(57)【要約】  本発明は、バイオマーカーとしてのソルチリンの使用に関する。とくに、ソルチリンは、感情障害のバイオマーカーとして有用である。本発明の一態様では、ソルチリンは、ソルチリンレベルを測定することにより双極性障害および単極性鬱病の診断の支援および疾患進行のモニタリングを行うために使用しうる。本発明はさらに、ソルチリンレベルを決定することにより双極性障害および単極性鬱病の治療の選択肢を通知する方法を提供する。
2017508144.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
双極性障害または双極性障害の素因のバイオマーカーとしてのソルチリンまたはソルチリンの断片の使用。
【請求項２】
対象者からのサンプル中のソルチリンまたはソルチリンの断片のレベルを決定する工程を含む、双極性障害の診断方法またはモニター方法。
【請求項３】
双極性障害に罹患している対象者において治療効果を改善する方法であって、
ａ．対象者からのサンプル中のソルチリンまたはソルチリンの断片のレベルを決定する工程と、
ｂ．前記対象者で決定された対照レベルと比較してまたは所定の値と比較してソルチリンまたはソルチリンの断片の血漿中または血清中のレベルが減少または増加した対象者に対して治療レジームを調整する工程と、
を含む方法。
【請求項４】
対象者からのサンプル中のソルチリンレベルを検出するためのキット。
【請求項５】
ソルチリンの検出がイムノアッセイでの抗ソルチリン抗体の使用によるものである、請求項４に記載のキット。
【請求項６】
双極性障害の素因の診断または決定に使用するための、請求項４〜５のいずれか一項に記載のキット。
【請求項７】
前記サンプルが血液サンプルである、請求項２〜４のいずれか一項に記載の方法またはキット。
【請求項８】
前記サンプルが血漿サンプルまたは血清サンプルである、請求項２〜４のいずれか一項に記載の方法またはキット。
【請求項９】
所定の値以下のソルチリンの測定レベルが、
ａ．双極性障害を有する対象者、
ｂ．双極性障害の素因を有する対象者、または
ｃ．治療の調整が必要とされる双極性障害の対象者、
の指標となる、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法または使用。
【請求項１０】
所定の値以上のソルチリンの測定レベルが、
ａ．双極性障害を有していない対象者、
ｂ．双極性障害の素因を有していない対象者、または
ｃ．治療の調整が必要とされる双極性障害の対象者、
の指標となる、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法または使用。
【請求項１１】
前記所定の値が、血清中ソルチリンで１６〜２２ｎｇ／ｍｌの範囲内または対照に対する相対値で約０．４〜０．８である、請求項９または１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記所定の値が、血清中ソルチリンで約１８ｎｇ／ｍｌまたは対照に対する相対値で約０．４〜０．６である、請求項９または１０に記載の方法。
【請求項１３】
炭酸リチウム、抗痙攣剤もしくは抗精神病剤、抗鬱剤、またはこれらの組合せにより治療を調整するための、請求項３、９、または１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
抗痙攣剤または抗精神病剤が、バルプロエート、カルバマゼピン、ラモトリジン、アリピプラゾール、オランザピン、クエチアピン、またはリスペリドンを含む群から選択される、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
ａ．請求項２に記載の方法を用いて対象者を診断する工程または
ｂ．請求項４に記載のキットを用いて対象者を診断する工程と、
ｃ．請求項１３または１４に記載の薬剤を治療上有効量で投与する工程と、
を含む、双極性障害に罹患している対象者の治療方法。
【請求項１６】
前記対象者が請求項２に記載の方法を用いた双極性障害の診断後にモニターされる、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
医薬の治療上有効量が請求項３に従って調整される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
