(57)【要約】本発明は、腎損傷を罹患する、または有する疑いのある対象におけるモニタリング、診断、予後、および治療レジメンの決定のための方法および組成物に関する。特に、本発明は、腎損傷における診断および予後のバイオマーカーアッセイとしてインターロイキン１８結合タンパク質を検出するアッセイの使用に関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象の腎臓の状態を評価する方法であって、
前記対象から得た体液試料においてインターロイキン１８結合タンパク質を検出するように構成されたアッセイ方法を行うことによりアッセイ結果を提供することと、
前記アッセイ結果を前記対象の腎臓の状態と相関させることと
を含む、方法。
【請求項２】
前記相関ステップが、
前記アッセイ結果を、前記対象の腎臓の状態のリスク階層化、診断、ステージ分類、予後、分類、およびモニタリングのうちの１つまたは複数と相関させることを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記相関ステップが、前記アッセイ結果に基づき、前記対象に、腎臓の状態の１つまたは複数の将来の変化の可能性を割り当てることを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
腎臓の状態の前記１つまたは複数の将来の変化が、腎機能に対する将来の損傷、腎機能の将来の低下、腎機能の将来の改善、および将来の急性腎不全（ＡＲＦ）のうちの１つまたは複数を含む、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記アッセイ結果が、インターロイキン１８結合タンパク質の測定濃度を含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記相関ステップが、複数のアッセイ結果を単一の複合的な結果に変換する関数を使用して、前記複数のアッセイ結果を組み合わせることを含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
腎臓の状態の前記１つまたは複数の将来の変化が、前記対象が罹患する腎損傷に関連する臨床転帰を含む、請求項３に記載の方法。
【請求項８】
腎臓の状態の前記１つまたは複数の将来の変化の可能性が、体液試料を前記対象から得る時点から３０日以内に、関心対象の事象が多かれ少なかれ起こり得ることである、請求項３に記載の方法。
【請求項９】
腎臓の状態の前記１つまたは複数の将来の変化の可能性が、２１日、１４日、７日、５日、９６時間、７２時間、４８時間、３６時間、２４時間、および１２時間からなる群から選択される期間内に、関心対象の事象が多かれ少なかれ起こり得ることである、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記対象が、前記対象において腎前性、腎性、または腎後性のＡＲＦの１つまたは複数の既知のリスク因子が既に存在することに基づき、腎臓の状態の評価に関して選択される、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記対象が、うっ血性心不全、子癇前症、子癇、糖尿病、高血圧、冠動脈疾患、タンパク尿、腎不全、正常範囲を下回る糸球体濾過、硬変、正常範囲を上回る血清クレアチニン、敗血症、腎機能に対する損傷、腎機能の低下、もしくはＡＲＦのうちの１つもしくは複数の診断が存在することに基づき、または大血管手術、冠動脈バイパス術、もしくは他の心臓手術を受けているか、もしくは受けたことがあることに基づき、またはＮＳＡＩＤ、シクロスポリン、タクロリムス、アミノグリコシド、ホスカルネット、エチレングリコール、ヘモグロビン、ミオグロビン、イホスファミド、重金属、メトトレキサート、放射線不透過造影剤、もしくはストレプトゾトシンへの曝露に基づき、腎臓の状態の評価のために選択される、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記相関ステップが、前記アッセイ結果に基づき、腎機能に対する損傷、腎機能の低下、またはＡＲＦのうちの１つまたは複数の存在または非存在の診断を前記対象に割り当てることを含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記相関ステップが、前記アッセイ結果に基づき、腎機能に対する損傷、腎機能の低下、またはＡＲＦを罹患した対象において、腎機能が改善または悪化しているかどうかを評価することを含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記対象において、腎機能に対する損傷の存在または非存在を診断する方法である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記対象において、腎機能の低下の存在または非存在を診断する方法である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
前記対象において、急性腎不全の存在または非存在を診断する方法である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
前記対象において、腎代替療法の必要性の存在または非存在を診断する方法である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
前記対象において、腎臓移植の必要性の存在または非存在を診断する方法である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
前記対象において、腎機能に対する損傷の将来の存在または非存在のリスクを割り当てる方法である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
前記対象において、腎機能の低下の将来の存在または非存在のリスクを割り当てる方法である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
前記対象において、急性腎不全の将来の存在または非存在のリスクを割り当てる方法である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】
前記対象において、腎代替療法の必要性の将来の存在または非存在のリスクを割り当てる方法である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３】
前記対象において、腎臓移植の必要性の将来の存在または非存在のリスクを割り当てる方法である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
腎臓の状態の前記１つまたは複数の将来の変化が、前記体液試料を得る時点から７２時間以内での、腎機能に対する将来の損傷、腎機能の将来の低下、腎機能の将来の改善、および将来の急性腎不全（ＡＲＦ）のうちの１つまたは複数を含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２５】
腎臓の状態の前記１つまたは複数の将来の変化が、前記体液試料を得る時点から４８時間以内での、腎機能に対する将来の損傷、腎機能の将来の低下、腎機能の将来の改善、および将来の急性腎不全（ＡＲＦ）のうちの１つまたは複数を含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２６】
腎臓の状態の前記１つまたは複数の将来の変化が、前記体液試料を得る時点から２４時間以内での、腎機能に対する将来の損傷、腎機能の将来の低下、腎機能の将来の改善、および将来の急性腎不全（ＡＲＦ）のうちの１つまたは複数を含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２７】
前記対象がＲＩＦＬＥステージ０またはＲにある、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２８】
前記対象がＲＩＦＬＥステージ０にあり、前記相関ステップが、前記対象が７２時間以内にＲＩＦＬＥステージＲ、Ｉ、またはＦに達する可能性を割り当てることを含む、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記対象がＲＩＦＬＥステージ０にあり、前記相関ステップが、前記対象が７２時間以内にＲＩＦＬＥステージＩまたはＦに達する可能性を割り当てることを含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記対象がＲＩＦＬＥステージ０にあり、前記相関ステップが、前記対象が７２時間以内にＲＩＦＬＥステージＦに達する可能性を割り当てることを含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３１】
前記対象がＲＩＦＬＥステージ０またはＲにあり、前記相関ステップが、前記対象が７２時間以内にＲＩＦＬＥステージＩまたはＦに達する可能性を割り当てることを含む、請求項２７に記載の方法。
【請求項３２】
前記対象がＲＩＦＬＥステージ０またはＲにあり、前記相関ステップが、前記対象が７２時間以内にＲＩＦＬＥステージＦに達する可能性を割り当てることを含む、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記対象がＲＩＦＬＥステージＲにあり、前記相関ステップが、前記対象が７２時間以内にＲＩＦＬＥステージＩまたはＦに達する可能性を割り当てることを含む、請求項２７に記載の方法。
【請求項３４】
前記対象がＲＩＦＬＥステージＲにあり、前記相関ステップが、前記対象が７２時間以内にＲＩＦＬＥステージＦに達する可能性を割り当てることを含む、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記対象がＲＩＦＬＥステージ０、Ｒ、またはＩにあり、前記相関ステップが、前記対象が７２時間以内にＲＩＦＬＥステージＦに達する可能性を割り当てることを含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３６】
前記対象がＲＩＦＬＥステージＩにあり、前記相関ステップが、前記対象が７２時間以内にＲＩＦＬＥステージＦに達する可能性を割り当てることを含む、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
前記相関ステップが、前記対象が４８時間以内にＲＩＦＬＥステージＲ、Ｉ、またはＦに達する可能性を割り当てることを含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３８】
前記相関ステップが、前記対象が４８時間以内にＲＩＦＬＥステージＩまたはＦに達する可能性を割り当てることを含む、請求項２９に記載の方法。
【請求項３９】
前記相関ステップが、前記対象が４８時間以内にＲＩＦＬＥステージＦに達する可能性を割り当てることを含む、請求項３０に記載の方法。
【請求項４０】
前記相関ステップが、前記対象が４８時間以内にＲＩＦＬＥステージＩまたはＦに達する可能性を割り当てることを含む、請求項３１に記載の方法。
【請求項４１】
前記相関ステップが、前記対象が４８時間以内にＲＩＦＬＥステージＦに達する可能性を割り当てることを含む、請求項３２に記載の方法。
【請求項４２】
前記相関ステップが、前記対象が４８時間以内にＲＩＦＬＥステージＩまたはＦに達する可能性を割り当てることを含む、請求項３３に記載の方法。
【請求項４３】
前記相関ステップが、前記対象が４８時間以内にＲＩＦＬＥステージＦに達する可能性を割り当てることを含む、請求項３４に記載の方法。
【請求項４４】
前記相関ステップが、前記対象が４８時間以内にＲＩＦＬＥステージＦに達する可能性を割り当てることを含む、請求項３５に記載の方法。
【請求項４５】
前記相関ステップが、前記対象が４８時間以内にＲＩＦＬＥステージＦに達する可能性を割り当てることを含む、請求項３６に記載の方法。
【請求項４６】
前記相関ステップが、前記対象が２４時間以内にＲＩＦＬＥステージＲ、Ｉ、またはＦに達する可能性を割り当てることを含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項４７】
前記相関ステップが、前記対象が２４時間以内にＲＩＦＬＥステージＩまたはＦに達する可能性を割り当てることを含む、請求項２９に記載の方法。
【請求項４８】
前記相関ステップが、前記対象が２４時間以内にＲＩＦＬＥステージＦに達する可能性を割り当てることを含む、請求項３０に記載の方法。
【請求項４９】
前記相関ステップが、前記対象が２４時間以内にＲＩＦＬＥステージＩまたはＦに達する可能性を割り当てることを含む、請求項３１に記載の方法。
【請求項５０】
前記相関ステップが、前記対象が２４時間以内にＲＩＦＬＥステージＦに達する可能性を割り当てることを含む、請求項３２に記載の方法。
【請求項５１】
前記相関ステップが、前記対象が２４時間以内にＲＩＦＬＥステージＩまたはＦに達する可能性を割り当てることを含む、請求項３３に記載の方法。
【請求項５２】
前記相関ステップが、前記対象が２４時間以内にＲＩＦＬＥステージＦに達する可能性を割り当てることを含む、請求項３４に記載の方法。
【請求項５３】
前記相関ステップが、前記対象が２４時間以内にＲＩＦＬＥステージＦに達する可能性を割り当てることを含む、請求項３５に記載の方法。
【請求項５４】
前記相関ステップが、前記対象が２４時間以内にＲＩＦＬＥステージＦに達する可能性を割り当てることを含む、請求項３６に記載の方法。
【請求項５５】
前記対象が急性腎不全ではない、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５６】
前記対象が、前記体液試料を得る時点より前に決定したベースライン値を超える、血清クレアチニンの１．５倍以上の増加を経験していない、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５７】
前記対象が、前記体液試料を得る時点に先立つ６時間にわたり少なくとも０．５ｍｌ／ｋｇ／時間の尿量を有する、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５８】
前記対象が、前記体液試料を得る時点より前に決定されたベースライン値を超える、血清クレアチニンの０．３ｍｇ／ｄＬ以上の増加を経験していない、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５９】
前記対象が、（ｉ）前記体液試料を得る時点より前に決定されたベースライン値を超える、血清クレアチニンの１．５倍以上の増加を経験しておらず、（ｉｉ）前記体液試料を得る時点に先立つ６時間にわたり少なくとも０．５ｍｌ／ｋｇ／時間の尿量を有し、かつ（ｉｉｉ）前記体液試料を得る時点より前に決定されたベースライン値を超える、血清クレアチニンの０．３ｍｇ／ｄＬ以上の増加を経験していない、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６０】
前記対象が、前記体液試料を得る時点より前に決定されたベースライン値を超える、血清クレアチニンの１．５倍以上の増加を経験していない、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６１】
前記対象が、前記体液試料を得る時点に先立つ６時間にわたり少なくとも０．５ｍｌ／ｋｇ／時間の尿量を有する、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６２】
前記対象が、（ｉ）前記体液試料を得る時点より前に決定されたベースライン値を超える、血清クレアチニンの１．５倍以上の増加を経験しておらず、（ｉｉ）前記体液試料を得る時点に先立つ１２時間にわたり少なくとも０．５ｍｌ／ｋｇ／時間の尿量を有し、かつ（ｉｉｉ）前記体液試料を得る時点より前に決定されたベースライン値を超える、血清クレアチニンの０．３ｍｇ／ｄＬ以上の増加を経験していない、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６３】
前記相関ステップが、７２時間以内に前記対象が、（ｉ）血清クレアチニンの１．５倍以上の増加を経験し、（ｉｉ）６時間にわたり０．５ｍｌ／ｋｇ／時間未満の尿量を有し、または（ｉｉｉ）血清クレアチニンの０．３ｍｇ／ｄＬ以上の増加を経験する可能性のうちの１つまたは複数を割り当てることを含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６４】
前記相関ステップが、４８時間以内に前記対象が、（ｉ）血清クレアチニンの１．５倍以上の増加を経験し、（ｉｉ）６時間にわたり０．５ｍｌ／ｋｇ／時間未満の尿量を有し、または（ｉｉｉ）血清クレアチニンの０．３ｍｇ／ｄＬ以上の増加を経験する可能性のうちの１つまたは複数を割り当てることを含む、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】
前記相関ステップが、２４時間以内に前記対象が、（ｉ）血清クレアチニンの１．５倍以上の増加を経験し、（ｉｉ）６時間にわたり０．５ｍｌ／ｋｇ／時間未満の尿量を有し、または（ｉｉｉ）血清クレアチニンの０．３ｍｇ／ｄＬ以上の増加を経験する可能性のうちの１つまたは複数を割り当てることを含む、請求項６３に記載の方法。
【請求項６６】
前記相関ステップが、７２時間以内に前記対象が、血清クレアチニンの１．５倍以上の増加を経験する可能性を割り当てることを含む、請求項６３に記載の方法。
【請求項６７】
前記相関ステップが、７２時間以内に前記対象が、６時間にわたり０．５ｍｌ／ｋｇ／時間未満の尿量を有する可能性を割り当てることを含む、請求項６３に記載の方法。
【請求項６８】
前記相関ステップが、７２時間以内に前記対象が、血清クレアチニンの０．３ｍｇ／ｄＬ以上の増加を経験する可能性を割り当てることを含む、請求項６３に記載の方法。
【請求項６９】
前記相関ステップが、４８時間以内に前記対象が、血清クレアチニンの１．５倍以上の増加を経験する可能性を割り当てることを含む、請求項６３に記載の方法。
【請求項７０】
前記相関ステップが、４８時間以内に前記対象が、６時間にわたり０．５ｍｌ／ｋｇ／時間未満の尿量を有する可能性を割り当てることを含む、請求項６３に記載の方法。
【請求項７１】
前記相関ステップが、４８時間以内に前記対象が、血清クレアチニンの０．３ｍｇ／ｄＬ以上の増加を経験する可能性を割り当てることを含む、請求項６３に記載の方法。
【請求項７２】
前記相関ステップが、２４時間以内に前記対象が、血清クレアチニンの１．５倍以上の増加を経験する可能性を割り当てることを含む、請求項６３に記載の方法。
【請求項７３】
前記相関ステップが、２４時間以内に前記対象が、６時間にわたり０．５ｍｌ／ｋｇ／時間未満の尿量を有する可能性を割り当てることを含む、請求項６３に記載の方法。
【請求項７４】
前記相関ステップが、２４時間以内に前記対象が、血清クレアチニンの０．３ｍｇ／ｄＬ以上の増加を経験する可能性を割り当てることを含む、請求項６３に記載の方法。
【請求項７５】
前記対象が、前記体液試料を得る時点より前に決定されたベースライン値を超える、血清クレアチニンの２倍以上の増加を経験していない、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７６】
前記対象が、前記体液試料を得る時点に先立つ１２時間にわたり少なくとも０．５ｍｌ／ｋｇ／時間の尿量を有する、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７７】
前記対象が、（ｉ）前記体液試料を得る時点より前に決定されたベースライン値を超える、血清クレアチニンの２倍以上の増加を経験しておらず、（ｉｉ）前記体液試料を得る時点に先立つ２時間にわたり少なくとも０．５ｍｌ／ｋｇ／時間の尿量を有し、かつ（ｉｉｉ）前記体液試料を得る時点より前に決定されたベースライン値を超える、血清クレアチニンの０．３ｍｇ／ｄＬ以上の増加を経験していない、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７８】
