(57)【要約】  本発明は、新規なキラル２，５−ジ置換されたシクロペンタンカルボン酸誘導体、それの製造方法、疾患の治療および／または予防のための単独でのもしくは組み合わせでのそれらの使用、ならびに疾患の治療および／または予防のための、特には気道、肺および心血管系の治療および／または予防のための医薬を製造する上でのそれらの使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（Ｉ−Ａ）の（１Ｓ，２Ｓ，５Ｒ）−２−［４−（ベンジルオキシ）ベンゾイル］−５−［（４−オキソ−１，２，３−ベンゾトリアジン−３（４Ｈ）−イル）メチル］シクロペンタンカルボン酸もしくは下記式（Ｉ−Ｂ）の（１Ｒ，２Ｒ，５Ｓ）−２−［４−（ベンジルオキシ）ベンゾイル］−５−［（４−オキソ−１，２，３−ベンゾトリアジン−３（４Ｈ）−イル）メチル］シクロペンタンカルボン酸、またはこれら化合物の混合物、またはこれら化合物もしくはそれらの混合物の塩、溶媒和物もしきは塩の溶媒和物。
【化１】
2017511319.tif 000041
【請求項２】
前記式（Ｉ−Ａ）および（Ｉ−Ｂ）の化合物がラセミ混合物として存在する請求項１に記載の式（Ｉ−Ａ）および（Ｉ−Ｂ）の化合物の混合物、またはこのラセミ混合物の塩、溶媒和物もしくは塩の溶媒和物。
【請求項３】
エナンチオマー的に純粋な形態での下記式（Ｉ−Ａ）の請求項１に記載の化合物、または該化合物の塩、溶媒和物もしくは塩の溶媒和物。
【化２】
2017511319.tif 000042
【請求項４】
下記式（ＩＩ）のエキソ−２−（トリメチルシリル）エチル２−オキソビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−カルボキシレート：
【化３】
2017511319.tif 000043
を、下記式（ＩＩＩ）のフェニル−グリニャル化合物：
【化４】
2017511319.tif 000044
［式中、Ｘは塩素、臭素またはヨウ素である。］と反応させて、下記式（ＩＶ）の付加物：
【化５】
2017511319.tif 000045
を得て、
次に、下記式（Ｖ）のイン・サイチュで製造されたメシレート：
【化６】
2017511319.tif 000046
を介してヒドロキシ基を脱離させて、下記式（ＶＩ）のオレフィン：
【化７】
2017511319.tif 000047
を得て、
次に、触媒としての四酸化オスミウムとともにＮ−メチルモルホリン−Ｎ−オキサイドで酸化を行って、下記式（ＶＩＩ）のシス−１，２−ジオール：
【化８】
2017511319.tif 000048
を得て、
次に、この二環式ジオールを、四酢酸鉛または過ヨウ素酸ナトリウムを用いて開裂させて、２−ベンゾイル−５−ホルミルシクロペンタンカルボン酸エステル（ＶＩＩＩ−Ａ）および（ＶＩＩＩ−Ｂ）のラセミ混合物：
【化９】
2017511319.tif 000049
2017511319.tif 000050
を得て、
この混合物を水素化ホウ素ナトリウムで還元して、ヒドロキシメチル化合物（ＩＸ−Ａ）および（ＩＸ−Ｂ）のラセミ混合物：
【化１０】
2017511319.tif 000051
を得て、
次に、アルキルホスファンもしくはアリールホスファンおよびアゾジカルボキシレートの存在下に、下記式（Ｘ）の１，２，３−ベンゾトリアジン−４（３Ｈ）−オン：
【化１１】
2017511319.tif 000052
との反応を行って、ベンゾトリアジノン誘導体（ＸＩ−Ａ）および（ＸＩ−Ｂ）のラセミ混合物：
【化１２】
2017511319.tif 000053
を得て、
最後に、酸もしくはフッ化物試薬を用いて２−（トリメチルシリル）エチルエステル基を開裂させて、本発明によるシクロペンタンカルボン酸（Ｉ−Ａ）および（Ｉ−Ｂ）のラセミ混合物：
【化１３】
2017511319.tif 000054
を得て、
適宜に、得られた化合物（Ｉ−Ａ）および（Ｉ−Ｂ）の混合物を、エナンチオマー的に純粋な化合物に分離するか、および／または相当する（ｉ）溶媒および／または（ｉｉ）塩基を用いて、溶媒和物、塩および／または塩の溶媒和物に変換する、請求項１から３のいずれか１項で定義の化合物または化合物の混合物の製造方法。
【請求項５】
疾患の治療および／または予防のための、請求項１から３のいずれか１項で定義の化合物または化合物の混合物。
【請求項６】
慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肺気腫、慢性気管支炎、ＣＯＰＤでの肺性高血圧（ＰＨ−ＣＯＰＤ）、気管支拡張症、喘息、間質性肺疾患、特発性肺線維症（ＩＰＦ）および肺サルコイドーシス、動脈硬化症、頸動脈硬化症、ウィルス性心筋炎、心筋症および動脈瘤（卒中、心筋梗塞および末梢動脈閉塞性疾患などのそれらの結果的疾患を含む）、ならびに慢性腎臓疾患およびアルポート症候群の治療および／または予防方法における使用のための、請求項１から３のいずれか１項で定義の化合物または化合物の混合物。
【請求項７】
慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肺気腫、慢性気管支炎、ＣＯＰＤでの肺性高血圧（ＰＨ−ＣＯＰＤ）、気管支拡張症、喘息、間質性肺疾患、特発性肺線維症（ＩＰＦ）および肺サルコイドーシス、動脈硬化症、頸動脈硬化症、ウィルス性心筋炎、心筋症および動脈瘤（卒中、心筋梗塞および末梢動脈閉塞性疾患などのそれらの結果的疾患を含む）、ならびに慢性腎臓疾患およびアルポート症候群の治療および／または予防のための医薬の製造における、請求項１から３のいずれか１項で定義の化合物または化合物の混合物の使用。
【請求項８】
１以上の不活性で無毒性の医薬として好適な補助剤と組み合わせて請求項１から３のいずれか１項で定義の化合物または化合物の混合物を含む医薬。
【請求項９】
コルチコステロイド類、β−アドレナリン受容体作動薬、抗ムスカリン様作動物質、ＰＤＥ４阻害剤、ＰＤＥ５阻害剤、ｓＧＣ活性化剤、ｓＧＣ刺激剤、ＨＮＥ阻害剤、プロスタサイクリン類縁体、エンドセリン拮抗薬、スタチン類、抗線維化剤、抗炎症剤、免疫調節剤、免疫抑制剤および細胞傷害剤からなる群から選択される１以上の別の有効成分と組み合わせた、請求項１から３のいずれか１項で定義の化合物または化合物の混合物を含む医薬。
【請求項１０】
慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肺気腫、慢性気管支炎、ＣＯＰＤでの肺性高血圧（ＰＨ−ＣＯＰＤ）、気管支拡張症、喘息、間質性肺疾患、特発性肺線維症（ＩＰＦ）および肺サルコイドーシス、動脈硬化症、頸動脈硬化症、ウィルス性心筋炎、心筋症および動脈瘤（卒中、心筋梗塞および末梢動脈閉塞性疾患などのそれらの結果的疾患を含む）、ならびに慢性腎臓疾患およびアルポート症候群の治療および／または予防のための請求項８または９に記載の医薬。
【請求項１１】
有効量の請求項１から３のいずれか１項で定義の化合物もしくは化合物の混合物または請求項８から１０のいずれか１項で定義の医薬を投与することによる、ヒトおよび動物における慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肺気腫、慢性気管支炎、ＣＯＰＤでの肺性高血圧（ＰＨ−ＣＯＰＤ）、気管支拡張症、喘息、間質性肺疾患、特発性肺線維症（ＩＰＦ）および肺サルコイドーシス、動脈硬化症、頸動脈硬化症、ウィルス性心筋炎、心筋症および動脈瘤（卒中、心筋梗塞および末梢動脈閉塞性疾患などのそれらの結果的疾患を含む）、ならびに慢性腎臓疾患およびアルポート症候群の治療および／または予防方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願は、新規なキラル２，５−ジ置換されたシクロペンタンカルボン酸誘導体、それの製造方法、それ単独でのまたは組み合わせでの疾患の治療および／または予防のためのそれの使用、および疾患の治療および／または予防、特には気道、肺および心血管系の疾患の治療および／または予防のための医薬製造のためのそれの使用に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
ヒトマクロファージエラスターゼ（ＨＭＥ、ＥＣ３．４．２４．６５）は、マトリックス−メタロ−ペプチダーゼ類（ＭＭＰ類）のファミリーに属し、ヒトマトリックス−メタロ−ペプチダーゼ１２（ｈＭＭＰ−１２）とも称される。そのタンパク質は、特に「刺激性」物質または粒子との接触後にマクロファージによって生成、活性化および放出され、その程度は次第に大きくなる。そのような物質および粒子は、例えば、特にタバコの煙や産業粉塵で生じるような懸濁粒子中の異物として存在し得る。より広い意味で、炎症プロセス中に時に高濃度で存在するように、これらの刺激性粒子には、内因性および外因性細胞構成要素および細胞残屑も含まれる。その非常に活性な酵素は、非常に多数の結合組織タンパク質、例えば、主としてタンパク質エラスチン（従って、この名がある）、およびさらに別のタンパク質およびコラーゲン、フィブロネクチン、ラミニン、硫酸コンドロイチン、硫酸ヘパリンおよびその他などのプロテオグリカン類を分解することができる。当該酵素のこのタンパク質分解活性により、マクロファージは基底膜を通り抜けることができる。例えばエラスチンは、例えば、肺および動脈において、高い弾性を示すあらゆる種類の組織で高濃度で生じる。組織損傷などの非常に多くの病理プロセスにおいて、ＨＭＥは組織崩壊および再構築において重要な役割を果たす。さらに、ＨＭＥは炎症プロセスにおける重要な調節剤である。それは、例えば中心的な炎症メディエータ腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ−α）を放出し、形質転換増殖因子−ベータ（ＴＧＦ−β）が介在するシグナル経路に介入することで、炎症細胞の動員において重要な分子である［Ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ａ  Ｂｒｏａｄ  Ｓｐｅｃｔｒｕｍ  ｏｆ  Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｍａｔｒｉｘ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｂｙ  Ｈｕｍａｎ  Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ  Ｅｌａｓｔａｓｅ，  Ｇｒｏｎｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．  ２７２，  １２１８９−１２１９４  （１９９７）］。ＭＭＰ−１２はまた、恐らくはインターフェロン−α（ＩＦＮ−α）介在シグナル経路への介入の結果として、宿主防御で、特には抗ウィルス免疫の調節において役割を果たす［Ａ  ｎｅｗ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ  ｒｏｌｅ  ｆｏｒ  ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ−１２  ｉｎ  ａｎｔｉｖｉｒａｌ  ｉｍｍｕｎｉｔｙ，  Ｍａｒｃｈａｎｔ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄ．  ２０，  ４９３−５０２  （２０１４）］。
【０００３】
従って、病因および／または進行が感染性もしくは非感染性炎症事象および／または増殖性および肥大性の組織および血管再構築に関連する多くの疾患、傷害および病的変化において、ＨＭＥが重要な役割を果たすと仮定される。これらは特に、肺、腎臓または心血管系に対する疾患および／または損傷であることができ、またはそれらは癌疾患または他の炎症疾患であることができる［Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ  ｍｅｔａｌｌｏｅｌａｓｔａｓｅ  （ＭＭＰ−１２）  ａｓ  ａ  ｔａｒｇｅｔ  ｆｏｒ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  ｄｉｓｅａｓｅｓ，  Ｌａｇｅｎｔｅ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．  Ｔｈｅｒ．  Ｔａｒｇｅｔｓ  １３，  ２８７−２９５  （２００９）；  Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ  Ｍｅｔａｌｌｏｅｌａｓｔａｓｅ  ａｓ  ａ  ｍａｊｏｒ  Ｆａｃｔｏｒ  ｆｏｒ  Ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ  Ｉｎｊｕｒｙ  ｉｎ  Ａｎｔｉ−Ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ  Ｂａｓｅｍｅｎｔ  Ｍｅｍｂｒａｎｅ  Ｎｅｐｈｒｉｔｉｓ，  Ｋａｎｅｋｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １７０，  ３３７７−３３８５  （２００３）；  Ａ  Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  Ｍａｔｒｉｘ  Ｍｅｔａｌｌｏｅｌａｓｔａｓｅ−１２  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  Ｒｅｔａｒｄｓ  Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｔｉｃ  Ｐｌａｑｕｅ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｉｎ  Ａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅ  Ｋｎｏｃｋ−ｏｕｔ  Ｍｉｃｅ，  Ｊｏｈｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ．  Ｔｈｒｏｍｂ．  Ｖａｓｃ．  Ｂｉｏｌ．  ３１，  ５２８−５３５  （２０１１）；  Ｉｍｐａｉｒｅｄ  Ｃｏｒｏｎａｒｙ  Ｃｏｌｌａｔｅｒａｌ  Ｇｒｏｗｔｈ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ  Ｉｓ  ｉｎ  Ｐａｒｔ  Ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｂｙ  Ｍａｔｒｉｘ  Ｍｅｔａｌｌｏｅｌａｓｔａｓｅ  １２−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ  ａｎｄ  Ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎ，  Ｄｏｄｄ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ．  Ｔｈｒｏｍｂ．  Ｖａｓｃ．  Ｂｉｏｌ．  ３３，  １３３９−１３４９  （２０１３）；  Ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ  ｐｈａｒｍａｃｏｇｅｎｏｍｉｃｓ  ｉｎ  ｎｏｎ−ｓｍａｌｌ−ｃｅｌｌ  ｌｕｎｇ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ，  Ｃｈｅｔｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｈａｒｍａｃｏｇｅｎｏｍｉｃｓ  １２，  ５３５−５４６  （２０１１）］。
【０００４】
この文脈で言及されるべき疾患および損傷は、特には、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肺気腫、間質性肺疾患（ＩＬＤ）、例えば、特発性肺線維症（ＩＰＦ）および肺サルコイドーシス、急性肺損傷（ＡＬＩ）、急性呼吸促迫症候群（ＡＲＤＳ）、嚢胞性線維症（ＣＦ；膵線維嚢胞症とも称される）、喘息、ならびに感染性の、特にはウィルス誘発性気道疾患などである。例としてここで挙げることができる他の線維症は、肝線維症および全身性硬化症である。ＨＭＥが関与する心血管系に対する疾患および損傷は、例えば、動脈硬化症、この場合は特に頸動脈硬化症、感染性心内膜炎、この場合は特にウィルス性心筋炎、心筋症、心不全、心原性ショック、急性冠症候群（ＡＣＳ）、動脈瘤、急性心筋梗塞（ＡＭＩ）後の再潅流傷害、腎臓もしくは網膜に対する虚血性傷害、ならびにそれらの慢性経過、例えば慢性腎臓疾患（ＣＫＤ）およびアルポート症候群における組織および血管変化である。この場合、メタボリック・シンドロームおよび肥満を挙げることもできる。敗血症関連の疾患は、例えば、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、重度の敗血症、敗血症ショックおよび多臓器不全（ＭＯＦ）；多臓器機能不全（ＭＯＤＳ）、さらには播種性血管内血液凝固（ＤＩＣ）である。腫瘍過程中の組織の崩壊および再構築の例は、癌細胞の健常組織への侵入（転移の形成）および新血管形成（血管新生）である。ＨＭＥが役割を果たす他の炎症疾患は、リウマチ様疾患、例えば関節リウマチ、さらには慢性的腸炎（炎症性腸疾患（ＩＢＤ）；クローン病ＣＤ；潰瘍性大腸炎ＵＣ）である。
【０００５】
概して、エラスターゼ介在病理過程は遊離エラスターゼ（ＨＭＥ）とメタロプロテイナーゼの組織阻害剤（ＴＩＭＰ）の間の平衡移動に基づくものであると仮定される。各種病理過程、特に炎症過程において、遊離エラスターゼ（ＨＭＥ）の濃度が高くなり、それは局所的にプロテアーゼと抗プロテアーゼの間の均衡がプロテアーゼの方に移動することを意味する。同様の均衡（不均衡）が、好中球細胞のエラスターゼ（ヒト好中球エラスターゼ、ＨＮＥ、セリンプロテアーゼファミリーの構成員）と内因性抗プロテアーゼＡＡＴ（α−１抗トリプシン、セリンプロテアーゼ阻害剤、ＳＥＲＰＩＮの構成員）との間に存在する。ＨＭＥがＨＮＥの阻害剤を開裂および失活させ、逆にＨＮＥがＨＭＥ阻害剤を開裂および失活させることから、この二つの平衡は関連しており、その結果、個々のプロテアーゼ／抗プロテアーゼ不均衡がさらに移動し得る。さらに、局所炎症の部分では、強い酸化条件が優勢であり（酸化的破壊）、その結果、プロテアーゼ／抗プロテアーゼ不均衡がさらに強くなる［Ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ  ｔｒｉａｄ  ｉｎ  ＣＯＰＤ：  ｏｘｉｄａｔｉｖｅ  ｓｔｒｅｓｓ，  ｐｒｏｔｅａｓｅ−ａｎｔｉｐｒｏｔｅａｓｅ  ｉｍｂａｌａｎｃｅ，  ａｎｄ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ，  Ｆｉｓｃｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｉｎｔ．  Ｊ．  ＣＯＰＤ  ６，  ４１３−４２１  （２０１１）］。
【０００６】
現在、２０種類を超えるＭＭＰが知られており、それらは歴史的に、それらの最も顕著な基質に関して異なる分類に粗く分けられており、例えばゼラチナーゼ類（ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−９）、コラゲナーゼ類（ＭＭＰ−１、ＭＭＰ−８、ＭＭＰ−１３）、ストロメライシン類（ＭＭＰ−３、ＭＭＰ−１０、ＭＭＰ−１１）およびマトリリシン類（ＭＭＰ−７、ＭＭＰ−２６）である。これまでのところ、ＨＭＥ（ＭＭＰ−１２）がメタロエラスターゼの唯一の代表的なものである。さらに、タンパク質を膜に固定する特徴的ドメインを有することから、さらなるＭＭＰ類が、いわゆるＭＴ−ＭＭＰ類（膜型ＭＭＰ類）の群に加えられている（ＭＭＰ−１４、ＭＭＰ−１５、ＭＭＰ−１６、ＭＭＰ−１７、ＭＭＰ−２４、ＭＭＰ−２５）。全てのＭＭＰ類の共通の特徴は、触媒活性において重要であり、他の金属タンパク質（例えば、ジスインテグリンおよびメタロプロテイナーゼ、ＡＤＡＭ）でも認められ得る酵素の活性中心における保存された亜鉛結合領域である。錯化した亜鉛は、タンパク質のＮ末端プロペプチドドメインにおけるスルフヒドリル基によってマスクされ、それにより当該酵素の酵素的に不活性なプロフォーム（ｐｒｏｆｏｒｍ）となる。このプロペプチドドメインの開裂除去の結果としてのみ、この配位から開放された酵素の活性中心に亜鉛があり、それによって当該酵素は活性化される（いわゆるシステインスイッチによる活性化）［Ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ａｓ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｆｏｒ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ａｎｄ  ｖａｓｃｕｌａｒ  ｄｉｓｅａｓｅｓ，  Ｈｕ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．  ６，  ４８０−４９８  （２００７）］。
【０００７】
既知の合成ＭＭＰ阻害剤のほとんどが、亜鉛錯化性官能基、非常に多くの場合、例えばヒドロキサメート、カルボキシレートまたはチオールを提供する［Ｒｅｃｅｎｔ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｍａｔｒｉｘ  Ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ａｉｄｅｄ  ｂｙ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ  Ｓｔｕｄｉｅｓ，  Ｂ．Ｇ．  Ｒａｏ，  Ｃｕｒｒ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｄｅｓ．  １１，  ２９５−３２２  （２００５）］。これら阻害剤の骨格も多くの場合、ペプチドに似ており、そして使用される用語はいわゆるペプチド模倣薬であり（概して、経口生物学的利用能が低い）、またはそれはペプチドと類似性がなく、そして使用される用語はより一般的には小分子（ＳＭＯＬ）である。これらの阻害剤の物理化学特性および薬物動態特性は、非常に一般的な意味において、どの組織で、どの期間にどの程度、どの標的分子（標的）および望ましくない分子（アンチ標的、オフターゲット）が「遭遇する」かに大きな影響を及ぼす。
【０００８】
ここで、疾患の発生率において、あるＭＭＰの具体的な役割を決定することは重要な課題である。特に、多数のＭＭＰおよびさらなる類似の分子（例えば、ＡＤＡＭ類）が、各場合で多数の可能な生理基質とともに存在し、従ってある環境下では多様なシグナル伝達経路における関連する阻害効果もしくは活性化効果も多くあるという事実のため、これはさらに困難になっている。多くのイン・ビトロ実験および前臨床イン・ビボ実験が、各種疾患モデルにおけるＭＭＰ類についての理解を深める上で大きく貢献している（例えば、トランスジェニック動物、ノックアウト動物ならびにヒト試験からの遺伝的データ）。可能な薬物療法に関しての標的のバリデーションは、最終的には、ヒトまたは患者での一連の臨床試験でのみ行うことができる。これに関して第１世代のＭＭＰ阻害剤が、癌研究で臨床的に検討されてきた。その時、ＭＭＰタンパク質ファミリーのわずかな代表的なものしか知られていなかった。有効用量で、生じた副作用が耐容できないものであったことから、検討された阻害剤の中で、臨床的に確実なものはなかった。さらなるＭＭＰが知られるようになった過程で明らかになったように、第１の阻害剤世代の代表的なものは、非選択的阻害剤であった。すなわち、非常に多数の異なるＭＭＰが同程度に阻害された（ｐａｎ−ＭＭＰ阻害剤、ｐａｎ−ＭＭＰＩ類）。恐らくは、１以上のＭＭＰ標的に対する所望の効果は、１以上のＭＭＰアンチ標的への望ましくない効果により、または別の標的部位（オフターゲット）での望ましくない効果によって隠されていた［Ｖａｌｉｄａｔｉｎｇ  ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏ  ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ  ａｓ  ｄｒｕｇ  ｔａｒｇｅｔｓ  ａｎｄ  ａｎｔｉ−ｔａｒｇｅｔｓ  ｆｏｒ  ｃａｎｃｅｒ  ｔｈｅｒａｐｙ，  Ｏｖｅｒａｌｌ  ＆  Ｋｌｅｉｆｅｌｄ，  Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖ．  Ｃａｎｃｅｒ  ６，  ２２７−２３９  （２００６）］。
【０００９】
選択性向上を特徴とするより新しいＭＭＰ阻害剤が、同様に臨床試験に付されており、ＭＭＰ−１２阻害剤と明確に称されている化合物などがあるが、これまでのところ、やはり、有力な臨床的成功には至っていない。より注意深く見ると、これまでの選択的であると記載されている阻害剤も、あまり選択的ではないことが分かってきている。
【００１０】
例えばＭＭＰ−１２阻害剤としての臨床試験化合物「ＭＭＰ４０８」に関しては、イン・ビトロでＭＭＰ−１３、ＭＭＰ−３、ＭＭＰ−１４、ＭＭＰ−９、Ａｇｇ−１、ＭＭＰ−１、Ａｇｇ−２、ＭＭＰ−７およびＴＡＣＥに対して若干ないし有意な選択性が記載されている［Ａ  Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  Ｍａｔｒｉｘ  Ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅａｓｅ  １２  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｆｏｒ  Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｃｈｒｏｎｉｃ  Ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ  Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  Ｄｉｓｅａｓｅ  （ＣＯＰＤ）：  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ｏｆ  （Ｓ）−２−（８−（Ｍｅｔｈｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｄｉｂｅｎｚｏ［ｂ，ｄ］ｆｕｒａｎ−３−ｓｕｌｆｏｎａｍｉｄｏ）−３−ｍｅｔｈｙｌｂｕｔａｎｏｉｃ  ａｃｉｄ  （ＭＭＰ４０８），  Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ５２，  １７９９−１８０２  （２００９）］。ＭＭＰ−２およびＭＭＰ−８に関するイン・ビトロ活性データからは、これら２種類のＭＭＰを代表するものに対する選択性があまり有利なものではないことが示されている［Ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ−１２  ｉｓ  ａ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｔａｒｇｅｔ  ｆｏｒ  ａｓｔｈｍａ  ｉｎ  ｃｈｉｌｄｒｅｎ  ａｎｄ  ｙｏｕｎｇ  ａｄｕｌｔｓ，  Ｍｕｋｈｏｐａｄｈｙａｙ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １２６，  ７０−７６  （２０１０）］。
【００１１】
