(57)【要約】  本発明は、皮下脂肪組織を調節することによる哺乳類の体型の改善方法において使用するための、アドレナリン受容体の作動薬及び／又は拮抗薬のプロドラッグを含む部分投与用医薬組成物であって、プロドラッグのオクタノール／水分配係数が少なくとも０である、部分投与用医薬組成物に関する。さらに、本発明は、皮下脂肪組織を部分的に調節することによる哺乳類の体型の改善方法におけるそれらの使用などの、そのようなプロドラッグの美容上及び治療上の応用に関する。また、本発明は、プロドラッグ自体、並びにこれらのプロドラッグの作製方法に関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
皮下脂肪組織を調節することによる哺乳類の体型の改善方法において使用するための、アドレナリン受容体の作動薬及び／又は拮抗薬のプロドラッグを含む部分投与用医薬組成物であって、
プロドラッグが、前記作動薬又は拮抗薬及び加水分解性部分を含み、
プロドラッグのオクタノール／水分配係数が、少なくとも０である、
部分投与用医薬組成物。
【請求項２】
調節が、部分投与の部位で行われる、
請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
調節が、皮下脂肪組織の量を減少させること、皮下脂肪組織の量を増加させること、又は皮下脂肪組織を強化することを含む、
請求項１又は２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
調節が、皮下脂肪組織の量を減少させることを含む、
請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項５】
プロドラッグのオクタノール／水分配係数が、少なくとも２．３である、
請求項１から４のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項６】
作動薬が、ベータアドレナリン受容体の作動薬（「ベータ作動薬」）、若しくはアルファアドレナリン受容体の作動薬（「アルファ作動薬」）であり、及び／又は拮抗薬が、ベータアドレナリン受容体の拮抗薬（「ベータ拮抗薬」）若しくはアルファアドレナリン受容体の拮抗薬（「アルファ拮抗薬」）である、
請求項１から５のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項７】
・ベータ作動薬が、オクトパミン（オルト、メタ、又はパラオクトパミン、好ましくはパラオクトパミン）、シネフリン（オルト、メタ、又はパラシネフリン、好ましくはパラシネフリン）、ノルエピネフリン、エピネフリン、エフェドリン、フェニルプロパノールアミン、チラミン、エピニン、フェニルエタノールアミン、ベータフェニルエチルアミン、ホルデニン、イソプロピルノルシネフリン、Ｎ−メチルチラミン、サルブタモール、レボサルブタモール、テルブタリン、ピルブテロール、プロカテロール、クレンブテロール、メタプロテレノール、フェノテロール、ビトルテロール、リトドリン、イソプレナリン、サルメテロール、ホルモテロール、バンブテロール、クレンブテロール、オロダテロール、インダテロール、アミベグロン（ＳＲ−５８６１１Ａ）、ＣＬ３１６，２４３、Ｌ−７４２，７９１、Ｌ−７９６，５６８、ＬＹ−３６８，８４２、ミラベグロン（ＹＭ−１７８）、Ｒｏ４０−２１４８、ＣＧＰ１２１７７、ソラベグロン（ＧＷ−４２７，３５３）、又はＢＲＬ３７，３４４であり；
・アルファ拮抗薬が、アリピプラゾール、アセナピン、アチパメゾール、シラゾリン、クロザピン、エファロキサン、イダゾキサン、ルラシドン、メルペロン、ミアンセリン、ミルタザピン、ナピタン、オランザピン、パリペリドン、リスペリドン、フェノキシベンザミン、フェントラミン、ピリベジル、ラウオルシン、リスペリドン、ロチゴチン、クエチアピン、ノルクエチアピン、セチプチリン、トラゾリン、ヨヒンビン、ジプラシドン、又はゾテピンであり；
・ベータ拮抗薬が、カルテオロール、ナドロール、ペンブトロール、ピンドロール、プロプラノロール、ソタロール、チモロール、アセブトロール、アテノロール、ベタキソロール、ビソプロロール、セリプロロース、エスモロール、メトプロロール、ネビボロール、ブシンドロール、カルベジロール、又はラベトロール、好ましくはペンブトロール、ピンドロール、プロプラノロール、アテノロール、メトプロロールＬ−７４８，３２８、Ｌ−７４８，３３７、又はＳＲ５９２３０Ａであり；
・アルファ作動薬が、４−ＮＥＭＤ、７−Ｍｅ−マルサニジン、アグマチン、アプラクロニジン、ブリモニジン、クロニジン、デトミジン、デクスメデトミジン、ファドルミジン、グアナベンズ、グアンファシン、ロフェキシジン、マルサニジン、メデトミジン、メタンフェタミン、ミバゼロール、リルメニジン、ロミフィジン、タリペキソール、チザニジン、トロニジン、キシラジン、キシロメタゾリン、又はＴＤＩＱである、
請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
プロドラッグが、エステルである、
請求項１から７のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項９】
エステルが、Ｃ２〜Ｃ３２アルキルエステルである、
請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
エステルが、ブタノアート、ペンタノアート、ヘプタノアート、アクタノアート、又はデカノアートエステルである、
請求項８又は９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
プロドラッグが、０．００１〜１０００ｍｇ／ｍｌの濃度で組成物中に存在する、
請求項１から１０のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１２】
クリーム、フォーム、ジェル、化粧水、軟膏、パッチ、ペースト、溶液、又はスプレーである、
請求項１から１１のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１３】
プロドラッグが、ベータ作動薬である、
請求項１から１２のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１４】
ベータ作動薬が、オクトパミン又はシネフリンであり、好ましくはｐ−オクトパミン又はｐ−シネフリンである、
請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
ホスホジエステラーゼ阻害剤及び／又はアデニルシクラーゼ刺激剤をさらに含む、
請求項１から１４のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１６】
請求項１から１５のいずれかに記載の医薬組成物を部分的に投与することを含む、
皮下脂肪組織を部分的に調節することによる哺乳類の体型の改善方法。
【請求項１７】
美容的方法である、
請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
プロドラッグが０．００１〜１０００ｍｇ／ｃｍ２の投与量で投与される、
請求項１６又は１７に記載の方法。
【請求項１９】
アドレナリン受容体の作動薬及び／又は拮抗薬のプロドラッグであって、前記作動薬又は拮抗薬及び加水分解性部分を含み、オクタノール／水分配係数が少なくとも０である、
プロドラッグ。
【請求項２０】
エステルである、
請求項１９に記載のプロドラッグ。
【請求項２１】
オクタノール／水分配係数が少なくとも２．３である、
請求項１９又は２０に記載のプロドラッグ。
【請求項２２】
ベータアドレナリン受容体の作動薬（「ベータ作動薬」）である、
請求項１９から２１のいずれかに記載のプロドラッグ。
【請求項２３】
ベータ作動薬が、オクトパミン（オルト、メタ、又はパラオクトパミン、好ましくはパラオクトパミン）、シネフリン（オルト、メタ、又はパラシネフリン、好ましくはパラシネフリン）、ノルエピネフリン、エピネフリン、エフェドリン、フェニルプロパノールアミン、チラミン、エピニン、フェニルエタノールアミン、ベータフェニルエチルアミン、ホルデニン、イソプロピルノルシネフリン、Ｎ−メチルチラミン、サルブタモール、レボサルブタモール、テルブタリン、ピルブテロール、プロカテロール、クレンブテロール、メタプロテレノール、フェノテロール、ビトルテロール、リトドリン、イソプレナリン、サルメテロール、ホルモテロール、バンブテロール、クレンブテロール、オロダテロール、インダテロール、アミベグロン（ＳＲ−５８６１１Ａ）、ＣＬ３１６，２４３、Ｌ−７４２，７９１、Ｌ−７９６，５６８、ＬＹ−３６８，８４２、ミラベグロン（ＹＭ−１７８）、Ｒｏ４０−２１４８、ＣＧＰ１２１７７、ソラベグロン（ＧＷ−４２７，３５３）、又はＢＲＬ３７，３４４である、
請求項２２に記載のプロドラッグ。
【請求項２４】
ベータ作動薬が、オクトパミン又はシネフリン、好ましくはパラオクトパミン又はパラシネフリンである、
請求項２２又は２３に記載のプロドラッグ。
【請求項２５】
医療用途のための、
請求項１９から２４のいずれかに記載のプロドラッグ。
【請求項２６】
皮下脂肪組織を調節することによる哺乳類の体型の改善方法において使用するための、
請求項１９から２４のいずれかに記載のプロドラッグ。
【請求項２７】
皮下脂肪組織の量を減少させる、皮下脂肪組織の量を増加させる、又は皮下脂肪組織を強化するための、
請求項１９から２４のいずれかに記載のプロドラッグの使用。
【請求項２８】
アドレナリン受容体作動薬又はアドレナリン受容体拮抗薬をアシル化剤によりエステル化することを含む、
アドレナリン受容体作動薬又は拮抗薬のプロドラッグの作製方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、皮下脂肪組織を部分的に調節するために有用な薬物又はプロドラッグ、及びこれらの薬物又はプロドラッグを含む医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
アドレナリン受容体作動薬及び／又はアドレナリン受容体拮抗薬の経口投与又は部分投与は、様々な目的として知られており、なかでも脂肪低減が知られている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
しかし、公知の方法は、いずれも皮下脂肪組織を部分的に標的とするために高いオクタノール／水分配係数を有するアドレナリン受容体作動薬若しくはアドレナリン受容体拮抗薬、又はそれらのプロドラッグの使用について開示されていない。アドレナリン受容体作動薬又はアドレナリン受容体拮抗薬による哺乳類を対象とする処置の欠点は、全身濃度が容易に高くなりすぎ、それにより大きな副作用が生じることである。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明は、皮下脂肪組織を調節することによる哺乳類の体型の改善方法において使用するためのアドレナリン受容体の作動薬及び／又は拮抗薬のプロドラッグを含む部分投与用医薬組成物であって、プロドラッグのオクタノール／水分配係数が少なくとも０である、部分投与用医薬組成物に関する。
【０００５】
哺乳類は、本発明において、例えばイヌ、ネコ、ウマ、ネズミ、ラット、又はヒトなどの任意の哺乳動物である。好ましくは、哺乳類は、ヒトである。
【０００６】
本発明の利点は、本発明に係るプロドラッグが、部分投与された場合に脂肪組織に対して高い親和性を有することである。
【図面の簡単な説明】
【０００７】
【図１】リン酸緩衝食塩水（「ＰＢＳ」）、ＰＢＳ／ラット脂肪懸濁液、又はＰＢＳ／ヒト脂肪懸濁液（菱形ｎ＝３、四角ｎ＝２、三角ｎ＝２）中のオクトパミンデカノアート（「ｏｃｔｄｅｃ」）の加水分解の図である。
【図２】グリセロール生成に対する、オクトパミン又はオクトパミンデカノアートを含むＰＢＳ／ヒト脂肪懸濁液のインキュベーションの効果の図である。
【図３】カルボマーヒドロゲル（３×３ｃｍに対して０．５ｍｌ）、続いてカルボマーヒドロゲル中の５ｍｇ／ｍｌオクトパミンデカノアート（３×３ｃｍに対して０．５ｍｌ）による、胴回りに対するラットの処置の効果の図である。処置は午前９時及び午後４時の１日２回であった（それぞれｎ＝４）。
【図４】カルボマーヒドロゲル（３×３ｃｍに対して０．５ｍｌ）、続いてカルボマーヒドロゲル中の５ｍｇ／ｍｌオクトパミンデカノアート（３×３ｃｍに対して０．５ｍｌ）による、血漿グリセロールレベルに対するラットの処置の効果の図である（それぞれｎ＝４）。
【図５】オクトパミンデカノアートへの考えられる合成経路の図である。
【図６ａ】ヒト脂肪の異なる濃度における、１０μＭのオクトパミンデカノアートのインビトロでの加水分解の図である。
【図６ｂ】ヒト脂肪の異なる濃度における、１００μＭのオクトパミンデカノアートのインビトロでの加水分解の図である。
【図６ｃ】ヒト脂肪の異なる濃度における、１０μＭのシネフリンデカノアートのインビトロでの加水分解の図である。
【図６ｄ】ヒト脂肪の異なる濃度における、１００μＭのシネフリンデカノアートのインビトロでの加水分解の図である。
【図７】血漿中のオクトパミンデカノアートの加水分解の図である。
【図８】３７℃におけるＰＢＳ中のオクトパミンデカノアート、オクトパミンペンタノアート、及びシネフリンデカノアートの加水分解の図である。
【図９】３７℃におけるＰＢＳ中のオクトパミン及びシネフリンの安定性の図である。実験はｎ＝２である。
【図１０ａ】ベータ拮抗薬プロプラノロールによるオクトパミンデカノアート１０μＭの脂肪懸濁液中における加水分解の阻害の図である。実験はｎ＝４〜８である。
【図１０ｂ】リパーゼ阻害剤オルリスタットによるオクトパミンデカノアート１０μＭの脂肪懸濁液中における加水分解の阻害の図である。実験はｎ＝４〜８である。
【図１０ｃ】ベータ拮抗薬プロプラノロールによるシネフリンデカノアート１０μＭの脂肪懸濁液中における加水分解の阻害の図である。実験はｎ＝４〜８である。
【図１０ｄ】リパーゼ阻害剤オルリスタットによるシネフリンデカノアート１０μＭの脂肪懸濁液中における加水分解の阻害の図である。実験はｎ＝４〜８である。
【図１０ｅ】図１０ａ〜図１０ｄのデータを経時で表す。
【図１１】オクトパミンヒドロゲル２．７５ｍｇ／ｍｌ、オクトパミンデカノアート５ｍｇ／ｍｌ、及びオクトパミンペンタノアート３．９８ｍｇ／ｍｌを０．２５ｍｌ塗布した後の、ヒト皮膚を通したインビトロの皮膚浸透の図である。浸透は、塗布の２時間後、皮膚の下の６０ｍｌ灌流浴の濃度である。実験はｎ＝２〜３である。
【図１２】オクトパミン（２．７５ｍｇ／ｍｌ）、オクトパミンデカノアート（５ｍｇ／ｍｌ）、及びオクトパミンペンタノアート（３．９８ｍｇ／ｍｌ）を０．２５ｍｌ塗布した後、塗布の２０時間後における、ヒト皮下脂肪の深さの増加に応じた層中のオクトパミンの組織濃度の図である。
【図１３ａ】３７℃で４時間の、２５０ｍｇ／ｍｌヒト脂肪懸濁液中のグリセリン生成に対する、イソプレナリンの効果の図である。実験はｎ＝４〜２０である。
【図１３ｂ】３７℃で４時間の、２５０ｍｇ／ｍｌヒト脂肪懸濁液中のグリセリン生成に対する、オクトパミンの効果の図である。実験はｎ＝４〜２０である。
【図１３ｃ】３７℃で４時間の、２５０ｍｇ／ｍｌヒト脂肪懸濁液中のグリセリン生成に対する、シネフリンの効果の図である。実験はｎ＝４〜２０である。
【図１３ｄ】３７℃で４時間の、２５０ｍｇ／ｍｌヒト脂肪懸濁液中のグリセリン生成に対する、プロプラノロールの効果の図である。実験はｎ＝４〜２０である。
【図１４】ヒトの胴回りに対する、２．７５ｍｇ／ｍｌの遊離型オクトパミンを含むヒドロゲル（２．５ｍｌ、１日１回）、５ｍｇ／ｍｌのオクトパミンデカノアートを含むヒドロゲル（２．５ｍｌを１日１回）、及び５ｍｇ／ｍｌのオクトパミンデカノアートを含むヒドロゲル（５ｍｌを１日２回）の、腹部及び腰への塗布の効果の図である。実験は２回の実験の平均である（ｎ＝２）。
【図１５】１人の個体の胴回りに対する、作動薬又は拮抗薬を含まない対照ヒドロゲル（２．５ｍｌ、１日１回）、２．７５ｍｇ／ｍｌのオクトパミン（２．５ｍｌ、１日１回）、５ｍｇ／ｍｌのオクトパミンデカノアート（「ＯｃｔＤｅｃ」、２．５ｍｌを１日１回、及び５ｍｌを１日２回）、３．９８ｍｇ／ｍｌのオクトパミンペンタノアート（「ＯｃｔＰｅｎｔ」、２．５ｍｌ、１日１回）、及び５ｍｇ／ｍｌのシネフリンデカノアート（「ＳｙＤｅｃ」、２．５ｍｌを１日１回、及び５ｍｌを１日１回）の、腹部及び腰への塗布の効果の図である。
