(57)【要約】  本発明は、ヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣ）およびキナーゼの阻害剤である、ヒドロキサメート基を含む、式（Ｉ）の縮合ピリミジン系ヒドロキサメート化合物に関する。より具体的には、本発明は、ヒドロキサメート置換プリンもしくは５Ｈ-ピロロ［３，２-ｄ］ピリミジン誘導体、それらの調製法、これらの化合物を含有する医薬組成物、並びに、ヒストン脱アセチル化酵素、非ヒストン脱アセチル化酵素およびキナーゼの活性／機能を有する酵素を含む、それらに関する、もしくはそれらと関連した、並びに／または不特定／多標的の機構を介した、障害／状態／疾患の治療におけるこれらの化合物の使用に関する。
2017510628.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物であって、
【化１】
2017510628.tif 000122
式中、Ｘ、ＹおよびＺは独立してＮ、ＣＨＲ３またはＣＲ３から選択され、Ｘ、ＹまたはＺのうちの少なくとも１つはＮであり；
【化２】
2017510628.tif 000123
は結合価が許す通りに単結合または二重結合であり；
Ｒ１およびＲ２は独立して、結合、ハロゲン、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアミノ、置換されていてもよいアルキルオキシ、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいヘテロシクロアルキル、置換されていてもよいアリールおよび置換されていてもよいヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ３およびＲ４は独立して、結合、水素、ハロゲン、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアミノ、置換されていてもよいアルキルオキシ、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいヘテロシクロアルキル、置換されていてもよいアリールおよび置換されていてもよいヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３またはＲ４のうちの少なくとも１つはさらに独立して、ヒドロキサメート基-Ｌ１-Ｒ５-Ｌ２-Ｒ６-Ｌ３-ＣＯＮ（Ｒａ）ＯＲｂによって置換されており、式中；
ＲａおよびＲｂは独立して、結合、水素、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアシルおよび置換されていてもよいアミノ酸残基からなる群から選択され；
Ｌ１、Ｌ２およびＬ３は独立して、結合、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアルケニルおよび置換されていてもよいアルキニルからなる群から選択され；
Ｒ５およびＲ６は独立して、結合、Ｏ、Ｓ、ＮＲｃ、Ｓ（Ｏ）ｎ、置換されていてもよいアミド、置換されていてもよい尿素、置換されていてもよいカルボニル尿素、置換されていてもよいチオ尿素、置換されていてもよいスルホンアミド、置換されていてもよいアミノスルホンアミド、置換されていてもよいスルホニル尿素、置換されていてもよいオキシム、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいヘテロシクロアルキル、置換されていてもよいアリールおよび置換されていてもよいヘテロアリールからなる群から選択され；式中；
Ｒｃは独立して、結合、水素、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアルケニル、置換されていてもよいアルキニルおよび置換されていてもよいアシルからなる群から選択され；
ｎは０〜２の整数である、前記化合物、またはその薬剤的に許容できる形態もしくはプロドラッグ。
【請求項２】
置換されていてもよいアルキルが置換されていてもよいＣ１〜Ｃ１２アルキルである、置換されていてもよいアルキルオキシが置換されていてもよいＣ１〜Ｃ１６アルキルオキシである、置換されていてもよいシクロアルキルが置換されていてもよいＣ３〜Ｃ９シクロアルキルである、置換されていてもよいヘテロシクロアルキルが、３〜８の環原子数を有し、Ｎ、ＯおよびＳからなる群から独立して選択される１〜３個のヘテロ原子を有する置換されていてもよいヘテロシクロアルキルである、置換されていてもよいアリールが置換されていてもよいＣ６〜Ｃ１８アリールである、置換されていてもよいヘテロアリールが、３〜８の環原子数を有し、Ｎ、ＯおよびＳからなる群から独立して選択される１〜３個のヘテロ原子を有する置換されていてもよいヘテロアリールである、置換されていてもよいアルケニルが置換されていてもよいＣ２〜Ｃ１２アルケニルである、または、置換されていてもよいアルキニルが置換されていてもよいＣ２〜Ｃ１２アルキニルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
ＸおよびＹが二重結合によって連結されている、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
ＸおよびＹが単結合によって連結されている、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｘ、ＹおよびＺがＮである、請求項３に記載の化合物。
【請求項６】
ＸおよびＺが共にＮであり、ＹがＣＲ３である、請求項３に記載の化合物。
【請求項７】
ＸがＣＨであり、ＹがＣＲ３であり、ＺがＮである、請求項３に記載の化合物。
【請求項８】
ＸがＣＨ２であり、ＹがＣＨＲ３であり、ＺがＮである、請求項５に記載の化合物。
【請求項９】
以下の式（Ｉａ）：
【化３】
2017510628.tif 000124
を有する、請求項５に記載の化合物。
【請求項１０】
以下の式（Ｉｂ）：
【化４】
2017510628.tif 000125
を有する、請求項６に記載の化合物。
【請求項１１】
以下の式（Ｉｃ）：
【化５】
2017510628.tif 000126
を有する、請求項７に記載の化合物。
【請求項１２】
以下の式（Ｉｄ）：
【化６】
2017510628.tif 000127
を有する、請求項８に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ１およびＲ２が独立して結合、ハロゲン、置換されていてもよいアミノ、置換されていてもよいアルキルアミノ、置換されていてもよいシクロアミノ、置換されていてもよいヘテロシクロアミノ、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいアリールまたは置換されていてもよいヘテロアリールである、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ１およびＲ２が独立して結合、ハロゲン、置換されていてもよいアミノ、置換されていてもよいアルキルアミノ、置換されていてもよいシクロアミノ、置換されていてもよいヘテロシクロアミノ、置換されていてもよいアリールアミノ、置換されていてもよいヘテロアリールアミノ、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいアリールまたは置換されていてもよいヘテロアリールである、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１５】
Ｒ１が置換されていてもよいヘテロシクロアミノ、置換されていてもよいヘテロアリールまたは置換されていてもよいアリールである、請求項１４に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒ１が置換されていてもよいフェニル、置換されていてもよいピリミジニル、置換されていてもよいピリジニル、置換されていてもよいピラジニル、置換されていてもよいチオモルホリノまたは置換されていてもよいモルホリノである、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｒ２がハロゲン、置換されていてもよいアミノ、置換されていてもよいアルキルアミノ、置換されていてもよいシクロアミノ、置換されていてもよいヘテロシクロアミノ、置換されていてもよいアリールまたは置換されていてもよいヘテロアリールである、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１８】
Ｒ２がＣｌ、Ｂｒ、Ｆ、ＮＨ２、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、置換されていても
よいピロリジニル、置換されていてもよいピペリジニル、置換されていてもよいモルホリノ、置換されていてもよいフェニル、置換されていてもよいピリジニル、置換されていてもよいピリミジニル、置換されていてもよいピラジニル、または置換されていてもよいベンズイミダゾリルである、請求項１７に記載の化合物。
【請求項１９】
Ｒ３およびＲ４が独立して、結合、水素、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアミノ、置換されていてもよいアルキルアミノ、置換されていてもよいシクロアミノ、置換されていてもよいヘテロシクロアミノ、置換されていてもよいアリールアミノ、置換されていてもよいヘテロアリールアミノ、置換されていてもよいアルキルオキシ、置換されていてもよいアリールオキシ、置換されていてもよいヘテロアリールオキシルまたは置換されていてもよいシクロアルキルである、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２０】
Ｒ３およびＲ４が独立して、結合、水素、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアミノ、置換されていてもよいアルキルアミノ、置換されていてもよいシクロアミノ、アリールアミノ、置換されていてもよいヘテロアリールアミノ、置換されていてもよいアルキルオキシ、置換されていてもよいアリールオキシ、置換されていてもよいヘテロアリールオキシルまたは置換されていてもよいシクロアルキルである、請求項１９に記載の化合物。
【請求項２１】
Ｒ３が結合、水素、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアミノ、置換されていてもよいアルキルアミノまたは置換されていてもよいシクロアミノである、請求項２０に記載の化合物。
【請求項２２】
Ｒ３が結合、水素、ＮＨ２、ジエチルアミノ、置換されていてもよいピロリジニルまたは置換されていてもよいピペリジニルである、請求項２１に記載の化合物。
【請求項２３】
Ｒ４が結合または置換されていてもよいアルキルである、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２４】
Ｒ４が結合、エチル、１-プロピル、２-プロピル、２-ブチル、３-ペンチルまたはシクロペンチルである、請求項２３に記載の化合物。
【請求項２５】
ＲａおよびＲｂが水素である、請求項１〜２４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２６】
Ｌ１、Ｌ２およびＬ３が独立して、結合、置換されていてもよいアルキルまたは置換されていてもよいアルケニルである、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２７】
Ｌ１、Ｌ２およびＬ３が独立して、Ｃ１〜Ｃ１０の炭素鎖長を有する、請求項２６に記載の化合物。
【請求項２８】
Ｒ５およびＲ６が独立して、結合、-Ｏ-、-Ｓ-、-ＮＨ-、-Ｎ（Ｍｅ）-、-Ｎ（Ａｃ）-、-Ｓ（Ｏ）-、-Ｓ（Ｏ）２-、-ＣＯＮＨ-、-ＮＨＣＯ-、-ＮＨＣＯＮＨ-、-Ｓ（Ｏ）２ＮＨ-、ＮＨＳ（Ｏ）２-、-ＮＨＳ（Ｏ）２ＮＨ-、置換されていてもよいヘテロシクロアルキルまたは置換されていてもよいアリールである、請求項１〜２７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２９】
Ｒ５およびＲ６が独立して、結合、-Ｏ-、-ＮＨ-、-Ｎ（Ｍｅ）-、-ＮＨＣＯ-、１，３-ピペリジニレン、１，４-ピペリジニレン、２，４-ピリミジニレン、２，５-ピリミジニレン、１，２-フェニレン、１，３-フェニレンまたは１，４-フェニレンである、請求項
２８に記載の化合物。
【請求項３０】
ヒドロキサメート基-Ｌ１-Ｒ５-Ｌ２-Ｒ６-Ｌ３-ＣＯＮ（Ｒａ）ＯＲｂが以下の構造から選択され；
【化７】
2017510628.tif 000128
式中、Ｒ７は結合、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、Ｏ、Ｓ、置換されていてもよいアミノ、-ＣＨ２Ｏ-、-ＯＣＨ２-、-ＣＨ２Ｓ（Ｏ）ｎ-、-Ｓ（Ｏ）ｎＣＨ２-、-Ｓ（Ｏ）ｎ-、-ＣＨ２Ｎ（Ｒｃ）-、-Ｎ（Ｒｃ）ＣＨ２-、-Ｎ（Ｒｃ）-、-ＣＯ-、-Ｃ（＝ＮＯＲａ）-、-ＣＯＮ（Ｒａ）-、-Ｎ（Ｒｃ）ＣＯ-、-Ｎ（Ｒｃ）ＣＯＮ（Ｒｃ）ＣＯ-、-ＣＯＮ（Ｒｃ）ＣＯＮＨ-、-Ｎ（Ｒｃ）ＣＯＮ（Ｒｂ）-、-Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒｃ）-、-Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒａ）ＣＯＮ（Ｒｃ）-、-Ｎ（Ｒｃ）ＣＯＮ（Ｒａ）Ｓ（Ｏ）２-、-Ｎ（Ｒｃ）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒａ）-および−Ｎ（Ｒｃ）Ｓ（Ｏ）２-からなる群から選択され；
ｍは０〜１０の整数である、請求項１〜２９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３１】
Ｒ２またはＲ４がヒドロキサメート基-Ｌ１-Ｒ５-Ｌ２-Ｒ６-Ｌ３-ＣＯＮ（Ｒａ）ＯＲｂを含有する、請求項１〜３０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３２】
Ｒ２またはＲ３がヒドロキサメート基を含有する場合にＲ１がモルホリンではない、請求項１〜３１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３３】
Ｒ２またはＲ３がヒドロキサメート基を含有する場合にＲ１が置換アミノである、請求項１〜３１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３４】
置換アミノがモルホリンである、請求項３３に記載の化合物。
【請求項３５】
以下の式（Ｉｂ）を有し：
【化８】
2017510628.tif 000129
Ｒ１は置換されていてもよいフェニル、置換されていてもよいピリミジニル、置換されていてもよいピリジニル、置換されていてもよいピラジニル、置換されていてもよいチオモルホリノまたは置換されていてもよいモルホリノであり；
Ｒ２はＣｌ、Ｂｒ、Ｆ、ＮＨ２、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、置換されていてもよいピロリジニル、置換されていてもよいピペリジニル、置換されていてもよいモルホリノ、置換されていてもよいフェニル、置換されていてもよいピリジニル、置換されていてもよいピリミジニル、置換されていてもよいピラジニル、または置換されていてもよいベンゾイミダゾリルであり；
Ｒ３は結合、水素、ＮＨ２、ジエチルアミノ、置換されていてもよいピロリジニルまたは置換されていてもよいピペリジニルであり；
Ｒ４は結合、エチル、１-プロピル、２-プロピル、２-ブチル、３-ペンチルまたはシクロペンチルである、請求項１〜３１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３６】
以下；
【表１−１】
2017510628.tif 000130
【表１−２】
2017510628.tif 000131
【表１−３】
2017510628.tif 000132
【表１−４】
2017510628.tif 000133
【表１−５】
2017510628.tif 000134
【表１−６】
2017510628.tif 000135
【表１−７】
2017510628.tif 000136
【表１−８】
2017510628.tif 000137
【表１−９】
2017510628.tif 000138
【表１−１０】
2017510628.tif 000139
【表１−１１】
2017510628.tif 000140
【表１−１２】
2017510628.tif 000141
【表１−１３】
2017510628.tif 000142
【表１−１４】
2017510628.tif 000143
【表１−１５】
2017510628.tif 000144
【表１−１６】
2017510628.tif 000145
【表１−１７】
2017510628.tif 000146
【表１−１８】
2017510628.tif 000147
【表１−１９】
2017510628.tif 000148
【表１−２０】
2017510628.tif 000149
【表１−２１】
2017510628.tif 000150
【表１−２２】
2017510628.tif 000151
【表１−２３】
2017510628.tif 000152
【表１−２４】
2017510628.tif 000153
【表１−２５】
2017510628.tif 000154
【表１−２６】
2017510628.tif 000155
【表１−２７】
2017510628.tif 000156
【表１−２８】
2017510628.tif 000157
【表１−２９】
2017510628.tif 000158
【表１−３０】
2017510628.tif 000159
からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物、またはその薬剤的に許容できる塩もしくはプロドラッグ。
【請求項３７】
以下；
【表２−１】
2017510628.tif 000160
【表２−２】
2017510628.tif 000161
【表２−３】
2017510628.tif 000162
【表２−４】
2017510628.tif 000163
【表２−５】
2017510628.tif 000164
【表２−６】
2017510628.tif 000165
【表２−７】
2017510628.tif 000166
【表２−８】
2017510628.tif 000167
【表２−９】
2017510628.tif 000168
【表２−１０】
2017510628.tif 000169
【表２−１１】
2017510628.tif 000170
【表２−１２】
2017510628.tif 000171
【表２−１３】
2017510628.tif 000172
【表２−１４】
2017510628.tif 000173
【表２−１５】
2017510628.tif 000174
【表２−１６】
2017510628.tif 000175
【表２−１７】
2017510628.tif 000176
【表２−１８】
2017510628.tif 000177
【表２−１９】
2017510628.tif 000178
【表２−２０】
2017510628.tif 000179
【表２−２１】
2017510628.tif 000180
【表２−２２】
2017510628.tif 000181
【表２−２３】
2017510628.tif 000182
【表２−２４】
2017510628.tif 000183
【表２−２５】
2017510628.tif 000184
からなる群から選択される、請求項３１に記載の化合物、またはその薬剤的に許容できる塩もしくはプロドラッグ。
【請求項３８】
以下；
【表３−１】
2017510628.tif 000185
【表３−２】
2017510628.tif 000186
【表３−３】
2017510628.tif 000187
【表３−４】
2017510628.tif 000188
【表３−５】
2017510628.tif 000189
【表３−６】
2017510628.tif 000190
からなる群から選択される、請求項３２または３３に記載の化合物、またはその薬剤的に許容できる塩もしくはプロドラッグ。
【請求項３９】
酵素阻害剤である、請求項１〜３８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項４０】
ヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣ）阻害剤である、請求項３９に記載の化合物。
【請求項４１】
ホスファチジルイノシチド-３-キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤である、請求項３９に記載の化合物。
【請求項４２】
ＰＩ３Ｋ-ＡＫＴ-ｍＴＯＲ経路の阻害剤である、請求項１〜３８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項４３】
多標的阻害剤である、請求項１〜３８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項４４】
ＨＤＡＣおよびＰＩ３Ｋを同時に阻害する、請求項４３に記載の化合物。
【請求項４５】
請求項１〜３８のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬剤的に許容できる形態もしくはプロドラッグ、および薬剤的に許容できる賦形剤を含む、医薬組成物。
【請求項４６】
請求項１〜３８のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬剤的に許容できる形態もしくはプロドラッグを細胞に投与することを含む、細胞におけるＨＤＡＣおよび／またはＰＩ３Ｋを阻害する方法。
【請求項４７】
ＨＤＡＣおよび／またはＰＩ３Ｋの阻害が細胞増殖の阻害をさらに含む、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
ＨＤＡＣおよび／またはＰＩ３Ｋの阻害が細胞を再プログラムして多能性幹細胞（ｉＰＳ細胞）を誘導することをさらに含む、請求項４６に記載の方法。
【請求項４９】
細胞がインビトロである、請求項４６または４７に記載の方法。
【請求項５０】
細胞が細胞株由来である、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
細胞株が不死化細胞株、遺伝子改変細胞株または初代細胞株である、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
細胞株が、ＭＶ４-１１、ＭＯＬＴ-４、ＰＣ-３、ＭＣＦ-７、ＳＵＰ-Ｂ１５、ＨＬ-６０、Ｋ-５６２、ＲＰＭＩ-８２２６、Ｄａｕｄｉ、Ｒａｊｉ、Ｒａｍｏｓ、Ｐｆｅｉｆｆｅｒ、Ａ４３１、ＡＣＨＮ、Ａ５４９、ＣＯＬＯ２０５、ＨＣＴ１１６、ＨＥＬ９２．１．７、ＮＣＩ-Ｈ５２２、Ａ３７５、ＮＣＩ-Ｈ４６０、ＢｘＰＣ-３、ＰＡＮＣ-１、ＳＫ-ＯＶ-３，Ｕ８７ＭＧ、Ｕ１３８ＭＧ、ＨｐｅＧ２、ＳＫ-ＨＥＰ１、ＨｕＨ-７、ＨＣＣＬＭ３、ＰＬＣ／ＰＲＦ／５、ＨｅＬａ、ＢＴ４７４、ＭＤＡ-ＭＢ-２３１、ＭＤＡ-ＭＢ-４３６およびＭＤＡ-ＭＢ-４６８からなる群から選択される、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
細胞が対象の組織由来である、請求項４６または４７に記載の方法。
【請求項５４】
細胞が対象内にある、請求項４６または４７に記載の方法。
【請求項５５】
治療を必要としている対象に、請求項１〜３８のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬剤的に許容できる形態もしくはプロドラッグ、または請求項４５に記載の組成物を投与することを含む、ＨＤＡＣ関連障害またはＰＩ３Ｋ関連障害を治療する方法。
【請求項５６】
治療を必要としている対象に、請求項１〜３８のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬剤的に許容できる形態もしくはプロドラッグ、または請求項４５に記載の組成物を投与することを含む、ＨＤＡＣ関連障害およびＰＩ３Ｋ関連障害を治療する方法。
【請求項５７】
障害が、がん、血管形成障害もしくは病的血管新生、線維症、炎症性疾患、喘息、神経障害、神経変性障害、筋変性疾患、自己免疫障害、血液の障害または骨髄の障害である、請求項５５または５６に記載の方法。
【請求項５８】
障害が、リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、もしくはホジキンリンパ腫、子宮頸がん、卵巣がん、乳がん、肺がん、前立腺がん、結腸直腸がん、肉腫、肝細胞癌、白血病もしくは骨髄腫、網膜血管新生疾患、肝線維症、腎線維症、アルツハイマー病もしくはハンチントン病、脊髄性筋萎縮症、ＨＩＶ／エイズ、真性赤血球増加症もしくは本能性血小板血症または骨髄線維症である、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
対象において追加の治療薬を投与する工程をさらに含む、請求項５５〜５７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６０】
治療を必要としている対象に、請求項１〜３８のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬剤的に許容できる形態もしくはプロドラッグ、または請求項４５に記載の組成物を投与することを含む、幹細胞の自己複製または分化を調節する方法。
【請求項６１】
治療で使用するための、請求項１〜３７のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬剤的形態もしくはプロドラッグ、または請求項４５に記載の組成物。
【請求項６２】
ＨＤＡＣ関連障害またはＰＩ３Ｋ関連障害の治療のための薬剤の製造における、請求項１〜３８のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬剤的に許容できる形態もしくはプロドラッグ、または請求項４５に記載の組成物の使用。
【請求項６３】
ＨＤＡＣ関連障害およびＰＩ３Ｋ関連障害の治療のための薬剤の製造における、請求項１〜３８のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬剤的に許容できる形態もしくはプ
ロドラッグ、または請求項４５に記載の組成物の使用。
【請求項６４】
障害が、がん、血管形成障害もしくは病的血管新生、線維症、炎症性疾患、喘息、神経障害、神経変性障害、筋変性疾患、自己免疫障害、血液の障害または骨髄の障害である、請求項６２または６３に記載の使用。
【請求項６５】
障害が、リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、もしくはホジキンリンパ腫、子宮頸がん、卵巣がん、乳がん、肺がん、前立腺がん、結腸直腸がん、肉腫、肝細胞癌、白血病もしくは骨髄腫、網膜血管新生疾患、肝臓および腎臓の線維症、アルツハイマー病もしくはハンチントン病、脊髄性筋萎縮症、ＨＩＶ／エイズ、真性赤血球増加症もしくは本態性血小板血症または骨髄線維症である、請求項６４に記載の使用。
【請求項６６】
薬剤が追加の治療薬と共に投与され、前記薬剤が追加の治療薬と組み合わせて、またはそれと変更（alteration）して投与される、請求項６２〜６５のいずれか一項に記載の使用。
【請求項６７】
幹細胞の自己複製または分化を調節するための薬剤の製造における、請求項１〜３８のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬剤的に許容できる形態もしくはプロドラッグ、または請求項４５に記載の組成物の使用。
【請求項６８】
式（Ｉ）の化合物を合成するための方法であって；
（ａ）  ハロゲン二置換プリン系化合物またはハロゲン二置換縮合ピリミジン系化合物を準備する工程；
（ｂ）  工程（ａ）の化合物におけるアミン（-ＮＨ-基）をアルキル化する工程；
（ｃ）  工程（ｂ）の中間化合物のハロゲン化物原子を、置換されていてもよいボロン酸エステルまたは置換されていてもよいアミンと選択的または連続的に置換して、それぞれ置換芳香族または置換アミンを形成させる工程；
（ｄ）  工程（ｃ）の中間化合物を、-Ｌ１-Ｒ５-Ｌ２-Ｒ６-Ｌ３-ＣＯＮ（Ｒａ）ＯＲｂの構造を有する保護ヒドロキサム酸基またはエステル（ヒドロキサム酸前駆物質）と選択的に共役させる工程；および
（ｅ）反応条件下で、段階（ｄ）の中間化合物の保護ヒドロキサメートまたはエステルをヒドロキサム酸に変換して、式（Ｉ）の化合物を形成させる工程
を含む、前記方法。
【請求項６９】
式（Ｉ）の化合物を合成するための方法であって；
（ａ）  ハロゲン二置換プリン系化合物またはハロゲン二置換縮合ピリミジン系化合物を準備する工程；
（ｂ）前記化合物のハロゲン化物原子のうちの１つを、置換されていてもよいボロン酸エステルまたは置換されていてもよいアミンと選択的に置換して、それぞれ置換芳香族または置換アミンを形成させる工程；
（ｃ）  工程（ｂ）の中間化合物におけるアミン（-ＮＨ-基）をアルキル化する工程；
（ｄ）  工程（ｃ）の中間化合物の残りのハロゲン化物原子を、置換されていてもよいボロン酸エステルまたは置換されていてもよいアミンと選択的に置換して、それぞれ置換芳香族または置換アミンを形成させる工程；
（ｅ）  工程（ｄ）の中間化合物を、-Ｌ１-Ｒ５-Ｌ２-Ｒ６-Ｌ３-ＣＯＮ（Ｒａ）ＯＲｂの構造を有する保護ヒドロキサム酸基またはエステル（ヒドロキサム酸前駆物質）と選択的に共役させる工程；および
（ｆ）反応条件下で、工程（ｅ）の中間化合物の保護ヒドロキサメートまたはエステルをヒドロキサム酸に変換して、式（Ｉ）の化合物を形成させる工程
を含む、前記方法。
【請求項７０】
式（Ｉ）の化合物を合成するための方法であって；
【化９】
2017510628.tif 000191
（ａ）  ハロゲン二置換プリン系化合物またはハロゲン二置換縮合ピリミジン系化合物を準備する工程；
（ｂ）  工程（ａ）の化合物におけるアミンをアルキル化する工程；
（ｃ）  工程（ｂ）の中間化合物のハロゲン化物原子を、置換されていてもよいボロン酸エステルまたは置換されていてもよいアミンと選択的または連続的に置換して、それぞれ置換芳香族または置換アミンを形成させる工程；
（ｄ）  工程（ｃ）の中間化合物において、式（Ｉ）のＹ位置に対応する炭素原子をアルキル化する工程；
（ｅ）  工程（ｄ）の中間化合物を、-Ｌ１-Ｒ５-Ｌ２-Ｒ６-Ｌ３-ＣＯＮ（Ｒａ）ＯＲｂの構造を有する保護ヒドロキサム酸基またはエステル（ヒドロキサム酸エステル前駆物質）と選択的に共役させる工程；および
（ｆ）反応条件下で、工程（ｅ）の中間化合物の保護ヒドロキサメートまたはエステルをヒドロキサム酸に変換して、式（Ｉ）の化合物を形成させる工程
を含む、前記方法。
【請求項７１】
式（Ｉ）の化合物を合成するための方法であって；
（ａ）  ハロゲン二置換プリン系化合物またはハロゲン二置換縮合ピリミジン系化合物を準備する工程；
（ｂ）  前記化合物のハロゲン化物原子のうちの１つを、置換されていてもよいボロン酸エステルまたは置換されていてもよいアミンと選択的に置換して、それぞれ置換芳香族または置換アミンを形成させる工程；
（ｃ）  工程（ｂ）の中間化合物におけるアミン（-ＮＨ-基）をアルキル化する工程；
（ｄ）  工程（ｃ）の中間化合物において、式（Ｉ）のＹ位置に対応する炭素原子をアルキル化する工程；
（ｅ）  工程（ｄ）の中間化合物の残りのハロゲン化物原子を、置換されていてもよいボロン酸エステルまたは置換されていてもよいアミンと選択的に置換して、それぞれ置換芳香族または置換アミンを形成させる工程；
（ｆ）  工程（ｅ）の化合物を、-Ｌ１-Ｒ５-Ｌ２-Ｒ６-Ｌ３-ＣＯＮ（Ｒａ）ＯＲｂの構造を有する保護ヒドロキサム酸基またはエステル（ヒドロキサム酸前駆物質）と選択的に共役させる工程；および
（ｇ）  反応条件下で、工程（ｆ）の中間化合物の保護ヒドロキサメートまたはエステルをヒドロキサム酸に変換して、式（Ｉ）の化合物を形成させる工程
を含む、前記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は概して、ヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣ）およびキナーゼの阻害剤である、縮合ピリミジン系ヒドロキサメート化合物に関する。より具体的には、本発明は、ヒドロキサメート置換プリンもしくは５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン誘導体、それらの調製法、これらの化合物を含有する医薬組成物、並びに、ヒストン脱アセチル化酵素、非ヒストン脱アセチル化酵素およびキナーゼの活性を有する酵素を含む、それらに関する、もしくはそれらと関連した、障害／状態／疾患の治療におけるこれらの化合物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
有効な標的の２つ以上の証明済みの経路に対して作用することにより、治療の可能性または有効性を増加させることができる、複合型薬剤または多標的薬剤の設計、合成および開発には、普遍的な関心がある。例えば、がん細胞の生存は多くの重要な経路に依存しているため、１つの経路の遮断または阻害では、がん細胞を殺傷する、またはがん細胞の増殖を阻害する可能性がほんの僅かである場合がある。がん細胞は、遮断された機能または経路を埋合わせまたは迂回することができ、それらの機能と協力することもできる。この原理は検証済みであり、例えば、薬剤の組合せ、例えば、ヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣ）阻害剤のボリノスタットおよび臨床試験中の種々の既知の薬剤、ＨＩＶ治療のための混合薬剤、並びに抗菌治療のためのオーグメンチン（アモキシシリンとクラブラン酸の混合物）が一緒に投与される、がん治療のための多剤併用化学療法において、既に利用されている。また、複数キナーゼ阻害剤であるスニチニブおよびソラフェニブ等、好結果の多標的薬剤が市販されている。併用療法および多標的薬剤は共に、疾患増悪に関与する複数の標的、経路またはネットワークを調節または阻害することにより、有効性を強化する、および／または薬剤耐性を克服することを目的とする。併用療法または多剤療法は２つ以上の薬剤を使用するため、その利点は、併用に利用可能ないくつかの単剤が存在すること、並びに、研究および開発のための、種々の薬剤併用試験の選択肢が存在すること、にある。しかし、併用療法には欠点がある。例えば、単剤は通常、単剤療法のためだけに開発されたものであり、必ずしも併用療法用に最適化されているわけではない。さらに、全ての単剤が、併用療法に適切である、または併用療法に適合している、というわけでもない。併用された２つ以上の薬剤の投与レジーム（dosage regime）の規定は、臨床背景における、投与量レベル、投与順序および潜在的な薬物−薬物相互作用の考慮を要求する、非常に複雑なプロセスである。さらに、複数の薬剤の使用が必要であるというコストに加え、併用療法はしばしば、望まれない有害作用または危険な薬物−薬物相互作用をもたらす可能性がある。例えば、エベロリムスは、進行性肝細胞癌（ＨＣＣ）の治療のための第Ｉ相臨床試験においてソラフェニブと併用されたが、有害事象のために、その用量を生物学的に有効な濃度まで増やすことができなかった。
【０００３】
対照的に、多標的薬剤分子は、単剤として、少なくとも２つの標的に作用する。多標的薬剤の利点は、単剤によって、複数の（キナーゼ）標的の調節が同時に達成可能であるということである。しかしながら、これが可能な薬剤の数は未だに限定されている。多標的薬剤は、典型的には、両方の親薬剤の骨格の化学的特徴を含むため、通常、薬剤の分子量またはサイズはより大きくなり、このことはしばしば、薬剤が毒性または薬物代謝による充分な暴露を受けないことに繋がる。親薬剤の２つの骨格に基づいて新たな分子を設計することは、容易なことではない。通常、所望の有効性は得られず、あるいは、新たな望まれない副作用がある。そのため、新たな多標的薬剤を得るために２つの骨格をどのように組み合わせるかは、予測不可能である。このことから、望まれない副作用を持たない良好な活性の確認は、驚くべき発見である。
【０００４】
従って、上記の不都合のうちの一つまたは複数を克服する、または少なくとも改善する、化合物の提供が必要とされている。前記化合物を含む医薬組成物、前記化合物を用いる疾患を治療するための方法、および前記化合物を合成するための方法の提供も必要とされている。
【発明の概要】
【０００５】
ヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣ）およびホスファチジルイノシチド３-キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）-ＡＫＴ-ラパマイシン（ｍＴＯＲ）経路の哺乳類標的を標的とするための一連の縮合ピリミジン系小分子が、設計および合成された。これらの分子は、ヒストン脱アセチル化酵素および他の脱アセチル化酵素活性を阻害するための亜鉛結合基（ヒドロキサム酸）、並びに、ＰＩ３Ｋ-ＡＫＴ-ｍＴＯＲ経路を調節するための置換基で飾られた縮合ピリミジンコアを含有する。各々の分子は各標的に対して独特な作用強度プロファイルを有しており、この系列は全体として、種々の指標または適用のために各標的に対して必要とされる広範な作用強度の可能な組合せの大部分を網羅している。これらの分子は、がんの治療および腫瘍学以外の応用のための多標的薬剤として作用する。
【０００６】
第一の態様において、式（Ｉ）の化合物、またはその薬剤的に許容できる形態もしくはプロドラッグが提供され；
【０００７】
【化１】
2017510628.tif 000003
式中、Ｘ、ＹおよびＺは独立して、Ｎ、ＣＨＲ３またはＣＲ３から選択され、式中、Ｘ、ＹまたはＺのうちの少なくとも１つはＮであり；
【化２】
2017510628.tif 000004
は結合価が許す通りに単結合または二重結合であり；Ｒ１およびＲ２は独立して、結合、ハロゲン、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアミノ、置換されていてもよいアルキルオキシ、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいヘテロシクロアルキル、置換されていてもよいアリールおよび置換されていてもよいヘテロアリールからなる群から選択され；Ｒ３およびＲ４は独立して、結合、水素、ハロゲン、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアミノ、置換されていてもよいアルキルオキシ、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいヘテロシクロアルキル、置換されていてもよいアリールおよび置換されていてもよいヘテロアリールからなる群から選択され；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３またはＲ４のうちの少なくとも１つはさらに独立して、ヒドロキサメート基-Ｌ１-Ｒ５-Ｌ２-Ｒ６-Ｌ３-ＣＯＮ（Ｒａ）ＯＲｂによって置換されており、式中；ＲａおよびＲｂは独立して、結合、水素、置換されていても
