(57)【要約】本発明は、新規な抗菌性化合物、それらを含む医薬組成物、および抗菌剤としてのそれらの使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物、および、式（Ｉ）の前記化合物の、薬学的に許容される、有機または無機の、酸または塩基との付加塩、エナンチオマー、Ｎ−オキシドおよび第四級アンモニウム塩。
【化１】
2017537938.tif 000068
式中、
Ａは、１０員の縮合二環式基であり；
Ｌ１は、σ結合、−Ｏ−または−Ｎ（Ｒ’）−を示し、ここで、Ｒ’は、水素原子または（Ｃ１−３）アルキルを示し；
Ｂは、ピペラジンまたはピペリジン環の二価の残基であり；
Ｌ２は、σ結合、−ＣＨ２−、−Ｏ−または−Ｎ（Ｒ’）−を示し、ここで、Ｒ’は、水素原子または（Ｃ１−３）アルキルを示し；
Ｙは、（Ｃ１−６）アルキレニル、（Ｃ２−６）アルケニレニル、（Ｃ２−６）アルキニレニル、または（Ｃ３−６）シクロアルキレニル基であり、該基は、−ＯＨ、（Ｃ１−３）アルキル、（Ｃ３−６）シクロアルキル、３〜５員のオキサシクロアルキル、−ＣＯＯＲ’、−ＮＲ’Ｒ“から選択される１以上の基で置換されていてもよく、ここで、Ｒ’およびＲ”は、同一または互いに異なって、水素原子または（Ｃ１−３）アルキルである；
Ｌ３は、−Ｏ−、−（ＣＨ２）２−、−Ｎ（Ｒ’）−、−Ｎ（Ｒ’）−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ’）−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｎ（Ｒ’）−（Ｃ１−６）アルキレニル−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒ’）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒ’）−（Ｃ１−６）アルキレニル−、−ＳＯ２−Ｎ（Ｒ’）−、−Ｎ（Ｒ’）−ＳＯ２−であり、ここで、Ｒ’は、水素原子または、（Ｃ１−３）アルキルである；
Ｃは、５員または６員の、飽和または不飽和環、または９員または１０員の縮合二環式基を有する基である。
【請求項２】
Ａが、下記の式（ＩＩ）を有する縮合２環式基である、請求項１の化合物。
【化２】
2017537938.tif 000069
式中、
Ｇ１およびＧ２は、同一または互いに異なって、ＣＨまたはＮであり；
Ｒ１は、Ｈ、ハロゲン原子、ＣＮまたはＣＦ３であり；
Ｒ２は、Ｈ、ハロゲン、ＯＨ、ＣＮ、ＣＦ３、（Ｃ１−６）アルキルまたは（Ｃ１−６）アルコキシであり；
Ｄは、以下から選択される二価の基であり：
【化３】
2017537938.tif 000070
ここで、Ｒ３は、Ｈ、（Ｃ１−６）アルキルまたは（Ｃ１−６）アルコキシである。
【請求項３】
Ｂが、下記の式（ＩＩＩ）を有する基である、請求項１の化合物。
【化４】
2017537938.tif 000071
式中、
Ｇ３およびＧ４は、同一または互いに異なって、Ｃ（Ｒ４）またはＮであり、但し、Ｇ３およびＧ４の少なくとも一方はＮである；
Ｒ４は、水素原子、−ＯＨ、−ＣＮ、−ＣＯＯＨ、−ＮＲ’Ｒ”を示し、ここで、Ｒ’およびＲ”は、同一または互いに異なって、水素原子または（Ｃ１−３）アルキルである；
Ｇ５は、Ｃ（＝Ｏ）またはＣ（Ｈ）（Ｒ５）であり；
ここで、Ｒ５は、水素原子、ＣＦ３、（Ｃ１−３）アルキル−ＣＦ３、−ＣＯＯＲ’および−ＣＯＮＲ’Ｒ”を示し、Ｒ’およびＲ”は、同一または互いに異なって、水素原子または（Ｃ１−３）アルキルである。
【請求項４】
Ｃが、以下の式（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）または（ＶＩＩＩ）の１つを有する、請求項１の化合物。
【化５】
2017537938.tif 000072
式中、
ｎは、０〜３の整数であり；
Ｐ１およびＰ２は、等しいかまたは互いに異なって、ＣＨまたはＮであり；
Ｐ３は、Ｏ、ＳまたはＮＨであり；
Ｒ６およびＲ７は、一緒になって、ＮおよびＯから選択される、少なくとも１個のヘテロ原子を含んでいてもよい、５員または６員の脂肪族または芳香族の環を形成し；
Ｒ８およびＲ９は、同一または互いに異なって、水素原子またはアリール基であるか、または一緒になって、ＮおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含んでいてもよい、５員又は６員の脂肪族または芳香族の環を形成する；
Ｒ１０およびＲ１１は、等しいかまたは互いに異なって、水素原子、または（Ｃ１−３）アルキル基であるか、または一緒になって、５員または６員の脂肪族または芳香族環を形成し；
そして、式（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）または（ＶＩＩＩ）の環を形成する、炭素原子または窒素原子に結合した各水素原子は、場合により、ハロゲン原子、ＯＨ、（Ｃ１−３）アルキルまたは（Ｃ１−３）アルコキシからなる群から選択される、少なくとも１つの置換基で置換されていてもよい。
【請求項５】
Ｒ６およびＲ７は一緒になって、ベンゼン、フラン、テトラヒドロフラン、ジオキソラン、ピペリジンおよびピペラジンからなる群から選択される環を形成する、請求項４の化合物。
【請求項６】
Ｒ８およびＲ９が、同一または互いに異なって、水素原子、またはアリール基、あるいは、一緒になって、ベンゼン、ピリジン、およびピペリジンから成る群から選択される環を形成する、請求項４の化合物。
【請求項７】
Ｃが、以下の式を１つ有する基である、請求項１の化合物。
【化６】
2017537938.tif 000073
【請求項８】
前記Ｙが、（Ｃ１−４）アルキレニル、（Ｃ２−４）アルキニレニル、または、（Ｃ５−６）シクロアルキレニル基であり、当該基は、−ＯＨ、メチル、（Ｃ３−４）シクロアルキル、３−または４−員のオキサシクロアルキル、−ＣＯＯＨ、−ＮＲ’Ｒ”から選択される、１以上の群で、置換されていてもよい。ここで、Ｒ’およびＲ”は、同一または互いに異なって、水素原子またはメチルである、請求項１の化合物。
【請求項９】
前記Ｙが、（Ｃ１−４）アルキレニル、（Ｃ２−４）アルキニレニル、または、シクロヘキシレニル基であり、当該基は、１以上の−ＯＨで、置換されていてもよい、請求項８の化合物。
【請求項１０】
前記Ｌ３が、−Ｏ−、−（ＣＨ２）２−、−Ｎ（Ｒ’）−であり、Ｒ’が、Ｈまたは（Ｃ１−３）アルキル、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＨ−（Ｃ１−３）アルキレニル−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−または−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（Ｃ１−３）アルキレニル−である、請求項１の化合物。
【請求項１１】
前記Ｌ３が、−Ｏ−、−（ＣＨ２）２−、−Ｎ（Ｒ’）−であり、ここで、Ｒ’が、Ｈまたはメチル、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−である、請求項１０の化合物。
【請求項１２】
請求項１乃至１１のいずれか１項に記載の、式（Ｉ）の化合物、その、薬学的に許容される、有機または無機の、酸または塩基との塩、または、そのエナンチオマー、またはその第四級アンモニウム塩、またはそのＮ−オキシドの、少なくとも１つ、ならびに、少なくとも１つの不活性の薬学的に許容される添加物を含む薬学的組成物。
【請求項１３】
医薬に使用するための、請求項１乃至１１のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項１４】
細菌感染症の治療に使用するための、請求項１乃至１１のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項１５】
請求項１４に記載の使用のための、請求項１乃至１１のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物であって、上記細菌感染症が、皮膚感染症、粘膜感染症、婦人科感染症、気道感染症（ＲＴＩ）、ＣＮＳ感染症、胃腸感染症、骨感染症、心臓血管感染症、性感染症、または尿路感染症からなる群から選択される、前記式（Ｉ）の化合物。
【請求項１６】
それを必要とする患者に、請求項１乃至１１のいずれか１項に記載の、式（Ｉ）の化合物を投与することを含む、細菌感染症を治療するための方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
［発明の分野］
本発明は、新規な抗菌性化合物、それらを含有する医薬組成物および抗菌剤としてのそれらの使用に関する。
［発明の背景］
ＤＮＡトポイソメラーゼは、複製または転写中のＤＮＡスーパーコイル形成の修飾に関与する酵素である。これらの酵素は、一本鎖または二本鎖のＤＮＡに結合し、そして、ＤＮＡ鎖がアンタングリング（ｕｎｔａｎｇｌｅｄ）またはアンワインディング（ｕｎｗｏｕｎｄ）されるように、ＤＮＡのリン酸骨格を切断する。複製または転写プロセスの終わりに、当該酵素自体が、ＤＮＡ骨格を再シール（ｒｅｓｅａｌ）する。
【０００２】
ＤＮＡトポイソメラーゼは、ＤＮＡ二重らせんの一本鎖を切断するとＩ型に、ＤＮＡ二重らせんの両方の鎖を切断すると、ＩＩ型に分類される。
【０００３】
細菌ＩＩ型トポイソメラーゼは、ほとんどすべての原核細胞（ｐｒｏｋａｒｙｏｔｉｃ  ｃｅｌｌｓ）に同時に存在するヘテロ四量体酵素である、ＤＮＡジャイレースおよびトポイソメラーゼ  ＩＶ（Ｔｏｐｏ  ＩＶ）を含む。両方の酵素は、ＤＮＡ複製、そして、したがって、細菌細胞の増殖および分裂に必要である。
【０００４】
菌ＩＩ型のトポイソメラーゼは、証明された抗菌標的、特に、フルオロキノロン類に属する化合物の抗菌標的である。
【０００５】
フルオロキノロン類は、細菌感染症、特に、院内感染および他のクラスの抗菌薬に対する耐性が疑われる感染症の治療において、重要な役割を果たす広域スペクトルの抗菌薬である。フルオロキノロン類は、グラム陰性細菌のＤＮＡジャイレースおよびグラム陽性細菌のトポイソメラーゼＩＶを阻害することによって作用する。
しかし、フルオロキノロン類に対する耐性は、ＤＮＡジャイレースおよびトポイソメラーゼ  ＩＶの薬物標的の活性部位、または、薬物蓄積のいずれかを変化させる突然変異のために、近年浮上した。さらに、キノロン類に対する耐性は、キノロン標的を阻害から保護するＱｎｒタンパク質を産生するプラスミドによって媒介され得る（ＧＡ  Ｊａｃｏｂｙ、ＣＩＤ、２００５：４１、Ｓｕｐｐｌ．２、ＳＤ１２０−Ｓ１２６）。
【０００６】
世界保健機関（ＷＨＯ）によると、抗菌剤耐性（ＡＭＲ）は、元々敏感であった抗菌剤に対する微生物の耐性である。抵抗性バクテリアは、抗生物質や抗菌薬による攻撃に耐えることができるため、標準的な治療法は効果がなくなり、そして、感染症は他の人に伝染する危険が増え続けている。
【０００７】
国際公開第０２／０７２５７２号、国際公開第２００６／０２１４４８号、国際公開第２００８／１３９２８８号、国際公開第２０１０／０８１８７４号、国際公開第２０１０／０８４１５２号、国際公開第２０１３／０６８９４８号および国際公開第２０１３／０８０１５６号は、抗菌活性を有する複素環化合物を開示する。
国際公開第９６／１０５６８号および国際公開第２０１２／００３４１８号は、他の治療活性を有する複素環式化合物を開示する。
【０００８】
［発明の概要］
本出願人は、耐性細菌の問題を克服する抗菌薬について、強く継続的な要望があることを認識した。このため、本出願人は、新しい抗菌化合物を開発するという問題に直面した。
特に、本出願人は、広範囲の活性を有する、すなわち、グラム陽性および／またはグラム陰性菌に対して有用な、新規な抗菌化合物を開発するという問題に直面した。
【０００９】
このため、第１の実施形態において、本発明は、式（Ｉ）の化合物、その薬学上許容される塩、エナンチオマー、Ｎ−オキシド及び第４級アンモニウム塩に関する。
【化１】
2017537938.tif 000002
式中、
Ａは、１０員の縮合二環式基であり；
Ｌ１は、σ結合、−Ｏ−または−Ｎ（Ｒ’）−を示し、ここで、Ｒ’は、水素原子または（Ｃ１−３）アルキルを示す；
Ｂは、ピペラジンまたはピペリジン環の二価の残基であり；
Ｌ２は、σ結合、−ＣＨ２−、−Ｏ−または−Ｎ（Ｒ’）−を示し、ここで、Ｒ’は、水素原子または（Ｃ１−３）アルキルを示す；
Ｙは、（Ｃ１−６）アルキレニル、（Ｃ２−６）アルケニレニル、（Ｃ２−６）アルキニレニル、または（Ｃ３−６）シクロアルキレニル基であり、該基は、−ＯＨ、（Ｃ１−３）アルキル、（Ｃ３−６）シクロアルキル、３〜５員のオキサシクロアルキル、−ＣＯＯＲ’、−ＮＲ’Ｒ”から選択される１以上の基で置換されていてもよく、ここで、Ｒ’およびＲ”は、同一または互いに異なって、水素原子または（Ｃ１−３）アルキルである；
Ｌ３は、−Ｏ−、−（ＣＨ２）２−、−Ｎ（Ｒ’）−、−Ｎ（Ｒ’）−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ’）−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｎ（Ｒ’）−（Ｃ１−６）アルキレニル−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒ’）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒ’）−（Ｃ１−６）アルキレニル−、−ＳＯ２−Ｎ（Ｒ’）−、−Ｎ（Ｒ’）−ＳＯ２−であり、ここで、Ｒ’は、水素原子または、（Ｃ１−３）アルキルである；
Ｃは、５員または６員の飽和または不飽和環、または９員または１０員の縮合二環式基を有する基である。
【００１０】
第２の実施形態において、本発明は、少なくとも１つの式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物に関する。
第３の実施形態において、本発明は、医薬において使用するための、式（Ｉ）の化合物に関する。
第４の実施形態では、本発明は、細菌感染症の治療に使用するための、式（Ｉ）の化合物に関する。
第５の実施形態では、本発明は、式（Ｉ）の化合物を、それを必要とする患者に投与することを含む、細菌感染症の治療方法に関する。
【００１１】
本発明の好ましい態様によれば、
Ａは、以下の式（ＩＩ）を有する縮合二環式基である。
【化２】
2017537938.tif 000003
式中、
Ｇ１およびＧ２は、同一または互いに異なって、ＣＨまたはＮであり；
Ｒ１は、Ｈ、ハロゲン原子、ＣＮまたはＣＦ３であり；
Ｒ２は、Ｈ、ハロゲン、ＯＨ、ＣＮ、ＣＦ３、（Ｃ１−６）アルキルまたは（Ｃ１−６）アルコキシであり；
Ｄは、以下から選択される二価の基であり：
【化３】
2017537938.tif 000004
Ｒ３は、Ｈ、（Ｃ１−６）アルキルまたは（Ｃ１−６）アルコキシである。
【００１２】
本発明の好ましい態様によれば、Ａは、以下の式の１つを有する縮合二環式基である。
【化４】
2017537938.tif 000005
【００１３】
好ましくは、Ｒ１が、Ｈまたはハロゲン原子であり、より好ましくは、Ｒ１は、ＨまたはＦである。
【００１４】
好ましくは、Ｒ２は、Ｈ、ハロゲン原子、ＯＨ、（Ｃ１−３）アルキルまたは（Ｃ１−３）アルコキシであり、より好ましくは、Ｒ２は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＯＨ、ＣＨ３またはＯＣＨ３である。
【００１５】
好ましくは、Ｒ３は、Ｈ、（Ｃ１−３）アルキルまたは（Ｃ１−３）アルコキシであり、より好ましくは、Ｒ３は、Ｈ、ＣＨ３またはＯＣＨ３である。
【００１６】
好ましくは、Ｌ１は、σ結合または−Ｎ（Ｒ’）−であり、ここで、Ｒ’は、Ｈまたはメチルであり、より好ましくは、Ｌ１は、σ結合または−ＮＨ−である。
【００１７】
本発明の好ましい態様によれば、Ｂは、下記の式（ＩＩＩ）を有する基であり、
【化５】
2017537938.tif 000006
式中、
Ｇ３およびＧ４は、同一または互いに異なって、Ｃ（Ｒ４）またはＮであり、但し、Ｇ３およびＧ４の少なくとも一方はＮである；
Ｒ４は、水素原子、−ＯＨ、−ＣＮ、−ＣＯＯＨ、−ＮＲ’Ｒ”を示し、ここで、Ｒ’およびＲ”は、同一または互いに異なって、水素原子または（Ｃ１−３）アルキルである；
Ｇ５は、Ｃ（＝Ｏ）またはＣ（Ｈ）（Ｒ５）であり；
Ｒ５は、水素原子、ＣＦ３、（Ｃ１−３）アルキル−ＣＦ３、−ＣＯＯＲ’および−ＣＯＮＲ’Ｒ”を示し、Ｒ’およびＲ”は、同一または互いに異なって、水素原子または（Ｃ１−３）アルキルである。
【００１８】
好ましくは、Ｒ４は、水素原子である。
【００１９】
好ましくは、Ｒ５は、Ｈ、−ＣＨ２ＣＦ３、−ＣＯＯＲ’または−ＣＯＮＲ’Ｒ”であり、ここで、Ｒ’およびＲ”は、ＨまたはＣＨ３である。
【００２０】
本発明の好ましい態様によれば、Ｂは、以下の式の１つを有する環残基である：
【化６】
2017537938.tif 000007
【００２１】
好ましくは、Ｌ２が、σ結合、または−ＮＨ−であり；より好ましくは、Ｌ２は、σ結合である。
【００２２】
好ましくは、Ｙは、（Ｃ１−４）アルキレニル、（Ｃ２−４）アルキニレニル、または（Ｃ５−６）シクロアルキレニル基であり、該基は、−ＯＨ、メチル、（Ｃ３−４）シクロアルキル、３−または４−員オキサシクロアルキル、−ＣＯＯＨ、−ＮＲ’Ｒ”から選択される、１以上の基で置換されていてもよい。ここで、Ｒ’およびＲ”は、同一または互いに異なって、水素原子またはメチル基である。
【００２３】
より好ましくは、Ｙは、（Ｃ１−４）アルキレニル、（Ｃ２−４）アルキニレニルまたはシクロヘキシレニル基であり、該基は、１個以上のヒドロキシ基で置換されていてもよい。
【００２４】
好ましくは、Ｌ３が、−Ｏ−、−（ＣＨ２）２−、−Ｎ（Ｒ’）−であり、ここで、Ｒ’は、Ｈまたは（Ｃ１−３）アルキル、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＨ−（Ｃ１−３）アルキレニル−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−または−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（Ｃ１−３）アルキレニル−である。
【００２５】
より好ましくは、Ｌ３は、−Ｏ−、−（ＣＨ２）２−、−Ｎ（Ｒ’）−であり、Ｒ’は、Ｈまたはメチル、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−である。
【００２６】
本発明の好ましい態様によれば、Ｃは、以下の式（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）または（ＶＩＩＩ）の１つを有する基である。
【化７】
2017537938.tif 000008
式中、
ｎは、０〜３の整数であり；
Ｐ１およびＰ２は、等しいかまたは互いに異なって、ＣＨまたはＮであり；
Ｐ３は、Ｏ、ＳまたはＮＨであり；
Ｒ６およびＲ７は、一緒になって、ＮおよびＯから選択される、少なくとも１個のヘテロ原子を含んでいてもよい、５員または６員の脂肪族または芳香族の環を形成する。
Ｒ８およびＲ９は、同一または互いに異なって、水素原子またはアリール基であるか、または一緒になって、ＮおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含んでいてもよい、５員又は６員の脂肪族または芳香族の環を形成する。
Ｒ１０およびＲ１１は、等しいか互いに異なって、水素原子、または（Ｃ１−３）アルキル基であるか、または一緒になって、５員または６員の脂肪族または芳香族環を形成し、そして、式（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）または（ＶＩＩＩ）の環を形成する、炭素原子または窒素原子に結合した各水素原子は、ハロゲン原子、ＯＨ、（Ｃ１−３）アルキルまたは（Ｃ１−３）アルコキシからなる群から選択される、少なくとも１つの置換基で置換されていてもよい。
【００２７】
好ましくは、ｎは０〜２の整数であり、より好ましくは、ｎは０または１である。
【００２８】
好ましくは、Ｒ６およびＲ７は、一緒になって、ベンゼン、フラン、テトラヒドロフラン、ジオキソラン、ピペリジンおよびピペラジンからなる群から選択される環を形成する。
【００２９】
好ましくは、Ｒ８およびＲ９は、等しいかまたは互いに異なって、水素原子またはアリール基であるか、または一緒になって、ベンゼン、ピリジン、およびピペリジンからなる群から選択される環を形成する。
【００３０】
好ましくは、Ｒ１０及びＲ１１は、同一または互いに異なって、水素原子、または（Ｃ１−３）アルキル基であるか、または一緒になって、シクロヘキサンまたはアリール環を形成する。
【００３１】
好ましくは、式（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）または（ＶＩＩＩ）の環を形成する炭素原子または窒素原子に結合している各水素原子は、塩素原子、フッ素原子、ＯＨ、メチルまたはメトキシからなる群から選択される、少なくとも１つの置換基で置換されていてもよい。
【００３２】
本発明の好ましい態様によれば、Ｃは、以下の式の１つを有する基である：
【化８】
2017537938.tif 000009
【００３３】
本明細書および以下の特許請求の範囲において、
用語「（Ｃ１−６）アルキル」は、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎーペンチル、イソペンチル、ネオ−ペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、ｓｅｃ−ペンチル、３−ペンチル、ｎ−ヘキシル、イソヘキシル、ネオ−ヘキシル、３−メチルーペンチル、２，３−ジメチルブチルのような、１〜６個の炭素原子を含む、直鎖状または分枝状のアルキル鎖を意味する。
【００３４】
本明細書および以下の特許請求の範囲において、
用語「（Ｃ１−３）アルキル」は、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピルのような、１〜３個の炭素原子を含む、直鎖状または分枝状のアルキル鎖を意味する。
【００３５】
本明細書および以下の特許請求の範囲において、
用語「（Ｃ１−６）アルコキシ」とは、例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ｎ−ペントキシ、イソペントキシ、ネオペントキシ、ｔｅｒｔ−ペントキシ、ｓｅｃ−ペントキシ、３−ペントキシ、ｎ−ヘキソキシ、イソヘキソキシ、ネオヘキソキシ、３−メチルペントキシ、２，３−ジメチルブトキシのような、直鎖状または分枝状の、１〜６個の炭素原子を含むアルコキシ鎖である。
【００３６】
本明細書および以下の特許請求の範囲において、
用語「（Ｃ１−３）アルコキシ」は、例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシのような、直鎖状または分枝状の、１〜３個の炭素原子を含む、アルコキシ鎖を意味する。
【００３７】
本明細書および以下の特許請求の範囲において、
用語「（Ｃ１−６）アルキレニル」は、例えば、メチレニル（−ＣＨ２−）、エチレニル（−ＣＨ２ＣＨ２−）、プロピレニル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）ブチレニル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）、ペンチレニル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）またはヘキセニル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）のような、１〜６個の炭素原子を含む、二価の直鎖又は分枝アルキル鎖を意味する。
【００３８】
本明細書および以下の特許請求の範囲において、
用語「（Ｃ１−４）アルキレニル」は、例えば、メチレニル（−ＣＨ２−）、エチレニル（−ＣＨ２ＣＨ２−）、プロピレニル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）ブチレニル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）のような、１〜４個の炭素原子を含む、二価の直鎖又は分枝アルキル鎖を意味する。
【００３９】
本明細書および以下の特許請求の範囲において、
用語「（Ｃ２−６）アルケニレニル」は、例えば、エテニレニル（−ＣＨ＝ＣＨ−）、プロペニレニル（−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−または−Ｃ（ＣＨ３）＝ＣＨ−）またはブテニレニル（−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２ＣＨ２−または−ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−または−Ｃ（ＣＨ３）＝ＣＨ−ＣＨ２−）のような、二価の、直鎖または分枝状の、２〜６個の炭素原子を含む、アルキレン鎖を意味する。
【００４０】
本明細書および以下の特許請求の範囲において、
用語（Ｃ２−６）アルキニレニルは、例えば、エチニレニル（−Ｃ≡Ｃ−）、プロピニレニル（−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ２−または−ＣＨ２−Ｃ≡Ｃ−）、ブチニレニル（−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ２ＣＨ２−又は−ＣＨ２−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ２−または−Ｃ（ＣＨ３）−Ｃ≡Ｃ−）、ペンチニレニル（−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−または−ＣＨ２ＣＨ２−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ２−または−Ｃ（ＣＨ２ＣＨ３）−Ｃ≡Ｃ−）、又はヘキシニレニル（−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−または−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ≡Ｃ−ＣＨ２ＣＨ２−又は−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）−Ｃ≡Ｃ−）のような、二価の、直鎖状または分枝状の２〜６個の炭素原子を含む、アルキニル鎖を意味する。
【００４１】
本明細書および以下の特許請求の範囲において、
用語（Ｃ２−４）アルキニレニルは、例えば、エチニレニル（−Ｃ≡Ｃ−）、プロピニレニル（−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ２−または−ＣＨ２−Ｃ≡Ｃ−）、ブチニレニル（−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ２ＣＨ２−又は−ＣＨ２−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ２−または−Ｃ（ＣＨ３）−Ｃ≡Ｃ−）のような、二価の、直鎖状または分枝状の２〜４個の炭素原子を含む、アルキニル鎖を意味する。
【００４２】
本明細書および以下の特許請求の範囲において、
用語「（Ｃ３−６）シクロアルキレニル」は、シクロプロピレニル、シクロブチレニル、シクロペンチレニル、およびシクロヘキシレニルのような、３〜６個の炭素原子を含む、二価のシクロアルキル基を意味する。
【００４３】
本明細書および以下の特許請求の範囲において、
用語「（Ｃ５−６）シクロアルキレニル」は、シクロペンチレニル、およびシクロヘキシレニルのような、５〜６個の炭素原子を含む、二価のシクロアルキル基を意味する。
【００４４】
本明細書および以下の特許請求の範囲において、
用語「（Ｃ３−６）シクロアルキル」は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルなどの３〜６個の炭素原子を含む、シクロアルキル基を意味する。
【００４５】
本明細書および以下の特許請求の範囲において、
用語「（Ｃ３−４）シクロアルキル」は、シクロプロピルおよびシクロブチルなどの３個または４個の炭素原子を含むシクロアルキル基を意味する。
【００４６】
本明細書および以下の特許請求の範囲において、
表現「３〜５員オキサシクロアルキル」は、少なくとも１個のＯ原子および２〜４個の炭素原子を含むシクロアルキル基を意味する。
【００４７】
本明細書および以下の特許請求の範囲において、
表現「３〜４員オキサシクロアルキル」は、少なくとも１個のＯ原子および２〜３個の炭素原子を含むシクロアルキル基を意味する。
【００４８】
本発明のある種の化合物は、互変異性体の形態で存在してもよく、本発明は、他に特定しない限り、それらの化合物のそのような互変異性体の全てを含む。
【００４９】
本発明の特定の化合物は、互変異性体の形態で存在することができ、そして、本発明は、他に特定しない限り、それらの化合物のそのような互変異性体のすべてを含む。
【００５０】
特に明記しない限り、本明細書に示される構造はまた、その構造の全ての立体化学的形態、すなわち、各不斉中心についてのＲおよびＳ立体配置、を含むことを意味する。したがって、本発明の化合物の単一の立体化学異性体ならびにエナンチオマーおよびジアステレオマー混合物も、本発明の範囲内である。したがって、本発明は、他の異性体（＞９０％、そして、好ましくは、＞９５％の、モル基準で他の立体異性体を含まない）を実質的に含まない、各ジアステレオマーまたはエナンチオマー、ならびにそのような異性体の混合物を包含する。
【００５１】
特定の光学異性体は、例えば、ジアステレオ異性体塩の形成によって、光学活性な酸または塩基で処理することによって、慣用の方法に従って、ラセミ混合物の分割によって得ることができる。
適切な酸の例は、酒石酸、ジアセチル酒石酸、ジベンゾイル酒石酸、ジトルオイル酒石酸およびカンファースルホン酸であり、次いで、結晶化によるジアステレオマー混合物の分離、続いて、これらの塩からの光学活性塩基の遊離である。
光学異性体の分離のための異なるプロセスは、エナンチオマーの分離を最大にするために最適に選択される、キラルクロマトグラフィーカラムの使用を含む。
さらに別の方法は、本発明の化合物を、活性化された形態の光学的に純粋な酸または光学的に純粋なイソシアネートと反応させることによる、共有結合のジアステレオマーの合成を含む。
合成されたジアステレオマーは、クロマトグラフィー、蒸留、結晶化または昇華などの従来の手段によって分離し、次に、加水分解して、エナンチオマー的に純粋な化合物を得ることができる。
本発明の光学活性化合物は、活性な出発物質を使用することによって得ることができる。これらの異性体は、遊離酸、遊離塩基、エステルまたは塩の形態であり得る。
【００５２】
本発明の化合物は、放射性標識された形態で存在することができる。すなわち、該化合物は、通常、自然界に見られる、原子質量または質量数とは異なる、原子質量または質量数を含む、１つ以上の原子を含み得る。水素、炭素、リン、フッ素及び塩素の放射性同位元素は、それぞれ、３Ｈ、１４Ｃ、３２Ｐ、３５Ｓ、１８Ｆおよび３６ＣＩを含む。これらの放射性同位体および／または他の原子の他の放射性同位体を含む本発明の化合物は、本発明の範囲内である。トリチウム化、すなわち、３Ｈ、および炭素−１４、すなわち１４Ｃの放射性同位体は、調製および検出が容易であるため、特に好ましい。
本発明の放射性標識化合物は、一般に、当業者に周知の方法によって調製することができる。好ましくは、このような放射性標識化合物は、放射性標識されていない試薬を、容易に利用可能な放射性標識試薬と置換することを除いて、本明細書に開示された手順を実施することによって調製することができる。
【００５３】
第２の実施形態では、本発明は、上記の式（Ｉ）の化合物、その薬学的に許容される有機または無機の酸または塩基との塩、またはそのエナンチオマー、または、そのＮ−オキシド、または、その４級アンモニウム塩の少なくとも１つ、ならびに、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物に関する。
【００５４】
好ましくは、本発明の医薬組成物は、適切な剤形で調製される。適切な剤形の例は、経口投与用の錠剤、カプセル剤、被覆錠剤、顆粒剤、液剤およびシロップ剤；局所投与のための、溶液、ポマード（ｐｏｍａｄｅ）および軟膏；経皮投与用の薬用パッチ；直腸投与用坐剤および注射用滅菌溶液が挙げられる。他の適切な剤形は、徐放性のものおよび経口、注射または経皮投与のためのリポソームに基づくものである。本発明の医薬組成物はまた、鼻腔エアロゾルまたは吸入によって投与することができ、または、ステントのような埋め込み型（ｉｍｐｌａｎｔａｂｌｅ）または留置型（ｉｎｄｗｅｌｌｉｎｇ）デバイスなどを有する埋め込み（ｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎ）（例えば、外科的）によって送達することもできる。
【００５５】
他の適切な剤形は、徐放性のもの、および、経口、注射または経皮投与のためのリポソームに基づくものである。
【００５６】
本発明の医薬組成物の剤形は、製薬化学者にはよく知られている技術によって、調製することができ、混合、造粒、圧縮、溶解、滅菌などを含む。典型的には、本発明の医薬組成物中の、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容される第四級アンモニウム塩、Ｎ−オキシドおよびその塩の量は、０．０１ミリグラム〜１，５００ミリグラム、好ましくは、０．１ミリグラム〜５００ミリグラム、および、より好ましくは、１ミリグラム〜２００ミリグラムである。
【００５７】
典型的には、本発明の医薬組成物中の式（Ｉ）の化合物の量は、０．００１〜２０ミリグラム／ｋｇ／日の投与レベルを確保するような量である。好ましくは、投与レベルは、０．０１〜７．５ミリグラム／ｋｇ／日、より好ましくは、０．１〜５ミリグラム／ｋｇ／日、そして、最も好ましくは、０．５〜２．５ミリグラム／ｋｇ／日である。
【００５８】
当業者が理解するように、上に列挙した用量よりも低いまたは高い用量が必要とされ得る。任意の特定の患者のための具体的な投与量および治療レジメンは、使用される特定の化合物の活性、年齢、体重、全般的健康状態、性別、食事、投与時間、排泄速度、医薬の組合せ、疾患の重症度および経過、ならびに疾患に対する患者の対応（ｄｉｓｐｏｓｉｔｉｏｎ）および治療する医師の判断を含む多くのファクターに依存する。
【００５９】
