(57)【要約】  開示されるのは、血漿コレステロールを減少させる治療剤として有用な合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチド、それらの誘導体、及び関連ペプチド；該ペプチドを作る合成法；該ペプチドを含む医薬組成物、並びに開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチド及びそれらの組成物を用いた脂質及び代謝障害の治療方法である。この要約は、特定の技術分野における検索用の選別手段として意図されているものであり、本発明を制限する意図はない。【特許請求の範囲】
【請求項１】
アポリポタンパク質（アポＥ）の受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであって、
前記合成アポＥ模倣ペプチドは、脂肪酸部分、ω−アミノ脂肪酸部分、またはアセチル化ω−アミノ脂肪酸部分を含む、前記合成アポＥ模倣ペプチド。
【請求項２】
前記合成アポＥ模倣ペプチドが、前記アセチル化ω−アミノ脂肪酸部分を含む、請求項１に記載のペプチド。
【請求項３】
前記アセチル化ω−アミノ脂肪酸部分が、Ａｃ−Ａｈａにある、請求項２に記載のペプチド。
【請求項４】
前記Ａｃ−Ａｈａが、前記ペプチドのＮ末端である、請求項２に記載のペプチド。
【請求項５】
前記合成アポＥ模倣ペプチドが、前記ω−アミノ脂肪酸部分を含む、請求項１に記載のペプチド。
【請求項６】
前記ω−アミノ脂肪酸部分が、４−アミノ−ブタノイル、６−アミノ−カプロイル、８−アミノ−オクタノイル、１０−アミノ−デカノイル、１２−アミノ−ラウロイル、１４−アミノ−ミリストイル、１４−アミノ−ミリストレオイル、１６−アミノ−パルミトイル、１８−アミノ−ステアロイル、１８−アミノ−オレオイル、１６−アミノ−パルミトレオイル、１８−アミノ−リノレオイル、１８−アミノ−リノレノイル、または２０−アミノ−アラキドノイルである、請求項５に記載のペプチド。
【請求項７】
前記ω−アミノ基が、アセチル化される、請求項６に記載のペプチド。
【請求項８】
前記脂肪酸部分、前記ω−アミノ脂肪酸部分、または前記アセチル化ω−アミノ脂肪酸部分が、前記ペプチドのＮ末端である、請求項１に記載のペプチド。
【請求項９】
前記脂質関連ペプチドが、クラスＡの両親媒性の螺旋ドメインを含む、請求項１に記載のペプチド。
【請求項１０】
前記クラスＡの両親媒性の螺旋ドメインが、ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ（配列番号５）、ＤＷＬＲＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＲＥＡＦ（配列番号６１８）、ＤＷＬＲＡＬＹＤＫＶＡＥＫＬＲＥＡＬ（配列番号６１９）、ＤＬＬＲＡＬＹＤＫＶＡＥＫＬＲＥＡＷ（配列番号６２０）、またはＦＡＥＫＬＫＥＡＶＫＤＹＦＡＫＬＷＤ（配列番号６１６）である、請求項９に記載のペプチド。
【請求項１１】
アポＥの前記受容体結合ドメインが、前記脂質関連ペプチドに共有結合される、請求項９に記載のペプチド。
【請求項１２】
前記アポリポタンパク質Ｅが、ヒト、マウス、ウサギ、サル、ラット、ウシ、ブタ及びイヌからなる群から選択される種由来である、請求項１に記載のペプチド。
【請求項１３】
前記合成ペプチドが、前記Ｃ末端でアミド基を用いて保護される、請求項１に記載のペプチド。
【請求項１４】
アポＥの前記受容体結合ドメインが、ＬＲＫＬＲＫＲＬＬＲ（配列番号４）、ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ（配列番号１１）、ＬＲＫＭＲＫＲＬＭＲ（配列番号７）、ＲＬＴＲＫＲＧＬＫ（配列番号１３）、ＬＲＲＭＲＲＲＬＭＲ（配列番号６２１）、またはＲＬＴＲＲＲＧＫ（配列番号６２２）である、請求項１に記載のペプチド。
【請求項１５】
アポＥの前記受容体結合ドメインが、ＬＲＫＬＲＫＲＬＬＲ（配列番号４）、ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ（配列番号１１）、ＬＲＫＭＲＫＲＬＭＲ（配列番号７）、またはＲＬＴＲＫＲＧＬＫ（配列番号１３）である、請求項１４に記載のペプチド。
【請求項１６】
前記合成アポＥ模倣ペプチドが、Ａｃ−Ａｈａ−ｈＥ１８Ａ−ＮＨ２またはＡｃ−Ａｈａ−［Ｒ］ｈＥ１８Ａ−ＮＨ２である、請求項１に記載のペプチド。
【請求項１７】
前記合成アポＥ模倣ペプチドが、ブタノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６２３）；ヘキサノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６２４）；オクタノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６２５）；デカノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６２６）；ラウロイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６２７）；ミリストイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６２８）；パルミトイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６２９）；ステアロイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６３０）；パルミトレオイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６３１）；アラキドイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６３２）；ベヘノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６３３）；オレオイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６３４）；リシノレオイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６３５）；リノレノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６３６）；バクセノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６３７）；ガドレオイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６３８）；エルコイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６３９）；セトレオイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６４０）；ネルボノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６４１）；アドレノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６４２）；α−リノレノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６４３）；γ−リノレノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６４４）；ＥＰＡ−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６４５）；またはＤＨＡ−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６４６）である、請求項１に記載のペプチド。
【請求項１８】
前記合成アポＥ模倣ペプチドが、オクタノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６２５）；ミリストイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６２８）；オレオイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６３４）；またはパルミトイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６２９）である、請求項１に記載のペプチド。
【請求項１９】
前記合成アポＥ模倣ペプチドが、ミリストイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６２８）である、請求項１に記載のペプチド。
【請求項２０】
前記合成アポＥ模倣ペプチドが、４−アミノ−ブタノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６４８）；６−アミノ−ヘキサノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６４９）；８−アミノ−オクタノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６５０）；１０−アミノ−デカノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６５１）；１２−アミノ−ラウロイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６５２）；１４−アミノ−ミリストイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６５３）；１６−アミノ−パルミトイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６５４）；１６−アミノ−パルミトレオイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６５５）；１８−アミノ−ステアロイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６５６）；１８−アミノ−オレオイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６５７）；１８−アミノ−リノレノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６５８）；または２０−アミノ−アラキドイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６５９）である、請求項１に記載のペプチド。
【請求項２１】
前記合成アポＥ模倣ペプチドが、４−アミノ−ブタノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６４８）；６−アミノ−ヘキサノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６４９）；８−アミノ−オクタノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６５０）；１０−アミノ−デカノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６５１）；１２−アミノ−ラウロイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６５２）；１４−アミノ−ミリストイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６５３）；または１６−アミノ−パルミトイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６５４）である、請求項１に記載のペプチド。
【請求項２２】
前記合成アポＥ模倣ペプチドが、６−アミノ−ヘキサノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６４９）である、請求項１に記載のペプチド。
【請求項２３】
請求項１〜１９のいずれか１項に記載の合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドと薬学上許容可能な担体とを含む、医薬組成物。
【請求項２４】
請求項１〜１９に記載の合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つを対象に投与することを含む方法であって、それによって、血漿ＬＤＬ、血漿ＶＬＤＬ、または双方が影響を受ける、前記方法。
【請求項２５】
前記合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドを、前記合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドと薬学上許容可能な担体とを含む組成物として投与する、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
ＬＤＬの前記対象の細胞への結合を高める、請求項２４に記載の方法。
【請求項２７】
前記対象の細胞によるＬＤＬの分解を増加させる、請求項２４に記載の方法。
【請求項２８】
前記対象におけるＬＤＬコレステロールを低下させる、請求項２４に記載の方法。
【請求項２９】
ＶＬＤＬの前記対象の細胞への結合を高める、請求項２４に記載の方法。
【請求項３０】
前記対象の細胞によるＶＬＤＬの分解を増加させる、請求項２４に記載の方法。
【請求項３１】
前記対象におけるＶＬＤＬコレステロールを低下させる、請求項２４に記載の方法。
【請求項３２】
前記対象におけるコレステロールの血漿中総濃度を低下させる、請求項２４に記載の方法。
【請求項３３】
前記合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドを、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１２ｍｇ／ｋｇの量で投与する、請求項２４に記載の方法。
【請求項３４】
前記対象が、冠状動脈疾患、関節リウマチ、糖尿病、アルツハイマー病、ＰＡＤ、脳血管疾患、糖尿病由来の循環器疾患、黄斑変性症、鬱血性心不全、及び／または全身性エリテマトーデスを有する、請求項２４に記載の方法。
【請求項３５】
請求項１〜１９に記載の合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、血漿コレステロールの減少方法。
【請求項３６】
前記合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドを、前記合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドと薬学上許容可能な担体とを含む組成物として投与する、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
ＬＤＬの前記対象の細胞への結合を高める、請求項３５に記載の方法。
【請求項３８】
前記対象の細胞によるＬＤＬの分解を増加させる、請求項３５に記載の方法。
【請求項３９】
前記対象におけるＬＤＬコレステロールを低下させる、請求項３５に記載の方法。
【請求項４０】
ＶＬＤＬの前記対象の細胞への結合を高める、請求項３５に記載の方法。
【請求項４１】
前記対象の細胞によるＶＬＤＬの分解を増加させる、請求項３５に記載の方法。
【請求項４２】
前記対象におけるＶＬＤＬコレステロールを低下させる、請求項３５に記載の方法。
【請求項４３】
前記対象におけるコレステロールの血漿中総濃度を低下させる、請求項２２に記載の方法。
【請求項４４】
前記合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドを、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１２ｍｇ／ｋｇの量で投与する、請求項３５に記載の方法。
【請求項４５】
前記対象が、冠状動脈疾患、関節リウマチ、糖尿病、アルツハイマー病、ＰＡＤ、脳血管疾患、糖尿病由来の循環器疾患、黄斑変性症、鬱血性心不全、及び／または全身性エリテマトーデスを有する、請求項３５に記載の方法。
【請求項４６】
請求項１〜１９に記載の合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、アテローム性動脈硬化症の治療方法。
【請求項４７】
前記合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドを、前記合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドと薬学上許容可能な担体とを含む組成物として投与する、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
ＬＤＬの前記対象の細胞への結合を高める、請求項４６に記載の方法。
【請求項４９】
前記対象の細胞によるＬＤＬの分解を増加させる、請求項４６に記載の方法。
【請求項５０】
前記対象におけるＬＤＬコレステロールを低下させる、請求項４６に記載の方法。
【請求項５１】
ＶＬＤＬの前記対象の細胞への結合を高める、請求項４６に記載の方法。
【請求項５２】
前記対象の細胞によるＶＬＤＬの分解を増加させる、請求項４６に記載の方法。
【請求項５３】
前記対象におけるＶＬＤＬコレステロールを低下させる、請求項４６に記載の方法。
【請求項５４】
前記対象におけるコレステロールの血漿中総濃度を低下させる、請求項４６に記載の方法。
【請求項５５】
前記合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドを、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１２ｍｇ／ｋｇの量で投与する、請求項４６に記載の方法。
【請求項５６】
前記対象が、冠状動脈疾患、関節リウマチ、糖尿病、アルツハイマー病、ＰＡＤ、脳血管疾患、糖尿病由来の循環器疾患、黄斑変性症、鬱血性心不全、及び／または全身性エリテマトーデスを有する、請求項４６に記載の方法。
【請求項５７】
脂質障害を有する対象の治療方法であって、
請求項１〜１９に記載の合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つまたはその組成物を前記対象投与することを含む、前記方法。
【請求項５８】
前記合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドを、前記合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドと薬学上許容可能な担体とを含む組成物として投与する、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
ＬＤＬの前記対象の細胞への結合を高める、請求項５７に記載の方法。
【請求項６０】
前記対象の細胞によるＬＤＬの分解を増加させる、請求項５７に記載の方法。
【請求項６１】
前記対象におけるＬＤＬコレステロールを低下させる、請求項５７に記載の方法。
【請求項６２】
ＶＬＤＬの前記対象の細胞への結合を高める、請求項５７に記載の方法。
【請求項６３】
前記対象の細胞によるＶＬＤＬの分解を増加させる、請求項５７に記載の方法。
【請求項６４】
前記対象におけるＶＬＤＬコレステロールを低下させる、請求項５７に記載の方法。
【請求項６５】
前記対象におけるコレステロールの血漿中総濃度を低下させる、請求項５７に記載の方法。
【請求項６６】
前記合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドを、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１２ｍｇ／ｋｇの量で投与する、請求項５７に記載の方法。
【請求項６７】
前記脂質障害が、冠状動脈疾患、関節リウマチ、糖尿病、アルツハイマー病、ＰＡＤ、脳血管疾患、糖尿病由来の循環器疾患、黄斑変性症、鬱血性心不全、及び／または  全身性エリテマトーデスである、請求項５７に記載の方法。
【請求項６８】
少なくとも１回の治療サイクルとそれに続く休止期とを含む投与計画であって、前記治療サイクルは、有効量の請求項１〜１９に記載のアポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを投与して、前記アポＥ模倣ペプチドの中止後、持続する治療効果を可能にすることを含み、前記アポＥ模倣ペプチドは、前記休止期の間、投与されない、前記投与計画。
【請求項６９】
前記治療サイクルが、週に１回で３ヵ月間、有効量の前記アポＥ模倣ペプチドを投与することを含む、請求項６８に記載の投与計画。
【請求項７０】
前記治療サイクルが、２週ごとに１回の１２週間まで有効量の前記アポＥ模倣ペプチドを投与することを含む、請求項６８に記載の投与計画。
【請求項７１】
前記投与計画が、前記休止期の後に第２の治療サイクルをさらに含む、請求項６８に記載の投与計画。
【請求項７２】
急性冠症候群（ＡＣＳ）の治療方法であって、少なくとも１回の治療サイクルの間、有効量の請求項１〜１９に記載のアポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを対象に投与することを含み、前記治療サイクルは、有効量のアポＥ模倣ペプチドを投与して、前記アポＥ模倣ペプチドの中止後、持続する治療効果を可能にすることを含み、前記治療サイクルには休止期が続き、アポＥ模倣ペプチドは、前記休止期の間、投与されない、前記治療方法。
【請求項７３】
前記休止期が、少なくとも４週間である、請求項７２に記載の方法。
【請求項７４】
前記休止期の後に第２の治療サイクルをさらに含む、請求項７２に記載の方法。
【請求項７５】
前記第２の治療サイクルを４週間の休止期の後に投与する、請求項７４に記載の方法。
【請求項７６】
前記第２の治療サイクルを当初の治療サイクルの開始から１年で投与する、請求項７４に記載の方法。
【請求項７７】
アポＥ模倣ペプチド以外のＡＣＳ治療剤を前記休止期中に投与する、請求項５９に記載の方法。
【請求項７８】
アポＥ模倣ペプチド以外のＡＣＳ治療剤が、従来のＬＤＬ低下療法またはＨＤＬ上昇療法である、請求項６４に記載の方法。
【請求項７９】
前記従来のＬＤＬ低下療法が、スタチンである、請求項６５に記載の方法。
【請求項８０】
前記ＨＤＬ上昇療法が、アポＡ１上昇剤、ＣＥＴＰ阻害剤、ホスホリパーゼＡ２阻害剤、アポＡ１ミラノ、またはアポＡ１模倣体である、請求項６５に記載の方法。
【請求項８１】
前記治療サイクルが、週に１回で３ヵ月間、有効量のアポＥ模倣ペプチドを投与することを含む、請求項７２に記載の方法。
【請求項８２】
請求項１〜１９に記載のペプチドのいずれか１つに特異的に結合するモノクローナル抗体。
【請求項８３】
アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであって、前記合成アポＥ模倣ペプチドは、アセチル化アミノヘキサン酸（Ａｃ−ＡＨＡ）を含み、アポリポタンパク質Ｅの前記受容体結合ドメインは、スクランブルされる、前記合成アポＥ模倣ペプチド。
【請求項８４】
アポリポタンパク質Ｅの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとからなる合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドであって、受容体結合ドメインは、前記脂質関連ペプチドに共有結合され、アポリポタンパク質Ｅの前記受容体結合ドメインと前記脂質関連ペプチドの双方は、スクランブルされる、前記合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチド。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、その全体が参照によって本明細書に組み入れられる２０１４年７月３１日に出願された米国特許仮出願番号第６２／０３１，５８５号の利益を主張する。
【０００２】
連邦支援の研究に関する声明
本発明は、国立衛生研究所によって授与されたＲＯ１ＨＬ０９０８０３のもとで政府の支援を受けた。政府は本発明に特定の権利を有する。
【０００３】
ＥＦＳ−ＷＥＢを介してテキストファイルとして提出された配列表への参照
２０１５年７月２０日に創られ、２２９，３７６バイトのサイズを有する「２１０８５．０１８７Ｐ１＿ＳＴ２５．ｔｘｔ」と名付けられたテキストファイルとして２０１５年７月２０日に提出された配列表は、３７Ｃ．Ｆ．Ｒ．§１．５２（ｅ）（５）に従って参照によって本明細書に組み入れられる。
【背景技術】
【０００４】
米国では、男性及び女性の双方にて心臓疾患は主な死亡の原因である。疾患に対する遺伝的素養、性別、喫煙や食事のような生活習慣因子、年齢、高血圧、及び高コレステロール血症を含む高脂血症を含むいくつかの原因因子が循環器疾患の発症に関与する。これらの因子のいくつか、特に、高脂血症及び高コレステロール血症（高い血中コレステロール濃度）は、アテローム性動脈硬化症に関連する有意なリスク因子を提供する。
【０００５】
アテローム性動脈硬化症は、血管における低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）分子の蓄積が原因で生じる炎症反応に関連する。それは何年間も無症候性である。アテローム性動脈硬化は、血管の硬化及び狭窄の原因となる。例えば、生活習慣の変更、投薬及び内科的治療のような、アテローム性動脈硬化症のためにいくつかの治療がある。スタチン類は、アテローム性動脈硬化症の周知の治療法である。スタチン類は、心臓のリスクを減らすことが判明しているが、スタチン療法の中止は保護効果を無効にする（Ｈｅｅｓｃｈｅｎら  Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ．１０５：１４４６−１４５２，２００２）。
【０００６】
アテローム性動脈硬化症を治療することに対する現在のアプローチは、早期の介入及び生涯にわたる治療を提供することである。このアプローチは、生涯過程の早期に無症状の患者を特定することを必要とし、リスクは年齢と共に増加するために生涯にわたって治療を維持することを必要とするので問題がある。さらに、最も有効な現在利用可能な治療法は、一次の介入であれまたは二次の介入であれ、患者の全てにおいて主要な心臓事象を防ぐことはできない。従って、アテローム性動脈硬化症を減らすことにおいて迅速な利益を提供することができ、持続する投与を必要としない長期の効果を有する治療法に対するニーズがある。本明細書で開示された組成物及び方法は、治療を中止した後でさえ持続する治療効果を伴うアテローム性動脈硬化症の治療法を提供する。
【発明の概要】
【０００７】
開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポリポタンパク質Ｅ（アポＥ）模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、アセチル化アミノヘキサン酸（Ａｃ−Ａｈａ）を含む。
【０００８】
また、開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、Ａｃ−Ａｈａを含み、Ａｃ−Ａｈａは、ペプチドのＮ末端であってもよい。
【０００９】
また、開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、Ａｃ−Ａｈａを含み、脂質関連ペプチドは、クラスＡの両親媒性の螺旋ドメインを含む。例えば、クラスＡの両親媒性の螺旋ドメインは、ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ（配列番号５）、ＤＷＬＲＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＲＥＡＦ（配列番号６１８）、ＤＷＬＲＡＬＹＤＫＶＡＥＫＬＲＥＡＬ（配列番号６１９）、ＤＬＬＲＡＬＹＤＫＶＡＥＫＬＲＥＡＷ（配列番号６２０）、またはＦＡＥＫＬＫＥＡＶＫＤＹＦＡＫＬＷＤ（配列番号６１６）であってもよい。
【００１０】
また、開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、Ａｃ−Ａｈａを含み、アポＥの受容体結合ドメインは、脂質関連ペプチドに共有結合されてもよい。
【００１１】
また、開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、Ａｃ−Ａｈａを含み、前記アポリポタンパク質Ｅは、ヒト、マウス、ウサギ、サル、ラット、ウシ、ブタ及びイヌからなる群から選択される種由来である。
【００１２】
また、開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、Ａｃ−Ａｈａを含み、前記合成ペプチドは、Ｃ末端でアミド基を用いて保護される。
【００１３】
また、開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、Ａｃ−Ａｈａを含み、アポＥの受容体結合ドメインは、ＬＲＫＬＲＫＲＬＬＲ（配列番号４）、ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ（配列番号１１）、ＬＲＫＭＲＫＲＬＭＲ（配列番号７）、またはＲＬＴＲＫＲＧＬＫ（配列番号１３）である。
【００１４】
また、開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、Ａｃ−Ａｈａを含み、アポＥの受容体結合ドメインは、ＬＲＫＬＲＫＲＬＬＲ（配列番号４）、ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ（配列番号１１）、ＬＲＫＭＲＫＲＬＭＲ（配列番号７）、ＲＬＴＲＫＲＧＬＫ（配列番号１３）、ＬＲＲＭＲＲＲＬＭＲ（配列番号６２１）、またはＲＬＴＲＲＲＧＫ（配列番号６２２）である。
【００１５】
また、開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、Ａｃ−Ａｈａを含み、合成アポＥ模倣ペプチドは、Ａｃ−Ａｈａ−ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2またはＡｃ−Ａｈａ−［Ｒ］ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2であってもよい。
【００１６】
開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、脂肪酸部分、ω−アミノ脂肪酸部分、またはアセチル化ω−アミノ脂肪酸部分を含む。
【００１７】
開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、アセチル化ω−アミノ脂肪酸部分を含み、アセチル化ω−アミノ脂肪酸部分は、ペプチドのＮ末端である。いくつかの態様において、ω−アミノ脂肪酸部分は、脂質関連ペプチドとアポＥの受容体結合ドメインの間に挿入してもよい。
【００１８】
開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、脂肪酸部分、ω−アミノ脂肪酸部分、またはアセチル化ω−アミノ脂肪酸部分を含み、脂質関連ペプチドは、クラスＡの両親媒性の螺旋ドメインを含む。例えば、クラスＡの両親媒性の螺旋ドメインは、ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ（配列番号５）、ＤＷＬＲＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＲＥＡＦ（配列番号６１８）、ＤＷＬＲＡＬＹＤＫＶＡＥＫＬＲＥＡＬ（配列番号６１９）、ＤＬＬＲＡＬＹＤＫＶＡＥＫＬＲＥＡＷ（配列番号６２０）、またはＦＡＥＫＬＫＥＡＶＫＤＹＦＡＫＬＷＤ（配列番号６１６）である。
【００１９】
開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、脂肪酸部分、ω−アミノ脂肪酸部分、またはアセチル化ω−アミノ脂肪酸部分を含み、脂質関連ペプチドは、クラスＡの両親媒性の螺旋ドメインを含み、アポＥの受容体結合ドメインは、脂質関連ペプチドに共有結合されてもよい。
【００２０】
開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、脂肪酸部分、ω−アミノ脂肪酸部分、またはアセチル化ω−アミノ脂肪酸部分を含み、前記アポリポタンパク質Ｅは、ヒト、マウス、ウサギ、サル、ラット、ウシ、ブタ及びイヌからなる群から選択される種由来であってもよい。
【００２１】
開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、脂肪酸部分、ω−アミノ脂肪酸部分、またはアセチル化ω−アミノ脂肪酸部分を含み、前記合成ペプチドは、Ｃ末端でアミド基を用いて保護される。
【００２２】