前記対象が、前記体液試料を得る時点より前に決定されたベースライン値を超える、血清クレアチニンの３倍以上の増加を経験していない、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７９】
前記対象が、前記体液試料を得る時点に先立つ２４時間にわたり少なくとも０．３ｍｌ／ｋｇ／時間の尿量、または前記体液試料を得る時点に先立つ１２時間にわたり無尿、を有する、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８０】
前記対象が、（ｉ）前記体液試料を得る時点より前に決定されたベースライン値を超える、血清クレアチニンの３倍以上の増加を経験しておらず、（ｉｉ）前記体液試料を得る時点に先立つ２４時間にわたり少なくとも０．３ｍｌ／ｋｇ／時間の尿量、または前記体液試料を得る時点に先立つ１２時間にわたり無尿、を有し、かつ（ｉｉｉ）前記体液試料を得る時点より前に決定されたベースライン値を超える、血清クレアチニンの０．３ｍｇ／ｄＬ以上の増加を経験していない、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８１】
前記相関ステップが、７２時間以内に前記対象が、（ｉ）血清クレアチニンの２倍以上の増加を経験し、（ｉｉ）１２時間にわたり０．５ｍｌ／ｋｇ／時間未満の尿量を有し、または（ｉｉｉ）血清クレアチニンの０．３ｍｇ／ｄＬ以上の増加を経験する可能性のうちの１つまたは複数を割り当てることを含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８２】
前記相関ステップが、４８時間以内に前記対象が、（ｉ）血清クレアチニンの２倍以上の増加を経験し、（ｉｉ）６時間にわたり０．５ｍｌ／ｋｇ／時間未満の尿量を有し、または（ｉｉｉ）血清クレアチニンの０．３ｍｇ／ｄＬ以上の増加を経験する可能性のうちの１つまたは複数を割り当てることを含む、請求項８１に記載の方法。
【請求項８３】
前記相関ステップが、２４時間以内に前記対象が、（ｉ）血清クレアチニンの２倍以上の増加を経験し、または（ｉｉ）６時間にわたり０．５ｍｌ／ｋｇ／時間未満の尿量を有する可能性のうちの１つまたは複数を割り当てることを含む、請求項８１に記載の方法。
【請求項８４】
前記相関ステップが、７２時間以内に前記対象が、血清クレアチニンの２倍以上の増加を経験する可能性を割り当てることを含む、請求項８１に記載の方法。
【請求項８５】
前記相関ステップが、７２時間以内に前記対象が、６時間にわたり０．５ｍｌ／ｋｇ／時間未満の尿量を有する可能性を割り当てることを含む、請求項８１に記載の方法。
【請求項８６】
前記相関ステップが、４８時間以内に前記対象が、血清クレアチニンの２倍以上の増加を経験する可能性を割り当てることを含む、請求項８１に記載の方法。
【請求項８７】
前記相関ステップが、４８時間以内に前記対象が、６時間にわたり０．５ｍｌ／ｋｇ／時間未満の尿量を有する可能性を割り当てることを含む、請求項８１に記載の方法。
【請求項８８】
前記相関ステップが、２４時間以内に前記対象が、血清クレアチニンの２倍以上の増加を経験する可能性を割り当てることを含む、請求項８１に記載の方法。
【請求項８９】
前記相関ステップが、２４時間以内に前記対象が、６時間にわたり０．５ｍｌ／ｋｇ／時間未満の尿量を有する可能性を割り当てることを含む、請求項８１に記載の方法。
【請求項９０】
前記相関ステップが、７２時間以内に前記対象が、（ｉ）血清クレアチニンの３倍以上の増加を経験し、または（ｉｉ）２４時間にわたり０．３ｍｌ／ｋｇ／時間未満の尿量、もしくは１２時間にわたる無尿を有する可能性のうちの１つまたは複数を割り当てることを含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９１】
前記相関ステップが、４８時間以内に前記対象が、（ｉ）血清クレアチニンの３倍以上の増加を経験し、または（ｉｉ）２４時間にわたり０．３ｍｌ／ｋｇ／時間未満の尿量、もしくは１２時間にわたる無尿を有する可能性のうちの１つまたは複数を割り当てることを含む、請求項９０に記載の方法。
【請求項９２】
前記相関ステップが、２４時間以内に前記対象が、（ｉ）血清クレアチニンの３倍以上の増加を経験し、または（ｉｉ）２４時間にわたり０．３ｍｌ／ｋｇ／時間未満の尿量、もしくは１２時間にわたる無尿を有する可能性のうちの１つまたは複数を割り当てることを含む、請求項９０に記載の方法。
【請求項９３】
前記相関ステップが、７２時間以内に前記対象が、血清クレアチニンの３倍以上の増加を経験する可能性を割り当てることを含む、請求項９０に記載の方法。
【請求項９４】
前記相関ステップが、７２時間以内に前記対象が、２４時間にわたり０．３ｍｌ／ｋｇ／時間未満の尿量、または１２時間にわたる無尿を有する可能性を割り当てることを含む、請求項９０に記載の方法。
【請求項９５】
前記相関ステップが、４８時間以内に前記対象が、血清クレアチニンの３倍以上の増加を経験する可能性を割り当てることを含む、請求項９０に記載の方法。
【請求項９６】
前記相関ステップが、４８時間以内に前記対象が、２４時間にわたり０．３ｍｌ／ｋｇ／時間未満の尿量、または１２時間にわたる無尿を有する可能性を割り当てることを含む、請求項９０に記載の方法。
【請求項９７】
前記相関ステップが、２４時間以内に前記対象が、血清クレアチニンの３倍以上の増加を経験する可能性を割り当てることを含む、請求項９０に記載の方法。
【請求項９８】
前記相関ステップが、２４時間以内に前記対象が、２４時間にわたり０．３ｍｌ／ｋｇ／時間未満の尿量、または１２時間にわたる無尿を有する可能性を割り当てることを含む、請求項９０に記載の方法。
【請求項９９】
前記体液試料が尿の試料である、請求項１〜９８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１００】
前記アッセイ方法が、（ｉ）検出のためインターロイキン１８結合タンパク質に特異的に結合する試薬と尿試料を接触させ、前記尿試料中のインターロイキン１８結合タンパク質を示すアッセイ結果を得て、（ｉｉ）現在もしくは将来の急性腎損傷、または現在もしくは将来の急性腎不全の既知の素因を有する既定の個体亜集団に前記対象を割り当てるために前記アッセイ結果を使用する、アッセイ機器に、前記対象から得た体液試料を導入することを含む、請求項１〜９９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０１】
前記患者が割り当てられた既定の個体亜集団に基づき、前記対象を治療することをさらに含み、前記治療が、腎代替療法を開始すること、腎臓に損傷を与えることが知られている化合物の送達を中止すること、腎臓に損傷を与えることが知られている手法を延期または回避すること、および利尿剤の投与を修正することのうちの１つまたは複数を含む、請求項１００に記載の方法。
【請求項１０２】
前記対象が、現在急性腎損傷または急性腎不全を有しておらず、前記アッセイ結果を、将来の急性腎損傷または将来の急性腎不全の既知の素因を有する既定の個体亜集団に前記対象を割り当てるために使用する、請求項１００または１０１に記載の方法。
【請求項１０３】
前記将来の急性腎損傷または将来の急性腎不全が、２１日、１４日、７日、５日、９６時間、７２時間、４８時間、３６時間、２４時間、および１２時間からなる群から選択される期間内にある、請求項１０２に記載の方法。
【請求項１０４】
前記対象が、現在急性腎損傷または急性腎不全を有しており、前記アッセイ結果を、急性腎損傷または急性腎不全からの将来回復する既知の素因を有する既定の個体亜集団に前記対象を割り当てるために使用する、請求項１００または１０１に記載の方法。
【請求項１０５】
前記急性腎損傷または急性腎不全からの将来の回復が、２１日、１４日、７日、５日、９６時間、７２時間、４８時間、３６時間、２４時間、および１２時間からなる群から選択される期間内にある、請求項１０４に記載の方法。
【請求項１０６】
腎損傷の評価のための、インターロイキン１８結合タンパク質の測定。
【請求項１０７】
急性腎損傷の評価のための、インターロイキン１８結合タンパク質の測定。
【請求項１０８】
インターロイキン１８結合タンパク質を検出するよう構成されたアッセイを行うための試薬と、
前記アッセイを行った結果を、インターロイキン１８結合タンパク質の濃度と相関させる、コード化された検量線を含むデバイスであって、前記検量線の濃度の範囲が、インターロイキン１８結合タンパク質の正常濃度と、ヒトの腎創傷を示すために使用されるインターロイキン１８結合タンパク質の閾値濃度とを含む、デバイスと
を含む、キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、２０１４年１１月１１日に出願の米国特許仮出願第６２／０７８，３４７号の利益を主張するものであり、この文献全体は本明細書中参照として援用されている。
【背景技術】
【０００２】
以下の本発明の背景の論述は、単に本発明の理解を読み手に支援するために提供されており、本発明に対する従来技術を記載または構成することを認めるものではない。
【０００３】
腎臓は身体からの水および溶質の排出に関与している。この機能として、酸‐塩基平衡の維持、電解質の濃度の調節、血液量の制御、および血圧の調節が挙げられる。そのため、損傷および／または疾患によって腎機能が失われると、実質的な病的状態および死亡率をもたらす。腎損傷の詳細な論述は、Ｈａｒｒｉｓｏｎ’ｓ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，  １７ｔｈ  Ｅｄ．，  ＭｃＧｒａｗ  Ｈｉｌｌ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ｐａｇｅｓ  １７４１−１８３０に提供されており、この文献全体は本明細書中参照として援用されている。腎臓の疾患および／損傷は、急性または慢性であり得る。急性および慢性の腎臓の疾患は、以下の通り記載されている（Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ＆  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ２００８，  ４７ｔｈ  Ｅｄ，  ＭｃＧｒａｗ  Ｈｉｌｌ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ｐａｇｅｓ  ７８５−８１５より。この文献全体は本明細書中参照として援用されている）：「急性腎不全は、数時間から数日間にわたる腎機能の悪化であり、血液中に窒素性老廃物（尿素窒素など）およびクレアチニンが滞留する。これら物質の滞留は、高窒素血症と呼ばれる。慢性腎不全（慢性的な腎疾患）は、数か月から数年にわたる腎機能の異常な喪失からもたらされる。」
【０００４】
急性腎不全（ＡＲＦ、急性腎損傷またはＡＫＩとしても知られている）は、糸球体濾過の急激な（概して約４８時間〜１週間以内に検出される）低下である。この濾過能力の喪失は、通常腎臓により排出される窒素性（尿素およびクレアチニン）および非窒素性の老廃物の滞留、尿量の低下、またはその両方をもたらす。ＡＲＦは、入院患者数の約５％、心肺バイパス手術の患者数の４〜１５％、および集中治療患者数の最大３０％で併発していることが報告されている。ＡＲＦは、原因として、腎前性、腎性、または腎後性と分類され得る。腎性疾患は、さらに糸球体、尿細管、間質、および血管の異常に分類することができる。ＡＲＦの主要な原因を以下の表に記載する。この出典はＭｅｒｃｋ  Ｍａｎｕａｌ，  １７ｔｈ  ｅｄ．，  Ｃｈａｐｔｅｒ  ２２２であり、この文献全体は本明細書中参照として援用されている。
【表１】
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【０００５】
虚血性ＡＲＦの場合、疾患の過程は、４つの段階に分けることができる。数時間〜数日間続く初期段階の間で、腎臓の灌流の低下が損傷につながる。糸球体の限外濾過が低下し、ろ液の流れが尿細管の中のデブリにより低下し、損傷した上皮を介した濾液の逆流が起こる。腎損傷は、腎臓の再灌流によりこの段階の間に媒介され得る。発生後に、持続する虚血性の損傷および炎症を特徴とし、内皮の損傷および血管のうっ血を含み得る拡張段階が起こる。１〜２週間持続する維持段階の間に腎細胞の損傷が起こり、糸球体濾過および尿量が最小値に達する。回復段階がその後に続き、ここでは腎臓の上皮が修復し、ＧＦＲが徐々に回復する。これにも関わらず、ＡＲＦを有する対象の生存率は、約６０％もの低さであり得る。
【０００６】
造影剤（造影媒体とも呼ばれる）、ならびにシクロスポリン、アミノグリコシドを含む抗生物質、およびシスプラチンなどの抗癌剤などの他の腎毒素により引き起こされる急性腎損傷は、数日〜約数週間の期間にわたり顕在化する。造影剤誘発性腎症（ＣＩＮ、造影剤により引き起こされるＡＫＩ）は、腎臓内の血管収縮（虚血性損傷をもたらす）により、および腎臓の尿細管上皮細胞に対して直接的に毒性がある活性酸素種の生成により引き起こされると考えられている。ＣＩＮは、古くから血中の尿素窒素および血清クレアチニンの、急性（２４〜４８時間以内に発症）であるが、可逆的な（ピーク：３〜５日、１週間以内に回復）上昇として現れる。
【０００７】
一般に報告されているＡＫＩを定義および検出する基準は、急激な（概して約２〜７日以内または入院期間内）血清クレアチニンの上昇である。ＡＫＩを定義および検出するための血清クレアチニンの上昇を使用することは良好に確立されているが、血清クレアチニンの上昇の大きさおよびＡＫＩを定義するために測定される時間は、刊行物によってかなり変動する。従来では、１００％、２００％などの血清クレアチニンの比較的大きな増加、２ｍｇ／ｄＬを超える値への少なくとも１００％の増加、および他の定義が、ＡＫＩを定義するために使用された。しかしながら、近年の傾向として、血清クレアチニンのより小さい上昇がＡＫＩの定義に使用されている。血清クレアチニンの上昇、ＡＫＩ、および関連する健康リスクの間の関係は、Ｐｒａｕｇｈｔ  ａｎｄ  Ｓｈｌｉｐａｋ，  Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｎｅｐｈｒｏｌ  Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓ  １４：２６５−２７０，  ２００５およびＣｈｅｒｔｏｗ  ｅｔ  ａｌ，  Ｊ  Ａｍ  Ｓｏｃ  Ｎｅｐｈｒｏｌ  １６：  ３３６５−３３７０，  ２００５で、その中に列挙される参照文献と共に概説されており、これら文献全体は本明細書中参照として援用されている。これら刊行物に記載されるように、現在では、急激に悪化する急性腎不全（ＡＫＩ）、ならびに死亡および他の有害な転帰のリスクの増加が、血清クレアチニンの非常に小さい増加と関連することが知られている。これらの増加は、相対的な（パーセント）値または名目上の値として決定され得る。血清クレアチニンの損傷前の値からの２０％という小さい相対的増加が、腎機能の急激な悪化（ＡＫＩ）および健康リスクの増加を示すことが報告されているが、ＡＫＩおよび健康リスクの増加を定義するためにより一般的に報告される値は、少なくとも２５％の相対的増加である。０．３ｍｇ／ｄＬ、０．２ｍｇ／ｄＬ、またはさらには０．１ｍｇ／ｄＬもの小さい名目上の増加が、腎機能の悪化および死亡リスクの増加を表すと報告されている。血清クレアチニンがこれら閾値に上昇するまでの様々な期間、たとえば患者が入院しているまたは集中治療室に入っている時間として定義される２日、３日、７日、または可変の期間が、ＡＫＩを定義するために使用されている。これらの研究は、腎機能またはＡＫＩの悪化に関して血清クレアチニン上昇（または上昇期間）の特定の閾値は存在せず、むしろ、血清クレアチニンの上昇の大きさが増加することに伴うリスクの継続的な増加が存在することを示す。
【０００８】
一研究（Ｌａｓｓｎｉｇｇ  ｅｔ  ａｌｌ，  Ｊ  Ａｍ  Ｓｏｃ  Ｎｅｐｈｒｏｌ  １５：１５９７−１６０５，  ２００４、この文献全体は本明細書中参照として援用）は、血清クレアチニンの増加および減少の両方を試験した。心臓手術後に血清クレアチニンの減少が−０．１〜−０．３ｍｇ／ｄＬで軽度であった患者では、最も死亡率が低かった。血清クレアチニンが大きく減少した患者（−０．４ｍｇ／ｄＬ以上）またはいくらか血清クレアチニンが増加した患者では死亡率が高かった。この知見により、著者らは、腎機能の非常にわずかな変化であっても（手術から４８時間以内の小さなクレアチニンの変化により検出される）患者の転帰に著しく影響すると結論付けた。臨床試験および臨床現場でＡＫＩを定義するために血清クレアチニンを使用する統合された分類システムに関する合意に達することを目的として、Ｂｅｌｌｏｍｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ．  ８（４）：Ｒ２０４−１２，  ２００４（全体が本明細書中参照として援用）は、ＡＫＩ患者を階層化するために以下の分類を提唱している：
「リスク」：血清クレアチニンのベースラインからの１．５倍増加、または、６時間の尿生成が＜０．５ｍＬ／ｋｇ体重／時
「損傷」：血清クレアチニンのベースラインからの２．０倍増加、または、１２時間の尿生成が＜０．５ｍＬ／ｋｇ／時
「不全」：血清クレアチニンのベースラインからの３．０倍増加、または、クレアチニン＞３５５μｍｏｌ／Ｌ（４４を超える上昇とともに）、または２４時間の尿量が０．３ｍＬ／ｋｇ／時未満、もしくは少なくとも１２時間の無尿；および２つの臨床転帰が含まれる
「喪失」：４週間超の腎代替療法の持続的必要性あり。
「ＥＳＲＤ」：末期腎疾患―３ヶ月間超の透析の必要性あり。
これらの判断基準は、ＲＩＦＬＥ基準と呼ばれ、腎状態を分類するための有用な臨床ツールを提供するものである。Ｋｅｌｌｕｍ，  Ｃｒｉｔ．  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．  ３６：  Ｓ１４１−４５，  ２００８  およびＲｉｃｃｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ．  ７３，  ５３８−５４６，  ２００８（各文献全体は本明細書中参照として援用されている）に論述されるように、ＲＩＦＬＥ基準は、ＡＫＩの一様な定義を提供し、これは多数の研究でバリデートされている。
【０００９】
最近、Ｍｅｈｔａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｒｉｔ．  Ｃａｒｅ  １１：Ｒ３１  （ｄｏｉ：１０．１１８６．ｃｃ５７１３），  ２００７（全体が本明細書中参照として援用されている）は、ＲＩＦＬＥから改変した、ＡＫＩ患者を階層化するための以下の類似の分類を提唱している：
「ステージＩ」：血清クレアチニンの０．３ｍｇ／ｄＬ以上の増加（≧２６．４μｍｏｌ／Ｌ）、またはベースラインから１５０％（１．５倍）以上への増加、または、６時間を超える間の尿量が１時間当たり０．５ｍＬ／ｋｇ未満；
「ステージＩＩ」：血清クレアチニンのベースラインから２００％超（＞２倍）への増加、または、１２時間を超える間の尿量が１時間当たり０．５ｍＬ／ｋｇ未満；
「ステージＩＩＩ」：血清クレアチニンのベースラインから３００％超（＞３倍）への増加、または少なくとも４４μｍｏｌ／Ｌの急激な増加を伴う血清クレアチニン≧３５４μｍｏｌ／Ｌ、または２４時間の尿量が１時間当たり０．３ｍＬ／ｋｇ未満、もしくは１２時間の無尿。
【００１０】
ＣＩＮ  Ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ  Ｗｏｒｋｉｎｇ  Ｐａｎｅｌ（ＭｃＣｏｌｌｏｕｇｈ  ｅｔ  ａｌ，  Ｒｅｖ  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ  Ｍｅｄ．  ２００６；７（４）：１７７−１９７、この内容全体は参照により本明細書に援用されている）は、（ＡＫＩの１種である）造影剤誘発性腎症を定義するために２５％の血清クレアチニン上昇を使用する。様々なグループが、ＡＫＩを検出するための血清クレアチニンの使用に関してするわずかに異なる基準を提唱しているが、ＡＫＩ（腎機能悪化）の検出には、０．３ｍｇ／ｄＬまたは２５％などの血清クレアチニンの小さい変化で十分であり、血清クレアチニン変化の大きさは、ＡＫＩの重篤度および死亡リスクの指標であるという合意が得られている。