本発明の医薬組成物は、経口的に、非経口的に、吸入スプレーによって、局所的に、直腸的に（ｒｅｃｔａｌｌｙ）、経鼻的に、口腔的に（ｂｕｃｃａｌｌｙ）、経膣的にまたは移植されたリザーバー（ｉｍｐｌａｎｔｅｄ  ｒｅｓｅｒｖｏｉｒ）を介して投与することができる。本明細書で使用される用語、「非経口」は、皮下、皮内、静脈内、筋肉内、関節内（ｉｎｔｒａ−ａｒｔｉｃｕｌａｒ）、滑液包内（ｉｎｔｒａｓｙｎｏｖｉａｌ）、胸骨内（ｉｎｔｒａｓｔｅｒｎａｌ）、くも膜下腔内（ｉｎｔｒａｔｈｅｃａｌ）、病巣内（ｉｎｔｒａｌｅｓｉｏｎａｌ）および頭蓋内（ｉｎｔｒａｃｒａｎｉａｌ）注射または注入技術（ｉｎｆｕｓｉｏｎ  ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ）を含む。
【００６０】
上記のように、置換基の性質に応じて、式（Ｉ）の化合物は、薬学的に許容される、有機または無機の酸または塩基との付加塩を形成することができる。
適切な生理学的に許容される、無機酸の典型的な例は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸および硝酸である。
適切な生理学的に許容される、有機酸の典型的な例は、酢酸、アスコルビン酸、安息香酸、クエン酸、フマル酸、乳酸、マレイン酸、メタンスルホン酸、シュウ酸、パラトルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、コハク酸、タンニン酸、酒石酸である。
適切な生理学的に許容される、無機塩基の典型的な例は、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、ナトリウムおよびカリウムの水酸化物、炭酸塩および炭酸水素塩、例えば水酸化アンモニウム、水酸化カルシウム、炭酸マグネシウム、炭酸水素ナトリウムおよび炭酸水素カリウムである。
適切な生理学的に許容される、有機塩基の典型的な例は、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ、Ｎ−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、Ｎ−メチルグルカミン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミンおよびトロメタミンである。
【００６１】
本明細書に記載されるように、本発明の医薬組成物は、本明細書中で使用される場合、特定の望まれる剤型に適した、任意のおよび全ての溶媒、希釈剤、または他の賦形剤、分散剤または懸濁剤、界面活性剤、等張剤、増粘剤または乳化剤、防腐剤、固体結合剤、潤滑剤などを含む、薬学上許容される添加剤と、本発明の化合物を一緒に含む。
【００６２】
薬学的に許容される賦形剤として役立ち得る材料のいくつかの例には、限定するものではないが、ラクトース、グルコースおよびスクロースのような糖類；トウモロコシデンプンおよびジャガイモデンプンのようなデンプン；ナトリウムカルボキシメチルセルロース、エチルセルロースおよび酢酸セルロースのような、セルロースおよびその誘導体、粉末のトラガカント；麦芽；ゼラチン；タルク；カカオバターおよび坐薬ワックスのような賦形剤；ピーナッツ油、綿実油、ベニバナ油；胡麻油；オリーブオイル；コーン油および大豆油などの油類；プロピレングリコールのようなグリコール；オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチル等のエステル類；寒天；水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウム等の緩衝剤；アルギン酸；発熱物質を含まない水；等張性生理食塩水；リンゲル溶液；エチルアルコールおよびリン酸緩衝液、ラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウムのような他の非毒性適合性潤滑剤、着色剤、離型剤、コーティング剤、甘味剤、着香剤および芳香剤、防腐剤および酸化防止剤を含む。
【００６３】
「薬学的に許容される（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｌｙ  ａｃｃｅｐｔａｂｌｅ）」および「生理学的に許容される（ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ  ａｃｃｅｐｔａｂｌｅ）」という用語は、特に限定することなく、生体に投与される医薬組成物を調製するのに適した、任意の物質を定義することを意図する。
【００６４】
第３の実施形態において、本発明は、医薬において使用するための、式（Ｉ）の化合物に関する。
【００６５】
第４の実施形態では、本発明は、細菌感染症の治療に使用するための、式（Ｉ）の化合物に関する。
【００６６】
第５の実施形態では、本発明は、式（Ｉ）の化合物を、それを必要とする患者に投与することを含む、細菌感染の治療方法に関する。
【００６７】
好ましくは、前記細菌感染症は、皮膚感染症、粘膜感染症、婦人科（ｇｙｎａｅｃｏｌｏｇｉｃａｌ）感染症、気道感染症（ＲＴＩ）、ＣＮＳ感染症、胃腸感染症、骨感染症、心血管感染症、性感染症、または尿路感染症である。
【００６８】
より詳細には、前記細菌感染症は、慢性気管支炎（ＡＣＥＢ）の急性増悪（ａｃｕｔｅ  ｅｘａｃｅｒｂａｔｉｏｎ）、急性中耳炎（ａｃｕｔｅ  ｏｔｉｔｉｓ  ｍｅｄｉａ）、急性副鼻腔炎（ａｃｕｔｅ  ｓｉｎｕｓｉｔｉｓ）、薬剤耐性菌による感染症、カテーテル関連敗血症（ｃａｔｈｅｔｅｒ−ｒｅｌａｔｅｄ  ｓｅｐｓｉｓ）、卒中（ｃｈａｎｃｒｏｉｄ）、クラミジア、市中肺炎（ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ−ａｃｑｕｉｒｅｄ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａ）（ＣＡＰ）、複雑な皮膚および皮膚構造感染症（ｃｏｍｐｌｉｃａｔｅｄ  ｓｋｉｎ  ａｎｄ  ｓｋｉｎ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ）、複雑でない皮膚および皮膚構造感染症（ｕｎｃｏｍｐｌｉｃａｔｅｄ  ｓｋｉｎ  ａｎｄ  ｓｋｉｎ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ）、心内膜炎（ｅｎｄｏｃａｒｄｉｔｉｓ）、発熱性好中球減少症（ｆｅｂｒｉｌｅ  ｎｅｕｔｒｏｐｅｎｉａ）、淋菌性頸管炎（ｇｏｎｏｃｏｃｃａｌ  ｃｅｒｖｉｃｉｔｉｓ）、淋菌性尿道炎（ｇｏｎｏｃｏｃｃａｌ  ｕｒｅｔｈｒｉｔｉｓ）、院内感染性肺炎（ｈｏｓｐｉｔａｌ−ａｃｑｕｉｒｅｄ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａ）（ＨＡＰ）、骨髄炎（ｏｓｔｅｏｍｙｅｌｉｔｉｓ）、敗血症（ｓｅｐｓｉｓ）、梅毒（ｓｙｐｈｉｌｉｓ）、人工呼吸器関連肺炎（ｖｅｎｔｉｌａｔｏｒ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａ）、腹腔内感染（ｉｎｔｒａａｂｄｏｍｉｎａｌ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ）、淋病（ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ）、髄膜炎（ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｓ）、破傷風（ｔｅｔａｎｕｓ）、または結核である。
【００６９】
さらに、前記細菌感染は、ヘリコバクターピロリまたはクラミジア肺炎による感染に関連するアテローム性動脈硬化症または心血管疾患；β‐ラクタム、バンコマイシン、アミノグリコシド、キノロン、クロラムフェニコール、テトラサイクリンおよびマクロライドが含まれるが、これらに限定されない、公知の抗菌剤に耐性な株を含む、黄色ブドウ球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、ブドウ球菌（Ｓ．ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ）、糞便レンサ球菌（Ｅ．ｆａｅｃａｌｉｓ）、バンコマイシン耐性腸球菌（Ｅ．ｆａｅｃｉｕｍ）、エンテロコッカス・デュラン（Ｅ．ｄｕｒａｎｓ）に起因する、心内膜炎および骨髄炎を含む、血液および組織感染症；気管支炎；カテーテル関連敗血症；軟性下かん（ｃｈａｎｃｒｏｉｄ）；クラミジア；地域性肺炎（ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ−ａｃｑｕｉｒｅｄ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａ）；マイコバクテリウム・アビウム（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｖｉｕｍ）またはマイコバクテリウム・イントラセルレア（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｅ）による感染に関連する、播種性マイコバクテリウム・アビウム複合体（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｖｉｕｍ  ｃｏｍｐｌｅｘ）（ＭＡＣ）；心内膜炎（ｅｎｄｏｃａｒｄｉｔｉｓ）；発熱性好中球減少症（ｆｅｂｒｉｌｅ  ｎｅｕｔｒｏｐｅｎｉａ）；ウェルシュ菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）またはバクテロイデス属菌種（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｓｐｐ）による感染に関連するガス壊疽（ｇａｓ  ｇａｎｇｒｅｎｅ）；胃腸炎感染症（ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｉｔｉｓ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ）；溶血性レンサ球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓ）、Ｃ群およびＧ群連鎖球菌（Ｇｒｏｕｐｓ  Ｃ  ａｎｄ  Ｇ  ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ）、ジフテリア菌（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ）またはアクチノバシラス・ヘモリティクム（Ａｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｍ）による感染に関連する糸球体腎炎（ｇｌｏｍｅｒｕｌｏｎｅｐｈｒｉｔｉｓ）；淋菌性子宮頸管炎（ｇｏｎｏｃｏｃｃａｌ  ｃｅｒｖｉｃｉｔｉｓ）；淋菌性尿道炎（ｇｏｎｏｃｏｃｃａｌ  ｕｒｅｔｈｒｉｔｉｓ）；婦人科感染症；院内感染肺炎（ＨＡＰ）；薬剤耐性細菌によって引き起こされる感染症；結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）、らい菌（Ｍ．ｌｅｐｒａｅ）、ヨーネ菌（Ｍ．ｐａｒａｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）、マイコバクテリウム・カンサシイ（Ｍ．ｋａｎｓａｓｉｉ）、または非結核性抗酸菌（Ｍ．ｃｈｅｌｏｎｅｉ）によって引き起こされる感染症；クリプトスポリジウム属菌種（Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ  ｓｐｐ）による感染症に関連する腸原生動物（ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ｐｒｏｔｏｚｏａ）；ボレリア−ブルグドルフェリ（Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ）による感染に関連するライム病；クラミジア・トラコマチス（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ）、ナイセリア・ゴノレエエ（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ）、黄色ブドウ球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、肺炎連鎖球菌（Ｓ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、ストレプトコッカス・ピオゲネス（Ｓ．ｐ��ｏｇｅｎｅｓ）、インフルエンザ菌、またはリステリア属菌種による感染に関連する結膜炎、角膜炎および膀胱炎；肺炎球菌、インフルエンザ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｊｌｕｅｎｚａｅ）、モラクセラ・カタラーリス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ）、黄色ブドウ球菌、腸球菌、エンテロコッカス・フェシウム、エンテロコッカス・カセリフラバス（Ｅ．ｃａｓｓｅｌｉｆｌａｖｕｓ）、表皮ブドウ球菌（Ｓ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）、ブドウ球菌（Ｓ．ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ）またはペプトストレプトコッカス菌種（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐｐ）の感染に関連する乳腺炎（ｍａｓｔｏｉｄｉｔｉｓ）；ビリダンス連鎖球菌（ｖｉｒｉｄａｎｓ  ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ）による感染に関連する歯原性感染（ｏｄｏｎｔｏｇｅｎｉｃ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ）；骨髄炎（ｏｓｔｅｏｍｙｅｌｉｔｉｓ）；中耳炎（ｏｔｉｔｉｓ  ｍｅｄｉａ）；百日咳菌（Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）による感染に関連する持続的な咳；咽頭炎（ｐｈａｒｙｎｇｉｔｉｓ）；黄色ブドウ球菌、コアグラーゼ陰性ブドウ球菌、ストレプトコッカス・ピオゲネス、ストレプトコッカス・アガラクティエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ａｇａｌａｃｔｉａｅ）、連鎖球菌群Ｃ−Ｆ（微小コロニー連鎖球菌）、ビリダンス連鎖球菌コリネバクテリウム・ミューニシムス（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｍｉｎｕｔｉｓｓｉｍｕｍ）、クロストリジウム属菌種（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｓｐｐ）、またはバルトネラ・ヘンセラエ（Ｂａｒｔｏｎｅｌｌａ  ｈｅｎｓｅｌａｅ）の感染に関連する子宮内発熱（ｐｕｅｒｐｅｒａｌ  ｆｅｖｅｒ）；マイコプラズマ・ニューモニエ（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、レジオネラ・ニューモフィラ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ）、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、ヘモフィルス・インフルエンザエ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｊｌｕｅｎｚａｅ）、またはクラミジア・ニューモニエ（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）による感染に関連する気道感染症；リウマチ熱；敗血症；クラモジア・トラコマチス（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ）、ヘモフィルス・デュクレイイ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｄｕｃｒｅｙｉ）、トレポネーマ・パリダム（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ  ｐａｌｌｉｄｕｍ）、ウレアプラズマ・ウレアリアムム（Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ  ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ）、またはネイセリア・ゴノレエエ（Ｎｅｉｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ）による感染に関連する性感染症；副鼻腔炎；梅毒；回帰熱（Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｒｅｃｕｒｒｅｎｔｉｓ）による感染に関連した全身性熱性症候群；扁桃炎；黄色ブドウ球菌（食中毒および毒素ショック症候群）またはＡ群、Ｂ群およびＣ群の連鎖球菌による感染に関連する毒素疾患；ヘリコバクター・ピロリによる感染に関連する潰瘍；スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）、凝固酵素陰性ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ｃｏａｇｕｌａｓｅ−ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏ��ｃａｌ）種またはエンテロコッカス菌種（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐｐ）による感染に関連する単純急性尿路感染症；複雑でない皮膚および軟部組織の感染症および膿瘍；尿道炎および子宮頸管炎；尿路感染；中枢神経系感染；ブドウ球菌によるデバイス関連感染症；ブドウ球菌による筋骨格感染症；志賀毒素産生大腸菌；ヘモフィルスインフルエンザ（インフルエンザ菌）（侵襲性疾患）；レジオネラシス；オウム病クラミジア−シッタシ；サルモネラ属菌種に起因するサルモネラ症；シゲラ属菌種によるシゲラ症；連鎖球菌毒素ショック症候群；ブドウ球菌毒素ショック症候群；およびサルモネラ・チフスによって引き起こされる腸チフスおよび腸炎、であり得る。
【００７０】
細菌感染症は、アシネトバクター属菌種（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐｐ）、バクテロイデス属菌種（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｓｐｐ）、バークホルデリア属菌種（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｓｐｐ）、カンピロバクター属菌種（Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐｐ）、クラミジア属菌種（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｓｐｐ）、クラミドフィラ属菌種、クロストリジウム属菌種（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｓｐｐ）、エンテロバクター属菌種（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐｐ）、エンテロコッカス属菌種（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐｐ）、エシェリキア属菌種（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｓｐｐ）、ガードネレラ属菌種（Ｇａｒｄｎｅｒｅｌｌａ  ｓｐｐ）、ヘモフィルス属菌種（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｓｐｐ）、ヘリコバクター属菌種（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐｐ）、クラブシエラ属菌種（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐｐ）、レジオネラ属菌種（Ｒｅｓｉｏｎｅｌｌａ  ｓｐｐ）、モラクセラ属菌種（Ｍｏｒｉｏｎｅｌｌａ  ｓｐｐ）、モルガネラ属菌種（Ｍｏｒｇａｎｅｌｌａ  ｓｐｐ）、マイコプラズマ属菌種（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｓｐｐ）、ナイセリア属菌種、ペプトストレプトコッカス属菌種、プロテウス属菌種、シュードモナス属菌種、サルモネラ属菌種、セラチア属菌種、ブドウ球菌属、ストレプトコッカス属菌種、ステノトロホモナス属菌種（Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓ  ｓｐｐ）、ウレアプラスマ属菌種、好気性菌（ａｅｒｏｂｅｓ）、偏性嫌気性微生物（ｏｂｌｉｇａｔｅ  ａｎａｅｒｏｂｅｓ）、通性嫌気性細菌（ｆａｃｕｌｔａｔｉｖｅ  ａｎａｅｒｏｂｅｓ）、グラム陽性細菌、グラム陰性菌、グラム可変細菌、および非定型呼吸器病原体により惹き起される感染症で在り得る。
【００７１】
より具体的には、細菌感染症は、アシネトバクター・バウマニ（ｂａｕｍａｎｉｉ）、アシネトバクター・ヘモリチカス、アシネトバクター・ジュニイ（ｊｕｎｉｉ）、アシネトバクター・ジョンソニイ、アシネトバクター・イオフィイ（ｌｗｏｆｆｉ）、バクテロイデス・ビビアス（ｂｉｖｉｕｓ）、バクテロイデス・フラジリス、バークホルデリア・セパシア、カンピロバクター・ジェジュニ（Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ）、クラミジア・ニューモニエ、クラミジア・ウレアリチカス（ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｓ）、クラミドフィラ・ニューモニエ、クロストリジウム・ディフィシル、エンテロバクター・アエロゲネス、エンテロバクター・クロアカエ、エンテロコッカス・フェカリス、エンテロコッカス・フェシウム、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）、ガードネレラ・バギナリス、ヘモフィルス・パラインフルエンザ、インフルエンザ菌（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）、ヘリコバクター・ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ）、肺炎桿菌（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、レジオネラ・ニューモフィラ、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌、メチシリン感受性黄色ブドウ球菌、モラクセラ・カタラーリス、モルガネラ・モルガニ、マイコプラズマ・ニューモニエ（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、淋菌、ペニシリン耐性肺炎連鎖球菌、ペニシリン感受性肺炎連鎖球菌、ペプトストレプトコッカス・マグナス、ペプトストレプトコッカス・ミクロス、ペプトストレプトコッカス・アナエロビアス（ａｎａｅｒｏｂｉｕｓ）、ペプトストレプトコッカス・アサカロリチカス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ａｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃｕｓ）、ペプトストレプトコッカス・プレボチイ（ｐｒｅｖｏｔｉｉ）、ペプトストレプトコッカス・テトラディアス（ｔｅｔｒａｄｉｕｓ）、ペプトストレプトコッカス・バギナリス、プロテウス・ミラビリス、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、キノロン耐性黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）、キノロン耐性表皮ブドウ球菌、腸チフス菌、サルモネラ菌パラチフス、サルモネラ・エンテ、ネズミチフス菌、霊菌、黄色ブドウ球菌、表皮ブドウ球菌、スタフィロコッカス・サプロフィチカス、ストレプトコッカス・アガラクティエ、肺炎連鎖球菌、化膿連鎖球菌、ステノトロホモナス・マルトフィリア、ウレアプラズマリティクム、バンコマイシン耐性エンテロコッカス・フェシウム、バンコマイシン耐性エンテロコッカス・フェカリス、バンコマイシン耐性黄色ブドウ球菌、及びバンコマイシン耐性表皮ブドウ球菌によって引き起こされる感染症で在り得る。
【００７２】
本発明の化合物の例を以下の表１に示す。
【００７３】
【表１】
2017537938.tif 000010
【００７４】
【表２】
2017537938.tif 000011
【００７５】
【表３】
2017537938.tif 000012
【００７６】
【表４】
2017537938.tif 000013
【００７７】
【表５】
2017537938.tif 000014
【００７８】
【表６】
2017537938.tif 000015
【００７９】
【表７】
2017537938.tif 000016
【００８０】
以下の合成例で説明したように、上記化合物を調製することができる。
【００８１】
当業者は、Ａ、Ｌ１、Ｂ、Ｌ２、Ｙ、Ｌ３及びＣについて様々な選択肢を含む化合物を含む、本発明の化合物の、合成、回収および特性決定のために有用な、合成戦略、保護基および他の材料および方法についての指針として、以下の実施例に含まれる情報と組み合わせて利用できる、複素環および他の関連する化学変換、回収および精製技術の確立された文献を有する。
【００８２】
以下に概略的に示される、それらのアプローチを含む、本明細書に記載の化合物を製造するために、様々な合成アプローチを使用することができる。当業者は、これらのアプローチにおいて、保護基が使用できることを理解する。
「保護基」は、潜在的に反応性の部位（例えば、アミン、ヒドロキシ、チオール、アルデヒドなど）での、化学反応を、一時的にブロックして、多官能性の化合物の別の部位で、選択的に反応を行うことができるように、使用することができる、化合物の部分である。
好ましい実施形態において、保護基は、良好な収率で選択的に反応して、計画された反応に適した保護された基質を与える。保護基は、存在する他の官能基を不当に攻撃しない、容易に入手可能な、好ましくは非毒性の試薬によって、良好な収率で、選択的に、除去可能でなければならない。保護基は、好ましくは、容易に分離可能な誘導体を形成する（より好ましくは、新しい立体中心を生成しない）。そして、保護基は、好ましくは、さらなる反応部位の複雑化を回避するために、最小限の追加の官能性を有する。様々な保護基およびそれらを配置および除去するための戦略、試薬および条件は、当技術分野で公知である。
【００８３】
また、所望の同位体、例えば、水素の代わりにトリチウムを富化した試薬を選択して、そのような同位体を含む本発明の化合物を作製してもよい。１つ以上の位置において、水素の代わりにトリチウムを含む、またはＣ、Ｎ、Ｐ及びＯの各種同位体を含む化合物は、本発明によって包含され、そして、例えば、化合物の代謝および／または組織分布を研究するために、または、代謝または生物学的な機能の他の側面の速度や経路を変更するために使用することができる。
【００８４】
本発明の化合物は、有機合成化学の分野で公知の合成方法と共に、または、当業者によって理解されている、その変法によって、下記の方法を用いて合成することができる。好適な方法としては、下記のものを含み、これらに限定されるものではない。反応は、採用される試薬および材料に適し、そして、達成される変換に適した、溶媒中で行われる。これは、分子上に存在する官能基は、所望の変換に一致している必要があることは、有機合成の当業者によって理解される。これは、時々、本発明の所望の化合物を得るために、合成ステップの順序を変更し、またはその他から１つの特定のプロセススキームを選択する、ある判断が必要な場合がある。
【００８５】
以下に記載された合成経路に概説されるように、および当業者に公知の標準的方法によって本発明の化合物を調製することができる。
【００８６】
［実施例］
以下に記載する合成経路で使用される略語のリスト：
Ｂｏｃ：ｔｅｒｔーブチルカルバメート
ｃＨｅｘ：シクロヘキサン
ＣＶ：カラム容量
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＩＰＥＡ：Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＡ：Ｎ、Ｎ−ジメチルアセトアミド
ＤＭＦ：Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
Ｅｔ２Ｏ：ジエチルエーテル
ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル
ＥｔＯＨ：エタノール
ＨＡＴＵ：１−［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジニウム−３−オキシド  ヘキサフルオロホスフェート
ＨＢＴＵ：Ｎ、Ｎ、Ｎ’、Ｎ’−テトラメチル−Ｏ−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）ウロニウム  ヘキサフルオロホスフェート
ＬＣ：液体クロマトグラフィー
ＭｅＣＮ：アセトニトリル
ＭｅＯＨ：メタノール
ＭＳ：質量分析
ＴＥＡ：トリエチルアミン
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
Ｐｄ／Ｃ：活性炭上のパラジウム
Ｐｄ（ｄｂａ）２：ビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）
Ｐｄ（ＯＡｃ）２：パラジウム（ＩＩ）アセテート
ＵＰＬＣ：超高速液体クロマトグラフィー
【００８７】
化合物２の調製：
Ｎ−｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝ピリジン−３−カルボキサミド塩酸塩
化合物２を、以下に説明されるように調製した。
【化９】
2017537938.tif 000017
【００８８】
ステップ１
Ｎ−（３，３−ジエトキシプロピル）ピリジン−３−カルボキサミド（２ａ）
ピリジン−３−カルボニルクロリド（１０グラム、５６．２ミリモル、１当量）を、ＴＥＡ（１９．５ミリリットル、１４０．４ミリモル、２．５当量）を含む、ＤＭＦ（５０ミリリットル）およびＣＨ３ＣＮ（２００ミリリットル）に溶解した。３，３−ジエトキシプロパン−１−アミン（１０．３５グラム、７０．２ミリモル、１．２５当量）のＣＨ３ＣＮ（２０ミリリットル）溶液を、０℃で、添加した。溶液を、一晩、撹拌し、次いで、濃縮し、ＤＣＭで希釈し、そして、飽和ＮａＨＣＯ３及びブラインで洗浄した。次いで、有機層を、分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、そして、真空中で蒸発させ、Ｎ−（３，３−ジエトキシプロピル）ピリジン−３−カルボキサミド２ａ（６．８グラム、収率４５％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）：２５３．０
【００８９】
ステップ２
Ｎ−（３−オキソプロピル）ピリジン−３−カルボキサミド（２ｂ）
中間体２ａ（５００ミリグラム、１．９８ミリモル、１当量）を、ＤＣＭ（５ミリリットル）に溶解した。ＴＦＡ（２ミリリットル）を加え、そして、３時間後、溶液を濃縮し、そして、トルエン、ジエチルエーテルおよび酢酸エチルで、数回、洗浄し、Ｎ−（３−オキソプロピル）ピリジン−３−カルボキサミド２ｂを、９００ミリグラム（収率は定量的）得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）：１７９．０
【００９０】
ステップ３
１−（ピペラジン−１−イル）イソキノリン（２ｃ）
１−クロロイソキノリン（３グラム、１８．３ミリモル、１当量）を、ピペラジン（２３．７グラム、２７４．５ミリモル、１５当量）および炭酸カリウム（３．８グラム、２７．５ミリモル、１．５当量）と共に、ＣＨ３ＣＮ（１５０ミリリットル）に溶解した。溶液を、４８時間、加熱還流し、次いで、濃縮し、ＤＣＭ（２５０ミリリットル）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３及びブラインで洗浄した。有機層を、分離し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして、真空中で蒸発させ、１−（ピペラジン−１−イル）イソキノリン２ｃ（３．９グラム、収率９４％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）：２１４．１
【００９１】
ステップ４
Ｎ−｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝ピリジン−３−カルボキサミド塩酸塩（２）
中間体２ｂ（１５０ミリグラム、０．５１ミリモル、１当量）を、ＤＣＭ（５ミリリットル）に溶解した。ＤＩＰＥＡ（０．０７８ミリリットル、０．４５ミリモル、０．９当量）、酢酸（一滴）および中間体２ｃ（８７ミリグラム、０．４１ミリモル、０．８当量）を、室温で続けて添加した。１０分後、ナトリウム  トリアセトキシボロヒドリド（１４１ミリグラム、０．６６ミリモル、１．３当量）を添加し、そして、溶液を、撹拌しながら、一晩、放置した。混合物を、ＤＣＭで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３および飽和塩化ナトリウム水で、洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空中で蒸発させた。粗製物質を、ＮＨ−カラムを用いて、酢酸エチルで溶出して精製し、所望のアミン（７８ミリグラム、０．２１ミリモル）を得た。生成物を、ＤＣＭ（５ミリリットル）に溶解し、そして、１ＭのＨＣｌのＥｔ２Ｏ（０．８４ミリリットル、４当量）を、０℃で滴下した。溶液を、２時間、撹拌し、次いで、真空で濃縮し、そして、ジエチルエーテルでトリチュレートし、表題化合物、Ｎ−｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝ピリジン−３−カルボキサミド塩酸塩２を、得た（７９ミリグラム、収率３９％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）：３７６．２