二重ＭＭＰ９／１２阻害剤であると記載されているＣＯＰＤ治療用の臨床試験物質ＡＺＤ１２３６［Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ａｎ  ｏｒａｌ  ＭＭＰ−９  ａｎｄ  −１２  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ，  ＡＺＤ１２３６，  ｏｎ  ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ  ｉｎ  ｍｏｄｅｒａｔｅ／ｓｅｖｅｒｅ  ＣＯＰＤ：  Ａ  ｒａｎｄｏｍｉｓｅｄ  ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ｔｒｉａｌ，  Ｄａｈｌ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｕｌｍ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  Ｔｈｅｒａｐ．  ２５，  １６９−１７７  （２０１２）］でも状況は似ている。この化合物の開発は２０１２年に停止された。ここではまた、ＭＭＰ−２およびＭＭＰ−１３の顕著な阻害が引用される［ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｗｉｐｏ．ｉｎｔ／ｒｅｓｅａｒｃｈ／ｅｎ／ｄｅｔａｉｌｓ．ｊｓｐ？ｉｄ＝２３０１］。
【００１２】
ＭＭＰ選択性を評価するとさらに、動物モデルの有意味性を注意深く計算することが示される。例えば、試験化合物ＭＭＰ４０８はマウスのオーソロガスＭＭＰ−１２標的に対して有意に低いアフィニティを示し、ＩＣ５０  ２ｎＭ（ヒトＭＭＰ−１２）、ＩＣ５０  １６０ｎＭ（マウスＭＭＰ−１２）、ＩＣ５０  ３２０ｎｍ（ラットのＭＭＰ−１２）である［上記のＬｉ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００９；  Ｍｕｋｈｏｐａｄｈｙａｙ  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１０を参照］。マウスの他のＭＭＰ類に対する活性強度に関するデータは公開されていない。試験物質ＡＺＤ１２３６についても同様であるように思われる［ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｗｉｐｏ．ｉｎｔ／ｒｅｓｅａｒｃｈ／ｅｎ／ｄｅｔａｉｌｓ．ｊｓｐ？ｉｄ＝２３０１下で提供の各種動物種における交差反応性に関する情報を参照する。］。
【００１３】
動物種の境界を越えた選択性プロファイル以外に、標的ＭＭＰ−１２自体に対する活性強度も非常に重要である。比較的類似の薬物動態プロファイルに関して、相対的に効力の高い化合物では、相対的に効力が低い化合物と比較して治療用量が低くなり、概して、用量低下は副作用の確率低下に関連するはずである。これは特に、所望の標的および／または望ましくないアンチ標的およびオフターゲットと相互作用し得る化合物のいわゆる「遊離画分」（未結合の画分、ｆｕ）に関して当てはまる（「遊離画分」は、血漿の構成成分に結合していない化合物の利用可能量と定義され、これらの構成成分は主として、例えばアルブミンなどの血液タンパク質構成成分である。）。従って、ＭＭＰ選択性以外に、特異性も非常に重要である。
【００１４】
従って、マクロファージエラスターゼを阻害する新たな有効成分は、高い選択性および特異性を有することで、標的化的にＨＭＥを阻害できるものであるべきである。これに関しては、その物質の良好な代謝安定性も必要である（低クリアランス）。さらに、これらの化合物は、酸化的条件下で安定であることで、疾患発生における阻害効力を喪失しないものであるべきである。
【００１５】
慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）は、肺気腫および／または慢性気管支炎が原因の呼吸流の閉塞を特徴とする進行の遅い肺疾患である。この疾患の最初の症状は通常、人生の４０代または５０代に現れる。その後の人生では、多くの場合で息切れが悪化し、咳で症状が出て、多量および時には膿性の痰を伴い、呼吸の狭窄から呼吸困難（呼吸窮迫）に至る症状を伴う。ＣＯＰＤは主として喫煙者の疾患である。喫煙は、ＣＯＰＤ症例全体の９０％の原因であり、ＣＯＰＤ関連死全体の８０から９０％の原因である。ＣＯＰＤは大きな医学的問題であり、全世界的に６番目に大きな死因となっている。４５歳を超える人々のうち、約４％から６％が冒されている。
【００１６】
呼吸流の閉塞は部分的かつ一時的である可能性があるが、ＣＯＰＤは治癒はできない。従って、その治療の目的は、生活の質を改善し、症状を緩和し、急性の悪化を防ぎ、肺機能の進行性障害を遅延させることにある。既存の薬物療法は過去２０から３０年間ほとんど変わっておらず、気管支拡張剤を用いて閉塞された呼吸経路を開放し、一定の状況下ではコルチコステロイド類を用いて肺の炎症を抑制するものである［Ｃｈｒｏｎｉｃ  Ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ  Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  Ｄｉｓｅａｓｅ，  Ｐ．  Ｊ．    Ｂａｒｎｅｓ，  Ｎ．  Ｅｎｇｌ．  Ｊ．  Ｍｅｄ．  ３４３，  ２６９−２８０  （２０００）］。タバコの煙その他の刺激物によって引き起こされる肺の慢性炎症は、その疾患の進行の原動力である。基礎の機序には、肺の炎症反応の過程で各種ケモカイン類を放出する免疫細胞が関与している。結果的に、好中球細胞およびさらなる進行中に、肺胞マクロファージが肺の結合組織および管腔に固定される。好中球細胞は、主としてＨＮＥおよびプロテイナーゼ３を含むプロテアーゼカクテルを分泌する。活性化マクロファージはＨＭＥを放出する。結果的に、プロテアーゼ／抗プロテアーゼ均衡は局所的にプロテアーゼの方に移動し、それによって特にエラスターゼ活性が制御されなくなり、その結果として、肺胞エラスチンの過剰分解に至る。この組織分解によって、気管支の崩壊が生じる。これによって、肺の弾性低下が生じ、それにより、呼吸流の妨げおよび呼吸障害に至る。さらに、高頻度および長期の肺炎症によって、気管支の再構築が生じ、結果的に病変形成に至る。そのような病変は、慢性気管支炎を特徴とする慢性咳の発生に寄与し得る。
【００１７】
ヒト痰サンプルを用いた実験から、ＨＭＥタンパク質の量が喫煙およびＣＯＰＤ状況に関連していることが知られている。ＨＭＥの検出可能な量は非喫煙者で最も低く、喫煙経験者および喫煙者では若干高く、ＣＯＰＤ患者では有意に上昇した［Ｅｌｅｖａｔｅｄ  ＭＭＰ−１２  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｌｅｖｅｌｓ  ｉｎ  ｉｎｄｕｃｅｄ  ｓｐｕｔｕｍ  ｆｒｏｍ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ＣＯＰＤ，  Ｄｅｍｅｄｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｔｈｏｒａｘ  ６１，  １９６−２０１  （２００６）］。同様のデータが、ヒト痰サンプルおよび気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）で得られた。ここで、活性化マクロファージ上のＨＭＥを検出および定量することができた。ＨＭＥ量はＣＯＰＤ患者／喫煙者＞ＣＯＰＤ患者／喫煙経験者＞喫煙経験者＞非喫煙者である［Ｐａｔｔｅｒｎｓ  ｏｆ  ａｉｒｗａｙ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ＭＭＰ−１２  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  ｓｍｏｋｅｒｓ  ａｎｄ  ｅｘ−ｓｍｏｋｅｒｓ  ｗｉｔｈ  ＣＯＰＤ，  Ｂａｂｕｓｙｔｅ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｒｅｓｐｉｒ．  Ｒｅｓ．  ８，  ８１−９０  （２００７）］。
【００１８】
ある一定の形でのＣＯＰＤに類似の炎症肺疾患は間質性肺疾患（ＩＬＤ）であり、特にこの場合、特発性肺線維症（ＩＰＦ）およびサルコイドーシスとしての発現である［Ｃｏｍｍｏｎａｌｉｔｉｅｓ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ｔｈｅ  ｐｒｏ−ｆｉｂｒｏｔｉｃ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｉｎ  ＣＯＰＤ  ａｎｄ  ＩＰＦ，  Ｌ．Ａ．  Ｍｕｒｒａｙ，  Ｐｕｌｍ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  Ｔｈｅｒａｐ．  ２５，  ２７６−２８０  （２０１２）；  Ｔｈｅ  ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｏｆ  ＣＯＰＤ  ａｎｄ  ＩＰＦ：  ｄｉｓｔｉｎｃｔ  ｈｏｒｎｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｓａｍｅ  ｄｅｖｉｌ？，  Ｃｈｉｌｏｓｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｒｅｓｐｉｒ．  Ｒｅｓ．  １３：３  （２０１２）］。ここでまた、細胞外基質のホメオスタシスが阻害される。ゲノムワイド関連試験からのデータは、そのような線維症の疾患発生率におけるＨＭＥの特定の役割を示唆するものである［Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ  Ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｓ  ＭＭＰ−１２  ａｎｄ  ＡＤＡＭＤＥＣ１  ａｓ  Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  Ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ  Ｍｅｄｉａｔｏｒｓ  ｏｆ  Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  Ｓａｒｃｏｉｄｏｓｉｓ，  Ｃｒｏｕｓｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ．  Ｊ．  Ｒｅｓｐｉｒ．  Ｃｒｉｔ．  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．  １７９，  ９２９−９３８  （２００９）；  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｍａｔｒｉｘ  Ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ−１２  Ｐｒｏｍｏｔｅｒ  Ｒｅｇｉｏｎ  ｗｉｔｈ  Ｓｙｓｔｅｍｉｃ  Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  ｉｎ  ａｎ  Ｉｔａｌｉａｎ  Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ，  Ｍａｎｅｔｔｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．  ３７，  １８５２−１８５７  （２０１０）；  Ｉｎｃｒｅａｓｅｄ  ｓｅｒｕｍ  ｌｅｖｅｌｓ  ａｎｄ  ｔｉｓｓｕｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ−１２  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｓｙｓｔｅｍｉｃ  ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ：  ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ｓｅｖｅｒｉｔｙ  ｏｆ  ｓｋｉｎ  ａｎｄ  ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  ｆｉｂｒｏｓｉｓ  ａｎｄ  ｖａｓｃｕｌａｒ  ｄａｍａｇｅ，  Ｍａｎｅｔｔｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｎｎ．  Ｒｈｅｕｍ．  Ｄｉｓ．  ７１，  １０６４−１０７０  （２０１２）］。
【００１９】
さらに、虚血性炎症疾患プロセスでのＨＭＥの決定的役割についてさらなる前臨床的証拠がある［Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ  Ｍｅｔａｌｌｏｅｌａｓｔａｓｅ  （ＭＭＰ−１２）  Ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  Ｍｉｔｉｇａｔｅｓ  Ｒｅｔｉｎａｌ  Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｉｎ  Ｉｓｃｈｅｍｉｃ  Ｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ，  Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，  ＰＬｏＳ  ＯＮＥ  ７  （１２），  ｅ５２６９９  （２０１２）］。さらなる炎症腎臓疾患でのＭＭＰ−１２の関与のように、虚血性腎臓損傷において有意に高いＭＭＰ−１２発現も知られている［ＪＮＫ  ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ａｎｄ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ｒｅｎａｌ  ｉｓｃｈａｅｍｉａ／  ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ  ｉｎｊｕｒｙ，  Ｋａｎｅｌｌｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎｅｐｈｒｏｌ．  Ｄｉａｌ．  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ．  ２５，  ２８９８−２９０８  （２０１０）；  Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ  Ｍｅｔａｌｌｏｅｌａｓｔａｓｅ  ａｓ  ａ  Ｍａｊｏｒ  Ｆａｃｔｏｒ  ｆｏｒ  Ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ  Ｉｎｊｕｒｙ  ｉｎ  Ａｎｔｉ−Ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ  Ｂａｓｅｍｅｎｔ  Ｍｅｍｂｒａｎｅ  Ｎｅｐｈｒｉｔｉｓ，  Ｋａｎｅｋｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎ．  １７０，  ３３７７−３３８５  （２００３）；  Ｒｏｌｅ  ｆｏｒ  Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ  Ｍｅｔａｌｌｏｅｌａｓｔａｓｅ  ｉｎ  Ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ  Ｂａｓｅｍｅｎｔ  Ｍｅｍｂｒａｎｅ  Ｄａｍａｇｅ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  Ａｌｐｏｒｔ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ，  Ｒａｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ．  Ｊ．  Ｐａｔｈｏｌ．  １６９，  ３２−４６  （２００６）；  Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍｅｔｚｉｎｃｉｎｓ  ｉｎ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｒｅｎａｌ  ａｌｌｏｇｒａｆｔ  ｒｅｊｅｃｔｉｏｎ：  Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｍａｒｋｅｒｓ  ａｎｄ  ｎｏｖｅｌ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｔａｒｇｅｔｓ，  Ｂｅｒｔｈｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ．  ６９，  ３５８−３６８  （２００６）；  Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ  ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｒｅｎａｌ  ｄａｍａｇｅ  ａｒｅ  ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｏｆ  Ｍａｔｒｉｘ  Ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ  １２  （ＭＭＰ−１２）  ｉｎ  ｔｈｅ  ｏｂｓｔｒｕｃｔｅｄ  ｋｉｄｎｅｙ，  Ａｂｒａｈａｍ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎｅｐｈｒｏｌｏｇｙ  １７，  ３２２−３２９  （２０１２）］。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００２０】
【非特許文献１】Ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ａ  Ｂｒｏａｄ  Ｓｐｅｃｔｒｕｍ  ｏｆ  Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｍａｔｒｉｘ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｂｙ  Ｈｕｍａｎ  Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ  Ｅｌａｓｔａｓｅ，  Ｇｒｏｎｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．  ２７２，  １２１８９−１２１９４  （１９９７）
【非特許文献２】Ａ  ｎｅｗ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ  ｒｏｌｅ  ｆｏｒ  ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ−１２  ｉｎ  ａｎｔｉｖｉｒａｌ  ｉｍｍｕｎｉｔｙ，  Ｍａｒｃｈａｎｔ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄ．  ２０，  ４９３−５０２  （２０１４）
【非特許文献３】Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ  ｍｅｔａｌｌｏｅｌａｓｔａｓｅ  （ＭＭＰ−１２）  ａｓ  ａ  ｔａｒｇｅｔ  ｆｏｒ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  ｄｉｓｅａｓｅｓ，  Ｌａｇｅｎｔｅ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．  Ｔｈｅｒ．  Ｔａｒｇｅｔｓ  １３，  ２８７−２９５  （２００９）
【非特許文献４】Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ  Ｍｅｔａｌｌｏｅｌａｓｔａｓｅ  ａｓ  ａ  ｍａｊｏｒ  Ｆａｃｔｏｒ  ｆｏｒ  Ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ  Ｉｎｊｕｒｙ  ｉｎ  Ａｎｔｉ−Ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ  Ｂａｓｅｍｅｎｔ  Ｍｅｍｂｒａｎｅ  Ｎｅｐｈｒｉｔｉｓ，  Ｋａｎｅｋｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １７０，  ３３７７−３３８５  （２００３）
【非特許文献５】Ａ  Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  Ｍａｔｒｉｘ  Ｍｅｔａｌｌｏｅｌａｓｔａｓｅ−１２  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  Ｒｅｔａｒｄｓ  Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｔｉｃ  Ｐｌａｑｕｅ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｉｎ  Ａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅ  Ｋｎｏｃｋ−ｏｕｔ  Ｍｉｃｅ，  Ｊｏｈｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ．  Ｔｈｒｏｍｂ．  Ｖａｓｃ．  Ｂｉｏｌ．  ３１，  ５２８−５３５  （２０１１）
【非特許文献６】Ｉｍｐａｉｒｅｄ  Ｃｏｒｏｎａｒｙ  Ｃｏｌｌａｔｅｒａｌ  Ｇｒｏｗｔｈ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ  Ｉｓ  ｉｎ  Ｐａｒｔ  Ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｂｙ  Ｍａｔｒｉｘ  Ｍｅｔａｌｌｏｅｌａｓｔａｓｅ  １２−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ  ａｎｄ  Ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎ，  Ｄｏｄｄ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ．  Ｔｈｒｏｍｂ．  Ｖａｓｃ．  Ｂｉｏｌ．  ３３，  １３３９−１３４９  （２０１３）
【非特許文献７】Ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ  ｐｈａｒｍａｃｏｇｅｎｏｍｉｃｓ  ｉｎ  ｎｏｎ−ｓｍａｌｌ−ｃｅｌｌ  ｌｕｎｇ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ，  Ｃｈｅｔｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｈａｒｍａｃｏｇｅｎｏｍｉｃｓ  １２，  ５３５−５４６  （２０１１）
【非特許文献８】Ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ  ｔｒｉａｄ  ｉｎ  ＣＯＰＤ：  ｏｘｉｄａｔｉｖｅ  ｓｔｒｅｓｓ，  ｐｒｏｔｅａｓｅ−ａｎｔｉｐｒｏｔｅａｓｅ  ｉｍｂａｌａｎｃｅ，  ａｎｄ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ，  Ｆｉｓｃｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｉｎｔ．  Ｊ．  ＣＯＰＤ  ６，  ４１３−４２１  （２０１１）
【非特許文献９】Ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ａｓ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｆｏｒ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ａｎｄ  ｖａｓｃｕｌａｒ  ｄｉｓｅａｓｅｓ，  Ｈｕ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．  ６，  ４８０−４９８  （２００７）
【非特許文献１０】Ｒｅｃｅｎｔ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｍａｔｒｉｘ  Ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ａｉｄｅｄ  ｂｙ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ  Ｓｔｕｄｉｅｓ，  Ｂ．Ｇ．  Ｒａｏ，  Ｃｕｒｒ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｄｅｓ．  １１，  ２９５−３２２  （２００５）
【非特許文献１１】Ｖａｌｉｄａｔｉｎｇ  ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏ  ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ  ａｓ  ｄｒｕｇ  ｔａｒｇｅｔｓ  ａｎｄ  ａｎｔｉ−ｔａｒｇｅｔｓ  ｆｏｒ  ｃａｎｃｅｒ  ｔｈｅｒａｐｙ，  Ｏｖｅｒａｌｌ  ＆  Ｋｌｅｉｆｅｌｄ，  Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖ．  Ｃａｎｃｅｒ  ６，  ２２７−２３９  （２００６）
【非特許文献１２】Ａ  Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  Ｍａｔｒｉｘ  Ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅａｓｅ  １２  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｆｏｒ  Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｃｈｒｏｎｉｃ  Ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ  Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  Ｄｉｓｅａｓｅ  （ＣＯＰＤ）：  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ｏｆ  （Ｓ）−２−（８−（Ｍｅｔｈｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｄｉｂｅｎｚｏ［ｂ，ｄ］ｆｕｒａｎ−３−ｓｕｌｆｏｎａｍｉｄｏ）−３−ｍｅｔｈｙｌｂｕｔａｎｏｉｃ  ａｃｉｄ  （ＭＭＰ４０８），  Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ５２，  １７９９−１８０２  （２００９）
【非特許文献１３】Ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ−１２  ｉｓ  ａ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｔａｒｇｅｔ  ｆｏｒ  ａｓｔｈｍａ  ｉｎ  ｃｈｉｌｄｒｅｎ  ａｎｄ  ｙｏｕｎｇ  ａｄｕｌｔｓ，  Ｍｕｋｈｏｐａｄｈｙａｙ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １２６，  ７０−７６  （２０１０）