【００１１】
数日間にわたる血清クレアチニンの連続測定はＡＫＩを検出し診断する認められた方法であり、ＡＫＩ患者を評価するための最も重要なツールのうちの１つであると考えられているが、一般的に、血清クレアチニンは、ＡＫＩ患者の診断、評価、およびモニタリングにおいていくつかの限界を有すると見なされている。血清クレアチニンがＡＫＩと診断されるとされる値まで上昇する（例えば０．３ｍｇ／ｄＬまたは２５％の上昇）期間は、使用される定義に応じて４８時間以上であり得る。ＡＫＩにおける細胞損傷は数時間にわたって起こり得ることから、４８時間以上で検出される血清クレアチニン上昇は、損傷の後期指標である可能性があり、よって血清クレアチニンに頼ることは、ＡＫＩの診断を遅らせる可能性がある。さらに、血清クレアチニンは、正確な腎臓の状態の良好な指標ではなく、腎機能が急速に変化しているＡＫＩの最急性期の間では治療が必要である。ＡＫＩを有する患者は、完全に回復する者もあれば、透析（短期間または長期間のいずれか）を必要とする患者もあり、死亡、主要な心臓有害事象、および慢性腎疾患を含む他の有害な転帰を有する患者も存在する。血清クレアチニンは濾過量のマーカーであるため、ＡＫＩ（腎前性、腎性、腎後性の閉塞、アテローム塞栓など）の原因、あるいは、腎性疾患の損傷の分類もしくは位置（例えば、尿細管、糸球体もしくは間質由来）の間を区別するものではない。尿量も同様に限定されており、これらのことを知ることは、ＡＫＩ患者を管理および治療する際にきわめて重要であり得る。
【００１２】
これらの限界は、特に初期の無症状の段階において、また腎臓の回復および修復が起こり得る後期の段階においても、ＡＫＩを検出して評価するより良好な方法の必要性を強調するものである。さらに、ＡＫＩを罹患するリスクがある患者をより良好に同定する必要がある。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
本発明の目的は、対象の腎機能を評価する方法および組成物を提供することである。本明細書中記載されるように、インターロイキン１８結合タンパク質（本明細書中「腎損傷マーカー」を表す）の測定は、腎機能に対する損傷、腎機能の低下、および／または急性腎不全（ｒｅｎａｌまたはｋｉｄｎｅｙ）を罹患する、または罹患するリスクのある対象の、診断、予後、リスク階層化、ステージ分類、モニタリング、分類、ならびにさらなる診断および治療のレジメンの決定に使用することができる。
【００１４】
インターロイキン１８結合タンパク質は、リスク階層化のため（すなわち、腎機能に対する将来の損傷、腎機能の低下への将来の進行、ＡＲＦへの将来の進行、腎機能の将来の改善などに関してリスクのある対象を同定するため）；存在する疾患の診断のため（すなわち腎機能に対する損傷を罹患している対象、腎機能の低下へと進行している対象、ＡＲＦへと進行した対象などを同定するため）；腎機能の悪化または改善のモニタリングのため；ならびに、腎機能の改善または悪化、死亡率のリスクの減少または増加、対象が腎代替療法（すなわち血液透析、腹膜透析、血液濾過法、および／または腎臓移植）を必要とするリスクの減少または増加、対象が腎機能に対する損傷から回復するリスクの減少または増加、対象がＡＲＦから回復するリスクの減少または増加、対象が末期の腎疾患へと進行するリスクの減少または増加、対象が慢性腎不全へと進行するリスクの減少または増加、対象が移植した腎臓を拒絶するリスクの減少または増加などの将来の医学的転帰を予測するため、個別に、または複数の腎損傷マーカーを含むパネルで、使用することができる。
【００１５】
第１の態様では、本発明は、対象の腎臓の状態を評価する方法に関する。これらの方法は、対象から得た体液試料中のインターロイキン１８結合タンパク質を検出するように構成されたアッセイ方法を行うことを含む。次に、アッセイ結果、たとえばインターロイキン１８結合タンパク質の測定濃度を、対象の腎臓の状態と相関させる。この腎臓の状態に対する相関は、アッセイ結果を、本明細書中に記載される対象のリスク階層化、診断、予後、ステージ分類、分類、およびモニタリングのうちの１つまたは複数に相関させることを含んでもよい。よって本発明は、腎損傷の評価のため、本発明の１つまたは複数の腎損傷マーカーを利用する。
【００１６】
特定の実施形態では、本明細書中記載される腎臓の状態を評価する方法は、対象のリスク階層化のための方法、すなわち、腎臓の状態の１つまたは複数の将来の変化の可能性を対象に割り当てるための方法である。これらの実施形態では、アッセイの結果を、このような１つまたは複数の将来の変化と相関させる。以下は好ましいリスク階層化の実施形態である。
【００１７】
好ましいリスク階層化の実施形態では、これらの方法は、腎機能に対する将来の損傷に関する対象のリスクを決定することを含み、アッセイ結果を、腎機能に対するそのような将来の損傷の可能性と相関させる。たとえば、測定濃度を、それぞれ閾値の値と比較してもよい。「正の（ｐｏｓｉｔｉｖｅ  ｇｏｉｎｇ）」の腎損傷マーカーでは、測定濃度が閾値を超える場合、測定濃度が閾値を下回る場合に割り当てられる可能性と比較して、腎機能に対する将来の損傷を罹患する可能性の増加が対象に割り当てられる。「負の（ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｇｏｉｎｇ）」腎損傷マーカーでは、測定濃度が閾値を下回る場合、測定濃度が閾値を超える場合に割り当てられる可能性と比較して、腎機能に対する将来の損傷を罹患する可能性の増加が対象に割り当てられる。
【００１８】
他の好ましいリスク階層化の実施形態では、これらの方法は、腎機能の将来の低下に関する対象のリスクを決定することを含み、アッセイ結果を、腎機能のそのような低下の可能性と相関させる。たとえば測定濃度を、閾値とそれぞれ比較してもよい。「正の」腎損傷マーカーでは、測定濃度が閾値を超える場合、測定濃度が閾値を下回る場合に割り当てられる可能性と比較して、腎機能の将来の低下を罹患する可能性の増加が対象に割り当てられる。「負の」腎損傷マーカーでは、測定濃度が閾値を下回る場合、測定濃度が閾値を超える場合に割り当てられる可能性と比較して、腎機能の将来の低下の可能性の増加が対象に割り当てられる。
【００１９】
さらなる他の好ましいリスク階層化の実施形態では、これらの方法は、腎機能の将来の改善に関する対象の可能性を決定することを含み、アッセイ結果を、腎機能のそのような将来の改善の可能性と相関させる。たとえば、測定濃度は、閾値とそれぞれ比較してもよい。「正の」腎損傷マーカーでは、測定濃度が閾値を下回る場合、測定濃度が閾値を超える場合に割り当てられる可能性と比較して、腎機能の将来の改善の可能性の増加が対象に割り当てられる。「負の」腎損傷マーカーでは、測定濃度が閾値を超える場合、測定濃度が閾値を下回る場合に割り当てられる可能性と比較して、腎機能の将来の改善の可能性の増加が対象に割り当てられる。
【００２０】
さらなる他の好ましいリスク階層化の実施形態では、これらの方法は、ＡＲＦへの進行に関する対象のリスクを決定することを含み、結果を、ＡＲＦへのそのような進行の可能性と相関させる。たとえば測定濃度を、閾値とそれぞれ比較してもよい。「正の」腎損傷マーカーでは、測定濃度が閾値を超える場合、測定濃度が閾値を下回る場合に割り当てられる可能性と比較して、ＡＲＦへの進行の可能性の増加が対象に割り当てられる。「負の」腎損傷マーカーでは、測定濃度が閾値を下回る場合、測定濃度が閾値を超える場合に割り当てられる可能性と比較して、ＡＲＦへの進行の可能性の増加が対象に割り当てられる。
【００２１】
他の好ましいリスク階層化の実施形態では、これらの方法は、対象の転帰のリスクを決定することを含み、アッセイの結果を、対象が罹患する腎損傷に関連する臨床転帰の発生の可能性と相関させる。たとえば、測定濃度を、閾値とそれぞれ比較してもよい。「正の」腎損傷マーカーでは、測定濃度が閾値を超える場合、測定濃度が閾値を下回る場合に割り当てられる可能性と比較して、急性腎損傷、悪化したステージのＡＫＩへの進行、死亡率、腎代替療法の必要、腎毒素の除去の必要、末期の腎疾患、心不全、脳卒中、心筋梗塞、慢性腎疾患への進行などのうちの１つまたは複数の可能性の増加が対象に割り当てられる。「負の」腎損傷マーカーでは、測定濃度が閾値を下回る場合、測定濃度が閾値を超える場合に割り当てられる可能性と比較して、急性腎損傷、悪化したステージのＡＫＩへの進行、死亡率、腎代替療法の必要、腎毒性物質の休薬の必要、末期の腎疾患、心不全、脳卒中、心筋梗塞、慢性腎疾患への進行などのうちの１つまたは複数の可能性の増加が対象に割り当てられる。
【００２２】
このようなリスク階層化の実施形態では、好ましくは、割り当てられる可能性またはリスクは、対象から体液試料を得た時点から１８０日以内に、関心対象の事象が多かれ少なかれ起こる可能性があることである。特に好ましい実施形態では、割り当てられる可能性またはリスクは、１８ケ月、１２０日、９０日、６０日、４５日、３０日、２１日、１４日、７日、５日、９６時間、７２時間、４８時間、３６時間、２４時間、１２時間、またはそれ未満などのより短い期間以内に発生する関心対象の事象に関連する。対象から体液を得た時点の０時間目のリスクは、現在の病態の診断に相当する。
【００２３】
好ましいリスク階層化の実施形態では、対象を、対象において腎前性、腎性、または腎後性のＡＲＦの１つまたは複数の既知のリスク因子が既に存在していることに基づき、リスク階層化のために選択する。たとえば、大血管手術、冠動脈バイパス術、もしくは他の心臓手術を受けている患者もしくは受けたことがある対象；うっ血性心不全、子癇前症、子癇、糖尿病、高血圧、冠動脈疾患、タンパク尿、腎不全、正常な範囲を下回る糸球体濾過、硬変、正常な範囲を上回る血清クレアチニン、もしくは敗血症が既に存在している対象；またはＮＳＡＩＤ、シクロスポリン、タクロリムス、アミノグリコシド、ホスカルネット、エチレングリコール、ヘモグロビン、ミオグロビン、イホスファミド、重金属、メトトレキサート、放射線不透過造影剤、もしくはストレプトゾトシンに曝露される対象は、すべて、本明細書中に記載される方法によるリスクのモニタリングに好ましい対象である。この列挙は限定を意味するものではない。この文脈の「既に存在していること」は、リスク因子が、対象から体液試料を得た時点で存在することを意味する。特に好ましい実施形態では、対象は、腎機能に対する損傷、腎機能の低下、またはＡＲＦの診断が存在することに基づいて、リスク階層化のために選択される。
【００２４】
他の実施形態では、本明細書中に記載される腎臓の状態を評価する方法は、対象の腎損傷を診断する方法、すなわち、対象が腎機能に対する損傷、腎機能の低下、またはＡＲＦを罹患しているかどうかを評価する方法である。これらの実施形態では、アッセイ結果、たとえばインターロイキン１８結合タンパク質の測定濃度を、腎臓の状態の変化の発生の有無と相関させる。以下は好ましい診断の実施形態である。
【００２５】
好ましい診断の実施形態では、これらの方法は、腎機能に対する損傷の存在または非存在を診断することを含み、アッセイ結果をそのような損傷の存在または非存在と相関させる。たとえば、各測定濃度を閾値と比較してもよい。正のマーカーでは、（測定濃度が閾値を下回る場合に割り当てた可能性と比較して）高い、腎機能に対する損傷の発生の可能性を、測定濃度が閾値を上回る場合の対象に割り当て；あるいは、（測定濃度が閾値を超える場合に割り当てた可能性と比較して）高い、腎機能に対する損傷が発生しない可能性を、測定濃度が閾値を下回る場合に対象に割り当ててもよい。負のマーカーでは、測定濃度が閾値を下回る場合、（測定濃度が閾値を超える場合に割り当てられる可能性と比較して）腎機能に対する損傷が存在する可能性の増加が対象に割り当てられ；あるいは、測定濃度が閾値を超える場合、（測定濃度が閾値を下回る場合に割り当てられる可能性と比較して）腎機能に対する損傷が存在しない可能性の増加が対象に割り当てられ得る。
【００２６】
他の好ましい診断の実施形態では、これらの方法は、腎機能の低下の存在または非存在を診断する方法を含み、アッセイ結果を、腎機能の低下を引き起こす損傷の存在または非存在と相関させる。たとえば、各測定濃度を閾値と比較してもよい。正のマーカーでは、測定濃度が閾値を超える場合、（測定濃度が閾値を下回る場合に割り当てられる可能性と比較して）腎機能の低下を引き起こす損傷が存在する可能性の増加が対象に割り当てられ；あるいは、測定濃度が閾値を下回る場合、（測定濃度が閾値を超える場合に割り当てられる可能性と比較して）腎機能の低下を引き起こす損傷が存在しない可能性の増加が対象に割り当てられ得る。負のマーカーでは、測定濃度が閾値を下回る場合、（測定濃度が閾値を超える場合に割り当てられる可能性と比較して）腎機能の低下を引き起こす損傷が存在する可能性の増加が対象に割り当てられ；あるいは、測定濃度が閾値を超える場合、（測定濃度が閾値を下回る場合に割り当てられる可能性と比較して）腎機能の低下を引き起こす損傷が存在しない可能性の増加が対象に割り当てられ得る。
【００２７】
さらなる他の好ましい診断の実施形態では、これらの方法は、ＡＲＦの存在または非存在を診断することを含み、アッセイ結果を、ＡＲＦを引き起こす損傷の存在または非存在と相関させる。たとえば各測定濃度を閾値と比較してもよい。正のマーカーでは、測定濃度が閾値を超える場合、（測定濃度が閾値を下回る場合に割り当てられる可能性と比較して）ＡＲＦが存在する可能性の増加が対象に割り当てられ；あるいは、測定濃度が閾値を下回る場合、（測定濃度が閾値を超える場合に割り当てられる可能性と比較して）ＡＲＦが存在しない可能性の増加が対象に割り当てられ得る。負のマーカーでは、測定濃度が閾値を下回る場合、（測定濃度が閾値を超える場合に割り当てられる可能性と比較して）ＡＲＦが存在する可能性の増加が対象に割り当てられ；あるいは、測定濃度が閾値を超える場合、（測定濃度が閾値を下回る場合に割り当てられる可能性と比較して）ＡＲＦが存在しない可能性の増加が対象に割り当てられ得る。
【００２８】
さらなる他の好ましい診断の実施形態では、これらの方法は、腎代替療法の必要があると対象を診断することを含み、アッセイ結果を、腎代替療法の必要性と相関させる。たとえば各測定濃度を閾値と比較してもよい。正のマーカーでは、測定濃度が閾値を超える場合、（測定濃度が閾値を下回る場合に割り当てられる可能性と比較して）腎代替療法の必要性を生じさせる損傷が存在する可能性の増加が対象に割り当てられ；あるいは、測定濃度が閾値を下回る場合、（測定濃度が閾値を超える場合に割り当てられる可能性と比較して）腎代替療法の必要性を生じさせる損傷が存在しない可能性の増加が対象に割り当てられ得る。負のマーカーでは、測定濃度が閾値を下回る場合、（測定濃度が閾値を超える場合に割り当てられる可能性と比較して）腎代替療法の必要性を生じさせる損傷が存在する可能性の増加が対象に割り当てられ；あるいは、測定濃度が閾値を超える場合、（測定濃度が閾値を下回る場合に割り当てられる可能性と比較して）腎代替療法の必要性を生じさせる損傷が存在しない可能の増加が対象に割り当てられ得る。
【００２９】
さらなる他の好ましい診断の実施形態では、これらの方法は、腎臓移植の必要があると対象を診断することを含み、アッセイ結果を、腎臓移植の必要性と相関させる。たとえば各測定濃度を閾値と比較してもよい。正のマーカーでは、測定濃度が閾値を超える場合、（測定濃度が閾値を下回る場合に割り当てられる可能性と比較して）腎臓移植の必要性を生じさせる損傷が存在する可能性の増加が対象に割り当てられ；あるいは、測定濃度が閾値を下回る場合、（測定濃度が閾値を超える場合に割り当てられる可能性と比較して）腎臓移植の必要性を生じさせる損傷が存在しない可能性の増加が対象に割り当てられ得る。負のマーカーでは、測定濃度が閾値を下回る場合、（測定濃度が閾値を超える場合に割り当てられる可能性と比較して）腎臓移植の必要性を生じさせる損傷が存在する可能性の増加が対象に割り当てられ；あるいは、測定濃度が閾値を超える場合、（測定濃度が閾値を下回る場合に割り当てられる可能性と比較して）腎臓移植の必要性を生じさせる損傷が存在しない可能性の増加が対象に割り当てられ得る。
【００３０】
さらなる他の実施形態では、本明細書中に記載される腎臓の状態を評価する方法は、対象の腎損傷をモニタリングする方法、すなわち、腎機能に対する損傷、腎機能の低下、またはＡＲＦを罹患している対象において、腎機能が改善または悪化しているかどうかを評価する方法である。これらの実施形態では、アッセイ結果、たとえばインターロイキン１８結合タンパク質の測定濃度を、腎臓の状態の変化の存在または非存在と相関させる。以下は好ましいモニタリングの実施形態である。
【００３１】
好ましいモニタリングの実施形態では、これらの方法は、腎機能に対する損傷を罹患している対象の腎臓の状態をモニタリングすることを含み、アッセイ結果を、対象の腎臓の状態の変化の存在または非存在と相関させる。たとえば測定濃度を閾値と比較してもよい。正のマーカーでは、測定濃度が閾値を超える場合、腎機能の悪化が対象に割り当てられ；あるいは測定濃度が閾値を下回る場合、腎機能の改善が対象に割り当てられ得る。負のマーカーでは、測定濃度が閾値を下回る場合、腎機能の悪化が対象に割り当てられ；あるいは測定濃度が閾値を超える場合、腎機能の改善が対象に割り当てられ得る。
【００３２】
他の好ましいモニタリングの実施形態では、これらの方法は、腎機能の低下を罹患している対象の腎臓の状態をモニタリングすることを含み、アッセイ結果を、対象の腎臓の状態の変化の存在または非存在と相関させる。たとえば測定濃度を閾値と比較してもよい。正のマーカーでは、測定濃度が閾値を超える場合、腎機能の悪化が対象に割り当てられ；あるいは測定濃度が閾値を下回る場合、腎機能の改善が対象に割り当てられ得る。負のマーカーでは、測定濃度が閾値を下回る場合、腎機能の悪化が対象に割り当てられ；あるいは測定濃度が閾値を超える場合、腎機能の改善が対象に割り当てられ得る。
【００３３】
さらなる他の好ましいモニタリングの実施形態では、これらの方法は、急性腎不全を罹患している対象の腎臓の状態をモニタリングすることを含み、アッセイ結果を、対象の腎臓の状態の変化の存在または非存在と相関させる。たとえば測定濃度を閾値と比較してもよい。正のマーカーでは、測定濃度が閾値を超える場合、腎機能の悪化が対象に割り当てられ；あるいは、測定濃度が閾値を下回る場合、腎機能の改善が対象に割り当てられ得る。負のマーカーでは、測定濃度が閾値を下回る場合、腎機能の悪化が対象に割り当てられ；あるいは測定濃度が閾値を超える場合、腎機能の改善が対象に割り当てられ得る。
【００３４】
他のさらなる好ましいモニタリングの実施形態では、これらの方法は、腎前性、腎性、または腎後性のＡＲＦに関する１つまたは複数の既知のリスク因子が既に存在することにより腎機能に対する損傷のリスクがある対象の腎臓の状態をモニタリングすることを含み、アッセイ結果を、対象の腎臓の状態の変化の存在または非存在と相関させる。たとえば測定濃度を閾値と比較してもよい。正のマーカーでは、測定濃度が閾値を超える場合、腎機能の悪化が対象に割り当てられ；あるいは測定濃度が閾値を下回る場合、腎機能の改善が対象に割り当てられ得る。負のマーカーでは、測定濃度が閾値を下回る場合、腎機能の悪化が対象に割り当てられ；あるいは測定濃度が閾値を超える場合、腎機能の改善が対象に割り当てられ得る。
【００３５】
さらなる他の好ましいモニタリングの実施形態では、これらの方法は、腎機能に対して損傷を有する、またはそのリスクのある対象の腎臓の状態を、急性腎損傷の将来の持続に関してモニタリングすることを含む。本明細書中使用される「将来の持続」は、存在する急性腎損傷が、２１日、１４日、７日、５日、９６時間、７２時間、４８時間、３６時間、２４時間、および１２時間からなる群から選択される期間持続することを表す。特定の実施形態では、対象は、試料を得る時点で急性腎損傷を有する。これは、試料を得る時点で対象が急性腎損傷を有していなければならないと暗に意味することを意味してはおらず、むしろ急性腎損傷の発症時に、対象が、持続するであろう急性腎損傷を罹患していることを意味する。様々な実施形態では、アッセイ結果、たとえばインターロイキン１８結合タンパク質の測定濃度を、対象の急性腎損傷の将来の持続と相関させる。たとえば測定濃度を閾値と比較してもよい。正のマーカーでは、測定濃度が閾値を超える場合、急性腎損傷の将来の持続が対象に割り当てられ；あるいは測定濃度が閾値を下回る場合、腎機能の将来の改善が対象に割り当てられ得る。負のマーカーでは、測定濃度が閾値を下回る場合、急性腎損傷の将来の持続が対象に割り当てられ；あるいは、測定濃度が閾値を超える場合、腎機能の将来の改善が対象に割り当てられ得る。
