(57)【要約】本発明は、ＰＣＳＫ９生物学の分野ならびにＰＣＳＫ９の生物学的活性のモジュレーションのための小分子リガンドの組成物および使用の方法に関する。特に、本発明は、タンパク質ＰＣＳＫ９のコンホメーションを変更することによって、低密度リポタンパク質の循環レベルをモジュレートする小分子化合物の組成物を提供する。これらの小分子リガンドとＰＣＳＫ９との結合は、タンパク質のコンホメーションを変更して、ＰＣＳＫ９と内因性の低密度リポタンパク質受容体との間の相互作用を改変し、そして、循環しているＬＤＬ−コレステロールのレベルの増減をもたらすことができる。高いＬＤＬ−コレステロールレベルは、心疾患に対する危険性の増加と関連する。低いＬＤＬ−コレステロールレベルは、肝機能障害などの他の状態において問題となり得るので、ＬＤＬレベルを上昇させることができる小分子リガンドにも有用性がある。
2017528448.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）ｉ）アロステリックモジュレーションを誘導する結合部位および低密度リポタンパク質受容体結合部位を含むＰＣＳＫ９タンパク質、
ｉｉ）前記結合部位に結合可能な小分子リガンド、
ｉｉｉ）低密度リポタンパク質受容体および低密度リポタンパク質を含む複数の肝細胞
を準備するステップと、
ｂ）前記小分子リガンドを前記結合部位に結合させるステップであって、前記小分子リガンドが、前記タンパク質のコンホメーションシフトを誘導する、ステップと、
ｃ）前記コンホメーションシフトにより前記低密度リポタンパク質受容体に対する前記低密度リポタンパク質受容体結合部位の親和性をモジュレートするステップと
を含む方法。
【請求項２】
前記小分子リガンドが、アロステリック阻害剤化合物であり、前記モジュレートするステップが、前記複数の肝細胞による前記低密度リポタンパク質の内在化が増加するように、前記低密度リポタンパク質受容体に対する前記低密度リポタンパク質受容体結合部位の親和性を低減させる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記小分子リガンドが、ＳＲＸ７５、ＳＲＸ７６、ＳＲＸ２０４、ＳＲＸ２０８、ＳＲＸ２０９、ＳＲＸ２１０、ＳＲＸ２１１、ＳＲＸ２１２、ＳＲＸ２１３、ＳＲＸ２１４、ＳＲＸ２１５、ＳＲＸ２１６、ＳＲＸ２１７、ＳＲＸ２１８、ＳＲＸ２１９、ＳＲＸ２２０、ＳＲＸ２２１、ＳＲＸ２２２、ＳＲＸ２２３、ＳＲＸ２２４、およびＳＲＸ２２５からなる群から選択される小分子化合物を含む、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記小分子リガンドが、アロステリック活性化因子化合物であり、前記モジュレートするステップが、前記複数の肝細胞による前記低密度リポタンパク質の内在化が低減するように、前記低密度リポタンパク質受容体に対する前記低密度リポタンパク質受容体結合部位の親和性を増加させる、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記小分子リガンドが、ＳＲＸ２００、ＳＲＸ２０１、ＳＲＸ２０５、ＳＲＸ２０６、およびＳＲＸ２０７からなる群から選択される、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
ａ）ｉ）アロステリックモジュレーションを誘導する結合部位および低密度リポタンパク質受容体結合部位を含むＰＣＳＫ９タンパク質、
ｉｉ）前記結合部位に結合可能な小分子リガンド、
ｉｉｉ）低密度リポタンパク質受容体の集団を含む複数の肝細胞
を準備するステップと、
ｂ）前記小分子リガンドを前記結合部位に結合させるステップであって、前記小分子リガンドが、前記タンパク質のコンホメーションシフトを誘導する、ステップと、
ｃ）前記コンホメーションシフトにより前記低密度リポタンパク質受容体の前記集団をモジュレートするステップと
を含む方法。
【請求項７】
前記小分子リガンドが、アロステリック阻害剤リガンドであり、前記モジュレートするステップが、肝細胞の細胞表面上で測定可能な前記低密度リポタンパク質受容体の前記集団を増加させる、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記小分子リガンドが、ＳＲＸ７５、ＳＲＸ７６、ＳＲＸ２０４、ＳＲＸ２０８、ＳＲＸ２０９、ＳＲＸ２１０、ＳＲＸ２１１、ＳＲＸ２１２、ＳＲＸ２１３、ＳＲＸ２１４、ＳＲＸ２１５、ＳＲＸ２１６、ＳＲＸ２１７、ＳＲＸ２１８、ＳＲＸ２１９、ＳＲＸ２２０、ＳＲＸ２２１、ＳＲＸ２２２、ＳＲＸ２２３、ＳＲＸ２２４、およびＳＲＸ２２５からなる群から選択される小分子化合物を含む、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記小分子リガンドが、アロステリック活性化因子リガンドであり、前記モジュレートするステップが、肝細胞の細胞表面上で測定可能な前記低密度リポタンパク質受容体の前記集団を低減させる、請求項６に記載の方法。
【請求項１０】
前記小分子リガンドが、ＳＲＸ２００、ＳＲＸ２０１、ＳＲＸ２０５、ＳＲＸ２０６、およびＳＲＸ２０７からなる群から選択される小分子化合物を含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記小分子リガンドが、
ＳＲＸ７５：（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−アセトアミド−３−ヒドロキシプロパンアミド）−３−オキソ−３−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）プロピル二水素ホスフェート；
ＳＲＸ７６：（Ｓ）−２−ベンズアミド−３−オキソ−３−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）プロピル二水素ホスフェート；
ＳＲＸ２０１：（Ｅ）−２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヒドラゾノ）−１−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）プロパン−１−オン；
ＳＲＸ２００：（Ｅ）−２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヒドラゾノ）−１−（４−フェニルピペリジン−１−イル）プロパン−１−オン；
ＳＲＸ２０５：（３Ｓ，５Ｓ，７Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−（４−ヒドロキシフェニル）−１−オキソプロパン−２−イル）アダマンタン−１−カルボキサミド；
ＳＲＸ２０６：［（３Ｓ）−３−アセトアミド−４−オキソ−４−｛４−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］−ピペリジン−１−イル｝ブチル］ホスホン酸；
ＳＲＸ２０７：（Ｓ）−（３−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）−４−オキソ−４−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）ブチル）ホスホン酸；
（Ｅ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−２−イル）−３−（（１ｓ，３Ｒ）−アダマンタン−１−イル）アクリルアミド；
（２Ｓ）−Ｎ２−（５−（（１ｓ，３Ｒ）−アダマンタン−１−イル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−Ｎ１−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）プロパン−１，２−ジアミン；
ＳＲＸ２０４：４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン；
ＳＲＸ２０８：｛４−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］−１−ピペラジニル｝アセトニトリル；
ＳＲＸ２０９：１−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペラジン；
ＳＲＸ２１０：４−［３−フルオロ−４−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペリジン；
ＳＲＸ２１１：４−［３−フルオロ−４−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペリジン；
ＳＲＸ２１２：４−（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）ピペリジン；
ＳＲＸ２１３：４−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］−４−ピペリジノール；
ＳＲＸ２１４：４−（４−メチルフェニル）ピペリジン；
ＳＲＸ２１５：２，３，４，４ａ，９，９ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−β−カルボリン；
ＳＲＸ２１６：５−クロロ−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，４’−ピペリジン］；
ＳＲＸ２１８：３−（ｐ−トリル）ピロリジン；
ＳＲＸ２１９：３−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ピロリジン；
ＳＲＸ２２０：４−（ピペリジン−４−イル）安息香酸；
ＳＲＸ２２１：４−（４−クロロフェニル）ピペラジン−２−オン；
ＳＲＸ２２２：１−（［１，１’−ビフェニル］−４−イル）ピペラジン；
ＳＲＸ２２３：４−フェニルシクロヘキサン−１−アミン；
ＳＲＸ２２４：１−（４−クロロフェニル）ピペラジン；
ＳＲＸ２２５：１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン；
３−（３−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）ピロリジン；
４−（４−ピペリジニル）ベンズアミド；
１−（４−クロロフェニル）−２，２−ジメチルピペラジン；
１−（４−クロロフェニル）−３，３−ジメチルピペラジン；
１−（４−クロロフェニル）−２−ピペラゾン；
４−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］−１−ピペラジンカルボン酸、エチルエステル；
１−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］−４−ピペリジンアミン；
３−（４−メチルフェニル）−ピロリジン；
４−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］−シクロヘキサンアミン；
３，５−ジメチル−１−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］−ピペラジン；
４−シクロヘキシルピペリジン；
４−フェノキシピペリジン；
１−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン−２，２，６，６−ｄ４
からなる群から選択される化合物であり、医薬組成物として製剤化される、請求項６に記載の方法。
【請求項１２】
前記医薬組成物が、医薬品をさらに含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記医薬品が、スタチン、心血管薬物、代謝性薬物、および抗高血圧薬物からなる群から選択される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記医薬組成物が、錠剤、液剤、ゲル剤、カプセル剤、サシェ剤、マイクロ粒子、リポソーム、ナノ粒子、塩、経皮的パッチ、軟膏剤、ローション剤、クリーム剤、ゲル剤、滴下剤、ストリップ、坐剤、スプレー剤および散剤からなる群から選択されるように製剤化される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
（ａ）請求項１１に記載の化合物と、
（ｂ）高コレステロール血症の治療のためのその使用に対する指示と
を含むキット。
【請求項１６】
（ａ）請求項１１に記載の化合物と、
（ｂ）低コレステロール血症の治療のためのその使用に対する指示と
を含むキット。
【請求項１７】
（ａ）請求項１１に記載の化合物と、
（ｂ）ＰＣＳＫ９タンパク質の生物学的活性の阻害のためのその使用に対する指示と
を含むキット。
【請求項１８】
（ａ）請求項１１に記載の化合物と、
（ｂ）ＰＣＳＫ９タンパク質の生物学的活性を増加させるためのその使用に対する指示と
を含むキット。
【請求項１９】
前記小分子リガンドが、医薬組成物の小分子化合物であり、前記化合物が、式：
【化２５】
2017528448.tif 000027
（式中、ｉ）Ｒ１５は、Ｈ、アルキル、環式アルキル、分枝アルキル、置換アルキルからなる群から選択され、ｉｉ）Ｒ１６は、不在およびＮＨからなる群から選択され、ｉｉｉ）Ｒ１７は、Ｎ、およびＣＨからなる群から選択され、ｉｖ）Ｒ１８は、Ｈ２、およびＯからなる群から選択され、ｖ）Ｒ１９は、Ｃ、およびＮからなる群から選択され、ｖｉ）Ｒ２０は、不在、ＣＨ２、Ｏ、およびＮＨからなる群から選択され、ｖｉｉ）Ｒ２１は、アリール、置換アリール、置換または非置換の５または６員の芳香族複素環、環式アルキル、５または６員の非芳香族複素環、および分枝アルキルからなる群から選択され、ｖｉｉｉ）Ｒ２２は、ＣＨ２または不在である）
を含む、請求項６に記載の方法。
【請求項２０】
前記小分子リガンドが、医薬組成物の小分子化合物であり、前記化合物が、式：
【化２６】
2017528448.tif 000028
（式中、ｉ）Ｒ１５は、Ｈ、アルキル、環式アルキル、分枝アルキル、置換アルキルからなる群から選択され、ｉｉ）Ｒ１６は、不在およびＮＨからなる群から選択され、ｉｉｉ）Ｒ１７は、Ｎ、およびＣＨからなる群から選択され、ｉｖ）Ｒ１８は、Ｈ２、およびＯからなる群から選択され、ｖ）Ｒ１９は、Ｃ、およびＮからなる群から選択され、ｖｉ）Ｒ２０は、不在、ＣＨ２、Ｏ、およびＮＨからなる群から選択され、ｖｉｉ）Ｒ２１は、アリール、置換アリール、置換または非置換の５または６員の芳香族複素環、環式アルキル、５または６員の非芳香族複素環、および分枝アルキルからなる群から選択され、ｖｉｉｉ）Ｒ２２は、ＣＨ２または不在である）
を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２１】
ＳＲＸ７５：（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−アセトアミド−３−ヒドロキシプロパンアミド）−３−オキソ−３−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）プロピル二水素ホスフェート；
ＳＲＸ７６：（Ｓ）−２−ベンズアミド−３−オキソ−３−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）プロピル二水素ホスフェート；
ＳＲＸ２０１：（Ｅ）−２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヒドラゾノ）−１−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）プロパン−１−オン；
ＳＲＸ２００：（Ｅ）−２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヒドラゾノ）−１−（４−フェニルピペリジン−１−イル）プロパン−１−オン；
ＳＲＸ２０５：（３Ｓ，５Ｓ，７Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−（４−ヒドロキシフェニル）−１−オキソプロパン−２−イル）アダマンタン−１−カルボキサミド；
ＳＲＸ２０６：［（３Ｓ）−３−アセトアミド−４−オキソ−４−｛４−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］−ピペリジン−１−イル｝ブチル］ホスホン酸；
ＳＲＸ２０７：（Ｓ）−（３−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）−４−オキソ−４−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）ブチル）ホスホン酸；
（Ｅ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−２−イル）−３−（（１ｓ，３Ｒ）−アダマンタン−１−イル）アクリルアミド；
（２Ｓ）−Ｎ２−（５−（（１ｓ，３Ｒ）−アダマンタン−１−イル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−Ｎ１−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）プロパン−１，２−ジアミン；および
（Ｅ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−２−イル）−３−（（１ｓ，３Ｒ）−アダマンタン−１−イル）アクリルアミド
からなる群から選択され、医薬組成物として製剤化される化合物または薬学的に許容されるその塩、水和物、もしくは溶媒和物。
【請求項２２】
前記医薬組成物が、医薬品をさらに含む、請求項２１に記載の化合物。
【請求項２３】
前記医薬品が、スタチン、心血管薬物、代謝性薬物、および抗高血圧薬物からなる群から選択される、請求項２２に記載の化合物。
【請求項２４】
前記医薬組成物が、錠剤、液剤、ゲル剤、カプセル剤、サシェ剤、マイクロ粒子、リポソーム、ナノ粒子、塩、経皮的パッチ、軟膏剤、ローション剤、クリーム剤、ゲル剤、滴下剤、ストリップ、坐剤、スプレー剤および散剤からなる群から選択されるように製剤化される、請求項２１に記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＰＣＳＫ９生物学の分野に関する。特に、本発明は、ＰＣＳＫ９タンパク質に結合し、細胞内のＰＣＳＫ９生物学的活性を異なる形で改変する小分子リガンドの組成物および使用の方法を提供する。これらの変化は、ＰＣＳＫ９のＬＤＬＲへの結合、またはＬＤＬＲからの解離における変更、細胞表面上のＬＤＬＲ数の変化、またはＬＤＬ内在化の速度の変化を含み得る。
【背景技術】
【０００２】
低密度リポタンパク質コレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）の血漿レベルの上昇は、冠動脈心疾患の発症に対して最も高いリスクファクターとなっている。血漿からのＬＤＬ−Ｃのクリアランスは、ＬＤＬ受容体（ＬＤＬＲ）の作用を介して主に肝臓により行われ、このＬＤＬ受容体は、ＬＤＬ粒子上でアポリポタンパク質Ｂ１００（ａｐｏＢ１００）に高親和性で結合し、これらのエンドサイトーシスの取込みを媒介する細胞表面糖タンパク質である。Ｇｏｌｄｓｔｅｉｎら、Ａｎｎｕ．  Ｒｅｖ．  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．、１巻：１〜３９頁（１９８５年）。常染色体優性高コレステロール血症（ＡＤＨ）は、ＬＤＬＲ（家族性高コレステロール血症（ＦＨ））またはａｐｏＢ１００（家族性ａｐｏＢ１００欠損）をコードする遺伝子に見出される血漿ＬＤＬクリアランスを減少させる突然変異に関連する。それぞれ、Ｈｏｂｂｓら、Ａｎｎｕ．  Ｒｅｖ．  Ｇｅｎｅｔ．、２４巻、１３３〜１７０頁（１９９０年）およびＩｎｎｅｒａｒｉｔｙら、Ｊ．  Ｌｉｐｉｄ  Ｒｅｓ．、３１巻：１３３７〜１３４９頁（１９９０年）。
【０００３】
低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）受容体（ＬＤＬＲ）は、ＶＬＤＬ、ＶＬＤＬ残留物、およびＬＤＬの効率的なエンドサイトーシスを媒介する。エンドサイトーシスプロセスの一部として、ＬＤＬＲは、リポタンパク質を肝臓のエンドソームへ放出する。
【０００４】
ＬＤＬ−コレステロールレベルをモジュレートする１つの手法は、ＰＣＳＫ９に結合する小さな化合物リガンドを同定し、ＬＤＬＲエンドサイトーシスによるリポタンパク質クリアランスの速度を増加させるか、または所望する場合には低減させるように、ＰＣＳＫ９とＬＤＬＲとの間の相互作用の動態を変更することにある。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Ｇｏｌｄｓｔｅｉｎら、Ａｎｎｕ．  Ｒｅｖ．  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．、１巻：１〜３９頁（１９８５年）
【非特許文献２】Ｈｏｂｂｓら、Ａｎｎｕ．  Ｒｅｖ．  Ｇｅｎｅｔ．、２４巻、１３３〜１７０頁（１９９０年）
【非特許文献３】Ｉｎｎｅｒａｒｉｔｙら、Ｊ．  Ｌｉｐｉｄ  Ｒｅｓ．、３１巻：１３３７〜１３４９頁（１９９０年）
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、ＰＣＳＫ９生物学および高コレステロール血症および低コレステロール血症の治療の分野に関する。特に、本発明は、ＰＣＳＫ９の生物学的コンホメーションに結合し、そのコンホメーションを変更するリガンドの組成物、およびこれらのリガンドを使用して、血液中の低密度リポタンパク質の循環レベルを変化させるようにＰＣＳＫ９活性を改変する方法を提供する。これらのリガンドは、小分子リガンドであってよく、小さな化学化合物であり、より好ましくは６００Ｄａ未満の小分子化合物である。ＰＣＳＫ９のコンホメーションを変更することにより、ＰＣＳＫ９と内因性の低密度リポタンパク質受容体との間の相互作用を変化させ、循環しているＬＤＬ−コレステロールのレベルの増減をもたらすことができる。高いＬＤＬ−コレステロールレベルは、心疾患に対する危険性の増加と関連する。低いＬＤＬ−コレステロールレベルは、肝機能障害などの他の状態において問題となり得るので、ＬＤＬレベルを上昇させることができるリガンドにも有用性がある。
【０００７】
一実施形態では、本発明は、ａ）ｉ）アロステリックモジュレーションを誘導する結合部位および低密度リポタンパク質受容体結合部位を含むＰＣＳＫ９タンパク質、ｉｉ）前記結合部位に結合可能な小分子化合物、ｉｉｉ）低密度リポタンパク質受容体および低密度リポタンパク質を含む複数の肝細胞を準備するステップと、ｂ）前記小分子化合物を前記結合部位に結合させるステップであって、前記小分子化合物が、前記タンパク質のコンホメーションシフトを誘導するステップと、ｃ）前記コンホメーションシフトにより前記低密度リポタンパク質受容体に対する前記低密度リポタンパク質受容体結合部位の親和性をモジュレートするステップとを含む方法を企図している。一実施形態では、小分子化合物は、ＳＲＸ７５、ＳＲＸ７６、ＳＲＸ２０４、ＳＲＸ２００、ＳＲＸ２０１、ＳＲＸ２０５、ＳＲＸ２０６、ＳＲＸ２０７、ＳＲＸ２０８、ＳＲＸ２０９、ＳＲＸ２１０、ＳＲＸ２１１、ＳＲＸ２１２、ＳＲＸ２１３、ＳＲＸ２１４、ＳＲＸ２１５、ＳＲＸ２１６、ＳＲＸ２１７、ＳＲＸ２１８、ＳＲＸ２１９、ＳＲＸ２２０、ＳＲＸ２２１、ＳＲＸ２２２、ＳＲＸ２２３、ＳＲＸ２２４、およびＳＲＸ２２５からなる群から選択される。一実施形態では、小分子化合物は、式：
【化１】
2017528448.tif 000003
（式中、ｉ）Ｒ１５は、Ｈ、アルキル、環式アルキル、分枝アルキル、および置換アルキルからなる群から選択され、ｉｉ）Ｒ１６は、不在およびＮＨからなる群から選択され、ｉｉｉ）Ｒ１７は、ＮおよびＣＨからなる群から選択され、ｉｖ）Ｒ１８は、Ｈ２およびＯからなる群から選択され、ｖ）Ｒ１９は、ＣおよびＮからなる群から選択され、ｖｉ）Ｒ２０は、不在、ＣＨ２、Ｏ、およびＮＨからなる群から選択され、ｖｉｉ）Ｒ２１は、アリール、置換アリール、置換または非置換の５または６員の芳香族複素環［０］、環式アルキル、５または６員の非芳香族複素環、および分枝アルキルからなる群から選択され、ｖｉｉｉ）Ｒ２２はＣＨ２または不在である）である。
