(57)【要約】治療の必要な被験体において、補体媒介性眼炎症、出血および線維症、およびその病理学的帰結を治療する方法であって、方法は、被験体に、治療的有効量の代替補体経路を阻害する抗体を投与することを含み、投与される抗体は、補体媒介性眼炎症、出血および線維症、およびその病理学的帰結を阻害するのに有効である、方法。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
代替経路の成分に結合し代替経路活性化を阻害する抗体またはその抗原結合性フラグメントの治療的有効量を被験体に投与することを含む、それを必要とする被験体の黄斑内および黄斑周囲の線維症および出血と関連する眼病態を治療する方法。
【請求項２】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントは古典経路活性化を阻害することなく代替補体経路活性化を阻害する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントはＣ３ｂ、プロパージン（Ｐ因子）、ＢａおよびＢｂ因子、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９からなる群より選択される代替経路の成分に結合する、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントは補体活性化を制御する補体制御因子に結合する、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントは、Ｃ３ａ、Ｃ５ａ、Ｃ３ｂ、Ｃ５ｂ、およびＣ５ｂ−９を産生する前記古典経路の能力のいずれも阻害することなく、前記代替経路により産生されるＣ３ａ、Ｃ５ａ、Ｃ３ｂ、Ｃ５ｂ、およびＣ５ｂ−９を選択的に阻害する、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントは前記代替経路により産生されるＰＣ３ｂＢｂの形成を選択的に阻害する、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントは前記代替経路機能の成分を中和する、請求項３のいずれかに記載の方法。
【請求項８】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントはＰ、Ｂｂ、またはＣ３ｂの少なくとも１つに結合する、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
抗体またはその抗原結合性フラグメントの前記治療的有効量は黄斑変性症、地図状萎縮および網膜線維症の包括的な治療に有効な量である、請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
【請求項１０】
前記被験体はドライ型加齢性黄斑変性を有し、抗体またはその抗原結合性フラグメントの前記治療的有効量は前記ドライ型加齢性黄斑変性を治療するのに有効な抗体の量である、請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
【請求項１１】
前記被験体はウェット型加齢性黄斑変性を有し、抗体またはその抗原結合性フラグメントの前記治療的有効量は前記ウェット型加齢性黄斑変性を治療するのに有効な抗プロパージン抗体の量である、請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
【請求項１２】
前記被験体は地図状萎縮を有し、抗体またはその抗原結合性フラグメントの前記治療的有効量は前記地図状萎縮を治療するのに有効な抗体またはその抗原結合性フラグメントの量である、請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
【請求項１３】
前記被験体はウェット型加齢性黄斑変性の発症後地図状萎縮を有し、抗体またはその抗原結合性フラグメントの前記治療的有効量は前記地図状萎縮を治療するのに有効な抗体またはその抗原結合性フラグメントの量である、請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
【請求項１４】
前記被験体はドライ型加齢性黄斑変性の発症後地図状萎縮を有し、抗体またはその抗原結合性フラグメントの前記治療的有効量は前記地図状萎縮を治療するのに有効な抗体またはその抗原結合性フラグメントの量である、請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
【請求項１５】
前記被験体は初期加齢性黄斑変性または加齢性黄斑変性前の過剰なドルーゼンを有し、抗体またはその抗原結合性フラグメントの前記治療的有効量は加齢性黄斑変性の発症を阻害するのに有効な抗体またはその抗原結合性フラグメントの量である、請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
【請求項１６】
代替経路の成分に結合し代替経路活性化を阻害する抗体またはその抗原結合性フラグメントの治療的有効量を抗ＶＥＧＦ、抗ＰＤＧＦ治療を受けている被験体に投与することを含む、それを必要とする被験体において眼障害を治療する方法。
【請求項１７】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントは低減されたエフェクター機能を有する、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記抗体は２つの抗体アイソフォームのハイブリッドである、請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントは代替経路の成分Ｃ３コンバターゼに結合し代替経路活性化を阻害する、請求項１６に記載の方法。
【請求項２０】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントは前記代替経路により産生されるＣ３ａ、Ｃ５ａ、Ｃ３ｂ、Ｃ５ｂ、およびＣ５ｂ−９を選択的に阻害するが前記古典経路を阻害しない、請求項１６に記載の方法。
【請求項２１】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントはＰ、Ｂｂ、またはＣ３ｂの少なくとも１つに結合する、請求項１６に記載の方法。
【請求項２２】
前記眼障害は前記被験体の外科的処置と関連するおよび／またはこれに起因する、請求項１５〜２１のいずれかに記載の方法。
【請求項２３】
前記外科的処置は心肺バイパス術外科手術である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記外科的処置は眼部外科的処置である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
前記眼障害は前記被験体の糖尿病と関連するおよび／またはこれに起因する、請求項１５〜２１のいずれかに記載の方法。
【請求項２６】
前記眼障害は前記網膜への物理的傷害と関連するおよび／またはこれに起因する、請求項１５〜２１のいずれかに記載の方法。
【請求項２７】
前記眼障害は異常な脈絡膜血管新生である、請求項１５〜１２のいずれかに記載の方法。
【請求項２８】
前記眼障害は網膜線維症である、請求項１５〜２１のいずれかに記載の方法。
【請求項２９】
前記眼障害は眼炎症である、請求項１５〜２１のいずれかに記載の方法。
【請求項３０】
前記眼障害は前房および後房眼疾患を含む、請求項１５〜２１のいずれかに記載の方法。
【請求項３１】
前記眼障害は下記からなる群より選択される、請求項１５〜２１のいずれかに記載の方法：網膜色素線条症、細動脈瘤、動脈閉塞性疾患、網膜中心静脈閉塞症、中心性漿液性網脈絡膜症、脈絡網膜変性症、脈絡膜破裂、脈絡膜炎、輪状網膜症、錐体変性症、錐体桿体ジストロフィー、嚢胞様黄斑浮腫、変性近視、優性／過剰ドルーゼン、眼内炎、滲出性網膜症、目のヒストプラスマ症、高血圧性網膜症、虚血性眼外傷、白血病性網膜症、黄斑浮腫、マラッティア・レベンティネーズ（Ｍａｌａｔｔｉａ  Ｌｅｖｅｎｔｉｎｅｓｅ）、ムコ多糖症、新生物、ノースカロライナ黄斑ジストロフィー、周辺網膜血管新生、光受容器変性、ポリープ状脈絡膜血管症、網膜前線維症、増殖性網膜症、増殖性硝子体網膜症、プルチェル網膜症、放射線誘導性網膜症、腎性網膜症、網膜血管腫症、網膜剥離、網膜瘢痕、網膜毛細血管拡張症、網膜静脈閉塞、未熟児網膜症、裂孔原性網膜剥離、桿体錐体ジストロフィー、ＲＰＥ変性、虹彩血管新生、鎌状赤血球網膜症、ソースビー眼底変性症、星状網膜症、網膜下脈絡膜血管新生、ぶどう膜炎、および静脈閉塞性疾患。
【請求項３２】
前記眼障害は下記からなる群より選択される、請求項１５〜２１のいずれかに記載の方法：糖尿病性網膜症、糖尿病性微小血管障害、周皮細胞死、網膜内微小血管、毛細血管瘤、血管透過性変化、黄斑浮腫、硝子体下および硝子体出血、ならびに網膜下脈絡膜血管新生。
【請求項３３】
代替経路の成分に結合し代替経路活性化を阻害する抗体またはその抗原結合性フラグメントの治療的有効量を被験体に投与することを含む、それを必要とする被験体において前記被験体の外科的処置と関連するおよび／またはこれに起因する眼障害を治療する方法。
【請求項３４】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントは前記被験体に投与されると前記被験体において血管透過性を下方制御する、請求項１〜３３のいずれかに記載の方法。
【請求項３５】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントは前記被験体に投与されると前記被験体において上皮透過性を下方制御する、請求項１〜３３のいずれかに記載の方法。
【請求項３６】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントは前記被験体に投与されると前記被験体において血管新生を阻害する、請求項１〜３３のいずれかに記載の方法。
【請求項３７】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントは前記被験体に投与されると前記被験体において網膜線維症を阻害する、請求項１〜３３のいずれかに記載の方法。
【請求項３８】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントは前記被験体に投与されると前記被験体において網膜色素上皮細胞萎縮を阻害する、請求項１〜３３のいずれかに記載の方法。
【請求項３９】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントは前記被験体に投与されると前記被験体においてＬＤＨを阻害する、請求項１〜３３のいずれかに記載の方法。
【請求項４０】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントは前記被験体に投与されると前記被験体において光受容体細胞死を阻害する、請求項１〜３３のいずれかに記載の方法。
【請求項４１】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントは前記被験体に投与されると前記被験体において血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）を下方制御する、請求項１〜３３のいずれかに記載の方法。
【請求項４２】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントは前記被験体に投与されると前記被験体において血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）を下方制御する、請求項１〜３３のいずれかに記載の方法。
【請求項４３】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントは前記被験体に投与されると前記被験体においてアンジオポエチン−２を下方制御する、請求項１〜３３のいずれかに記載の方法。
【請求項４４】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントは前記被験体に投与されると前記被験体において線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）を下方制御する、請求項１〜３３のいずれかに記載の方法。
【請求項４５】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントは前記被験体に投与されると前記被験体において結合組織増殖因子（ＣＴＧＦ）を下方制御する、請求項１〜３３のいずれかに記載の方法。
【請求項４６】
前記抗体は前記被験体に投与されるとＣ３ｂ形成を阻害する、請求項１〜３３のいずれかに記載の方法。
【請求項４７】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントは前記被験体に投与されるとＣ５ａ形成を阻害する、請求項１〜３３のいずれかに記載の方法。
【請求項４８】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントと組み合わせて血管透過性の下方制御因子を投与することをさらに含む、請求項１〜４７のいずれかに記載の方法。
【請求項４９】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントと組み合わせて上皮透過性の下方制御因子を投与することをさらに含む、請求項１〜４７のいずれかに記載の方法。
【請求項５０】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントと組み合わせて上皮透過性の下方制御因子を投与することをさらに含む、請求項１〜４７のいずれかに記載の方法。
【請求項５１】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントと組み合わせて血管新生の阻害剤を投与することをさらに含む、請求項１〜４７のいずれかに記載の方法。
【請求項５２】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントと組み合わせて上皮透過性の下方制御因子を投与することをさらに含む、請求項１〜４７のいずれかに記載の方法。
【請求項５３】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントと組み合わせて血管新生の阻害剤を投与することをさらに含む、請求項１〜４７のいずれかに記載の方法。
【請求項５４】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントと組み合わせて網膜線維症の阻害剤を投与することをさらに含む、請求項１〜４７のいずれかに記載の方法。
【請求項５５】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントと組み合わせてＲＰＥ細胞萎縮の阻害剤を投与することをさらに含む、請求項１〜４７のいずれかに記載の方法。
【請求項５６】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントと組み合わせてＬＤＨの阻害剤を投与することをさらに含む、請求項１〜４７のいずれかに記載の方法。
【請求項５７】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントと組み合わせて光受容体細胞死の阻害剤を投与することをさらに含む、請求項１〜４７のいずれかに記載の方法。
【請求項５８】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントと組み合わせてＶＥＧＦの下方制御因子を投与することをさらに含む、請求項１〜４７のいずれかに記載の方法。
【請求項５９】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントと組み合わせてＰＤＧＦの下方制御因子を投与することをさらに含む、請求項１〜４７のいずれかに記載の方法。
【請求項６０】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントと組み合わせてアンジオポエチン−２の下方制御因子を投与することをさらに含む、請求項１〜４７のいずれかに記載の方法。
【請求項６１】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントと組み合わせてＦＧＦの下方制御因子を投与することをさらに含む、請求項１〜４７のいずれかに記載の方法。