【００３６】
さらなる他の実施形態では、本明細書中記載される腎臓の状態を評価する方法は、対象の腎損傷を分類する方法、すなわち、対象の腎損傷が、腎前性、腎性、または腎後性であるかどうかを決定し、および／または、これらの分類を、急性尿細管傷害、急性糸球体腎炎  急性尿細管間質性腎炎、急性血管性腎症、もしくは浸潤性疾患などのサブクラスにさらに細分し、および／または、対象が特定のＲＩＦＬＥステージへ進行する可能性を割り当てる方法である。これらの実施形態では、アッセイ結果、たとえばインターロイキン１８結合タンパク質の測定濃度を、特定の分類および／またはサブクラスと相関させる。以下は好ましい分類の実施形態である。
【００３７】
好ましい分類の実施形態では、これらの方法は、対象の腎損傷が腎前性、腎性、または腎後性であるかどうかを決定すること、および／または急性尿細管傷害、急性糸球体腎炎  急性尿細管間質性腎炎、急性血管性腎症、もしくは浸潤性疾患などのサブクラスにこれらの分類を細分すること、および／または対象が特定のＲＩＦＬＥステージへ進行する可能性を割り当てることを含み、アッセイ結果を、対象の損傷分類と相関させる。たとえば測定濃度を閾値と比較してもよく、測定濃度が閾値を超える場合、特定の分類が割り当てられ；あるいは、測定濃度が閾値を下回る場合、異なる分類が対象に割り当てられ得る。
【００３８】
これらの方法での使用に望ましい閾値に達するために、様々な方法が当業者によって使用され得る。たとえば閾値は、正常な対象で測定した腎損傷マーカーの７５、８５、９０、９５、または９９パーセンタイルを表す濃度を選択することにより、そのような正常な対象集団から決定され得る。あるいは、閾値は、「疾患を有する」対象集団、たとえばある損傷（たとえばＡＲＦへの進行、または死亡、透析、腎臓移植などの他のいくつかの臨床転帰）を罹患している、またはある損傷の素因を有する対象集団から、そのような対象で測定した腎損傷マーカーの７５、８５、９０、９５、または９９パーセンタイルを表す濃度を選択することにより決定され得る。別の代替的な方法では、閾値は、同じ対象の腎損傷マーカーの以前の測定値から決定してもよく、すなわち対象の腎損傷マーカーのレベルの経時的な変化を、対象にリスクを割り当てるために使用してもよい。
【００３９】
しかしながら、上記の論述は、本発明の腎損傷マーカーを対応する個々の閾値と比較しなければならないことを意味するものではない。アッセイ結果を組み合わせる方法は、多変量ロジスティック回帰、対数線形モデリング、ニューラルネットワーク解析、ｍのうちのｎ分析（ｎ−ｏｆ−ｍ  ａｎａｌｙｓｉｓ）、決定木解析、マーカー比の計算などの使用を含み得る。この列挙は限定を意味するものではない。これらの方法で、個々のマーカーを組み合わせることにより決定される複合的な結果を、それがマーカー自体であるかのように扱ってもよく、すなわち個々のマーカーに関する本明細書中に記載される複合的な結果の閾値を決定してもよく、個々の患者の複合的な結果を、この閾値と比較してもよい。
【００４０】
特定の試験が２つの集団を区別する能力は、ＲＯＣ解析を使用して確立することができる。たとえば、腎臓の状態の１つまたは複数の将来の変化に対して素因を有する「第１の」亜集団、および素因を有しない「第２の」亜集団から確立したＲＯＣ曲線を使用して、ＲＯＣ曲線を計算することができ、曲線下面積は試験の質の尺度を提供する。好ましくは、本明細書中記載される試験は、０．５超、好ましくは少なくとも０．６、より好ましくは０．７、さらにより好ましくは少なくとも０．８、さらにより好ましくは少なくとも０．９、および最も好ましくは少なくとも０．９５のＲＯＣ曲線下面積を提供する。
【００４１】
特定の態様では、１つまたは複数の腎損傷マーカー、またはそのようなマーカーの複合物の測定濃度は、連続変数として扱ってもよい。たとえば、いずれかの特定の濃度を、対象の腎機能の将来の低下、損傷の存在、分類などの対応する確率に変換することができる。さらなる別の代替的な方法では、閾値は、「第１の」亜集団（たとえば腎臓の状態の１つまたは複数の将来の変化、損傷の存在、分類などに対して素因を有する）およびそのような素因を有しない「第２の」亜集団などの「ビン」に、対象の集団を分ける際に、特異性および感度の許容可能なレベルを提供することができる。閾値は、試験の精度に関する以下の尺度の１つまたは複数により、この第１および第２の集団を分けるために選択される：
１超、好ましくは少なくとも約２以上または約０．５以下、より好ましくは少なくとも約３以上または０．３３以下、さらにより好ましくは少なくとも約４以上または約０．２５以下、さらにより好ましくは少なくとも約５以上または約０．２以下、および最も好ましくは少なくとも約１０以上または約０．１以下のオッズ比；
０．５超、好ましくは少なくとも約０．６、より好ましくは少なくとも約０．７、さらにより好ましくは少なくとも０．８、さらにより好ましくは少なくとも約０．９、および最も好ましくは約０．９５の特異性（この場合、対応する感度は０．２超、好ましくは約０．３超、より好ましくは約０．４超、さらにより好ましくは少なくとも約０．５、さらにより好ましくは約０．６、さらにより好ましくは約０．７超、さらにより好ましくは約０．８超、より好ましくは約０．９超、および最も好ましくは約０．９５超である）；
０．５超、好ましくは少なくとも約０．６、より好ましくは少なくとも約０．７、さらにより好ましくは少なくとも約０．８、さらにより好ましくは少なくとも約０．９、および最も好ましくは少なくとも約０．９５の感度（この場合、対応する特異性は、０．２超、好ましくは約０．３超、より好ましくは約０．４超、さらにより好ましくは少なくとも約０．５超、さらにより好ましくは約０．６、さらにより好ましくは約０．７超、さらにより好ましくは約０．８超、より好ましくは約０．９超、および最も好ましくは約０．９５超である）；
少なくとも７５％の特異性と組み合わせた少なくとも約７５％の感度；
１超、少なくとも約２、より好ましくは少なくとも約３、さらにより好ましくは少なくとも約５、および最も好ましくは少なくとも約１０の正の尤度比（感度／（１−特異性）として計算）；または
１未満、約０．５以下、より好ましくは約０．３以下、および最も好ましくは約０．１以下の負の尤度比（（１−感度）／特異性として計算）。
上記の測定値のいずれかの文脈での用語「約」は、所定の測定値の±５％を表す。
【００４２】
また、複数の閾値を、対象の腎臓の状態を評価するために使用してもよい。たとえば腎臓の状態の１つまたは複数の将来の変化、損傷の発生、分類などに対して素因を有する「第１の」亜集団と、そのような素因を有しない「第２の」亜集団とを、単一の群に組み合わせることができる。次いでこの群を、３つ以上の等しいパート（下位区分の数に応じた三分位数、四分位数、五分位数などとして知られる）に細分する。どの下位区分に該当するかに基づき、オッズ比を対象に割り当てる。三分位数を検討する場合、最低または最高の三分位数は、他の下位区分との比較のための基準として使用することができる。この基準となる下位区分には、オッズ比１を割り当てる。第２三分位には、その第１三分位に対するオッズ比を割り当てる。すなわち、第２三分位の人は、第１三分位の人と比較すると、腎臓の状態の１つまたは複数の将来の変化を罹患する可能性が３倍高い。第３三分位にも、その第１三分位に対するオッズ比を割り当てる。
【００４３】
特定の実施形態では、アッセイ方法はイムノアッセイである。このようなアッセイで使用する抗体は、関心対象の完全長の腎損傷マーカーに特異的に結合し、また以下に定義されるように、これに「関連する」１つまたは複数のポリペプチドにも結合し得る。多くのイムノアッセイのフォーマットは当業者に知られている。好ましい体液試料は、尿、血液、血清、唾液、涙液、および血漿からなる群から選択される。
【００４４】
上述の方法のステップは、腎損傷マーカーのアッセイ結果が、本明細書中に記載される方法での単離に使用されることを意味するように解釈すべきではない。むしろ、追加的な変数または他の臨床兆候が、本明細書中記載される方法に含まれていてもよい。たとえばリスク階層化、診断、分類、モニタリングなどの方法は、アッセイ結果を、人口統計情報（たとえば体重、性別、年齢、人種）、病歴（たとえば家族歴、手術の種類、動脈瘤、うっ血性心不全、子癇前症、子癇、糖尿病、高血圧、冠動脈疾患、タンパク尿、腎不全、または敗血症などの既に存在する疾患、ＮＳＡＩＤ、シクロスポリン、タクロリムス、アミノグリコシド、ホスカルネット、エチレングリコール、ヘモグロビン、ミオグロビン、イホスファミド、重金属、メトトレキサート、放射線不透過造影剤、またはストレプトゾトシンなどの毒素曝露の種類）、臨床変数（たとえば血圧、体温、呼吸数）、リスクスコア（ＡＰＡＣＨＥスコア、ＰＲＥＤＩＣＴスコア、ＵＡ／ＮＳＴＥＭＩに関するＴＩＭＩリスクスコア、フラミンガムリスクスコア）、糸球体濾過量、推定糸球体濾過量、尿生成速度、血清または血漿中クレアチニン濃度、尿中クレアチニン濃度、ナトリウムの部分排泄率、尿中ナトリウム濃度、血清または血漿中クレアチニンに対する尿中クレアチニンの比率、尿比重、尿浸透圧、血漿中尿素窒素に対する尿中尿素窒素の比率、血漿中のクレアチニンに対するＢＵＮの比率、尿中ナトリウム／（尿中クレアチニン／血漿中クレアチニン）として計算した腎不全指数、血清中または血漿中好中球ゼラチナーゼ（ＮＧＡＬ）濃度、尿中ＮＧＡＬ濃度、血清または血漿中シスタチンＣ濃度、血清または血漿中心筋トロポニン濃度、血清または血漿中ＢＮＰ濃度、血清または血漿中ＮＴｐｒｏＢＮＰ濃度、ならびに血清または血漿中ｐｒｏＢＮＰ濃度からなる群から選択される、対象に関して測定された１つまたは複数の変数と組み合わせることができる。１つまたは複数の腎損傷マーカーのアッセイ結果と組み合わせることができる腎機能の他の測定値は、本明細書において以下におよびＨａｒｒｉｓｏｎ’ｓ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，  １７ｔｈ  Ｅｄ．，  ＭｃＧｒａｗ  Ｈｉｌｌ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ｐａｇｅｓ  １７４１−１８３０、およびＣｕｒｒｅｎｔ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ＆  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ２００８，  ４７ｔｈ  Ｅｄ，  ＭｃＧｒａｗ  Ｈｉｌｌ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ｐａｇｅｓ  ７８５−８１５に記載されており、各文献全体は本明細書中参照として援用されている。
【００４５】
１超のマーカーを測定する場合、個々のマーカーを、同時に得た試料で測定してもよく、異なる（たとえばより早いまたはより遅い）時間で得た試料から決定してもよい。また個々のマーカーは、同じまたは異なる体液試料で測定してもよい。たとえば１つの腎損傷マーカーを、血清または血漿の試料で測定してもよく、別の腎損傷マーカーを、尿の試料で測定してもよい。さらに、可能性の割り当ては、１つまたは複数の追加的な変数の経時的な変化と個々の腎損傷マーカーのアッセイの結果を組み合わせてもよい。
【００４６】
様々な関連する態様において、本発明は、本明細書中に記載される方法を行うデバイスおよびキットにも関する。適切なキットは、記載される閾値の比較を行うための説明書と共に、記載される腎損傷マーカーの少なくとも１つに関するアッセイを行うために十分な試薬を含む。
【００４７】
特定の実施形態では、このようなアッセイを行う試薬はアッセイデバイスに提供されており、当該アッセイデバイスは、当該キットに含むことができる。好ましい試薬は、１つまたは複数の固相抗体を含み、固相抗体は、固相支持体に結合した意図されるバイオマーカー標的を検出する抗体を含む。サンドイッチイムノアッセイの場合では、このような試薬は、検出可能な標識に結合した意図されるバイオマーカー標的を検出する抗体を含む、１つまたは複数の検出可能に標識した抗体をも含むことができる。アッセイデバイスの一部として提供され得る追加的な任意の要素は、以下で説明される。
【００４８】
検出可能な標識は、それ自体が検出可能である分子（たとえば蛍光部分、電気化学的な標識、ｅｃｌ（電気化学的な発光）標識、金属キレート、コロイド金属粒子など）、ならびに、検出可能な反応産物（たとえば西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼなどの酵素）の産生により、またはそれ自体が検出可能であり得る特異的結合分子（たとえば二次抗体に結合する標識した抗体、ビオチン、ジゴキシゲニン、マルトース、オリゴヒスチジン、２，４−ジニトロベンゼン（ｄｉｎｔｒｏｂｅｎｚｅｎｅ）、フェニルヒ酸（ｐｈｅｎｙｌａｒｓｅｎａｔｅ）、ｓｓＤＮＡ、ｄｓＤＮＡなど）の使用を介して間接的に検出され得る分子を含んでもよい。
【００４９】
シグナル発生要素からのシグナルの生成は、当該分野でよく知られた様々な光学的方法、聴覚的方法、および電気化学的方法を使用して行うことができる。検出形式の例として、蛍光、放射化学的検出、反射率、吸光度、電流測定、コンダクタンス、インピーダンス、インターフェロメトリー、エリプリメトリーなどが挙げられる。これら特定の方法では、固相抗体を、シグナル生成のため変換器（たとえば回折格子、電気化学センサーなど）に結合させて、他方では、固相抗体から空間的に離れている変換器（たとえば励起光源および光学検出器を使用する蛍光光度計）によりシグナルを生成する。この列挙は限定を意味するものではない。任意選択で標識分子の必要がなくなる抗体ベースのバイオセンサーもまた、検体の存在または量を決定するために使用してもよい。
【００５０】
発明の詳細な説明
本発明は、１つまたは複数の腎損傷マーカーの測定を介した、腎機能に対する損傷、腎機能の低下、および／または急性腎不全を罹患している、または罹患するリスクのある対象の診断、鑑別診断、リスク階層化、モニタリング、分類、および治療レジメンの決定のための方法および組成物に関する。様々な実施形態では、インターロイキン１８結合タンパク質またはそれに関連する１つもしくは複数のマーカーの測定濃度を、対象の腎臓の状態と相関させる。
【００５１】
本明細書の目的のため、以下の定義を使用する。
本明細書中使用される「腎機能に対する損傷」は、腎機能の測定値の急激な（１４日以内、好ましくは７日以内、より好ましくは７２時間以内、およびさらにより好ましくは４８時間以内の）測定可能な低下である。このような損傷は、たとえば、糸球体濾過量または推算ＧＦＲ、尿量の減少、血清クレアチニンの増加、血清中シスタチンＣの増加、腎代替療法の必要性などにより、同定され得る。「腎機能の改善」は、腎機能の測定値の急激な（１４日以内、好ましくは７日以内、より好ましくは７２時間以内、およびさらにより好ましくは４８時間以内の）測定可能な増加である。ＧＦＲを測定および／または推定する好ましい方法は、本明細書中以下に記載されている。
本明細書中使用される「腎機能の低下」は、血清クレアチニンの０．１ｍｇ／ｄＬ（&#8805;８．８μｍｏｌ／Ｌ）以上の絶対的な増加、血清クレアチニンの２０％（ベースラインから１．２倍）以上のパーセンテージの増加、または尿量の減少（１時間あたり０．５ｍｌ／ｋｇ未満の乏尿が報告されている）により同定される、腎機能の急激な（１４日以内、好ましくは７日以内、より好ましくは７２時間以内、およびさらにより好ましくは４８時間以内の）低下である。
本明細書中使用される「急性腎不全」または「ＡＲＦ」は、血清クレアチニンの０．３ｍｇ／ｄｌ（&#8805;２６．４μｍｏｌ／ｌ）以上の絶対的な増加、血清クレアチニンの５０％（ベースラインから１．５倍）以上のパーセンテージの増加、尿量の減少（少なくとも６時間にわたる１時間あたり０．５ｍｌ／ｋｇ未満の乏尿の報告）により同定される急激な（１４日以内、好ましくは７日以内、より好ましくは７２時間以内、およびさらにより好ましくは４８時間以内の）腎機能の低下である。この用語は“急性腎臓障害”または“ＡＫＩ”と同義である。
【００５２】
これに関して、当業者は、イムノアッセイから得られるシグナルが、１つまたは複数の抗体および標的生体分子（すなわち解析物）と、抗体が結合する必要なエピトープを含むポリペプチドとの間で形成される複合体の直接的な結果であることを理解するものである。このようなアッセイは、完全長のバイオマーカーを検出して、アッセイ結果は関心対象のバイオマーカー濃度として表記され得るが、実際にアッセイ由来のシグナルは、試料に存在するそのようなすべての「免疫反応性」ポリペプチドの結果である。またバイオマーカーの発現は、タンパク質の測定（たとえばドットブロット、ウェスタンブロット、クロマトグラフィー法、質量分析など）、および核酸の測定（ｍＲＮＡの定量化）を含むイムノアッセイ以外の手段により決定してもよい。この列挙は限定を意味するものではない。
【００５３】
本明細書中使用される用語「インターロイキン１８結合タンパク質」は、生物学的な試料に存在する、インターロイキン１８結合タンパク質の前駆体（ヒト配列Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  Ｏ９５９９８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１））由来の１つまたは複数のポリペプチドを表す。
【化１】
2017534874.tif 000004
【００５４】
以下のドメインが、インターロイキン１８結合タンパク質で同定されている。
【化２】
2017534874.tif 000005
【００５５】
本明細書中使用される、検体の「存在または量とシグナルを関連させること」との文言は、この理解を反映するものである。アッセイシグナルは、概して、関心対象の検体の既知の濃度を使用して計算される標準曲線の使用を介して検体の存在または量に関連している。この用語が本明細書中で使用されるように、アッセイが検体の生理学的に関連する濃度の存在または量を表す検出可能なシグナルを生成できる場合、アッセイは検体を「検出するように構成されている」。抗体のエピトープはアミノ酸約８個の次数であるため、関心対象のマーカーを検出するように構成されたイムノアッセイは、これらのポリペプチドがアッセイで使用される抗体または複数の抗体に結合するために必要なエピトープを含む限り、このマーカーの配列に関連したポリペプチドをも検出する。
【００５６】
本明細書中に記載の腎損傷マーカーのうちの１つなどのバイオマーカーに関して本明細書中で使用される用語「関連マーカー」は、マーカー自体の代替物または独立したバイオマーカーとして検出され得る、特定のマーカーまたはその生合成の親（ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  ｐａｒｅｎｔ）の１つまたは複数のフラグメント、変異体などを表す。またこの用語は、生物学的試料に存在する、結合タンパク質、受容体、ヘパリン、脂質、糖などの追加的な種と複合体を形成したバイオマーカーの前駆体に由来する１つまたは複数のポリペプチドをも表す。
【００５７】
用語「正の」マーカーは、この用語が本明細書中で使用される際は、疾患または病態を罹患していない対象と比較して、当該疾患または病態を罹患した対象で上昇したと決定されるマーカーを表す。用語「負の」マーカーは、この用語が本明細書中で使用される際は、疾患または病態を罹患していない対象と比較して、当該疾患または病態を罹患した対象で低下したと決定されるマーカーを表す。
【００５８】
本明細書中使用される用語「対象」は、ヒトまたは非ヒトの生物を表す。よって本明細書中に記載される方法および組成物は、ヒトの疾患および獣医学的な疾患の両方に使用可能である。さらに、対象は好ましくは生存する生物であるが、本明細書中記載される発明は、死後の解析にも使用してよい。好ましい対象はヒトであり、最も好ましくは「患者」であり、これは本明細書中使用されるように、疾患または病態の医療を受けている生存するヒトを表す。これは、病態の兆候に関して試験されている、定義された疾患を有さない人物を含む。
