(57)【要約】  式(I)の化合物及び当該化合物を含む組成物を用いてウイルス感染症を治療する方法を開示する。【化１】2017521458.tif 000033【選択図】なし
2017521458.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Iの化合物
【化１】
2017521458.tif 000031
［式中、
R1は、C1-6アルキルであり、
R2は、C5-14アリール、C3-7シクロアルキル、(C3-7)シクロアルケニル、(C2-9)ヘテロ環、及び(C2-9)ヘテロアリールであり、それぞれが、ハロゲン、C1-6アルキル、C1-6ヘテロアルキル、又はC1-6アルキレン若しくはC1-6ヘテロアルキレンから選択される1〜4個の置換基によって置換されてもよく、前記C1-6アルキレン又はC1-6ヘテロアルキレンは、前記C5-14アリール、C3-7シクロアルキル、(C3-C7)シクロアルケニル、(C2-C9)ヘテロ環、又は(C2-C9)ヘテロアリール上の隣接する炭素原子と結合して環を形成し、また、ヘテロ環、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、及びヘテロアルキレンは、それぞれ、S、N、又はOから選択される1〜3個のヘテロ原子を含み、
Lは、結合又はC1-3アルキレンであり、
R3は、H、C1-6アルキル、C5-14アリール、C3-7シクロアルキル、(C3-7)シクロアルケニル、(C2-9)ヘテロ環、及び(C2-9)ヘテロアリールであり、それぞれが、ハロゲン、C1-6アルキルから選択される1〜4個の置換基によって置換されてもよく、ヘテロ環及びヘテロアリールは、それぞれ、S、N、又はOから選択される1〜3個のヘテロ原子を含む］。
【請求項２】
R1がt-ブチルである、請求項1に記載の化合物又は塩。
【請求項３】
R2が置換されてもよいフェニル又はシクロヘキセニルである、請求項1又は請求項2の化合物。
【請求項４】
R2がフッ素、メチル、又は-CH2CH2CH2O-若しくは-NHCH2CH2O-から選択される1〜4個の置換基で置換されてもよいフェニルであり、前記-CH2CH2CH2O-又は-NHCH2CH2O-は、前記フェニル上の隣接する炭素原子と結合して二環式の環を形成する、請求項3に記載の化合物。
【請求項５】
R3がフェニルである、請求項1〜4のいずれかに記載の化合物。
【請求項６】
OR1が結合する炭素の立体化学が以下に描く通りである、
【化２】
2017521458.tif 000032
請求項1〜5のいずれかに記載の化合物。
【請求項７】
請求項1〜6のいずれかに記載の化合物の薬学的に許容される塩。
【請求項８】
請求項1〜7のいずれかに記載の化合物又は塩を含む医薬組成物。
【請求項９】
ウイルスのレトロウイルス科に属するウイルスによって少なくとも部分的に媒介された患者のウイルス感染症を治療する方法であって、前記患者に請求項8に記載の組成物を投与することを含む、方法。
【請求項１０】
前記ウイルス感染症がHIVウイルスによって媒介される、請求項9に記載の方法。
【請求項１１】
薬物療法に使用するための、請求項1〜7のいずれかに記載の化合物又は塩。
【請求項１２】
ヒトにおけるウイルス感染症の治療に使用するための、請求項1〜7のいずれかに記載の化合物又は塩。
【請求項１３】
ヒトにおけるウイルス感染症の治療に使用するための医薬品の製造における、請求項1〜7のいずれかに記載の化合物又は塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、置換イソインドリノン化合物、その医薬品組成物、及びこのような化合物の投与によって、(i)HIVに感染している対象におけるHIV複製を阻害する、又は(ii)HIVに感染している対象を治療するための、その使用方法に関する。
【０００２】
本発明は、置換イソインドリン化合物、その医薬品組成物、及びこのような化合物の投与によって、(i)HIVに感染している対象におけるHIV複製を阻害する、又は(ii)HIVに感染している対象を治療するための、その使用方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
ヒト免疫不全ウイルス1型(HIV-1)は、後天性免疫不全疾患(AIDS)の罹患をもたらす。HIVの症例数は増加し続け、現在、世界で2500万人を超える人が、当該ウイルスに感染している。今日、抗レトロウイルス薬を用いてウイルス複製を長期間抑制することが、HIV-1感染を治療するための唯一の選択肢である。実際に、米国食品医薬品局によって、異なる6クラスの阻害剤にわたる25種類の薬剤が承認されており、これらは、患者の生存率及びQOLを大いに向上していることが示されている。しかし、望ましくない薬物間相互作用、薬物-食物相互作用、治療の不遵守、及び当該標的酵素の突然変異による薬剤耐性のため、依然として新たな治療法が必要とされている。
【０００４】
現在、ほとんど全てのHIV陽性患者は、高活性抗レトロウイルス剤療法(「HAART」)と呼ばれる抗レトロウイルス薬の組合せを用いた治療計画によって治療されている。しかし、薬剤耐性HIV-1変異体の急速な出現を防ぐため、様々な薬剤による組合せを、しばしば毎日患者に投与しなければならないため、HAART療法は複雑であることが多い。HAARTが患者生存率に良い影響をもたらすにもかかわらず、薬剤耐性は依然として起こる可能性がある。多剤耐性HIV-1分離株の出現は、深刻な臨床的帰結をもたらすものであり、サルベージ療法として知られている新規投与計画によって抑制しなければならない。
【０００５】