【図１６】腹部及び腰の皮下脂肪に対する、５ｍｇ／ｍｌのオクトパミンデカノアートを含むヒドロゲル（５ｍｌ、１日２回）の効果の図である。実験は２回又は３回の試行の平均である（ｎ＝２〜３）。
【図１７ａ】オクトパミンデカノアート（５ｍｇ／ｍｌ、２．５ｍｌ及び５ｍｌ）を含むヒドロゲルの単回投与における、オクトパミンの血漿レベルの図である。実験は１回又は２回の実験の平均である（ｎ＝ｌ〜２）。
【図１７ｂ】遊離型オクトパミン（２．７５ｍｇ／ｍｌ、２．５ｍｌ及び５ｍｌ）を含むヒドロゲルの単回投与における、オクトパミンの血漿レベルの図である。実験は１回又は２回の実験の平均である（ｎ＝ｌ〜２）。
【図１７ｃ】オクトパミンペンタノアート（３．９８ｍｇ／ｍｌ、２．５ｍｌ）を含むヒドロゲルの単回投与における、オクトパミンの血漿レベルの図である。実験は１回又は２回の実験の平均である（ｎ＝ｌ〜２）。
【図１８】５ｍｇ／ｍｌのオクトパミンデカノアート（５ｍｌ、１日２回）を含むヒドロゲルによる長期処置中の、塗布の１２時間後の遊離型オクトパミンの血漿レベルの図である。実験は１回又は２回の試行の平均である（ｎ＝ｌ〜２）
【図１９】５ｍｇ／ｍｌのオクトパミンデカノアート（５ｍｌ、１日２回）を含むヒドロゲルの腹部及び腰への塗布における、心収縮、心臓拡張期、及び心拍数の図である。データは２人の平均を表す。
【図２０】３７℃で４時間の、２５０ｍｇ／ｍｌのヒト脂肪懸濁液中のグリセロール生成に対する、ベータ−３作動薬（ＳＲ  ５８６１１Ａ、ＣＬ  ３１６２４３、ＣＧＰ１２１７７）、ベータ拮抗薬（ＳＲ  ５９２３０Ａ）、アルファ−２拮抗薬のヨヒンビン（「Ｙｏ」）、アルファ２作動薬のキシラジン（「Ｘｙｌ」）、及びホスホジエステラーゼ阻害剤のカフェイン（「Ｃｏｆ」）の効果の図である。実験はｎ＝３〜４である。
【図２１】シネフリンデカノアートへの考えられる合成経路の図である。
【図２２】本発明に係るプロドラッグエステルへの一般的な合成法の図である。式中、Ｒ１ａ及びＲ１ｂがＨ又はＯＨであり、Ｒ１ａ及びＲ１ｂのうちの少なくとも１つがＯＨであり、Ｒ２はＨ又はメチルであり、Ｘは脱離基、好ましくはクロリド、ブロミド、又はヨージドであり、Ｒ３はベンジル又はアルキル（好ましくはメチル又はイソプロピル）であり、Ｒ４は上記で定義されるＣ２〜Ｃ３２アルキルエステルを得るためのＣ１〜Ｃ３１アルキル基であり、Ｒ５ａ及びＲ５ｂのうちの少なくとも１つはＲ４ＣＯである。
【図２３】エステルプロドラッグの合成の一般的な経路の図である。式中、１０はフリーのＯＨ−基を有する、他の部分で定義されるアドレナリン受容体の作動薬又は拮抗薬であり、このフリーのＯＨ−基は好ましくはベンジル又はフェノールのＯＨ−基であり、１１はアシル化剤、好ましくは酸ハロゲン化物又は無水物であり、ＬＧは脱離基であり、好ましくはハロゲン化物（好ましくはクロリド）、又はカルボキシラートから選択され、ＨＭは他の部分で定義される加水分解性部分である。
【図２４】アミドプロドラッグ１５の生成の一般的な経路の図である。式中、１３は少なくとも１つのアミン水素を含むフリーのアミン基を有する、他の部分で記載されるアドレナリン受容体の作動薬又は拮抗薬であり、このフリーのアミン基は好ましくは第１級アルキルアミンであり、Ｒ”はＨ又はＣ１〜Ｃ８直鎖、分岐、又は環状アルキル基から、例えばメチル、エチル、又はイソプロピル、好ましくはＨなどから選択され、好ましくは、フリーのＯＨ−基、より好ましくはフェノール又はベンジルのフリーのＯＨ−基は、適切な保護基によって保護され、１４はカルボン酸基によって官能化された他の部分で定義される加水分解性部分であり、カップリング剤は任意の公知のカップリング剤、例えばＤＣＣ、ＥＤＣＩ、ＨＡＴＵ、又はＨＢＴＵなどであってもよい。
【図２５】カルバマートプロドラッグ１８の生成の一般的な経路の図である。式中、１６はフリーのＯＨ−基を有する、他の部分で記載されるアドレナリン受容体の作動薬又は拮抗薬であり、このフリーのＯＨ−基は好ましくはベンジル又はフェノールのＯＨ−基であり、１７はイソシアナートによって官能化された、他の部分で定義される加水分解性部分である。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
部分投与とは、プロドラッグが哺乳類の皮膚に塗布され、皮膚に浸透することを意味する。或いは、部分投与とは、本発明において、プロドラッグがマイクロインジェクション又はイオントフォレーシスによって投与されることを意味する場合もある。そのように、本発明における部分投与は、経皮投与と同じである。本発明に係るプロドラッグは、好ましくは部分投与の部位に存在している皮下脂肪組織を標的とする。これにより、投与部位の皮下脂肪組織においてプロドラッグが部分的に蓄積され、本質的に全身の吸収を回避する。
【０００９】
本発明に係るプロドラッグの皮下脂肪組織への吸収は、部分的な脂肪組織における作動薬及び／又は拮抗薬の濃度を増加させるが、プロドラッグは部分的に存在する内因性酵素の作用によって加水分解され、その結果アドレナリン受容体作動薬及び／又はアドレナリン受容体拮抗薬が皮下脂肪組織内のプロドラッグから放出される。プロドラッグから作動薬又は拮抗薬を放出させることが可能な酵素としては、例えばリパーゼ、エステラーゼ、パラオキソナーゼ、カルボキシルエステラーゼ、アセチルコリンエステラーゼ、コリンエステラーゼ、ビフェニル加水分解酵素、アルカリホスファターゼ、アミダーゼ、トランスペプチダーゼ、ＣＹＰ４５０、トリプシン、キモトリプシン、エラスターゼ、カルボキシペプチダーゼ、アミノペプチダーゼが挙げられる。好ましくは、酵素はリパーゼ酵素である。
【００１０】
好ましくは、皮下脂肪組織中に存在する内因性酵素が、プロドラッグから作動薬又は拮抗薬を放出させることが可能かは、プロドラッグを対象とする酵素又は組織に曝し、例えば紫外可視分光測定、質量分析法、ガスクロマトグラフィー、又は液体クロマトグラフィーなどの適切な分析技術により、薬物がプロドラッグから放出されるかを測定することによって試験できる。
【００１１】
プロドラッグの脂肪組織に対する親和性は、作動薬又は拮抗薬の全身濃度に本質的に影響を与えず、部分的な脂肪組織における作動薬又は拮抗薬の濃度を何倍も増加できる利点を有する。これは、先行技術のアドレナリン受容体作動薬又はアドレナリン受容体拮抗薬の投与に付随する副作用を回避する。
【００１２】
脂肪組織中の増加した潜在的な濃度は、さらなる作動薬又は拮抗薬が脂肪組織中に吸収されない場合と比較して、皮下脂肪組織に対する作動薬又は拮抗薬の自然の効果を高める。これは、哺乳類の体の部分的な改善を可能にする、なぜなら作動薬又は拮抗薬は皮下脂肪組織中の脂肪の分解又は脂肪の蓄積を制御するアドレナリン受容体と相互作用するからである。
【００１３】
さらに、部分投与の経路は、肝臓の初期の通過の影響を回避し、体型改善に関与する皮下脂肪組織中の部分的な濃度の増加に寄与する。
【００１４】
本発明に係る医薬組成物は、オクタノール／水分配係数が少なくとも０、好ましくは少なくとも１、より好ましくは少なくとも２、より好ましくは少なくとも２．３、さらにより好ましくは少なくとも２．５、さらにより好ましくは少なくとも３であるアドレナリン受容体の作動薬又は拮抗薬を含む。オクタノール／水分配係数は、化合物の親油性の指標であって当業者に周知である。
【００１５】
オクタノール／水分配係数は、対象とする溶質としての一定量の作動薬、拮抗薬、又はプロドラッグを等量のオクタノール及び水の混合物中に溶解させ、次いで各溶媒中の溶質の濃度を測定することからなる、振とうフラスコ法にて決定できる。オクタノール／水分配係数は、水中の濃度に対するオクタノール中の溶質の濃度比にて計算され、１０ｌｏｇ値として表される。オクタノール／水分配係数は、ｌｏｇＰとも呼ばれる。オクタノール／水分配係数は、例えばＣｈｅｍＳｋｅｔｃｈ（登録商標）又はＣｈｅｍＤｒａｗ（登録商標）などの標準的化学ソフトウェアでの計算にて正確に予測できる。
【００１６】
オクタノール／水分配係数が０とは、溶質がオクタノール相及び水相中に等しい濃度で存在することを意味し、一方、オクタノール水分配係数が２とは、オクタノール中の溶質の濃度が水中の溶質の濃度の１００倍であることを意味する。
【００１７】
二種類のアドレナリン受容体である、アルファアドレナリン受容体及びベータアドレナリン受容体が存在する。
【００１８】
作動薬（「アルファ作動薬」）によるアルファアドレナリン受容体の刺激は、リパーゼ活性が抑制される効果がある。リパーゼ活性の抑制は、トリグリセリドの生成と比較してトリグリセリドの加水分解が低減するという効果がある。これは組織中のトリグリセリドの量を増加させる効果があり、それによって皮下脂肪組織の量を増加させる。拮抗薬（「アルファ拮抗薬」）によるアルファアドレナリン受容体の阻害は、反対の効果があり、皮下脂肪組織の量を減少させる。
【００１９】
作動薬（「ベータ作動薬」）によるベータアドレナリン受容体の刺激は、リパーゼ活性が増加する効果があり、その結果トリグリセリドの加水分解がトリグリセリドの生成と比較して増加する。トリグリセリドの量が減少すると、皮下脂肪組織の量は減少する。拮抗薬（「ベータ拮抗薬」）によるベータアドレナリン受容体の阻害は、反対の効果があり、皮下脂肪組織の量を増加させる。
【００２０】
したがって、ベータアドレナリン受容体作動薬又はアルファアドレナリン受容体拮抗薬のいずれかの皮下脂肪組織中の存在が増加すると、皮下脂肪組織の量が減少する効果が分かる。ベータアドレナリン受容体拮抗薬又はアルファアドレナリン受容体作動薬のいずれかの皮下脂肪組織中の存在が増加すると、皮下脂肪組織の量が増加する効果がある。
【００２１】
ベータアドレナリン受容体は、例えばベータ−１、ベータ−２、又はベータ−３受容体でよいが、好ましくは、ベータ−３受容体である。アルファアドレナリン受容体は、好ましくはアルファ−２アドレナリン受容体である。
【００２２】
作動薬は、アドレナリン受容体を活性化する（刺激する）化合物であり、拮抗薬は、アドレナリン受容体を阻害する化合物である。化合物がアドレナリン受容体の作動薬か又は拮抗薬かは、適切なセカンドメッセンジャーのシグナルに対する化合物の影響を調べることで試験できる。
【００２３】
ベータアドレナリン受容体の作動薬（ベータアドレナリン受容体作動薬、又は「ベータ作動薬」とも呼ばれる）は、本発明において、ベータアドレナリン受容体、好ましくはベータ−３受容体を活性化する任意の化合物である。代わり又はさらに、これは実施例に記載される方法にしたがってグリセリンを増加させる任意の化合物である。
【００２４】
化合物がベータアドレナリン受容体、好ましくはベータ−３アドレナリン受容体の作動薬かは、適切な受容体含有物質を含む化合物のインキュベーションにおけるセカンドメッセンジャーのシグナルの刺激又は阻害を測定することで試験できる。適切なセカンドメッセンジャーのシグナルは、例えば環状ＡＭＰ（ｃＡＭＰ）である。セカンドメッセンジャーとしてのｃＡＭＰの場合、ｃＡＭＰの量の増加は、ベータアドレナリン受容体の刺激を示す。逆に、ｃＡＭＰの量の減少は、ベータアドレナリン受容体の阻害を示す。
【００２５】
アルファアドレナリン受容体の場合、作動薬は、ｃＡＭＰの量を減少させ、阻害剤は、ｃＡＭＰの量を増加させる。
【００２６】
作動薬は、部分作動薬又は完全作動薬であってもよい。完全作動薬は、受容体に結合するとその受容体の最大の活性化を示す作動薬である。部分作動薬は、受容体に結合すると完全作動薬にて得られる活性化と比較して部分的な活性化のみを示す作動薬である。部分作動薬及び完全作動薬は、完全作動薬により受容体を活性化させ、上記のような適切なセカンドメッセンジャーのシグナルに基づいて活性化を記録することにより、その最大の活性化の大きさを測定することで識別できる。試料作動薬により得られるセカンドメッセンジャーのシグナルが完全作動薬によって得られるシグナルと同様の高さの場合、試料作動薬は、完全作動薬である。セカンドメッセンジャーのシグナルがより低い場合は、部分作動薬である。本発明において、部分作動薬及び完全作動薬は共に作動薬と考えられるが、完全作動薬が好ましい。
【００２７】
作動薬は、セカンドメッセンジャーのシグナルを直接的又は間接的に増加又は減少できる。直接的な活性化とは、作動薬が、作動薬とアドレナリン受容体との間の直接的な分子相互作用によってセカンドメッセンジャーのシグナルを増加させることを意味する。間接的な活性化とは、作動薬が、アドレナリン受容体でない種との分子相互作用によってセカンドメッセンジャーのシグナルを増加させることを意味する。或いは、間接的な活性化は、再取り込み阻害などのメカニズムによるノルエピネフリンなどの天然のベータ作動薬の増加によって生じる。
【００２８】
化合物がアドレナリン受容体の間接的作動薬かは、ノルエピネフリン取り込み分析、又はホスホジエステラーゼ阻害分析にて試験できる。アフィニティ（ＩＣ５０）は、典型的には０．０５ｎＭ〜２００ｎＭの範囲である。アドレナリン受容体の間接的作動薬としては、限定されないがＮＥ（ノルエピネフリン）取り込み阻害剤、ＮＥリリーサー（ＮＥ  ｒｅｌｅａｓｅｒ）、ホスホジエステラーゼ阻害剤、アデニルシクラーゼ活性化物質、及び神経伝達調節物質が挙げられる。好ましくは、本発明に係る間接的アドレナリン受容体作動薬は、フェンフルラミン、フォルスコリン、カフェイン、テオフィリン、リモナバン、又はアンフェタミン、最も好ましくはアンフェタミン、フォルスコリン、又はカフェインである。
【００２９】
アドレナリン受容体作動薬の例としては、ベータ作動薬及びアルファ作動薬が挙げられる。ベータ作動薬が好ましい。ベータ作動薬の中では、ベータ−３作動薬が好ましい。アルファ作動薬の中では、アルファ−２作動薬が好ましい。すべての作動薬の中で、ベータ−３作動薬及びアルファ−２作動薬が非常に好ましく、最も好ましいのはベータ−３作動薬である。
【００３０】
適切なベータ作動薬（アドレナリン受容体作動薬とも呼ばれる）の例は、オクトパミン（オルト、メタ、又はパラオクトパミン、好ましくはパラオクトパミン）、シネフリン（オルト、メタ、又はパラシネフリン、好ましくはパラシネフリン）、ノルエピネフリン、エピネフリン、エフェドリン、フェニルプロパノールアミン、チラミン、エピニン、フェニルエタノールアミン、ベータフェニルエチルアミン、ホルデニン、イソプロピルノルシネフリン、Ｎ−メチルチラミン、サルブタモール、レボサルブタモール（ｌｅｖｏｓａｌｂｕｔａｍｏｌ）、テルブタリン、ピルブテロール、プロカテロール、クレンブテロール、メタプロテレノール、フェノテロール、ビトルテロール、リトドリン、イソプレナリン、サルメテロール、ホルモテロール、バンブテロール、クレンブテロール、オロダテロール、インダテロール、アミベグロン（ＳＲ−５８６１１Ａ）、ＣＬ３１６，２４３、Ｌ−７４２，７９１、Ｌ−７９６，５６８、ＬＹ−３６８，８４２、ミラベグロン（ＹＭ−１７８）、Ｒｏ４０−２１４８、ＣＧＰ１２１７７、ソラベグロン（Ｓｏｌａｂｅｇｒｏｎ）（ＧＷ−４２７，３５３）、及びＢＲＬ３７，３４４である。
【００３１】
好ましいベータ作動薬は、オクトパミン（オルト、メタ、又はパラオクトパミン、好ましくはパラオクトパミン）、シネフリン（オルト、メタ、又はパラシネフリン、好ましくはパラシネフリン）、ノルエピネフリン、エピネフリン、エフェドリン、フェニルプロパノールアミン、チラミン、エピニン、フェニルエタノールアミン、ベータ−フェニルエチルアミン、ＢＲＬ３７，３４４、ホルデニン、イソプロピルノルシネフリン、Ｎ−メチルチラミン、イソプレナリン、アミベグロン（ＳＲ−５８６１１Ａ）、Ｌ−７４２，７９１、Ｌ−７９６，５６８、ＬＹ−３６８，８４２、ミラベグロン（ＹＭ−１７８）、Ｒｏ４０−２１４８、ＣＧＰ１２１７７、及びソラベグロン（ＧＷ−４２７，３５３）である。
【００３２】
より好ましいベータ作動薬は、オクトパミン（オルト、メタ、又はパラオクトパミン、好ましくはパラオクトパミン）、シネフリンシネフリン（オルト、メタ、又はパラシネフリンシネフリン、好ましくはパラシネフリン）、イソプレナリン、ＳＲ５８６１１Ａ、ＣＧＰ１２１７７であり、さらにより好ましいのは（オルト、メタ、又はパラオクトパミン、好ましくはパラオクトパミン）、シネフリン（オルト、メタ、又はパラシネフリン、好ましくはパラシネフリン）、及びイソプレナリンであり、より好ましいのはパラオクトパミン、パラシネフリン、及びイソプレナリンであり、最も好ましいのはパラオクトパミン及びパラシネフリン、好ましくはパラオクトパミンである。
【００３３】
