33.27, 30.68, 19.73, 18.89, 15.75, 12.84, 8.78
【００６９】
(実施例１１)
本実施例のシチジン誘導体は、Ｇ１２とコード化され、その反応式は次のとおりである。
【化２１】
2017534657.tif 000025
【００７０】
化合物２７(３００mg、０.５１mmol)、２−(４−ニトロ−１Ｈ−イミダゾール)酢酸(１０５mg、０.６１mmol)およびＤＣＣ(２１０mg、１.０２mmol)を混合し、１０mLのジクロロメタンに添加し、次いでＤＭＡＰ(９mg、０.０７３mmol)を添加した。反応物を、一夜、室温で撹拌した。ＴＬＣ試験を実施した。反応完了後、２０mLの水を希釈のために添加した。３×３０mLのジクロロメタンを３回の抽出に使用した。有機相を２０mLの水および２０mLの飽和塩溶液で洗浄した。無水硫酸ナトリウムを使用して乾燥させ、カラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン／メタノール、６６：１)を実施して、２００mgの中間体(５３％)を得た。本中間体をＴＦＡのジクロロメタン溶液で直接処理して、７０mgのＧ１２(４０％)を得た。
【００７１】
(実施例１２)
本実施例のシチジン誘導体は、Ｇ１３とコード化される。
化合物３５をまず製造した。
【化２２】
2017534657.tif 000026
【００７２】
化合物２４(５ｇ、０.０１mol)、(Ｐｈ３)ＰｄＣｌ２(１.５ｇ、２.１４mmol)およびＣｕＩ(１.０ｇ、５.２７mmol)を、予め乾燥させた反応フラスコに添加し、ここで、乾燥ＴＨＦ(１００ml)、Ｍｅ３ＳｉＣ≡ＣＨ(５.２ｇ、０.０５３mol)およびＴＥＡ(１５ml)を窒素保護下に添加し、室温で一夜反応させた。反応完了後、溶媒を、減圧下の蒸留により除去した。シリカゲルクロマトグラフィー(酢酸エチル／石油エーテル：１：１)を精製のために実施して、２.６７ｇ(収率５７％)の化合物３０を得た。
化合物３０(１０ｇ、１.１mmol)をＭｅＯＨ(２００ml)に添加し、完全に溶解するまで撹拌し、０℃で１５分冷却した。Ｋ２ＣＯ３(１０.９２ｇ、３.９５mmol)を添加し、０℃で２時間撹拌した。反応完了後、炭酸カリウムをまず濾過により除去し、溶媒を、減圧下の蒸留により除去した。シリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン／メタノール：１０：１)を精製のために実施して、５.４６ｇ(収率８４.２７％)の化合物３１を得た。
化合物６１(５.４６ｇ、０.０１９mol)、ＣｕＳＯ４.５Ｈ２Ｏ(４７５mg、１.９mmol)およびＶｃ.Ｎａ(１.１３ｇ、５.７mmol)を、ＴＨＦ(５５mL)と水(４９ml)の混合物に添加し、窒素保護下室温で１０分撹拌した。
【化２３】
2017534657.tif 000027
を添加し、次いで窒素保護下室温で３６時間撹拌した。反応完了後、溶媒を、減圧下の蒸留により除去した。シリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン／メタノール：１５：１)を精製のために実施して、４.８８ｇ(収率６１.０％)の化合物３２を得た。
化合物３２：ESIMS: C18H18F2N6O4の計算値 m/z 421.18 (M+H)+, 実測値421.36
【００７３】
【化２４】
2017534657.tif 000028
上記反応式において、ＨＭＤＳはヘキサメチルジシラザンである。
【００７４】
化合物３２(２.０ｇ、４.７６mmol)、ＨＭＤＳ(２０mL)および(ＮＨ４)２ＳＯ４(５０.３mg、０.３８mmol)を１,４−ジオキサン(２０mL)に添加し、還流下、８０℃で４時間撹拌した。反応完了後、溶媒を、減圧下の蒸留により除去した。溶媒をトルエン(５ml×２)との回転蒸発により溶媒を留去し、次いでオイルポンプで吸い出した。ジクロロメタン(４０ml)およびピリジン(１.１３ｇ、１４.３mmol)を添加し、混合物を０℃に冷却し、ここで、ニトロベンゾエート(３.０８ｇ、１４.３mmol)をゆっくり添加し、１０℃で一夜撹拌した。反応完了後、溶媒を、減圧下の蒸留により除去した。メタノール(４０mL)を添加し、０℃で１５分冷却した。次いでトリエチルアミン(６.７ml)を滴下し、１０℃で一夜撹拌した。反応完了後、溶媒を、減圧下の蒸留により除去した。シリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン／メタノール：４０：１)を精製のために実施して、７８０mg(３工程収率２７.３％)の化合物３３を得た。
化合物３３：ESIMS: C26H23F2N7O8の計算値 m/z 600.22 (M+H)+, 実測値600.25
【００７５】
【化２５】
2017534657.tif 000029
【００７６】
化合物３３(７８０mg、１.３mmol)およびＮａ２ＣＯ３(６９０mg、６.５mmol)を１,４−ジオキサン(２０ml)と水(５ml)の混合物に添加し、溶解のために撹拌した。(Ｂｏｃ)２Ｏ(３４０.６mg、１.５６mmol)を室温で添加し、一夜、室温で撹拌した。反応完了後、溶媒を、減圧下の蒸留により除去した。シリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン／メタノール：８０：１)を精製のために実施して、３６６mg(収率４０.２％)の化合物３４を得た。
化合物３４：ESIMS: C31H31F2N7O10の計算値 m/z 700.28 (M+H)+, 実測値700.08
【００７７】
【化２６】
2017534657.tif 000030
【００７８】
化合物３４(２５０mg、０.３６mmol)、化合物２２(１０９mg、０.４３mmol)、ＤＣＣ(１４８mg、０.７２mmol)およびＤＭＡＰ(５mg)を１２mLのジクロロメタンに添加し、一夜、室温で撹拌した。反応完了後、ＤＣＣを吸引濾過により除去した。シリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン／メタノール：１００：１)を精製のために実施して、２１０mg(収率６０.０％)の化合物３５を得た。
化合物３５：ESIMS: C38H33Cl3F2N8O12の計算値 m/z 937.28 (M+H)+, 実測値937.28
【００７９】
化合物３５(２１０mg、０.２２４mmol)を、ＤＣＭ／ＴＦＡ＝５：１の１０ml系に添加し、室温で４時間撹拌した。反応完了後、溶媒を、減圧下の蒸留により除去した。シリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン／メタノール：６０：１)を精製のために実施して、１４０mg(収率７５.０％)のＧ１３を得た。
ESIMS: C33H25Cl3F2N8O10の計算値 m/z 837.17 (M+H)+, 実測値837.27
