(57)【要約】本開示は、ポリアミンコンジュゲート、その異性体、プロドラッグ、及び医薬的に許容可能な塩に関する。本開示は、更に、ポリアミンコンジュゲート、その立体異性体、プロドラッグ、医薬的に許容可能な塩を調製する方法と、それを含有する医薬組成物とに関する。【化1】2017514887.tif 000069  本開示の化合物は、微生物が媒介する疾患の治療、予防、又は抑制に有用となる。【選択図】図5
2017514887.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Iの化合物
【化１】
2017514887.tif 000051
又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、
nは、1、2、3、4、又は5であり、Yは、-CH2-、-CO-、-CONH-、-COO-からなる群から選択され、
A1及びA2は、1個又は最大4個の付加アミノ酸の配列から独立して選択され、前記アミノ酸は、L構造又はD構造から独立して選択され、A1及びA2は、1個以上のR2により随意に置換され、
Rは、C4-C28アルキル、C4-28アルケニル、C4-C28アルキン、C6-C18アリール、C3-C28シクロアルキル、飽和又は不飽和5乃至18員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものから選択され、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、
R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される化合物。
【請求項２】
Yは、-CH2-又は-CO-であり、
A1及びA2は、同じか又は異なっており、2個のアミノ酸残基から独立して選択され、前記アミノ酸は、L構造又はD構造から独立して選択され、Rは、C4-28アルキル、C6-18アリールから選択される、請求項1記載の化合物又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物。
【請求項３】
A1及びA2は、同じか又は異なっており、1、2、3、又は4個のアミノ酸残基から独立して選択され、前記アミノ酸残基は、L構造又はD構造から独立して選択され、正に帯電する、請求項1記載の化合物又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物。
【請求項４】
Yは、-CH2-であり、
N1は、正に帯電する、請求項1記載の化合物又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物。
【請求項５】
以下からなる群から選択される、請求項1記載の化合物又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物。
【化２】
2017514887.tif 000052
【化３】
2017514887.tif 000053
【化４】
2017514887.tif 000054
【化５】
2017514887.tif 000055
【化６】
2017514887.tif 000056
【化７】
2017514887.tif 000057
【化８】
2017514887.tif 000058
【化９】
2017514887.tif 000059
【化１０】
2017514887.tif 000060
【化１１】
2017514887.tif 000061
【化１２】
2017514887.tif 000062
【化１３】
2017514887.tif 000063
【化１４】
2017514887.tif 000064
【化１５】
2017514887.tif 000065
【化１６】
2017514887.tif 000066
【化１７】
2017514887.tif 000067
【請求項６】
以下の化合物である、請求項1記載の化合物又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物。
【化１８】
2017514887.tif 000068
【請求項７】
細菌、ウイルス、真菌類、及び原生動物からなる群から選択される微生物により生じた患者の疾患又は状態の治療に用いる、請求項1乃至6の何れかに記載の式(I)の化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物。
【請求項８】
細菌、ウイルス、真菌類、及び原生動物からなる群から選択される微生物の増殖の途絶又は阻害に用いる、請求項1乃至6の何れかに記載の式(I)の化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物。
【請求項９】
細菌、ウイルス、真菌類、及び原生動物からなる群から選択される微生物により生じた患者の疾患又は状態の治療における、請求項1乃至6の何れかに記載の式(I)の化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物の使用。
【請求項１０】
細菌、ウイルス、真菌類、及び原生動物からなる群から選択される微生物の増殖の途絶又は阻害する方法における、請求項1乃至6の何れかに記載の式(I)の化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物の使用。
【請求項１１】
請求項1乃至6の何れかに記載の式(I)の化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物を患者に投与することを含む、細菌、ウイルス、真菌類、及び原生動物からなる群から選択される微生物により生じた患者の疾患又は状態を治療する方法。
【請求項１２】
前記微生物は、細菌、ウイルス、及び真菌類からなる群から選択される、請求項7若しくは請求項8記載の化合物、又は請求項9若しくは請求項10記載の使用、又は請求項11記載の方法。
【請求項１３】
前記微生物は、細菌及びウイルスからなる群から選択される、請求項12記載の化合物、使用、又は方法。
【請求項１４】
前記微生物は、ウイルスである、請求項7乃至13の何れかに記載の化合物、使用、又は方法。
【請求項１５】
前記ウイルスは、エボラウイルスである、請求項14記載の化合物、使用、又は方法。
【請求項１６】
グラム陽性菌により生じた疾患又は状態を治療するための、請求項1乃至6の何れかに記載の式(I)の化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物。
【請求項１７】
グラム陰性菌により生じた疾患又は状態を治療するための、請求項1乃至6の何れかに記載の式(I)の化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物。
【請求項１８】
黄色ブドウ球菌、エンテロコッカス・フェシウム、及び大腸菌、又はその任意の組み合わせからなる群から選択される薬剤感受性菌により生じた疾患又は状態を治療するための、請求項1乃至6の何れかに記載の式(I)の化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物。
【請求項１９】
バンコマイシン耐性エンテロコッカス・フェシウム、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌、及びβ-ラクタム耐性肺炎桿菌、又はその任意の組み合わせからなる群から選択される薬剤感受性菌により生じた疾患又は状態を治療するための、請求項1乃至6の何れかに記載の式(I)の化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物。
【請求項２０】
医薬組成物を含む又は含まない抗菌性の被覆及び/又は表面を調製するための、請求項1乃至6の何れかに記載の式(I)の化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物。
【請求項２１】
金属、セラミクス、ガラス、ポリマー、プラスチック、繊維、及びその組み合わせからなる群から選択される材料による前記表面のための請求項20記載の方法。
【請求項２２】
請求項1乃至6の何れかに記載の式(I)の化合物又はその塩及び担体を含む組成物。
【請求項２３】
請求項1乃至6の何れかに記載の式(I)の化合物又はその医薬的に許容可能な塩を、医薬的に許容可能な担体と共に、随意で1種類以上の他の医薬組成物と組み合わせて含む医薬組成物。
【請求項２４】
請求項1乃至6の何れかに記載の式(I)の化合物又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物を調製する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は、医薬品化学の分野に関し、特に抗菌性化合物の開発に関する。本開示は、ポリアミンコンジュゲート、その異性体、プロドラッグ、及びその医薬的に許容可能な塩に関する。本開示は、更に、高い抗菌活性を示すポリアミンコンジュゲートの合成及び特徴付けに関する。本開示の化合物は、微生物が媒介する疾患及び状態の治療、予防、及び抑制に有用となる。
【背景技術】
【０００２】
従来の抗生物質に対する菌耐性は、現時点で国際保健にとって最も深刻な問題の1つである。この問題を克服する新たな抗細菌剤を開発するための研究が継続されている。抗菌ペプチド(antimicrobial peptides, AMP)により、こうした満たされていない要求に対応することが可能となる(Hancock et al. Nat. Biotechnol., 2006, 24, 1551-1557; Hancock et al. Nat. Rev. Drug Discov., 2012, 11, 37-51)。AMPは、動物界及び植物界において広範に見られ、あらゆる感染に対する第1の防衛線となる(Michael Zasloff Nature, 2002, 45, 389-395)。これらは、正味カチオン電荷及び両親媒性(疎水性/親水性バランス)を備えた両親媒性ペプチドであり、主に細菌細胞膜の溶解を引き起こして作用することが知られており、一方、従来の抗生物質の殆どは、細菌内に特定の標的を有する。そのため、点突然変異であっても不活性になる可能性がある従来の抗生物質の場合とは異なり、細菌が抗菌ペプチドに対する耐性を発現させる傾向は低くなり得る(Brogden et al. Nature Rev. Microbiol., 2005, 3, 238-250)。しかしながら、AMPは、一部が臨床試験で有望とされているが、未だに臨床用に認可されていない。これは、主に、生体内毒性があり、製造コストが高く、プロテアーゼ分解を受けやすいためである。
【０００３】
他のクラスの両親媒性ペプチドに、正味カチオン/アニオン電荷及び親油性の脂肪族末端を有するリポペプチドがある。リポペプチド内の親油性末端は、その微生物膜相互作用を促進する活性に対して、決定的な役割を果たす(Malina et al. Biochem. J., 2005, 390, 695-702; Makovitzki et al. PNAS, 2006, 103, 15997-6002)。リポペプチドは、一般に、狭い範囲の微生物に対して抗菌活性を示す。例えば、ダプトマイシンは、グラム陽性菌に対してのみ活性を有し、ポリミキシン(ポリミキシンB及びコリスチン)は、グラム陰性菌に対してのみ活性を有し、エキノカンジンは、抗真菌薬としてのみ機能する。ダプトマイシンは、カルシウム(Ca+2)依存性の細菌膜電位の消失により作用し、細胞機能を複数の面で混乱させ、細胞成分の漏出を引き起こす。カチオン性リポペプチドであるポリミキシンは、グラム陰性菌の外側の細胞膜からカルシウム(Ca+2)及びマグネシウム(Mg+2)を排除することによりアニオン性リポ多糖分子と結合し、これにより細胞外皮の透過性を変化させ、細胞成分の漏出をもたらし、最終的に細胞死を引き起こす。FDAでは、ダプトマイシンを複雑性皮膚・皮膚組織感染症の治療用として認可している。しかしながら、最近、ダプトマイシンの耐性が報告されている(Infect. Dis. Clin. Pract., 2013, 21, 79-84)。ポリミキシンは、1960年代に臨床使用が可能となったが、現在、その毒性のため、最終手段としてのみ用いられている。リポペプチドの制約は、主に、その生体内毒性と、構造が複雑で、合成が困難であり、製造コストが高いことにある。そのため、リポペプチドが直面する問題に対応する設計及び戦略の開発に対して、多大な労力が向けられている。
【０００４】
以上のことから、細菌感染の治療及び予防に最先端で用いられる化合物は、効果が限定されていることは明らかである。更に、抗細菌活性が改善され、耐性発現の可能性が低く、現在利用可能な抗生物質による治療に耐性を有する細菌感染に対する有効性が改善され、又は標的微生物に対する予期せぬ選択性を有する、新たな化合物を同定する必要性は、引き続き存在している。
【０００５】
スペルミジンは、リボソーム及び生体組織内に見られ、生物内で様々な代謝機能を有するポリアミン化合物(C7H19N3)である。ノルスペルミジンは、スペルミジンのホモログであり、有意な抗腫瘍活性を有する。更に、バイオフィルム分解因子としても機能する。
【０００６】
ノルスペルミジンは、菌体外多糖と直接特異的に相互作用する。D-アミノ酸及びノルスペルミジンは、共に作用して、既存のバイオフィルムを破壊する(“A Self-produced Trigger for Biofilm Disassembly that Targets Exopolysaccharide”, Koldkin-Gal et. al., Cell, 2012)。
【０００７】
ポリアミン-ペプチドコンジュゲートのライブラリは、トリパノチオンレダクターゼの阻害剤として同定されている。ノルスペルミジン系ペプチドは、トリパノチオンレダクターゼを阻害する(“Mechanism and structure-activity relationships of norspermidine-based peptidic inhibitors of trypanothione reductase”, Dixon et. al., Biorganic & Medicinal Chemistry, 2005)。
【０００８】
WO2012151554には、ポリアミンを用いて、バイオフィルムを処置又は低減し、バイオフィルム関連障害を治療し、バイオフィルム形成を防止する方法が開示されている。ノルスペルミジンと、D-Tyr、又はD-Met、D-Trp、D-Leu、及びD-Tyrの混合物とを組み合わせて用い、別個に付与した際にはバイオフィルム形成の阻止に効果の無い濃度で、枯草菌によるバイオフィルム形成を防止することが開示されている。
【０００９】
WO2013017714には、フェニルアラニン系リポペプチドに構造的に類似した低分子量オルガノゲルとして機能する化合物が開示されている。
【００１０】
感染を予防する、又はバイオフィルムを妨げるために用いられる作用剤は、何れも哺乳類細胞に対して無毒性であり、環境に対して安全である必要がある。バイオフィルムの阻害に十分な量の特定の殺生物剤は、宿主組織にも損傷を与える可能性がある。局所組織領域内に導入された抗生物質により、耐性生物の形成が誘発され、耐性生物は、その後バイオフィルム群集を形成し、その中のプランクトン微生物が同様に特定の抗生物質に対する耐性を有する恐れがある。更に、感染を根絶するための長期的な全身抗生物質療法では、宿主細胞に対する毒性のレベルが高くなる。従って、多剤耐性菌を含む菌株に対する活性が強化され且つ本質的に無毒で生分解性である新たな化合物及び/又は誘導体を同定及び/又は開発する必要性が存在する。
【００１１】
抗細菌性化合物に加え、他の種類の微生物、特にウイルス、真菌類、及び原生動物に対して有効な化合物に対する必要性も大きい。抗ウイルス化合物に対する大きな必要性は、現在認可された治療法が存在しないエボラウイルスの流行が今回発生したことにも現れている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１２】
【特許文献１】WO2012/151554
【非特許文献】
【００１３】
【非特許文献１】Hancock et al. Nat. Biotechnol., 2006, 24, 1551-1557; Hancock et al. Nat. Rev. Drug Discov., 2012, 11, 37-51
【発明の概要】
【００１４】
本発明は、更なる抗菌性化合物(即ち、細菌、ウイルス、真菌類、及び/又は原生動物に対して有効な化合物)に対する必要性に対処する。
【００１５】
本発明は、式I(下記参照)の化合物が有利な抗菌特性を示すという驚くべき発見に基づいている。したがって、本開示は、式Iの化合物
【化１】
2017514887.tif 000003
又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、1、2、3、4、又は5であり、Yは、-CH2-、-CO-、-CONH-、-COO-の基から選択され、A1及びA2は、1個又は最大4個の付加アミノ酸の配列から独立して選択され、前記アミノ酸は、L構造又はD構造から独立して選択され、A1及びA2は、1個以上のR2により随意に置換され、Rは、C4-C28アルキル、C4-28アルケニル、C4-C28アルキン、C6-C18アリール、C3-C28シクロアルキル、飽和又は不飽和5乃至18員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものから選択され、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物を提供する。
【００１６】
本開示は、更に、細菌、ウイルス、真菌類、及び原生動物からなる群から選択される微生物の増殖の途絶又は阻害に用いる、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物に関する。一実施形態において、前記微生物は、細菌又はウイルスである。一実施形態において、前記微生物は、細菌である。一実施形態において、前記微生物は、ウイルスである。一実施形態において、前記微生物は、細菌である。一実施形態において、前記微生物は、菌類である。一実施形態において、前記微生物は、原生動物である。一実施形態において、前記ウイルスは、エボラウイルスである。
【００１７】
本開示は、更に、細菌、ウイルス、真菌類、及び原生動物からなる群から選択される微生物の増殖の途絶又は阻害における、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物の使用に関する。一実施形態において、前記微生物は、細菌又はウイルスである。一実施形態において、前記微生物は、細菌である。一実施形態において、前記微生物は、ウイルスである。一実施形態において、前記微生物は、細菌である。一実施形態において、前記微生物は、菌類である。一実施形態において、前記微生物は、原生動物である。一実施形態において、前記ウイルスは、エボラウイルスである。
【００１８】
本開示は、更に、細菌、ウイルス、真菌類、及び原生動物からなる群から選択される微生物により生じた患者の疾患又は状態の治療に用いる、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物に関する。一実施形態において、前記微生物は、細菌又はウイルスである。一実施形態において、前記微生物は、細菌である。一実施形態において、前記微生物は、ウイルスである。一実施形態において、前記微生物は、細菌である。一実施形態において、前記微生物は、真菌類である。一実施形態において、前記微生物は、原生動物である。一実施形態において、前記ウイルスは、エボラウイルスである。
【００１９】
本開示は、更に、細菌、ウイルス、真菌類、及び原生動物からなる群から選択される微生物により生じた患者の疾患又は状態の治療における、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物の使用に関する。一実施形態において、前記微生物は、細菌又はウイルスである。一実施形態において、前記微生物は、細菌である。一実施形態において、前記微生物は、ウイルスである。一実施形態において、前記微生物は、細菌である。一実施形態において、前記微生物は、真菌類である。一実施形態において、前記微生物は、原生動物である。一実施形態において、前記ウイルスは、エボラウイルスである。
【００２０】
本開示は、更に、請求項1乃至6の何れかに記載の式(I)の化合物又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物を患者に投与することを含む、細菌、ウイルス、真菌類、及び原生動物からなる群から選択される微生物により生じた患者の疾患又は状態を治療する方法に関する。
【００２１】
細菌、ウイルス、真菌類、及び原生動物により生じる疾患及び状態は、当該技術分野において周知である。
【００２２】
前記患者は、一般に哺乳類であり、好ましくはヒトである。
【００２３】
一部の実施形態において、微生物により生じた疾患又は状態の治療は、治療有効量の化合物の患者への投与を含む。治療有効量とは、単独で又は組み合わせて患者に投与した際に、こうした治療に影響を与えるのに十分な化合物の量を示す。何れの場合においても、適切な治療有効量は、当業者より確定され得るか、又は日常の実験により決定可能となり得る。治療有効量は、有益な効果が化合物の何らかの毒性又は有害な効果を上回る量でもある。
【００２４】
本開示は、更に、細菌、真菌類、及びウイルスにより生じた疾患を治療するための、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物に関する。
【００２５】
本開示は、更に、医薬組成物を含む又は含まない抗菌性の被覆及び/又は表面を調製するための、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物に関する。
【００２６】
本開示は、式(I)の化合物又はその塩、及び担体を含む組成物に関する。
【００２７】
本開示は、式Iの化合物又はその医薬的に許容可能な塩を、医薬的に許容可能な担体と共に、1種類以上の他の医薬組成物と任意に組み合わせて含む医薬組成物に関する。
【００２８】
本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物を調製するプロセスに関する。
【００２９】
本保護対象の上記及び他の特徴、態様、及び利点は、以下の説明を参照することで更に良く理解されよう。本概要は、選択した概念を簡潔な形で紹介するものである。本概要は本開示の重要な特徴又は必須の特徴を特定するものではなく、保護対象の範囲を限定するために用いられるものでもない。
【図面の簡単な説明】
【００３０】
【図１】図1は、50％ヒト血漿における抗細菌効力を示す図である。
【図２】図2は、HeLa細胞株に対する細胞毒性を示し、(a)化合物16の様々な濃度での細胞生存率、(b)様々な条件での細胞の明視野顕微鏡画像を示す図である(スケールバー=100μm)。
【図３】図3は、静止期の黄色ブドウ球菌に対する化合物16の殺菌動態を示す図である。
【図４】図4は、菌耐性を誘発する傾向を示し、化合物16と対照抗生物質であるノルフロキサシン及びコリスチンとのMICの増加倍数の比較を示す図である。
【図５】図5は、黄色ブドウ球菌のバイオフィルム破壊を示し、(a)バイオフィルムにおける細胞生存率の定量化、(b)クリスタルバイオレット染色による視覚化、及び(c) バイオフィルムの共焦点顕微鏡画像を示す図である。
【図６】図6は、化合物16の調製のための濃度の計算を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００３１】
本明細書に記載の構造式及び本開示の全体に亘って、以下の用語は、特に他の記載が無い限り、次の意味を有する。
【００３２】
定義
【００３３】
「アルキル」という用語は、4乃至28個の炭素分子、更に好ましくは6乃至20個の炭素分子を有するモノラジカル分岐又は非分岐飽和炭化水素鎖を示す。この用語の例には、n-ブチル、iso-ブチル、t-ブチル、n-ヘキシル、n-デシル、テトラデシル等の基が含まれる。これらの基は、任意に置換し得る。
【００３４】
「アルケニル」という用語は、好ましくは4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19,20、21、22、23、24、25、26、27、又は28個の炭素分子、更に好ましくは6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、又は20個の炭素分子、更により好ましくは12、13、14、15、又は16個の炭素分子を有すると共に、1、2、3、4、5、又は6個の二重結合(ビニル)、好ましくは1個の二重結合を有する、分岐又は非分岐不飽和炭化水素基のモノラジカルを示す。これらの基は、任意に置換し得る。
【００３５】
「アルキン」という用語は、好ましくは4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19,20、21、22、23、24、25、26、27、又は28個の炭素分子、更に好ましくは6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、又は20個の炭素分子、及び更により好ましくは12、13、14、15、又は16個の炭素分子を有すると共に、1、2、3、4、5、又は6個のアセチレン(三重結合)不飽和の部位、好ましくは1個の三重結合を含む、不飽和炭化水素のモノラジカルを示す。これらの基は、任意に置換し得る。
【００３６】
「ハロ」又は「ハロゲン」は、単独で、又は他の任意の用語との組み合わせにおいて、クロロ(Cl)、フルオロ(F)、ブロモ(Br)、及びヨード(I)等のハロゲンを意味する。
【００３７】
「アリール」という用語は、単一の環(例えば、フェニル)、又は複数の環(例えば、ビフェニル)、又は複数の縮合(融合)環(例えば、ナフチル又はアントラニル)を有する6乃至18個の炭素分子の芳香族炭素環式基を示す。好適なアリールには、フェニル、ナフチル等が含まれる。これらの基は、任意に置換し得る。
【００３８】
「シクロアルキル」という用語は、単一の環式の環又は部分的に不飽和となり得る複数の縮合環を有する3乃至28個の炭素分子の炭素環式基を示す。このようなシクロアルキル基には、一例として、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、シクロオクチル等の単一環構造、又はアダマンタニル、ビシクロ[2.2.1]ヘプタン、1,3,3-トリメチルビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル、(2,3,3-トリメチルビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル)等の多重環構造、又はアリール基に融合された炭素環式基、例えばインダン等が含まれる。これらの基は、任意に置換し得る。
【００３９】
「ヘテロシクリル」という用語は、単一の環又は複数の縮合環を有し、5乃至18個の炭素分子、及び窒素、硫黄、リン、及び/又は酸素から選択される1乃至10個のヘテロ原子、好ましくは1、2、又は3個のヘテロ原子を環内に有する、飽和基又は部分的に不飽和の基又は不飽和基を示す。ヘテロシクリル基は、単一の環又は複数の縮合環を有することが可能であり、テトラヒドロフラニル、モルホリニル、ピペリジニル、ピペラジニル、ジヒドロピリジニル、テトラヒドロキノリニル、ピロリジニル等を含む。これらの基は、任意に置換し得る。
【００４０】
本明細書において、「置換された」という用語は、全ての許容可能な有機化合物の置換基を含むと考えられる。広範な局面において、許容可能な置換基には、有機化合物の非環式及び環式、分岐及び非分岐、炭素環式及びヘテロ環式、芳香族及び非芳香族置換基が含まれる。置換基の例には、例えば、上述したものが含まれる。許容可能な置換基は、適切な有機化合物に対して、1つ以上となる場合があり、同一又は異なるものとなる場合がある。本発明の目的として、窒素等のヘテロ原子は、ヘテロ原子の原子価を満たす水素置換基及び/又は本明細書に記載の有機化合物の任意の許容可能な置換基を有し得る。
【００４１】
本明細書に記載の化合物は、1個以上のキラル中心及び/又は二重結合を含んでよく、そのため、二重結合異性体(即ち、幾何異性体)、位置異性体、エナンチオマ、又はジアステレオマ等の立体異性体として存在し得る。したがって、本明細書に示した化学構造は、立体異性体的に純粋な形態(例えば、幾何的に純粋、エナンチオマ的に純粋、又はジアステレオマ的に純粋)及びエナンチオマ及び立体異性体の混合体を含め、例示又は特定された化合物の、可能な全てのエナンチオマ及び立体異性体を包含する。エナンチオマ及び立体異性体の混合体は、当業者に周知の分離手法又はキラル合成手法を用いて、成分のエナンチオマ又は立体異性体に分解することができる。化合物は、エノール型、ケト型、及びその混合を含む、幾つかの互変異性型で存在し得る。したがって、本明細書に示した化学構造は、例示又は特定された化合物の、可能な全ての互変異性型を包含する。
【００４２】
「医薬的に許容可能な塩」は、医薬的に許容可能な酸又は塩基を有する塩を含む。医薬的に許容可能な酸には、無機酸、例えば、塩酸、硫酸、リン酸、二リン酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、及び硝酸と、有機酸、例えば、クエン酸、フマル酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、アスコルビン酸、シュウ酸、コハク酸、酒石酸、安息香酸、酢酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、又はp-トルエンスルホン酸との両方が含まれる。医薬的に許容可能な塩基には、アルカリ金属(例えば、ナトリウム又はカリウム)及びアルカリ土類金属(例えば、カルシウム又はマグネシウム)水酸化物、及び有機塩基、例えば、アルキルアミン、アリールアルキルアミン、及びヘテロ環式アミンが含まれる。
【００４３】
「多形体」という用語は、同じ分子の結晶形を示し、異なる多形体は、異なる物理特性、例えば、融解温度、融解熱、溶解度、溶解速度、及び/又は振動スペクトルを、結晶格子における分子の配置又は立体配座の結果として有し得る。
【００４４】
「溶媒和物」という用語は、本明細書において、溶媒を含有する物質の結晶形を示す。
【００４５】
「水和物」という用語は、溶媒が水である溶媒和物を示す。
【００４６】
「薬剤感受性菌」とは、本明細書において、少なくとも1種類の薬物への暴露により生存することができなくなる細菌である。
【００４７】
本開示は、式Iの化合物
【化２】
2017514887.tif 000004
又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、1、2、3、4、又は5であり、Yは、-CH2-、-CO-、-CONH-、-COO-の基から選択され、A1及びA2は、1個又は最大4個の付加アミノ酸の配列から独立して選択され、前記アミノ酸は、L構造又はD構造から独立して選択され、A1及びA2は、1個以上のR2により随意に置換され、Rは、C4-C28アルキル、C4-28アルケニル、C4-C28アルキン、C6-C18アリール、C3-C28シクロアルキル、飽和又は不飽和5乃至18員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものから選択され、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００４８】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物
【化３】
2017514887.tif 000005