【００５９】
好ましくは、検体は、ある試料で測定される。このような試料は、対象から得てもよく、または対象に提供されるよう意図された生物学的物質から得てもよい。たとえば、試料は、対象への潜在的な移植に関して評価される腎臓から得てもよく、検体の測定を使用して、既に存在する損傷に関して腎臓を評価してもよい。好ましい試料は体液試料である。
【００６０】
本明細書中で使用される用語「体液試料」は、患者または移植ドナーなどの関心対象の診断、予後、分類、または評価の目的のために得た体液の試料を表す。特定の実施形態では、そのような試料は、進行中の病態の転帰または病態に及ぼす治療レジメンの効果を決定する目的のために得てもよい。好ましい体液試料として、血液、血清、血漿、脳脊髄液、尿、唾液、痰、および胸水が挙げられる。さらに、当業者は、特定の体液試料が、分画または精製手法、たとえば血清または血漿の成分への全血の分離の後でより容易に解析され得ることを理解するものである。
【００６１】
本明細書中使用される用語「診断」は、当業者が、患者が所定の疾患または病態を罹患しているかどうかの確率（「可能性」）を推定かつ／または決定できる方法を表す。本発明の場合、「診断」は、試料を得てアッセイを行う対象の急性腎損傷またはＡＲＦの診断（すなわち発生の有無）を得るために、任意選択で他の臨床特徴と共に、本発明の腎損傷マーカーに関するアッセイ、最も好ましくはイムノアッセイの結果を使用することを含む。このような診断が「決定される」とは、診断が１００％正確であることを暗に意味しないことを意味する。多くのバイオマーカーは複数の病態を表す。熟練した臨床医は、他に情報がない状態で（ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ  ｖａｃｕｕｍ）バイオマーカーの結果を使用せず、むしろ試験結果を、診断に達するために他の臨床兆候と共に使用する。よって、既定の診断閾値の１側面で測定したバイオマーカーのレベルは、既定の診断閾値の他の側面で測定したレベルと比較して、対象に疾患が存在する可能性がより大きいことを示す。
【００６２】
また、予後のリスクは、所定の過程または転帰が起こる確率（「可能性」）のシグナルである。予後指標のレベルまたはレベルの変化は、次に、病的状態（たとえば腎機能の悪化、将来のＡＲＦ、または死亡）の確率の増加に関連し、患者の有害な転帰の「可能性の増加を示す」とされる。
【００６３】
マーカーアッセイ
【００６４】
一般的に、イムノアッセイは、関心対象のバイオマーカーを含むまたは含むことが疑われる試料に、バイオマーカーに特異的に結合する少なくとも１つの抗体を接触させることを含む。次に、試料中のポリペプチドを抗体に結合させることにより形成される複合体の存在または量を示すシグナルが生成される。次に、このシグナルを、試料中のバイオマーカーの存在または量と関連させる。バイオマーカーの検出および解析のための多くの方法およびデバイスが当業者によく知られている。たとえば米国特許第６，１４３，５７６号；第６，１１３，８５５号；第６，０１９，９４４号；第５，９８５，５７９号；第５，９４７，１２４号；第５，９３９，２７２号；第５，９２２，６１５号；第５，８８５，５２７号；第５，８５１，７７６号；第５，８２４，７９９号；第５，６７９，５２６号；第５，５２５，５２４号；および第５，４８０，７９２号、ならびにＴｈｅ  Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ，  Ｄａｖｉｄ  Ｗｉｌｄ，  ｅｄ．  Ｓｔｏｃｋｔｏｎ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  １９９４を参照されたい。表、図面、および特許請求の範囲をすべて含む各文献全体が参照として本明細書中に援用されている。
【００６５】
当該分野で知られているアッセイデバイスおよび方法は、関心対象のバイオマーカーの存在または量に関連するシグナルを生成するために、様々なサンドイッチアッセイ、競合アッセイ、または非競合アッセイのフォーマットで標識した分子を利用することができる。適切なアッセイフォーマットは、クロマトグラフィー、質量分析、およびタンパク質の「ブロッティング」の方法をも含む。さらに、バイオセンサーおよび光学的なイムノアッセイなどの特定の方法およびデバイスは、標識分子を必要とすることなく検体の存在または量を決定するために使用され得る。たとえば米国特許第５，６３１，１７１号；および５，９５５，３７７号を参照されたい。表、図面、および特許請求の範囲のすべてを含む各文献全体は、参照として本明細書中に援用されている。また当業者は、限定するものではないが、Ｂｅｃｋｍａｎ  ＡＣＣＥＳＳ（登録商標）、Ａｂｂｏｔｔ  ＡＸＳＹＭ（登録商標）、Ｒｏｃｈｅ  ＥＬＥＣＳＹＳ（登録商標）、Ｄａｄｅ  Ｂｅｈｒｉｎｇ  ＳＴＲＡＴＵＳ（登録商標）システムを含むロボット器具が、イムノアッセイを行うことができるイムノアッセイの分析器の中に含まれることを理解している。しかしながら、たとえば酵素結合免疫測定法（ＥＬＩＳＡ）、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、競合結合アッセイなどといったいかなる適切なイムノアッセイも利用してもよい。
【００６６】
抗体または他のポリペプチドは、アッセイで使用するための様々な固相支持体上に固定され得る。特異的な結合部材を固定するために使用され得る固相は、固相結合アッセイにおける固相として開発および／または使用されたものを含む。適切な固相の例として、膜フィルター、セルロースベースの紙、ビーズ（重合体、ラテックス、および常磁性の粒子を含む）、ガラス、シリコンウェーハー、マイクロ粒子、ナノ粒子、ＴｅｎｔａＧｅｌ、ＡｇｒｏＧｅｌ、ＰＥＧＡゲル、ＳＰＯＣＣゲル、ならびに、マルチウェルプレートが挙げられる。アッセイストリップは、固相支持体上のアレイにおいて１つまたは複数の抗体をコーティングすることによって調製することができる。次にこのストリップを、試験試料に浸し、次いで洗浄ステップおよび検出ステップにより迅速に処理して、発色スポットなどの測定可能なシグナルを生成することができる。抗体または他のポリペプチドは、アッセイデバイスの表面に直接接合または間接的結合のいずれかにより、アッセイデバイスの特定の領域に結合させてもよい。後者の事例において、抗体または他のポリペプチドを、粒子または他の固相支持体上に固定して、固相支持体をデバイスの表面に固定してもよい。
【００６７】
生物学的アッセイには検出方法が必要であり、最も一般的な結果の定量化方法のうちの１つは、試験される生物系における成分のうちの１つに対して親和性を有するタンパク質または核酸に検出可能な標識を結合させることである。検出可能な標識は、それら自体が検出可能である分子（例えば、蛍光部分、電気化学的な標識、金属キレートなど）、ならびに、検出可能な反応産物の産生により（例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼなどの酵素）または、それ自体が検出可能でありうる特異的結合分子（例えばビオチン、ジゴキシゲニン、マルトース、オリゴヒスチジン、２，４−ジニトロベンゼン（ｄｉｎｔｒｏｂｅｎｚｅｎｅ）、フェニルヒ酸（ｐｈｅｎｙｌａｒｓｅｎａｔｅ）、ｓｓＤＮＡ、ｄｓＤＮＡなど）により、間接的に検出し得る分子を含み得る。
【００６８】
固相および検出可能な標識コンジュゲートの調製は、多くの場合、化学的架橋剤の使用を含む。架橋試薬は、少なくとも２つの反応基を含有し、概して（同一反応基を含有する）ホモ官能性架橋剤（ｈｏｍｏｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｃｒｏｓｓ−ｌｉｎｋｅｒ）と、（同一でない反応基を含有する）ヘテロ官能性架橋剤（ｈｅｔｅｒｏｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｃｒｏｓｓ−ｌｉｎｋｅｒ）とに分けられる。アミンを介してスルフヒドリルに結合する、あるいは非特異的に反応するホモ二官能性架橋剤は、多くの商業的供給源から入手可能である。マレイミド、ハロゲン化アルキルおよびアリール、α&#8722;ハロアシル、ならびにピリジルジスルフィドは、チオール反応基である。マレイミド、ハロゲン化アルキルおよびアリール、ならびにα&#8722;ハロアシルは、チオールエーテル結合を形成するためにスルフヒドリルと反応し、一方でピリジルジスルフィドは、混合ジスルフィドを生成するためにスルフヒドリルと反応する。ピリジルジスルフィド生成物は、開裂可能である。イミドエステルも、タンパク質&#8722;タンパク質架橋に非常に有用である。コンジュゲーションを成功させるために各々が異なる特性を組み合わせる様々なヘテロ二官能性架橋剤が市販されている。
【００６９】
特定の態様では、本発明は、記載される腎損傷マーカーの解析のためのキットを提供する。本キットは、腎損傷マーカーの少なくとも１つの抗体を含む少なくとも１つの試験試料の解析のための試薬を含む。また本キットは、本明細書中に記載される診断および／または予後相関のうちの１つまたは複数を行うためのデバイスおよび説明書を含むことができる。好ましいキットは、検体に関して、サンドイッチアッセイを実施するための抗体の対、または、競合アッセイを実行するための標識された種を含む。好ましくは、抗体の対は、固相にコンジュゲートされる第１の抗体と、検出可能な標識にコンジュゲートされる第２の抗体とを含み、第１の抗体および第２の抗体は、それぞれ腎損傷マーカーに結合する。最も好ましくは、抗体の各々は、モノクロナール抗体である。キットの使用および相関を行うための説明書は、その製造、輸送、販売、または使用の間のいかなる時にもキットに添付またはキットに付随している、記載または記録されたいずれかの材料を表すラベルの形態とすることができる。たとえば、ラベリングという用語は、広告のビラおよびパンフレット、梱包材、説明書、オーディオまたはビデオカセット、コンピュータディスク、ならびにキットに直接刻まれた書き込みを含む。
【００７０】
抗体
【００７１】
本明細書中使用される用語「抗体」は、抗原またはエピトープに特異的に結合できる免疫グロブリン遺伝子、複数の免疫グロブリン遺伝子、またはそのフラグメントに由来する、それらをモデルとする、またはそれらにより実質的にコードされている、ペプチドまたはポリペプチドを表す。たとえばＦｕｎｄａｍｅｎｔａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，  ３ｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｗ．Ｅ．  Ｐａｕｌ，  ｅｄ．，  Ｒａｖｅｎ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｎ．Ｙ．  （１９９３）；  Ｗｉｌｓｏｎ  （１９９４；  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  Ｍｅｔｈｏｄｓ  １７５：２６７−２７３；  Ｙａｒｍｕｓｈ  （１９９２）  Ｊ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２５：８５−９７を参照されたい。用語抗体は、抗原結合能を保持する抗原結合部分、すなわち「抗原結合部位」（たとえばフラグメント、サブシークエンス、相補性決定領域（ＣＤＲ））を含み、（ｉ）Ｆａｂフラグメント、ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ、およびＣＨ１ドメインからなる一価のフラグメント；（ｉｉ）Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、ヒンジ領域でジスルフィド架橋により結合した２つのＦａｂフラグメントを含む二価のフラグメント；（ｉｉｉ）ＶＨおよびＣＨ１ドメインからなるＦｄフラグメント；（ｉｖ）抗体のシングルアームのＶＬおよびＶＨドメインからなるＦｖフラグメント、（ｖ）ＶＨドメインからなるｄＡｂフラグメント（Ｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，  （１９８９）  Ｎａｔｕｒｅ  ３４１：５４４−５４６）、ならびに（ｖｉ）単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。一本鎖抗体もまた、用語「抗体」に参照として含まれている。
【００７２】
本明細書中に記載されるイムノアッセイに使用される抗体は、好ましくは、本発明の腎損傷マーカーに特異的に結合する。用語「特異的に結合する」は、上述のように、抗体が、結合するエピトープを提示する任意のポリペプチドに結合するため、意図する標的部位に独占的に抗体が結合することを表すことを意図していない。むしろ、意図する標的の親和性が、適切なエピトープを提示しない非標的分子の親和性と比較して約５倍大きい場合に、抗体は「特異的に結合する」。好ましくは、抗体の親和性は、非標的分子に対するその親和性よりも、標的分子に関して少なくとも約５倍、好ましくは約１０倍、より好ましくは２５倍、さらにより好ましくは５０倍、および最も好ましくは１００倍以上大きい。好ましい実施形態では、好ましい抗体は、少なくとも約１０７Ｍ−１、好ましくは約１０８Ｍ−１〜約１０９Ｍ−１、約１０９Ｍ−１〜約１０１０Ｍ−１、または約１０１０Ｍ−１〜約１０１２Ｍ−１の親和性で結合する。
【００７３】
親和性は、Ｋｄ＝ｋｏｆｆ／ｋｏｎとして計算する（ｋｏｆｆは解離速度定数であり、ｋｏｎは会合速度定数であり、Ｋｄは平衡定数である）。親和性は、様々な濃度（ｃ）の標識リガンドの結合分画（ｒ）を測定することにより、平衡時に決定することができる。このデータを、スキャッチャードの等式ｒ／ｃ＝Ｋ（ｎ−ｒ）を使用してグラフにする：式中、ｒ＝平衡時の結合したリガンドのモル数／受容体のモル数；ｃ＝平衡時の遊離のリガンド濃度；Ｋ＝平衡会合定数；およびｎ＝受容体１分子あたりのリガンド結合部位の数。グラフを用いた解析により、ｒ／ｃを、Ｘ軸上のｒに対してＹ軸上にプロットすることにより、スキャッチャードプロットを生成する。スキャッチャード解析による抗体の親和性の測定は当該分野でよく知られている。たとえばｖａｎ  Ｅｒｐ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ  １２：  ４２５−４３，  １９９１；  Ｎｅｌｓｏｎ  ａｎｄ  Ｇｒｉｓｗｏｌｄ，  Ｃｏｍｐｕｔ．  Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｐｒｏｇｒａｍｓ  Ｂｉｏｍｅｄ．  ２７：  ６５−８，  １９８８を参照とされたい。
【００７４】
用語「エピトープ」は、抗体に特異的に結合できる抗原決定基を表す。通常、エピトープは、アミノ酸または糖側鎖などの分子の化学的に活性な表面群別からなり、通常、特定の３次元構造の特徴、および特定の電荷の特徴を有する。コンフォメーショナルエピトープおよび非コンフォメーショナルエピトープは、変性溶媒の存在下で後者ではなく前者に対する結合が喪失する点で、区別される。
【００７５】
多くの刊行物が、選択された検体への結合に関してポリペプチドのライブラリーを生成およびスクリーニングするためにファージディスプレイ技術の使用を論述している。たとえばＣｗｉｒｌａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ  ８７，  ６３７８−８２，  １９９０；  Ｄｅｖｌｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４９，  ４０４−６，  １９９０，  Ｓｃｏｔｔ  ａｎｄ  Ｓｍｉｔｈ，  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４９，  ３８６−８８，  １９９０；およびＬａｄｎｅｒらの米国特許第５，５７１，６９８号を参照されたい。ファージディスプレイ法の基本的な概念は、スクリーニングされるポリペプチドをコードするＤＮＡと当該ポリペプチドとの間の物理的会合を確立することである。この物理的会合は、ポリペプチドをコードするファージゲノムを包有するカプシドの一部としてのポリペプチドを表示するファージ粒子により、提供される。ポリペプチドとその遺伝的物質との間の物理的会合の確立により、異なるポリペプチドを含有する非常に多数のファージを同時に大量にスクリーニングすることができる。ある標的に対して親和性を有するポリペプチドを表示するファージは、当該標的に結合し、これらのファージを、当該標的に対する親和性スクリーニングにより濃縮する。これらファージによって表示されるポリペプチドの同一性を、各ファージのゲノムから決定することができる。次に、これらの方法を使用して、所望の標的に関する結合親和性を有すると同定されたポリペプチドを、従来の方法によりバルクで合成することができる。たとえば米国特許第６，０５７，０９８号を参照されたい。表、図面、および特許請求の範囲のすべてを含むこの文献全体は、本明細書中参照として援用されている。
【００７６】
次に、これらの方法により生成された抗体を、精製した関心対象のポリペプチドに対する親和性および特異性に関する第１のスクリーニングにより、および必要であれば、結果を、結合から除外されることが望ましいポリペプチドに対する抗体の親和性および特異性と比較することにより、選択してもよい。このスクリーニングの手法は、精製したポリペプチドをマイクロタイタープレートの別々のウェルに固定することを伴い得る。次に、潜在的な抗体または抗体群を含む溶液を、それぞれのマイクロタイターウェルに入れ、約３０分〜２時間インキュベートする。次にマイクロタイターウェルを洗浄し、標識した二次抗体（たとえば産生した抗体がマウスの抗体である場合、アルカリホスファターゼにコンジュゲートした抗マウス抗体）をウェルに添加し、約３０分間インキュベートし、次に洗浄する。基質をウェルに添加すると、固定したポリペプチドに対する抗体が存在する場合に着色反応が起こる。
【００７７】
次に、このようにして同定された抗体を、選択されたアッセイ設計における親和性および特異性に関してさらに解析してもよい。標的タンパク質に関するイムノアッセイの開発では、精製標的タンパク質は、選択されている抗体を使用してイムノアッセイの感度および特異性を判断する基準として作用する。様々な抗体の結合親和性は異なり得ること；特定の抗体の対（たとえばサンドイッチアッセイの場合）が、立体的に互いに干渉し得ることなどから、抗体のアッセイ性能は、抗体の絶対的な親和性および特異性よりも重要な尺度であり得る。
【００７８】
アッセイの相関
【００７９】
バイオマーカーの使用に関連して本明細書中で使用される用語「相関させる」は、所定の病態を罹患していることがわかっている、もしくは当該病態のリスクを有することがわかっている人、または所定の病態を有さないことが分かっている人のバイオマーカーの存在または量と、患者におけるバイオマーカーの存在または量とを比較することを表す。多くの場合、これは、バイオマーカー濃度の形態でのアッセイ結果を、疾患の存在もしくは非存在または一部の将来の転帰の可能性を示すように選択された既定の閾値と比較する形態をとる。
【００８０】
診断閾値を選択することは、特に、疾患の確率の考慮、異なる試験の閾値での真偽診断の分布、および診断に基づく治療の結果（または治療の失敗）の推定を伴う。たとえば、有効性が高く低レベルのリスクを有する特定の治療の投与を考慮する場合、臨床医は実質的な診断の不確定要素を受け入れることができるため、必要な試験はほとんどない。他方で、治療選択肢の有効性が低くよりリスクがある状況では、多くの場合、臨床者は高い度合いの診断の確実性を必要とする。よって、費用／有用性の解析は、診断閾値の選択に関与している。
【００８１】
適切な閾値は、様々な方法で決定され得る。たとえば、心筋トロポニンを使用した急性心筋梗塞の診断用の１つの推奨される診断閾値は、正常な集団で観察される濃度の９７．５パーセンタイルである。別の方法は、同じ患者由来の連続試料を観察することであってもよく、この場合、以前の「ベースライン」の結果を使用して、バイオマーカーレベルの経時的な変化に関してモニタリングする。