単極性鬱病または単極性鬱病の素因のバイオマーカーとしてのソルチリンまたはソルチリンの断片の使用。
【請求項１９】
対象者からのサンプル中のソルチリンまたはソルチリンの断片のレベルを決定する工程を含む、単極性鬱病の診断方法またはモニター方法。
【請求項２０】
前記サンプルが双極性障害に罹患している疑いのある対象者からのものである、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
単極性鬱病に罹患している対象者において治療効果を改善する方法であって、
ａ．対象者からのサンプル中のソルチリンまたはソルチリンの断片のレベルを決定する工程と、
ｂ．前記対象者で決定された対照レベルと比較してまたは所定の値と比較してソルチリンまたはソルチリンの断片の血漿中または血清中のレベルが減少または増加した対象者に対して治療レジームを調整する工程と、
を含む方法。
【請求項２２】
単極性鬱病の素因の診断または決定に使用するための、請求項４に記載のキット。
【請求項２３】
所定の値以上のソルチリンの測定レベルが、
ａ．単極性鬱病を有する対象者、
ｂ．単極性鬱病の素因を有する対象者、
ｃ．治療の調整が必要とされる単極性鬱病の対象者、
の指標となる、請求項１８〜２１のいずれか一項に記載の方法または使用。
【請求項２４】
前記所定の値が、血清中ソルチリンで３０〜６０ｎｇ／ｍｌの範囲内または対照に対する相対値で約１．５〜３である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
双極性障害と単極性鬱病とを識別するための、請求項１８〜２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
前記対象者がヒトである、請求項１〜２５のいずれか一項に記載のキット、方法、または使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、バイオマーカーとしてのソルチリンの使用に関する。とくに、ソルチリンは、感情障害のバイオマーカーとして有用である。本発明の一態様では、ソルチリンは、ソルチリンレベルを測定することにより双極性障害および単極性鬱病の診断または診断支援を行うためにおよび疾患進行のモニタリングを行うために使用しうる。本発明はさらに、ソルチリンレベルを決定することにより双極性障害および単極性鬱病の治療の選択肢を通知する方法を提供する。
【背景技術】
【０００２】
双極性障害は、罹患者、その親族、および社会全体に重大な悪影響を及ぼす重篤な精神病態である（Ｍｕｒｒａｙ，Ｃ．Ｊ．２０１２，Ｌａｎｃｅｔ．３８０，２１９７−２２２３）。双極性障害の生涯有病率は約１〜２％であり（Ｍｅｒｉｋａｎｇａｓ，Ｋ．Ｒ．２０１１，Ａｒｃｈ．Ｇｅｎ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ．６８，２４１−２５１）、この病気は世界的に障害の主要原因の１つである（Ｍｕｒｒａｙ，Ｃ．Ｊ．２０１２，Ｌａｎｃｅｔ．３８０，２１９７−２２２３）。
【０００３】
双極性障害は、気分、活動、およびエネルギーのエピソード性病的障害により特徴付けられる。国際疾病分類の第１０版（ＩＣＤ−１０）（世界保健機関１９９３年）によれば、双極性（気分）障害の診断は、両方の気分極、すなわち、鬱病エピソードと、軽躁病エピソード、躁病エピソード、または混合性感情エピソードのいずれかと、が関与する病的気分の少なくとも２つのエピソードに従って割り当てられる。しかしながら、軽躁病エピソード、躁病エピソード、および混合性感情エピソードの反復性エピソードもまた、ＩＣＤ−１０によれば双極性障害として分類される。精神障害の診断・統計マニュアルの第４版および第５版（ＤＳＭ−ＩＶおよびＤＳＭ−５）（米国精神医学会１９９４年、米国精神医学会２０１３年）の双極性障害の基準は、躁病エピソードまたは混合性エピソードの単一エピソード（鬱病エピソードをなんら含まない）もまた双極性障害として分類されるという点でＩＣＤ−１０のものとわずかに異なる。
【０００４】