1H-NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8.34 (s, 1H), 8.23 (m, 3H), 7.57 (m, 3H), 7.33 (m, 3H), 7.23 (m, 2H), 6.38 (m, 1H), 5.49 (m, 3H), 5.30 (s, 3H), 5.13 (m, 2H), 4.73 (m, 1H), 4.33 (m, 3H)
【００８０】
【化２７】
2017534657.tif 000031
【００８１】
【化２８】
2017534657.tif 000032
を、市販されているかまたは容易に製造される三窒化物化合物に置き換えて、Ｒ２が
【化２９】
2017534657.tif 000033
である化合物を得ることができ、ここで、Ｘ１はＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ１−Ｃ１０置換アルキル、Ｃ１−Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１０置換アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキルスルホニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオール、−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈまたは置換−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈであり、ここで、置換アルキルおよび置換アルコキシの炭素鎖は１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシルまたはカルボキシルで独立して置換されており、−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈおよび置換−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈにおいて、ｎ＝０、１、２、３〜１０であり、置換−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈの炭素鎖またはベンゼン環は１個もしくは２個もしくは３個のＨ、ハロゲン、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシルまたはカルボキシルで置換されている。
【００８２】
(実施例１３)
本実施例のシチジン誘導体は、Ｇ１４とコード化された。
化合物３９をまず製造した。
【化３０】
2017534657.tif 000034
【００８３】
化合物３２(１.５ｇ、３.５７mmol)、ＨＭＤＳ(１５mL)および(ＮＨ４)２ＳＯ４(３７.７mｇ、０.２８５mmol)を１,４−ジオキサン(１５mL)に添加し、還流下、８０℃で４時間撹拌した。反応完了後、減圧下の蒸留により溶媒を除去した。溶媒をトルエン(５ml×２)との回転蒸発により留去し、次いで真空ポンプで吸い出した。ジクロロメタン(３０mL)およびピリジン(０.８４６ｇ、０.０１mmol)を添加し、混合物を０℃に冷却し、ここで、クロロギ酸ベンジル(１.８３ｇ、０.０１mmol)をゆっくり添加し、１０℃で一夜撹拌した。反応完了後、減圧下の蒸留により溶媒を除去した。４０mLのメタノールを添加し、０℃に１５分冷却した。次いで６mLのトリエチルアミンを滴下し、１０℃で一夜撹拌した。反応完了後、溶媒を減圧蒸留により除去した。シリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン／メタノール：４０：１)を精製のために実施して、５７０mg(収率２８.８％)の化合物３７を得た。
ESIMS: C25H24F2N6O6の計算値 m/z 555.24 (M+H)+, 実測値555.04
【００８４】
化合物３７(５２０mg、０.９３９mmol)およびＮａ２ＣＯ３(４９７.５mg、４.６９mmol)を１２mLの１,４−ジオキサンと３mlの水の混合物に添加し、撹拌して溶解させた。(Ｂｏｃ)２Ｏ(２４５.５mg、１.１２６mmol)を室温で添加し、一夜、室温で撹拌した。反応完了後、溶媒を減圧蒸留により除去した。シリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン／メタノール：８０：１)を精製のために実施して、２７８mg(収率４５.３％)の化合物３８を得た。
ESIMS: C31H32F2N6O8の計算値 m/z 655.28 (M+H)+, 実測値655.08
【００８５】
【化３１】
2017534657.tif 000035
【００８６】
化合物３８(２００mg、０.３mmol)、化合物２２(９３.６mg、０.３６７mmol)、ＤＣＣ(１２６mg、０.６１２mmol)およびＤＭＡＰ(１０mg)を１０mLのジクロロメタンに添加し、一夜、室温で撹拌した。反応完了後、ＤＣＣを吸引濾過により除去した。シリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン／メタノール：１２５：１)を精製のために実施して、１７０mg(収率６２.５％)の化合物３９を得た。
ESIMS: C38H34Cl3F2N7O10の計算値 m/z 914.14(M+Na)+, 実測値914.36
【００８７】
【化３２】
2017534657.tif 000036
【００８８】
化合物３９(１４０mL、０.１５７mmol)を、ＤＣＭ／ＴＦＡ＝５：１の１０ml系に添加し、室温で４時間撹拌した。反応完了後、溶媒を減圧蒸留により除去した。シリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン／メタノール：５０：１)を精製のために実施して、９５mg(収率７６.４３％)のＧ１４を得た。
ESIMS: C33H26Cl3F2N7O8の計算値 m/z 814.26 (M+Na)+, 実測値814.61
1H-NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8.50 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.33 (m, 9H), 7.23 (m, 2H), 6.38 (m, 1H), 5.49 (m, 2H), 5.30 (s, 4H), 5.13 (m, 1H), 4.80 (m, 1H), 4.50 (m, 2H), 4.30 (m, 1H)
13C-NMR (CDCl3, 100 MHz) δ 168.61, 157.65, 155.68, 146.20, 143.22, 140.59, 128.87, 128.02, 123.07, 117.24, 68.19, 64.11, 54.40, 12.69
【００８９】
【化３３】
2017534657.tif 000037