又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、1、2、3、4、又は5であり、Yは、-CH2-、-CO-、-CONH-、-COO-の基から選択され、A1及びA2は、1個又は最大4個の付加アミノ酸の配列から独立して選択され、前記アミノ酸は、L構造又はD構造から独立して選択され、A1及びA2は、独立して正に帯電し、Rは、C4-C28アルキル、C4-C28アルケニル、C4-C28アルキン、C6-C18アリール、C3-C8シクロアルキル、飽和又は不飽和5乃至18員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものから選択され、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００４９】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CO-であり、A1及びA2は、L-フェニルアラニンであり、A1及びA2は、1個以上のR2により随意に置換され、Rは、C9アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００５０】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、1、2、3、4、又は5であり、Yは、-CH2-、-CO-、-CONH-、-COO-の基から選択され、A1及びA2は、同じか又は異なっており、1、2、3、又は4個のアミノ酸残基から独立して選択され、前記アミノ酸残基は、L構造又はD構造から独立して選択され且つ正に帯電し、Rは、C4-C28アルキル、C4-C28アルケニル、C4-C28アルキン、C6-C18アリール、C3-C8シクロアルキル、飽和又は不飽和5乃至18員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択され、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００５１】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、1、2、3、4、又は5であり、Yは、-CH2-であり、A1及びA2は、1個又は最大4個の付加アミノ酸の配列から独立して選択され、前記アミノ酸は、L構造又はD構造から独立して選択され、A1及びA2は、1個以上のR2により随意に置換され、Rは、C4-C28アルキル、C4-28アルケニル、C4-C28アルキン、C6-C18アリール、C3-C28シクロアルキル、飽和又は不飽和5乃至18員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択され、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択され、N1は、正に帯電する、化合物に関する
【００５２】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、1、2、3、4、又は5であり、Yは、-CH2-、又は-CO-であり、A1及びA2は、同じか又は異なっており、2個のアミノ酸残基から独立して選択され、前記アミノ酸は、L構造又はD構造から独立して選択され、Rは、C4-28アルキル、C6-18アリールから選択される、化合物に関する。
【００５３】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CO-であり、A1及びA2は、L-フェニルアラニンであり、A1及びA2は、1個以上のR2により随意に置換され、Rは、C11アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００５４】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CO-であり、A1及びA2は、L-フェニルアラニンであり、A1及びA2は、1個以上のR2により随意に置換され、Rは、C13アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００５５】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CO-であり、A1及びA2は、L-フェニルアラニンであり、A1及びA2は、1個以上のR2により随意に置換され、Rは、C15アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００５６】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CO-であり、A1及びA2は、L-フェニルアラニンであり、A1及びA2は、1個以上のR2により随意に置換され、Rは、C17アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００５７】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CO-であり、A1及びA2は、D-フェニルアラニンであり、A1及びA2は、1個以上のR2により随意に置換され、Rは、C11アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００５８】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CO-であり、A1及びA2は、L-トリプトファンであり、A1及びA2は、1個以上のR2により随意に置換され、Rは、C13アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００５９】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CO-であり、A1及びA2は、L-トリプトファンであり、A1及びA2は、1個以上のR2により随意に置換され、Rは、C15アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００６０】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CO-であり、A1及びA2は、L-リジンであり、A1及びA2は、1個以上のR2により随意に置換され、Rは、C9アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００６１】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CO-であり、A1及びA2は、L-リジンであり、A1及びA2は、1個以上のR2により随意に置換され、Rは、C11アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００６２】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CO-であり、A1及びA2は、L-リジンであり、A1及びA2は、1個以上のR2により随意に置換され、Rは、C13アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００６３】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CO-であり、A1及びA2は、L-リジンであり、A1及びA2は、1個以上のR2により随意に置換され、Rは、C15アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００６４】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CO-であり、A1及びA2は、L-リジンであり、A1及びA2は、1個以上のR2により随意に置換され、Rは、C17アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００６５】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CO-であり、A1及びA2は、L-オルニチンであり、A1及びA2は、1個以上のR2により随意に置換され、Rは、C13アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００６６】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CO-であり、A1及びA2は、L-オルニチンであり、A1及びA2は、1個以上のR2により随意に置換され、Rは、C15アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００６７】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CO-であり、A1及びA2は、D-リジンであり、A1及びA2は、1個以上のR2により随意に置換され、Rは、C13アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００６８】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CO-であり、A1及びA2は、D-リジンであり、A1及びA2は、1個以上のR2により随意に置換され、Rは、C15アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００６９】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CH2-であり、A1及びA2は、L-フェニルアラニンであり、A1及びA2は、1個以上のR2により随意に置換され、Rは、C7アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００７０】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CH2-であり、A1及びA2は、L-アラニンであり、A1及びA2は、1個以上のR2により随意に置換され、Rは、C7アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００７１】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CH2-であり、A1及びA2は、L-リジンであり、A1及びA2は、1個以上のR2により随意に置換され、Rは、C7アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００７２】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CO-であり、A1及びA2は、L-フェニルアラニンであり、A1及びA2は、1個以上のR2により随意に置換され、Rは、C10アリールであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００７３】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CO-であり、A1及びA2は、L-リジンであり、A1及びA2は、正に帯電し、Rは、C9アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００７４】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CO-であり、A1及びA2は、L-リジンであり、A1及びA2は、正に帯電し、Rは、C11アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００７５】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CO-であり、A1及びA2は、L-リジンであり、A1及びA2は、正に帯電し、Rは、C13アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００７６】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CO-であり、A1及びA2は、L-リジンであり、A1及びA2は、正に帯電し、Rは、C15アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００７７】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CO-であり、A1及びA2は、L-リジンであり、A1及びA2は、正に帯電し、Rは、C17アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００７８】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CO-であり、A1及びA2は、L-オルニチンであり、A1及びA2は、正に帯電し、Rは、C13アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００７９】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CO-であり、A1及びA2は、L-オルニチンであり、A1及びA2は、正に帯電し、Rは、C15アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００８０】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CO-であり、A1及びA2は、D-リジンであり、A1及びA2は、正に帯電し、Rは、C13アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００８１】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CO-であり、A1及びA2は、D-リジンであり、A1及びA2は、正に帯電し、Rは、C15アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００８２】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CH2-であり、A1及びA2は、L-リジンであり、A1及びA2は、正に帯電し、Rは、C7アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、化合物に関する。
【００８３】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CH2-であり、A1及びA2は、L-フェニルアラニンであり、A1及びA2は、1個以上のR2により随意に置換され、Rは、C7アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択され、N1は、正に帯電する、化合物に関する。
【００８４】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CH2-であり、A1及びA2は、L-アラニンであり、A1及びA2は、1個以上のR2により随意に置換され、Rは、C7アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択され、N1は、正に帯電する、化合物に関する。
【００８５】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、nは、2であり、Yは、-CH2-であり、A1及びA2は、L-リジンであり、A1及びA2は、1個以上のR2により随意に置換され、Rは、C7アルキルであり、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択され、N1は、正に帯電する、化合物に関する。
【００８６】
実施形態によれば、本開示は、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、以下からなる群から選択される化合物に関する。
【化４】
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【化５】
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【化６】
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【化７】
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【化８】
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【化９】
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【化１０】
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【化１１】
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【化１２】
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【化１３】
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【化１４】
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【化１５】
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【化１６】
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【化１７】
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【化１８】
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【化１９】
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【００８７】
好適な実施形態において、式Iの化合物は、次の通りである。
【化２０】
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【００８８】
一実施形態において、前記化合物は、化合物2、化合物6、化合物7、化合物11、化合物12、化合物13、化合物15、化合物16、及び化合物17からなる群から選択される。
【００８９】
一実施形態において、前記化合物は、化合物2、化合物6、化合物7、化合物12、及び化合物17からなる群から選択される。
【００９０】
一実施形態において、前記化合物は、化合物2、化合物6、化合物7、化合物12、化合物13、化合物15、化合物16、及び化合物17からなる群から選択される。
【００９１】
一実施形態において、前記化合物は、化合物11、化合物12、化合物15、化合物16、及び化合物17からなる群から選択される。
【００９２】
一実施形態において、前記化合物は、11及び化合物12からなる群から選択される。
【００９３】
実施形態によれば、本開示は、細菌、真菌類、及びウイルスにより生じた疾患の治療に用いる、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物に関する。
【００９４】
他の実施形態によれば、本開示は、グラム陽性菌及びグラム陰性菌により生じた疾患又は状態を治療するための、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物に関する。
【００９５】
他の実施形態によれば、本開示は、黄色ブドウ球菌、フェシウム菌、及び大腸菌、又はその任意の組み合わせからなる群から選択される薬剤感受性菌により生じた疾患又は状態を治療するための、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物に関する。
【００９６】
更に他の実施形態によれば、本開示は、バンコマイシン耐性フェシウム菌、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌、及びβ-ラクタム耐性肺炎桿菌、又はその組み合わせからなる群から選択される薬剤耐性菌により生じた疾患又は状態を治療するための、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物に関する。
【００９７】
本開示の実施形態は、医薬組成物を含む抗菌性の被覆及び/又は表面を調製するための、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物に関する。
【００９８】
本開示の実施形態は、医薬組成物を含まない抗菌性の被覆及び/又は表面を調製するための、式Iの化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物に関する。
【００９９】
本開示の実施形態において、開示した前記表面は、金属、セラミクス、ガラス、ポリマー、プラスチック、繊維、及びその組み合わせからなる群から選択される材料により形成されるものとする。
【０１００】
実施形態によれば、本開示は、式(I)の化合物又はその医薬的に許容可能な塩を、医薬的に許容可能な担体と共に、随意で1種類以上の他の医薬組成物と組み合わせて含む医薬組成物に関する。
【０１０１】
本開示の実施形態においては、式(I)の化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物を調製するプロセスが提供される。
【０１０２】
略語
【０１０３】
実施例及び本明細書の他の箇所においては、以下の略語が使用される。
DCM: ジクロロメタン
NaCl: 塩化ナトリウム
Na2CO3: 炭酸ナトリウム
DMF: N, N-ジメチルホルムアミド
DMSO: N, N-ジメチルスルホキシド
HBTU: O-ベンゾトリアゾール-N, N, N’, N’-テトラメチル-ウロニウム-ヘキサフルオロホスファート
DIPEA: N, N-ジイソプロピルエチルアミン
HCl: 塩酸
RT: 室温
μM: マイクロモーラ(Micromolar)
【０１０４】
式(I)の化合物は、以下に記載のスキーム1乃至8に概略を示したように調製し得る。
【０１０５】
【化２１】
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【化２２】
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【化２３】
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【化２４】
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【化２５】
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【化２６】
2017514887.tif 000028
【化２７】
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【化２８】
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【化２９】
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【化３０】
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【化３１】
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【化３２】
2017514887.tif 000034
【化３３】
2017514887.tif 000035
【化３４】
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【化３５】
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【化３６】
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【化３７】
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【化３８】
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【実施例】
【０１０６】
以下の実施例では、本発明の化合物の合成、活性、及び応用に関する詳細を記載する。以下の内容は、例示的なものに過ぎず、本発明は、これらの実施例に記載した詳細により限定されないと理解されたい。
【０１０７】
材料及び方法
【０１０８】
全ての溶媒は、試薬グレードであり、使用前に蒸留及び乾燥を行った。全ての試薬は、Sigma-Aldrich、Alfa-Aesar、S.D.Fine、Avra、及びSpectrochemより購入し、更に精製することなく使用した。分析的な薄層クロマトグラフィー(TLC)は、シリカゲル60 F254によりプレコートされたE.Merck TLCプレート上で行い、UV光及びヨウ素を用いて視覚化した。カラムクロマトグラフィーは、シリカゲル(60乃至120メッシュ)上で、比率の異なるクロロホルム及びメタノール溶媒系を用いて行った。核磁気共鳴スペクトルは、Bruker(AV-400)400MHzスペクトロメータにおいて重水素化溶媒中で記録した。質量スペクトルは、6538-UHD Accurate-Mass Q-TOF LC-MS機器を用いて求めた。化合物(クロロホルム又はメタノール中)の赤外線(IR)スペクトルは、Bruker IFS66 V/sスペクトロメータにおいてNaCl結晶を用いて記録した。光学濃度の測定には、Tecan InfiniteProシリーズM200 Microplate Readerを用いた。黄色ブドウ球菌(MTCC737)及び大腸菌(MTCC443)の菌株は、MTCC(インド、チャンディーガル)より購入した。MRSA(ATCC33591)、エンテロコッカス・フェシウム(ATCC19634)、バンコマイシン耐性エンテロコッカス・フェシウム(vancomycin resistant Enterococcus faecium, VRE)(ATCC51559)、及び肺炎桿菌(ATCC 700603)は、ATCC(米国メリーランド州ロックビル)より入手した。
【０１０９】
微生物及び培養条件
【０１１０】
合成した化合物の抗細菌活性は、グラム陰性(大腸菌、肺炎桿菌)及びグラム陽性(黄色ブドウ球菌、MRSA、エンテロコッカス・フェシウム、及びVRE)細菌の両方に対して評価した。大腸菌は、ルリア-ベルターニ培地において培養し、黄色ブドウ球菌、MRSAは、酵母ブドウ糖培地(滅菌蒸留水1000mL中、牛肉エキス1g、酵母エキス2g、及びペプトン5g、NaCl 5g)において増殖させた。フェシウム菌及びVREは、ブレインハートインフュージョン培地(BHI)において増殖させた。細菌試料は、凍結乾燥させ、-80℃で保管した。これらのストック5μLを、それぞれの培地3mLに添加し、培養物を6時間37℃で増殖させた後、実験に用いた。
【０１１１】
実施例1:
【０１１２】
本開示のアミノ酸に基づく脂質化した小分子(1乃至23、39、40、及び42乃至65)は、N-Boc保護アミノ酸、ノルスペルミジン、及び脂肪酸から、O-ベンゾトリアゾール-N,N,N’,N’-テトラメチル-ウロニウム-ヘキサフルオロホスファート(HBTU)をカップリング試薬として用いた単純なアミドカップリング反応の後、トリフルオロ酢酸を用いて脱保護することにより合成した。化合物(1乃至23、39、40、及び42乃至65)を合成する方法に利用したステップは、実施例1.1乃至1.20において、更に詳述する。
【０１１３】
実施例1.1: N1-(Boc-LPhe)-N3-[{3-(Boc-LPhe)アミノ}プロピル]プロパン-1,3-ジアミン(24)の合成: 約5g(2当量、18.85mmol)のN-Boc-L-フェニルアラニンを、約25mLの無水DCMに0℃で溶解した。反応混合物において、約9.8mL(6当量、56.55mmol)のDIPEA、その後、約7.2g(2当量、18.85mmol)のHBTUを添加した。次に、約8mLのDMFを反応混合物に添加した。10分後、約1.2g(1当量、9.43mmol)のノルスペルミジン[ビス(3-アミノプロピル)アミン]を滴下した。反応混合物を、48時間0℃で攪拌した。次に、反応溶媒を蒸発させ、残留物を酢酸エチルで希釈した。その後、ワークアップを、1N HCl(50mL、3回)、続いて飽和Na2CO3溶液(50mL、3回)により行った。粗生成物を酢酸エチル層において採取した。最後に、カラムを行い、生成物を収率65％で単離した。FT-IR (NaCl): 3311 cm-1 (-NH- str.), 3033 cm-1 (aromatic C-H str.), 2929 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2854 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1700 cm-1 and 1684 cm-1 (C=O str.), 1654 cm-1, 1635 cm-1 (aromatic C=C str.). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.300-7.204 (m, 10H), 7.194 (s, 2H), 5.368 (s, 2H), 4.314-4.298 (d, 2H), 3.370-2.985 (m, 12H), 2.570 (s, 1H), 1.687-1.676 (m, 4H), 1.386 (s, 18H). HRMS (m/z): 626.3891 [(M+H) +] (観測), 626.3918 [(M+H) +] (計算).
【０１１４】
実施例1.1.1: N,N-ビス-[{3-(Boc-LPhe)アミノ}プロピル]アルカンアミド(25a乃至25e): 約1.5当量の飽和脂肪酸(C10、C12、C14、C16、及びC18)を無水DCMに0℃で溶解した。反応混合物において、約4当量のDIPEA、その後、約1.5当量のHBTUを添加した。次に、DMFを反応混合物に添加した。10分後、約1当量の24を滴下し、無水DCMに溶解させた。反応混合物をRTにして、24時間攪拌した。次に、反応溶媒を蒸発させ、残留物を酢酸エチルで希釈した。その後、ワークアップを、最初に1N HCl(3回)、続いて飽和Na2CO3溶液(3回)により行った。粗生成物を酢酸エチル層において採取した。最後に、カラムを行い、ピューレ生成物を収率75乃至80％で単離した。
【０１１５】
実施例1.1.1.1: N,N-ビス-[{3-(Boc-LPhe)アミノ}プロピル]デカンアミド(25a): FT-IR (NaCl): 3304 cm-1 (-NH- str.), 3029 cm-1 (aromatic C-H str.), 2927 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2855 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1699 cm-1 and 1684 cm-1 (C=O str.), 1652 cm-1, 1635 cm-1 (aromatic C=C str.). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.246-7.097 (m, 12H), 5.350-5.229 (m, 2H), 4.355-4.315 (d, 2H), 3.384-2.871 (m, 12H), 2.215-2.195 (t, 2H), 1.597-1.463 (m, 6H), 1.353 (s, 18H), 1.255 (s, 12H), 0.889-0.855 (t, 3H). HRMS (m/z): 780.5268 [(M+H) +] (観測), 780.5275 [(M+H) +] (計算).