双極性障害の診断は複雑で間違えやすい。したがって、適正な診断は数年遅れることが多く、患者の良好な転帰には早期の介入および治療がきわめて重要であるので、予後不良をもたらす（Ｄｒａｎｃｏｕｒｔ，Ｎ  ｅｔ  ａｌ，２０１３，Ａｃｔａ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒ．Ｓｃａｎｄ．１２７，１３６−１４４）。この遅れの理由の１つは、現在の診断が精神医学的診察のみに依存すること、すなわち、患者／親族との対話を通じた情報収集、入院／外来診療時の精神病理学的所見、および神経心理学的検査に依存することである。実質上すべての「内科」疾患の症例とは異なり、双極性障害の診断時に医者を支援するための認定されたパラクリニカル検査たとえばバイオマーカーアッセイは、残念ながら存在しない（Ｓｉｎｇｈ，Ｉ  ａｎｄ  Ｒｏｓｅ，Ｎ．，２００９．Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ  ｉｎ  ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ．Ｎａｔｕｒｅ．４６０，２０２−２０７、Ｂｏｋｓａ，Ｐ．２０１３，Ｊ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．３８，７５−７７）。
【０００５】
診断されれば、双極性障害は、気分安定剤（リチウム、種々の抗癲癇剤）または非定型抗精神病剤を用いて薬理学的治療が可能である（Ｙａｔｈａｍ，Ｌ．Ｎ，ｅｔ  ａｌ．，２００９，Ｂｉｐｏｌａｒ  Ｄｉｓｏｒｄ．１１，２２５−２５５、米国精神医学会２００２年、Ｇｒｕｎｚｅ，Ｈ．，ｅｔ  ａｌ．，２０１３，Ｗｏｒｌｄ  Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ．１４，１５４−２１９、英国国立医療技術評価機構２００６年、Ｓｕｐｐｅｓ，Ｔ．，ｅｔ  ａｌ．，２００５，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ．６６，８７０−８８６、Ｇｏｏｄｗｉｎ，Ｇ．Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．，２００９，Ｊ．Ｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．２３，３４６−３８８）。しかしながら、特定の薬剤に対する反応の確実な予測因子やバイオマーカーの同定および臨床診療への導入がなされていないので、患者に対する適正な薬剤の選択は、現在は試行錯誤法に基づいている（Ｒｙｂａｋｏｗｓｋｉ，Ｊ．Ｋ．，２０１３，ＣＮＳ  Ｄｒｕｇｓ．２７，１６５−１７３、Ｆｒｅｙ，Ｂ．Ｎ．ｅｔ  ａｌ．，２０１３，Ｎ．Ｚ．Ｊ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ．４７，３２１−３３２）。これは問題であり、最適な治療を遅らせて双極性障害に罹患している人々の予後を悪くする。
【０００６】
したがって、診断未確定（それゆえ未治療）の双極性障害の期間を短くして適正な治療を処方するために、信頼性のあるバイオマーカーの開発／検出が緊急に必要とされている。
【０００７】
以上の記述では双極性障害に重点を置いているが、まったく同じ課題が単極性鬱病の診断および治療に存在する。
【０００８】
単極性鬱病とは、国際疾病分類の第１０版（ＩＣＤ−１０）に記載の鬱病エピソード（コードＦ３２）または反復性鬱病性障害（コードＦ３３）を意味する（世界保健機関１９９３年、これは精神障害の診断・統計マニュアルの第４版および第５版（ＤＳＭ−ＩＶおよびＤＳＭ−５）（米国精神医学会１９９４年、米国精神医学会２０１３年）に記載の大鬱病性障害にほぼ対応する）。
【０００９】
液胞タンパク質選別１０タンパク質（Ｖｐｓ１０ｐ）ドメインレセプターファミリーは、発達中の脳および成人の脳の両方で発現される一群の膜貫通分子である（Ｗｉｌｌｎｏｗ，Ｔ．Ｅ．ｅｔ  ａｌ．２００８，Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．９，８９９−９０９）。このファミリーは、ニューロンの機能および生存能の調節に重要な役割を果たす５つの構造関連レセプターサブタイプ：ソルチリン、ＳｏｒＬＡ、ＳｏｒＣＳ１、ＳｏｒＣＳ２、およびＳｏｒＣＳ３からなる（Ｈｅｒｍｅｙ，Ｇ．，ｅｔ  ａｌ．２００４，．