ベータ作動薬の中では、ベータ−３作動薬が好ましい。ベータ−３作動薬は、例えばオクトパミン（オルト、メタ、又はパラオクトパミン、好ましくはパラオクトパミン）、シネフリン（オルト、メタ、又はパラシネフリン、好ましくはパラシネフリン）、イソプロピルノルシネフリン、アミベグロン（ＳＲ−５８６１１Ａ）、Ｌ−７４２，７９１、Ｌ−７９６，５６８、ＬＹ−３６８，８４２、ミラベグロン（ＹＭ−１７８）、Ｒｏ４０−２１４８、ソラベグロン（ＧＷ−４２７，３５３）、ＣＧＰ１２１７７、及びＢＲＬ３７，３４４である。
【００３４】
最も好ましいベータ−３−作動薬は、（オルト、メタ、又はパラ）オクトパミン、及び（オルト、メタ、又はパラ）シネフリンであり、最も好ましくはパラオクトパミン及びパラシネフリンである。
【００３５】
適切なアルファ作動薬、特にアルファ−２作動薬の例は、４−ＮＥＭＤ、７−Ｍｅ−マルサニジン（ｍａｒｓａｎｉｄｉｎｅ）、アグマチン、アプラクロニジン、ブリモニジン、クロニジン、デトミジン、デクスメデトミジン、ファドルミジン（Ｆａｄｏｌｍｉｄｉｎｅ）、グアナベンズ、グアンファシン、ロフェキシジン、マルサニジン、メデトミジン、メタンフェタミン、ミバゼロール（Ｍｉｖａｚｅｒｏｌ）、リルメニジン、ロミフィジン（Ｒｏｍｉｆｉｄｉｎｅ）、タリペキソール、チザニジン、トロニジン、キシラジン、キシロメタゾリン、及びＴＤＩＱである。
【００３６】
好ましいアルファ作動薬は、キシロメタゾリン、クロニジン、グアナベンズ、キシラジン、及びグアンファシンであり、最も好ましいアルファ作動薬はキシロメタゾリン及びキシラジン、最も好ましくはキシラジンである。
【００３７】
アドレナリン受容体の拮抗薬は、限定されないが、ベータ拮抗薬、ベータ−３拮抗薬、及びアルファ−２拮抗薬が挙げられる。好ましくは、ベータ−３拮抗薬が本発明において使用される。化合物がアドレナリン受容体の拮抗薬かは、上記のように決定できる。
【００３８】
適切なベータ拮抗薬の例は、カルテオロール、ナドロール、ペンブトロール、ピンドロール、プロプラノロール、ソタロール、チモロール、アセブトロール、アテノロール、ベタキソロール、ビソプロロール、セリプロロース、エスモロール、メトプロロール、ネビボロール、ブシンドロール、カルベジロール、及びラベトロール（Ｌａｂｅｔｏｌｏｌ）、Ｌ−７４８，３２８、Ｌ−７４８，３３７、及びＳＲ５９２３０Ａである。好ましいベータ拮抗薬は、ペンブトロール、ピンドロール、プロプラノロール、アテノロール、メトプロロール、Ｌ−７４８，３２８、Ｌ−７４８，３３７、及びＳＲ５９２３０Ａである。好ましくは、本発明に係るベータアドレナリン受容体拮抗薬は、プロプラノロール、ＳＲ５９２３０Ａ又はメトプロロールであり、最も好ましくはプロプラノロール又はＳＲ５９２３０Ａ、最も好ましくはＳＲ５９２３０Ａである。
【００３９】
適切なベータ−３拮抗薬の例は、Ｌ−７４８，３２８、Ｌ−７４８，３３７、及びＳＲ５９２３０Ａである。
【００４０】
適切なアルファ拮抗薬、特にアルファ−２拮抗薬の例は、アリピプラゾール、アセナピン、アチパメゾール、シラゾリン、クロザピン、エファロキサン、イダゾキサン、ルラシドン、メルペロン、ミアンセリン、ミルタザピン、ナピタン（Ｎａｐｉｔａｎｅ）、オランザピン、パリペリドン、リスペリドン、フェノキシベンザミン、フェントラミン、ピリベジル、ラウオルシン、ロチゴチン、クエチアピン、ノルクエチアピン（Ｎｏｒｑｕｅｔｉａｐｉｎｅ）、セチプチリン、トラゾリン、ヨヒンビン、ジプラシドン、ゾテピン、好ましくはヨヒンビンである。
【００４１】
プロドラッグは、加水分解性部分に共有結合している、上記のアドレナリン受容体の作動薬又は拮抗薬を含む化合物と定義される。インビボにおいて、プロドラッグは、作動薬又は拮抗薬と加水分解性部分との間の共有結合の加水分解によって作動薬又は拮抗薬を放出し、それによりプロドラッグ放出する。本発明に係るプロドラッグのオクタノール／水分配係数（ｌｏｇＰ）は、少なくとも０、好ましくは少なくとも１、より好ましくは少なくとも２、より好ましくは少なくとも２．３、さらにより好ましくは少なくとも２．５、さらにより好ましくは少なくとも３である。好ましくは、加水分解性部分は、遊離型の作動薬又は拮抗薬よりも疎水性が高く、その結果プロドラッグのｌｏｇＰは、遊離型の作動薬又は拮抗薬よりも高い。
【００４２】
本発明における加水分解性部分は、親油性と呼ぶこともできる。本発明における親油性とは、そのｌｏｇＰが少なくとも０、好ましくは少なくとも１、より好ましくは少なくとも２、より好ましくは少なくとも２．３、さらにより好ましくは少なくとも２．５、さらにより好ましくは少なくとも３であることを意味する。一般に、そのような基は、公知でありアルキル基を含む。
【００４３】
適切なアルキル基は、好ましくはＣ２〜Ｃ３２アルキル基、好ましくはＣ２〜Ｃ２４、より好ましくはＣ４〜Ｃ２０直鎖又は分岐、飽和又は不飽和アルキル基、より好ましくはＣ２〜Ｃ２４、より好ましくはＣ４〜Ｃ２０直鎖アルキル基である。さらにより好ましくは、アルキル基はＣ５〜Ｃ１８飽和又は不飽和アルキル基、例えばペンタン酸、ヘプタン酸、オクタン酸又はデカン酸に由来するアルキル基などであり、より好ましくはＣ７〜Ｃ１２飽和又は不飽和脂肪アルキル基である。本発明におけるアルキル基は、分岐していてもよいが、好ましくはアルキル基は、一方の末端に、作動薬又は拮抗薬への結合に使われる官能基を有する直鎖である。直鎖は、飽和であってもよく、又は１つ又は複数の二重結合を含んでいてもよい。作動薬又は拮抗薬への結合に使われる適切な官能基は、例えばカルボン酸基、酸ハロゲン化物、又はイソシアナートである。
【００４４】
プロドラッグが個体に投与されると、プロドラッグは、例えば上記の内因性酵素の作用によってインビボで加水分解されて作動薬又は拮抗薬を放出する。
【００４５】
本発明に係るプロドラッグは、エステル、アミド、アミノ酸エステル、リン酸エステル、カルボナート、カルバマート、オキシム、Ｎ−マンニッヒ塩基、エナミノン、イミン、カルバミド、ＰＥＧコンジュゲート、又は分子内プロセスに基づくプロドラッグでもよい。好ましくは、プロドラッグは、エステル、カルバマート、又はアミド、より好ましくはエステル又はアミド、最も好ましくはエステルである。本発明に係るプロドラッグは、脂肪組織中に吸収されると、インビボで加水分解され、アドレナリン受容体作動薬又はアドレナリン受容体拮抗薬を放出し、その後アドレナリン受容体に対する作動薬又は拮抗薬の作用によって皮下脂肪組織を調節する。
【００４６】
非常に好ましい実施形態において、本発明に係るプロドラッグは、アドレナリン受容体作動薬のエステルである。代替的な好ましい実施形態において、本発明に係るプロドラッグは、アドレナリン受容体拮抗薬のエステルである。
【００４７】
エステルは、本発明において、アシル化剤との反応によってフリーの−ＯＨ基上でエステル基によりエステル化された化合物である。好ましくは、エステル基は、親油性エステル基である。好ましくは、フリーの−ＯＨ基は、アドレナリン受容体作動薬又は拮抗薬のフェニル環上に位置している。さらに好ましくは、すべてのフリーの−ＯＨ基が親油性エステル基で置換されている。
【００４８】
本発明におけるエステル基は、親油性であってもよい。本発明における親油性とは、そのｌｏｇＰが少なくとも０、好ましくは少なくとも１、より好ましくは少なくとも２、より好ましくは少なくとも２．３、さらにより好ましくは少なくとも２．５、さらにより好ましくは少なくとも３であることを意味する。一般に、そのような基は公知であり、疎水性エステル基、例えばアルキルエステルなど、好ましくはＣ２〜Ｃ３２アルキルエステルなどを含む。
【００４９】
エステル基は、好ましくはＣ２〜Ｃ２４、より好ましくはＣ４〜Ｃ２０直鎖又は分岐、飽和又は不飽和アルキルエステル、より好ましくはＣ２〜Ｃ２４、より好ましくはＣ４〜Ｃ２０脂肪酸エステルである。さらにより好ましくは、エステル基は、Ｃ５〜Ｃ１８飽和又は不飽和脂肪酸エステル、例えばペンタノアート、ヘプタノアート、オクタノアート、又はデカノアートエステルなどであり、より好ましくはＣ７−Ｃ１２飽和又は不飽和脂肪酸エステル、最も好ましくはデカノアートエステルである。本発明における脂肪酸は、分岐していてもよいが、好ましくは脂肪酸は直鎖である。好ましくは、本発明における脂肪酸は、天然脂肪酸、すなわち一方の末端にカルボン酸基を有するｎ個の炭素原子の直鎖であり、この直鎖は飽和していてもよく、又は１つ若しくは複数の二重結合を含んでいてもよい。
【００５０】
高い皮膚浸透のために、代替的な好ましい脂肪酸エステル基は、ペンタノアートエステル、ヘプタノアートエステル、オクタノアートエステル、又はデカノアートエステルであり、最も好ましくはペンタノアートエステルである。
【００５１】
プロドラッグは、多くの合成経路にしたがって調製できる。有機化学の当業者は、本発明に係るプロドラッグの無数の合成法を考え付くことができる。デカノアートエステルプロドラッグへの適切な経路を図５に示す。この経路は、塩化デカノイルを異なるアシル化剤で置き換えることによって、本発明に係る他のアルキルエステルプロドラッグを得るように適合させてもよい。この例は、塩化デカノイル（Ｃ９Ｈ１９ＣＯＣｌ）の代わりに塩化バレロイルを使用してオクトパミンペンタノアートを得る。さらに、ジベンジルアミン２を異なるアミンで置き換えることによって、異なるアミン部分を得てもよい。この例は、図２１に示され、式中、ベンジルメチルアミン６がジベンジルアミン２の代わりに使用される。この方法は、１に由来するフェノールコアを別のフェノール又はビスフェノールで置き換え、使用される試薬の量を適切に修正するように容易に適合できる。
【００５２】
したがって、プロドラッグへの考えられる一般的な合成経路が図２２に示され、式中、Ｒ１ａ及びＲ１ｂがＨ又はＯＨであり、Ｒ１ａ及びＲ１ｂのうちの少なくとも１つがＯＨであり、Ｒ２はＨ又はメチルであり、Ｘは脱離基、好ましくはクロリド、ブロミド、又はヨージドであり、Ｒ３はベンジル又はアルキル（好ましくはメチル又はイソプロピル）であり、Ｒ４は上記で定義されるＣ２〜Ｃ３２アルキルエステルを得るためのＣ１〜Ｃ３１アルキル基であり、Ｒ５ａ及びＲ５ｂの少なくとも１つはＲ４ＣＯである。
【００５３】
一般に、本発明に係るエステルプロドラッグは、エステルを形成させるように官能化された加水分解する部分を有するアドレナリン受容体作動薬又はアドレナリン受容体拮抗薬をエステル化することによって作成できる。これはアシル化剤であってもよい。アシル化剤は、エステル化が適切なエステル基によるフリーの−ＯＨ基の置換を生じさせるように選択される。エステル化は、当技術分野において公知であるように、溶液中で、好ましくは０〜１４０℃、より好ましくは２０〜１００℃の温度において、好ましくは酸性又は塩基性条件下で適切に実現される。塩基性条件が好ましい。好ましくは、プロドラッグは、その後単離及び／又は精製される。単離及び／又は精製の適切な方法としては、例えば抽出、クロマトグラフィー、及び結晶化が挙げられ、当技術分野において周知である。
適切なアシル化剤は、例えばＣ４〜Ｃ２０直鎖若しくは分岐、飽和若しくは不飽和酸の酸ハロゲン化物、好ましくは酸塩化物、又はＣ４〜Ｃ２０直鎖若しくは分岐、飽和若しくは不飽和アルキル酸の無水物である。適切なアシル化剤の例は、ヘプタノイルクロリド、オクタノイルクロリド、デカノイルクロリド、ドデカノイルクロリド、無水ヘプタン酸、無水オクタン酸、無水デカン酸、及び無水ドデカン酸である。しかし、当業者は、様々なアシル化剤を使用してエステル化を実現するための無数の方法を考え付くことができ、これらは除外されない。
【００５４】
エステルプロドラッグ１２を生成させるための代替的な一般的なスキームが、例えば図２３に示され、式中、１０はフリーのＯＨ−基を有する上記のようなアドレナリン受容体の作動薬又は拮抗薬であり、このフリーのＯＨ−基は、好ましくはベンジル又はフェノールのＯＨ−基であり、１１はアシル化剤、好ましくは酸ハロゲン化物又は酸無水物であり、ＬＧは脱離基であり、好ましくはハロゲン化物（好ましくはクロリド）、又はカルボキシラートから選択され、ＨＭは上記で定義される加水分解性部分である。そのような反応を行うための条件は当技術分野において周知である。
【００５５】
エステル化のための適切な溶媒は、当技術分野において公知であり、好ましくはＤＭＦ、ＤＭＳＯ、及びピリジンなどの極性非プロトン性溶媒、メタノール、エタノールなどの極性プロトン性溶媒、又はトルエン若しくはキシレンなどの芳香族溶媒が挙げられる。
【００５６】
エステル化における酸性条件を実現するための適切な酸は、当技術分野において公知であり、例えばＨＣｌ、Ｈ２ＳＯ４、ＨＮＯ３、又は酢酸が挙げられる。エステル化における塩基性条件を実現するための適切な塩基は、当技術分野において公知であり、例えばＫＯＨ、ＮａＯＨ、ＬｉＯＨ、又はピリジンが挙げられる。
【００５７】
本発明に係るプロドラッグがアミドである場合、アミド基は、好ましくはアドレナリン受容体作動薬又は拮抗薬のフリーのＮ−Ｈ基上で形成される。アミドプロドラッグを作製する方法は、当業者が容易に考え得る。例えば、考え得る方法は、官能基としてのカルボン酸を介してフリーのアミンを加水分解性部分にアシストカップリング（ａｓｓｉｓｔｅｄ  ｃｏｕｐｌｉｎｇ）させることによって、プロドラッグのフリーアミン型をアミドへ転化させる。アシストカップリングの適切な薬剤、及びそれらの使用法は、周知であり、例えばＤＣＣ、ＥＤＣＩ、ＨＡＴＵ、又はＨＢＴＵが挙げられる。或いは、作動薬又は拮抗薬を上記のようなアシル化剤と反応させてもよい。好ましくは、フリーのフェノール及びベンジルの−ＯＨ基は、この反応の間、例えばメトキシメチルエーテル（ＭＯＭ）基などの適切な保護基によって保護される。
【００５８】
アミドプロドラッグ１５を生成させるための一般的な経路が、例えば図２４に示され、式中、１３は少なくとも１つのアミン水素を含むフリーのアミン基を有する上記のようなアドレナリン受容体の作動薬又は拮抗薬であり、このフリーのアミン基は、好ましくは第１級アルキルアミンであり、Ｒ”はＨ若しくはＣ１〜Ｃ８直鎖、分岐、又は環状アルキル基から、例えばメチル、エチル、又はイソプロピル、好ましくはＨなどから選択され、好ましくは、フリーのＯＨ−基、より好ましくはフェノール又はベンジルのフリーのＯＨ−基は、適切な保護基によって保護され、１４はカルボン酸基によって官能化された上記のような加水分解性部分であり、カップリング剤は任意の公知のカップリング剤、例えばＤＣＣ、ＥＤＣＩ、ＨＡＴＵ、又はＨＢＴＵなどでもよい。そのような反応を行うための条件は、当技術分野において周知である。
【００５９】
カルバマートプロドラッグは、例えば、作動薬又は拮抗薬のフリーのＯＨ−基、好ましくはフェノールの−ＯＨ基を、イソシアナート官能基を含む加水分解性部分と反応させることで調製できる。カルバマートプロドラッグ１８を生成させるための一般的な経路が例えば図２５に示され、式中、１６はフリーのＯＨ−基を有する上記のようなアドレナリン受容体の作動薬又は拮抗薬であり、このフリーのＯＨ−基は、好ましくはベンジル又はフェノールのＯＨ−基であり、１７はイソシアナートによって官能化された上記のような加水分解性部分である。そのような反応を行うための条件は、当技術分野において周知である。
【００６０】
したがって、本発明は、上記でさらに定義されるように、プロドラッグのオクタノール／水分配係数が少なくとも０である、アドレナリン受容体の作動薬及び／又は拮抗薬のプロドラッグに関する。プロドラッグは、上記で定義される任意のプロドラッグでもよいが、好ましくは、プロドラッグは、エステル又はアミドであり、最も好ましくはエステルである。さらに、本発明は、アドレナリン受容体作動薬又はアドレナリン受容体拮抗薬を、適切に官能化された加水分解性部分とカップリングさせること、及びプロドラッグを単離することを含む、アドレナリン受容体作動薬又は拮抗薬のプロドラッグを作製する方法に関する。場合により、プロドラッグは、その後クロマトグラフィー又は結晶化などに精製される。好ましくは、カップリングは、アシル化剤を使用したエステル化にて実現される。
【００６１】
本発明に係る組成物による皮下脂肪組織の調節は、皮下脂肪（脂肪（ａｄｉｐｏｓｅ））組織の量を減少させること、皮下脂肪組織の量を増加させること、又は皮下脂肪組織を強化することを含む。これは脂肪組織に対するプロドラッグの親和性にて実現され、プロドラッグの親和性は、脂肪組織中のプロドラッグの吸収を高め、その結果、内因性酵素の作用にてプロドラッグから作動薬又は拮抗薬が放出された後に、皮下脂肪組織は、作動薬又は拮抗薬の増加した存在量に応答する。
【００６２】