【請求項６２】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントと組み合わせてＣＴＧＦ下方制御因子を投与することをさらに含む、請求項１〜４７のいずれかに記載の方法。
【請求項６３】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントと組み合わせて網膜グリア細胞活性化の下方制御因子を投与することをさらに含む、請求項１〜４７のいずれかに記載の方法。
【請求項６４】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントと組み合わせてＣ３ｂの阻害剤を投与することをさらに含む、請求項１〜４７のいずれかに記載の方法。
【請求項６５】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントと組み合わせてＣ５ａの阻害剤を投与することをさらに含む、請求項１〜４７のいずれかに記載の方法。
【請求項６６】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントと組み合わせて眼内活性化の選択的阻害剤を投与することをさらに含む、請求項１〜４７のいずれかに記載の方法。
【請求項６７】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントと組み合わせて、ＶＥＧＦを直接標的にする抗体および／または小分子剤を投与することをさらに含む、請求項１〜４７のいずれかに記載の方法。
【請求項６８】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントと組み合わせて、ＰＤＧＦを直接標的にする抗体および／または小分子剤を投与することをさらに含む、請求項１〜４７のいずれかに記載の方法。
【請求項６９】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントと組み合わせて、アンジオポエチン−２を直接標的にする抗体および／または小分子剤を投与することをさらに含む、請求項１〜４７のいずれかに記載の方法。
【請求項７０】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントと組み合わせて、ＣＴＧＦを直接標的にする抗体および／または小分子剤を投与することをさらに含む、請求項１〜４７のいずれかに記載の方法。
【請求項７１】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントと組み合わせて、Ｃ５ａを直接標的にする抗体および小分子剤を投与することをさらに含む、請求項１〜４７のいずれかに記載の方法。
【請求項７２】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントと組み合わせて、Ｃ３ｂを直接標的にする抗体および／または小分子剤を投与することをさらに含む、請求項１〜４７のいずれかに記載の方法。
【請求項７３】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントと組み合わせて、Ｃ４を直接標的にする抗体および／または小分子剤を投与することをさらに含む、請求項１〜４７のいずれかに記載の方法。
【請求項７４】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントと組み合わせて、前記古典経路を阻害する抗体および／または小分子剤を投与することをさらに含む、請求項１〜４７のいずれかに記載の方法。
【請求項７５】
前記抗体またはその抗原結合性フラグメントと組み合わせて、下記からなる群より選択される少なくとも１つ作用物質を投与することをさらに含む、請求項１〜４７のいずれかに記載の方法：ラニビズマブ、ベバシズマブ、アフリベルセプト、ＫＨ９０２  ＶＥＧＦ受容体−Ｆｃ融合タンパク質、２Ｃ３抗体、ＯＲＡ１０２、ペガプタニブ、ベバシラニブ、ＳＩＲＮＡ−０２７、デクルシン、デクルシノール、ピクロポドフィリン、ググルステロン、ＰＬＧ１０１、エイコサノイドＬＸＡ４、ＰＴＫ７８７、パゾパニブ、アキシチニブ、ＣＤＤＯ−Ｍｅ、ＣＤＤＯ−Ｉｍｍ、シコニン、β−ヒドロキシイソバレリルシコニン、またはガングリオシドＧＭ３、ＤＣ１０１抗体、Ｍａｂ２５抗体、Ｍａｂ７３抗体、４Ａ５抗体、４Ｅ１０抗体、５Ｆ１２抗体、ＶＡＯ１抗体、ＢＬ２抗体、ＶＥＧＦ関連タンパク質、ｓＦＬＴＯ１、ｓＦＬＴ０２、ペプチドＢ３、ＴＧ１００８０１、ソラフェニブ、およびＧ６−３１抗体。
【請求項７６】
前記抗体は、プロパージンに特異的に結合し代替補体経路活性化を阻害する、抗プロパージン抗体またはその抗原結合部分であり、前記抗プロパージン抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４４、４６−４８、５１−７８または８６の重鎖可変ドメインのＣＤＲに対し少なくとも８０％配列同一性を有する少なくとも２つのＣＤＲ（複数可）を有する重鎖を含み、または（ｉｉ）単離された抗プロパージン抗体またはその抗原結合部分、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４４、４６−４８、５１−７８または８６の重鎖可変ドメインのＣＤＲに対し少なくとも８０％配列同一性を有する少なくとも２つのＣＤＲ（複数可）を有する重鎖可変領域の、プロパージンへの結合を競合的に阻害する、請求項１−７５のいずれかに記載の方法。
【請求項７７】
前記抗体は、プロパージンに特異的に結合し代替補体経路活性化を阻害する、抗プロパージン抗体またはその抗原結合部分であり、前記抗プロパージン抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２、３、４、７−３３、４１、４２、または４３の軽鎖可変ドメインのＣＤＲに対し少なくとも８０配列同一性を有する少なくとも２つのＣＤＲ（複数可）を有する軽鎖を含み、または（ｉｉ）単離された抗プロパージン抗体またはその抗原結合部分、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２、３、４、７−３３、４１、４２、または４３の軽鎖可変ドメインのＣＤＲに対し少なくとも８０％配列同一性を有する少なくとも２つのＣＤＲ（複数可）を有する重鎖可変領域の、プロパージンへの結合を競合的に阻害する、請求項１−７５のいずれかに記載の方法。
【請求項７８】
前記抗体は、プロパージンに特異的に結合し代替補体経路活性化を阻害する、抗プロパージン抗体またはその抗原結合部分であり、前記抗プロパージン抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４４、４６−４８、５１−７８および８６からなる群より選択される重鎖可変ドメインの３つのＣＤＲを含む重鎖を含み、または（ｉｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４４、４６−４８、５１−７８および８６からなる群より選択される重鎖可変ドメインの３つのＣＤＲを含む重鎖を含む、単離された抗プロパージン抗体またはその抗原結合部分の、プロパージンへの結合を競合的に阻害する、請求項１−７５のいずれかに記載の方法。
【請求項７９】
前記抗体は、プロパージンに特異的に結合し代替補体経路活性化を阻害する、抗プロパージン抗体またはその抗原結合部分であり、前記抗プロパージン抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２、３、４、７−３３、４１、４２、および４３からなる群より選択される軽鎖可変ドメインの３つのＣＤＲを含む軽鎖を含み、または（ｉｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２、３、４、７−３３、４１、４２、および４３からなる群より選択される軽鎖可変ドメインの３つのＣＤＲを含む軽鎖を含む、単離された抗プロパージン抗体またはその抗原結合部分の、プロパージンへの結合を競合的に阻害する、請求項１−７５のいずれかに記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本出願は、２０１３年１２月２４に出願された米国仮特許出願第６１／９２０，５４１号（その内容は参照により本明細書に組み込まれる）の優先権の恩典を主張する。
【０００２】
発明の分野
本発明は、補体活性化および補体活性化副産物により引き起こされ、またはこれらと関連し得る、補体媒介性眼部疾患の防止および治療に関し、特定的には、眼内空間における線維症、出血、炎症、血管新生および脈絡膜血管新生を治療および防止するために、補体活性化の阻害剤を使用する組成物および方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
補体系は眼疾患において活性化される。図１は、補体系の２つの主要経路；古典経路および代替経路の概略図を提供する。代替経路（ＡＰ）は病原体および異質なまたは異常な表面により活性化され（例えばドルーゼン）、急激な自己増幅が可能である。ＡＰの過剰なおよび／または長期の活性化は、多くの炎症性および非炎症性病態および障害の主因であると考えられる。加齢性黄斑変性（ＡＭＤ）、糖尿病性網膜症、ぶどう膜炎、網膜線維症、出血、および多くの眼病態および障害における炎症は、ＡＰ活性化および調節不全により引き起こされる。
【０００４】
ＡＰは、補体因子Ｂ、Ｄ、およびＰ（プロパージン）から構成される。図２は、補体系活性化の結果として産生されるサイトカインおよび増殖因子の概略図を提供する。補体因子Ｃ３ａおよびＣ５ａは免疫系細胞、および他の型の細胞を活性化して、ＴＮＦ−α、ＶＥＧＦ、サイトカイン、増殖因子、および他の炎症性メディエータを生成させる。ＡＰ活性化時に、Ｃ３ｂはプロパージンおよびＢ因子に結合し、複合体ＰＣ３ｂＢを形成する。Ｄ因子はその後、複合体内のＢ因子を切断する。Ｂ因子のこの切断により活性コンバターゼが生成し、これがさらにＣ３ｂおよびＣ３ａへとＣ３を切断し、これにより、追加のＣ３コンバターゼの形成を永続化する。追加の分子のＣ３ｂおよびＢｂがＰＣ３ｂＢｂと結合して活性Ｃ５コンバターゼを形成し、これがＣ５の分子をＣ５ｂおよびＣ５ａへと切断する。Ｃ５ｂはその後、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８およびＣ９因子と結合して溶解性巨大分子Ｃ５ｂ−９（膜侵襲複合体、または「ＭＡＣ」としても知られている）を形成する。ＭＡＣは、細胞膜に穴を開けることにより細胞を溶解する。これは、知られているプロセスの１つであり、これにより、ＡＭＤおよび他の眼障害との関連で、ＲＰＥ細胞、桿体および錐体が補体系活性化の結果として損傷される。
【発明の概要】
【０００５】
本明細書で記載される実施形態は、それを必要とする被験体において、線維症、血管出血、炎症、および細胞死により媒介される眼病態を治療および／または防止する組成物および方法に関する。方法は、被験体に代替経路（ＡＰ）阻害剤の治療的有効量を投与して、被験体において線維症、血管出血、炎症、および／または細胞死を阻害することを含み得る。
【０００６】
いくつかの実施形態では、方法は、代替経路を選択的にブロックするがレクチンまたは古典経路に何の効果も有さない、代替経路阻害抗体またはその抗原結合性フラグメントの治療的有効量を被験体に投与することにより、それを必要とする被験体の脈絡膜血管新生、網膜萎縮症、網膜線維症、血管出血、および眼障害と関連する炎症を治療、防止および／または阻害することを含み得る。例えば、方法は、プロパージンに高親和性で結合し（例えば、１ｐＭ〜１０００ｐＭのＫＤ）プロパージンのＣ３ｂおよびＣ５ｂへの結合をブロックする抗体による、代替経路の選択的阻害を含んでよい。そのような抗体は、ＴＳＲ０、ＴＳＲ１、ＴＳＲ４、ＴＳＲ５、およびＴＳＲ６からなる群より選択される６つのＴＳＲのうちの少なくとも１つに結合できる。網膜線維症および出血を阻害するための抗プロパージン抗体の使用は、どの補体阻害剤も網膜線維症および網膜出血の阻害を示していないので新規である。
【０００７】
他の実施形態では、方法は、選択的に代替経路をブロックするがレクチンまたは古典経路に何の効果も有さない代替経路阻害抗体（すなわち、抗ＡＰ抗体）またはその抗原結合性フラグメントの治療的有効量を被験体に投与することにより、それを必要とする被験体の眼障害と関連するＶＥＧＦ形成、Ｃ５ｂ−９形成およびサイトカイン形成を治療、防止および／または阻害することを含み得る。いくつかの実施形態では、抗ＡＰ抗体は、プロパージンに結合しＣ３ｂ／Ｃ５ｂとのプロパージン相互作用をブロックし、炎症、組織傷害、および血管新生を阻害する抗プロパージン抗体を含んでよい。抗ＡＰ抗体の投与は、代替経路によるＣ３ａ／Ｃ５ａの形成を防止し、Ｃ３ａ／Ｃ５ａによる網膜上皮細胞を含む炎症細胞の活性化、血管新生を促進する内皮増殖因子（例えば、ＶＥＧＦ）の放出を防止し、活性化された細胞からの炎症性メディエータ（例えば、サイトカイン）の産生を防止し、組織傷害（例えば、ＭＡＣ）および網膜上皮細胞、桿体および錐体の傷害の原因となるＣ５ｂ−９の産生を防止できる。目の損傷された細胞は、組織死のマーカーであるＬＤＨを産生する。抗ＡＰ抗体はまた、乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）形成を防止でき、眼細胞死を阻害するために使用できる。
【０００８】
代替経路により産生されるＣ３ａ／Ｃ５ａはどちらも、眼細胞、例えば、限定はされないが、ＲＰＥ細胞、桿体および錐体細胞を活性化し、血管新生を促進する炎症性メディエータおよびＶＥＧＦ増殖因子のその後の放出を引き起こす。Ｃ３ａ／Ｃ５ａの阻害はＶＥＧＦ形成および炎症性メディエータを制御でき、よって炎症が制御される。代替経路の活性化により産生されることが知られている追加の分子は下記である；ＴＮＦ−α、ＩＬ−１、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１７、ＶＥＧＦ、および／またはＰＤＧＦ。抗ＡＰ抗体は、眼障害におけるそのような活性化を制御できる。
【０００９】
血管の形成は組織修復にとって重要であり、これは疾患におけるＶＥＧＦ形成により媒介される。代替経路により生成されるＣ３ａ／Ｃ５ａはどちらも、眼細胞、例えば、限定はされないが、ＲＰＥ細胞、桿体および錐体細胞を活性化し、血管新生を促進するＶＥＧＦおよびＰＤＧＦ増殖因子のその後の放出を引き起こす。そのため、Ｃ３ａ／Ｃ５ａの阻害は、病態を引き起こすＶＥＧＦ形成を制御し組織修復に関与するＶＥＧＦは制御しないことが期待される。いくつかの実施形態では、本明細書で記載される抗ＡＰ抗体は、処置後に補体媒介性眼障害を発症するリスクがあると同定されている、眼科学的処置を受けている被験体のための予防的治療において使用できる。いくつかの実施形態では、抗ＡＰ抗体は、眼部処置と関連する線維症、出血および炎症を阻害できる。さらに他の実施形態では、抗ＡＰ抗体は、眼科学的処置後に組織修復を阻害することなく血管新生を防止できる。
【００１０】
別の実施形態では、眼部外科的処置（または他の物理的眼部外傷）を受けている被験体における正常な組織修復による線維症および出血を阻害するためのプロセスは、創傷治癒を促進するために、被験体に抗ＡＰ抗体を投与することを含んでよい。１つの実施形態では、ＡＰ媒介性眼病態を治療するためのプロセスは、眼部外科的処置中に起きてよく、この場合、処置を受けている被験体は、視力喪失に至ることがある／至らないこともある網膜出血または炎症により特徴付けられる病状に苦しんでいる。この実施形態は、外科的処置直前、処置中または処置後のいずれかで抗ＡＰ抗体を投与する工程を含む。
【００１１】
他の実施形態では、抗ＡＰ抗体は、下記を含むが、それらに限定されないぶどう膜炎の病態に続発する線維症および出血を防止するために使用できる；虹彩炎、毛様体扁平部炎、脈絡膜炎、脈絡網膜炎、前部ぶどう膜炎、後部ぶどう膜炎、強膜炎、眼部血管新生、アテローム性動脈硬化、抗リン脂質症候群に続発する網膜動脈閉塞症、血管新生緑内障、虹彩血管新生、プルチェル網膜症、ソースビー眼底変性症、ドイン蜂巣状網膜ジストロフィー、マラッティア・レベンティネーズ（Ｍａｌａｔｔｉａ  Ｌｅｖｅｎｔｉｎｅｓｅ）、家族性優性ドルーゼン、ノースカロライナ黄斑ジストロフィー、若年性黄斑変性症、シュタルガルト病、卵黄様黄斑変性症、成人発症中心窩黄斑卵黄状ジストロフィー（ＡＯＦＶＤ）、ソースビー眼底変性症、およびベスト病。
【００１２】
