(57)【要約】  本発明は、炎症性腸疾患の治療および／または予防に使用するための、プロバイオティクスならびにヒアルロン酸もしくはその薬学的に許容される塩を含有する局所用組成物に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
プロバイオティクスならびにヒアルロン酸もしくはその薬学的に許容される塩を含有する局所用組成物。
【請求項２】
少なくとも１種の生理学的に許容される添加剤を含むことを特徴とする請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記プロバイオティクスは、アシドフィルス菌、ラクトバチルス・ブレビス、ラクトバチルス・ブフネリ、ラクトバチルス・カゼイ、ラクトバチルス・パラカゼイ、ラクトバチルス・カテナフォルメ、ラクトバチルス・セロビオスス、ラクトバチルス・クリスパツス、ラクトバチルス・クルバツス、デルブリュッキ菌、ファーメンタム菌、ラクトバチルス・ジェンセニイ、ラクトバチルス・ライヒマニイ、ラクトバチルス・ミヌツス、ラクトバチルス・プランタルム、ラクトバチルス・ロイテリ、ラクトバチルス・ロゴサエ、ラクトバチルス・サリバリウス、ビフィドバクテリウム・アドレスセンティス、ビフィドバクテリウム・アングラツム、ビフィズス菌、ビフィドバクテリウム・ブレーベ、ビフィドバクテリウム・カテヌラツム、ビフィドバクテリウム・デンティウム、ビフィドバクテリウム・エリクソニイ、ビフィドバクテリウム・インファンツ、ビフィドバクテリウム・ロングム、ビフィドバクテリウム・プランタルム、ビフィドバクテリウム・シュードカテヌラツム、ビフィドバクテリウム・シュードロングム、ストレプトコッカス・ラクチス、ストレプトコッカス・ラフィノラクティス、ストレプトコッカス・サーモフィルス、またはそれらの混合物から選択され、好ましくはラクトバチルス属であり、より好ましくはラクトバチルス・カゼイであることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
２００，０００，０００個〜３，０００，０００，０００個、好ましくは５００，０００，０００個〜２，０００，０００，０００個に含まれる量のプロバイオティクス生細胞を含むことを特徴とする請求項１から３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
組成物の総重量に対して０．１重量％〜３重量％に含まれる量の、好ましくは１重量％未満の量のプロバイオティクス生細胞を含むことを特徴とする請求項１から４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
前記ヒアルロン酸は、高分子量ヒアルロン酸であり、好ましくは５００，０００ダルトン〜３，０００，０００ダルトンに含まれる分子量、より好ましくは１，０００，０００ダルトン以上の分子量を有することを特徴とする請求項１から５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
組成物の総重量に対して３重量％〜１５重量％に含まれる量の、好ましくは約５重量％の量のヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩を含むことを特徴とする請求項１から６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
１０ｍｇ〜３００ｍｇ、好ましくは５０ｍｇ〜１５０ｍｇに含まれる量のヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩を含むことを特徴とする請求項１から７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
組成物の総重量に対して０．１％〜３％に含まれる量のプロバイオティクス生細胞および３％〜１５％に含まれる量のヒアルロン酸を含むことを特徴とする請求項１から８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
慢性炎症性腸疾患、例えば、クローン病および潰瘍性大腸炎の治療に使用するための組成物であることを特徴とする請求項１から９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
経口投与または直腸投与され、好ましくは直腸投与されることを特徴とする請求項１から１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１２】
クリーム剤、軟膏剤、ポマード剤、液剤、懸濁剤、水またはゲル分散性散剤の形態であり、好ましくは水分散性散剤であることを特徴とする、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
単独で、または５−ＡＳＡ、コルチコステロイド、アザチオプリン／６−メルカプトプリン、メトトレキサート、シクロスポリンおよび抗ＴＮＦα薬から選択される伝統的な炎症性腸疾患治療と組み合わせて投与されることを特徴とする請求項１から１２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１４】