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．８８，１４７０−１４７６、Ｈｅｒｍｅｙ，Ｇ．２００９，Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ．Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．６６，２６７７−２６８９）。Ｖｐｓ１０ｐドメインをコードする遺伝子は、双極性障害をはじめとする神経精神障害の発症に関連付けられてきた（Ｃｈｒｉｓｔｏｆｏｒｏｕ，Ａ．ｅｔ  ａｌ．２０１１，Ｍｏｌ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ．１６，２４０、Ｏｌｌｉｌａ，Ｈ．Ｍ．ｅｔ  ａｌ．２００９，Ｍｏｌ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ．１４，３５１、Ｂａｕｍ，Ａ．Ｅ．ｅｔ  ａｌ．２００８，Ｍｏｌ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ．１３，１９７−２０７、Ｔａｋａｔａ，Ａ．ｅｔ  ａｌ．２０１１，Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ  Ｃｌｉｎ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．６５，２８０−２８５）。
【００１０】
本発明の発明者らは、双極性障害および単極性鬱病の対象者でソルチリンレベルが有意に変化することを見いだした。これらの知見は、双極性障害および単極性鬱病との関連で、１）診断剤または診断助剤として、２）疾患進行および治療反応をモニターするために、ならびに３）治療／医薬の選択肢および用量を通知するために、ソルチリンを使用しうることを意味する。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明は、双極性障害および単極性鬱病または双極性障害および／もしくは単極性鬱病の素因のバイオマーカーとしてのソルチリンまたはソルチリンの断片の使用に関する。本発明はさらに、対象者からのサンプル中のソルチリンまたはソルチリンの断片のレベルを決定することを含む、双極性障害および単極性鬱病の診断方法またはモニター方法を提供する。
【００１２】
他の実施形態では、本発明は、双極性障害または単極性鬱病に罹患している対象者において、たとえば治療／医薬の選択肢および用量を通知することにより、治療効果を改善する方法を提供する。前記方法は、
ａ．対象者からのサンプル中のソルチリンまたはソルチリンの断片のレベルを決定する工程と、
ｂ．前記対象者で決定された対照レベルと比較してまたは所定の値と比較してソルチリンまたはソルチリンの断片の血漿中または血清中のレベルが減少または増加した対象者に対して治療レジームを調整する工程と、
を含む。
【００１３】
対象者からのサンプル中のソルチリンレベルを検出するためのキットもまた提供される。キットは、抗ソルチリン抗体を用いたＥＬＩＳＡなどのイムノアッセイでありうる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１Ａ】対照と比較した双極性障害（ＢＤ）および単極性鬱病（ＵＤ）の対象者の血清中ソルチリンのレベル。
【図１Ｂ】すべて対照群の平均値に対する相対値で与えられた双極性障害（ＢＤ）の対象者、単極性鬱病（ＵＤ）の対象者、および対照の対象者の血清中ソルチリンのレベル。
【図２】個別の患者の血清中の値および対照と比較した個別の患者の相対値を示すデータ。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
本発明は、所定の値以下のソルチリンレベルが双極性障害の存在に関連しかつ所定の値以上のソルチリンレベルが単極性鬱病の存在に関連するという知見に基づく。この知見により双極性障害および単極性鬱病に対する診断プロセスおよび治療を改善することが可能である。
【００１６】