【０１１６】
実施例1.1.1.2: N,N-ビス-[{3-(Boc-LPhe)アミノ}プロピル]doデカンアミド(25b): FT-IR (NaCl): 3300 cm-1 (-NH- str.), 3030 cm-1 (aromatic C-H str.), 2928 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2854 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1699 cm-1 and 1683 cm-1 (C=O str.), 1652 cm-1, 1635 cm-1 (aromatic C=C str.). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.215-7.096 (m, 12H), 5.417-5.277 (m, 2H), 4.360-4.328 (d, 2H), 3.356-2.869 (m, 12H), 2.209-2.189 (t, 2H), 1.714-1.463 (m, 6H), 1.351 (s, 18H), 1.244 (s, 16H), 0.885-0.851 (t, 3H). HRMS (m/z): 808.5593 [(M+H) +] (観測), 808.5588 [(M+H) +] (計算).
【０１１７】
実施例1.1.1.3: N,N-ビス-[{3-(Boc-LPhe)アミノ}プロピル]tetraデカンアミド(25c): FT-IR (NaCl): 3301 cm-1 (-NH- str.), 3028 cm-1 (aromatic C-H str.), 2926 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2855 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1699 cm-1 and 1684 cm-1 (C=O str.), 1654 cm-1, 1637 cm-1 (aromatic C=C str.). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.215-7.100 (m, 12H), 5.495-5.345 (m, 2H), 4.352-4.333 (d, 2H), 3.451-2.861 (m, 12H), 2.202-2.182 (t, 2H), 1.644-1.547 (m, 6H), 1.345 (s, 18 H), 1.235 (s, 20 H), 0.879-0.845 (t, 3H). HRMS (m/z): 836.5908[(M+H) +] (観測), 836.5901 [(M+H) +] (計算).
【０１１８】
実施例1.1.1.4: N,N-ビス-[{3-(Boc-LPhe)アミノ}プロピル]hexaデカンアミド(25d): FT-IR (NaCl): 3299 cm-1 (-NH- str.), 3031 cm-1 (aromatic C-H str.), 2927 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2854 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1699 cm-1 and 1684 cm-1 (C=O str.), 1656 cm-1, 1635 cm-1 (aromatic C=C str.). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.211-7.097 (m, 12H), 5.515-5.357 (m, 2H), 4.356-4.337 (d, 2H), 3.425-2.861 (m, 12H), 2.200-2.181 (t, 2H), 1.690-1.435 (m, 6H), 1.343 (s, 18H), 1.233 (s, 24 H), 0.877-0.843 (t, 3H). ). HRMS (m/z): 864.6227 [(M+H) +] (観測), 864.6214 [(M+H) +] (計算).
【０１１９】
実施例1.1.1.5: N,N-ビス-[{3-(Boc-LPhe)アミノ}プロピル]octaデカンアミド(25e): FT-IR (NaCl): 3302 cm-1 (-NH- str.), 3028 cm-1 (aromatic C-H str.), 2927 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2855 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1699 cm-1 and 1684 cm-1 (C=O str.), 1652 cm-1, 1635 cm-1 (aromatic C=C str.). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.245-7.100 (m, 12H), 5.338-5.216 (m, 2H), 4.338-4.319 (d, 2H), 3.484-2.802 (m, 12H), 2.214-2.194 (t, 2H), 1.631-1.3578 (m, 6H), 1.354 (s, 18H), 1.250 (s, 28H), 0.894-0.860 (t, 3H). HRMS (m/z): 892.6535 [(M+H) +] (観測), 892.6527 [(M+H) +] (計算).
【０１２０】
実施例1.1.2: N,N-ビス-[{3-(LPhe)アミノ}プロピル]アルカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(1乃至5): 最初に、1当量の25a乃至25eをDCMに溶解させた。激しく攪拌した溶液に対して、4当量(過量)のトリフルオロ酢酸(TFA)を添加し、RTで12時間攪拌した。その後、反応溶媒及び未使用のTFAを取り除き、純粋な生成物を収率100％で得た。
【０１２１】
実施例1.1.2.1: N,N-ビス-[{3-(LPhe)アミノ}プロピル]デカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(1): FT-IR (NaCl): 3270 cm-1 (-NH- str.), 3034 cm-1 (aromatic C-H str.), 2930 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2859 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1673 cm-1 (C=O str.), 1618 cm-1,1577 cm-1 (aromatic C=C str.). 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 8.473-8.231 (m, 8H), 7.339-7.219 (m, 10H), 3.939 (s, 2H), 3.187-2.889 (m, 12H), 2.200-2.165 (t, 2H), 1.527-1.446 (m, 6H), 1.221 (s, 12H), 0.864-0.830 (t, 3H). HRMS (m/z): 580.4225 [(M+H) +] (観測), 580.4243 [(M+H) +] (計算).
【０１２２】
実施例1.1.2.2: N,N-ビス-[{3-(LPhe)アミノ}プロピル]ドデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(2): FT-IR (NaCl): 3275 cm-1 (-NH- str.), 3034 cm-1 (aromatic C-H str.), 2927 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2855 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1680 cm-1 (C=O str.), 1620 cm-1, 1576 cm-1 (aromatic C=C str.). 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 8.479-8.235 (m, 8H), 7.341-7.218 (m, 10H), 3.940 (s, 2H), 3.171-2.924 (m, 12H), 2.199-2.165 (t, 2H), 1.526-1.444 (m, 6H), 1.221 (s, 16H), 0.865-0.831 (t, 3H). HRMS (m/z): 608.4510 [(M+H) +] (観測), 608.4540 [(M+H) +] (計算).
【０１２３】
実施例1.1.2.3: N,N-ビス-[{3-(LPhe)アミノ}プロピル]テトラデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(3): FT-IR (NaCl): 3275 cm-1 (-NH- str.), 3033 cm-1 (aromatic C-H str.), 2927 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2856 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1679 cm-1 (C=O str.), 1620 cm-1, 1576 cm-1 (aromatic C=C str.). 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 8.506-8.257 (m, 8H), 7.333-7.218 (m, 10H), 3.944 (s, 2H), 3.184-2.905 (m, 12H), 2.197-2.163 (t, 2H), 1.525-1.443 (m, 6H), 1.222 (s, 20H), 0.865-0.831 (t, 3H). HRMS (m/z): 636.4843 [(M+H) +] (観測), 636.4853 [(M+H) +] (計算).
【０１２４】
実施例1.1.2.4: N,N-ビス-[{3-(LPhe)アミノ}プロピル]ヘキサデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(4): FT-IR (NaCl): 3277 cm-1 (-NH- str.), 3034 cm-1 (aromatic C-H str.), 2928 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2857 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1676 cm-1 (C=O str.), 1618 cm-1, 1577 cm-1 (aromatic C=C str.). 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 8.500-8.254 (m, 8H), 7.334-7.218 (m, 10H), 3.944 (s, 2H), 3.202-2.891 (m, 12H), 2.197-2.163 (t, 3H), 1.525-1.444 (m, 6H), 1.226 (s, 24H), 0.866-0.832 (t, 3H). HRMS (m/z): 664.5156 [(M+H) +] (観測), 664.5166 [(M+H) +] (計算).
【０１２５】
実施例1.1.2.5: N,N-ビス-[{3-(LPhe)アミノ}プロピル]オクタデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(5): FT-IR (NaCl): 3275 cm-1 (-NH- str.), 3034 cm-1 (aromatic C-H str.), 2926 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2854 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1679 cm-1 (C=O str.), 1619 cm-1, 1576 cm-1 (aromatic C=C str.). 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 8.500-8.253 (m, 8H), 7.334-7.217 (m, 10H), 3.943 (s, 2H), 3.201-2.891 (m, 12H), 2.196-2.163 (t, 2H), 1.524-1.443 (m, 6H), 1.226 (s, 28H), 0.866-0.832 (t, 3H). HRMS (m/z): 692.5433 [(M+H) +] (観測), 692.5479 [(M+H) +] (計算).
【０１２６】
実施例1.2: N1-(Boc-DPhe)-N3-[{3-(Boc-DPhe)アミノ}プロピル]プロパン-1,3-ジアミン(26)の合成: 約2.3g(2当量、8.67mmol)のN-Boc-D-フェニルアラニンを、約10mLの無水DCMに0℃で溶解した。反応混合物に対して、約4.5mL(6当量、26.01mmol)のDIPEA、その後、約3.3g(2当量、8.67mmol)のHBTUを添加した。次に、約3mLのDMFを反応混合物に添加した。10分後、約0.57g(1当量、4.3mmol)のノルスペルミジン[ビス(3-アミノプロピル)アミン]を滴下した。反応混合物を、48時間0℃で攪拌した。次に、反応溶媒を蒸発させ、残留物を酢酸エチルで希釈した。その後、ワークアップを、最初に1N HCl(25mL、3回)、続いて飽和Na2CO3溶液(25mL、3回)により行った。粗生成物を酢酸エチル層において採取した。最後に、カラムを行い、生成物を収率66％で単離した。FT-IR (NaCl): 3303 cm-1(-NH- str.), 3015 cm-1 (aromatic C-H str.), 2929 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2853 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1699 cm-1 and (C=O str.), 1654 cm-1, 1636 cm-1 (aromatic C=C str.). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.245-7.192 (m, 12H), 5.415 (s, 2H), 4.334-4.328 (d, 2H), 3.377-2.995 (m, 12H), 2.568 (s, 1H), 1.698-1.654 (m, 4H), 1.375 (s, 18H). HRMS (m/z): 626.3901 [(M+H) +] (観測), 626.3918 [(M+H) +] (計算).
【０１２７】
実施例1.2.1: N,N-ビス-[{3-(Boc-DPhe)アミノ}プロピル]ドデカンアミド(27)の合成: 約0.24g(1.5当量、1.2mmol)のドデカン酸を、3mLの無水DCMに0℃で溶解させた。反応混合物において、約0.3mL(4当量、3.2mmol)のDIPEA、その後、約0.46g(1.5当量、1.2mmol)のHBTUを添加した。次に、約1mLのDMFを反応混合物に添加した。10分後、約0.5g(1当量、0.8mmol)の26を滴下し、1mLの無水DCMに溶解させた。反応混合物をRTにして、24時間攪拌した。次に、反応溶媒を蒸発させ、残留物を酢酸エチルで希釈した。その後、ワークアップを、最初に1N HCl(15mL、3回)、続いて飽和Na2CO3溶液(15mL、3回)により行った。粗生成物を酢酸エチル層において採取した。最後に、カラムを行い、純粋な生成物を収率77％で単離した。FT-IR (NaCl): 3303 cm-1 (-NH- str.), 3034 cm-1 (aromatic C-H str.), 2926 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2854 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1697 cm-1 and 1687 cm-1 (C=O str.), 1654 cm-1, 1632 cm-1 (aromatic C=C str.). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.212-7.094 (m, 12H), 5.55-5.442 (m, 2H), 4.353-4.334 (d, 2H), 3.452-2.892 (m, 12H), 2.205-2.185 (t, 2H), 1.647-1.451 (m, 6H), 1.434 (s, 18H), 1.343 (s, 16H), 0.878-0.844 (t, 3H). HRMS (m/z): 808.5590 [(M+H) +] (観測), 808.5588 [(M+H) +] (計算).
【０１２８】
実施例1.2.2: N,N-ビス-[{3-(DPhe)アミノ}プロピル]ドデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(6)の合成: 最初に、1当量の27をDCMに溶解させた。攪拌した溶液に対して、4当量(過量)のトリフルオロ酢酸(TFA)を添加し、RTで12時間攪拌した。その後、反応溶媒及び未使用のTFAを取り除き、純粋な生成物を収率100％で得た。FT-IR (NaCl): 3305 cm-1 (-NH- str.), 3030 cm-1 (aromatic C-H str.), 2929 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2852 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1680 cm-1 (C=O str.), 1620 cm-1, 1576 cm-1 (aromatic C=C str.). 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 8.483-8.240 (m, 8H), 7.345-7.222 (m, 10H), 3.945 (s, 2H), 3.191-2.893 (m, 12H), 2.203-2.169 (t, 2H), 1.531-1.449 (m, 6H), 1.225 (s, 16H), 0.870-0.836 (t, 3H). HRMS (m/z): 608.4527 [(M+H) +] (観測), 608.4540 [(M+H) +] (計算).
【０１２９】
実施例1.3: N1-(Boc-LTrp)-N3-[{3-(Boc-LTrp)アミノ}プロピル]プロパン-1,3-ジアミン(28)の合成: 約4g(2当量、13.14mmol)のN-Boc-L-トリプトファンを、約20mLの無水DCMに0℃で溶解させた。反応混合物において、約7.5mL(6当量、39.4mmol)のDIPEA、その後、約4.99g(2当量、13.143mmol)のHBTUを添加した。次に、約5mLのDMFを反応混合物に添加した。10分後、約0.86g(1当量、6.6mmol)のノルスペルミジン[ビス(3-アミノプロピル)アミン]を反応混合物に滴下した。反応混合物を、48時間0℃で攪拌した。次に、反応溶媒を蒸発させ、残留物を酢酸エチルで希釈した。その後、ワークアップを、最初に1N HCl(50mL、3回)、続いて飽和Na2CO3溶液(50mL、3回)により行った。粗生成物を酢酸エチル層において採取した。最後に、カラムを行い、生成物を収率66％で単離した。FT-IR (NaCl): 3313 cm-1 (-NH- str.), 2957 cm-1 (aromatic C-H str.), 2920 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2848 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1718 cm-1 (C=O str.),1622 cm-1, 1541 cm-1 (aromatic C=C str.). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 9.054 (s, 2H), 7.620- 6.990(m, 10H), 6.609 (m, 2H), 5.480 (s, 2H), 4.309(s, 2H), 3.349-2.997(m, 12H), 2.055 (s, 1H), 1.638-1.529 (m, 4H), 1.482 (s, 18H). HRMS (m/z): 704.4128 [(M+H) +] (観測), 704.4136 [(M+H) +] (計算).
【０１３０】
実施例1.3.1: N,N-ビス-[{3-(Boc-LTrp)アミノ}プロピル]アルカンアミド(29a乃至29b)の合成: 約1.5当量の飽和脂肪酸(C14、C16)を無水DCMに0℃で溶解した。反応混合物において、約4当量のDIPEA、その後、約1.5当量のHBTUを添加した。次に、DMFを反応混合物に添加した。10分後、約1当量の28を滴下し、無水DCMに溶解させた。反応混合物をRTにして、24時間攪拌した。次に、反応溶媒を蒸発させ、残留物を酢酸エチルで希釈した。その後、ワークアップを、最初に1N HCl(3回)、続いて飽和Na2CO3溶液(3回)により行った。粗生成物を酢酸エチル層において採取した。最後に、カラムを行い、純粋な生成物を収率75乃至80％で単離した。
【０１３１】
実施例1.3.1.1: N,N-ビス-[{3-(Boc-LTrp)アミノ}プロピル]テトラデカンアミド(29a): FT-IR (NaCl): 3311 cm-1 (-NH- str.), 2977 cm-1 (aromatic C-H str.), 2926 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2853cm-1 (-CH2- sym. str.), 1695 cm-1 (C=O str.),1658 cm-1, 1630 cm-1 (aromatic C=C str.). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 8.490-8.255 (d, 2H), 7.518- 6.605(m, 12H), 5.269-5.212 (m, 2H), 4.425-4.407 (d, 2H), 3.297-2.837 (m, 12H), 2.111-2.076 (t, 2H), 1.527-1.450 (m, 6H), 1.370 (s, 18H), 1.251 (s, 20H), 0.894-0.861 (t, 3H). HRMS (m/z): 914.6107 [(M+H) +] (観測), 914.6119 [(M+H) +] (計算).
【０１３２】
実施例1.3.1.2: N,N-ビス-[{3-(Boc-LTrp)アミノ}プロピル]ヘキサデカンアミド(29b): FT-IR (NaCl): 3308 cm-1(-NH- str.), 2956 cm-1 (aromatic C-H str.), 2920 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2852cm-1 (-CH2- sym. str.), 1720 cm-1 (C=O str.), 1623 cm-1, 1542 cm-1 (aromatic C=C str.). 1H-NMR (400 MHz,CDCl3) δ/ppm: 8.512-8.289 (d, 2H), 7.484- 6.664 (m, 12H), 5.297-5.224 (d, 2H), 4.423-4.405 (d, 2H), 3.351-2.832 (m, 12H), 2.111-2.092 (t, 2H), 1.551-1.461 (m, 6H).1.364 (s, 18H),1.248 (s, 24H), 0.894-0.860 (t, 3H). HRMS (m/z): 942.6387 [(M+H) +] (観測), 942.6432 [(M+H) +] (計算).
【０１３３】
実施例1.3.2: N,N-ビス-[{3-(LTrp)アミノ}プロピル]アルカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(7、8)の合成: 最初に、1当量の29a及び29bをDCMに溶解させた。激しく攪拌した溶液に対して、4当量(過量)のトリフルオロ酢酸(TFA)を添加し、RTで12時間攪拌した。その後、反応溶媒及び未反応のTFA を取り除き、純粋な生成物7、8を収率100％で得た。
【０１３４】
実施例1.3.2.1: N,N-ビス-[{3-(LTrp)アミノ}プロピル]テトラデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(7): FT-IR (NaCl): 3268 cm-1 (-NH- str.), 3062 cm-1 (aromatic C-H str.), 2925 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2853 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1673 cm-1 (C=O str.), 1618 cm-1, 1578 cm-1 (aromatic C=C str.). 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 11.013-10.666 (m, 2H), 8.548-8.100 (m, 8H), 7.635- 6.979 (m, 10H), 3.902 (s, 2H), 3.219-3.033(m, 12H), 2.193-2.161 (t, 2H), 1.425-1.319 (m, 6H), 1.223(s, 20H), 0.865-0.831 (t, 3H). HRMS (m/z): 714.5039 [(M+H) +] (観測), 714.5071[(M+H) +] (計算).
【０１３５】
実施例1.3.2.2: N,N-ビス-[{3-(LTrp)アミノ}プロピル]ヘキサデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(8): FT-IR (NaCl): 3262 cm-1 (-NH- str.), 3058 cm-1 (aromatic C-H str.), 2924 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2853 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1674 cm-1 (C=O str.), 1618 cm-1, 1578 cm-1 (aromatic C=C str.). 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 10.999-10.657 (m, 2H), 8.523-8.368 (m, 8H), 7.625- 6.977 (m, 10H), 3.418 (s, 2H), 3.215-2.938 (m, 12H), 2.185-2.153 (t, 2H), 1.486-1.312 (m, 6H), 1.217(s, 24H), 0.859-0.825 (t, 3H). HRMS (m/z): 742.5376 [(M+H) +] (観測), 742.5384 [(M+H) +] (計算).
【０１３６】
実施例1.4: N1-(Boc-LLys-Boc)-N3-[{3-(Boc-LLys-Boc)アミノ}プロピル]プロパン-1,3-ジアミン(30)の合成: 約5.75g(2当量、16.6mmol)のN,N-ジ-Boc-L-リジンを、約30mLの無水DCMに0℃で溶解させた。反応混合物において、約8.65mL(6当量、49.8mmol)のDIPEA、その後、約6.30g(2当量、16.6mmol)のHBTUを添加した。次に、約10mLのDMFを反応混合物に添加した。10分後、約1.2g(1当量、8.3mmol)のノルスペルミジン[ビス(3-アミノプロピル)アミン]を反応混合物に滴下した。反応混合物を、48時間0℃で攪拌した。その後、反応溶媒を蒸発させ、残留物を酢酸エチルで希釈した。その後、ワークアップを、最初に1N HCl(50mL、3回)、続いて飽和Na2CO3溶液(50mL、3回)により行った。粗生成物を酢酸エチル層において採取した。最後に、カラムを行い、生成物を収率65％で単離した。FT-IR (NaCl): 3315 cm-1 (-NH- str.), 2929 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2866 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1700 cm-1, 1673 cm-1 (C=O str.). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.475 (s, 2H), 5.521 (s, 2H), 4.786 (s, 2H), 4.034 (s, 2H), 3.514-3.008 (m, 12H), 2.049 (s, 1H), 1.773-1.486 (m, 16H), 1.425 (s, 36H). HRMS (m/z): 788.5493 [(M+H) +] (観測), 788.5497 [(M+H) +] (計算).
【０１３７】
実施例1.4.1: N,N-ビス-[{3-(Boc-LLys-Boc)アミノ}プロピル]アルカンアミド(31a乃至31e)の合成: 約1.5当量の飽和脂肪酸(C10、C12、C14、C16、及びC18)を、無水DCMに0℃で溶解した。約4当量のDIPEA、その後、約1.5当量のHBTUを添加した。次に、DMFを反応混合物に添加した。10分後、約1当量の30を滴下し、無水DCMに溶解させた。反応混合物をRTにして、24時間攪拌した。次に、反応溶媒を蒸発させ、残留物を酢酸エチルで希釈した。その後、ワークアップを、最初に1N HCl(3回)、続いて飽和Na2CO3溶液(3回)により行った。粗生成物を酢酸エチル層において採取した。最後に、カラムを行い、ピューレ生成物(31a乃至31e)を収率75乃至80％で単離した。
【０１３８】
実施例1.4.1.1: N,N-ビス-[{3-(Boc-LLys-Boc)アミノ}プロピル]デカンアミド(31a): FT-IR (NaCl): 3316 cm-1 (-NH- str.), 2928 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2855 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1700 cm-1, 1661 cm-1 (C=O str.). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.320 (s, 2H), 5.364-5.300 (d, 2H), 4.713(s, 2H), 4.152-4.134 (d, 2H), 3.549-2.991(m, 12H), 2.272-2.233 (t, 2H), 1.886-1.461 (m, 18H), 1.419 (s, 36H), 1.249 (s, 12H), 0.882-0.848 (t, 3H). HRMS (m/z): 942.6830 [(M+H) +] (観測), 942.6855 [(M+H) +] (計算).