【非特許文献１４】Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ａｎ  ｏｒａｌ  ＭＭＰ−９  ａｎｄ  −１２  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ，  ＡＺＤ１２３６，  ｏｎ  ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ  ｉｎ  ｍｏｄｅｒａｔｅ／ｓｅｖｅｒｅ  ＣＯＰＤ：  Ａ  ｒａｎｄｏｍｉｓｅｄ  ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ｔｒｉａｌ，  Ｄａｈｌ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｕｌｍ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  Ｔｈｅｒａｐ．  ２５，  １６９−１７７  （２０１２）
【非特許文献１５】Ｃｈｒｏｎｉｃ  Ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ  Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  Ｄｉｓｅａｓｅ，  Ｐ．  Ｊ．    Ｂａｒｎｅｓ，  Ｎ．  Ｅｎｇｌ．  Ｊ．  Ｍｅｄ．  ３４３，  ２６９−２８０  （２０００）
【非特許文献１６】Ｅｌｅｖａｔｅｄ  ＭＭＰ−１２  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｌｅｖｅｌｓ  ｉｎ  ｉｎｄｕｃｅｄ  ｓｐｕｔｕｍ  ｆｒｏｍ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ＣＯＰＤ，  Ｄｅｍｅｄｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｔｈｏｒａｘ  ６１，  １９６−２０１  （２００６）
【非特許文献１７】Ｐａｔｔｅｒｎｓ  ｏｆ  ａｉｒｗａｙ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ＭＭＰ−１２  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  ｓｍｏｋｅｒｓ  ａｎｄ  ｅｘ−ｓｍｏｋｅｒｓ  ｗｉｔｈ  ＣＯＰＤ，  Ｂａｂｕｓｙｔｅ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｒｅｓｐｉｒ．  Ｒｅｓ．  ８，  ８１−９０  （２００７）
【非特許文献１８】Ｃｏｍｍｏｎａｌｉｔｉｅｓ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ｔｈｅ  ｐｒｏ−ｆｉｂｒｏｔｉｃ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｉｎ  ＣＯＰＤ  ａｎｄ  ＩＰＦ，  Ｌ．Ａ．  Ｍｕｒｒａｙ，  Ｐｕｌｍ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  Ｔｈｅｒａｐ．  ２５，  ２７６−２８０  （２０１２）；
【非特許文献１９】Ｔｈｅ  ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｏｆ  ＣＯＰＤ  ａｎｄ  ＩＰＦ：  ｄｉｓｔｉｎｃｔ  ｈｏｒｎｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｓａｍｅ  ｄｅｖｉｌ？，  Ｃｈｉｌｏｓｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｒｅｓｐｉｒ．  Ｒｅｓ．  １３：３  （２０１２）
【非特許文献２０】Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ  Ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｓ  ＭＭＰ−１２  ａｎｄ  ＡＤＡＭＤＥＣ１  ａｓ  Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  Ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ  Ｍｅｄｉａｔｏｒｓ  ｏｆ  Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  Ｓａｒｃｏｉｄｏｓｉｓ，  Ｃｒｏｕｓｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ．  Ｊ．  Ｒｅｓｐｉｒ．  Ｃｒｉｔ．  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．  １７９，  ９２９−９３８  （２００９）
【非特許文献２１】Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｍａｔｒｉｘ  Ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ−１２  Ｐｒｏｍｏｔｅｒ  Ｒｅｇｉｏｎ  ｗｉｔｈ  Ｓｙｓｔｅｍｉｃ  Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  ｉｎ  ａｎ  Ｉｔａｌｉａｎ  Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ，  Ｍａｎｅｔｔｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．  ３７，  １８５２−１８５７  （２０１０）
【非特許文献２２】Ｉｎｃｒｅａｓｅｄ  ｓｅｒｕｍ  ｌｅｖｅｌｓ  ａｎｄ  ｔｉｓｓｕｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ−１２  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｓｙｓｔｅｍｉｃ  ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ：  ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ｓｅｖｅｒｉｔｙ  ｏｆ  ｓｋｉｎ  ａｎｄ  ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  ｆｉｂｒｏｓｉｓ  ａｎｄ  ｖａｓｃｕｌａｒ  ｄａｍａｇｅ，  Ｍａｎｅｔｔｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｎｎ．  Ｒｈｅｕｍ．  Ｄｉｓ．  ７１，  １０６４−１０７０  （２０１２）
【非特許文献２３】Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ  Ｍｅｔａｌｌｏｅｌａｓｔａｓｅ  （ＭＭＰ−１２）  Ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  Ｍｉｔｉｇａｔｅｓ  Ｒｅｔｉｎａｌ  Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｉｎ  Ｉｓｃｈｅｍｉｃ  Ｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ，  Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，  ＰＬｏＳ  ＯＮＥ  ７  （１２），  ｅ５２６９９  （２０１２）
【非特許文献２４】ＪＮＫ  ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ａｎｄ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ｒｅｎａｌ  ｉｓｃｈａｅｍｉａ／  ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ  ｉｎｊｕｒｙ，  Ｋａｎｅｌｌｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎｅｐｈｒｏｌ．  Ｄｉａｌ．  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ．  ２５，  ２８９８−２９０８  （２０１０）
【非特許文献２５】Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ  Ｍｅｔａｌｌｏｅｌａｓｔａｓｅ  ａｓ  ａ  Ｍａｊｏｒ  Ｆａｃｔｏｒ  ｆｏｒ  Ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ  Ｉｎｊｕｒｙ  ｉｎ  Ａｎｔｉ−Ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ  Ｂａｓｅｍｅｎｔ  Ｍｅｍｂｒａｎｅ  Ｎｅｐｈｒｉｔｉｓ，  Ｋａｎｅｋｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎ．  １７０，  ３３７７−３３８５  （２００３）
【非特許文献２６】Ｒｏｌｅ  ｆｏｒ  Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ  Ｍｅｔａｌｌｏｅｌａｓｔａｓｅ  ｉｎ  Ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ  Ｂａｓｅｍｅｎｔ  Ｍｅｍｂｒａｎｅ  Ｄａｍａｇｅ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  Ａｌｐｏｒｔ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ，  Ｒａｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ．  Ｊ．  Ｐａｔｈｏｌ．  １６９，  ３２−４６  （２００６）
【非特許文献２７】Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍｅｔｚｉｎｃｉｎｓ  ｉｎ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｒｅｎａｌ  ａｌｌｏｇｒａｆｔ  ｒｅｊｅｃｔｉｏｎ：  Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｍａｒｋｅｒｓ  ａｎｄ  ｎｏｖｅｌ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｔａｒｇｅｔｓ，  Ｂｅｒｔｈｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ．  ６９，  ３５８−３６８  （２００６）
【非特許文献２８】Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ  ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｒｅｎａｌ  ｄａｍａｇｅ  ａｒｅ  ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｏｆ  Ｍａｔｒｉｘ  Ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ  １２  （ＭＭＰ−１２）  ｉｎ  ｔｈｅ  ｏｂｓｔｒｕｃｔｅｄ  ｋｉｄｎｅｙ，  Ａｂｒａｈａｍ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎｅｐｈｒｏｌｏｇｙ  １７，  ３２２−３２９  （２０１２）］。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２１】
従って、本発明の目的は、強力な、選択的および特異的ヒトマクロファージエラスターゼ（ＨＭＥ／ＭＭＰ−１２）阻害剤として働き、従って特に気道、肺および心血管系の疾患の治療および／または予防に好適である新規物質を確認および提供することにあった。
【００２２】
特許出願ＷＯ９６／１５０９６−Ａ１、ＷＯ９７／４３２３７−Ａ１、ＷＯ９７／４３２３８−Ａ１、ＷＯ９７／４３２３９−Ａ１、ＷＯ９７／４３２４０−Ａ１、ＷＯ９７／４３２４５−Ａ１およびＷＯ９７／４３２４７−Ａ１には、ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−３、ＭＭＰ−９および、これらより低い程度でＭＭＰ−１に対する阻害活性を有する４−アリール−および４−ビアリール−置換された４−オキソブタン酸誘導体が開示されており、この活性プロファイルから、これらの化合物は、特に骨関節炎、関節リウマチおよび腫瘍疾患の治療に好適であると考えられた。ＷＯ９８／０９９４０−Ａ１およびＷＯ９９／１８０７９−Ａ１には、非常に多様な疾患の治療に好適なＭＭＰ−２、ＭＭＰ−３および／またはＭＭＰ−１３の阻害剤としてのさらなるビアリールブタン酸誘導体が開示されている。ＷＯ００／４０５３９−Ａ１は、これら化合物によるＭＭＰ−２、ＭＭＰ−３、ＭＭＰ−８、ＭＭＰ９、ＭＭＰ−１２およびＭＭＰ−１３の異なった形で顕著な阻害に基づく、肺および気道の疾患の治療のための４−ビアリール−４−オキソブタン酸類の使用を特許請求している。さらに、ＷＯ２０１２／０１４１１４−Ａ１には３−ヒドロキシプロピオン酸誘導体が記載されており、ＷＯ２０１２／０３８９４２−Ａ１には二重ＭＭＰ９／１２阻害剤としてのオキシ−またはスルホニル酢酸誘導体が記載されている。
【００２３】
しかしながら、上記で記載の目的の背景に対して、先行技術からのこれらのＭＭＰ阻害剤が多くの場合、例えば特にはＭＭＰ−１２に対する不十分な阻害効力、他のＭＭＰ類と比較したＭＭＰ−１２に対する不十分な選択性および／または限られた代謝安定性などの欠点を有することが見出された。
【００２４】
ＷＯ２００４／０９２１４６−Ａ２、ＷＯ２００４／０９９１６８−Ａ２、ＷＯ２００４／０９９１７０−Ａ２、ＷＯ２００４／０９９１７１−Ａ２、ＷＯ２００６／０５００９７−Ａ１およびＷＯ２００６／０５５６２５−Ａ２において、さらなるアリールアルカンカルボン酸誘導体が、糖尿病、癌疾患および神経変性疾患の治療のためのタンパク質−チロシン−ホスファターゼ１Ｂ（ＰＴＰ−１Ｂ）の阻害剤として記載されている。
【００２５】
驚くべきことに、ある種の２，５−ジ置換されたシクロペンタンカルボン酸誘導体が、先行技術から公知の化合物と比較して、活性強度およびヒトマクロファージエラスターゼ（ＨＭＥ／ｈＭＭＰ−１２）に対する選択性に関して大幅に改善されたプロファイルを有することが認められている。さらに、本発明による化合物は、アルブミンなどの血漿構成要素への非特異的結合が低いことを示しており、さらにはそれらは、低いイン・ビボクリアランスをおよび良好な代謝安定性を有する。この全体的な特性プロファイルは、本発明による化合物に関して、低い服用性、ならびにより高い標的化作用機序の結果として、治療法中の望ましくない副作用出現のリスク低下を示唆するものである。
【００２６】
本発明による化合物はさらに、マウスのＭＭＰ−１２（マウスマクロファージエラスターゼ、ＭＭＥとも称される）およびラットのＭＭＰ−１２のような齧歯類のオーソロガスＭＭＰ−１２ペプチダーゼ類に対する顕著な阻害活性および選択性を特徴とする。これは、上記疾患の各種確立された動物モデルにおける物質のより総合的な前臨床評価を容易にするものである。
【課題を解決するための手段】
【００２７】
本発明は、単離型、エナンチオマー的に純粋な形もしくは化合物の混合物の形態での次の化合物：下記式（Ｉ−Ａ）の（１Ｓ，２Ｓ，５Ｒ）−２−［４−（ベンジルオキシ）ベンゾイル］−５−［（４−オキソ−１，２，３−ベンゾトリアジン−３（４Ｈ）−イル）メチル］シクロペンタンカルボン酸および下記式（Ｉ−Ｂ）の（１Ｒ，２Ｒ，５Ｓ）−２−［４−（ベンジルオキシ）ベンゾイル］−５−［（４−オキソ−１，２，３−ベンゾトリアジン−３（４Ｈ）−イル）メチル］シクロペンタンカルボン酸ならびにこれら化合物もしくはそれらの混合物の塩、溶媒和物および塩の溶媒和物を提供する。
【化１】
2017511319.tif 000002
2017511319.tif 000003
【００２８】
本発明の特定の実施形態は、ラセミ混合物の形態での、またはそのラセミ混合物の塩、溶媒和物もしくは塩の溶媒和物としての式（Ｉ−Ａ）および（Ｉ−Ｂ）の化合物に関する。
【００２９】
本発明の文脈において、好ましいものは、エナンチオマー的に純粋な形態での下記式（Ｉ−Ａ）：
【化２】
2017511319.tif 000004
【００３０】
の化合物（１Ｓ，２Ｓ，５Ｒ）−２−［４−（ベンジルオキシ）ベンゾイル］−５−［（４−オキソ−１，２，３−ベンゾトリアジン−３（４Ｈ）−イル）メチル］シクロペンタンカルボン酸、またはそれの塩、溶媒和物もしくは塩の溶媒和物である。
【発明を実施するための形態】
【００３１】
本発明の文脈において、「エナンチオマー的に純粋」という用語は、キラル中心の絶対配置に関して対象の化合物が、９５％強、好ましくは９８％強のエナンチオマー過剰で存在することを意味するものと理解されるべきである。エナンチオマー過剰ｅｅは、この場合、下記式を用いて、キラル相でのＨＰＬＣ分析クロマトグラムを評価することによって計算される。
【数１】
2017511319.tif 000005
【００３２】
以下、狭い意味での式（Ｉ−Ａ）および（Ｉ−Ｂ）の化合物およびこれら化合物の混合物およびこれら化合物の塩、溶媒和物および塩の溶媒和物およびさらなる意味でのそれらの混合物は、まとめて「本発明による化合物」と称される。
【００３３】
本発明の文脈において、塩は好ましくは、生理的に許容される塩である。自体が薬学的応用に適さないが、例えば本発明による化合物の単離、精製もしくは貯蔵には使用可能である塩も包含される。
【００３４】
本発明による化合物の生理的に許容される塩には、特には、従来の塩基から誘導される塩、例えば好ましくは、アルカリ金属塩（例えばナトリウムおよびカリウム塩）、アルカリ土類金属塩（例えばカルシウムおよびマグネシウム塩）、亜鉛塩およびアンモニアもしくは１から１６個の炭素原子を有する有機アミンから誘導されるアンモニウム塩、例えば好ましくはエチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−エチルジイソプロピルアミン、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トロメタミン、ジメチルアミノエタノール、ジエチルアミノエタノール、コリン、プロカイン、ジシクロヘキシルアミン、ジベンジルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ−メチルピペリジン、アルギニン、リジンおよび１，２−エチレンジアミンの塩などがある。
【００３５】
本発明の文脈において、溶媒和物は、溶媒分子による配位によって固体または液体状態で錯体を形成する本発明による化合物の形態と説明される。水和物は、配位が水によるものである溶媒和物の特定の形態である。本発明の文脈において好ましい溶媒和物は水和物である。
【００３６】
本発明はまた、本発明による化合物の全ての好適な同位体型を包含するものである。本発明による化合物の同位体型は、この場合、本発明による化合物内の少なくとも１個の原子が同一原子番号であるが、通常もしくは支配的に天然に存在する原子質量とは異なる原子質量を有する別の原子に交換されている化合物を意味するものと理解される。本発明による化合物に組み込むことができる同位体の例には、水素、炭素、窒素および酸素の同位体、例えば２Ｈ（重水素）、３Ｈ（三重水素）、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１７Ｏおよび１８Ｏである。本発明による化合物の特定の同位体型、特には１以上の放射性同位体が組み込まれているものが、例えば、作用機序や身体での活性化合物分布を調べる上で有用であることができ、製造および検出が比較的容易であることから、特には３Ｈまたは１４Ｃ同位体で標識された化合物がこの目的に関しては好適である。さらに、同位体、例えば重水素を組み込むことで、化合物の代謝安定性が高くなることで特定の治療上の利点が得られる可能性があり、例えば身体での半減期の延長または必要な活性用量の低減につながり、従って、本発明による化合物のそのような修飾は、一部の場合では、本発明の好ましい実施形態も構成し得る。本発明による化合物の同位体型は、当業者には公知の一般的な方法によって製造することができ、例えば下記に記載の方法および作業例で報告の手順により、特定の試薬および／またはそこでの原料化合物の相当する同位体修飾を用いることで製造可能である。
【００３７】
さらに、本発明は、本発明による化合物のプロドラッグも包含する。「プロドラッグ」という用語は、この場合、自体が生理活性であるか不活性であり得るが、身体中に存在する間に、例えば代謝経路もしくは加水分解経路によって本発明による化合物に変換される化合物を指す。
【００３８】
特に、本発明は、プロドラッグとして、本発明による式（Ｉ−Ａ）および（Ｉ−Ｂ）のカルボン酸の加水分解可能なエステル誘導体を包含する。これらは、生理的媒体中、下記で記載の生物試験の条件下で、特には酵素経路もしくは化学的経路によってイン・ビボで加水分解されて、主要な生理活性化合物としての遊離カルボン酸となり得るエステルを意味するものと理解すべきである。アルキル基が直鎖または分岐であることができる（Ｃ１−Ｃ４）−アルキルエステルが、そのようなエステルとして好ましい。特に好ましいものは、メチル、エチルまたはｔｅｒｔ−ブチルエステルである。
【００３９】
本発明はさらに、下記式（ＩＩ）のエキソ−２−（トリメチルシリル）エチル２−オキソビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−カルボキシレート：
【化３】
2017511319.tif 000006
【００４０】
を、下記式（ＩＩＩ）のフェニル−グリニャル化合物：
【化４】
2017511319.tif 000007
【００４１】
［式中、Ｘは塩素、臭素またはヨウ素である。］と反応させて、下記式（ＩＶ）の付加物：
【化５】
2017511319.tif 000008
【００４２】
を得て、
次に、下記式（Ｖ）のイン・サイチュで製造されたメシレート：
【化６】
2017511319.tif 000009
【００４３】
を介してヒドロキシ基を脱離させて、下記式（ＶＩ）のオレフィン：
【化７】
2017511319.tif 000010
【００４４】
を得て、
次に、触媒としての四酸化オスミウムとともにＮ−メチルモルホリン−Ｎ−オキサイドで酸化を行って、下記式（ＶＩＩ）のシス−１，２−ジオール：
【化８】
2017511319.tif 000011
【００４５】
を得て、
次に、この二環式ジオールを、四酢酸鉛または過ヨウ素酸ナトリウムを用いて開裂させて、２−ベンゾイル−５−ホルミルシクロペンタンカルボン酸エステル（ＶＩＩＩ−Ａ）および（ＶＩＩＩ−Ｂ）のラセミ混合物：
【化９】
2017511319.tif 000012
2017511319.tif 000013
【００４６】
を得て、
この混合物を水素化ホウ素ナトリウムで還元して、ヒドロキシメチル化合物（ＩＸ−Ａ）および（ＩＸ−Ｂ）のラセミ混合物：
【化１０】
2017511319.tif 000014
2017511319.tif 000015
【００４７】
を得て、
次に、アルキルホスファンもしくはアリールホスファンおよびアゾジカルボキシレートの存在下に、下記式（Ｘ）の１，２，３−ベンゾトリアジン−４（３Ｈ）−オン：
【化１１】
2017511319.tif 000016
【００４８】
との反応を行って、ベンゾトリアジノン誘導体（ＸＩ−Ａ）および（ＸＩ−Ｂ）のラセミ混合物：
【化１２】
2017511319.tif 000017
2017511319.tif 000018
【００４９】
を得て、
最後に、酸もしくはフッ化物試薬を用いて２−（トリメチルシリル）エチルエステル基を開裂させて、本発明によるシクロペンタンカルボン酸（Ｉ−Ａ）および（Ｉ−Ｂ）のラセミ混合物：
【化１３】
2017511319.tif 000019
【００５０】
を得て、
適宜に、得られた化合物（Ｉ−Ａ）および（Ｉ−Ｂ）の混合物を、エナンチオマー的に純粋な化合物に分離するか、および／または相当する（ｉ）溶媒および／または（ｉｉ）塩基を用いて、溶媒和物、塩および／または塩の溶媒和物に変換する、式（Ｉ−Ａ）および（Ｉ−Ｂ）の本発明による化合物の製造方法を提供する。
【００５１】
グリニャル反応（ＩＩ）＋（ＩＩＩ）→（ＩＶ）は、ジエチルエーテルまたはテトラヒドロフランなどのエーテル系溶媒中、−２０℃から＋２５℃の温度範囲で、一般的な条件下で行う。
【００５２】
過剰量の例えばトリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンまたはピリジンなどの一般的なアミン塩基の存在下に三級アルコール（ＩＶ）をメタンスルホニルクロライドと反応させることで、メシレート（Ｖ）を製造し、それをイン・サイチュでの反応条件下に脱離させてオレフィン（ＶＩ）とする。反応（ＩＶ）→（Ｖ）→（ＶＩ）は、不活性溶媒としてのジクロロメタンまたはクロロホルムなどのクロロ炭化水素中、−１０℃から＋２５℃の温度範囲で一般的条件下で行う。変換（ＩＶ）→（ＶＩ）（脱水）は別途において、過剰のピリジンの存在下にオキシ塩化リンまたは塩化チオニルで（ＩＶ）を処理することによっても行うことができる［例えば、Ｃ．Ａ．  Ｇｒｏｂ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｈｅｌｖ．  Ｃｈｉｍ．  Ａｃｔａ  ６６  （８），  ２６５６−２６６５（１９８３）参照］。
【００５３】
オレフィン（ＶＩ）のシス−１，２−ジオール（ＶＩＩ）へのビス−ヒドロキシ化は、公知の方法に従って、触媒の四酸化オスミウム（市販のｔｅｒｔ−ブタノールまたは水中溶液として）の存在下にＮ−メチルモルホリンＮ−オキサイド（ＮＭＯ）と反応させることで行う。その反応は通常、０℃から＋２５℃の温度範囲でテトラヒドロフランおよび／またはアセトンの水との混合物中で行う。
【００５４】
その後のジオール開裂（ＶＩＩ）→（ＶＩＩＩ−Ａ）／（ＶＩＩＩ−Ｂ）に好適な酸化剤は、特には四酢酸鉛または過ヨウ素酸ナトリウムである。四酢酸鉛との反応は好ましくは、メタノールなどのアルコール系溶媒中、−２０℃から＋２５℃の温度範囲で行う。過ヨウ素酸ナトリウムとの反応は通常、テトラヒドロフランおよび／またはアセトンの水との混合物中、０℃から＋２５℃の温度範囲で行う。ジオール開裂に過ヨウ素酸ナトリウムを用いる場合、変換（ＶＩ）→（ＶＩＩ）→（ＶＩＩＩ−Ａ）／（ＶＩＩＩ−Ｂ）は、「ワンポットプロセス」で、すなわち（ＶＩＩ）の中間的単離を行わずに行うこともできる。
【００５５】
ホルミル化合物（ＶＩＩＩ−Ａ）／（ＶＩＩＩ−Ｂ）の一級アルコール（ＩＸ−Ａ）／（ＩＸ−Ｂ）への還元は、メタノールまたはエタノールなどのアルコール系溶媒中、０℃から＋２５℃の温度範囲で、水素化ホウ素ナトリウムと反応させることで、公知の方法によって行う。
【００５６】
