(57)【要約】  本発明は、概して、ＩＬ−２３Ａ関連疾患、特に炎症疾患、例えば乾癬の処置に有用なバイオマーカーに関する。本発明はまた、本明細書に開示されたバイオマーカーを使用する方法（例えば、ＩＬ−２３アンタゴニストを利用する療法において）にも関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）患者から生物学的試料を得ること；
ｂ）該試料中の１つ以上のバイオマーカーのレベル又は１つ以上のバイオマーカーの発現レベルを測定すること；
ｃ）該レベルを、該バイオマーカーのレベルの対照の値と比較すること；及び
ｄ）該試料と該対照との間のレベルにおける差異が、患者における有益な応答を反映するか否かを決定すること
を含む、
ＩＬ−２３Ａアンタゴニストの投与後の患者における有益な応答の有無を検出するための方法であって、
該１つ以上のバイオマーカーは、ＩＬ−２３／ＩＬ−１７系、ケラチノサイト及び上皮細胞の分化、組織炎症、並びにＩＦＮα経路に関連する遺伝子／タンパク質である、方法。
【請求項２】
前記1つ以上のバイオマーカーの遺伝子又はタンパク質のレベルが測定される、請求項１記載の方法。
【請求項３】
患者が乾癬を患う、請求項１〜２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４】
前記対照の値が、乾癬を患っていない被験者由来の試料を使用して計算される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記対照の値が、既知の乾癬患者由来の試料を使用して決定される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
前記対照の値が、患者から採取された少なくとも１つの以前の試料を使用して決定される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記１つ以上のバイオマーカーが、Ｓ−１００Ａ７、好中球ゼラチナーゼリポカリン、又はβ−デフェンシン２である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
生物学的試料が、皮膚生検、血液、血漿又は血清の試料である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
ＩＬ−２３Ａアンタゴニストが、抗ＩＬ−２３Ａ抗体又はその抗原結合フラグメントである、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
バイオマーカーのレベルが、ＲＮＡ配列決定又はＥＬＩＳＡによって決定される、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記試料と前記対照との間のレベルにおける差異が、患者における有益な応答を反映している場合、患者へのＩＬ−２３Ａアンタゴニストの投与を継続することを更に含む、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
有望な治療剤が乾癬の処置において効果的であるかどうかを決定する方法であって、
ａ）該有望な治療剤で処置する前の乾癬患者から、第一の生物学的試料を得ること；
ｂ）該有望な治療剤で乾癬患者を処置すること；
ｃ）該有望な治療剤で処置した後の乾癬患者から、第二の生物学的試料を得ること；
ｄ）該第一及び第二の試料中の１つ以上のバイオマーカーの発現レベルを測定すること；
ｅ）該第二の試料中のバイオマーカーのレベルを、該第一の試料中のレベルと比較すること
を含む方法であって、
該第一の試料中よりも低い該第二の試料中のバイオマーカーレベルは、該有望な治療剤が効果的であることを示し、更に、該１つ以上のバイオマーカーは、ＩＬ−２３／ＩＬ−１７系、ケラチノサイト及び上皮細胞の分化、組織炎症、並びにＩＦＮα経路に関連する遺伝子である、方法。
【請求項１３】
前記第一の試料中よりも低い前記第二の試料中のバイオマーカーレベルは、臨床効力評価における改善と相関する、請求項１２記載の方法。
【請求項１４】
前記第二の試料中のバイオマーカーのレベルが前記第一の試料中のレベルよりも低い場合、患者の処置を継続することを更に含む、請求項１２又は１３記載の方法。
【請求項１５】
被験者の乾癬を処置する方法であって、
ａ）被験者の処置を開始するかどうか、処置の投与量を改変するかどうか、投与間隔を改変するかどうか、又は処置を中止するかどうかを、先行する請求項のいずれかに記載の方法に基づいて決定すること；及び
ｂ）該決定に基づいて処置レジメンを改変すること
を含む、方法。
【請求項１６】
乾癬処置に対する患者の応答をモニタリングする方法であって、
ａ）該患者から第一の生物学的試料を得ること；
ｂ）該第一の生物学的試料中の１つ以上のバイオマーカーのレベルを測定すること（ここで、該１つ以上のバイオマーカーは、ＩＬ−２３／ＩＬ−１７系、ケラチノサイト及び上皮細胞の分化、組織炎症、並びにＩＦＮα経路に関連する遺伝子／タンパク質である）；
ｃ）処置化合物を該患者に投与すること；
ｄ）該患者から第二の生物学的試料を得ること；
ｅ）該第二の生物学的試料中の該１つ以上のバイオマーカーのレベルを測定すること；及び
ｆ）第一及び第二の生物学的試料から得られた該１つ以上のバイオマーカーのレベルを比較すること
を含む方法であって、
該第二の生物学的試料中の該１つ以上のバイオマーカーのレベルの低下が、効果的な応答を示す、方法。
【請求項１７】
乾癬用の薬物処置プロトコールに対する患者のコンプライアンスをモニタリングするための方法であって、
ａ）該患者から生物学的試料を得ること；
ｂ）１つ以上のバイオマーカーのレベルを測定すること（ここで、該１つ以上のバイオマーカーは、ＩＬ−２３／ＩＬ−１７系、ケラチノサイト及び上皮細胞の分化、組織炎症、並びにＩＦＮα経路に関連する遺伝子／タンパク質である）；及び
ｃ）該患者の試料中の該レベルが、対照の未処置試料中の該レベルと比較して低下しているかどうかを決定すること
を含む方法であって、
レベルの低下が、該薬物処置プロトコールに対する患者のコンプライアンスを示す、該方法。
【請求項１８】
前記第二の生物学的試料中の前記１つ以上のバイオマーカーの前記レベルが、前記第一の生物学的試料中の前記レベルと比較して、少なくとも約５０％、５５％、６０％、６５％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、又は９５％又はそれ以上低下している、請求項１５〜１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記生物学的試料が、皮膚生検、血液、血漿又は血清の試料である、請求項１５〜１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
前記ＩＬ−２３Ａのアンタゴニストが、抗ＩＬ−２３Ａ抗体又はその抗原結合フラグメントである、請求項１５〜１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
バイオマーカーの前記レベルが、ＲＮＡ配列決定又はＥＬＩＳＡによって決定される、請求項１５〜１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
Ｓ−１００タンパク質、好中球ゼラチナーゼリポカリン及びβ−デフェンシン２からなる群より選択される１つ以上のバイオマーカーに特異的に結合する、１つ以上の抗体又はその抗原結合フラグメントを含む、ＥＬＩＳＡキット。
【請求項２３】
乾癬のモニタリングにおいて前記キットを使用するための説明書を更に含む、請求項２２記載のＥＬＩＳＡキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
配列表
本出願は、ＡＳＣＩＩ形式で電子的に提出された配列表を含み、その全体が参照により本明細書に援用される。２０１５年７月１６日に作成された該ＡＳＣＩＩのコピーは０９−０６３２−ＷＯ−１＿ＳＬ．ｔｘｔと命名され、２５，６２６バイトのサイズである。
【０００２】
発明の技術分野
本発明は、概して、ＩＬ−２３Ａ関連疾患、特に炎症疾患、例えば乾癬の処置に有用なバイオマーカーに関する。本発明はまた、本明細書に開示されたバイオマーカーを使用する方法（例えば、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストを利用する療法において）にも関する。
【背景技術】
【０００３】
発明の背景
乾癬は、慢性で、免疫により媒介される炎症性皮膚疾患であり、全世界の発症率は約２％であり、有意な罹患率を伴い、患者のクオリティ・オブ・ライフ及び幸福(well-being)に対してかなりの心理社会的影響を及ぼし得る。尋常性乾癬は最もよくある病型であり、患者の約８０〜９０％が罹患し、皮膚上に生じたプラークとして顕現し；該疾患は通常、思春期後期及び成人期初期に始まり、成人期を通じて持続し得る。罹患する体表面積（ＢＳＡ）の程度、並びに、紅斑、硬結、及び鱗屑をはじめとする皮膚の徴候の程度は、乾癬の重症度を規定し、約２０〜３０％の患者は、中程度から重度の疾患を有する。
【０００４】
乾癬は、自己免疫性及び自己炎症性の構成要素を有する、病因不明の多因子疾患である。複数のゲノム全体の関連研究により、ＩＬ−２３受容体の遺伝子の変異体が、乾癬の易罹患性に関連づけられた。ヒトＩＬ−２３は主に、抗原提示細胞によって産生され、Ｔヘルパー１７（Ｔｈ１７）細胞の分化を誘導する。これにより、ＩＬ−１７及びＩＬ−２２が産生され、これは乾癬に観察される上皮肥厚化及び組織炎症の発生を媒介し得る。
【０００５】
それ故、乾癬に対する処置の選択肢の効力を追跡し、乾癬及び他の炎症疾患のこれらの処置から最も恩恵を得る患者を同定し、必要に応じて患者のための治療薬の投与量を決定し調整するための改善された手段が必要である。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
発明の概要
本発明は上記のニーズに取り組み、ＩＬ−２３Ａ関連疾患の処置に有用なバイオマーカーを提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
１つの実施態様では、本発明は、ａ）患者から生物学的試料を得ること；ｂ）該試料中の１つ以上のバイオマーカーの発現レベルを測定すること；ｃ）該レベルを、バイオマーカーのレベルの対照値と比較すること；及びｄ）試料と対照との間のレベルにおける差異が、患者における有益な応答を反映するか否かを決定することを含む、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストの投与後の患者における有益な応答の有無を検出するための方法を提供し、ここで１つ以上のバイオマーカーは、ＩＬ−２３／ＩＬ−１７系（例えば、ＩＬ−２３Ａ、ＩＬ−２３Ｒ、ＩＬ−２２、ＩＬ−２２ＲＡ１ ＲＡ２、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−１７Ｆ、ＩＬ−１７ＲＡ、及びＩＬ−１７ＲＣの１つ以上）、ケラチノサイト及び上皮細胞の分化（例えば、後期角化エンベロープタンパク質、トランスグルタミナーゼ１、及びコルニフェリンの１つ以上）、組織炎症（例えば、β−デフェンシン２、好中球ゼラチナーゼリポカリン、及びＳ−１００タンパク質の１つ以上）、又はＩＦＮα経路（例えば、ＩＦＩＨ１、ＩＳＧ１５、ＩＲＦ７、ＩＦＩ４４、ＭＸ１、ＭＸ２、ＳＴＡＴ１及びＴＲＩＭ２２の１つ以上）に関連する遺伝子／タンパク質である。
【０００８】
１つの実施態様では、患者における有益な応答の有無は、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストの投与前及び投与後に検出される。
【０００９】
１つの実施態様では、対照値は、プラセボで処置された患者の数値である。１つの実施態様では、対照値は、プラセボで処置された患者の数値であり、差異は、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストで処置された患者の試料とプラセボで処置された患者の試料との間の差異である。
【００１０】
１つの実施態様では、上記１つ以上のバイオマーカーの遺伝子又はタンパク質のレベルが測定される。１つの実施態様では、患者は乾癬に罹患している。
【００１１】
１つの実施態様では、対照値は、乾癬に罹患していない被験者由来の試料を使用して計算される。１つの実施態様では、対照値、例えばプラセボ値は、既知の乾癬患者の試料、例えばプラセボで処置された乾癬患者の試料を使用して決定される。１つの実施態様では、対照値は、患者から採取された少なくとも１つの以前の試料を使用して決定される。
【００１２】
１つの実施態様では、１つ以上のバイオマーカーはＳ−１００Ａ７、好中球ゼラチナーゼリポカリン又はβ−デフェンシン２である。１つの実施態様では、生物学的試料は、皮膚生検、血液、血漿又は血清の試料である。１つの実施態様では、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストは、抗ＩＬ−２３Ａ抗体又はその抗原結合フラグメントである。１つの実施態様では、バイオマーカーのレベルは、ＲＮＡ配列決定又はＥＬＩＳＡ又は別のタンパク質アッセイによって決定される。
【００１３】
１つの実施態様では、前記方法は更に、試料と対照との間のレベルにおける差異が、患者における有益な応答を反映する場合、患者へのＩＬ−２３Ａアンタゴニストの投与を継続することを含む。１つの実施態様では、前記方法は更に、アンタゴニスト対プラセボで処置された患者のレベルにおける差異が患者における有益な応答を反映している場合、患者へのＩＬ−２３Ａアンタゴニストの投与を継続することを含む。
【００１４】
更なる実施態様では、本発明は、ａ）有望な治療剤で処置する前の乾癬患者から第一の生物学的試料を得ること；ｂ）有望な治療剤で乾癬患者を処置すること；ｃ）有望な治療剤で処置した後に、乾癬患者から第二の生物学的試料を得ること；ｄ）上記第一及び第二の試料中の１つ以上のバイオマーカーの発現レベルを測定すること；及びｅ）第二の試料中のバイオマーカーのレベルを、第一の試料中のレベルと比較することを含む、有望な治療剤が乾癬の処置において効果的であるかどうかを決定する方法を提供し、ここで第一の試料中よりも低い第二の試料中のバイオマーカーレベルは、有望な治療剤が効果的であることを示し、更に、ここで１つ以上のバイオマーカーは、ＩＬ−２３／ＩＬ−１７系（例えば、ＩＬ−２３Ａ、ＩＬ−２３Ｒ、ＩＬ−２２、ＩＬ−２２ＲＡ１ ＲＡ２、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−１７Ｆ、ＩＬ−１７ＲＡ、及びＩＬ−１７ＲＣの１つ以上）、ケラチノサイト及び上皮細胞の分化（例えば、後期角化エンベロープタンパク質、トランスグルタミナーゼ１、及びコルニフェリンの１つ以上）、組織炎症（例えば、β−デフェンシン２、好中球ゼラチナーゼリポカリン、及びＳ−１００タンパク質の１つ以上）、並びにＩＦＮα経路（例えば、ＩＦＩＨ１、ＩＳＧ１５、ＩＲＦ７、ＩＦＩ４４、ＭＸ１、ＭＸ２、ＳＴＡＴ１及びＴＲＩＭ２２の１つ以上）に関連する遺伝子である。１つの実施態様では、該工程ｅ）は、第二の試料中のバイオマーカーのレベルを第一の試料中のレベルと比較することを含み、ここで第一の試料よりも第二の試料の方が低いバイオマーカーレベル、及び乾癬の症例における臨床効力尺度すなわちＰＡＳＩスコアの改善との相関は、有望な治療剤が効果的であることを示す。
【００１５】
１つの実施態様では、前記方法は更に、第二の試料中のバイオマーカーのレベルが、第一の試料中のレベルよりも低い場合、患者の処置を継続することを含む。
【００１６】
更なる実施態様では、本発明は、ａ）被験者の処置を開始するかどうか、処置の投与量を改変するかどうか、投与間隔を改変するかどうか、又は処置を中止するかどうかを、先行請求項のいずれかに記載の方法に基づいて決定すること；及びｂ）決定に基づいて処置レジメンを改変することを含む、被験者の乾癬を処置する方法を提供する。
【００１７】
更なる実施態様では、本発明は、
ａ）患者から第一の生物学的試料を得ること；
ｂ）上記第一の生物学的試料中の１つ以上のバイオマーカーのレベルを測定すること（ここで、上記１つ以上のバイオマーカーは、ＩＬ−２３／ＩＬ−１７系（例えば、ＩＬ−２３Ａ、ＩＬ−２３Ｒ、ＩＬ−２２、ＩＬ−２２ＲＡ１ ＲＡ２、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−１７Ｆ、ＩＬ−１７ＲＡ、及びＩＬ−１７ＲＣの１つ以上）、ケラチノサイト及び上皮細胞の分化（例えば、後期角化エンベロープタンパク質、トランスグルタミナーゼ１、及びコルニフェリンの１つ以上）、組織炎症（例えば、β−デフェンシン２、好中球ゼラチナーゼリポカリン、及びＳ−１００タンパク質の１つ以上）、並びにＩＦＮα経路（例えば、ＩＦＩＨ１、ＩＳＧ１５、ＩＲＦ７、ＩＦＩ４４、ＭＸ１、ＭＸ２、ＳＴＡＴ１及びＴＲＩＭ２２の１つ以上）に関連する遺伝子／タンパク質である）；
ｃ）処置化合物を患者に投与すること；
ｄ）患者から第二の生物学的試料を得ること；
ｅ）上記第二の生物学的試料中の上記１つ以上のバイオマーカーのレベルを測定すること；及び
ｆ）第一及び第二の生物学的試料から得られた１つ以上のバイオマーカーのレベルを比較すること
を含む、乾癬処置に対する患者の応答をモニタリングする方法を提供し、
ここで第二の生物学的試料中の１つ以上のバイオマーカーのレベルの低下は、効果的な応答を示す。１つの態様では、第二の生物学的試料中の１つ以上のバイオマーカーのレベルの低下、及び乾癬の症例における臨床効力尺度すなわちＰＡＳＩスコアの改善との相関は、効果的な応答を示す。
【００１８】
更なる実施態様では、本発明は、
ａ）患者から生物学的試料を得ること；
ｂ）１つ以上のバイオマーカーのレベルを測定すること（ここで、１つ以上のバイオマーカーは、ＩＬ−２３／ＩＬ−１７系（例えば、ＩＬ−２３Ａ、ＩＬ−２３Ｒ、ＩＬ−２２、ＩＬ−２２ＲＡ１ ＲＡ２、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−１７Ｆ、ＩＬ−１７ＲＡ、及びＩＬ−１７ＲＣの１つ以上）、ケラチノサイト及び上皮細胞の分化（例えば、後期角化エンベロープタンパク質、トランスグルタミナーゼ１、及びコルニフェリンの１つ以上）、組織炎症（例えば、β−デフェンシン２、好中球ゼラチナーゼリポカリン、及びＳ−１００タンパク質の１つ以上）、並びにＩＦＮα経路（例えば、ＩＦＩＨ１、ＩＳＧ１５、ＩＲＦ７、ＩＦＩ４４、ＭＸ１、ＭＸ２、ＳＴＡＴ１及びＴＲＩＭ２２の１つ以上）に関連する遺伝子／タンパク質である）；及び
ｃ）患者の試料中のレベルが、対照の未処置試料中のレベルと比較して低下しているかどうかを決定すること
を含む、乾癬用の薬物処置プロトコールに対する患者のコンプライアンスをモニタリングするための方法を提供し、
ここで低下したレベルは、該薬物処置プロトコールに対する患者のコンプライアンスを示す。
【００１９】
１つの実施態様では、上記方法のいずれか１つにおいて、第二の生物学的試料中の１つ以上のバイオマーカーのレベルは、第一の生物学的試料中のレベルと比較して、少なくとも約２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％又は９５％又はそれ以上低下している。
【００２０】
１つの実施態様では、上記方法のいずれか１つにおいて、生物学的試料は皮膚生検、血液、血漿又は血清の試料である。１つの実施態様では、上記方法のいずれか１つにおいて、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストは、抗ＩＬ−２３Ａ抗体又はその抗原結合フラグメントである。１つの実施態様では、上記方法のいずれか１つにおいて、バイオマーカーのレベルは、ＲＮＡ配列決定又はＥＬＩＳＡ又は別のタンパク質アッセイによって決定される。
