(57)【要約】  本開示は、親水性自壊性リンカーを含む抗ＣＤ２２抗体−薬物コンジュゲートを提供する。本開示は、がんを治療するための組成物及び方法を更に提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
2017523958.tif 000099
［式中：
Ｄは薬物部分であり；
ＴはヒトＣＤ２２に特異的に結合する抗体である標的化部分であり；
Ｘは親水性の自壊性リンカーであり；
Ｌ１は結合、第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーであり；
Ｌ２は結合又は第二の自壊性リンカーであって；
ここで、Ｌ１が第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーである場合に、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が第二の自壊性リンカーである場合に、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合又はスペーサーであり；且つ
Ａはアシル単位である］
の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体。
【請求項２】
式（ＩＩ）：
2017523958.tif 000100
［式中、
Ｄは薬物部分であり；
ＴはヒトＣＤ２２に特異的に結合する抗体である標的化部分であり；
Ｒ１は水素、無置換若しくは置換Ｃ１−３アルキル、又は無置換若しくは置換ヘテロシクリルであり；
Ｌ１は結合、第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーであり；
Ｌ２は結合又は第二の自壊性リンカーであって；
ここで、Ｌ１が第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーである場合に、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が第二の自壊性リンカーである場合に、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合又はスペーサーであり；且つ
Ａはアシル単位である］
の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体。
【請求項３】
式（Ｉａ）：
2017523958.tif 000101
［式中、
ｐは、１から２０であり；
Ｄは薬物部分であり；
ＴはヒトＣＤ２２に特異的に結合する抗体である標的化部分であり；
Ｘは親水性の自壊性リンカーであり；
Ｌ１は結合、第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーであり；
Ｌ２は結合又は第二の自壊性リンカーであって；
ここで、Ｌ１が第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーである場合に、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が第二の自壊性リンカーである場合に、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合又はスペーサーであり；且つ
Ａはアシル単位である］
の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体。
【請求項４】
式（ＩＩａ）：
2017523958.tif 000102
［式中、
ｐは、１から２０であり；
Ｄは薬物部分であり；
ＴはヒトＣＤ２２に特異的に結合する抗体である標的化部分であり；
Ｒ１は水素、無置換若しくは置換Ｃ１−３アルキル、又は無置換若しくは置換ヘテロシクリルであり；
Ｌ１は結合、第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーであり；
Ｌ２は結合又は第二の自壊性リンカーであって；
ここで、Ｌ１が第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーである場合に、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が第二の自壊性リンカーである場合に、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合又はスペーサーであり；且つ
Ａはアシル単位である］
の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体。
【請求項５】
ｐが１から４である、請求項３又は４に記載の化合物。
【請求項６】
Ｌ１が結合である、請求項１から５の何れか一項に記載の化合物。
【請求項７】
Ｌ１が第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーである、請求項１から５の何れか一項に記載の化合物。
【請求項８】
Ｌ１がアミノベンジルオキシカルボニルリンカーである、請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