よいアルキル、置換されていてもよいアシルおよび置換されていてもよいアミノ酸残基からなる群から選択され；Ｌ１、Ｌ２およびＬ３は独立して、結合、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアルケニルおよび置換されていてもよいアルキニルからなる群から選択され；Ｒ５およびＲ６は独立して、結合、Ｏ、Ｓ、ＮＲｃ、Ｓ（Ｏ）ｎ、置換されていてもよいアミド、置換されていてもよい尿素、置換されていてもよいカルボニル尿素、置換されていてもよいチオ尿素、置換されていてもよいスルホンアミド、置換されていてもよいアミノスルホンアミド、置換されていてもよいスルホニル尿素、置換されていてもよいオキシム、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいヘテロシクロアルキル、置換されていてもよいアリールおよび置換されていてもよいヘテロアリールからなる群から選択され；式中；Ｒｃは独立して、結合、水素、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアルケニル、置換されていてもよいアルキニルおよび置換されていてもよいアシルからなる群から選択され；ｎは０〜２の整数である。
【０００８】
第二の態様において、上記定義の化合物、またはその薬剤的に許容できる形態もしくはプロドラッグ、および薬剤的に許容できる賦形剤を含む、医薬組成物が提供される。
【０００９】
本開示のさらなる実施形態において、脱アセチル化酵素、および／または脂質キナーゼ／プロテインキナーゼもしくはその断片もしくは複合体もしくはその機能的等価物、およびＰＩ３ＫもしくはＡｋｔキナーゼもしくはｍＴＯＲキナーゼもしくはその断片もしくは複合体もしくはその機能的等価物からなる群から選択されるキナーゼを阻害する方法が開示され、前記方法は、プロテインキナーゼ、またはその断片もしくは複合体もしくはその機能的等価物、および／またはその補助因子を、有効量の上記定義の化合物に暴露することを含む。
【００１０】
いくつかの実施形態では、脱アセチル化酵素は、ヒストン脱アセチル化酵素またはその断片もしくは複合体またはその機能的等価物である。いくつかの実施形態では、ヒストン脱アセチル化酵素またはその断片もしくは複合体は、ＨＤＡＣ１もしくはＨＤＡＣ２もしくはＨＤＡＣ３もしくはＨＤＡＣ６もしくはＨＤＡＣ８またはその断片、またはその複合体またはその機能的複合体である。いくつかの実施形態では、ＨＤＡＣは、ＨＤＡＣ１もしくはＨＤＡＣ６  その断片もしくは複合体またはその機能的複合体である。
【００１１】
いくつかの実施形態では、脂質キナーゼ／プロテインキナーゼは、ＰＩ３Ｋキナーゼまたはその断片またはその複合体またはその機能的複合体である。いくつかの実施形態では、ＰＩ３Ｋキナーゼまたはその断片またはその複合体またはその機能的複合体は、クラスＩ  ＰＩ３Ｋまたはその断片またはその複合体またはその機能的複合体である。
【００１２】
いくつかの実施形態では、プロテインキナーゼは、セリン／スレオニンプロテインキナーゼもしくは脂質キナーゼまたはその断片または複合体またはその機能的等価物である。いくつかの実施形態では、セリン／スレオニンプロテインキナーゼまたはその断片もしくは複合体は、ｍＴＯＲプロテインキナーゼまたはその断片、またはその複合体またはその機能的複合体である。いくつかの実施形態では、セリン／スレオニンプロテインキナーゼは、ｍＴＯＲＣ１またはその断片もしくは複合体またはその機能的等価物である。
【００１３】
前記化合物は、ヒストン脱アセチル化酵素および他の脱アセチル化酵素活性を阻害するための亜鉛結合基（ヒドロキサム酸）、並びに、ＰＩ３Ｋ-ＡＫＴ-ｍＴＯＲ経路を調節するための置換基で飾られた縮合ピリミジンコアを含有し得ることが好ましい。前記化合物は、同時にヒストン脱アセチル化酵素および他の脱アセチル化酵素活性を阻害し、ＰＩ３Ｋ-ＡＫＴ-ｍＴＯＲ経路を調節し得るように、亜鉛結合基および縮合ピリミジンコアの両方を含有し得ることが好ましい。さらに、前記化合物は、亜鉛結合基を含有するため、その活性部位内に亜鉛を含有するあらゆる酵素を阻害し得ることが好ましい。さらに、前記
化合物は、ヒストン脱アセチル化酵素活性および他の脱アセチル化酵素活性の阻害剤として使用され得ることが好ましい。前記化合物は、ＰＩ３Ｋ-ＡＫＴ-ｍＴＯＲ経路に対する調節剤として使用され得る。
【００１４】
さらに、各標的（すなわち、ＨＤＡＣまたはキナーゼ）に対する成分は同一分子内に存在し、それらを互いに両立させることが好ましい。これにより、有害な薬物-薬物相互作用の問題が克服される。さらに、各標的に対する各成分は、それらが組み込まれる位置およびそれらが有し得る置換基の面から別個に最適化され得る。これにより、前記薬剤の活性および物理化学的特性の調節がもたらされ得る。さらに、前記化合物は、２つの別々の標的を標的とすることによって、相加的または相乗的に作用し得ることが好ましい。そのため、同一分子内に、各標的に対する最も強力な基を置くことが可能である。さらに、前記化合物の、物理化学的特性、構造活性相関の両立性に対する最適化および有効性試験は、複数の作用剤を試験する必要もなく、単一の作用剤に対して行われ得る。
【００１５】
さらに、前記化合物は、各分子が各標的に対して独自の作用強度プロファイル（低〜高の範囲）を有するように設計および作製されることが好ましい。このことは、種々の指標または適用のために異なる標的に対して異なる有効性を有するという目的に合わせられるように、前記化合物を微調整してもよいことを示唆している。例えば、ＨＤＡＣ／ＰＩ３Ｋ阻害の作用強度の組合せは、以下のように記載することができる：高／高、高／中、高／低、中／高、中／中、中／低、低／高、低／中および低／低。作用強度の組合せに応じて、あらゆる組合せの標的酵素が標的化され得る。さらに、種々の作用強度組合せを有する広範な化合物を有することによって、併用療法のためのコンビナトリアルライブラリーを模倣することが可能となり得る。さらに、特定のがんまたは状態に対し、最良の化合物が、インビトロおよび／またはインビボで評価されることにより、選択され得ることが好ましい。
【００１６】
さらに、前記化合物は小分子であることが好ましい。これらの小型分子は、高レベルの活性を維持しながら、毒性がより小さく、有害薬物作用の発生率がより小さいことが見出されている。
【００１７】
実際には、ハイブリッド形成またはマージ（merging）または新規設計による作用多標的分子の設計および合成は、達成が容易な課題ではない。
【００１８】
いくつかの実施形態では、一つまたは複数のプロテインキナーゼを前記化合物に暴露する方法は、前記化合物を、一つまたは複数のプロテインキナーゼを含有する哺乳動物に投与することを含む。
【００１９】
さらなる実施形態において、哺乳動物における状態を治療または予防する方法が提供され、前記方法では、セリン／スレオニンプロテインキナーゼまたはその断片もしくは複合体またはその機能的等価物およびＰＩ３Ｋキナーゼまたはその断片もしくは複合体またはその機能的等価物からなる群から選択される一つまたは複数のプロテインキナーゼの阻害によって、状態の病態または総体症状が予防、阻害または改善され、前記方法は治療有効量の上記定義の化合物の投与を含む。
【００２０】
いくつかの実施形態では、前記状態は、がん、血管形成障害もしくは病的血管新生、線維症、炎症性疾患、喘息、神経障害、神経変性障害、筋変性疾患、自己免疫障害、血液の障害または骨髄の障害である。いくつかの実施形態では、がんは、以下からなる群から選択される：骨髄増殖性疾患（特発性骨髄線維症、真性赤血球増加症、本態性血小板血症、慢性骨髄性白血病）、骨髄化生、慢性骨髄単球性白血病、急性リンパ性白血病、急性赤芽球性白血病、ホジキン病および非ホジキン病、Ｂ細胞リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞
リンパ腫、急性Ｔ細胞白血病、骨髄異形成症候群、形質細胞障害、毛様細胞性白血病、カポジ肉腫、リンパ腫等の血液のがんおよび固形腫瘍；乳癌、卵巣がん、子宮頸がん、膣および外陰部のがん、子宮内膜増殖症等の婦人科がん；結腸直腸癌、ポリープ、肝臓がん、胃がん、膵がん、胆嚢がん等の胃腸管がん；前立腺がん、腎臓および腎がん等の尿路がん；膀胱がん、尿道がん、陰茎がん；メラノーマ等の皮膚がん；グリア芽腫、神経芽細胞腫、星状細胞腫、上衣腫（ependynoma）、脳幹神経膠腫、髄芽腫、髄膜腫、星状細胞腫、乏突起膠腫等の脳腫瘍；上咽頭癌、喉頭癌等の頭頸部がん；肺癌（ＮＳＣＬＣおよびＳＣＬＣ）、中皮腫等の気道がん；網膜芽細胞腫等の眼疾患；骨肉腫、筋骨格腫瘍等の筋骨格疾患；扁平上皮癌および類線維腫。
【００２１】
さらなる実施形態では、ＨＤＡＣおよび非ヒストン脱アセチル化酵素またはその断片もしくは複合体またはその機能的等価物からなる群から選択される一つまたは複数の脱アセチル化酵素を阻害するための、上記定義の化合物の使用が提供される。
【００２２】
またさらなる実施形態では、セリン／スレオニンプロテインキナーゼまたはその断片もしくは複合体またはその機能的等価物、およびＡｋｔもしくはｍＴＯＲキナーゼまたはその断片もしくは複合体またはその機能的等価物からなる群から選択される一つまたは複数のプロテインキナーゼを阻害するための、上記定義の化合物の使用が提供される。
【００２３】
いくつかの実施形態では、前記プロテインキナーゼは、ＰＩ３Ｋキナーゼまたはその断片またはその複合体またはその機能的複合体である。いくつかの実施形態では、ＰＩ３Ｋキナーゼまたはその断片またはその複合体またはその機能的複合体は、クラスＩ  ＰＩ３Ｋまたはその断片またはその複合体またはその機能的複合体である。
【００２４】
第三の態様において、上記定義の化合物、またはその薬剤的に許容できる形態もしくはプロドラッグを細胞に投与することを含む、細胞におけるＨＤＡＣおよび／またはＰＩ３Ｋを阻害する方法が提供される。
【００２５】
いくつかの実施形態では、対象における増殖性状態を予防または治療する方法が提供され、前記方法は、治療有効量の上記定義の化合物の投与を含む。
【００２６】
第四の態様において、治療を必要としている対象に、上記定義の化合物、またはその薬剤的に許容できる形態もしくはプロドラッグ、または上記定義の組成物を投与することを含む、ＨＤＡＣ関連障害またはＰＩ３Ｋ関連障害を治療する方法が提供される。
【００２７】
第五の態様において、治療を必要としている対象に、上記定義の化合物、またはその薬剤的に許容できる形態もしくはプロドラッグ、または上記定義の組成物を投与することを含む、ＨＤＡＣ関連障害およびＰＩ３Ｋ関連障害を治療する方法が提供される。
【００２８】
第六の態様において、治療を必要としている対象に、上記定義の化合物、またはその薬剤的に許容できる形態もしくはプロドラッグ、または上記定義の組成物を投与することを含む、幹細胞の自己複製または分化を調節する方法が提供される。
【００２９】
さらなる実施形態では、動物における状態を治療するための薬剤の調製における上記定義の化合物の使用が提供され、その使用において、ＨＤＡＣおよび非ヒストン脱アセチル化酵素またはその断片もしくは複合体またはその機能的等価物からなる群から選択される一つまたは複数の脱アセチル化酵素阻害は、状態の病態または総体症状を予防、阻害または改善する。
【００３０】
さらなる実施形態では、動物における状態を治療するための薬剤の調製における上記定
義の化合物の使用が提供され、その使用において、セリン／スレオニンプロテインキナーゼまたはその断片もしくは複合体またはその機能的等価物およびＰＩ３Ｋキナーゼまたはその断片もしくは複合体またはその機能的等価物からなる群から選択される一つまたは複数のプロテインキナーゼの阻害は、状態の病態または総体症状を予防、阻害または改善する。
【００３１】
第七の態様において、ＨＤＡＣ関連障害またはＰＩ３Ｋ関連障害の治療のための薬剤の製造における、上記定義の化合物、またはその薬剤的に許容できる形態もしくはプロドラッグ、または上記定義の組成物の使用が提供される。
【００３２】
第八の態様において、ＨＤＡＣ関連障害およびＰＩ３Ｋ関連障害の治療のための薬剤の製造における、上記定義の化合物、またはその薬剤的に許容できる形態もしくはプロドラッグ、または上記定義の組成物の使用が提供される。
【００３３】
第九の態様において、幹細胞の自己複製または分化を調節するための薬剤の製造における、上記定義の化合物、またはその薬剤的に許容できる形態もしくはプロドラッグ、または上記定義の組成物の使用が提供される。
【００３４】
さらなる実施形態では、セリン／スレオニンプロテインキナーゼまたはその断片もしくは複合体またはその機能的等価物およびＰＩ３Ｋキナーゼまたはその断片もしくは複合体またはその機能的等価物からなる群から選択される一つまたは複数のプロテインキナーゼの阻害が、状態の病態または総体症状を予防、阻害または改善する、ある状態の治療における、上記定義の化合物またはその薬剤的に許容できる塩、Ｎ-オキシドもしくはプロドラッグの使用が提供される。
【００３５】
いくつかの実施形態では、プロテインキナーゼは、セリン／スレオニンプロテインキナーゼまたはその断片もしくは複合体またはその機能的等価物である。いくつかの実施形態では、セリン／スレオニンプロテインキナーゼまたはその断片もしくは複合体は、ｍＴＯＲプロテインキナーゼまたはその断片、またはその複合体またはその機能的複合体である。いくつかの実施形態では、セリン／スレオニンプロテインキナーゼは、ｍＴＯＲＣ１またはその断片もしくは複合体またはその機能的等価物である。
【００３６】
いくつかの実施形態では、前記プロテインキナーゼは、ＰＩ３Ｋキナーゼまたはその断片またはその複合体またはその機能的複合体である。いくつかの実施形態では、ＰＩ３Ｋキナーゼまたはその断片またはその複合体またはその機能的複合体は、クラスＩ  ＰＩ３Ｋまたはその断片またはその複合体またはその機能的複合体である。
【００３７】
いくつかの実施形態では、セリン／スレオニンプロテインキナーゼまたはその断片もしくは複合体は、Ａｋｔプロテインキナーゼまたはその断片、またはその複合体またはその機能的複合体である。
【００３８】
さらなる実施形態では、細胞を誘導多能性幹細胞（ｉＰＳ細胞）に再プログラムする方法が提供される。前記方法は、対象から単離された細胞への治療有効量の上記定義の化合物の投与を含む。
【００３９】
さらなる実施形態では、対象における増殖性状態を治療するための薬剤の調製における、上記定義の化合物の使用が提供される。
【００４０】
いくつかの実施形態では、前記状態は、がん、血管形成障害もしくは病的血管新生、線維症、炎症性疾患、喘息、神経障害、神経変性障害、筋変性疾患、自己免疫障害、血液の
障害または骨髄の障害である。いくつかの実施形態では、がんは、以下からなる群から選択される：骨髄増殖性疾患（特発性骨髄線維症、真性赤血球増加症、本態性血小板血症、慢性骨髄性白血病）、骨髄化生、慢性骨髄単球性白血病、急性リンパ性白血病、急性赤芽球性白血病、ホジキン病および非ホジキン病、Ｂ細胞リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、急性Ｔ細胞白血病、骨髄異形成症候群、形質細胞障害、毛様細胞性白血病、カポジ肉腫、リンパ腫等の血液のがんおよび固形腫瘍；乳癌、卵巣がん、子宮頸がん、膣および外陰部のがん、子宮内膜増殖症等の婦人科がん；結腸直腸癌、ポリープ、肝臓がん、胃がん、膵がん、胆嚢がん等の胃腸管がん；前立腺がん、腎臓および腎がん等の尿路がん；膀胱がん、尿道がん、陰茎がん；メラノーマ等の皮膚がん；グリア芽腫、神経芽細胞腫、星状細胞腫、上衣腫（ependynoma）、脳幹神経膠腫、髄芽腫、髄膜腫、星状細胞腫、乏突起膠腫等の脳腫瘍；上咽頭癌、喉頭癌等の頭頸部がん；肺癌（ＮＳＣＬＣおよびＳＣＬＣ）、中皮腫等の気道がん；網膜芽細胞腫等の眼疾患；骨肉腫、筋骨格腫瘍等の筋骨格疾患；扁平上皮癌および類線維腫。
【００４１】
好都合なことに、上記定義の化合物は、ＨＤＡＣ酵素およびＰＩ３Ｋキナーゼに対する阻害活性、並びに、種々のヒト腫瘍細胞株に対する抗増殖活性を示した。上記定義の化合物の大部分が、良薬らしい特性、すなわち、インビトロにおける代謝的安定性、溶解性および望ましい親油性を示した。さらに好都合なことに、前記化合物は、腫瘍細胞における複数の標的、すなわち、ＨＤＡＣの阻害によるヒストンおよびα-チューブリンの高アセチル化、に対する活性；ＰＩ３Ｋ-ＡＫＴ-ｍＴＯＲ経路：リン光体-Ａｋｔ（Ｓｅｒ４７３）の減少またはｍＴＯＲＣ２の活性阻害、並びに、ホスホ-Ｐ７０Ｓ６Ｋ（Ｔｈｒ３８９）／ホスホ-Ｐ８５Ｓ６Ｋ（Ｔｈｒ４１２）、ホスホ-Ｓ６（Ｓｅｒ２４０／２４４）およびホスホ-４Ｅ-ＢＰ１（Ｔｈｒ３７／４６）の減少またはｍＴＯＣＲ１の活性の阻害も示した。さらに好都合なことに、これらの化合物は、ＰＩ３ｋ阻害剤ＧＤＣ-０９４１よりもずっとより効率的に、ＰＣ-３細胞およびＭＶ-４-１１細胞における細胞アポトーシス、ＭＶ-４-１１細胞における細胞死も誘導した。
【００４２】
好都合なことに、これらの化合物はまた、腫瘍モデルにおいて生物学的薬物標的を調節した。前記化合物は、担癌マウスに経口的に投与された場合にＰＣ-３前立腺腫瘍におけるヒストン高アセチル化を誘導し、異なる投与経路を介してはＭＶ４-１１異種移植片腫瘍におけるヒストン高アセチル化を誘導した。前記化合物はまた、ＮＣｒヌードマウスＨｅｐＧ２異種移植モデルおよびＣＢ１７  ｓｃｉｄマウスＨｅｐＧ２異種移植モデル、並びにＨｕＨ-７  ＨＣＣ異種移植モデル等のＨＣＣモデルにおいて、優れた抗腫瘍活性を示した。前記化合物はまた、４Ｔ１マウス転移性乳癌モデル、ＮＣＩ-Ｈ４６０肺がん異種移植モデルおよびＭＶ４-１１白血病異種移植モデルにおいて経口的に投与された場合に、いくつかの異種移植モデルにおいて広範な抗腫瘍活性を有することが示された。
【００４３】
本開示はさらに、式（Ｉ）の化合物およびその前駆物質を合成するための方法に関する。
【００４４】
第十の態様において、以下の工程を含む、式（Ｉ）の化合物を合成するための方法が提供される；（ａ）ハロゲン二置換プリン系化合物またはハロゲン二置換縮合ピリミジン系化合物を準備する工程；（ｂ）工程（ａ）の化合物におけるアミン（-ＮＨ-基）をアルキル化する工程；（ｃ）工程（ｂ）の中間化合物のハロゲン化物原子を、置換されていてもよいボロン酸エステルまたは置換されていてもよいアミンと選択的または連続的に置換して、それぞれ置換芳香族または置換アミンを形成させる工程；（ｄ）工程（ｃ）の中間化合物を、-Ｌ１-Ｒ５-Ｌ２-Ｒ６-Ｌ３-ＣＯＮ（Ｒａ）ＯＲｂの構造を有する保護ヒドロキサム酸基またはエステル（ヒドロキサム酸前駆物質）と選択的に共役させる工程；並びに、（ｅ）反応条件下で、工程（ｄ）の中間化合物の保護ヒドロキサメートまたはエステルをヒドロキサム酸に変換して、式（Ｉ）の化合物を形成させる工程。
【００４５】
第十一の態様において、以下の工程を含む、式（Ｉ）の化合物を合成するための方法が提供される；（ａ）ハロゲン二置換プリン系化合物またはハロゲン二置換縮合ピリミジン系化合物を準備する工程；（ｂ）前記化合物のハロゲン化物原子のうちの１つを、置換されていてもよいボロン酸エステルまたは置換されていてもよいアミンと選択的に置換して、それぞれ置換芳香族または置換アミンを形成させる工程；（ｃ）工程（ｂ）の中間化合物におけるアミン（-ＮＨ-基）をアルキル化する工程；（ｄ）工程（ｃ）の中間化合物の残りのハロゲン化物原子を、置換されていてもよいボロン酸エステルまたは置換されていてもよいアミンと選択的に置換して、それぞれ置換芳香族または置換アミンを形成させる工程；（ｅ）工程（ｄ）の中間化合物を、-Ｌ１-Ｒ５-Ｌ２-Ｒ６-Ｌ３-ＣＯＮ（Ｒａ）ＯＲｂの構造を有する保護ヒドロキサム酸基またはエステル（ヒドロキサム酸前駆物質）と選択的に共役させる工程；並びに（ｆ）反応条件下で、工程（ｅ）の中間化合物の保護ヒドロキサメートまたはエステルをヒドロキサム酸に変換して、式（Ｉ）の化合物を形成させる工程。
【００４６】
第十二の態様において、以下の工程を含む、式（Ｉ）の化合物を合成するための方法が提供される；
【００４７】
【化３】
2017510628.tif 000005
（ａ）ハロゲン二置換プリン系化合物またはハロゲン二置換縮合ピリミジン系化合物を準備する工程；（ｂ）工程（ａ）の化合物におけるアミンをアルキル化する工程；（ｃ）工程（ｂ）の中間化合物のハロゲン化物原子を、置換されていてもよいボロン酸エステルまたは置換されていてもよいアミンと選択的または連続的に置換して、それぞれ置換芳香族または置換アミンを形成させる工程；（ｄ）工程（ｃ）の中間化合物において、式（Ｉ）のＹ位置に対応する炭素原子をアルキル化する工程；（ｅ）工程（ｄ）の中間化合物を、-Ｌ１-Ｒ５-Ｌ２-Ｒ６-Ｌ３-ＣＯＮ（Ｒａ）ＯＲｂの構造を有する保護ヒドロキサム酸基またはエステル（ヒドロキサム酸エステル前駆物質）と選択的に共役させる工程；並びに（ｆ）反応条件下で、工程（ｅ）の中間化合物の保護ヒドロキサメートまたはエステルをヒドロキサム酸に変換して、式（Ｉ）の化合物を形成させる工程。
【００４８】
第十三の態様において、以下の工程を含む、式（Ｉ）の化合物を合成するための方法が提供される；（ａ）ハロゲン二置換プリン系化合物またはハロゲン二置換縮合ピリミジン系化合物を準備する工程；（ｂ）前記化合物のハロゲン化物原子のうちの１つを、置換されていてもよいボロン酸エステルまたは置換されていてもよいアミンと選択的に置換して、それぞれ置換芳香族または置換アミンを形成させる工程；（ｃ）工程（ｂ）の中間化合物におけるアミン（-ＮＨ-基）をアルキル化する工程；（ｄ）工程（ｃ）の中間化合物において、式（Ｉ）のＹ位置に対応する炭素原子をアルキル化する工程；（ｅ）工程（ｄ）の中間化合物の残りのハロゲン化物原子を、置換されていてもよいボロン酸エステルまた
は置換されていてもよいアミンと選択的に置換して、それぞれ置換芳香族または置換アミンを形成させる工程；（ｆ）工程（ｅ）の化合物を、-Ｌ１-Ｒ５-Ｌ２-Ｒ６-Ｌ３-ＣＯＮ（Ｒａ）ＯＲｂの構造を有する保護ヒドロキサム酸基またはエステル（ヒドロキサム酸前駆物質）と選択的に共役させる工程；並びに（ｇ）反応条件下で、工程（ｆ）の中間化合物の保護ヒドロキサメートまたはエステルをヒドロキサム酸に変換して、式（Ｉ）の化合物を形成させる工程。
【００４９】
本教示のこれらおよび他の特徴は本明細書に記載される。
【００５０】
定義
本明細書では、当業者（skilled addressee）に周知のいくつかの用語が使用されているが、明確さのためにいくつかの用語を定義する。本明細書で使用される以下の単語および用語は、指示された意味を有するものとする。
【００５１】
以下のいくつかの置換基の定義には、「基は末端基または架橋基であり得る」という記述がある。これは、前記用語の使用が、基が分子の２つの他の部分の間のリンカーである状況、および基が末端部分である状況を包含することを目的としていることを示すことを目的としている。一例として用語アルキルを用いると、いくつかの刊行物は用語「アルキレン」を架橋基として使用し、そのため、これらの他の刊行物では、用語「アルキル」（末端基）と用語「アルキレン」（架橋基）との区別が存在する。本出願ではこのような区別は無く、大部分の基は架橋基であっても末端基であってもよい。
【００５２】
「アシル」は、Ｒ-Ｃ（＝Ｏ）-基を意味し、式中、Ｒ基は、本明細書で定義される、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいヘテロシクロアルキル、置換されていてもよいアリールまたは置換されていてもよいヘテロアリール基であり得る。アシルの例としては、アセチル、ベンゾイルおよびアミノ酸由来アミノアシルが挙げられる。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、カルボニル炭素を介して分子の残部に結合する。
【００５３】
「アシルアミノ」は、Ｒ-Ｃ（＝Ｏ）-ＮＨ-基を意味し、式中Ｒ基は、本明細書で定義される、アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル；アリールまたはヘテロアリール基であり得る。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、窒素原子を介して分子の残部に結合する。
【００５４】
「アルケニル」は、基または基の一部として、少なくとも１個の炭素炭素二重結合を含有し、直鎖内に２〜１２個の炭素原子、より好ましくは２〜１０個の炭素原子、最も好ましくは２〜６個の炭素原子を有することが好ましい、直鎖状であっても分岐状であってもよい、脂肪族炭化水素基を示す。前記基は直鎖内に複数の二重結合を含有していてもよく、各々についての配向性は独立してＥまたはＺである。アルケニル基の例としては、限定はされないが、エテニル、プロペニル、ブテニル、ペンテニル、ヘキセニル、ヘプテニル、オクテニルおよびノネニルが挙げられる。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。
【００５５】
「アルケニルオキシ」は、アルケニル-Ｏ-基を示し、式中アルケニルは本明細書における定義の通りである。好ましいアルケニルオキシ基はＣ１〜Ｃ６アルケニルオキシ基である。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、酸素原子を介して分子の残部に結合する。
【００５６】
「アルキル」は、基または基の一部として、直鎖または分岐鎖の脂肪族炭化水素基を示し、特に記載がない限り、好ましくはＣ１〜Ｃ１２アルキル、より好ましくはＣ１〜Ｃ１
０アルキル、最も好ましくはＣ１〜Ｃ６を指す。適切な直鎖および分岐鎖Ｃ１〜Ｃ６アルキル置換基の例としては、メチル、エチル、ｎ-プロピル、２-プロピル、ｎ-ブチル、ｓｅｃ-ブチル、ｔ-ブチル、ヘキシル等が挙げられる。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。
【００５７】
「アルキルアミノ」は、指定が無い限り、モノアルキルアミノおよびジアルキルアミノの両方を含む。「モノアルキルアミノ」は、アルキル-ＮＨ-基を意味し、式中のアルキルは本明細書における定義の通りである。「ジアルキルアミノ」は（アルキル）２Ｎ-基を意味し、式中の各アルキルは同じであっても異なっていてもよく、それぞれ、アルキルについて本明細書における定義の通りである。アルキル基はＣ１〜Ｃ６アルキル基であることが好ましい。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、窒素原子を介して分子の残部に結合する。
【００５８】
「アルキルアミノカルボニル」は式（アルキル）ｘ（Ｈ）ｙＮＣ（＝Ｏ）-の基を指し、式中、アルキルは本明細書における定義の通りであり、ｘは１または２であり、Ｘ＋Ｙの合計は２である。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、カルボニル炭素を介して分子の残部に結合する。
【００５９】
「アルキルオキシ」はアルキル-Ｏ-基を指し、式中のアルキルは本明細書における定義の通りである。アルキルオキシはＣ１〜Ｃ６アルキルオキシであることが好ましい。例としては、限定はされないが、メトキシおよびエトキシが挙げられる。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。
【００６０】
「アルキルオキシアルキル」はアルキルオキシ-アルキル-基を指し、式中のアルキルオキシ部分およびアルキル部分は本明細書における定義の通りである。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、アルキル基を介して分子の残部に結合する。
【００６１】
「アルキルオキシアリ（alkyloxyary）」はアルキルオキシ-アリール-基を示し、式中のアルキルオキシ部分およびアリール部分は本明細書における定義の通りである。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、アリール基を介して分子の残部に結合する。
【００６２】
「アルキルオキシカルボニル」はアルキル-Ｏ-Ｃ（＝Ｏ）-基を示し、式中のアルキルは本明細書における定義の通りである。アルキル基はＣ１〜Ｃ６アルキル基であることが好ましい。例としては、限定はされないが、メトキシカルボニルおよびエトキシカルボニルが挙げられる。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、カルボニル炭素を介して分子の残部に結合する。
【００６３】
「アルキルオキシシクロアルキル」はアルキルオキシ-シクロアルキル-基を示し、式中のアルキルオキシ部分およびシクロアルキル部分は本明細書における定義の通りである。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、シクロアルキル基を介して分子の残部に結合する。
【００６４】
「アルキルオキシヘテロアリール」はアルキルオキシ-ヘテロアリール-基を示し、式中のアルキルオキシ部分およびヘテロアリール部分は本明細書における定義の通りである。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、ヘテロアリール基を介して分子の残部に結合する。
【００６５】
「アルキルオキシヘテロシクロアルキル」はアルキルオキシ-ヘテロシクロアルキル-基
を示し、式中のアルキルオキシ部分およびヘテロシクロアルキル部分は本明細書における定義の通りである。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、ヘテロシクロアルキル基を介して分子の残部に結合する。
【００６６】
「アルキルスルフィニル」はアルキル-Ｓ-（＝Ｏ）−基を意味し、式中のアルキルは本明細書における定義の通りである。アルキル基はＣ１〜Ｃ６アルキル基であることが好ましい。アルキルスルフィニル基の例としては、限定はされないが、メチルスルフィニルおよびエチルスルフィニルが挙げられる。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、硫黄原子を介して分子の残部に結合する。
【００６７】
「アルキルスルホニル」はアルキル-Ｓ（＝Ｏ）２−基を指し、式中のアルキルは上記定義の通りである。アルキル基はＣ１〜Ｃ６アルキル基であることが好ましい。例としては、限定はされないが、メチルスルホニルおよびエチルスルホニルが挙げられる。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、硫黄原子を介して分子の残部に結合する。
【００６８】
「アルキニル」は、基または基の一部として、炭素炭素三重結合を含有し、直鎖内に２〜１２個の炭素原子、より好ましくは２〜１０個の炭素原子、より好ましくは２〜６個の炭素原子を有することが好ましい、直鎖状であっても分岐状であってもよい、脂肪族炭化水素基を意味する。構造の例としては、限定はされないが、エチニルおよびプロピニルが挙げられる。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。
【００６９】
「アルキニルオキシ」はアルキニル-Ｏ−基を指し、式中のアルケニルは本明細書における定義の通りである。好ましいアルキニルオキシ基はＣ１〜Ｃ６アルキニルオキシ基である。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、酸素原子を介して分子の残部に結合する。
【００７０】
「アミノ酸」は、基または基の一部として、少なくとも１個の一級、二級、三級または四級アミノ基、および、カルボン酸、スルホン酸、もしくはホスホン酸、またはこれらの混合物であり得る少なくとも１個の酸基を有することを意味する。アミノ基は、酸基に関して、「α」、「β」、「γ」・・・〜「ω」であり得る。アミノ酸は天然であっても合成であってもよく、それらの誘導体が包含され得る。「アミノ酸」の骨格は、ハロゲン、ヒドロキシ、グアニド、複素環式基から選択される一つまたは複数の基と置換されていてもよい。よって、用語「アミノ酸」は、その範囲内に、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、プロリン、フェニルアラニン、トリプトファン、セリン、スレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパルト（asparte）、グルタミン、リジン、アルギニンおよびヒスチジン、タウリン、ベタイン、Ｎ-メチルアラニン等も包含する。アミノ酸の（Ｌ）型および（Ｄ）型も本開示の範囲に包含される。さらに、本開示での使用に適したアミノ酸は、２〜３例を挙げると、ヒドロキシル化されたアミノ酸、リン酸化されたアミノ酸、スルホン化されたアミノ酸、アシル化されたアミノ酸、およびグリコシル化されたアミノ酸を含むように誘導体化されてもよい。
【００７１】
「アミノ酸残基」は、アミノ基の水素原子を欠く（-ＮＨ-ＣＨＲ-ＣＯＯＨ）、またはカルボキシ基のヒドロキシ部分を欠く（ＮＨ２-ＣＨＲ-ＣＯ-）、または両方を欠く（-ＮＨ-ＣＨＲ-ＣＯ-）、アミノ酸構造を指す。
【００７２】
「アミノ」は、−ＮＲａＲｂ型の基を指し、式中のＲａおよびＲｂはそれぞれ、限定はされないが、水素、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアルケニル、置換されていてもよいアルキニル、および置換されていてもよいアリール基を含む基から選択される。
【００７３】
「アミノアルキル」はＮＨ２-アルキル基−を意味し、式中のアルキル基は本明細書における定義の通りである。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、アルキル基を介して分子の残部に結合する。
【００７４】
「アミノスルホニル」はＮＨ２-Ｓ（＝Ｏ）２−基を意味する。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、 硫黄原子を介して分子の残部に結合する。
【００７５】
「アリール」は、基または基の一部として、以下を示す：（ｉ）環当たり５〜１２個の原子を有することが好ましい、置換されていてもよい、単環式、または縮合多環式、芳香族の炭素環（全て炭素である環原子を有する環構造）。アリール基の例としては、フェニル、ナフチル等が挙げられる。（ｉｉ）フェニルおよびＣ５-７シクロアルキルまたはＣ５-７シクロアルケニル基が縮合して、テトラヒドロナフチル、インデニルまたはインダニル等の環式構造を形成している、置換されていてもよい、部分飽和二環式芳香族炭素環式部分。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。典型的には、アリール基はＣ６〜Ｃ１８アリール基である。
【００７６】
「アリールアルケニル」は、アリールおよびアルケニルが本明細書における定義の通りである、アリール-アルケニル-基を意味する。アリールアルケニル基の例としては、フェニルアリルが挙げられる。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、アルケニル基を介して分子の残部に結合する。
【００７７】
「アリールアルキル」は、アリール部分およびアルキル部分が本明細書における定義の通りである、アリール-アルキル-基を意味する。好ましいアリールアルキル基はＣ１-５アルキル部分を含有する。アリールアルキル基の例としては、ベンジル、フェネチル、１-ナフタレンメチルおよび２-ナフタレンメチルが挙げられる。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、アルキル基を介して分子の残部に結合する。
【００７８】
「アリールアルキルオキシ」は、アルキルおよびアリールが本明細書における定義の通りである、アリール-アルキル-Ｏ-基を指す。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、酸素原子を介して分子の残部に結合する。
【００７９】
「アリールアミノ」は、指定が無い限り、モノアリールアミノおよびジアリールアミノの両方を包含する。モノアリールアミノは式アリールＮＨ-の基を意味し、式中のアリールは本明細書における定義の通りである。ジアリールアミノはアミノ式（アリール）２Ｎ-の基を意味し、式中の各アリールは、同じであっても異なっていてもよく、それぞれ、アリールについての本明細書における定義の通りである。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、窒素原子を介して分子の残部に結合する。
【００８０】
「アリールヘテロアルキル」は、アリール部分およびヘテロアルキル部分が本明細書における定義の通りである、アリール-ヘテロアルキル-基を意味する。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、ヘテロアルキル基を介して分子の残部に結合する。
【００８１】
「アリールオキシ」はアリール−Ｏ−基を指し、式中のアリールは本明細書における定義の通りである。アリールオキシは、好ましくはＣ６〜Ｃ１８アリールオキシ、より好ましくはＣ６〜Ｃ１０アリールオキシである。前記基は末端基であっても架橋基であっても
よい。前記基は、末端基である場合、酸素原子を介して分子の残部に結合する。
【００８２】
「アリールスルホニル」はアリール-Ｓ（＝Ｏ）２-基を意味し、式中のアリール基は本明細書における定義の通りである。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、 硫黄原子を介して分子の残部に結合する。
【００８３】
「結合」は化合物または分子内の原子間の連結である。結合は単結合、二重結合、または三重結合であり得る。
【００８４】
「シクロアルケニル」は、少なくとも１個の炭素炭素二重結合を含有し、環当たり５〜１０個の炭素原子を有することが好ましい、非芳香族の、単環式または多環式の環系を意味する。単環式シクロアルケニル環の例としては、シクロペンテニル、シクロヘキセニルまたはシクロヘプテニルが挙げられる。シクロアルケニル基は一つまたは複数の置換基によって置換されていてもよい。シクロアルケニル基は典型的には、Ｃ３〜Ｃ１２アルケニル基である。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。
【００８５】
「シクロアルキル」は、特に記載がない限り、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル等の、環当たり３〜９個の炭素原子を含有することが好ましい、飽和した、単環式または縮合多環式もしくはスピロ多環式の、炭素環を指す。シクロアルキルには、シクロプロピルおよびシクロヘキシル等の単環系、デカリン等の二環系、並びにアダマンタン等の多環系が包含される。シクロアルキル基は典型的には、Ｃ３〜Ｃ１２アルキル基である。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。
【００８６】
「シクロアルキルアルキル」は、シクロアルキル部分およびアルキル部分が本明細書における定義の通りである、シクロアルキル-アルキル-基を意味する。モノシクロアルキルアルキル基の例としては、シクロプロピルメチル、シクロペンチルメチル、シクロヘキシルメチルおよびシクロヘプチルメチルが挙げられる。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、アルキル基を介して分子の残部に結合する。