【００２１】
１つの実施態様では、本発明は更に、例えば本明細書に開示された方法を使用して、患者を選択する方法を提供する。１つの実施態様では、本発明は更に、例えば本発明の方法を使用して、ＩＬ−２３アンタゴニストを用いての処置後に有益な応答を有することが予想される患者の患者集団の質を高める(enrich)方法を提供する。１つの実施態様では、本発明は更に、例えば本発明の方法を使用して、ＩＬ−２３アンタゴニストを用いての処置前又は処置後早期に有益な応答を有することが予想される患者の患者集団の質を高める方法を提供する。
【００２２】
更なる実施態様では、本発明は更に、１つ以上のバイオマーカーに特異的に結合する１つ以上の抗体又は抗原結合フラグメントを含む、ＥＬＩＳＡキットを提供し、ここで１つ以上のバイオマーカーは、すなわちＳ−１００タンパク質、好中球ゼラチナーゼリポカリン又はβ−デフェンシン２である。１つの実施態様では、ＥＬＩＳＡ又は他のタンパク質アッセイキットは更に、処置前にキットを使用するための又は乾癬をモニタリングするための説明書を含む。
【００２３】
１つの実施態様では、上記方法のいずれか１つにおいて、抗ＩＬ−２３Ａ抗体又はその抗原結合フラグメントは以下に開示されているとおりである。
【００２４】
１つの実施態様では、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストは、抗ＩＬ−２３ｐ１９又はその抗原結合フラグメントの抗体であり、ここでの該抗体又はその抗原結合フラグメントは、配列番号１のアミノ酸配列（ＣＤＲ１−Ｌ）；配列番号２のアミノ酸配列（ＣＤＲ２−Ｌ）；及び配列番号３のアミノ酸配列（ＣＤＲ３−Ｌ）を含む軽鎖可変領域；並びに、配列番号４、７、８又は９のアミノ酸配列（ＣＤＲ１−Ｈ）；配列番号５のアミノ酸配列（ＣＤＲ２−Ｈ）；及び配列番号６のアミノ酸配列（ＣＤＲ３−Ｈ）を含む重鎖可変領域を含む。
【００２５】
１つの実施態様では、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストは、抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体又はその抗原結合フラグメントであり、ここでの該抗体又はその抗原結合フラグメントは、配列番号１のアミノ酸配列（ＣＤＲ１−Ｌ）；配列番号２のアミノ酸配列（ＣＤＲ２−Ｌ）；及び配列番号３のアミノ酸配列（ＣＤＲ３−Ｌ）を含む軽鎖可変領域；並びに、配列番号４のアミノ酸配列（ＣＤＲ１−Ｈ）；配列番号５のアミノ酸配列（ＣＤＲ２−Ｈ）；及び配列番号６のアミノ酸配列（ＣＤＲ３−Ｈ）を含む重鎖可変領域を含む。
【００２６】
１つの実施態様では、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストは、抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体又はその抗原結合フラグメントであり、ここでの該抗体又はその抗原結合フラグメントは、配列番号１のアミノ酸配列（ＣＤＲ１−Ｌ）；配列番号２のアミノ酸配列（ＣＤＲ２−Ｌ）；及び配列番号３のアミノ酸配列（ＣＤＲ３−Ｌ）を含む軽鎖可変領域；並びに、配列番号７のアミノ酸配列（ＣＤＲ１−Ｈ）；配列番号５のアミノ酸配列（ＣＤＲ２−Ｈ）；及び配列番号６のアミノ酸配列（ＣＤＲ３−Ｈ）を含む重鎖可変領域を含む。
【００２７】
１つの実施態様では、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストは、抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体又はその抗原結合フラグメントであり、ここでの該抗体又はその抗原結合フラグメントは、配列番号１のアミノ酸配列（ＣＤＲ１−Ｌ）；配列番号２のアミノ酸配列（ＣＤＲ２−Ｌ）；及び配列番号３のアミノ酸配列（ＣＤＲ３−Ｌ）を含む軽鎖可変領域；並びに、配列番号８のアミノ酸配列（ＣＤＲ１−Ｈ）；配列番号５のアミノ酸配列（ＣＤＲ２−Ｈ）；及び配列番号６のアミノ酸配列（ＣＤＲ３−Ｈ）を含む重鎖可変領域を含む。
【００２８】
１つの実施態様では、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストは、抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体又はその抗原結合フラグメントであり、ここでの該抗体又はその抗原結合フラグメントは、配列番号１のアミノ酸配列（ＣＤＲ１−Ｌ）；配列番号２のアミノ酸配列（ＣＤＲ２−Ｌ）；及び配列番号３のアミノ酸配列（ＣＤＲ３−Ｌ）を含む軽鎖可変領域；並びに、配列番号９のアミノ酸配列（ＣＤＲ１−Ｈ）；配列番号５のアミノ酸配列（ＣＤＲ２−Ｈ）；及び配列番号６のアミノ酸配列（ＣＤＲ３−Ｈ）を含む重鎖可変領域を含む。
【００２９】
１つの実施態様では、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストは、抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体又はその抗原結合フラグメントであり、ここでの該抗体又はその抗原結合フラグメントは、配列番号１０、１１、１２、又は１３のいずれか１つのアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；及び、配列番号１４、１５、１６、又は１７のいずれか１つのアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【００３０】
１つの実施態様では、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストは、抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体又はその抗原結合フラグメントであり、ここでの該抗体又はその抗原結合フラグメントは、配列番号１１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、及び配列番号１４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【００３１】
１つの実施態様では、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストは、抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体又はその抗原結合フラグメントであり、ここでの該抗体又はその抗原結合フラグメントは、配列番号１１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、及び配列番号１５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【００３２】
１つの実施態様では、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストは、抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体又はその抗原結合フラグメントであり、ここでの該抗体又はその抗原結合フラグメントは、配列番号１０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、及び配列番号１４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【００３３】
１つの実施態様では、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストは、抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体又はその抗原結合フラグメントであり、ここで該抗体又はその抗原結合フラグメントは、配列番号１０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、及び配列番号１５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【００３４】
１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体はヒト化抗体である。１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体はモノクローナル抗体である。１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体は完全長抗体である。１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体はヒト化モノクローナル抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体、例えば完全長のヒト化モノクローナル抗体である。１つの実施態様では、抗原結合フラグメントは、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、又は一本鎖Ｆｖフラグメントである。１つの実施態様では、抗原結合フラグメントは、軽鎖可変領域及び重鎖可変領域を含む。
【００３５】
１つの実施態様では、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストは、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ、又はＩｇＥ重鎖定常領域に連結された、配列番号１４又は１５のアミノ酸配列を含む抗体である。ヒトＩｇＧ１重鎖定常領域に連結された、配列番号１４又は１５のアミノ酸配列を含む抗体。ヒトκ又はλ軽鎖定常領域に連結された、配列番号１０又は１１のアミノ酸配列を含む抗体。ヒトκ軽鎖定常領域に連結された、配列番号１０又は１１のアミノ酸配列を含む抗体。
【００３６】
１つの実施態様では、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストは、ヒトＩｇＧ１重鎖定常領域に連結された配列番号１４又は１５のアミノ酸配列と；ヒトκ軽鎖定常領域に連結された配列番号１０又は１１のアミノ酸配列とを含む、抗体である。
【００３７】
１つの実施態様では、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストは、配列番号１０、１１、１２、及び１３のいずれか１つからなる群より選択されたアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、配列番号１４、１５、１６、及び１７のいずれか１つからなる群より選択されたアミノ酸配列を含む重鎖可変領域とを含む、ヒト化モノクローナル抗ＩＬ２３ｐ１９抗体である。
【００３８】
１つの実施態様では、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストは、配列番号１１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、配列番号１４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域とを含む、ヒト化モノクローナル抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体である。
【００３９】
１つの実施態様では、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストは、配列番号１１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、配列番号１５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域とを含む、ヒト化モノクローナル抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体である。
【００４０】
１つの実施態様では、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストは、配列番号１０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、配列番号１４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域とを含む、ヒト化モノクローナル抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体である。
【００４１】
１つの実施態様では、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストは、配列番号１０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、配列番号１５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域とを含む、ヒト化モノクローナル抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体である。
【００４２】
１つの実施態様では、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストは、配列番号１８又は２１のアミノ酸配列を含む軽鎖と、配列番号１９又は２０のアミノ酸配列を含む重鎖とを含む、ヒト化モノクローナル抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体である。
【００４３】
１つの実施態様では、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストは、配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖と、配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖とを含む、ヒト化モノクローナル抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体である。
【００４４】
１つの実施態様では、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストは、配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖と、配列番号２０のアミノ酸配列を含む重鎖とを含む、ヒト化モノクローナル抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体である。
【００４５】
１つの実施態様では、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストは、配列番号２１のアミノ酸配列を含む軽鎖と、配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖とを含む、ヒト化モノクローナル抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体である。
【００４６】
１つの実施態様では、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストは、配列番号２１のアミノ酸配列を含む軽鎖と、配列番号２０のアミノ酸配列を含む重鎖とを含む、ヒト化モノクローナル抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体である。
【００４７】
１つの実施態様では、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストは、抗体Ａ、抗体Ｂ、抗体Ｃ、又は抗体Ｄである。
【００４８】
１つの実施態様では、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストは、国際公開第２００７／００５９５５号、国際公開第２００７／０２４８４６号、国際公開第２００７／０２７７１４号、国際公開第２００７／０７６５２４号、国際公開第２００８／１０３４３２号、又は国際公開第２０１２／０６１４４８号に開示された抗体である。
【図面の簡単な説明】
【００４９】
【図１】抗体Ａを静脈内（ＩＶ）に又は皮下（ＳＣ）に投与された患者についてのＰＡＳＩスコアの改善の平均値。抗体Ａ（ＩＶ）については、１２週目までＮ＝２４、その後はＮ＝２３（１名の患者は、元々は抗体Ａの５mg/kg群に割り付けられたが、転居に因り追跡不能となり、１２週目以降は中止された）。抗体Ａ（ＳＣ）については、全体を通してＮ＝１５。ＩＶ、静脈内；ＰＡＳＩ、乾癬部位重症度指数；ＳＣ、皮下。
【図２】抗体Ａ対プラセボでの処置後のＲＮＡ配列決定分析からの７９個の遺伝子のクラスターにおける発現の倍率変化（ベースラインから８週目までの変化）の全体的な減少を示したヒートマップであり、各々のカラムは個々の患者を示す。尺度は、７９個の各々の遺伝子の発現の倍率変化のｌｏｇ２を示し、赤色は増加倍率変化を示し、青色は減少倍率変化を示す（抗体Ａ対プラセボ）。
【図３】抗体Ａで処置された患者におけるこの遺伝子クラスターの発現の減少と、より低いＰＡＳＩスコアとの間の有意な相関を示した［抗体Ａ（点）対プラセボ（バツ印）］、８週目における各患者についての７９個の遺伝子のクラスター平均値（図２より）対ＰＡＳＩスコアの相関プロット。
【発明を実施するための形態】
【００５０】
詳細な説明
ＩＬ−２３のｐ１９サブユニット（本明細書においては「ＩＬ−２３Ａ」、「ＩＬ−２３ｐ１９」及び「ｐ１９サブユニット」とも称される）は、２１アミノ酸リーダー配列を含有している１８９アミノ酸ポリペプチドである（Oppmann et al. Immunity 13:715 (2000)、配列番号２２）。該分子の生物学的活性は、ＩＬ−１２ｐ４０サブユニットと対を形成してＩＬ−２３を形成する場合にのみ検出される。ＩＬ−２３は主に、活性化された樹状細胞（ＤＣ）及び貪食細胞によって発現されている。ＩＬ−２３の受容体は、ＩＬ−２３Ｒと呼ばれる独特なサブユニットと対を形成したＩＬ−１２受容体のＩＬ−１２Ｒβ１サブユニットから構成されることが判明した（Parham et al. J. Immunol. 168:5699 (2002)）。該受容体の発現は主に、記憶Ｔ細胞及びＮＫ細胞上に検出される。したがって、このサイトカイン：受容体の対の発現は、免疫細胞の特定の個体群に限定されているようである。ＩＬ−１２とＩＬ−２３は多くの機能を共有するであろうと最初は考えられていたが、データは、その状況が異なることを示した。ＩＬ−１２は、Ｔｈ１細胞の生成に主な役割を有しているが、ＩＬ−２３は、Ｔｈ１７と呼ばれる近年認められたＴｈ細胞サブセットの生成及び維持に決定的に関与していることが判明した（Kikly et al. Curr. Opin. Immunol. 18:670 (2006), Kastelein et al. Ann. Rev. Immunol. 25:221 (2007)）。これらの細胞は、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−１７Ｆ、ＩＬ−２２、及び他の炎症誘発性サイトカイン、例えばＩＬ−６及びＴＮＦ−αを産生する。以下に記載されているように、これらのＴｈ１７細胞の役割に関する動物モデル研究は、慢性炎症及び自己免疫における駆動力としてのその重要性を示す。
【００５１】
【表１】
2017524359.tif 000002