Ｌ１が、
2017523958.tif 000103
［式中、ｎは１又は２である］
からなる群より選択される、請求項７に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｌ１が、
2017523958.tif 000104
からなる群より選択される、請求項７に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｌ２が結合である、請求項１から１０の何れか一項に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｌ２が第二の自壊性リンカーである、請求項６に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｌ２がアミノベンジルオキシカルボニルリンカーである、請求項１２に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｌ２が
2017523958.tif 000105
［式中、ｎは１又は２である］
から選択される、請求項１２に記載の化合物。
【請求項１５】
Ｌ３が、１から１０のアミノ酸残基のペプチドリンカーである、請求項１から１４の何れか一項に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｌ３が、２から４のアミノ酸残基のペプチドリンカーである、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｌ３が、少なくとも一のリジン又はアルギニン残基を含むペプチドリンカーである、請求項１から１４の何れか一項に記載の化合物。
【請求項１８】
Ｌ３が、リジン、Ｄ−リジン、シトルリン、アルギニン、プロリン、ヒスチジン、オルニチン及びグルタミンから選択されるアミノ酸残基を含むペプチドリンカーである、請求項１から１６の何れか一項に記載の化合物。
【請求項１９】
Ｌ３が、バリン、イソロイシン、フェニルアラニン、メチオニン、アスパラギン、プロリン、アラニン、ロイシン、トリプトファン及びチロシンから選択されるアミノ酸残基を含むペプチドリンカーである、請求項１から１６の何れか一項に記載の化合物。
【請求項２０】
Ｌ３が、バリン−シトルリン、プロリン−リジン、メチオニン−Ｄ−リジン、アスパラギン−Ｄ−リジン、イソロイシン−プロリン、フェニルアラニン−リジン、及びバリン−リジンから選択されるジペプチド単位である、請求項１５に記載の化合物。
【請求項２１】
Ｌ３がバリン−シトルリンである、請求項２０に記載の化合物。
【請求項２２】
Ｌ４が結合である、請求項１から２１の何れか一項に記載の化合物。
【請求項２３】
Ｌ４がスペーサーである、請求項１から２１の何れか一項に記載の化合物。
【請求項２４】
スペーサーがポリアルキレングリコール、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、又はポリアミンである、請求項２３に記載の化合物。
【請求項２５】
Ｌ４がＬ４ａ−Ｃ（Ｏ）、Ｌ４ａ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ、Ｌ４ａ−Ｓ（Ｏ）２、又はＬ４ａ−Ｓ（Ｏ）２−ＮＨであって、各Ｌ４ａが独立してポリアルキレングリコール、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、又はポリアミンである、請求項２３に記載の化合物。
【請求項２６】
Ｌ４がＬ４ａ−Ｃ（Ｏ）であって、Ｌ４ａがポリアルキレングリコール、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、又はポリアミンである、請求項２３に記載の化合物。
【請求項２７】
Ｌ４がＬ４ａ−Ｃ（Ｏ）であって、Ｌ４ａがポリアルキレングリコールである、請求項２３に記載の化合物。
【請求項２８】
Ｌ４がＬ４ａ−Ｃ（Ｏ）であって、Ｌ４ａがポリエチレングリコールである、請求項２３に記載の化合物。
【請求項２９】
スペーサーが式−ＣＨ２−（ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２）ｍ−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−のものであって、ｍが０から３０の整数である、請求項２３に記載の化合物。
【請求項３０】
Ｌ４がＬ４ａ−Ｃ（Ｏ）であって、Ｌ４ａがアルキレンである、請求項２３に記載の化合物。
【請求項３１】
Ａが
2017523958.tif 000106
［式中、各Ｑ２はＮＨ又はＯであり、各ｑは独立して１から１０の整数であり、各ｑ１は、独立して１から１０の整数である］
からなる群より選択される、請求項１から３０の何れか一項に記載の化合物。
【請求項３２】
Ａが、
2017523958.tif 000107
［式中、各Ｑ２は独立してＮＨ又はＯであり、各ｑは独立して１から１０の整数である］
からなる群より選択される、請求項３１に記載の化合物。
【請求項３３】
ｑが２、３、４、又は５である、請求項３２に記載の化合物。