現行のガイドラインでは、サルベージ療法には、少なくとも2種、好ましくは3種の十分に活性のある薬剤を用いることを推奨している。通常、第一選択療法では、当該ウイルスの酵素である逆転写酵素及びプロテアーゼを標的とする3〜4種の薬剤を組み合わせる。サルベージ療法の1つの選択肢は、当該耐性分離株に対する活性を維持している、同じ機序的クラスの薬剤を異なる組合せで投与することである。しかし、耐性変異によって同じクラスの様々な薬剤に対する広範な交差耐性が付与されることが頻繁に生じるため、この手法の選択肢は限局的であることが多い。近年、融合、侵入、及びインテグラーゼ阻害剤の開発によって、代替の治療戦略の利用が可能となった。しかし、新規薬剤の3クラス全てに対する耐性が、研究室及び患者のいずれにおいても既に報告されている。このため、抗レトロウイルス薬を用いたHIV-1感染患者の治療が継続的に成功を収めるには、新規の標的及び作用機序を有する新規な改良された薬剤の開発を続ける必要があろう。
【０００６】
例えば、過去10年間にわたり、HIV阻害剤の標的は、HIV-1インテグラーゼと水晶体上皮由来増殖因子/p75(「LEDGF」)とのタンパク質間相互作用であることが報告されている。LEDGFは、HIV-1インテグラーゼの細胞由来転写共役因子であり、その組込み前複合体を宿主クロマチンに結合することで、宿主細胞のゲノムへの逆転写されたウイルスcDNAのウイルス組み込みを促進する。HIV複製の初期段階に重要な役割を持つため、LEDGFとインテグラーゼとの相互作用は、HIV薬剤療法の別の興味深い標的を示している。
【発明の概要】
【０００７】
端的には、1つの態様では、本発明は、式Iの化合物であって、
【０００８】
【化１】
2017521458.tif 000003
式中、
R1は、C1-6アルキルであり、
R2は、C5-14アリール、C3-7シクロアルキル、(C3-7)シクロアルケニル、(C2-9)ヘテロ環、及び(C2-9)ヘテロアリールであり、それぞれが、ハロゲン、C1-6アルキル、C1-6ヘテロアルキル、又はC1-6アルキレン若しくはC1-6ヘテロアルキレンから選択される1〜4個の置換基によって置換されてもよく、前記C1-6アルキレン又はC1-6ヘテロアルキレンは、前記C5-14アリール、C3-7シクロアルキル、(C3-C7)シクロアルケニル、(C2-C9)ヘテロ環、又は(C2-C9)ヘテロアリール上の隣接する炭素原子と結合して環を形成し、また、ヘテロ環、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、及びヘテロアルキレンは、それぞれ、S、N、又はOから選択される1〜3個のヘテロ原子を含み、
Lは、結合又はC1-3アルキレンであり、
R3は、H、C1-6アルキル、C5-14アリール、C3-7シクロアルキル、(C3-7)シクロアルケニル、(C2-9)ヘテロ環、及び(C2-9)ヘテロアリールであり、それぞれが、ハロゲン、C1-6アルキルから選択される1〜4個の置換基によって置換されてもよく、ヘテロ環及びヘテロアリールは、それぞれ、S、N、又はOから選択される1〜3個のヘテロ原子を含む、前記化合物を開示する。
【０００９】
別の態様では、本発明は、式Iの化合物の薬学的に許容される塩を開示する。
【００１０】
別の態様では、本発明は、式Iの化合物又は薬学的に許容されるその塩を含む医薬組成物を開示する。
【００１１】
別の態様では、本発明は、ウイルスのレトロウイルス科に属するウイルスによって少なくとも部分的に媒介された患者のウイルス感染症を治療する方法であって、前記患者に式Iの化合物又は薬学的に許容されるその塩を含む組成物を投与するステップを含む方法を開示する。いくつかの実施形態では、当該ウイルス感染症は、HIVウイルスによって媒介される。
【００１２】
別の態様では、本発明の特定の実施形態において、HIVに感染している対象を治療する方法であって、当該対象に治療有効量で式Iの化合物又は薬学的に許容されるその塩を投与するステップを含む方法が提供される。
【００１３】
さらに別の態様では、本発明の特定の実施形態において、HIV感染リスクのある対象におけるHIV感染の進行を阻害する方法であって、当該対象に治療有効量で式Iの化合物又は薬学的に許容されるその塩を投与するステップを含む方法が提供される。これらの及び他の実施形態は、以下の本文中にさらに記載されている。
【００１４】
本発明の別の実施形態によれば、ウイルスのレトロウイルス科に属するウイルスによって少なくとも部分的に媒介された、哺乳動物のウイルス感染症を予防又は治療する方法であって、前記方法は、前記ウイルス感染症と診断された又は前記ウイルス感染症の発症リスクのある哺乳動物に、式Iで定義される化合物を投与するステップを含み、前記ウイルスはHIVウイルスであり、さらにHIVウイルスに対して活性のある1種以上の薬剤を治療有効量で投与するステップを含み、HIVウイルスに対して活性のある前記薬剤は、ヌクレオチド逆転写酵素阻害剤、非ヌクレオチド逆転写酵素阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、侵入、結合、及び融合阻害剤、インテグラーゼ阻害剤、成熟阻害剤、CXCR4阻害剤、並びにCCR5阻害剤からなる群から選択される、方法が提供される。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
好ましくは、R1はt-ブチルである。
【００１６】
好ましくは、R2は置換されてもよいフェニル又はシクロヘキセニルである。最も好ましくは、R2は、フッ素、メチル、又は-CH2CH2CH2O-若しくは-NHCH2CH2O-から選択される1〜4個の置換基で置換されてもよいフェニルであり、前記-CH2CH2CH2O-又は-NHCH2CH2O-は、前記フェニル上の隣接する炭素原子と結合して二環式の環を形成する。
【００１７】
好ましくは、R3はフェニルである。
【００１８】
好ましくは、OR1が結合する炭素の立体化学は、以下に描く通りである。
【００１９】
【化２】
2017521458.tif 000004
【００２０】
「薬学的に許容される塩」には、例に過ぎないが、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウム、及びテトラアルキルアンモニウムなど、当該技術分野で周知の様々な有機及び無機の対イオン由来の薬学的に許容される塩、並びに当該分子に塩基性官能基が含まれる場合、塩酸、臭化水素酸、酒石酸、メシル酸、酢酸、マレイン酸、及びシュウ酸などの有機又は無機酸の塩が含まれる。適当な塩として、P. Heinrich Stahl、Camille G. Wermuth(編)、Handbook of Pharmaceutical Salts Properties, Selection, and Use; 2002に記載の塩が挙げられる。