【００８２】
同様に集団試験を使用して、決定閾値を選択してもよい。レーダー画像の解析のために第二次世界大戦中に開発されたシグナル検出理論の分野由来の受信者操作特性（「ＲＯＣ」）、およびＲＯＣ解析は、多くの場合、「非疾患状態」の亜集団から「疾患状態」の亜集団を最良に区別できる閾値を選択するために使用される。この場合の偽陽性は、試験が陽性であるが、実際は人が疾患を有さない場合に起こる。他方で、偽陰性は、試験が陰性である場合に起こり、人が健常であることが示唆されるが、実際は疾患を有する。ＲＯＣ曲線を作成するために、決定閾値が連続的に変動するように真陽性率（ＴＰＲ）および偽陽性率（ＦＰＲ）を決定する。ＴＰＲは感度と等価であり感度、ＦＰＲは１−特異性に等しいことから、ＲＯＣのグラフは、時に感度対（１−特異性）のプロットと呼ばれる。完全な試験は、１．０のＲＯＣ曲線下面積を有し、ランダム試験は０．５の面積を有する。閾値は、許容可能なレベルの特異性および感度を提供するように選択される。
【００８３】
この文脈では、「疾患状態」は、１つの特徴（疾患もしくは病態の存在、またはいくつかの転帰の発生）を有する集団を表すことを意味し、「非疾患状態」は、この特徴を欠如する集団を表すことを意味する。１つの決定閾値は、このような方法の最も単純な適用であるが、複数の決定閾値を使用してもよい。たとえば、第１の閾値を下回る場合、疾患の非存在が比較的高い信頼度で割り当てられ、第２の閾値を超える場合、疾患の存在が、比較的高い信頼度で割り当てられ得る。２つの閾値の間は不定と考えられ得る。このことは、本来、単に例示的であることを意味する。
【００８４】
閾値の比較に加えて、アッセイ結果を、患者の分類（疾患の存在または非存在、転帰の可能性など）と相関させる他の方法は、決定木、ルールの設定、Ｂａｙｅｓｉａｎ法、ニューラルネットワーク法を含む。これらの方法は、対象が複数の分類のうちの１つの分類に属する度合いを表す確率値を生成することができる。
【００８５】
試験の精度の測定は、Ｆｉｓｃｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｉｎｔｅｎｓｉｖｅ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．  ２９：  １０４３−５１，  ２００３に記載されるように得てもよく、所定のバイオマーカーの有効性を決定するために使用してもよい。これらの測定値は、感度および特異性、予測値、尤度比、診断のオッズ比、およびＲＯＣ曲線下面積を含む。ＲＯＣプロットの曲線下面積（「ＡＵＣ」）は、分類指標が、ランダムに選択された正の例を、ランダムに選択された負の例よりも高くランクづける確率に等しい。ＲＯＣ曲線下面積は、グループが連続的なデータであると考えられる２つのグループで得られるスコア間の差の中央値に関して試験するマン・ホイットニーのＵ検定、またはウィルコクソン順位検定に等しいと考えられ得る。
【００８６】
上述のように、適切な試験は、以下の、これらの様々な測定値に関する結果のうちの１つまたは複数を示し得る：０．５超、好ましくは少なくとも０．６、より好ましくは少なくとも０．７、さらにより好ましくは少なくとも０．８、さらにより好ましくは少なくとも０．９、および最も好ましくは少なくとも０．９５の特異性（この場合、対応する感度は、０．２超、好ましくは０．３超、より好ましくは０．４超、さらにより好ましくは少なくとも０．５、さらにより好ましくは０．６、さらにより好ましくは０．７超、さらにより好ましくは０．８超、より好ましくは０．９超、および最も好ましくは０．９５超である）；０．５超、好ましくは少なくとも０．６、より好ましくは少なくとも０．７、さらにより好ましくは少なくとも０．８、さらにより好ましくは少なくとも０．９、および最も好ましくは少なくとも０．９５の感度（この場合、対応する特異性は、０．２超、好ましくは０．３超、より好ましくは０．４超、さらにより好ましくは少なくとも０．５、さらにより好ましくは０．６、さらにより好ましくは０．７超、さらにより好ましくは０．８超、より好ましくは０．９超、および最も好ましくは０．９５超である）；少なくとも７５％の特異性と組み合わせた少なくとも７５％の感度；０．５超、好ましくは少なくとも０．６、より好ましくは０．７、さらにより好ましくは少なくとも０．８、さらにより好ましくは少なくとも０．９、および最も好ましくは少なくとも０．９５のＲＯＣ曲線下面積；１とは異なる、好ましくは少なくとも２以上または約０．５以下、より好ましくは少なくとも約３以上または約０．３３以下、さらにより好ましくは少なくとも約４以上または約０．２５以下、さらにより好ましくは少なくとも約５以上または約０．２以下、および最も好ましくは少なくとも約１０以上または約０．１以下のオッズ比；１超、少なくとも２、より好ましくは少なくとも３、さらにより好ましくは少なくとも５、および最も好ましくは少なくとも１０の正の尤度比（感度／（１−特異性）として計算）；ならびに１未満、０．５以下、より好ましくは０．３以下、および最も好ましくは０．１以下の負の尤度比（（１−感度）／特異性）。
【００８７】
さらなる臨床指標を、本発明の腎損傷マーカーのアッセイ結果と組み合わせてもよい。これらは、腎臓の状態に関連した他のバイオマーカーを含む。例として以下が挙げられ、ここでは一般的なバイオマーカー名、続いてそのバイオマーカーまたはその親についてのＳｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔエントリ番号を列挙する：アクチン（Ｐ６８１３３）；アデノシンデアミナーゼ結合タンパク質（ＤＰＰ４、Ｐ２７４８７）；α&#8722;１&#8722;酸性糖タンパク質１（Ｐ０２７６３）；α−１−ミクログロブリン（Ｐ０２７６０）；アルブミン（Ｐ０２７６８）；アンギオテンシノゲナーゼ（Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎｏｇｅｎａｓｅ）（レニン、Ｐ００７９７）；アネキシンＡ２（Ｐ０７３５５）；βグルクロニダーゼ（Ｐ０８２３６）；Ｂ−２−ミクログロブリン（Ｐ６１７６９）；β&#8722;ガラクトシダーゼ（Ｐ１６２７８）；ＢＭＰ−７（Ｐ１８０７５）；脳性ナトリウム利尿ペプチド（ｐｒｏＢＮＰ、ＢＮＰ−３２、ＮＴｐｒｏＢＮＰ；Ｐ１６８６０）；カルシウム結合タンパク質β（Ｓ１００−β、Ｐ０４２７１）；炭酸脱水酵素９（Ｑ１６７９０）；カゼインキナーゼ２（Ｐ６８４００）；カテプシンＢ（Ｐ０７８５８）；セルロプラスミン（Ｐ００４５０）；クラスタリン（Ｐ１０９０９）；補体Ｃ３（Ｐ０１０２４）；システインリッチタンパク質（ＣＹＲ６１、Ｏ００６２２）；チトクロムＣ（Ｐ９９９９９）；上皮増殖因子（ＥＧＦ、Ｐ０１１３３）；エンドセリン−１（Ｐ０５３０５）；細胞外分泌フェチュインＡ（Ｅｘｏｓｏｍａｌ  Ｆｅｔｕｉｎ−Ａ）（Ｐ０２７６５）；脂肪酸結合タンパク質、心臓（ＦＡＢＰ３、Ｐ０５４１３）；脂肪酸結合タンパク質、肝臓（Ｐ０７１４８）；フェリチン（軽鎖、Ｐ０２７９２；重鎖  Ｐ０２７９４）；フルクトース−１，６−ビホスファターゼ（Ｆｒｕｃｔｏｓｅ−１，６−ｂｉｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ）（Ｐ０９４６７）；ＧＲＯ−α（ＣＸＣＬ１、（Ｐ０９３４１）；成長ホルモン（Ｐ０１２４１）；肝細胞増殖因子（Ｐ１４２１０）；インスリン様増殖因子Ｉ（Ｐ０５０１９）；免疫グロブリンＧ；免疫グロブリン軽鎖（κおよびλ）；インターフェロンγ（Ｐ０１５７９）；リゾチーム（Ｐ６１６２６）；インターロイキン−１α（Ｐ０１５８３）；インターロイキン−２（Ｐ６０５６８）；インターロイキン−４（Ｐ０５１１２）；インターロイキン−９（Ｐ１５２４８）；インターロイキン−１２ｐ４０（Ｐ２９４６０）；インターロイキン−１３（Ｐ３５２２５）；インターロイキン−１６（Ｑ１４００５）；Ｌ１細胞接着分子（Ｐ３２００４）；乳酸デヒドロゲナーゼ（Ｐ００３３８）；ロイシンアミノペプチダーゼ（Ｐ２８８３８）；メプリンＡ&#8722;αサブユニット（Ｑ１６８１９）；メプリンＡ&#8722;βサブユニット（Ｑ１６８２０）；ミッドカイン（Ｐ２１７４１）；ＭＩＰ２−α（ＣＸＣＬ２，Ｐ１９８７５）；ＭＭＰ−２（Ｐ０８２５３）；ＭＭＰ−９（Ｐ１４７８０）；ネトリン−１（Ｏ９５６３１）；中性エンドペプチダーゼ（Ｐ０８４７３）；オステオポンチン（Ｐ１０４５１）；腎乳頭抗原１（ＲＰＡ１）；腎乳頭抗原２（ＲＰＡ２）；レチノール結合タンパク質（Ｐ０９４５５）；リボヌクレアーゼ；Ｓ１００カルシウム結合タンパク質Ａ６（Ｐ０６７��３）；血清アミロイドＰ成分（Ｐ０２７４３）；ナトリウム／水素交換アイソフォーム（ＮＨＥ３，Ｐ４８７６４）；スペルミジン／スペルミンＮ１−アセチルトランスフェラーゼ（Ｐ２１６７３）；ＴＧＦ−β１（Ｐ０１１３７）；トランスフェリン（Ｐ０２７８７）；トレフォイル因子３（ＴＦＦ３、Ｑ０７６５４）；Ｔｏｌｌ様タンパク質４（Ｏ００２０６）；総タンパク質；尿細管間質性腎炎抗原（Ｑ９ＵＪＷ２）；ウロモジュリン（タム&#8722;ホルスフォールタンパク質，Ｐ０７９１１）。
【００８８】
リスク階層化の目的のために、アディポネクチン（Ｑ１５８４８）；アルカリホスファターゼ（Ｐ０５１８６）；アミノペプチダーゼＮ（Ｐ１５１４４）；カルビンディンＤ２８ｋ（Ｐ０５９３７）；シスタチンＣ（Ｐ０１０３４）；Ｆ１ＦＯ  ＡＴＰアーゼの８サブユニット（Ｐ０３９２８）；γグルタミルトランスフェラーゼ（Ｐ１９４４０）；ＧＳＴａ（α&#8722;グルタチオン&#8722;Ｓ&#8722;トランスフェラーゼ，Ｐ０８２６３）；ＧＳＴｐｉ（グルタチオン&#8722;Ｓ&#8722;トランスフェラーゼＰ；ＧＳＴクラスπ；Ｐ０９２１１）；ＩＧＦＢＰ−１（Ｐ０８８３３）；ＩＧＦＢＰ−２（Ｐ１８０６５）；ＩＧＦＢＰ−６（Ｐ２４５９２）；膜内在性タンパク質１（Ｉｔｍ１、Ｐ４６９７７）；インターロイキン−６（Ｐ０５２３１）；インターロイキン−８（Ｐ１０１４５）；インターロイキン−１８（Ｑ１４１１６）；ＩＰ−１０（１０ｋＤａインターフェロンγ誘導タンパク質，Ｐ０２７７８）；ＩＲＰＲ（ＩＦＲＤ１，Ｏ００４５８）；イソバレリルＣｏＡ  デヒドロゲナーゼ（ＩＶＤ、Ｐ２６４４０）；Ｉ−ＴＡＣ／ＣＸＣＬ１１（Ｏ１４６２５）；ケラチン１９（Ｐ０８７２７）；Ｋｉｍ−１（Ａ型肝炎ウイルス細胞性受容体１，Ｑ９６Ｄ４２）；Ｌ−アルギニン：グリシンアミジノトランスフェラーゼ（Ｐ５０４４０）；レプチン（Ｐ４１１５９）；リポカリン２（ＮＧＡＬ，Ｐ８０１８８）；ＭＣＰ−１（Ｐ１３５００）；ＭＩＧ（γインターフェロン誘導モノカインＱ０７３２５）；ＭＩＰ−１ａ（Ｐ１０１４７）；ＭＩＰ−３ａ（Ｐ７８５５６）；ＭＩＰ−１β（Ｐ１３２３６）；ＭＩＰ−１ｄ（Ｑ１６６６３）；ＮＡＧ（Ｎ&#8722;アセチル&#8722;β&#8722;Ｄ&#8722;グルコサミニダーゼ，Ｐ５４８０２）；有機イオン輸送体（ＯＣＴ２，Ｏ１５２４４）；オステオプロテジェリン（Ｏ００３００）；Ｐ８タンパク質（Ｏ６０３５６）；プラスミノーゲンアクチベーターインヒビター１（ＰＡＩ−１，Ｐ０５１２１）；ＰｒｏＡＮＰ（１−９８）（Ｐ０１１６０）；プロテインホスファターゼ１β（ＰＰＩ−β，Ｐ６２１４０）；Ｒａｂ  ＧＤＩ−β（Ｐ５０３９５）；腎カリクレイン（Ｐ０６８７０）；膜内在性タンパク質のＲＴ１．Ｂ&#8722;１（α）鎖（Ｑ５Ｙ７Ａ８）；腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー１Ａ（ｓＴＮＦＲ−Ｉ，Ｐ１９４３８）；腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー１Ｂ（ｓＴＮＦＲ−ＩＩ，Ｐ２０３３３）；組織メタロプロテアーゼ阻害物質３（ＴＩＭＰ−３，Ｐ３５６２５）；ｕＰＡＲ（Ｑ０３４０５）を、本発明の腎損傷マーカーのアッセイ結果と組み合わせることができる。
【００８９】
本発明の腎損傷マーカーのアッセイの結果と組み合わせられ得る他の臨床指標として、人口統計情報（たとえば体重、性別、年齢、人種）、病歴（たとえば家族歴、手術の種類、動脈瘤、うっ血性心不全、子癇前症、子癇、糖尿病、高血圧、冠動脈疾患、タンパク尿、腎不全、または敗血症などの既に存在する疾患、ＮＳＡＩＤ、シクロスポリン、タクロリムス、アミノグリコシド、ホスカルネット、エチレングリコール、ヘモグロビン、ミオグロビン、イホスファミド、重金属、メトトレキサート、放射線不透過造影剤、またはストレプトゾトシンなどの毒素曝露の種類）、臨床変数（たとえば血圧、体温、呼吸数）、リスクスコア（ＡＰＡＣＨＥスコア、ＰＲＥＤＩＣＴスコア、ＵＡ／ＮＳＴＥＭＩに関するＴＩＭＩリスクスコア、フラミンガムリスクスコア）、尿中総タンパク質の測定値、糸球体濾過量、推定糸球体濾過量、尿生成速度、血清または血漿中クレアチニン濃度、腎乳頭抗原１（ＲＰＡ１）の測定値；腎乳頭抗原２（ＲＰＡ２）の測定値；尿中クレアチニン濃度、ナトリウムの部分排泄率、尿中ナトリウム濃度、血清または血漿中クレアチニンに対する尿中クレアチニンの比率、尿比重、尿浸透圧、血漿中尿素窒素に対する尿中尿素窒素の比率、血漿中のクレアチニンに対するＢＵＮの比率、および／または尿中ナトリウム／（尿中クレアチニン／血漿中クレアチニン）として計算される腎不全指数が挙げられる。腎損傷マーカーのアッセイ結果と組み合わせることのできる他の腎機能の測定値は、本明細書中の以下、およびＨａｒｒｉｓｏｎ’ｓ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，  １７ｔｈ  Ｅｄ．，  ＭｃＧｒａｗ  Ｈｉｌｌ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ｐａｇｅｓ  １７４１−１８３０，  ａｎｄ  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ＆  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ２００８，  ４７ｔｈ  Ｅｄ，  ＭｃＧｒａｗ  Ｈｉｌｌ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ｐａｇｅｓ  ７８５−８１５に記載されており、各文献全体は本明細書中参照として援用されている。
【００９０】
このようにしてアッセイ結果／臨床指標を組み合わせることは、多変量ロジスティック回帰、対数線形モデリング、ニューラルネットワーク解析、ｍのうちのｎ分析（ｎ−ｏｆ−ｍ  ａｎａｌｙｓｉｓ）、決定木解析などの使用を含み得る。この列挙は限定を意味しない。
【００９１】
急性腎不全の診断
【００９２】
上述のように、本明細書中使用される用語「急性腎損傷（ｒｅｎａｌまたはｋｉｄｎｅｙ）」および「急性腎不全（ｒｅｎａｌまたはｋｉｄｎｅｙ）」は、ベースライン値からの血清クレアチニンの変化の観点から、部分的に定義されている。ＡＲＦの大部分の定義は、血清クレアチニンの使用および多くの場合では尿量を含む、一般的な要素を有する。患者は、腎機能障害を示し得るが、この比較で使用するための腎機能の利用可能なベースライン測定値を有さない。このような事象では、患者が最初に正常なＧＦＲを有したと仮定することにより、ベースラインの血清クレアチニン値を推定してもよい。糸球体濾過量（ＧＦＲ）は、単位時間あたりの、腎臓の糸球体毛細血管からボーマン嚢へと濾過された体液量である。糸球体濾過量（ＧＦＲ）は、血液中で一定したレベルを有し、自由に濾過されるが腎臓により再吸収されず分泌されない任意の化学物質を測定することにより、計算することができる。ＧＦＲは、概して、ｍｌ／分の単位で表されている。
【数１】
2017534874.tif 000006
【００９３】
体表面積に対してＧＦＲを正規化することにより、１．７３ｍ２あたり約７５〜１００ｍｌ／分のＧＦＲを推定することができる。よって測定された濾過量は、計算可能な血液量からもたらされた尿中の物質量である。
【００９４】
糸球体濾過量（ＧＦＲまたはｅＧＦＲ）を計算または推定するために使用されるいくつかの異なる技術が存在する。しかしながら臨床現場では、クレアチニンクリアランスが、ＧＦＲを測定するために使用されている。クレアチニンは、身体により正常に産生されている（クレアチニンは、筋肉で見いだされるクレアチンの代謝物である）。これは、糸球体により自由に濾過されるがまた、腎尿細管によって非常に少量が活発に分泌されるため、クレアチニンクリアランスは、実際のＧＦＲを１０〜２０％過剰評価する。この誤差の限度は、クレアチニンのクリアランスを測定する容易さを考慮すると、許容可能である。
【００９５】
クレアチニンクリアランス（ＣＣｒ）は、クレアチニンの尿中濃度（ＵＣｒ）、尿流量（Ｖ）、およびクレアチニンの血漿中濃度（ＰＣｒ）に関する値が既知である場合、計算することができる。尿中濃度と尿流量の積により、クレアチニンの排泄率が提供されるため、クレアチニンクリアランスもまた、血漿中濃度により除算したその排泄率（（ＵＣｒ×Ｖ）とも言われている。これは、一般的に、
【数２】
2017534874.tif 000007
として数学的に表される。
【００９６】
一般的に、朝の空の膀胱から明朝の膀胱の含有量までの２４時間尿の採取が行われ、比較のために血液試験を行う。
【数３】
2017534874.tif 000008
2017534874.tif 000009
【００９７】
体格の異なる人々の間で結果を比較可能にするために、多くの場合、ＣＣｒは体表面積（ＢＳＡ）に関して補正され、平均的な体格の男性と比較してｍｌ／分／１．７３ｍ２として表される。大部分の成年は、１．７（１．６〜１．９）に達するＢＳＡを有するが、著しく肥満または痩身の患者は、実際のＢＳＡに関して補正したＣＣｒを有するべきである。
【数４】
2017534874.tif 000010
【００９８】
クレアチニンクリアランス測定の精度（採取が完全である場合であっても）は、糸球体濾過量（ＧＦＲ）が減少するとクレアチニンの分泌が増加し、よって血清クレアチニンの上昇が少なくなるため、限定されている。このため、クレアチニンの排泄は、濾過負荷量よりも非常に多く、ＧＦＲの多大な過剰評価が起こる可能性がある（２倍もの大きい差）。しかしながら、臨床目的のため、腎機能が安定しているか、または悪化もしくは改善しているかどうかを決定することが重要である。これは、多くの場合、血清クレアチニンそのものをモニタリングすることにより決定されている。クレアチニンクリアランスのように、血清クレアチニンは、非定常状態のＡＲＦにおいて、ＧＦＲを正確に反映するものではない。にもかかわらず、血清クレアチニンがベースラインから変化する度合いは、ＧＦＲの変化を反映するものである。血清クレアチニンは簡便かつ容易に測定され、腎機能に特異的である。
【００９９】
ｍＬ／ｋｇ／時間の尿量に基づき尿量を決定する目的の場合、１時間ごとの尿の採取および測定が適切である。たとえば累積２４時間の尿量のみが利用可能であり、患者の体重が提供されない場合、ＲＩＦＬＥの尿量基準の若干の修正が記述されている。たとえばＢａｇｓｈａｗ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎｅｐｈｒｏｌ．  Ｄｉａｌ．  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ．  ２３：  １２０３&#8211;１２１０，  ２００８は、患者の平均体重７０ｋｇを仮定し、患者を、以下：＜３５ｍＬ／ｈ（リスク）、＜２１ｍＬ／ｈ（損傷）または＜４ｍＬ／ｈ（不全）に基づいてＲＩＦＬＥの分類に割り当てる。
【０１００】
治療レジメンの選択
【０１０１】
診断を行った後、臨床医は、腎代替療法の開始、腎臓に損傷を与えることが知られている化合物の送達の中止、腎移植、腎臓に損傷を与えることが知られている手法の延期または回避、利尿剤の投与の修正、目標指向型治療の開始などの、診断と適合可能である治療レジメンを容易に選択することができる。当業者は、本明細書中に記載される診断方法に関連して論述されている多くの疾患の適切な治療を承知している。たとえばＭｅｒｃｋ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｙ，  １７ｔｈ  Ｅｄ．  Ｍｅｒｃｋ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，  Ｗｈｉｔｅｈｏｕｓｅ  Ｓｔａｔｉｏｎ，  ＮＪ，  １９９９を参照されたい。さらに、本明細書中記載される方法および組成物は予後の情報を提供するため、本発明のマーカーを使用して、治療経過をモニタリングすることができる。たとえば、予後状態の改善または悪化は、特定の治療が有効であるまたは有効ではないことを示し得る。