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ＝１１．３７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），９．２９−９．１４（ｍ，２Ｈ），８．８８（ｄｄ，Ｊ＝１．５，５．５Ｈｚ，１Ｈ），８．６０（ｔｄ，Ｊ＝１．８，８．１Ｈｚ，１Ｈ），８．２１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），８．０６（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，１Ｈ），８．０２（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），７．９３−７．７８（ｍ，２Ｈ），７．７２（ｄｄｄ，Ｊ＝１．４，７．０，８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．５９（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，１Ｈ），６．７１（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），４．０６（ｄ，Ｊ＝１３．５Ｈｚ，２Ｈ），３．８８−３．５６（ｍ，４Ｈ），３．４４（ｑ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，４Ｈ），３．３４−３．２０（ｍ，２Ｈ），２．０９（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ）
【００９２】
化合物３の調製
Ｎ−｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝ベンズアミド塩酸塩
化合物３は、ステップ１で、塩化ベンゾイルを用い、化合物２について記載した手順に従って調製した。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）：３７５．２
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  d  ＝１１．６８（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），８．７９（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ），８．２５（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），８．０６（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），８．０２（ｄｄ，Ｊ＝１．０，６．３Ｈｚ，１Ｈ），７．９８−７．８６（ｍ，３Ｈ），７．７５（ｄｄｄ，Ｊ＝１．１，７．０，８．５Ｈｚ，１Ｈ），７．６３（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，１Ｈ），７．５８−７．４１（ｍ，３Ｈ），４．１６（ｄ，Ｊ＝１３．５Ｈｚ，２Ｈ），３．９０（ｔ，Ｊ＝１２．４Ｈｚ，２Ｈ），３．６６（ｄ，Ｊ＝１３．１Ｈｚ，２Ｈ），３．５６−３．３４（ｍ，４Ｈ），３．２５（ｑｕｉｎ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，２Ｈ），２．０８（ｑｕｉｎ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ）
【００９３】
化合物４の調製
Ｎ−｛２−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］エチル｝ベンズアミド塩酸塩
化合物４は、ステップ１で、塩化ベンゾイルおよび２，２−ジエトキシエタンアミンを用いて、化合物２について記載した手順に従って調製した。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）：３６１．２
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  d  ＝８．７１（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ），８．１５（ｄ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，１Ｈ），８．１４（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），７．９３（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．９１−７．８７（ｍ，２Ｈ），７．７５（ｄｄｄ，Ｊ＝１．５，７．０，８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．６４（ｄｄｄ，Ｊ＝１．７，７．０，８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．６１−７．４５（ｍ，４Ｈ），６．０６（ｓ，２Ｈ），３．６８（ｑ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ），３．６３−３．１９（ｍ，１０Ｈ）
【００９４】
化合物１４の調製
【化１０】
2017537938.tif 000018
化合物１４は、ステップ３で、１，６−ジクロロイソキノリンを使用して、化合物２の合成に関して記載された手順に従って、調製した（収率７８％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４１０．２
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  d  ＝１１．３６（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），９．３０（ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ），９．２５（ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ），８．９０（ｄｄ，Ｊ＝１．３，５．３Ｈｚ，１Ｈ），８．６７（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），８．１９（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ），８．１４（ｄ，Ｊ＝３．３Ｈｚ，１Ｈ），８．１３（ｓ，１Ｈ），７．８８（ｄｄ，Ｊ＝５．４，８．１Ｈｚ，１Ｈ），７．６７（ｄｄ，Ｊ＝２．１，９．１Ｈｚ，１Ｈ），７．５１（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ），３．９６（ｄ，Ｊ＝１３．９Ｈｚ，２Ｈ），３．７６−３．５４（ｍ，４Ｈ），３．５０−３．３４（ｍ，４Ｈ），３．３２−３．１９（ｍ，Ｊ＝４．６Ｈｚ，２Ｈ），２．１９−１．９９（ｍ，２Ｈ）
【００９５】
化合物２１の調製
Ｎ−｛３−［４−（３−メチルイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝ピリジン−３−カルボキサミド塩酸塩
化合物２１は、ステップ３において、１−クロロ−３−メチルイソキノリンを用い、化合物２について記載した手順に従って、調製した。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）：３９０．２
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ＝１１．３７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），９．３０（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ），９．２５（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１Ｈ），８．９０（ｄｄ，Ｊ＝１．４，５．１Ｈｚ，１Ｈ），８．６５（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），８．１２（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），７．９２−７．８３（ｍ，２Ｈ），７．７８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．６０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．３７（ｓ，１Ｈ），７．３０−５．９８（ｍ，３Ｈ），５．７６（ｓ，１Ｈ），３．９８（ｄ，Ｊ＝１３．３Ｈｚ，２Ｈ），３．７８−３．５４（ｍ，４Ｈ），３．５１−３．３４（ｍ，４Ｈ），３．２７（ｔｄ，Ｊ＝４．６，９．６Ｈｚ，２Ｈ），２．５４（ｓ，３Ｈ），２．１９−１．９９（ｍ，１Ｈ）
【００９６】
化合物２８の調製
４−（｛１−［３−（イソキノリン−１−イル）プロパ−２−イン−１−イル］ピペリジン−４−イル｝アミノ）−２Ｈ−クロメン−２−オン
化合物２８は、以下の説明のように調製した。
【化１１】
2017537938.tif 000019
【００９７】
ステップ１
２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−イル  トリフルオロメタンスルホネート（２８ａ）
４−ヒドロキシクマリン（１グラム、６．１７ミリモル、１当量）を、ＤＣＭ（３０ミリリットル）に溶解し、トリエチルアミン（１．７２ミリリットル、１２．３４ミリモル、２当量）を添加し、そして、得られた混合物を、−１０℃に冷却した。トリフルオロメタンスルホン酸無水物（１．２５ミリリットル、７．４ミリモル、１．２当量）のＤＣＭ（５ミリリットル）を滴下し、そして、溶液を、２時間、−１０℃で、撹拌した。得られた赤褐色溶液を、室温まで加温し、ｃＨｅｘ／Ｅｔ２Ｏ  １／１（５０ミリリットル）で希釈し、そして、溶離液として、ｃＨｅｘ／Ｅｔ２Ｏ  １／１を用いて、シリカゲルのパッドを通して濾過した。溶媒を、真空中で除去し、２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−イル  トリフルオロメタンスルホネート２８ａ（１．７６グラム、収率９７％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）：２９５．０
【００９８】
ステップ２
ｔｅｒｔ−ブチル  ４−［（２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−イル）アミノ］ピペリジン−１−カルボキシレート（２８ｂ）
トリエチルアミン（１ミリリットル、７．２ミリモル、１．２当量）のアセトニトリル（２ミリリットル）を、中間体２８ａ（１．７６グラム、５．９９ミリモル、１当量）および１−Ｂｏｃ−４−アミノピペリジン（１．２グラム、５．９９ミリモル、１当量）の乾燥アセトニトリル（２０ミリリットル）の撹拌溶液に、滴下した。混合物を、２時間、加熱還流し、次いで、室温に冷却し、ＤＣＭ（１００ミリリットル）で希釈し、そして、飽和ＮａＨＣＯ３（５０ミリリットル）および水（５０ミリリットル）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして、真空中で蒸発させた。粗製物質を、メタノールでトリチュレートにより精製して、ｔｅｒｔ−ブチル  ４−［（２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−イル）アミノ］ピペリジン−１−カルボキシレート２８ｂ（１．５１グラム、収率７３％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）：３４５．２
【００９９】
ステップ３
４−（ピペリジン−４−イルアミノ）−２Ｈ−クロメン−２−オン  トリフルオロ酢酸塩（２８ｃ）
中間体２８ｂ（１グラム、２．９０ミリモル、１当量）を、ＤＣＭ（１０ミリリットル）に溶解し、そして、ＴＦＡ（３ミリリットル）を、０℃で、滴下した。溶液を、２時間、撹拌し、次いで、真空中で濃縮し、そして、トルエン（２５ミリリットル）およびジエチルエーテル（２５ミリリットル）で洗浄し、４−（ピペリジン−４−イルアミノ）−２Ｈ−クロメン−２−オン  トリフルオロ酢酸塩２８ｃを得、さらに精製することなく使用した（１．２２グラム、収率は定量的）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）：２４５．１
【０１００】
ステップ４
４−｛［１−（プロパ−２−イン−１−イル）ピペリジン−４−イル］アミノ｝−２Ｈ−クロメン−２−オン（２８ｄ）
中間体２８ｃ（５０ミリグラム、０．１４ミリモル、１当量）および炭酸カリウム（３８．７ミリグラム、０．２８ミリモル、２当量）のＤＭＦ（２ミリリットル）溶液に、３−ブロモ−１−プロピン（２０．８ミリグラム、０．１４ミリモル、１当量）を、室温で、加えた。反応物を、一晩、攪拌放置し、次いで、濾過し、そして、濾液を濃縮した。残渣を、シリカゲルカラムにより、ＥｔＯＡｃから、ＥｔＯＡｃ／メタノール８：２で溶出することにより、精製し、４−｛［１−（プロパ−２−イン−１−イル）ピペリジン−４−イル］アミノ｝−２Ｈ−クロメン−２−オン  ２８ｄ（２５．６ミリグラム、収率６４％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）：２８３．１
【０１０１】
ステップ５
４−（｛１−［３−（イソキノリン−１−イル）プロパ−２−イン−１−イル］ピペリジン−４−イル｝アミノ）−２Ｈ−クロメン−２−オン（２８）
中間体２８ｄ（１８６ミリグラム、０．６６ミリモル、１当量）、１−クロロイソキノリン（１２０ミリグラム、０．７２ミリモル、１．１当量）およびＣｕＩ（１２ミリグラム、０．０６６ミリモル、０．１当量）を、乾燥ＤＭＦ（３．６ミリリットル）に溶解した。ＤＩＰＥＡ（０．４７３ミリリットル、２．６４ミリモル、４当量）を添加した。混合物を、真空および窒素を、交互に適用することにより脱気し、次いで、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（４５ミリグラム、０．０６６ミリモル、０．１当量）を添加し、そして、混合物を、６０℃で、加熱した。３時間後、水（１０ミリリットル）を添加し、そして、混合物を、酢酸エチル（３×１０ミリリットル）で抽出した。有機層を、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして、真空中で濃縮して、粗製物質２８３ミリグラムを得た。シリカゲルカラムによる精製を、ＥｔＯＡｃから、ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ  ８：２で溶出した後、化合物、４−（｛１−［３−（イソキノリン−１−イル）プロパ−２−イン−１−イル］ピペリジン−４−イル｝アミノ−２Ｈ−クロメン−２−オン２８（８７ミリグラム、収率３２％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）：４１０．２
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール−ｄ４）  δ  ＝８．４２−８．３４（ｍ，２Ｈ），７．９７−７．９３（ｍ，１Ｈ），７．８９（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．７９−７．６６（ｍ，３Ｈ），７．５８−７．４９（ｍ，１Ｈ），７．２８−７．２０（ｍ，２Ｈ），５．３０（ｓ，１Ｈ），３．７８（ｓ，２Ｈ），３．６０−３．４７（ｍ，１Ｈ），３．１３（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，２Ｈ），２．５９（ｄｔ，Ｊ＝１．８，１１．８Ｈｚ，２Ｈ），２．１１（ｄ，Ｊ＝１１．３Ｈｚ，２Ｈ），１．７９（ｄｑ，Ｊ＝３．０，１２．０Ｈｚ，２Ｈ）
【０１０２】
化合物３１の調製
Ｎ−｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝フロ［３，２−ｂ］ピリジン−６−カルボキサミド塩酸塩
化合物３１は、以下の説明のように調製した。
【化１２】
2017537938.tif 000020
【０１０３】
ステップ１
ｔｅｒｔ−ブチル  ｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝カルバメート（３１ａ）
１−（ピペラジン−１−イル）イソキノリン２ｃ（１．４０グラム、６．５４ミリモル、１当量）、ｔｅｒｔ−ブチル  Ｎ−（３−ブロモプロピル）カルバメート（１．４８グラム、６．２２ミリモル、０．９５当量）、カリウムヨウ化物（０．５４グラム、３．２７ミリモル、０．５０当量）および炭酸カリウム（１．８１グラム、１３．１ミリモル、２当量）のＤＭＦ（２０ミリリットル）の混合物を、室温で、２日間、撹拌した。反応物を、ＥｔＯＡｃ（２００ミリリットル）およびブライン（２５０ミリリットル）間で分配した。有機層を、分離し、次いで、ブライン（３×２００ミリリットル）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして、減圧下で蒸発させた。残渣を、シリカゲル（ＳＮＡＰ  １００）のクロマトグラフィーに付し、シクロヘキサン中のＡ（Ａは、ＭｅＯＨ／酢酸エチル（５：９５））である）の２０〜１００％の勾配で溶出し、２．１０グラムの（収率８７％）の、ｔｅｒｔ−ブチル  ｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝カルバメート３１ａを得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝３７１．２
【０１０４】
ステップ２
３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロパン−１−アミンのＴＦＡ塩（３１ｂ）
中間体３１ａ（６．３５グラム、８．７４ミリモル）を、ＤＣＭ（２５ミリリットル）に溶解し、そして、ＴＦＡ（１ミリリットル）を、０℃で、滴下した。溶液を、２時間、撹拌し、次いで、真空で濃縮し、トルエンおよびジエチルエーテルで洗浄し、３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロパン−１−アミンのＴＦＡ塩３１ｂ（６．３５グラム、収率９３％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）２７１．２
【０１０５】
ステップ３
Ｎ−｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝フロ［３，２−ｂ］ピリジン−６−カルボキサミドの塩酸塩（３１）
中間体３１ｂ（２５０ミリグラム、０．３４ミリモル、１当量）および市販のフロ［３，２−ｂ］ピリジン−６−カルボン酸（５６ミリグラム、０．３４ミリモル、１当量）を、乾燥ＤＭＦ（２ミリリットル）に溶解した。ＴＥＡ（０．２５ミリリットル、１．７ミリモル、５当量）を加え、混合物を、０℃に冷却し、そして、ＨＡＴＵ（１３６ミリグラム、０．３６ミリモル、１．０５当量）を添加した。室温で、２時間、撹拌した後、ＤＣＭを添加し、有機層を、飽和ＮａＨＣＯ３およびブラインで洗浄し、そして、真空中で蒸発させた。粗製物質を、シリカゲルカラムにより、ＥｔＯＡｃから、ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ  ８：２にで溶離して精製し、所望の化合物１００ミリグラムを得た。生成物を、ＤＣＭ（５ミリリットル）に溶解し、そして、ＨＣｌ（ジエチルエーテル中１Ｍ溶液、０．７０ミリリットル、４当量）を、０℃で、滴下した。溶液を、３０分間、撹拌し、次いで、真空で濃縮し、そして、ジエチルエーテルでトリチュレートし、Ｎ−｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝フロ［３，２−ｂ］ピリジン−６−カルボキサミドの塩酸塩３１（１２０ミリグラム、０．２３ミリモル、収率６８％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４１６．２
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ＝１１．４２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），９．０９（ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ），９．０５（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），８．５７（ｓ，１Ｈ），８．５１（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），８．２３（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ），８．１０−８．００（ｍ，２Ｈ），７．９１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．７４（ｄｄｄ，Ｊ＝１．０，７．０，８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．６１（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，１Ｈ），７．２５（ｄｄ，Ｊ＝１．０，２．４Ｈｚ，１Ｈ），４．１１（ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，２Ｈ），３．８１（ｔ，Ｊ＝１２．７Ｈｚ，２Ｈ），３．６７（ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，２Ｈ），３．５５−３．３６（ｍ，４Ｈ），３．３５−３．２０（ｍ，２Ｈ），２．１１（ｑｕｉｎ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）
【０１０６】
化合物３５の調製
Ｎ−｛３−［４−（６−メチルイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝ピリジン−３−カルボキサミド
化合物３５を、１−クロロ−６−メチルイソキノリンを、ステップ３で使用し、化合物２について記載した手順に従って調製した。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）：３９０．２
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ＝１１．４４（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），９．２６（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），９．２２（ｓ，１Ｈ），８．８８（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），８．５９（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），８．１４（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），７．９８（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，１Ｈ），７．８４（ｓ，２Ｈ），７．５９（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），７．５３（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，１Ｈ），４．１２（ｄ，Ｊ＝１４．３Ｈｚ，２Ｈ），３．８２（ｔ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ，２Ｈ），３．６６（ｄ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ，２Ｈ），３．５０−３．３５（ｍ，４Ｈ），３．３２−３．２１（ｍ，２Ｈ），２．５４（ｓ，３Ｈ），２．０８（ｑｕｉｎ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）
【０１０７】
化合物３６の調製
Ｎ−｛３−［４−（６−メトキシイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝ピリジン−３−カルボキサミドの塩酸塩
化合物３６は、ステップ３において、１−クロロ−６−メトキシイソキノリンを用いて、化合物２について記載した手順に従って調製した。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）：４０６．２
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ＝１１．０３（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），９．１３（ｄ，Ｊ＝１．３Ｈｚ，１Ｈ），９．０７（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，１Ｈ），８．８０（ｄｄ，Ｊ＝１．０，５．０Ｈｚ，１Ｈ），８．４０（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），８．１４（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ），７．９８（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，１Ｈ），７．７２−７．６４（ｍ，１Ｈ），７．５２（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ），７．４８（ｓ，１Ｈ），７．３２（ｄｄ，Ｊ＝２．３，９．３Ｈｚ，１Ｈ），４．３９−３．５３（ｍ，８Ｈ），３．４９−３．３３（ｍ，４Ｈ），３．３１−３．１９（ｍ，２Ｈ），２．１６−１．９５（ｍ，２Ｈ）
【０１０８】
化合物３８の調製
Ｎ−（２，５−ジフルオロベンジル）−３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロパン−１−アミンの塩酸塩
中間体３１ｂ（０．２１ミリモル、１当量）を、乾燥ＤＣＥ（３ミリリットル）に溶解し、そして、２，５−ジフルオロベンズアルデヒド（３２．８ミリグラム、０．２３ミリモル、１．１当量）、ＤＩＰＥＡ（０．１４６ミリリットル、０．８４ミリモル、４当量）および酢酸（一滴）を、室温で、続けて添加した。混合物を、６０℃で、４時間、撹拌した。水素化ホウ素ナトリウム（１２ミリグラム、０．３１５ミリモル、１．５当量）を添加した。混合物を、室温で、１２時間、撹拌し、次いで、ＤＣＭを加え、そして、混合物を、飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄した。回収した有機層を、真空中で蒸発させ、そして、粗製物質を、シリカゲル−カラムにより、酢酸エチルから、酢酸エチル／メタノール６：４で溶出して精製し、遊離塩基として、所望の化合物を得た。生成物を、ＤＣＭに溶解し、次いで、塩酸（ジエチルエーテル中、１Ｍ溶液、０．１５６ミリリットル、３当量）を、０℃で、滴下した。溶液を、２時間、撹拌し、次いで、真空で濃縮し、そして、ジエチルエーテルで、トリチュレートし、Ｎ−（２，５−ジフルオロベンジル）−３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロパン−１−アミン  塩酸塩  ３８（２６．６ミリグラム、収率２４％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）：３９７．２
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ＝１１．００（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），９．４７（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），８．２１−８．０８（ｍ，２Ｈ），７．９５（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７７（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７０−７．５９（ｍ，２Ｈ），７．５１（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４５−７．３２（ｍ，２Ｈ），５．７５（ｓ，１Ｈ），４．２３（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２Ｈ），３．９０（ｄ，Ｊ＝１２．８Ｈｚ，２Ｈ），３．５８（ｂｒ．ｓ．，４Ｈ），３．４３−３．２２（ｍ，４Ｈ），３．１８−３．０７（ｍ，２Ｈ），２．２２（ｑｕｉｎ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ）
【０１０９】
化合物３９の調製
２，５−ジフルオロ−Ｎ−｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝ベンズアミドの塩酸塩
化合物３９は、ステップ３で、２，５−ジフルオロ安息香酸を用いて、化合物３１について記載した手順に従って調製した。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）：４１１．２
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ＝１０．０４（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），８．６３−８．５３（ｍ，１Ｈ），８．１５（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ），７．９５（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７６（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６９−７．６０（ｍ，１Ｈ），７．５５−７．４５（ｍ，２Ｈ），７．４４−７．３２（ｍ，２Ｈ），３．８８（ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，２Ｈ），３．６３（ｂｒ．ｓ．，３Ｈ），３．４６−３．３２（ｍ，６Ｈ），３．２６（ｔｄ，Ｊ＝５．３，１０．７Ｈｚ，２Ｈ），２．００（ｑｕｉｎ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ）
【０１１０】
化合物４２の調製
Ｎ−｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝フロ［２，３−ｃ］ピリジン−５−カルボキサミド塩酸塩
化合物４２は、ステップ３において、フロ［２，３−ｃ］ピリジン−５−カルボン酸を用いて、化合物３１について記載した手順に従って調製した。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）：４８９．２
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ＝１０．２４（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），９．０７（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ），９．０３（ｓ，１Ｈ），８．４３（ｄ，Ｊ＝０．８Ｈｚ，１Ｈ），８．３６（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ），８．１５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），８．１２（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），７．９６（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．７９（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．６６（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．５２（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），７．２３（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１Ｈ），３．９１（ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，２Ｈ），３．６０（ｂｒ．ｓ．，４Ｈ），３．５０−３．３３（ｍ，５Ｈ），３．３１−３．１６（ｍ，２Ｈ），２．１６−１．９５（ｍ，２Ｈ）
【０１１１】
化合物４３の調製
Ｎ−｛３−［４−（１，６−ナフチリジン−５−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝ピリジン−３−カルボキサミド塩酸塩
化合物４３は、ステップ３において、５−クロロ−１，６−ナフチリジンを用いて、化合物２について記載した手順に従って調製した。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）：３７７．２
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ＝（ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）９．０４（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），９．００（ｄｄ，Ｊ＝１．６，４．１Ｈｚ，１Ｈ），８．７１（ｄｄ，Ｊ＝１．８，４．８Ｈｚ，１Ｈ），８．３９−８．３３（ｍ，２Ｈ），８．２２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），８．１７（ｔｄ，Ｊ＝１．９，８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．５２（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４３（ｄｄ，Ｊ＝４．３，８．５Ｈｚ，１Ｈ），７．３９（ｄｄ，Ｊ＝４．９，７．９Ｈｚ，１Ｈ），３．６５（ｑ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ），３．５６−３．４１（ｍ，４Ｈ），２．８１（ｂｒ．ｓ．，４Ｈ），２．７３（ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ），１．９１（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ）
【０１１２】
化合物４５の調製
Ｎ−｛３−［４−（６−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝ピリジン−３−カルボキサミド塩酸塩
