(57)【要約】任意に種々の作用因子との組み合わせにおける、とりわけ種々の癌の治療のためのＣＢＬ０１３７と関連する方法及び組成物が提供される。例えば、キナーゼ阻害薬化学療法薬を用いた治療を受けている対象へ有効量のＣＢＬ０１３７を投与することを含む、癌の治療方法である。さらなる例としては、癌を治療することを必要とする対象へ、有効量のキナーゼ阻害薬化学療法薬を投与した後に、有効量のＣＢＬ０１３７を投与することを含む、癌の治療方法である。【選択図】図３
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
キナーゼ阻害薬化学療法薬を用いた治療を受けている対象へ有効量のＣＢＬ０１３７を投与することを含む、癌の治療方法。
【請求項２】
癌を治療することを必要とする対象へ、有効量のキナーゼ阻害薬化学療法薬を投与した後に、有効量のＣＢＬ０１３７を投与することを含む、癌の治療方法。
【請求項３】
癌を治療することを必要とする対象へ、有効量のＣＢＬ０１３７及び有効量のキナーゼ阻害薬化学療法薬を併用投与することを含む、癌の治療方法。
【請求項４】
癌を治療することを必要とする対象へ、有効量のＣＢＬ０１３７及び有効量のキナーゼ阻害薬化学療法薬からなる配合剤を投与することを含む、癌の治療方法。
【請求項５】
前記キナーゼ阻害薬化学療法薬は、ＢＩ−２３５６、スーテント、ＰＦ−５６２２７１、ＡＭＧ７０６、ダサチニブ、ソラフェニブ、ＧＳＫ４６１３６４Ａ、ｂｅｚ−２３５、及びラパチニブから選択される、先行請求項のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
前記キナーゼ阻害薬化学療法薬は、ソラフェニブである、先行請求項のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記ＣＢＬ０１３７及び／またはキナーゼ阻害薬化学療法薬は、静脈内に及び／または経口で投与される、先行請求項のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記ＣＢＬ０１３７及び／またはキナーゼ阻害薬化学療法薬は、治療量未満で投与される、先行請求項のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記治療量未満のＣＢＬ０１３７及び／または前記キナーゼ阻害薬化学療法薬は、認可適応量（ａｐｐｒｏｖｅｄ  ｌａｂｅｌ  ｄｏｓｅ）及び／または最大耐量（ＭＴＤ）の約５０％未満、または約６０％未満、または約７０％未満、または約８０％未満、または約８５％未満、または約９０％未満である、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
ＣＢＬ０１３７及び／またはキナーゼ阻害薬化学療法薬の治療可能時間域は拡大している、先行請求項のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記ヌクレオシド類似体化学療法薬の治療可能時間域拡大は、キナーゼ阻害薬化学療法薬維持療法を受ける癌患者の尤度を高めること、前記キナーゼ阻害薬化学療法薬の完全な投与計画を受ける癌患者の尤度を高めること、前記キナーゼ阻害薬化学療法薬の完全な投与計画よりも高いもの受けている癌患者の尤度を高めること、及び前記キナーゼ阻害薬化学療法薬処置の用量または長さを増大させることのうちの１つ以上を含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
ＣＢＬ０１３７及び前記キナーゼ阻害薬化学療法薬からなる組み合わせは、相乗効果を生じる、先行請求項のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
ＣＢＬ０１３７及び前記キナーゼ阻害薬化学療法薬からなる組み合わせは、相乗的な腫瘍発達遅延効果を生じる、先行請求項のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
ＣＢＬ０１３７及び前記キナーゼ阻害薬化学療法薬からなる組み合わせは、ＮＦ−κＢ遺伝子の相乗的な発現低下を生じる、先行請求項のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
ＣＢＬ０１３７及び前記キナーゼ阻害薬化学療法薬からなる組み合わせは、ＴＮＦ及びＩＬ−８のうちの１つ以上の発現の実質的に完全な抑止を生じる、先行請求項のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
前記癌は肝癌である、先行請求項のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
前記肝癌は、肝細胞癌（ＨＣＣ）である、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記癌は、原発腫瘍または二次性腫瘍である、請求項１６または１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
ヌクレオシド類似体化学療法薬を用いた治療を受けている対象へ、有効量のＣＢＬ０１３７を投与することを含む、癌の治療方法。
【請求項２０】
癌を治療することを必要とする対象へ、有効量のヌクレオシド類似体化学療法薬を投与した後に、有効量のＣＢＬ０１３７を投与することを含む、癌の治療方法。
【請求項２１】
癌を治療することを必要とする対象へ、有効量のＣＢＬ０１３７及び有効量のヌクレオシド類似体化学療法薬を併用投与することを含む、癌の治療方法。
【請求項２２】
癌を治療することを必要とする対象へ、有効量のＣＢＬ０１３７及び有効量のヌクレオシド類似体化学療法薬の配合剤を投与することを含む、癌の治療方法。
【請求項２３】
前記ヌクレオシド類似体化学療法薬は、ゲムシタビン、カペシタビン、５−フルオロウラシル、５’−デオキシ−５−フルオロウリジン、ＢＯＦ−Ａ２、フトラフル、ＵＦＴ、Ｓ−１、シタラビン、デシタビン、クラドリビン、クロファラビン、及びフルダラビンから選択される、請求項１９〜２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
前記ヌクレオシド類似体化学療法薬は、ゲムシタビンである、請求項１９〜２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
前記ＣＢＬ０１３７及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬は、静脈内に及び／または経口で投与される、請求項１９〜２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
前記ＣＢＬ０１３７及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬は、治療量未満で投与される、請求項１９〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
前記治療量未満のＣＢＬ０１３７及び／または前記ヌクレオシド類似体化学療法薬は、認可適応量及び／または最大耐量（ＭＴＤ）の約５０％未満、または約６０％未満、または約７０％未満、または約８０％未満、または約８５％未満、または約９０＆未満である、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
ＣＢＬ０１３７及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬の治療可能時間域は拡大している、請求項１９〜２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２９】
前記ヌクレオシド類似体化学療法薬の拡大した治療可能時間域は、ヌクレオシド類似体化学療法薬維持療法を受けている癌患者の尤度を増大させること、前記ヌクレオシド類似体化学療法薬の完全な投与計画を受けている癌患者の尤度を増大させること、前記ヌクレオシド類似体化学療法薬の完全な投与計画を越えるものを受けている癌患者の尤度を増大させること、及び前記ヌクレオシド類似体化学療法薬治療の用量または長さを増大させることのうちの１つ以上を含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
ＣＢＬ０１３７及び前記ヌクレオシド類似体化学療法薬からなる組み合わせは、相乗効果を生じる、請求項１９〜２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３１】
ＣＢＬ０１３７及び前記ヌクレオシド類似体化学療法薬からなる組み合わせは、相乗的な腫瘍発達遅延効果を生じる、請求項１９〜３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３２】
ＣＢＬ０１３７は、ゲムシタビン感度／耐性を制御する遺伝子の減少を生じる、請求項１９〜３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３３】
ＣＢＬ０１３７は、シチジンデアミナーゼサブユニット及びリボヌクレオチド還元酵素サブユニットのうちの１つ以上の減少を生じる、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記癌は、膵癌である、請求項１９〜３３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５】
前記膵癌は、膵管腺癌（ＰＤＡＣ）である、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記癌は、肺癌である、請求項１９〜３３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７】
前記肺癌は、非小細胞肺癌である、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記癌は、原発腫瘍または二次性腫瘍である、請求項１９〜３７のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（優先権）
本出願は、そのすべての内容が全体として参照により本明細書に組み込まれる２０１４年４月６日出願の米国仮出願第６１／９７５，８６５号由来の優先権を請求する。
【０００２】
（本発明の分野）
本発明は、ＣＢＬ０１３７及び種々の組み合わせ作用因子を用いた治療を含む、種々の癌の治療のための方法及び組成物に一部関する。
【背景技術】
【０００３】
種々の癌療法は、種々の腫瘍、ならびに、関連して、有効量及び副作用に関する問題となる平衡状態に対して無効性によって妨害される。実際、種々の作用因子の治療が採用されることは、特に単一療法が期待外れの臨床効果を提供している場合に、種々の作用因子の治療が採用されることは、癌療法において普遍的である。
【０００４】
それゆえ、一般的な癌療法の臨床上の有効性を改善する種々の癌の治療のための更なるアプローチが必要とされている。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
したがって、本発明は、種々の抗癌薬の有効性を高めることによって、例えば、治療上の有益性の喪失なく用量の減少を可能にすることによって腫瘍減少効果を改善すること及び／または療法の副作用を低下させることによって、より有効な癌療法をもたらす組成物及び方法を用意する。種々の態様において、本組成物及び方法は、患者を有益である相乗効果を提供する。種々の態様において、本組成物及び方法は、臨床効果の喪失なく用量減少を可能にし、それにより副作用を低下させ患者の生活の質を改善する。
【０００６】
いくつかの態様において、本発明は、有効量のＣＢＬ０１３７の組成物を、キナーゼ阻害薬またはヌクレオシド類似体化学療法薬を用いた治療を受けている対象へ投与することを含む、癌の治療方法を提供する。いくつかの態様において、本発明は、癌を治療することを必要とする対象へ、有効量のキナーゼ阻害薬またはヌクレオシド類似体化学療法薬を投与することと連続的にまたは同時に、有効量のＣＢＬ０１３７を投与することを含む、癌の治療方法を提供する。他の態様において、本発明は、ＣＢＬ０１３７及びキナーゼ阻害薬またはヌクレオシド類似体化学療法薬からなる配合剤の抗癌性使用に関する組成物を用意する。さらなる態様において、キナーゼ阻害薬またはヌクレオシド類似体化学療法薬を用いた種々の癌を治療する上での使用、あるいは当該癌の治療のための作用因子の製造における使用のためのＣＢＬ０１３７が提供される。
【０００７】
種々の態様において、ヌクレオシド類似体化学療法薬は、ゲムシタビンである。種々の実施形態において、キナーゼ阻害薬化学療法薬は、ソラフェニブである。
【０００８】
種々の実施形態において、ＣＢＬ０１３７及び／またはキナーゼ阻害薬若しくはヌクレオシド類似体化学療法薬は、治療量未満のＣＢＬ０１３７及び／またはキナーゼ阻害薬若しくはヌクレオシド類似体化学療法薬を用いた対象の治療を可能にする。種々の実施形態において、作用因子の組み合わせは、相乗効果を提供し及び／または治療からの対象の副作用を低下させる。例えば、種々の実施形態において、例えば、ＣＢＬ０１３７及びゲムシタビンまたは／ソラフェニブの使用は、当該作用因子単独のいずれかと比較して高い抗癌治療（例えば、腫瘍発達の減少）に備える。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】ＨｅｐＧ２腫瘍保有ヌードマウスの複数の群についてのカプラン・マイヤー生存曲線を示す。パネルＡは、（左から右へと標識した）ビヒクル（第一の行）または異なる投与計画のＣＢＬ０１３７（第三の行）、ソラフェニブ（第二の行）、若しくはＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブ（第四の行）を用いて処置した（ＨｅｐＧ２試験）腫瘍保有ヌードマウスの生存曲線を示す。パネルＢは、（左から右へと標識した）ビヒクル（第一の行）または異なる投与計画のＣＢＬ０１３７（第二の行）、ソラフェニブ（第三の行）、若しくはＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブ（第四の行）を用いて処置した（ＨｅｐＧ２（用量未満のＣＢＬ０１３７）試験）腫瘍保有ヌードマウスの生存曲線を示す。
【図２】Ｈｅｐ３Ｂ腫瘍保有ヌードマウスの複数の群についてのカプラン・マイヤー生存曲線を示す。具体的には、パネルＡは、（左から右へと標識した）ビヒクル（第一の行）または異なる投与計画のＣＢＬ０１３７（第二の行）、ソラフェニブ（第四の行）、若しくはＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブ（第三の行）を用いて処置した（Ｈｅｐ３Ｂ試験）腫瘍保有ヌードマウスの生存曲線を示す。パネルＢは、（左から右へと標識した）ビヒクル（第一の行）または異なる投与計画のＣＢＬ０１３７（第二の行）、ソラフェニブ（第三の行）、若しくはＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブ（第四の行）を用いて処置した（Ｈｅｐ３Ｂ（用量未満のＣＢＬ０１３７）試験）腫瘍保有ヌードマウスの生存曲線を示す。
【図３】ＨｅｐＧ２腫瘍保有ヌードマウスの複数の群における腫瘍体積の平均倍数変化を示す。パネルＡは、ビヒクルまたは異なる投与計画のＣＢＬ０１３７、ソラフェニブ、若しくはＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブを用いて処置した腫瘍保有ヌードマウスの腫瘍体積（ＨｅｐＧ２試験）の平均倍数変化を示す。パネルＢは、ビヒクルまたは異なる投与計画のＣＢＬ０１３７、ソラフェニブ、若しくはＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブを用いて処置した腫瘍保有ヌードマウスの腫瘍体積（ＨｅｐＧ２（用量未満のＣＢＬ０１３７）試験）における平均倍数変化を示す。平均倍数腫瘍発達は、各個々の腫瘍（１個体あたり２個）について１日目に対してＸ日目の腫瘍体積を標準化すること、次いで、標準化した値を各群におけるすべての腫瘍について平均することによって算出した。各群について、データは、当該群を代表するのに十分な数の測定結果（すなわち、当該データの歪みを防止するための群における個体総数の５０％以上についての測定結果）があった時点について表されている。誤差棒は、当該平均の標準誤差を表す。
【図４】Ｈｅｐ３Ｂ腫瘍保有ヌードマウスの複数の群における腫瘍体積の平均倍数変化を示す。パネルＡは、ビヒクルまたは異なる投与計画のＣＢＬ０１３７、ソラフェニブ、若しくはＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブを用いて処置した腫瘍保有ヌードマウスの腫瘍体積（Ｈｅｐ３Ｂ試験）の平均倍数変化を示す。ＥＯＴは、処置の終了を表す。パネルＢは、ビヒクルまたは異なる投与計画のＣＢＬ０１３７、ソラフェニブ、若しくはＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブを用いて処置した腫瘍保有ヌードマウスの腫瘍体積（Ｈｅｐ３Ｂ（用量未満のＣＢＬ０１３７）試験）の平均倍数変化を示す。平均倍数腫瘍発達は、各個々の腫瘍（１個体あたり２個）について１日目に対してＸ日目の腫瘍体積を標準化すること、次いで、標準化した値を各群におけるすべての腫瘍について平均することによって算出した。各群について、データは、当該群を代表するのに十分な数の測定結果（すなわち、当該データの歪みを防止するための群における個体総数の５０％以上についての測定結果）があった時点について表されている。誤差棒は、当該平均の標準誤差を表す。
【図５】ビヒクル、ＣＢＬ０１３７、ソラフェニブ、またはＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブを用いて処置した２時間後及び２４時間後のＨｅｐＧ２またはＨｅｐ３Ｂ腫瘍保有ヌードマウスについてのウェスタンブロット分析を示す。具体的には、当該ウェスタンブロットは、ｓｐｔ１６、ＳＳＲＰ１、ｐ５３、ｐ２１、Ｐ−ＥＲＫ、ＥＲＫ、Ｍｃｌ−１、及びＧＡＰＤＨ（対照）の発現をモニターした。パネルＡは、ＨｅｐＧ２試験由来の腫瘍保有ヌードマウスに対応しているのに対し、パネルＢは、Ｈｅｐ３Ｂ試験由来の腫瘍保有ヌードマウスに対応している。
【図６】ＨｅｐＧ２またはＨｅｐ３Ｂ腫瘍保有ヌードマウスについてＮＦ−κＢ標的遺伝子の発現に及ぼすＣＢＬ０１３７、ソラフェニブ、またはＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブ処置の効果を示す。具体的には、パネルＡ及びＢはそれぞれ、ＤＭＳＯ、ＣＢＬ０１３７、ソラフェニブ、ＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブ、ＤＭＳＯ＋ＴＮＦ、ＣＢＬ０１３７＋ＴＮＦ、ソラフェニブ＋ＴＮＦ、またはＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブ＋ＴＮＦを用いた処置後のＨｅｐＧ２腫瘍保有ヌードマウスにおけるＩＬ−８及びＴＮＦの発現に対応している。パネルＣ及びＤはそれぞれ、ＤＭＳＯ、ＣＢＬ０１３７、ソラフェニブ、ＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブ、ＤＭＳＯ＋ＴＮＦ、ＣＢＬ０１３７＋ＴＮＦ、ソラフェニブ＋ＴＮＦ、またはＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブ＋ＴＮＦを用いた処置後のＨｅｐ３Ｂ腫瘍保有ヌードマウスにおけるＩＬ−８及びＴＮＦの発現に対応している。
【図７】ＰＤＡ腫瘍保有ＳＣＩＤマウスの複数の群についてのカプラン・マイヤー生存曲線を示す。具体的には、パネルＡは、（左から右へと標識した）ビヒクル（第一の行）または異なる投与計画のＣＢＬ０１３７（第二の行）、ゲムシタビン（第七の行）、若しくはＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビン（第十の行）を用いて処置した（ＰＤＡ＃１３７５６試験）腫瘍保有ＳＣＩＤマウスの生存曲線を示す。パネルＢは、（左から右へと標識した）ビヒクル（第一の行）または異なる投与計画のＣＢＬ０１３７（第二の行）、ゲムシタビン（第四の行）、若しくはＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビン（第九の行）を用いて処置した腫瘍保有ＳＣＩＤマウスの生存曲線を示す。
【図８】Ｈ１９７５  ＮＳＣＬＣ腫瘍保有ヌードマウスの複数の群についてのカプラン・マイヤー生存曲線を示す。具体的には、パネルＡは、（左から右へと標識した）ビヒクル（第一の行）または異なる投与計画のＣＢＬ０１３７（第二の行）、ゲムシタビン（第三の行）、若しくはＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビン（第四の行）を用いて処置した（Ｈ１９７５  ＮＳＣＬＣ試験１）腫瘍保有ヌードマウスの生存曲線を示す。パネルＢは、（左から右へと標識した）ビヒクル（第三の行）または異なる投与計画のＣＢＬ０１３７（第六の行）、ゲムシタビン（第四の行）、若しくはＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビン（第五の行）を用いて処置した（Ｈ１９７５  ＮＳＣＬＣ試験２）腫瘍保有ヌードマウスの生存曲線を示す。
