(57)【要約】  （ａ）生分解性高分子及び薬物をハロゲン化アルカン溶媒に溶解させて薬物含有生分解性高分子溶液を製造し；（ｂ）前記高分子溶液を、界面活性剤を含む連続相で均質に混合して分散相を形成し；（ｃ）連続相及び分散相を含むエマルションをハロゲン化アルカン溶媒の沸点未満の温度で保持し、連続相内に微粒子を形成し；（ｄ）微粒子を１次乾燥し；（ｅ）前記１次乾燥された微粒子をアルコール水溶液に混合した後、アルコール水溶液をハロゲン化アルカン溶媒の沸点以上の温度で保持し、残留するハロゲン化アルカン溶媒を微粒子から抽出及び蒸発させ；そして（ｆ）得られた微粒子を２次乾燥して薬物含有微粒子を生成することを含む、薬物含有徐放性微粒子の製造方法である。薬物含有徐放性微粒子は、微粒子内のハロゲン化アルカン溶媒を容易に除去すると共に、微粒子内の生分解性高分子の加水分解を最小化して優れた薬物の徐放性を発揮することができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）生分解性高分子及び薬物をハロゲン化アルカン溶媒に溶解させて薬物含有生分解性高分子溶液を製造する段階と、
（ｂ）前記薬物含有生分解性高分子溶液を、界面活性剤を含む連続相で均質に混合して分散相を形成する段階と、
（ｃ）前記連続相及び分散相を含むエマルションをハロゲン化アルカン溶媒の沸点未満の温度で保持し、前記連続相内に微粒子を形成する段階と、
（ｄ）前記微粒子を１次乾燥する段階と、
（ｅ）１次乾燥された微粒子をアルコール水溶液に混合した後、前記アルコール水溶液をハロゲン化アルカン溶媒の沸点以上の温度で保持し、残留するハロゲン化アルカン溶媒を微粒子から抽出及び蒸発させる段階と、
（ｆ）得られた微粒子を２次乾燥して薬物含有微粒子を生成する段階と、を含む薬物含有徐放性微粒子の製造方法。
【請求項２】
前記生分解性高分子は、ポリカプロラクトン、乳酸‐カプロラクトン共重合体、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、乳酸‐グリコール酸共重合体及びこれらの混合物からなる群より選択される、請求項１に記載の薬物含有徐放性微粒子の製造方法。
【請求項３】
前記薬物は、抗癌剤、抗精神病薬物、高脂血症治療剤、高血圧治療剤、てんかん治療剤、胃腸関係治療剤、リュウマチ治療剤、鎮痙剤、結核治療剤、筋弛緩剤、不整脈治療剤、骨粗鬆症治療剤、勃起不全治療剤、止血剤、抗ウイルス剤、ホルモン剤、抗生剤、糖尿治療剤、抗真菌剤、抗血栓剤、解熱鎮痛消化剤及びこれらの混合物からなる群より選択される、請求項１に記載の薬物含有徐放性微粒子の製造方法。
【請求項４】
前記抗精神病薬物は、ハロペリドール、ブロムペリドール、マレイン酸フルフェナジン、クロルプロマジン、ヒベンズ酸クロルプロマジン、スルピリド、塩酸カルピプラミン、マレイン酸カルピプラミン、塩酸クロカプラミン、塩酸モサプラミン、リスペリドン、クロザピン、オランザピン、セルチンドール及びこれらの混合物からなる群より選択される、請求項３に記載の薬物含有徐放性微粒子の製造方法。
【請求項５】
前記ハロゲン化アルカン溶媒は、ジクロロメタン、クロロホルム、クロロエタン、ジクロロエタン、トリクロロエタン及びこれらの混合物からなる群より選択される、請求項１に記載の薬物含有徐放性微粒子の製造方法。
【請求項６】
前記界面活性剤は、非イオン性界面活性剤、陰イオン性界面活性剤、陽イオン性界面活性剤及びこれらの混合物からなる群より選択される、請求項１に記載の薬物含有徐放性微粒子の製造方法。
【請求項７】
前記界面活性剤を含む連続相がポリビニルアルコール水溶液である、請求項１に記載の薬物含有徐放性微粒子の製造方法。
【請求項８】
前記アルコールは、メタノール、エタノール、イソプロパノール及びこれらの混合物からなる群より選択される、請求項１に記載の薬物含有徐放性微粒子の製造方法。
【請求項９】
前記１次乾燥及び２次乾燥は真空乾燥で行われる、請求項１に記載の薬物含有徐放性微粒子の製造方法。
【請求項１０】
段階（ｃ）と段階（ｄ）との間に、濾過及び洗浄を通じて連続相を除去して微粒子を得る段階をさらに含む、請求項１に記載の薬物含有徐放性微粒子の製造方法。
【請求項１１】
段階（ｅ）と段階（ｆ）との間に、濾過及び洗浄を通じてアルコール水溶液を除去して微粒子を得る段階をさらに含む、請求項１に記載の薬物含有徐放性微粒子の製造方法。
【請求項１２】
