(57)【要約】  化合物は一般式：Ｅｘ４‐リンカー‐Ｓａｒ（６４Ｃｕ）‐Ｆｌ（式中、Ｅｘ４はエキセンジン-４アナログであり；リンカーはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）鎖、例えば４つのエチレングリコール残基で形成されたものであり；Ｆｌはフォトルミネッセント部分であり、及びＳａｒ（６４Ｃｕ）はサルコファジン部分にキレートした銅‐６４の原子である）を有し、インスリノーマ細胞とβ細胞集団の検出と局在化のための集学的画像化剤として有用である。
2017504563.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式：
Ｅｘ４‐リンカー‐Ｓａｒ（６４Ｃｕ）‐Ｆｌ
の化合物
（式中、
Ｅｘ４はエキセンジン-４アナログであり；
リンカーはポリエチレングリコール鎖であり；
Ｆｌはフォトルミネッセント部分であり、及び
Ｓａｒ（６４Ｃｕ）はサルコファジン部分にキレートした銅‐６４の原子である）。
【請求項２】
エキセンジン-４アナログが配列番号１のアミノ酸１２の修飾を介してＳａｒ（６４Ｃｕ）に結合している、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
エキセンジン-４アナログが配列番号２である、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｆｌがスルホ‐Ｃｙ５である、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
リンカーのポリエチレングリコール鎖が４つのエチレングリコール残基からなる、請求項３に記載の化合物。
【請求項６】
Ｆｌがスルホ‐Ｃｙ５である、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
リンカーのポリエチレングリコール鎖が４つのエチレングリコール残基からなる、請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
化合物が６４Ｃｕ‐Ｅ４ｘ１２‐Ｓａｒ‐Ｆｌである、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
ヒト被験者を含む被験者のβ細胞集団とインスリノーマ細胞を検出するための方法であって、請求項１〜８のいずれか一項の化合物を被験者に導入するステップ、及び６４Ｃｕの検出、フォトルミネッセント部分の光学的検出、又は両方により化合物を検出し、β細胞集団又はインスリノーマ細胞が存在するかどうかを決定するステップを含む、上記方法。
【請求項１０】
検出ステップが腫瘍を可視化するための手術中の光学的検出ステップを含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１１】
検出ステップが診断画像を創出することを含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１２】
インスリノーマ細胞及び／又はβ細胞集団を検出及び／又は局所化するための、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の陳述
本願は２０１３年７月２５日に出願された米国仮出願第６１／８５８，５５０号からの優先権を主張するものであり、その出願は参照による取り込みを許容するすべての管轄において参照することにより取り込まれるものとする。
【０００２】
本願は集学的画像化に使用するための化合物、並びに手術前及び手術中のインスリノーマ及びＢ細胞集団画像化、局在化及び診断におけるその化合物の使用に関する。
【背景技術】
【０００３】