【００８７】
「シクロアルキルアルケニル」は、シクロアルキル部分およびアルケニル部分が本明細書における定義の通りである、シクロアルキル-アルケニル-基を意味する。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、アルケニル基を介して分子の残部に結合する。
【００８８】
「シクロアルキルヘテロアルキル」は、シクロアルキル部分およびヘテロアルキル部分が本明細書における定義の通りである、シクロアルキル−ヘテロアルキル-基を意味する。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、 ヘテロアルキル基を介して分子の残部に結合する。
【００８９】
「シクロアルキルオキシ」はシクロアルキル-Ｏ-基を指し、式中のシクロアルキルは本明細書における定義の通りである。シクロアルキルオキシはＣ１〜Ｃ６シクロアルキルオキシであることが好ましい。例としては、限定はされないが、シクロプロパンオキシおよびシクロブタンオキシが挙げられる。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、酸素原子を介して分子の残部に結合する。
【００９０】
「シクロアルケニルオキシ」はシクロアルケニル-Ｏ-基を指し、式中のシクロアルケニルは本明細書における定義の通りである。シクロアルケニルオキシはＣ１〜Ｃ６シクロアルケニルオキシであることが好ましい。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、酸素原子を介して分子の残部に結合する。
【００９１】
「シクロアミノ」は、少なくとも１つの環内に少なくとも１個の窒素を含有する、飽和した、単環式、二環式、または多環式の環を指す。各環は好ましくは３〜１０員、より好ましくは４〜７員である。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、窒素原子を介して分子の残部に結合する。
【００９２】
「ハロアルキル」は、水素原子のうちの一つまたは複数がフッ素、塩素、臭素およびヨウ素からなる群から選択されるハロゲン原子で置換されている、本明細書で定義されるアルキル基を指す。ハロアルキル基は典型的には、式ＣｎＨ（２ｎ＋１-ｍ）Ｘｍを有し、式中、各Ｘは独立してＦ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩからなる群から選択される。この型の基において、ｎは、典型的には１〜１０、より好ましくは１〜６、最も好ましくは１〜３である。ｍは、典型的には１〜６、より好ましくは１〜３である。ハロアルキルの例としては、フルオロメチル、ジフルオロメチルおよびトリフルオロメチルが挙げられる。
【００９３】
「ハロアルケニル」は、水素原子のうちの一つまたは複数がＦ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩからなる群から独立して選択されるハロゲン原子で置換されている、本明細書で定義されるアルケニル基を指す。
【００９４】
「ハロアルキニル」は、水素原子のうちの一つまたは複数がＦ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩからなる群から独立して選択されるハロゲン原子で置換されている、本明細書で定義されるアルキニル基を指す。
【００９５】
「ハロゲン」は塩素、フッ素、臭素またはヨウ素を意味する。
【００９６】
「ヘテロアルキル」は、鎖内に２〜１２個の炭素、より好ましくは２〜６個の炭素を有することが好ましい、その炭素うちの一つまたは複数がＳ、Ｏ、ＰおよびＮから選択されるヘテロ原子で置換されている、直鎖または分岐鎖のアルキル基を指す。ヘテロアルキルの例としては、アルキルエーテル、二級アミンおよび三級アルキルアミン、アミド、硫化アルキル等が挙げられる。ヘテロアルキルの例としては、ヒドロキシＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルオキシＣ１〜Ｃ６アルキル、アミノＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノＣ１〜Ｃ６アルキル、およびジ（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）アミノＣ１〜Ｃ６アルキルも挙げられる。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。
【００９７】
「ヘテロアルキルオキシ」はヘテロアルキル-Ｏ-基を指し、式中のヘテロアルキルは本明細書における定義の通りである。ヘテロアルキルオキシはＣ１〜Ｃ６ヘテロアルキルオキシであることが好ましい。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。
【００９８】
単独または基の一部の「ヘテロアリール」は、芳香環内に環原子として一つまたは複数のヘテロ原子を有し、環原子の残りが炭素原子である、芳香環（好ましくは５または６員の芳香環）を含有する基を指す。適切なヘテロ原子としては窒素、酸素および硫黄が挙げられる。ヘテロアリールの例としては、チオフェン、ベンゾチオフェン、ベンゾフラン、ベンズイミダゾール、ベンズオキサゾール、ベンゾチアゾール、ベンズイソチアゾール、ナフト［２，３−ｂ］チオフェン、フラン、イソインドリジン、キサントレン（xantholene）、フェノキサチン（phenoxatine）、ピロール、イミダゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、テトラゾール、インドール、イソインドール、１Ｈ−インダゾール、プリン、キノリン、イソキノリン、フタラジン、ナフチリジン、キノキサリン、シンノリン、カルバゾール、フェナントリジン、アクリジン、フェナジン、チアゾール、イソチアゾール、フェノチアジン、オキサゾール、イソオキサゾール、フラザン、フェノキサジン、２−、３−または４−ピリジル、２−、３−、４−、５−、または８−キノリル、１−、３−、４−、または５−イソキノリニル  １−、２−、または３
−インドリル、および２−、または３−チエニルが挙げられる。ヘテロアリール基は典型的にはＣ１〜Ｃ１８ヘテロアリール基である。ヘテロアリール基は３〜８個の環原子を含み得る。ヘテロアリール基は、Ｎ、ＯおよびＳからなる群から独立して選択される１〜３個のヘテロ原子を含み得る。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。
【００９９】
「ヘテロアリールアルキル」は、ヘテロアリール部分およびアルキル部分が本明細書における定義の通りである、ヘテロアリール−アルキル基を意味する。好ましいヘテロアリールアルキル基は低級アルキル部分を含有する。ヘテロアリールアルキル基の例としては、ピリジルメチルが挙げられる。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、アルキル基を介して分子の残部に結合する。
【０１００】
「ヘテロアリールアルケニル」は、ヘテロアリール部分およびアルケニル部分が本明細書における定義の通りである、ヘテロアリール−アルケニル−基を意味する。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、 アルケニル基を介して分子の残部に結合する。
【０１０１】
「ヘテロアリールヘテロアルキル」は、ヘテロアリール部分およびヘテロアルキル部分が本明細書における定義の通りである、ヘテロアリール−ヘテロアルキル−基を意味する。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、 ヘテロアルキル基を介して分子の残部に結合する。
【０１０２】
「ヘテロアリールアミノ」は、芳香環内に環原子として少なくとも１個の窒素および少なくとももう１個のヘテロ原子、好ましくは少なくとも１つの環内に１〜３個のヘテロ原子、を有する、芳香環（好ましくは５または６員の芳香環）を含有する基を指す。適切なヘテロ原子としては窒素、酸素および硫黄が挙げられる。アリールアミノおよびアリールは本明細書における定義の通りである。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、窒素原子を介して分子の残部に結合する。
【０１０３】
「ヘテロアリールオキシ」は、ヘテロアリール−Ｏ−基を指し、式中のヘテロアリールは本明細書における定義の通りである。ヘテロアリールオキシはＣ１〜Ｃ１８ヘテロアリールオキシであることが好ましい。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、酸素原子を介して分子の残部に結合する。
【０１０４】
「ヘテロ環式」は、環原子として窒素、硫黄および酸素からなる群から選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含有する、飽和、部分不飽和または完全不飽和の、単環式、二環式または多環式の環系を指す。ヘテロ環式部分の例としては、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルケニルおよびヘテロアリールが挙げられる。
【０１０５】
「ヘテロシクロアルケニル」は、本明細書における定義の通りの、ただし少なくとも１個の二重結合を含有する、ヘテロシクロアルキルを指す。ヘテロシクロアルケニル基は典型的には、Ｃ２〜Ｃ１２ヘテロシクロアルケニル基である。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。
【０１０６】
「ヘテロシクロアルキル」は、少なくとも１つの環内に、窒素、硫黄、酸素から選択される少なくとも１個のヘテロ原子、好ましくは１〜３個のヘテロ原子を含有する、飽和した、単環式、二環式、または多環式の環を指す。各環は好ましくは３〜１０員、より好ましくは４〜７員である。適切なヘテロシクロアルキル置換基の例としては、ピロリジル、テトラヒドロフリル、テトラヒドロチオフラニル、ピペリジル、ピペラジル、テトラヒドロピラニル、モルフィリノ、１，３−ジアザパン、１，４−ジアザパン、１，４−オキサゼパン、および１，４−オキサチアパンが挙げられる。ヘテロシクロアルキル基は典型的
にはＣ２〜Ｃ１２ヘテロシクロアルキル基である。ヘテロシクロアルキル基は３〜８個の環原子を含み得る。ヘテロシクロアルキル基は、Ｎ、ＯおよびＳからなる群から独立して選択される１〜３個のヘテロ原子を含み得る。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。
【０１０７】
「ヘテロシクロアルキルアルキル」は、ヘテロシクロアルキル部分およびアルキル部分が本明細書における定義の通りである、ヘテロシクロアルキル−アルキル−基を指す。ヘテロシクロアルキルアルキル基の例としては、（２−テトラヒドロフリル）メチル、（２−テトラヒドロチオフラニル）メチルが挙げられる。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、アルキル基を介して分子の残部に結合する。
【０１０８】
「ヘテロシクロアルキルアルケニル」は、ヘテロシクロアルキル部分およびアルケニル部分が本明細書における定義の通りである、ヘテロシクロアルキル−アルケニル−基を指す。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、 アルケニル基を介して分子の残部に結合する。
【０１０９】
「ヘテロシクロアルキルヘテロアルキル」は、ヘテロシクロアルキル部分およびヘテロアルキル部分が本明細書における定義の通りである、ヘテロシクロアルキル−ヘテロアルキル−基を意味する。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、 ヘテロアルキル基を介して分子の残部に結合する。
【０１１０】
「ヘテロシクロアルキルオキシ」はヘテロシクロアルキル−Ｏ−基を指し、式中のヘテロシクロアルキルは本明細書における定義の通りである。ヘテロシクロアルキルオキシはＣ１〜Ｃ６ヘテロシクロアルキルオキシであることが好ましい。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、酸素原子を介して分子の残部に結合する。
【０１１１】
「ヘテロシクロアルケニルオキシ」はヘテロシクロアルケニル−Ｏ−基を指し、式中のヘテロシクロアルケニルは本明細書における定義の通りである。ヘテロシクロアルケニルオキシはＣ１〜Ｃ６ヘテロシクロアルケニルオキシであることが好ましい。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、酸素原子を介して分子の残部に結合する。
【０１１２】
「ヘテロシクロアミノ」は、少なくとも１つの環内に、少なくとも１個の窒素、および窒素、硫黄、酸素から選択される少なくとももう１個のヘテロ原子、好ましくは１〜３個のヘテロ原子を含有する、飽和した、単環式、二環式、または多環式の環を指す。各環は好ましくは３〜１０員、より好ましくは４〜７員である。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、窒素原子を介して分子の残部に結合する。
【０１１３】
「ヒドロキシアルキル」は、水素原子のうちの一つまたは複数がＯＨ基で置換されている、本明細書で定義されるアルキル基を指す。ヒドロキシアルキル基は典型的には、式ＣｎＨ（２ｎ＋１−ｘ）（ＯＨ）ｘを有する。この型の基において、ｎは、典型的には１〜１０、より好ましくは１〜６、最も好ましくは１〜３である。ｘは、典型的には１〜６、より好ましくは１〜４である。
【０１１４】
基としての「低級アルキル」は、特に記載がない限り、メチル、エチル、プロピル（ｎ−プロピルまたはイソプロピル）またはブチル（ｎ−ブチル、イソブチルまたは第三ブチル）等の、鎖内に１〜６個の炭素原子、より好ましくは１〜４個の炭素、を有する、直鎖
状であっても分岐状であってもよい、脂肪族炭化水素基を意味する。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。
【０１１５】
「対象」はヒトまたは動物を指す。
【０１１６】
「スルフィニル」はＲ−Ｓ（＝Ｏ）−基を意味し、式中のＲ基は、本明細書で定義される、ＯＨ、アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル；アリールまたはヘテロアリール基であり得る。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、硫黄原子を介して分子の残部に結合する。
【０１１７】
「スルフィニルアミノ」はＲ−Ｓ（＝Ｏ）−ＮＨ−基を意味し、式中のＲ基は、本明細書で定義される、ＯＨ、アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル；アリールまたはヘテロアリール基であり得る。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、窒素原子を介して分子の残部に結合する。
【０１１８】
「スルホニル」はＲ−Ｓ（＝Ｏ）２−基を意味し、式中のＲ基は、本明細書で定義される、ＯＨ、アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル；アリールまたはヘテロアリール基であり得る。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、 硫黄原子を介して分子の残部に結合する。
【０１１９】
「スルホニルアミノ」はＲ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ−基を意味する。前記基は末端基であっても架橋基であってもよい。前記基は、末端基である場合、窒素原子を介して分子の残部に結合する。
【０１２０】
式（Ｉ）の化合物のファミリーには、「Ｅ」または「Ｚ」立体配置異性体のジアステレオ異性体、鏡像異性体、互変異性体、および幾何異性体、またはＥおよびＺ異性体の混合物を含む異性体が包含されることが理解される。また、ジアステレオマー、鏡像異性体、および幾何異性体等のいくつかの異性体は、物理的および／または化学的手法によって、当業者によって分離可能であることが理解される。
【０１２１】
開示された実施形態の化合物のいくつかは、単一の立体異性体、ラセミ化合物、並びに／または鏡像異性体および／もしくはジアステレオマーの混合物として存在し得る。全てのこのような単一の立体異性体、ラセミ化合物およびそれらの混合物は、記載および特許請求された発明の主題の範囲内であることが意図される。
【０１２２】
さらに、式（Ｉ）は、適用可能な場合、化合物の溶媒和形態および非溶媒和形態も包含することが意図される。従って、各々の式は、水和形態および非水和形態を含む、表示の構造を有する化合物を包含する。
【０１２３】
さらに、本発明の化合物は２つ以上の不斉炭素原子を含有していてもよい可能性がある。それらの化合物において、不斉炭素原子に対する結合を示すための実線の使用は、全ての可能な立体異性体の包含が意図されている、ことを示すように意図されている。本発明の化合物における一つまたは複数の不斉炭素原子に対する結合を示すための実線の使用、および同一化合物における他の不斉炭素原子に対する結合を示すための点線または実線の楔の使用は、ジアステレオマーの混合物が存在することを示すように意図されている。
【０１２４】
本明細書で使用される用語「置換されていてもよい」は、この用語が指す群が、非置換であってもよいこと、または、アルキル、アルケニル、アルキニル、チオアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキルアルケニル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルヘテロアルキル、シクロアルキルオキシ、シクロ
アルケニルオキシ、シクロアミノ、ハロ、カルボキシル、ハロアルキル、ハロアルキニル、アルキニルオキシ、ヘテロアルキル、ヘテロアルキルオキシ、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル、アルコキシ、チオアルコキシ、アルケニルオキシ、ハロアルコキシ、ハロアルケニル、ハロアルキニル、ハロアルケニルオキシ、ニトロ、アミノ、ニトロアルキル、ニトロアルケニル、ニトロアルキニル、ニトロヘテロシクリル、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルケニルアミン、アミノアルキル、アルキニルアミノ、アシル、アルキルオキシ、アルキルオキシアルキル、アルキルオキシアリール、アルキルオキシカルボニル、アルキルオキシシクロアルキル、アルキルオキシヘテロアリール、アルキルオキシヘテロシクロアルキル、アルケノイル、アルキノイル、アシルアミノ、ジアシルアミノ、アシルオキシ、アルキルスルホニルオキシ、ヘテロ環式、ヘテロシクロアルケニル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキルアルケニル、ヘテロシクロアルキルヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキルオキシ、ヘテロシクロアルケニルオキシ、ヘテロシクロキシ、ヘテロシクロアミノ、ハロヘテロシクロアルキル、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、アルキルスルフェニル、アルキルカルボニルオキシ、アルキルチオ、アシルチオ、アミノスルホニル、リン含有基、例えばホスホノおよびホスフィニル、スルフィニル、スルフィニルアミノ、スルホニル、スルホニルアミノ、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルケニル、ヘテロアリールヘテロアルキル、ヘテロアリールアミノ、ヘテロアリールオキシ、アリールアルケニル、アリールアルキル、アルキルアリール、アルキルヘテロアリール、アリールオキシ、アリールスルホニル、シアノ、シアン酸、イソシアン酸、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（アルキル）、並びに−Ｃ（Ｏ）Ｎ（アルキル）２から独立して選択される一つまたは複数の群で置換されていてもよいこと、を意味する。
【０１２５】
用語「薬剤的に許容できる塩」は、上記で確認された化合物の所望の生物活性を保持し、薬剤的に許容できる酸付加塩および塩基付加塩を包含する、塩を指す。式（Ｉ）の化合物の適切な薬剤的に許容できる酸付加塩は、無機酸から、または有機酸から調製され得る。そのような無機酸の例は、塩酸、硫酸、およびリン酸である。適切な有機酸は、脂肪族、シクロ脂肪族、芳香族、ヘテロ環式カルボン酸およびスルホン酸の有機酸クラスから選択され得、これらの例は、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、グルコン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸、アルキルスルホン酸、アリールスルホン酸である。薬剤的に許容できる塩に関するさらなる情報は、Remington’s Pharmaceutical Sciences, 19th Edition, Mack Publishing Co., Easton, PA 1995に見出すことができる。作用剤が固体である場合、本発明の化合物、作用剤および塩が様々な結晶形態または多形相で存在し得、その全てが本開示および特定の式の範囲に包含されることが意図されることは、当業者によって理解される。
【０１２６】
「プロドラッグ」は、生物系内で、通常は代謝的手段（例えば、加水分解、還元または酸化）によって、式（Ｉ）の化合物への変換を起こす化合物を意味する。例えば、ヒドロキシル基を含有する式（Ｉ）の化合物のエステルプロドラッグは、インビボにおける加水分解によって、親分子に変換可能であり得る。ヒドロキシル基を含有する式（Ｉ）の化合物の適切なエステルは、例えば、ギ酸エステル、酢酸エステル、クエン酸エステル、乳酸エステル、酒石酸エステル、マロン酸エステル、シュウ酸エステル、サリチル酸エステル、プロピオン酸エステル、コハク酸エステル、フマル酸エステル、マレイン酸エステル、メチレン−ビス−β−ヒドロキシナフトエ酸エステル、ゲンチジン酸エステル（gestisate）、イセチオン酸エステル、ジ−ｐ−トルオイル酒石酸エステル、メタンスルホン酸エステル、エタンスルホン酸エステル、ベンゼンスルホン酸エステル、ｐ−トルエンスルホン酸エステル、シクロヘキシルスルファミン酸エステルおよびキナ酸エステルである。別の例として、例えば、カルボキシ基を含有する式（Ｉ）の化合物のエステルプロドラッグは、インビボにおける加水分解によって、親分子に変換可能であり得る。（エステルプロドラッグの例は、F.J. Leinweber, Drug Metab. Res.,18:379, 1987に記載されるもので
ある）。同様に、アミノ基を含有する式（Ｉ）の化合物のアシルプロドラッグは、インビボにおける加水分解によって、親分子に変換可能であり得る（これらおよび他の官能基（例えばアミン）についてのプロドラッグの多くの例が、Prodrugs: Challenges and Rewards (Parts 1 and 2); Ed V. Stella, R. Borchardt, M. Hageman, R.Oliyai, H. Maag and J Tilley; Springer, 2007に記載されている）。
【０１２７】
用語「治療有効量」または「有効量」は、有益なまたは所望の臨床結果を及ぼすのに充分な量である。有効量は、一回または複数回の投与で投与することができる。有効量は、典型的には、病状の進行を緩和、改善、安定化、逆行、緩徐化または遅延させるのに充分な量である。
【０１２８】
用語「機能的等価物」は、本明細書に記載の特定のプロテインキナーゼ種の変種を包含することが意図される。キナーゼが、所与のキナーゼアイソフォームの一次、二次、三次または四次構造が原型の（protoypical）キナーゼと異なりながらも、その分子がプロテインキナーゼとしての生物活性を維持するような、アイソフォームを有し得ることは理解されよう。アイソフォームは、集団内の通常の対立遺伝子変異から生じる場合があり、アミノ酸の置換、欠失、付加、短縮、または重複等の変異を含む。また、用語「機能的等価物」には、転写レベルで発生する変異体も包含される。酵素（例えば、ＨＤＡＣおよびＰＩ３Ｋ）は、転写物変異から生じるアイソフォームを有する。他の機能的等価物として、グリコシル化等の翻訳後修飾が変化したキナーゼも包含される。
【０１２９】
用語「細胞を再プログラムする」は、哺乳類の発生中の、ＤＮＡメチル化等の、エピジェネティックマークの抹消および再構築を包含することが意図される。
【０１３０】
単語「実質的に」は「完全に」を排除せず、例えば、Ｙを「実質的に含有しない」組成物は、Ｙを完全に含有していない場合がある。必要であれば、単語「実質的に」は、本発明の定義から省略されてもよい。
【０１３１】
特に指定がない限り、用語「含む（comprising）」および「含む（comprise）」、並びにその文法的変異形は、記載の要素を含むが追加の非記載要素の包含も許容するような、「オープン」または「包括的」な言語を表すことが意図されている。
【０１３２】
本明細書で使用される場合、製剤成分の濃度の文脈における、用語「約」は、典型的には、記載値の±１０％、より典型的には記載値の±７．５％、より典型的には記載値の±５％、より典型的には記載値の±４％、より典型的には記載値の±３％、より典型的には記載値の±２％、さらにより典型的には記載値の±１％、およびさらにより典型的には記載値の±０．５％を意味する。
【０１３３】
本開示の全体を通じて、ある実施形態は範囲形式で開示され得る。範囲形式での記述が、便宜および簡潔さのみを目的としており、開示された範囲の可動性のない範囲限定と解釈されるべきではないことは、理解されるべきである。従って、範囲の記載は、具体的に開示された全ての可能な部分範囲、およびその範囲内の個々の数値を有すると見なされるべきである。例えば、１〜６等の範囲の記載は、１〜３、１〜４、１〜５、２〜４、２〜６、３〜６等の具体的に開示された部分範囲、並びに、その範囲内の個々の数字、例えば、１、２、３、４、５、および６、を有すると見なされるべきである。これは、範囲の幅に関係なく適用される。
【０１３４】
ある実施形態は、本明細書において広範且つ総称的に記載されている場合がある。属の開示に含まれる、より狭い種および亜属分類のそれぞれも、開示の一部を形成する。これは、削除された物質が本明細書に具体的に記載されているかどうかにかかわらず、属から
いかなる対象をも取り除く、但し書または否定による限定を伴う、実施形態の属の記述を含む。
【０１３５】
添付の図面は、開示された実施形態を図示しており、開示された実施形態の原理を説明するのに役立つ。しかし、図面が例示のみを目的として設計され、本発明の範囲の定義としては設計されていないことを理解されたい。
【図面の簡単な説明】
【０１３６】
【図１】図１は、既知のＨＤＡＣ阻害剤の典型的なクラス、並びに、典型的なＨＤＡＣ阻害剤（ボリノスタット）が３つの部分：亜鉛結合基（ＺＢＧ）、リンカー、並びに親油性および表面認識「ＣＡＰ」基から構成されること、を示すスキームである。ＣＡＰはＨＤＡＣ酵素の結合ポケットの外側に存在するため、ＣＡＰ基をキナーゼ阻害剤骨格と置換することで、新規のＨＤＡＣ−キナーゼ二重阻害剤を得ることができる。
【図２】図２はＰＩ３Ｋ／ｍＴＯＲ阻害剤の例を示す。
【図３】図３は、化合物８、９、１１および１２にさらに誘導体化することができる、重要な中間体７を調製するための、典型的な手順のスキームを示す。
【図４】図４は、化合物１または化合物３内の２個の塩素原子の別の置換順序、並びに化合物１７、１９および２１の調製を示す、スキームを示している。
【図５】図５は、Ｒ３が水素であり、Ｘが窒素である場合の、化合物７（スキーム１、図３）および化合物１８（スキーム２、図４）のＲ３基をさらに変化させる方法を示す、スキームを示している。
【図６】図６は、Ｒ３が水素であり、Ｘが窒素である場合の、化合物１４（スキーム２、図４）のＲ３基を変化させる別の方法を示す、スキームを示している。
【図７】図７は、容易に調達できる、または市販の出発物質（例えば、４）のさらなる誘導体化のための通常の合成経路、および保護または置換されたヒドロキサム酸（３８）を調製するための手順を示す、スキームを示している。
【図８】図８は、Ｎ−ヒドロキシ−４−（３−（９−イソプロピル−２−モルホリノ−９Ｈ−プリン−６−イル）フェノキシ）ブタンアミドの合成のための反応スキームを示している。
【図９】図９は、Ｎ−ヒドロキシ−７−（２−（３−（ヒロドキシメチル）フェニル）−６−モルホリノ−９Ｈ−プリン−９−イル）ヘプタンアミドの合成のための反応スキームを示している。
【図１０】図１０は、７−（６−（２−アミノピリミジン−５−イル）−２−モルホリノ−９Ｈ−プリン−９−イル）−Ｎ−ヒドロキシヘプタンアミドの合成のための反応スキームを示している。
【図１１】図１１は、Ｎ１−ヒドロキシ−Ｎ８−（３−（９−イソプロピル−２−モルホリノ−９Ｈ−プリン−６−イル）フェニル）オクタンジアミドの合成のための反応スキームを示している。
【図１２】図１２は、（Ｅ）−Ｎ−ヒドロキシ−３−（４−（（（２−（２−（６−メトキシピリジン−３−イル）−６−モルホリノ−９Ｈ−プリン−９−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）アクリルアミドの合成のための反応スキームを示している。
【図１３】図１３は、６−（（６−（２−アミノピリミジン−５−イル）−９−イソプロピル−２−モルホリノ−９Ｈ−プリン−８−イル）アミノ）−Ｎ−ヒドロキシヘキサンアミドの合成のための反応スキームを示している。
【図１４】図１４は、４−（（（（２−（２−アミノピリミジン−５−イル）−９−エチル−６−モルホリノ−９Ｈ−プリン−８−イル）メチル）（メチル）アミノ）メチル）−Ｎ−ヒドロキシベンズアミド（３５ｈ）および化合物３５ａ〜ｆの合成のための反応スキームを示している。
【図１５】図１５は、前記化合物で処理されたＰＣ−３細胞における、ＨＤＡＣの阻害およびＰＩ３ｋ−Ａｋｔ−ｍＴＯＲ経路の調節を示している。
【図１６】図１６は、前記化合物で処理されたＭＣＦ７細胞における、ＰＩ３Ｋ−ＡＫＴ−ｍＴＯＲ経路の調節を示している。
【図１７】図１７は、前記化合物で処理された細胞における、ＨＤＡＣの阻害によるヒストン３（Ｌｙｓ９）の高アセチル化を示している。
【図１８】図１８は、前記化合物で処理された細胞における、ＨＤＡＣ６の阻害によるα−チューブリンの高アセチル化を示している。
【図１９】図１９は、前記化合物で処理された細胞における、ＰＩ３Ｋ−ＡＫＴ−（ｍＴＯＲ）経路：ｐ−Ａｋｔ（Ｓｅｒ４７３）のレベルおよびｍＴＯＲＣ２の活性の調節を示している。
【図２０−１】図２０は、前記化合物で処理された細胞における、ＰＩ３Ｋ−ＡＫＴ−（ｍＴＯＲ）経路：ｍＴＯＲＣ１活性の調節を示している。
【図２０−２】図２０は、前記化合物で処理された細胞における、ＰＩ３Ｋ−ＡＫＴ−（ｍＴＯＲ）経路：ｍＴＯＲＣ１活性の調節を示している。
【図２１】図２１は、前記化合物で処理された細胞における、カスパーゼ活性の誘導を示している。
【図２２−１】図２２は、前記化合物により誘導されたＭＶ−４−１１の細胞死を示している。
【図２２−２】図２２は、前記化合物により誘導されたＭＶ−４−１１の細胞死を示している。
【図２３】図２３は、前記化合物で処理されたＰＣ−３腫瘍における、ヒストン高アセチル化を示している。
【図２４】図２４は、前記化合物で処理されたＭＶ４−１１腫瘍における、ヒストン高アセチル化を示している。
【図２５】図２５は、ＮＣｒヌードマウスＨｅｐＧ２異種移植モデルにおける前記化合物の有効性を示している。
【図２６−１】図２６は、ＣＢ１７  ｓｃｉｄマウスＨｅｐＧ２異種移植モデルにおける前記化合物の有効性を示している。
【図２６−２】図２６は、ＣＢ１７  ｓｃｉｄマウスＨｅｐＧ２異種移植モデルにおける前記化合物の有効性を示している。
【図２７】図２７は、ＮＣｒヌードマウスＨｕＨ−７異種移植モデルにおける前記化合物の有効性を示している。
【図２８】図２８は、４Ｔ１マウス転移性乳癌モデルにおける前記化合物の有効性を示している。
【図２９】図２９は、ＮＣＩ−Ｈ４６０肺がん異種移植モデルにおける前記化合物の有効性を示している。
【図３０】図３０は、ＭＶ４−１１異種移植モデルにおける前記化合物の有効性を示している。
【図３１】図３１
【発明を実施するための形態】
【０１３７】
複合型薬剤または多標的薬剤は、２つ以上の立証された経路または検証された標的に対して作用することにより、治療の可能性または治療の有効性を増加させることができる。例えば、がん細胞の生存は多くの重要な経路に依存しているため、１つの経路の遮断または阻害では、標的細胞の殺傷または増殖阻害の可能性がほんの僅かである場合がある。例えば、成功の可能性が各々の経路について０．４すなわち４０％であると仮定すると、失敗の可能性は１−０．４＝０．６である。２つの経路（または標的）を標的とする場合、失敗の可能性は０．６×０．６＝０．３６になり、一方で、成功の可能性は劇的に増加する（１−０．３６＝０．６４）。３つの経路を標的とする場合、成功率は０．７８４になり、枚挙にいとまがない。
【０１３８】
生物システムは、互いに補い合い、機能にシナジーを与え合うため、単純ではない。しかし、複数の経路を標的にすることの原理は、検証済みであり、がん治療のための多剤併用化学療法等において既に使用されている。例としては、薬剤の組合せ、例えば、ヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣ）阻害剤のボリノスタットおよび臨床試験中の種々の既知の薬剤、ＨＩＶ治療のための混合薬剤、並びに抗菌治療のためのオーグメンチン（アモキシシリンとクラブラン酸の混合物）、が挙げられる。また、複数キナーゼ阻害剤であるスニチニブおよびソラフェニブ等、好結果の多標的薬剤が市販されている。しかしながら、併用のために２つ以上の薬剤を使用する、あるいは、偶然にもいくつかの多標的薬剤を発見することの代わりに、新規の多標的薬剤分子は、各々の標的および全体的な標的調節特性および薬らしい特性に必要なキーとなる化学構造モチーフを組み込むことによって、相加的または相乗的に作用する検証済みおよび／または新規の薬物標的の組合せを標的とするように設計することができる。この種の薬剤の設計および開発はより困難で有り得るが、その利点は、この分子が、２つ以上の薬剤の物理的混合物または化学的複合物ではなく新規の化学成分であり、そのため、特許性があり、より重要なことには、新たな薬理学的特性を有する、という点である。
【０１３９】
エピジェネティクスは、遺伝子使用を調節するＤＮＡへの化学修飾であると見なすことができる。ヒストン分子のアミノ酸残基（特に、ヒストン分子のアミノ（Ｎ）末尾に位置するアミノ酸残基）は、メチル化、アセチル化、リン酸化、ユビキチン化、ＳＵＭＯ化、シトルリン化およびＡＤＰリボシル化を含む様々な翻訳後修飾を受け易い。何種類かの共有結合修飾（アセチル化およびリジンメチル化等）は可逆的であるが、一方で、種々の残基におけるアセチル化は、より多くの構造的役割を有すると考えられており、ヌクレオソーム構造を「緩め」、転写因子による接近をより容易にする。ヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣ）は、検証済みの抗がん剤標的（図１）であり、ＨＤＡＣ阻害剤に関する研究が進んでいる。さらに、ＨＤＡＣ阻害剤は、ＴＮＦα等の炎症誘発性サイトカインの発現を阻害するその能力のために、関節リウマチおよび真性糖尿病等の自己免疫性疾患および炎症性疾患において、有望な用途がある。ＨＤＡＣ阻害剤は、幹細胞の自己複製および分化等における腫瘍学以外での指標も有し得る。
【０１４０】
ＨＤＡＣ阻害剤（ＨＤＡＣｉ）は、多くの化学療法剤およびキナーゼ阻害剤と共に相加的または相乗的に使用されることが承認されている。例えば、ソラフェニブと併用したＨＤＡＣｉパノビノスタットによる処置は、肝細胞癌（ＨＣＣ）モデルの治療において最高の前臨床効果を示し、この新規の併用を用いる臨床研究に理論的根拠を与えた。ｍＴＯＲ阻害剤は、ＨＣＣ細胞におけるＨＤＡＣｉ誘導アポトーシスを有意に増強した。ｍＴＯＲＣ１／２の両方の阻害は、ｍＴＯＲＣ１シグナル伝達を効率的に遮断するだけでなく、選択的なｍＴＯＲＣ１阻害によって引き起こされるＡＫＴ−フィードバックの活性化も抑制した。インビボ研究によって、ｍＴＯＲ阻害剤ＡＺＤ８０５５およびＨＤＡＣｉボリノスタットの併用が、腫瘍成長を明らかな有害作用もなくほぼ完全に阻害したことが示され、これにより、ｍＴＯＲ阻害剤およびＨＤＡＣｉの併用療法が、ＨＣＣの治療のための有効な治療方針であり得ることが示唆された。さらに、ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ／ｍＴＯＲ経路およびＲａｓ／Ｒａｆ／ＭＡＰＫ経路を標的とする二重ＰＩ３Ｋ／ｍＴＯＲ阻害剤ＰＫＩ−５８７（ＰＦ−０５２１２３８４）およびソラフェニブが、ＨＣＣ細胞増殖を相乗的に阻害することが示された。これらのことから、ＨＤＡＣキナーゼ阻害剤、特に、ＨＤＡＣ／ＰＩ３Ｋ−Ａｋｔ−ｍＴＯＲ経路を多重に阻害する阻害剤は、ＨＤＡＣモチーフおよびキナーゼ骨格の両方が適切に選択されたならば、ＨＣＣおよび他の適用症を治療するための、それら２つまたは３つの個々の作用剤の目的を果たすだろう。
【０１４１】
イマチニブは、科学および販売の両方の分野において大成功を収めた最初のキナーゼである。それ以来、キナーゼ阻害剤の研究は非常に魅力的な分野となり、現在、多くのキナーゼ薬剤候補が臨床試験中である。ホスファチジルイノシチド３−キナーゼ−ＡＫＴ−ラ
パマイシンの哺乳類標的（ＰＩ３Ｋ−Ａｋｔ−ｍＴＯＲ）シグナル伝達経路は、多岐にわたる生理的過程を広範に制御しており、細胞周期進行、分化、転写、翻訳およびアポトーシスを含む、細胞の成長および生存の多くの面に不可欠である。増幅による、または変異の直接的な結果としての調節不全は、広範囲のがんの発生および進行と密接に関連付けられており、このカスケード内の重要なタンパク質の小分子調節剤の開発における、強い関心を促している。ＰＩ３Ｋ、Ａｋｔおよび他のキナーゼ、例えば、３−ホスホイノシチド依存性プロテインキナーゼ−１（ＰＤＫ１）、ｍＴＯＲは、現在までに、様々な度合いの臨床的成果を伴って、直接的に標的とされている（図２）。
【０１４２】
ＰＩ３Ｋ−ｍＴＯＲ経路は、細胞遊走および血管新生においても重要な役割を果たす。上皮細胞の運動性制御におけるｐ１１０αの独特な機能は、血管リモデリングおよび血管新生における、ｐ１１０βおよびｐ１１０δに優る、このタンパク質の重要性を支持している。クラスＩＩ  ＰＩ３Ｋのアイソフォームである、ＰＩ３Ｋ−Ｃ２αは、血管形成および障壁の完全性において重要な役割を有し、血管疾患に対する新たな治療標的を代表している。腎細胞癌（ＲＣＣ）の治療に承認されたｍＴＯＲ阻害剤であるテムシロリムスは、ｍＴＯＲ阻害を介して網膜色素上皮細胞および上皮細胞における増殖および遊走を阻害し、ＶＥＧＦおよびＰＤＧＦの発現を減少させる。ＣＣＩ−７７９は、ｍＴＯＲ／Ｈｉｆ−１α／ＶＥＧＦシグナル伝達の標的化と関連付けられた血管新生抑制機構によって、横紋筋肉腫異種移植片の成長を阻害する。ＨＤＡＣ／ＰＩ３Ｋ−Ａｋｔ−ｍＴＯＲ経路の多標的阻害剤は、ＨＣＣ、ＲＣＣおよび甲状腺癌等の血管過多腫瘍、並びに網膜血管新生疾患の治療に有益であるだろう。