前記薬物含有微粒子は、前記薬物含有微粒子の全体重量に対し、２０重量％〜９９重量％の生分解性高分子を含む、請求項１に記載の薬物含有徐放性微粒子の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、薬物含有徐放性微粒子の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
長期投与を要する薬物に対して多様な剤形が適用されている。投与回数を減らし、体内における安定的な薬物濃度を提供するため、このような薬物は徐放性製剤で提供されることが望ましい。徐放性製剤の一類型は、薬物が微小球体内に封じ込まれた生分解性微粒子（ｍｉｃｒｏｐａｒｔｉｃｌｅ）である。その例として、黄体形成ホルモン放出ホルモン（リュープロライド（ｌｅｕｐｒｏｌｉｄｅ）またはＬＨＲＨ）を含む生分解性微粒子であるリュープロンデポット（ＬＵＰＲＯＮ  Ｄｅｐｏｔ）が挙げられる。リュープロライドは、ホルモン依存性癌、特に前立腺癌及び性早熟症の治療に使用される。
【０００３】
微粒子は直径が約１〜１０００ミクロンである粒子である。注入のため、微粒子は１２５ミクロン以下であることが望ましい。このような大きさの微粒子は、外科的な移植の代りに、標準皮下注射用針で注入することができる。微粒子の一類型は、薬物を捕捉する生分解性高分子ネットワークで構成される。前記生分解性高分子が体内で生分解することによって薬物が放出される。最も多く使用される生分解性高分子は、ポリ乳酸、または乳酸‐グリコール酸共重合体である。
【０００４】
最も多く用いられる徐放性微粒子の製造方法は、相分離法（ｐｈａｓｅ  ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ）、噴霧乾燥法（ｓｐｒａｙ  ｄｒｙｉｎｇ）及び溶媒蒸発法（ｓｏｌｖｅｎｔ  ｅｖａｐｏｒａｔｉｏｎ）である。コアセルベーション（ｃｏａｃｅｒｖａｔｉｏｎ）とも呼ばれる相分離法は、非溶媒を添加することで高分子の溶解度を減少させる。一般的な微粒子の製造方法では、生分解性高分子をジクロロメタンのような有機溶媒に溶解させる。脂溶性薬物は前記生分解性高分子溶液に溶解させる。親水性薬物は、水に溶解させてから前記生分解性高分子溶液に分散させるか（Ｗ／Ｏ（Ｗａｔｅｒ−ｉｎ−Ｏｉｌ）乳剤）、又は、固形粉末として分散させる。非溶媒（通常、シリコーンオイル）を徐々に添加することで、２つの相が形成される；すなわち、高分子を含むシリコーンオイル相及び高分子が除去された（高分子を含まない）有機溶媒相である。有機溶媒を抽出するか又は蒸発させることによって、薬物を含む生分解性高分子微粒子がシリコーンオイル相で固形化される。コアセルベート（シリコーンオイル）は高分子微粒子に吸着される。
【０００５】
噴霧乾燥法において、生分解性高分子はジクロロメタンのような揮発性有機溶媒に溶解される。薬物は前記生分解性高分子溶液に溶解されるか又は分散される。前記溶液または分散液は加熱された空気中に噴射される。溶媒が蒸発しながら固形微粒子を形成する。
【０００６】
溶媒蒸発法は微粒子の製造に最も多く用いられる。溶媒蒸発法では、薬物を含む有機高分子溶液を分散媒質に乳化させ、分散媒質は通常水溶性であるが、オイルであっても良い。前記方法はＯ／Ｗ（Ｏｉｌ−ｉｎ−Ｗａｔｅｒ）法、Ｗ／Ｏ／Ｗ（Ｗａｔｅｒ−ｉｎ−Ｏｉｌ−ｉｎ−Ｗａｔｅｒ）法、及びＯ／Ｏ（Ｏｉｌ−ｉｎ−Ｏｉｌ）法に細分化することができる。
【０００７】
Ｏ／Ｗ法において、薬物及び高分子はジクロロメタンまたはメタノール／ジクロロメタン混合物のような有機溶媒に溶解される。前記薬物−高分子−有機溶媒の溶液は水相に分散される。水相における有機溶媒液滴（ｄｒｏｐｌｅｔ）の形成を補助するため、乳化剤（通常、界面活性剤）が水相に加えられる。撹拌を通じて有機溶媒を蒸発させ、液滴が封入薬物とともに高分子微粒子として固形化される。
【０００８】
Ｗ／Ｏ／Ｗ法において、薬物及び有機溶媒を含むＷ／Ｏ乳剤を製造するため、水溶性薬物溶液を用意した後、それを有機溶媒内の高分子溶液に分散させる。Ｗ／Ｏ／Ｗ乳剤を形成するため、前記Ｗ／Ｏ高分子−薬物乳剤を水相に乳化させる。撹拌しながら有機溶媒を蒸発させ、乳剤内の高分子−薬物液滴を微粒子として固形化させる。
【０００９】
Ｏ／Ｏ法において、薬物及び高分子を水と混合される溶媒（例えば、アセトニトリル）に溶解させる。Ｏ／Ｏ乳剤を製造するため、前記溶液をＳＰＡＮ８０のような乳化剤の存在下でオイル相に乳化させる。有機溶媒はオイルによって抽出され、濾過によって微粒子が得られる。
【００１０】