【００５２】
本発明は、ＩＬ−２３Ａ関連疾患の処置に有用なバイオマーカーを提供する。
【００５３】
１つの実施態様では、本発明は、ａ）患者から生物学的試料を得ること；ｂ）該試料中の１つ以上のバイオマーカーの発現レベルを測定すること；ｃ）該レベルを、バイオマーカーのレベルの対照値と比較すること；及びｄ）試料と対照との間のレベルにおける差異が、患者における有益な応答を反映するか否かを決定することを含む、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストの投与後の患者における有益な応答の有無を検出するための方法を提供し、ここで、１つ以上のバイオマーカーは、ＩＬ−２３／ＩＬ−１７系（例えば、ＩＬ−２３Ａ、ＩＬ−２３Ｒ、ＩＬ−２２、ＩＬ−２２ＲＡ１ ＲＡ２、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−１７Ｆ、ＩＬ−１７ＲＡ、及びＩＬ−１７ＲＣの１つ以上）、ケラチノサイト及び上皮細胞の分化（例えば、後期角化エンベロープタンパク質、トランスグルタミナーゼ１、及びコルニフェリンの１つ以上）、組織炎症（例えば、β−デフェンシン２、好中球ゼラチナーゼリポカリン、及びＳ−１００タンパク質の１つ以上）、又はＩＦＮα経路（例えば、ＩＦＩＨ１、ＩＳＧ１５、ＩＲＦ７、ＩＦＩ４４、ＭＸ１、ＭＸ２、ＳＴＡＴ１及びＴＲＩＭ２２の１つ以上）に関連する遺伝子／タンパク質である。
【００５４】
１つの実施態様では、患者における有益な応答の有無は、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストの投与前及び投与後に検出される。
【００５５】
１つの実施態様では、対照値は、プラセボで処置された患者の数値である。１つの実施態様では、対照値は、プラセボで処置された患者の数値であり、差異は、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストで処置された患者の試料とプラセボで処置された患者の試料との間の差異である。
【００５６】
１つの実施態様では、上記１つ以上のバイオマーカーの遺伝子又はタンパク質のレベルが測定される。１つの実施態様では、患者は乾癬に罹患している。
【００５７】
１つの実施態様では、対照値は、乾癬に罹患していない被験者由来の試料を使用して計算される。１つの実施態様では、対照値、例えばプラセボ値は、既知の乾癬患者の試料、例えばプラセボで処置された乾癬患者の試料を使用して決定される。１つの実施態様では、対照値は、患者から採取された少なくとも１つの以前の試料を使用して決定される。
【００５８】
１つの実施態様では、１つ以上のバイオマーカーはＳ−１００Ａ７、好中球ゼラチナーゼリポカリン又はβ−デフェンシン２である。１つの実施態様では、生物学的試料は、皮膚生検、血液、血漿又は血清の試料である。１つの実施態様では、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストは、抗ＩＬ−２３Ａ抗体又はその抗原結合フラグメントである。１つの実施態様では、バイオマーカーのレベルは、ＲＮＡ配列決定又はＥＬＩＳＡ又は別のタンパク質アッセイによって決定される。
【００５９】
１つの実施態様では、前記方法は更に、試料と対照との間のレベルにおける差異が、患者における有益な応答を反映する場合、患者へのＩＬ−２３Ａアンタゴニストの投与を継続することを含む。１つの実施態様では、前記方法は更に、アンタゴニスト対プラセボで処置された患者のレベルにおける差異が患者における有益な応答を反映している場合、患者へのＩＬ−２３Ａアンタゴニストの投与を継続することを含む。
【００６０】
更なる実施態様では、本発明は、ａ）有望な治療剤で処置する前の乾癬患者から第一の生物学的試料を得ること；ｂ）有望な治療剤で乾癬患者を処置すること；ｃ）有望な治療剤で処置した後に、乾癬患者から第二の生物学的試料を得ること；ｄ）上記第一及び第二の試料中の１つ以上のバイオマーカーの発現レベルを測定すること；及びｅ）第二の試料中のバイオマーカーのレベルを、第一の試料中のレベルと比較することを含む、有望な治療剤が乾癬の処置において効果的であるかどうかを決定する方法を提供し、ここで第一の試料中よりも第二の試料中の方が低いバイオマーカーレベルは、有望な治療剤が効果的であることを示し、更に、ここで１つ以上のバイオマーカーは、ＩＬ−２３／ＩＬ−１７系（例えば、ＩＬ−２３Ａ、ＩＬ−２３Ｒ、ＩＬ−２２、ＩＬ−２２ＲＡ１ ＲＡ２、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−１７Ｆ、ＩＬ−１７ＲＡ、及びＩＬ−１７ＲＣの１つ以上）、ケラチノサイト及び上皮細胞の分化（例えば、後期角化エンベロープタンパク質、トランスグルタミナーゼ１、及びコルニフェリンの１つ以上）、組織炎症（例えば、β−デフェンシン２、好中球ゼラチナーゼリポカリン、及びＳ−１００タンパク質の１つ以上）、並びにＩＦＮα経路（例えば、ＩＦＩＨ１、ＩＳＧ１５、ＩＲＦ７、ＩＦＩ４４、ＭＸ１、ＭＸ２、ＳＴＡＴ１及びＴＲＩＭ２２の１つ以上）に関連する遺伝子である。１つの実施態様では、該工程ｅ）は、第二の試料中のバイオマーカーのレベルを第一の試料中のレベルと比較することを含み、ここで第一の試料中よりも第二の試料中の方が低いバイオマーカーレベル、及び乾癬の症例における臨床効力尺度すなわちＰＡＳＩスコアの改善との相関は、有望な治療剤が効果的であることを示す。
【００６１】
１つの実施態様では、前記方法は更に、第二の試料中のバイオマーカーのレベルが、第一の試料中のレベルよりも低い場合、患者の処置を継続することを含む。
【００６２】
更なる実施態様では、本発明は、ａ）被験者の処置を開始するかどうか、処置の投与量を改変するかどうか、投与間隔を改変するかどうか、又は処置を中止するかどうかを、先行する請求項のいずれかの方法に基づいて決定すること；及びｂ）決定に基づいて処置レジメンを改変することを含む、被験者の乾癬を処置する方法を提供する。
【００６３】
更なる実施態様では、本発明は、
ａ）患者から第一の生物学的試料を得ること；
ｂ）上記第一の生物学的試料中の１つ以上のバイオマーカーのレベルを測定すること（ここで、上記１つ以上のバイオマーカーは、ＩＬ−２３／ＩＬ−１７系（例えば、ＩＬ−２３Ａ、ＩＬ−２３Ｒ、ＩＬ−２２、ＩＬ−２２ＲＡ１ ＲＡ２、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−１７Ｆ、ＩＬ−１７ＲＡ、及びＩＬ−１７ＲＣの１つ以上）、ケラチノサイト及び上皮細胞の分化（例えば、後期角化エンベロープタンパク質、トランスグルタミナーゼ１、及びコルニフェリンの１つ以上）、組織炎症（例えば、β−デフェンシン２、好中球ゼラチナーゼリポカリン、及びＳ−１００タンパク質の１つ以上）、並びにＩＦＮα経路（例えば、ＩＦＩＨ１、ＩＳＧ１５、ＩＲＦ７、ＩＦＩ４４、ＭＸ１、ＭＸ２、ＳＴＡＴ１及びＴＲＩＭ２２の１つ以上）に関連する遺伝子／タンパク質である）；
ｃ）処置化合物を患者に投与すること；
ｄ）患者から第二の生物学的試料を得ること；
ｅ）上記第二の生物学的試料中の上記１つ以上のバイオマーカーのレベルを測定すること；及び
ｆ）第一及び第二の生物学的試料から得られた１つ以上のバイオマーカーのレベルを比較すること
を含む、乾癬処置に対する患者の応答をモニタリングする方法を提供し、
ここで第二の生物学的試料中の１つ以上のバイオマーカーのレベルの低下は、効果的な応答を示す。１つの態様では、第二の生物学的試料中の１つ以上のバイオマーカーのレベルの低下、及び乾癬の症例における臨床効力尺度すなわちＰＡＳＩスコアの改善との相関は、効果的な応答を示す。
【００６４】
更なる実施態様では、本発明は、
ａ）患者から生物学的試料を得ること；
ｂ）１つ以上のバイオマーカーのレベルを測定すること（ここで、１つ以上のバイオマーカーは、ＩＬ−２３／ＩＬ−１７系（例えば、ＩＬ−２３Ａ、ＩＬ−２３Ｒ、ＩＬ−２２、ＩＬ−２２ＲＡ１ ＲＡ２、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−１７Ｆ、ＩＬ−１７ＲＡ、及びＩＬ−１７ＲＣの１つ以上）、ケラチノサイト及び上皮細胞の分化（例えば、後期角化エンベロープタンパク質、トランスグルタミナーゼ１、及びコルニフェリンの１つ以上）、組織炎症（例えば、β−デフェンシン２、好中球ゼラチナーゼリポカリン、及びＳ−１００タンパク質の１つ以上）、並びにＩＦＮα経路（例えば、ＩＦＩＨ１、ＩＳＧ１５、ＩＲＦ７、ＩＦＩ４４、ＭＸ１、ＭＸ２、ＳＴＡＴ１及びＴＲＩＭ２２の１つ以上）に関連する遺伝子／タンパク質である）；及び
ｃ）患者の試料中のレベルが、対照の未処置試料中のレベルと比較して低下しているかどうかを決定すること
を含む、乾癬用の薬物処置プロトコールに対する患者のコンプライアンスをモニタリングするための方法を提供し、
ここで低下したレベルは、該薬物処置プロトコールに対する患者のコンプライアンスを示す。
【００６５】
１つの実施態様では、上記方法のいずれか１つにおいて、第二の生物学的試料中の１つ以上のバイオマーカーのレベルは、第一の生物学的試料中のレベルと比較して、少なくとも約２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％又は９５％又はそれ以上低下している。
【００６６】
１つの実施態様では、上記方法のいずれか１つにおいて、生物学的試料は皮膚生検、血液、血漿又は血清の試料である。１つの実施態様では、上記方法のいずれか１つにおいて、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストは、抗ＩＬ−２３Ａ抗体又はその抗原結合フラグメントである。１つの実施態様では、上記方法のいずれか１つにおいて、バイオマーカーのレベルは、ＲＮＡ配列決定又はＥＬＩＳＡ又は別のタンパク質アッセイによって決定される。
【００６７】
１つの実施態様では、本発明は更に、例えば本明細書に開示された方法を使用して、患者を選択する方法を提供する。１つの実施態様では、本発明は更に、例えば本発明の方法を使用して、ＩＬ−２３アンタゴニストを用いての処置後に有益な応答を示すことが予想される患者の患者集団の質を高める方法を提供する。１つの実施態様では、本発明は更に、例えば本発明の方法を使用して、ＩＬ−２３アンタゴニストを用いての処置前又は処置後早期に有益な応答を示すことが予想される患者の患者集団の質を高める方法を提供する。
【００６８】
更なる実施態様では、本発明は更に、１つ以上のバイオマーカーに特異的に結合する１つ以上の抗体又は抗原結合フラグメントを含む、ＥＬＩＳＡキットを提供し、ここで１つ以上のバイオマーカーは、すなわちＳ−１００タンパク質、好中球ゼラチナーゼリポカリン又はβ−デフェンシン２である。１つの実施態様では、ＥＬＩＳＡ又は他のタンパク質アッセイキットは更に、処置前にキットを使用するための又は乾癬をモニタリングするための説明書を含む。
【００６９】
１つの実施態様では、上記方法のいずれか１つにおいて、抗ＩＬ−２３Ａ抗体又はその抗原結合フラグメントは以下に開示されているとおりである。
【００７０】
１つの態様では、抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体はヒト化抗体である。１つの態様では、抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体はモノクローナル抗体である。１つの態様では、抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体は完全長抗体である。１つの態様では、抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体はヒト化モノクローナル抗体、例えば完全長のヒト化モノクローナル抗体である。
【００７１】
本発明の抗体又は抗原結合フラグメントは、特異的な「ＩＬ−２３ｐ１９抗原エピトープ」又は「ＩＬ−２３ｐ１９エピトープ」を認識する。本明細書において使用するこれらの用語は、抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体と免疫反応性を起こすことができる分子（例えばペプチド）又は分子のフラグメントを指し、これには例えば、配列番号１１／１４、１１／１５、１０／１４、又は１０／１５の軽鎖配列／重鎖配列の組合せを有する抗体のいずれかによって認識されるＩＬ−２３ｐ１９抗原決定基が含まれる。
【００７２】
抗体又は免疫グロブリンの一般構造は、当業者には周知である。これらの分子は、２本の同一な軽鎖（Ｌ）と２本の同一な重鎖（Ｈ）から構成される典型的には約１５０，０００ダルトンのヘテロ四量体糖タンパク質であり、これは典型的には完全長抗体と呼ばれる。各々の軽鎖は、１本のジスルフィド結合によって重鎖に共有結合で連結されてヘテロ二量体を形成し、ヘテロ二量体の２本の同一な重鎖の間でのジスルフィド共有結合を通してヘテロ四量体分子が形成される。軽鎖と重鎖は互いに１本のジスルフィド結合によって連結されているが、２本の重鎖間のジスルフィド結合の数は、免疫グロブリンのアイソタイプによって異なる。各々の重鎖及び軽鎖はまた、規則的に配置された鎖内ジスルフィド架橋を有する。各々の重鎖は、アミノ末端に可変ドメイン（ＶＨ）、続いて３つ又は４つの定常ドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３及びＣＨ４）、並びに、ＣＨ１とＣＨ２間のヒンジ領域を有する。各々の軽鎖は、アミノ末端可変ドメイン（ＶＬ）及びカルボキシ末端定常ドメイン（ＣＬ）という２つのドメインを有する。ＶＬドメインは、非共有結合的にＶＨドメインと会合し、一方、ＣＬドメインは一般的にＣＨ１ドメインにジスルフィド結合を介して共有結合で連結されている。特定のアミノ酸残基が、軽鎖可変ドメインと重鎖可変ドメインとの間の境界領域を形成すると考えられている（Chothia et al., 1985, J. Mol. Biol. 186:651-663）。可変ドメインはまた、本明細書において可変領域とも称される。
【００７３】
可変ドメイン内の特定のドメインが、様々な抗体間で大幅に異なり、すなわち「超可変的」である。これらの超可変ドメインは、その特異的な抗原決定基に対する各々の特定の抗体の結合及び特異性に直接関与している残基を含有している。軽鎖可変ドメインと重鎖可変ドメインの両方における超可変性は、相補性決定領域（ＣＤＲ）又は超可変ループ（ＨＶＬ）として知られる３つのセグメントに集中している。ＣＤＲは、Kabat et al., 1991, In: Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md.の配列比較によって規定され、一方、ＨＶＬ（本明細書においてＣＤＲとも称される）は、Chothia and Lesk, 1987, J. Mol. Biol. 196: 901-917に記載のような可変ドメインの３次元構造に従って構造的に規定される。これらの２つの方法では、ＣＤＲの同定は僅かに異なる結果となる。Kabatによって定義されているように、ＣＤＲ−Ｌ１は、軽鎖可変ドメイン内のおよそ２４〜３４残基に位置し、ＣＤＲ−Ｌ２はおよそ５０〜５６残基に位置し、ＣＤＲ−Ｌ３はおよそ８９〜９７残基に位置し；ＣＤＲ−Ｈ１は、重鎖可変ドメイン内のおよそ３１〜３５残基に位置し、ＣＤＲ−Ｈ２はおよそ５０〜６５残基に位置し、ＣＤＲ−Ｈ３はおよそ９５〜１０２残基に位置する。特定のＣＤＲを包含する正確な残基の番号は、ＣＤＲの配列及びサイズに依存して変化する。当業者は、抗体の可変領域のアミノ酸配列が与えられれば、どの残基が特定のＣＤＲを含むか慣用的に決定することができる。それ故、重鎖及び軽鎖のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、ＣＤＲ３は、所与の抗体に特異的な独特かつ機能的な特性を規定する。
【００７４】
重鎖及び軽鎖の各々の中にある３つのＣＤＲは、フレームワーク領域（ＦＲ）によって隔てられ、このフレームワーク領域はより可変性が低い傾向がある配列を含有している。重鎖及び軽鎖の可変ドメインのアミノ末端からカルボキシ末端にかけて、ＦＲ及びＣＤＲは、ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、及びＦＲ４の順に整列している。ＦＲの主にβ−シートの立体配置により、各々の鎖内のＣＤＲが互いに及び他の鎖のＣＤＲと近接する。結果として生じたコンフォメーションは抗原結合部位に寄与するが（Kabat et al., 1991, NIH Publ. No. 91-3242, Vol. I, pages 647-669を参照）、全てのＣＤＲ残基が必ずしも抗原との結合に直接関与しているわけではない。
【００７５】
ＦＲ残基及びＩｇ定常ドメインは、抗原との結合に直接関与していないが、抗原との結合に寄与する、及び／又は、抗体エフェクター機能を媒介する。いくつかのＦＲ残基は少なくとも３つの方法で抗原との結合に対して有意な効果を及ぼすと考えられている：エピトープに非共有結合的に直接結合することによって、１つ以上のＣＤＲ残基と相互作用することによって、及び重鎖と軽鎖との間の境界領域に影響を及ぼすことによって。定常ドメインは、抗原との結合に直接関与していないが、様々なＩｇエフェクター機能を媒介し、例えば抗体依存性細胞傷害作用（ＡＤＣＣ）、補体依存性細胞傷害作用（ＣＤＣ）及び抗体依存性細胞貪食（ＡＤＣＰ）における抗体の関与を媒介する。
【００７６】
脊椎動物の免疫グロブリンの軽鎖は、定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、カッパ（κ）及びラムダ（λ）という２つの明確に異なるクラスの中の１つに割り当てられる。これに対して、哺乳動物の免疫グロブリンの重鎖は、定常ドメインの配列に従って、５つの主要なクラスの中の１つに割り当てられる：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭ。ＩｇＧ及びＩｇＡは更にサブクラス（アイソタイプ）に分類される、例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２。様々なクラスの免疫グロブリンに対応する重鎖定常ドメインは、α、δ、ε、γ、及びμとそれぞれ呼ばれる。天然免疫グロブリンのクラスのサブユニット構造及び３次元立体配置は周知である。
【００７７】
「抗体」、「抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体」、「ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体」、「ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９エピトープ抗体」、及び「変異ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９エピトープ抗体」という用語は具体的に、所望の生物学的活性、例えばＩＬ−２３ｐ１９との結合を示すモノクローナル抗体（完全長のモノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、多重特異的抗体（例えば二重特異的抗体）、及び抗体フラグメント、例えば可変ドメイン、及び抗体の他の部分を包含する。「モノクローナル抗体」（ｍＡｂ）という用語は、非常に特異的であり、単一の抗原決定基、すなわち「エピトープ」に対して指向される、抗体を指す。それ故、「モノクローナル」という修飾語は、同一のエピトープに対して指向される抗体を示し、任意の特定の方法による抗体の産生が必要とされると捉えられるものではない。モノクローナル抗体は、例えばハイブリドーマ法（Kohler et al., 1975, Nature 256:495）又は当技術分野において公知である組換えＤＮＡ法（例えば米国特許第４，８１６，５６７号明細書を参照）、又はClackson et al., 1991, Nature 352: 624-628、及びMarks et al., 1991, J. Mol. Biol. 222: 581-597に記載の技術を使用してファージ抗体ライブラリーを使用して組換え産生されたモノクローナル抗体の単離法をはじめとする、当技術分野において公知である任意の技術又は方法によって作製され得ることが理解されるべきである。