【００２１】
代謝異常の治療又は予防の方法には、単剤療法として、本発明の化合物又は塩を単独で投与するステップが含まれてもよい。また、本発明の化合物及び塩は、他の治療薬と組み合わせて使用してもよい。本発明の化合物及び塩と組み合わせて使用するための適当な薬剤として、例えば、インスリン感受性増強剤、グルコース吸収阻害剤、ビグアナイド系、インスリン分泌促進剤、又はメトホルミンが挙げられる。
【００２２】
[実施例]
本発明の化合物は、周知の従来の合成方法を含む、様々な方法によって生成してもよい。例示的な一般的合成方法は、以下の通りであり、次いで本発明の特定の化合物は実施例において調製する。
【００２３】
【化３】
2017521458.tif 000005
【００２４】
[実施例1]2-(2-ベンジル-4,7-ジメチル-3-オキソ-6-(p-トリル)イソインドリン-5-イル)-2-(tert-ブトキシ)酢酸
【００２５】
【化４】
2017521458.tif 000006
【００２６】
ステップ1:2-ベンジル-5-(ベンジルジメチルシリル)-4,7-ジメチルイソインドリン-1-オン
【００２７】
【化５】
2017521458.tif 000007
【００２８】
N-ベンジル-N-(ブタ-2-イン-1-イル)ブタ-2-インアミドは、Org. Biomol. Chem、2004、2、1287〜1294に記載の周知の手順によって調製された。
【００２９】
ベンジル(エチニル)ジメチルシランは、J. Am. Chem. Soc.、2005、127、3666〜36667に記載の周知の手順によって調製された。
【００３０】
ベンジル(エチニル)ジメチルシラン(5.2g、29.8mmol)の1,2-DCE(15mL)溶液を、5分間N2で脱気し、Cp*ClRu(cod)(0.253g、0.666mmol)で処理した。これに、脱気したN-ベンジル-N-(ブタ-2-イン-1-イル)ブタ-2-インアミド(1.5g、6.66mmol)の1,2-DCE(15mL)溶液を、10分間にわたって滴下して加えた。1時間後、反応混合物を減圧下で濃縮し、その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(0〜30% EtOAc/ヘキサン)で精製し、黄色固体として表題化合物を得た(1.66g  収率62%、4:1位置異性体の混合物)。主異性体 - 1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ = 7.39 - 7.29 (m, 5H), 7.26 (s, 1H), 7.22 - 7.15 (m, 2H), 7.11 - 7.05 (m, 1H), 7.00 - 6.91 (m, 2H), 4.81 (s, 2H), 4.16 - 4.09 (m, 2H), 2.99 - 2.66 (m, 3H), 2.46 - 2.36 (m, 2H), 2.28 - 2.18 (m, 3H), 0.37 - 0.29 (m, 6H); LC/MS (m/z) ES+ = 400 (M+1)
【００３１】
ステップ2:2-ベンジル-5-ヒドロキシ-4,7-ジメチルイソインドリン-1-オン
【００３２】
【化６】
2017521458.tif 000008
【００３３】
2-ベンジル-5-(ベンジルジメチルシリル)-4,7-ジメチルイソインドリン-1-オン(1.66g、4.15mmol)の氷冷したテトラヒドロフラン(10mL)溶液に、TBAF(16.62mL、16.62mmol)を5分間にわたって滴下して処理した。さらに10分後、メタノール(30mL)、KHCO3(0.832g、8.31mmol)、及びH2O2(4.24mL、41.5mmol)を加え、この混合物を室温まで加温した。45分後、反応混合物を、Na2S2O3飽和水溶液(1mL)とEtOAc(3×10mL)とに分配した。有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ(MgSO4)、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー(0〜3%MeOH/DCM)で精製し、白色固体として表題化合物を得た(0.67g、60%)。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ = 7.37 - 7.28 (m, 6H), 6.67 (s, 1H), 5.82 (br. s., 1H), 4.77 (s, 2H), 4.10 (s, 2H), 2.66 (s, 3H), 2.08 (s, 3H); LC/MS (m/z) ES+ = 268 (M+1)
【００３４】
ステップ3:2-ベンジル-6-ブロモ-5-ヒドロキシ-4,7-ジメチルイソインドリン-1-オン
【００３５】
【化７】
2017521458.tif 000009
【００３６】
2-ベンジル-5-ヒドロキシ-4,7-ジメチルイソインドリン-1-オン(1.6g、6.0mmol)及びNaHCO3(1.5g、18.0mmol)のDCM(30mL)懸濁液を、NBS(1.6g、9.0mmol)で処理した。20分後、反応混合物をNa2S2O3飽和水溶液で処理し、分層した。有機層を水で洗浄し、乾燥させ(Na2SO4)、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー(0〜100% EtOAc-ヘキサン)で精製し、白色固体として表題化合物を得た(1.5g、収率70%)。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ = 7.29 (m, 5H), 6.01 (s, 1H), 4.75 (s, 2H), 4.05 (s, 2H), 2.81 (s, 3H), 2.15 (s, 3H); LC/MS (m/z) ES+ = 348 (M+2).