【請求項３４】
Ａが、
2017523958.tif 000108
［式中、各Ｑ２は独立してＮＨ又はＯである］
からなる群より選択される、請求項１から３０の何れか一項に記載の化合物。
【請求項３５】
抗体の重鎖の一又は複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられている、請求項１から３４の何れか一項に記載の化合物。
【請求項３６】
抗体が重鎖定常領域を含み、重鎖定常領域における一又は複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられている、請求項３５に記載の化合物。
【請求項３７】
抗体が重鎖定常領域を含み、重鎖定常領域における１５５、１５７、１６５、１６９、１９７、及び４４２位の一又は複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられており、番号付けがカバットのＥＵインデックスに従う、請求項３６に記載の化合物。
【請求項３８】
抗体の軽鎖の一又は複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられている、請求項１から３７の何れか一項に記載の化合物。
【請求項３９】
抗体が軽鎖定常領域を含み、抗体の軽鎖定常領域における一又は複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられている、請求項３８に記載の化合物。
【請求項４０】
Ｄが、追加されたシステイン残基を介してＴに結合している、請求項３５から３９の何れか一項に記載の化合物。
【請求項４１】
Ｄがアミノ含有薬物部分であって、該薬物がアミノ基を通じてＬ１又はＸに結合している、請求項１から４０の何れか一項に記載の化合物。
【請求項４２】
Ｄがデュオカルマイシン、ドラスタチン、ツブリシン、ドキソルビシン（ＤＯＸ）、パクリタキセル若しくはマイトマイシンＣ（ＭＭＣ）、又はそのアミノ誘導体である、請求項４１に記載の化合物。
【請求項４３】
Ｄが、
2017523958.tif 000109
からなる群より選択される、請求項４１に記載の化合物。
【請求項４４】
Ｄが
2017523958.tif 000110
である、請求項４１に記載の化合物。
【請求項４５】
−Ａ−Ｌ４−Ｌ３−Ｌ２−が
2017523958.tif 000111
である、請求項１から５の何れか一項に記載の化合物。
【請求項４６】
−Ａ−Ｌ４−Ｌ３−Ｌ２−Ｘ−Ｌ１−Ｄが
2017523958.tif 000112
である、請求項１から５の何れか一項に記載の化合物。
【請求項４７】
−Ａ−Ｌ４−Ｌ３−Ｌ２−Ｘ−Ｌ１−Ｄが
2017523958.tif 000113
である、請求項１から５の何れか一項に記載の化合物。
【請求項４８】
−Ａ−Ｌ４−Ｌ３−Ｌ２−Ｘ−Ｌ１−Ｄが
2017523958.tif 000114
である、請求項１から５の何れか一項に記載の化合物。
【請求項４９】
抗ＣＤ２２抗体が、ヒト化抗体、キメラ抗体、又はヒト抗体である、請求項１から４８の何れか一項に記載の化合物。
【請求項５０】
抗ＣＤ２２抗体が重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、
（１）重鎖可変領域が配列番号２のアミノ酸配列の三の重鎖ＨＶＲを含み、及び／若しくは軽鎖可変領域が配列番号１のアミノ酸配列の三の軽鎖ＨＶＲを含み；
（２）重鎖可変領域が配列番号４のアミノ酸配列の三の重鎖ＨＶＲを含み、及び／若しくは軽鎖可変領域が配列番号３のアミノ酸配列の三の軽鎖ＨＶＲを含み；
（３）重鎖可変領域が配列番号６のアミノ酸配列の三の重鎖ＨＶＲを含み、及び／若しくは軽鎖可変領域が配列番号５のアミノ酸配列の三の軽鎖ＨＶＲを含み；
（４）重鎖可変領域が配列番号８のアミノ酸配列の三の重鎖ＨＶＲを含み、及び／若しくは軽鎖可変領域が配列番号７のアミノ酸配列の三の軽鎖ＨＶＲを含み；又は
（５）重鎖可変領域が配列番号１０のアミノ酸配列の三の重鎖ＨＶＲを含み、及び／若しくは軽鎖可変領域が配列番号９のアミノ酸配列の三の軽鎖ＨＶＲを含む、
請求項１から４８の何れか一項に記載の化合物。
【請求項５１】
抗ＣＤ２２抗体が重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、
（１）重鎖可変領域が配列番号２のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖可変領域が配列番号１のアミノ酸配列を含み；
（２）重鎖可変領域が配列番号４のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖可変領域が配列番号３のアミノ酸配列を含み；
（３）重鎖可変領域が配列番号６のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖可変領域が配列番号５のアミノ酸配列を含み；
（４）重鎖可変領域が配列番号８のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖可変領域が配列番号７のアミノ酸配列を含み；又は