反応（ＩＸ−Ａ）／（ＩＸ−Ｂ）＋（Ｘ）→（ＸＩ−Ａ）／（ＸＩ−Ｂ）は、「ミツノブ反応」の一般的条件下、ホスフィンおよびアゾジカルボキシレートの存在下に行う［例えば、Ｄ．  Ｌ．  Ｈｕｇｈｅｓ，  Ｏｒｇ．  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ  ４２，  ３３５（１９９２）；Ｄ．  Ｌ．  Ｈｕｇｈｅｓ，  Ｏｒｇ．  Ｐｒｅｐ．  Ｐｒｏｃｅｄ．  Ｉｎｔ．  ２８（２），  １２７（１９９６）を参照する。］。ホスフィン成分として好適なものは、例えばトリフェニルホスフィン、トリ−ｎ−ブチルホスフィン、１，２−ビス（ジフェニルホスフィノ）エタン（ＤＰＰＥ）、ジフェニル（２−ピリジル）ホスフィン、（４−ジメチルアミノフェニル）ジフェニルホスフィンまたはトリス（４−ジメチルアミノフェニル）ホスフィンであり、使用可能なアゾジカルボキシレートは、例えばジエチルアゾジカルボキシレート（ＤＥＡＤ）、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（ＤＩＡＤ）、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルアゾジカルボキシレート、Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラメチルアゾジカルボサミド（ＴＭＡＤ）、１，１′−（アゾジカルボニル）ジピペリジン（ＡＤＤＰ）または４，７−ジメチル−３，５，７−ヘキサヒドロ−１，２，４，７−テトラゾシン−３，８−ジオン（ＤＨＴＤ）である。好ましくは、この場合、ジエチルアゾジカルボキシレート（ＤＥＡＤ）と組み合わせたトリ−ｎ−ブチルホスフィンを用いる。使用される不活性溶媒は好ましくは、テトラヒドロフラン、トルエンまたはこれら２種類の混合物である。その反応は概して、−２０℃から＋４０℃、好ましくは０℃から＋２５℃の温度範囲で行う。
【００５７】
工程段階（ＸＩ−Ａ）／（ＸＩ−Ｂ）→（Ｉ−Ａ）／（Ｉ−Ｂ）における２−（トリメチルシリル）エチルエステル基の開裂は、ジクロロメタンなどの不活性溶媒中、特にはトリフルオロ酢酸などの強酸を用いて、またはテトラヒドロフランなどのエーテル系溶媒中、特にフッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム（ＴＢＡＦ）などのフッ化物を用いて、一般的方法に従って行う。そのエステル開裂は通常、−２０℃から＋２５℃の温度範囲で行う。
【００５８】
本発明による化合物の混合物は、好適な場合には、中間体（ＩＸ−Ａ）／（ＩＸ−Ｂ）または（ＸＩ−Ａ）／（ＸＩ−Ｂ）の段階で既にエナンチオマー的に純粋な化合物に分離しても良く、次にそれをさらに、上記で記載の反応手順に従って別個に反応させる。立体異性体のそのような分離は、当業者に公知の一般的方法によって行うことができる。本発明の文脈において、好ましくは、キラル分離相でのクロマトグラフィー法を用いる。あるいは、カルボン酸（Ｉ−Ａ）／（Ｉ−Ｂ）の場合、分離は、キラル塩基を用いてジアステレオマー塩を介して行うこともできる。
【００５９】
エキソ−２−（トリメチルシリル）エチル２−オキソビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−カルボキシレート（ＩＩ）の製造は報告されている［ＷＯ９６／１５０９６、実施例３６０／段階１およびその文献で引用のさらなる文献を参照する。］。式（ＩＩＩ）および（Ｘ）の化合物は市販されているか、それ自体が文献に記載されており、またはそれらは文献で刊行の方法と同様に、当業者に明らかな方法で製造することができる。多くの詳細な手順も、実験の部において、出発化合物および中間体の製造に関するセクションにもあり得る。
【００６０】
本発明による化合物の製造を下記の反応図式にまとめてある。
【００６１】
図式
【化１４】
2017511319.tif 000020
【００６２】
本発明による化合物は、貴重な薬理特性を有し、ヒトおよび動物における疾患の予防および治療に用いることができる。
【００６３】
本発明による化合物は、ヒトマクロファージエラスターゼ（ＨＭＥ／ｈＭＭＰ−１２）の強力で非反応性の選択的阻害剤であり、それは、先行技術から公知の化合物と比較して、活性の強度および選択性の組み合わせに関して大幅に改善されたプロファイルを有する。さらに、本発明による化合物は、アルブミンなどの血漿構成成分への潜在的に競合性の非特異的結合の試験条件下であっても高ＨＭＥ−阻害活性を示す。さらに、本発明による化合物は、低イン・ビボクリアランスおよび良好な代謝安定性を有する。この特性プロファイル全体で、本発明による化合物に関して、低用量および前記のより標的性の作用機序の結果として、治療時の望ましくない副作用出現のリスク低下が示唆される。
【００６４】
従って、本発明による化合物は、疾患および病理過程、マクロファージエラスターゼ（ＨＭＥ／ｈＭＭＰ−１２）が感染性もしくは非感染性炎症事象および／または組織もしくは血管再構築の過程で関与するものの治療および／または予防において特定の範囲で好適である。
【００６５】
本発明の文脈において、それらには特には、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、喘息および間質性肺疾患（ＩＬＤ）の群などの気道および肺の疾患、さらには動脈硬化症および動脈瘤などの心血管系の疾患などがある。
【００６６】
慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）の症状には、特には、特にその疾患の急性増悪段階（ＡＥ−ＣＯＰＤ）での、肺気腫、例えば、喫煙誘発の肺気腫、慢性気管支炎（ＣＢ）、ＣＯＰＤにおける肺性高血圧（ＰＨ−ＣＯＰＤ）、気管支拡張症（ＢＥ）およびこれらの組み合わせなどがある。
【００６７】
喘息の症状には、間欠的もしくは持続的経過を取る多様な重度の喘息性疾患、例えば難治性喘息、気管支喘息、アレルギー性喘息、内因性喘息、外因性喘息および医薬もしくは埃によって誘発される喘息などがある。
【００６８】
間質性肺疾患（ＩＬＤ）の群には、特発性肺線維症（ＩＰＦ）、肺サルコイドーシスおよび急性間質性肺炎、非特異的間質性肺炎、リンパ球様間質性肺炎、間質性肺疾患を伴う呼吸細気管支炎、特発性器質化肺炎、剥離性間質性肺炎および分類不能特発性間質性肺炎、さらには肉芽腫性間質性肺疾患、起源既知の間質性肺疾患および起源未知の他の間質性肺疾患などがある。
【００６９】
本発明による化合物は、気道および肺の他の疾患、例えば、肺動脈高血圧（ＰＡＨ）および他の形態の肺性高血圧（ＰＨ）、閉塞性細気管支炎症候群（ＢＯＳ）、急性呼吸器症候群（ＡＲＤＳ）、急性肺損傷（ＡＬＩ）、α−１−抗トリプシン欠乏症（ＡＡＴＤ）および嚢胞性線維症（ＣＦ）、各種形態の気管支炎（慢性気管支炎、感染性気管支炎、好酸球性気管支炎）、気管支拡張症、肺炎、農夫肺および関連疾患、感染性および非感染性咳および風邪（慢性炎症性咳、医原性咳）、鼻粘膜炎症（薬剤性鼻炎、血管運動神経性鼻炎および季節性アレルギー性鼻炎、例えば花粉症など）およびポリープの治療および／または予防にも使用可能である。
【００７０】
心血管系の疾患の群には、本発明の文脈において、特に動脈硬化症およびそれの二次疾患、例えば、頸部動脈の動脈硬化症（頸動脈硬化症）の場合の卒中、冠動脈の動脈硬化症の場合の心筋梗塞、足の動脈の動脈硬化症の結果としての末梢動脈閉塞性疾患（ｐＡＯＤ）、さらに動脈瘤、特には例えば動脈硬化症、高血圧、傷害および炎症、感染（例えば、リウマチ熱、梅毒、ライムボレリア症の場合）、遺伝性結合組織衰弱（例えば、マルファン症候群およびエーラー・ダンロス症候群の場合）の結果としての、または肺の右−左シャントまたはシャント依存性潅流を有する遺伝性心臓欠損の場合の大動脈への容積負荷の結果としての大動脈の動脈瘤、さらには川崎症候群からの疾患の過程における、そして大動脈弁の遺伝的欠損患者における脳の領域における冠状動脈での動脈瘤などがある。
【００７１】
さらに、本発明による化合物は、さらなる心臓血管疾患、例えば高血圧（高血圧症）、心不全、冠動脈性心疾患、安定および不安定狭心症、腎性高血圧、末梢血管および心血管障害、不整脈、心房性および心室性不整脈および伝導障害、例えば、ＩからＩＩＩ度の房室ブロック、上室性頻脈性不整脈、心房細動、心房粗動、心室細動、心室粗動、心室頻脈、トルサード・ド・ポアンツ頻拍、心房性および心室性期外収縮、房室接合部期外収縮、洞不全症候群、失神、房室結節リエントリー性頻拍、ウォルフ・パーキンソン・ホワイト症候群、急性冠症候群（ＡＣＳ）、自己免疫性心臓障害（心外膜炎、心内膜炎、弁膜炎、大動脈炎、心筋症）、ボクサー心筋症、ショック、例えば心原性ショック、敗血症ショックおよびアナフィラキシーショックの治療および／または予防に、血栓塞栓障害および虚血、例えば心筋虚血、心肥大、一過性および虚血性発作、子癇前症、炎症性心血管障害、冠動脈および末梢動脈の攣縮、浮腫形成、例えば、肺浮腫、脳浮腫、腎性浮腫または心不全によって引き起こされる浮腫、末梢循環障害、再灌流損傷、動脈および静脈血栓症、微量アルブミン尿、心筋不全、内皮機能不全、微小および大血管損傷（血管炎）の治療および／または予防に、さらには例えば、血栓溶解療法、経皮的血管形成術（ＰＴＡ）、経管的冠動脈形成術（ＰＴＣＡ）、心臓移植およびバイパス手術後の再狭窄の予防に用いることができる。
【００７２】
本発明の文脈において、「心不全」という用語は、心不全の急性型と慢性型の両方、およびより具体的なまたは関連する型の疾患、例えば、急性非代償性心不全、右心不全、左心不全、全心不全、虚血性心筋症、拡張型心筋症、肥大型心筋症、特発性心筋症、先天性心臓欠損、心臓弁欠損、心臓面欠損関連の心不全、僧帽弁狭窄、僧帽弁閉鎖不全、大動脈弁狭窄、大動脈弁閉鎖不全、三尖弁狭窄、三尖弁閉鎖不全、肺動脈弁狭窄、肺動脈弁閉鎖不全、混合型心臓弁欠損、心筋炎症（心筋炎）、慢性心筋炎、急性心筋炎、ウイルス性心筋炎、糖尿病性心不全、アルコール性心筋症、心臓貯蔵障害、拡張期心不全および収縮期心不全を包含する。
【００７３】
本発明による化合物は、腎障害、特に、腎機能不全および腎不全を治療および／または予防するのにも好適である。本発明の文脈において、「腎機能不全」および「腎不全」という用語は、その急性症状と慢性症状の両方、ならびに基礎腎臓障害または関連の腎臓障害、例えば、腎低灌流、透析時低血圧、閉塞性尿路疾患、糸球体症、糸球体腎炎、急性糸球体腎炎、糸球体硬化、尿細管間質障害、腎症疾患、例えば、原発性および先天性腎疾患、腎炎、免疫学的腎障害、例えば、移植腎拒絶反応およびアルポート症候群、免疫複合体誘発性腎障害、毒性物質によって誘発される腎症、造影剤によって誘発される腎症、糖尿病性および非糖尿病性腎症、腎盂腎炎、腎嚢胞、腎硬化症、高血圧性腎硬化症およびネフローゼ症候群（例えば、異常に低下したクレアチニンおよび／または水分排泄、異常に上昇した尿素、窒素、カリウムおよび／またはクレアチニンの血中濃度、例えば、グルタミルシンテターゼなどの腎臓酵素の変化した活性、変化した尿浸透圧または尿量、増加した微量アルブミン尿、マクロアルブミン尿、糸球体および細動脈の病変、尿細管拡張、高リン酸塩血症ならびに／あるいは透析の必要性によって診断的に特性決定可能である）を包含する。本発明はまた、腎機能不全、例えば、高血圧、肺水腫、心不全、尿毒症、貧血、電解質異常（例えば、高カリウム血症、高ナトリウム血症）ならびに骨および炭水化物代謝の障害を治療および／または予防するための本発明による化合物の使用も含む。
【００７４】
さらに、本発明による化合物は、泌尿器科障害、例えば、良性前立腺症候群（ＢＰＳ）、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、良性前立腺腫脹（ＢＰＥ）、膀胱下尿道閉塞（ＢＯＯ）、下部尿路症候群（ＬＵＴＳ）、神経性過活動膀胱（ＯＡＢ）、失禁、例えば、混合型尿失禁、切迫性尿失禁、ストレス性尿失禁または溢流性尿失禁（ＭＵＩ、ＵＵＩ、ＳＵＩ、ＯＵＩ）、骨盤痛、さらには勃起不全および、男性および女性性機能障害の治療および／または予防に好適である。
【００７５】
さらに、本発明による化合物は、抗炎症作用を有するので、敗血症（ＳＩＲＳ）、多臓器不全（ＭＯＤＳ、ＭＯＦ）、腎臓の炎症性障害、慢性腸炎症（ＩＢＤ、クローン病、潰瘍性大腸炎）、膵炎、腹膜炎、膀胱炎、前立腺炎、副睾丸炎、卵巣炎、卵管炎、外陰膣炎、リウマチ様障害、中枢神経系の炎症障害、多発性硬化症、炎症性皮膚障害および炎症性眼球障害の治療および／または予防のための抗炎症剤として使用することができる。
【００７６】
さらに、本発明による化合物は、内臓、例えば、肺、心臓、腎臓、骨髄および特に、肝臓の線維性障害、ならびに皮膚科的線維症および線維性眼障害の治療および／または予防に好適である。本発明の文脈において、「線維性障害」という用語は、特には肝線維症、肝硬変、肺線維症、心内膜心筋線維症、腎症、糸球体腎炎、間質性腎線維症、糖尿病から生じる線維性損傷、骨髄線維症、腹膜線維症および同様の線維性障害、強皮症、限局性強皮症、ケロイド、肥厚性瘢痕、母斑、糖尿病網膜症、増殖性硝子体網膜症および結合組織の障害（例えば、サルコイドーシス）などの障害を含む。本発明による化合物は同様に、創傷治癒の促進に、例えば緑内障手術の結果としての術後瘢痕の抑制に、そして加齢もしくは角化皮膚について美容的に用いることができる。
【００７７】
本発明による化合物は、溶血性貧血などの貧血、特には異常血色素症、例えば鎌状赤血球貧血および地中海貧血症、巨赤芽球性貧血、鉄欠乏性貧血、急性血液喪失による貧血、置換術貧血（ｄｉｓｐｌａｃｅｍｅｎｔ  ａｎａｅｍｉａｓ）および再生不良性貧血の治療および／または予防に用いることもできる。
【００７８】
さらに、本発明による化合物は、例えば皮膚癌、脳腫瘍、乳癌、骨髄腫瘍、白血病、脂肪肉腫、消化管、肝臓、膵臓、肺、腎臓、尿管、前立腺および生殖器官の癌、さらにはリンパ球増殖系の悪性腫瘍、例えばホジキンおよび非ホジキンリンパ腫の治療に好適である。
【００７９】
さらに、本発明による化合物は、脂質代謝障害および異脂肪血症（低リポタンパク質血症、高トリグリセリド血症、高脂血症、複合型脂質異常症、高コレステロール血症、無βリポタンパク質血症、シトステロール血症）、黄色腫症、タンジアー病、脂肪症、肥満、代謝障害（メタボリック・シンドローム、高血糖、インシュリン依存性糖尿病、非インシュリン依存性糖尿病、妊娠性糖尿病、高インシュリン血症、インシュリン抵抗性、耐糖能障害および糖尿病性続発症、例えば網膜症、腎症およびニューロパシー）、消化管および腹部の障害（舌炎、歯肉炎、歯周炎、食道炎、好酸球性胃腸炎、肥満細胞症、クローン病、結腸炎、直腸炎、肛門そう痒症、下痢、セリアック病、肝炎、肝線維症、肝硬変、膵臓炎および胆嚢炎）、中枢神経系の障害および神経変性障害（脳卒中、アルツハイマー病、パーキンソン病、認知症、癲癇、鬱病、多発性硬化症）、免疫障害、甲状腺障害（甲状腺機能亢進症）、皮膚障害（乾癬、アクネ、湿疹、神経皮膚炎、例えば、アバクリブス皮膚炎（ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ  ａｂａｃｒｉｂｕｓ）、日光過敏性皮膚炎、アレルギー性皮膚炎、アンモニア皮膚炎、人工的皮膚炎、自家性皮膚炎（ａｕｔｏｇｅｎｉｃ  ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ）、アトピー性皮膚炎、熱性皮膚炎（ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ  ｃａｌｏｒｉｃａ）、火傷性皮膚炎（ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ  ｃｏｍｂｕｓｔｉｏｎｉｓ）、凍傷性皮膚炎、化粧品皮膚炎、痂皮性皮膚炎（ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ  ｅｓｃｈａｒｏｔｉｃａ）、剥脱性皮膚炎、壊疸性皮膚炎（ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ  ｇａｎｇｒａｅｎｏｓｅ）、うっ滞性皮膚炎、疱疹状皮膚炎、苔癬様皮膚炎、線状皮膚炎、悪性皮膚炎（ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ  ｍａｌｉｇｎａ）、薬剤発疹性皮膚炎（ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  ｅｒｕｐｔｉｏｎ  ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ）、手掌または足裏の皮膚炎（ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ  ｐａｌｍａｒｉｓ  ａｎｄ  ｐｌａｎｔａｒｉｓ）、寄生虫性皮膚炎、光アレルギー性接触皮膚炎、光毒性皮膚炎、膿疱性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、日光皮膚炎、中毒性皮膚炎、メレニー潰瘍、毒物皮膚炎、感染性皮膚炎、発熱性皮膚炎（ｐｙｒｏｇｅｎｉｃ  ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ）および口囲皮膚炎などの各種形態の皮膚炎、ならびに角膜炎、水疱症、血管炎、蜂巣炎、脂肪織炎、エリテマトーデス、紅斑症、リンパ腫、皮膚癌、スウィート症候群、ウェーバー・クリスチャン症候群（Ｗｅｂｅｒ−Ｃｈｒｉｓｔｉａｎ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、瘢痕形成、疣贅形成、凍瘡）、炎症性眼疾患（サルコイドーシス、眼瞼炎、結膜炎、虹彩炎、ブドウ膜炎、脈絡膜炎、眼球炎）、ウイルス性疾患（インフルエンザ、アデノおよびコロナウイルス、例えば、ＨＰＶ、ＨＣＭＶ、ＨＩＶ、ＳＡＲＳに起因する）、骨格の骨および関節ならびに骨格筋の障害（多種多様の形態の関節炎、例えば、アルカプトン尿性関節炎（ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ａｌｃａｐｔｏｎｕｒｉａ）、強直性関節炎（ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ａｎｋｙｌｏｓａｎｓ）、赤痢型関節炎（ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ｄｙｓｅｎｔｅｒｉｃａ）、滲出性関節炎（ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ｅｘｓｕｄａｔｉｖａ）、真菌性関節炎（ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ｆｕｎｇｏｓａ）、淋菌性関節炎（ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｉｃａ）、破壊性関節炎、乾癬性関節炎（ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ｐｓｏｒｉａｔｉｃａ）、化膿性関節炎（ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ｐｕｒｕｌｅｎｔａ）、リウマチ性関節炎、漿液性関節炎（ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ｓｅｒｏｓａ）、梅毒性関節炎（ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ｓｙｐｈｉｌｉｔｉｃａ）、結核性関節炎（ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓａ）、尿酸関節炎（ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ｕｒｉｃａ）、色素性絨毛結節性関節炎（ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ｖｉｌｌｏｎｏｄｕｌａｒｉｓ  ｐｉｇｍｅｎｔｏｓａ）、非定型関節炎、血友病性関節炎、若年性慢性関節炎、関節リウマチおよび転移性関節炎（ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ）、さらに、スティル症候群（Ｓｔｉｌｌ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、フェルティー症候群、シェーグレン症候群、クラットン症候群（Ｃｌｕｔｔｏｎ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、ポンセット症候群（Ｐｏｎｃｅｔ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、ポット症候群（Ｐｏｔｔ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）およびライター症候群（Ｒｅｉｔｅｒ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、多種多様な形態の関節症、例えば、変形性関節症（ａｒｔｈｒｏｐａｔｈｉｅ  ｄｅｆｏｒｍａｎｓ）、神経障害性関節症（ａｒｔｈｒｏｐａｔｈｉｅ  ｎｅｕｒｏｐａｔｈｉｃａ）、更年期関節症（ａｒｔｈｒｏｐａｔｈｉｅ  ｏｖａｒｉｐｒｉｖａ）、乾癬性関節症（ａｒｔｈｒｏｐａｔｈｉｅ  ｐｓｏｒｉａｔｉｃａ）および脊髄ろう性関節症（ａｒｔｈｒｏｐａｔｈｉｅ  ｔａｂｉｃａ）、全身性強皮症、多種多様な形態の炎症性ミオパチー、例えば、流行性ミオパチー（ｍｙｏｐａｔｈｉｅ  ｅｐｉｄｅｍｉｃａ）、線維性ミオパチー（ｍｙｏｐａｔｈｉｅ  ｆｉｂｒｏｓａ）、ミオグロビン尿性ミオパチー（ｍｙｏｐａｔｈｉｅ  ｍｙｏｇｌｏｂｉｎｕｒｉｃａ）、骨化性ミオパチー（ｍｙｏｐａｔｈｉｅ  ｏｓｓｉｆｉｃａｎｓ）、神経症性骨化性ミオパチー（ｍｙｏｐａｔｈｉｅ  ｏｓｓｉｆｉｃａｎｓ  ｎｅｕｒｏｔｉｃａ）、多発性進行性骨化性ミオパチー（ｍｙｏｐａｔｈｉｅ  ｏｓｓｉｆｉｃａｎｓ  ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖａ  ｍｕｌｔｉｐｌｅｘ）、化膿性ミオパチー（ｍｙｏｐａｔｈｉｅ  ｐｕｒｕｌｅｎｔａ）、リウマチ性ミオパチー（ｍｙｏｐａｔｈｉｅ  ｒｈｅｕｍａｔｉｃａ）、旋毛虫性ミオパチー（ｍｙｏｐａｔｈｉｅ  ｔｒｉｃｈｉｎｏｓａ）、熱帯性ミオパチー（ｍｙｏｐａｔｈｉｅ  ｔｒｏｐｉｃａ）およびチフス性ミオパチー（ｍｙｏｐａｔｈｉｅ  ｔｙｐｈｏｓａ）、ならびにギュンター症候群およびミュンヒマイアー症候群（Ｍｕｅｎｃｈｍｅｙｅｒ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ））、動脈の炎症性変化（多種多様な形態の動脈炎、例えば、動脈内膜炎、動脈中膜炎（ｍｅｓａｒｔｅｒｉｔｉｓ）、動脈周囲炎、汎動脈炎、リウマチ性動脈炎、変形性動脈炎（ａｒｔｅｒｉｔｉｓ  ｄｅｆｏｒｍａｎｓ）、側頭動脈炎（ａｒｔｅｒｉｔｉｓ  ｔｅｍｐｏｒａｌｉｓ）、頭蓋動脈炎（ａｒｔｅｒｉｔｉｓ  ｃｒａｎｉａｌｉｓ）、巨細胞性動脈炎（ａｒｔｅｒｉｔｉｓ  ｇｉｇａｎｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｉｓ）および肉芽腫性動脈炎（ａｒｔｅｒｉｔｉｓ  ｇｒａｎｕｌｏｍａｔｏｓａ）、ならびに、ホートン症候群、チャーグ・ストラウス症候群および高安動脈炎）、マックル・ウェルズ症候群、菊池病、多発性軟骨炎、強皮症（ｄｅｒｍａｔｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）、ならびに炎症性または免疫性成分を有する他の障害、例えば、白内障、悪液質、骨粗鬆症、痛風、失禁、ハンセン病（ｌｅｐｒａ）、セザリー症候群および腫瘍随伴症候群の治療および／または予防に、臓器移植後の拒絶反応に、そして、創傷治癒および血管形成（特に慢性創傷の場合）に使用することができる。
【００８０】
特性プロファイルから、本発明による化合物は、特に、気道および肺の疾患、主として慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、この場合は特には肺気腫、慢性気管支炎（ＣＢ）、ＣＯＰＤにおける肺性高血圧（ＰＨ−ＣＯＰＤ）および気管支拡張症（ＢＥ）、ならびにこれらの種類の病気の組み合わせ、特には急激に増悪する段階のＣＯＰＤ疾患（ＡＥ  ＣＯＰＤ）でのもの、さらには喘息および間質性肺疾患、この場合特には特発性肺線維症（ＩＰＦ）および肺サルコイドーシス、心血管系の疾患、特には動脈硬化症、具体的には頸動脈硬化症、さらにはウィルス性心筋炎、心筋症および動脈瘤、例えば卒中、心筋梗塞および末梢動脈閉塞性疾患（ｐＡＶＫ）などのそれらの続発症、さらには慢性腎臓疾患およびアルポート症候群の治療および／または予防に好適である。
【００８１】
ヒトにおける上記の十分に特性決定された疾患は、他の哺乳動物でも同等の病因でも生じ得るものであり、その場合も同様に、本発明の化合物によって治療することができる。
【００８２】
本発明の文脈において、「治療」または「治療すること」という用語は、疾患、状態、障害、傷害または健康問題の、またはこのような状態および／またはこのような状態の症状の発達、経過または進行の阻害、遅延、検査、軽減、減弱、制限、減少、抑制、忌避または治癒を含む。ここでは、「療法」は「治療」という用語と同義であると理解される。
【００８３】
「防止」、「予防」または「妨害」という用語は本発明の文脈において同義的に使用され、疾患、状態、障害、傷害または健康問題の罹患、経験、患いまたは保有、またはこのような状態および／またはこのような状態の症状の発達または進行の回避またはリスク低下を指す。
【００８４】
疾患、状態、障害、傷害または健康問題の治療または予防は、部分的であっても完全であってもよい。
【００８５】
本発明はさらに、障害、特別には上記の障害の治療および／または予防のための本発明による化合物の使用を提供する。
【００８６】
本発明はさらに、障害、特には上記の障害の治療および／または予防のための医薬を製造する上での本発明による化合物の使用を提供する。
【００８７】
本発明はさらに、障害、特には上記の障害の治療および／または予防のための、少なくとも一つの本発明による化合物を含む医薬を提供する。
【００８８】
本発明はさらに、障害、特には上記の障害の治療および／または予防方法での本発明による化合物の使用を提供する。
【００８９】
本発明はさらに、有効量の少なくとも一つの本発明による化合物を用いる、障害、特には上記の障害の治療および／または予防方法を提供する。
【００９０】
本発明による化合物は、単独で、または必要に応じて１以上の薬理活性物質と組み合わせて使用することができるが、ただしこの組み合わせは望ましくなく許容できない副作用に至らないものである。本発明はさらに、特に上記障害の治療および／または予防のための、少なくとも一つの本発明による化合物と、１以上の別の活性化合物とを含む医薬品を提供する。組み合わせに好適な活性化合物の好ましい例には、下記のものなどがある。
【００９１】
・例えば、例えばそして好ましくは吸入もしくは全身的に投与されるβ−アドレナリン受容体の作動薬（β−模倣薬）、吸入投与される抗ムスカリン様作動物質およびＰＤＥ４阻害剤の群からの慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）または気管支喘息の療法に使用される抗閉塞／気管支拡張剤；
・有機硝酸塩およびＮＯ供与体、例えば、ニトロプルシドナトリウム、ニトログリセリン、一硝酸イソソルビド、二硝酸イソソルビド、モルシドミンまたはＳＩＮ−１、ならびに吸入ＮＯ；
・環状グアノシン一リン酸（ｃＧＭＰ）および／または環状アデノシン一リン酸（ｃＡＭＰ）の分解を阻害する化合物、例えば、ホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）１、２、３、４および／または５の阻害剤、特にはＰＤＥ４阻害剤、例えばロフルミラスト、およびＰＤＥ５阻害剤、例えば、シルデナフィル、バルデナフィル、タダラフィル、ウデナフィル、ダサンタフィル、アバナフィル、ミロフェナフィルまたはロデナフィル；