他の実施形態では、１つ以上の特許請求される抗ＡＰ抗体は、虹彩炎、毛様体扁平部炎、脈絡膜炎、脈絡網膜炎、前部ぶどう膜炎、後部ぶどう膜炎、または強膜炎、眼部血管新生、糖尿病性網膜症または糖尿病と関連する目の他の炎症性障害を含むが、それらに限定されないぶどう膜炎の病態に続発する炎症、血管新生、細胞萎縮、組織分解、ＬＤＨの放出、線維症および／または出血を防止する、高血圧性網膜症を防止する、自己免疫性ぶどう膜炎または自己免疫障害に続発するぶどう膜炎、ベーチェット病、イールズ病、または目の他の自己免疫性炎症疾患、アテローム性動脈硬化、抗リン脂質症候群に続発する網膜動脈閉塞症、血管新生緑内障、虹彩血管新生、プルチェル網膜症、ＡＭＤ、ソースビー眼底変性症、ドイン蜂巣状網膜ジストロフィー、マラッティア・レベンティネーズ（Ｍａｌａｔｔｉａ  Ｌｅｖｅｎｔｉｎｅｓｅ）、家族性優性ドルーゼン、ノースカロライナ黄斑ジストロフィー、若年性黄斑変性症、シュタルガルト病、卵黄様黄斑変性症、成人発症中心窩黄斑卵黄状ジストロフィー（ＡＯＦＶＤ）、ソースビー眼底変性症、またはベスト病、血管閉塞、例えば、限定はされないが；網膜中心静脈閉塞症（ＣＲＶＯ）、閉塞性末梢動脈疾患、アテローム性動脈硬化に続発する眼虚血性症候群、抗リン脂質症候群に続発する網膜動脈閉塞症、血管新生緑内障、虹彩血管新生、またはプルチェル網膜症、未熟児網膜症または家族性滲出性硝子体網膜症、目の前眼部で起こる眼病態、およびフックス角膜内皮変性症を防止するために使用できる。
【００１３】
いくつかの実施形態では、抗ＡＰ抗体は、血管閉塞により特徴付けられる病態に続発する線維症および／または出血を防止するために使用される。血管閉塞と関連するそのような病態としては、下記が挙げられる：網膜中心静脈閉塞症（ＣＲＶＯ）、閉塞性末梢動脈疾患、アテローム性動脈硬化に続発する眼虚血性症候群、抗リン脂質症候群に続発する網膜動脈閉塞症、血管新生緑内障、虹彩血管新生、およびプルチェル網膜症。
【００１４】
１つの実施形態では、抗ＡＰ抗体は、糖尿病性網膜症に続発する線維症および出血を防止するために使用される。別の実施形態では、抗Ｐ、抗Ｃ３ｂ、または抗Ｂｂ抗体は、糖尿病患者における網膜線維症または出血、高血圧性網膜症、自己免疫障害、自己免疫性ぶどう膜炎またはぶどう膜炎、ベーチェット病、イールズ病、または目の他の自己免疫疾患と関連する、任意のまたは全てのＡＰ媒介性病態を治療するために使用される。
【００１５】
いくつかの実施形態では、抗ＡＰ抗体は、未熟児網膜症または家族性滲出性硝子体網膜症、目の前眼部で起こる眼病態、フックス角膜内皮変性症、血管新生の防止のための抗ＶＥＧＦ剤による反復治療に続発する線維症および／または出血を防止するために使用される。
【００１６】
いくつかの実施形態では、眼出血および／または線維症を治療するために使用される抗ＡＰ抗体は、Ｂａ、Ｂｂ、Ｃ３ｂ、Ｄ、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７またはＣ８を含む補体因子の群の１つに結合するものである。発明の他の実施形態では、眼出血および／または線維症を治療するために使用される抗ＡＰ抗体は、古典またはレクチン経路をも阻害するものである。
【００１７】
いくつかの実施形態では、抗ＡＰ抗体は、抗プロパージンまたは抗Ｐ抗体であってよい。抗プロパージン抗体は、血管新生を阻害でき、一方、眼炎症、眼浮腫、網膜線維症および出血も阻害できる。本発明は、ＡＰ媒介性の血管新生、眼炎症、眼浮腫、眼組織萎縮、血管透過性、線維症、出血ならびに他の炎症性および自己免疫が引き起こす病状および病態を含む、疾患および障害を防止または治療するためのプロセスを提供する。
【００１８】
別の実施形態では、本明細書で記載される抗Ｐ抗体の１つ以上は、ウェット型ＡＭＤを治療するために使用できる。本明細書で記載される抗Ｐ抗体の１つ以上は、前に抗ＶＥＧＦ剤により治療された被験体を治療するために使用され得る。本明細書で記載される、特許請求される抗Ｐ抗体の１つ以上は、抗ＶＥＧＦ剤が禁忌である血管新生のための治療を必要とする被験体を治療するために使用され得る。別の実施形態では、１つ以上の抗Ｐ抗体は、抗ＶＥＧＦ剤による治療後のドライ型ＡＭＤの発症を防止するために使用できる。
【００１９】
本明細書で記載される実施形態はまた、下記の少なくとも１つが疾患過程の一部である眼病態を制御および防止するために抗Ｐ抗体を使用するプロセスに関する；炎症、血管新生、細胞萎縮、組織分解、ＬＤＨの放出、線維症および／または出血。
【００２０】
別の実施形態では、眼部外科的処置中または処置後に起こるＡＰ活性化と関連するＡＰ媒介性眼病態を治療するためのプロセスは、１つ以上の抗Ｐ抗体を被験体に、眼部処置直前、処置中または処置直後のいずれかで投与することを含んでよい。
【００２１】
別の実施形態は、過剰なまたは制御されない補体活性化と関連する障害の治療のための医薬または組成物の調製のための、これらの抗ＡＰ抗体の使用に関する。それらは、眼障害、特に、血管新生、組織傷害、組織破壊、地図状萎縮が疾患を特徴付ける障害中の補体活性化を含む。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１】古典および代替補体経路の両方の概略図である。
【図２】ＡＰにより産生されるＣ３ａおよびＣ５ａがどのように細胞を活性化させるかの概略図であり、これにより、ＴＮＦ−α、炎症性メディエータ、増殖因子、例えばＶＥＧＦおよびＰＤＧＦ、ならびに炎症性サイトカインが産生される。
【図３】抗ＡＰ抗体が透析の体外モデル中にヒト血液に添加された実験からのデータを提示し、この場合、補体活性化が起きたことがわかっている。３７℃でのインキュベーション後、ＶＥＧＦのレベルを、従来の方法を用いて測定した。この実験からのデータにより、抗ＡＰ抗体はヒト血液中でのＶＥＧＦの産生を阻害できたことが証明される。
【図４】抗ＡＰ抗体が透析の体外モデル中にヒト血液に添加された実験からのデータを提示し、この場合、補体活性化が起きたことがわかっている。３７℃でのインキュベーション後、ＰＤＧＦのレベルを、従来の方法を用いて測定した。この実験からのデータにより、抗ＡＰ抗体はヒト血液中でのＰＤＧＦの産生を阻害できたことが証明される。
【図５】抗ＡＰ抗体が透析の体外モデル中にヒト血液に添加された実験からのデータを提示し、この場合、補体活性化が起きたことがわかっている。３７℃でのインキュベーション後、ＴＮＦ−αのレベルを、従来の方法を用いて測定した。この実験からのデータにより、抗ＡＰ抗体はヒト血液中でのＴＮＦ−αの産生を阻害できたことが証明される。
【図６】抗ＡＰ抗体が透析の体外モデル中にヒト血液に添加された実験からのデータを提示し、この場合、補体活性化が起きたことがわかっている。３７℃でのインキュベーション後、ＩＬ−１ｂのレベルを、従来の方法を用いて測定した。この実験からのデータにより、抗ＡＰ抗体はヒト血液中でのＩＬ−１ｂの産生を阻害できたことが証明される。
【図７】細胞溶解のエクスビボ阻害を示す。このグラフは、抗Ｐ抗体を、ＭＡＣ形成、細胞溶解、およびＬＤＨの放出に対するそれらの効果について評価する（対照に対して）研究から収集したデータの表示である。
【図８】ＣＮＶのアカゲザルモデルから取ったアカゲザル網膜の撮られた画像を示し、この場合、参照薬物は抗ＶＥＧＦ剤であり、試験薬物は発明の抗Ｐ抗体の１つであった。
【図９】ウェット型ＡＭＤおよびＣＮＶのアカゲザルモデルの第３週に観察されたＣＮＶ面積の定量化から収集されたデータのグラフ表示であり、各研究群におけるＣＮＶの程度を定量するために使用される方法は、本出願の明細書において記載される。
【図１０】Ａは、アカゲザルウェット型−ＡＭＤ／ＣＮＶモデル研究から取った、アカゲザルの目の撮られた画像における網膜出血の可視化を示す。出血は、これらの画像では、目立って暗い、または黒色の領域として、見られる。この図面では、これらの領域の２〜３個（だが、全てではない）が白の点線で輪郭が取られている。画像は出血の可視化の例として提供されるにすぎない。Ｂは、対照と比較するために、処置した網膜からとった画像の一例を提供する。
【図１１】ウェット型ＡＭＤおよびＣＮＶのアカゲザルモデルの第３週において観察される出血の定量化を示し−各研究群における出血の程度を定量するために使用される方法は、本出願の明細書において記載される。
【図１２】研究被験目の画像を示し−これらの画像は、ウェット型ＡＭＤのアカゲザルモデルからのものである。画像は元々カラーであったが、本出願のためのグレースケールに変換されている。
【図１３】Ａ−Ｂ。線維症の可視化を示す−上の画像は全てＣＮＶ研究のアカゲザルモデルにおけるアカゲザル網膜から撮った。図１３Ａでは、白の点線で輪郭が描かれた領域は、研究の第３週における、線維症の外観のいくつかの例である（これらの実施例のために輪郭が描かれたものよりも多くの線維症が写真中に存在することに注意されたい）。観察者は、図１２で示された各画像を、図１３Ｂ上のように提供されるグレーディングキーを使用して格付けした。
【図１４】線維症の定量化を示す−上のグラフは、アカゲザルＣＮＶ研究からの各被験動物における、線維症の程度に対する観察者グレードの結果を提供する。上で提供されるデータからわかるように、抗Ｐ抗体は、処置した３匹の動物のうち２匹で、線維症を実質的に低減させた。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
定義
本明細書で特定的に規定されない限り、この文書で使用される全ての用語は、本発明の当業者により理解されるであろうものと同じ意味を有する。下記定義は明確にするために、本発明を説明するために明細書および特許請求の範囲で使用されるそれらの意図される意味を規定するために、提供される。
【００２４】
補体経路
「古典経路」は、抗原−抗体複合体により引き起こされ／活性化される補体系経路を指す。
【００２５】
「代替経路」（「ＡＰ」または「ｔｈｅ  ＡＰ」と省略される）は、異質な表面として認識される人工のまたは死んだ細胞表面（または細胞−表面様材料）により引き起こされ／活性化される補体系経路を指す。
【００２６】
「代替経路特異的タンパク質」は、Ｂ因子、Ｂｂ因子、Ｄ因子、プロパージン、および／またはＡＰＣ３コンバターゼにより特異的に産生されるＡＰ媒介性Ｃ３ｂを指す。
【００２７】
「抗ＡＰ抗体」は、ＡＰ特異タンパク質を標的にする全ての抗体、ならびにＡＰ媒介性Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、およびＣ９を標的にする（に結合する）任意の抗体を含む抗体の群を指す。ＡＰ抗体はまた、例えばＤＡＦ、ＭＩＲＬなど、Ｃ３、Ｃ３ｂ、Ｐ、Ｂ、Ｄ、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、またはＳタンパク質のＡＰ媒介性産生を調節する任意のタンパク質または分子に結合する抗体を含む。
【００２８】
「抗Ｐ抗体」はヒトプロパージンまたは動物プロパージンに対して産生された抗体である。抗Ｐ抗体は、ヒトまたは動物プロパージンに結合しＡＰを阻害する全ての抗体を含む。
【００２９】
「Ｃ３ａ依存性細胞活性化」は、ＡＰにより産生されたＣ３ａがＣ３ａ細胞受容体に結合した時に起こる、好中球、単球、血小板、Ｔリンパ球、内皮細胞、マスト細胞、血小板、網膜上皮細胞、桿体、錐体、および他の細胞の活性化を説明する。
【００３０】
「Ｃ５ａ依存性細胞活性化」は、ＡＰにより産生されたＣ５ａが、Ｃ５ａ細胞受容体に結合した時に起こる、好中球、単球、血小板、Ｔリンパ球、内皮細胞、マスト細胞、血小板、網膜上皮細胞、桿体、錐体、および他の細胞の活性化を説明する。
【００３１】
「Ｃ５ｂ−９／ＭＡＣ媒介性／依存性組織傷害／細胞損傷」は、ｓＣ５ｂ−９および／またはＣ５ｂ−９（膜侵襲複合体、または「ＭＡＣ」としても知られている）の形成により引き起こされる細胞損傷を説明する。そのような組織傷害は、補体媒介性ＭＡＣ産生および沈着が疾患病態の一部である眼疾患で起こる。
【００３２】
「ＡＰ媒介性炎症」は、ＡＰにより媒介され、炎症を引き起こす、および／または永続化させる、多数の生理的プロセス、細胞活性化、およびタンパク質産生を指す。ＡＰ媒介性炎症は、ＡＰ依存性Ｃ３ａ、Ｃ３ｂ、Ｃ５ａ、Ｃ５ｂ、Ｃ５ｂ−９、および／またはｓＣ５ｂ−９の連続した、または増加した形成、および／または放出、およびその予想される結果全てにより測定できる。Ｃ３ａ、Ｃ５ａ、Ｃ５ｂ−９は細胞を活性化し、炎症性メディエータ、例えば、限定はされないが；ＴＮＦ−α、ＩＬ−１、ＰＤＧＦ、ＶＥＧＦ、好中球エラスターゼ、ならびに他のサイトカインおよび炎症性メディエータを放出させる。
【００３３】
「抗体」は、本明細書では、ジスルフィド結合により相互連結される２つの重（Ｈ）鎖および２つの軽（Ｌ）鎖を含む。各重鎖は、重鎖可変領域（本明細書では、ＶＨと省略される）および重鎖定常領域から構成される。重鎖定常領域は、３つのドメインから構成される；ＣＨ１、ＣＨ２およびＣＨ３。各軽鎖は、軽鎖可変領域（本明細書では、ＶＬと省略される）および軽鎖定常領域から構成される。軽鎖定常領域は、１つのドメイン、ＣＬから構成される。ＶＨおよびＶＬ領域はさらに、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれるより保存的な領域が散在される、相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる超可変性の領域に細分され得る。各ＶＨおよびＶＬは、アミノ末端からカルボキシル末端へと下記の順で配列される３つのＣＤＲおよび４つのフレームワークから構成される：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４。重および軽鎖の可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメインを含む。「抗体」という用語は、任意の抗体産生哺乳類（例えば、マウス、ラット、ウサギ、およびヒトを含む霊長類）に由来する全抗体およびその抗体フラグメントを包含する。例示的な抗体としては、ポリクローナル、モノクローナルおよび組換え抗体；多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）；ヒト化抗体；マウス抗体；キメラの、マウス−ヒト、マウス−霊長類、霊長類−ヒトモノクローナル抗体；および抗イディオタイプ抗体が挙げられ、任意の無傷の分子またはそのフラグメントであってもよい。
【００３４】
「抗原結合性フラグメント」は、それが由来する全抗体と同じ標的に結合する全抗体のフラグメントを指す。抗体フラグメントの型としては、ナノボディ、ダイアボディ、線形抗体、単鎖抗体分子および抗体フラグメントから形成される多重特異性抗体が挙げられる。抗体フラグメントの例としては、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２およびＦｖフラグメント、またはｓｃＦｖフラグメント（および上記のいずれかの任意のペグ化バリエーション）が挙げられる。抗原結合性フラグメントの例としては下記が挙げられるが、それらに限定されない：
「Ｆａｂ」フラグメント（ＶＨおよびＶＬを有する単鎖可変領域）；
「一価フラグメント」（ＶＬ、ＶＨ、ＣＬおよびＣＨ１ドメインから構成される抗体フラグメント）；
「Ｆ（ａｂ’）２」フラグメント（ジスルフィド架橋によりヒンジ領域で連結される２つのＦａｂフラグメントを含む二価フラグメント）；
「Ｆｄ」フラグメント（抗体のＶＨおよびＣＨ１ドメインから構成される）；
「Ｆｖ」フラグメント（抗体のシングルアームのＶＬおよびＶＨドメインから構成される）；
シングルドメイン抗体（「ｄＡｂ」）、ＶＨドメインまたはＶＬドメインから構成される；
単離された相補性決定領域（「ＣＤＲ」、以下で規定される）。
【００３５】
「相補性決定領域（ＣＤＲ）」は、抗体の主要結合領域である。全長抗体では、典型的には、３つのＣＤＲが、２つの重および軽鎖可変領域の各々の可変領域内で見出される。
【００３６】
「キメラ抗体」は、非ヒト種の動物由来の抗体由来の可変ドメインおよびＣＤＲを含むが、抗体分子の残りはヒト抗体由来である組換えタンパク質である。
【００３７】
「ヒト化抗体」は、非ヒトＣＤＲおよびヒト化フレームワーク領域から構成される抗体である。ヒト化抗体は、典型的には、抗体相補性決定領域のみが非ヒト起源である組換えタンパク質である。
【００３８】
抗体の「機能誘導体」は、抗体の機能領域から取り出された、または抗体の機能領域をそれ自体内に組み入れる任意の化合物である。抗体の機能誘導体としては下記が挙げられるが、それらに限定されない：抗原結合性フラグメント（前に規定されている）、ＣＤＲ、キメラ抗体、モノクローナル抗体、組換え抗体、および単鎖抗体。ＣＤＲ（前に規定されている）はまた、抗原結合性フラグメントとして、シングルドメイン抗体、マキシボディ、ミニボディ、細胞内抗体、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディ、ｖ−ＮＡＲおよびｂｉｓ−ｓｃＦｖに組む込むことができる。抗体の抗原結合性フラグメントは、フィブロネクチンＩＩＩ型（Ｆｎ３）などのポリペプチドに基づく足場にグラフトさせることができる。抗原結合性フラグメントは、相補的軽鎖ポリペプチドと共に、一対の抗原結合領域を形成する、一対のタンデムＦｖセグメント（ＶＨ−ＣＨ１−ＶＨ−ＣＨ１）を含む単鎖分子に組む込むことができる。