【００７８】
「単量体」という用語は、均一な形態の抗体を指す。例えば、完全長の抗体では、単量体は、２本の同一な重鎖と２本の同一な軽鎖とを有する単量体の抗体を意味する。
【００７９】
キメラ抗体は、ある種（例えば非ヒト哺乳動物、例えばマウス）に由来する抗体の重鎖及び軽鎖の可変領域と、別の種（例えばヒト）に由来する抗体の重鎖及び軽鎖の定常領域とからなり、そしてこれは、第一の種（例えばマウス）に由来する抗体の可変領域をコードするＤＮＡ配列を、第二の種（例えばヒト）に由来する抗体の定常領域のＤＮＡ配列に連結させ、連結させた配列を含有している発現ベクターを用いて宿主を形質転換して、それがキメラ抗体を産生することを可能とすることによって得ることができる。或いは、キメラ抗体はまた、重鎖及び／又は軽鎖の１つ以上の領域若しくはドメインが、別の免疫グロブリンクラス若しくはアイソタイプ由来の、又は共通配列若しくは生殖系列配列由来のモノクローナル抗体内の対応する配列と同一であるか、相同であるか、又はその変異体であるものであり得る。キメラ抗体は、このような抗体のフラグメントを含んでいてもよい。ただし、該抗体フラグメントは、その親抗体の所望の生物学的活性、例えば同じエピトープへの結合を示す（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号明細書；及びMorrison et al., 1984, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81: 6851-6855を参照）。
【００８０】
「抗体フラグメント」、「抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体フラグメント」、「抗ＩＬ−２３ｐ１９エピトープ抗体フラグメント」、「ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体フラグメント」、「ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９エピトープ抗体フラグメント」、「変異ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９エピトープ抗体フラグメント」という用語は、完全長の抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体の一部を指し、可変領域又は機能的能力、例えば特異的なＩＬ−２３ｐ１９のエピトープへの結合は保持されている。抗体フラグメントの例としては、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｄ、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、及びｓｃＦｖ−Ｆｃフラグメント、ディアボディ、鎖状抗体、一本鎖抗体、ミニボディ、抗体フラグメントから形成されたディアボディ、及び抗体フラグメントから形成された多重特異的抗体が挙げられるが、これらに限定されない。
【００８１】
完全長の抗体を、パパイン又はペプシンなどの酵素で処理することにより、有用な抗体フラグメントを作製することができる。パパインによる消化を使用することにより、「Ｆａｂ」フラグメントと呼ばれる２つの同一な抗原結合性の抗体フラグメント（各々は１つの抗原結合部位を有する）と残りの「Ｆｃ」フラグメントを生成する。Ｆａｂフラグメントはまた、軽鎖の定常ドメイン及び重鎖のＣＨ１ドメインも含有している。ペプシンによる処理により、２つの抗原結合部位を有するＦ（ａｂ’）２フラグメントが生じ、これは依然として抗原と架橋することができる。
【００８２】
Ｆａｂ’フラグメントは、ＣＨ１ドメインのＣ末端における抗体ヒンジ領域由来の１つ以上のシステインを含む、追加の残基の存在によってＦａｂフラグメントとは異なる。Ｆ（ａｂ’）２抗体フラグメントは、ヒンジ領域内のシステイン残基によって連結されたＦａｂ’フラグメントの対である。抗体フラグメントの他の化学的結合も公知である。
【００８３】
「Ｆｖ」フラグメントは、緊密に非共有結合的に会合した１つの重鎖可変ドメインと１つの軽鎖可変ドメインとの二量体からなる、完全な抗原認識結合部位を含有している。この立体配置では、各々の可変ドメインの３つのＣＤＲは相互作用して、ＶＨ−ＶＬ二量体の表面上の抗原結合部位を規定する。要するに、６つのＣＤＲが、抗体に対して抗原結合特異性を付与する。
【００８４】
「一本鎖Ｆｖ」すなわち「ｓｃＦｖ」抗体フラグメントは、抗体のＶＨドメインとＶＬドメインとを含む一本鎖Ｆｖ変異体であり、ここでのドメインは、１本のポリペプチド鎖内に存在している。一本鎖Ｆｖは、抗原を認識し結合することができる。ｓｃＦｖポリペプチドはまた場合により、ＶＨドメインとＶＬドメインの間に位置するポリペプチドリンカーを含有していてもよく、これによりｓｃＦｖと抗原との結合のために望ましい３次元構造の形成が促進される（例えば、Pluckthun, 1994, In The Pharmacology of monoclonal Antibodies, Vol. 113, Rosenburg and Moore eds., Springer-Verlag, New York, pp. 269-315を参照）。
【００８５】
「ディアボディ」は、２つの抗原結合部位を有する小さな抗体フラグメントを指し、このフラグメントは、同じポリペプチド鎖内に軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）に接続された重鎖可変ドメイン（ＶＨ）を含む（ＶＨ−ＶＬ又はＶＬ−ＶＨ）。ディアボディは、例えばHolliger et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 6444-6448においてより完全に記載されている。
【００８６】
他の認められている抗体フラグメントとしては、一対の直列なＦｄセグメント（ＶＨ−ＣＨ１−ＶＨ−ＣＨ１）を含むことにより一対の抗原結合領域を形成しているものが挙げられる。これらの「鎖状抗体」は、例えばZapata et al. 1995, Protein Eng. 8(10):1057-1062に記載のように二重特異的であっても単一特異的であってもよい。
【００８７】
「ヒト化抗体」又は「ヒト化抗体フラグメント」は、予め決定された抗原に結合することができ、そしてヒト免疫グロブリンのアミノ酸配列を実質的に有する１つ以上のＦＲと、非ヒト免疫グロブリンのアミノ酸配列を実質的に有する１つ以上のＣＤＲとを含む、免疫グロブリンアミノ酸配列変異体又はそのフラグメントを含む、特殊な種類のキメラ抗体である。「インポート」配列としばしば称されるこの非ヒトアミノ酸配列は、典型的には、「インポート」抗体ドメイン、特に可変ドメインから採用される。一般的には、ヒト化抗体は、ヒト重鎖可変ドメイン又は軽鎖可変ドメインのＦＲ間に挿入された、非ヒト抗体の少なくともＣＤＲ又はＨＶＬを含む。本発明は、マウスモノクローナル抗体に由来するＣＤＲ、又は、ヒト生殖系列配列の重鎖可変ドメイン及び軽鎖可変ドメインのＦＲ間に挿入された表１及び２に示されるヒト化ＣＤＲを含有している、特定のヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体を記載する。特定のマウスＦＲ残基が、ヒト化抗体の機能にとって重要である場合があり、それ故、特定のヒト生殖系列配列の重鎖及び軽鎖の可変ドメイン残基が、対応するマウス配列の残基と同じになるように改変されることが理解される。
【００８８】
別の態様では、ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体は、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメイン（例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂｃ、及びＦｖフラグメントに含有されているような）の実質的に全部を含み、ここではＣＤＲの全部又は実質的に全部が、非ヒト免疫グロブリンのＣＤＲに相当し、具体的に本明細書において、ＣＤＲの全部が、本明細書の以下の表１及び２に詳述されているようなマウス配列又はヒト化配列であり、ＦＲの全部又は実質的に全部が、ヒト免疫グロブリン共通配列又は生殖系列配列のＦＲである。別の態様では、ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体はまた、免疫グロブリンＦｃ領域の少なくとも一部、典型的にはヒト免疫グロブリンのそれを含む。通常、抗体は、両方の軽鎖、並びに重鎖の少なくとも可変ドメインを含有する。抗体はまた、適宜、重鎖のＣＨ１領域、ヒンジ領域、ＣＨ２領域、ＣＨ３領域、及び／又はＣＨ４領域の１つ以上を含み得る。
【００８９】
ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体は、ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＤ、ＩｇＡ、及びＩｇＥを含むあらゆるクラスの免疫グロブリン、並びに、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２を含むあらゆるアイソタイプから選択され得る。例えば、定常ドメインは、補体に結合する定常ドメインであってもよく、この場合ヒト化抗体は、細胞傷害活性を示すことが望まれ、アイソタイプは典型的にはＩｇＧ１である。このような細胞傷害活性が望ましくない場合には、定常ドメインは別のアイソタイプ、例えばＩｇＧ２であってもよい。代替的なヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体は、１つを超える免疫グロブリンのクラス又はアイソタイプに由来する配列を含み得、所望のエフェクター機能を最適化するために特定の定常ドメインを選択することは、当技術分野の技能範囲内である。具体的な実施態様では、本発明は、ＩｇＧ１抗体、より特定するとエフェクター機能がノックアウトされているＩｇＧ１抗体である抗体を提供する。
【００９０】
ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体のＦＲ及びＣＤＲ又はＨＶＬは、親配列に対して正確に対応している必要はない。例えば、インポートＣＤＲ若しくはＨＶＬ、又は共通配列若しくは生殖系列配列のＦＲ配列における１つ以上の残基を、置換、挿入、又は欠失によって改変（例えば突然変異誘発）させてもよく、これにより生じたアミノ酸残基は、いずれかの親配列の対応する位置の元来の残基とはもはや同一ではないが、該抗体はそれにも関わらずＩＬ−２３ｐ１９に結合する機能を保持している。このような改変は典型的には大規模ではなく、保存的改変であろう。通常、ヒト化抗体残基の少なくとも７５％、より頻繁には少なくとも９０％、最も頻繁には９５％超、又は９８％超、又は９９％超が、親共通配列又は生殖系列配列のＦＲ配列及びインポートＣＤＲ配列の残基に相当する。
【００９１】
重鎖可変領域と軽鎖可変領域との間の境界領域（「ＶＬ−ＶＨ境界領域」）に影響を及ぼす免疫グロブリン残基は、２つの鎖の互いの近接性又は配向に影響を及ぼす残基である。鎖間相互作用に関与する可能性のある特定の残基としては、ＶＬ残基３４、３６、３８、４４、４６、８７、８９、９１、９６及び９８、並びにＶＨ残基３５、３７、３９、４５、４７、９１、９３、９５、１００、及び１０３が挙げられる（Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest (National Institutes of Health, Bethesda, Md., 1987)に示される番号付けシステムを利用）。米国特許第６，４０７，２１３号明細書はまた、ＶＬ残基４３及び８５、並びにＶＨ残基４３及び６０などの残基も、この相互作用に関与している可能性があると考察している。これらの残基は、ヒトＩｇＧについてのみ示されているが、それらは種間で適用可能である。鎖間相互作用に関与することが合理的に考えて予想される重要な抗体残基が、共通配列への置換のために選択される。
【００９２】
「共通配列」及び「共通抗体」という用語は、任意の特定のクラス、アイソタイプ、又はサブユニット構造の全ての免疫グロブリン、例えばヒト免疫グロブリン可変ドメインにおける各々の位置において最も高い頻度で存在するアミノ酸残基を含む、アミノ酸配列を指す。共通配列は、特定の種の又は多くの種の免疫グロブリンに基づき得る。「共通」配列、構造、又は抗体は、特定の実施態様に記載されているような共通ヒト配列を包含すると理解され、任意の特定のクラス、アイソタイプ、又はサブユニット構造の全てのヒト免疫グロブリンにおける各々の位置において最も高い頻度で存在するアミノ酸残基を含む、アミノ酸配列を指す。したがって、共通配列は、１つ以上の公知の免疫グロブリンに存在するアミノ酸を各々の位置において有するアミノ酸配列を含有するが、任意の単一の免疫グロブリンの完全アミノ酸配列を正確に複製していなくてもよい。可変領域の共通配列は、どの天然に生成された抗体又は免疫グロブリン（Kabat et al., 1991, Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md.）及びその変異体からも得られない。重鎖及び軽鎖の共通配列のＦＲ、及びその変異体は、ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体の調製のための有用な配列を提供する。例えば、米国特許第６，０３７，４５４号明細書及び同第６，０５４，２９７号明細書を参照されたい。
【００９３】
ヒト生殖系列配列は、ヒト個体群に天然に見られる。そうした生殖系列遺伝子の組合せは、抗体の多様性を生じる。抗体の軽鎖についての生殖系列抗体配列は、保存されたヒト生殖系列κ又はλｖ−遺伝子及びｊ−遺伝子に由来する。同様に、重鎖配列は、生殖系列ｖ−、ｄ−及びｊ−遺伝子に由来する（LeFranc, M-P, and LeFranc, G, “The Immunoglobulin Facts Book” Academic Press, 2001）。
【００９４】
本明細書において使用する「変異体」、「抗ＩＬ−２３ｐ１９変異体」、「ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９変異体」、又は「変異ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９」は各々、表１に示されているような配列のいずれかに由来する少なくとも１つの軽鎖可変マウスＣＤＲ、又は、表２に示されているようなマウスモノクローナル抗体に由来する１つの重鎖マウスＣＤＲ配列を有する、ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体を指す。変異体としては、一方又は両方の軽鎖又は重鎖の可変ドメインに１つ以上のアミノ酸変化を有する変異体が挙げられ、ただし、アミノ酸変化は、ＩＬ−２３ｐ１９への抗体の結合を実質的に損なわない。本明細書において生成された例示的なヒト化抗体としては、抗体Ａ、抗体Ｂ、抗体Ｃ、及び抗体Ｄとして称されるものが挙げられ、その様々な軽鎖及び重鎖が配列番号１８及び２１、並びに配列番号１９及び２０にそれぞれ示されている。
【００９５】
「単離された」抗体は、その天然環境の成分から同定及び分離及び／又は回収されたものである。抗体の天然環境の混入成分は、抗体の診断用途又は治療用途に干渉する可能性のある材料であり、これは酵素、ホルモン、又は他のタンパク質性若しくは非タンパク質性溶質であり得る。１つの態様では、該抗体は、抗体の重量に対して少なくとも９５％超まで単離されて精製される。
【００９６】
単離された抗体としては、それが産生された組換え細胞内のインサイチュでの抗体が挙げられる。なぜなら、当該抗体の天然の周囲環境のうちの少なくとも１つの構成要素が存在しなくなるからである。しかしながら、通常、単離された抗体は、組換え細胞性材料が除去されるような少なくとも１回の精製工程によって調製される。
【００９７】
「抗体の性能」という用語は、抗体による抗原の認識又は抗体のインビボでの効力に寄与する因子を指す。抗体のアミノ酸配列の変化は、フォールディングなどの抗体の特性に影響を及ぼし得、抗原に抗体が結合する初期速度（ｋａ）、抗原からの抗体の解離定数（ｋｄ）、抗原に対する抗体の親和性定数（Ｋｄ）、抗体のコンフォメーション、タンパク質の安定性、及び抗体の半減期などの、物理的因子に影響を及ぼし得る。
【００９８】
本明細書において使用する「エピトープでタグ化された」という用語は、「エピトープタグ」に融合させた抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体を指す。「エピトープタグ」は、抗体産生のためのエピトープを提供するに十分な数のアミノ酸を有するポリペプチドであるが、それが、ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体の所望の活性に干渉しないように設計されている。エピトープタグは通常、十分に独特であるので、エピトープタグに対して生じた抗体は、実質的に他のエピトープと交差反応しない。適切なタグポリペプチドは一般的に、少なくとも６個のアミノ酸残基を含有し、通常、約８〜５０個のアミノ酸残基、又は約９〜３０個の残基を含有している。エピトープタグ及び該エピトープに結合する抗体の例としては、ｆｌｕ ＨＡタグポリペプチド及びその抗体である１２ＣＡ５（Field et al., 1988 Mol. Cell. Biol. 8: 2159-2165）；ｃ−ｍｙｃタグ及びその８Ｆ９、３Ｃ７、６Ｅ１０、Ｇ４、Ｂ７及び９Ｅ１０抗体（Evan et al., 1985, Mol. Cell. Biol. 5(12):3610-3616）；及び単純ヘルペスウイルス糖タンパク質Ｄ（ｇＤ）タグ及びその抗体（Paborsky et al. 1990, Protein Engineering 3(6): 547-553）が挙げられる。特定の実施態様では、エピトープタグは、「サルベージ受容体に結合するエピトープ」である。本明細書において使用する「サルベージ受容体に結合するエピトープ」という用語は、ＩｇＧ分子のインビボでの血清中半減期を延長させることに関与する、ＩｇＧ分子（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４）のＦｃ領域のエピトープを指す。
【００９９】
診断上並びに治療上のモニタリングのために、本発明の抗体をまた、標識に、すなわち標識のみに又は標識と追加の第二の薬剤（プロドラッグ、化学療法剤など）のいずれかにコンジュゲートさせてもよい。他の第二の薬剤から識別されるような標識は、検出可能な化合物又は組成物である物質を指し、それを、本発明のヒト化抗体に直接又は間接的にコンジュゲートさせ得る。標識はそれ自体検出可能であっても（例えば放射性同位体標識又は蛍光標識）、又は、酵素標識の場合、検出可能な基質化合物又は組成物の化学的変化を触媒してもよい。標識されたヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体を調製し、インビトロ及びインビボでの診断を含む様々な適用に使用することができる。
【０１００】