【０１４３】
血管新生抑制剤は、がん治療における使用で成功している。ＨＤＡＣ阻害剤は、血管内皮増殖因子シグナル伝達を変化させ得るため、腫瘍血管新生を標的とするために使用される。クラスＩＩｂ  ＨＤＡＣ６は、コルタクチンの脱アセチル化により上皮細胞遊走および血管新生を制御し、ＥＢ１依存的に細胞遊走を制御し得る。このことから、ＨＤＡＣ６は、上皮細胞遊走および血管新生を阻害するための標的となる。
【０１４４】
肝線維症および腎線維症は共に、未だ満たされていない高い医療ニーズを有する。ＨＤＡＣ阻害剤が、実験的な肝線維症および腎線維症において研究されている。ヒストン脱アセチル化酵素２は、通常の瘢痕およびケロイド瘢痕において発現増加している。クラスＩＩ  ＨＤＡＣ阻害は、ミクロＲＮＡ−２９の誘導によって肝星細胞（hepatic stellate sell）の活性化を妨害し、ミクロＲＮＡ−２９ｂは、ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ経路を標的とすることによる、肝星細胞活性化の減弱およびアポトーシスの誘導によって、肝線維症を防止する。さらに、新規のＰＩ３Ｋ阻害剤であるＨＳ−１７３は、肝線維症における肝星細胞の活性化を減弱する。増加しつつあるこれらの証拠は全て、病的線維症の治療のための、ＨＤＡＣ／ＰＩ３Ｋ−Ａｋｔ−ｍＴＯＲ経路の多標的阻害剤の開発を支援するものである。
【０１４５】
式（Ｉ）の化合物、またはその薬剤的に許容できる形態もしくはプロドラッグが提供され；
【０１４６】
【化４】
2017510628.tif 000006
式中、Ｘ、ＹおよびＺは独立して、Ｎ、ＣＨＲ３またはＣＲ３から選択され得、式中、Ｘ、ＹまたはＺのうちの少なくとも１つはＮであり；
【０１４７】
【化５】
2017510628.tif 000007
は結合価が許す通りに単結合または二重結合であり得；
Ｒ１およびＲ２は、結合、ハロゲン、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアミノ、置換されていてもよいアルキルオキシ、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいヘテロシクロアルキル、置換されていてもよいアリールおよび置換されていてもよいヘテロアリールからなる群から独立して選択され得；
Ｒ３およびＲ４は結合、水素、ハロゲン、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアミノ、置換されていてもよいアルキルオキシ、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいヘテロシクロアルキル、置換されていてもよいアリールおよび置換されていてもよいヘテロアリールからなる群から独立して選択され得；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３またはＲ４のうちの少なくとも１つは、ヒドロキサメート基−Ｌ１−Ｒ５−Ｌ２−Ｒ６−Ｌ３−ＣＯＮ（Ｒａ）ＯＲｂによってさらに独立して置換されていてもよく、式中；
ＲａおよびＲｂは、結合、水素、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアシルおよび置換されていてもよいアミノ酸残基からなる群から独立して選択され得；
Ｌ１、Ｌ２およびＬ３は、結合、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアルケニルおよび置換されていてもよいアルキニルからなる群から独立して選択され得；
Ｒ５およびＲ６は、結合、Ｏ、Ｓ、ＮＲｃ、Ｓ（Ｏ）ｎ、置換されていてもよいアミド、置換されていてもよい尿素、置換されていてもよいカルボニル尿素、置換されていてもよいチオ尿素、置換されていてもよいスルホンアミド、置換されていてもよいアミノスルホンアミド、置換されていてもよいスルホニル尿素、置換されていてもよいオキシム、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいヘテロシクロアルキル、置換されていてもよいアリールおよび置換されていてもよいヘテロアリールからなる群から独立して選択され得；式中；
Ｒｃは、結合、水素、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアルケニル、置換されていてもよいアルキニルおよび置換されていてもよいアシルからなる群から独立して選択され得；
ｎは０〜２の整数であり得る。
【０１４８】
Ｘ、ＹおよびＺは、Ｎ、ＣＨＲ３またはＣＲ３から独立して選択され得、式中、Ｘ、ＹまたはＺのうちの少なくとも１つはＮである。ＸはＮ、ＣＨＲ３またはＣＲ３であり得る。ＹはＮ、ＣＨＲ３またはＣＲ３であり得る。ＺはＮ、ＣＨＲ３またはＣＲ３であり得る。Ｘ、ＹおよびＺは全てＮであり得る。ＸおよびＺは共にＮであり得、ＹはＣＲ３であり得る。ＸはＣＲ３であり得、ＹはＣＲ３であり得、ＺはＮであり得る。ＸはＣＨであり得、ＹはＣＲ３であり得、ＺはＮであり得る。ＸはＮであり得、ＹはＣＲ３であり得、ＺはＣＲ３であり得る。ＸはＮであり得、ＹはＣＲ３であり得、ＺはＣＨであり得る。
【０１４９】
ＸはＣＨ２であり得、ＹはＣＨＲ３であり得、ＺはＮであり得る。ＸおよびＺは共にＮであり得、ＹはＣＨＲ３であり得る。ＸはＣＨＲ３であり得、ＹはＣＨＲ３であり得、ＺはＮであり得る。ＸはＣＨ２であり得、ＹはＣＨＲ３であり得、ＺはＮであり得る。ＸはＮであり得、ＹはＣＨＲ３であり得、ＺはＣＨＲ３であり得る。ＸはＮであり得、ＹはＣＨＲ３であり得、ＺはＣＨ２であり得る。
【０１５０】
【化６】
2017510628.tif 000008
は結合価が許す通りに単結合または二重結合であり得る。ＸおよびＹは二重結合によって連結されていてもよい。ＸおよびＹは単結合によって連結されていてもよい。
【０１５１】
前記化合物は以下の式（Ｉｂ）、（Ｉｃ）または（Ｉｄ）のうちのいずれか１つを有し得；
【０１５２】
【化７】
2017510628.tif 000009
Ｒ１およびＲ２は、結合、ハロゲン、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアミノ、置換されていてもよいアルキルオキシ、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいヘテロシクロアルキル、置換されていてもよいアリールおよび置換されていてもよいヘテロアリールからなる群から独立して選択され得る。Ｒ１およびＲ２は独立して、結合、ハロゲン、置換されていてもよいアミノ、置換されていてもよいアルキルアミノ、置換されていてもよいシクロアミノ、置換されていてもよいヘテロシクロアミノ、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいアリールまたは置換されていてもよいヘテロアリールであり得る。Ｒ１およびＲ２は独立して、結合、ハロゲン、置換されていてもよいアミノ、置換されていてもよいアルキルアミノ、置換されていてもよいシクロアミノ、置換されていてもよいヘテロシクロアミノ、置換されていてもよいアリールアミノ、置換されていてもよいヘテロアリールアミノ、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいアリールまたは置換されていてもよいヘテロアリールであり得る。Ｒ１は、置換されていてもよいヘテロシクロアミノ、置換されていてもよいヘテロアリールまたは置換されていてもよいアリールであり得る。
【０１５３】
Ｒ１は、置換されていてもよいフェニル、置換されていてもよいピリミジニル、置換されていてもよいピリジニル、置換されていてもよいピラジニル、置換されていてもよいチオモルホリノまたは置換されていてもよいモルホリノであり得る。
【０１５４】
Ｒ２は、ハロゲン、置換されていてもよいアミノ、置換されていてもよいアルキルアミノ、置換されていてもよいシクロアミノ、置換されていてもよいヘテロシクロアミノ、置換されていてもよいアリールまたは置換されていてもよいヘテロアリールであり得る。Ｒ２は、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、ＮＨ２、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、置換されていてもよいピロリジニル、置換されていてもよいピペリジニル、置換されていてもよいモルホリノ、置換されていてもよいフェニル、置換されていてもよいピリジニル、置換されていてもよいピリミジニル、置換されていてもよいピラジニル、または置換されていてもよいベンゾイミダゾリルであり得る。
【０１５５】
Ｒ３およびＲ４は、結合、水素、ハロゲン、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアミノ、置換されていてもよいアルキルオキシ、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいヘテロシクロアルキル、置換されていてもよいアリールおよび置換されていてもよいヘテロアリールからなる群から独立して選択され得る。Ｒ３およびＲ４は独立して、結合、水素、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアミノ、置換されていてもよいアルキルアミノ、置換されていてもよいシクロアミノ、置換されていてもよいヘテロシクロアミノ、置換されていてもよいアリールアミノ、置換されていてもよいヘテロアリールアミノ、置換されていてもよいアルキルオキシ、置換されていてもよいアリールオキシ、置換されていてもよいヘテロアリールオキシルまたは置換されていてもよいシクロアルキルであり得る。Ｒ３およびＲ４は独立して、結合、水素、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアミノ、置換されていてもよいアルキルアミノ、置換されていてもよいシクロアミノ、アリールアミノ、置換されていてもよいヘテロアリールアミノ、置換されていてもよいアルキルオキシ、置換されていてもよいアリールオキシ、置換されていてもよいヘテロアリールオキシルまたは置換されていてもよいシクロアルキルであり得る。
【０１５６】
Ｒ３は、結合、水素、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアミノ、置換されていてもよいアルキルアミノまたは置換されていてもよいシクロアミノであり得る。Ｒ３は、結合、水素、ＮＨ２、ジエチルアミノ、置換されていてもよいピロリジニルまたは置換されていてもよいピペリジニルであり得る。
【０１５７】
Ｒ４は、結合または置換されていてもよいアルキルであり得る。Ｒ４は、結合、エチル、１−プロピル、２−プロピル、２−ブチル、３−ペンチルまたはシクロペンチルであり得る。
【０１５８】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３またはＲ４のうちの少なくとも１つは、ヒドロキサメート基−Ｌ１−Ｒ５−Ｌ２−Ｒ６−Ｌ３−ＣＯＮ（Ｒａ）ＯＲｂによってさらに置換されていてもよい。
【０１５９】
ＲａおよびＲｂは、結合、水素、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアシルおよび置換されていてもよいアミノ酸残基からなる群から独立して選択され得る。ＲａおよびＲｂは水素であり得る。アミノ酸残基はプロドラッグの溶解性および生物学的利用能を向上させ得る。
【０１６０】
Ｌ１、Ｌ２およびＬ３は、結合、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアルケニルおよび置換されていてもよいアルキニルからなる群から独立して選択され得る。Ｌ１、Ｌ２およびＬ３は独立して、Ｃ１〜Ｃ１０の炭素鎖長を有し得る。
【０１６１】
Ｒ５およびＲ６は、結合、Ｏ、Ｓ、ＮＲｃ、Ｓ（Ｏ）ｎ、置換されていてもよいアミド、置換されていてもよい尿素、置換されていてもよいカルボニル尿素、置換されていてもよいチオ尿素、置換されていてもよいスルホンアミド、置換されていてもよいアミノスルホンアミド、置換されていてもよいスルホニル尿素、置換されていてもよいオキシム、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいヘテロシクロアルキル、置換されていてもよいアリールおよび置換されていてもよいヘテロアリールからなる群から独立して選択され得る。Ｒ５およびＲ６は独立して、結合、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−Ｎ（Ｍｅ）−、−Ｎ（Ａｃ）−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−ＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−、−ＮＨＣＯＮＨ−、−Ｓ（Ｏ）２ＮＨ−、ＮＨＳ（Ｏ）２−、−ＮＨＳ（Ｏ）２ＮＨ−、置換されていてもよいヘテロシクロアルキルまたは置換されていてもよいアリールであり得る。Ｒ５およびＲ６は独立して、結合、−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｎ（Ｍｅ）−、−ＮＨＣＯ−、１，３−ピペリジニレン、１，４−ピペリジニレン、２，４−ピリミジニレン、２，５−ピリミジニレン、１，２−フェニレン、１，３−フェニレンまたは１，４−フェニレンであり得る。
【０１６２】
Ｒｃは、結合、水素、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアルケニル、置換されていてもよいアルキニルおよび置換されていてもよいアシルからなる群から独立して選択され得る。
【０１６３】
ｎは０〜２の整数であり得る。
【０１６４】
置換されていてもよいアルキルは、置換されていてもよいＣ１〜Ｃ１２アルキル、置換されていてもよいＣ１〜Ｃ２アルキル、置換されていてもよいＣ１〜Ｃ４アルキル、置換されていてもよいＣ２〜Ｃ５アルキル、置換されていてもよいＣ１〜Ｃ６アルキル、置換されていてもよいＣ１〜Ｃ８アルキル、置換されていてもよいＣ１〜Ｃ１０アルキル、置換されていてもよいＣ２〜Ｃ４アルキル、置換されていてもよいＣ２〜Ｃ６アルキル、置換されていてもよいＣ２〜Ｃ８アルキル、置換されていてもよいＣ２〜Ｃ１０アルキル、置換されていてもよいＣ１〜Ｃ１２アルキル、置換されたＣ４〜Ｃ６アルキル、置換されていてもよいＣ４〜Ｃ８アルキル、置換されていてもよいＣ４〜Ｃ１０アルキル、置換されていてもよいＣ４〜Ｃ１２アルキル、置換されていてもよいＣ６〜Ｃ８アルキル、置換されていてもよいＣ６〜Ｃ１０アルキル、置換されていてもよいＣ６〜Ｃ１２アルキル、置換されていてもよいＣ８〜Ｃ１０アルキル、置換されていてもよいＣ８〜Ｃ１２アルキル、または置換されていてもよいＣ１０〜Ｃ１２アルキルであり得る。置換されていてもよいアルキルは、置換されていてもよいＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１またはＣ１２アルキルであり得る。
【０１６５】
置換されていてもよいアルキルオキシは、置換されていてもよいＣ１〜Ｃ１６アルキルオキシ、置換されていてもよいＣ１〜Ｃ２アルコキシ、置換されていてもよいＣ１〜Ｃ４アルコキシ、置換されていてもよいＣ１〜Ｃ６アルコキシ、置換されていてもよいＣ１〜Ｃ８アルコキシ、置換されていてもよいＣ１〜Ｃ１０アルコキシ、置換されていてもよいＣ１〜Ｃ１２アルコキシ、置換されていてもよいＣ１〜Ｃ１４アルコキシ、置換されていてもよいＣ２〜Ｃ４アルコキシ、置換されていてもよいＣ２〜Ｃ６アルコキシ、置換されていてもよいＣ２〜Ｃ８アルコキシ、置換されていてもよいＣ２〜Ｃ１０アルコキシ、置換されていてもよいＣ２〜Ｃ１２アルコキシ、置換されていてもよいＣ２〜Ｃ１４アルコキシ、置換されていてもよいＣ２〜Ｃ１６アルコキシ、置換されていてもよいＣ４〜Ｃ６アルコキシ、置換されていてもよいＣ４〜Ｃ８アルコキシ、置換されていてもよいＣ４〜Ｃ１０アルコキシ、置換されていてもよいＣ４〜Ｃ１２アルコキシ、置換されていてもよいＣ４〜Ｃ１４アルコキシ、置換されていてもよいＣ４〜Ｃ１６アルコキシ、置換されていてもよいＣ６〜Ｃ８アルコキシ、置換されていてもよいＣ６〜Ｃ１０アルコキシ、置換
されていてもよいＣ６〜Ｃ１２アルコキシ、置換されていてもよいＣ６〜Ｃ１４アルコキシ、置換されていてもよいＣ６〜Ｃ１６アルコキシ、置換されていてもよいＣ８〜Ｃ１０アルコキシ、置換されていてもよいＣ８〜Ｃ１２アルコキシ、置換されていてもよいＣ８〜Ｃ１４アルコキシ、置換されていてもよいＣ８〜Ｃ１６アルコキシ、置換されていてもよいＣ１０〜Ｃ１２アルコキシ、置換されていてもよいＣ１０〜Ｃ１４アルコキシ、置換されていてもよいＣ１０〜Ｃ１６アルコキシ、置換されていてもよいＣ１２〜Ｃ１４アルコキシ、置換されていてもよいＣ１２〜Ｃ１６アルコキシまたは置換されていてもよいＣ１４〜Ｃ１６アルコキシであり得る。置換されていてもよいアルコキシは、置換されていてもよいＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１、Ｃ１２、Ｃ１３、Ｃ１４、Ｃ１５またはＣ１６アルコキシであり得る。
【０１６６】
置換されていてもよいシクロアルキルは、置換されていてもよいＣ３〜Ｃ９シクロアルキル、置換されていてもよいＣ３〜Ｃ６シクロアルキルまたは置換されていてもよいＣ３〜Ｃ９シクロアルキルであり得る。置換されていてもよいシクロアルキルは、置換されていてもよいＣ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８またはＣ９シクロアルキルであり得る。
【０１６７】
置換されていてもよいヘテロシクロアルキルは、３〜８の環原子数を有する置換されていてもよいヘテロシクロアルキル、３〜４の環原子数を有する置換されていてもよいヘテロシクロアルキル、３〜５の環原子数を有する置換されていてもよいヘテロシクロアルキル、３〜６の環原子数を有する置換されていてもよいヘテロシクロアルキル、３〜７の環原子数を有する置換されていてもよいヘテロシクロアルキル、４〜５の環原子数を有する置換されていてもよいヘテロシクロアルキル、４〜６の環原子数を有する置換されていてもよいヘテロシクロアルキル、４〜７の環原子数を有する置換されていてもよいヘテロシクロアルキル、４〜８の環原子数を有する置換されていてもよいヘテロシクロアルキル、５〜６の環原子数を有する置換されていてもよいヘテロシクロアルキル、５〜７の環原子数を有する置換されていてもよいヘテロシクロアルキル、５〜８の環原子数を有する置換されていてもよいヘテロシクロアルキル、６〜７の環原子数を有する置換されていてもよいヘテロシクロアルキル、６〜８の環原子数を有する置換されていてもよいヘテロシクロアルキルまたは７〜８の環原子数を有する置換されていてもよいヘテロシクロアルキルであり得る。置換されていてもよいヘテロシクロアルキルは、置換されていてもよく、３、４、５、６、７または８の環原子数を有し得る。置換されていてもよいヘテロシクロアルキルは、Ｎ、ＯおよびＳからなる群から独立して選択される１〜３個のヘテロ原子を有し得る。置換されていてもよいヘテロシクロアルキルは、Ｎ、ＯおよびＳからなる群から独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を有し得る。置換されていてもよいヘテロシクロアルキルは、Ｎ、ＯおよびＳからなる群から独立して選択される２〜３個のヘテロ原子を有し得る。
【０１６８】
置換されていてもよいアリールは、置換されていてもよいＣ６〜Ｃ１８アリール、置換されていてもよいＣ６〜Ｃ１０アリール、置換されていてもよいＣ６〜Ｃ１２アリール、置換されていてもよいＣ６〜Ｃ１４アリール、置換されていてもよいＣ６〜Ｃ１６アリール、置換されたＣ８〜Ｃ１０アリール、置換されていてもよいＣ８〜Ｃ１２アリール、置換されていてもよいＣ８〜Ｃ１４アリール、置換されていてもよいＣ８〜Ｃ１６アリール、置換されていてもよいＣ８〜Ｃ１８アリール、置換されていてもよいＣ１０〜Ｃ１２アリール、置換されていてもよいＣ１０〜Ｃ１４アリール、置換されていてもよいＣ１０〜Ｃ１６アリール、置換されていてもよいＣ１０〜Ｃ１８アリール、置換されていてもよいＣ１２〜Ｃ１４アリール、置換されていてもよいＣ１２〜Ｃ１６アリール、置換されていてもよいＣ１２〜Ｃ１８アリール、置換されていてもよいＣ１４〜Ｃ１６アリール、置換されていてもよいＣ１４〜Ｃ１８アリールまたは置換されていてもよいＣ１４〜Ｃ１８アリールであり得る。置換されていてもよいアリールは、置換されていてもよいＣ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１、Ｃ１２、Ｃ１３、Ｃ１４、Ｃ１５、Ｃ１６、Ｃ１７また
はＣ１８アリールであり得る。
【０１６９】
置換されていてもよいヘテロアリールは、３〜８の環原子数を有するヘテロアリール、３〜４の環原子数を有する置換されていてもよいヘテロアリール、３〜５の環原子数を有する置換されていてもよいヘテロアリール、３〜６の環原子数を有する置換されていてもよいヘテロアリール、３〜７の環原子数を有する置換されていてもよいヘテロアリール、４〜５の環原子数を有する置換されていてもよいヘテロアリール、４〜６の環原子数を有する置換されていてもよいヘテロアリール、４〜７の環原子数を有する置換されていてもよいヘテロアリール、４〜８の環原子数を有する置換されていてもよいヘテロアリール、５〜６の環原子数を有する置換されていてもよいヘテロアリール、５〜７の環原子数を有する置換されていてもよいヘテロアリール、５〜８の環原子数を有する置換されていてもよいヘテロアリール、６〜７の環原子数を有する置換されていてもよいヘテロアリール、６〜８の環原子数を有する置換されていてもよいヘテロアリールまたは７〜８の環原子数を有する置換されていてもよいヘテロアリールであり得る。置換されていてもよいヘテロアリールは、置換されていてもよく、３、４、５、６、７または８の環原子数を有し得る。置換されていてもよいヘテロアリールは、Ｎ、ＯおよびＳからなる群から独立して選択される１〜３個のヘテロ原子を有し得る。置換されていてもよいヘテロアリールは、Ｎ、ＯおよびＳからなる群から独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を有し得る。置換されていてもよいヘテロアリールは、Ｎ、ＯおよびＳから成る群から独立して選択される２〜３個のヘテロ原子を有し得る。
【０１７０】
置換されていてもよいアルケニルは、置換されていてもよいＣ２〜Ｃ１２アルケニル、置換されていてもよいＣ２〜Ｃ４アルケニル、置換されていてもよいＣ２〜Ｃ６アルケニル、置換されていてもよいＣ２〜Ｃ８アルケニル、置換されていてもよいＣ２〜Ｃ１０アルケニル、置換されていてもよいＣ１〜Ｃ１２アルケニル、置換されたＣ４〜Ｃ６アルケニル、置換されていてもよいＣ４〜Ｃ８アルケニル、置換されていてもよいＣ４〜Ｃ１０アルケニル、置換されていてもよいＣ４〜Ｃ１２アルケニル、置換されていてもよいＣ６〜Ｃ８アルケニル、置換されていてもよいＣ６〜Ｃ１０アルケニル、置換されていてもよいＣ６〜Ｃ１２アルケニル、置換されていてもよいＣ８〜Ｃ１０アルケニル、置換されていてもよいＣ８〜Ｃ１２アルケニル、または置換されていてもよいＣ１０〜Ｃ１２アルケニルであり得る。置換されていてもよいアルケニルは、置換されていてもよいＣ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１またはＣ１２アルケニルであり得る。
【０１７１】
置換されていてもよいアルキニルは、置換されていてもよいＣ２〜Ｃ１２アルキニル、置換されていてもよいＣ２〜Ｃ４アルキニル、置換されていてもよいＣ２〜Ｃ６アルキニル、置換されていてもよいＣ２〜Ｃ８アルキニル、置換されていてもよいＣ２〜Ｃ１０アルキニル、置換されていてもよいＣ１〜Ｃ１２アルキニル、置換されたＣ４〜Ｃ６アルキニル、置換されていてもよいＣ４〜Ｃ８アルキニル、置換されていてもよいＣ４〜Ｃ１０アルキニル、置換されていてもよいＣ４〜Ｃ１２アルキニル、置換されていてもよいＣ６〜Ｃ８アルキニル、置換されていてもよいＣ６〜Ｃ１０アルキニル、置換されていてもよいＣ６〜Ｃ１２アルキニル、置換されていてもよいＣ８〜Ｃ１０アルキニル、置換されていてもよいＣ８〜Ｃ１２アルキニル、または置換されていてもよいＣ１０〜Ｃ１２アルキニルであり得る。置換されていてもよいアルキニルは、置換されていてもよいＣ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１またはＣ１２アルキニルであり得る。
【０１７２】
ヒドロキサメート基−Ｌ１−Ｒ５−Ｌ２−Ｒ６−Ｌ３−ＣＯＮ（Ｒａ）ＯＲｂは、以下の構造のうちのいずれか１つから選択され得；
【０１７３】
【化８】
2017510628.tif 000010
【０１７４】
Ｒ７は、結合、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、Ｏ、Ｓ、置換されていてもよいアミノ、−ＣＨ２Ｏ−、−ＯＣＨ２−、−ＣＨ２Ｓ（Ｏ）ｎ−、−Ｓ（Ｏ）ｎＣＨ２−、−Ｓ（Ｏ）ｎ−、−ＣＨ２Ｎ（Ｒｃ）−、−Ｎ（Ｒｃ）ＣＨ２−、−Ｎ（Ｒｃ）−、−ＣＯ−、−Ｃ（＝ＮＯＲａ）−、−ＣＯＮ（Ｒａ）−、−Ｎ（Ｒｃ）ＣＯ−、−Ｎ（Ｒｃ）ＣＯＮ（Ｒｃ）ＣＯ−、−ＣＯＮ（Ｒｃ）ＣＯＮＨ−、−Ｎ（Ｒｃ）ＣＯＮ（Ｒｂ）−、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒｃ）−、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒａ）ＣＯＮ（Ｒｃ）−、−Ｎ（Ｒｃ）ＣＯＮ（Ｒａ）Ｓ（Ｏ）２−、−Ｎ（Ｒｃ）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒａ）−および−Ｎ（Ｒｃ）Ｓ（Ｏ）２−からなる群から選択され得；
ｍは０〜１０の整数であり得る。
【０１７５】
Ｒ２またはＲ４はヒドロキサメート基−Ｌ１−Ｒ５−Ｌ２−Ｒ６−Ｌ３−ＣＯＮ（Ｒａ）ＯＲｂを含有し得る。
【０１７６】
Ｒ２またはＲ３がヒドロキサメート基を含有する場合、Ｒ１はモルホリンにはなり得ない。
【０１７７】
Ｒ２またはＲ３がヒドロキサメート基を含有する場合、Ｒ１は置換アミノであり得る。置換アミノはモルホリンであり得る。
【０１７８】
前記化合物は以下の式（Ｉｂ）を有し得：
【０１７９】
【化９】
2017510628.tif 000011
式中、Ｒ１は、置換されていてもよいフェニル、置換されていてもよいピリミジニル、置換されていてもよいピリジニル、置換されていてもよいピラジニル、置換されていてもよいチオモルホリノまたは置換されていてもよいモルホリノであり得；
Ｒ２は、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、ＮＨ２、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、置換されていてもよいピロリジニル、置換されていてもよいピペリジニル、置換されていてもよいモルホリノ、置換されていてもよいフェニル、置換されていてもよいピリジニル、置換されていてもよいピリミジニル、置換されていてもよいピラジニル、または置換されていてもよいベンゾイミダゾリルであり得；
Ｒ３は、結合、水素、ＮＨ２、ジエチルアミノ、置換されていてもよいピロリジニルまたは置換されていてもよいピペリジニルであり得；
Ｒ４は、結合、エチル、１−プロピル、２−プロピル、２−ブチル、３−ペンチルまたはシクロペンチルであり得る。
【０１８０】
本開示の具体的な化合物としては、以下：
【０１８１】
【化１０−１】
2017510628.tif 000012
【化１０−２】
2017510628.tif 000013
【化１０−３】
2017510628.tif 000014
【化１０−４】
2017510628.tif 000015
【化１０−５】
2017510628.tif 000016
【化１０−６】
2017510628.tif 000017
【化１０−７】
2017510628.tif 000018
【化１０−８】
2017510628.tif 000019
【化１０−９】
2017510628.tif 000020
【化１０−１０】
2017510628.tif 000021
またはその薬剤的に許容できる塩もしくはプロドラッグが挙げられる。
【０１８２】
Ｒ２またはＲ３がヒドロキサメート基を含有する場合のＲ１がモルホリンでない場合の具体的な化合物には、以下：
【０１８３】
【化１１−１】
2017510628.tif 000022
【化１１−２】
2017510628.tif 000023
【化１１−３】
2017510628.tif 000024
【化１１−４】
2017510628.tif 000025
【化１１−５】
2017510628.tif 000026
【化１１−６】
2017510628.tif 000027
【化１１−７】
2017510628.tif 000028
【化１１−８】
2017510628.tif 000029
【化１１−９】
2017510628.tif 000030
【化１１−１０】
2017510628.tif 000031
またはその薬剤的に許容できる塩もしくはプロドラッグが含まれ得る。
【０１８４】
Ｒ２またはＲ３がヒドロキサメート基を含有し、置換アミノがモルホリンである場合の、Ｒ１が置換アミノである、具体的な化合物には、以下：
【０１８５】
【化１２−１】
2017510628.tif 000032
【化１２−２】
2017510628.tif 000033
またはその薬剤的に許容できる塩もしくはプロドラッグが含まれ得る。
【０１８６】
上記定義の化合物は酵素阻害剤であり得る。上記定義の化合物は、ある種の脱アセチル化酵素およびプロテインキナーゼの活性を阻害する能力を有し得る。脱アセチル化酵素はヒストン脱アセチル化酵素であり得る。脱アセチル化酵素活性を阻害する能力は、前記化合物がヒストン脱アセチル化酵素および／または非ヒストン脱アセチル化酵素分子に対し
て直接且つ単独で作用し、生物活性を阻害した結果であり得る。キナーゼは脂質キナーゼまたはプロテインキナーゼであり得る。キナーゼは脂質キナーゼおよびプロテインキナーゼであり得る。キナーゼはホスファチジルイノシテート−３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）であり得る。キナーゼ活性を阻害する能力は、前記化合物がキナーゼ分子に対して直接且つ単独で作用し、生物活性を阻害した結果であり得る。しかしながら、前記化合物は少なくとも部分的には、リン酸化プロセスに関与する問題のキナーゼの補助因子に対しても作用し得ることが理解される。
【０１８７】
本明細書で開示される化合物は、脱アセチル化酵素分子またはその複合体もしくは断片に対して直接的且つ単独で作用し、生物活性を阻害し得る。しかしながら、前記化合物は少なくとも部分的には、脱アセチル化プロセスに関与する補助因子に対しても作用し得ることが理解される。公知のキナーゼ補助因子としては、イオン種（亜鉛等）が挙げられる。
【０１８８】
本明細書で開示される化合物は、キナーゼ分子またはその複合体もしくは断片に対して直接的且つ単独で作用し、生物活性を阻害し得る。しかしながら、前記化合物は少なくとも部分的には、リン酸化プロセスに関与する補助因子に対しても作用し得ることが理解される。公知のキナーゼ補助因子としては、イオン種（亜鉛およびカルシウム等）、脂質（ホスファチジルセリン等）、およびジアシルグリセロールが挙げられる。
【０１８９】
上記定義の化合物は、ＨＤＡＣおよび／もしくはＰＩ３Ｋキナーゼまたはその断片もしくは複合体もしくは機能的複合体に対する活性を有し得る。上記定義の化合物は、ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤（ＨＤＡＣ）またはホスファチジルイノシテート−３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤であり得る。上記定義の化合物は、ヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣ）阻害剤およびホスファチジルイノシテート−３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤であり得る。上記定義の化合物は、ＰＩ３Ｋ−ＡＫＴ−ｍＴＯＲ経路の阻害剤であり得る。上記定義の化合物は多標的阻害剤であり得る。上記定義の化合物は、ヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣ）およびホスファチジルイノシテート−３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）を同時に阻害し得る。
【０１９０】
上記定義の化合物は、ｍＴＯＲもしくはＡｋｔ等のある種のセリン／スレオニンキナーゼ、またはその断片もしくは複合体もしくは機能的等価物に対する活性を有し得る。
【０１９１】
脂質キナーゼおよびプロテインキナーゼの阻害は、当該技術分野におけるいくつかの周知の方法のいずれかで実行され得る。例えば、インビトロにおけるプロテインキナーゼの阻害が望まれる場合、適量の前記化合物がキナーゼを含有する溶液に添加され得る。哺乳動物におけるキナーゼの活性を阻害することが望まれる場合、キナーゼの阻害は、典型的には、キナーゼを含有する哺乳動物に前記化合物を投与することを含み得る。
【０１９２】
細胞におけるＨＤＡＣおよび／またはＰＩ３Ｋを阻害する方法は、上記定義の化合物、またはその薬剤的に許容できる形態もしくはプロドラッグを細胞に投与することを含み得る。ＨＤＡＣおよび／またはＰＩ３Ｋの阻害は、細胞増殖の阻害をさらに含み得る。ＨＤＡＣおよび／またはＰＩ３Ｋの阻害は、細胞を再プログラムして多能性幹細胞（ｉＰＳ細胞）を誘導することをさらに含み得る。
【０１９３】
細胞はインビトロの細胞であり得る。細胞は細胞株由来であり得る。細胞株は不死化細胞株、遺伝子改変細胞株または初代細胞株であり得る。細胞株は、ＭＶ４−１１、ＭＯＬＴ−４、ＰＣ−３、ＭＣＦ７、ＳＵＰ−Ｂ１５、ＨＬ−６０、Ｋ−５６２、ＲＰＭＩ−８２２６、Ｄａｕｄｉ、Ｒａｊｉ、Ｒａｍｏｓ、Ｐｆｅｉｆｆｅｒ、Ａ４３１、ＡＣＨＮ、Ａ５４９、ＣＯＬＯ２０５、ＨＣＴ１１６、ＨＥＬ９２．１．７、ＮＣＩ−Ｈ５２２、Ａ
３７５、ＮＣＩ−Ｈ４６０、ＢｘＰＣ−３、ＰＡＮＣ−１、ＳＫ−ＯＶ−３、Ｕ８７ＭＧ、Ｕ１３８ＭＧ、ＨｐｅＧ２、ＳＫ−ＨＥＰ１、ＨｕＨ−７、ＨＣＣＬＭ３、ＰＬＣ／ＰＲＦ／５、ＨｅＬａ、ＢＴ４７４、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、ＭＤＡ−ＭＢ−４３６およびＭＤＡ−ＭＢ−４６８からなる群から選択され得る。
【０１９４】
細胞は対象の組織由来であり得る。細胞は対象内の細胞であり得る。
【０１９５】
上記定義のこれらの化合物は、腫瘍学の指標、並びに、自己免疫性疾患および炎症性疾患等の非腫瘍学の指標および適用、幹細胞の自己複製および分化、のための調節剤または阻害剤として使用され得る。
【０１９６】
従って、上記定義の化合物は、脂質および上記種類のプロテインキナーゼを阻害するそれらの能力が利用可能である、複数の適用が存在し得る。例えば、上記定義の化合物は、セリン／スレオニンプロテインキナーゼを阻害するために使用され得る。前記化合物はまた、プロテインキナーゼおよび／またはその補助因子の阻害が状態の病態または総体症状を予防、阻害または改善する、哺乳動物における状態の治療または予防においても使用され得る。
【０１９７】
上記定義の化合物、またはその薬剤的形態（pharmaceutically form）もしくはプロドラッグ、または上記定義の組成物は、治療用であり得る。
【０１９８】
ＨＤＡＣ関連障害またはＰＩ３Ｋ関連障害を治療する方法は、治療を必要としている対象に、上記定義の化合物、またはその薬剤的に許容できる形態もしくはプロドラッグ、または上記定義の組成物を投与することを含み得る。ＨＤＡＣ関連障害およびＰＩ３Ｋ関連障害を治療する方法は、治療を必要としている対象に、上記定義の化合物、またはその薬剤的に許容できる形態もしくはプロドラッグ、または上記定義の組成物を投与することを含み得る。
【０１９９】
前記方法は、対象において追加の治療薬を投与する工程をさらに含み得る。幹細胞の自己複製または分化を調節する方法は、治療を必要としている対象に、上記定義の化合物、またはその薬剤的に許容できる形態もしくはプロドラッグ、または上記定義の組成物を投与することを含み得る。
【０２００】
また、上記定義の化合物は、プロテインキナーゼの阻害によって状態の病態または総体症状が予防、阻害または改善され得る、動物における状態の治療のための薬剤の調製においても、使用され得る。また、上記定義の化合物は、キナーゼ関連障害の治療または予防のための薬剤の調製においても、使用され得る。
【０２０１】
上記定義の化合物、またはその薬剤的に許容できる形態もしくはプロドラッグ、または上記定義に従う組成物の使用は、ＨＤＡＣ関連障害またはＰＩ３Ｋ関連障害の治療のための薬剤の製造における使用であり得る。上記定義の化合物、またはその薬剤的に許容できる形態もしくはプロドラッグ、または上記定義の組成物の使用は、ＨＤＡＣ関連障害およびＰＩ３Ｋ関連障害の治療のための薬剤の製造における使用であり得る。
【０２０２】
上記定義の化合物、またはその薬剤的に許容できる形態もしくはプロドラッグ、または上記定義の組成物の使用は、幹細胞の自己複製または分化を調節するための薬剤の製造における使用であり得る。
【０２０３】
前記使用は、追加の治療薬と組み合わせて、またはそれと変更（alteration）して投与され得る、追加の治療薬と共に投与される薬剤をさらに含み得る。
【０２０４】
状態または障害は、がん、血管形成障害もしくは病的血管新生、線維症、炎症性疾患、喘息、神経障害、神経変性障害、筋変性疾患、自己免疫障害、血液の障害または骨髄の障害からなる群から選択され得る。状態または障害は、リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、もしくはホジキンリンパ腫、子宮頸がん、卵巣がん、乳がん、肺がん、前立腺がん、結腸直腸がん、肉腫、肝細胞癌、白血病もしくは骨髄腫、網膜血管新生疾患、肝線維症、腎線維症、アルツハイマー病もしくはハンチントン病、脊髄性筋萎縮症、ＨＩＶ／エイズ、真性赤血球増加症もしくは本態性血小板血症または骨髄線維症であり得る。
【０２０５】
上記定義の化合物は、限定はされないが、骨がん、脳およびＣＮＳの腫瘍、乳がん、結腸直腸がん、内分泌がん、例えば、副腎皮質癌、膵がん、下垂体がん、甲状腺がん、副甲状腺がん、胸腺がん、胃腸がん、肝臓がん、肝外胆管がん、消化管カルチノイド腫瘍、胆嚢がん、尿生殖器がん、婦人科がん、頭頸部がん、白血病、骨髄腫、血液疾患、肺がん、リンパ腫、眼がん、皮膚がん、軟部肉腫、成人軟部肉腫、カポジ肉腫、泌尿器系がんを含む、様々ながんの治療で有用であることが予測される。
【０２０６】
