(57)【要約】標的指向化リガンド−細胞毒性薬複合体、例えば、ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体は、癌、例えば、前立腺癌を治療するのに有用である。別の態様において、本発明は、癌を治療することを必要とする対象における癌の治療方法に注目し、当該方法は、当該対象へ、治療有効量の本発明のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体、例えば、式（ＩＩ）〜式（ＸＸ）、または当該ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体を含む組成物を投与することを含む。【選択図】図１
2017501115.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（ＩＢ）
ＤＵＰＡ−リンカー−ＲＳ−インデノイソキノリン  （ＩＢ）
（式中、
ＤＵＰＡは、修飾されたまたは非修飾の２−［３−（１，３−ジカルボキシプロピル）−ウレイド］ペンタン二酸であり、
リンカーは、単結合、置換もしくは非置換アルキル、ペプチド、またはペプチドグリカンであり、
インデノイソキノリンは、置換または非置換インデノイソキノリンであり、かつ
ＲＳは、所望の細胞内でインデノイソキノリンを放出することのできる放出セグメントであり、この中で、前記放出セグメントは、炭酸セグメント、カルバミン酸セグメント、またはアシルヒドラゾンセグメントである）
によって表される、ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項２】
前記リンカーはペプチドである、請求項１に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項３】
前記複合体は、式（ＩＩ）
【化４５】
2017501115.tif 000050
（式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＮＲ１１Ｒ１２、ニトロ、Ｃ１〜５アルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、シアノ、Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｏ−Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｓ−Ｃ１〜３アルキル、（ＣＯ）ＯＲ１１、（ＣＯ）ＮＲ１１Ｒ１２、ＳＯ２Ｒ１１、ＳＯ２ＮＲ１１Ｒ１２、もしくはＣ３〜８シクロヘテロアルキルであり、または２つの隣接するＯ−Ｃ１〜３アルキル基は、それらの結合する原子とともに５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成し、
Ｒ１１及びＲ１２は各々独立して、ＨまたはＣ１〜５アルキルであり、この中で、Ｃ１〜５アルキルは、ハロ、ＯＨ、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、アミノ、Ｃ１〜３アルキルアミノ、及びジ−Ｃ１〜３アルキルアミノから独立して選択される置換基で任意に単置換もしくは多置換され、またはＲ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、４〜７員のシクロヘテロアルキルもしくはヘテロアリールを形成し、かつ
ｍは０〜５である）
によって表される、請求項１に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項４】
ｍは２〜４である、請求項３に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項５】
ｍは３である、請求項３に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項６】
前記複合体は、式（Ｖ）
【化４６】
2017501115.tif 000051
によって表される、請求項３に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項７】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は各々独立して、Ｈ、ハロ、ニトロ、Ｃ１〜５アルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、シアノ、Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｓ−Ｃ１〜３アルキル、ＳＯ２Ｒ１１、もしくは（ＣＯ）ＯＲ１１であり、または２つの隣接するＯ−Ｃ１〜３アルキル基はそれらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する、請求項６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項８】
Ｒ１、Ｒ４、Ｒ５、及びＲ６は各々、Ｈである、請求項６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項９】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々、Ｈ、ニトロ、ＯＨ、またはＯＣＨ３である、請求項６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項１０】
Ｒ２はニトロである、請求項６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項１１】
Ｒ６はＯＣＨ３である、請求項６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項１２】
Ｒ６及びＲ７は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する、請求項６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項１３】
Ｒ６及びＲ７は、メチレンジオキシを形成する、請求項６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項１４】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＳＣＨ３、ＳＯ２ＣＨ３、またはＣＯ２ＣＨ３である、請求項６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項１５】
Ｒ６はハロである、請求項６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項１６】
Ｒ６はフルオロである、請求項６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項１７】
ｍは２〜４である、請求項６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項１８】
ｍは３である、請求項６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項１９】
前記複合体は、式（ＩＩＩ）
【化４７】
2017501115.tif 000052
（式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ１０は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＮＲ１１Ｒ１２、ニトロ、Ｃ１〜５アルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、シアノ、Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｏ−Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｓ−Ｃ１〜３アルキル、（ＣＯ）ＯＲ１１、（ＣＯ）ＮＲ１１Ｒ１２、ＳＯ２Ｒ１１、ＳＯ２ＮＲ１１Ｒ１２、もしくはＣ３〜８シクロヘテロアルキルであり、または２つの隣接するＯ−Ｃ１〜３アルキル基は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成し、
Ｒ９は、Ｈ、ハロ、Ｏ−Ｃ１〜５アルキル、ＮＲ１１Ｒ１２、ニトロ、Ｃ３〜６シクロアルキル、またはＣ３〜８シクロヘテロアルキルであり、
Ｒ１１及びＲ１２は各々独立して、ＨまたはＣ１〜５アルキルであり、この中で、Ｃ１〜５アルキルは、ハロ、ＯＨ、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、アミノ、Ｃ１〜３アルキルアミノ、及びジ−Ｃ１〜３アルキルアミノから独立して選択される置換基で任意に単置換もしくは多置換され、またはＲ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、４〜７員のシクロヘテロアルキルもしくはヘテロアリールを形成し、
ｎは０〜５であり、かつ
ｐは３である）
によって表される、請求項１に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項２０】
前記複合体は、式（ＶＩ）
【化４８】
2017501115.tif 000053
（式中、Ｒ５、Ｒ７、及びＲ８は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＮＲ１１Ｒ１２、ニトロ、Ｃ１〜５アルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、シアノ、Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｏ−Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｓ−Ｃ１〜３アルキル、（ＣＯ）ＯＲ１１、（ＣＯ）ＮＲ１１Ｒ１２、ＳＯ２Ｒ１１、ＳＯ２ＮＲ１１Ｒ１２、もしくはＣ３〜８シクロヘテロアルキルであり、または２つの隣接するＯ−Ｃ１〜３アルキル基は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する）
によって表される、請求項１９に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項２１】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ７、及びＲ８は各々独立して、Ｈ、ハロ、ニトロ、Ｃ１〜５アルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、シアノ、Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｓ−Ｃ１〜３アルキル、ＳＯ２Ｒ１１、もしくは（ＣＯ）ＯＲ１１であり、または２つの隣接するＯ−Ｃ１〜３アルキル基は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する、請求項２０に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項２２】
Ｒ１、Ｒ４、Ｒ５、及びＲ８は各々、Ｈである、請求項２０に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項２３】
Ｒ２、Ｒ３、及びＲ７は各々、Ｈ、ニトロ、ＯＨ、またはＯＣＨ３である、請求項２０に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項２４】
Ｒ２、Ｒ３、及びＲ７は各々、ＯＨまたはＯＣＨ３である、請求項２０に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項２５】
Ｒ２及びＲ３は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する、請求項２０に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項２６】
Ｒ２及びＲ３は、メチレンジオキシを形成する、請求項２０に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項２７】
Ｒ２、Ｒ３、及びＲ７は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＳＣＨ３、ＳＯ２ＣＨ３、またはＣＯ２ＣＨ３である、請求項２０に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項２８】
Ｒ２、Ｒ３、及びＲ７は各々独立して、Ｈまたはハロである、請求項２０に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項２９】
Ｒ２、Ｒ３、及びＲ７は各々独立して、Ｈまたはフルオロである、請求項２０に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項３０】
ｎは２〜４である、請求項２０に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項３１】
ｎは３である、請求項２０に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項３２】
Ｒ９は、ＮＲ１１Ｒ１２である、請求項２０に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項３３】
Ｒ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、４〜７員のシクロヘテロアルキル基またはヘテロアリール基を形成する、請求項３２に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項３４】
Ｒ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、モルホリン基を形成する、請求項３２に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項３５】
Ｒ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、イミダゾール基を形成する、請求項３２に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項３６】
前記複合体は、式（ＶＩＩ）
【化４９】
2017501115.tif 000054
（式中、Ｒ５、Ｒ６、及びＲ８は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＮＲ１１Ｒ１２、ニトロ、Ｃ１〜５アルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、シアノ、Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｏ−Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｓ−Ｃ１〜３アルキル、（ＣＯ）ＯＲ１１、（ＣＯ）ＮＲ１１Ｒ１２、ＳＯ２Ｒ１１、ＳＯ２ＮＲ１１Ｒ１２、もしくはＣ３〜８シクロヘテロアルキルであり、または２つの隣接するＯ−Ｃ１〜３アルキル基は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する）
によって表される、請求項１９に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項３７】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、及びＲ８は各々独立して、Ｈ、ハロ、ニトロ、Ｃ１〜５アルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、Ｓ−Ｃ１〜３アルキル、ＳＯ２Ｒ１１、もしくは（ＣＯ）ＯＲ１１であり、または２つの隣接するＯ−Ｃ１〜３アルキル基は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する、請求項３６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項３８】
Ｒ１、Ｒ４、Ｒ５、及びＲ８は各々、Ｈである、請求項３６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項３９】
Ｒ２、Ｒ３、及びＲ６は各々、Ｈ、ニトロ、ＯＨ、またはＯＣＨ３である、請求項３６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項４０】
Ｒ２、Ｒ３、及びＲ６は各々、ＯＣＨ３である、請求項３６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項４１】
Ｒ２及びＲ３は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する、請求項３６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項４２】
Ｒ２及びＲ３は、メチレンジオキシを形成する、請求項３６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項４３】
Ｒ２、Ｒ３、及びＲ６は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＳＣＨ３、ＳＯ２ＣＨ３、またはＣＯ２ＣＨ３である、請求項３６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項４４】
Ｒ２、Ｒ３、及びＲ６は各々独立して、Ｈまたはハロである、請求項３６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項４５】
Ｒ２、Ｒ３、及びＲ６は各々独立して、Ｈまたはフルオロである、請求項３６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項４６】
ｎは２〜４である、請求項３６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項４７】
ｎは３である、請求項３６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項４８】
Ｒ９は、ＮＲ１１Ｒ１２である、請求項３６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項４９】
Ｒ１１及びＲ１２は各々、Ｈである、請求項４８に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項５０】
Ｒ１１はＨであり、かつＲ１２は、ＯＨで単置換されたＣ１〜５アルキルである、請求項４８に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項５１】
Ｒ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、４〜７員のシクロヘテロアルキル基またはヘテロアリール基を形成する、請求項４８に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項５２】
Ｒ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、モルホリン基を形成する、請求項４８に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項５３】
Ｒ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、イミダゾール基を形成する、請求項４８に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項５４】
前記複合体は、式（ＩＶ）
【化５０】
2017501115.tif 000055
（式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＮＲ１１Ｒ１２、ニトロ、Ｃ１〜５アルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、シアノ、Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｏ−Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｓ−Ｃ１〜３アルキル、（ＣＯ）ＯＲ１１、（ＣＯ）ＮＲ１１Ｒ１２、ＳＯ２Ｒ１１、ＳＯ２ＮＲ１１Ｒ１２、もしくはＣ３〜８シクロヘテロアルキルであり、または２つの隣接するＯ−Ｃ１〜３アルキル基は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成し、
Ｒ９は、Ｈ、ハロ、Ｏ−Ｃ１〜５アルキル、ＮＲ１１Ｒ１２、ニトロ、Ｃ３〜６シクロヘテロアルキル、またはＣ３〜８シクロヘテロアルキルであり、
Ｒ１１及びＲ１２は各々独立して、ＨまたはＣ１〜５アルキルであり、この中で、Ｃ１〜５アルキルは、ハロ、ＯＨ、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、アミノ、Ｃ１〜３アルキルアミノ、及びジ−Ｃ１〜３アルキルアミノから独立して選択される置換基で任意に単置換もしくは多置換され、またはＲ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、４〜７員のシクロヘテロアルキル基もしくはヘテロアリール基を形成し、かつ
ｎは０〜５である）
によって表される、請求項１に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項５５】
前記複合体は、式（ＶＩＩＩ）
【化５１】
2017501115.tif 000056
によって表される、請求項５４に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項５６】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は各々独立して、Ｈ、ハロ、ニトロ、Ｃ１〜５アルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、シアノ、Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｓ−Ｃ１〜３アルキル、ＳＯ２Ｒ１１、もしくは（ＣＯ）ＯＲ１１であり、または２つの隣接するＯ−Ｃ１〜３アルキルは、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する、請求項５５に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項５７】
Ｒ１、Ｒ４、Ｒ５、及びＲ８は各々、Ｈである、請求項５５に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項５８】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々、Ｈ、ニトロ、ＯＨ、またはＯＣＨ３である、請求項５５に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項５９】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々、ＯＨまたはＯＣＨ３である、請求項５５に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項６０】
Ｒ２及びＲ３は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する、請求項７４に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項６１】
Ｒ２及びＲ３は、メチレンジオキシを形成する、請求項５５に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項６２】
Ｒ６及びＲ７は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する、請求項７４に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項６３】
Ｒ６及びＲ７は、メチレンジオキシを形成する、請求項５５に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項６４】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＳＣＨ３、ＳＯ２ＣＨ３、またはＣＯ２ＣＨ３である、請求項５５に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項６５】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々独立して、Ｈまたはハロである、請求項５５に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項６６】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々独立して、Ｈまたはフルオロである、請求項５５に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項６７】
ｎは２〜４である、請求項５５に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項６８】
ｎは３である、請求項５５に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項６９】
Ｒ９は、ＮＲ１１Ｒ１２である、請求項５５に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項７０】
Ｒ１１及びＲ１２は各々、Ｈである、請求項６９に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項７１】
Ｒ１１はＨであり、かつＲ１２はＯＨで単置換されたＣ１〜５アルキルである、請求項６９に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項７２】
Ｒ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、４〜７員のシクロヘテロアルキル基またはヘテロアリール基を形成する、請求項６９に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項７３】
Ｒ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、モルホリン基を形成する、請求項６９に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項７４】
Ｒ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、イミダゾール基を形成する、請求項６９に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項７５】
前記複合体は、式（ＩＸ）
【化５２】
2017501115.tif 000057
（式中、
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びＲ１０は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＮＲ１１Ｒ１２、ニトロ、Ｃ１〜５アルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、シアノ、Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｏ−Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｓ−Ｃ１〜３アルキル、（ＣＯ）ＯＲ１１、（ＣＯ）ＮＲ１１Ｒ１２、ＳＯ２Ｒ１１、ＳＯ２ＮＲ１１Ｒ１２、もしくはＣ３〜８シクロヘテロアルキルであり、または２つの隣接するＯ−Ｃ１〜３アルキル基は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成し、
Ｒ９は、Ｈ、ハロ、Ｏ−Ｃ１〜５アルキル、ＮＲ１１Ｒ１２、ニトロ、Ｃ３〜６シクロアルキル、またはＣ３〜８シクロヘテロアルキルであり
Ｒ１１及びＲ１２は各々独立して、ＨまたはＣ１〜５アルキルであり、この中で、Ｃ１〜５アルキルは、ハロ、ＯＨ，Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、アミノ、Ｃ１〜３アルキルアミノ、及びジ−Ｃ１〜３アルキルアミノから独立して選択される置換基で任意に単置換もしくは多置換され、またはＲ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、４〜７員のシクロヘテロアルキルまたはヘテロアリールを形成し、
ｎは、０〜５であり、かつ
ｐは、３である）
によって表される、請求項１に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項７６】
前記複合体は、式（Ｘ）
【化５３】
2017501115.tif 000058
（式中、Ｒ１、Ｒ２、及びＲ４は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＮＲ１１Ｒ１２、ニトロ、Ｃ１〜５アルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、シアノ、Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、Ｓ−Ｃ１〜３アルキル、（ＣＯ）ＯＲ１１、（ＣＯ）ＮＲ１１Ｒ１２、ＳＯ２Ｒ１１、ＳＯ２ＮＲ１１Ｒ１２、もしくはＣ３〜８シクロヘテロアルキルであり、または２つの隣接するＯ−Ｃ１〜３アルキル基は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する）によって表される、請求項７５に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項７７】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は各々独立して、Ｈ、ハロ、ニトロ、Ｃ１〜５アルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、Ｓ−Ｃ１〜３アルキル、ＳＯ２Ｒ１１、もしくは（ＣＯ）ＯＲ１１であり、または２つの隣接するＯ−Ｃ１〜３アルキル基は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する、請求項７６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項７８】
Ｒ１、Ｒ４、Ｒ５、及びＲ８は各々、Ｈである、請求項７６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項７９】
Ｒ２、Ｒ６、及びＲ７は各々、Ｈ、ニトロ、ＯＨ、またはＯＣＨ３である、請求項７６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項８０】
Ｒ２、Ｒ６、及びＲ７は、ＯＨまたはＯＣＨ３である、請求項７６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項８１】
Ｒ６及びＲ７は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する、請求項７６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項８２】
Ｒ６及びＲ７は、メチレンジオキシを形成する、請求項７６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項８３】
Ｒ２、Ｒ６、及びＲ７は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＳＣＨ３、ＳＯ２ＣＨ３、またはＣＯ２ＣＨ３である、請求項７６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項８４】
Ｒ２、Ｒ６、及びＲ７は各々独立して、Ｈまたはハロである、請求項７６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項８５】
Ｒ２、Ｒ６、及びＲ７は各々独立して、Ｈまたはフルオロである、請求項７６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項８６】
ｎは２〜４である、請求項７６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項８７】
