(57)【要約】  本開示は、親水性自己崩壊型リンカーを有する化合物を提供し、リンカーは、適切な条件下で切断可能であり、より優れた溶解性の化合物を提供するために親水性基を組み込む。本開示の化合物は、薬物部分、選択された細胞集団を標的化することができる標的化部分、およびアシル単位を含有するリンカー、薬物部分と標的化部分との間に距離を提供するための任意のスペーサー単位、適切な条件下で切断され得るペプチドリンカー、親水性自己崩壊型リンカー、および任意の第二の自己崩壊型スペーサーまたは環化自己消去型リンカーを含む。本開示のいくつかの側面において、標的化部分は、抗ＨＥＲ２抗体である。本開示はさらに、がんを処置するための組成物および方法を提供する。
2017525755.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2017525755.tif 000113
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体であって；
式中：
Ｄは、薬物部分であり；
Ｔは、標的化部分であり、ここで、Ｔは、ヒトＨＥＲ２に特異的に結合する抗体であり；
Ｘは、親水性自己崩壊型リンカーであり；
Ｌ１は、結合、自己崩壊型リンカー、または環化自己消去型リンカーであり；
Ｌ２は、結合または自己崩壊型リンカーであり；
ここで、Ｌ１が自己崩壊型リンカーまたは環化自己消去型リンカーである場合、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が自己崩壊型リンカーである場合、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合またはスペーサーであり；および
Ａはアシル単位である、
前記化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体。
【請求項２】
式（ＩＩ）：
【化２】
2017525755.tif 000114
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体であって；
式中：
Ｄは、薬物部分であり；
Ｔは、標的化部分であり、ここで、Ｔは、ヒトＨＥＲ２に特異的に結合する抗体であり；
Ｒ１は、水素、未置換もしくは置換されたＣ１−３アルキル、または未置換もしくは置換されたヘテロシクリルであり；
Ｌ１は、結合、自己崩壊型リンカー、または環化自己消去型リンカーであり；
Ｌ２は、結合または自己崩壊型リンカーであり；
ここで、Ｌ１が自己崩壊型リンカーまたは環化自己消去型リンカーである場合、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が自己崩壊型リンカーである場合、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合またはスペーサーであり；および
Ａはアシル単位である、
前記化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体。
【請求項３】
式（Ｉａ）：
【化３】
2017525755.tif 000115
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体であって；
式中：
ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０であり；
Ｄは、薬物部分であり；
Ｔは、標的化部分であり、ここで、Ｔは、ヒトＨＥＲ２に特異的に結合する抗体であり；
Ｘは、親水性自己崩壊型リンカーであり；
Ｌ１は、結合、自己崩壊型リンカー、または環化自己消去型リンカーであり；
Ｌ２は、結合または自己崩壊型リンカーであり；
ここで、Ｌ１が自己崩壊型リンカーまたは環化自己消去型リンカーである場合、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が自己崩壊型リンカーである場合、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合またはスペーサーであり；および
Ａはアシル単位である、
前記化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体。
【請求項４】
式（ＩＩａ）：
【化４】
2017525755.tif 000116
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体であって；
式中：
ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０であり；
Ｄは、薬物部分であり；
Ｔは、標的化部分であり、ここで、Ｔは、ヒトＨＥＲ２に特異的に結合する抗体であり；
Ｒ１は、水素、未置換もしくは置換されたＣ１−３アルキル、または未置換もしくは置換されたヘテロシクリルであり；
Ｌ１は、結合、自己崩壊型リンカー、または環化自己消去型リンカーであり；
Ｌ２は、結合または自己崩壊型リンカーであり；
ここで、Ｌ１が自己崩壊型リンカーまたは環化自己消去型リンカーである場合、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が自己崩壊型リンカーである場合、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合またはスペーサーであり；および
Ａはアシル単位である、
前記化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体。
【請求項５】
ｐが１、２、３、または４である、請求項３または４に記載の化合物。
【請求項６】
Ｄが、アミノ基含有薬物部分であり、ここで、薬物が、前記アミノ基含有薬物部分の前記アミノ基を介して、Ｌ１またはＸに結合されている、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
Ｄが、デュオカルマイシン、ドラスタチン、ツブリシン(tubulysin)、ドキソルビシン（ＤＯＸ）、パクリタキセル、もしくはマイトマイシンＣ（ＭＭＣ）、またはそれらのアミノ誘導体である、請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
Ａ−Ｌ４−Ｌ３−Ｌ２−Ｘ−Ｌ１−Ｄが、
【化５】
2017525755.tif 000117
である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９】
Ｌ１が結合である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｌ１が、自己崩壊型リンカーまたは環化自己消去型リンカーである、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｌ１が、アミノベンジルオキシカルボニルリンカーである、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｌ１が、
【化６】
2017525755.tif 000118
【化７】
2017525755.tif 000119
式中、ｎは１または２である、
からなる群から選択される、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｌ１が、
【化８】
2017525755.tif 000120
からなる群から選択される、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｌ２が、結合である、請求項１０〜１２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１５】
Ｌ２が、自己崩壊型リンカーである、請求項９に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｌ２が、アミノベンジルオキシカルボニルリンカーである、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｌ２が、
【化９】
2017525755.tif 000121
式中、ｎが１または２である、
から選択される、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１８】
Ｌ３が、１〜１０個のアミノ酸残基のペプチドリンカーである、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１９】
Ｌ３が、２、３、または４個のアミノ酸残基のペプチドリンカーである、請求項１８に記載の化合物。
【請求項２０】
Ｌ３が、少なくとも１個のリジンまたは少なくとも１個のアルギニン残基を含むペプチドリンカーである、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２１】
Ｌ３が、リジン、Ｄ−リジン、シトルリン、アルギニン、プロリン、ヒスチジン、オルニチンおよびグルタミンから選択されるアミノ酸残基を含むペプチドリンカーである、請求項１８に記載の化合物。
【請求項２２】
Ｌ３が、バリン、イソロイシン、フェニルアラニン、メチオニン、アスパラギン、プロリン、アラニン、ロイシン、トリプトファン、およびチロシンから選択されるアミノ酸残基を含むペプチドリンカーである、請求項２１に記載の化合物。
【請求項２３】
Ｌ３が、バリン−シトルリン、プロリン−リジン、メチオニン−Ｄ−リジン、アスパラギン−Ｄ−リジン、イソロイシン−プロリン、フェニルアラニン−リジン、およびバリン−リジンから選択されるジペプチド単位である、請求項１８〜２２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２４】
Ｌ３が、バリン−シトルリンである、請求項２３に記載の化合物。
【請求項２５】
Ｌ４が結合である、請求項１〜２４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２６】
Ｌ４がスペーサーである、請求項２５に記載の化合物。
【請求項２７】
スペーサーが、ポリアルキレングリコール、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、またはポリアミンである、請求項２６に記載の化合物。
【請求項２８】
Ｌ４が、Ｌ４ａ−Ｃ（Ｏ）、Ｌ４ａ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ、Ｌ４ａ−Ｓ（Ｏ）２、またはＬ４ａ−Ｓ（Ｏ）２−ＮＨであり、式中、各Ｌ４ａが、独立して、ポリアルキレングリコール、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、またはポリアミンである、請求項２６に記載の化合物。
【請求項２９】
Ｌ４が、Ｌ４ａ−Ｃ（Ｏ）であり、式中、Ｌ４ａが、ポリアルキレングリコール、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、またはポリアミンである、請求項２６に記載の化合物。
【請求項３０】
Ｌ４が、Ｌ４ａ−Ｃ（Ｏ）であり、式中、Ｌ４ａが、ポリアルキレングリコールである、請求項２６に記載の化合物。
【請求項３１】
Ｌ４が、Ｌ４ａ−Ｃ（Ｏ）であり、式中、Ｌ４ａが、ポリエチレングリコールである、請求項２６に記載の化合物。
【請求項３２】
スペーサーが、式−ＣＨ２−（ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２）ｍ−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−で表わされ、式中、ｍが、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０の整数である、請求項２６に記載の化合物。
【請求項３３】
Ｌ４が、Ｌ４ａ−Ｃ（Ｏ）であり、式中、Ｌ４ａが、アルキレンである、請求項２６に記載の化合物。
【請求項３４】
Ａが、
【化１０】
2017525755.tif 000122
【化１１】
2017525755.tif 000123
からなる群から選択され、式中、各Ｑ２が、ＮＨまたはＯであり、各ｑが、独立して、１〜１０の整数であり、および各ｑ１が、独立して、１〜１０の整数である、請求項１〜３３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３５】
Ａが、
【化１２】
2017525755.tif 000124
であり、式中、各Ｑ２が、独立して、ＮＨまたはＯであり、各ｑが、独立して、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０の整数である、請求項３４に記載の化合物。
【請求項３６】
ｑが、２、３、４、または５である、請求項３５に記載の化合物。
【請求項３７】
Ａが、
【化１３】
2017525755.tif 000125
【化１４】
2017525755.tif 000126
の群から選択され、式中、各Ｑ２が、独立して、ＮＨまたはＯである、請求項１〜３３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３８】
Ｄが、アミノ基含有薬物部分であり、薬物が、前記アミノ基含有薬物部位の前記アミノ基を介して、Ｌ１またはＸに結合される、請求項９〜３７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３９】
Ｄが、
【化１５】
2017525755.tif 000127
からなる群から選択されるデュオカルマイシンのアミノ誘導体である、請求項３８に記載の化合物。
【請求項４０】
Ｄが、
【化１６】
2017525755.tif 000128
である、請求項３８に記載の化合物。
【請求項４１】
Ａ−Ｌ４−Ｌ３−Ｌ２が、
【化１７】
2017525755.tif 000129
である、請求項９〜３８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項４２】
Ａ−Ｌ４−Ｌ３−Ｌ２−Ｘ−Ｌ１−Ｄが、
【化１８】
2017525755.tif 000130
である、請求項９〜３８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項４３】
Ａ−Ｌ４−Ｌ３−Ｌ２−Ｘ−Ｌ１−Ｄが、
【化１９】
2017525755.tif 000131
である、請求項９〜３８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項４４】
Ａ−Ｌ４−Ｌ３−Ｌ２−Ｘ−Ｌ１−Ｄが、
【化２０】
2017525755.tif 000132
である、請求項９〜３８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項４５】
抗ＨＥＲ２抗体が、ヒト化抗体、キメラ抗体、モノクローナル抗体またはヒト抗体である、請求項１〜４４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項４６】
ヒト化抗ＨＥＲ２抗体が、トラスツズマブである、請求項４５に記載の化合物。
【請求項４７】
抗ＨＥＲ２モノクローナル抗体が、ペルツズマブである、請求項４５に記載の化合物。
【請求項４８】
抗ＨＥＲ２モノクローナル抗体が、マルゲツキシマブ(margetuximab)である、請求項４５に記載の化合物。
【請求項４９】
抗体の重鎖および／または軽鎖の１以上のアミノ酸残基が、システイン残基で置換されている、請求項１〜４８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５０】
抗体のＦｃ領域の１以上のアミノ酸残基が、システイン残基で置換されている、請求項４９に記載の化合物。
【請求項５１】
抗体の１以上のアミノ酸残基が、ＥＵナンバリングを使用して、軽鎖の１４７位、１８８位、２００位、２０１位および／もしくは２０６位、ならびに／または重鎖の１５５位、１５７位、１６５位、１６９位、１９７位、１９９位、２０９位、２１１位および／もしくは４４２位にある、請求項４９に記載の化合物。
【請求項５２】
Ｄが、システイン残基を経由してＴに連結される、請求項４９〜５１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５３】
抗ＨＥＲ２抗体が、重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含み、ここで、
（１）重鎖可変領域が、配列番号１６〜１８のアミノ酸配列の３つの重鎖ＣＤＲを含み、および／または、軽鎖可変領域が、配列番号１９〜２１のアミノ酸配列の３つの軽鎖ＣＤＲを含むか；
（２）重鎖可変領域が、配列番号２２〜２４のアミノ酸配列の３つの重鎖ＣＤＲを含み、および／または、軽鎖可変領域が、配列番号２５〜２７のアミノ酸配列の３つの軽鎖ＣＤＲを含むか；あるいは、
（３）重鎖可変領域が、配列番号２８〜３０のアミノ酸配列の３つの重鎖ＣＤＲを含み、および／または、軽鎖可変領域が、配列番号３１〜３３のアミノ酸配列の３つの軽鎖ＣＤＲを含む、
請求項１〜５２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５４】
抗ＨＥＲ２抗体が、重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含み、ここで、
（１）重鎖可変領域が、配列番号８のアミノ酸配列を含み、および／または、軽鎖可変領域が、配列番号７のアミノ酸配列を含み、
（２）重鎖可変領域が、配列番号１３のアミノ酸配列を含み、および／または、軽鎖可変領域が、配列番号１２のアミノ酸配列を含み、
（３）重鎖可変領域が、配列番号１５のアミノ酸配列を含み、および／または、軽鎖可変領域が、配列番号１４のアミノ酸配列を含む、
請求項１〜５２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５５】
請求項１〜５４のいずれか一項に記載の化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体および薬学的に許容し得る担体を含む、医薬組成物。
【請求項５６】
細胞を殺傷する方法であって、前記細胞を殺傷するのに十分な量の、請求項１〜５４のいずれか一項に記載の化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体もしくは医薬組成物を細胞に投与することを含む、前記方法。
【請求項５７】
細胞が、がん細胞である、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
がん細胞が、乳がん細胞、胃がん細胞、または卵巣がん細胞である、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
有効量の請求項１〜５４のいずれか一項に記載の化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体もしくは医薬組成物を個体に投与することを含む、それが必要な個体におけるがんを処置する方法。
【請求項６０】
がんが、乳がん、胃がん、または卵巣がんである、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
請求項１〜５４のいずれか一項に記載の化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体もしくは医薬組成物を含む、キット。
【請求項６２】
式（ＩＩ）：
【化２１】
2017525755.tif 000133
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体を調製する方法であって；
式中：
Ｄは、薬物部分であり；
Ｔは、標的化部分であり、ここで、Ｔは、ヒトＨＥＲ２に特異的に結合する抗体であり；
Ｒ１は、水素、未置換もしくは置換されたＣ１−３アルキル、または未置換もしくは置換されたヘテロシクリルであり；
Ｌ１は、結合、自己崩壊型リンカー、または環化自己消去型リンカーであり；
Ｌ２は、結合または自己崩壊型リンカーであり；
ここで、Ｌ１が自己崩壊型リンカーまたは環化自己消去型リンカーである場合、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が自己崩壊型リンカーである場合、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合またはスペーサーであり；および
Ａはアシル単位であり；
化合物Ｚ：
【化２２】
2017525755.tif 000134
またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体と抗体を反応させることを含む、前記方法。
【請求項６３】
式（ＩＩａ）：
【化２３】
2017525755.tif 000135
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体を調製する方法であって；
式中：
ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０であり；
Ｄは、薬物部分であり；
Ｔは、標的化部分であり、ここで、Ｔは、ヒトＨＥＲ２に特異的に結合する抗体であり；
Ｒ１は、水素、未置換もしくは置換されたＣ１−３アルキル、または未置換もしくは置換されたヘテロシクリルであり；
Ｌ１は、結合、自己崩壊型リンカー、または環化自己消去型リンカーであり；
Ｌ２は、結合または自己崩壊型リンカーであり；
ここで、Ｌ１が自己崩壊型リンカーまたは環化自己消去型リンカーである場合、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が自己崩壊型リンカーである場合、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合またはスペーサーであり；および
Ａはアシル単位であり；
化合物Ｚ：
【化２４】
2017525755.tif 000136
またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体と抗体を反応させることを含む、前記方法。
【請求項６４】
抗ＨＥＲ２抗体が、ヒト化抗体、キメラ抗体、モノクローナル抗体またはヒト抗体である、請求項６２または６３に記載の方法。
【請求項６５】
抗体重鎖および／または軽鎖の１以上のアミノ酸残基がシステイン残基で置換されている、請求項６２〜６４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６６】
抗体のＦｃ領域の１以上のアミノ酸残基がシステイン残基で置換されている、請求項６２〜６５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６７】
抗体の１以上のアミノ酸残基が、ＥＵナンバリングを使用して、軽鎖の１４７位、１８８位、２００位、２０１位および／もしくは２０６位、ならびに／または重鎖の１５５位、１５７位、１６５位、１６９位、１９７位、１９９位、２０９位、２１１位および／もしくは４４２位にある、請求項６５に記載の方法。
【請求項６８】
抗体が、１以上のスルフヒドリル基を含む、請求項６２または６３に記載の方法。
【請求項６９】
化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体であって、前記化合物が、請求項６２または６３に記載の方法によって調製され、ここで、抗体が、１以上のスルフヒドリル基を含む、前記化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体。
【請求項７０】
請求項６９に記載の化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体および薬学的に許容し得る担体を含む、医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本願は、2014年6月23日に出願された米国特許仮出願第US62/015,661号および2014年6月20日に出願された米国特許仮出願第US62/014,912号の35 U.S.C. § 119(e)に基づく利益を主張し、これらの各々が参照して本明細書に組み込まれる。
【０００２】
発明の分野
本開示は、抗がん治療薬(therapeutics)の分野の開示であり、抗体−薬物抱合体（ＡＤＣ）形式を介して、細胞障害性薬物のがん細胞への特異的送達のための効力および特異性を提供する。
【背景技術】
【０００３】
背景
抗体−薬物抱合体（ＡＤＣ）は、モノクローナル抗体（ｍＡｂ）の特異性を細胞障害性分子の効力と組み合わせる１つのクラスの治療薬である。ＡＤＣの使用により、抱合体化された細胞障害性剤により、抗体のがん殺傷活性に力を与え、標的特異的送達は、遊離の有毒剤への暴露により引き起こされる全身性毒性を回避する。現在、２つのＡＤＣが、ヒトのがんの処置についてＦＤＡにより認可されている。細胞障害性剤MMAEと抱合体化された抗ＣＤ３０抗体である、ADCETRIS（登録商標）（ブレンツキシマブベドチンまたはSGN-35）は、再発性ＣＤ３０陽性リンパ腫を処置するように設計されている。細胞障害性剤DM1と抱合体化された抗ＨＥＲ２抗体である、KADCYLA（登録商標）（T-DM1）は、ＨＥＲ２陽性転移性乳がんを処置するように設計されている。
【０００４】
リンカー技術は、ＡＤＣ効力、特異性、および安全性に深く影響する。酵素不安定なリンカーは、薬物放出の制御を達成するために、細胞の内側および外側で、プロテアーゼの差次的な活性を利用する。薬物は、ペプチド結合を介して、抗体に抱合体化され得、細胞内に存在するリソソームプロテアーゼの作用によって、特定の腫瘍型において上昇したレベルで、特異的にのみ切断され得る(Koblinsk et al, 2000)。これは、血流中のリンカーの安定性を保証して、健常組織への損傷を制限するだろう。しかしながら、いくつかの酵素不安定なリンカーの関連する疎水性の増加は、特に強力に疎水性の薬物との、ＡＤＣの凝集をもたらし得る。したがって、血清安定性および可溶性の増加を提供し得、疎水性薬物の効率的な抱合および細胞内送達を可能にするリンカーについての必要性が存在する。
【０００５】
ヒト上皮成長因子受容体２タンパク質、ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２）は、上皮成長因子受容体ファミリーのメンバーである。これらの受容体チロシンキナーゼは、発生および発がんの両方において重要な役割を果たすことが知られている。ＨＥＲ２タンパク質の過剰発現は、２５％〜３０％の原発性乳がんにおいて観察され(Press et al, 1993)、がん標的化治療の重要な候補となっている。ヒト化抗ＨＥＲ２抗体であるトラスツズマブは、in vitroおよびマウス異種移植モデルの両方において、ＨＥＲ２を過剰発現するヒト腫瘍細胞の増殖を阻害することが示されている(Hudziak et al, 1989; Baselga et al, 1998)。トラスツズマブは、臨床的に活性であり、ＨＥＲ２過剰発現転移性乳がんを有する患者を処置する際に効力を示している(Baselga et al, 1996)が、トラスツズマブに最初に応答したこの集団の大部分は、１年以内に耐性を発生する(Romond et al, 2005; Nahta et al, 2006; Pohlmann et al, 2009)。したがって、ＨＥＲ２を過剰発現する腫瘍細胞に対する新規な治療法を開発する必要性が存在する。
【発明の概要】
【０００６】
概要