【０００８】
一実施形態では、小分子化合物は、アロステリック阻害剤リガンドであり、前記モジュレートするステップは、前記複数の肝細胞による前記低密度リポタンパク質の内在化が増加するように、前記低密度リポタンパク質受容体に対する前記低密度リポタンパク質受容体結合部位の親和性を低減させる。一実施形態では、前記タンパク質のコンホメーションシフトは、誘導適合シフトおよび生体力学シフトからなる群から選択される。一実施形態では、小分子化合物は有機化学化合物である。一実施形態では、小分子化合物は８００Ｄａ未満の有機化学化合物である。一実施形態では、小分子化合物は、１００Ｄａ超および８００Ｄａ未満の有機化学化合物である。一実施形態では、小分子化合物は、１００Ｄａ超および６００Ｄａ未満の有機化学化合物である。一実施形態では、小分子化合物は、１μＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、５００ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、２５０ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、１５０ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、１００ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、５０ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、１０ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、１ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、ＳＲＸ７５、ＳＲＸ７６、ＳＲＸ２０４、ＳＲＸ２０８、ＳＲＸ２０９、ＳＲＸ２１０、ＳＲＸ２１１、ＳＲＸ２１２、ＳＲＸ２１３、ＳＲＸ２１４、ＳＲＸ２１５、ＳＲＸ２１６、ＳＲＸ２１７、ＳＲＸ２１８、ＳＲＸ２１９、ＳＲＸ２２０、ＳＲＸ２２１、ＳＲＸ２２２、ＳＲＸ２２３、ＳＲＸ２２４、およびＳＲＸ２２５からなる群から選択される。
【０００９】
一実施形態では、本発明は、ａ）ｉ）アロステリックモジュレーションを誘導する結合部位および低密度リポタンパク質受容体結合部位を含むＰＣＳＫ９タンパク質、ｉｉ）前記結合部位に結合可能な小分子リガンド、ｉｉｉ）低密度リポタンパク質受容体の集団を含む複数の肝細胞を準備するステップと、ｂ）前記小分子リガンドを前記結合部位に結合させるステップであって、前記小分子リガンドが、前記タンパク質のコンホメーションシフトを誘導するステップと、ｃ）前記コンホメーションシフトにより前記低密度リポタンパク質受容体の前記集団をモジュレートするステップとを含む方法を企図している。一実施形態では、小分子リガンドは、ＳＲＸ７５、ＳＲＸ７６、ＳＲＸ２０４、ＳＲＸ２００、ＳＲＸ２０１、ＳＲＸ２０５、ＳＲＸ２０６、ＳＲＸ２０７、ＳＲＸ２０８、ＳＲＸ２０９、ＳＲＸ２１０、ＳＲＸ２１１、ＳＲＸ２１２、ＳＲＸ２１３、ＳＲＸ２１４、ＳＲＸ２１５、ＳＲＸ２１６、ＳＲＸ２１７、ＳＲＸ２１８、ＳＲＸ２１９、ＳＲＸ２２０、ＳＲＸ２２１、ＳＲＸ２２２、ＳＲＸ２２３、ＳＲＸ２２４、およびＳＲＸ２２５からなる群から選択される。一実施形態では、小分子化合物は、式：
【化２】
2017528448.tif 000004
（式中、ｉ）Ｒ１５は、Ｈ、アルキル、環式アルキル、分枝アルキル、および置換アルキルからなる群から選択され、ｉｉ）Ｒ１６は、不在およびＮＨからなる群から選択され、ｉｉｉ）Ｒ１７は、ＮおよびＣＨからなる群から選択され、ｉｖ）Ｒ１８は、Ｈ２およびＯからなる群から選択され、ｖ）Ｒ１９は、ＣおよびＮからなる群から選択され、ｖｉ）Ｒ２０は、不在、ＣＨ２、Ｏ、およびＮＨからなる群から選択され、ｖｉｉ）Ｒ２１は、アリール、置換アリール、置換または非置換の、５または６員の芳香族複素環［０］、環式アルキル、５または６員の非芳香族複素環、および分枝アルキルからなる群から選択され、ｖｉｉｉ）Ｒ２２はＣＨ２または不在である）である。
【００１０】
一実施形態では、小分子リガンドは、アロステリック阻害剤リガンドであり、前記モジュレートするステップは、前記複数の肝細胞の細胞表面上で測定可能な前記低密度リポタンパク質受容体の前記集団を増加させる。一実施形態では、前記タンパク質のコンホメーションシフトは、誘導適合シフトおよび生体力学シフトからなる群から選択される。一実施形態では、小分子化合物は有機化学化合物である。一実施形態では、小分子化合物は８００Ｄａ未満の有機化学化合物である。一実施形態では、小分子化合物は、１００Ｄａ超および８００Ｄａ未満の有機化学化合物である。一実施形態では、小分子化合物は、１００Ｄａ超および６００Ｄａ未満の有機化学化合物である。一実施形態では、小分子化合物は、１μＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、５００ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、２５０ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、１５０ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、１００ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、５０ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、１０ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、１ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、ＳＲＸ７５、ＳＲＸ７６、ＳＲＸ２０４、ＳＲＸ２０８、ＳＲＸ２０９、ＳＲＸ２１０、ＳＲＸ２１１、ＳＲＸ２１２、ＳＲＸ２１３、ＳＲＸ２１４、ＳＲＸ２１５、ＳＲＸ２１６、ＳＲＸ２１７、ＳＲＸ２１８、ＳＲＸ２１９、ＳＲＸ２２０、ＳＲＸ２２１、ＳＲＸ２２２、ＳＲＸ２２３、ＳＲＸ２２４、およびＳＲＸ２２５からなる群から選択される。
【００１１】
一実施形態では、リガンドは、ＳＲＸ７５、ＳＲＸ７６、ＳＲＸ２００、ＳＲＸ２０１、ＳＲＸ２０４、ＳＲＸ２０５、ＳＲＸ２０６、ＳＲＸ２０７、ＳＲＸ２０８、ＳＲＸ２０９、ＳＲＸ２１０、ＳＲＸ２１１、ＳＲＸ２１２、ＳＲＸ２１３、ＳＲＸ２１４、ＳＲＸ２１５、ＳＲＸ２１６、ＳＲＸ２１７、ＳＲＸ２１８、ＳＲＸ２１９、ＳＲＸ２２０、ＳＲＸ２２１、ＳＲＸ２２２、ＳＲＸ２２３、ＳＲＸ２２４、およびＳＲＸ２２５からなる群から選択される。
【００１２】
一実施形態では、本発明は、これらに限定されないが、ＳＲＸ７５、ＳＲＸ７６、ＳＲＸ２００、ＳＲＸ２０１、ＳＲＸ２０４、ＳＲＸ２０５、ＳＲＸ２０６、ＳＲＸ２０７、ＳＲＸ２０８、ＳＲＸ２０９、ＳＲＸ２１０、ＳＲＸ２１１、ＳＲＸ２１２、ＳＲＸ２１３、ＳＲＸ２１４、ＳＲＸ２１５、ＳＲＸ２１６、ＳＲＸ２１７、ＳＲＸ２１８、ＳＲＸ２１９、ＳＲＸ２２０、ＳＲＸ２２１、ＳＲＸ２２２、ＳＲＸ２２３、ＳＲＸ２２４、およびＳＲＸ２２５を含む化合物を企図している。
【００１３】
一実施形態では、化合物は、医薬組成物として製剤化される。一実施形態では、医薬組成物は、医薬品をさらに含む。一実施形態では、医薬品は、スタチン、心血管薬物、代謝性薬物、および抗高血圧薬物からなる群から選択される。一実施形態では、医薬品は、エゼチミブ、ベシル酸アムロジピン、シタグリプチン、メトホルミン、アトルバスタチン、ロスバスタチンおよびシンバスタチンからなる群から選択される。一実施形態では、医薬組成物は、錠剤、液剤、ゲル剤、カプセル剤、サシェ剤、マイクロ粒子、リポソーム、ナノ粒子、塩、経皮的パッチ、軟膏剤、ローション剤、クリーム剤、ゲル剤、滴下剤、ストリップ、坐剤、スプレー剤および散剤からなる群から選択されるように製剤化される。
【００１４】
一実施形態では、本発明は、ＰＣＳＫ９アロステリック小分子リガンドを含む組成物を企図している。一実施形態では、組成物は医薬組成物である。一実施形態では、医薬組成物は、前記リガンドの有効用量を含む。一実施形態では、医薬組成物は、１種または複数種の塩を含む。一実施形態では、医薬組成物は、経口投与用に製剤化される。
【００１５】
一実施形態では、本発明は、ａ）ＰＣＳＫ９に結合し、タンパク質のアロステリックモジュレーターである小分子化合物を対象に投与するステップであって、前記対象が、心血管疾患の少なくとも１つの症状を有するステップと、ｂ）前記ＰＣＳＫ９アロステリックモジュレーター小分子化合物の投与により心血管疾患の前記少なくとも１つの症状を減少させるステップとを含む方法を企図している。一実施形態では、前記少なくとも１つの症状は、１０％〜８５％減少する。一実施形態では、前記少なくとも１つの症状は２０％〜６５％減少する。一実施形態では、前記少なくとも１つの症状は３０％〜５５％減少する。一実施形態では、心血管疾患は冠疾患を含む。一実施形態では、心血管疾患は高血圧を含む。一実施形態では、心血管疾患は高コレステロール血症を含む。一実施形態では、心血管疾患はアテローム性動脈硬化症を含む。一実施形態では、少なくとも１つの症状は、循環している高密度リポタンパク質の減少を含む。一実施形態では、少なくとも１つの症状は循環しているコレステロールの上昇を含む。一実施形態では、少なくとも１つの症状は循環している低密度リポタンパク質の上昇を含む。一実施形態では、少なくとも１つの症状は高血圧を含む。一実施形態では、投与は、有効用量の前記ＰＣＳＫ９アロステリックモジュレーター小分子化合物を含む。一実施形態では、前記投与は、これらに限定されないが、リポソーム、マイクロ粒子およびナノ粒子を含む群から選択される送達システムをさらに含む。一実施形態では、有効用量は医薬組成物を含む。一実施形態では、医薬組成物は塩を含む。一実施形態では、医薬組成物は経口投与用に製剤化される。一実施形態では、アロステリックモジュレーター小分子化合物は有機化学化合物である。一実施形態では、アロステリックモジュレーター小分子化合物は８００Ｄａ未満の有機化学化合物である。一実施形態では、小分子化合物は、１００Ｄａ超および８００Ｄａ未満の有機化学化合物である。一実施形態では、小分子化合物は、１００Ｄａ超および６００Ｄａ未満の有機化学化合物である。一実施形態では、アロステリックモジュレーター化合物は、１μＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、アロステリックモジュレーター化合物は、５００ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、アロステリックモジュレーター化合物は、２５０ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、アロステリックモジュレーター化合物は、１５０ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、アロステリックモジュレーター化合物は、１００ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、アロステリックモジュレーター化合物は、５０ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、アロステリックモジュレーター化合物は、１０ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、アロステリックモジュレーター化合物は、１ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、アロステリックモジュレーター化合物は、ＳＲＸ７５、ＳＲＸ７６、ＳＲＸ２００、ＳＲＸ２０１、ＳＲＸ２０４、ＳＲＸ２０���、ＳＲＸ２０６、ＳＲＸ２０７、ＳＲＸ２０８、ＳＲＸ２０９、ＳＲＸ２１０、ＳＲＸ２１１、ＳＲＸ２１２、ＳＲＸ２１３、ＳＲＸ２１４、ＳＲＸ２１５、ＳＲＸ２１６、ＳＲＸ２１７、ＳＲＸ２１８、ＳＲＸ２１９、ＳＲＸ２２０、ＳＲＸ２２１、ＳＲＸ２２２、ＳＲＸ２２３、ＳＲＸ２２４、およびＳＲＸ２２５からなる群から選択される。
【００１６】
一実施形態では、本発明は、ａ）ＰＣＳＫ９アロステリック小分子化合物を対象に投与するステップであって、前記対象が、肝疾患の少なくとも１つの症状を有するステップと、ｂ）前記ＰＣＳＫ９アロステリック小分子化合物の投与により肝疾患の前記少なくとも１つの症状の減少させるステップとを含む方法を企図している。一実施形態では、少なくとも１つの症状は、低密度リポタンパク質受容体密度の上昇を含む。一実施形態では、少なくとも１つの症状は、低密度リポタンパク質受容体密度の減少を含む。一実施形態では、前記少なくとも１つの症状は、１０％〜８５％減少する。一実施形態では、前記少なくとも１つの症状は、２０％〜６５％減少する。一実施形態では、前記少なくとも１つの症状は、３０％〜５５％減少する。一実施形態では、ＰＣＳＫ９アロステリック小分子化合物は、ＰＣＳＫ９アロステリック阻害剤化合物を含む。一実施形態では、投与は、前記ＰＣＳＫ９アロステリック阻害剤化合物の有効用量を含む。一実施形態では、前記投与は、これらに限定されないが、リポソーム、マイクロ粒子およびナノ粒子を含む群から選択される送達システムをさらに含む。一実施形態では、有効用量は医薬組成物を含む。一実施形態では、医薬組成物は１種または複数種の塩を含む。一実施形態では、医薬組成物は経口投与用に製剤化される。一実施形態では、小分子化合物は有機化学化合物である。一実施形態では、小分子化合物は８００Ｄａ未満の有機化学化合物である。一実施形態では、小分子化合物は、１００Ｄａ超および６００Ｄａ未満の有機化学化合物である。一実施形態では、小分子化合物は、１μＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、５００ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、２５０ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、１５０ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、１００ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、５０ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、１０ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、１ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、これらに限定されないが、ＳＲＸ７５、ＳＲＸ７６、ＳＲＸ２００、ＳＲＸ２０１、ＳＲＸ２０４、ＳＲＸ２０５、ＳＲＸ２０６、ＳＲＸ２０７、ＳＲＸ２０８、ＳＲＸ２０９、ＳＲＸ２１０、ＳＲＸ２１１、ＳＲＸ２１２、ＳＲＸ２１３、ＳＲＸ２１４、ＳＲＸ２１５、ＳＲＸ２１６、ＳＲＸ２１７、ＳＲＸ２１８、ＳＲＸ２１９、ＳＲＸ２２０、ＳＲＸ２２１、ＳＲＸ２２２、ＳＲＸ２２３、ＳＲＸ２２４、およびＳＲＸ２２５を含む群から選択される。
【００１７】
一実施形態では、本発明は、ａ）ＰＣＳＫ９アロステリック小分子化合物を対象に投与するステップであって、前記対象が、血液中のＰＣＳＫ９タンパク質レベルの上昇という少なくとも１つの症状を有するステップと、ｂ）血液中のＰＣＳＫ９タンパク質レベルの上昇という前記少なくとも１つの症状を、前記ＰＣＳＫ９アロステリック小分子化合物の投与により減少させるステップとを含む方法を企図している。一実施形態では、少なくとも１つの症状は、低密度リポタンパク質受容体密度の減少を含む。一実施形態では、前記少なくとも１つの症状は、１０％〜８５％減少する。一実施形態では、前記少なくとも１つの症状は、２０％〜６５％減少する。一実施形態では、前記少なくとも１つの症状は、３０％〜５５％減少する。一実施形態では、ＰＣＳＫ９アロステリック小分子化合物は、ＰＣＳＫ９アロステリック阻害剤化合物を含む。一実施形態では、投与は、前記ＰＣＳＫ９アロステリック小分子化合物の有効用量を含む。一実施形態では、前記投与は、これらに限定されないが、リポソーム、マイクロ粒子およびナノ粒子を含む群から選択される薬物システムをさらに含む。一実施形態では、有効用量は医薬組成物を含む。一実施形態では、医薬組成物は塩を含む。一実施形態では、医薬組成物は経口投与用に製剤化される。一実施形態では、小分子化合物は有機化学化合物である。一実施形態では、小分子化合物は８００Ｄａ未満の有機化学化合物である。一実施形態では、小分子化合物は、１００Ｄａ超および８００Ｄａ未満の有機化学化合物である。一実施形態では、小分子化合物は、１００Ｄａ超および６００Ｄａ未満の有機化学化合物である。一実施形態では、小分子化合物は、１μＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、５００ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、２５０ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、１５０ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、１００ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、５０ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、１０ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、１ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、ＳＲＸ７５、ＳＲＸ７６、ＳＲＸ２０４、ＳＲＸ２０８、ＳＲＸ２０９、ＳＲＸ２１０、ＳＲＸ２１１、ＳＲＸ２１２、ＳＲＸ２１３、ＳＲＸ２１４、ＳＲＸ２１５、ＳＲＸ２１６、ＳＲＸ２１７、ＳＲＸ２１８、ＳＲＸ２１９、ＳＲＸ２２０、ＳＲＸ２２１、ＳＲＸ２２２、ＳＲＸ２２３、ＳＲＸ２２４、およびＳＲＸ２２５からなる群から選択される。
【００１８】
一実施形態では、本発明は、ａ）ＰＣＳＫ９アロステリック小分子化合物を対象に投与するステップであって、前記対象が、血液中のＰＣＳＫ９タンパク質レベルが平均未満であるという少なくとも１つの症状を有するステップと、ｂ）抑制されたＰＣＳＫ９という前記少なくとも１つの症状を前記ＰＣＳＫ９アロステリック小分子化合物の投与により減少させるステップとを含む方法を企図している。一実施形態では、少なくとも１つの症状は、低密度リポタンパク質受容体密度の上昇を含む。一実施形態では、少なくとも１つの症状は、低コレステロール血症を含む。一実施形態では、前記少なくとも１つの症状は、１０％〜８５％減少する。一実施形態では、前記少なくとも１つの症状は、２０％〜６５％減少する。一実施形態では、前記少なくとも１つの症状は、３０％〜５５％減少する。一実施形態では、ＰＣＳＫ９アロステリック小分子化合物は、ＰＣＳＫ９アロステリック活性化因子化合物を含む。一実施形態では、投与は、前記ＰＣＳＫ９アロステリック小分子化合物の有効用量を含む。一実施形態では、前記投与は、これらに限定されないが、リポソーム、マイクロ粒子およびナノ粒子を含む群から選択される薬物システムをさらに含む。一実施形態では、有効用量は医薬組成物を含む。一実施形態では、医薬組成物は１種または複数種の塩を含む。一実施形態では、医薬組成物は経口投与用に製剤化される。一実施形態では、小分子化合物は有機化学化合物である。一実施形態では、小分子化合物は８００Ｄａ未満の有機化学化合物である。一実施形態では、小分子化合物は、１００Ｄａ超および８００Ｄａ未満の有機化学化合物である。一実施形態では、小分子化合物は、２００Ｄａ超および６００Ｄａ未満の有機化学化合物である。一実施形態では、小分子化合物は、１μＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、５００ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、２５０ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、１５０ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、１００ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、５０ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、１０ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、１ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、これらに限定されないが、ＳＲＸ２００、ＳＲＸ２０１、ＳＲＸ２０５、ＳＲＸ２０６、およびＳＲＸ２０７を含む群から選択される。
【００１９】