ｎは３である、請求項７６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項８８】
Ｒ９は、ＮＲ１１Ｒ１２である、請求項７６に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項８９】
Ｒ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、４〜７員のシクロヘテロアルキル基またはヘテロアリール基を形成する、請求項８８に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項９０】
Ｒ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、モルホリン基を形成する、請求項８８に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項９１】
Ｒ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、イミダゾール基を形成する、請求項８８に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項９２】
前記複合体は、式（ＸＩ）
【化５４】
2017501115.tif 000059
（式中、Ｒ１、Ｒ３、及びＲ４は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＮＲ１１Ｒ１２、ニトロ、Ｃ１〜５アルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、シアノ、Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｏ−Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｓ−Ｃ１〜３アルキル、（ＣＯ）ＯＲ１１、（ＣＯ）ＮＲ１１Ｒ１２、ＳＯ２Ｒ１１、ＳＯ２ＮＲ１１Ｒ１２、もしくはＣ３〜８シクロヘテロアルキルであり、または２つの隣接するＯ−Ｃ１〜３アルキル基は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する）
によって表される、請求項７５に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項９３】
Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は各々独立して、Ｈ、ハロ、ニトロ、Ｃ１〜５アルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、Ｓ−Ｃ１〜３アルキル、ＳＯ２Ｒ１１、もしくは（ＣＯ）ＯＲ１１であり、または２つの隣接するＯ−Ｃ１〜３アルキル基は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する、請求項９２に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項９４】
Ｒ１、Ｒ４、Ｒ５、及びＲ８は各々、Ｈである、請求項９２に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項９５】
Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々、Ｈ、ニトロ、ＯＨ、またはＯＣＨ３である、請求項９２に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項９６】
Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は、ＯＨまたはＯＣＨ３である、請求項９２に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項９７】
Ｒ６及びＲ７は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する、請求項９２に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項９８】
Ｒ６及びＲ７は、メチレンジオキシを形成する、請求項９２に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項９９】
Ｒ３、Ｒ６及びＲ７は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＳＣＨ３、ＳＯ２ＣＨ３、またはＣＯ２ＣＨ３である、請求項９２に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項１００】
Ｒ３、Ｒ６及びＲ７は各々独立して、Ｈまたはハロである、請求項９２に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項１０１】
Ｒ３、Ｒ６及びＲ７は各々独立して、Ｈまたはフルオロである、請求項９２に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項１０２】
ｎは２〜４である、請求項９２に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項１０３】
ｎは３である、請求項９２に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項１０４】
Ｒ９は、ＮＲ１１Ｒ１２である、請求項９２に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項１０５】
Ｒ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、４〜７員のシクロヘテロアルキル基またはヘテロアリール基を形成する、請求項１０４に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項１０６】
Ｒ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、モルホリン基を形成する、請求項１０４に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項１０７】
Ｒ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、イミダゾール基を形成する、請求項１０４に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項１０８】
前記複合体は、式（ＸＩＩ）〜（ＸＸ）
【化５５−１】
2017501115.tif 000060
【化５５−２】
2017501115.tif 000061
【化５５−３】
2017501115.tif 000062
によって表される、請求項１に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体。
【請求項１０９】
請求項１に記載のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体及び少なくとも１つの医薬として許容され得る担体を含む、医薬組成物。
【請求項１１０】
癌を治療することを必要とする対象における癌の治療方法であって、前記対象へ、治療有効量の請求項１に記載の式（ＩＢ）によって表されるＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体を投与することを含む、前記方法。
【請求項１１１】
前記リンカーはペプチドである、請求項１１０に記載の方法。
【請求項１１２】
前記癌は、前立腺癌である、請求項１１０に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
政府の利益の陳述
本発明は、米国国立保健研究所によって授与されたＣＡ０８９５６６の下での米国政府の支援でなされた。当該政府は、本発明におけるある一定の権利を有している。
【０００２】
技術分野
本発明は、癌、例えば前立腺癌を治療するのに有用である標的指向化リガンド−細胞毒性薬複合体、例えばＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体に関する。
【背景技術】
【０００３】
前立腺癌は、米国における男性の癌に関する２番目の主因であり（１番目の肺癌に続く）、２０１１年には新たな２４０，８９０症例が概算されており、３３，７２０例が死亡している（Ｓｉｅｇｅｌら，ＣＡ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｊ．Ｃｌｉｎ．２０１１，６１，２１２〜２３６）。現行の治療種類には、ホルモン療法及び化学療法があるが、両方ともこれらの使用を損なう失望する及び時には有害な結果を伴う。癌治療における化学療法の効能はしばしば、２つの主要因子、すなわち副次的毒性と腫瘍耐性の出現とによって制限される（Ｓｏｕｄｙら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１３，５６，７５６４〜７５７３）。それゆえ、通常の傍系の損傷なく癌細胞を選択的に殺滅することができ、かつ腫瘍細胞が耐性を獲得するのを予防することのできる方法論を開発する喫緊の必要性がある。
【０００４】
ほとんどの前立腺癌細胞は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）を、正常前立腺細胞の８〜１２倍の増加で過剰発現する（Ｏ’Ｋｅｅｆｅら，Ｔｈｅ  Ｐｒｏｓｔａｔｅ  ２００４，５８，２００〜２１０）。加えて、遺伝子アレイ分析及び免疫組織化学的研究は、ＰＳＭＡが前立腺癌における２番目に最も上方制御されたタンパク質であり、ＰＳＭＡの発現レベルが癌の攻撃性とともに亢進することを明らかにした（Ｗａｎｇら，Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２００７，１０２，５７１〜５７９）。ＰＳＭＡは、正常組織においては低レベルまたは検出できないレベルで存在するが、特に固形腫瘍が進行または転移するにつれ、当該腫瘍の血管新生において非常に過剰発現することもわかっている（Ｇｈｏｓｈら，Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２００４，９１，５２８〜５３９）。この違いは、ＰＳＭＡを欠失する正常細胞を残しながら、非特異的細胞毒性薬をこれらの病原性細胞へ送達するために利用され得る。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Ｓｉｅｇｅｌら，ＣＡ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｊ．Ｃｌｉｎ．２０１１，６１，２１２〜２３６
【非特許文献２】Ｓｏｕｄｙら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１３，５６，７５６４〜７５７３
【非特許文献３】Ｏ’Ｋｅｅｆｅら，Ｔｈｅ  Ｐｒｏｓｔａｔｅ  ２００４，５８，２００〜２１０
【非特許文献４】Ｗａｎｇら，Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２００７，１０２，５７１〜５７９
【非特許文献５】Ｇｈｏｓｈら，Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２００４，９１，５２８〜５３９
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、標的指向化リガンド−細胞毒性薬複合体を特長とする。
一態様において、本発明は、式（ＩＡ）
ＤＵＰＡ−リンカー−ＲＳ−薬剤  （ＩＡ）
（式中、
ＤＵＰＡは、修飾されたまたは非修飾の２−［３−（１，３−ジカルボキシプロピル）−ウレイド］ペンタン二酸であり、
リンカーは、単結合、置換もしくは非置換アルキル、ペプチド、またはペプチドグリカンであり、
薬剤は、細胞毒性薬であり、かつ
ＲＳは、所望の細胞内で薬剤を放出することのできる放出セグメントであり、この中で、当該放出セグメントは、炭酸セグメント、カルバミン酸セグメント、またはアシルヒドラゾンセグメントである）
によって表されるＤＵＰＡ−薬剤複合体を特長とする。
【０００７】
別の態様において、本発明は、式（ＩＢ）
ＤＵＰＡ−リンカー−ＲＳ−インデノイソキノリン  （ＩＢ）
（式中、
ＤＵＰＡは、修飾されたまたは非修飾の２−［３−（１，３−ジカルボキシプロピル）−ウレイド］ペンタン二酸であり、
リンカーは、単結合、置換もしくは非置換アルキル、ペプチド、またはペプチドグリカンであり、
インデノイソキノリンは、置換または非置換インデノイソキノリンであり、かつ
ＲＳは、所望の細胞内でインデノイソキノリンを放出することのできる放出セグメントであり、この中で、当該放出セグメントは、炭酸セグメント、カルバミン酸セグメント、またはアシルヒドラゾンセグメントである）
によって表されるＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体を特長とする。
【０００８】
いくつかの実施形態において、ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体は、式（ＩＩ）
【化１】
2017501115.tif 000003
（式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＮＲ１１Ｒ１２、ニトロ、Ｃ１〜５アルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、シアノ、Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｏ−Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｓ−Ｃ１〜３アルキル、（ＣＯ）ＯＲ１１、（ＣＯ）ＮＲ１１Ｒ１２、ＳＯ２Ｒ１１、ＳＯ２ＮＲ１１Ｒ１２、もしくはＣ３〜８シクロヘテロアルキルであり、または２つの隣接するＯ−Ｃ１〜３アルキル基は、それらの結合する原子とともに５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成し、
Ｒ１１及びＲ１２は各々独立して、ＨまたはＣ１〜５アルキルであり、この中で、Ｃ１〜５アルキルは、ハロ、ＯＨ、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、アミノ、Ｃ１〜３アルキルアミノ、及びジ−Ｃ１〜３アルキルアミノから独立して選択される置換基で任意に単置換もしくは多置換され、またはＲ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、４〜７員のシクロヘテロアルキルもしくはヘテロアリールを形成し、かつ
ｍは０〜５である）
によって表される。
【０００９】
いくつかの実施形態において、ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体は、式（ＩＩＩ）
【化２】
2017501115.tif 000004
（式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ１０は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＮＲ１１Ｒ１２、ニトロ、Ｃ１〜５アルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、シアノ、Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｏ−Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｓ−Ｃ１〜３アルキル、（ＣＯ）ＯＲ１１、（ＣＯ）ＮＲ１１Ｒ１２、ＳＯ２Ｒ１１、ＳＯ２ＮＲ１１Ｒ１２、もしくはＣ３〜８シクロヘテロアルキルであり、または２つの隣接するＯ−Ｃ１〜３アルキル基は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成し、
Ｒ９は、Ｈ、ハロ、Ｏ−Ｃ１〜５アルキル、ＮＲ１１Ｒ１２、ニトロ、Ｃ３〜６シクロアルキル、またはＣ３〜８シクロヘテロアルキルであり、
Ｒ１１及びＲ１２は各々独立して、ＨまたはＣ１〜５アルキルであり、この中で、Ｃ１〜５アルキルは、ハロ、ＯＨ、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、アミノ、Ｃ１〜３アルキルアミノ、及びジ−Ｃ１〜３アルキルアミノから独立して選択される置換基で任意に単置換もしくは多置換され、またはＲ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、４〜７員のシクロヘテロアルキルもしくはヘテロアリールを形成し、
ｎは０〜５であり、かつ
ｐは３である）
によって表される。
【００１０】
いくつかの実施形態において、ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体は、式（ＩＶ）
【化３】
2017501115.tif 000005
（式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＮＲ１１Ｒ１２、ニトロ、Ｃ１〜５アルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、シアノ、Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｏ−Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｓ−Ｃ１〜３アルキル、（ＣＯ）ＯＲ１１、（ＣＯ）ＮＲ１１Ｒ１２、ＳＯ２Ｒ１１、ＳＯ２ＮＲ１１Ｒ１２、もしくはＣ３〜８シクロヘテロアルキルであり、または２つの隣接するＯ−Ｃ１〜３アルキル基は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成し、
Ｒ９は、Ｈ、ハロ、Ｏ−Ｃ１〜５アルキル、ＮＲ１１Ｒ１２、ニトロ、Ｃ３〜６シクロアルキル、またはＣ３〜８シクロヘテロアルキルであり、
Ｒ１１及びＲ１２は各々独立して、ＨまたはＣ１〜５アルキルであり、この中で、Ｃ１〜５アルキルは、ハロ、ＯＨ、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、アミノ、Ｃ１〜３アルキルアミノ、及びジ−Ｃ１〜３アルキルアミノから独立して選択される置換基で任意に単置換もしくは多置換され、またはＲ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、４〜７員のシクロヘテロアルキル基もしくはヘテロアリール基を形成し、かつ
ｎは０〜５である）
によって表される。
【００１１】
別の態様において、本発明は、本発明のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体、例えば式（ＩＩ）〜式（ＸＸ）及び少なくとも１つの医薬として許容されうる担体を含む医薬組成物を特長とする。
【００１２】
別の態様において、本発明は、癌を治療することを必要とする対象における癌の治療方法に注目し、当該方法は、当該対象へ、治療有効量の本発明のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体、例えば、式（ＩＩ）〜式（ＸＸ）、または当該ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体を含む組成物を投与することを含む。いくつかの実施形態において、当該癌は、前立腺癌、卵巣癌、肺癌、または乳癌である。ある実施形態において、当該癌は前立腺癌である。
【００１３】
さらに別の態様において、本発明は、式（ＩＢ）
ＤＵＰＡ−リンカー−ＲＳ−インデノイソキノリン  （ＩＢ）
（式中、
ＤＵＰＡは、修飾されたまたは非修飾の２−［３−（１，３−ジカルボキシプロピル）−ウレイド］ペンタン二酸であり、
リンカーは、単結合、置換もしくは非置換のアルキル、ペプチド、またはペプチドグリカンであり、
インデノイソキノリンは、置換または非置換のインデノイソキノリンであり、かつ
ＲＳは、所望の細胞内でインデノイソキノリンを放出することのできる放出セグメントであり、この中で、放出セグメントは、炭酸セグメント、カルバミン酸セグメント、またはアシルヒドラゾンセグメントである）
によって表されるＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体の調製方法に注目し、当該方法は、
（ａ）ＤＵＰＡをペプチドと反応させて、ＤＵＰＡ−ペプチド試薬を調製すること、
（ｂ）ＲＳ試薬をインデノイソキノリンと反応させて、インデノイソキノリン化合物を調製すること、及び
（ｃ）工程（ａ）のＤＵＰＡ−ペプチド試薬を工程（ｂ）のＲＳ−インデノイソキノリン化合物と反応させて、ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体を調製すること
を含む。
【００１４】
いくつかの実施形態において、ＲＳ試薬は、式（ＸＸＩ）
【化４】
2017501115.tif 000006
によって表される。
【００１５】
いくつかの実施形態において、ＤＵＰＡ−ペプチド試薬は、式（ＸＸＩＩ）
【化５】
2017501115.tif 000007
によって表される。
【００１６】
本発明の１つ以上の実施形態に関する詳細は、下記の添付、すなわち説明において示す。本発明の他の特色、目的、及び利点は、説明及び図面から、ならびに特許請求の範囲から明らかであろう。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】図１は、ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体の一般的な概略図を示す。
【図２】図２は、ＰＳＭＡへ結合した切断型断片５２の分子モデルを示す。立体像は、外斜視図（弛緩図）のためにプログラムされている。
【図３】図３は、ＬＮＣａＰ細胞培養物中でのインデノイソキノリン６及び１８ならびにこれらのＤＵＰＡ複合体８４及び８６の細胞毒性を示す。
【図４】図４は、２２ＲＶ１腫瘍に罹患している無胸腺ヌードマウスを用いた動物試験におけるＤＵＰＡ複合体８６を用いた療法の腫瘍体積対日数を示す。治療済み＝８６、非処置＝対照、競合＝８６＋１０×２８、遊離薬＝１８、用量：４０ｎｍｏｌ／個体、または２．０μｍｏｌ／ｋｇ、ＩＰ注射、交互の日、３日／週を３週間。
【図５】図５は、２２ＲＶ１腫瘍に罹患している無胸腺ヌードマウスを用いた動物誌Ｋ年におけるＤＵＰＡ複合体８６を用いた療法の生存個体数対用量を示す。治療済み＝８６、非治療＝対照、競合８６＋１０×２８、遊離薬＝１８。用量：４０ｎｍｏｌ／個体、または２．０μｍｏｌ／ｋｇ、ＩＰ注射、交互の日、３日／週を３週間。
【図６】図６は、２２ＲＶ１腫瘍に罹患している無胸腺ヌードマウスを用いた動物試験におけるＤＵＰＡ複合体８６を用いた療法の平均体重対日数を示す。治療済み＝８６、非治療＝対照、競合＝８６＋１０×２８、遊離薬＝１８。用量：４０ｎｍｏｌ／個体、または２．０μｍｏｌ／ｋｇ、ＩＰ注射、交互の日、３日／週を３週間。注：基剤薬群における２６日目に、データ地点は、１匹のみのマウスの体重を表しているのに対し、他の４匹のマウスは、薬剤の細胞毒性により死亡した。
【図７】図７Ａ及び図７Ｂは、ＬＮＣａｐ細胞株におけるＭＣ−７−７０(化合物１８)及びそのＤＵＰＡ複合体の検査結果を示す。図７Ａ：ＬＮＣａｐ腫瘍罹患マウスにおけるＤＵＰＡ−ＭＣ−７−７０の療法。及び図７Ｂ：ＤＵＰＡ−ＭＣ−７−７０を用いた治療の間のマウスの体重減少。
【図８Ａ】図８Ａ〜図８Ｃは、ＤＵＰＡ−ＭＣ−７−７０の検査結果を示す（ＭＣ−７−７０は化合物１８である）。図８Ａ：ＬＮＣａｐ腫瘍罹患マウスにおけるＤＵＰＡ−ＭＣ−７−７０の療法、図８Ｂ：ＬＮＣａＰ細胞の２時間及び２４時間のインキュベーションにおけるＤＵＰＡ−ＭＣ−７−７０のＩＣ５０、及び図８Ｃ：ＤＵＰＡ−ＭＣ−７−７０複合体を用いた治療の間のマウスの体重減少。
【図８Ｂ】図８Ａ〜図８Ｃは、ＤＵＰＡ−ＭＣ−７−７０の検査結果を示す（ＭＣ−７−７０は化合物１８である）。図８Ａ：ＬＮＣａｐ腫瘍罹患マウスにおけるＤＵＰＡ−ＭＣ−７−７０の療法、図８Ｂ：ＬＮＣａＰ細胞の２時間及び２４時間のインキュベーションにおけるＤＵＰＡ−ＭＣ−７−７０のＩＣ５０、及び図８Ｃ：ＤＵＰＡ−ＭＣ−７−７０複合体を用いた治療の間のマウスの体重減少。
【図８Ｃ】図８Ａ〜図８Ｃは、ＤＵＰＡ−ＭＣ−７−７０の検査結果を示す（ＭＣ−７−７０は化合物１８である）。図８Ａ：ＬＮＣａｐ腫瘍罹患マウスにおけるＤＵＰＡ−ＭＣ−７−７０の療法、図８Ｂ：ＬＮＣａＰ細胞の２時間及び２４時間のインキュベーションにおけるＤＵＰＡ−ＭＣ−７−７０のＩＣ５０、及び図８Ｃ：ＤＵＰＡ−ＭＣ−７−７０複合体を用いた治療の間のマウスの体重減少。
【図９】図９は、本発明の化合物または複合体についての検査結果を示す。
【図１０】図１０Ａ及び図１０Ｂは、示されたインキュベーション時間後のヒト２２ＲＶ１細胞株の生存に及ぼす遊離薬１８（図１０Ａ）及びＤＵＰＡ複合体８６（図１０Ｂ）の用量−応答性３Ｈ−チミジン組み込みアッセイを示す。
【図１１Ａ】図１１Ａ及び図１１Ｂは、ＰＳＭＡへ結合したＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体８６の分子モデルを示す。立体像は、外斜視図（弛緩図）についてプログラムされている。図１１Ａ：リガンド、空間充填モデル、タンパク質スティックモデル。図１１Ｂ：リガンド、スティックモデル、タンパク質、リボン及び空間充填モデル。
【図１１Ｂ】図１１Ａ及び図１１Ｂは、ＰＳＭＡへ結合したＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体８６の分子モデルを示す。立体像は、外斜視図（弛緩図）についてプログラムされている。図１１Ａ：リガンド、空間充填モデル、タンパク質スティックモデル。図１１Ｂ：リガンド、スティックモデル、タンパク質、リボン及び空間充填モデル。
【００１８】
説明の簡素化及び明確性のために、図に示される要素が必ずしも正確な縮尺率で描かれてはいないことは認識されるであろう。例えば、要素のいくつかの寸法は、明確性のために他の要素に対して誇張されていることがある。さらに、適切とみなされる場合、参照番号は、対応する要素または類似の要素を示すために、図の中で反復されることがある。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
以下の詳細な説明において、多くの具体的な詳細が、本発明の完全な理解を提供するために示されている。しかしながら、本発明がこれらの具体的な詳細なしで実施され得ることは当業者によって理解されるであろう。他の場合において、周知の方法、手順、及び構成要素は、本発明を曖昧にしないために、詳細に説明されてはいない。
【００２０】
本発明は、標的指向化リガンド−細胞毒性薬複合体を提供する。
【００２１】
いくつかの実施形態において、本発明は、式（ＩＡ）
ＤＵＰＡ−リンカー−ＲＳ−薬剤  （ＩＡ）
（式中、
ＤＵＰＡは、修飾されたまたは非修飾の２−［３−（１，３−ジカルボキシプロピル）−ウレイド］ペンタン二酸であり、
リンカーは、単結合、置換もしくは非置換のアルキル、ペプチド、またはペプチドグリカンであり、
薬剤は、細胞毒性薬であり、かつ
ＲＳは、所望の細胞内で薬剤を放出することのできる放出セグメントであり、この中で、当該放出セグメントは、炭酸セグメント、カルバミン酸セグメント、またはアシルヒドラゾンセグメントである）
によって表されるＤＵＰＡ−薬剤複合体を特長とする。
【００２２】
いくつかの実施形態において、本発明は、（ＩＢ）
ＤＵＰＡ−リンカー−ＲＳ−インデノイソキノリン  （ＩＢ）
（式中、
ＤＵＰＡは、修飾されたまたは非修飾の２−［３−（１，３−ジカルボキシプロピル）−ウレイド］ペンタン二酸であり、
リンカーは、単結合、置換もしくは非置換のアルキル、ペプチド、またはペプチドグリカンであり、
インデノイソキノリンは、置換または非置換のインデノイソキノリンであり、かつ
ＲＳは、所望の細胞内で薬剤を放出することのできる放出セグメントであり、この中で、当該放出セグメントは、炭酸セグメント、カルバミン酸セグメント、またはアシルヒドラゾンセグメントである）
によって表されるＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体に関する。
【００２３】
いくつかの実施形態において、リンカーはペプチドである。
【００２４】
いくつかの実施形態において、インデノイソキノリンは、本明細書に説明するようなインデノイソキノリンである。他の実施形態において、インデノイソキノリンは、当該技術分野で公知のインデノイソキノリンである。本明細書に説明するインデノイソキノリンは、ハロ、ＮＲ１１Ｒ１２、ニトロ、Ｃ１〜５アルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、シアノ、Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｏ−Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｓ−Ｃ１〜３アルキル、（ＣＯ）ＯＲ１１、（ＣＯ）ＮＲ１１Ｒ１２、ＳＯ２Ｒ１１、ＳＯ２ＮＲ１１Ｒ１２、及びＣ３〜８シクロヘテロアルキルから選択される基でさらに置換することができ、または２つの隣接するＯ−Ｃ１〜３アルキル基は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する。
【００２５】
いくつかの実施形態において、当該ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体は、式（ＩＩ）
【化６】
2017501115.tif 000008
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＮＲ１１Ｒ１２、ニトロ、Ｃ１〜５アルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、シアノ、Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｏ−Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｓ−Ｃ１〜３アルキル、（ＣＯ）ＯＲ１１、（ＣＯ）ＮＲ１１Ｒ１２、ＳＯ２Ｒ１１、ＳＯ２ＮＲ１１Ｒ１２、もしくはＣ３〜８シクロヘテロアルキルであり、または２つの隣接するＯ−Ｃ１〜３アルキル基は、それらの結合する窒素原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成し、
Ｒ１１及びＲ１２は各々独立して、ＨまたはＣ１〜５アルキルであり、この中で、Ｃ１〜５アルキルは、ハロ、ＯＨ、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、アミノ、Ｃ１〜３アルキルアミノ、及びジ−Ｃ１〜３アルキルアミノから独立して選択される置換基で任意に単置換もしくは多置換され、またはＲ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、４〜７員のシクロヘテロアルキルもしくはヘテロアリールを形成し、かつ
ｍは０〜５である）
によって表される。
【００２６】
他の実施形態において、ｍは１である。ある実施形態において、ｍは２である。いくつかの実施形態において、ｍは３である。いくつかの実施形態において、ｍは４である。他の実施形態において、ｍは５である。いくつかの実施形態において、ｍは２〜４である。
【００２７】
いくつかの実施形態において、当該ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体は、式（Ｖ）
【化７】
2017501115.tif 000009
によって表される。
【００２８】
いくつかの実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は各々独立して、Ｈ、ハロ、ニトロ、Ｃ１〜５アルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、シアノ、Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｓ−Ｃ１〜３アルキル、ＳＯ２Ｒ１１、もしくは（ＣＯ）ＯＲ１１であり、または２つの隣接するＯ−Ｃ１〜３アルキル基はそれらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する。
【００２９】
いくつかの実施形態において、Ｒ１、Ｒ４、Ｒ５、及びＲ８は各々、Ｈである。
【００３０】
いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々、Ｈ、ニトロ、ＯＨ、ＯＣＨ３、シアノ、Ｃ１〜３ハロアルキルである。いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々、Ｈ、シアノ、またはＣ１〜３ハロアルキルである。他の実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々、Ｈまたはシアノである。いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々、ＨまたはＣ１〜３ハロアルキルである。