本開示の化合物は、薬物部分、選択された細胞集団を標的化することができる標的化部分、ならびにアシル単位を含有するリンカー、前記薬物部分と前記標的化部分との間に距離を提供するための任意のスペーサー単位、適切な条件下で切断可能であり得るペプチドリンカー、親水性自己崩壊型（self-immolative）リンカー、および任意の第二の自己崩壊型スペーサーまたは環化自己消去化型（self-elimination）リンカーを含む。
【０００７】
本開示はまた、式（Ｉ）：
【化１】
2017525755.tif 000003
式中：
Ｄは、薬物部分であり；
Ｔは、標的化部分であり；
ここで、Ｘは、親水性自己崩壊型リンカーであり；
Ｌ１は、結合、自己崩壊型リンカー、または環化自己消去型リンカーであり；
Ｌ２は、結合または自己崩壊型リンカーであり；
ここで、Ｌ１が自己崩壊型リンカーまたは環化自己消去型リンカーである場合、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が自己崩壊型リンカーである場合、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合またはスペーサーであり；および
Ａはアシル単位である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体を提供する。
【０００８】
本開示はまた、式（ＩＩ）：
【化２】
2017525755.tif 000004
式中：
Ｄは、薬物部分であり；
Ｔは、標的化部分であり；
Ｒ１は、水素、未置換もしくは置換されたＣ１−３アルキル、または未置換もしくは置換されたヘテロシクリルであり；
Ｌ１は、結合、自己崩壊型リンカー、または環化自己消去型リンカーであり；
Ｌ２は、結合、自己崩壊型リンカーであり；
ここで、Ｌ１が自己崩壊型リンカーまたは環化自己消去型リンカーである場合、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が自己崩壊型リンカーである場合、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合またはスペーサーであり；および
Ａはアシル単位である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体を提供する。
【０００９】
いくつかの態様において、式（Ｉａ）：
【化３】
2017525755.tif 000005
式中、Ｄ、Ｔ、Ｘ、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４およびＡは、式（Ｉ）に定義されるとおりであり、ｐは１〜２０である、で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体が提供される。いくつかの態様において、ｐは１〜８である。いくつかの態様において、ｐは１〜６である。いくつかの態様において、ｐは１〜４である。いくつかの態様において、ｐは２〜４である。いくつかの態様において、ｐは１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０である。いくつかの態様において、ｐは１、２、３、または４である。
【００１０】
いくつかの態様において、式（ＩＩａ）：
【化４】
2017525755.tif 000006
式中、Ｄ、Ｔ、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４およびＡは、式（ＩＩ）に定義されるとおりであり、ｐは１〜２０である、で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体が提供される。いくつかの態様において、ｐは１〜８である。いくつかの態様において、ｐは１〜６である。いくつかの態様において、ｐは１〜４である。いくつかの態様において、ｐは２〜４である。いくつかの態様において、ｐは１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０である。いくつかの態様において、ｐは１、２、３、または４である。
【００１１】
式Ｉ、ＩＩ、ＩａおよびＩＩａで表わされる化合物のいくつかの態様において、Ｔは、抗体標的化分子である。いくつかの態様において、Ｔは、抗ＨＥＲ２抗体である。いくつかの態様において、Ｔは、抗ＨＥＲ２モノクローナル抗体である。いくつかの態様において、抗ＨＥＲ２抗体は、ペルツズマブである。いくつかの態様において、抗ＨＥＲ２モノクローナル抗体は、マルゲツキジマブ(margetuximab)である。いくつかの態様において、Ｔは、ヒト化抗ＨＥＲ２抗体である。いくつかの態様において、ヒト化抗ＨＥＲ２抗体は、トラスツズマブである。
【００１２】
式Ｉ、ＩＩ、ＩａおよびＩＩａで表わされる化合物のいくつかの態様において、抗体の重鎖および／または軽鎖の１以上のアミノ酸残基は、システイン残基で置換されている。いくつかの態様において、抗体のＦｃ領域の１以上のアミノ酸残基は、システイン残基で置換されている。いくつかの態様において、抗体の１以上のアミノ酸残基は、ＥＵナンバリング（KabatにおけるＥＵ指標）を使用して、軽鎖の１４７位、１８８位、２００位、２０１位および／もしくは２０６位、ならびに／または重鎖の１５５位、１５７位、１６５位、１６９位、１９７位、１９９位、２０９位、２１１位および／もしくは４４２位にあるシステイン残基で置換されている。いくつかの態様において、Ｄは、システイン残基を経由してＴに連結される。いくつかの態様において、Ｄは、アミノ基含有薬物部分であり、ここで、薬物は、アミノ基含有薬物部分のアミノ基を介して、Ｌ１またはＸに結合される。いくつかの態様において、Ｄは、デュオカルマイシン、ドラスタチン、ツブリシン(tubulysin)、ドキソルビシン（ＤＯＸ）、パクリタキセル、もしくはマイトマイシンＣ（ＭＭＣ）、またはそのアミノ誘導体である。
【００１３】
上記態様のいずれかにおいて、Ａ−Ｌ４−Ｌ３−Ｌ２−Ｘ−Ｌ１−Ｄは、
【化５】
2017525755.tif 000007
である。
【００１４】
本開示のいくつかの側面は、本明細書に記載された化合物を含む医薬組成物、またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体；および薬学的に許容し得る担体を伴う。
本開示のいくつかの側面は、細胞を殺傷する方法を伴う。前記方法は、細胞を殺傷するのに十分な量の、本明細書に記載された化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体もしくは医薬組成物を細胞に投与することを含む。いくつかの態様において、細胞は、がん細胞である。いくつかの態様において、がん細胞は、乳がん細胞、胃がん細胞、または卵巣がん細胞である。
【００１５】
本開示のいくつかの側面は、がんを処置することが必要な個体におけるがんを処置するための方法を伴う。前記方法は、有効量の本明細書に記載された化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体もしくは医薬組成物を個体に投与することを含む。いくつかの態様において、がんは、乳がん、胃がん、または卵巣がんである。
本開示のいくつかの側面は、式Ｉ、Ｉａ、ＩＩまたはＩＩａで表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体もしくは医薬組成物の、がんを処置する際の使用を伴う。いくつかの態様において、がんは、乳がん、胃がん、または卵巣がんである。
【００１６】
いくつかの態様において、Ｌ１は、結合である。いくつかの態様において、Ｌ１は、自己崩壊型リンカーである。いくつかの態様において、Ｌ１は、アミノベンジルオキシカルボニルリンカーである。いくつかの態様において、Ｌ１は、
【化６】
2017525755.tif 000008
【化７】
2017525755.tif 000009
式中、ｎは１または２である、
からなる群から選択される。
【００１７】
いくつかの態様において、Ｌ１は、
【化８】
2017525755.tif 000010
からなる群から選択される。
【００１８】
いくつかの態様において、Ｌ２は、結合である。いくつかの態様において、Ｌ２は、自己崩壊型リンカーである。いくつかの態様において、Ｌ２は、アミノベンジルオキシカルボニルリンカーである。いくつかの態様において、Ｌ２は、
【化９】
2017525755.tif 000011
式中、ｎは１または２である、
から選択される。
【００１９】
いくつかの態様において、Ｌ３は、１〜１０個のアミノ酸残基のペプチドリンカーである。いくつかの態様において、Ｌ３は、２〜４個のアミノ酸残基のペプチドリンカーである。いくつかの態様において、Ｌ３は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０個のアミノ酸残基のペプチドリンカーである。いくつかの態様において、Ｌ３は、少なくとも１個のリジンまたは少なくとも１個のアルギニン残基を含むペプチドリンカーである。いくつかの態様において、Ｌ３は、リジン、Ｄ−リジン、シトルリン、アルギニン、プロリン、ヒスチジン、オルニチンおよびグルタミンから選択されるアミノ酸残基を含むペプチドリンカーである。いくつかの態様において、Ｌ３は、バリン、イソロイシン、フェニルアラニン、メチオニン、アスパラギン、プロリン、アラニン、ロイシン、トリプトファン、およびチロシンから選択されるアミノ酸残基を含むペプチドリンカーである。いくつかの態様において、Ｌ３は、バリン−シトルリン、プロリン−リジン、メチオニン−Ｄ−リジン、アスパラギン−Ｄ−リジン、イソロイシン−プロリン、フェニルアラニン−リジン、およびバリン−リジンから選択されるジペプチド単位である。いくつかの態様において、Ｌ３は、バリン−シトルリンである。
【００２０】
いくつかの態様において、Ｌ４は、結合である。いくつかの態様において、Ｌ４は、スペーサーである。いくつかの態様において、スペーサーは、ポリアルキレングリコール、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、またはポリアミンである。いくつかの態様において、Ｌ４は、Ｌ４ａ−Ｃ（Ｏ）、Ｌ４ａ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ、Ｌ４ａ−Ｓ（Ｏ）２、またはＬ４ａ−Ｓ（Ｏ）２−ＮＨであり、式中、各Ｌ４ａは、独立して、ポリアルキレングリコール、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、またはポリアミンである。いくつかの態様において、Ｌ４は、Ｌ４ａ−Ｃ（Ｏ）であり、式中、Ｌ４ａは、ポリアルキレングリコール、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、またはポリアミンである。いくつかの態様において、Ｌ４は、Ｌ４ａ−Ｃ（Ｏ）であり、式中、Ｌ４ａは、ポリアルキレングリコールである。いくつかの態様において、Ｌ４は、Ｌ４ａ−Ｃ（Ｏ）であり、式中、Ｌ４ａは、ポリエチレングリコールである。いくつかの態様において、スペーサーは、式−ＣＨ２−（ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２）ｍ−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−で表わされ、式中、ｍは、０〜３０の整数である。いくつかの態様において、スペーサーは、式−ＣＨ２−（ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２）ｍ−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−で表わされ、式中、ｍは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０の整数である。いくつかの態様において、Ｌ４は、Ｌ４ａ−Ｃ（Ｏ）であり、式中、Ｌ４ａは、アルキレンである。
【００２１】
いくつかの態様において、Ａは、
【化１０】
2017525755.tif 000012
【化１１】
2017525755.tif 000013
からなる群から選択され、式中、各Ｑ２は、ＮＨまたはＯであり、各ｑは、１〜１０の整数であり、各ｑ１は、独立して、１〜１０の整数である。いくつかの態様において、ｑは、２、３、４、または５である。特定の態様において、ｑ１は、２、３、４、または５である。さらなる態様において、各ｑは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０の整数である。いくつかの態様において、Ａは、
【化１２】
2017525755.tif 000014
であり、式中、各Ｑ２は、独立して、ＮＨまたはＯであり、各ｑは、独立して、１〜１０の整数である。さらなる態様において、各ｑは、独立して、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０の整数である。いくつかの態様において、ｑは、２、３、４、または５である。いくつかの態様において、Ａは、
【化１３】
2017525755.tif 000015
の群から選択され、式中、各Ｑ２は、独立して、ＮＨまたはＯである。
【００２２】
いくつかの態様において、Ｄは、アミノ基含有薬物部分であり、ここで、薬物は、アミノ基含有薬物部分のアミノ基を介して、Ｌ１またはＸに結合される。いくつかの態様において、Ｄは、
【化１４】
2017525755.tif 000016
からなる群から選択されるデュオカルマイシンのアミノ誘導体である。
【００２３】
いくつかの態様において、Ｄは、ドラスタチン（例として、モノメチルドラスタチン１０）：
【化１５】
2017525755.tif 000017
のアミノ誘導体である。
【００２４】
いくつかの態様において、Ａ−Ｌ４−Ｌ３−Ｌ２は、
【化１６】
2017525755.tif 000018
【化１７】
2017525755.tif 000019
【００２５】
本開示のいくつかの側面は、式（ＩＩ）：
【化１８】
2017525755.tif 000020
式中：
Ｄは、薬物部分であり；
Ｔは、抗体であり；
Ｒ１は、水素、未置換もしくは置換されたＣ１−３アルキル、または未置換もしくは置換されたヘテロシクリルであり；
Ｌ１は、結合、自己崩壊型リンカー、または環化自己消去型リンカーであり；
Ｌ２は、結合または自己崩壊型リンカーであり；
ここで、Ｌ１が自己崩壊型リンカーまたは環化自己消去型リンカーである場合、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が自己崩壊型リンカーである場合、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合またはスペーサーであり；および
Ａはアシル単位である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体を調製する方法を伴う。
【００２６】
前記方法は、化合物Ｚ：
【化１９】
2017525755.tif 000021
またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体と抗体を反応させることを含む。
【００２７】
本開示のいくつかの側面は、式（ＩＩａ）：
【化２０】
2017525755.tif 000022
式中：
ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０であり；
Ｄは、薬物部分であり；
Ｔは、抗体であり；
Ｒ１は、水素、未置換もしくは置換されたＣ１−３アルキル、または未置換もしくは置換されたヘテロシクリルであり；
Ｌ１は、結合、自己崩壊型リンカー、または環化自己消去型リンカーであり；
Ｌ２は、結合または自己崩壊型リンカーであり；
ここで、Ｌ１が自己崩壊型リンカーまたは環化自己消去型リンカーである場合、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が自己崩壊型リンカーである場合、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合またはスペーサーであり；および
Ａはアシル単位である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体を調製する方法を伴う。
【００２８】
前記方法は、化合物Ｚ：
【化２１】
2017525755.tif 000023
またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体と抗体を反応させることを含む。
【００２９】
いくつかの態様において、抗体は、抗ＨＥＲ２抗体である。いくつかの態様において、抗体は、抗ＨＥＲ２モノクローナル抗体である。いくつかの態様において、抗体は、ヒト化抗ＨＥＲ２抗体、任意には、ヒト化抗ＨＥＲ２モノクローナル抗体である。いくつかの態様において、抗体の重鎖および／または軽鎖の１以上のアミノ酸残基は、システイン残基で置換されている。いくつかの態様において、抗体のＦｃ領域の１以上のアミノ酸残基は、システイン残基で置換されている。いくつかの態様において、抗体の１以上のアミノ酸残基が、ＥＵナンバリング（KabatにおけるＥＵ指標）を使用して、軽鎖の１４７位、１８８位、２００位、２０１位および／もしくは２０６位、ならびに／または重鎖の１５５位、１５７位、１６５位、１６９位、１９７位、１９９位、２０９位、２１１位および／もしくは４４２位において、システイン残基で置換されている。いくつかの態様において、抗体は、１以上のスルフヒドリル基を含む。いくつかの態様において、化合物は、本明細書に記載された方法の１つを使用して調製され、ここで、抗体は、１以上のスルフヒドリル基を含む。
【００３０】
また提供されるのは、本明細書に記載された化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体、および薬学的に許容し得る担体を含む医薬組成物である。
【００３１】
本開示のいくつかの側面は、式（ＩＸ）：
【化２２】
2017525755.tif 000024
式中、Ｒは、ＮＯ２またはＮＨ２である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体を伴う。
【００３２】
本開示のいくつかの側面は、化合物Ｘ：
【化２３】
2017525755.tif 000025
式中：
Ｌ２は、結合または自己崩壊型リンカーであり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合またはスペーサーであり；および
Ａはアシル単位であり；および
Ｒ１は、水素、未置換もしくは置換されたＣ１−３アルキル、または未置換もしくは置換されたヘテロシクリルである、
またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体を調製する方法を伴う。
【００３３】
前記方法は、化合物Ｗ：Ａ−Ｌ４−Ｌ３−Ｌ２および化合物Ｉ：
【化２４】
2017525755.tif 000026
を反応させることを含む。
【００３４】
本開示のいくつかの側面は、化合物Ｚ：
【化２５】
2017525755.tif 000027
式中：
Ｄは、薬物部分であり；
Ｌ１は、結合、自己崩壊型リンカー、または環化自己消去型リンカーであり；
Ｌ２は、結合または自己崩壊型リンカーであり；
ここで、Ｌ１が自己崩壊型リンカーまたは環化自己消去型リンカーである場合、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が自己崩壊型リンカーである場合、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合またはスペーサーであり；および
Ａは、アシル単位であり；
Ｒ１は、水素、未置換もしくは置換されたＣ１−３アルキル、または未置換もしくは置換されたヘテロシクリルである、
またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体を調製する方法を伴う。
【００３５】
前記方法は、化合物Ｘ：
【化２６】
2017525755.tif 000028
およびクロロギ酸ｐ−ニトロフェニルを反応させて、化合物Ｙ：
【化２７】
2017525755.tif 000029
を形成させること、および、化合物ＹをＬ１−Ｄを含む化合物と反応させることを含む。
【００３６】
本開示のいくつかの側面は、化合物Ｘ１：
【化２８】
2017525755.tif 000030
式中：
Ｌ２は、結合または自己崩壊型リンカーであり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；および
Ｒ１は、水素、未置換もしくは置換されたＣ１−３アルキル、または未置換もしくは置換されたヘテロシクリルである、
またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体を調製する方法を伴う。
【００３７】
前記方法は、化合物Ｗ１：Ｌ３−Ｌ２および化合物Ｉ：
【化２９】
2017525755.tif 000031
を反応させることを含む。
【００３８】
本開示のいくつかの側面は、化合物Ｙ１：
【化３０】
2017525755.tif 000032
式中：
Ｄは、薬物部分；
Ｌ１は、結合、自己崩壊型リンカー、または環化自己消去型リンカーであり；
Ｌ２は、結合または自己崩壊型リンカーであり；
ここで、Ｌ１が自己崩壊型リンカーまたは環化自己消去型リンカーである場合、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が自己崩壊型リンカーである場合、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；および
Ｒ１は、水素、未置換もしくは置換されたＣ１−３アルキル、または未置換もしくは置換されたヘテロシクリルである、
またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体を調製する方法を伴う。
【００３９】
前記方法は、クロロギ酸ｐ−ニトロフェニルの存在下、化合物Ｘ１：
【化３１】
2017525755.tif 000033
およびＬ１−Ｄを含む化合物を反応させることを含む。
【００４０】
いくつかの態様において、ビス（４／ｐ−ニトロフェニル）カーボネート、ホスゲン、トリホスゲン(triphosgene)／ビス（トリクロロメチルカーボネート）、クロロギ酸トリクロロメチル、Ｎ，Ｎ’−ジスクシンイミジルカーボネート、および１，１’−カルボニルジイミダゾールからなる群から選択される化合物は、化合物Ｙ１を調製する方法においてクロロギ酸ｐ−ニトロフェニルを置換する。
【００４１】
本開示のいくつかの側面は、化合物Ｚ：
【化３２】
2017525755.tif 000034
式中：
Ｄは、薬物部分であり；
Ｌ１は、結合、自己崩壊型リンカー、または環化自己消去型リンカーであり；
Ｌ２は、結合または自己崩壊型リンカーであり；
ここで、Ｌ１が自己崩壊型リンカーまたは環化自己消去型リンカーである場合、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が自己崩壊型リンカーである場合、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は、結合またはスペーサーであり；
Ａはアシル単位であり；および
Ｒ１は、水素、未置換もしくは置換されたＣ１−３アルキル、または未置換もしくは置換されたヘテロシクリルである、
またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体を調製する方法を伴う。
【００４２】
前記方法は、化合物Ｙ１：
【化３３】
2017525755.tif 000035
およびＡ−Ｌ４を含む化合物を反応させることを含む。
【００４３】
また提供されるのは、式：
【化３４】
2017525755.tif 000036
式中：
Ｌ２は、結合または自己崩壊型リンカーであり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合またはスペーサーであり；および
Ａはアシル単位であり；および
Ｒ１は、水素、未置換もしくは置換されたＣ１−３アルキル、または未置換もしくは置換されたヘテロシクリルである、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体である。
【００４４】
また提供されるのは、式：
【化３５】
2017525755.tif 000037
式中：
Ｄは、薬物部分であり；
Ｌ１は、結合、自己崩壊型リンカー、または環化自己消去型リンカーであり；
Ｌ２は、結合または自己崩壊型リンカーであり；
ここで、Ｌ１が自己崩壊型リンカーまたは環化自己消去型リンカーである場合、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が自己崩壊型リンカーである場合、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合またはスペーサーであり；および
Ａはアシル単位であり；および
Ｒ１は、水素、未置換もしくは置換されたＣ１−３アルキル、または未置換もしくは置換されたヘテロシクリルである、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体である。
【００４５】
また提供されるのは、式：
【化３６】
2017525755.tif 000038
式中：
Ｌ２は、結合または自己崩壊型リンカーであり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；および
Ｒ１は、水素、未置換もしくは置換されたＣ１−３アルキル、または未置換もしくは置換されたヘテロシクリルである、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体である。
【００４６】
また提供されるのは、式：
【化３７】
2017525755.tif 000039
式中：
Ｄは、薬物部分であり；
Ｌ１は、結合、自己崩壊型リンカー、または環化自己消去型リンカーであり；
Ｌ２は、結合または自己崩壊型リンカーであり；
ここで、Ｌ１が自己崩壊型リンカーまたは環化自己消去型リンカーである場合、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が自己崩壊型リンカーである場合、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；および
Ｒ１は、水素、未置換もしくは置換されたＣ１−３アルキル、または未置換もしくは置換されたヘテロシクリルである、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体である。
【００４７】
本開示はまた、式（ＩＩＩ）：
【化３８】
2017525755.tif 000040
；ＮＨ
式中、Ｔは、標的化部分である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体を提供する。
【００４８】
いくつかの態様において、提供されるのは、式（ＩＩＩａ）：
【化３９】
2017525755.tif 000041