一実施形態では、本発明は、ａ）ｉ）アロステリックモジュレーション部位およびオルソステリック低密度リポタンパク質受容体（ＬＤＬＲ）結合部位を含むＰＣＳＫ９タンパク質、ｉｉ）前記アロステリックモジュレーション部位に結合可能なアロステリック小分子化合物を準備するステップと、ｂ）前記アロステリック小分子化合物を、前記アロステリックモジュレーション部位に結合させるステップであって、前記アロステリック小分子化合物が、前記オルソステリックＬＤＬＲ結合部位のコンホメーションシフトを誘導するステップとを含む方法を企図している。一実施形態では、前記アロステリック小分子化合物の前記アロステリックモジュレーション部位への前記結合は、前記オルソステリックＬＤＬＲ結合部位の誘導適合のコンホメーションシフトを阻害する。一実施形態では、結合は、前記ＰＣＳＫ９タンパク質のコンホメーションシフトを誘導する。一実施形態では、得られたＰＣＳＫ９コンホメーションシフトは、前記オルソステリックＬＤＬＲ結合部位のＬＤＬＲとの相互作用の結合親和性を減少させ、低密度リポタンパク質クリアランスは増加する。一実施形態では、コンホメーションシフトは、前記オルソステリック低密度リポタンパク質受容体結合部位の低密度リポタンパク質受容体からの解離を増強する。一実施形態では、コンホメーションシフトは、結合リガンドへのオルソステリックＣｉｓ−Ｈｉｓ豊富なドメイン（ＣＨＲＤ）結合部位を減少させる（例えば、低ｐＨでのベシクルトラフィッキングを促進するために；ＤｅＶａｙら、「Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｒｏｐｒｏｔｅｉｎ  ｃｏｎｖｅｒｔａｓｅ  ｓｕｂｔｉｌｉｓｉｎ／ｋｅｘｉｎ  ｔｙｐｅ  ９  （ＰＣＳＫ９）  ｔｒａｆｆｉｃｋｉｎｇ  ｒｅｖｅａｌｓ  ａ  ｎｏｖｅｌ  ｌｙｓｏｓｏｍａｌ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｖｉａ  ａｍｙｌｏｉｄ  ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ−ｌｉｋｅ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ２  （ＡＰＬＰ２）」、Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．、２８８巻（１５号）：１０８０５〜１０８１８頁（２０１３年）。一実施形態では、オルソステリック低密度リポタンパク質受容体結合部位のコンホメーションシフトは誘導適合の阻害を含む。一実施形態では、前記アロステリック小分子化合物の結合は、ＰＣＳＫ９のオルソステリックＬＤＬＲ結合部位の誘導適合に対して必要とされるコンホメーションシフトを減少させ、前記オルソステリックＬＤＬＲ相互作用の結合親和性を阻害し、低密度リポタンパク質クリアランスは増加する。一実施形態では、前記オルソステリック低密度リポタンパク質受容体結合部位コンホメーションシフトを誘導させることは生体力学的なものである。一実施形態では、コンホメーションシフトは、ＰＣＳＫ９触媒ドメインとＰＣＳＫ９Ｃ末端ドメインとの間の連結ループの生体力学的強化をもたらす。一実施形態では、生体力学的コンホメーションシフトは、アミノ酸アラニン４４３側鎖および／または骨格の移動および／または回転による運動を含む。一実施形態では、生体力学的コンホメーションシフトは、アミノ酸バリン４４１側鎖および／または骨格の移動および／または回転による運動を含む。一実施形態では、生体力学的コンホメーションシフトは、���ミノ酸アスパラギン酸４２２側鎖および／または骨格の移動および／または回転による運動を含む。一実施形態では、生体力学的コンホメーションシフトは、アミノ酸トレオニン１６２側鎖および／または骨格の移動および／または回転による運動を含む。一実施形態では、生体力学的コンホメーションシフトは、アミノ酸プロリン４４５側鎖および／または骨格の移動および／または回転による運動を含む。一実施形態では、生体力学的コンホメーションシフトは、アミノ酸プロリン４４６側鎖および／または骨格の移動および／または回転による運動を含む。一実施形態では、生体力学的コンホメーションシフトは、ヒスチジン４４９の再配向および転座を含む。一実施形態では、生体力学的機序は、アミノ酸アラニン４４３側鎖および／または骨格の移動および／または回転による運動の阻害を含む。一実施形態では、生体力学的機序は、アミノ酸バリン４４１側鎖および／または骨格の移動および／または回転による運動の阻害を含む。一実施形態では、生体力学的機序は、アミノ酸アスパラギン酸４２２側鎖および／または骨格の移動および／または回転による運動の阻害を含む。一実施形態では、生体力学的機序は、アミノ酸トレオニン１６２側鎖および／または骨格の移動および／または回転による運動の阻害を含む。一実施形態では、生体力学的機序は、アミノ酸プロリン４４５側鎖および／または骨格の移動および／または回転による運動の阻害を含む。一実施形態では、生体力学的機序は、アミノ酸プロリン４４６側鎖および／または骨格の移動および／または回転による運動の阻害を含む。一実施形態では、生体力学的シフトは、ヒスチジン４４９側鎖および／または骨格の移動および／または回転による運動の阻害を含む。一実施形態では、小分子化合物は有機化学化合物である。一実施形態では、小分子化合物は８００Ｄａ未満の有機化学化合物である。一実施形態では、小分子化合物は、１００Ｄａ超および８００Ｄａ未満の有機化学化合物である。一実施形態では、小分子化合物は、１００Ｄａ超および６００Ｄａ未満の有機化学化合物である。一実施形態では、小分子化合物は、１μＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、５００ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、２５０ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、１５０ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、１００ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、５０ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、１０ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、１ｎＭ未満の結合親和性でＰＣＳＫ９に結合する。一実施形態では、小分子化合物は、ＳＲＸ７５、ＳＲＸ７６、ＳＲＸ２０４、ＳＲＸ２０８、ＳＲＸ２０９、ＳＲＸ２１０、ＳＲＸ２１１、ＳＲＸ２１２、ＳＲＸ２１３、ＳＲＸ２１４、ＳＲＸ２１５、ＳＲＸ２１６、ＳＲＸ２１７、ＳＲＸ２１８、ＳＲＸ２１９、ＳＲＸ２２０、ＳＲＸ２２１、ＳＲＸ２２２、ＳＲＸ２２３、ＳＲＸ２２��、およびＳＲＸ２２５からなる群から選択される。
【００２０】
一実施形態では、本発明は、式：
【化３】
2017528448.tif 000005
を含む化合物、ＳＲＸ２０４および好ましくはＳＲＸ２０４の医薬組成物を企図している。
【００２１】
一実施形態では、本発明は、式：
【化４】
2017528448.tif 000006
の化合物および担体（式中：ｉ）Ｒ１は、Ｏ、ＣＨ２からなる群から選択され、ｉｉ）Ｒ２は、アシル化アミン（例えば、ＡｃＮＨ−）、置換アシルアミン（例えばＡｃＮＨＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）ＣＯＮＨ−）、カルバメート（例えば、ＢｎＯＣＯＮＨ−）、ウレタン、アルコキシル、分枝アルコキシ、アリールオキシル、置換アリールオキシ、５員の芳香族複素環、置換されている５員の芳香族複素環を含む群から選択され、ｉｉｉ）Ｒ３は、Ｈ、ＯＨからなる群から選択され、ｉｖ）Ｒ４は、Ｈ２、Ｏからなる群から選択され、ｖ）Ｒ５は、Ｃ、Ｎからなる群から選択され、ｖｉ）Ｒ６は、ＣＨ２、Ｏ、または不在を含む群から選択され、ｖｉｉ）Ｒ７は、アリール、置換アリール、置換または非置換の５または６員の芳香族複素環［０］、環式アルキル、５または６員の非芳香族複素環、分枝アルキル、または不在を含む群から選択される）を含む医薬組成物を企図している。一実施形態では、化合物は、
ＳＲＸ７５：（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−アセトアミド−３−ヒドロキシプロパンアミド）−３−オキソ−３−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）プロピル二水素ホスフェート；
ＳＲＸ７６：（Ｓ）−２−ベンズアミド−３−オキソ−３−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）プロピル二水素ホスフェート；
（Ｓ）−２−イソブチルアミド−３−オキソ−３−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）プロピル二水素ホスフェート；
（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−アセトアミド−３−ヒドロキシプロパンアミド）−３−オキソ−３−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）プロピル二水素ホスフェート；
ベンジル（Ｓ）−（１−オキソ−３−（ホスホノオキシ）−１−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−イル）カルバメート；
（Ｓ）−２−（３，３−ジメチルウレイド）−３−オキソ−３−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）プロピル二水素ホスフェート；
（Ｓ）−２−アセトアミド−３−オキソ−３−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン−１−イル）プロピル二水素ホスフェート；
（Ｓ）−２−アセトアミド−３−オキソ−３−（４−フェニルピペリジン−１−イル）プロピル二水素ホスフェート；
（Ｓ）−２−アセトアミド−３−（４−シクロヘキシルピペリジン−１−イル）−３−オキソプロピル二水素ホスフェート；
（Ｓ）−２−アセトアミド−３−オキソ−３−（４−（ピリジン−３−イル）ピペリジン−１−イル）プロピル二水素ホスフェート；
（Ｓ）−２−アセトアミド−３−（４−（５−メチルオキサゾール−２−イル）ピペラジン−１−イル）−３−オキソプロピル二水素ホスフェート；
（Ｓ）−２−アセトアミド−３−オキソ−３−（４−フェノキシピペリジン−１−イル）プロピル二水素ホスフェート；
（Ｓ）−２−アセトアミド−３−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）ピペリジン−１−イル）−３−オキソプロピル二水素ホスフェート；
（Ｓ）−２−アセトアミド−３−オキソ−３−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）プロピル水素メチルホスホネート
（Ｓ）−２−（４−エチル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−３−オキソ−３−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）プロピル二水素ホスフェート；
（Ｓ）−３−オキソ−２−フェノキシ−３−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）プロピル二水素ホスフェート；
（Ｓ）−２−イソプロポキシ−３−オキソ−３−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）プロピル二水素ホスフェート；
（２Ｓ）−２−（５−エチル−３Ｈ−ピラゾール−３−イル）−３−オキソ−３−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）プロピル二水素ホスフェート；
（Ｓ）−２−（２−エチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−３−オキソ−３−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）プロピル二水素ホスフェート；
（Ｒ）−２−（２−エチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−２−ヒドロキシ−３−オキソ−３−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）プロピル二水素ホスフェート；
（Ｒ）−２−（５−エチル−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）−３−オキソ−３−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）プロピル二水素ホスフェート；
（Ｓ）−３−オキソ−２−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−３−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）プロピル二水素ホスフェート；
ＳＲＸ２０６：（（Ｓ）−３−（（Ｓ）−２−アセトアミド−３−ヒドロキシプロパンアミド）−４−オキソ−４−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）ブチル）ホスホン酸；
（Ｓ）−（３−ベンズアミド−４−オキソ−４−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）ブチル）ホスホン酸；
（Ｓ）−（３−イソブチルアミド−４−オキソ−４−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）ブチル）ホスホン酸；
（Ｓ）−（３−アセトアミド−４−オキソ−４−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）ブチル）ホスホン酸；
ＳＲＸ２０７：（Ｓ）−（３−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）−４−オキソ−４−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）ブチル）ホスホン酸；
（Ｓ）−（３−（３，３−ジメチルウレイド）−４−オキソ−４−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）ブチル）ホスホン酸；
（Ｓ）−（３−アセトアミド−４−オキソ−４−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン−１−イル）ブチル）ホスホン酸；
（Ｓ）−（３−アセトアミド−４−オキソ−４−（３−オキソ−４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン−１−イル）ブチル）ホスホン酸；
（Ｓ）−（３−アセトアミド−４−オキソ−４−（４−フェニルピペリジン−１−イル）ブチル）ホスホン酸；
（Ｓ）−（３−アセトアミド−４−（４−シクロヘキシルピペリジン−１−イル）−４−オキソブチル）ホスホン酸；
（Ｓ）−（３−アセトアミド−４−オキソ−４−（４−（ピリジン−３−イル）ピペリジン−１−イル）ブチル）ホスホン酸；
（Ｓ）−（３−アセトアミド−４−（４−（５−メチルオキサゾール−２−イル）ピペラジン−１−イル）−４−オキソブチル）ホスホン酸；
（Ｓ）−（３−アセトアミド−４−オキソ−４−（４−フェノキシピペリジン−１−イル）ブチル）ホスホン酸；
（Ｓ）−（３−アセトアミド−４−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）ピペリジン−１−イル）−４−オキソブチル）ホスホン酸；
（Ｓ）−（３−（４−エチル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−４−オキソ−４−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）ブチル）ホスホン酸；
（Ｓ）−（４−オキソ−３−フェノキシ−４−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）ブチル）ホスホン酸；
（Ｓ）−（３−イソプロポキシ−４−オキソ−４−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）ブチル）ホスホン酸；
（（３Ｒ）−３−（５−エチル−３Ｈ−ピラゾール−３−イル）−４−オキソ−４−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）ブチル）ホスホン酸；
（Ｒ）−（３−（２−エチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−４−オキソ−４−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）ブチル）ホスホン酸；
（Ｓ）−（３−（２−エチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−３−ヒドロキシ−４−オキソ−４−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）ブチル）ホスホン酸；
（Ｒ）−（３−（５−エチル−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）−４−オキソ−４−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）ブチル）ホスホン酸；
（Ｒ）−２−（２−エチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−２−ヒドロキシ−３−オキソ−３−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）プロピル二水素ホスフェート
からなる一覧から選択される。
【００２２】
一実施形態では、本発明は、式：
【化５】
2017528448.tif 000007
の化合物および担体（式中、ｉ）Ｒ８は、アルキル、ヒドロキシアルキル、置換アルキル、不在を含む群から選択され、ｉｉ）Ｒ９は、ＮＨおよびＯからなる群から選択され、ｉｉｉ）Ｒ１０は、アルキル、分枝アルキル、ヒドロキシアルキル、置換アルキル、置換または非置換の５または６員の芳香族複素環［０］、−ＣＯＮＨＲ（式中、Ｒ＝アルキル、ヒドロキシルアルキル、置換アルキル、分枝アルキル、置換もしくは非置換アリールまたはヘテロアリール）を含む群から選択され、ｉｖ）Ｒ１１は、Ｈ２、Ｏを含む群から選択され、ｖ）Ｒ１２は、ＣおよびＮからなる群から選択され、ｖｉ）Ｒ１３は、ＣＨ２、Ｏ、不在を含む群から選択され、ｖｉｉ）Ｒ１４は、アリール、置換アリール、置換または非置換の５または６員の芳香族複素環［０］、環式アルキル、５または６員の非芳香族複素環、分枝アルキル、不在を含む群から選択される）を含む医薬組成物を企図している群から選択される。一実施形態では、化合物は、
ＳＲＸ２０１：（Ｅ）−２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヒドラゾノ）−１−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）プロパン−１−オン；
ＳＲＸ２００：（Ｅ）−２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヒドラゾノ）−１−（４−フェニルピペリジン−１−イル）プロパン−１−オン；
（Ｅ）−２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヒドラゾノ）−１−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン−１−イル）プロパン−１−オン；
（Ｅ）−４−（２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヒドラゾノ）プロパノイル）−１−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン−２−オン；
（Ｅ）−２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヒドラゾノ）−１−（４−フェニルピペラジン−１−イル）プロパン−１−オン；
（Ｅ）−２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヒドラゾノ）−１−（４−シクロヘキシルピペリジン−１−イル）プロパン−１−オン；
（Ｅ）−２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヒドラゾノ）−１−（４−フェノキシピペリジン−１−イル）プロパン−１−オン；
（Ｅ）−２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヒドラゾノ）−１−（４−（ピリジン−３−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−１−オン；
（Ｅ）−２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヒドラゾノ）−１−（４−（ピリジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）プロパン−１−オン；
（Ｅ）−２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヒドラゾノ）−１−（４−（５−メチルオキサゾール−２−イル）ピペラジン−１−イル）プロパン−１−オン；
（Ｅ）−２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヒドラゾノ）−１−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）ピペリジン−１−イル）プロパン−１−オン；
（Ｅ）−２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヒドラゾノ）−１−（４−フェニルピペリジン−１−イル）ペンタン−１−オン；
（Ｅ）−２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヒドラゾノ）−３−ヒドロキシ−１−（４−フェニルピペリジン−１−イル）プロパン−１−オン；
（Ｚ）−２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヒドラゾノ）−１−（４−フェニルピペリジン−１−イル）−２−（チオフェン−２−イル）エタン−１−オン；
（Ｅ）−２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヒドラゾノ）−１−（４−フェニルピペリジン−１−イル）−２−（ピリジン−２−イル）エタン−１−オン；
（Ｅ）−２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヒドラゾノ）−Ｎ−エチル−３−オキソ−３−（４−フェニルピペリジン−１−イル）プロパンアミド；
（Ｅ）−２−（２−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヒドラゾノ）−１−（４−フェニルピペリジン−１−イル）プロパン−１−オン
からなる一覧から選択される。
【００２３】
一実施形態では、本発明は、式：
【化６】
2017528448.tif 000008
の化合物および担体（式中、このスキャフォールドは、ｉ）５員の芳香族複素環または縮合複素環「Ｈ」に繋がっており、アミノ基を介して、ｉｉ）４．８〜６．２オングストローム離れているかさ高い、架橋した二環「Ｂ」に連結しているキラルアミノテトラゾールからなる）を含む医薬組成物を企図している。一実施形態では、「Ｂ」は、１−アダマンタン、２−アダマンタン、ノルボルナン、ノルボルネン、Ｎ−メチルトロパン、他の同様の架橋した炭素環もしくは複素環、またはその置換形を含む群から選択することができる。置換は、アルコール、アミン、カルボキシレート、ハロゲン化物、または他の共通の有機部分を含み得る。一実施形態では、「Ｈ」は、描かれているような３−インドール、または他の縮合または非縮合の５員の芳香族複素環、例えば、３−インダゾール、３−ピロール、イミダゾール、オキサゾール、オキサジアゾール、プリンなどを含む群から選択することができる。一実施形態では、４．８〜６．２オングストロームスペーサーは、スキーム７に記載されているようなペプチド性、または、スキーム９に記載されているようなオレフィン、または５もしくは６員の芳香族、例えば式：
【化７】
2017528448.tif 000009
のものであってよい。
【００２４】
一実施形態では、化合物は、
ＳＲＸ２０５：（３Ｓ，５Ｓ，７Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−（４−ヒドロキシフェニル）−１−オキソプロパン−２−イル）アダマンタン−１−カルボキサミド；
標的４：（Ｅ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−２−イル）−３−（（１ｓ，３Ｒ）−アダマンタン−１−イル）アクリルアミド；
（３Ｓ，５Ｓ，７Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ）−３−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−（４−ヒドロキシフェニル）−１−オキソプロパン−２−イル）アダマンタン−１−カルボキサミド；
（３Ｓ，５Ｓ，７Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）アダマンタン−１−カルボキサミド；