国際出願ＰＣＴ／ＪＰ１９９３／０１６７３号には、溶媒蒸発法のうちＯ／Ｗ法を用いて抗精神病薬含有徐放性微粒球を製造する方法が開示されている。具体的に、該特許文献には、ハロゲン化アルカン溶媒、例えば、ジクロロメタンを用いて徐放性微粒球を製造する方法が開示されているが、ハロゲン化アルカンを溶媒として用いる場合、生分解性高分子及び薬物からなる微粒球内に前記ハロゲン化アルカン溶媒が残留することがあり、これは除去し難い。このような微粒球内におけるハロゲン化アルカン溶媒の残存は毒性及び発癌性を引き起こす恐れがあるため、生体内投与のため、徐放性微粒球の製造過程で必ず解決すべき重要な課題の１つである。
【００１１】
このような残存ハロゲン化アルカン溶媒を除去するため、一般に徐放性微粒球の製造過程で熱を加えるが、このように加熱すれば、ＰＬＧＡのようなポリエステル類生分解性高分子の加水分解が促進されて分子量が急激に落ち、薬物の徐放性が低下するという問題が生じる。したがって、ハロゲン化アルカン溶媒を容易に除去すると共に、生分解性高分子の加水分解を最小化できる徐放性微粒子の製造方法の開発が求められている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
本発明は、溶媒蒸発法を用いた薬物含有徐放性微粒子の製造方法において、前記微粒子内に残留するハロゲン化アルカン溶媒を容易に除去すると共に、前記微粒子内の生分解性高分子の分子量減少を最小化することで、薬物の優れた徐放性を維持することができる薬物含有徐放性微粒子の製造方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明は、上記の課題を解決するための手段として、
（ａ）生分解性高分子及び薬物をハロゲン化アルカン溶媒に溶解させて薬物含有生分解性高分子溶液を製造する段階；
（ｂ）前記薬物含有生分解性高分子溶液を、界面活性剤を含む連続相で均質に混合して分散相を形成する段階；
（ｃ）前記連続相及び分散相を含むエマルションをハロゲン化アルカン溶媒の沸点未満の温度で保持し、前記連続相内に微粒子を形成する段階；
（ｄ）前記微粒子を１次乾燥する段階；
（ｅ）１次乾燥された微粒子をアルコール水溶液に混合した後、前記アルコール水溶液をハロゲン化アルカン溶媒の沸点以上の温度で保持し、残留するハロゲン化アルカン溶媒を微粒子から抽出及び蒸発させる段階；及び
（ｆ）得られた微粒子を２次乾燥して薬物含有微粒子を生成する段階を含む薬物含有徐放性微粒子の製造方法を提供する。
【発明の効果】
【００１４】
本発明の薬物含有徐放性微粒子の製造方法によれば、微粒子内に残留するハロゲン化アルカン溶媒を容易に除去すると共に、微粒子内の生分解性高分子の加水分解による分子量減少を最小化することができ、それによって薬物の優れた徐放性を有する薬物含有徐放性微粒子を製造することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
本発明は、（ａ）生分解性高分子及び薬物をハロゲン化アルカン溶媒に溶解させて薬物含有生分解性高分子溶液を製造する段階；（ｂ）前記薬物含有生分解性高分子溶液を、界面活性剤を含む連続相で均質に混合して分散相を形成する段階；（ｃ）前記連続相及び分散相を含むエマルションをハロゲン化アルカン溶媒の沸点未満の温度で保持し、前記連続相内に微粒子を形成する段階；（ｄ）前記微粒子を１次乾燥する段階；（ｅ）１次乾燥された微粒子をアルコール水溶液に混合した後、前記アルコール水溶液をハロゲン化アルカン溶媒の沸点以上の温度で保持し、残留するハロゲン化アルカン溶媒を微粒子から抽出及び蒸発させる段階；及び（ｆ）得られた微粒子を２次乾燥して薬物含有微粒子を生成する段階を含む薬物含有徐放性微粒子の製造方法に関する。
【００１６】
以下、本発明の薬物含有徐放性微粒子の製造方法を具体的に説明する。
【００１７】
本願で用いられる用語「溶媒蒸発法」は、生分解性高分子及び薬物を有機溶媒に溶解させて製造した薬物含有生分解性高分子溶液を、界面活性剤を含む連続相に添加した後、それから得られた微粒子をアルコール水溶液に添加して薬物含有微粒子を形成し、前記薬物含有微粒子から残留する有機溶媒を除去する方法を称する。
【００１８】
本発明の製造方法は、（ａ）生分解性高分子及び薬物をハロゲン化アルカン溶媒に溶解させて薬物含有生分解性高分子溶液を製造する段階を含む。
【００１９】
前記段階（ａ）は、生分解性高分子をハロゲン化アルカン溶媒に溶解させて生分解性高分子溶液を製造した後、前記生分解性高分子溶液に薬物を溶解または分散させて薬物含有生分解性高分子溶液を製造する方法、または生分解性高分子及び薬物を同時にハロゲン化アルカン溶媒に溶解させて薬物含有生分解性高分子溶液を製造する方法で行うことができる。
【００２０】