（５）重鎖可変領域が配列番号１０のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖可変領域が配列番号９のアミノ酸配列を含む、
請求項１から４８の何れか一項に記載の化合物。
【請求項５２】
抗体が、配列番号１２又は配列番号１３のアミノ酸配列を含むヒト重鎖定常領域及び配列番号１１のアミノ酸配列を含むヒト軽鎖定常領域を含み、重鎖定常領域におけるＴ１５５、Ｓ１５７、Ｓ１６５、Ｔ１６９、Ｔ１９７、及びＳ４４２位の一又は複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられており、番号付けがカバットのＥＵインデックスに従う、請求項１から５１の何れか一項に記載の化合物。
【請求項５３】
抗体が、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、及びｓｃＦｖからなる群より選択される抗原結合断片である、請求項１から５１の何れか一項に記載の化合物。
【請求項５４】
請求項１から５３の何れか一項に記載の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体；及び薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物。
【請求項５５】
請求項１から５３の何れか一項に記載の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体の有効量を細胞に投与することを含む、ヒトＣＤ２２を発現する細胞を死滅させる方法。
【請求項５６】
細胞ががん細胞である、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
がん細胞がリンパ腫又は白血病細胞である、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
個体においてがんを治療する方法であって、該個体に請求項１から５３の何れか一項に記載の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体の有効量を投与することを含む方法。
【請求項５９】
がんがＣＤ２２陽性血液悪性腫瘍である、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
ＣＤ２２陽性血液悪性腫瘍が、Ｂ細胞リンパ腫又は急性リンパ芽球性白血病である、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
請求項１から５３の何れか一項に記載の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を含むキット。
【請求項６２】
がんの治療における使用説明書を更に含む、請求項６１に記載のキット。
【請求項６３】
式（ＩＩ）：
2017523958.tif 000115
［式中、
Ｄは薬物部分であり；
ＴはヒトＣＤ２２に特異的に結合する抗体である標的化部分であり；
Ｒ１は水素、無置換若しくは置換Ｃ１−３アルキル、又は無置換若しくは置換ヘテロシクリルであり；
Ｌ１は結合、第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーであり；
Ｌ２は結合又は第二の自壊性リンカーであって；
ここで、Ｌ１が第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーである場合に、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が第二の自壊性リンカーである場合に、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合又はスペーサーであり；且つ
Ａはアシル単位である］
の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を調製する方法であって、
抗体を化合物Ｚ
2017523958.tif 000116
又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体と反応させること
を含む方法。
【請求項６４】
式（ＩＩａ）：
2017523958.tif 000117
［式中、
ｐは、１から２０であり；
Ｄは薬物部分であり；
ＴはヒトＣＤ２２に特異的に結合する抗体である標的化部分であり；
Ｒ１は水素、無置換若しくは置換Ｃ１−３アルキル、又は無置換若しくは置換ヘテロシクリルであり；
Ｌ１は結合、第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーであり；
Ｌ２は結合又は第二の自壊性リンカーであって；
ここで、Ｌ１が第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーである場合に、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が第二の自壊性リンカーである場合に、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合又はスペーサーであり；且つ