（３Ｓ，５Ｓ，７Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ）−３−（１Ｈ−インダゾール−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−（４−ヒドロキシフェニル）−１−オキソプロパン−２−イル）アダマンタン−１−カルボキサミド；
（３Ｓ，５Ｓ，７Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ）−３−（１Ｈ−イミダゾール−４−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−（４−ヒドロキシフェニル）−１−オキソプロパン−２−イル）アダマンタン−１−カルボキサミド；
（３Ｓ，５Ｓ，７Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ）−３−（２−エチル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−（４−ヒドロキシフェニル）−１−オキソプロパン−２−イル）アダマンタン−１−カルボキサミド；
（１ｒ，５Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−（４−ヒドロキシフェニル）−１−オキソプロパン−２−イル）ビシクロ［３．３．１］ノナン−１−カルボキサミド；
（１Ｒ，５Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−（４−ヒドロキシフェニル）−１−オキソプロパン−２−イル）ビシクロ［３．１．１］ヘプタン−３−カルボキサミド；
（２Ｓ）−Ｎ２−（３−（（１ｓ，３Ｒ）−アダマンタン−１−イル）フェニル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−Ｎ１−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）プロパン−１，２−ジアミン；
（２Ｓ）−Ｎ２−（６−（（１ｓ，３Ｒ）−アダマンタン−１−イル）ピリジン−２−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−Ｎ１−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）プロパン−１，２−ジアミン；
（２Ｓ）−Ｎ２−（５−（（１ｓ，３Ｒ）−アダマンタン−１−イル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−Ｎ１−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）プロパン−１，２−ジアミン；
Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−（４−ヒドロキシフェニル）−１−オキソプロパン−２−イル）−８−メチル−８−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−カルボキサミド；
（１Ｒ，２Ｒ，４Ｒ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−（４−ヒドロキシフェニル）−１−オキソプロパン−２−イル）ビシクロ［２．２．１］ヘプタ−５−エン−２−カルボキサミド；
（１Ｓ，２Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−（４−ヒドロキシフェニル）−１−オキソプロパン−２−イル）−５，６−ジヒドロキシビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボキサミド；
（Ｅ）−Ｎ−（（Ｒ）−１−（（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ）−３−（６−アミノ−９Ｈ−プリン−９−イル）プロパン−２−イル）−３−（（１ｓ，３Ｓ）−アダマンタン−１−イル）アクリルアミド
からなる一覧から選択される。
【００２５】
一実施形態では、化合物は、
ＳＲＸ２０４：４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン；
ＳＲＸ２０８：｛４−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］−１−ピペラジニル｝アセトニトリル；
ＳＲＸ２０９：１−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペラジン；
ＳＲＸ２１０：４−［３−フルオロ−４−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペリジン；
ＳＲＸ２１１：４−［３−フルオロ−４−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペリジン；
ＳＲＸ２１２：４−（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）ピペリジン；
ＳＲＸ２１３：４−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］−４−ピペリジノール；
ＳＲＸ２１４：４−（４−メチルフェニル）ピペリジン；
ＳＲＸ２１５：２，３，４，４ａ，９，９ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−β−カルボリン；
ＳＲＸ２１６：５−クロロ−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，４’−ピペリジン］；
ＳＲＸ２１７：６−（ｔｅｒｔ−ブチル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン；
ＳＲＸ２１８：３−（ｐ−トリル）ピロリジン；
ＳＲＸ２１９：３−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ピロリジン；
ＳＲＸ２２０：４−（ピペリジン−４−イル）安息香酸；
ＳＲＸ２２１：４−（４−クロロフェニル）ピペラジン−２−オン；
ＳＲＸ２２２：１−（［１，１’−ビフェニル］−４−イル）ピペラジン；
ＳＲＸ２２３：４−フェニルシクロヘキサン−１−アミン；
ＳＲＸ２２４：１−（４−クロロフェニル）ピペラジン；
ＳＲＸ２２５：１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン；
３−（３−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）ピロリジン；
４−（４−ピペリジニル）ベンズアミド；
６−（１，１−ジメチルエチル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン；
１，２，３，４−テトラヒドロ−６−（２−メチルプロピル）−イソキノリン；
１−（４−クロロフェニル）−２，２−ジメチルピペラジン；
１−（４−クロロフェニル）−３，３−ジメチルピペラジン；
１−（４−クロロフェニル）−２−ピペラゾン；
４−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］−１−ピペラジンカルボン酸、エチルエステル；
１−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］−４−ピペリジンアミン；
３−（４−メチルフェニル）−ピロリジン；
４−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］−シクロヘキサンアミン；
３，５−ジメチル−１−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］−ピペラジン；
２−（４−クロロフェニル）−２，５−ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン；
４−シクロヘキシルピペリジン；
４−フェノキシピペリジン；
１−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン−２，２，６，６−ｄ４
からなる一覧から選択される。
【００２６】
一実施形態では、本発明は、式：
【化８】
2017528448.tif 000010
の化合物（式中、ｉ）Ｒ１５は、Ｈ、アルキル、環式アルキル、分枝アルキル、および置換アルキルからなる群から選択され、ｉｉ）Ｒ１６は、不在およびＮＨからなる群から選択され、ｉｉｉ）Ｒ１７は、ＮおよびＣＨからなる群から選択され、ｉｖ）Ｒ１８は、Ｈ２およびＯからなる群から選択され、ｖ）Ｒ１９は、ＣおよびＮからなる群から選択され、ｖｉ）Ｒ２０は、不在、ＣＨ２、Ｏ、およびＮＨからなる群から選択され、ｖｉｉ）Ｒ２１は、アリール、置換アリール、置換または非置換の５または６員の芳香族複素環、環式アルキル、５または６員の非芳香族複素環、および分枝アルキルからなる群から選択され、ｖｉｉｉ）Ｒ２２は、ＣＨ２または不在である）を含む医薬組成物を企図している。
【００２７】
一実施形態では、医薬組成物は、第２の薬学的化合物とさらに組み合わせる。一実施形態では、第２の薬学的化合物は、高コレステロール血症に対する治療として使用される。一実施形態では、第２の薬学的化合物は、高コレステロール血症以外の代謝性の状態に対する治療として使用される。一実施形態では、医薬組成物は、ＳＲＸ７５、ＳＲＸ７６、ＳＲＸ２０４、ＳＲＸ２００、ＳＲＸ２０１、ＳＲＸ２０５、ＳＲＸ２０６、ＳＲＸ２０７、ＳＲＸ２０８、ＳＲＸ２０９、ＳＲＸ２１０、ＳＲＸ２１１、ＳＲＸ２１２、ＳＲＸ２１３、ＳＲＸ２１４、ＳＲＸ２１５、ＳＲＸ２１６、ＳＲＸ２１７、ＳＲＸ２１８、ＳＲＸ２１９、ＳＲＸ２２０、ＳＲＸ２２１、ＳＲＸ２２２、ＳＲＸ２２３、ＳＲＸ２２４、およびＳＲＸ２２５を含む群から選択され、第２の薬学的化合物とさらに組み合わせる。一実施形態では、医薬組成物はスタチンをさらに含む。一実施形態では、スタチンは、これらに限定されないが、アトルバスタチン、ロスバスタチンおよび／またはシンバスタチンを含む。一実施形態では、医薬組成物は抗糖尿病の薬物を含む。一実施形態では、医薬組成物は心血管薬物を含む。一実施形態では、医薬組成物はエゼチミブ（Ｚｅｔｉａ（登録商標））を含む。一実施形態では、医薬組成物は、これに限定されないが、ベシル酸アムロジピン（Ｎｏｒｖａｓｃ（登録商標））を含む抗高血圧剤を含む。一実施形態では、抗糖尿病の薬物として、これらに限定されないが、シタグリプチン（Ｊａｎｕｖｉａ（登録商標））および／またはメトホルミンが挙げられる。
【００２８】
一実施形態では、本発明は、（ａ）医薬組成物と、（ｂ）高コレステロール血症の治療のためのその使用に対する指示とを含む市販のパッケージをさらに企図する。一実施形態では、本発明は、（ａ）医薬組成物と、（ｂ）低コレステロール血症の治療のためのその使用に対する指示とを含む市販のパッケージをさらに企図している。一実施形態では、本発明は、（ａ）医薬組成物と、（ｂ）ＰＣＳＫ９タンパク質の生物学的活性の阻害のためのその使用に対する指示とを含む市販のパッケージをさらに企図する。一実施形態では、本発明は、（ａ）医薬組成物と、（ｂ）ＰＣＳＫ９タンパク質の生物学的活性を増加させるためのその使用に対する指示とを含む市販のパッケージをさらに企図する。一実施形態では、本発明は、キットとしての市販のパッケージをさらに企図している。
【００２９】
一実施形態では、本発明は、（ａ）本明細書で企図されたような小分子化合物を含む医薬組成物と、（ｂ）高コレステロール血症の治療のためのその使用に対する指示とを含むキットをさらに企図している。一実施形態では、本発明は、（ａ）本明細書で企図されたような小分子化合物を含む医薬組成物と、（ｂ）低コレステロール血症の治療のためのその使用に対する指示とを含むキットをさらに企図している。一実施形態では、本発明は、（ａ）本明細書で企図されたような小分子化合物を含む医薬組成物と、（ｂ）ＰＣＳＫ９タンパク質の生物学的活性の阻害のためのその使用に対する指示とを含むキットをさらに企図している。一実施形態では、本発明は、（ａ）本明細書で企図されたような小分子化合物を含む医薬組成物と、（ｂ）ＰＣＳＫ９タンパク質の生物学的活性を増加させるためのその使用に対する指示とを含むキットをさらに企図している。一実施形態では、本発明は（ａ）ＳＲＸ７５、ＳＲＸ７６、ＳＲＸ２０４、ＳＲＸ２０８、ＳＲＸ２０９、ＳＲＸ２１０、ＳＲＸ２１１、ＳＲＸ２１２、ＳＲＸ２１３、ＳＲＸ２１４、ＳＲＸ２１５、ＳＲＸ２１６、ＳＲＸ２１７、ＳＲＸ２１８、ＳＲＸ２１９、ＳＲＸ２２０、ＳＲＸ２２１、ＳＲＸ２２２、ＳＲＸ２２３、ＳＲＸ２２４、ＳＲＸ２２５、および１−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン−２，２，６，６−ｄ４を含む群から選択される医薬組成物と、（ｂ）高コレステロール血症の治療のためのその使用に対する指示とを含むキットをさらに企図している。
定義
【００３０】
以下の略語は、明細書全体にわたり使用されている：
Ｂｎ：ベンジル
Ｂｚ：ベンゾイル
Ａｃ：アセチル
Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル
Ｆｍｏｃ：９−フルオレニルメトキシカルボニル
Ｃｂｚ：ベンジルオキシカルボニル
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＮＭＰ：Ｎ−メチルピロリドン
ＰｙＢＯＰ：（ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）トリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート
ＮＭＭ：Ｎ−メチルモルホリン
ＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィー
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＴＭＳ−Ｂｒ：臭化トリメチルシリル
Ｔｆ：トリフルオロメチルスルホニル
ＨＡＴＵ：２−（７−アザ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＤＩＰＥＡ：ジイソプロピルエチルアミン
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＬＡＨ：水素化リチウムアルミニウム
【００３１】
「薬学的に許容される塩」という用語は、本明細書で使用する場合、任意の塩基性の窒素原子においてプロトン化されて、塩を形成することができる、本発明の化合物の遊離塩基を指す。「遊離塩基」という用語は、非塩形態のアミン化合物を指す。記載されている遊離形態の特定の塩化合物は、当技術分野で公知の技術を使用して単離することができる。例えば、遊離形態は、適切な塩基性希釈水溶液、例えば、希釈した水性ＮａＯＨ、炭酸カリウム、アンモニアおよび炭酸水素ナトリウムで塩を処理することによって再生することができる。遊離形態は、これらのそれぞれの塩形態とは、ある特定の物理的特性、例えば、極性溶媒への溶解性においていくらか異なることもあるが、そうでなければ、酸および塩基の塩は、本発明の目的に対してこれらのそれぞれの遊離形態と薬学的に同等である。薬学的に許容される塩は、従来の化学的手法により塩基性の部分を含有する本明細書に記載の化合物から合成することができる。一般的に、塩基性の化合物の塩は、イオン交換クロマトグラフィーにより、または遊離塩基を化学量論的量もしくは過剰量の所望の塩形成の無機酸もしくは有機酸と適切な溶媒もしくは溶媒の様々な組合せの中で反応させることにより調製される。したがって、本発明の薬学的に許容される塩は、本明細書に記載の塩基性の化合物から、無機酸、有機酸またはポリマー酸との反応により調製することができる。例えば、従来の無毒性塩として、塩酸、酢酸、トルエンスルホン酸、硫酸、ベンゼンスルホン酸、フマル酸またはコハク酸などの酸由来のものが挙げられる。上に記載されている薬学的に許容される塩および他の典型的な薬学的に許容される塩の調製は、Ｂｅｒｇら、（１９７７年）、Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｓｃｉ．、「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ」６６巻：１〜１９頁でより完全に記載されている。
【００３２】
「水和物」という用語は、本明細書で使用する場合、安定した量の水も含有する薬学的に許容される塩の形態を指す。
【００３３】
「溶媒和物」という用語は、本明細書で使用する場合、安定した量の無毒性溶媒も含有する薬学的に許容される塩の形態を指す。
【００３４】
「小分子化合物」という用語は、本明細書で使用する場合、細胞外で合成した、１，０００Ｄａ未満の有機化学化合物を指す。
【００３５】
「小分子リガンド」という用語は、本明細書で使用する場合、複合体を形成するために別の天然生体分子に結合する小分子化合物を指す。
【００３６】
「コンホメーション」という用語は、本明細書で使用する場合、任意の化合物および／または分子の三次元の立体化学的配置を指す。例えば、任意の特定のコンホメーションは、タンパク質における立体相互作用、疎水性相互作用、水素結合、電気化学的結合および／または塩架橋の相互作用の熱力学的バランスから生じる。
【００３７】
「ＬＤＬ−Ｒ」および「ＬＤＬＲ」という用語は、本明細書で使用する場合、低密度リポタンパク質受容体に対する略語を指す。この略語は、全体のＬＤＬ−Ｒ受容体タンパク質またはその任意の部分に関連し得る。ＬＤＬ−Ｒは、細胞表面上に存在し、ＬＤＬ−Ｒ／ＬＤＬ複合体が細胞（すなわち、例えば、肝細胞）内に内在化されるように低密度リポタンパク質と結合することができ、細胞内でＬＤＬは放出され、ＬＤＬ−Ｒは細胞表面に再び再循環される。
【００３８】
「結合インターフェイス」という用語は、本明細書で使用する場合、少なくとも２個の異なる分子の官能基（すなわち、例えば、ヒドロキシル、アミド、アミン、カルボキシル、アミジン、グアニジン、炭化水素、スルホニルなど）の間の任意の一群の誘引性の相互作用（すなわち、例えば、水素結合、静電気相互作用、疎水性相互作用など）を指す。引力の群は、安定した分子の平面を形成し、これによって、少なくとも２個の分子間で「結合インターフェイス」を形成する。
【００３９】
「誘導適合」という用語は、本明細書で使用する場合、受け取る分子のコンホメーションの変化を必要とする、小分子化合物の任意の受け入れを指す。このようなコンホメーションは、アミノ酸側鎖の並進／回転による運動および柔軟性のあるループにより促進され得るので、静電界および／または疎水性の場を再編成する。
【００４０】
「複合体」または「組成物」という用語は、本明細書で使用する場合、通常、共有結合ではなくむしろ弱い静電結合により繋がれた２個またはそれ超のイオンまたは分子の任意の化学的会合を指す。例えば、複合体または組成物は、本明細書に記載されているような小分子化合物と、ＰＣＳＫ９アミノ酸配列との間で形成され得るので、小分子化合物：ＰＣＳＫ９アミノ酸配列複合体または組成物を作り出す。任意選択で、このような複合体または組成物は、これらに限定されないが、ＥＧＦＡ領域を含む、これらに限定されないが、ＬＤＬＲアミノ酸配列またはその任意の部分もまた含むことができる。
【００４１】
「水素結合」という用語は、本明細書で使用する場合、１つの極性分子（水分子など）中の水素原子と、通常、同じまたは異なる極性の物質の別の分子の中の小さな電気陰性原子（酸素、窒素、またはフッ素原子など）との間の静電気引力を指す。
【００４２】
「塩架橋」という用語は、本明細書で使用する場合、電荷を帯びた部分が重複するような形でカチオン性およびアニオン性化学構造が整列する、水素結合および／または静電気相互作用などの任意の相互作用、または相互作用の組合せを指す。
【００４３】
「相互作用」という用語は、本明細書で使用する場合、１個の分子および／または官能基が、別の分子および／または官能基に対して有し得る任意の作用を指す。このような作用として、これらに限定されないが、立体（すなわち、例えば、物理的）、静電的（すなわち、例えば、電気的引力または反発）、電磁、親水性、または疎水性作用を挙げることができる。
【００４４】
「重複する」という用語は、本明細書で使用する場合、１個の分子の電子構造が、別の分子の上にあり、別の分子の境界を通り越して広がる、またはこのように位置決めされるような、任意の分子の位置決めを指す。
【００４５】
「高コレステロール血症」という用語は、本明細書で使用する場合、血中コレステロールレベルが、臨床上推奨されているレベルより上に上昇している任意の医学的状態を指す。例えば、コレステロールが低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）を使用して測定される場合、高コレステロール血症は、測定されたＬＤＬレベルが、例えば、約７０ｍｇ／ｄｌより上であると存在し得る。代わりに、コレステロールが遊離血漿コレステロールを使用して測定される場合、高コレステロール血症は、測定された遊離コレステロールレベルが、例えば、約２００〜２２０ｍｇ／ｄｌより上であると存在し得る。
【００４６】
「低コレステロール血症」という用語は、本明細書で使用する場合、血中コレステロールレベルが、臨床上推奨されているレベル未満の任意の医学的状態を指す。例えば、全コレステロールまたはＬＤＬ−Ｃレベルが、性別、人種、および年齢の調整後、一般集団の５パーセンタイル未満と測定された場合である。
【００４７】
「症状」という用語は、本明細書で使用する場合、患者により観察された疾患または物理的障害の任意の主観的または客観的証拠を指す。例えば、主観的証拠は、通常患者の自己報告に基づき、これらに限定されないが、疼痛、頭痛、視覚障害、悪心および／または嘔吐を含み得る。代わりに、客観的証拠は、通常、これらに限定されないが、体温、全血球数、脂質パネル、甲状腺パネル、血圧、心拍数、心電図、組織および／または身体画像化スキャンを含む医療検査の結果である。
【００４８】
「疾患」および／または「障害」という用語は、本明細書で使用する場合、生命機能の性能を妨害または改変する、生きている動物または植物の身体またはその部分の１つの標準状態の任意の機能障害を指す。徴候および症状を区別することにより典型的に明らかにされるように、それは通常：ｉ）環境因子（栄養不良、産業的危険物、または気候など）；ｉｉ）特定の感染性薬剤（蠕虫、細菌、またはウイルスなど）；ｉｉｉ）生物特有の欠陥（遺伝的異常性など）；および／またはｉｖ）これらの因子の組合せへの応答である。
【００４９】
「親和性」という用語は、本明細書で使用する場合、２個またはそれ超の分子が集合して複数部分の複合体を形成し、前記複合体中に集合したまま留まる熱力学的傾向の尺度を指す。例えば、小分子リガンドはＰＣＳＫ９に対して高親和性を有し、複合体を形成することを熱力学的に好む。状態の変化（例えば、受容体内在化プロセスの間のｐＨ）が、分子の親和性を減少させることによって、これが互いに解離する、または分離することが理解されている。例えば、ｐＨの変化は、ＬＤＬＲに対するＬＤＬ親和性を低減させ、その複合体のその後の解離を生じることができる。
【００５０】
「由来の」という用語は、本明細書で使用する場合、化合物の供給源を指す。１つの点において、化合物は、生物または特定の種の由来であることができる。別の点では、化合物は、大きな複合体由来であることができる。別の点では、化合物は、大きな複合体の部分またはすべての化学的修飾に由来することができる。
【００５１】
「タンパク質」という用語は、本明細書で使用する場合、ペプチド結合により繋がれたアミノ酸残基からなり、炭素、水素、窒素、酸素、通常硫黄の元素を含有し、連続したタンパク質骨格を形成する多くの天然の極めて複雑な物質（酵素または抗体など）のいずれかを指す。一般的に、タンパク質は、数百以内の桁数を有するアミノ酸を含む。
【００５２】
「ペプチド」という用語は、本明細書で使用する場合、１つの酸のアミノ基と別の酸のカルボキシル基との組合せによる３種またはそれ超のアミノ酸に由来し、通常タンパク質の部分加水分解により得られる様々なアミドのいずれかを指す。一般的に、ペプチドは数十またはそれ未満以内の桁数を有するアミノ酸を含む。