【００９０】
【化３４】
2017534657.tif 000038
を、市販されているかまたは容易に製造される三窒化物化合物に置き換えて、Ｒ２が
【化３５】
2017534657.tif 000039
である化合物を得ることができ、ここで、Ｘ１はＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ１−Ｃ１０置換アルキル、Ｃ１−Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１０置換アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキルスルホニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオール、−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈまたは置換−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈであり、置換アルキルおよび置換アルコキシの炭素鎖は１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシルまたはカルボキシルで独立して置換されており、−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈおよび置換−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈにおいて、ｎ＝０、１、２、３〜１０であり、置換−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈの炭素鎖またはベンゼン環は、１個もしくは２個もしくは３個のＨ、ハロゲン、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシルまたはカルボキシルで置換されている。
【００９１】
(実施例１４)
本実施例のシチジン誘導体は、Ｇ１５としてコード化される。
化合物４３をまず製造した。
【化３６】
2017534657.tif 000040
【００９２】
化合物３２(１.３ｇ、３.０mmol)、ＨＭＤＳ(１３mL)および(ＮＨ４)２ＳＯ４(３２.７mm、０.２４７mmol)を１,４−ジオキサン(１３mL)に添加し、還流下、８０℃で４時間撹拌した。反応完了後、溶媒を減圧蒸留により除去した。溶媒をトルエン(５ml×２)との回転蒸発により乾燥させ、次いでオイルポンプで吸い出した。ジクロロメタン(２６mL)およびピリジン(０.７３３ｇ、９.３mmol)を添加し、混合物を０℃に冷却し、ここで、クロロギ酸ブチル(１.２６８ｇ、９.３mmol)をゆっくり添加し、１０℃で一夜撹拌した。反応完了後、溶媒を減圧蒸留により除去した。メタノール(３０mL)を添加し、０℃で１５分冷却し、次いでトリエチルアミン(４.５mL)を滴下し、１０℃で一夜撹拌した。反応完了後、溶媒を減圧蒸留により除去した。シリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン／メタノール：４０：１)を精製のために実施して、８５０mg(収率５２.８％)の化合物４１を得た。
化合物４１(８００mg、１.５３８mmol)およびＮａ２ＣＯ３(８１５mg、７.６９mmol)を、２５mLの１,４−ジオキサンおよび６mLの水の混合物に添加し、溶解のために撹拌した。(Ｂｏｃ)２Ｏ(４０３mg、１.８５mmol)を室温で添加し、一夜、室温で撹拌した。反応完了後、溶媒を減圧蒸留により除去した。シリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン／メタノール：８０：１)を精製のために実施して、４５８mg(収率４８.１％)の化合物４２を得た。
ESIMS: C28H34F2N6O8の計算値 m/z 637.76 (M+NH4)+, 実測値637.46
【００９３】
【化３７】
2017534657.tif 000041
【００９４】
化合物４２(３８０mg、０.６１３mmol)、化合物２２(１８７.５mg、０.７３６mmol)、ＤＣＣ(２５２.５mg、１.２２６mmol)およびＤＭＡＰ(２０mg)を２０mLのジクロロメタンに添加し、一夜、室温で撹拌した。反応完了後、ＤＣＣを吸引濾過により除去した。シリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン／メタノール：１２５：１)を精製のために実施して、３３３mg(収率６３.５％)の化合物４３を得た。
ESIMS: C35H36Cl3F2N7O10の計算値 m/z 858.18 (M+H)+, 実測値858.28
【００９５】
【化３８】
2017534657.tif 000042
【００９６】
化合物４３(３１０mg、０.３６２mmol)を、ＤＣＭ／ＴＦＡ＝５：１の１２ml系に添加し、室温で４時間撹拌した。反応完了後、溶媒を減圧蒸留により除去した。シリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン／メタノール：５０：１)を精製のために実施して、２３５mg(収率８５.８％)のＧ１５を得た。
ESIMS: C30H28Cl3F2N7O8の計算値 m/z 758.18 (M+H)+, 実測値758.18
1H-NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8.43 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.11 (m, 1H), 7.70 (m, 1H), 7.63 (m, 1H), 7.34 (m, 4H), 6.34 (m, 1H), 5.53 (m, 3H), 5.21 (m, 2H), 4.76 (m, 1H), 4.54 (m, 1H), 4.46 (m, 1H), 4.43 (m, 1H), 4.20 (m, 2H), 1.70 (m, 2H), 1.41 (m, 2H), 0.95 (m, 3H)
【００９７】
【化３９】
2017534657.tif 000043
を、市販されているかまたは容易に製造される三窒化物化合物に置き換えて、Ｒ２が
【化４０】
2017534657.tif 000044