前記生分解性高分子の重量平均分子量は、特に制限されないが、その下限が１０，０００以上、望ましくは３０，０００以上、より望ましくは５０，０００以上、さらに望ましくは７５，０００以上であり得、その上限が５００，０００以下、望ましくは４００，０００以下、より望ましくは３００，０００以下、さらに望ましくは２００，０００以下であり得る。
【００２１】
前記生分解性高分子の種類は、特に制限されないが、望ましくはポリエステルが使用でき、特にポリカプロラクトン、乳酸‐カプロラクトン共重合体、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、乳酸‐グリコール酸共重合体及びこれらの混合物からなる群より選択でき、より望ましくは乳酸‐グリコール酸共重合体を使用することができる。
【００２２】
前記生分解性高分子として乳酸‐グリコール酸共重合体を使用する場合、前記共重合体内の乳酸とグリコール酸とのモル比は９９：１〜５０：５０であり得、望ましくは７５：２５であり得る。本発明で使用可能な市販中の生分解性高分子の例としては、エボニック社製のＲｅｓｏｍｅｒ  ＲＧ  ７５５Ｓ、Ｒｅｓｏｍｅｒ  ＲＧ  ７５６Ｓ及びＲｅｓｏｍｅｒ  ＲＧ  ８５８Ｓなどが挙げられる。
【００２３】
前記段階（ａ）で使用される薬物の種類は、特に制限されず、例えば、抗癌剤；抗不安剤、抗うつ剤、神経安定剤及び抗精神神経用剤などのような抗精神病薬物；高脂血症治療剤、高血圧治療剤、低血圧治療剤、抗血栓剤、血管弛緩剤及び不整脈治療剤などのような心血関係治療剤；てんかん治療剤；抗潰瘍剤などのような胃腸関係治療剤；リュウマチ治療剤；鎮痙剤；結核治療剤；筋弛緩剤；骨粗鬆症治療剤；勃起不全治療剤；止血剤；性ホルモン剤などのようなホルモン剤；糖尿治療剤；抗生剤；抗真菌剤；抗ウイルス剤；解熱鎮痛消化剤；自律神経調節剤；コルチコステロイド；利尿剤；抗利尿剤；鎮痛剤；麻酔剤；抗ヒスタミン剤；抗原虫剤；抗貧血剤；抗喘息剤；痙攣防止剤；解毒剤；抗片頭痛剤；抗嘔吐剤；抗パーキンソン剤；抗てんかん剤；抗血小板剤；鎮咳去たん剤；気管支拡張剤；強心剤；免疫調節剤；タンパク質薬物；遺伝子薬物；及びこれらの混合物から選択でき、望ましくは抗癌剤、抗精神病薬物、高脂血症治療剤、高血圧治療剤、てんかん治療剤、胃腸関係治療剤、リュウマチ治療剤、鎮痙剤、結核治療剤、筋弛緩剤、不整脈治療剤、骨粗鬆症治療剤、勃起不全治療剤、止血剤、抗ウイルス剤、ホルモン剤、抗生剤、糖尿治療剤、抗真菌剤、抗血栓剤、解熱鎮痛消化剤及びこれらの混合物からなる群より選択することができる。
【００２４】
上述した薬物のうち抗精神病薬物の種類は、特に制限されないが、望ましくはハロペリドール（ｈａｌｏｐｅｒｉｄｏｌ）、ブロムペリドール（ｂｒｏｍｐｅｒｉｄｏｌ）、マレイン酸フルフェナジン（ｆｌｕｐｈｅｎａｚｉｎｅｍａｌｅａｔｅ）、クロルプロマジン（ｃｈｌｏｒｐｒｏｍａｚｉｎｅ）、ヒベンズ酸クロルプロマジン（ｃｈｌｏｒｐｒｏｍａｚｉｎｅｈｉｂｅｎｚａｔｅ）、スルピリド（ｓｕｌｐｉｒｉｄｅ）、塩酸カルピプラミン（ｃａｒｐｉｐｒａｍｉｎｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、マレイン酸カルピプラミン（ｃａｒｐｉｐｒａｍｉｎｅ ｍａｌｅａｔｅ）、塩酸クロカプラミン（ｃｌｏｃａｐｒａｍｉｎｅ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、塩酸モサプラミン（ｍｏｓａｐｒａｍｉｎｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、リスペリドン（ｒｉｓｐｅｒｉｄｏｎｅ）、クロザピン（ｃｌｏｚａｐｉｎｅ）、オランザピン（ｏｌａｎｚａｐｉｎｅ）、セルチンドール（ｓｅｒｔｉｎｄｏｌｅ）及びこれらの混合物からなる群より選択でき、より望ましくはリスペリドンまたはその酸付加塩を使用することができる。
【００２５】
前記段階（ａ）において、生分解性高分子及び薬物を溶解させる溶媒として使用されるハロゲン化アルカンは、沸点が１２０℃以下であり、水と混和しない性質を有することが望ましい。ハロゲン化アルカン溶媒の水と混和しない性質を用いることで、後述する段階（ｂ）で、界面活性剤を含む連続相内に薬物含有生分解性高分子溶液を均質に混合して分散相または不連続相を形成することができる。
【００２６】
前記段階（ａ）で使用されるハロゲン化アルカン溶媒の種類は、特に制限されないが、望ましくは塩化アルカンであり得、より望ましくはジクロロメタン、クロロホルム、クロロエタン、ジクロロエタン、トリクロロエタン及びこれらの混合物からなる群より選択でき、最も望ましくはジクロロメタンを使用することができる。