上記定義の化合物で治療され得るがんの例としては、以下が挙げられる：骨髄増殖性疾患（特発性骨髄線維症、真性赤血球増加症、本態性血小板血症、慢性骨髄性白血病）、骨髄化生、慢性骨髄単球性白血病、急性リンパ性白血病、急性赤芽球性白血病、ホジキン病および非ホジキン病、Ｂ細胞リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、急性Ｔ細胞白血病、骨髄異形成症候群、形質細胞障害、毛様細胞性白血病、カポジ肉腫、リンパ腫等の血液のがんおよび固形腫瘍；乳癌、卵巣がん、子宮頸がん、膣および外陰部のがん、子宮内膜増殖症等の婦人科がん；結腸直腸癌、ポリープ、肝臓がん、胃がん、膵がん、胆嚢がん等の胃腸管がん；前立腺がん、腎臓および腎がん等の尿路がん；膀胱がん、尿道がん、陰茎がん；メラノーマ等の皮膚がん；グリア芽腫、神経芽細胞腫、星状細胞腫、上衣腫（ependynoma）、脳幹神経膠腫、髄芽腫、髄膜腫、星状細胞腫、乏突起膠腫等の脳腫瘍；上咽頭癌、喉頭癌等の頭頸部がん；肺癌（ＮＳＣＬＣおよびＳＣＬＣ）、中皮腫等の気道がん；網膜芽細胞腫等の眼疾患；骨肉腫、筋骨格腫瘍等の筋骨格疾患；扁平上皮癌および類線維腫。
【０２０７】
上記定義の化合物のヒトへの投与は、経口または直腸等の経腸投与用に承認された様式のいずれかによって、または皮下、筋肉内、静脈内および皮内経路等の非経口投与によって、行われ得る。注射は、ボーラス、または持続もしくは間欠注入によるものであり得る。上記定義の活性化合物は、典型的には、薬剤的に許容できる担体または希釈剤中に、治療有効量で患者に送達されるのに充分な量で含まれ得る。種々の実施形態において、阻害化合物は、正常細胞に対してよりも、急速増殖細胞（例えばがん性腫瘍）に対して選択的に毒性、またはより毒性であり得る。
【０２０８】
上記定義の化合物は使用の際、前記化合物の生物による利用を可能にする、あらゆる形態または様式で投与され得る。製剤調製の当業者は、選択された化合物の具体的な特徴、治療される状態、治療される状態の段階、および他の関連状況に基づいて、適切な投与形態および投与様式を容易に選択することができる。
【０２０９】
上記定義の化合物は、単独で、または薬剤的に許容できる担体、希釈剤もしくは賦形剤と組み合わされた医薬組成物の形態で、投与され得る。前記化合物は、それら自体有効ではあるが、通常、それらの薬剤的に許容できる塩の形態で製剤化および投与され、これは、これらの形態が通常、より安定で、より結晶化が容易で、溶解性が増加するためである。
【０２１０】
しかし、上記定義の化合物は、通常、所望の投与様式に基づいて製剤化された医薬組成
物の形態で使用される。医薬組成物は、上記定義の通りの化合物、またはその薬剤的に許容できる形態もしくはプロドラッグ、および薬剤的に許容できる賦形剤を含み得る。従って、いくつかの実施形態において、本開示は、式（Ｉ）の化合物および薬剤的に許容できる担体、希釈剤または賦形剤を含む、医薬組成物を提供する。前記組成物は、当該技術分野において周知の様式で調製され得る。
【０２１１】
他の実施形態において、前記医薬組成物の成分のうちの一つまたは複数を充填された一つまたは複数の容器を含む、医薬品パックまたはキットが提供される。そのようなパックまたはキット中には、単位投与量の作用剤を含む容器が存在していてもよい。前記キットは、使用前にさらに希釈され得る濃縮物（例えば、凍結乾燥した組成物）として有効な作用剤を含む組成物を含んでいてもよく、あるいは、使用濃度で提供されてもよく、そのキットにおいてはバイアルが一つまたは複数の投与量を含んでいてもよい。キットにおいては、医師がバイアルを直接利用できるように、単一投与量を無菌バイアル内で提供することができ、バイアルには作用剤の所望の量および濃度が含まれると都合が良い。そのような容器には、様々な資料、例えば、使用説明書、または医薬品もしくは生物由来物質の製造、使用もしくは販売を規制する政府当局が定めた形式の、ヒトへの投与のための製造、使用または販売の機関による承認を示す注意事項が付随していてもよい。
【０２１２】
前記化合物は、前記障害／疾患の治療のための一つまたは複数の追加の薬剤と組み合わせて、使用または投与され得る。前記成分は、同一製剤で、または別々の製剤で投与され得る。別々の製剤で投与される場合、前記化合物は、順次、または他の薬剤と同時に投与され得る。
【０２１３】
一つまたは複数の追加の薬剤と組み合わせて投与可能であることに加え、前記化合物は、併用療法で使用され得る。これが行われる場合、前記化合物は、典型的には、互いに組み合わされて投与される。従って、前記化合物のうちの一つまたは複数は、所望の効果を達成するために、同時に（組み合わされた調製物として）、または順次、投与され得る。これは、２つの薬剤の併用効果が治療結果の向上をもたらすように、各々の化合物の治療上の特性が異なる場合に、特に望ましい。
【０２１４】
非経口注射用の医薬組成物は、薬剤的に許容できる無菌の水溶液もしくは非水溶液、分散液、懸濁液または乳液、並びに、使用の直前の無菌の注射用溶液もしくは分散液への再構成のための無菌散剤を含み得る。適切な水性および非水性の担体、希釈剤、溶媒またはビヒクルの例としては、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等）、並びにその適切な混合物、植物油（例えば、オリーブ油）、並びに注射用の有機酸エステル（例えば、オレイン酸エチル）が挙げられる。適切な流動性は、例えば、レシチン等のコーティング材料の使用によって、分散液の場合では必要な粒径の維持によって、および界面活性剤の使用によって、維持され得る。
【０２１５】
これらの組成物は、保存剤、湿潤剤、乳化剤、および分散剤等のアジュバントも含有し得る。微生物作用の阻止は、種々の抗細菌剤および抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノールソルビン酸等の含有によって保証され得る。糖類、塩化ナトリウム等の等張剤を含むことも望ましい場合がある。注射用医薬品形態の長期に亘る吸収は、モノステアリン酸アルミニウム（aluminium monostearate）およびゼラチン等の、吸収を遅延させる作用剤の含有によってもたらされ得る。
【０２１６】
必要であれば、また、より有効な分布のために、前記化合物は、ポリマーマトリックス、リポソーム、およびミクロスフェア等の徐放性または標的化された送達系に取り込まれてもよい。
【０２１７】
注射用製剤は、例えば、細菌保持フィルターを通じた濾過によって、または、使用の直前に滅菌水もしくは他の無菌注射用媒体に溶解もしくは分散させることが可能な無菌固体組成物の形態で滅菌剤を組み入れることによって、無菌化され得る。
【０２１８】
経口投与用の固体剤形は、カプセル剤、錠剤、丸剤、散剤、および粒剤を含み得る。このような固体剤形において、活性化合物は、少なくとも１つの不活性な薬剤的に許容できる賦形剤もしくは担体、例えば、クエン酸ナトリウムもしくはリン酸二カルシウム、並びに／または、ａ）充填剤もしくは増量剤、例えば、デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、およびケイ酸、ｂ）結合剤、例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロース、およびアカシア、ｃ）保湿剤、例えば、グリセロール、ｄ）崩壊剤、例えば、寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモもしくはタピオカデンプン、アルギン酸、ある種のケイ酸塩、および炭酸ナトリウム、ｅ）溶解遅延剤、例えば、パラフィン、ｆ）吸収促進剤、例えば、第４級アンモニウム化合物、ｇ）湿潤剤、セチルアルコールおよびグリセロールモノステアレート、ｈ）吸収剤、例えば、カオリンおよびベントナイト粘土、並びに、ｉ）滑沢剤、例えば、滑石、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、並びにこれらの混合物、と混合され得る。カプセル剤、錠剤および丸剤の場合、剤形は緩衝剤も含み得る。
【０２１９】
似たような種類の固体組成物も、ラクトース、すなわち乳糖、および高分子量ポリエチレングリコール等の賦形剤を用いる、軟および硬ゼラチンカプセル中の充填剤として使用され得る。
【０２２０】
錠剤、糖剤、カプセル剤、丸剤、および粒剤の固体剤形は、腸溶コーティングおよび医薬品製剤分野において周知の他のコーティング等のコーティングおよびシェルと一緒に調製され得る。これらは、所望により乳白剤を含有していてもよく、所望により遅延させて、腸管のある部分のみで、または選択的に、活性成分を放出する、組成物であってもよい。使用され得る包埋組成物の例としては、高分子物質およびろうが挙げられる。
【０２２１】
活性化合物は、適切な場合、上記の賦形剤のうちの一つまたは複数を含む、マイクロカプセル化形態であってもよい。
【０２２２】
経口投与用の液体剤形は、薬剤的に許容できる乳剤、水剤、懸濁剤、シロップ剤およびエリキシル剤を含み得る。活性化合物に加えて、液体剤形は、当該技術分野において一般に使用される不活性希釈剤、例えば、水または他の溶媒、可溶化剤および乳化剤、例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、油（具体的には、綿実油、落花生油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油、およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、Ｓｏｌｕｔｏｌ（登録商標）ＨＳ１５、クレモフォールＥＬ、ソルビタン脂肪酸エステルポリエチレングリコールエーテル、並びにこれらの混合物を含有し得る。
【０２２３】
不活性希釈剤に加えて、経口用組成物は、湿潤剤、乳化および懸濁剤、甘味剤、香味剤、および芳香剤等のアジュバントも含み得る。
【０２２４】
懸濁剤は、活性化合物に加えて、例えば、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル、微結晶性セルロース、アルミニウムメタヒロロキシド（aluminium metahydroxide）、ベントナイト、寒天、並びにトラ
ガント等の懸濁化剤、並びにこれらの混合物を含有し得る。
【０２２５】
直腸投与または膣内投与用の組成物は、前記化合物を、カカオ脂、ポリエチレングリコール等の適切な非刺激性の賦形剤もしくは担体と混合することにより調製され得る坐剤、または、室温で固体であるが、体温の温度では液体であるために、直腸または腟腔において融解し、活性化合物を放出する、座薬ワックスであることが好ましい。
【０２２６】
化合物の局所投与のための剤形としては、散剤、貼付剤、噴霧剤、軟膏剤および吸入剤が挙げられる。活性化合物は、無菌条件下で、薬剤的に許容できる担体、および必要とされ得る、あらゆる必要な保存剤、緩衝液、または噴射剤と混合され得る。
【０２２７】
投与される化合物の量は、状態を治療および低減または軽減することが好ましい。治療有効量は、主治医を務める診断医により、従来技術の使用によって、および、類似の環境下で得られた結果の観察によって、容易に決定することができる。治療有効量を決定する際、いくつかの要素が考慮されるべきであり、例えば、限定はされないが、動物の種、そのサイズ、年齢および全体的な健康、関連する具体的な状態、状態の重症度、患者の治療への応答、投与される具体的な化合物、投与様式、投与される調製物の生物学的利用能、選択された用量レジーム（dose regime）、他の薬物治療の使用、並びに他の関連する状況が挙げられる。
【０２２８】
好ましい投与量は、約０．０１〜４００ｍｇ／体重キログラム／日の範囲であり得る。より好ましい投与量は、０．１〜２００ｍｇ／体重キログラム／日、より好ましくは０．２〜１００ｍｇ／体重キログラム／日、さらにより好ましくは０．２〜５０ｍｇ／体重キログラム／日の範囲であり得る。適切な用量が、一日あたり複数の分割量で投与されてもよい。
【０２２９】
式（Ｉ）の化合物を合成するための方法は、以下の工程を含み得る；（ａ）ハロゲン二置換プリン系化合物またはハロゲン二置換縮合ピリミジン系化合物を準備する工程；（ｂ）工程（ａ）の化合物におけるアミン（−ＮＨ−基）をアルキル化する工程；（ｃ）工程（ｂ）の中間化合物のハロゲン化物原子を、置換されていてもよいボロン酸エステルまたは置換されていてもよいアミンと選択的または連続的に置換して、それぞれ置換芳香族または置換アミンを形成させる工程；（ｄ）工程（ｃ）の中間化合物を、−Ｌ１−Ｒ５−Ｌ２−Ｒ６−Ｌ３−ＣＯＮ（Ｒａ）ＯＲｂの構造を有する保護ヒドロキサム酸基またはエステル（ヒドロキサム酸前駆物質）と選択的に共役させる工程；並びに、（ｅ）反応条件下で、工程（ｄ）の中間化合物の保護ヒドロキサメートまたはエステルをヒドロキサム酸に変換して、式（Ｉ）の化合物を形成させる工程。
【０２３０】
式（Ｉ）の化合物を合成するための方法は、以下の工程を含み得る；（ａ）ハロゲン二置換プリン系化合物またはハロゲン二置換縮合ピリミジン系化合物を準備する工程；（ｂ）前記化合物のハロゲン化物原子のうちの１つを、置換されていてもよいボロン酸エステルまたは置換されていてもよいアミンと選択的に置換して、それぞれ置換芳香族または置換アミンを形成させる工程；（ｃ）工程（ｂ）の中間化合物におけるアミン（−ＮＨ−基）をアルキル化する工程；（ｄ）工程（ｃ）の中間化合物の残りのハロゲン化物原子を、置換されていてもよいボロン酸エステルまたは置換されていてもよいアミンと選択的に置換して、それぞれ置換芳香族または置換アミンを形成させる工程；（ｅ）工程（ｄ）の中間化合物を、−Ｌ１−Ｒ５−Ｌ２−Ｒ６−Ｌ３−ＣＯＮ（Ｒａ）ＯＲｂの構造を有する保護ヒドロキサム酸基またはエステル（ヒドロキサム酸前駆物質）と選択的に共役させる工程；並びに（ｆ）反応条件下で、工程（ｅ）の中間化合物の保護ヒドロキサメートまたはエステルをヒドロキサム酸に変換して、式（Ｉ）の化合物を形成させる工程。
【０２３１】
式（Ｉ）の化合物を合成するための方法は、
【０２３２】
【化１３】
2017510628.tif 000034
以下の工程を含み得る；（ａ）ハロゲン二置換プリン系化合物またはハロゲン二置換縮合ピリミジン系化合物を準備する工程；（ｂ）工程（ａ）の化合物におけるアミンをアルキル化する工程；（ｃ）段階（ｂ）の中間化合物のハロゲン化物原子を、置換されていてもよいボロン酸エステルまたは置換されていてもよいアミンと選択的または連続的に置換して、それぞれ置換芳香族または置換アミンを形成させる工程；（ｄ）工程（ｃ）の中間化合物において、式（Ｉ）のＹ位置に対応する炭素原子をアルキル化する工程；（ｅ）工程（ｄ）の中間化合物を、−Ｌ１−Ｒ５−Ｌ２−Ｒ６−Ｌ３−ＣＯＮ（Ｒａ）ＯＲｂの構造を有する保護ヒドロキサム酸基またはエステル（ヒドロキサム酸エステル前駆物質）と選択的に共役させる工程；並びに（ｆ）反応条件下で、工程（ｅ）の中間化合物の保護ヒドロキサメートまたはエステルをヒドロキサム酸に変換して、式（Ｉ）の化合物を形成させる工程。
【０２３３】
式（I）の化合物を合成するための方法は、以下の工程を含み得る；（ａ）ハロゲン二置換プリン系化合物またはハロゲン二置換縮合ピリミジン系化合物を準備する工程；（ｂ）前記化合物のハロゲン化物原子のうちの１つを、置換されていてもよいボロン酸エステルまたは置換されていてもよいアミンと選択的に置換して、それぞれ置換芳香族または置換アミンを形成させる工程；（ｃ）工程（ｂ）の中間化合物におけるアミン（−ＮＨ−基）をアルキル化する工程；（ｄ）工程（ｃ）の中間化合物において、式（Ｉ）のＹ位置に対応する炭素原子をアルキル化する工程；（ｅ）工程（ｄ）の中間化合物の残りのハロゲン化物原子を、置換されていてもよいボロン酸エステルまたは置換されていてもよいアミンと選択的に置換して、それぞれ置換芳香族または置換アミンを形成させる工程；（ｆ）工程（ｅ）の化合物を、−Ｌ１−Ｒ５−Ｌ２−Ｒ６−Ｌ３−ＣＯＮ（Ｒａ）ＯＲｂの構造を有する保護ヒドロキサム酸基またはエステル（ヒドロキサム酸前駆物質）と選択的に共役させる工程；並びに（ｇ）反応条件下で、段階（ｆ）の中間化合物の保護ヒドロキサメートまたはエステルをヒドロキサム酸に変換して、式（Ｉ）の化合物を形成させる工程。
【実施例】
【０２３４】
本開示の非限定例および比較例が、特定の実施例への参照によってより詳細に記述されるが、これは、いかなる形であれ、本発明の範囲を限定するものと解釈されるべきではない。
【０２３５】
使用された略語の表
名称／用語                        略語
Ｄｉクロロエタン（１，２−）      ＤＣＥ
ジクロロメタン                    ＤＣＭ
ジメチルホルムアミド（Ｎ，Ｎ−）  ＤＭＦ
ジメチルスルホキシド              ＤＭＳＯ
等量                              ｅｑｕｉｖ
高速液体クロマトグラフィー又は    ＨＰＬＣ
高圧液体クロマトグラフィー
高分解能質量分析                  ＨＲＭＳ
Ｎ−ブロモスクシンイミド          ＮＢＳ
Ｎ−メチル−２−ピロリドン        ＮＭＰ
核磁気共鳴                        ＮＭＲ
トリフルオロ酢酸                  ＴＦＡ
テトラヒドロフラン                ＴＨＦ
【０２３６】
実施例１：材料および方法
下記の実施例では、特に記載がない限り、下記の全ての温度は摂氏温度単位であり、全ての部および百分率は、特に指示しない限り重量部および重量％である。化合物の合成に有用な試薬は、シグマ・アルドリッチ社（シンガポール１１７５２８、シンガポール）、ボロン・モレキュラー社（Boron Molecular Inc.）（ローリー、ノースカロライナ州２７６１６、米国）、またはコンビ−ブロック社（Combi-Blocks, Inc.）（サンディエゴ、カリフォルニア９２１２６、米国）等の、商業的供給業者から購入してもよく、特に記載がない限りは追加の精製無しで使用してもよく、あるいは、当該技術分野において公知の手法によって入手または調製してもよい。
【０２３７】
下記の反応は、陽圧の窒素、アルゴン下、または乾燥管を用いて、周囲温度（特に記載がない限り）で、無水溶媒中で行い、反応フラスコには注射器を介した基質および試薬の導入のためのゴム隔壁を装着した。ガラス器具はオーブン乾燥および／または熱乾燥させた。分析用薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）は、ガラス薄層シリカゲル６０Ｆ２５４プレート（Ｅメルク社（E Merck）（０．２５ｍｍ））上で行い、適切な溶媒比（ｖ／ｖ）で溶出させ、ＵＶ吸収によって可視化した。反応は、ＴＬＣおよび／またはＬＣ−ＭＳでアッセイし、出発物質の消費または所望の生成物の形成により判断された場合に停止された。
【０２３８】
ワークアップは、通常、反応溶媒または抽出溶媒で反応体積を倍増させた後、２５体積％の抽出体積を用いて指示水溶液で洗浄することにより行った（特に記載がない限り）。生成物溶液は、無水硫酸ナトリウム（Ｎａ２ＳＯ４）または硫酸マグネシウム（ＭｇＳＯ４）で乾燥させ、その後濾過し、溶媒の蒸発は減圧下でロータリーエバポレーターを用い、減圧除去された溶媒として記述した。フラッシュカラムクロマトグラフィは、シリカゲル６０（メルクＫＧａＡ社（Merck KGaA）、０．０４０〜０．０６３ｍｍ、２３０〜４００メッシュＡＳＴＭ）を用いて行った。
【０２３９】
逆相分取高速液体クロマトグラフィー（ＲＰＨＰＬＣ）を、Ｇｉｌｓｏｎ  ＨＰＬＣシステム（３３１／３３２ポンプ、ＧＸ−２７１リキッドハンドラー（liquid handler）、１７２ダイオードアレイドクター（diode array doctor）（ＤＡＤ）、Ｔｒｉｌｕｔｉｏｎ  ＬＣソフトウェア）で、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘカラム（Ｌｕｎａ、５μｍ、Ｃ１８  １００Ａ、１５０ｍｍ×２１．２ｍｍ）を用い、調節可能な溶媒勾配（通常、水＋０．０５％ＴＦＡ中５〜９５％のアセトニトリル）を用い、１５分または２０分の勾配で、２０ｍＬ／分の流速で行い、通例の精製に使用した。全ての化合物の予備的な純度および同一性を、Ｗａｔｅｒｓ  ２７９５分離モジュールでの分離の後、エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）ポジティブモードのＷａｔｅｒｓ  Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  ＺＱ質量分析計で、ＬＣ−ＭＳ解析によって、精製後に評価した。ＨＰＬＣ分離は、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘカラム（Ｌｕｎａ、５μｍ、Ｃ１８  １００Ａ、５０ｍｍ×２．００ｍｍ）で、０．８ｍ
Ｌ／分の流速、水＋０．０５％ＴＦＡ中Ｘ〜９５％（Ｘ＝５、３０または５０）のアセトニトリルの４分間勾配で、Ｗａｔｅｒｓ  ２９９６フォトダイオードアレイ検出器を用いて、行った。純度および同一性を、集積ＵＶクロマトグラム（２２０〜４００ｎｍ）および質量スペクトルで評価した。最終純度を、島津社製ＬＣ−２０ＡＤ  ＵＦＬＣシステムを用い、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘカラム（Ｌｕｎａ、５μｍ、Ｃ１８  １００Ａ、５０ｍｍ×２．００ｍｍ）上で、０．８ｍＬ／分の流速および６分間に亘る水＋０．０５％ＴＦＡ中５〜９５％のアセトニトリルの勾配で、測定した。全ての最終産物が、９０％超の純度を有した（２２０ｎｍおよび２５４ｎｍの波長におけるＨＰＬＣによる）。
【０２４０】
１Ｈ（４００．１３ＭＨｚ）、１３Ｃ（１００．６１ＭＨｚ）、１５Ｎ（４０．５５ＭＨｚ）、および１９Ｆ（３７６．４７ＭＨｚ）核についての１Ｄおよび２Ｄ  ＮＭＲ実験は全て、ブルカー社製ＡＶＡＮＣＥ−４００デジタルＮＭＲ分光計で行った。ＮＭＲスペクトルは、内部テトラメチルシラン標準（１Ｈおよび１３Ｃにおいて０．００ｐｐｍ）、またはＣＤＣｌ３（７．２６および７７．１ｐｐｍ）もしくはＣＤ３ＯＤ（３．３１および４９．０ｐｐｍ）、またはＤＭＳＯ−ｄ６（２．５０および３９．５ｐｐｍ）の溶媒ピークを参照して、ｐｐｍ単位で報告される。他のＮＭＲ溶媒は必要に応じて使用した。ピーク多重度が報告される際、以下の略語が使用される：ｓ＝一重線、ｄ＝二重線、ｔ＝三重線、ｑ＝四重線、ｍ＝多重線、ｂｒ＝ブロード（broadened）、ｄｄ＝二重線の二重線、ｄｔ＝三重線の二重線、ｂｓ＝ブロードな一重線（broadened singlet）。結合定数が与えられる場合、ヘルツ単位で報告される。
【０２４１】
ＣＨＮの元素分析は、パーキンエルマー社製２４００ＣＨＮ／ＣＨＮＳ元素分析計で行った。ＨＲＭＳの結果は、精製した化合物を直接注入したブルカー社製ｍｉｃｒＯＴＯＦ−Ｑ  ＩＩ（ＥＳＩ、ポジティブモード）から得られた。
【０２４２】
種々の実施形態の試薬は、下記の反応経路および合成スキームを用い、当該技術分野において利用可能な技術を利用し、容易に入手可能な出発物質を用いて、調製され得る。実施形態の特定の化合物の調製が以下の実施例に詳述されるが、種々の実施形態のいくつかの他の作用剤が調製されるように、記載された化学反応を容易に適合し得ることは、当業者によって認められる。例えば、例示されていない化合物の合成は、当業者には明らかな変更によって、例えば、干渉基を適切に保護することによって、当該技術分野において公知の他の適切な試薬に変更することによって、または反応条件に通例の変更を加えることによって、上手く実行され得る。有機合成における適切な保護基の表は、T.W. Greene and P. G. Wuts‘Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Edition, John Wiley & Sons, New York, 1991およびP. J. Kocienski’s  Protecting Groups, 3rd ed., Georg Thieme Verlag, New York, 2005の両方に見出すことができる。あるいは、本明細書で開示される、または当該技術分野において公知の他の反応は、種々の実施形態の他の化合物の調製に適用性を有すると認められる。
【０２４３】
実施例２：通常の反応スキーム
実際には、ハイブリッド形成、マージ（merging）または新規設計による作用多標的分子の設計および合成は、達成が容易な課題ではない。第一段階は、ＨＤＡＣおよびキナーゼの両方の二重阻害を達成することであった。構造活性相関（ＳＡＲ）を調べるためにＨＤＡＣ阻害剤部分を様々な位置に導入し、作用強度およびアイソフォーム選択性について多様な組合せ群を調べることにより、ＰＩ３Ｋ阻害に対して同じことを行った。種々の特性を有する置換基、例えば、芳香族基および非芳香族基、環式基および非環式基、極性基および親油性基、酸性基、塩基性基および中性基を使用して、ＳＡＲを網羅した。利用可能な最良のＨＤＡＣ／ＰＩ３Ｋ組合せプロファイルは知られていないため、広範な作用強度を有するように分子を設計して、インビトロおよびインビボの評価において最良の結果を達成した。
【０２４４】
スキーム１
広範な置換プリンおよびピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンは、いくつかの供給源から市販されている２，６−ジクロロプリンまたは２，４−ジクロロ−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンから開始される、簡単な４または５段階の手順で調製することができる。図３に示されるように、典型的な手順は、炭酸カリウム等の適切な塩基の存在下でハロゲン化アルキルを用いることにより、化合物１のＮＨ基をアルキル化する。あるいは、光延反応条件の下、アルコールを、ホスフィンおよび活性化剤（例えば、アゾジカルボン酸ジエチル）の存在下で１と反応させることにより、類似のアルキル化生成物２が得られ得る。２つの塩素原子は、最適な反応条件下で、選択的に、または順次、置換することができる。鈴木反応条件の下、ボロン酸エステル（４）を用いることで、より活性な塩素原子が置換され、モノクロロ化合物５が形成される。２つ目の塩素原子を、１，４−ジオキサン、ＤＭＦ、ＮＭＰ、またはＴＨＦ等の適切な溶媒中、高温で、アミン（６）（例えば、モルホリン）で置換することにより、所望の化合物７を得ることができる。７の官能基Ｐ２またはＲ２ｂまたはＰ３は、エステル、ヒドロキサム酸の前駆物質、または保護ヒドロキサメートを含有していてもよく、これは、ヒドロキサム酸８または９または１２に容易に変換することができる。７のＰ３基がヒドロキシル基（フェノールまたはアルコール）またはアルデヒドを含有する場合、化合物７を、ハロゲン化物によるヒドロキシル基のアルキル化（例えば、Ｐ５−Ｐ１、Ｐ１＝Ｂｒ）、またはアミンによるアルデヒドの還元的アミノ化（例えば、Ｐ５−Ｐ１、Ｐ１＝−ＮＨ２または−ＮＨ−）によってさらに変化させることで、１１を得ることができ、これはその後、ヒドロキサム酸１２に変換される。
【０２４５】
図３において、使用された試薬および条件は以下の通りである：（ａ）Ｐ１＝Ｂｒの場合、ＮａＩ／Ｋ２ＣＯ３；（ｂ）Ｐ１＝ＯＨの場合、光延反応、Ｐｈ３Ｐ／ＤＥＡＤ；（ｃ）鈴木カップリング、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２・ＣＨ２Ｃｌ２、Ｋ２ＣＯ３／ジオキサン、マイクロ波照射または熱；（ｄ）置換；（ｅ）ＮＨ２ＯＨ・ＨＣｌ（１０等量）／ＮａＯＭｅ（２０等量）／ＭｅＯＨ、０℃〜室温；（ｆ）５〜５０％ＴＦＡ／ジクロロメタン；（ｇ）還元的アミノ化、Ｐ５−Ｐ１（１０）、Ｐ１＝−ＮＨ−または−ＮＨ２および−ＣＨＯ含有Ｐ３、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３、ＤＣＥ、室温。
【０２４６】
スキーム２
図４は、化合物１または化合物３内の２つの塩素原子の別の置換順序を示している。より活性な塩素原子が最初にアミン６に置換されて、１を介して１３、または３を介して１４が得られる。１３のＮＨ基が後にアルキル化されて、１４が形成される。１４のＰ２基がニトリルである場合、ニトリル基がアミンに還元され、次に、ハロゲン化物によるアルキル化またはアルデヒドによる還元的アミノ化によって、さらに置換アミン１５に変換される。アミン１５が鈴木カップリング反応によってさらに変化されることで１６が得られ、これがその後ヒドロキサム酸１７に変換される。モノクロロ化合物１４からも得られる化合物１８には２つの選択肢がある：Ｐ２基またはＰ３基は、エステルまたは保護ヒドロキサメートを含有する場合、ヒドロキサム酸１９または２１に変換され；Ｐ３基は、ヒドロキシル基（フェノールまたはアルコール）またはアルデヒドを含有する場合、スキーム１の化合物７と同様に（すなわち、ヒドロキシルのアルキル化またはアルデヒドの還元的アミノ化）処理されて２０が形成され、これが次にヒドロキサム酸２１に変換される。
【０２４７】
図４において使用された試薬および条件は以下の通りである：（ａ）置換、純粋またはジオキサン中のアミン（６）、熱；（ｂ）Ｐ１＝ハロゲン化物の場合、Ｋ２ＣＯ３／ＤＭＦ；ｃ）Ｐ１＝ＯＨの場合、光延反応、Ｐｈ３Ｐ／ＤＥＡＤ；（ｄ）Ｐ２は末端ニトリル基を含有する：還元、ＮａＢＨ４／ＮｉＣｌ２、ＴＨＦ−ＭｅＯＨ（１：２）、室温；（ｅ）Ｐ２ＣＨ２Ｐ１によるアルキル化、Ｐ１はハロゲン化物または脱離基；（ｆ）Ｐ７ＣＨＯ、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３、ＤＣＥによる還元的アミノ化、室温；（ｇ）鈴木カップリ
ング、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２・ＣＨ２Ｃｌ２、Ｋ２ＣＯ３／ジオキサン、マイクロ波または熱；（ｈ）ＮＨ２ＯＨ・ＨＣｌ（１０等量）／ＮａＯＭｅ（２０等量）／ＭｅＯＨ、−２０℃〜室温；（ｉ）５〜５０％ＴＦＡ／ジクロロメタン
【０２４８】
スキーム３
図５は、Ｒ３が水素であり、Ｘが窒素である場合に、化合物７（スキーム１）および化合物１８（スキーム２）のＲ３基をさらに変化させる方法を示している。プリン７および１８の両方がＮＢＳでブロム化されることで、それぞれブロマイド２２および２６が得られる。次に、８位の臭素原子がアミンで置換される。エステルまたは保護ヒドロキサム酸は２３および２７のＰ２またはＲ３ｂ基に存在し得るため、その後の変換の後に４種のヒドロキサム酸２４、２５、２７および２８が形成され得る。
【０２４９】
図５において、使用された試薬および条件は以下の通りである：（ａ）ＮＢＳ、ＣＨＣｌ３；（ｂ）ＮＭＰまたはＤＭＳＯ、１３０℃、１２時間；（ｃ）ＮＨ２ＯＨ・ＨＣｌ（１０等量）／ＮａＯＭｅ（２０等量）／ＭｅＯＨ、−２０℃〜室温。
【０２５０】
スキーム４
図６は、Ｒ３が水素であり、Ｘが窒素である場合の、化合物１４（スキーム２）のＲ３基を変化させるための別の方法を示している。最初に、プリン１４の８位にアルデヒド２９が導入され、次に、アルデヒド２９がアミン３０に変換される。３０のＲｆ基が、エステルまたは保護ヒドロキサメートを含有する場合に、鈴木生成物３１を介してヒドロキサム酸３２に変換される。３０が二級アミン（Ｒｆ＝Ｈ）である場合、３０をハロゲン化物によるアルキル化またはアルデヒドによる還元的アミノ化によってさらに変化させることで、アミン３３を得ることができる。モノクロロアミン３３が最後に、鈴木反応産物３４を介してヒドロキサム酸３５に変換される。
【０２５１】
図６において、使用された試薬および条件は以下の通りである：（ａ）ＤＭＦ、ｎ−ＢｕＬｉ；ｂ）アミンＲｄＮＨ２、ＮａＢＨ４、ＤＣＥ−ＭｅＯＨによる還元的アミノ化；（ｃ）鈴木カップリング、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２・ＣＨ２Ｃｌ２、Ｋ２ＣＯ３／ジオキサン、マイクロ波または熱；（ｄ）ＮＨ２ＯＨ・ＨＣｌ（１０等量）／ＮａＯＭｅ（２０等量）／ＭｅＯＨ、０℃〜室温；（ｅ）５〜５０％ＴＦＡ／ＤＣＭ；（ｆ）Ｐ１２ＣＨ２Ｐ１（Ｐ１はハロゲン化物または脱離基）、Ｅｔ３Ｎによるアルキル化；（ｇ）Ｐ１２ＣＨＯ、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３、ＤＣＥ、室温による還元的アミノ化；
【０２５２】
スキーム５
図７は、容易に調達できる、または市販の出発物質（例えば、４）のさらなる誘導体化のための通常の合成経路、および保護または置換されたヒドロキサム酸（３８）を調製するための手順を示している。ボロン酸エステル（４）は、スキーム１および２の両方で使用される鈴木カップリング反応の重要な物質であり、鈴木反応を受ける前に修飾することができる。例えば、ボロン酸エステルのアミノ基（４ａ）が酸と共役されることでアミド（４ｂ）が形成され、これは、エステル基を有し、ヒドロキサム酸の前駆物質である。ヒドロキサム酸は、対応するメチルエステルまたはエチルエステルから、過剰なヒドロキシルアミン［すなわち、ＭｅＯＨ中の、ＮＨ２ＯＨ・ＨＣｌ（１０等量）、ＮａＯＭｅ（２０等量）］でそれを処理することにより、容易に作製することができる。保護ヒドロキシルアミンまたは置換ヒドロキシルアミンの他の調製法がスキーム５に記載される。酸（３７）は、以下の方法によってヒドロキサム酸（３６）に変換することができる。（ｉ）酸が、ＣｌＣＯＣＯＣｌ、またはＳＯＣｌ２、または中性条件下での他の試薬（例えば、ＣＢｒ４を伴うＰｈ３Ｐ、または２，４，６−トリクロロ−［１，３，５］トリアジン）で処理されることにより、より緩やかな条件下で酸塩化物に変換される；または、（ｉｉ）酸が、クロロギ酸イソブチルと反応することにより、活性エステルに変換される；（ｉｉ
ｉ）酸塩化物、または活性エステルが、ヒドロキシルアミンまたは保護ヒドロキシルアミンＲｇＮＨＯＲｈ［例えば、Ｏ−ベンジルヒドロキシルアミン、Ｏ−（２，４−ジメトキシ−ベンジル）−ヒドロキシルアミン、Ｏ，Ｎ−ビス−（２，４−ジメトキシ−ベンジル）−ヒドロキシルアミン、Ｏ−（テトラヒドロ−ピラン−２−イル）−ヒドロキシルアミン、Ｏ−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シリル）−ヒドロキシルアミン］と反応することで、ヒドロキサム酸または保護ヒドロキサム酸が得られる；ｉｖ）共役化試薬を用いて、前記酸がヒドロキシルアミンまたは保護ヒドロキシルアミンＲｇＮＨＯＲｈと共役される。保護基は、（置換）ベンジル基を除去するための水素化分解、または酸に不安定な保護基を切断するための、酸による切断（例えば、陽イオン捕捉剤を含むまたは含まない、ＤＣＭ中のＴＦＡ）等の、文献で知られている方法によって除去することができる。
【０２５３】
図７において、使用された試薬および条件は以下の通りである：（ａ）ＥＤＣＩ−ＨＯＢＴ／ＤＣＭ；ｂ）ｉ）酸塩化物形成；ｉｉ）ヒドロキシルアミンＲｉＮＨＯＲｊ；ｃ）ＥＤＣＩ−ＨＯＢｔ、ＲｉＮＨＯＲｊ。
【０２５４】
実施例３：Ｎ−ヒドロキシ−４−（３−（９−イソプロピル−２−モルホリノ−９Ｈ−プリン−６−イル）フェノキシ）ブタンアミドの合成（図３、化合物１２ａ）
Ｎ−ヒドロキシ−４−（３−（９−イソプロピル−２−モルホリノ−９Ｈ−プリン−６−イル）フェノキシ）ブタンアミドを合成するための反応スキームが、図８に示される。
【０２５５】
段階１：３−（２−クロロ−９−イソプロピル−９Ｈ−プリン−６−イル）フェノール（５ａ）の合成
ジオキサン（１０ｍＬ）中の２，６−ジクロロ−９−イソプロピル−９Ｈ−プリン３ａ（２３０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）、（３−ヒドロキシフェニル）ボロン酸４ｃ（１５２ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）の撹拌後溶液に、脱イオン水（１．０ｍＬ）中のＫ２ＣＯ３（３４５ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。この混合物を３０分間脱気した後、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２・ＣＨ２Ｃｌ２（４１ｍｇ）を加え、得られた混合物を７０℃で５時間加熱した。ＬＣ−ＭＳによって反応の完了が示された。簡易なワークアップの後、フラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ヘキサン中２０％〜５０％酢酸エチル）によって生成物５ａ（２１５ｍｇ、７５％）を得た。
【０２５６】
段階２：３−（９−イソプロピル−２−モルホリノ−９Ｈ−プリン−６−イル）フェノール（７ａ）の合成
３−（２−クロロ−９−イソプロピル−９Ｈ−プリン−６−イル）フェノール５ａ（３００ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）をモルホリン（５ｍＬ）中に溶解させた。得られた混合物を８０℃で１０時間加熱した。ＬＣ−ＭＳによって反応の完了が示された。簡単なワークアップの後、未精製物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、酢酸エチル／ヘキサン＝１：２）によって精製して、７ａ（２９０ｍｇ、８２％）を得た。
【０２５７】
段階３：エチル４−（３−（９−イソプロピル−２−モルホリノ−９Ｈ−プリン−６イル）フェノキシ）ブタノエート（１１ａ）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の７ａ（８０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）、エチル６−ブロモブチレート（６９ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）の撹拌後溶液に、無水炭酸カリウム（９８ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を１００℃で一晩（１６時間）加熱した。ワークアップの後、未精製物を、フラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ヘキサン中１７％〜２５％の酢酸エチル）によって精製して、１１ａ（８６ｍｇ、８０％）を得た。LC-MS m/z 454.2 ([M + H]+).1HNMR (CDCl3)  δ 8.32 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 8.20 (s, 1H),
7.96 (s, 1H), 7.43 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.02 (dd, J = 8.0, 2.4 Hz, 1H),  4.80 (七重線, J = 6.8 Hz, 1H), 4.14 (m, 4H), 3.93 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.84 (t, J = 4.8 Hz, 4H),  2.56 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 2.15 (五重線, J = 6.8 Hz, 2H), 1.61 (d, J 
= 6.8 Hz, 6H), 1.25 (t, J = 7.2 Hz, 3H).13C NMR (CDCl3) δ 173.3, 159.0, 158.7, 154.4, 153.9, 139.2, 137.6, 129.5, 124.3, 122.3, 117.0, 115.0, 67.0, 66.7, 60.4,
46.8, 45.1, 30.8, 24.6, 23.4, 14.3.