【００３７】
ステップ4:2-ベンジル-5-ヒドロキシ-4,7-ジメチル-6-ビニルイソインドリン-1-オン
【００３８】
【化８】
2017521458.tif 000010
【００３９】
2-ベンジル-6-ブロモ-5-ヒドロキシ-4,7-ジメチルイソインドリン-1-オン(300mg、0.867mmol)、カリウムビニルトリフルオロボレート(464mg、3.468mmol)、及びNa2CO3(8.67mL、4.335mmol、2M水溶液)の1,4-ジオキサン(12mL)の溶液を、5分間N2で脱気し、Pd(dppf)Cl2・DCM(142mg、0.1734mmol)で処理し、100℃に加熱した。3時間後、反応混合物を室温に冷却し、Celiteのパッドを通して濾過し、固体をEtOAcで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(0〜100% EtOAc-ヘキサン)で精製し、無色油状物として表題化合物を得た(150mg、収率60%)。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ = 7.31 (m, 5H), 6.74 (m, 1H), 6.02 (s, 1H), 5.81 (dd, 1H), 5.55 (dd, 1H), 4.77 (s, 2H), 4.09 (s, 2H),  2.67 (s, 3H), 2.11 (s, 3H); LC/MS (m/z) ES+ = 294 (M+H).
【００４０】
ステップ5:2-ベンジル-4,7-ジメチル-1-オキソ-6-ビニルイソインドリン-5-イルトリフルオロメタンスルホネート
【００４１】
【化９】
2017521458.tif 000011
【００４２】
2-ベンジル-5-ヒドロキシ-4,7-ジメチル-6-ビニルイソインドリン-1-オン(150mg、0.614mmol)及びK2CO3(85mg、0.614mmol)のDMF(4mL)懸濁液を、1,1,1-トリフルオロ-N-フェニル-N-((トリフルオロメチル)スルホニル)メタンスルホンアミド(219mg、0.614mmol)で処理した。1時間後、反応混合物をEtOAcで希釈し、水に注ぎ込んだ。分層し、有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ(MgSO4)、減圧下で濃縮した。残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー(0〜100% EtOAc-ヘキサン)で精製し、無色油状物として表題化合物を得た(191mg、収率88%)。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ 7.32 (m, 5H), 6.66 (m, 1H), 5.73 (dd, 1H), 5.45 (d, 1H), 4.78 (s, 2H), 4.13 (s, 2H), 2.74 (s, 3H), 2.25 (s, 3H); LC/MS (m/z) ES+ = 426 (M+H).
【００４３】
ステップ6:2-ベンジル-4,7-ジメチル-5-(p-トリル)-6-ビニルイソインドリン-1-オン
【００４４】
【化１０】
2017521458.tif 000012
【００４５】
2-ベンジル-4,7-ジメチル-1-オキソ-6-ビニルイソインドリン-5-イルトリフルオロメタンスルホネート(175mg、0.412mmol)、p-トリルボロン酸(224mg、1.648mmol)、及びNa2CO3(4mL、2.06mmol、2.0M水溶液)のDMF(5mL)溶液を、5分間N2で脱気し、テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)(95mg、0.0824mmol)で処理し、80℃まで加熱した。30分後、反応混合物を室温に冷却し、EtOAcで希釈し、Celiteのパッドを通して濾過した。固体をEtOAcで洗浄し、濾液を水、ブラインで洗浄し、乾燥させ(MgSO4)、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー(0〜100% EtOAc-ヘキサン)で精製し、無色油状物として表題化合物を得た(114mg、収率75%)。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ 7.31 (m, 5H), 7.18 (d, 2H), 6.94 (d, 2H), 6.32 (m, 1H), 5.30 (m, 1H), 5.04 (m, 1H), 4.81 (s, 2H), 4.12 (s, 2H), 2.80 (s, 3H), 2.38 (s, 3H), 1.88 (s, 3H); LC/MS (m/z) ES+ = 368 (M+H).
【００４６】
ステップ7:2-ベンジル-4,7-ジメチル-3-オキソ-6-(p-トリル)イソインドリン-5-カルバルデヒド
【００４７】
【化１１】
2017521458.tif 000013
【００４８】
2-ベンジル-4,7-ジメチル-5-(p-トリル)-6-ビニルイソインドリン-1-オン(110mg、0.299mmol)のTHF/H2O(3:1溶液を6mL)溶液を、オスミウム酸カリウム二水和物(44.1mg、0.120mmol)及び過ヨウ素酸ナトリウム(384mg、1.796mmol)で処理した。30分後、反応混合物を、Na2S2O3(6mL、10%水溶液)で処理し、EtOAcで抽出した。有機層を水、ブラインで洗浄し、乾燥させ(MgSO4)、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(0〜100% EtOAc-ヘキサン)で精製し、白色固体として表題化合物を得た(42mg、38%)。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ 9.79 (s, 1H), 7.33 (m, 5H), 7.26 (d, 2H), 7.05 (d, 2H), 4.82 (s, 2H), 4.18 (s, 2H), 3.06 (s, 3H), 2.42 (s, 3H), 1.96 (s, 3H); LC/MS (m/z) ES+ = 370 (M+H).