【００５３】
「精製された」または「単離した」という用語は、本明細書で使用する場合、様々な他の構成成分を除去する処理（すなわち、例えば、分画化）の対象下となる組成物であって、発現されるその生物学的活性を実質的に保持する組成物を指すことができる。
「実質的に精製される」という用語が使用される場合、この記号表示は、小分子化合物が組成物の主成分を形成する、例えば、組成物の約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約９５％またはそれ超を構成する（すなわち、例えば、重量／重量および／または重量／容量）組成物を指す。「均質まで精製される」という用語は、単一の小分子化合物種（すなわち、例えば、ＳＤＳ−ＰＡＧＥまたはＨＰＬＣ分析に基づき）が存在するよう「明らかな均質」まで精製された組成物を含むように使用される。精製された組成物は、すべての微量の不純物が除去されたことを意味することを意図するわけではない。
【００５４】
本明細書で使用する場合、「実質的に精製された」という用語は、これらの天然の環境から除去され、単離されまたは分離され、これらに自然に伴う他の構成成分を少なくとも６０％、好ましくは７５％、およびより好ましくは９０％含まない分子、例えば、小分子化合物などを指す。
【００５５】
「生体適合性」という用語は、本明細書で使用する場合、宿主においてかなりの悪影響をもたらす応答を惹起しない任意の材料を指す。外来性の物体が、生体中に導入された場合、その物体は、宿主に負の影響を与えることになる免疫反応、例えば、炎症性応答などを誘導するという懸念が常に存在する。本発明との関連で、生体適合性は、それが設計される用途に従い評価される。例えば、包帯は皮膚と生体適合性があるとみなされるのに対して、移植される医療デバイスは、身体の内部組織と生体適合性があるとみなされる。好ましくは、生体適合性材料として、これらに限定されないが、生分解性および生体安定性材料が挙げられる。
【００５６】
「アミノ酸配列」および「ポリペプチド配列」という用語は、本明細書で使用する場合、互換的であり、複数のアミノ酸の連続した配列を指す。
【００５７】
「誘導体」という用語は、本明細書で使用する場合、小分子化合物の任意の化学的修飾を指す。このような修飾の例として、これらに限定されないが、アルキル、アリール、ヒドロキシル、スルフヒドリル、スルホキシル、スルホニル、アシル、ホスホリル、アルコキシル、アミノまたはアミノ複素環式基による水素の置き換えが挙げられる。他の起こり得る化学的修飾として、これらに限定されないが、Ｃ末端アミド、およびアシルまたはスルホニルＮ末端修飾が挙げられる。
【００５８】
「結合する」という用語は、本明細書で使用する場合、永久または一時的であってよい、任意の物理的付加または密接な会合を含む。一般的に、水素結合、疎水性の力、ファンデルワールス力、共有結合およびイオン結合などの相互作用は、目的の分子と、測定される／影響を受ける分析物／標的との間の物理的付加を促進する。「結合」相互作用は、結合が、化学反応の発生を引き起こす状況の場合のように短時間であってよい。結合構成成分が酵素であり、分析物／標的が酵素に対する基質である場合、それは典型的である。結合剤と分析物／標的との間の接触から生じる反応もまた、本発明の目的のためには、結合の定義の範囲内である。
化学的用語：
【００５９】
アルキル：各炭素原子が、単結合のみを使用して、ちょうど４個の異なる原子に直接連結するように、炭素原子および水素原子のみからなる鎖。
【００６０】
低級アルキル：１〜６個の炭素原子を含有するアルキル鎖。
【００６１】
分枝アルキル：炭素原子の環を作り出さずに、２個超の他の炭素原子に直接連結している１個または複数の炭素原子を含有するアルキル鎖。
【００６２】
ヒドロキシアルキル：少なくとも１つの炭素原子が、−ＯＨであるヒドロキシル（ｈｙｄｏｘｙｌ）に結合しているアルキル鎖。
【００６３】
シクロアルキル：環を形成するアルキル鎖。例として、−ＣＨ２−シクロプロピルまたは−シクロヘキシルが挙げられる。
【００６４】
複素環：環を形成し、１個または複数の「ヘテロ原子」、すなわち、安定した共有結合を形成することができるＣまたはＨ以外の原子、例えば、Ｎ、Ｏ、またはＳなどを含有する原子の鎖。この状況において、「複素環（ｈｅｔｅｒｏｃｙｌｅ）」は、非芳香族環を意味する。例として、４個の炭素原子および１個の酸素を有するテトラヒドロフラン環、または４個の炭素原子ならびに１個の窒素および１個の酸素を有し、ＮおよびＯが互いに１，４となるように配置されたモルホリンが挙げられる。
【００６５】
芳香族環：一重および二重の「ｐｉ」結合を交互に含有することによって、ｐｉ電子の数（典型的には安定した化合物のためには二重結合１つ当たり２個）が偶数ではあるが、４の倍数ではないような原子の環。
【００６６】
ヘテロアリール：少なくとも１個のヘテロ原子の芳香族環。この状況において、ヘテロアリールは３〜６員環を意味する。
【００６７】
アシル：基：−ＣＯ−Ｒを含有するカルボニル。この文書では、Ｒ＝典型的なペプチド修飾基を生成する、例えば、−ＣＨ３（アセチル）、−ＣＨ（ＣＨ２）２（イソブチリル）など。
【００６８】
ベンゾイル：基：−ＣＯ−Ｐｈ（Ｐｈ＝フェニル）を含有するカルボニル。
【００６９】
スルホニル：基：−ＳＯ２−Ｒを含有するスルホニル。
【００７０】
カルバモイル：基：−ＣＯＮＲ１Ｒ２
【００７１】
アルコキシ：１つまたは複数のエーテル（−Ｏ−）結合を含有するアルキル鎖、例えば、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３など。
【００７２】
アリール：フェニルまたは置換フェニル
【００７３】
ヘテロアリール：５または６員の芳香族複素環
【００７４】
縮合した複素環：２またはそれ超の縮合環を含有し、そのうちの少なくとも１つが複素環である、インドールなどの環系。環は芳香族である必要はない：インドリンは、非芳香族環に縮合した芳香族環である。
【００７５】
負に帯電した極性基：極性基は、生理学的なｐＨにおいて負電荷を保有する。
【図面の簡単な説明】
【００７６】
【図１】図１は、ＨｅｐＧ２細胞における％ＰＣＳＫ９モジュレーションの例示的データを示している。細胞は、９６−ウェルプレート内で、ＰＣＳＫ９タンパク質単独（変異型Ｄ３７４Ｙ：２ｎＭ；ＷＴ：１０ｎＭ）または予備混合したタンパク質の不在下または存在下で、合計２０ｈインキュベートし、示されたμＭ濃度のＳＲＸ化合物と共に４時間予備インキュベートした。１６ｈ後、ＤｉＩ−ＬＤＬ（５μｇ／ｍｌ）をインキュベーション混合物に加えた。４ｈ後、蛍光を測定した（Ｅｘ：５２０ｎｍ／Ｅｍ：５７５ｎｍ；カットオフ：５５０ｎｍ）。ＤｉＩ−ＬＤＬの取込みに対するＰＣＳＫ９活性の％阻害（＞０％）または活性化（＜０％）を相対蛍光から計算した。
【００７７】
【図２】図２は、ＨｕＨ７細胞内の％ＰＣＳＫ９阻害の例示的データを示している。細胞は、１２−ウェルプレート内で、ＰＣＳＫ９タンパク質（１０ｎＭ）の不在下もしくは存在下でまたは示された濃度のＳＲＸ化合物と混合したＰＣＳＫ９タンパク質の存在下で合計６ｈインキュベートした。６時間後、細胞をプレートから放出し、抗−ＬＤＬＲ抗体で１時間処理し、次いですすぎ、７ＡＡＤと対比染色し、次いで蛍光活性化した細胞選別（ＦＡＣＳ）で測定した。阻害を以下の通り計算した：［「試料ＬＤＬＲ蛍光」−「１０ｎＭ  ＰＣＳＫ９蛍光」］／［「ＰＣＳＫ９なしの基底蛍光」−「１０ｎＭ  ＰＣＳＫ９蛍光」］×１００％。
【００７８】
【図３】図３は、ＨｕＨ７細胞における％ＰＣＳＫ９阻害の例示的データを示している。細胞は、１２−ウェルプレート内で、ＤｉＩ−ＬＤＬを有するリポタンパク質欠損血清中、最終濃度５μｇ／ｍｌで、ＰＣＳＫ９タンパク質単独（１０ｎＭ）の不在下もしくは存在下で、または示された濃度のＳＲＸ化合物を有するタンパク質の存在下で、合計６ｈインキュベートした。６ｈ後、細胞をプレートから放出し、７ＡＡＤと対比染色し、次いで蛍光活性化した細胞選別（ＦＡＣＳ）で測定した。Ｄｉｌ−ＬＤＬ取込みに対するＰＣＳＫ９活性の％阻害は、ＰＣＳＫ９単独により低減した蛍光と対比させた、化合物の存在下での相対蛍光の回収から、方程式の形で記載されているように計算した：［「試験した化合物の蛍光」−「１０ｎＭ  ＰＣＳＫ９蛍光」］／［「ＰＣＳＫ９なしの基底蛍光」−「１０ｎＭ  ＰＣＳＫ９蛍光」］×１００％。
【００７９】
【図４】図４は、ＦＡＣＳによる細胞表面ＬＤＬＲ発現で測定した、ＨｕＨ７細胞における％ＰＣＳＫ９阻害の例示的データを示している。細胞は、約２４時間１２−ウェルプレート内で培養し、続いて１０ｎＭの組換え型ＰＣＳＫ９と、示された濃度を有する用量のＳＲＸ化合物により処理した。６時間のインキュベーション期間後、細胞をすすぎ、収集し、抗−ＬＤＬＲ抗体および細胞生存度染色で染色し、次いでフローサイトメトリー（別名、蛍光活性化細胞選別−ＦＡＣＳ）で測定した。ＰＣＳＫ９％阻害をＬＤＬＲ回収の量の％として計算し、１０ｎＭの組換え型ＰＣＳＫ９により引き起こされたＬＤＬＲの降下により正規化した。
【発明を実施するための形態】
【００８０】
本発明は、ＰＣＳＫ９生物学の分野ならびに高コレステロール血症および低コレステロール血症の状態を含む治療のための化合物の使用に関する。特に、本発明は、ＰＣＳＫ９生物学的コンホメーションおよび活性に結合し、変更するリガンドの組成物を提供する。これらのリガンドは小分子化学化合物であり、より好ましくは８００Ｄａ未満の小分子化合物である。ＰＣＳＫ９のコンホメーションを変更することにより、ＰＣＳＫ９と内因性の低密度リポタンパク質受容体との間の相互作用を変化させ、循環しているＬＤＬ−コレステロールのレベルの増減をもたらすことができる。高いＬＤＬ−コレステロールレベルは、心疾患に対する危険性の増加と関連する。低いＬＤＬ−コレステロールレベルは、肝機能障害などの他の状態において問題となり得るので、ＬＤＬレベルを上昇させることができるリガンドにも有用性がある。
Ｉ．天然ＰＣＳＫ９の生理的役割
【００８１】
プロタンパク質コンバターゼであるスブチリシン／ケキシンタイプ９（ＰＣＳＫ９としも公知）は、ヒトの中でＰＣＳＫ９遺伝子によってコードされている酵素である。Ｓｅｉｄａｈら、「Ｔｈｅ  ｓｅｃｒｅｔｏｒｙ  ｐｒｏｐｒｏｔｅｉｎ  ｃｏｎｖｅｒｔａｓｅ  ｎｅｕｒａｌ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ−ｒｅｇｕｌａｔｅｄ  ｃｏｎｖｅｒｔａｓｅ  １  （ＮＡＲＣ−１）：  ｌｉｖｅｒ  ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｎｅｕｒｏｎａｌ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ」、Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  Ｕ．Ｓ．Ａ．、１００巻（３号）：９２８〜９３３頁（２００３年）。同様の遺伝子（オルソログ）が多くの種にわたって見出されている。ＰＳＣＫ９を含む多くの酵素は、その活性を遮断するペプチド鎖の区域を有することから、最初に合成された時点では不活性であり、プロタンパク質コンバターゼは、酵素を活性化させるためにその区域を除去する。
【００８２】
ＰＳＣＫ９遺伝子は、分泌性スブチラーゼファミリーのプロテアーゼＫサブファミリーに属するプロタンパク質コンバターゼをコードする。コードされたタンパク質は、小胞体内で自己触媒的分子内プロセシングを経験する溶解性酵素原として合成される。このタンパク質は、プロタンパク質コンバターゼとして機能する。例えば、ヒトＰＣＳＫ９アミノ酸配列は以下のものである。
００１  ｍｇｔｖｓｓｒｒｓｗ  ｗｐｌｐｌｌｌｌｌｌ  ｌｌｌｇｐａｇａｒａ  ｑｅｄｅｄｇｄｙｅｅ  ｌｖｌａｌｒｓｅｅｄ  ｇｌａｅａｐｅｈｇｔ
０６１  ｔａｔｆｈｒｃａｋｄ  ｐｗｒｌｐｇｔｙｖｖ  ｖｌｋｅｅｔｈｌｓｑ  ｓｅｒｔａｒｒｌｑａ  ｑａａｒｒｇｙｌｔｋ  ｉｌｈｖｆｈｇｌｌｐ
１２１  ｇｆｌｖｋｍｓｇｄｌ  ｌｅｌａｌｋｌｐｈｖ  ｄｙｉｅｅｄｓｓｖｆ  ａｑｓｉｐｗｎｌｅｒ  ｉｔｐｐｒｙｒａｄｅ  ｙｑｐｐｄｇｇｓｌｖ
１８１  ｅｖｙｌｌｄｔｓｉｑ  ｓｄｈｒｅｉｅｇｒｖ  ｍｖｔｄｆｅｎｖｐｅ  ｅｄｇｔｒｆｈｒｑａ  ｓｋｃｄｓｈｇｔｈｌ  ａｇｖｖｓｇｒｄａｇ
２４１  ｖａｋｇａｓｍｒｓｌ  ｒｖｌｎｃｑｇｋｇｔ  ｖｓｇｔｌｉｇｌｅｆ  ｉｒｋｓｑｌｖｑｐｖ  ｇｐｌｖｖｌｌｐｌａ  ｇｇｙｓｒｖｌｎａａ
３０１  ｃｑｒｌａｒａｇｖｖ  ｌｖｔａａｇｎｆｒｄ  ｄａｃｌｙｓｐａｓａ  ｐｅｖｉｔｖｇａｔｎ  ａｑｄｑｐｖｔｌｇｔ  ｌｇｔｎｆｇｒｃｖｄ
３６１  ｌｆａｐｇｅｄｉｉｇ  ａｓｓｄｃｓｔｃｆｖ  ｓｑｓｇｔｓｑａａａ  ｈｖａｇｉａａｍｍｌ  ｓａｅｐｅｌｔｌａｅ  ｌｒｑｒｌｉｈｆｓａ
４２１  ｋｄｖｉｎｅａｗｆｐ  ｅｄｑｒｖｌｔｐｎｌ  ｖａａｌｐｐｓｔｈｇ  ａｇｗｑｌｆｃｒｔｖ  ｗｓａｈｓｇｐｔｒｍ  ａｔａｖａｒｃａｐｄ
４８１  ｅｅｌｌｓｃｓｓｆｓ  ｒｓｇｋｒｒｇｅｒｍ  ｅａｑｇｇｋｌｖｃｒ  ａｈｎａｆｇｇｅｇｖ  ｙａｉａｒｃｃｌｌｐ  ｑａｎｃｓｖｈｔａｐ
５４１  ｐａｅａｓｍｇｔｒｖ  ｈｃｈｑｑｇｈｖｌｔ  ｇｃｓｓｈｗｅｖｅｄ  ｌｇｔｈｋｐｐｖｌｒ  ｐｒｇｑｐｎｑｃｖｇ  ｈｒｅａｓｉｈａｓｃ
６０１  ｃｈａｐｇｌｅｃｋｖ  ｋｅｈｇｉｐａｐｑｅ  ｑｖｔｖａｃｅｅｇｗ  ｔｌｔｇｃｓａｌｐｇ  ｔｓｈｖｌｇａｙａｖ  ｄｎｔｃｖｖｒｓｒｄ
６６１  ｖｓｔｔｇｓｔｓｅｇ  ａｖｔａｖａｉｃｃｒ  ｓｒｈｌａｑａｓｑｅ  ｌｑ（アクセッション番号ＮＰ＿７７７５９６）
【００８３】
ＰＳＣＫ９は、コレステロールホメオスタシスにおいて調節性役割を果たすと考えられている。例えば、ＰＣＳＫ９は、ＬＤＬ−Ｒの内在化および分解をもたらす低密度リポタンパク質受容体（ＬＤＬ−Ｒ）の上皮成長因子様反復Ａ（ＥＧＦ−Ａ）ドメインと結合することができる。明確には、ＬＤＬ−Ｒレベルの減少は、ＬＤＬ−Ｃ代謝の低減をもたらし、これが高コレステロール血症につながる可能性もあると予想される。
【００８４】
約９百万のアメリカ人が心臓関連の問題に対して高いまたは非常に高いリスクを持っているので、ＰＣＳＫ９阻害剤（特にスタチンと併用した場合）から恩恵を受けることができることが見積もられる。ＰＣＳＫ９阻害剤は、ある特定の条件でスタチンを置き換える可能性のある、このような広範囲におよぶ使用をもたらすことができる。ＰＣＳＫ９は、コレステロールホメオスタシスに作用するので、医学的有意性がある。ＰＣＳＫ９生物学的作用を遮断する薬物は、低密度リポタンパク質コレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）の循環レベルを低下させると考えられている（すなわち、例えば、ＬＤＬ−Ｒの利用可能性を増加させ、結果的に、ＬＤＬ−Ｃクリアランスを増加させる）。このような薬物に対して、ヒトにおけるこれらの安全性および効力を評価するために、これらが心疾患における効果を改善させることができるかどうか判定するための第三相臨床試験が開始されている。
【００８５】
ＬＤＬ−Ｒ／ＰＣＳＫ９の複合体形成を阻害する薬物は、従来利用可能であるコレステロール低下薬物（すなわち、例えば、スタチン）よりもコレステロールをさらにずっと低下させることが示唆されてきた。これが、コレステロールの上昇により引き起こされる心発作および他の疾患も低下させるのは、生物学的に妥当である。ヒトでの研究は、現在行われている第三相臨床試験を含めて、ＰＣＳＫ９阻害が、許容される副作用と共に、実際に心血管疾患を低下させかどうかに集中している。Ｌｏｐｅｚ  Ｄ．、「Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ＰＣＳＫ９  ａｓ  ａ  ｎｏｖｅｌ  ｓｔｒａｔｅｇｙ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｈｙｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉａ」、Ｄｒｕｇ  Ｎｅｗｓ  Ｐｅｒｓｐｅｃｔ．、２１巻（６号）：３２３〜ｅ３０頁（２００８年）；Ｓｔｅｉｎｂｅｒｇら、「Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ＰＣＳＫ９：  ａ  ｐｏｗｅｒｆｕｌ  ｗｅａｐｏｎ  ｆｏｒ  ａｃｈｉｅｖｉｎｇ  ｉｄｅａｌ  ＬＤＬ  ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  ｌｅｖｅｌｓ」、Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  Ｕ．Ｓ．Ａ．、１０６巻（２４号）：９５４６〜９５４７頁（２００９年）；Ｍａｙｅｒ、「Ａｎｎｅｘｉｎ  Ａ２  ｉｓ  ａ  Ｃ−ｔｅｒｍｉｎａｌ  ＰＣＳＫ９−ｂｉｎｄｉｎｇ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｔｈａｔ  ｒｅｇｕｌａｔｅｓ  ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ  ｌｏｗ  ｄｅｎｓｉｔｙ  ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｌｅｖｅｌｓ」、Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．、２８３巻（４６号）：３１７９１〜３１８０１頁（２００８年）；およびＡｎｏｎｏｍｙｏｕｓ、「Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  ｓｅｌｅｃｔｓ  Ｉｓｉｓ  ｄｒｕｇ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ＰＣＳＫ９  ａｓ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｃａｎｄｉｄａｔｅ  ｆｏｒ  ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  ｄｉｓｅａｓｅ」、Ｐｒｅｓｓ  Ｒｅｌｅａｓｅ．、ＦｉｅｒｃｅＢｉｏｔｅｃｈ．、２００８年４月８日。
【００８６】
現在、ＰＣＳＫ９抗体薬物は治験を受けている（例えば、Ｓａｎｏｆｉ／Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ、Ａｍｇｅｎ、Ｐｆｉｚｅｒ、Ｎｏｖａｒｔｉｓ、Ｒｏｃｈｅ）ことが報告されている。しかし、抗体療法の１つの欠点は、投与が皮下または静脈内注射により実施されることである。ＬＤＬ−Ｒと相互作用し、したがってＬＤＬ−Ｒ／ＰＣＳＫ９複合体形成を阻害する触媒ドメイン付近のＰＣＳＫ９と結合するいくつかのモノクローナル抗体は現在治験を受けている。これらの抗体として、ＡＭＧ１４５（Ａｍｇｅｎ）、１Ｄ０５−ＩｇＧ２（Ｍｅｒｃｋ＆Ｃｏ．）、およびＳＡＲ２３６５５３／ＲＥＧＮ７２７（Ａｖｅｎｔｉｓ／Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ）が挙げられる。Ｌａｍｂｅｒｔら、「Ｔｈｅ  ＰＣＳＫ９  ｄｅｃａｄｅ」、Ｊ．  Ｌｉｐｉｄ  Ｒｅｓ．、５３巻（１２号）、２５１５〜２５２４頁（２０１２年）。
【００８７】
ＬＤＬ−Ｒ／ＰＣＳＫ９の複合体形成を阻害するために、ＬＤＬ−ＲのＥＧＦ−Ａドメインを模倣するペプチドが開発された。Ｓｈａｎら、「ＰＣＳＫ９  ｂｉｎｄｓ  ｔｏ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ａｎｄ  ｃａｎ  ｂｅ  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｌｙ  ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ  ｂｙ  ａｎ  ＥＧＦ−Ａ  ｐｅｐｔｉｄｅ」、Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．  Ｒｅｓ．  Ｃｏｍｍｕｎ．、３７５巻（１号）：６９〜７３頁（２００８年）。ＥＧＦ−Ａ結合部位のペプチド性ＰＣＳＫ９阻害剤は、直鎖ペプチドライブラリーと、ジスルフィド拘束されたファージディスプレイペプチドライブラリーの両方をスクリーニングすることにより同定された。この手法はＬＤＬ受容体の天然結合ドメインの構造的擬態を含む１３−アミノ酸ペプチド（Ｐｅｐ２−８）を同定した。ペプチド阻害剤結合部位は、ＥＧＦ（Ａ）ドメインのものと広く重複すると判定された。したがって、Ｐｅｐ２−８は、ＬＤＬ受容体結合の競合性阻害剤として作用する。これは、ＬＤＬ受容体−ＥＧＦ（Ａ）ドメインとＰＣＳＫ９との相互作用も破壊する抗−ＰＣＳＫ９モノクローナル抗体の阻害機序と同種のものである。Ｚｈａｎｇら、「Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  Ｓｍａｌｌ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｔｈａｔ  Ｉｎｈｉｂｉｔｓ  ＰＣＳＫ９  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｂｉｎｄｉｎｇ  ｔｏ  ｔｈｅ  Ｌｏｗ  Ｄｅｎｓｉｔｙ  Ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ」、Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ、２８９巻：９４２〜９５５頁（２０１４年）。
【００８８】
ＰＣＳＫ９アンチセンスオリゴヌクレオチド（Ｉｓｉｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）は、マウスにおいて、ＬＤＬ−Ｒの発現を増加させ、全コレステロール循環レベルを低減させることが示されている。Ｇｒａｈａｍら、「Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｒｏｐｒｏｔｅｉｎ  ｃｏｎｖｅｒｔａｓｅ  ｓｕｂｔｉｌｉｓｉｎ／ｋｅｘｉｎ  ｔｙｐｅ  ９  ｒｅｄｕｃｅｓ  ｓｅｒｕｍ  ＬＤＬ  ｉｎ  ｈｙｐｅｒｌｉｐｉｄｅｍｉｃ  ｍｉｃｅ」、Ｊ．  Ｌｉｐｉｄ  Ｒｅｓ．、４８巻（４号）：７６３〜７６７頁（２００７年）。マウスにおいて、ロックド核酸（Ｓａｎｔａｒｉｓ  Ｐｈａｒｍａ）がＰＣＳＫ９  ｍＲＮＡレベルを減少させることも報告されている。Ｇｕｐｔａら、「Ａ  ｌｏｃｋｅｄ  ｎｕｃｌｅｉｃ  ａｃｉｄ  ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  （ＬＮＡ）  ｓｉｌｅｎｃｅｓ  ＰＣＳＫ９  ａｎｄ  ｅｎｈａｎｃｅｓ  ＬＤＬＲ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ａｎｄ  ｉｎ  ｖｉｖｏ」、ＰＬｏＳ  ＯＮＥ、５巻（５号）：ｅ１０６８２頁（２０１０年）；およびＬｉｎｄｈｏｌｍら、「ＰＣＳＫ９  ＬＮＡ  ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ  ｉｎｄｕｃｅ  ｓｕｓｔａｉｎｅｄ  ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ＬＤＬ  ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  ｉｎ  ｎｏｎｈｕｍａｎ  ｐｒｉｍａｔｅｓ」．、Ｍｏｌ．  Ｔｈｅｒ．、２０巻（２号）：３７６〜３８１頁（２０１２年）。ＲＮＡｉ（ＡＬＮ−ＰＣＳ、Ａｌｎｙｌａｍ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）の最初の治験は、ＬＤＬ−Ｒ／ＰＣＳＫ９複合体形成を阻害する有効な手段としてプラスの結果が示されている。Ｆｒａｎｋ−Ｋａｍｅｎｅｔｓｋｙら、「Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ＲＮＡｉ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ＰＣＳＫ９  ａｃｕｔｅｌｙ  ｌｏｗｅｒｓ  ｐｌａｓｍａ  ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  ｉｎ  ｒｏｄｅｎｔｓ  ａｎｄ  ＬＤＬ  ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  ｉｎ  ｎｏｎｈｕｍａｎ  ｐｒｉｍａｔｅｓ」、Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  Ｕ．Ｓ．Ａ．、１０５巻（３３号）：１１９１５〜１１９２０頁（２００８年）。