である化合物を得ることができ、ここで、Ｘ１はＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ１−Ｃ１０置換アルキル、Ｃ１−Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１０置換アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキルスルホニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオール、−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈまたは置換−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈであり、置換アルキルおよび置換アルコキシの炭素鎖は１個もしくは２個もしくは３個のハロゲン、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシルまたはカルボキシルで独立して置換されており、−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈおよび置換−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈにおいて、ｎ＝０、１、２、３〜１０であり、置換−(ＣＨ２)ｎ−Ｐｈの炭素鎖またはベンゼン環は、１個もしくは２個もしくは３個のＨ、ハロゲン、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシルまたはカルボキシルで置換されている。
【００９８】
(実施例１５)
本実施例のシチジン誘導体は、Ｇ１６としてコード化される。
【化４１】
2017534657.tif 000045
【００９９】
化合物１１(２ｇ、４.５２mmol)および炭酸ナトリウム(３.４ｇ)を１３３mLの１,４−ジオキサンと３４mLの水の混合物に溶解し、１０分撹拌した。(Ｂｏｃ)２Ｏ(１.４７ｇ、６.７８mmol)を添加し、室温で少なくとも４８時間反応させた。回転蒸発を実施して、溶媒を留去した。ジクロロメタン(７０mL)および水(１００mL)を添加し、ジクロロメタン(７０mL×３)を抽出に使用した。回転蒸発を実施して、有機相を留去した。カラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン：メタノール＝８０：１)を実施して、１.２ｇ(４８.９％)の化合物４５を得た。
ESIMS: C19H26BrF2N3O8の計算値 m/z 542.09 (M+H)+, 実測値542.11
【０１００】
【化４２】
2017534657.tif 000046
【０１０１】
Ｂｏｃ保護下の化合物４５(３５５mg、０.６５mmol)、化合物２２(４９９mg、１.９５mmol)およびＤＣＣ(４０１mg、１.９５mmol)を混合し、４５mLのジクロロメタンに添加し、ここで、ＤＭＡＰ(２mg、０.０１６mmol)を次いで添加した。反応物を、一夜、室温で撹拌した。ＴＬＣ試験を実施した。反応完了後、５mLの水を希釈のために添加した。２×２０mLのジクロロメタンを抽出に使用した。有機相を５mLの水および５mLの飽和塩溶液で洗浄した。無水硫酸ナトリウムを使用して乾燥させ、次いでＴＦＡを使用して、直接目的化合物Ｇ１６(１１０mg、２工程収率２４％)を得た。
【０１０２】
1H-NMR (MeOD-d4, 400 MHz) δ: 8.05(s, 2H, Ar), 6.22(t, 1H, J = 7.6 Hz, H1'), 5.15(m, 2H), 4.67(m, 1H, H5a'), 4.48(m, 4H, H5b', H4', O-CH2-CH3), 1.70(m, 2H, -O-CH2-CH2-CH2-CH3), 1.28(m, 2H, -O-CH2-CH2-CH2-CH3), 0.97(m, 2H, -O-CH2-CH2-CH2-CH3)
13C-NMR (MeOD-d4, 100 MHz) δ: 168.12, 155.98, 142.88, 141.03, 124.15, 122.75, 117.32, 82.73, 78.37, 77.97, 63.76, 63.55, 62.67, 41.82, 31.04, 30.63, 29.98, 18.88, 18.84, 12.81, 8.29
ESIMS: C21H20BrCl3F2N4O8の計算値 m/z 681.94 (M+2H)+, 実測値681.15
【０１０３】
(実施例１６)
本実施例のシチジン誘導体は、Ｇ１７とコード化される。
【化４３】
2017534657.tif 000047
【０１０４】
化合物１０(９１１mg、１.７５mmol)を５０mLのジメチルホルムアミドに溶解し、ここで、ジブロモヒダントイン(５００mg、１.７５mmol)を添加して薄黄色溶液を得て、室温で１時間撹拌した。ＬＣＭＳ試験を、反応が完了したことを確認できるまで実施した。溶媒を除去するために減圧下回転蒸発を実施し、カラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン／メタノール：２０：１)を実施して、化合物４７(４８３mg、総収率５２.９％、白色固体)を得た。
1H-NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8.40 (s, 1H, Ar), 8.23 (d, J = 4 Hz, 2H, Ar), 7.60 (d, J = 4 Hz, 2H, Ar), 6.15 (m, 1H, H1'), 5.30 (s, 2H, Ar-CH2), 4.50 (m, 1H, H5a'), 4.48 (m, 4H, H5b', H4', O-CH2-CH3)
【０１０５】
化合物４７(２.３３ｇ、５.７２mmol)および炭酸ナトリウム(４.１２ｇ)を１３３mLの１,４−ジオキサンと３４mLの水の混合物に溶解し、１０分撹拌し、ここで、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(１.７２ｇ、７.９mmol)を添加し、室温で少なくとも４８時間反応させた。回転蒸発を実施して、溶媒を留去した。ジクロロメタン(７０mL)および水(１００mL)を添加し、ジクロロメタン(７０mL×３)を抽出に使用した。回転蒸発を実施して、有機相を留去した。カラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン：メタノール＝８０：１)を実施して、１.４ｇ(４９％)の化合物４８を得た。
【０１０６】
【化４４】
2017534657.tif 000048
【０１０７】
Ｂｏｃ保護されている化合物４８(５４０mg、０.８６９mmol)、化合物２２(６６７mg、２.６０mmol)およびＤＣＣ(５３７mg、２.６０mmol)を混合し、４５mLのジクロロメタンに添加し、次いで、ＤＭＡＰ(２mg、０.０１６mmol)を添加した。反応物を、一夜、室温で撹拌した。ＴＬＣ試験を実施した。反応完了後、５mLの水を希釈のために添加した。２×２０mLのジクロロメタンを抽出に使用した。有機相を５mLの水および５mLの飽和塩溶液で洗浄した。無水硫酸ナトリウムを使用して乾燥させ、次いでＴＦＡを使用して、直接目的化合物Ｇ１７(１１５mg、２工程収率１７％)を得た。
【０１０８】