インスリノーマはランゲルハンス島の癌の最もよく見られる形態であるが、一般的な人口集団での発生は百万人にわずか１〜４人にすぎず、めったに見られないため不幸なことにしばしば無視されがちな癌の形態である。発生は剖検検査でより高い（０．８％〜１０％）ことが報告されており、これはこれらの腫瘍が診断されない頻度が高いことを示唆している。ほとんどの症例では、インスリノーマの診断と除去はいずれも、様々な画像化の多様性における信号対ノイズ比が低いために難しいのである。それに加えて、あいまいな診断や誤った陽性／陰性結果に至る非特異的な及び／又は不明瞭な症状を有する患者も多く見られる。同様に、腫瘍組織の切除は、腫瘍の周辺を容易に線引きできないことがしばしばであるため、インスリノーマの症例では難しいことがある。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
そのため、インスリノーマを明確ではっきりと診断し、なおかつ一旦検出されたら外科的に切除するのに役立てることのできる診断ツールの臨床的なニーズが満たされていないのである。さらに、非浸襲的で、広く適用でき、実施が容易なインスリノーマの診断ツールはこれまでに存在しない。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
これらのニーズを処理するため、本発明は、集学的画像化剤として使用することができる化合物を提供する。化合物は一般式：
Ｅｘ４‐リンカー‐Ｓａｒ（６４Ｃｕ）‐Ｆｌ
式中、
Ｅｘ４はエキセンジン-４アナログであり；
リンカーはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）鎖、例えば４つのエチレングリコール残基で形成されたものであり；
Ｆｌはフォトルミネッセント部分であり、
Ｓａｒ（６４Ｃｕ）はサルコファジン（ｓａｒｃｏｐｈａｇｉｎｅ）部分にキレートした銅‐６４の原子である。
【０００６】
好ましい態様では、エキセンジン-４アナログは配列番号１のアミノ酸１２の修飾を介してＳａｒ（６４Ｃｕ）に結合している。具体的なエキセンジン-４アナログは配列番号２に示されている。
【０００７】
例示的なフォトルミネッセント部分はスルホ‐Ｃｙ５である。
化合物の具体的な態様は式１に示す構造を有する。この化合物は本明細書中で６４Ｃｕ‐Ｅ４ｘ１２‐Ｓａｒ‐Ｆｌと称する。
【０００８】
本発明の化合物はフォトルミネッセント部分を介する光学画像化技術により、そして陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）のような６４Ｃｕを検出する画像化技術により検出することができる。したがって、本発明はさらに、検出可能な元素のいずれか又は両方を用いる診断画像化における化合物の使用を提供する。
【０００９】
本発明はさらに、本発明の集学的画像化剤、例えば６４Ｃｕ‐Ｅ４ｘ１２‐Ｓａｒ‐Ｆｌを、被験者に集学的画像化化合物を導入し、ＰＥＴ画像化、光学的検出、又は両方により化合物を検出し、インスリノーマ細胞が存在するかどうかを判断することにより、ヒト被験者を含む被験者のインスリノーマ細胞を検出するのに用いる診断方法を提供する。検出は、診断的画像化設定で、又は腫瘍を局在化して外科的除去を容易にするための手術内腫瘍検出のために行うことができる。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】図１は、本発明の化合物の一つの具体的な態様、６４Ｃｕ‐Ｅ４ｘ１２‐Ｓａｒ‐Ｆｌの構造を示す。
【図２】図２は図１の化合物の合成スキームを示す。
【図３】図３は本発明の化合物の非放射性標識形態での励起及び発光スペクトルを示す。