【０１３９】
実施例1.4.1.2: N,N-ビス-[{3-(Boc-LLys-Boc)アミノ}プロピル]ドデカンアミド(31b): FT-IR (NaCl): 3320 cm-1 (-NH- str.), 2929 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2855 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1695 cm-1, 1661 cm-1 (C=O str.). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm : 7.349 (s, 2H), 5.398-5.331 (d, 2H), 4.728 (s, 2H), 4.151-4.134 (d, 2H), 3.545-2.988 (m, 12H), 2.269-2.231 (t, 2H), 1.737-1.458 (m, 18H), 1.415 (s, 36H), 1.242 (s, 16H), 0.880-0.846 (t, 3H). HRMS (m/z): 970.7135 [(M+H) +] (観測), 970.7168 [(M+H) +] (計算).
【０１４０】
実施例1.4.1.3 N,N-ビス-[{3-(Boc-LLys-Boc)アミノ}プロピル]テトラデカンアミド(31c): FT-IR (NaCl): 3311cm-1 (-NH- str.), 2927 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2855 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1697 cm-1, 1661 cm-1 (C=O str.). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.327 (s, 2H), 5.65-5.302 (d, 2H), 4.710 (s, 2H), 4.156-4.139 (d, 2H), 3.560-2.966 (m, 12H), 2.275-2.236 (t, 2H), 1.667-1.464 (m, 18H), 1.423 (s, 36H), 1.247 (s, 20H), 0.888-0.854 (t, 3H). HRMS (m/z): 998.7462 [(M+H) +] (観測), 998.7481 [(M+H) +] (計算).
【０１４１】
実施例1.4.1.4: N,N-ビス-[{3-(Boc-LLys-Boc)アミノ}プロピル]ヘキサデカンアミド(31d): FT-IR (NaCl): 3337cm-1 (-NH- str.), 2929 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2869 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1697 cm-1, 1661 cm-1 (C=O str.). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.360-7.309 (d, 2H), 5.422-5.351 (d, 2H), 4.750 (s, 2H), 4.139-4.123 (d, 2H), 3.526-2.985 (m, 12H), 2.258-2.220 (t, 2H), 1.714-1.452 (m, 18H), 1.403 (s, 36H), 1.228 (s, 24H), 0.870-0.836 (t, 3H). HRMS (m/z): 1026.7787 [(M+H) +] (観測), 1026.7794 [(M+H) +] (計算).
【０１４２】
実施例1.4.1.5: N,N-ビス-[{3-(Boc-LLys-Boc)アミノ}プロピル]オクタデカンアミド(31e): FT-IR (NaCl): 3321 cm-1 (-NH- str.), 2927 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2853 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1699 cm-1, 1663 cm-1 (C=O str.). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.367-7.310(d, 2H), 5.436-5.372(d, 2H), 4.768(s, 2H), 4.116-4.099 (d, 2H), 3.513-3.055(m, 12H), 2.252-2.216 (t, 2H) 1.722-1.443 (m, 18H), 1.398 (s, 36H), 1.223 (s, 28H), 0.865-0.830 (t, 3H). HRMS (m/z): 1054.8097 [(M+H) +] (観測), 1054.8107 [(M+H) +] (計算).
【０１４３】
実施例1.4.2: N,N-ビス-[{3-(LLys)アミノ}プロピル]アルカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(9乃至13)の合成: 最初に、1当量の31a乃至31eをDCMに溶解させた。激しく攪拌した溶液に対して、4当量(過量)のトリフルオロ酢酸(TFA)を添加し、RTで12時間攪拌した。その後、反応溶媒及び未使用のTFAを取り除き、純粋な生成物9乃至13を収率100％で得た。
【０１４４】
実施例1.4.2.1: N,N-ビス-[{3-(LLys)アミノ}プロピル]デカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(9): FT-IR (NaCl): 3277cm-1 (-NH- str.), 2928 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2858 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1677 cm-1 (C=O str.). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 8.619-7.877(m, 14H), 3.709-3.653 (d, 2H), 3.646-2.760 (m, 12H), 2.241-2.222 (t, 2H), 1.709-1.312 (m, 18H), 1.241 (s, 12H), 0.871-0.837 (t, 3H). HRMS (m/z): 542.4752 [(M+H)+] (観測) , 542.4758 [(M+H)+] (計算).
【０１４５】
実施例1.4.2.2: N,N-ビス-[{3-(LLys)アミノ}プロピル]ドデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(10): FT-IR (NaCl): 3264 cm-1(-NH- str.), 2929 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2869 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1676 (C=O str.). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 8.608-7.862 (m, 14H), 3.709 (s, 2H), 3.274-2.761(m, 12H), 2.254-2.221 (t, 2H), 1.688-1.289 (m, 18H), 1.239 (s, 16H), 0.871-0.837 (t, 3H). HRMS (m/z): 570.5016 [(M+H)+] (観測), 570.5071 [(M+H)+] (計算).
【０１４６】
実施例1.4.2.3: N,N-ビス-[{3-(LLys)アミノ}プロピル]テトラデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(11): FT-IR (NaCl): 3316cm-1 (-NH- str.), 2978 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2867 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1697 cm-1 (C=O str.). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 8.599-7.841(m, 14H), 3.706 (s, 2H), 3.285-2.759 (m, 12H), 2.240-2.220 (t, 2H), 1.686-1.324 (m, 18H), 1.236 (s, 20H), 0.869-0.835 (t, 3H). HRMS (m/z): 598.3578 [(M+H) +] (観測), 598.5384 [(M+H) +] (計算).
【０１４７】
実施例1.4.2.4: N,N-ビス-[{3-(LLys)アミノ}プロピル]ヘキサデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(12): FT-IR (NaCl): 3337cm-1 (-NH- str.), 2979 cm-1, 2929 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2869 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1697 cm-1, 1661 cm-1 (C=O str.). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 8.600-7.842 (d, 14H), 3.706 (s, 2H), 3.288-2.759 (m, 12H), 2.258-2.221 (t, 2H), 1.687-1.325 (m, 18H), 1.237 (s, 24H), 0.870-0.836 (t, 3H). HRMS (m/z): 626.5669 [(M+H) +] (観測), 626.5697 [(M+H) +] (計算).
【０１４８】
実施例1.4.2.5: N,N-ビス-[{3-(LLys)アミノ}プロピル]オクタデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(13): FT-IR (NaCl): 3272 cm-1 (-NH- str.), 2979 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2854 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1676 cm-1 (C=O str.). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 8.599-7.846 (m, 14H), 3.708 (s, 2H), 3.274-3.033 (m, 12H), 2.254-2.220 (t, 2H), 1.687-1.324 (m, 18H), 1.235 (s, 28H), 0.869-0.835 (t, 3H). HRMS (m/z): 654.5973 [(M+H)+] (観測), 654.6010 [(M+H)+] (計算).
【０１４９】
実施例1.5.: N1-(Boc-LOrn-Boc)-N3-[{3-(Boc-LOrn-Boc)アミノ}プロピル]プロパン-1,3-ジアミン(32)の合成: 約5g(2当量、15.04mmol)のN-Boc-L-オルニチンを、約25mLの無水DCMに0℃で溶解させた。反応混合物において、約7.8mL(6当量、45.12mmol)のDIPEA、その後、約5.70g(2当量、15.04mmol)のHBTUを添加した。次に、約6mLのDMFを反応混合物に添加した。10分後、約0.99g(1当量、7.52mmol)のノルスペルミジン[ビス(3-アミノプロピル)アミン]を反応混合物に滴下した。反応混合物を、48時間0℃で攪拌した。次に、反応溶媒を蒸発させ、残留物を酢酸エチルで希釈した。その後、ワークアップを、最初に1N HCl(50mL、3回)、続いて飽和Na2CO3(50mL、3回)溶液により行った。粗生成物を酢酸エチル層において採取した。最後に、カラムを行い、収率66％の生成物を単離した。FT-IR (NaCl): 3311 cm-1 (-NH- str.), 2927 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2856 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1700 cm-1, 1678 cm-1 (C=O str.). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.472 (s, 2H), 5.524 (s, 2H), 4.776 (s, 2H), 4.134 (s, 2H), 3.504-3.018 (m, 12H), 2.139 (s, 1H), 1.765-1.445 (m, 12H), 1.395 (s, 36H). HRMS (m/z): 760.5172 [(M+H) +] (観測), 760.5184 [(M+H) +] (計算).
【０１５０】
実施例1.5.1.: N,N-ビス-[{3-(Boc-LOrn-Boc)アミノ}プロピル]アルカンアミド(33a、33b): 約1.5当量の飽和脂肪酸(C14、C16)を、無水DCMに0℃で溶解させた。約4当量のDIPEA、その後、約1.5当量のHBTUを添加した。次に、DMFを反応混合物に添加した。10分後、約1当量の32を滴下し、無水DCMに溶解させた。反応混合物をRTにして、24時間攪拌した。次に、反応溶媒を蒸発させ、残留物を酢酸エチルで希釈した。その後、ワークアップを、最初に1N HCl(3回)、続いて飽和Na2CO3溶液(3回)により行った。粗生成物を酢酸エチル層において採取した。最後に、カラムを行い、純粋な生成物を収率75乃至80％で単離した。
【０１５１】
実施例1.5.1.1: N,N-ビス-[{3-(Boc-LOrn-Boc)アミノ}プロピル]テトラデカンアミド(33a): FT-IR (NaCl): 3318cm-1 (-NH- str.), 2928 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2854 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1698 cm-1 (C=O str.). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.350 (s, 2H), 5.523-5.548 (d, 2H), 4.879 (s, 2H), 4.199-4.181 (d, 2H), 3.479-3.025 (m,12H), 2.256-2.218 (t, 2H), 1.731-1.491 (m, 14H), 1.397 (s, 36H), 1.224 (s, 20), 0.864-0.8350 (t, 3H). HRMS (m/z): 970.7175 [(M+H)+] (観測), 970.7168 [(M+H)+] (計算).
【０１５２】
実施例1.5.1.2: N,N-ビス-[{3-(Boc-LOrn-Boc)アミノ}プロピル]ヘキサデカンアミド(33b): FT-IR (NaCl): 3318cm-1 (-NH- str.), 2927 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2855 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1700 cm-1 (C=O str.). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm : 7.284 (s, 2H), 5.459-5.387 (d, 2H), 4.849-4.833 (d, 2H), 4.216-4.199 (d, 2H), 3.501-3.040 (m,12H), 2.270-2.232 (t, 2H), 1.767-1.541 (m, 14H), 1.415(s, 36H), 1.241 (s, 24H), 0.882-0.848 (t, 3H). HRMS (m/z): 998.7415 [(M+H)+] (観測), 998.7481 [(M+H)+] (計算).
【０１５３】
実施例1.5.2: N,N-ビス-[{3-(LOrn)アミノ}プロピル]アルカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(14、15)の合成: 最初に、1当量の33a及び33bをDCMに溶解させた。激しく攪拌した溶液に対して、4当量(過量)のトリフルオロ酢酸(TFA)を添加し、RTで12時間攪拌した。その後、反応溶媒及び未反応のTFAを取り除き、純粋な生成物14、15を収率100％で得た。
【０１５４】
実施例1.5.2.1: N,N-ビス-[{3-(LOrn)アミノ}プロピル]テトラデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(14): FT-IR (NaCl): 3266 cm-1 (-NH- str.), 2928 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2855 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1675 cm-1 (C=O str.). 1H-NMR (400 MHz, D2O) δ/ppm: 4.048-4.010 (d, 2H), 3.367-3.043 (m, 12H), 2.373-2.236 (t, 2H), 2.001-1.576 (m, 14H), 1.294 (s, 20H), 0.906-0.873 (t, 3H). HRMS (m/z): 570.5063 [(M+H) +] (観測), 570.5071 [(M+H) +] (計算).
【０１５５】
実施例1.5.2.2: N,N-ビス-[{3-(LOrn)アミノ}プロピル]ヘキサデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(15): FT-IR (NaCl): 3267 cm-1 (-NH- str.), 2924 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2854 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1673 cm-1 (C=O str.). 1H-NMR (400 MHz, D2O) δ/ppm: 4.044-4.011 (d, 2H), 3.369-3.039 (m, 12H), 2.372-2.235 (t, 2H), 2.001-1.579 (m, 14H), 1.298 (s, 24H), 0.911-0.878 (t, 3H). HRMS (m/z): 598.5378 [(M+H)+] (観測), 598.5384 [(M+H)+] (計算).
【０１５６】
実施例1.6: N1-(Boc-DLys-Boc)-N3-[{3-(Boc-DLys-Boc)アミノ}プロピル]プロパン-1,3-ジアミン(34)の合成: 約5g(2当量、14.4mmol)のN,N-ジ-Boc-D-リジンを、約25mLの無水DCMに0℃で溶解させた。反応混合物に対して、約7.5mL(6当量、43.2mmol)のDIPEA、その後、約6.30g(2当量、14.4mmol)のHBTUを添加した。次に、約6mLのDMFを反応混合物に添加した。更に10分後、約0.94g(1当量、8.3mmol)のノルスペルミジン[ビス(3-アミノプロピル)アミン]を反応混合物に滴下した。次に、反応混合物を、48時間0℃で攪拌した。次に、反応溶媒を蒸発させ、残留物を酢酸エチルで希釈した。その後、ワークアップを、最初に1N HCl(50mL、3回)、続いて飽和Na2CO3溶液(50mL、3回)により行った。粗生成物を酢酸エチル層において採取した。最後に、カラムを行い、生成物を収率67％で単離した。FT-IR(NaCl): 3316 cm-1 (-NH- str.), 2931 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2863 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1701 cm-1, 1670 cm-1 (C=O str.). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.475 (s, 2H), 5.521 (s, 2H), 4.786 (s, 2H), 4.034(s, 2H), 3.514-3.008 (m, 12H), 2.049 (s, 1H), 1.773-1.486 (m, 16H), 1.425 (s, 36H). HRMS (m/z): 788.5497 [(M+H) +] (観測), 788.5593 [(M+H) +] (計算).
【０１５７】
実施例1.6.1.: N,N-ビス-[{3-(Boc-DLys-Boc)アミノ}プロピル]アルカンアミド(35a、35b)の合成: 約1.5当量の飽和脂肪酸(C14、C16)を、無水DCMに0℃で溶解した。約4当量のDIPEA、その後、約1.5当量のHBTUを反応混合物に添加した。次に、DMFを反応混合物に添加した。10分後、約1当量の34を無水DCMに溶解させ、反応混合物に滴下した。次に、反応混合物をRTにして、24時間攪拌した。次に、反応溶媒を蒸発させ、残留物を酢酸エチルで希釈した。その後、ワークアップを、最初に1N HCl(3回)、続いて飽和Na2CO3溶液(3回)により行った。粗生成物を酢酸エチル層において採取した。最後に、カラムを行い、ピューレ生成物を収率75乃至80％で単離した。
【０１５８】
実施例1.6.1.1: N,N-ビス-[{3-(Boc-DLys-Boc)アミノ}プロピル]テトラデカンアミド(35a): FT-IR(NaCl): 3311cm-1 (-NH- str.), 2927 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2855 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1697 cm-1, 1661 cm-1 (C=O str.). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm : 7.326 (s, 2H), 5.345-5.288 (d, 2H), 4.708 (s, 2H), 4.158-4.141 (d, 2H), 3.569-2.984 (m, 12H), 2.276-2.237 (t, 2H), 1.747-1.465 (m, 18H), 1.424 (s, 36H), 1.247 (s, 20H), 0.889-0.855 (t, 3H). HRMS (m/z): 998.7415 [(M+H) +] (観測), 998.7481 [(M+H) +] (計算).
【０１５９】
実施例1.6.1.2: N,N-ビス-[{3-(Boc-DLys-Boc)アミノ}プロピル]ヘキサデカンアミド(35b): FT-IR(NaCl): 3311cm-1 (-NH- str.), 2927 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2855 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1697 cm-1, 1661 cm-1 (C=O str.).1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm : 7.361-7.309 (s, 2H), 5.435-5.363 (d, 2H), 4.53 (s, 2H), 4.120 (s, 2H), 3.529-2.978 (m, 12H), 2.256-2.218 (t, 2H), 1.712-1.446 (m, 18H), 1.402 (s, 36H), 1.226 (s, 20H), 0.868-0.834 (t, 3H). HRMS (m/z): 1026.7742 [(M+H) +] (観測), 1026.7794 [(M+H) +] (計算).
【０１６０】
実施例1.6.2: N,N-ビス-[{3-(DLys)アミノ}プロピル]アルカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(16、17)の合成: 最初に、1当量の35a及び35bをDCMに溶解させた。激しく攪拌した溶液に対して、4当量(過量)のトリフルオロ酢酸(TFA)を添加し、RTで12時間攪拌した。その後、反応溶媒及び未反応のTFAを取り除き、純粋な生成物16、17を収率100％で得た。
【０１６１】
実施例1.6.2.1: N,N-ビス-[{3-(DLys)アミノ}プロピル]テトラデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(16): FT-IR (NaCl): 3268 cm-1 (-NH- str.), 2927 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2857 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1676 cm-1 (C=O str.). 1H-NMR (400 MHz, D2O) δ/ppm: 3.983-3.976 (m, 2H), 3.352-2.984 (m, 12H), 2.350-2.314 (t, 2H), 1.923-1.445 (m, 18H), 1.280 (s, 24H), 0.894-0.862 (t, 3H). HRMS (m/z): 598.5378 [(M+H) +] (観測), 598.5384 [(M+H) +] (計算).
【０１６２】
実施例1.6.2.2: N,N-ビス-[{3-(DLys)アミノ}プロピル]ヘキサデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(17): FT-IR (NaCl): 3272 cm-1 (-NH- str.), 2926 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2855 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1677 cm-1 (C=O str.). 1H-NMR (400 MHz, D2O) δ/ppm: 4.007-3.979 (m, 2H), 3.370-3.002 (m, 12H), 2.372-2.336 (t, 2H), 1.924-1.462 (m, 18H), 1.300 (s, 24H), 0.913-0.880 (t, 3H). HRMS (m/z): 626.5688 [(M+H) +] (観測), 626.5697 [(M+H) +] (計算).
【０１６３】
実施例1.7: N,N-ビス-(プロピルニトリル)オクチルアミン(36)の合成: 最初に、約5g(1当量、38.68mmol)のN-オクチルアミンを、約25mLの無水MeOHに0℃で溶解させた。反応混合物に対して、約15.2mL(6当量、232.08mmol)のアクリロニトリルを30分間で滴下した。次に、反応混合物をRTにして、48時間攪拌を続けた。反応溶媒及び未使用のアクリロニトリルを、ロータリーエバポレータ、最終的には高真空ポンプ及びオーブンを用いて取り除き、純粋な36を収率100％で得た。FT-IR (NaCl): 2926 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2856 cm-1 (-CH2- sym. str.), 2249 cm-1 (-CN str.). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 2.873-2.839 (t, 4H), 2.536-2.499 (t, 2H), 2.477-2.442 (t, 4H), 1.460-1.281 (m, 2H), 1.277 (s, 10H), 0.897-0.862 (t, 3H).
【０１６４】
実施例1.7.1: N1-(3-アミノプロピル)-N1-オクチルプロパン-1,3-ジアミントリス(トリフルオロアセタート)(37)の合成: 約2.88g(2当量、75.88mmol)の水素化アルミニウムリチウム(LAH)を、約20mLの新鮮な無水ジエチルエーテル(Et2O)に0℃で窒素雰囲気下において懸濁させた。次に、約8.93g(1当量、37.94mmol)の36を約10mLの無水Et2Oに溶解させ、LAH懸濁液に滴下注入した。反応混合物をRTにして、2時間攪拌した。次に、反応混合物を再び0℃にして、これにミリポア水をゆっくりと滴下した。未反応LAHを完全に破壊した後、ワークアップを水及びEt2Oにより行った。有機層(Et2O)を数回採取し、最終的に、無水硫酸ナトリウム(Na2SO4)上で乾燥させた。その後、乾燥させた粗生成物を得た。次に、粗生成物を20mLの4N HClに懸濁させ、2時間攪拌した。再び水及びEt2Oを用いてワークアップを行い、水層を採取し、ロータリーエバポレータを用いて体積を5mLまで減少させた。最後に、残水を凍結乾燥機により取り除き、純粋な37を収率60％で得た。FT-IR (NaCl): 3357 cm-1 (-NH- str.), 2927 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2854 cm-1 (-CH2- sym. str.). 1H-NMR (400 MHz, D2O) δ/ppm: 3.349-3.307 (t, 4H), 3.266-3.225 (t, 2H), 3.138-3.099 (t, 4H), 2.195-2.115 (m, 4H), 1.756-1.700 (m, 2H), 1.299(s, 10H), 0.898-0.865 (t, 3H). HRMS (m/z): 244.2774 [(M+H) +] (観測), 244.2753 [(M+H) +] (計算).