脂肪組織に対するプロドラッグの親和性とは、プロドラッグがほぼ完全に脂肪組織中に吸収されることを意味する。プロドラッグは、血液中に吸収されにくい傾向があり、好ましくは脂肪組織中に分配される。これは血液中のプロドラッグの迅速な加水分解を回避し、ひいては作動薬及び／又は拮抗薬の全身濃度が高くなるのを回避し、アドレナリン受容体作動薬又は拮抗薬の血漿中の存在の増加に付随する副作用を妨げる。したがって、皮下脂肪組織中のプロドラッグの部分濃度は、作動薬又は拮抗薬の全身濃度に著しく影響を与えることなく、作動薬又は拮抗薬の部分的な濃度増加につながる。
【００６３】
皮下脂肪組織は、本発明において、脂肪細胞を含む、哺乳類の皮膚直下の組織層である。これは脂肪がトリグリセリドとして貯蔵されている組織層である。
【００６４】
皮下脂肪組織中の多すぎる貯蔵脂肪は、過剰な身体容積として現れることがあり、これは本明細書に記載の脂肪組織の調節によって低減できる。そのような過剰な脂肪は、多くの場合に腹部、腰、臀部、又は太ももで生じ、これらの場所は、減量又は身体改善プログラムにおけるよく知られた「問題の領域」として示されることがある。したがって、これらの場所は、本発明に係る組成物、特にベータアドレナリン受容体の作動薬のプロドラッグ、及び／又はアルファアドレナリン受容体の拮抗薬のプロドラッグを含む組成物を部分投与するための好ましい部位である。そのような組成物は、皮下脂肪組織の量を減少させる効果がある。脂肪組織の量の減少は、ＢＭＩ、胴囲、腰回り、及び胸囲、又は皮下脂肪を測定することによって測定できる。
【００６５】
脂肪組織中に非常にわずかしか脂肪が貯蔵されていないと、やせ過ぎに見える場合がある。これは本明細書に記載のように皮下脂肪組織の量を増加させる（「太らせる」）ことによって、本発明にしたがって調節できる。やせ過ぎの場所は、多くの場合、体のうちで顔、胸、臀部、又は腰の部分において生じ、これらの場所は、本発明に係る組成物、特にベータアドレナリン受容体の拮抗薬のプロドラッグ、及び／又はアルファアドレナリン受容体の作動薬のプロドラッグを含む組成物を部分投与するための好ましい部位である。これは、皮下脂肪組織の量を増加させる効果がある。
【００６６】
あるいは、体脂肪は、不均一な層で存在する場合がある。この場合、脂肪組織のより均一な層を得るために、比較的体脂肪が少ない部分に、皮下脂肪組織の量を増加させる本発明に係る部分投与用組成物を施してもよい。本発明において、本発明による２つの組成物を異なる場所で塗布することが特に有利であり、１つの処置は、過剰な脂肪がある場所で皮下脂肪組織を減少させ、１つの処置は、比較的脂肪が少ない場所で皮下脂肪組織を増加させる。このように、約均一な厚さの皮下脂肪組織の層を得ることが可能である。
【００６７】
脂肪組織の量の増加は、ＢＭＩ、胴囲、腰回り、及び胸囲、又は皮下脂肪を測定することで測定できる。
【００６８】
また、皮下脂肪は、その内部構造又は強度を緩める場合があり、これはしわ又はセルライト（「オレンジピール症候群（ｏｒａｎｇｅ  ｐｅｅｌ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）」）の形成につながることがある。これには、皮下脂肪組織を強化する本発明に係る組成物の塗布にて対抗できる。内部構造又は強度の低下は、例えば個体の顔及び首に生じることがある。したがって、これらの場所は、皮下脂肪組織を強化する本発明に係る組成物を部分投与するための好ましい部位である。あるいは、セルライトは、通常、個体の太もも、大腿部、及び臀部で生じ、したがってこれらも皮下脂肪組織を強化する本発明に係る組成物の塗布が好ましい部位である。脂肪組織を強化することは、強度を増加させることにより、脂肪組織が本発明に係る化合物及び方法によって影響を受けることを意味する。
【００６９】
これは、例えばしわのサイズ及び関数を測定するための形状測定法（ｐｒｏｆｉｌｏｍｅｔｒｉｃ  ｍｅｔｈｏｄ）にて測定できる。しわのサイズは、弛緩した状態で測定でき、代表的なパラメータは平均「しわ深さ」、平均「しわ面積」、平均「しわ体積」、及び平均「しわ組織貯蔵体積（Ｗｒｉｎｋｌｅ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｒｅｓｅｒｖｏｉｒ  Ｖｏｌｕｍｅ）」（ＷＴＲＶ）と考えられる。セルライトの重症度は、目視又はしわ深さにて測定できる。
【００７０】
皮下脂肪組織の強化は、作動薬及び／又は拮抗薬のプロドラッグにて実現できる。これは、好ましくはベータ及びアルファアドレナリン受容体の阻害及び／又は活性化を実現するために、１つ又は複数のアドレナリン受容体の作動薬及び拮抗薬の、１つ又は複数のプロドラッグを含む組成物にて実現される。
【００７１】
本発明に係る組成物の投与は、皮下脂肪組織の量を減少させること、又は前記組織を強化することのいずれかによって、セルライトを除去することにさらに効果的である。したがって、本発明は、さらにセルライトを除去する方法で使用するための、他の部分に記載のアドレナリン受容体作動薬又はアドレナリン受容体拮抗薬のプロドラッグ、及びこのプロドラッグを含む組成物に関する。好ましくは、プロドラッグは、ベータ作動薬又はアルファ拮抗薬、より好ましくはベータ作動薬、より好ましくはベータ−３作動薬、最も好ましくはオクトパミン、シネフリン、又はイソプレナリン、好ましくはオクトパミンである。最も好ましいプロドラッグは、好ましくはペンタノアート、ヘプタノアート、オクタノアート、又はデカノアートエステルプロドラッグなどの、Ｃ５〜Ｃ１２加水分解性部分に基づくプロドラッグである。
【００７２】
一般に、皮下脂肪組織の調節にて哺乳類の体型を改善させることは、皮下脂肪組織の体積の増加若しくは減少、又は皮下脂肪組織の強化につながる。好ましくは、体型改善の効果は、部分的効果であり、このことは、効果が塗布の部位において生じ、プロドラッグが塗布されていない部位では生じないことを意味する。本実施形態において、プロドラッグは、塗布の部位において皮下脂肪組織を部分的に標的として、皮下脂肪組織の部分的な調節を実現する。
【００７３】
組成物がベータアドレナリン受容体作動薬又はアルファアドレナリン受容体拮抗薬のプロドラッグを含む場合、調節は、好ましくは皮下脂肪組織の量を減少させることを含む。これは脂肪トリグリセリドの加水分解並びに脂肪酸及びグリセロールの血液中への遊離を生じさせる。
【００７４】
組成物がベータアドレナリン受容体拮抗薬又はアルファアドレナリン受容体作動薬のプロドラッグを含む場合、調節は、好ましくは皮下脂肪組織の量を増加させることを含む。
【００７５】
本発明の利点は、作動薬及び／又は拮抗薬の全身濃度が高くなるのを回避しながら、脂肪組織の体積の増加又は減少を必要とする哺乳類の体の部位を作動薬又は拮抗薬によって自在に標的にできることである。
【００７６】
本発明に係るプロドラッグのさらなる利点は、他の部分に記載のように、そのｌｏｇＰが少なくとも０であることである。このことは、作動薬又は拮抗薬自体と比較して皮膚を通した経皮的吸収を増加させ、したがって吸収の速度及び又は吸収できるプロドラッグの量を増加させ、これは皮下脂肪組織の調節の向上を可能にする。浸透は、好ましくは、上記で定義されるような加水分解性部分などの親油性基、好ましくはエステル基、例えば親油性エステル基などの存在にて向上する。さらに、定義されるようなｌｏｇＰを有するプロドラッグは、好ましくは脂肪組織中に分配され、このことはプロドラッグからの放出後に作動薬又は拮抗薬による脂肪組織の調節をさらに向上させる。本発明に係るプロドラッグは、アドレナリン受容体の作動薬又は拮抗薬上に親油性エステル基を含む。
【００７７】
ベータアドレナリン受容体作動薬及び／又はアルファアドレナリン受容体拮抗薬のプロドラッグの特有の利点は、それらの作用の様式が得られる効果と相乗的であることである。皮下脂肪組織中でプロドラッグが加水分解されると、ベータ作動薬及び／又はアルファ拮抗薬はリパーゼの作用を刺激する。リパーゼは、トリグリセリドを加水分解して皮下脂肪組織の減少を生じさせるだけでなく、プロドラッグ自体も加水分解する。したがって、プロドラッグの投与は、リパーゼの作用の増大をもたらすだけでなく、プロドラッグの加水分解の増大をももたらす。加水分解の生成物（作動薬又は拮抗薬）は、リパーゼのさらに増大した作用を刺激するので、これはトリグリセリドの加水分解に対するプロドラッグの作用において自己強化（自己触媒）効果をもたらす。このサイクルによって、本実施形態は、皮下脂肪組織の量の減少において特に効果がある。
【００７８】
ベータアドレナリン受容体の作動薬又はアルファアドレナリン受容体の拮抗薬のプロドラッグとは別に、組成物がホスホジエステラーゼ阻害剤も含む場合、ベータ受容体の刺激又はアルファ受容体の阻害における効果は増幅される。したがって、特に好ましい実施形態において、脂肪分解効果を高めるために、組成物は、ベータ作動薬及び／又はアルファ拮抗薬のプロドラッグ、並びにホスホジエステラーゼ阻害剤、若しくはそのプロドラッグ、又はアデニルシクラーゼ刺激剤若しくはそのプロドラッグを含む。適切なアデニルシクラーゼ刺激剤又はホスホジエステラーゼ阻害剤は、フォルスコリン、カフェイン、及びテオフィリン、好ましくはカフェインである。ホスホジエステラーゼ阻害剤又はアデニルシクラーゼ刺激剤のプロドラッグは、アドレナリン受容体作動薬又はアドレナリン受容体拮抗薬のプロドラッグに沿って定義される。
【００７９】
本発明に係るプロドラッグは、エステル又はアミド基などの親油性基を変化させることによって経皮投与のために最適化できる。本発明に係る好ましいプロドラッグは、特に皮下脂肪の量を減少させるための、アドレナリン受容体作動薬の親油性エステルである。代替的な好ましいプロドラッグは、特に皮下脂肪の量を増加させるための、アドレナリン受容体拮抗薬の親油性エステルである。親油性は、極性環境よりもむしろ非極性環境に対して親和性を有すると定義され、親油性基は、非極性環境に対する親和性を増加させる基である。本組成物のプロドラッグとして非常に好ましいのは、アドレナリン受容体作動薬、好ましくはベータ−３アドレナリン受容体作動薬の親油性エステルである。
【００８０】
本発明に係る作動薬又は拮抗薬のプロドラッグは、中性分子でもよいが、任意の薬学的に許容される塩の形態を有してもよく、又は例えば安定化剤としての薬学的に許容される分子と複合体化させてもよい。適切な塩は、例えば臭化物、塩化物、酒石酸塩、又はクエン酸塩である。
【００８１】
また、１つ又は複数の立体中心を有する本発明に係るプロドラッグは、いずれかの立体中心においてＲ若しくはＳの立体配置を有していてもよく、又はＲ及びＳ立体異性体の混合物であってもよい。したがって、本発明に係るプロドラッグは、純水な立体異性体でもよく、又はエナンチオマー混合物及びジアステレオマー混合物を含めた、任意の比率の立体異性体の混合物でもよい。好ましくは、プロドラッグは、ラセミ混合物である。
【００８２】
本発明は、さらにアドレナリン受容体の１つ又は複数の作動薬、アドレナリン受容体の、１つ又は複数の拮抗薬、並びにアドレナリン受容体の作動薬及び／又は拮抗薬の、１つ又は複数のプロドラッグを含む、部分投与のための医薬組成物に関する。このように、１つ又は複数のプロドラッグを含む組成物は、１つ又は複数の「遊離型」作動薬及び／又は拮抗薬も含んでいてもよい。遊離型とは、本発明において、作動薬又は拮抗薬が加水分解性部分に共有結合していないが、代わりにアドレナリン受容体に対して最も親和性が高い形態であることを意味している。好ましくは、本実施形態において、遊離型の作動薬及び拮抗薬はまた、ｌｏｇＰが少なくとも０である。より好ましくは、遊離型の作動薬及び拮抗薬は、ｌｏｇＰが少なくとも１、より好ましくは少なくとも２、より好ましくは少なくとも２．３、より好ましくは少なくとも２．５であり、最も好ましくはそれらのｌｏｇＰが少なくとも３である。
【００８３】
遊離型の作動薬及び／又は拮抗薬は、リパーゼの作用に対してプロドラッグと同じ又は逆の効果を有してもよい。作動薬及び／又は拮抗薬がリパーゼの作用に対してプロドラッグと同じ作用を有する場合が好ましい。したがって、ベータ作動薬及び／又はアルファ拮抗薬の、１つ又は複数のプロドラッグを含む組成物は、１つ又は複数の遊離型ベータ作動薬及び／又は遊離型アルファ拮抗薬も含んでいてよい。１つ又は複数の遊離型ベータ拮抗薬及び／又は１つ又は複数の遊離型アルファ作動薬も含む、ベータ拮抗薬の、１つ若しくは複数のプロドラッグ及び／又はアルファ作動薬の、１つ若しくは複数のプロドラッグを含む組成物も好ましい。
【００８４】
好ましい実施形態において、組成物は、作動薬、拮抗薬、及びプロドラッグの全体のｍｏｌ％として、少なくとも５％、好ましくは少なくとも１０％、より好ましくは少なくとも２０％、より好ましくは少なくとも３０％、より好ましくは少なくとも４０％、より好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは少なくとも７０％、より好ましくは少なくとも８０％、より好ましくは少なくとも９０％、より好ましくは少なくとも９５％、及び最も好ましくは少なくとも９８％のプロドラッグを含む。
【００８５】
本発明は、好ましくはまた、１つ又は複数のアドレナリン受容体作動薬の１つ又は複数のプロドラッグと、１つ又は複数のアドレナリン受容体拮抗薬の１つ又は複数のプロドラッグとの組合せを含む組成物であって、上記のような遊離型作動薬及び／又は拮抗薬をさらに含んでもよい組成物にも関連する。好ましくは、組成物は、１つ若しくは複数のベータアドレナリン受容体作動薬の１つ若しくは複数のプロドラッグ、及び／又は１つ若しくは複数のアルファアドレナリン拮抗薬の１つ若しくは複数のプロドラッグを含む。別の好ましい組成物は、１つ若しくは複数のベータアドレナリン受容体拮抗薬の１つ若しくは複数のプロドラッグ、及び／又は１つ又は複数のアルファアドレナリン受容体作動薬の１つ若しくは複数のプロドラッグを含む。
【００８６】
本発明に係る医薬組成物において、プロドラッグは、好ましくは０．００１〜１０００ｍｇ／ｍｌ、より好ましくは０．０１〜１００ｍｇ／ｍｌ、さらにより好ましくは０．１〜１０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。ヒドロゲルの密度は、０．８〜１．２ｇ／ｍｌの間、好ましくは０．９〜１．１ｇ／ｍｌの間でもよい。遊離型作動薬又は拮抗薬は、存在する場合、同じ濃度範囲で存在してもよい。
【００８７】
本発明に係る組成物は、好ましくは薬学的に許容される担体も含む。適切な担体としては、限定はされないが、ヒドロゲル、皮膚用クリーム、皮膚用シャンプー、皮膚用フォーム、皮膚用粉末、皮膚用ジェル、皮膚用化粧水、皮膚用軟膏、皮膚用パッチ、薬用光沢剤（ｐｌａｔｅｒ）、皮膚用ペースト、皮膚用湿布、皮膚用溶液、皮膚用スプレー、イオントフォレーシスパッチ、スティック、又は注射液が挙げられる。好ましい担体は、ヒドロゲル、皮膚用クリーム、皮膚用ジェル、皮膚用化粧水、又は皮膚用軟膏である。
【００８８】
さらに好ましくは、医薬組成物は、クリーム、フォーム、ジェル、化粧水、軟膏、パッチ、ペースト、溶液、又はスプレーであり、好ましくは皮膚用ジェル又は皮膚用化粧水である。或いは、医薬組成物は、マイクロインジェクション又はイオントフォレーシスにおいて薬学的に許容可能である。
【００８９】
本発明に係るプロドラッグは、好ましくは０．００１〜１０００ｍｇ／ｃｍ２、好ましくは０．０１〜１００ｍｇ／ｃｍ２、最も好ましくは０．１〜１０ｍｇ／ｃｍ２で皮膚に塗布される。遊離型作動薬又は拮抗薬は、存在する場合、同じ濃度範囲で塗布してもよい。
【００９０】
組成物は、１つ又は複数の薬学的に許容される賦形剤をさらに含んでいてもよい。適切な賦形剤は、経皮吸収向上剤、安定化剤、着色剤、乳化剤、保存料、粘度上昇剤、保湿剤、香気向上剤、及び皮膚引き締め剤（ｓｋｉｎ  ｔｉｇｈｔｅｎｅｒ）である。
【００９１】
適切な経皮吸収向上剤の例は、ナイアシンエステル、有機溶媒（ジメチルスルホキシド、アルコール、及びアルカノール（エタノール、デカノール）、プロピレングリコール、アゾン、ピロリドン、テルペン）、界面活性剤（洗剤）、尿素、及びサリチル酸である。
【００９２】
適切な安定化剤の例は、抗酸化剤である。適切な抗酸化剤は、当技術分野において公知であり、水溶性又は脂溶性であってもよい。適切な脂溶性安定化剤及び抗酸化剤は、ｄｌ−アルファ−トコフェロール及びブチルヒドロキシトルエンであり、適切な水溶性安定化剤及び抗酸化剤は、アスコルビン酸、ピロ亜硫酸ナトリウム、及びエデト酸二ナトリウムである。
【００９３】
適切な着色剤の例は、酸化鉄（黄色、赤色、褐色）、及びクロロフィルである。
【００９４】