ＩＩ．ＰＣＳＫ９アロステリック部位のモジュレーション小分子化合物
【００８９】
ＰＣＳＫ９の変異体は、循環しているコレステロールを増減させることができる。Ａｂｉｆａｄｅｌら、「Ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ＰＣＳＫ９  ｃａｕｓｅ  ａｕｔｏｓｏｍａｌ  ｄｏｍｉｎａｎｔ  ｈｙｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉａ」、Ｎａｔ．  Ｇｅｎｅｔ．、３４巻（２号）：１５４〜１５６頁（２００３年）。ＬＤＬ−Ｃは、肝臓細胞の表面でＬＤＬ−Ｒに結合し、受容体−リガンド複合体として肝細胞内で内在化された時点で血液から通常除去される。しかし、ＰＣＳＫ９がＬＤＬ−Ｒに結合した際に、ＬＤＬ−Ｒは、複合体化したＬＤＬ粒子と共に同時に劣化する。しかし、ＰＣＳＫ９がＬＤＬ−Ｒと結合しない場合、ＬＤＬ−Ｒは内在化後再循環され、これによって、さらなるコレステロールの除去のために細胞表面に戻る。
【００９０】
一部の実施形態では、本発明は、ＬＤＬ−Ｒ／ＰＣＳＫ９複合体を形成するＰＣＳＫ９の能力に対するモジュレーション作用を有する小分子化合物に関する。一部の実施形態では、本発明は、ＰＣＳＫ９タンパク質に結合して、タンパク質の生物学的活性をモジュレートする小分子化合物の使用を企図している。一部の実施形態では、小分子は、ＬＤＬ−Ｒ／ＰＣＳＫ９複合体形成を低減し、よって、脂質の異常調節を含む様々な疾患を治療するのに有用である。一部の実施形態では、小分子は、ＬＤＬ−Ｒ／ＰＣＳＫ９複合体形成を増加させ、よってＬＤＬ異常調節に関連する療法の研究および開発において有用である。
【００９１】
発明の機序を理解する必要はないが、「機能獲得」型（ＧＯＦ）ＰＣＳＫ９突然変異体が、これらに限定されないが、高コレステロール血症を含む状態をもたらし得ると考えられている。例えば、ＰＣＳＫ９に結合し、細胞（例えば、肝細胞）の表面上の低密度リポタンパク質受容体に対する、ＰＣＳＫ９の低密度リポタンパク質受容体の親和性を増加させる化合物は、低密度リポタンパク質受容体の内在化および分解を増加させることによって、高コレステロール血症の症状を増加させることが予想される。
【００９２】
発明の機序を理解する必要はないが、「機能喪失」型（ＬＯＦ）ＰＣＳＫ９突然変異体が、低密度リポタンパク質の減少を含む状態をもたらし得るので、低コレステロール血症をもたらすことが予想され、よって、これらに限定されないが、冠動脈心疾患を含む心血管疾患の危険性を減少させると考えられている。例えば、細胞（例えば、肝細胞）の表面上の低密度リポタンパク質受容体に対する、ＰＣＳＫ９の低密度リポタンパク質受容体結合部位の親和性を低減するＰＣＳＫ９に結合する小分子化合物は、低密度リポタンパク質を内在化し、同時に起きる低密度リポタンパク質受容体のリサイクルによる低密度リポタンパク質のクリアランスを促進することによって、高コレステロール血症の症状を減少させることも予想される。
【００９３】
ＰＣＳＫ９結合小分子化合物の本発明の開示された実施形態は、当技術分野で記載されている現存のペプチドおよびリガンドを上回るいくつかの利点を有する。例えば、小分子ＰＣＳＫ９結合化合物は、本明細書で企図されているように、これらの化合物が以前に記述された多くのペプチドよりも小さいという利点を有する。これらの小分子化合物は、抗体投与で観察される免疫学的反応、または核酸投与（すなわち、アンチセンスまたはロックド核酸）で観察されているような全身性分解問題が生じることもなく、経口投与することができることが想定される。それでもなお、これらの小さな化合物は長い半減期を有するので、封入薬物送達システム、例えば、リポソームまたは他の生分解性の保護組成物などは、抗体または核酸のいずれかよりも大きくこれらの半減期を延ばすことになる。本出願に記載されているこれらの小分子化合物は、薬物様特性などのための望ましい特徴を有するように新たに設計される。
ＩＩＩ．臨床用治療剤
【００９４】
一部の実施形態では、本発明は、心血管疾患の症状を有する対象への小分子ＰＣＳＫ９アロステリック阻害剤化合物の投与を企図している。一実施形態では、心血管疾患は、高コレステロール血症を含む。一実施形態では、心血管疾患は高血圧を含む。一実施形態では、高コレステロール血症は、低密度リポタンパク質レベルの上昇を含む。
【００９５】
一部の実施形態では、本発明は、小分子ＰＣＳＫ９アロステリック阻害剤化合物の、代謝性疾患の症状を有する対象への投与を企図している。一実施形態では、代謝性疾患は糖尿病を含む。
【００９６】
発明の機序を理解する必要はないが、ＰＣＳＫ９アロステリック阻害剤小分子化合物（すなわち、例えば、本明細書に記載のもの）の投与は、低密度リポタンパク質受容体に対する低密度リポタンパク質結合部位の親和性が低減し、ＰＣＳＫ９／ＬＤＬ−Ｒ複合体形成が低減するように、ＰＣＳＫ９タンパク質のコンホメーションシフトを誘導すると考えられている。ＰＣＳＫ９／ＬＤＬ−Ｒ複合体形成の低減は、循環しているＬＤＬへの結合のためのＬＤＬ−Ｒ受容体のバイオアベイラビリティーの増加をもたらし、よって、ＬＤＬ−ＲによるＬＤＬの内在化およびクリアランスを増加させる。小分子ＰＣＳＫ９アロステリック阻害剤化合物は、肝細胞ＬＤＬ−Ｒのバイオアベイラビリティーの増加をもたらし得るとさらに考えられている。
【００９７】
さらに、発明の機序を理解する必要はないが、ＰＣＳＫ９アロステリック活性化因子小分子化合物（すなわち、本明細書に記載のものなど）の投与は、低密度リポタンパク質受容体に対する低密度リポタンパク質結合部位の親和性を増加させ、ＰＣＳＫ９／ＬＤＬ−Ｒ複合体形成が増加または安定化するように、ＰＣＳＫ９タンパク質のコンホメーションシフトを誘導すると考えられている。ＰＣＳＫ９／ＬＤＬ−Ｒ複合体形成における増加または安定化は、循環しているＬＤＬへの結合に対するＬＤＬ−Ｒ受容体のバイオアベイラビリティーの低減をもたらし、よって、ＬＤＬ−ＲによるＬＤＬの内在化およびクリアランスを低減させる。ＰＣＳＫ９アロステリック活性化因子化合物は、肝細胞ＬＤＬ−Ｒのバイオアベイラビリティーの低減をもたらし得るとさらに考えられている。
Ａ．高コレステロール血症
【００９８】
高コレステロール血症（ｈｙｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌａｅｍｉａとも綴られる）は、血液中の高レベルのコレステロールの存在である。これは、「高脂血症」（血液中の上昇した脂質レベル）および「高リポタンパク質血症」（血液中の上昇したリポタンパク質レベル）の形態である。Ｄｕｒｒｉｎｇｔｏｎ，  Ｐ「Ｄｙｓｌｉｐｉｄａｅｍｉａ」Ｔｈｅ  Ｌａｎｃｅｔ、３６２巻（９３８５号）：７１７〜７３１頁。高コレステロール血症は、典型的には環境因子と遺伝因子の組合せによる。環境因子として、肥満および食事選択が挙げられる。遺伝的寄与は通常、複数の遺伝子の相加効果によるが、ただし、時には、例えば、家族性高コレステロール血症などの場合のように単一遺伝子の欠陥が原因となり得る。以下を含むいくつかの２次的原因が存在する：真性糖尿病２型、肥満、アルコール、モノクローナル免疫グロブリン血症、透析、ネフローゼ症候群、閉塞性黄疸、甲状腺機能低下症、クッシング症候群、拒食症、投薬（サイアザイド系利尿剤、シクロスポリン、グルココルチコイド、ベータ遮断剤、レチノイン酸）。Ｂｈａｔｎａｇａｒら、（２００８年）「Ｈｙｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌａｅｍｉａ  ａｎｄ  ｉｔｓ  ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ」ＢＭＪ、３３７巻：ａ９９３頁。例えば、常染色体優性のＡＰＯＢ遺伝子、常染色体劣性ＬＤＬＲＡＰ１遺伝子、ＰＣＳＫ９遺伝子の常染色体優性家族性高コレステロール血症（ＨＣＨＯＬＡ３）変異、またはＬＤＬレセプター遺伝子において１つまたは複数の遺伝突然が存在する家族性高コレステロール血症など、遺伝的異常は、ある場合には完全に高コレステロール血症の原因となる。「Ｈｙｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉａ」Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｈｏｍｅ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  Ｕ．Ｓ．  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ、ｇｈｒ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ＝ｈｙｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉａ。高コレステロール血症の原因となる突然変異が１つもないとしても、遺伝的素因は依然として、ほとんど運動しない生活、肥満、またはアテローム生成食と組み合わさって主要な役割を果たす。Ｃｉｔｋｏｗｉｔｚら、（２０１０年）「Ｐｏｌｙｇｅｎｉｃ  Ｈｙｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉａ」ｅＭｅｄｉｃｉｎｅ  Ｍｅｄｓｃａｐｅ、ｅｍｅｄｉｃｉｎｅ．ｍｅｄｓｃａｐｅ．ｃｏｍ／  ａｒｔｉｃｌｅ／１２１４２４−ｏｖｅｒｖｉｅｗ。
【００９９】
コレステロールはステロールである。これは、３つの主要な脂質のクラスのうちの１つであり、すべての動物細胞がコレステロールを利用して細胞膜を構築し、したがって、すべての動物細胞により製造される。植物細胞はコレステロールを製造しない。コレステロールはまた、ステロイドホルモン、胆汁酸およびビタミンＤの前駆体である。コレステロールは水に不溶性であるため、タンパク質粒子（リポタンパク質）内の血漿中で輸送される。リポタンパク質は、これらの密度により分類される：超低密度リポタンパク質（ＶＬＤＬ）、中間密度リポタンパク質（ＩＤＬ）、低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）および高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）。Ｂｉｇｇｅｒｓｔａｆｆら、（２００４年）、「Ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇ  ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｓ  ａｓ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ  ｏｆ  ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  ａｎｄ  ｏｔｈｅｒ  ｌｉｐｉｄｓ」、Ａｄｖ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｅｄｕｃ、２８巻（１〜４号）：１０５〜６頁。すべてのリポタンパク質はコレステロールを保有するが、ＨＤＬ以外（非ＨＤＬコレステロールと呼ばれる）のリポタンパク質、特にＬＤＬ−コレステロールのレベルの上昇は、アテローム性動脈硬化症および冠動脈心疾患の危険性の増加と関連する。Ｃａｒｍｅｎａら、（２００４年）「Ａｔｈｅｒｏｇｅｎｉｃ  ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ  ｐａｒｔｉｃｌｅｓ  ｉｎ  ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ」、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ、１０９巻（２３号付録１）：ＩＩＩ  ２〜７頁。対照的に、高レベルのＨＤＬコレステロールは保護的である。Ｋｏｎｔｕｓｈら、（２００６年）「Ａｎｔｉａｔｈｅｒｏｇｅｎｉｃ  ｓｍａｌｌ，  ｄｅｎｓｅ  ＨＤＬ−−ｇｕａｒｄｉａｎ  ａｎｇｅｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  ａｒｔｅｒｉａｌ  ｗａｌｌ？」、Ｎａｔ  Ｃｌｉｎ  Ｐｒａｃｔ  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ  Ｍｅｄ、３巻（３号）：１４４〜１５３頁。血液中非ＨＤＬコレステロールおよびＬＤＬレベルの上昇は、食事、肥満、遺伝性（遺伝的）疾患（例えば、家族性高コレステロール血症におけるＬＤＬ受容体突然変異など）、または糖尿病および低活動の甲状腺など他の疾患の存在の結果となり得る。全コレステロールは、血液中のすべての脂肪の量である。これらの脂肪は脂質と呼ばれる。全コレステロールを構成する異なるタイプの脂質が存在する。２つの最も重要なタイプは、低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）−「悪玉」コレステロールと高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）「善玉」コレステロールである。高コレステロール、特に「悪玉」コレステロール（ＬＤＬ）は、動脈を詰まらせる可能性がある。ＬＤＬは、心臓への血流を減少させる可能性がある。ＬＤＬは、心疾患、脳卒中、または心発作につながる可能性がある。コレステロールは、１デシリットル当たりのミリグラム（ｍｇ／ｄＬ）で測定する。心疾患または糖尿病などの状態では、ＬＤＬコレステロールは、１００ｍｇ／ｄＬ未満に留まるべきである。心疾患に対する危険性がある場合、ＬＤＬコレステロールは、１３０ｍｇ／ｄＬよりも低くあるべきである。一般的に、ＬＤＬコレステロールは、１６０〜１９０ｍｇ／ｄＬよりも低くあるべきである。代替の、ＨＤＬ「善玉」コレステロールは高くあるべきである。例えば、男性におけるＨＤＬレベルは、４０ｍｇ／ｄＬより上であるべきであり、一方で女性に対するＨＤＬレベルは５０ｍｇ／ｄＬより上であるべきである。
【０１００】
高コレステロール血症の１つの症状は、アテローム性動脈硬化症をもたらし得る血清コレステロールの長期にわたる上昇を含む。Ｂｈａｔｎａｇａｒら、（２００８年）「Ｈｙｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌａｅｍｉａ  ａｎｄ  ｉｔｓ  ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ」、ＢＭＪ、３３７巻：ａ９９３頁。数１０年という期間にわたり慢性的に上昇した血清コレステロールは動脈内でアテローム性プラークの形成の原因となる。これは、関与する動脈の進行性狭窄（狭小化）またはさらに完全な閉塞（遮断）をもたらし得る。代わりに、より小さなプラークは、断裂し、凝血塊の形成および血流の遮断を引き起こし得る。Ｆｉｎｎ  ＡＶ、Ｎａｋａｎｏ  Ｍ、Ｎａｒｕｌａ  Ｊ、Ｋｏｌｏｄｇｉｅ  ＦＤ、Ｖｉｒｍａｎｉ  Ｒ（２０１０年７月）、「Ｃｏｎｃｅｐｔ  ｏｆ  ｖｕｌｎｅｒａｂｌｅ／ｕｎｓｔａｂｌｅ  ｐｌａｑｕｅ」、Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ．  Ｔｈｒｏｍｂ．  Ｖａｓｃ．  Ｂｉｏｌ．、３０巻（７号）：１２８２〜１２９２頁。冠動脈の突然の閉塞により心筋梗塞または心発作が生じる。脳への供給を行う動脈の閉塞は脳卒中を引き起こす可能性がある。狭窄または閉塞の発生がゆっくりとしている場合、組織および器官への血液供給は、器官の機能が損なわれるまでゆっくりと縮小する。この時点で、その組織虚血（血液供給における制限）は、これらに限定されないが、脳の一時的虚血（一般的に一過性脳虚血発作と呼ばれる）を含む特定の症状として現れることもあり、一時的視覚喪失、めまいおよびバランスの機能障害、失語症（発語困難）、通常身体の片側での不全麻痺（衰弱）および錯感覚（無感覚またはピリピリ感）として現れることもある。心臓への不十分な血液供給が、胸痛として現れることもあり、眼の虚血が、１つの眼の一過性の視覚損失として現れることもある。脚への不十分な血液供給が、歩行時のふくらはぎの疼痛として現れることもあり、その一方で、腸内で食後の腹痛として存在することもある。Ｇｒｕｎｄｙら、（１９９８年）「Ｐｒｉｍａｒｙ  ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｏｒｏｎａｒｙ  ｈｅａｒｔ  ｄｉｓｅａｓｅ：  ｇｕｉｄａｎｃｅ  ｆｒｏｍ  Ｆｒａｍｉｎｇｈａｍ：  ａ  ｓｔａｔｅｍｅｎｔ  ｆｏｒ  ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌｓ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  ＡＨＡ  Ｔａｓｋ  Ｆｏｒｃｅ  ｏｎ  Ｒｉｓｋ  Ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ．    Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｈｅａｒｔ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ」、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ、９７巻（１８号）：１８７６〜１８８７頁。
Ｂ．低コレステロール血症
【０１０１】
低コレステロール血症は、血液（−血症）中の異常に低い（ハイポ−）レベルのコレステロールの存在である。高い全コレステロール（高コレステロール血症）の存在は、心血管疾患は相関するが、身体のコレステロール産生の欠陥もまた有害な結果をもたらす可能性がある。コレステロールは、哺乳動物細胞膜の必須成分であり、適切な膜浸透率および流動度を確立するのに必要とされる。平均コレステロールレベルよりも低いレベルが直接有害であるかどうかは明白ではないが、特定の病気に遭遇することが多い。
【０１０２】
低コレステロールの起こり得る原因として、これらに限定されないが、スタチン、甲状腺機能亢進、または過活動の甲状腺、副腎不全、肝疾患、吸収不良（腸からの不十分な栄養素の吸収）、例えば、セリアック病、栄養不良、無βリポタンパク質血症（５０ｍｇ／ｄｌ未満のコレステロール測定値を引き起こす遺伝性疾患）、低βリポタンパク血症（５０ｍｇ／ｄｌ未満のコレステロール測定値を引き起こす遺伝性疾患）、マンガン欠乏症、Ｓｍｉｔｈ−Ｌｅｍｌｉ−Ｏｐｉｔｚ症候群、Ｍａｒｆａｎ症候群、白血病および他の血液疾患が挙げられる。
【０１０３】
人口統計の研究は、低コレステロールは、主にうつ病、がん、出血性脳卒中、大動脈解離および呼吸器疾患による死亡率の増加を伴うことを示唆している。Ｊａｃｏｂｓら、（１９９２年）「Ｒｅｐｏｒｔ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ  ｏｎ  Ｌｏｗ  Ｂｌｏｏｄ  Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ：  Ｍｏｒｔａｌｉｔｙ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｓ」、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ、８６巻（３号）：１０４６〜１０６０頁；およびＳｕａｒｅｚ  Ｅ．Ｃ．、（１９９９年）「Ｒｅｌａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｔｒａｉｔ  ｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ  ａｎｄ  ａｎｘｉｅｔｙ  ｔｏ  ｌｏｗ  ｌｉｐｉｄ  ａｎｄ  ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｈｅａｌｔｈｙ  ｙｏｕｎｇ  ａｄｕｌｔ  ｗｏｍｅｎ」、Ｐｓｙｃｈｏｓｏｍ  Ｍｅｄ、６１巻（３号）：２７３〜２７９頁。低コレステロールレベルの原因は、これが何であるにせよ、死亡も引き起こしている可能性もあり、低コレステロールは病弱であるという単なるマーカーである可能性もある。
Ｃ．糖尿病
【０１０４】
糖尿病は、２千万人超のアメリカ人に影響を与えている。４千万人超のアメリカ人が糖尿病前症（多くの場合２型糖尿病を発症する前）を有する。糖尿病は、通常、血液中に高レベルの糖が存在する一生の（慢性）疾患である。インスリンは、血糖を制御するために膵臓で産生されるホルモンである。糖尿病は、過少インスリン、インスリン耐性、または両方により引き起こされる可能性がある。糖尿病を理解するためには、食物が分解され、エネルギーのために身体で使用される正常なプロセスを最初に理解することが重要である。
【０１０５】
食物が消化されるときいくつかの事柄が起きる。グルコースと呼ばれる糖が血流に入る。グルコースは、身体に対する燃料の供給源である。膵臓と呼ばれる器官はインスリンを作る。インスリンの役割は、血流からグルコースを、これを燃料として使用することができる筋肉、脂肪、および肝臓細胞へと移動させることである。
【０１０６】
糖尿病に罹っている人々は高い血糖を有するが、これは彼らの身体が、糖を、エネルギー用に貯蔵する脂肪、肝臓、および筋肉細胞へと移動することができないからである。なぜなら、彼らの膵臓が十分なインスリンを作ることができないか、またはこれらの細胞がインスリンに正常に応答していないからである。
【０１０７】
２つの主要なタイプの糖尿病がある。各タイプに対して原因およびリスクファクターは異なる。１型糖尿病はいずれの年齢でも生じ得るが、子供、１０代、または若年成人において最も多く診断される。この疾患において、身体はわずかなインスリンしか作らないか、またはインスリンをまったく作らない。毎日のインスリン注射が必要とされる。正確な原因は不明である。２型糖尿病は、大部分の糖尿病の症例を構成している。これは、最も多くの場合成人期に生じる。高い肥満率のため、１０代および若年成人が現在２型糖尿病と診断されている。２型糖尿病に罹っている多くの人々は、自分がこれに罹っていることを知らない。
【０１０８】
妊娠性糖尿病は、糖尿病を有さない女性が、妊娠中の任意の時期に発症する高血糖である。
【０１０９】
糖尿病の症状は、高血糖レベルから生じ得、これらに限定されないが、視界不良、過剰なのどの渇き、疲労、空腹感、排尿、多くの場合および体量の減少が挙げられる。
ＩＶ．医薬組成物
【０１１０】
本発明は、医薬組成物（例えば、上に記載されている化合物を含む）をさらに提供する。本発明の医薬組成物は、局在的または全身性治療が所望されるかどうか、および治療すべき領域に応じていくつかの方式で投与することができる。投与は、局所的投与（眼用および経膣および直腸の送達を含めた、粘膜に対する投与を含む）、肺投与（例えば、ネブライザーを含む、散剤またはエアゾール剤の吸入または吹送法；気管内、鼻腔内、表皮的および経皮的）、経口投与または非経口投与であってよい。非経口投与として、静脈内、動脈内、皮下、腹腔内または筋肉内注射もしくは注入、または脳内（例えば、髄腔内または側脳室内）の投与が挙げられる。