開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、脂肪酸部分、ω−アミノ脂肪酸部分、またはアセチル化ω−アミノ脂肪酸部分を含み、アポＥの受容体結合ドメインは、ＬＲＫＬＲＫＲＬＬＲ（配列番号４）、ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ（配列番号１１）、ＬＲＫＭＲＫＲＬＭＲ（配列番号７）、またはＲＬＴＲＫＲＧＬＫ（配列番号１３）であってもよい。アポＥの受容体結合ドメインは、ＬＲＫＬＲＫＲＦＦＲ（配列番号１２）、ＬＲＫＬＰＫＲＬＬＲ（配列番号８）、ＬＲＮＶＲＫＲＬＶＲ（配列番号９）、ＭＲＫＬＲＫＲＶＬＲ（配列番号１０）、ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ（配列番号１１）、ＬＲＫＬＲＫＲＦＦＲ（配列番号１２）、ＬＲＫＬＲＫＲＬＬＲ（配列番号４）、またはＬＲＫＭＲＫＲＬＭＲ（配列番号７）であってもよいが、これらに限定されない。
【００２３】
開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、脂肪酸部分、ω−アミノ脂肪酸部分、またはアセチル化ω−アミノ脂肪酸部分を含み、アポＥの受容体結合ドメインは、ＬＲＫＬＲＫＲＬＬＲ（配列番号４）、ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ（配列番号１１）、ＬＲＫＭＲＫＲＬＭＲ（配列番号７）、ＲＬＴＲＫＲＧＬＫ（配列番号１３）、ＬＲＲＭＲＲＲＬＭＲ（配列番号６２１）、またはＲＬＴＲＲＲＧＫ（配列番号２２）であってもよい。
【００２４】
開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、脂肪酸部分、ω−アミノ脂肪酸部分、またはアセチル化ω−アミノ脂肪酸部分を含み、合成アポＥ模倣ペプチドは、ブタノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６２３）；ヘキサノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６２４）；オクタノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６２５）；デカノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６２６）；ラウロイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６２７）；ミリストイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６２８）；パルミトイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６２９）；ステアロイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６３０）；パルミトレオイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６３１）；アラキドイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６３２）；ベヘノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６３３）；オレオイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６３４）；リシノレオイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６３５）；リノレノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６３６）；バクセノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６３７）；ガドレオイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６３８）；エルコイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６３９）；セトレオイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６４０）；ネルボノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６４１）；アドレノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６４２）；α−リノレノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６４３）；γ−リノレノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６４４）；ＥＰＡ−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６４５）；またはＤＨＡ−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６４６）であってもよい。上述において、脂肪酸部分は、左側に示し、ペプチドＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ（配列番号１１）に結合する。「ＥＰＡ」は、５，８，１１，１���，１７−エイコサペンタエン酸に由来する部分を示し；「ＤＨＡ」は、４，７，１０，１３，１６，１９−ドコサヘキサエン酸に由来する部分を示す。
【００２５】
開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、天然油または脂肪油、例えば、魚油に由来する脂肪酸部分を含み、合成アポＥ模倣ペプチドは、（魚油）−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６４７）であってもよい。上述において、「（魚油）」は、魚油中の脂肪酸（ＥＰＡ及びＤＨＡなどの魚油成分を含むが、これらに限定されない）が、ペプチドＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ（配列番号１１）に結合することを示す。従って、合成アポＥ模倣ペプチドは、それらを調製するために使用した魚油に由来する脂肪酸基を含むペプチドの混合物である。
【００２６】
開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、脂肪酸部分、ω−アミノ脂肪酸部分、またはアセチル化ω−アミノ脂肪酸部分を含み、合成アポＥ模倣ペプチドは、４−アミノ−ブタノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６４８）；６−アミノ−ヘキサノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６４９）；８−アミノ−オクタノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６５０）；１０−アミノ−デカノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６５１）；１２−アミノ−ラウロイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６５２）；１４−アミノ−ミリストイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６５３）；１６−アミノ−パルミトイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６５４）；１６−アミノ−パルミトレオイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６５５）；１８−アミノ−ステアロイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６５６）；１８−アミノ−オレオイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６５７）；１８−アミノ−リノレノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６５８）；または２０−アミノ−アラキドイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６５９）であってもよい。上述において、脂肪酸部分は、左側に示し、ペプチドＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ（配列番号１１）に結合する。
【００２７】
開示されるのは、本明細書で開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つと薬学上許容可能な担体とを含む医薬組成物である。
【００２８】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを対象に投与することを含む方法であって、それによって、血漿ＬＤＬ、血漿ＶＬＤＬ、または双方が影響を受ける。
【００２９】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを対象に投与することを含む方法であって、それによって、血漿ＬＤＬ、血漿ＶＬＤＬ、または双方が影響を受け、合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドを、合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドと薬学上許容可能な担体とを含む組成物として投与する。
【００３０】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを対象に投与することを含む方法であって、それによって、血漿ＬＤＬ、血漿ＶＬＤＬ、または双方が影響を受け、ＬＤＬの対象の細胞への結合を高める。
【００３１】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを対象に投与することを含む方法であって、それによって、血漿ＬＤＬ、血漿ＶＬＤＬ、または双方が影響を受け、対象の細胞によるＬＤＬの分解を増加させる。
【００３２】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを対象に投与することを含む方法であって、それによって、血漿ＬＤＬ、血漿ＶＬＤＬ、または双方が影響を受け、対象におけるＬＤＬコレステロールを低下させる。
【００３３】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを対象に投与することを含む方法であって、それによって、血漿ＬＤＬ、血漿ＶＬＤＬ、または双方が影響を受け、ＶＬＤＬの対象の細胞への結合を高める。
【００３４】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを対象に投与することを含む方法であって、それによって、血漿ＬＤＬ、血漿ＶＬＤＬ、または双方が影響を受け、対象の細胞によるＶＬＤＬの分解を増加させる。
【００３５】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを対象に投与することを含む方法であって、それによって、血漿ＬＤＬ、血漿ＶＬＤＬ、または双方が影響を受け、対象におけるＶＬＤＬコレステロールを低下させる。
【００３６】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを対象に投与することを含む方法であって、それによって、血漿ＬＤＬ、血漿ＶＬＤＬ、または双方が影響を受け、対象におけるコレステロールの血漿中総濃度を低下させる。
【００３７】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを対象に投与することを含む方法であって、それによって、血漿ＬＤＬ、血漿ＶＬＤＬ、または双方が影響を受け、前記合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドを、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１２ｍｇ／ｋｇの量で投与する。
【００３８】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを対象に投与することを含む方法であって、それによって、血漿ＬＤＬ、血漿ＶＬＤＬ、または双方が影響を受け、対象は、冠状動脈疾患、関節リウマチ、糖尿病、アルツハイマー病、末梢動脈疾患（ＰＡＤ）、脳血管疾患、糖尿病由来の循環器疾患、黄斑変性症、鬱血性心不全、及び／または全身性エリテマトーデスを有する。
【００３９】
また、開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、血漿コレステロールの減少方法である。
【００４０】
開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、血漿コレステロールの減少方法であり、合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドを、合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドと薬学上許容可能な担体とを含む組成物として投与する。
【００４１】
開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、血漿コレステロールの減少方法であり、ＬＤＬの対象の細胞への結合を高める。
【００４２】
開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、血漿コレステロールの減少方法であり、対象の細胞によるＬＤＬの分解を増加させる。
【００４３】
開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、血漿コレステロールの減少方法であり、対象におけるＬＤＬコレステロールを低下させる。
【００４４】
開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、血漿コレステロールの減少方法であり、ＶＬＤＬの対象の細胞への結合を高める。
【００４５】
開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、血漿コレステロールの減少方法であり、対象の細胞によるＶＬＤＬの分解を増加させる。
【００４６】
開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、血漿コレステロールの減少方法であり、対象におけるＶＬＤＬコレステロールを低下させる。
【００４７】
開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、血漿コレステロールの減少方法であり、対象におけるコレステロールの血漿中総濃度を低下させる。
【００４８】
開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、血漿コレステロールの減少方法であり、前記合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドを、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１２ｍｇ／ｋｇの量で投与する。
【００４９】
開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、血漿コレステロールの減少方法であり、対象は、冠状動脈疾患、関節リウマチ、糖尿病、アルツハイマー病、ＰＡＤ、脳血管疾患、糖尿病由来の循環器疾患、黄斑変性症、鬱血性心不全、及び／または全身性エリテマトーデスを有する。
【００５０】
また、開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、アテローム性動脈硬化症の治療方法である。
【００５１】
開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、アテローム性動脈硬化症の治療方法であり、合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドを、合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドと薬学上許容可能な担体とを含む組成物として投与する。
【００５２】
開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、アテローム性動脈硬化症の治療方法であり、ＬＤＬの対象の細胞への結合を高める。
【００５３】
開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、アテローム性動脈硬化症の治療方法であり、対象の細胞によるＬＤＬの分解を増加させる。
【００５４】
開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、アテローム性動脈硬化症の治療方法であり、対象におけるＬＤＬコレステロールを低下させる。
【００５５】
開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、アテローム性動脈硬化症の治療方法であり、ＶＬＤＬの対象の細胞への結合を高める。
【００５６】
開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、アテローム性動脈硬化症の治療方法であり、対象の細胞によるＶＬＤＬの分解を増加させる。
【００５７】
開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、アテローム性動脈硬化症の治療方法であり、対象におけるＶＬＤＬコレステロールを低下させる。
【００５８】
開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、アテローム性動脈硬化症の治療方法であり、対象におけるコレステロールの血漿中総濃度を低下させる。
【００５９】
開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、アテローム性動脈硬化症の治療方法であり、前記合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドを、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１２ｍｇ／ｋｇの量で投与する。
【００６０】
開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、アテローム性動脈硬化症の治療方法であり、対象は、冠状動脈疾患、関節リウマチ、糖尿病、アルツハイマー病、ＰＡＤ、脳血管疾患、糖尿病由来の循環器疾患、黄斑変性症、鬱血性心不全、及び／または全身性エリテマトーデスを有する。
【００６１】
また、開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つまたはその組成物の有効量を対象に投与することを含む、脂質障害を有する対象の治療方法である。
【００６２】
開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つまたはその組成物の有効量を対象に投与することを含む、脂質障害を有する対象の治療方法であり、合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドを、合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドと薬学上許容可能な担体とを含む組成物として投与する。
【００６３】
開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つまたはその組成物の有効量を対象に投与することを含む、脂質障害を有する対象の治療方法であり、ＬＤＬの対象の細胞への結合を高める。
【００６４】
開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つまたはその組成物の有効量を対象に投与することを含む、脂質障害を有する対象の治療方法であり、対象の細胞によるＬＤＬの分解を増加させる。
【００６５】
開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つまたはその組成物の有効量を対象に投与することを含む、脂質障害を有する対象の治療方法であり、対象におけるＬＤＬコレステロールを低下させる。
【００６６】
開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つまたはその組成物の有効量を対象に投与することを含む、脂質障害を有する対象の治療方法であり、ＶＬＤＬの対象の細胞への結合を高める。
【００６７】
開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つまたはその組成物の有効量を対象に投与することを含む、脂質障害を有する対象の治療方法であり、対象の細胞によるＶＬＤＬの分解を増加させる。
【００６８】
開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つまたはその組成物の有効量を対象に投与することを含む、脂質障害を有する対象の治療方法であり、対象におけるＶＬＤＬコレステロールを低下させる。
【００６９】
開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つまたはその組成物の有効量を対象に投与することを含む、脂質障害を有する対象の治療方法であり、対象におけるコレステロールの血漿中総濃度を低下させる。
【００７０】
開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つまたはその組成物の有効量を対象に投与することを含む、脂質障害を有する対象の治療方法であり、前記合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドを、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１２ｍｇ／ｋｇの量で投与する。
【００７１】
開示されるのは、開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのいずれか１つまたはその組成物の有効量を対象に投与することを含む、脂質障害を有する対象の治療方法であり、脂質障害は、冠状動脈疾患、関節リウマチ、糖尿病、アルツハイマー病、ＰＡＤ、脳血管疾患、糖尿病由来の循環器疾患、黄斑変性症、鬱血性心不全、及び／または全身性エリテマトーデスである。
【００７２】
また、開示されるのは、少なくとも１回の治療サイクルとそれに続く休止期とを含む投与計画であって、治療サイクルは、有効量の開示されたアポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを投与して、アポＥ模倣ペプチドの中止後、持続する治療効果を可能にすることを含み、アポＥ模倣ペプチドは、休止期の間、投与されない。場合によっては、治療サイクルは、週に１回で３ヵ月間、有効量のアポＥ模倣ペプチドを投与することを含む。場合によっては、治療サイクルは、２週ごとに１回の１２週間まで有効量のアポＥ模倣ペプチドを投与することを含む。
【００７３】
開示されるのは、少なくとも１回の治療サイクルとそれに続く休止期とを含む投与計画であって、治療サイクルは、有効量の開示されたアポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを投与して、アポＥ模倣ペプチドの中止後、持続する治療効果を可能にすることを含み、アポＥ模倣ペプチドは、休止期の間、投与されず、投与計画は、休止期の後に第２の治療サイクルをさらに含む。
【００７４】
また、開示されるのは、急性冠症候群（ＡＣＳ）の治療方法であって、少なくとも１回の治療サイクルの間、有効量の開示されたアポＥ模倣ペプチドのいずれかを対象に投与することを含み、治療サイクルは、有効量のアポＥ模倣ペプチドを投与して、アポＥ模倣ペプチドの中止後、持続する治療効果を可能にすることを含み、治療サイクルには休止期が続き、アポＥ模倣ペプチドは、休止期の間、投与されない。
【００７５】
開示されるのは、急性冠症候群（ＡＣＳ）の治療方法であって、少なくとも１回の治療サイクルの間、有効量の開示されたアポＥ模倣ペプチドのいずれかを対象に投与することを含み、治療サイクルは、有効量のアポＥ模倣ペプチドを投与して、アポＥ模倣ペプチドの中止後、持続する治療効果を可能にすることを含み、治療サイクルには休止期が続き、アポＥ模倣ペプチドは、休止期の間、投与されず、休止期は、少なくとも４週間である。
【００７６】
開示されるのは、急性冠症候群（ＡＣＳ）の治療方法であって、少なくとも１回の治療サイクルの間、有効量の開示されたアポＥ模倣ペプチドのいずれかを対象に投与することを含み、治療サイクルは、有効量のアポＥ模倣ペプチドを投与して、アポＥ模倣ペプチドの中止後、持続する治療効果を可能にすることを含み、治療サイクルには休止期が続き、アポＥ模倣ペプチドは、休止期の間、投与されず、休止期の後に第２の治療サイクルをさらに含む。場合によっては、第２の治療サイクルは４週間の休止期の後に投与することができる。場合によっては、第２の治療サイクルを当初の治療サイクルの開始から１年で投与することができる。
【００７７】
開示されるのは、急性冠症候群（ＡＣＳ）の治療方法であって、少なくとも１回の治療サイクルの間、有効量の開示されたアポＥ模倣ペプチドのいずれかを対象に投与することを含み、治療サイクルは、有効量のアポＥ模倣ペプチドを投与して、アポＥ模倣ペプチドの中止後、持続する治療効果を可能にすることを含み、治療サイクルには休止期が続き、アポＥ模倣ペプチドは、休止期の間、投与されず、休止期の後に第２の治療サイクルをさらに含み、アポＥ模倣ペプチド以外のＡＣＳ治療剤を休止期中に投与する。
【００７８】
開示されるのは、急性冠症候群（ＡＣＳ）の治療方法であって、少なくとも１回の治療サイクルの間、有効量の開示されたアポＥ模倣ペプチドのいずれかを対象に投与することを含み、治療サイクルは、有効量のアポＥ模倣ペプチドを投与して、アポＥ模倣ペプチドの中止後、持続する治療効果を可能にすることを含み、治療サイクルには休止期が続き、アポＥ模倣ペプチドは、休止期の間、投与されず、休止期の後に第２の治療サイクルをさらに含み、アポＥ模倣ペプチド以外のＡＣＳ治療剤を休止期中に投与し、アポＥ模倣ペプチド以外のＡＣＳ治療剤は、従来のＬＤＬ低下療法またはＨＤＬ上昇療法である。場合によっては、従来のＬＤＬ低下療法は、スタチンであってもよい。場合によっては、ＨＤＬ上昇療法は、アポＡ１上昇剤、ＣＥＴＰ阻害剤、ホスホリパーゼＡ２阻害剤、アポＡ１ミラノ、またはアポＡ１模倣体であってもよい。
【００７９】
開示されるのは、急性冠症候群（ＡＣＳ）の治療方法であって、少なくとも１回の治療サイクルの間、有効量の開示されたアポＥ模倣ペプチドのいずれかを対象に投与することを含み、治療サイクルは、有効量のアポＥ模倣ペプチドを投与して、アポＥ模倣ペプチドの中止後、持続する治療効果を可能にすることを含み、治療サイクルには休止期が続き、アポＥ模倣ペプチドは、休止期の間、投与されず、休止期の後に第２の治療サイクルをさらに含み、アポＥ模倣ペプチド以外のＡＣＳ治療剤を休止期中に投与し、アポＥ模倣ペプチド以外のＡＣＳ治療剤は、従来のＬＤＬ低下療法またはＨＤＬ上昇療法であり、治療サイクルは、週に１回で３ヵ月間、有効量のアポＥ模倣ペプチドを投与することを含む。
【００８０】
また、開示されるのは、開示された合成アポＥペプチドのいずれか１つに特異的に結合するモノクローナル抗体である。
【００８１】
また、開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであって、合成アポＥ模倣ペプチドは、Ａｃ−ＡＨＡを含み、アポリポタンパク質Ｅの受容体結合ドメインは、スクランブルされる。
【００８２】
また、開示されるのは、アポリポタンパク質Ｅの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとからなる合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドであって、受容体結合ドメインは、前記脂質関連ペプチドに共有結合され、アポリポタンパク質Ｅの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドの双方は、スクランブルされる。
【００８３】
添付の図面は、本明細書に組み込まれ、その一部を構成し、記載と一緒に開示された方法及び組成物のいくつかの実施形態を説明し、開示された方法及び組成物の原理を説明するのに役立つ。
【図面の簡単な説明】
【００８４】
【図１】非常に効果的なペプチドを開発するのに用いたいくつかの戦略を記載する。
【図２Ａ−２Ｇ】図２Ａ〜２Ｇは、示されたアポＥ模倣ペプチド類似体の比較分析ＨＰＬＣプロファイルを示す。クロマトグラフィーは、以下のように実施した：Ｃ−１８カラム−２５０×４．６ｍｍ；移動相は、３５分にわたって（０．１％ＴＦＡ含有）水中で３０〜７０％アセトニトリルの勾配であった。
【図３】単回用量投与（ｎ＝４匹の動物／群）後のアポＥヌルマウス（１００μｇ／マウス）における示されたアポＥ模倣ペプチド類似体によるコレステロール低下（血漿コレステロールの低下率）を示す。ベースラインレベルは、用量投与時の相対血漿コレステロールである。時点は、単回用量投与後の示された時間での血漿コレステロールレベルを示す。単回用量は、生理食塩水ビヒクルを用いて投与した。
【図４】３つの活性アポＥ模倣ペプチド類似体の比較分析ＨＰＬＣプロファイルを示す。クロマトグラフィーは、以下のように実施した：Ｃ−１８カラム−２５０×４．６ｍｍ；移動相は、１２分にわたって（０．１％ＴＦＡ含有）水中で３０〜７０％アセトニトリルの勾配であった。
【図５Ａ−５Ｂ】図５Ａおよび５Ｂは、用量レベルがいずれも５０μｇ（図５Ａ）または用量レベルがいずれも１００μｇ（図５Ｂ）での血漿コレステロールを低下させる３つの活性アポＥ模倣ペプチド類似体の効果（％低下）の代表的なデータを示す。本研究は、アポＥヌルマウス（ｎ＝４匹の動物／群）で実施した。時点は、単回用量投与後の示された時間での血漿コレステロールレベルを示す。単回用量は、生理食塩水ビヒクルを用いて投与した。ＡＣ−Ａｈａ−［Ｒ］ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2が、５０及び１００μｇ／マウスの両方でアポＥヌルマウスにおける血漿コレステロールを低下させるのに非常に効果的であることをデータは示している。
【図６】ＣＨ3−（ＣＨ2）n−ＣＯ−（アポＥ模倣ペプチド）分子が、アルキルカルボキシル部分を含まないため、肝クリアランスが強化されたモデルを提供するアポＥ模倣ペプチドよりも脂質粒子により貪欲に結合するモデルを示す。
【図７】実験計画を示す表である。アポＥヌルマウスには、１００ｕｇ／マウスの濃度で尾静脈注射を介して生理食塩水中のペプチドＡｃ−ｈｅ１８Ａ−ＮＨ2（ＡＥＭ−２８）、Ａｃ−［Ｒ］ｈｅ１８Ａ−ＮＨ2（ＡＥＭ−２８（Ｒ））、またはＡｃ−Ａｈａ−［Ｒ］ｈｅ１８Ａ−ＮＨ2（ＡＥＳ−２１）を投与した。投与前及び投与後１、６及び２４時間に頬出血を介して血液を採取した。血清試料は、（Ｗａｃｏ社製総コレステロールキットを用いて）総血清コレステロールについて分析することができる。
【図８Ａ−８Ｂ】図８Ａおよび８Ｂは、総コレステロール（ｍｇ／ｄＬ）対時間（図８Ａ）及び総コレステロール（投与後の％）対時間（図８Ｂ）をそれぞれ示すグラフである。３つの異なるペプチドを、生理食塩水中のペプチド１００ｕｇを用いて、およそ１０週齢の雌のアポＥヌルマウスに尾静脈注射を介して投与した。示した誤差バーは、平均の標準誤差（ＳＥＭ）である。群１（全ての時点でｎ＝４匹の動物）以外の全ての結果（ｎ＝５匹の動物）。
【図９】図８に示すマウス注射からの結果を示す表である。
【図１０】総血清コレステロール（投与後レベルの％）の結果を示す表である。
【図１１】実験計画を示す。アポＥヌルマウスには、５０μｇ／マウスの濃度で尾静脈注射を介して生理食塩水中のＡＣ−ｈＥ１８Ａ−ＮＨ２（ＡＥＭ−２８）、ＡＣ−［Ｒ］ｈＥ１８Ａ−ＮＨ２（ＡＥＭ−２８（Ｒ））、またはＡＣ−Ａｈａ−［Ｒ］ｈｅ１８Ａ−ＮＨ２（ＡＥＳ２−２１）を投与した。投与前及び投与後１、６及び２４時間に頬出血を介して血液を採取した。血清試料は、（総コレステロールキット（Ｗａｋｏ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ  ＵＳＡ、Ｉｎｃ．、Ｒｉｃｈｍｏｎｄ、ＶＡ）を用いて）総血清コレステロールについて分析する。
【図１２Ａ−１２Ｂ】図１２Ａ及び１２Ｂは、総コレステロール（ｍｇ／ｄＬ）対時間及び総コレステロール（投与後の％）対時間をそれぞれ示すグラフである。３つの異なるペプチドを、生理食塩水中のペプチド１００ｕｇを用いて、およそ１０週齢の雌のアポＥノックアウトマウスに尾静脈注射を介して投与した。動物は、生理食塩水中のペプチド５０μｇによる２回目の投与前に２週間回復させた。示した誤差バーは、平均の標準誤差（ＳＥＭ）である。全ての結果（ｎ＝５匹の動物）。「ＡＥＭ−２８生理食塩水」は、ペプチドＡＣ−ｈＥ１８Ａ−ＮＨ２を示し；「ＡＥＭ−２８（Ｒ）生理食塩水」は、ペプチドＡＣ−［Ｒ］ｈＥ１８Ａ−ＮＨ２を示し；及び「ＡＥＳ２−２１」は、ペプチドＡＣ−Ａｈａ−［Ｒ］ｈｅ１８Ａ−ＮＨ２を示す。