【００３９】
「Ｆｃ領域」は、エフェクター機能（以下で規定される）を含む抗体の領域を指す。
【００４０】
「エフェクター機能」は、抗体の天然Ｆｃ領域に起因するそれらの生物活性を指し、抗体アイソタイプの間で変化する。抗体エフェクター機能の例としては下記が挙げられる：Ｃ１ｑ結合および補体依存性細胞傷害；Ｆｃ受容体結合；抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）；食作用；細胞表面受容体（例えば、Ｂ細胞受容体）の下方制御；Ｆｃ受容体を発現する血小板の活性化の欠如；およびＢ細胞活性化。治療抗体の副作用を最小に抑える、または排除するために、エフェクター機能を最小に抑える、または排除することが好ましいことがある。
【００４１】
「低減されたＦｃエフェクター機能（複数可）」は、抗体が、抗体のＦｃ領域を認識する抗原に対して作用しない、抗体の機能（複数可）を指す。低減されたＦｃエフェクター機能の例としては下記が挙げられるが、それらに限定されない：低減された抗原へのＦｃ結合、抗原に対するＦｃ活性化の欠如、正常なＦｃエフェクター機能を防止する突然変異を含むＦｃ領域、または血小板およびＦｃ受容体を有する他の細胞の活性化の防止。
【００４２】
２つ以上の核酸またはポリペプチド配列との関連での「同一」は、同じである２つ以上の配列または部分配列を指す。２つの配列が、比較窓にわたって最大対応に対して比較および整列された場合、同じであるアミノ酸残基またはヌクレオチドの特定のパーセンテージを有する（すなわち、特定の領域にわたって、または、特定されない場合、全配列にわたって、６０％同一性、任意で６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９９％同一性）、または下記配列比較アルゴリズムの１つを使用して、または手動整列化および目視検査により測定される指定領域を有する場合、２つの配列は「実質的に同一」である。任意で、同一性は、少なくとも約５０ヌクレオチド（または１０アミノ酸）の長さである領域にわたって、またはより好ましくは１００〜５００または１０００またはそれを超えるヌクレオチド（または２０、５０、２００またはそれを超えるアミノ酸）の長さである領域にわたって存在する。２つのアミノ酸配列間のパーセント同一性はまた、ＭｅｙｅｒｓおよびＭｉｌｌｅｒのアルゴリズムを用いて決定できる。
【００４３】
補体媒介性眼炎症、出血および線維症の治療、およびその病理学的帰結
本明細書で記載される実施形態は、罹患被験体に有効量の抗ＡＰ抗体を投与することにより、網膜線維症、出血および／または眼炎症と関連する任意の眼病状を患う被験体を治療するための組成物および方法に関する。投与される抗ＡＰ抗体（例えば、抗プロパージン抗体または抗Ｐ抗体）は、ＡＰのＰＣ３ｂＢ複合体を標的にする、任意のＡＰ特異タンパク質、および／または任意の抗体を標的にしてもよい。加えて、本明細書で記載される実施形態は、罹患被験体に有効量の抗ＡＰ抗体を投与することにより、（限定はされないが）ＡＭＤおよびＡＭＤ様病状を含む補体媒介性変性眼障害を治療するための方法を含む。
【００４４】
ＡＰ−媒介性眼病態の特異的メカニズム
ＡＭＤおよびドルーゼン
リポフスチンの沈着および蓄積を含むＡＭＤおよび他の障害を有する患者においては、ドルーゼンは目のブルッフ膜と網膜色素上皮（ＲＰＥ）の間で集積する可能性がある。この材料の集積はブルッフ膜の断裂を引き起こし、血液網膜関門の破壊に至る。血液網膜関門の破壊は、脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）、網膜下出血、漿液性網膜（または網膜色素上皮）剥離、脂質滲出液、および／または血管結合組織瘢痕をもたらす。これらの病態は全て１つ以上の眼疾患の一部である。ドルーゼン沈着物および損傷された組織は、代替補体経路を活性化すると知られており、これは、最終的に炎症、組織傷害、最終的な視力喪失をもたらす。
【００４５】
ドルーゼンおよび代替経路
ＡＭＤとの関連で、いくつかの炎症性サイトカイン、活性化されたミクログリア細胞、マクロファージおよび他の炎症細胞がドルーゼンと関連することが見出されている。活性化された細胞、活性化された補体経路の成分、および炎症性メディエータの存在は、病態の現場での代替経路の活性化を示唆する。慢性炎症、およびその帰結は網膜色素上皮の完全性を脅かす可能性があり、これはひいては、光受容器萎縮および脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）を引き起こす。最近の所見により、ＡＭＤ発病における免疫プロセス（それにより炎症細胞および分子メディエータがブルッフ膜の内側または周囲の炎症を永続化させるプロセスを含む）の役割が確認された。補体活性化の調節不全はアナフィラトキシンの過剰産生を引き起こし、これは様々な眼組織細胞を活性化する。ＡＭＤとの関連で、活性化されたＲＰＥ細胞はＶＥＧＦを放出し、線維芽細胞およびマクロファージを傷害部位に動員し、網膜線維症および炎症を引き起こす。慢性補体活性化は慢性眼炎症の主因および駆動力であり、これが眼障害および病態の根本的原因である。
【００４６】
代替経路および炎症
慢性局所炎症および補体活性化は、眼病態に密接に関与する。我々のアプローチは、目の慢性炎症プロセスを弱めるまたは阻害するような様式で、補体経路における特定の分子構成物を標的にすることである。本明細書で記載される抗ＡＰ抗体は、ＡＭＤならびに関連する眼障害および病態において炎症、出血、線維症、および血管新生を引き起こす、炎症プロセスを阻害する治療の方法において使用できる。本明細書で記載される抗ＡＰ抗体は、眼外科手術と関連する、または眼外科手術の可能性のある術後合併症である、炎症、出血、線維症、および血管新生を阻害するために使用できる。
【００４７】
自然免疫系のＡＰの活性化によりＣ５ａおよびＣ３ａが産生され、これらは強力なアナフィラトキシンである。補体活性化の調節不全により、Ｃ５ａおよびＣ３ａの過剰産生が起こる。Ｃ５ａおよびＣ３ａは、網膜および免疫系細胞を活性化し、これにより補体系活性のカスケードを永続化させ、これが慢性眼炎症を引き起こす。Ｃ５ａは、ＲＰＥ細胞の生存率および免疫細胞増殖を抑制する能力を減少させ、線維芽細胞およびマクロファージの過剰増殖および動員を引き起こす。同時に、Ｃ５ａはまたＲＰＥ細胞によるＶＥＧＦ分泌を増加させ、これはＣＮＶを永続化させる。Ｃ３ａ受容体を有する免疫系細胞、例えば単球、Ｔ−リンパ球、マスト細胞、好塩基球、およびミクログリア細胞もまた、Ｃ３ａにより活性化される。活性化された細胞は、炎症性メディエータ、例えばＴＮＦ、ＩＬ−１、ＩＬ−６、ＩＬ８、ＶＥＧＦ、ＰＤＧＦ、ＦＧＦ、およびいくつかの他のサイトカインを放出する（図２を参照されたい）。これらの炎症性メディエータの全てを阻害するために、本発明の作用物質はＡＰ上流を、プロパージンがＣ３ｂに結合する時点で、標的にする。
【００４８】
代替経路および血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）
前に記載されるように、Ｃ５ａはＲＰＥ細胞を活性化してＶＥＧＦを産生させる。ＡＰはまた、ＶＥＧＦの産生を媒介できる他の細胞を活性化する。ＡＰが調節不全の病態では、ＶＥＧＦの産生は過剰になり得る。よって、ＡＰ阻害は、Ｃ３ａおよびＣ５ａ産生を阻害し、よってＶＥＧＦの産生を阻害することが予想される。ＶＥＧＦの阻害は、ＣＮＶおよび血管機能不全に関連する他の眼病態を効果的に阻害するのに重要である。補体媒介性ＶＥＧＦ産生のＡＰ上流を標的にすることにより、本明細書で記載される抗ＡＰ抗体は、組織修復を脅かすことなく、ＶＥＧＦの形成を阻害する治療方法を提供できる。
【００４９】
ＶＥＧＦおよび血管新生
正常な状況下では、ＶＥＧＦの産生は新しい血管の増殖を開始させ、傷害組織の治癒を促進する。いくつかの病態では、過剰な、慢性の、または別様に制御されないＶＥＧＦ産生は、異常なおよび／または過剰な血管の増殖を引き起こす。制御されないＶＥＧＦの産生が脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）において重要な役割を果たすことは、当技術分野内でよく知られている。ドルーゼンまたはいくつかの他の網膜傷害源の存在が起きた場合、炎症プロセスはＶＥＧＦ産生の増殖を引き起こす。健康な組織では、このＶＥＧＦが放出されて傷害部位での正常な新しい血管の増殖を促進する。病態下では、制御されないＶＥＧＦにより、異常な血管の制御されない増殖（ＣＮＶとしても知られている）が起こる。ＣＮＶは傷害を悪化させ、視力喪失を直接引き起こし得る。
【００５０】
ＶＥＧＦはＣＮＶの主因であるが、これは新しい健康な血管の形成を促進する。新しい脈管構造の正常な形成は創傷治癒のために必要とされる。よって、理想的な治療は、眼病態に重要な病的ＶＥＧＦの形成を防止するだけでなければならない。不運なことに、抗ＶＥＧＦ治療は、ＶＥＧＦを完全に枯渇させ、ＣＮＶを防止するのに有効であることが証明されているが、組織修復も防止する。同様に、血管新生全てを完全に阻害するいずれの治療も、組織修復を阻害する。この理由のために、ＶＥＧＦを直接中和する作用物質は、眼外科手術を受けている患者には適応されない。眼部処置の正常な過程において形成される病変は、疾患と本質的に関連するものと共に、正常な組織修復のためにＶＥＧＦを必要とする。その結果として、眼外科手術を受ける患者は抗ＶＥＧＦ剤で処置することができない。
【００５１】
血管新生およびウェット型ＡＭＤ
血管新生ＡＭＤは「ウェット型ＡＭＤ」または「滲出性ＡＭＤ」とも呼ばれ、補体系の不十分な制御と関連する。ＶＥＧＦの調節不全は異常な脈管構造の制御されない増殖を引き起こす。進行例では、血管新生ＡＭＤは色素上皮剥離および網膜下出血と関連する。現在のところ利用可能な薬物は、ＶＥＧＦを中和し、ＣＮＶを治療できる。これらの療法は抗ＶＥＧＦ剤および抗体（ＰＣＴ／ＵＳ１２／２０８５５号）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ（ＥＰ０７０８７１４３１）、およびＸｏｍａ（ＰＣＴ／ＵＳ０８／０８０５３１号）を含む。ルセンティス（抗ＶＥＧＦ抗体Ｆａｂ）およびアイリーア（ＶＥＧＦ受容体）は、先行技術の２つの抗ＶＥＧＦ剤である。これらのＶＥＧＦ標的剤は、ウェット型ＡＭＤ患者に、血管新生の治療および防止のために提供される。これらの薬物はＣＮＶを防止するには有効であるが、ＶＥＧＦがなくても疾患進行を永続化させる根底にある眼炎症、線維症、および出血を含む血管漏出を防止しない。ＶＥＧＦを標的にする作用物質は、ＡＰまたはＡＰ誘導性炎症もしくは組織傷害を直接阻害しない。その結果として、そのような作用物質は、補体媒介性炎症、ＭＡＣ形成を介するＲＰＥ破壊、またはＡＰ調節不全の任意の他の病理学的徴候を防止しない。その上、組織修復に対するそれらの阻害効果のために、最近の研究は、そのような作用物質が最終的に、地図状萎縮および永久的視力喪失を引き起こすことを示している。よって、網膜線維症、血管出血、およびＣＮＶを防止する作用物質は要求を満たさない。そのような作用物質は、ＶＥＧＦ治療後のさらなる損傷を制御するのに必要とされる。
【００５２】
ウェット型ＡＭＤの２匹の別々の動物モデルで、本明細書で記載される抗ＡＰ抗体がＣＮＶ、炎症、線維症、および出血ならびに創傷治癒を防止できることが見出された。本質的に創傷であり、炎症、線維症、および出血に至る、レーザー誘導性ＣＮＶを生成させた。アカゲザルにおけるＣＮＶモデルで、本明細書で記載される抗ＡＰ抗体（例えば、抗プロパージン抗体Ｆａｂ）はＣＮＶを阻害した。同じ研究で、ＣＮＶは、ルセンティス（抗ＶＥＧＦ抗体Ｆａｂ）で治療したそれらのサルにおいて、より完全に阻害された。しかしながら、ルセンティス治療された動物は、抗ＡＰ抗体で治療した動物よりも、より多くの出血およびより多くの線維症（瘢痕）を経験した。
【００５３】
本明細書で記載される他の実施形態は、ＡＭＤのための併用治療に関し、これはＣＮＶの治療における抗ＶＥＧＦ治療の効率を利用し、これはまた抗ＡＰ抗体を利用する。抗ＶＥＧＦ剤の短期使用、続いて（または同時に）抗ＡＰ抗体の使用は、ＣＮＶに対して即効を提供できる一方、炎症、組織萎縮、再発ＣＮＶ、出血およびＣＮＶ後患者における出血にも対処し、さらに視力喪失を低減させる。
【００５４】
代替経路の活性化は、どちらもＡＭＤ病態に関与するＶＥＧＦおよびＰＤＧＦなどの複数の増殖因子を生成させる。ＶＥＧＦ単独またはＶＥＧＦおよびＰＤＧＦの両方を直接標的にする薬物は、ウェット型ＡＭＤにおいて効力を示した。しかしながら、両方の因子を標的にする治療がより有効である。フォビスタは、そのどちらもが血管新生の原因となる既存の増殖因子を中和する抗ＶＥＧＦおよび抗ＰＤＧＦによる併用療法である。いくつかの実施形態では、抗ＡＰ抗体は、血管新生、線維症、および炎症の原因となる複数の増殖因子の形成を防止するために使用できる。現在のところ、網膜線維症のための治療はない。本明細書で記載される抗ＡＰ抗体はＶＥＧＦおよびＰＤＧＦの両方の産生をブロックできる。
【００５５】
代替経路および組織傷害
補体経路活性化により、ＭＡＣ（Ｃ５ｂ−９）の形成が引き起こされる。前に記載されるように、ならびに、図１および図２において概略的に提示されるように、いったんＡＰが活性化されると、炎症細胞活性化およびＭＡＣ形成に至るであろう。ＭＡＣ−媒介性ＲＰＥ活性化は、ＡＭＤおよび他の眼病態における視力喪失に関し重要である。破壊されたＲＰＥの断片がドルーゼンにおいて、補体系タンパク質、例えばＭＡＣと共に見出された。研究被験体がＡＰを介して機能的ＭＡＣを形成できないノックアウト研究は、組織損傷、脱髄、低減された炎症細胞浸潤物、および改善された機能回復におけるＡＰの役割の証拠を提供する。
【００５６】
組織傷害および地図状萎縮
地図状萎縮（ＧＡ）は、ドライ型ＡＭＤの進行型である。ＡＭＤ疾患進行の経過において、ドルーゼンが拡大し補体駆動性炎症が制御不能に増殖するので、眼組織は物理的および生理的損傷を患う。ドルーゼンはこれらの細胞に物理的圧力を与え酸化ストレスを引き起こす可能性があり、一方、補体駆動ＭＡＣ形成は細胞の溶解および死を引き起こす。さらに状況を悪化させることに、炎症性メディエータの放出は血管透過性を引き起こし、これは浮腫、出血および他の血管病態を引き起こす。ＲＰＥ細胞に対するこれらの物理的および生理的攻撃の極致および蓄積は、最終的に網膜上皮組織の不可逆的損失をもたらす。網膜色素上皮は光受容細胞の下に存在し、目の光覚細胞に対して重要な代謝サポートを提供する。ＲＰＥ組織の損失は光受容細胞の損失および視力喪失を引き起こす。これらのイベントの組み合わせは様々な眼病態をもたらす。
【００５７】
現在のところ、多くの眼病態に対するＦＤＡに認可された有効な治療はない。ランパリズマブは抗Ｄ因子抗体であり、ＧＡ患者における第ＩＩ相試験において肯定的データを示した。この薬物はＧＡに対してのみ適応されており、ＣＮＶ、網膜線維症、または出血を制御しない。本明細書で記載される抗ＡＰ抗体は、同じクラスの薬物であるにも関わらず、ランパリズマブができるものを超えて、網膜線維症、血管出血、および炎症を阻害できる。本明細書で記載される抗ＡＰ抗体は、不活性なＣ３複合体ＰＣ３ｂＢの形成を防止しないランパリズマブに比べ、Ｃ３コンバターゼの不活性な複合体の形成を防止する。よって、発明は、ランパリズマブの作用メカニズムの上流であるＡＰの工程で作用する。
【００５８】
代替経路および網膜線維症
線維症は、目内の陳旧性または慢性病変と関連する。ウェット型ＡＭＤを有する被験体はラニビズマブで治療されると、彼等は、線維症、続いて、近年同定された予想外の視力喪失を最終的に発症することが示されている。ＣＮＶ、組織萎縮、および線維症は黄斑の変性をひきおこす。ベバシズマブで治療した目を、線維症、組織萎縮、網膜下出血、ＣＮＶの程度、および色素上皮剥離（ＰＥＤ）について評価した。蛍光眼底造影でのＣＮＶ漏出のサイズおよび段階分けもまた評価した。遡及研究では、網膜中心ＰＥＤ、および網膜下液（ＳＲＦ）厚さを、光干渉断層撮影を用いて評価した。大きな病変を予想する他の因子は、中心窩下および両側性病変ならびにベースラインでの出血の存在であった。大きな両側性病変およびベースラインでの出血は、追跡での網膜下線維症と相関した。
【００５９】