式中、Ｔは、標的化部分であり、ｐは、１〜２０である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体である。いくつかの態様において、ｐは、１〜８である。いくつかの態様において、ｐは、１〜６である。いくつかの態様において、ｐは、１〜４である。いくつかの態様において、ｐは、２〜４である。いくつかの態様において、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０である。いくつかの態様において、ｐは、１、２、３、または４である。
【００４９】
本開示は、式（ＩＶ）：
【化４０】
2017525755.tif 000042
式中、Ｔは、標的化部分である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体を提供する。
【００５０】
いくつかの態様において、提供されるのは、式（ＩＶａ）：
【化４１】
2017525755.tif 000043
式中、Ｔは、標的化部分であり、ｐは、１〜２０である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体である。いくつかの態様において、ｐは、１〜８である。いくつかの態様において、ｐは、１〜６である。いくつかの態様において、ｐは、１〜４である。いくつかの態様において、ｐは、２〜４である。いくつかの態様において、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０である。いくつかの態様において、ｐは、１、２、３、または４である。
【００５１】
本開示は、式（Ｖ）：
【化４２】
2017525755.tif 000044
式中、Ｔは、標的化部分である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体を提供する。
【００５２】
いくつかの態様において、提供されるのは、式（Ｖａ）：
【化４３】
2017525755.tif 000045
式中、Ｔは、標的化部分であり、ｐは、１〜２０である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体である。いくつかの態様において、ｐは、１〜８である。いくつかの態様において、ｐは、１〜６である。いくつかの態様において、ｐは、１〜４である。いくつかの態様において、ｐは、２〜４である。いくつかの態様において、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０である。いくつかの態様において、ｐは、１、２、３、または４である。
【００５３】
本開示は、式（ＶＩ）：
【化４４】
2017525755.tif 000046
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物を提供する。
【００５４】
本開示は、式（ＶＩＩ）：
【化４５】
2017525755.tif 000047
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物を提供する。
【００５５】
本開示は、式（ＶＩＩＩ）：
【化４６】
2017525755.tif 000048
で表わされる化合物を提供する。
【００５６】
本開示は、式（ＩＸ）：
【化４７】
2017525755.tif 000049
式中、Ｒは、ＮＯ２またはＮＨ２である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体を提供する。
【００５７】
特定の態様において、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）または（ＩＸ）で表わされる化合物は、本明細書の詳細な説明に記載または例示された化合物種から選択される化合物である。
【００５８】
式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、もしくは（Ｖ）または（Ｉａ）、（ＩＩａ）、（ＩＩＩａ）、（ＩＶａ）、もしくは（Ｖａ）で表わされる化合物の特定の態様において、Ｔは抗体標的化分子である。いくつかの他の態様において、Ｔは、抗ＨＥＲ２抗体である。さらなる態様において、抗ＨＥＲ２抗体は、ヒト化またはモノクローナルまたはヒト化モノクローナル抗体である。いくつかの態様において、Ｔは、ヒト化抗ＨＥＲ２モノクローナル抗体のトラスツズマブである。いくつかの態様において、抗ＨＥＲ２モノクローナル抗体は、ペルツズマブである。いくつかの態様において、抗ＨＥＲ２モノクローナル抗体は、マルゲツキジマブである。
【００５９】
さらなる態様において、抗体の重鎖および／または軽鎖の１以上のアミノ酸残基が、システイン残基で置換されている（例として、親抗体において存在しない位置においてシステイン残基を含むように操作されている）。いくつかの態様において、抗体のＦｃ領域の１以上のアミノ酸残基は、システイン残基で置換されている。いくつかの態様において、抗体の１以上のアミノ酸残基は、ＥＵナンバリング（KabatにおけるＥＵ指標）を使用して、軽鎖の１４７位、１８８位、２００位、２０１位および／もしくは２０６位、ならびに／または重鎖の１５５位、１５７位、１６５位、１６９位、１９７位、１９９位、２０９位、２１１位および／もしくは４４２位にある。いくつかの態様において、操作されたシステイン残基を含有する抗体は、抗ＨＥＲ２抗体である。式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、もしくは（Ｖ）または（Ｉａ）、（ＩＩａ）、（ＩＩＩａ）、（ＩＶａ）、もしくは（Ｖａ）で表わされる化合物のいくつかの態様において、Ｄは、システイン（例として、操作された）残基を経由して、Ｔに連結される。
【００６０】
特定の態様において、Ｄは、アミノ含有薬物部分である。いくつかの態様において、Ｄは、アミノ基を介して、Ｌ１またはＸに結合されている。さらなる態様において、Ｄは、デュオカルマイシン、ドラスタチン、ツブリシン(tubulysin)、ドキソルビシン（ＤＯＸ）、パクリタキセル、もしくはマイトマイシンＣ（ＭＭＣ）、またはそのアミノ誘導体である。
【００６１】
さらなる側面において、本開示は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、もしくは（Ｖ）または（Ｉａ）、（ＩＩａ）、（ＩＩＩａ）、（ＩＶａ）、もしくは（Ｖａ）で表わされる化合物あるいはその薬学的に許容し得る塩の少なくとも１つを含む医薬組成物を提供する。本態様に従う医薬組成物は、薬学的に許容し得る賦形剤をさらに含み得る。本開示はまた、医薬としての使用のために、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、もしくは（Ｖ）または（Ｉａ）、（ＩＩａ）、（ＩＩＩａ）、（ＩＶａ）、もしくは（Ｖａ）で表わされる化合物あるいはその薬学的に許容し得る塩を提供する。
【００６２】
別の側面において、本開示は、細胞を殺傷する方法を提供し、細胞を殺傷するのに十分な量の、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、もしくは（Ｖ）または（Ｉａ）、（ＩＩａ）、（ＩＩＩａ）、（ＩＶａ）、もしくは（Ｖａ）で表わされる化合物を細胞に投与することを含む。いくつかの態様において、細胞は、がん細胞である。さらなる態様において、がん細胞は、乳がん細胞、胃がん細胞または卵巣がん細胞である。
【００６３】
別の側面において、本開示は、がんの処置が必要な個体においてがんを処置する方法を提供し、式（Ｉ）〜（Ｖ）もしくは（Ｉａ）〜（Ｖａ）で表わされる化合物またはその塩、溶媒和化合物もしくは立体異性体の有効量を前記個体に投与することを含む。本明細書に記載の方法を用いて処置され得るがんの例は、これらに限定されないが、乳癌、膀胱癌、すい臓癌、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、卵巣癌、子宮内膜癌、結腸癌、腎臓癌、頭頸部癌、胃癌、食道癌、前立腺癌、および精巣胚細胞性癌、子宮がん、ウィルムス腫瘍を含む。いくつかの態様において、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、もしくは（Ｖ）または（Ｉａ）、（ＩＩａ）、（ＩＩＩａ）、（ＩＶａ）、もしくは（Ｖａ）で表わされる化合物において、Ｔは、抗ＨＥＲ２抗体であり、Ｄは、アミノ含有薬物部分である。さらなる態様において、Ｔは、抗体のトラスツズマブであり、Ｄは、モノメチルドラスタチン１０である。いくつかの態様において、Ｔは、抗体のペルツズマブであり、Ｄは、モノメチルドラスタチン１０である。いくつかの態様において、Ｔは、抗体のマルゲツキジマブであり、Ｄは、モノメチルドラスタチン１０である。
【００６４】
別の側面において、本開示は、がんの処置における使用のための、式（Ｉ）：
【化４８】
2017525755.tif 000050
式中：
Ｄは、薬物部分であり；
Ｔは、標的化部分であり；
ここで、Ｘは、親水性自己崩壊型リンカーであり；
Ｌ１は、結合、自己崩壊型リンカー、または環化自己消去型リンカーであり；
Ｌ２は、結合または自己崩壊型リンカーであり；
ここで、Ｌ１が自己崩壊型リンカーまたは環化自己消去型リンカーである場合、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が自己崩壊型リンカーである場合、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合またはスペーサーであり；および
Ａはアシル単位である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体を提供する。
【００６５】
別の側面において、本開示は、がんの処置における使用のための、式（ＩＩ）：
【化４９】
2017525755.tif 000051
式中：
Ｄは、薬物部分であり；
Ｔは、標的化部分であり；
Ｒ１は、水素、未置換もしくは置換されたＣ１−３アルキル、または未置換もしくは置換されたヘテロシクリルであり；
Ｌ１は、結合、自己崩壊型リンカー、または環化自己消去型リンカーであり；
Ｌ２は、結合、自己崩壊型リンカーであり；
ここで、Ｌ１が自己崩壊型リンカーまたは環化自己消去型リンカーである場合、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が自己崩壊型リンカーである場合、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合またはスペーサーであり；および
Ａはアシル単位である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体を提供する。
【００６６】
別の側面において、本開示は、がんの処置における使用のための、式（ＩＩ）：
【化５０】
2017525755.tif 000052
式中：
Ｄは、薬物部分であり；
Ｔは、標的化部分であり；
Ｒ１は、水素、未置換もしくは置換されたＣ１−３アルキル、または未置換もしくは置換されたヘテロシクリルであり；
Ｌ１は、結合、自己崩壊型リンカー、または環化自己消去型リンカーであり；
Ｌ２は、結合、自己崩壊型リンカーであり；
ここで、Ｌ１が自己崩壊型リンカーまたは環化自己消去型リンカーである場合、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が自己崩壊型リンカーである場合、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合またはスペーサーであり；および
Ａはアシル単位である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体を提供する。
【００６７】
別の側面において、本開示は、がんの処置における使用のための、式（Ｉａ）：
【化５１】
2017525755.tif 000053
式中、Ｄ、Ｔ、Ｘ、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４およびＡは、式（Ｉ）について定義されるとおりであり、ｐは、１〜２０である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体を提供する。いくつかの態様において、ｐは、１〜８である。いくつかの態様において、ｐは、１〜６である。いくつかの態様において、ｐは、１〜４である。いくつかの態様において、ｐは、２〜４である。いくつかの態様において、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０である。いくつかの態様において、ｐは、１、２、３、または４である。
【００６８】
いくつかの態様において、がんの処置における使用のための、式（ＩＩａ）：
【化５２】
2017525755.tif 000054
式中、Ｄ、Ｔ、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４およびＡは、式（ＩＩ）について定義されるとおりであり、ｐは、１〜２０である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体が提供される。いくつかの態様において、ｐは、１〜８である。いくつかの態様において、ｐは、１〜６である。いくつかの態様において、ｐは、１〜４である。いくつかの態様において、ｐは、２〜４である。いくつかの態様において、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０である。いくつかの態様において、ｐは、１、２、３、または４である。
【００６９】
いくつかの側面において、本開示はまた、がんの処置における使用のための、式（ＩＩＩ）：
【化５３】
2017525755.tif 000055
式中、Ｔは、標的化部分である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体を提供する。
【００７０】
いくつかの態様において、提供されるのは、がんの処置における使用のための、式（ＩＩＩａ）：
【化５４】
2017525755.tif 000056
式中、Ｔは、標的化部分であり、ｐは、１〜２０である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体である。いくつかの態様において、ｐは、１〜８である。いくつかの態様において、ｐは、１〜６である。いくつかの態様において、ｐは、１〜４である。いくつかの態様において、ｐは、２〜４である。いくつかの態様において、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０である。いくつかの態様において、ｐは、１、２、３、または４である。
【００７１】
本開示は、がんの処置における使用のための、式（ＩＶ）：
【化５５】
2017525755.tif 000057
式中、Ｔは、標的化部分である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体を提供する。
【００７２】
いくつかの態様において、提供されるのは、がんの処置における使用のための、式（ＩＶａ）：
【化５６】
2017525755.tif 000058
式中、Ｔは、標的化部分であり、ｐは、１〜２０である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体である。いくつかの態様において、ｐは、１〜８である。いくつかの態様において、ｐは、１〜６である。いくつかの態様において、ｐは、１〜４である。いくつかの態様において、ｐは、２〜４である。いくつかの態様において、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０である。いくつかの態様において、ｐは、１、２、３、または４である。
【００７３】
本開示は、がんの処置における使用のための、式（Ｖ）：
【化５７】
2017525755.tif 000059
式中、Ｔは、標的化部分である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体を提供する。
【００７４】
いくつかの態様において、提供されるのは、がんの処置における使用のための、式（Ｖａ）：
【化５８】
2017525755.tif 000060
式中、Ｔは、標的化部分であり、ｐは、１〜２０である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体である。いくつかの態様において、ｐは、１〜８である。いくつかの態様において、ｐは、１〜６である。いくつかの態様において、ｐは、１〜４である。いくつかの態様において、ｐは、２〜４である。いくつかの態様において、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０である。いくつかの態様において、ｐは、１、２、３、または４である。
【００７５】
さらなる側面において、本開示は、がんの処置における使用のための、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、もしくは（Ｖ）または（Ｉａ）、（ＩＩａ）、（ＩＩＩａ）、（ＩＶａ）、もしくは（Ｖａ）で表わされる化合物またはその薬学的に許容し得る塩の少なくとも１つを含む医薬組成物を提供する。本態様に従う医薬組成物は、薬学的に許容し得る賦形剤をさらに含み得る。本開示はまた、医薬としての使用のための、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、もしくは（Ｖ）または（Ｉａ）、（ＩＩａ）、（ＩＩＩａ）、（ＩＶａ）、もしくは（Ｖａ）で表わされる化合物またはその薬学的に許容し得る塩を提供する。
【００７６】
別の側面において、本開示は、がんを処置するための医薬の製造における、式（Ｉ）：
【化５９】
2017525755.tif 000061
式中：
Ｄは、薬物部分であり；
Ｔは、標的化部分であり；
ここで、Ｘは、親水性自己崩壊型リンカーであり；
Ｌ１は、結合、自己崩壊型リンカー、または環化自己消去型リンカーであり；
Ｌ２は、結合または自己崩壊型リンカーであり；
ここで、Ｌ１が自己崩壊型リンカーまたは環化自己消去型リンカーである場合、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が自己崩壊型リンカーである場合、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合またはスペーサーであり；および
Ａはアシル単位である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体の使用を提供する。
【００７７】
さらなる側面において、本開示は、がんを処置するための医薬の製造における、式（ＩＩ）：
【化６０】
2017525755.tif 000062
式中：
Ｄは、薬物部分であり；
Ｔは、標的化部分であり；
Ｒ１は、水素、未置換もしくは置換されたＣ１−３アルキル、または未置換もしくは置換されたヘテロシクリルであり；
Ｌ１は、結合、自己崩壊型リンカー、または環化自己消去型リンカーであり；
Ｌ２は、結合、自己崩壊型リンカーであり；
ここで、Ｌ１が自己崩壊型リンカーまたは環化自己消去型リンカーである場合、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が自己崩壊型リンカーである場合、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合またはスペーサーであり；および
Ａはアシル単位である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体の使用を提供する。
【００７８】
別の側面において、本開示は、がんを処置するための医薬の製造における、式（ＩＩ）：
【化６１】
2017525755.tif 000063
式中：
Ｄは、薬物部分であり；
Ｔは、標的化部分であり；
Ｒ１は、水素、未置換もしくは置換されたＣ１−３アルキル、または未置換もしくは置換されたヘテロシクリルであり；
Ｌ１は、結合、自己崩壊型リンカー、または環化自己消去型リンカーであり；
Ｌ２は、結合、自己崩壊型リンカーであり；
ここで、Ｌ１が自己崩壊型リンカーまたは環化自己消去型リンカーである場合、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が自己崩壊型リンカーである場合、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合またはスペーサーであり；および
Ａはアシル単位である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体の使用を提供する。
【００７９】
別の側面において、本開示は、がんを処置するための医薬の製造における、式（Ｉａ）：
【化６２】
2017525755.tif 000064
式中、Ｄ、Ｔ、Ｘ、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４およびＡは、式（Ｉ）について定義されるとおりであり、ｐは、１〜２０である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体の使用を提供する。いくつかの態様において、ｐは、１〜８である。いくつかの態様において、ｐは、１〜６である。いくつかの態様において、ｐは、１〜４である。いくつかの態様において、ｐは、２〜４である。いくつかの態様において、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０である。いくつかの態様において、ｐは、１、２、３、または４である。
【００８０】
いくつかの態様において、がんを処置するための医薬の製造における、式（ＩＩａ）：
【化６３】
2017525755.tif 000065
式中、Ｄ、Ｔ、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４およびＡは、式（ＩＩ）について定義されるとおりであり、ｐは、１〜２０である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体の使用が提供される。いくつかの態様において、ｐは、１〜８である。いくつかの態様において、ｐは、１〜６である。いくつかの態様において、ｐは、１〜４である。いくつかの態様において、ｐは、２〜４である。いくつかの態様において、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０である。いくつかの態様において、ｐは、１、２、３、または４である。
【００８１】
いくつかの側面において、本開示はまた、がんを処置するための医薬の製造における、式（ＩＩＩ）：
【化６４】
2017525755.tif 000066
式中、Ｔは、標的化部分である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体の使用を提供する。
【００８２】
いくつかの態様において、提供されるのは、がんを処置するための医薬の製造における、式（ＩＩＩａ）：
【化６５】
2017525755.tif 000067
式中、Ｔは、標的化部分であり、ｐは、１〜２０である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体の使用である。いくつかの態様において、ｐは、１〜８である。いくつかの態様において、ｐは、１〜６である。いくつかの態様において、ｐは、１〜４である。いくつかの態様において、ｐは、２〜４である。いくつかの態様において、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０である。いくつかの態様において、ｐは、１、２、３、または４である。
【００８３】
本開示は、がんを処置するための医薬の製造における、式（ＩＶ）：
【化６６】
2017525755.tif 000068
式中、Ｔは、標的化部分である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体の使用を提供する。
【００８４】
いくつかの態様において、提供されるのは、がんを処置するための医薬の製造における、式（ＩＶａ）：
【化６７】
2017525755.tif 000069
式中、Ｔは、標的化部分であり、ｐは、１〜２０である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体の使用である。いくつかの態様において、ｐは、１〜８である。いくつかの態様において、ｐは、１〜６である。いくつかの態様において、ｐは、１〜４である。いくつかの態様において、ｐは、２〜４である。いくつかの態様において、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０である。いくつかの態様において、ｐは、１、２、３、または４である。
【００８５】
本開示は、がんを処置するための医薬の製造における、式（Ｖ）：
【化６８】
2017525755.tif 000070
式中、Ｔは、標的化部分である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体の使用を提供する。
【００８６】
いくつかの態様において、提供されるのは、がんを処置するための医薬の製造における、式（Ｖａ）：
【化６９】
2017525755.tif 000071
式中、Ｔは、標的化部分であり、ｐは、１〜２０である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体の使用である。いくつかの態様において、ｐは、１〜８である。いくつかの態様において、ｐは、１〜６である。いくつかの態様において、ｐは、１〜４である。いくつかの態様において、ｐは、２〜４である。いくつかの態様において、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０である。いくつかの態様において、ｐは、１、２、３、または４である。
【００８７】
いくつかの側面において、本開示は、がんを処置するための医薬の製造における、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、もしくは（Ｖ）または（Ｉａ）、（ＩＩａ）、（ＩＩＩａ）、（ＩＶａ）、もしくは（Ｖａ）で表わされる化合物またはその薬学的に許容し得る塩の少なくとも１つを含む医薬組成物の使用を提供する。本態様に従う医薬組成物は、薬学的に許容し得る賦形剤をさらに含み得る。本開示はまた、医薬としての使用のための、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、もしくは（Ｖ）または（Ｉａ）、（ＩＩａ）、（ＩＩＩａ）、（ＩＶａ）、もしくは（Ｖａ）で表わされる化合物またはその薬学的に許容し得る塩を提供する。
【００８８】
上で考察される態様のいずれかにおいて、抗ＨＥＲ２抗体は、重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含み、ここで、
（１）重鎖可変領域が、配列番号１６〜１８のアミノ酸配列の３つの重鎖ＣＤＲを含み、および／または、軽鎖可変領域が、配列番号１９〜２１のアミノ酸配列の３つの軽鎖ＣＤＲを含むか；
（２）重鎖可変領域が、配列番号２２〜２４のアミノ酸配列の３つの重鎖ＣＤＲを含み、および／または、軽鎖可変領域が、配列番号２５〜２７のアミノ酸配列の３つの軽鎖ＣＤＲを含むか；あるいは、
（３）重鎖可変領域が、配列番号２８〜３０のアミノ酸配列の３つの重鎖ＣＤＲを含み、および／または、軽鎖可変領域が、配列番号３１〜３３のアミノ酸配列の３つの軽鎖ＣＤＲを含む。