同時、個別または逐次使用のための、前記の伝統的な治療の１つとの組合せ製剤として投与されることを特徴とする、請求項１３に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、炎症性腸疾患の治療および／または予防に使用するための、プロバイオティクスならびにヒアルロン酸もしくはその薬学的に許容される塩を含有する局所用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
炎症性腸疾患（「ＩＢＤ」）は、腸壁の慢性炎症を特徴とし、とりわけクローン病および潰瘍性大腸炎を含む。
【０００３】
従来の治療法は、５−アミノサリチル酸（５−ＡＳＡ）、コルチコステロイド、アザチオプリン／６−メルカプトプリン、メトトレキサート、シクロスポリンおよび抗ＴＮＦα薬によって主に代表され、これらは主に免疫系を調節することが意図されている［１］。
【０００４】
これらの疾患は、「特発性の」疾患、即ち、未知の原因によるものである。有力な病因仮説は、抗原（例えば、腸内に通常存在する細菌）に対する異常な腸免疫反応である。この免疫学的不均衡は、個体の遺伝因子と環境因子との間の相互作用の変化によって確立されうる。
【０００５】
他方、「適正な量で投与すれば宿主に健康上の利益を与える、生きている微生物」と定義されるプロバイオティクス［２］は、ヒトの微生物叢、すなわち、消化管内に見られる一連の相利共生微生物を良い方向に調節して、ＩＢＤを有する患者に、より多量に存在する病原性細菌を喪失して共生細菌を増加させることができる。
【０００６】
それらの作用メカニズムはまだ明らかになっていないが、プロバイオティクスは、腸透過性および粘膜免疫系を調節して、病原性細菌を腸粘膜の表面に寄せ付けさせないと考えることができる［１、３］。
【０００７】
いくつかの菌株がＩＢＤに使用され、多くの公表文献がそれらの有効性を裏付けている［４］。
【０００８】
しかし、これまで、直腸製剤の形態でのプロバイオティクスの投与に関連する臨床研究はごくわずかしか公表されておらず、従来の治療法との組合せに関するもののみであった［５〜８］。
【０００９】
特に、５−ＡＳＡの単独経口投与またはラクトバチルス・カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃａｓｅｉ）ＤＧとの５−ＡＳＡの経口投与は、５−ＡＳＡの経口投与とラクトバチルス・カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃａｓｅｉ）ＤＧの直腸投与との組合せとは異なり、腸管内菌叢に対して有意な効果を示さないことが立証された（例えば、非特許文献１参照。）［５］。
【００１０】
この研究は、従来の治療法と併せて使用した場合の、プロバイオティクスの有意な局所的抗炎症活性に注目している。
【００１１】
５−ＡＳＡとラクトバチルス・カゼイＤＧの直腸での考えられる共同作用メカニズムは、粘膜に付着する微生物叢の変化に関係している可能性があり、したがって、粘膜の免疫応答の操作に寄与して、抗炎症性サイトカインに有利なように炎症促進性サイトカインのバランスを変化させ得る。
【００１２】
しかし、上記臨床試験は、炎症性腸疾患の治療における「粘膜治癒」、すなわち、あらゆる炎症性および潰瘍性病変の完全な非存在という基本的な側面を扱っていない。臨床診療においては、「粘膜治癒」は、長期症状寛解および再発のないより長い無再発期間と関連付けられている。これは、入院、合併症および外科的切除の頻度の減少をもたらし、患者のクオリティオブライフを有意に改善する［９、１０］。
【００１３】
グリコサミノグリカンであるヒアルロン酸は、過度のストレスおよび緊張から組織を保護すると同時に、組織の水和を確実にするのに重要な役割を果たすことが知られている［１１〜１３］。
【００１４】
ヒアルロン酸は、コラーゲンおよび結合組織の形成を刺激することによって、身体をウイルスおよび細菌から保護し、組織の可塑性を増加させ、最適な皮膚水和を確実にする［１１、１４］。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１５】
【非特許文献１】Ｄｉｇ．Ｄｉｓ．Ｓｃｉ．２０１１，５６：１１７８−１１８７
【非特許文献２】Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，ｓｉｘｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ  ２００９
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１６】
炎症性腸疾患の治療と「粘膜治癒」の出現の両方に対処できる処方は存在しないので、これらの課題に効果的に対応する代替処方の必要性が感じられる。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