Ａはアシル単位である］
の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を調製する方法であって、
抗体を化合物Ｚ
2017523958.tif 000118
又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体と反応させること
を含む方法。
【請求項６５】
抗体が一又は複数のスルフヒドリル基を含む、請求項６３又は６４に記載の方法。
【請求項６６】
抗体の重鎖の一又は複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられている、請求項６３から６５の何れか一項に記載の方法。
【請求項６７】
抗体が重鎖定常領域を含み、重鎖定常領域における一又は複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられている、請求項６６に記載の方法。
【請求項６８】
抗体がヒト重鎖定常領域を含み、重鎖定常領域における１５５、１５７、１６５、１６９、１９７、及び４４２位の一又は複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられており、番号付けがカバットのＥＵインデックスに従う、請求項６７に記載の方法。
【請求項６９】
抗体の軽鎖の一又は複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられている、請求項６３から６８の何れか一項に記載の方法。
【請求項７０】
抗体が軽鎖定常領域を含み、抗体の軽鎖定常領域における一又は複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられている、請求項６９に記載の方法。
【請求項７１】
Ｄが、追加されたシステイン残基を介してＴに結合している、請求項６６から７０の何れか一項に記載の方法。
【請求項７２】
抗ＣＤ２２抗体が、ヒト化抗体、キメラ抗体、又はヒト抗体である、請求項６３から７１の何れか一項に記載の方法。
【請求項７３】
抗ＣＤ２２抗体が重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、
（１）重鎖可変領域が配列番号２のアミノ酸配列の三の重鎖ＨＶＲを含み、及び／若しくは軽鎖可変領域が配列番号１のアミノ酸配列の三の軽鎖ＨＶＲを含み；
（２）重鎖可変領域が配列番号４のアミノ酸配列の三の重鎖ＨＶＲを含み、及び／若しくは軽鎖可変領域が配列番号３のアミノ酸配列の三の軽鎖ＨＶＲを含み；
（３）重鎖可変領域が配列番号６のアミノ酸配列の三の重鎖ＨＶＲを含み、及び／若しくは軽鎖可変領域が配列番号５のアミノ酸配列の三の軽鎖ＨＶＲを含み；
（４）重鎖可変領域が配列番号８のアミノ酸配列の三の重鎖ＨＶＲを含み、及び／若しくは軽鎖可変領域が配列番号７のアミノ酸配列の三の軽鎖ＨＶＲを含み；又は
（５）重鎖可変領域が配列番号１０のアミノ酸配列の三の重鎖ＨＶＲを含み、及び／若しくは軽鎖可変領域が配列番号９のアミノ酸配列の三の軽鎖ＨＶＲを含む、
請求項６３から７１の何れか一項に記載の方法。
【請求項７４】
抗ＣＤ２２抗体が重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、
（１）重鎖可変領域が配列番号２のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖可変領域が配列番号１のアミノ酸配列を含み；
（２）重鎖可変領域が配列番号４のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖可変領域が配列番号３のアミノ酸配列を含み；
（３）重鎖可変領域が配列番号６のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖可変領域が配列番号５のアミノ酸配列を含み；
（４）重鎖可変領域が配列番号８のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖可変領域が配列番号７のアミノ酸配列を含み；又は
（５）重鎖可変領域が配列番号１０のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖可変領域が配列番号９のアミノ酸配列を含む、
請求項６３から７１の何れか一項に記載の方法。
【請求項７５】
抗体が、配列番号１２又は配列番号１３のアミノ酸配列を含むヒト重鎖定常領域及び配列番号１１のアミノ酸配列を含むヒト軽鎖カッパ定常領域を含み、重鎖定常領域におけるＴ１５５、Ｓ１５７、Ｓ１６５、Ｔ１６９、Ｔ１９７、及びＳ４４２位の一又は複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられており、番号付けがカバットのＥＵインデックスに従う、請求項６３から７４の何れか一項に記載の方法。
【請求項７６】
化合物が請求項６３から７５の何れか一項に記載の方法によって調製され、抗体が一又は複数のスルフヒドリル基を含む、化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体。