本出願で用いられる「診断（ｄｉａｇｎｏｓｅまたはｄｉａｇｎｏｓｅｄまたはｄｉａｇｎｏｓｉｎｇ）」という用語は、サンプル中のソルチリンの測定レベルが対象者の診断時に使用される唯一のパラメーターであることを意味することが意図されるものではないことを理解すべきである。医師は、たとえばＩＣＤ−１０およびＤＳＭ−５に概説されるように、適正な診断を下す際にいくつかの臨床所見を使用するであろう。しかしながら、本発明は、所与の対象者に対して適正な診断に達するのを支援しうる。
【００１７】
したがって、本発明は、バイオマーカーとしてのソルチリンまたはソルチリンの断片の使用に関する。ソルチリンの配列は、配列番号１で与えられ、「断片」という用語は、少なくとも５アミノ残基長、たとえば、少なくとも１０、１５、２０アミノ残基長など、の免疫学的測定可能断片を意味することが意図される。
【００１８】
バイオマーカーとしてのソルチリンの使用は、一実施形態ではキットの使用により評価しうる。かかるキットは、双極性障害または単極性鬱病の診断時に感度および特異度を増加させるうえで精神科病院、精神科外来診療所、および個人開業精神科医または他の医療スタッフに有益でありうる。さらに、キットは、病気の重症度または治療に対する反応をモニターするのに有用でありうる。
【００１９】
本発明の一態様では、かかるキットは、ソルチリンまたはソルチリンの断片に対する抗体の使用によりイムノアッセイの形態をとりうる。かかる抗体は、当業者であればルーチン法を用いて容易に作製可能である。たとえば、モノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ２５６，４９５（１９７５）に最初に記載されたハイブリドーマ法により生成しうるかまたは組換えＤＮＡ法により生成しうる。モノクローナル抗体はまた、たとえばＣｌａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３５２，６２４−６２８（１９９１）およびＭａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２，５８１−５９７（１９９１）に記載の技術を用いてファージ抗体ライブラリーからも単離しうる。したがって、たとえば、モノクローナル抗体は、フロイントアジュバントなどの適切なアジュバントと共にソルチリンまたはソルチリンの断片を用いて免疫されたマウスから得られるネズミ脾臓Ｂリンパ球細胞から調製されたハイブリドーマから取得しうる。ソルチリンの断片は、その免疫原性を高めるためにＫＬＨなどの担体にコンジュゲートしうる。モノクローナル抗体はまた、免疫されたヒトまたは非ヒト哺乳動物、たとえば、ラット、ウサギ、イヌ、霊長動物などの抗体発現細胞に由来するハイブリドーマからも取得しうる。また、抗ソルチリン抗体は、たとえばＭｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ａｎｄ  Ａｂｃａｍから市販品としても入手可能である。
【００２０】
イムノアッセイは、競合アッセイまたは非競合アッセイ（たとえば、一部位競合アッセイまたは二部位競合アッセイ）の形態をとりうるとともに、酵素（たとえば、ホースラディッシュペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）、アルカリホスファターゼ（ＡＰ）、もしくはグルコースオキシダーゼを用いる酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ））、放射性同位体（たとえば、ラジオイムノアッセイ）、フルオロゲンレポーターなどの標識を使用しうる。以上の技術の適用時にガイダンスを提供するために多くの参照文献が利用可能である（Ｔｉｊｓｓｅｎ，Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ａｎｄ  Ｔｈｅｏｒｙ  ｏｆ  Ｅｎｚｙｍｅ  Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓ（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ａｍｓｔｅｒｄａｍ，１９８５）、Ｃａｍｐｂｅｌｌ，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ａｍｓｔｅｒｄａｍ，１９８４）、Ｈｕｒｒｅｌｌ，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，ＦＬ，１９８２）、およびＺｏｌａ，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，ｐｐ．１４７−１５８（ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．，１９８７）。