【図９】図９は、ＰＤＡ腫瘍保有ＳＣＩＤマウスの複数の群における腫瘍体積の平均倍数変化を示す。具体的には、パネルＡは、（左から右へと標識した）ビヒクル（第一の行）または異なる投与計画のＣＢＬ０１３７（第二の行）、ゲムシタビン（第三の行）、若しくはＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビン（第四の行）を用いて処置した腫瘍保有ＳＣＩＤマウスの腫瘍体積の平均倍数変化を示す。パネルＢは、（左から右へと標識した）ビヒクル（第一の行）または異なる投与計画のＣＢＬ０１３７（第二の行）、ゲムシタビン（第三の行）、若しくはＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビン（第四の行）を用いて処置した腫瘍保有ＳＣＩＤマウスの腫瘍体積（ＰＤＡ＃１３５９０試験）の平均倍数変化を示す。ＥＯＴは、処置の終了を表す。平均倍数腫瘍発達は、各個々の腫瘍（１個体あたり２個）について１日目に対してＸ日目の腫瘍体積を標準化すること、次いで、標準化した値を各群におけるすべての腫瘍について平均することによって算出した。各群について、データは、当該群を代表するのに十分な数の測定結果（すなわち、当該データの歪みを防止するための群における個体総数の５０％以上についての測定結果）があった時点について表されている。誤差棒は、当該平均の標準誤差を表す。
【図１０】Ｈ１９７５  ＮＳＣＬＣ腫瘍保有ヌードマウスの複数の群における腫瘍体積の平均倍数変化を示す。具体的には、パネルＡは、ビヒクル（第一の行）または異なる投与計画のＣＢＬ０１３７、ゲムシタビン、若しくはＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビンを用いて処置した腫瘍保有ヌードマウスの腫瘍体積の平均倍数変化を示す。パネルＢは、ビヒクルまたは異なる投与計画のＣＢＬ０１３７、ゲムシタビン、若しくはＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビンを用いて処置した腫瘍保有ヌードマウスの腫瘍体積（Ｈ１９７５  ＮＳＣＬＣ試験２）の平均倍数変化を示す。ＥＯＴは、処置の終了を表す。平均倍数腫瘍発達は、各個々の腫瘍（１個体あたり２個）について１日目に対してＸ日目の腫瘍体積を標準化すること、次いで、標準化した値を各群におけるすべての腫瘍について平均することによって算出した。各群について、データは、当該群を代表するのに十分な数の測定結果（すなわち、当該データの歪みを防止するための群における個体総数の５０％以上についての測定結果）があった時点について表されている。誤差棒は、当該平均の標準誤差を表す。
【図１１】インビトロでのＭｉａＰａｃａ２細胞及びＢＸＰＣ３  ＰＤＡ細胞及びＨ１９７５細胞及びＡ５４９  ＮＳＣＬＣ細胞におけるＣＢＬ０１３７及びゲムシタビンの活性関連マーカーに関するウェスタンブロット分析を示す。具体的には、パネルＡは、ＭｉａＰａｃａ２  ＰＤＡに対応しており、パネルＢは、ＢｘＰＣ３  ＰＤＡに対応しており、パネルＣは、Ｈ１９７５  ＮＳＣＬＣに対応しており、かつパネルＤは、Ａ５４９  ＮＳＣＬＣに対応している。
【図１２】インビトロでのＰＤＡ細胞株及びＮＳＣＬＣ（Ｈ１９７５及びＡ５４９）細胞株におけるＣＤＡ及びｄＣＫの発現に及ぼすＣＢＬ０１３７±ゲムシタビン（または対照としてのＤＭＳＯ）の効果を示す。具体的には、パネルＡは、Ｈ１９７５  ＣＤＡに対応しており、パネルＢは、Ｈ１９７５  ｄＣＫに対応しており、パネルＣは、Ａ５４９  ＣＤＡに対応しており、パネルＤは、Ａ５４９  ｄＣＫに対応しており、パネルＥは、ＭｉａＰａｃａ２  ＣＤＡに対応しており、かつパネルＦは、ＭｉａＰａｃａ２  ｄＣＫに対応している。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本発明は、ＣＢＬ０１３７がキナーゼ阻害薬（例えば、ソラフェニブ）またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）を含む種々の作用因子との組み合わせで使用した場合に、相乗効果を有することができ、それゆえ、これらの処置の治療可能時間域を拡大する（治療量未満の投与を可能にすることを含む）という発見に一部基づいている。したがって、本発明は、癌を治療する改善された方法を提供する。
【００１１】
いくつかの態様において、本発明は、キナーゼ阻害薬化学療法薬を用いた治療を受けている対象へ有効量のＣＢＬ０１３７を投与することを含む、癌の治療方法を提供する。いくつかの態様において、本発明は、癌を治療することを必要とする対象へ、有効量のキナーゼ阻害薬化学療法薬を投与することと連続してまたは同時に、有効量のＣＢＬ０１３７を投与することを含む、癌の治療方法を提供する。他の態様において、本発明は、ＣＢＬ０１３７及びキナーゼ阻害薬化学療法薬からなる配合剤の組成物及び抗癌性使用を用意する。さらなる態様において、種々の癌を治療することにおける使用のためのＣＢＬ０１３７及びキナーゼ阻害薬化学療法薬、または種々の癌の治療のための作用因子の製造における使用のためのＣＢＬ０１３７及びキナーゼ阻害薬化学療法薬が提供される。
【００１２】
クラキシン（Ｃｕａｒｘｉｎ）−１３７としても公知のＣＢＬ０１３７は、そのすべての内容が全体として参照により本明細書により組み込まれる国際特許公開第ＷＯ２０１０／０４２４４５号において説明されている。ＣＢＬ０１３７は構造上、以下の通り表される。
【化１】
2017513933.tif 000003
【００１３】
種々の実施形態において、キナーゼ阻害薬化学療法薬は、１つ以上のチロシンタンパク質キナーゼ（例えば、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ）、Ｒａｆキナーゼ（例えば、Ｃ−Ｒａｆ、Ｂ−Ｒａｆ）、及び細胞内セリン／トレオニンキナーゼ（例えば、Ｃ−Ｒａｆ、野生型Ｂ−Ｒａｆ及び突然変異体Ｂ−Ｒａｆ）を阻害する。種々の実施形態において、キナーゼ阻害薬化学療法薬は、血管新生抑制性である。種々の実施形態において、キナーゼ阻害薬化学療法薬は、ＢＩ−２３５６、スーテント、ＰＦ−５６２２７１、ＡＭＧ７０６、ダサチニブ、ソラフェニブ、ＧＳＫ４６１３６４Ａ、Ｂｅｚ−２３５、及びラパチニブから選択される（その内容が参照により本明細書により組み込まれるＮａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗ  Ｃａｎｃｅｒ  ９，２８〜３９（２００９年１月号）を参照されたい）。具体的な実施形態において、キナーゼ阻害薬化学療法薬は、ソラフェニブ（例えば、ＮＥＸＡＶＡＲ）である。
【００１４】
種々の実施形態において、ＣＢＬ０１３７は、キナーゼ阻害薬化学療法薬（例えば、ソラフェニブ）を用いた治療を受けている患者の脈絡で使用する場合、またはキナーゼ阻害薬化学療法薬（例えば、ソラフェニブ）との配合剤または併用投与（例えば、連続してまたは同時に）として投与する場合、キナーゼ阻害薬化学療法薬（例えば、ソラフェニブ）及び／またはＣＢＬ０１３７の治療可能時間域を拡大する。
【００１５】
例えば、このような投与は、治療量未満の作用因子を投与することを可能にすることがある。種々の実施形態において、治療量未満のＣＢＬ０１３７及び／またはキナーゼ阻害薬化学療法薬は、認可適応量及び／または最大耐量（ＭＴＤ）の約５０％未満、または約６０％未満、または約７０％未満、または約８０％未満、または約８５％未満、または約９０％未満である。種々の実施形態において、治療量未満の使用は、作用因子のいずれかまたは作用因子の組み合わせの治療上の利益の程度に明らかに影響することはない。例えば、ソラフェニブについては、治療は、１日２回の４００ｍｇを含むことがあり、いくつかの実施形態において、治療量未満は１日約４００ｍｇ、または１日約４８０ｍｇ、または１日約５６０ｍｇ、または１日約６４０ｍｇ、または１日約６８０ｍｇ、または１日約７２０ｍｇを含むことがある。本発明は、毎日または１日２回の投与を可能にする。いくつかの実施形態において、本発明は、全量を毎日服用することを可能にし、１日２回投与に関する患者の服薬遵守問題を回避する。さらに、患者によっては、副作用のため、ソラフェニブの用量減少を必要とする（例えば、１日１回の４００ｍｇまで減少、隔日に４００ｍｇまでの減少）。いくつかの実施形態において、本方法は、このような用量減少についての必要性を防止する。
【００１６】
さらに、種々の実施形態において、ＣＢＬ０１３７は、キナーゼ阻害薬化学療法薬（例えば、ソラフェニブ）を用いた治療を受けている患者の脈絡で使用する場合、またはキナーゼ阻害薬化学療法薬（例えば、ソラフェニブ）との配合剤または併用投与（例えば、連続してまたは同時に）として投与する場合、用量減少を可能にし、このことはしたがって、低下を用意し、副作用である。例えば、ソラフェニブの以下の副作用、すなわち、リンパ球減少症、低リン血漿、出血、高血圧、下痢、発疹、脱毛症、手足症候群、掻痒、紅斑、アミラーゼの亢進、リパーゼの亢進、疲労、疼痛、悪心、嘔吐、白血球減少症、好中球減少症、貧血、血小板減少症、食欲不振、体重減少、低カルシウム血症、低カリウム血症、鬱、末梢性感覚ニューロパチー、耳鳴、うっ血性心不全、心筋梗塞、心筋虚血、嗄声、便秘、口内炎、消化不良、嚥下障害、乾燥肌、剥脱性皮膚炎、ざ瘡、皮膚落屑、関節痛、筋痛、腎不全、蛋白尿、勃起不全、無力症、発熱、インフルエンザ様疾病のうちの１つ以上は、低下または除外されることがある。
【００１７】
種々の実施形態において、ＣＢＬ０１３７及び／またはキナーゼ阻害薬化学療法薬（例えば、ソラフェニブ）の治療可能時間域拡大は、ＣＢＬ０１３７及び／またはキナーゼ阻害薬化学療法薬（例えば、ソラフェニブ）維持療法を受ける癌患者の尤度を高めること、ＣＢＬ０１３７及び／またはキナーゼ阻害薬化学療法薬（例えば、ソラフェニブ）の完全な投与計画を受ける癌患者の尤度を高めること、ＣＢＬ０１３７及び／またはキナーゼ阻害薬化学療法薬（例えば、ソラフェニブ）の非常に完全な投与計画を受けている癌患者の尤度を高めること、ならびにＣＢＬ０１３７及び／またはキナーゼ阻害薬化学療法薬（例えば、ソラフェニブ）処置の用量または長さを増大させることのうちの１つ以上を含む。
【００１８】
種々の実施形態において、ＣＢＬ０１３７及びキナーゼ阻害薬化学療法薬（例えば、ソラフェニブ）からなる組み合わせは、相乗効果を生じる。いくつかの実施形態において、当該相乗効果とは、腫瘍発達遅延効果、またはＮＦ−κＢ遺伝子の減少、またはＴＮＦ及びＩＬ−８のうちの１つ以上の発現の低下若しくは実質的に完全な抑止である。
【００１９】
いくつかの実施形態において、本明細書に説明する種々の癌（原発腫瘍または二次性腫瘍を含む）は、ＣＢＬ０１３７単一療法（別の作用因子、例えば、ソラフェニブを用いた治療を受けている患者の脈絡における単一療法を含むがこれに限定しない）またはキナーゼ阻害薬化学療法薬（例えば、ソラフェニブ）との併用療法を用いて治療されることがある。
【００２０】
いくつかの実施形態において、当該癌は肝癌である。いくつかの実施形態において、当該肝癌は肝細胞癌（ＨＣＣ）である。
【００２１】
種々の実施形態において、本明細書に説明する肝癌とは、原発性肝癌である。種々の実施形態において、原発性肝癌は、肝細胞癌（ＨＣＣ）、胆管癌、血管肉腫、及び肝芽腫のうちの１つである。種々の実施形態において、本発明には、肝癌に関する以下の危険因子、すなわち、硬変、多量のアルコール消費（アルコール依存症を含む）、非アルコール性脂肪肝疾患、肝炎ウイルスによる感染、喫煙、低免疫、家族歴、糖尿病、胆嚢除去、Ｘ線若しくはＣＴ走査由来の放射線、高体重、ビンロウ（ｂｅｔｅｌ  ｑｕｉｄ）消費、及びアフラトキシン消費のうちの１つ以上と関連した原発性肝癌の治療を含む。
【００２２】
いくつかの実施形態において、肝癌とは、二次性肝癌である。種々の実施形態において、二次性肝癌は、例えば、結腸癌、肺癌、胃癌、膵癌、乳癌、胆道癌、食道癌、卵巣癌、前立腺癌、腎癌、及び黒色腫を含む、肝臓へしばしば転移する複数のタイプの原発癌のうちの１つ以上に由来する。
【００２３】
種々の実施形態において、本明細書に説明する肝癌は、例えば、ＧＰＣ３、ＧＰＣ３＋熱ショックタンパク質７０＋グルタミンシンテターゼ。テロメラーゼ、増殖細胞核抗原標識指標、Ｋｉ−６７、ＭＩＢ−１  Ｅ−カドヘリン、及びβ−カテニンから選択される肝癌組織マーカーのうちの１つ以上を有する。種々の実施形態において、本明細書に説明する肝癌は、例えば、ＡＦＰ、ＡＦＰ−コンカナバリンＡ、ＡＦＰ−ＬＣＡ結合、等電点におけるＨＣＣ特異的ＡＦＰバンド（モノシアル酸化ＡＦＰ）、ＡＦＰレクチン親和性亜群（ＬＣＡ反応性ＬＣＡ−Ｌ３、赤血球凝集性植物性血球凝集素Ｅ４反応性ＡＦＰ−Ｐ４及びＰ５）、循環遊離ＡＦＰ−ＩｇＭ複合体、ビタミンＫ欠乏若しくは拮抗作用ＩＩ型によって生成されるＤＣＰ／プロトロンビン、硫酸ヘパリンプロテオグリカンであるＧＰＣ−３の可溶性ＮＨ２断片、ゴルジタンパク質７３、アイソ−γＧＴＰ、フェリチン、アルカリホスファターゼのバリアント、α１−アンチトリプシン、α１−酸糖タンパク質、オステオポンチン、アルドラーゼＡ、５［プライム］−ヌクレオチドホスホジエステラーゼ、ＣＫ１８、ＣＫ１９、ＴＰＡ、ＴＰＳ、循環遊離扁平上皮癌抗原−ＩｇＭ複合体、α−フコシルトランスフェラーゼ、α−Ｌ−フコシダーゼ。トランスフォーミング増殖因子β１、細胞間細胞接着分子１、抗ｐ５３抗体、インターロイキン８、インターロイキン６、インスリン様増殖因子ＩＩ、テロメラーゼ若しくはテロメラーゼ逆転写酵素ｍＲＮＡ、血管内皮増殖因子、野生型エストロゲン受容体バリアント、ビタミンＢ１２結合タンパク質、ニューロテンシン、遊離核酸、循環無細胞血清ＤＮＡ、例えば、ｐ１６過剰メチル化のような後成的異常、及び血漿プロテアソームから選択される肝癌血清マーカーのうちの１つ以上を有する。
【００２４】
種々の実施形態において、本明細書に説明する肝癌は、例えば、ＡＦＰ  ｍＲＮＡのＲＴＰＣＲによって検出される末梢血中の循環腫瘍細胞から選択される肝癌腫瘍細胞マーカーのうちの１つ以上を有する。種々の実施形態において、本明細書に説明する肝癌は、例えば、血漿グルタミン酸カルボキシ−ペプチダーゼホスホリパーゼＡ２  Ｇ１３及びＧ７及び他のｃＤＮＡマイクロアレイ由来のコードされたタンパク質、黒色腫抗原遺伝子１、３、Ｘ染色体１、２、４、５上の滑膜肉腫、筋形質カルシウム結合タンパク質１、ニューヨーク食道扁平上皮癌１型、ならびに循環メチル化ＤＮＡ（ｒａｓ結合ドメインファミリー１Ａ）から選択される肝癌遺伝マーカーのうちの１つ以上を有する。
【００２５】
いくつかの実施形態において、肝癌は、アルファ−フェトプロテインを発現する。いくつかの実施形態において、本発明の肝癌を定義するマーカーに関するさらなる詳細は、例えば、Ｓｔｕｒｇｅｏｎら．Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｔｕｍｏｒ  Ｍａｒｋｅｒｓ  ｉｎ  Ｌｉｖｅｒ，Ｂｌａｄｄｅｒ，Ｃｅｒｖｉｃａｌ，ａｎｄ  Ｇａｓｔｒｉｃ  Ｃａｎｃｅｒｓ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｉｎｃ．（２０１０）において認められ、その内容は参照により本明細書により組み込まれる。
【００２６】
種々の実施形態において、本明細書に説明する肝癌は、局在性の摘出可能型、局在性の摘出不可能型、進行性及び再発性のうちの１つ以上として分類される。種々の実施形態において、本明細書に説明する肝癌は、ＡＪＣＣ（ＴＮＭ）病期分類システムを用いて分類される。病期は、ローマ数字Ｉ〜ＩＶ（１〜４）を用いて標識される。いくつかの病期はさらに、Ａ及びＢまたはＣにさえ細かく分けられる。たいていの部分について、番号が小さければ小さいほど、癌はあまり広がっていない。病期ＩＶ（４）のようにより大きな番号は、より進行した癌を意味する。
【００２７】
種々の実施形態において、ＣＢＬ０１３７及び／またはキナーゼ阻害薬化学療法薬は、静脈内に及び／または経口で投与される。
【００２８】
いくつかの態様において、本発明は、ヌクレオシド類似体化学療法薬を用いた治療を受けている対象へ、有効量のＣＢＬ０１３７を投与することを含む、癌の治療方法を提供する。いくつかの態様において、本発明は、癌を治療することを必要とする対象へ、有効量のヌクレオシド類似体化学療法薬を投与することと連続してまたは同時に、有効量のＣＢＬ０１３７を投与することを含む、癌の治療方法を提供する。他の態様において、本発明は、ＣＢＬ０１３７及びヌクレオシド類似体化学療法薬からなる配合剤の組成物、及び抗癌性使用を提供する。さらなる態様において、種々の癌を治療する上でのまたは種々の癌の治療のための薬剤の製造における使用のためのＣＢＬ０１３７及びヌクレオシド類似体化学療法薬が提供される。
【００２９】
種々の実施形態において、ヌクレオシド類似体化学療法薬は、ゲムシタビン、カペシタビン、５−フルオロウラシル、５’−デオキシ−５−フルオロウリジン、ＢＯＦ−Ａ２、フトラフル、ＵＦＴ、Ｓ−１、シタラビン、デシタビン、クラドリビン、クロファラビン、及びフルダラビンから選択される。具体的な実施形態において、ヌクレオシド類似体化学療法薬は、ゲムシタビン（例えば、ＧＥＭＺＡＲ）である。
【００３０】
種々の実施形態において、ＣＢＬ０１３７は、ヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）を用いた治療を受けている患者の脈絡で使用する場合、またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）との配合剤または併用投与（例えば、連続してまたは同時に）として投与する場合、ヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）及び／またはＣＢＬ０１３７の治療可能時間域を拡大する。例えば、このような投与は、治療量未満の当該作用因子のいずれかを投与することができることがある。種々の実施形態において、治療量未満のＣＢＬ０１３７及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）は、認可適応量及び／または最大耐量（ＭＴＤ）の約５０％未満、または約６０％未満、または約７０％未満、または約８０％未満、または約８５％未満、または約９０％未満である。種々の実施形態において、治療量未満の使用は、当該作用因子の意いずれかまたは作用因子の組み合わせの治療上の利益の程度に明らかに影響するということはない。例えば、ゲムシタビンについては、治療は、体表面積の約１〜１．２ｇ／ｍ２を含むことがあり、いくつかの態様において、治療量未満は、約０．５〜０．６ｇ／ｍ２、または約０．６４〜０．７２ｇ／ｍ２、または約０．７〜０．８４ｇ／ｍ２、または約０．８〜０．９６ｇ／ｍ２、または約０．８５〜１．０２ｇ／ｍ２、または約０．９〜１．０８ｇ／ｍ２を含む。
【００３１】
さらに、種々の実施形態において、ＣＢＬ０１３７は、ヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）を用いた治療を受けている患者の脈絡で使用する場合、またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）を用いた配合剤または併用投与（例えば、連続してまたは同時に）として投与する場合、用量の減少を可能にし、このことはしたがって、副作用の低下を用意する。例えば、ゲムシタビンの次の副作用、すなわちインフルエンザ様症状（例えば、筋痛、発熱、頭痛、悪寒、及び疲労）、発熱（例えば、初回投与の６〜１２時間以内）、疲労、悪心、嘔吐、食欲不振、皮疹、アレルギー反応、下痢、虚弱、毛髪脱落、口内炎、睡眠困難、及び息切れのうちの１つ以上は低下または除去されることがある）。
【００３２】
種々の実施形態において、ＣＢＬ０１３７及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）の治療可能時間域拡大は、ＣＢＬ０１３７及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）維持療法を受ける癌患者の尤度を高めること、ＣＢＬ０１３７及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）の完全な投与計画を受ける癌患者の尤度を高めること、ＣＢＬ０１３７及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）の完全な投与計画よりも高いもの受けている癌患者の尤度を高めること、ならびに／あるいはＣＢＬ０１３７及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）処置の用量または長さを増大させることのうちの１つ以上を含む。
【００３３】
例えば、膵癌のための一般的なゲムシタビン投与計画は、１週間に１回を最長７週間までの注射（例えば、３０分間にわたる静脈内）で始まり、次いで処置なしで１週間となる。その後、投薬は、週１回を３週間に次いで、１週間の休薬となる。しばしば約４周期を使用する。
【００３４】
いくつかの実施形態において、膵癌のためのアジュバント化学療法及び化学放射線同時併用療法についての治療推奨は、ゲムシタビン１０００ｍｇ／ｍ２静脈内を毎週３０分間を３週間、若しくはゲムシタビンの１〜２週間後に開始する放射線中のポンプを介したゲムシタビン：５−フルオロウラシル（ＦＵ）２５０ｍｇ／ｍ２／日の連続静脈内注入の１〜２週間後に開始する同時の化学放射線同時併用療法、若しくは合計５０．４Ｇｙに至る１．８Ｇｙ／日の放射線療法、次いで、化学放射線同時併用療法の３〜５週間後：ゲムシタビン１０００ｍｇ／ｍ２静脈内を毎週３０分間、これらを２８日ごと３周期とする。上記の投与計画は、カペシタビン８００〜９００ｍｇ／ｍ２経口１日２回プラス放射線５〜６週間が先行することがある。
【００３５】
いくつかの実施形態において、局所的に進行する摘出不可能な疾患についての治療推奨は、ネオアジュバント療法：ゲムシタビン１０００ｍｇ／ｍ２静脈内を毎週３０分間を３週間、２８日ごとならびに／または同時の放射線療法４０Ｇｙを用いた１〜３日目及び２９〜３１日目の５−ＦＵ５００ｍｇ／ｍ２／日静脈内ボーラスとする。
【００３６】
いくつかの実施形態において、転移性疾患パクリタキセルタンパク質についての治療推奨は、各２８日周期の１、８、及び１５日目の３０〜４０分間の１２５ｍｇ／ｍ２プラスゲムシタビン１０００ｍｇ／ｍ２静脈内、またはゲムシタビン１０００ｍｇ／ｍ２静脈内を毎週３０分間を７週間、次いで１週間の休薬、次に毎週を３週間、２８日ごと、またはゲムシタビン１０００ｍｇ／ｍ２静脈内を３０分間、１日目及び１５日目にプラスシスプラチン５０ｍｇ／ｍ２静脈内を１日目及び１５日目に１時間、２８日ごと、またはゲムシタビン１０００ｍｇ／ｍ２静脈内を毎週７週間プラスエルロチニブ１００ｍｇ経口を１〜５６日目に毎日、次いで１週間の休薬、次に１、８、及び１５日目のゲムシタビン１０００ｍｇ／ｍ２、２８日ごとプラスエルロチニブ１００ｍｇ経口を１〜２８日目の毎日、最多４周期、またはゲムシタビン１０００ｍｇ／ｍ２静脈内を毎週３週間、２８日ごと、プラスカペシタビン１６６０ｍｇ／ｍ２／日を毎週３週間、２８日ごとと結び付けた。