【００８９】
上で考察される態様のいずれかにおいて、抗ＨＥＲ２抗体が、重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含み、ここで、
（１）重鎖可変領域が、配列番号８のアミノ酸配列を含み、および／または、軽鎖可変領域が、配列番号７のアミノ酸配列を含み、
（２）重鎖可変領域が、配列番号１３のアミノ酸配列を含み、および／または、軽鎖可変領域が、配列番号１２のアミノ酸配列を含み、
（３）重鎖可変領域が、配列番号１５のアミノ酸配列を含み、および／または、軽鎖可変領域が、配列番号１４のアミノ酸配列を含む。
【００９０】
本開示のさらなる態様、特徴、および利点は、以下の詳細な説明から、および、本開示の実践を介して、明らかであろう。
【図面の簡単な説明】
【００９１】
【図１】図１は、Ｔａｐ−１８ＨのＮＭＲスペクトルを示す。
【図２】図２は、Ｔａｐ−１８Ｈｒ１のＮＭＲスペクトルを示す。
【図３】図３は、Ｔａｐ−１８Ｈｒ２のＮＭＲスペクトルを示す。
【図４】図４は、卵巣がんＳＫＯＶ−３に対する抗ＨＥＲ２−ＩｇＧ１／ＴＡＰ１８Ｈｒ１のin vivoでの抗腫瘍活性を示す。
【００９２】
【図５】図５は、乳がんＭＤＡ−ＭＢ−４５３に対する抗ＨＥＲ２−ＩｇＧ１／ＴＡＰ１８Ｈｒ１のin vivoでの抗腫瘍活性を示す。矢印は、ＡＤＣ処置の時間（１日目）を示す。
【図６】図６は、胃がんＮＣＩ−Ｎ８７に対する抗ＨＥＲ２−ＩｇＧ１／ＴＡＰ１８Ｈｒ１のin vivoでの抗腫瘍活性を示す。矢印は、ＡＤＣ処置の時間（１日目および２２日目）を示す。
【００９３】
【図７】図７は、胃がんＮＣＩ−Ｎ８７に対する部位特異的抱合体化抗ＨＥＲ２−Ｃｙｓバリアントのin vivoでの抗腫瘍活性を示す。矢印は、ＡＤＣ処置の時間（１日目）を示す。
【図８】図８は、乳がんＪＩＭＴ−１に対する、Ｔａｐ１８Ｈｒ１が従来法で(conventional)抱合体化された抗ＨＥＲ２バリアントおよび部位特異的抱合体化抗ＨＥＲ２−Ｃｙｓバリアントのin vivoでの抗腫瘍活性を示す。矢印は、ＡＤＣ処置の時間（１日目）を示す。
【発明を実施するための形態】
【００９４】
詳細な説明
本開示は、親水性自己崩壊型リンカーを有する化合物を提供し、これは、適切な条件下で切断可能であり、より優れた可溶性の化合物を提供するために親水性基を組み込んでもよい。親水性自己崩壊型リンカーは、しばしば疎水性である細胞障害性薬物に、薬物抱合体の可溶性の増加を提供し得る。薬物抱合体において親水性自己崩壊型リンカーを使用する他の利点は、薬物抱合体の安定性の増加および薬物抱合体の凝集の減少を含む。
【００９５】
本開示は、優れた血清安定性を有し得る薬物抱合体を提供する。例としては、水性緩衝液またはヒト血清中で迅速に加水分解されやすい不安定な炭酸結合部(linkage)を介して、薬物のヒドロキシル基がスペーサーに連結される薬物抱合体とは対照的に、本願の薬物抱合体は、ベンジルオキシカルボニル結合部を利用する。これらの抱合体は、同じ条件下で、比較的より安定であり、プロテアーゼ、例として、カテプシンＢを用いる処置の際に薬物を放出する断片化を選択的に起こす。血清安定性は、不活性薬物を患者の血清に投与することが望ましいときに、薬物抱合体について望ましい特性であり、リガンドによる標的において不活性な薬物濃度を有し、次いで、標的の近傍でのみ活性形態に変換される薬物抱合体を有する。
【００９６】
本開示は、凝集が減少し得る薬物抱合体を提供する。いくつかの酵素不安定なリンカーの関連する疎水性の増加は、薬物抱合体、特に強力に疎水性の薬物との凝集をもたらし得る。親水性基のリンカーへの組み込みにより、薬物抱合体の凝集が減少する。化学的に不安定なリンカーおよび切断可能でないリンカーを用いるＡＤＣと比較して、本明細書に記載のリンカーは、特定の酵素不安定な設計を介するより優れた血清安定性、および、異種がん細胞に対するバイスタンダー効果を介するより優れた効力を達成し得る。本開示の化合物は、薬物部分、選択された細胞集団を標的化することができる標的化部分、およびアシル単位を含有するリンカー、前記薬物部分と前記標的化部分との間に距離を提供する任意のスペーサー単位、適切な条件下で切断可能であり得るペプチドリンカー、親水性自己崩壊型リンカー、および任意の第二の自己崩壊型スペーサーまたは環化自己消去型リンカーを含む。前記特徴の各々を以下に考察する。
【００９７】
「アルキル」は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０個の炭素原子、好ましくは、１、２、３、４、５、または６個の炭素原子を有する一価の飽和脂肪族ヒドロカルビル基を指す。この用語は、例として、メチル（ＣＨ３−）、エチル（ＣＨ３ＣＨ２−）、ｎ−プロピル（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２−）、イソプロピル（（ＣＨ３）２ＣＨ−）、ｎ−ブチル（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）、イソブチル（（ＣＨ３）２ＣＨＣＨ２−）、ｓｅｃ−ブチル（（ＣＨ３）（ＣＨ３ＣＨ２）ＣＨ−）、ｔ−ブチル（（ＣＨ３）３Ｃ−）、ｎ−ペンチル（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）、ネオペンチル（（ＣＨ３）３ＣＣＨ２−）、およびｎ−ヘキシル（ＣＨ３（ＣＨ２）５−）などの直鎖および分枝状のヒドロカルビル基を含む。
【００９８】
「アルキレン」は、好ましくは１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０個、より好ましくは１、２、または３個の炭素原子を有する、直鎖または分枝状のいずれかである二価の脂肪族ヒドロカルビレン基を指す。この用語は、例として、メチレン（−ＣＨ２−）、エチレン（−ＣＨ２ＣＨ２−）、ｎ−プロピレン（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）、イソ−プロピレン（−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）−）、（−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＣＨ２−）、（−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−）、（−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＨ−）、（−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２−）などを含む。
【００９９】
「アルケニル」は、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０個の炭素原子、好ましくは２、３、または４個の炭素原子を有し、少なくとも１個、好ましくは１〜２個の不飽和二重結合部位を有する、直鎖または分枝状のヒドロカルビル基を指す。この用語は、例としては、bi−ビニル、アリル、およびブタ−３−エン−１−イルを含む。この用語内に含まれるのは、シスおよびトランス立体異性体またはこれらの異性体の混合物である。
【０１００】
「アルケニレン」は、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０個の炭素原子、好ましくは２、３、または４個の炭素原子を有し、少なくとも１個、好ましくは１〜２個の不飽和二重結合部位を有する、直鎖または分枝状のヒドロカルビレン基を指す。この用語は、例として、bi−ビニル、アリル、およびブタ−３−エン−１−イルを含む。この用語内に含まれるのは、シスおよびトランス立体異性体またはこれらの異性体の混合物である。
【０１０１】
「アルキニル」は、２、３、４、５、または６個の炭素原子、好ましくは２〜３個の炭素原子を有し、少なくとも１個、好ましくは１〜２個の不飽和三重結合部位を有する、直鎖または分岐状のヒドロカルビル基を指す。かかるアルキニル基の例としては、アセチレニル（−Ｃ≡ＣＨ）、およびプロパルギル（−ＣＨ２Ｃ≡ＣＨ）を含む。
【０１０２】
「アルキニレン」は、２、３、４、５、または６個の炭素原子、好ましくは２〜３個の炭素原子を有し、少なくとも１個、好ましくは１〜２個の不飽和三重結合を有する、直鎖または分枝状のヒドロカルビレン基を指す。かかるアルキニル基の例としては、アセチレニル（−Ｃ≡ＣＨ）、およびプロパルギル（−ＣＨ２Ｃ≡ＣＨ）を含む。
【０１０３】
「アミノ」は、−ＮＨ２基を指す。
「置換アミノ」は、−ＮＲＲ基を指し、式中、各Ｒが独立して、水素、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アルケニル、置換アルケニル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、ヘテロアリール、およびヘテロシクリルからなる群から選択され、ただし、少なくとも１つのＲは水素ではない。
【０１０４】
「アリール」は、単一の環（フェニル基に存在するものなど）または複数の縮合環を有する環系（かかる芳香族環系の例としては、ナフチル、アントリルおよびインダニルを含む）を有し、この縮合環は芳香族であってもなくてもよく、ただし、結合地点は芳香族環の原子を介する、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、または１８個の炭素原子の一価の芳香族炭素環式基を指す。この用語は、例として、フェニルおよびナフチルを含む。
【０１０５】
アリール置換基についての定義によって他に制約されない限り、かかるアリール基は、アシルオキシ、ヒドロキシ、チオール、アシル、アルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、置換アルキル、置換アルコキシ、置換アルケニル、置換アルキニル、置換シクロアルキル、置換シクロアルケニル、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アシルアミノ、アルカリル、アリール、アリールオキシ、アジド、カルボキシル、カルボキシルエステル、シアノ、ハロゲン、ニトロ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、アミノアシルオキシ、オキシアシルアミノ、チオアルキルオキシ、置換チオアルコキシ、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、スルホニルアミノ、−ＳＯ−アルキル、−ＳＯ−置換アルキル、−ＳＯ−アリール、−ＳＯ−ヘテロアリール、−ＳＯ２−アルキル、−ＳＯ２−置換アルキル、−ＳＯ２−アリール、−ＳＯ２−ヘテロアリールおよびトリハロメチルから選択される、１、２、３、４、もしくは５個の置換基、または１、２、もしくは３個の置換基で任意に置換され得る。
【０１０６】
「シクロアルキル」は、縮合、架橋、およびスピロ環系を含む、単一または複数の環状の環を有する、３、４、５、６、７、８、９、または１０個の炭素原子の環状アルキル基を指す。適切なシクロアルキル基の例としては、例えば、アダマンチル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロオクチルなどを含む。かかるシクロアルキル基は、例として、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロオクチルなどの単一の環構造、または、アダマンチルなどの複数の環構造などを含む。
【０１０７】
「ヘテロアリール」は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０個の炭素原子などの１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、または１５個の炭素原子、および、前記環内の酸素、窒素、および硫黄からなる群から選択される１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０個のヘテロ原子の芳香族基を指す。かかるヘテロアリール基は、単一の環（ピリジニル、イミダゾリル、またはフリルなどの）または１つの環系中の複数の縮合環（例としては、インドリジニル(indolizinyl)、キノリニル、ベンゾフラン、ベンズイミダゾリルまたはベンゾチエニルなどの基におけるような）を有し得、ここで、前記環系内の少なくとも１つの環は芳香族環であり、前記環系内の少なくとも１つの環は芳香族環であり、ただし、結合の地点は、芳香族環の原子を介する。特定の態様において、ヘテロアリール基の窒素および／または硫黄環原子は、任意に酸化され、Ｎ−オキシド（Ｎ→Ｏ）、スルフィニル、またはスルホニル部分を提供する。この用語は、例として、ピリジニル、ピロリル、インドリル、チオフェニル、およびフラニルを含む。
【０１０８】
ヘテロアリール置換基についての定義によって他に制約されない限り、かかるヘテロアリール基は、アシルオキシ、ヒドロキシ、チオール、アシル、アルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、置換アルキル、置換アルコキシ、置換アルケニル、置換アルキニル、置換シクロアルキル、置換シクロアルケニル、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アシルアミノ、アルカリル、アリール、アリールオキシ、アジド、カルボキシル、カルボキシルエステル、シアノ、ハロゲン、ニトロ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、アミノアシルオキシ、オキシアシルアミノ、チオアルキルオキシ、置換チオアルコキシ、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、スルホニルアミノ、−ＳＯ−アルキル、−ＳＯ−置換アルキル、−ＳＯ−アリール、−ＳＯ−ヘテロアリール、−ＳＯ２−アルキル、−ＳＯ２−置換アルキル、−ＳＯ２−アリール、−ＳＯ２−ヘテロアリールおよびトリハロメチルから選択される、１、２、３、４、もしくは５個の置換基、または１、２、もしくは３個の置換基で任意に置換され得る。
【０１０９】
ヘテロアリールの例としては、これらに限定されないが、ピロール、イミダゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、インドリジン、イソインドール、プリン、イソキノリン、キノリン、フタラジン、ナフチルピリジン、キノキサリン、キナゾリン、シンノリン、プテリジン、カルバゾール、カルボリン、フェナントリジン、アクリジン、フェナントロリン、イソチアゾール、フェナジン、イソキサゾール、フェノキサジン、フェノチアジン、ピぺリジン、ピペラジン、フタルイミド、４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［ｂ］チオフェン、チアゾール、チオフェン、ベンゾ［ｂ］チオフェンなどを含む。
【０１１０】
「複素環(heterocycle)」、「複素環の(heterocyclic)」、「ヘテロシクロアルキル」または「ヘテロシクリル」は、縮合、架橋、またはスピロ環系を含む単一環または複数の縮合環を有し、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０個のヘテロ原子を含む３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０個の環原子を有する、飽和または部分的に不飽和の基を指す。これらの環原子は、炭素、窒素、硫黄、または酸素からなる群から選択され、ここで、縮合環系において、環の１つ以上が、シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであってもよく、ただし、結合地点は、非芳香族環を介する。特定の態様において、複素環基の窒素および／または硫黄原子は、任意に酸化され、Ｎ−オキシド、−Ｓ（Ｏ）−、または−ＳＯ２−部分を提供する。
【０１１１】
複素環の例としては、これらに限定されないが、アゼチジン、ジヒドロインドール、インダゾール、キノリジン、イミダゾリジン、イミダゾリン、ピぺリジン、ピペラジン、インドリン、１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン、チアゾリジン、モルフォリニル、チオモルフォリニル（チアモルフォリニルとも称される）、１，１−ジオキソチオモルフォリニル、ピペリジニル、ピロリジン、テトラヒドロフラニルなどを含む。
【０１１２】
ヘテロアリールまたはヘテロシクリル基が「置換(substituted)」される場合、ヘテロアリールまたは複素環置換基についての定義によって他に制約されない限り、かかるヘテロアリールまたは複素環基は、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシ、オキソ、チオケト、カルボキシル、カルボキシルエステル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、スルホニルアミノ、−ＳＯ−アルキル、−ＳＯ−置換アルキル、−ＳＯ−アリール、−ＳＯ−ヘテロアリール、−ＳＯ−ヘテロシクリル、−ＳＯ２−アルキル、−ＳＯ２−置換アルキル、−ＳＯ２−アリール、−ＳＯ２−ヘテロアリール、および−ＳＯ２−ヘテロシクリルから選択される、１、２、３、４、もしくは５個、または、１、２、もしくは３個の置換基で置換され得る。
【０１１３】
「ポリアルキレングリコール」は、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、およびポリブチレングリコールなどの、直鎖または分枝状のポリアルキレングリコールポリマーを指す。ポリアルキレングリコールサブユニットは、単一のポリアルキレングリコール単位である。例としては、ポリエチレングリコールサブユニットの例は、鎖の末端地点において水素でキャップされた、エチレングリコール、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、またはプロピレングリコール、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−であろう。ポリ（アルキレングリコール）の他の例は、これらに限定されないが、ＰＥＧ、メトキシポリ（エチレングリコール）（ｍＰＥＧ）などのＰＥＧ誘導体、ポリ（エチレンオキシド）、ＰＰＧ、ポリ（テトラメチレングリコール）、ポリ（エチレンオキシド／プロピレンオキシド共重合体）、またはそれらの共重合体および組み合わせを含む。
【０１１４】
「ポリアミン」は、ポリアルキレンイミンにおけるように骨格に組み込まれるか、または、ポリビニルアミンにおけるようにペンダント基で、モノマー単位中にアミン官能性を有するポリマーを指す。
本明細書の開示に加えて、用語「置換（された）」は、特定の基またはラジカルを修飾するために使用される場合、前記特定の基またはラジカルの１以上の水素原子が、以下に定義される同じまたは異なる置換基で、各々お互いに独立して交換されていることもまた意味し得る。
【０１１５】
本明細書の個々の用語に関して開示される基に加えて、前記特定の基またはラジカル中の飽和炭素原子上の１以上の水素を置換するための置換基（単一の炭素上の任意の２個の水素が、＝Ｏ、＝ＮＲ７０、＝Ｎ−ＯＲ７０、＝Ｎ２または＝Ｓで交換され得る）は、他に特定されない限り、−Ｒ６０、ハロ、＝Ｏ、−ＯＲ７０、−ＳＲ７０、−ＮＲ８０Ｒ８０、トリハロメチル、−ＣＮ、−ＯＣＮ、−ＳＣＮ、−ＮＯ、−ＮＯ２、＝Ｎ２、−Ｎ３、−Ｓ（Ｏ）Ｒ７０、−ＳＯ２Ｒ７０、−ＳＯ２Ｏ−Ｍ＋、−ＳＯ２ＯＲ７０、−ＯＳＯ２Ｒ７０、−ＯＳＯ２Ｏ−Ｍ＋、−ＯＳＯ２ＯＲ７０、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）２（Ｍ＋）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）Ｏ−Ｍ＋、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、−Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、−Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｍ＋、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ７０、−Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、−Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ７０、−ＯＣ（Ｓ）Ｒ７０、−ＯＣ（Ｏ）ＯＭ＋、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲ７０、−ＯＣ（Ｓ）ＯＲ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、−ＮＲ７０ＣＯ２−Ｍ＋、−ＮＲ７０ＣＯ２Ｒ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、−ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０および−ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０であり、式中、Ｒ６０は、任意に置換されたアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールアルキルからなる群から選択され、各Ｒ７０は、独立して、水素またはＲ６０であり；各Ｒ８０は、独立して、Ｒ７０であるか、または２つのＲ８０であり、前記２つのＲ８０は結合される窒素原子と一緒になって、Ｏ、ＮおよびＳからなる群より選択される同じまたは異なる１〜４個のさらなるヘテロ原子を任意に含んでいてもよい３、４、５、６、または７員のヘテロシクロアルキルを形成し、前記Ｎは、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１−４アルキル、−ＣＯ２Ｃ１−４アルキル、または−ＳＯ２Ｃ１−４アルキル置換を有していてもよく；各Ｍ＋は、正味の正の１の電荷を有する対イオンである。
【０１１６】
各Ｍ＋は、独立して、例としては、Ｋ＋、Ｎａ＋、Ｌｉ＋などのアルカリイオン；＋Ｎ（Ｒ６０）４などのアンモニウムイオン；または［Ｃａ２＋］０．５、［Ｍｇ２＋］０．５、もしくは［Ｂａ２＋］０．５などのアルカリ土類イオンであり得る（下付きの０．５は、かかる二価のアルカリ土類イオンについての対イオンの１つが、本態様の化合物のイオン化形態であり得、もう一方が、塩素イオンなどの典型的な対イオンであり得ること、あるいは、本明細書に開示される２つのイオン化化合物は、かかる二価のアルカリ土類イオンについて対イオンとして役立ち得、または、本態様の二重にイオン化された化合物は、かかる二価のアルカリ土類イオンについての対イオンとして役立ち得る）。
【０１１７】
本明細書の開示に加えて、「置換された」アルケン、アルキン、アリールおよびヘテロアリール基中の不飽和炭素原子上の水素についての置換基は、他に特定されない限り、−Ｒ６０、ハロ、−Ｏ−Ｍ＋、−ＯＲ７０、−ＳＲ７０、−Ｓ−Ｍ＋、−ＮＲ８０Ｒ８０、トリハロメチル、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＣＮ、−ＳＣＮ、−ＮＯ、−ＮＯ２、−Ｎ３、−Ｓ（Ｏ）Ｒ７０、−ＳＯ２Ｒ７０、−ＳＯ３−Ｍ＋、−ＳＯ３Ｒ７０、−ＯＳＯ２Ｒ７０、−ＯＳＯ３−Ｍ＋、−ＯＳＯ３Ｒ７０、−ＰＯ３２（Ｍ＋）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）Ｏ−Ｍ＋、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、−Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、−Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０、−ＣＯ２−Ｍ＋、−ＣＯ２Ｒ７０、−Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、−Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ７０、−ＯＣ（Ｓ）Ｒ７０、−ＯＣＯ２−Ｍ＋、−ＯＣＯ２Ｒ７０、−ＯＣ（Ｓ）ＯＲ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、−ＮＲ７０ＣＯ２−Ｍ＋、−ＮＲ７０ＣＯ２Ｒ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、−ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０および−ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０であり、式中、Ｒ６０、Ｒ７０、Ｒ８０およびＭ＋は、以前に定義されるとおりであり、ただし、置換されたアルケンまたはアルキンの場合、置換基は、−Ｏ−Ｍ＋、−ＯＲ７０、−ＳＲ７０または−Ｓ−Ｍ＋ではない。
【０１１８】
本明細書の個々の用語に関して開示される置換基に加えて、「置換された」ヘテロシクロアルキルおよびシクロアルキル基中の窒素原子上の水素についての置換基は、他に特定されない限り、−Ｒ６０、−ＯＭ＋、−ＯＲ７０、−ＳＲ７０、−ＳＭ＋、−ＮＲ８０Ｒ８０、トリハロメチル、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＮＯ、−ＮＯ２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ７０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ７０、−Ｓ（Ｏ）２ＯＭ＋、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲ７０、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ７０、−ＯＳ（Ｏ）２ＯＭ＋、−ＯＳ（Ｏ）２ＯＲ７０、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ）２（Ｍ＋）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）ＯＭ＋、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）（ＯＲ７０）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、−Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、−Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ７０、−Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、−Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ７０、−ＯＣ（Ｓ）Ｒ７０、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲ７０、−ＯＣ（Ｓ）ＯＲ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）ＯＲ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、−ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０および−ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０であり、式中、Ｒ６０、Ｒ７０、Ｒ８０およびＭ＋は、上に定義される通りである。