乳化剤は、イオノゲン性（ｉｏｎｏｇｅｎｉｃ）又は非イオノゲン性であってもよい。イオノゲン性乳化剤の例は、アルキルスルファート及び第４級アンモニウム塩である。非イオノゲン性乳化剤の例は、ポリエチレングリコール、脂肪、アルコールエーテル（セトマクロゴール）、ソルビタンオレアート（ｓｏｒｂｉｔａｎ  ｏｌｅａｔｅ）（＝Ｓｐａｎ  ８０）、及びポリエチレングリコールソルビタンエーテル（＝ポリソルバート８０、Ｔｗｅｅｎ  ８０）である。
【００９５】
適切な保存料の例は、パラベン（パラヒドロキシ安息香酸誘導体）、ソルビン酸、クロルヘキシジンジグルコナート、セトリミド、フェノール、フェノキシエタノール、プロピレングリコール、エタノール、及びグリセロールである。
【００９６】
粘度上昇剤の例は、セルロース誘導体、無機コロイド、ポリアクリル酸誘導体（カルボマー）、及び天然粘度上昇剤、例えばトラガンドなどである。
【００９７】
保湿剤の例は、グリセロール、ポリエチレングリコール、及びソルビトール７０％である。
【００９８】
香気向上剤の例は、バラ油、ラベンダー油、及び他の精油である。
【００９９】
皮膚引き締め剤の例は、コラーゲン、ＰｈｙｔｏＣｅｌｌＴｅｃ幹細胞、成長因子、ペプチド、トリペプチド、ヘキサペプチド、抗酸化剤、皮膚軟化剤、皮脂制御剤、抗炎症剤、コラーゲン生成剤、植物ステロール、糖脂質、及びポリフェノールである。
【０１００】
本発明は、さらに、上記のような医薬組成物を部分的に投与することを含む、皮下脂肪組織を部分的に調節することによって哺乳類の体型を改善する方法に関する。好ましくは、この方法は美容的方法である。
【０１０１】
本発明に係る美容的方法において、哺乳類の体は、皮下脂肪組織を部分的に調節することで体型改善できる。本発明に係る美容的方法において、脂肪組織の量を減少又は増加させると、対象の肉体的な外観が変化する。この効果は、そのような効果が求められる体の任意の部位において自在に、対象が皮下脂肪組織の体積を増加又は減少させることを可能にする。皮下脂肪は、多くの場合に、魅力的な肉体的外観を積極的に追及する個体が特に取り組むのが困難だと考える「問題の領域」に関連するので、このことはそれらの領域の標的とする部分的な調節を可能にする。したがって、治療効果を使用せずに、より魅力的な肉体的外観を得ることができる。この目的に特に好ましいのは、ベータアドレナリン受容体、好ましくはベータ−３受容体の作動薬のプロドラッグである。
【０１０２】
さらに、本発明に係る美容的方法は、皮下脂肪組織の量を減少若しくは増加させることにより、又は皮下脂肪組織を強化することにより、しわの処置を可能にする。
【０１０３】
あるいは、本発明に係る組成物は、哺乳類の健康的体重を得るための医療において、例えば皮下脂肪組織を調節することによって過体重又は低体重の個体に関して健康的体重を得るための処置などに使用できる。皮下脂肪組織を減少させることによって過体重の個体において健康的体重を得る方法で使用するための、ベータアドレナリン受容体作動薬、好ましくはベータ−３アドレナリン受容体のプロドラッグが特に好ましい。これは、肥満及びＩＩ型糖尿病の処置又は予防に非常に有利である場合がある。
【０１０４】
美容的方法及び医療は、患者のタイプによって区別できる。２５を超えるＢＭＩにて評価される、過体重にて引き起こされる肥満又はＩＩ型糖尿病のリスクが増大した個体では、本発明による皮下脂肪組織を減少させるための組成物の投与は、医療的なものである。ＢＭＩが２５未満である個体などの、増大したリスクがない個体では、本発明による皮下脂肪組織を減少させるための組成物の投与は、美容的なものである。
【０１０５】
本発明による皮下脂肪組織を増加させるための組成物に関しては、ＢＭＩが１８．５未満である個体などの、重度の低体重である個体への投与は医療的なものであるが、一方ＢＭＩが１８．５を超える個体へのそのような組成物の投与は美容的なものである。
【０１０６】
皮下脂肪組織を強化することにより前記皮下脂肪組織を調節する、本発明による組成物の投与は、患者のタイプにかかわらず常に美容的なものである。
【０１０７】
本発明に係る組成物は、上記のような単独の美容的処置又は治療的処置として投与してもよいが、さらなる公知の処置と組み合わせることもできる。例えば、本発明に係るプロドラッグの部分投与は、経口投与される薬物と組み合わせてもよい。皮下脂肪組織を減少させる効果を有する本発明に係るプロドラッグは、同じ目的を有する経口処置と適切に組み合わせてもよい。そのような処置は、例えばカフェインの経口投与と組み合わせた、ベータ−３受容体作動薬のプロドラッグを含む組成物の部分投与でもよい。
【０１０８】
あるいは、本発明は、肥満又はＩＩ型糖尿病の処置で使用する薬剤の製造のための、上記のような１つ又は複数のプロドラッグの使用に関連する。
【０１０９】
得られる多くの変形例があるため、すべてのパラメータの組合せ又はパラメータの群を記載できない。したがって、特定の特徴について記載される任意の範囲又は可能性は、任意の他の範囲又は別の特徴の可能性と共に使用されることが想定される。
【０１１０】
本発明を説明する項目：
１．皮下脂肪組織を調節することによる哺乳類の体型の改善方法において使用するためのアドレナリン受容体の作動薬及び／若しくは拮抗薬、並びに／又は前記作動薬若しくは拮抗薬のプロドラッグを含む部分投与用医薬組成物であって、作動薬、拮抗薬、又はプロドラッグのオクタノール／水分配係数が少なくとも０である、部分投与用医薬組成物。
２．皮下脂肪組織の部分的調節を実現するために、作動薬、拮抗薬、又はプロドラッグが皮下脂肪組織に対して親和性を有する、項目１に記載の医薬組成物。
３．調節が、皮下脂肪組織の量を減少若しくは増加させること、又は皮下脂肪組織を強化することを含む、項目１又は２に記載の医薬組成物。
４．作動薬がベータ作動薬若しくはアルファ作動薬であり、及び／又は拮抗薬がベータ拮抗薬若しくはアルファ拮抗薬である、項目１から３のいずれかに記載の医薬組成物。
５．項目４に記載の医薬組成物であって、
・ベータ作動薬が、オクトパミン、ｐ−シネフリン、ｍ−シネフリン（フェニレフリン）、ノルエピネフリン、エピネフリン、エフェドリン、フェニルプロパノールアミン、チラミン、エピニン、フェニルエタノールアミン、ベータフェニルエチルアミン、ホルデニン、イソプロピルノルシネフリン、Ｎ−メチルチラミン、サルブタモール、レボサルブタモール、テルブタリン、ピルブテロール、プロカテロール、クレンブテロール、メタプロテレノール、フェノテロール、ビトルテロール、リトドリン、イソプレナリン、サルメテロール、ホルモテロール、バンブテロール、クレンブテロール、オロダテロール、インダテロール、アミベグロン（ＳＲ−５８６１１Ａ）、ＣＬ３１６，２４３、Ｌ−７４２，７９１、Ｌ−７９６，５６８、ＬＹ−３６８，８４２、ミラベグロン（ＹＭ−１７８）、Ｒｏ４０−２１４８、ソラベグロン（ＧＷ−４２７，３５３）、又はＢＲＬ３７，３４４であり；
・アルファ作動薬が、４−ＮＥＭＤ、７−Ｍｅ−マルサニジン、アグマチン、アプラクロニジン、ブリモニジン、クロニジン、デトミジン、デクスメデトミジン、ファドルミジン、グアナベンズ、グアンファシン、ロフェキシジン、マルサニジン、メデトミジン、メタンフェタミン、ミバゼロール、リルメニジン、ロミフィジン、タリペキソール、チザニジン、トロニジン、キシラジン、キシロメタゾリン、又はＴＤＩＱであり；
・ベータ拮抗薬が、カルテオロール、ナドロール、ペンブトロール、ピンドロール、プロプラノロール、ソタロール、チモロール、アセブトロール、アテノロール、ベタキソロール、ビソプロロール、セリプロロース、エスモロール、メトプロロール、ネビボロール、ブシンドロール、カルベジロール、又はラベトロール、好ましくはペンブトロール、ピンドロール、プロプラノロール、アテノロール、メトプロロールＬ−７４８，３２８、Ｌ−７４８，３３７、又はＳＲ５９２３０Ａであり；又は
・アルファ拮抗薬が、アリピプラゾール、アセナピン、アチパメゾール、シラゾリン、クロザピン、エファロキサン、イダゾキサン、ルラシドン、メルペロン、ミアンセリン、ミルタザピン、ナピタン、オランザピン、パリペリドン、リスペリドン、フェノキシベンザミン、フェントラミン、ピリベジル、ラウオルシン、リスペリドン、ロチゴチン、クエチアピン、ノルクエチアピン、セチプチリン、トラゾリン、ヨヒンビン、ジプラシドン、又はゾテピンである。
６．プロドラッグが親油性エステルである、項目１から５のいずれかに記載の医薬組成物。
７．親油性エステルがＣ４〜Ｃ２０アルキルエステルである、項目６に記載の医薬組成物。
８．親油性エステルがブタン酸、ヘプタン酸、又はデカン酸エステルである、項目７記載の医薬組成物。
９．作動薬、拮抗薬、又はプロドラッグが０．００１〜１０００ｍｇ／ｍｌの濃度で組成物中に存在する、項目１から８のいずれかに記載の医薬組成物。
１０．医薬組成物がクリーム、フォーム、ジェル、化粧水、軟膏、パッチ、ペースト、溶液、又はスプレーである、項目１から９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
１１．項目１から１０のいずれかに記載の医薬組成物を部分的に投与することを含む、皮下脂肪組織を部分的に調節することによる哺乳類の体型の改善方法。
１２．美容的方法である、項目１１に記載の方法。
１３．作動薬、拮抗薬、又はプロドラッグが０．００１〜１０００ｍｇ／ｃｍ２の投与量で投与される、項目１１又は１２に記載の方法。
１４．アドレナリン受容体作動薬又はアドレナリン受容体拮抗薬の親油性エステル。
１５．医療用途、好ましくはＩＩ型糖尿病又は肥満の処置のための、項目１４に記載の親油性エステル。
１６．哺乳類の体型の改善方法において使用するための、項目１４に記載の親油性エステル。
１７．アドレナリン受容体作動薬又はアドレナリン受容体拮抗薬をアシル化剤によりエステル化することを含む、アドレナリン受容体作動薬の親油性エステル又はアドレナリン受容体拮抗薬の親油性エステルの作製方法。
【０１１１】
ここで本発明を、以下の何ら制限されない実施例にて説明する。
【実施例】
【０１１２】
＜材料及び方法＞
［化学物質］
ラセミｐ−オクトパミンＨＣｌ（「オクトパミン」又は「ｏｃｔ」）、ラセミｐ−シネフリン（「シネフリン」又は「ｓｙｎ」）、及び（Ｓ）−（−）−プロプラノロールＨＣｌ（「プロプラノロール」又は「ｐｒｏｐ」）をＳｉｇｍａ社から入手した。ｐ−オクトパミンデカノアートＨＣｌ、ｐ−オクトパミンペンタノアートＨＣｌ、及びｐ−シネフリンデカノアートＨＣｌは、Ｓｙｎｃｏｍ社（Ｇｒｏｎｉｎｇｅｎ、オランダ）にて合成された。Ｌ−（−）−ノルエピネフリンビタルトラートをＳｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ社から購入した。他の化合物は、通常供給業者から入手した。
【０１１３】
［カルボマーヒドロゲル］
０．１ｇのＥＤＴＡ二ナトリウム（Ｆａｇｒｏｎ）を約５０ｍｌの水中に溶解させることにより、実施例３、４及び５のカルボマーヒドロゲルを作製した。１０ｇのプロピレングリコールを加えた。Ｔｕｒｒａｘを使用して１ｇのカルボマー９７４Ｐ（Ｆａｇｒｏｎ）を分散させた。トロメタモール（Ｆａｇｒｏｎ）を１０ｍｌの水中に溶解させ、カルボマーゲルへ加えた。オクトパミンデカノアート（下記参照）を含む又は含まない２０ｍｌのエタノール（９６％）を加え、Ｔｕｒｒａｘで処理した。総重量が１００ｇになるまで水を加えた。Ｔｕｒｒａｘによって均質化させた後、ヒドロゲルを５０ｍｌの試験管へ移した。
【０１１４】
オクトパミンデカノアート（０．５ｇ）を２０ｍｌのエタノール（９６％）中に最大限に溶解させた。５分間の超音波処理後、ミクロ懸濁液を得た。２０ｍｌのミクロ懸濁液を２０ｍｌのエタノールの代わりにカルボマーヒドロゲルへ加えた。ヒドロゲルの最終濃度は５ｍｇ／ｍｌであった。
【０１１５】
他の実施例における（カルボマー）ヒドロゲルを同様に調製した。１００ｍｇのＥＤＴＡ二ナトリウムを５０ｍｌの超高純度水中に溶解させることによりヒドロゲルを作製した。１０ｇのプロピレングリコールを加え混合した。回転子−固定子を使用して１ｇのカルボマー９７４Ｐを溶液中に分散させた。１ｇのトロメタモールを１０ｍｌの水中に溶解させ、分散させたカルボマーと共に混合した。８０ｇの重量まで水を加えた。ヒドロゲルを使用のために４℃で保存した。
【０１１６】
３０℃で５分間の超音波処理を使用して、１５ｍｌの７０％エタノール中に、適切な量のオクトパミン、オクトパミンデカノアート、オクトパミンペンタノアート、及びシネフリンデカノアート、又は他のプロドラッグを溶解させた。１５ｍｌの得られたエタノール溶液を３５ｇのヒドロゲルへ加え、回転子固定子を使用して混合して、示される最終濃度を得た。完成させたヒドロゲルを５０ｍｌ試験管へ移し、４℃で保存した。
【０１１７】
完成させたヒドロゲルは、ヒドロゲルの５０ｍｌ当たり０．７３ｍｍｏｌの遊離型オクトパミン若しくはオクトパミンプロドラッグ、又はヒドロゲルの５０ｍｌ当たり０．７０ｍｍｏｌのシネフリンデカノアートを含んでいた。これらのヒドロゲルを作製するために、１３７．８ｍｇのオクトパミンＨＣｌ、２５０ｍｇのオクトパミンデカノアートＨＣｌ、１９９ｍｇのオクトパミンペンタノアートＨＣｌ、又は２５０ｍｇのシネフリンデカノアートＨＣｌを使用した。
【０１１８】
様々な濃度のヒドロゲルのために、プロドラッグの量を容易に変化させてヒドロゲル中のプロドラッグの特定の濃度を得ることができる。
【０１１９】
これらの調製手順にしたがって作製されたヒドロゲルは１．０ｇ／ｍｌの密度を有する。
【０１２０】
［オクトパミンデカノアートプロドラッグの合成（図５）］
２−（ジベンジルアミノ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）エタノン（３）
３５ｍＬトルエン中の臭化物１（４．８ｇ、２２．３ｍｍｏｌ）の混合物を氷冷した。ジベンジルアミン２（８．８ｇ、８．６ｍＬ、２当量）を滴下して添加した。混合物を室温で一晩撹拌した。混合物をろ過し、溶媒を蒸発させて赤色固体として粗製２−（ジベンジルアミノ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）エタノン（３；９．７ｇ、定量的）を得た。
【０１２１】
４−（２−（ジベンジルアミノ）アセチル）フェニルデカノアート（４）
１００ｍＬアセトン中の２−（ジベンジルアミノ）−ｌ−（４−ヒドロキシフェニル）エタノン３（７．３５ｇ、粗製、１７．８ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｋ２ＣＯ３（４．５ｇ、１．８当量）を加えた。混合物を１時間環流させた。混合物を冷却し、固体をろ別した。溶媒を蒸発させて７ｇの黄色油状物を得た。この油状物を５０ｍＬのアセトン中に溶解させた。この混合物に塩化デカノイル（３．１ｍＬ、１．５当量）及びＥｔ３Ｎ（３．６ｍＬ、１．５当量）を加えた。混合物を室温で一晩撹拌した。固体をろ別し、溶媒を蒸発させて８．４ｇの黄色油状物を得た。この油状物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン１：９）により精製して黄色油状物として４−（２−（ジジベンジルアミノ）アセチル）フェニルデカノアート（４；５．２５ｇ、６１％）を得て、これを静置すると固化した。
【０１２２】
４−（２−アミノ−１−ヒドロキシエチル）フェニルデカノアート（５）
１００ｍＬエーテル中の４−（２−（ジベンジルアミノ）アセチル）フェニルデカノアート４（５．２５ｇ、１０．８ｍｍｏｌ）の混合物に、ジオキサン中の４Ｎ  ＨＣｌ（８ｍＬ、３当量）を加えた。混合物を室温で５分間撹拌し、溶媒を蒸発させた。混合物を１００ｍＬのエタノール中に溶解させた。この混合物に、５００ｍｇの１０％Ｐｄ／Ｃを加え、混合物を１気圧のＨ２下で三晩撹拌した。Ｐｄ／Ｃをろ別し、溶媒を蒸発させて２．５ｇの粘着性／泡状の固体を得た。この固体を７．５ｍＬのリン酸緩衝液（ＫＨ２ＰＯ４／Ｋ２ＨＰＯ３  ｐＨ＝７）中で粉砕（ｔｒｉｔｕｒｅ）して白色の沈殿を得た。この沈殿をろ別し、水、アセトンで洗浄し、乾燥させて１．３２ｇの白色固体を得た。この物質（オクトパミンデカノアート遊離塩基？）を１０ｍＬの水中に入れた。透明溶液になるまでＨＣｌ水溶液を滴下して添加した。混合物を凍結乾燥し固体を収集して、白色のろう状固体として４−（２−アミノ−１−ヒドロキシエチル）フェニルデカノアート（５；９９０ｍｇ、２７％）を得た。純度（ＬＣ−ＭＳ）：＞９３％であった。
【０１２３】
＜オクトパミンペンタノアートプロドラッグの合成＞
図５に示すものと同じ経路にしたがってオクトパミンペンタノアートの合成を行ったが、塩化デカノイルの代わりに塩化バレロイルを使用した。
【０１２４】