本発明の様々な態様において、ヒト化抗体の１つ以上のドメインは組換え発現される。このような組換え発現は、１つ以上の制御配列、すなわち、特定の宿主生物における作動可能に連結されたコード配列の発現に必要とされるポリヌクレオチド配列を使用し得る。原核細胞において使用するのに適した制御配列としては、例えば、プロモーター、オペレーター、及びリボソーム結合部位の配列が挙げられる。真核細胞の制御配列としては、プロモーター、ポリアデニル化シグナル、及びエンハンサーが挙げられるがこれらに限定されない。これらの制御配列は、原核宿主細胞及び真核宿主細胞におけるヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体の発現及び産生のために使用され得る。
【０１０１】
核酸配列は、それが別の核酸配列と機能的関係に配置されている場合に「作動可能に連結」されている。例えば、核酸プレ配列又は分泌リーダーは、それがポリペプチドの分泌に関与するプレタンパク質として発現される場合、ポリペプチドをコードする核酸に作動可能に連結されており；プロモーター又はエンハンサーは、それが配列の転写に影響を及ぼす場合、コード配列に作動可能に連結されており；又は、リボソーム結合部位は、それが翻訳を促進するように位置している場合、コード配列に作動可能に連結されている。一般的に、「作動可能に連結される」は、連結されているＤＮＡ配列が連続的であり、分泌リーダーの場合には、連続的かつリーディングフレーム内にあることを意味する。しかしながら、エンハンサーは、場合により近接している。連結は、好都合な制限酵素部位におけるライゲーションによって達成され得る。このような部位が存在しない場合には、合成オリゴヌクレオチドアダプター又はリンカーを使用していてもよい。
【０１０２】
本明細書において使用する「細胞」、「細胞株」及び「細胞培養物」という表現は同義語として使用され、全てのこのような名称はその子孫を含む。したがって、「形質転換体」及び「形質転換細胞」は、初代の対象細胞、及び継代数に関係なくそれから得られた培養物を含む。
【０１０３】
処置の目的のための「哺乳動物」という用語は、ヒト、飼い慣らされた動物及び家畜、並びに動物園用、スポーツ用、又はペット用の動物、例えばイヌ、ウマ、ネコ、ウシなどをはじめとする哺乳動物として分類される任意の動物を指す。好ましくは、哺乳動物はヒトである。
【０１０４】
本明細書において使用する「障害」は、本明細書に記載されたヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体を用いての処置から恩恵を受けるであろう任意の容態である。これは、慢性及び急性の障害又は疾患、例えば、問題となっている障害に哺乳動物を罹りやすくさせる病状を含む。
【０１０５】
本明細書において使用する「ＩＬ−２３に関連した障害」又は「ＩＬ−２３に関連した疾患」という用語は、ＩＬ−２３の活性が疾患の原因となり、典型的にはＩＬ−２３が異常に発現されている、容態を指す。ＩＬ−２３に関連した障害は、免疫系の疾患及び障害、例えば、自己免疫障害及び炎症障害を含む。このような容態としては、乾癬、炎症性腸疾患、例えば潰瘍性大腸炎又はクローン病、及び脊椎関節炎、例えば強直性脊椎炎、Ｘ線所見が認められない軸性脊椎関節炎、末梢性脊椎関節炎、又は乾癬性関節炎が挙げられる。
【０１０６】
「静脈内注入」という用語は、約１５分間を超える時間をかけての、一般的には約３０〜９０分間かけての、動物又はヒト患者の静脈への薬剤の導入を指す。
【０１０７】
「静脈内ボーラス」又は「静脈内プッシュ」という用語は、生体が約１５分間以内、一般的には５分間以内に薬物を受けるような、動物又はヒトの静脈への薬物の投与を指す。
【０１０８】
「皮下投与」という用語は、動物又はヒト患者の皮膚下への、好ましくは皮膚と根底にある組織との間のポケット内への、薬物貯蔵所からの比較的緩徐で持続的な送達による、薬剤の導入を指す。皮膚をつまむか、又は皮膚を引き上げて根底にある組織から引き離すことにより、ポケットが作られ得る。
【０１０９】
「皮下注入」という用語は、３０分以内、又は９０分以内を含むがそれに限定されない時間をかけての、動物又はヒト患者の皮膚下への、好ましくは皮膚と根底にある組織との間のポケット内への、薬物貯蔵所からの比較的緩徐で持続的な送達による、薬物の導入を指す。場合により、注入は、動物又はヒト患者の皮膚下に埋め込まれた薬物送達ポンプの皮下埋め込みによって行なわれ得、ここでポンプは、予め決定された時間かけて、例えば３０分間、９０分間、又は処置レジメンの長さにおよぶ時間をかけて、予め決定された量の薬物を送達する。
【０１１０】
「皮下ボーラス」という用語は、動物又はヒト患者の皮膚下への薬物の投与を指し、ここでボーラス薬物送達は、約１５分以内であり；別の態様では、５分以内であり、更に別の態様では、６０秒以内である。また更なる別の態様では、投与は、皮膚と根底にある組織との間のポケット内であり、ここでポケットは、皮膚をつまむか又は皮膚を引き上げて根底の組織から引き離すことによって作られ得る。
【０１１１】
「治療有効量」という用語は、処置される障害の１つ以上の症状を緩和又は寛解する活性物質の量を指すために使用される。別の態様では、治療有効量は、例えば疾患の進行を緩徐化させることにおいて効果的であることが示されている標的血清濃度を指す。効力は、処置しようとする容態に依存して、慣用的な方法で測定され得る。
【０１１２】
本明細書において使用する「処置」及び「療法」などという用語は、１つ以上の症状の軽減又は緩和、疾患若しくは障害の進行の退行、緩徐化、又は休止を含むがこれらに限定されない、あらゆる臨床的に望ましいか又は有益な効果をもたらす、疾患又は障害についての治療的措置並びに予防的又は抑制的措置を含むことを意味する。したがって、例えば、処置という用語は、疾患又は障害の症状の発症前又は発症後の薬剤の投与を含み、これにより、疾患又は障害の１つ以上の兆候が予防又は除去される。別の例として、この用語は、疾患の臨床徴候後に薬剤を投与することにより、疾患の症状と戦うことを含む。更に、発症後及び臨床症状が発生した後の薬剤の投与は（ここでは、処置により疾患の寛解がもたらされるか否かに関係なく、投与が、疾患又は障害の臨床パラメーター、例えば組織損傷度、又は転移の量若しくは程度に影響を及ぼす）、本明細書において使用する「処置」又は「療法」を含む。更に、単独での又は別の治療剤と組み合わせた本発明の組成物が、ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体組成物を使用しない場合の症状と比較して、処置される障害の少なくとも１つの症状を軽減又は寛解する限り、結果は、障害の全ての症状が軽減されるか否かに関係なく、根底にある障害の効果的な処置であると判断されるべきである。
【０１１３】
「添付文書」という用語は、適応症、使用法、投与法、禁忌、及び／又はこのような治療用製品の使用についての警告に関する情報を含有している、治療用製品の商用パッケージに慣例上含まれる説明書を指すために使用される。
【０１１４】
抗体
本発明の状況において使用された選択された抗体のＣＤＲを表１及び２に示す。本発明の状況において使用された選択された抗体の可変領域を表３及び４に示す。
【０１１５】
【表２】
2017524359.tif 000003
【０１１６】
【表３】
2017524359.tif 000004
【０１１７】
【表４】
2017524359.tif 000005
【０１１８】
【表５】
2017524359.tif 000006
【０１１９】
マウス抗体６Ｂ８から得られたヒト化軽鎖可変領域及び重鎖可変領域の選択された組合せにより、抗体Ａ、Ｂ、Ｃ及びＤが得られた：
抗体Ａ：ＩｇΚ−６６を有する６Ｂ８−ＩｇＧ１ＫＯ−２（重鎖可変領域６Ｂ８ＣＶＨ−０２及び軽鎖可変領域６Ｂ８ＣＶＫ−６６）；
抗体Ｂ；ＩｇΚ−６６を有する６Ｂ８−ＩｇＧ１ＫＯ−５（重鎖可変領域６Ｂ８ＣＶＨ−０５及び軽鎖可変領域６Ｂ８ＣＶＫ−６６）；
抗体Ｃ：ＩｇΚ−６５を有する６Ｂ８−ＩｇＧ１ＫＯ−２（重鎖可変領域６Ｂ８ＣＶＨ−０２及び軽鎖可変領域６Ｂ８ＣＶＫ−６５）；
抗体Ｄ：ＩｇΚ−６５を有する６Ｂ８−ＩｇＧ１ＫＯ−５（重鎖可変領域６Ｂ８ＣＶＨ−０５及び軽鎖可変領域６Ｂ８ＣＶＫ−６５）。
【０１２０】
抗体Ａ、Ｂ、Ｃ及びＤは、表５に示される重鎖及び軽鎖の配列を有する。
【０１２１】
【表６】
2017524359.tif 000007
2017524359.tif 000008
【０１２２】
上記の表５における抗体Ａ、Ｂ、Ｃ及びＤの軽鎖及び重鎖の可変領域に下線が付されている。
【０１２３】
１つの態様では、本発明のヒト化抗体は、抗体Ａ、抗体Ｂ、抗体Ｃ、又は抗体Ｄである。したがって、１つの実施態様では、本発明のヒト化抗体は、配列番号１８の軽鎖配列及び配列番号１９の重鎖配列を含む（抗体Ａ）。別の実施態様では、本発明のヒト化抗体は配列番号１８の軽鎖配列及び配列番号２０の重鎖配列を含む（抗体Ｂ）。別の実施態様では、本発明のヒト化抗体は配列番号２１の軽鎖配列及び配列番号１９の重鎖配列を含む（抗体Ｃ）。別の実施態様では、本発明のヒト化抗体は配列番号２１の軽鎖配列及び配列番号２０の重鎖配列を含む（抗体Ｄ）。
【０１２４】
更なる実施態様では、本発明のヒト化抗体は、配列番号１８の軽鎖配列及び配列番号１９の重鎖配列からなる（抗体Ａ）。更なる実施態様では、本発明のヒト化抗体は、配列番号１８の軽鎖配列及び配列番号２０の重鎖配列からなる（抗体Ｂ）。更なる実施態様では、本発明のヒト化抗体は、配列番号２１の軽鎖配列及び配列番号１９の重鎖配列からなる（抗体Ｃ）。更なる実施態様では、本発明のヒト化抗体は、配列番号２１の軽鎖配列及び配列番号２０の重鎖配列からなる（抗体Ｄ）。
【０１２５】
いくつかの実施態様では、ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体（その抗原結合フラグメント、例えば重鎖及び軽鎖の可変領域を含む）は、抗体Ａ（軽鎖配列＝配列番号１８；重鎖配列＝配列番号１９）、抗体Ｂ（軽鎖配列＝配列番号１８；重鎖配列＝２０）、抗体Ｃ（軽鎖配列＝配列番号２１；重鎖配列＝配列番号１９）、又は抗体Ｄ（軽鎖配列＝配列番号２１；重鎖配列＝配列番号２０）に由来する残基のアミノ酸配列を含む。
【０１２６】
更なる実施態様では、本発明は、配列番号２２のアミノ酸残基１０８〜１２６及びアミノ酸残基１３７〜１５１からなる、エピトープにおいてヒトＩＬ−２３ｐ１９に結合する、抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体又はその抗原結合フラグメントを提供する。
【０１２７】
更なる実施態様では、本発明は、本発明の抗体、例えば本明細書に記載された抗体Ａ、抗体Ｂ、抗体Ｃ、又は抗体Ｄと競合的に、ヒトＩＬ−２３ｐ１９に結合する、抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体又はその抗原結合フラグメントを提供する。ＩＬ−２３ｐ１９に対する抗体又は抗原結合フラグメントの競合的結合能は、当技術分野において公知である競合的結合アッセイを使用して測定することができる。
【０１２８】
いくつかの実施態様では、本発明は、配列番号１０、１１、１２又は１３に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域配列を有する他のヒト化抗体を記載する。いくつかの実施態様では、本発明は、配列番号１４、１５、１６又は１７に示されるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域配列を有する他のヒト化抗体を記載する（上記の表３及び４参照）。これらの抗体のＣＤＲ配列を表１及び２に示す。特に、本発明は、配列番号１１／１４、１１／１５、１０／１４又は１０／１５の軽鎖可変領域と重鎖可変領域の組合せを有するモノクローナル抗体を提供する。このような可変領域を、ヒト定常領域と組み合わせてもよい。
【０１２９】
特定の実施態様では、ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体は、抗体フラグメントである。様々な抗体フラグメントが上記に一般的に考察され、抗体フラグメントの生成のために開発された技術がある。フラグメントは、インタクトな抗体のタンパク質分解による消化を介して得ることができる（例えば、Morimoto et al., 1992, Journal of Biochemical and Biophysical Methods 24:107-117; and Brennan et al., 1985, Science 229:81参照）。或いは、フラグメントは、組換え宿主細胞において直接産生されてもよい。例えば、Ｆａｂ’−ＳＨフラグメントはＥ．ｃｏｌｉから直接回収され得、これを化学的に結合させてＦ（ａｂ’）２フラグメントを形成することができる（例えば、Carter et al., 1992, Bio/Technology 10:163-167参照）。別のアプローチによると、Ｆ（ａｂ’）２フラグメントは組換え宿主細胞培養物から直接単離され得る。抗体フラグメントの生成のための他の技術は、熟練者にとっては明らかであろう。したがって、１つの態様では、本発明は、本明細書に記載のＣＤＲ、特に本明細書に記載のＬ−ＣＤＲ１、Ｌ−ＣＤＲ２、Ｌ−ＣＤＲ３、Ｈ−ＣＤＲ１、Ｈ−ＣＤＲ２、及びＨ−ＣＤＲ３の組合せの１つを含む、抗体フラグメントを提供する。更なる態様では、本発明は、本明細書に記載の可変領域、例えば本明細書に記載の軽鎖可変領域と重鎖可変領域の組合せの１つを含む、抗体フラグメントを提供する。
【０１３０】
特定の実施態様は、配列番号１９又は２０の重鎖配列と組み合わせて配列番号１８又は２１のいずれかの軽鎖配列を含む、ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体のＦ（ａｂ’）２フラグメントを含む。このような実施態様は、このようなＦ（ａｂ’）２を含むインタクトな抗体を含み得る。
【０１３１】
いくつかの実施態様では、抗体又は抗体フラグメントは、エフェクター機能を媒介する定常領域を含む。定常領域は、ＩＬ−２３を発現している標的細胞に対する、抗体依存性細胞傷害応答（ＡＤＣＣ）、抗体依存性細胞貪食応答（ＡＤＣＰ）、及び／又は補体依存性細胞傷害応答（ＣＤＣ）を提供することができる。エフェクタードメイン（単数又は複数）は、例えば、Ｉｇ分子のＦｃ領域であり得る。
【０１３２】
抗体のエフェクタードメインは、任意の適切な脊椎動物の動物種及びアイソタイプに由来し得る。異なる動物種に由来するアイソタイプは、エフェクター機能を媒介する能力が異なる。例えば、ヒト免疫グロブリンがＣＤＣ及びＡＤＣＣ／ＡＤＣＰを媒介する能力は一般的に、それぞれ、ＩｇＭ≒ＩｇＧ１≒ＩｇＧ３＞ＩｇＧ２＞ＩｇＧ４及びＩｇＧ１≒ＩｇＧ３＞ＩｇＧ２／ＩｇＭ／ＩｇＧ４の順である。マウス免疫グロブリンはＣＤＣ及びＡＤＣＣ／ＡＤＣＰを一般的にそれぞれ、マウスＩｇＭ≒ＩｇＧ３＞＞ＩｇＧ２ｂ＞ＩｇＧ２ａ＞＞ＩｇＧ１及びＩｇＧ２ｂ＞ＩｇＧ２ａ＞ＩｇＧ１＞＞ＩｇＧ３の順で媒介する。別の例では、マウスＩｇＧ２ａはＡＤＣＣを媒介するが、マウスＩｇＧ２ａ及びＩｇＭはどちらもＣＤＣを媒介する。
【０１３３】
ポリヌクレオチド、ベクター、宿主細胞、及び組換え法
他の実施態様は、ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体をコードする配列を含む単離されたポリヌクレオチド、ベクター、及び該ポリヌクレオチドを含む宿主細胞、並びに、ヒト化抗体の産生のための組換え技術を包含する。単離されたポリヌクレオチドは、例えば、完全長のモノクローナル抗体、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、及びＦｖフラグメント、ディアボディ、鎖状抗体、一本鎖抗体分子、並びに抗体フラグメントから形成された多重特異的抗体をはじめとする、任意の所望の形態の抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体をコードすることができる。
【０１３４】
ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体又はそのフラグメント若しくは鎖をコードする配列を含むポリヌクレオチド（単数又は複数）を、当技術分野において公知であるような１つ以上の調節配列又は制御配列に融合させることができ、またこれを当技術分野において公知であるような適切な発現ベクター又は宿主細胞に含有させることができる。重鎖可変ドメイン又は軽鎖可変ドメインをコードする各ポリヌクレオチド分子を、独立して、ヒト定常ドメインなどの定常ドメインをコードするポリヌクレオチド配列に融合させることができ、これによりインタクトな抗体の生成が可能となる。或いは、ポリヌクレオチド又はその一部を互いに融合させることができ、これにより、一本鎖抗体の生成のための鋳型がもたらされる。
【０１３５】
組換え産生のために、抗体をコードするポリヌクレオチドを、クローニング用（ＤＮＡの増幅）又は発現用の複製可能なベクターに挿入する。組換え抗体を発現させるための多くの適切なベクターが入手可能である。ベクター成分は一般的に、以下の１つ以上を含むがこれらに限定されない：シグナル配列、複製起点、１つ以上のマーカー遺伝子、エンハンサー配列、プロモーター、及び転写終結配列。
【０１３６】
ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体はまた融合ポリペプチドとして生成されてもよく、ここでは該抗体は、シグナル配列などの異種ポリペプチド、又は成熟タンパク質若しくはポリペプチドのアミノ末端に特異的な切断部位を有する他のポリペプチドと融合している。選択された異種シグナル配列は典型的には、宿主細胞によって認識されプロセシング（すなわちシグナルペプチダーゼによって切断）されるものである。ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体シグナル配列を認識しプロセシングしない原核宿主細胞では、シグナル配列を、原核生物のシグナル配列によって置換してもよい。シグナル配列は、例えば、アルカリホスファターゼ、ペニシリナーゼ、リポタンパク質、熱安定性エンテロトキシンＩＩリーダーなどであり得る。酵母での分泌のために、天然シグナル配列を、例えば、酵母インベルターゼα因子（サッカロマイセス（Saccharomyces）及びクルイベロマイセス（Kluyveromyces）α因子リーダーを含む）、酸性ホスファターゼ、Ｃ．アルビカンス（C. albicans）・グルコアミラーゼ、又は国際公開第９０／１３６４６号に記載のシグナルから得られたリーダー配列で置換してもよい。哺乳動物細胞では、哺乳動物シグナル配列、並びにウイルス分泌リーダー、例えば単純ヘルペスｇＤシグナルを使用してもよい。このような前駆領域についてのＤＮＡを、ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体をコードするＤＮＡにリーディングフレーム内でライゲートする。
【０１３７】
発現ベクター及びクローニングベクターは、１つ以上の選択された宿主細胞においてベクターが複製することを可能とする核酸配列を含有している。一般的には、クローニングベクター内におけるこの配列は、ベクターが宿主染色体ＤＮＡとは独立して複製することを可能とするものであり、これは複製起点又は自律複製配列を含む。様々な細菌、酵母、及びウイルスについてのこのような配列は周知である。プラスミドｐＢＲ３２２由来の複製起点は大半のグラム陰性細菌にとって適切であり、２−υプラスミド起点は酵母に適切であり、様々なウイルス起点（ＳＶ４０、ポリオーマ、アデノウイルス、ＶＳＶ、及びＢＰＶ）は哺乳動物細胞におけるクローニングベクターにとって有用である。一般的に、複製起点の成分は、哺乳動物発現ベクターには必要とされない（ＳＶ４０起点が典型的には使用され得る。なぜなら、それは初期プロモーターを含有しているからである）。