1H-NMR (MeOD-d4, 400 MHz) δ:.05 (s, 2H, Ar), 6.22 (t, 1H, J = 7.6 Hz, H1'), 5.15 (m, 2H), 4.67 (m, 1H, H5a'), 4.48 (m, 4H, H5b', H4', O-CH2-CH3), 1.70 (m, 2H, -O-CH2-CH2-CH2-CH3), 1.28 (m, 2H, -O-CH2-CH2-CH2-CH3), 0.97 (m, 2H, -O-CH2-CH2-CH2-CH3)
13C-NMR (MeOD-d4, 100 MHz) δ: 67.81, 157.47, 155.55, 142.93, 141.00, 128.98, 128.42, 123.99, 117.54, 79.92, 76.89, 76.55, 66.69, 65.80, 63.78, 62.54
ESIMS: C24H17BrCl3F2N5O10の計算値 m/z 760.92 (M+2H)+, 実測値760.10
【０１０９】
(実施例１７  シチジン誘導体の塩酸塩)
本実施例は、実施例１の化合物、すなわち４−Ｎ−(ｎ−ブトキシカルボニル)−２’−デオキシ−２’,２’−ジフルオロシチジンの塩酸塩の製造を含む。
０.５０ｇの４−Ｎ−(ｎ−ブトキシカルボニル)−２’−デオキシ−２’,２’−ジフルオロシチジンを６０mLの酢酸エチルに溶解し、氷浴下乾燥塩酸ガスで処理した。１５分撹拌後、溶媒を除去して、白色固体生成物を得た。
他のシチジン誘導体の塩酸塩の製造は、上記と同様であった。
上記塩酸塩に加えて、シチジン誘導体のリン酸塩、硫酸塩、炭酸塩、硝酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩、スルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、メシル酸塩、安息香酸塩またはフマル酸塩も製造できる。
【０１１０】
(実施例１８  シチジン誘導体の凍結乾燥粉末注射剤)
本実施例は、実施例１３の化合物Ｇ１４の凍結乾燥粉末注射剤の製造を含む。
Ｇ１４の凍結乾燥粉末注射剤は、３０ｇの化合物Ｇ１４、３００ｇのマンニトール(２０％ｗ／ｖ)、７ｇの緩衝剤リン酸二水素ナトリウム二水和物および４.０ｇの界面活性剤ポロキサマー１８８(Ｆ６８)を含む。
上記処方により正確に秤量したリン酸二水素ナトリウム二水和物、ポロキサマー１８８(Ｆ６８)(CAS No. 9003-11-6)およびマンニトール(２０％ｗ／ｖ)を、３００ｇの予め１０℃未満に冷却した注射用水に添加し、溶液のｐＨ値を、０.１mol／ＬのＮａＯＨを使用して７.３〜７.５に調節した。次いで処方量のＧ１４を上記溶液に添加し、よく混合し、ｐＨ値を０.１mol／Ｌ  ＮａＯＨ溶液または０.１mol／Ｌ  ＨＣｌを使用して７.３±０.２に調節した(本実施例では７.５を使用した)。得られた溶液を２０００ｇになるまで水に添加し、０.２２μm微孔膜をとおして濾過滅菌した。濾液を、１バイアルあたり２.０ｇで分配した。バイアルを半栓状態で塞ぎ、次いで凍結乾燥機で乾固するまで凍結乾燥させた。乾燥が完了した後、バイアルを減圧下に完全密栓し、ラベルを付し、包装して、凍結乾燥粉末注射剤１０００バイアルを製造した。その後、２〜８℃で保存した。
上記凍結乾燥粉末注射剤、すなわち、滅菌粉末注射剤の他、本発明のシチジン誘導体は、溶液タイプ注射剤、懸濁液タイプ注射剤およびエマルジョンタイプ注射剤のような注射用の他の形態に製剤できる。
【０１１１】
(実施例１９  シチジン誘導体の経口医薬組成物)
本実施例のシチジン誘導体の医薬組成物は、活性成分および補助薬を含み、ここで、薬学的活性成分は、上記実施例において製造したシチジン誘導体または対応する塩酸塩である。組成物中の薬学的活性成分の重量は１％〜９５％を占める(本実施例では３０％)。補助薬は、水、ラクトース、トウモロコシデンプン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース(ＨＰＭＣ)およびステアリン酸マグネシウムからなった。本実施例の医薬組成物の投与形態は錠剤である。
医薬組成物の適用可能な投与形態として、上記錠剤に加えて、薬学的活性成分を経口散剤、顆粒剤、カプセル剤、ペレット剤、溶液剤、懸濁液剤、エマルジョン剤、シロップ剤またはエリキシル剤または持続放出および制御放出製剤または一般的な対応する補助薬(その効果により、添加剤および付加物などとして分類される)を含む他の経口医薬組成物に製剤できる。例えば、添加剤は医薬グレードマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリン塩、セルロースまたは硫酸マグネシウムを含む。
【０１１２】
上記経口投与形態の実現に際し、医薬添加物は、不活性固体希釈剤、水性溶媒、リポソーム、マイクロスフェアまたは／および非毒性有機溶媒などのような、当技術分野において既に知られるものを含む、薬学的活性成分のための担体として選択され得る。好ましい添加物は、湿潤剤、乳化剤、ｐＨ緩衝液、ヒト血清アルブミン、抗酸化剤、防腐剤、静菌剤、グルコース、スクロース、トレハロース、マルトース、レシチン、グリシン、ソルビン酸、プロピレングリコール、ポリエチレン、プロタミン、ホウ酸、塩化ナトリウムまたは塩化カリウム、鉱油、植物油などを含み、その１以上の組み合わせを担体として選択し得る。
本発明の医薬組成物は、新生物血液学的障害または悪性固形腫瘍を標的とし、特に、標的腫瘍は肺癌、前立腺癌、乳癌、結腸癌、胃癌、膵臓癌、肝臓癌、食道癌、脳腫瘍、卵巣癌、子宮癌、腎臓癌、頭頸部癌、皮膚癌、膀胱癌、外陰癌、精巣癌、直腸癌、絨毛癌、胚細胞腫瘍、悪性リンパ腫、白血病および多発性骨髄腫を含み、さらに好ましい標的腫瘍は膵臓癌(一次および二次処置)、非小細胞性肺癌、乳癌、卵巣癌および頭頚部の扁平上皮細胞癌および結腸癌を含み得るが、本発明はこれらに限定されない。
【０１１３】
(適用の実施例１、ＩＣＲマウスにおける一連の化合物の単回腹腔内投与のＭＴＤ試験)
本実験は、ＩＣＲマウスにおける単回腹腔内投与の毒性効果を試験し、各対象の最大耐量(ＭＴＤ)を決定するためであった。最大耐量(ＭＴＤ)は、動物を死亡させない、動物に１０％(０日目と比較して)を超える体重減少を起こさせないまたは顕著な副作用を生じさせない用量をいう。
【０１１４】
１. 試験物質の構成
試験物質の溶解に使用する溶媒の入手源は次のとおりである。
【表３】
2017534657.tif 000049
対応する量の試験物質を５mLガラス管にとり、撹拌用５mmマグネチックスターラーを用いて、エタノールに溶解させた。完全に溶解した後、クレモフォールＥＬを、撹拌を続けながら添加した。記載した量の食塩水を添加し、使用前に均一に撹拌した。エタノール、クレモフォールＥＬおよび生理食塩水の体積比は５：５：９０であった。
【０１１５】
２. 試験動物
種類および系統：ＩＣＲマウス；グレード：ＳＰＦ；性別：雌
入手源：Shanghai Slac Laboratory Animal Co., Ltd.