２−（ジベンジルアミノ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）エタノン（３）
３５０ｍＬのトルエン中の臭化物１（５０ｇ、２３２ｍｍｏｌ）の混合物を氷冷した。ジベンジルアミン２（９０ｍＬ、２当量）を３０分かけて滴下して添加した。混合物を室温で一晩撹拌した。混合物をろ過し、溶媒を蒸発させて、赤色油状物として粗製２−（ジベンジルアミノ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）エタノン（３；９１．６ｇ、定量的）を得た。この油状物を次の工程でそのまま使用した。
【０１２５】
４−（２−（ジベンジルアミノ）アセチル）フェニルバレロアート
４００ｍＬのアセトン中の２−（ジベンジルアミノ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）エタノン３（３０．５ｇ、粗製、７７．３ｍｍｏｌと仮定）の混合物に、Ｋ２ＣＯ３（１９．５ｇ、１．８当量）を加えた。混合物を１時間環流させた。混合物を冷却し、固体をろ別した。約半分の体積が残るまで溶媒を蒸発させた。この溶液に、塩化バレロイル（１１．１ｍＬ、１．２当量）及びＥｔ３Ｎ（１５．６ｍＬ、１．５当量）を加えた。混合物を室温で一晩撹拌した。固体をろ別し、溶媒を蒸発させて、黄色の油状物として４−（２−（ジベンジルアミノ）アセチル）フェニルバレロアート（４；３５．４ｇ、定量的）を得て、これを静置すると固化した。この固体を次の工程でそのまま使用した。
【０１２６】
４−（２−アミノ−１−ヒドロキシエチル）フェニルバレロアート塩酸塩
（オクトパミンペンタノアートＨＣｌ）
２５０ｍＬのジエチルエーテル中の４−（２−（ジベンジルアミノ）アセチル）フェニルバレロアート４（１２．７５ｇ、粗製、約２７ｍｍｏｌ）の混合物に、ジオキサン中の４Ｎ  ＨＣｌ（２０ｍＬ、３当量）を加えた。混合物を室温で１０分間撹拌し、溶媒を蒸発させた。固体をジエチルエーテル中で粉砕し、ろ過により単離し、乾燥させた。固体を２５０ｍＬのエタノール中に溶解させた。この混合物に、１ｇの１０％Ｐｄ／Ｃを加え、混合物を１気圧のＨ２雰囲気下で４晩撹拌した。Ｐｄ／Ｃをろ別し、溶媒を蒸発させて、黄色固体として５．８ｇの粗製ＨＣｌ塩を得た。この固体を１５０ｍＬのリン酸緩衝液（ＫＨ２ＰＯ４／Ｋ２ＨＰＯ３  ｐＨ＝７）中で１時間粉砕して、淡黄色の沈殿を得た。この沈殿をろ別し、水、アセトン、ジエチルエーテルで洗浄し、乾燥させて、白色固体として４．７ｇの遊離塩基を得た。この材料を５０ｍＬの水に溶解した。濃ＨＣｌ水溶液（２．０ｍＬ、１．２当量）を滴下添加し、透明溶液が得られるまで（約１０分）混合物を室温で撹拌した。混合物を凍結乾燥し、固体を収集して、淡黄色の粘着性固体として４−（２−アミノ−１−ヒドロキシエチル）フェニルバレロアート塩酸塩（５；５．１ｇ、１から３ステップで６２％）を得た。純度（ＬＣ−ＭＳ）：＞８６％であった。
【０１２７】
＜シネフリンデカノアートプロドラッグの合成＞
図５に示すものと同じ経路にしたがってシネフリンデカノアートの合成を行ったが、ジベンジルアミンの代わりにベンジルメチルアミンを使用した。経路を図２１に示す。
【０１２８】
２−（ベンジル（メチル）アミノ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）エタン−１−オン（７）
トルエン（３５０ｍＬ）中の臭化物１（５０．０ｇ、２３３ｍｍｏｌ、１．０当量）の氷／水で冷却した懸濁液に、ベンジルメチルアミン（６０．０ｍＬ、４６５ｍｍｏｌ、２．０当量）を加え、内部温度が７℃から２２℃まで上昇した。反応の間、混合物は最初に低粘度の懸濁液となり、その後高粘度の懸濁液が得られた。翌日、１Ｈ−ＮＭＲは９２％の転化率を示し、追加のベンジルメチルアミン（６．０ｍＬ、４６．５ｍｍｏｌ、０．２当量）を加えた。さらに２時間撹拌した後、反応混合物を濃縮乾固させた。残渣を水（２５０ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（４×４００ｍＬ）との間で分配した。合わせた有機層をブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮乾固させた。残渣（６４．３ｇ）をＥｔＯＡｃ中に溶解し、一晩撹拌した。得られる懸濁液を−１８℃まで冷却し、生成物をろ過により収集した（２９．９ｇ）。ろ液を濃縮して乾固させ、カラムクロマトグラフィーにより精製した（３００ｇシリカ、１：１のＥｔＯＡｃ：ＣＨ２Ｃｌ２で溶離）。純粋な画分を貯め、濃縮して乾固させ、上記で単離した純物質と合わせた。これにより白色固体として表題化合物を得た（全量５０．９ｇ、収率８６％）。
【０１２９】
４−（Ｎ−ベンジル−Ｎ−メチルグリシル）フェニルデカノアート（８）
フェノール７（５０．９ｇ、１９９ｍｏｌ、１．０当量）をアセトン（１０００ｍＬ）中に溶解させ、Ｋ２ＣＯ３（４９．５ｇ、３５８ｍｍｏｌ、１．８当量）で処理し、混合物を２時間加熱環流させた。室温まで冷却した後、固体をろ過により除去した。濃縮した試料の１Ｈ−ＮＭＲは、出発物質から塩へ完全に転化したことを示した。
【０１３０】
塩化デカノイル（１８．１ｍＬ、８９．６ｍｍｏｌ、１．５当量）を３００ｍＬの上記のアセトン溶液（５９．７ｍｍｏｌカリウム塩、１．０当量）へ加えた。得られる低粘度の懸濁液をＥｔ３Ｎ（１２．４ｍＬ、８９．６ｍｍｏｌ、１．５当量）で処理し、内部温度が３５℃まで上昇する間に高粘度の懸濁液が得られた。試料を３時間後に採取し、ＴＬＣは出発物質が完全に消費されたことを示した。固体をろ過により除去し、ろ液を濃縮して乾固させた。これにより表題化合物及び塩化デカノイルの混合物（２８．５ｇ、最大５９．７ｍｍｏｌ）が得られ、これを次のステップでそのまま使用した。
【０１３１】
４−（１−ヒドロキシ−２−（メチルアミノ）エチル）フェニルデカノアート（９）
（シネフリンデカノアート塩酸塩）
２００ｍＬのジエチルエーテル中の４−（Ｎ−ベンジル−Ｎ−メチルグリシル）フェニルデカノアート８（１０．４ｇ、粗製、約２５ｍｍｏｌ）の混合物に、ジオキサン中の４Ｎ  ＨＣｌ（１５ｍＬ、３当量）を加えた。混合物を室温で１０分間撹拌し、溶媒を蒸発させて黄色の油状物を得た。この油状物を２００ｍＬのエタノール中に溶解させた。この混合物に１ｇの１０％Ｐｄ／Ｃを加え、混合物を１気圧のＨ２雰囲気下で４晩撹拌した。反応混合物をセライトのパッドに通してろ過し、次いで蒸発させて乾固させた。粗生成物（１０．７ｇ）を３ｇのバッチで逆相カラムクロマトグラフィーにより精製した。生成物を含有するバッチを合わせた。アセトニトリルを真空中で除去し、水層を凍結乾燥により除去した。オフホワイトの生成物として生成物を得た（１．９ｇ、２１％）。
【０１３２】
＜倫理上の承認＞
すべての実験は、倫理指針にしたがって行った。
【実施例１】
【０１３３】
＜エステルプロドラッグの極性計算＞
親化合物の様々なエステルの極性計算を行った。表１はこれらの計算の結果を示す。親油性は、ブタノアート、ペンタノアート、ヘプタノアート、及びデカノアートの順に、一般にはそれぞれ１、１．５、２．５及び４のｌｏｇＰだけ増加した。
【表１】
2017534610.tif 000002
【実施例２】
【０１３４】
＜エステル加水分解のインビトロ分析＞
腹部の脂肪組織をオスのウィスター系ラット（４００ｇ、Ｈａｒｌａｎ  Ｚｅｉｓｔ）から採取し、使用まで−８０℃で保存した。ヒトの脂肪組織を美容外科から入手し、使用まで−８０℃で保存した。組織をリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ（Ｉｒｖｉｎｅ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）中で１分間、Ｔｕｒｒａｘで処理した（ラット組織については８０ｍｇ／ｍｌ、ヒト組織については２４０ｍｇ／ｍｌ）。
【０１３５】
３０℃でサーモスタット制御された５０ｍｌビーカーを使用して、放出されたオクトパミンを測定した。３０ｍｌのＰＢＳ（撹拌したもの）を、２８０ｎｍ及び２．５６ＡＵＦＳに設定されたＵＶ検出器（ＳＰＤ−１０Ａｖｐ  Ｓｈｉｍａｄｚｕ  ＵＶ／ＶＩＳ）に１ｍｌ／分にてポンプで通した（Ｇｉｌｓｏｎ  ｍｉｎｉｐｕｌｓｅ３）。出口はビーカーへ再循環させた。１ｍｍ／分及び１ｍＶのゲインに設定された平台記録装置（Ｋｉｐｐ）において紫外線シグナルを記録した。
【０１３６】
超高純度水中に１μｌ／ｍｌで１．８％塩酸を加えて、オクトパミン溶液及びオクトパミンデカノアート溶液（１ｍＭ）を作製した。オクトパミンデカノアートを３０℃で３０分間超音波処理した。
【０１３７】
ＵＶ検出器がＰＢＳに対して安定してから、１ｍｌの組織懸濁液をＰＢＳへ加えた。ＵＶシグナルが安定してから、１ｍＭのオクトパミンデカノアートを５ｍｌ加えた。ＰＢＳでのデカノアートエステルの自然に起こる加水分解をモニタリングするために、組織懸濁液を加えずに対照実験を行った。
【０１３８】
＜結果＞
オクトパミン及びオクトパミンデカノアートのＵＶスペクトルを取得した。オクトパミンは２７９ｎｍでＵＶ吸収極大を示した。一方、オクトパミンデカノアートは２６９ｎｍで極大を示した。オクトパミンの相対強度はオクトパミンデカノアートよりも１０倍高かった。
【０１３９】
図１はインビトロの加水分解実験の結果を示す。オクトパミンデカノアートは１１０分当たり１０％の速度で自然に加水分解してオクトパミンとなった。ラット脂肪懸濁液が存在する間は、オクトパミンデカノアートは大幅に速く加水分解し、１１０分以内に５０％を超える遊離型オクトパミンが得られた。ラット組織よりも３倍高い濃度のヒト脂肪組織の存在下で、デカノアートが加水分解し、１１０分で４０％を超える転化率が得られた。
【０１４０】
このことから、オクトパミンのエステルプロドラッグであるオクトパミンデカノアートの加水分解は、脂肪組織の存在下でＰＢＳ中より速いことが分かる。これは脂肪組織の存在によって、例えば内因性酵素など、中でもエステルを加水分解することが知られているリパーゼによって、引き起こされているはずである。
【実施例３】
【０１４１】
＜ヒト脂肪におけるグリセリン生成に対するオクトパミンデカノアートの効果のインビトロ分析＞
テフロン（登録商標）のポッターを使用して、６ｍＭグルコースを含む１０ｍｌのＰＢＳ中にヒト脂肪組織を均質化させた（１０ｍｌ当たり２．４ｇの脂肪組織）。懸濁液を５０ｍｌビーカーへ移し、均一性を保つために３７℃で静かに撹拌した。０．３ｍｌの懸濁液を２ｍｌの反応バイアルへ移し、オクトパミン（最終濃度１μＭ）及びオクトパミンデカノアート（最終濃度１０μＭ）をスパイクとして入れ、２ｍｌの最終体積となるまでＰＢＳ／グルコースを加えた。バイアルを３７℃で２時間インキュベートした。
【０１４２】
試料を４０００ｒｐｍで２分間遠心分離し、組織を含む、浮いている脂肪を除去した後、１０μｌの試料を採取した。
【０１４３】
酵素キット（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ）を使用して試料を分析し、２０μｌをＨＰＬＣ蛍光検出器（Ｓｈｉｍａｄｚｕ  ＲＦ  １０Ａｘｌ）へダイレクトフローインジェクション（Ｖｉｃｉバルブと０．１５ｍｌ／分のＳｈｉｍａｄｚｕ  １０  ＡＤｖｐ  ＨＰＬＣポンプ、バルブの前にあるｔｈｅｒｍｏｓ  １５＊２．１  Ｃ１８カラムを併用、移動相として超高純度水を使用）を使用することにより蛍光強度を測定した。キャリブレーション試料２〜１０００μＭの調製によってキャリブレーションを行った。
【０１４４】
＜結果＞
図２は、ヒト脂肪懸濁液中のグリセリン生成に対するオクトパミン及びオクトパミンデカノアートの効果を示す。オクトパミンと共に２時間インキュベーションした後にレベルが増加し（Ｐ＝０．１０、両側ｔ検定）、オクトパミンデカノアートについては有意性が得られた（Ｐ＝０．０４７、両側ｔ検定）。
【実施例４】
【０１４５】
＜ヒト皮膚を通るオクトパミンデカノアートの浸透のインビトロ分析＞
４×４ｃｍ四方のヒト皮膚を切り取り、ＰＢＳで洗浄した。皮下脂肪を除去し、ＰＢＳが満たされた５０ｍｌの撹拌されたビーカーの上に皮膚を固定し、ＰＢＳと皮膚の内側との間に空気がないようにした。外側に露出した皮膚の開放表面は４．９ｃｍ２であった。ＰＢＳ中でＴｕｒｒａｘにより処理された１ｍｌの０．２２１ｍｇ／ｍｌヒト脂肪をＰＢＳへ加えた。
【０１４６】
０．５時間安定化させた後、皮膚に１分間優しくすり込むことにより、５ｍｇ／ｍｌのオクトパミンデカノアートを含む１ｍｌのヒドロゲルを投与した。逆さまにした２０ｍｌビーカーで皮膚を覆い、浸透させ加水分解を生じさせるために一晩放置した。試料をｔ＝０及びｔ＝１０００分において採取し、直ちに−８０℃で凍結させた。
【０１４７】
ＵＶ検出器を備えたＨＰＬＣを使用して試料を分析した。Ｓｈｉｍａｄｚｕ  ＨＰＬＣポンプ（１０  ＡＤｖｐ）を、ｖａｌｃｏインジェクションバルブ（２０μｌループ）、Ｔｈｅｒｍｏ  ＨＰＬＣカラム（１５０ｍｍ＊２．１ｍｍ、ＢＤＳ  ｈｙｐｅｒｓｉｌ、Ｃ１８）と併用した。オクトパミンは２７９ｎｍで検出され、０〜１０００μＭの標準物質をインジェクションすることによりキャリブレーションを行った。移動相は、７８６ｍｇ  ＫＨ２ＰＯ４、５００ｍｌ超高純度水、１５ｍｌ  ＭｅＯＨ、０．５ｍｌ酢酸（９９％）、及び５５．５５ｍｇヘプタスルホン酸から成り、０．２５ｍｌ／分で、ポンプによりシステムに通した。
【０１４８】
＜結果＞
オクトパミンデカノアートヒドロゲルを塗布して１０００分後の、ビーカー中で検出されたオクトパミンの濃度は０．５２４μＭ（標準誤差０．２９４）であった。浸透／転化率のパーセントは０．１８＋０．０９％と計算された。
【０１４９】
このことから、オクトパミンデカノアートプロドラッグは皮膚に浸透し、脂肪組織、中でもリパーゼの存在によって、浸透後に加水分解されることが分かる。
【実施例５】
【０１５０】
＜ラットの胴囲及び体重に対するオクトパミンデカノアートヒドロゲルによる処置のインビボにおける効果＞
オスのウィスター系ラット（約５００ｇ）の体重を毎日量り、胴回りを測定した。傷の治癒を確認するために、その動物は、１週間に１回、次の処置の少なくとも１２時間前に毛を剃った。
【０１５１】
その動物は、最初にプロドラッグを含有しないカルボマーヒドロゲルを１か月間処置され（１日２回腹部に塗布、３×３ｃｍ）、その後、その動物は５ｍｇ／ｍｌのオクトパミンデカノアートを含有する０．５ｍｌカルボマーヒドロゲルを処置された（塗布濃度０．２７７ｍｇ／ｃｍ２）。尾の静脈の採血（１００μｌの血漿、血液１００μｌ当たり５μｌのヘパリン５００  ＩＥ）を８日目、２１日目、３６日目（化合物処置の開始）、５１日目、及び５８日目に行った。血液を遠心分離し（１０分、１４ＫＲＰＭ）、血漿を−８０℃で保存した。
【０１５２】
オクトパミンデカノアートによる３週間の処置後（最後の塗布の１６時間後）、イソフルランを使用して動物に麻酔を施し（２％、０．８ｌ／分  Ｏ２）、オクトパミンの測定のために微小透析プローブ（２ｃｍセルロース膜、Ｂｒａｉｎｌｉｎｋ、オランダ）を腹部の脂肪に挿入した。プローブに１．５μｌ毎分で食塩水を流し、３０分試料を３００μｌバイアル中に収集した。試料の収集はプローブの挿入の１５分後に開始された。
【０１５３】
＜解析＞
ＳｙｍＤＡＱにより誘導体化した後にＬＣ−ＭＳＭＳ（Ｓｃｉｅｘ  ＡＰＩ  ４０００と連結したＳｈｉｍａｄｚｕ  ２０  ＡＤｖｐ）を使用して、血液及び透析液の試料をオクトパミンについて分析した。すなわち、２２．５μｌの試料を１０μｌの０．５ｍｇ／ｍｌ  ＳｙｍＤＡＱ試薬と混合し、カラムに注射した。０．０１〜８ｎＭの試料でキャリブレーションを行った。
【０１５４】
酵素キット（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ）を使用して血液試料をグリセリンについて分析し、２０μｌをＨＰＬＣ蛍光検出器（Ｓｈｉｍａｄｚｕ  ＲＦ  １０Ａｘｌ）へダイレクトフローインジェクション（Ｖｉｃｉバルブと０．１５ｍｌ／分のＳｈｉｍａｄｚｕ  １０  ＡＤｖｐ  ｈｐｌｃポンプ、バルブの前にあるｔｈｅｒｍｏｓ  １５＊２．１  Ｃ１８カラムを併用、移動相として超高純度水を使用）を使用することにより、蛍光強度を測定した。キャリブレーション試料２〜１０００μＭの調製によってキャリブレーションを行った。
【０１５５】
＜結果＞