網膜線維症はまた、目組織への傷害および外傷に起因することがある。傷害または外傷は多くの起源に由来する可能性がある。その上、慢性炎症が網膜線維症を引き起こすこともある。初期組織損傷の部位では、しばしば炎症細胞の浸潤があり、これは最終的に瘢痕組織へと発展することが示されている。
【００６０】
線維症の１つの可能性のあるメカニズムはサイトカインの産生であり、これは線維芽細胞を活性化し動員する。活性化された線維芽細胞はより多くのサイトカインおよび他の炎症性メディエータを産生し、免疫細胞、例えばマクロファージの動員および活性化を助け、これらは線維症および炎症で重要な役割を果たす。線維芽細胞はまた、ＶＥＧＦの産生を媒介する。よって、線維性瘢痕は、本質的に壊死性であるが、また血管形成され得る。線維症は複合的プロセスであり、抗ＶＥＧＦ療法は線維症または血管漏出を制御できない。我々は、本明細書で記載される抗ＡＰ抗体が、抗ＶＥＧＦ治療により治療されていない線維性瘢痕の形成および遺残を防止できるという驚くべき発見を提示する。
【００６１】
代替経路および糖尿病性網膜症
研究は、補体媒介性炎症性サイトカインが糖尿病性網膜症の進行において重要な役割を果たすことを示した。特に、ＶＥＧＦは、血液網膜関門の崩壊および結果として生じる黄斑浮腫において重大な役割を果たすことが示されている。抗ＶＥＧＦ（ＶＥＧＦ標的）剤は、糖尿病性網膜症の進行を治療および防止するのに有効であることが証明されている。本明細書で記載される抗ＡＰ抗体の投与は、炎症性サイトカインの形成を防止し、ＶＥＧＦの形成を阻害できる。したがって、発明は、糖尿病性網膜症を効果的に治療できる。
【００６２】
代替経路および他の眼疾患
目内でのＡＰの調節不全は無数の眼病態を引き起こし、ＡＭＤおよび糖尿病性網膜症はその中の２つにすぎない。他の器官および組織におけるＡＰの調節不全もまた、別の範囲の病態を引き起こす。先進国における失明の主因は、視力喪失に至る共通の経路としての病的眼炎症および血管新生を有するいくつかの障害に起因する。これらの障害としては、滲出性加齢黄斑変性（ＡＭＤ）、糖尿病性網膜症（ＤＲ）、未熟児網膜症（ＲＯＰ）、網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）および眼腫瘍が挙げられる。目内のＡＰの調節不全は、無数の眼病態を引き起こす。他の器官および組織でのＡＰの調節不全もまた、眼内空間で別の範囲の病態を引き起こす。目との関連で、ＡＰの調節不全は下記に関与し得る：ａ）ＡＭＤ様疾患、例えば先天性および家族性ドルーゼン；ｂ）自己免疫性ぶどう膜炎および自己免疫障害に続発するぶどう膜炎、例えば黄斑浮腫；ｃ）網膜虚血および網膜虚血と関連する、またはこれにより引き起こされる眼病態、例えば高血圧性網膜症および未熟児網膜症；ならびに、ｄ）目の前眼部の炎症性病態。
【００６３】
ドルーゼンおよびＡＭＤ様疾患
いくつかの先天性および家族性障害は、ドルーゼンの沈着およびリポフスチン沈着物により特徴付けられる。そのような障害としては、ソースビー眼底変性症、ドイン蜂巣状網膜ジストロフィー、マラッティア・レベンティネーズ（Ｍａｌａｔｔｉａ  Ｌｅｖｅｎｔｉｎｅｓｅ）、家族性優性ドルーゼン、ノースカロライナ黄斑ジストロフィー、若年性黄斑変性症、シュタルガルト病、卵黄様黄斑変性症、成人発症中心窩黄斑卵黄状ジストロフィー（ＡＯＦＶＤ）、ソースビー眼底変性症、およびベスト病が挙げられる。ドルーゼンの過剰な沈着により特徴付けられる障害および病態は、ＡＭＤとほぼ同じように、黄斑変性症およびＣＮＶを引き起こす。ドルーゼンおよびリポフスチン沈着物は炎症反応を開始させ、酸化ストレスを眼組織に与える。炎症性メディエータおよびサイトカインは、調節不全のＡＰ活性化の結果として増殖する。ＶＥＧＦの産生は血管新生、浮腫および出血を引き起こす。ＭＡＣの形成は組織損傷および萎縮を引き起こす。線維芽細胞の動員は線維症に至る。
【００６４】
抗ＶＥＧＦ剤は、ＡＯＦＶＤおよびマラッティア・レベンティネーズ（Ｍａｌａｔｔｉａ  Ｌｅｖｅｎｔｉｎｅｓｅ）（蜂巣状網膜ジストロフィー）と関連する血管新生に対して有効であることが証明されている。症例報告では、抗ＶＥＧＦ剤はドルーゼンの沈着と関連する血管新生を治療する能力を証明している。発明は、炎症性サイトカインの形成を阻害し、ＶＥＧＦの形成を阻害する。したがって、発明は、ドルーゼンの沈着と関連する血管新生を効果的に治療できる。
【００６５】
ドルーゼンの沈着は、眼炎症およびＡＰ活性化、炎症性サイトカインの放出、および関連する炎症性病態を引き起こすことが知られている。本明細書で記載される抗ＡＰ抗体はＡＰを阻害でき、よって炎症性サイトカインの放出および関連する炎症性病態を阻害できる。
【００６６】
自己免疫性ぶどう膜炎、および自己免疫障害に続発するぶどう膜炎
自己免疫性ぶどう膜炎は、目における調節不全の炎症の結果である。これらの病状としては、虹彩炎、毛様体扁平部炎、脈絡膜炎、脈絡網膜炎、前部ぶどう膜炎、後部ぶどう膜炎、および強膜炎が挙げられるが、それらに限定されない。いくつかの自己免疫障害は、主として身体の他の器官に影響し、必ずしもＡＭＤと関連しない、いくつかの障害を含み、炎症に基づく眼合併症を有することもあり、ＰＮＨ、多嚢胞性腎臓疾患、関節リウマチ、ループス、などを含む。
【００６７】
例えば、ぶどう膜炎は、小血管脈管構造に影響を与える自己免疫障害であるベーチェット病を患う患者における一般的な症状である。ベーチェット病患者は、ＴＮＦ−α阻害剤である、インフリキシマブ（レミケードとして商標登録）による治療から恩恵を受ける。本明細書で記載される抗ＡＰ抗体は、ＡＰ−媒介性ＴＮＦ−αの形成を防止でき、ぶどう膜炎を患っているベーチェット病患者に同様の利益を提供できる。
【００６８】
イールズ病（若年性再発性網膜硝子体出血、網膜静脈周囲炎、および／または原発網膜血管周囲炎としても知られている）は、網膜脈管構造閉塞および眼炎症により特徴付けられる特発性自己免疫障害である。血管新生ならびに再発性網膜および硝子体出血は、イールズ病の特徴である。抗ＶＥＧＦ剤による治療は、血管閉塞に起因する酸化ストレスに対する炎症反応と関連する血管新生を治療するのに有効である。したがって、発明は、ＶＥＧＦの産生を阻害することにより利益を提供するであろう。加えて、本明細書で記載される抗ＡＰ抗体は、いくつかの他の炎症性サイトカインおよびメディエータ、例えばＴＮＦ−αの産生を阻害することにより、さらなる利益を提供できる。
【００６９】
網膜虚血（および関連する眼病態）
血管閉塞障害の場合、酸化ストレスは、網膜への十分な循環の欠如により引き起こされる。この酸化ストレスは代替経路活性化を引き起こし、これにより、ぶどう膜炎、眼浮腫および血管新生が生じる。血管閉塞障害は、炎症性眼病態を引き起こし、これとしては下記が挙げられるが、それらに限定されない：網膜中心静脈閉塞症（ＣＲＶＯ）、閉塞性末梢動脈疾患、アテローム性動脈硬化に続発する眼虚血性症候群、抗リン脂質症候群に続発する網膜動脈閉塞症、血管新生緑内障、虹彩血管新生、およびプルチェル網膜症。これらは全て、血管病態および／または血管閉塞が、眼組織への酸化ストレスおよび結果として生じる炎症反応のために、ＣＮＶおよび／または眼組織変性を引き起こす可能性を示す病状である。抗ＶＥＧＦ剤による治療は、様々な血管閉塞病態に起因する酸化ストレスに対する炎症反応と関連する血管新生を治療するのに有効である。
【００７０】
高血圧性網膜症は、目の微小血管に対する慢性高血圧の病理学的効果により引き起こされる網膜組織の酸化ストレス、炎症、および血管新生により引き起こされる。慢性高血圧はまた、網膜細動脈瘤を引き起こすことが知られている。網膜細動脈瘤もまた抗ＶＥＧＦ治療で治療できる。本明細書で記載される抗ＡＰ抗体は、眼炎症およびＶＥＧＦ媒介性血管新生を阻害でき、高血圧性網膜症および／または慢性高血圧と関連する網膜細動脈瘤を有する患者に治療効果を提供することが予想され得る。
【００７１】
酸化ストレスはまた、早期網膜脈管構造により引き起こされ得る。未熟児網膜症は、網膜の脈管構造が十分発達する時間を有する前に未熟児が生まれた場合の病状である。同様に、家族性滲出性硝子体網膜症は、早産と関連しない、網膜の脈管構造が完全には成熟していない障害である。これらの病状のどちらにおいても、完全に成熟した網膜脈管構造の欠如が網膜の酸化ストレスを引き起こし、ＡＭＤと関連して見られるものと同様の炎症および血管新生が続いて起こる。
【００７２】
目の前眼部の炎症性病態
ＡＰ媒介性炎症はまた、目の前眼部の発病、例えば前部自己免疫性ぶどう膜炎に関与する。血管新生緑内障および角膜血管新生は、前部目の炎症性病態である。抗ＶＥＧＦ剤は、目の前部領域において血管新生緑内障および角膜血管新生を治療する能力を証明した。したがって、発明は、ＶＥＧＦの産生を阻害することにより利益を提供するであろう。加えて、本明細書で記載される抗ＡＰ抗体は、眼炎症を阻害する、ＭＡＣ形成を阻害する、および他の炎症性サイトカインおよびメディエータの産生を阻害することにより、さらなる利益を提供できる。
【００７３】
フックス角膜内皮変性症（ＦＣＥＤ）は角膜内皮の変性疾患であり、最終的に角膜浮腫および視力喪失に至る。ＦＣＥＤの発病は部分的にしか理解されていないままであるが、炎症および浮腫が疾患進行において重要な役割を果たすことが知られている。その上、最近の研究は補体系活性化の役割を支持する。本明細書で記載される抗ＡＰ抗体は、角膜における補体駆動炎症および浮腫を阻害することによりＦＣＥＤを治療できる。
【００７４】
ＡＭＤにおける治療の限界−要求される新しい治療を考慮して
抗ＶＥＧＦ治療は血管新生を制御するだけであり、ぶどう膜炎、浮腫、出血および線維症を引き起こす根底にある炎症プロセスには何の効果も有さない。新しい血管群のそれらの無差別の阻害のために、抗ＶＥＧＦは、組織修復では、とりわけ患者が外科的処置を受けている場合には禁忌である。健康な新しい血管の増殖が、組織修復のために必要とされる。残念なことに、抗ＶＥＧＦ剤は全ての新しい血管の増殖を阻害し、よって組織修復を阻害する。
【００７５】
ＡＰ媒介性の炎症、線維症、および網膜出血の制御
２つの強力なアナフィラトキシン、Ｃ３ａおよびＣ５ａが、ＡＰ活性化の結果、産生される。補体活性化により、Ｃ３ａおよびＣ５ａの両方の形成が引き起こされる。どちらのアナフィラトキシンも炎症細胞を活性化し、様々な炎症性メディエータを放出させる。ＴＮＦおよびＩＬ−１は２つのそのような炎症性メディエータであり、そのどちらも、炎症の強力な制御因子であることが示されている。ＶＥＧＦおよびＰＤＧＦは２つの血管新生分子であり、これらはまた、炎症およびＡＰ活性化に応じて眼細胞から放出される。Ｃ３ａ分子は、Ｃ３ａ受容体（Ｃ３ａＲ）に対し高い親和性を有する。Ｃ３ａＲは、好中球、単球、血小板、マスト細胞、Ｔリンパ球、網膜上皮細胞、および他の細胞上に存在する。活性化されると、これらの細胞は炎症性メディエータ、増殖因子、過酸化物およびプロテアーゼを産生し、これらは疾患病態を引き起こす、および／または悪化させる。Ｃ３ａと同様に、Ｃ５ａもまた、いくつかの眼病態および関連眼疾患に関係する炎症性メディエータの放出を引き起こす。Ｃ５ａは、様々な眼および非眼細胞を活性化することが知られている。例えば、Ｃ５ａはＲＰＥを活性化してＶＥＧＦを産生／放出させることが知られており、これはＣＮＶにおいてよく確立された役割を有する。よって、Ｃ３ａおよびＣ５ａ産生の阻害は、炎症、線維症、および網膜出血と関連する全ての眼病態の治療にとって必須であり、ここでこれらの炎症性メディエータは影響を受ける眼組織および細胞に対し壊滅的な帰結（例えばＣＮＶ、組織変性、および視力喪失）を有する。
【００７６】
Ｃ５ａ産生はＣ５ｂ産生と同時である（Ｃ５はＣ５ａおよびＣ５ｂへと切断されるため）。Ｃ５ｂ分子は、細胞の脂質二重層に挿入され、Ｃ５ｂ−９またはｓＣ５ｂ−９の形成（ＭＡＣ）が開始される。Ｃ５ｂ−９は、細胞表面上で形成され、組織傷害を引き起こす複合体である。Ｃ５ｂ−９の細胞膜への統合により、細胞の溶解、および死が引き起こされ、組織傷害および分解をもたらす。ＡＭＤとの関連で、ＭＡＣ形成は、ＲＰＥ細胞の溶解ならびに目の桿体および錐体の損傷をもたらす。この組織破壊は、治療しないまま放置すると、通常、軽度〜重度の視力喪失および潜在的に失明につながる。本明細書で記載される抗ＡＰ抗体は、Ｃ３ａ、Ｃ３ｂ、Ｃ５ａ、Ｃ５ｂ、およびＣ５ｂ−９の形成を阻害することにより、ＭＡＣ形成を介するＡＰ依存性細胞溶解を防止できる。
【００７７】
本明細書で記載される抗ＡＰ抗体は、ＡＰ活性を防止し、Ｃ３ａおよびＣ５ｂ産生、炎症、ＶＥＧＦ産生、およびＭＡＣ形成を防止できる。よって、抗Ｐ抗体を含む、抗ＡＰ抗体は、炎症、線維症、網膜出血、ＣＮＶ、および組織変性と関連する眼病態を治療するために使用できる。
【００７８】
抗ＡＰ抗体
抗ＡＰ抗体は、ＡＰ特異タンパク質またはタンパク質複合体を標的にし、代替補体ＡＰ活性化を阻害する、任意の抗体またはその抗原結合性フラグメントを含んでよい。いくつかの実施形態では、抗ＡＰ抗体またはそのフラグメントは、古典経路補体活性化を阻害するまたはこれに影響を与えることなく代替補体経路活性化を阻害できる。本明細書で記載される抗ＡＰ抗体は、眼炎症、線維症、網膜出血、ＣＮＶ、および組織変性の治療のために使用できる。
【００７９】
抗Ｃ３ｂ抗体
１つの実施形態では、本明細書で記載される抗ＡＰ抗体は抗Ｃ３ｂ抗体またはその抗原結合性フラグメントであってよい。Ｃ３ｂは大きなタンパク質であり、そのため複数の抗体がこのタンパク質の様々なセグメントに対して生成され得る。抗体が結合し様々な様式でタンパク質の活性を阻害する、複数の部位が存在する。抗体がＣ３ｂに結合する様式および場所によって、その抗体の効果は、重要でない〜完全な阻害の範囲であり得る。
【００８０】
抗Ｃ３ｂ抗体は、Ｃ３ｂのＢ因子との相互作用を防止するようにＣ３ｂに結合するものを含んでよい。これらの抗体の効果は、必然的に代替経路に分離される。なぜなら、そのような相互作用は古典経路には存在しないからである。これらの抗体は、疾患開始および進行を引き起こす病理学的転帰に重要な、Ｃ３ａ／Ｃ３ｂ、Ｃ５ａ／Ｃ５ｂ、およびＣ５ｂ−９／ｓＣ５ｂ−９の形成を防止する。代替経路によるこれらの分子の各々の形成の阻害は、重要な生理的帰結を有する。代替経路により産生されるＣ３ｂ（本明細書では、「ａＣ３ｂ」と呼ばれる）の阻害は、赤血球の血管外溶血に影響する。古典経路により産生されるＣ３ｂはこれらの抗体により阻害されず、よって、ＣＰにより生成されるＣ３ｂ（本明細書では、「ｃＣ３ｂ」と呼ばれる）でコートされる異質粒子／細菌のオプソニン化のために必要とされる。Ｃ３ａ形成の阻害は、単球活性化および炎症の有効なマーカーであるＴＮＦ−αの産生に対し直接的効果を有する。
【００８１】
抗プロパージン抗体
別の実施形態では、本明細書で記載される抗ＡＰ抗体は抗プロパージン抗体またはその抗原結合性フラグメントであってよい。Ｃ３ｂの場合と同様に、プロパージンは、抗体が結合できる多くの可能性のある部位を有する、大きなタンパク質である。異なる様式でおよび／またはプロパージンタンパク質の異なる部位で結合する異なる抗体は、古典経路または代替経路の増幅ループのいずれかを阻害する。プロパージンは、古典経路の増幅ループの一部であることが知られている。よって、古典経路活性化は、増幅ループを阻害する特異的抗プロパージン抗体の使用により弱めることができる（例えば、米国特許第６，３３３，０３４号）。いくつかの抗体は、古典経路内でのプロパージンのＣ３ｂへの相互作用が、古典経路増幅にとって重要となる、古典経路活性化を阻害できる。
【００８２】
プロパージンは、それ自体に結合し、凝集物を生成する。凝集物の構造によって、プロパージンを結合する抗体は単、二、三および四量体を結合でき、それぞれが、異なる応答を生成させる。よって、抗体対プロパージン比は、１：１、１：２、１：３、および１：４であってよい。これは、抗体がいずれの構造でも結合できることを意味する。
【００８３】
プロパージンは直接的にＡＰ活性化に関与するが、インビボでの増幅ループを介する古典経路活性化に間接的に関与する。また、プロパージンはＣ３ｂおよびＣ５ｂの両方を結合する。プロパージンのＣ３ｂとの相互作用を妨害する抗体は、プロパージンのＣ５ｂとの相互作用を妨害してもよく、またはしなくてもよい（逆の場合も同じ）。１つまたは両方を防止する抗体は、識別可能な臨床的意義を有し得る。
【００８４】
よって、プロパージンを標的にするいくつかの抗体は、ａ）古典経路および代替経路の両方を阻害する、またはｂ）代替経路のみを阻害する。
【００８５】