【図４】図４は６４ＣｕＣｌ２を用いる図１の化合物の放射性標識の手順を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明は、ＰＥＴ画像化とインスリノーマの手術中の光学的画像化の両方に使用できる新しいクラスの集学的画像化剤を提供する。核と光学的トレーサーとを単一の分子中で標的部分とともに組み合わせることにより、各モダリティの独特の特性から利益を得ることができる。ＰＥＴは有意に高い空間的解像度を提供し、放射性トレーサー濃度の定量的分析を可能にし、蛍光画像化は高解像度の画像を提供する。
【００１２】
集学的画像化剤の開発は単一モダリティの薬剤では必ずしも見られない潜在的な課題を提示する。第一に、検出可能な部分の結合により、標的部分の結合親和性を変化させ、標的部分が化合物の検出成分の非存在下よりも効率が低くなるというリスクが生じる。第二に、検出成分の結合はプローブの薬物動力学に影響を与えることがあり、排出速度に変化をもたらし、血中半減期を延長又は短縮してしまう。これは必要とする画像化剤の量だけでなく、診断又は手術中の局在化を実施するのに利用できる時間的フレームに影響を与える可能性がある。
【００１３】
これらの課題は達成することができ、化合物は一般式：
Ｅｘ４‐リンカー‐Ｓａｒ（６４Ｃｕ）‐Ｆｌ
を有する本発明にしたがい提供される。
【００１４】
この化合物において、Ｅｘ４はエキセンジン-４アナログを表す。エキセンジン-４は配列番号１に示す配列を有する３９個のアミノ酸ペプチドである。本願で用いる「エキセンジン-４アナログ」という用語は、３９残基の配列中一つのアミノ酸がエキセンジン-４がリンカーに結合するための点を提供するように修飾されている３９残基の配列をいう。特定の残基は変更することができるが、特定の態様では修飾残基は配列番号１のアミノ酸１２である。残基への修飾の性質はエキセンジン-４アナログとリンカーとの間の結合の形成を容易にするようにリンカーの機能と相容れるように選択される。以下の特定の例では、アジドを有するポリエチレングリコールリンカーを、非天然アミノ酸を（Ｓ）‐２‐アミノ‐４‐ペンチン酸のアルキン部分とともに有するエキセンジン-４アナログとともに用いた。しかし、他の修飾アミノ酸をリンカー上の他の官能基との反応性を提供するように用いることができる。
【００１５】
式の「リンカー」部は、式中のＥｘ４に、及びＳａｒ部分に結合するための官能基を含み、ポリエチレングリコール鎖により分離されている。ポリエチレングリコール鎖の長さはインビボでの化合物の半減期及びエキセンジン-４アナログへの結合親和性のような特性を変えるように変更することができる。特定の例では、リンカーは４つのポリエチレングリコール部分を含有する。
【００１６】
一般式中のＳａｒ（６４Ｃｕ）要素は６４Ｃｕの原子がキレート化しているサルコファジン（ｓａｒｃｏｐｈａｇｉｎｅ）部分を表す。Ｆｉｇ．１の特定の例では、アミノメチル‐ベンジル修飾銅キレート剤サルコファジンを、スルホ‐Ｃｙ５蛍光トレーサー、Ｆｌを結合するために用いた。
【００１７】
図１の集学的画像化剤、６４Ｃｕ‐Ｅ４ｘ１２‐Ｓａｒ‐Ｆｌは図２Ａ〜Ｄで概略を示した手法を用いて合成した。この手順は確立した反応シーケンス（１５〜１７）に基づいている。最終的な分子の構成部分の初期評価によれば、６４Ｃｕ‐Ｅ４ｘ１２‐Ｓａｒ‐Ｆｌの非放射活性バージョンであるＣｕ‐Ｅ４ｘ１２‐Ｓａｒ‐Ｆｌを合成することによりスキームの実現可能性が確認された。蛍光トレーサー（スルホ‐Ｃｙ５）を結合するためのサルコファジン（ＤｉＡｍＳａｒ）、及びキレート剤とバイオマーカーの間のポリエチレングリコール（ＰＥＧ）リンカー。ＤｉＡｍＳａｒは放射性銅のキレート剤としても作用することができる。Ｎ‐Ｂｏｃ‐４‐（アミノメチル）‐ベンジルブロミドの存在下で、保護された第一アミンを担持する高反応性求電子試薬、ＤｉＡｍＳａｒは、トリフルオロ酢酸による処理後、蛍光トレーサーとＰＥＧリンカーの結合がアニリン誘導体を用いた先の努力に比較してよりうまくいくように官能化されている（２０）。