【０１１９】
本明細書の開示に加えて、特定の態様において、置換されている基は、１、２、３、もしくは４個の置換基、１、２、もしくは３個の置換基、１もしくは２個の置換基、または１個の置換基を有する。上に定義された全ての置換基において、置換基をさらなる置換基を用いて置換基自体を定義することによって到達するポリマー（例としては、置換アリール基などによってさらに置換されている、置換アリール基を用いてそれ自体置換された置換基としての置換アリール基を有する置換アリール）は、本明細書での包含について意図されないことが理解される。かかる場合、かかる置換の最大数は、３である。例としては、本明細書で特に検討される置換アリール基の連続置換は、置換アリール−（置換アリール）−置換アリールに限定される。
【０１２０】
他に示されない限り、本明細書に明示的に定義されていない置換基の命名法は、結合地点に向かって隣接する官能性が伴う、官能性の末端部分を名付けることによって到達される。例としては、置換基「アリールアルキルオキシカルボニル」は、（アリール）−（アルキル）−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−基を指す。
【０１２１】
１以上の置換基を含有する本明細書に開示された基のいずれかに関して、かかる基は、立体的に非実際的および／または合成が実行可能でない、いずれの置換または置換パターンも含まないことが、もちろん理解される。さらに、本主題の化合物は、これらの化合物の置換から生じる全ての立体化学異性体を含む。用語「薬学的に許容し得る塩」は、哺乳動物などの患者への投与に許容し得る塩（所与の投薬レジメンについて許容し得る哺乳動物安全性を有する対イオンを有する塩）を意味する。かかる塩は、薬学的に許容し得る無機または有機の塩基から、および、薬学的に許容し得る無機または有機の酸から誘導され得る。
【０１２２】
「薬学的に許容し得る塩」は、化合物の薬学的に許容し得る塩を指し、この塩は、当該分野で周知の種々の有機および無機の対イオンから誘導され、例として、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウム、テトラアルキルアンモニウムなど；および分子が塩基性官能性を含有する場合、塩酸塩、臭化水素酸塩、ギ酸塩、酒石酸塩、べシル酸塩、メシル酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、シュウ酸塩などのような有機または無機酸の塩を含む。
【０１２３】
基の構造図中の波線は、親構造への基の結合地点を示す。
用語「その（それらの）塩」は、酸のプロトンが、金属カチオンまたは無機カチオンなどのカチオンによって交換されるときに形成される化合物を意味する。適用可能な場合、塩は、薬学的に許容し得る塩であるが、これは、患者への投与のために意図されていない中間化合物の塩について必要とされていない。例としては、本発明の化合物の塩は、化合物が無機または有機酸によってプロトン化されて、塩のアニオン成分として抱合体ベースの無機または有機酸とともにカチオンを形成するものを含む。
【０１２４】
「溶媒和化合物」は、溶媒分子と溶質の分子またはイオンとの組み合わせによって形成された複合体を指す。溶媒は、有機化合物、無機化合物、または両方の混合物であり得る。溶媒のいくつかの例は、これらに限定されないが、メタノール、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、ジメチルスルホキシド、および水を含む。溶媒が水である場合、形成される溶媒和化合物は、水和物である。
【０１２５】
「立体異性体(stereoisomer)」および「立体異性体(stereoisomers)」は、同じ原子結合性を有するが、異なる空間中の原子配置を有する化合物を指す。立体異性体は、シス−トランス異性体、ＥおよびＺ異性体、エナンチオマー、およびジアステレオマーを含む。
【０１２６】
「互変異性体」は、エノール−ケトおよびイミン−エナミン互変異性体などの、原子の電子結合においておよび／またはプロトンの位置においてのみ異なる分子の代替形態、あるいは、ピラゾール類、イミダゾール類、ベンズイミダゾール類、トリアゾール類、およびテトラゾール類などの、−Ｎ＝Ｃ（Ｈ）−ＮＨ−環原子配置を含有するヘテロアリール基の互変異性体形態を指す。当業者は、他の互変異性体配置が可能であることを認識するだろう。用語「その（それらの）塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体」は、主題の化合物の立体異性体の薬学的に許容し得る塩の溶媒和化合物などの、塩、溶媒和化合物および立体異性体の全ての並べ替え(permutations)を含むことが意図されることが理解されるだろう。
【０１２７】
本明細書で使用される場合、薬物、化合物、抱合体、薬物抱合体、抗体薬物抱合体、または医薬組成物の「有効投与量(effective dosage)」または「有効量(effective amount)」は、有益なまたは所望の結果をもたらすのに十分な量である。予防的使用のために、有益または所望の結果は、疾患の生化学的、組織学的および／または行動学的徴候を含む疾患、その合併症、および疾患の発生の間に示す病理学的中間表現型の、危険性を除去もしくは低減させること、重篤度を減少させること、または開始を遅らせることなどの結果を含む。治療的使用のために、有益または所望の結果は、疾患から生じる１以上の徴候を減少させること、疾患に罹患する者の生活の質を増加させること、疾患を処置するために必要とされる他の薬物療法の用量を減少させること、標的化を介するなどの別の薬物療法の効果を強化すること、疾患の進行を遅らせること、および／または生存を延長させることなどの臨床的結果を含む。
【０１２８】
がんまたは腫瘍の場合、薬物の有効量は、がん細胞の数を低減させる際；腫瘍サイズを低減させる際；末梢器官へのがん細胞浸潤を阻害する（すなわち、ある程度遅くし、好ましくは停止させる）際；腫瘍転移を阻害する（すなわち、ある程度遅くし、好ましくは停止させる）際；腫瘍増殖をある程度阻害する際；ならびに／または障害に関連する徴候の１以上をある程度軽減する際に効果を有し得る。有効投与量は、１回以上の投与で投与され得る。
【０１２９】
本開示の目的のために、有効投与量の薬物、化合物、または医薬組成物は、直接または間接のいずれかで予防または治療処置を達成するのに十分な量である。臨床の文脈において理解されるとおり、薬物、化合物、または医薬組成物の有効投与量は、別の薬物、化合物、または医薬組成物と組み合わせて達成されてもよいし達成されなくてもよい。したがって、「有効量」は、１以上の治療剤を投与する文脈で考慮され得、単回剤は、１以上の他の剤と組み合わせて所望の結果が達成され得るかまたは達成される場合、有効量で与えられると考慮され得る。
【０１３０】
本明細書で使用される場合、「投与」は、状態を処置するために治療剤を投薬するための一般的な用語を指す。いくつかの態様において、本開示の医薬組成物は、錠剤、カプセル剤、または丸剤のような経口投与可能な化合物または混合物とするのに、または、非経口、静脈内、皮膚内、筋肉内、腹膜内、経鼻、舌下、気管内、吸入、眼内、膣内、直腸、皮下、または経皮投与に適した化合物とするのに、適した薬学的に許容し得る担体または賦形剤を含有する。
【０１３１】
種々の投与経路が利用可能である。選択される特定の様式は、選択される特定の剤、処置される特定の状態、治療効力に要求される投与量にもちろん依存するだろう。いくつかの投与様式は、以下に考察される。
【０１３２】
本開示の化合物または医薬組成物は、当業者に知られている任意の手段によって達成され得る。投与経路は、これらに限定されないが、経口、非経口、静脈内、筋肉内、腹膜内、経鼻、舌下、気管内、吸入、皮下、眼内、膣内、および直腸を含む。全身経路は、経口および非経口を含む。
【０１３３】
経口投与のために、化合物は、活性化合物を当該分野で周知の薬学的に許容し得る担体と組み合わせることによって容易に製剤化することができる。かかる担体は、本開示の化合物を、処置される対象による経口摂取用の、錠剤、丸剤、糖衣錠、カプセル剤、液剤、ゲル、シロップ、スラリー、懸濁剤などとして製剤化することを可能にする。任意には、経口製剤はまた、内部酸性条件を中和するための生理食塩水または緩衝液中に製剤化されてもよいし、担体なしで投与されてもよい。
【０１３４】
化合物を全身送達することが望ましい場合、化合物は、例として、ボーラス注射または持続注入による、注射による非経口投与のために製剤化されてもよい。注射のための製剤は、例として、保存剤が添加されているアンプルでまたは複数用量容器での、単位投与形態で提示され得る。組成物は、油状または水性ビヒクル中の懸濁剤、溶液またはエマルジョンなどの形態をとり得、懸濁剤、安定化剤および／または分散剤などの製剤化剤(formulatory agents)を含有し得る。
【０１３５】
非経口投与のための医薬製剤は、水溶性形態で活性化合物の水溶液を含む。さらに、活性化合物の懸濁剤は、適切な油状注射懸濁剤として調製され得る。適切な親水性溶媒またはビヒクルは、ゴマ油などの脂肪油、またはオレイン酸エチルもしくはトリグリセリドなどの合成脂肪酸エステル、またはリポソームを含む。水性注射懸濁剤は、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトールまたはデキストランなどの懸濁剤の粘性を増加させる物質を含有し得る。任意には、懸濁剤は、適切な安定化剤または高度に濃縮された溶液の調製を可能にする化合物の溶解度を増加させる適切な剤を含有し得る。あるいは、活性化合物は、使用の前に、適切なビヒクル、例としてパイロジェンフリー滅菌水との構成のための粉末形態で存在し得る。
【０１３６】
化合物はまた、例として、カカオバターまたは他のグリセリドなどの従来の坐剤の基剤を含有する、坐剤または保持浣腸剤(retention enemas)などの直腸または膣用組成物で製剤化され得る。
本明細書で使用される場合、「と組み合わせて(in conjunction with)」は、別の処置様式に加えた、１つの処置様式の投与を指す。例として、「と組み合わせて」は、個体へのもう一方の処置様式の投与前、投与間、または投与後の１つの処置様式の投与を指す。
【０１３７】
本明細書で使用される場合、「処置」または「処置する」は、臨床結果を好ましくは含む、有益または所望の結果を得るためのアプローチである。本開示の目的のために、有益または所望の臨床結果は、これらに限定されないが、以下の１以上を含む：がん性細胞の増殖を低減すること（または破壊すること）、疾患から生じる徴候を減少させること、疾患に罹患する者の生活の質を増加させること、疾患を処置するのに必要な他の薬物療法の用量を減少させること、疾患の進行を遅延させること、および／または個体の生存を延長させること。
【０１３８】
本明細書で使用される場合、「疾患の発生を遅延させること」は、疾患（がんなど）発生を延期させ(defer)、妨げ、遅らせ、遅延させ、安定化し、および／または延期する(postpone)ことを意味する。この遅延は、処置される疾患および／または個体の病歴に依存して、種々の長さの時間であり得る。当業者に明らかなとおり、十分なまたは顕著な遅延は、実際に、個体が疾患を発生しないという点で、予防を包含し得る。例として、転移の発生などの後期がんは、遅延され得る。
【０１３９】
「個体」または「対象」は、哺乳動物、より好ましくはヒトである。哺乳動物はまた、これらに限定されないが、家畜、スポーツ用動物、ペット（ネコ、イヌ、ウマなど）、霊長類、マウスおよびラットを含む。「処置が必要な個体におけるがんの処置」は、がんを有するとして同定されている個体、すなわち、がんを有するとして医者に診断されている（例としては、当該分野で周知の方法を使用して）個体である。いくつかの態様において、処置が必要な個体は、がんを有するかまたはがんを発生していることが疑われる個体である。がんを有するかまたはがんを発生していることが疑われる個体の例は、これらに限定されないが、がんまたはがんの発生と関連する変異を有するとして同定された対象、がんの家族病歴を有する対象、およびがんを以前に治癒していたかまたはがんを治癒した対象（寛解状態のがん患者を含む）を含む。
【０１４０】
本明細書で使用される場合、用語「特異的に認識する」または「特異的に結合する」は、標的と抗体（または分子または部分）との間の誘因または結合などの測定可能なおよび再現可能な相互作用を指し、これは、生物学的分子を含む異種分子集団の存在下での標的の存在を決定するものである。例としては、エピトープに特異的にまたは優先的に結合する抗体は、標的の他のエピトープまたは非標的のエピトープに結合するよりも大きい親和性、結合活性を有するエピトープと、より容易におよび／またはより長い期間結合する抗体である。例としては、第一の標的に特異的または優先的に結合する抗体（または部分またはエピトープ）は、第二の標的に特異的にまたは優先的に結合してもよいし、しなくてもよいことがまた理解される。
【０１４１】
したがって、「特異的結合」または「優先的結合」は、（これは排他的な結合を含んでもよいが）必ずしも排他的な結合を必要としない。標的に特異的に結合する抗体は、少なくとも約１０３Ｍ−１または１０４Ｍ−１、ときどき１０５Ｍ−１または１０６Ｍ−１、他の場合において、約１０６Ｍ−１または１０７Ｍ−１、約１０８Ｍ−１〜１０９Ｍ−１、または約１０１０Ｍ−１〜１０１１Ｍ−１またはこれ以上の会合定数を有し得る。種々の免疫アッセイフォーマットを使用して、特定のタンパク質と特異的に免疫反応性の抗体を選択することができる。例として、固相ELISA免疫アッセイを慣用的に使用して、タンパク質と特異的に免疫反応性のモノクローナル抗体を選択する。例として、特異的免疫反応性を決定するために使用され得る免疫アッセイフォーマットおよび条件の説明のために、Harlow and Lane (1988) Antibodies, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Publications, New Yorkを参照のこと。
【０１４２】
本明細書で使用される場合、用語「がん」、「腫瘍」、「がん性」、および「悪性」は、未制御の細胞増殖によって典型的に特徴づけられる哺乳動物における生理学的状態を指すかまたはこれを説明する。がんの例は、これらに限定されないが、腺癌、リンパ腫、芽細胞腫、メラノーマ、肉腫を含む癌を含む。かかるがんのより詳細な例は、扁平上皮がん、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、肺腺癌、肺扁平上皮癌、胃腸がん、ホジキンリンパ腫および非ホジキンリンパ腫、膵臓がん、神経膠芽腫、子宮頸がん、神経膠腫、卵巣がん、肝癌および肝細胞腫などの肝臓がん、膀胱がん、乳がん、結腸がん、結腸直腸がん、子宮内膜癌または子宮癌、唾液腺癌、腎細胞癌およびウィルムス腫瘍などの腎臓がん、基底細胞癌、メラノーマ、中皮腫、前立腺がん、甲状腺がん、精巣がん、食道がん、胆嚢がん、および種々の頭頸部がんを含む。
【０１４３】
本明細書で使用される場合および添付の特許請求の範囲において、単数形態「１つの(a)」、「１つの(an)」、および「その(the)」は、文脈がその他を明確に示さない限り、複数の参照を含む。例として、「抗体」への参照は、モル量などの１〜多数の抗体を指し、当業者に公知のその等価物を含むなどである。
【０１４４】
本明細書の値またはパラメーターについての「約」への参照は、その値またはパラメーター自体に向けられた態様を含む（およびこれを説明する）。例としては、「約Ｘ」を参照する説明は、「Ｘ」の説明を含む。
本明細書に記載される開示の側面およびバリエーションは、側面およびバリエーション「からなる(consisting of)」および／または「から本質的になる(consisting essentially of)」を含むことが理解される。
【０１４５】
他に定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術および科学用語は、本開示が属する分野の当業者によって一般的に理解される意味と同じ意味を有する。本明細書に記載されるものと類似または等価の任意の方法および材料はまた、本開示の実践および試験において使用されてもよいが、好ましい方法および材料がここで説明される。本明細書で述べられた全ての刊行物は、刊行物が関連して引用される方法および／または材料を開示および説明するために参照して本明細書に組み込まれる。
【０１４６】
他に注意される場合を除き、本態様の方法および技術は、当該分野で周知の従来の方法にしたがって、ならびに、本明細書全体に引用および考察される種々の一般的およびより具体的な参考文献において記載されるように、一般的に実施される。例として、Loudon, Organic Chemistry, 4th edition, New York: Oxford University Press, 2002, pp. 360-361, 1084-1085; Smith and March, March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, 5th edition, Wiley-Interscience, 2001を参照のこと。主題の化合物を命名するのに本明細書で使用される命名法は、本明細書の例において例示される。この命名法は、市販のAutoNomソフトウェア(MDL、サンリアンドロ、カリフォルニア)を使用して一般的に導き出されている。
【０１４７】
別々の態様の文脈において明確性のために記載される本開示の特定の特徴はまた、単一の態様において組み合わせて提供されてもよいことが理解される。逆に、単一の態様の文脈において簡潔性のために記載される本開示の種々の特徴はまた、別々にまたは任意の適切なサブコンビネーションで提供されてもよい。変数によって示される化学基に関係する態様の全ての組み合わせは、本開示によって具体的に包含され、ならびに、かかる組み合わせが安定な化合物である化合物（すなわち、単離され、特徴づけられ、および生物学的活性について試験することができる化合物）を包含する程度に、各々および全ての組み合わせが個々におよび明確に開示されているかのように、本明細書に開示される。さらに、かかる変数を記載する態様において列挙される化学基の全てのサブコンビネーションはまた、本開示によって具体的に包含され、ならびに、各々および全てのかかるサブコンビネーションが本明細書に個々におよび明示的に開示されているかのように、本明細書に開示される。
【０１４８】
本開示は、式（Ｉ）：
【化７０】
2017525755.tif 000072
式中：
Ｄは、薬物部分であり；
Ｔは、標的化部分であり；
ここで、Ｘは、親水性自己崩壊型リンカーであり；
Ｌ１は、結合、自己崩壊型リンカー、または環化自己消去型リンカーであり；
Ｌ２は、結合または自己崩壊型リンカーであり；
ここで、Ｌ１が自己崩壊型リンカーまたは環化自己消去型リンカーである場合、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が自己崩壊型リンカーである場合、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合またはスペーサーであり；および
Ａはアシル単位である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体を提供する。
【０１４９】
本開示はまた、式（ＩＩ）：
【化７１】
2017525755.tif 000073
式中：
Ｄは、薬物部分であり；
Ｔは、標的化部分であり；
Ｒ１は、水素、未置換もしくは置換されたＣ１−３アルキル、または未置換もしくは置換されたヘテロシクリルであり；
Ｌ１は、結合、自己崩壊型リンカー、または環化自己消去型リンカーであり；
Ｌ２は、結合、自己崩壊型リンカーであり；
ここで、Ｌ１が自己崩壊型リンカーまたは環化自己消去型リンカーである場合、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が自己崩壊型リンカーである場合、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合またはスペーサーであり；および
Ａはアシル単位である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体を提供する。
【０１５０】
いくつかの態様において、標的化部分は、薬物部分へ連結するための１以上の付着部位を有する。例としては、標的化部分Ｔは、リンカー−薬物部分（例としては、Ａ−Ｌ４−Ｌ３−Ｌ２−Ｘ−Ｌ１−Ｄ）への連結のための複数の部位を有し得る。したがって、また提供されるのは、式（Ｉａ）：
【化７２】
2017525755.tif 000074
式中、Ｘ、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４およびＡは、式（Ｉ）について定義されるとおりであり、およびｐは、１〜２０である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体である。いくつかの態様において、ｐは、１〜８である。いくつかの態様において、ｐは、１〜６である。いくつかの態様において、ｐは、１〜４である。いくつかの態様において、ｐは、２〜４である。いくつかの態様において、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０である。いくつかの態様において、ｐは、１、２、３、または４である。
【０１５１】
本開示はまた、式（ＩＩａ）：
【化７３】
2017525755.tif 000075
式中、Ｒ１、Ｘ、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４およびＡは、式（ＩＩ）について定義されるとおりであり、およびｐは、１〜２０である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体を提供する。いくつかの態様において、ｐは、１〜８である。いくつかの態様において、ｐは、１〜６である。いくつかの態様において、ｐは、１〜４である。いくつかの態様において、ｐは、２〜４である。いくつかの態様において、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０である。いくつかの態様において、ｐは、１、２、３、または４である。
【０１５２】
ペプチドリンカー
いくつかの態様において、Ｌ３は、ペプチドリンカーである。いくつかの態様において、Ｌ３は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０個のアミノ酸残基のペプチドリンカーである。特定の態様において、Ｌ３は、２、３、または４個のアミノ酸残基のペプチドリンカーである。特定の場合において、Ｌ３は、ジペプチドリンカーである。
【０１５３】
アミノ酸残基は、天然に存在するかまたは非天然のアミノ酸残基であり得る。用語「天然アミノ酸」および「天然に存在するアミノ酸」は、Ａｌａ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｕ、Ｐｈｅ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｐｒｏ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｖａｌ、Ｔｒｐ、およびＴｙｒを指す。「非天然アミノ酸アミノ酸」（すなわち、アミノ酸は天然に存在しない）は、非制限的例として、ホモセリン、ホモアルギニン、シトルリン、フェニルグリシン、タウリン、ヨードチロシン、セレノシステイン、ノルロイシン（「Ｎｌｅ」）、ノルバリン（「Ｎｖａ」）、ベータ−アラニン、Ｌ−またはＤ−ナフタアラニン、オルニチン（「Ｏｒｎ」）などを含む。
【０１５４】
アミノ酸はまた、天然および非天然のアミノ酸のＤ型を含む。天然に存在する（「Ｌ−」）アミノ酸における立体配置に対して、「Ｄ−」は、「Ｄ」（右旋性）立体配置を有するアミノ酸を指す。特定の立体配置が示されない場合、当業者は、アミノ酸がＬ−アミノ酸であることを理解するだろう。しかしながら、アミノ酸はまた、Ｄ−およびＬ−立体配置のラセミ混合物であり得る。天然および非天然アミノ酸は、市販されているもの(Sigma Chemical Co.; Advanced Chemtech)または当該分野で公知の方法を使用して合成されてもよい。アミノ酸置換は、これらの生物学的活性が保持される限り、残基の極性、電荷、溶解度、疎水性、親水性、および／または両親媒性性質における類似性に基づいて行わてもよい。
【０１５５】
アミノ酸残基の配列は、１以上の腫瘍関連プロテアーゼによって、得られたペプチジル誘導体薬物抱合体から酵素選択的に切断されるように、特異的に仕立てられてもよい。
特定の態様において、Ｌ３は、少なくとも１個のリジンまたは少なくとも１個のアルギニン残基を含むペプチドリンカーである。
特定の態様において、リジン、Ｄ−リジン、シトルリン、アルギニン、プロリン、ヒスチジン、オルニチンおよびグルタミンから選択されるアミノ酸残基を含むペプチドリンカーである。
【０１５６】
特定の態様において、Ｌ３は、バリン、イソロイシン、フェニルアラニン、メチオニン、アスパラギン、プロリン、アラニン、ロイシン、トリプトファン、およびチロシンから選択されるアミノ酸残基を含むジペプチドリンカーである。
特定の態様において、Ｌ３は、バリン−シトルリン、プロリン−リジン、メチオニン−Ｄ−リジン、アスパラギン−Ｄ−リジン、イソロイシン−プロリン、フェニルアラニン−リジン、およびバリン−リジンから選択されるジペプチドリンカーである。特定の態様において、Ｌ３は、バリン−シトルリンである。
【０１５７】
本開示における使用に適切な多数の特定のペプチドリンカー分子が、特定の腫瘍関連プロテアーゼによる酵素切断についての選択性において設計および最適化され得る。本開示における使用のための特定のペプチドリンカーは、プロテアーゼ、カテプシンＢおよびＤに対して最適化されているものである。
【０１５８】
疎水性自己崩壊型リンカー
本明細書に記載される化合物のいくつかの態様において、Ｘは、親水性自己崩壊型リンカーである。
【０１５９】
本開示の化合物は、間隔をあけ、２つの機能的部分を一緒に共有結合により連結し、化合物のより優れた溶解性を提供する親水性基を組み込む親水性自己崩壊型スペーサー部分を使用する。いくつかの態様において、親水性自己崩壊型スペーサー部分は、標的化部分および薬物部分を一緒に連結する。いくつかの酵素不安定なリンカーの関連する疎水性の増加は、特に、強力に疎水性の薬物との、薬物抱合体の凝集をもたらし得る。親水性基のリンカーへの組み込みにより、薬物抱合体の凝集が減少するだろう。
【０１６０】
自己崩壊型スペーサーは、２つの空間の空いた化学的部分を一緒に共有結合により連結して通常安定な三分子にすることができる二官能性化学的部分として定義され得、酵素切断の手段により三分子から１つの空間の空いた化学部分を放出し得、酵素切断後、分子の残りから自発的に切断してもう一方の空間の空いた化学的部分を放出し得る。
【０１６１】
特定の態様において、Ｘは、ベンジルオキシカルボニル基である。特定の態様において、Ｘは、
【化７４】
2017525755.tif 000076