【００３７】
本方法は、完全な治療計画が完遂でき、または用量は増大するよう、治療可能時間域を開くことがあり、治療を用いない期間は短縮若しくは除去され、または周期数は減少若しくは増加する。さらに、ＣＢＬ０１３７は、本明細書に説明する治療計画における作用因子のうちのいずれかを補充またはこれに取って代わることがある。
【００３８】
肺癌については、一般的なゲムシタビン投与計画とは、３週間の注射（例えば、３０分間の静脈内）に１週間の休薬を伴う。非小細胞肺癌についての第Ｉ期または第ＩＩ期についてのアジュバント化学療法のための許容され得る化学療法投与計画（４周期を完遂するための目標）は、シスプラチン７５ｍｇ／ｍ２静脈内を１日目に、プラスゲムシタビン１２５０ｍｇ／ｍ２を１日目及び８日目に２１日ごとにである。加えて、ゲムシタビンを有するオキサリプラチン（Ｇｅｍ／Ｏｘ）を使用することがある。
【００３９】
本方法は、完全な投与計画が完遂できるよう、または用量が増加するよう、治療可能時間域を開くことがあり、治療を用いない期間は短縮若しくは除去され、または周期数は減少若しくは増加する。さらに、ＣＢＬ０１３７は、本明細書に説明する治療計画における作用因子のうちのいずれかを補充またはこれに取って代わることがある。
【００４０】
種々の実施形態において、ＣＢＬ０１３７及びヌクレオシド類似体化学療法薬からなる組み合わせは、相乗効果を生じる。いくつかの実施形態において、当該効果は、相乗的な腫瘍発達遅延効果である。いくつかの実施形態において（例えば、膵癌または肺癌の治療において）、ＣＢＬ０１３７は、ゲムシタビンの感受性／耐性を制御する遺伝子の減少、例えば、シタジンデアミナーゼサブユニット及びリボヌクレオチド還元酵素サブユニットのうちの１つ以上の減少を生じる。
【００４１】
いくつかの実施形態において、種々の癌（原発腫瘍または二次性腫瘍を含む）は、本明細書で説明する場合、ＣＢＬ０１３７単一療法（別の作用因子（例えば、ゲムシタビン）を用いた治療を受けている患者の脈絡での単一療法を含むがこれに限定しない、またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）との併用療法を用いて治療することがある。
【００４２】
いくつかの実施形態において、当該癌とは膵癌である。いくつかの実施形態において、当該膵癌とは膵管腺癌（ＰＤＡＣ）である。
【００４３】
いくつかの実施形態において、当該膵癌とは、外分泌膵癌である。例えば、当該癌は、管腺癌であることがあり、任意に顕微鏡検査下で中程度に分化しているからほとんど分化していないまでの顆粒構造を特徴とすることがある。当該癌の病因は例えば、ＫＲＡＳ突然変異、ＣＤＫＮ２Ａ突然変異／欠失、ＴＰ５３突然変異、ＳＭＡＤ４欠失／突然変異、及びＳＷＩ／ＳＮＦ突然変異／欠失のうちの１つ以上であることがある。当該癌は、より多くの前癌性病変（例えば、膵上皮内腫瘍、乳頭状粘液腫瘍、及び粘液性嚢胞腫瘍）のうちの１つを含むことがある。外分泌膵癌は、粘液性、腺扁平上皮癌、印環細胞癌、肝様癌、粘液癌、未分化癌、及び破骨細胞様巨細胞を有する未分化癌でもあることがある。
【００４４】
さらに、本発明は、膵嚢胞性腫瘍及び膵神経内分泌腫瘍（例えば、膵内分泌腫瘍（ＰＥＴ）、及び膵神経内分泌腫瘍（ＰＮＥＴ））ならびに膵内分泌癌（ＰＮＥＣ）に備える。
【００４５】
いくつかの実施形態において、当該癌は、肺癌である。いくつかの実施形態において、当肺癌は、非小細胞肺癌である。
【００４６】
肺癌は、腫瘍細胞の顕微鏡下での様相に基づいて、２つのタイプ、すなわち、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）及び非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）へ大まかに分類される。ＳＣＬＣは、攻撃的かつ迅速に発達しており、タバコの喫煙と強力に関連している。ＳＣＬＣは、体内の多くの部位へ迅速に転移し、ＳＣＬＣが広範に広がった後に最もしばしば発見される。ＮＳＣＬＣは、最も普遍的な肺癌であり、当該腫瘍において認められる細胞のタイプによって示される３つの主要なタイプ、すなわち、腺癌、扁平上皮癌及び大細胞癌を有する。気管支類癌腫も提供される。
【００４７】
種々の実施形態において、ＣＢＬ０１３７及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬は、静脈内に及び／または経口で投与される。
【００４８】
種々の実施形態において、本作用因子は、アジュバント療法として有用である。アジュバント療法とは、一次治療または主要治療に加えて付与される治療である。種々の実施形態において、患者は、１つ以上の一次治療または主要治療を受けている最中である。ＣＢＬ０１３７（及び／またはキナーゼ阻害薬化学療法薬、例えば、ソラフェニブ及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）のような追加の作用因子）は、一次治療または主要治療とともに投与されることがある。例えば、ＣＢＬ０１３７（ならびに／あるいはキナーゼ阻害薬化学療法薬、例えば、ソラフェニブ及び／またはヌクレオシド類似薬化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）のような追加の作用因子）は、原発腫瘍（複数可）の切除に対するアジュバントであることがある。
【００４９】
また、種々の実施形態において、本作用因子は、ネオアジュバント療法として有用である。ネオアジュバント療法は、一次治療または主要治療の前に付与される療法を指し、しばしば、患者に一次治療または主要治療を準備させるためである。例えば、いくつかの実施形態において、本作用因子を用いた治療は、当該疾患の重症度を弱化させるであろうし、一次治療または主要治療をより受け入れやすくするであろう。具体的な実施形態において、ＣＢＬ０１３７（ならびに／あるいはキナーゼ阻害薬化学療法薬、例えば、ソラフェニブ及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）のような追加の作用因子）は、その後の切除（例えば、外科的切除）を許容するために患者を治療する上で使用される。
【００５０】
種々の実施形態において、追加の組み合わせ作用因子も提供され、これにはチオテパ及びシトキサンシクロスホスファミドのようなアルキル化薬、ブスルファン、インプロスルファン及びピポスルファンのようなスルホン酸アルキル、ベンゾドーパ、カルボクオン、メチュレドーパ、及びウレドーパのようなアジリジン、アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスホラミド及びトリメチロロメラミンを含むエチレンイミン及びメチラメラミン（ｍｅｔｈｙｌａｍｅｌａｍｉｎｅ）、アセトゲニン（例えば、ブラタシン及びブラタシノン）、カンプトテシン（合成類似体であるトポテカンを含む）、ブリオスタチン、カリスタチン、ＣＣ−１０６５（そのアドゼレシン、カルゼレシン及びビゼレシン合成類似体を含む）、クリプトフィシン（例えば、クリプトフィシン１及びクリプトフィシン８）、ドラスタチン、デュオカルマイシン（合成類似体であるＫＷ−２１８９及びＣＢ  １−ＴＭ１を含む）、エリュテロビン、パンクラチスタチン、サルコジクチイン、スポンジスタチン、クロランブシル、クロマファジン、シクロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシドヒドロクロリド、メルファラン、ノベムビチン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタードのような窒素マスタード、カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、及びラニムスチンのようなニトロソウレア、エンジイン抗生物質（例えば、カリケアマイシン、特にカリケアマイシンガンマ１及びカリケアマイシンオメガ１（例えば、Ａｇｎｅｗ，Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．，３３：１８３〜１８６（１９９４）を参照されたい））、ジネミシンＡを含むジネミシン、クロドロナートのようなビスホスホナート、エスペラマイシン、ならびにネオカルジノスタチンクロモフォア及び関連色素タンパク質エンジイン抗生物質クロモフォア）、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、オートラマイシン（ａｕｔｈｒａｍｙｃｉｎ）、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、アドリアマイシンドキソルビシン（モルホリノ−ドキソルビシン、シアノモルホリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシン及びデオキシドキソルビシンを含む）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、ミトマイシンＣのようなミトマイシン、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン（ｐｏｔｆｉｒｏｍｙｃｉｎ）、ピューロマイシン、ケラマイシン（ｑｕｅｌａｍｙｃｉｎ）、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン、メトトレキサート及び５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）のような代謝拮抗薬、デノプテリン、メトトレキサート、プテロプレリン、トリメトレキサートのような葉酸類似体、フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミピリン、チオグアニンの���うなプリン類似体、アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフル、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジンのようなピリミジン類似体、カルステロン、ドロモスタノロンプロピオナート、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトンのようなアンドロゲン、アミノグルテチリド、ミトタン、トリロスタンのような腎臓拮抗物質（ａｎｔｉ−ａｄｒｅｎａｌ）、フロリン酸のような葉酸補液、アセグラトン、アルドホスファミドグリコシド、アミノレブリン酸、エニルウラシル、アムサクリン、ベストラブシル、ビサントレン、エダトレキサート、デメコルチン、ジアジクオン、エルホルミチン（ｅｌｆｏｒｍｉｔｈｉｎｅ）、エリプチニウムアセタート、エポチロン、エトグルシド、硝酸ガリウム、ヒドロキシ尿素、レンチナン、ロニダイニン（ｌｏｎｉｄａｉｎｉｎｅ）、マイタンシン及びアンサミトシンのようなマイタンシノイド、ミトグアゾン、ミトキサントロン、モピダンモール（ｍｏｐｉｄａｎｍｏｌ）、ニトラエリン、ペントスタチン、フェナメット、ピラルビシン、ロソキサントロン、ポドフィリン酸、２−エチルヒドラジド、プロカルバジン、ＰＳＫ多糖複合体（ＪＨＳ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，オレゴン州ユージーン市）、ラゾキサン、リゾキシン、シゾフラン、スピロゲルマニウム、テヌアゾン酸、トリアジコン、２，２’，２”−トリクロロトリエチルアミン、トリコテセン（例えば、Ｔ−２毒素、ベラクリンＡ、ロリジンＡ及びアングイジン）、ウレタン、ビンデシン、ダカルバジン、マンノムスチン、ミトブロニトール、ミトラクトール、ピポブロマン、ガシトシン（ｇａｃｙｔｏｓｉｎｅ）、アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）、シクロホスファミド、チオテパ、タキソイド、例えば、タキソールパクリタキセル（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，ニュージャージー州プリンストン市）、アブラキサンクレモホル非含有、パクリタキセルのアルブミン操作型ナノ粒子製剤（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐａｒｔｎｅｒｓ，シャンバーグ村，１１１）、ならびにタキソテレドセタキセル（Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ  Ｒｏｒｅｒ，仏国アントニー市）、６−チオグアニン、メルカプトプリン、メトトレキサート、シスプラチン、オキサリプラチン及びカルボプラチンのような白金類似体、ビンブラスチン、白金、エトポシド（ＶＰ−１６）、イホスファミド、ミトキサントロン、ビンクリスチン、ナベルビン、ビノレルビン、ノバントロン、テニポシド、エダトレキサート、ダウノマイシン、アミノプレリン、ゼローダ、イバンドロナート、イリノテカン（カンプトサル、ＣＰＴ−１１）、（５−ＦＵ及びロイコボリンを用いたイリノテカンの治療投与計画を含む）、トポイソメラーゼ阻害薬ＲＦＳ２０００、ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）、レチノン酸のようなレチノイド、カペシタビン、コンブレタスタチン、ロイコボリン（ＬＶ）、オキサリプラチン治療投与計画（ＦＯＬＦＯＸ）を含むオキサリプラチン、ラパチニブ（タイケルブ）、細胞増殖を低下させるＰＫＣ−α、Ｒａｆ、Ｈ−Ｒａｓ、ＥＧＦＲ（例えば、エルロチニブ（タルセバ））及びＶＥＧＦ−Ａの阻害薬、ならびに上記のうちのいずれかの医薬として許容され得る塩、酸または誘導体を含むが、これらに限定しない。加えて、当該治療方法にはさらに、放射線の使用を含むことができる。加えて、当該治療方法にはさらに、光線力学療法の使用を含むことができる。
【００５１】
上述のように、種々の実施形態において、本発明は、癌及び／または腫瘍、例えば、癌及び／または腫瘍の治療または予防に関する。本明細書で使用する場合、「癌」または「腫瘍」は、身体の器官及び系の正常な機能に干渉する細胞の制御されていない増殖及び／または細胞生存の異常な増加及び／またはアポトーシスの阻害に関する。良性及び悪性の癌、ポリープ、過形成及び休眠状態の腫瘍または微小転移が含まれる。また、免疫系によって妨害されない異常な増殖を有する細胞（例えば、ウイルス感染した細胞）が含まれる。癌または腫瘍を有する対象とは、当該対象の体内に存在する客観的に測定可能な癌細胞を有する対象である。癌の元の位置から移動して生命の維持に必要な器官に播種する癌は、罹患した器官の機能的悪化を通じて、結局は対象の死亡をもたらすことができる。白血病のような造血系の癌は、対象における正常な造血性区画を打ち負かすことができ、それにより造血系不全を（貧血、血小板減少症及び好中球減少症の形態で）もたらし、究極的には死亡を生じる。
【００５２】
当該癌は、原発癌または転移癌であることがある。原発癌は、臨床的に検出可能となる減を発する部位にある癌細胞の領域であることがあり、原発腫瘍であることがある。対照的に、転移癌は、ある器官または部分から別の非隣接性器官または部分への疾患の伝播であることがある。転移癌は、局所領域における取り囲んでいる正常組織に浸透及び浸潤する能力を獲得し、新たな腫瘍を形成し、このことが局所転移となることがある癌細胞に起因することがある。「転移」は、体内での原発部位から他の場所への癌の伝播を指す。癌細胞は、原発腫瘍から離脱して、リンパ管及び血管へと浸透し、血流を通じて循環し、体内の他所にある正常組織における遠位の増殖巣において発達する（転移する）ことができる。転移は、局所的または遠位であることができる。転移とは、原発腫瘍から断絶している腫瘍細胞において随伴性であり、血流を通じて移動し、遠隔部位で停止する連続的な過程である。当該新規部位で、当該細胞は血液供給を確立し、生命を脅かす塊を形成するよう増殖することができる。当該腫瘍細胞内の刺激性及び阻害性の両分子経路はこの挙動を調節し、当該腫瘍細胞と遠位にある宿主細胞の間の相互作用も有意である。転移は、具体的な症状のモニタリングに加えて、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）走査、コンピュータ断層撮影法（ＣＴ）走査、血液及び血小板の計数、肝機能試験、胸部Ｘ線ならびに骨走査の単独での使用または併用を通じて検出されることがある。
【００５３】
当該癌は、リンパ管及び／または血管の壁に浸透する能力を獲得する癌細胞にも起因することがあり、この後、当該癌細胞は、血流を通じて体内の他の部位及び組織へと循環することができる（それにより循環腫瘍細胞となる）。当該癌は、リンパ性または血行性の伝播のような過程によることがある。当該癌は、別の部位では静止となって、管または壁に再浸透して、増殖し続け、ついには別の臨床的に検出可能な腫瘍を形成する腫瘍細胞に起因することもある。当該癌は、この新たな腫瘍であることがあり、これは、転移性（または二次性）腫瘍であることがある。
【００５４】
当該癌は、転移した腫瘍細胞に起因することがあり、これは、二次性腫瘍または転移性腫瘍であることがある。当該腫瘍の細胞は、元の腫瘍における細胞に類似していることがある。例として、乳癌または結腸癌が肝臓へ転移する場合、二次性腫瘍は、肝臓に存在しながら、異常な乳房細胞または結腸細胞から構成されるが、異常な肝細胞からは構成されない。肝臓における腫瘍はしたがって、転移性乳癌または転移性結腸癌であることがあり、肝癌ではない。
【００５５】
当該癌は、任意の組織由来の起源を有することがある。当該癌は、黒色腫、結腸、乳房、または前立腺を起源とすることがあり、したがって、元来それぞれ皮膚、乳房、または前立腺であった細胞から構成されることがある。当該癌は、血液系腫瘍であることもあり、これはリンパ腫であることがある。
【００５６】
本発明の代表的な癌及び／または腫瘍には、基底細胞癌、胆道癌、膀胱癌、骨癌、脳及び中枢神経系の癌、乳癌、腹膜癌、子宮頚癌、絨毛癌、結腸直腸癌、結合組織癌、消化器系の癌、子宮内膜癌、食道癌、眼癌、頭頚部癌、胃癌（ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）（胃腸癌を含む）、膠芽腫、肝癌（ｈｅｐａｔｉｃ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、肝細胞癌、上皮内腫瘍、腎癌（ｋｉｄｎｅｙ  ｃａｎｃｅｒ）または腎癌（ｒｅｎａｌ  ｃａｎｃｅｒ）、喉頭癌、白血病、肝癌（ｌｉｖｅｒ  ｃａｎｃｅｒ）、肺癌（例えば、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺の腺癌、及び肺の扁平上皮癌）、黒色腫、骨髄腫、神経芽腫、口腔癌（唇、舌、口、及び咽頭）、卵巣癌、膵癌、前立腺癌、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、直腸癌、呼吸器系の癌、唾液腺癌、肉腫、皮膚癌、扁平上皮癌、胃癌（ｓｔｏｍａｃｈ  ｃａｎｃｅｒ）、精巣癌、甲状腺癌、子宮癌または子宮内膜癌、泌尿器系の癌、外陰癌、ホジキンリンパ腫及び非ホジキンリンパ腫を含むリンパ腫、及びＢ細胞リンパ腫（軽度悪性リンパ腫／濾胞性非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）を含む）、小リンパ球性（ＳＬ）ＮＨＬ、中等度／濾胞性ＮＨＬ、中等度びまん性ＮＨＬ、重度免疫芽球姓ＮＨＬ、重度小非分割細胞性ＮＨＬ、巨大腫瘤病変ＮＨＬ、マントル細胞リンパ腫、エイズ関連リンパ腫、及びマクログロブリン血症、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、毛髪様細胞白血病、慢性骨髄芽球性白血病、ならびに他の癌腫及び肉腫、ならびに食後リンパ増殖性疾患（ＰＴＬＤ）、ならびに母斑症と関係した異常な血管増殖、浮腫（脳腫瘍と関係しているもののような）、及びメーグス症候群が含まれるが、これらに限定しない。
【００５７】
いくつかの実施形態において、本明細書に説明するＣＢＬ０１３７（ならびに／またはキナーゼ阻害薬化学療法薬、例えばソラフェニブ及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）のような追加の作用因子）には、すなわち、共有結合が組成物の活性を防止しないような当該組成物への任意のタイプの分子の共有結合によって修飾された誘導体を含む。例えば、限定するわけではないが、誘導体には、とりわけ、グリコシル化、脂質付加、アセチル化、ペグ化、リン酸化、アミド化、公知の保護基／遮断基による誘導体化、タンパク質切断、細胞リガンドまたは他のタンパク質への結合あんどによって修飾された組成物を含む。任意の数多くの化学修飾は、特異的化学的切断、アセチル化、ホルミル化、ツニカマイシンの代謝合成などを含むがこれらに限定しない公知の技術によって実施することができる。加えて、当該誘導体は、１つ以上の非従来性アミノ酸を含有することができる。
【００５８】
なおも他の実施形態において、本明細書に説明するＣＢＬ０１３７（及び／またはキナーゼ阻害薬化学療法薬、例えば、ソラフェニブ及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）のような追加の作用因子）は、化学的リンカーのようなエフェクター部分、例えば、蛍光色素、酵素、基質、生物発光材料、放射性材料、及び化学発光部分のような検出可能な部分、または例えばストレプトアビジン、アビジン、ビオチン、細胞毒、細胞毒性薬、及び放射性材料のような機能的部分を付加するために修飾することがある。
【００５９】