【図１３】生のコレステロール値を示す表である。
【図１４】投与後コレステロールの％を示す表である。
【図１５】ショ糖を与えたラットモデルにおける血漿トリグリセリドプロファイルの代表的なデータを示す。６５％（ｗ／ｖ）ショ糖を含有する食事を２週間した後にトリグリセリドレベルが増加したことをデータは示している。本研究は、雄のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットで実施した。
【図１６】単回用量を介して（静脈内尾静脈注射を介して）示されたペプチド（生理食塩水ビヒクル中）または対照（生理食塩水）の投与後の示された時間での、高ショ糖（６５％（ｗ／ｖ））の食事を２週間与えたラットにおけるトリグリセリドレベルに与える開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドの効果の代表的なデータを示す。「対照」は、生理食塩水を投与したラットを示し；「ＡＥＭ−２８」は、５ｍｇ／ｋｇのペプチドＡｃ−ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2を（尾静脈を介して静脈内）投与したラットを示し；「Ｒ−ＡＥＭ−２８」は、５ｍｇ／ｋｇのペプチドＡｃ−［Ｒ］ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2を（尾静脈を介して静脈内）投与したラットを示し；及び「Ａｈａ−Ｒ−ＡＥＭ−２８」は、５ｍｇ／ｋｇのペプチドＡｈａ−［Ｒ］ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2を（尾静脈を介して静脈内）投与したラットを示す。
【図１７】示されたペプチドまたは対照（生理食塩水）の投与後４８時間での、高ショ糖（６５％（ｗ／ｖ））の食事を２週間与えたラットにおけるトリグリセリドレベルに与える開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドの効果の代表的なデータを示す。「生理食塩水」は、生理食塩水を（尾静脈を介して静脈内）投与したラットを示し；「ＡＥＭ−２８」は、５ｍｇ／ｋｇのペプチドＡｃ−ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2を（尾静脈を介して静脈内）投与したラットを示し；「Ｒ−ＡＥＭ−２８」は、５ｍｇ／ｋｇのペプチドＡｃ−［Ｒ］ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2を（尾静脈を介して静脈内）投与したラットを示し；及び「Ａｈａ−Ｒ−ＡＥＭ−２８」は、５ｍｇ／ｋｇのペプチドＡｈａ−［Ｒ］ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2を（尾静脈を介して静脈内）投与したラットを示す。
【図１８】示されたペプチドまたは対照（生理食塩水）の投与後４８時間での、高ショ糖（６５％（ｗ／ｖ））の食事を２週間与えたラットにおける血漿コレステロールレベルに与える開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドの効果の代表的なデータを示す。「生理食塩水」は、生理食塩水を（尾静脈を介して静脈内）投与したラットを示し；「ＡＥＭ−２８」は、５ｍｇ／ｋｇのペプチドＡｃ−ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2を（尾静脈を介して静脈内）投与したラットを示し；「Ｒ−ＡＥＭ−２８」は、５ｍｇ／ｋｇのペプチドＡｃ−［Ｒ］ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2を（尾静脈を介して静脈内）投与したラットを示し；及び「Ａｈａ−Ｒ−ＡＥＭ−２８」は、５ｍｇ／ｋｇのペプチドＡｈａ−［Ｒ］ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2を（尾静脈を介して静脈内）投与したラットを示す。
【図１９】示されたペプチド（生理食塩水ビヒクル中）または対照（生理食塩水）の投与後４８時間での、ラットにおける血漿グルコースレベルに与える開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドの効果の代表的なデータを示す。ラットには、ペプチド注入前に高ショ糖（６５％（ｗ／ｖ））の食事を２週間与えている。「生理食塩水」は、生理食塩水を（尾静脈を介して静脈内）投与したラットを示し；「ＡＥＭ−２８」は、５ｍｇ／ｋｇのペプチドＡｃ−ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2を（尾静脈を介して静脈内）投与したラットを示し；「Ｒ−ＡＥＭ−２８」は、５ｍｇ／ｋｇのペプチドＡｃ−［Ｒ］ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2を（尾静脈を介して静脈内）投与したラットを示し；及び「Ａｈａ−Ｒ−ＡＥＭ−２８」は、５ｍｇ／ｋｇのペプチドＡｈａ−［Ｒ］ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2を（尾静脈を介して静脈内）投与したラットを示す。
【図２０Ａ−２０Ｅ】図２０Ａ〜２０Ｅは、脂肪酸部分を含む示され開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドの代表的な分析ＨＰＬＣプロファイルを示す。クロマトグラフィーは、以下のように実施した：Ｃ−１８Ｖｙｄａｃカラム−２５０×４．６ｍｍ；移動相は、１２分にわたって３５〜７０％の水／アセトニトリル（０．１％ＴＦＡ）の勾配であった。
【図２１】血漿コレステロールレベルに与える、脂肪酸部分を含む開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドの効果（血漿コレステロールの％低下）の代表的なデータを示す。データは、示されたペプチド（生理食塩水ビヒクル中）１００μｇを投与したアポＥヌルマウス（雌；群＝４）を用いて、ペプチドの投与後の示された時間で得た。この研究で投与したペプチドは、合成後にさらにＨＰＬＣ精製せずに透析した。ベースラインレベルは、ペプチド投与時の血漿コレステロールレベルである。全てのペプチドは、静脈内尾静脈注射を介して投与した。
【図２２】血漿コレステロールレベルに与える、脂肪酸部分を含む開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドの効果の代表的なデータを示す。示されたペプチド５０μｇを投与したアポＥヌルマウス（雌；群＝３）を用いてデータを得た。本研究は、それ以外は図２１に記載したように実施した。示された時間は、静脈内尾静脈注射を介して５０μｇの単回用量の投与後の時間である。
【図２３】血漿コレステロールレベルに与える、脂肪酸部分を含む開示された合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドの効果の代表的なデータを示す。示されたペプチド１００μｇを投与したアポＥヌルマウス（雌；群＝３）を用いてデータを得た。本研究は、それ以外は図２１に記載したように実施した。示された時間は、静脈内尾静脈注射を介して５０μｇの単回用量の投与後の時間である。
【図２４】血漿コレステロールレベルに与えるミリストイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−１８Ａ−ＮＨ２（すなわち、ミリストイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ２（配列番号６２８））の効果の代表的な用量反応データを示す。示された用量レベルを投与したアポＥヌルマウス（雌；群＝５）を用いてデータを得た。ペプチド投与後２４時間で試料を採取した。本研究は、それ以外は図２１に記載したように実施した。示された用量は、静脈内尾静脈注射を介して投与した。
【図２５】血漿コレステロールレベルに与えるミリストイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−１８Ａ−ＮＨ２（すなわち、ミリストイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ２（配列番号６２８））の効果の代表的な用量反応データを示す。示された用量レベルを投与したアポＥヌルマウス（雌；群＝５）を用いてデータを得た。ペプチドの投与後の示された時間で試料を採取した。本研究は、それ以外は図２１に記載したように実施した。示された用量は、静脈内尾静脈注射を介して投与した。
【図２６】（５時間での）血漿コレステロールの最大減少率対用量レベル（μｇ）に関して再プロットした図２５に記載の研究からのデータを示す。データは閉じた円として示し、データにフィッティングさせた双曲線の結果とともに示す。
【図２７】２４時間での血漿コレステロールの減少率対用量レベル（μｇ）に関して再プロットした図２５に記載の研究からのデータを示す。データは閉じた円として示し、データにフィッティングさせた双曲線の結果とともに示す。
【図２８】血漿コレステロールレベル（ｍｇ／ｄＬ）に与えるオクタノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−１８Ａ−ＮＨ２（すなわち、オクタノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ２（配列番号６２５））の効果の代表的な用量反応データを示す。示された用量レベルを投与したアポＥヌルマウス（雌；群＝５）を用いてデータを得た。ペプチドの投与後の示された時間で試料を採取した。本研究は、それ以外は図２１に記載したように実施した。示された用量は、静脈内尾静脈注射を介して投与した。
【図２９】血漿コレステロールレベル（ベースライン血漿コレステロールレベルの％）に与えるオクタノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−１８Ａ−ＮＨ２（すなわち、オクタノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ２（配列番号６２５））の効果の代表的な用量反応データを示す。ベースラインレベルは、ペプチド投与時の血漿コレステロールレベルである。示された用量レベルを投与したアポＥヌルマウス（雌；群＝５）を用いてデータを得た。ペプチドの投与後の示された時間で試料を採取した。本研究は、それ以外は図２１に記載したように実施した。示された用量は、静脈内尾静脈注射を介して投与した。
【図３０】（５時間での）血漿コレステロールの最大減少率対用量レベル（μｇ）に関して再プロットした図２８〜２９に記載の研究からのデータを示す。データは閉じた円として示し、データにフィッティングさせた双曲線の結果とともに示す。
【図３１】２４時間での血漿コレステロールの減少率対用量レベル（μｇ）に関して再プロットした図２８〜２９に記載の研究からのデータを示す。データは閉じた円として示し、データにフィッティングさせた双曲線の結果とともに示す。
【発明を実施するための形態】
【００８５】
開示された方法及び組成物は、特定の実施形態の以下の詳細な説明及びその中に含まれる実施例及び図面及びその前の及び以下の記載への参照によってさらに容易に理解され得る。
【００８６】
開示された方法及び組成物は、特に特定されない限り、特定の合成法、特定の分析技術または特定の試薬に限定されず、そのようなものとして変化し得ることが理解されるべきである。本明細書で使用される専門用語は、特定の実施形態を記載することのみの目的であり、限定するようには意図されないことも理解されるべきである。
【００８７】
Ａ．定義
本明細書で使用される専門用語は、特定の実施形態を記載することのみを目的とし、限定するようには意図されない。
【００８８】
本明細書及び添付の特許請求の範囲で使用されるとき、単数形態「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、文脈が特に明瞭に指示しない限り、複数の指示対象を含めることができる。従って、例えば、「１つの化合物」に対する参照は、化合物の混合物を含み、「１つの医薬担体」に対する参照は、２以上のそのような担体の混合物等を含む。
【００８９】
単語「または」は、本明細書で使用されるとき、特定のリストの任意の１つのメンバーを意味し、そのリストのメンバーの任意の組み合わせも含む。
【００９０】
範囲は、「約」１つの特定の値から及び／または「約」別の特定の値までとして本明細書では表現され得る。用語「約」は、大まかにまたは周辺の範囲にて近似的に意味するように本明細書で使用される。用語「約」が数的範囲と併せて使用される場合、言及される数値の上下に境界を拡大することによってその範囲を改変する。一般に、用語「約」は、２０％の分散によって言及された値の上下に数値を改変するように本明細書で使用される。そのような範囲が表現される場合、別の実施形態は、１つの特定の値から及び／または他の特定の値まで含む。同様に、値が先行する「約」の使用によって近似値として表現される場合、特定の値は、別の実施形態を形成することが理解されるであろう。範囲のそれぞれの端点は、他の端点に関して及び他の端点とは無関係にの双方で有意であることがさらに理解されるであろう。
【００９１】
本明細書で使用されるとき、用語「アミノ酸配列」は、アミノ酸残基を表す略記、文字、符号または単語のリストを指す。本明細書で使用されるアミノ酸の略記は、アミノ酸についての従来の１文字コードであり、以下のように表現される：Ａ、アラニン；Ｃ、システイン；Ｄ、アスパラギン酸；Ｅ、グルタミン酸；Ｆ、フェニルアラニン；Ｇ、グリシン；Ｈ、ヒスチジン；Ｉ、イソロイシン；Ｋ、リジン；Ｌ、ロイシン；Ｍ、メチオニン；Ｎ、アスパラギン；Ｐ、プロリン；Ｑ、グルタミン；Ｒ、アルギニン；Ｓ、セリン；Ｔ、トレオニン；Ｖ、バリン；Ｗ、トリプトファン；及びＹ、チロシン。
【００９２】
化学種の残基は、本明細書及び結びの請求項で用いる場合、特定の反応スキームにおける化学種の生成物、またはこれから得られる製剤もしくは化学製品である成分を指し、このことは、該部分が実際に該化学種から得られるかどうかに関係ない。従って、ポリエステル中のエチレングリコール残基は、エチレングリコールを用いてポリエステルを調製したかどうかに関係なく、該ポリエチレン中の１以上の−ＯＣＨ2ＣＨ2Ｏ−ユニットを指す。同様に、ポリエステル中のセバシン酸残基は、この残基が、ポリエステルを得るためにセバシン酸またはそのエステルを反応させることで得られるかどうかに関係なく、該ポリエチレン中の１以上の−ＣＯ（ＣＨ2）8ＣＯ−部分を指す。
【００９３】
「ペプチド」は、本明細書で使用されるとき、任意のペプチド、オリゴペプチド、ポリペプチド、遺伝子産物、発現産物またはタンパク質を指す。ペプチドは、連続するアミノ酸で構成される。用語「ペプチド」は、天然に存在する分子または合成の分子を包含する。
【００９４】
本明細書で使用されるとき、用語「アポＥ模倣体」は、アポリポタンパク質Ｅを模倣するペプチドと相互交換可能である。アポＥ模倣体は、アポＥに関連する、それの特徴である、またはそれを模倣するペプチドである。アポＥ模倣体には、アポＥペプチド（すなわち、完全長アポＥに由来するペプチド）が含まれる。
【００９５】
本明細書で使用されるとき、「逆方向付けされる」、「逆方向付け」、「逆類似体」または「逆配列」は、逆に方向付けされないペプチドに比べて逆のアミノ酸配列を有する（すなわち、元々の配列が右から左に読まれる（または書かれる））ペプチドまたはペプチドの一部を指す。例えば、１つのペプチドがアミノ酸配列ＡＢＣＤＥを有するとすると、逆配列を有する逆類似体または逆ペプチドは、以下：ＥＤＣＢＡである。二重ドメインペプチド、例えば、Ａｃ−ｈＥ−１８Ａ−ＮＨ２では、ｈＥ配列が右から左に読まれる、または１８Ａ配列が右から左に読まれる。ＬＲＫＬＲＫＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ（配列番号１）の逆類似体は、ＲＬＬＲＫＲＬＫＲＬ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ（配列番号２）またはＬＲＫＬＲＫＲＬＬＲ−ＦＡＥＫＬＫＥＡＶＫＤＹＦＡＫＬＷＤ（配列番号３）であってもよい。
【００９６】
本明細書で使用されるとき、「二重ドメインペプチド」、「二重ドメイン合成ペプチド」または「二重ドメインアポＥ模倣ペプチド」は、脂質関連ペプチド／ドメイン及び受容体結合のペプチド／ドメインを含むペプチドを意味することとする。
【００９７】
本明細書で使用されるとき、「単一ドメインペプチド」、「単一ドメインの合成ペプチド」または「単一ドメインアポＥ模倣ペプチド」は、脂質関連ペプチド／ドメインまたは受容体結合のペプチド／ドメインを含むが、双方を含まないペプチドを意味することとする。
【００９８】
本明細書で使用されるとき、「ドメイン交換された」、「交換されたドメイン」または「交換された」ペプチドは、脂質関連ペプチドが合成のアポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのＮ末端にあるように脂質関連ペプチドをアポリポタンパク質Ｅの受容体結合ドメインに共有結合させることを意味することとする。例えば、ペプチド１８Ａ−ｈＥは、ドメイン交換されたペプチドの例示である。
【００９９】
本明細書で使用されるとき、「スクランブルされた」、「スクランブルされた型」または「スクランブルされたペプチド」は、アミノ酸配列の組成物はスクランブルされないペプチドと同じであるが、アミノ酸の配列が変えられるので、ペプチドがα−両親媒性の螺旋を形成できなくなるまたは脂質関連（またはＨＳＰＧ関連）の特性を持たないことを意味することとする。しかしながら、場合によっては、本発明で記載されるように、スクランブルされたペプチドは、例えば、π螺旋のような種々の螺旋構造を形成できるままである。例えば、ペプチドの１つがアミノ酸配列ＡＢＣＤＥを有するならば、ペプチドのスクランブルされた型は、アミノ酸配列ＤＥＡＢＣを有し得る。スクランブルされたペプチドは、スクランブルされるペプチドの部分より前に「Ｓｃ」を有するとして示されることが多い。例えば、Ｓｃ−ｈＥ−１８Ａは、ペプチドのｈＥ部分がスクランブルされることを意味する。
【０１００】
本明細書で使用されるとき、「試料」は、動物；動物に由来する組織または臓器；細胞（対象の中の、対象から直接採取された、または培養で維持された若しくは培養された細胞株に由来する細胞）；細胞溶解物（または溶解分画）；または細胞抽出物；または細胞若しくは細胞性物質（例えば、ポリペプチドまたは核酸）に由来する１以上の分子を含有する溶液を意味することとし、それらは本明細書で記載されるようにアッセイされる。試料は、細胞または細胞成分を含有する任意の体液または排泄物（例えば、血液、尿、糞便、唾液、涙液、胆汁、しかし、これらに限定されない）でもあり得る。
【０１０１】
本明細書で使用されるとき、「対象」は、投与の標的、例えば、動物を指す。従って、開示された方法の対象は、脊椎動物、例えば、哺乳類であってもよい。例えば、対象はヒトであってもよい。その用語は、特定の年齢または性別を意味しない。対象は、「個体」または「患者」と相互交換可能に使用することができる。
【０１０２】
本明細書で使用されるとき、「調節する」は、上昇させることまたは低下させることによって変化させることを意味することとする。
【０１０３】
本明細書で使用されるとき、「脂質結合ドメインＥ」及び「脂質関連ペプチド」は、相互交換可能に使用される。本明細書で使用されるとき、双方の用語は、アポリポタンパク質Ｅの脂質結合ドメインを意味してもよい。
【０１０４】
本明細書で使用されるとき、「単離されたポリペプチド」または「精製されたポリペプチド」は、そのポリペプチドが天然で普通会合している物質を実質的に含まないポリペプチド（またはその断片）を意味することとする。本発明のポリペプチドまたはその断片は、例えば、天然の供給源（例えば、哺乳類細胞）からの抽出によって、ポリペプチドをコードする組換え核酸の発現（例えば、細胞にてまたは無細胞翻訳系にて）によって、またはポリペプチドを化学的に合成することによって得ることができる。加えて、ポリペプチド断片は、これらの方法のいずれかによって、または完全長のタンパク質及び／またはポリペプチドを切断することによって得ることができる。
【０１０５】
本明細書で使用されるとき、「１８Ａ」は、ペプチドまたはペプチド配列の文脈で使用する場合、ペプチドＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ（配列番号５）を指す。ペプチド配列は、単離されたペプチドとして、またはより大きなペプチド配列内の配列として存在することができる。
【０１０６】
本明細書で使用されるとき、「ｈＥ」は、ペプチドまたはペプチド配列の文脈で使用する場合、ペプチドＬＲＫＬＲＫＲＬＬＲ（配列番号４）を指す。ペプチド配列は、単離されたペプチドとして、またはより大きなペプチド配列内の配列として存在することができる。
【０１０７】
本明細書で使用されるとき、「［Ｒ］ｈＥ」は、ペプチドまたはペプチド配列の文脈で使用する場合、ペプチドＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ（配列番号１１）を指す。ペプチド配列は、単離されたペプチドとして、またはより大きなペプチド配列内の配列として存在することができる。
【０１０８】
本明細書で使用されるとき、用語、「脂肪族」は、飽和及び不飽和の両方の直鎖（すなわち、非分枝）または分枝の脂肪族炭化水素を含み、これらは、必要に応じて、１以上の官能基で置換されている。当業者に理解されるように、「脂肪族」とは、本明細書中にて、アルキル、アルケニル、アルキニル部分を含むものとするが、これらに限定されない。従って、本明細書で使用されるとき、用語「アルキル」は、直鎖及び分枝のアルキル基を含む。「アルケニル」、「アルキニル」などのような他の一般用語には、類似の規定が適用される。特定の実施形態において、本明細書で使用されるとき、「低級アルキル」とは、約１〜６個の炭素原子を有するアルキル基（置換、非置換、分枝または非分枝）を示すように使用される。「置換アルキル」は、１以上の官能基で置換されているアルキル基を指す。置換基には、以下に述べる置換基のいずれか、すなわち、安定化合物の形成をもたらす以下に列挙する置換基が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０９】
本明細書で使用されるとき、「アルケニル」は、用語「アルケニル」とは、単一の水素原子を除去することによって少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有する炭化水素部分から誘導される一価の基を示す。
【０１１０】
本明細書で定義されるとき、「ｎ」が整数である「Ｃn」は、炭化水素分子または断片（例えば、アルキル基）を記載し、「ｎ」は、断片または分子中の炭素原子数を示す。
【０１１１】
本明細書で使用されるとき、「脂肪酸部分」は、脂肪（カルボキシル）酸のアシル成分を含む任意の分子種及び／または分子断片を指す。すなわち、脂肪酸部分は、脂肪酸から誘導可能なアシル部分（すなわち、一般的には、ＲＣ（＝Ｏ）−の形態である）を包含する基であり、Ｒは、対応する脂肪酸の脂肪族鎖を表す。
【０１１２】
本明細書で使用されるとき、用語「脂肪酸」は、脂肪族鎖（「尾部」）を有するモノカルボン酸を包含することを意味し、前記脂肪族鎖は、飽和、モノ不飽和（脂肪族鎖上のどこかに１つの不飽和結合を有する）またはポリ不飽和（脂肪族鎖上のどこかに少なくとも２つの不飽和結合を有する）のいずれかであってもよい。脂肪族鎖上の不飽和結合は、二重（シス及び／またはトランス配置で）または三重結合であってもよい。脂肪酸の脂肪族鎖（飽和、モノ不飽和またはポリ不飽和のいずれか）の長さは、８〜３２個の炭素原子で変化してもよい。脂肪酸は、天然源（動物源または植物源のいずれか）、合成源または半合成源に由来してもよい。
【０１１３】
本明細書で使用されるとき、用語「脂肪酸」は、炭化水素鎖において任意の二重結合または三重結合を含有しない飽和脂肪酸を含む。飽和脂肪酸には、プロピオン酸（Ｃ３）（例として、Ｃ３は、プロピオン酸が３つの炭素原子をその炭化水素鎖中に有することを示す；他の例の脂肪酸の炭化水素鎖における炭素原子の数は、本明細書中に類似な方法で示す）、酪酸（Ｃ４）、吉草酸（Ｃ５）、カプロン酸（Ｃ６）、エナント酸（Ｃ７）、カプリル酸（Ｃ８）、ペラルゴン酸（Ｃ９）、カプリン酸（Ｃ１０）、ウンデシル酸（Ｃ１１）、ラウリン酸（Ｃ１２）、トリデシル酸（Ｃ１３）、ミリスチン酸（Ｃ１４）、ペンタデシル酸（Ｃ１５）、パルミチン酸（Ｃ１６）、マルガリン酸（Ｃ１７）、ステアリン酸（Ｃ１８）、イソステアリン酸（Ｃ１８）、ノナデシル酸（Ｃ１９）、アラキジン酸（Ｃ２０）、ヘンイコシル酸（Ｃ２１）、ベヘン酸（Ｃ２２）、トリコシル酸（Ｃ２３）、リグノセリン酸（Ｃ２４）、ペンタコシル酸（Ｃ２５）、セロチン酸（Ｃ２６）、ヘプタコシル酸（Ｃ２７）、モンタン酸（Ｃ２８）、ノナコシル酸（Ｃ２９）、メリシン酸（Ｃ３０）、ヘナトリアコンチル酸（Ｃ３１）、ラッセロ酸（Ｃ３２）、プシルル酸（Ｃ３３）、ゲダ酸（Ｃ３４）、セロプラスチン酸（Ｃ３５）及びヘキサトリアコンチル酸（Ｃ３６）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１４】
本明細書で使用されるとき、用語「脂肪酸」は、炭化水素鎖において１つの二重結合または三重結合を含有するモノ不飽和脂肪酸、及び炭化水素鎖において１つより多くの二重結合及び／または三重結合を含有するポリ不飽和脂肪酸も含む。そのような酸には、オメガ３、オメガ６、オメガ９脂肪酸、他の脂肪酸、例えば、ミリストレイン酸及びパルミトレイン酸及び共役脂肪酸などが挙げられるが、これらに限定されない。モノ不飽和及びポリ不飽和脂肪酸の例には、（ａ）オメガ３脂肪酸、例えば、ヘキサデカトリエン酸（Ｃ１６：３）；（例として、Ｃ１６：３は、ヘキサデカトリエン酸がその炭化水素鎖における１６個の炭素原子及び３つの二重結合を有することを示す；他の例の不飽和脂肪酸の炭化水素鎖における炭素原子及び二重結合の数は、本明細書中に類似な方法で示す）、アルファリノレン酸（Ｃ１８：３）及びエイコサペンタン酸（２０：５）、（ｂ）オメガ６脂肪酸、例えば、リノール酸（１８：２）、ドコサジエン酸（Ｃ２２：２）、アラキドン酸（Ｃ２０：４）及びテトラコサテトラエン酸（Ｃ２４：５）、（ｃ）オメガ９脂肪酸、例えば、オレイン酸（Ｃ１８：１）、エイコセン酸（Ｃ２０：１）及びネブロン酸（Ｃ２４：１）、並びに（ｄ）共役脂肪酸、例えば、ルメン酸（Ｃ１８：２）、エレオスタト酸（Ｃ１８：３）及びルメレン酸（Ｃ１８：３）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１５】
本明細書で使用されるとき、用語「脂肪酸」は、分岐鎖脂肪酸も含む。分岐鎖脂肪酸の例には、モノメチル分岐鎖脂肪酸、例えば、１４−メチルペンタデカン酸、６−メチルカプリル酸、４−メチル−３−ペンテン酸、（ピロテレブ酸）、２−メチル−２Ｅ−ブテン酸（チグリン酸）、２−メチル−２Ｚ−ブテン酸（アンゲリカ酸）、マルチメチル分岐鎖酸、イソプレノイド脂肪酸（ビッタタラクトン、全トランス型レチノイン酸）、分岐鎖メトキシ脂肪酸及びヒドロキシ、並びに他の脂肪酸、例えば、２−ヒドロキシオクタン酸及び４−オキソペンタン酸（レブリン酸）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１６】
用語「脂肪酸」は、脂肪酸ではない成分を含み得る天然油または脂肪などの脂肪酸を含む混合物も含む。脂肪酸の混合物を含むと理解される天然油または脂肪には、動物脂肪、大豆油、ヤシ油、パーム油、パーム核油、菜種油、綿実油、亜麻仁油、ヒマワリ油、魚油、藻類油等が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１７】
用語「ω−アミノ脂肪酸」は、その炭化水素鎖の遠位炭素でアミノ基を特徴とする脂肪酸を指す。本発明の文脈で使用されるω−アミノ脂肪酸部分は、飽和または不飽和の炭化水素鎖であってもよい。これらの部分は、炭化水素鎖の一端でカルボキシル基を有し、炭化水素鎖の他端でアミン基を有する。そのようなω−アミノ脂肪酸部分においてカルボキシル基及びアミン基と結合している炭化水素鎖は、通常、３〜３２個の炭素原子を有する。
【０１１８】
ω−アミノ脂肪酸の例には、４−アミノ酪酸、６−アミノカプロン酸、８−アミノカプリル酸、１０−アミノカプリン酸（１０−アミノデカン酸）、１２−アミノラウリン酸（１２−アミノドデカン酸）、１４−アミノミリスチン酸（１４−アミノテトラデカン酸）、１４−アミノミリストレイン酸、１６−アミノパルミチン酸（１６−アミノヘキサデカン酸）、１８−アミノステアリン酸、１８−アミノオレイン酸、１６−アミノパルミトレイン酸、１８−アミノリノール酸、１８−アミノリノレン酸及び２０−アミノアラキドン酸が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１９】
「投与計画」は、本明細書で使用されるとき、少なくとも１回の休止期が後に続く少なくとも１回の治療サイクルを指す。投与計画は、１を超える治療サイクルと１を超える休止期を含んでもよい。例えば、投与計画は、３ヵ月の治療サイクルとその後の１年の休止期であってもよい。別の例は、６ヵ月の治療サイクルとその後の６ヵ月の休止期、次いで３ヵ月の治療サイクルとその後の１年の休止期であってもよい。
【０１２０】
「用量」または「投与量」は、本明細書で使用されるとき、特定の時間に服用される、例えば、アポＥ模倣体のような治療剤の特定の量を指す。
【０１２１】
本明細書で使用されるとき、「治療する」は、疾患または状態の影響の悪化を防ぐ若しくは遅らせる、または疾患の影響を部分的にまたは完全に反転するために、アテローム性動脈硬化症を有する、例えば、ヒトまたは他の哺乳類（例えば、動物モデル）のような対象に開示された組成物の１つを投与することを意味することとする。
【０１２２】
本明細書で使用されるとき、「防ぐ」は、アテローム性動脈硬化症を発症することに対して高い感受性を有する対象がアテローム性動脈硬化症を発症する機会を出来るだけ減らすことを意味することとする。
【０１２３】
本明細書で使用されるとき、用語「治療サイクル」は、確立された期間のアポＥ模倣体の投与を指す。治療サイクルには、広い範囲のアポＥ模倣体の投与量及び種々の長さの時間のアポＥ模倣体の投与が含まれる。例えば、治療サイクルは、アポＥ模倣体が週に２回、３ヵ月間投与される３ヵ月間であってもよい。
【０１２４】
本明細書で使用されるとき、「有効量」は、所望の効果を提供するための組成物またはアポＥ模倣体の十分な量を意味することとする。例えば、アポＥ模倣体の有効量は、治療効果を提供し、且つ治療の中止後、持続する治療効果を提供する量であってもよい。アポＥ模倣体の有効量は、アテローム性動脈硬化の減少、動脈壁硬化の減少、収縮期高血圧の低下、動脈炎症の減少、ＨＤＬ分画の抗酸化能の上昇及び／または心筋機能の改善によって説明される利益を生じることができる量であると共に、アポＥ模倣体の中止の後、持続する治療効果を可能にする量である。必要とされる正確な量は、対象の種、年齢及び全身状態、治療される疾患の（または根底にある遺伝的欠陥）の重症度、使用される特定の化合物、投与の方式等に応じて対象から対象で異なるであろう。従って、正確な「有効量」を特定するのは可能ではない。しかしながら、適切な「有効量」は、ごく普通の実験のみを用いて当業者によって決定され得る。
【０１２５】
本明細書で使用されるとき、「持続する治療効果」は、治療が中止された後に持続する治療効果である。例えば、持続する治療効果は、急性のコレステロール低下効果がなくなった後でさえ維持される。
【０１２６】
「休止期」は、本明細書で使用されるとき、アポＥ模倣体が投与されない時期を指す。
【０１２７】
「アテローム性動脈硬化症の負荷」は、本明細書で使用されるとき、患者の動脈におけるアテローム性動脈硬化の量である。これには、冠状動脈、頸動脈、末梢動脈及び他の動脈が含まれ得る。粉瘤は、線維性被膜、石灰化の領域、コレステロール結晶及びコレステロールを運ぶマクロファージ（泡沫細胞）を含有する平滑筋とコラーゲンを伴った複雑な病変、及び／または石灰化の少ない、薄い線維性被膜で泡沫細胞とコレステロールが多いあまり複雑ではないさらに不安定な病変（不安定病変）であり得る。不安定病変は、動脈の内腔に侵入し、または動脈の内腔から拡張し得る。
【０１２８】
字句「脂質障害」は、対象が血液中に過剰の脂質または増加した炎症性脂質を有する場合を意味することとする。脂質には、ｏｘ−ＬＤＬ（すなわち、酸化ＰＡＰＣ（１−パルミトイル−２−アラキドニルホスファチジルコリン））などの脂質が挙げられるが、これらに限定されない。ＬＤＬの脂質成分であるＰＡＰＣまたはＰＬＰＣの酸化により、酸化脂質が生成される。脂質障害を有することは、アテローム性動脈硬化症及び心臓疾患などの炎症性疾患をより発症しやすくなる可能性がある。脂質障害は、遺伝的素因または食事によって引き起こされ得る。
【０１２９】
本明細書で使用されるとき、「リポタンパク質（単数）」または「リポタンパク質（複数）」は、タンパク質と脂質を含有する生化学的集合体を意味することとする。脂質またはそれらの誘導体は、タンパク質に共有結合し得るまたは非共有結合し得る。多数の酵素、トランスポーター、構造タンパク質、抗原、付着因子及び毒素は、リポタンパク質である。例としては、血液の高密度及び低密度のリポタンパク質、ミトコンドリア及び葉緑体の膜貫通タンパク質、及び細菌のリポタンパク質が挙げられる。