【００２１】
一実施形態では、キットは、標識された抗ＩｇＧ抗体を最後に添加する前にサンプルを添加して抗ソルチリン抗体と共にインキュベートする、抗ソルチリン抗体で被覆されたＥＬＩＳＡの形態をとりうる。続いて、実際の濃度を確定するために本発明の実施例で例証されるようにリードアウトを作成された標準曲線と比較しうる。しかしながら、サンプル中のソルチリンレベルはまた、「ベースライン濃度」または「対照レベル」とも比較しうる。たとえば、対照レベルは、治療効果または治療投与量もしくは治療期間の調整の必要性を決定するために、対象者が治療剤の初回投与を受ける前の対象者からのサンプル中のソルチリンレベルでありうるか、あるいはＳＣＡＮ問診（世界保健機関１９９８年）に従って不安または感情障害を有するいずれの対象者も除外して、より広範にわたる正常集団の代表値を使用しうる。
【００２２】
「サンプル」という用語は、対象者から単離された組織または流体のサンプルを意味し、たとえば、限定されるものではないが、血漿、血清、脊髄液、リンパ液、外側皮膚切片、気道、腸管、および泌尿生殖管、涙、唾液、痰、乳、全血もしくは任意の血液画分、血液派生物、血液細胞、腫瘍、ニューロン組織、器官、または任意のタイプの組織、洗浄（たとえば気管支系の洗浄）により得られる任意のサンプル、およびｉｎ  ｖｉｖｏ細胞培養成分のサンプルを含む。とくに、サンプルは、双極性障害または単極性鬱病を有する疑いがあるかまたは有する対象者から得られる血液サンプル、血漿サンプル、または血清サンプルの形態をとりうる。
【００２３】
他の実施形態では、本発明は、双極性障害または単極性鬱病に罹患している対象者において、たとえば治療／医薬の選択肢および用量を通知することにより、治療効果を改善する方法を提供する。本方法は、
ａ．対象者からのサンプル中のソルチリンまたはソルチリンの断片のレベルを決定する工程と、
ｂ．前記対象者で決定された対照レベルと比較してまたは所定の値と比較してソルチリンまたはソルチリンの断片の血漿中または血清中のレベルが減少または増加した対象者に対して治療レジメンを調整する工程と、
を含む。
【００２４】
対象者においてソルチリンのレベルを決定する一方法は、上述したキットの使用によるものでありうる。
【００２５】
したがって、本方法はまた、所定の値以下のソルチリンの測定レベルが、
ａ．双極性障害を有する対象者、
ｂ．双極性障害の素因を有する対象者、または
ｃ．現在の治療レジメンに依存して、たとえば、特異的医薬、より高い／より低い投与量、または治療期間の延長／短縮の形態で、治療の調整が必要とされる双極性障害の対象者、
の指標となる、以上に記載の方法またはキットに関する。
【００２６】
したがってまた、所定の値以上のソルチリンの測定レベルは、
ａ．双極性障害を有していない対象者、
ｂ．双極性障害の素因を有していない対象者、または
ｃ．現在の治療レジメンに依存して、たとえば、特異的医薬、より高い／より低い治療投与量、または治療期間の延長／短縮の形態で、治療の調整が必要とされる双極性障害の対象者、
の指標となる。
【００２７】
本発明の実施例（図１Ａ）は、約０．８の相対値（図１Ｂ）に対応する約１８ｎｇ／ｍｌの血清中ソルチリンカットオフを用いると双極性障害の対象者の約４０％を高い特異度および少数の偽陽性で健常対照者から分離可能であることを示している。
【００２８】
したがって、上述した「所定の値」は、約１８ｎｇ／ｍｌのソルチリンレベルでありうるが、かかる値は、測定装置の取扱いの技術的差異に起因してある特定の信頼区間を有するので、約１８ｎｇ／ｍｌは、たとえば１６〜２２ｎｇ／ｍｌ、たとえば１７〜２１ｎｇ／ｍｌまたは１８〜２０ｎｇ／ｍｌの範囲内の値を含むことを理解すべきである。対照に対する相対血清中濃度は、約０．４〜約０．８、たとえば約０．４〜約０．７または約０．４〜約０．６になる。
【００２９】