【０１３８】
発現ベクター及びクローニングベクターは、発現の同定を容易にする選択マーカーをコードする遺伝子を含有していてもよい。典型的な選択マーカー遺伝子は、抗生物質又は他の毒素に対する耐性を付与するタンパク質、例えばアンピシリン、ネオマイシン、メトトレキサート、又はテトラサイクリンをコードするか、或いは、栄養要求性の欠失を補完する物(complement auxotrophic deficiencies)であるか、又は他の代替選択肢では、複合培地に存在しない特定の栄養分を供給し、例えば桿菌のためのＤ−アラニンラセミ化酵素をコードする遺伝子である。
【０１３９】
選択スキームの一例は、宿主細胞の増殖を停止する薬物を利用する。異種遺伝子を用いてうまく形質転換された細胞は、薬物耐性を付与するタンパク質を産生し、よって選択計画を生き延びる。このような優性選択の例は、薬物のネオマイシン、ミコフェノール酸、及びハイグロマイシンを使用する。哺乳動物細胞のための一般的な選択マーカーは、ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体をコードする核酸を取り入れる能力のある細胞の同定を可能とするもの、例えばＤＨＦＲ（ジヒドロ葉酸レダクターゼ）、チミジンキナーゼ、メタロチオネイン−Ｉ及び−ＩＩ（例えば霊長類のメタロチオネイン遺伝子）、アデノシンデアミナーゼ、オルニチンデカルボキシラーゼなどである。ＤＨＦＲ選択遺伝子を用いて形質転換された細胞をまず、ＤＨＦＲの競合的アンタゴニストであるメトトレキサート（Ｍｔｘ）を含有する培養培地中で全ての形質転換体を培養することによって同定する。野生型ＤＨＦＲを使用する場合の適切な宿主細胞は、ＤＨＦＲ活性の欠損したチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞株（例えばＤＧ４４）である。
【０１４０】
或いは、抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体、野生型ＤＨＦＲタンパク質、及び別の選択マーカー、例えばアミノグリコシド３’−ホスホトランスフェラーゼ（ＡＰＨ）をコードするＤＮＡ配列を用いて形質転換された又は同時形質転換された宿主細胞（特に、内因性ＤＨＦＲを含有する野生型宿主）を、選択マーカーのための選択物質、例えばアミノグリコシド抗生物質、例えばカナマイシン、ネオマイシン、又はＧ４１８を含有している培地中での細胞増殖によって選択することができる。例えば、米国特許第４，９６５，１９９号明細書を参照されたい。
【０１４１】
組換え産生を、宿主細胞としての酵母細胞において行なう場合、酵母プラスミドＹＲｐ７に存在するＴＲＰ１遺伝子（Stinchcomb et al., 1979, Nature 282: 39）を、選択マーカーとして使用することができる。ＴＲＰ１遺伝子は、トリプトファン中で増殖する能力を欠失している酵母の突然変異株、例えばＡＴＣＣ番号４４０７６又はＰＥＰ４−１のための選択マーカーを提供する（Jones, 1977, Genetics 85:12）。よって、酵母宿主細胞ゲノム内のｔｒｐ１損傷の存在は、トリプトファンの非存在下での増殖によって、形質転換を検出するために有効な環境を提供する。同様に、Ｌｅｕ２ｐ欠損酵母株、例えばＡＴＣＣ２０，６２２及び３８，６２６は、ＬＥＵ２遺伝子を有する公知のプラスミドによって補完される。
【０１４２】
更に、１．６μmの環状プラスミドｐＫＤ１に由来するベクターを、クルイベロマイセス（Kluyveromyces）酵母の形質転換のために使用することができる。或いは、組換え仔ウシキモシンの大規模産生のための発現系がＫ．ラクティス（K. lactis）において報告された（Van den Berg, 1990, Bio/Technology 8:135）。クリベロマイセスの工業生産株による成熟組換えヒト血清アルブミンの分泌のための安定な多コピー発現ベクターも開示されている（Fleer et al., 1991, Bio/Technology 9:968-975）。
【０１４３】
発現ベクター及びクローニングベクターは通常、宿主生物によって認識されかつ抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体又はそのポリペプチド鎖をコードする核酸分子に作動可能に連結されている、プロモーターを含有している。原核生物宿主と共に使用するのに適したプロモーターとしては、ｐｈｏＡプロモーター、β−ラクタマーゼ及びラクトースプロモーター系、アルカリホスファターゼ、トリプトファン（ｔｒｐ）プロモーター系、及びハイブリッドプロモーター、例えばｔａｃプロモーターが挙げられる。他の公知の細菌プロモーターも適している。細菌系に使用するためのプロモーターはまた、ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体をコードするＤＮＡに作動可能に連結されたシャイン・ダルガーノ（Ｓ．Ｄ．）配列も含有している。
【０１４４】
多くの真核生物プロモーター配列が公知である。実質的に全ての真核生物遺伝子が、転写が開始される部位から約２５〜３０塩基上流に位置するＡＴリッチ領域を有する。多くの遺伝子の転写開始から７０〜８０塩基上流に見られる別の配列はＣＮＣＡＡＴ領域であり、そこではＮはどのようなヌクレオチドでもよい。大半の真核生物遺伝子の３’末端には、コード配列の３’末端へのポリＡテイルの付加のためのシグナルである可能性があるＡＡＴＡＡＡ配列がある。これらの全ての配列は、真核生物発現ベクターに適切に挿入される。
【０１４５】
酵母宿主と共に使用するのに適したプロモーター配列の例としては、３−ホスホグリセリン酸キナーゼ又は他の解糖酵素、例えばエノラーゼ、グリセルアルデヒド−３−リン酸デヒドロゲナーゼ、ヘキソキナーゼ、ピルビン酸デカルボキシラーゼ、ホスホフルクトキナーゼ、グルコース−６−リン酸イソメラーゼ、３−ホスホグリセリン酸ムターゼ、ピルビン酸キナーゼ、トリオースリン酸イソメラーゼ、ホスホグルコースイソメラーゼ、及びグルコキナーゼのプロモーターが挙げられる。
【０１４６】
誘導性プロモーターは、増殖条件によって制御される転写という更なる利点を有する。これらは、アルコールデヒドロゲナーゼ２、イソシトクロムＣ、酸性ホスファターゼ、窒素代謝に関連した誘導酵素、メタロチオネイン、グリセルアルデヒド−３−リン酸デヒドロゲナーゼ、及びマルトース及びガラクトースの利用に関与する酵素についての酵母プロモーター領域を含む。酵母における発現に使用するのに適したベクター及びプロモーターは更に、欧州特許第７３，６５７号明細書に記載されている。酵母エンハンサーはまた、有利には酵母プロモーターと共に使用される。
【０１４７】
哺乳動物宿主細胞内のベクターからのヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体の転写は、例えば、ポリオーマウイルス、鶏痘ウイルス、アデノウイルス（例えばアデノウイルス２型）、ウシパピローマウイルス、トリ肉腫ウイルス、サイトメガロウイルス、レトロウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、及びサルウイルス４０（ＳＶ４０）などのウイルスのゲノムから得られたプロモーターによって、異種哺乳動物プロモーター、例えばアクチンプロモーター又は免疫グロブリンプロモーターから、又は熱ショックプロモーターから制御される。ただし、このようなプロモーターは宿主細胞系と適合性がある。
【０１４８】
ＳＶ４０ウイルスの初期及び後期プロモーターは簡便には、ＳＶ４０ウイルス複製起点も含有するＳＶ４０制限酵素フラグメントとして得られる。ヒトサイトメガロウイルスの最初期プロモーターは簡便には、ＨｉｎｄＩＩＩ Ｅ制限酵素フラグメントとして得られる。ベクターとしてウシパピローマウイルスを使用して哺乳動物宿主においてＤＮＡを発現させるための系は、米国特許第４，４１９，４４６号明細書に開示されている。この系の改変が、米国特許第４，６０１，９７８号明細書に記載されている。また、単純ヘルペスウイルス由来のチミジンキナーゼプロモーターの制御下にあるマウス細胞内のヒトｐ−インターフェロンｃＤＮＡの発現を開示している、Reyes et al., 1982, Nature 297:598-601も参照されたい。或いは、ラウス肉腫ウイルスの長い末端反復配列をプロモーターとして使用してもよい。
【０１４９】
組換え発現ベクターに使用され得る別の有用な配列は、高等な真核生物によるヒト化ＩＬ−２３ｐ１９抗体をコードするＤＮＡの転写を増加させるために使用される、エンハンサー配列である。哺乳動物遺伝子（例えばグロビン、エラスターゼ、アルブミン、α−フェトプロテイン、及びインスリン）に由来する多くのエンハンサー配列が現在公知である。しかしながら、典型的には、真核細胞ウイルスに由来するエンハンサーが使用される。例としては、複製起点の下流側にあるＳＶ４０エンハンサー（ｂｐ１００〜２７０）、サイトメガロウイルス初期プロモーターエンハンサー、複製起点の下流側にあるポリオーマエンハンサー、及びアデノウイルスエンハンサーが挙げられる。また、真核生物プロモーターの活性化のためのエンハンサー配列の記載についてYaniv, 1982, Nature 297:17-18を参照されたい。エンハンサーは、ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体をコードする配列の５’位又は３’位でベクターにスプライシングされ得るが、好ましくはプロモーターに対して５’の部位に位置する。
【０１５０】
真核宿主細胞（酵母、真菌、昆虫、植物、動物、ヒト、又は他の多細胞生物由来の有核細胞）に使用される発現ベクターはまた、転写終結のために必要とされる及びｍＲＮＡの安定化のために必要とされる配列も含有していてもよい。このような配列は、一般的に、真核生物又はウイルスのＤＮＡ又はｃＤＮＡの５’及び場合により３’非翻訳領域から入手できる。これらの領域は、抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体をコードするｍＲＮＡの非翻訳部分内にポリアデニル化フラグメントとして転写されるヌクレオチドセグメントを含有している。１つの有用な転写終結成分は、ウシ成長ホルモンポリアデニル化領域である。国際公開第９４／１１０２６号及びそこに開示されている発現ベクターを参照されたい。いくつかの実施態様では、ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体は、ＣＨＥＦ系を使用して発現させ得る（例えば、米国特許第５，８８８，８０９号明細書を参照されたい；その開示は参照により本明細書に援用される）。
【０１５１】
本明細書においてベクター内のＤＮＡをクローニング又は発現させるのに適した宿主細胞は、上記の原核細胞、酵母細胞、又はより高等な真核細胞である。この目的のために適した原核細胞としては、真正細菌、例えばグラム陰性菌又はグラム陽性菌、例えば腸内細菌科、例えば大腸菌類、例えば大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）、エンテロバクター菌、エルウィニア菌、クレブシエラ菌、プロテウス菌、サルモネラ菌、例えばサルモネラ・チフィリウム（Salmonella typhimurium）、セラチア菌、例えばセラチア・マルセセンス（Serratia marcescans）、及び赤痢菌、並びに、桿菌、例えば枯草菌及びバチルス・リケニフォルミス（B. licheniformis）（例えば１９８９年４月１２日に公開された旧東ドイツ国経済特許第２６６，７１０号明細書に開示されたＢ．リケニフォルミス４１Ｐ）、シュードモナス菌、例えば緑膿菌、及びストレプトマイセス菌が挙げられる。１つの好ましいＥ．ｃｏｌｉクローニング宿主はＥ．ｃｏｌｉ２９４（ＡＴＣＣ ３１，４４６）であるが、Ｅ．ｃｏｌｉ Ｂ、Ｅ．ｃｏｌｉ Ｘ１７７６（ＡＴＣＣ ３１，５３７）及びＥ．ｃｏｌｉ Ｗ３１１０（ＡＴＣＣ ２７，３２５）などの他の株も適している。これらの例は、制限するものではなくむしろ例である。
【０１５２】
原核生物の他に、糸状菌又は酵母などの真核微生物も、ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体をコードするベクターに適したクローニング用宿主又は発現用宿主である。サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cerevisiae）又は一般的なパン酵母が、より下等な真核宿主微生物の中で最も一般的に使用されている。しかしながら、多くの他の属、種、及び株が一般的に入手可能であり、かつ本明細書において有用であり、例えば分裂酵母（Schizosaccharomyces pombe）；クリベロマイセス（Kluyveromyces）宿主、例えばＫ．ラクティス（K. lactis）、Ｋ．フラジリス（K. fragilis）（ＡＴＣＣ １２，４２４）、Ｋ．ブルガリクス（K. bulgaricus）（ＡＴＣＣ １６，０４５）、Ｋ．ウィッカーラミ（K. wickeramii）（ＡＴＣＣ ２４，１７８）、Ｋ．ワルティイ（K. waltii）（ＡＴＣＣ ５６，５００）、Ｋ．ドロソフィラルム（K. drosophilarum）（ＡＴＣＣ ３６，９０６）、Ｋ．サーモトレランス（K. thermotolerans）、及びＫ．マルキシアヌス（K. marxianus）；ヤロウィア属（yarrowia）（欧州特許第４０２，２２６号明細書）；ピキア・パストリス（Pichia pastors）（欧州特許第１８３，０７０号明細書）；カンジダ；トリコデルマ・レーシア（Trichoderma reesia）（欧州特許第２４４，２３４号明細書）；アカパンカビ（Neurospora crassa）；シュワンニオマイセス（Schwanniomyces）、例えばシュワンニオマイセス・オシデンタリス（Schwanniomyces occidentalis）；及び糸状菌、例えばニュースポラ（Neurospora）、アオカビ類（Penicillium）、トリポクラディウム（Tolypocladium）、及びアスペルギルス（Aspergillus）宿主、例えばＡ．ニデュランス（A. nidulans）及びクロコウジカビ（A. niger）である。
【０１５３】
グリコシル化ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体の発現に適した宿主細胞は、多細胞生物から得られる。無脊椎動物細胞の例としては、植物細胞及び昆虫細胞、例えば数多くのバキュロウイルス株及び変異株、並びにヨトウガ（Spodoptera frugiperda）（イモムシ）、ネッタイシマカ（Aedes aegypti）（蚊）、ヒトスジシマカ（Aedes albopictus）（蚊）、キイロショウジョウバエ（ショウジョウバエ）、及びボムビークス・モリー（Bombyx mori）（カイコ）などの宿主からの対応する許容される昆虫宿主細胞が挙げられる。例えばアウトグラファ・カリフォルニカ（Autographa californica）ＮＰＶのＬ−１変異体及びボムビークス・モリー（Bombyx mori）ＮＰＶのＢｍ−５株などの、トランスフェクション用の様々なウイルス株が公共的に入手可能であり、このようなウイルスを、特にヨトウガ細胞のトランスフェクションのために使用し得る。
【０１５４】
綿、コーン、ジャガイモ、大豆、ペチュニア、トマト、及びタバコの植物細胞培養物もまた宿主として使用することができる。
【０１５５】
別の態様では、ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９の発現は、脊椎動物細胞内で行なわれる。培養液（組織培養液）中の脊椎動物細胞の増殖は慣用的な手順となっており、技術は広く利用可能である。有用な哺乳動物宿主細胞株の例は、ＳＶ４０によって形質転換されたサル腎臓ＣＶ１株（ＣＯＳ−７、ＡＴＣＣ ＣＲＬ １６５１）、ヒト胚腎臓株（懸濁培養液中での増殖のためにサブクローニングされた２９３又は２９３細胞）、（Graham et al., 1977, J. Gen Virol. 36: 59）、ベビーハムスター腎臓細胞（ＢＨＫ、ＡＴＣＣ ＣＣＬ１０）、チャイニーズハムスター卵巣細胞／−ＤＨＦＲ１（ＣＨＯ、Urlaub et al., 1980, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77: 4216；例えばＤＧ４４）、マウスセルトリ細胞（ＴＭ４、Mather, 1980, Biol. Reprod. 23:243-251）、サル腎臓細胞（ＣＶ１ ＡＴＣＣ ＣＣＬ ７０）、アフリカミドリザル腎臓細胞（ＶＥＲＯ−７６、ＡＴＣＣ ＣＲＬ−１５８７）、ヒト子宮頸癌細胞（ＨＥＬＡ、ＡＴＣＣ ＣＣＬ ２）、イヌ腎臓細胞（ＭＤＣＫ、ＡＴＣＣ ＣＣＬ ３４）、バッファローラット肝臓細胞（ＢＲＬ ３Ａ、ＡＴＣＣ ＣＲＬ １４４２)、ヒト肺細胞（Ｗ１３８、ＡＴＣＣ ＣＣＬ ７５）、ヒト肝臓細胞（ＨｅｐＧ２、ＨＢ８０６５）、マウス乳腺腫瘍（ＭＭＴ ０６０５６２、ＡＴＣＣ ＣＣＬ ５１）、ＴＲ１細胞（Mather et al., 1982, Annals N.Y. Acad. Sci. 383: 44-68）、ＭＲＣ５細胞、ＦＳ４細胞、及びヒト肝細胞腫株（ＨｅｐＧ２）である。
【０１５６】
宿主細胞を、ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体産生のための上記の発現ベクター又はクローニングベクターを用いて形質転換し、そして、プロモーターを誘導するために、形質転換体を選択するために、又は所望の配列をコードする遺伝子を増幅させるために適宜改変された慣用的な栄養培地中で培養する。
【０１５７】
本明細書に記載のヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体を産生するために使用された宿主細胞は、様々な培地中で培養され得る。市販の培地、例えばＨａｍ Ｆ１０（Sigma-Aldrich Co.、セントルイス、ミズーリ州）、最小必須培地（（ＭＥＭ）、（Sigma-Aldrich Co.）、ＲＰＭＩ−１６４０（Sigma-Aldrich Co.）、及びダルベッコ改変イーグル培地（（ＤＭＥＭ）、Sigma-Aldrich Co.）が、宿主細胞を培養するのに適している。更に、Ham et al., 1979, Meth. Enz. 58: 44, Barnes et al., 1980, Anal. Biochem. 102: 255、米国特許第４，７６７，７０４号明細書、米国特許第４，６５７，８６６号明細書、米国特許第４，９２７，７６２号明細書、米国特許第４，５６０，６５５号明細書、米国特許第５，１２２，４６９号明細書、国際公開第９０／１０３４３０号、及び国際公開第８７／００１９５号の１つ以上に記載された培地のいずれかを、宿主細胞のための培養培地として使用し得る。これらの培地のいずれかに、必要であれば、ホルモン及び／又は他の成長因子（例えばインスリン、トランスフェリン、又は上皮成長因子）、塩（例えば塩化ナトリウム、カルシウム、マグネシウム、及びリン酸塩）、緩衝液（例えばＨＥＰＥＳ）、ヌクレオチド（例えばアデノシン及びチミジン）、抗生物質（例えばゲンタマイシン）、微量元素（マイクロモルの範囲の最終濃度で通常存在する無機化合物として定義される）、及びブドウ糖又は等価なエネルギー源を補充し得る。他の補助物質も、当業者には公知であろう適切な濃度で含まれていてもよい。培養条件、例えば温度、ｐＨなどは、発現のために選択された宿主細胞と共に以前に使用されたものであり、当業者には明らかであろう。
【０１５８】