【０１３０】
本明細書で使用されるとき、「高密度リポタンパク質」（ＨＤＬ）は、コレステロールを輸送することができるそのサイズが幾分変化する（直径８〜１１ｎｍ）リポタンパク質のクラスを意味することとする。ＨＤＬコレステロールは、ＨＤＬに会合するコレステロールである。血中コレステロールの約１／４〜１／３は、高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）によって運ばれる。ＨＤＬコレステロールは、高レベルのＨＤＬが心臓発作に対して保護すると思われるので「善玉」コレステロールとして知られる。低レベルのＨＤＬ（男性で４０ｍｇ／ｄＬ未満及び女性で５０ｍｇ／ｄＬ未満）も心臓疾患のリスクを高める。医療専門家は、ＨＤＬは身体から受け渡されるとコレステロールを動脈から肝臓に戻す傾向があると考えている。一部の専門家は、ＨＤＬが動脈プラークから過剰なコレステロールを取り除くのでその集積を遅らせると考えている。
【０１３１】
本明細書で使用されるとき、「超低密度リポタンパク質」（ＶＬＤＬ）は、リポタンパク質のサブクラスを意味することとする。それは肝臓にてコレステロールとアポリポタンパク質から組み立てられる。それは血流で低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）に変換される。ＶＬＤＬ粒子は、３０〜８０ｎｍの直径を有する。ＶＬＤＬは、カイロミクロンが外因性（食事性）の産物を輸送する場合、内在性の産物を輸送する。
【０１３２】
本明細書で使用されるとき、「低密度リポタンパク質」または「ＬＤＬ」は、サイズが変化し（約２２ｎｍ）、それらが実際に質量分布とサイズ分布を有する変化する数のトリグリセリドとコレステリルエステルを含有することができるリポタンパク質を意味することとする。各ネイティブなＬＤＬ粒子は、単一のアポリポタンパク質Ｂ−１００分子（アポＢ−１００、４５３６アミノ酸アミノ酸残基を有するタンパク質）と、トリグリセリド及びコレステリルエステルを取り囲むリン脂質被膜とを含有し、水性環境でそれらを可溶性に保持する。ＬＤＬは、一般に悪玉コレステロールと呼ばれる。ＬＤＬコレステロールは、ＬＤＬに会合するコレステロールである。多すぎるＬＤＬコレステロールが血中を循環すると、心臓や脳を養う動脈の内壁にそれはゆっくり集積することができる。ほかの物質と一緒に、それは、動脈を狭くし、柔軟性をなくす厚くて硬い沈着物であるプラークを形成することができる。この状態がアテローム性動脈硬化として知られる。血栓が生じ、狭い動脈を遮断すると、その時、心臓発作または卒中が生じ得る。
【０１３３】
コレステロールは、血液に溶解することはできない。それは、リポタンパク質と呼ばれる担体によって細胞まで及び細胞から輸送されなければならない。ＬＤＬ及びＨＤＬは、トリグリセリドが豊富なリポタンパク質（ＶＬＤＬ）及びＬｐ（ａ）コレステロールと共に総コレステロール量を構成し、それは血液検査によって測定することができる。
【０１３４】
語句「核酸」は、本明細書で使用されるとき、Ｗａｔｓｏｎ／Ｃｒｉｃｋの塩基対合によって相補性の核酸とハイブリッド形成することが可能であるＤＮＡまたはＲＮＡまたはＤＮＡ／ＲＮＡハイブリッド、一本鎖または二本鎖、センスまたはアンチセンスにかかわらず、天然に存在するまたは合成のオリゴヌクレオチドまたはポリヌクレオチドを指す。本発明の核酸には、ヌクレオチド類似体（例えば、ＢｒｄＵ）、及び非ホスホジエステルヌクレオチド間結合（例えば、ペプチド核酸（ＰＮＡ）またはチオジエステル結合）も含むことができる。特に、核酸には、限定しないで、ＤＮＡ、ＲＮＡ、ｃＤＮＡ、ｇＤＮＡ、ｓｓＤＮＡ、ｄｓＤＮＡまたはその任意の組み合わせを挙げることができる。
【０１３５】
特に定義されない限り、本明細書で使用される専門用語及び科学用語は全て、開示された方法及び組成物が属する技術の当業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書で記載されるものに類似するまたはそれと同等である方法及び材料を本方法及び組成物の実践または試験にて使用することができるけれども、特に有用な方法、装置及び材料は記載されるようなものである。本明細書で引用される出版物及びそのためにそれらが引用される材料は、参照によって本明細書に具体的に組み入れられる。以前の発明のために本発明がそのような開示に先行するように権利が与えられないという承認として解釈されるものは何もない。参照が従来技術を構成するという承認は為されない。参照の議論は、著者らが主張するものを述べ、出願者らは引用された文書の正確さ及び適切性に挑戦する権利を保有する。多数の出版物が本明細書で参照されるが、そのような参照はこれらの文書のいずれかが当該技術における共通する一般常識の一部を形成するという承認を構成しないことが明瞭に理解されるであろう。
【０１３６】
Ｂ．アポＥ模倣ペプチド
開示されるのは、アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドまたはアポＥ模倣体である。アポＥ模倣ペプチドの非限定例が、本明細書で提供される。アポＥ模倣体は単一ドメインまたは二重ドメインのペプチドであってもよい。アポＥ模倣体を含有する組成物も開示される。
【０１３７】
開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、アセチル化アミノヘキサン酸（Ａｃ−Ａｈａ）を含む。
【０１３８】
開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、Ａｃ−Ａｈａを含み、Ａｃ−Ａｈａは、ペプチドのＮ末端である。いくつかの態様において、Ａｈａは、クラスＡの両親媒性の螺旋ドメインを含む脂質関連ペプチドの間に挿入してもよい。
【０１３９】
開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、Ａｃ−Ａｈａを含み、脂質関連ペプチドは、クラスＡの両親媒性の螺旋ドメインを含む。例えば、クラスＡの両親媒性の螺旋ドメインは、ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ（配列番号５）、ＤＷＬＲＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＲＥＡＦ（配列番号６１８）、ＤＷＬＲＡＬＹＤＫＶＡＥＫＬＲＥＡＬ（配列番号６１９）、ＤＬＬＲＡＬＹＤＫＶＡＥＫＬＲＥＡＷ（配列番号６２０）、またはＦＡＥＫＬＫＥＡＶＫＤＹＦＡＫＬＷＤ（配列番号６１６）である。
【０１４０】
開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、Ａｃ−Ａｈａを含み、脂質関連ペプチドは、クラスＡの両親媒性の螺旋ドメインを含み、アポＥの受容体結合ドメインは、脂質関連ペプチドに共有結合されてもよい。
【０１４１】
開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、Ａｃ−Ａｈａを含み、前記アポリポタンパク質Ｅは、ヒト、マウス、ウサギ、サル、ラット、ウシ、ブタ及びイヌからなる群から選択される種由来であってもよい。
【０１４２】
開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、Ａｃ−Ａｈａを含み、前記合成ペプチドは、Ｃ末端でアミド基を用いて保護される。
【０１４３】
開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、Ａｃ−Ａｈａを含み、アポＥの受容体結合ドメインは、ＬＲＫＬＲＫＲＬＬＲ（配列番号４）、ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ（配列番号１１）、ＬＲＫＭＲＫＲＬＭＲ（配列番号７）、またはＲＬＴＲＫＲＧＬＫ（配列番号１３）であってもよい。アポＥの受容体結合ドメインは、ＬＲＫＬＲＫＲＦＦＲ（配列番号４）、ＬＲＫＬＰＫＲＬＬＲ（配列番号８）、ＬＲＮＶＲＫＲＬＶＲ（配列番号９）、ＭＲＫＬＲＫＲＶＬＲ（配列番号１０）、ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ（配列番号１１）、ＬＲＫＬＲＫＲＦＦＲ（配列番号１２）、ＬＲＫＬＲＫＲＬＬＲ（配列番号４）、またはＬＲＫＭＲＫＲＬＭＲ（配列番号７）であってもよいが、これらに限定されない。
【０１４４】
開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、Ａｃ−Ａｈａを含み、アポＥの受容体結合ドメインは、ＬＲＫＬＲＫＲＬＬＲ（配列番号４）、ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ（配列番号１１）、ＬＲＫＭＲＫＲＬＭＲ（配列番号７）、ＲＬＴＲＫＲＧＬＫ（配列番号１３）、ＬＲＲＭＲＲＲＬＭＲ（配列番号６２１）、またはＲＬＴＲＲＲＧＫ（配列番号６２２）であってもよい。
【０１４５】
開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、Ａｃ−Ａｈａを含み、合成アポＥ模倣ペプチドは、Ａｃ−Ａｈａ−ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2またはＡｃ−Ａｈａ−［Ｒ］ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2であってもよい。Ａｃ−Ａｈａ−ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2のアポＥ模倣ペプチドは、Ａｃ−Ａｈａ−ＬＲＫＬＲＫＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号１）である。Ａｃ−Ａｈａ−［Ｒ］ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2のアポＥ模倣ペプチドは、Ａｃ−Ａｈａ−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６６２）である。
【０１４６】
開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、脂肪酸部分、ω−アミノ脂肪酸部分、またはアセチル化ω−アミノ脂肪酸部分を含む。
【０１４７】
開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、アセチル化ω−アミノ脂肪酸部分を含み、アセチル化ω−アミノ脂肪酸部分は、ペプチドのＮ末端である。いくつかの態様において、ω−アミノ脂肪酸部分は、クラスＡの両親媒性の螺旋ドメインの脂質関連ペプチドの間に挿入してもよい。
【０１４８】
開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、脂肪酸部分、ω−アミノ脂肪酸部分、またはアセチル化ω−アミノ脂肪酸部分を含み、脂質関連ペプチドは、クラスＡの両親媒性の螺旋ドメインを含む。例えば、クラスＡの両親媒性の螺旋ドメインは、ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ（配列番号５）、ＤＷＬＲＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＲＥＡＦ（配列番号６１８）、ＤＷＬＲＡＬＹＤＫＶＡＥＫＬＲＥＡＬ（配列番号６１９）、ＤＬＬＲＡＬＹＤＫＶＡＥＫＬＲＥＡＷ（配列番号６２０）、またはＦＡＥＫＬＫＥＡＶＫＤＹＦＡＫＬＷＤ（配列番号６１６）である。
【０１４９】
開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、脂肪酸部分、ω−アミノ脂肪酸部分、またはアセチル化ω−アミノ脂肪酸部分を含み、脂質関連ペプチドは、クラスＡの両親媒性の螺旋ドメインを含み、アポＥの受容体結合ドメインは、脂質関連ペプチドに共有結合されてもよい。
【０１５０】
開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、脂肪酸部分、ω−アミノ脂肪酸部分、またはアセチル化ω−アミノ脂肪酸部分を含み、前記アポリポタンパク質Ｅは、ヒト、マウス、ウサギ、サル、ラット、ウシ、ブタ及びイヌからなる群から選択される種由来であってもよい。
【０１５１】
開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、脂肪酸部分、ω−アミノ脂肪酸部分、またはアセチル化ω−アミノ脂肪酸部分を含み、前記合成ペプチドは、Ｃ末端でアミド基を用いて保護される。
【０１５２】
開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、脂肪酸部分、ω−アミノ脂肪酸部分、またはアセチル化ω−アミノ脂肪酸部分を含み、アポＥの受容体結合ドメインは、ＬＲＫＬＲＫＲＬＬＲ（配列番号４）、ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ（配列番号１１）、ＬＲＫＭＲＫＲＬＭＲ（配列番号７）、またはＲＬＴＲＫＲＧＬＫ（配列番号１３）であってもよい。アポＥの受容体結合ドメインは、ＬＲＫＬＲＫＲＦＦＲ（配列番号４）、ＬＲＫＬＰＫＲＬＬＲ（配列番号８）、ＬＲＮＶＲＫＲＬＶＲ（配列番号９）、ＭＲＫＬＲＫＲＶＬＲ（配列番号１０）、ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ（配列番号１１）、ＬＲＫＬＲＫＲＦＦＲ（配列番号１２）、ＬＲＫＬＲＫＲＬＬＲ（配列番号４）、またはＬＲＫＭＲＫＲＬＭＲ（配列番号７）であってもよいが、これらに限定されない。
【０１５３】
開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、脂肪酸部分、ω−アミノ脂肪酸部分、またはアセチル化ω−アミノ脂肪酸部分を含み、アポＥの受容体結合ドメインは、ＬＲＫＬＲＫＲＬＬＲ（配列番号４）、ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ（配列番号１１）、ＬＲＫＭＲＫＲＬＭＲ（配列番号７）、ＲＬＴＲＫＲＧＬＫ（配列番号１３）、ＬＲＲＭＲＲＲＬＭＲ（配列番号６２１）、またはＲＬＴＲＲＲＧＫ（配列番号６２２）であってもよい。
【０１５４】
開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、脂肪酸部分、ω−アミノ脂肪酸部分、またはアセチル化ω−アミノ脂肪酸部分を含み、合成アポＥ模倣ペプチドは、ブタノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６２３）；ヘキサノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６２４）；オクタノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６２５）；デカノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６２６）；ラウロイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６２７）；ミリストイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６２８）；パルミトイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６２９）；ステアロイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６３０）；パルミトレオイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６３１）；アラキドイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６３２）；ベヘノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６３３）；オレオイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６３４）；リシノレオイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６３５）；リノレノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６３６）；バクセノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６３７）；ガドレオイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６３８）；エルコイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６２３９）；セトレオイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６４０）；ネルボノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６４１）；アドレノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６４２）；α−リノレノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６４３）；γ−リノレノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６４４）；ＥＰＡ−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６４５）；またはＤＨＡ−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６４６）であってもよい。上述において、脂肪酸部分は、左側に示し、ペプチドＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ（配列番号１１）に結合する。「ＥＰＡ」は、５，８，１１，���４，１７−エイコサペンタエン酸に由来する部分を示し；「ＤＨＡ」は、４，７，１０，１３，１６，１９−ドコサヘキサエン酸に由来する部分を示す。
【０１５５】
開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、天然油または脂肪油、例えば、魚油に由来する脂肪酸部分を含み、合成アポＥ模倣ペプチドは、（魚油）−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号６６３）であってもよい。上述において、「（魚油）」は、魚油中の脂肪酸（ＥＰＡ及びＤＨＡなどの魚油成分を含むが、これらに限定されない）が、ペプチドＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ（配列番号１１）に結合することを示す。従って、合成アポＥ模倣ペプチドは、それらを調製するために使用した魚油に由来する脂肪酸基を含むペプチドの混合物である。
【０１５６】
場合によっては、合成アポＥ模倣ペプチドは、脂肪酸を含む開示されたペプチドのいずれかであってもよい。
【０１５７】
場合によっては、合成アポＥ模倣ペプチドは、アセチル化脂肪酸を含む開示されたペプチドのいずれかであってもよい。
【０１５８】
また、開示されるのは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、合成アポＥ模倣ペプチドは、Ａｃ−Ａｈａを含み、アポリポタンパク質Ｅの受容体結合ドメインは、スクランブルされる。アポＥのスクランブルされた受容体結合ドメインの例が、以下に提供される。
【０１５９】
また、開示されるのは、アポリポタンパク質Ｅの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとからなる合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドであり、受容体結合ドメインは、前記脂質関連ペプチドに共有結合される、アポリポタンパク質Ｅの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドの双方は、スクランブルされる。アポＥのスクランブルされた受容体結合ドメイン及びスクランブルされた脂質関連ペプチドの例が、以下に提供される。
【０１６０】
アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドは、肝臓における受容体に代替リガンドを提供して、リポタンパク質（ＬＤＬ、ＶＤＬＤ及びβ−ＶＬＤＬ）を含有するアテローム形成性のアポリポタンパク質Ｂを一掃することによる直接的なコレステロール低下効果、及び動脈壁に対する直接的な有益な効果の双方を有する。冠状アテローム性動脈硬化を画像化する新しいさらに効果的な方法は、動脈壁に対する利益の直接的な測定を可能にする（Ｖａｎ  Ｖｅｌｚｅｎら．Ｈｅｌｌｅｎｉｃ  Ｊ  Ｃａｒｄｉｏｌ、５０：２４５−２６３，２００９）。アポＥ模倣ペプチドは、動脈壁からのコレステロールの除去を高め、ＨＤＬと併せて機能し、マクロファージからコレステロールを受け入れる脂質が乏しいプレβ−ＨＤＬの形成を高める。アポＥ模倣ペプチドは、動脈壁における死細胞及び死んでいく細胞のマクロファージが介在するクリアランスを刺激し（貪食除去）、ＰＯＮ−１レベルを上昇させ、血漿脂質ヒドロペルオキシドのレベルを下げることによってＨＤＬの質を改善し、アテローム性動脈硬化病変におけるマクロファージ含有量を減らしてさらに安定な病変を生じ、動脈壁における炎症を低下させることができる。その結果、アポＥ模倣ペプチドは、アテローム性動脈硬化病変のサイズをａｐｏＡ−Ｉ模倣ペプチドよりもさらに迅速に且つスタチン（ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤）よりもさらに迅速に減らす。コレステロールのレベルが生理食塩水処理の動物と同じである場合でさえ、アポＥ模倣ペプチドで処理した動物にてアテローム性動脈硬化病変の退行が持続する。従って、効果は、コレステロールの低下によって単純には説明することができない。
【０１６１】
１．アポリポタンパク質Ｅ
アポリポタンパク質Ｅ（アポＥ）は、例えば、超低密度リポタンパク質（ＶＬＤＬ）及びカイロミクロンなどのトリグリセリドが豊富なリポタンパク質の代謝において重要な役割を担う。アポリポタンパク質Ｅは、低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）受容体（アポＢ、Ｅ受容体）及び、ＬＤＬ受容体関連タンパク質（ＬＲＰ）、超低密度リポタンパク質受容体（ＶＬＤＬＲ）及びアポＥ２受容体（アポＥ２Ｒ）を含む遺伝子ファミリーのメンバーへのアポＥ含有リポタンパク質の高親和性結合に介在する（Ｍａｈｌｅｙ，Ｒ．Ｗ．，（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４０，６２２−６３０）。アテローム性動脈硬化におけるアポＥの推定上の複雑な役割は、いくつかの所見：（ｉ）ヒトのアポＥを過剰発現するマウスは低レベルの血漿総コレステロールレベルを有する（Ｓｈｉｍｏｎｏ，Ｈ．Ｎ．，ら，（１９９２）、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．９０，２０８４−２９９１）、（ｉｉ）コレステロールを食べさせたウサギへのヒトアポＥの静脈内注射は、これらの動物をアテローム性動脈硬化から保護する（Ｙａｍａｄａ，ら，（１９８９）、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８６，６６５−６６９）、及び（ｉｉｉ）マウスにおけるアポＥ遺伝子の喪失は、自然発生のアテローム性動脈硬化を生じ（Ｚｈａｎｇ，Ｓ．Ｈ．ら，（１９９２）、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２５８，４６８−４７１）、それはアポＥ欠損マウスにてマクロファージ特異的なａｐｏＥ発現が開始されると改善する（Ｓｐａｎｇｅｎｂｅｒｇ，Ｊ．ら，（１９９７）、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ、１３４９，１０９−１２１）、という所見によって強調されている。
【０１６２】
アポＥは、脂質を結合し、２つの主なドメインを有するタンパク質である（Ｍａｈｌｅｙ，Ｒ．Ｗ．ら  Ｊ．Ｌｉｐｉｄ  Ｒｅｓ．１９９９，４０：６２２−６３０）。２２ｋＤａのアミノ末端ドメインは、Ｘ線結晶学試験によって４螺旋束であり（Ｗｉｌｓｏｎ，Ｃ．ら  Ｓｃｉｅｎｃｅ、１９９１；２５２：１８１７−１８２２）、正に荷電した受容体結合ドメインを含有することが示されている。受容体への超低密度リポタンパク質（ＶＬＤＬ）の結合に介在するこの領域については、アポリポタンパク質は、リポタンパク質表面に会合しなければならず、これはＣ末端の両親媒性の螺旋領域によって可能になる。正に荷電した受容体結合ドメインを含有する４螺旋束がリポタンパク質表面で広がらなければ、その時、ＶＬＤＬは、受容体への結合で不完全である。従って、アテローム形成性のアポＥ含有リポタンパク質の取り込みを高めるには、アポＥの正に荷電したアルギニン（Ａｒｇ）リッチクラスタードメインとＣ末端の両親媒性の螺旋ドメインの双方が必要とされる。
【０１６３】
アポＥは、３４，２００の分子量を持つ２９９アミノ酸残基のタンパク質として分泌される。アポＥのＣ末端領域（１９２〜２９９）が高トリグリセリド血症のＶＬＤＬへのその結合に必須であり、Ｎ末端の２２ｋＤａドメイン（１〜１９１）がＬＤＬ−Ｒに結合する（Ｂｒａｄｌｅｙ，Ｗ．Ａ．ら，（１９８６）、Ｊ．Ｌｉｐｉｄ  Ｒｅｓ．２７，４０−４８）という事実を説明するのに、アポＥの２つの断片へのトロンビン切断に基づいて、２ドメイン仮説が当初提案された。タンパク質及びその変異体の追加の物理化学的な性状分析は、この概念を拡大し、領域１９２〜２１１はリン脂質に結合する一方で、アミノ末端ドメイン（１〜１９１）は４螺旋束にてＬＤＬ受容体結合ドメインを含有する球状構造であることを示した（Ｗｉｌｓｏｎ，Ｃ．ら，（１９９１）、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２５２，１８１７−１８２２）。合成ペプチド（Ｓｐａｒｒｏｗら  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、３１（４）：１０６５−８，１９９２）及びモノクローナル抗体による研究は、正に荷電したアミノ酸、Ａｒｇ及びＬｙｓにて濃縮されるドメインである残基１２９〜１６９の間でａｐｏＥのＬＤＬ受容体結合ドメインを正確に示した（Ｒａｌｌ，Ｓ．Ｃ．，Ｊｒ．ら，（１９８２）、ＰＮＡＳ  ＵＳＡ、７９，４６９６−４７００；Ｌａｌａｚａｒ，Ａ．ら，（１９８８）、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６３，３５４２−２５４５；Ｄｙｅｒ，Ｃ．Ａ．ら，（１９９１）、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２９６，２２８０３−２２８０６；及びＤｙｅｒ，Ｃ．Ａ．ら，（１９９１）、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６６，１５００９−１５０１５）。
【０１６４】
最小限のアルギニンリッチアポＥ受容体結合ドメイン（１４１〜１５０）が、クラスＡの両親媒性の螺旋に共有結合した場合、低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）及び超低密度リポタンパク質（ＶＬＤＬ）の取り込み及びクリアランスを高めるのに十分だったという仮説を調べるために、ペプチドを合成し、ヒトアポＥの受容体結合ドメインＬＲＫＬＲＫＲＬＬＲ（配列番号４）（ｈアポＥ［１４１−１５０］、「ｈＥ」とも呼ばれる）を１８Ａ、よく特徴付けられた高親和性の脂質関連ペプチド（ＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ（配列番号５）、「１８Ａ」とも呼ばれる）に連結し、ｈアポＥ［１４１−１５０］−１８Ａ（「ｈＥ−１８Ａ」とも呼ばれる）と呼ばれるペプチドを生成した（特定のアポＥ模倣体及びその使用を教示するために、その全体が参照によって本明細書に組み入れられる米国特許第６，５０６，８８０号を参照されたい）。合成したのはまた、Ａｃ−ｈＥ１８Ａ−ＮＨ２と呼ばれるｈＥ−１８Ａの末端保護された類似体だった。２つの類似体、ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−１８Ａ（配列番号１１）（「ｈＥ（Ｒ）−１８Ａ」とも呼ばれる）及びＬＲＫＭＲＫＲＬＭＲ−１８Ａ（配列番号７）（「ｍＥ１８Ａ」とも呼ばれる）を用いて、受容体結合ドメインにおけるリジン残基の重要性及び疎水性残基の役割も調べ、それによってヒトアポＥの受容体結合ドメインを修飾し、１４３位及び１４６位にてアルギニン（Ｒ）残基をリジン（Ｋ）残基に置換し（ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ、配列番号１１）、且つそれによって、マウスアポＥの受容体結合ドメイン（ＬＲＫＭＲＫＲＬＭＲ、配列番号７）をそれぞれ１８Ａに連結した。次いで細胞によるヒトＬＤＬ／ＶＬＤＬの取り込み及び分解に対する二重特性ペプチドの効果を測定した。
【０１６５】
誘導されたＬＤＬ受容体を伴ったＭＥＦ１細胞にて、ＬＤＬの内部移行を、それぞれＡｃ−ｍＥ−１８Ａ−ＮＨ2、Ａｃ−ｈＥ−１８Ａ−ＮＨ2及びＡｃ−ｈＥ（Ｒ）−１８Ａ−ＮＨ2によって３回、５回及び７回、増強することを測定した。３つのペプチドは全て、ＬＤＬの分解を１００パーセント高めた。Ａｃ−ｈＥ−１８Ａ−ＮＨ2及び対照ペプチドＡｃ−１８Ａ−ＮＨ2は、双方ともＶＬＤＬと相互作用し、ＶＬＤＬからのａｐｏＥの置換を引き起こした。しかしながら、Ａｃ−ｈＥ−１８Ａ−ＮＨ2が会合したＶＬＤＬだけがａｐｏＥの非存在にもかかわらず、単独でのＶＬＤＬに比べてＶＬＤＬの取り込みを６倍及び分解を３倍に高めた。しかしながら、これらのペプチドの存在下での線維芽細胞へのＬＤＬの結合は、調べたＬＤＬの濃度範囲にわたって飽和できなかった。
【０１６６】
さらに、ＬＤＬ受容体関連タンパク質（ＬＲＰ）またはＬＤＬ受容体または双方の存在に無関係なＬＤＬ内部移行の類似する増強が見られた。しかしながら、ヘパリナーゼ及びヘパリチナーゼによる細胞の事前処理は、細胞による増強されたペプチド介在性のＬＤＬの取り込み及び分解を、８０％を超えて無効にした。データは、二重ドメインペプチドが両親媒性の脂質結合ドメイン（１８Ａ）を介したＬＤＬへの結合によってＬＤＬの取り込み及び分解を高めることを示した。しかしながら、最小限の１４１〜１５０のＡｒｇリッチドメインは、ＬＤＬレベルを低下させなかったが、１８Ａ脂質関連ドメインとの組み合わせでのみ低下させ、ＬＤＬ受容体結合を付与しなかったが、線維芽細胞による取り込み及び分解のためのＨＳＰＧ経路にＬＤＬ／ペプチド複合体を向けた。
【０１６７】
２．脂肪酸
開示されたペプチドは、脂肪酸部分、ω−アミノ脂肪酸部分、またはアセチル化ω−アミノ脂肪酸部分に結合することができる。種々の態様において、脂肪酸部分、ω−アミノ脂肪酸部分、またはアセチル化ω−アミノ脂肪酸部分は、ペプチドのＮ末端アミノ基を介して開示されたペプチドに結合する。
【０１６８】
種々の態様において、脂肪酸部分、ω−アミノ脂肪酸部分、またはアセチル化ω−アミノ脂肪酸部分とペプチドのＮ末端アミノ基の連結は、それぞれ以下の式によって表される構造を有し：
2017528437.tif 000002
式中、Ａは、２〜３２個の炭素原子を有する脂肪族基である。さらなる態様において、脂肪族基は、アルキル基である。さらに別の態様において、脂肪族基は、０〜３つの二重結合を含む。さらに別の態様において、脂肪族基は、アルケニル基である。
【０１６９】
さらなる態様において、開示されたペプチドに結合した脂肪酸部分は、精製された脂肪酸から誘導される。さらに別の態様において、開示されたペプチドに結合した脂肪酸部分は、飽和脂肪酸から誘導される。さらに別の態様において、開示されたペプチドに結合した脂肪酸部分は、不飽和脂肪酸から誘導される。さらに別の態様において、不飽和脂肪酸は、２つ以上の二重結合を有するポリ不飽和脂肪酸である。
【０１７０】
種々の態様において、合成アポＥ模倣ペプチドは、脂肪酸部分を含む。
【０１７１】
脂肪酸部分が誘導される脂肪酸の例には、酪酸、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、デカン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ペンタデカン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ベヘニン酸、エルカ酸、リグノセリン酸、マルガリン酸、ミリストレイン酸、パルミトレイン酸、オレイン酸、ガドレイン酸、リシノール酸、バクセン酸、リノール酸、リノレン酸、アルファ−リノレン酸、ガンマ−リノレン酸、リカン酸、マルガロレイン酸、アラキドン酸、ガドレイン酸、ネルボン酸、アラキドン酸、ドコサペンタエン酸（ＤＰＡ）、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）等が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１７２】