本明細書に説明するＣＢＬ０１３７（ならびに／あるいはキナーゼ阻害薬化学療法薬、例えば、ソラフェニブ及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）のような追加の作用因子）は、医薬として許容され得る塩を形成するために、無機酸若しくは有機酸と反応することのできる十分に塩基性の官能基、または無機酸若しくは有機酸と反応することのできるカルボキシル基を保有することができる。医薬として許容され得る酸付加塩は、当該技術分野で周知のように、医薬として許容され得る酸から形成される。このような塩には、例えば、それらが全体として参照により本明細書により組み込まれるＪｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，６６，２〜１９（１９７７）ならびにＴｈｅ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ；Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ  Ｕｓｅ．Ｐ．Ｈ．Ｓｔａｈｌ及びＣ．Ｇ．Ｗｅｒｍｕｔｈ（編），Ｖｅｒｌａｇ，チューリッヒ市（スイス国）２００２において列挙される医薬として許容され得る塩を含む。
【００６０】
医薬として許容され得る塩には、硫酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硝酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、酸性リン酸塩、イソニコチン酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、酸性クエン酸塩、酒石酸塩、オレイン酸塩、タンニン酸塩、パントテン酸塩、重酒石酸塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチシン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルカロン酸塩（ｇｌｕｃａｒｏｎａｔｅ）、糖酸塩、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、カンファースルホン酸塩、パモ酸塩、フェニル酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、アクリル酸塩、クロロ安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ｏ−アセトキシ安息香酸塩、ナフタレン−２−安息香酸塩、イソ酪酸塩、フェニル酪酸塩、ｏ−ヒドロキシ酪酸塩、ブチン−１，４−ジカルボン酸塩、ヘキシン−１，４−ジカルボン酸塩、カプリン酸塩、カプリル酸塩、ケイ酸塩、グリコール酸塩、ヘプタン酸塩、馬尿酸塩、リンゴ酸塩、ヒドロキシマレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、ニコチン酸塩、フタル酸塩、テレフタル酸塩、プロピオル酸塩、プロピオン酸塩、フェニルプロピオン酸塩、セバシン酸塩、スベリン酸塩、ｐ−ブロモベンゼンスルホン酸塩、クロロベンゼンスルホン酸塩、エチルスルホン酸塩、２−ヒドロキシエチルスルホン酸塩、メチルスルホン酸塩、ナフタレン−１−スルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホン酸塩、ナフタレン−１，５−スルホン酸塩、キシレンスルホン酸塩、及び酒石酸塩を非限定例として含む。
【００６１】
「医薬として許容され得る塩」という用語は、カルボン酸官能基のような酸性官能基と塩基とを有する本発明の組成物の塩も指す。適切な塩基には、ナトリウム、カリウム、及びリチウムのようなアルカリ金属の水酸化物、カルシウム及びマグネシウムのようなアルカリ土類金属の水酸化物、アルミニウム及び亜鉛のような他の金属の水酸化物、アンモニア、及び非置換またはヒドロキシ置換モノ−、ジ−、またはトリ−アルキルアミンのような有機アミン、ジシクロヘキシルアミン、トリブチルアミン、ピリジン、Ｎ−メチル、Ｎ−エチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、モノ−、ビス−、またはトリス（２−ヒドロキシエチル）アミンのようなモノ−、ビス−、またはトリス−（２−ＯＨ−低級アルキルアミン）、２−ヒドロキシ−ｔｅｒｔ−ブチルアミン、あるいはＮ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）アミンまたはトリ−（２−ヒドロキシエチル）アミンのようなＮ，Ｎ−ジ−低級アルキル−Ｎ−（ヒドロキシル−低級アルキル）−アミン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、ならびにアルギニン、リジン、及びこれらに類するもののようなアミノ酸を含むが、それらに限定しない。
【００６２】
いくつかの実施形態において、本明細書に説明する組成物は、医薬として許容され得る塩の形態にある。
【００６３】
さらに、本明細書に説明する任意のＣＢＬ０１３７（ならびに／あるいはキナーゼ阻害薬化学療法薬、例えば、ソラフェニブ及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）のような追加の作用因子）は、医薬として許容され得る担体またはビヒクルを含む組成物の構成要素として対象へ投与することができる。このような組成物は任意に、適切な投与のための形態を提供するよう、適切な量の医薬として許容され得る賦形剤を含むことができる。
【００６４】
医薬賦形剤は、水ならびに、ピーナッツ由、ダイズ油、鉱油、ゴマ油及びこれらに類するもののような、石油、動物起源、植物起源、または合成起源の油を含む、油のような液体であることができる。医薬賦形剤は例えば、塩類溶液、アカシアゴム、ゼラチン、デンプンペースト、タルク、ケラチン、コロイド状シリカ、尿素及びこれらに類するものであることができる。加えて、助剤、安定化剤、増粘剤、潤滑剤、及び着色料を使用することができる。一実施形態において、医薬として許容され得る賦形剤は、対象へ投与する場合、滅菌済みである。水は、本明細書に説明する任意の作用因子が静脈内投与される場合、有用な賦形剤である。塩類溶液ならびにデキストロース及びグリセロールの水溶液も、具体的には注射可能な溶液のための液体賦形剤として採用することができる。適切な医薬賦形剤には、デンプン、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、麦芽、コメ、小麦粉、白亜、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、モノステアリン酸グリセロール、タルク、塩化ナトリウム、乾燥スキムミルク、グリセロール、プロピレン、グリコール、水、エタノール及びこれらに類するものも含む。本明細書に説明する任意の作用因子は、所望の場合、少量の湿潤剤または乳化剤、あるいはｐＨ緩衝剤も含むことができる。
【００６５】
本発明には、本明細書に説明するＣＢＬ０１３７（ならびに／あるいはキナーゼ阻害薬化学療法薬、例えば、ソラフェニブ及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）のような追加の作用因子）は、液剤、懸濁剤、エマルション、ドロップ剤、錠剤、丸剤、ペレット剤、カプセル剤、液体含有カプセル剤、散剤、抒情性製剤、坐剤、エマルション、エアゾール、スプレー、懸濁剤、または使用に適した任意の他の形態を取ることができる。一実施形態において、当該組成物は、カプセルの形態にある（例えば、米国特許第５，６９８，１５５号を参照されたい）。適切な医薬賦形剤に関する他の例は、参照により本明細書に組み込まれるＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  １４４７〜１６７６（Ａｌｆｏｎｓｏ  Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ編，第１９版  １９９５）において説明されている。
【００６６】
必要な場合、ＣＢＬ０１３７（ならびに／あるいはキナーゼ阻害薬化学療法薬、例えば、ソラフェニブ及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）のような追加の作用因子）には、可溶化剤も含むことができる。また、当該作用因子は、当該技術分野で公知の適切なビヒクルまたは送達装置を用いて送達することができる。本明細書に概略する併用療法は、単一の送達ビヒクルまたは送達装置において同時送達することができる。投与のための組成物には任意に、例えば、注射部位における疼痛を弱化させるためのリグノカインのような局所麻酔薬を含むことができる。
【００６７】
本発明のＣＢＬ０１３７（ならびに／あるいはキナーゼ阻害薬化学療法薬、例えば、ソラフェニブ及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）のような追加の作用因子）を含む製剤は、単位剤形において簡便に呈されることがあり、医薬分野において周知の方法のいずれかによって調製されることがある。このような方法には概して、治療薬を、１つ以上の補助成分を構成する担体と結合させる工程を含む。典型的には、当該製剤は、当該治療薬を液体担体、微小に分割された固体担体、またはその両方と均一かつ入念に結合させること、次いで、必要な場合、当該生成物を所望の製剤の剤形（例えば、湿式または乾式造粒、粉末配合物などであり、それに続いて当該技術分野で公知の従来法を用いて錠剤化される）へと成形することによって調製される。
【００６８】
一実施形態において、本明細書に説明する任意のＣＢＬ０１３７（ならびに／あるいはキナーゼ阻害薬化学療法薬、例えば、ソラフェニブ及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）のような追加の作用因子）は、本明細書に説明する投与様式に適した組成物として、所定の手順に従って製剤化される。
【００６９】
投与経路には、例えば、皮内、筋肉内、腹腔内、静脈内、皮下、鼻内、硬膜外、経口、舌下、鼻内、脳内、膣内、経皮、直腸内、吸入による、または局所的に、特に耳、鼻、眼、若しくは皮膚へを含む。いくつかの実施形態において、投与することは、経口でまたは非経口注射によって果たされる。投与様式は、担当者の自由裁量となることができ、医学的容態の部位に一部依存する。たいていの場合、投与は結果的に、本明細書に説明する任意の作用因子の血流への放出を生じる。
【００７０】
本発明に説明するＣＢＬ０１３７（ならびに／あるいはキナーゼ阻害薬化学療法薬、例えば、ソラフェニブ及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）のような追加の作用因子）は、経口投与することができる。このようなＣＢＬ０１３７（ならびに／あるいは、キナーゼ阻害薬化学療法薬、例えばソラフェニブ及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）のような追加の作用因子）は、任意の他の簡便な経路によって、例えば、静脈内注入若しくはボーラス注射によって、上皮の若しくは粘膜皮膚の裏打ち（例えば、口腔粘膜、直腸及び腸の粘膜など）を通じての吸収によって投与することもでき、別の生物活性のある作用因子とともに投与することができる。投与は、全身性または局所性であることができる。種々の送達系、例えば、リポソーム、微粒子、マイクロカプセル、カプセルなどにおける封入は公知であり、投与するために使用することができる。
【００７１】
具体的な実施形態において、治療の必要のある領域へ局所的に投与することが望ましいことがある。
【００７２】
一実施形態において、本明細書に説明するＣＢＬ０１３７（ならびに／あるいはキナーゼ阻害薬化学療法薬、例えば、ソラフェニブ及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）のような追加の作用因子）は、ヒトへの経口投与に適した組成物として、所定の手順に従って製剤化される。経口送達のための組成物は、例えば、錠剤、ロゼンジ剤、水性または油性の懸濁剤、顆粒剤、散剤、エマルション、カプセル剤、シロップ剤、またはエリキシル剤の形態であることができる。経口投与される組成物は、１つ以上の作用因子、例えば、フルクトース、アスパルテームまたはサッカリンのような甘味料、ペパーミント、冬緑油、またはサクランボのような着香料、着色料、及び保存料を、医薬として美味な調製物を提供するために含むことができる。その上、錠剤または丸剤の形態の場合、組成物は、胃腸管における崩壊及び吸収を遅延させるために被覆され、それにより、延長した期間にわたって持続した作用を提供することができる。本明細書に説明する、浸透圧性で有効な、駆動性のあるＣＢＬ０１３７（ならびに／あるいはキナーゼ阻害薬化学療法薬、例えば、ソラフェニブ及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）のような追加の作用因子）を取り囲む選択的に浸透性のある膜も、経口投与される組成物に適している。これらの後者のプラットフォームにおいて、当該カプセルを取り囲んでいる環境からの液体は、当該駆動性化合物によって吸収され、これが、開口部を通じて当該作用因子または作用因子組成物を移動させるよう膨潤する。これらの送達プラットフォームは、即時放出製剤の急上昇する特性とは対照的に、本質的にはゼロの桁の送達特性を提供することができる。モノステアリン酸グリセロールまたはステアリン酸グリセロールのような時間遅延材料も有用であることができる。経口組成物には、マンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、セルロース、及び炭酸マグネシウムのような標準的な賦形剤を含むことができる。一実施形態において、当該賦形剤は、医薬等級である。懸濁剤は、当該有効化合物に加えて、例えば、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトール及びソルビタンエステル、微結晶性セルロース、メタ水酸化アルミニウム、ベントナイト、アガー−アガー、トラガカントなど、ならびにこれらの混合物のような懸濁剤を含有することがある。
【００７３】
非経口投与（例えば、静脈内、筋肉内、腹腔内、皮下及び関節内注射及び注入）に適した剤形には、例えば、液剤、懸濁剤、分散剤、エマルション、及びこれらに類するものを含む。当該剤形は、滅菌済みの注射可能媒体中に使用直前に溶解または懸濁することのできる滅菌済みの固体組成物（例えば、凍結乾燥した組成物）の形態で製造されることもある。当該剤形は、例えば、当該技術分野で公知の懸濁剤または分散剤を含有することがある。
【００７４】
本発明に説明するＣＢＬ０１３７（ならびに／あるいはキナーゼ阻害薬化学療法薬、例えば、ソラフェニブ及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）のような追加の作用因子）の薬用量は、投薬スケジュールと同様に、治療中の疾患、対象の全身の健康、及び投与する医師の自由裁量を含むがこれらに限定しない種々のパラメータによることができる。本明細書に説明する任意の作用因子は、投与を必要とする対象へ、追加の治療薬の投与の前（例えば、５分前、１５分前、３０分前、４５分前、１時間前、２時間前、４時間前、６時間前、１２時間前、２４時間前、４８時間前、７２時間前、９６時間前、１週間前、２週間前、３週間前、４週間前、５週間前、６週間前、８週間前、または１２週間前）、投与と同時またはその後（例えば、５分後、１５分後、３０分後、４５分後、１時間後、２時間後、４時間後、６時間後、１２時間後、２４時間後、４８時間後、７２時間後、９６時間後、１週間後、２週間後、３週間後、４週間後、５週間後、６週間後、８週間後、または１２週間後）に投与することができる。種々の実施形態において、本明細書に説明する任意の作用因子は、１分間空けて、１０分間空けて、３０分間空けて、１時間未満空けて、１時間空けて、１時間〜２時間空けて、２時間〜３時間空けて、３時間〜４時間空けて、４時間〜５時間空けて、５時間〜６時間空けて、６時間〜７時間空けて、７時間〜８時間空けて、８時間〜９時間空けて、９時間〜１０時間空けて、１０時間〜１１時間空けて、１１時間〜１２時間空けて、２４時間以下を空けてまたは４８時間以下を空けて投与される。
【００７５】
単回薬用量を生じるよう担体材料と混合した本明細書に説明するＣＢＬ０１３７（ならびに／あるいはキナーゼ阻害薬化学療法薬、例えば、ソラフェニブ及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）のような追加の作用因子）の量は、治療中の対象及び特定の投与様式により変化させることができる。インビトロまたはインビボでのアッセイは、最適な薬用量範囲を識別するのに役立つよう採用することができる。
【００７６】
概して、有用な用量は、当業者に公知である。例えば、用量は、その内容のすべてが全体として参照により組み込まれる参考文献Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ’Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ，第６６版，ＰＤＲ  Ｎｅｔｗｏｒｋ，２０１２年版（２０１１年１２月２７日版）を用いて判断してもよい。いくつかの実施形態において、本発明は、参考文献Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ’Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅを用いて判断される用量を超過する用量、または認可適応量またはＭＴＤを下回る用量を患者が受容するのを許容する。
【００７７】
本明細書に説明するＣＢＬ０１３７（ならびに／あるいはキナーゼ阻害薬化学療法薬、例えば、ソラフェニブ及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）のような追加の作用因子）の薬用量は、容態が治療されることになっていようと予防されることになっていようと、容態の重症度、ならびに治療されることになっている対象の齢、体重、及び健康状態を含むいくつかの因子によることができる。加えて、特定の対象についての薬理ゲノミクス（治療薬の薬物動態特性、薬力学的特性または効能特性に及ぼす遺伝子型の効果）情報は、使用する薬用量に影響することがある。さらに、実際の個々の薬用量は、投与中の薬剤の具体的な組み合わせ、投与時間、投与経路、製剤の性質、排泄率、治療中の特定の疾患、障害の重症度、及び障害の解剖学的位置を含む種々の因子にいくぶん応じて調整することができる。薬用量のいくつかのバリエーションは期待することができる。
【００７８】
いくつかの実施形態において、哺乳類へ経口投与する場合、本明細書に説明するＣＢＬ０１３７（ならびに／あるいはキナーゼ阻害薬化学療法薬、例えば、ソラフェニブ及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）のような追加の作用因子）の薬用量は、０．００１ｍｇ／ｋｇ／日〜１００ｍｇ／ｋｇ／日、０．０１ｍｇ／ｋｇ／日〜５０ｍｇ／ｋｇ／日、または０．１ｍｇ／ｋｇ／日〜１０ｍｇ／ｋｇ／日であることがある。ヒトへ経口投与する場合、本明細書に説明する任意の作用因子の薬用量は通常、１日あたり０．００１ｍｇ〜１０００ｍｇ、１日あたり１ｍｇ〜６００ｍｇ、または１日あたり５ｍｇ〜３０ｍｇである。
【００７９】
いくつかの実施形態において、非経口注射による本明細書に説明するＣＢＬ０１３７（ならびに／あるいはキナーゼ阻害薬化学療法薬、例えば、ソラフェニブ及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）のような追加の作用因子）の投与について、薬用量は、１日あたり０．１ｍｇ〜２５０ｍｇ、１日あたり１ｍｇ〜２０ｍｇ、または１日あたり３ｍｇ〜５ｍｇであることがある。注射は、毎日最多４回ほど付与することがある。概して、経口投与または非経口投与する場合、本明細書に説明する任意の作用因子の薬用量は通常、１日あたり０．１ｍｇ〜１５００ｍｇ、または１日あたり０．５ｍｇ〜１０ｍｇ、または１日あたり０．５ｍｇ〜５ｍｇである。１日あたり最高３０００ｍｇの薬用量を投与することができる。
【００８０】
別の実施形態において、送達は、ベシクル、特にリポソーム中であることができる（Ｌａｎｇｅｒ，１９９０，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４９：１５２７〜１５３３、Ｔｒｅａｔら，Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ｏｆ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ中，Ｌｏｐｅｚ−Ｂｅｒｅｓｔｅｉｎ及びＦｉｄｌｅｒ（編），Ｌｉｓｓ，ニューヨーク，３５３頁〜３６５頁（１９８９）を参照されたい）。
【００８１】
ＣＢＬ０１３７（ならびに／あるいはキナーゼ阻害薬化学療法薬、例えば、ソラフェニブ及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）のような追加の作用因子）は、徐放性または持効性の手段によってあるいは当業者に周知の送達装置によって投与することができる。例としては、それらの各々が全体として参照により本明細書に組み込まれる米国特許第３，８４５，７７０号、第３，９１６，８９９号、第３，５３６，８０９号、第３，５９８，１２３号、第４，００８，７１９号、第５，６７４，５３３号、第５，０５９，５９５号、第５，５９１，７６７号、第５，１２０，５４８号、第５，０７３，５４３号、第５，６３９，４７６号、第５，３５４，５５６号、及び第５，７３３，５５６号において説明されるものが挙げられるが、これらに限定しない。このような剤形は、例えば、変化する割合における所望の徐放性特性を提供するためのヒドロプロピルメチルセルロース、他のポリマーマトリックス、ゲル、透過膜、浸透圧系、多層被膜、微粒子、リポソーム、ミクロスフェア、またはこれらの組み合わせを用いて、１つ以上の有効成分の徐放または持効性放出を提供するのに有用であることができる。本明細書に説明する製剤を含む、当業者に公知の適切な徐放性または持効性製剤は、本明細書に説明する作用因子の有効成分とともに使用するために容易に選択することができる。本発明はしたがって、徐放または持効性放出に適した錠剤、カプセル剤、ゲルキャップ剤、及びカプレット剤のような経口投与に適した単回単位剤形を提供する。