【００３１】
いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々、Ｈ、ニトロ、ＯＨ、またはＯＣＨ３である。いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々、ニトロ、ＯＨ、またはＯＣＨ３である。
【００３２】
他の実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＳＣＨ３、ＳＯ２ＣＨ３、またはＣＯ２ＣＨ３である。いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＳＣＨ３、またはＣＯ２ＣＨ３である。
【００３３】
いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々、ＯＨまたはＯＣＨ３である。
【００３４】
いくつかの実施形態において、Ｒ２はニトロである。他の実施形態において、Ｒ６はＯＣＨ３である。
【００３５】
いくつかの実施形態において、Ｒ６及びＲ７は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する。ある実施形態において、Ｒ６及びＲ７は、メチレンジオキシを形成する。
【００３６】
いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＳＣＨ３、ＳＯ２ＣＨ３、またはＣＯ２ＣＨ３である。いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＳＣＨ３、またはＣＯ２ＣＨ３である。他の実施形態において、Ｒ６はハロである。ある実施形態において、Ｒ６はフルオロである。
【００３７】
いくつかの実施形態において、当該ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体は、式（ＩＩＩ）
【化８】
2017501115.tif 000010
（式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ１０は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＮＲ１１Ｒ１２、ニトロ、Ｃ１〜５アルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、シアノ、Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｏ−Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｓ−Ｃ１〜３アルキル、（ＣＯ）ＯＲ１１、（ＣＯ）ＮＲ１１Ｒ１２、ＳＯ２Ｒ１１、ＳＯ２ＮＲ１１Ｒ１２、もしくはＣ３〜８シクロヘテロアルキルであり、または２つの隣接するＯ−Ｃ１〜３アルキル基は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成し、
Ｒ９は、Ｈ、ハロ、Ｏ−Ｃ１〜５アルキル、ＮＲ１１Ｒ１２、ニトロ、Ｃ３〜６シクロアルキル、またはＣ３〜８シクロヘテロアルキルであり、
Ｒ１１及びＲ１２は各々独立して、ＨまたはＣ１〜５アルキルであり、この中で、Ｃ１〜５アルキルは、ハロ、ＯＨ、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、アミノ、Ｃ１〜３アルキルアミノ、及びジ−Ｃ１〜３アルキルアミノから独立して選択される置換基で任意に単置換もしくは多置換され、またはＲ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、４〜７員のシクロヘテロアルキルもしくはヘテロアリールを形成し、
ｎは０〜５であり、かつ
ｐは３である）
によって表される。
【００３８】
いくつかの実施形態において、ｎは２〜４である。他の実施形態において、ｎは３である。他の実施形態において、ｎは１である。
【００３９】
いくつかの実施形態において、当該ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体は、式（ＶＩ）
【化９】
2017501115.tif 000011
によって表される。
【００４０】
いくつかの実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ７、及びＲ８は各々独立して、Ｈ、ハロ、ニトロ、Ｃ１〜５アルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、シアノ、Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｓ−Ｃ１〜３アルキル、ＳＯ２Ｒ１１、もしくは（ＣＯ）ＯＲ１１であり、または２つの隣接するＯ−Ｃ１〜３アルキル基は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する。
【００４１】
いくつかの実施形態において、Ｒ１、Ｒ４、Ｒ５、及びＲ８は各々、Ｈである。
【００４２】
いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々、Ｈ、ニトロ、ＯＨ、ＯＣＨ３、シアノ、Ｃ１〜３ハロアルキルである。いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々、Ｈ、シアノ、またはＣ１〜３ハロアルキルである。他の実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々、Ｈまたはシアノである。いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々、ＨまたはＣ１〜３ハロアルキルである。
【００４３】
いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ７は各々、Ｈ、ニトロ、ＯＨ、またはＯＣＨ３である。
【００４４】
いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ７は各々、ニトロ、ＯＨ、またはＯＣＨ３である。他の実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ７は各々、ＯＨまたはＯＣＨ３である。
【００４５】
いくつかの実施形態において、Ｒ２及びＲ３は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する。他の実施形態において、Ｒ２及びＲ３は、メチレンジオキシを形成する。
【００４６】
いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ７は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＳＣＨ３、ＳＯ２ＣＨ３、またはＣＯ２ＣＨ３である。いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ７は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＳＣＨ３、またはＣＯ２ＣＨ３である。いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ７は各々独立して、ＨまたはＳＯ２ＣＨ３である。いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ７は各々独立して、ＨまたはＳＯ２ＣＨ３である。他の実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ７は各々独立して、Ｈまたはハロである。ある実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ７は各々独立して、Ｈまたはフルオロである。
【００４７】
いくつかの実施形態において、ｎは２〜４である。他の実施形態において、ｎは３である。
【００４８】
いくつかの実施形態において、Ｒ９は、ＮＲ１１Ｒ１２である。いくつかの実施形態において、Ｒ１１及びＲ１２は各々、Ｈである。他の実施形態において、Ｒ１１はＨであり、かつＲ１２は、ＯＨで単置換されたＣ１〜５アルキルである。ある実施形態において、Ｒ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、４〜７員のシクロヘテロアルキル基またはヘテロアリール基を形成する。いくつかの実施形態において、Ｒ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、モルホリン基を形成する。他の実施形態において、Ｒ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、イミダゾール基を形成する。
【００４９】
いくつかの実施形態において、当該ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体は、式（ＶＩＩ）
【化１０】
2017501115.tif 000012
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、及びＲ８は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＮＲ１１Ｒ１２、ニトロ、Ｃ１〜５アルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、シアノ、Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｏ−Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｓ−Ｃ１〜３アルキル、（ＣＯ）ＯＲ１１、（ＣＯ）ＮＲ１１Ｒ１２、ＳＯ２Ｒ１１、ＳＯ２ＮＲ１１Ｒ１２、もしくはＣ３〜８シクロヘテロアルキルであり、または２つの隣接するＯ−Ｃ１〜３アルキル基は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する）
によって表される。
【００５０】
いくつかの実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、及びＲ８は各々独立して、Ｈ、ハロ、ニトロ、Ｃ１〜５アルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、Ｓ−Ｃ１〜３アルキル、ＳＯ２Ｒ１１、もしくは（ＣＯ）ＯＲ１１であり、または２つの隣接するＯ−Ｃ１〜３アルキル基は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する。
【００５１】
いくつかの実施形態において、Ｒ１、Ｒ４、Ｒ５、及びＲ８は各々、Ｈである。
【００５２】
いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ６は各々、Ｈ、ニトロ、ＯＨ、またはＯＣＨ３である。いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ３及びＲ６は各々、ニトロ、ＯＨ、またはＯＣＨ３である。他の実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ６は各々、ＯＨまたはＯＣＨ３である。ある実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ６は各々、ＯＣＨ３である。
【００５３】
いくつかの実施形態において、Ｒ２及びＲ３は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する。ある実施形態において、Ｒ２及びＲ３は、メチレンジオキシを形成する。
【００５４】
いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ６は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＳＣＨ３、ＳＯ２ＣＨ３、またはＣＯ２ＣＨ３である。いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ６は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＳＣＨ３、またはＣＯ２ＣＨ３である。いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ６は各々独立して、ＨまたはＳＯ２ＣＨ３である。ある実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ６は各々独立して、Ｈまたはハロである。他の実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ６は各々独立して、Ｈまたはフルオロである。
【００５５】
いくつかの実施形態において、ｎは２〜４である。他の実施形態において、ｎは３である。
【００５６】
いくつかの実施形態において、Ｒ９は、ＮＲ１１Ｒ１２である。いくつかの実施形態において、Ｒ１１及びＲ１２は各々、Ｈである。他の実施形態において、Ｒ１１はＨであり、かつＲ１２は、ＯＨで単置換されたＣ１〜５アルキルである。ある実施形態において、Ｒ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、４〜７員のシクロヘテロアルキル基またはヘテロアリール基を形成する。いくつかの実施形態において、Ｒ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、モルホリン基を形成する。他の実施形態において、Ｒ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、イミダゾール基を形成する。
【００５７】
いくつかの実施形態において、当該ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体は、式（ＩＶ）
【化１１】
2017501115.tif 000013
（式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＮＲ１１Ｒ１２、ニトロ、Ｃ１〜５アルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、シアノ、Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｏ−Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｓ−Ｃ１〜３アルキル、（ＣＯ）ＯＲ１１、（ＣＯ）ＮＲ１１Ｒ１２、ＳＯ２Ｒ１１、ＳＯ２ＮＲ１１Ｒ１２、もしくはＣ３〜８シクロヘテロアルキルであり、または２つの隣接するＯ−Ｃ１〜３アルキル基は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成し、
Ｒ９は、Ｈ、ハロ、Ｏ−Ｃ１〜５アルキル、ＮＲ１１Ｒ１２、ニトロ、Ｃ３〜６シクロヘテロアルキル、またはＣ３〜８シクロヘテロアルキルであり、
Ｒ１１及びＲ１２は各々独立して、ＨまたはＣ１〜５アルキルであり、この中で、Ｃ１〜５アルキルは、ハロ、ＯＨ、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、アミノ、Ｃ１〜３アルキルアミノ、及びジ−Ｃ１〜３アルキルアミノから独立して選択される置換基で任意に単置換もしくは多置換され、またはＲ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、４〜７員のシクロヘテロアルキル基もしくはヘテロアリール基を形成し、かつ
ｎは０〜５である）
によって表される。
【００５８】
いくつかの実施形態において、ＲＳは、本明細書に定義する放出セグメントである。
【００５９】
いくつかの実施形態において、ｎは２〜４である。他の実施形態において、ｎは３である。他の実施形態において、ｎは１である。
【００６０】
いくつかの実施形態において、当該ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体は、式（ＶＩＩＩ）
【化１２】
2017501115.tif 000014
によって表される。
【００６１】
いくつかの実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は各々独立して、Ｈ、ハロ、ニトロ、Ｃ１〜５アルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、シアノ、Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｓ−Ｃ１〜３アルキル、ＳＯ２Ｒ１１、もしくは（ＣＯ）ＯＲ１１であり、または２つの隣接するＯ−Ｃ１〜３アルキルは、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する。
【００６２】
いくつかの実施形態において、Ｒ１、Ｒ４、Ｒ５、及びＲ８は各々、Ｈである。
【００６３】
いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々、Ｈ、ニトロ、ＯＨ、ＯＣＨ３、シアノ、Ｃ１〜３ハロアルキルである。いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々、Ｈ、シアノ、またはＣ１〜３ハロアルキルである。他の実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々、Ｈまたはシアノである。いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々、ＨまたはＣ１〜３ハロアルキルである。
【００６４】
いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々、Ｈ、ニトロ、ＯＨ、またはＯＣＨ３である。いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々、ニトロ、ＯＨ、またはＯＣＨ３である。他の実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＳＣＨ３、ＳＯ２ＣＨ３、またはＣＯ２ＣＨ３である。いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＳＣＨ３、またはＣＯ２ＣＨ３である。いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々独立して、ＨまたはＳＯ２ＣＨ３である。ある実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々独立して、Ｈまたはハロである。いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々独立して、Ｈまたはフルオロである。
【００６５】
いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々、ＯＨまたはＯＣＨ３である。
【００６６】
いくつかの実施形態において、Ｒ２及びＲ３は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する。ある実施形態において、Ｒ２及びＲ３は、メチレンジオキシを形成する。
【００６７】
他の実施形態において、Ｒ６及びＲ７は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する。ある実施形態において、Ｒ６及びＲ７は、メチレンジオキシを形成する。
【００６８】
いくつかの実施形態において、ｎは、２〜４である。他の実施形態において、ｎは３である。
【００６９】
いくつかの実施形態において、Ｒ９は、ＮＲ１１Ｒ１２である。いくつかの実施形態において、Ｒ１１及びＲ１２は各々、Ｈである。他の実施形態において、Ｒ１１はＨであり、かつＲ１２はＯＨで単置換されたＣ１〜５アルキルである。いくつかの実施形態において、Ｒ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、４〜７員のシクロヘテロアルキル基またはヘテロアリール基を形成する。ある実施形態において、Ｒ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、モルホリン基を形成する。いくつかの実施形態において、Ｒ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、イミダゾール基を形成する。
【００７０】
いくつかの実施形態において、当該ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体は、式（ＩＸ）
【化１３】
2017501115.tif 000015
（式中、
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びＲ１０は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＮＲ１１Ｒ１２、ニトロ、Ｃ１〜５アルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、シアノ、Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｏ−Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｓ−Ｃ１〜３アルキル、（ＣＯ）ＯＲ１１、（ＣＯ）ＮＲ１１Ｒ１２、ＳＯ２Ｒ１１、ＳＯ２ＮＲ１１Ｒ１２、もしくはＣ３〜８シクロヘテロアルキルであり、または２つの隣接するＯ−Ｃ１〜３アルキル基は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成し、
Ｒ９は、Ｈ、ハロ、Ｏ−Ｃ１〜５アルキル、ＮＲ１１Ｒ１２、ニトロ、Ｃ３〜６シクロアルキル、またはＣ３〜８シクロヘテロアルキルであり、
Ｒ１１及びＲ１２は各々独立して、ＨまたはＣ１〜５アルキルであり、この中で、Ｃ１〜５アルキルは、ハロ、ＯＨ、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、アミノ、Ｃ１〜３アルキルアミノ、及びジ−Ｃ１〜３アルキルアミノから独立して選択される置換基で任意に単置換もしくは多置換され、またはＲ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、４〜７員のシクロヘテロアルキルまたはヘテロアリールを形成し、
ｎは、０〜５であり、かつ
ｐは、３である）
によって表される。
【００７１】
いくつかの実施形態において、ｎは、２〜４である。他の実施形態において、ｎは３である。他の実施形態において、ｎは１である。
【００７２】
いくつかの実施形態において、当該ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体は、式（Ｘ）
【化１４】
2017501115.tif 000016
（式中、Ｒ１、Ｒ２、及びＲ４は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＮＲ１１Ｒ１２、ニトロ、Ｃ１〜５アルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、シアノ、Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、Ｓ−Ｃ１〜３アルキル、（ＣＯ）ＯＲ１１、（ＣＯ）ＮＲ１１Ｒ１２、ＳＯ２Ｒ１１、ＳＯ２ＮＲ１１Ｒ１２、もしくはＣ３〜８シクロヘテロアルキルであり、または２つの隣接するＯ−Ｃ１〜３アルキル基は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する）によって表される。
【００７３】
いくつかの実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は各々独立して、Ｈ、ハロ、ニトロ、Ｃ１〜５アルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、Ｓ−Ｃ１〜３アルキル、ＳＯ２Ｒ１１、もしくは（ＣＯ）ＯＲ１１であり、または２つの隣接するＯ−Ｃ１〜３アルキル基は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する。
【００７４】
いくつかの実施形態において、Ｒ１、Ｒ４、Ｒ５、及びＲ８は各々、Ｈである。
【００７５】
いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ６、及びＲ７は各々、Ｈ、ニトロ、ＯＨ、またはＯＣＨ３である。他の実施形態において、Ｒ２、Ｒ６、及びＲ７は、ＯＨまたはＯＣＨ３である。
【００７６】
いくつかの実施形態において、Ｒ６及びＲ７は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する。他の実施形態において、Ｒ６及びＲ７は、メチレンジオキシを形成する。
【００７７】
いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ６、及びＲ７は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＳＣＨ３、ＳＯ２ＣＨ３、またはＣＯ２ＣＨ３である。いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ６、及びＲ７は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＳＣＨ３、またはＣＯ２ＣＨ３である。いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ６、及びＲ７は各々独立して、ＨまたはＳＯ２ＣＨ３である。いくつかの実施形態において、Ｒ２、Ｒ６、及びＲ７は各々独立して、Ｈまたはハロである。ある実施形態において、Ｒ２、Ｒ６、及びＲ７は各々独立して、Ｈまたはフルオロである。
【００７８】
いくつかの実施形態において、ｎは、２〜４である。いくつかの実施形態において、ｎは３である。
【００７９】
いくつかの実施形態において、Ｒ９は、ＮＲ１１Ｒ１２である。いくつかの実施形態において、Ｒ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、４〜７員のシクロヘテロアルキル基またはヘテロアリール基を形成する。いくつかの実施形態において、Ｒ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、モルホリン基を形成する。他の実施形態において、Ｒ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、イミダゾール基を形成する。
【００８０】
いくつかの実施形態において、当該ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体は、式（ＸＩ）
【化１５】
2017501115.tif 000017
（式中、Ｒ１、Ｒ３、及びＲ４は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＮＲ１１Ｒ１２、ニトロ、Ｃ１〜５アルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、シアノ、Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｏ−Ｃ１〜３ハロアルキル、Ｓ−Ｃ１〜３アルキル、（ＣＯ）ＯＲ１１、（ＣＯ）ＮＲ１１Ｒ１２、ＳＯ２Ｒ１１、ＳＯ２ＮＲ１１Ｒ１２、もしくはＣ３〜８シクロヘテロアルキルであり、または２つの隣接するＯ−Ｃ１〜３アルキル基は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する）によって表される。
【００８１】
いくつかの実施形態において、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は各々独立して、Ｈ、ハロ、ニトロ、Ｃ１〜５アルキル、Ｏ−Ｃ１〜３アルキル、Ｓ−Ｃ１〜３アルキル、ＳＯ２Ｒ１１、もしくは（ＣＯ）ＯＲ１１であり、または２つの隣接するＯ−Ｃ１〜３アルキル基は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する。
【００８２】
いくつかの実施形態において、Ｒ１、Ｒ４、Ｒ５、及びＲ８は各々、Ｈである。
【００８３】
いくつかの実施形態において、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は各々、Ｈ、ニトロ、ＯＨ、またはＯＣＨ３である。ある実施形態において、Ｒ３、Ｒ６、及びＲ７は、ＯＨまたはＯＣＨ３である。
【００８４】
いくつかの実施形態において、Ｒ６及びＲ７は、それらの結合する原子とともに、５〜７員のシクロヘテロアルキル基を形成する。いくつかの実施形態において、Ｒ６及びＲ７は、メチレンジオキシを形成する。
【００８５】
他の実施形態において、Ｒ３、Ｒ６及びＲ７は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＳＣＨ３、ＳＯ２ＣＨ３、またはＣＯ２ＣＨ３である。いくつかの実施形態において、Ｒ３、Ｒ６及びＲ７は各々独立して、Ｈ、ハロ、ＳＣＨ３、またはＣＯ２ＣＨ３である。いくつかの実施形態において、Ｒ３、Ｒ６及びＲ７は各々独立して、ＨまたはＳＯ２ＣＨ３である。ある実施形態において、Ｒ３、Ｒ６及びＲ７は各々独立して、Ｈまたはハロである。他の実施形態において、Ｒ３、Ｒ６及びＲ７は各々独立して、Ｈまたはフルオロである。
【００８６】
いくつかの実施形態において、ｎは、２〜４である。ある実施形態において、ｎは３である。
【００８７】
いくつかの実施形態において、Ｒ９は、ＮＲ１１Ｒ１２である。いくつかの実施形態において、Ｒ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、４〜７員のシクロヘテロアルキル基またはヘテロアリール基を形成する。ある実施形態において、Ｒ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、モルホリン基を形成する。他の実施形態において、Ｒ１１及びＲ１２は、それらの結合する窒素原子とともに、イミダゾール基を形成する。
【００８８】
いくつかの実施形態において、当該ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体は、式（ＸＩＩ）
【化１６】
2017501115.tif 000018
によって表される。
【００８９】
いくつかの実施形態において、当該ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体は、式（ＸＩＩＩ）
【化１７】
2017501115.tif 000019
によって表される。
【００９０】
いくつかの実施形態において、当該ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体は、式（ＸＩＶ）
【化１８】
2017501115.tif 000020
によって表される。
【００９１】
いくつかの実施形態において、当該ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体は、式（ＸＶ）
【化１９】
2017501115.tif 000021
によって表される。
【００９２】
いくつかの実施形態において、当該ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体は、式（ＸＶＩ）
【化２０】
2017501115.tif 000022
によって表される。
【００９３】
いくつかの実施形態において、当該ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体は、式（ＸＶＩＩ）
【化２１】
2017501115.tif 000023
によって表される。
【００９４】
いくつかの実施形態において、当該ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体は、式（ＸＶＩＩＩ）
【化２２】
2017501115.tif 000024
によって表される。
【００９５】
いくつかの実施形態において、当該ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体は、式（ＸＩＸ）
【化２３】
2017501115.tif 000025
によって表される。
【００９６】
いくつかの実施形態において、当該ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体は、式（ＸＸ）
【化２４】
2017501115.tif 000026
によって表される。