【０１１１】
局所投与のための医薬組成物および製剤として、経皮的パッチ、軟膏剤、ローション剤、クリーム剤、ゲル剤、滴下剤、坐剤、スプレー剤、液剤および散剤を挙げることができる。従来の薬学的担体、水性、粉末または油性の基剤、増粘剤なども必要であり、または望ましいこともある。
【０１１２】
経口、舌下または口腔内頬側投与のための組成物および製剤として、散剤または顆粒剤、懸濁液または水もしくは非水性の媒体の溶液、カプセル剤、ゲル剤、滴下剤、ストリップ、ガム、サシェ剤または錠剤が挙げられる。増粘剤、香味剤、希釈剤、乳化剤、分散助剤または結合剤が望ましいこともある。
【０１１３】
非経口、髄腔内または側脳室内の投与のための組成物および製剤として、緩衝剤、希釈剤および他の適切な添加剤、例えば、これらに限定されないが、経皮吸収促進剤、担体化合物および他の薬学的に許容される担体または賦形剤などもまた含有し得る滅菌水溶液を挙げることができる。
【０１１４】
本発明の医薬組成物として、これらに限定されないが、溶液、乳剤、およびリポソーム含有製剤が挙げられる。これらの組成物は、これらに限定されないが、予め形成された液剤、自己乳化する固体および自己乳化する半固体を含む様々な構成成分から創出することができる。
【０１１５】
一部の実施形態では、医薬組成物は、他の薬物および／またはホルモンをさらに含み得る。例えば、医薬組成物は、スタチン薬物をさらに含み得る。スタチン（またはＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤）は、肝臓内でのコレステロールの産生にある役割を果たす酵素ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素を阻害することによってコレステロールレベルを低下させるために使用される薬物のクラスである。コレステロールレベルの増加は、心血管疾患を伴うので、スタチンはこれらの疾患の予防に使用されてきた。Ｌｅｗｉｎｇｔｏｎら、「Ｂｌｏｏｄ  ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  ａｎｄ  ｖａｓｃｕｌａｒ  ｍｏｒｔａｌｉｔｙ  ｂｙ  ａｇｅ，  ｓｅｘ，  ａｎｄ  ｂｌｏｏｄ  ｐｒｅｓｓｕｒｅ：  ａ  ｍｅｔａ−ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ  ｄａｔａ  ｆｒｏｍ  ６１  ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ  ｓｔｕｄｉｅｓ  ｗｉｔｈ  ５５，０００  ｖａｓｃｕｌａｒ  ｄｅａｔｈｓ」、Ｌａｎｃｅｔ、３７０巻（９６０２号）：１８２９〜１８３９頁（２００７年）。研究により、スタチンは、２次的な予防戦略として心血管疾患（ＣＶＤ）を治療するのに最も有効であることが判明したが、コレステロールレベルの上昇はあるが、以前ＣＶＤに罹ったことがない場合については、恩恵は不確かである。Ｔａｙｌｏｒら「Ｓｔａｔｉｎｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｐｒｉｍａｒｙ  ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  ｄｉｓｅａｓｅ」、Ｉｎ：  Ｔａｙｌｏｒ，  Ｆｉｏｎａ．  Ｃｏｃｈｒａｎｅ  Ｄａｔａｂａｓｅ  Ｓｙｓｔ  Ｒｅｖ（１巻）（２０１１年）。スタチンは、稀ではあるが、重症の有害作用、特に筋肉損傷を有する。
【０１１６】
スタチンの具体例として、これらに限定されないが、アトルバスタチン（Ｌｉｐｉｔｏｒ（登録商標）およびＴｏｒｖａｓｔ（登録商標））、フルバスタチン（Ｌｅｓｃｏｌ（登録商標））、ロバスタチン（Ｍｅｖａｃｏｒ（登録商標）、Ａｌｔｏｃｏｒ（登録商標）、Ａｌｔｏｐｒｅｖ（登録商標））、ピタバスタチン（Ｌｉｖａｌｏ（登録商標）、Ｐｉｔａｖａ（登録商標））、プラバスタチン（Ｐｒａｖａｃｈｏｌ（登録商標）、Ｓｅｌｅｋｔｉｎｅ（登録商標）、Ｌｉｐｏｓｔａｔ（登録商標））、ロスバスタチン（Ｃｒｅｓｔｏｒ（登録商標））およびシンバスタチン（Ｚｏｃｏｒ（登録商標）、Ｌｉｐｅｘ（登録商標））が挙げられる。スタチンと別の薬剤のいくつかの組合せ調製物、例えば、エゼチミブ／シンバスタチンなどもまた利用可能である。
【０１１７】
心血管薬物の具体例として、これらに限定されないが、プロプラノロール、ジギタリス、ベシル酸アムロジピン、およびニフェジピンが挙げられる。
【０１１８】
他の医薬組成物の具体例として、これらに限定されないが、エゼチミブ（ｅｘｅｔｉｍｉｂｅ）（Ｚｅｔｉａ（登録商標））、ベシル酸アムロジピン（Ｎｏｒｖａｓｃ（登録商標））、ナイアシン、シタグリプチン（Ｊａｎｕｖｉａ（登録商標））、メトホルミンまたはオーリスタット（Ａｌｌｉ（登録商標）／Ｘｅｎｉｃａｌ（登録商標））をさらに挙げることができる。
【０１１９】
単位剤形で好都合に提示され得る本発明の医薬製剤は、医薬業界において周知の従来技術に従い調製することができる。このような技術は、活性成分を薬学的担体（複数可）または賦形剤（複数可）と合わせるステップを含む。一般的に、製剤は、活性成分を、液体担体または微粉砕された固体担体または両方と、均一におよび密に合わせ、次いで、必要に応じて、生成物を成形することによって調製する。
【０１２０】
本発明の組成物は、多くの可能な剤形、例えば、これらに限定されないが、錠剤、カプセル剤、液体シロップ剤、軟質ゲル剤、坐剤、および浣腸剤などのいずれかに製剤化することができる。本発明の組成物はまた、水性、非水性または混合媒体中の懸濁液として製剤化することもできる。水性懸濁剤は、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトールおよび／またはデキストランを含む懸濁液の粘度を増加させる物質をさらに含有し得る。懸濁液はまた安定剤を含有し得る。
【０１２１】
本発明の一実施形態では、医薬組成物は、泡状物質として製剤化および使用することができることができる。薬学的泡状物質として、これらに限定されないが、乳剤、マイクロエマルジョン、クリーム剤、ゼリーおよびリポソームなどの製剤が挙げられる。基本的に性質が類似しているが、これらの製剤は構成成分および最終生成物の粘稠度が異なる。
【０１２２】
本発明の組成物は、医薬組成物に慣例的に見出される他の補助的構成成分をさらに含有し得る。したがって、例えば、組成物は、追加の、適合性のある、薬学的に活性のある材料、例えば、かゆみ止め、収斂剤、局所麻酔剤もしくは抗炎症剤を含有してもよいし、または本発明の組成物の様々な剤形を物理的に製剤化するのに有用な追加の材料、例えば、染料、香味剤、防腐剤、抗酸化剤、乳白剤、増粘剤および安定剤などを含有してもよい。しかし、このような材料は、これらを加えた場合、本発明の組成物の構成成分の生物学的活性を過度に妨げるべきではない。製剤は、無菌化でき、所望する場合、製剤の活性医薬成分（複数可）と有害に相互作用しない補助剤、例えば、滑沢剤、防腐剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、浸透圧に影響を与えるための塩、緩衝剤、着色剤、香味剤および／または芳香物質などと混合することができる。
【０１２３】
投薬は、治療すべき病態の重症度および応答性に依存し、治療の過程は数日から数カ月持続するか、または治癒がもたらされるまで、もしくは病態の縮小が達成されるまで持続する。最適な投薬計画は、患者体内の薬物蓄積の測定から計算することができる。投与する医師は、最適用量、投薬方法および繰り返し率を簡単に判定することができる。最適用量は、個々のオリゴヌクレオチドの相対効力に応じて異なってもよく、一般的には、ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏの動物モデルにおいて有効であることが判明したＥＣ５０に基づき、または本明細書に記載の小分子化合物に基づき見積もることができる。一般的に、用量は、体重１ｋｇ当たり０．０１μｇ〜１００ｇであり、毎日、毎週、毎月または毎年１回またはそれ超投与することができる。治療する医師は、体液または組織中の薬物の測定された滞留時間および濃度に基づき投薬に対する繰り返し率を見積もることができる。治療が成功した後は、対象に維持療法を経験させることによって、病態の再発を予防することが望ましいこともあり、小分子化合物には、毎日１回またはそれ超から２０年に１回、体重１ｋｇ当たり０．０１μｇ〜１００ｇの範囲の維持量が投与される。
【０１２４】
一実施形態では、本発明は、（ａ）医薬組成物と、（ｂ）高コレステロール血症の治療のためのその使用に対する指示とを含む市販のパッケージをさらに企図する。一実施形態では、本発明は、（ａ）医薬組成物と、（ｂ）低コレステロール血症の治療のためのその使用に対する指示とを含む市販のパッケージをさらに企図している。一実施形態では、本発明は、（ａ）医薬組成物と、（ｂ）ＰＣＳＫ９タンパク質の生物学的活性の阻害のためのその使用に対する指示とを含む市販のパッケージをさらに企図する。一実施形態では、本発明は、（ａ）医薬組成物と、（ｂ）ＰＣＳＫ９タンパク質の生物学的活性を増加させるためのその使用に対する指示とを含む市販のパッケージをさらに企図する。
Ｖ．化学の説明
【０１２５】
一般構造１と呼ばれるスキーム１〜４は、以下に示されているようなアミドスキャフォールドを含む：
【化９】
2017528448.tif 000011
ＳＲＸ７５（実施例５）は、実施例のセクションに記載されている固相樹脂技術を使用して合成した。
【０１２６】
（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−（（（ベンジルオキシ）（ヒドロキシ）ホスホリル）オキシ）−１−オキソプロパン−２−イル）カルバメートを固相樹脂に付加した。Ｆｍｏｃ保護基を除去し、カップリング試薬を使用して、Ｎ末端を（Ｓ）−２−アセトアミド−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）プロパン酸と反応させた。得られた中間体を樹脂から除去し、４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン）とＣ末端でカップリングした。保護基を除去した。様々な樹脂、保護基、カップリング試薬を使用して所望の転換を達成することができる。
【０１２７】
スキーム１に概説されている公知のＣｂｚ保護されたホスホネートスキャフォールド（Ｃａｒｏｆｆら、ＵＳ８，５１８，９１２、２０１３年）からＳＲＸ２０６（実施例６）を調製した。カップリング試薬を使用して、Ｃｂｚ保護されたホスホネート酸スキャフォールドを４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジンにカップリングした。水素化によりＣｂｚ基を除去し、規定通りの化学反応を使用して、アシル化を達成した。ＴＭＳ−Ｂｒを使用して、所望のホスホン酸を遊離して、エチル部分を除去した。
【化１０】
2017528448.tif 000012
【０１２８】
代わりに、アミン部分（Ｒ２）を、様々な芳香族および非芳香族置換基で置き換えることができる。スキーム２は、公知の化学を使用してＮ末端アミンから作り出したアジドの環付加を使用して、Ｒ２位置にトリアゾールを作り出すための方法を示している（Ｂｕｒｇｅｓｓ、ＵＳ２００９／０２６４３１５Ａ１、２００９年を参照されたい）。
【０１２９】
スキーム２：
【化１１】
2017528448.tif 000013
【０１３０】
スキーム３は、Ｒ２位置（この図の中ではオキサジアゾール）において他の単純な複素環を作り出すために、アルファカルボキシレートをどのように使用することができるかを例示している。アルファカルボキシ基は、アミドの隣のメチレンを脱プロトン化し、ＣＯ２でクエンチすることによって導入することができる。
【化１２】
2017528448.tif 000014
【０１３１】
最後に、スキーム４は、アルファ脱離基を、アリールオキシ−などの求核試薬でどのように置き換えることができるかを図示している。アルファブロモは、様々な方法で得ることができる。例えば、アミドの隣のメチレンを脱プロトン化し、Ｂｒ２でクエンチすることができる。
【化１３】
2017528448.tif 000015
【０１３２】
スキーム５〜６、以下に示されている一般構造２、すなわち、カルボキサミドへの５−アミノテトラゾールヒドラゾンアルファからなるスキャフォールドを参照している。
【化１４】
2017528448.tif 000016
【０１３３】
ＳＲＸ２０１（実施例７）、テトラゾール置換ヒドラゾンをスキーム５に示されているように合成した。テトラゾールヒドラジンとピルビン酸との反応は、ヒドラゾンを生成し、このヒドラゾンを、アミドカップリング試薬を使用して反応させることによって、所望のアミドを得る。
【化１５】
2017528448.tif 000017
【０１３４】
Ｒ１０位置において錯体置換を導入するための方法がスキーム６に示されている。公知のヒドラゾン酸は、アミドに変換することができ、位置アルファにおいて求電子的にカルボニルへとハロゲン化することができる。得られたハロゲンは、遷移金属（例えばパラジウム０）触媒作用の影響下で、カルボニル化、または様々な金属化アリールおよびアルキルシントンとのカップリングに適しているはずである。
【化１６】
2017528448.tif 000018
【０１３５】
スキーム７〜９は、キラルアミノ、５−アミノテトラゾールに基づくスキャフォールドについて記載している。スキームは、どのように、テトラゾール部分を用いて（Ｓ）−２−アミノ−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン酸誘導体のカルボキシ末端を修飾し、アミド化学反応を使用して、標的とされる疎水性ポケットを満たすようにキラルコアから適当な距離でかさ高い二環に繋がれたのかを示している。
【０１３６】
次いで、ＬＡＨを使用して、Ｍｅｉｎｗａｌｄアミドを介して、化合物をキラルアルデヒドへと変換した。他の条件も潜在的には使用することができる。還元的アミノ化を使用して、アルデヒドをベンジル保護した５−アミノテトラゾールと化合させた。得られたシントンを脱ＢＯＣ化することで、キラルアミンを生成し、これによってこの特定のスキャフォールドのコアを形成した。
【化１７】
2017528448.tif 000019
【０１３７】
スキーム８では、キラルサブユニットは、（Ｓ）−３−（４−（ベンジルオキシ）フェニル）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）プロパン酸を用いて修飾する。得られた小片を脱ＢＯＣ化し、１−アダマントイルクロリドでキャッピングする。２つのベンジル保護基を除去する。
【化１８】
2017528448.tif 000020
【０１３８】
代わりに、キラルサブユニット（スキーム９）を脱ベンジル化し、アダマンチルアクリレートと反応させて、所望のスキャフォールドのオレフィン変異を作り出すこともできる。
【化１９】
2017528448.tif 000021
【０１３９】
このスキャフォールドの別の変化形は、５または６員の複素環を使用してキラルアミンから二環式部分を分離することである。オキサジアゾールスペーサーを組み込んだ潜在的類似体の調製がスキーム１０に示されている：
【化２０】
2017528448.tif 000022
【０１４０】
アダマンタンカルボン酸は、様々な文献の方法を使用してオキサジアゾールに変換し、ハロゲン化することができる。ハロゲンは、主要のキラルアミンを熱的に使用して置き換えることができる。このような置き換えは文献に記載されている（Ｅｗｉｎｇ，  Ｗ．Ｒ．ら、ＵＳ２０１３  ０１８４２８４）
【実施例】
【０１４１】
本発明の記載は、以下の実施例によりさらに図示されるが、限定されると決して解釈されるべきではない。すべての引用された参考文献（本出願全体にわたり引用された文献参照、発行された特許、公開特許出願）の内容は、ここに明示的に参照により組み込まれている。
（実施例１）
細胞培養物およびトランスフェクション
【０１４２】
内因性のＰＣＳＫ９が欠けているＨｅｐＧ２／ｓｈＰＣＳＫ９またはＨｕＨ７／ｓｈＰＣＳＫ９細胞（１）を、１２ウェルマイクロプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ  Ｂｉｏ−Ｏｎｅ）内の１×１０５細胞／ウェルに播種した。次いで、これらの細胞を、５０μＭの（または、最も活性のある化合物に対して必要とされる場合、これ未満）各小分子化合物と共に４ｈ予備インキュベートした、またはインキュベートしていない０．７μｇ／ｍｌのＶ５タグを付けたＰＣＳＫ９またはその機能獲得型ＰＣＳＫ９−Ｄ３７４Ｙのいずれかと共に４ｈまたは一晩インキュベートした。次いで、細胞を、１×完全なプロテアーゼ阻害剤混合物（Ｒｏｃｈｅ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅ）を補充した１％Ｎｏｎｉｄｅｔ  Ｐ−４０、０．５％デオキシコール酸ナトリウム、０．１％ＳＤＳを含有する１×ＲＩＰＡ緩衝剤（１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、５０ｍＭトリス−ＨＣｌ、ｐＨ８．０）に溶解し、ウエスタンブロット法で分析した。
（実施例２）
ＦＡＣＳ分析
【０１４３】
ＨｅｐＧ２、ＨｕＨ７、ＦＬ８３Ｂなどの細胞、または短鎖ヘアピンＰＣＳＫ９ノックダウン配列をトランスフェクトした細胞株、例えば、ＨｅｐＧ２／ｓｈＰＣＳＫ９、ＨｕＨ７／ｓｈＰＣＳＫ９、ＦＬ８３Ｂ／ｓｈＰＣＳＫ９などを、５０μＭ（または、最も活性のある化合物に対して必要とされる場合、これ未満）で使用される、例示された小分子化合物のそれぞれと予備インキュベートしたＰＣＳＫ９、加えて、化合物なしの対照で予備インキュベートする試料と共に上に記載されている通り、３７℃で４ｈインキュベートした。Ｂｅｎｊａｎｎｅｔら、「Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｐｒｏｓｅｇｍｅｎｔ  ａｎｄ  ｐＨ  ｏｎ  ｔｈｅ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ＰＣＳＫ９：  ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｆｏｒ  ａｄｄｉｔｉｏｎａｌ  ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  ｅｖｅｎｔｓ」、Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．  ２８５巻（５２号）：４０９６５〜４０９７８頁（２０１０年）。
【０１４４】
細胞を、溶液Ａ（０．５％ウシ血清アルブミン（Ｓｉｇｍａ）および１ｇ／リットルグルコースを含有するカルシウム／マグネシウム非含有ダルベッコＰＢＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ））で３回洗浄する。細胞を室温で１０ｍｉｎ、１×ヴェルセン溶液（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）でインキュベートし、次いでこれに続いて５ｍｌの溶液Ａを添加する。細胞を、ヒトＬＤＬＲ  ｍＡｂ−Ｃ７（１：１００；Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）を含有する溶液Ａ中で４０ｍｉｎインキュベートする。洗浄に続いて、細胞を二次抗体（Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６４７  ロバ抗−マウス抗体；１：２５０；Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ）を含有する溶液Ａ中で２０ｍｉｎインキュベートする。
【０１４５】
次いで、細胞を０．２％のヨウ化プロピジウムを含有するＰＢＳ中に懸濁させ、ＦＡＣＳ  ＢＤ  ＬＳＲ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用し、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６４７を有する、ヨウ化プロピジウム（死滅した細胞）および生細胞中ＬＤＬＲの両方についてＦＡＣＳで細胞を分析した。ＰＣＳＫ９の阻害剤である小分子化合物とインキュベートした細胞は、化合物なしの試料に対して、ＬＤＬＲ量の増加を示すことが予想され、ＰＣＳＫ９の活性化因子である小分子化合物とインキュベートした細胞は、化合物なしの試料に対して、ＬＤＬＲ量の低減を示すことが予想される。
（実施例３）
細胞のｄｉＩ−ＬＤＬ取込みアッセイ
【０１４６】
ＨｅｐＧ２、ＨｕＨ７、ＦＬ８３Ｂなどの細胞または短鎖ヘアピンＰＣＳＫ９ノックダウン配列をトランスフェクトした細胞株、例えば、ＨｅｐＧ２／ｓｈＰＣＳＫ９、ＨｕＨ７／ｓｈＰＣＳＫ９、ＦＬ８３Ｂ／ｓｈＰＣＳＫ９などを９６−ウェルプレート内の２×１０４細胞／ウェルに播種し、ＲＰＭＩ＋１０％ＦＢＳ中３７℃で培養した。約２４時間後、細胞培地を吸引し、さらなる実験のために、ＲＰＭＩ＋３〜５ｍｇ／ｍＬ  ＬＰＤＳ（リポタンパク質欠損血清、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）培地と置き換えた。Ｂｅｎｊａｎｎｅｔら、「Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｐｒｏｓｅｇｍｅｎｔ  ａｎｄ  ｐＨ  ｏｎ  ｔｈｅ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ＰＣＳＫ９：  ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｆｏｒ  ａｄｄｉｔｉｏｎａｌ  ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  ｅｖｅｎｔｓ」、Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．、２８５巻（５２号）：４０９６５〜４０９７８頁（２０１０年）。
【０１４７】
細胞を以下と共に培養することによって小分子化合物活性を評価した：ｉ）ＳＲＸ化合物なし／ＰＣＳＫ９タンパク質複合体（対照、Ｃｎｔ）；ｉｉ）ＰＣＳＫ９タンパク質；およびｉｉｉ）ＳＲＸ化合物／ＰＣＳＫ９複合体。以下を含む、これらの実験条件の様々な順列もまた使用した：ｉ）野生型タイプＰＣＳＫ９（ＷＴ）の添加；ｉｉ）変異型ＰＣＳＫ９（例えば、Ｄ３７４Ｙ変異型ＰＣＳＫ９、ＤＹ）の添加；ｉｉｉ）様々なＳＲＸ化合物および／または同じ濃度のＰＣＳＫ９および／または組合せの添加；ｉｖ）様々なＳＲＸ化合物および／または異なる濃度のＰＣＳＫ９および／または組合せの添加；ｖ）トランスフェクトした短鎖ヘアピン配列を有する、または有さない上述されている異なる細胞の使用；ｖｉ）ＰＣＳＫ９およびＳＲＸ化合物の予備インキュベーション（例えば、１、時間、２時間、３時間、４時間など）；ｖｉｉ）これらに限定されないが、体温（例えば、３７℃）、上述の生理学的温度（例えば、３９℃）を含む様々な温度；およびｖｉｉｉ）掻き混ぜなし／あり（例えば、振盪機または穏やかな周期的ボルテックス）。
【０１４８】