式中、Ｒ１は、水素、未置換もしくは置換されたＣ１−３アルキル、または未置換もしくは置換されたヘテロシクリルである、
である。
【０１６２】
いくつかの態様において、本開示は、式（ＩＩ）：
【化７５】
2017525755.tif 000077
式中：
Ｄは、薬物部分であり；
Ｔは、標的化部分である、
Ｒ１は、水素、未置換もしくは置換されたＣ１−３アルキル、または未置換もしくは置換されたヘテロシクリルであり；
Ｌ１は、結合、自己崩壊型リンカー、または環化自己消去型リンカーであり；
Ｌ２は、結合、自己崩壊型リンカーであり；
ここで、Ｌ１が自己崩壊型リンカーまたは環化自己消去型リンカーである場合、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が自己崩壊型リンカーである場合、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合またはスペーサーであり；および
Ａはアシル単位である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体を提供する。
【０１６３】
また提供されるのは、式（ＩＩａ）：
【化７６】
2017525755.tif 000078
式中、Ｄ、Ｔ、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４およびＡは、式（ＩＩ）について定義されるとおりであり、およびｐは、１〜２０である、
で表わされる化合物またはその塩もしくは溶媒和化合物もしくは立体異性体である。いくつかの態様において、ｐは、１〜８である。いくつかの態様において、ｐは、１〜６である。いくつかの態様において、ｐは、１〜４である。いくつかの態様において、ｐは、２〜４である。いくつかの態様において、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０である。いくつかの態様において、ｐは、１、２、３、または４である。いくつかの態様において、ｐは、２である。いくつかの態様において、ｐは、３である。いくつかの態様において、ｐは、４である。
【０１６４】
式（ＩＩ）または（ＩＩａ）の特定の態様において、Ｒ１は水素である。特定の場合において、Ｒ１は、メチルである。
薬物部分の放出は、アミノベンジルオキシカルボニル基の自己消去型反応に基づいている。例示の目的のために、薬物およびペプチドが付着されたアミノベンジルオキシカルボニル基との反応スキームを以下に示す。
スキーム１
【化７７】
2017525755.tif 000079
【０１６５】
スキーム１を参照すると、ペプチドからの切断の際、アミノベンジルオキシカルボニルが形成され、自発的な１，６消去（elimination）を起こして、シクロヘキサ−２，５−ジエニミン(dienimine)誘導体および二酸化炭素を形成し、薬物を放出することができる。
【０１６６】
任意の第二の自己崩壊型リンカーまたは環化自己消去型リンカー
任意の第二の自己崩壊型リンカーまたは環化自己消去型リンカーは、化合物の切断を微調整して薬物部分を放出することを可能にするさらなるリンカーを提供する。
【０１６７】
本明細書に記載される化合物において、Ｌ１は、結合、自己崩壊型リンカー、または環化自己消去型リンカーであり；Ｌ２は、結合または自己崩壊型リンカーであり；ここで、Ｌ１が自己崩壊型リンカーまたは環化自己消去型リンカーである場合、Ｌ２は結合であり；ここで、Ｌ２が自己崩壊型リンカーである場合、Ｌ１は結合である。したがって、親水性自己崩壊型リンカーに隣接する、任意の第二の自己崩壊型リンカーまたは環化自己消去型リンカーが存在する。
【０１６８】
特定の態様において、Ｌ１は、結合であり、Ｌ２は、結合である。特定の態様において、Ｌ１は、自己崩壊型リンカーまたは環化自己消去型リンカーであり、Ｌ２は、結合である。特定の態様において、Ｌ１は、結合であり、Ｌ２は、自己崩壊型リンカーである。
【０１６９】
いくつかの態様において、Ｌ１は、結合である。特定の態様において、Ｌ１は、親水性自己崩壊型リンカーおよび薬物部分を分離する、自己崩壊型スペーサーまたは環化自己消去型リンカーである。特定の態様において、Ｌ１は、アミノベンジルオキシカルボニルリンカーである。
【０１７０】
特定の態様において、Ｌ１は、
【化７８】
2017525755.tif 000080
【化７９】
2017525755.tif 000081
式中、ｎは１または２である、
から選択される。
【０１７１】
特定の場合において、自己崩壊型リンカーまたは環化自己消去型リンカーは、使用され得る、より広範な種々の部分についての設計可能性を提供する。例としては、式（ＩＶ）または（ＩＶａ）において、親水性自己崩壊型リンカーと薬物部分との間のカルバメート結合部（−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｈ）−）結合部は、安定な薬物抱合体を提供し、容易に切断して遊離の薬物部分を提供するだろう。親水性自己崩壊型リンカーは、典型的には、オキシカルボニル基（−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−）で終わる。薬物部分が、反応してカルバメート基を形成するように使用され得るアミノ反応性基を有する場合、（任意の）第二の自己崩壊型単位または環化自己消去型リンカーは、依然として使用されてもよいが、必要ではない。しかしながら、薬物がアミノ基を含有しない場合、代わりに薬物はいくつかの他の反応性官能基を含有し、かかる薬物は、依然として、薬物部分とアミノベンジルカルボニル基との間に中間の自己崩壊型スペーサーまたは環化自己消去型リンカーを含むことにより、本態様ののアミノベンジルオキシカルボニル含有化合物に組み込まれてもよい。
【０１７２】
以下のＬ１の環化自己消去型リンカーは、ヒドロキシル含有またはチオール含有薬物部分の結合部を、親水性自己崩壊型リンカーのアミノベンジルオキシカルボニル基に提供する：
【化８０】
2017525755.tif 000082
【０１７３】
本態様の化合物中の環化自己消去型リンカーは、薬物部分を放出する化合物の切断を提供する。隣接する親水性自己崩壊型リンカーの消去メカニズムは、Ｌ１のアミノ基を暴露するだろう。次いで、アミノ基は、環化反応中に、Ｌ１のカルバメート基またはチオカルバメート結合部および薬物部分と反応し、ヒドロキシル含有またはチオール含有薬物部分を放出することができる。
【０１７４】
いくつかの態様において、Ｌ２は、結合である。特定の態様において、Ｌ２は、親水性自己崩壊型リンカーおよびペプチドリンカーを分離する自己崩壊型スペーサーである。特定の態様において、Ｌ２は、アミノベンジルオキシカルボニルリンカーである。特定の態様において、Ｌ２は、
【化８１】
2017525755.tif 000083
式中、ｎは１または２である、
から選択される。
【０１７５】
任意のスペーサー
いくつかの態様において、Ｌ４は結合またはスペーサーである。特定の態様において、Ｌ４は、結合である。特定の態様において、Ｌ４は、薬物部分と標的化部分との間に距離を提供し得るスペーサーである。
【０１７６】
特定の態様において、スペーサーは、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、置換複素環式、およびヘテロ原子、ならびにこれらの組み合わせから選択される。スペーサーは、その原子含量において、同種であってもよいし異種であってもよい（例としては、炭素原子のみを含有するスペーサーまたはスペーサー上に炭素原子および１以上のヘテロ原子を含有するスペーサー）。好ましくは、スペーサーは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、または５０個の炭素原子ならびに酸素、窒素および硫黄から選択される０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０個のヘテロ原子を含有する。スペーサーはまた、キラルまたはアキラル、直鎖状、分枝状または環状であってもよい。
【０１７７】
特定の態様において、Ｌ４は、ポリアルキレングリコール、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、およびポリアミンから選択されるスペーサーである。アルキレンの例としては、これらに限定されないが、ビニレン（−ＣＨ＝ＣＨ−）、アリレン（−ＣＨ２Ｃ＝Ｃ−）、およびブタ−３−エン−１−イレン（−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ＝ＣＨ−）を含む。アルケニレンの例としては、これらに限定されないが、アセチレニレン（−Ｃ≡Ｃ−）、およびプロパルギレン（−ＣＨ２Ｃ≡Ｃ−）を含む。
【０１７８】
特定の態様において、Ｌ４は、ペプチド結合部の末端へ結合部を提供し得る官能基を含むスペーサーである。Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）−ＮＨ、Ｓ（Ｏ）２、およびＳ（Ｏ）２−ＮＨのような官能基は、ペプチド結合部の末端へ結合部を提供し得る。特定の場合において、Ｌ４は、Ｌ４ａ−Ｃ（Ｏ）、Ｌ４ａ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ、Ｌ４ａ−Ｓ（Ｏ）２、Ｌ４ａ−Ｓ（Ｏ）２−ＮＨであり、式中、Ｌ４ａは、ポリアルキレングリコール、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、およびポリアミンから選択される。特定の場合において、Ｌ４は、Ｌ４ａ−Ｃ（Ｏ）であり、式中、Ｌ４ａは、ポリアルキレングリコール、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、およびポリアミンから選択される。
【０１７９】
特定の態様において、Ｌ４は、Ｌ４ａ−Ｃ（Ｏ）であり、式中、Ｌ４ａは、ポリアルキレングリコールである。特定の態様において、Ｌ４は、Ｌ４ａ−Ｃ（Ｏ）であり、式中、Ｌ４ａは、ポリエチレングリコールである。特定の態様において、スペーサーは、式−ＣＨ２−（ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２）ｍ−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−のスペーサーであり、式中、ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０の整数である。特定の態様において、Ｌ４は、Ｌ４ａ−Ｃ（Ｏ）であり、式中、Ｌ４ａは、アルキレンである。特定の態様において、Ｌ４は、Ｌ４ａ−Ｃ（Ｏ）であり、式中、Ｌ４ａは、Ｃ１−１０アルキレン、Ｃ１−８アルキレン、またはＣ１−６アルキレンである。特定の態様において、Ｌ４は、Ｌ４ａ−Ｃ（Ｏ）であり、式中、Ｌ４ａは、Ｃ４アルキレン、Ｃ５アルキレン、またはＣ６アルキレンである。特定の態様において、Ｌ４は、Ｌ４ａ−Ｃ（Ｏ）であり、式中、Ｌ４ａは、Ｃ５アルキレンである。
【０１８０】
アシル単位
本明細書に記載される化合物において、Ａはアシル単位である。特定の態様において、アシル単位「Ａ」は、硫黄原子を含み、標的化部分に由来する硫黄原子を介して標的化部分に連結される。かかる場合において、ジチオ結合は、アシル単位と標的化部分との間に形成される。
【０１８１】
特定の態様において、Ａは、
【化８２】
2017525755.tif 000084
から選択され、式中、Ｑ２は、ＮＨまたはＯであり、各ｑは、独立して、１〜１０の整数であり、各ｑ１は、独立して、１〜１０の整数である。いくつかの態様において、ｑは、２、３、４、または５などの２〜５の整数である。いくつかの態様において、ｑ１は、２、３、４、または５などの２〜５の整数である。
【０１８２】
特定の態様において、Ａは、
【化８３】
2017525755.tif 000085
であり、式中、Ｑ２は、ＮＨまたはＯであり、ｑは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０の整数である。特定の場合において、ｑは、２、３、４、または５などの２〜５の整数である。
【０１８３】
特定の態様において、Ａは、
【化８４】
2017525755.tif 000086
であり、式中、Ｑ２は、ＮＨまたはＯであり、ｑは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０の整数である。特定の場合において、ｑは、２、３、４、または５などの２〜５の整数である。
【０１８４】
特定の態様において、Ａは、
【化８５】
2017525755.tif 000087
【化８６】
2017525755.tif 000088
から選択され、式中、Ｑ２は、ＮＨまたはＯである。
【０１８５】
薬物部分
本態様の薬物抱合体は、対応する薬物が有効である通常の目的について有効であり、および、標的化部分において固有の、薬物が特に有用である所望の細胞に薬物を輸送する能力に起因して、優れた効力を有する。
【０１８６】
本態様における使用のための好ましい薬物は、がん治療のために使用されるものなどの細胞障害性薬物である。かかる薬物は、一般に、ＤＮＡ損傷剤、抗代謝剤、天然物およびこれらのアナログを含む。細胞障害性剤の特定のクラスは、例として、ジヒドロ葉酸還元酵素阻害剤などの酵素阻害剤、チミジル酸合成酵素阻害剤、ＤＮＡ干渉物質、ＤＮＡ開裂剤、トポイソメラーゼ阻害剤、アントラサイクリンファミリーの薬物、ビンカ薬物、マイトマイシン、ブレオマイシン、細胞障害性ヌクレオシド、プテリジンファミリーの薬物、ジイネン(diynenes)、ポドフィロトキシン、分化誘導剤、およびタキソールを含む。
【０１８７】
これらのクラスの特定の有用なメンバーは、例としては、メトトレキサート、メトプテリン、ジクロロメトトレキサート、５−フルオロウラシル、６−メルカプトプリン、シトシンアラビノシド、メルファラン、レウロシン(leurosine)、レウロシデイン(leurosideine)、アクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、マイトマイシンＣ、マイトマイシンＡ、カルミノマイシン、アミノプテリン、タリソマイシン(tallysomycin)、ポドフィロトイキシンおよびエポトシドまたはリン酸エトポシドなどのポドフィロトキシン誘導体、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、タキソール、タキソテール、レチノイン酸、酪酸、Ｎ８−アセチルスペルミジン、カンプトテシン、およびこれらのアナログを含む。他の薬物は、ドラスタチンおよびデュオカルマイシンを含む。
【０１８８】
当業者は、本開示の抱合体を調製する目的のために、化合物の反応をより簡便とするために、所望の化合物に化学的修飾を行うことができる。
【０１８９】
特定の態様において、Ｄは、薬物がＬ１またはＸに結合する手段である化学的に反応性の官能基を有する薬物部分である。特定の場合において、官能基は、一級アミン、二級アミン、ヒドロキシル、およびスルフヒドリルから選択される。特定の場合において、官能基は、一級アミンまたは二級アミンである。特定の場合において、官能基は、ヒドロキシルである。特定の場合において、官能基は、スルフヒドリルである。
【０１９０】
上に考察されるとおり、親水性自己崩壊型リンカーは、典型的には、オキシカルボニル基（−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−）で終わるだろう。したがって、アミノ含有薬物部分は、オキシカルボニル基と容易に反応してカルバメート基を形成するだろう。特定の態様において、Ｄは、アミノ含有薬物部分であり、ここで、薬物は、アミノ基を介して、Ｌ１またはＸに結合される。しかしながら、薬物部分がアミノ基を含有しない場合、Ｌ１の第二の自己崩壊型リンカーまたは環化自己消去型リンカーは、使用され得るより広範な種々の部分のための設計可能性を提供し得る。特定の態様において、Ｄは、ヒドロキシル含有またはスルフヒドリル含有薬物部分であり、ここで、薬物は、ヒドロキシルまたはスルフヒドリル基を介して、Ｌ１に結合される。
【０１９１】
代表的なアミノ含有薬物は、マイトマイシンＣ、マイトマイシンＡ、ダウノルビシン、ドキソルビシン、アミノプテリン、アクチノマイシン、ブレオマイシン、９−アミノカンプトテシン、Ｎ８−アセチルスペルミジン、１−（２−クロロエチル）−１，２−ジメタンスルホニルヒドラジド、タリソマイシン、シタラビン、ドラスタチンおよびそれらの誘導体を含む。アミノ含有薬物はまた、アミノ基を天然に含有しない薬物のアミノ誘導体を含む。特定の態様において、Ｄは、デュオカルマイシン、ドラスタチン、ツブリシン、ドキソルビシン（ＤＯＸ）、パクリタキセル、またはマイトマイシンＣ（ＭＭＣ）、またはそれらのアミノ誘導体である。
【０１９２】
代表的なヒドロキシ含有薬物は、エトポシド、カンプトテシン、タキソール、エスペラミシン、１，８−ジヒドロキシ−ビシクロ［７．３．１］トリデカ−４−９−ジエン−２，６−ジイン−１３−オン、（米国特許第5,198,560号）、ポドフィロトキシン、アングイジン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、モルホリン−ドキソルビシン、ｎ−（５，５−ジアセトキシ−ペンチル）ドキソルビシン、デュオカルマイシン、およびそれらの誘導体を含む。
代表的なスルフヒドリル含有薬物は、エスペラミシンおよび６−メルカプトプリン、およびそれらの誘導体を含む。
【０１９３】
本態様における薬物としての使用のための細胞障害性剤の特定の基は、以下の式：
【化８７】
2017525755.tif 000089
【化８８】
2017525755.tif 000090
で表わされる薬物を含む。
【０１９４】
標的化部分
本開示において記載されるような標的化部分は、所与の細胞集団と特異的に結合し、複合体を形成し、反応し、または、会合する部分または分子を指す。例としては、標的化部分は、所与の細胞集団（例としては、治療的に処置されるかまたはその他生物学的に修飾されることが求められる所与の細胞集団）に関連する受容性部分またはレセプターと、特異的に結合し、複合体を形成し、反応し、または会合し得る。本明細書に記載される抱合体において、本明細書に記載される標的化部分は、抱合体中の薬物部分へリンカーを介して連結される。いくつかの態様において、標的化部分は、標的化部分が結合し、複合体を形成し、反応し、または会合する特定の標的細胞集団へ薬物部分（例としては、治療目的に使用される薬物部分）を送達することができる。
【０１９５】
標的化部分は、例としては、抗体などの高分子量タンパク質、低分子量タンパク質、ポリペプチドまたはペプチド、および非ペプチジル部分を含んでもよい。本明細書に記載されるタンパク質、ポリペプチド、またはペプチド部分は、例としては、トランスフェリン、血清アルブミン、上皮成長因子（「ＥＧＦ」）、ボンベシン、ガストリン、ガストリン放出ペプチド、血小板由来増殖因子、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＴＧＦ−αおよびＴＧＦ−βなどの腫瘍増殖因子（「ＴＦＧ」）、ワクシニア増殖因子（「ＶＧＦ」）、インスリンおよびインスリン様増殖因子ＩおよびＩＩを含んでもよい。非ペプチジル部分は、例としては、炭水化物、レクチン、および低密度リポタンパク質由来のアポタンパク質を含んでもよい。特定の態様におけるタンパク質、抗体、ポリペプチド、またはペプチドは、その非修飾形態、リンカーへ結合するための使用などの本明細書に記載される抱合体において使用するために修飾された形態、または本明細書に記載される抱合体に存在する部分を指してもよい。
【０１９６】
いくつかの態様において、標的化部分は、抗体（または抗体部分または抗体標的化部分）である。いくつかの態様において、抗体標的化部分は、抗体を含む。いくつかの態様において、標的化部分は、スルフヒドリル（−ＳＨ）基（例としては、遊離の反応性スルフヒドリル（−ＳＨ）基）を含むか、または、かかるスルフヒドリル基を含有するように修飾されてもよい。いくつかの態様において、標的的化部分は、スルフヒドリル基（例としては、遊離の反応性スルフヒドリル基）を有する抗体を含む。いくつかの態様において、標的化部分は、遊離のチオール基を有する抗体などの遊離チオール基を含むか、または、かかるチオール基を含有するように修飾されてもよい。いくつかの態様において、スルフヒドリル基またはチオール基を含む標的化部分は、スルフヒドリル基中の硫黄原子を介してリンカーへ結合する。
【０１９７】
いくつかの態様において、標的化部分（例としては、抗体標的化部分）は、薬物部分へ連結するための１以上の付着部位を有する。例としては、標的化部分Ｔ（例としては、抗体）は、リンカー−薬物部分（例としては、Ａ−Ｌ４−Ｌ３−Ｌ２−Ｘ−Ｌ１−Ｄ、式中、Ａは、標的化抗体のスルフヒドリル基への結合に適している）へ連結するための複数の部位（例としては、複数のスルフヒドリル基）を有し得る。いくつかの態様において、標的化部分は、１〜２０個の付着部位を有し得る。いくつかの態様において、標的化部分は、１〜２０、１〜１０、１〜８、１〜６、１〜４、２〜８、２〜６、または２〜４個の付着部位を有し得る。いくつかの態様において、標的化部分は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０個の付着部位を有する。
【０１９８】
いくつかの態様において、標的化部分は、１、２、３、４、５、６、７、または８個の付着部位を有する。いくつかの態様において、標的化部分は、２個の付着部位を有する。いくつかの態様において、標的化部分は、１個の付着部位を有する。いくつかの態様において、標的化部分は、４個の付着部位を有する。いくつかの場合において、特定の可能性のある付着部位は、薬物部分への結合のためにアクセス可能でなくてもよい。したがって、標的化部分Ｔにおける付着部位の数は、可能性のある付着部位の数よりも少ない数の薬物部分が付着した薬物抱合体を生じ得る。いくつかの態様において、１以上の付着部位は、薬物部分を結合するためにアクセス可能であってもよい。例としては、抗体標的化部分は、リンカーを介する薬物部分への結合のためにアクセス可能である抗体の各鎖上に１または２個のスルフヒドリル基を有し得る。
【０１９９】
いくつかの態様において、標的化部分は、抗体または抗体標的化部分である。本明細書に記載される抗体は、免疫グロブリン分子の可変領域に位置する少なくとも１つの抗原認識部位を介して、炭水化物、ポリヌクレオチド、脂質、ポリペプチドなどのような標的への特異的な結合が可能である免疫グロブリン分子を指す。本明細書で使用される場合、用語「抗体」は、無傷のポリクローナルまたはモノクローナル抗体だけでなく、その抗原結合フラグメント（Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２，、Ｆｖなど）、単鎖（ＳｃＦｖ）、その変異体、抗体部分を含む融合タンパク質、抗原認識部位を含む任意の他の修飾された立体配置の免疫グロブリン分子も包含する。抗体は、ＩｇＧ、ＩｇＡ、またはＩｇＭ（またはそのサブクラス）などの任意のクラスの抗体を含み、抗体は、任意の特定のクラスである必要はない。
【０２００】
その重鎖の定常ドメインの抗体アミノ酸配列に依存して、免疫グロブリンは、異なるクラスに割り当てられ得る。免疫グロブリンの５つの主要なクラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、およびＩｇＭが存在し、これらのいくつかは、サブクラス（アイソタイプ）、例としては、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１およびＩｇＡ２にさらに分けられ得る。異なるクラスの免疫グロブリンに対応する重鎖定常ドメインは、それぞれ、アルファ、デルタ、エプシロン、ガンマ、およびミューと呼ばれている。異なるクラスのサブユニット構造および三次元立体配置の免疫グロブリンは、周知である。
【０２０１】
本明細書に記載される標的化部分に含まれるかまたは使用される抗体（または抗体標的化部分）は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、抗体フラグメント（例としては、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、Ｆｃなど）、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体（例としては、完全ヒト抗体）、単鎖（ＳｃＦｖ）、二重特異性抗体、多重特異性抗体、その変異体、抗体部分を含む融合タンパク質、および要求される特異性の抗原認識部位を含む任意の他の修飾された立体配置の免疫グロブリン分子を包含し得る。抗体は、マウス、ラット、ラクダ、ヒト、または任意の他の起源（ヒト化抗体を含む）であり得る。
【０２０２】
いくつかの態様において、本明細書に記載される標的化部分において使用される抗体（または抗体標的化部分）は、以下のいずれか１つである：二重特異性抗体、多重特異性、単鎖、二機能性、ならびに抗体の少なくとも１つの超可変領域（ＨＶＲ）または相補性決定領域（ＣＤＲ）によって付与されるポリペプチドについて親和性を有するキメラおよびヒト化分子。本開示において使用される抗体はまた、抗体重鎖の可変領域または抗体軽鎖の可変ドメインのいずれかである単一ドメイン抗体を含む。Holt et al., Trends Biotechnol. 21:484-490, 2003。１つの抗体由来の６つの天然に存在するＨＶＲまたはＣＤＲのうちの３つを含有する、抗体重鎖の可変領域または抗体軽鎖の可変ドメインのいずれかを含むドメイン抗体を作成する方法はまた、当該分野で公知である。例としては、Muyldermans, Rev. Mol. Biotechnol. 74:277-302, 2001.を参照のこと。
【０２０３】
いくつかの態様において、本明細書に記載される標的化部分に含まれるかまたは使用される抗体（または抗体標的化部分）は、モノクローナル抗体である。本明細書で使用される場合、モノクローナル抗体は、実質的に均質な抗体（すなわち、集団を構成する個々の抗体は、少量で存在し得る可能性のある天然に存在する変異体を除いて同一である）の抗体を指す。さらに、異なる決定因子（エピトープ）に対して向けられた異なる抗体を典型的に含む、ポリクローナル抗体調製物(preparations)に対して、モノクローナル抗体は、別々の抗体の混合物ではない。
【０２０４】
修飾語句「モノクローナル」は、実質的に均質な集団の抗体から得られる抗体の特徴を示し、任意の特定の方法による抗体の産生を要求すると解釈されるべきではない。例としては、本開示において使用されるモノクローナル抗体は、Kohler and Milstein, 1975, Nature, 256:495によって最初に記載されるハイブリドーマ方法によって作成されてもよいし、米国特許第4,816,567号において記載されるような組み換えＤＮＡ方法によって作成されてもよい。モノクローナル抗体はまた、例としては、McCafferty et al., 1990, Nature, 348:552-554に記載されるような技術を使用して作成されたファージライブラリーから単離されてもよい。
【０２０５】
いくつかの態様において、本明細書に記載される標的化部分に含まれるかまたは使用される抗体（または抗体標的化部分）は、キメラ抗体である。本明細書で使用される場合、キメラ抗体は、第一の種由来の可変領域または改変領域の一部および第二の種由来の定常領域を有する抗体を指す。無傷のキメラ抗体は、２コピーのキメラ軽鎖および２コピーのキメラ重鎖を含む。キメラ抗体の産生は、当該分野で公知である(Cabilly et al. (1984), Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 81:3273-3277; Harlow and Lane (1988), Antibodies: a Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory)。