・可溶性グアニル酸シクラーゼ（ｓＧＣ）のＮＯ非依存性およびヘム非依存性活性化剤、例えば特には、ＷＯ０１／１９３５５、ＷＯ０１／１９７７６、ＷＯ０１／１９７７８、ＷＯ０１／１９７８０、ＷＯ０２／０７０４６２およびＷＯ０２／０７０５１０に記載の化合物；
・可溶性グアニル酸シクラーゼ（ｓＧＣ）のＮＯ依存性であるがヘム依存性刺激剤、例えば特に、リオシグアトおよびＷＯ００／０６５６８、ＷＯ００／０６５６９、ＷＯ０２／４２３０１、ＷＯ０３／０９５４５１、ＷＯ２０１１／１４７８０９、ＷＯ２０１２／００４２５８、ＷＯ２０１２／０２８６４７およびＷＯ２０１２／０５９５４９に記載の化合物；
・ヒト好中球エラスターゼ（ＨＮＥ）を阻害する化合物、例えば特には、シベレスタット、ＤＸ８９０（レルトラン）、さらにはＷＯ２００４／０２０４１０、ＷＯ２００４／０２０４１２、ＷＯ２００４／０２４７００、ＷＯ２００４／０２４７０１、ＷＯ２００５／０８０３７２、ＷＯ２００５／０８２８６３、ＷＯ２００５／０８２８６４、ＷＯ２００９／０８０１９９、ＷＯ２００９／１３５５９９、ＷＯ２０１０／０７８９５３およびＷＯ２０１０／１１５５４８に記載の化合物；
・プロスタサイクリン類縁体およびＩＰ受容体作動薬、例えばおよび好ましくは、イロプロスト、ベラプロスト、トレプロスチニル、エポプロステノールまたはＮＳ−３０４；
・エンドセリン受容体拮抗薬、例えばおよび好ましくは、ボセンタン、ダルセンタン（ｄａｒｕｓｅｎｔａｎ）、アンブリセンタンまたはシタクスセンタン；
・抗炎症、免疫調節、免疫抑制性および／または細胞傷害薬、例えばおよび好ましくは、全身投与もしくは吸入投与されるコルチコステロイド類、さらにはアセチルシステイン、モンテルカスト、アザチオプリン、シクロホスファミド、ヒドロキシカルバミド、アジスロマイシン、ＩＦＮ−γ、ピルフェニドンまたはエタネルセプトの群からのもの；
・抗線維症薬、例えばおよび好ましくは、リゾホスファチジン酸受容体１（ＬＰＡ−１）拮抗薬、リシルオキシダーゼ（ＬＯＸ）阻害剤、リシルオキシダーゼ様−２阻害剤、血管作動性腸管ペプチド（ＶＩＰ）、ＶＩＰ類縁体、αｖβ６−インテグリン拮抗薬、コルヒチン、ＩＦＮ−β、Ｄ−ペニシラミン、ＷＮＴシグナル経路の阻害剤またはＣＣＲ２拮抗薬；
・脂質代謝を改変する活性化合物、例えばおよび好ましくは、甲状腺受容体作動薬、コレステロール合成阻害剤、例えばおよび好ましくは、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤またはスクアレン合成阻害剤、ＡＣＡＴ阻害剤、ＣＥＴＰ阻害剤、ＭＴＰ阻害剤、ＰＰＡＲ−α、ＰＰＡＲ−γおよび／またはＰＰＡＲ−δ作動薬、コレステロール吸収阻害剤、リパーゼ阻害剤、ポリマー性胆汁酸吸着剤、胆汁酸再吸収阻害剤およびリポタンパク質（ａ）拮抗薬の群からのもの；
・降圧活性化合物、例えばおよび好ましくは、カルシウム拮抗薬、アンギオテンシンＡＩＩ拮抗薬、ＡＣＥ阻害剤、バソペプチダーゼ阻害剤、エンドセリン拮抗薬、レニン阻害剤、α受容体遮断薬、β受容体遮断薬、鉱質コルチコイド受容体拮抗薬、さらには利尿薬の群からのもの；
・シグナル伝達カスケードを阻害する化合物、例えばおよび好ましくは、キナーゼ阻害剤の群からのもの、特にはチロシンキナーゼおよび／またはセリン／トレオニンキナーゼ阻害剤、例えばおよび好ましくは、ニンテダニブ、ダサチニブ、ニロチニブ、ボスチニブ、レゴラフェニブ、ソラフェニブ、スニチニブ、セジラニブ、アキシチニブ、テラチニブ、イマチニブ、ブリバニブ、パゾパニブ、バタラニブ、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ラパチニブ、カネルチニブ、レスタウルチニブ、ペリチニブ、セマクサニブまたはタンデュチニブの群からのもの；
・セロトニンのその受容体への結合を遮断する化合物、例えばおよび好ましくは、５−ＨＴ２Ｂ受容体の拮抗薬、例えばＰＲＸ−０８０６６；
・増殖因子、サイトカイン類およびケモカイン類の拮抗薬、例えばおよび好ましくは、ＴＧＦ−β、ＣＴＧＦ、ＩＬ−１、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１３およびインテグリン類の拮抗薬；
・Ｒｈｏキナーゼ阻害性化合物、例えばおよび好ましくは、ファスジル、Ｙ−２７６３２、ＳＬｘ−２１１９、ＢＦ−６６８５１、ＢＦ−６６８５２、ＢＦ−６６８５３、ＫＩ−２３０９５またはＢＡ−１０４９；
・可溶性エポキシド加水分解酵素（ｓＥＨ）を阻害する化合物、例えばＮ，Ｎ′−ジシクロヘキシル尿素、１２−（３−アダマンタン−１−イルウレイド）ドデカン酸または１−アダマンタン−１−イル−３−｛５−［２−（２−エトキシエトキシ）エトキシ］ペンチル｝尿素；
・心臓のエネルギー代謝に影響する化合物、例えばおよび好ましくは、エトモキシル、ジクロロ酢酸塩、ラノラジンまたはトリメタジジン；
・抗血栓剤、例えばおよび好ましくは、血小板凝集阻害剤、抗凝血剤および線維素溶解促進物質の群からのもの；
・例えば肺その他の臓器における腫瘍の治療法に用いられるものなどの化学療法薬；および／または
・抗生物質、特にはフルオロキノロンカルボン酸類の群からのもの、例えばおよび好ましくは、シプロフロキサシンまたはモキシフロキサシン。
【００９２】
本発明の好ましい実施形態において、本発明による化合物は、β−アドレナリン受容体作動薬、例えばおよび好ましくは、アルブテロール、イソプロテレノール、メタプロテレノール、テルブタリン、フェノテロール、フォルモテロール、レプロテロール、サルブタモールまたはサルメテロールと組み合わせて投与される。
【００９３】
本発明の好ましい実施形態において、本発明による化合物は、抗ムスカリン様作動物質、例えばおよび好ましくは、臭化イプラトロピウム（ｉｐｒａｔｒｏｐｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅ）、臭化チオトロピウム（ｔｉｏｔｒｏｐｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅ）または臭化オキシトロピウム（ｏｘｉｔｒｏｐｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅ）と組み合わせて投与される。．
本発明の好ましい実施形態において、本発明による化合物は、コルチコステロイド、例えばおよび好ましくは、プレドニゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、トリアムシノロン、デキサメタゾン、ベクロメタゾン、ベタメタゾン、フルニソリド、ブデソニドまたはフルチカゾンと組み合わせて投与される。
【００９４】
抗血栓薬は好ましくは、血小板凝集阻害剤、抗凝血剤および線維素溶解促進性物質の群からの化合物を意味するものと理解される。
【００９５】
本発明の好ましい実施形態において、本発明による化合物は、血小板凝集阻害剤、例えばおよび好ましくは、アスピリン、クロピドグレル、チクロピジンまたはジピリダモールと組み合わせて投与される。
【００９６】
本発明の好ましい実施形態において、本発明による化合物は、トロンビン阻害剤、例えばおよび好ましくは、キシメラガトラン、メラガトラン、ダビガトラン、ビバリルジンまたはクレキサンと組み合わせて投与される。
【００９７】
本発明の好ましい実施形態において、本発明による化合物は、ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ拮抗薬、例えばおよび好ましくは、チロフィバンまたはアブシキシマブと組み合わせて投与される。
【００９８】
本発明の好ましい実施形態において、本発明による化合物は、Ｘａ因子阻害剤、例えばおよび好ましくは、リバロキサバン、アピキサバン、フィデキサバン、ラザキサバン、フォンダパリナックス、イドラパリナックス、ＤＵ−１７６ｂ、ＰＭＤ−３１１２、ＹＭ−１５０、ＫＦＡ−１９８２、ＥＭＤ−５０３９８２、ＭＣＭ−１７、ＭＬＮ−１０２１、ＤＸ９０６５ａ、ＤＰＣ９０６、ＪＴＶ８０３、ＳＳＲ−１２６５１２またはＳＳＲ−１２８４２８と組み合わせて投与される。
【００９９】
本発明の好ましい実施形態において、本発明による化合物は、ヘパリンまたは低分子量（ＬＭＷ）ヘパリン誘導体と組み合わせて投与される。
【０１００】
本発明の好ましい実施形態において、本発明による化合物は、ビタミンＫ拮抗薬、例えばおよび好ましくはクマリンと組み合わせて投与される。
【０１０１】
降圧剤は好ましくは、カルシウム拮抗薬、アンジオテンシンＡＩＩ拮抗薬、ＡＣＥ阻害剤、エンドセリン拮抗薬、レニン阻害剤、α−受容体遮断薬、β−受容体遮断薬、鉱質コルチコイド受容体拮抗薬および利尿剤の群からの化合物を意味するものと理解される。
【０１０２】
本発明の好ましい実施形態において、本発明による化合物は、カルシウム拮抗薬、例えばおよび好ましくは、ニフェジピン、アムロジピン、ベラパミルまたはジルチアゼムと組み合わせて投与される。
【０１０３】
本発明の好ましい実施形態において、本発明による化合物は、α−１−受容体遮断薬、例えばおよび好ましくは、プラゾシンと組み合わせて投与される。
【０１０４】
本発明の好ましい実施形態において、本発明による化合物は、β−受容体遮断薬、例えばおよび好ましくは、プロプラノロール、アテノロール、チモロール、ピンドロール、アルプレノロール、オクスプレノロール、ペンブトロール、ブプラノロール、メチプラノロール、ナドロール、メピンドロール、カラザロール、ソタロール、メトプロロール、ベタキソロール、セリプロロール、ビソプロロール、カルテオロール、エスモロール、ラベタロール、カルベジロール、アダプロロール、ランジオロール、ネビボロール、エパノロールまたはブシンドロールと組み合わせて投与される。
【０１０５】
本発明の好ましい実施形態において、本発明による化合物は、アンギオテンシンＡＩＩ拮抗薬、例えばおよび好ましくは、ロサルタン、カンデサルタン、バルサルタン、テルミサルタンまたはエンブサルタンと組み合わせて投与される。
【０１０６】
本発明の好ましい実施形態において、本発明による化合物は、ＡＣＥ阻害剤、例えばおよび好ましくは、エナラプリル、カプトプリル、リシノプリル、ラミプリル、デラプリル、ホシノプリル、キノプリル（ｑｕｉｎｏｐｒｉｌ）、ペリンドプリルまたはトランドプリル（ｔｒａｎｄｏｐｒｉｌ）と組み合わせて投与される。
【０１０７】
本発明の好ましい実施形態において、本発明による化合物は、エンドセリン拮抗薬、例えばおよび好ましくは、ボセンタン、ダルセンタン、アンブリセンタンまたはシタクスセンタンと組み合わせて投与される。
【０１０８】
本発明の好ましい実施形態において、本発明による化合物は、レニン阻害剤、例えばおよび好ましくは、アリスキレン、ＳＰＰ−６００またはＳＰＰ−８００と組み合わせて投与される。
【０１０９】
本発明の好ましい実施形態において、本発明による化合物は、鉱質コルチコイド受容体拮抗薬、例えばおよび好ましくは、スピロノラクトン、エプレレノンまたはフィネレノンと組み合わせて投与される。
【０１１０】
本発明の好ましい実施形態において、本発明による化合物は、利尿剤、例えばおよび好ましくは、フロセミド、ブメタニド、トルセミド、ベンドロフルメチアジド、クロルチアジド、ヒドロクロルチアジド、ヒドロフルメチアジド、メチクロチアジド、ポリチアジド、トリクロルメチアジド、クロルタリドン、インダパミド、メトラゾン、キネタゾン、アセタゾラミド、ジクロルフェナミド、メタゾラミド、グリセリン、イソソルビド、マンニトール、アミロライドまたはトリアムテレンと組み合わせて投与される。
【０１１１】
脂質代謝改変剤は好ましくは、ＣＥＴＰ阻害剤、甲状腺受容体作動薬、コレステロール合成阻害剤、例えばＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤またはスクアレン合成阻害剤、ＡＣＡＴ阻害剤、ＭＴＰ阻害剤、ＰＰＡＲ−α、ＰＰＡＲ−γおよび／またはＰＰＡＲ−δ作動薬、コレステロール吸収阻害剤、ポリマー性胆汁酸吸着剤、胆汁酸再吸収阻害剤、リパーゼ阻害剤およびリポタンパク質（ａ）拮抗薬の群からの化合物を意味するものと理解される。
【０１１２】
本発明の好ましい実施形態において、本発明による化合物は、ＣＥＴＰ阻害剤、例えばおよび好ましくは、トルセトラピブ（ＣＰ−５２９４１４）、ＪＪＴ−７０５またはＣＥＴＰワクチン（Ａｖａｎｔ）と組み合わせて投与される。
【０１１３】
本発明の好ましい実施形態において、本発明による化合物は、甲状腺受容体作動薬、例えばおよび好ましくは、Ｄ−チロキシン、３，５，３′−トリヨードサイロニン（Ｔ３）、ＣＧＳ２３４２５またはアキシチロム（ＣＧＳ２６２１４）と組み合わせて投与される。
【０１１４】
本発明の好ましい実施形態において、本発明による化合物は、スタチン類からのＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、例えばおよび好ましくは、ロバスタチン、シンバスタチン、プラバスタチン、フルバスタチン、アトルバスタチン、ロスバスタチンまたはピタバスタチンと組み合わせて投与される。
【０１１５】
本発明の好ましい実施形態において、本発明による化合物は、スクアレン合成阻害剤、例えばおよび好ましくは、ＢＭＳ−１８８４９４またはＴＡＫ−４７５と組み合わせて投与される。
【０１１６】
本発明の好ましい実施形態において、本発明による化合物は、ＡＣＡＴ阻害剤、例えばおよび好ましくは、アバシミブ、メリナミド、パクチミベ、エフルシミベまたはＳＭＰ−７９７と組み合わせて投与される。
【０１１７】
本発明の好ましい実施形態において、本発明による化合物は、ＭＴＰ阻害剤、例えばおよび好ましくは、インプリタピド、ＢＭＳ−２０１０３８、Ｒ−１０３７５７またはＪＴＴ−１３０と組み合わせて投与される。
【０１１８】
本発明の好ましい実施形態において、本発明による化合物は、ＰＰＡＲ−γ作動薬、例えばおよび好ましくは、ピオグリタゾンまたはロシグリタゾンと組み合わせて投与される。
【０１１９】
本発明の好ましい実施形態において、本発明による化合物は、ＰＰＡＲ−δ作動薬、例えばおよび好ましくは、ＧＷ５０１５１６またはＢＡＹ６８−５０４２と組み合わせて投与される。
【０１２０】
本発明の好ましい実施形態において、本発明による化合物は、コレステロール吸収阻害剤、例えばおよび好ましくは、エゼチミブ、チクエシドまたはパマクエシドと組み合わせて投与される。
【０１２１】
本発明の好ましい実施形態において、本発明による化合物は、リパーゼ阻害剤、例えばおよび好ましくは、オーリスタットと組み合わせて投与される。
【０１２２】
本発明の好ましい実施形態において、本発明による化合物は、ポリマー性胆汁酸吸着剤、例えばおよび好ましくは、コレスチラミン、コレスチポール、コレソルバム（ｃｏｌｅｓｏｌｖａｍ）、コレスタゲル（ＣｈｏｌｅｓｔａＧｅｌ）またはコレスチミドと組み合わせて投与される。
【０１２３】
本発明の好ましい実施形態において、本発明による化合物は、胆汁酸再吸収阻害剤、例えばおよび好ましくは、ＡＳＢＴ（＝ＩＢＡＴ）阻害剤、例えばＡＺＤ−７８０６、Ｓ−８９２１、ＡＫ−１０５、ＢＡＲＩ−１７４１、ＳＣ−４３５またはＳＣ−６３５と組み合わせて投与される。
【０１２４】
本発明の好ましい実施形態において、本発明による化合物は、リポタンパク質（ａ）拮抗薬、例えばおよび好ましくは、ゲンカベン（ｇｅｍｃａｂｅｎｅ）カルシウム（ＣＩ−１０２７）またはニコチン酸と組み合わせて投与される。
【０１２５】
特に好ましいものは、本発明による化合物とコルチコステロイド類、β−アドレナリン受容体作動薬、抗ムスカリン様作動物質、ＰＤＥ４阻害剤、ＰＤＥ５阻害剤、ｓＧＣ活性化剤、ｓＧＣ刺激剤、ＨＮＥ阻害剤、プロスタサイクリン類縁体、エンドセリン拮抗薬、スタチン類、抗線維化剤、抗炎症剤、免疫調節剤、免疫抑制剤および細胞傷害剤からなる群から選択される１以上の別の有効成分との組み合わせである。
【０１２６】
本発明は、さらに、少なくとも一つの本発明による化合物を、代表的には１以上の不活性で無毒性の医薬として好適な賦形剤とともに含む医薬、および、上記の目的でのそれらの使用を提供する。
【０１２７】
本発明による化合物は、全身的および／または局所的に作用し得る。これに関して、それらは、好適な方法で、例えば、経口、非経口、肺、経鼻、舌下、舌、口腔、直腸、皮膚、経皮、結膜もしくは耳の経路で、またはインプラントもしくはステントとして投与可能である。
【０１２８】
本発明による化合物は、これらの投与経路に好適な投与形態で投与することができる。
【０１２９】
経口投与に好適な投与形態は、先行技術に従って機能し、本発明による化合物を急速かつ／または改変された形で放出し、本発明の化合物を結晶形および／または非晶質形および／または溶解形で含有するものであり、例えば、錠剤（非被覆および被覆錠剤、例えば、本発明の化合物の放出を制御する胃液耐性または難溶もしくは不溶のコーティングを有するもの）、口腔内で急速に崩壊する錠剤、またはフィルム／オブラート、フィルム／凍結乾燥剤、カプセル剤（例えば、硬または軟ゼラチンカプセル剤）、糖衣錠、粒剤、ペレット、粉剤、乳濁液、懸濁液、エアロゾルまたは液剤である。
【０１３０】
非経口投与は、吸収段階を回避して（例えば、静脈、動脈、心臓内、脊髄内または腰椎内投与）、または吸収（例えば、吸入、筋肉、皮下、皮内、経皮または腹腔内投与）を含むことができる。非経口投与に好適な投与形態には、液剤、懸濁液、乳濁液、凍結乾燥品または滅菌粉剤形態の注射および注入用製剤などがある。
【０１３１】
他の投与経路については、好適な例は、吸入用医薬形態（とりわけ、粉末吸入器、噴霧器、計量式エアロゾル）、点鼻薬、液剤もしくは噴霧剤、錠剤；舌、舌下または口腔投与用のフィルム／オブラートもしくはカプセル剤、坐剤、耳および眼用製剤、膣用カプセル剤、水系懸濁液（ローション、振盪混合物）、親油性懸濁液、軟膏、クリーム、経皮治療系（例えば、貼付剤）、ミルク剤、ペースト、泡剤、散布用粉剤（ｓｐｒｉｎｋｌｉｎｇ  ｐｏｗｄｅｒ）、インプラントまたはステントである。
【０１３２】
経口、肺内（吸入）および静脈投与が好ましい。
【０１３３】
本発明による化合物は、上述の投与形態に変換できる。これは、不活性、無毒性、医薬として好適な賦形剤と混合することにより、自体公知の方法で行うことができる。これらの賦形剤には、担体（例えば微結晶セルロース、乳糖、マンニトール）、溶媒（例えば液体ポリエチレングリコール類）、乳化剤および分散剤または湿展剤（例えばドデシル硫酸ナトリウム、ポリオキシソルビタンオレエート）、結合剤（例えばポリビニルピロリドン）、合成および天然ポリマー（例えばアルブミン）、安定剤（例えば抗酸化剤、例えばアスコルビン酸）、着色料（例えば無機顔料、例えば酸化鉄）および香味および／または臭気矯正剤などがある。
【０１３４】
概して、非経口投与の場合、約０．００１から１ｍｇ／ｋｇ、好ましくは約０．０１から０．５ｍｇ／ｋｇの量を投与して有効な結果を達成するのが有利であることが認められている。経口投与の場合、用量は、約０．０１から１００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは約０．０１から２０ｍｇ／ｋｇ、非常に好ましくは約０．１から１０ｍｇ／ｋｇである。肺内投与の場合、量は通常、吸入当たり約０．１から５０ｍｇである。
【０１３５】
そうではあっても、適切な場合、具体的には体重、投与経路、活性化合物に対する個体の応答、製剤の性質および投与を行う時間もしくは間隔に応じて、上述の量から逸脱することが必要な場合がある。従って、場合により、上述の最小量より少なくても十分な場合があり得るものであり、一方、他の場合には、上述の上限を超えなければならない。比較的大きい量を投与する場合、これらを１日かけていくつかの個別用量に分けるのが望ましいことがある。
【０１３６】
下記の作業例は本発明を説明するものである。本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
【０１３７】
Ａ．実施例
略称および頭字語：
ａｂｓ．：絶対
Ａｃ：アセチル
ａｑ．：水系、水溶液
ｂｒ．：広い（ＮＭＲシグナルで）
Ｅｘ．：実施例
Ｂｕ：ブチル
ｃ：濃度
ｃａ．：約、大体
ｃａｔ．：触媒量の
ＣＩ：化学イオン化（ＭＳで）
ｄ：二重線（ＮＭＲで）
ｄ：日
ＴＬＣ：薄層クロマトグラフィー
ＤＣＩ：直接化学イオン化（ＭＳで）
ｄｄ：二重線の二重線（ＮＭＲで）
ＤＥＡＤ：ジエチルアゾジカルボキシレート
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
Ｄｔ：三重線の二重線（ＮＭＲで）
ｏｆ  ｔｈ．：理論値の（化学収率）
ｅｅ：エナンチオマー過剰
ＥＩ：電子衝突電離（ＭＳで）
ｅｎｔ：エナンチオマー的に純粋な、エナンチオマー
ｅｑ．：当量
ＥＳＩ：エレクトロスプレーオン化（ＭＳで）
Ｅｔ：エチル
ｈ：時間
ＨＰＬＣ：高圧、高速液体クロマトグラフィー
ｉＰｒ：イソプロピル
ｃｏｎｃ：濃（溶液の場合）
ＬＣ：液体クロマトグラフィー
ＬＣ／ＭＳ：液体クロマトグラフィー結合質量分析
Ｌｉｔ．：文献（参考文献）
ｍ：多重線（ＮＭＲで）
Ｍｅ：メチル
ｍｉｎ：分
ＭＰＬＣ：中圧液体クロマトグラフィー（シリカゲルで；フラッシュクロマトグラフィーとも称される）
Ｍｓ：メタンスルホニル（メシル）
ＭＳ：質量分析
ＮＭＯ：Ｎ−メチルモルホリンＮ−オキサイド
ＮＭＲ：核磁気共鳴スペクトル測定
Ｐｒ：プロピル
ｑ（またはｑｕａｒｔ）：四重線（ＮＭＲで）
ｑｄ：二重線の四重線（ＮＭＲで）
ｑｕａｎｔ．：定量的（化学収率で）
ｑｕｉｎｔ：五重線（ＮＭＲで）
ｒａｃ：ラセミ、ラセミ体
Ｒｆ：保持指数（ＴＬＣで）
ＲＰ：逆相（ＨＰＬＣで）
ＲＴ：室温
Ｒｔ：保持時間（ＨＰＬＣ、ＬＣ／ＭＳで）
ｓ：一重線（ＮＭＲで）
ｓｅｐｔ：七重線（ＮＭＲで）
ＳＦＣ：超臨界液体クロマトグラフィー
ｔ：三重線（ＮＭＲで）
ｔＢｕ：ｔｅｒｔ−ブチル
ｔｄ：二重線の三重線（ＮＭＲで）
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＵＶ：紫外線スペクトル測定
ｖ／ｖ：体積比（溶液の）
ｔｏｇ．：一緒に
ＨＰＬＣおよびＬＣ／ＭＳ法：
方法１（ＬＣ／ＭＳ）：
装置：Ｗａｔｅｒｓ  ＡＣＱＵＩＴＹ  ＳＱＤ  ＵＰＬＣシステム；カラム：Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＨＳＳ  Ｔ３  １．８μ  ５０×１ｍｍ；移動相Ａ：水１リットル＋９９％強度ギ酸０．２５ｍＬ；移動相Ｂ：アセトニトリル１リットル＋９９％強度ギ酸０．２５ｍＬ；勾配：０．０分９０％Ａ→１．２分５％Ａ→２．０分５％Ａ；オーブン：５０℃；流量：０．４０ｍＬ／分；ＵＶ検出：２０８−４００ｎｍ。
【０１３８】
方法２（ＬＣ／ＭＳ）：
装置：Ｗａｔｅｒｓ  ＵＰＬＣ  Ａｃｑｕｉｔｙ搭載Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  Ｑｕａｔｔｒｏ  Ｐｒｅｍｉｅｒ；カラム：Ｔｈｅｒｍｏ  Ｈｙｐｅｒｓｉｌ  ＧＯＬＤ１．９μ  ５０×１ｍｍ；移動相Ａ：水１リットル＋５０％強度ギ酸０．５ｍＬ、移動相Ｂ：アセトニトリル１リットル＋５０％強度ギ酸０．５ｍＬ；勾配：０．０分９７％Ａ→０．５分９７％Ａ→３．２分５％Ａ→４．０分５％Ａ；オーブン：５０℃；流量：０．３ｍＬ／分；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１３９】
方法３（分取ＨＰＬＣ）：
カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ  Ｃ１８、１０μｍ、２５０×３０ｍｍ；移動相：０．１％ＴＦＡ含有アセトニトリル／水；勾配：０−５．００分１０：９０、３．００分でサンプル注入；５．００−２３．００分で９５：５；２３．００−３０．００分９５：５；３０．００−３０．５０分で１０：９０；３０．５０−３１．２０分１０：９０。
【０１４０】
方法４（分取ＨＰＬＣ）：
カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ  Ｃ１８、１０μｍ、２５０×３０ｍｍ；移動相：０．１％ＴＦＡ含有アセトニトリル／水；勾配：０−５．００分１０：９０、３．００分でサンプル注入；５．００−２０．００分で９５：５；２０．００−３０．００分９５：５；３０．００−３０．５０分で１０：９０；３０．５０−３１．２０分１０：９０。
【０１４１】
単結晶Ｘ線構造解析
単結晶：室温でエタノールからの結晶化によって得られたもの；回折計：Ａｐｅｘ−ＩＩ−ＣＣＤ面積検出器搭載Ｂｒｕｋｅｒ回折計；放射：ＣｕＫα線１．５４１７８Å；温度：１１０Ｋ；モノクロメーター：ミラー；θ範囲：５．５３から６７．０２°；走査タイプ：全球データ収集オメガおよびファイ走査；指数範囲：−６≦ｈ≦６、−３８≦ｋ≦３７、−７≦ｌ≦７；収集反射：２１８８４；独立反射：４０７３［Ｒ（ｉｎｔ）＝０．０６３３］；θに対する完全性：６７．６８°  ９７．８％．
構造解および精密化：直接法による構造解（ＳＨＥＬＸＳ）；構造精密化：最小二乗精密化、計算および同位体的に精製された理想的位置での水素原子；精密パラメータの数：３２６；最終Ｒ指数（観察データ）：Ｒ１＝０．０４１３、ｗＲ２＝０．０９２６；Ｒ指数（全データ）：Ｒ１＝０．０５６１、ｗＲ２＝０．０９８４；データ／パラメータ比：１２．４９；Ｆ２への適合度：１．０１９；Ｆｌａｃｋパラメータ：０．０２（１２）。
【０１４２】
さらなる詳細：
下記の実施例および試験の説明におけるパーセントは、別段の断りがない限り、重量パーセントであり、部は重量部である。液体／液体溶液についての溶媒比、希釈比および濃度データは、各場合、体積基準である。
【０１４３】
純度は通常、ＬＣ／ＭＳクロマトグラフィーにおける相当するピーク積分に基づいたものであるが、それはさらに、１Ｈ−ＮＭＲスペクトラムを用いて決定されていても良い。純度が示されていない場合、通常はＬＣ／ＭＳクロマトグラフィーにおける自動ピーク積分に従って１００％であるか、純度は明瞭には決定されていない。
【０１４４】
理論値の％で記載の収率は、＜１００％の純度が示されている場合、純度について補正されている。溶媒含有もしくは汚染バッチでは、形式収率は「＞１００％」である可能性がある。その場合、収率は溶媒や純度について補正されていない。
【０１４５】
１Ｈ−ＮＭＲシグナルのカップリングパターンについての下記の記載の一部は、ＡＣＤ  ＳｐｅｃＭａｎａｇｅｒ（ＡＣＤ／Ｌａｂｓ  Ｒｅｌｅａｓｅ  １２．００、製品バージョン１２．５）の提示から直接取ったものであり、必ずしも厳密に調べたものとは限らない。一部の場合で、ＳｐｅｃＭａｎａｇｅｒの提示を人の手で調節している。人の手によって調節または割り当てられた記述は通常、対象のシグナルの見た目に基づいたものであり、必ずしも厳密な物理的に正確な解釈に相当するとは限らない。概して、記載の化学シフトは、対象のシグナルの中心を指す。広い多重線の場合、間隔が示される。溶媒または水によって不明瞭となっているシグナルについては、暫定的に割り当てたり、列記しないようにした。
【０１４６】
融点および融点範囲が記載されている場合、それらは未補正である。
【０１４７】
以下において製造が明瞭に記載されていない全ての反応物または試薬は、一般に利用可能な提供元から商業的に購入したものである。製造が同様に以下において記載されておらず、商業的に入手できなかったか、通常は使えない供給元から得た他の全ての反応物または試薬については、それらの製造が記載されている刊行文献を挙げてある。
【０１４８】