【００８２】
有効成分の徐放または持効性放出は、ｐＨの変化、温度の変化、適切な波長の光による刺激、酵素の濃度または利用可能性、水の濃度または利用可能性、あるいは、他の生理学的条件または化合物を含むがこれらに限定しない種々の条件によって刺激することができる。
【００８３】
別の実施形態において、ポリマー材料を使用することができる（Ｍｅｄｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ，Ｌａｎｇｅｒ及びＷｉｓｅ（編），ＣＲＣ  Ｐｒｅｓ．，フロリダ州ボカラトン市（１９７４）、Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ，Ｄｒｕｇ  Ｐｒｏｄｕｃｔ  Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ，Ｓｍｏｌｅｎ及びＢａｌｌ（編），Ｗｉｌｅｙ，ニューヨーク（１９８４）、Ｒａｎｇｅｒ及びＰｅｐｐａｓ，１９８３，Ｊ．Ｍａｃｒｏｍｏｌ．Ｓｃｉ．Ｒｅｖ．Ｍａｃｒｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．２３：６１を参照されたく、Ｌｅｖｙら，１９８５，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２８：１９０、Ｄｕｒｉｎｇら，１９８９，Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．２５：３５１、Ｈｏｗａｒｄら，１９８９，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．７１：１０５も参照されたい）。
【００８４】
別の実施形態において、徐放系は、治療されることになっている標的領域近くに配置することができ、したがって、全身用量のほんのわずかを必要とする（例えば、Ｇｏｏｄｓｏｎ，Ｍｅｄｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ中，上述，第２巻，１１５頁〜１３８頁（１９８４）を参照されたい）。Ｌａｎｇｅｒ，１９９０，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４９：１５２７〜１５３３による総説において考察されている他の徐放系を使用することがある。
【００８５】
本明細書に説明するＣＢＬ０１３７（ならびに／あるいはキナーゼ阻害薬化学療法薬、例えば、ソラフェニブ及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）のような追加の作用因子）の投与は独立して、毎日４回または１か月に１〜４回または１年に１〜６回または２、３、４若しくは５年ごとに１回であることができる。投与は、１日または１か月、２か月、３か月、６か月、１年、２年、３年の持続期間の間であることができ、対象の寿命の間でさえあることがある。慢性的な長期の投与が必要であることがある。薬用量は、単回用量として投与されることがあり、または複数回用量へ分割されることがある。概して、所望の薬用量は、長期間の設定間隔で、通常、少なくとも数週間若しくは数か月間にわたって投与されることがあるが、数か月間若しくは数年またはそれより長い、より長い投与期間が必要とされることがある。
【００８６】
本明細書に説明するＣＢＬ０１３７（ならびに／あるいはキナーゼ阻害薬化学療法薬、例えば、ソラフェニブ及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）のような追加の作用因子）を利用する投薬計画は、対象のタイプ、種、齢、体重、性別及び医学的容態、治療されることになっている容態の重症度、投与経路、対象の腎機能若しくは肝機能、個体の薬理ゲノミクス構成、ならびに採用する本発明の具体的な化合物を含む種々の因子にしたがって選択することができる。本明細書に説明するＣＢＬ０１３７（ならびに／あるいはキナーゼ阻害薬化学療法薬、例えば、ソラフェニブ及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）のような追加の作用因子）は、単一の日用量で投与することができ、または毎日の薬用量の合計は、毎日２、３または４回の分割された用量で投与することができる。さらに、本明細書に説明するＣＢＬ０１３７（ならびに／あるいはキナーゼ阻害薬化学療法薬、例えば、ソラフェニブ及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬（例えば、ゲムシタビン）のような追加の作用因子）は、投薬計画じゅうで間欠的によりもむしろ持続的に投与することができる。
【００８７】
いくつかの実施形態において、対象及び／または動物は、哺乳類、例えば、ヒト、マウス、ラット、モルモット、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ブタ、ウサギ、ヒツジ、またはサル、チンパンジー、若しくはヒヒのような非ヒト霊長類である。他の実施形態において、対象及び／または動物は、非哺乳類の、このような、例えば、ゼブラフィッシュである。いくつかの実施形態において、対象及び／または動物は、蛍光タグ付けした細胞（例えば、ＧＦＰを用いる）を含むことがある。いくつかの実施形態において、対象及び／または動物は、蛍光細胞を含むトランスジェニック動物である。
【００８８】
いくつかの実施形態において、対象及び／または動物は、ヒトである。いくつかの実施形態において、当該ヒトは小児のヒトである。他の実施形態において、当該ヒトは成人のヒトである。他の実施形態において、当該ヒトは、老人のヒトである。他の実施形態において、当該ヒトは、患者と呼ぶことがある。
【００８９】
ある実施形態において、当該ヒトの年齢は、約０か月〜約６か月齢、約６〜約１２か月齢、約６〜約１８か月齢、約１８〜約３６か月齢、約１〜約５歳、約５〜約１０歳、約１０〜約１５歳、約１５〜約２０歳、約２０〜約２５歳、約２５〜約３０歳、約３０〜約３５歳、約３５〜約４０歳、約４０〜約４５歳、約４５〜約５０歳、約５０〜約５５歳、約５５〜約６０歳、約６０〜約６５歳、約６５〜約７０歳、約７０〜約７５歳、約７５〜約８０歳、約８０〜約８５歳、約８５〜約９０歳、約９０〜約９５歳または約９５〜約１００歳の範囲である。
【００９０】
他の実施形態において、対象は、非ヒト動物であり、それゆえ本発明は、獣医学的使用に関する。具体的な実施形態において、非ヒト動物は、家庭のペットである。別の具体的な実施形態において、非ヒト動物は、家畜動物である。
【００９１】
本発明は、本明細書に説明する任意の作用因子の投与を単純化することのできるキットを提供する。本発明の例示的なキットは、単位剤形において本明細書で説明する任意の組成物を含む。一実施形態において、単位剤形は、本明細書に説明する任意の作用因子及び医薬として許容され得る担体、希釈剤、賦形剤、またはビヒクルを含有する、滅菌済みであることができる、事前に充填しておいた注射器のような容器である。キットはさらに、本明細書に説明する任意の作用因子の使用を説明するラベルまたは印字された説明書を含み得る。キットには、開瞼器、局所麻酔薬、及び投与箇所のための洗浄剤も含むことがある。キットはさらに、本明細書に説明する１つ以上の追加の作用因子も含むことができる。一実施形態において、キットは、有効量の本発明の組成物と、本明細書に説明するような有効量の別の組成物とを含有する容器を含む。一実施形態において、キットは、ＣＢＬ０１３７及びキナーゼ阻害薬化学療法薬、例えば、ソラフェニブ及び／またはヌクレオシド類似体化学療法薬、例えば、ゲムシタビンを含む。
【００９２】
本発明は、以下の非限定的な実施例によってさらに説明される。
【実施例】
【００９３】
（材料及び方法）
動物：４０匹の雌無胸腺ヌードマウスを各肝細胞癌（ＨＣＣ）試験（ＨｅｐＧ２、ＨｅｐＧ２（用量未満のＣＢＬ０１３７）、Ｈｅｐ３Ｂ、及びＨｅｐ３Ｂ（用量未満のＣＢＬ０１３７））について得、１群あたり１０個体からなる処置群へと分けた（１つのケージあたり５匹のマウス２ケージ）。ＨｅｐＧ２（用量未満のＣＢＬ０１３７）試験について、ビヒクル処置した対照群１は、９個体からなった（５匹のマウス１ケージ及び４匹のマウス１ケージ）。４０匹の雌ＳＣＩＤマウスを各膵癌試験のためにＲｏｓｗｅｌｌ  Ｐａｒｋ  Ｃａｎｃｅｒ  ＩｎｓｔｉｔｕｔｅのＬＡＲから得、１群あたり５個体（１つのケージの中で飼育）からなる処置群へと分けた。７６匹の雌ヌードマウスを各Ｈ１９７５非小細胞肺癌異種移植試験のために得、１群あたり１０匹（１ケージあたり５匹のマウス２ケージ）からなる処置群へと分けた。
【００９４】
腫瘍：ＨｅｐＧ２  ＨＣＣ腫瘍片は、動物群ＢＢＬの技術スタッフによって供給した（８０個）。Ｈｅｐ３Ｂ  ＨＣＣ腫瘍片は動物研究中枢ＢＢＬの技術スタッフによって供給した（８０個）。ＰＤＡ＃１３５９０及び＃１３７５６腫瘍片は、動物研究中枢ＢＢＬの技術スタッフによって供給した（１００個）。Ｈ１９７５及びＡ５４９  ＮＳＣＬＣ腫瘍細胞は、ＢＢＬの技術スタッフによって供給した（５×１０７個／ｍｌにおける８〜９ｍＬ）。
【００９５】
ＨｅｐＧ２検査材料の説明：２ｍｍ×２ｍｍ片の非壊死性ＨｅｐＧ２腫瘍（２回継代腫瘍、収集時約６００〜７００ｍｍ３（ＨｅｐＧ２試験）、継代１回腫瘍、収集時約５００〜９００ｍｍ３（ＨｅｐＧ２（用量未満のＣＢＬ０１３７）試験）ヌードマウスにおいて伝播、ヒトＨｅｐＧ２肝細胞癌細胞（ＡＴＣＣ）に元来由来。
【００９６】
Ｈｅｐ３Ｂ検査材料の説明：非壊死性Ｈｅｐ３Ｂ腫瘍２ｍｍ×２ｍｍ片（継代１回腫瘍、収集時約６００〜７００ｍｍ３（Ｈｅｐ３Ｂ試験）、継代９回腫瘍、収集時約８００ｍｍ３（Ｈｅｐ３Ｂ（用量未満のＣＢＬ０１３７）試験）ヌードマウスにおいて伝播、ヒトＨｅｐ３Ｂ肝細胞癌細胞（ＡＴＣＣ）に元来由来）。
【００９７】
ＰＤＡ検査材料の説明：ＳＣＩＤマウスにおいて伝播した非壊死性患者由来ＰＤＡ＃１３５９０または＃１３７５６腫瘍（継代６回腫瘍、収穫時約６００〜７００ｍｍ３）２ｍｍ×２ｍｍ片。
【００９８】
Ｈ１９７５  ＮＳＣＬＳ検査材料の説明：ヒトＨ１９７５  ＮＳＣＬＣ細胞株（ＡＴＣＣに元来由来）懸濁液を、５×１０７個／ｍｌでマトリゲルと１：１混合し（１００μｌの注射液あたり送達される５×１０６個）、接種まで氷上で維持した。
【００９９】
腫瘍片はすべて新鮮に収集し、生物安全性キャビネットの中で無菌的に操作し、滅菌済みＲＰＭＩ＋１０％ＦＢＳ培地またはＤ−ＰＢＳ中に置いた後、マウスへ植え込んだ。複数の片を収穫直後に植え込んだ。
【０１００】
試薬及び薬剤：カプチゾル（Ｃａｐｔｉｓｏｌ）、Ｃｙｄｅｘにより供給（カタログ番号：Ｃａｐｔｉｓｏｌ、バッチ：ＮＣ−０４Ａ−０５０３３、及び保存条件：２〜５℃）、塩化カルシウムまたは塩化マグネシウム非含有Ｄ−ＰＢＳ、１×、Ｍｅｄｉａ  Ｃｏｒｅによって供給、Ｃｌｅｖｅｌａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃ  Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ（ＣＣＦ）（カタログ番号：１２１−５００ｐ及び保存条件：２〜５℃、使用中は氷上で維持）、ＣＢＬ０１３７、Ａｐｔｕｉｔにより供給（カタログ番号：ＣＢＬ０１３７、バッチ：１０−１０６−８８−３０、及び保存条件：デシケーターの中で室温）、ゲムシタビン、ヒドロクロリド塩、ＬＣ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓによって供給（カタログ番号：Ｇ−４１７７、バッチ：ＧＭＣ−１０３、及び保存条件：−２０℃）、ソラフェニブ、ＬＣ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓによって供給（カタログ番号：Ｓ−８５０２、バッチ：ＢＳＦＦ−１０５、及び保存条件：−２０℃）、ＲＰＭＩ１６４０、Ｍｅｄｉａ  Ｃｏｒｅによって供給、ＣＣＦ（カタログ番号：ＣＣＦ、１２〜５００ｐ及び保存条件：４℃、使用中は氷上で維持）、ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、Ａｔｌａｎｔａ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓによって供給（カタログ番号：Ｓ１１０５０、バッチ：Ａ１０３１、保存条件：−２０℃）、塩化ナトリウム（ＮａＣｌ、注射用０．９％）、Ｂａｘｔｅｒ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｃｏｒｐ．またはＨｏｓｐｉｒａ，Ｉｎｃにより供給（バッチ：Ｐ２２０５２５（Ｂａｘｔｅｒ）または６４−１０６−ＪＴ（Ｈｏｓｐｉｒａ）及び保存条件：室温）、マトリゲル、Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃによって供給（カタログ番号：ＣＢ３５４２４８（ＢＤ  １２４８３）、バッチ：３７３９９、及び保存条件：−２０℃）、ならびにジメトキシスルホキシド（ＤＭＳＯ）、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈによって供給（カタログ番号３４８６９−１００ｍｌ、バッチ：ＳＨＢＢ７６９５Ｖ、及び保存条件：室温）。
【０１０１】
薬剤及び試薬の調製：投薬溶液は、ＨＣＣ試験及びＰＤＡ試験のために４つのロットで調製し（試験の処置相の各週につき１つ）、新鮮溶液を試験じゅう使用することを確実にした。ＨｅｐＧ２試験のための各溶液の調製当日、３５ｍｌのソラフェニブ（１．９ｍｇ／ｍｌ）を５％ＤＭＳＯ−２００ｍｇ／ｍｌカプチゾル中に構成し、１２ｍｌのＣＢＬ０１３７（８．８ｍｇ／ｍｌ）を１００ｍｇ／ｍｌのカプチゾル中に構成した。薬剤の投与溶液及びビヒクル対照溶液（１００ｍｇ／ｍｌカプチゾル及び５％ＤＭＳＯ−２００ｍｇ／ｍｌのカプチゾル）はすべて、濾過滅菌した。
【０１０２】
ＨｅｐＧ２（用量未満のＣＢＬ０１３７）試験について、３６ｍｌのソラフェニブ（３．７５ｍｇ／ｍｌ）を５％ＤＭＳＯ−２００ｍｇ／ｍｌカプチゾル中に構成し、１３ｍｌのＣＢＬ０１３７（７．５ｍｇ／ｍｌ）を１００ｍｇ／ｍｌのカプチゾル中に構成した。静脈投与用溶液（ＣＢＬ０１３７の投薬溶液及び１００ｍｇ／ｍｌのカプチゾルビヒクル対照溶液）を濾過滅菌した。
【０１０３】
Ｈｅｐ３Ｂ試験について、３４．２ｍｌのソラフェニブ（３．７５ｍｇ／ｍｌ）を５％ＤＭＳＯ−２００ｍｇ／ｍｌカプチゾル中に構成し、１４ｍｌのＣＢＬ０１３７（７．５ｍｇ／ｍｌ）を１００ｍｇ／ｍｌのカプチゾル中に構成した。静脈内投与用溶液（ＣＢＬ０１３７の投薬溶液及び１００ｍｇ／ｍｌのカプチゾルビヒクル対照溶液）を濾過滅菌した。
【０１０４】
Ｈｅｐ３Ｂ（用量未満のＣＢＬ０１３７）試験について、投薬溶液を２つのロットで調製した（試験の治療相の２週間について各１）。投薬の最初の２週間については、１４ｍｌのＣＢＬ０１３７（６．２５ｍｇ／ｍｌ）は１００ｍｇ／ｍｌのカプチゾル中に構成し、６８．４ｍｌのソラフェニブ（３．７５ｍｇ／ｍｌ）は、５％ＤＭＳＯ−２００ｍｇ／ｍｌカプチゾル中に構成した。最後の２週間の投薬について、１４ｍｌのＣＢＬ０１３７（６．２５ｍｇ／ｍｌ）を１００ｍｇ／ｍｌのカプチゾル中に構成し、６８．４ｍｌのソラフェニブ（３．７５ｍｇ／ｍｌ）を５％ＤＭＳＯ−２００ｍｇ／ｍｌカプチゾル中に構成した。
【０１０５】
ＰＤＡ試験について、ゲムシタビン及びＣＢＬ０１３７からなる溶液は、Ｍｉｌｌｉ−Ｑ水中に構成した１２ｍｌのゲムシタビン（５．０ｍｇ／ｍｌ）、及び１５０ｍｇ／ｍｌのカプチゾル中に構成した７ｍｌのＣＢＬ０１３７（１０．０ｍｇ／ｍｌ）として調製し、濾過滅菌した。
【０１０６】
先に調製した溶液はすべて、これらの使用の週の間４℃で保存した。
【０１０７】
ＮＳＣＬＣ試験について、溶液は２つのロット（２週間につき１回）で調製し、振戦溶液が試験じゅう使用されることを確実にした。Ｈ１９７５  ＮＳＣＬＣ試験１について、溶液は、１００ｍｇ／ｍｌカプチゾル中の４．４ｍｇ／ｍｌ及び８．８ｍｇ／ｍｌのＣＢＬ０１３７の各１０ｍｌの２つのチューブ、ならびに滅菌膵中の５．０ｍｇ／ｍｌ及び２．５ｍｇ／ｍｌゲムシタビンの各１０ｍｌの２つのチューブとした。Ｈ１９７５  ＮＳＣＬＣ試験２について、溶液は、１５０ｍｇ／ｍｌカプチゾル中の１１．２５ｍｇ／ｍｌのＣＢＬ０１３７における１６ｍｌの１つのチューブ及び滅菌水中の１．０ｍｇ／ｍｌゲムシタビンにおける各２５ｍｌの２つのチューブとした。
【０１０８】
腫瘍片の調製及び皮下植え込み：ＨｅｐＧ２腫瘍（ＨｅｐＧ２試験については継代２回、及びＨｅｐ２（用量未満のＣＬＢ０１３７）試験ついては継代１回）またはＨｅｐ３Ｂ腫瘍（Ｈｅｐ３Ｂ試験については継代１回及びＨｅｐ３Ｂ（用量未満のＣＬＢ０１３７）試験については継代９回）を無胸腺ヌードマウスにおいて増殖させ、約５００〜９００ｍｍ３に到達すると、安楽死させたマウスから収集した。ＰＤＡ腫瘍（継代６回）をＳＣＩＤマウスにおいて増殖させ（両脇腹）、大きさが約６００〜７００ｍｍ３に到達すると、安楽死させたマウスから収集した。収集した腫瘍は、ＲＰＭＩ＋１０％ＦＢＳ培地またはＤ−ＰＢＳプラスペニシリン／ストレプトマイシンを含有する滅菌済みペトリ皿へ移した。移植材料の生存率を確認するために、十分な培地を添加して腫瘍を浸漬した。腫瘍は、滅菌メスを用いて２ｍｍ×２ｍｍの立方体へと解剖した。当該片の大きさ及び形状をできるだけ均一になるよう注意を払った。腫瘍片は、調製直後に受け手マウスへと移植した。
【０１０９】
腫瘍細胞の調製及び接種：接種前夜、マトリゲルを冷蔵庫中の氷上へと置いて解凍した。細胞収集開始前に、ある量のピペット、チューブ及びチップを冷凍庫の中へと置き、それによりマトリゲルを用いた作業をする時間にこれらは冷たかった。１ｍｌ注射器及び１／２”２３Ｇ針も事前に冷却しておいた。この工程は、室温以上（すなわち、３７℃）で固体となるマトリゲルの成熟前凝固を防止するために必要であった。
【０１１０】
Ｈ１９７５細胞懸濁液は、ＰＢＳ中で腫瘍接種直前に調製した。継代１６回でのＨ１９７５細胞は、４０枚の１５０ｍｍ径の皿から収集し、ＰＢＳ（５．８７ｍｌ）中で１０×１０７個／ｍｌへ希釈した。接種直前に、事前に冷却しておいたチップ及びチューブを用いて、４．５ｍｌのこの細胞懸濁液を、等容積のマトリゲル（１：１）と、総容積９ｍｌとなるよう混合した。細胞懸濁液は氷上で保存した。細胞の終濃度は、５×１０７個／ｍｌであった。
【０１１１】
マウスの接種前に、チューブを数回転倒させることによって、腫瘍細胞−マトリゲル混合物を注意深く混和した。事前に冷却しておいた１ｍｌ注射器に腫瘍細胞−マトリゲル混合物を充填した後、事前に冷却しておいた１／２”２３Ｇキャップ付き針を注射器の末端に装着して、注射を実行した。閉じた充填した注射器を数回転倒させた後、１００μｌの細胞−マトリゲル混合物を各マウスの左脇腹へと皮下接種した。
【０１１２】
接種のために、マウスをイソフルラン（１００％Ｏ２中の３〜４％誘導、１〜２％維持）で麻酔して、適切な皮下接種を支援した。
【０１１３】
腫瘍の大きさの測定：腫瘍の大きさは、２次元（ｍｍにおける）、つまりたがいに対して垂直に取られた最大長（ｌ）及び最大幅（ｗ）において、デジタルカリスパによって測定した。この測定結果を用いて、式：腫瘍体積＝（ｌ×ｗ２）／２（ｗ＜ｌ）により腫瘍体積を算出した。この式によって得た値は、ｍｇにおける腫瘍の量とも等しい。腫瘍植え込み２日後に開始して、腫瘍測定は、治療開始前の２〜３日ごとに行った後、州２回行った（例えば、１日目（Ｄ１、治療開始当日）、Ｄ４、Ｄ８、Ｄ１１、Ｄ１５、Ｄ１８、Ｄ２２、Ｄ２５、Ｄ２９、Ｄ３２、Ｄ３６、Ｄ３９、Ｄ４３、Ｄ４６、Ｄ５０、Ｄ５３及びＤ５７）。腫瘍測定結果は、計画した測定間の終了点を通過するのを防止するために、腫瘍の大きさの終了点に腫瘍の大きさが接近する場合、より頻繁に収集した。
【０１１４】
検査品および対照品の投与：治療群あたりの平均腫瘍体積が約４５〜２００ｍｍ３となったとき、指定した溶液をマウスに投与した。
【０１１５】
ＨｅｐＧ２試験のマウスは、以下の投与計画、すなわち１）ビヒクル、２）１５ｍｇ／ｋｇソラフェニブ毎日経口（ｐｏ）、３）７０ｍｇ／ｋｇのＣＢＬ０１３７４日ごとに静脈内（Ｑ４ｄ）、または４）７０ｍｇ／ｋｇのＣＢＬ０１３７静脈内Ｑ４ｄ＋１５ｍｇ／ｋｇソラフェニブ毎日ｐｏにより、ＣＢＬ０１３７及び／またはソラフェニブを用いて処置した。ＨｅｐＧ２（用量未満のＣＢＬ０１３７）試験のマウスは、１）ビヒクル対照、２）３０ｍｇ／ｋｇソラフェニブ毎日経口（ｐｏ）、３）６０ｍｇ／ｋｇのＣＢＬ０１３７を４日ごとに（Ｑ４ｄ）静脈内（ｉｖ）、または４）６０ｍｇ／ｋｇのＣＢＬ０１３７をＱ４ｄでｉｖ＋３０ｍｇ／ｋｇソラフェニブ毎日ｐｏにより、ＣＢＬ０１３７及び／またはソラフェニブを用いて治療した。Ｈｅｐ３Ｂ試験のマウスは、１）ビヒクル、２）３０ｍｇ／ｋｇソラフェニブ毎日ｐｏ、３）６０ｍｇ／ｋｇのＣＢＬ０１３７をＱ４ｄでｉｖ、または４）６０ｍｇ／ｋｇのＣＢＬ０１３７をＱ４ｄでｉｖ＋３０ｍｇ／ｋｇソラフェニブを毎日ｐｏで治療した。Ｈｅｐ３Ｂ（用量未満のＣＢＬ０１３７）試験のマウスは、１）ビヒクル、２）３０ｍｇ／ｋｇソラフェニブ毎日経口（ｐｏ）、３）５０ｍｇ／ｋｇのＣＢＬ０１３７を４日ごと（Ｑ４ｄ）で静脈内（ｉｖ）、または４）５０ｍｇ／ｋｇのＣＢＬ０１３７をＱ４ｄでｉｖ＋３０ｍｇ／ｋｇソラフェニブを毎日ｐｏで治療した。陰性対照群（第１群）は、対応する薬剤と同じ送達経路及び計画を用いてＣＢＬ０１３７（１００ｍｇ／ｍｌのカプチゾル）及びソラフェニブ（５％ＤＭＳＯ−２００ｍｇ／ｍｌカプチゾル）の送達に使用するビヒクルの組み合わせを用いて４週間治療した。ＣＢＬ０１３７を用いたＱ４ｄ投与は、本試験のＤ１、Ｄ５、Ｄ９、Ｄ１３、Ｄ１７、Ｄ２１、Ｄ２５、及びＤ２９に実施し、ソラフェニブの毎日の投与は、Ｄ１〜Ｄ２８に実施した。両方よりもむしろたった１つの薬剤（ＣＢＬ０１３７またはソラフェニブ）を受ける群については、付与していない薬剤のためのビヒクルを、対応する送達経路及び計画を用いて偽投与としてその箇所で投与した。経口または静脈内で投与される投与溶液の容積は、８ｍｌ／体重ｋｇであった。静脈内注射は、尾静脈を介して実施した。薬剤の投与は、注射器に力をかけることなく緩徐に実施した。