【０２５８】
段階４：Ｎ−ヒドロキシ−４−（３−（９−イソプロピル−２−モルホリノ−９Ｈ−プリン−６−イル）フェノキシ）ブタンアミド（１２ａ）の合成
ドライアイス上で冷却後の無水ＭｅＯＨ（１．５ｍＬ）中の１１ａ（５５ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）、塩酸ヒドロキシルアミン（８５ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）の撹拌後溶液に、ナトリウムメトキシド（０．７ｍＬ、３．０ｍｍｏｌ）をゆっくりと加えた。得られた混合物を−２０℃で１時間撹拌し、その後室温まで温めた。ＬＣ−ＭＳは２時間後に反応の完了を示した。ワークアップの後、この混合物をＲＰＨＰＬＣで精製し、ＨＰＬＣ画分の凍結乾燥の後に、１２ａを白色固体として得た（ＴＦＡ塩として、２５ｍｇ、計算値の４９％）。LC−MS m/z 441.1 ([M + H]+).ＨＰＬＣ純度（２５４ｎｍ）：９４．７％。
【０２５９】
１２ａの遊離塩基の調製
ＴＦＡ塩をアセトニトリルおよび水に溶解させ、次に、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液を用いて約ｐＨ８まで塩基性にした。減圧下でアセトニトリルを除去した後、この水溶液を酢酸エチルで抽出した（３回）。合わせた有機層を乾燥および蒸発させて、未精製の遊離塩基を得て、これをさらにＭｅＯＨ中の再結晶で精製した。LC−MS m/z 441.2 ([M + H]+).ＨＰＬＣ純度（２５４ｎｍ）：９９．８％。1H NMR (DMSO-d6) δ10.44 (s, 1H), 8.72 (s,
1H), 8.38 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.36 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.46 (t,
J = 8.0 Hz, 1H), 7.10 (dd, J = 7.8, 2.2 Hz, 1H),  4.75 (七重線, J = 6.6 Hz, 1H), 4.05 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 3.81 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.74 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 
2.18 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 1.99 (五重線, J = 7.0 Hz, 2H), 1.55 (d, J = 6.8 Hz, 6H).13C NMR (DMSO-d6) δ169.1, 159.0, 158.4, 154.3, 152.9, 142.1, 137.9, 130.0, 125.2, 121.9, 116.9, 115.8, 67.8, 66.5, 45.7, 45.2, 29.3, 25.3, 22.3.HRMS (ESI) m/z [M + H]+ C22H28N6O4の計算値441.2245; 実測値, 441.2256.
【０２６０】
実施例４：Ｎ−ヒドロキシ−７−（２−（３−（ヒロドキシメチル）フェニル）−６−モルホリノ−９Ｈ−プリン−９−イル）ヘプタンアミド（図４、化合物１９ｆ）の合成
Ｎ−ヒドロキシ−７−（２−（３−（ヒロドキシメチル）フェニル）−６−モルホリノ−９Ｈ−プリン−９−イル）ヘプタンアミドを合成するための反応スキームが、図９に示される。
【０２６１】
段階１：エチル７−（２，６−ジクロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）ヘプタノエート（３ｄ）の合成
ＤＭＦ（１５ｍＬ）中の２，６−ジクロロ−９Ｈ−プリン１ａ（３７６ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）、エチル７−ブロモヘプタノエート（５２１ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）の撹拌後溶液に、無水炭酸カリウム（５５２ｍｇ、４．０ｍｍｏｌ）およびＮａＩ（６４ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を４０℃で１２時間撹拌した。ＬＣ−ＭＳによって反応の完了が示された。ワークアップの後、未精製物を、フラッシュクロマトグラフィー（シリカ、１：３〜１：２の酢酸エチル／ヘキサン）によって精製して、３ｄ（４８０ｍｇ、６９％）を得た。
【０２６２】
段階２：エチル７−（２−クロロ−６−モルホリノ−９Ｈ−プリン−９−イル）ヘプタノエート（１４ｂ）の合成
ジオキサン（１０ｍＬ）中の３ｄ（３４４ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）の撹拌後溶液に、モルホリン（４３５ｍｇ、５．０ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を６０℃で３時間撹拌した。ＬＣ−ＭＳによって反応の完了が示された。簡易なワークアップの後、１４ｂの粗生成物（４０４ｍｇ、１００％）を得て、さらなる精製無しで次の反応段階に使用した
。LC-MS m/z 397.2 ([M + H]+).1HNMR (CDCl3)  δ 7.70 (s, 1H), 4.00-5.60 (m, 8H), 3.82 ( t, J = 4.6 Hz, 4H), 2.27 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.85 (m, 2H), 1.60 (五重線,
J = 7.0 Hz, 2H), 1.34 (m, 4H), 1.24 (t, J = 7.0 Hz, 3H).13C NMR (CDCl3) δ 173.6, 153.94, 153.93, 152.2, 118.6, 66.9, 60.3, 45.7(br), 43.8, 34.1, 29.8, 28.5, 26.3, 24.7, 14.3.
【０２６３】
段階３：エチル７−（２−（３−（ヒロドキシメチル）フェニル）−６−モルホリノ−９Ｈ−プリン−９−イル）ヘプタノエート（１８ｆ）の合成
ジオキサン（５．０ｍＬ）中の未精製１４ｂ（１００ｍｇ、０．２５４ｍｍｏｌ）、ボロン酸４ｃ（７６ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）の撹拌後溶液に、炭酸カリウム（８６ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２・ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍｇ）を加えた。得られた混合物をマイクロ波照射下で１５０℃で１時間撹拌した。ＬＣ−ＭＳは１時間後に反応の完了を示した。溶媒を除去した後、未精製物をＤＣＭ中に懸濁し、フラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＤＣＭ中１％〜２％ＭｅＯＨ）によって精製して、１８ｆ（３０ｍｇ、５２．６％）を得た。LC-MS m/z 468.3 ([M + H]+).1HNMR (DMSO-d6)  δ 8.34 (s, 1H), 8.27 (dt-like, J = 7.2 Hz, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.44 −7.37 (m, 2H), 5.28 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 4.58 (d, J = 4.4 Hz, 2H), 4.30 (br s, 4H), 4.23 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 4.01 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.77 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 2.24 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.86 (五重線, J = 7.2 Hz, 2H), 1.49 (五重線, J = 7.4 Hz, 2H),1.22−1.38 (m, 4H), 1.14 (t, J = 7.0 Hz, 3H).13C NMR (DMSO-d6)  δ 173.3, 157.3, 153.5, 152.3, 142.9, 141.1, 138.6, 128.4, 128.3, 126.7, 126.2, 118.7, 66.7, 63.5, 60.1,
45.6, 43.2, 33.8, 29.5, 28.2, 26.1, 24.7, 14.5.
【０２６４】
段階４：Ｎ−ヒドロキシ−７−（２−（３−（ヒロドキシメチル）フェニル）−６−モルホリノ−９Ｈ−プリン−９−イル）ヘプタンアミド（１９ｆ）の合成
ドライアイス上で冷却後の無水ＭｅＯＨ（１．０ｍＬ）中の１８ｆ（３０ｍｇ、０．０６４ｍｍｏｌ）、塩酸ヒドロキシルアミン（６７ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ）の撹拌後溶液に、ナトリウムメトキシド（０．３７ｍＬ、１．６ｍｍｏｌ）をゆっくりと加えた。得られた混合物を−２０℃で１時間撹拌し、その後室温まで温めた。ＬＣ−ＭＳは２時間後に反応の完了を示した。簡易なワークアップの後、この混合物をＲＰＨＰＬＣで精製して、Ｎ−ヒドロキシ−７−（２−（３−（ヒロドキシメチル）フェニル）−６−モルホリノ−９Ｈ−プリン−９−イル）ヘプタンアミド１９ｆを白色固体として得た（ＴＦＡ塩として、８ｍｇ、計算値の２２％）。ＴＦＡ塩をアセトニトリルおよび水に溶解させ、次に、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液を用いて約ｐＨ８まで塩基性にした。減圧下でアセトニトリルを除去した後、この水溶液を酢酸エチルで抽出した（３回）。合わせた有機層を乾燥および蒸発させて、未精製の遊離塩基を得て、これをさらにＭｅＯＨ中の再結晶で精製した。１９ｆの遊離塩基：LC−MS m/z 455.1 ([M + H]+).ＨＰＬＣ純度（２５４ｎｍ）：９７．４％。1H NMR (DMSO-d6) δ10.33 (s, 1H), 8.66 (s, 1H), 8.35 (s, 1H),  8.27 (dt-like, J = 7.6 Hz, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.44 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.40 (dt-like, J = 7.6 Hz, 1H), 5.29 (t, J = 7.6 Hz, 1H),  4.59 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 4.31 (m, 4H), 4.23
(t, J = 7.0 Hz, 2H), 3.78 (t, 4H), 1.93 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 1.87 (五重線, 2H),
1.48 (五重線, 2H), 1.29 (m, 4H) ; 13C NMR (DMSO-d6) δ 169.0, 156.9, 153.0, 151.8, 142.5, 140.6, 138.2, 128.0, 127.9, 126.2, 125.8, 118.2, 66.3, 63.0, 45.1, 42.8, 32.2, 29.1, 28.0, 25.7, 25.0. HRMS (ESI) m/z [M + H]+ C23H30N6O4の計算値, 455.2402; 実測値, 455.2405.
【０２６５】
実施例５：７−（６−（２−アミノピリミジン−５−イル）−２−モルホリノ−９Ｈ−プリン−９−イル）−Ｎ−ヒドロキシヘプタンアミド（図３、化合物８ａ）の合成
７−（６−（２−アミノピリミジン−５−イル）−２−モルホリノ−９Ｈ−プリン−９−イル）−Ｎ−ヒドロキシヘプタンアミドを合成するための反応スキームが、図１０に示
される。
【０２６６】
段階１：エチル７−（６−（２−アミノピリミジン−５−イル）−２−クロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）ヘプタノエート（５ｄ）の合成
ジオキサン（１５ｍＬ）中の３ｄ（実施例２、段階１）（３４４ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）、５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリミジン−２−アミン４ｄ（２４０ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）の撹拌後溶液に、脱イオン水（２．０ｍＬ）中のＫ２ＣＯ３（３４５ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。この混合物を３０分間脱気した後、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２・ＣＨ２Ｃｌ２（４１ｍｇ、０．０５等量）を加えた。得られた混合物を８２℃で６時間加熱した。ＬＣ−ＭＳによって反応の完了が示された。ワークアップの後、未精製物を、フラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ヘキサン中３３％〜５０％〜１００％の酢酸エチル）によって精製して、５ｄ（１５０ｍｇ、３７％）を得た。
【０２６７】
段階２．  エチル７−（６−（２−アミノピリミジン−５−イル）−２−モルホリノ−９Ｈ−プリン−９−イル）ヘプタノエート（７ｂ）の合成
ＤＭＦ（５ｍＬ）中の５ｄ（１５０ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）の撹拌後溶液に、モルホリン（０．７０ｍＬ、３．０ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を８０℃で１２時間加熱した。ＬＣ−ＭＳによって反応の完了が示された。ワークアップの後、未精製物のＤＣＭ中１０％ＭｅＯＨ中での再結晶によって、７ｂ（１２０ｍｇ、７２％）を得た。
【０２６８】
段階３：７−（６−（２−アミノピリミジン−５−イル）−２−モルホリノ−９Ｈ−プリン−９−イル）−Ｎ−ヒドロキシヘプタンアミド（８ａ）の合成
ドライアイス上で冷却後の無水ＭｅＯＨ（１．５ｍＬ）中の７ｂ（７０ｍｇ、０．１５５ｍｍｏｌ）、塩酸ヒドロキシルアミン（１０８ｍｇ、１５．５ｍｍｏｌ）の撹拌後溶液に、ナトリウムメトキシド（９０１μＬ、３．９ｍｍｏｌ）をゆっくりと加えた。得られた混合物を−２０℃で１時間撹拌し、その後室温まで温めた。ＬＣ−ＭＳは３時間後に反応の完了を示した。ワークアップの後、未精製物を、ＲＰＨＰＬＣによって精製して、７−（６−（２−アミノピリミジン−５−イル）−２−モルホリノ−９Ｈ−プリン−９−イル）−Ｎ−ヒドロキシヘプタンアミド８ａを得た（ＴＦＡ塩として、１５ｍｇ、計算値の２１％）。LC−MS m/z 442.1 ([M + H]+).ＨＰＬＣ純度（２５４ｎｍ）：９６．６％。1H
NMR (DMSO-d6) δ10.34 (s, 1H), 9.54 (s, 2H), 8.25 (s, 1H), 7.45 (s, 2H), 4.12 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.78 (m, 4H), 3.72 (m, 4H), 1.93 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.85 (m, 2H), 1.48 (m, 2H), 1.26 (m, 4H). HRMS (ESI) m/z [M + H]+ C20H27N9O3の計算値, 442.2310; 実測値, 442.2308.
【０２６９】
実施例６：Ｎ１−ヒドロキシ−Ｎ８−（３−（９−イソプロピル−２−モルホリノ−９Ｈ−プリン−６−イル）フェニル）オクタンジアミド（図３、化合物１２ｆ）の合成
Ｎ１−ヒドロキシ−Ｎ８−（３−（９−イソプロピル−２−モルホリノ−９Ｈ−プリン−６−イル）フェニル）オクタンジアミドを合成するための反応スキームが、図１１に示される。
【０２７０】
段階１：メチル８−オキソ−８−（（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル）アミノ）オクタノエート（スキーム５、４ｂ）の合成
無水ＤＣＭ（１５ｍＬ）中の（３−アミノフェニル）ボロン酸エステル（１６４ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）、モノメチルスベレート（１５５ｍｇ、０．８３ｍｍｏｌ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミドヒドロクロリド（ＥＤＣＩ）（１５９ｍｇ、０．８３ｍｍｏｌ）の撹拌後溶液に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ、１１２ｍｇ）を加えた。この混合物を室温で４時間撹拌した。ＬＣ−ＭＳによっ
て反応の完了が示された。ワークアップの後、未精製物を、フラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ヘキサン中２０％〜２５％酢酸エチル）によって精製して、生成物４ｂ（１４９ｍｇ、４６％）を得た。
【０２７１】
段階２：メチル８−（（３−（２−クロロ−９−イソプロピル−９Ｈ−プリン−６−イル）フェニル）アミノ）−８−オキソオクタノエート（５ｃ）の合成
ジオキサン（１０ｍＬ）中の２，６−ジクロロ−９−イソプロピル−９Ｈ−プリン３ａ（５９ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）、４ｂ（１００ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）の撹拌後溶液に、脱イオン水（１．０ｍＬ）中のＫ２ＣＯ３（８８ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。この混合物を３０分間脱気した後、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２・ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍｇ、０．０５等量）を加えた。得られた混合物を８２℃で６時間加熱した。ＬＣ−ＭＳによって反応の完了が示された。ワークアップの後、未精製物を、フラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ヘキサン中２５％〜３３％の酢酸エチル）によって精製して、５ｃ（１００ｍｇ、８５％）を得た。
【０２７２】
段階３：メチル８−（（３−（９−イソプロピル−２−モルホリノ−９Ｈ−プリン−６−イル）フェニル）アミノ）−８−オキソオクタノエート（７ｃ）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の５ｃ（７５ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）の撹拌後溶液に、モルホリン（１４０ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を８０℃で１６時間加熱した。ワークアップの後、未精製物を、フラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ヘキサン中３３％〜５０％酢酸エチル）によって精製して、７ｃ（４６ｍｇ、５５％）を得た。
【０２７３】
段階４：Ｎ１−ヒドロキシ−Ｎ８−（３−（９−イソプロピル−２−モルホリノ−９Ｈ−プリン−６−イル）フェニル）オクタンジアミド（１２ｆ）の合成
ドライアイス上で冷却後の無水ＭｅＯＨ（１ｍＬ）中の７ｃ（４６ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）、塩酸ヒドロキシルアミン（７０ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ）の撹拌後溶液に、ナトリウムメトキシド（５２０μＬ、２．２ｍｍｏｌ）をゆっくりと加えた。得られた混合物を−２０℃で１時間撹拌し、その後室温まで温めた。ＬＣ−ＭＳは２時間後に反応の完了を示した。ワークアップの後、未精製物を、ＲＰＨＰＬＣによって精製して、１２ｆを得た（ＴＦＡ塩として、２０ｍｇ、計算値の３５％）。LC−MS m/z 510.2 ([M + H]+).1H NMR
(DMSO-d6) δ10.34 (s, 1H), 10.07 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.51 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.92 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.45 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 4.75 (m, J = 6.4 Hz, 1H), 3.81 (m, 4H), 3.74 (m, 4H), 2.34 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.94 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.61 (m, 2H), 1.54 (d, J = 6.8 Hz, 6H), 1.50 (m, 2H), 1.29 (m, 4H).ＨＰＬＣ純度（２５４ｎｍ）：９８．４％； HRMS(ESI) m/z [M + H]+C26H35N7O4の計算値、510.2824;実測値、510.2835.
【０２７４】
実施例７：（Ｅ）−Ｎ−ヒドロキシ−３−（４−（（（２−（２−（６−メトキシピリジン−３−イル）−６−モルホリノ−９Ｈ−プリン−９−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）アクリルアミド（図４、化合物１７ａ）の合成
（Ｅ）−Ｎ−ヒドロキシ−３−（４−（（（２−（２−（６−メトキシピリジン−３−イル）−６−モルホリノ−９Ｈ−プリン−９−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）アクリルアミドを合成するための反応スキームが、図１２に示される。
【０２７５】
段階１：４−（２−クロロ−９Ｈ−プリン−６−イル）モルホリン（１３ａ）の合成
モルホリン（１．３９ｍＬ、１５．８７ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（２６ｍＬ）中の１ａ（１．０ｇ、５．２９ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。得られた混合物を室温で１６時間撹拌した。モルホリンの添加直後に白色の沈殿物が観察された。この白色沈殿を濾去し、水（２回）およびメタノール（２回）で洗浄して、１３ａ（１．１３ｇ、９０％）を得た。
【０２７６】
段階２：２−（２−クロロ−６−モルホリノ−９Ｈ−プリン−９−イル）アセトニトリル（１４ｃ）の合成
アセトニトリル／ＤＭＳＯ（１９：１）中の１３ａ（１．１８ｇ、４．９４ｍｍｏｌ）の溶液に、２−ヨードアセトニトリル（０．７１ｍＬ、９．８７ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（１．３６ｇ、９．８７ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を６０℃で３時間加熱した。次に、溶媒を減圧除去し、水を加えた。水層をＤＣＭ（２回）で抽出し、合わせた有機層をブライン（１回）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下で蒸発させた。この未精製の油を、フラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ヘキサン中５０％酢酸エチル）によって精製して、１４ｃ（１．３１ｇ、９５％）を薄茶色の固体として得た。
【０２７７】
段階３：２−（２−クロロ−６−モルホリノ−９Ｈ−プリン−９−イル）エタンアミン（１４ｄ）の合成
ＭｅＯＨ／ＴＨＦ（２：１）中の１４ｃ（１．２３ｇ、４．４２ｍｍｏｌ）およびＮｉＣｌ２・６Ｈ２Ｏ（１０５ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、水素化ホウ素ナトリウム（１．１７ｇ、３０．９７ｍｍｏｌ）を少しずつ加えた。得られた混合物を室温で１時間撹拌した。次に、溶媒を減圧除去し、炭酸水素ナトリウム飽和溶液を加えた。水層をＤＣＭ（２回）で抽出し、合わせた有機層をブライン（１回）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下で蒸発させた。この未精製物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＤＣＭ中１０％メタノール）によって精製して、１４ｄ（５７７ｍｇ、４６％）を無色の油として得た。
【０２７８】
段階４：（Ｅ）−メチル３−（４−（（（２−（２−クロロ−６−モルホリノ−９Ｈ−プリン−９−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）アクリレート（１５ａ）の合成
ＤＣＥ（１０ｍＬ）中の１４ｄ（５７６ｍｇ、２．０４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、（Ｅ）−メチル３−（４−ホルミルフェニル）アクリレート（４６６ｍｇ、２．４５ｍｍｏｌ）、酢酸（０．１２ｍＬ、２．０４ｍｍｏｌ）およびトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（６４９ｍｇ、３．０６ｍｍｏｌ）を順次加えた。得られた混合物を室温で５時間撹拌した。炭酸水素ナトリウム飽和溶液を加えて反応をクエンチし、水層を塩化メチレン（２回）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１回）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下で蒸発させた。この未精製物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＤＣＭ中４％メタノール）によって精製して、１５ａ（４１４ｍｇ、４４％）をオフホワイトの固体として得た。
【０２７９】
段階５および６：実施例４、段階３および４の類似の手順に従って、表題化合物（Ｅ）−Ｎ−ヒドロキシ−３−（４−（（（２−（２−（６−メトキシピリジン−３−イル）−６−モルホリノ−９Ｈ−プリン−９−イル）エチル）アミノ）メチル）フェニル）アクリルアミド（１７ａ）をＴＦＡ塩として得た。LC-MS m/z 531 ([M + H]+).1HNMR (DMSO-d6)
δ 10.82 (br s, 1H), 9.16 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 9.07 (br s, 2H), 8.54 (dd, J = 2.4 Hz, 8.8 Hz, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.56 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.46 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.42 (オーバーラップ, 1H), 6.88 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.50 (d, J = 16 Hz, 1H), 4.60 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 4.34 − 4.28 (m, 6H), 3.92 (s, 3H), 3.77 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.60 (t-like, 2H). HRMS (ESI) m/z [M + H]+ C27H31N8O4の計算値、531.2463; 実測値、 531.2473.
【０２８０】
実施例８：６−（（６−（２−アミノピリミジン−５−イル）−９−イソプロピル−２−モルホリノ−９Ｈ−プリン−８−イル）アミノ）−Ｎ−ヒドロキシヘキサンアミド（図５、化合物２４ａ）の合成
６−（（６−（２−アミノピリミジン−５−イル）−９−イソプロピル−２−モルホリノ−９Ｈ−プリン−８−イル）アミノ）−Ｎ−ヒドロキシヘキサンアミドを合成するための反応スキームが、図１３に示される。
【０２８１】
段階１：５−（８−ブロモ−９−イソプロピル−２−モルホリノ−９Ｈ−プリン−６−イル）ピリミジン−２−アミン（２２ａ）の合成
ＣＨＣｌ３（１５ｍＬ）中の５−（９−イソプロピル−２−モルホリノ−９Ｈ−プリン−６−イル）ピリミジン−２−アミン７ｄ（４００ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ）の撹拌後溶液に、氷水浴中でＮＢＳ（３６２ｍｇ、２．０３ｍｍｏｌ）をゆっくりと加えた。得られた混合物を２時間かけて室温まで温めた。ワークアップの後、未精製物を、フラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＤＣＭ中２５％〜３３％の酢酸エチル）によって精製して、２２ａ（２２５ｍｇ、４４％）を得た。
【０２８２】
段階２：メチル６−（（６−（２−アミノピリミジン−５−イル）−９−イソプロピル−２−モルホリノ−９Ｈ−プリン−８−イル）アミノ）ヘキサノエート（２３ａ）の合成
ＮＭＰ（１ｍＬ）中の２２ａ（５２ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）の撹拌後溶液に、メチル６−アミノヘキサノエートヒドロクロリド（３８０ｍｇ、１．８８ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を１３０℃で１２時間加熱した。ワークアップの後、未精製物を、フラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ヘキサン中２０％〜８０％酢酸エチル）によって精製して、２３ａ（４４ｍｇ、７３％）を得た。
【０２８３】
段階３：６−（（６−（２−アミノピリミジン−５−イル）−９−イソプロピル−２−モルホリノ−９Ｈ−プリン−８−イル）アミノ）−Ｎ−ヒドロキシヘキサンアミド（２４ａ）の合成
ドライアイス上で冷却後の無水ＭｅＯＨ（１．０ｍＬ）中の２３ａ（３５ｍｇ、０．０７２ｍｍｏｌ）、塩酸ヒドロキシルアミン（５１ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ）の撹拌後溶液に、ナトリウムメトキシド（３３４μＬ、１．４４ｍｍｏｌ）をゆっくりと加えた。得られた混合物を−２０℃で１時間撹拌し、その後室温まで温めた。ＬＣ−ＭＳは２時間後に反応の完了を示した。ワークアップの後、未精製物を、ＲＰＨＰＬＣによって精製して、２４ａを得た（ＴＦＡ塩で、３０ｍｇ、計算値の６９％）。LC−MS m/z 485.3 ([M + H]+).1H NMR (DMSO-d6) δ10.40 (s, 1H), 9.21 (s, 2H), 7.78 (s, 1H), 7.41 (s, 2H), 4.65 (m, J = 6.8 Hz, 1H), 3.43 (m, 4H), 1.98 (m, 2H), 1.65 (m, 2H), 1.58 (d, J = 6.8 Hz, 6H), 1.33 (m, 2H).ＨＰＬＣ純度（２５４ｎｍ）：９９．２％。HRMS (ESI) m/z [M + H]+ C22H32N10O3の計算値, 485.2732; 実測値, 485.2749.
【０２８４】
実施例９：４−（（（（２−（２−アミノピリミジン−５−イル）−９−エチル−６−モルホリノ−９Ｈ−プリン−８−イル）メチル）（メチル）アミノ）メチル）−Ｎ−ヒドロキシベンズアミド（図６、化合物３５ｈ）の合成
４−（（（（２−（２−アミノピリミジン−５−イル）−９−エチル−６−モルホリノ−９Ｈ−プリン−８−イル）メチル）（メチル）アミノ）メチル）−Ｎ−ヒドロキシベンズアミドを合成するための反応スキームが、図１４に示される。
【０２８５】
段階１：２−クロロ−９−エチル−６−モルホリノ−９Ｈ−プリン−８−カルバルデヒド（２９ａ）の合成
ＴＨＦ（１１ｍＬ）中の４−（２−クロロ−９−エチル−９Ｈ−プリン−６−イル）モルホリン１４ａ（６００ｍｇ、２．２５ｍｍｏｌ）の溶液に、ヘキサン中のｎ−ＢｕＬｉの溶液（２．５Ｍ、１．０８ｍｌ、２．７ｍｍｏｌ）を−７８℃で加えた。得られた混合物を−７８℃で１時間撹拌した後、ＤＭＦ（０．２６ｍＬ、３．３７ｍｍｏｌ）を１０分間かけて滴下した。次に、この反応混合物を室温でさらに２時間撹拌し、その後、反応混合物を氷上でクエンチした。水層を酢酸エチル（２回）で抽出し、ブライン（１回）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮して、未精製の黄色の油を得た。この未精製物を、ヘキサン／酢酸エチル（７：３）で溶出させるフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、２９ａ（３９８ｍｇ、６０％）をオフホワイトの固体として得た。LC
-MS m/z 296 ([M+H]+).1HNMR (CDCl3) δ 9.88 (s, 1H), 4.70 (br s, 2H), 4.59 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 4.06 (br s, 2H), 3.86 (s, 4H), 1.41 (t, J = 7.1 Hz, 3H).