飽和脂肪酸の例には、プロパン酸、ブタン酸、ペンタン酸、ヘキサン酸、ヘプタン酸、オクタン酸、ノナン酸、デカン酸、ウンデカン酸、ドデカン酸、トリデカン酸、テトラデカン酸、ペンタデカン酸、ヘキサデカン酸、ヘプタデカン酸、オクタデカン酸、ノナデカン酸、イコサン酸、ヘンイコサン酸、ドコサン酸、トリコサン酸、テトラコサン酸、ペンタコサン酸、ヘキサコサン酸、ヘプタコサン酸、オクタコサン酸、ノナコサン酸、トリアコンタン酸、ヘントリアコンタン酸、ドトリアコンタン酸、トリトリアコンタン酸、テトラトリアコンタン酸、ペンタトリアコンタン酸、及びヘキサトリアコンタン酸が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１７３】
不飽和脂肪酸の例には、ミリストレイン酸、パルミトレイン酸、サピエン酸、オレイン酸、リノール酸、アルファ−リノレン酸、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、エルカ酸、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）、及びドコサペンタエン酸が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１７４】
種々の態様において、開示されたペプチドに結合した脂肪酸部分は、未精製の脂肪酸、または天然油または脂肪などの脂肪酸の混合物から誘導される。通常、天然油または脂肪は、１つ以上の脂肪酸を含む概して疎水性の化合物の不均一混合物である。脂肪酸源は、（これらに限定されないが）動物脂肪、生物油、または大豆油、ヤシ油、パーム油、パーム核油、菜種油、綿実油、亜麻仁油、ヒマワリ油、魚油、藻類油などの野菜油等の天然油または脂肪を含み得る。
【０１７５】
さらなる態様において、天然油または脂肪は、１以上のオメガ−３脂肪酸、例えば、海産油、例えば、魚油、オキアミ油及び藻類油を含有するかまたは濃縮しているものである。ＤＨＡ及び／またはＥＰＡを含有する任意の油を使用することができる。さらなる態様において、天然油または脂肪は、少なくとも７０重量％または約７０重量％のＤＨＡ、例えば、少なくとも７５重量％または約７５重量％、少なくとも８０重量％または約８０重量％、少なくとも８５重量％または約８５重量％、または少なくとも９０重量％または約９０重量％のＤＨＡを含有する。さらに別の態様において、天然油または脂肪は、５重量％または約５重量％〜１５重量％または約１５重量％のＥＰＡ、例えば、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４または１５重量％のＥＰＡを含有する。さらに別の態様において、天然油または脂肪は、１０％以下または約１０％のＥＰＡ、または１０％未満または約１０％のＥＰＡを含有する。
【０１７６】
さらなる態様において、脂肪酸部分は、オメガ−３脂肪酸から誘導される。本明細書で使用されるとき、用語「オメガ−３ポリ不飽和脂肪酸（複数可）」または「オメガ−３脂肪酸」は、共通してｎ−３位置（すなわち、分子のメチル末端から３個目の結合）に炭素−炭素結合を有する不飽和脂肪カルボン酸のファミリーを指す。通常、それらは、約１６〜約２４個の炭素原子と、３〜６個の炭素−炭素二重結合を含有する。オメガ−３ポリ不飽和脂肪酸は、天然に見いだすことができ、これらの天然のオメガ−３ポリ不飽和脂肪酸は、全ての炭素−炭素二重結合がシス配置であることが多い。
【０１７７】
オメガ−３脂肪酸の例には、７，１０，１３−ヘキサデカトリエン酸（時に１６：３（ｎ−３）と省略される）；９，１２，１５−オクタデカテトリエン酸（α−リノレン酸（ＡＬＡ）、１８：３（ｎ−３））；６，９，１２，１５−オクタデカテトラエン酸（ステアリドン酸（ＳＴＤ）、１８：４（ｎ−３））；１１，１４，１７−エイコサトリエン酸（エイコサトリエン酸（ＥＴＥ）、２０：３（ｎ−３））；８，１１，１４，１７−エイコサテトラエン酸（エイコサテトラエン酸（ＥＴＡ）、２０：４（ｎ−３））；５，８，１１，１４，１７−エイコサペンタエン酸（エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、（２０：５（ｎ−３））；７，１０，１３，１６，１９−ドコサペンタエン酸（ドコサペンタエン酸（ＤＰＡ）、２２：５（ｎ−３））；４，７，１０，１３，１６，１９−ドコサヘキサエン酸（ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）、２２：６（ｎ−３））；９，１２，１５，１８，２１−テトラコサペンタエン酸（テトラコサペンタエン酸、２４：５（ｎ−３））；及び６，９，１２，１５，１８，２１−テトラコサヘキサエン酸（テトラコサヘキサエン酸、２４：６（ｎ−３））が挙げられるが、これらに限定されない。エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）及びドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）は、魚油中に天然に見いだされ、様々な食事療法用／治療用組成物中に使用されている。
【０１７８】
種々の長さの脂肪酸が熟考される。一態様において、脂肪酸は、奇数の炭素数を持つ合成脂肪酸を含む、Ｃ６〜Ｃ２４、Ｃ１０〜Ｃ２４、Ｃ１０〜Ｃ２８、またはＣ１０〜Ｃ３２の鎖長を含む。さらなる態様において、脂肪酸は、Ｃ１０、Ｃ１２、Ｃ１４、Ｃ１６、Ｃ１８、Ｃ２０、Ｃ２０、Ｃ２２及びＣ２４からなる群から選択される鎖長を含む。さらに別の態様において、脂肪酸は、Ｃ１４、Ｃ１６及びＣ１８からなる群から選択される鎖長を有する。さらに別の態様において、脂肪酸は、Ｃ１３、Ｃ１５及びＣ１７からなる群から選択される鎖長を有する。さらに別の態様において、脂肪酸は、４〜２８個の炭素を有する。
【０１７９】
本発明の種々の態様において、脂肪酸脂肪族鎖は、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、または３２個の炭素原子を含む。
【０１８０】
種々の態様において、脂肪酸は、天然に存在する脂肪酸である。さらなる態様において、脂肪酸は、短鎖脂肪酸（例えば、６個未満の炭素）、中鎖脂肪酸（例えば、６〜１２個の炭素）、長鎖脂肪酸（例えば、１２個よりも長い炭素）、または超長鎖脂肪酸（例えば、２２個よりも長い炭素）である。さらに別の態様において、脂肪酸は、シス配置の不飽和脂肪酸である。さらに別の態様において、脂肪酸は、シス配置の不飽和脂肪酸である。
【０１８１】
種々の態様において、合成アポＥ模倣ペプチドは、ω−アミノ脂肪酸部分を含む。
【０１８２】
例示のω−アミノ脂肪酸部分は、限定しないで、４−アミノ酪酸、６−アミノカプロン酸、８−アミノカプリル酸、１０−アミノカプリン酸（１０−アミノデカン酸）、１２−アミノラウリン酸（１２−アミノドデカン酸）、１４−アミノミリスチン酸（１４−アミノテトラデカン酸）、１４−アミノミリストレイン酸、１６−アミノパルミチン酸（１６−アミノヘキサデカン酸）、１８−アミノステアリン酸、１８−アミノオレイン酸、１６−アミノパルミトレイン酸、１８−アミノリノール酸、１８−アミノリノレン酸及び２０−アミノアラキドン酸を含むω−アミノ脂肪酸から誘導される。さらなる態様において、ω−アミノ脂肪酸部分は、６−アミノカプロン酸から誘導される。
【０１８３】
さらなる態様において、ω−アミノ脂肪酸部分は、４−アミノブタノイル、６−アミノカプロイル、８−アミノオクタノイル、１０−アミノデカノイル、１２−アミノラウロイル、１４−アミノミリストイル、１４−アミノミリストレオイル、１６−アミノパルミトレオイル、１８−アミノステアロイル、１８−アミノオレオイル、１６−アミノパルミトレオイル、１８−アミノリノレオイル、１８−アミノリノレノイル、または２０−アミノアラキドノイルである。さらに別の態様において、ω−アミノ脂肪酸部分は、６−アミノ−カプロイル（または、６−アミノヘキサノイルとも呼ばれる）である。
【０１８４】
種々の態様において、ω−アミノ脂肪酸部分は、以下の構造を有するω−アミノ脂肪酸から誘導され：
2017528437.tif 000003
ここで、Ａは、２〜３２個の炭素原子を有する脂肪族基である。さらなる態様において、脂肪族基は、アルキル基である。さらに別の態様において、脂肪族基は、０〜３個の二重結合を含む。さらに別の態様において、脂肪族基は、アルケニル基である。種々の態様において、Ａは、−（ＣＨ2）5−である。
【０１８５】
さらなる態様において、ω−アミノ脂肪酸部分は、ペプチドのＮ末端アミノ基を介してペプチドに結合し、ペプチドへの結合の後に、ω−アミノ脂肪酸部分は、以下の構造を有し：
2017528437.tif 000004
ここで、Ａは、２〜３２個の炭素原子を有する脂肪族基である。さらなる態様において、脂肪族基は、アルキル基である。さらに別の態様において、脂肪族基は、０〜３個の二重結合を含む。さらに別の態様において、脂肪族基は、アルケニル基である。種々の態様において、Ａは、−（ＣＨ2）5−である。
【０１８６】
種々の態様において、合成アポＥ模倣ペプチドは、アセチル化ω−アミノ脂肪酸部分を含む。さらなる態様において、開示されたペプチドは、開示されたω−アミノ脂肪酸のいずれかに結合することができ、ω−アミノ基上にアセチル部分をさらに含む。
【０１８７】
さらなる態様において、ω−アミノ脂肪酸部分は、ペプチドのＮ末端アミノ基を介してペプチドに結合し、ペプチドへの結合の後に、ω−アミノ基はアセチル化され、ω−アミノ脂肪酸部分は、以下の構造を有し：
2017528437.tif 000005
ここで、Ａは、２〜３２個の炭素原子を有する脂肪族基である。さらなる態様において、脂肪族基は、アルキル基である。さらに別の態様において、脂肪族基は、０〜３個の二重結合を含む。さらに別の態様において、脂肪族基は、アルケニル基である。種々の態様において、Ａは、−（ＣＨ2）5−である。
【０１８８】
脂肪酸部分が誘導される脂肪酸は、市販されており、種々の化学的方法で調製することができる（Ｒｅｃｅｎｔ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｆａｔｔｙ  Ａｃｉｄ  Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ，Ｅｄｉｔｏｒｓ：Ｋｎｏｔｈｅ  Ｇ  ａｎｄ  Ｄｅｒｋｓｅｎ  ＪＴＢ，ＡＯＣＳ  Ｐｒｅｓｓ  １９９９，ＩＳＢＮ  １−８９３９９７−００−６）。
【０１８９】
３．単一ドメインペプチド
開示されるのは、単一ドメインの合成アポＥ模倣体である。単一ドメインの合成アポＥ模倣体は、アポＥの受容体結合ドメインまたは脂質関連ペプチドからなることができる。
【０１９０】
ｉ．受容体結合ドメインペプチド
合成アポＥ模倣体のための受容体結合ドメインペプチドは、アポＥのヒト受容体結合ドメインペプチドであってもよい。例えば、開示された合成アポＥ模倣体の受容体結合ドメインペプチドは、ＬＲＫＬＲＫＲＬＬＲ、ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ、またはＬＲＫＬＲＫＲＦＦＲのアミノ酸配列を含んでもよい。そのような合成アポＥ模倣体の受容体結合ドメインペプチドは、マウス、ウサギ、サル、ラット、ウシ、ブタ及びイヌからなる群から選択される種に由来してもよい。
【０１９１】
開示された合成アポＥ模倣体で使用することができる受容体結合ドメインペプチドの例は、表１に提供される。
2017528437.tif 000006
【０１９２】
表１におけるイタリック体の残基は、ヒト配列からの変化を示すが、アミノ酸の特性は保存されている。表１における太字イタリック体の残基は、その位置でのヒト配列との差異を示す。
【０１９３】
合成アポＥ模倣体のための受容体結合ドメインペプチドは、アポリポタンパク質Ｂ（アポＢ）のＬＤＬ受容体（ＬＤＬＲ）結合ドメインであってもよい。アポＢのＬＤＬ受容体（ＬＤＬＲ）結合ドメインは、配列ＲＬＴＲＫＲＧＬＫを有することができる。アポＢ−１００は、ＬＤＬ受容体の結合ドメインとして役立つ９つのアミノ酸（３３５９〜３３６７）を持つ５５０，０００Ｄａの糖タンパク質である（Ｓｅｇｒｅｓｔら，Ｊ．Ｌｉｐｉｄ．Ｒｅｓ．４２，ｐｐ．１３４６−１３６７（２００１））。クラスリン被覆ピットにおけるＬＤＬＲへの結合の際、ＬＤＬは、エンドサイトーシスを介して内部移行し、ｐＨの低下が受容体をＬＤＬから解離させるエンドソームに移動する。受容体は、細胞の表面に戻って再利用される一方で、ＬＤＬは、粒子が分解されるリソソームに移動する（Ｇｏｌｄｓｔｅｉｎら，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１，ｐｐ．１−３９（１９８５））。アポＢのＬＤＬ受容体（ＬＤＬＲ）結合ドメインは、開示されたペプチドと共に使用される場合、アポＥについて本出願全体を通して記載されるように変化させ、及び／または修飾することもできる。例えば、アポＢのＬＤＬ受容体（ＬＤＬＲ）結合ドメインは、開示された脂質関連ペプチドと共に使用することができ、その際、アポＢのＬＤＬ受容体（ＬＤＬＲ）結合ドメインは、前記脂質関連ペプチドに共有結合される。加えて、アポＢのＬＤＬ受容体（ＬＤＬＲ）結合ドメインは、スクランブルすることができ、逆方向性にすることができ、以下で記載されるようなドメイン交換ペプチドの一部であってもよい。
【０１９４】
ｉｉ．脂質関連ペプチド
脂質関連ペプチドは、単独で使用することができ、またはアポＥ模倣ペプチドと併用して使用することができる。これらの合成アポＥ模倣体のための脂質関連ペプチドは、非極性面にて芳香族または脂肪族の残基を有するアポＡ−ＩのクラスＡの両親媒性の螺旋ペプチド、アポＡ−ＩのクラスＡの両親媒性の螺旋ペプチド模倣体、ペンタペプチド、テトラペプチド、トリペプチド、ジペプチド及びアミノ酸の対を含む小さなペプチド、アポ−Ｊ（Ｇ*ペプチド）及び、例えば、以下で記載されるようなペプチド模倣体であってもよいが、これらに限定されない。
【０１９５】
ａ．クラスＡの両親媒性の螺旋ペプチド
一態様において、開示された方法での使用のための脂質関連ペプチドには、例えば、米国特許第６，６６４，２３０号及びＰＣＴ公開ＷＯ０２／１５９２３及びＷＯ２００４／０３４９７７にて記載されたようなクラスＡの両親媒性の螺旋ペプチドが挙げられる。クラスＡの両親媒性の螺旋を含むペプチド（「クラスＡのペプチド」）は、アテローム性動脈硬化症の１以上の症状を緩和すると同様に他の障害を治療することが可能であることが発見された。
【０１９６】
クラスＡのペプチドは、極性と非極性の残基の分離を生じ、それによって極性の面と非極性面を形成し、正に荷電した残基は、極性／非極性の界面に存在し、負に荷電する残基は、極性の面の中心に存在するα螺旋の形成を特徴とする（例えば、Ａｎａｎｔｈａｒａｍａｉａｈ（１９８６）、Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ，１２８：６２６−６６８を参照されたい）。アポＡ−Ｉの第４エクソンは、３．６６７残基／ターンに折り畳まれるとクラスＡの両親媒性の螺旋構造を生じることが言及される。
【０１９７】
１８Ａと名付けられたクラスＡのペプチドの１つ（例えば、Ａｎａｎｔｈａｒａｍａｉａｈ（１９８６）、Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ，１２８：６２６−６６８を参照）は、本明細書で記載されるように修飾されて、経口で投与可能な且つ、アテローム性動脈硬化症の１以上の症状及び／または本明細書で記載されるような他の適応を抑制するまたは予防することに高度に有効であるペプチドを生じた。特定の理論に束縛されないで、開示されたペプチドは、ＬＤＬの酸化を軽減する播種分子（複数可）を取得することによってインビボで作用することができると考えられる。
【０１９８】
１８Ａの疎水性面におけるＰｈｅ残基の数を増やすことは、Ｐａｌｇｕｎａｃｈａｒｉら（１９９６）、Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ，＆  Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌ．１６：３２８−３３８によって記載された計算により判定されたように脂質の親和性を高めることができる。理論的には、１８Ａの非極性面での残基のＰｈｅによる手順通りの置換は、６ペプチドが得られ得る。追加の２、３及び４のＰｈｅを伴うペプチドは、それぞれ１３、１４及び１５単位の理論的な脂質親和性（λ）値を有し得る。しかしながら、追加のＰｈｅが４から５に増すと、λ値は、４単位急増した（１９λ単位に）。６または７のＰｈｅに増やすことは、あまり劇的な増加を生じなかった（それぞれ２０及び２１λ単位に）。
【０１９９】
４Ｆ、Ｄ４Ｆ、５Ｆ及びＤ５Ｆ等と名付けられたペプチドを含めて多数のこれらクラスＡのペプチドが作製された。種々のクラスＡのペプチドは、アテローム性動脈硬化感受性のマウス及びウサギにて病変の発症を阻害した。加えて、ペプチドは、本明細書で記載される種々の病態の１以上の症状を緩和することにおいて様々な、しかし、有意な程度の有効性を示す。多数のそのようなペプチドを表２に示す。
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*リンカーには下線を引く；ＮＭＡはＮ−メチルアントラニリルである
【０２００】
特定の態様において、ペプチドは、残基は全てＬ形態のアミノ酸であるＬ−４Ｆまたは１以上の残基がＤ形態のアミノ酸であるＤ−４Ｆとしても知られる４Ｆ（表２におけるＤ−Ｗ−Ｆ−Ｋ−Ａ−Ｆ−Ｙ−Ｄ−Ｋ−Ｖ−Ａ−Ｅ−Ｋ−Ｆ−Ｋ−Ｅ−Ａ−Ｆ（配列番号１６））の変異を含む。本明細書で記載されるペプチドのいずれかにおいて、Ｃ末端及び／またはＮ末端及び／または内部の残基は、本明細書で記載されるような１以上の保護基で保護することができる。
【０２０１】
表２の種々のペプチドが、アミノ末端を保護するアセチル基またはＮ−メチルアントラニリル基及びカルボキシル末端を保護するアミド基と共に説明される一方で、これらの保護基のいずれかは、排除され得る及び／または本明細書で記載されるような別の保護基で置換され得る。ペプチドは、本明細書で記載されるような１以上のＤ形態のアミノ酸を含んでもよい。特定の態様において、表２のペプチドのあらゆるアミノ酸（例えば、あらゆるエナンチオマーアミノ酸）は、Ｄ形態のアミノ酸である。
【０２０２】
表２は、完全に包括的であるわけではないことも言及される。本明細書で提供される教示を用いて、他の好適なクラスＡの両親媒性の螺旋ペプチドを（例えば、保存的または半保存的な置換（例えば、Ｅによって置換されるＤ）、伸長、欠失等によって）ごく普通に作製することができる。従って、例えば、一実施形態は、本明細書で示されるペプチド（例えば、表２における２Ｆ、３Ｆ、３Ｆ14、４Ｆ、５Ｆ、６Ｆ、または７Ｆとして同定されたペプチド）のいずれか１以上の切り詰めを利用する。従って、例えば、Ａ−Ｆ−Ｙ−Ｄ−Ｋ−Ｖ−Ａ−Ｅ−Ｋ−Ｌ−Ｋ−Ｅ−Ａ−Ｆ（配列番号５のアミノ酸５〜１８）は、１以上のＤアミノ酸を含む１８ＡのＣ末端から１４アミノ酸を含むペプチドを説明する一方で、他は他の切り詰めを説明する。
【０２０３】
さらに長いペプチドも好適である。そのような長いペプチドは、全体でクラスＡの両親媒性の螺旋を形成してもよく、またはクラスＡの両親媒性の螺旋は、ペプチドの１以上のドメインを形成することができる。加えて、本発明は、ペプチドの多量体の型（例えば、コンカテマー）を熟考する。従って、例えば、本明細書で説明されるペプチドは（直接またはリンカー（例えば、炭素リンカーまたは１以上のアミノ酸）を介して１以上の介在アミノ酸と）一緒にカップリングすることができる。説明に役立つポリマーペプチドには、１８Ａ−Ｐｒｏ−１８Ａ及び、特定の実施形態において、１以上のＤアミノ酸を含む、さらに好ましくはアミノ酸ごとに本明細書で記載されるようなＤアミノ酸を含む、及び／または一方若しくは双方の末端が保護されている以下の表（表２Ｂ）におけるペプチドが挙げられる。
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ｂ．非極性面にて芳香族または脂肪族の残基を有するアポＡ−ＩのクラスＡの両親媒性の螺旋ペプチド模倣体
【０２０４】
また、開示されるのは、修飾されたクラスＡの両親媒性の螺旋ペプチドである。特定の好ましいペプチドは、１以上の芳香族残基を非極性面、例えば、３ＦCπ（４Ｆに存在するように）の中心で組み入れ、または１以上の脂肪族残基を非極性面、例えば、３ＦIπの中心で組み入れる。例えば、表３を参照されたい。特定の理論に束縛されないで、ペプチド３ＦCπの非極性面における中心の芳香族残基は、非極性面の中心におけるπ電子の存在のために水分子がペプチド／脂質複合体の疎水性の脂質アルキル鎖の近傍に浸透するのを可能にすることができ、それは同様に、細胞表面からそれらを遮蔽する反応性酸素種（例えば、脂質ヒドロペルオキシド）の侵入を可能にする。非極性面、例えば、３ＦIπの中心で脂肪族残基を伴うペプチドは、同様に作用することができるが、３ＦCπほど効果的ではない。
【０２０５】
一態様において、ペプチドは、炎症誘発性のＨＤＬを抗炎症性のＨＤＬに変換することができ、抗炎症性のＨＤＬをさらに抗炎症性にすることができ、及び／または動脈壁の細胞によって生成されるＬＤＬが誘導する単球の走化性活性を表２で示すＤ４Ｆまたは他のペプチドと同等にまたはそれより大きく低下させることができる。
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【０２０６】
ｃ．他のクラスＡ及び一部のクラスＹの両親媒性の螺旋ペプチド
上述のクラスＡの両親媒性の螺旋ペプチドの１以上と同一のアミノ酸組成を有するクラスＡの両親媒性の螺旋ペプチド。従って、例えば、特定の実施形態において、本発明は、４Ｆと同一のアミノ酸組成を有するペプチドを熟考する。従って、特定の実施形態において、本発明は、１８アミノ酸からなるペプチドを含む活性剤を含み、その際、１８アミノ酸は、３つのアラニン（Ａ）、２つのアスパラギン酸（Ｄ）、２つのグルタミン酸（Ｅ）、４つのフェニルアラニン（Ｆ）、４つのリジン（Ｋ）、１つのバリン（Ｖ）、１つのトリプトファン（Ｗ）及び１つのチロシン（Ｙ）から成り、ペプチドは、クラスＡの両親媒性の螺旋を形成し、酸化剤による酸化に対してリン脂質を保護する。種々の実施形態において、ペプチドは、少なくとも１つの「Ｄ」アミノ酸残基を含み；特定の実施形態において、ペプチドは、全て「Ｄ」形態のアミノ酸残基を含む。そのような種々のペプチドを表４で説明する。これらのペプチドのリバース（レトロ）、インバース、レトロ−インバース及び環状に順を変えた形態も熟考される。表４は、アミノ酸組成：３つのアラニン（Ａ）、２つのアスパラギン酸（Ｄ）、２つのグルタミン酸（Ｅ）、４つのフェニルアラニン（Ｆ）、４つのリジン（Ｋ）、１つのバリン（Ｖ）、１つのトリプトファン（Ｗ）及び１つのチロシン（Ｙ）を有する代表的な１８アミノ酸の長さのクラスＡの両親媒性の螺旋ペプチドの配列及び識別子の名称を提供する。
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【０２０７】
生物学的に活性があり、有用なペプチドを容易に同定するのは可能である。従って、例えば、以下のペプチド：３Ｆ１；３Ｆ２；４Ｆ、そのリバース（レトロ）形態及びそのレトロ−インバーソ形態は活性があるとして的確に同定されている。脂質関連ペプチドは、長さ１８アミノ酸であり、クラスＡの両親媒性の螺旋を形成するペプチドを含むことができ、その際、該ペプチドは、アミノ酸組成：２つのアスパラギン酸、２つのグルタミン酸、４つのリジン、１つのトリプトファン、１つのチロシン、１以下のロイシン、１以下のバリン、１以上で３以下のアラニンを有し、且つ群：フェニルアラニン、アルファ−ナフトアラニン、ベータ−ナフトアラニン、ヒスチジンに由来する３〜６のアミノ酸を伴い、且つ、中性ｐＨで正の電荷を持つ４アミノ酸を含むクラスＡの両親媒性の螺旋の螺旋輪における極性面で９または１０のアミノ酸を含有し、正に荷電した残基の２つは極性面と非極性面の界面に存在し、極性面における４つの正に荷電した残基の２つは隣接し、非極性面では群：フェニルアラニン、α−ナフトアラニン、β−ナフトアラニン、ヒスチジンに由来するアミノ酸残基の２つも隣接し、非極性面にてこの群に由来する４以上のアミノ酸があれば、この群に由来する隣接しない少なくとも２つの残基もある。場合によっては、酸性アミノ酸は、２つのアスパラギン酸及び２つのグルタミン酸を有するよりもむしろグルタミン酸である。いくつかの態様において、脂質関連ペプチドは、１８Ａであってもよく、１８Ａの酸性アミノ酸の各々は、Ｇｌｕ残基である。
【０２０８】
クラスＡの両親媒性の螺旋ペプチドと同様に特定のクラスＹが開示される。クラスＹの両親媒性の螺旋ペプチドは、当業者に既知である（例えば、Ｓｅｇｒｅｓｔら（１９９２）、Ｊ．Ｌｉｐｉｄ  Ｒｅｓ．３３：１４１−１６６；Ｏｒａｍ及びＨｅｉｎｅｃｋｅ（２００５）、Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｒｅｖ．８５：１３４３−１３７２等を参照されたい）。これらのペプチドには、クラスＡの両親媒性の螺旋を形成する１８アミノ酸のペプチド、または式Ｉ：
ＤＸＸＫＹＸＸＤＫＸＹＤＫＸＫＤＹＸ（配列番号３６７）  （I）
によって記載されるクラスＹの両親媒性の螺旋が挙げられるが、これには限定されず、式中、Ｄは独立してＡｓｐまたはＧｌｕであり、Ｋは独立してＬｙｓまたはＡｒｇであり、Ｘは独立してＬｅｕ、ｎｏｒＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、β−Ｎａｌ、またはα−Ｎａｌであり、２つのＫ残基の間の極性面にあることができる１つを除いてＸ残基は全て非極性面にあり（例えば、螺旋ホイール図で見た場合）；Ｙは独立して非極性面におけるＡｌａ、Ｈｉｓ、Ｓｅｒ、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、またはＴｈｒであり（例えば、螺旋ホイール図で見た場合）、Ｙは独立して極性面におけるＡｌａ１つ、ＨＩｓ１つ、Ｓｅｒ１つ、Ｇｌｎ１つ、Ａｓｎ１つ、または極性面におけるＴｈｒ１つであり（例えば、螺旋ホイール図で見た場合）、２以下のＫは隣接し（例えば、螺旋ホイール図で見た場合）、３以下のＤは隣接し（例えば、螺旋ホイール図で見た場合）、４番目のＤはＹによって他のＤから分離される。ヒスチジン及び／またはα−及びβ−ナフトアラニンを伴うペプチドを含むこの種の代表的なペプチドを表５に示す。これらのペプチドのリバース（レトロ）、インバース、レトロ−インバース及び環状に順を変えた形態も熟考される。
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【０２０９】
クラスＡの４Ｆ及びベータ−Ｎｐｈを伴うＲｅｖ４Ｆ類似体の例。同様に、アルファ−Ｎｐｈ類似体を設計することができる。上記類似体と同様に、ＨｉｓをＮｐｈ類似体に組み入れることができる。Ｄ＞Ｅ類似体、Ｅ＞Ｄ類似体及びＤ−Ｅ交換類似体は、上述の類似体と同様に追加の可能性である。
4Nph                 Ac-DWNphKANphYDKVAEKNphKEANph-NH2  (配列番号460)
[D-E交換] 4Nph       Ac-EWNphKANphYEKVADKNphKDANph-NH2 (配列番号461)
[D>E]4Nph            Ac-EWNphKANphYEKVAEKNphKEANph-NH2 (配列番号462)
[E>D]4Nph            Ac-DWNphKANphYDKVADKNphKDANph-NH2 (配列番号463)
[D-1>E]4Nph          Ac-EWNphKANphYDKVAEKNphKEANph-NH2 (配列番号464)
[D-8>E]4Nph          Ac-DWNphKANphYEKVAEKNphKEANph-NH2 (配列番号465)
[E-12>D]4Nph         Ac-DWNphKANphYDKVADKNphKEANph-NH2 (配列番号466)
[E-16>D]4Nph         Ac-DWNphKANphYDKVAEKNphKDANph-NH2 (配列番号467)
【０２１０】
４Ｎｐｈについて上述したように、以下で提供される類似体のそれぞれについて最低７つの追加の類似体。
[F-3, 6,>Nph]4F       Ac-DWNphKANphYDKVAEKFKEAF-NH2 (配列番号468)
[F-14, 18>Nph]4F      Ac-DWFKAFYDKVAEKNphKEANph-NH2 (配列番号469)
[[F-3>Nph]4F          Ac-DWNphKAFYDKVAEKFKEAF-NH2 (配列番号470)
[F-6>Nph]4F           Ac-DWFKANphYDKVAEKFKEAF-NH2 (配列番号471)
[F-14>Nph]4F          Ac-DWFKAFYDKVAEKNphKEAF-NH2 (配列番号472)
[F-18>Nph]4F          Ac-DWFKAFYDKVAEKFKEANph-NH2 (配列番号473)
【０２１１】
以下で記載される類似体のそれぞれについて、Ｄ−Ｅを交換すること、Ｄ＞Ｅ及びＥ＞Ｄ及び単一のＤまたはＥの類似体によって上述のように最低７の追加の類似体が可能である。
Rev-4Nph                Ac-NphAEKNphKEAVKDYNphAKNphWD-NH2 (配列番号474)
[F-3, 6>Nph]Rev         Ac-NphAEKNphKEAVKDYFAKFWD-NH2 (配列番号475)
4F [F-13, 16]Rev-4F     Ac-FAEKFKEAVKDYNphAKNphWD-NH2 (配列番号476)
[F-3>Nph]Rev-4F         Ac-NphAEKFKEAVKDYFAKFWD-NH2 (配列番号477)
[F-6>Nph]Rev-4F         Ac-FAEKNphKEAVKDYFAKFWD-NH2 (配列番号478)
[F-13>Nph]Rev-4F        Ac-FAEKFKEAVKDYNphAKFWD-NH2 (配列番号479)
[F-16>Nph]Rev-4F        Ac-FAEKEKEAVKDYFAKNphWD-NH2 (配列番号480)
【０２１２】
以下に記載される類似体について、Ｈｉｓまたはアルファ−Ｎｐｈ及びベータ−Ｎｐｈを組み入れることによって追加の類似体が可能である。
Rev-[D>E]-4F         Ac-FAEKFKEAVKEYFAKFWE-NH2    (配列番号481)
Rev-[E>D]4F          Ac-FADKFKDAVKDYFAKFWD-NH2    (配列番号482)
Rev-R4-4F            Ac-FAERFREAVKDYFAKFWD-NH2    (配列番号483)
Rev-R6-4F            Ac-FAEKFREAVKDYFAKFWD-NH2    (配列番号484)
Rev-R10-4F           Ac-FAEKFKEAVRDYFAKFWD-NH2    (配列番号485)
Rev-R14-4F           Ac-FAEKFKEAVKDYFARFWD-NH2    (配列番号486)
Rev-[D>E]-4F         Ac-FAEKFKEAVKEYFAKFWE-NH2    (配列番号481)
Rev-[E>D]4F          Ac-FADKFKDAVKDYFAKFWD-NH2    (配列番号482)
Rev-R4-4F            Ac-FAERFREAVKDYFAKFWD-NH2    (配列番号483)
Rev-R6-4F            Ac-FAEKFREAVKDYFAKFWD-NH2    (配列番号484)
Rev-R10-4F           Ac-FAEKFKEAVRDYFAKFWD-NH2    (配列番号485)
Rev-R14-4F           Ac-FAEKFKEAVKDYFARFWD-NH2    (配列番号486)
Rev-[D>E]-4F         Ac-FAEKFKEAVKEYFAKFWE-NH2    (配列番号481)
Rev-[E>D]4F          Ac-FADKFKDAVKDYFAKFWD-NH2    (配列番号482)
Rev-R4-4F            Ac-FAERFREAVKDYFAKFWD-NH2    (配列番号483)
Rev-R6-4F            Ac-FAEKFREAVKDYFAKFWD-NH2    (配列番号484)
Rev-R10-4F           Ac-FAEKFKEAVRDYFAKFWD-NH2    (配列番号485)  
Rev-R14-4F           Ac-FAEKFKEAVKDYFARFWD-NH2    (配列番号486)
Rev-R4-4F            Ac-FAERFREAVKDYFAKFWD-NH2    (配列番号483)
Rev-R6-4F            Ac-FAEKFREAVKDYEAKFWD-NH2    (配列番号487)
Rev-R10-4F           Ac-FAEKFKEAVRDYFAKFWD-NH2    (配列番号485)