【００９７】
いくつかの実施形態において、ＲＳとインデノイソキノリンの間の結合は、適切な条件下で切断される。いくつかの実施形態において、当該適切な条件は、細胞内である。いくつかの実施形態において、当該細胞は、癌細胞である。ある実施形態において、当該細胞は、前立腺癌細胞である。
【００９８】
別の態様において、本発明は、式（ＩＢ）
ＤＵＰＡ−リンカー−ＲＳ−インデノイソキノリン  （ＩＢ）
（式中、
ＤＵＰＡは、修飾されたまたは非修飾の２−［３−（１，３−ジカルボキシプロピル）−ウレイド］ペンタン二酸であり、
リンカーは、単結合、置換もしくは非置換のアルキル、ペプチド、またはペプチドグリカンであり、
インデノイソキノリンは、置換または非置換のインデノイソキノリンであり、かつ
ＲＳは、所望の細胞内でインデノイソキノリンを放出することのできる放出セグメントであり、この中で、当該放出セグメントは、炭酸セグメント、カルバミン酸セグメント、またはアシルヒドラゾンセグメントである）
によって表されるＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体の調製方法を提供し、当該方法は、
（ｄ）ＤＵＰＡをペプチドと反応させて、ＤＵＰＡ−ペプチド試薬を調製すること、
（ｅ）ＲＳ試薬をインデノイソキノリンと反応させて、ＲＳ−インデノイソキノリン化合物を調製すること、及び
（ｆ）工程（ａ）のＤＵＰＡ−ペプチド試薬を工程（ｂ）のＲＳ−インデノイソキノリン化合物と反応させて、当該ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体を調製すること
を含む。
【００９９】
いくつかの実施形態において、当該ＲＳ試薬は、式（ＸＸＩ）
【化２５】
2017501115.tif 000027
によって表される。
【０１００】
いくつかの実施形態において、当該ＤＵＰＡ−ペプチド試薬は、式（ＸＸＩＩ）
【化２６】
2017501115.tif 000028
によって表される。
【０１０１】
インデノイソキノリンＴｏｐ１阻害薬１〜１９、８７、及び８８（スキーム１）ならびにこれらのＤＵＰＡ複合体の一般的な合成をスキーム１及び２に例示する。
スキーム１：インデノイソキノリンＴｏｐ１阻害薬１〜１９、８７、及び８８の一般的な合成
【化２７】
2017501115.tif 000029
【０１０２】
スキーム１において、ベンズアルデヒド２０（２０における感受性のある官能基は必要な場合、保護されていた）と３−ブロモプロピルアミンとの反応は、シッフ塩基２１を提供し、これは、無水３−ニトロホモフタル酸との縮合の際に、良好な収率及び純度でシス酸２２を生じ、ＳＯＣｌ２、次いでＡｌＣｌ３を用いた酸２２の処理は、臭化インデノイソキノリン２３を生じ、２３における臭素原子の適切な塩基（モルホリン、イミダゾール、またはアジ化物、次いで、シュタウディンガー還元及び酸性加水分解）との置き換えは、所望の対応するアミン２４〜２６を提供した。
【０１０３】
スキーム２：ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体及び炭酸／カルバミン酸複合体の一般的な合成
【化２８】
2017501115.tif 000030
スキーム２において、炭酸試薬２７とフェノール１８またはアミン６との反応はそれぞれ、炭酸２９またはカルバミン酸３１を生じ、軽度に酸性の水性媒体中（条件Ａ）またはＤＭＳＯ及び塩基性ＤＩＰＥＡ中（条件Ｂ）のいずれかでの２９または３１のＤＵＰＡ−ペプチド試薬２８による処理はそれぞれ、対応するＤＵＰＡ−薬剤複合体３０及び３２を生じた。応用のいくつかの部分において、複合体３０は複合体８６であり、複合体３２は複合体８４である。
【０１０４】
ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体（ＸＶＩ）〜（ＸＸ）は、スキーム２に説明する方法によって調製することができる。
【化２９】
2017501115.tif 000031
【０１０５】
スキーム３：炭酸試薬２７の合成
【化３０】
2017501115.tif 000032
スキーム３において、２−メルカプトエタノール（３３）の塩化スルフェニル３４による処理に続くＣＨ３ＣＮ中のピリジン３５の還流下での添加は、アルコール３６をＨＣｌ塩として提供した。３６のトリホスゲン（３７）との反応は、ホスゲンの炭酸中間体を生じ、これは、トリアゾール３８とのエステル交換反応の際に、優れた収率（全体で７９％）及び純度で所望の炭酸試薬２７を生じた。
【０１０６】
スキーム４：ＤＵＰＡ前駆体４４の合成
【化３１】
2017501115.tif 000033
スキーム４において、α，γ−ジベンジルグルタミン酸塩４０及びトリホスゲンを−７８℃で不活性雰囲気下でトリエチルアミン（ＴＥＡ）で２時間処理して、イソシアン酸塩４１を提供した（または、α，γ−ジベンジルグルタミン酸塩４０をトリエチルアミン（ＴＥＡ）の存在下で、０℃で不活性雰囲気下で２時間、トリホスゲンで処理して、イソシアン酸塩４１を提供した）。グルタミン酸塩４２の一晩かけての撹拌しながらの添加は、作業及びカラムクロマトグラフィーの後で尿素４３を生じた。ＥｔＯＡｃ中で一晩（または２日間）の、かつＰｄ−Ｃの存在下での雰囲気中での水素化は、１００％の収率で純粋なＤＵＰＡ前駆体４４を生じた。
【０１０７】
【化３２】
2017501115.tif 000034
スキーム５において、Ｆｍｏｃ−固相ペプチド合成を用いて、ＤＵＰＡ−ペプチド試薬２８を調製し、報告されているＦｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−（４−ＭｅＯＴｒｔ）樹脂の代わりに、Ｆｍｏｃ非含有Ｈ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−（２−ＣｌＴｒｔ）樹脂（４５）で出発し、その理由は、試薬４５が、Ｌ−ＣｙｓからＤ−Ｃｙｓへのラセミ化を抑制することができるだけでなく、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−（４−ＭｅＯＴｒｔ）樹脂を使用する場合に第一のＦｍｏｃ切断にかかる時間を節約することもできるからであった。
【０１０８】
有効となるために、ＤＵＰＡ部分へ結合した抗癌薬（例えば、インデノイソキノリン）は、前立腺癌細胞の内側に到達するまで溶液中での安定性を与える方法で結合していなければならず、当該結合は、のちに薬剤を遊離するであろう放出機序、例えば、容易な薬剤放出機序を支持しなければならない。本発明において、当該放出機序は、中間体４６を生じるための、エンドソームの還元環境内でのグルタチオンによるＤＵＰＡ−薬剤複合体３０のジスルフィド還元（スキーム６）を包含する（Ｌｅａｍｏｎら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２００８，６８，９８３９〜９８４４）。
【０１０９】
スキーム６：
【化３３】
2017501115.tif 000035
スキーム６において、中間体４６中のスルフヒドリル基は、親薬剤１８及び１，３−オキサチオラン−２−オン（４８）を遊離するための経路（ａ）または遊離薬１８、チイラン（４７）、及び二酸化炭素を得るための経路（ｂ）のいずれかを介して分子内求核攻撃を受けるよう設計した（Ｋｕｌａｒａｔｎｅら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１０，５３，７７６７〜７７７７）。
【０１１０】
ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体の抗腫瘍活性は、高親和性ＰＳＭＡリガンドである２−（ホスホノメチル）ペンタン二酸（ＰＭＰＡ）（Ｋｉ＝０．２７５ｎＭ）の存在下で、動物モデルにおいて検査することができ（Ｊａｃｋｓｏｎら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９６，３９，６１９〜６２２）、これは、競合剤として作用し、ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体の１００倍過剰量で使用した。活性が完全に遮断される（すなわち、異種移植片モデルにおける腫瘍体積が対照群の腫瘍体積と類似している）場合、当該結果は、ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体の活性及び取り込みがＰＳＭＡ仲介性でなければならないことを支持するであろうし、このことは、遊離薬（例えば、インデノイソキノリン）が、細胞の外側の代わりに細胞の内側で遊離しなければならないことを暗示しているであろう。当該複合体の毒性は、ＰＳＭＡを欠失する細胞によって吸収されないであろうことから、低下すべきである。
【０１１１】
本発明のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体には、当該複合体の４つの構成要素、すなわち標的指向化リガンド（例えば、ＤＵＰＡ）、リンカー（例えば、ペプチド）、薬剤放出セグメント、及び細胞毒性薬（例えば、インデノイソキノリン）が含まれる。図１は、リガンド標的指向化治療法の概念において使用するリガンド−薬剤複合体の一般的な概略図を示す。腫瘍標的指向化リガンド（ＤＵＰＡ）は、ペプチドリンカー及び、標的細胞の内側で遊離薬の放出を容易にするであろう炭酸薬剤放出セグメントによって、細胞毒性インデノイソキノリンＴｏｐ１阻害薬へ結合する。当該複合体のこれら４つの構成要素は、結合最適化、効能亢進、及び癌特異性／選択性を含む種々の目的のために改質され得る。
【０１１２】
本発明の薬剤複合体において、当該薬剤は、当業者及び医療従事者に公知のもの、例えばトポイソメラーゼＩ阻害薬を含む任意の細胞毒性薬であり得る。いくつかの実施形態において、当該薬剤複合体は、ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体である。いくつかの実施形態において、当該ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体のインデノイソキノリンは、本明細書に説明するインデノイソキノリン化合物である。当該ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体は、癌、例えば、卵巣癌、肺癌、乳癌、または前立腺癌の治療に使用することができる。いくつかの実施形態において、当該ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体は、前立腺癌の治療に使用することができる。
【０１１３】
本発明の薬剤複合体、例えば、ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体において、ＤＵＰＡは、ＩＩ型膜糖タンパク質（Ｋｉ＝８ｎＭ）であるＰＳＭＡ（葉酸ヒドロラーゼＩ型またはグルタミン酸カルボキシペプチダーゼＩＩ型とも呼ぶ）に対する高い親和性を示す（Ｋｏｚｉｋｏｗｓｋｉら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００４．４７．１７２９〜１７３８）。ＤＵＰＡへの結合の際に、ＰＳＭＡは、エンドサイト―シスを受け、リガンドを放出し、次に細胞表面へと迅速に再生利用する。いくつかの実施形態において、ＤＵＰＡは改質することができる。例えば、ＤＵＰＡは、アルキル基、ヒドロキシ基、アルコキシ基、チオ基、リン酸基もしくはチオリン酸基、シアノ基、または当該技術分野で公知の他の置換基で置換することができる。他の実施形態において、ＤＵＰＡは、改質されていない。
【０１１４】
本発明の薬剤複合体、例えば、ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体において、当該リンカーは、ＤＵＰＡ及び薬剤（例えば、インデノイソキノリン）を結合することのできる、当該技術分野で公知の任意のスペーサーであり得る。いくつかの実施形態において、当該リンカーは結合である。いくつかの実施形態において、当該リンカーは、１つ以上のヘテロ原子と置換することのできるまたは置換することのできないアルキル鎖である。他の実施形態において、当該リンカーは、ペプチドまたはペプチドグリカンである。いくつかの実施形態において、当該リンカー（例えば、ペプチド）の長さ及び化学的組成は、ＰＳＭＡに対するＤＵＰＡリガンドの結合親和性を高めるのを支援するよう修飾することができる。当該リンカーは、本発明の薬剤または複合体の疎水性または親水性の平衡をとるためにより親水性またはより疎水性となるよう修飾することもできる。
【０１１５】
本発明の複合体の放出セグメント（例えば、ＲＳ）は、所望の細胞内で当該複合体中の薬剤、例えば、インデノイソキノリンを放出することができる。いくつかの実施形態において、当該放出セグメントは、炭酸セグメント、カルバミン酸セグメント、またはアシルヒドラゾンセグメントである。ある実施形態において、当該放出セグメントは炭酸セグメントである。
【０１１６】
本発明の複合体、例えば、ＤＵＰＡ−インデノイソキノリンにおいて、当該インデノイソキノリンは、さらなる複合体形成に適した、反応性のヒドロキシル基またはアミン基を保有する。
【化３４】
2017501115.tif 000036
【０１１７】
本炭酸またはカルボン酸結合の安定性は、遊離薬の細胞毒性及び現行の方法論の実行可能性を判断する重要な因子であり、その理由は、当該安定性が、前立腺癌細胞に到達するのに血漿中で十分安定しており、かつ当該複合体が当該細胞の内部に一旦入ると、遊離薬を放出することが十分に容易であることの両方でなければならないからである。このような因子は、インデノイソキノリン薬に最も適した結合を判断するためにモニターしなければならない。いくつかの実施形態において、インデノイソキノリン化合物４、１２、１５、及び１７は、本発明の複合体に所望の候補である。他の実施形態において、インデノイソキノリン化合物６、１６、及び１８は、本発明の複合体に所望の候補である。
【０１１８】
いくつかの実施形態において、本明細書の他所で示す結合に加えて、当該ＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体における放出セグメント（例えば、ＲＳ）は、スキーム７において例示する複合体へ結合することができる。したがって、当該複合体は、イミン加水分解を受けることができるし、炭酸試薬２７のヒドラジンとの反応は、ヒドラジド中間体４９を提供したので、このことは、１８による処理の際に、アシルヒドラゾン５０を生じるであろうし、ジスルフィド５０のＤＭＳＯ及びＤＩＰＥＡ中（条件Ｂ）のＤＵＰＡ−ペプチド２８による類似の処理は、所望の生成物５１を生じるであろう。エンドソームの形態での内部移行化の際に、遊離薬（例えば、インデノイソキノリン）は、その複合体から、ドキソルビシンの場合に成功裡に採用された放出機序であるエンドソームｐＨで当該複合体の酸触媒性アシルヒドラゾン加水分解を介して細胞内で放出されるであろう（Ｚｈｏｕら，Ｂｉｏｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ２０１１，１２，１４６０〜１４６７、Ｙｏｏら，Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ２００２，８２，１７〜２７、Ｌｅｅら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．２００６，１０３，１６６４９〜１６６５４、Ｂａｅら，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．２００３，４２，４６４０〜４６４３、及びＨｕら，Ｂｉｏｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ２０１０，１１，２０９４〜２１０２を参照されたい）。
スキーム７：
【化３５】
2017501115.tif 000037
【０１１９】
本発明のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体のペプチドは、ＰＳＭＡとそのリガンドの結合を確実にするためにＤＵＰＡリガンドと細胞毒性薬の間のスペーサーとして、及びインデノイソキノリンの水溶解度を改良するための手段としての両方で機能した。ＤＵＰＡ−薬剤複合体（例えば、３０及び３２または８４及び８６）はすべて、室温で水中で完全かつ容易に溶解する。いくつかの実施形態において、当該ペプチドリンカーの長さ及び化学的組成は、ＰＳＭＡに対するＤＵＰＡリガンドの結合親和性を高めるのを支援するであろうように改質することができる。改質の一例として、ペプチドリンカー２８の構造は、内部フェニルアラニンのグルタミン酸残基による置換によって変化させてあり、結果として生じる化合物５２の切断形態は、図２に示すようにＰＳＭＡ標的上でドッキングし及びエネルギーを最低限にされた（当該切断形態は、本アプローチにおける理論的根拠の簡素化及び迅速な提示に使用したことに留意されたい）。新たなＧｌｕ残基は、リンカーの水溶解度を改良するであろうし、その理論的モデルは、ＰＳＭＡ結晶構造におけるＬｙｓ２０７（左下）の末端側鎖アンモニウム陽イオンを用いて潜在的な塩架橋（２．２３Å）を明らかにした。
【０１２０】
定義
本明細書における種々の箇所で、本発明の化合物の置換基は複数の基においてまたは範囲において開示される。本発明にはこのような基または範囲のメンバーの各々の及びあらゆる副組み合わせが含まれることは具体的に企図される。例えば、「Ｃ１〜５アルキル」という用語は、メチル、エチル、Ｃ３アルキル、Ｃ４アルキル、及びＣ５アルキルを個々に開示するよう具体的に企図される。
【０１２１】
本発明の化合物が安定であることはさらに企図される。本明細書で使用する場合、「安定な」は、反応混合物からの純度の有用な程度までの単離を生き残るために十分頑強な、活好ましくは有効な治療薬へと製剤化することのできる化合物を指す。
【０１２２】
明確さのために別個の実施形態の脈絡において説明される本発明のある特長は、単一の実施形態における組み合わせにおいて提供することもできることはさらに認められる。逆に、簡潔さのために単一の実施形態の脈絡で説明される本発明の種々の特長は、個別にまたは任意の適切な副組み合わせで提供することもできる。
【０１２３】
いくつかの実施形態において、「アルキル」という用語は、直鎖または分枝鎖である飽和炭化水素基を指すよう意味する。例となるアルキル基には、メチル（Ｍｅ）、エチル（Ｅｔ）、プロピル（例えば、ｎ−プロピル及びイソプロピル）、ブチル（例えば、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル）、ペンチル（例えば、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル）、及びこれらに類するものが挙げられる。アルキル基は、１〜約２０、２〜約２０、１〜約１０、１〜約８、１〜約６、１〜約４、または１〜約３の炭素原子を含有することができる。
【０１２４】
いくつかの実施形態において、「ハロアルキル」は、１つ以上のハロゲン置換基を有するアルキル基を指す。例となるハロアルキル基には、ＣＦ３、Ｃ２Ｆ５、ＣＨＦ２、ＣＣｌ３、ＣＨＣｌ２、Ｃ２Ｃｌ５、及びこれらに類するものが含まれる。
【０１２５】
いくつかの実施形態において、「アリール」は、例えば、フェニル、ナフチル、アントラセニル、」フェナントレニル、及びこれらに類するものなどの単環式または多環式（例えば、２、３または４つの縮合環を有する）芳香族炭化水素を指す。いくつかの実施形態において、アリール基は、６〜約２０の炭素原子を有する。
【０１２６】
いくつかの実施形態において、「シクロアルキル」は、環化したアルキル基、アルケニル基、及びアルキニル基を含む非芳香族炭素環式化合物を指す。シクロアルキル基には、スピロ環式化合物を含む単環式または多環式（例えば、２、３または４つの縮合環を有する）を含むことができる。いくつかの実施形態において、シクロアルキル基は、３〜約２０の炭素原子、３〜約１４の炭素原子、３〜約１０の炭素原子、または３〜７の炭素原子を有することができる。シクロアルキル基はさらに、０、１、２、もしくは３の二重結合及び／または０、１、もしくは２の三重結合を有することができる。シクロアルキル環へ縮合した１つ以上の芳香環を有する（すなわち、単結合を共通して有する）部分、例えば、シクロペンタン、シクロペンテン、シクロヘキサン、及びこれらに類するもののベンゾ誘導体も、シクロアルキルの定義に含まれる。１つ以上の縮合した芳香環を有するシクロアルキル基は、芳香族部分または非芳香族部分のいずれかを通じて結合することができる。シクロアルキル基の１つ以上の環形成炭素原子は酸化することができ、例えば、オキソ置換基またはスルフィド置換基を有することができる。例となるシクロアルキル基としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、シクロヘキサジエニル、シクロヘプタトリエニル、ノルボルニル、ノルピニル、ノルカミル、アダマンチル、及びこれらに類するものが挙げられる。
【０１２７】
いくつかの実施形態において、「ヘテロアリール」は、硫黄、酸素、または窒素などの少なくとも１つのヘテロ原子環メンバーを有する芳香族複素環を指す。ヘテロアリール基には、単環式及び多環式（例えば、２、３または４つの縮合環を有する）の系を含む。ヘテロアリール基における任意の環形成Ｎ原子も酸化して、Ｎ−オキソ部分を形成することができる。ヘテロアリール基の例としては、ピリジル、Ｎ−オキソピリジル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアジニル、フリル、キノリル、イソキノリル、チエニル、イミダゾリル、チアゾリル、インドリル、ピリル、オキサゾリル、ベンゾフリル、ベンゾチエニル、ベンズチアゾリル、イソキサゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、インダゾリル、１，２，４−チアジアゾリル、イソチアゾリル、ベンゾチエニル、プリニル、カルバゾリル、ベンズイミダゾリル、インドリニル、及びこれらに類するものが挙げられる。いくつかの実施形態において、ヘテロアリール基は、１〜約２０の炭素原子を、さらなる実施形態においては約３〜約２０の炭素原子を有する。いくつかの実施形態において、ヘテロアリール基は、３〜約１４の、３〜約７の、または５〜６の環形成原子を含有する。いくつかの実施形態において、ヘテロアリール基は、１〜約４の、１〜約３の、または１〜２のヘテロ原子を有する。
【０１２８】
いくつかの実施形態において、「シクロヘテロアルキル」または「ヘテロシクロアルキル」は、環形成原子のうちの１つ以上がＯ原子、Ｎ原子、またはＳ原子などのヘテロ原子である非芳香族複素環を指す。シクロヘテロアルキル基またはヘテロシクロアルキル基には、スピロ環式化合物と同様に、単環式または多環式（例えば、２、３または４つの縮合環を有する）環系を含むことができる。例となるシクロヘテロアルキル基またはヘテロシクロアルキル基としては、モルホリノ、チオモルホリノ、ピペラジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチエニル、２，３−ジヒドロベンゾフリル、１，３−ベンゾジオキソール、ベンゾ−１，４−ジオキサン、ピペリジニル、ピロリジニル、イソキサゾリジニル、イソチアゾリジニル、ピラゾリジニル、オキサゾリジニル、チアゾリジニル、イミダゾリジニル、及びこれらに類するものが挙げられる。非芳香族複素環へ縮合した１つ以上の芳香環を有する（すなわち、単結合を共通して有する）部分、例えば、複素環のフタリミジル誘導体、ナフタリミジル誘導体、及びベンゾ誘導体もシクロヘテロアルキルまたはヘテロシクロアルキルの定義に含まれる。１つ以上の縮合した芳香環を有するシクロヘテロアルキル基またはヘテロシクロアルキル基は、芳香族部分または非芳香族部分のいずれかを通じて結合することができる。１つ以上の環形成原子が１または２のオキソ基またはスルフィド基によって置換されている部分も、シクロヘテロアルキルまたはヘテロシクロアルキルの定義に含まれる。いくつかの実施形態において、シクロヘテロアルキル基またはヘテロシクロアルキル基は、１〜約２０の炭素原子を、さらなる実施形態において、約３〜約２０の炭素原子を有する。いくつかの実施形態において、シクロヘテロアルキル基またはヘテロシクロアルキル基は、３〜約２０、３〜約１４、３〜約７、または５〜６の環形成原子を含有する。いくつかの実施形態において、シクロヘテロアルキル基またはヘテロシクロアルキル基は、１〜約４の、１〜約３の、または１〜２のヘテロ原子を有する。いくつかの実施形態において、シクロヘテロアルキル基またはヘテロシクロアルキル基は、０〜３個の二重結合を含有する。いくつかの実施形態において、シクロヘテロアルキル基またはヘテロシクロアルキル基は、０〜２個の三重結合を含有する。
【０１２９】
いくつかの実施形態において、「ハロ」または「ハロゲン」には、フルオロ、クロロ、ブロモ、及びヨードが含まれる。
【０１３０】
いくつかの実施形態において、「置換された」という用語は、分子または基における水素部分と非水素部分との置き換えを指す。「単置換された」または「多置換された」という用語は、置換された基の原子価まで１つ以上の置換基で置換されていることを意味する。例えば、単置換された基は、１つの置換基で置換されていることができ、多置換された基は、２、３、４、または５つの置換基で置換されていることができる。概して、考えられ得る置換基のリストが提供される場合、当該置換基は、当該基から独立して選択することができる。
【０１３１】
いくつかの実施形態において、「反応している」という用語は、化学系の熱力学及び速度論により、示された試薬の分子レベルの相互作用及び化学的変態を可能にするような方法で、当該示された試薬が互いに架橋していることを指すよう意味する。反応していることは、試薬のうちの少なくとも１つが少なくとも部分的に可溶性である適切な溶媒または溶媒混合物を用いることによって、特に固体試薬について促進されることができる。反応していることは典型的には、適切な時間、及び所望の化学的変態を生じるのに適切な条件下で実施される。
【０１３２】
本明細書に説明する化合物は、非対称性である（例えば、１つ以上の立体中心を有する）ことができる。鏡像異性体及びジアステレオマーなどの立体異性体はすべて、別段の記載がない限り企図される。非対称的に置換された炭素原子を含有する本発明の化合物は、光学的に活性のある形態でまたはラセミ形態で単離することができる。光学的に活性のある出発材料から光学的に活性のある形態をどのように調製するかに関する方法は、ラセミ混合物の分割によってまたは立体選択的合成によってなど、当該技術分野で公知である。オレフィン類、Ｃ＝Ｎ二重結合、及びこれらに類するものに関する多くの幾何異性体も本明細書に説明する化合物において存在することができ、このような安定した異性体はすべて、本発明において熟考されている。本発明の化合物のシス幾何異性体及びトランス幾何異性体は説明されており、異性体の混合物としてまたは分離した異性体形態として分離され得る。
【０１３３】
非対称性炭素原子を含有する化合物の場合、本発明は、Ｄ型、Ｌ型、及びＤ、Ｌ混合物に関し、また、１つを超える非対称性炭素原子が存在する場合、ジアステレオマー形態に関する。非対称性炭素原子を含有する、及び一般的にラセミ化合物として生じる本発明の当該化合物は、公知の様式で、例えば、光学的に活性のある酸を用いて光学的に活性のある異性体へと分離することができる。しかしながら、初めから光学的に活性のある出発物質を使用することも可能であり、それに次いで、対応する光学的に活性のある化合物またはジアステレオマー化合物が最終生成物として得られる。
【０１３４】
本発明の化合物には、互変異性形態も含まれる。互変異性形態は、プロトンの同時の移動とともに、単結合と隣接する二重結合との交換から結果的に生じる。互変異性形態には、同じ経験式及び総帯電を有する異性体プロトン付加状態であるプロトトロピー互変異性体が含まれる。例となるプロトトロピー互変異性体としては、ケトン−エノール対、アミド−イミド酸対、ラクタム−ラクチム対、アミド−イミド酸対、エナミン−イミン対、及びプロトンが複素環系の２つ以上の位置を占有することのできる環状形態、例えば、１Ｈ−及び３Ｈ−イミダゾール、１Ｈ−、２Ｈ−及び４Ｈ−１，２，４−トリアゾール、１Ｈ−及び２Ｈ−イソインドール、ならびに１Ｈ−及び２Ｈ−ピラゾールが挙げられる。互変異性形態は、平衡状態にあることができ、または適切な置換によってある形態へと立体的にロックされることができる。
【０１３５】
本発明の化合物には、中間体または最終化合物において生じる原子の同位体もすべて含むことができる。同位体には、同じ原子番号だが異なる質量数を有する原子を含む。例えば、水素の同位体には、トリチウム及び重水素を含む。
【０１３６】
いくつかの実施形態において、「化合物」または「複合体」という用語は、本明細書で使用する場合、示される構造の立体異性体、幾何異性体、互変異性体、及び同位体をすべて含むよう意味する。
【０１３７】
いくつかの実施形態において、本発明の複合体は、実質的に単離される。「実質的に単離される」が意味するのは、当該化合物が形成または検出された環境から当該化合物が少なくとも部分的にまたは実質的に分離されることである。部分的な分離には例えば、本発明の化合物において濃縮された組成物を含むことができる。実質的な分離には、本発明の化合物、またはその塩の少なくとも約５０重量％、少なくとも約６０重量％、少なくとも約７０重量％、少なくとも約８０重量％、少なくとも約９０重量％、少なくとも約９５重量％、少なくとも約９７重量％、または少なくとも約９９重量％を含有する組成物を含むことができる。化合物及びその塩を単離するための方法は、当該技術分野で通例である。
【０１３８】
いくつかの実施形態において、本明細書で使用する「治療有効量」は、与えられた条件及び投与法について治療効果を提供する量を指す。
【０１３９】
いくつかの実施形態において、「医薬として許容され得る」という句は、確かな医学的判断の範囲内で、過剰な毒性、刺激、アレルギー応答、または他の問題もしくは合併症を有することなく、妥当な恩恵／リスク比に相応して、ヒト及び動物の組織と接触した使用に適した当該化合物、材料、組成物、及び／または剤形を指すよう本明細書において採用される。
【０１４０】
本明細書で使用する「対象」は、動物またはヒトを指す。いくつかの実施形態において、「対象」という用語はヒトを指す。
【０１４１】
組成物及び投与
別の態様において、本発明は、本発明のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン及び少なくとも１つの医薬として許容され得る担体を含む医薬組成物を特長とする。
【０１４２】
治療有効用量の本発明によるＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体は、医薬組成物を製造するために生理学的に許容され得る担体、希釈剤及び／またはアジュバントに加えて使用される。活性のある複合体の用量は、投与経路、患者の年齢及び体重、治療することになっている疾患の性質及び重症度、ならびに類似の因子に応じて変化することができる。日用量は、１回で投与されることになっている単回用量として与えることができ、または２回以上の日用量へとさらに分割することができ、一般的には０．００１〜２０００ｍｇである。特に好ましいのは、０．１〜５００ｍｇ、例えば、０．１〜１００ｍｇの日用量を投与することである。
【０１４３】
適切な投与形態は、経口、非経口、静脈内、経皮的、局所的、吸入、鼻内及び舌下調製物である。特に好ましいのは、本発明による化合物の経口、非経口、例えば、静脈内もしくは筋肉内、鼻内、例えば乾燥粉末または舌下調製物を用いることである。錠剤、糖衣錠、カプセル剤、分散性散剤、顆粒剤、水性液剤、アルコール含有水性液剤、水性もしくは油性懸濁剤、シロップ剤、ジュース剤またはドロップ剤など、通常の天然成分でできた調製形態が使用される。
【０１４４】
固体医薬形態は、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、リン酸ナトリウム、ラクトース、デンプン、マンニトール、アルギン酸塩、ゼラチン、グアーガム、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸アルミニウム、メチルセルロース、タルク、高度に分散したケイ酸、シリコーン油、高分子量脂肪酸（ステアリン酸など）、ゼラチン、寒天または植物性もしくは動物性の油脂、または固体高分子量ポリマー（ポリエチレングリコールなど）などの不活性成分及び担体物質を含むことができ、経口投与に適した調製物は、所望の場合、追加の味付け料及び／または甘味料を含むことができる。
【０１４５】
液体医薬形態は、滅菌化することができ、及び／または浸透圧を調節するためにもしくは緩衝のために、保存料、安定化剤、湿潤剤、浸透剤、乳化剤、拡張剤、可溶化剤、塩類、糖類もしくは糖アルコール類などの補助物質、及び／または粘度調節剤を適宜含む。このような添加剤の例は、酒石酸及びクエン酸緩衝液、エタノールならびに金属イオン封鎖剤（エチレンジアミン四酢酸及びその非毒性塩）である。液体酸化ポリエチレン、微結晶性セルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、デキストランまたはゼラチンなどの高分子量ポリマーは、粘度を調節するのに適している。固体担体物質の例は、デンプン、ラクトース、マンニトール、メチルセルロース、タルク、高度に分散したケイ酸、高分子量脂肪酸（ステアリン酸など）、ゼラチン、寒天、リン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、動物性及び植物性脂肪、ならびにポリエチレングリコールなどの固体高分子量ポリマーである。