【００４９】
ステップ8、9、10:メチル2-(2-ベンジル-4,7-ジメチル-3-オキソ-6-(p-トリル)イソインドリン-5-イル)-2-(tert-ブトキシ)アセテート
【００５０】
【化１２】
2017521458.tif 000014
【００５１】
2-ベンジル-4,7-ジメチル-3-オキソ-6-(p-トリル)イソインドリン-5-カルバルデヒド(42mg、0.114mmol)の氷冷したDCM(3mL)溶液を、ヨウ化亜鉛(II)(18mg、0.057mmol、0.5当量)及びトリメチルシランカルボニトリル(0.153mL、1.14mmol、10当量)で処理した。10分後、反応混合物を、水で処理し、分層した。有機層を、ブラインで洗浄し、乾燥させ(Na2SO4)、濾過し、減圧下で濃縮して2-(2-ベンジル-4,7-ジメチル-3-オキソ-6-(p-トリル)イソインドリン-5-イル-2-((トリメチルシリル)オキシ)アセトニトリル(60mg粗製物)を得て、これをさらに精製することなく直ちに用いた。LC/MS(m/z)ES+=469(M+H)。
【００５２】
2-(2-ベンジル-4,7-ジメチル-3-オキソ-6-(p-トリル)イソインドリン-5-イル)-2-((トリメチルシリル)オキシ)アセトニトリル(60mg、0.129mmol)の氷冷したMeOH(40mL)溶液を、HCl(g)でバブリングした。30分後、反応混合物を、減圧下で濃縮し、HCl(水溶液)(100mL、1.0N)で処理し、90℃に加熱した。1時間後、反応混合物を室温に冷却し、EtOAcで抽出した。次に、有機層を、ブラインで洗浄し、乾燥させ(MgSO4)、濾過し、減圧下で濃縮し、メチル2-(2-ベンジル-4,7-ジメチル-3-オキソ-6-(p-トリル)イソインドリン-5-イル)-2-ヒドロキシアセテート(70mg粗製物)を得て、これをさらに精製することなく直ちに用いた。LC/MS(m/z)ES+=430(M+H)。
【００５３】
2-(2-ベンジル-4,7-ジメチル-3-オキソ-6-(p-トリル)イソインドリン-5-イル)-2-ヒドロキシアセテート(70mg、0.163mmol)の酢酸tert-ブチル(15mL)溶液を、HClO4(0.49mL、70%)で処理した。15分後、反応混合物を0℃に冷却し、50% NaOH水溶液を用いてpHを8に調整した。水層を、EtOAcで抽出し、有機層を乾燥させ(MgSO4)、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー(0〜100% EtOAc-ヘキサン)で精製し、無色油状物として表題化合物を得た(24mg、3ステップにわたって43%)。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ 7.32 (m, 5H), 7.23 (m, 3H), 7.04 (d, 1H), 5.07 (s, 1H), 4.78 (s, 2H), 4.09 (s, 2H), 3.67 (s, 3H), 2.85 (s, 3H), 2.40 (s, 3H), 1.83 (s, 3H), 0.94 (s, 9H); LC/MS (m/z) ES+ = 486 (M+H).
【００５４】
ステップ11:(2-(2-ベンジル-4,7-ジメチル-3-オキソ-6-(p-トリル)イソインドリン-5-イル)-2-(tert-ブトキシ)酢酸
【００５５】
【化１３】
2017521458.tif 000015
【００５６】
メチル2-(2-ベンジル-4,7-ジメチル-3-オキソ-6-(p-トリル)イソインドリン-5-イル)-2-(tert-ブトキシ)アセテート(10mg、0.021mmol)の1,4-ジオキサン(2mL)溶液を、LiOH(0.52mL、0.52mmol、1.0M水溶液)で処理し、80℃に加熱した。6時間後、反応混合物を、減圧下で濃縮し、EtOAcと1M HClとに分配した。有機層を、ブラインで洗浄し、乾燥させ(MgSO4)、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、逆相HPLCによって精製し、白色固体として表題化合物を得た(6mg、62%)。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ 7.30 (m, 8H), 7.05 (d, 1H), 5.20 (s, 1H), 4.79 (d, 2H), 4.10 (d, 2H), 2.84 (s, 3H), 2.40 (s, 3H), 1.85 (s, 3H), 0.97 (s, 9H); LC/MS (m/z) ES+ = 472 (M+H).
【００５７】
[実施例2](S)-(2-(2-ベンジル-4,7-ジメチル-3-オキソ-6-(p-トリル)イソインドリン-5-イル)-2-(tert-ブトキシ)酢酸
【００５８】
【化１４】
2017521458.tif 000016
【００５９】
2-(2-ベンジル-4,7-ジメチル-3-オキソ-6-(p-トリル)イソインドリン-5-イル)-2-(tert-ブトキシ)酢酸の試料を、S,S Whelk-Oカラム(250x30mm内径、5μm、Regis Technologies、Morton Grove、Illinois)を用いて、40℃、140バールを維持した超臨界条件下で、PIC prep SFCシステム(PIC Solution、Avignon、France)上でメタノール改質CO2(30%MeOH、70%CO2)を合計流速90mL/分で送液して、精製した。トリガー式採取を、Knauerの波長選択可能なUV-Vis検出装置を用いて、220nmで行った。
【００６０】
キラル純度は、S,S Whelk-Oカラム(250x4.6mm内径、5μm; Regis Technologies、Morton Grove、IL)を用いて、40℃、140バールを維持した超臨界条件下で、DAD検出器が装備されており、220nmでモニタリングするAurora Fusion A5 Evolution SFCシステム(Agilent Technologies、Santa Clara、CA)上でメタノール改質CO2(40%MeOH、60%CO2)を合計流速2mL/分で送液する、キラル分析用HPLCによって判定された。これらの条件下における表題化合物の保持時間は、5.67分であった。
【００６１】
[実施例3]2-(2-ベンジル-6-(4-クロロフェニル)-4,7-ジメチル-3-オキソイソインドリン-5-イル)-2-(tert-ブトキシ)酢酸
【００６２】
【化１５】
2017521458.tif 000017
【００６３】
表題化合物は、ステップ5で4-クロロフェニルボロン酸を用いること以外、実施例1と同様にして生成された。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ = 7.54 - 7.30 (m, 8H), 7.12 (br. s., 1H), 5.21 - 5.06 (m, 1H), 4.81 (s, 2H), 4.13 (d, J=2.0 Hz, 2H), 2.87 (br. s., 3H), 1.86 (s, 3H), 1.11 - 0.98 (m, 9H);  LC/MS (m/z) ES+= 492 (M+1).