【０１１６】
ＰＤＡ試験のマウスは、以下の投与計画、すなわち、１）ビヒクル、２）４０ｍｇ／ｋｇのゲムシタビンをＱ４ｄ、腹腔内で４週間、３）９０ｍｇ／ｋｇのＣＢＬ０１３７を週１回、ｉｖで４週間、または４）４０ｍｇ／ｋｇのゲムシタビンをＱ４ｄ、ｉｐで４週間＋９０ｍｇ／ｋｇのＣＢＬ０１３７を週１回、ｉｖで４週間によりＣＢＬ０１３７及び／またはゲムシタビンを用いて治療した。ＰＤＡ＃１３７５６試験のマウスは、以下の投与計画、すなわち１）ビヒクル、２）４０ｍｇ／ｋｇのゲムシタビンをＱ４ｄ、ｉｐで４週間、３）８０ｍｇ／ｋｇのＣＢＬ０１３７を週１回、ｉｖで４週間、または４）４０ｍｇ／ｋｇのゲムシタビンをＱ４ｄ、ｉｐで４週間＋８０ｍｇ／ｋｇのＣＢＬ０１３７を週１回、ｉｖで４週間により、ＣＢＬ０１３７及び／またはげむしった便を用いて治療した。ゲムシタビンを用いたＱ４ｄ投与は、本試験のＤ１、Ｄ５、Ｄ９、Ｄ１３、Ｄ１７、Ｄ２１、Ｄ２５、及びＤ２９に実施し、ＣＢＬ０１３７を用いた週１回の投与は、Ｄ１、Ｄ８、Ｄ１５及びＤ２２に実施した。陰性対照群（第１群）は、対応する薬剤と同じ送達経路及び計画を用いて、ゲムシタビン（滅菌ＭｉｌｌｉＱ水）及びＣＢＬ０１３７（１５０ｍｇ／ｍｌカプチゾル）の送達に使用するビヒクルの組み合わせを用いて４週間治療した。ｉｐまたはｉｖで投与する投与溶液の容積は、８ｍｌ／マウス体重ｋｇであった。静脈内注射は、尾静脈を介して実施した。薬剤の投与は、注射器に力をかけることなく緩徐に実施した。
【０１１７】
ＮＳＣＬＣ試験１のマウスは、以下の投与計画、すなわち、１）ビヒクル、２）７０ｍｇ／ｋｇのＣＢＬ０１３７をＱ４ｄ、ｉｖ、３）４０ｍｇ／ｋｇのゲムシタビンをＱ４ｄ、ｉｐ、または４）７０ｍｇ／ｋｇのＣＢＬ０１３７をＱ４ｄ、ｉｖ＋４０ｍｇ／ｋｇのゲムシタビンをＱ４ｄ、ｉｐにより、ＣＢＬ０１３７及び／またはゲムシタビンを用いて治療した。ＮＳＣＬＣ試験２のマウスは、以下の投与計画、すなわち、１）ビヒクル、２）９０ｍｇ／ｋｇのＣＢＬ０１３７を週１回、ｉｖで４週間、３）２０ｍｇ／ｋｇのゲムシタビンをＱ４ｄ、ｉｐで４週間、または４）９０ｍｇ／ｋｇのＣＢＬ０１３７を週１回、ｉｖで４週間＋２０ｍｇ／ｋｇのゲムシタビンをＱ４ｄ、ｉｐで４週間により、ＣＢＬ０１３７及び／またはゲムシタビンを用いて治療した。すべての群について、Ｑ４ｄ投与は、本試験のＤ１、Ｄ５、Ｄ９、Ｄ１３、Ｄ１７、Ｄ２１、Ｄ２５、及びＤ２９に実施した。両方よりもむしろたった１つの薬剤を受けた群については、付与しなかった薬剤についてのビヒクルを偽投与としてその箇所に投与した。ｉｐまたはｉｖ投与した投薬溶液の容積は、８ｍｌ／マウス体重ｋｇであった。静脈内注射は、尾静脈を介して実施した。薬剤の投与は、注射器に力をかけることなく緩徐に実施した。
【０１１８】
モニタリング及び試料回収：１日２回、マウスを本実験の持続期間、死亡率及び罹患率についてモニターした。特に、マウスを、皮膚、毛皮、運動活動、及び主要な一般的行動パターンの変化について観察した。異常な観察はすべて文書化し、半定量的スコアを「身体容態」、「姿勢」、及び「活動性」について割り当てた。４、３、２及び１のスコアはそれぞれ、正常容態（４）、わずかに異常な容態（３）、中程度に異常な容態（２）及び重度に異常な容態（１）へ割り当てた。ケージは、層状のフローフードとなっており、マウスの行動を明確に評価するために開いていた。マウスが毒性の有意な徴候（例えば、波打ち運動、猫背の姿勢、低い活動、１５％を超える体重減少）を示す場合、治療は、完全に回復する（すなわち、体重が開始重量の１０％以内に戻る）まで、当該マウスについて休止した。
【０１１９】
データ分析：試験群すべてについて、最大腫瘍発達阻害は、１１日目、１３日目または１５日目（Ｘ日目）について算出した。この時点は、統計分析のために比較した群すべてにおける十分な数の腫瘍を有している最新時点であった。各腫瘍について、相対的な腫瘍の大きさは、治療を開始した１日目における腫瘍の大きさに対して算出した（すなわち、倍数腫瘍発達）。各腫瘍について最大腫瘍発達阻害を算出するために、以下の等式、すなわち、１００−（倍数腫瘍発達薬で処置したＸ日目／平均倍数腫瘍発達ビヒクルで処置したＸ日目）×１００を用いた。群間の腫瘍の大きさの差は、分散分析（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ５  Ｓｏｆｔｗａｒｅ）を用いて判定したが、ここで、「＊」はＰ＝０．０１〜０．０５（有意）を指し、「＊＊」は、Ｐ＝０．００１〜０．０１（非常に有意）を指し、かつ「＊＊＊」は、Ｐ＜０．００１（極度に有意）を指す。統計的に有意ではなかった差は「ｎｓ」で示す。腫瘍倍増時間（ｄＴ）は、本試験については算出できず、その理由は、第３群及び第４群について本試験の治療相の間に腫瘍が倍増していなかったからである。腫瘍発達遅延（Ｔ−Ｃ）は、１０００ｍｍ３の大きさの終了点に到達するための対照についての中央値時間を、大きさの終了点に到達するための治療群についての中央値時間のものから減算することによって算出した。「腫瘍の大きさ」の終了点に到達するための「時間」の算出に関して、本試験の間に各群におけるいくつかの腫瘍がまったく発達しなかったことは特筆されるべきである。これらの腫瘍は、終了点に到達するよう明確に進行していなかったので、時間にも関わらず、「終了点に到達するための時間」の計算から除外した。しかしながら、これらの腫瘍は、すべての群における概算的に等しい頻度で生じたので、任意の他の分析から除外しなかった。Ｔ／Ｃ％は、次の通り算出し、すなわち、（ＴＸ日目−Ｔ１日目）／（ＣＸ日目−Ｃ１日目）×１００とし、式中、Ｔ及びＣは、治療した腫瘍の中央値腫瘍体積を表し、Ｃは、指定した日にちにおける対照腫瘍の中央値腫瘍体積である。この値は、対照腫瘍に対する治療腫瘍の大きさを表す。したがって、Ｔ／Ｃ％＝４０は、治療した腫瘍の大きさが指定した時点で対照腫瘍の大きさの４０％であることを意味する。試験群間の中央値生存時間の差は、対数順位検定（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ５  Ｓｏｆｔｗａｒｅ）を用いて分析した。
【０１２０】
（実施例１：Ｈｅｐ２ＧまたはＨｅｐ３Ｂ肝細胞癌異種移植に対するＣＢＬ０１３７−ソラフェニブ併用治療の評価）
ＨｅｐＧ２試験についての死亡率の動態は、図１のパネルＡに呈する。本試験における動物の死亡率に及ぼす治療毒性の任意の実質的な影響の徴候はなかった。薬剤治療は、死亡率のより早期の開始に関して原因ではなく、あるいはビヒクル治療に対するＭＳＴに負に影響しなかった（中央値生存時間）。本試験における死亡率及び生存結果に関する動態の差は主として、治療効能の反映であり、毒性の反映ではなかった。同様に、同じ結果は、図１のパネルＢ、図２のパネルＡ、及び図２のパネルＢにそれぞれ表されているＨｅｐＧ２（用量未満のＣＢＬ０１３７）試験、Ｈｅｐ３Ｂ試験、及びＨｅｐ３Ｂ（用量未満のＣＢＬ０１３７）について観察された。
【０１２１】
ＨｅｐＧ２腫瘍保有マウス（図１、パネルＡ）の生存に関する動態分析は、ビヒクル処置した第１群において観察された１５日間のＭＳＴが、ソラフェニブ単独を用いた治療（第２群、ＭＳＴ＝１５日間）によって変化しなかったが、ＣＢＬ０１３７単独またはＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブを用いた治療によってそれぞれ５４．０日間及び５２．５日間まで増加することを示した。これらのＭＳＴの差は、腫瘍の発達に及ぼす適用された治療の効果を反映しており、その理由は、本試験における死亡率が、１個体を除き、治療毒性ではなく腫瘍関連パラメータに起因したからである（上述を参照されたい）。
【０１２２】
ＨｅｐＧ２（用量未満のＣＢＬ０１３７）腫瘍保有マウス（図１、パネルＢ）の生存に関する動態分析は、ＭＳＴが、ビヒクル処置した第１群において観察された１３日間から、薬剤処置した第２、３、及び４群においてそれぞれ、２７．５日間、２３日間、及び３８．５日間まで延長することを示した。その上、併用治療した第４群におけるＭＳＴは、いずれかの単一療法群におけるＭＳＴよりも長かった（併用対ソラフェニブ単独についてのＰ＝０．０２０４及び併用対ＣＢＬ０１３７単独についてのＰ＝０．０００１）。単一薬剤処置した第２群と第３群の間の差は有意ではなかった（Ｐ＝０．３７３）。
【０１２３】
Ｈｅｐ３Ｂ腫瘍保有マウス（図２、パネルＡ）の生存に関する動態分析は、ビヒクル処置した第１群において観察された１１日間の中央値生存時間（ＭＳＴ）が検査した薬剤処置すべてによって延長する（Ｐ＜０．０００１）ことを示した。したがって、ＭＳＴは、ソラフェニブ処置による２５日間、ＣＢＬ０１３７処置による３６日間、及びＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブによる３９．５日間まで延長した。これらのＭＳＴ値は、３つの異なる薬剤処置群間の他の腫瘍発達パラメータにおける差を反映している一方で、薬剤処置した群間でのＭＳＴの差は異なっていなかった。本試験における動物生存の持続時間は主として、処置の毒性の発達よりもむしろ終了点の大きさまでの腫瘍の発達の動態の反映であった。
【０１２４】
同じ傾向は、Ｈｅｐ３Ｂ（用量未満のＣＢＬ０１３７）腫瘍保有マウス（図２、パネルＢ）の生存の動態における差によって観察された。ビヒクル処置したマウスの中央値生存時間（ＭＳＴ）は、ソラフェニブ、ＣＢＬ０１３７、及びＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブ処置した群においてそれぞれ２１．５日間、１７．５日間、及び２８日間と比較して１４．５日間であった。ビヒクル処置した群と比較した対数順位分析は、生存時間における観察した延長が、ＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブ群について（Ｐ＝０．００９２）、及びソラフェニブ単一療法群について（Ｐ＝０．０１３）統計的に有意であるが、ＣＢＬ０１３７単一療法群については（Ｐ＝０．２６８８）そうではないことを示した。ＭＳＴにおけるこれらの差は、腫瘍の発達に及ぼす薬剤処置の効果を反映しており、その理由はまた、本試験における死亡率が主として、腫瘍関連パラメータによるものであり、治療毒性によるものではないからであった。
【０１２５】
次に、検査した治療投与計画の抗腫瘍効能を、デジタルカリスパを用いた本試験の経過じゅう、腫瘍の測定を通じて確立した。
【０１２６】
（開始体積に対する治療の時間経過の間の異なる日数に及ぼす腫瘍体積の群あたりの平均倍数変化によって表される）各試験群における腫瘍の発達の動態は、図３（パネルＡ及びＢ）及び図４（パネルＡ及びＢ）に示す。ＨｅｐＧ２試験（図３、パネルＡ）について、第１５日目は、平均倍数腫瘍発達の分析について選択し、その理由は、このような分析についての群すべてにおいて十分なデータ点がある最新の時点であるからであった。この当日、第１日目に対する腫瘍体積の平均変化は、第１群（ビヒクル）における９．０倍、第２群における８．４倍（ソラフェニブ単独）、第３群における０．５倍（ＣＢＬ０１３７単独）及び第４群における０．９（ＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブ）であった。平均倍数腫瘍発達は、第１群または第２群のいずれかにおけるよりも第３群及び第４群において小さかったが、第３群と第４群それら自体の間には差はなかった。この平均倍数腫瘍発達データは、第３群及び第４群における腫瘍が、本試験の最初の１５日間に発達せず、むしろ退行することを示した。この観察と一致して、両ＣＢＬ０１３７治療群（第３群及び第４群）におけるＴ／Ｃ％の値は陰性であった（それぞれ、−３．５％及び−３．３％）のに対し、第２群における７２．６％のＴ／Ｃ％値は、ソラフェニブ単一療法の最小限の効果を示した。個々の腫瘍の点で、ＣＢＬ０１３７処置した代３群において発達した１６個の腫瘍のうちの１４個及びＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブの第４群における１６個のうちの１３個は、治療の時間経過の間の退行のいくらかの程度を実証した。対照的に、ビヒクル処置した第１群及びソラフェニブ処置した第２群それぞれにおいて発達した１５個のうちの０個及び１４個のうちの０個の腫瘍は、類似の挙動を示した。しかしながら、退行する腫瘍の大部分は、本試験の治療相の終了約２週間後に発達し始め、この発達期の間の全体的な（１群あたりの平均の）動態及び腫瘍発達の程度は、第３群と第４群の間で類似していた（図３、パネルＡ）。
【０１２７】
腫瘍発達の動態の点で、腫瘍倍増時間（ｄＴ）は、ＨｅｐＧ２試験について算出できず、その理由は第３群及び第４群についての試験の治療相の間に、腫瘍倍増はなかったが、むしろ退行があったからである。治療群（Ｔ）及び対照群（Ｃ）における腫瘍大きさ終点に到達する中央値時間を基にした腫瘍発達遅延（Ｔ−Ｃ）は、ＣＢＬ０１３７またはＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブ治療をそれぞれ用いた３９．４日及び３９．８日と比較してソラフェニブ治療を用いた５．６５日であった。これらの計算に対して、本試験の時間経過の間にまったく発達していない任意の腫瘍（第１〜４群それぞれについて４／２０、６／２０、４／２０及び４／２０）は除外し、その理由は当該腫瘍が、終了点に明確には到達していないからであった。しかしながら、発達していない腫瘍が、すべての群におけるほぼ等しい頻度で生じるという理由で、任意の他の分析から除外されなかったことは特筆すべきである。ビヒクル処置した第１群（ケージ２マウス４）における１つの追加の腫瘍は、第１５日目（及び第１５日目における対応する％発達阻害）における平均倍数腫瘍発達の算出からしか除外されておらず、その理由は、処置が開始した後まで測定可能な大きさであるとは見えず、それゆえ、倍数発達及び阻害のレベルを正確に評価するための基準測定がなかったからである。
【０１２８】
ＨｅｐＧ２（用量未満のＣＢＬ０１３７）試験について、各試験群における腫瘍発達の動態は、図３、パネルＢに示す。第１３日目は、平均倍数腫瘍発達の分析に選択され、その理由は、このような分析のためにすべての群において十分なデータ点がある最新の時点であったからである。この当日、第１日に対する腫瘍体積の平均変化は、第１群（ビヒクル）において１３．２倍であり、第２群（ソラフェニブ単独）において３．２倍であり、第３群（ＣＢＬ０１３７単独）において３．５倍であり、かつ第４群（ＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブ）において１．６であった。したがって、第１日目と第１３日目の間の腫瘍発達は、第２群における７６％、第３群における７４％及び第４群における８８％だけ阻害された。
【０１２９】
平均倍数腫瘍発達は、ビヒクル処置した第１群においてよりも３つの薬剤処置した群（第３、４及び５群）において小さかった。薬剤処置した群間での平均倍数腫瘍発達の差は、第１３日目に置いて統計的に有意ではなく、その理由としては、腫瘍はちょうど発達し始めたからである。より後の時点（例えば、第２３日目）において、腫瘍発達の差は、より明確であり、分析用の第２〜４群において十分な生存マウスがいた。第２３日目に、平均倍数腫瘍発達は、ソラフェニブ処置した第２群及びＣＢＬ０１３７処置した第３群において、併用処置した第４群における２．１１倍と比較してそれぞれ６．０２倍及び６．２６倍であった。単一療法群間の第２３日目における平均倍数腫瘍発達の差は、有意ではなかった（Ｐ＝０．９７９）が、併用群といずれかの単一療法群の間の差は有意であった（併用対ソラフェニブ単独の比較についてはＰ＝０．００１７及び併用対ＣＢＬ０１３７単独についてはＰ＝０．００３８）。
【０１３０】
腫瘍発達を抑制する上でのＣＢＬ０１３７及びソラフェニブ（及びさらにより大きな程度まで、ＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブ）の効能は、第１３日目に算出されたＴ／Ｃ％値によっても示された。これらの値は、第２、３及び４群における腫瘍がそれぞれ、ビヒクル処置した第１群における腫瘍の大きさの２７．３％、１０．２％及び４．３％であることを示した。
【０１３１】
腫瘍発達の動態の点で、腫瘍倍増時間（ｄＴ）は、ＨｅｐＧ２（用量未満のＣＢＬ０１３７）試験について算出することはできなかったが、その理由としては、併用処置した第４群における腫瘍が、本試験の治療相が終わった後まで発達し始めなかったからである。治療群（Ｔ）及び対照群（Ｃ）における腫瘍の大きさの終了点に到達する中央値時間に基づいた腫瘍発達遅延（Ｔ−Ｃ）は、ソラフェニブ治療で１７日間、ＣＢＬ０１３７治療で１０日間、及びＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブ治療で２９日間であった。これらの計算については、各群における腫瘍の大きさの終了点に到達する中央値時間（それぞれ、第１〜４群における１２．６、２９．６、２２．５及び４１．６）を、指数関数発達曲線からの外挿によって判定した。終了点に到達する中央値時間の延長は、ビヒクル処置した第１群と比較した場合、３つの薬剤処置した群すべてについて統計的に有意であった。薬剤処置した群のうち、終了点までの中央値時間は、ＣＢＬ０１３７単一療法群と比較してソラフェニブ単一療法群においてより大きかった（Ｐ＝０．０１５）が、終了点までの中央値時間は、併用処置した群においてさらにより大きかった（併用対ソラフェニブ単独についてＰ＝０．００１かつ併用対ＣＢＬ０１３７単独についてＰ＜０．０００１）。
【０１３２】
Ｈｅｐ３Ｂ試験について、各試験群における腫瘍発達の動態は、図４、パネルＡに示す。第１１日目は、このような分析についてすべての群において十分なデータ点がある最新の時点であるので、平均倍数腫瘍発達の分析のために選択した。この当日、第１日に対する腫瘍体積の平均変化は、第２群（ソラフェニブ単独）における２．９８倍、第３群（ＣＢＬ０１３７単独）及び第４群（ＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブ）における１３５と比較して、第１群（ビヒクル）において９．０８倍であった。したがって、第１１日目の腫瘍発達は、第２群において６７．２％、第３群において８８．４％及び第４群において８５．１％だけ阻害された。平均倍数腫瘍発達は、３つの薬剤処置した群すべて（第３、４及び５群）において、ビヒクル処置した第１群におけるよりも低かった（第１群との各対形成した比較についてＰ＜０．０００１）。薬剤処置した群間の平均倍数腫瘍発達の差は、第１１日目で統計的に有意ではなく、その理由として、腫瘍がその時点で実質的に（第２群において）発達しなかったまたは（第３及び４群において）まったく発達しなかったからである。統計分析のために３つの薬剤処置した群すべてにおいて十分な生存マウスを有する最新の時点（すなわち、第２５日目）において、腫瘍発達の差は、より明らかであり、平均倍数腫瘍発達は、ソラフェニブ処置した第２群において８．２２倍であり、ＣＢＬ０１３７処置した第３群において３．０３倍であり、及び併用処置した第４群において２．２１倍であった。それゆえ、平均して、ソラフェニブ単一療法群における腫瘍は、ＣＢＬ０１３７単一療法群（Ｐ＝０．０１４）における腫瘍、または併用群（Ｐ＝０．００８）における腫瘍よりも第２５日目までにより発達していた。対照的に、第２５日目における平均倍数腫瘍発達は、ＣＢＬ０１３７単一療法群と併用群の間で異ならなかった（Ｐ＝０．８９８）。
【０１３３】
腫瘍発達を抑制する上でのソラフェニブ、及びさらにより大きな程度までの、ＣＢＬ０１３７及びＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブの効能は、第１１日目について算出されるＴ／Ｃ％値によっても示された。これらの値は、第２、３及び４群における腫瘍が、ビヒクル処置した第１群における腫瘍の大きさのそれぞれ３３．４％、−６．４％及び２．５％であることを示した。ＣＢＬ０１３７処置した第３群について算出した陰性Ｔ／Ｃ％値は、腫瘍が、第１１日目までにこの群において（退行した）大きさにおいて実際に縮小したことを示す。
【０１３４】
腫瘍発達の動態の点で、腫瘍の大きさの終了点に到達する腫瘍倍増時間（ｄＴ）、及び腫瘍発達遅延（Ｔ−Ｃ）は、Ｈｅｐ３Ｂ試験について算出することができず、その理由として、ＣＢＬ０１３７処置した第３群及びＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブ処置した第４群は、本試験の治療相の間に実質的に発達しなかった（かつ多くの場合、実際に退行し、以下を参照されたい）からである。
【０１３５】
第１１日目及び第２５日目の両方についての平均倍数腫瘍発達値が、ＣＢＬ０１３７処置した第３群及び併用処置した第４群におけるわずかな程度の腫瘍発達（３倍未満）を示したが、これらの群における個々の腫瘍の多くは発達せず、むしろ本試験の治療相の間に退行した（腫瘍体積は、第１日目における治療の開始時のものよりも小さかった）。開始体積の８０％以下までの退行は、第３群における１１／２０の腫瘍について、及び第４群における８／１９の腫瘍について治療期間中のいくつかの時点で観察された。これらの腫瘍のすべてについて、退行は、治療の開始の際にすぐには観られなかったが、腫瘍が緩徐に発達した後に露顕した（例えば、第８日目以降）。これらの腫瘍のほとんどの発達は、一過性に抑制されるにすぎなかったが、他のものは実質的に一度も発達せず（２倍未満の発達、対第１日目）、または当該動物を安楽死させるまで退行を示し続けた（１倍未満の発達、対第１日目）。
【０１３６】
各試験群におけるＨｅｐ３Ｂ（用量未満のＣＢＬ０１３７）試験についての腫瘍発達の動態は、図４、パネルＢに示す。ＣＢＬ０１３７単一療法についての試験において観察される効能の欠如は、理論によって結び付けられるよう願うことなく、使用する最適未満の用量によるらしかった（４日ごとの投薬について７０ｍｇ／ｋｇのＭＴＤと比較した５０ｍｇ／ｋｇ）。ＨＣＣ及び他の腫瘍移植モデルにおける複数の他の試験は、Ｑ４ｄ、ｉｖで４週間投与した７０ｍｇ／ｋｇのＣＢＬ０１３７を用いて強力な効能を実証した（例えば、ＨｅｐＧ２試験）。実際、Ｈｅｐ３Ｂ試験において、６０ｍｇ／ｋｇのＣＢＬ０１３７は非常に強力であり、効能を評価するために５０ｍｇ／ｋｇまでの減少を必要とした。