【０２８６】
段階２：１−（２−クロロ−９−エチル−６−モルホリノ−９Ｈ−プリン−８−イル）−Ｎ−メチルメタンアミン（３０ａ）の合成
ＤＣＥ／ＭｅＯＨ（２：１）中の２−クロロ−９−エチル−６−モルホリノ−９Ｈ−プリン−８−カルバルデヒド２９ａ（３００ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）の溶液に、メタノール中のメチルアミンの溶液（９．８Ｍ、０．８３ｍＬ、８．１４ｍｍｏｌ）を加えた。室温で３０分間撹拌した後、白色沈殿が観察された。次に、得られた混合物をさらに５時間撹拌し、溶媒を減圧除去して、オフホワイトの固体を得た。次に、この未精製固体をＤＣＭ／ＭｅＯＨ（４：１）の溶液中に溶解させ、水素化ホウ素ナトリウム（１１５ｍｇ、３．０５ｍｍｏｌ）を分割して添加した。得られた混合物を室温で１５時間撹拌した。反応混合物を減圧下で蒸発させ、水を加えた。水層を塩化メチレン（２回）で抽出し、ブライン（１回）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮して、未精製のオフホワイトの固体を得た。この未精製物を、塩化メチレン／メタノール（２４：１）で溶出させるフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、３０ａ（２５６ｍｇ、８２％）を白色固体として得た。
【０２８７】
段階３Ａ：（Ｅ）−メチル３−（４−（（（（２−クロロ−９−エチル−６−モルホリノ−９Ｈ−プリン−８−イル）メチル）（メチル）アミノ）メチル）フェニル）アクリレート（３３ａ）の合成
ＤＣＥ（４．０ｍＬ）中の３０ａ（２４２ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、（Ｅ）−メチル３−（４−ホルミルフェニル）アクリレート（１６３ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）、酢酸（４７μＬ、０．７８ｍｍｏｌ）およびトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（２４８ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ）を順次加えた。得られた混合物を室温で５時間撹拌した。炭酸水素ナトリウム飽和溶液を加えて反応をクエンチし、水層を塩化メチレン（２回）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１回）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下で蒸発させた。この未精製物を、ヘキサン／酢酸エチル（３：２）で溶出させるフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、３３ａ（３２８ｍｇ、８７％）を白色固体として得た。LC-MS m/z 485 ([M + H]+).1HNMR (CDCl3)  δ 7.68 (d, J = 16 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.33 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.43 (d, J = 16 Hz, 1H), 4.27 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 4.27 (マスクピーク, 4H), 3.81 (s, 3H), 3.83 − 3.80 (マスクピーク, 4H), 3.70 (s, 2H), 3.59 (s, 2H), 2.23 (s, 3H), 1.34 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
【０２８８】
段階３Ｂ：メチル４−（（（（２−クロロ−９−エチル−６−モルホリノ−９Ｈ−プリン−８−イル）メチル）（メチル）アミノ）メチル）ベンゾエート（３３ｂ）の合成
ＴＨＦ（７．８ｍＬ）中の１−（２−クロロ−９−エチル−６−モルホリノ−９Ｈ−プリン−８−イル）−Ｎ−メチルメタンアミン３０ａ（４８５ｍｇ、１．５７ｍｍｏｌ）の溶液に、メチル４−（ブロモメチル）ベンゾエート（４６６ｍｇ、２．０３ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．２８ｍＬ、２．０３ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で１６時間撹拌し、溶媒を減圧除去した。次に、飽和炭酸水素ナトリウムを加え、水層を酢酸エチル（２回）で抽出し、ブライン（１回）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮して、未精製の黄色の油を得た。この未精製物を、ヘキサン／酢酸エチル（３：２）で溶出させるフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、３３ｂ（７０３ｍｇ、９８％）を無色の油として得た。
【０２８９】
段階４：メチル４−（（（（２−（２−アミノピリミジン−５−イル）−９−エチル−６−モルホリノ−９Ｈ−プリン−８−イル）メチル）（メチル）アミノ）メチル）ベンゾエート（３４ｈ）の合成
ジオキサン（０．９ｍＬ）中の３３ｂ（２０３ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｋ２ＣＯ３（１２２ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ）水溶液を加え、次に、５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリミジン−２−アミン４ａ（１４７ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２・ＣＨ２Ｃｌ２（１８ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）を加えた。次に、反応混合物を１５０℃で２０分間、マイクロ波反応器内で加熱した。ジオキサンを除去し、水層を酢酸エチル（３回）で抽出した。合わせた有機抽出液をＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下で蒸発させた。褐色の残渣を、ヘキサン／酢酸エチル（２：３）〜ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（２４：１）で溶出させるフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、３４ｈ（１６８ｍｇ、７０％）を薄茶色の固体として得た。LC-MS m/z 518 ([M + H]+).1HNMR (CDCl3)  δ 9.26 (s, 2H), 7.99 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.40 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 5.25 (s, 2H), 4.37−4.32 (m, 6H), 3.91 (s, 3H), 3.86 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.75 (s, 2H), 3.65 (s, 2H), 2.25 (s, 3H), 1.41 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
【０２９０】
段階５：４−（（（（２−（２−アミノピリミジン−５−イル）−９−エチル−６−モルホリノ−９Ｈ−プリン−８−イル）メチル）（メチル）アミノ）メチル）−Ｎ−ヒドロキシベンズアミド（３５ｈ）の合成
ＮａＯＭｅ（１．２３ｍＬ、５．３６ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（４．２ｍＬ、２：３ｖ／ｖ）中の３４ｈ（７９ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）および塩酸ヒドロキシルアミン（１０６ｍｇ、１．５３ｍｍｏｌ）の溶液に−７８℃で滴加した。次に、反応混合物を室温まで温め、３０分間撹拌した。次に、反応混合物を水で希釈して澄明溶液を得て、６Ｎ  ＨＣｌで中和した。この未精製混合物をＲＰＨＰＬＣで精製して、表題化合物３５ｈを得た（ビス−ＴＦＡ塩として、６０ｍｇ、５３％）。あるいは、ＲＰＨＰＬＣ画分の溶媒を減圧除去し、炭酸水素ナトリウム飽和溶液を精製化合物に加え、酢酸エチル（３回）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１回）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮して、３５ｈ（遊離塩基として、１７ｍｇ、２２％）を白色固体として得た。３５ｈのＴＦＡ塩：LC-MS m/z 519 ([M + H]+).1HNMR (DMSO-d6)  δ 11.32 (br s, 1H), 9.14 (s, 2H), 7.84 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.58 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.20 (br s, 2H), 4.63 (br s, 2H), 4.30−4.27 (m, 8H), 3.79 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 2.78 (br s, 3H), 1.35 (t, J = 7.2 Hz, 3H).３５ｈの遊離塩基：LC-MS m/z 519 ([M + H]+).1HNMR (DMSO-d6)  δ 11.20 (s, 1H), 9.10 (s, 2H), 9.03 (s, 1H), 7.73 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.41 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.07 (s, 2H), 4.34−4.25 (m, 6H), 3,79 (s, 2H), 3.76−3.74 (m, 4H), 3.64 (s, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.36 (t, J = 6.8 Hz, 3H). HRMS (ESI) m/z [M
+ H]+ C25H31N10O3の計算値, 519.2575; 実測値, 519.2593.
【０２９１】
表１中の以下の化合物は、スキーム１〜５に記載の合成経路および実施例３〜９の手順の類似手順を用いて作製された。
【０２９２】
【表１−１】
2017510628.tif 000035
【表１−２】
2017510628.tif 000036
【表１−３】
2017510628.tif 000037
【表１−４】
2017510628.tif 000038
【表１−５】
2017510628.tif 000039
【表１−６】
2017510628.tif 000040
【表１−７】
2017510628.tif 000041
【表１−８】
2017510628.tif 000042
【表１−９】
2017510628.tif 000043
【表１−１０】
2017510628.tif 000044
【表１−１１】
2017510628.tif 000045
【表１−１２】
2017510628.tif 000046
【表１−１３】
2017510628.tif 000047
【表１−１４】
2017510628.tif 000048
【０２９３】
以下のヒドロキサメートは、スキーム１〜５に記載の合成経路および実施例３〜９の手順の類似手順を用いて作製された。これらの化合物は、任意の識別番号（ＥＸで示される）、および実施例２のスキームに存在する対応する化合物、並びにそれらの構造を割り当てられ、解析データが以下の表２に示される。
【０２９４】
【表２−１】
2017510628.tif 000049
【表２−２】
2017510628.tif 000050
【表２−３】
2017510628.tif 000051
【表２−４】
2017510628.tif 000052
【表２−５】
2017510628.tif 000053
【表２−６】
2017510628.tif 000054
【表２−７】
2017510628.tif 000055
【表２−８】
2017510628.tif 000056
【表２−９】
2017510628.tif 000057
【表２−１０】
2017510628.tif 000058
【表２−１１】
2017510628.tif 000059
【表２−１２】
2017510628.tif 000060
【表２−１３】
2017510628.tif 000061
【表２−１４】
2017510628.tif 000062
【表２−１５】
2017510628.tif 000063
【表２−１６】
2017510628.tif 000064
【表２−１７】
2017510628.tif 000065
【表２−１８】
2017510628.tif 000066
【表２−１９】
2017510628.tif 000067
【表２−２０】
2017510628.tif 000068
【表２−２１】
2017510628.tif 000069
【表２−２２】
2017510628.tif 000070
【表２−２３】
2017510628.tif 000071
【表２−２４】
2017510628.tif 000072
【表２−２５】
2017510628.tif 000073
【表２−２６】
2017510628.tif 000074
【表２−２７】
2017510628.tif 000075
【表２−２８】
2017510628.tif 000076
【表２−２９】
2017510628.tif 000077
【表２−３０】
2017510628.tif 000078
【表２−３１】
2017510628.tif 000079
【表２−３２】
2017510628.tif 000080
【表２−３３】
2017510628.tif 000081
【表２−３４】
2017510628.tif 000082
【表２−３５】
2017510628.tif 000083
【表２−３６】
2017510628.tif 000084
【表２−３７】
2017510628.tif 000085
【表２−３８】
2017510628.tif 000086
【表２−３９】
2017510628.tif 000087
【表２−４０】
2017510628.tif 000088
【表２−４１】
2017510628.tif 000089
【表２−４２】
2017510628.tif 000090
【表２−４３】
2017510628.tif 000091
【表２−４４】
2017510628.tif 000092
【表２−４５】
2017510628.tif 000093
【表２−４６】
2017510628.tif 000094
【表２−４７】
2017510628.tif 000095
【表２−４８】
2017510628.tif 000096
【表２−４９】
2017510628.tif 000097
【表２−５０】
2017510628.tif 000098
【表２−５１】
2017510628.tif 000099
【表２−５２】
2017510628.tif 000100
【表２−５３】
2017510628.tif 000101
【表２−５４】
2017510628.tif 000102
【表２−５５】
2017510628.tif 000103
【表２−５６】
2017510628.tif 000104
【表２−５７】
2017510628.tif 000105
【表２−５８】
2017510628.tif 000106
【表２−５９】
2017510628.tif 000107
【表２−６０】
2017510628.tif 000108
【表２−６１】
2017510628.tif 000109
【表２−６２】
2017510628.tif 000110
【０２９５】
実施例１０：酵素アッセイ
ＨＤＡＣ酵素アッセイ
ＨｅＬａ核抽出物を、通例のＨＤＡＣ阻害アッセイにおけるＨＤＡＣの供給源として使用する。組換えＨＤＡＣ酵素、ＨＤＡＣ１（カタログ番号５００５）、ＨＤＡＣ３／ＮｃｏＲ２（カタログ番号５０００３）、ＨＤＡＣ４（カタログ番号５０００４）、ＨＤＡＣ６（カタログ番号５０００６）、ＨＤＡＣ８（カタログ番号５０００８）はＢＰＳバイオサイエンス社（米国）から購入した。ＨＤＡＣ４（番号Ｈ８６−３１Ｇ−１０）、ＨＤＡＣ５（カタログ番号Ｈ８７−３１Ｇ）、ＨＤＡＣ９（カタログ番号Ｈ９１−３１Ｇ）、ＨＤＡＣ１０（カタログ番号Ｈ９２−３１Ｇ）、およびＨＤＡＣ１１（カタログ番号Ｈ９３−３０Ｇ）は、シグナルケム社（SignalChem）（カナダ）から購入した。このアッセイは、蛍光に基づくＨＤＡＣ活性アッセイを用いて、９６ウェル型（黒色ＮＢＳ半面積９６ウェルプレート、コーニング社＃３９９３）において行う。ＨｅＬａ核抽出物、ＨＤＡＣ１、２、３、６、および１０用の基質Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ａｃ）−ＡＭＣ（カタログ番号Ｉ−１８７５）、ＨＤＡＣ４、５、７、８、９および１１用のＢｏｃ−Ｌｙｓ（Ｔｆａ）−ＡＭＣ（カタログ番号Ｉ−１９８５）を、ベイケムＡＧ社（Bachem AG）（スイス）から購入した。反応混合物（５０μＬ／ウェル）は、２５ｍＭトリス（ｐＨ８．０）、１３７ｍＭ  ＮａＣｌ、２．７ｍＭ  ＫＣｌ、１ｍＭ  ＭｇＣｌ２、０．１ｍｇ／ｍＬ  ＢＳＡ、試験化合物、適切な濃度の酵素、および５０μＭの基質を含有するアッセイ緩衝液から構成され、室温で２時間インキュベートする。ディベロッパー（developer）［５０μＬ／ウェル、２ｍｇ／ｍＬのトリプシン（カタログ番号Ｔ４７９９、シグマ・アルドリッチ社）、５０ｍＭのトリス（ｐＨ８．０）、および４．５μＭのＬＡＱ８２４（ＣＡＳ４０４９５１−５３−７）を含有］の添加により反応を停止させ、３７℃で３０分間インキュベートする。ＢｉｏＴｅｋ  Ｓｙｎｅｒｇｙ  Ｈ４  Ｈｙｂｒｉｄ  Ｍｕｌｔｉ−Ｍｏｄｅ
Ｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ  Ｒｅａｄｅｒを用いて３６０ｎｍの励起波長および４６０ｎｍ
の蛍光波長において蛍光を検出し、ＢｉｏＴｅｋ’ｓ  Ｇｅｎ５（ｖ２．０３．０１）ソフトウェアを用いて生データを処理する。ＩＣ５０が表１に記載され、ボリノスタット（ＳＡＨＡ）は、正の対照として使用し、我々が以前に報告（Wang, et al. J. Med. Chem.
2011, 54, 4694-4720）したように作製した。
【０２９６】
キナーゼ酵素アッセイ
脂質キナーゼＰＩ３Ｋα：カタログ番号ＰＶ４７８８（インビトロジェン社製）、またはカタログ番号４０６２０（ＢＰＳバイオサイエンス社製、米国）またはカタログ番号Ｐ２７−１８Ｈ（シグナルケム社製、カナダ）；ｐ１１０α（Ｈ１０４７Ｒ）／ｐ８５α（カタログ番号４０６４１）（ＢＰＳ社製）、ｐ１１０α（Ｅ５４５Ｋ）／ｐ８５α（カタログ番号Ｐ２７−１５Ｈ）（シグナルケム社製）；ＰＩ３Ｋβ：カタログ番号Ｐ２８−１０Ｈ（シグナルケム社）、カタログ番号４０６２２（ＢＰＳ）、ＰＩ３Ｋδ：カタログ番号Ｐ３０−１０Ｈ（シグナルケム社）を、ＡＤＰ−Ｇｌｏ（商標）Ｋｉｎａｓｅ  Ａｓｓａｙ（プロメガ社）で使用した。ＰＩ３Ｋ阻害剤のＧＤＣ−０９４１およびワートマニンは、ＬＣラボラトリーズ社（LC Laboratories）（米国０１８０１マサチューセッツ州ウォバーン、ニューボストンストリート１６５）から粉末として購入した後、１０ｍＭストックとしてＤＭＳＯ中で調製した。ＰＩ３ｋおよびｍＴＯＲの二重阻害剤であるＧＤＣ−０９８０は、セレック・ケミカルズ社（Selleck Chemicals）（米国７７０５４テキサス州ヒューストン、Ｓ  Ｌｏｏｐ  Ｗ＃２２５、２６２６）から、ＤＭＳＯ中の１０ｍＭストックとして購入した。連続希釈した化合物溶液（５μＬ／ウェル、３倍、８濃度）を、白色ＮＢＳ半面積９６ウェルプレート（コーニング社＃３９９２）に添加した。脂質希釈緩衝液（２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５、０．５ｍＭ  ＥＧＴＡ）中の脂質ＰＩＰ２：ＰＳ（１：３）混合物（０．１６７ｍｇ／ｍＬ：０．５ｍｇ／ｍＬ）を、反応緩衝液（３．３３ｘ）（１５９ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５、８７ｍＭ  ＮａＣｌ、９．５ｍＭ
ＭｇＣｌ２、０．０８ｍｇ／ｍＬ  ＢＳＡ）で希釈（１：１）し、１．６７ｘ希釈標準溶液を作製し、ＰＩ３Ｋ酵素を１．６７ｘ希釈標準溶液で希釈し、１５μＬ／ウェルを反応に使用した。脱イオン水中のＡＴＰ（１２５μＭ、５μＬ／ウェル）を加えて、反応を開始させた。室温で１時間反応させた後、ＡＤＰ−Ｇｌｏ溶液（２５μＬ／ウェル）の添加により反応を停止させ、室温で４０分間インキュベートし、次に、キナーゼ検出溶液（５０μＬ／ウェル）を添加し、４０分間インキュベートし、Ｂｉｏｔｅｋ  Ｓｙｎｅｒｇｙ  Ｈ４  Ｈｙｂｒｉｄ  Ｍｕｌｔｉ−Ｍｏｄｅ  Ｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ  Ｒｅａｄｅｒ上で発光を読み取った。生データはＢｉｏＴｅｋ’ｓ  Ｇｅｎ５（ｖ２．０３．０１）ソフトウェアを用いて処理する。ＩＣ５０が表１に記載され、ＧＤＣ−０９４１、ＧＤＣ−０９８０およびワートマニンは正の対照として使用される。
【０２９７】
ＩＣ５０は、酵素活性の５０％阻害に必要な化合物の濃度と定義される。
作用強度の定義：
「Ｉ」：１μＭ＜ＩＣ５０≦１０μＭ。
「ＩＩ」：０．１μＭ＜ＩＣ５０≦１μＭ。
「ＩＩＩ」：０．０１μＭ＜ＩＣ５０≦０．１μＭ。
「ＩＶ」：ＩＣ５０≦０．０１μＭ
【０２９８】
【表３−１】
2017510628.tif 000111
【表３−２】
2017510628.tif 000112
【表３−３】
2017510628.tif 000113
【表３−４】
2017510628.tif 000114
【０２９９】
実施例１１：細胞培養および抗増殖アッセイ（細胞ＩＣ５０）
細胞アッセイで使用される代表的なヒト腫瘍細胞株は、乳がん（ＢＴ−４７４、ＭＣＦ７、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、ＭＤＡ−ＭＢ−４３６、およびＭＤＡ−ＭＢ−４６８）、結腸がん（ＣＯＬＯ２０５およびＨＣＴ１１６）、グリア芽腫（Ｕ８７ＭＧ）、白血病（ＨＬ−６０、Ｋ−５６２、ＭＯＬＴ−４、ＭＶ−４−１１、ＲＰＭＩ−８２２６、ＳＵＰ−Ｂ１５）、肺がん（Ａ５４９、ＮＣＩ−Ｈ４６０、およびＮＣＩ−Ｈ５２２）、メラノーマ（Ａ−３７５）、卵巣がん（ＳＫ−ＯＶ−３）、膵がん（ＢｘＰＣ−３およびＰＡＮＣ−１）、前立腺がん（ＰＣ−３およびＤＵ１４５）、並びに腎がん（Ａ−４９８およびＡＣＨＮ）の細胞株である。細胞株ＣＯＬＯ２０５、ＨＣＴ１１６、ＭＯＬＴ−４、ＭＶ−４−１１、Ｋ−５６２、ＲＰＭＩ８２２６、ＳＵＰ−Ｂ１５、Ｕ８７ＭＧ、ＳＫ−ＯＶ−３、ＰＣ−３、ＤＵ−１４５、ＮＣＩ−Ｈ４６０、ＮＣＩ−Ｈ５２２、Ａ３７５、ＨｅｐＧ２、ＳＫ−ＨＥＰ１、ＢｘＰＣ−３およびＰＡＮＣ−１はＡＴＣＣから購入し、ＡＴＣ
Ｃ推奨培地を用いて増殖させた。細胞株ＭＣＦ７、ＴＢ４７４、Ｔ−４７Ｄ、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、ＭＤＡ−ＭＢ−４６８、ＭＤＡ−ＭＢ−４３６、Ａ５４９、Ａ−４９８、ＡＨＣＮ、およびＨｅＬａはＡＴＣＣから購入した。細胞を、１０％ＦＢＳおよび２ｍＭグルタミンを含有する培地中、３７℃、５％ＣＯ２で培養した。細胞を、ＭｙｃｏＡｌｅｒｔ（商標）ＰＬＵＳ  Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  Ｋｉｔ（ロンザ・ウォーカーズビル社（Lonza Walkersville, Inc.））を用いて定期的にモニターし、細胞がマイコプラズマを含有していないことを確かめた。抗生物質（１００Ｕ／ｍＬのペニシリンおよび１００μｇ／ｍＬのストレプトマイシン）は単に、化合物希釈に使用した培地および９６ウェルアッセイプレート内の細胞に添加した。ＤＭＥＭ（４．５ｇ／Ｌグルコース）およびＲＰＭＩ１６４０は、バイオポリス・シェアード・ファシリティズ社（Biopolis Shared Facilities）（ＢＳＦ）（シンガポール）から入手した。細胞アッセイにおいて、ＢｘＰＣ−３、ＰＣ−３、ＨＣＴ１１６、ＣＯＬＯ２０５、ＭＶ−４−１１、ＲＰＭＩ８２２６、ＨＬ−６０、ＳＵＰ−Ｂ１５、Ｔ−４７ＤはＲＰＭＩ１６４０中で培養し；Ａ−４９８、ＡＣＨＮ、ＤＵ１４５、ＭＣＦ７、ＰＡＮＣ−１，Ｕ−８７ＭＧ、ＮＣＩ−Ｈ４６０、ＮＣＩ−Ｈ５２２、ＨｅＬａ、およびＡ−３７５はＤＭＥＭ中で培養し；ＢＴ−４７４、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、ＭＤＡ−ＭＢ−４６８、ＭＤＡ−ＭＢ−４３６はＤＭＥＭ／Ｆ１２（１：１）中で培養した。
【０３００】
典型的なスクリーニング実験において、細胞（１００μＬ／ウェル）は、個々の細胞株の倍加時間およびアッセイの直線性に応じて、２，０００〜３０，０００細胞／ウェルの範囲の播種密度で、９６ウェルマイクロタイタープレートに播種する。透明９６ウェル組織培養プレート（コーニング社＃３５９６、またはヌンク社１６７００８）は比色分析および細胞成長状態のモニタリングに使用し、一方、白色９６ウェル組織培養プレート（コーニング社＃３９１７）は発光アッセイおよび蛍光アッセイに使用する。細胞播種後、マイクロタイタープレートを、３７℃、５％ＣＯ２、９５％空気および１００％相対湿度で一晩（最長２４時間）インキュベートし、その後、接着細胞に対して化合物を添加する。細胞播種の直後に、浮遊細胞を試験化合物で処理する。
【０３０１】
試験化合物を、同一培地を用いて連続希釈（３倍または４倍、８濃度）し、プレート（１５〜２５μＬ／ウェル）に添加する。７２時間培養した後、以下の２つの方法を用いて、プレートを細胞毒性／生存率についてアッセイする。選択化合物について、２４時間および４８時間の薬剤処理の後のＩＣ５０も決定した。
【０３０２】
スルホローダミンＢ（ＳＲＢ）法
プレート内の細胞を、冷トリクロロ酢酸（ＴＣＡ）（脱イオン水中５０％ｗ／ｖ、各ウェル内の培地の１／４体積）で固定し、４℃で１時間（接着細胞）または２時間（浮遊細胞）インキュベートする。プレートを５回（水道水×３、脱イオン水×２）洗浄し、風乾する。ＳＲＢ溶液（１％酢酸中０．４％（ｗ／ｖ））を各ウェル（６０μＬ／ウェル）に添加し、プレートを室温で３０分間インキュベートした後、１％酢酸溶液で４回洗浄し、風乾する。トリス塩基溶液（１０ｍＭ、１００μＬ／ウェル）の添加により結合色素を溶解させ、吸光度をＢｉｏＴｅｋ  Ｓｙｎｅｒｇｙ  Ｈ４  Ｈｙｂｒｉｄ  Ｍｕｌｔｉ−Ｍｏｄｅ  Ｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ  Ｒｅａｄｅｒ上で５１５ｎｍの波長で読み取る。
【０３０３】
ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）発光細胞生存率アッセイ
プレートにＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）試薬（９５μＬ／ウェル）を加え、製造会社のプロトコルに従ってＢｉｏＴｅｋ  Ｈ４リーダー上で発光を読み取る。
【０３０４】
ＢｉｏＴｅｋ’ｓ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｇｅｎ５  （ｖ２．０３．０１）を用いて生データを処理し、阻害性ＩＣ５０値を得る。ボリノスタットおよびＧＤＣ−０９４１を正の対照として使用する。
【０３０５】
ＩＣ５０は、非処理細胞に対して、細胞の５０％阻害に必要な化合物の濃度と定義される。ＩＣ５０データを以下の表４および表５に示す。作用強度の定義は以下の通りである：
「Ｉ」：ＩＣ５０＞１０μＭ。
「ＩＩ」：２μＭ＜ＩＣ５０≦１０μＭ。
「ＩＩＩ」：０．５μＭ＜ＩＣ５０≦２μＭ。
「ＩＶ」：ＩＣ５０≦０．５μＭ
【０３０６】
【表４−１】
2017510628.tif 000115
【表４−２】
2017510628.tif 000116
【表４−３】
2017510628.tif 000117
【０３０７】
【表５−１】
2017510628.tif 000118
【表５−２】
2017510628.tif 000119
【表５−３】
2017510628.tif 000120
【０３０８】
実施例１２：ウエスタンブロット解析
上記の細胞培養アッセイおよび抗増殖アッセイのセクション（実施例１１）に記載の通りに、細胞を培養し、試験化合物で処理する。細胞を冷ＤＰＢＳで２回洗浄し、氷上で冷却し、溶解緩衝液［５０ｍＭ  トリス（ｐＨ７．４）、２．５ｍＭ  β−グリセロリン酸、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、１％ＮＰ−４０、０．５％デオキシコール酸ナトリウム、０．１％ＳＤＳ、２ｍＭオルトバナジウム酸ナトリウム、１０ｍＭフッ化ナトリウム，１ｍＭ
ＥＤＴＡおよび新たに添加されるプロテアーゼ阻害剤ＰＭＳＦ（０．１ｍＭ）並びにプロテアーゼ阻害剤混合物（カタログ番号０３９６９、ナカライテスク社またはカタログ番号５３９１３４、カルバイオケム社）で処理する。可溶化物を、２０×２分間の２０，０００×ｇで澄明にし、ＢＣＡ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ａｓｓａｙ  Ｋ（カタログ番号７１２８５−３、ノバジェン社（Novagen）、米国）を用いてタンパク質濃度を測定する。細胞可溶化物中のタンパク質をＳＤＳ−ＰＡＧＥで分離し、ＰＶＤＦに転写し、適切な一次抗体および二次抗体でプローブする。ヒストンＨ３（アセチルＫ９）（カタログ番号９６４９）、ヒストンＨ３（カタログ番号９７１５）、アセチル−α−チューブリン（Ｌｙｓ４０）（カタログ番号５３３５）、α−チューブリン（カタログ番号２１２５）、ｐＡｋｔ（Ｓｅｒ４７３）（カタログ番号４０６０）、ｐＡｋｔ（Ｔｈｒ３０８）（カタログ番号４０５６、＃２９６５）、抗Ａｋｔ（ｐａｎ）（カタログ番号４６８５）、ｐＳ６リボソームタンパク質（Ｓｅｒ２４０／２４４）（カタログ番号５３６４）、Ｓ６リボソームタンパク質（カタログ番号２２１７）、ｐＳ６リボソームタンパク質（Ｓ２４０／２４４）、ホスホ−ＰＲＡＳ４０（Ｔｈｒ２４６）（カタログ番号２９９７）、ｐ−ｍＴＯＲ（Ｓ２４４８）（カタログ番号５５３６）、ｐＥｒｋ１／２（Ｔ２０２／ｙ２０４）（カタログ番号４３７６）、ホスホ−４Ｅ−ＢＰ１（Ｔｈｒ３７／４６）（カタログ番号２８５５）、ｐ７０Ｓ６キナーゼ（カタログ番号２７０８）、ホスホ−ｐ７０  Ｓ６キナーゼ（Ｔｈｒ３８９）（カタログ番号９２３４）、ホスホ−ｐ７０Ｓ６キナーゼ（Ｔｈｒ４２１／Ｓｅｒ４２４）（カタログ番号９２０４）、ホスホ−ｐ７０Ｓ６キナーゼ（Ｓｅｒ３７１）（カタログ番号９２０８）、ｐＰＤＫ１（Ｓｅｒ２４１）（カタログ番号３４３８）、およびＨＲＰ結合抗ウサギＩｇＧ（カタログ番号７０７４）の抗体は、セル・シグナリング・テクノロジー社（Cell Signaling Technology）（米国）から購入した。抗β−アクチン（カタログ番号ａｂ８２２７）はアブカム社製であり、抗ＧＡＰＤＨ−ＨＲＰ（カタログ番号ｓｃ−２５７７８−ＨＲＰ）はサンタ・クルーズ・バイオテクノロジー社（Santa Cruz Biotechnology, Inc.）製であった。ピアス社製ＥＣＬ  Ｗｅｓｔｅｒｎ  Ｂｌｏｔｔｉｎｇ  Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ（カタログ番号３２２９）を用いてタンパク質バンドを検出し、ＦＵＪＩ  Ｓｕｐｅｒ  ＲＸ−Ｎフィルムを用いてキャプチャし、その後、ＩｍａｇｅＪ（１．４７Ｖ）ソフトウェアを用いてそれをスキャンおよび解析する。代表的なウェスタンブロット像を図１５に示し、解析結果を図１７〜２０に示す。
【０３０９】
図１５に、ＰＣ−３細胞におけるＨＤＡＣｓおよびＰＩ３ｋ−Ａｋｔ−ｍＴＯＲ経路の阻害が示される。ＰＣ−３細胞は、以下の濃度（全て０．１％ＤＭＳＯを含有する）の試験化合物で、３７℃で２４時間処理し、その後、ウエスタンブロット解析のセクションに従って処理した。
【０３１０】
レーン  試料
１      ＤＭＳＯ（０．１％）
２      ボリノスタット＿１０μＭ
３      ＧＤＣ−０９４１＿１μＭ
４      ＥＸ１＿１μＭ
５      ＥＸ１＿１０μＭ
６      ＥＸ２＿１μＭ
７      ＥＸ２＿１０μＭ
８      インスリン（１００  μｇ／ｍＬ）、３０分
レーン  試料
Ａ      ＥＸ３＿１０μＭ
Ｂ      ＥＸ６＿１０μＭ
Ｃ      ＥＸ３７＿１０μＭ
Ｄ      ＥＸ４０＿１０μＭ
Ｅ      ＥＸ４１＿１０μＭ
Ｆ      ＥＸ７＿１０μＭ
Ｇ      ＥＸ９７＿１０μＭ
【０３１１】
試験化合物例について、ヒストン３（Ｌｙｓ９）およびα−チューブリンの高アセチル化が観察された（図１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃおよび１５Ｄ）。ＥＸ１およびＥＸ２（図１５Ａ）の両方によって示されるように、高アセチル化効果は用量依存的である。試験例は、幅広い活性でＰＩ３Ｋ−Ａｋｔ−ｍＴＯＲ経路も阻害した。ＥＸ４０およびＥＸ４１を除き、これらは全て、Ａｋｔ（Ｓｅｒ４７３）のリン酸化、すなわちｍＴＯＲＣ２の活性を阻害した（図１５Ａおよび図１５Ｂ）。これらはまた、Ｓ６（Ｓｅｒ２４０／２４４）のリン酸化、すなわちｍＴＯＲＣ１の活性も阻害した（ＥＸ２、ＥＸ４０およびＥＸ４１を除く、図１５Ｃおよび図１５Ｄ）。ＤＭＳＯ（０．１％）をタンパク質リン酸化のブランク対照として使用し、ＩｍａｇｅＪで解析する際に１００％として正規化した。また、ＰＣ−３細胞をインスリン（１００μｇ／ｍＬ）で３０分間処理したところ、ｐＡｋｔリン酸化およびｐＳ６リン酸化の両方が有意に増強された。ゲルをデジタル化し、ＩｍａｇｅＪで解析した（詳細については図１７〜２０を参照）。