【００６４】
[実施例4]2-(2-ベンジル-6-(クロマン-6-イル)-4,7-ジメチル-3-オキソイソインドリン-5-イル)-2-(tert-ブトキシ)酢酸
【００６５】
【化１６】
2017521458.tif 000018
【００６６】
表題化合物は、ステップ5で2-(クロマン-6-イル)-4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロランを用いること以外、実施例1と同様にして生成された。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ = 7.39 - 7.29 (m, 5H), 7.17 (br. s., 1H), 6.92 - 6.77 (m, 2H), 5.27 (br. s., 1H), 4.89 - 4.75 (m, 2H), 4.24 (t, J=5.1 Hz, 2H), 4.12 (br. s., 2H), 2.91 - 2.75 (m, 5H), 2.11 - 2.00 (m, 2H), 1.90 (d, J=4.5 Hz, 3H), 1.01 (br. s., 9H); LC/MS (m/z) ES+ = 514 (M+1).
【００６７】
【化１７】
2017521458.tif 000019
【００６８】
[実施例5](S)-2-((M)-2-ベンジル-6-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-4,7-ジメチル-3-オキソイソインドリン-5-イル)-2-(tert-ブトキシ)酢酸
【００６９】
【化１８】
2017521458.tif 000020
【００７０】
ステップ1:エチル2-(2-ベンジル-6-ヒドロキシ-4,7-ジメチル-3-オキソイソインドリン-5-イル)-2-ヒドロキシアセテート
【００７１】
【化１９】
2017521458.tif 000021
【００７２】
2-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロランは、WO2009/062285に記載の周知の手順によって調製された。
【００７３】
2-ベンジル-5-ヒドロキシ-4,7-ジメチルイソインドリン-1-オン(1g、3.74mmol)の氷冷したDCM(30mL)溶液を、TiCl4(0.413mL、3.74mmol)で処理した。5分後、2-オキソ酢酸エチル(0.742mL、3.74mmol)を加えた。5時間後、反応混合物を0℃に冷却し、TiCl4(0.207mL、1.87mmol)を追加して処理した。18時間後、反応混合物を水に注ぎ込み、EtOAcで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ(Na2SO4)、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー(0〜100% EtOAc-ヘキサン)で精製し、白色泡沫として表題化合物を得た(1.01g、収率73%)。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ = 8.22 (s, 1H), 7.38 - 7.28 (m, 5H), 5.73 (s, 1H), 4.85-4.67 (m, 2H), 4.30 (qd, J=7.1, 10.7 Hz, 1H), 4.18 - 4.11 (m, 1H), 4.05 (s, 2H), 3.84 (s, 1H), 2.84 (s, 3H), 2.08 - 2.04 (m, 3H), 1.22 (t, J=7.2 Hz, 3H); LC/MS (m/z) ES+ = 370 (M+1).
【００７４】
ステップ2:エチル2-(2-ベンジル-4,7-ジメチル-3-オキソ-6-(((トリフルオロメチル)スルホニル)オキシ)イソインドリン-5-イル)-2-((トリエチルシリル)オキシ)アセテート
【００７５】
【化２０】
2017521458.tif 000022
【００７６】
エチル2-(2-ベンジル-6-ヒドロキシ-4,7-ジメチル-3-オキソイソインドリン-5-イル)-2-ヒドロキシアセテート(1g、2.71mmol)の氷冷したジクロロメタン(20mL)溶液を、イミダゾール(0.332g、4.87mmol)及びクロロトリエチルシラン(0.545mL、3.25mmol)で処理した。30分後、反応混合物を水に注ぎ込み、分層した。有機層を、1N HCl、ブラインで洗浄し、乾燥させ(Na2SO4)、濾過し、減圧下で濃縮し、黄色油状物としてメチル2-(2-ベンジル-6-ヒドロキシ-4,7-ジメチル-3-オキソイソインドリン-5-イル)-2-((トリエチルシリル)オキシ)アセテートを得た。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ = 8.72 (s, 1H), 7.37 - 7.28 (m, 5H), 5.68 (s, 1H), 4.76 (d, J=2.0 Hz, 2H), 4.27 - 4.17 (m, 1H), 4.15 - 4.08 (m, 1H), 4.06 (d, J=2.0 Hz, 2H), 2.85 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 1.03 - 0.90 (m, 15H); LC/MS (m/z) ES+ = 484 (M+1).
【００７７】
残渣を、DCM(30mL)に溶解し、-78℃に冷却し、トリエチルアミン(0.874mL、6.27mmol)及びTf2O(0.457mL、2.71mmol)で処理した。1時間後、反応混合物を水に注ぎ込み、分層した。有機層を、1N HCl、飽和NaHCO3水溶液で洗浄し、乾燥させ(Na2SO4)、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー(0〜100% EtOAc-ヘキサン)で精製し、無色のガムとして表題化合物を得た(1.48g、収率89%)。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ = 7.41 - 7.29 (m, 5H), 5.74 (s, 1H), 4.89 - 4.68 (m, 2H), 4.30 - 4.07 (m, 4H), 2.81 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 1.20 (t, J=7.2 Hz, 3H), 0.93 - 0.86 (m, 9H), 0.69 - 0.54 (m, 6H); LC/MS (m/z) ES+ = 616 (M+1).