【０１３７】
第１５日目は、平均倍数腫瘍発達の分析のために選択され、その理由は、このような分析のためにすべての群における十分なデータ点がある最新の時点だったからである。この当日、第１日目に対する腫瘍体積の平均の変化は、第２群（ソラフェニブ単独）における１０．２倍、第３群（ＣＢＬ０１３７単独）における１３．０倍及び第４群におおける４．３倍（ＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブ）と比較して、第１群（ビヒクル）における２１．０倍であった。したがって、第１日目と第１５日目の間の腫瘍発達は、第２群における５１．４％、第３群における３８．２％及び第４群における７９．６％だけ阻害された。併用処置した群（第４群）における第１５日目の平均倍数腫瘍発達の減少は、ビヒクル処置した第１群と比較して統計的に有意であった（Ｐ＜０．００５３、表３．２．１）。しかしながら、いずれかの単一療法群（第２または３群）とビヒクル群の間の平均倍数腫瘍発達の差は、有意ではなかった（Ｐ＞０．０５）。
【０１３８】
腫瘍発達に関するすべての他のパラメータの分析（ｄＴ、終了点までの時間、発達遅延、Ｔ／Ｃ％）は類似の結果を付与し、薬剤処置した群における抗腫瘍効能亢進に向けての傾向は、ビヒクル処置、より強い有益な効果を有するソラフェニブ単一療法を上回る顕著な有益な効果を有するＣＢＬ０１３７単一療法を用いて観察され、ＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブ併用は、最強の効果を有している。統計分析で処理することのできるパラメータ（ｄＴ及び終了点までの中央値時間）について、併用処置群とビヒクル処置群の間の差は、非常に統計的に有意であるのに対し（Ｐ＜０．０００１）、いずれかの単一薬剤群とビヒクル群の間の差は、統計的有意性に到達しなかった（Ｐ＞０．０５、しかし、ソラフェニブ処置群とビヒクル処置群の間の終了点までの中央値時間の差はほぼ有意であった（Ｐ＝０．０５３４））。
【０１３９】
ＣＢ０１３７＋ソラフェニブ治療が、ビヒクルと比較してＨｅｐ３Ｂ腫瘍に対して有効であるという知見と一致して、単一の薬剤は示さなかったが、これら３つの薬剤処置群の直接的な比較は、概して（ほとんどのパラメータについて）、併用が、いずれかの単一の薬剤よりも有効であり、単一の薬剤群間で統計的な有意性はないことを示した。このことは、第１５日目におけるｄＴ、終了点までの時間、及び％発達阻害についての症例であった（ＣＢＬ０１３７単独に対する併用の比較のため）。第１５日目の平均倍数腫瘍発達は、第３群において最大であり（ＣＢＬ０１３７単独、１３．０倍）、次いで第２群（ソラフェニブ単独、１０．２倍）、及び次いで第４群（ＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブ、４．３倍）であったが、これらの差は統計的有意性に到達しなかった。Ｈｅｐ３Ｂ（用量未満のＣＢＬ０１３７）試験において後に、薬剤処置した群間での平均腫瘍発達の差は、併用処置群における腫瘍が抑制されながら、単一薬剤処置群における腫瘍が指数関数的に発達し続けるので、より明白となった。したがって、第１９日目（統計分析のために３つの薬剤処置した群すべてにおける十分な生存マウスを有する最新時点）に、平均倍数腫瘍発達は、第４群における５．６倍と比較して第２群及び第３群においてそれぞれ、１９．５倍及び２１．８倍であった。この時点で、いずれかの単一療法群と比較した併用処置群における平均倍数腫瘍発達の減少は、統計的有意に近かった（第２群及び第４群の比較についてはＰ＝０．０６６６、かつ第３群及び第４群の比較についてはＰ＝０．０５２２）。ＭＳＴは、ＣＢＬ０１３７単一療法群と比較してＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブ群（Ｐ＝０．０２１６）及びソラフェニブ単一療法群（Ｐ＝０．０４１５）の両方において延長したが、ＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブ群とソラフェニブの間の差は有意ではなかった（Ｐ＝０．３８１９）。
【０１４０】
要約すると、理論によって結び付けられるよう願うことなく、ＨｅｐＧ２の結果は、ソラフェニブ単独を用いた治療が、ＨｅｐＧ２腫瘍発達に対して何ら効果を有していないが、ＣＢＬ０１３７を用いた治療が、非常に有効であることを示した。ＣＢＬ０１３７投与計画へのソラフェニブの追加は、本試験において使用する容態の下で、その抗腫瘍効果を亢進しなかった。ＨｅｐＧ２（用量未満のＣＢＬ０１３７）試験について、理論によって結び付けられるよう願うことなく、本結果は、ソラフェニブ単逸療法及びＣＢＬ０１３７単一療法の検査した投与計画が、ＨｅｐＧ２腫瘍発達を有効に抑制し、類似のレベルの効能を示すことを示した。驚くべきことに、ソラフェニブとＣＢＬ０１３７の投与計画の併用は結果的に、いずれかの薬剤単独を用いた治療よりも大きな抗腫瘍効能を生じた（相乗性）。
【０１４１】
加えて、理論によって結び付けられるよう願うことなく、Ｈｅｐ３Ｂの結果は、ソラフェニブ単一療法、ＣＢＬ０１３７単一療法、及びＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブ併用治療の適用した投与計画が、Ｈｅｐ３Ｂ移植片の発達を抑制する上ですべて効能があることを示した。しかしながら、ＣＢＬ０１３７及びＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブは、ソラフェニブよりもこのモデルにおいて抗腫瘍薬としてより有効であった。ＣＢＬ０１３７及びＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブによって提供される腫瘍抑制のレベルは類似しており、（ｉ）適用される用量のＣＢＬ０１３７の強力な効能と、（ｉｉ）動物重量減少による併用処置群におけるソラフェニブを用いた投薬の減少との併用効果に最も起因するらしい。それゆえ、この２つの薬剤の組み合わせが抗腫瘍効能亢進をもたらすかどうかを判断することは、Ｈｅｐ３Ｂ試験においては可能ではなかった。この状況は、ＨｅｐＧ２試験において観察されるものと同様であり、ここで、適用される用量のＣＢＬ０１３７が、ＨｅｐＧ２  ＨＣＣ移植片に対して非常に効能があり、したがって、ＣＢＬ０１３７及びソラフェニブからなる組み合わせの際に、任意の追加の有益性に関する観察を防止した。調製した薬剤用量（ＨｅｐＧ２（用量未満のＣＢＬ０１３７）試験）を用いて実施するＨｅｐＧ２モデルにおけるその後の試験は、いずれかの薬剤単独の効能と比較して、ＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブの併用の高い効能を明らかにした。類似の結果は、理論によって結び付けられるよう願うことなく、調整した薬剤用量を用いて実施したＨｅｐ３Ｂモデルにおいて観察された（Ｈｅｐ３Ｂ（用量未満のＣＢＬ０１３７）研究）。
【０１４２】
上述と類似のマウス試験を、腫瘍抑制に及ぼすＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブの起こり得る機序を判定するために、インビトロで実施した。図５（パネルＡ及びＢ）は、ビヒクル、ＣＢＬ０１３７、ソラフェニブ、またはＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブ処置の２時間後及び２４時間後ＨｅｐＧ２及びＨｅｐ３Ｂ腫瘍保有マウスから得たウェスタンブロットに由来する結果を示す。具体的には、ウェスタンブロットは、ｓｐｔ１６、ＳＳＰＲ１、ｐ５３、ｐ２１、Ｐ−ＥＲＫ、ＥＲＫ、Ｍｃｌ−１、及びＧＡＰＤＨ（対照）タンパク質の発現に及ぼす薬剤処置の効果をモニターし、当該タンパク質のうちほとんどは、細胞周期の進行および調節に関与している。ＳＳＲＰ１／ｓｐｔ１６は、ＣＢＬ０１３７活性のための公知の標的であり、すなわち、ＣＢＬ０１３７はサブユニットを密接に（可逆的に）結合させ、２時間での発現低下をもたらす。ＣＢＬ０１３７は、ｐ３及びｐ５３標的、ｐ２１（Ｈｅｐ３Ｂはｐ５３欠損性なので、ＨｅｐＧ２単独）を誘導することが公知であるが、ウェスタンブロットでみられるように、ソラフェニブはこの誘導を遮断した。ソラフェニブは、Ｐ−ＥＲＫのリン酸化を遮断することが公知であり、ならびにＭｃｌ−１の下方調節を生じる。ＣＢＬ０１３７は、併用処置においてこのことに影響しなかった。
【０１４３】
腫瘍抑制に及ぼすＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブの併用処置の起こり得る機序を明らかにするために、追加のインビトロ試験を実施した。図６（パネルＡ〜Ｄ）は、遺伝子特異的プライマー及びプローブを用いるリアルタイムＰＣＲを用いて測定される腫瘍保有ヌードマウス（ＨｅｐＧ２及びＨｅｐ３Ｂ）についてのＮＨ−κＢ標的遺伝子（ＩＬ−８及びＴＮＦ）の発現に及ぼすＣＢＬ０１３７、ソラフェニブ、またはＣＢＬ０１３７＋ソラフェニブ処置の効果を示す。ＣＢＬ０１３７は、ＮＦ−κＢを阻害することが公知である。したがって、当該薬剤への曝露後２時間で、ＮＦ−κＢ標的遺伝子（ＩＬ−８及びＴＮＦ）の発現は低下すべきである。ソラフェニブも、ＣＢＬ０１３７よりも少ないにもかかわらず、ＮＦ−κＢ標的遺伝子の発現に及ぼす効果を有することも観察された。最後に、強力な相乗性がＮＦ−κＢ遺伝子の発現に関してＣＢＬ０１３７とソラフェニブの間に観察され、両ＨＣＣ細胞株においてＴＮＦ及びＩＬ−８の両方の発現のほぼ完全な抑止を伴った。理論によって結び付けられるよう願うことなく、ＣＢＬ０１３７及びソラフェニブの併用効果は、ＮＦ−κＢ経路に及ぼす効果に一部よるように見えた。
【０１４４】
（実施例２：膵癌（またはＨ１９７５非小細胞肺癌異種移植片）に対するＣＢＬ０１３７−ゲムシタビン併用治療の評価）
実施例１において説明したのと類似のマウス試験を実施して、膵癌及び非小細胞肺癌に対するＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビンの併用治療の効果を判定した。ＰＤＡ異なる試験群についての死亡率の動態は、図７、パネルＡに呈する。本試験における動物の死亡率に及ぼす治療毒性の任意の実質的な影響に関する徴候はなかった。薬剤処置は、死亡率のより早期の開始を生じることも、ビヒクル処置に対してＭＳＴに負に影響を及ぼすこともなかった。本試験におけるマウスは、過剰の体重減少／死亡によって安楽死させられることはなかった。本試験における死亡率はすべて、大きさ終了点に到達する、またはある併用処置した動物の場合には、本試験の終了（第８９日目）に到達する腫瘍によるものであった。それゆえ、本試験における死亡率及び生存結果の動態の差は主として、処置効能の反映であり、毒性によるものではなかったので、以下にさらに論議する。
【０１４５】
ＰＤＡの異なる試験群についての死亡率の動態は、図７、パネルＢに呈する。ＭＳＴは、本試験の終了（第８８日目）に至るこれらの群におけるマウスの大部分の生存により、二重薬併用群について正確に計算することはできなかった。本試験における死亡率は、腫瘍の発達に主としてよるものであって、治療毒性によるものではなかった。また、本試験における死亡率及び生存結果の動態における差は主として、治療効能の反映であったので、以下にさらに論議する。
【０１４６】
ＮＳＣＬＣ試験１の異なる試験群についての死亡率の動態は、図８、パネルＡに呈する。ケージ側の観察のいずれも、本試験の経過中に検査した投与計画（ＣＢＬ０１３７）単一療法、ゲムシタビン単一療法またはＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビン併用）の任意の毒性を示さなかった。本試験における死亡率はすべて、２０００ｍｍ３の大きさの終了点に到達する腫瘍によって惹起される安楽死から結果として生じた。それゆえ、中央値生存時間は、腫瘍量に直接関連していたので、以下に論議する。
【０１４７】
ＮＳＣＬＣ試験２の異なる試験群についての死亡率の動態は、図８、パネルＢに呈する。４つの試験群（ビヒクル、ＣＢＬ０１３７、ゲムシタビン、及びＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビン）において、当該動物のいずれにも死亡率の徴候はなかった。これらの群における薬剤処置は、死亡率のより早期の開始を生じることはなく、またはビヒクル処置に対するＭＳＴに負に影響することはなかった。第１群における死亡率すべて、及び単一の薬剤処置は２０００ｍｍ３の大きさの終了点に到達する腫瘍によって惹起される安楽死から結果として生じた。ＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビンにおける２匹のマウスについて、腫瘍は、安楽死時に潰瘍化していることが特記されたが、大きさの終了点（１５４７及び１９２１ｍｍ３）に接近してもいた。本試験における２匹のマウス（両方ともＣＢＬ０１３７処置群に由来）は、第８９日目（本試験の終了）まで生存した。これらのマウスのうちの１匹は、その「腫瘍」が実際に、腫瘍よりもむしろ剖検の際に肥厚したリンパ節であることが分かったので、分析すべてから除外した。第８９日目まで生存した他のマウスは、終了点の大きさ（１６４３ｍｍ３）に接近している腫瘍を有していた。それゆえ、ＭＳＴは、腫瘍量に直接関連していたので、以下に論議する。
【０１４８】
次に、検査した処置投与計画の抗腫瘍効能を、デジタルカリスパを用いた本試験の経過じゅう、腫瘍の測定を通じて確立した。
【０１４９】
各ＰＤＡ及びＮＳＣＬＣ試験（開始体積に対する治療の経過の間の異なる日数に及ぼす腫瘍体積における群あたりの平均倍数変化によって表される）についての腫瘍発達の動態は、図９及び図１０（パネルＡ及びＢ）に示す。
【０１５０】
具体的には、図９、パネルＡは、ＰＤＡ＃１３７５６試験についての各試験群における腫瘍発達の動態を示す。薬剤処置群すべてをビヒクル処置群と比較するために、腫瘍の発達は第１５日目で評価し、この最新時点で分析のためにすべての群における十分なデータ地点があった。ＣＢＬ０１３７単一療法を除く検査した薬剤処置はすべて、ビヒクル処置した第１群と比較して抗腫瘍効能を実証した。この効能は、ビヒクル対照と比較して第１５日目に平均倍数腫瘍発達の減少、ならびに第１５日目における対照腫瘍に対する処置した腫瘍の大きさ（Ｔ／Ｃ％）の減少、及び腫瘍が大きさの終了点に到達する時間の延長において明らかになった。ゲムシタビン単独及びＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビンについて、第１５日目における平均倍数腫瘍発達は１．０未満であり、腫瘍が発達し損ねただけでなく、薬剤処置の開始時にその大きさに対して実際に縮小したことを示した。実際、これらの群における個々の腫瘍の大部分（それぞれ、８／１０及び５／６）は、第１５日目に退行または消失した（測定可能な腫瘍なし）。本試験におけるＣＢＬ０１３７単一療法の効能の欠如が、選択された用量によりそうであったことは特筆すべきである。抗腫瘍効能試験のための週１回の投薬計画のための最大耐量及び最適な用量のＣＢＬ０１３７は、９０ｍｇ／ｋｇ  ＣＢＬ０１３７である。
【０１５１】
概して、処置期間において早期に識別可能ではなかった異なる薬剤併用の潜在的な相加／相乗効果を評価するために（すなわち、第１５日目、この最新時点で、ビヒクル対照群との比較をすることができた）、腫瘍発達は、可能な場合、第２９日目（処置期間の最後の日）及び第５４日目（分析のための比較した群においてとどまっている十分なマウスを有する最新時点）にも評価した。ゲムシタビン、ＣＢＬ０１３７及びこれらの併用の比較は、第１５日目に、ゲムシタビン及びゲムシタビン＋ＣＢＬ０１３７群の両方における腫瘍発達が、ＣＢＬ０１３７群と比較して低下することを示した。したがって、ＣＢＬ０１３７群における第１５日目の３０．４倍の平均腫瘍発達と比較して、腫瘍は、ゲムシタビン群において０．５５倍発達し（Ｐ＝０．００１４）、ゲムシタビン＋ＣＢＬ０１３７群において０．４倍発達した（Ｐ＝０．００７５）。第１５日目における腫瘍の発達に及ぼすゲムシタビン及びゲムシタビン＋ＣＢＬ０１３７の効果は、異ならなかった（Ｐ＞０．９９９）。第２９日目に、ＣＢＬ０１３７群の分析のために十分な腫瘍はなかったが、ゲムシタビン及びゲムシタビン＋ＣＢＬ０１３７群は、腫瘍発達の点で識別不可能のままであった（両群における腫瘍すべての退行）。５４日目までに、腫瘍は両群において発達し始めたが、ゲムシタビン＋ＣＢＬ０１３７群における腫瘍は、ゲムシタビン単一療法群における腫瘍よりも緩徐に発達した。したがって、第５４日目に、ゲムシタビン群における平均倍数腫瘍発達は、２６．７倍であったのに対し、ゲムシタビン＋ＣＢＬ０１３７群は、たったの２．８倍であった（Ｐ＝０．００９）。いずれかの単一薬剤を上回るゲムシタビン＋ＣＢＬ０１３７のより大きな効能も、併用処置群（Ｐ＝０．０１５３）における及びＣＢＬ０１３７単独を用いた１７日間に対する（Ｐ＝０．００１７）長期の動物生存時間によっても示された。これらの結果は、理論によって結び付けられるよう願うことなく、ＣＢＬ０１３７がそれ自体に有効ではない条件下でさえゲムシタビンの効果を高めることを示した。
【０１５２】
図９、パネルＢは、ＰＤＡ試験についての各試験群における腫瘍発達の動態を示す。薬剤処置群すべてをビヒクル処置群と比較するために、腫瘍発達は、処置期間の最後の日である第２９日目に評価した。検査した薬剤処置はすべて、ビヒクル処置した第１群と比較して抗腫瘍効能を実証した。この効能は、ビヒクル処置した対照群と比較して、第２９日目に平均倍数腫瘍発達の減少によって明らかとなった。平均倍数腫瘍発達におけるこれらの減少は、６６．９％〜９８．１％の腫瘍発達阻害に対応した。検査した薬剤処置すべての腫瘍抑制効果は、第２９日目の対照腫瘍に対する処置腫瘍のより小さな大きさ（Ｔ／Ｃ％）、及び腫瘍が大きさの終了点に到達する時間の延長によっても示された。ＣＢＬ０１３７単独以外の薬剤処置群すべてについて、第２９日目の平均倍数腫瘍発達は、１．０未満であり、平均で腫瘍は、発達し損ねるだけでなく、薬剤処置の開始時にその大きさに対して実際に縮小したことを示す。個々の腫瘍の１／９及び３／１０しか、第２９日目にビヒクル及びＣＢＬ０１３７群においてそれぞれ第２９日目に退行を示さなかった。対照的に、ゲムシタビン（６／６）及びＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビン（８／８）で処置した群における個々の腫瘍の大部分は、第２９日までに退行または消失した（測定可能な腫瘍なし）。検査した各単一薬投与計画が腫瘍の発達を抑制する能力も、ビヒクル群と比較して、当該群において長期の生存によって示された。したがって、ＭＳＴは、ビヒクル群における４６日間から、ゲムシタビン及びＣＢＬ０１３７でそれぞれ処置した群における７６．５日間及び７４日間まで延長した。ＭＳＴは、この群における動物の大部分が本試験の終了時まで生存したので、二重薬処置群について評価することはできなかった。しかしながら、ＭＳＴそれ自体の算出なしでさえ、併用治療の強力な効能は、本試験の終了まで生存したビヒクル処置動物がいなかった（０／５）のに対し、ゲムシタビン＋ＣＢＬ０１３７における３／５の動物が生存したという知見によって支持されている。
【０１５３】
異なる薬剤処置の相対的な抗腫瘍効能の比較のために、腫瘍の発達は、第２９日目（ビヒクル対照群との比較が実施できた最新時点）に評価しただけでなく、第５７日目（処置期間の終了１か月後）及び腫瘍がすべての群においてより発達し始め、群間の差がより明白であった第７１日目（分析のために比較した群にとどまっている十分なマウスを有する最新時点）にも評価した。これらの分析（第２９日目における平均倍数腫瘍発達ならびに第５７日目及び第７１日目における平均倍数腫瘍発達）ならびに動物生存時間（ＭＳＴ）の分析は、検査した単一薬処置であるゲムシタビン及びＣＢＬ０１３７の抗主脳効果に差がないことを示した。
【０１５４】
ゲムシタビン、ＣＢＬ０１３７及びこれらの併用の比較は、３つの分析した時点すべて（第２９日目、第５７日目及び第７１日目）において、平均倍数腫瘍発達は併用群において低く、次いでゲムシタビン群及びＣＢＬ０１３７群においてであった。例えば、群間の差が最も明白となるより後期の時点では、第５７日目における平均倍数腫瘍発達は併用処置との０．７５±０．１３、ゲムシタビン処置との７．９１±２．７、及びＣＢＬ０１３７処置との１０．９５±３．１であり、第７１日目における対応する平均倍数腫瘍発達値は、２．２２±０．９４、１２．９８±３．９、及び１６．１３±５．７であった。上記のように、ゲムシタビン単一療法とＣＢＬ０１３７単一療法の間の平均倍数腫瘍発達における差は、いずれの時点においても実質的ではなかった。ゲムシタビン群と併用群の間の腫瘍発達の差は、第５７日目及び第７１日目の両方で実質的であった（５〜１０倍）（第７１日目における差はＰ＝０．０７２であった）。ゲムシタビン単一療法と比較したＣＢＬ０１３７単一療法のわずかにより低い効能のため、ＣＢＬ０１３７群と併用群の間の腫瘍発達の差は、Ｄ５７における倍数腫瘍発達についてＰ＝０．００８５であり、Ｄ７１における倍数腫瘍発達についてＰ＝０．００６５であった。いずれかの薬剤単独を上回るゲムシタビン＋ＣＢＬ０１３７の併用の効能亢進は、動物の生存における差によっても示された。ＭＳＴは、併用処置群について算出及び評価することができなかった（動物の大部分が本試験の終了まで生存したため）が、生存は、ゲムシタビン群（第８８日目まで生存する１／４の個体、ＭＳＴ＝７６．５日）及びＣＢＬ０１３７群（第８８日目まで生存する０／５の個体、ＭＳＴ＝７４日）の両方と比較して併用群（第８日目の試験終了まで生存する４／５の個体、ＭＳＴは８８日超）において長期化した。これらの結果は、理論によって結び付けられるよう願うことなく、ＣＢＬ０１３７及びゲムシタビンの両方が単一の薬剤としてＰＤＡ＃１３５９０腫瘍発達に対して有効であるのに対し、これらの併用が効能亢進を結果的に生じることを示した。当該薬剤を併用する有益な効果は、ＣＢＬ０１３７単一療法との比較に置いて統計的に有意であるにすぎなかったが、当該効果は、ゲムシタビン単一療法との比較においても実質的であった。理論によって結び付けられるよう願うことなく、これらの結果は、ＣＢＬ０１３７及びゲムシタビンの両方が、単一の作用因子としてＰＤＡ＃１３５９０腫瘍発達に対して有効であるが、これらの併用は効能亢進を結果として生じることを示した。