【００２７】
本発明の製造方法は、（ｂ）前記薬物含有生分解性高分子溶液を界面活性剤を含む連続相で均質に混合して分散相を形成する段階を含む。
【００２８】
前記段階（ｂ）において、薬物含有生分解性高分子溶液と界面活性剤とを含む連続相を均質に混合する方法は、特に制限されないが、望ましくは高速撹拌機を用いて行うことができる。
【００２９】
前記段階（ｂ）のように、前記連続相及び分散相を含むエマルションを形成する場合、薬物含有生分解性高分子溶液は、界面活性剤を含む連続相内で均質に分散され、液滴状の分散相または不連続相を形成する。
【００３０】
前記段階（ｂ）で使用される界面活性剤の種類は、特に制限されず、薬物含有生分解性高分子溶液が連続相内で安定的な液滴の分散相を形成し、Ｏ／Ｗエマルションの形成を補助できるものであれば、如何なるものでも使用することができる。望ましくは、前記界面活性剤として、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロース、レシチン、ゼラチン、ポリビニルアルコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル及びポリオキシエチレンヒマシ油誘導体などのような非イオン性界面活性剤；ラウリル硫酸ナトリウム及びステアリン酸ナトリウムなどのような陰イオン性界面活性剤；イミダゾール、エステルアミン、線状ジアミン及び脂肪族アミンなどのような陽イオン性界面活性剤、並びにこれらの混合物からなる群より選択でき、最も望ましくはポリビニルアルコールを使用することができる。
【００３１】
前記段階（ｂ）において、界面活性剤を含む連続相中の界面活性剤の含量は、界面活性剤を含む連続相の全体体積を基準にして、０．０１ｗ／ｖ％〜２０ｗ／ｖ％、望ましくは０．１ｗ／ｖ％〜５ｗ／ｖ％であり得る。界面活性剤の含量が０．０１ｗ／ｖ％未満であれば、連続相内に液滴状の分散相または不連続相が形成されないことがあり、界面活性剤の含量が２０ｗ／ｖ％を超えれば、過量の界面活性剤のため、連続相内に微粒子が形成された後、界面活性剤を除去することが困難である。
【００３２】
前記段階（ｂ）で使用される連続相としては水を使用することができる。連続相として水を使用する場合、後述する段階（ｃ）で連続相内に微粒子を形成した後、後述する段階（ｄ）を行う前に、濾過及び洗浄を通じて微粒子の表面に残留する連続相及びポリビニルアルコールのような水溶性界面活性剤をより容易に除去することができる。
【００３３】
前記段階（ｂ）で使用される、界面活性剤を含む連続相としては、ポリビニルアルコール水溶液を使用することが望ましい。すなわち、界面活性剤としてポリビニルアルコールを使用し、連続相として水を使用することができる。
【００３４】
本発明の製造方法は、（ｃ）前記段階（ｂ）で形成された分散相及び連続相を含むエマルションをハロゲン化アルカン溶媒の沸点未満の温度で保持し、前記連続相内に微粒子を形成する段階を含む。
【００３５】
前記段階（ｃ）において、液滴状の薬物含有生分解性高分子溶液（分散相または不連続相）及び界面活性剤を含む連続相を含むエマルションを、ハロゲン化アルカン溶媒の沸点未満の温度で一定時間、例えば、２〜３時間保持または撹拌すれば、分散相または不連続相である液滴状の薬物含有生分解性高分子溶液から連続相側にハロゲン化アルカン溶媒が抽出される。液滴状の薬物含有生分解性高分子溶液からハロゲン化アルカン溶媒が抽出されながら、前記液滴状の分散相または不連続相は固形化されて微粒子を形成することができる。
【００３６】
従来の溶媒蒸発法を用いた微粒子の製造方法では、前記液滴状の分散相または不連続相からハロゲン化アルカン溶媒を除去するため加熱し、その熱によって生分解性高分子の加水分解が生じて分子量が減少するという問題がある。
【００３７】
一方、本発明では、前記段階（ｃ）がハロゲン化アルカン溶媒の沸点未満の温度で行われるため、熱による生分解性高分子の加水分解を最小化しながら前記液滴状の分散相または不連続相が固形化され、それにより生分解性高分子及び薬物を含む微粒子を前記連続相内で形成することができる。
【００３８】
本発明の製造方法は、前記段階（ｃ）と後述する段階（ｄ）との間に、濾過及び洗浄を通じて連続相を除去して微粒子を得る段階をさらに含むことができる。
【００３９】