下記に記載の中間体、例示的実施例および比較化合物において、「ラセミ体」という記述と組み合わせた対象の例のＩＵＰＡＣ名（ＩＵＰＡＣ  ｐａｃｋ  ｎａｍｅ）に列記された名称「１ＲＳ，２ＲＳ，５ＳＲ」は、１Ｒ，２Ｒ，５Ｓ−エナンチオマー（→各場合で、「１ＲＳ，２ＲＳ，５ＳＲ」における位置の数の後の最初の文字）と相当する１Ｓ，２Ｓ，５Ｒ−エナンチオマー（→各場合、位置の数の後の２番目の文字）のラセミ混合物である。「エナンチオマー１」および「エナンチオマー２」という記述と組み合わせた名称「１ＲＳ，２ＲＳ，５ＳＲ」は、これらが別個の単離された形での２種類のエナンチオマーであり、これらエナンチオマーに対する絶対配置（１Ｒ，２Ｒ，５Ｓまたは１Ｓ，２Ｓ，５Ｒ）の割り当てがまだ行われていないことを意味する。
【０１４９】
キラル中心の相対的立体化学配置を簡潔に表すため、下記のラセミ例示化合物の構造式において、関与するエナンチオマーの一方の構造式のみを再現しているが、関連するＩＵＰＡＣ名についての「ラセミ体」という記述から明らかなように、これらの場合、各場合で反対の絶対配置を有する第２のエナンチオマーが常に含まれる。
【０１５０】
原料および中間体
実施例１Ａ
２−（トリメチルシリル）エチル２−［４−（ベンジルオキシ）フェニル］−２−ヒドロキシビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−カルボキシレート
【化１５】
2017511319.tif 000021
【０１５１】
エキソ−２−（トリメチルシリル）エチル２−オキソビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−カルボキシレート［ＷＯ９６／１５０９６、実施例３６０／段階１］２４．３０ｇ（９５．５２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６０ｍＬ）中溶液を、内部温度約−５℃でアルゴン下に１Ｍ  ４−（ベンジルオキシ）フェニルマグネシウムブロミドのＴＨＦ中溶液１１４．６２ｍＬ（１１４．６２ｍｍｏｌ）とゆっくり混合し、その際に内部温度は最大０℃まで上昇した。次に、冷却浴を外し、混合物を１時間後撹拌した。次に、混合物を５％強度のクエン酸溶液２００ｍＬと混合し、ジクロロメタンで２回抽出した。合わせた有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、濃縮した。残留物をシリカゲル１ｋｇでのフラッシュクロマトグラフィーによって精製した（移動相シクロヘキサン／酢酸エチル９：１）。これによって、標題化合物２８．７０ｍｇを得た（理論値の６６％；純度９７％）。
【０１５２】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ［ｐｐｍ］＝７．４９−７．２７（ｍ、７Ｈ）、６．９５（ｄ、２Ｈ）、５．０９（ｓ、２Ｈ）、５．０５（ｓ、１Ｈ）、４．１０−４．００（ｍ、２Ｈ）、２．４４−２．３７（ｍ、１Ｈ）、２．３３−２．２４（ｍ、１Ｈ）、２．２３−２．１１（ｍ、１Ｈ）、１．７８−１．６０（ｍ、１Ｈ）、１．５２−１．２６（ｍ、４Ｈ）、０．９５−０．８０（ｍ、２Ｈ）、０．００（ｓ、９Ｈ）。
【０１５３】
ＬＣ／ＭＳ（方法１、ＥＳＩｐｏｓ）：Ｒｔ＝３．１５分；ｍ／ｚ＝４  ２１［Ｍ＋Ｈ−Ｈ２Ｏ］＋。
【０１５４】
実施例２Ａ
２−（トリメチルシリル）エチル２−［４−（ベンジルオキシ）フェニル］ビシクロ［２．２．１］ヘプタ−２−エン−７−カルボキシレート
【化１６】
2017511319.tif 000022
【０１５５】
方法Ａ：
実施例１Ａからの化合物２８．７０ｇ（６３．４６６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１５０ｍＬ）中溶液に、アルゴン下に約０℃で、最初にトリエチルアミン２６．５０ｍＬ（１９０．４０ｍｍｏｌ）を加え、次にメタンスルホニルクロライド９．８２ｍＬ（１２６．９３ｍｍｏｌ）をゆっくり加え、その際に内部温度が５℃を超えないようにした。混合物を０℃で１．５時間撹拌した。次に、混合物をジクロロメタンで希釈し、水で抽出した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、濃縮し、残留物をシリカゲル１ｋｇでのフラッシュクロマトグラフィー（移動相シクロヘキサン／酢酸エチル９５：５）によって精製した。これによって、標題化合物２０．０６ｇ（理論値の７５％）を得た。
【０１５６】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ［ｐｐｍ］＝７．４８−７．２８（ｍ、７Ｈ）、６．９７（ｄ、２Ｈ）、６．３０（ｄ、１Ｈ）、５．１１（ｓ、２Ｈ）、４．１５−４．０６（ｍ、２Ｈ）、３．４３（ｂｒｓ、１Ｈ）、３．０６（ｂｒｓ、１Ｈ）、１．８５−１．７１（ｍ、２Ｈ）、１．１７−１．０６（ｍ、１Ｈ）、１．０４−０．８７（ｍ、３Ｈ）、０．０４（ｓ、９Ｈ）。
【０１５７】
ＬＣ／ＭＳ（方法１、ＥＳＩｐｏｓ）：Ｒｔ＝１．６１分；ｍ／ｚ＝４２１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１５８】
方法Ｂ：
実施例１Ａからの化合物２０．０ｇ（４５．６ｍｍｏｌ）のピリジン（１６０ｍＬ）中溶液に、撹拌しながら１０分間かけてオキシ塩化リン６４．０ｍＬ（６８６ｍｍｏｌ）を滴下した。混合物を５０℃で１時間、次に室温で終夜撹拌した。混合物を水１リットルおよび小さい氷塊とともにゆっくり混合し、その際に内部温度は２５℃以下に維持した。次に、混合物をジクロロメタンで抽出し、合わせた有機相を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、移動相ヘプタン／酢酸エチル９：１）によって精製した。これによって、標題化合物１６．３ｇを得た（理論値の８５％）。
【０１５９】
実施例３Ａ
２−（トリメチルシリル）エチル２−［４−（ベンジルオキシ）フェニル］−２，３−ジヒドロキシビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−カルボキシレート
【化１７】
2017511319.tif 000023
【０１６０】
脱気した実施例２Ａからの化合物２５．３７ｇ（６０．３１４ｍｍｏｌ、純度補正していない）のＴＨＦ（１５０ｍＬ）中溶液にアルゴン下に、０℃で、脱気したＮ−メチルモルホリンＮ−オキサイド（ＮＭＯ）１５．９０ｇ（１３５．７１ｍｍｏｌ）の水（４２ｍＬ）中溶液をアルゴン下に加えた。この混合物に、撹拌しながら２．５％強度の四酸化オスミウムのｔｅｒｔ−ブタノール中溶液１１６ｍＬ（９．０５ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた。次に、混合物を０℃で１時間撹拌した。室温でさらに１６時間撹拌後、混合物を酢酸エチル１５０ｍＬで希釈し、各場合１０％強度のクエン酸溶液２５０ｍＬで２回、各場合飽和炭酸水素ナトリウム溶液３００ｍＬで２回、そして各場合飽和塩化ナトリウム溶液３００ｍＬで２回抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで脱水し、濃縮した。これによって、標題化合物２７．５１ｍｇを得た（理論値の７５％；純度７５％）。
【０１６１】
ＬＣ／ＭＳ（方法１、ＥＳＩｐｏｓ）：Ｒｔ＝１．４０分；ｍ／ｚ＝４３７４２１［Ｍ＋Ｈ−Ｈ２Ｏ］＋。
【０１６２】
実施例４Ａ
２−（トリメチルシリル）エチル（１ＲＳ，２ＲＳ，５ＳＲ）−２−［４−（ベンジルオキシ）ベンゾイル］−５−ホルミルシクロペンタンカルボキシレート（ラセミ体）
【化１８】
2017511319.tif 000024
【０１６３】
方法Ａ：
アルゴン下、浴温−１５℃で、四酢酸鉛３０．９６ｇ（６６．３４ｍｍｏｌ、純度９５％）を、実施例３Ａからの化合物２７．４２ｇ（６０．３１ｍｍｏｌ、純度補正していない）のメタノール（１７０ｍＬ）中溶液にゆっくり加えた。混合物を−１５℃で１時間撹拌した。昇温させて室温とした後、混合物をセライトで濾過し、濾過残留物を各場合メタノール５０ｍＬで３回抽出した。濾液を濃縮し、残留物をジクロロメタン５００ｍＬおよび水５００ｍＬに取ったが、相分離ははっきりしなかった。その後、混合物をシリカゲルで濾過し、シリカゲルをジクロロメタンで洗浄した。相分離後、水相をジクロロメタン１５０ｍＬで再度抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで脱水し、濃縮した。これによって、標題化合物２７．１ｍｇ（理論値の８６％；純度８７％）を得た。
【０１６４】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ［ｐｐｍ］＝９．７２（ｄ、１Ｈ）、８．０２（ｄ、２Ｈ）、７．５３−７．３４（ｍ、５Ｈ）、７．１８（ｄ、２Ｈ）、５．２５（ｓ、２Ｈ）、４．１７（ｑ、１Ｈ）、４．０９（ｄｄ、２Ｈ）、３．７４（ｔ、１Ｈ）、３．２３−３．１４（ｍ、１Ｈ）、２．２４−２．１３（ｍ、１Ｈ）、２．０８−１．８８（ｍ、２Ｈ）、１．６１−１．４９（ｍ、１Ｈ）、０．８７−０．７９（ｍ、２Ｈ）、０．００（ｓ、９Ｈ）。
【０１６５】
ＬＣ／ＭＳ（方法１、ＥＳＩｐｏｓ）：Ｒｔ＝１．４５分、ｍ／ｚ＝４２５［Ｍ＋Ｈ−２８］＋。
【０１６６】
方法Ｂ：
０℃でアルゴン下に、最初にＮ−メチルモルホリンＮ−オキサイド（ＮＭＯ）７６．８７ｇ（６５６ｍｍｏｌ）、次に４％強度の四酸化オスミウム水溶液２．０９ｇ（８．２０ｍｍｏｌ）を、実施例２Ａからの化合物６９．０ｇ（１３１ｍｍｏｌ、純度約８０％）のアセトン／水／ＴＨＦ混合液（３：１：１）中溶液に加えた。混合物を室温で３日間撹拌した。次に、過ヨウ素酸ナトリウム１０５．２６ｇ（４９２ｍｍｏｌ）を加え、混合物をさらに室温で終夜撹拌した。酢酸エチルおよび１０％強度のクエン酸水溶液と混合した後、水相を分離し、酢酸エチルで１回抽出した。合わせた有機相を飽和炭酸水素ナトリウム溶液で１回洗浄し、次にケイ酸マグネシウム（Ｆｌｕｏｒｉｓｉｌ）と撹拌した。濾過後、フィルター残留物を酢酸エチルで洗浄した。濾液を濃縮した後、そうして得られた残留物を、２回の同様に実施した予備実験［実施例２Ａからの化合物の量：３．０ｇ（７．１３ｍｍｏｌ）または３．２ｇ（７．６１ｍｍｏｌ）を使用］からの残留物と合わせ、フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、移動相石油エーテル／酢酸エチル８：２）によって一緒に精製した。このようにして、標題化合物５３ｇ（予備実験を考慮した理論値の５８％、純度８９％）を得た。
【０１６７】
実施例５Ａ
２−（トリメチルシリル）エチル（１ＲＳ，２ＲＳ，５ＳＲ）−２−［４−（ベンジルオキシ）ベンゾイル］−５−（ヒドロキシメチル）シクロペンタンカルボキシレート（ラセミ体）
【化１９】
2017511319.tif 000025
【０１６８】
室温で、水素化ホウ素ナトリウム６７７ｍｇ（１７．８９５ｍｍｏｌ）を実施例４Ａからの化合物２７．０ｇ（５９．６５ｍｍｏｌ、純度補正していない）のエタノール（１３５ｍＬ）中溶液にゆっくり加え、混合物を室温で３０分間撹拌した。混合物を各場合塩化アンモニウム溶液４００ｍＬおよび水と混合し、各場合酢酸エチル３００ｍＬで２回抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで脱水し、濃縮した。これによって、標題化合物２１．９０ｍｇ（理論値の７０％；純度８７％）を得た。
【０１６９】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ［ｐｐｍ］＝７．９５（ｄ、２Ｈ）、７．４８−７．３１（ｍ、５Ｈ）、７．１２（ｄ、２Ｈ）、５．２０（ｓ、２Ｈ）、４．６４（ｔ、１Ｈ）、４．０７−３．９８（ｍ、３Ｈ）、３．５３−３．４５（ｍ、１Ｈ）、３．４０−３．３４（ｍ、１Ｈ）、２．９４（ｔ、１Ｈ）、２．３４−２．２３（ｍ、１Ｈ）、２．１２−２．０１（ｍ、１Ｈ）、１．９０−１．７８（ｍ、１Ｈ）、１．６７−１．４７（ｍ、２Ｈ）、０．８２−０．７５（ｍ、２Ｈ）、０．００（ｓ、９Ｈ）。
【０１７０】
ＬＣ／ＭＳ（方法１、ＥＳＩｐｏｓ）：Ｒｔ＝１．３４分；ｍ／ｚ＝４５５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１７１】
実施例６Ａ
２−（トリメチルシリル）エチル（１ＲＳ，２ＲＳ，５ＳＲ）−２−［４−（ベンジルオキシ）ベンゾイル］−５−［（４−オキソ−１，２，３−ベンゾトリアジン−３（４Ｈ）−イル）メチル］シクロペンタンカルボキシレート（ラセミ体）
【化２０】
2017511319.tif 000026
【０１７２】
アルゴン下、１，２，３−ベンゾトリアジン−４（３Ｈ）−オン２４３ｍｇ（１．６５ｍｍｏｌ）およびトリブチルホスファン１．１１ｇ（５．５０ｍｍｏｌ）を、実施例５Ａからの化合物５００ｍｇ（１．１０ｍｍｏｌ、純度補正していない）のＴＨＦ（６ｍＬ）中溶液に加えた、次に、４０％強度のジエチルアゾジカルボキシレート（ＤＥＡＤ）のトルエン中溶液１．５０ｍＬ（３．３０ｍｍｏｌ）を０℃で滴下した。混合物を室温で約１時間撹拌し、酢酸エチルで希釈し、各場合水５ｍＬで２回、飽和塩化ナトリウム溶液で２回抽出した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、濃縮した。残留物を分取ＨＰＬＣ（方法４）によって精製した。これによって、標題化合物３３４ｍｇ（理論値の５２％）を得た。
【０１７３】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ［ｐｐｍ］＝８．４４（ｄｄ、１Ｈ）、８．３８（ｄ、１Ｈ）、８．２７（ｔｄ、１Ｈ）、８．１５−８．０８（ｍ、３Ｈ）、７．６５−７．４８（ｍ、５Ｈ）、７．２９（ｄ、２Ｈ）、５．３７（ｓ、２Ｈ）、４．７４−４．６２（ｍ、２Ｈ）、４．２６（ｑ、１Ｈ）、３．４０（ｔ、１Ｈ）、３．１３−３．０１（ｍ、１Ｈ）、２．３６−２．２５（ｍ、１Ｈ）、２．２１−２．１０（ｍ、１Ｈ）、１．９６−１．８４（ｍ、１Ｈ）、１．７７−１．６５（ｍ、１Ｈ）、０．５３−０．４６（ｍ、２Ｈ）、０．１７（ｓ、９Ｈ）。
【０１７４】
ＬＣ／ＭＳ（方法１、ＥＳＩｐｏｓ）：Ｒｔ＝１．５１分；ｍ／ｚ＝５８４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１７５】
実施形態例
実施例１
（＋／−）−（１ＲＳ，２ＲＳ，５ＳＲ）−２−［４−（ベンジルオキシ）ベンゾイル］−５−［（４−オキソ−１，２，３−ベンゾトリアジン−３（４Ｈ）−イル）メチル］シクロペンタンカルボン酸（ラセミ体）
【化２１】
2017511319.tif 000027
【０１７６】
実施例６Ａからの化合物２１３ｍｇ（０．３６５ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２ｍＬ）中溶液を、０℃でトリフルオロ酢酸１ｍＬ（１２．９８ｍｍｏｌ）と混合した。混合物を０℃で１時間撹拌し、５℃で約１８時間保存した。混合物を濃縮し、残留物をジクロロメタンに取り、溶液を再度濃縮した。この手順を数回繰り返した。最後に、残留物をアセトニトリル／ＴＨＦに取り、分取ＨＰＬＣによって精製した（方法３）。そうして、これによって、標題化合物１２５ｍｇを得た（理論値の７１％）。
【０１７７】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ［ｐｐｍ］＝１２．１５（ｓ、１Ｈ）、８．２６（ｄ、１Ｈ）、８．２０（ｄ、１Ｈ）、８．１１−８．０５（ｍ、１Ｈ）、８．０１−７．８９（ｍ、３Ｈ）、７．５２−７．２８（ｍ、５Ｈ）、７．１３（ｄ、２Ｈ）、５．２１（ｓ、２Ｈ）、４．５３（ｄｄ、２Ｈ）、４．１５−４．０６（ｍ、１Ｈ）、３．２４（ｔ、１Ｈ）、２．９３−２．８０（ｍ、１Ｈ）、２．１７−２．０４（ｍ、１Ｈ）、１．９４−１．８３（ｍ、１Ｈ）、１．７２−１．６０（ｍ、１Ｈ）、１．５７−１．４４（ｍ、１Ｈ）。
【０１７８】
ＬＣ／ＭＳ（方法１、ＥＳＩｐｏｓ）：Ｒｔ＝１．１６分；ｍ／ｚ＝４８４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１７９】
エナンチオマーの分離：
方法Ａ：
実施例１からのラセミ化合物６４５ｍｇをジオキサン２０ｍＬに溶かし、キラル相での分取ＨＰＬＣによってエナンチオマーに分離した（実施例２および３参照）［カラム：Ｄａｉｃｅｌ  Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＩＣ、５μｍ  ２５０ｍｍ×２０ｍｍ；流量：１５ｍＬ／分；検出：２２０ｎｍ；注入体積：０．２ｍＬ；温度：２５℃；移動相：ｔ＝０−５分８０％メタノール／２０％アセトニトリル］。
【０１８０】
方法Ｂ：
実施例１からのラセミ化合物５１０ｍｇを高温でＴＨＦ  １０ｍＬに溶かし、キラル相での分取ＳＦＣによってエナンチオマーに分離した（実施例２および３参照）［カラム：Ｄａｉｃｅｌ  Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＳ−Ｈ、５μｍ、２５０ｍｍ×２０ｍｍ；流量：１００ｍＬ／分；検出：２１０ｎｍ；注入体積：０．２５ｍＬ；温度：４０℃；移動相：ｔ＝０−８分６０％二酸化炭素／４０％エタノール］。
【０１８１】
実施例２
（＋）−（１Ｓ，２Ｓ，５Ｒ）−２−［４−（ベンジルオキシ）ベンゾイル］−５−［（４−オキソ−１，２，３−ベンゾトリアジン−３（４Ｈ）−イル）メチル］シクロペンタンカルボン酸
【化２２】
2017511319.tif 000028
【０１８２】
収量（方法Ａによる）：２０９ｍｇ；ｅｅ値＝９９％。
【０１８３】
［α］Ｄ２０＝＋６７．２°、５８９ｎｍ、ｃ＝０．３２ｇ／１００ｍＬ、クロロホルム。
【０１８４】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ［ｐｐｍ］＝１２．１５（ｓ、１Ｈ）、８．２６（ｄ、１Ｈ）、８．２０（ｄ、１Ｈ）、８．１１−８．０５（ｍ、１Ｈ）、８．０１−７．９０（ｍ、３Ｈ）、７．４９−７．３１（ｍ、５Ｈ）、７．１３（ｄ、２Ｈ）、５．２１（ｓ、２Ｈ）、４．５３（ｄｄ、２Ｈ）、４．１５−４．０６（ｍ、１Ｈ）、３．２４（ｔ、１Ｈ）、２．９４−２．８０（ｍ、１Ｈ）、２．１７−２．０３（ｍ、１Ｈ）、１．９４−１．８２（ｍ、１Ｈ）、１．７２−１．６０（ｍ、１Ｈ）、１．５７−１．４４（ｍ、１Ｈ）。
【０１８５】
ＬＣ／ＭＳ（方法２、ＥＳＩｐｏｓ）：Ｒｔ＝２．５９分；ｍ／ｚ＝４８４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１８６】
単結晶Ｘ線構造解析により、このエナンチオマーについて（１Ｓ，２Ｓ，５Ｒ）−絶対配置が得られた。得られた結晶データを下記の表に示している（方法の説明については、実験の部の導入段落を参照する。）。
【０１８７】
実施例２についてのＸ線構造解析からの結晶データ
【表１】
2017511319.tif 000029
【０１８８】
実施例３
（−）−（１Ｒ，２Ｒ，５Ｓ）−２−［４−（ベンジルオキシ）ベンゾイル］−５−［（４−オキソ−１，２，３−ベンゾトリアジン−３（４Ｈ）−イル）メチル］シクロペンタンカルボン酸
【化２３】
2017511319.tif 000030
【０１８９】
収量（方法Ａによる）：２２８ｍｇ；ｅｅ値＝９９％。
【０１９０】
［α］Ｄ２０＝−６８．３°、５８９ｎｍ、ｃ＝０．３５ｇ／１００ｍＬ、クロロホルム
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ［ｐｐｍ］＝１２．１５（ｓ、１Ｈ）、８．２６（ｄ、１Ｈ）、８．２０（ｄ、１Ｈ）、８．１１−８．０５（ｍ、１Ｈ）、８．０１−７．８９（ｍ、３Ｈ）、７．４９−７．３１（ｍ、５Ｈ）、７．１３（ｄ、２Ｈ）、５．２１（ｓ、２Ｈ）、４．５３（ｄｄ、２Ｈ）、４．１４−４．０５（ｍ、１Ｈ）、３．２４（ｔ、１Ｈ）、２．９４−２．８０（ｍ、１Ｈ）、２．１７−２．０４（ｍ、１Ｈ）、１．９５−１．８３（ｍ、１Ｈ）、１．７２−１．６０（ｍ、１Ｈ）、１．５７−１．４４（ｍ、１Ｈ）。
【０１９１】
ＬＣ／ＭＳ（方法２、ＥＳＩｐｏｓ）：Ｒｔ＝２．５９分；ｍ／ｚ＝４８４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１９２】
比較例：
比較例Ａ−１
（１ＲＳ，２ＲＳ，５ＳＲ）−２−［（４′−クロロビフェニル−４−イル）カルボニル］−５−［（４−オキソ−１，２，３−ベンゾトリアジン−３（４Ｈ）−イル）メチル］シクロペンタンカルボン酸（ラセミ体）
【化２４】
2017511319.tif 000031
【０１９３】
このラセミ化合物およびそれの分離については、実施例１としてＷＯ９７／４３２３９−Ａ１に記載されている。
【０１９４】
エナンチオマーの分離
（１ＲＳ，２ＲＳ，５ＳＲ）−２−［（４′−クロロビフェニル−４−イル）カルボニル］−５−［（４−オキソ−１，２，３−ベンゾトリアジン−３（４Ｈ）−イル）メチル］シクロペンタンカルボン酸（ラセミ体）１．４５０ｇ（２．９７ｍｍｏｌ）をエタノール８０ｍＬおよびアセトニトリル２０ｍＬの混合物に溶かし、キラル相での分取ＨＰＬＣ（比較例Ａ−２およびＡ−３参照）［カラム：Ｄａｉｃｅｌ  Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＩＤ  ５μｍ  ２５０ｍｍ×２０ｍｍ；流量：１２ｍＬ／分；検出：２２０ｎｍ；注入体積：１．８ｍＬ；温度：４５℃；移動相：１００％エタノール定組成；運転時間：１２分によってエナンチオマーに分離した。
【０１９５】
比較例Ａ−２
（１ＲＳ，２ＲＳ，５ＳＲ）−２−［（４′−クロロビフェニル−４−イル）カルボニル］−５−［（４−オキソ−１，２，３−ベンゾトリアジン−３（４Ｈ）−イル）メチル］シクロペンタンカルボン酸（エナンチオマー１）
これによって、標題化合物６３７ｍｇ（化学純度１００％）を得た。
【０１９６】
Ｒｔ＝５．５９分、ｅｅ値＝９９％［カラム：Ｄａｉｃｅｌ  Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  Ｃ−Ｈ２５０ｍｍ×４．６ｍｍ、５μｍ；流量：１．０ｍＬ／分；検出：２２０ｎｍ；温度：４５℃；移動相：１００％エタノール＋０．２％ＴＦＡ＋１％水、定組成］。
【０１９７】
比較例Ａ−３
（１ＲＳ，２ＲＳ，５ＳＲ）−２−［（４′−クロロビフェニル−４−イル）カルボニル］−５−［（４−オキソ−１，２，３−ベンゾトリアジン−３（４Ｈ）−イル）メチル］シクロペンタンカルボン酸（エナンチオマー２）
これによって、標題化合物６５１ｍｇ（化学純度１００％）を得た。
【０１９８】
Ｒｔ＝８．５１分、ｅｅ値＝９９％［カラム：Ｄａｉｃｅｌ  Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  Ｃ−Ｈ２５０ｍｍ×４．６ｍｍ、５μｍ；流量：１．０ｍＬ／分；検出：２２０ｎｍ；温度：４５℃；移動相：１００％エタノール＋０．２％ＴＦＡ＋１％水、定組成］。
【０１９９】
比較例Ｂ−１：
（＋／−）−４−オキソ−２−［２−（４−オキソ−１，２，３−ベンゾトリアジン−３（４Ｈ）−イル）エチル］−４−［４−（ペンチルオキシ）フェニル］ブタン酸（ラセミ体）
【化２５】
2017511319.tif 000032
【０２００】
当該ラセミ化合物およびそれの製造については、実施例１５としてＷＯ９７／４３２３７−Ａ１に記載されている。
【０２０１】
エナンチオマーの分離：
（＋／−）−４−オキソ−２−［２−（４−オキソ−１，２，３−ベンゾトリアジン−３（４Ｈ）−イル）エチル］−４−［４−（ペンチルオキシ）フェニル］ブタン酸（ラセミ体）２５０ｍｇ（０．５７ｍｍｏｌ）をアセトニトリル７ｍＬに溶かし、キラル相での分取ＨＰＬＣ（比較例Ｂ−２およびＢ−３参照）［カラム：Ｄａｉｃｅｌ  Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ−Ｈ、５μｍ、２５０ｍｍ×２０ｍｍ；流量：２０ｍＬ／分；検出：２８０ｎｍ；注入体積：０．１２ｍＬ；温度：２５℃；移動相：８０％アセトニトリル／２０％エタノール＋０．２％氷酢酸、定組成；運転時間：６分］によってエナンチオマーに分離した。
【０２０２】
比較例Ｂ−２：
（＋）−４−オキソ−２−［２−（４−オキソ−１，２，３−ベンゾトリアジン−３（４Ｈ）−イル）エチル］−４−［４−（ペンチルオキシ）フェニル］ブタン酸（エナンチオマー１）
これによって、標題化合物１１１ｍｇ（化学純度１００％）を得た。
【０２０３】
［α］Ｄ２０＝＋３０．６°、５８９ｎｍ、ｃ＝０．３２ｇ／１００ｍＬ、クロロホルム。
【０２０４】
Ｒｔ＝８．２１分、ｅｅ値＝１００％［カラム：Ｄａｉｃｅｌ  Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ−Ｈ、２５０ｍｍ×４．６ｍｍ、５μｍ；流量：１．０ｍＬ／分；検出：２８０ｎｍ；移動相：８０％アセトニトリル＋０．２％氷酢酸／２０％エタノール＋０．２％氷酢酸、定組成］。
【０２０５】
比較例Ｂ−３：
（−）−４−オキソ−２−［２−（４−オキソ−１，２，３−ベンゾトリアジン−３（４Ｈ）−イル）エチル］−４−［４−（ペンチルオキシ）フェニル］ブタン酸（エナンチオマー２）
これによって、標題化合物１１９ｍｇ（化学純度１００％）を得た。
【０２０６】
［α］Ｄ２０＝−２５．６°、５８９ｎｍ、ｃ＝０．３５ｇ／１００ｍＬ、クロロホルム。
【０２０７】
Ｒｔ＝１０．３４分、ｅｅ値＝９９％［カラム：Ｄａｉｃｅｌ  Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ−Ｈ、２５０ｍｍ×４．６ｍｍ、５μｍ；流量：１．０ｍＬ／分；検出：２８０ｎｍ；移動相：８０％アセトニトリル＋０．２％氷酢酸／２０％エタノール＋０．２％氷酢酸、定組成］。
【０２０８】
Ｂ．薬理的効力の評価
本発明による化合物の薬理活性を、当業者に公知のイン・ビトロおよびイン・ビボ試験によって示すことができる。下記の使用例は、本発明による化合物の生理活性を記載するものであるが、本発明はこれらの例に限定されるものではない。
【０２０９】
略称および頭字語
ＡＰＭＡ：４−アミノフェニル水銀アセテート
Ｂｒｉ（登録商標）−３５：ポリオキシエチレンラウリルエーテル
ＢＳＡ：ウシ血清アルブミン
ＣＹＰ：シトクロムＰ４５０
Ｄａｐ（またはＤｐａ）：Ｌ−２，３−ジアミノプロピオン酸（β−アミノ−１−アラニン）
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
Ｄｎｐ：２，４−ジニトロフェニル
ＥＤＴＡ：エチレンジアミンテトラ酢酸
ＨＥＰＥＳ：２−［４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−イル］エタンスルホン酸
ＨＭＥ：ヒトマクロファージエラスターゼ
ＩＣ：阻害濃度
ｉ．ｖ．：経静脈
Ｍｃａ：（７−メトキシクマリン−４−イル）アセチル
ＭＭＰ：マトリックスメタロペプチダーゼ
ＭＴＰ：マイクロタイタープレート
ＮＡＤＰ＋：ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドホスフェート（酸化型）
ＮＡＤＰＨ：ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドホスフェート（還元型）
Ｎｖａｌ：ノルバリン
ＰＥＧ：ポリエチレングリコール
ｐ．ｏ．：経口
Ｔｒｉｓ：トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン
ｖ／ｖ：（溶液の）体積比
ｗ／ｗ：（溶液の）重量比
Ｂ−１．イン・ビトロＨＭＥ阻害試験
ＨＭＥ（ＭＭＰ−１２）に対する本発明による化合物の活性を、イン・ビトロ阻害試験で確認する。好適なペプチド基質のＨＭＥ介在アミド分解開裂によって、この場合、蛍光増加に至る。蛍光のシグナル強度は、酵素活性に正比例する。酵素の半分が阻害される（蛍光のシグナル強度５０％）試験化合物の活性濃度を、ＩＣ５０として提供する。
【０２１０】
標準的イン・ビトロＨＭＥ阻害試験：