Rev-R14-4F           Ac-FAEKFKEAVKDYFARFWD-NH2    (配列番号486)
Rev-[D>E]-4F         Ac-FAEKFKEAVKEYFAKFWE-NH2    (配列番号481)
Rev-[E>D]4F          Ac-FADKFKDAVKDYFAKFWD-NH2    (配列番号482)
Rev-R4-4F            Ac-FAERFREAVKDYFAKFWD-NH2    (配列番号483)
Rev-R6-4F            Ac-FAEKFREAVKDYFAKFWD-NH2    (配列番号484)
Rev-R10-4F           Ac-FAEKFKEAVRDYFAKFWD-NH2    (配列番号485)
Rev-R14-4F           Ac-FAEKFKEAVKDYFARFWD-NH2    (配列番号486)
【０２１３】
以下の類似体のそれぞれについて、上述の例を用いて追加のＨ類似体及びＮｐｈ類似体が可能である。各類似体は、上記の例で記載された変化を伴う７類似体を生じることができる。
Rev3F-2               Ac-LFEKFAEAFKDYVAKWKD-NH2 (配列番号488)
RevR4-3F-2            Ac-LFERFAEAFKDYVAKWKD-NH2 (配列番号489)
RevR10-3F2            Ac-LFEKFAEAFRDYVAKWKD-NH2 (配列番号490)
RevR15-3F-2           Ac-LFEKFAEAFKDYVARWKD-NH2 (配列番号491)
RevR17-3F-2           Ac-LFEKFAEAFKDYVAKWRD-NH2 (配列番号492)
Rev[D>E]3F2           Ac-LFEKFAEAFKEYVAKWKE-NH2 (配列番号493)
Rev[E>D]3F-2          Ac-LFDKFADAFKDYVAKWKD-NH2 (配列番号494)
Rev-[E3>D]-3F-2       Ac-LFDKFAEAFKDYVAKWKD-NH2 (配列番号495)
Rev-[E7>D]-3F-2       Ac-LFEKFADAFKDYVAKWKD-NH2 (配列番号496)
Rev[D11>E]3F-2        Ac-LFEKFAEAFKEYVAKWKD-NH2 (配列番号497)
Rev-[D18>E]3F-2       Ac-LFEKFAEAFKDYVAKWKE-NH2 (配列番号498)
Rev3F-1               Ac-FAEKAWEFVKDYFAKLKD-NH2 (配列番号499)
RevR4-3F-1            Ac-FAERAWEFVKDYFAKLKD-NH2 (配列番号500)
RevR10-3F-1           Ac-FAEKAWEFVKDYFAKLKD-NH2 (配列番号501)
RevR15-3F-1           Ac-FAEKAWEFVKDYFAKLKD-NH2 (配列番号502)
RevR17-3F-1           Ac-FAEKAWEFVKDYFAKLRD-NH2 (配列番号503)
Rev[D>E]3F-1          Ac-FAEKAWEFVKEYFAKLKE-NH2 (配列番号504)
Rev[E>D}3F-1          Ac-FADKAWDFVKDYFAKLKD-NH2 (配列番号505)
Rev[E3>D]-3F-1        Ac-FADKAWEFVKDYFAKLKD-NH2 (配列番号506)
Rev[E7>D]3F-1         Ac-FAEKAWDFVKDYFAKLKD-NH2 (配列番号507)
Rev-[D11>E]3F-1       Ac-FAEKAWEFVKEYFAKLKD-NH2 (配列番号508)
Rev-[D18>E]3F-1       Ac-FAEKAWEFVKDYFAKLKE-NH2 (配列番号509)
Rev-5F                Ac-FFEKFKEFVKDYFAKLWD-NH2 (配列番号510)
Rev-[D>E]5F           Ac-FFEKFKEFVKEYFAKLWE-NH2 (配列番号511)
Rev-[E>D]5F           Ac-FFDKFKDFVKDYFAKLWD-NH2 (配列番号512)
Rev-R4-5F             Ac-FFERFKEFVKDYFAKLWD-NH2 (配列番号513)
Rev-R6-5F             Ac-FFEKFREFVKDYFAKLWD-NH2 (配列番号514)
Rev-R10-5F            Ac-FFEKFKEFVRDYFAKLWD-NH2 (配列番号515)
Rev-R15-5F            Ac-FFEKFKEFVKDYFARLWD-NH2 (配列番号516)
Rev-[E3>D]-5F         Ac-FFDKFKEFVKDYFAKLWD-NH2 (配列番号517)
Rev-[E7>D]5F          Ac-FFEKFKDFVKDYFAKLWD-NH2 (配列番号518)
Rev-[D11>E]-5F        Ac-FFEKFKEFVKEYFAKLWD-NH2 (配列番号519)
Rev-[D18>E]-5F        Ac-FFEKFKEFVKDYFAKLWE-NH2 (配列番号520)
Rev-5F-2              Ac-FLEKFKEFVKDYFAKFWD-NH2 (配列番号521)
Rev-[D>E]-5F-2        Ac-FLEKFKEFVKEYFAKFWE-NH2 (配列番号522)
Rev-[E>D]-5F-2        Ac-FLDKFKEFVKDYFAKFWD-NH2 (配列番号523)
Rev-[E3>D]-5F-2       Ac-FLDKFKEFVKDYFAKFWD-NH2 (配列番号524)
Rev-[E7>D]-5F-2       Ac-FLEKFKDFVKDYFAKFWD-NH2 (配列番号525)
Rev-[D11>E]-5F-2      Ac-FLEKFKEFVKEYFAKFWD-NH2 (配列番号526)
Rev-[D18>E]-5F-2      Ac-FLEKFKEFVKDYFAKFWE-NH2 (配列番号527)
Rev-R4-5F-2           Ac-FLERFKEFVKDYFAKFWD-NH2 (配列番号528)
Rev-R6-5F-2           Ac-FLEKFREFVKDYFAKFWD-NH2 (配列番号529)
RevR10-5F-2           Ac-FLEKFKEFVRDYFAKFWD-NH2 (配列番号530)
Rev-R16-5F-2          Ac-FLEKFKEFVKDYFARFWD-NH2 (配列番号531)
Rev-6F                Ac-FFEKFKEFFKDYFAKLWD-NH2 (配列番号532)
Rev-[D>E]-6F          Ac-FFEKFKEFFKEYFAKLWE-NH2 (配列番号533)
Rev-[E>D]-6F          Ac-FFDKFKDFFKDYFAKLWD-NH2 (配列番号534)
Rev-R4-6F             Ac-FFERFKEFFKDYFAKLWD-NH2 (配列番号535)
Rev-R6-6F             Ac-FFEKFREFFKDYFAKLWD-NH2 (配列番号536)
Rev-R10-6F            Ac-FFEKFKEFFRDYFAKLWD-NH2 (配列番号537)
Rev-R14-6F            Ac-FFERFKEFFKDYFARLWD-NH2 (配列番号538)
Rev-[E3>D]-6F         Ac-FFDKFKEFFKDYFAKLWD-NH2 (配列番号539)
Rev-[E7>D]-6F         Ac-FFEKEKDFFKDYFAKLWD-NH2 (配列番号540)
Rev-[D11>E]-6F        Ac-FFEKFKEFFKEYFAKLWD-NH2 (配列番号541)
Rev-[D18>E]-6F        Ac-FFEKFKEFFKDYFAKLWE-NH2 (配列番号542)
Rev-4F                Ac-FAEKFKEAVKDYFAKFWD-NH2 (配列番号543)
Rev-[D>E]-4F          Ac-FAEKFKEAVKEYFAKFWE-NH2 (配列番号481)
Rev-[E>D]4F           Ac-FADKFKDAVKDYFAKFWD-NH2 (配列番号482)
Rev-R4-4F             Ac-FAERFREAVKDYFAKFWD-NH2 (配列番号483)
Rev-R6-4F             Ac-FAEKFREAVKDYFAKFWD-NH2 (配列番号484)
Rev-R10-4F            Ac-FAEKFKEAVRDYFAKFWD-NH2 (配列番号485)
Rev-R14-4F            Ac-FAEKFKEAVKDYFARFWD-NH2 (配列番号486)
4F-2                  Ac-DKWKAVYDKFAEAFKEFF-NH2 (配列番号544)
[D>E]-4F-2            Ac-EKWKAVYEKFAEAFKEFF-NH2 (配列番号545)
[E>D]-4F-2            Ac-DKWKAVYDKFADAFKDFF-NH2 (配列番号546)
R2-4F-2               Ac-DRWKAVYDKFAEAFKEFF-NH2 (配列番号547)
R4-4F-2               Ac-DKWRAVYDKFAEAFKEFF-NH2 (配列番号548)
R9-4F-2               Ac-DKWKAVYDRFAEAFKEFF-NH2 (配列番号549)
R14-4F-2              Ac-DKWKAVYDKFAEAFREFF-NH2 (配列番号550)
Rev4F-2               Ac-FFEKFAEAFKDYVAKWKD-NH2 (配列番号551)
Rev-[D>E]-4F-2        Ac-FFEKFAEAFKEYVAKWKE-NH2 (配列番号552)
Rev-[E>D]-3F-2        Ac-FFDKFADAFKDYVAKWKD-NH2 (配列番号553)
Rev-R4-4F-2           Ac-FFERFAEAFKDYVAKWKD-NH2 (配列番号554)
Rev-R10-4F-2          Ac-EFERFAEAFRDYVAKWKD-NH2 (配列番号555)
Rev-R15-4F-2          Ac-FFEKFAEAFKDYVARWKD-NH2 (配列番号556)
Rev-R17-4F-2          Ac-FFERFAEAFKDYVAKWRD-NH2 (配列番号557)
Rev-[E3>D]-4F-2       Ac-FFDKFAEAFKDYVAKWKD-NH2 (配列番号558)
Rev-[E7>D]-4F-2       Ac-FFEKFADAFKDYVAKWKD-NH2 (配列番号559)
Rev-[D11>E]-4F-2      Ac-FFERFAEAFKEYVAKWKD-NH2 (配列番号560)
Rev-[D18>E]-4F-2      Ac-FFERFAEAFKDYVAKWKE-NH2 (配列番号561)
Rev-7F                Ac-FFEKFKEFFKDYFAKFWD-NH2 (配列番号562)
Rev-[E>D]-7F          Ac-FFDKFKDFFKDYFAKFWD-NH2 (配列番号563)
Rev-[D>E]-7F          Ac-FFEKFKEFFKEYFAKFWE-NH2 (配列番号564)
Rev-R4-7F             Ac-FFERFKEFFKDYFAKFWD-NH2 (配列番号565)
Rev-R6-7F             Ac-FFEKFREFFKDYFAKFWD-NH2 (配列番号566)
Rev-R10-7F            Ac-FFEKFKEFFRDYFAKFWD-NH2 (配列番号567)
Rev-R14-7F            Ac-FFEKFKEFFKDYFARFWD-NH2 (配列番号568)
Rev-[E3>D]-7F         Ac-FFDKFKEFFKDYFAKFWD-NH2 (配列番号569)
Rev-[E7>D]7F          Ac-FFEKFKDFFKDYFAKFWD-NH2 (配列番号570)
Rev-[D11>E]-7F        Ac-FFEKFKEFFKEYFAKFWD-NH2 (配列番号571)
Rev-[D18>E]-7F        Ac-FFEKFKEFFKDYFAKFWE-NH2 (配列番号572)
【０２１４】
本明細書で記載されるペプチドのいずれかは、本明細書で同定される相当する天然のアミノ酸に加えてまたはその代わりに非天然のアミノ酸を含むことができることも言及される。そのような修飾には、アセチル化、アミド化、ホルミル化、メチル化、硫酸化等が挙げられるが、これらに限定されない。説明に役立つ非天然のアミノ酸には、オルニチン、ノルロイシン、ノルバリン、Ｎ−メチルバリン、６−Ｎ−メチルリジン、Ｎ−メチルイソロイシン、Ｎ−メチルグリシン、サルコシン、イノシン、アロ−イソロイシン、イソデスモリジン、４−ヒドロキシプロリン、３−ヒドロキシプロリン、アロ−ヒドロキシリジン、ヒドロキシリジン、Ｎ−エチルアスパラギン、Ｎ−エチルグリシン、２，３−ジアミノプロピオン酸、２，２’−ジアミノプロピオン酸、デスモシン、２，４−ジアミノ酪酸、２−アミノピメリン酸、３−アミノイソ酪酸、２−アミノイソ酪酸、２−アミノヘプタン酸、６−アミノカプロン酸、４−アミノ酪酸、２−アミノ酪酸、β−アラニン、３−アミノアジピン酸、２−アミノアジピン酸等が挙げられるが、これらに限定されない。特定の実施形態において、本明細書で記載されるペプチドの「天然の」アミノ酸の１以上を相当する非天然のアミノ酸（例えば、上述のような）で置換することができる。
【０２１５】
特定の実施形態において、本発明は、修飾されたリジンの使用を特に熟考する。そのような修飾には、イプシロンリジンのビオチン修飾及び／またはイプシロンリジンのメチル化が挙げられるが、これらに限定されない。イプシロンメチル化リジンを含む説明に役立つペプチドには、Ａｃ−Ｄ−Ｗ−Ｆ−Ｋ（ｅＣＨ3）2−Ａ−Ｆ−Ｙ−Ｄ−Ｋ（ｅＣＨ3）2−Ｖ−Ａ−Ｅ−Ｋ（ｅＣＨ3）−2−Ｆ−Ｋ（ｅＣＨ3）2−Ｅ−Ａ−Ｆ−ＮＨ（ＣＨ3）2（配列番号５７３）及び：Ａｃ−ＤＷＦＫ（ｅＣＨ3）2ＡＦＹＤＫ（ｅＣＨ3）2ＶＡＥＫ（ｅＣＨ3）2ＦＫ（ｅＣＨ3）2ＥＡＦ−ＮＨ（ＣＨ3）（配列番号５７４）が挙げられるが、これらに限定されない。他の修飾されたアミノ酸には、オルニチン類似体及びホモアミノアラニン類似体（Ｌｙｓのための（ＣＨ2）4−−ＮＨ2の代わりに、それは、Ｈａａのための−−（ＣＨ2）2−−ＮＨ2及びＯｒｎのための−−（ＣＨ2）3−−ＮＨ2であってもよい）等が挙げられるが、これらに限定されない。これらの修飾は説明に役立つものであって限定を意図するものではないことが言及される。修飾されたアミノ酸を持つ説明に役立つ４Ｆ類似体を表６に示す。
表６：修飾されたアミノ酸を含む説明に役立つ４Ｆ類似体
4FのεN-ジメチル-Lys誘導体(εN-Dime)
2017528437.tif 000033
4FのεN-ジエチル-Lys誘導体(εN-Diet)
2017528437.tif 000034
4FのεN-モノエチル-Lys誘導体(εN-Me)
2017528437.tif 000035
4FのεN-エチル-Lys誘導体(εN-Et)
2017528437.tif 000036
4FのホモLys類似体(hK) (--CH2)5-NH2
2017528437.tif 000037
2017528437.tif 000038
【０２１６】
４．二重ドメインペプチド
二重ドメインペプチドも開示される。二重ドメインペプチドは、アポリポタンパク質Ｅの開示された受容体結合ドメインと開示された脂質関連ペプチドの組み合わせからなる合成アポＥ模倣ペプチドであることができ、前記受容体結合ドメインは、前記脂質関連ペプチドに共有結合される。
【０２１７】
また、開示されるのは、アポリポタンパク質Ｂの開示された受容体結合ドメインと開示された脂質関連ペプチドの組み合わせからなる合成アポＥ模倣ペプチドであり、前記受容体結合ドメインは、前記脂質関連ペプチドに共有結合される。開示された合成アポＥ模倣ペプチドの非限定例は、表７に提供される。開示された合成アポＥ模倣ペプチドは、アセチル基及びアミノ基を用いてＮ末端保護することもできる。表７は、二重ドメインを含む開示された合成アポＥ模倣ペプチドの非限定の代表的な例を提供する。
表７：二重ドメインペプチド
2017528437.tif 000039
2017528437.tif 000040
【０２１８】
ｉ．ドメイン交換ペプチド
また、開示されるのは、アポリポタンパク質Ｅの開示された受容体結合ドメインと開示された脂質関連ペプチドの組み合わせからなる合成アポＥ模倣体であり、前記受容体結合ドメインは、ドメインが交換される方向性にて前記脂質関連ペプチドに共有結合される。また、開示されるのは、アポリポタンパク質Ｂの開示された受容体結合ドメインと開示された脂質関連ペプチドの組み合わせからなる合成アポＥ模倣体であり、前記受容体結合ドメインは、ドメインが交換される方向性にて前記脂質関連ペプチドに共有結合される。これらのペプチドは、「ドメイン交換された」、「交換されたドメイン」または「交換された」ペプチドと呼ばれ得る。例えば、開示されるのは、アポリポタンパク質Ｅの開示された受容体結合ドメインと開示された脂質関連ペプチドの組み合わせからなる合成アポＥ模倣体であり、前記受容体結合ドメインは、上記で記載されたもの及び表７におけるものにドメイン交換される方向性にて前記脂質関連ペプチドに共有結合される。具体的には、脂質関連ペプチドは、脂質関連ペプチドが合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドのＮ末端であるように、アポリポタンパク質Ｅの受容体結合ドメインに共有結合される。表８は、アポリポタンパク質Ｅの開示された受容体結合ドメインと開示された脂質関連ペプチドの組み合わせを含む開示された合成アポＥ模倣体の非限定例を提供し、前記受容体結合ドメインは、ドメインが交換される方向性にて前記脂質関連ペプチドに共有結合される。
表８：ドメイン交換ペプチド
2017528437.tif 000041
2017528437.tif 000042
【０２１９】
開示されたドメイン交換された合成アポＥ模倣体も、アセチル基及びアミノ基を用いてＮ末端保護することができる。
【０２２０】
ｉｉ．逆方向性のペプチド
また、開示されるのは、アポリポタンパク質Ｅの開示された受容体結合ドメインと開示された脂質関連ペプチドの組み合わせからなる合成アポＥ模倣ペプチドであり、前記受容体結合ドメインは、逆方向性にて前記脂質関連ペプチドに共有結合される。例えば、開示されるのは、アポリポタンパク質Ｅの開示された受容体結合ドメインと開示された脂質関連ペプチドの組み合わせからなる合成アポＥ模倣ペプチドであり、受容体結合ドメインの配列または脂質関連ペプチドの配列のいずれかまたは双方の配列が逆方向性にある。また、開示されるのは、アポリポタンパク質Ｂの開示された受容体結合ドメインと開示された脂質関連ペプチドの組み合わせからなる合成アポＥ模倣ペプチドであり、前記受容体結合ドメインは、逆方向性にて前記脂質関連ペプチドに共有結合される。表９は、アポリポタンパク質Ｅの開示された受容体結合ドメインと開示された脂質関連ペプチドの組み合わせを含む開示された合成アポＥ模倣ペプチドの非限定例を提供し、前記受容体結合ドメインは、逆方向性にて前記脂質関連ペプチドに共有結合される。
表９：逆方向性のペプチド
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2017528437.tif 000044
【０２２１】
ｉｉｉ．スクランブルされたペプチド
また、開示されるのは、アポリポタンパク質Ｅの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドからなる合成アポＥ模倣ペプチドであり、前記受容体結合ドメインは、前記脂質関連ペプチドに共有結合され、アポリポタンパク質Ｅの受容体結合ドメインは、スクランブルされる。例えば、開示されるのは、Ｄ−Ｗ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｆ−Ｖ−Ｙ−Ｄ−Ｋ−Ｖ−Ｆ−Ｋ−Ｌ−Ｋ−Ｅ−Ｆ−Ｆ（配列番号６９）のアミノ酸配列を含むアポリポタンパク質Ｅの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドからなる合成アポリポタンパク質Ｅ模倣ペプチドであり、前記受容体結合ドメインは、前記脂質関連ペプチドに共有結合される。また、開示されるのは、アポリポタンパク質Ｂの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドからなる合成アポＥ模倣ペプチドであり、前記受容体結合ドメインは、前記脂質関連ペプチドに共有結合され、アポリポタンパク質Ｂの受容体結合ドメインは、スクランブルされる。
【０２２２】
また、開示されるのは、アポリポタンパク質Ｅの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドからなる合成アポＥ模倣ペプチドであり、前記受容体結合ドメインは、前記脂質関連ペプチドに共有結合され、脂質関連ペプチドは、スクランブルされる。例えば、本明細書で開示されるのは、Ｅ−Ｗ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｆ−Ｖ−Ｙ−Ｅ−Ｋ−Ｖ−Ｆ−Ｋ−Ｌ−Ｋ−Ｅ−Ｆ−Ｆ（配列番号７０）のアミノ酸配列を含むアポリポタンパク質Ｅの脂質結合ドメインと受容体結合ドメインペプチドを含む合成アポＥ模倣ペプチドであり、前記脂質結合ドメインは、前記受容体結合ドメインペプチドに共有結合される。
【０２２３】
また、開示されるのは、アポリポタンパク質Ｅの受容体結合ドメインとアポリポタンパク質Ｅの脂質関連ペプチドからなる合成アポＥ模倣体であり、受容体結合ドメインは、前記脂質関連ペプチドに共有結合され、受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドの双方がスクランブルされる。表１０は、アポリポタンパク質Ｅの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドを含む開示されたスクランブルされた合成アポＥ模倣体の非限定例を提供し、前記受容体結合ドメインは、前記脂質関連ペプチドに共有結合され、アポリポタンパク質Ｅの受容体結合ドメインは、スクランブルされる。
表１０：スクランブルされたドメインペプチド
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【０２２４】
開示されたスクランブルされた合成アポＥ模倣体も、アセチル基及びアミド基を用いてＮ末端保護及びＣ末端保護することができる。開示されたスクランブルされた合成アポＥ模倣体も、上述のように逆方向付けすることができる。
【０２２５】
ｉｖ．連結
本発明に従って任意の好適なリンカーを使用することができる。ペプチド連結は、当該技術で既知の及び以下の参考文献：Ｓｐａｔｏｌａ（１９８３）ｐ．２６７  ｉｎ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ，Ｐｅｐｔｉｄｅｓ，ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，Ｂ．Ｗｅｉｎｓｔｅｉｎ，編，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ；Ｓｐａｔｏｌａ（１９８３）Ｖｅｇａ  Ｄａｔａ  １（３）Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｂａｃｋｂｏｎｅ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ．（一般的な見解）；Ｍｏｒｌｅｙ（１９８０）Ｔｒｅｎｄｓ  Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．ｐｐ．４６３−４６８（一般的な見解）；Ｈｕｄｓｏｎら．（１９７９）Ｉｎｔ  Ｊ  ＰｅｐｔＰｒｏｔ  Ｒｅｓ  １４：１７７−１８５（−−ＣＨ2ＮＨ−−，ＣＨ2ＣＨ2−−）；Ｓｐａｔｏｌａら（１９８６）Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ  ３８：１２４３−１２４９（−−ＣＨ2−−Ｓ）；Ｈａｎｎ，（１９８２）Ｊ  ＣｈｅｍＳｏｃ  Ｐｅｒｋｉｎ  Ｔｒａｎｓ  Ｉ、３０７−３１４（−−ＣＨ−−ＣＨ−−，シス及びトランス）；Ａｌｍｑｕｉｓｔら  （１９８０）Ｊ  Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２３：１３９２−１３９８（−−ＣＯＣＨ2−−）；Ｊｅｎｎｉｎｇｓ−Ｗｈｉｔｅら（１９８２）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．２３：２５３３（−−ＣＯＣＨ2−−）；Ｓｚｅｌｋｅら，Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ａｐｐｌｎ．ＥＰ４５６６５（１９８２）ＣＡ：９７：３９４０５（１９８２）（−−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２−−）；Ｈｏｌｌａｄａｙら（１９８３）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ  ２４：４４０１−４４０４（−−Ｃ（ＯＨ）ＣＨ2−−）；及びＨｒｕｂｙ（１９８２）Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．，３１：１８９−１９９（−−ＣＨ2−−Ｓ−−））にてさらに記載されている方法によって、−−ＣＨ2ＮＨ−−、−−ＣＨ2Ｓ−−、−−ＣＨ2−−ＣＨ2−−、−−ＣＨ＝ＣＨ−−（シス及びトランス）、−−ＣＯＣＨ2−−、−−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ2−−、−−ＣＨ2ＳＯ−−等からなる群から選択することができる。
【０２２６】
特に好まれる非ペプチド連結の１つは、−−ＣＨ2ＮＨ−−である。そのようなペプチド模倣体は、例えば、さらに経済的な製造、高い化学的安定性、向上した医薬特性（半減期、吸収、効能、有効性等）、低下した抗原性及びその他を含むポリペプチドの実施形態にわたって有意な利点を有し得る。
【０２２７】
一態様において、リンカーは、切断可能なリンカーである。少ない例ではあるが、切断可能なリンカーには、プロテアーゼ切断可能なペプチドリンカー、ヌクレアーゼ感受性の核酸リンカー、リパーゼ感受性の脂質リンカー、グリコシダーゼ感受性の炭水化物リンカー、ｐＨ感受性のリンカー、低酸素感受性のリンカー、光切断可能なリンカー、熱不安定性リンカー、酵素切断可能なリンカー（例えば、エステラーゼ切断可能なリンカー）、超音波感受性のリンカー、Ｘ線切断可能なリンカー等が挙げられる。
【０２２８】
５．変異体
受容体結合ドメインまたは脂質関連ペプチドは、上述のように修飾するまたは変化させることができる。例えば、受容体結合ドメインまたは脂質関連ペプチドを変異させる、スクランブルする、及び／または逆方向性にすることができる。二重ドメインポリペプチドのために本明細書で開示される任意の他の修飾または変化を単一ドメインペプチドにも使用することができる。
【０２２９】
本明細書で開示されたペプチドの多数の他の変異体または誘導体も熟考される。例えば、スクランブルされたペプチドを逆方向性にすることができ、または交換された方向性にすることができる。さらに、逆方向性のペプチドを交換された方向性にすることができる。開示されたペプチドの他の組み合わせ全ても熟考される。ペプチドの非限定例は、本明細書で記載されている（例えば、表１〜５を参照されたい）。本明細書で使用されるとき、用語「類似体」は、「変異体」及び「誘導体」と相互交換可能に使用される。変異体及び誘導体は、当業者によく理解されており、アミノ酸配列の修飾が関与し得る。そのようなアミノ酸配列の修飾は、通常、３つのクラス：実質的な変異体、挿入変異体または欠失変異体の１以上に入る。挿入には、単一または複数のアミノ酸残基のアミノ末端及び／またはカルボキシル末端の融合と同様に配列内の挿入が挙げられる。挿入は、普通、例えば、１〜４の残基の幅で、アミノ末端またはカルボキシル末端の融合のものより小さな挿入である。これらの変異体は、普通、タンパク質をコードするＤＮＡにおけるヌクレオチドの部位特異的変異誘発を行い、それによって変異体をコードするＤＮＡを作出し、その後組換え細胞の培養にてＤＮＡを発現させることによって調製される。既知の配列を有するＤＮＡにて所定の部位で置換変異を行う技法は周知であり、例えば、Ｍ１３プライマー変異誘発及びＰＣＲ変異誘発。アミノ酸置換は、通常、単一の残基であるが、同時に多数の異なる位置で生じることができる。置換、欠失、挿入またはその任意の組み合わせを組み合わせて、最終的な誘導体または類似体に到達し得る。置換変異体は、少なくとも１つの残基が取り除かれ、その場所に種々の残基が挿入されるものである。そのような置換は、一般に、表１１及び１２に従って行われ、保存的置換と呼ばれる。
【０２３０】
機能のまたは免疫的な同一性における実質的な変化は、表１１のものより保存性ではない置換を選択すること、すなわち、（ａ）置換の領域におけるポリペプチド主鎖の構造、例えば、シートまたは螺旋の立体構造、（ｂ）標的部位での分子の電荷または疎水性、または（ｃ）側鎖の嵩高さを維持することに対するその効果においてさらに有意に異なる残基を選択することによって起こされる。一般に、タンパク質の特性において最大の変化を生じると予想される置換は、（ａ）親水性残基、例えば、セリルまたはスレオニルが疎水性残基、例えば、ロイシル、イソロイシル、フェニルアラニル、バリルまたはアラニル；トリプトファン、チロシニルで置換される、（ｂ）システインまたはプロリンが任意の他の残基で置換される、（ｃ）電気的に正の側鎖を有する残基、例えば、リシル、アルギニルまたはヒスチジルが電気的に負の残基、例えば、グルタミルまたはアスパルチルで置換される；または（ｄ）嵩高の側鎖を有する残基、例えば、フェニルアラニンが側鎖を有さないもの、この場合、例えば、グリシンで（またはによって）置換される、または（ｅ）硫酸化及び／またはグリコシル化のための部位の数を増やすことによるものである。
表１１：アミノ酸置換
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表１２：アミノ酸略語
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【０２３１】
本明細書で開示されるタンパク質の変異体及び誘導体を定義する方法の１つは、特定の既知の配列に対する相同性／同一性という点でそれらを定義することであることを理解されたい。具体的に開示されるのは、本明細書で具体的に引用される合成アポＥ模倣体に対して少なくとも、７０％または少なくとも７５％または少なくとも８０％または少なくとも８５％または少なくとも９０％または少なくとも９５％の相同性を有する、本明細書で開示される合成アポＥ模倣体または他のタンパク質またはペプチドの変異体である。当業者は、２つのタンパク質の相同性をどのように決定するのかを容易に理解する。
【０２３２】
ポリペプチドは、例えば、翻訳後プロセッシングのような天然の過程によって、または当該技術で周知である化学修飾法によって修飾することができる。修飾は、ペプチド主鎖、アミノ酸の側鎖及びアミノ末端またはカルボキシル末端を含むポリペプチドのどこでも生じることができる。所与のポリペプチドにて同じ型の修飾がいくつかの部位で同じ程度にまたは様々な程度に存在することができる。また、所与のポリペプチドは、多数の型の修飾を有することができる。修飾には、限定しないで、アセチル化、アシル化、ＡＤＰ−リボシル化、アミド化、共有結合架橋または環化、フラビンの共有結合、ヘム部分の共有結合、ヌクレオチドまたはヌクレオチド誘導体の共有結合、脂質または脂質誘導体の共有結合、ホスファチジルイノシトールの共有結合、ジスルフィド結合の形成、脱メチル化、システインまたはピログルタミン酸の形成、ホルミル化、γ−カルボキシル化、グリコシル化、ＧＰＩアンカーの形成、ヒドロキシル化、ヨード化、メチル化、イリストイル化、酸化、ペグ化、タンパク質分解処理、リン酸化、プレニル化、ラセミ化、セレノイル化、硫酸化、及びアルギニル化のような転移ＲＮＡが介在するタンパク質へのアミノ酸の付加が挙げられる（Ｐｒｏｔｅｉｎｓ−Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  第２版，Ｔ．Ｅ．Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９９３）；Ｐｏｓｔｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｖａｌｅｎｔ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，Ｂ．Ｃ．Ｊｏｈｎｓｏｎ編，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ｐｐ．１−１２（１９８３）を参照されたい）。