組換え技術を使用する場合、抗体は、細胞内の細胞膜周辺腔で産生されても、又は培地中に直接分泌されてもよい。抗体が細胞内で産生される場合、第一工程として細胞を破壊してタンパク質を放出させ得る。宿主細胞又は溶解したフラグメントのいずれかの粒子状破片物を、例えば、遠心分離又は限外ろ過によって除去することができる。Carter et al., 1992, Bio/Technology 10:163-167は、Ｅ．ｃｏｌｉの細胞膜周辺腔に分泌された抗体を単離するための手順を記載している。
【０１５９】
簡潔に言えば、細胞ペーストを、酢酸ナトリウム（ｐＨ３．５）、ＥＤＴＡ、及びフェニルメチルスルホニルフルオライド（ＰＭＳＦ）の存在下で約３０分間かけて解凍する。細胞破片物を、遠心分離によって除去することができる。抗体が培地に分泌される場合、このような発現系からの上清を、一般的にまず、市販のタンパク質濃縮フィルター、例えばアミコン又はミリポアペリコン限外ろ過装置を使用して濃縮する。ＰＭＳＦなどのプロテアーゼ阻害剤を、上記工程のいずれかに含めることにより、タンパク質の分解を抑制することができ、そして抗生物質を含めることにより外来性の混入物の増殖を防ぐことができる。様々な方法を使用して、宿主細胞から抗体を単離することができる。
【０１６０】
細胞から調製された抗体組成物を、例えば、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、及びアフィニティクロマトグラフィーを使用して精製することができ、アフィニティクロマトグラフィーが典型的な精製技術である。アフィニティリガンドとしてのプロテインＡの適切性は、抗体に存在するあらゆる免疫グロブリンＦｃドメインの種及びアイソタイプに依存する。プロテインＡを使用して、ヒトγ１、γ２、又はγ４重鎖に基づいた抗体を精製することができる（例えば、Lindmark et al., 1983 J. Immunol. Meth. 62:1-13参照）。プロテインＧは、全てのマウスアイソタイプ及びヒトγ３に推奨される（例えば、Guss et al., 1986 EMBO J. 5:1567-1575参照）。アフィニティリガンドが付着するマトリックスは、アガロースであることが最も多いが、他のマトリックスも利用可能である。力学的に安定なマトリックス、例えば制御された細孔ガラス又はポリ（スチレンジビニル）ベンゼンは、アガロースを用いて達成され得るより迅速な流速及びより短い処理時間を可能とする。抗体がＣＨ３ドメインを含む場合、Bakerbond ABX（商標）樹脂（J. T. Baker、フィリップスバーグ、ニュージャージー州）が精製のために有用である。タンパク質精製のための他の技術、例えばイオン交換カラム上での分画、エタノールによる沈降、逆相ＨＰＬＣ、シリカクロマトグラフィー、陰イオン又は陽イオン交換樹脂上でのヘパリンセファロース（商標）クロマトグラフィー（例えばポリアスパラギン酸カラム）、クロマトフォーカッシング、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、及び硫酸アンモニウム沈降法もまた、回収しようとする抗体に依存して利用可能である。
【０１６１】
任意の予備精製工程（単数又は複数）の後に、関心対象の抗体と混入物とを含む混合物を、典型的には低塩濃度（例えば約０〜０．２５Ｍの塩）で行なわれる、ｐＨ約２．５〜４．５の溶出緩衝液を使用した、低いｐＨでの疎水性相互作用クロマトグラフィーにかけ得る。
【０１６２】
バイオマーカーを使用したキット
本明細書に開示されている１つ以上のバイオマーカー（例えばβ−デフェンシン２、好中球ゼラチナーゼリポカリン、及びＳ−１００タンパク質）を、例えば、患者の処置前又は処置の開始後早期のいずれかにおける抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体に対する応答を予測するために、分析法、例えばアッセイキット、テストスティック、又は別の診断装置に展開させることができる。１つの態様では、このような分析法は、診断アッセイを実施するための説明書と共に、分析装置を含む又は含まない、包装された予め決定された量の試薬の組合せを含む。特定の抗体が酵素又は色素又は放射性同位体で標識されている場合、該キットは、検出可能な発色団又はフルオロフォアを与える基質前駆体などの、酵素によって必要とされる基質及び補因子を含み得る。更に、他の添加剤、例えば安定化剤、緩衝液（例えば遮断緩衝液又は溶解緩衝液）などが含まれていてもよい。アッセイの感度を実質的に最適化する試薬の溶液中濃度を与えるために、様々な試薬の相対量を幅広く変化させ得る。試薬は、溶解時に適切な濃度を有する試薬溶液を与えるであろう賦形剤を含む、通常、凍結乾燥させた乾燥粉末として、又は溶液として提供され得る。
【０１６３】
治療用途
別の実施態様では、本明細書において開示されたヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体は、本明細書に記載されているようなＩＬ−２３ｐ１９の発現に関連した様々な障害の処置に有用である。ＩＬ−２３に関連した障害を処置するための方法は、治療有効量のヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体をそれを必要とする被験者に投与することを含む。
【０１６４】
ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体又は薬剤は、非経口、皮下、腹腔内、肺内、及び鼻腔内、並びに局所的な免疫抑制処置を所望の場合には病巣内投与（灌流するか、又はさもなくば移植前に移植片を抗体と接触させることを含む）をはじめとする任意の適切な手段によって投与される。ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体又は薬剤は、例えば、注入として又はボーラスとして投与され得る。非経口注入は、筋肉内、静脈内、動脈内、腹腔内、又は皮下投与を含む。更に、ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体は適切には、特に漸減している投与量の抗体を用いてのパルス注入によって投与される。１つの態様では、投薬は、一部には投与が短時間であるか又は慢性であるかに依存して、注射によって、最も好ましくは静脈内又は皮下注射によって行なわれる。
【０１６５】
疾患の予防又は治療のために、抗体の適切な投与量は、上記に定義されているような処置しようとする疾患の種類、疾患の重度及び経緯、該抗体が予防目的で投与されるか又は治療目的で投与されるか、以前の療法、患者の臨床履歴、並びに該抗体に対する応答、並びに担当医師の慎重さなどの様々な要因に依存する。該抗体は、一度に又は一連の処置に亘り患者に適切に投与される。
【０１６６】
疾患の種類及び重度に依存して、約１μg/kg〜２０mg/kg（例えば、０．１〜１５mg/kg）の抗体が、例えば、１回以上の別々の投与によるか又は連続的な注入によるものであれ、患者への投与のための候補初回投与量である。典型的な１日投与量は、上記の要因に依存して、約１μg/kg〜１００mg/kg又はそれ以上の範囲であり得る。数日間又はそれ以上におよぶ反復投与の場合、容態に依存して、疾患の症状の望ましい抑制が起こるまで処置は持続される。しかしながら、他の投与計画も有用であり得る。この療法の進行は、従来の技術及びアッセイによって容易にモニタリングされる。例示的な投与計画は、国際公開第９４／０４１８８号に開示されているものである。
【０１６７】
「抑制」という用語は、「寛解」及び「軽減」と同じ内容で本明細書において使用され、疾患の１つ以上の特徴の減少を意味する。
【０１６８】
前記抗体組成物は、良い医療行為にかなっている様式で製剤化され、計量され(dosed)、投与される。この文脈において考えられる因子としては、処置される具体的な障害、処置される具体的な哺乳動物、個々の患者の臨床容態、障害の原因、薬剤の送達部位、投与法、投与計画、及び医療従事者には公知である他の因子が挙げられる。投与しようとする抗体の「治療有効量」はこのような配慮によって左右され、そしてこれは、ＩＬ−２３の発現に関連した障害を予防、寛解、又は治療するために必要とされる最小量である。
【０１６９】
前記抗体は、問題の障害を予防又は治療するために現在使用されている薬剤の１つ以上と共に製剤化される必要はないが、場合によりそれと共に製剤化される。このような他の薬剤の有効量は、製剤中に存在するヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体の量、障害又は処置の種類、及び上記に考察された他の因子に依存する。これらは一般的に、本明細書で以前に使用されたのと同じ投与量及び投与経路で、又は今までに使用された投与量のおよそ１〜９９％で使用される。
【０１７０】
ＩＬ−２３に関連した障害
抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体又は薬剤は、ＩＬ−２３の異常な発現によって、例えば免疫細胞（例えばリンパ球又は樹状細胞）の不適切な活性化によって特徴付けられる免疫学的障害を治療又は予防するのに有用である。このような異常なＩＬ−２３の発現は、例えば、上昇したＩＬ−２３タンパク質レベルに起因する可能性がある。
【０１７１】
免疫細胞の不適切な活性化によって特徴付けられ、そして本明細書に記載の方法によって治療又は予防することのできる免疫学的疾患は、例えば、該障害の根底にある過敏症反応（単数又は複数）の種類（単数又は複数）によって分類され得る。これらの反応は、典型的には、４つの種類に分類される：アナフィラキシー反応、細胞傷害性（細胞溶解性）反応、免疫複合体反応、又は細胞性免疫（ＣＭＩ）反応（遅延型過敏症（ＤＴＨ）反応とも呼ばれる）。（例えば、Fundamental Immunology (William E. Paul ed., Raven Press, N.Y., 3rd ed. 1993)参照）。免疫学的疾患としては、炎症疾患及び自己免疫疾患が挙げられる。
【０１７２】
免疫学的疾患の具体例としては、以下が挙げられる：乾癬、炎症性腸疾患、例えば潰瘍性大腸炎又はクローン病、及び脊椎関節炎、例えば強直性関節炎、Ｘ線所見が認められない軸性脊椎関節炎、末梢性脊椎関節炎、又は乾癬性関節炎。
【０１７３】
１つの態様では、免疫学的疾患は乾癬である。乾癬は、機能障害を示すケラチノサイト分化及び過増殖、並びに炎症性Ｔ細胞及び樹状細胞の顕著な蓄積によって特徴付けられる、皮膚の慢性的な炎症疾患である。例えば、免疫学的疾患としては、例えば全身療法又は光線療法の候補である患者における、尋常性乾癬、例えば慢性尋常性乾癬、例えば中程度から重度の慢性尋常性乾癬が挙げられる。例えば、免疫学的疾患としては、手掌膿疱性乾癬、滴状乾癬、倒置乾癬、膿疱性乾癬、又は乾癬性紅皮症が挙げられる。
【０１７４】
医薬組成物及びその投与
ＩＬ−２３ｐ１９結合剤（例えば抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体）を含む組成物を、免疫学的障害を有する又は有するリスクがある被験者に投与することができる。本発明は更に、免疫学的障害の予防又は治療用の医薬品の製造におけるＩＬ−２３ｐ１９結合剤（例えば抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体）の使用を提供する。本明細書において使用する「被験者」という用語は、ＩＬ−２３ｐ１９結合剤を投与することのできる任意の哺乳動物患者を意味し、例えば、霊長類、げっ歯類及びイヌなどのヒト及び非ヒト哺乳動物が挙げられる。本明細書に記載の方法を使用した処置に特に意図される被験者としては、ヒトが挙げられる。抗体又は薬剤を、単独で又は他の組成物と組み合わせてのいずれかで、免疫学的障害の予防又は治療において投与することができる。
【０１７５】
このような医薬組成物に使用するための抗体の更なる例はまた、配列番号１０、１１、１２又は１３のいずれかの軽鎖可変領域アミノ酸配列を有するヒト化抗体又は抗体フラグメントを含むものである。このような医薬組成物に使用するのに好ましい抗体はまた、配列番号１４、１５、１６又は１７のいずれかの重鎖可変領域アミノ酸配列を有するヒト化抗体又は抗体フラグメントを含むものである。
【０１７６】
このような医薬組成物に使用するための抗体の更なる例はまた、配列番号１１及び１４、配列番号１１及び１５、配列番号１０及び１４、又は配列番号１０及び１５のいずれかの軽鎖可変領域及び重鎖可変領域を有するヒト化抗体又は抗体フラグメントを含むものである。
【０１７７】
このような医薬組成物に使用するための抗体の更なる例はまた、配列番号１８又は２１のいずれかの軽鎖領域アミノ酸配列を有するヒト化抗体を含むものである。このような医薬組成物に使用するのに好ましい抗体はまた、配列番号１９又は２０のいずれかの重鎖可変領域アミノ酸配列を有するヒト化抗体を含むものである。
【０１７８】
このような医薬組成物に使用するための抗体の更なる例はまた、抗体Ａ、抗体Ｂ、抗体Ｃ、又は抗体Ｄを含むものである。
【０１７９】
様々な送達システムが知られており、これを使用してＩＬ−２３ｐ１９結合剤を投与することができる。導入法としては、皮内、筋肉内、腹腔内、静脈内、皮下、鼻腔内、硬膜外、及び経口経路が挙げられるがこれらに限定されない。ＩＬ−２３ｐ１９結合剤は、例えば、注入、ボーラス、又は注射によって投与されてもよく、そして、他の生物学的に活性な薬剤、例えば化学療法剤と一緒に投与されてもよい。投与は全身性であっても局所性であってもよい。好ましい実施態様では、投与は、皮下注射による。このような注射用の製剤は、隔週毎に１回投与され得る例えばプレフィルドシリンジに調製され得る。
【０１８０】
具体的な実施態様では、ＩＬ−２３ｐ１９結合剤組成物は、注射によって、カテーテルを用いて、坐剤を用いて、又は埋込剤を用いて投与され、該埋込剤は、多孔性材料、非多孔性材料、又はゲル性材料（サイラスティック膜などの膜を含む）、又は繊維である。典型的には、該組成物を投与する場合に、抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体又は薬剤が吸収しない材料が使用される。
【０１８１】
他の実施態様では、抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体又は薬剤は、徐放性システムで送達される。１つの実施態様では、ポンプが使用され得る（例えばLanger, 1990, Science 249:1527-1533; Sefton, 1989, CRC Crit. Ref. Biomed. Eng. 14:201; Buchwald et al., 1980, Surgery 88:507; Saudek et al., 1989, N. Engl. J. Med. 321:574参照）。別の実施態様では、ポリマー材料が使用され得る。（例えば、Medical Applications of Controlled Release (Langer and Wise eds., CRC Press, Boca Raton, Fla., 1974); Controlled Drug Bioavailability, Drug Product Design and Performance (Smolen and Ball eds., Wiley, New York, 1984); Ranger and Peppas, 1983, Macromol. Sci. Rev. Macromol. Chem. 23:61. See also Levy et al., 1985, Science 228:190; During et al., 1989, Ann. Neurol. 25:351; Howard et al., 1989, J. Neurosurg. 71:105参照）。他の徐放性システムも、例えば上記のLangerにおいて考察されている。
【０１８２】
ＩＬ−２３ｐ１９結合剤（例えば抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体）を、治療有効量の結合剤と１つ以上の薬学的に適合性の成分とを含む医薬組成物として投与することができる。
【０１８３】
典型的な実施態様では、医薬組成物は、ヒトへの静脈内投与又は皮下投与に適合した医薬組成物として、慣用的な手順に従って製剤化される。典型的には、注射による投与用の組成物は、無菌等張水性緩衝液中の溶液である。必要であれば、該医薬はまた、可溶化剤及び局所麻酔剤、例えばリグノカインを含むことにより、注射部位における疼痛を和らげることができる。一般的には、成分は、別々に又は単位投与剤形内に一緒に混合されてのいずれかで、例えば凍結乾燥粉末又は水分非含有の濃縮物として、活性物質の量を示したアンプル又はサシェなどの密閉シーリングされた容器で供給される。該医薬を注入によって投与しようとする場合、それを、無菌の医薬等級の水又は食塩水を含有している注入瓶を用いて施薬することができる。該医薬を注射によって投与する場合、成分を投与前に混合することができるように、注射用滅菌水又は食塩水のアンプルを提供し得る。
【０１８４】
更に、医薬組成物は、（ａ）凍結乾燥形のＩＬ−２３ｐ１９結合剤（例えば抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体）を含有している容器と、（ｂ）注射用の薬学的に許容される希釈剤（例えば滅菌水）を含有している第二の容器とを含む、医薬キットとして提供され得る。薬学的に許容される希釈剤は、凍結乾燥させた抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体又は薬剤の復元又は希釈のために使用され得る。このような容器（単数又は複数）に場合により付随されるのは、医薬品又は生物学的製剤の製造、使用又は販売を規制する政府当局によって定められた形式の通知であり得、この通知は、ヒトへの投与のための製造、使用又は販売の当局による承認を反映する。
【０１８５】
本発明の状況において使用される医薬組成物の例は、本明細書における以下の実施例２に開示されている。
【０１８６】
免疫学的障害の治療又は予防に効果的であるＩＬ−２３ｐ１９結合剤（例えば抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体）の量は、標準的な臨床的技術によって決定され得る。更に、インビトロアッセイを場合により使用して、最適な投与量範囲を同定することを助け得る。製剤に使用される正確な投与量はまた、投与経路及び免疫学的障害の段階に依存し、施術者の判断及び各患者の環境に応じて決断されるべきである。有効投与量は、インビトロ又は動物モデル試験システムから導かれた用量反応曲線から推定され得る。
【０１８７】
一般的には、免疫学的障害を有する患者に投与される抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体又はＩＬ−２３ｐ１９結合剤の投与量は、典型的には、約０．１mg/kg〜約１００mg/kg（被験者の体重）である。被験者に投与される投与量は、約０．１mg/kg〜約５０mg/kg、約１mg/kg〜約３０mg/kg、約１mg/kg〜約２０mg/kg、約１mg/kg〜約１５mg/kg、又は約１mg/kg〜約１０mg/kg（被験者の体重）である。
【０１８８】