【請求項７７】
請求項７６に記載の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体、及び薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１４年６月２０日に出願された米国仮特許出願第６２／０１５３２０号の優先権の利益を主張し、その開示は参照により全体が本明細書に援用される。
【０００２】
ＡＳＣＩＩテキストファイルでの配列表の提出
ＡＳＣＩＩテキストファイルでの以下の提出物の内容は、参照により全体が本明細書に援用される：コンピューター読み取り可能な形式（ＣＲＦ）の配列表（ファイル名：６０６５９２０００９４０ＳＥＱＬＩＳＴ．ＴＸＴ、データ記録日：２０１５年６月１７日、サイズ：７５ＫＢ）。
【０００３】
発明の分野
本発明は、がん治療の分野にあり、抗体−薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）フォーマットを通じてがん細胞に細胞傷害性薬物を特異的に送達するための有効性及び特異性を提供する。
【背景技術】
【０００４】
抗体−薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）は、モノクローナル抗体（ｍＡｂ）の特異性を細胞傷害性分子の力価と組み合わせる治療薬のクラスである。ＡＤＣの使用は、コンジュゲートされた細胞傷害性剤による抗体のがん死滅活性を可能とする一方で、標的特異的送達により、遊離の毒性剤に対する曝露によって引き起こされる全身毒性を回避する。２０１４年５月現在、二種のＡＤＣが、ヒトがんを治療するためにＦＤＡによって承認されている。細胞傷害性剤ＭＭＡＥとコンジュゲートした抗ＣＤ３０抗体であるＡｄｃｅｔｒｉｓ（ブレンツキシマブベドチン又はＳＧＮ−３５）は、ＣＤ３０陽性再発リンパ腫を治療するために設計されている。細胞傷害性剤ＤＭ１とコンジュゲートした抗ＨＥＲ２抗体であるＫａｄｃｙｌａ（Ｔ−ＤＭ１）は、ＨＥＲ２陽性転移性乳がんを治療するために設計されている。
【０００５】
リンカー技術は、ＡＤＣの力価、特異性、及び安全性に強い影響を及ぼす。酵素不安定リンカーは、細胞の内側及び外側のプロテアーゼの活性の差を利用して、薬物放出のコントロールを達成する。薬物は、ペプチド結合を介して抗体にコンジュゲートさせることができ、細胞の内側に存在するリソソームプロテアーゼの作用により、また、ある腫瘍型における上昇値で、抗体から特異的に切断され得るにすぎない（Koblinskiら(2000) Clin. Chem. Acta 291:113-135）。このことは、血流でのリンカーの安定性を確実にして健康な組織に対するダメージを制限する。しかしながら、いくつかの酵素不安定リンカーの疎水性の増加は、特に、高い疎水性を持つ薬物とのＡＤＣの凝集をもたらし得る。親水性の自壊性リンカーは、特異的酵素に対して不安定となる設計を介してより良好な血清安定性をもたらし、及び不均一ながん細胞に対するバイスタンダー効果を介してより良好な有効性を達成し得る。
【０００６】
ＣＤ２２を選択的に標的とする多数の治療剤が、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）（Sullivan-Changら(2013) BioDrugs 27(4):293-304）、及びＡＬＬ（Hasoら(2013) Blood 121(7):1165-74）を含む造血器悪性腫瘍の治療において記載されている。ネイキッド抗体又はラジオイムノコンジュゲートとしてのエプラツズマブ（ｈＬＬ２又はＬＹＭＯＰＣＩＤＥ（商標）Ｉｍｍｕｎｏｍｅｄｉｃｓ，Ｉｎｃ．）は、臨床試験において有効性を証明した（Lindenら(2005) Clin Cancer Res. 11(14): 5215-22; Leonardら (2005) J Clin Oncol 23: 5044-5051）。ＣＤ２２はまた、Ｂ細胞悪性腫瘍におけるその系列特異的発現及び抗体結合時の急速な内部移行のために、ＡＤＣの理想的な標的であり得る。いくつかの毒素コンジュゲートが開発中であり、ＣＤ２２＋悪性腫瘍の治療のために臨床試験において調べられている（Kantarjianら(2012) Lancet Oncol. 13(4):403-11; Kreitmanら(2011) Clin Cancer Res. 17(20):6398-405; Katoら(2012) Oncoimmunology. 1(9):1469-1475; Liら(2013) Mol Cancer Ther. 12(7):1255-65; DiJosephら(2007) Nature Leukemia 21: 2240-2245）。
【０００７】
抗体−薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）フォーマットを通じて、細胞傷害性薬物をがん細胞に送達することができる改善された有効性を有する抗がん治療が必要である。
【発明の概要】
【０００８】