【００７８】
ステップ3:エチル2-(2-ベンジル-4,7-ジメチル-3-オキソ-6-(((トリフルオロメチル)スルホニル)オキシ)イソインドリン-5-イル)-2-オキソアセテート
【００７９】
【化２１】
2017521458.tif 000023
【００８０】
エチル2-(2-ベンジル-4,7-ジメチル-3-オキソ-6-(((トリフルオロメチル)スルホニル)オキシ)イソインドリン-5-イル)-2-((トリエチルシリル)オキシ)アセテート(1.46g、2.371mmol)の氷冷したテトラヒドロフラン(20mL)溶液を、48% HF(5.0mL、138mmol)で処理し、室温に加温した。1.5時間後、反応混合物を、EtOAcで希釈し、固体のNaHCO3を加えてクエンチした。反応混合物を、Celiteのパッドを通して濾過し、濾液をEtOAcで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、乾燥させ(Na2SO4)、濾過し、減圧下で濃縮し、白色泡沫としてエチル2-(2-ベンジル-4,7-ジメチル-3-オキソ-6-(((トリフルオロメチル)スルホニル)オキシ)イソインドリン-5-イル)-2-ヒドロキシアセテートを得た(1.1g、97%)。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ = 7.40 - 7.29 (m, 5H), 5.64 (d, J=2.5 Hz, 1H), 4.79 (d,J=3.0 Hz, 2H), 4.37 - 4.20 (m, 2H), 4.16 (s, 2H), 3.42 (d, J=2.8 Hz, 1H), 2.78 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 1.23 (t, J=7.2 Hz, 3H); LC/MS (m/z) ES+ = 502 (M+1).
【００８１】
エチル2-(2-ベンジル-4,7-ジメチル-3-オキソ-6-(((トリフルオロメチル)スルホニル)オキシ)イソインドリン-5-イル)-2-ヒドロキシアセテート(1.1g、2.293mmol)のDCM(20mL)溶液を、Dess-Martinペルヨージナン(1.207g、2.85mmol)で処理した。1時間後、反応混合物に、飽和Na2S2O3水溶液及び飽和NaHCO3水溶液を加えてクエンチした。15分後、反応混合物を、DCMで希釈し、分層した。合わせた有機抽出物を乾燥させ(Na2SO4)、濾過し、減圧下で濃縮し、黄色泡沫として表題化合物を得た(1.1g、93%)。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ = 7.41 - 7.29 (m, 5H), 4.81 (s, 2H), 4.40 (q, J=7.1 Hz, 2H), 4.21 (s, 2H), 2.74 (s, 3H), 2.33 - 2.28 (m, 3H), 1.39 (t, J=7.2 Hz, 3H); LC/MS (m/z) ES+ = 500 (M+1).
【００８２】
ステップ5:(S)-エチル2-(2-ベンジル-4,7-ジメチル-3-オキソ-6-(((トリフルオロメチル)スルホニル)オキシ)イソインドリン-5-イル)-2-ヒドロキシアセテート
【００８３】
【化２２】
2017521458.tif 000024
【００８４】
エチル2-(2-ベンジル-4,7-ジメチル-3-オキソ-6-(((トリフルオロメチル)スルホニル)オキシ)イソインドリン-5-イル)-2-オキソアセテート(1.1g、2.102mmol)及び(R)-CBS(117mg、0.420mmol)の-45℃のトルエン(15mL)溶液に、カテコールボラン(4.20mL、4.20mmol、THF中1.0M)を滴下して処理した。反応混合物を、1.5時間かけて-20℃に加温した。反応混合物を、EtOAcで希釈し、2 M Na2CO3水溶液で処理した。反応混合物を、30分間激しく撹拌し、分層した。有機層を、飽和NH4Cl水溶液で洗浄し、乾燥させ(Na2SO4)、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー(0〜100% EtOAc-ヘキサン)で精製し、ガム状固体として表題化合物を得た(950mg、収率90%)。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ = 7.40 - 7.29 (m, 5H), 5.64 (d, J=2.5 Hz, 1H), 4.79 (d, J=1.8 Hz, 2H), 4.37 - 4.21 (m, 2H), 4.16 (s, 2H), 3.42 (d, J=2.8 Hz, 1H), 2.79 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 1.24 (t, J=7.0 Hz, 3H); LC/MS (m/z) ES+ = 502 (M+1).
【００８５】
ステップ6:(S)-エチル2-(2-ベンジル-4,7-ジメチル-3-オキソ-6-(((トリフルオロメチル)スルホニル)オキシ)イソインドリン-5-イル)-2-(tert-ブトキシ)アセテート
【００８６】
【化２３】
2017521458.tif 000025
【００８７】
ステップ7:(S)-エチル2-((M)-2-ベンジル-6-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-4,7-ジメチル-3-オキソイソインドリン-5-イル)-2-(tert-ブトキシ)アセテート
【００８８】
【化２４】
2017521458.tif 000026
【００８９】
(S)-メチル2-(2-ベンジル-4,7-ジメチル-3-オキソ-6-(((トリフルオロメチル)スルホニル)オキシ)イソインドリン-5-イル)-2-(tert-ブトキシ)アセテート(120mg、0.215mmol)、2-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン(81.73mg、0.279mmol)、及びフッ化セシウム(130.7mg、0.86mmol)のDME(5mL)溶液を、5分間N2で脱気し、Sphosパラダサイクル(49.11mg、0.065mmol)で処理し、130℃で40分間マイクロ波下で照射した。反応混合物を、EtOAcで希釈し、飽和NaHCO3水溶液、ブラインで洗浄し、乾燥させ(Na2SO4)、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー(0〜50%EtOAc-ヘキサン)で精製し、白色固体として表題化合物を得た(30mg、24%)。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ = 7.37 - 7.28 (m, 5H), 6.62 (d, J=11.3 Hz, 1H), 5.04 (s, 1H), 4.80 (s, 2H), 4.28 (t, J=5.1 Hz, 2H), 4.13 - 4.04 (m, 4H), 2.93 (s, 3H), 2.70 (d, J=4.8 Hz, 2H), 2.14 (d, J=5.3 Hz, 2H), 1.79 (s, 3H), 1.75 (s, 3H), 1.17 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.10 (s, 9H); LC/MS (m/z) ES+ = 574 (M+1).