ＤｉＡｍＳａｒのアミノメチル‐ベンジル単位による伸長は、求核置換反応の立体的に好ましい環境を作り出す。最後に、Ｋ１２位で修飾したネオペプチドＥ４ｘ１２により、二機能性サルコファジン画像化剤を生体分子トレーサーに銅（Ｉ）触媒アジド‐アルキン１，３‐双極子環状付加反応を介して結合することが可能となった（２１）。Ｃｕ‐Ｅ４ｘ１２‐Ｓａｒ‐Ｆｌの５段階合成をＨＰＬＣとＥＳＩ‐ＭＳにより確認した。図３は、６４８ｎｍの吸収極大及び６６０ｎｍの発光極大を示すＣｕ‐Ｅ４ｘ１２‐Ｓａｒ‐Ｆｌの特異的吸収及び発光クロマトグラムを示す。これはスルホ‐Ｃｙ５の文献値と一致する。
【００１８】
図４は６４ＣｕＣｌ２を用いる化合物の放射性標識の手順を示す。
【００１９】
６４Ｃｕ‐Ｅ４ｘ１２‐Ｓａｒ‐Ｆｌを含む本発明の化合物は、満たされていない臨床的ニーズを充足する。これは、内科医に、たとえインスリノーマ腫瘍の大きさが２ｃｍ未満であっても腫瘍を局所化することを可能にする。なお、腫瘍の外科的切除の間、手術中の光学的画像化を同じ薬剤で行うことができる。
【００２０】
さらに、６４Ｃｕ‐Ｅ４ｘ１２‐Ｓａｒ‐Ｆｌを含む本発明の化合物は１型糖尿病における自己免疫性破壊の大きさを評価するに際しβ細胞集団を定量化するのに用いることができる。
【００２１】
本発明の化合物はインスリノーマ腫瘍の診断及び手術中の光学的切除を可能にするモジュール式のプラットフォームを提供する。一般に本明細書で提案するような集学的画像化システムは従来の標識プローブ（ＰＥＴか蛍光のいずれか）を超える多くの利点を有している。しかし、今日の実際の臨床における主力製品技術の一つとなっているＰＥＴ画像化とは異なり、手術中の光学的画像化及び増大された外科的システムは依然として臨床においてその応用可能性を証明する必要がある。６４Ｃｕ‐Ｅ４ｘ１２‐Ｓａｒ‐Ｆｌを含む本発明の化合物は、このまだ満たされていない臨床的ニーズにこたえるものである。
【００２２】
生体マウスのインスリノーマのＰＥＴ画像化において、６４Ｃｕ‐Ｅ４ｘ１２‐Ｓａｒ‐Ｆｌは先に開発されたプロトコル（１５〜１７）に類似した条件で用いられる。ＩＮＳ‐１、ＭＩＮ６、又は９１６‐１腫瘍異種移植片を有する各マウスに、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ、１５０μＬ）に溶解した６４Ｃｕ‐Ｅ４ｘ１２‐Ｓａｒ‐Ｆｌの飽和用量（０．２ｎｍｏｌ／ｇ）を摂取させる。６４Ｃｕ‐Ｅ４ｘ１２‐Ｓａｒ‐Ｆｌの静脈内注射の後、化合物は血流を介して循環し、ＧＬＰ‐１受容体を発現する細胞上に蓄積する。同時に、非特異的に結合する材料は腎臓を介して全身的に排出されるであろう。循環時間の間、動的全身ＰＥＴスキャンが６４Ｃｕ‐Ｅ４ｘ１２‐Ｓａｒ‐Ｆｌの蓄積の過程を観察し、生体マウスのインスリノーマ腫瘍と膵β細胞の特異的局所化を可能にする。
【００２３】
６４ＣｕのようなＰＥＴトレーサーは腫瘍の巨視的な画像化と検出を可能にする。ＰＥＴトレーサーとの組合せにおいて、フォトルミネッセント標識を追加することで広域の手術中の画像化が可能となり、腫瘍組織の同定と外科的切除の助けとなる。単一の分子における放射活性トレーサーとフォトルミネッセント標識の組合せにより、深い組織貫通性と高解像度広域画像化とを組み合わせる能力を提供する。生体内高解像度内視鏡検査により内科医は腫瘍周辺と微小な浸潤物をすばやく同定することが可能になる。これは、病変部を健康な組織から区別するために免疫組織化学染色を必要としないので、リアルタイムでその場で提供できる外科的周辺の分析の更なる支援となる。
【実施例】
【００２４】
本発明は上記の開示に十分に記載され実施可能であるが、以下の実施例は本発明の利点を明らかにするために提示される。
【００２５】
インビトロ受容体結合アッセイ。先に記載の受容体結合アッセイ（２６）を６４Ｃｕ‐Ｅ４ｘ１２‐Ｓａｒ‐Ｆｌの受容体結合親和性を測定するために用いた。