３８４ホールのマイクロタイタープレートで、試験緩衝液（０．１Ｍ  ＨＥＰＥＳ  ｐＨ７．４、０．１５Ｍ  ＮａＣｌ、０．０３Ｍ  ＣａＣｌ２、０．００４ｍＭ  ＺｎＣｌ２、０．０２Ｍ  ＥＤＴＡ、０．００５％Ｂｒｉｊ（登録商標））合計４１μＬの試験体積で、酵素（０．５ｎＭ  ＨＭＥ；Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、９１７−ＭＰ、製造者説明書による自己触媒的活性化）および分子内消光基質［５μＭ  Ｍｃａ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｄａｐ（Ｄｎｐ）−ＮＨ２；Ｂａｃｈｅｍ、Ｍ−２６７０］を、試験物質（ＤＭＳＯ中溶液として）の非存在下または存在下に３７℃で２時間インキュベートする。試験バッチの蛍光強度を測定する（励起３２３ｎｍ、発光３９３ｎｍ）。蛍光強度を有効成分濃度に対してプロットすることで、ＩＣ５０値を確認する。
【０２１１】
高感度イン・ビトロＨＭＥ阻害試験
上記の標準的なＨＭＥ阻害試験において、非常に強力な試験物質についてナノモル以下のＩＣ値が生じる場合、それのより正確な測定のために、改変された試験を用いる。この場合、１／１０の酵素濃度を用いて（最終濃度が例えば０．０５ｎＭ）、試験の感度を高くする。従って、試験のインキュベーション時間はより長いものを選択する（例えば、１６時間）。
【０２１２】
反応緩衝液中での血清アルブミン存在下におけるイン・ビトロＨＭＥ阻害試験
本試験は、上記の標準的なＨＭＥ阻害試験に相当するが、改変反応緩衝液を用いる。この反応緩衝液はさらに、生理的血清アルブミン含有量の約半量に相当する最終濃度２％（体積比）のウシ血清アルブミン（ＢＳＡ、脂肪酸を含まない、Ａ６００３、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）を含む。この改変試験での酵素濃度は、インキュベーション時間のように（例えば、３時間）、若干高くする（例えば、０．７５ｎＭ）。
【０２１３】
下記の表１には、本発明の作業例およびさらには先行技術からの２種類の構造的に関連のある比較化合物（ラセミ体として、または分離されたエナンチオマーとして）についてのこれらＨＭＥ阻害試験からのＩＣ５０値を示してある（場合により、いくつかの独立の個々の測定値からの平均値として、そして二つの有効桁数に四捨五入）。異なって作ったＤＭＳＯ原液からのラセミ体およびエナンチオマーについて、ＩＣ５０値を測定した。標準的方法によるラセミ体については社内材料ロジスティクスからの自動的に作られたＤＭＳＯ原液を用いたが、エナンチオマーについては、エナンチオマーの互いとのより正確な直接比較のため、各場合で、製造したばかりの人力で調製したＤＭＳＯ原液を用いた。
【０２１４】
表１：血清アルブミン（ＢＳＡ）の非存在下（−）または存在下（＋）でのヒトマクロファージエラスターゼ（ＨＭＥ／ｈＭＭＰ−１２）の阻害
【表２】
2017511319.tif 000033
【０２１５】
表１におけるデータから明らかなように、本発明による化合物１から３が、関連する比較化合物Ａ−１からＡ−３またはＢ−１からＢ−３と比較して大幅に強力であるか（複数桁の強さ：実施例１とＢ−１、実施例２とＢ−２、実施例３とＢ−３を参照）、または同等に強力である（同じ桁の強さ：実施例１とＡ−１、実施例２とＡ−３、実施例３とＡ−２を参照）。本発明による化合物および比較化合物の競争的である可能性のある例えば血清アルブミンに対する非特異的タンパク質結合の試験条件下でも同様の状況が生じる（ＢＳＡの存在下のＩＣ５０値：実施例２とＡ−３またはＢ−２を参照）。
【０２１６】
さらに、表２Ａ／２Ｂおよび３Ａ／３Ｂは、関連する比較化合物と比較して、特に匹敵するＨＭＥ活性を有するものと比較して、本発明による化合物の有意に高い選択性を示している（当該表を参照）。
【０２１７】
Ｂ−２．イン・ビトロＭＭＰ阻害試験
他のＭＭＰに対する本発明による化合物の活性強度（従って、それらの選択性）を同様に、イン・ビトロ阻害試験で確認する。この場合、好適なペプチド基質のＭＭＰ介在アミド分解開裂によっても、蛍光増加が生じる。蛍光のシグナル強度は、酵素活性に正比例する。酵素の半分が阻害される（蛍光のシグナル強度５０％）試験化合物の活性濃度を、ＩＣ５０として提供する。
【０２１８】
ａ）ヒトＭＭＰ：
イン・ビトロＭＭＰ−１阻害試験：
組換えＭＭＰ−１（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、９０１−ＭＰ）を、製造者説明書に従って、ＡＰＭＡを用いることで化学的に活性化する。白色３８４ホールマイクロタイタープレート（ＭＴＰ）で、分析される試験化合物１μＬ（ＤＭＳＯ中溶液として、好適な濃度は例えば、１ｎＭから３０μＭ）を、活性化酵素（最終濃度、例えば２ｎＭ）の反応緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ  ｐＨ７．５、１０ｍＭ  ＣａＣｌ２、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、０．０５％Ｂｒｉｊ（登録商標）−３５）中溶液２４μＬにピペット注入する。合計試験体積５０μＬとなるように、分子内消光基質Ｍｃａ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｄｐａ（Ｄｎｐ）−Ａｌａ−Ａｒｇ−ＮＨ２（最終濃度、例えば１０μＭ；Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ＥＳ−００１）を加えることで、酵素反応を開始する。好適な期間にわたり（例えば、温度３２℃で１２０分）、蛍光強度（励起３２０ｎｍ、発光４１０ｎｍ）を測定することで、ＭＭＰ−１反応の進行を測定する。
【０２１９】
イン・ビトロＭＭＰ−２阻害試験：
製造者説明書に従って、ＡＰＭＡを用い、組換えＭＭＰ−２（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、９０２−ＭＰ）を化学的に活性化する。３８４ホールマイクロタイタープレート（ＭＴＰ）で、分析対象の試験化合物（ＤＭＳＯ中溶液として、好適な濃度は例えば１ｎＭから３０μＭ）１μＬを、白色活性化酵素（最終濃度、例えば２ｎＭ）の反応緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ  ｐＨ７．５、１０ｍＭ  ＣａＣｌ２、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、０．０５％Ｂｒｉｊ（登録商標）−３５）中溶液２４μＬにピペットで注入する。合計試験体積５０μＬとなるように分子内消光基質Ｍｃａ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｄｐａ（Ｄｎｐ）−Ａｌａ−Ａｒｇ−ＮＨ２（最終濃度、例えば１０μＭ；Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ＥＳ−００１）を加えることで、酵素反応を開始する。好適な期間にわたり（例えば、温度３２℃で１２０分）、蛍光強度（励起３２０ｎｍ、発光４１０ｎｍ）を測定することで、ＭＭＰ−２反応の進行を測定する。
【０２２０】
イン・ビトロＭＭＰ−３阻害試験：
製造者説明書に従って、ＡＰＭＡを用い、組換えＭＭＰ−３（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、５１３−ＭＰ）を化学的に活性化する。白色３８４ホールマイクロタイタープレート（ＭＴＰ）で、分析対象の試験化合物（ＤＭＳＯ中溶液として、好適な濃度は例えば１ｎＭから３０μＭ）１μＬを、活性化酵素（最終濃度、例えば２ｎＭ）の反応緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ  ｐＨ７．５、１０ｍＭ  ＣａＣｌ２、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、０．０５％Ｂｒｉｊ（登録商標）−３５）中溶液２４μＬにピペットで注入する。合計試験体積５０μＬとなるように分子内消光基質Ｍｃａ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｎｖａｌ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ（Ｄｎｐ）−ＮＨ２（最終濃度、例えば１０μＭ；Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ＥＳ−００２）を加えることで酵素反応を開始する。好適な期間にわたり（例えば、温度３２℃で１２０分）、蛍光強度（励起３２０ｎｍ、発光４１０ｎｍ）を測定することで、ＭＭＰ−３反応の進行を測定する。
【０２２１】
イン・ビトロＭＭＰ−７阻害試験：
製造者説明書に従って、ＡＰＭＡを用い、組換えＭＭＰ−７（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、９０７−ＭＰ）を化学的に活性化する。白色３８４ホールマイクロタイタープレート（ＭＴＰ）で、分析対象の試験化合物（ＤＭＳＯ中溶液として、好適な濃度は例えば１ｎＭから３０μＭ）１μＬを、活性化酵素（最終濃度、例えば０．５ｎＭ）の反応緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ  ｐＨ７．５、１０ｍＭ  ＣａＣｌ２、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、０．０５％Ｂｒｉｊ（登録商標）−３５）中溶液２４μＬにピペット注入する。合計試験体積５０μＬとなるように、分子内消光基質Ｍｃａ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｄｐａ（Ｄｎｐ）−Ａｌａ−Ａｒｇ−ＮＨ２（最終濃度、例えば１０μＭ；Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ＥＳ−００１）を加えることで酵素反応を開始する。好適な期間にわたり（例えば、温度３２℃で１２０分）、蛍光強度（励起３２０ｎｍ、発光４１０ｎｍ）を測定することで、ＭＭＰ−７反応の進行を測定する。
【０２２２】
イン・ビトロＭＭＰ−８阻害試験：
製造者説明書に従って、ＡＰＭＡを用い、組換えＭＭＰ−８（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、９０８−ＭＰ）を化学的に活性化する。分析対象の試験化合物（ＤＭＳＯ中溶液として、好適な濃度は例えば１ｎＭから３０μＭ）１μＬを、白色３８４ホールマイクロタイタープレート（ＭＴＰ）で、活性化酵素（最終濃度、例えば０．５ｎＭ）の反応緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ  ｐＨ７．５、１０ｍＭ  ＣａＣｌ２、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、０．０５％Ｂｒｉｊ（登録商標）−３５）中溶液２４μＬにピペット注入する。合計試験体積５０μＬとなるように分子内消光基質Ｍｃａ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｄｐａ（Ｄｎｐ）−Ａｌａ−Ａｒｇ−ＮＨ２（最終濃度、例えば１０μＭ；Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ＥＳ−００１）を加えることで、酵素反応を開始する。好適な期間にわたり（例えば、温度３２℃で１２０分）、蛍光強度（励起３２０ｎｍ、発光４１０ｎｍ）を測定することで、ＭＭＰ−８反応の進行を測定する。
【０２２３】
イン・ビトロＭＭＰ−９阻害試験：
製造者説明書に従って、ＡＰＭＡを用い、組換えＭＭＰ−９（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、９１１−ＭＰ）を化学的に活性化する。白色３８４ホールマイクロタイタープレート（ＭＴＰ）で、分析対象の試験化合物（ＤＭＳＯ中溶液として、好適な濃度は例えば１ｎＭから３０μＭ）１μＬを、活性化酵素（最終濃度、例えば０．１ｎＭ）の反応緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ  ｐＨ７．５、１０ｍＭ  ＣａＣｌ２、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、０．０５％Ｂｒｉｊ（登録商標）−３５）中溶液２４μＬにピペット注入する。合計試験体積５０μＬとなるように分子内消光基質Ｍｃａ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｄｐａ（Ｄｎｐ）−Ａｌａ−Ａｒｇ−ＮＨ２（最終濃度、例えば１０μＭ；Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ＥＳ−００１）を加えることで酵素反応を開始する。好適な期間にわたり（例えば、温度３２℃で１２０分）、蛍光強度（励起３２０ｎｍ、発光４１０ｎｍ）を測定することで、ＭＭＰ−９反応の進行を測定する。
【０２２４】
イン・ビトロＭＭＰ−１０阻害試験：
製造者説明書に従って、ＡＰＭＡを用い、組換えＭＭＰ−１０（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、９１０−ＭＰ）を化学的に活性化する。白色３８４ホールマイクロタイタープレート（ＭＴＰ）で、分析対象の試験化合物（ＤＭＳＯ中溶液として、好適な濃度は例えば１ｎＭから３０μＭ）１μＬを、活性化酵素（最終濃度、例えば２ｎＭ）の反応緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ  ｐＨ７．５、１０ｍＭ  ＣａＣｌ２、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、０．０５％Ｂｒｉｊ（登録商標）−３５）中溶液２４μＬにピペット注入する。合計試験体積５０μＬとなるように分子内消光基質Ｍｃａ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｎｖａｌ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ（Ｄｎｐ）−ＮＨ２（最終濃度、例えば１０μＭ；Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ＥＳ−００２）を加えることで酵素反応を開始する。好適な期間にわたり（例えば、温度３２℃で１２０分間）蛍光強度（励起３２０ｎｍ、発光４１０ｎｍ）を測定することで、ＭＭＰ−１０反応の進行を測定する。
【０２２５】
イン・ビトロＭＭＰ−１３阻害試験：
製造者説明書に従って、ＡＰＭＡを用い、組換えＭＭＰ−１３（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、５１１−ＭＰ）を化学的に活性化する。白色３８４ホールマイクロタイタープレート（ＭＴＰ）で、分析対象の試験化合物（ＤＭＳＯ中溶液として、好適な濃度は例えば１ｎＭから３０μＭ）１μＬを、活性化酵素（最終濃度、例えば０．１ｎＭ）の反応緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ  ｐＨ７．５、１０ｍＭ  ＣａＣｌ２、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、０．０５％Ｂｒｉｊ（登録商標）−３５）中溶液２４μＬにピペット注入する。合計試験体積５０μＬとなるように分子内消光基質Ｍｃａ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｄｐａ（Ｄｎｐ）−Ａｌａ−Ａｒｇ−ＮＨ２（最終濃度、例えば１０μＭ；Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ＥＳ−００１）を加えることで酵素反応を開始する。好適な期間にわたり（例えば、温度３２℃で１２０分）、蛍光強度（励起３２０ｎｍ、発光４１０ｎｍ）を測定することで、ＭＭＰ−１３反応の進行を測定する。
【０２２６】
イン・ビトロＭＭＰ−１４阻害試験：
製造者説明書に従って、組換えフーリン（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、１５０３−ＳＥ）を用い、組換えＭＭＰ−１４（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、９１８−ＭＰ）を酵素的に活性化する。白色３８４ホールマイクロタイタープレート（ＭＴＰ）で、分析対象の試験化合物（ＤＭＳＯ中溶液として、好適な濃度は例えば、１ｎＭから３０μＭ）１μＬを、活性化酵素（最終濃度、例えば０．５ｎＭ）の反応緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ  ｐＨ７．５、１０ｍＭ  ＣａＣｌ２、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、０．０５％Ｂｒｉｊ（登録商標）−３５）中溶液２４μＬにピペット注入する。合計試験体積５０μＬとなるように分子内消光基質Ｍｃａ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｄｐａ（Ｄｎｐ）−Ａｌａ−Ａｒｇ−ＮＨ２（最終濃度、例えば５μＭ；Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ＥＳ−０１０）を加えることで、酵素反応を開始する。好適な期間にわたり（例えば、温度３２℃で１２０分）、蛍光強度（励起３２０ｎｍ、発光４１０ｎｍ）を測定することで、ＭＭＰ−１４反応の進行を測定する。
【０２２７】
イン・ビトロＭＭＰ−１６阻害試験：
製造者説明書に従って、組換えフーリン（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、１５０３−ＳＥ）を用い、組換えＭＭＰ−１６（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、１７８５−ＭＰ）を酵素的に活性化する。白色３８４ホールマイクロタイタープレート（ＭＴＰ）で、分析対象の試験化合物（ＤＭＳＯ中溶液として、好適な濃度は例えば、１ｎＭから３０μＭ）１μＬを、活性化酵素（最終濃度、例えば１ｎＭ）の反応緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ  ｐＨ７．５、１０ｍＭ  ＣａＣｌ２、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、０．０５％Ｂｒｉｊ（登録商標）−３５）中溶液２４μＬにピペット注入する。合計試験体積５０μＬとなるように分子内消光基質Ｍｃａ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｄｐａ（Ｄｎｐ）−Ａｌａ−Ａｒｇ−ＮＨ２（最終濃度、例えば５μＭ；Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ＥＳ−０１０）を加えることで酵素反応を開始する。好適な期間にわたり（例えば、温度３２℃で１２０分）蛍光強度（励起３２０ｎｍ、発光４１０ｎｍ）を測定することで、ＭＭＰ−１６反応の進行を測定する。
【０２２８】
下記の表２Ａおよび２Ｂに、本発明の代表的実施形態例、さらには先行技術からの２種類の構造的に関連のある比較化合物（ラセミ体として、または分離されたエナンチオマーとして）についてのヒトＭＭＰの阻害に関するこれらの試験からのＩＣ５０値を示してある（場合により、いくつかの独立の個々の測定値からの平均値として、そして二つの有効桁数に四捨五入）。異なって作ったＤＭＳＯ原液からのラセミ体およびエナンチオマーについて、ＩＣ５０値を測定した。標準的方法によりラセミ体について社内材料ロジスティクスからの自動的に作られたＤＭＳＯ原液を用いたが、製造したばかりのエナンチオマーの場合、各場合でエナンチオマーを互いにより正確に直接比較するために、人力で調製したＤＭＳＯ原液を用いた。
【０２２９】
表２Ａ：ヒトＭＭＰの阻害
【表３】
2017511319.tif 000034
【０２３０】
表２Ｂ：ヒトＭＭＰの阻害
【表４】
2017511319.tif 000035
【０２３１】
表１および２Ａ／２Ｂに示した阻害データの比較から、本発明による化合物、特にはより活性なエナンチオマーが、ＨＭＥに対して非常に高い阻害効力（二桁ピコモルの範囲で）および同時に関連するヒトＭＭＰに対する非常に高い選択性（２から４桁またはそれ以上大きい）を有することがわかる。
【０２３２】
表２Ａ／２Ｂにおけるデータからさらに明らかなように、本発明による化合物は、関連する比較化合物Ａ−１／Ａ−３またはＢ−１／Ｂ−２と比較して、有意に高い選択性（基本的に、複数桁）または同等の選択性（基本的に、同桁）を有する。
【０２３３】
総合的に見て、このデータから、本発明による化合物が、関連する比較化合物と比較して有意に選択性が高いか、同等の選択性の場合には効力が有意に高く、すなわち活性の強度および選択性の組み合わせに関してかなり改善されていることは明らかである。
【０２３４】
ｂ）齧歯類のＭＭＰ：
マウスのイン・ビトロＭＭＰ−２阻害試験：
製造者説明書に従って、ＡＰＭＡを用い、マウスの組換えＭＭＰ−２（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、９２４−ＭＰ）を化学的に活性化する。白色３８４ホールマイクロタイタープレート（ＭＴＰ）で、分析対象の試験化合物（ＤＭＳＯ中溶液として、好適な濃度は例えば１ｎＭから３０μＭ）１μＬを、活性化酵素（最終濃度、例えば０．１ｎＭ）の反応緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ  ｐＨ７．５、１０ｍＭ  ＣａＣｌ２、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、０．０５％Ｂｒｉｊ（登録商標）−３５）中溶液２４μＬにピペットで注入する。合計試験体積５０μＬとなるように分子内消光基質Ｍｃａ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｄｐａ（Ｄｎｐ）−Ａｌａ−Ａｒｇ−ＮＨ２（最終濃度、例えば１０μＭ；Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ＥＳ−００１）を加えることで酵素反応を開始する。好適な期間にわたり（例えば、温度３２℃で１２０分）蛍光強度（励起３２０ｎｍ、発光４１０ｎｍ）を測定することで、ＭＭＰ−２反応の進行を測定する。
【０２３５】
マウスのイン・ビトロＭＭＰ−３阻害試験：
製造者説明書に従って、ＡＰＭＡを用い、マウスの組換えＭＭＰ−３（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、５４８−ＭＰ）を化学的に活性化する。白色３８４ホールマイクロタイタープレート（ＭＴＰ）で、分析対象の試験化合物（ＤＭＳＯ中溶液として、好適な濃度は例えば１ｎＭから３０μＭ）１μＬを、活性化酵素（最終濃度、例えば０．５ｎＭ）の反応緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ  ｐＨ７．５、１０ｍＭ  ＣａＣｌ２、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、０．０５％Ｂｒｉｊ（登録商標）−３５）中溶液２４μＬにピペットで注入する。合計試験体積５０μＬとなるように分子内消光基質Ｍｃａ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｎｖａｌ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ（Ｄｎｐ）−ＮＨ２（最終濃度、例えば５μＭ；Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ＥＳ−００２）を加えることで酵素反応を開始する。好適な期間にわたり（例えば、温度３２℃で１２０分）蛍光強度（励起３２０ｎｍ、発光４１０ｎｍ）を測定することで、ＭＭＰ−３反応の進行を測定する。
【０２３６】
マウスのイン・ビトロＭＭＰ−７阻害試験：
製造者説明書に従って、ＡＰＭＡを用い、マウスの組換えＭＭＰ−７（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、２９６７−ＭＰ）を化学的に活性化する。白色３８４ホールマイクロタイタープレート（ＭＴＰ）で、分析対象の試験化合物（ＤＭＳＯ中溶液として、好適な濃度は例えば１ｎＭから３０μＭ）１μＬを、活性化酵素（最終濃度、例えば０．５ｎＭ）の反応緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ  ｐＨ７．５、１０ｍＭ  ＣａＣｌ２、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、０．０５％Ｂｒｉｊ（登録商標）−３５）中溶液２４μＬにピペットで注入する。合計試験体積５０μＬとなるように分子内消光基質Ｍｃａ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｄｐａ（Ｄｎｐ）−Ａｌａ−Ａｒｇ−ＮＨ２（最終濃度、例えば５μＭ；Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ＥＳ−０１０）を加えることで酵素反応を開始する。好適な期間にわたり（例えば、温度３２℃で１２０分）蛍光強度（励起３２０ｎｍ、発光４１０ｎｍ）を測定することで、ＭＭＰ−７反応の進行を測定する。
【０２３７】
マウスのイン・ビトロＭＭＰ−８阻害試験：
製造者説明書に従って、ＡＰＭＡを用い、マウスの組換えＭＭＰ−８（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、２９０４−ＭＰ）を化学的に活性化する。白色３８４ホールマイクロタイタープレート（ＭＴＰ）で、分析対象の試験化合物（ＤＭＳＯ中溶液として、好適な濃度は例えば１ｎＭから３０μＭ）１μＬを、活性化酵素（最終濃度、例えば２ｎＭ）の反応緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ  ｐＨ７．５、１０ｍＭ  ＣａＣｌ２、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、０．０５％Ｂｒｉｊ（登録商標）−３５）中溶液２４μＬにピペットで注入する。合計試験体積５０μＬとなるように分子内消光基質Ｍｃａ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｄｐａ（Ｄｎｐ）−Ａｌａ−Ａｒｇ−ＮＨ２（最終濃度、例えば５μＭ；Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ＥＳ−０１０）を加えることで、酵素反応を開始する。好適な期間にわたり（例えば、温度３２℃で１２０分）、蛍光強度（励起３２０ｎｍ、発光４１０ｎｍ）を測定することで、ＭＭＰ−８反応の進行を測定する。。
【０２３８】
マウスのイン・ビトロＭＭＰ−９阻害試験：