【０３１２】
図１６に、ＭＣＦ７細胞におけるＰＩ３Ｋ−ＡＫＴ−ｍＴＯＲ経路の調節を示す。ＭＣＦ７細胞を一晩かけて血清飢餓状態にし、３０分間のインスリン刺激（２０μｇ／ｍＬ）も含んで、試験化合物で２時間処理した。Ｖはブランク対照としてのビヒクルＤＭＳＯ（０．１％）であり、ＩｍａｇｅＪ解析においてそのリン酸化レベルを１００％に正規化した。ゲルをデジタル化し、ＩｍａｇｅＪで解析した（詳細については図１７〜２０を参照）。
【０３１３】
図１７には、ＨＤＡＣの阻害によるヒストン３（Ｌｙｓ９）の高アセチル化が示される。図１７Ａには、上部に示される濃度の試験化合物（図１５）で２４時間処理されたＰＣ−３細胞が示される。グラフは、２つのウェスタンブロット解析から得られた結果を表す。ボリノスタット（１０μＭ）を正の対照として使用し、ＩｍａｇｅＪ解析においてそのアセチル化レベルを１００％に正規化した。図１７Ｂは、一晩かけて血清飢餓状態にされ、最後の３０分間での全ての試料に対するインスリン（２０μｇ／ｍＬ）刺激を含んで、試験化合物で２時間処理された、ＭＣＦ７細胞を示している。ビヒクルＤＭＳＯ（０．１％）をブランク対照として使用し、そのａｃＨ３レベルを１に正規化した。該当する場合、Ｙ軸は平均値±ＳＤを表す。
【０３１４】
図１８には、ＨＤＡＣ６の阻害によるα−チューブリンの高アセチル化が示される。図１８Ａは、上部に示された濃度の試験化合物（図１５）で２４時間処理されたＰＣ−３細胞を示しており、図のグラフは２つのウェスタンブロット解析から得られた結果を表す。ボリノスタット（１０μＭ）を正の対照として使用し、ＩｍａｇｅＪ解析においてそのアセチル化レベルを１００％に正規化した。図１７Ｂは、一晩かけて血清飢餓状態にされ、最後の３０分間での全ての試料に対するインスリン（２０μｇ／ｍＬ）刺激を含んで、試験化合物で２時間処理された、ＭＣＦ７細胞を示している。ブランク対照としてのビヒクルＤＭＳＯ（０．１％）、およびそのアセチル化レベルを１に正規化した。該当する場合、Ｙ軸は平均値±ＳＤを表す。
【０３１５】
図１９において、ＰＩ３Ｋ−ＡＫＴ−（ｍＴＯＲ）経路：ｐ−Ａｋｔ（Ｓｅｒ４７３）レベルおよびｍＴＯＲＣ２の活性の調節が示される。図１９Ａは、上部に示された濃度の試験化合物（図１５）で２４時間処理されたＰＣ−３細胞を示しており、グラフは２つのウェスタンブロット解析から得られた結果を表す。ビヒクルＤＭＳＯ（０．１％）をブランク対照として使用し、ＩｍａｇｅＪ解析においてそのリン酸化レベルを１００％に正規化した。インスリン（１００μｇ／ｍＬ、３０分間）処理細胞において、ｐＡｋｔレベル
が有意に増強された。図１９Ｂは、一晩かけて血清飢餓状態にされ、最後の３０分間での全ての試料に対するインスリン刺激（２０μｇ／ｍＬ）を含んで、試験化合物で２時間処理された、ＭＣＦ７細胞を示している。ビヒクルＤＭＳＯ（０．１％）をブランク対照として使用し、そのリン酸化レベルを１００％に正規化した。該当する場合、Ｙ軸は平均値±ＳＤを表す。
【０３１６】
図２０において、ＰＩ３Ｋ−ＡＫＴ−（ｍＴＯＲ）経路：ｍＴＯＲＣ１活性の調節が示される。ＭＣＦ７細胞を一晩かけて血清飢餓状態にし、全ての試料について、最後の３０分間のインスリン刺激（２０μｇ／ｍＬ）も含んで、試験化合物で２時間処理した。ブランク対照としてのビヒクルＤＭＳＯ（０．１％）、そのリン酸化レベルを１００％に正規化した。図２０Ａに、ＭＣＦ７細胞におけるｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ（Ｔｈｒ３８９）／ｐ−Ｐ８５Ｓ６Ｋ（Ｔｈｒ４１２）レベルが示される。図２０Ｂに、ＭＣＦ７細胞におけるｐ−Ｓ６（Ｓｅｒ２４０／２４４）レベルが示される。図２０Ｃに、ＭＣＦ細胞におけるｐ−４Ｅ−ＢＰ１（Ｔｈｒ３７／４６）レベルが示される。図２０Ｄでは、ＰＣ−３細胞を、上部に示される濃度の試験化合物（図１５）で２４時間処理した。インスリン（１００μｇ／ｍＬ、３０分間）処理細胞においてｐＳ６レベルが増強された。該当する場合、Ｙ軸は平均値±ＳＤを表す。
【０３１７】
実施例１３：カスパーゼ活性アッセイ
上記の細胞培養アッセイおよび抗増殖アッセイのセクションに記載の通りに、９６ウェルプレート内で、細胞を培養し、試験化合物で処理する。カスパーゼアッセイ緩衝液［１００ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）、２００ｍＭ  ＮａＣｌ，４ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．１％ＣＨＡＰＳ、および新たに加える５ｍＭ  ＤＴＴ、および５０μＭのカスパーゼ基質Ｚ−ＤＥＶＤ−Ｒ１１０または（Ｚ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ａｓｐ）２−ローダミン１１０（カタログ番号Ｍ−２６１５、ベイケム社、スイス）］を細胞に添加（１００μＬ／ウェル）し、プレートを室温でインキュベートし、ＢｉｏＴｅｋ  Ｓｙｎｅｒｇｙ  Ｈ４リーダー（励起：４９６／９ｎｍ、発光：５２１／９ｎｍ）上でカスパーゼ活性についてモニターする。カスパーゼ活性が低い場合、インキュベーション時間は一晩（１８時間）まで延長できる。スタウロスポリンを正の対照として使用する。代表的な結果を図２１に示す。
【０３１８】
図２１は、試験例のカスパーゼ活性を示す。細胞をＥＸ１、ＥＸ２、ＧＤＣ−０９４１、ボリノスタットおよびスタウロスポリン（正の対照）で処理し、カスパーゼ活性を異なる時点でモニターした。図２１ＡはＭＶ−４−１１細胞を示し、カスパーゼ活性が６、２４、４８および７２時間においてモニターされ、最大活性は２４時間で見られた。ＥＸ２およびＥＸ１は共に、カスパーゼ活性の誘導の面で、ボリノスタットよりも強力である。ＧＤＣ０９４１は非常に弱い活性および作用強度を示した。ＥＣ５０は、ＥＸ１、ＥＸ２、ボリノスタットおよびＧＤＣ−０９４１について、それぞれ、０．５２、０．５０、１．１６、および１２．７μＭである。図２１Ｂは、２４、４８および７２時間の時点でモニターされたＰＣ−３細胞を示している。最大カスパーゼ活性は４８時間に見られた。ＥＸ１およびＥＸ２は共に、カスパーゼ活性の誘導の面で、ボリノスタットよりも強力である。ＧＤＣ−０９４１は両方の腫瘍細胞において非常に弱い活性を示した。該当する場合、Ｙ軸は平均値±ＳＤを表す。
【０３１９】
実施例１４：細胞生存率／細胞毒性アッセイ
上記の細胞培養アッセイおよび抗増殖アッセイのセクションに記載の通りに、９６ウェルプレート内で、細胞を培養し、試験化合物で処理し、製造会社のプロトコルに従いＣｙｔｏＴｏｘ−Ｇｌｏ（商標）細胞毒性アッセイキット（プロメガ社）を用いて、死細胞および生細胞の含量を測定する。簡潔に説明すると、ＣｙｔｏＴｏｘ−Ｇｌｏ（商標）細胞毒性アッセイ試薬（４８μＬ／ウェル）を９６ウェルプレート内の細胞に添加し、Ｂｉｏ
Ｔｅｋ  Ｓｙｎｅｒｇｙ  Ｈ４リーダーを用いて発光シグナルを記録し、次に、溶解試薬（４８μＬ／ウェル）を添加し、死細胞および生細胞の両方から得られる発光シグナルを記録する。生存率は、総発光値から実験的細胞死から生じる発光シグナルを減算することにより算出できる。スタウロスポリンを正の対照として使用する。代表的な結果を図２２に示す。
【０３２０】
図２２は、前記化合物により誘導されたＭＶ−４−１１細胞死を示す。細胞をＥＸ１、ＥＸ２、ＧＤＣ−０９４１、ボリノスタットおよびスタウロスポリン（正の対照）で処理し、ＣｙｔｏＴｏｘ−Ｇｌｏ（商標）細胞毒性アッセイキットを用いて細胞死を評価した。非処理細胞に対する処理細胞の細胞死の倍率を異なる時点でモニターした。最大の細胞死は、試験化合物の添加の４８時間後に生じた。図２２ＡはＥＸ１、化合物例１を示す。図２２ＢはＥＸ２、化合物例２を示す。図２２ＣはＧＤＣ−０９４１を示す。図２２Ｄは、ＥＸ１、ＥＸ２、ＧＤＣ−０９４１、およびボリノスタットについての、４８時間の時点での細胞死を示す。細胞死作用強度ＥＣ５０は、ＥＸ１、ＥＸ２、ボリノスタットおよびＧＤＣ−０９４１について、それぞれ、０．１９、０．０６９、０．５８および２．７５μＭと推定された。該当する場合、Ｙ軸は平均値±ＳＤを表す。
【０３２１】
実施例１５：ミクロソーム安定性
ＧＩＢＩＯ
プールされたヒト肝臓ミクロソーム（ＨＬＭ）（カタログ番号ＨＭＭＣＰＬ）、マウス肝臓ミクロソーム（ＭＬＭ）（カタログ番号ＢＣＭＣＰＬ）、およびラット肝臓ミクロソーム（ＲＬＭ）（カタログ番号ＲＴＭＣＰＬ）を、ライフテクノロジーズ社から購入した。インキュベーション（incubation）は、試験化合物（５μＭ）または対照化合物（ベラパミルおよびデキストロメトルファン）、０．５ｍｇ／ｍＬのミクロソーム、３．３ｍＭ
ＭｇＣｌ２、１．３ｍＭ  β−ＮＡＤＰＨ、および１００ｍＭリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ７．４）で構成された。試料を３０、４５、または６０分間インキュベートする。氷冷アセトニトリル０．３％ギ酸を用いて反応を終わらせる。次に、試料を４℃で１５分間、２０，０００×ｇで遠心する。上清をＬＣ−ＭＳで解析する。代表的な結果を表６に示す。
【０３２２】
【表６】
2017510628.tif 000121
【０３２３】
化合物のインビトロ代謝的安定性を、３０分間（マウス、ＭＬＭ）、４５分間（ラット
、ＲＬＭ）、３０または４５分間（ヒト、ＨＬＭ）インキュベートした、０．５ｍｇ／ｍＬのタンパク質の肝ミクロソーム（ＬＭ）を用いてアッセイした。残存する（reminaing）親化合物（parent comppund）の％を、ＬＣ−ＭＳを用いて測定した。ベラパミルおよびデキストロメトルファンの両方を正の対照（postive control）として使用した。
【０３２４】
実施例１６：薬物動態（ＰＫ）
全ての動物試験は、シンガポールのバイオロジカル・リソース・センター（Biological
Resource Centre）（ＢＲＣ）の施設内動物管理使用委員会による承認プロトコルに従って行った。ＢＡＬＢ／ｃマウス（８〜１２週齢、ＢＲＣ、バイオポリス（Biopolis）、シンガポール）に、化合物例の種々の処方溶液または懸濁液を、静脈内、経口および腹腔内投与した。連続的な採血（serial bleeding）の後に血液を集め、遠心し、血漿を−８０℃で凍結した。組織（例えば、肝臓、肺、および腎臓）をドライアイスまたは液体窒素で急速凍結し、解析まで−８０℃に維持した。血漿試料は、内部標準のカルバマゼピン（ＣＢＺ）を添加し、以前の記述（Jayaraman, et al. Drug Metab. Dispos. 2011, 39, 2219−2232）の通りに処理された。定量分析は、Ｗａｔｅｒｓ２９９６フォトダイオードアレイ（ＰＤＡ）検出器およびｍｉｃｒｏｍａｓｓ  Ｑｕａｔｔｒｏ  ｍｉｃｒｏ質量分析計を備えたＷａｔｅｒｓ２７９５セパレーションモジュール上で行った。試料を、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）、ＳｅｃｕｒｉｔｙＧｕａｒｄカートリッジ（Ｃ１８  ４×２．０ｍｍ）を伴う２．０×５０ｍｍカラム、上で、０．５ｍＬ／分の流速で、６分間の勾配（ｘ〜９５％のＢ、溶媒Ａ、０．１％のギ酸（ＦＡ）を含有する超純水、溶媒Ｂ、０．１％のＦＡを含有するメタノール、ｘは５〜５０から選択）で分離し、多重反応モニタリングを用いてデータを得て、ＱｕａｎＬｙｎｘ  ｉｎ  ＭａｓＬｙｎｘソフトウェア（Ｖ４．１、ウォーターズ社（Waters Inc.））で定量化した。ＰＫパラメーターを、サミットＰＫ社（Summit PK）のウェブサイト（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｓｕｍｍｉｔｐｋ．ｃｏｍ／ｅｑｕａｔｉｏｎｓ／ｅｑｕａｔｉｏｎｓ．ｈｔｍ）によって定義されるＰＫ方程式に基づいて、Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ  Ｅｘｃｅｌ  ２０１０を用いて、評価した。曲線下面積の算出および多次指数曲線除去（multi-exponential curve stripping）の両方を使用した。前記方法によって、我々の以前のデータについて、ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ（ファーサイト社（Pharsight）、マウンテンヴュー、カリフォルニア州）と同様の結果を得ることができる。
【０３２５】
実施例１７：インビボにおける薬力学研究（ＰＤ）および有効性研究
全ての動物試験は、シンガポールのバイオロジカル・リソース・センター（ＢＲＣ）の施設内動物管理使用委員会による承認プロトコルに従って行った。雌ＢＡＬＢ／ｃヌードマウス（７および１０週齢、ＢＲＣ、バイオポリス社、シンガポール）または雌ＮＣｒヌードマウス（５〜６および７〜９週齢、インビボス社（InVivos Pte Ltd）、シンガポール）に、無血清のＤＭＥＭまたはＲＰＭＩ１６４０増殖培地およびＭａｔｒｉｇｅｌ（カタログ番号３５４２３４、コーニング・ディスカバリー・ラボウェア社）（１：１）中に懸濁した約５×１０６個の腫瘍細胞を右側腹部に接種させ、１００〜１５０μＬの総体積で注射した。デジタルノギスを用いて腫瘍を測定し、式：腫瘍容積＝長さ×幅２×０．５を用いて腫瘍容積を評価した。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ％）＝［１−（Ｔｔ−Ｔ０）／（Ｃｔ−Ｃ０）×１００、Ｃ０およびＣｔはそれぞれ０日目およびｔ日目の対照群（ビヒクル）の平均腫瘍容積であり；Ｔ０およびＴｔはそれぞれ０日目およびｔ日目の処置群の平均腫瘍容積である。行われた統計は全て、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（ｖ４．００またはｖ６．０４、グラフパッド・ソフトウェア社（GraphPad Software Inc.）を用いて行い、２つの群の比較には対応のない両側ｔ検定を使用し、３つ以上の群の比較には１元配置分散分析とその後のダネット多重比較検定を使用した。
【０３２６】
実施例１８：標的の調節
ＰＣ−３前立腺がん異種移植片
ＰＣ−３腫瘍を有するＢＡＬＢ／ｃヌードマウスに、ビヒクル、ボリノスタット（２００ｍｇ／ｋｇ）、ＥＸ１（１５０ｍｇ／ｋｇ）およびＥＸ７８（１００ｍｇ／ｋｇ）を経口投与した。血液試料、腫瘍および他の組織を、表示時点（各時点につき２匹のマウス）においてＰＫ／ＰＤ試験用に採取した。ＰＣ−３腫瘍におけるＨ３の高アセチル化を、ＥＸ１処置マウスおよびＥＸ７８処置マウスの腫瘍のウェスタンブロット解析によって確認し、ボリノスタットを正の対照として使用した（図２３）。
【０３２７】
図２３はＰＣ−３腫瘍におけるヒストン高アセチル化を示す。図２３Ａは腫瘍組織のウエスタンブロット解析を示す。使用したレーンおよび濃度は以下の通りである：
【０３２８】
レーン  試料
１／２  ３時間におけるビヒクル
３／４  ３時間におけるボリノスタット
５／６  １時間におけるＥＸ１
７／８  ２時間におけるＥＸ１
９／Ａ  ３時間におけるＥＸ１
Ｂ    ４時間におけるＥＸ７８
【０３２９】
ＰＣ−３腫瘍における有意なヒストン高アセチル化が、処置マウスで観察された。図２３Ｂは、デジタル化および正規化されたウエスタンブロット解析の結果を示している。該当する場合、Ｙ軸は平均値±ＳＥＭを表す。
【０３３０】
ＭＶ４−１１急性骨髄性白血病異種移植片
ＭＶ４−１１腫瘍を有するマウスも、薬力学的（ＰＤ）評価のために、静脈内（ＩＶ）（５０ｍｇ／ｋｇ）、腹腔内（ＩＰ）（１００ｍｇ／ｋｇ）および経口（per orem）（ＰＯ）（１５０ｍｇ／ｋｇ）経路を介したＥＸ２、ＩＶ（２５ｍｇ／ｋｇ）およびＰＯ（１００ｍｇ／ｋｇ）経路の両方を介したＥＸ７８で処置した。ＥＸ２の３つ全ての投与経路が、ＭＶ４−１１腫瘍におけるＨ３の高アセチル化をもたらす（図２４）。ＥＸ７８も、両方の投与経路でＨ３の高アセチル化を誘導した。
【０３３１】
図２４は、ＭＶ４−１１腫瘍におけるヒストン高アセチル化を示す。ビヒクル［ＤＭＳＯ／ＰＥＧ４００／滅菌水（１０：４０：５０）］、ＥＸ２およびＥＸ７８を投与された、ＭＶ４−１１腫瘍を有するＢＡＬＢ／ｃヌードマウス。腫瘍を表示時点において採取した。図２４Ａは腫瘍組織のウエスタンブロット解析を示す。
【０３３２】
使用したレーンおよび濃度は以下の通りである：
【０３３３】
レーン    試料
１          ３時間におけるビヒクル、ＰＯ
２          １時間におけるＥＸ２、ＰＯ
３          ２時間におけるＥＸ２、ＰＯ
４／５／６  ３時間おけるＥＸ２、ＰＯ
７          ２時間におけるＥＸ２、ＩＶ
８          ３時間におけるＥＸ２、ＩＶ
９          ２時間におけるＥＸ２、ＩＰ
Ａ          １時間におけるＥＸ７８、ＩＶ
Ｂ          ２時間におけるＥＸ７８、ＰＯ
Ｃ          ３時間におけるＥＸ７８、ＰＯ
Ｄ          ４時間におけるＥＸ７８、ＰＯ
【０３３４】
ＭＶ４−１１腫瘍における有意なヒストン高アセチル化が、処置マウスで観察された。図２４Ｂは、デジタル化および正規化されたウエスタンブロット解析の結果を示している。該当する場合、Ｙ軸は平均値±ＳＥＭを表す。
【０３３５】
実施例１９：有効性
ＮＣｒヌードマウスＨｅｐＧ２異種移植モデル
雌ＮＣｒヌードマウス（ＣｒＴａｃ：ＮＣｒ−Ｆｏｘｎ１ｎｕ、５週齢、インビボス社、シンガポール）の右側腹部に、６×１０６個のＨｅｐＧ２細胞を接種させた。ＨｅｐＧ２腫瘍サイズが平均して２７５ｍｍ３になった際（移植から１３日後）、マウスを無作為化し、ビヒクル、ＥＸ２（１５０ｍｇ／ｋｇ）およびソラフェニブトシレート（９８ｍｇ／ｋｇ）を４週間（週あたり一日一回×５）経口投与した。ビヒクル群のマウスは、３回目のサイクルの最後の投与の１８日後に、腫瘍量が原因で、安楽死させた。ＥＸ２は、１８日目（最後の投与後）に、ＴＧＩ＝９６％で有意な腫瘍阻害を示した（図２５）。参照ソラフェニブトシレート（９８ｍｇ／ｋｇ）も有効であったが、ＴＧＩ＝７１％（１８日目）であった。
【０３３６】
図２５は、ＮＣｒヌードマウスＨｅｐＧ２異種移植モデルにおける有効性を示している。ＨｅｐＧ２腫瘍を有する雌ＮＣｒヌードマウスを、ビヒクルまたはＥＸ２（１５０ｍｇ／ｋｇ）で、約２７５ｍｍ３の平均腫瘍容積を有する０日目から、４サイクル処置した：５日投与２日非投与（週あたりまたはサイクルあたり一日一回×５）。図２５Ａは、有意な腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）が４日目から達成されたことを示している。３サイクル目の最後の投与後１８日目に、ＴＧＩ＝９６％、ｐ＝０．００３４。処置は４サイクル目まで継続したが、一方、ビヒクル群のマウスは腫瘍量のために１８日目に安楽死させた。図２５Ｂは、ＥＸ２がＮＣｒヌードマウスにおいて耐容性良好であり、この服用レベルにおいて有意な毒性が観察されなかったことを示している。該当する場合、Ｙ軸は平均値±ＳＥＭを表す。
【０３３７】
ＣＢ１７重症複合免疫不全マウスＨｅｐＧ２異種移植モデル
ＥＸ２がＨｅｐＧ２腫瘍を有するＮＣｒヌードマウスにおいて優れた抗腫瘍活性を示したため、さらに、ＣＢ１７重症複合免疫不全マウスにおける用量反応（dose repose）で評価した。雌Ｃ．Ｂ−１７重症複合免疫不全マウス（Ｃ．Ｂ−Ｉｇｈ−１ｂ／ＩｃｒＴａｃ−Ｐｒｋｄｃｓｃｉｄ、５週齢、インビボス社、シンガポール）の右側腹部に、５×１０６個のＨｅｐＧ２細胞を接種させた。ＨｅｐＧ２腫瘍サイズ平均約２４０ｍｍ３になった際、担癌マウスを無作為化（群あたり５匹のマウス）し、０日目において、ビヒクル、ＥＸ２（１５０、７５および３７．５ｍｇ／ｋｇ）およびソラフェニブトシレートを４週間（週あたり一日一回×５）経口投与した。ＥＸ２は、用量依存的に有意な腫瘍阻害を示した。全ての服用レベルが耐容性良好であり、有意な腫瘍成長遅延が達成された（図２６）。
【０３３８】
図２６において、ＣＢ１７重症複合免疫不全マウスＨｅｐＧ２異種移植モデルにおける有効性が示される。ＨｅｐＧ２腫瘍を有するＣＢ１７重症複合免疫不全マウスを、ビヒクル、ＥＸ２（１５０、７５および３７．５ｍｇ／ｋｇ）およびソラフェニブトシレート（１００ｍｇ／ｋｇ、一日一回×５×２、その後、８０ｍｇ／ｋｇ、一日一回×５×２）で、４週間（週あたり一日一回×５）、平均腫瘍容積が約２４０ｍｍ３である０日目から、処置した。図２６Ａは、有意な腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）が４日目から達成されたことを示している。４サイクル目の最後の投与の後、２６日目において、ＴＧＩは、ＥＸ２（１５０、７５および３７．５ｍｇ／ｋｇ）およびソラフェニブトシレートについて、それぞれ、１１７％、８２％、３８％および９８％であった。図２６Ｂは、２６日目において、処置群の腫瘍サイズがビヒクル群よりも有意に小さく、ＥＸ２  １５０ｍｇ／ｋｇ群および７５ｍｇ／ｋｇ群並びにソラフェニブ群においてはｐ＜０．０１であったが、３７．５ｍ
ｇ／ｋｇ群においてはｐ＞０．０５であったことを示している。図２６Ｃは、ＥＸ２が全ての服用レベルにおいて耐容性良好であり、有意な体重（ＢＷ）減少が無かったことを示している。ビヒクル群は、増加し続ける腫瘍量のために、ＢＷ減少を有する。ソラフェニブトシレート（１００ｍｇ／ｋｇ）は耐容性良好ではなく；その用量は３サイクル目および４サイクル目に８０ｍｇ／ｋｇに減少された。図２６Ｄは、腫瘍サイズが初期値（１００％とする）に対して正規化されたことを示している。最後の投与の後（２５日目）、長期間の成長遅延の後に腫瘍は再成長を開始したが、１５０ｍｇ／ｋｇのＥＸ２はソラフェニブよりも有効であると思われた。該当する場合、Ｙ軸は平均値±ＳＥＭを表す。
【０３３９】
ＮＣｒヌードマウスＨｕＨ−７異種移植モデル
雌ＮＣｒヌードマウス（ＣｒＴａｃ：ＮＣｒ−Ｆｏｘｎ１ｎｕ、８週齢、インビボス社、シンガポール）の右側腹部に、６．２×１０６個のＨｕＨ−７細胞を接種させた。ＨｕＨ−７腫瘍サイズが平均約１０３ｍｍ３になった際、マウスを無作為化し、ビヒクル［ＤＭＳＯ／Ｓｏｌｕｔｏｌ（登録商標）ＨＳ１５／滅菌水（１０：３６：５４）］およびＥＸ２（１５０ｍｇ／ｋｇ）を２週間（週あたり一日一回×５、群あたり５匹のマウス）、それぞれ経口投与した。ＥＸ２は、１２日目（最後の投与の後）にＴＧＩ＝１０２％の良好な腫瘍成長阻害を示し、再度、ＥＸ２はこの服用レベルにおいて耐容性良好であった（ビヒクル群に対し、最大体重減少は５％未満）。大きく且つ定着した腫瘍を用いて実験を繰り返した。ＨｕＨ−７腫瘍サイズが平均約３６３ｍｍ３になった際、マウスを無作為化（群あたり５匹のマウス）し、ビヒクル［ＮＭＰ／Ｓｏｌｕｔｏｌ（登録商標）ＨＳ１５／滅菌水（１０：３６：５４）］およびＥＸ２（１５０ｍｇ／ｋｇ）を経口投与した。ＥＸ２は、６日目において１サイクルの処置（週あたり一日一回×５）の後にＴＧＩ＝８８％（ｐ＝０．００１６）の、１２日目において２サイクルの処置（一日一回×５×２）の後にＴＧＩ＝６７％（ｐ＝０．００８２）の、良好な腫瘍成長阻害を示した（図２７）。
【０３４０】
図２７において、ＮＣｒヌードマウスＨｕＨ−７異種移植モデルにおける有効性が示される。ＨｕＨ−７腫瘍を有するＮＣｒヌードマウスを、ビヒクルまたはＥＸ２（１５０ｍｇ／ｋｇ）で０日目から処置した（週あたりまたはサイクルあたり一日一回×５、すなわち５日間処置２日間非処置）。図２７Ａは、ＥＸ２（一日一回×５×２）によるマウス（０日目における平均腫瘍容積は１０３ｍｍ３）の処置後１２日目における、ＴＧＩ＝１０２％の良好な腫瘍成長阻害を示している。図２７Ｂは、ＥＸ２が、定着した腫瘍（０日目の平均腫瘍サイズは３６３ｍｍ３）に対しても、１サイクルの処置の後にＴＧＩ＝８８％（ｐ＝０．００１６）で、および、１２日目においてＴＧＩ＝６７％（ｐ＝０．００８２）で、有効であったことを示している。図２７Ｂにおいて、腫瘍サイズは初期体積（０日目を１００％とする）に対して正規化した。該当する場合、Ｙ軸は平均値±ＳＥＭを表す。
【０３４１】
４Ｔ１マウス転移性乳癌モデル
雌ＮＣｒヌードマウス（ＣｒＴａｃ：ＮＣｒ−Ｆｏｘｎ１ｎｕ、１３週齢、インビボス社、シンガポール）の第四乳腺脂肪体に、１．１×１０６個の４Ｔ１（ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ−２５３９（商標））細胞を移植した。４Ｔ１腫瘍サイズが平均７０〜７４ｍｍ３になった際（腫瘍移植から５日後）、担癌マウスを無作為化（群あたりｎ＝５）し、ビヒクルおよびＥＸ２（１５０ｍｇ／ｋｇ）を、３サイクル（サイクルあたり、一日一回×５、５日間投与１日間非投与）０日目  経口投与し、１６日目は３つのサイクルの最後の投与である。ＥＸ２は、１７日目にＴＧＩ＝５３％有意な腫瘍阻害を示した（ｐ＝０．００６３）（図２８）。
【０３４２】
図２８において、４Ｔ１マウス転移性乳癌モデルにおける有効性が示される。４Ｔ１腫瘍を有する雌ＮＣｒヌードマウスを、ビヒクルおよびＥＸ２で、３サイクル（サイクルあたり、一日一回×５、５日間処置１日間非処置、群あたり５匹のマウス）処置した。図２
８Ａにおいて、腫瘍成長曲線が示される。図２８Ｂにおいて、１７日目の腫瘍サイズが示される（ｐ＝０．００６３）。該当する場合、Ｙ軸は平均値±ＳＥＭを表す。
【０３４３】
ＮＣＩ−Ｈ４６０肺がん異種移植モデル
雌Ｃ．Ｂ−１７重症複合免疫不全マウス（Ｃ．Ｂ−Ｉｇｈ−１ｂ／ＩｃｒＴａｃ−Ｐｒｋｄｃｓｃｉｄ、７週齢、インビボス社、シンガポール）の右側腹部に、６．８×１０６個のＮＣＩ−Ｈ４６０細胞を接種させた。腫瘍サイズが平均１５０〜１６０ｍｍ３になった際、マウスを無作為化し、０日目から、ビヒクルおよびＥＸ２（１５０ｍｇ／ｋｇ）を２週間（週あたり一日一回×５）経口投与した。ＥＸ２は、２つのサイクルの処置の後の１２日目に、ＴＧＩ＝４６％（ｐ＝０．０２９２）の有意な腫瘍成長阻害を示した。ＥＸ２はこの服用レベルにおいても耐容性良好であった（図２９）。
【０３４４】
図２９において、ＮＣＩ−Ｈ４６０肺がん異種移植モデルにおける有効性が示される。雌のＮＣＩ−Ｈ４６０腫瘍（tuynor）を有するＣＢ１７重症複合免疫不全マウスに、ビヒクルおよびＥＸ２（１５０ｍｇ／ｋｇ）を２週間（週あたり一日一回×５）、経口投与した。図２９Ａは、ＥＸ２が、２つのサイクルの処置の後の１２日目に、ＴＧＩ＝４６％（ｐ＝０．０２９２）の有意な腫瘍成長阻害を示したことを示している。図２９Ｂは、ＥＸ２がこの服用レベルにおいても耐容性良好であったことを示している。該当する場合、Ｙ軸は平均値±ＳＥＭを表す。
【０３４５】
ＭＶ４−１１異種移植モデル
雌ＢＡＬＢ／ｃヌード（Ｃ．Ｃｇ／ＡｎＮＴａｃ−Ｆｏｘｎ１ｎｕ［ｃｃ］ＮＥ９、５週齢、インビボス社、シンガポール）の右側腹部に、１１×１０６個のＭＶ４−１１細胞を接種させた。腫瘍サイズが平均１７３ｍｍ３になった際、マウスを無作為化（群当たり６匹のマウス）し、０日目から、ビヒクルおよびＥＸ２（１５０および７５ｍｇ／ｋｇ）を３週間（週あたり一日一回×５）、経口投与した。１２日目から２０日目まで、ＥＸ２は、１５０ｍｇ／ｋｇ群（２群、１匹は６日目に非処置関連死、最後はｎ＝１１）において平均ＴＧＩ＝５２％（ｐ＜０．０５）を示したが、７５ｍｇ／ｋｇ群においてはＴＧＩ＝２３％（ｐ＞０．０５）を示した（図３０）。
【０３４６】
図３０において、ＭＶ４−１１異種移植モデルにおける有効性が示される。担癌雌ＢＡＬＢ／ｃヌードマウスに、ビヒクルおよびＥＸ２（１５０および７５ｍｇ／ｋｇ）を３週間（週あたり一日一回×５）、経口投与した。図３０Ａは腫瘍成長曲線を示しており：腫瘍サイズは、初期値（０日目を１００％とする）に対して正規化され、ＥＸ２は、１５０ｍｇ／ｋｇ群においては１２日目〜２０日目に平均ＴＧＩ＝５１％（ｐ＜０．０５）の有意な腫瘍阻害を示したが、７５ｍｇ／ｋｇは有意に有効ではなかった。図３０Ｂは２０日目の腫瘍サイズを示しており、ＴＧＩは、１５０ｍｇ／ｋｇおよび７５ｍｇ／ｋｇにおいて、それぞれ、５１％（ｐ＜０．０５）および２０％（ｐ＞０．０５）である。該当する場合、Ｙ軸は平均値±ＳＥＭを表す。
【０３４７】
実施例１９：概要
上記定義の化合物は、ＨＤＡＣ酵素およびＰＩ３Ｋキナーゼに対する阻害活性（表３）、並びに、種々のヒト腫瘍細胞株に対する抗増殖活性（表４および表５）を示した。上記定義の化合物の大部分が、良薬らしい特性、すなわち、インビトロにおける代謝的安定性、溶解性および望ましい親油性を示した（表６）。選択された化合物は、腫瘍細胞における複数の標的（図１５および図１６）、すなわち、ＨＤＡＣの阻害によるヒストン（図１７）およびα−チューブリン（図１８）の高アセチル化、に対する活性；ＰＩ３Ｋ−ＡＫＴ−ｍＴＯＲ経路：リン光体−Ａｋｔ（Ｓｅｒ４７３）の減少またはｍＴＯＲＣ２の活性
阻害（図１９）、並びに、ホスホ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ（Ｔｈｒ３８９）／ホスホ−Ｐ８５Ｓ６Ｋ（Ｔｈｒ４１２）、ホスホ−Ｓ６（Ｓｅｒ２４０／２４４）およびホスホ−４Ｅ−Ｂ
Ｐ１（Ｔｈｒ３７／４６）の減少またはｍＴＯＣＲ１の活性の阻害（図２０）も示した。これらの化合物は、ＰＩ３ｋ阻害剤ＧＤＣ−０９４１またはＨＤＡＣ阻害剤ボリノスタットよりもずっとより効率的に、ＰＣ−３細胞およびＭＶ−４−１１細胞における細胞アポトーシス（図２１）、ＭＶ−４−１１細胞における細胞死（図２２）も誘導した。
【０３４８】
これらの化合物はまた、腫瘍モデルにおいて生物学的薬物標的を調節した。例えば、ＥＸ１およびＥＸ７８は、担癌マウスに経口的に投与された場合にＰＣ−３前立腺腫瘍におけるヒストン高アセチル化を誘導し（図２３）、ＥＸ２およびＥＸ７８は、異なる投与経路を介して、ＭＶ４−１１異種移植片腫瘍におけるヒストン高アセチル化を誘導した（図２４）。ＥＸ２はまた、ＨＣＣモデル、例えば、ＮＣｒヌードマウスＨｅｐＧ２異種移植モデル（図２５）およびＣＢ１７  ｓｃｉｄマウスＨｅｐＧ２異種移植モデル（図２６）、並びにＨｕＨ−７  ＨＣＣ異種移植モデル（図２７）において、優れた抗腫瘍活性を示した。化合物ＥＸ２はまた、経口投与された場合にいくつかの（a number）異種移植モデルにおいて広範な抗腫瘍活性を示した：４Ｔ１マウス転移性乳癌モデル（図２８）、ＮＣＩ−Ｈ４６０肺がん異種移植モデル（図２９）およびＭＶ４−１１白血病異種移植モデル（図３０）。
【産業上の利用可能性】
【０３４９】
上記定義の化合物は、脱アセチル化酵素、脂質および上記種類のプロテインキナーゼを阻害するそれらの能力が利用可能である、複数の適用が存在し得る。例えば、上記定義の化合物は、脱アセチル化酵素およびキナーゼを、別々または同時に阻害するために使用され得る。前記化合物はまた、脱アセチル化酵素および／もしくはプロテインキナーゼおよび／もしくはその補助因子の阻害によって、並びに／または不特定の機構を介して、状態の病態または総体症状が予防、阻害または改善される、哺乳動物における状態または障害の治療または予防においても使用され得る。前記状態または障害は、がん、血管形成障害もしくは病的血管新生、線維症、炎症性疾患、喘息、神経障害、神経変性障害、筋変性疾患、自己免疫障害、血液の障害または骨髄の障害である。前記化合物は、白血病または骨髄腫、リンパ腫、乳がん、肺がん、肝細胞癌および他の血管過多腫瘍等のがん、並びに網膜血管新生疾患の治療において特に有用であり得る。上記定義の化合物は、ｉＰＳ細胞を作製するための、細胞の再プログラム誘導においても応用され得る。
【０３５０】
上記開示を読んだ後、本発明の精神および範囲から逸脱することなく、本発明の様々な他の変更形態および改変形態が当該技術分野における当業者には明らかであること、並びに、全てのこのような変更形態および改変形態は添付の特許請求の範囲に含まれることが意図されること、は明らかである。
【図１】
2017510628.tif 000192
【図２】
2017510628.tif 000193
【図３】
2017510628.tif 000194
【図４】
2017510628.tif 000195
【図５】
2017510628.tif 000196
【図６】
2017510628.tif 000197
【図７】
2017510628.tif 000198
【図８】
2017510628.tif 000199
【図９】
2017510628.tif 000200
【図１０】
2017510628.tif 000201
【図１１】
2017510628.tif 000202
【図１２】
2017510628.tif 000203
【図１３】
2017510628.tif 000204
【図１４】
2017510628.tif 000205
【図１５】
2017510628.tif 000206
【図１６】
2017510628.tif 000207
【図１７】
2017510628.tif 000208
【図１８】
2017510628.tif 000209
【図１９】
2017510628.tif 000210
【図２０−１】
2017510628.tif 000211
【図２０−２】
2017510628.tif 000212
【図２１】
2017510628.tif 000213
【図２２−１】
2017510628.tif 000214
【図２２−２】
2017510628.tif 000215
【図２３】
2017510628.tif 000216
【図２４】
2017510628.tif 000217
【図２５】
2017510628.tif 000218
【図２６−１】
2017510628.tif 000219
【図２６−２】
2017510628.tif 000220
【図２７】
2017510628.tif 000221
【図２８】
2017510628.tif 000222
【図２９】
2017510628.tif 000223
【図３０】
2017510628.tif 000224
【図３１】
2017510628.tif 000225
【国際調査報告】
2017510628.tif 000226
2017510628.tif 000227
2017510628.tif 000228
2017510628.tif 000229
2017510628.tif 000230