【０１４６】
非経口的または局所的適用のための油状懸濁剤は、脂肪酸鎖における８〜２２Ｃ原子を各場合に有する液体脂肪酸エステルなどの植物性合成または半合成油、例えば、パルミチン酸、ラウリン酸、トリデカン酸、マルガリン酸、ステアリン酸、アラキドン酸、ミリスチン酸、ベヘン酸、ペンタデカン酸、リノール酸、エライジン酸、ブラジジン酸、エルカ酸またはオレイン酸であることができ、これらは、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、ペンタノールもしくはこれらの異性体、グリコールまたはグリセロールなど、１〜６Ｃの原子を有する一価〜三価アルコールでエステル化される。このような脂肪酸エステルの例はとりわけ、市販のミグリオール、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸イソプロピル、ＰＥＧ６−カプリン酸、飽和脂肪アルコールのカプリル酸／カプリン酸エステル、ポリオキシエチレングリセロールトリオレアート、オレイン酸エチル、人工ダックテール腺脂などの蝋状脂肪酸エステル、ヤシ脂肪酸イソプロピルエステル、オレイン酸オレイル、オレイン酸デシル、乳酸エチル、フタル酸ジブチル、アジピン酸ジイソプロピル、ポリオール脂肪酸エステルである。異なる粘度のシリコーン油、またはイソトリデシルアルコール、２−オクチルドデカノール、セチルステアリルアルコールもしくはオレイルアルコールなどの脂肪アルコール、またはオレイン酸などの脂肪酸も適している。さらに、ヒマシ油、アーモンド油、オリーブ油、ゴマ油、綿実油、ピーナッツ油またはダイズ油などの植物油を使用することが可能である。
【０１４７】
適切な溶媒、ゼラチン化剤及び可溶化剤は、水または水混和性溶媒である。適切な物質の例は、エタノールもしくはイソプロピルアルコール、ベンジルアルコール、２−オクチルドデカノールなどのアルコール、ポリエチレングリコール、フタル酸エステル、アジピン酸エステル、プロピレングリコール、グリセロール、ジプロピレングリコールもしくはトリプロピレングリコール、蝋、メチルセロソルブ、セロソルブ、エステル、モルホリン、ジオキサン、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、シクロヘキサノンなどである。
【０１４８】
ゼラチン化剤及びフィルム形成剤の混合物も完全に可能である。この場合、特にカルボキシメチルセルロース、ポリアクリル酸、ポリメタクリル酸及びこれらの塩、アミロペクチンセミグリコール酸ナトリウム、アルギン酸もしくはナトリウム塩としてのプロピレングリコールアルギン酸塩、アラビアゴム、キサンタンゴム、グアーゴムまたはカラゲナンなどのイオン性巨大分子の使用がなされる。以下は、追加の製剤化助剤として使用することができる。すなわち、グリセロール、異なる粘度のパラフィン、トリエタノールアミン、コラーゲン、アラントイン及びノバンチゾール酸である。例えば、ラウリル硫酸Ｎａ、脂肪アルコールエーテルスルファート、ジ−Ｎａ−Ｎ−ラウリル−β−イミノジプロピオナート、ポリエトキシ化ヒマシ油もしくはモノオレイン酸ソルビタン、モノステアリン酸ソルビタン、ポリソルベート（例えば、トゥイーン）、セチルアルコール、レシチン、モノステアリン酸グリセロール、ステアリン酸ポリオキシエチレン、アルキルフェノールポリグリコールエーテル、塩化セチルトリメチルアンモニウムまたはモノ／ジアルキルポリグリコールエーテルオルトリン酸モノエタノールアミン塩の界面活性剤、乳化剤または湿潤剤も、製剤化に必要とすることができる。エマルションを安定化させまたは抗酸化物質、例えばトコフェロールもしくはブチルヒドロキシアニソールなどの活性物質またはｐ−ヒドロキシ安息香酸エステルなどの保存剤の分解を防止するための、モンモリロナイトまたはコロイド状ケイ酸などの安定化剤は同様に、所望の製剤を調製するために使用することができる。
【０１４９】
非経口投与のための調製物は、アンプルまたはバイアルなど、個別の用量単位形態で存在することができる。活性化合物の溶液、好ましくは水溶液、特に等張性溶液及びまた懸濁液の使用は好ましく実施される。これらの注射形態は、使用する準備のできている調製物として入手可能にすることができ、または使用直前に活性のある化合物、例えば凍結乾燥物を、他の固体担体物質を適宜含有する場合、所望の溶媒または懸濁剤と混合することによって単に調製することができる。
【０１５０】
鼻内調製物は、水性もしくは油性の溶液としてまたは水性もしくは油性の懸濁液として存在することができる。当該鼻内調製物は、適切な溶媒または懸濁剤を用いて使用前に調製される凍結乾燥物としても存在することができる。
【０１５１】
吸入可能調製物は、散剤、液剤または懸濁剤として表すことができる。好ましくは、吸入可能調製物は、散剤、例えば、有効成分とラクトースなどの適切な製剤助剤との混合物として存在する。
【０１５２】
当該調製物は、通例の抗微生物条件及び無菌条件下で製造、分注及び密封される。
【０１５３】
先に示したように、本発明のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体は、さらなる活性のある薬剤、例えば、癌、例えば前立腺癌、卵巣癌、肺癌、または乳癌の治療において有用な治療活性のある化合物との併用療法として投与してもよい。併用療法のために、有効成分は、単回用量形態でいくつかの有効成分を含有する組成物として、及び／または個別の剤形において個々の有効成分を含有するキットとして製剤化してもよい。併用療法で使用する有効成分は、同時に投与され得または別個に投与され得る。
【０１５４】
医薬方法
本発明のＤＵＰＡ−インデノイソキノリンは、細胞、例えば、癌細胞、例えば、前立腺癌細胞の浸潤の際に放出することのできるトポイソメラーゼＩ型（Ｔｏｐ１）阻害薬を含有する。それゆえ、本発明のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体が、トポイソメラーゼＩ型（Ｔｏｐ１）を阻害することが価値のある、トポイソメラーゼＩ型によって生じる、トポイソメラーゼＩ型と関係した及び／またはトポイソメラーゼＩ型の随伴する障害を治療または予防するのに使用することができることが、本発明である。本発明のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体は、慢性リンパ球性白血病、多発性骨髄腫、大細胞未分化癌、肺癌、ユーイング肉腫、非ホジキンリンパ腫、乳癌、結腸癌、胃癌、卵巣癌、膀胱癌、悪性黒色腫、及び前立腺癌を含むがこれらに制限しないトポイソメラーゼＩ型阻害薬にすることが公知の癌を治療するのに使用することができる。別の態様において、本発明は、癌細胞を有効量の本発明のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体と接触させて、トポイソメラーゼＩ型阻害薬誘発性細胞毒性から正常細胞を防護しながら腫瘍細胞の増殖の阻害を得ることを含む、癌細胞の増殖を阻害する方法に関する。本発明のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体は、癌、例えば、前立腺癌、卵巣癌、肺癌、または乳癌の治療に使用することができることは、本発明の一実施形態である。いくつかの実施形態において、本発明のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体は、前立腺癌の治療に使用することができる。
【０１５５】
図１は、リガンド−薬剤複合体の一般的な模式図を示し、腫瘍標的指向化リガンド（例えば、ＤＵＰＡ）は、ペプチドリンカーと、標的細胞内部での遊離薬の容易な放出を可能にするであろう薬剤放出セグメント（例えば、カーボネート結合）とを介して、細胞毒性薬（例えば、Ｔｏｐ１阻害薬）へ結合する。
【０１５６】
ＰＳＭＡ（葉酸ヒドロラーゼＩ型またはグルタミン酸カルボキシペプチダーゼＩＩ型とも呼ばれる）は、２−［３−（１，３−ジカルボキシプロピル）−ウレイド］ペンタン二酸（ＤＵＰＡ）というリガンドに対する高い親和性（Ｋｉ＝８ｎＭ、ＩＣ５０＝４７ｎＭ）を示すＩＩ型膜糖タンパク質である（Ｋｏｚｉｋｏｗｓｋｉら．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００４，４７，１７２９〜１７３８、Ｋｏｚｉｋｏｗｓｋｉら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００１，４４，２９８〜３０１）。リガンド（例えば、ＤＵＰＡ）への結合の際に、ＰＳＭＡは、エンドサイト―シスを受け、リガンドを放出し、次に、細胞表面へと迅速に再生利用する。ＰＳＭＡは、すべての腫瘍病期において認められており、アンドロゲン欠乏後に上方制御されることが示された（Ｗａｎｇら，Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２００７，１０２，５７１〜５７９）。
【０１５７】
本発明のＤＵＰＡ−インデノイソキノリン複合体には、ＰＳＭＡへ選択的に結合し（Ｋｕｌａｒａｔｎｅら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１０，５３，７７６７〜７７７７）、したがって、薬剤を前立腺癌細胞へより容易にかつ選択的に進入させること、及びＰＳＭＡを欠失する正常細胞に対する有害な副作用を低下させながら当該薬剤の生物学的利用率及び効能を高めることによって細胞毒性を高めるリガンドＤＵＰＡへ結合するインデノイソキノリントポイソメラーゼＩ型（Ｔｏｐ１）阻害薬を含む。適切なペプチドリンカーを当該薬剤、例えばインデノイソキノリン阻害薬とＤＵＰＡリガンドの間にスペーサーとして付加して、（１）ＰＳＭＡのＤＵＰＡ部分への結合を容易にし、したがって、ＰＳＭＡ及びそのリガンドの結合に対する細胞毒性薬の何らかの起こり得る介入を防止し、（２）その制限された溶解度が臨床的展開におけるこの薬剤タイプの主要な欠点のうちであるインデノイソキノリンＴｏｐ１阻害薬の全体的な水溶解度を改良した。ペプチドは、いくつかの理由、すなわち（１）合成の容易さ、（２）化学的修飾における可撓性、（３）種々の条件（ｐＨ、温度）におけるより高い安定性、及び（４）その構築ブロックが、ペプチド分解の際に周辺組織によって潜在的に使用することのできる天然Ｌ型アミノ酸であるので、より生体適合性でありかつ免疫原性応答に対してあまり感受性がないこと、のためにリンカーとして選択した。
【０１５８】
インデノイソキノリンＴｏｐ１阻害薬のＤＵＰＡ結合は、当該インデノイソキノリン抗癌薬を前立腺癌細胞へ安全かつ選択的に送達する有効な方法である。例えば、前立腺標的指向化リガンドＤＵＰＡは、薬剤放出のためのジスルフィドリンカーと、ＤＵＰＡの受容体（ＰＳＭＡ）へのＤＵＰＡの結合を確実にし、当該複合体の全体的な水溶解度を改良するペプチドリンカーとを介して、強力かつ細胞毒性のあるＴｏｐ１阻害薬の１８（２２ＲＶ１細胞に対する２．０ｎＭのＩＣ５０）へ結合させた。遊離薬１８とは対照的に、当該結合体は、検査した有効量（４０ｎｍｏｌ／個体）において致死的ではなかった。さらに、実験結果は、ＤＵＰＡ複合体８６の取り込みがＰＳＭＡによって仲介され、遊離薬５はあまり水溶解度を呈さないのに対し、８６は室温で水中で容易に溶解することを示した。さらに、ＤＵＰＡ標的指向化機序は、ＤＵＰＡ複合体とともに使用して配置し療法に対する応答をモニターすることのでき、及びＤＵＰＡ−インデノイソキノリンＴｏｐ１阻害薬治療に適した患者を識別することのできる９９ｍＴｃ放射性造影剤へも結合した（Ｋｕｌａｒａｔｎｅら，Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ  ２００９，６，７８０〜７８９及び７９０〜８００）。加えて、ＰＳＭＡの独特な特徴（発現レベルは腫瘍の攻撃性とともに上昇し、腫瘍病期全体において存在し、アンドロゲン除去後に上方制御される）は、ＰＳＭＡを化学療法のための有用な治療標的にし、このことは、現行の結合アプローチとともに、許容され得ない用量制限毒性効果を生じることなく、転移性前立腺癌の治療及び治癒にとって新たなかつ有効な薬剤を提供する。
【０１５９】
本発明が、本明細書において先に特に示され及び説明された物事によって制限されることはないことは当業者によって認められる。むしろ、本発明の範囲には、上記の種々の特長の組み合わせ及び副組み合わせの両方を、本明細書を読む際に当業者に生じるであろう、かつ先行技術にはない多様性及び変更を含む。
【０１６０】
本発明は、以下の実例となる実施例に関してさらに説明するであろうし、このことは、任意の様式で本発明の範囲を制限するよう企図するものではない。
【実施例】
【０１６１】
一般的な方法
溶媒及び試薬は、商業的売主から購入し、さらなる精製なしで使用した。融点は、Ｍｅｌ−Ｔｅｍｐ装置とともに毛細管を用いて測定し、修正しなかった。赤外スペクトルは、溶媒としてＣＨＣｌ３を用いてＫＢｒペレットに関してフィルムとして、Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ１６００シリーズまたはＳｐｅｃｔｒｕｍ  Ｏｎｅ  ＦＴＩＲ分光計を用いて得、基線修正した。１Ｈ  ＮＭＲスペクトルは、３００または５００ＭＨｚで、Ｂｒｕｋｅｒ  ＡＲＸ３００またはＢｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ５００分光計を用いて、それぞれＱＮＰプローブまたはＴＸＩ  ５ｍｍ／ＢＢＯプローブを用いて記録した。
【０１６２】
質量スペクトル分析は、Ｐｕｒｄｕｅ大学キャンパス規模質量分析センターで実施した。ＡＰＣＩ−ＭＳ試験は、Ａｇｉｌｅｎｔ６３２０イオン捕捉質量分析計を用いて実施した。ＥＳＩ−ＭＳ試験は、ＦｉｎｎｉｇａｎＭＡＴ  ＸＬ９５（ＦｉｎｎｉｇａｎＭＡＴ社、独国ブレーメン市）質量分析計を用いて実施した。当該機器は、１００００の分解能まで、適切なポリプロピレングリコール標準物質を用いてピーク間にある１０％の谷部で較正した。ＭＡＬＤＩ−ＭＳ試験は、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ（マサチューセッツ州フレイミングハム町）Ｖｏｙａｇｅｒ  ＤＥ  ＰＲＯ質量分析計を用いて実施した。この機器は、飛行時間型質量分析装置を用いたイオン化のために窒素レーザー（３３７ｎｍ紫外レーザー）を利用する。これらの試料に使用するマトリックスは、（Ｒ）−シアノ−４−ヒドロキシケイ皮酸であり、ペプチドＬＨＲＨは、内部標準物質として使用した。
【０１６３】
分析用薄層クロマトグラフィーは、Ｂａｋｅｒ−フレックスシリカゲルＩＢ２−Ｆプラスチック裏打ち済みＴＬＣプレート上で実施した。化合物は、別段の指定がない限り、短波長及び長波長の両方の紫外光ならびにニンヒドリン染色を用いて可視化した。シリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーは、４０〜６３μＭフラッシュシリカゲルを用いて実施した。固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）は、標準的なペプチド合成装置（Ｃｈｅｍｇｌａｓｓ，ニュージャージー州ヴァインランド市）を用いて実施した。
【０１６４】
ペプチド及びペプチド複合体はすべて、調製用逆相高性能液体クロマトグラフィー（ＲＰ−ＨＰＬＣ、Ｗａｔｅｒｓ，ｘＴｅｒｒａ  Ｃ１８  １０μｍ、１９ｍｍ×２５０ｍｍ）によって精製し、分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ  ２４８７二波長吸光度検出器及び１０μＬの注射容積を備えたＷａｔｅｒｓ  １５２５二相性ＨＰＬＣポンプ）によって分析した。１５ｃｍ×４．６ｍｍの寸法のＳｕｎｒｉｓｅ  Ｃ１８  ５μＭ  １００Å逆相カラム（ＥＳ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ）は、すべての分析用ＨＰＬＣ実験に使用した。ＨＰＬＣによって概算される純度については、別段の指定がない限り、２５４ｎｍで紫外検出器によってモニターする場合、主要ピークは、組み合わせた合計ピーク面積の９５％以上を占めた。液体クロマトグラフィー／質量分析（ＬＣ／ＭＳ）分析は、紫外ダイオードアレイ検出器と連結したＷａｔｅｒｓ微量ＺＱ４０００質量分析計を用いて得た。収率はすべて、単離した化合物を指す。
【０１６５】
ＩＣ５０（用量依存性）試験についての一般的な手順
２２ＲＶ１細胞を２４穴（５００００個／ウェル）Ｆａｌｃｏｎプレートに播種し、２４〜４８時間の期間にわたって単層を形成させておいた。古い培地を、増大する濃度の薬剤（標的指向化または非標的指向化のいずれか）を含有する新鮮培地（０．５ｍＬ）と交換し、細胞を３７℃でさらに２時間及び２４時間（標的指向化薬の場合）インキュベートした。細胞を新鮮培地で洗浄し（３×０．５ｍＬ）、新鮮培地（０．５ｍＬ）中で３７℃でさらに６６時間インキュベートした。各ウェル中の使用済みの培地を［３Ｈ］−チミジン（１ｍＣｉ／ｍＬ）を含有する新鮮培地（０．５ｍＬ）と交換し、細胞を３７℃でさらに４時間インキュベートして、［３Ｈ］−チミジン組み込みを許容した。次にこの細胞を培地（２×０．５ｍＬ）で洗浄し、５％トリクロロ酢酸（０．５ｍＬ）で室温で１０分間処理した。トリクロロ酢酸を０．２５ＮのＮａＯＨ（０．５ｍＬ）と交換し、この細胞をＥｃｏｌｕｍｅシンチレーションカクテル（３．０ｍＬ）を含有する個々のシンチレーションバイアルへ移し、十分に混合して均質な液体を形成し、液体シンチレーション分析装置において計数した。ＩＣ５０値は、％［３Ｈ］−チミジン組み込み対薬剤の対数濃度（標的指向化及び非標的指向化）をＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ４を用いてプロットすることによって算出した。
【０１６６】
インビボでの実験
５〜６週齢の雄ｎｕ／ｎｕマウス（Ｈａｒｌａｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を標準的な１２時間明暗周期で維持し、本実験の期間中、正常マウス食を給餌した。ＰＳＭＡ陽性前立腺癌２２ＲＶ１細胞（２０％ＨＣマトリゲル中の２×１０６）を当該マウスの右肩に注射した。腫瘍はノギスで２〜３日ごとに２つの垂直な方向で測定し、主要体積は、０．５×Ｌ×Ｗ２で算出し、式中Ｌは長軸（ミリメートルにおける）であり、ＷはＬに対して垂直な軸（ミリメートルにおける）である。検査化合物の投薬溶液は、滅菌塩類溶液中に調製し、腹腔内注射を介してマウスにおいて投与した。マウスは２群（５個体／群）へ分け、処理は、皮下腫瘍が体積約１００ｍｍ３に到達した時に開始した。各用量は、１００μＬの塩類容積の容積中の検査化合物を２μｍｏｌ／ｋｇで付与した。大まかな毒性の目安として、マウスの体重も各投薬時に記録した。結果はＧｒａｐｈ  Ｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ４を用いることによってプロットした。
【０１６７】
実施例１：Ｎ−［４−（ベンジルオキシ）ベンジリデン］−３−ブロモ−１−プロピルアミン（５４）
３−ブロモプロピルアミンヒドロブロミド（３．５６ｇ、１６．２ｍｍｏｌ）をＣＨＣｌ３（５０ｍＬ）及びＥｔ３Ｎ（１．６４ｇ、１６．２ｍｍｏｌ）中に希釈した。この混合物を５分間撹拌した後、化合物５３（３．００ｇ、１４．１ｍｍｏｌ）及びＮａ２ＳＯ４（４．０２ｇ、２８．３ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で１６時間撹拌した後、Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ×３）及び鹹水（１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、濃縮して生成物５４を淡黄色のシロップ（４．６９ｇ、１００％＋残留溶媒）として得た。ＩＲ（フィルム）２８３９，１６４５，１６０５，１５０９，１２４６，１１６６，８３０ｃｍ−１、ｌＨ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．２６（ｓ，１Ｈ），７．６８（ｄｄ，Ｊ＝１．８及び６．９Ｈｚ，２Ｈ），７．４５−７．３３（ｍ，５Ｈ），７．０２（ｄｄ，Ｊ＝１．９及び６．９Ｈｚ，２Ｈ），５．１１（ｓ，２Ｈ），３．７４（ｄｔ，Ｊ＝０．９及び６．２Ｈｚ，２Ｈ），３．５１（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），２．２７（ｍ，２Ｈ）；ＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）３３２／３３４（ＭＨ＋，１００／９７）。
【０１６８】
実施例２：シス−４−カルボキシ−３，４−ジヒドロ−Ｎ−（３−ブロモプロピル）−３−［４−（ベンジルオキシ）フェニル］−７−ニトロ−１（２Ｈ）−イソキノロン（５５）
シッフ塩基５４（４．６９ｇ、１４．１ｍｍｏｌ）を０℃でＣＨＣｌ３（５０ｍＬ）中に希釈し、無水物５８（２．８０ｇ、１３．５ｍｍｏｌ）を添加した。赤色混合物を０℃で２時間撹拌した後、室温まで加温して、撹拌を２時間続行した。クリーム状の橙色の混合物を濾過し、残渣をＣＨＣｌ３で洗浄して、生成物５５をオフホワイト色の固体（５．１８ｇ、７１％）として提供した。融点１４０〜１４１℃。ＩＲ（フィルム）３０７６，１７２７，１６３０，１５２５，１３４７，１１８７，７３８ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．７１（ｄ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ），８．３９（ｄｄ，Ｊ＝２．６及び６．０Ｈｚ，１Ｈ），７．９２（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），７．４０−７．３０（ｍ，５Ｈ），６．９２−６．８３（ｍ，４Ｈ）５．１９（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ），５．０３（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，１Ｈ）４．９８（ｓ，２Ｈ），３．９０（ｍ，１Ｈ），３．５９（ｍ，２Ｈ），３．０３（ｍ，１Ｈ），２．１６（ｍ，１Ｈ），２．０４（ｍ，１Ｈ）；ＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）４１５（［ＭＨ−ＣＯＯＨ−Ｂｒ］＋，１００）；ＨＲＥＳＩＭＳ  ＭＨ＋についての計算値：５３９．０８１８，実測値：５３９．０８１２。
【化３６】
2017501115.tif 000038
ａ試薬及び条件：（ａ）３−ブロモプロピルアミンヒドロブロミド、Ｅｔ３Ｎ、Ｎａ２ＳＯ４、ＣＨＣｌ３、室温、（ｂ）５８、ＣＨＣｌ３、０℃→室温、（ｃ）ｉ．ＳＯＣｌ２、室温、ｉｉ．ＡｌＣｌ３、１，２−ジクロロエタン、０℃→室温、（ｄ）ｉ．モルホリン、ＴＨＦ、７０℃、ｉｉ．ＨＢｒ、ＭｅＯＨ、室温、（ｅ）ｉ．イミダゾール、ＴＨＦ、７０℃、ｉｉ．ＨＣｌ、ＭｅＯＨ、室温、（ｆ）ｉ．ＮａＮ３、ＤＭＳＯ、７０℃、ｉｉ．ＰＰｈ３、ＴＨＦ、７０℃、ｉｉｉ．ＨＢｒ、ＭｅＯＨ、７０℃。
【０１６９】
実施例３：６−（３−ブロモプロピル）−９−ヒドロキシ−３−ニトロ−５Ｈ−インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−５，１１（６Ｈ）−ジオン（１）
シス酸５６（０．５０ｇ、０．９３ｍｍｏｌ）をＳＯＣｌ２（５０ｍＬ）中に希釈し、室温で１６時間撹拌した。結果として生じる黄色の溶液を蒸発乾固させた。この黄色のシロップを０℃で１，２−ジクロロエタン（５０ｍＬ）に希釈し、１５分間撹拌した後、ＡｌＣｌ３（０．２５ｇ、１．８５ｍｍｏｌ）を添加した。黒色の混合物を２時間加熱還流した後、蒸発乾固させた。残留している残渣をＣＨＣｌ３（１００ｍＬ）で希釈し、６ＮのＨＣｌ（１００ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ×３）及び鹹水（１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過及び濃縮し、ＳｉＯ２へと吸着させ、ＣＨＣｌ３で溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）で精製して、赤色の固体である生成物１ａｓ（５７ｍｇ、１５％）を提供した。融点２８１〜２８３（分解）℃。ＩＲ（フィルム）３２７３，１６５９，１６１３，１５３１，１３４５，１２７０，７５５ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１０．８２（ｓ，１Ｈ）、８．８３（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），８．６１（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），８．５１（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），７．７４（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），６．９９（ｓ，１Ｈ），６．８９（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），４．５４（ｍ，２Ｈ），３．７８（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，２Ｈ），２．３３（ｍ，２Ｈ）；ＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）４２８／４３０（Ｍ＋，９９／１００）；ＨＲＥＳＩＭＳ  Ｍ＋についての計算値：４２８．０００８、実測値：４２８．００００。
【０１７０】
実施例４：９−ヒドロキシ−６−（３−モルホリノプロピル）−３−ニトロ−５Ｈ−インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−５，１１（６Ｈ）−ジオンヒドロブロミド（２）
フェノール１（５０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（３０ｍＬ）中に希釈した後、Ｋ２ＣＯ３（８３ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）及びモルホリン（５１ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）を添加した。この赤色溶液を７０℃で１６時間加熱した。この冷却した溶液をＨＢｒ水溶液（４８重量％、２０ｍＬ）で希釈し、室温で３時間撹拌した。次にこの深赤色の溶液をＣＨＣｌ３（１０ｍＬ）及びアセトン（１０ｍＬ）で希釈し、濃縮した。この希釈及び濃縮を３回反復して、ＨＢｒを除去した。最終濃縮物をＨＰＬＣ薄膜フィルタで濾過し、残渣をＣＨＣｌ３で洗浄して、生成物２を深褐色の固体（４９ｍｇ、８３％）として提供した。融点２９５〜２９７（分解）℃。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１０．８７（ｓ，１Ｈ），９．５３（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），８．８６（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），８．６６（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），８．５６（ｄｄ，Ｊ＝２．４及び６．５Ｈｚ，１Ｈ），７．７０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．０４（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．９３（ｄｄ，Ｊ＝２．３及び６．０Ｈｚ，１Ｈ），４．５２（ｍ，２Ｈ），３．９８（ｍ，２Ｈ），３．６４（ｍ，２Ｈ），３．３８（ｍ，４Ｈ），３．０８（ｍ，２Ｈ），２．２１（ｍ，２Ｈ）；ＥＳＩＭＳ（正のモード）ｍ／ｚ（相対強度）４３６（ＭＨ＋，１００）；ＨＲＥＳＩＭＳ  ＭＨ＋についての計算値：４３６．１５０９，実測値：４３６．１５０８。
【０１７１】
実施例５：６−（３−（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）プロピル）−７−ヒドロキシ−３−ニトロ−５Ｈ−インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−５，１１（６Ｈ）−ジオンヒドロクロリド（３）
臭化物１（７０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（２０ｍＬ）中に希釈した後、ＮａＩ（１２２ｍｇ、０．８１５ｍｍｏｌ）及びイミダゾール（６７ｍｇ、０．９８ｍｍｏｌ）を添加した。赤色混合物を７０℃で１６時間加熱した後、１０ｍＬの容積まで濃縮した。この混合物を濾過し、残渣をアセトン及びＣＨＣｌ３で洗浄して、中性化合物を深赤色の固体として提供した。粗生成物をＨＣｌの３Ｎのメタノール溶液（２０ｍＬ）中に希釈して室温で５時間撹拌した。この混合物を濃縮及び濾過した。この残渣をＣＨＣｌ３で洗浄して、褐色の固体である生成物３ａｓ（４２．６ｍｇ、６２％）を得た。融点３２３〜３２５℃（分解）。ＩＲ（フィルム）１６６８，１６１１，１５０３，１４２８，１３３４，１２６３ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．３８（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ），８．９７（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ），８．６７（ｄｄ，Ｊ＝２．５及び６．７Ｈｚ，１Ｈ），７．８５（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），７．７６（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．５６（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．３８（ｔ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），４．３７（ｍ，２Ｈ），４．１４（ｍ，２Ｈ）；ＥＳＩＭＳ（正のモード）ｍ／ｚ（相対強度）４１７（ＭＨ＋，１００）；ＨＲＥＳＩＭＳ  ＭＨ＋についての計算値：４１７．１１９９、実測値：４１７．１２０２；ＨＰＬＣ純度：１００％（ＭｅＯＨ，１００％），１００％（ＭｅＯＨ−Ｈ２Ｏ，７０：３０）。
【０１７２】
実施例６：６−（３−アミノプロピル）−９−ヒドロキシ−３−ニトロ−５Ｈ−インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−５，１１（６Ｈ）−ジオンヒドロブロミド（４）
臭化物１（１００ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）をＤＭＳＯ（２０ｍＬ）中に希釈した後、ＮａＮ３（７５ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を７０℃で１６時間加熱し、ＣＨＣｌ３（５０ｍＬ×２）で抽出した。この抽出物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ×４）及び鹹水（１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し及び濃縮して、粗アジ化物を提供した。この化合物をＴＨＦ（２０ｍＬ）に希釈した後、ＰＰｈ３（１８１ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を１６時間加熱還流した。この冷却した深褐色溶液を３ＭのＨＢｒメタノール溶液（２０ｍＬ）で希釈し、撹拌を４時間還流して続行した。この明赤色溶液を蒸発させ、ＣＨＣｌ３（１０ｍＬ）中に再度希釈し、０℃で１６時間安置しておき、この間、沈殿物が形成した。この溶液を次に、ＨＰＬＣ濾紙で濾過し、残渣をＣＨＣｌ３で完全に洗浄して、生成物４（３３．１ｍｇ、３２％）を深赤色の固体として提供した。融点３６０〜３６２℃（分解）。ｌＨ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１０．８３（ｓ，１Ｈ），８．８３（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ），８．６１（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），８．５２（ｄｄ，Ｊ＝２．５及び６．４Ｈｚ，１Ｈ），７．７４−７．６７（ｍ，４Ｈ），６．９９（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ），６．９１（ｄｄ，Ｊ＝２．２及び６．１Ｈｚ，１Ｈ），４．５２（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），２．９９（ｍ，２Ｈ），２．０８（ｍ，２Ｈ）；ＡＰＣＩＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）３６６（［ＭＨ−ＮＨ３］＋，１００）；ＨＲＭＳＥＳＩ  ＭＨ＋についての計算値：３６６．１０９０，実測値：３６６．１０８２。