【０２３３】
変異体は、ペプチド模倣体も含むことができる。本明細書で使用されるとき、「ペプチド模倣体」は、正常なペプチド化合物の一部の変化を含むタンパク質の機能の模倣体を意味する。ペプチド模倣体は、通常、生物特性にて特定のタンパク質の１以上の機能を模倣する短い配列のアミノ酸である。ペプチド類似体は、元々のペプチドの一部の特性を高め、例えば、安定性を高め、有効性を高め、送達を向上させ、半減期等を延ばす。既知のポリペプチド配列に基づいてペプチド模倣体を作製する方法は、例えば、米国特許第５，６３１，２８０号；同第５，６１２，８９５号；及び同第５，５７９，２５０号に記載されている。ペプチド模倣体の使用には、所与の位置での非アミド結合を伴う非アミノ酸残基の組み入れが関与することができる。本発明の一実施形態は、化合物が結合、好適な模倣体で置き換えられたペプチド主鎖またはアミノ酸成分を有するペプチド模倣体である。好適なアミノ酸模倣体であり得る非天然のアミノ酸の一部の非限定例には、β−アラニン、Ｌ−α−アミノ酪酸、Ｌ−γ−アミノ酪酸、Ｌ−α−アミノイソ酪酸、Ｌ−ε−アミノカプロン酸、７−アミノヘプタン酸、Ｌ−アスパラギン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｎ−ε−Ｂｏｃ−Ｎ−α−ＣＢＺ−Ｌ−リジン、Ｎ−ε−Ｂｏｃ−Ｎ−α−Ｆｍｏｃ−Ｌ−リジン、Ｌ−メチオニンスルホン、Ｌ−ノルロイシン、Ｌ−ノルバリン、Ｎ−α−Ｂｏｃ−Ｎ−δＣＢＺ−Ｌ−オルニチン、Ｎ−δ−Ｂｏｃ−Ｎ−α−ＣＢＺ−Ｌ−オルニチン、Ｂｏｃ−ｐ−ニトロ−Ｌ−フェニルアラニン、Ｂｏｃ−ヒドロキシプロリン、及びＢｏｃ−Ｌ−チオプロリンが挙げられる。
【０２３４】
６．核酸
本明細書が種々のペプチド配列を議論するので、それらのポリペプチド配列をコードすることができる核酸も開示されることが理解される。これには、特定のポリペプチド配列に関連する縮重した配列全て、すなわち、特定のポリペプチド配列１つをコードする配列を有する核酸全てと同様にタンパク質配列の開示された変異体及び誘導体をコードする縮重した核酸を含む核酸全てが含まれる。従って、各特定の核酸配列は、本明細書で書き出されなくてもよいが、各配列及びあらゆる配列が実際開示され、開示されたポリペプチド配列を介して本明細書で記載されることが理解される。
【０２３５】
７．ブロッキング基／保護基及びＤ残基
開示された組成物は、アセチル基とそれに続く保護基とを含んでもよい。保護基は、限定されないが、脂肪酸であってもよい。脂肪酸は、飽和、不飽和または必須脂肪酸であってもよい。脂肪酸には、ＤＨＡ、ＥＰＡ、リノール酸、またはミリスチン酸などの任意の他の飽和アミノ酸が挙げられ得るが、これらに限定されない。
【０２３６】
本明細書で記載される種々の組成物は、保護基なしで示され得るが、特定の実施形態（例えば、特に経口投与用では）において、それらは、１、２、３、４以上の保護基を持つことができる。保護基は、ペプチド（複数可）のＣ末端及び／またはＮ末端及び／またはペプチド（複数可）を含む１以上の内部残基にカップリングすることができる（例えば、構成アミノ酸上の１以上のＲ基をブロックすることができる）。従って、例えば、特定の実施形態において、本明細書で記載されるペプチドのいずれかは、例えば、アミノ末端を保護するアセチル基及び／またはカルボキシル末端を保護するアミド基を持つことができる。そのような「二重保護されたペプチド」の一例は、ブロッキング基を持つＡｃ−ＬＲＫＬＲＫＲＬＬＲＤＷＬＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＬＫＥＡＦ−ＮＨ2（配列番号１）であり、これらの保護基のいずれかまたは双方を排除することができ、及び／または本明細書で記載されるような別の保護基で置換することができる。特定の理論に束縛されないで、本発明の主題ペプチドの特にアミノ末端及び／またはカルボキシル末端の遮断は、経口送達を改善することができ、血清半減期を増やすこともできることは本発明の発見だった。
【０２３７】
多数の保護基がこの目的に好適である。そのような基には、アセチル基、アミド基及びアルキル基が挙げられるが、これらに限定されず、アセチル基及びアルキル基はＮ末端の保護に特に好まれ、アミド基はカルボキシル末端の保護に好まれる。例えば、保護基には、脂肪酸におけるようなアルキル鎖、プロペオニル、ホルミル等を挙げることができるが、これらに限定されない。カルボキシル保護基には、アミド、エステルが挙げられ、エーテル形成保護基も使用することができる。例えば、アセチル基を用いてアミノ末端を保護することができ、アミド基を用いてカルボキシル末端を保護することができる。これらのブロッキング基は、ペプチドの螺旋形成傾向を高める。追加のブロッキング基には、種々の長さのアルキル基、例えば、式ＣＨ3（ＣＨ2）nＣＯを有する基が挙げられ、式中、ｎは約１〜約２０、好ましくは約１〜約１６または１８、さらに好ましくは約３〜約１３、最も好ましくは約３〜約１０である。
【０２３８】
さらに、保護基には、脂肪酸におけるようなアルキル鎖、プロペオニル、ホルミル等が挙げられるが、これらに限定されない。例えば、カルボキシル保護基には、アミド、エステル、及びエーテル形成保護基を挙げることができる。これらのブロッキング基は、ペプチドの螺旋形成傾向を高めることができる。ブロッキング基には、種々の長さのアルキル基、例えば、式ＣＨ3（ＣＨ2）nＣＯを有する基を挙げることができ、式中、ｎは約３〜約２０、好ましくは約３〜約１６、さらに好ましくは約３〜約１３、最も好ましくは約３〜約１０である。
【０２３９】
他の保護基には、Ｆｍｏｃ、ｔ−ブトキシカルボニル（ｔ−ＢＯＣ）、９−フルオレンアセチル基、１−フルオレンカルボキシル基、９−フルオレンカルボキシル基、９−フルオレン−１−カルボキシル基、ベンジルオキシカルボニル、キサンチル（Ｘａｎ）、トリチル（Ｔｒｔ）、４−メチルトリチル（Ｍｔｔ）、４−メトキシトリチル（Ｍｍｔ）、４−メトキシ−２，３，６−トリメチル−ベンゼンスルホニル（Ｍｔｒ）、メシチレン−２−スルホニル（Ｍｔｓ）、４，４−ジメトキシベンズヒドリル（Ｍｂｈ）、トシル（Ｔｏｓ）、２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−スルホニル（Ｐｍｃ）、４−メチルベンジル（ＭｅＢｚｌ）、４−メトキシベンジル（ＭｅＯＢｚｌ）、ベンジルオキシ（ＢｚｌＯ）、ベンジル（Ｂｚｌ）、ベンゾイル（Ｂｚ）、３−ニトロ−２−ピリジンスルフェニル（Ｎｐｙｓ）、１−（４，４−ジメチル−２，６−ジアクソシクロヘキシリデン）エチル（Ｄｄｅ）、２，６−ジクロロベンジル（２，６−ＤｉＣｌ−Ｂｚｌ）、２−クロロベンジルオキシカルボニル（２−Ｃｌ−Ｚ）、２−ブロモベンジルオキシ−カルボニル（２−Ｂｒ−Ｚ）、ベンジルオキシメチル（Ｂｏｍ）、シクロヘキシルオキシ（ｃＨｘＯ）、ｔ−ブトキシメチル（Ｂｕｍ）、ｔ−ブトキシ（ｔＢｕＯ）、ｔ−ブチル（ｔＢｕ）、アセチル（Ａｃ）、及びトリフルオロアセチル（ＴＦＡ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２４０】
保護基／ブロッキング基は、本発明のペプチドを含む適当な残基（複数可）にそのような基をカップリングする方法がそうであるように、当業者に周知である（例えば、Ｇｒｅｅｎｅら（１９９１）、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，第２版，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．Ｓｏｍｅｒｓｅｔ，Ｎ．Ｊ．を参照されたい）。例えば、アセチル化は、ペプチドが無水酢酸を用いた樹脂上にある場合、合成の間に達成することができる。アミド保護は、合成のための適当な樹脂を選択することによって達成することができる。
【０２４１】
本明細書で開示された組成物は、本明細書で記載されるような１以上のＤ形態の（レボではなくデキストロ）アミノ酸を含むこともできる。例えば、少なくとも２つのエナンチオマーアミノ酸、少なくとも４つのエナンチオマーアミノ酸、または少なくとも８または１０のエナンチオマーアミノ酸は、「Ｄ」形態のアミノ酸であってもよい。さらに、本明細書で記載されるペプチドの２つに１つまたはあらゆるアミノ酸（例えば、あらゆるエナンチオマーアミノ酸）は、「Ｄ」形態のアミノ酸である。
【０２４２】
さらに、エナンチオマーアミノ酸の少なくとも５０％は、「Ｄ」形態のアミノ酸であることができ、エナンチオマーアミノ酸の少なくとも８０％は、「Ｄ」形態であることができ、エナンチオマーアミノ酸の少なくとも９０％または全てさえは、「Ｄ」形態のアミノ酸であってもよい。
【０２４３】
ＦＭＯＣ−Ａｈａは、正常アミノ酸鎖伸長手順（縮合剤としてＨＯＢｔ＋ＤＣＣまたはＨＢＴＵを使用）を用いて、最後のアミノ酸として成長鎖に加えてもよい。ＤＭＦ中の２０％ピペリジンを用いてＦＭＯＣ基の除去後、ＮＨ２は、塩基条件下で過剰の無水酢酸を用いるか、または、ペプチド鎖伸長に用いたアミノ酸縮合剤を用いて酢酸を縮合するかのいずれかでアセチル化することができる。
【０２４４】
Ｃ．医薬組成物
開示されるのは、本明細書で開示される合成アポＥ模倣ペプチドのいずれかと薬学上許容可能な担体とを含む医薬組成物である。
【０２４５】
「薬学上許容可能な」によって、当業者に周知であるように、有効成分の任意の分解を出来るだけ抑えるように、且つ対象における任意の有害な副作用を出来るだけ抑えるように選択される物質または担体を意味する。担体の例には、ジミリストイルホスファチジル（ＤＭＰＣ）、リン酸緩衝化生理食塩水、または多小胞リポソームが挙げられる。例えば、ＰＧ：ＰＣ：コレステロール：ペプチドまたはＰＣ：ペプチドは、本発明にて担体として使用することができる。他の好適な薬学上許容可能な担体及びその製剤化は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（第１９版）編．Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ、１９９５にて記載されている。通常、適当な量の薬学上許容可能な塩を製剤で用いて製剤を等張にする。薬学上許容可能な担体の他の例には、生理食塩水、リンガー溶液及びデキストロース溶液が挙げられるが、これらに限定されない。溶液のｐＨは、約５〜約８、または約７〜約７．５であってもよい。さらなる担体には、組成物を含有する固形の疎水性ポリマーの半透過性マトリクスのような持続する放出製剤が挙げられ、そのマトリクスは、成形された物品、例えば、フィルム、ステント（血管形成処置の間に血管に埋め込まれる）、リポソームまたは微粒子の形態である。例えば、投与経路及び投与される組成物の濃度に応じて特定の担体がさらに好ましくてもよいことは当業者に明らかであろう。これらは最も典型的には、例えば、無菌の水、生理食塩水、及び生理的ｐＨで緩衝化された溶液のような溶液を含むヒトへの薬剤の投与のための標準の担体である。
【０２４６】
医薬組成物には、本発明のポリペプチド、ペプチド、核酸、ベクターの意図される活性が危うくされない限り、担体、増粘剤、希釈剤、緩衝液、保存剤等も含まれ得る。医薬組成物には、１以上の有効成分（本発明の組成物に加えて）、例えば、抗菌剤、抗炎症剤、麻酔薬等も含まれ得る。医薬組成物は、局所治療または全身治療が所望かどうかに応じて及び治療される領域に応じて多数の方法で投与され得る。
【０２４７】
非経口投与の製剤には、無菌の水性または非水性の溶液、懸濁液及びエマルジョンが含まれる。非水性溶媒の例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、例えば、オリーブ油のような植物油、及び例えば、オレイン酸エチルのような注射可能な有機エステルである。水性担体には、生理食塩水及び緩衝化媒体を含む、水、アルコール性／水性の溶液、エマルジョンまたは懸濁液が挙げられる。非経口のビヒクルには、塩化ナトリウム溶液、リンガーのデキストロース、デキストロースと塩化ナトリウム、乳酸化リンガー溶液、または固定油が挙げられる。静脈内ビヒクルには、流体及び栄養補給液、電解質補給液（例えば、リンガーのデキストロースに基づくもの）等が挙げられる。保存剤及び他の添加剤、例えば、抗菌剤、抗酸化剤、キレート剤及び不活性気体等も存在してもよい。
【０２４８】
局所投与のための製剤には、軟膏、ローション、クリーム、ゲル、点滴剤、坐薬、スプレー、液体及び粉末が含まれていてもよい。従来の医薬担体、水性基剤、粉末基剤、油性基剤、増粘剤等が必要または所望されてもよい。
【０２４９】
経口投与のための組成物には、粉末または顆粒、水または非水性媒体における懸濁液または溶液、カプセル、サシェまたは錠剤が挙げられる。増粘剤、風味剤、希釈剤、乳化剤、分散助剤、または結合剤が望ましくてもよい。組成物の一部は、例えば、塩酸、臭化水素酸、過塩素酸、硝酸、チオシアン酸、硫酸及びリン酸のような無機酸、及び例えば、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、及びフマル酸のような有機酸との反応によって形成される、または、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化アンモニウム、水酸化カリウムのような無機塩基、及び、例えば、モノ−、ジ−、トリ−アルキル及びアリールアミン及び置換されたエタノールアミンのような有機塩基との反応によって形成される薬学上許容可能な酸付加塩または塩基付加塩として投与される可能性があり得る。
【０２５０】
Ｄ．ＬＤＬ及びＶＬＤＬに影響を及ぼす方法
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを対象に投与することを含む方法であって、それによって、血漿ＬＤＬ、血漿ＶＬＤＬ、または双方が影響を受ける。アポＥ模倣ペプチドは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであってもよく、合成アポＥ模倣ペプチドは、Ａｃ−Ａｈａを含む。例えば、合成アポＥ模倣ペプチドは、Ａｃ−Ａｈａ−ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2またはＡｃ−Ａｈａ−［Ｒ］ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2であってもよい。
【０２５１】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを対象に投与することを含む方法であって、それによって、血漿ＬＤＬ、血漿ＶＬＤＬ、または双方が影響を受け、合成アポＥ模倣ペプチドを、合成アポＥ模倣ペプチドと薬学上許容可能な担体とを含む組成物として投与する。
【０２５２】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを対象に投与することを含む方法であって、それによって、血漿ＬＤＬ、血漿ＶＬＤＬ、または双方が影響を受け、ＬＤＬの対象の細胞への結合を高める。
【０２５３】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを対象に投与することを含む方法であって、それによって、血漿ＬＤＬ、血漿ＶＬＤＬ、または双方が影響を受け、対象の細胞によるＬＤＬの分解を増加させる。
【０２５４】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを対象に投与することを含む方法であって、それによって、血漿ＬＤＬ、血漿ＶＬＤＬ、または双方が影響を受け、対象におけるＬＤＬコレステロールを低下させる。
【０２５５】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを対象に投与することを含む方法であって、それによって、血漿ＬＤＬ、血漿ＶＬＤＬ、または双方が影響を受け、ＶＬＤＬの対象の細胞への結合を高める。
【０２５６】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを対象に投与することを含む方法であって、それによって、血漿ＬＤＬ、血漿ＶＬＤＬ、または双方が影響を受け、対象の細胞によるＶＬＤＬの分解を増加させる。
【０２５７】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを対象に投与することを含む方法であって、それによって、血漿ＬＤＬ、血漿ＶＬＤＬ、または双方が影響を受け、対象におけるＶＬＤＬコレステロールを低下させる。
【０２５８】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを対象に投与することを含む方法であって、それによって、血漿ＬＤＬ、血漿ＶＬＤＬ、または双方が影響を受け、対象におけるコレステロールの血漿中総濃度を低下させる。
【０２５９】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを対象に投与することを含む方法であって、それによって、血漿ＬＤＬ、血漿ＶＬＤＬ、または双方が影響を受け、前記合成アポＥ模倣ペプチドは、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇの量で投与される。例えば、アポＥ模倣ペプチドの濃度は、０．０１、０．１、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０ｍｇ／ｋｇ、またはその間の任意の範囲であり得る。
【０２６０】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを対象に投与することを含む方法であって、それによって、血漿ＬＤＬ、血漿ＶＬＤＬ、または双方が影響を受け、対象は、冠状動脈疾患、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、糖尿病、アルツハイマー病、ＰＡＤ、脳血管疾患、糖尿病由来の循環器疾患、黄斑変性症、及び／または鬱血性心不全、または細菌感染症を有する。
【０２６１】
Ｅ．血漿コレステロールの減少方法
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、血漿コレステロールの減少方法である。アポＥ模倣ペプチドは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであってもよく、合成アポＥ模倣ペプチドは、Ａｃ−Ａｈａを含む。例えば、合成アポＥ模倣ペプチドは、Ａｃ−Ａｈａ−ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2またはＡｃ−Ａｈａ−［Ｒ］ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2であってもよい。
【０２６２】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、血漿コレステロールの減少方法であり、合成アポＥ模倣ペプチドを、合成アポＥ模倣ペプチドと薬学上許容可能な担体とを含む組成物として投与する。
【０２６３】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、血漿コレステロールの減少方法であり、ＬＤＬの対象の細胞への結合を高める。
【０２６４】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、血漿コレステロールの減少方法であり、対象の細胞によるＬＤＬの分解を増加させる。
【０２６５】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、血漿コレステロールの減少方法であり、対象におけるＬＤＬコレステロールを低下させる。
【０２６６】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、血漿コレステロールの減少方法であり、ＶＬＤＬの対象の細胞への結合を高める。
【０２６７】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、血漿コレステロールの減少方法であり、対象の細胞によるＶＬＤＬの分解を増加させる。
【０２６８】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、血漿コレステロールの減少方法であり、対象におけるＶＬＤＬコレステロールを低下させる。
【０２６９】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、血漿コレステロールの減少方法であり、対象におけるコレステロールの血漿中総濃度を低下させる。
【０２７０】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、血漿コレステロールの減少方法であり、前記合成アポＥ模倣ペプチドは、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇの量で投与される。例えば、アポＥ模倣ペプチドの濃度は、０．０１、０．１、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０ｍｇ／ｋｇ、またはその間の任意の範囲であり得る。
【０２７１】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、血漿コレステロールの減少方法であり、対象は、冠状動脈疾患、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、糖尿病、アルツハイマー病、ＰＡＤ、脳血管疾患、糖尿病由来の循環器疾患、黄斑変性症、及び／または鬱血性心不全を有する。
【０２７２】
Ｆ．アテローム性動脈硬化症の治療方法
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、アテローム性動脈硬化症の治療方法である。アポＥ模倣ペプチドは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであってもよく、合成アポＥ模倣ペプチドは、Ａｃ−Ａｈａを含む。例えば、合成アポＥ模倣ペプチドは、Ａｃ−Ａｈａ−ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2またはＡｃ−Ａｈａ−［Ｒ］ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2であってもよい。
【０２７３】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、アテローム性動脈硬化症の治療方法であり、合成アポＥ模倣ペプチドを、合成アポＥ模倣ペプチドと薬学上許容可能な担体とを含む組成物として投与する。
【０２７４】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、アテローム性動脈硬化症の治療方法であり、ＬＤＬの対象の細胞への結合を高める。
【０２７５】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、アテローム性動脈硬化症の治療方法であり、対象の細胞によるＬＤＬの分解を増加させる。
【０２７６】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、アテローム性動脈硬化症の治療方法であり、対象におけるＬＤＬコレステロールを低下させる。
【０２７７】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、アテローム性動脈硬化症の治療方法であり、ＶＬＤＬの対象の細胞への結合を高める。
【０２７８】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、アテローム性動脈硬化症の治療方法であり、対象の細胞によるＶＬＤＬの分解を増加させる。
【０２７９】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、アテローム性動脈硬化症の治療方法であり、対象におけるＶＬＤＬコレステロールを低下させる。
【０２８０】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、アテローム性動脈硬化症の治療方法であり、対象におけるコレステロールの血漿中総濃度を低下させる。
【０２８１】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、アテローム性動脈硬化症の治療方法であり、前記合成アポＥ模倣ペプチドは、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇの量で投与される。例えば、アポＥ模倣ペプチドの濃度は、０．０１、０．１、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０ｍｇ／ｋｇ、またはその間の任意の範囲であり得る。
【０２８２】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、アテローム性動脈硬化症の治療方法であり、対象は、冠状動脈疾患、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、糖尿病、アルツハイマー病、ＰＡＤ、脳血管疾患、糖尿病由来の循環器疾患、黄斑変性症、及び／または鬱血性心不全を有する。
【０２８３】
Ｇ．脂質障害の治療方法
開示されるのは、開示されたアポＥ模倣ペプチドまたはその組成物のいずれか１つの有効量を対象に投与することを含む、脂質障害を有する対象の治療方法である。アポＥ模倣ペプチドは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドであってもよく、合成アポＥ模倣ペプチドは、Ａｃ−Ａｈａを含む。例えば、合成アポＥ模倣ペプチドは、Ａｃ−Ａｈａ−ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2またはＡｃ−Ａｈａ−［Ｒ］ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2であってもよい。
【０２８４】
開示されるのは、開示されたアポＥ模倣ペプチドまたはその組成物のいずれか１つの有効量を対象に投与することを含む、脂質障害を有する対象の治療方法であり、合成アポＥ模倣ペプチドを、合成アポＥ模倣ペプチドと薬学上許容可能な担体とを含む組成物として投与する。
【０２８５】
開示されるのは、開示されたアポＥ模倣ペプチドまたはその組成物のいずれか１つの有効量を対象に投与することを含む、脂質障害を有する対象の治療方法であり、ＬＤＬの対象の細胞への結合を高める。
【０２８６】
開示されるのは、開示されたアポＥ模倣ペプチドまたはその組成物のいずれか１つの有効量を対象に投与することを含む、脂質障害を有する対象の治療方法であり、対象の細胞によるＬＤＬの分解を増加させる。
【０２８７】
開示されるのは、開示されたアポＥ模倣ペプチドまたはその組成物のいずれか１つの有効量を対象に投与することを含む、脂質障害を有する対象の治療方法であり、対象におけるＬＤＬコレステロールを低下させる。
【０２８８】
開示されるのは、開示されたアポＥ模倣ペプチドまたはその組成物のいずれか１つの有効量を対象に投与することを含む、脂質障害を有する対象の治療方法であり、ＶＬＤＬの対象の細胞への結合を高める。
【０２８９】
開示されるのは、開示された合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを含む組成物の有効量を対象に投与することを含む、アテローム性動脈硬化症の治療方法であり、対象の細胞によるＶＬＤＬの分解を増加させる。
【０２９０】
開示されるのは、開示されたアポＥ模倣ペプチドまたはその組成物のいずれか１つの有効量を対象に投与することを含む、脂質障害を有する対象の治療方法であり、対象におけるＶＬＤＬコレステロールを低下させる。
【０２９１】
開示されるのは、開示されたアポＥ模倣ペプチドまたはその組成物のいずれか１つの有効量を対象に投与することを含む、脂質障害を有する対象の治療方法であり、対象におけるコレステロールの血漿中総濃度を低下させる。
【０２９２】
開示されるのは、開示されたアポＥ模倣ペプチドまたはその組成物のいずれか１つの有効量を対象に投与することを含む、脂質障害を有する対象の治療方法であり、前記合成アポＥ模倣ペプチドは、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇの量で投与される。例えば、アポＥ模倣ペプチドの濃度は、０．０１、０．１、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０ｍｇ／ｋｇ、またはその間の任意の範囲であり得る。
【０２９３】
開示されるのは、開示されたアポＥ模倣ペプチドまたはその組成物のいずれか１つの有効量を対象に投与することを含む、脂質障害を有する対象の治療方法であり、脂質障害は、冠状動脈疾患、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、糖尿病、アルツハイマー病、ＰＡＤ、脳血管疾患、糖尿病由来の循環器疾患、黄斑変性症、及び／または鬱血性心不全であってもよい。
【０２９４】
Ｈ．モノクローナル抗体
開示されるのは、本明細書で記載される合成アポＥ模倣ペプチドのいずれか１つに特異的に結合するモノクローナル抗体である。
【０２９５】
Ｉ．投与計画
開示されるのは、有効量の開示されたアポＥ模倣ペプチドのいずれかの少なくとも１回の治療サイクルとそれに続く休止期とを含む投与計画である。投与計画の休止期は、アポＥ模倣ペプチドを投与しない期間である。アポＥ模倣ペプチドは、限定されないが、Ａｃ−Ａｈａ−ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2またはＡｃ−Ａｈａ−［Ｒ］ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2であり得る。
【０２９６】
開示されるのは、少なくとも１回の治療サイクルとそれに続く休止期とを含む投与計画であって、治療サイクルは、有効量のアポＥ模倣ペプチドを投与して、アポＥ模倣ペプチドの中止後、持続する治療効果を可能にすることを含み、アポＥ模倣ペプチドは、休止期の間、投与されない。アポＥ模倣ペプチドの有効量は、持続する治療効果を生じるだけでなく、それは急性の有益な効果を引き起こすのに十分な量でもある。従って、アポＥ模倣ペプチドの効果は、治療サイクルの間、治療サイクルの終了時、及び休止期の間に測定することができ、見ることができる。持続する治療効果は、急性のコレステロール低下効果がなくなった後でさえ見られる治療効果である。
【０２９７】
本明細書で開示されるのは、少なくとも１回の治療サイクルとそれに続く休止期を含む投与計画であって、治療サイクルは、有効量のアポＥ模倣ペプチドを投与して、アポＥ模倣体の中止の後、持続する治療効果を可能にすることを含み、アポＥ模倣ペプチドは、休止期の間、投与されず、治療サイクルは、週に１回で３ヵ月間、有効量のアポＥ模倣ペプチドを投与することを含み、または治療サイクルは、２週ごとに１回の１２週間まで有効量のアポＥ模倣ペプチドを投与することを含む。
【０２９８】
開示されるのは、少なくとも１回の治療サイクルとそれに続く休止期とを含む投与計画であって、治療サイクルは、有効量のアポＥ模倣ペプチドを投与して、アポＥ模倣ペプチドの中止後、持続する治療効果を可能にすることを含み、アポＥ模倣ペプチドは、休止期の間、投与されず、投与計画は、休止期の後に第２の治療サイクルをさらに含む。
【０２９９】
一態様において、投与計画は、少なくとも１回の治療サイクルとそれに続く休止期とを含んでもよく、治療サイクルは、アポＥの受容体結合ドメインと脂質関連ペプチドとを含む合成アポＥ模倣ペプチドの有効量を投与して、アポＥ模倣ペプチドの中止の後、持続する治療効果を可能にすることを含み、アポＥ模倣ペプチドは、休止期の間、投与されず、合成アポＥ模倣ペプチドは、Ａｃ−Ａｈａを含む。
【０３００】
投与計画は、休止期の後に第２の治療サイクルをさらに含むことができる。第２の休止期は、第２の治療サイクルの後に存在することができる。場合によっては、第３、第４、第５、第６、第７、第８、第９または第１０の治療サイクルを投与することができ、各治療サイクルには休止期が続く。一態様において、投与計画は、無限の治療サイクルを含み、それぞれそれには休止期が続く。例えば、対象は、生涯にわたって連続する治療サイクルとそれに続く休止期とを含む投与計画を処方され得る。
【０３０１】
一態様において、第２の投与計画は、アテローム性動脈硬化病変の再発または他のアテローム性動脈硬化因子に基づいて処方することができる。第２の投与計画は、当初の投与計画が投与された１、２、３、４、５年後、または５年を上回った後に投与することができる。第２の投与計画は、当初の投与計画と同じであることができ、または異なることができる。例えば、当初の投与計画は、３ヵ月の治療サイクルとそれに続く１年の休止期であってもよい。１年の休止期の後、対象を検査することができ、アテローム性動脈硬化病変が再び集積しているのであれば、その時は、別の３ヵ月の治療サイクルとそれに続く休止期または６ヵ月の治療サイクルとそれに続く休止期からなる第２の投与計画を処方することができる。アポＥ模倣体の用量は、当初の投与計画と任意のさらに処方される投与計画との間で変化することができる。