認可番号：０１３０７４９
試験開始時の動物体重：１８〜２０ｇ
量および性別：４１匹、雌
飼育様式：ケージあたり６匹
順応期間：５〜７日、飼育条件は試験期間と同一
動物室の環境温度は１８〜２６℃であり、相対湿度は３０〜７０％であり、点灯は１２時間であった。試験動物は、順応期間として、試験前５〜７日を与えた。ＳＰＦラットおよびマウスの育成および繁殖用動物餌は、Ｃｏ６０で滅菌したものを、Beijing Ke Ao Xie Li Co., Ltd.から購入した。滅菌濾過水を試験動物に使用した。実験期間中、動物は水および餌を自由に摂取できた。
【０１１６】
３. 試験法
投与方法：ｉｐ。動物が死亡した場合、動物が生存するまで用量を減少させた；動物が死亡しない場合、用量を増加させた；動物がある高用量で正常に生存したとき、試験を終了した。最後に、試験物質に対するマウスのＭＴＤを、試験結果から決定した。動物を、急性投与後７日観察を継続した。
実験中、全動物は、投与後１日２回(１０：００ａｍ、１６：００ｐｍ)の詳細かつ継続的状態観察下に、１４日間置かれた。観察は、皮膚、毛、耳、鼻、口腔、胸部、腹部、外生殖器、肢および足、呼吸器および循環器系、自律神経性作用(例えば唾液分泌)、神経系(例えば振戦、痙攣、ストレス応答および異常行動)を含むが、これらに限定されなかった。
投与前に動物の体重を測り、その後、各日の同じ時間に計量し、記録した。
１週間投与後の観察結果、動物体重および動物生存を、毎日詳細に記録した。
【０１１７】
４. 試験結果
Ｇ３およびＧ４は３５０mg／kgで耐容性であり、Ｇ５は３００mg／kgで耐容性であり、Ｇ６は２００mg／kgで耐容性であり、Ｇ７は２００mg／kgで耐容性であり、Ｇ８は３００mg／kgで耐容性であり、Ｇ１０は４００mg／kgで耐容性であり、Ｇ１１は４００mg／kgで耐容性であり、Ｇ１２は４００mg／kgで耐容性であり、Ｇ１３は４００mg／kgで耐容性であり、Ｇ１５は４００mg／kg、Ｇ１６は４００mg／kgで耐容性であった。
【０１１８】
(処置実施例２：腫瘍増殖阻害に対する一連の化合物の効果)
接種部位での腫瘍形成および増殖および試験動物の体重変化を観察することにより、本処置実施例は、ＨＣＴ−１１６結腸腫瘍担持ヌードマウスへの化合物Ｇ２〜Ｇ１７の１回腹腔内注射の、ＨＣＴ−１１６結腸癌異種移植の腫瘍増殖阻害および毒性を評価した。
【０１１９】
１. 試験目的
結腸癌ＨＣＴ−１１６担持ヌードマウスの移植腫瘍に対する本発明のシチジン誘導体サンプルの増殖阻害効果および毒性を決定するため。
【０１２０】
２. 試験物質の調製
試験物質の溶解に使用した溶媒の入手源は次のとおりである。
【表４】
2017534657.tif 000050
対応する量の試験物質を５mLガラス管にとり、撹拌用５mmマグネチックスターラーを用いて、エタノールに溶解した。完全に溶解した後、クレモフォールＥＬを、撹拌を続けながら添加した。記載した量の食塩水を添加し、使用前に均一に撹拌した。エタノール、クレモフォールＥＬおよび生理食塩水の体積比は５：５：９０であった。
【０１２１】
３. 試験動物
種類および系統：Ｂａｌｂ／ｃヌードマウス；レベル：ＳＰＦ；性別：雌
入手源：Shanghai Sippr-bk Laboratory Animal Co., Ltd.