化合物４５は、ステップ３において、１−クロロ−６−フルオロイソキノリンを用いて、化合物２について記載した手順に従って調製した。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）：３９４．２
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  d  ＝９．４０−９．３２（ｍ，１Ｈ），９．２８（ｓ，１Ｈ），８．９３（ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ），８．７２（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），８．３０（ｄｄ，Ｊ＝５．６，９．１Ｈｚ，１Ｈ），８．０９（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，１Ｈ），７．９９−７．８９（ｍ，１Ｈ），７．８４（ｄｄ，Ｊ＝２．２，９．５Ｈｚ，１Ｈ），７．６３−７．５２（ｍ，２Ｈ），４．０２（ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ，２Ｈ），３．７５（ｔ，Ｊ＝１２．６Ｈｚ，２Ｈ），３．６４（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，２Ｈ），３．４３（ｄｄｄ，Ｊ＝５．７，５．８，１１．８Ｈｚ，４Ｈ），３．３４−３．２０（ｍ，２Ｈ），２．２０−１．９７（ｍ，２Ｈ）
【０１１３】
化合物５０の調製
本明細書で以下に記載されるように、化合物５０を調製した。
ステップ１
ｔｅｒｔ−ブチル  Ｎ−｛３−［４−（ナフタレン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝カルバメートの合成：
【化１３】
2017537938.tif 000021
市販の、１−（ナフタレン−１−イル）ピペラジン塩酸塩（２００ミリグラム、０．８０ミリモル）、ｔｅｒｔ−ブチル  Ｎ−（３−ブロモプロピル）カルバメート（１８２ミリグラム、０．７６ミリモル）、ヨウ化カリウム（６６ミリグラム、０１６ミリモル）および炭酸カリウム（２２１ミリグラム、１．６ミリモル）のＤＭＦ（３ミリリットル）溶液を、室温で、１８時間、撹拌した。反応混合物を、ＥｔＯＡｃ（５０ミリリットル）およびブライン（５０ミリリットル）の間で分配し、有機層を、ブライン（５０ミリリットル）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして、減圧下で蒸発させた。残渣を、シリカゲル（ＳＮＡＰ  ２５）のクロマトグラフィーにかけ、シクロヘキサン中、３０から１００パーセントのＥｔＯＡｃの勾配で溶出し、２６３ミリグラム（０．７１ミリモル、収率９４％）の表題化合物を得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝３７０．４
【０１１４】
ステップ２
３−［４−（ナフタレン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロパン−１−アミンの合成：
【化１４】
2017537938.tif 000022
ＴＦＡ（２ミリリットル）を、ｔｅｒｔ−ブチル  Ｎ−｛３−［４−（ナフタレン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝カルバメート（２６１ミリグラム、０．７１ミリモル）のジクロロメタン（６ミリリットル）の溶液に添加した。得られた混合物を、室温で、１時間、撹拌し、次いで、揮発性物質を、減圧下で、蒸発させた。残渣を、ジクロロメタン（１０ミリリットル）に溶解し、そして、減圧下で、蒸発させる操作を、２回、繰り返した。得られた残留物を、ＭｅＯＨ（４ミリリットル）に溶解し、そして、予め処理された（ｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄ）ＳＣＸカートリッジ（５グラム）に付し、ＭｅＯＨで、そして、メタノール中の２Ｍアンモニア溶液で溶出した。塩基性画分を、減圧下で乾燥させ、１９３ミリグラム（０．７１ミリモル、定量的）の表題化合物を、白色固体として得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝２７０．３
【０１１５】
ステップ３
４−（｛３−［４−（ナフタレン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝アミノ）−２Ｈ−クロメン−２−オン塩酸塩（化合物５０）の合成：
【化１５】
2017537938.tif 000023
化合物５０は、化合物５３のステップ３の合成に記載の手順に従って調製した（収率２１％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４１４．２
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  d  ＝１０．７９（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），８．１９−８．０８（ｍ，２Ｈ），７．９８−７．８７（ｍ，２Ｈ），７．６７（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６１（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），７．５７−７．５０（ｍ，２Ｈ），７．４６（ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．３４（ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），７．３２（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．１８（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），５．２８（ｓ，１Ｈ），３．６４（ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，２Ｈ），３．５３−３．１９（ｍ，１０Ｈ），２．１６（ｑｕｉｎ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）
【０１１６】
化合物５３の調製
４−［｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝（メチル）アミノ］−２Ｈ−クロメン−２−オン塩酸塩
化合物５３は、以下のように調製した。
【０１１７】
ステップ１
ｔｅｒｔ−ブチル  ｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝メチルカルバメート（５３ａ）
【化１６】
2017537938.tif 000024
水素化ナトリウム（２４ミリグラム、鉱油中６０％分散物、０．６１ミリモル、１．５当量）を、中間体３１ａ（１５０ミリグラム、０．４１ミリモル、１当量）のＤＭＦ（２ミリリットル）撹拌溶液に、室温で、添加した。混合物を、１０分間、撹拌し、次いで、ヨードメタン（３８μＬ、０．６１ミリモル、１．５当量）を添加した。攪拌を、２時間、継続し、次いで、反応を、水（５０ミリリットル）でクエンチし、そして、ＥｔＯＡｃ（５０ミリリットル）で抽出した。有機層を、ブライン（５０ミリリットル）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして、減圧下で蒸発させた。残留物を、ＮＨ修飾シリカゲル（直列の２×ＳＮＡＰ  １１）クロマトグラフィーに付し、シクロヘキサン中、１０〜５０％のＥｔＯＡｃの勾配で溶出し、７８ミリグラムの、ｔｅｒｔ−ブチル  ｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝メチルカルバメート５３ａ（収率５０％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝３８５．４
【０１１８】
ステップ２
３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］−Ｎ−メチルプロパン−１−アミン（５３ｂ）
ＴＦＡ（１ミリリットル）を、室温で、中間体５３ａ（７８ミリグラム、０．２ミリモル、１当量）のジクロロメタン（３ミリリットル）溶液に加え、そして、得られた混合物を、６０分間、撹拌した。揮発性物質を、減圧下で蒸発させ、次いで、残渣を、ＭｅＯＨ（２ミリリットル）に溶解し、そして、予め処理された（ｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄ）ＳＣＸカートリッジ（１グラム）に付した。ＳＣＸは、メタノール、そして次いで、メタノール中の２Ｍアンモニア溶液で溶出した。塩基性画分を、減圧下で蒸発させ、５６ミリグラムの、３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］−Ｎ−メチルプロパン−１−アミン、５３ｂ（収率は定量的）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝２８５．３
【０１１９】
ステップ３
４−［｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝（メチル）アミノ］−２Ｈ−クロメン−２−オン塩酸塩（５３）
中間体５３ｂ（５６ミリグラム、０．２ミリモル、１．１当量）、トリエチルアミン（３７μＬ、０．２７ミリモル、１．５当量）および２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−イル  トリフルオロメタンスルホネート２８ａ（５３ミリグラム、０．１８ミリモル、１当量）のアセトニトリル（２ミリリットル）の溶液を、１時間、７０℃に加熱した。反応混合物を、減圧下で濃縮し、そして、残渣を、ジクロロメタン（１０ミリリットル）およびブライン／炭酸水素ナトリウムの混合物（１：１、１０ミリリットル）に分配した。混合物を、疎水性フリット（相分離器）に通して、ジクロロメタン（１０ミリリットル）で洗浄濾過した。有機層を、減圧下で蒸発させ、そして、残留物を、ＮＨ−修飾シリカゲル（直列の２×ＳＮＡＰ  １１）のクロマトグラフィーに付し、シクロヘキサン中、２０−１００％ＥｔＯＡｃの勾配を用いて溶出して、無色の粘着性ゴム、７９ミリグラムを得た。生成物を、ジクロロメタン（３ミリリットル）に溶解し、そして、１Ｍ  ＨＣｌのジエチルエーテル（０．４６ミリリットル）溶液で処理し、沈殿させた。得られた混合物を、減圧下で蒸発させ、そして、残渣を、ジエチルエーテルでトリチュレートした。固体を、乾燥し、８５ミリグラムの、４−［｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝（メチル）アミノ］−２Ｈ−クロメン−２−オン塩酸塩５３を、白色固体として得た（収率９５％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４２９．２
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ＝８．１９（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），８．１２（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），８．００（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．８８−７．８０（ｍ，１Ｈ），７．７１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．６３（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．５７（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４３−７．３４（ｍ，１Ｈ），５．６６（ｓ，１Ｈ），３．９８（ｄ，Ｊ＝１３．８Ｈｚ，２Ｈ），３．７３−３．５３（ｍ，４Ｈ），３．５１−３．３５（ｍ，４Ｈ），３．３１−３．１４（ｍ，２Ｈ），３．０８（ｓ，３Ｈ），２．２４（ｂｒ．ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）
【０１２０】
化合物５７の調製
４−（｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］−３−オキソプロピル｝アミノ）−２Ｈ−クロメン−２−オン塩酸塩
化合物５７は、以下のように調製した。
【化１７】
2017537938.tif 000025
【０１２１】
ステップ１
ｔｅｒｔ−ブチル  ｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］−３−オキソプロピル｝カルバメート（５７ａ）
１−（ピペラジン−１−イル）イソキノリン、２ｃ（１００ミリグラム、０．４６ミリモル、１当量）を、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ‘−エチルカルボジイミド塩酸塩（１０４ミリグラム、０．５４ミリモル、１．２当量）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（７２ミリグラム、０．５４ミリモル、１．２当量）、３−｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニル］アミノ｝プロパン酸（８６ミリグラム、０．４６ミリモル、１当量）およびＴＥＡ（１９０μＬ、０．１３８ミリモル、３当量）のＤＣＭ（５ミリリットル）の撹拌溶液に、室温で、添加した。得られた混合物を、一晩、撹拌し、次いで、有機層を、炭酸水素ナトリウム溶液で洗浄し、疎水性フリット（相分離器）で濾過し、そして、減圧下で蒸発させた。残渣を、シリカゲル（ＳＮＡＰ  １０）のクロマトグラフィーに付し、シクロヘキサン中、１０−１００％のＥｔＯＡｃの勾配で溶出し、ｔｅｒｔ−ブチル  ｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］−３−オキソプロピル｝カルバメート、５７ａを、１４８ミリグラム得た（収率８５％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝３８５．４
【０１２２】
ステップ２
３−アミノ−１−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロパン−１−オン（５７ｂ）
中間体５７ｂは、ステップ２において、中間体５３ｂの合成に関して記載された手順に従って調製した（収率９２％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝２８５．３
【０１２３】
ステップ３
４−（｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］−３−オキソプロピル｝アミノ）−２Ｈ−クロメン−２−オン塩酸塩（５７）
化合物５７は、ステップ３において、５３の合成に関して記載された手順に従って調製した（収率８７％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４２９．３
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ＝８．２６（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），８．１１−８．００（ｍ，２Ｈ），７．９８−７．８７（ｍ，２Ｈ），７．８０−７．６８（ｍ，２Ｈ），７．６３−７．５６（ｍ，１Ｈ），７．５４（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ），７．３８−７．２５（ｍ，２Ｈ），５．１９（ｓ，１Ｈ），４．１５（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），３．８７−３．６２（ｍ，８Ｈ），３．５５（ｑ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），２．８２（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）
【０１２４】
化合物５８の調製
４，４−（｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝アミノ）キノリン−２（１Ｈ）−オン塩酸塩
化合物５８は、以下のように調製した。
【化１８】
2017537938.tif 000026
【０１２５】
ステップ１
２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−４−イル  トリフルオロメタンスルホネート（５８ａ）
１，１，１−トリフルオロ−Ｎ−フェニル−Ｎ−（トリフルオロメタン）スルホニルメタン  スルホンアミド（１．０６グラム、２．９８ミリモル、１．２当量）を、４−ヒドロキシ−１，２−ジヒドロキノリン−２−オン（０．４グラム、２．４８ミリモル、１当量）およびトリエチルアミン（１．０４ミリリットル、７．４４ミリモル、３当量）のＤＭＦ（１５ミリリットル）の撹拌懸濁液に、室温で、添加した。反応物を、２時間、撹拌し、次いで、水（１００ミリリットル）に注ぎ、そして、ＥｔＯＡｃ（６０ミリリットル）で抽出した。有機層を、ブライン（５０ミリリットル）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして、減圧下で蒸発させた。残渣を、シリカゲル（１０グラム）に吸収させ、そして、シリカゲルカラム（ＳＮＡＰ  ５０）上部に置き、シクロヘキサン中、５０−１００％のＥｔＯＡｃで溶出し、５３７ミリグラム（１．８３ミリモル、収率７４％）の２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−４−イル  トリフルオロメタンスルホネート、５８ａを、白色固体として、得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝２９４．１
【０１２６】
ステップ２
４，４−（｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝アミノ）キノリン−２（１Ｈ）−オン塩酸塩（５８）
化合物５８は、ステップ３において、中間体５８ａ及び３１ｂを用いて、化合物５３の合成に関して記載された手順に従って調製した（収率２８％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４１４．４
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ＝１２．１６（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），１１．０６（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），８．２７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），８．１８（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），８．１０（ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ），７．９９（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．８９−７．７８（ｍ，１Ｈ），７．７４−７．６１（ｍ，２Ｈ），７．６０−７．４５（ｍ，２Ｈ），７．３５（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），５．８２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），５．０２（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），３．９７（ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，２Ｈ），３．７９−３．５５（ｍ，４Ｈ），３．５３−３．２３（ｍ，６Ｈ），２．１９（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）
【０１２７】
化合物６０の調製
４−（｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝アミノ）−６−フェニル−２Ｈ−ピラン−２−オン塩酸塩
化合物６０は、以下のように調製した。
【化１９】
2017537938.tif 000027
【０１２８】
ステップ１
４−ヒドロキシ−６−フェニル−２Ｈ−ピラン−２−オン（６０ａ）
二塩化マロニル（０．２５ミリリットル、２．６ミリモル、１当量）を、トリメチル［（１−フェニルエテニル）オキシ］シラン（１．０７ミリリットル、５．２ミリモル、２当量）のジエチルエーテル（１６ミリリットル）の撹拌溶液に、−７８oＣで、滴下した。反応混合物を、一晩、攪拌し、反応液を、室温まで徐々に加温した。沈殿した固体を集め、ジエチルエーテル（２０ミリリットル）で洗浄し、そして、真空下で乾燥させ、４−ヒドロキシ−６−フェニル−２Ｈ−ピラン−２−オン、６０ａの、０．３４グラム（１．８ミリモル、収率７０％）を得、さらに精製することなく次に進行させた。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝１８９．１
【０１２９】
ステップ２
２−オキソ−６−フェニル−２Ｈ−ピラン−４−イル  トリフルオロメタンスルホネート（６０ｂ）
中間体６０ｂは、ステップ１において、中間体６０ａを用いて、２８ａの合成に記載の手順に従って調製した（収率７７％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝３２１．１
【０１３０】
ステップ３
４−（｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝アミノ）−６−フェニル−２Ｈ−ピラン−２−オン塩酸塩（６０）
化合物６０は、ステップ３において、中間体６０ｂおよび３１ｂを用いて、５３の合成に記載の手順に従って調製した（収率３７％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４４１．４
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ＝１１．０５（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），８．１９（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），８．１０（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），７．９９（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．８３（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），７．７０（ｄｄ，Ｊ＝６．７，１４．７Ｈｚ，４Ｈ），７．６１−７．４６（ｍ，４Ｈ），６．６０（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），５．６２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），５．０３（ｄ，Ｊ＝１．３Ｈｚ，１Ｈ），３．９８（ｄ，Ｊ＝１１．８Ｈｚ，２Ｈ），３．６４（ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，４Ｈ），３．４９−３．３５（ｍ，２Ｈ），３．２８（ｂｒ．ｓ．，４Ｈ），２．１５−２．００（ｍ，２Ｈ）
【０１３１】
化合物６８の調製
４−（４−｛３−［（２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−イル）アミノ］プロピル｝ピペラジン−１−イル）キノリン−２（１Ｈ）−オン塩酸塩
化合物６８は、以下のように調製した。
【化２０】
2017537938.tif 000028
【０１３２】
ステップ１
ｔｅｒｔ−ブチル  ４−［３−（１，３−ジオキソ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル）プロピル］ピペラジン−１−カルボキシレート（６８ａ）
Ｎ−（３−ブロモプロピル）フタルイミド（２．１グラム、７．６６ミリモル、１当量）、１−Ｂｏｃ−ピペラジン（１．５グラム、８ミリモル、１当量）、ヨウ化カリウム（２．５４グラム、１５．３ミリモル、２当量）および炭酸カリウム（１．７６グラム、１２．７ミリモル、１．７当量）を、ＤＭＡ（１５ミリリットル）に溶解し、そして、室温で、１６時間、攪拌した。溶媒を、蒸発させ、そして、残渣を、ＤＣＭに溶解させた。塩を、ろ過により除去し、そして、溶媒を蒸発させた後、ろ液を、シリカカラムで（ｃＨｅｘ：ＥｔＯＡｃ８：２から、ｃＨｅｘ：ＥｔＯＡｃ１：１）により、精製した。所望の生成物、ｔｅｒｔ−ブチル  ４−［３−（１，３−ジオキソ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル）プロピル］ピペラジン−１−カルボキシレート６８ａを、淡黄色結晶性固体として得た（２．８グラム、収率は定量的）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝３７４．１
【０１３３】
ステップ２
ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（３−アミノプロピル）ピペラジン−１−カルボキシレート（６８ｂ）
中間体６８ａ（１．９グラム、５．０８ミリモル）を、メチルアミン（無水エタノール中３３％、２０ミリリットル）に溶解し、４時間、４０℃に加熱した。溶媒を、蒸発させ、残留物を、ジエチルエーテルに溶解し、そして、濾過し、そして、濾液を、蒸発させ、ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（３−アミノプロピル）ピペラジン−１−カルボキシレート（６８ｂ）を、無色油状物として得た（１．１グラム、収率８９％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝２４４．３。
【０１３４】
ステップ３
ｔｅｒｔ−ブチル  ４−｛３−［（２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−イル）アミノ］プロピル｝ピペラジン−１−カルボキシレート（６８ｃ）
中間体６８ｂ（１．１グラム、４．５ミリモル、１．１当量）、トリエチルアミン（０．６７４ミリリットル、４．８ミリモル、１．２当量）および２−オキソクロメン−４−イル  トリフルオロメタンスルホネート２８ａ（１．２グラム、４．１ミリモル、１当量）のアセトニトリル（２０ミリリットル）溶液を、１時間、７０℃に加熱した。反応混合物を、減圧下で濃縮し、そして、残渣を、ジクロロメタンとブライン／炭酸水素ナトリウムの混合物（１：１）との間で分配した。混合物を、疎水性フリット（相分離器）を通して、ジクロロメタンで、濾過・洗浄した。有機層を、減圧下で蒸発させ、そして、残渣を、シリカゲル（ＳＮＡＰ５０）のクロマトグラフィーで、シクロヘキサン中、ＥｔＯＡｃの勾配で溶出して、ｔｅｒｔ−ブチル  ４−｛３−［（２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−イル）アミノ］プロピル｝ピペラジン−１−カルボキシレート６８ｃ（７００ミリグラム、収率４４％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝３８８．３
【０１３５】
ステップ４
４−｛［３−（ピペラジン−１−イル）プロピル］アミノ｝クロメン−２−オン（６８ｄ）
ＴＦＡ（２ミリリットル）を、室温で、中間体６８ｃ（７００ミリグラム、１．８ミリモル）のジクロロメタン（６ミリリットル）の溶液に加え、得られた混合物、２０分間、撹拌した。残渣を、減圧下で蒸発させ、ＭｅＯＨに溶解し、そして、予め、処理された（ｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄ）ＳＣＸカートリッジに付した。ＳＣＸは、メタノール、そして次いで、メタノール中の、２Ｍのアンモニアの溶液で、溶出した。塩基性画分を、減圧下で蒸発させ、４−｛［３−（ピペラジン−１−イル）プロピル］アミノ｝クロメン−２−オン６８ｄ（４５６ミリグラム、収率８８％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝２８８．３
【０１３６】
ステップ５
４−（４−｛３−［（２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−イル）アミノ］プロピル｝ピペラジン−１−イル）キノリン−２（１Ｈ）−オン塩酸塩（６８）
中間体６８ｄ（７０ミリグラム、０２４ミリモル、１．１当量）、トリエチルアミン（３５ｕＬ、０．２６ミリモル、１．２当量）および中間体５８ａ（７１ミリグラム、０．２２ミリモル、１当量）のＤＭＳＯ（５ミリリットル）溶液を、１時間、８０oＣに加熱した。混合物を、水で処理し、得られた固体を濾過し、ジクロロメタン（５ミリリットル）に溶解し、そして、ＨＣｌ（ジエチルエーテル中の１Ｍ溶液、０．６３０ミリリットル）で処理し、沈殿を引き起こした。得られた混合物を、減圧下で蒸発させ、そして、残渣を、ジエチルエーテルでトリチュレートした。固体を乾燥し、１１３ミリグラムの、４−（４−｛３−［２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−イル）アミノ］プロピル｝ピペラジン−１−イル）キノリン−２（１Ｈ）−オン塩酸塩６８を、白色固体として、得た（収率は定量的）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４３１．３
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ＝１１．４６（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），１１．２０（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），８．１８（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．９８（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），７．６９（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６０（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），７．４９（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．３２（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ），７．１６（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），５．９５（ｓ，１Ｈ），５．２６（ｓ，１Ｈ），３．７８−３．１９（ｍ，１３Ｈ），２．１５（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）
【０１３７】
化合物７０の調製
４−｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロポキシ｝−２Ｈ−クロメン−２−オン塩酸塩
化合物７０は、以下のように調製した。
【化２１】
2017537938.tif 000029
【０１３８】
ステップ１
３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロパン−１−オール（７０ａ）：
炭酸カリウム（６３４ミリグラム、４．６ミリモル、１．５当量）、１−クロロイソキノリン（５００ミリグラム、３．１ミリモル、１当量）および３−（ピペラジン−１−イル）プロパン−１−オール（８８１ミリグラム、６．１ミリモル、２当量）のＤＭＳＯ（４ミリリットル）混合物を、５時間、マイクロ波照射下、１２０℃に加熱した。反応液を、室温まで放冷させた。次いで、固体を濾過し、水で洗浄し、そして、減圧下で乾燥させ、６９０ミリグラムの、３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロパン−１−オール７０ａ（収率８１％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝２７２．２
【０１３９】
ステップ２
４−｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロポキシ｝−２Ｈ−クロメン−２−オン塩酸塩（７０）
メタンスルホニルクロリド（５７μＬ、０．７４ミリモル、２当量）を、中間体７０ａ（１００ミリグラム、０．３７ミリモル、１当量）およびＴＥＡ（２０６μＬ、１．４８ミリモル、４当量）のジクロロメタン（１０ミリリットル）の撹拌溶液に、０℃で、添加した。反応液を、３０分間、攪拌し、次いで、室温まで昇温放置させた。反応混合物を、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液および水で洗浄した。有機層を、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、そして、減圧下で濃縮した。中間体は、更に精製することなく、次の反応に使用した。
水素化ナトリウム（鉱油中６０％分散物、１５ミリグラム、０．３７ミリモル、１当量）を、４−ヒドロキシ−２Ｈ−クロメン−２−オン（６０ミリグラム、０．３７ミリモル、１当量）のアセトニトリル（４ミリリットル）の撹拌溶液に加えた。懸濁液を、室温で、３０分間攪拌し、そして、先に得られた中間体のアセトニトリル（４ミリリットル）溶液に添加した。Ｋ２ＣＯ３（７６ミリグラム、０．５５ミリモル、１．５当量）を加え、そして、混合物を、２時間、８０℃に加熱した。揮発性物質を、減圧下で除去し、残渣を、ジクロロメタンに溶解し、そして、水およびブラインで洗浄した。有機層を、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物を、シリカゲルクロマトグラフィーに付し、ジクロロメタン中、混合物Ａ（Ａは、ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ＝９５／５）の勾配で溶出して、７２ミリグラムの白色泡状物を得た。生成物を、ジクロロメタン（４ミリリットル）およびＭｅＯＨの最小量に溶解し、次いで、ＨＣｌ（ジエチルエーテル中の１Ｍ溶液、０．４４ミリリットル）で処理し、沈殿を引き起こした。溶媒を、減圧下で蒸発させ、そして、残渣を、ジエチルエーテルでトリチュレートした。得られた固体を乾燥し、９２ミリグラムの、４−｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロポキシ｝−２Ｈ−クロメン−２−オン塩酸塩７０（収率５１％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４１６．３