今回驚くべきことに、プロバイオティクスおよびヒアルロン酸を含有する局所用組成物が炎症性腸疾患の治療に特に有利であることが見出された。特に、上記組成物において、プロバイオティクスおよびヒアルロン酸は、上記疾患の治療に驚くべき相乗効果を示す。
【００１８】
したがって、本発明の目的は、炎症性腸疾患、例えば、クローン病および潰瘍性大腸炎の治療に使用するための、プロバイオティクスならびにヒアルロン酸もしくはその薬学的に許容される塩ならびに好ましくは少なくとも１種の生理学的に許容される添加剤を含有する局所用組成物である。
【００１９】
本発明によるプロバイオティクスは、アシドフィルス菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）、ラクトバチルス・ブレビス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｂｒｅｖｉｓ）、ラクトバチルス・ブフネリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｂｕｃｈｎｅｒｉ）、ラクトバチルス・カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃａｓｅｉ）、ラクトバチルス・パラカゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐａｒａｃａｓｅｉ）、ラクトバチルス・カテナフォルメ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃａｔｅｎａｆｏｒｍｅ）、ラクトバチルス・セロビオスス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｌｌｏｂｉｏｓｕｓ）、ラクトバチルス・クリスパツス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｒｉｓｐａｔｕｓ）、ラクトバチルス・クルバツス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｕｒｖａｔｕｓ）、デルブリュッキ菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ）、ファーメンタム菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ）、ラクトバチルス・ジェンセニイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｊｅｎｓｅｎｉｉ）、ラクトバチルス・ライヒマニイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｅｉｃｈｍａｎｎｉｉ）、ラクトバチルス・ミヌツス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｉｎｕｔｕｓ）、ラクトバチルス・プランタルム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、ラクトバチルス・ロイテリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｅｕｔｅｒｉ）、ラクトバチルス・ロゴサエ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｏｇｏｓａｅ）、ラクトバチルス・サリバリウス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）、ビフィドバクテリウム・アドレスセンティス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ）、ビフィドバクテリウム・アングラツム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｎｇｕｌａｔｕｍ）、ビフィズス菌（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｂｉｆｉｄｕｍ）、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｂｒｅｖｅ）、ビフィドバクテリウム・カテヌラツム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｃａｔｅｎｕｌａｔｕｍ）、ビフィドバクテリウム・デンティウム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｅｎｔｉｕｍ）、ビフィドバクテリウム・エリクソニイ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｅｒｉｋｓｏｎｉｉ）、ビフィドバクテリウム・インファンツ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｉｎｆａｎｔｓ）、ビフィドバクテリウム・ロングム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｌｏｎｇｕｍ）、ビフィドバクテリウム・プランタルム