ＨＥＫ‐ｈＧＬＰＲ１Ｒヒト胚性腎細胞を９６穴プレートに蒔き（穴当たり５．５ｘ１０４細胞）、３７℃で４８時間培養した。結合緩衝液（１２０ｍＭ  ＮａＣｌ、１．２ｍＭ  ＭｇＳＯ４、１３ｍＭ  酢酸ナトリウム、５ｍＭ  ＫＣｌ、１．２ｇ／Ｌ  Ｔｒｉｓ、２ｇ／Ｌ  ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、及び１．８ｇ／Ｌ  グルコース、ｐＨ７．６）で洗浄後、細胞を３０ｐＭの１２５Ｉ‐エキセンジン‐４（エキセンジン-４）（９〜３９、Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ，Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ）及び６４Ｃｕ‐Ｅ４ｘ１２‐Ｓａｒ‐Ｆｌ（最終濃度範囲：１０−１２〜１０−６Ｍ）で共処理した。３７℃で２時間インキュベーション後、細胞を１ｍｇ／ｍＬ  ＢＳＡを含むＰＢＳ（３ｘ１５０μＬ）で洗浄し、溶解させ（ＲＩＰＡ  １ｘ緩衝液、１５分）、内容物の放射活性をＷａｌｌａｃ３”１４８０自動γカウンターを用いて測定した。
【００２６】
ＩＣ５０が４．７±０．８ｎＭのエキセンジン-４と比較して、二つのモードの画像化トレーサー６４Ｃｕ‐Ｅ４ｘ１２‐Ｓａｒ‐Ｆｌについて５０．３±３．７ｎＭというわずかに高いＩＣ５０値であった。６４Ｃｕ‐Ｅ４ｘ１２‐Ｓａｒ‐Ｆｌの結合親和性は、ＧＬＰ‐１Ｒ陽性９１６‐１インスリノーマ細胞が強い取り込みを示す共焦点細胞画像化で確認した。６４Ｃｕ‐Ｅ４ｘ１２‐Ｓａｒ‐Ｆｌとのインキュベーション（１０ｎＭ又は１００ｎＭ、９０分）の後、細胞を固定しセロミクスブルー（Ｃｅｌｌｏｍｉｃｓ  ｂｌｕｅ）全細胞染色で染色した（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、ＭＡ、ＵＳＡ）ところ、先に見られたのと同様に蛍光画像化プローブの内在化を示した（１６）。６４Ｃｕ‐Ｅ４ｘ１２‐Ｓａｒ‐ＦｌのＧＬＰ‐１Ｒ特異性を示すために、９１６‐１細胞を、６４Ｃｕ‐Ｅ４ｘ１２‐Ｓａｒ‐Ｆｌでのインキュベーションの前に過剰の非変性ペプチドＥ４ｘ１２（１μＭ）でプレインキュベートし、蛍光シグナルの抑制をＮＩＲで観察した。
【００２７】
インビボ実験
動物。すべての動物実験と手順は、Ｍｅｍｏｒｉａｌ  Ｓｌｏａｎ  Ｋｅｔｔｅｒｉｎｇ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｎｔｅｒ（スローンケタリング記念がんセンター）にてＩｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ（動物実験委員会）により設定された指針にしたがい行った。マウスインシュリン１プロモータ（ＭＩＰ‐ＧＦＰ）の対照の下、ＧＦＰを発現するトランスジェニックホモ接合性Ｂ６．Ｃｇ‐Ｔｇ（Ｉｎｓ１‐ＧＦＰ）１Ｈａｒａ／ＪマウスをＪａｃｋｓｏｎ研究所（ｔｈｅ  Ｊａｃｋｓｏｎ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ）から得て、６〜８週齢で養育した。得られた同腹の仔を膵β細胞集団画像化に用いた。雌の無胸腺ヌードマウス（Ｔａｃｏｎｉｃ  Ｌａｂ；ＣｒＴａｃ：ＮＣｒ‐Ｆｏｘｎ１ｎｕ、６〜８週、２０〜２２ｇ）の右肩に腫瘍を誘導した。９１６‐１インスリノーマ細胞（３．０ｘ１０６）を培地とマトリゲル（１５０μＬ）の１：１混合液に懸濁し、皮下注射して３週間後に異種移植腫瘍マウスモデル（＜２ｍｍ腫瘍体積）を確立した。
【００２８】