【０１０２】
本発明が、言及される目的を実行し、かつ言及される目的および利点、ならびにそれらに固有のものを入手するように良好に適合されていることを、当業者は容易に理解するものである。本明細書中提供される実施例は好ましい実施形態を表すが、これは例示的なものであり、本発明の範囲を限定するようには意図されていない。
【０１０３】
実施例１：造影剤誘発性腎症の試料の採取
【０１０４】
この試料の採取試験の目的は、血管内に造影剤を投与する前および後で、患者から血漿および尿の試料、ならびに臨床データを採取することである。ヨウ素化造影剤の血管内投与を含むＸ線／造影剤の手法を受けた約２５０名の成年を登録する。この試験に登録するために、各患者は、以下の組み入れ基準のすべてを満たさなければならず、かつ以下の除外基準のいずれも満たしてはならない：
組み入れ基準
１８歳以上の男性および女性；
造影剤の血管内投与を含むＸ線／造影剤の手法（ＣＴスキャンまたは冠動脈インターベンションなど）を受けている；
造影剤投与から少なくとも４８時間入院すると予測される。
試験の参加に関して書類でインフォームドコンセントを提供し、かつすべての試験の手法に応じることができ、その旨意思がある。
除外基準
腎移植のレシピエント；
造影剤の手法の前での急性的な腎機能の悪化；
登録時に、すでに透析（急性もしくは慢性）を受けているか、または透析のひっ迫した必要がある；
造影剤の投与から４８時間以内にさらなる腎傷害に関する有意なリスクを伴う主要な外科的手法（たとえば心肺バイパス術を含む）または造影剤を用いた追加的なイメージング手法を受けると予測される；
過去３０日以内での実験的な療法を伴う介入臨床試験への参加；
ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）または肝炎ウイルスを含む既知の感染症。
【０１０５】
第１の造影剤投与の直前（および任意の手法前積極補水後）に、ＥＤＴＡ抗凝固血液試料（１０ｍｌ）および尿の試料（１０ｍｌ）を、各患者から採取する。次に、血液および尿の試料を、インデックスコントラスト（ｉｎｄｅｘ  ｃｏｎｔｒａｓｔ）手法の間の最後の造影剤の投与から４（±０．５）、８（±１）、２４（±２）４８（±２）、および７２（±２）時間後に、採取する。血液を、直接的な静脈穿刺を介して、または存在する大腿鞘、中心静脈系、末梢静脈内系、もしくはヘパリンロックなどの他の利用可能な静脈アクセスを介して採取する。これら試験の血液試料を、臨床施設で血漿へと処理し、凍結し、Ａｓｔｕｔｅ  Ｍｅｄｉｃａｌ，  Ｉｎｃ．（カリフォルニア州サンディエゴ）へ発送する。試験の尿の試料を凍結し、Ａｓｔｕｔｅ  Ｍｅｄｉｃａｌ，  Ｉｎｃへ発送する。
【０１０６】
血清クレアチニンを、第１の造影剤の投与の直前（任意の手法前積極補水後）、および最後の造影剤の投与から４（±０．５）、８（±１）、２４（±２）、および４８（±２））、および７２（±２）時間後に（理想的には試験試料を得るのと同時に）、施設で評価する。さらに、各患者の状態を、追加的な血清および尿中のクレアチニンの測定、透析の必要性、入院状態、および有害な臨床転帰（死亡率を含む）に関して、３０日間にわたり評価する。
【０１０７】
造影剤の投与の前に、以下の評価：収縮期血圧＜８０ｍｍｇＨｇ＝５ポイント；動脈内バルーンポンプ＝５ポイント；うっ血性心不全（クラスＩＩＩ〜ＩＶ、または肺水腫の病歴）＝５ポイント；年齢＞７５歳＝４ポイント；ヘマトクリットレベル＜男性で３９％、＜女性で３５％＝３ポイント；糖尿病＝３ポイント；造影剤の量＝１００ｍｌごとに１ポイント；血清クレアチニンレベル＞１．５ｇ／ｄＬ＝４ポイント、または推算ＧＦＲ４０〜６０ｍｌ／分／１．７３ｍ２＝２ポイント、２０〜４０ｍｌ／分／１．７３ｍ２＝４ポイント、＜２０ｍｌ／分／１．７３ｍ２＝６ポイントに基づき、各患者にリスクを割り当てる。割り当てたリスクは以下の通りである：ＣＩＮおよび透析のリスク：合計５ポイント以下＝ＣＩＮのリスク―７．５％、透析のリスク―０．０４％；合計６〜１０ポイント＝ＣＩＮのリスク―１４％、透析のリスク―０．１２％；合計１１〜１６ポイント＝ＣＩＮのリスク―２６．１％、透析のリスク―１．０９％；＞合計１６ポイント＝ＣＩＮのリスク―５７．３％、透析のリスク―１２．８％。
【０１０８】
実施例２：心臓手術の試料の採取
【０１０９】
この試料の採取試験の目的は、腎機能に損傷を与える可能性があることが知られた手法である心臓血管手術を受ける前および後の患者から、血漿および尿の試料、ならびに臨床データを採取することである。このような手術を受ける約９００名の成年を登録する。この試験に登録するために、各患者は、以下の組み入れ基準のすべてを満たさなければならず、以下の除外基準のいずれも満たしてはならない：
試験対象患者基準
１８歳以上の男性および女性；
心臓血管手術を受けた；
腎移植のリスクスコアに関するトロント／オタワの予測リスク指標（Ｔｏｒｏｎｔｏ／Ｏｔｔａｗａ  Ｐｒｅｄｉｃｔｉｖｅ  Ｒｉｓｋ  Ｉｎｄｅｘ  ｆｏｒ  Ｒｅｎａｌ  Ｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔ  ｒｉｓｋ  ｓｃｏｒｅ）（Ｗｉｊｅｙｓｕｎｄｅｒａ  ｅｔ  ａｌ．，  ＪＡＭＡ  ２９７：  １８０１−９，  ２００７）少なくとも２；および
試験の参加に関して書類でインフォームドコンセントを提供し、かつすべての試験の手法に応じることができ、その旨意思がある。
除外基準
既知の妊娠；
以前の腎移植；
登録前での腎機能の急性的な悪化（たとえばＲＩＦＬＥ基準のいずれかの分類）
登録時に、すでに透析（急性もしくは慢性）を受けているか、または透析のひっ迫した必要がある；
現在別の臨床試験に登録している、またはＡＫＩに関する薬剤の注入もしくは治療介入を含む心臓手術から７日以内に別の臨床試験に登録されると予測される；
ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）または肝炎ウイルスを含む既知の感染症。
【０１１０】
最初の切開から３時間以内（およびいずれかの前処理の水和の後）にＥＤＴＡ抗凝固血液試料（１０ｍｌ）、全血（３ｍｌ）、および尿の試料（３５ｍｌ）を、各患者から採取する。次に、血液および尿の試料を、手法から３（±０．５）、６（±０．５）、１２（±１）、２４（±２）、および４８（±２）時間後に採取し、次に、対象が病院に留まる場合に、３日目〜７日目に毎日採取する。血液を、直接的な静脈穿刺、または現存する大腿鞘、中心静脈系、末梢静脈内系、もしくはヘパリンロックなどの他の入手可能な静脈アクセスを介して採取する。これらの試験の血液の試料を凍結し、Ａｓｔｕｔｅ  Ｍｅｄｉｃａｌ，  Ｉｎｃ．（カリフォルニア州サンディエゴ）に発送する。この試験の尿の試料を凍結し、Ａｓｔｕｔｅ  Ｍｅｄｉｃａｌ，  Ｉｎｃへ発送する。
【０１１１】
実施例３：急性疾患の対象の試料の採取
【０１１２】
この試験の目的は、急性疾患患者から試料を採取することである。少なくとも４８時間ＩＣＵにいると予測される約９００名の成年を登録する。この試験に登録されるため、各患者は、以下の組み入れ基準のすべてを満たさなければならず、かつ以下の除外基準のいずれも満たしてはならない：
組み入れ基準
１８歳以上の男性および女性
試験集団１：
ショック（ＳＢＰ＜９０ｍｍＨｇ、および／またはＭＡＰ＞６０ｍｍＨｇを維持するため昇圧剤の投与が必要である、および／またはＳＢＰの少なくとも４０ｍｍＨｇの低下が報告される）；ならびに
敗血症の
うちの少なくとも１つを有する約３００名の患者
試験集団２：
登録から２４時間以内にコンピューター化医師オーダーエントリー（ＣＰＯＥ）で順序づけられたＩＶ抗生物質
登録から２４時間以内の造影剤の曝露
急性非代償性心不全を伴う腹腔内圧の増加；ならびに
ＩＣＵへの入院の主な理由としての、および登録後４８時間ＩＣＵに入院する可能性のある重篤な外傷
のうちの少なくとも１つを有する約３００名の患者
試験集団３：急性腎損傷（たとえば敗血症、低血圧／ショック（ショック＝収縮期のＢＰ＜９０ｍｍＨｇ、および／またはＭＡＰ＞６０ｍｍＨｇを維持するための昇圧剤の投与の必要性、および／またはＳＢＰ＞４０ｍｍＨｇの低下の報告）、重度の外傷、出血、または大手術）に関する既知のリスク因子を伴う急性期治療状況（ＩＣＵまたはＥＤ）により入院すると予測される；ならびに／または登録後少なくとも２４時間ＩＣＵに入院すると予測される約３００名の患者
除外基準
既知の妊娠；
入院した個体；
以前の腎移植；
登録前の既知の急性的な腎機能の悪化（たとえばＲＩＦＬＥ基準のいずれかの分類）；
登録から５日以内に透析（急性もしくは慢性）を受けたか、または登録時にひっ迫した必要がある；
ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）または肝炎ウイルスを含む既知の感染症；
上述の組み入れ基準のＳＢＰ＜９０ｍｍＨｇのみを満たし、主治医または治験責任医師の意見ではショックを有していない。
【０１１３】
インフォームドコンセントを提供した後、ＥＤＴＡ抗凝固血液試料（１０ｍｌ）および尿の試料（２５〜３０ｍｌ）を、各患者から採取する。次に、血液および尿の試料を、造影剤を投与してから４（±０．５）、および８（±１）時間後（該当する場合）；登録から１２（±１）、２４（±２）、および４８（±２）時間後、ならびにその後、対象が入院している間の最大７日目〜１４日目まで毎日、採取する。血液を、直接的な静脈穿刺、または存在する大腿鞘、中心静脈系、末梢静脈内系、もしくはヘパリンロックなどの他の利用可能な静脈アクセスを介して採取する。これらの試験の血液試料を、臨床施設で血漿へと処理し、凍結し、Ａｓｔｕｔｅ  Ｍｅｄｉｃａｌ，  Ｉｎｃ．（カリフォルニア州サンディエゴ）に発送する。この試験の尿の試料を凍結し、Ａｓｔｕｔｅ  Ｍｅｄｉｃａｌ，  Ｉｎｃに発送する。
【０１１４】
実施例４：イムノアッセイフォーマット
【０１１５】
標準的なサンドイッチ酵素イムノアッセイ技術を使用して、検体を測定する。検体に結合する第１の抗体を、９６ウェルポリスチレンマイクロプレートのウェルに固定する。検体の標準物質および試験の試料を、適切なウェルにピペッティングし、存在するいずれかの検体を、固定した抗体に結合させる。未結合の物質を洗い流した後、検体に結合する西洋ワサビペルオキシダーゼコンジュゲート第２抗体をウェルに添加することにより、検体（存在する場合）および第１の抗体とのサンドイッチ複合体を形成する。未結合の抗体‐酵素の試薬を除去するために洗浄した後、テトラメチルベンジジンおよび過酸化水素を含む基質溶液をウェルに添加する。試料に存在する検体の量に比例して発色が起こる。発色を停止させ、色の強度を、５４０ｎｍまたは５７０ｎｍで測定する。検体の濃度を、検体の標準物質から決定した標準曲線と比較することにより、試験試料に割り当てる。本明細書中報告されているインターロイキン１８結合タンパク質の単位は、ｐｇ／ｍｌである。
【０１１６】
実施例５：明らかに健常なドナーおよび慢性疾患患者の試料
【０１１７】
既知の慢性または急性の疾患を有さないドナー（「明らかに健常なドナー」）由来のヒトの尿試料を、２つのベンダー（Ｇｏｌｄｅｎ  Ｗｅｓｔ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ，  Ｉｎｃ．，  ２７６２５  Ｃｏｍｍｅｒｃｅ  Ｃｅｎｔｅｒ  Ｄｒ．，  Ｔｅｍｅｃｕｌａ，  ＣＡ  ９２５９０およびＶｉｒｇｉｎｉａ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，  Ｉｎｃ．，  ９１５  Ｆｉｒｓｔ  Ｃｏｌｏｎｉａｌ  Ｒｄ．，  Ｖｉｒｇｉｎｉａ  Ｂｅａｃｈ，  ＶＡ  ２３４５４）から購入した。尿の試料を発送し、−２０℃未満で凍結保存した。これらベンダーから、性別、人種（黒人／白人）、喫煙状態、および年齢を含む個々のドナーに関する人口統計情報を得た
【０１１８】
うっ血性心不全、冠動脈疾患、慢性腎疾患、慢性閉塞性肺疾患、糖尿病、および高血圧を含む様々な慢性疾患を有するドナー（「慢性疾患患者」）由来のヒトの尿試料を、Ｖｉｒｇｉｎｉａ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，  Ｉｎｃ．，  ９１５  Ｆｉｒｓｔ  Ｃｏｌｏｎｉａｌ  Ｒｄ．，  Ｖｉｒｇｉｎｉａ  Ｂｅａｃｈ，  ＶＡ  ２３４５４から購入した。尿の試料を発送し、−２０℃未満で凍結保存した。ベンダーから、年齢、性別、人種（黒人／白人）、喫煙状態、およびアルコールの使用、身長、体重、慢性疾患の診断、現在の投薬、および過去の手術を含むドナー個々の症例記録表を得た。
【０１１９】
実施例６：ＩＣＵ患者でのインターロイキン１８結合タンパク質の測定
【０１２０】
集中治療室（ＩＣＵ）の患者を、以下の試験に登録する。ＥＤＴＡ抗凝固血液試料（１０ｍｌ）および尿の試料（２５〜３０ｍｌ）を、登録時、造影剤投与から４（±０．５）および８（±１）時間後（該当する場合）；登録から１２（±１）、２４（±２）、および４８（±２）時間後、ならびにその後の、対象が入院している間の最大７日目〜１４日目まで毎日、各患者から採取する。市販のアッセイの結果を使用した標準的なイムノアッセイの方法により、患者がＲＩＦＬＥ  ＩまたはＦにある間に採取した最も早期の試料で、インターロイキン１８結合タンパク質を測定する。
【０１２１】
試料の採取から１２時間後、２４時間後、４８時間後、もしくは７２時間後、または試料採取から７日以内のいずれかの時点から開始する期間の間、血清クレアチニン、尿量、または血清クレアチニンおよび尿量の両方に基づき、腎臓の状態をＲＩＦＬＥ基準により評価する。２つのコホートを、「回復した」および「回復していない」集団を表すと定義する。「回復した」コホートは、２４時間、４８時間、または７２時間の期間の間の最大のＲＩＦＬＥステージが非損傷（ＲＩＦＬＥ０）である患者を表す。「回復していない」コホートは、２４時間、４８時間、または７２時間の期間で最大のＲＩＦＬＥステージが、損傷のリスクあり（Ｒ）、損傷（Ｉ）、または不全（Ｆ）である患者を表す。患者が、登録から９日以内に死亡する、または腎代替療法（ＲＲＴ）を受ける場合、患者は「回復していない」とされる。
【０１２２】
「回復した」および「回復していない」コホートを区別する能力は、受信者動作特性（ＲＯＣ）解析を使用して決定する。
【０１２３】
表１：「回復した」および「回復していない」コホートの尿試料におけるマーカーのレベルおよびＲＯＣ曲線下面積（ＡＵＣ）の比較。ここで、回復は試料の採取から１２時間後に始まり、腎臓の状態は、血清クレアチニン（ｓＣｒ）のみ、尿量（ＵＯ）のみ、または血清クレアチニンもしくは尿量のＲＩＦＬＥ基準により、評価されている。
【表２】
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【０１２４】
表２：「回復した」および「回復していない」コホートの尿試料におけるマーカーのレベルおよびＲＯＣ曲線下面積（ＡＵＣ）の比較。ここで、回復は、試料の採取から２４時間後に始まり、腎臓の状態は、血清クレアチニン（ｓＣｒ）のみ、尿量（ＵＯ）のみ、または血清クレアチニンもしくは尿量のＲＩＦＬＥ基準により、評価されている。
【表３】
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【０１２５】
表３：「回復した」および「回復していない」コホートの尿試料におけるマーカーのレベルおよびＲＯＣ曲線下面積（ＡＵＣ）の比較。ここで、回復は、試料の採取から４８時間後に始まり、腎臓の状態は、血清クレアチニン（ｓＣｒ）のみ、尿量（ＵＯ）のみ、または血清クレアチニンもしくは尿量のＲＩＦＬＥ基準により、評価されている。
【表４】
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【０１２６】
表４：「回復した」および「回復していない」コホートの尿の試料におけるマーカーのレベルおよびＲＯＣ曲線下面積（ＡＵＣ）の比較。ここで、回復は、試料の採取から７２時間後に始まり、腎臓の状態は、血清クレアチニン（ｓＣｒ）のみ、尿量（ＵＯ）のみ、または血清クレアチニンもしくは尿量のＲＩＦＬＥ基準により、評価されている。
【表５】
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【０１２７】
表５：「回復した」および「回復していない」コホートの尿の試料におけるマーカーのレベルおよびＲＯＣ曲線下面積（ＡＵＣ）の比較。ここで、回復は、試料の採取後７日以内に始まり、腎臓の状態は、血清クレアチニン（ｓＣｒ）のみ、尿量（ＵＯ）のみ、または血清クレアチニンもしくは尿量のＲＩＦＬＥ基準により、評価されている。
【表６】
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【０１２８】
実施例７：ＩＣＵに入った患者の腎臓の状態を評価するための、インターロイキン１８結合タンパク質の使用：ＲＩＦＬＥ  ＩおよびＦからのＲＩＦＬＥ  ０およびＲへの回復
【０１２９】
集中治療室（ＩＣＵ）に入っている患者を、以下の試験に登録する。ＥＤＴＡ抗凝固血液試料（１０ｍＬ）および尿の試料（２５〜３０ｍｌ）を、登録時、造影剤投与から４（±０．５）および８（±１）時間後（該当する場合）；登録から１２（±１）、２４（±２）、および４８（±２）時間後、ならびにその後の、対象が入院する間の最大７日目〜１４日目まで毎日、各患者から採取する。市販のアッセイ試薬を使用した標準的なイムノアッセイ方法により、患者がＲＩＦＬＥ  ＩまたはＦにある間に採取した最も早期の試料でインターロイキン１８結合タンパク質を測定する。
【０１３０】
試料の採取から１２時間後、２４時間後、４８時間後、もしくは７２時間後、または試料採取から７日以内のいずれかの時点で開始する期間の間、血清クレアチニン、尿量、または血清クレアチニンおよび尿量の両方に基づき、腎臓の状態をＲＩＦＬＥ基準により評価する。２つのコホートを、「回復した」および「回復していない」集団を表すと定義する。「回復した」コホートは、２４時間、４８時間、または７２時間の間の最大のＲＩＦＬＥステージが、非損傷（ＲＩＦＬＥ０）であるまたは損傷のリスクのある（Ｒ）患者を表す。「回復していない」コホートは、２４時間、４８時間、または７２時間の間の最大のＲＩＦＬＥステージが、損傷（Ｉ）または不全（Ｆ）である患者を表す。患者が、登録から９日以内に死亡する、または腎代替療法（ＲＲＴ）を受ける場合、患者は「回復していない」とされる。
【０１３１】
「回復した」および「回復していない」コホートを区別する能力は、受信者動作特性（ＲＯＣ）解析を使用して決定する。
【０１３２】
表６：「回復した」および「回復していない」コホートの尿試料におけるマーカーのレベルおよびＲＯＣ曲線下面積（ＡＵＣ）の比較。ここで、回復は試料の採取から１２時間後に始まり、腎臓の状態は、血清クレアチニン（ｓＣｒ）のみ、尿量（ＵＯ）のみ、または血清クレアチニンもしくは尿量のＲＩＦＬＥ基準により、評価されている。
【表７】
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【０１３３】
表７：「回復した」および「回復していない」コホートの尿試料におけるマーカーのレベルおよびＲＯＣ曲線下面積（ＡＵＣ）の比較。ここで、回復は、試料の採取から２４時間後に始まり、腎臓の状態は、血清クレアチニン（ｓＣｒ）のみ、尿量（ＵＯ）のみ、または血清クレアチニンもしくは尿量のＲＩＦＬＥ基準により、評価されている。
【表８】
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【０１３４】
表８：「回復した」および「回復していない」コホートの尿試料におけるマーカーのレベルおよびＲＯＣ曲線下面積（ＡＵＣ）の比較。ここで、回復は、試料の採取から４８時間後に始まり、腎臓の状態は、血清クレアチニン（ｓＣｒ）のみ、尿量（ＵＯ）のみ、または血清クレアチニンもしくは尿量のＲＩＦＬＥ基準により、評価されている。
【表９】