前の段落に記載されている条件の組合せの１つを使用して、細胞を１６時間培養した。１６時間後、培地濃度をｄｉＩ−ＬＤＬ５μｇ／ｍＬにするのに必要とされる量のｄｉＩ−ＬＤＬ（１，１’−ジオクタデシル−３，３，３’，３’−テトラメチルインドカルボシアニン過塩素酸塩とカップリングした低密度リポタンパク質）を培養物ウェルに加え、細胞を、これらの新規条件下でさらに４時間継続して培養した。４時間のインキュベーション期間の終わりに（全部で２０時間の細胞培養）、脱イオン化したオートクレーブ水またはＰＢＳなどの溶媒中に、１０μＭ  Ｈｏｅｃｈｓｔ  ３３３４２中４％ホルムアルデヒドを加えて細胞取込みを停止し、試料を２０℃で２０分間インキュベートした。細胞試料をＰＢＳで２回すすぎ、次いで３６０ｎｍで励起させて蛍光を測定し、４６０ｎｍで発光を検出してＤＮＡ含有量を測定した。次いで、１０分間振盪させながら、０．１Ｎ  ＮａＯＨ溶液中で、０．１％ＳＤＳと共に細胞試料をインキュベートした。５３０ｎｍでの励起および５８０ｎｍでの得られた発光を使用して、試料中のｄｉＩ−ＬＤＬの蛍光を定量化した。
【０１４９】
ｄｉＩ−ＬＤＬＲの蛍光測定を、Ｈｏｅｃｈｓｔ蛍光から判定した見積もられる細胞数に対して正規化した。異なる実験条件についてデータを分析し、Ｃｎｔ試料のパーセンテージ相対蛍光単位（ＲＦＵ）として報告した。パーセント阻害は、化合物に曝露した試料のＲＦＵと、ＰＣＳＫ９−化合物なしのＲＦＵとの差異を、Ｃｎｔ試料のＲＦＵからＰＣＳＫ９−化合物なしのＲＦＵを引いたＲＦＵ差異で割ったものとして計算した。これは、また［（ＳＲＸ：ＲＦＵ）−（ＰＣＳＫ９−化合物なし：ＲＦＵ）］／［（Ｃｎｔ：ＲＦＵ）−（ＰＣＳＫ９−化合物なし：ＲＦＵ）］×１００％、としても表現される。
（実施例４）
直接的結合測定
【０１５０】
これらの全体が参照により本明細書に組み込まれている、「Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｍｅｔｒｉｃ  ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  ｓｙｓｔｅｍ  ａｎｄ  ｍｅｔｈｏｄ」（ＥＰ１２１０５８１）、「Ｆｒｅｅ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ  ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ  ｂｙ  ｂａｃｋｓｃａｔｔｅｒｉｎｇ  ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｍｅｔｒｙ」（ＷＯ２００９０３９４６６）、「Ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ−ｓｔａｂｌｅ  ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｍｅｔｅｒ」（ＷＯ２００９０７６３７２）、および「Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｅｖｅｎｔ  ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｂａｃｋ−ｓｃａｔｔｅｒｉｎｇ  ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｍｅｔｒｙ」（ＷＯ２０１３１５８３００）に以前に記述された後方散乱干渉法を使用して直接的結合を測定した。例えば、６点をとる結合曲線を使用して、ＳＲＸ２００は、測定値Ｋｄ：２４ｎＭ±８ｎＭ、ｒ２：０．８６で組換え型ヒトＰＣＳＫ９に結合すると測定された。
（実施例５）
ＳＲＸ７５の合成
【化２１】
2017528448.tif 000023
ＳＲＸ７５：（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−アセトアミド−３−ヒドロキシプロパンアミド）−３−オキソ−３−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）プロピルリン酸二水素塩
【０１５１】
（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−（（（ベンジルオキシ）（ヒドロキシ）ホスホリル）オキシ）−１−オキソプロパン−２−イル）カルバメート［１５８１７１−１４−３］を２−クロロトリチル樹脂に付加した。Ｆｍｏｃ保護基を除去した。ウロニウムベースのアミドカップリング試薬を使用して、Ｎ末端を（Ｓ）−２−アセトアミド−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）プロパン酸［７７２８５−０９−７］と反応させ、得られた（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−アセトアミド−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）プロパンアミド）−３−ヒドロキシ−３−オキソプロピルベンジル水素ホスフェートを、ＤＣＭ中１％ＴＦＡを２×１ｈｒ使用する反応により、樹脂ベースから切断した。
【０１５２】
次いで、（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−アセトアミド−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）プロパンアミド）−３−ヒドロキシ−３−オキソプロピルベンジル水素ホスフェートを４−（４−トリフルオロメチルフェニル）−ピペリジンＨＣｌと縮合させた。別に、各化合物の１モル当量をＮＭＰに可溶化した。１当量のｐｙｂｏｐおよび３当量のＮＭＭを（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−アセトアミド−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）プロパンアミド）−３−ヒドロキシ−３−オキソプロピルベンジル水素ホスフェート溶液に加え、続いて４−（４−トリフルオロメチルフェニル）−ピペリジンＨＣｌ溶液を加えた。反応物を一晩撹拌させ、次いで、もう１当量のｐｙｂｏｐ、および２当量のＮＭＭと共に、もう１当量のＮＭＰ中４−（４−トリフルオロメチルフェニル）−ピペリジンＨＣｌを反応溶液に加えた。反応を進行させて、続いてＭＳ分析を行い、出発物質が観察することができなくなった時点で完了したとみなした。
【０１５３】
９３％ＴＦＡ、２．５％水、２．５％エタンジチオール、１％トリエチルシラン、および１％チオアニソールのカクテルを使用して、２時間切断することにより保護基を化合物から除去した。切断カクテルと反応溶液との比１０：１を使用した。２時間後、反応物を水で希釈し、凍結し、一晩凍結乾燥した。
【０１５４】
凍結乾燥後、酢酸エチル／メタノール勾配を作動させて、化合物を順相シリカクロマトグラフィーで精製した。適当な画分を収集し、乾燥させた後、Ｃ１８カラム上でＨ２Ｏ／アセトニトリル勾配を作動させて、逆相ＨＰＬＣにより化合物を精製した。画分を凍結乾燥させて、
【０１５５】
（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−アセトアミド−３−ヒドロキシプロパンアミド）−３−オキソ−３−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン−１−イル）プロピルリン酸二水素塩を生成した。
【０１５６】
１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤ３ＯＤ−ｄ６）  δ  ７．６０  （ｄ，  ２Ｈ），  ７．４７  （ｍ，  ２Ｈ），  ５．２４  （ｍ，  １Ｈ），  ４．６９  （ｍ，  １Ｈ），  ４．４８  （ｍ，  １Ｈ），  ４．２７  （ｍ，  １Ｈ），  ４．１８  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．８０  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．２８  （ｍ，  １Ｈ），  ２．９７  （ｍ，  １Ｈ），  ２．８３  （ｍ，  １Ｈ），  ２．０５  （ｓ，  ３Ｈ），  １．９１−１．６１  （ｍ，  ４Ｈ）．
（実施例６）
ＳＲＸ２０６の合成
【化２２】
2017528448.tif 000024
ＳＲＸ２０６：［（３Ｓ）−３−アセトアミド−４−オキソ−４−｛４−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］−ピペリジン−１−イル｝ブチル］ホスホン酸
ステップ１：ジエチル［（３Ｓ）−３−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−４−オキソ−４−｛４−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペリジン−１−イル｝ブチル］ホスホネートの調製
【０１５７】
（２Ｓ）−２−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−４−（ジエトキシホスホリル）ブタン酸（Ｃａｒｏｆｆら、ＵＳ８，５１８，９１２、２０１３年、９６０ｍｇ、２．５７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）／塩化メチレン（２０ｍＬ）中撹拌溶液を、窒素下で、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．７９ｍＬ、１０．３ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（４７２ｍｇ、３．０８ｍｍｏｌ）およびＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（５９２ｍｇ、３．０８ｍｍｏｌ）で順次処理し、混合物を１０ｍｉｎ撹拌した。４−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペリジン塩酸塩（７１７ｍｇ、２．７０ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を室温で一晩撹拌した。１８ｈの時点で、混合物を塩化メチレン（４０ｍＬ）で希釈し、飽和水性ＮａＨＣＯ３（３０ｍＬ）および１／２−飽和ブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮し、減圧下で乾燥させた。シリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ、５０〜１００％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、次いで５％ＥｔＯＨ／ＥｔＯＡｃ溶出液）による精製によって、１．１０ｇ（７３％）の表題化合物を無色のガム状物質として得た。Ｃ２８Ｈ３６Ｆ３Ｎ２Ｏ６Ｐに対するＭＳ（ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ５８５．７（Ｍ＋Ｈ）＋；ＨＰＬＣ  保持時間：４．３５ｍｉｎ（＞９９．０％純度）。
ステップ２：ジエチル［（３Ｓ）−３−アミノ−４−オキソ−４−｛４−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］−ピペリジン−１−イル｝ブチル］ホスホネートの調製
【０１５８】
ジエチル［（３Ｓ）−３−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−４−オキソ−４−｛４−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペリジン−１−イル｝ブチル］ホスホネート（ステップ１、４７０ｍｇ、０．８０ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（８ｍＬ）中溶液を、窒素下で、１０％Ｐｄ／Ｃ（６１％水で湿らせたＤｅｇｕｓｓａタイプ、４３ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）で処理した。混合物を真空排気し、窒素を数回、次いで水素を充填し直し、水素雰囲気（二重のバルーン）下で３ｈ撹拌した。ｓｏｌｋａ  ｆｌｏｋを介した濾過で触媒を除去し、濾液を濃縮し、減圧下で乾燥させることによって、３５６ｍｇ（９８％）の表題化合物を無色のガム状物質として得た。Ｃ２０Ｈ３０Ｆ３Ｎ２Ｏ４Ｐに対するＭＳ（ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ４５１．８（Ｍ＋Ｈ）＋；ＨＰＬＣ  保持時間：３．４０ｍｉｎ（＞９９．０％純度）。
ステップ３：ジエチル［（３Ｓ）−３−アセトアミド−４−オキソ−４−｛４−［４−（トリフルオロメチル）−フェニル］ピペリジン−１−イル｝ブチル］ホスホネートの調製
【０１５９】
ジエチル［（３Ｓ）−３−アミノ−４−オキソ−４−｛４−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペリジン−１−イル｝ブチル］ホスホネート（ステップ２、３５０ｍｇ、０．７７７ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（７．８ｍＬ）中撹拌溶液を、窒素下で、ピリジン（１２６μＬ、１．５５ｍｍｏｌ）、続いて無水酢酸（８８．０μＬ、０．９３２ｍｍｏｌ）を滴下して処理し、得られた無色の、均質な混合物を室温で一晩撹拌した。２０ｈの時点で、反応混合物を塩化メチレン（２０ｍＬ）で希釈し、飽和水性ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ）、水（１０ｍＬ）およびブライン（５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮し、減圧下で乾燥させた。ラジアルクロマトグラフィー［２０００ミクロンシリカゲルローター；０〜１５％ＥｔＯＨ／ＥｔＯＡｃ溶出液］による精製によって、３８５ｍｇ（１００％）の表題化合物を無色の粘性の油状物質として得た。Ｃ２２Ｈ３２Ｆ３Ｎ２Ｏ５Ｐに対するＭＳ（ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ４９３．６（Ｍ＋Ｈ）＋；ＨＰＬＣ  保持時間：３．７３ｍｉｎ（＞９９．０％純度）。
ステップ４：［（３Ｓ）−３−アセトアミド−４−オキソ−４−｛４−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］−ピペリジン−１−イル｝ブチル］ホスホン酸の調製
【０１６０】
ジエチル［（３Ｓ）−３−アセトアミド−４−オキソ−４−｛４−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペリジン−１−イル｝ブチル］ホスホネート（ステップ３、２９０ｍｇ、０．５８９ｍｍｏｌ）の乾燥アセトニトリル（２ｍＬ）中撹拌溶液を、窒素下で、氷水浴内で冷却し、ブロモトリメチルシラン（１．６ｍＬ、１２ｍｍｏｌ）を滴下して処理した。得られた均質な混合物を冷却しながら３０ｍｉｎ撹拌し、次いで冷却浴槽を取り外し、反応物を室温で撹拌させた。３．２５ｈの時点で、混合物を氷水浴内で冷却し、水（５ｍＬ）で滴下して処理し、室温で３０ｍｉｎ撹拌した。混合物を追加の水（３ｍＬ）で希釈し、塩化メチレン（５×２０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ  Ｒｆシステム上での分取ＨＰＬＣ［１５０ｇ  Ｃ１８Ａｑ  Ｇｏｌｄカラム；０〜５０％アセトニトリル（０．０７％ＴＦＡ）／水（０．１％ＴＦＡ）の勾配を用いた溶出］による精製および生成物画分の凍結乾燥により、１８７ｍｇ（７３％）の表題化合物を白色の非晶質固体として生成した。
【０１６１】
１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ８．２４  （ｄ，  Ｊ＝８．４Ｈｚ，  約０．５Ｈ），  ８．１６  （ｄ，  Ｊ＝８．０Ｈｚ，  約０．５Ｈ），  ７．６７  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．４８  （ｍ，  ２Ｈ），  ４．８２  （ｍ，  １Ｈ），  ４．５４  （ｂｄ，  Ｊ＝１２Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．１１  （ｂｔ，  Ｊ＝１４Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．１１  （ｍ，  １Ｈ），  ２．９４  （ｍ，  １Ｈ），  ２．６７  （ｂｑ，  Ｊ＝１２Ｈｚ，  １Ｈ），  １．８５８／１．８５１  （２ｓ，３Ｈ），  １．８５−１．４０  （ｍ，  ８Ｈ）；Ｃ１８Ｈ２４Ｆ３Ｎ２Ｏ５Ｐに対するＭＳ（ＥＳＩ−）  ｍ／ｚ４３５．２（Ｍ−Ｈ）−；ＨＰＬＣ  保持時間：３．０１ｍｉｎ（９９．０％純度）。
（実施例７）
ＳＲＸ２０１の合成
【化２３】
2017528448.tif 000025
ＳＲＸ２０１：（２Ｅ）−１−オキソ−１−｛４−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペリジン−１−イル｝アセトン１Ｈ−テトラゾール−５−イルヒドラゾン
ステップ１：（２Ｅ）−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルヒドラゾノ）プロパン酸の調製
【０１６２】
水（３ｍＬ）中の５−ヒドラジノ−１Ｈ−テトラゾール塩酸塩（２７８ｍｇ、２．０４ｍｍｏｌ）の激しく撹拌した溶液を、２−オキソプロパン酸ナトリウム（２２４ｍｇ、２．０４ｍｍｏｌ）の水（２ｍＬ）中溶液ですばやく処理し、得られたオフホワイト色のスラリーを室温で４ｈ撹拌した。固体を濾過で単離し、水で洗浄し（３×０．５ｍＬ）、高真空下で一晩乾燥させることによって、３０６ｍｇ（８８％）の表題化合物をオフホワイト色の固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  １５．５５  （ｂｓ，  ０．５−１Ｈ），  １２．００  （ｂｓ，  約１Ｈ），  １１．６４  （ｓ，  約１Ｈ），  ２．０８  （ｓ，  ３Ｈ）；Ｃ４Ｈ６Ｎ６Ｏ２に対するＭＳ（ＥＳＩ−）  ｍ／ｚ１６９．１（Ｍ−Ｈ）−。
ステップ２：（２Ｅ）−１−オキソ−１−｛４−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペリジン−１−イル｝アセトン１Ｈ−テトラゾール−５−イルヒドラゾンの調製
【０１６３】
（２Ｅ）−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルヒドラゾノ）プロパン酸（ステップ１、９４ｍｇ、０．５６ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）ウロニウムヘキサフルオロホスフェート（２９０ｍｇ、０．７６２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．７ｍＬ）中撹拌溶液を、窒素下で、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３５４Ｌ、２．０３ｍｍｏｌ）で処理することによって、赤オレンジ色の均質な混合物を得、１０ｍｉｎ撹拌し、４−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペリジン塩酸塩（１３５ｍｇ、０．５０８ｍｍｏｌ）で処理した。得られた琥珀色の均質な混合物を室温で撹拌し、ＨＰＬＣでモニターした。約１９ｈの時点で、混合物をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）で希釈し、水性クエン酸（０．５Ｍ、４ｘ２０ｍＬ）およびブライン（２×１０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮することによって、粗生成物を得、これを２つのバッチに分割し、分取ＨＰＬＣ［ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ  Ｒｆシステム；３０ｇＣ１８Ａｑ  Ｇｏｌｄカラム；０〜８０％メタノール（０．０７％ＴＦＡ）／水（０．１％ＴＦＡ）の勾配で溶出］で精製した。生成物画分（約９５％純度）をプールし、濃縮し、水性の残渣をＥｔＯＡｃ（３５ｍＬ）で抽出し、有機相をＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。分取ＨＰＬＣ［ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ  Ｒｆシステム；３０ｇＣ１８Ａｑ  Ｇｏｌｄカラム；１０〜５０％アセトニトリル（０．０７％ＴＦＡ）／水（０．１％ＴＦＡ）の勾配で溶出］による再精製および生成物画分の凍結乾燥によって、４９ｍｇ（２５％）の表題化合物を白色の羊毛状の固体として生成した。
【０１６４】
１Ｈ  ＮＭＲ  （３００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  １５．２１  （ｂｓ，  ０．２−１Ｈ），  １０．８９  （ｓ，  １Ｈ），  ７．６８  （ｄ，  Ｊ＝８．４Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．５２  （ｄ，  Ｊ＝８．１  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ４．５３  （ｂｄ，  Ｊ＝１３Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．９７  （ｂｄ，  Ｊ＝１３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．２１  （ｍ，  １Ｈ），  ２．９５  （ｍ，  １Ｈ），  ２．８０  （ｍ，  １Ｈ），  ２．１０  （ｓ，  ３Ｈ），  １．９１−１．５０  （ｍ，  ４Ｈ）；Ｃ１６Ｈ１８Ｆ３Ｎ７Ｏに対するＭＳ（ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ３８２．１（Ｍ＋Ｈ）＋；ＨＰＬＣ  保持時間：３．５８ｍｉｎ（９８．０％純度）。分析ＨＰＬＣ条件：Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  ＨＰＬＣ。Ｚｏｒｂａｘ  Ｅｃｌｉｐｓｅ  ＸＤＢ−Ｃ１８  ５０×４．６ｍｍカラム。溶媒Ａ−水（０．１％ＴＦＡ）；溶媒Ｂ−アセトニトリル（０．０７％ＴＦＡ）。流速−１．５０ｍＬ／ｍｉｎ。勾配−５ｍｉｎ９５％Ａ〜９０％Ｂ、１ｍｉｎ保持、次いで９５％Ａへと１ｍｉｎにわたり再循環。２１４および２５４ｎｍでのＵＶ検出。
（実施例８）
ＳＲＸ２０５の合成
【化２４】
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【０１６５】
５−アミノテトラゾールを２位においてベンジルで保護し（Ｊ．  Ｃｏｍｂ．  Ｃｈｅｍ．、２００４年、６巻、６９５頁）、（Ｎａ（ＯＡｃ）３ＢＨ、ＨＯＡｃ）をｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−（１−ヒドロキシ−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１−オキソプロパン−２−イル）カルバメート由来のアルデヒドと反応させた。得られたキラルサブユニットを脱ＢＯＣ化（ＴＦＡ／ＤＣＭ）し、（Ｓ）−３−（４−（ベンジルオキシ）フェニル）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）プロパン酸とカップリングした（ＥＤＣ、ヒューニッヒ塩基）。これを再び、脱ＢＯＣ化し、１−アダマントイルクロリド（ＴＥＡ）と反応させた。両方のベンジル保護基の除去は、２０％Ｐｅａｒｌｍａｎ触媒を６７時間にわたり水素バルーン下で使用して達成した。Ｃ３２Ｈ３８Ｎ８Ｏ３に対するＭＳ（ＥＳＩ−）  ｍ／ｚ５８１．１（Ｍ−Ｈ）−
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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