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ＝１１．４１（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），８．２０（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），８．１０（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ），８．００（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．９５（ｄｄ，Ｊ＝１．４，７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．８５（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．７４−７．６６（ｍ，２Ｈ），７．５７（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ），７．４５−７．３７（ｍ，２Ｈ），５．９５（ｓ，１Ｈ），５．３６（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），４．３８（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），４．０１（ｄ，Ｊ＝１３．１Ｈｚ，２Ｈ），３．７９−３．５９（ｍ，４Ｈ），３．５５−３．３６（ｍ，４Ｈ），２．４５−２．３５（ｍ，２Ｈ）
【０１４０】
化合物７１の調製
４−（イソキノリン−１−イル）−１−｛３−［（２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−イル）アミノ］プロピル｝ピペラジン−２−オン塩酸塩
化合物７１は、以下のように調製した。
【化２２】
2017537938.tif 000030
【０１４１】
ステップ１
４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−２−オン（７１ａ）
化合物７０の合成のステップ１に記載される手順に従って、ピペラジン−２−オンを用いて、中間体７１ａを調製した（収率７７％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝２２８．１
【０１４２】
ステップ２
ｔｅｒｔ−ブチル  ｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）−２−オキソピペラジン−１−イル］プロピル｝カルバメート（７１ｂ）
ＮａＨ（６０％鉱油中分散物、８１ミリグラム、２ミリモル、１．１当量）およびｔｅｒｔ−ブチル  Ｎ−（３−ブロモプロピル）カルバメート（３３０ミリグラム、１．４ミリモル、０．７５当量）を、中間体７１ａ（４２０ミリグラム、１．８ミリモル、１当量）の無水ＤＭＦ（６ミリリットル）の撹拌溶液に添加した。混合物を、４時間、撹拌し、次いで、水でクエンチし、そして、酢酸エチルで抽出した。有機層を、硫酸ナトリウムで乾燥させ、そして、シリカのクロマトグラフィーに付し、石油エーテル中、５０〜１００％のＥｔＯＡｃの勾配で溶出して、２７３ミリグラムの、ｔｅｒｔ−ブチル  ｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）−２−オキソピペラジン−１−イル］プロピル｝カルバメート７１ｂ（収率５１％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝３８５．２
【０１４３】
ステップ３
１−（３−アミノプロピル）−４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−２−オン（７１ｃ）
中間体７１ｃは、化合物５３の合成のステップ２に記載の手順に従って調製した（収率は定量的）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝２８５．３
【０１４４】
ステップ４
４−（イソキノリン−１−イル）−１−｛３−［（２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−イル）アミノ］プロピル｝ピペラジン−２−オン塩酸塩（７１）
化合物７１は、化合物５３の合成のステップ３に記載の手順に従って調製した（収率８０％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４２９．３
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ＝８．２３（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），８．０５（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），８．０２−７．９３（ｍ，２Ｈ），７．８７（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ），７．７６−７．６３（ｍ，２Ｈ），７．６１−７．５３（ｍ，１Ｈ），７．５０（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，１Ｈ），７．３５−７．２３（ｍ，２Ｈ），５．１９（ｓ，１Ｈ），５．０４−４．３８（ｍ，１Ｈ），４．２４（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），３．９２（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），３．６０（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），３．５１（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），３．３０（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），１．９３（ｑｕｉｎ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）
【０１４５】
化合物７４の調製
４−（｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］シクロヘキシル｝アミノ）−２Ｈ−クロメン−２−オン塩酸塩
化合物７４は、以下のように調製した。
【化２３】
2017537938.tif 000031
【０１４６】
ステップ１
ｔｅｒｔ−ブチル  ｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］シクロヘキシル｝カルバメート（７４ａ）
ナトリウム  トリアセトキシボロヒドリド（５９１ミリグラム、２．８ミリモル、３当量）を、１−（ピペラジン−１−イル）イソキノリン２ｃ（２００ミリグラム、０．９３ミリモル、１当量）およびｔｅｒｔ−ブチル  Ｎ−（３−オキソシクロヘキシル）カルバメート（２００ミリグラム、０．９３ミリモル、１当量）のジクロロメタン（５ミリリットル）撹拌溶液に添加した。反応物を、室温で、２時間、撹拌し、次いで、ＤＣＭで希釈し、そして、水でクエンチした。混合物を、疎水性フリット（相分離器）で濾過した。有機層を、ブラインおよび炭酸水素ナトリウム溶液（１：１）の混合物で洗浄し、そして、疎水性フリット（相分離器）で濾過した。有機層を、減圧下で蒸発させた。残渣を、シリカゲル（ＳＮＡＰ  １０）のクロマトグラフィーに付し、シクロヘキサン中、ＥｔＯＡｃの勾配で溶出して、２４５ミリグラムの、ｔｅｒｔ−ブチル  ｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］シクロヘキシル｝カルバメート７４ａを得た（収率６３％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４１１．４
【０１４７】
ステップ２
３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］シクロヘキサンアミン（７４ｂ）
中間体７４ｂは、化合物５３の合成のステップ２に記載の手順に従って調製した（収率は定量的）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝３１１．３
【０１４８】
ステップ３
４−（｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］シクロヘキシル｝アミノ）−２Ｈ−クロメン−２−オン塩酸塩（７４）
化合物７４は、化合物５３の合成のステップ３に記載の手順に従って調製した（収率８７％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４５５．４
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １．６０−１．７６（ｍ，２Ｈ），１．７６−１．８９（ｍ，３Ｈ），１．９２−２．０１（ｍ，１Ｈ），２．１３−２．２２（ｍ，１Ｈ），２．４２（ｄ，Ｊ＝１２．７２Ｈｚ，１Ｈ），３．３６−４．０６（ｍ，８Ｈ），３．７６−３．８４（ｍ，１Ｈ），４．２４（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），５．３１（ｓ，１Ｈ），６．９７（ｄ，Ｊ＝６．３６Ｈｚ，１Ｈ），７．２８−７．３８（ｍ，２Ｈ），７．５５（ｄ，Ｊ＝５．９０Ｈｚ，１Ｈ），７．５８−７．６４（ｍ，１Ｈ），７．６９（ｔ，Ｊ＝７．５８Ｈｚ，１Ｈ），７．８３（ｔ，Ｊ＝７．６０Ｈｚ，１Ｈ），７．９９（ｄ，Ｊ＝７．６０Ｈｚ，１Ｈ），８．０８（ｄ，Ｊ＝５．８７Ｈｚ，１Ｈ），８．２１（ｄ，Ｊ＝７．６０Ｈｚ，１Ｈ），８．３１（ｄ，Ｊ＝７．３４Ｈｚ，１Ｈ），１０．８８（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）
【０１４９】
化合物７５の調製
Ｎ−｛２−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］エチル｝−２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−カルボキサミド塩酸塩
化合物７５は、以下のように調製した。
【化２４】
2017537938.tif 000032
【０１５０】
ステップ１
２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−カルボン酸（７５ａ）
パラジウムジクロリド（８０ミリグラム、０．４５ミリモル、０．１当量）を、２−ヨードフェノール（１グラム、４．５ミリモル、１当量）、ジメチルマレエート（１．７１ミリリットル、１３．６ミリモル、３当量）およびトリエチルアミン（１．９０ミリリットル、１３．６ミリモル、３当量）の水（４０ミリリットル）の攪拌混合物に添加した。反応混合物を、２４時間、８５℃に加熱した。反応混合物を、１Ｍ  ＨＣｌ溶液で酸性化し、そして、ジクロロメタンで、繰り返し抽出した。合わせた有機層を、疎水性フリット（相分離器）で濾過し、そして、減圧下で蒸発させた。残渣を、ＲＰ−１８（ＳＮＡＰ  ６０）でクロマトグラフィーに付し、水中、２から１００％のＭｅＣＮの勾配で溶出した。ＭｅＣＮを、減圧下で除去し、次いで、水層を、１Ｍ  ＮａＯＨ溶液で、塩基性化し、そして、ジエチルエーテル（２×５０ミリリットル）で洗浄した。水層を、１Ｍ  ＨＣｌ溶液で酸性化し、そして、ジクロロメタンで繰り返し抽出した。合わせた有機層を、疎水性フリット（相分離器）で濾過し、そして、減圧下で蒸発させて、２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−カルボン酸７５ａを、２２８ミリグラム（収率２６％）、淡黄色固体として、得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝１９１．０
【０１５１】
ステップ２
２−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］エタンアミン（７５ｂ）
Ｎ−（２−ブロモエチル）フタルイミドを使用して、化合物６８の合成のステップ２に記載したように、中間体７５ｂを調製した（収率４７％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝２５７．２
【０１５２】
ステップ３
Ｎ−｛２−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］エチル｝−２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−カルボキサミド塩酸塩（７５）：
化合物７５は、化合物５７の合成のステップ１に記載の条件に従って調製した（５９ミリグラム、収率３５％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４２９．３
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ＝１１．２５（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），９．３３（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），８．２０（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），８．１１（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），８．００（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．９０−７．７９（ｍ，２Ｈ），７．６９（ｑ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，２Ｈ），７．５６（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４７（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．３９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），６．８６（ｓ，１Ｈ），４．６１−３．０４（ｍ，１３Ｈ）
【０１５３】
化合物８１の調製
Ｎ−｛２−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］エチル｝−２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−カルボキサミド塩酸塩
化合物８１は、以下のように調製した。
【化２５】
2017537938.tif 000033
メチル  ピペラジン−２−カルボキシレートから出発して、化合物７１について記載したように、化合物８１を調製した。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４７３．３
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ＝８．１４（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），８．０８（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），７．８５−７．７５（ｍ，２Ｈ），７．７１−７．６４（ｍ，１Ｈ），７．６３−７．５７（ｍ，１Ｈ），７．５４（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），７．３８−７．２８（ｍ，２Ｈ），５．２７（ｓ，１Ｈ），４．６４（ｂｒ．ｓ．，７Ｈ），４．１２−３．５６（ｍ，６Ｈ），３．３８（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，４Ｈ），２．２４−１．９２（ｍ，２Ｈ）
【０１５４】
化合物８２の調製
４−（イソキノリン−１−イル）−１−｛３−［（２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−イル）アミノ］プロピル｝ピペラジン−２−カルボン酸塩酸塩
メチル  ４−（イソキノリン−１−イル）−１−｛３−［（２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−イル）アミノ］プロピル｝ピペラジン−２−カルボキシレート塩酸塩８１（４０ミリグラムの、０．０８５ミリモル、１当量）のＴＨＦ／水９：１（１ミリリットル）の溶液に、ＬｉＯＨ（４ミリグラム、０．０９３ミリモル、１．１当量）を加えた。混合物を、６０℃で、５時間撹拌し、次いで、減圧下で濃縮した。残渣を、水に溶解し、そして、１ＭのＨＣｌ（６当量）を加えた。溶媒を蒸発させ、そして、粗生成物を、Ｃ１８逆相クロマトグラフィーをにより（アセトニトリル／水を、５：９５から１００：０）で精製して、４−（イソキノリン−１−イル）−１−｛３−［（２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−イル）アミノ］プロピル｝ピペラジン−２−カルボン酸塩酸塩８２を（３８ミリグラム、収率８４％）得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４５９．３
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ＝８．１８−８．１０（ｍ，２Ｈ），８．０５（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．９０（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７７−７．６６（ｍ，２Ｈ），７．５９（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），７．４２（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），７．３６−７．２８（ｍ，２Ｈ），５．２１（ｓ，１Ｈ），３．７１−３．６２（ｍ，１Ｈ），３．６１−３．５４（ｍ，１Ｈ），３．５２−３．０８（ｍ，９Ｈ），２．９６（ｔｄ，Ｊ＝６．７，１３．２Ｈｚ，１Ｈ），２．８２−２．７０（ｍ，２Ｈ），１．８６（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ）
【０１５５】
化合物８３の調製
４−（｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）−２−（２，２，２−トリフルオロエチル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝アミノ）−２Ｈ−クロメン−２−オン塩酸塩
化合物８３について、以下のように調製した。
【化２６】
2017537938.tif 000034
【０１５６】
２−（２，２，２−トリフルオロエチル）ピペラジンから出発して、化合物７１について記載したように、化合物８３を調製した。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４９７．３
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ＝１１．５１（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），８．２５−８．０８（ｍ，３Ｈ），７．９７（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．８８（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），７．７９（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．７０−７．６３（ｍ，１Ｈ），７．６３−７．５７（ｍ，１Ｈ），７．５４（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ），７．４０−７．２６（ｍ，１Ｈ），５．３０（ｓ，１Ｈ），５．４２（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），４．４６−２．７４（ｍ，１３Ｈ），２．１４（ｑｕｉｎ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）
【０１５７】
化合物８５の調製
４−（｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝アミノ）−７−メトキシ−２Ｈ−クロメン−２−オン塩酸塩
化合物８５は、以下のように調製した。
【化２７】
2017537938.tif 000035
【０１５８】
ステップ１
７−メトキシ−２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−イル  トリフルオロメタンスルホネート（８５ａ）
４−ヒドロキシ−７−メトキシ−２Ｈ−クロメン−２−オンから出発して、化合物２８の合成のステップ１に記載されているように、中間体８５ａを調製した（収率は定量的）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝３２５．１
【０１５９】
ステップ２
４−（｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝アミノ）−７−メトキシ−２Ｈ−クロメン−２−オン塩酸塩（８５）
化合物７１の合成のステップ４で説明したように、化合物８５を、中間体８５ａおよび３１ｂを用いて、調製した（収率２２％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４４５．４
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ＝１１．０７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），８．１８（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），８．０９（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ），８．０６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．９９（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．８３（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），７．６９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．５５（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ），６．９３（ｄｄ，Ｊ＝２．３，８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．８８（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ），５．１４（ｓ，１Ｈ），４．１０（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），３．９７（ｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ，２Ｈ），３．８９−３．７７（ｍ，３Ｈ），３．７１−３．５２（ｍ，４Ｈ），３．３９（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，４Ｈ），３．２９（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），２．１４（ｑｕｉｎ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）
【０１６０】
化合物８７の調製
３−（｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝アミノ）−２Ｈ−クロメン−２−オン塩酸塩
化合物８７は、以下のように調製した。
【化２８】
2017537938.tif 000036
【０１６１】
ステップ１
３−ブロモ−２Ｈ−クロメン−２−オン（８７ａ）
臭素（０．３５ミリリットル、６．８４ミリモル、１当量）を、クマリン（１グラム、６．８４ミリモル、１当量）のクロロホルム（１０ミリリットル）の撹拌溶液に、０℃で、滴下した。反応混合物を、一晩、室温まで徐々に温めた。トリエチルアミン（２ミリリットル）を加え、反応混合物を、水（２×１０ミリリットル）で洗浄した。有機層を、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、そして、減圧下で蒸発させた。残渣を、シリカゲル（ＳＮＡＰ  ５０）のクロマトグラフィーにかけ、５％ＥｔＯＡｃの石油エーテルで溶出し、白色固体として、３−ブロモ−２Ｈ−クロメン−２−オン８７ａを、５０４ミリグラム得た（収率３３％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝２２５．０
【０１６２】
ステップ２
３−（｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝アミノ）−２Ｈ−クロメン−２−オン塩酸塩（８７）
中間体３１ｂ（５０ミリグラム、０．１８５ミリモル、１当量）および８７ａ（５０ミリグラム、０．２２２ミリモル、１．２当量）のＰｄ（ＯＡｃ）２（５ミリグラム、０．０１９ミリモル、０．１当量）、キサントホス（Ｘａｎｔｐｈｏｓ）（１１ミリグラム、０．０１９ミリモル、０．１当量）およびＣｓ２ＣＯ３（９０ミリグラム、０．２８ミリモル、１．５当量）の１，４−ジオキサン（２．５ミリリットル）混合物を、２時間、マイクロ波照射下、封管中、１３０℃に加熱した。反応混合物を、減圧下で濃縮し、そして、残渣を、シリカゲル（ＳＮＡＰ２５）のクロマトグラフィーに付し、ジクロロメタン中、０〜２％のＡ混合物の勾配で溶出（Ａは、ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ  １０：１である）した。部分的に純粋な生成物は、さらに、分取ＬＣ−ＭＳによって精製し、黄色のゴム状物を２０ミリグラム得た。生成物を、ジクロロメタン（４ミリリットル）に溶解し、そして、１Ｍ  ＨＣｌのジエチルエーテル（０．１６ミリリットル）溶液で処理し、沈殿を引き起こした。得られた混合物を、減圧下で蒸発させ、そして、残渣を、ジエチルエーテルでトリチュレートした。固体を乾燥し、３−（｛３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝アミノ）−２Ｈ−クロメン−２−オン塩酸塩８７を、２４ミリグラム（収率２７％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４１５．３
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ＝１１．１６（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），８．１９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），８．０８（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），８．００（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．８５（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ），７．７０（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），７．５７（ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ），７．４７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），７．３７−７．１０（ｍ，３Ｈ），６．６８（ｓ，１Ｈ），６．２７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），４．００（ｄ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ，２Ｈ），４．３７−３．８１（ｍ，１Ｈ），３．６４（ｄ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ，４Ｈ），３．４０（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，２Ｈ），３．２８（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，４Ｈ），２．１１（ｂｒ．ｑｕｉｎ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）
【０１６３】
化合物９６の調製
４−（｛３−［４−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝アミノ）−５−メチル−２Ｈ−クロメン−２−オン塩酸塩
化合物９６について、以下のように調製した。
【化２９】
2017537938.tif 000037
【０１６４】
ステップ１
１−（２−ヒドロキシ−６−メチルフェニル）エタノン（９６ａ）
２−ヒドロキシ−６−メチル安息香酸（２グラム、１２．７ミリモル、１当量）のＴＨＦ（１３ミリリットル）溶液を、−７８℃に、冷却した。ＭｅＬｉ（Ｅｔ２Ｏ中、１．６Ｍ、３８．１ミリモル、３当量）を、滴下した。混合物を、一晩、室温で撹拌し、次いで、０℃に冷却し、そして、飽和ＮＨ４Ｃｌで、クエンチした。酢酸エチルを加え、そして、有機層を、ブラインで洗浄した。溶媒を、真空で除去し、そして、粗製物質を、シリカゲル−カラムにより、ｃＨｅｘから、ｃＨｅｘ／酢酸エチル  ７：３で溶出して精製し、１−（２−ヒドロキシ−６−メチルフェニル）エタノン９６ａを、９８０ミリグラム得た（収率５１％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝１５１．０
【０１６５】
ステップ２
４−ヒドロキシ−５−メチル−２Ｈ−クロメン−２−オン（９６ｂ）
中間体９６ａ（０．９８グラム、６．５ミリモル、１当量）のトルエン（１０ミリリットル）溶液を、ＮａＨ（鉱油中６０％分散物、０．７８４グラム、１９．６ミリモル、３．０当量）のトルエン（２０ミリリットル）撹拌懸濁液に、室温で、滴下した。撹拌を、１０分間継続し、次いで、ジエチルカーボネート（１．５８ミリリットル、１３．１ミリモル、２当量）のトルエン（１０ミリリットル）溶液を滴下し、次いで、混合物を、４８時間、１１５℃に加熱した。溶媒を、減圧下で蒸発させ、固体残渣を、氷冷水（１００ミリリットル）中に少しずつ加え、濁った（ｔｕｒｂｉｄ）溶液を得た。水層を、ジエチルエーテル（５０ミリリットル）で洗浄し、次いで、１Ｍ  ＨＣｌ溶液（６０ミリリットル）で酸性化し、白色の固体の沈殿を引き起こした。固体を濾過により回収し、そして、水で洗浄した。湿ったフィルターケーキを、ジクロロメタン（１００ミリリットル）に懸濁し、そして、減圧下で蒸発させ、４−ヒドロキシ−５−メチル−２Ｈ−クロメン−２−オン９６ｂを、９４９ミリグラム（収率８２％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝１７７．０
【０１６６】
ステップ３
５−メチル−２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−イル  トリフルオロメタンスルホネート（９６ｃ）
化合物２８の合成のステップ１に記載されているように、中間体９６ｃは、中間体９６ｂを使用して、調製した（収率５８％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝３０９．０
【０１６７】
ステップ４
４−（｛３−［４−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝アミノ）−５−メチル−２Ｈ−クロメン−２−オン塩酸塩（９６）
中間体９６ｄを用いて、化合物７１の合成のステップ４で説明したように、化合物９６を調製した。中間体９６ｄは、１−クロロ−７−フルオロイソキノリンから出発して、化合物３１の合成のステップ２に記載の手順に従って調製した（収率３１％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４４７．３
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ＝１１．１７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），８．１３（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），８．０９（ｄｄ，Ｊ＝５．５，８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．８７（ｄ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ），７．７４（ｔ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），７．５９（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４４（ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．１６（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．１２（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），６．６５（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），５．５９（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），５．２７（ｓ，１Ｈ），３．８７（ｄ，Ｊ＝１２．８Ｈｚ，２Ｈ），３．６３（ｄ，Ｊ＝１１．３Ｈｚ，２Ｈ），３．５５（ｔ，Ｊ＝１２．８Ｈｚ，２Ｈ），３．４４（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，４Ｈ），３．２８（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），２．８４（ｓ，３Ｈ），２．２７−２．０６（ｍ，２Ｈ）