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【０１３５】
表９：「回復した」および「回復していない」コホートの尿試料におけるマーカーのレベルおよびＲＯＣ曲線下面積（ＡＵＣ）の比較。ここで、回復は、試料の採取から７２時間後に始まり、腎臓の状態は、血清クレアチニン（ｓＣｒ）のみ、尿量（ＵＯ）のみ、または血清クレアチニンもしくは尿量のＲＩＦＬＥ基準により、評価されている。
【表１０】
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【０１３６】
表１０：「回復した」および「回復していない」コホートの尿試料におけるマーカーのレベルおよびＲＯＣ曲線下面積（ＡＵＣ）の比較。ここで、回復は、試料の採取後７日以内に始まり、腎臓の状態は、血清クレアチニン（ｓＣｒ）のみ、尿量（ＵＯ）のみ、または血清クレアチニンもしくは尿量のＲＩＦＬＥ基準により、評価されている。
【表１１】
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【０１３７】
実施例８：ＩＣＵに入っている患者の腎臓の状態を評価するための、インターロイキン１８結合タンパク質の使用：ＲＩＦＬＥ  Ｆでの持続
【０１３８】
集中治療室（ＩＣＵ）に入っている患者を、以下の試験に登録する。ＥＤＴＡ抗凝固血液試料（１０ｍｌ）および尿の試料（２５〜３０ｍｌ）を、登録時、造影剤投与から４（±０．５）および８（±１）時間後、（該当する場合）；登録から１２（±１）、２４（±２）、および４８（±２）時間後、ならびにその後の対象が入院している間の最大７日目〜１４日目まで毎日、各患者から採取する。市販のアッセイ試薬を使用した標準的なイムノアッセイ方法により、患者がＲＩＦＬＥ  ＩまたはＦにある間に採取した最も早期の試料で、インターロイキン１８結合タンパク質を測定する。
【０１３９】
腎臓の状態を、血清クレアチニン、尿量、または血清クレアチニンおよび尿量の両方に基づきＲＩＦＬＥ基準により評価する。２つのコホートを、「持続性」および「非持続性」の集団を表すように定義する。「持続性」は、２４時間、４８時間、または７２時間の間の最も低いＲＩＦＬＥステージが不全（Ｆ）であり、持続期間が試料採取時から始まって、試料採取から２４時間後、４８時間後、７２時間後、９６時間後、または１６８時間後までであり得る、患者を表す。「非持続性」は、不全（Ｆ）時に持続性ではなく、かつ２４時間、４８時間、または７２時間の間の最も低いＲＩＦＬＥステージが、非損傷（ＲＩＦＬＥ  ０）、損傷のリスクがある（Ｒ）または損傷（Ｉ）であり、持続期間が試料採取時から始まって、試料採取から２４時間後、４８時間後、７２時間後、９６時間後、または１６８時間後までであり得る、患者を表す。患者が不全（Ｆ）の後に死亡する、または試料採取から、試料採取から２４時間後、４８時間後、７２時間後、９６時間後、もしくは１６８時間後までのいずれかの時間で腎代替療法（ＲＲＴ）を受ける場合、患者は「持続性」であるとされる。
【０１４０】
「持続性」および「非持続延性」の患者を区別する能力は、受信者動作特性（ＲＯＣ）解析を使用して決定する。
【０１４１】
表１１：「持続性」および「非持続性」のコホートの尿試料におけるマーカーのレベルおよびＲＯＣ曲線下面積（ＡＵＣ）の比較。ここで、持続は試料採取から２４時間以内に始まり、腎臓の状態は、血清クレアチニン（ｓＣｒ）のみ、尿量（ＵＯ）のみ、または血清クレアチニンもしくは尿量のＲＩＦＬＥ基準により、評価されている。
【表１２】
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【０１４２】
表１２：「持続性」および「非持続性」のコホートの尿試料におけるマーカーのレベルおよびＲＯＣ曲線下面積（ＡＵＣ）の比較。ここで、持続は試料採取から４８時間以内に始まり、腎臓の状態は、血清クレアチニン（ｓＣｒ）のみ、尿量（ＵＯ）のみ、または血清クレアチニンもしくは尿量のＲＩＦＬＥ基準により、評価されている。
【表１３】
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【０１４３】
表１３：「持続性」および「非持続性」のコホートの尿試料におけるマーカーのレベルおよびＲＯＣ曲線下面積（ＡＵＣ）の比較。ここで、持続は試料採取から７２時間以内に始まり、腎臓の状態は、血清クレアチニン（ｓＣｒ）のみ、尿量（ＵＯ）のみ、または血清クレアチニンもしくは尿量のＲＩＦＬＥ基準により、評価されている。
【表１４】
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【０１４４】
表１４：「持続性」および「非持続性」のコホートの尿試料におけるマーカーのレベルおよびＲＯＣ曲線下面積（ＡＵＣ）の比較。ここで、持続は試料採取から９６時間以内に始まり、腎臓の状態は、血清クレアチニン（ｓＣｒ）のみ、尿量（ＵＯ）のみ、または血清クレアチニンもしくは尿量のＲＩＦＬＥ基準により、評価されている。
【表１５】
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【０１４５】
表１５：「持続性」および「非持続性」のコホートの尿試料におけるマーカーのレベルおよびＲＯＣ曲線下面積（ＡＵＣ）の比較。ここで、持続は試料採取から１６８時間以内に始まり、腎臓の状態は、血清クレアチニン（ｓＣｒ）のみ、尿量（ＵＯ）のみ、または血清クレアチニンもしくは尿量のＲＩＦＬＥ基準により、評価されている。
【表１６】
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【０１４６】
実施例９：ＩＣＵに入っている患者の腎臓の状態を評価するための、インターロイキン１８結合タンパク質の使用：ＲＩＦＬＥ  ＩまたはＦでの持続
【０１４７】
集中治療室（ＩＣＵ）に入っている患者を、以下の試験に登録する。ＥＤＴＡ抗凝固血液試料（１０ｍｌ）および尿の試料（２５〜３０ｍｌ）を、登録時、造影剤投与から４（±０．５）および８（±１）時間後（該当する場合）；登録から１２（±１）、２４（±２）、および４８（±２）時間後、ならびにその後の、対象が入院している間の最大７日目〜１４日目まで毎日、各患者から採取する。市販のアッセイ試薬を使用した標準的なイムノアッセイ法により、患者がＲＩＦＬＥ  ＩまたはＦにある間に採取した最も早期の試料で、インターロイキン１８結合タンパク質を測定する。
【０１４８】
腎臓の状態を、血清クレアチニン、尿量、または血清クレアチニンおよび尿量の両方に基づきＲＩＦＬＥ基準により評価する。２つのコホートを、「持続性」および「非持続性」の集団を表すように定義する。「持続性」は、２４時間、４８時間、または７２時間の間の最も低いＲＩＦＬＥステージが、損傷（Ｉ）または不全（Ｆ）であり、持続期間が試験採取時から始まって、試験採取から２４時間後、４８時間後、７２時間後、９６時間後、または１６８時間後までであり得る、患者を表す。「非持続性」は、損傷（Ｉ）または不全（Ｆ）時に持続性ではなく、かつ２４時間、４８時間、または７２時間の間の最も低いＲＩＦＬＥステージが、非損傷（ＲＩＦＬＥ  ０）または損傷のリスクがある（Ｒ）であり、持続期間が試験採取時から始まって、試験採取から２４時間後、４８時間後、７２時間後、９６時間後、または１６８時間後までであり得る、患者を表す。患者が損傷（Ｉ）もしくは不全（Ｆ）の後に死亡する、または試料採取から、試料採取から２４時間後、４８時間後、７２時間後、９６時間後、もしくは１６８時間後までのいずれかの時点で腎代替療法（ＲＲＴ）を受ける場合、患者は「持続性」があるとされる。
【０１４９】
「持続性」および「非持続性」のコホートを区別する能力は、受信者動作特性（ＲＯＣ）解析を使用して、決定する。
【０１５０】
表１６：「持続性」および「非持続性」のコホートの尿試料におけるマーカーのレベルおよびＲＯＣ曲線下面積（ＡＵＣ）の比較。ここでは持続は、試料の採取から２４時間以内に始まり、腎臓の状態は、血清クレアチニン（ｓＣｒ）のみ、尿量（ＵＯ）のみ、または血清クレアチニンもしくは尿量のＲＩＦＬＥ基準により、評価されている。
【表１７】
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【０１５１】
表１７：「持続性」および「非持続性」のコホートの尿試料におけるマーカーのレベルおよびＲＯＣ曲線下面積（ＡＵＣ）の比較。ここでは持続は、試料の採取から４８時間以内に始まり、腎臓の状態は、血清クレアチニン（ｓＣｒ）のみ、尿量（ＵＯ）のみ、または血清クレアチニンもしくは尿量のＲＩＦＬＥ基準により、評価されている。
【表１８】
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2017534874.tif 000055
【０１５２】
表１８：「持続性」および「非持続性」のコホートの尿試料におけるマーカーのレベルおよびＲＯＣ曲線下面積（ＡＵＣ）の比較。ここでは持続は、試料の採取から７２時間以内に始まり、腎臓の状態は、血清クレアチニン（ｓＣｒ）のみ、尿量（ＵＯ）のみ、または血清クレアチニンもしくは尿量のＲＩＦＬＥ基準により、評価されている。
【表１９】
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2017534874.tif 000058
【０１５３】
表１９：「持続性」および「非持続性」のコホートの尿試料におけるマーカーのレベルおよびＲＯＣ曲線下面積（ＡＵＣ）の比較。ここでは持続は、試料の採取から９６時間以内に始まり、腎臓の状態は、血清クレアチニン（ｓＣｒ）のみ、尿量（ＵＯ）のみ、または血清クレアチニンもしくは尿量のＲＩＦＬＥ基準により、評価されている。
【表２０】
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【０１５４】
表２０：「持続性」および「非持続性」のコホートの尿試料におけるマーカーのレベルおよびＲＯＣ曲線下面積（ＡＵＣ）の比較。ここでは持続は、試料の採取から１６８時間以内に始まり、腎臓の状態は、血清クレアチニン（ｓＣｒ）のみ、尿量（ＵＯ）のみ、または血清クレアチニンもしくは尿量のＲＩＦＬＥ基準により、評価されている。
【表２１】
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【０１５５】
実施例１０：ＩＣＵ患者におけるインターロイキン１８結合タンパク質
【０１５６】
集中治療室（ＩＣＵ）に入っている患者を以下の試験に登録する。各患者を、腎臓の状態により、ＲＩＦＬＥ基準により決定されるように、登録から７日以内に達した最も高いステージに従って、非損傷（０）、損傷のリスクがある（Ｒ）、損傷（Ｉ）、および不全（Ｆ）として分類する。ＥＤＴＡ抗凝固血液試料（１０ｍｌ）および尿の試料（５０ｍｌ）を、登録時、登録から１２（±１）、２４（±２）、３６（±２）、４８（±２）、６０（±２）、７２（±２）、および８４（±２）時間後、ならびにその後の対象が入院する間最大７日目まで毎日、各患者から採取する。インターロイキン１８結合タンパク質を、採取した尿試料および血液試料の血漿成分において、市販のアッセイ試薬を使用した標準的なイムノアッセイ方法により、測定する。
【０１５７】
２つのコホートを、「疾患状態の」および「正常な」集団を表すように定義する。これらの用語は便宜上使用されており、「疾患状態の」および「正常な」は、単純に、比較のため２つのコホートを表す（ＲＩＦＬＥ  ０ｖｓＲＩＦＬＥ  Ｒ、ＩおよびＦ；ＲＩＦＬＥ  ０ｖｓＲＩＦＬＥ  Ｒ；ＲＩＦＬＥ  ０およびＲ  ｖｓＲＩＦＬＥ  ＩおよびＦなど）。「最高ステージ前の」時間は、特定の患者が、このコホートで定義される最低の疾患ステージに達する時間と比較した、試料が採取される時間を表し、±１２時間である３つのグループに固定される。たとえば、２つのコホートとして０対Ｒ、Ｉ、Ｆを使用する「２４時間前」は、ステージＲ（またはＲに達する試料がない場合はＩ、またはＲもしくはＩに達する試料がない場合はＦ）に達する前の２４時間（±１２時間）を意味する。
【０１５８】
受信者動作特性（ＲＯＣ）曲線を、各バイオマーカーについて作成して、ＲＯＣ曲線下面積（ＡＵＣ）を決定する。また、コホート２の患者は、コホート２に対する裁定理由に従って、血清クレアチニンの測定値（ｓＣr）に基づいて、尿量（ＵＯ）に基づいて、または血清クレアチニンの測定値もしくは尿量のいずれかに基づいて分けられる。血清クレアチニンの測定値のみに基づいてステージＲ、Ｉ、またはＦに裁定された患者に関して、上述と同じ例（０対Ｒ、Ｉ、Ｆ）を使用すると、ステージ０のコホートは、尿量に基づいてステージＲ、Ｉ、またはＦに裁定された患者を含み得；尿量単独に基づきステージＲ、Ｉ、またはＦに裁定された患者では、ステージ０のコホートは、血清クレアチニン測定値に基づきステージＲ、Ｉ、またはＦに裁定された患者を含み得；および血清クレアチニンの測定値または尿量に基づいてステージＲ、Ｉ、またはＦに裁定された患者では、ステージ０のコホートは、血清クレアチニンの測定値および尿量の両方に関してステージ０にある患者のみを含む。同様に、血清クレアチニンの測定値または尿量に基づき裁定される患者のデータでは、最も重篤なＲＩＦＬＥステージをもたらす裁定方法を使用する。
【０１５９】
コホート１とコホート２とを区別する能力は、ＲＯＣ解析を使用して決定される。ＳＥは、ＡＵＣの標準誤差であり、ｎは試料または個々の患者（「ｐｔｓ」と表される）の数である。標準誤差は、Ｈａｎｌｅｙ，  Ｊ．  Ａ．，  ａｎｄ  ＭｃＮｅｉｌ，  Ｂ．Ｊ．，  Ｔｈｅ  ｍｅａｎｉｎｇ  ａｎｄ  ｕｓｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  ａｒｅａ  ｕｎｄｅｒ  ａ  ｒｅｃｅｉｖｅｒ  ｏｐｅｒａｔｉｎｇ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ  （ＲＯＣ）  ｃｕｒｖｅ．  Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ  （１９８２）  １４３：  ２９−３６に記載されるように計算され；ｐ値は、両側Ｚ検定を用いて計算する。ＡＵＣ＜０．５は、比較のための負のマーカーを表す。ＡＵＣ＞０．５は、比較のための正のマーカーを表す。
【０１６０】
様々なバイオマーカーの閾値（または「カットオフ」）の濃度を選択して、コホート１とコホート２とを区別するための関連する感度および特異性を決定する。ＯＲは、特定のカットオフ濃度に関して計算されたオッズ比であり、９５％のＣＩは、オッズ比に関する信頼区間である。
【０１６１】
表２１：コホート１（ＲＩＦＬＥステージ０を超えて進行しなかった患者）から採取した尿試料、ならびにコホート２におけるステージＲ、Ｉ、またはＦに達する０時間前、２４時間前、および４８時間前に対象から採取された尿試料における、マーカーレベルの比較
【表２２】
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【０１６２】
表２２：コホート１（ＲＩＦＬＥステージ０またはＲを超えて進行しなかった患者）から採取した尿の試料、ならびにコホート２におけるステージＩまたはＦに達する０時間前、２４時間前、および４８時間前に対象から採取された尿試料における、マーカーレベルの比較
【表２３】
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【０１６３】
表２３：コホート１（ＲＩＦＬＥステージＲに達するが、ＲＩＦＬＥステージＲを超えて進行しなかった患者）およびコホート２（ＲＩＦＬＥステージＩまたはＦに達した患者）から、ステージＲに達してから１２時間以内に採取した尿試料における、マーカーレベルの比較
【表２４】
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【０１６４】
表２４：コホート１（ＲＩＦＬＥステージ０を超えて進行しなかった患者）から採取した尿試料の最大マーカーレベルと、コホート２における登録時からステージＦに達する０時間前、２４時間前、および４８時間前までの間で対象から採取した尿試料の最大値との比較。
【表２５】
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【０１６５】
表２５：コホート１（ＲＩＦＬＥステージ０を超えて進行しなかった患者）から採取したＥＤＴＡ試料、ならびにコホート２における、ステージＲ、Ｉ、またはＦに達する０時間前、２４時間前、および４８時間前に対象から採取したＥＤＴＡ試料における、マーカーレベルの比較
【表２６】
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【０１６６】
表２６：コホート１（ＲＩＦＬＥステージ０またはＲを超えて進行しなかった患者）から採取したＥＤＴＡ試料、ならびにコホート２における、ステージＩまたはＦに達する０時間前、２４時間前、および４８時間前に対象から採取したＥＤＴＡ試料における、マーカーレベルの比較
【表２７】
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【０１６７】
表２７：コホート１（ＲＩＦＬＥステージＲに達するが、ＲＩＦＬＥステージＲを超えて進行しなかった患者）およびコホート２（ＲＩＦＬＥステージＩまたはＦに達した患者）からの、ステージＲに達してから１２時間以内に採取したＥＤＴＡ試料のマーカーレベルの比較
【表２８】
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【０１６８】
表２８：コホート１（ＲＩＦＬＥステージ０を超えて進行しなかった患者）から採取したＥＤＴＡ試料の最大マーカーレベルと、コホート２において登録時からステージＦに達する０時間前、２４時間前、および４８時間前までの間で対象から採取したＥＤＴＡ試料の最大値の比較
【表２９】
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【０１６９】
当業者が本発明を作成かつ使用するために十分詳細に本発明を説明かつ例示してきたが、本発明の趣旨および範囲を逸脱することのない様々な代替物、修正、および改善は、明白である。本明細書中提供される実施例は好ましい実施形態を表し、例示的なものであり、本発明の範囲を限定すると意図されていない。
これらの修正および他の使用は、当業者が想定するものである。これらの修正は、本発明の趣旨の中に含まれており、特許請求の範囲により定義されている。
【０１７０】
本発明の範囲および趣旨から逸脱することなく、様々な置換および修正を本明細書中開示される本発明に対して行うことができることは、当業者に容易に理解されている。
【０１７１】
本明細書中に記載されるすべての特許および刊行物は、本発明が関与する分野の当業者のレベルを表すものである。すべての特許および刊行物は、各個々の刊行物が具体的かつ個別に参照として援用されていることが示されるのと同程度に、本明細書中参照として援用されている。
【０１７２】
本明細書中例示的に記載される発明は、本明細書中具体的に開示されていない要素または複数の要素、限定または複数の限定が存在しない状態で、適宜行うことができる。よって、たとえば、本明細書中のそれぞれの例において、用語「含む」、「〜から本質的になる」、および「からなる」のいかなるものも、他の２つの用語のいずれかと置き換えてもよい。使用されている用語および表記は、説明のための用語として使用され、限定するものではなく、示され、記載される特性のいずれかの等価物、またはそれらの一部を排除する当該用語および表記の使用を意図するものではなく、請求される本発明の範囲内で様々な修正が可能であることが理解されている。よって、本発明は、好ましい実施形態および任意の特性により具体的に開示されているが、本明細書中に開示される概念の修正および変動は、当業者により再区分されてもよく、このような修正および変動は、添付の特許請求の範囲により定義されるように本発明の範囲内であるとされることが理解されるべきである。
【０１７３】
他の実施形態は、以下の特許請求の範囲内に記載されている。
【国際調査報告】
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