【００９０】
ステップ8:(S)-2-((M)-2-ベンジル-6-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-4,7-ジメチル-3-オキソイソインドリン-5-イル)-2-(tert-ブトキシ)酢酸
【００９１】
【化２５】
2017521458.tif 000027
【００９２】
(S)-エチル2-((M)-2-ベンジル-6-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-4,7-ジメチル-3-オキソイソインドリン-5-イル)-2-(tert-ブトキシ)アセテート(30mg、0.052mmol)のTHF/EtOH(1.5mL、2:1)溶液を、LiOH(0.5mL、2.0M)で処理し、65℃に加熱した。5時間後、反応混合物を、室温に冷却し、1N HClで酸性化し、EtOAcで抽出した。有機物を、ブラインで洗浄し、乾燥させ(Na2SO4)、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、逆相HPLCで精製し、白色固体として表題化合物を得た(13.4mg)。1H NMR (400MHz, メタノール-d4) δ = 7.42 - 7.28 (m, 5H), 6.64 (d, J=11.3 Hz, 1H), 5.12 (s, 1H), 4.83 (s, 2H), 4.28 - 4.23 (m, 4H), 2.90 (s, 3H), 2.74 (t, J=6.5 Hz, 2H), 2.13 (d, J=4.8 Hz, 2H), 1.83 (s, 3H), 1.81 (s, 3H), 1.12 (s, 9H); LC/MS (m/z) ES+ = 546 (M+1).
【００９３】
下記化合物は、上記の実施例1〜5に記載の手順と同様にして調製された。
【００９４】
[実施例6](S)-2-(2-ベンジル-6-(4,4-ジメチルシクロヘキサ-1-エン-1-イル)-4,7-ジメチル-3-オキソイソインドリン-5-イル)-2-(tert-ブトキシ)酢酸
【００９５】
【化２６】
2017521458.tif 000028
【００９６】
表題化合物は、ステップ7で(4,4-ジメチルシクロヘキサ-1-エン-1-イル)ボロン酸を用いること以外、実施例5と同様にして生成された。1H NMR (400MHz, メタノール-d4) シフト = 7.42 - 7.24 (m, 5H), 5.73 - 5.40 (m, 2H), 4.80 (s, 2H), 4.22 (s, 2H), 2.84 (d, J=2.8 Hz, 3H), 2.62 - 2.49 (m, 1H), 2.18 - 1.95 (m, 6H), 1.66 - 1.50 (m, 2H), 1.27 - 1.18 (m, 9H), 1.16 - 1.04 (m, 6H); LC/MS (m/z) ES+ = 490 (M+1).
【００９７】
[実施例7]:(S)-2-((M)-2-ベンジル-6-(8-フルオロ-5-メチル-3,4-ジヒドロ-2H-ベンゾ[b][1,4]オキサジン-6-イル)-4,7-ジメチル-3-オキソイソインドリン-5-イル)-2-(tert-ブトキシ)酢酸
【００９８】
【化２７】
2017521458.tif 000029
【００９９】
表題化合物は、ステップ7で8-フルオロ-5-メチル-6-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)-3,4-ジヒドロ-2H-ベンゾ[b][1,4]オキサジン(WO2013/12649に記載の周知の手順によって調製)を用いること以外、実施例5と同様にして生成された。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ = 7.41 - 7.28 (m, 5H), 6.27 (d, J=11.0 Hz, 1H), 5.19 (br. s., 1H), 4.90 - 4.73 (m, 2H), 4.35 (t, J=4.4 Hz, 2H), 4.14 (s, 2H), 3.57 (td, J=4.3, 6.7 Hz, 2H), 2.86 (s, 3H), 1.80 (s, 3H), 1.73 (s, 3H), 1.15 (s, 9H); LC/MS (m/z) ES+ = 547 (M+1).
【０１００】
生物学的実施例
抗HIV活性
MT4アッセイ
表1の本発明の化合物の抗ウイルスHIV活性及び細胞毒性の値は、HTLV-1形質転換細胞株MT-4を用いて並行して測定したが、その方法は既に記載された以下の方法を基にした(Hazenら、2007、In vitro antiviral activity of the novel, tyrosyl-based human immunodeficiency virus (HIV) type 1 protease inhibitor brecanavir (GW640385) in combination with other antiretrovirals and against a panel of protease inhibitor-resistant HIV(他の抗ウイルス剤と併用した新規なチロシル系のヒト免疫不全症ウイルス(HIV)1型プロテアーゼ阻害剤、ブレカナビル(GW640385)の、一団のプロテアーゼ阻害剤耐性HIVに対するインビトロ抗ウイルス活性)(Hazenら、「In vitro antiviral activity of the novel, tyrosyl-based human immunodeficiency virus (HIV) type 1 protease inhibitor brecanavir (GW640385) in combination with other antiretrovirals and against a panel of protease inhibitor-resistant HIV」、Antimicrob. Agents Chemother. 2007、51:3147〜3154、及びPauwelsら、「Sensitive and rapid assay on MT-4 cells for the detection of antiviral compounds against the AIDS virus」、J. of Virological Methods 1987、16:171〜185)。
【０１０１】
ルシフェラーゼ活性は、cell titer glo(Promega、Madison、Wis.)を加えてから96時間後に測定した。細胞保護阻害率(%)のデータを、化合物無添加の対照に対してプロットした。同じ条件で、当該化合物の細胞毒性を、cell titer Glo(商標)(Promega、Madison、Wis)を用いて判定した。IC50は、各化合物の3〜4倍の希釈系列を用いた10点用量反応曲線から判定し、この濃度範囲は1000倍超である。
【０１０２】
これらの値は、標準的な4パラメータロジスティック方程式を用いて化合物のモル濃度に対してプロットした。
y=((Vmax*x^n)/(K^n+x^n))+Y2
ここで、
Y2=yの最小値      n=傾斜因子
Vmax=yの最大値    x=化合物濃度[M]
K=EC50
【０１０３】
MT4アッセイで試験したとき、化合物は、表1に列挙したIC50値を有することが分かった。
【０１０４】
【表１】
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【国際調査報告】
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