【０２０６】
典型的には、これらのキメラ抗体において、軽鎖および重鎖の両方の可変領域は、１種の哺乳動物由来の抗体の可変領域を模倣し、定常部分は、別の種に由来する抗体中の配列と相同である。かかるキメラ形態に対する１つの明らかな利点は、例としては、ヒト細胞調製物に由来する定常領域と組み合わせて、例としては、可変領域が非ヒト宿主生物由来の容易に入手可能なハイブリドーマまたはＢ細胞を使用する現在公知の供給源から簡便に由来してもよい点である。可変領域は、調製の容易性という利点を有し、特異性は、その供給源によって影響されないが、ヒト定常領域は、非ヒト供給源由来の定常領域よりも、抗体が注射されるときに、ヒト対象から免疫応答を誘発する可能性が低いようである。しかしながら、定義は、この特定の例に限定されない。
【０２０７】
いくつかの態様において、本明細書に記載される標的化部分に含まれるかまたは使用される抗体（または抗体標的化部分）は、ヒト化抗体である。本明細書で使用される場合、ヒト化抗体は、特異性キメラ免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖、または非ヒト免疫グロブリン由来の最小配列を含有するそのフラグメント（Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２または他の抗体の抗原結合サブ配列など）である非ヒト（例としては、マウス）抗体の形態を指す。ほとんどの部分について、ヒト化抗体は、レシピエントのＨＶＲまたはＣＤＲ由来の残基が、所望の特異性、親和性および能力を有するマウス、ラット、またはウサギなどの非ヒト種のＨＶＲまたはＣＤＲ由来の残基（ドナー抗体）と交換されているヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。
【０２０８】
いくつかの場合において、ヒト免疫グロブリンのＦｖフレームワーク領域（ＦＲ）残基は、対応する非ヒト残基によって交換されている。さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体または移入されたＨＶＲまたはＣＤＲまたはフレームワーク配列のいずれにおいても見い出されない残基を含んでもよいが、抗体性能をさらに改良および最適化するために含まれる。一般に、ヒト化抗体は、ＨＶＲまたはＣＤＲ領域の全てまたは実質的に全てが非ヒト免疫グロブリンのものに対応し、ＦＲ領域の全てまたは実質的に全てがヒト免疫グロブリンコンセンサス配列のものである、少なくとも１つ、典型的には、２つの可変ドメインの実質的に全部を含むだろう。
【０２０９】
ヒト化抗体は、最適には、免疫グロブリン定常領域またはドメイン（Ｆｃ）の少なくとも一部、典型的には、ヒト免疫グロブリンのものを含むだろう。抗体は、WO 99/58572に記載されるようにＦｃ領域が修飾され得る。ヒト化抗体の他の形態は、元の抗体に関して変更されている、１以上（１、２、３、４、５、６個）のＨＶＲまたはＣＤＲを有し、これらは、１以上のＨＶＲまたはＣＤＲが元の抗体由来の１以上のＨＶＲまたはＣＤＲに「由来する」とも称される。
【０２１０】
いくつかの態様において、本明細書に記載される標的化部分に含まれるかまたは使用される抗体（または抗体標的化部分）は、ヒト抗体である。本明細書で使用される場合、ヒト抗体は、ヒトによって産生される抗体のものに対応するアミノ酸配列を有する抗体および／または当該分野で公知のヒト抗体を作成する技術のいずれかを使用して作成された抗体を意味する。本明細書において使用されるヒト抗体は、少なくとも１つのヒト重鎖ポリペプチドまたは少なくとも１つのヒト軽鎖ポリペプチドを含む抗体を含む。１つのかかる例は、マウス軽鎖およびヒト重鎖のポリペプチドを含む抗体である。ヒト抗体は、当該分野で公知の種々の技術を使用して産生され得る。１つの態様において、ヒト抗体は、ヒト抗体を発現するファージライブラリーから選択される(Vaughan et al., 1996, Nature Biotechnology, 14:309-314; Sheets et al., 1998, PNAS, (USA) 95:6157-6162; Hoogenboom and Winter, 1991, J. Mol. Biol., 227:381; Marks et al., 1991, J. Mol. Biol., 222:581)。
【０２１１】
ヒト抗体はまた、トランスジェニック動物、例としては、内因性免疫グロブリン遺伝子が部分的または完全に不活化されているマウスに、ヒト免疫グロブリン座位を導入することによって作成され得る。このアプローチは、米国特許第5,545,807号、同第5,545,806号；同第5,569,825号；同第5,625,126号；同第5,633,425号；および同第5,661,016号に記載されている。あるいは、ヒト抗体は、標的抗原に対して向けられる抗体を産生するヒトＢリンパ球を不死化することによって調製され得る（かかるＢリンパ球は個体から回収されてもよいし、in vitroで免疫化されていてもよい）。例としては、Cole et al., Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, p. 77 (1985); Boerner et al., 1991, J. Immunol., 147 (1):86-95；および米国特許第5,750,373号を参照のこと。
【０２１２】
ヒト上皮成長因子２タンパク質、ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２）は、発生および腫瘍発生の両方において重要な役割を果たすことが知られているレセプター型チロシンキナーゼである。いくつかの態様において、本明細書に記載される標的化部分に含まれるかまたは使用される抗体（または抗体標的化部分）は、ＨＥＲ２に特異的に結合する。さらなる態様において、抗ＨＥＲ２抗体は、モノクローナルまたはヒト化抗体である。ヒト化モノクローナル抗ＨＥＲ２抗体のトラスツズマブ（HERCEPTIN（登録商標））は、ＨＥＲ２陽性がんを処置するために現在使用されている。いくつかの態様において、本明細書に記載される標的化部分に含まれるかまたは使用される抗体は、トラスツズマブである。ペルツズマブ（PERJETA（登録商標））およびマルゲツキシマブを含む他の抗ＨＥＲ２抗体は、当該分野で公知である。いくつかの態様において、本明細書に記載される標的化部分に含まれるかまたは使用される抗体は、ペルツズマブである。いくつかの態様において、本明細書に記載される標的化部分に含まれるかまたは使用される抗体は、マルゲツキジマブである。
【０２１３】
いくつかの態様において、抗ＨＥＲ２抗体は、配列番号７由来の１、２、または３個のＨＶＲ（またはＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域および／または配列番号８由来の１、２または３個のＨＶＲ（またはＣＤＲ）を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの態様において、抗体は、配列番号７由来の３個のＨＶＲ（またはＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域および／または配列番号８由来の３個のＨＶＲ（またはＣＤＲ）を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの態様において、抗体は、配列番号７の配列に少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、および／または、配列番号８の配列に少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの態様において、抗体は、配列番号７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および／または配列番号８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２１４】
いくつかの態様において、抗ＨＥＲ２抗体は、配列番号１２由来の１、２、または３個のＨＶＲ（またはＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域および／または配列番号１３由来の１、２または３個のＨＶＲ（またはＣＤＲ）を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの態様において、抗体は、配列番号１２由来の３個のＨＶＲ（またはＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域および／または配列番号１３由来の３個のＨＶＲ（またはＣＤＲ）を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの態様において、抗体は、配列番号１２の配列に少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、および／または、配列番号１３の配列に少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの態様において、抗体は、配列番号１２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および／または配列番号１３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２１５】
いくつかの態様において、抗ＨＥＲ２抗体は、配列番号１４由来の１、２、または３個のＨＶＲ（またはＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域および／または配列番号１５由来の１、２または３個のＨＶＲ（またはＣＤＲ）を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの態様において、抗体は、配列番号１４由来の３個のＨＶＲ（またはＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域および／または配列番号１５由来の３個のＨＶＲ（またはＣＤＲ）を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの態様において、抗体は、配列番号１４の配列に少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、および／または、配列番号１５の配列に少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの態様において、抗体は、配列番号１４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および／または配列番号１５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２１６】
【表１】
2017525755.tif 000091
【０２１７】
ヒトカッパ軽鎖定常ドメイン配列（配列番号１）RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
【０２１８】
ヒトＩｇＧ１重鎖定常ドメイン配列（配列番号２）
ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
【０２１９】
ヒトＩｇＧ２重鎖定常ドメイン配列（配列番号３）
ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPAAAPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPSK
【０２２０】
ヒトＩｇＧ３重鎖定常ドメイン配列（配列番号４）
ASTKGPSVFPLAPCSRSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYTCNVNHKPSNTKVDKRVELKTPLGDTTHTCPRCPEPKSCDTPPPCPRCPEPKSCDTPPPCPRCPEPKSCDTPPPCPRCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFKWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTFRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESSGQPENNYNTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNIFSCSVMHEALHNRFTQKSLSLSPGK
【０２２１】
ヒトＩｇＧ４重鎖定常ドメイン配列（配列番号５）
ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
【０２２２】
ｈＩｇＧ４−Ｓ２２８Ｐのアミノ酸配列（配列番号６）
ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
【０２２３】
トラスツズマブ（HERCEPTIN（登録商標）, Roche Inc.）軽鎖可変領域のアミノ酸配列（配列番号７）
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVNTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYTTPPTFGQGTKVEIK
【０２２４】
トラスツズマブ（HERCEPTIN（登録商標）, Roche Inc.）重鎖可変領域のアミノ酸配列（配列番号８）
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIKDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTNGYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGDGFYAMDYWGQGTLVTVSS
【０２２５】
ヒトカッパ定常ドメインを含むトラスツズマブ（HERCEPTIN（登録商標）, Roche Inc.）軽鎖のアミノ酸配列（配列番号９）
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVNTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYTTPPTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
【０２２６】
ヒトＩｇＧ１定常ドメインを含むトラスツズマブ（HERCEPTIN（登録商標）, Roche Inc.）重鎖のアミノ酸配列（配列番号１０）
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIKDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTNGYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGDGFYAMDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
【０２２７】
ヒトＩｇＧ４−Ｓ２２８Ｐ定常ドメインを含むトラスツズマブ（HERCEPTIN（登録商標）, Roche Inc.）重鎖のアミノ酸配列（配列番号１１）
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIKDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTNGYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGDGFYAMDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
【０２２８】
ペルツズマブ（PERJETA（登録商標）, Roche Inc.）軽鎖可変領域のアミノ酸配列（配列番号１２）
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQDVSIGVAWYQQKPGKAPKLLIYSASYRYTGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYYIYPYTFGQGTKVEIK
【０２２９】
ペルツズマブ（PERJETA（登録商標）, Roche Inc.）重鎖可変領域のアミノ酸配列（配列番号１３）
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFTDYTMDWVRQAPGKGLEWVADVNPNSGGSIYNQRFKGRFTLSVDRSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARNLGPSFYFDYWGQGTLVTVSS
【０２３０】
マルゲツキジマブ（Macrogenics Inc.）軽鎖可変領域のアミノ酸配列（配列番号１４）
DIVMTQSHKFMSTSVGDRVSITCKASQDVNTAVAWYQQKPGHSPKLLIYSASFRYTGVPDRFTGSRSGTDFTFTISSVQAEDLAVYYCQQHYTTPPTFGGGTKVEIK
【０２３１】
マルゲツキジマブ（Macrogenics Inc.）重鎖可変領域のアミノ酸配列（配列番号１５）
QVQLQQSGPELVKPGASLKLSCTASGFNIKDTYIHWVKQRPEQGLEWIGRIYPTNGYTRYDPKFQDKATITADTSSNTAYLQVSRLTSEDTAVYYCSRWGGDGFYAMDYWGQGASVTVSS
【０２３２】
【表２】
2017525755.tif 000092
【０２３３】
いくつかの態様において、本明細書に記載される標的化部分に含まれるかまたは使用される抗体は、修飾されている。いくつかの態様において、修飾は、操作されたシステイン置換である。
【０２３４】
いくつかの態様において、操作されたシステイン置換は、抗体のＩｇＧ重鎖上で生じる。いくつかの態様において、操作されたシステイン置換は、抗体のＩｇＧ重鎖上の特定の位置で生じる。いくつかの態様において、操作されたシステイン置換を有していてもよいＩｇＧ重鎖上のアミノ酸位置は、（ＥＵナンバリング）１１８−２１５、２３４、２３５，２３６、２３７、２３８、２３９、２４６、２４８、２４９、２５４、２６５、２６７、２６９、２７０、２７３、２７６、２７８、２７９、２８２、２８３、２８４、２８６、２８７、２８９、２９２、２９３、２９４、２９７、２９８、２９９、３００、３０２、３０３、３１２、３１４、３１５、３１８、３２０、３２４、３２６、３２７、３３０、３３２、３３３、３３４、３３５、３３６、３３７、３３９、３４１−４４７を含む。上に開示されたアミノ酸位置は、US 2012/0148580 A1; WO 2013/093809 A1; US 2009/0258420 A1; US 7521541 B2; US 7855275 B2; US 2011/0137017 A1; US 2012/0213705 A1; US 2011/0033378 A1; US 8455622 B2に記載されており、これらは、その全体を参照して本明細書に組み込まれる。部位特異的抱合のための操作されたシステインとなり得るＩｇＧ重鎖上のさらなる位置は、（ＥＵナンバリング）１２１、１２２、１２４、１２５、１２６、１２９、１５９、１８７、１８８、１９０、１９１、１９３、１９７、１９９、２０１、２０２、２０３、２０５、２０７、２０８、２０９、２１１、２１２、２１５、２９５、２９６、３０１を含む。
【０２３５】
いくつかの態様において、操作されたシステイン置換は、抗体のＩｇＧ軽鎖上で生じる。いくつかの態様において、操作されたシステイン置換は、抗体のＩｇＧ軽鎖上の特定の位置で生じる。いくつかの態様において、操作されたシステイン置換を有してもいＩｇＧ軽鎖上のアミノ酸位置は、WO 2013/093809 A1; US 2009/0258420 A1; US 7855275 B2; US 8455622 B2に記載されているような、（Kabatナンバリング）１０８−２１１を含み、これらは、その全体を参照して本明細書に組み込まれる。部位特異的抱合のための操作されたシステインとなり得るＩｇＧ軽鎖上のさらなる位置は、（Kabatナンバリング）、１１２、１１４、１１５、１１６、１４７、１９５、１９９、２００、２０１、２０２、２０３、２０６、２０７、２０８、２０９、２１０を含む。
【０２３６】
治療適用
いくつかの態様において、本開示は、本明細書において考察される十分に致死量の化合物を細胞に投与することによって細胞を殺傷する方法を提供する。いくつかの態様において、殺傷される細胞は、がん細胞である。いくつかの態様において、細胞は、乳がん細胞、胃がん細胞、または卵巣がん細胞である。いくつかの態様において、本明細書に開示される細胞を殺傷するための方法は、in vitroで実施され得る。いくつかの態様において、細胞を殺傷するための方法は、in vivoで実施され得る。
【０２３７】
いくつかの態様において、本明細書で考察される化合物は、対象における疾患または障害の処置における治療レジメンの一部として、有効量で投与され得る。いくつかの態様において、本開示は、本明細書に開示されている有効量の化合物を個体に投与することを含む、それが必要な個体におけるがんの処置のための方法を提供する。いくつかの態様において、有効量は、投与様式および上で考察される要因に依存して、１または数日または多くの日数の間、１以上の投与用量で、約０．００１ｍｇ／ｋｇ〜約１０００ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約７５０ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約５００ｍｇ／ｋｇ、約１．０ｍｇ／ｋｇ〜約２５０ｍｇ／ｋｇ、約１０．０ｍｇ／ｋｇ〜約１５０ｍｇ／ｋｇで変化する。
【０２３８】
いくつかの態様において、本開示の化合物は、他の治療化合物と組み合わせて投与され得る。いくつかの態様において、他の治療用化合物は、抗がん薬物または化学療法薬である。当業者は、広範な種々のがん化学療法薬に精通しているであろう。いくつかの態様において、本開示の化合物は、放射線療法などの（しかしこれに限定されない）他の形態のがん療法と組み合わせて投与され得る。
【０２３９】
いくつかの態様において、本明細書に開示されるがんを処置する方法の使用は、がん性細胞の増殖を低減させること（または破壊すること）、疾患から生じる徴候を減少させること、疾患に罹患する者の生活の質を増加させること、および／または疾患の発生を遅延させることを含むが、これに限定されない、有利なまたは望ましい臨床結果をもたらす。当業者に明らかなように、十分なまたは顕著な遅延は、個体ががんを発症しないという点で、実際に、予防を包含し得る。例としては、転移の発生などの、後期がんは、遅延され得る。
【０２４０】
いくつかの態様において、本明細書に記載される化合物の標的化部分は、がん細胞に特異的に結合する。がん結合標的化部分の例示的だが非制限的な例は、抗ＣＤ２０抗体、抗ＣＤ３０抗体および抗ＨＥＲ２を含む。さらなる態様において、本明細書で考察される化合物の薬物部分は、がんの処置において有効である薬物である。かかる薬物の非制限的な例は、マイトマイシンＣ、マイトマイシンＡ、ダウノルビシン、ドキソルビシン、アミノプテリン、アクチノマイシン、ブレノマイシン、９−アミノカンプトテシン、Ｎ８−アセチルスペルミジン、１−（２−クロロエチル）−１，２−ジメタンスルホニルヒドラジド、タリソマイシン、シタラビン、ドラスタチンおよびそれらの誘導体を含む。
【０２４１】
以下の例は、本開示の有用性を制限するのではなく、例示するために提供される。
【０２４２】
例１
例２のための材料および方法
リンカー−薬物の合成
化合物Ｔａｐ−１８Ｈの合成は、以下のスキームにおいて示される。中間体化合物ＭおよびＯもまた、以下のスキームにおいて示される。
【０２４３】
【化８９】
2017525755.tif 000093
【０２４４】
【化９０】
2017525755.tif 000094
【０２４５】
化合物Ｔａｐ−１８Ｈの合成のスキームを参照すると、市販の４−ニトリフェニルグリオキシル酸を、架橋剤としてのＰＣｌ５、またはＤＭＦ中のＥＤＣＩおよびＮｉＰｒ２Ｅｔ、またはＣＨ２Ｃｌ２中の２−クロロ−４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジンおよびＮ−メチルモルホリンのいずれかを使用して、Ｎ−メチルピメラジンと縮合して所望のケトアミドを産生した。典型的な手順において、ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍｌ）中の２−クロロ−４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン（５ｍｍｏｌ）の溶液、Ｎ−メチルモルホリン（１５ｍｍｏｌ）を、連続攪拌下、０〜５℃で添加した。白色懸濁液が３０〜４０分後に形成され、この混合物に、ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍｌ）中の４−ニトロフェニルグリオキシル酸を添加して、透明な溶液を形成した。混合物を１時間攪拌した後、Ｎ−メチルピペラジン（５ｍｍｏｌ）を室温で添加した。反応の完了後（ＴＬＣ、１０分）、混合物を１０％ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄し（２×１０ｍｌ）、続いてＨ２Ｏで洗浄した（３×１０ｍｌ）。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下で除去して粗生成物を得て、これを再結晶化またはカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝８：２）によってさらに精製した。
【０２４６】
ケトアミド化合物を、ＴＨＦまたはＤＩＢＡＬ−Ｈまたは水素化ホウ素ナトリウムの存在下で、０．５当量のＬｉＡｌＨ４によってさらに還元して、ニトロ化合物Ｃを産生した。[B. P. Bandgar and S. S. Pandit, Tetrahedron Letters 44 (2003) 3855-3858]  ニトロ化合物Ｃを、収率６５〜８１％で、約６〜１１時間室温で、ＳｎＣｌ２を用いる処理またはメタノール中の触媒としてＰｄ／Ｃ（１０％ｗ／ｗ）を用いる接触水素化のいずれかによって、アニリン化合物Ｉに還元した。これは、RB04-50 Reactor Bを用いるMultiMaxIRシステムを使用する以下の手順を介して得た。反応器を、３５ｍｌのメタノール、０．０３ｍｇの１０％Ｐｄ／Ｃおよび０．０２５２ｍｏｌのニトロ化合物Ｃで最初に充填し、水素を６．３ｂａｒ（Ｈ２、定圧）の圧力まで反応器中に添加した。
【０２４７】
化合物Ｍの合成のスキームを参照すると、Ｂｏｃ保護Ｌ−バリンを、ＤＣＭ中のＮ−ヒドロキシスクシンイミドおよびＥＤＡＣ−ＨＣＬ、または、ＤＣＭ中のＮ−ヒドロキシスクシンイミドおよびＥＤＣで処理して、スクシンイミドエステルを得た。この活性化エステルをＬ−シトルリンおよびＣＨ３ＣＮ、Ｈ２Ｏ、ＮａＨＣＯ３を用いて反応させ、Ｂｏｃ保護化合物Ｍを得た。