多くの双極性障害者は、炭酸リチウム、抗痙攣剤（たとえば、バルプロエート、カルバマゼピン、ラモトリジン）、または抗精神病剤（たとえば、アリピプラゾール、オランザピン、クエチアピン、もしくはリスペリドン）を用いて治療される。これらの治療レジームの調整、たとえば、投与量の低下／増加、医薬の変更、または治療期間の短縮／延長による調整は、対象者からのサンプル中のソルチリンレベルを決定することにより判断しうる。
【００３０】
したがって、一実施形態では、本発明は、
ａ．上述した方法を用いることにより対象者を診断する工程または
ｂ．以上に記載のキットにより対象者を診断する工程と、
ｃ．治療上有効量の医薬を投与する工程と、
を含む、双極性障害に罹患している対象者の治療方法に関する。
【００３１】
他の実施形態では、本発明は、単極性鬱病者と健常対照者との区別を可能にする。したがって、対象者からのサンプル中のソルチリンまたはソルチリンの断片のレベルを決定する工程を含む方法。対象者は、単極性鬱病を有する疑いがあるかまたは有すると診断された対象者でありうる。
【００３２】
本発明は、対象者において治療効果を改善する方法を提供するので、前記方法は、対象者からのサンプル中のソルチリンまたはソルチリンの断片のレベルを決定する工程と、前記対象者で決定された対照レベルと比較してまたは所定の値と比較してソルチリンまたはソルチリンの断片の血漿中または血清中のレベルが減少または増加した対象者に対して治療レジームを調整する工程と、を含む。
【００３３】
対象者においてソルチリンのレベルを決定する一方法は、上述したキットの使用によるものでありうる。したがって、本方法はまた、所定の値以上のソルチリンの測定レベルが、
ａ．単極性鬱病を有する対象者、
ｂ．単極性鬱病の素因を有する対象者、または
ｃ．現在の治療レジメンに依存して、たとえば、特異的医薬、より高い／より低い投与量、または治療期間の延長／短縮の形態で、治療の調整が必要とされる単極性鬱病の対象者、
の指標となる、以上に記載の方法またはキットに関する。
【００３４】
したがってまた、所定の値以下のソルチリンの測定レベルは、
ａ．単極性鬱病を有していない対象者、
ｂ．単極性鬱病の素因を有していない対象者、または
ｃ．現在の治療レジメンに依存して、たとえば、特異的医薬、より高い／より低い治療投与量、または治療期間の延長／短縮の形態で、治療の調整が必要とされる単極性鬱病の対象者、
の指標となる。
【００３５】
本発明の実施例は、約４０ｎｇ／ｍｌの血清中ソルチリンカットオフを用いると単極性鬱病の対象者を高い特異度および少数の偽陽性で対照から分離可能であることを示している。
【００３６】
したがって、上述した「所定の値」は、約１．５の相対値（図１Ｂ）に対応する約４０ｎｇ／ｍｌのソルチリンレベルでありうるが、かかる値は、測定装置の取扱いの技術的差異に起因してある特定の信頼領域をその周りに有するので、約４０ｎｇ／ｍｌは、たとえば３０〜６０ｎｇ／ｍｌ、たとえば３５〜５０ｎｇ／ｍｌまたは３５〜５０ｎｇ／ｍｌの範囲内の値を含むことを理解すべきである。対照に対する相対血清中濃度は、約１．５〜約３、たとえば約１．５〜約２．５または約１．５〜約２．３になる。
【実施例】
【００３７】
実験の詳細
本発明者らは、双極性障害、単極性鬱病、および対照の対象者においてソルチリンの血清中レベルを測定した。これらの実験は、Ｒｉｓｓｋｏｖのオーフス大学病院（精神科病院）と共同で行った。
【００３８】
バイオマーカーの同定に使用した患者／対照者：  患者集団は、双極性感情障害のＩＣＤ−１０基準および双極性Ｉ型障害のＤＳＭ−ＩＶ基準を満たす７４名の患者（Ｂｕｔｔｅｎｓｃｈｏｎ，Ｈ．Ｎ．ｅｔ  ａｌ．２０１０，Ｐｓｙｃｈｉａｔｒ．Ｇｅｎｅｔ．２０，９３−１０１）と、単極性鬱病エピソードのＩＣＤ−１０基準を満たす６１名の患者（Ｋｏｌｓｔａｄ，Ｈ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．２０１１，Ａｍ．Ｊ．Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ．１７３，９４−１０２、Ｋａｅｒｌｅｖ，Ｌ．ｅｔ  ａｌ．２０１１，ＢＭＣ  Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ．１１，５３９−２４５８−１１−５３９．）と、からなっていた。患者はすべて、神経精神医学臨床評価表（ＳＣＡＮ）半構造化診断面接（２．