前記段階（ｃ）を行った結果、生分解性高分子、薬物及び残存するハロゲン化アルカン溶媒からなる微粒子が前記連続相内に分散され、懸濁液が生成される。前記懸濁液内には液体連続相、界面活性剤、抽出されたハロゲン化アルカン溶媒、及び分散された微粒子が存在する。したがって、後述する乾燥段階（ｄ）を行う前に、前記懸濁液を濾過して固形化された微粒子を得て、前記固形化された微粒子を水で１回以上、望ましくは１回〜３回洗浄して界面活性剤を除去し、さらに濾過して洗浄された微粒子を得ることができる。
【００４０】
残存する界面活性剤を除去するための洗浄段階は、通常連続相で使用された水を用いて行うことができ、前記洗浄段階は数回繰り返すことができる。
【００４１】
本発明の製造方法は、（ｄ）前記段階（ｃ）の後、または、前記濾過及び洗浄段階の後、前記微粒子を１次乾燥する段階を含む。
【００４２】
前記段階（ｄ）において、１次乾燥方法は特に制限されないが、望ましくは熱による生分解性高分子の損傷を最小化するため、真空乾燥で行うことができる。濾過及び洗浄を通じて得られた微粒子に対して真空乾燥を行う場合、微粒子内に存在する水分を蒸発または昇華によって除去することができる。前記真空乾燥は常温で行うことが望ましい。
【００４３】
前記段階（ｄ）の結果、前記１次乾燥によって得られた固形化された微粒子には固体膜が形成され、後述する段階（ｅ）でアルコール水溶液の温度をハロゲン化アルカン溶媒の沸点以上で保持させても、熱による生分解性高分子の加水分解を防止することができる。
【００４４】
本発明の製造方法は、（ｅ）前記段階（ｄ）で得られた１次乾燥された微粒子をアルコール水溶液に混合した後、前記アルコール水溶液をハロゲン化アルカン溶媒の沸点以上の温度で保持し、残留するハロゲン化アルカン溶媒を微粒子から抽出及び蒸発させる段階を含む。
【００４５】
前記段階（ｄ）で得られた１次乾燥された微粒子内には、生分解性高分子及び薬物の外にも、ハロゲン化アルカン溶媒が残存しているため、前記微粒子から残存する前記溶媒を除去する必要がある。
【００４６】
したがって、段階（ｄ）で得られた１次乾燥された微粒子をアルコール水溶液に混合した後、ハロゲン化アルカン溶媒の沸点以上の温度で一定時間、２時間〜３時間保持または撹拌すれば、前記微粒子内に残存するハロゲン化アルカン溶媒が前記アルコール水溶液中に溶解され、抽出及び蒸発することができる。
【００４７】
前記段階（ｅ）で使用されるアルコールの種類は特に制限されないが、望ましくはメタノール、エタノール、イソプロパノール及びこれらの混合物からなる群より選択でき、エタノールであることがより望ましい。
【００４８】
前記アルコール水溶液中のアルコールの含量は、アルコール水溶液の全体体積に対し、５体積％〜８０体積％、望ましくは１０体積％〜５０体積％であり得る。前記アルコールの含量が５体積％未満の場合は、前記微粒子内に残存するハロゲン化アルカン溶媒の抽出が容易でなく、さらに工程時間が長くなる恐れがある。前記アルコールの含量が８０体積％を超える場合は、前記微粒子同士で凝集が起きる恐れがある。
【００４９】
本発明の製造方法は、前記段階（ｅ）と後述する段階（ｆ）との間に、濾過及び洗浄を通じてアルコール水溶液を除去して微粒子を得る段階をさらに含むことができる。
【００５０】
前記段階（ｅ）を行った結果、アルコール水溶液はアルコール；水；及び生分解性高分子と薬物からなる微粒子；を含む。したがって、後述する乾燥段階（ｆ）を行う前に、前記アルコール水溶液を濾過して固形化された微粒子を得て、前記固形化された微粒子を水で１回以上、望ましくは１回〜３回洗浄してアルコールを除去し、さらに濾過して洗浄された微粒子を得ることができる。
【００５１】
前記アルコールを除去するための洗浄段階は、通常連続相で使用される水を用いて行うことができ、前記洗浄段階は数回繰り返すことができる。
【００５２】
本発明の製造方法は、（ｆ）前記段階（ｅ）の後、または、前記濾過及び洗浄段階の後、得られた微粒子を２次乾燥して薬物含有微粒子を生成する段階を含む。
【００５３】
前記段階（ｆ）において、２次乾燥方法は特に制限されないが、望ましくは熱による生分解性高分子の損傷を最小化するため、真空乾燥で行うことができる。濾過及び洗浄を通じて得られた微粒子に対して真空乾燥を行う場合、水、洗浄後残存するアルコール及び水内に残存するハロゲン化アルカン溶媒を蒸発または昇華を通じて微粒子から除去することができる。前記真空乾燥は、常温で行われることが望ましい。
【００５４】
前記段階（ｆ）の結果、生分解性高分子及び薬物からなる薬物含有徐放性微粒子を得ることができる。
【００５５】
本発明の製造方法によって製造された薬物含有徐放性微粒子には、ハロゲン化アルカン溶媒が残存せず、残存したときに問題となるハロゲン化アルカン溶媒の毒性及び発癌性を解消することができ、このように微粒子内に残存するハロゲン化アルカン溶媒の除去過程で、生分解性高分子の加水分解を最小化し、微粒子の薬物放出の徐放性を維持することができる。