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、ビフィドバクテリウム・シュードカテヌラツム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｐｓｅｕｄｏｃａｔｅｎｕｌａｔｕｍ）、ビフィドバクテリウム・シュードロングム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｐｓｅｕｄｏｌｏｎｇｕｍ）、ストレプトコッカス・ラクチス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｌａｃｔｉｓ）、ストレプトコッカス・ラフィノラクティス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｒａｆｆｉｎｏｌａｃｔｉｓ）、ストレプトコッカス・サーモフィルス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）、またはそれらの混合物から選択される。
【００２０】
好ましくは、プロバイオティクスは、ラクトバチルス属、より好ましくはラクトバチルス・カゼイ、さらに好ましくはラクトバチルス・カゼイＤＧ（パリのパスツール研究所に、寄託番号Ｉ−１５７２ＣＮＣＭで寄託されている菌株）である。
【００２１】
本発明によるヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩は、高分子量ヒアルロン酸であり、好ましくは５００，０００ダルトン〜３，０００，０００ダルトンに含まれる分子量、より好ましくは１，０００，０００ダルトン以上の分子量を有する。
【００２２】
本発明による生理学的に許容される添加剤は、当業者に公知であり、文献に記載され（例えば、非特許文献２参照。）、この文献は参照により本明細書に組み込まれる。
【００２３】
本発明による特に好ましい添加剤の例としては、これらに限定するものではないが、希釈剤、結合剤、界面活性剤、ゲル化剤、安定剤が挙げられる。
【００２４】
本発明による特に好ましい添加剤は、キサンタンガムである。
【００２５】
本発明によれば、組成物は、２００，０００，０００個〜１０，０００，０００，０００個の量、好ましくは５００，０００，０００個〜２，０００，０００，０００個の量のプロバイオティクス生細胞を含有する。
【００２６】
本発明の一実施形態によれば、組成物は、組成物の総重量に対して０．１重量％〜３重量％に含まれる量、好ましくは１重量％未満の量のプロバイオティクス生細胞を含有する。
【００２７】
本発明によれば、組成物は、１０ｍｇ〜３００ｍｇ、好ましくは５０ｍｇ〜１５０ｍｇに含まれる量のヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩を含有する。
【００２８】
本発明の一実施形態によれば、組成物は、組成物の総重量に対して３重量％〜１５重量％含まれる量、好ましくは約５重量％の量のヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩を含有する。
【００２９】
本発明の特に好ましい実施形態によれば、組成物は、組成物の総重量の０．１％〜３％の量のプロバイオティクス生細胞および３％〜１５％の量のヒアルロン酸を含有する。
【００３０】
本発明によれば、組成物は、経口投与または直腸投与することができ、好ましくは直腸投与する。
【００３１】
本発明の組成物は主に局所レベルで作用し、すなわち、循環系に入るのではなく、適用部位における細菌量の減少と腸粘膜の修復の組合せによって局部的なレベルでのみ作用を及ぼす。
【００３２】
実際に、プロバイオティクスとヒアルロン酸は、腸レベルでの炎症プロセスに対して相乗的に作用して、炎症促進因子を減少させ、抗炎症因子を増加させる。
【００３３】
プロバイオティクスは、いわゆる「腸管内微生物叢」を直接的または間接的に調節して、腸透過性および粘膜免疫系に対して重要な作用を及ぼし；このようにして、過度の免疫応答および炎症応答の原因となる潜在的に病原性の細菌を腸粘膜表面に寄せ付けないようにする。
【００３４】
しかし、ヒアルロン酸は、ＴＬＲ（Ｔｏｌｌ様受容体）に対する直接作用によって、かなりの瘢痕性および抗炎症性を有する化合物である。さらにまた、ヒアルロン酸は、コラーゲンおよび結合組織の形成を刺激することによって、身体をウイルスおよび細菌から保護し、組織の可塑性を増加させ、最適な皮膚の水和を確実にする。この保護作用により、腸粘膜の完全性が保たれ、いわゆる「粘膜治癒」が促進され得る。
【００３５】
直腸投与する場合、本発明の組成物は、半固体または液体形態で、好ましくはクリーム剤、軟膏剤、ポマード剤、液剤、懸濁剤、水またはゲル中に分散される散剤として製剤化でき、より好ましくは、組成物は、水中に分散される散剤として製剤化される。
【００３６】
本発明の組成物中に使用される、前に言及した成分および添加剤、好ましくはキサンタンガムは、生成物がｉｎ  ｓｉｔｕで、より長い時間とどまることができるようにするのに必要な、より大きい稠度およびより高い粘度を製剤にもたらす。
【００３７】