【０１６５】
実施例1.7.2: N1-オクチル-N3-(Boc-LAA)-N1-[3-{(Boc-LAA)アミノ}プロピル]プロパン-1,3-ジアミン(38a乃至38c): 約2当量のそれぞれのN-Boc-アミノ酸(N-Boc-L-フェニルアラニン、N-Boc-L-アラニン、及びN,N-ジ-Boc-L-リジン)を、無水DCMに0℃で溶解した。約3当量のDIPEAを反応混合物に添加し、その後、約2当量のHBTUを添加した。次に、DMFを反応混合物に添加した。10分後、約1当量の37を滴下し、無水DCM及び更に3当量のDIPEAに溶解させた。反応混合物をRTにして、48時間攪拌した。次に、反応溶媒を蒸発させ、残留物を酢酸エチルで希釈した。その後、ワークアップを、最初に1N HCl(3回)、続いて飽和Na2CO3溶液(3回)により行った。粗生成物を酢酸エチル層において採取した。最後に、カラムを行い、ピューレ生成物を収率70-75％で単離した。
【０１６６】
実施例1.7.2.1: N1-オクチル-N3-(Boc-LPhe)-N1-[3-{(Boc-LPhe)アミノ}プロピル]プロパン-1,3-ジアミン(38a): FT-IR (NaCl): 3264 cm-1 (-NH- str.), 3033 cm-1 (aromatic C-H str.), 2930 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2856 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1700 cm-1 (C=O str.), 1674 cm-1 (aromatic C=C str.). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.219-7.190 (m, 12H), 5.451-5.258 (m, 2H), 4.363-4.348 (d, 2H), 3.375-2.884 (m, 14H), 1.852-1.328 (m, 6H), 1.278 (s, 18H), 1.265 (s, 10H), 0.881-0.847 (t, 3H).
【０１６７】
実施例1.7.2.2: N1-オクチル-N3-(Boc-LAla)-N1-[3-{(Boc-LAla)アミノ}プロピル]プロパン-1,3-ジアミン(38b): FT-IR (NaCl): 3294 cm-1 (-NH- str.), 2929 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2856 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1700 cm-11659 cm-1 (C=O str.). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.301 (s, 2H), 5.542 (s, 2H), 4.191 (s, 2H), 3.489 -3.191 (m, 4H), 2.613-2.553(m, 6H), 1.723-1.674 (d, 6H), 1.437 (s, 18H), 1.369 (s, 6H), 1.269 (s, 10H), 0.895-0.861 (t, 3H).
【０１６８】
実施例1.7.2.3: N1-オクチル-N3-(Boc-LLys)-N1-[3-{(Boc-LLys)アミノ}プロピル]プロパン-1,3-ジアミン(38c): FT-IR (NaCl): 3321 cm-1 (-NH- str.), 2928 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2856 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1700 cm-1 1664 cm-1 (C=O str.). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.146 (s, 2H), 5.295-5224 (d, 2H), 4.695-4.507 (d, 2H), 4.157-4.076 (d, 2H), 3.600-3.098 (m, 14H), 2.019-1.490 (m, 18H), 1.434 (s, 36H), 1.272 (s, 10H), 0.898-0.871 (t, 3H).
【０１６９】
実施例1.7.3.1: N1-オクチル-N3-(Boc-LPhe)-N1-[3-{(Boc-LPhe)アミノ}プロピル]プロパン-1,3-ジアミントリス(トリフルオロアセタート)(18): FT-IR (NaCl): 3222 cm-1 (-NH- str.), 3030 cm-1 (aromatic C-H str.), 2930 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2856 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1674 cm-1 (C=O str.), 1574 cm-1 (aromatic C=C str.). 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 8.557-8.197 (m, 7H), 7.344-7.222 (m, 10H), 3.946-3.932 (d, 2H), 3.167-2.861 (m, 14H), 1.617-1.525 (m, 6H), 1.265 (s, 10H), 0.870-0.839 (t, 3H). HRMS (m/z): 538.4098 [(M+H) +] (観測), 538.4121 [(M+H) +] (計算).
【０１７０】
実施例1.7.3.2: N1-オクチル-N3-(Boc-LAla)-N1-[3-{(Boc-LAla)アミノ}プロピル]プロパン-1,3-ジアミントリス(トリフルオロアセタート)(19): FT-IR (NaCl): 3210 cm-1 (-NH- str.), 2928 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2857 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1675 cm-1 (C=O str.). 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 8.714-8.219 (d, 7H), 3.836-3.819 (d, 2H), 3.210-2.850 (m, 14H), 1.907-1.618 (m, 6H), 1.349 (s, 6H) 1.269 (s, 10H), 0.882-0.848 (t, 3H). HRMS (m/z): 386.3406 [(M+H) +] (観測), 386.3495 [(M+H) +] (計算).
【０１７１】
実施例1.7.3.3: N1-オクチル-N3-(Boc-LLys)-N1-[3-{(Boc-LLys)アミノ}プロピル]プロパン-1,3-ジアミントリス(トリフルオロアセタート)(20): FT-IR (NaCl): 3210 cm-1 (-NH- str.), 2926 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2856 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1680 cm-1 (C=O str.). 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 8.691-7.877 (m, 13H), 3.731-3.716 (d, 2H), 3.700-2.737 (m, 14H), 1.801-1.341 (m, 18H), 1.280 (s, 10H), 0.886-0.852 (t, 3H). HRMS (m/z): 500.4658 [(M+H) +] (観測), 500.4652 [(M+H) +] (計算).
【０１７２】
実施例1.8: N,N-ビス-[{3-(LPhe)アミノ}プロピル]α-ナフチルアセトアミドビス(トリフルオロアセタート)(21)の合成: 約2.23g(1.5当量、1.2mmol)のα-ナフチル酢酸を、約4mLの無水DCMに0℃で溶解させた。反応混合物に対して、約0.63mL(4.5当量、3.56mmol)のDIPEA、その後、約0.45(1.5当量、1.2mmol)のHBTUを添加した。次に、約1mLのDMFを反応混合物に添加した。10分後、約0.5g(1当量、8.3mmol)の24を反応混合物に滴下し、約0.5mLの無水DCMに溶解させた。反応混合物を、48時間0℃で攪拌した。その後、反応溶媒を蒸発させ、残留物を酢酸エチルで希釈した。その後、ワークアップを、最初に1N HCl(10mL、3回)、続いて飽和Na2CO3溶液(10mL、3回)により行った。粗生成物を酢酸エチル層において採取した。次に、酢酸エチルをロータリーエバポレータにより取り除き、粗生成物を2mLのDCMに再び溶解させた後、2mLのトリフルオロ酢酸(TFA)を溶液に添加した。12時間後、反応溶媒及び未使用のTFAを、ロータリーエバポレータ、最終的には高真空ポンプを用いて取り除いた。その後、これをミリポア水に溶解させ、HPLCを行って、純粋な21を収率75％で得た。FT-IR(NaCl): 3315 cm-1 (-NH- str.), 2929 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2866 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1700 cm-1, 1673 cm-1 (C=O str.). 1H-NMR (400 MHz, D2O) δ/ppm: 7.887-7.118 (m, 17H), 4.105-4,073 (m, 2H), 3.980-3.969 (d, 2H), 3.200-2.891 (m, 12H), 1.498-1.446 (m, 4H). HRMS (m/z): 594.3410 [(M+H) +] (観測), 594.3444 [(M+H) +] (計算).
【０１７３】
実施例1.9: N1-LPhe-N3-[{3-(LPhe)アミノ}プロピル]プロパン-1,3-ジアミントリス(トリフルオロアセタート)(22)の合成: 最初に、1当量の24をDCMに溶解させた。激しく攪拌した溶液に対して、4当量(過量)のトリフルオロ酢酸(TFA)を添加し、RTで12時間攪拌した。その後、反応溶媒及び未使用のTFAを取り除き、純粋な生成物を収率100％で得た。FT-IR (NaCl): 3273 cm-1 (-NH- str.), 3036 cm-1 (aromatic C-H str.), 2924 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2857 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1678 cm-1 (C=O str.), 1617 cm-1, 1579 cm-1 (aromatic C=C str.). 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.502-8.242 (m, 10H), 7.360-7.214 (m, 10H), 3.927-3.912 (d, 2H), 3.171-2.719 (m, 12H), 1.644-1.614 (m, 4H). HRMS (m/z): 426.2879 [(M+H) +] (観測), 426.2869 [(M+H) +] (計算).
【０１７４】
実施例1.10: N1-LLys-N3-[{3-(LLys)アミノ}プロピル]プロパン-1,3-ジアミントリス(トリフルオロアセタート)(23)の合成: 最初に、1当量の30をDCMに溶解させた。激しく攪拌した溶液に対して、4当量(過量)のトリフルオロ酢酸(TFA)を添加し、RTで12時間攪拌した。その後、反応溶媒及び未使用のTFAを取り除き、純粋な生成物を収率100％で得た。FT-IR (NaCl): 3321 cm-1 (-NH- str.), 2927 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2846 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1710 cm-1, 1678 cm-1 (C=O str.). 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 8.613-7.866 (m, 16H), 4.011 (s, 2H), 3.512-3.014 (m, 12H), 1.713-1.416 (m, 16H). HRMS (m/z): 388.3409 [(M+H) +] (観測), 388.3400 [(M+H) +] (計算). 
【０１７５】
実施例1.11: N,N-ビス-[{3-(Boc-LLys-Boc)アミノ}プロピル]アルケンアミド(41a、41b)の合成: 約1.5当量のオレイン酸及びリノール酸を、無水DCMに0℃で溶解した。約4当量のDIPEA、その後、約1.5当量のHBTUを添加した。次に、DMFを反応混合物に添加した。10分後、約1当量の30を滴下し、無水DCMに溶解させた。反応混合物をRTにして、24時間攪拌した。次に、反応溶媒を蒸発させ、残留物を酢酸エチルで希釈した。その後、ワークアップを、最初に1N HCl(3回)、続いて飽和Na2CO3溶液(3回)により行った。粗生成物を酢酸エチル層において採取した。最後に、カラムを行い、ピューレ生成物(41a、41b)を収率75乃至80％で単離した。
【０１７６】
実施例1.11.1.1: N,N-ビス-[{3-(Boc-LLys-Boc)アミド}プロピル]オレアミド(41a): 収率77％、FT-IR (NaCl): 3321 cm-1 (-NH- str.), 2927 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2853 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1699 cm-1, 1663 cm-1 (C=O str.). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.359 (s, 2H), 5.481-5.292 (m, 4H), 4.764 (s, 2H), 4.130-4.117 (t, 2H), 3.436-3.049 (m, 12H), 2.250-2.212 (t, 2H), 1.980-1.949 (t, 4H), 1.717-1.438 (m, 18H), 1.394 (s, 36H), 1.2267-1.232 (bs, 20H), 0.861-0.827 (t, 3H); HRMS (m/z): 1052.7944 [(M+H)+] (観測), 1052.7950 [(M+H)+] (計算).
【０１７７】
実施例1.11.1.2: N,N-ビス-[{3-(Boc-LLys-Boc)アミド}プロピル]リノールアミド(41b): 収率76％、FT-IR (NaCl): 3321 cm-1 (-NH- str.), 2927 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2853 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1699 cm-1, 1663 cm-1 (C=O str.); 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.348 (s, 2H), 5.459-5.257 (m, 6H), 4.760 (s, 2H), 4.115 (t, 2H), 3.514-2.973 (m, 12H), 2.750-2.718 (t, 2H), 2.251-2.212 (t, 2H), 2.038-1.987 (m, 4H), 1.704-1.442 (m, 18H), 1.394 (s, 36H), 1.237 (bs, 14H), 0.871-0.836 (t, 3H); HRMS (m/z): 1050.7785 [(M+H)+] (観測), 1050.7794 [(M+H)+] (計算).
【０１７８】
実施例1.11.2: N,N-ビス-[{3-(LLys)アミド}プロピル]アルケンアミドテトラキス(トリフルオロアセタート)(39、40)の合成: 約1当量の41a及び41bを、DCM(3mL)に溶解させた。激しく攪拌した溶液に対して、4当量(過量)のトリフルオロ酢酸(TFA)を添加し、RTで12時間攪拌した。その後、溶媒及び未使用のTFAを取り除くことで、純粋な生成物が収率100％で得られた。
【０１７９】
実施例1.11.2.1: N,N-ビス-[{3-(LLys)アミド}プロピル]オレアミドテトラキス(トリフルオロアセタート)(39): FT-IR (NaCl): 3272 cm-1 (-NH- str.), 2979 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2854 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1676 cm-1 (C=O str.). 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 8.621-7.884 (m, 14H), 3.704 (t, 2H), 3.606 (m, 2H), 3.245-2.755 (m, 12H), 2.245-2.212 (t, 2H), 1.684-1.224 (m, 42H), 0.854-0.821 (t, 3H). HRMS (m/z): 652.5852 [(M+H)+] (観測), 652.5853 [(M+H)+] (計算).
【０１８０】
実施例1.11.2.2: N,N-ビス-[{3-(LLys)アミド}プロピル]リノールアミドテトラキス(トリフルオロアセタート)(40): FT-IR (NaCl): 3272 cm-1 (-NH- str.), 2979 cm-1 (-CH2- asym. str.), 2854 cm-1 (-CH2- sym. str.), 1676 cm-1 (C=O str.); 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 8.605-7.850 (m, 14H), 5.500-5.050 (m, 2H), 3.708 (t, 2H), 3.253-2.758 (m, 14H), 2.237-2.220 (t, 2H), 2.026-1.954 (m, 2H), 1.687-1.240 (m, 36H), 0.850 (t, 3H). HRMS (m/z): 650.5684 [(M+H) +] (観測), 650.5697 [(M+H) +] (計算).
【０１８１】
実施例1.12: N1-Boc-N3-(3-(Boc-アミノ)プロピル)プロパン-1,3-ジアミン(66): 約1当量のノルスペルミジンをMeOH(50mL)に溶解させ、溶液を-80℃で保管した。1.5当量のジ-tert-ブチルジカーボネート(Boc2O)をMeOH(50mL)に溶解させ、反応混合物に滴下した。反応を1時間-80℃で継続させた。その後、反応混合物がRTになるようにした。MeOHを減圧下で取り除き、シリカゲル(60乃至120メッシュ)上でのカラムクロマトグラフィーにより、メタノール及びクロロホルム(7:93)を溶離剤として用いて精製することにより、生成物が収率65％で得られた。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 5.182 (s, 2H), 3.190-3.175 (m, 4H), 2.649-2.616 (m, 4H), 1.860 (s, 1H), 1.666-1.602 (m, 4H), 1.417 (s, 18H).
【０１８２】
実施例1.12.1: N,N-ビス(3-(Boc-アミノ)プロピル)アルカンアミド(67a乃至67c): 約1.5当量の飽和脂肪酸(ドデカン酸、テトラデカン酸、又はヘキサデカン酸)を、無水DCM(12mL)に0℃で溶解した。反応混合物において、4当量のN,N-ジイソプロピルエチルアミン(DIPEA)を添加し、その後、1.5当量のN,N,N’,N’-テトラメチル-O-(1H-ベンゾトリアゾール-1-イル)ウロニウムヘキサフルオロホスファート(HBTU)を添加した。次に、DMF(3mL)を反応混合物に添加した。10分後、無水DCM(1mL)中の1当量の66を滴下した。反応混合物をRTにして、24時間攪拌した。溶媒を蒸発させ、残留物を酢酸エチルで希釈した(50mL)。その後、ワークアップを、最初に1N HCl(3回)、続いて飽和Na2CO3溶液(3回)により行った。粗生成物を酢酸エチル層において抽出した。最後に、シリカゲル(60乃至120メッシュ)上でのカラムクロマトグラフィーにより、比率の異なるメタノール及びクロロホルムを溶離剤として用いて精製を完了することにより、67a乃至67cが収率75乃至80％で得られた。
【０１８３】
実施例1.12.1.1: N,N-ビス(3-(Boc-アミノ)プロピル)ドデカンアミド(67a): 収率80％、1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 5.379-4.629 (d, 2H), 3.400-3.029 (m, 8H), 2.296-2.258 (t, 2H), 1.764-1.594 (m, 6H), 1.422 (s, 18H), 1.249 (m, 16H), 0.887-0.853 (t, 3H).
【０１８４】
実施例1.12.1.2: N,N-ビス(3-(Boc-アミノ)プロピル)テトラデカンアミド(67b): 収率75％、1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 5.377-4.643 (d, 2H), 3.400-3.030 (m, 8H), 2.299-2.261 (t, 2H), 1.774-1.592 (m, 6H), 1.422 (s, 18H), 1.246 (m, 20H), 0.887-0.853 (t, 3H).
【０１８５】
実施例1.12.1.3: N,N-ビス(3-(Boc-アミノ)プロピル)ヘキサデカンアミド(67c): 収率76％、1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 5.377-4.643 (d, 2H), 3.400-3.030 (m, 8H), 2.299-2.261 (t, 2H), 1.774-1.592 (m, 6H), 1.422 (s, 18H), 1.246 (m, 24H), 0.887-0.853 (t, 3H).
【０１８６】
実施例1.17.2: N,N-ビス(3-アミノプロピル)アルカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(68a乃至68c): 約1当量の67a乃至67cをDCM(3mL)に溶解した。激しく攪拌した溶液に対して、4当量(過量)のトリフルオロ酢酸(TFA)を添加し、混合物をRTで12時間攪拌した。溶媒及び未使用のTFAを取り除くことで、純粋な化合物68a乃至68cが収率100％で得られた。
【０１８７】
実施例1.12.2.1: N,N-ビス(3-アミノプロピル)ドデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(68a): 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 7.931-7.797 (d, 6H), 3.326-3.268 (m, 4H), 2.832-2.688 (m, 4H), 2.299-2.262 (t, 2H), 1.821-1.693 (m, 6H), 1.502-1.470 (m, 2H), 1.242 (m, 16H), 0.871-0.837 (t, 3H). HRMS (m/z): 314.3172 [(M+H)+] (観測), 314.3171 [(M+H)+] (計算).
【０１８８】
実施例1.12.2.2: N,N-ビス(3-アミノプロピル)テトラデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(68b): 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 7.966-7.825 (d, 6H), 3.328-3.269 (m, 4H), 2.851-2.710 (m, 4H), 2.297-2.260 (t, 2H), 1.787-1.713 (m, 4H), 1.483 (m, 2H), 1.234 (m, 20H), 0.867-0.833 (t, 3H). HRMS (m/z): 342.3482 [(M+H)+] (観測), 342.3484 [(M+H)+] (計算).
【０１８９】
実施例1.12.2.3: N,N-ビス(3-アミノプロピル)ヘキサデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(68c): 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 7.890-7.765 (d, 6H), 3.328-3.272 (m, 4H), 2.851-2.713 (m, 4H), 2.304-2.267 (t, 2H), 1.801-1.695 (m, 4H), 1.491 (m, 2H), 1.241 (m, 24H), 0.875-0.840 (t, 3H); HRMS (m/z): 370.3787 [(M+H)+] (観測), 370.3797 [(M+H)+] (計算).
【０１９０】
実施例1.13.1: N,N-ビス-[{3-(Boc-Gly)アミド}プロピル]アルカンアミド(69a乃至69c): 約2.4当量のN-Boc-グリシンを、無水DCM(12mL)に0℃で溶解させた。反応混合物において、6当量のDIPEA、その後、2.4当量のHBTUを添加した。次に、DMF(3mL)を反応混合物に添加した。10分後、無水DCM(1mL)中の1当量の68a乃至68cを滴下した。反応混合物をRTにして、48時間攪拌した。溶媒を蒸発させ、残留物を酢酸エチルで希釈した(50mL)。その後、ワークアップを、最初に1N HCl(3回)、続いて飽和Na2CO3溶液(3回)により行った。粗生成物を酢酸エチル層において抽出した。最後に、シリカゲル(60乃至120メッシュ)上でのカラムクロマトグラフィーにより、メタノール及びクロロホルムを溶離剤として用いて精製を完了することにより、69a乃至69cが収率65乃至70％で得られた。
【０１９１】
実施例1.13.1.1: N,N-ビス-[{3-(Boc-Gly)アミド}プロピル]ドデカンアミド(69a): 収率:67％、1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.277-6.995 (s, 2H), 5.609 (s, 2H), 3.746-3.732 (d, 4H), 3.316-3.152 (m, 8H), 2.259-2.221 (t, 2H), 1.757-1.542 (m, 6H), 1.403 (s, 18H), , 1.217 (bs, 16H), 0.853-0.819 (t, 3H). HRMS (m/z): 628.4653 [(M+H)+] (観測), 628.4649 [(M+H)+] (計算).
【０１９２】
実施例1.13.1.2: N,N-ビス-[{3-(Boc-Gly)アミド}プロピル]テトラデカンアミド(69b): 収率:68％、1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.225-6.874 (s, 2H), 5.520 (s, 2H), 3.766-3.751 (d, 4H), 3.338-3.160 (m, 8H), 2.277-2.239 (t, 2H), 1.774-1.564 (m, 6H), 1.425 (s, 18H), 1.234 (bs, 3H). HRMS (m/z): 656.4957 [(M+H) +] (観測), 656.4962 [(M+H) +] (計算)
【０１９３】
実施例1.13.1.3: N,N-ビス-[{3-(Boc-Gly)アミド}プロピル]ヘキサデカンアミド(69c): 収率:66％、1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.229-6.874 (s, 2H), 5.511 (s, 2H), 3.769-3.754 (t, 2H), 3.340-3.163 (m, 8H), 2.278-2.240 (t, 2H), 1.775-1.583 (m, 6H), 1.427 (s, 18H), 1.234 (bs, 24H), 0.875-0.841 (t, 3H). HRMS (m/z): 684.5290 [(M+H) +] (観測), 684.5275 [(M+H) +] (計算).