【００５６】
従来技術のように、溶媒蒸発法を用いた薬物含有微粒子の製造過程において、前記微粒子内の生分解性高分子が加水分解して分子量が減少する場合、前記製造された微粒子を生体内に投与すれば、分子量の減少によって生分解性高分子の加水分解が速まり、薬物を徐々に放出する薬物の徐放性効果が奏されない恐れがある。
【００５７】
一方、本発明の製造方法によって薬物含有徐放性微粒子を製造すれば、生分解性高分子の加水分解を最小化して分子量の減少を防止できるため、前記微粒子を生体内に投与したとき、薬物の優れた徐放性効果を奏することができる。
【００５８】
本発明の製造方法によって製造された薬物含有徐放性微粒子は、微粒子全体重量に対して２０重量％〜９９重量％、望ましくは５０重量％〜８０重量％の生分解性高分子を含むことができる。
【実施例】
【００５９】
以下、本発明による実施例及び本発明によらない比較例を通じて本発明を詳しく説明するが、本発明の範囲が下記実施例によって制限されることはない。
【００６０】
実施例１
生分解性高分子として１０ｇのＰＬＧＡ（乳酸‐グリコール酸共重合体であって、乳酸とグリコール酸とのモル比が７５：２５である）及び薬物として８ｇのリスペリドンを４０ｍｌのジクロロメタン（沸点：３９．６℃）溶媒に溶解させて薬物含有生分解性高分子溶液を製造した。また、界面活性剤としてポリビニルアルコールを使用し、連続相として水を使用して５Ｌのポリビニルアルコール水溶液（濃度：０．２５ｗ／ｖ％）を製造した。次いで、前記薬物含有生分解性高分子溶液を前記ポリビニルアルコール水溶液に混合した後、高速撹拌して液滴状の分散相を形成した。また、前記連続相及び分散相を含むエマルションを１５℃で２時間〜３時間保持し、液滴状の薬物含有生分解性高分子溶液からポリビニルアルコール水溶液側にジクロロメタン溶媒を抽出して、前記液滴の固形化を通じて前記連続相内に微粒子を形成した。その後、固形化された微粒子を濾過した後、前記微粒子を水で３回洗浄してポリビニルアルコールを除去した。次いで、再度濾過して前記洗浄された微粒子を得た後、１次真空乾燥して微粒子内に残存する水分及びジクロロメタンを蒸発させることで、１次乾燥された微粒子を得た。前記１次乾燥された微粒子を５００ｍＬのエタノール水溶液（濃度：２５ｖ／ｖ％）に混合した後、４５℃で２時間〜３時間微粒子を撹拌して前記微粒子内に残留するジクロロメタンをエタノール水溶液側に抽出しながら蒸発させた。次いで、前記微粒子を含むエタノール水溶液を濾過した後、前記微粒子を水で３回洗浄してエタノールを除去した。その後、さらに濾過を通じて前記洗浄された微粒子を得た後、２次真空乾燥して微粒子内に残存する水分、ジクロロメタン及びエタノールを除去することで、薬物含有徐放性微粒子を得た。
【００６１】
比較例１
実施例１と同じ方法で薬物含有生分解性高分子溶液及び５Ｌのポリビニルアルコール水溶液を製造した。次いで、前記薬物含有生分解性高分子溶液を前記ポリビニルアルコール水溶液に混合した後、高速撹拌して液滴状の分散相を形成した。また、前記連続相及び分散相を含むエマルションを１５℃で２時間〜３時間保持して液滴状の薬物含有生分解性高分子溶液からポリビニルアルコール水溶液側にジクロロメタン溶媒を抽出し、前記液滴の固形化を通じて連続相内に微粒子を形成した。その後、微粒子を含む連続相を４５℃で２時間〜３時間撹拌して前記微粒子からジクロロメタンを蒸発させた後、固形化された微粒子を濾過した後、水で３回洗浄してポリビニルアルコールを除去した。次いで、再度濾過して前記洗浄された微粒子を得た後、真空乾燥して微粒子内に残存する水分及びジクロロメタンを蒸発させることで、薬物含有微粒子を得た。
【００６２】
比較例２
実施例１と同じ方法で薬物含有生分解性高分子溶液及び５Ｌのポリビニルアルコール水溶液を製造した。次いで、前記薬物含有生分解性高分子溶液を前記ポリビニルアルコール水溶液に混合した後、高速撹拌して液滴状の分散相を形成した。また、前記連続相及び分散相を含むエマルションを１５℃で２時間〜３時間保持して、液滴状の薬物含有生分解性高分子溶液からポリビニルアルコール水溶液側にジクロロメタン溶媒を抽出し、前記液滴の固形化を通じて前記連続相内に微粒子を形成した。その後、微粒子を含む連続相を４５℃で２時間〜３時間撹拌して前記微粒子からジクロロメタンを蒸発させ、前記微粒子をさらに固形化した。その後、固形化された微粒子を濾過した後、水で３回洗浄してポリビニルアルコールを除去した。