【０１５５】
図１０、パネルＡは、Ｈ１９７５  ＮＳＣＬＣ試験１について各試験群における腫瘍発達の動態を示す。第２２日目は、処置群すべてにおける十分なデータ点があった最新時点であるので、平均倍数腫瘍発達の分析に選択した。この分析は、処置の検査した投与計画すべてが、ビヒクル処置と比較して抗腫瘍効能を提供することを示した。第２２日目における平均倍数腫瘍発達は、ビヒクル処置した第１群における１５．２から、ＢＬ０１３７単独、ゲムシタビン単独、またはこれら２つの併用に関する薬剤処置群においてそれぞれ、２．２、２．７、及び１．４まで減少した。最も有効な投与計画は、ＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビンの併用であり、次にＣＢＬ０１３７単一療法、及び次にゲムシタビン単一療法であり、これはそれぞれ、９０．８％、８５．３％及び８２．６％の第２２日目における腫瘍発達阻害に対応していた。図１０、パネルＡにおいて示す腫瘍発達の動態は、より後期の時点におけるより大きな分離も示した。分析は、第２９日目（治療期の終了）及び第４０日目に平均倍数腫瘍発達について反復し、ここで、単一薬処置動物の腫瘍は、指数関数的に発達していたが、併用処置動物ではそうならなかった。これらの分析は、これらの後期の時点の両方において、ＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビンの高い用量の併用が、単一療法として投与されるいずれかの薬剤よりもＨ１９７５腫瘍発達を抑制する上でより有効であることを示した。
【０１５６】
投与計画すべての抗腫瘍効能は、終了点に到達する時間、発達遅延、Ｔ／Ｃ％、及び中央値生存時間（ＭＳＴ）を含む、評価される腫瘍発達に関する他のパラメータによって確認した。例えば、ＭＳＴは、ビヒクル対照第１群における２２日からＣＢＬ０１３７、ゲムシタビン、またはこれら２つの併用の薬剤処置群においてそれぞれ４５．５、５１．５、５６日まで延長した。先に論議したように、本試験におけるマウス生存動態を示す生存曲線は、図８、パネルＡに示す。
【０１５７】
図１０、パネルＢは、Ｈ１９７５  ＮＳＣＬＣ試験２について各試験群における腫瘍発達の動態を示す。検査した処置すべての抗腫瘍効能の評価について、第５日目は、平均倍数腫瘍発達の分析に選択し、その理由は、すべての処置群において十分なデータ点がある最新地点であったためである。当該分析は、処置の検査した投与計画すべてが、ビヒクル処置と比較して有意な抗腫瘍効能を提供することを示した。第５日目の平均倍数腫瘍発達は、ビヒクル処置した第１群における１．７６倍から他の試験群すべてにおける１．０倍未満まで低下した（Ｐ＜０．０００１）。１．０未満の平均倍数腫瘍発達は、腫瘍の退行を示し、実際、ＣＬＢ０１３７、ゲムシタビン、及びこれら２つの併用それぞれにおける６／９、９／１０、及び９／１０の個々の腫瘍は、第１日目における処置の開始時よりも第５日目において小さかった（第１群における１／９と比較して）。ＣＢＬ０１３７、ゲムシタビン及びＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビン処置の抗腫瘍効能も、ＭＳＴにおける延長によって反映された。ＭＳＴは、ビヒクル処置した第１群において１６日であったのに対し、ＣＢＬ０１３７、ゲムシタビン、及びＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビンそれぞれにおいて４０、４８．５及び６６日まで長期化した（ビヒクル群に対する各薬剤処置群の比較についてＰ＜０．０００１）。
【０１５８】
ＣＢＬ０１３７、ゲムシタビン及びＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビンの効能は、第１５日目（ビヒクル群に対する薬剤処置群の比較のために軍中に十分な動物がいる最後の日）及び第３９日目（薬剤処置群間の比較のために群中に十分な動物がいる最後の日）の両方においてさらに分析した。ＣＢＬ０１３７群、ゲムシタビン群及びＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビン群をビヒクル群と比較する上で、第５日目にみられるように、第１５日目における平均倍数腫瘍発達は、薬剤処置の３つの投与計画すべてによって低下した。したがって、平均倍数腫瘍発達は、それぞれ、ビヒクル処置した第１群における８．５２倍に対して、ＣＢＬ０１３７、ゲムシタビン、及びＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビンそれぞれにおける０．９２倍、０．９５８倍及び０．４６１倍であった（ビヒクル群に対する各薬剤処置群の比較についてはＰ＜０．０００１）。このことは、ＣＢＬ０１３７、ゲムシタビン、またはこれら２つの併用においてそれぞれ、第１５日目における８９．２％、８８．８％及び９４．６％の腫瘍発達阻害に対応していた。ＣＢＬ０１３７、ゲムシタビン及びＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビン投与計画の強力な抗腫瘍効能は、終了点に到達する時間及び発達遅延、ならびにＴ／Ｃ％を含む腫瘍発達の追加のパラメータによって確認した。終了点に到達するための中央値時間は、ビヒクル処置を用いた１５．６日からＣＢＬ０１３７、ゲムシタビン及びＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビン処置をそれぞれ用いた３９．５日、４７．８日及び６６．２日まで延長した（ビヒクル群に対する各薬剤処置群の比較についてはＰ＜０．０００１）。このことは、ＣＢＬ０１３７を用いた２３．９日、ゲムシタビンを用いた３２．２日、及びＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビンを用いた５０．５日の腫瘍発達の遅延（ビヒクル処置に対する）に対応していた。上記のように、ＭＳＴの延長（ビヒクル処置に対する）は、本試験におけるＣＢＬ０１３７、ゲムシタビン及びＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビンの抗腫瘍効能の追加の徴候であった。
【０１５９】
ＣＢＬ０１３７、ゲムシタビン、またはこれら２つの併用はさらに、いずれかの単一の薬剤を用いた治療と比較して、ＣＢＬ０１３７及びゲムシタビンの併用が結果的に、効能亢進を生じるかどうかを判定するために分析した。本試験において後期に、特に第２９日目に終了した処置期間の後、両方の単一の薬剤で処置した群における腫瘍は、非常により大きな速度で発達し始めたのに対し、ＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビン群における腫瘍は、抑制され続けた。それゆえ、第３９日目（比較のために群中に十分な生存動物を有している試験の最後の日）に、平均倍数腫瘍発達は、ＣＢＬ０１３７処置群（５．７倍、Ｐ＝０．０００４）において及びゲムシタビン処置群（３．６６倍、Ｐ＝０．００６４）においてよりもＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビン処置群（０．４８倍）において低かった。これらの群についての終了点の値に対する中央値時間の比較は、同じ結果を付与し、ＣＢＬ０１３７群とゲムシタビン群の間に差がなかったが、これら２つの薬剤の併用は、いずれかの単一薬剤処置と比較して、終了点までの中央値時間の延長をもたらした。同様に、ＣＢＬ０１３７単一療法群とゲムシタビン単一療法群の間にはＭＳＴに差がなかった（それぞれ４０日及び４８．５日、Ｐ＝０．２０８７）のに対し、ゲムシタビン単一療法群とＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビン併用群（４８．５日対６６日、Ｐ＜０．０００１）の間には大きな差があり、ＣＢＬ０１３７単一療法とＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビン併用群の間の差はほぼ有意であった（４０日対６６日、Ｐ＝０．０６０３）。ＣＢＬ０１３７単一療法群における単一腫瘍保有マウスは、本試験の終了まで生存した（第８９日目）。しかしながら、このマウスにおける腫瘍（ＣＢＬ０１３７処置群由来）は、本試験の終了時に安楽死させた場合の大きさ終了点に接近している（１６４３ｍｍ３）。
【０１６０】
全体として、理論によって結び付けられるよう願うことなく、ＰＤＡ試験結果は、ＣＢＬ０１３７の例外はあるものの、薬剤処置（単一療法及び二重薬併用）がすべて、患者由来のＰＤＡ＃１３７５６腫瘍移植片に対して効能があった。ゲムシタビン＋ＣＢＬ０１３７の併用は、いずれかの薬剤単独よりも効能があることが認められた。この治療投与計画は、腫瘍の退行を完了させ、当該退行は、治療期間の終了後約２週間維持された。ＰＤＡ試験結果の支持において理論によって結び付けられるよう願うことなく、ＰＤＡ結果は、薬剤処置がすべて（単一療法及び二重薬併用）が、患者由来のＰＤＡ腫瘍移植片に対して有効であることも示した。検査した単一薬投与計画（ゲムシタビン及びＣＢＬ０１３７）は、等しく効能があり、ＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビン二重薬投与計画は、単一療法として投与される対応する薬剤よりも有効であった。
【０１６１】
加えて、理論によって結び付けられるよう願うことなく、Ｈ１９７５  ＮＳＣＬＣ試験１分析は、ＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビンの併用が、単一療法として投与されるいずれかの薬剤よりもＨ１９７５腫瘍発達を抑制する上で有効であることを示した。これらの結果を支持する上で、理論によって結び付けられるよう願うことなく、Ｈ１９７５  ＮＳＣＬＣ試験２データは、ＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビンを用いた併用処置が、いずれかの単一薬の効能よりも大きな効能を生じることも示した。薬剤併用の抗腫瘍効果の強度は、本試験の処置相の終了を十分に越えて腫瘍の抑制／退行を維持する能力によって示された（平均腫瘍体積は、本試験の第３９日目の開始体積の約１／２であった）。
【０１６２】
先のものと同様のマウス試験は、インビトロで実施して、腫瘍抑制に及ぼすＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビンの併用処置の起こり得る機序を決定した。図１１（パネルＡ〜Ｄ）は、ビヒクル、２μＭのＣＢＬ０１３７、２〜２５μＭのゲムシタビン、またはＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビン処置を用いて処置したＰＤＡ及びＨ１９７５  ＮＳＣＬＣ腫瘍保有マウスから処理したウェスタンブロットからの結果を示す。具体的には、ウェスタンブロットは、インビトロで膵（ＭｉａＰａｃａ２（図１１、パネルＡ）及びＢｘＰＣ３（図１１、パネルＢ）及びＮＳＣＬＣ（Ｈ１９７５（図１１、パネルＣ）及びＡ５４９（図１１、パネルＤ）におけるＣＢＬ０１３７（ＳＰＴ１６及びＳＳＲＰ１）及びゲムシタビン（ＥＮＴ１、Ｒ１、及びＲ２）活性のマーカーの発現に及ぼす薬剤処置の効果をモニターした。細胞を２時間（ＳＳＲＰ１、ＳＰＴ１６）または２４時間（ＥＮＴ１、Ｒ１、及びＲ２）処置した。インキュベーション後、可溶性タンパク質溶解物を、１×ＣＣＬＲプラスプロテアーゼ及びホスファターゼ阻害薬を用いて調製した。特異的なタンパク質バンドは、ＥＣＬによって可視化した。ＧＡＰＤＨは、本実験における搭載対照として使用した。理論によって結び付けられるよう願うことなく、ＥＮＴ１は、ＣＢＬ０１３７または併用処置、代わりに併用の場合、Ｒ１及びＲ２（リボヌクレオチド還元酵素サブユニット）のＣＢＬ０１３７遮断誘導によって影響されなかった。単一療法処置として、ＣＢＬ０１３７は、Ｒ１サブユニットの減少を生じさせるようにも見え、ＣＢＬ０１３７は、ＮＳＣＬＣよりもＰＤＡにおいて効果はより顕著であった。
【０１６３】
追加のインビトロでの試験は、腫瘍抑制に及ぼすＣＢＬ０１３７＋ゲムシタビンの併用処置の起こり得る機序を説明するために実施した。図１２（パネルＡ〜Ｆ）は、２μＭのＣＢＬ０１３７、２〜２５μＭのゲムシタビン、またはこれらの併用を用いた処置後のＮＳＣＬＣ及びＰＤＡ細胞株におけるＣＤＡ及びｄＣＫ（２つのゲムシタビン感度関連遺伝子）の発現に及ぼすＣＢＬ０１３７±ゲムシタビン処置の効果を示す。発現は、遺伝子特異的プライマー及びプローブを用いたリアルタイムＰＣＲを用いて測定した。後者は、ＦＡＭで標識した。Ｂ２−ミクログロブリンは、対照遺伝子として使用した。発現レベルは、ΔΔＣｔ法によって測定した。誤差棒は、平均の標準誤差を表す。理論によって結び付けられるよう願うことなく、ＣＢＬ０１３７は、Ｈ１９７５  ＮＳＣＬＣ及びＭｉａＰａｃａ２  ＰＤＡ細胞株におけるＣＤＡ（シチジンデアミナーゼ）の発現を抑止したが、ｄＣＫ（デオキシシチジンキナーゼ）は抑止しなかった。ＣＢＬ０１３７は、Ａ５４９におけるＣＤＡに何ら効果を及ぼさなかった。この細胞株は、ＣＢＬ０１３７に対してほとんど応答せず、１つの移植片実験においてゲムシタビンに対して耐性があった。
【０１６４】
まとめると、理論によって結び付けられるよう願うことなく、この２つのインビトロ実験は、ＣＢＬ０１３７が、ゲムシタビン感度／耐性を制御することに関与する下流制御性遺伝子／タンパク質（例えば、シタジンデアミナーゼ及びリボヌクレオチド還元酵素サブユニット）によってゲムシタビンの抗腫瘍活性を亢進することがある。
【０１６５】
（定義）
以下の定義は、本明細書に開示する本発明とともに使用する。別段の定義がない限り、本明細書で使用する技術用語及び科学用語はすべて、本発明の属する技術分野における当業者に対して通常理解されるのと同じ意味を有する。
【０１６６】
本明細書で使用する場合、「ａ」、「ａｎ」、または「ｔｈｅ」は１つまたは１つより多くを意味することができる。
【０１６７】
さらに、「約」という用語は、参照される数的表示とともに使用する場合、参照される数の表示の参照された数的表示プラスまたはマイナス最大１０％を意味する。例えば、「約５０」という言語は、４５〜５５の範囲を網羅する。
【０１６８】
「有効量」は、医学的用途とともに使用する場合、関心対象の疾患、例えば癌の病変形成の測定可能な治療、予防、または速度低下を提供するのに有効な量である。
【０１６９】
本明細書で参照する場合、組成物の百分率はすべて、別段の指定がない限り、組成物全体の重量による。本明細書で使用する場合、「を含む」という用語及びその変形は、リストにおける項目の引用がこの技術の組成物及び方法において有用であることもある他の類似項目の除外とならないことがあるよう、非限定的であるよう企図される。同様に、用語「ことができる」及び「ことがある」及びこれらの変形は、実施形態がある要素または特長を含むことができるまたは含むことがある引用が、当該要素または特長を含有しない本技術の他の実施形態を除外しないよう、非限定的であるよう企図される。
【０１７０】
ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ、ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ、またはｈａｖｉｎｇのような用語の同義語としてのオープンエンドな用語「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ」は、本発明を説明及び請求するために本明細書で使用されるが、本発明、またはその実施形態は、「ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ」または「ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ」のような代替用語を用いて代替的に説明することがある。
【０１７１】
本明細書で使用する場合、「好ましい」及び「好ましくは」という語は、ある状況下である利益を生じる技術の実施形態を指す。しかしながら、他の実施形態も、同じまたは他の条件下で好ましいことがある。さらに、１つ以上の好ましい実施形態の引用は、他の実施形態が有用ではないことを暗示するものではなく、本技術の範囲から他の実施形態を除外するよう企図するものではない。
【０１７２】
治療効果を達成するのに必要とされる本明細書に説明する組成物の量は、特定の目的のために従来の手順に従って経験的に測定されることがある。概して、治療目的のために治療薬（例えば、ＣＢＬ０１３７及び／または本明細書に説明する追加の作用因子）を投与するために、治療薬は、薬学的に有効な用量で付与される。「薬理学的有効量」、「薬理学的有効用量」、「治療有効量」、または「有効量」は、特に障害または疾患を治療するために所望の結果を達成することのできる所望の生理学的効果または量を生じるのに十分な量を指す。本明細書で使用する有効量には、例えば、当該障害または疾患の症状の発達を遅延させ、当該障害または疾患の症状の時間経過を変化させ（例えば疾患の症状の進行を遅延させる）、当該障害または疾患の１つ以上の症状または徴候を低下または除去する、及び障害または疾患の症状を逆転させるのに十分な量を含むであろう。例えば、癌に罹患している患者への治療薬の投与は、潜在的な容態を撲滅または寛解させる場合だけでなく、患者が当該疾患と関係する症状の重症度または持続期間の低下、例えば、腫瘍量の減少、循環腫瘍細胞の減少、進行非含有生存の増加を報告する場合も治療の有益性を提供する。治療の有益性には、改善が実現化されるかどうかにかかわらず、潜在的な疾患または障害の進行を休止または遅延させることも含む。
【０１７３】
有効量、毒性、および治療効能は、細胞培養物または実験動物における標準的な医薬手順によって、例えば、ＬＤ５０（集団の約５０％に対して致死である用量）及びＥＤ５０（集団の約５０％における治療有効量）を測定するために測定することができる。薬用量は、採用される剤形及び利用される投与経路に応じて変化させることができる。毒性効果と治療効果の間の用量比は、治療指数であり、ＬＤ５０／ＥＤ５０比として表すことができる。いくつかの実施形態において、大きな治療指数を呈する組成物及び方法が好ましい。治療有効用量は、例えば、細胞培養アッセイを含むインビトロアッセイから初期的に概算することができる。また、用量は、細胞培養物中で若しくは適切な動物モデルにおいて測定されるＩＣ５０を含む循環血漿濃度範囲を達成するために、動物モデルにおいて製剤化することができる。血漿中の説明される組成物のレベルは、例えば、高速液体クロマトグラフィーによって測定することができる。任意の特定の薬用量の効果は、適切なバイオアッセイによってモニターすることができる。薬用量は、意志によって判断することができ、必要に応じて、治療の観察される効果に見合うよう調整することができる。
【０１７４】
ある実施形態において、効果は、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約５０％、少なくとも約７０％、または少なくとも約９０％の定量可能な変化を結果的に生じるであろう。いくつかの実施形態において、効果は、約１０％、約２０％、約３０％、約５０％、約７０％、またはさらには約９０％またはそれより多くの定量可能な変化を結果的に生じるであろう。治療上の利益には、改善が実現されるかどうかにかかわらず、潜行している疾患若しくは障害の進行を休止若しくは遅延させることまたは毒性の低下も含む。
【０１７５】
ある実施形態において、癌を治療するであろう医薬有効量は、症状を典型的には少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％調節するであろう。例示的な実施形態において、このような調節は結果的に、例えば、癌細胞の数の統計的に有意な及び定量可能な変化または本明細書に説明する毒性の徴候（例えば、血液検査におけるある細胞の数、血液検査における肝酵素の数、など）を結果的に生じるであろう。
【０１７６】
（等価物）
本発明は、その具体的な実施形態とともに説明されてきたが、さらなる修飾ができることは理解されるであろうし、本出願は、概して本発明の原理に従って、及び本発明が属する技術分野内で公知のまたは通例的な実施内となるような、ならびに上述に示す必須の特長へ適用されることがある、及び添付の特許請求の範囲において従う、本開示からの逸脱を含む、本発明のいかなる変化、使用、または適用も網羅するよう企図されている。
【０１７７】
当業者は、本明細書に具体的に説明する具体的な実施形態に対する数多くの等価物を、たったの定型的な実験法を用いて認識するであろうし、または確認することができるであろう。このような等価物は、以下の特許請求の範囲に包含されるよう企図される。
【０１７８】
（参照による組み込み）
本明細書に参照される特許及び公開物はすべて、その全体が参照により本明細書により組み込まれる。
【０１７９】
本明細書で論議した公開物は、本出願の出願日に先立って、単に当該公開物の開示のために準備される。本明細書のいかなるものも、本発明が先行発明によりこのような公開物を以前の日付にするよう権利を付与されるものではないという認可として解釈されるものではないことになっている。
【０１８０】
本明細書で使用する場合、見出しはすべて組織化のために単純であり、いかなる様式における開示も制限するよう企図するものではない。いかなる個々の節の内容も、すべての節に対して等しく適用可能であることがある。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【国際調査報告】
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