【０１９４】
実施例1.13.2: N,N-ビス-[{3-(Gly)アミド}プロピル]アルカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(42、43、44): 約1当量の69a乃至69cをDCM(3mL)に溶解させ。激しく攪拌した溶液に対して、4当量(過量)のトリフルオロ酢酸(TFA)を添加し、RTで12時間攪拌した。その後、溶媒及び未使用のTFAを取り除くことにより、生成物が収率100％で得られた。
【０１９５】
実施例1.13.2.1: N,N-ビス-[{3-(Gly)アミド}プロピル]ドデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(42): 1H-NMR (100MHz, DMSO-d6); δ/ppm: 8.482-8.073 (s, 8H), 3.536-3.366 (s, 4H), 3.251-3.086 (m, 8H), 2.254-2.217 (t, 2H), 1.675-1.577 (m, 6H), 1.237 (bs, 16H), 0.868-0.834 (t, 3H). HRMS (m/z): 428.3588 [(M+H)+] (観測), 428.3601 [(M+H)+] (計算).
【０１９６】
実施例1.13.2.2: N,N-ビス-[{3-(Gly)アミド}プロピル]テトラデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(43): 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 8.449-8.053 (s, 8H), 3.532-3.527 (s, 4H), 3.355-3.070 (m, 8H), 2.254-2.218 (t, 2H), 1.657-1.578 (m, 6H), 1.236 (bs, 20H), 0.852-0.835 (t, 3H). HRMS (m/z): 456.3915 [(M+H)+] (観測), 456.3914 [(M+H)+] (計算).
【０１９７】
実施例1.13.2.3: N,N-ビス-[{3-(Gly)アミド}プロピル]ヘキサデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(44): 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 8.460-8.071 (s, 8H), 3.534-3.527 (s, 4H), 3.333-3.070 (m, 8H), 2.252-2.218 (t, 2H), 1.657-1.595 (m, 6H), 1.235 (bs, 24H), 0.851-0.835 (t, 3H). HRMS (m/z): 484.4231 [(M+H)+] (観測), 484.4227 [(M+H)+] (計算).
【０１９８】
実施例1.14.1: N,N-ビス-[{3-(Boc-LAla)アミド}プロピル]アルカンアミド(70a乃至70c): 約2.4当量のN-Boc-L-アラニンを無水DCM(12mL)に0℃で溶解させた。反応混合物において、6当量のDIPEA、その後、2.4当量のHBTUを添加した。次に、DMF(3mL)を反応混合物に添加した。10分後、無水DCM(1mL)中の1当量の68a乃至68cを滴下した。反応混合物をRTにして、48時間攪拌した。溶媒を蒸発させ、残留物を酢酸エチルで希釈した(50mL)。その後、ワークアップを、最初に1N HCl(3回)、続いて飽和Na2CO3溶液(3回)により行った。粗生成物を酢酸エチル層において抽出した。最後に、シリカゲル(60乃至120メッシュ)上でのカラムクロマトグラフィーにより、メタノール及びクロロホルムを溶離剤として用いて精製を完了することにより、70a乃至70cが、収率65乃至70％で得られた。
【０１９９】
実施例1.14.1.1: N,N-ビス-[{3-(Boc-LAla)アミド}プロピル]ドデカンアミド(70a): 収率:65％、1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.334-7.200 (d, 2H), 5.385-5.266 (m, 2H), 4.212-4.197 (d, 2H), 3.450-3.033 (m, 8H), 2.267-2.229 (t, 2H), 1.757-1.567 (m, 6H), 1.412 (s, 18H), 1.332-1.315 (d, 6H), 1.234 (bs, 16H), 0.872-0.838 (t, 3H). HRMS (m/z): 656.4949 [(M+H)+] (観測), 656.4962 [(M+H)+] (計算).
【０２００】
実施例1.14.1.2: N,N-ビス-[{3-(Boc-LAla)アミド}プロピル]テトラデカンアミド(70b): 収率:69％、1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.334-7.211 (d, 2H), 5.387-5.282 (m, 2H), 4.207 (s, 2H), 3.448-3.033 (m, 8H), 2.264-2.227 (t, 2H), 1.734-1.567 (m, 6H), 1.409 (s, 18H), 1.329-1.312 (d, 6H), 1.229 (bs, 20H), 0.870-0.836 (t, 3H). HRMS (m/z): 684.5241 [(M+H)+] (観測), 684.5275 [(M+H)+] (計算).
【０２０１】
実施例1.14.1.3: N,N-ビス-[{3-(Boc-LAla)アミド}プロピル]ヘキサデカンアミド(70c): 収率:68％、1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.335-7.199 (d, 2H), 5.387-5.260 (m, 2H), 4.213-4.198 (d, 2H), 3.455-3.031 (m, 8H), 2.268-2.230 (t, 2H), 1.744-1.722 (m, 6H), 1.413 (s, 18H), 1.333-1.316 (d, 6H), 1.232 (bs, 24H), 0.875-0.840 (t, 3H). HRMS (m/z): 712.5558 [(M+H)+] (観測), 712.5558 [(M+H)+] (計算).
【０２０２】
実施例1.14.2: N,N-ビス-[{3-(LAla)アミド}プロピル]アルカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(45、46、47): 約1当量の70a乃至70cをDCM(3mL)に溶解させた。激しく攪拌した溶液に対して、4当量(過量)のトリフルオロ酢酸(TFA)を添加し、RTで12時間攪拌した。その後、溶媒及び未使用のTFAを取り除くことにより、生成物が収率100％で得られた。
【０２０３】
実施例1.14.2.1: N,N-ビス-[{3-(LAla)アミド}プロピル]ドデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(45): 1H-NMR (100MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 8.417-8.084 (s, 8H), 3.793-3.776 (t, 2H), 3.247-3.037 (m, 8H), 2.284-2.212 (t, 2H), 1.660-1.472 (m, 6H), 1.347-1.333 (d, 6H), 1.237 (bs, 16H), 0.871-0.837 (t, 3H). HRMS (m/z): 456.3847 [(M+H)+] (観測), 456.3914 [(M+H)+] (計算).
【０２０４】
実施例1.14.2.2: N,N-ビス-[{3-(LAla)アミド}プロピル]テトラデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(46): 1H-NMR (100MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 8.531-8.130 (s, 8H), 3.817-3.785 (t, 2H), 3.243-3.035 (m, 8H), 2.244-2.209 (t, 2H), 1.675-1.466 (m, 6H), 1.346-1.333 (d, 6H), 1.232 (bs, 20H), 0.866-0.832 (t, 3H). HRMS (m/z): 484.4103 [(M+H)+] (観測), 484.4227 [(M+H)+] (計算).
【０２０５】
実施例1.14.2.3: N,N-ビス-[{3-(LAla)アミド}プロピル]ヘキサデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(47): 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 8.460-8.071 (s, 8H), 3.534-3.527 (s, 4H), 3.333-3.070 (m, 8H), 2.252-2.218 (t, 2H), 1.657-1.595 (m, 6H), 1.235 (bs, 24H), 0.851-0.835 (t, 3H). HRMS (m/z): 512.4410 [(M+H)+] (観測), 512.4540 [(M+H)+] (計算).
【０２０６】
実施例1.15.1: N,N-ビス-[{3-(Boc-LVal)アミド}プロピル]アルカンアミド(71a乃至70c): 約2.4当量のN-Boc-L-バリンを無水DCM(12mL)に0℃で溶解させた。反応混合物において、6当量のDIPEA、その後、2.4当量のHBTUを添加した。次に、DMF(3mL)を反応混合物に添加した。10分後、無水DCM(1mL)中の1当量の68a乃至68cを滴下した。反応混合物をRTにして、48時間攪拌した。溶媒を蒸発させ、残留物を酢酸エチルで希釈した(50mL)。その後、ワークアップを、最初に1N HCl(3回)、続いて飽和Na2CO3溶液(3回)により行った。粗生成物を酢酸エチル層において抽出した。最後に、シリカゲル(60乃至120メッシュ)上でのカラムクロマトグラフィーにより、メタノール及びクロロホルムを溶離剤として用いて精製を完了することにより、71a乃至71cが、収率65乃至70％で得られた。
【０２０７】
実施例1.15.1.1: N,N-ビス-[{3-(Boc-LVal)アミド}プロピル]ドデカンアミド(71a): 収率:67％、1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.553-7.486 (m, 2H), 5.425-5.271 (m, 2H), 3.949-3.910 (t, 2H), 3.606-3.900 (m, 8H), 2.238-2.184 (t, 2H), 1.916-1.541 (m, 8H), 1.386 (s, 18H), 1.207 (bs, 16H), 0.929-0.891 (m, 12H), 0.847-0.813 (t, 3H). HRMS (m/z): 712.5586 [(M+H)+] (観測), 712.5588 [(M+H)+] (計算).
【０２０８】
実施例1.15.1.2: N,N-ビス-[{3-(Boc-LVal)アミド}プロピル]テトラデカンアミド(71b): 収率:66％、1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.531-7.479 (m, 2H), 5.371-5.231 (m, 2H), 3.978-3.924 (t, 2H), 3.655-2.914 (m, 8H), 2.258-2.201 (t, 2H), 1.928-1.565 (m, 8H), 1.409 (s, 18H), 1.230 (bs, 20H), 0.953-0.913 (m, 12H), 0.872-0.838 (t, 3H). HRMS (m/z): 740.5850 [(M+H)+] (観測), 740.5901 [(M+H)+] (計算).
【０２０９】
実施例1.15.1.3: N,N-ビス-[{3-(Boc-LVal)アミド}プロピル]ヘキサデカンアミド(71c): 収率:68％、1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.515-7.475 (m, 2H), 5.366-5.224 (m, 2H), 3.977-3.924 (t, 2H), 3.649-2.907 (m, 8H), 2.257-2.219 (t, 2H), 1.928-1.563 (m, 8H), 1.407 (s, 18H), 1.228 (bs, 24H), 0.951-0.912 (m, 12H), 0.870-0.836 (t, 3H). HRMS (m/z): 768.6166 [(M+H)+] (観測), 768.6214 [(M+H)+] (計算).
【０２１０】
実施例1.15.2: N,N-ビス-[{3-(LVal)アミド}プロピル]アルカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(48、49、50): 約1当量の71a乃至71cをDCM(3mL)に溶解させた。激しく攪拌した溶液に対して、4当量(過量)のトリフルオロ酢酸(TFA)を添加し、RTで12時間攪拌した。その後、溶媒及び未使用のTFAを取り除くことにより、純粋な生成物が収率100％で得られた。
【０２１１】
実施例1.15.2.1: N,N-ビス-[{3-(Val)アミド}プロピル]ドデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(48): 1H-NMR (100MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 8.569-8.128 (m, 8H), 3.500 (s, 2H), 3.256-2.984 (m, 8H), 2.254-2.223 (t, 2H), 2.063-2.021 (m, 2H), 1.684-1.472 (m, 6H), 1.234 (bs, 16H), 0.936-0.919 (d, 12H), 0.868-0.834 (t, 3H). HRMS (m/z): 512.4481 [(M+H)+] (観測), 512.4540 [(M+H)+] (計算).
【０２１２】
実施例1.15.2.2: N,N-ビス-[{3-(LVal)アミド}プロピル]テトラデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(49): 1H-NMR (100MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 8.569-8.122 (m, 8H), 3.520 (s, 2H), 3.256-2.984 (m, 8H), 2.254-2.223 (t, 2H), 2.063-2.019 (m, 2H), 1.685-1.472 (m, 6H), 1.234 (bs, 20H), 0.936-0.919 (d, 12H), 0.868-0.834 (t, 3H). HRMS (m/z): 540.4783 [(M+H)+] (観測), 540.4853 [(M+H)+] (計算).
【０２１３】
実施例1.15.2.3: N,N-ビス-[{3-(LVal)アミド}プロピル]ヘキサデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(50): 1H-NMR (100MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 8.611-8.158 (m, 8H), 3.539 (s, 2H), 3.256-3.004 (m, 8H), 2.250-2.220 (t, 2H), 2.080-2.020 (m, 2H), 1.685-1.469 (m, 6H), 1.229 (bs, 24H), 0.936-0.919 (d, 12H), 0.864-0.830 (t, 3H). HRMS (m/z): 568.5128 [(M+H)+] (観測), 568.5166 [(M+H)+] (計算).
【０２１４】
実施例1.16.1: N,N-ビス-[{3-(Boc-LIle)アミド}プロピル]アルカンアミド(72a乃至72c): 約2.4当量のN-Boc-L-イソロイシンを無水DCM(12mL)に0℃で溶解させた。反応混合物において、6当量のDIPEA、その後、2.4当量のHBTUを添加した。次に、DMF(3mL)を反応混合物に添加した。10分後、無水DCM(1mL)中の1当量の68a乃至68cを滴下した。反応混合物をRTにして、48時間攪拌した。溶媒を蒸発させ、残留物を酢酸エチルで希釈した(50mL)。その後、ワークアップを、最初に1N HCl(3回)、続いて飽和Na2CO3溶液(3回)により行った。粗生成物を酢酸エチル層において抽出した。最後に、シリカゲル(60乃至120メッシュ)上でのカラムクロマトグラフィーにより、メタノール及びクロロホルムを溶離剤として用いて精製を完了することにより、72a乃至72cが収率65乃至70％で得られた。
【０２１５】
実施例1.16.1.1: N,N-ビス-[{3-(Boc-LIle)アミド}プロピル]ドデカンアミド(72a): 収率:68％、1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.530-7.469 (m, 2H), 5.315-5.183 (m, 2H), 3.998-3.917 (t, 2H), 3.672-2.887 (m, 8H), 2.254-2.209 (t, 2H), 2.002-1.557 (m, 10H), 1.403 (s, 18H), 1.227 (bs, 16H), 1.148-1.063 (m, 2H), 0.859-0.839 (m, 15H). HRMS (m/z): 740.5080 [(M+H)+] (観測), 740.5901 [(M+H)+] (計算).
【０２１６】
実施例1.16.1.2: N,N-ビス-[{3-(Boc-LIle)アミド}プロピル]テトラデカンアミド(72b): 収率:70％、1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.532-7.572 (m, 2H), 5.317-5.185 (m, 2H), 4.013-3.959 (t, 2H), 3.673-2.891 (m, 8H), 2.259-2.204 (t, 2H), 2.008-1.567 (m, 10H), 1.410 (s, 18H), 1.235 (bs, 20H), 1.151-1.069 (m, 2H), 0.903-0.842 (m, 15H). HRMS (m/z): 768.6249 [(M+H)+] (観測), 768.6214 [(M+H)+] (計算).
【０２１７】
実施例1.16.1.3: N,N-ビス-[{3-(Boc-LIle)アミド}プロピル]ヘキサデカンアミド(72c): 収率:67％、1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.581-7.492 (m, 2H), 5.435-5.279 (m, 2H), 3.972-3.929 (t, 2H), 3.564-2.892 (m, 8H), 2.225-2.174 (t, 2H), 1.794-1.529 (m, 10H), 1.371 (s, 18H), 1.197 (bs, 24H), 1.113-1.021 (m, 2H),0.863-0.803 (m, 15H). HRMS (m/z): 796.6477 [(M+H)+] (観測), 796.6527 [(M+H)+] (計算).
【０２１８】
実施例1.16.2: N,N-ビス-[{3-(LIle)アミド}プロピル]アルカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(51、52、52): 約1当量の72a乃至72cをDCM(3mL)に溶解させた。激しく攪拌した溶液に対して、4当量(過量)のトリフルオロ酢酸(TFA)を添加し、RTで12時間攪拌した。その後、溶媒及び未使用のTFAを取り除くことにより、純粋な生成物が収率100％で得られた。
【０２１９】
実施例1.16.2.1: N,N-ビス-[{3-(LIle)アミド}プロピル]ドデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(51): 1H-NMR (100MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 8.518-8.111 (m, 8H), 3.562 (s, 2H), 3.333-2.976 (m, 8H), 2.251-2.224 (t, 2H), 1.794-1.471 (m, 10H), 1.232 (bs, 16H), 1.152-1.076 (m, 2H), 0.901-0.832 (m, 15H). HRMS (m/z): 540.4715 [(M+H)+] (観測), 540.4853 [(M+H)+] (計算).
【０２２０】
実施例1.16.2.2: N,N-ビス-[{3-(LIle)アミド}プロピル]テトラデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(52): 1H-NMR (100MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 8.527-8.116 (m, 8H), 3.566 (s, 2H), 3.337-2.978 (m, 8H), 2.257-2.227 (t, 2H), 1.796-1.479 (m, 10H), 1.234 (bs, 20H), 1.156-1.081 (m, 2H), 0.905-0.835 (m, 15H). HRMS (m/z): 568.5097 [(M+H)+] (観測), 568.5166 [(M+H)+] (計算).
【０２２１】
実施例1.16.2.3: N,N-ビス-[{3-(LIle)アミド}プロピル]ヘキサデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(53): 1H-NMR (100MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 8.572-8.146 (m, 8H), 3.570 (s, 2H), 3.254-2.963 (m, 8H), 2.262-2.219 (t, 2H), 1.797-1.456 (m, 10H), 1.231 (bs, 24H), 1.154-1.079 (m, 2H), 0.902-0.832 (m, 15H). HRMS (m/z): 596.5325 [(M+H)+] (観測), 596.5479 [(M+H)+] (計算).
【０２２２】
実施例1.17.1: N,N-ビス-[{3-(Boc-LLeu)アミド}プロピル]アルカンアミド(73a乃至73c): 約2.4当量のN-Boc-L-ロイシンを、無水DCM(12mL)に0℃で溶解させた。反応混合物において、6当量のDIPEA、その後、2.4当量のHBTUを添加した。次に、DMF(3mL)を反応混合物に添加した。10分後、無水DCM(1mL)中の1当量の68a乃至68cを滴下した。反応混合物をRTにして、48時間攪拌した。溶媒を蒸発させ、残留物を酢酸エチルで希釈した(50mL)。その後、ワークアップを、最初に1N HCl(50mL、3回)、続いて飽和Na2CO3溶液(50mL、3回)により行った。粗生成物を酢酸エチル層において抽出した。最後に、シリカゲル(60乃至120メッシュ)上でのカラムクロマトグラフィーにより、メタノール及びクロロホルムを溶離剤として用いて精製を完了することにより、73a乃至73cが収率65乃至70％で得られた。
【０２２３】
実施例1.17.1.1: N,N-ビス-[{3-(Boc-LLeu)アミド}プロピル]ドデカンアミド(73a): 収率:69％、1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.637-7.534 (s, 2H), 5.246-5.126 (d, 2H), 4.246-4.126 (t, 2H), 3.628-2.890 (m, 8H), 2.254-2.180 (t, 2H), 2.160-2.135 (m, 2H), 1.719-1.458 (m, 10H), 1.400 (s, 18H), 1.230 (bs, 16H), 0.923-0.835 (m, 15H). HRMS (m/z): 740.5845 [(M+H)+] (観測), 740.5901 [(M+H)+] (計算).
【０２２４】
実施例1.17.1.2: N,N-ビス-[{3-(Boc-LLeu)アミド}プロピル]テトラデカンアミド(73b): 収率:66％、1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.621-7.527 (s, 2H), 5.248-5.129 (d, 2H), 4.248-4.129 (t, 2H), 3.480-2.893 (m, 8H), 2.257-2.220 (t, 2H), 2.160-1.458 (m, 12H), 1.404 (s, 18H), , 1.232 (bs, 20H), 0.912-0.839 (m, 15H). HRMS (m/z): 768.6181 [(M+H)+] (観測), 768.6214 [(M+H)+] (計算).
【０２２５】
実施例1.17.1.3: N,N-ビス-[{3-(Boc-LLeu)アミド}プロピル]ヘキサデカンアミド(73c): 収率:68％、1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.624-7.530 (s, 2H), 5.252-5.132 (d, 2H), 4.219-4.201 (t, 2H), 3.634-2.894 (m, 8H), 2.257-2.220 (t, 2H), 1.746-1.454 (m, 12H), 1.404 (s, 18H), 1.233 (bs, 24H), 0.912-0.840 (m, 15H). HRMS (m/z): 796.6482 [(M+H)+] (観測), 796.6527 [(M+H)+] (計算).
【０２２６】
実施例1.17.2: N,N-ビス-[{3-(LLeu)アミド}プロピル]アルカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(54、55、56): 約1当量の70a乃至70cをDCM(3mL)に溶解した。激しく攪拌した溶液に対して、4当量(過量)のトリフルオロ酢酸(TFA)を添加し、RTで12時間攪拌した。その後、溶媒及び未使用のTFAを取り除くことにより、純粋な生成物が収率100％で得られた。
【０２２７】
実施例1.17.2.1: N,N-ビス-[{3-(LLeu)アミド}プロピル]ドデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(54): 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 8.670-8.176 (m, 8H), 3.758-3.715 (t, 2H), 3.252-3.007 (m, 8H), 2.240-2.227 (t, 2H), 1.684-1.476 (m, 12H), 1.234 (bs, 16H), 0.906-0.833 (m, 15H). HRMS (m/z): 540.4860 [(M+H)+] (観測), 540.4853 [(M+H)+] (計算).
【０２２８】
実施例1.17.2.2: N,N-ビス-[{3-(LLeu)アミド}プロピル]テトラデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(55): 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 8.523-8.188 (m, 8H), 3.710 (s, 2H), 3.253-2.994 (m, 8H), 2.257-2.225 (t, 2H), 1.667-1.474 (m, 12H), 1.231 (bs, 20H), 0.904-0.830 (m, 15H). HRMS (m/z): 568.5182 [(M+H)+] (観測), 568.5166 [(M+H)+] (計算).