いくつかの実施形態では、抗ＡＰ抗体は抗プロパージン抗体であってよく、これはプロパージン機能を制御するのに関与するプロパージン上のドメインに向けられるか特異的に結合する。抗プロパージン抗体またはそのフラグメントは、古典補体活性化を阻害するまたは古典補体活性化に影響することなく代替補体経路活性化を阻害でき、ならびにプロパージン（オリゴマ／モノマ）のＣ３ｂへの結合を阻害でき、プロパージンのＢ因子への結合を阻害でき、プロパージンのＣ３ｂＢ複合体への結合を阻害でき、Ｂ因子のＤ因子切断を阻害でき、Ｃ３コンバターゼの半減期を低減でき、プロパージンのＮ末端（ＴＳＲ６と結合してオリゴマを生成する）をブロックすることによりプロパージンモノマのオリゴマ化を防止でき、プロパージンのＣ５またはＣ５ｂへの結合を阻害でき、膜侵襲複合体Ｃ５ｂ−９の形成を低減でき、アナフィラトキシン、例えばＣ３ａおよび／またはＣ５ａの形成を低減でき、Ｃ３ｂの形成を低減でき、好中球、単球および血小板の活性化を低減でき、および／または白血球凝集物形成を低減できる。
【００８６】
哺乳類プロパージンのアミノ酸配列はわかっている。例えば、ヒトプロパージンのアミノ酸配列は、ＧｅｎＢａｎｋデータベースにおいて受入番号ＡＡＡ３６４８９で開示される。ヒトプロパージンは４６９アミノ酸のタンパク質であり、これはシグナルペプチド（アミノ酸１−２８）、および６つの、下記の通りの、それぞれ、約６０アミノ酸の非同一トロンボスポンジン１型反復配列（ＴＳＲ）を含む：アミノ酸８０−１３４（ＴＳＲ１）、アミノ酸１３９−１９１（ＴＳＲ２）、アミノ酸１９６−２５５（ＴＳＲ３）、アミノ酸２６０−３１３（ＴＳＲ４）、アミノ酸３１８−３７７（ＴＳＲ５）、およびアミノ酸３８２−４６２（ＴＳＲ６）。
【００８７】
いくつかの実施形態では、抗プロパージン抗体は、プロパージン上に位置する特異的エピトープに結合してＡＰ活性化を阻害できる。１つの例では、抗プロパージン剤は、プロパージンのＮ末端ドメインに結合してプロパージンのＣ３ｂへの結合を阻害できる。他の実施形態では、抗プロパージン抗体は、プロパージンのＴＳＲ１に及ぶＮ末端セグメントに結合できる。
【００８８】
抗プロパージン抗体はまた、哺乳類宿主において、機能的プロパージンのレベルを阻害できる。機能的プロパージンとは代替経路を活性化できるプロパージン分子を意味する。
【００８９】
別の態様では、抗プロパージン抗体は、プロパージンを高い親和性で結合でき、プロパージンのオリゴマ化を阻害でき、Ｃ３ｂＢ複合体におけるＢ因子のＤ因子媒介性切断を阻害でき、古典補体経路を阻害せず、代替補体経路活性化を防止でき、Ｃ３ａ、Ｃ５ａ、およびＣ５ｂ−９形成を阻害でき、好中球、単球および血小板活性化を阻害できる。白血球血小板コンジュゲート形成を阻害する。
【００９０】
抗Ｂａ抗体
他の実施形態では、本明細書で記載される抗ＡＰ抗体は、抗Ｂａ抗体またはその抗原結合性フラグメントであってよい。タンパク質Ｂａ（Ｂ因子から切断される）は、およそ３３，０００の分子量を有する大きなタンパク質である。よって、プロパージンおよびＣ３ｂのように、多数の抗体のいずれかが、タンパク質の様々なタンパク質モチーフおよびその上の位置に対して生成され得る。このタンパク質を用いると、ＡＰの他のタンパク質のように、抗Ｂａ抗体はＣ３ａ、Ｃ３ｂ、Ｃ５ａ、Ｃ５ｂ、およびＣ５ｂ−９の形成を阻害するように、タンパク質に結合する。
【００９１】
抗Ｂｂ抗体
さらに他の実施形態では、本明細書で記載される抗ＡＰ抗体は、抗Ｂｂ抗体またはその抗原結合性フラグメントであってよい。タンパク質Ｂｂ（Ｂ因子の切断生成物）は、およそ６４，０００の分子量を有する大きなタンパク質である。抗Ｂｂ抗体は、標的抗原として、ＢｂおよびＢ因子を結合するが、Ｂａは結合しない。いくつかの実施形態では、抗Ｂｂ因子抗体はＢｂフラグメントを結合し、Ｂａフラグメントは結合せず、Ｃ３ｂに結合するＢ因子を阻害せず、Ｃ３ｂ産生を阻害し、Ｃ３ａ、Ｃ５ａ、およびＣ５ｂ−９形成を阻害し、ウサギ赤血球の溶解を阻害する。抗Ｂｂ抗体は、古典経路と共有されない接合点で、代替経路によるＣ３ａ、Ｃ３ｂ、Ｃ５ａ、Ｃ５ｂ、およびＣ５ｂ−９の形成を防止できる。これらの分子の各々の形成の阻害は生理的帰結を有する。抗Ｂｂ抗体はまた、Ｃ３ｂのオリゴマ化を阻害できる。天然Ｃ３の分子量はほぼ１９０ｋＤａであり、コンバターゼにより切断されると、Ｃ３はＣ３ａ（１０ｋＤａ）およびＣ３ｂ（１８０ｋＤａ）に変換される。このＣ３ｂ分子はプロパージンオリゴマに対し高親和性を有し、その結果、プロパージン三量体に付着される３つのＣ３ｂ分子を含む複合体を形成する。本明細書で記載される抗Ｂｂ抗体は、Ｃ３ｂの追加の分子の形成を防止でき、よって、Ｃ３ｂオリゴマを形成しない複合体が得られる。Ｃ３ｂ形成が完全に防止された場合、プロパージンはＣ３ｂ付着なしで、単独で浮遊するであろう。プロパージンはＣ３またはＣ３ｂのアイソフォームを結合しない。
【００９２】
Ｃ３ｂ（ａＣ３ｂ）の阻害は、血管外溶血に影響するであろう。Ｃ３ａおよびＣ５ａの阻害は、細胞活性化およびその後の炎症性メディエータの放出に影響するであろう。炎症性メディエータは、過剰産生されると、ヒトにおいて様々な疾患病態を引き起こす可能性がある。その際、これらの抗体はまた、炎症のよく知られたマーカー、例えばＴＮＦ−αおよびＩＬ−１の形成を防止する。
【００９３】
いくつかの実施形態では、抗Ｂｂ抗体は、セリンプロテアーゼドメイン、特に、Ｂｂ領域のセリンプロテアーゼの触媒三残基に結合できる。セリンプロテアーゼドメインは無傷のＢ因子の第３のおよび最後のドメインを形成する。セリンプロテアーゼドメインは触媒部位を有し、これが単独でＣ３切断に関与する。この触媒部位は無傷のＢ因子およびＢｂフラグメントの両方において露出される一方で、それはＢａがＤ因子により切断された後にのみ活性となる。他の実施形態では、抗Ｂｂ因子抗体は触媒三残基に結合して、不活性高次構造を所定の位置でロックすることにより、またはＤ因子がＢ因子を切断する領域に結合することにより、その活性を防止できる。
【００９４】
表１および表２は、本明細書で記載される方法において抗ＡＰ抗体として使用できる、抗Ｃ３ｂ、抗Ｐ、抗Ｂａ、および抗Ｂｂ抗体の重および軽鎖可変ドメインまたは領域のアミノ酸配列を列挙する。表は抗体の重鎖および軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３ならびにフレームワーク領域を同定する。したがって、本明細書で記載される出願の態様は、下記を含む、単離されたモノクローナル抗体、またはその抗原結合部分に関する：（ａ）個々の抗体のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに（ｂ）個々の抗体のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
【００９５】
表３は、本明細書で記載される方法で使用できる、抗Ｃ３ｂ、抗Ｐ、および抗Ｂｂ抗体の重および軽鎖の完全アミノ酸配列の例を列挙する。重および軽鎖は表１および２に列挙される重および軽鎖可変領域のＣＤＲを含む。
【表１】
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【表２】
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【表３】
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【００９６】
いくつかの実施形態では、本明細書で記載される抗ＡＰ抗体は、本明細書で記載される抗体のアミノ酸配列の重鎖および軽鎖可変領域のＣＤＲに実質的に相同または同一であるアミノ酸配列を含む重および軽鎖可変領域を含んでよく、ここで、抗体は所望の機能特性を保持する。例えば、発明は、重鎖可変領域および軽鎖可変領域のＣＤＲを含む、単離されたモノクローナル抗体、またはその抗原結合部分を提供し、ここで：（ａ）重鎖可変領域は、個々の抗体について表２に列挙される重鎖可変領域のＣＤＲに少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、または１００％相同または同一な少なくとも１、２、または３つのＣＤＲを含み；（ｂ）軽鎖可変領域は、個々の抗体について表１に列挙される軽鎖可変領域のアミノ酸配列に少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、または１００％相同または同一な少なくとも１、２、または３つのＣＤＲを含み；ならびに（ｃ）抗体は個々のタンパク質、Ｃ３ｂ、Ｐ、Ｂａ、またはＢｂに特異的に結合する。
【００９７】
様々な態様では、抗体は、例えば、ヒト抗体、ヒト化抗体またはキメラ抗体であってよい。他の態様では、ＶＨおよび／またはＶＬアミノ酸配列は、上で明記される配列に８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同であってもよい。上で明記される配列のＶＨおよびＶＬ領域に対し高い（すなわち、８０％以上）相同性を有するＶＨおよびＶＬ領域を有する抗体は、アミノ酸配列をコードする核酸分子の変異誘発（例えば、部位特異的またはＰＣＲ−媒介性変異誘発）により得ることができ、続いて、本明細書で記載される機能アッセイを使用して、保持された機能について、コードされた変化抗体の試験が実施される。
【００９８】
本明細書では、２つのアミノ酸配列間のパーセント相同性は２つの配列間のパーセント同一性と等価である。２つの配列間のパーセント同一性は、それらの配列により共有される同一位置の数の関数であり（すなわち、％相同性＝同一位置の数／位置の総数×１００）、２つの配列の最適整列のために導入される必要がある、ギャップの数、および各ギャップの長さが考慮される。配列の比較および２つの配列間のパーセント同一性の決定は、下記の非限定的な例で記載される数学アルゴリズムを使用して達成できる。
【００９９】
ある一定の態様では、発明の抗ＡＰ抗体は、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含む重鎖可変領域およびＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含む軽鎖可変領域を含んでよく、ここで、これらのＣＤＲ配列の１つ以上が、本明細書で記載される好ましい抗体に基づく特定されたアミノ酸配列、またはその保存的改変を含み、抗体は所望の機能特性を保持する。したがって、発明は、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列を含む重鎖可変領域、ならびにＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列を含む軽鎖可変領域を含む、単離されたモノクローナル抗体、またはその抗原結合部分を提供する。
【０１００】
本明細書では、「保存的配列改変」という用語は、アミノ酸配列を含む抗体の結合特性に著しく影響しない、または結合特性を変化させないアミノ酸改変を指すことが意図される。そのような保存的改変はアミノ酸置換、付加および欠失を含む。改変は、当技術分野で知られている標準技術、例えば部位特異的突然変異誘発およびＰＣＲ−媒介性変異誘発により抗体に導入できる。保存的アミノ酸置換は、アミノ酸残基が、同様の側鎖を有するアミノ酸残基と置き換えられるものである。同様の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは、当技術分野において規定されている。これらのファミリーは、塩基性側鎖（例えば、リジン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、無電荷極性側鎖（例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、チロシン、システイン、トリプトファン）、非極性側鎖（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン）、β−分枝側鎖（例えば、スレオニン、バリン、イソロイシン）および芳香族側鎖（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）を有するアミノ酸を含む。よって、抗体のＣＤＲ領域内の１つ以上のアミノ酸残基は、同じ側鎖ファミリーからの他のアミノ酸残基と置き換えることができ、変化した抗体は、保持される機能（すなわち、上記（ｃ）から（ｊ）で明記される機能）について本明細書で記載される機能アッセイを使用して試験され得る。
【０１０１】
本明細書で記載される抗ＡＰ抗体は、改変抗体を設計するための開始材料として、本明細書で開示されるＶＨおよび／またはＶＬ配列の１つ以上を有する抗体を使用して調製でき、この改変抗体は開始抗体から変化した特性を有し得る。抗体は、１つまたは両方の可変領域（すなわち、ＶＨおよび／またはＶＬ）内の、例えば１つ以上のＣＤＲ領域内のおよび／または１つ以上のフレームワーク領域内の１つ以上の残基を改変することにより設計できる。加えてまたはその代わりに、抗体は、例えば、抗体のエフェクター機能（複数可）を変化させるために、定常領域（複数可）内の残基を改変することにより設計できる。
【０１０２】
実施できる可変領域操作の１つの型は、ＣＤＲグラフティングである。抗体は標的抗原と、６つの重および軽鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）に位置するアミノ酸残基を主に介して相互作用する。この理由のために、ＣＤＲ内のアミノ酸配列は、ＣＤＲの外側の配列よりも、個々の抗体間でより多様である。ＣＤＲ配列はほとんどの抗体−抗原相互作用に関与するので、異なる特性を有する異なる抗体由来のフレームワーク配列上にグラフトした、特異的な天然起源の抗体由来のＣＤＲ配列を含む発現ベクターを構築することにより、特異的な天然起源の抗体の特性を模倣する組換え抗体を発現させることが可能である。よって、そのような抗体は、表に記載されるＶＨおよびＶＬＣＤＲ配列を含むが、これらの抗体由来の異なるフレームワーク配列を含んでもよい。
【０１０３】
可変領域改変の別の型は、ＶＨおよび／またはＶＫＣＤＲ１、ＣＤＲ２および／またはＣＤＲ３領域内のアミノ酸残基を突然変異させ、よって、対象となる抗体の１つ以上の結合特性（例えば、親和性）を改善するものである。部位特異的突然変異誘発またはＰＣＲ−媒介性変異誘発は、突然変異（複数可）および抗体結合への効果、または対象となる他の機能特性を導入するために、実施でき、本明細書で記載され、実施例で提供されるインビトロまたはインビボアッセイで評価できる。保存的改変（上記のように）が導入される。突然変異はアミノ酸置換、付加または欠失であってよいが、好ましくは置換である。その上、典型的には、ＣＤＲ領域内の１、２、３、４または５以下の残基が変更される。
【０１０４】
一般に、治療抗体は、選択されるとすぐに、様々な異なる理由のために、様々な様式で操作され、変更され、設計され得る。例えば、選択された抗体の不活性（非結合）部分は、抗体の決定的な機能を全く変更しない無数の方法で変更され、操作され得る。実際、抗体の機能（タンパク質結合部分）は、抗体の残りとは完全に分断され得る。これらの変更は、抗体をより容易に、かつより安価で産生させるのに有用であり得る。または、そのような変更はヒト被験体において、抗体をより化学的に安定にできる。選択された抗体のこれらの操作および誘導は新しい、または別々の発明ではない。したがって、属自体の同じ明確な特性を利用する選択された抗体の属の任意のそのような操作、変更および誘導は、発明の範囲内である。
【０１０５】
発明は、選択された属の抗体の任意の１つまたはいくつかの機能（標的タンパク質結合）成分を構成する化合物、ならびにそのような化合物の治療的使用を含む。これらの化合物としては下記が挙げられるが、それらに限定されない：選択された属の全抗体、選択された属の抗体の抗原結合フラグメント、および選択された属の抗体に由来する任意の抗体または抗体フラグメントのキメラまたはヒト化出現物。発明のそのような誘導物としては下記が挙げられるが、それらに限定されない：切断型、直鎖、単鎖、ＩｇＧフラグメント、Ｆ（ａｂ）フラグメント、Ｆ（ａｂ’）フラグメント、Ｆ（ａｂ）２フラグメント、Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、ＦｖフラグメントまたはｓｃＦｖフラグメント（選択された属の任意の抗体から顕在化され得る）。
【０１０６】
発明は、２９７位置で突然変異されてグリコシル化抗体を生成する、そのＦｃ領域を有する抗体属の任意のメンバーの結果を含む。発明は、低減されたＦｃ−媒介性エフェクター機能を誘発するように操作される選択された属の任意の抗体の結果を含む。操作方法としては、限定はされないが、アミノ酸突然変異、アミノ酸付加または欠失、グリカン修飾または除去、ペグ化、および／またはトランケーションが挙げられる。
【０１０７】