【０３０２】
場合によっては、第２の投薬は、第１の治療後に対象で判断された血管応答性、収縮期の高血圧症の存在、または労作性狭心症に基づいて投与することができる。場合によっては、第２の投薬は、血漿コレステロールの量に基づいて投与することができる。投与頻度は、血漿コレステロールを減少させる必要性に応じて変化させ、本明細書で開示される障害のいずれかのリスクを最小限または排除することができる。
【０３０３】
１．治療サイクル
治療サイクルは、種々の投与量のアポＥ模倣ペプチドの投与と同様に種々の時点での投与を含むことができる。アポＥ模倣ペプチドは、６ヵ月までの種々の時間量で投与することができる。場合によっては、投与は、１、２、３、４、５または６ヵ月までの間で存在することができる。例えば、アポＥ模倣ペプチドは、週に１回、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、または２４週間投与することができる。
【０３０４】
各治療サイクルの時間の長さは、投薬当たり投与されるアポＥ模倣ペプチドの量に応じて変化することができる。治療サイクルは、週に１回、２回または３回のアポＥ模倣ペプチドの投与を含むことができる。いくつかの態様において、アポＥ模倣ペプチドを毎日投与することができる。いくつかの態様において、アポＥ模倣ペプチドを２週ごとに１回または月に１回でさえ投与することができる。場合によっては、アポＥ模倣体を２週ごとに４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２または２４週間投与することができる。例えば、治療サイクルは、週に１回で４週間または２週ごとに１回で６ヵ月までアポＥ模倣ペプチドを投与することを含むことができる。従って、各治療サイクルは、投与について確立した長さの時間と同様にその時間枠の間、確立した投薬スケジュールを含む。
【０３０５】
一態様において、治療サイクルの間に１を超えるアポＥ模倣ペプチドを投与することができる。１を超えるアポＥ模倣ペプチドは、一緒にまたは別々の組成物にて製剤化することができる。場合によっては、１以上のアポＥ模倣体が、例えば、コレステロール低下薬のような１以上の他の治療剤と併用して投与される。
【０３０６】
２．休止期
開示された投与計画は、少なくとも１回の治療サイクルとそれに続く休止期とを含むことができる。休止期は、アポＥ模倣ペプチドが投与されない時期であり、時期の長さは変化することができる。休止期の長さは、治療サイクルの間に投与されたアポＥ模倣体の持続する治療効果がどれだけ長く続くかに依存する。場合によっては、休止期は、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２ヵ月であってもよい。場合によっては、休止期は、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０年であってもよい。例えば、休止期は、少なくとも４週間（１ヵ月）であってもよい。
【０３０７】
休止期がどれくらい長く続くべきかを決定する方法の１つは、対象を検査して対象の動脈にてアテローム性動脈硬化の負荷の進行を判定することである。アテローム性動脈硬化の負荷が循環器疾患のリスクを高めるレベルまで進行しているのであれば、その時は、対象は、第２の投与計画を処方され得る。アテローム性動脈硬化の負荷が安定しているのであれば、その時は休止期を延長することができる。休止期の長さは、ＶＬＤＬ低下、ＬＤＬ低下、グルコース低下、炎症低下、血管応答性、収縮期の高血圧症の存在、または労作性狭心症、または血漿コレステロール量に基づくものであってもよい。対象を定期的に検査することができる。例えば、３、６、９、１２、１８、２４、３０または３６ヵ月ごとに対象を検査することができる。
【０３０８】
一態様において、休止期は、治療サイクルの間に投与されるアポＥ模倣ペプチドの量及び達成されるアテローム性動脈硬化の軽減に応じて減らすことができ、または延ばすことができる。例えば、治療サイクルの間でアポＥ模倣ペプチドの用量が増し、アテローム性動脈硬化の負荷が実質的に軽減するのであれば、休止期を延ばすことができる。休止期の長さは、治療サイクルの長さに基づいて変化することもできる。例えば、対象が特定の用量のアポＥ模倣ペプチドを週に１回で３ヵ月間受け取っているのであれば、その時、休止期は、同じ用量のアポＥ模倣体を週に１回で６ヵ月間受け取っている対象よりも短い可能性がある。
【０３０９】
アポＥ模倣体は休止期の間には投与されないが、アポＥ模倣体以外のアテローム性動脈硬化治療剤は、休止期の間に投与することができる。アポＥ模倣体以外のアテローム性動脈硬化治療剤は、従来の脂質低下剤、例えば、スタチン、胆汁酸金属イオン封鎖剤またはフィブラート、またはＣＥＴＰ阻害剤、ＶＬＤＬ合成阻害剤、ＰＣＳＫ９阻害剤のような新規のアテローム性動脈硬化治療剤、及び／または動脈炎症阻害剤であってもよい。言い換えれば、アポＥ模倣体以外のアテローム性動脈硬化治療剤は、従来のＬＤＬ低下治療剤またはＨＤＬ上昇治療剤であってもよい。
【０３１０】
場合によっては、アポＥ模倣体の有益な効果は、治療サイクルが完了した後でさえ対象にて依然として存在することができる。一例において、アポＥ模倣体の半減期は、１、２、３、４、５、１０、１５、２０、２５または３０日未満である。場合によっては、アポＥ模倣体は、治療サイクルが完了した後の対象にてもはや検出可能ではない。従って、長期の治療効果は、残留するアポＥ模倣体に由来するものではない。
【０３１１】
３．用量
アポＥ模倣ペプチドの用量または投与量は、例えば、患者における年齢、状態、性別及び疾患の程度、投与経路、治療サイクルの長さ、または他の薬剤が計画に含まれるどうかのような、これらに限定されないが、多数の因子に応じて変化することができ、当業者によって決定されることができる。
【０３１２】
有効な投与量は、経験的に決定することができ、そのような決定を行うことは当該技術の技量の範囲内である。組成物の投与のための投与量範囲は、疾患が治療される所望の効果を生じるのに十分大きなものである。例えば、投与量は、治療効果を提供するのに有効な量、及び治療（すなわち、アポＥ模倣ペプチド）が中止された後でさえ持続する治療効果を提供するまたは可能にするのに有効な量であってもよい。治療効果は、アテローム性動脈硬化病変の軽減、動脈壁硬化の減少、収縮期高血圧の低下、血管応答性の上昇、心機能の改善であってもよいが、これらに限定されない。治療効果は、例えば、Ｃ反応性タンパク質のような、これに限定されないが、動脈炎症のマーカーによって測定することができる。治療効果は、ＭＲＩ、血管内超音波、超高速画像ＣＴスキャン、Ｂモード超音波検査、仮想組織学、血管内超音波、光干渉性断層撮影、または他の既知の方法を含むアテローム性動脈硬化画像技術によって測定することができる。
【０３１３】
投与量は、例えば、望ましくない交差反応、アナフィラキシー反応等のような有害な副作用を起こすほど大きくすべきではない。投与量は、対抗適応の事象にて個々の内科医によって調整され得る。投与量は変化することができ、毎日１以上の用量投与で１日または数日間投与することができる。医薬品の所与のクラスについて適当な投与量についての文献にて指針を見いだすことができる。
【０３１４】
好適な投与量には、０．０１ｍｇ／ｋｇ〜２０ｍｇ／ｋｇの間の量が挙げられるが、これらに限定されない。例えば、本明細書で開示されるのは、対象に開示されたアポＥ模倣ペプチドの１以上を投与することを含む方法であり、アポＥ模倣ペプチドは、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇの量で投与される。例えば、アポＥ模倣ペプチドの濃度は、０．０１、０．１、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０ｍｇ／ｋｇであり得る。
【０３１５】
アポＥ模倣ペプチドの用量をボーラス注射としてまたは１時間以上の点滴として投与することができる。
【０３１６】
Ｊ．投与計画を用いた治療方法
少なくとも１回の治療サイクルの間、有効量の開示されたアポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを投与することと、それに続く休止期とを含む、急性冠症候群（ＡＣＳ）またはアテローム性動脈硬化症の治療方法を提供する。例えば、アポＥ模倣ペプチドは、Ａｃ−Ａｈａ−ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2またはＡｃ−Ａｈａ−［Ｒ］ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2であってもよい。従って、開示された方法は、１以上の開示された投与計画を用いてアポＥ模倣ペプチドを投与することを含む。従って、開示される治療サイクルまたは休止期のいずれかを開示された方法で使用することができる。本明細書で開示される方法は、治療剤の非存在下でさえ持続する治療効果を可能にすることができる。開示された方法は、有効量のアポＥ模倣体の投与を含むことができる。有効量のアポＥ模倣体は、アポＥ模倣体を中止した後に持続する治療効果を可能にすることができる量であり得る。
【０３１７】
本明細書で開示されるのは、少なくとも１回の治療サイクルの間、有効量の開示されたアポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを投与することを含むＡＣＳの治療方法であり、治療サイクルは、有効量のアポＥ模倣ペプチドを投与して、アポＥ模倣ペプチドの中止後、持続する治療効果を可能にすることを含み、治療サイクルには休止期が続き、休止期の間アポＥ模倣ペプチドは投与されない。
【０３１８】
本明細書で開示されるのは、少なくとも１回の治療サイクルの間、有効量の開示されたアポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを投与することを含むＡＣＳの治療方法であり、治療サイクルは、有効量のアポＥ模倣ペプチドを投与して、アポＥ模倣ペプチドの中止後、持続する治療効果を可能にすることを含み、治療サイクルには休止期が続き、休止期の間、アポＥペプチドは投与されず、休止期は、少なくとも４週間である。
【０３１９】
本明細書で開示されるのは、少なくとも１回の治療サイクルの間、有効量の開示されたアポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを投与することを含むＡＣＳの治療方法であり、治療サイクルは、有効量のアポＥ模倣ペプチドを投与して、アポＥ模倣ペプチドの中止後、持続する治療効果を可能にすることを含み、治療サイクルには休止期が続き、休止期の間、アポＥペプチドは投与されず、休止期の後に第２の治療サイクルをさらに含む。第２の治療サイクルは、４週間の休止期の後、または当初の治療サイクルの開始から１年後に投与することができる。
【０３２０】
本明細書で開示されるのは、少なくとも１回の治療サイクルの間、有効量の開示されたアポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを投与することを含むＡＣＳの治療方法であり、治療サイクルは、有効量のアポＥ模倣ペプチドを投与して、アポＥ模倣ペプチドの中止後、持続する治療効果を可能にすることを含み、治療サイクルには休止期が続き、休止期の間、アポＥペプチドは投与されず、アポＥ模倣ペプチド以外のＡＣＳ治療剤は、休止期の間に投与される。アポＥ模倣ペプチド以外のＡＣＳ治療剤は、従来のＬＤＬ低下療法またはＨＤＬ上昇療法であり得る。従来のＬＤＬ低下療法は、限定されないが、スタチンであり得る。ＨＤＬ上昇療法は、限定されないが、アポＡ１上昇剤、ＣＥＴＰ阻害剤、ホスホリパーゼＡ２阻害剤、アポＡ１ミラノ、またはアポＡ１模倣体であり得る。
【０３２１】
本明細書で開示されるのは、少なくとも１回の治療サイクルの間、有効量のアポＥ模倣体を投与することを含むアテローム性動脈硬化症の治療方法であり、治療サイクルは、有効量のアポＥ模倣体を投与して、アポＥ模倣体の中止後、持続する治療効果を可能にすることを含み、アポＥ模倣体は、Ａｃ−Ａｈａ−ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2またはＡｃ−Ａｈａ−［Ｒ］ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2ペプチドからなり、治療サイクルには休止期が続き、休止期の間、アポＥ模倣体は投与されない。
【０３２２】
本明細書で開示されるのは、少なくとも１回の治療サイクルの間、有効量の開示されたアポＥ模倣ペプチドのいずれか１つを投与することを含むＡＣＳの治療方法であり、治療サイクルは、有効量のアポＥ模倣ペプチドを投与して、アポＥ模倣ペプチドの中止後、持続する治療効果を可能にすることを含み、治療サイクルには休止期が続き、休止期の間、アポＥペプチドは投与されず、治療サイクルは、週に１回で３ヵ月間、有効量のアポＥ模倣ペプチドを投与することを含む。
【０３２３】
開示された治療方法は、対象に応じて種々の時間で存在することができる。特に、治療は、循環器事象または脳血管事象のリスクが高いまたは高い残留リスクがあると見なされる対象にて存在することができる。一例において、治療は、急性冠状動脈事象に続いて対象が安定化された後、開始することができる。一例において、治療は、急性冠状動脈事象の直後、または急性冠状動脈事象の３、６、９または１２ヵ月後、開始することができる。治療は、例えば、冠状動脈バイパス手術（ＣＡＢＧ）、経皮冠動脈介入（血管形成、ＰＣＩ）、または冠状動脈へのステントの埋め込みのような急性の介入心臓処置に続いて開始することができる。高リスクであると見なされる対象は、ホモ接合型家族性高コレステロール血症（ＦＨ）、重度難治性ＦＨ、糖尿病を有する個体、または急性冠症候群（ＡＣＳ）後の個体であってもよい。高リスクの対象では、治療を延長することができる。
【０３２４】
１．治療サイクル
治療サイクルは、投与計画に関して前に記載したように、時間の長さで変化することができる。治療サイクルは、少なくとも４週間であってもよいが、６ヵ月まで続くことができる。一例において、開示された方法は、有効量のアポＥ模倣ペプチドの週１回で１ヵ月間（４週間）、３ヵ月間（１２週間）または６ヵ月間（２４週間）の投与が関与する治療サイクルを有する。治療サイクルには、週１回、２回または３回のアポＥ模倣ペプチドの投与が含まれ得る。いくつかの態様において、アポＥ模倣ペプチドは、毎日投与することができる。いくつかの態様において、アポＥ模倣ペプチドは、２週ごとに１回またはさらに月に１回投与することができる。場合によっては、アポＥ模倣ペプチドは、２週間ごとに４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２または２４週間投与することができる。各治療サイクルは、投与についての確立された時間の長さと同様にその時間枠の間での確立された投薬スケジュールを含むことができる。
【０３２５】
方法は、休止期の後に第２の治療サイクルをさらに含むことができる。一態様において、第２の治療サイクルは４週間の休止期の後に投与することができる。別の態様において、第２の治療サイクルは、当初の治療サイクルの開始から少なくとも１年で投与することができる。
【０３２６】
２．休止期
休止期は、投与計画に関して前に記載したように、少なくとも４週間であってもよいが、数年続くことができる。休止期の間、アポＥ模倣ペプチドは投与されない。
【０３２７】
休止期の長さは、治療サイクルの間に投与されたアポＥ模倣ペプチドの持続する治療効果がどれくらい長く続くかに依存する。場合によっては、休止期は、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２ヵ月であってもよい。場合によっては、休止期は、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０年であってもよい。例えば、休止期は、少なくとも４週間（１ヵ月）であってもよい。
【０３２８】
一態様において、休止期は、治療サイクルの間に投与されたアポＥ模倣ペプチドの用量に応じて減らすことができ、または延長することができる。例えば、治療サイクルの間のアポＥ模倣ペプチドの用量が増やされるのであれば、休止期を延長することができる。休止期の長さは、治療サイクルの長さに基づいて変化することもできる。例えば、対象が週に１回で３ヵ月間特定の用量のアポＥ模倣ペプチドを受け取るのであれば、その時は、休止期は、週に１回で６ヵ月間同じ用量のアポＥ模倣ペプチドを受け取る対象よりも短くてもよい。
【０３２９】
アポＥ模倣ペプチドは休止期の間は投与されないけれども、アポＥ模倣ペプチド以外のアテローム性動脈硬化治療剤は、休止期の間に投与することができる。アポＥ模倣体以外のアテローム性動脈硬化治療剤は、例えば、スタチンまたは胆汁酸封鎖剤のような従来の脂質低下剤、及び／または、例えば、ＰＣＳＫ９阻害剤、ＶＬＤＬ合成阻害剤、及び／またはＣＥＴＰ阻害剤のような治療剤であってもよい。
【０３３０】
３．アテローム性動脈硬化症
血管壁におけるＬＤＬの蓄積とＬＤＬに対する炎症反応の組み合わせは、アテローム性動脈硬化症を惹起するのに関与する。血管壁内のＬＤＬは、酸化されるようになり、それは血管壁を損傷し、免疫応答を誘発する。マクロファージのような免疫細胞は、酸化されたＬＤＬを処理することができず、最終的には破裂して、動脈壁におけるさらに多くの酸化されたコレステロールをもたらす。血管壁に対してますます損傷を引き起こすこのサイクルは連続する。コレステロールの増加は、最終的に血管壁の硬化と狭窄を生じるプラークをもたらす。開示された方法は、アテローム性動脈硬化症及び他の脂質障害を治療するのに有用である。
【０３３１】
Ｋ．送達
本明細書で記載される方法では、アポＥ模倣ペプチドの投与または送達は、種々のメカニズムを介することができる。上記で定義されたように、本明細書で開示されるのは、治療方法、治療するための投与計画及びそれらの投与計画を使用する方法である。投与計画及び方法は、例えば、薬学上許容可能な担体のような担体も含むことができる本明細書で記載されるポリペプチドまたは核酸のいずれか１つ以上を含有する組成物を含む。例えば、開示されるのは、本明細書で開示されるアポＥ模倣ペプチドと薬学上許容可能な担体とを含む医薬組成物である。
【０３３２】
開示されたアポＥ模倣ペプチドは、溶液または懸濁液（例えば、微粒子、リポソームまたは細胞に組み込まれた）であってもよい。これらの組成物は、抗体、受容体または受容体リガンドを介して特定の細胞型に対して標的とされることができる。当業者は、開示された組成物と共にそのような標的剤をどのように作製し、使用するかを知っている。標的剤は、例えば、抗体が抱合されるリポソーム；細胞特異的なリガンドを介した受容体が介在するＤＮＡの標的化；及びインビボでの細胞の高度に特異的なレトロウイルス標的化のようなビヒクルであってもよい。そのような任意のビヒクルは、本明細書の組成物の一部であってもよい。例えば、アポＥ模倣ペプチドを血管壁に向ける標的剤を組成物に含めることができる。
【０３３３】
開示された組成物のために任意の好適な投与経路を使用することができる。好適な投与経路には、例えば、局所、腸内、局部、全身性または非経口の経路を挙げることができる。例えば、投与は、経皮、吸入、浣腸、結膜、点眼剤、点耳剤、肺胞、鼻、鼻内、腸内、経口、口腔内、経口腔、腸管、直腸、直腸内、経直腸、注射、点滴、静脈内、動脈内、筋肉内、脳内、心室内、脳室内、心臓内、皮下、骨内、皮内、くも膜下、腹腔内、膀胱内、空洞内、髄内、眼内、頭蓋内、経皮、経粘膜、経鼻、吸入、嚢内、硬膜外、硬膜外、硝子体内等であってもよい。開示された組成物は、任意の他の治療法にて及び任意の他の治療法と共に使用することができる。
【０３３４】
典型的なペプチド製剤とは異なって、Ｄ形態のアミノ酸を含む本発明のペプチドは、胃酸等によるタンパク質分解に対して保護することなく経口でさえ投与することができる。それにもかかわらず、特定の実施形態において、保護的賦形剤の使用によってペプチド送達を向上させることができる。このことは通常、ポリペプチドを組成物と複合体化し、それを酸性及び酵素的な加水分解に耐性にすることによって、または適宜耐性の担体、例えば、リポソームにポリペプチドをパッキングすることによって達成される。経口送達のためにポリペプチドを保護する手段は、当該技術分野で周知である（例えば、治療剤の経口送達のための脂質組成物を記載している米国特許第５，３９１，３７７号を参照されたい）。
【０３３５】
高い血清半減期は、持続放出のタンパク質「パッキング」システムの使用によって維持することができる。そのような持続放出システムは、当業者に周知である。好ましい一実施形態において、タンパク質及びペプチドのためのＰｒｏＬｅａｓｅ生分解性マイクロスフェア送達システム（Ｔｒａｃｙ（１９９８）、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｐｒｏｇ．，１４：１０８；Ｊｏｈｎｓｏｎら（１９９６）、Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄ．２：７９５；Ｈｅｒｂｅｒｔら（１９９８），Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔ．Ｒｅｓ．１５，３５７）、他の剤と共にまたはそれを伴わずに乾燥製剤として配合することができるポリマーマトリクスにおける活性剤を含有する生分解性ポリマーマイクロスフェアで構成される乾燥粉末。
【０３３６】
ＰｒｏＬｅａｓｅマイクロスフェア製作工程は、活性剤の完全性を維持しながら、高いカプセル化効率を達成するために具体的に考案された。工程は、（ｉ）安定化賦形剤を伴う薬剤溶液をスプレー凍結乾燥することによるバルクからの凍結乾燥薬剤粒子の調製、（ｉｉ）薬剤／ポリマー懸濁液の調製に続く超音波処理または均質化を行って、薬剤の粒度を低下させること、（ｉｉｉ）液体窒素への噴霧化による凍結された薬剤／ポリマーのマイクロスフェアの作出、（ｉｖ）エタノールによるポリマー溶媒の抽出、及び（ｖ）最終的な乾燥粉末産物を作出するための濾過及び真空乾燥からなる。得られる粉末は、固形形態の活性剤を含有し、それは、多孔性ポリマー粒子の中で均質に且つ厳格に分散される。工程で最も一般的に使用されるポリマーであるポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）（ＰＬＧ）は、生体適合性であり且つ生分解性である。
【０３３７】
カプセル化は、低温（例えば、−４０℃）で達成することができる。カプセル化の間、タンパク質は、水の非存在下にて固体状態で維持されるので、タンパク質の水が誘導する立体構造的な移動を出来るだけ抑え、反応物質としての水を含むタンパク質の分解反応を防ぎ、タンパク質が変性を受け得る有機／水性の界面を回避する。好まれる工程は、ほとんどのタンパク質が不溶性であるので高いカプセル化効率（例えば、９５％を超える）が得られる溶媒を使用する。
【０３３８】
別の実施形態において、溶液の１以上の成分を、希釈の準備ができている、例えば、保存容器にて（例えば、予め測定した容量にて）、またはある容量の水に添加する準備ができている可溶性カプセルにて「濃縮物」として提供することができる。
【０３３９】
前述の製剤及び投与方法は、説明に役立つことが意図されるのであって、限定することは意図されない。本明細書で提供される教示を用いて、他の好適な製剤及び投与の方式を容易に考案することができることが理解されるであろう。
【０３４０】
１．併用療法
開示された方法の一態様において、アポＥ模倣体は、単独で、または１以上の追加の治療剤との併用で投与することができる。追加の治療剤は、治療される疾患または症状に基づいて選択される。種々のクラスの好適な医薬剤及び薬剤の記載は、Ｇｏｏｄｍａｎ及びＧｉｌｍａｎ，Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，（第１１版，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．）（２００５）にて見いだされ得る。例えば、アポＥ模倣体を含有する医薬組成物は、アテローム性動脈硬化症を治療するための１以上の既知の治療剤と併用して投与することができる。アテローム性動脈硬化症を治療するための治療剤には、コレステロール低下剤、ＨＤＬ上昇剤、血圧降下剤、血液菲薄剤（すなわち、血栓を防ぐ薬物）、抗炎症剤及び抗アテローム形成剤が挙げられるが、これらに限定されない。コレステロール低下剤の例には、コレステロール吸収阻害剤、胆汁酸封鎖剤、フィブラート、ＰＣＳＫ９阻害剤、ミクロソームトリグリセリド転移タンパク質阻害剤、アポリポタンパク質Ｂ合成阻害剤、またはＣＥＴＰ阻害剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【０３４１】
アポＥ模倣体は、開示された追加の治療剤のいずれかと併せてまたはそれが後に続いて投与することができる。治療は、ＬＤＬアフェレーシス療法と併せてまたはそれが後に続いて投与することができる。
【０３４２】
併用療法は、投与計画の治療サイクルの間にアポＥ模倣体と追加の治療剤とを投与することを含むことができる。併用療法は、治療サイクルの間にアポＥ模倣体を、及び休止期の間に追加の治療剤を投与することを含むこともできる。
【実施例】
【０３４３】
開示された方法及び組成物は、それらが変化し得るので、特定の記載される方法論、プロトコール及び試薬に限定されないことが理解される。本明細書で使用される専門用語は、特定の実施形態のみを記載する目的のためのものであって、添付の特許請求の範囲によってのみ限定される本発明の範囲を限定することは意図されないことも理解されるべきである。
【０３４４】
当業者は、わずかなごく普通の実験を用いて、本明細書で記載される方法及び組成物の特定の実施形態に対する多数の同等物を認識するであろうし、突き止めることができるであろう。そのような同等物は、以下の特許請求の範囲によって包含されることが意図される。
【０３４５】
実施例１：合成アポＥ模倣ペプチド類似体の調製及び分析
図３〜１４に記載の研究に使用した合成アポＥ模倣ペプチドは、標準のＦｍｏｃ固相ペプチド合成技術によって調製した。種々のペプチド及び調製の理論的根拠を図１に示す。合成ペプチドの代表的な分析ＨＰＬＣプロファイルを図２Ａ〜２Ｇに示す。
【０３４６】
実施例２：アポＥヌルマウスにおけるＡＥＭ類似体の効果
血漿コレステロールレベルに与える種々の合成アポＥ模倣ペプチドの効果を示す研究を図３〜１４に示す。
【０３４７】
実施例３：高ショ糖を与えたラットにおけるＡＥＭ類似体の効果
雄のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットをチャールズリバー社から購入し、６５％ショ糖を含有する食事を２週間与えた。リポタンパク質プロファイル（図１５）は、トリグリセリドの増加を示した。ラットは、ペプチドの投与時には３７０＋／−２０ｇの重さであった。（５ｍｇ／ｋｇ尾静脈）投与したペプチドは以下の通りであった：Ａｃ−ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2、Ａｃ−［Ｒ］ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2及びＡｃ−Ａｈａ−［Ｒ］ｈＥ１８Ａ−ＮＨ2、ここで、ｈＥは、ＬＲＫＬＲＫＲＬＬＲ（配列番号４）を指し、［Ｒ］ｈＥは、ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ（配列番号６）を指し、Ａｈａは、Ｈ2Ｎ−（ＣＨ2）5−ＣＯＯＨを指す。グラフに示した時間に採血し、細胞を分離した後、コレステロール、トリグリセリド及びグルコースレベルについて血漿を分析した。種々の時点の血漿トリグリセリドレベルを図１６に示す。血漿トリグリセリド（図１７）、コレステロールレベル（図１８）、及び血漿グルコースレベル（図１９）について、ペプチド投与後４８時間でのデータも得た。
【０３４８】
実施例４：ペプチドを含有する脂肪酸の調製及び分析
以下のペプチドを調製した：（１）オクタノイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−１８Ａ−ＮＨ2（配列番号６２５）；（２）ミリストイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−１８Ａ−ＮＨ2（配列番号６２８）；（３）オレオイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−１８Ａ−ＮＨ2（配列番号６３４）；（４）パルミトイル−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−１８Ａ−ＮＨ2（配列番号６２９）；及び（５）魚油−ＬＲＲＬＲＲＲＬＬＲ−１８Ａ−ＮＨ2（配列番号６４７）、ここで、魚油は、主としてエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）とドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）の混合物であり、他の成分は少量である。
【０３４９】
ペプチドは、Ｒｉｎｋアミド樹脂（１０ｇの樹脂上に存在する５ｍＭの官能基を使用した）上で合成した。ＨＢＴｕ縮合法（３つのカップリングの５ｘ、３ｘ、及び２ｘで各アミノ酸の３つのカップリング）を用いて、適当なＦＭＯＣ−アミノ酸誘導体を添加した。最後のアミノ酸であるロイシン（Ｌ）を添加した後、樹脂は、およそ４０ｇの重量であり、アミノ酸のカップリングの定量的収率を示した。脂肪酸ごとに樹脂（２ｇ）を取り出し、ＤＭＦ中のＨＢＴｕを用いて、１０Ｘ及び５Ｘカップリングで各脂肪酸を２回添加した。ＴＦＡ：水：アニソール：エチレンジチオール（容量で９５：２：２：１、１０ｍｌ／Ｇの試薬）を室温で３．５時間用いて、ペプチドを樹脂から放出させた。樹脂を濾過した後、エーテルを添加してペプチドを沈殿させ、エーテルで３回遠心分離して洗浄した。ペプチドをまず透析した後、ＨＰＬＣで精製した。魚油誘導体は、精製するのが非常に困難な混合物を含有していることが知られているため、これは精製しなかったが、アポＥヌルマウスにおいて血漿コレステロールを低下させるこのペプチドの能力については、他の透析したペプチドと比較した。ペプチドの精製は、Ｃ１８シリカゲルカラムを用いて達成し、図２０Ａ〜２０Ｅは、ペプチドの代表的な分析ＨＰＬＣプロファイルを示す（Ｃ−１８  Ｖｙｄａｃカラム−２５０×４．６ｍｍ；溶媒系は、水／アセトニトリル（０．１％ＴＦＡ）、１２分で３５〜７０％の勾配であった）。
【０３５０】
実施例５：アポＥヌルマウスにおけるペプチドを含有する脂肪酸の効果
血漿コレステロールに与える、ペプチドのＮ末端で脂肪酸部分を含む合成アポＥ模倣ペプチドの効果を図２１〜３１に示す。
【０３５１】
本発明の範囲または精神から逸脱することなく本発明に種々の改変及び変更を実施できることが当業者には明らかになるであろう。本発明の他の実施形態は、本明細書の考慮、及び本明細書で開示される本発明の実施から、当業者には明らかになるであろう。本明細書及び実施例は、典型としてのみ解されるよう意図されたものであり、本発明の真の範囲及び精神は、以下の特許請求の範囲によって示される。
【図１】
2017528437.tif 000048
【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図２Ｄ】
2017528437.tif 000052
【図２Ｅ】
2017528437.tif 000053
【図２Ｆ】
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【図２Ｇ】
2017528437.tif 000055
【図３】
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【図４】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図６】
2017528437.tif 000060
【図７】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２Ａ】
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【図１２Ｂ】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０Ａ】
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【図２０Ｂ】
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【図２０Ｃ】
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【図２０Ｄ】
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【図２０Ｅ】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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