本開示の化合物は、薬物部分、選択された細胞集団（例えば、ＣＤ２２を発現する細胞集団）を標的とすることができる抗体である標的化部分、及びアシル単位を含有するリンカー、薬物部分と標的化部分（例えば、抗ＣＤ２２抗体）との間に距離を与えるための任意のスペーサー単位、適切な条件下で開裂可能であり得るペプチドリンカー、親水性の自壊性リンカー、及び任意の第二の自壊性スペーサー又は環化自己脱離リンカーを含む。
【０００９】
本開示は、式（Ｉ）：
2017523958.tif 000002
［式中：
Ｄは薬物部分であり；
ＴはＣＤ２２（例えば、ヒトＣＤ２２）に特異的に結合する抗体である標的化部分であり；
Ｘは親水性の自壊性リンカーであり；
Ｌ１は結合、第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーであり；
Ｌ２は結合又は第二の自壊性リンカーであって；
ここで、Ｌ１が第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーである場合に、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が第二の自壊性リンカーである場合に、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合又はスペーサーであり；且つ
Ａはアシル単位である］
の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を提供する。
【００１０】
本開示は、式（ＩＩ）：
2017523958.tif 000003
［式中、
Ｄは薬物部分であり；
ＴはＣＤ２２（例えば、ヒトＣＤ２２）に特異的に結合する抗体である標的化部分であり；
Ｒ１は水素、無置換若しくは置換Ｃ１−３アルキル、又は無置換若しくは置換ヘテロシクリルであり；
Ｌ１は結合、第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーであり；
Ｌ２は結合又は第二の自壊性リンカーであって；
ここで、Ｌ１が第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーである場合に、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が第二の自壊性リンカーである場合に、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合又はスペーサーであり；且つ
Ａはアシル単位である］
の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を提供する。
【００１１】
本開示は、式（Ｉａ）：
2017523958.tif 000004
［式中、
ｐは、１から２０であり；
Ｄは薬物部分であり；
ＴはＣＤ２２（例えば、ヒトＣＤ２２）に特異的に結合する抗体である標的化部分であり；
Ｘは親水性の自壊性リンカーであり；
Ｌ１は結合、第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーであり；
Ｌ２は結合又は第二の自壊性リンカーであって；
ここで、Ｌ１が第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーである場合に、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が第二の自壊性リンカーである場合に、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合又はスペーサーであり；且つ
Ａはアシル単位である］
の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を提供する。
【００１２】
本開示は、式（ＩＩａ）：
2017523958.tif 000005
［式中、
ｐは、１から２０であり；
Ｄは薬物部分であり；
ＴはＣＤ２２（例えば、ヒトＣＤ２２）に特異的に結合する抗体である標的化部分であり；
Ｒ１は水素、無置換若しくは置換Ｃ１−３アルキル、又は無置換若しくは置換ヘテロシクリルであり；
Ｌ１は結合、第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーであり；
Ｌ２は結合又は第二の自壊性リンカーであって；
ここで、Ｌ１が第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーである場合に、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が第二の自壊性リンカーである場合に、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合又はスペーサーであり；且つ
Ａはアシル単位である］
の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を提供する。
【００１３】
上記の化合物のある実施態様において、ｐは１から４である。ある実施態様において、Ｌ１は結合である。ある実施態様において、Ｌ１は、第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーである。ある実施態様において、Ｌ１は、アミノベンジルオキシカルボニルリンカーである。ある実施態様において、Ｌ１は、