次いで、再度濾過して前記洗浄された微粒子を得た後、１次真空乾燥して微粒子内に残存する水分及びジクロロメタンを蒸発させることで、１次乾燥された微粒子を得た。前記１次乾燥された微粒子を５００ｍＬのエタノール水溶液（濃度：２５ｖ／ｖ％）に混合した後、４５℃で２時間〜３時間微粒子を撹拌して残留するジクロロメタンを前記微粒子からエタノール水溶液の方に抽出しながら蒸発させた。次いで、前記微粒子を含むエタノール水溶液を濾過した後、前記微粒子を水で３回洗浄してエタノールを除去した。その後、再度濾過して前記洗浄された微粒子を得た後、２次真空乾燥して微粒子内に残存する水分、ジクロロメタン及びエタノールを除去することで薬物含有微粒子を得た。
【００６３】
試験例１：微粒子内の生分解性高分子の重量平均分子量の測定
実施例１、比較例１及び２で得られた、薬物含有微粒子内の生分解性高分子（すなわち、ＰＬＧＡ）の重量平均分子量を高性能液体クロマトグラフィー（ウォーターズ社製、ＧＰＣ−１５０Ｃ  Ｐｌｕｓ）を用いて下記のように測定した。分離カラムはＳｈｏｄｅｘ  ＧＰＣ  ＫＦ−Ｇ、８０４、８０３、８０２及び８０１の順に直列で連結して使用した。コラム温度を５０℃にし、移動相としてテトラヒドロプランを用いて１．０ｍｌ／分に移動させ、検出機は示差屈折計を使用した。その後、それぞれのポリスチレン標準液重量平均分子量の検量線を用いて試験液の重量平均分子量を計算した。
【００６４】
試験例２：微粒子内の残留溶媒量の測定
実施例１、比較例１及び２で得られた薬物含有微粒子内の残留溶媒量を、検査液及び標準液をヘッドスペースバイアルに５ｍｌずつ正確に採取して測定した。検査液及び標準液における、ジクロロメタン及びエタノールのピーク面積であるＡＴ及びＡＳをそれぞれ測定し、得られた微粒子内の残留溶媒量を下記式で計算した。
【００６５】
【数１】
2017524035.tif 000002
【００６６】
ＡＴ：検査液におけるジクロロメタン及びエタノールのピーク面積
ＡＳ：標準液におけるジクロロメタン及びエタノールのピーク面積
ＷＴ：得られた微粒子の採取量（ｇ）
ＷＳ：標準品の採取量（ｇ）
【００６７】
実施例１、比較例１及び２の試験例の測定結果を下記表１に示した。
【００６８】
【表１】
2017524035.tif 000003
【００６９】
表１に記載されたように、実施例１の場合、ハロゲン化アルカン溶媒の沸点未満の温度で連続相及び分散相を含むエマルションを保持して連続相内に微粒子を形成した後、１次真空乾燥して得られた微粒子をアルコール水溶液に混合し、ハロゲン化アルカン溶媒の沸点以上の温度で保持し、微粒子内に残留するハロゲン化アルカン溶媒を抽出及び蒸発させて除去した後、２次真空乾燥することで、微粒子内の生分解性高分子の加水分解を最小化しながら微粒子内の残存するハロゲン化アルカン溶媒を完全に除去した。
【００７０】
しかし、比較例１の場合、実施例１と異なって、１次真空乾燥及びアルコール水溶液による追加的なハロゲン化アルカン溶媒の除去なく、ハロゲン化アルカン溶媒の沸点以上の温度で微粒子を含む連続相を保持して、微粒子をさらに固形化させた後、真空乾燥を通じて微粒子を得ることで、微粒子内に残存するハロゲン化アルカン溶媒が多量存在することが分かる。
【００７１】
また、比較例２の場合、実施例１と異なって、１次真空乾燥の前にハロゲン化アルカン溶媒の沸点以上の温度で微粒子を含む連続相を保持して、微粒子をさらに固形化させる段階をさらに行うことで、微粒子内に残存するハロゲン化アルカン溶媒をすべて除去したが、それによって微粒子内の生分解性高分子の加水分解が起き、生分解性高分子の重量平均分子量が減少したことが分かる。
【００７２】
以上のように、本発明の製造方法によって薬物含有徐放性微粒子を製造する場合、微粒子内に残存するハロゲン化アルカン溶媒をすべて除去でき、その過程で微粒子内の生分解性高分子が加水分解して分子量が減少する問題も最小化することができる。したがって、本発明の製造方法によって製造された薬物含有徐放性微粒子は、毒性及び発癌性を有するハロゲン化アルカン溶媒を完全に除去すると共に、生分解性高分子の重量平均分子量を維持して薬物の徐放性を良好に維持することができる。
【国際調査報告】
2017524035.tif 000004
2017524035.tif 000005
2017524035.tif 000006
2017524035.tif 000007
2017524035.tif 000008
2017524035.tif 000009
2017524035.tif 000010
2017524035.tif 000011