【０１７３】
実施例７：化合物５〜１１、１５、及び１７〜１９
化合物５〜１１、１５、及び１７〜１９は、Ｍｏｒｒｅｌｌらによって報告された手順を基に合成した（Ｍｏｒｒｅｌｌら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００６，４９，７７４０〜７７５３、Ｍｏｒｒｅｌｌら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００７，５０，４４１９〜４４３０、及びＭｏｒｒｅｌｌら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００７，５０，４３８８〜４４０４）。生物学的に検査したインデノイソキノリンアミンヒドロクロリド６９〜７９の純度は、ＨＰＬＣによる９５％以上であった。
【化３７】
2017501115.tif 000039
ａ試薬及び条件：（ａ）ＨＮＯ３煙霧、０℃→室温、（ｂ）ＡｃＣｌ、還流、（ｃ）ＢｎＣｌ、ＤＭＦ、Ｋ２ＣＯ３、室温、（ｄ）３−ブロモＥｔ３Ｎ、Ｎａ２ＳＯ４、ＣＨＣｌ３、室温、（ｅ）ＣＨＣｌ３、０℃→室温、（ｆ）ＳＯＣｌ２、０℃→室温、（ｇ）ＮａＮ３、ＤＭＳＯ、７０℃、（ｈ）ｉ．Ｐ（ＯＥｔ）３、ベンゼン、還流、ｉｉ．ＨＢｒ水溶液、７０℃、（ｉ）モルホリン、ＮａＩ、ＤＭＦ、室温、（ｊ）イミダゾール、ＮａＩ、ＤＭＦ、７０℃、（ｋ）ＨＢｒ水溶液、７０℃。
【０１７４】
実施例８：無水４−ニトロホモフタル酸（５８））（Ｗｈｉｔｍｏｒｅら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９４４，６６，１２３７〜１２４０
二酸６（８．８３ｇ、３９．２ｍｍｏｌ）を塩化アセチル（３０ｍＬ）中に希釈し、この混合物を２時間還流して撹拌した後、ＡｃＣｌを蒸発させた。残余の溶液を濾過し、ＣＨＣｌ３でわずかに洗浄して、白色の固体である生成物５８ａｓ（５．７５ｇ、７１％）を提供した。融点１４７〜１４８℃（文献（Ｗｈｉｔｍｏｒｅら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９４４，６６，１２３７〜１２４０）、１５４〜１５５℃）。１Ｈ  NMR（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．６６（ｓ，１Ｈ），８．５５（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），７．７３（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），４．４１（ｓ，２Ｈ）。
【０１７５】
実施例９：ベンジルバニリン（６０））（Ｇｕｔｈｒｉｅら，Ｃａｎ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．１９５５，３３，７２９〜７４２
臭化ベンジル（５．９０ｇ、３４．５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５０ｍＬ）中のバニリン５９（５．００ｇ、３２．９ｍｍｏｌ）の溶液へ添加した後、Ｋ２ＣＯ３（９．０８ｇ、６５．７ｍｍｏｌ）を添加した。黄色の混合物を室温で２時間撹拌した後、Ｅｔ２Ｏ−Ｈ２Ｏ（２００ｍＬ、１：１）の溶液へそそぎ、５分間撹拌した。エーテル相を分離した。水層をＥｔ２Ｏ（５０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせた有機抽出物をＨ２Ｏ（５０ｍＬ×３）及び鹹水（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、濃縮して、粗残渣を得、これをヘキサンで洗浄して、白色固体（７．９１ｇ、９９％）である純粋な生成物６０ａｓを供給した。融点４９〜５１℃（文献（Ｇｕｔｈｒｉｅら，Ｃａｎ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．１９５５，３３，７２９〜７４２）、６１℃）。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ９．８４（ｓ，１Ｈ），７．４４−７．３６（ｍ，７Ｈ），７．００（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），５．２５（ｓ，２Ｈ），３．９５（ｓ，３Ｈ）。
【０１７６】
実施例１０：Ｎ−［４’−（ベンジルオキシ）−３’−メトキシベンジリデン］−３−ブロモプロパン−１−アミン（６１）
３−ブロモプロピルアミンヒドロブロミド（３．１２ｇ、１４．２ｍｍｏｌ）をＣＨＣｌ３（１０ｍＬ）に希釈した。ベンジルバニリン６０（３．００ｇ、１２．４ｍｍｏｌ）をＣＨＣｌ３（１０ｍＬ）に溶解し、当該アミン溶液へ緩徐に添加した。Ｅｔ３Ｎ（１．３９ｇ、１３．６ｍｍｏｌ）の添加の際に、この混合物は透明になった。Ｎａ２ＳＯ４（３．５２ｇ、２４．８ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を室温で１６時間撹拌した後、ＣＨＣｌ３で５０ｍＬに希釈し、Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ×３）及び鹹水（１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、濃縮して、黄色のシロップ（４．４９ｇ、１００％＋残留溶媒）である生成物６１ａｓを提供した。ＩＲ（フィルム）２９３７，２８４１，１６４６，１６０２，１５８７，１５１２，１４５６，１４１５，１２７０，１２３３，７４３ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣ１３）δ８．２２（ｓ，１Ｈ），７．４５−７．３０（ｍ，６Ｈ），７．１０（ｄｄ，Ｊ＝１．７及び６．４Ｈｚ，１Ｈ），６．９０（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），５．２０（ｓ，２Ｈ），３．９５（ｓ，３Ｈ），３．７４（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ），３．５１（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ），２．２７（ｍ，２Ｈ）。
【０１７７】
実施例１１：シス−４−カルボキシ−３，４−ジヒドロ−Ｎ−（３−ブロモプロピル）−３−［４−（ベンジルオキシ）−３−メトキシフェニル］−７−ニトロ−１（２Ｈ）−イソキノロン（６２）
シッフ塩基６１（７．４８ｇ、２０．７ｍｍｏｌ）をＣＨＣｌ３（５０ｍＬ）に希釈し０℃へ１０分間冷却した後、無水５８（４．２８ｇ、２０．７ｍｍｏｌ）を添加した。赤色混合物を０℃で２時間、次いで室温でさらに３時間撹拌した。この混合物を濾過し、残渣をＣＨＣｌ３で洗浄して、白色固体（７．５５ｇ、６４％）である生成物６２ａｓを得た。融点１４５〜１４６℃。ＩＲ（フィルム）３０７９，１７４８，１６２１，１５２０，１４９３，１４１８，１３４９，１１７７，７５５ｃｍ−1；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ９．０６（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），８．３６（ｄｄ，Ｊ＝２．５及び６．０Ｈｚ，１Ｈ），７．８７（ｄ，Ｊ ＝８．８Ｈｚ），７．３５−７．２８（ｍ，５Ｈ），６．７１（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ），６．５０（ｍ，２Ｈ），５．１３（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ），５．０４（ｓ，２Ｈ），４．８０（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ），４．０４（ｍ，１Ｈ），３．６３（ｓ，３Ｈ），３．４８（ｍ，２Ｈ），３．２８（ｍ，１Ｈ），２．３１（ｍ，１Ｈ），２．１８（ｍ，１Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）５６９／５７１（［ＭＨ］＋，２７／２８）；ＨＲＭＳ(＋ＥＳＩ) ＭＨ＋についての計算値：５６９．０９２３、実測値：５６９．０９３２。
【０１７８】
実施例１２：９−（ベンジルオキシ）−６−（３−ブロモプロピル）−８−メトキシ−３−ニトロ−５Ｈ−インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−５，１１（６Ｈ）−ジオン（６３）
シス酸６２（１．５０ｇ、２．６３ｍｍｏｌ）をＳＯＣｌ２（５０ｍＬ）に希釈し、この混合物を室温で４時間撹拌した。この赤色溶液を蒸発乾固させ、残渣をＣＨＣｌ３（５０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３（１００ｍＬ）で緩徐にクエンチした。この混合物を室温で１０分間撹拌し、この２層を分離した。この水層をＣＨＣｌ３（５０ｍＬ）で抽出した。組み合わせた有機層をＨ２Ｏ（１００ｍＬ×３）及び鹹水（１００ｍＬ）で洗浄した後、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し及びＳｉＯ２上へと吸着させ、ＣＨＣｌ３で溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）によって精製して、赤褐色の固体（２２８ｍｇ、１６％）である生成物６３ａｓを提供した。融点２１８〜２２０（分解）℃。ＩＲ（フィルム）１６７７，１６１１，１５０４，１４２７，１３３６，１３００，７４６ｃｍ−1；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣ１３）δ９．１５（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），８．７８（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），８．４７（ｄｄ，Ｊ＝２．５及び６．７Ｈｚ，１Ｈ），７．４４−７．３６（ｍ，６Ｈ），７．３１（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），５．２６（ｓ，２Ｈ），４．７１（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），４．０６（ｓ，３Ｈ），３．７４(ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，２Ｈ)，２．５１（ｍ，２Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）５４９／５５１（［ＭＨ］＋，４２／５３）；ＨＲＭＳ（＋ＥＳＩ）ＭＨ＋についての計算値：５４９．０６６１，実測値：５４９．０６７２。
【０１７９】
実施例１３：６−（３−アジドプロピル）−９−（ベンジルオキシ）−８−メトキシ−３−ニトロ−５Ｈ−インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−５，１１（６Ｈ）−ジオン（６４）
化合物６３（１５０ｍｇ、０．２７３ｍｍｏｌ）及びＮａＮ３（１７８ｍｇ、２．７３ｍｍｏｌ）をＤＭＳＯ（５０ｍＬ）に希釈し、７０℃で１５時間加熱した。この赤色溶液をＣＨＣｌ３（１００ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ×４）及び鹹水（１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過及び濃縮し、ＳｉＯ２へと吸着させ、ＣＨＣｌ３で溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）によって精製して、深赤色の固体（３６．２ｍｇ、２６％）である生成物６４ａｓを提供した。融点２０５〜２０７（分解）℃。ＩＲ（フィルム）２０９０，１６７３，１６１０，１５７９，１５０２，１４２７，８４７ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ９．１４（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ），８．７５（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），８．４５（ｄｄ，Ｊ＝２．３及び６．７Ｈｚ，１Ｈ），７．４８−７．３５（ｍ，５Ｈ），７．２８（ｓ，１Ｈ），５．２６（ｓ，２Ｈ），４．６１（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），４．０７（ｓ，３Ｈ），３．７９（ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，２Ｈ），２．１６（ｍ，２Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）５１２（ＭＨ＋，１００）；ＨＲＭＳ（＋ＥＳＩ）ＭＨ＋についての計算値：５１２．１５７０，実測値：５１２．１５７６。
【０１８０】
実施例１４：６−（３−アミノプロピル）−９−ヒドロキシ−８−メトキシ−３−ニトロ−５Ｈ−インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−５，１１（６Ｈ）−ジオンヒドロブロミド（１２）
化合物６４（３０ｍｇ、０．０５９ｍｍｏｌ）をベンゼン（５０ｍＬ）に希釈し、トリエチルホスファイト（２９．２ｍｇ、０．１７６ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を１６時間加熱還流した後、室温へ冷却しておいた。ＨＢｒ水溶液（４８重量％、３０ｍＬ）を添加し、この反応混合物を７０℃で５時間加熱し、この間、当該反応混合物は褐色／赤色エマルションになった。この冷却した混合物を濃縮してベンゼン及びＨＢｒを除去した。次に、この濃縮物をアセトン（１０ｍＬ）で希釈し、再度濃縮した。この手順を３回反復した。最終混合物を真空下でＨＰＬＣフィルタで濾過し、残渣をＣＨＣｌ３及びアセトンで洗浄して、褐色の固体（２６．０ｍｇ、９３％）である所望の生成物１２ａｓを提供した。融点２８５〜２８７（分解）℃。ＩＲ（フィルム）３２４３，２８４８，１７０５，１６４１，１６１４，１５６２，１４８８，１３３６，１２０７，１１３３，８６８ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１０．４１（ｓ，１Ｈ），８．８３（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ），８．６０（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），８．５１（ｄｄ，Ｊ＝２．５及び６．５Ｈｚ，１Ｈ），７．７４（ｂｒ  ｓ，３Ｈ），７．１９（ｓ，１Ｈ），７．０３（s，１Ｈ），４．５８（ｍ，２Ｈ），３．９８（ｓ，３Ｈ），３．０１（ｍ，２Ｈ），２．１４（ｍ，２Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）３９６（ＭＨ＋，１００）；ＨＲＭＳ（＋ＥＳＩ）ＭＨ＋についての計算値：３９６．１１９６，実測値：３９６．１１９９；ＨＰＬＣ純度：１００％（ＭｅＯＨ，１００％），９８．６％（ＭｅＯＨ−Ｈ２Ｏ，９０：１０）。Ｃ２０Ｈ１８ＢｒＮ３Ｏ６についての分析計算値：Ｃ，５０．４４；Ｈ，３．８１；Ｎ，８．８２．実測値：Ｃ，５０．１３；Ｈ，３．７５；Ｎ，８．５９。
【０１８１】
実施例１５：９−（ベンジルオキシ）−８−メトキシ−６−（３−モルホリノプロピル）−３−ニトロ−５Ｈ−インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−５，１１［６Ｈ］−ジオン（６５）
化合物６３（３２０ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（３０ｍＬ）に希釈し、ＮａＩ（５２３ｍｇ、３．４９ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を７０℃で３０分加熱した後、モルホリン（３０４ｍｇ、３．４９ｍｍｏｌ）を添加し、加熱を２時間続行した。この溶液を室温で１４時間撹拌した後、Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、ＣＨＣｌ３（５０ｍＬ×３）で抽出した。この抽出物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ×５）及び鹹水（１００ｍＬ）で洗浄した後、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、ＳｉＯ２へ吸着させ、ＣＨＣｌ３中の２％から４％へ至るＭｅＯＨの勾配で溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）によって精製して、褐色固体（１４０ｍｇ、４４％）である生成物６５ａｓを提供した。融点２３３〜２３４（分解）℃。ＩＲ（フィルム）１６７３，１６１２，１５５７，１５０７，１４２８，１３３３，１３００，６６７ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣ１３）δ９．１５（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ），８．７５（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），８．４５（ｄｄ，Ｊ＝２．４及び６．５Ｈｚ，１Ｈ），７．４７−７．３５（ｍ，５Ｈ），７．３１（ｓ，１Ｈ），７．２１（ｓ，１Ｈ），５．２５（ｓ，２Ｈ），４．６３（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ），４．０１（ｓ，３Ｈ），３．６６（ｍ，４Ｈ），２．６０（ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ），２．４６（ｍ，４Ｈ），２．１４（ｍ，２Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）５５６（［ＭＨ］＋，１００）；ＨＲＭＳ（＋ＥＳＩ）ＭＨ＋についての計算値：５５６．２０８４，実測値：５５６．２０７６。
【０１８２】
実施例１６：９−ヒドロキシ−８−メトキシ−６−（３−モルホリノプロピル）−３−ニトロ−５Ｈ−インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−５，１１（６Ｈ）−ジオンヒドロブロミド（１３）
化合物６５（５０ｍｇ、０．０９０ｍｍｏｌ）をＨＢｒ水溶液（４８重量％、３５ｍＬ）で希釈し、７０℃で５時間加熱し、この間、これは黒色のエマルションになった。この冷却した混合物を濃縮して、ＨＢｒを除去した。この濃縮物をアセトン（１０ｍＬ）で希釈し、再度濃縮した。この手順を３回反復した。この最終混合物を真空下で濾過し、残渣をＣＨＣｌ３及びアセトンで洗浄して、所望の生成物１３を黒色の固体（４７．５ｍｇ、９７％）として提供した。融点：４００℃超。ＩＲ（フィルム）３２０６，１６９７，１６４１，１６１４，１５５８，１５０６，１４２７，１３３５，７９２ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣ１３）δ１０．４５（ｓ，１Ｈ），９．４９（ｓ，１Ｈ），８．８７（ｓ，１Ｈ），８．６５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），８．５５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），７．２３（ｓ，１Ｈ），７．０８（ｓ，１Ｈ），４．６３（ｍ，２Ｈ），４．００−３．９５（ｍ，７Ｈ），３．６１（ｍ，４Ｈ），３．１０（ｍ，２Ｈ），２．２８（ｍ，２Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）４４７（ＭＨ＋，８９）；ＨＲＭＳ（＋ＥＳＩ）ＭＨ＋についての計算値：４４７．１３０５，実測値：４４７．１３０３；ＨＰＬＣ純度：１００％（ＭｅＯＨ，１００％），９７．８％（ＭｅＯＨ−Ｈ２Ｏ，９０：１０）。Ｃ２４Ｈ２４ＢｒＮ３Ｏ７・０．１Ｈ２Ｏについての分析計算値: Ｃ，５２．５９；Ｈ，４．４５；Ｎ，７．６７。実測値：Ｃ，５２．２８；Ｈ，４．２４；Ｎ，７．３０。
【０１８３】
実施例１７：６−（３−（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）プロピル）−９−（ベンジルオキシ）−８−メトキシ−３−ニトロ−５Ｈ−インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−５，１１（６Ｈ）−ジオン（６６）
化合物６３（１００ｍｇ、０．１８２ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（３０ｍＬ）に希釈し、ＮａＩ（２７３ｍｇ、１．８２ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を７０℃で３０分間加熱した後、イミダゾール（１２４ｍｇ、１．８２ｍｍｏｌ）を添加し、加熱を１６時間続行した。この深赤色の溶液をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、ＣＨＣｌ３（５０ｍＬ×３）で抽出した。この抽出物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ×５）及び鹹水（２００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、ＳｉＯ２へ吸着させ、ＣＨＣｌ３中の４％ＭｅＯＨで溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）によって精製して、生成物６６を褐色の固体（３６．２ｍｇ、３７％）として提供した。融点２３５〜２３６（分解）℃。ＩＲ（フィルム）１６６２，１６１２，１５５５，１４２４，１２９１，７４６ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ９．１７（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ），８．７７（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），８．４８（ｄｄ，Ｊ＝２．４及び６．６Ｈｚ，１Ｈ），７．６１（ｓ，１Ｈ），７．４６−７．３０（ｍ，５Ｈ），７．１２（ｓ，１Ｈ），７．０５（ｓ，１Ｈ），６．８５（ｓ，１Ｈ），５．２４（ｓ，２Ｈ），４．６１（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），４．２７（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ），３．８６（ｓ，３Ｈ），２．４２（ｍ，２Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）５３７（ＭＨ＋，１００）；ＨＲＭＳ（＋ＥＳＩ）ＭＨ＋についての計算値：５３７．１７７４，実測値：５３７．１７８４。
【０１８４】
実施例１８：６−（３−（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）プロピル）−９−ヒドロキシ−８−メトキシ−３−ニトロ−５Ｈ−インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−５，１１（６Ｈ）−ジオンヒドロブロミド（１４）
化合物６６（５０ｍｇ、０．０９３ｍｍｏｌ）をＨＢｒ水溶液（４８重量％、３５ｍＬ）で希釈し、７０℃で５時間加熱し、この間これは褐色のエマルションになった。この冷却した混合物を濃縮して、ＨＢｒを除去した。この濃縮物を次に、アセトン（１０ｍＬ）で希釈し、再度濃縮した。この手順を３回反復した。この最終混合物を真空下で濾過し、この残渣をＣＨＣｌ３及びアセトンで洗浄して、所望の生成物１４を淡褐色の固体（２４．６ｍｇ、５０％）として提供した。融点４００℃超。ＩＲ（フィルム）３３９８，１６８０，１６０９，１５５７，１４９２，１４２９，１３８５，１３３８，８５９ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１０．４３（ｓ，１Ｈ），９．１１（ｓ，１Ｈ），８．８６（ｓ，１Ｈ），８．６５（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），８．５４（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ），７．８３（ｓ，１Ｈ），７．６８（ｓ，１Ｈ），７．２３（ｓ，１Ｈ），７．０８（ｓ，１Ｈ），４．６０（ｍ，２Ｈ），４．３７（ｍ，２Ｈ），３．９７（ｓ，３Ｈ），２．５０（ｍ，２Ｈ、水ピークの下）；ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）４６６（ＭＨ＋，１００）；ＨＲＭＳ（＋ＥＳＩ）ＭＨ＋についての計算値：４６６．１６１４，実測値：４６６．１６１８；ＨＰＬＣ純度：１００％（ＭｅＯＨ，１００％），９６．７％（ＭｅＯＨ−Ｈ２Ｏ，９０：１０）。Ｃ２３Ｈ１９ＢｒＮ４Ｏ６・０．５Ｈ２Ｏについての分析計算値：Ｃ，５１．５１；Ｈ，３．７６；Ｎ，１０．４５。実測値：Ｃ，５１．３３；Ｈ，３．４６；Ｎ，１０．３０。
【化３８】
2017501115.tif 000040
【０１８５】
実施例１９：３−ブロモ−Ｎ−（３，４−メチレンジオキシベンジリデン）プロパン−１−アミン（６８）
３−ブロモプロピルアミンヒドロブロミド（１．８２ｇ、８．３３ｍｍｏｌ）をＣＨＣｌ３（３０ｍＬ）及びＥｔ３Ｎ（１．０１ｇ、９．９９ｍｍｏｌ）に希釈した。この混合物を塩が完全に溶解するまで撹拌し、次に、ピペロナール６７（１．００ｇ、６．６６ｍｍｏｌ）及びＮａ２ＳＯ４（１．８９ｇ、１３．３ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で１６時間撹拌し、ＣＨＣｌ３（１００ｍＬ）で希釈した後、Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ×３）及び鹹水（１００ｍＬ）で洗浄した。この有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、濃縮して、生成物６８を淡黄色のシロップ（１．８０ｇ、１００％）として得た。ＩＲ（フィルム）２８９７，１６４３，１６０５，１４４７，１２５３，１０３７，８０９ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．２１（ｓ，１Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝１．４Ｈｚ，１Ｈ），７．１２（ｄｄ，Ｊ＝１．５及び６．４Ｈｚ，１Ｈ），６．８４（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），６．０１（ｓ，２Ｈ），３．７３（ｄｔ，Ｊ＝１．１及び５．３Ｈｚ，２Ｈ），３．５１（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ），２．２８（ｍ，Ｈ）；ＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）２７０／２７２（ＭＨ＋，１００／９３）。
【０１８６】
実施例２０：シス−Ｎ−（３−ブロモプロピル）−４−カルボキシ−３，４−ジヒドロ−３−（３，４−メチレンジオキシフェニル）−７−ニトロ−１（２Ｈ）−イソキノロン（６９）
シッフ塩基６８（１．８０ｇ、６．６６ｍｍｏｌ）を０℃でＣＨＣｌ３（５０ｍＬ）に希釈し、無水４−ニトロホモフタル酸５８（１．３８ｇ、６．６６ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を０℃で２時間の後、室温で２時間撹拌した。この混濁混合物を濾過し、残渣をＣＨＣｌ３で洗浄して、粗酸６９をオフホワイト色の固体（１．５６ｇ、４９％）として提供した。融点１６７〜１６８℃。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．６１（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），８．２７（ｄｄ，Ｊ＝２．５及び５．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４９（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），６．７８（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．６８（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ），６．４８（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ），５．９４（ｓ，２Ｈ），５．０５（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），４．１０（ｍ，１Ｈ），３．７７（ｍ，１Ｈ），３．６０（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），２．９６（ｍ，１Ｈ），２．４８（ｍ，２Ｈ）；ＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）４７７／４７９（ＭＨ＋，９２／９８）。
【０１８７】
実施例２１：６−（３−ブロモプロピル）−５，６−ジヒドロ−８，９−メチレンジオキシ−３−ニトロ−５，１１−ジオキソ−１１Ｈ−インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン（７０）
酸６９（１．００ｇ、２．１０ｍｍｏｌ）をＳＯＣｌ２（正味３０ｍＬ）中で１時間加熱した。この冷却した葡萄色の溶液を蒸発乾固させ、この残渣をエーテルで粉砕し、濾過し、エーテルで洗浄して、生成物７０を褐色の固体（０．１８ｇ、１９％）として提供した。融点２６０〜２６３℃（分解）。粗生成物をさらなる精製なしで次の反応へ供した。
【０１８８】
実施例２２：６−（３−アミノプロピル）−５，６−ジヒドロ−８，９−メチレンジオキシ−３−ニトロ−５，１１−ジオキソ−１１Ｈ−インデノ［１，２−ｃ］イソキノリンヒドロクロリド（１６）
臭化物７０（１００ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）及びＮａＮ３（７１ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）をＤＭＳＯ（２５ｍＬ）中で７０℃で１時間加熱した。この冷却した溶液をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、ＣＨＣｌ３（７５ｍＬ）で抽出した。この抽出物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ×４）及び鹹水（１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過及び濃縮し、ＳｉＯ２へと吸着させ、ＣＨＣｌ３で溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）で精製して、中間体のアジ化物を提供した。このアジ化物及びＰ（ＯＥｔ）３（１０９ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）を希釈し、ベンゼン（２０ｍＬ）中で７０℃で１６時間加熱した。この冷却した溶液を次に、メタノール中の３ＮのＨＣｌ（３０ｍＬ）で希釈し、２時間加熱還流した。結果的に生じる溶液を蒸発乾固させた。個の残渣をアセトンで粉砕し、濾過し、アセトンで洗浄して、生成物１６を褐色の固体（６９．３ｍｇ、７４％）として提供した。融点２９４〜２９６℃（分解）。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．８０（ｓ，１Ｈ），８．５７（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），８．５０（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），７．８１（ｂｒ  ｓ，３Ｈ），７．５０（ｓ，１Ｈ），７．２０（ｓ，１Ｈ），６．２４（ｓ，２Ｈ），４．５０（ｍ，２Ｈ），２．９７（ｍ，２Ｈ），２．０８（ｍ，２Ｈ）；ＨＰＬＣ純度：９８．５％（ＭｅＯＨ，１００％）。