いくつかの実施形態では、抗ＡＰ抗体またはその抗原結合性フラグメントは、プロパージンに特異的に結合し、代替補体経路活性化を阻害する。抗ＡＰ抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４４、４６−４８、５１−７８または８６の重鎖可変ドメインのＣＤＲに対し少なくとも８０％、少なくとも９０％、または１００％配列同一性を有する少なくとも１、２、または３つのＣＤＲ（複数可）を有する重鎖を含み、または（ｉｉ）単離された抗プロパージン抗体またはその抗原結合性フラグメント、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４４、４６−４８、５１−７８または８６の重鎖可変ドメインのＣＤＲに対し少なくとも８０％、少なくとも９０％、または１００％配列同一性を有する少なくとも１、２、３つのＣＤＲ（複数可）を有する重鎖可変領域の、プロパージンへの結合を競合的に阻害する。
【０１０８】
いくつかの実施形態では、プロパージンに特異的に結合し、代替補体経路活性化を阻害する抗プロパージン抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２、３、４、７−３３、４１、４２、または４３の軽鎖可変ドメインのＣＤＲに対し少なくとも８０％、少なくとも９０％、または１００％配列同一性を有する少なくとも１、２、または３つのＣＤＲ（複数可）を有する軽鎖を含み、または（ｉｉ）単離された抗プロパージン抗体またはその抗原結合性フラグメント、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２、３、４、７−３３、４１、４２、または４３の軽鎖可変ドメインのＣＤＲに対し少なくとも８０％、少なくとも９０％、または１００％配列同一性を有する少なくとも１、２、３つのＣＤＲ（複数可）を有する重鎖可変領域の、プロパージンへの結合を競合的に阻害する。
【０１０９】
他の実施形態では、プロパージンに特異的に結合し、代替補体経路活性化を阻害する抗プロパージン抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４４、４６−４８、５１−７８および８６からなる群より選択される重鎖可変ドメインの３つのＣＤＲを含む重鎖を含み、または（ｉｉ）単離された抗プロパージン抗体またはその抗原結合性フラグメント（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４４、４６−４８、５１−７８および８６からなる群より選択される重鎖可変ドメインの３つのＣＤＲを含む重鎖を含む）のプロパージンへの結合を競合的に阻害する。
【０１１０】
他の実施形態では、プロパージンに特異的に結合し、代替補体経路活性化を阻害する抗プロパージン抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２、３、４、７−３３、４１、４２、および４３からなる群より選択される軽鎖可変ドメインの３つのＣＤＲを含む軽鎖を含み、または（ｉｉ）単離された抗プロパージン抗体またはその抗原結合性フラグメント（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２、３、４、７−３３、４１、４２、および４３からなる群より選択される軽鎖可変ドメインの３つのＣＤＲを含む軽鎖を含む）の、プロパージンへの結合を競合的に阻害する。
【０１１１】
任意の抗ＡＰ抗体またはその抗原結合性フラグメントは、眼出血および／または線維症を治療するために使用できることが認識されるであろう。これらの抗ＡＰ抗体は、例えば下記で開示される抗ＡＰを含んでよい：特許出願第ＵＳ２０１２／５０１，１６５号（Ｂａｎｓａｌ）、ＰＣＴ／ＵＳ２０１２／６７５，２２０号（Ｂａｎｓａｌ）、ＰＣＴ／ＵＳ２０１３／０３４，９８２号（Ｂａｎｓａｌ）、ＰＣＴ／２０１１／０２６，８４１号（Ｂａｎｓａｌ）、ＰＣＴ／ＵＳ２０１３／５８３，８７９号（Ｂａｎｓａｌ）、ＵＳ２０１３／６４６，２８６号（Ｂａｎｓａｌ）、ＵＳ０９／１３８，７２３号（Ｂａｎｓａｌ、Ｇｌｉａｔｅｃｈ）、ＰＣＴ／ＵＳ２０１２／０４４９７４号（Ｓｏｎｇ）、ＰＣＴ／ＵＳ２００８／００７２７０号（Ｓｏｎｇ）、ＵＳ１４／１８３，２１３号（Ｈｏｌｅｒｓら）、ＵＳ１１／０５７，０４７号（Ｈｏｌｅｒｓら）、ＵＳ１３／４８２，３２８号（Ｆｕｎｇら、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、ＵＳ１３／１３５，９０７号（Ｃａｍｐａｇｎｅ、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０６５７７１号（Ｃｈａｍｐａｇｎｅ、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、ＰＣＴ／ＥＰ２００３／００７４８７号（Ｔｅｄｅｓｃｏ）、ＰＣＴ／ＩＢ２０１２／０５７３９４号（Ｂｒａｎｎｅｔｔｉ、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＰＣＴ／ＥＰ２００９／０６００５２号（Ｄｉｅｆｅｎｂａｃｈ−Ｓｔｒｅｉｂｅｒ、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＵＳ１３／７１６，５２６号（Ｊｏｈｎｓｏｎら、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＰＣＴ／ＥＰ２０１０／０５６１２９号（Ｅｔｅｍａｄ−Ｇｉｌｂｅｒｔｓｏｎら、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＰＣＴ／ＵＳ２００６／０４３１０３号（Ｆｕｎｇら）、ＰＣＴ／ＵＳ２００３／０２７８０８号（Ｗａｎｇ、Ａｌｅｘｉｏｎ）、ＵＳ１１／０５０，５４３号（Ｂｅｌｌ）、および登録特許第８，４３５，５１２号（Ｂａｎｓａｌ）。
【０１１２】
治療方法
本発明の方法は、治療の必要な哺乳類被験体に、有効量または治療的有効量の抗ＡＰ抗体を投与して、網膜線維症、出血および／または眼炎症を治療する工程を一般に含んでよい。
【０１１３】
対象抗体の「有効量」または「治療的有効量」は、代替補体経路の活性化後に産生されるポリペプチドの産生および／またはそのレベルを、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、またはそれより多く低減させるのに有効な量である。
【０１１４】
抗プロパージン抗体は、薬学的に許容される賦形剤（複数可）を有する製剤で個体に投与できる。多種多様の薬学的に許容される賦形剤が当技術分野で知られており、本明細書で詳細に記載する必要はない。
【０１１５】
本明細書で記載される方法では、対象抗体は、所望の治療効果を得ることができる任意の好都合な手段を使用して、宿主に投与できる。よって、抗体は、治療的投与のために様々な製剤に組む込むことができる。１つの例では、対象抗体は、適切な、薬学的に許容される担体または希釈剤と組み合わせることにより、医薬組成物に製剤化でき、固体、半固体、液体または気体形態の調製物、例えば錠剤、カプセル、粉末、顆粒、軟膏剤、溶液、坐薬、注射剤、吸入薬およびエアロゾルに製剤化できる。
【０１１６】
そのようなものとして、対象抗体の投与は、様々な投与、例えば経口、頬側、直腸、非経口、腹腔内、皮内、皮下、筋肉内、経皮、鼻腔内、肺、気管内投与などで達成できる。眼疾患の治療のために、現在のところ、好ましい投与方法は、硝子体内（ＩＶＴ）を介する目中への直接的な注射である。これは、現在のところ使用可能でないが、将来使用可能になるかもしれない代替メカニズムによる可能性のある投与を排除しない。必要なら、抗ＡＰ抗体はまた、皮下注射または静脈内注射を介して全身的に与えることができる。本明細書で記載される抗ＡＰ抗体の投与、および／またはその任意の機能的誘導は当技術分野で知られている任意の方法によってもよい。投与は急性または慢性（例えば、毎日、毎週、毎月、など）であってよく、あるいは他の作用物質と組み合わせてよい。
【０１１７】
医薬剤形では、抗ＡＰ抗体は、独立してまたは他の薬学的に活性な化合物と適切な関連で、ならびに組み合わせて投与できる。下記の方法および賦形剤は単なる例示であり、決して制限的ではない。
【０１１８】
注射または静脈内投与のための単位剤形は、抗ＡＰ抗体を、組成物中で、滅菌水、生理食塩水または別の薬学的に許容される担体中の溶液として含んでよい。
【０１１９】
抗ＡＰ抗体は、ある一定の頻度でおよび所望の治療効果を達成するための期間の間、個体に投与できる。例えば、抗ＡＰ抗体は、例えば、１ヶ月に１回、１ヶ月に２回、１ヶ月に３回、１週間おき（ｑｏｗ）、１週間に１回（ｑｗ）、１週間に２回（ｂｉｗ）、１週間に３回（ｔｉｗ）、１週間に４回、１週間に５回、１週間に６回、一日おきに（ｑｏｄ）、毎日（ｑｄ）、１日２回（ｑｉｄ）、または１日３回（ｔｉｄ）、あるいは実質的に連続して、または連続して、約１日〜約１週間、約２週間〜約４週間、約１ヶ月〜約２ヶ月、約２ヶ月〜約４ヶ月、約４ヶ月〜約６ヶ月、またはそれより長い範囲の期間にわたって投与できる。
【０１２０】
併用療法
抗ＡＰ抗体は、いくつかの実施形態では、第２の治療薬との併用療法において有効量で投与できる。
【０１２１】
疾患状態
いくつかの実施形態では、本明細書で記載される抗ＡＰ抗体は、処置後に補体媒介性眼障害を発症するリスクがあると同定されている、眼科学的処置を受けている被験体に対する予防的治療において使用できる。いくつかの実施形態では、抗ＡＰ抗体は、眼部処置と関連する線維症、出血および炎症を阻害できる。さらに他の実施形態では、抗ＡＰ抗体は、組織修復を阻害することなく眼科学的処置後に血管新生を防止できる。
【０１２２】
別の実施形態では、発明は、眼部外科的処置（または他の物理的眼部外傷）を受けている被験体において、正常な組織修復を有する、線維症および出血を阻害するためのプロセスを提供し、この場合、本明細書で記載される抗ＡＰ抗体が創傷治癒を促進するために投与される。発明の１つの実施形態では、発明は、眼部外科的処置中に起こるＡＰ媒介性眼病態を治療するためのプロセスを提供し、ここで、処置を受けている被験体は、視力喪失に至る可能性がある／ない網膜出血または炎症により特徴付けられる病状を患う。この実施形態は、外科的処置の直前、処置中または処置後のいずれかに適格な抗Ｐ抗体を投与する工程を含む。
【０１２３】
他の実施形態では、抗ＡＰ抗体は、下記を含むが、それらに限定されないぶどう膜炎の病態に続発する線維症および出血を防止するために使用できる；虹彩炎、毛様体扁平部炎、脈絡膜炎、脈絡網膜炎、前部ぶどう膜炎、後部ぶどう膜炎、強膜炎、眼血管新生、アテローム性動脈硬化、抗リン脂質症候群に続発する網膜動脈閉塞症、血管新生緑内障、虹彩血管新生、プルチェル網膜症、ソースビー眼底変性症、ドイン蜂巣状網膜ジストロフィー、マラッティア・レベンティネーズ（Ｍａｌａｔｔｉａ  Ｌｅｖｅｎｔｉｎｅｓｅ）、家族性優性ドルーゼン、ノースカロライナ黄斑ジストロフィー、若年性黄斑変性症、シュタルガルト病、卵黄様黄斑変性症、成人発症中心窩黄斑卵黄状ジストロフィー（ＡＯＦＶＤ）、ソースビー眼底変性症、およびベスト病。
【０１２４】
他の実施形態では、特許請求される抗ＡＰ抗体の１つ以上は、虹彩炎、毛様体扁平部炎、脈絡膜炎、脈絡網膜炎、前部ぶどう膜炎、後部ぶどう膜炎、または強膜炎、眼部血管新生、糖尿病性網膜症または糖尿病と関連する目の他の炎症性障害を含むが、それらに限定されないぶどう膜炎の病態に続発する炎症、血管新生、細胞萎縮、組織分解、ＬＤＨの放出、線維症および／または出血を防止する、高血圧性網膜症を防止する、自己免疫性ぶどう膜炎または自己免疫障害に続発するぶどう膜炎、ベーチェット病、イールズ病、または目の他の自己免疫性炎症疾患、アテローム性動脈硬化、抗リン脂質症候群に続発する網膜動脈閉塞症、血管新生緑内障、虹彩血管新生、プルチェル網膜症、ＡＭＤ、ソースビー眼底変性症、ドイン蜂巣状網膜ジストロフィー、マラッティア・レベンティネーズ（Ｍａｌａｔｔｉａ  Ｌｅｖｅｎｔｉｎｅｓｅ）、家族性優性ドルーゼン、ノースカロライナ黄斑ジストロフィー、若年性黄斑変性症、シュタルガルト病、卵黄様黄斑変性症、成人発症中心窩黄斑卵黄状ジストロフィー（ＡＯＦＶＤ）、ソースビー眼底変性症、またはベスト病、血管閉塞、例えば、限定はされないが；網膜中心静脈閉塞症（ＣＲＶＯ）、閉塞性末梢動脈疾患、アテローム性動脈硬化に続発する眼虚血性症候群、抗リン脂質症候群に続発する網膜動脈閉塞症、血管新生緑内障、虹彩血管新生、またはプルチェル網膜症、未熟児網膜症または家族性滲出性硝子体網膜症、目の前眼部で起こる眼病態、およびフックス角膜内皮変性症を防止するために使用できる。
【０１２５】
いくつかの実施形態では、抗ＡＰ抗体は、血管閉塞により特徴付けられる病態に続発する線維症および／または出血を防止するために使用される。血管閉塞と関連するそのような病態は、下記を含み得る：網膜中心静脈閉塞症（ＣＲＶＯ）、閉塞性末梢動脈疾患、アテローム性動脈硬化に続発する眼虚血性症候群、抗リン脂質症候群に続発する網膜動脈閉塞症、血管新生緑内障、虹彩血管新生、およびプルチェル網膜症。
【０１２６】
１つの実施形態では、抗ＡＰ抗体は、糖尿病性網膜症に続発する線維症および出血を防止するために使用される。別の実施形態では、抗Ｐ、抗Ｃ３ｂ、または抗Ｂｂ抗体は、糖尿病患者、高血圧性網膜症、自己免疫障害、自己免疫性ぶどう膜炎またはぶどう膜炎、ベーチェット病、イールズ病、または目の他の自己免疫疾患における、網膜線維症または出血と関連する任意のまたは全てのＡＰ媒介性病態を治療するために使用される。
【０１２７】
いくつかの実施形態では、抗ＡＰ抗体は、未熟児網膜症または家族性滲出性硝子体網膜症、目の前眼部で起こる眼病態、フックス角膜内皮変性症、血管新生の防止のための抗ＶＥＧＦ剤による反復治療に続発する線維症および／または出血を防止するために使用される。
【０１２８】
いくつかの実施形態では、眼出血および／または線維症を治療するために使用される抗ＡＰ抗体は、Ｂａ、Ｂｂ、Ｃ３ｂ、Ｄ、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７またはＣ８を含む補体因子の群の１つに結合するものである。発明の他の実施形態では、眼出血および／または線維症を治療するために使用される抗ＡＰ抗体はまた、古典またはレクチン経路を阻害するものである。
【０１２９】
１つの例では、ＣＮＶの防止のための抗ＶＥＧＦ剤で治療されている高齢患者が、眼外科手術のために病院に到着する。患者は、外科的処置を受ける前に、抗ＶＥＧＦ治療を中断することが要求される可能性がある。なぜなら抗ＶＥＧＦ剤は手術後の治癒および回復を脅かすからである。外科手術は、外科手術により引き起こされる外傷のために、直ちに炎症および出血を引き起こす。抗ＶＥＧＦ治療なしでは、制御されない炎症により、患者は術後ＣＮＶを発症する。抗ＶＥＧＦ剤なしでＣＮＶを防止するために、外科医は、患者にこの発明の抗Ｐ抗体を投与できる。この抗Ｐ剤は炎症の進行を阻害し、よって、血管新生の原因となるＶＥＧＦの形成を阻害する。術後創傷治癒は血管新生、線維症、血管漏出または浮腫の発症なしで起こる。
【０１３０】
別の例では、患者がＣＮＶまたは血管結合組織ＰＥＤに対する治療を求めて保健医療施設に到着し、指示の通り、眼専門家が患者にラニビズマブの注射を与える。患者は、血管結合組織ＰＥＤのためのラニビズマブの硝子体内注射後１分未満に起こるＲＰＥ断裂を受ける。そのような症例は、ラニビズマブを使用しない。というのは、この薬物は断裂に適応されないからである。しかしながら、本発明の薬物は組織修復をブロックせず、よって、病変を治癒しないというおそれなく、そのような患者に適応されるであろう。
【０１３１】
さらに別の例では、片目または両目において眼異常を患う患者が、先天性欠損、レンズ変化、白内障、または緑内障と関連する病態の矯正のための眼外科手術のために病院を訪れる。患者は美容の理由で、または天然レンズ置換のために眼外科手術を受ける場合がある。外科手術の結果、または自発的または先天的理由のために、患者は血管新生を発症する。そのような条件下では、ラニビズマブを投与できない。というのは、それは眼外科手術に対し禁忌であるからである。この発明の抗Ｐ抗体は、ＣＮＶを防止するために使用でき、組織修復は正常に進行する。よって、抗Ｐ抗体は、血管新生および外科手術の両方が、疾患過程の一部である眼病状で使用できる。
【０１３２】
さらに別の例では、ＣＮＶを防止するため毎月または隔月にルセンティスの注射剤を受けた患者は、連続的な病変を有するであろう。というのは、ルセンティスは組織修復を防止するからである。最終的な結果は、瘢痕の形成および線維症および視力喪失である。本発明の抗ＡＰ抗体は新しいＶＥＧＦの形成を防止し、よってＣＮＶを制御する一方、視力を脅かす出血および線維症も防止する。本発明の抗ＡＰ抗体の投与は、抗ＶＥＧＦ剤の反復治療を受けた患者における視力喪失を防止するために使用できる。