製造者説明書に従って、ＡＰＭＡを用い、マウスの組換えＭＭＰ−９（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、９０９−ＭＰ）を化学的に活性化する。白色３８４ホールマイクロタイタープレート（ＭＴＰ）で、分析対象の試験化合物（ＤＭＳＯ中溶液として、好適な濃度は例えば１ｎＭから３０μＭ）１μＬを、活性化酵素（最終濃度、例えば０．１ｎＭ）の反応緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ  ｐＨ７．５、１０ｍＭ  ＣａＣｌ２、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、０．０５％Ｂｒｉｊ（登録商標）−３５）２４μＬにピペットで注入する。合計試験体積５０μＬとなるように分子内消光基質Ｍｃａ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｄｐａ（Ｄｎｐ）−Ａｌａ−Ａｒｇ−ＮＨ２（最終濃度、例えば５μＭ；Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ＥＳ−００１）を加えることで酵素反応を開始する。好適な期間にわたり（例えば、温度３２℃で１２０分）、蛍光強度（励起３２０ｎｍ、発光４１０ｎｍ）を測定することで、ＭＭＰ−９反応の進行を測定する。
【０２３９】
マウスのイン・ビトロＭＭＰ−１２阻害試験：
製造者説明書に従って、マウスの組換えＭＭＰ−１２（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、３４６７−ＭＰ）を自己触媒的に活性化する。白色３８４ホールマイクロタイタープレート（ＭＴＰ）で、分析対象の試験化合物（ＤＭＳＯ中溶液として、好適な濃度は例えば１ｎＭから３０μＭ）１μＬを、活性化酵素（最終濃度、例えば１ｎＭ）の反応緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ  ｐＨ７．５、１０ｍＭ  ＣａＣｌ２、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、０．０５％Ｂｒｉｊ（登録商標）−３５）中溶液２４μＬにピペットで注入する。合計試験体積５０μＬとなるように分子内消光基質Ｍｃａ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｄｐａ（Ｄｎｐ）−Ａｌａ−Ａｒｇ−ＮＨ２（最終濃度、例えば５μＭ；Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ＥＳ−０１０）を加えることで酵素反応を開始する。好適な期間にわたり（例えば、温度３２℃で１２０分）、蛍光強度（励起３２０ｎｍ、発光４１０ｎｍ）を測定することで、ＭＭＰ−１２反応の進行を測定する。
【０２４０】
マウスの高感度イン・ビトロＭＭＰ−１２阻害試験：
上記のマウスのＭＭＰ−１２阻害試験において、高効力試験物質についてナノモル以下のＩＣ値が生じる場合、それのより正確な測定のために、改変された試験を用いる。この場合、１／１０の酵素濃度を用いて（最終濃度が例えば０．１ｎＭ）、試験の感度を高くする。試験のインキュベーション時間は、それに応じてより長くなるように選択する（例えば、１６時間）。
【０２４１】
ラットのイン・ビトロＭＭＰ−２阻害試験：
製造者説明書に従って、ＡＰＭＡを用い、ラットの組換えＭＭＰ−２（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、９２４−ＭＰ）を化学的に活性化する。白色３８４ホールマイクロタイタープレート（ＭＴＰ）で、分析対象の試験化合物（ＤＭＳＯ中溶液として、好適な濃度は例えば１ｎＭから３０μＭ）０．１μＬを、活性化酵素（最終濃度、例えば１ｎＭ）の反応緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ  ｐＨ７．５、１０ｍＭ  ＣａＣｌ２、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、０．０５％Ｂｒｉｊ（登録商標）−３５）中溶液２４μＬにピペットで注入する。合計試験体積５０μＬとなるように分子内消光基質Ｍｃａ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｄｐａ（Ｄｎｐ）−Ａｌａ−Ａｒｇ−ＮＨ２（最終濃度、例えば１０μＭ；Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ＥＳ−００１）を加えることで酵素反応を開始する。好適な期間にわたり（例えば、温度３２℃で１２０分）、蛍光強度（励起３２０ｎｍ、発光４１０ｎｍ）を測定することで、ＭＭＰ−２反応の進行を測定する。
【０２４２】
ラットのイン・ビトロＭＭＰ−８阻害試験：
製造者説明書に従って、ＡＰＭＡを用い、ラットの組換えＭＭＰ−８（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、３２４５−ＭＰ）を化学的に活性化する。白色３８４ホールマイクロタイタープレート（ＭＴＰ）で、分析対象の試験化合物（ＤＭＳＯ中溶液として、好適な濃度は例えば１ｎＭから３０μＭ）２μＬを、活性化酵素（最終濃度、例えば１ｎＭ）の反応緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ  ｐＨ７．５、１０ｍＭ  ＣａＣｌ２、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、０．０５％Ｂｒｉｊ（登録商標）−３５）中溶液２４μＬにピペットで注入する。合計試験体積５０μＬとなるように分子内消光基質Ｍｃａ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｄｐａ（Ｄｎｐ）−Ａｌａ−Ａｒｇ−ＮＨ２（最終濃度、例えば５μＭ；Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ＥＳ−０１０）を加えることで酵素反応を開始する。好適な期間にわたり（例えば、温度３２℃で１２０分）、蛍光強度（励起３２０ｎｍ、発光４１０ｎｍ）を測定することで、ＭＭＰ−８反応の進行を測定する。
【０２４３】
ラットのイン・ビトロＭＭＰ−９阻害試験：
製造者説明書に従って、ＡＰＭＡを用い、ラットの組換えＭＭＰ−９（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、５４２７−ＭＭ）を化学的に活性化する。白色３８４ホールマイクロタイタープレート（ＭＴＰ）で、分析対象の試験化合物（ＤＭＳＯ中溶液として、好適な濃度は例えば１ｎＭから３０μＭ）０．１μＬを、活性化酵素（最終濃度、例えば１ｎＭ）の反応緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ  ｐＨ７．５、１０ｍＭ  ＣａＣｌ２、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、０．０５％Ｂｒｉｊ（登録商標）−３５）中溶液２４μＬにピペットで注入する。合計試験体積５０μＬとなるように分子内消光基質Ｍｃａ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｄｐａ（Ｄｎｐ）−Ａｌａ−Ａｒｇ−ＮＨ２（最終濃度、例えば５μＭ；Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ＥＳ−００１）を加えることで酵素反応を開始する。好適な期間にわたり（例えば、温度３２℃で１２０分）、蛍光強度（励起３２０ｎｍ、発光４１０ｎｍ）を測定することで、ＭＭＰ−９反応の進行を測定する。
【０２４４】
ラットのイン・ビトロＭＭＰ−１２阻害試験：
ラットのＭＭＰ−１２（Ｕｎｉｐｒｏｔ  ＮＰ_４４６４１５．１；構成物Ｌ９６−Ｖ２７７）を、別のＮ末端Ｈｉｓ−Ｔａｇおよび大腸菌（Ｅ．  ｃｏｌｉ）（ＢＬ２１）におけるｐＤＥｃｏ７ベクターによる連続ＴＥＶ開裂配列と発現させる。そうして組換え的に発現されたタンパク質は、細胞内不溶タンパク質区画（いわゆる封入体）を形成する。これは、分離および変性条件下での強い洗浄後に可溶化される。そのためには、大腸菌（Ｅ．  ｃｏｌｉ）培地２５０ｍＬからの封入体ペレット分画を体積１２０ｍＬの緩衝液Ａ（５０ｍＭ  ＴｒｉｓｐＨ７．４、１００ｍＭ  ＮａＣｌ、０．０３ｍＭ  ＺｎＣｌ２、１０ｍＭ  ＣａＣｌ２、８Ｍ尿素）に取る。各場合で緩衝液Ｂ（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ  ｐＨ７．４、１００ｍＭ  ＮａＣｌ、０．０３ｍＭ  ＺｎＣｌ２、１０ｍＭ  ＣａＣｌ２）に対して４から８℃で数回、サンプル６０ｍＬを透析することで、可溶性タンパク質を復元させる。透析後、サンプルを遠心する（２５０００×ｇ）。上清中に再折り畳みタンパク質を得て、収量は大腸菌（Ｅ．  ｃｏｌｉ）培地２５０ｍＬ当たり３．７ｍｇである。そうして得られたタンパク質は、それ以上の精製操作やプロテアーゼ介在開裂工程なしに酵素的に活性である。
【０２４５】
白色３８４ホールマイクロタイタープレート（ＭＴＰ）で、分析対象の試験化合物（ＤＭＳＯ中溶液として、好適な濃度は例えば、１ｎＭから３０μＭ）１μＬを、ＭＭＰ−１２タンパク質（最終濃度、例えば１ｎＭ）の反応緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ  ｐＨ７．５、１０ｍＭ  ＣａＣｌ２、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、０．０５％Ｂｒｉｊ（登録商標）−３５）中溶液２４μＬにピペットで注入する。合計試験体積５０μＬとなるように分子内消光基質Ｍｃａ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｄｐａ（Ｄｎｐ）−Ａｌａ−Ａｒｇ−ＮＨ２（最終濃度、例えば５μＭ；Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ＥＳ−００１）を加えることで酵素反応を開始する。好適な期間にわたり（例えば、温度３２℃で１２０分）、蛍光強度（励起３２０ｎｍ、発光４１０ｎｍ）を測定することで、ＭＭＰ−１２反応の進行を測定する。
【０２４６】
下記の表３Ａおよび３Ｂには、本発明の代表的な実施形態例とさらには先行技術からの２種類の構造的に関係のある比較化合物（ラセミ体として、および分離されたエナンチオマーとして）についての齧歯類ＭＭＰの阻害に関するこれらの試験からのＩＣ５０値が提供されている（一部においては、いくつかの独立の個々の測定値の平均として、そして二つの有効桁数の四捨五入）。異なって作ったＤＭＳＯ原液からのラセミ体およびエナンチオマーについて、ＩＣ５０値を測定した。標準的方法によるラセミ体については社内材料ロジスティクスからの自動的に作られたＤＭＳＯ原液を用いたが、エナンチオマーの場合、エナンチオマーの互いとのより正確な直接比較のため、各場合で、製造したばかりの人力で調製したＤＭＳＯ原液を用いた。
【０２４７】
表３Ａ：マウスのＭＭＰの阻害
【表５】
2017511319.tif 000036
【０２４８】
表３Ｂ：ラットのＭＭＰの阻害
【表６】
2017511319.tif 000037
【０２４９】
従って、本発明による化合物は、マウスおよびラットのＭＭＰ−１２に対する非常に高い阻害効力（ナノモル以下の範囲）を有し、同時にマウスおよびラットの他のＭＭＰと比較して非常に高い選択性（通常は二桁）を有する。
【０２５０】
表３Ａ／３Ｂ中のデータから明らかなように、本発明による化合物は、ＭＭＰ−１２に関して関連する比較化合物と比較して有意に強力であり（実施例１とＢ−１、実施例２とＢ−２を比較）、または同等に強力である（実施例１とＡ−１、実施例２とＡ−３を比較）。さらに、本発明による化合物は、マウスおよびラットの他のＭＭＰに関して、関連する比較化合物（基本的に、複数桁）と比較して有意に高い選択性を有する。
【０２５１】
ＭＭＰ−１２に対する非常に高い効力と組み合わせて、マウスおよびラットのオーソロガスＭＭＰに対するこの有意に高い選択性のため、本発明による化合物は、比較化合物と対照的に、ヒト対象者および患者での臨床試験に先立つ齧歯類での疾患モデルでの前臨床試験に特に適している。
【０２５２】
従って、表１、２Ａ／２Ｂおよび３Ａ／３Ｂ中の阻害データの要約的評価として、本発明による化合物がヒトならびにマウスおよびラットのオーソロガスＭＭＰ−１２酵素の両方に対して非常に高い阻害効力を有し、さらに関連するヒトもしくは齧歯類ＭＭＰに対する非常に高い選択性を示すと言うことができる。活性強度および選択性の本発明による化合物の各場合での得られたプロファイルは常に、先行技術からの列記された比較化合物のものより有意に良好である。
【０２５３】
Ｂ−３．肺気腫の動物モデル
マウス、ラットまたはハムスターにおけるエラスターゼ誘発肺気腫は、広く使用されている肺気腫の動物モデルである［Ｔｈｅ  Ｆａｓ／Ｆａｓ−ｌｉｇａｎｄ  ｐａｔｈｗａｙ  ｄｏｅｓ  ｎｏｔ  ｍｅｄｉａｔｅ  ｔｈｅ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ｉｎ  ｅｌａｓｔａｓｅ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｅｍｐｈｙｓｅｍａ  ｉｎ  ｍｉｃｅ，  Ｓａｗａｄａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｅｘｐ．  Ｌｕｎｇ  Ｒｅｓ．  ３３，  ２７７−２８８  （２００７）］。動物は、ブタ膵臓エラスターゼの経口気管内点滴を受ける。試験物質による動物の処置は、ブタ膵臓エラスターゼの点滴当日に開始し、そして３週間の期間にわたる。研究の終了後、肺コンプライアンスを測定し、肺胞の形態計測を実施する。
【０２５４】
肺気腫のさらなるマウスモデルは、喫煙およびインフルエンザウィルス感染によって誘発される肺気腫である［Ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｒｉｂｏｎｕｃｌｅａｓｅ  Ｌ  ｉｎ  ｖｉｒａｌ  ｐａｔｈｏｇｅｎ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｐａｔｔｅｒｎ／ｉｎｆｌｕｅｎｚａ  ｖｉｒｕｓ  ａｎｄ  ｃｉｇａｒｅｔｔｅ  ｓｍｏｋｅ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ，  Ｚｈｏｕ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １９１，  ２６３７−２６４６  （２０１３）］。動物を数週間にわたってタバコ煙に曝露し、次にインフルエンザウィルス感染に曝露する。試験終了後、気管支肺胞上皮洗浄液（ＢＡＬＦ）中の分化細胞カウントを求め、肺の肺胞形態計測を行う。
【０２５５】
Ｂ−４．シリカ誘発肺炎症の動物モデル
マウス、ラットもしくはハムスターにおけるシリカの経口気管内投与により、肺での炎症が生じる［Ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｏｆ  ｓｉｌｉｃａ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  ｆｉｂｒｏｓｉｓ  ｉｎ  ｍｉｃｅ，  Ｓｈｉｍｂｏｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｅｘｐ．  Ｌｕｎｇ  Ｒｅｓ．  ３６，  ２９２−３０１  （２０１０）］。動物を、シリカ点滴当日に試験物質で処理する。２４時間後、気管支肺胞上皮洗浄を行って、細胞含有量および生物マーカーを測定する。
【０２５６】
Ｂ−５．シリカ誘発肺線維症のアニマルモデル
マウス、ラットもしくはハムスターにおけるシリカ誘発肺線維症は、広く使用されている肺線維症の動物モデルである［Ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｏｆ  ｓｉｌｉｃａ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  ｆｉｂｒｏｓｉｓ  ｉｎ  ｍｉｃｅ，  Ｓｈｉｍｂｏｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｅｘｐ．  Ｌｕｎｇ  Ｒｅｓ．  ３６，  ２９２−３０１  （２０１０）］。動物に、シリカの経口気管内点滴を受けさせる。試験物質による動物の処置を、シリカ点滴当日または治療的には１週間後に開始し、６週間にわたって延長する。試験終了後、気管支肺胞上皮洗浄による細胞含有量および生物マーカーの測定、そして肺線維症の組織学的評価を行う。
【０２５７】
Ｂ−６．ＡＴＰ誘発肺炎症の動物モデル
マウスへのＡＴＰ（アデノシン三リン酸）の気管内投与により、肺における炎症が生じる［Ａｃｕｔｅ  ｌｕｎｇ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｖｅｎｔｉｌａｔｏｒ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｌｕｎｇ  ｉｎｊｕｒｙ  ｃａｕｓｅｄ  ｂｙ  ＡＴＰ  ｖｉａ  ｔｈｅ  Ｐ２Ｙ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ：  Ａｎ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ｓｔｕｄｙ，  Ｍａｔｓｕｙａｍａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｒｅｓｐｉｒ．  Ｒｅｓ．  ９７９  （２００８）］。動物を、２４時間の期間にわたりＡＴＰ点滴当日に、試験物質で処理する（強制経口投与により、飼料もしくは飲料水を加えることで、浸透圧ミニポンプを使用して、皮下もしくは腹腔内注射により、または吸入により）。実験終了後、細胞含有量および炎症誘発マーカーを測定するための気管支肺胞上皮洗浄を行う。
【０２５８】
Ｂ−７．ＣＹＰ阻害試験
酵素源として蓄積ヒト肝臓ミクロソームを用い、ＣＹＰ特異的代謝物を形成する標準物質（下記参照）の存在下に、物質がヒトにおけるＣＹＰ酵素ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ｃ９、ＣＹＰ２Ｄ６およびＣＹＰ３Ａ４を阻害する能力を調べる。試験化合物の非存在下での標準物質のＣＹＰ特異的代謝物生成の程度と比較して、６種類の試験化合物濃度［２．８、５．６、８．３、１６．７、２０（または２５）および５０μＭ）で阻害効果を阻害し、相当するＩＣ５０値を計算する。個々のＣＹＰアイソフォームを特異的に阻害する標準的阻害剤を常に共インキュベートして、異なるシリーズ間の結果を同等とする。
【０２５９】
各場合６種類の異なる濃度の試験化合物（潜在的阻害剤として）の存在下でのフェナセチン、ジクロフェナク、トルブタミド、デキストロメトルファンまたはミダゾラムのヒト肝臓ミクロソームとのインキュベーションをワークステーションで行う（Ｔｅｃａｎ，  Ｇｅｎｅｓｉｓ，  Ｃｒａｉｌｓｈｅｉｍ，  Ｇｅｒｍａｎｙ）。標準的インキュベーション混合物は、総体積２００μＬに１．３ｍＭ  ＮＡＤＰ＋、３．３ｍＭ  ＭｇＣｌ２・６Ｈ２Ｏ、３．３ｍＭグルコース６−ホスフェート、グルコース６−ホスフェートデヒドロゲナーゼ（０．４Ｕ／ｍＬ）および１００ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）を含む。試験化合物を好ましくはアセトニトリルに溶かす。９６ウェルプレートを、所定期間にわたり３７℃で蓄積ヒト肝臓ミクロソームとともにインキュベートする。好適な内部標準を含むアセトニトリル１００μＬを加えることで反応停止する。沈澱したタンパク質を遠心によって除去し、上清を合わせ、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳによって分析する。
【０２６０】
Ｂ−８．代謝安定性を測定するための肝細胞アッセイ
肝細胞に対する試験化合物の代謝安定性を、実験においてできる限り線形動力学的条件を確保するために化合物を低濃度（好ましくは、１μＭ未満または約１μＭ）および低細胞数（好ましくは、１×１０６細胞／ｍＬ）でインキュベートすることによって決定する。インキュベーション溶液からのサンプル７個をＬＣ−ＭＳ分析用に規定時間枠で取り出して、特定化合物の半減期（すなわち、分解）を測定する。この半減期を用いて、各種「クリアランス」パラメータ（ＣＬ）および「Ｆｍａｘ」値を計算する（下記参照）。
【０２６１】
ＣＬおよびＦｍａｘ値は、肝細胞中の該化合物の１相および２相代謝の尺度である。インキュベーション混合物中の酵素に対する有機溶媒の影響をできる限り低く維持するため、それの濃度は通常、１％（アセトニトリル）または０．１％（ＤＭＳＯ）に限定される。
【０２６２】
全ての動物種および種族（ｒａｃｅｓ）について、細胞１．１×１０８／肝臓ｇの肝臓中の肝細胞の細胞数を計算する。インキュベーション時間（通常、９０分）を大幅に超えている半減期を基準にして算出されたＣＬパラメータは、大まかなガイドラインと見なされ得るにすぎない。
【０２６３】
計算されたパラメータおよびそれらの意味は以下の通りである。
【表７】
2017511319.tif 000038
【０２６４】
下記の表４は、実施形態例２について、化合物のラット肝細胞とのインキュベーション後のこのアッセイからのＣＬおよびＦｍａｘ値を示す（いくつかの独立の個々の測定からの平均値として）。
【０２６５】
表４：ラット肝細胞とのインキュベーション後の血中クリアランスおよび生物学的利用能計算値
【表８】
2017511319.tif 000039
【０２６６】
従って、本発明の特定実施形態例は、このモデルで、計算血中クリアランスが低く、計算生物学的利用能が高いイン・ビトロでの良好な薬物動態プロファイルを示す。
【０２６７】
Ｂ−９．代謝試験
本発明の化合物の代謝プロファイルを確認するため、非常に完全な肝Ｉ相およびＩＩ相代謝ならびに代謝に関与する酵素についての情報を取得および比較するために、それら化合物を各種動物種（例えば、ラット、イヌ）およびヒト起源の肝臓ミクロソームまたは初代新鮮肝細胞とともにインキュベートする。
【０２６８】
本発明の化合物を約１から１０μＭの濃度でインキュベートする。このために、アセトニトリル中０．１から１ｍＭの濃度を有する当該化合物の原液を調製し、次いで、インキュベーション混合物に１：１００希釈でピペットを用いて移す。肝臓ミクロソームを、１ｍＭ  ＮＡＤＰ＋、１０ｍＭグルコース−６−リン酸および１単位のグルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼからなるＮＡＤＰＨ生成系を含むおよび含まない５０ｍＭリン酸カリウム緩衝液ｐＨ７．４中３７℃でインキュベートする。初代肝細胞を同様に３７℃で、ウィリアムＥ培地中懸濁液でインキュベートする。０から４時間のインキュベーション時間後、インキュベーション混合物をアセトニトリル（最終濃度約３０％）を用いて停止し、タンパク質を約１５０００×ｇで遠心分離する。こうして停止したサンプルを直接分析するか、分析まで−２０℃で保存する。
【０２６９】
紫外線および質量分析検出を含む高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ−ＵＶ−ＭＳ／ＭＳ）によって分析を行う。このために、インキュベーションサンプルの上清を、好適なＣ１８逆相カラムおよびアセトニトリルと１０ｍＭギ酸アンモニウム水溶液または０．０５％ギ酸の可変溶離液混合物を用いてクロマトグラフィー精製する。質量分析データと組み合わせたＵＶクロマトグラムは、代謝物の同定、構造決定および定量的評価、ならびにインキュベーション混合物中の本発明による化合物の代謝的減少の定量的測定に役立つ。
【０２７０】
Ｂ−１０．イン・ビボでの薬物動態試験
試験対象の物質を、ラット、マウスもしくはイヌにおいて、液剤として静脈投与し（例えば、少量のＤＭＳＯを加えた相当する血漿中溶液、またはＰＥＧ／エタノール／水混合物中溶液）、経口投与を液剤として（例えばＳｏｌｕｔｏｌ／エタノール／水またはＰＥＧ／エタノール／水混合物）または懸濁液として（例えば、水／チロース混合物中懸濁液）行い、各場合とも強制経口投与である。物質の投与後、動物から定時に採血を行う。血液をヘパリン処理し、遠心によってそれから血漿を得る。試験物質を、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳによって血漿中で分析的に定量する。このようにして求めた血漿濃度／時間プロットから、内部標準を用い、バリデーション済みコンピュータプログラムを用いて、ＡＵＣ（濃度／時間曲線下の面積）、Ｃｍａｘ（最大血漿濃度）、ｔ１／２（半減期）、ＶＳＳ（分布容積）およびＣＬ（クリアランス）ならびに絶対および相対生物学的利用能ＦおよびＦｒｅｌ（静注／経口比較または経口投与後の懸濁液と液剤との比較）などの薬物動態パラメータを計算する。
【０２７１】
下記の表５は、実施形態例２についてのラット、マウスおよびイヌでの薬物動態パラメータを示す。
【０２７２】
表５：実施形態例２についての薬物動態パラメータ
【表９】
2017511319.tif 000040
【０２７３】
従って、本発明の特定の実施形態例は、イン・ビボで、液剤（Ｆ）、そしてさらには懸濁液（Ｆｒｅｌ）から、非常に低い血漿クリアランス（ＣＬ）、長い半減期（ｔ１／２）、非常に高い曝露（ＡＵＣ）および非常に高い生物学的利用能を有する。総合的に見ると、本発明による化合物は、調べた動物種ラット、マウスおよびイヌにおいてイン・ビボで非常に良好な薬物動態プロファイルを示すことから、ある特定の程度、ヒトへの低容量での１日１回経口投与に好適であるように思われる。
【０２７４】
Ｃ．医薬組成物の実施形態例
本発明による化合物は、下記のように医薬製剤に変換することができる。
【０２７５】
錠剤：
組成：
本発明による化合物１００ｍｇ、乳糖（１水和物）５０ｍｇ）、トウモロコシデンプン（天然）５０ｍｇ、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ２５）（ＢＡＳＦ，  Ｌｕｄｗｉｇｓｈａｆｅｎ，  Ｇｅｒｍａｎｙ）１０ｍｇおよびステアリン酸マグネシウム２ｍｇ。
【０２７６】
錠剤重量２１２ｍｇ。直径８ｍｍ、曲率半径１２ｍｍ。
【０２７７】
製造：
本発明の化合物、乳糖およびデンプンの混合物を、５％（重量基準）ＰＶＰ水溶液を用いて造粒する。顆粒を乾燥し、ステアリン酸マグネシウムと５分間混和する。この混合物を慣用の打錠機で打錠する（錠剤の形態については上記を参照）。打錠のために用いられるガイド値は、打錠力１５ｋＮである。
【０２７８】
経口投与できる懸濁液：
組成：
本発明による化合物１０００ｍｇ、エタノール（９６％）１０００ｍｇ、Ｒｈｏｄｉｇｅｌ（登録商標）（ＵＳＡ，  ＰｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａのＦＭＣからのキサンタンガム）４００ｍｇおよび水９９ｇ。
【０２７９】
経口懸濁剤１０ｍＬは、本発明による化合物１００ｍｇの単一用量に相当する。
【０２８０】
製造：
Ｒｈｏｄｉｇｅｌをエタノールに懸濁し、その懸濁液に本発明による化合物を加える。撹拌しながら水を添加する。その混合物を、Ｒｈｏｄｉｇｅｌの膨潤が完了するまで約６時間撹拌する。
【０２８１】
経口投与用液剤：
組成：
本発明による化合物５００ｍｇ、ポリソルベート２．５ｇおよびポリエチレングリコール４００ｇ。経口液剤２０ｇは、本発明による化合物１００ｍｇの単一用量に相当する。
【０２８２】
製造：
本発明による化合物を、ポリエチレングリコールとポリソルベートの混合物中に撹拌しながら懸濁させる。本発明による化合物が完全に溶解するまで、撹拌操作を継続する。
【０２８３】
静注液剤：
本発明による化合物を、生理的に許容される溶媒（例えば、等張性生理食塩水、グルコース溶液５％および／またはＰＥＧ４００溶液３０％）に、飽和溶解度より低い濃度で溶かす。得られた溶液を無菌的に濾過し、無菌かつ発熱物質を含まない注射器に入れる。
【国際調査報告】
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