１版）（世界保健機関１９９８年）を用いて精神科医により診断された。７１名の対照者は、デンマークカウンティの大きい公益事業場内の従業員であった（Ｋｏｌｓｔａｄ，Ｈ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．２０１１，Ａｍ．Ｊ．Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ．１７３，９４−１０２、Ｋａｅｒｌｅｖ，Ｌ．ｅｔ  ａｌ．２０１１，ＢＭＣ  Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ．１１，５３９−２４５８−１１−５３９）。ＩＣＤ−１０の不安障害または感情障害が存在した場合、ＳＣＡＮ面接（世界保健機関１９９８年）後に対照者から除外した。血液サンプルは、２００３年／２００４年に双極性症例から、２００７年／２００９年に鬱病症例から、および２００７年に対照から採取した。試験への参加に関してすべてのドナーからインフォームドコンセントを得た（Ｂｕｔｔｅｎｓｃｈｏｎ，Ｈ．Ｎ．ｅｔ  ａｌ．２０１０，Ｐｓｙｃｈｉａｔｒ．Ｇｅｎｅｔ．２０，９３−１０１、Ｋｏｌｓｔａｄ，Ｈ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．２０１１，Ａｍ．Ｊ．Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ．１７３，９４−１０２、Ｋａｅｒｌｅｖ，Ｌ．ｅｔ  ａｌ．２０１１，ＢＭＣ  Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ．１１，５３９−２４５８−１１−５３９）。
【００３９】
血液サンプルの採取および血清の単離：  血清サンプル用の血液は、抗凝固剤フリーのチューブ（Ｔｅｒｕｍｏ、ＶｅｎｏｓａｆｅＴＭ、ＶＦ−１０９ＳＰ）に採取し、２４時間以内に遠心分離した（１５５０ｇ、１０ｍｉｎ、４℃）。上清は−８０℃でアリコートで貯蔵した。
【００４０】
血清中ソルチリンレベルの定量：  ソルチリンの定量のために、１００ｍＭ  ＮａＨＣＯ３、ｐＨ９．８で希釈された１０μｇ／ｍｌのポリクローナルウサギ抗ソルチリン抗体（＃５４３８）により９６ウェルＮｕｎｃＭａｘｉｓｏｒｂ  Ｆ９６プレートを３７℃で１時間被覆した。被覆されたウェルをＰＢＳ中の２％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）により室温で３０分間ブロックし、０．０５％Ｔｗｅｅｎ−２０を含有するＰＢＳで４回洗浄した。標準曲線を作成するためにヒトソルチリンの精製細胞外ドメインの希釈系列を使用した。１％ＢＳＡおよび０．０５％Ｔｗｅｅｎ−２０を含有するＰＢＳ中にサンプル、精製ソルチリン、一次抗体、および二次抗体を希釈した。プレートをサンプルと共に３７℃で１時間インキュベートし、０．０５％Ｔｗｅｅｎ−２０を含有するＰＢＳで４回洗浄し、続いて１μｇ／ｍｌのマウスモノクローナル抗ソルチリン（Ｆ１１）（Ｇｕｓｔａｆｓｅｎ，Ｃ．ｅｔ  ａｌ．２０１３，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．３３，６４−７１）と共に３７℃で１時間インキュベートし、その後に４回洗浄した。最後に、プレートをＨＲＰコンジュゲートウサギ抗マウスＩｇＧ（Ｄａｋｏ  Ｐ０２６０）と共に室温で１時間インキュベートし、ＰＢＳで４回および水で４回洗浄し、その後にｏ−フェニレンジアミンジヒドロクロリド／ペルオキシド（ＯＰＤ）を添加し、続いてＥＬＩＳＡプレートリーダーを用いて４９０ｎｍの吸光度を測定した。
【００４１】
統計解析のためにスチューデントのｔ検定を使用した。
【００４２】
結果は、図１Ａ、１Ｂ、および２に見ることが可能である。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２】
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【図３】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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