【０１３３】
さらに別の例では、高齢患者は、２年の毎月のラニビズマブ療法後に、視力喪失を示す。眼専門家は患者の視力喪失を、色素性異常、萎縮性瘢痕、および漏出の欠如などの、抑制されたＣＮＶと一般に関連する病変特性に帰する。ラニビズマブ療法を受けた患者における将来のＶＡ改善は、ＣＮＶを標的にする戦略ではなく、光受容器およびＲＰＥ機能の保存を必要とし得る。発明の抗ＡＰ抗体の投与は、ＲＰＥ細胞生存率を脅かす他の炎症性サイトカインおよびメディエータと共に、ＭＡＣの産生を阻害するであろう。抗ＡＰ剤によるＲＰＥ細胞の保存は、抗ＶＥＧＦ剤がもはや視力喪失を防止できない場合に視力を保つであろう。
【０１３４】
別の例では、腫瘍増殖抑制のために抗ＶＥＧＦ剤で治療された患者は、腫瘍退縮部位での治癒の欠如のために、進行中の病変および出血を示す。抗ＶＥＧＦ剤は、腫瘍退縮に有効であることがよく知られている。抗ＶＥＧＦ剤は腫瘍に対する血管増殖を阻害し、よって、腫瘍増殖を阻害する。しかしながら、抗ＶＥＧＦ剤はまた腫瘍後後退治癒および健康組織再増殖を阻害する。眼専門家は、抗ＶＥＧＦ剤により達成された腫瘍抑制を保存するために発明の抗ＡＰ剤を投与でき、一方、創傷治癒および健康組織再増殖のための治療も提供される。本出願の発明は、健康組織再増殖および治癒のために必要とされるＶＥＧＦを脅かすことなく、ＡＰにより産生されるＶＥＧＦを阻害することにより、腫瘍退縮を促進するために使用できる。
【０１３５】
別の例では、片目または両目において眼異常を患う高齢患者が、眼外科手術のために病院を訪れる。目の外科手術は、外傷の結果として、即時炎症および出血を引き起こす。炎症性サイトカインおよびメディエータは、外科手術中および術後直ちに増殖し始める。外科手術後数日および数週間、炎症が続き、増殖因子の放出および免疫系細胞の活性化を引き起こす。眼外科手術の術後合併症としては、線維症、血管新生、血管漏出および浮腫が挙げられる。手術成績を改善するために、外科医は、外科手術の直前に本発明の抗Ｐ抗体を投与できる。外科手術前の抗Ｐ抗体の投与は、外科手術中の炎症および出血を直ちに低減させ、外科手術後の増殖因子の放出および免疫系細胞の活性化を阻害する。術後創傷治癒は、血管新生、線維症、血管漏出または浮腫の発症なしで起こる。
【０１３６】
別の例では、片目または両目において非増殖性糖尿病性網膜症を患う高齢患者が、眼外科手術のために病院を訪れる。炎症性サイトカインおよびメディエータは、外科手術中および術後直ちに増殖し始める。外科手術後数日および数週間、炎症が続き、増殖因子の放出および免疫系細胞の活性化を引き起こす。炎症および増殖因子の放出は患者の罹患血管を異常に増殖させ、血管新生を引き起こす。血管新生の発症は、患者の非増殖性糖尿病性網膜症を増殖性糖尿病性網膜症に進行させ、これは患者の視力を脅かす。手術成績を改善するために、および患者の疾患状態の手術後前進を防止するために、外科医は、外科手術の直前に本発明の抗Ｐ抗体を投与できる。外科手術前の抗Ｐ抗体の投与は、外科手術中の炎症および出血を直ちに低減させ、外科手術後の増殖因子の放出および免疫系細胞の活性化を阻害する。術後創傷治癒は、血管新生、線維症、血管漏出または浮腫の発症なしで起こる。
【０１３７】
別の例では、片目または両目において増殖性糖尿病性網膜症を患う高齢患者が、眼外科手術のために病院を訪れる。増殖性糖尿病性網膜症を有する患者では、網膜に供給する血管の血管新生が存在する。増殖性糖尿病性網膜症のための標準治療は、抗ＶＥＧＦ剤の投与を含む。抗ＶＥＧＦ剤は眼外科手術には禁忌である。患者は、眼外科手術を受けるために抗ＶＥＧＦ剤の使用を中断することを要求されるであろう。抗ＶＥＧＦ剤なしでは、眼外科手術により引き起こされる炎症は、炎症性メディエータ、サイトカインおよび増殖因子の放出を引き起こし、これらは増殖性糖尿病性網膜症を有する患者において血管新生を引き起こし得る。手術成績を改善するために、および患者の疾患状態の手術後前進を防止するために、外科医は、外科手術の直前に本発明の抗Ｐ抗体を投与できる。外科手術前の抗Ｐ抗体の投与は、外科手術中の炎症および出血を直ちに低減させ、外科手術後の増殖因子の放出および免疫系細胞の活性化を阻害する。術後創傷治癒は、血管新生、線維症、血管漏出または浮腫の発症なしで起こる。
【０１３８】
さらに別の例では、閉塞性網膜血管炎と関連する障害、例えばベーチェット病またはイールズ病と診断された患者が、眼外科手術のために病院を訪れる。閉塞性網膜血管炎は、慢性炎症により網膜血管新生がもたらされる可能性のある炎症状態である。眼外科手術は外傷誘導性炎症を引き起こし、これは、外科手術中に直ちに増殖し始める炎症性サイトカインおよびメディエータの即時放出を引き起こす。外科手術後数日および数週間、炎症が続き、増殖因子の放出および免疫系細胞の活性化を引き起こす。手術成績を改善するために、および患者の疾患状態の手術後前進を防止するために、外科医は、外科手術の直前に本発明の抗Ｐ抗体を投与できる。外科手術前の抗Ｐ抗体の投与は、外科手術中の炎症および出血を直ちに低減させ、外科手術後の増殖因子の放出および免疫系細胞の活性化を阻害する。術後創傷治癒は、血管新生、線維症、血管漏出または浮腫の発症なしで起こる。
【０１３９】
さらに別の例では、前にヒストプラズマ・カプスラーツムに曝露された成人患者が、ＯＨＳと関係のない眼外科手術のために病院を訪れる。患者は外科手術前にいくつかの眼炎症を経験しているが、まだ、「ヒストスポット」または眼ヒストプラスマ症候群（ＯＨＳ）の任意の他の顕著な徴候を発症していない。眼外科手術は外傷、炎症および出血を引き起こし、これにより患者は感染に対しより脆弱となる。外科手術後の数週間で、患者はＯＨＳの早期徴候を示し始める。手術成績を改善するために、および外科手術直後の炎症および出血を低減させるために、外科医は、外科手術の直前に本発明の抗Ｐ抗体を投与できる。抗Ｐ抗体の投与は、感染と闘う患者の能力を脅かさない。術後創傷治癒は、血管新生、線維症、血管漏出または浮腫の発症なしで起こる。
【０１４０】
別の例では、前に眼ヒストプラスマ症候群（ＯＨＳ）と診断された成人患者が、眼外科手術のために病院を訪れる。病原体への曝露により引き起こされる慢性炎症により、何人かのＯＨＳ患者は、眼浮腫、血管新生、および線維症を発症する。眼外科手術は外傷、炎症および出血を引き起こし、これにより患者は感染に対しより脆弱になる。手術成績を改善するために、および患者の疾患状態の手術後前進を防止するために、外科医は、感染と闘う患者の能力を脅かさずに、外科手術の直前に本発明の抗Ｐ抗体を投与できる。術後創傷治癒は、血管新生、線維症、血管漏出または浮腫の発症なしで起こる。
【０１４１】
さらに別の例では、過剰なドルーゼンの沈着と関連する先天性障害と診断された患者が、眼外科手術のために病院を訪れる。家族性ドルーゼンを有する患者では、ドルーゼンの大きな沈着物が眼炎症および血液目関門における破壊を引き起こす可能性があり、これは、血管新生および視力喪失をもたらすことがある。眼外科手術は炎症および出血を引き起こし、すでにドルーゼン沈着物からのストレス下にある網膜上皮層にストレスを与える可能性がある。眼外科手術により引き起こされる炎症は、炎症性メディエータおよびサイトカインのさらなる放出を直ちに引き起こす。外科手術後数日および数週間、継続する炎症は増殖因子の放出、ＭＡＣ産生、および免疫系細胞の活性化を引き起こし、これらは網膜細胞死、血液網膜関門の破壊および血管新生を引き起こす可能性がある。手術成績を改善するために、および患者の疾患状態の手術後前進を防止するために、外科医は、外科手術の直前に本発明の抗Ｐ抗体を投与できる。外科手術前の抗Ｐ抗体の投与は、外科手術直後の炎症およびサイトカインおよび増殖因子の放出を低減させる。術後創傷治癒は血管新生、線維症、血管漏出または浮腫の発症なしで起こる。
【０１４２】
さらに別の例では、外科的処置後に過剰な線維性組織および瘢痕を発症する病歴を有する成人患者が、眼外科手術のために病院を訪れる。眼外科手術は即時外傷および炎症を引き起こす。外科手術後数日および数週間、炎症は増殖因子の放出ならびに瘢痕形成および線維症に関与する細胞の活性化を引き起こす。眼線維症のための予防的治療なしでは、患者は手術部位で過剰な瘢痕組織を発症する。手術成績を改善するために、および手術後線維症および瘢痕を阻害するために、外科医は、外科手術の直前に本発明の抗Ｐ抗体を投与できる。外科手術前の抗Ｐ抗体の投与は炎症を低減させ、増殖因子の手術後放出および線維症に関与する細胞活性化を阻害する。術後創傷治癒は、血管新生、線維症、血管漏出または浮腫の発症なしで起こる。
【０１４３】
別の例では、フォン・ヴィルブランド病（ＶＷＤ）の病歴を有する成人患者が、眼外科手術のために病院を訪れる。眼外科手術は即時外傷、炎症および出血を引き起こす。患者の障害のために、手術部位での出血は過剰で長期である。眼溶血のための予防的治療なしでは、患者は、未解決の溶血のため外科手術からの回復に苦労する。手術成績を改善するために、外科医は、外科手術の直前に本発明の抗Ｐ抗体を投与できる。外科手術前の抗Ｐ抗体の投与は炎症および溶血を低減させる。溶血の低減は手術部位での治癒を改善する。術後創傷治癒は、血管新生、線維症、血管漏出または浮腫の発症なしで起こる。
【０１４４】
実施例
この発明は本明細書で記載される特定の実施形態に制限されないことが理解されるべきである。そのようなものは当然変動するからである。本明細書で使用される専門用語は特定の実施形態を説明するためのもにすぎず、制限することを意図しないこともまた理解されるべきである。というのも、本発明の範囲は添付の特許請求の範囲によってのみ制限されるからである。
【０１４５】
実施例１：発明の代替経路阻害抗体は、ＶＥＧＦ、ＰＤＧＦ、ＴＮＦ−α、およびＩＬ−１ｂの産生を阻害する
実施例３で記載される抗ＡＰ抗体を、透析の体外モデル中にヒト血液に添加した。この場合、補体活性化が起きることがわかっている。３７℃でのインキュベーション後、ＶＥＧＦ、ＰＤＧＦ、ＴＮＦ−α、およびＩＬ−１ｂのレベルを、従来の方法を用いて測定した。これらの実験からのデータは、抗ＡＰ抗体が、そうでなければ補体活性化が起きたであろうヒト血液中でＶＥＧＦ、ＰＤＧＦ、ＴＮＦ−α、およびＩＬ−１ｂの産生を阻害できたことを証明する。これらの実験からのデータのグラフ表示を、図３（ＶＥＧＦ）、図４（ＰＤＧＦ）、図５（ＴＮＦ−α）、および図６（ＩＬ−１ｂ）に示す。
【０１４６】
実施例２：抗ＡＰ抗体はＡＰおよびＬＤＨをエクスビボで阻害する
ＡＰ阻害のための抗体の活性を試験するために、ウサギ赤血球を、ＡＰ活性化のみが起こる１０％の正常ヒト血清を含む緩衝液中でインキュベートした。（／Ｍｇ２＋／ＥＧＴＡ）。これらのｒＲＢＣはＡＰを活性化し、細胞の溶解により、細胞により散乱される光が徐々に減少する。本発明のＡＰ特異抗体をｒＲＢＣと３７℃で１０％ＮＨＳ中でインキュベートした場合、溶解はこの抗体により防止された。これは、本発明のＡＰ特異抗体がＡＰをブロックすることを意味する。血漿をＬＤＨにより評価し、ＡＰ特異抗体はＬＤＨ形成を防止することが証明された。溶解およびＬＤＨはいずれも眼疾患における重大なパラメータであり、前者は細胞傷害を示し、死細胞はＬＤＨを放出するので後者は細胞死を示す。図７で示されるように、細胞傷害／溶解およびＬＤＨの両者は重なる。
【０１４７】
実施例３：抗Ｐ抗体Ｆａｂはウェット型ＡＭＤのアカゲザルモデルにおいてＣＮＶを阻害する
この研究のために使用されるヒト化抗プロパージン抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２の軽鎖可変ドメイン３ＣＤＲおよびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５５の重鎖可変ドメイン３ＣＤＲを有する全長抗体の１つのＦａｂフラグメントである。研究のために使用される材料を２５．５ｍｇ／ｍＬの濃度で評価した。我々はＩｇＧの代わりに抗Ｐ抗体のＦａｂを使用した。なぜなら研究はｆａｂ形態の抗ＶＥＧＦ抗体ルセンティス（登録商標）（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）との比較を含んだからである。バイアル中のルセンティスの濃度は１０ｍｇ／ｍｌであり、体積は３００μｌ／バイアルである。抗Ｐ抗体の濃度はリン酸緩衝生理食塩水中２５ｍｇ／ｍｌであった。被験物質、参照物質および対照物質をそれぞれ、研究割当時に２．９−３．９年齢であった無処置雌アカゲザルにおいて実施した、単回硝子体内注射を介して投与した。被験体は第−１日に３．０−４．８ｋｇであった（ｎ＝９）。
【０１４８】
ルセンティスを５００μｇ／目（ヒトにおいて使用するための治療量）の用量で投与し、一方、１．２５ｍｇ／目を抗Ｐ抗体に対して使用した（我々の現在の製剤に基づいて許容可能な最高濃度）。注射剤の投与後に、レーザーを使用して、各動物の各目の網膜上に９つの組織傷害のスポットを作製した。これらのレーザーを当てたスポットは、他の動物モデルにおいてＣＮＶを誘導することが当技術分野で知られている。レーザー誘導後、２週間の期間で治癒およびＣＮＶ形成させた。２週間の術後期間後、ＦＡ画像を、第２週、第３週および第４週の終わりに撮った。カラー画像を、第週２、第３週および第４週の終わりに撮った。ＦＡ画像をＩｍａｇｅＪプログラムの助けにより評価した。
【０１４９】
ＦＡ画像上に現れるＣＮＶを、本技術分野で知られており、許容されるＩｍａｇｅＪプログラムを用いて定量した。図８は、第２週、第３週、および第４週で撮った画像を示す。第４週画像の過剰暴露のために、意味のあるＦＡデータ分析は、第２週および第３週の終わりに撮った画像に対してのみ可能であった。ＩｍａｇｅＪ分析の結果を、図９に示す（第２週に対応する）。この研究の結果が証明するように、抗Ｐ抗体はＣＮＶを阻害するのに有効であった。予想通りに、抗ＶＥＧＦ阻害剤は、レーザー誘導後の数週間、血管増殖を防止するのにより有効であった。本出願において前に記載されるように、抗ＶＥＧＦ剤は全ての新しい血管の増殖を阻害する。この発明の目的は、創傷治癒のために必要とされるであろう新しい血管の増殖を阻害することなく、新しい血管の過剰な増殖を阻害する、ＣＮＶのための治療を提供することである。
【０１５０】
実施例４：抗Ｐ抗体Ｆａｂはウェット型ＡＭＤのアカゲザルモデルにおいて溶血を阻害する
出血定量化を、元々は上記実施例３で記載されるＣＮＶ研究の評価のために撮られたＦＡ画像を使用して実施した。ＣＮＶおよびレーザースポットの周りの黒色領域を出血として同定した（図１０を参照されたい）。黒色領域は、大部分はＣＮＶの領域の周り、およびＣＮＶの真下に存在した。黒色スポットはまた、ＣＮＶのレーザー誘導により生成された円形組織傷害の中心で認められた。これらの領域を、ＩｍａｇｅＪを用いて、実施例３で記載されるように、ＣＮＶの定量化で使用されたものと同様の方法を使用して定量した。第３週後の出血に対する定量的評価の結果を、図１１に示す。
【０１５１】
実施例５：抗Ｐ抗体Ｆａｂはウェット型ＡＭＤのアカゲザルモデルにおいて網膜線維症を阻害する
図１２は、上記実施例３から４で記載されるアカゲザル研究から撮ったカラー画像（本出願のためにグレースケールに変換）を示す。これらをＣＮＶの治療および誘導後の網膜線維症の発症について研究被験体を評価するために使用した。網膜線維症はカラー画像中に、レーザースポットを取り囲む、またはそこから延びる、軽く色づいた「筋が多い」または不明瞭にパターンのある領域として現れる。０〜６のスケールを用い、ゼロは線維症の出現がなく６は最も大規模な線維症があるとし、複数の観察者が各画像について線維症の可視化についてフルカラー画像をスコア化した。観察者は、試験、参照または対照群からの画像の同定に対し、盲検とした。可視化された線維症の例および観察者に提供されたグレーディングキーが図１３で提供される。図１４は、線維症に関する観察者の評価の定量的結果のグラフ表示を提供する。データからわかるように、抗Ｐ抗体は、処置した３匹の動物のうち２匹で線維症を実質的に低減させた。線維症のいくらかの改善はルセンティス処置群における３匹の動物のうち２匹でも見られたが、抗Ｐ抗体処置動物で見られた線維症の改善はルセンティス処置群でみられたものより著しく大きかった。
【０１５２】
発明の上記説明から、当業者であれば、改善、変更および改変を理解するであろう。当技術分野の技術の範囲内のそのような改善、変更および改変は、添付の特許請求の範囲により包含されることが意図される。本出願で引用される全ての参考文献、刊行物、および特許は本明細書でその全体が参照により組み込まれる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【国際調査報告】
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2017502023.tif 000063