【０１６８】
化合物９７の調製
４−（｛３−［４−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝アミノ）−３−メチル−２Ｈ−クロメン−２−オン塩酸塩
化合物９７は、以下のように調製した。
【化３０】
2017537938.tif 000038
【０１６９】
ステップ１
４−ヒドロキシ−３−メチル−２Ｈ−クロメン−２−オン（９７ａ）
中間体９７ａは、１−（２−ヒドロキシフェニル）プロパン−１−オンを用いて、化合物９６の合成のステップ２に記載の手順に従って調製した（２．１グラム、収率２０％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝１７７．０
【０１７０】
ステップ２
３−メチル−２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−イル  トリフルオロメタンスルホネート（９７ｂ）
中間体９７ｂは、中間体９７ａを用いて、化合物２８の合成のステップ１に記載される手順に従って調製した（収率５８％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝３０９．０
【０１７１】
ステップ３
４−（｛３−［４−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝アミノ）−３−メチル−２Ｈ−クロメン−２−オン塩酸塩（９７）
中間体９６ｄを用いて、化合物７１の合成のステップ４で説明したように、化合物９７を調製した。中間体９６ｄは、１−クロロ−７−フルオロイソキノリンから出発して、化合物３１の合成のステップ２に記載の手順に従って調製した（収率３８％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４４７．３
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ＝１０．８４（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），８．２０−８．１１（ｍ，２Ｈ），８．０７（ｄｄ，Ｊ＝５．５，９．０Ｈｚ，１Ｈ），７．８４（ｄｄ，Ｊ＝２．４，１０．２Ｈｚ，１Ｈ），７．７１（ｄｔ，Ｊ＝２．５，８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．６１−７．４８（ｍ，２Ｈ），７．３８−７．２４（ｍ，２Ｈ），６．７２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），４．４８（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），３．８１（ｄ，Ｊ＝１１．８Ｈｚ，２Ｈ），３．６５（ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ），３．５９（ｄ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ，２Ｈ），３．５３−３．３２（ｍ，４Ｈ），３．２２（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），２．１６（ｓ，３Ｈ），２．１４−２．０４（ｍ，２Ｈ）
【０１７２】
化合物１０１の調製
４−（｛３−［４−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝アミノ）−３−メチル−２Ｈ−クロメン−２−オン塩酸塩
化合物１０１について、以下のように調製した。
【化３１】
2017537938.tif 000039
【０１７３】
ステップ１
ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（３−メトキシ−３−オキソプロピル）ピペラジン−１−カルボキシレート（１０１ａ）
メチル  ３−ブロモプロパノエート（０．６０７ミリリットル、５．５６ミリモル、１．０５当量）を、Ｎ−Ｂｏｃ−ピペラジン（１グラム、５．３ミリモル、１当量）およびＴＥＡ（０．８７０ミリリットル、６．３６ミリモル、１．２当量）の無水ＴＨＦ（８ミリリットル）溶液に添加し、反応物を、室温で、一晩、撹拌した。混合物を、ＥｔＯＡｃで希釈し、有機層を、炭酸水素ナトリウム溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして、減圧下で蒸発させた。残渣を、シリカゲル（ＳＮＡＰ  ２５）のクロマトグラフィーに付し、シクロヘキサン中の、ＥｔＯＡｃの２０−１００％の勾配で溶出して、１．３グラムの、ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（３−メトキシ−３−オキソプロピル）ピペラジン−１−カルボキシレート１０１ａを得た（収率９０％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝２７３．２
【０１７４】
ステップ２
３−［４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン−１−イル］プロパン酸（１０１ｂ）
中間体１０１ａ（１．３グラム、４．７ミリモル、１当量）のＴＨＦ／水（９：１）溶液に、ＬｉＯＨ（１２３ミリグラム、５．１７ミリモル、１．１当量）を加えた。混合物を、１時間、６０℃で、撹拌し、次いで、減圧下で濃縮した。粗３−［４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン−１−イル］プロパン酸１０１ｂ（６０７ミリグラム）を、さらに精製することなく進行させた。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝２５９．２
【０１７５】
ステップ３
ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（３−アミノ−３−オキソプロピル）ピペラジン−１−カルボキシレート（１０１ｃ）
ヘキサメチルジシラザン（０．４８８ミリリットル、２．３５ミリモル、１当量）を、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（５４０ミリグラム、２．８２ミリモル、１．２当量）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（３８１ミリグラム、２．８２ミリモル、１．２当量）、中間体１０１ｂ（６０７ミリグラム、２．３５ミリモル、１当量）およびＴＥＡ（９７７μＬ、７．０５ミリモル、３当量）のＤＣＭ（８ミリリットル）の撹拌溶液に添加した。得られた混合物を、室温で、一晩、撹拌した。有機層を、炭酸水素ナトリウム溶液で洗浄し、疎水性フリット（相分離器）で濾過し、そして、減圧下で蒸発させた。残渣を、修飾ＮＨシリカゲル（ＳＮＡＰ  ２６）のクロマトグラフィーに付し、ＥｔＯＡｃ中の、１０−１００％のＡの勾配で溶出（Ａは、ＭｅＯＨ／ＡｃＯＥｔ（５：９５）である）し、４５４ミリグラムの、ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（３−アミノ−３−オキソプロピル）ピペラジン−１−カルボキシレート１０１ｃを、白色固体として得た（収率７５％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝２５８．２
【０１７６】
ステップ４
３−（ピペラジン−１−イル）プロパンアミド（１０１ｄ）
中間体１０１ｄは、化合物６８の合成のステップ４に記載の手順に従って調製した（収率は定量的）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝１５８．１
【０１７７】
ステップ５
３−［４−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロパンアミド（１０１ｅ）
化合物７３の合成のステップ１に記載されているように、中間体１０１ｅは、１−クロロ−７−フルオロイソキノリン（収率８４％）を使用して、調製した。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝３０３．２
【０１７８】
ステップ６
４−（｛３−［４−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝アミノ）−３−メチル−２Ｈ−クロメン−２−オン塩酸塩（１０１）
４−（トリフルオロメタン）スルホニルクロメン−２−オン２８ａ（１４９ミリグラム、０．５１ミリモル、１．３当量）、３−［４−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロパンアミド１０１ｅ（１１７ミリグラム、０．３９ミリモル、１当量）、Ｋ３ＰＯ４（１６５ミリグラム、０．７８ミリモル、２当量）、Ｐｄ（ｄｂａ）２（１１ミリグラム、０．０１９ミリモル、０．０５当量）およびキサントホス（Ｘａｎｔｐｈｏｓ）（１１ミリグラム、０．０１９ミリモル、０．０５当量）を、Ｎ２乾燥ジオキサン（４ミリリットル）を充填したシュレンク（Ｓｃｈｌｅｎｋ）管に負荷した。そして、得られた混合物を、３０分間１００℃で撹拌した。有機層を、水で洗浄し、疎水性フリット（相分離器）で濾過し、そして、減圧下で蒸発させた。残渣を、シリカゲル（ＳＮＡＰ１０）のクロマトグラフィーで処理し、シクロヘキサン中、ＥｔＯＡｃの５０−１００％の勾配で溶出した。得られた固体を、ＤＣＭに溶解し、そして、０℃に冷却した。３当量の、１Ｍ  ＨＣｌのジエチルエーテルを加え、１時間後、混合物を、真空中で蒸発させ、そして、残渣を、ジエチルエーテルでトリチュレートして、４−（｛３−［４−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝アミノ）−３−メチル−２Ｈ−クロメン−２−オン塩酸塩１０１を、５８ミリグラム（収率２９％）得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４４７．３
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ＝１０．８１（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），１０．４４（ｓ，１Ｈ），８．３４（ｄｄ，Ｊ＝１．４，８．４Ｈｚ，１Ｈ），８．１６（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），８．０８（ｄｄ，Ｊ＝５．８，９．０Ｈｚ，１Ｈ），７．８６（ｄｄ，Ｊ＝２．５，１０．３Ｈｚ，１Ｈ），７．７６−７．６６（ｍ，２Ｈ），７．５８（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４８−７．４１（ｍ，２Ｈ），７．２４（ｓ，１Ｈ），４．９９（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），３．８５（ｄ，Ｊ＝１０．５Ｈｚ，２Ｈ），３．６６−３．５９（ｍ，２Ｈ），３．５９−３．５２（ｍ，２Ｈ），３．５０−３．４１（ｍ，４Ｈ），３．３１（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）
【０１７９】
化合物１０７の調製
４−（｛３−［４−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝アミノ）−７−ヒドロキシ−２Ｈ−クロメン−２−オン塩酸塩
化合物１０７を、以下のように調製した。
【化３２】
2017537938.tif 000040
【０１８０】
ステップ１
７−（ベンジルオキシ）−４−ヒドロキシ−２Ｈ−クロメン−２−オン（１０７ａ）
中間体１０７ａは、１−［４−（ベンジルオキシ）−２−ヒドロキシフェニル］エタノンを用いて、化合物９６の合成のステップ２に記載の手順に従って調製した（収率８６％）。ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝２６９．２
【０１８１】
ステップ２
７−（ベンジルオキシ）−２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−イル  トリフルオロメタンスルホネート（１０７ｂ）
中間体１０７ｂは、化合物２８の合成のステップ１に記載される手順に従って、調製した（収率は定量的）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４０１．１
【０１８２】
ステップ３
７−（ベンジルオキシ）−４−（｛３−［４−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝アミノ）−２Ｈ−クロメン−２−オン（１０７ｃ）
化合物７１の合成のステップ４で説明したように、中間体１０７ｃは、中間体９６ｄを用いて、調製した。
中間体９６ｄは、１−クロロ−７−フルオロイソキノリンから出発して、化合物３１の合成のステップ２に記載の手順に従って、調製した（収率３７％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝５３９．４
【０１８３】
ステップ４
４−（｛３−［４−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝アミノ）−７−ヒドロキシ−２Ｈ−クロメン−２−オン塩酸塩（１０７）
中間体１０７ｃ（４９ミリグラム、０．０９ミリモル、１当量）のＥｔＯＨ（４ミリリットル）懸濁液に、Ｐｄ／Ｃ  １０％（０．０５当量）を加え、そして、混合物を、水素（１気圧）下、室温で、撹拌した。３０時間後、混合物を濾過し、そして、真空中で濃縮した。残渣を、ＳＣＸカートリッジ（１グラム）に付し、ＭｅＯＨで、そして、１Ｍ  ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液で溶出した。塩基性溶液は、真空中で濃縮して、無色の油状物（３４ミリグラム）を得た。これを、フラッシュクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ  ＫＰ−Ｓｉｌ  １０グラム  ＳＮＡＰカートリッジ、溶離液Ａ：酢酸エチル、Ｂ：酢酸エチル／メタノール＝８０／２０、９０：１０から０：１００までの勾配Ａ／Ｂ）で精製し、白色固体を、１８．２ミリグラムを得た。生成物を、ＭｅＯＨに溶解し、そして、１Ｍ  ＨＣｌのジエチルエーテル（０．１ミリリットル）溶液を添加した。混合物を、窒素下で濃縮し、残渣を、ジエチルエーテル（２ｘ）でトリチュレートし、４−（｛３−［４−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝アミノ）−７−ヒドロキシ−２Ｈ−クロメン−２−オン塩酸塩１０７を、白色固体として（１８．７ミリグラム、収率４０％）得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４４９．３
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ＝１０．５１（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），１０．４２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），８．１６（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），８．０７（ｄｄ，Ｊ＝５．５，９．０Ｈｚ，１Ｈ），７．９０（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．８５（ｄｄ，Ｊ＝２．３，１０．３Ｈｚ，１Ｈ），７．７５−７．６６（ｍ，２Ｈ），７．５７（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），６．７５（ｄｄ，Ｊ＝２．３，８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．６３（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ），５．０９（ｓ，１Ｈ），３．８２（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），３．７３（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），３．６１（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，２Ｈ），３．４７−３．３３（ｍ，６Ｈ），３．２８（ｔｄ，Ｊ＝５．０，１０．０Ｈｚ，２Ｈ），２．１０（ｑｕｉｎ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ）
【０１８４】
化合物１１１の調製
４−（｛１−［（イソキノリン−１−イルオキシ）アセチル］ピペリジン−４−イル｝アミノ）−２Ｈ−クロメン−２−オン
化合物１１１を、以下のように調製した。
【化３３】
2017537938.tif 000041
【０１８５】
ステップ１
エチル（イソキノリン−１−イルオキシ）アセテート（１１１ａ）
エチル  ヒドロキシアセテート（３．４５ミリリットル、３６．４ミリモル、３当量）のＴＨＦ（１５ミリリットル）懸濁液に、ＮａＨ（鉱油中６０％分散物、１．４７グラム、３６．６ミリモル、３当量）を、少しずつ加えた。混合物を、７０℃に加熱し、そして、１時間撹拌し、次いで、１−クロロイソキノリン（２グラム、１２．３ミリモル、１当量）のＴＨＦ（１５ミリリットル）溶液を添加した。反応混合物を、一晩、７０℃で撹拌し、次いで、室温に冷却し、ＮａＣｌ飽和溶液（１５ミリリットル）中に注ぎ、そして、ＥｔＯＡｃ（３×１０ミリリットル）で抽出した。回収した有機層を、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、そして、真空下で濃縮した。残渣を、シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーにより、ヘキサン／酢酸エチル＝９：１で溶出して、エチル  （イソキノリン−１−イルオキシ）アセテート１１１ａを、１．８５グラム（収率６５％）を得た。
ＧＣ／ＭＳ：２３１
【０１８６】
ステップ２
（イソキノリン−１−イルオキシ）酢酸（１１１ｂ）
中間体１１１ａ（１．２グラム、５．２ミリモル）の、ＴＨＦ／ＥｔＯＨ  １：１混合物（１０ミリリットル）の溶液に、ＮａＯＨ（１Ｍ溶液、２０．４ミリリットル、４当量）を加えた。溶液を、室温、３時間攪拌し、次いで、溶媒を、真空下で除去し、水（１０ミリリットル）を、残渣に加え、１ＭのＨＣｌ（中和）を続けて加えた。混合物を、１５分間、撹拌し、次いで、得られた固体を濾過し、水で洗浄し、そして、乾燥させ、（イソキノリン−１−イルオキシ）酢酸１１１ｂを、０．８３グラム（収率＝７８％）得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝２０４．１
【０１８７】
ステップ３
４−（｛１−［（イソキノリン−１−イルオキシ）アセチル］ピペリジン−４−イル｝アミノ）−２Ｈ−クロメン−２−オン（１１１）
中間体１１１ｂ（０．３グラム、１．４８ミリモル、１当量）の、ＤＭＦ（１０ミリリットル）溶液に、ＴＥＡ（０．４６ミリリットル、３．２５ミリモル、２．２当量）、中間体２８ｃ（０．５グラム、１．６３ミリモル、１．１当量）およびＨＢＴＵ（６１６ミリグラム、１．６３ミリモル、１．１当量）を加えた。混合物を、一晩、室温で、撹拌し、次いで、ＥｔＯＡｃで希釈し、そして、濾過した。溶液を、水で洗浄し、そして、濃縮した。残渣を、ＥｔＯＡｃで希釈し、白色の固体を分離し、それを濾過し、乾燥して、１８２ミリグラムの４−（｛１−［（イソキノリン−１−イルオキシ）アセチル］ピペリジン−４−イル｝アミノ）−２Ｈ−クロメン−２−オン１１１を得た（収率２９％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４３０．２
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ＝８．２５（ｄｄ，Ｊ＝０．７，７．７Ｈｚ，１Ｈ），８．１５（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．９７（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），７．９２（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），７．７９（ｄｄｄ，Ｊ＝１．５，７．０，８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．７１−７．５５（ｍ，２Ｈ），７．４１（ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ），７．３８−７．２５（ｍ，３Ｈ），５．４０（ｓ，１Ｈ），５．３４（ｓ，２Ｈ），４．３５（ｄ，Ｊ＝１２．９Ｈｚ，１Ｈ），４．０７−３．９４（ｍ，１Ｈ），３．９２−３．７０（ｍ，１Ｈ），３．２７（ｄ，Ｊ＝１１．８Ｈｚ，１Ｈ），２．８１（ｔｄｄ，Ｊ＝１１．９，１２．１，１２．３Ｈｚ，１Ｈ），２．１９−１．８１（ｍ，２Ｈ），１．６６（ｄｑ，Ｊ＝３．０，１１．８Ｈｚ，１Ｈ），１．４９（ｄｑ，Ｊ＝３．０，１１．８Ｈｚ，１Ｈ）
【０１８８】
化合物１１７の調製
Ｎ−（イソキノリン−１−イル）−２−｛４−［（２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−イル）アミノ］ピペリジン−１−イル｝アセトアミド
化合物１１７を、以下のように調製した。
【化３４】
2017537938.tif 000042
【０１８９】
ステップ１
エチル  ｛４−［（２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−イル）アミノ］ピペリジン−１−イル｝アセテート（１１７ａ）
中間体２８ｃ（０．６４グラム、１．７９ミリモル、１当量）のＭｅＣＮ（１０ミリリットル）溶液に、Ｋ２ＣＯ３（０．７４グラム、５．３４ミリモル、３当量）を添加した。混合物を、１時間、還流下で撹拌し、次いで、ブロモ酢酸エチル（０．２ミリリットル、１．７８ミリモル、１当量）のＭｅＣＮ（５ミリリットル）溶液を、滴下した。還流下で、２時間、撹拌した後、混合物を、室温に冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈し、濾過し、そして、真空下で濃縮した。残留物を、シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーにより、ＣＨＣｌ３／メタノール＝９：１で溶出して精製して、エチル  ｛４−［（２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−イル）アミノ］ピペリジン−１−イル｝酢酸塩１１７ａを、０．４５グラム得た（収率７６％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝３３１．２
【０１９０】
ステップ２
｛４−［（２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−イル）アミノ］ピペリジン−１−イル｝酢酸（１１７ｂ）
中間体１１７ｂは、中間１１７ａから出発して、化合物１１１の合成の、ステップ２に記載の手順に従って、調製した（収率は定量的）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝３０３．１
【０１９１】
ステップ３
Ｎ−（イソキノリン−１−イル）−２−｛４−［（２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−イル）アミノ］ピペリジン−１−イル｝アセトアミド（１１７）
化合物１１７は、イソキノリン−１−アミンを用いて、化合物１１１の合成のステップ３に記載の手順に従って調製した（収率４３％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４２９．２
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ＝１１．４７−１０．９６（ｍ，１Ｈ），１０．１２−９．６５（ｍ，１Ｈ），８．３４（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），８．１７（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，２Ｈ），８．０８−７．７６（ｍ，３Ｈ），７．７２（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．６６−７．５４（ｍ，１Ｈ），７．４８−７．２３（ｍ，３Ｈ），５．３８（ｓ，１Ｈ），４．８１−４．０９（ｍ，２Ｈ），４．０５−３．４１（ｍ，４Ｈ），２．３３−１．８３（ｍ，４Ｈ）
【０１９２】
化合物１１８の調製
Ｎ−（イソキノリン−１−イルメチル）−２−｛４−［（２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−イル）アミノ］ピペリジン−１−イル｝アセトアミド
化合物１１８は、中間１１７ｂおよび１−（イソキノリン−１−イル）メタンアミンを用いて、化合物１１１の合成のステップ３に記載の手順に従って、調製した（収率２６％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４４３．２
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  d  ＝８．５３（ｔ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，１Ｈ），８．４７（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），８．２６（ｑｄ，Ｊ＝１．０，８．３Ｈｚ，１Ｈ），８．１８（ｄｄ，Ｊ＝１．３，８．０Ｈｚ，１Ｈ），８．０１（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．８６−７．７６（ｍ，２Ｈ），７．７２（ｄｄｄ，Ｊ＝１．５，７．０，８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．５９（ｄｔ，Ｊ＝１．５，７．７Ｈｚ，１Ｈ），７．３９−７．１５（ｍ，３Ｈ），５．２５（ｓ，１Ｈ），５．０１（ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，２Ｈ），３．６３−３．３９（ｍ，１Ｈ），３．０７（ｓ，２Ｈ），２．９５（ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ，２Ｈ），２．３８−２．２２（ｍ，２Ｈ），２．０２−１．８８（ｍ，２Ｈ），１．７６（ｄｑ，Ｊ＝３．６，１１．７Ｈｚ，２Ｈ）
【０１９３】
化合物１１９の調製
Ｎ−（１−ベンゾチオフェン−２−イルメチル）−３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロパン−１−アミン
化合物１１９を、中間体３１ｂおよび１−ベンゾチオフェン−２−カルボアルデヒドを用いて、化合物２の合成のステップ４に記載の手順に従って，調製した（収率２０％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４１７．２
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）  δ  ＝８．１３（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），８．０７（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），７．８３−７．６６（ｍ，３Ｈ），７．６０（ｄｄｄ，Ｊ＝１．３，７．０，８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．４９（ｄｄｄ，Ｊ＝１．５，７．０，８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．３６−７．２７（ｍ，２Ｈ），７．２４（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），７．２０（ｄ，Ｊ＝０．７Ｈｚ，１Ｈ），４．１４（ｄ，Ｊ＝０．９Ｈｚ，２Ｈ），３．４７（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，４Ｈ），２．８５（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ），２．７７（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，４Ｈ），２．５９（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），１．８４（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ）
【０１９４】
化合物１２０の調製
Ｎ−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イルメチル）−３−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロパン−１−アミン
化合物１２０を、中間体３１ｂおよび１，３−ベンゾジオキソール−５−カルボアルデヒドを用いて、化合物２の合成のステップ４に記載の手順に従って、調製した（収率１０％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４０５．２
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）  d  ＝８．１３（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），８．０２（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），７．７５（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６１（ｄｄｄ，Ｊ＝１．１，７．０，８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．５０（ｄｄｄ，Ｊ＝１．７，７．０，８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．２６（ｄｄ，Ｊ＝０．６，５．８Ｈｚ，１Ｈ），６．９３−６．８５（ｍ，２Ｈ），６．８１（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），５．９４（ｓ，２Ｈ），３．９９（ｓ，２Ｈ），３．４７−３．２３（ｍ，４Ｈ），３．１１（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ），２．８７−２．７２（ｍ，４Ｈ），２．６５（ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ），１．９６（ｑｕｉｎ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ）
【０１９５】
化合物１２２の調製
４−（｛３−［４−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝アミノ）−５，６，７，８−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラノ［３，２−ｃ］ピリジン−２−オン塩酸塩
化合物１２２について、以下のように調製した。
【化３５】
2017537938.tif 000043
【０１９６】
ステップ１
ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（ピロリジン−１−イル）−３，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（１２２ａ）
ピロリジン（３．５グラム、５０．２ミリモル、２当量）を、１−Ｂｏｃ−４−ピペリドン（５グラム、２５ミリモル、１当量）の乾燥トルエン（３０ミリリットル）溶液に、加えた。混合物を、Ｄｅａｎ−Ｓｔａｒｋ装置を用いて、９０℃で、加熱した。３時間後、混合物を、真空中で濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（ピロリジン−１−イル）−３，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート１２２ａを、黄色油状物として得た（６．３グラム、収率は定量的）。化合物を、さらに精製及び特性決定することなく使用した。
【０１９７】
ステップ２
ｔｅｒｔ−ブチル  ３−アセチル−４−オキソピペリジン−１−カルボキシレート（１２２ｂ）
中間体１２２ａ（６．３グラム、２５ミリモル、１当量）を、１，４−ジオキサン（２５ミリリットル）に溶解した。無水酢酸（５．２１ミリリットル、５５．２ミリモル、２．２当量）を加え、そして、得られた混合物を、２日間、窒素下に、室温で、放置した。水（６ミリリットル）を加え、そして、得られた混合物を、１時間、還流し、次いで、室温まで冷却し、そして、真空中で濃縮した。水（２０ミリリットル）を添加し、そして、水層を、ＥｔＯＡｃ（２０ミリリットル）で、２回抽出した。合わせた有機抽出物を、５％ｗ／ｗの塩酸水溶液（２０ミリリットル）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、真空中で濃縮した。得られたオレンジ色の油状物を、シリカゲルカラムにより、シクロヘキサンから、シクロヘキサン／酢酸エチル＝９：１で溶出して精製して、ｔｅｒｔ−ブチル  ３−アセチル−４−オキソピペリジン−１−カルボキシレート１２２ｂを、２，９８グラム（収率４９％）得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝２４２．２
【０１９８】
ステップ３