【０２４８】
化合物Ｔａｐ−１８Ｈの合成のスキームを参照すると、アニリン化合物Ｉを、室温で３２時間、ＤＭＦ中のＤＣＣ／ＨＯＢｔの手段によりＢｏｃ保護化合物Ｍとカップリングさせて化合物Ｎ（収率７８〜８２％）を得るか、または、ＰＳ−カルボジイミドを用いてカップリングさせ、この反応において、化合物Ｎの合成は、２当量のＰＳ−カルボジイミドおよび１．７当量のＤＣＭ中のＨＯＢｔの存在下で、１００ｍｇの化合物Ｍと１．５当量のアニリン化合物Ｉから出発して２４時間行った。ＬＣ／ＭＳによる分析は、所望な質量を有するピークおよびおよそ５０〜６０％の変換率を示した。
【０２４９】
カップリング産物の化合物Ｃを、次いで、ＤＣＭ中の２，６−ルチジンの存在下、室温で８時間、クロロギ酸４−ニトロフェニルと反応させて、炭酸化合物Ｐを得て、ＬＣ／ＭＳは、所望の質量を有するピークを示した。
ＤＭＦ中のＨＯＡｔおよびＥｔ３Ｎの存在下、炭酸化合物Ｐのモノメチルドラスタチン１０での処理により、化合物Ｑを形成した。
【０２５０】
化合物Ｏの合成のスキームを参照すると、β−アラニンを、ＤＭＦ中の無水マレイン酸で処理し、こうして得られた酸を、ＤＣＣカップリング下でＮ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）と反応させて、ＮＨＳエステルを得た。市販のｔ−ｂｏｃ−Ｎ−アミド−ｄＰＥＧ４−酸中のＢＯＣ保護基をＴＦＡでの処理により除去し、アミンのＴＦＡ塩を得て、これを以前に合成したＮＨＳエステルと反応させた。こうして得られたカルボン酸を単離して、ＥＤＣＩを使用してＮ−ヒドロキシスクシンイミドとカップリングさせ、ＮＨＳエステル化合物Ｏを得た。
【０２５１】
化合物Ｔａｐ−１８Ｈの合成のスキームを参照すると、化合物Ｑ中のＢｏｃ基を、ＴＦＡを用いて除去し、遊離アミンを無水アセトニトリルおよびＮａＨＣＯ３中のＮＨＣエステル化合物Ｏと室温で１２〜３６時間カップリングさせて、収率３５〜４５％で最終生成物Ｔａｐ−１８Ｈを得た。
図１は、Ｔａｐ−１８ＨのＮＭＲスペクトルを示す。
【０２５２】
化合物ＴＡＰ−１８Ｈｒ１の合成
以下の式を有するＴａｐ−１８Ｈｒ１を合成した。図２は、Ｔａｐ−１８Ｈｒ１のＮＭＲスペクトルを示す。
【化９１】
2017525755.tif 000095
【０２５３】
化合物ＴＡＰ−１８Ｈｒ２の合成
以下の式を有するＴａｐ−１８Ｈｒ２を合成した。図３は、Ｔａｐ−１８Ｈｒ２のＮＭＲスペクトルを示す。
【化９２】
2017525755.tif 000096
【０２５４】
細胞株
ヒト卵巣がん細胞株ＳＫＯＶ−３(ATCC, Cat. No. HTB-77)を、１０％ＦＢＳ(HyClone, Cat. No. SH30071.03)、１００Ｕ／ｍＬペニシリン／１００μｇ／ｍＬストレプトマイシン(GIBCO, Cat. No. 15140)で補充したMcCoy’s 5A Medium（改変）(GIBCO, Cat. No. 16600)中で培養した。ヒト乳がん細胞MDA-MB-453(BCRC, Cat. No. 60429)を、１０％ＦＢＳ(HyClone, Cat. No. SH30071.03)、１００Ｕ／ｍＬペニシリン／１００μｇ／ｍＬストレプトマイシン(GIBCO, Cat. No. 15140)で補充したLeibovitz’s L-15培地(GIBCO, Cat. No. 11415)中で培養した。ヒト乳がん細胞ＪＩＭＴ−１(DSMZ, Cat. No. ACC 589)を、１０％ＦＢＳ(HyClone, Cat. No. SH30071.03)、１００Ｕ／ｍＬペニシリン／１００μｇ／ｍＬストレプトマイシン(GIBCO, Cat. No. 15140)で補充したDulbecco’s MEM培地(GIBCO, Cat. No.11965)中で培養した。ヒト胃がん細胞ＮＣＩ−Ｎ８７(CCRC, Cat. No. 60217)およびヒトＴ白血病細胞Ｊｕｒｋａｔ(BCRC, Cat. No 60424)を、１０％ＦＢＳ(HyClone, Cat. No. SH30071.03)、１００Ｕ／ｍＬペニシリン／１００μｇ／ｍＬストレプトマイシン(GIBCO, Cat. No. 15140)で補充したRPMI Medium 1640(GIBCO, Cat. No. 22400)中で培養した。
【０２５５】
試薬
ＤＴＴおよびＤＴＰＡは、Sigma-Aldrich (St. Louis, MO)から入手した。ＴＣＥＰは、Acros (Morris Plains, NJ)から入手した。ＤＴＮＢは、Thermo Scientific (Rockford, IL)から入手した。リン酸ナトリウム、ホウ酸ナトリウム、および塩化ナトリウムは、J.T. Baker (Center Valley, PA)から入手した。システインは、Alfa Aesar (Ward Hill, MA)から入手した。
【０２５６】
抗ＨＥＲ２システインバリアントの作成
システイン残基を、部位特異的変異誘発方法を用いて、ヒト化抗ＨＥＲ２抗体に導入した（ＩｇＧ１について配列番号９として軽鎖および配列番号１０として重鎖またはＩｇＧ４について配列番号１１）。手短にいうと、変異誘発をオーバーラッピングＰＣＲによって実施した。所望の塩基における特定の変更は、ヌクレオチドを変化させたプライマーを組み込むことによって導入することができる。プライマーが伸長する際、変異を得られたアンプリコンにおいて創出した。変異位置および対応する隣接領域を、以下の表３に列挙する。
【０２５７】
【表３−１】
2017525755.tif 000097
【表３−２】
2017525755.tif 000098
【０２５８】
抗ＨＥＲ２−Ｃｙｓバリアントを発現する安定な細胞株の産生
抗ＨＥＲ２−システイン（抗ＨＥＲ２−Ｃｙｓ）バリアント（表１）を、Flp-In CHO細胞(Invitrogen, Cat.No: R708-07)中で安定的に発現および産生させた。システイン置換した抗体バリアントのDNA配列を、pcDNA5/FRTベクター(Invitrogen, Cat.No: V6010-20)に挿入して、販売業者によって提供される標準的な手順に従って、pOG44(Invitrogen, Cat.No V6005-20)を用いて同時導入した。確立した細胞株の培養上清を回収し、プロテインＡセファロースビーズ(GE Healthcare, Cat.No: 17-5280-04)を用いて精製した。精製されたタンパク質を、ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびサイズ排除クロマトグラフィーの両方を用いて分析して抗体の性質を保証した。
【０２５９】
抗ＨＥＲ２−ＩｇＧ１抗体の従来の抱合
抗ＨＥＲ２−ＩｇＧ１（配列番号９として軽鎖、配列番号１０として重鎖）抗体を、３７℃で２時間、０．０２５Ｍホウ酸ナトリウムｐＨ８、０．０２５Ｍ  ＮａＣｌ、１ｍＭ  ＤＴＰＡ中の約１．５５当量のＴＣＥＰを用いて還元した。タンパク質濃度を、１．０ｍｇ／ｍＬ溶液について２８０ｎｍで１．４８の吸光度を使用して定量化し、モル濃度を、１４５，５３２ｇ／ｍｏｌのモル重量を使用して決定した。生成されたｍＡｂ−システインチオールの濃度を、ＤＴＮＢを用いる滴定により決定した。典型的には、３．０チオール／ｍＡｂを得た。部分的に還元された抗体を、１．２モル濃度のマレイミノカプロイル−薬物／ｍＡｂシステインチオールまたはマレイミド−薬物（Ｔａｐ１８Ｈｒ１、Ｔａｐ−１８Ｈｒ１）／ｍＡｂ−システインチオールを用いてアルキル化した。アルキル化反応は、４℃で１２〜１６時間実施した。
【０２６０】
システイン（１ｍＭ最終）を使用して、任意の未反応の過剰なマレイミドカプロイル−薬物またはマレイミド−薬物をクエンチした。Ｔａｐ１８Ｈｒ１抱合混合物を、結合緩衝液、１０ｍＭリン酸ナトリウム、１０ｍＭ  ＮａＣｌ、５％ＤＭＳＯ、ｐＨ７．０で最初に５倍に希釈し、抗ＨＥＲ２／Ｔａｐ１８Ｈｒ１として名付けられた抱合抗体２０ｍｇあたり、１ｍＬヒドロキシアパタイトの負荷能力で、ヒドロキシアパタイトカラム(Macroprep ceramic type I 40 μm, BioRad, Hercules, CA)にアプライした。カラムを、５カラム容量の結合緩衝液で以前に平衡化した。サンプルアプライ後、カラムを、３カラム容量の結合緩衝液で洗浄し、次いで、５カラム容量の１０ｍＭリン酸ナトリウム、１０ｍＭ  ＮａＣｌ、ｐＨ７．０を用いて平衡化した。結合ＡＤＣは次いで、２００ｍＭリン酸ナトリウム、１０ｍＭ  ＮａＣｌ、ｐＨ７．０を用いて溶出した。溶出後、緩衝液を、ＨｉＰｒｅｐ（商標）２６／１０  Ｄｅｓａｌｔｉｎｇカラム（任意）を使用して、ダルベッコリン酸緩衝生理食塩水に変更した。
【０２６１】
抗ＨＥＲ２−Ｃｙｓバリアントの部位特異的抱合
導入されたシステイン上にリンカー負荷量Ｔａｐ１８Ｈｒ１（Ｔａｐ−１８Ｈｒ１）を特異的に抱合するために、還元／酸化手順を使用した。培養条件間に生じ得た導入されたシステイン部位上のシステインまたはグルタチオンを取り除くために、抗ＨＥＲ２−Ｃｙｓバリアントを最初に、１ｍＭ  ＤＴＰＡ(Sigma-Aldrich, Cat.No: D6518)を含有するＰＢＳ(Gibco(登録商標), Cat. No: 21600-069)中の１０〜１５倍の過剰のモル濃度のＴＣＥＰ(Acros Organics, Cat.No: 363830100)を用いて３７℃で２〜５時間処理した。過剰のＴＣＥＰを除去した後、室温で３〜５時間または４℃で３〜１６時間、抗体の２０〜７０倍過剰のモル濃度のデヒドロアスコルビン酸（ＤＨＡ）(Sigma-Aldrich, Cat.No:261556)を用いて、抗体を再び酸化して、鎖間ジスルフィド結合の再形成を保証した。サンプルをＰＢＳへ緩衝液を交換した。マレイミド連結薬物負荷量（Ｔａｐ１８Ｈｒ１）を次いで添加し、処理された抗体上の遊離チオールと反応させた。過剰の負荷量をＮ−アセチル−Ｌ−システイン(Sigma-Aldrich, Cat.No:A7250)でクエンチし、ＣＨＴセラミックヒドロキシアパタイト(Bio-Rad, Cat.No:157-0040)を使用して、抱合体化された抗体を精製した。
【０２６２】
逆相ＨＰＬＣ分析による薬物抗体比（ＤＡＲ）の決定
ＨＰＬＣ分析の前に、抱合体サンプルを、５０℃の加熱下で１５分間、６Ｍグアニジンハイドロクロライドおよび２０ｍＭ  ＤＴＴを用いて処理した。１００μｇの処理された抱合体サンプルを、ＰＬＲＰ−Ｓカラム(2.1 x 150 mm, 8μm, 1000Å, Agilent)にアプライした。流速は、０．８ｍＬ／分であり、カラム温度は、８０℃であった。溶媒Ａは、ミニＱ水中の０．０５％トリフルオロ酢酸であり、溶媒Ｂは、アセトニトリル中の０．０４％トリフルオロ酢酸であった。方法は以下から構成された：均一濃度の２５％Ｂを３ｍｌ、５０％Ｂまで２５ｍｌ直線勾配、９５％Ｂまで２ｍｌ直線勾配、２５％Ｂまで１ｍｌ直線勾配、および均一濃度の２５％Ｂを２ｍｌ。ピークの割り当ては、非抱合抗体（Ｌ０およびＨ０）を用いて行った。Ｈ１およびＨ２は、溶出時間およびＵＶスペクトル（Ａ２４８／２８０比は、薬物負荷量とともに増加する）によって割り当てられた。
【０２６３】
抗ＨＥＲ２抗体およびＴａｐ１８Ｈｒ１抱合体のがん細胞への結合
Ｖ字底ウェルプレートで１ウェル当たり、１×１０５個の細胞を播種し、１００μｌの非抱合Ａｂまたは指定された濃度のＡＤＣとともにインキュベートした。４℃で６０〜９０分間のインキュベート後、細胞を２００μｌ  ＦＡＣＳ緩衝液（１％ＦＢＳを含有する１ｘＰＢＳ）を用いて一回洗浄し、ＦＡＣＳ緩衝液中の１００μｌのμｇ／ｍｌヤギＦ（ａｂ’）２−抗ヒトＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）−ＲＰＥ(Southern Biotech, Cat. No. 2043-09)を用いて染色し、次いで、４℃で３０〜６０分間インキュベートした。細胞をＦＡＣＳ緩衝液で一回洗浄し、フローサイトメトリー(BD LSR, BD Life Sciences)によって分析した。
【０２６４】
In vitro細胞障害アッセイ：ＷＳＴ−１アッセイ
９６ウェルマイクロタイタープレート上に１ウェル当たり、ＳＫＯＶ−３細胞は、５ｘ１０３個の細胞を播種し、ＭＤＡ−ＭＢ−４５３およびＪＩＭＴ−１は２ｘ１０４個の細胞を播種し、ＮＣＩ−Ｎ８７は、４ｘ１０４個の細胞を播種し、Ｊｕｒｋａｔ細胞は２．５ｘ１０４個の細胞を播種した。抗ＨＥＲ２／Ｔａｐ１８Ｈｒ１または非抱合抗体を、最終容量２００μＬ／ウェルで、指示された濃度で６連で添加した。ＭＤＡ−ＭＢ−４５３細胞を次いで、３７℃、０％ＣＯ２で９６時間、新たな等価な培地で４８時間インキュベートした。ＳＫＯＶ−３、ＪＩＭＴ−１、ＮＣＩ−Ｎ８７、およびＪｕｒｋａｔ細胞を、３７℃、５％ＣＯ２で６８〜７２時間インキュベートした。インキュベート後、細胞生存率を、製造業者の指示に従って、細胞増殖試薬ＷＳＴ−１(Roche, Cat. No. 11644807001)によって検出した。手短に言うと、インキュベートの終わりに、１００μＬの培地を取り除き、１０μＬ／ウェルのＷＳＴ−１を添加した。至適な発色現象（未処理対照のＯＤ４５０が≧１の場合、４５０ｎｍにおける吸光度（ＯＤ４５０値）を、分光光度計(Molecular Devices(Sunnyvale, CA), VERSAmaxマイクロプレートリーダー)によって測定した。複製物の平均を得て、バックグラウンド（培地対照）を減算した。得られたＯＤ４５０値を使用して、以下の式に従って、阻害％を計算した：［ＯＤ４５０溶媒−ＯＤ４５０サンプル］／［ＯＤ４５０溶媒］＊１００。
【０２６５】
がん異種移植モデルにおけるＡＤＣ処置
抗ＨＥＲ２／Ｔａｐ１８Ｈｒ１で処置されたＳＫＯＶ−３
皮下異種移植モデルを確立するために、２５％High Concentration Matrigel(BD Biosciences, Cat. No. 354248)を含有する１００μＬ  ＰＢＳ中の１ｘ１０７個のＳＫＯＶ−３細胞を、６週齢の雌性C.B-17 SCIDマウス(Lasco, Taipei, Taiwan)の右側腹部に移植した。抗ＨＥＲ２／Ｔａｐ１８Ｈｒ１を、腫瘍細胞接種のおよそ２時間後に、１００μＬ中の３ｍｇ／ｋｇで静脈内注射した（１日目として標識する）。腫瘍体積を、ノギスを用いて２垂直の寸法で一週間に一回または二回測定し、式（０．５２＊長さ＊幅＊幅）にしたがって計算した。
【０２６６】
抗ＨＥＲ２／Ｔａｐ１８Ｈｒ１で処置したＭＤＡ−ＭＢ−４５３
皮下異種移植モデルを確立するために、５０％High Concentration Matrigel(BD Biosciences, Cat. No. 354248)を含有する１５０μＬ  ＰＢＳ中の１ｘ１０７個のＳＫＯＶ−３細胞を、７週齢の雌性C.B-17 SCIDマウス(Lasco, Taipei, Taiwan)の右側腹部に移植した。平均腫瘍体積が１５０ｍｍ３に達したとき、抗ＨＥＲ２／Ｔａｐ１８Ｈｒ１を、１００μＬ中の３ｍｇ／ｋｇで１回静脈内注射した（１日目として標識する）。腫瘍体積を、ノギスを用いて２垂直の寸法で一週間に二回測定し、式（０．５２＊長さ＊幅＊幅）にしたがって計算した。
【０２６７】
抗ＨＥＲ２／Ｔａｐ１８Ｈｒ１および部位特異的Ｔａｐ１８Ｈｒ１抱合体化抗ＨＥＲ２システインバリアントで処置したＮＣＩ−Ｎ８７
皮下異種移植モデルを確立するために、１００μＬ  ＰＢＳ中の５ｘ１０６個のＮＣＩ−Ｎ８７細胞を、７週齢の雌性C.B-17 SCIDマウス(Lasco, Taipei, Taiwan)の右側腹部に移植した。平均腫瘍体積が１８０ｍｍ３に達したとき、薬物抱合体化抗体を、静脈内注射した（１日目として標識する）。腫瘍体積を、ノギスを用いて２垂直の寸法で一週間に一回または二回測定し、式（０．５２＊長さ＊幅＊幅）にしたがって計算した。
【０２６８】
抗ＨＥＲ２／Ｔａｐ１８Ｈｒ１および部位特異的Ｔａｐ１８Ｈｒ１抱合体化抗ＨＥＲ２システインバリアントで処置したＪＩＭＴ−１
皮下異種移植モデルを確立するために、１００μＬ  ＰＢＳ中の５ｘ１０６個のＪＩＭＴ−１細胞を、６週齢の雌性C.B-17 SCIDマウス(Lasco, Taipei, Taiwan)の右側腹部に移植した。平均腫瘍体積が１００ｍｍ３に達したとき、薬物抱合体化抗体を、１００μＬ中の３ｍｇ／ｋｇで１回静脈内注射した（１日目として標識する）。腫瘍体積を、ノギスを用いて２垂直の寸法で一週間に二回測定し、式（０．５２＊長さ＊幅＊幅）にしたがって計算した。
【０２６９】
例２：抗ＨＥＲ２抗体ベースの抗体薬物抱合体（ＡＤＣ）のがん細胞に対するin vitro細胞内結合活性
抗ＨＥＲ２／Ｔａｐ１８Ｈｒ１結合活性
抗ＨＥＲ２裸（naked）抗体およびＴａｐ１８Ｈｒ１抱合体化抗体の結合能力を、ＳＫＯＶ−３、ＮＣＩ−Ｎ８７、ＭＤＡ−ＭＢ−４５３およびＪｕｒｋａｔ細胞において評価した。表４におけるデータは、試験されたサンプルが、ヒトＨＥＲ２発現細胞株（ＮＣＩ−Ｎ８７、ＳＫＯＶ−３、およびＭＤＡ−ＭＢ−４５３）に特異的に結合するが、ヒトＨＥＲ２を発現しないＪｕｒｋａｔに結合しないことを示す。さらに、裸抗体および薬物抱合体化抗体の両方が、同等な平均経口強度（ＭＦＩ）でこれらの細胞に結合する。これらの結果は、抗ＨＥＲ２／Ｔａｐ１８Ｈｒ１が、裸抗体の抗原反応性を保持し、ＨＥＲ２発現細胞に効果的に結合することを示す。
【０２７０】
【表４】
2017525755.tif 000099
【０２７１】
ＪＩＭＴ−１乳がん細胞、ＮＣＩ−Ｎ８７胃がん細胞、およびＳＫＯＶ−３卵巣がん細胞におけるＴａｐ１８Ｈｒ１抱合体化抗ＨＥＲ２システインバリアントの結合能力
薬物抱合を有するかまたは有さない抗ＨＥＲ２−ＩｇＧ１  Ｃｙｓバリアントの結合能力を、ＪＩＭＴ−１乳がん細胞（表５〜７）、ＮＣＩ−Ｎ８７胃がん細胞（表８）、およびＳＫＯＶ−３卵巣がん細胞（表９）において評価した。表５〜９におけるデータは、抗ＨＥＲ２−ＩｇＧ１システインバリアントが、抗ＨＥＲ２−ＩｇＧ１  Ａｂを有する試験された細胞の全てに同等に結合することを示す。さらに、部位特異的抱合体化抗ＨＥＲ２−ＩｇＧ１  ＡＤＣはまた、他のバリアントよりもわずかに低い親和性を示した抗ＨＥＲ２−Ｓ４４２Ｃ−ＩｇＧ１／Ｔａｐ１８Ｈｒ１を除き、抗原反応性を保持した。
【０２７２】
【表５】
2017525755.tif 000100
【０２７３】
【表６】
2017525755.tif 000101
【０２７４】
【表７】
2017525755.tif 000102
【０２７５】
【表８】
2017525755.tif 000103
【０２７６】
【表９】
2017525755.tif 000104
【０２７７】
薬物抱合を有するかまたは有さない抗ＨＥＲ２−ＩｇＧ４ｐ  Ｃｙｓバリアントの結合を、ＪＩＭＴ−１乳がん細胞（表１０〜１１）、ＮＣＩ−Ｎ８７胃がん細胞（表１２）、およびＳＫＯＶ−３卵巣がん細胞（表１３）において評価した。表１０〜１３におけるデータは、抗ＨＥＲ２−ＩｇＧ４ｐシステインバリアントの結合が、抗ＨＥＲ２−ＩｇＧ４ｐ抗体のものと同等であるが、抗ＨＥＲ２−ＩｇＧ１抗体（表５〜９）のものと比較して低いことが示されており、結合活性の減少が、システイン変異ではなく、ＩｇＧ４アイソタイプに起因することが示される。全体としては、部位特異的抱合体化抗ＨＥＲ２−ＩｇＧ４ｐ  ＡＤＣは、抗原反応性を保持した。ＩｇＧ１バリアントと類似して、抗ＨＥＲ２−Ｓ４４２Ｃ−ＩｇＧ４ｐはまた、他のバリアントよりもわずかに低い親和性を示した。
【０２７８】
【表１０】
2017525755.tif 000105
【０２７９】
【表１１】
2017525755.tif 000106
【０２８０】
【表１２】
2017525755.tif 000107
【０２８１】
【表１３】
2017525755.tif 000108
【０２８２】
例３：抗ＨＥＲ２抗体ベースの抗体薬物抱合体（ＡＤＣ）のがん細胞に対するin vitro細胞障害性効果
従来の抱合体化抗ＨＥＲ２抗体（抗ＨＥＲ２／Ｔａｐ１８Ｈｒ１）のin vitro細胞障害活性を、ＨＥＲ２陽性がん細胞株（ＮＣＩ−Ｎ８７、ＳＫＯＶ−３、ＭＤＡ−ＭＢ−４５３、およびＪＩＭＴ−１）およびＨＥＲ２陰性細胞株（Ｊｕｒｋａｔ）において評価した。裸抗体による細胞障害性はまた、並行して試験した。５および１．２５μｇ／ｍＬにおいて、抗ＨＥＲ２裸抗体は、ＮＣＩ−Ｎ８７（胃がん細胞）およびＭＢＡ−ＭＤ−４５３（乳がん細胞）において細胞障害性を誘導することができるが、従来の抱合体化抗ＨＥＲ２は、さらにより強力であった（表１４）。ＪＩＭＴ−１（乳がん細胞）およびＳＫＯＶ−３（卵巣がん細胞）については、薬物抱合体化抗ＨＥＲ２は、５および１．２５μｇ／ｍＬにおいて、５０％を超える増殖阻害を引き起こすることができる（表１４および１５）。ＨＥＲ２陰性細胞株Ｊｕｒｋａｔにおいて細胞障害性は観察されなかった。これらの結果は、Ｔａｐ１８Ｈｒ１抱合体化抗ＨＥＲ２は、抗原特異性を有する標的がん細胞に細胞障害性薬物を送達したことを実証する。
【０２８３】
【表１４】
2017525755.tif 000109
【０２８４】
【表１５】
2017525755.tif 000110
【０２８５】
部位特異的抱合体化抗ＨＥＲ２−Ｃｙｓバリアントのin vitro細胞障害活性もまた、ＮＣＩ−Ｎ８７、ＪＩＭＴ−１、およびＳＫＯＶ−３細胞において評価した。表１６および１７は、抗ＨＥＲ２システインバリアントの試験されたＡＤＣの細胞障害性アッセイの結果を示す。５および１．２５μｇ／ｍＬにおいて、部位特異的ＡＤＣは、ＨＥＲ２陽性がん細胞（ＮＣＩ−Ｎ８７、ＪＩＭＴ−１、およびＳＫＯＶ−３）を殺傷するのに強力であったが、ＨＥＲ２陰性細胞株（Ｊｕｒｋａｔ）においては強力でなかった。わずかに低い結合にもかかわらず、抗ＨＥＲ２−Ｓ４４２Ｃ／Ｔａｐ１８Ｈｒ１は、他のシステインバリアントと同様の程度の、抗原発現細胞における細胞障害性を誘導した。これらの結果は、部位特異的抗ＨＥＲ２  ＡＤＣが、抗原特異性を有する標的がん細胞へ細胞障害性薬物を送達できることを実証する。
【０２８６】
【表１６】
2017525755.tif 000111
【０２８７】
【表１７】
2017525755.tif 000112
【０２８８】
例４：従来の抱合体化抗ＨＥＲ２で処置されたＳＫＯＶ−３異種移植片
抗ＨＥＲ２／Ｔａｐ１８Ｈｒ１の効力を、卵巣がん細胞ＳＫＯＶ−３に対してin vivoで評価した。マウスを、腫瘍細胞接種およそ２時間後、ビヒクル（ＰＢＳ、１００μＬ）または単回用量の１００μＬ中の３ｍｇ／ｋｇのＡＤＣで静脈内処置した（１日目として標識する）。１日目の腫瘍サイズを、マトリゲルを含む接種容量に起因して、１００ｍｍ３として記録した。注射したマトリゲルは、１５日目までに吸収され、腫瘍は確立され、ビヒクル群で着実に増殖した（図４）。抗ＨＥＲ２／Ｔａｐ１８Ｈｒ１での処置により、１７日目に腫瘍増殖が抑制され、この群の全てのマウス（５／５）は、２７日目以降、検出可能でない腫瘍を示した。両方の群の体重が着実に増加するにつれて、細胞障害性は観察されなかった。このデータは、単回注射により、抗ＨＥＲ２／Ｔａｐ１８Ｈｒ１は、ＳＣＩＤマウスにおいて移植された抗原陽性腫瘍の増殖を有効に阻害し得ることを示す。
【０２８９】
例５：従来の抱合体化抗ＨＥＲ２で処置されたＭＤＡ−ＭＢ−４５３異種移植片
抗ＨＥＲ２／Ｔａｐ１８Ｈｒ１の効力を、乳がん細胞ＭＤＡ−ＭＢ−４５３に対してin vivoで評価した。平均接種腫瘍サイズが〜１５０ｍｍ３に達したとき、マウスを、ＰＢＳ（ビヒクル、１００μＬ）または単回用量の１００μＬ中の３ｍｇ／ｋｇのＡＤＣで静脈内処置した（１日目として標識する）。抗ＨＥＲ２／Ｔａｐ１８Ｈｒ１群は、８日目に腫瘍退行を示し、平均腫瘍サイズは、１１日目以降に＜５０ｍｍ３までさらに抑制された（図５）。研究の終わりに、６匹のマウス中３匹が、完全な腫瘍対抗を示した。両方の群において、マウスの体重は着実に増加した。このデータは、抗ＨＥＲ２／Ｔａｐ１８Ｈｒ１は、ＳＣＩＤマウスにおいて移植された抗原陽性腫瘍の増殖を有効に阻害し得ることを示す。
【０２９０】
例６：Ｔａｐ１８Ｈｒ１が従来法で抱合体化された抗ＨＥＲ２および部位特異的抱合体化抗ＨＥＲ２  Ｃｙｓバリアントで処置されたＮＣＩ−Ｎ８７異種移植片
従来の抱合体化抗ＨＥＲ２／Ｔａｐ１８Ｈｒ１の効力を、胃がん細胞ＮＣＩ−Ｎ８７に対してin vivoで評価した。平均接種腫瘍サイズが〜１８０ｍｍ３に達したとき、マウスを、ＰＢＳ（１００μＬ中のビヒクル）またはＡＤＣ（１００μＬ中の３または５ｍｇ／ｋｇ）で二回静脈内処置した（１日目および２２日目として標識する）。ビヒクル群の腫瘍は増殖し、１５日目に５００ｍｍ３に達したが（図６）、抗ＨＥＲ２／Ｔａｐ１８Ｈｒ１群は、５日目に腫瘍増殖の遅延を示し、平均腫瘍サイズは、１９日目以降に＜３０ｍｍ３までさらに抑制された。研究の終わりに、ほとんどの腫瘍が、ＡＤＣ処理群の両方において、１０ｍｍ３以下であった。３つの群において、マウスの体重は着実に増加した。このデータは、抗ＨＥＲ２／Ｔａｐ１８Ｈｒ１は、ＳＣＩＤマウスにおいて移植された抗原陽性腫瘍の増殖を有効に阻害し得ることを示す。
【０２９１】
部位特異的抱合体化抗ＨＥＲ２−Ｃｙｓバリアントの効力を、胃がん細胞ＮＣＩ−Ｎ８７に対してin vivoで評価した。平均接種腫瘍サイズが〜１８０ｍｍ３に達したとき、マウスを、ＰＢＳ（ビヒクル、１００μＬ）または等価な薬物用量のＡＤＣ（１００μＬ中の９．７μｇ／ｋｇ  Ｔａｐ１８Ｈｒ１）で静脈内処置した（１日目として標識する）。図７に示されるように、部位特異的抱合体化バリアントで処置した全てのマウスは、ビヒクル群と比較して、顕著に遅延した腫瘍増殖を示した。ＡＤＣ処置群において体重は変化せず、ビヒクル群において、腫瘍の重量に起因して、わずかに増加した。このデータは、単回注射で、部位特異的抱合体化抗ＨＥＲ２−Ｃｙｓバリアントは、ＳＣＩＤマウスにおいて移植された抗原陽性腫瘍の増殖を有効に阻害し得ることを示す。
【０２９２】
例７：Ｔａｐ１８Ｈｒ１が従来法で抱合体化された抗ＨＥＲ２および部位特異的抱合体化抗ＨＥＲ２−Ｃｙｓバリアントで処置されたＪＩＭＴ−１異種移植片
従来の抱合体化抗ＨＥＲ２／Ｔａｐ１８Ｈｒ１および部位特異的抱合体化抗ＨＥＲ２−Ｃｙｓバリアントの効力を、公知のハーセプチン耐性乳がん細胞ＪＩＭＴ−１に対してin vivoで評価した。平均接種腫瘍サイズが〜１００ｍｍ３に達したとき、マウスを、ＰＢＳ（ビヒクル対照、１００μＬ）またはＡＤＣ（１００μＬ中の３ｍｇ／ｋｇ）で一回静脈内処置した（１日目として標識する）。図８に示されるとおり、全てのＡＤＣ処置群は、ビヒクル群と比較して、７日目以降、腫瘍増殖の顕著な遅延を示した。マウスの体重は、全ての群において着実に増加した。このデータは、単回投与により、従来の抗ＨＥＲ２／Ｔａｐ１８Ｈｒ１だけでなく、部位特異的抱合体化抗ＨＥＲ２−Ｃｙｓバリアントも、ＳＣＩＤマウスにおいて移植されたＨＥＲ２陽性腫瘍の増殖を有効に阻害し得ることを示す。
【図１】
2017525755.tif 000137
【図２】
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【図３】
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【図４】
2017525755.tif 000140
【図５】
2017525755.tif 000141
【図６】
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【図７】
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【図８】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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