動物数：１００匹の動物を発注し、健康なものを試験に選んだ
動物用認可番号：０１２３６２７。
試験開始時の動物年齢：７〜９週齢
試験開始時の動物体重：１８〜２２ｇ
環境順応時間：５〜７日
動物ナンバリング：テイルタグ
動物室は２３±２℃、４０％〜７０％湿度に維持し、１２時間毎に点灯・消灯した。
動物餌(ＳＬＡＣ−Ｍ０１)をBeijing Ke Ao Xie Li Co., Ltd.から購入し、滅菌濾過水を試験動物に使用した。実験期間中、動物は餌および水を自由に摂取できた。
【０１２２】
４. 試験法
４.１  腫瘍細胞：Institute of Cell Biology, Chinese Academy of Sciencesから購入した結腸癌ＨＣＴ−１１６細胞。細胞を、Ｆ−１２培地(１０％ＦＢＳ含有)で、二酸化炭素インキュベーター中、３７℃および飽和湿度で、体積画分で５％ＣＯ２および９５％空気でインキュベートした。接種前、対数期の細胞を採り、０.２５％トリプシンで消化し、ＰＢＳで１回洗浄し、計数用にＰＢＳに再懸濁した。細胞を無血清培地に再懸濁し、約３×１０７細胞／mLに調節した。
【０１２３】
４.２  動物接種および群分け：各ヌードマウスに、滅菌状態で、後肢右側に０.１mLの細胞懸濁液(３×１０６細胞／マウス)を皮下接種した。腫瘍が約６０〜１５０mm３に増殖したとき、類似する腫瘍体積および望ましい形態を有するヌードマウスを、１群あたり６マウスで、群分けのために選択した(一緒のグループに、不規則な形状または複数腫瘍がない、単一球状形態を選択するのが望ましい)。群分けは次のとおりである。
【表５】
2017534657.tif 000051
ＩＰ：腹腔内注射；ＱＤ×１：単回注射
Control群、すなわちモデル対照群に、エタノール、クレモフォールＥＬおよび食塩水の混合物(５：５：９０)を注射した。
【０１２４】
４.３  動物投与および観察
各群のヌードマウスの接種部位での腫瘍形成を観察した。腫瘍小結節の直径(Ｄ)を、円形穴尺を使用して測定し、腫瘍小結節の体積(Ｖ)を次の式：Ｖ＝３／４π(Ｄ／２)３に従い、計算した。
抗腫瘍活性を腫瘍増殖阻害率ＴＧＩ(％)および相対的腫瘍増殖速度Ｔ／Ｃ(％)により評価した。
腫瘍増殖阻害率ＴＧＩ(％)は：ＴＧＩ(％)＝(Ｖ対照−Ｖ処置)／Ｖ対照)×１００％として計算した。
相対的腫瘍体積(ＲＴＶ)は：ＲＴＶ＝Ｖｔ／Ｖ０(式中、Ｖ０は群分けし、投与したときの腫瘍体積であり、Ｖｔは測定時の腫瘍体積である)として計算した。
相対的増殖率Ｔ／Ｃ(％)は：Ｔ／Ｃ(％)＝ＴＲＴＶ／ＣＲＴＶ×１００％として計算した。
ＴＲＴＶ：処置群のＲＴＶ；ＣＲＴＶ：対照群のＲＴＶ。
これらのマウスを、週３回体重測定した。
【０１２５】
４.４  疾病症状
各動物の全疾病症状を、試験開始時および試験中記録しなければならない。各日、同じ時間に観察すべきである。
動物は、体重減少が２０％を超えたとき、瀕死のときまたは腫瘍体積が２８００mm３を超えたとき、ＣＯ２により殺した。腫瘍を摘出し、秤量し、臓器に病理学的変化があるか否かを評価し、記録するために動物を解剖し、観察した。
【０１２６】
４.５  データおよび統計解析
データを、特に断らない限り、平均±ＳＥＭで表した；対応のないＴ検定を、２群間のデータについて実施した。Ｐ＜０.０５を有意差とした。
【０１２７】
５. 試験結果
(１)  臨床的観察および死亡率
Ｇ４  ３５０mg／kg群において、１匹の動物が投与４日目に死亡し、３匹の動物の活動が低下し、体重が減少し、体表面温度が正常より低く、かつ他の疾病症状を有した。Ｇ８  ３５０mg／kg群における動物は、すべて投与４日目に死亡した。Ｇ６、３００mg／kg群の５匹の動物は、投与４日目に死亡した。モデル対照群と他の化合物群(Ｇ３、Ｇ５、Ｇ７、Ｇ９、Ｇ１０、Ｇ１１、Ｇ１２、Ｇ１３、Ｇ１５、Ｇ１６)で疾病症状に有意な差はなかった。各群の死亡率を表２に示す(ＱＤ＊１：単回腹腔内注射)。
【表６】
2017534657.tif 000052
【０１２８】
(２)ヒト結腸癌ＨＣＴ−１１６を担持するマウスの体重に対する試験化合物の効果
各群の動物の平均体重を表３に示す。
【表７】
2017534657.tif 000053
＊ｐ＜０.０５、＊＊ｐ＜０.０１対媒体群
【０１２９】
【表８】
2017534657.tif 000054
＊ｐ＜０.０５、＊＊ｐ＜０.０１対媒体群
【０１３０】
【表９】
2017534657.tif 000055
＊ｐ＜０.０５、＊＊ｐ＜０.０１対媒体群
【０１３１】
Ｇ１０〜Ｇ１６群の体重変化率を表４−２に示す。
【表１０】
2017534657.tif 000056
＊ｐ＜０.０５、＊＊ｐ＜０.０１対媒体群
【０１３２】