【０２２９】
実施例1.17.2.3: N,N-ビス-[{3-(LLeu)アミド}プロピル]ヘキサデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(56): 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 8.608-8.130 (m, 8H), 3.694 (s, 2H), 3.238-2.994 (m, 8H), 2.240-2.227 (t, 2H), 1.683-1.477 (m, 12H), 1.234 (bs, 24H), 0.911-0.853 (m, 15H). HRMS (m/z): 596.5475 [(M+H)+] (観測), 596.5479 [(M+H)+] (計算).
【０２３０】
実施例1.18.1: N,N-ビス-[{3-(Boc-LPro)アミド}プロピル]アルカンアミド(74a乃至74c): 約2.4当量のN-Boc-L-プロリンを無水DCM(12mL)に0℃で溶解させた。反応混合物において、6当量のDIPEA、その後、2.4当量のHBTUを添加した。次に、DMF(3mL)を反応混合物に添加した。10分後、無水DCM(1mL)中の1当量の68a乃至68cを滴下した。反応混合物をRTにして、48時間攪拌した。溶媒を蒸発させ、残留物を酢酸エチルで希釈した(50mL)。その後、ワークアップを、最初に1N HCl(3回)、続いて飽和Na2CO3溶液(3回)により行った。粗生成物を酢酸エチル層において抽出した。最後に、シリカゲル(60乃至120メッシュ)上でのカラムクロマトグラフィーにより、メタノール及びクロロホルムを溶離剤として用いて精製を完了することにより、74a乃至74cが収率65乃至70％で得られた。
【０２３１】
実施例1.18.1.1: N,N-ビス-[{3-(Boc-LPro)アミド}プロピル]ドデカンアミド(74a): 収率:70％、1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.441-6.795 (s, 2H), 4.219-4.131 (t, 2H), 3.532-3.055 (m, 12H), 2.265-2.228 (t, 2H), 2.164-1.583 (m, 14H), 1.429 (s, 18H), 1.229 (bs, 16H), 0.869-0.835 (t, 3H). HRMS (m/z): 708.5245 [(M+H)+] (観測), 708.5275 [(M+H)+] (計算).
【０２３２】
実施例1.18.1.2: N,N-ビス-[{3-(Boc-LPro)アミド}プロピル]テトラデカンアミド(74b): 収率:65％、1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.509-6.795 (s, 2H), 4.219-4.131 (t, 2H), 3.553-3.055 (m, 12H), 2.265-2.164 (t, 2H), 2.164-1.583 (m, 14H), 1.420 (s, 18H), 1.229 (bs, 20H), 0.869-0.835 (t, 3H). HRMS (m/z): 736.5596 [(M+H)+] (観測), 736.5588 [(M+H)+] (計算).
【０２３３】
実施例1.18.1.3: N,N-ビス-[{3-(Boc-LPro)アミド}プロピル]ヘキサデカンアミド(74c): 収率:68％、1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ/ppm: 7.519-6.806 (s, 2H), 4.224-4.136 (t, 2H), 3.558-3.088 (m, 12H), 2.269-2.232 (t, 2H), 2.152-1.586 (m, 14H), 1.425 (s, 18H), 1.232 (bs, 16H), 0.874-0.840 (t, 3H). HRMS (m/z): 764.5910 [(M+H)+] (観測), 764.5901 [(M+H)+] (計算).
【０２３４】
実施例1.18.2: N,N-ビス-[{3-(LPro)アミド}プロピル]アルカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(57、58、59): 約1当量の74a乃至74cをDCM(3mL)に溶解させた。激しく攪拌した溶液に対して、4当量(過量)のトリフルオロ酢酸(TFA)を添加し、RTで12時間攪拌した。その後、溶媒及び未使用のTFAを取り除くことにより、純粋な生成物が収率100％で得られた。
【０２３５】
実施例1.18.2.1: N,N-ビス-[{3-(LPro)アミド}プロピル]ドデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(57): 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 9.787 (s, 2H), 8.731-8.540 (m, 4H) 4.168-4.151 (m, 2H), 3.227-2.885 (m, 12H), 2.280-1.464 (m, 16H), 1.230 (bs, 16H), 0.862-0.828 (t, 3H). HRMS (m/z): 508.3608 [(M+H)+] (観測), 508.4227 [(M+H)+] (計算).
【０２３６】
実施例1.18.2.2: N,N-ビス-[{3-(LPro)アミド}プロピル]テトラデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(58): 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 9.683 (s, 2H), 8.702-8.518 (m, 4H) 4.157-4.144 (m, 2H), 3.302-3.009 (m, 12H), 2.500- 1.465 (m, 16H), 1.230 (bs, 20H), 0.862-0.828 (t, 3H). HRMS (m/z): 536.3861 [(M+H)+] (観測), 536.4540 [(M+H)+] (計算).
【０２３７】
実施例1.18.2.3: N,N-ビス-[{3-(LPro)アミド}プロピル]ヘキサデカンアミドビス(トリフルオロアセタート)(59): 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ/ppm: 9.715 (s, 2H), 8.713-8.525 (m, 4H) 4.163-4.146 (m, 2H), 3.231-2.994 (m, 12H), 2.500-1.465 (m, 16H), 1.229 (bs, 24H), 0.847-0.829 (t, 3H). HRMS (m/z): 564.4152 [(M+H)+] (観測), 564.4853 [(M+H)+] (計算).
【０２３８】
実施例1.19.1: N1-(Boc-DLeu)-N3-[{3-(Boc-DLeu)アミド}プロピル]プロパン-1,3-ジアミン(75): 約2当量のN-Boc-D-ロイシンを約25mLの無水DCMに0℃で溶解させた。反応混合物において、約6当量のDIPEA、その後、約2当量のHBTUを添加した。次に、約8mLのDMFを反応混合物に添加した。10分後、約1当量のノルスペルミジン[ビス(3-アミノプロピル)アミン]を滴下した。反応混合物を4時間0℃で攪拌した。次に、反応溶媒を蒸発させ、残留物を酢酸エチルで希釈した。その後、ワークアップを、1N HCl(3回)、続いて飽和Na2CO3溶液(3回)により行った。粗生成物を酢酸エチル層において採取した。最後に、カラムを行い、生成物を収率67％で単離した。HRMS(m/z):558.4241[(M+H)+](観測)、558.4231[(M+H)+](計算)。
【０２３９】
実施例1.19.2: N,N-ビス[3-(Boc-DLeu)アミドプロピル]オクタンアミド(76): 約1.5当量のオクタン酸を無水DCM(12mL)に0℃で溶解させた。反応混合物に対して、約4当量のDIPEA、その後1.5当量のHBTUを添加した。次に、DMF(3mL)を反応混合物に添加した。10分後、無水DCM(2mL)中の1当量の75を滴下した。反応混合物を室温にして、24時間攪拌した。24時間の終わりに、溶媒を蒸発させ、残留物を酢酸エチルで希釈した。反応混合物の洗浄を、最初に1N HCl(3回)、続いて飽和Na2CO3溶液(3回)により行った。粗生成物を酢酸エチル層において抽出し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、最後にシリカゲル(60乃至120メッシュ)上でのカラムクロマトグラフィーにより、メタノール及びクロロホルムを溶離剤として用いて精製を完了することにより、76が収率72％で得られた。HRMS (m/z): 684.5204 [(M+H)+] (観測), 684.5275 [(M+H)+] (計算).
【０２４０】
実施例1.19.3: N,N-ビス[3-(DLeu)アミドプロピル]オクタンアミドビス(トリフルオロアセタート)(77): 約1当量の76をDCM(3mL)に溶解させた。激しく攪拌した溶液に対して、4当量(過量)のトリフルオロ酢酸(TFA)を添加し、RTで12時間攪拌した。その後、溶媒及び未使用のTFAを取り除くことにより、純粋な生成物が収率100％で得られた。HRMS (m/z): 484.4184 [(M+H)+] (観測), 484.4227 [(M+H)+] (計算).
【０２４１】
実施例1.19.4: N,N-ビス[3-(Boc-DAADLeu)アミドプロピル]オクタンアミド(78a乃至78c): 約2当量のN,N-ジ-Boc-D-リジン、N-Boc-D-ロイシン、又はN-Boc-D-フェニルアラニンを、約25mLの無水DCMに0℃で溶解した。反応混合物において、約6当量のDIPEA、その後、約2当量のHBTUを添加した。次に、約8mLのDMFを反応混合物に添加した。10分後、無水DCM(2mL)中の1当量の77を滴下した。反応混合物を室温にして、48時間攪拌した。48時間の終わりに、溶媒を蒸発させ、残留物を酢酸エチルで希釈した。反応混合物の洗浄を、最初に1N HCl(3回)、続いて飽和Na2CO3溶液(3回)により行った。粗生成物を酢酸エチル層において抽出し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、最後にシリカゲル(60乃至120メッシュ)上でのカラムクロマトグラフィーにより、メタノール及びクロロホルムを溶離剤として用いて精製を完了することにより、78a乃至78cが収率65乃至70％で得られた。
【０２４２】
実施例1.19.4.1: N,N-ビス[3-(Boc-DLys-BocDLeu)アミドプロピル]オクタンアミド(78a): 収率-68％、HRMS (m/z): 1140.8053 [(M+H)+] (観測), 1140.8223 [(M+H)+] (計算).
【０２４３】
実施例1.19.4.2: N,N-ビス[3-(Boc-DLeuDLeu)アミドプロピル]オクタンアミド(78b): 収率-66％、HRMS (m/z): 910.6837 [(M+H)+] (観測), 910.6957 [(M+H)+] (計算).
【０２４４】
実施例1.19.4.3: N,N-ビス[3-(Boc-DPheDLeu)アミドプロピル]オクタンアミド(78c): 収率-68％、HRMS (m/z): 978.6502 [(M+H)+] (観測), 978.6644 [(M+H)+] (計算).
【０２４５】
実施例1.19.5: N,N-ビス[3-(DAADLeu)アミドプロピル]オクタンアミドビス/テトラキス(トリフルオロアセタート)(60、61、62): 約1当量の78a乃至78cをDCM(3mL)に溶解させた。激しく攪拌した溶液に対して、4当量(過量)のトリフルオロ酢酸(TFA)を添加し、RTで12時間攪拌した。その後、溶媒及び未使用のTFAを取り除くことにより、純粋な生成物が収率100％で得られた。
【０２４６】
実施例1.19.5.1: N,N-ビス[3-(DLysDLeu)アミドプロピル]オクタンアミドテトラキス(トリフルオロアセタート)(60): HRMS (m/z): 740.5940 [(M+H)+] (観測), 740.6126 [(M+H)+] (計算).
【０２４７】
実施例1.19.5.2: N,N-ビス[3-(DLeuDLeu)アミドプロピル]オクタンアミドビス(トリフルオロアセタート)(61): HRMS (m/z): 710.5724 [(M+H)+] (観測), 710.5908 [(M+H)+] (計算).
【０２４８】
実施例1.19.5.3: N,N-ビス[3-(DPheDLeu)アミドプロピル]オクタンアミドビス(トリフルオロアセタート)(62): HRMS (m/z): 778.5375 [(M+H)+] (観測), 778.5595 [(M+H)+] (計算).
【０２４９】
実施例1.20.1: N1-(Boc-DPhe)-N3-[{3-(Boc-DPhe)アミド}プロピル]プロパン-1,3-ジアミン(79): 約2当量のN-Boc-D-フェニルアラニンを、約25mLの無水DCMに0℃で溶解させた。反応混合物において、約6当量のDIPEA、その後、約2当量のHBTUを添加した。次に、約8mLのDMFを反応混合物に添加した。10分後、約1当量のノルスペルミジン[ビス(3-アミノプロピル)アミン]を滴下した。反応混合物を48時間0℃で攪拌した。次に、反応溶媒を蒸発させ、残留物を酢酸エチルで希釈した。その後、ワークアップを、1N HCl(3回)、続いて飽和Na2CO3溶液(3回)により行った。粗生成物を酢酸エチル層において採取した。最後に、カラムを行い、生成物を収率70％単離した。HRMS (m/z): 626.3898 [(M + H)+] (観測), 626.3918 [(M + H)+] (計算).
【０２５０】
実施例1.20.2: N,N-ビス[3-(Boc-DPhe)アミドプロピル]オクタンアミド(80): 約1.5当量のオクタン酸を無水DCM(12mL)に0℃で溶解させた。反応混合物に対して、約4当量のDIPEA、その後1.5当量のHBTUを添加した。次に、DMF(3mL)を反応混合物に添加した。10分後、無水DCM(2mL)中の1当量の79を滴下した。反応混合物を室温にして、24時間攪拌した。24時間の終わりに、溶媒を蒸発させ、残留物を酢酸エチルで希釈した。反応混合物の洗浄を、最初に1N HCl(3回)、続いて飽和Na2CO3溶液(3回)により行った。粗生成物を酢酸エチル層において抽出し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、最後にシリカゲル(60乃至120メッシュ)上でのカラムクロマトグラフィーにより、メタノール及びクロロホルムを溶離剤として用いて精製を完了することにより、80が収率74％で得られた。HRMS (m/z): 752.4911 [(M+H)+] (観測), 752.4962 [(M+H)+] (計算).
【０２５１】
実施例1.20.3: N,N-ビス[3-(DPhe)アミドプロピル]オクタンアミドビス(トリフルオロアセタート)(81): 約1当量の80をDCM(3mL)に溶解させた。激しく攪拌した溶液に対して、4当量(過量)のトリフルオロ酢酸(TFA)を添加し、RTで12時間攪拌した。その後、溶媒及び未使用のTFAを取り除くことにより、純粋な生成物が収率100％で得られた。HRMS (m/z): 552.3946 [(M+H)+] (観測), 552.3914 [(M+H)+] (計算).
【０２５２】
実施例1.20.4: N,N-ビス[3-(Boc-DAADPhe)アミドプロピル]オクタンアミド(82a乃至82c): 約2当量のN,N-ジ-Boc-D-リジン、N-Boc-D-ロイシン、又はN-Boc-D-フェニルアラニンを、約25mLの無水DCMに0℃で溶解させた。反応混合物において、約6当量のDIPEA、その後、約2当量のHBTUを添加した。次に、約8mLのDMFを反応混合物に添加した。10分後、無水DCM(2mL)中の1当量の81を滴下した。反応混合物を室温にして、48時間攪拌した。48時間の終わりに、溶媒を蒸発させ、残留物を酢酸エチルで希釈した。反応混合物の洗浄を、最初に1N HCl(3回)、続いて飽和Na2CO3溶液(3回)により行った。粗生成物を酢酸エチル層において抽出し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、最後にシリカゲル(60乃至120メッシュ)上でのカラムクロマトグラフィーにより、メタノール及びクロロホルムを溶離剤として用いて精製を完了することにより、82a乃至82cが収率65乃至70％で得られた。
【０２５３】
実施例1.20.4.1: N,N-ビス[3-(Boc-DLys-BocDPhe)アミドプロピル]オクタンアミド(82a): 収率-67％、HRMS (m/z): 1208.7910 [(M+H)+] (観測), 1208.7910 [(M+H)+] (計算).
【０２５４】
実施例1.20.4.2: N,N-ビス[3-(Boc-DLeuDPhe)アミドプロピル]オクタンアミド(82b): 収率-68％、HRMS (m/z): 978.6630 [(M+H)+] (観測), 978.6644 [(M+H)+] (計算).
【０２５５】
実施例1.20.4.3: N,N-ビス[3-(Boc-DPheDPhe)アミドプロピル]オクタンアミド(82c): 収率-65％、HRMS (m/z): 1064.6280 [(M+H)+] (観測), 1046.6331 [(M+H)+] (計算).
【０２５６】
実施例1.20.5: N,N-ビス[3-(DAADPhe)アミドプロピル]オクタンアミドビス/テトラキス(トリフルオロアセタート)(63、64、65): 約1当量の82a乃至82cをDCM(3mL)に溶解させた。激しく攪拌した溶液に対して、4当量(過量)のトリフルオロ酢酸(TFA)を添加し、RTで12時間攪拌した。その後、溶媒及び未使用のTFAを取り除くことにより、純粋な生成物が収率100％で得られた。
【０２５７】
実施例1.20.5.1: N,N-ビス[3-(DLysDPhe)アミドプロピル]オクタンアミドテトラキス(トリフルオロアセタート)(63): HRMS (m/z): 808.5796 [(M+H)+] (観測), 808.5813 [(M+H)+] (計算).
【０２５８】
実施例1.20.5.2: N,N-ビス[3-(DLeuDPhe)アミドプロピル]オクタンアミドビス(トリフルオロアセタート)(64): HRMS (m/z): 778.5390 [(M+H)+] (観測), 778.5595 [(M+H)+] (計算).
【０２５９】
実施例1.20.5.3: N,N-ビス[3-(DPheDPhe)アミドプロピル]オクタンアミドビス(トリフルオロアセタート)(65): HRMS (m/z): 846.5059 [(M+H)+] (観測), 846.5282 [(M+H)+] (計算).