例示的な投与量としては、１ng/kg〜１００mg/kgが挙げられるがこれらに限定されない。いくつかの実施態様では、投与量は約０．５mg/kg、約１mg/kg、約２mg/kg、約３mg/kg、約４mg/kg、約５mg/kg、約６mg/kg、約７mg/kg、約８mg/kg、約９mg/kg、約１０mg/kg、約１１mg/kg、約１２mg/kg、約１３mg/kg、約１４mg/kg、約１５mg/kg、又は約１６mg/kgである。投与量は、例えば、１日１回、１週間に１回（週１回）、１週間に２回、１週間に３回、１週間に４回、１週間に５回、１週間に６回、２週間に１回、又は１か月に１回、２か月毎に１回、又は３か月毎に１回投与され得る。具体的な実施態様では、投与量は、約０．５mg/kg/週、約１mg/kg/週、約２mg/kg/週、約３mg/kg/週、約４mg/kg/週、約５mg/kg/週、約６mg/kg/週、約７mg/kg/週、約８mg/kg/週、約９mg/kg/週、約１０mg/kg/週、約１１mg/kg/週、約１２mg/kg/週、約１３mg/kg/週、約１４mg/kg/週、約１５mg/kg/週、又は約１６mg/kg/週である。いくつかの実施態様では、投与量は、約１mg/kg/週から約１５mg/kg/週の範囲である。
【０１８９】
いくつかの実施態様では、ＩＬ−２３ｐ１９結合剤を含む医薬組成物は更に、結合剤とコンジュゲートした又はコンジュゲートしていないのいずれかである治療剤を含むことができる。抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体又はＩＬ−２３ｐ１９結合剤は、免疫学的障害の治療又は予防のための１つ以上の治療剤と組み合わせて共投与されてもよい。
【０１９０】
このような併用療法の投与は、疾患パラメーター（例えば症状の重度、症状の数、又は再発頻度）に対して相加効果又は相乗効果を及ぼすことができる。
【０１９１】
併用投与のための治療計画に関して、具体的な実施態様では、抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体又はＩＬ−２３ｐ１９結合剤は、治療剤と併用して投与される。別の具体的な実施態様では、治療剤は、抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体又は抗ＩＬ−２３ｐ１９結合剤の投与の少なくとも１時間及び最大数か月間前又は後に、例えば、抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体又は抗ＩＬ−２３ｐ１９結合剤の投与の少なくとも１時間、５時間、１２時間、１日間、１週間、１か月間、又は３カ月間前又は後に投与される。
【０１９２】
本発明は、以下の実施例に更に記載されており、この実施例は本発明の範囲を制限するものではない。
【実施例】
【０１９３】
実施例
実施例１：試験
試験デザイン
これは、多施設、無作為化、並行割付、二重盲検、単一用量漸増(single-rising-dose)、プラセボ対照、用量内コホート試験である。６週間のスクリーニング期間後、患者は、２つの実験群の１つに割り付けられた。第一の群では、患者は無作為化され、６つの連続的な用量コホート（０．０１、０．０５、０．２５、１、３、及び５mg/kg）の１つに割り付けられ、そして無作為化されて１回量の抗体Ａ又はプラセボを静脈内（ＩＶ）に受けた；各コホートには４人の患者が含まれた（３：１の比；抗体Ａ：プラセボ）。第二の群では、患者は無作為化され、２つの並行用量群（０．２５及び１mg/kg）の１つに割り付けられ、そして無作為化され抗体Ａ又はプラセボを皮下（ＳＣ）に受けた；各コホートには７人の患者が計画された（６：１の比；抗体Ａ：プラセボ）。サンプルサイズは、単一用量漸増試験のために一般的に使用される数値に基づき、仮説検定に従って計算しなかった。
【０１９４】
抗体ＡのＩＶ投与群は順次参加し、抗体ＡのＳＣ投与群は並行に無作為化された。各々のコホート内への活性物質対プラセボの割付は二重盲検であったが、ＩＶ群及びＳＣ群の両方について、コホートは盲検ではなく、治験責任医師及び患者には既知であった。
【０１９５】
薬物の中央無作為化及び盲検的割付を、相互作用応答ツールを介して行なった。無作為化リストを、疑似乱数発生器及び供給されたシード値を組み込んだ検証済みシステムを使用して作成した。無作為化コードへのアクセスは制御され文書化された。
【０１９６】
全ての患者を２４週間経過観察した。プロトコールの修正により、ベースラインから２４週目までに少なくとも５０％の乾癬部位重症度指数（５０以上のＰＡＳＩ）の改善を示した抗体ＡをＳＣに受けた患者は、任意選択の経過観察期間への参加の打診が許容された。
【０１９７】
患者
適格な患者は、年齢１８〜７５歳で、６カ月以上続く慢性の中程度から重度の尋常性乾癬を有し、ＢＳＡの発症は１０以上であり、ＰＡＳＩは１２以上であり、中程度及びそれ以上の医師による静的全体評価（ｓＰＧＡ）スコアを有する。女性患者は妊娠している可能性がなく、患者は１８．５以上であるが４０未満である肥満度指数を有していた。
【０１９８】
除外基準には、試験投薬前の２４週間以内にウステキヌマブ、１２週間以内に他の生物学的製剤又はプソラレン及び紫外線Ａ波（ＰＵＶＡ）、４週間以内に中波長紫外線光線療法及び経口抗乾癬薬物療法、又は２週間以内に局所的な抗乾癬薬物療法（軟化剤を除外）を用いての前処置を受けていた患者が含まれた。現在又は以前の臨床的に顕著な乾癬疾患、乾癬以外の医学的状態、又は身体検査の所見を有する患者も、治験責任医師の臨床的判断に基づいて、本試験から除外された。慢性感染又は関連した急性感染（肝炎及び結核（又はスクリーニング時にインターフェロン−γ遊離アッセイで陽性）を含む）を有する患者も試験から除外された。
【０１９９】
試験投薬及び投与量
ＩＶ投与のために、抗体Ａ（１０mg/mL）又はプラセボ溶液を、１００mLの生理食塩水溶液のＩＶ注入バッグに注入した。抗体Ａ（９０mg/mL）又はプラセボのプレフィルドシリンジを、希釈することなくＳＣ投与し；過剰な容量は廃棄した。
【０２００】
評価項目
主要評価項目は、抗体Ａの安全性及び認容性であり、これは身体検査、バイタルサイン、心電図（ＥＣＧ）、臨床検査、有害事象（ＡＥ）報告、並びに治験責任医師による局所的及び全身的な認容性の評価に基づいて記述的に評価された。第二臨床評価項目としては、４週目、８週目、１２週目及び２４週目におけるベースラインからのＰＡＳＩの比率の変化及びｓＰＧＡが含まれていた。患者の写真を試験プロトコールの一部として得た。第二の薬物動態評価項目も、薬力学的評価項目と共に評価された。
【０２０１】
病理組織診断、免疫組織化学的検査、及びＲＮＡ配列決定
６mmの皮膚のパンチ生検試料を、代表的な乾癬病変から、ベースラインにおいて及び同じ領域から８週間目において、全ての患者から入手した。生検材料を、病理組織診断、免疫組織化学的検査、及びＲＮＡ配列決定分析のために処理した。組織切片を染色した。病理組織診断は、ヘマトキシリン及びエオシンによる染色に基づいた。切片はまた特異的な抗体を用いて染色し、ケラチノサイト関連マーカー（Ｋ１６及びＫｉ６７）、組織炎症に関連したマーカー（Ｓ−１００Ａ７、好中球ゼラチナーゼリポカリン、β−デフェンシン２）、樹状細胞リソソーム膜糖タンパク質（ＤＣ−ＬＡＭＰ）、ＣＤ１１ｃ（皮膚樹状細胞マーカー）、及びＣＤ３（活性化Ｔ細胞マーカー）の存在について半定量的に評価した。更に、Illumina Hi-Seq 2000（Illumina Inc.、サンディエゴ、カリフォルニア州）を使用するその後の網羅的なトランスクリプトーム全体のＲＮＡ配列決定のために、皮膚生検試料からＲＮＡを抽出した。
【０２０２】
統計分析
抗体Ａの投与群とプラセボとの間の、安全性、臨床効力、及び抗体Ａのバイオマーカーの比較を、記述的に要約した。疾患活動度の耐えられない増加を経験した後に救出処置を受けた患者において、制限された薬物の投与後に評価された効力の評価項目を打ち切ったか、又は、救出前の最後の観察を繰り越した（継続）。
【０２０３】
ＲＮＡ配列決定カウントデータに関する一般化線形モデルを、分散（dispersion）（variance）の経験ベイズ推定量を使用してあてはめた。モデルは、各転写物についての様々な共変数、調整された倍率変化の得られた推定値、及びｐ値を含んでいた。各転写物についての偽陽性率をコンピューターで算出し、ｐ値閾値を決定した。各患者データセットについての遺伝子発現倍率変化を、以下の式に従って計算した：（８週目における抗体Ａによる処置の数値／ベースラインにおける数値）／（８週目におけるプラセボによる処置の数値／ベースラインにおける数値）。
【０２０４】
遺伝子オントロジー（ＧＯ）経路の部分解析は、バックグラウンド（全てのヒト遺伝子、Huang et al, Genome Biol.2007;8:R183）と比較した遺伝子セットについての濃縮比及びｐ値を推定する、アプローチを使用した。公開されているマイクロアレイデータをGene Expression Omnibusデータベース（http://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo）からダウンロードし、robust multi-array average法による正規化を使用した。経験ベイズｔ検定／分散分析モデルは倍率変化をコンピューターで算出し、各遺伝子についてのｐ値を計算した。
【０２０５】
結果
スクリーニングされた７３人の患者のうち、３９人が適格であった；２４人が６つの抗体Ａ（ＩＶ）のコホートに無作為化され、１４人が２つの抗体Ａ（ＳＣ）のコホートに無作為化された。１mg/kgをＳＣに受けるように元々無作為化された１人の患者は、０．２５mg/kgの用量を不注意にも受けた。それ故、追加の患者が１mg/kgのコホートに割り付けられ、よって７人及び６人の患者が、それぞれ０．２５及び１mg/kgのＳＣコホートに含まれた。３９人全ての患者が１回量の抗体Ａ又はプラセボを受け、そして、転居のために１２週間後に経過観察を中止した５mg/kgのＩＶ群内の１人の患者を除いて、２４週間の経過観察を完了した。
【０２０６】
ベースラインにおける個体群統計は全ての処置群間で類似し；患者は同じような疾患期間を有し、ＳＣコホートとＩＶコホート内で同等であった。ＰＡＳＩスコア平均値は１５．７〜２２．８の範囲であり、無作為化時の個々の被験者のスコアは１０．５〜４３．４の範囲であった。
【０２０７】
全体的に、ＩＶ又はＳＣに抗体Ａを受けている患者では、７５、９０及び１００％のＰＡＳＩの減少が、１２週目において患者のそれぞれ８７％（２７／３１）、５８％（１８／３１）、及び１６％（５／３１）によって達成され；プラセボを受けている患者は誰もＰＡＳＩスコアのこれらの改善を達成しなかった（表６）。２４週目に、ＰＡＳＩ ７５が、全体の抗体Ａの患者の６８％によって達成され（２２／３１）；１人のプラセボ患者（１３％）のみが、２４週目にＰＡＳＩ ７５を達成した。２４週目にＰＡＳＩ ９０及び１００の割合が、抗体Ａの患者のそれぞれ４８％（１５／３１）及び２９％（９／３１）によって達成され；プラセボコホート内のどの患者も、これらのＰＡＳＩの改善を達成しなかった。１回量の抗体Ａの投与の２４週間以内に、０．２５mg/kg以上の抗体Ａの用量群（ｎ＝２５）の９６％、８４％、及び６４％の患者が、それぞれＰＡＳＩ ７５、ＰＡＳＩ ９０及びＰＡＳＩ １００を達成した。
【０２０８】
ｓＰＧＡの評価はＰＡＳＩと一致し；全てのＳＣ抗体Ａ患者が、１２週目及び２４週目の両方において「消失」又は「ほぼ消失」を達成し（表６）；臨床的改善は、病変の写真によって確認された。
【０２０９】
抗体ＡコホートにおけるＰＡＳＩスコアの改善は、早くも２週間目に観察された。更なるＰＡＳＩスコアの改善が、８週目まで観察され、２４週目まで維持された（図１）。全てのＳＣ抗体Ａ患者が２４週目にＰＡＳＩ ７５を示した。プロトコールの修正により２４週目以降もその経過観察が延長されることにより、抗体Ａに対するこの応答の持続性を評価した。抗体ＡをＳＣに受けた１３人中８人の患者が適格であり、この任意選択の経過観察に参加するように選択された。８人中６人の患者が、１回量投与後に４１〜６６週間の範囲でＰＡＳＩ １００を維持した（データは示されていない）。
【０２１０】
【表７】
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【０２１１】
【表８】
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【０２１２】
１２週目及び２４週目においてＰＡＳＩ ７５〜１００及び好ましいｓＰＧＡを達成している各処置群の患者数。Ｎ値は、ベースラインにおける１群あたりの患者数を示し；示された場合を除き、全ての患者を１２週目及び２４週目に分析した。全体の抗体Ａの値は、抗体Ａ群の合計として示されている。
ａＮ＝２は、５mg/kg群の患者一名の転居に起因する。
ＩＶ、静脈内；ＰＡＳＩ、乾癬部位重症度指数；ＳＣ、皮下；ｓＰＧＡ、医師による静的全体評価。
【０２１３】
病理組織診断、免疫組織化学的検査、及びＲＮＡ配列決定
１回量の抗体Ａにより、ベースラインから８週目までに、不全角化を有する角化症、表皮肥厚(epidermal acanthosis)、並びに真皮及び表皮における全般的な炎症の顕著な減少がもたらされた。抗体Ａを用いての処置により、８週目に、ケラチノサイト層の肥厚（Ｋ１６）及び過剰増殖（Ｋｉ６７）、Ｔ細胞による皮膚への浸潤（ＣＤ３）、好中球（好中球ゼラチナーゼリポカリン）、樹状細胞（ＣＤ１１ｃ及びＤＣ−ＬＡＭＰ）、及び組織炎症（β−デフェンシン２、Ｓ−１００Ａ８／Ａ９）に関連したマーカーの減少がもたらされた。皮膚生検マーカーのこれらの変化は主に、様々なマーカー間で、プラセボと比較して、０．２５mg/kg以上のＩＶ及びＳＣの抗体Ａの用量のコホートの患者において観察された。
【０２１４】
また、抗体Ａを用いての処置により、患者の皮膚生検において、プラセボと比較して（ベースラインを８週目と比較して）、１９９個の遺伝子（ＩＶ）及び２２６個の遺伝子（ＳＣ）の発現において有意な（２倍を超える）減少（ｐ＜０．００５）がもたらされた。これらの２つのコホート間の重複は１９２個の遺伝子であった。この遺伝子セットは、ＩＬ−２３／ＩＬ−１７系（ＩＬ−２３Ａ、ＩＬ−２３Ｒ、ＩＬ−２２、ＩＬ−２２ＲＡ１ ＲＡ２、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−１７Ｆ、ＩＬ−１７ＲＡ及びＩＬ−１７ＲＣ）、ケラチノサイト及び上皮細胞の分化（後期角化エンベロープタンパク質、トランスグルタミナーゼ１、及びコルニフェリン）、組織炎症（β−デフェンシン２、好中球ゼラチナーゼリポカリン、及びＳ−１００Ａ７／Ａ８）、並びにＩＦＮα経路（ＩＦＩＨ１、ＩＳＧ１５、ＩＲＦ７、ＩＦＩ４４、ＭＸ１、ＭＸ２、ＳＴＡＴ１及びＴＲＩＭ２２）に関連する遺伝子を含んでいた。ＧＯ経路解析もまた、これらの遺伝子によって示される経路の有意な調節を示した（表７）。
【０２１５】
【表９】
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【０２１６】
抗体Ａを用いての処置後に濃縮されたＲＮＡは、以前に記載された方法（Huang et al. Genome Biol 2007）を使用してバックグラウンドと比較して同定された。ＧＯ経路は、公開されているマイクロアレイデータ（http://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo）及びrobust multi-array average法による正規化を使用して同定された。経験ベイズのｔ検定又は分散分析モデルは倍率変化をコンピューターで算出し、各遺伝子についてのｐ値を計算した（Huang et al. Genome Biol 2007）。ＨＧＮＣ遺伝子名を使用する。
【０２１７】
ＧＯ、遺伝子オントロジー；ＲＮＡ、リボ核酸；ＨＧＮＣ、ＨＵＧＯ遺伝子命名法委員会。
【０２１８】
抗体Ａに応答性の遺伝子セットのうち、７９個の遺伝子のサブセットの発現が、抗体Ａを用いての処置後に減少し、８週目のＰＡＳＩスコアと有意に相関した（ｒ＝０．７３、ｐ＝２×１０−６）。ＩＬ−２３Ａ及びＩＬ−２３Ｒの発現の低下もまた、８週目のＰＡＳＩスコアと有意に相関した（ｒ＝０．５７及びｒ＝０．５４；ｐ＜０．００５）。更に、抗体Ａによる処置により、乾癬患者の病変組織と非病変組織とを識別することが以前に報告された遺伝子セットが正規化された。重要なことには、この遺伝子セットは、ＰＡＳＩスコアと相関した抗体Ａに応答性の遺伝子セットとかなりの重複（９１％）を示した。
【０２１９】
結果を表８に要約し、これは７９個の遺伝子転写物、正式名、及び倍率変化（ｐ値）を示す。各患者データセットについての遺伝子発現倍率変化を、以下の式を使用して計算した：（８週目における抗体Ａによる処置の数値／ベースラインにおける数値）／（８週目におけるプラセボによる処置の数値／ベースラインにおける数値）。
【０２２０】
【表１０】
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【０２２１】
実施例２：医薬組成物
本発明の抗体に適した製剤の例を以下に示す。以下の製剤に使用される抗体は、例えば、抗体Ａ、抗体Ｂ、抗体Ｃ、又は抗体Ｄである。
【０２２２】
【表１１】
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【０２２３】
製剤１のｐＨは典型的にはｐＨ６．０〜７．０の範囲内であり、例えばｐＨ６．５である。この製剤は、静脈内投与に特に適している。
【０２２４】
使用される賦形剤の分子量（g/molでの分子量）：コハク酸二ナトリウム六水和物＝２７０．１４g/mol；コハク酸＝１１８．０９g/mol；塩化ナトリウム＝５８．４４g/mol。
【０２２５】
製剤の浸透圧は、Osmomat 030（Gonotec GmbH、ベルリン、ドイツ）を使用して決定したところ３００＋／−３０mOsmol/kgである。製剤の２０℃における密度は、DMA 4500（Anton Paar GmbH、オストフィルダーン・シャルンハウゼン、ドイツ）の測定装置を使用して決定したところ約１．００８９g/cm３である。
【０２２６】
【表１２】
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【０２２７】
製剤２のｐＨは、典型的にはｐＨ５．５〜６．５の範囲内であり、例えばｐＨ５．５〜６．１であり、例えばｐＨは５．８である。この製剤は、皮下投与に特に適している。
【０２２８】
使用される賦形剤の分子量（g/molでの分子量）：
分子量：コハク酸（Ｃ４Ｈ６Ｏ４）＝１１８．０９g/mol
分子量：コハク酸二ナトリウム六水和物（Ｃ４Ｏ４Ｎａ２Ｈ４×６Ｈ２Ｏ）＝２７０．１４g/mol
分子量：ソルビトール＝１８２．１７g/mol
分子量：ポリソルベート２０＝１２２７．７２g/mol。
【０２２９】
製剤の浸透圧は、Osmomat 030（Gonotec GmbH、ベルリン、ドイツ）を使用して決定したところ３００＋／−３０mOsmol/kgである。製剤の２０℃における密度は、DMA 4500（Anton Paar GmbH、オストフィルダーン・シャルンハウゼン、ドイツ）の測定装置を使用して決定したところ約１．０４０g/cm３である。
【０２３０】
【表１３】
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【０２３１】
製剤３のｐＨは、典型的にはｐＨ５．５〜６．５の範囲内であり、例えば５．５〜６．１であり、例えばｐＨは５．８である。この製剤は、皮下投与に特に適している。
【０２３２】
使用される賦形剤の分子量（g/molでの分子量）：
分子量：ソルビトール＝１８２．１７g/mol
分子量：ポリソルベート２０＝１２２７．７２g/mol。
【０２３３】
製剤の浸透圧は、Osmomat 030（Gonotec GmbH、ベルリン、ドイツ）を使用して決定したところ３００＋／−３０mOsmol/kgである。
【図１】
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【図２】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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