血中半減期。雌のヌードマウス（６〜８週、ｎ＝４）にＰＢＳ（５％ＤＭＳＯ、２００μＬ）中６４  ６４Ｃｕ‐Ｅ４ｘ１２‐Ｓａｒ‐Ｆｌ（３０〜３５μＣｉ）を側尾静脈経由で注射した。あらかじめ決めておいた時点（２、４、８、１６、３０、６０、９０、１２０、１５０、及び１８０分）で、血液サンプルを各動物の大伏在静脈から得た。血液サンプルの放射活性はパーキンエルマー（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）社のＷＩＺＡＲＤ２自動γカウンターで記録し、収集した血液サンプルの重量を決定した。グラム当たり注入用量％として表したトレーサー取り込みの百分率（％ＩＤ／ｇ）を、計数時間に対して崩壊補正をした、実際に注入した用量当たりの血液重量中に存在する活性として計算した。
【００２９】
１０．１分の重み付きｔ１/２を測定した。半減期は、二相指数関数崩壊曲線に適合し、高速薬剤分配と低速除去相を有する多区画モデルに類似していた。
【００３０】
ＰＥＴ画像化。少量の動物ＰＥＴ画像データをマイクロＰＥＴＦｏｃｕｓ１２０に記録した。ＰＢＳ（４％ＤＭＳＯ、２００μＬ）中６４Ｃｕ‐Ｅ４‐Ｆｌ（３３５±３５μＣｉ）を尾静脈から腫瘍担持ヌードマウス（ｎ＝７）に注入した。注入後５〜６時間で、マウスを酸素中２Ｌ／ｍｉｎの１．５〜２．０％イソフラン（Ｂａｘｔｅｒ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）で麻酔し、ＰＥＴ画像を１０分にわたり記録した。さらに追加の一群のヌードマウス（ｎ＝５）に、遮断剤として、またエキセンジン-４のＧＬＰ‐１受容体に対する特異性を決定するために、ＰＢＳ（４％ＤＭＳＯ、２００μＬ）中の非標識のエキセンジン-４（１００倍過剰）とあらかじめ混合した６４Ｃｕ‐Ｅ４ｘ１２‐Ｓａｒ‐Ｆｌ（３３５±３５μＣｉ）を注入した。画像はＡｓｉＰｒｏ  ＶＭソフトウェア（Ｃｏｎｃｏｒｄｅ  Ｍｉｃｒｏｓｙｓｔｅｍｓ）を用いて解析した。異種移植片腫瘍の活性濃度の定量は４つの異なるスライス中、関心領域（ＲＯＩ）を描き、最大値を平均化することによりなされた。得られたＰＥＴ画像において、ＧＬＰ‐１Ｒ陽性９１６‐１腫瘍は容易に可視化された。
【００３１】
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【００３２】
特許請求の範囲
１．  一般式：
Ｅｘ４‐リンカー‐Ｓａｒ（６４Ｃｕ）‐Ｆｌ
の化合物
（式中、
Ｅｘ４はエキセンジン-４アナログであり；
リンカーはポリエチレングリコール鎖であり；
Ｆｌはフォトルミネッセント部分であり、及び
Ｓａｒ（６４Ｃｕ）はサルコファジン部分にキレートした銅‐６４の原子である）。
２．  エキセンジン-４アナログが配列番号１のアミノ酸１２の修飾を介してＳａｒ（６４Ｃｕ）に結合している、請求項１に記載の化合物。
３．  エキセンジン-４アナログが配列番号２である、請求項２に記載の化合物。
４．  Ｆｌがスルホ‐Ｃｙ５である、請求項３に記載の化合物。
５．  リンカーのポリエチレングリコール鎖が４つのエチレングリコール残基からなる、請求項３に記載の化合物。
６．  Ｆｌがスルホ‐Ｃｙ５である、請求項１に記載の化合物。
７．  リンカーのポリエチレングリコール鎖が４つのエチレングリコール残基からなる、請求項６に記載の化合物。
８．  化合物が６４Ｃｕ‐Ｅ４ｘ１２‐Ｓａｒ‐Ｆｌの構造を有する、請求項１に記載の化合物。
９．  ヒト被験者を含む被験者のインスリノーマ細胞を検出するための方法であって、請求項１〜８のいずれか一項の化合物を被験者に導入するステップ、及び６４Ｃｕの検出、フォトルミネッセント部分の光学的検出、又は両方により化合物を検出し、インスリノーマ細胞が存在するかどうかを決定するステップを含む、上記方法。
１０．  検出ステップが腫瘍を可視化するための手術中の光学的検出ステップを含む、請求項１０に記載の方法。
１１．  検出ステップが診断画像を創出することを含む、請求項９に記載の方法。