【０１８９】
実施例２３：｛３−［３−ニトロ−５，１１−ジオキソ−５，１１−ジヒドロ−６Ｈ−インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−６−イル］プロピル｝カルバミン酸２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）エチル（７１）
化合物５（４４ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）に溶解した後、炭酸塩２７（５３ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１４ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）、及びＥｔ３Ｎ（１１５ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で１６時間撹拌した後、ＳｉＯ２カラムへ直接負荷し、ＣＨＣｌ３で溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、生成物７１を橙色の固体（４２．１ｍｇ、６６％）として提供した。融点２２０〜２２１℃。ＩＲ（フィルム）３３１４，１６９４，１６６４，１５５８，１５００，１３４０，７６７ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．８８（ｓ，１Ｈ），８．７２（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ），８．５７（ｄ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ，１Ｈ），８．４３（ｍ，１Ｈ），７．８３−７．７７(ｍ，３Ｈ)，７．６６−７．５６(ｍ，３Ｈ)，７．４７（ｍ，１Ｈ），７．２１（ｍ，１Ｈ），４．５０（ｍ，２Ｈ），４．１８（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ），３．２０（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ），３．０８（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ），１．９５（ｍ，２Ｈ）。
【０１９０】
実施例２４：｛３−［９−メトキシ−３−ニトロ−５，１１−ジオキソ−５Ｈ−インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−６（１１Ｈ）−イル］プロピル｝カルバミン酸２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）エチル（７２）
化合物６（５０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）に溶解した後、炭酸塩２７（５８ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１５ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）、及びＥｔ３Ｎ（２４ｍｇ，０．２４ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で１６時間撹拌した後、ＣＨＣｌ３で溶出して、生成物７２を赤色の固体（６８．４ｍｇ、９６％）として提供した。融点１４６〜１４８℃。ＩＲ（フィルム）３４２６，１６７０，１６１２，１５５６，１５０４，１３３４ｃｍ−１； １Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．８４(ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ)，８．６５（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ），８．５３（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，１Ｈ），８．４２（ｓ，１Ｈ），７．８０−７．７２（ｍ，３Ｈ），７．４６（ｍ，１Ｈ），７．１９（ｍ，２Ｈ），７．０４（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ），４．４６（ｍ，２Ｈ），４．１９（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），３．８９（ｓ，３Ｈ），３．２０（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２ｈ），３．０９（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ），１．９５（ｍ，２Ｈ）；ＨＰＬＣ純度：９８．９％（ＭｅＯＨ，１００％）。
【０１９１】
実施例２５：｛３−［９−メチルチオ−３−ニトロ−５，１１−ジオキソ−５Ｈ−インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−６（１１Ｈ）−イル］プロピル｝カルバミン酸２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）エチル（７３）
化合物７（５０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）に溶解した後、炭酸塩２７（５６ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１４ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）、及びＥｔ３Ｎ（２３ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で１６時間撹拌した後、シリカゲルカラムへ直接負荷し、ＣＨＣｌ３で溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、生成物７３を赤色の固体（２８．８ｍｇ、４１％）として提供した。融点１５２〜１５４℃。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．８２（ｓ，１Ｈ），８．６０（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，１Ｈ），８．５７（ｍ，２Ｈ），７．７８（ｍ，２Ｈ），７．６８(ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ)，７．４８（ｍ，１Ｈ），７．３７−７．３１（ｍ，２Ｈ），７．２２（ｍ，１Ｈ），４．４６（ｍ，２Ｈ），４．１８（ｍ，２Ｈ），３．２１（ｍ，２Ｈ），３．１０（ｍ，２Ｈ），２．５８（ｓ，３Ｈ），１．９５（ｍ，２Ｈ）。
【０１９２】
実施例２６：｛３−［９−フルオロ−３−ニトロ−５，１１−ジオキソ−５Ｈ−インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−６（１１Ｈ）−イル］プロピル｝カルバミン酸２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）エチル（７４）
化合物８（６７ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）に溶解した後、炭酸塩２７（８０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（２０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）、及びＥｔ３Ｎ（３４ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で１６時間撹拌した後、シリカゲルカラムへ直接負荷し、ＣＨＣｌ３中の１％ＭｅＯＨで溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、生成物７４を赤色の固体（４０．０ｍｇ、４２％）として提供した。融点１７７〜１７８℃。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．８４（ｓ，１Ｈ），８．６３（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），８．５２（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ），８．４４（ｍ，１Ｈ），７．７８（ｍ，１Ｈ），７．６９（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），７．４９（ｍ，１Ｈ），７．３１（ｓ，１Ｈ），７．２２（ｍ，１Ｈ），７．１６（ｍ，１Ｈ），４．４３（ｍ，２Ｈ），４．１８（ｍ，２Ｈ），３．２３（ｍ，２Ｈ），３．０８（ｍ，２Ｈ），１．９４（ｍ，２Ｈ）；ＨＰＬＣ純度：９８．４％（ＭｅＯＨ：１００％）。
【化３９】
2017501115.tif 000041
【０１９３】
実施例２７：｛３−［９−クロロ−３−ニトロ−５，１１−ジオキソ−５Ｈ−インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−６（１１Ｈ）−イル］プロピル｝カルバミン酸２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）エチル（７５）
化合物９（５２ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）に溶解した後、炭酸塩２７（６０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１５ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）、及びＥｔ３Ｎ（２５ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で１６時間撹拌した後、シリカゲルカラムへ直接負荷し、ＣＨＣｌ３で溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、生成物７５を橙色の固体（３８．４ｍｇ、５２％）として提供した。融点１６０〜１６１℃。ＩＲ（フィルム）３３３８，１７０５，１６７８，１５５８，１５０４，１３４０，７５１ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．８３（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），８．６２（ｄ，Ｊ  ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），８．５４（ｄｄ，Ｊ＝２．２及び６．７Ｈｚ，１Ｈ），８．４１（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１Ｈ），７．８０−７．７７（ｍ，３Ｈ），７．６３−７．５８（ｍ，２Ｈ），７．４５（ｍ，１Ｈ），７．２１（ｍ，１Ｈ），４．４７（ｍ，２Ｈ），４．１８（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ），３．２０（ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ），３．０８（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），１．９４（ｍ，２Ｈ）；ＨＰＬＣ純度：９５．５％（ＭｅＯＨ：１００％）。
【０１９４】
実施例２８：｛３−［９−ブロモ−３−ニトロ−５，１１−ジオキソ−５Ｈ−インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−６（１１Ｈ）−イル］プロピル｝カルバミン酸２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）エチル（７６）
化合物１０（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）に溶解した後、炭酸塩２７（５２ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１３ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）、及びＥｔ３Ｎ（２２ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で１６時間撹拌した後、シリカゲルカラムへ直接負荷し、ＣＨＣｌ３で溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、生成物７６を橙色の固体（４６．１ｍｇ、６７％）として提供した。融点１６２〜１６４℃。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．８３（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ），８．６１（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ），８．５４（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），８．４４（ｍ，１Ｈ），７．８１−７．７５（ｍ，４Ｈ），７．７０（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ），７．４６（ｍ，１Ｈ），７．２２（ｍ，１Ｈ），４．４７（ｍ，２Ｈ），４．１７（ｍ，２Ｈ），３．２１（ｍ，２Ｈ），３．０７（ｍ，２Ｈ），１．９５（ｍ，２Ｈ）。
【０１９５】
実施例２９：３−ニトロ−５，１１−ジオキソ−６−｛３−｛｛［２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）エトキシ］カルボニル｝アミノ｝プロピル｝−６，１１−ジヒドロ−５Ｈ−インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−９−カルボン酸メチル（７７）
化合物１１（５５ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）に溶解した後、炭酸塩２７（５９ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１５ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）、及びＥｔ３Ｎ（２５ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で１６時間撹拌した後、シリカゲルカラムへ直接負荷し、ＣＨＣｌ３で溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、生成物７７を橙色の固体（７３．２ｍｇ、９５％）として提供した。融点１４７〜１４９℃。ＩＲ（フィルム）３４０４，１７２０，１６７０，１６０３，１５１８，１３３８，１２５２，７６０ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．８３（ｄ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ），８．６６（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ），８．５５（ｄｄ，Ｊ＝２．３及び６．６Ｈｚ，１Ｈ），８．４４（ｍ，１Ｈ），８．１４（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．９６（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），７．８８（ｓ，１Ｈ），７．８１（ｍ，２Ｈ），７．５０（ｍ，１Ｈ），７．２２（ｍ，１Ｈ），４．５１（ｍ，２Ｈ），４．２０（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ），３．８９（ｓ，３Ｈ），３．２５（ｍ，２Ｈ），３．１３（ｍ，２Ｈ），１．９８（ｍ，２Ｈ）；ＨＰＬＣ純度：９６．１％（ＭｅＯＨ：１００％）。
【０１９６】
実施例３０：｛３−［８−メトキシ−３−ニトロ−５，１１−ジオキソ−９−｛｛［２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）エトキシ］カルボニル｝オキシ｝−５Ｈ−インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−６（１１Ｈ）−イル］プロピル｝カルバミン酸２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）エチル（７８）及び（３−（９−ヒドロキシ−８−メトキシ−３−ニトロ−５，１１−ジオキソ−５Ｈ−インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−６（１１Ｈ）−イル）プロピル）カルバミン酸２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）エチル（７９）
化合物１２（８．７ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）に希釈した後、炭酸塩２７（７．０ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（２．３ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ）、及びＥｔ３Ｎ（３．７ｍｇ、０．０３６ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で１６時間撹拌し、この間、材料はすべて完全に溶解して透明な赤色の溶液を得た。この溶液を次にシリカゲルカラムへ直接負荷し、ＣＨＣｌ３中の２％〜４％のＭｅＯＨで溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、両生成物を提供した。
【０１９７】
カルバミン酸塩７８（８．２ｍｇ、７２％）：１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１０．３６（ｓ，１Ｈ），８．８１（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ），８．５６（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，１Ｈ），８．４７−８．４１（ｍ，２Ｈ），７．８０−７．７４（ｍ，２Ｈ），７．４５（ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），７．２２−７．１７（ｍ，２Ｈ），６．９９（ｓ，１Ｈ），４．４６（ｍ，２Ｈ），４．１８（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ），３．９６（ｓ，３Ｈ），３．２２（ｍ，２Ｈ），３．０７（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ），１．９６（ｍ，２Ｈ）。
【０１９８】
二炭酸塩７９（４．３ｍｇ、２８％）：融点１１５〜１１７℃。ＩＲ（フィルム）３２９２，１７６６，１７０５，１６７４，１６１４，１５６０，１５０７，１４１８，１３３８，１２５２，７６０ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．８８（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），８．６９（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ），８．５６（ｄｄ，Ｊ＝２．４及び６．６Ｈｚ，１Ｈ），８．４７（ｄ，Ｊ＝４．６Ｈｚ，１Ｈ），８．４２（ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，１Ｈ），７．８６−７．７３（ｍ，４Ｈ），７．５８（ｓ，１Ｈ），７．４２（ｍ，２Ｈ），７．２７（ｍ，１Ｈ），７．２１（ｍ，１Ｈ），４．５４（ｍ，２Ｈ），４．４８（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ），４．１６（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，２Ｈ），４．０５（ｓ，３Ｈ），３．２４（ｍ，４Ｈ），３．０６（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ），１．９９（ｍ，２Ｈ）；ＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）８４４（ＭＮａ＋，１００）；ＨＲＭＳＥＳＩ  ＭＨ＋についての計算値：８２２．１０３２，実測値：８２２．１０３６。
【０１９９】
実施例３１：８−メトキシ−６−（３−モルホリノプロピル）−３−ニトロ−５，１１−ジオキソ−６，１１−ジヒドロ−５Ｈ−インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−９−イル［２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）エチル］カルボナート（８０）
化合物１３（２０ｍｇ、０．０３７ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）に希釈した後、炭酸塩２７（１７ｍｇ、０．０４４ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（４．５ｍｇ、０．０３７ｍｍｏｌ）、及びＥｔ３Ｎ（９．３ｍｇ、０．０９２ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で１６時間撹拌し、この間、材料はすべて完全に溶解して、透明な橙色の溶液を得た。この溶液を次に、シリカゲルカラムへ直接負荷し、ＣＨＣｌ３中の０％〜２％のＭｅＯＨで溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、生成物８０を橙色の固体（１２．４ｍｇ、５０％）として提供した。融点１３３〜１３５℃。ＩＲ（フィルム）１７６４，１６７５，１６１３，１５６０，１５０８，１３３７，１２８５，１２５１，１１９０ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．８９（ｄ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ），８．７１（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），８．５８（ｄｄ，Ｊ＝２．２及び６．６Ｈｚ，１Ｈ），８．４７（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），７．８４（ｍ，２Ｈ），７．５９（ｓ，１Ｈ），７．４７（ｓ，１Ｈ），７．２６（ｓ，１Ｈ），４．６４（ｍ，２Ｈ），４．４６（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），４．０４（ｓ，３Ｈ），３．３９（ｍ，６Ｈ），３．２４（t，Ｊ＝５．５Ｈｚ，２Ｈ），２．２９（ｍ，４Ｈ），２．０２（ｍ，２Ｈ）；ＡＰＣＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  (相対強度)６７９（ＭＨ＋，１００）；ＨＲＭＳ（＋ＥＳＩ）  ＭＨ＋についての計算値：６７９．１５３３，実測値：６７９．１５２８；ＨＰＬＣ純度：１００％（ＭｅＯＨ：１００％）。
【０２００】
実施例３２：６−［３−（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）プロピル］−８−メトキシ−３−ニトロ−５，１１−ジオキソ−６，１１−ジヒドロ−５Ｈ−インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−９−イル［２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）エチル］カルボナート（８１）
化合物１４（２０ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）に希釈した後、炭酸塩２７（１８ｍｇ、０．０４６ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（４．６ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）、及びＥｔ３Ｎ（１０ｍｇ、０．０９５ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で１６時間撹拌し、この間、材料はすべて完全に溶解して、透明な橙色の溶液を得た。この溶液を次に、シリカゲルカラムへ直接負荷し、ＣＨＣｌ３中の０％〜３％のＭｅＯＨで溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、生成物８１を橙色の固体（９．４ｍｇ、３８％）として提供した。融点１６８〜１７０℃（分解）。ＩＲ（フィルム）１７５６，１６６９，１６１１，１５５６，１５０３，１４２３，１３３５，１１８７ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．８０（ｓ，１Ｈ），８．５６（ｍ，１Ｈ），８．４６（ｍ  ２Ｈ），８．１６（ｍ，１Ｈ），７．８４−７．７７（ｍ，２Ｈ），７．５２（ｍ，２Ｈ），７．２９（ｍ，２Ｈ），７．０８（ｍ，１Ｈ），４．５５（ｍ，４Ｈ），４．４５（ｍ，２Ｈ），４．２７（s，３Ｈ），３．２２（ｍ，２Ｈ），２．３２（ｍ，２Ｈ）；ＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）６９４／６９６（ＭＣＩ−，１００）；ＨＲＭＳＥＳＩ  ＭＣＩ−についての計算値：６９４．０８３３，実測値：６９４．０８４０；ＨＰＬＣ純度：１００％（ＭｅＯＨ：１００％），９７．７（ＭｅＯＨ−Ｈ２Ｏ，９０：１０）。
【０２０１】
実施例３３：｛３−［８，９−メチレンジオキシ−３−ニトロ−５，１１−ジオキソ−５Ｈ−インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−６（１１Ｈ）−イル］プロピル｝カルバミン酸２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）エチル（８２）
化合物１６（５０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）に溶解した後、炭酸塩２７（５４ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１４ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）、及びＥｔ３Ｎ（１１８ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で１６時間撹拌した後、シリカゲルカラムへ直接負荷し、ＣＨＣｌ３で溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、生成物８２を褐色の固体（３８．９ｍｇ、５５％）として提供した。融点１６７〜１６９℃。ＩＲ（フィルム）３４３５，１６９９，１６７７，１６１１，１５５３，１５００，１３３２，１３０８，１２９０，１０２８ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．７６（ｓ，１Ｈ），８．５１−８．４３（ｍ，３Ｈ），７．８０−７．７７（ｍ，２Ｈ），７．４４（ｍ，１Ｈ），７．３１（ｓ，１Ｈ），７．２１（ｍ，１Ｈ），７．１４（ｓ，１Ｈ），６．２１（ｓ，２Ｈ），４．４０（ｍ，２Ｈ），４．１８（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，２Ｈ），３．１７（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２Ｈ），３．０７（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），１．９１（ｍ，２Ｈ）。
【０２０２】
実施例３４：｛２，３，８−トリメトキシ−６−（３−モルホリノプロピル）−５，１１−ジオキソ−６，１１−ジヒドロ−５Ｈ−インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−９−イル｝炭酸２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）エチル（８３）
化合物１８（５０ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）に溶解した後、炭酸塩２７（４８ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１３ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）、及びＥｔ３Ｎ（２１ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で１６時間撹拌した後、シリカゲルカラムへ直接負荷し、ＣＨＣｌ３中の３％ＭｅＯＨで溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、生成物８３を赤色の固体（６４．８ｍｇ、９０％）として提供した。融点１３０〜１３２℃。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣＩ３）δ８．５１（ｄ，Ｊ＝４．５Ｈｚ，１Ｈ），８．０９（ｓ，１Ｈ），７．６９−７．６６（ｍ，３Ｈ），７．３７（ｓ，１Ｈ），７．１６−７．１２（ｍ，２Ｈ），４．５９（ｑ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，４Ｈ），４．０６（ｓ，３Ｈ），４．００（ｓ，３Ｈ），３．９８（ｓ，３Ｈ），３．６８（ｔ，Ｊ＝４．３Ｈｚ，４Ｈ），３．１８（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ），２．５９（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），２．４７（ｂｒ  ｓ，４Ｈ），２．１４（ｍ，２Ｈ）。
【０２０３】
実施例３５：２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）エタノールヒドロクロリド（３６）
２−メルカプトエタノール（３３）（０．７７ｇ、９．９ｍｍｏｌ）をＣＨ３ＣＮ（５ｍＬ）に溶解し、事前に０℃に冷却しておいたＣＨ３ＣＮ（８ｍＬ）中のメトキシカルボニルスルフェニルクロリド（３４）（１．２５ｇ、９．９ｍｍｏｌ）の溶液へ滴下して添加した。淡黄色の溶液を０℃で３０分間、無色になるまで撹拌した。ＣＨ３ＣＮ（２０ｍＬ）中の２−メルカプトピリジン（３５）（１．０ｇ、９．０ｍｍｏｌ）の溶液をこの透明な溶液へ滴下して添加し、この黄色の混合物を２時間還流しながら撹拌し、この間、白色の沈殿物が形成した。次に、この白色の沈殿物を有する無色の混合物を０℃で１時間撹拌し、濾過した。フィルターケークをＣＨ３ＣＮで洗浄し、生成物３６を白色の無定形固体（１．８４ｇ、９２％）として提供した。融点１２８〜１３０℃。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣ１３）δ９．１３（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ），８．１０（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．８２（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．６１（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１Ｈ），４．０１（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ），３．２７（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ）；ＥＳＩＭＳ（正のモード）ｍ／ｚ（相対強度）１８８［（ＭＨ＋−Ｈ２Ｏ）＋，１００］。
【０２０４】
実施例３６：１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール−１−イル［２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）エチル］炭酸ヒドロクロリド（２７）