ｔｅｒｔ−ブチル  ４−ヒドロキシ−２−オキソ−７，８−ジヒドロ−２Ｈ−ピラノ［３，２−ｃ］ピリジン−６（５Ｈ）−カルボキシレート（１２２ｃ）
中間体１２２ｂ（１グラム、４．１４ミリモル、１当量）のＴＨＦ（２０ミリリットル）溶液を、−７８℃に冷却した。リチウム  ビス（トリメチルシリル）アミド（ＴＨＦの１Ｍ溶液、１２．４ミリリットル、３当量）を滴下した。−７８℃で、１時間、撹拌した後、ジメチルカーボネート（０．４ミリリットル、４．６ミリモル、１．１当量）を添加した。得られた混合物を、−１０℃にゆっくりと温めた。１時間後、反応液を、０℃に冷却し、ｐＨが、６になるまで、１Ｍ  ＨＣｌでクエンチした。酢酸エチルを添加し、有機層を分離し、ブラインで洗浄し、そして、真空中で蒸発させ、粗ｔｅｒｔ−ブチル  ３−（３−メトキシ−３−オキソプロパノイル）−４−オキソピペリジン−１−カルボキシレートを得、さらに精製することなく使用した。
粗製物質を、トルエン（８ミリリットル）に溶解し、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（０．６２ミリリットル、４．１４ミリモル、１当量）を加え、そして、混合物を、還流下で攪拌した。３時間後、反応物を、０℃に冷却し、そして、１Ｍ  ＨＣｌでクエンチした。酢酸エチルを加え、有機層を分離し、ブラインで洗浄し、そして、真空中で蒸発させた。粗製物質は、シリカゲルカラムにより、ＥｔＯＡｃから、ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ  ７：３で溶出して精製して、ｔｅｒｔ−ブチル  ４−ヒドロキシ−２−オキソ−７，８−ジヒドロ−２Ｈ−ピラノ［３，２−ｃ］ピリジン−６（５Ｈ）−カルボキシレート１２２ｃを、６００ミリグラム（収率５４％）得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝２６８．２
【０１９９】
ステップ４
ｔｅｒｔ−ブチル  ２−オキソ−４−｛［（トリフルオロメチル）スルホニル］オキシ｝−７，８−ジヒドロ−２Ｈ−ピラノ［３，２−ｃ］ピリジン−６（５Ｈ）−カルボキシレート（１２２ｄ）
中間体１２２ｄは、化合物２８の合成のステップ１に記載される手順に従って調製した（収率は定量的）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４００．１
【０２００】
ステップ５
ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（｛３−［４−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝アミノ）−２−オキソ−７，８−ジヒドロ−２Ｈ−ピラノ［３、２−ｃ］ピリジン−６（５Ｈ）−カルボキシレート（１２２ｅ）
化合物７１の合成のステップ４で説明したように、中間体１２２ｅは、中間体９６ｄを用いて、調製した（収率１７％）。
中間体９６ｄは、１−クロロ−７−フルオロイソキノリンから出発して、化合物３１の合成のステップ２に記載の手順に従って調製した。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝５３８．４
【０２０１】
ステップ６
４−（｛３−［４−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］プロピル｝アミノ）−５，６，７，８−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラノ［３，２−ｃ］ピリジン−２−オン塩酸塩（１２２）
化合物６８の合成のステップ４に記載されているように、化合物１２２を調製した（収率７２％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４３８．２
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  d  ＝１０．７４（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），９．６１（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），８．１６（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），８．０７（ｄｄ，Ｊ＝５．８，９．０Ｈｚ，１Ｈ），７．８４（ｄｄ，Ｊ＝２．５，１０．３Ｈｚ，１Ｈ），７．７１（ｄｔ，Ｊ＝２．５，８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．５７（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），７．１６（ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ），５．０６（ｓ，１Ｈ），４．１６−３．８６（ｍ，３Ｈ），３．８１（ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，２Ｈ），３．５９（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），３．５０−３．３２（ｍ，６Ｈ），３．３１−３．１６（ｍ，４Ｈ），２．７３（ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ），２．１４−１．９３（ｍ，Ｊ＝７．０，７．０，７．０，７．０Ｈｚ，２Ｈ）
【０２０２】
化合物１２３の調製
本明細書の以下に記載されるように、化合物１２３を調製した。
【化３６】
2017537938.tif 000044
【０２０３】
ステップ１
２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−イル  トリフルオロメタンスルホネート（１２３ａ）
４−ヒドロキシクマリン（１グラム、６．１７ミリモル、１当量）を、ＤＣＭ（３０ミリリットル）に溶解し、トリエチルアミン（１．７２ミリリットル、１２．３４ミリモル、２当量）を添加し、そして、得られた混合物を、−１０℃に、冷却した。トリフルオロメタンスルホン酸無水物（１．２５ミリリットル、７．４ミリモル、１．２当量）のＤＣＭ（５ミリリットル）を滴下し、そして、溶液を、２時間、−１０℃で、撹拌した。得られた赤褐色の溶液を、室温に温め、ｃＨｅｘ／Ｅｔ２Ｏ  １／１（５０ミリリットル）で希釈し、そして、溶離液として、ｃＨｅｘ／Ｅｔ２Ｏ  １／１を使用して、シリカゲルのパッドを通して濾過した。溶媒を、真空下で除去し、２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−イル  トリフルオロメタンスルホネート１２３ａを得た（１．７６グラム、収率９７％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）：２９５．０
【０２０４】
ステップ２
ｔｅｒｔ−ブチル  ４−［（２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−イル）アミノ］ピペリジン−１−カルボキシレート（１２３ｂ）
トリエチルアミン（１ミリリットル、７．２ミリモル、１．２当量）のアセトニトリル（２ミリリットル）溶液を、中間体１２３ａ（１．７６グラム、５．９９ミリモル、１当量）および１−Ｂｏｃ−４−アミノピペリジン（１．２グラム、５．９９ミリモル、１当量）の乾燥アセトニトリル（２０ミリリットル）の撹拌溶液に、滴下した、混合物を、２時間、加熱還流し、次いで、室温まで冷却し、ＤＣＭ（１００ミリリットル）で希釈し、そして、飽和ＮａＨＣＯ３（５０ミリリットル）および水（５０ミリリットル）で洗浄した。有機層を、分離し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして、真空中で蒸発させた。粗製物質を、メタノールでトリチュレートすることにより、精製し、ｔｅｒｔ−ブチル  ［４−（２−オキソ−２Ｈ−クロメン−４−イル）アミノ］ピペリジン−１−カルボキシレート１２３ｂ（１．５１グラム、収率７３％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）：３４５．２
【０２０５】
ステップ３
４−（ピペリジン−４−イルアミノ）−２Ｈ−クロメン−２−オン  トリフルオロ酢酸塩（１２３ｃ）
中間体１２３ｂ（１グラム、２．９０ミリモル、１当量）を、ＤＣＭ（１０ミリリットル）に溶解し、そして、ＴＦＡ（３ミリリットル）を、０℃で、滴下した。溶液を、２時間、撹拌し、次いで、真空中で濃縮し、そして、トルエン（２５ミリリットル）およびジエチルエーテル（２５ミリリットル）で洗浄して、４−（ピペリジン−４−イルアミノ）−２Ｈ−クロメン−２−オン  トリフルオロ酢酸塩１２３ｃを得、さらに精製することなく使用した（１．２２グラム、収率は定量的）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）：２４５．１
【０２０６】
ステップ４
４−｛［１−（プロパ−２−イン−１−イル）ピペリジン−４−イル］アミノ｝−２Ｈ−クロメン−２−オン（１２３ｄ）
中間体１２３ｃ（５０ミリグラム、０．１４ミリモル、１当量）および炭酸カリウム（３８．７ミリグラム、０．２８ミリモル、２当量）のＤＭＦ（２ミリリットル）溶液に、３−ブロモ−１−プロピン（２０．８ミリグラム、０．１４ミリモル、１当量）を、室温で、加えた。反応物を、一晩攪拌し、次いで、濾過し、そして、濾液を濃縮した。残渣を、シリカゲルカラムにより、ＥｔＯＡｃから、ＥｔＯＡｃ／メタノール＝８：２で溶出して精製し、４−｛［１−（プロパ−２−イン−１−イル）ピペリジン−４−イル］アミノ｝−２Ｈ−クロメン−２−オン１２３ｄを得た（２５．６ミリグラム、収率６４％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）：２８３．１
【０２０７】
ステップ５
４−（｛１−［３−（イソキノリン−１−イル）プロパ−２−イン−１−イル］ピペリジン−４−イル｝アミノ）−２Ｈ−クロメン−２−オン（１２３ｅ）
中間体１２３ｄ（１８６ミリグラム、０．６６ミリモル、１当量）、１−クロロイソキノリン（１２０ミリグラム、０．７２ミリモル、１．１当量）およびＣｕＩ（１２ミリグラム、０．０６６ミリモル、０．１当量）を、乾燥ＤＭＦ（３．６ミリリットル）に溶解した。ＤＩＰＥＡ（０．４７３ミリリットル、２．６４ミリモル、４当量）を添加した。混合物を、真空及び窒素を適用することにより脱気し、次いで、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（４５ミリグラム、０．０６６ミリモル、０．１当量）を添加し、そして、混合物を、６０℃で加熱した。３時間後、水（１０ミリリットル）を添加し、そして、混合物を、酢酸エチル（３×１０ミリリットル）で抽出した。有機層を、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、そして、真空中で濃縮して、粗製物質２８３ミリグラムを得た。ＥｔＯＡｃから、ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ  ８：２で溶出した、シリカゲルカラムによる精製後、化合物、４−（｛１−［３−（イソキノリン−１−イル）プロパ−２−イン−１−イル］ピペリジン−４−イル｝アミノ）−２Ｈ−クロメン−２−オン１２３ｅ（８７ミリグラム、収率３２％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）：４１０．２
【０２０８】
ステップ６
４−（｛１−［３−（イソキノリン−１−イル）プロピル］ピペリジン−４−イル｝アミノ）−２Ｈ−クロメン−２−オン（１２３ｆ）：
中間体１２３ｅ、４−（｛１−［３−（イソキノリン−１−イル）プロパ−２−イン−１−イル］ピペリジン−４−イル｝アミノ）−２Ｈ−クロメン−２−オン（８２ミリグラム、０．２ミリモル、１当量）のＥｔＯＡｃ（５ミリリットル）溶液に、Ｐｄ／Ｃ  １０％（０．０５当量）を加え、そして、混合物を、室温で、水素（３．５気圧）下で攪拌した。３時間後、ＤＣＭを添加し、混合物を、次いで、濾過し、そして、真空中で濃縮して、粗製物質を得た。これを、シリカゲルカラムで、ＤＣＭから、ＤＣＭ／メタノール８：２にで溶離することにより精製して、中間体１２３ｆを、３０ミリグラム（０．０７２ミリモル、収率３６％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）：４１４．１
【０２０９】
ステップ７
３−シクロヘキシル−３−［（２−｛［１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−イル］アミノ｝エチル）アミノ］プロパン−１−オール（化合物１２３）の合成：
４−（｛１−［３−（イソキノリン−１−イル）プロピル］ピペリジン−４−イル｝アミノ）−２Ｈ−クロメン−２−オン（１２３ｆ、２５ミリグラム、０．０６ミリモル）のアセトン（５ミリリットル）溶液に、炭酸カリウム（４３ミリグラム、０．３１ミリモル）を添加した。１時間撹拌した後、混合物を、０℃に冷却し、次いで、ヨウ化メチル（３．７μＬ、０．０６ミリモル）を添加した。混合物を、室温に戻るまで放置し、次いで、一晩撹拌し、濾過し、そして、真空中で濃縮した。残留物を、分取ＨＰＬＣ（Ｃ１８、水中１０〜３０％のアセトニトリル）によって精製し、１３．３ミリグラム（０．０２４ミリモル、収率４０％）の表題化合物を得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）：４２８．２
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  d  ＝８．４４（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），８．３２（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），８．１６−８．０９（ｍ，１Ｈ），７．９９（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．８３−７．７６（ｍ，１Ｈ），７．７６−７．６８（ｍ，２Ｈ），７．６７−７．５８（ｍ，１Ｈ），７．５４（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），７．４０−７．３０（ｍ，２Ｈ），５．３６（ｓ，１Ｈ），３．９６−３．７９（ｍ，１Ｈ），３．７５−３．５９（ｍ，４Ｈ），３．５７−３．３６（ｍ，４Ｈ），３．１３（ｓ，３Ｈ），２．３９−２．０５（ｍ，６Ｈ）
【０２１０】
化合物１２８の調製
（２Ｓ、３Ｓ）および（２Ｒ、３Ｒ）４−（｛３−［１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−イル］−２，３−ジヒドロキシプロピル｝アミノ）−２Ｈ−クロメン−２−オン塩酸塩
化合物１２８を、以下のように調製した。
【化３７】
2017537938.tif 000045
【０２１１】
ステップ１
［１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−イル］メタノール（１２８ａ）
中間体１２８ａは、ピペリジン−４−イルメタノールを用いて、化合物７０の合成のステップ１に記載される手順に従って調製した（収率８２％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）２６１．２
【０２１２】
ステップ２
１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−カルボアルデヒド（１２８ｂ）
中間体１２８ａ（６７５ミリグラム、２．６ミリモル、１当量）、炭酸水素ナトリウム（１．０９グラム、１３ミリモル、５当量）およびＤｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎペルヨージナン（１．６５グラム、３．９ミリモル、１．５当量）を、ＤＣＭ（４ミリリットル）に懸濁した。反応混合物を、３時間、室温で、撹拌し、次いで、飽和ＮａＨＣＯ３／２ＮのＮａ２Ｓ２Ｏ３＝１：１の比でクエンチした。１５分後、水とＤＣＭを添加し、有機層を、分離し、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で処理し、そして、減圧下で濃縮し、１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−カルボアルデヒド１２８ｂを得た。これをさらに精製することなく進行させた（６７１ミリグラム、収率は定量的）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝２５９．１
【０２１３】
ステップ３
メチル  （２Ｅ）−３−［１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−イル］プロパ−２−エノエート（１２８ｃ）
メチル  ２−（ジメトキシホスホリル）アセテート（２２４ミリグラム、１．２３ミリモル、１．６当量）を、カリウム  ｔｅｒｔ−ブトキシド（１３８ミリグラム、１．２３ミリモル、１．６当量）のＴＨＦ（３ミリリットル）溶液に、０℃で添加した。混合物を、室温で、３０分間撹拌し、次いで、中間体１２８ｂ（１９９ミリグラム、０．７７ミリモル、１当量）のＴＨＦ（２ミリリットル）溶液を、０℃で、滴下した。反応物を、室温で、一晩、撹拌した。反応を、水でクエンチし、そして、ＥｔＯＡｃ（２ｘ）で抽出した。有機層を、硫酸ナトリウムで乾燥させ、そして、減圧下で蒸発させた。残渣を、シリカゲル（ＳＮＡＰ  １０）のクロマトグラフィーに付し、シクロヘキサン中の０−３０％ＥｔＯＡｃの勾配で溶出して、１２５ミリグラムのメチル  （２Ｅ）−３−［１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−イル］プロパ−２−エノエート１２８ｃ（収率５２％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝３１５．１
【０２１４】
ステップ４
（２Ｅ）−３−［１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−イル］プロパ−２−エン−１−オール（１２８ｄ）
水素化ジイソブチルアルミニウム（シクロヘキサン中１Ｍ溶液、１３ミリリットル、３．７当量）を、−７８℃で、１２８ｄ（１．１グラム、３．５ミリモル、１当量）のＴＨＦ（２５ミリリットル）の撹拌溶液に滴下した。混合物を、同温度で、１時間撹拌し、次いで、メタノール（４ミリリットル）でクエンチし、そして、室温に放置し温めた。酢酸エチル（１００ミリリットル）およびロッシェル（Ｒｏｃｈｅｌｌｅ）飽和溶液（１５０ミリリットル）を添加し、得られた混合物を、１５分間、激しく撹拌し、有機層を分離し、そして硫酸ナトリウムで乾燥させた。揮発性物質を減圧下で除去し、（２Ｅ）−３−［１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−イル］プロパ−２−エン−１−オール１２８ｄを、０．９グラム得た（収率９０％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝２８７．４
【０２１５】
ステップ５
ジ−ターシャリーブチル  ｛（２Ｅ）−３−［１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−イル］プロパ−２−エン−１−イル｝イミドジカーボネート（１２８ｅ）
中間体１２８ｄ（８００ミリグラム、２．８ミリモル、１当量）のＤＣＭ（４．５ミリリットル）溶液に、ＴＥＡ（０．９７ミリリットル、７ミリモル、２．５当量）を添加した。混合物を、０℃に冷却し、次いで、メタンスルファノニル  クロリド（０．２６ミリリットル、３．３５ミリモル、１．２当量）を、Ｎ２雰囲気下で添加した。混合物を、放置し、室温に温め、そして、１時間撹拌した。ＤＣＭを添加し、そして、溶液を、飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄した。有機層を、分離し、そして、真空中で蒸発させ、（２Ｅ）−３−［１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−イル］プロパ−２−エン−１−イル  メタンスルホネート（収率は定量）を得、それをさらに精製することなく使用した。
中間体（２Ｅ）−３−［１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−イル］プロパ−２−エン−１−イル  メタンスルホネート（２．８ミリモル、１当量）を、ジーｔｅｒｔ−ブチル−イミノジカルボキシレート（１グラム、４．７５ミリモル、１．７当量）、Ｋ２ＣＯ３（０．７グラム、５ミリモル、１．８当量）およびＬｉＩ（１２ミリグラム、０．０９２ミリモル、０．０３当量）のアセトニトリル（２０ミリリットル）の撹拌混合物に滴下した。反応物を、一晩、還流し、次いで、ＮａＨＣＯ３およびＥｔＯＡｃを添加した。有機層を、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。残渣を、シリカゲル（ＳＮＡＰ  ５０）のクロマトグラフィーに付し、ｃＨｅｘ中の０〜１５％の溶液Ａの勾配で溶出して（Ａは、ＥｔＯＡｃ中の２０％ＭｅＯＨ溶液である）、５８０ミリグラムのジーｔｅｒｔ−ブチル  ｛（２Ｅ）−３−［１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−イル］プロパ−２−エン−１−イル｝イミドジカーボネート１２８ｅ（収率４８％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４８６．４
【０２１６】
ステップ６
（２Ｓ、３Ｓ）および（２Ｒ、３Ｒ）  ３−アミノ−１−［１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−イル］プロパン−１，２−ジオール塩酸塩（１２８ｆ）
中間体１２８ｅ（５８０ミリグラム、１．２ミリモル、１当量）のｔ−ブタノール／水１：１（８ミリリットル）の撹拌溶液に、４−メチルモルホリン−Ｎ−オキシド（１６７ミリグラム、１．４ミリモル、１．２当量）と四酸化オスミウム（４％水溶液）の一滴を添加した。室温で、１８時間、撹拌した後、ＥｔＯＡｃを加え、そして、有機層を、水およびブラインで洗浄し、分離し、そして、真空中で蒸発させた。残留物の３００ミリグラムを、ＤＣＭ／メタノール（５ミリリットル）に溶解し、そして、０℃に冷却した。３当量の、１Ｍ  ＨＣｌのジエチルエーテル溶液の３当量を添加し、そして、混合物を、一晩、室温で、攪拌し、そして、次いで、５時間、６０℃で撹拌した。溶媒を真空中で蒸発させ、１９９ミリグラムの（１Ｓ、２Ｓ）−３−アミノ−１−［１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−イル］プロパン−１，２−ジオール塩酸塩１２８ｆを、ラセミ混合物として得た（収率９５％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝３２０．１
【０２１７】
ステップ７
（２Ｓ、３Ｓ）および（２Ｒ、３Ｒ）  ４−（｛３−［１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−イル］−２，３−ジヒドロキシプロピル｝アミノ）−２Ｈ−クロメン−２−オン塩酸塩（１２８）
化合物７１の合成のステップ４で説明したように、化合物１２８は、ラセミ混合物として、中間体１２８ｆおよび２８ａを用いて、調製した（収率８６％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４６４．３ 
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １．４６−１．６１（ｍ，２Ｈ），１．７３−１．８４（ｍ，２Ｈ），２．０６−２．１３（ｍ，１Ｈ），２．７７−２．８８（ｍ，１Ｈ），３．２５（ｔ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ），３．２９−３．３６（ｍ，１Ｈ），３．４０−３．４８（ｍ，１Ｈ），３．６４−３．７７（ｍ，２Ｈ），３．８４−３．９８（ｍ，１Ｈ），４．４５（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ），４．８３（ｄ，Ｊ＝６．３６Ｈｚ，１Ｈ），５．２４（ｓ，１Ｈ），７．２９−７．３６（ｍ，２Ｈ），７．４０（ｄ，Ｊ＝５．８７Ｈｚ，１Ｈ），７．５６−７．７１（ｍ，４Ｈ），７．９８（ｄｄ，Ｊ＝８．８０，５．８７Ｈｚ，１Ｈ），８．０７（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ），８．０９（ｄ，Ｊ＝５．８７Ｈｚ，１Ｈ）
【０２１８】
化合物１２９の調製
（２Ｒ、３Ｓ）および（２Ｓ、３Ｒ）  ４−（｛３−［１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−イル］−２，３−ジヒドロキシプロピル｝アミノ）−２Ｈ−クロメン−２−オン塩酸塩
化合物１２９を、以下のように調製した。
【０２１９】
【化３８】
2017537938.tif 000046
化合物１２８の合成について記載したように、メチル  （２Ｚ）−３−［１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−イル］プロパ−２−エノエートを重要な中間体として使用して、ラセミ混合物として、化合物１２９を調製した。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４６４．３
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １．５８−１．９６（ｍ，４Ｈ），２．０５（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），３．１１−３．２７（ｍ，３Ｈ），３．３３（ｄｄ，Ｊ＝７．８３，２．９３Ｈｚ，１Ｈ），３．６１−３．６９（ｍ，１Ｈ），３．７１−３．７９（ｍ，１Ｈ），４．００（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），５．２３（ｓ，１Ｈ），７．２５−７．３８（ｍ，２Ｈ），７．５３（ｄ，Ｊ＝５．８７Ｈｚ，１Ｈ），７．５９（ｔ，Ｊ＝７．５８Ｈｚ，１Ｈ），７．７２−７．７７（ｍ，１Ｈ），７．８２（ｄ，Ｊ＝９．７８Ｈｚ，２Ｈ），７．９３（ｄ，Ｊ＝４．４０Ｈｚ，１Ｈ），８．１３（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，２Ｈ）
【０２２０】
化合物１３０の調製
Ｎ−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イルメチル）−２−［４−（イソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］エタンアミン
中間体７５ｂおよび１，３−ベンゾジオキソール−５−カルボアルデヒドを用いて、化合物２の合成のステップ４に記載の手順に従って、化合物１３０を、調製した（収率２５％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝３９１．２
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  d  ＝８．０９（ｄ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，２Ｈ），８．０８（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），７．８９（ｄｄ，Ｊ＝０．９，８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．７１（ｄｄｄ，Ｊ＝１．２，６．８，８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６１（ｄｄｄ，Ｊ＝１．２，６．８，８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．４０（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ），７．０５（ｔ，Ｊ＝１．０Ｈｚ，１Ｈ），６．９５（ｄ，Ｊ＝１．０Ｈｚ，２Ｈ），６．０２（ｓ，２Ｈ），３．９７（ｓ，２Ｈ），３．３４（ｂｒ．ｓ．，４Ｈ），２．９４（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ），２．７６−２．５８（ｍ，６Ｈ）
【０２２１】
化合物１３６の調製
本明細書で以下に記載されるように、化合物１３６を調製した。
【０２２２】
ステップ１
３−シクロヘキシル−３−（｛（２Ｒ）−３−［４−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］−２−ヒドロキシプロピル｝アミノ）プロパン酸（ギ酸塩、化合物１３６）の合成：
【化３９】
2017537938.tif 000047
【０２２３】
ジアステレオ異性体の混合物として、化合物、３−シクロヘキシル−３−（｛（２Ｒ）−３−［４−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］−２−ヒドロキシプロピル｝アミノ）プロパン酸（ギ酸塩）は、化合物１３９について記載した合成法に従って、ラセミの３−アミノ−３−シクロヘキシルプロパン酸を用いて、調製した（収率４４％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４５９．５
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．８６−１．２９（ｍ，５Ｈ），１．４９−１．７９（ｍ，６Ｈ），２．０５−２．１７（ｍ，１Ｈ），２．２５（ｄｔ，Ｊ＝１６．１４，４．１６Ｈｚ，１Ｈ），２．４８（ｄ，Ｊ＝７．３４Ｈｚ，２Ｈ），２．６２−２．７９（ｍ，５Ｈ），２．８０−２．９５（ｍ，２Ｈ），３．２８（ｂｒ．ｓ．，４Ｈ），３．８４−３．９４（ｍ，１Ｈ），７．４５（ｄ，Ｊ＝５．３８Ｈｚ，１Ｈ），７．６５（ｔｄ，Ｊ＝８．６８，２．６９Ｈｚ，１Ｈ），７．６９（ｄ，Ｊ＝９．７８Ｈｚ，１Ｈ），８．０１（ｄｄ，Ｊ＝９．０５，５．６２Ｈｚ，１Ｈ），８．１２（ｄ，Ｊ＝５．８７Ｈｚ，１Ｈ），８．１５（ｓ，１Ｈ）
【０２２４】
化合物１３７の調製
本明細書で以下に記載されるように、化合物１３７を調製した。
【０２２５】
ステップ１
３−シクロヘキシル−３−（｛（２Ｓ）−３−［４−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］−２−ヒドロキシプロピル｝アミノ）プロパン酸（ギ酸塩、化合物１３７）の合成：
【化４０】
2017537938.tif 000048
化合物、３−シクロヘキシル−３−（｛（２Ｓ）−３−［４−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］−２−ヒドロキシプロピル｝アミノ）プロパン酸（ギ酸塩）は、ジアステレオ異性体の混合物として、ラセミの３−アミノ−３−シクロヘキシルプロパン酸を用いて、化合物１３８について記載した合成法に従って調製した。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４５９．５
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．８２−１．３２（ｍ，５Ｈ），１．４７−１．８０（ｍ，６Ｈ），２．０４−２．１６（ｍ，１Ｈ），２．２０−２．２８（ｍ，１Ｈ），２．４８（ｄ，Ｊ＝６．８５Ｈｚ，２Ｈ），２．７２（ｂｒ．ｓ．，５Ｈ），２．８０−２．９４（ｍ，２Ｈ），３．２９（ｂｒ．ｓ．，４Ｈ），３．８８（ｄ，Ｊ＝５．８７Ｈｚ，１Ｈ），５．０２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），７．４５（ｄ，Ｊ＝５．３８Ｈｚ，１Ｈ），７．６５（ｔｄ，Ｊ＝８．５６，２．４５Ｈｚ，１Ｈ），７．６９（ｄ，Ｊ＝９．７８Ｈｚ，１Ｈ），８．０１（ｄｄ，Ｊ＝９．０５，５．６２Ｈｚ，１Ｈ），８．１２（ｄ，Ｊ＝５．８７Ｈｚ，１Ｈ），８．１５（ｓ，１Ｈ）
【０２２６】
化合物１３８の調製
本明細書で以下に記載されるように、化合物１３８を調製した。
ステップ１
７−フルオロ−１−（４−｛［（２Ｒ）−オキシラン−２−イル］メチル｝ピペラジン−１−イル）イソキノリンの合成：
【化４１】
2017537938.tif 000049
表題の中間体を、７−フルオロ−１−（４−｛［（２Ｒ）−オキシラン−２−イル］メチル｝ピペラジン−１−イル）イソキノリン（化合物１３９を参照）の合成に関して記載された手順に従って、（Ｒ）−（＋）−エピクロロヒドリンを用いて、調製した（収率９２％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝２８８．３
【０２２７】
ステップ２
（２Ｓ）−シクロヘキシル  （｛（２Ｓ）−３−［４−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］−２−ヒドロキシプロピル｝アミノ）酢酸（ギ酸塩、化合物１３８）の合成：
【化４２】
2017537938.tif 000050
７−フルオロ−１−（４−（｛［（２Ｒ）−オキシラン−２−イル］メチル｝ピペラジン−１−イル）イソキノリンおよび（２Ｓ）−アミノ（シクロヘキシル）酢酸を用いて、化合物１３９について記載した手順に従って、化合物１３８を、調製した（収率２７％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４４５．２
１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １．０９−１．３７（ｍ，５Ｈ），１．６２−１．８５（ｍ，６Ｈ），２．５７−２．６０（ｍ，４Ｈ），２．７３−２．８９（ｍ，５Ｈ），２．９４（ｄｄ，Ｊ＝１１．９８，４．１６Ｈｚ，１Ｈ），３．１１（ｄ，Ｊ＝４．４０Ｈｚ，１Ｈ），３．３４（ｄ，Ｊ＝７．３４Ｈｚ，４Ｈ），３．９６−４．０９（ｍ，１Ｈ），７．５２（ｄ，Ｊ＝５．３８Ｈｚ，１Ｈ），７．７１（ｔｄ，Ｊ＝８．６８，２．６９Ｈｚ，１Ｈ），７．７６（ｄｄ，Ｊ＝１０．０３，２．２０Ｈｚ，１Ｈ），８．０７（ｄｄ，Ｊ＝９．２９，５．８７Ｈｚ，１Ｈ），８．１８（ｄ，Ｊ＝５．８７Ｈｚ，１Ｈ），８．２１（ｓ，１Ｈ）
【０２２８】
化合物１３９の調製
本明細書で以下に記載されるように、化合物１３９を調製した。
ステップ１
ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−カルボン酸の合成：
【化４３】
2017537938.tif 000051