図３は、対照カルボマーヒドロゲルとそれに続く５ｍｇ／ｍｌのオクトパミンデカノアートヒドロゲルによる動物の処置の効果を示す。動物の体重はそれらの成長曲線にしたがう傾向を維持したが、胴回りはオクトパミンカルボマーヒドロゲルの塗布の開始から著しく低減し、３週間の処置後に約１０％の低減を達成した。一元配置分散分析Ｐ＜０．００１（一方向ＡＮＯＶＡ  ＲＭ−事後ボンフェローニ法（ｐｏｓｔ  ｈｏｃ  Ｂｏｎｆｅｒｒｏｎｉ）；ｐ＝０．０５）を使用すると、胴回りは対照の処置と比較した場合に著しく低減した。
【０１５６】
図４は、血漿グリセリンレベルに対するオクトパミンデカノアートカルボマーヒドロゲルによる処置の効果を示す。１５日後にレベルが増加し（Ｐ＝０．１０１、両側ｔ検定）、２２日の処置後に有意性が得られた（Ｐ＝０．０２４、両側ｔ検定）。
【０１５７】
オクトパミンデカノアートカルボマーヒドロゲルによる処置の開始前と、１５日及び２２日の処置後の両方で、オクトパミンの血漿レベルはＬＬＯＱ（定量下限（０．１ｎＭ））を下回った。これは、処置が著しい全身のオクトパミン曝露を引き起こさないことを示す。オクトパミンの皮下レベルは０．９６ｎＭ＋０．３６ｎＭであり、最後の塗布の１６時間後であっても血漿レベルを超えていた。
【０１５８】
本発明によるオクトパミンプロドラッグの部分投与は、皮下脂肪組織の量を減少させるが、遊離型オクトパミンの全身濃度の増加は引き起こさないことが分かる。
【実施例６】
【０１５９】
＜加水分解実験（図６〜１０）＞
美容外科手術を受けた肥満の女性被検者から、ヒト腹部脂肪組織を入手した。テフロンのポッターチップを使用して、５ｍＭ  Ｄ（＋）−グルコース一水和物を含むＰＢＳ溶液（Ｉｒｖｉｎｅ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）中に５３０ｒｐｍで組織を均質化した（Ｊａｎｋｅ＆Ｋｕｎｋｅｌ  ＫＧのＰｏｔｔｅｒ  ＲＷ  １９  Ｎｒ  ２９７９５）。
【０１６０】
組織懸濁液（１、７．５、２５、又は２４０ｍｇ脂肪／ｍｌ  ＰＢＳ、又は血漿）を撹拌し、１．９８ｍｌのアリコートをポリプロピレンの２ｍｌねじ口バイアル（Ｓａｒｓｔｅｄｔ）へ移した。プロドラッグエステル（オクトパミンデカノアート及びシネフリンデカノアート）を示された濃度で加え、混合し、３７℃でインキュベートした（図６）。リパーゼの阻害を調べる場合は、プロドラッグエステルを加える５分前にプロプラノロール又はオルリスタットを加えた（図１０）。
【０１６１】
プロドラッグを添加して１５分後、２０μｌの１．８％ＨＣｌを加えることにより脂肪分解を停止させた。試料を遠沈させ（１３０００ｒｐｍで３分、４℃）、上澄みを分析のために−１８℃で保存した。血漿中の加水分解の分析（図７）のために、１０μｌの全血を、オクトパミンデカノアートを示された濃度で含む１ｍｌのＰＢＳへ加えた。ＰＢＳ中のエステル、オクトパミン、及びシネフリンの安定性のため（図８、９）、脂肪又は血液を含まないＰＢＳ中でインキュベーションを行った。
【０１６２】
ＨＰＬＣ  ＵＶを使用して試料を分析した。Ｇｉｌｓｏｎ  ２３４自動注入装置及びＳｈｉｍａｄｚｕ  ｈｐｌｃポンプ（１０  ＡｄＶＰ）を、２７０ｎｍに設定されたＳｈｉｍａｄｚｕ  ＵＶ（１０ＡＶｐ）と併用した。逆相ＨＰＬＣカラム（Ｔｈｅｒｍｏ  ＢＤＳ  Ｈｙｐｅｒｓｉｌ  Ｃ１８  １５０ｍｍ×２．１ｍｍ、３μｍ）を使用して試料を分離した。移動相は、０．１７５ｍｌ／分の流量で、１．６ｇ  ＫＨ２ＰＯ４、１１０ｍｇ  １−ヘプタンスルホン酸ナトリウム、１ｌ超高純度水、１５ｍＬメタノール、及び１ｍｌ酢酸から成り、０．２５ｍｌ／分で構成された。
【０１６３】
＜結果＞
懸濁液中の脂肪組織の量が増加すると、オクトパミンデカノアート及びシネフリンデカノアートの加水分解速度がより高くなる（図６ａ〜ｄ）。オクトパミンデカノアート及びシネフリンデカノアートは共に、脂肪組織の存在によって、特に脂肪組織中に存在する内因性酵素、特にリパーゼによって加水分解されることが分かる。
【０１６４】
オクトパミンデカノアートは血漿中でも加水分解されることが可能であり（図７）、これによって血流に入る少量のプロドラッグが急速に遊離型オクトパミンに転化され、そのためプロドラッグが全身にわたって分配されないことが確実になる。
【０１６５】
オクトパミンデカノアート（「ｏｃｔｄｅｃ」）、オクトパミンペンタノアート（「ｏｃｔｐｅｎｔ」）、及びシネフリンデカノアート（「ｓｙｎｄｅｃ」）の加水分解は、ＰＢＳ中では血漿又は脂肪組織の存在下よりもはるかに低速度で生じる（図８）。このことは、内因性化合物、最も考えられるのはリパーゼなどの酵素が、本発明に係るプロドラッグから活性のアドレナリン受容体作動薬及び／又は拮抗薬への加水分解の増加に関与することを示している。
【０１６６】
遊離型オクトパミン又はシネフリンはＰＢＳ中で安定している（図９）。
【０１６７】
本発明に係るプロドラッグの投与の自己強化、自己触媒効果は、以下のように示すことができる。オクトパミンデカノアート（「ＯＤ」）又はシネフリンデカノアート（「ＳＤ」）が上記の脂肪懸濁液に加えられると、１５分後に約４０〜４５％の加水分解の基礎レベルが見られる（図１０）。
【０１６８】
プロプラノロールはベータ受容体拮抗薬である。プロプラノロールのベータ拮抗薬としての作用は、受容体の媒介によってリパーゼの作用を抑制する効果がある。プロプラノロールの量を増加させて加えると、対照と比較してオクトパミンデカノアート（図１０ａ）又はシネフリンデカノアート（図１０ｃ）の加水分解を減少させることが示されている。したがって、脂肪組織からのリパーゼは少なくとも部分的には、脂肪組織の存在下におけるオクトパミンデカノアート及びシネフリンデカノアートの加水分解に関与する。
【０１６９】
これはオルリスタットを懸濁液に加える場合にさらに明らかである。オルリスタットはリパーゼ拮抗薬であり、したがってリパーゼ自体を遮断する。ベータ受容体が媒介するリパーゼの刺激又は抑制に対する効果はない。オクトパミンデカノアート（図１０ｂ）又はシネフリンデカノアート（図１０ｄ）の懸濁液へオルリスタットを加えると、オクトパミンデカノアート又はシネフリンデカノアートに対するリパーゼの加水分解作用をさらに抑制する。リパーゼ自体を遮断することにより、リパーゼの活性化を低下させる効果しかないベータ受容体の遮断よりも、プロドラッグの加水分解がより大きく抑制される。
【０１７０】
これらの結果はこの関連において評価されるべきである。加水分解生成物であるオクトパミン又はシネフリンは、それ自体が、例えばグリセロール生成の増加によって分かるように、ベータアドレナリン受容体を刺激しそれによりリパーゼ活性を刺激する効果を有する、（図２、４）。リパーゼ活性は本発明に係るプロドラッグの加水分解にも関与する（図６ａ〜ｄ）。
【０１７１】
本発明に係るプロドラッグの部分投与は、プロドラッグの部分的加水分解を生じさせて遊離型のオクトパミン又はシネフリンを生じさせ、これによりリパーゼ活性が増大することが分かる。リパーゼ活性の増大は、プロドラッグの加水分解の増大、並びにトリグリセリドの加水分解の増大に関与している。したがって、本発明に係るプロドラッグは、リパーゼの活性化による自身の加水分解の促進において自己触媒的であり、この活性化は、同時にトリグリセリド（脂肪組織）の加水分解の増大を生じさせる。したがって、リパーゼに対するプロドラッグの作用は、プロドラッグに対するリパーゼの作用を刺激し、トリグリセリドの加水分解の大幅な増大をもたらす。したがって、リパーゼの活性化とプロドラッグの加水分解との間に明らかな相乗効果がある。
【０１７２】
さらに、本発明に係るプロドラッグの高いｌｏｇＰに起因して、プロドラッグは優先的に脂肪組織に吸収され、ここにリパーゼが存在しており、トリグリセリドが加水分解されることになる。これによって、本発明の特許請求の範囲にしたがい、トリグリセリドが非常に効率的に加水分解される。したがって、上記の自己触媒的加水分解メカニズムと、脂肪組織中のプロドラッグの分配に関与する、プロドラッグの特性ｌｏｇＰとの間に、さらなる相乗効果がある。
【０１７３】
逆の効果、すなわちリパーゼ活性の低下による皮下脂肪組織の量の増加も生じ得ると予期することが妥当であると想定される。これは、記載される実験から、リパーゼ活性の抑制は決して１００％ではないことが分かるので、リパーゼ残存活性が一部残るためである。したがって、リパーゼ活性を抑制する作動薬又は拮抗薬（上記のベータ拮抗薬及び／又はアルファ作動薬）の場合も、一部のリパーゼ活性が残り、プロドラッグを加水分解させ、さらにリパーゼ活性を低下させる。これは、皮下脂肪組織の量の部分的な増加、及び／又は皮下脂肪組織の強化をもたらすことになる。
【０１７４】
しかし、リパーゼ活性を刺激する作動薬及び拮抗薬（上記のベータ作動薬及び／又はアルファ拮抗薬）において自己触媒効果が最も強いので、リパーゼ活性を刺激するプロドラッグが好ましい。
【実施例７】
【０１７５】
＜皮膚浸透＞
美容外科手術を受けた肥満の女性対象からのヒト皮膚を切り出し、皮膚浸透チャンバー中に固体した。浸透によってプロドラッグを転化させるために、チャンバーにおいて６．２５ｃｍ２の皮膚を、７．５ｍｇ／ｍｌの均質化組織を含んだ６０ｍｌの撹拌されたＰＢＳ（５ｍＭグルコース）上に露出させた。２．７５ｍｇ／ｍｌの遊離型オクトパミン、５ｍｇ／ｍｌのオクトパミンデカノアート、又は３．９８ｍｇ／ｍｌのオクトパミンペンタノアートを含む０．２５ｍｌのヒドロゲルを皮膚に１回塗布し、２時間浸透させ、プロドラッグの遊離型オクトパミンへの完全な加水分解を確実にする。チャンバーを３７℃でサーモスタット制御した。ＰＢＳ中に均質化された組織から１ｍｌシリンジを使用して試料を取り出し、ＬＣ−質量分析法を使用して分析した。完全な転化を仮定すると、この分析は等量のオクトパミンを基準として皮膚を通るオクトパミンプロドラッグの全浸透量を評価し、これを等量のオクトパミン自体の浸透と比較する。
【０１７６】
ＨＰＬＣ質量分析を使用して試料を分析した。Ｓｈｉｍａｄｚｕ  ＨＰＬＣ（ＬＣ２０ＡＤポンプ及びＳＩＬ  １０  ＡＤｖｐインジェクター）をＳｃｉｅｘ  ＡＰＩ  ４０００質量分析計と併用した。ＨＰＬＣカラムは、３５℃でサーモスタット制御された、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ、Ｓｙｎｅｒｇｉ  Ｍａｘ（ＢＯＬ−Ｐ−ＲＰ２．５−０３６）、３．０×１００ｍｍ、２．５μｍであった。移動相は、溶離液Ａ：超高純度水（「ＵＰ」）中の０．１％ギ酸（「ＦＡ」）、及び溶離液Ｂ：７０％アセトニトリル（「ＡＣＮ」）＋０．１％ＦＡで構成され、全粒量は０．３ｍｌ／分であった。補給流は、溶離液Ｃ：０．１５ｍｌ／分のＡＣＮ中の０．１％ＦＡ、及びすすぎ液：ＵＰ／ＡＣＮ／ＦＡ＝５０／５０／０．１で構成された。
【０１７７】
オクトパミンの分離は、４分で０から４０％の溶離液Ｂの勾配をかけ、次いで次の１．５分で１００％まで溶離液Ｂの勾配をかけることによって実現した。勾配は１００％Ｂで０．５分維持された。
【０１７８】
沈殿後にオクトパミンを測定した（２５ｎＭオクトパミン−ｄ３、ＡＣＮ／ＵＰ／ＦＡ  ９５％／５％／０．１％中、）。１０ｐＬの試料を１５ｐＬの沈殿溶媒に加え、１０秒間ボルテックスした。試料を１３０００ｒｐｍで５分遠心分離し、ＵＰ中の１４μＬ、０．１％  ＦＡを６μＬの上澄みに加え、１０秒間ボルテックスした。自動注入装置は、２０μＬの０．５ｍｇ／ｍｌ  ＳｙｍＤＡＱ試薬（オンライン）を加え、３５μＬを注入するようにプログラムされた。ＳｙｍＤＡＱ試薬は、４．５ｍｌのＵＰ、５ｍｌの０．２５Ｍ  ＮａＨＣＯ３、０．５ｍｌのメタノール（「ＭｅＯＨ」）、及び２０μｌの２−メルカプトエタノール中に、５ｍｇのＳｙｍＤＡＱ、を溶解させることにより調製された。
【表２】
2017534610.tif 000003
【表３】
2017534610.tif 000004
【０１７９】
＜結果＞
遊離型オクトパミンを含むヒドロゲルの部分投与は、皮膚を通してオクトパミンを少量浸透させた。オクトパミンデカノアート及びペンタノアートの浸透は、約１０倍高かった（図１１）。
【実施例８】
【０１８０】
＜皮膚及び脂肪浸透の分析＞
美容外科手術を受けた肥満の女性対象からの、皮膚が付着したヒト脂肪の立方体（５×５×５ｃｍ）を４℃で切り出した。立方体を容器に移し、皮膚が容器の縁を覆うようにした。２．７５ｍｇ／ｍｌの遊離型オクトパミン、５ｍｇ／ｍｌのオクトパミンデカノアート、又は３．９８ｍｇ／ｍｌのオクトパミンペンタノアートを含む０．２５ｍｌのヒドロゲルを一回塗布し、２０時間浸透させた。その後立方体を−８０℃で冷凍した。
【０１８１】
解凍してすぐ、下にある脂肪を汚染しないように注意し、皮膚を注意深く取り除いた。脂肪を切断して、塗布した部位の直下にあった１×１ｃｍの円柱状の脂肪を得た。円柱をスライスして、塗布した部位の下の０〜２ｃｍの脂肪深さにわたる０．５ｃｍ厚さの薄片を得た。組織を５ｍｌ  ＰＢＳ（５ｍＭグルコース）中で超音波処理し、試料を遠心沈殿させた（１３０００ｒｐｍで３０分間、４℃）。透明の上澄みを注射針及びシリンジで除去し、分析まで冷凍させた。実施例７に記載のようにオクトパミンの分析を行った。
【０１８２】
＜結果＞
オクトパミン、オクトパミンデカノアート、及びオクトパミンペンタノアートは皮膚及び脂肪組織の両方を通って浸透する。オクトパミンデカノアート及びペンタノアートの塗布によって、オクトパミンを含むヒドロゲルの塗布よりも、すべての脂肪層においてより高い濃度の遊離型オクトパミンが得られる（図１２）。
【実施例９】
【０１８３】
＜インビトロのグリセロール生成の分析＞
美容外科手術を受けた肥満の女性対象から得られたヒト腹部脂肪組織を、５ｍＭ  Ｄ（＋）−グルコース一水和物を含むＰＢＳ溶液（Ｉｒｖｉｎｅ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）中で、テフロンのポッターチップを使用して５３０ｒｐｍで均質化させて（Ｊａｎｋｅ＆Ｋｕｎｋｅｌ  ＫＧのＰｏｔｔｅｒ  ＲＷ  １９  Ｎｒ  ２９７９５）、２５０ｍｇ／ｍｌのヒト脂肪懸濁液を得た。
【０１８４】
脂肪懸濁液を撹拌し、１．７５ｍｌのアリコートをポリプロピレンの２ｍｌねじ口バイアル（Ｓａｒｓｔｅｄｔ）へ移した。試験化合物を示される濃度で加え、バイアルを３７℃で４時間インキュベートした。バイアルを毎時間混合した。対照（インキュベートされなかったが代わりに直ちに冷凍された懸濁液）と、４時間インキュベートされた対照試料のグリセリン含量を分析することにより、４時間でのグリセリンの生成を計算した。生成されたグリセリン量を１００％と設定した。実験試料のグリセリン含量を対照に対する％として表した。
【０１８５】
実験試料をインキュベーション後に冷凍した。脂肪ペレットを除去し、解凍するとすぐに試料を遠心沈殿させ（１３０００ｒｐｍで１５分間、４℃）、透明の上澄みをピペットで取り、分析まで冷凍した。
【０１８６】
酵素キット（グリセリン分析キット、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ）を使用してグリセロールを分析した。要するに９６ウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ）中で、１００μｌのグリセロール分析反応混合物を上澄みの１０μｌの試料に加え、１５秒振とうした後に２０分インキュベートした。吸光度を５７０ｎｍでプレートリーダー（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｍｕｌｔｉｓｋａｎ  ＦＣ）により読み取った。グリセロールの検量線（０．０１５μＭ〜１０００μＭ）を定量化のために使用した。
【０１８７】
＜結果＞
イソプレナリンは０．１〜約８００ｎＭの様々な濃度でグリセロール含量の増加を生じさせた（図１３ａ）。
【０１８８】
オクトパミンは０．１〜１０００００ｎＭの様々な濃度でグリセロール含量の増加を生じさせた（図１３ｂ）。
【０１８９】
シネフリンは０．１から少なくとも１０００００ｎＭの様々な濃度でグリセロール含量の増加を生じさせた（図１３ｃ）。
【０１９０】
プロプラノロールは０．１から少なくとも１０００ｎＭの濃度でほぼ一定のグリセロール含量をもたらした（図１３ｄ）。１０００ｎＭを超える濃度では、グリセロール含量が減少した。
【０１９１】
ベータ３作動薬（ＳＲ５８６１１Ａ、ＣＬ３１６２４３、ＣＧＰ１２１７７）は、グリセロールの生成を増加させたが、一方でベータ拮抗薬ＳＲ５９２３０は、グリセリンの生成を低減させた（図２０）。
【０１９２】
アルファ２拮抗薬のヨヒンビンは、グリセロールの生成を増加させたが、一方でアルファ２作動薬のキシラジンは、グリセロールの生成を低減させた（図２０）。
【０１９３】
ホスホジエステラーゼ阻害剤のカフェインは、グリセロールの生成を増加させた（図２０）。