化合物３６（１．００ｇ、４．４７ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）及びＥｔ３Ｎ（０．４５ｇ、４．４７ｍｍｏｌ）に溶解し、０℃でトリホスゲン（３７）（０．４４ｇ、１．４９ｍｍｏｌ）の溶液へ滴下して添加した。この溶液を室温で１．５時間撹拌した後、ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）及びＥｔ３Ｎ（０．４５ｇ、４．４７ｍｍｏｌ）中のヒドロキシベンゾトリアゾール（３８）（０．６０ｇ、４．４７ｍｍｏｌ）の溶液を滴下して添加した。この混合物を次に室温で１６時間撹拌した後、ＣＨＣｌ３で５０ｍＬに希釈し、Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ×３）及び鹹水（１００ｍＬ）で洗浄した。この有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過及び濃縮した。結果として生じる黄色の油をヘキサンで粉砕し、濾過して、生成物２７を白色の固体（１．３６ｇ、７９％）として提供した。融点１１６〜１１８℃。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣ１３）δ８．４０（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），８．１８（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），８．０４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．９２（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７７−７．７４（ｍ，２Ｈ），７．６６（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．１９（ｍ，１Ｈ），４．７４（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），３．３８（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ）。
【０２０５】
実施例３７：ヒドラジンカルボン酸２−（ピリジン−２−イルジスルアニル）エチル（４９）
炭酸塩２７（５００ｍｇ、１．３０ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（３３４ｍｇ、２．６０ｍｍｏｌ）、及びＮ２Ｈ４・Ｈ２Ｏ（１３０ｍｇ、２．６０ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）に希釈し、この混合物を０℃で１．５時間撹拌した。この黄色の溶液を次にＣＨＣｌ３で３０ｍＬに希釈し、Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ×３）及び鹹水（１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過及び濃縮して、生成物４９を黄色の液体として提供した。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．４９（ｄ，Ｊ＝４．９Ｈｚ，１Ｈ），７．６７−７．６１（ｍ，２Ｈ），７．１３（ｍ，１Ｈ），４．４１（ｄｄ，Ｊ＝２．５及び３．９Ｈｚ，２Ｈ），３．７３（ｓ，１Ｈ），３．０９（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ）
【０２０６】
実施例３８：５−ベンジル１−（ｔｅｒｔ−ブチル）（（（Ｓ）−１，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−１，５−ジオキソペンタン−２−イル）カルバモイル）−Ｌ−グルタマート（４３）（Ｋｕｌａｒａｔｎｅら，Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍ．２００９，６，７９０〜８００）
Ｌ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯｔＢｕ（４０）（５００ｍｇ、１．６９ｍｍｏｌ）及びトリホスゲン（１６８ｍｇ、０．５６５ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（２５ｍＬ）に０℃でアルゴン下で５分間希釈した後、Ｅｔ３Ｎ（３７６ｍｇ、３．７２ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を０℃で２時間撹拌した後、Ｅｔ３Ｎ（２４４ｍｇ、２．４２ｍｍｏｌ）及びＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）中のＬ−Ｇｌｕ（ＯＢｎ）−ＯｔＢｕ（４２）（６１３ｍｇ、１．８６ｍｍｏｌ）を添加した。撹拌を室温で１６時間続行した後、この反応物を１Ｍ  ＨＣｌ（５０ｍＬ）でクエンチした。有機層を黄色のシロップへと濃縮し、これをヘキサン中の３０％から５０％に至る勾配のＥｔＯＡｃで溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製して、尿素４３を透明な無色のシロップ（０．９４ｇ、９６％）として提供した。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．３４（ｓ，５Ｈ），５．１１（ｓ，２Ｈ），５．０５−５．００（ｍ，２Ｈ），４．４０−４．３１（ｍ，２Ｈ），２．４９−２．４０（ｍ，２Ｈ），２．３７−２．２６（ｍ，２Ｈ），２．２２−２．０５（ｍ，２Ｈ），１．９６−１．８２（ｍ，２Ｈ），１．４６−１．４３（ｓ，２７Ｈ）。
【０２０７】
実施例３９：（Ｓ）−５−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−４−（３−（（Ｓ）−１，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−１，５−ジオキソペンタン−２−イル）ウレイド）−５−オキソペンタン酸（４（Ｋｕｌａｒａｔｎｅら，Ｍｏｌ.Ｐｈａｒｍ．２００９，６，７９０〜８００）
化合物４３（０．９６ｇ、１．６６ｍｍｏｌ）をＥｔＯＡｃ（１５ｍＬ）に希釈し、この混合物をアルゴンで５分間脱気した後、１０％Ｐｄ活性炭（２０ｍｇ）を添加し、この混合物をさらに５分間脱気した。この混合物を室温によって水素バルーンを用いて１６時間水素化した後、濾過し、セライトパッドを通じてＥｔＯＡｃで洗浄した。この溶液をヘキサン中の３０％から５０％に至るＥｔＯＡｃ勾配で溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）で濃縮及び精製して、透明な無色のシロップを得た。このシロップをヘキサンで粉砕し、一晩静置しておき、ＤＵＰＡ前駆体４４を白色の半固体（０．７０ｇ、８６％）として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ５．８４（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），５．４２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），４．４４（ｍ，１Ｈ），４．３４（ｍ，１Ｈ），２．４３−２．３９（ｍ，２Ｈ），２．３６−２．２８（ｍ，２Ｈ），２．２４−２．０３（ｍ，２Ｈ），１．９１−１．７９（ｍ，２Ｈ），１．４８（ｓ，９Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ），１．４４（s，９Ｈ）。
注：以下の融点（星印＊で注記）はすべて、固体の試料が半液体の粘着性のあるゴムへと軟化し始め、一度も液相に到達していない温度として定義する。
【０２０８】
実施例４０：ＤＵＰＡ−Ａｏｃ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｄａｐ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ試薬（２８）のＦｍｏｃ固相ペプチド合成（Ｋｕｌａｒａｔｎｅら，Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍ．２００９，６，７９０〜８００）
Ｈ−Ｌ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−（２−ＣｌＴｒｔ）樹脂（４５）（０．７ｍｅｑ／ｇ、２００ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）中で３０分間膨潤させ、その間、この混合物をアルゴンで発泡させていた。ＣＨ２Ｃｌ２を排水し、ＤＭＦ（３ｍＬ）中のＦｍｏｃ−Ｌ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ（２．５当量）、ＰｙＢＯＰ（２．５当量）、ＨＯＢｔ（２．５当量）、及びＤＩＰＥＡ（５．０当量）の溶液を当該樹脂に添加した。この混合物をアルゴンで３時間発泡させ、ＤＭＦ（５ｍＬ×３、５分／回、各洗浄後に排水）及びｉＰｒＯＨ（５ｍＬ×３、５分／回、各洗浄後に排水）で洗浄した。カイザー検査を実施して、陰性結果を得、これは、カップリング反応が成功していることを示した。次に、当該樹脂をＤＭＦ中の２０％ピペリジン（５ｍＬ×３、１０分／回、各洗浄後に排水）、ＤＭＦ（５ｍＬ×３、５分／回、各洗浄後に排水）、及びｉ−ＰｒＯＨ（５ｍＬ×３、５分／回、各洗浄後に排水）で洗浄した。
【０２０９】
第二のカイザー検査を実施して、陽性結果を得、これは、Ｆｍｏｃ基の切断が成功していることを示した。先の一連の流れをＢｏｃ−Ｌ−Ｄａｐ（Ｆｍｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−８−Ａｏｃ−ＯＨ、及び保護されたＤＵＰＡ前駆体のカップリングについて反復した。最終生成物を、アルゴンを発泡させながらＴＦＡ：Ｈ２Ｏ：ＴＩＰＳ：１，２−エタンジチオールカクテル（９２．５：２．５：２．５：２．５）（７．５ｍＬ、３０分）で洗浄することによって樹脂から切断した。さらに７．５ｍＬ部分のカクテルをＴＦＡ（７．５ｍＬ）で希釈して、１５ｍＬ溶液を調製した。この溶液を用いて樹脂を２回洗浄した（７．５ｍＬ／回、１５分／回）。この濾液を収集及び濃縮した。結果として生じるシロップをＥｔ２Ｏ中で沈殿させ、この混合物を遠心分離し、沈殿物を収集した。粗生成物を調製用ＨＰＬＣ（λ＝２５４ｎｍ、溶媒勾配０％Ｂから８０％Ｂで３０分、Ａ＝ＮＨ４ＯＡｃ／ＡｃＯＨ水性緩衝液（ｐＨ＝５）、Ｂ＝ＭｅＣＮ）で精製した。純粋な画分を組み合わせ、真空下で濃縮し、４８時間凍結乾燥させて、純粋なＤＵＰＡ−ペプチド生成物２８を白色の固体（１７２ｍｇ、５８％全体収率、またはカップリング工程あたりの９１．３％平均収率）として得た。融点＊１７５〜１７８℃。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．３９（ｄ，Ｊ＝９．１０Ｈｚ，１Ｈ），８．９２（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），８．６８（ｍ，１Ｈ），８．１６（ｍ，１Ｈ），７．８１（ｍ，１Ｈ），７．７１（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），７．２９−７．１，１０Ｈ），６．４５（ｍ，１Ｈ），６．３６（ｍ，１Ｈ），４．４３（ｍ，４Ｈ），４．２２（ｑ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ），４．０３−３．９６（ｍ，６Ｈ），３．４３−３．３６（ｍ，２Ｈ），３．１４−２．８４（ｍ，７Ｈ），２．６３（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ），２．２０−２．１８（ｍ，２Ｈ），２．０７（ｍ，２Ｈ），２．０２−１．９４（ｍ，１Ｈ），１．９１−１．８０（ｍ，３Ｈ），１．７４−１．６８（ｍ，３Ｈ），１．３１−１．２６（ｍ，４Ｈ），１．１７−１．０３（ｍ，８Ｈ）；ＬＣ／ＭＳ（ＥＳ−ＡＰＩ）ｍ／ｚ  １０６０．２（Ｍ＋），及び５３０．７（Ｍ２＋）。ＵＶ／可視光：λｍａｘ＝２５４ｎｍ。
【０２１０】
【化４０】
2017501115.tif 000042
実施例４１：（１２Ｒ，１５Ｓ，１８Ｓ，２２Ｓ，２５Ｓ，３９Ｓ，４３Ｓ）−１８−アミノ−２２，２５−ジベンジル−１５−（カルボキシメチル）−１−（９−メトキシ−３−ニトロ−５，１１−ジオキソ−５，１１−ジヒドロ−６Ｈ−インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−６−イル）−５，１４，１７，２１，２４，２７，３６，４１−オクタオキソ−６−オキサ−９，１０−ジチア−４，１３，１６，２０，２３，２６，３５，４０，４２−ノナアザペンタテトラコンタン−１２，３９，４３，４５−テトラカルボン酸（８４）
ＤＵＰＡ−ペプチド２８（３５．８ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）をｐＨ＝６のＮＨ４ＯＡｃの緩衝水溶液（２ｍＬ）に溶解した後、ＴＨＦ（４ｍＬ）中の炭酸塩７２（２０．０ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で１時間撹拌した後、真空下で濃縮した。この濃縮物を調製用ＲＰ−ＨＰＬＣ（λ＝２５４ｎｍ、溶媒勾配：０％Ｂから８０％Ｂへ３０分、Ａ＝ＮＨ４ＯＡｃ／ＡｃＯＨ水性緩衝液（ｐＨ＝７）、Ｂ＝ＭｅＣＮ）で精製して、所望の生成物８４を橙色の固体（１５．５ｍｇ、２９．８％）として提供した。融点＊２１５〜２１７℃。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６＋１滴のＤ２Ｏ）：δ８．８２（ｓ，１Ｈ），８．６１（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），８．４９（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，１Ｈ），７．７２（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），７．２２−７．０４（ｍ，１２Ｈ），４．４２−４．３７（ｍ，４Ｈ），４．１７（ｍ，１Ｈ），４．１１（ｍ，３Ｈ），３．８９−３．８４（ｍ，５Ｈ），３．４２−３．２６（ｍ，２Ｈ），３．１５−３．１１（ｍ，２Ｈ），３．０３−２．７９（ｍ，７Ｈ），２．５７−２．５０（ｍ，５Ｈ），２．１６（ｍ，２Ｈ），２．０３（ｍ，２Ｈ），１．９１−１．７７（ｍ，６Ｈ），１．７３−１．６６（ｍ，３Ｈ），１．２４（ｍ，５Ｈ），１．０６（ｍ，４Ｈ），０．９５（ｍ，２Ｈ）；ＭＡＬＤＩ−ＭＳ（相対強度）ｍ／ｚ  １５４１（ＭＨ＋）；ＨＲＭＳ（＋ＥＳＩ）  ＭＨ＋についての計算値：１５４１．５２４１，実測値１５４１．５２３３（Δｍ／ｍ＝０．５ｐｐｍ）；ＵＶ／可視光：λｍａｘ＝２５４ｎｍ。
【０２１１】
【化４１】
2017501115.tif 000043
実施例４２：（１２Ｒ，１５Ｓ，１８Ｓ，２２Ｓ，２５Ｓ，３９Ｓ，４３Ｓ）−１８−アミノ−２２，２５−ジベンジル−１５−（カルボキシメチル）−１−（３−ニトロ−５，１２−ジオキソ−５，１２−ジヒドロ−６Ｈ−［１，３］ジオキソロ［４’，５’：５，６］インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−６−イル）−５，１４，１７，２１，２４，２７，３６，４１−オクタオキソ−６−オキサ−９，１０−ジチア−４，１３，１６，２０，２３，２６，３５，４０，４２−ノナアザペンタテトラコンタン−１２，３９，４３，４５−テトラカルボン酸（８５）
ＤＵＰＡ−ペプチド２８（３５．０ｍｇ、０．０３３ｍｍｏｌ）及び炭酸塩８２（２０．０ｍｇ、０．０３３ｍｍｏｌ）をＤＭＳＯ（３ｍＬ）及びＤＩＰＥＡ（８．５ｍｇ、０．０６６ｍｍｏｌ）に溶解した。この混合物を室温で１６時間撹拌した後、調製用ＲＰ−ＨＰＬＣ（λ＝２５４ｎｍ、溶媒勾配：０％Ｂから８０％Ｂまで３０分、Ａ＝ＮＨ４ＯＡｃ／ＡｃＯＨ水性緩衝液（ｐＨ＝７）、Ｂ＝ＭｅＣＮ）で精製して、所望の生成物８５を褐色の固体（３１．５ｍｇ、６１．４％）として提供した。融点＊１９０〜１９２℃。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６＋１滴のＤ２Ｏ）：δ８．７５（ｓ，１Ｈ），８．５０（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），８．４２（ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ），７．２７（ｓ，１Ｈ），７．２０−７．０７（ｍ，１１Ｈ），６．１８（ｓ，２Ｈ），４．５８（ｍ，１Ｈ），４．４４−４．３８（ｍ，４Ｈ），４．２０（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ），４．１２（ｍ，２Ｈ），３．９２（ｍ，２Ｈ），３．４４（ｍ，１Ｈ），３．２７（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），２．９８−２．９０（ｍ，３Ｈ），２．８８−２．７６（ｍ，５Ｈ），２．６０−２．５２（ｍ，５Ｈ），２．１９（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），２．０４（ｍ，１Ｈ），２．８６−１．６４（ｍ，７Ｈ），１．２５（ｍ，５Ｈ），１．０７（ｍ，４Ｈ），０．９５（ｍ，２Ｈ）；ＵＶ／可視光：λｍａｘ＝２５４ｎｍ。
【０２１２】
【化４２】
2017501115.tif 000044
実施例４３：（８Ｒ，１１Ｓ，１４Ｓ，１８Ｓ，２１Ｓ，３５Ｓ，３９Ｓ）−１４−アミノ−１８，２１−ジベンジル−１１−（カルボキシメチル）−１，１０，１３，１７，２０，２３，３２，３７−オクタオキソ−１−（（２，３，８−トリメトキシ−６−（３−モルホリノプロピル）−５，１１−ジオキソ−６，１１−ジヒドロ−５Ｈ−インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−９−イル）オキシ）−２−オキサ−５，６−ジチア−９，１２，１６，１９，２２，３１，３６，３８−オクタアザヘンテトラコンタン−８，３５，３９，４１−テトラカルボン酸（８６）
方法Ａ：ＤＵＰＡ−ペプチド２８（３０．６ｍｇ、０．０２８ｍｍｏｌ）をｐＨ＝６のＮＨ４ＯＡｃ緩衝水溶液（２ｍＬ）に溶解した後、ＴＨＦ(２ｍＬ)中の炭酸塩８３（２０．０ｍｇ、０．０２８ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で１時間撹拌した後、真空下で濃縮した。この濃縮物を調製用ＲＰ−ＨＰＬＣ（λ＝２５４ｎｍ、溶媒勾配：０％Ｂから８０％Ｂで３０分、Ａ＝ＮＨ４ＯＡｃ／ＡｃＯＨ水性緩衝液（ｐＨ＝７）、Ｂ＝ＭｅＣＮ）で精製して、所望の生成物８６を濃紫色の固体（２９．６ｍｇ、６２．５％）として提供した。融点＊１８８〜１９０℃。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６＋１滴のＤ２Ｏ）：δ７．８８（ｓ，１Ｈ），７．４８（ｓ，１Ｈ），７．３６（ｓ，１Ｈ），７．２２−７．０６（ｍ，１１Ｈ），４．５０−４．４８（ｍ，２Ｈ），４．４０−４．３５（ｍ，５Ｈ），４．２０（ｍ，１Ｈ），４．０９（ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ），３．８３（ｓ，３Ｈ），３．９１−３．８６（ｍ，８Ｈ），３．８３−３．８１（ｍ，３Ｈ），３．７８（ｓ，１Ｈ），３．４０（ｍ，７Ｈ），３．２６（ｍ，１Ｈ），３．１３−３．０７（ｍ，２Ｈ），２．９８（ｍ，３Ｈ），２．９３（ｍ，２Ｈ），２．８３（ｍ，１Ｈ），２．６４−２．４６（ｍ，３Ｈ），２．４３（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ），２．２７（ｍ，４Ｈ），２．１８（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ），２．０４（ｍ，２Ｈ），１．９５−１．８５（ｍ，８Ｈ），１．７３（ｍ，２Ｈ），１．２６（ｍ，５Ｈ），１．０７（ｍ，５Ｈ），０．９６（ｍ，２Ｈ）；ＭＡＬＤＩ−ＭＳ（相対強度）ｍ／ｚ  １６４２（ＭＨ＋）；ＨＲＭＳ（＋ＥＳＩ）  ＭＨ＋についての計算値：１６４２．５９６９，実測値１６４２．６０４３（Δｍ／ｍ  ２０＝４．５ｐｐｍ）；ＵＶ／可視光：λｍａｘ＝２５４ｎｍ。
【０２１３】
方法Ｂ：
【化４３】
2017501115.tif 000045
炭酸塩８３（１５ｍｇ、０．０２２ｍｍｏｌ）及びＤＵＰＡ−ペプチド試薬２８（２３ｍｇ、０．０２２ｍｍｏｌ）をＤＭＳＯ（３ｍＬ）及びＤＩＰＥＡ（５．６ｍｇ、０．０４３ｍｍｏｌ）に溶解した。この混合物を室温で１６時間撹拌した後、調製用ＲＰ−ＨＰＬＣ（λ＝２８０ｎｍ、溶媒勾配：０％Ｂから８０％Ｂで３０分、Ａ＝ＮＨ４ＯＡｃ／ＡｃＯＨ水性緩衝液（ｐＨ＝７）、Ｂ＝ＭｅＣＮ）によって精製して、生成物８６を濃紫色の固体（２２．３ｍｇ、６３％）として提供した。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６＋１滴のＤ２Ｏ）：δ７．８８（ｓ，１Ｈ），７．４８（ｓ，１Ｈ），７．３６（ｓ，１Ｈ），７．２２−７．０６（ｍ，１１Ｈ），４．５０−４．４８（ｍ，２Ｈ），４．４０−４．３５（ｍ，５Ｈ），４．２０（ｍ，１Ｈ），４．０９（ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ），３．８３（ｓ，３Ｈ），３．９１−３．８６（ｍ，８Ｈ），３．８３−３．８１（ｍ，３Ｈ），３．７８（ｓ，１Ｈ），３．４０（ｍ，７Ｈ），３．２６（ｍ，１Ｈ），３．１３−３．０７（ｍ，２Ｈ），２．９８（ｍ，３Ｈ），２．９３（ｍ，２Ｈ），２．８３（ｍ，１Ｈ），２．６４−２．４６（ｍ，３Ｈ），２．４３（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ），２．２７（ｍ，４Ｈ），２．１８（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ），２．０４（ｍ，２Ｈ），１．９５−１．８５（ｍ，８Ｈ），１．７３（ｍ，２Ｈ），１．２６（ｍ，５Ｈ），１．０７（ｍ，５Ｈ），０．９６（ｍ，２Ｈ）；ＭＡＬＤＩ−ＭＳ（相対強度）ｍ／ｚ  １６４２（ＭＨ＋）；ＨＲＭＳ（＋ＥＳＩ）  ＭＨ＋（Ｃ７６Ｈ９６Ｎ１１Ｏ２６Ｓ２)についての計算値：１６４２．５９６９，実測値１６４２．６０４３（Ａｍ／ｍ＝４．５ｐｐｍ）；ＵＶ／可視光：λｍａｘ＝２８０ｎｍ；ＨＰＬＣ純度：９７．２％（ＭｅＣＮ，１００％）。
【０２１４】
生物学的データ
実施例４４
本方法の有望な有効性を実証するための一例として、ＬＮＣａｐ細胞培養物における基剤薬６及び１８ならびに当該基剤薬の対応するＤＵＰＡ複合体８４及び８６の細胞毒性は、低いナノモル濃度の範囲にあると判定した（図３）。ＤＵＰＡ複合体の優れた細胞毒性は、ジスルフィド還元及び中間体から基剤薬（６及び１８）への転換が細胞内で生じていることの示度として機能した。効能の亢進はまだ観察されてはいないが、この励まされる結果は、本発明者らの開始時の仮説を部分的に支持し、ペプチドリンカーをさらに最適化して薬剤放出機序を容易にするよう駆り立てた。
【０２１５】
実施例４５
遊離薬１８及びそのＤＵＰＡ複合体８６の細胞毒性を２２ＲＶ１細胞培養物において評価し、ＩＣ５０値を用量依存的３Ｈ−チミジン組み込みアッセイにおいて低いナノモル濃度範囲にあると定量化した（代表的なグラフは図１０に示す）。インデノイソキノリン１８自体のＩＣ５０値は、２時間のインキュベーション後に判定した時、２．０ｎＭであった。複合体８６は、２時間のインキュベーション後に活性を示さなかったが、２４時間のインキュベーション後に１１．４ｎＭのＩＣ５０値を生じた。１８に対する８６の効能の亢進は観察されなかった。実際、複合体８６は、薬剤１８自体よりもわずかに効能が低かった。しかしながら、複合体８６の潜在的な値は、「正常」細胞における細胞毒性を欠失しており、このことは、８６が毒性のあまりない抗癌薬であることを結果として生じるだろう。
【０２１６】
実施例４６
動物モデルにおける効能を実証し、毒性を調査するために、２２ＲＶ１異種移植片保有マウス（ＬＮＣａｐ異種移植片モデルに類似）をインデノイソキノリン１８及びそのＤＵＰＡ複合体８６を４０ｎｍｏｌ／個体の用量（２．０μｍｏｌ／ｋｇ）で腹腔内注射によって交互の日に単回用量で用いて３日／週で３週間（合計９回）処置した（図４〜６）。４群のマウスを実験に利用した。すなわち（ａ）未処置群（▲）は対照として機能し、（ｂ）遊離薬群（◆）は遊離薬１８を用いて処置し、（ｃ）処置群（■）にはＤＵＰＡ複合体８６を与え、ならびに（ｄ）競合薬群（▼）は、ＤＵＰＡ複合体８６及びＤＵＰＡ−ペプチド試薬２８の両方を受け、その濃度は８６の１０倍過剰量とした。試薬２８は、ＰＳＭＡ競合薬として機能し、ＤＵＰＡ結合に利用可能なＰＳＭＡすべてを完全に飽和させるために、非常により高濃度で使用し、したがって、８６の取り込みが実際にＰＳＭＡ仲介性である場合、ＤＵＰＡ複合体８６のＰＳＭＡ仲介性取り込みを防止した。
【０２１７】
図４における結果は、ＤＵＰＡ処置した群及び基剤薬処置した群についての処置機関の間の腫瘍発達の完全な休止及び退縮をそれぞれ、未処置群またはＤＵＰＡ複合体８６及びＰＳＭＡ競合薬２８を用いて処置した群と比較して示し、これは、ＤＵＰＡ複合体の取り込みがＰＳＭＡ仲介性であることを暗示した。遊離薬１８を用いて処置した群と比較して複合体８６を用いて処置した群において観察されたより低い抗腫瘍効能（検査した用量での腫瘍発達の休止）は、当該複合体のより低い毒性によって補償された（図５）。複合体８６は、前立腺癌細胞に対して、身体における他の細胞と比較して選択的に細胞毒性であるのに対し、遊離薬１８は、処置期間中に５個体のうちの４個体の死亡を結果的に生じた（図５）。ＰＳＭＡ競合薬２８を処置群と比較して複合体の１０倍過剰量で使用する時の競合群における活性の完全な喪失は、２８が８６と競合してＰＳＭＡに対する結合から有効に防止し、それにより１８の細胞内取り込みを遮断することを示唆した。この観察は、（ａ）細胞内取り込みの前の溶液中での複合体８６の十分な安定性、（ｂ）腫瘍細胞への８６のＰＳＭＡ仲介性取り込み、及び（ｃ）悪性細胞への内部移行化後の遊離薬１８の迅速な遊離を可能にするための８６の十分な傾向を示す。言い換えれば、本データは、複合体８６の細胞殺滅効果が空のＰＳＭＡ受容体の存在を必要としており、遊離薬の成熟前細胞外放出に続く罹患細胞中への受動的な拡散を生じないことを暗示した。
【０２１８】
さらに、図４におけるデータは遊離薬１８に及ぼす高用量での腫瘍退縮も実証した。図６は、４つの群における生存マウスがすべて、処置期間中に正常体重を保有していたことを示し、ＤＵＰＡ複合体療法が十分耐用されていることを示した。加えて、図６は、基剤薬が毒性であり、このことが結果的に３回の注射（１週間）後の（１群あたり５個体のうちの）４個体の死亡を結果的に生じたのに対し、類似の抗腫瘍効能を表すＤＵＰＡ複合体は当該動物に対して非毒性であり、かつ化学療法薬として非常により安全であることを示している。１８に対して８６の大きく低下した毒性（図５）は、当該複合体が当該薬剤自体よりも大きな安全性及び選択性を有するであろうという仮説を支持している。
【０２１９】
実施例４７
ＰＳＭＡが前立腺癌細胞１個あたり約１００万コピーのレベルで発現するのみである（Ｋｕｌａｒａｔｎｅら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１０，５３，７７６７〜７７７７）ので、非常に強力かつ高度に細胞毒性のある抗癌薬しかＤＵＰＡ複合体に考慮されていないので、ＰＳＭＡをシャトルとして使用して前立腺癌細胞の内側に送達される低濃度がなおも有効であることができる。誘導体化できる反応性ヒドロキシル基を有する化合物１８は、強力なＴｏｐ１阻害活性（＋＋＋＋＋）及び優れた細胞毒性平均−グラフ中間点（ＭＧＭ）ＧＩ５０値（８７ｎＭ）を６０個の癌細胞株からなるＮＣＴパネルにおいて呈する。
【化４４】
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【０２２０】
Ｔｏｐ１仲介性ＤＮＡ切断アッセイにおけるａＴｏｐ１阻害活性は、１μＭのカンプトテシンに対する次の説明において等級分類され、つまり０：阻害活性なし、＋：２０％と５０％の間の活性、＋＋：５０％と７５％の間の活性、＋＋＋：７５％と９５％の間の活性、＋＋＋＋：等効力、＋＋＋＋＋：より強力である。ｂ平均−グラフ中間点（ＭＧＭ）は、うまく検査した６０個のヒト癌細胞株からなる全体的なＮＣＩパネルにわたるＧＩ５０の概算平均値であり、ＭＧＭ計算の間、０．０１〜１００μＭの検査範囲外に収まるＧＩ５０値を有する化合物は、０．０１μＭと１００μＭの値を割り当てられる。
【０２２１】
選択したインデノイソキノリンの生物学的活性を表１に列挙する。
【表１】
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【表２−１】
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【表２−２】
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【０２２２】
実施例４９：分子モデリング
複合体８６の設計は、８６とＰＳＭＡの間に形成される複合体の分子モデリングによって容易にされた（図１１Ａ及び図１１Ｂ）。本モデルを構築するのに使用するドッキング及びエネルギー最小化手順は、以下の工程において要約することができる。１）ＤＵＰＡの立体配座は、Ｓｙｂｙｌによって最小化されたエネルギーであり、次に、ＰＳＭＡのリガンド結合部位（ＰＤＢコード２Ｃ６Ｃ、元のリガンドＧＰＩ−１８４３１は除去されている）へ、ＧＯＬＤ３．０を用いてドッキングし、２）リンカーペプチドの立体配座は、Ｓｙｂｙｌによって最小化されたエネルギーであり、次に、共有結合を通じてＤＵＰＡへ結合して、ＧＯＬＤ３．０を用いてＰＳＭＡ結合部位へドッキングされ、３）インデノイソキノリンの立体配座は、Ｓｙｂｙｌによって最小化されたエネルギーであり、次に、共有結合を通じてペプチドへ結合して、ＧＯＬＤ３．０を用いてＰＳＭＡ結合部位へドッキングされ、４）結果として生じる複合体である３−ＰＳＭＡ錯体のさらなるエネルギー最小化は、Ｓｙｂｙｌを用いて実施された。タンパク質については、ＡＭＢＥＲ電荷を使用した。リガンドについては、Ｇａｓｔｅｉｇｅｒ電荷を使用し、複合体−ＰＳＭＡ錯体の最小化は、ＡＭＢＥＲ７ＦＦ９９力場を用いて実施した。
【０２２３】
図１１Ａ及び図１１Ｂに示すＰＳＭＡへ結合した８６の分子モデルによると、複合体の右側にあるＤＵＰＡ断片及び結合したポリメチレンリンカーは、当該タンパク質の中心において本明細書に示すＬ型トンネルを占有する。複合体構造は２つのフェニルアラニンのレベルにあるトンネルから出現し、左に向いている残余構造は、片側でタンパク質を有するが、もう片側（見る側に面する）ではバルク溶媒に対して本質的に開いている。ジスルフィドがすでに溶媒へ曝露されているので、図１１Ａ及び図１１Ｂにおける当該ジスルフィドの左側に結合し得る将来の薬剤分子は、放出機序に影響することなくおそらく交換することができる。将来の薬剤設計において遭遇するであろう最も難解な問題は、前立腺癌細胞に及ぼすＰＳＭＡの狭用部位における適切な製剤化及び生物学的利用率の最適化を可能にするよう正しい溶解度特徴を有する非常に実用的な考慮に実際によるかもしれないことは起こりがちである。リンカー鎖のペプチドの性質は、異なるアミノ酸残基の置換を通じて複合体の溶解度特徴の調節を容易にするであろうし、あるいは、追加の窒素原子は、インデノイソキノリン環系へと組み込まれ、Ｔｏｐ１阻害効力を維持しながら、より大きな水中溶解度を結果的に生じることができる（Ｋｉｓｅｌｅｖら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１０，５３，８７１６〜８７２６、Ｋｉｓｅｌｅｖら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１１，５４，６１０６〜６１１６、Ｋｉｓｅｌｅｖら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１２，５５，１６８２〜１６９７、及びＫｉｓｅｌｅｖら，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２０１２，７７，５１６７〜５１７２）。
【０２２４】
本発明のある特長は本明細書において実証及び説明してきたが、多くの修飾、置換、変化、及び等価物がいまや、当業者に対して生じるであろう。それゆえ、添付の特許請求の範囲は、本発明の真の精神内に収まるような修飾及び変更をすべて網羅するよう企図されることは理解されることになっている。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図８Ｃ】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【国際調査報告】
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