１２．  インスリノーマ細胞を検出及び／又は局所化するための、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【図１】
2017504563.tif 000003
【図２Ａ】
2017504563.tif 000004
【図２Ｂ】
2017504563.tif 000005
【図２Ｃ】
2017504563.tif 000006
【図２Ｄ】
2017504563.tif 000007
【図３】
2017504563.tif 000008
【図４】
2017504563.tif 000009
【配列表】
2017504563000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成28年2月2日(2016.2.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式：
Ｅｘ４‐リンカー‐Ｓａｒ（６４Ｃｕ）‐Ｆｌ
の化合物
（式中、
Ｅｘ４はエキセンジン-４アナログであり；
リンカーはポリエチレングリコール鎖であり；
Ｆｌはフォトルミネッセント部分であり、及び
Ｓａｒ（６４Ｃｕ）はサルコファジン部分にキレートした銅‐６４の原子である）。
【請求項２】
エキセンジン-４アナログが配列番号１のアミノ酸１２の修飾を介してＳａｒ（６４Ｃｕ）に結合している、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
エキセンジン-４アナログが配列番号２である、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｆｌがスルホ‐Ｃｙ５である、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
リンカーのポリエチレングリコール鎖が４つのエチレングリコール残基からなる、請求項３に記載の化合物。
【請求項６】
Ｆｌがスルホ‐Ｃｙ５である、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
リンカーのポリエチレングリコール鎖が４つのエチレングリコール残基からなる、請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
化合物が６４Ｃｕ‐Ｅ４ｘ１２‐Ｓａｒ‐Ｆｌである、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
ヒト被験者を含む被験者のインスリノーマ細胞を検出するための方法であって、請求項１〜８のいずれか一項の化合物を被験者に導入するステップ、及び６４Ｃｕの検出、フォトルミネッセント部分の光学的検出、又は両方により化合物を検出し、インスリノーマ細胞が存在するかどうかを決定するステップを含む、上記方法。
【請求項１０】
ヒト被験者を含む被験者のβ細胞集団及びインスリノーマ細胞を検出するための方法であって、請求項１〜８のいずれか一項の化合物を被験者に導入するステップ、及び６４Ｃｕの検出、フォトルミネッセント部分の光学的検出、又は両方により化合物を検出し、β細胞集団又はインスリノーマ細胞が存在するかどうかを決定するステップを含む、上記方法。
【請求項１１】
検出ステップが腫瘍を可視化するための手術中の光学的検出ステップを含む、請求項９又は１０に記載の方法。
【請求項１２】
検出ステップが診断画像を創出することを含む、請求項９又は１０に記載の方法。
【請求項１３】
インスリノーマ細胞及び／又はβ細胞集団を検出及び／又は局所化するための、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【国際調査報告】
2017504563.tif 000010
2017504563.tif 000011
2017504563.tif 000012