【０２６０】
実施例2:
【０２６１】
In vitro抗細菌活性
【０２６２】
最小発育阻止濃度(MIC): 抗細菌活性は、最小発育阻止濃度(Minimum Inhibitory Concentration, MIC)として報告され、これは一晩のインキュベーション後に微生物の増殖を阻止することが可能な抗細菌剤の最低濃度である。全ての合成化合物は、改変した微量液体希釈形式で測定した。ストック溶液は、オートクレーブミリポア水を用いて、化合物を連続的に希釈することにより作成した。細菌の凍結乾燥試料は、-80℃で保管した。約5μLのこれらのストックを、約3mLのそれぞれの培養液に添加し、培養物を約6時間、約37℃で増殖させた後、実験を行った。この6時間増殖培養物は、黄色ブドウ球菌(MTCC 737)、MRSA(ATCC 33591)の場合は、約109 cfu/mL、大腸菌(MTCC 443)、エンテロコッカス・フェシウム(ATCC 19634)、VRE、及び肺炎桿菌(ATCC 700603)の場合は、108 cfu/mLとなることが延展プレーティング法(spread plating method)により判定された。この6時間増殖培養物を希釈して、105 cfu/mLの有効細胞濃度とした後、MICの判定に用いた。化合物は、最大作業濃度が250μg/mLとなるような形で、滅菌ミリポア水において(2倍希釈で)連続的に希釈した。約50μLのこれらの滅菌希釈液を、96ウェルプレートのウェルに加えた後、約150μLの細菌溶液を添加した。その後、プレートを約37℃、150rpmで、インキュベータにおいてインキュベートし、600nmでのODを、24時間後にTECAN(Infiniteシリーズ、M200プロ)プレートリーダを用いて記録した。各濃度は、三つ組の値を有しており、全ての実験を少なくとも2回行い、MIC値は、各濃度について三つ組OD値の平均を利用して決定して、濃度に対してプロットした。その後、データに対して、シグモイドフィッティングを行った。曲線から、MIC値を、細菌を含まない対照のものとODが類似する曲線内の点として決定した。
【０２６３】
これらの化合物の抗菌活性を、様々な細菌に対して、最小発育阻止濃度(MIC)を評価することにより判定した。殆どの化合物は、臨床的に認可された従来の抗生物質と同程度のマイクロモル濃度で、グラム陽性菌及びグラム陰性菌の両方に対して活性を有した。例えば、化合物2、6、7、12、及び17は、黄色ブドウ球菌に対して2乃至5μMの範囲の濃度で活性を有した(表1)。同様に、化合物11及び12は、それぞれMIC値が2及び1.1μMの非常に良好な活性をエンテロコッカス・フェシウムに対して示した。他の化合物も、この細菌に対して高い活性を示しており、化合物2、6、7、13、15、16、及び17は、2乃至5μMの範囲のMIC値を有している(表1)。大腸菌の場合は、リジン及びオルニチン系の化合物のみが良好な活性を示しており、化合物11、12、15、16、及び17が、4乃至6μM(表1)の濃度範囲のMIC値を有する。バンコマイシン耐性エンテロコッカス・フェシウム(VRE)は、病原性の高い多剤耐性菌である。全ての化合物は、VREに対して活性を有しており、殆どの化合物が5μMを下回るMIC値を有し(表2)、最も高い活性は、MIC値1及び1.5μMで、それぞれ化合物11及び12が示した。殆どの化合物は、MRSA及び多剤耐性肺炎桿菌に対して、マイクロモル(3乃至10μM)の濃度範囲で活性を有した(表2)。
【０２６４】
全ての抗細菌活性を表1及び2に示している。
【０２６５】
【表１】
2017514887.tif 000041
【０２６６】
【表２】
2017514887.tif 000042
【０２６７】
実施例3:
【０２６８】
溶血活性
【０２６９】
赤血球を、採取直後のヘパリン化ヒト血液から単離し、PBS(pH7.4)中において5vol％で再懸濁させた。96ウェルマイクロタイタープレートにおいて、150μLの赤血球懸濁液を、50μLの連続希釈化合物に添加した。2種類の対照を作成し、一方は、化合物を含まず、他方は、Triton X-100の1vol％溶液を50μL含むものとした。プレートを、1時間37℃でインキュベートした。その後、プレートを3,500rpmで5分間遠心分離し、100μLの上清を各ウェルから新たな96ウェルマイクロタイタープレートに移し、A540を測定した。溶血の割合は、(A-A0)/(Atotal-A0)×100として決定し、ここで、Aは、試験ウェルの吸光度であり、A0は、陰性対照(化合物を含まない)の吸光度であり、及びAtotalは、100％溶血ウェル(Triton X-100を含む)の吸光度で、全て540nmにおけるものである。
【０２７０】
化合物の毒性の研究は、採取直後のヒト赤血球に対して行った。化合物の毒性は、HC50値(表3)、即ち、血液細胞の50％が溶解する化合物の濃度により定めた。溶血性の研究により、これら全ての化合物が、ヒト赤血球と比較して、細菌に対する選択性を有することが明らかとなった。化合物9及び10は、1000μMの濃度においてさえ、溶血性を全く示さなかった。しかしながら、同時に、これらの化合物は、活性の観点では良好ではない。選択性(HC50/MIC)の観点で最良の化合物は、化合物11であり、50％の溶血を588μMで示し、耐性菌VREについて392の選択性を有する。
【０２７１】
【表３】
2017514887.tif 000043
【０２７２】
実施例4:
【０２７３】
ヒト血漿における抗細菌効力: リポペプチドの制約の1つは、プロテアーゼ分解を受けやすいことである。我々は、合成設計により、この制約を克服することができた。D-フェニルアラニン(化合物6)をL-フェニルアラニン(化合物2)の位置に組み込み、化合物を50％ヒト血漿中でインキュベート後、様々な時間間隔でMIC実験を行った(図1)。化合物2の50％血漿との2時間のインキュベーション後、MIC値は、5.4μMから10.7μMに増加した一方、4時間のインキュベーション後には更に22μMまで増加し、その後、MIC値は、24時間のインキュベーションまで変わらないこと分かった。しかしながら、化合物6は、24時間のインキュベーションに至るまで、血漿中で活性の損失を全く示さなかった。これは、化合物6が血漿中で安定していることを示している。
【０２７４】
【表４】
2017514887.tif 000044
【０２７５】
【表５】
2017514887.tif 000045
【０２７６】
【表６】
2017514887.tif 000046
【０２７７】
実施例5:
【０２７８】
細胞毒性: 哺乳類細胞株(Hela細胞)に対する化合物の毒性を、MTTアッセイにより決定した。化合物8aの細胞毒性を、HeLa及びRAW(マクロファージ)細胞株について評価した。簡単に説明すると、細胞を、96ウェルプレートにおいて、DMEM培地(10％ウシ胎児血清及び5％ペニシリン-ストレプトマイシンを補充)中で70乃至80％程度の集密度になるまで増殖させた。その後、細胞を、50μLの連続希釈した化合物16により処理した。2種類の対照を作成し、一方には化合物を含めず(未処理細胞)、他方は、10vol％Triton-X100溶液により処理した。プレートを、1 時間、37℃で、5％CO2雰囲気下においてインキュベートした。24時間後、培地を慎重に取り除いた後、100μLのMTT溶液(濃度5mg/mL)を各ウェルに添加した。プレートを4時間37℃で、5％CO2雰囲気下においてインキュベートした。次に、遠心分離を1100rpmで5分間行い、上清を除去した。その後、100μLのDMSOを添加して、ホルマザン結晶を可溶化した。その後、プレートのODを、570nmで記録した。細胞生存の割合は、次の式を用いて計算した: 細胞生存率(％) = (Atreated-AtritonX-treated)/(Anon-treated-AtritonX-treated)×100。各濃度は、三つ組の値を有し、三つ組OD値の平均を濃度に対してプロット後、シグモイドプロットによりフィッティングした。曲線から、細胞生存率50％に対応する値を決定した。明視野顕微鏡画像については、40×対物レンズを使用し、Leica DM2500顕微鏡を用いて画像を取り込んだ。化合物16は、そのMICにおいて毒性を示さず、これらの細胞株に対して、EC50値(細胞生存率50％)>70μg/mLとなった(図2)。この結果は、選択的な抗細菌剤を開発する上で、化合物16が非常に大きな可能性を有することを示している。
【０２７９】
実施例6:
【０２８０】
静止期細菌に対する抗細菌活性: 従来の抗生物質は、細菌内の細胞プロセスを主な標的としているため、殆どの既知の抗生物質は、細菌の静止期には効果の無い状態のままとなる。静止期の黄色ブドウ球菌に対する時間-殺菌動態を、化合物16について調べた。簡単に説明すると、黄色ブドウ球菌を酵母ブドウ糖培地において37℃で18時間増殖させ、静止期に到達させた。試験化合物16を、静止期細菌に対して、作用濃度50及び100μg/mLで添加した。150rpmで振盪しながら、37℃でインキュベートした。異なる時間間隔(0、1及び3時間)で、その溶液からの20μLのアリコートを、0.9％生理食塩水において、10倍で連続希釈した。その後、希釈液から、20μLを酵母ブドウ糖寒天プレート上に付与し、37℃でインキュベートした。24時間後、細菌コロニを計数し、結果を対数スケール、即ち、Log(CFU/mL)で表した。図3に示したように、化合物16は、3Log cfu/mLを上回る細胞生存率の減少を、50μg/mL(略8×MICの化合物濃度)という低濃度であっても暴露1時間以内に示した。こうした結果は、殆どの抗生物質が効果の無い状態となる細胞時期であり、細菌の分裂が生じない静止期であっても、化合物16が高い有効性を保持することを示唆している。
【０２８１】
実施例7:
【０２８２】
耐性の研究: 抗生物質耐性菌の出現は、国際保健にとって大きな問題である。したがって、これらの化合物が十分な寿命を有する抗細菌剤となる可能性を調べるために、黄色ブドウ球菌(グラム陽性代表)及び大腸菌(グラム陰性代表)が、これらの化合物に対する耐性を発達させる能力を調べた。この研究には、化合物16をモデル化合物として選択した。ノルフロキサシンを黄色ブドウ球菌に対する正の対照として用い、コリスチンを大腸菌の場合に正の対照として使用した。最初に、化合物16のMIC値を、両方の細菌に対して決定した。ノルフロキサシン及びコリスチンの場合にも、初期MIC値をそれぞれの細菌に対して決定した。翌日のMIC実験のために、化合物のMIC濃度未満(MIC/2)から、細菌を用いて細菌希釈物を作成した。24時間のインキュベーション期間後、再び、化合物のMIC濃度未満(MIC/2)から、細菌懸濁液を用いて細菌希釈物を調製し、次のMIC実験のために測定を行った。このプロセスを、黄色ブドウ球菌及び大腸菌について、それぞれ20及び30継代に亘り繰り返した。試験化合物及び対照抗生物質に対して増加したMICの倍数を、日数に対してプロットしたところ、試験化合物では、黄色ブドウ球菌及び大腸菌に対して、それぞれ20及び30継代後もMICは変化を示さず(図4)、一方、ノルフロキサシンの場合は約800倍、コリスチンの場合は250倍のMICの増加が観察された。この研究は、このタイプの化合物に対する耐性を発達させることが、細菌にとって困難であることを示唆している。
【０２８３】
実施例8:
【０２８４】
細菌バイオフィルムの破壊: バイオフィルムは、菌体外多糖、タンパク質、及び場合によっては細胞外DNAからなる自己形成した細胞外基質内に、細菌が埋め込まれた状態となる粘着性の細菌群集である。細菌は、バイオフィルム内で多細胞生物として振る舞い、抗生物質の侵入を防止する戦略を作り出す。結果として、プランクトン細菌を死滅させることが可能な抗生物質は、嚢胞性線維症(CF)患者の肺感染、熱傷創感染、カテーテル感染、細菌性心内膜炎、慢性創傷感染等のバイオフィルムに関連する感染の治療に効果が無くなる場合が多い。このクラスの化合物の細菌バイオフィルム破壊剤としての有効性は、事前に形成したバイオフィルムを根絶する程度を、化合物16と、エリスロマイシン、ノルフロキサシン、リネゾリド、テトラサイクリン、及びバンコマイシン等の抗生物質とで比較することにより確定させた。簡単に説明すると、1％グルコース及び1％NaClを補充した栄養培地中の黄色ブドウ球菌(略105 cfu/mLに希釈)の対数期培養物により、ストック溶液を調製した。次に、このストック溶液を100μL加えることにより、96ウェルプレート内にバイオフィルムを増殖させた。その後、100μLの試験化合物16と、エリスロマイシン、ノルフロキサシン、リネゾリド、テトラサイクリン、及びバンコマイシン等の対照抗生物質(64×MIC)とをバイオフィルムに添加し、24時間インキュベートした。100μLの完全培地を化合物又は抗生物質の代わりに添加した対照を1種類作成した。24時間の終わりに、バイオフィルム懸濁物の連続10倍希釈液を平板培養することで、破壊されたバイオフィルムを定量した。バイオフィルムにおける細胞生存率をLog(CFU/mL)として表し、未処理の対照と比較した。視覚化のため、破壊されたバイオフィルムを0.1％のクリスタルバイオレット(CV)により染色し、通常のデジタルカメラにより画像を取得した。共焦点レーザー顕微鏡用に、バイオフィルムをSYTO-9(3μM)により染色した。その結果、未処理の対照と比較して、化合物16は、そのMIC濃度において、病原性黄色ブドウ球菌の既存のバイオフィルムで細胞生存率の有意な減少(4Log cfu/mL超)を示したが、一方、抗生物質では、図5aに示すように、非常に高い濃度(64×MIC)でさえ有意な減少を示すものが無かった。更に、細胞生存率の5及び6Log(CFU/mL)の減少が、それぞれ濃度4×MIC及び10×MICで観察された。クリスタルバイオレット染色及び共焦点イメージングにより、バイオフィルム破壊の範囲を視覚化することが可能となった。クリスタルバイオレット染色により、図5bに示すように、化合物16(濃度10×MIC)が、未処理の対照及び抗生物質と比較して、事前に形成したバイオフィルム質量の甚大な減少を示すことが明証された。同じ濃度において、共焦点顕微鏡により、図5cに示すように、有意なバイオフィルムの根絶も明らかとなった。
【０２８５】
実施例9:
【０２８６】
In vitro抗ウイルス活性
【０２８７】
MRC-5及びVeroE6細胞をEuropean Collection of Cell Culturesから入手し、96ウェルプレートに播種した。化合物16を、in vitro抗ウイルス研究のモデルとして選択した。濃度範囲は、in vitroでの作業に提案されている推奨濃度(1mg/ml)のそれぞれの側に2つの濃度で設定した。濃度は、添加される等体積のウイルス懸濁液を考慮に入れて、最終希釈の2倍にした(図6)。
【０２８８】
封じ込めレベル4の実験室内で、96ウェルプレートの内側のウェルから培地を取り除いた。エッジ効果のため、外側のウェルは、培地を加えた状態のままとした。化合物は、一つの希釈度当たり5回繰り返して添加した。エボラウイルス懸濁液(ME718株)は、略500TCID50/ウェルの濃度で添加して、一つの化合物の希釈度当たりウェルを三つ組とし、残り2つのウェルは培地のみを加えた状態とした。
【０２８９】
MRC-5及びVeroE6細胞におけるエボラウイルス増殖の結果に基づき、MRC-5及びVeroE6細胞からの上清を、それぞれ感染後3及び6日目に収集した。細胞を顕微鏡で評価し、細胞の健康状態の評価を行った。140μlの上清を、560μl AVL緩衝液に添加し、RNA抽出及びPCRを行った。PCRアッセイからのCt値を用いて、試料中のエボラウイルスRNAレベルの量の一貫した示度を示した。ホルムアルデヒド溶液を全てのウェルに添加し、付着細胞を固定した後、クリスタルバイオレットにより染色し、セルの付着を評価した。
【０２９０】
これらの結果を確認するため、第2のin vitroでの研究をMRC-5細胞において実施した。エボラウイルス感染を、より高い接種量(ウェル当たり5000 TCID50)とし、上清を2日後にAVL緩衝液に収集した。更に、ウェルの表面をRLT緩衝液により処理し、試料を採取して、付着細胞内のウイルスRNAレベルの評価を行った。加えて、使用した化合物の濃度を低くした。
【０２９１】
第1のin vitro試験によるエボラウイルスPCRアッセイのCt値を、MRC-5及びVeroE6の研究について、それぞれ表7及び8に示す。PCRアッセイは、高濃度では検出不能なエボラウイルス特異信号を示し、低濃度ではウイルスゲノムのレベルが減少した。
【０２９２】
【表７】
2017514887.tif 000047
【０２９３】
【表８】
2017514887.tif 000048
【０２９４】
モデル化合物16の抗ウイルス効果を確認するため、高用量のエボラウイルスに感染させたMRC-5細胞においてin vitroスクリーニングを繰り返し、2日間置いた。上清及び付着細胞からのCt値を、それぞれ表9及び10に示す。Ct値は、前回の研究よりも全体として低く、これは使用したウイルス接種量が高い結果である可能性が高い。結果は、前回の研究に一致しており、化合物16が、存在するウイルスゲノムの量を減少させたことを示している。
【０２９５】
【表９】
2017514887.tif 000049
【０２９６】
【表１０】
2017514887.tif 000050
【０２９７】
更にin vitroでの研究を実施し、技術準備スコア(Technology Readiness Score)、現在のエボラウイルスの流行に違いを生じさせる能力、及びエボラウイルスに対する効果の見込みにより特定した19種類の他の化合物と、モデル化合物16とを比較した。これら20種類の化合物(化合物16を含む)のウイルス増幅に対する影響を、エボラウイルスに感染させたMRC-5及びVeroE6細胞を用いて評価した。これら20種類の化合物のうち、化合物16は、両方の細胞タイプにおいて、最も高い2つのCt値の1つをもたらした。
【０２９８】
本明細書の保護対象及びその等価物について記載された上記実施例は、記載したものを含む多数の利点を有する。
【０２９９】
本開示の化合物は、ヒト血漿中で高い安定性を有する。本開示の化合物は、薬剤耐性菌を含む様々な病原体に対して高い抗細菌活性を示す。毒性の研究により、全ての化合物が、ヒト赤血球に対するよりも、細菌に対して選択性を有することが明らかとなった。本開示の化合物は、病原性の高いウイルスに対しても、高い抗ウイルス活性を有する。したがって、本開示の化合物は、非常に有利な抗菌特性を示す。上述した有利な抗細菌性及び抗ウイルス性の結果を鑑みて、本発明者は、本開示の化合物を他の種類の微生物、特に真菌類及び原生動物に対しても使用し得ると考える。
【０３００】
保護対象をその特定の実施形態を参照して相当に詳細に説明してきたが、他の実施形態も可能である。したがって、本発明の主旨及び範囲は、本明細書に含まれる実施形態の説明に限定されるべきではない。
【符号の説明】
【０３０１】
[図1]
Compound 2: 化合物2
Compound 6: 化合物6
Without plasma: 血漿なし
[図2]
Cell viability: 細胞生存率
Concentration: 濃度
Non-treated: 未処理
Compound 16: 化合物16
TritonX-treated: Triton X処理
[図3]
Control: 対照
Compound 16: 化合物16
Time (h): 時間(h)
[図4]
Fold of incrense in MIC: MICの増加倍数
Norfloxacin against S. aureus: 黄色ブドウ球菌に対するノルフロキサシン
Compound 16 against S. aureus: 黄色ブドウ球菌に対する化合物16
Colistin against E. coli: 大腸菌に対するコリスチン
Compound 16 against E. coli: 大腸菌に対する化合物16
Days: 日数
[図5]
Cell viability in biofilm: バイオフィルムにおける細胞生存率
Preincubated: プレインキュベート
Non-treated: 未処理
Erythromycin: エリスロマイシン
Norfloxacin: ノルフロキサシン
Linezolid: リネゾリド
Tetracycline: テトラサイクリン
Vancomycinバンコマイシン
Compound 16: 化合物16
[図6]
Cat: カタログ
Batch: バッチ
Stock: ストック
Recommended dose (Rd): 推奨用量(Rd)
Conc: 濃度
56.2mgを1.4mlの培養液に溶解させ、更に培養液において1:1希釈=20mg/ml
【図１】
2017514887.tif 000070
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【手続補正書】
【提出日】平成28年4月15日(2016.4.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Iの化合物
【化１】
2017514887.tif 000076
又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物であって、
nは、1、2、3、4、又は5であり、Yは、-CH2-、-CO-、-CONH-、-COO-からなる群から選択され、
A1及びA2は、1個又は最大4個の付加アミノ酸の配列から独立して選択され、前記アミノ酸は、L構造又はD構造から独立して選択され、A1及びA2は、1個以上のR2により随意に置換され、
Rは、C6-C28アルキル、C4-28アルケニル、C4-C28アルキン、C6-C18アリール、C3-C28シクロアルキル、飽和又は不飽和5乃至18員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものから選択され、Rは、1個以上のR2により随意に置換され、
R2は、水素、ハロゲン、CF3、CN、直鎖又は分岐C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C5-C6アリール、芳香族5乃至6員環ヘテロシクリルで、O、N、及びSから選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を有するものからなる群から独立して選択される、抗菌活性を示す化合物。
【請求項２】
Yは、-CH2-又は-CO-であり、
A1及びA2は、同じか又は異なっており、2個のアミノ酸残基から独立して選択され、前記アミノ酸は、L構造又はD構造から独立して選択され、Rは、C4-28アルキル、C6-18アリールから選択される、請求項1記載の化合物又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物。
【請求項３】
A1及びA2は、同じか又は異なっており、1、2、3、又は4個のアミノ酸残基から独立して選択され、前記アミノ酸残基は、L構造又はD構造から独立して選択され、正に帯電する、請求項1記載の化合物又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物。
【請求項４】
Yは、-CH2-であり、
N1は、正に帯電する、請求項1記載の化合物又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物。
【請求項５】
以下からなる群から選択される、請求項1記載の化合物又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物。
【化２】
2017514887.tif 000077
【化３】
2017514887.tif 000078
【化４】
2017514887.tif 000079
【化５】
2017514887.tif 000080
【化６】
2017514887.tif 000081
【化７】
2017514887.tif 000082
【化８】
2017514887.tif 000083
【化９】
2017514887.tif 000084
【化１０】
2017514887.tif 000085
【化１１】
2017514887.tif 000086
【化１２】
2017514887.tif 000087
【化１３】
2017514887.tif 000088
【化１４】
2017514887.tif 000089
【化１５】
2017514887.tif 000090
【化１６】
2017514887.tif 000091
【化１７】
2017514887.tif 000092
【請求項６】
以下の化合物である、請求項1記載の化合物又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物。
【化１８】
2017514887.tif 000093
【請求項７】
細菌、ウイルス、真菌類、及び原生動物からなる群から選択される微生物により生じた患者の疾患又は状態の治療に用いる、請求項1乃至6の何れかに記載の式(I)の化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物。
【請求項８】
細菌、ウイルス、真菌類、及び原生動物からなる群から選択される微生物の増殖の途絶又は阻害に用いる、請求項1乃至6の何れかに記載の式(I)の化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物。
【請求項９】
細菌、ウイルス、真菌類、及び原生動物からなる群から選択される微生物により生じた患者の疾患又は状態の治療における、請求項1乃至6の何れかに記載の式(I)の化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物の使用。
【請求項１０】
細菌、ウイルス、真菌類、及び原生動物からなる群から選択される微生物の増殖の途絶又は阻害する方法における、請求項1乃至6の何れかに記載の式(I)の化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物の使用。
【請求項１１】
請求項1乃至6の何れかに記載の式(I)の化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物を患者に投与することを含む、細菌、ウイルス、真菌類、及び原生動物からなる群から選択される微生物により生じた患者の疾患又は状態を治療する方法。
【請求項１２】
前記微生物は、細菌、ウイルス、及び真菌類からなる群から選択される、請求項7若しくは請求項8記載の化合物、又は請求項9若しくは請求項10記載の使用、又は請求項11記載の方法。
【請求項１３】
前記微生物は、細菌及びウイルスからなる群から選択される、請求項12記載の化合物、使用、又は方法。
【請求項１４】
前記微生物は、ウイルスである、請求項7乃至13の何れかに記載の化合物、使用、又は方法。
【請求項１５】
前記ウイルスは、エボラウイルスである、請求項14記載の化合物、使用、又は方法。
【請求項１６】
グラム陽性菌により生じた疾患又は状態を治療するための、請求項1乃至6の何れかに記載の式(I)の化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物。
【請求項１７】
グラム陰性菌により生じた疾患又は状態を治療するための、請求項1乃至6の何れかに記載の式(I)の化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物。
【請求項１８】
黄色ブドウ球菌、エンテロコッカス・フェシウム、及び大腸菌、又はその任意の組み合わせからなる群から選択される薬剤感受性菌により生じた疾患又は状態を治療するための、請求項1乃至6の何れかに記載の式(I)の化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物。
【請求項１９】
バンコマイシン耐性エンテロコッカス・フェシウム、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌、及びβ-ラクタム耐性肺炎桿菌、又はその任意の組み合わせからなる群から選択される薬剤感受性菌により生じた疾患又は状態を治療するための、請求項1乃至6の何れかに記載の式(I)の化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物。
【請求項２０】
医薬組成物を含む又は含まない抗菌性の被覆及び/又は表面を調製するための、請求項1乃至6の何れかに記載の式(I)の化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物。
【請求項２１】
金属、セラミクス、ガラス、ポリマー、プラスチック、繊維、及びその組み合わせからなる群から選択される材料による前記表面のための請求項20記載の化合物、又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物。
【請求項２２】
請求項1乃至6の何れかに記載の式(I)の化合物又はその塩及び担体を含む組成物。
【請求項２３】
請求項1乃至6の何れかに記載の式(I)の化合物又はその医薬的に許容可能な塩を、医薬的に許容可能な担体と共に、随意で1種類以上の他の医薬組成物と組み合わせて含む医薬組成物。
【請求項２４】
請求項1乃至6の何れかに記載の式(I)の化合物又はその立体異性体、医薬的に許容可能な塩、多形体、溶媒和物、及び水和物を調製する方法。
【国際調査報告】
2017514887.tif 000094
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2017514887.tif 000097
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