中間体２ｃの合成について記載したように、１−クロロ−７−フルオロイソキノリンおよびＮ−Ｂｏｃ−ピペラジンを用いて、表題中間体を調製した（収率９４％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝３３２．３
【０２２９】
ステップ２
７−フルオロ−１−（ピペラジン−１−イル）イソキノリン（トリフルオロ酢酸塩）の合成：
【化４４】
2017537938.tif 000052
中間体２８ｃの合成について記載したように、ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−カルボン酸を用いて、表題中間体を調製した（収率は定量的）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝２３２．２
【０２３０】
ステップ３
７−フルオロ−１−（４−｛［（２Ｓ）−オキシラン−２−イル］メチル｝ピペラジン−１−イル）イソキノリンの合成：
【化４５】
2017537938.tif 000053
７−フルオロ−１−（ピペラジン−１−イル）イソキノリン（トリフルオロ酢酸塩、４４８ミリグラム、１．３ミリモル）を、ＭｅＯＨ（１２ミリリットル）に溶解し、水酸化ナトリウム（１５６ミリグラム、３．９ミリモル）、続けて、（Ｓ）−（＋）−エピクロロヒドリン（０．９２ミリリットル、１１．７ミリモル）を、−１０℃で、加えた。反応混合物を、３０時間、同温度で、攪拌した後、４℃で一晩、放置した。混合物を、濾過し、固体を、アセトンで洗浄し、そして、有機層を、真空中で蒸発させた。残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（ＳＮＡＰ  ５０、Ｃｙ：酢酸エチル：メタノール６：３：１）を行い、３７０ミリグラムの７−フルオロ−１−（４−｛［（２Ｓ）−オキシラン−２−イル］メチル｝ピペラジン−１−イル）イソキノリンを、黄色油状物として得た（収率９８％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝２８８．３
【０２３１】
ステップ４
（２Ｒ）−シクロヘキシル  （｛（２Ｒ）−３−［４−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］−２−ヒドロキシプロピル｝アミノ）酢酸（ギ酸塩、化合物１３９）の合成：
【化４６】
2017537938.tif 000054
７−フルオロ−１−（４−｛［（２Ｓ）−オキシラン−２−イル］メチル｝ピペラジン−１−イル）イソキノリン（６０ミリグラム、０．２１ミリモル）、（２Ｒ）−アミノ（シクロヘキシル）酢酸（９８ミリグラム、０．６３ミリモル）およびＤＩＰＥＡ（１５０μＬ、０．８４ミリモル）を、イソプロパノール／水１：１の混合物に溶解し、そして、３時間、９０℃で、撹拌した。溶媒を、真空中で蒸発させ、残渣を、ＥｔＯＡｃで処理し、そして、Ｃ１８（ＳＮＡＰ  ３０、濃度勾配：アセトニトリル＋０．１％ギ酸の０−２３％水中＋０．１％ギ酸中）（ＳＮＡＰ  ３０，  ｇｒａｄｉｅｎｔ：  ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ  ＋  ０．１  ％  ｆｏｒｍｉｃ  ａｃｉｄ  ０  −  ２３％  ｉｎ  ｗａｔｅｒ  ＋  ０．１％  ｆｏｒｍｉｃ  ａｃｉｄ）でクロマトグラフィーを行い、３５ミリグラム（０．０７ミリモル、収率３３％）の（２Ｒ）−シクロヘキシル  （｛（２Ｒ）−３−［４−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］−２−ヒドロキシプロピル｝アミノ）酢酸（ギ酸塩）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４４５．２
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．９９−１．３６（ｍ，５Ｈ），１．５３−１．７８（ｍ，６Ｈ），２．４７（ｄ，Ｊ＝６．３６Ｈｚ，２Ｈ），２．６５−２．８１（ｍ，５Ｈ），２．８６（ｄｄ，Ｊ＝１１．９８，４．１６Ｈｚ，１Ｈ），３．０２（ｄ，Ｊ＝４．４０Ｈｚ，１Ｈ），３．２８（ｂｒ．ｓ．，６Ｈ），３．８８−４．００（ｍ，１Ｈ），７．４５（ｄ，Ｊ＝５．８７Ｈｚ，１Ｈ），７．６５（ｔｄ，Ｊ＝８．６８，２．６９Ｈｚ，１Ｈ），７．７０（ｄｄ，Ｊ＝１０．２７，１．９６Ｈｚ，１Ｈ），８．０１（ｄｄ，Ｊ＝９．０５，５．６２Ｈｚ，１Ｈ），８．１２（ｄ，Ｊ＝５．８７Ｈｚ，１Ｈ），８．１７（ｓ，１Ｈ）
【０２３２】
化合物１４０の調製
本明細書で以下に記載されるように、化合物１４０を調製した。
【０２３３】
ステップ１
（２Ｓ）−シクロヘキシル  （｛（２Ｒ）−３−［４−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］−２−ヒドロキシプロピル｝アミノ）酢酸（ギ酸塩、化合物１４０）の合成：
【化４７】
2017537938.tif 000055
（２Ｓ）−アミノ（シクロヘキシル）酢酸を用いて、化合物１３９について記載した合成に従って、化合物、（２Ｓ）−シクロヘキシル  （｛（２Ｒ）−３−［４−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］−２−ヒドロキシプロピル｝アミノ）酢酸（蟻酸塩）を調製した（収率１５％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４４５．３
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．９９−１．３９（ｍ，５Ｈ），１．５４−１．７８（ｍ，６Ｈ），２．５２−２．５４（ｍ，２Ｈ），２．６７−２．９０（ｍ，６Ｈ），３．０６（ｄ，Ｊ＝４．４０Ｈｚ，１Ｈ），３．２７（ｂｒ．ｓ．，４Ｈ），３．８８−３．９９（ｍ，１Ｈ），７．４５（ｄ，Ｊ＝５．３８Ｈｚ，１Ｈ），７．６５（ｔｄ，Ｊ＝８．８０，２．４５Ｈｚ，１Ｈ），７．７０（ｄｄ，Ｊ＝１０．０３，２．２０Ｈｚ，１Ｈ），８．０１（ｄｄ，Ｊ＝９．０５，５．６２Ｈｚ，１Ｈ），８．１１（ｄ，Ｊ＝５．３８Ｈｚ，１Ｈ），８．１６（ｓ，１Ｈ）
【０２３４】
化合物１４１の調製
本明細書で以下に記載されるように、化合物１４１を調製した。
【０２３５】
ステップ１
（３Ｒ）−３−（｛（２Ｒ）−３−［４−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］−２−ヒドロキシプロピル｝アミノ）−３−フェニルプロパン酸（ギ酸塩、化合物１４１）の合成：
【化４８】
2017537938.tif 000056
化合物、（３Ｒ）−３−（｛（２Ｒ）−３−［４−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］−２−ヒドロキシプロピル｝アミノ）−３−フェニルプロパン酸（ギ酸塩）は、（３Ｒ）−３−アミノ−３−フェニルプロパン酸を用いて、化合物１３９について記載の合成法に従って調整された（収率１９％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４５３．４
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ２．３３−２．４６（ｍ，４Ｈ），２．５５−２．７３（ｍ，６Ｈ），３．２３（ｂｒ．ｓ．，４Ｈ），３．７８−３．８５（ｍ，１Ｈ），４．１１（ｄｄ，Ｊ＝９．７８，４．８９Ｈｚ，１Ｈ），７．２５−７．３１（ｍ，１Ｈ），７．３６（ｔ，Ｊ＝７．５８Ｈｚ，２Ｈ），７．３９−７．４７（ｍ，３Ｈ），７．６１−７．７０（ｍ，２Ｈ），８．００（ｄｄ，Ｊ＝８．８０，５．８７Ｈｚ，１Ｈ），８．１１（ｄ，Ｊ＝５．８７Ｈｚ，１Ｈ）
【０２３６】
化合物１４２の調製
本明細書で以下に記載されるように、化合物１４２を調製した。
【０２３７】
ステップ１
（３Ｒ）−３−（｛（２Ｓ）−３−［４−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］−２−ヒドロキシプロピル｝アミノ）−３−フェニルプロパン酸（ギ酸塩、化合物１４２）の合成：
【化４９】
2017537938.tif 000057
化合物、（３Ｒ）−３−（｛（２Ｓ）−３−［４−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペラジン−１−イル］−２−ヒドロキシプロピル｝アミノ）−３−フェニルプロパン酸（ギ酸塩）は、（３Ｒ）−３−アミノ−３−フェニルプロパン酸を用いて、化合物１３８について記載された合成法に従って、製造された（収率１９％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４５３．４
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ２．３３−２．５６（ｍ，５Ｈ），２．５７−２．７２（ｍ，５Ｈ），３．２３（ｂｒ．ｓ．，４Ｈ），３．７４−３．８１（ｍ，１Ｈ），４．０８（ｄｄ，Ｊ＝１０．０３，４．６５Ｈｚ，１Ｈ），７．２６−７．３１（ｍ，１Ｈ），７．３６（ｔ，Ｊ＝７．５８Ｈｚ，２Ｈ），７．４０−７．４６（ｍ，３Ｈ），７．６１−７．７０（ｍ，２Ｈ），８．００（ｄｄ，Ｊ＝９．０５，５．６２Ｈｚ，１Ｈ），８．１１（ｄ，Ｊ＝５．８７Ｈｚ，１Ｈ）
【０２３８】
化合物１６７の調製
本明細書で以下に記載されるように、化合物１６７を調製した。
【０２３９】
ステップ１
３−シクロヘキシル−３−［（２−｛［１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−イル］アミノ｝エチル）アミノ］プロパン−１−オール（化合物１６７）の合成：
【化５０】
2017537938.tif 000058
【０２４０】
メチル  ３−シクロヘキシル−３−［（２−｛［１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−イル］アミノ｝エチル）アミノ］プロパノエート（化合物１８９、４５ミリグラム、０．１ミリモル）のＴＨＦ（１０ミリリットル）溶液に、ＮａＢＨ４（１９ミリグラム、０．５ミリモル）を添加した。混合物を、１時間還流し、次いで、ＭｅＯＨ（０．１３ミリリットル、３．３ミリモル）を添加した。還流下、１８時間撹拌した後、混合物を、室温に冷却し、真空下で濃縮し、そして、水とＤＣＭの間に分配した。有機層を、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、そして、真空下で濃縮した。残留物を、分取ＨＰＬＣ（Ｃ１８、水中、３０％から６５％のアセトニトリル）により精製して、３−シクロヘキシル−３−［（２−｛［１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−イル］アミノ｝エチル）アミノ］プロパン−１−オール（１４ミリグラム、０．０３ミリモル、２つのステップにわたって３０％収率）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４２９．３
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）  δ  ＝８．１２（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ），７．７６（ｄｄ，Ｊ＝５．６，８．９Ｈｚ，１Ｈ），７．６７（ｄｄ，Ｊ＝２．６，１０．２Ｈｚ，１Ｈ），７．４０（ｄｔ，Ｊ＝２．６，８．６Ｈｚ，１Ｈ），７．２７（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ），４．０１（ｄｄｄ，Ｊ＝３．８，５．８，１１．６Ｈｚ，１Ｈ），３．８６−３．６３（ｍ，２Ｈ），３．４９−２．７２（ｍ，１３Ｈ），２．２０（ｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ，２Ｈ），２．０９−１．５４（ｍ，８Ｈ），１．４５−０．８７（ｍ，４Ｈ）
【０２４１】
化合物１８９の調製
本明細書で以下に記載されるように、化合物１８９を調製した。
【０２４２】
ステップ１
ｔｅｒｔ−ブチル  ［１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−イル］カルバメートの合成：
【化５１】
2017537938.tif 000059
炭酸カリウム（４．６グラム、３３ミリモル）を、１−クロロ−７−フルオロイソキノリン（５グラム、２７．５ミリモル）およびｔｅｒｔーブチル  ピペリジン−４−イルカルバメート（１３．８グラム、６８．８ミリモル）の、メチル  イソプロピル  ケトン（５０ミリリットル）の撹拌溶液に、室温で、添加した。得られた混合物を、一晩、加熱還流した。ＵＰＬＣチェックが、反応が完了したことを示した。次いで、混合物を、室温まで放冷させ、次に、水を添加した。混合物を、ＥｔＯＡｃで抽出し、合わせた有機層を、ブラインで洗浄し、そして、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を、減圧下で蒸発させ、そして、得られた残渣を、シリカゲル  フラッシュクロマトグラフィー（１００％ヘキサンから、ヘキサン／酢酸エチル８：２）で精製し、ｔｅｒｔ−ブチル  ［１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−イル］カルバメートを得た（７．１グラム、２０．６ミリモル、収率７５％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝３４６．２
【０２４３】
ステップ２
１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）−Ｎ−［（４−メトキシフェニル）メチル］ピペリジン−４−アミン塩酸塩の合成：
【化５２】
2017537938.tif 000060
ｔｅｒｔ−ブチル  ［１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−イル］カルバメート（５．５グラム、１５．９ミリモル）の乾燥ＤＭＦ（５０ミリリットル）溶液に、ＮａＨ（鉱油中６０％、１．５グラム、３１．８ミリモル）を添加した。室温で、１時間、撹拌した後、ｐ−メトキシベンジルクロリド（５ミリリットル、３１．８ミリモル）を添加した。反応混合物を、一晩、室温で撹拌し、次いで、冷水（３００ミリリットル）中に注いだ。溶液を、ＥｔＯＡｃで抽出し、合わせた有機層を、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして、濃縮乾固した。乾燥した残渣を、ＭｅＯＨ中のＨＣｌ溶液（１．２５Ｍ、２００ミリリットル）に溶解し、そして、混合物を、２時間、還流した。溶媒を、真空下で除去し、そして、得られた残留物を、イソプロパノールで処理し、そして、乾燥して、１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）−Ｎ−［（４−メトキシフェニル）メチル］ピペリジン−４−アミン塩酸塩を得た（５．６グラム、１５．３ミリモル、収率９６％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝３６６．２
【０２４４】
ステップ３
Ｎ−（２−クロロエチル）−１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）−Ｎ−［（４−メトキシフェニル）メチル］ピペリジン−４−アミンの合成：
【化５３】
2017537938.tif 000061
１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）−Ｎ−［（４−メトキシフェニル）メチル］ピペリジン−４−アミン塩酸塩（２グラム、５ミリモル）およびＤＩＰＥＡ（０．９ミリリットル、５ミリモル）のアセトニトリル（１０ミリリットル）溶液に、クロロアセトアルデヒド（５０重量％水溶液、２．５ミリリットル、１９．９ミリモル）を加えた。室温で、１５分間、撹拌した後、酢酸（０．５７ミリリットル）およびＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（２．１グラム、１０ミリモル）を添加した。混合物を、室温で、３時間、撹拌し、０．１Ｍ  ＨＣｌの添加により、ｐＨを５〜６に調整した。炭酸水素ナトリウムの添加後、溶液を、ＤＣＭで抽出し、有機層を、水で洗浄し、硫酸ナトリウムで処理し、真空下で濃縮した。ＥｔＯＡｃを、残渣に加え、得られた固体を濾去し、そして、溶媒を、減圧下で蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィーによる精製（シリカゲル、クロロホルム／メタノール９：１）して、Ｎ−（２−クロロエチル）−１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）−Ｎ−［（４−メトキシフェニル）メチル］ピペリジン−４−アミンを得た（６５０ミリグラム、１．５ミリモル、３０％収率）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４２８．１
【０２４５】
ステップ４
メチル  ３−シクロヘキシル−３−［（２−｛［１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−イル］［（４−メトキシフェニル）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］プロパノエートの合成：
【化５４】
2017537938.tif 000062
ヨウ化ナトリウム（３９ミリグラム、０．２６ミリモル）およびＮ−（２−クロロエチル）−１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）−Ｎ−［（４−メトキシフェニル）メチル］ピペリジン−４−アミン（１１０ミリグラム、０．２６ミリモル）のＤＭＦ（５ミリリットル）溶液を、１５分間、撹拌し、次いで、０℃に冷却した。炭酸カリウム（１０７ミリグラム、０．７７ミリモル）を加え、次いで、メチル  ３−アミノ−３−シクロヘキシルプロパノエート塩酸塩（１１４ミリグラム、０．５１ミリモル）のＤＭＦ（５ミリリットル）溶液を、ワンポットで加えた。混合物を、一晩、９０℃で撹拌し、次いで、冷却し、そして、冷水に注いだ。溶液を、ＤＣＭで抽出し、有機層を、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、そして、真空下で濃縮して、メチル  ３−シクロヘキシル−３−［（２−｛［１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−イル］［（４−メトキシフェニル）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］プロパノエート（１１０ミリグラム、０．２０ミリモル、収率７７％）を得、これをさらに精製することなく進行した。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝５７７．３
【０２４６】
ステップ５
メチル  ３−シクロヘキシル−３−［（２−｛［１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−イル］アミノ｝エチル）アミノ］プロパノエート（化合物１８９）の合成：
【化５５】
2017537938.tif 000063
メチル  ３−シクロヘキシル−３−［（２−｛［１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−イル］［（４−メトキシフェニル）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］プロパノエート（１１０ミリグラム、０．２０ミリモル）およびＴＦＡ（１ミリリットル）のＤＣＭ（１０ミリリットル）混合物を、一晩、還流した。室温まで冷却した後、飽和ＮａＨＣＯ３を加え、得られた溶液を、ＥｔＯＡｃで抽出し、有機層を、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、そして、真空下で濃縮した。分取ＨＰＬＣ（Ｃ−１８、水中、１０％から４５％ＣＨ３ＣＮ）による精製により、５８ミリグラム（０．１３ミリモル、収率６５％）の、メチル  ３−シクロヘキシル−３−［（２−｛［１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−イル］アミノ｝エチル）アミノ］プロパノエートを得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４５７．３
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６／Ｄ２Ｏ）  δ  ｐｐｍ  ０．９４−１．３３（ｍ，５Ｈ），１．５３−２．０３（ｍ，８Ｈ），２．２２（ｄ，Ｊ＝１１．１１Ｈｚ，２Ｈ），２．７７−２．９０（ｍ，２Ｈ），３．０４−３．１８（ｍ，２Ｈ），３．３２−３．５２（ｍ，６Ｈ），３．６４−３．７１（ｍ，３Ｈ），３．７２−４．２２（ｍ，２Ｈ），７．５３（ｄ，Ｊ＝５．９０Ｈｚ，１Ｈ），７．６６−７．８０（ｍ，２Ｈ），７．９８−８．１２（ｍ，２Ｈ）
【０２４７】
化合物１９０の調製
本明細書で以下に記載されるように、化合物１９０を調製した。
【０２４８】
ステップ１
リチウム  ３−シクロヘキシル−３−［（２−｛［１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−イル］アミノ｝エチル）アミノ］プロパノエート（化合物１９０）の合成：
【化５６】
2017537938.tif 000064
メチル  ３−シクロヘキシル−３−［（２−｛［１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−イル］アミノ｝エチル）アミノ］プロパノエート（化合物１８９、６０ミリグラム、０．１３ミリモル）の、ＴＨＦ（０．４ミリリットル）、メタノール（０．２ミリリットル）および水（０．２ミリリットル）の混合物の溶液に、ＬｉＯＨｘ水（１１ミリグラム、０．２６ミリモル）を加えた。反応混合物を、２０分間、５５℃で、攪拌し、次いで、溶媒を、蒸発させ、そして、粗生成物を、逆相クロマトグラフィー（Ｃ−１８、１００％水から、７／３＝水／アセトニトリル）により精製し、リチウム  ３−シクロヘキシル−３−［（２−｛［１−（７−フルオロイソキノロン−１−イル）ピペリジン−４−イル］アミノ｝エチル）アミノ］プロパノエート（３２ミリグラム、０．０７ミリモル、収率５６％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４４３．３
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．８２−１．２９（ｍ，５Ｈ），１．４１−１．８０（ｍ，８Ｈ），１．８６−２．０４（ｍ，３Ｈ），２．０９（ｄｄ，Ｊ＝１５．３０，３．９１Ｈｚ，１Ｈ），２．５８−２．７９（ｍ，６Ｈ），２．９３（ｔ，Ｊ＝１２．５０Ｈｚ，２Ｈ），３．６４（ｄ，Ｊ＝１２．４９Ｈｚ，２Ｈ），７．４１（ｄ，Ｊ＝５．７６Ｈｚ，１Ｈ），７．５９−７．６９（ｍ，２Ｈ），７．９９（ｄｄ，Ｊ＝８．７１，５．６９Ｈｚ，１Ｈ），８．０９（ｄ，Ｊ＝５．８０Ｈｚ，１Ｈ）
【０２４９】
化合物１９１の調製
本明細書で以下に記載されるように、化合物１９１を調製した。
【０２５０】
ステップ１
３−シクロヘキシル−３−［（２−｛［１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−イル］アミノ｝エチル）アミノ］−Ｎ−ヒドロキシプロパンアミド（化合物１９１）の合成：
【化５７】
2017537938.tif 000065
ヒドロキシルアミン塩酸塩（２．６グラム、４０ミリモル）のＭｅＯＨ（１２ミリリットル）の撹拌溶液に、水酸化カリウム（３．３グラム、５９ミリモル）のＭｅＯＨ（７ミリリットル）の溶液を、０℃で、ゆっくりと加えた。添加後、混合物を、０℃で、３０分間、撹拌し、次いで、室温に到達させた。得られた沈殿物を、濾過し、そして、遊離ヒドロキシルアミンの溶液を、１００ミリリットルのフラスコに入れました。メチル  ３−シクロヘキシル−３−［（２−｛［１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−イル］アミノ｝エチル）アミノ］プロパノエート（化合物１８９、８７ミリグラム、０．１９ミリモル）のＭｅＯＨ（５ミリリットル）を、この溶液に添加した。得られた溶液を、０℃で、３０分間、脱気し、次いで、濃縮乾固した。残渣を、水に、溶解させ、水層を、１ＭのＨＣｌを添加することによりｐＨ５に酸性化し、そして、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして、濃縮した。残渣を、逆相クロマトグラフィー（Ｃ−１８、１００％水から、８：２＝水／アセトニトリル）で精製し、３−シクロヘキシル−３−［（２−｛［１−（７−フルオロイソキノリン−１−イル）ピペリジン−４−イル］アミノ｝エチル）アミノ］−Ｎ−ヒドロキシプロパンアミドを得た（１３ミリグラム、０．０２８ミリモル、収率１５％）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）＝４５８．３
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．９２−１．８１（ｍ，１２Ｈ），１．３１−１．４７（ｍ，１Ｈ），１．９０−２．１６（ｍ，４Ｈ），２．６５−２．７２（ｍ，３Ｈ），２．７４−２．８１（ｍ，２Ｈ），２．８１−２．８９（ｍ，１Ｈ），２．８８−２．９９（ｍ，２Ｈ），３．６９（ｄ，Ｊ＝１２．７２Ｈｚ，２Ｈ），７．４３（ｄ，Ｊ＝５．２６Ｈｚ，１Ｈ），７．６０−７．７０（ｍ，２Ｈ），８．００（ｄｄ，Ｊ＝９．８７，５．９２Ｈｚ，１Ｈ），８．０７−８．１２（ｍ，１Ｈ）
【０２５１】
実施例
実施例１
大腸菌や黄色ブドウ球菌における、ＤＮＡジャイレース及びトポＩＶの阻害
上記化合物は、以下の方法に従って、グラム陽性およびグラム陰性細菌の両方において、ジャイレースの超らせんアッセイ（ｇｙｒａｓｅ  ｓｕｐｅｒｃｏｉｌｉｎｇ  ａｓｓａｙ）における酵素ＤＮＡジャイレースの阻害、および脱連関アッセイ（ｄｅｃａｔｅｎａｔｉｏｎ  ａｓｓａｙ）における酵素トポイソメラーゼＩＶの阻害について試験を行った。
両方のアッセイはブランシュ  Ｆ、ら（Ｂｌａｎｃｈｅ  Ｆ，ｅｔ  ａｌ）の論文から変更したセットアップ法（ｓｅｔ−ｕｐ  ｍｅｔｈｏｄ）に従って行った。「黄色ブドウ球菌及び大腸菌の、ＩＩ型のＤＮＡトポイソメラーゼの行動の相違（Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ  Ｂｅｈａｖｉｏｒｓ）」、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．，１９９６年、４０巻、１２号、２７１４-２７２０頁
化合物を、１つの濃度（２００、１００または５０μＭ）で、二回ずつ、スクリーニングした。シプロフロキサシンおよびノボビオシンは、それぞれ、２００および５０μＭの単一濃度で、参照化合物として使用した。
【０２５２】
ＤＮＡジャイレースの超らせんアッセイ（ＤＮＡ  ｇｙｒａｓｅ  ｓｕｐｅｒｃｏｉｌｉｎｇ  ａｓｓａｙ）
黄色ブドウ球菌および大腸菌のジャイレース  スーパーコイル・アッセイ・キット（Ｉｎｓｐｉｒａｌｉｓ、英国）の試薬を使用した。実行するための反応の数に十分な総容積を有するマスターミックスを、以下の試薬を使用して調製した：
５×アッセイ緩衝液、リラックス（ｒｅｌａｘｅｄ）ｐＢＲ３２２基質（０．５μｇ／反応）、ＲＮａｓｅ−ＤＮａｓｅフリー水（ＲＮａｓｅ−ＤＮａｓｅ  ｆｒｅｅ  ｗａｔｅｒ）。
この混合物のアリコートを、各チューブに分注し、そして、１０×化合物のストック溶液またはビヒクル対照（ＤＭＳＯ）を、各反応管に添加した。
反応は、大腸菌（２Ｕ／反応）または黄色ブドウ球菌（１Ｕ／反応）のジャイレース酵素の添加により開始された。
希釈緩衝液の等量を添加した試料を、陰性対照として使用した（酵素なし）。
反応管を穏やかにボルテックスし（ｇｅｎｔｌｅ  ｖｏｒｔｅｘｅｄ）、そして、３７℃で、３０分間、インキュベートした。各反応を、停止緩衝液３０μｌと３０μｌのクロロホルム／イソアミルアルコール（２４／１）を添加することにより停止させ、５〜１０秒間、簡単にボルテックスし（ｂｒｉｅｆｌｙ  ｖｏｒｔｅｘｅｄ）、そして、２分間、２００００ｘｇで遠心分離した。サンプルを、１％アガロースゲルの上にロードし、そして、ＴＡＥ（４０ｍＭのトリス−酢酸、２ｍＭのＥＤＴＡ）で、８０Ｖの定電圧で、１時間、電気泳動に付した。
【０２５３】
データ収集と分析
リラックスｐＢＲ３２２（ｒｅｌａｘｅｄ  ｐＢＲ３２２）を、ＤＮＡジャイレースで処理すると、リラックス・トポアイソマー（ｒｅｌａｘｅｄ  ｔｏｐｏｉｓｏｍｅｒｓ）（異なるリンク数のＤＮＡ）を、アガロースゲル上で、より速く移動する、プラスミドのスーパーコイル形態に変換した。
リラックスされた基質に存在するが、リラックスされたトポアイソマーの一部と共移動する、オープン円形（ニック（ｎｉｃｋｅｄ））ＤＮＡで構成される、上方のバンドはまた、目に見えるかもしれない。
バンドは、３０分間、臭化エチジウム染色（１：２００００希釈）、続いて、１０分間、蒸留水で脱染色（ｄｅｓｔａｉｎｉｎｇ）することによって、可視化された。
酵素に対する化合物の活性を評価するために、ゲル中のスーパーコイル化したＤＮＡのバンドは、製造者の指示に従って、デジタル  イメージングシステムである、ＩｍａｇｅＱｕａｎｔ  ＬＡＳ  ４０００（ＧＥヘルスケア）で、撮影された。
各バンドの蛍光強度を、ＩｍａｇｅＱｕａｎｔ  ＴＬ  ソフトウェアによって分析し、そして、体積（ローリングボール法（ｒｏｌｌｉｎｇ  ｂａｌｌ  ｍｅｔｈｏｄ）を用いて、バックグラウンド強度を差し引いた後の画像特徴における材料の未校正量の体積）（（ｖｏｌｕｍｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｕｎｃａｌｉｂｒａｔｅｄ  ｑｕａｎｔｉｔｙ  ｏｆ  ｍａｔｅｒｉａｌ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｉｍａｇｅ  ｆｅａｔｕｒｅ  ａｆｔｅｒ  ｓｕｂｔｒａｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｂａｃｋｇｒｏｕｎｄ  ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ  ｂｙ  ｕｓｉｎｇ  ｒｏｌｌｉｎｇ  ｂａｌｌ  ｍｅｔｈｏｄ））として表した。
各バンドの強度を、パーセンテージとして、同じゲル上で、陽性対照として提供されたビヒクル  サンプルのバンド強度と比較した。
阻害活性は、陽性対照に対する阻害パーセントとして表した。
結果は以下の表２に纏めた。
【０２５４】
トポイソメラーゼＩＶの脱連関アッセイ（ｄｅｃａｔｅｎａｔｉｏｎ  ａｓｓａｙ）
黄色ブドウ球菌および大腸菌のトポイソメラーゼ  ＩＶの脱連関キット（ｄｅｃａｔｅｎａｔｉｏｎ  ｋｉｔｓ）（Ｉｎｓｐｉｒａｌｉｓ、英国）を用いた。
実施する反応の数に十分な総容量を有するマスターミックスは、以下の試薬を用いて調製された：５×アッセイ緩衝液（５０ｍＭのＨＥＰＥＳ−ＫＯＨ（ｐＨ７．６）、１００ｍＭのグルタミン酸カリウム、１０ｍＭの酢酸マグネシウム、１０ｍＭのＤＴＴ、１ｍＭのＡＴＰ、５０μｇ／ミリリットルのアルブミン）、ｋＤＮＡ基質（２００ｎｇ／反応）、ＲＮａｓｅ−ＤＮａｓｅフリー水（ＲＮａｓｅ−ＤＮａｓｅ  ｆｒｅｅ  ｗａｔｅｒ）。
この混合物のアリコートを各チューブに分注し、次いで、１０×化合物ストック溶液またはビヒクル対照（ＤＭＳＯ）を、各反応チューブに添加した。
反応は、トポイソメラーゼ  ＩＶ酵素（０．５Ｕ／反応）を添加して開始した。
希釈緩衝液の等量を添加した試料（酵素なし）は、陰性対照として使用した。
反応管を、穏やかにボルテックスし（ｇｅｎｔｌｅ  ｖｏｒｔｅｘｅｄ）、そして、３７℃で、３０分間、インキュベートした。各反応を、停止緩衝液３０μｌおよびクロロホルム／イソアミルアルコール（２４／１）の３０μｌの添加により停止し、５〜１０秒間，簡単にボルテックスし、そして、２分間、２００００ｘｇで遠心分離した。上層から採取したサンプルを、１％アガロースゲルにロードし、そして、ＴＡＥ（４０ｍＭのトリス−酢酸、２ｍＭのＥＤＴＡ）中で、８０Ｖの定電圧で、１時間、電気泳動に付した。
【０２５５】
データ収集と分析
高い分子量のせいで、ｋＤＮＡは、通常の電気泳動条件下で、アガロースゲルに入ることができなかったが、ウェルに残った。トポ  ＩＶ  トポイソメラーゼの存在下で、ミニサークル（ｍｉｎｉ−ｃｉｒｃｌｅｓ）（２．５ＫＢ）は、脱連関によって（ｂｙ  ｄｅｃａｔｅｎａｔｉｏｎ）、ｋＤＮＡから遊離し、そして、比較的高い電圧で、迅速かつ容易に、ゲル上で遊離した。
バンドは、３０分間、臭化エチジウム染色（希釈１：２００００）、続いて、１０分間、蒸留水で、脱染色によって可視化した。
単一濃度スクリーニングアッセイにおいて、酵素に対する化合物の活性を評価するために、ゲル中の脱連関された（ｄｅｃａｔｅｎａｔｅｄ）ＤＮＡのバンドは、製造者の指示に従って、デジタル・イメージング・システムである、ＩｍａｇｅＱｕａｎｔ  ＬＡＳ  ４０００（ＧＥヘルスケア）で撮影した。
各バンドの蛍光強度を、ＩｍａｇｅＱｕａｎｔ  ＴＬ  ソフトウェアによって分析し、そして、体積（ローリングボール法（ｒｏｌｌｉｎｇ  ｂａｌｌ  ｍｅｔｈｏｄ）を用いて、バックグラウンド強度を差し引いた後の画像特徴における材料の未校正量の体積）（（ｖｏｌｕｍｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｕｎｃａｌｉｂｒａｔｅｄ  ｑｕａｎｔｉｔｙ  ｏｆ  ｍａｔｅｒｉａｌ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｉｍａｇｅ  ｆｅａｔｕｒｅ  ａｆｔｅｒ  ｓｕｂｔｒａｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｂａｃｋｇｒｏｕｎｄ  ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ  ｂｙ  ｕｓｉｎｇ  ｒｏｌｌｉｎｇ  ｂａｌｌ  ｍｅｔｈｏｄ））として表した。
各バンドの強度を、パーセンテージとして、同じゲル上で、陽性対照として提供されたビヒクルサンプルのバンド強度と比較した。
阻害活性は、陽性対照に対する阻害パーセントとして表した。
結果を、以下の表２に纏める。
【０２５６】
【表８】
2017537938.tif 000066
【０２５７】
【表９】
2017537938.tif 000067
【０２５８】
上記の結果は、実施化合物は、効果的に、グラム陽性細菌である大腸菌および／またはグラム陰性細菌である黄色ブドウ球菌の、ＤＮＡジャイレースおよびトポＩＶの両方を阻害することを示した。
【国際調査報告】
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