【０１９４】
これらの結果から、ベータアドレナリン受容体作動薬であるオクトパミン、シネフリン、及びイソプレナリンの添加は、トリグリセリドの加水分解を生じさせてグリセロール含量を増加させることが分かる。この効果は作動薬の濃度の増加と共に増大するが、非常に高い濃度では減少する。これは現在、ベータ受容体の感度の低下が、高濃度のベータアドレナリン受容体作動薬におけるグリセロール含量の減少に関与すると仮定される。
【０１９５】
ベータアドレナリン受容体拮抗薬のプロプラノロールを加えると逆の効果がある。１０００ｎＭを超える濃度でグリセロール含量の減少があり、この効果は濃度の増加と共に増大する。プロプラノロールよりも拮抗薬活性が高い拮抗薬は、より低い濃度でこの効果を示すことになると仮定される。
【０１９６】
図２０から、ここでの効果は、他のベータ作動薬、並びにアルファ拮抗薬についても生じることが分かる。逆の効果は、上述のように、ベータ拮抗薬及びアルファ作動薬について生じる。
【実施例１０】
【０１９７】
＜ヒトのボランティアへの塗布＞
腹部／腰の実験のため、４３歳及び３９歳（それぞれＢＭＩ  ２５．５及び２８）の２名の男性ボランティアにおける腹部回り、並びに腹部及び腰の皮下脂肪を毎日（午前８時）モニタリングした。血圧及び体重を毎日モニタリングした。脚の実験のため、４２歳の１名の女性ボランティア（ＢＭＩ  ２３．１）における脚回りを毎日（午前８時モニタリング）モニタリングした。
【０１９８】
＜ヒドロゲルの塗布＞
５ｍｌシリンジを使用してヒドロゲルを示されるように毎日又は１日２回塗布して体積を測定した。
【０１９９】
腹部の実験のため、示される体積のヒドロゲルを腹部においてへその周りに１０ｃｍの半径で塗布した。同じ体積を腰の領域に塗布した。脚の実験のため、２．５ｍｌを各々の脚に塗布した。
【０２００】
＜血漿サンプリング＞
十分に手を洗った後、指穿刺を使用して血液をサンプリングした。バイアルのキャップから突き出たキャピラリーを使用して血液（４０μｌ）をサンプリングし、１０μｌのヘパリン２０ＩＥ／ｍｌが入った３００μｌバイアル中に遠心沈殿させた。血漿をピペットで取り、３００μｌバイアルへ移し、分析まで−２０℃で保存した。
【０２０１】
オクトパミンを実施例７に記載のように分析した。
【０２０２】
＜血漿グリセロール分析＞
酵素キット（Ｓｉｇｍａ）を使用して、上記のようにグリセリンを分析した。
【０２０３】
＜皮下脂肪＞
皮下脂肪測定デバイス（Ｖｅｔｍｅｔｅｒ  Ｓｌｉｍｇｕｉｄｅ  Ｃ−１２０）を使用して、腰及びへそから４ｃｍの腹部における皮膚の厚さを測定することにより、皮下脂肪を評価した。
【０２０４】
＜処置レジーム＞
２．７５ｍｇ／ｍｌの遊離型オクトパミンを含むヒドロゲル（２．５ｍｌ、１日１回）の腹部及び腰への投与、５ｍｇ／ｍｌオクトパミンデカノアートを含むヒドロゲル（２．５ｍｌを１日１回、及び５ｍｌを１日２回）のヒトの胴回りへの投与の効果を調べた（図１４）。実験は２回の実験の平均である（ｎ＝２）。
【０２０５】
また、１人の個体の胴回りに対する、対照ヒドロゲル、２．７５ｍｇ／ｍｌのオクトパミン（２．５ｍｌ、１日１回）、５ｍｇ／ｍｌのオクトパミンデカノアート（２．５ｍｌを１日１回、及び５ｍｌを１日２回）及び３．９８ｍｇ／ｍｌのオクトパミンペンタノアート（２．５ｍｌ、１日１回）、並びに５ｍｇ／ｍｌのシネフリンデカノアート（２．５ｍｌ、１日１回）の、腹部及び腰への塗布の効果を調べた（図１５）。
【０２０６】
また、腹部及び腰の皮下脂肪に対する５ｍｇ／ｍｌのオクトパミンデカノアート（５ｍｌ、１日２回）の効果を調べた（図１６）。実験は２回又は３回の試行の平均である（ｎ＝２〜３）。
【０２０７】
また、オクトパミンデカノアート（５ｍｇ／ｍｌ、２．５ｍｌを１日１回、及び５ｍｌを１日２回；図１７ａ）、遊離型オクトパミン（２．７５ｍｇ／ｍｌ、２．５ｍｌを１日１回、及び５ｍｌを１日２回；図１７ｂ）、及びオクトパミンペンタノアート（３．９８ｍｇ／ｍｌ、２．５ｍｌ、１日１回；図１７ｃ）の投与について、オクトパミンの血漿レベルをモニタリングした。実験は１回又は２回の実験の平均である（ｎ＝１〜２）。
【０２０８】
当量の遊離型オクトパミンを比較するために実験を設定した。そのため、プロドラッグ又はオクトパミンの量は等量の遊離型オクトパミンを与えるように変化させる。
【０２０９】
＜結果＞
オクトパミンデカノアート（「ｏｃｔｄｅｃ」）を含むヒドロゲルの部分投与は、２．５ｍｌを１日１回使用するか又は５ｍｌを１日２回使用するかに関わらず、１６日後に胴回りを約４％減少させた。同じ処置レジーム及び同じモル濃度における遊離型オクトパミン（「ｏｃｔ」）の部分投与は効果がなかった（図１４）。
【０２１０】
オクトパミンデカノアート（「ｏｃｔｄｅｃ」）、オクトパミンペンタノアート（「ｏｃｔｐｅｎｔ」）、又はシネフリンデカノアート（「ｓｙｄｅｃ」）を含むヒドロゲルの部分投与は、２１日後に胴回りを２〜５％減少させた。同じ処置レジーム及び同じモル濃度における遊離型オクトパミン（「ｏｃｔ」）の部分投与は効果がなかった（図１５）。
【０２１１】
オクトパミンデカノアートを含むヒドロゲルの部分投与は、２０日で皮下脂肪を１０〜２０％低減させた（図１６）。
【０２１２】
オクトパミンデカノアート及びペンタノアートのプロドラッグを含むヒドロゲルを使用した処置レジームにより、遊離型オクトパミンの許容不可能な血漿レベルは生じなかった（図１７ａ及びｃ）。オクトパミンは脂肪組織から血漿へゆっくり放出され、副作用は報告されなかった。プロドラッグの投与により遊離型オクトパミンの許容可能な全身濃度が得られ、これも遊離型オクトパミンを含むヒドロゲルの投与の場合と同様であった（図１７ｂ）。しかし、遊離型オクトパミンを含むヒドロゲルは皮下脂肪組織（図１５）を減少させなかった。
【０２１３】
オクトパミンデカノアートを含むヒドロゲルによる長期処置（５ｍｇ／ｍｌ、５ｍｌ、１日２回）の間、オクトパミンの血漿レベルは許容可能な値で維持された。副作用は報告されなかった（図１８）。
【０２１４】
血圧（心収縮（「ｓｙｓｔ」）及び心臓拡張期（「ｄｉａ」））並びに心拍数（「ＨＲ」）は、これらの実験の間正常なままであり（図１９）、副作用は報告されなかった。
【実施例１１】
【０２１５】
＜セルライトの除去＞
３．９８ｍｇ／ｍｌのオクトパミンペンタノアートを含むヒドロゲル（５ｍｌ）をヒト対象に対して１日１回、中程度のセルライトがある領域に塗布した。３日後にセルライトは著しく減少した。
【図１】
2017534610.tif 000005
【図２】
2017534610.tif 000006
【図３】
2017534610.tif 000007
【図４】
2017534610.tif 000008
【図５】
2017534610.tif 000009
【図６ａ】
2017534610.tif 000010
【図６ｂ】
2017534610.tif 000011
【図６ｃ】
2017534610.tif 000012
【図６ｄ】
2017534610.tif 000013
【図７】
2017534610.tif 000014
【図８】
2017534610.tif 000015
【図９】
2017534610.tif 000016
【図１０ａ】
2017534610.tif 000017
【図１０ｂ】
2017534610.tif 000018
【図１０ｃ】
2017534610.tif 000019
【図１０ｄ】
2017534610.tif 000020
【図１０ｅ】
2017534610.tif 000021
【図１１】
2017534610.tif 000022
【図１２】
2017534610.tif 000023
【図１３ａ】
2017534610.tif 000024
【図１３ｂ】
2017534610.tif 000025
【図１３ｃ】
2017534610.tif 000026
【図１３ｄ】
2017534610.tif 000027
【図１４】
2017534610.tif 000028
【図１５】
2017534610.tif 000029
【図１６】
2017534610.tif 000030
【図１７ａ】
2017534610.tif 000031
【図１７ｂ】
2017534610.tif 000032
【図１７ｃ】
2017534610.tif 000033
【図１８】
2017534610.tif 000034
【図１９】
2017534610.tif 000035
【図２０】
2017534610.tif 000036
【図２１】
2017534610.tif 000037
【図２２】
2017534610.tif 000038
【図２３】
2017534610.tif 000039
【図２４】
2017534610.tif 000040
【図２５】
2017534610.tif 000041
【手続補正書】
【提出日】平成28年7月22日(2016.7.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
皮下脂肪組織を調節することによる哺乳類の体型の改善方法において使用するための、アドレナリン受容体の作動薬及び／又は拮抗薬のプロドラッグを含む部分投与用医薬組成物であって、
プロドラッグが、エステルであり、
プロドラッグが、前記作動薬又は拮抗薬及び加水分解性部分を含み、
プロドラッグのオクタノール／水分配係数が少なくとも０である、
部分投与用医薬組成物。
【請求項２】
調節が、部分投与の部位で行われる、
請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
調節が、皮下脂肪組織の量を減少させること、皮下脂肪組織の量を増加させること、又は皮下脂肪組織を強化することを含む、
請求項１又は２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
調節が、皮下脂肪組織の量を減少させることを含む、
請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項５】
プロドラッグのオクタノール／水分配係数が、少なくとも２．３である、
請求項１から４のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項６】
作動薬が、ベータアドレナリン受容体の作動薬（「ベータ作動薬」）、若しくはアルファアドレナリン受容体の作動薬（「アルファ作動薬」）であり、及び／又は拮抗薬が、ベータアドレナリン受容体の拮抗薬（「ベータ拮抗薬」）若しくはアルファアドレナリン受容体の拮抗薬（「アルファ拮抗薬」）である、
請求項１から５のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項７】
・ベータ作動薬が、オクトパミン（オルト、メタ、又はパラオクトパミン、好ましくはパラオクトパミン）、シネフリン（オルト、メタ、又はパラシネフリン、好ましくはパラシネフリン）、ノルエピネフリン、エピネフリン、エフェドリン、フェニルプロパノールアミン、チラミン、エピニン、フェニルエタノールアミン、ベータフェニルエチルアミン、ホルデニン、イソプロピルノルシネフリン、Ｎ−メチルチラミン、サルブタモール、レボサルブタモール、テルブタリン、ピルブテロール、プロカテロール、クレンブテロール、メタプロテレノール、フェノテロール、ビトルテロール、リトドリン、イソプレナリン、サルメテロール、ホルモテロール、バンブテロール、クレンブテロール、オロダテロール、インダテロール、アミベグロン（ＳＲ−５８６１１Ａ）、ＣＬ３１６，２４３、Ｌ−７４２，７９１、Ｌ−７９６，５６８、ＬＹ−３６８，８４２、ミラベグロン（ＹＭ−１７８）、Ｒｏ４０−２１４８、ＣＧＰ１２１７７、ソラベグロン（ＧＷ−４２７，３５３）、又はＢＲＬ３７，３４４であり；
・アルファ拮抗薬が、アリピプラゾール、アセナピン、アチパメゾール、シラゾリン、クロザピン、エファロキサン、イダゾキサン、ルラシドン、メルペロン、ミアンセリン、ミルタザピン、ナピタン、オランザピン、パリペリドン、リスペリドン、フェノキシベンザミン、フェントラミン、ピリベジル、ラウオルシン、リスペリドン、ロチゴチン、クエチアピン、ノルクエチアピン、セチプチリン、トラゾリン、ヨヒンビン、ジプラシドン、又はゾテピンであり；
・ベータ拮抗薬が、カルテオロール、ナドロール、ペンブトロール、ピンドロール、プロプラノロール、ソタロール、チモロール、アセブトロール、アテノロール、ベタキソロール、ビソプロロール、セリプロロース、エスモロール、メトプロロール、ネビボロール、ブシンドロール、カルベジロール、又はラベトロール、好ましくはペンブトロール、ピンドロール、プロプラノロール、アテノロール、メトプロロールＬ−７４８，３２８、Ｌ−７４８，３３７、又はＳＲ５９２３０Ａであり；
・アルファ作動薬が、４−ＮＥＭＤ、７−Ｍｅ−マルサニジン、アグマチン、アプラクロニジン、ブリモニジン、クロニジン、デトミジン、デクスメデトミジン、ファドルミジン、グアナベンズ、グアンファシン、ロフェキシジン、マルサニジン、メデトミジン、メタンフェタミン、ミバゼロール、リルメニジン、ロミフィジン、タリペキソール、チザニジン、トロニジン、キシラジン、キシロメタゾリン、又はＴＤＩＱである、
請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
エステルが、Ｃ２〜Ｃ３２アルキルエステルである、
請求項１から７のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項９】
エステルが、ブタノアート、ペンタノアート、ヘプタノアート、アクタノアート、又はデカノアートエステルである、
請求項１から８のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１０】
プロドラッグが、０．００１〜１０００ｍｇ／ｍｌの濃度で組成物中に存在する、
請求項１から９のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１１】
クリーム、フォーム、ジェル、化粧水、軟膏、パッチ、ペースト、溶液、又はスプレーである、
請求項１から１０のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１２】
プロドラッグが、ベータ作動薬である、
請求項１から１１のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１３】
ベータ作動薬が、オクトパミン又はシネフリンであり、好ましくはｐ−オクトパミン又はｐ−シネフリンである、
請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
ホスホジエステラーゼ阻害剤及び／又はアデニルシクラーゼ刺激剤をさらに含む、
請求項１から１３のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１５】
請求項１から１４のいずれかに記載の医薬組成物を部分的に投与することを含む、
皮下脂肪組織を部分的に調節することによる哺乳類の体型の改善方法。
【請求項１６】
美容的方法である、
請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
プロドラッグが、０．００１〜１０００ｍｇ／ｃｍ２の投与量で投与される、
請求項１５又は１６に記載の方法。
【請求項１８】
オクトパミンのプロドラッグであって、
オクトパミン及び加水分解性部分を含むエステルであり、
オクタノール／水分配係数が少なくとも０である、
プロドラッグ。
【請求項１９】
オクタノール／水分配係数が少なくとも２．３である、
請求項１８に記載のプロドラッグ。
【請求項２０】
医療用途のための、
請求項１８又は１９に記載のプロドラッグ。
【請求項２１】
皮下脂肪組織を調節することによる哺乳類の体型の改善方法において使用するための、
請求項１８又は１９に記載のプロドラッグ。
【請求項２２】
皮下脂肪組織の量を減少させる、皮下脂肪組織の量を増加させる、又は皮下脂肪組織を強化するための、
請求項１８又は１９に記載のプロドラッグの使用。
【請求項２３】
オクトパミンをアシル化剤によりエステル化することを含む、
オクトパミンのプロドラッグの作製方法。
【国際調査報告】
2017534610.tif 000042
2017534610.tif 000043
2017534610.tif 000044
2017534610.tif 000045
2017534610.tif 000046
2017534610.tif 000047