好ましい一実施形態によれば、本発明の組成物は、浣腸剤または直腸フォーム剤の形態で、好ましくは浣腸剤の形態で投与される。
【００３８】
したがって、プロバイオティクスとヒアルロン酸の相乗効果のため、本発明の組成物は、コラーゲンおよび結合組織の産生を著しく刺激することによって、進行中の炎症プロセスに直接作用し、結果として、炎症性腸疾患の発症によって傷つけられた腸粘膜を修復する。
【００３９】
さらにまた、本発明の組成物は、共生種を増加させかつ潜在的に病原性の種の存在を減らすことによって、ヒト微生物叢の組成の変更において重要な免疫調節の役割を果たすことができる。
【００４０】
本発明の一実施形態によれば、組成物は、単独で、または５−ＡＳＡ、コルチコステロイド、アザチオプリン／６−メルカプトプリン、メトトレキサート、シクロスポリンおよび抗ＴＮＦα薬から選択される伝統的な炎症性腸疾患治療薬と組み合わせて投与してもよい。
【００４１】
好ましくは、組成物は、１日当たり１回または複数回、より好ましくは１日２回直腸投与する。
【００４２】
本発明の組成物は、２週間〜１６週間に含まれる治療期間、好ましくは４週間〜１２週間に含まれる期間、さらに好ましくは少なくとも８週間の期間、投与する。
【００４３】
本発明のさらなる一実施形態によれば、組成物は、同時、個別または逐次使用のための、上記の従来の治療薬の１つとの組合せ製剤として投与する。
【００４４】
本発明のさらなる目的は、急性放射線直腸炎の予防に使用するための、プロバイオティクスならびにヒアルロン酸もしくはその薬学的に許容される塩ならびに好ましくは少なくとも１種の生理学的に許容される添加剤を含有する組成物である。このような使用は、前立腺がんのために放射線療法を受けている患者を特に対象とする。
【発明を実施するための形態】
【００４５】
実験の部
本発明の目的は、プロバイオティクスならびにヒアルロン酸もしくはその薬学的に許容される塩、ならびに好ましくは少なくとも１種の生理学的に許容される添加剤を含有する局所用組成物である。
【００４６】
この処方は、炎症性腸疾患、例えば、クローン病および潰瘍性大腸炎の治療におけるその有効性を検証することを目標とする臨床研究の対象となるであろう。以下の表は、上記の本発明の質的および量的組成を要約している。
【００４７】
【表１】
2017513906.tif 000002
【００４８】
このような処方を実現する前に、炎症性腸疾患の治療に最も適当な組成および直腸製剤に最適な化学的−物理的特性を有する生成物を得ることを目標として、いくつかの試験を行った。
【００４９】
本発明の目的の組成物の処方のいくつかの考えられる変更を以下に報告する。
【００５０】
直腸投与される最終溶液が等浸透圧溶液でなければならないことを考慮して、適当な方法でチキソトロピー剤の質的および量的組成を変更することが必要である。この点に関して、ヒアルロン酸も粘性付与力(viscosifying power)を有することを考慮することが重要であり、したがって、同様な力を有する量の添加剤を適切な方法で投与することが必要である。ヒアルロン酸の量は、塊の形成に導く過度に粘稠な処方を回避するために、組成物の総重量に対して約９〜１４％に相当する約２００〜３００ｍｇに等しい量まで増加させ、それによってキサンタンガムを減少させてもよい。
【００５１】
或いは、ヒアルロン酸の百分率を不変のままにして、サンタンガムの量を約０．５〜６％増加させてもよい。
【００５２】
キサンタンガムは場合によっては、別の粘性付与剤、例えば、キサンタンガムより大きい粘性力を有するヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）と置き換えることもできる。しかし、このような添加剤は、塊を形成する傾向もより大きく、キサンタンガムを代わりに用いる場合と比較して、わずか３〜４％までしか増加させることができない。
【００５３】
最後に、とりわけ粘度に関して最終組成物をわずかに乱すこともなく、乳酸桿菌生細胞の量を、組成物の総重量の約２％に相当する約１０，０００，０００，０００個まで（または過剰の生細胞が通常使用されることを考慮して、最大９％まで）も増加させることができる。結果として、以下の組成物を得ることができる。
【００５４】
【表２】
2017513906.tif 000003
【００５５】
【表３】
2017513906.tif 000004
【００５６】
【表４】
2017513906.tif 000005
【００５７】
【表５】
2017513906.tif 000006
【００５８】
【表６】
2017513906.tif 000007
【００５９】
【表７】
2017513906.tif 000008
【００６０】
【表８】
2017513906.tif 000009
【００６１】
これらは、上記組成物の種々の成分の考えられる組合せを示すことを目的とする単なる処方例である。
（参考文献）
【００６２】
2017513906.tif 000010
2017513906.tif 000011
【国際調査報告】
2017513906.tif 000012
2017513906.tif 000013
2017513906.tif 000014