上記データにより、結腸癌ＨＣＴ−１１６を担持するヌードマウスの移植腫瘍に対する化合物の増殖阻害効果の点で、Ｇ４  ３５０mg／kg群の動物の体重が投与後４日目に有意に減少し(ｐ＜０.０５)、平均体重減少率は１０.９１±３.４５％であった。その後、これらの動物の体重は、安定して増えた。これらの体重は、モデル対照群と比較して、１８日目〜２０日目に有意に増加した(ｐ＜０.０５)。Ｇ５  ３２５mg／kg群の動物の体重は投与後４日目に有意に減少し、体重減少率は１０％未満であった。その後、これらの動物の体重は、安定して増えた。これらの体重は、モデル対照群と比較して、１３日目〜２０日目に有意に増加した(ｐ＜０.０５〜０.０１)。Ｇ７  ２５０mg／kg群の動物の体重は、投与後４日目および６日目に有意に減少し(ｐ＜０.０５)、体重減少率はそれぞれ１２.２８±４.７８％および４.３９±３.６％であった。その後、これらの動物の体重は、安定して増えた。他の処置群とモデル対照群の体重で、有意差は無かった。
【０１３３】
(３)ヒト結腸癌ＨＣＴ−１１６を担持するマウスの腫瘍体積に対する試験化合物の効果
各群の特定の腫瘍体積を表５に示す。
【表１１】
2017534657.tif 000057
＊ｐ＜０.０５、＊＊ｐ＜０.０１対媒体群
【０１３４】
【表１２】
2017534657.tif 000058
＊ｐ＜０.０５、＊＊ｐ＜０.０１対媒体群
【０１３５】
腫瘍体積の上記データから、本発明のシチジン誘導体は、腫瘍に顕著な阻害効果を有した。
【０１３６】
(４)ヒト結腸癌ＨＣＴ−１１６を担持するマウスの増殖阻害率(ＴＧＩ％)に対する試験化合物の効果
ヒト結腸癌ＨＣＴ−１１６を担持するマウスのＴＧＩ％に対する試験化合物の効果を、次の表６に示す。
【表１３】
2017534657.tif 000059
【０１３７】
【表１４】
2017534657.tif 000060
【０１３８】
Ｇ３  ３５０mg／kg群のＴＧＩ％は、５８.１０％の最高値に８日目に到達し、２２日目で約４６.８２％であった。Ｇ４  ３５０mg／kg群のＴＧＩ％は良好に制御され、９２.５８％の最高値に１１日目に到達し、２２日目でなお７０％以上を維持した。Ｇ５  ３２５mg／kg群のＴＧＩ％は良好に制御され、９４.４６％の最高値に１１日目に到達し、および２４日目でなお７０％以上を維持した。Ｇ９  ３２５mg／kg群のＴＧＩ％は、４日目に８０.７７％の最高値に到達し、２２日目で約４０％であった。Ｇ７  ２５０mg／kg群のＴＧＩ％は、８２.６２％の最高値に８日目で到達し、２２日目で４４.０７％であった。
【０１３９】
(５)ヒト結腸癌ＨＣＴ−１１６を担持し、試験化合物を投与したマウスの相対的腫瘍体積(ＲＴＶ)
ヒト結腸癌ＨＣＴ−１１６を担持し、化合物Ｇ３〜Ｇ９を投与したマウスの相対的腫瘍体積(ＲＴＶ)を表７−１に示す。
【表１５】
2017534657.tif 000061
【０１４０】
Ｇ４  ３５０mg／kg群の相対的腫瘍体積は、モデル対照群と比較して、４日目〜１８日目に有意に減少した(ｐ＜０.０５〜０.０１)。Ｇ５  ３２５mg／kg群の相対的腫瘍体積は、モデル対照群と比較して、４日目〜１８日目に有意に減少した(ｐ＜０.０５〜０.０１)。Ｇ７  ２５０mg／kg群の相対的腫瘍体積は、モデル対照群と比較して、４日目〜１５日目に有意に減少した(ｐ＜０.０５〜０.０１)。Ｇ９  ３２５mg／kg群の相対的腫瘍体積は、モデル対照群と比較して、４日目にのみ有意に減少した(ｐ＜０.０５)。他の処置群とモデル対照群の間で、相対的腫瘍体積に有意差はなかった。
【０１４１】
ヒト結腸癌ＨＣＴ−１１６を担持し、Ｇ１０〜Ｇ１６を投与したマウスの相対的腫瘍体積(ＲＴＶ)を表７−２に示す。
【表１６】
2017534657.tif 000062
【０１４２】
(６)ヒト結腸癌ＨＣＴ−１１６を担持し、試験化合物を投与したマウスの相対的腫瘍増殖率(Ｔ／Ｃ％)
ヒト結腸癌ＨＣＴ−１１６を担持するマウスのＴ／Ｃ％に対する試験化合物の効果を、次の表８に示す。
【表１７】
2017534657.tif 000063
【０１４３】
Ｇ４  ３５０mg／kg群のＴ／Ｃ％は、１３日目に１７.６２％の最小値に到達し、２２日目に７５.３８％であった。Ｇ５  ３２５mg／kg群のＴ／Ｃ％は、１１日目に１０.０１％の最小値に到達し、２２日目に６８.７７％であった。Ｇ７  ２５０mg／kg群のＴ／Ｃ％は、８日目に１７.６７％の最小値に到達し、２２日目に５８.６２％であった。
【０１４４】
結腸癌ＨＣＴ−１１６を担持するヌードマウスの移植腫瘍に対する一連の化合物の増殖阻害効果に関する試験において、化合物Ｇ４、Ｇ５およびＧ７は、結腸癌ＨＣＴ−１１６を担持するヌードマウスの移植腫瘍に対して良好なＴＧＩ％を有し、同時に単回腹腔内投与後８日目〜１３目に良好な腫瘍阻害効果を有し、ここで、Ｇ５は、１１日目に１０.０１％の最小Ｔ／Ｃ％に到達し、体重減少に影響が少なく、平均体重減少率は１０％未満であった。
【０１４５】
【表１８】
2017534657.tif 000064
【０１４６】
上記試験の結果に基づき、本発明の新型シチジン誘導体が、抗腫瘍剤として優れた効果を提供することが確認された。
上記実施例は本発明を十分に説明し、当業者は、それに多様な修飾を施すことができ、それらの修飾は本発明の範囲内であることを理解する。
【国際調査報告】
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