2017523958.tif 000006
［式中ｎは１又は２である］
からなる群より選択される。
ある実施態様において、Ｌ１は、
2017523958.tif 000007
からなる群より選択される。
【００１４】
上記の化合物のある実施態様において、Ｌ２は結合である。ある実施態様において、Ｌ２は、第二の自壊性リンカーである。ある実施態様において、Ｌ２は、アミノベンジルオキシカルボニルリンカーである。ある実施態様において、Ｌ２は、
2017523958.tif 000008
［式中ｎは１又は２である］
から選択される。
【００１５】
上記の化合物のある実施態様において、Ｌ３は、１から１０のアミノ酸残基のペプチドリンカーである。ある実施態様において、Ｌ３は、２から４のアミノ酸残基のペプチドリンカーである。ある実施態様において、Ｌ３は、少なくとも一のリジン又はアルギニン残基を含むペプチドリンカーである。ある実施態様において、Ｌ３は、リジン、Ｄ−リジン、シトルリン、アルギニン、プロリン、ヒスチジン、オルニチン、及びグルタミンから選択されるアミノ酸残基を含むペプチドリンカーである。ある実施態様において、Ｌ３は、バリン、イソロイシン、フェニルアラニン、メチオニン、アスパラギン、プロリン、アラニン、ロイシン、トリプトファン、及びチロシンから選択されるアミノ酸残基を含むペプチドリンカーである。ある実施態様において、Ｌ３は、バリン−シトルリン、プロリン−リジン、メチオニン−Ｄ−リジン、アスパラギン−Ｄ−リジン、イソロイシン−プロリン、フェニルアラニン−リジン、及びバリン−リジンから選択されるジペプチド単位である。ある実施態様において、Ｌ３は、バリン−シトルリンである。
【００１６】
上記の化合物のある実施態様において、Ｌ４は結合である。ある実施態様において、Ｌ４はスペーサーである。ある実施態様において、スぺ−サーは、ポリアルキレングリコール、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、又はポリアミンである。ある実施態様において、Ｌ４は、Ｌ４ａ−Ｃ（Ｏ）、Ｌ４ａ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ、Ｌ４ａ−Ｓ（Ｏ）２、又はＬ４ａ−Ｓ（Ｏ）２−ＮＨであって、各Ｌ４ａは、 独立してポリアルキレングリコール、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、又はポリアミンである。ある実施態様において、Ｌ４はＬ４ａ−Ｃ（Ｏ）であって、Ｌ４ａは、ポリアルキレングリコール、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、又はポリアミンである。ある実施態様において、Ｌ４はＬ４ａ−Ｃ（Ｏ）であって、Ｌ４ａはポリアルキレングリコールである。ある実施態様において、Ｌ４はＬ４ａ−Ｃ（Ｏ）であって、Ｌ４ａはポリエチレングリコールである。ある実施態様において、スペーサーは、式−ＣＨ２−（ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２）ｍ−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−のスペーサーであって、ｍは０から３０の整数である。ある実施態様において、Ｌ４はＬ４ａ−Ｃ（Ｏ）であって、Ｌ４ａはアルキレンである。
【００１７】
上記の化合物のある実施態様において、Ａは、
2017523958.tif 000009
［式中、Ｑ２はＮＨ又はＯであり、各ｑは独立して１から１０の整数であり、各ｑ１は独立して１から１０の整数である］からなる群より選択される。ある実施態様において、ｑは、２、３、４、又は５である。ある実施態様において、ｑ１は、２、３、４、又は５である。ある実施態様において、Ａは、
2017523958.tif 000010
［式中、各Ｑ２は、独立してＮＨ又はＯであり、各ｑは独立して１から１０の整数である］からなる群より選択される。ある実施態様において、ｑは、２、３、４又は５である。ある実施態様において、Ａは、
2017523958.tif 000011
［式中、各Ｑ２は独立してＮＨ又はＯである］からなる群より選択される。
【００１８】
上記の化合物のある実施態様において、抗ＣＤ２２抗体の重鎖の一又は複数のアミノ酸残基は、一又は複数のシステイン残基で置き換えられている。ある実施態様において、抗体は重鎖定常領域（例えば、ヒトＩｇＧの重鎖定常領域）を含み、重鎖定常領域（例えば、ＣＨ１、ＣＨ２、又はＣＨ３）における一又は複数のアミノ酸残基は、一又は複数のシステイン残基で置き換えられている。ある実施態様において、抗体は重鎖定常領域（例えば、ヒトＩｇＧの重鎖定常領域）を含み、重鎖定常領域における１５５、１５７、１６５、１６９、１９７、及び４４２位から選択される一又は複数のアミノ酸残基は、一又は複数のシステイン残基で置き換えられており、番号付けはカバットのＥＵインデックスに従う。ある実施態様において、抗体は、ヒトＩｇＧ１、ヒトＩｇＧ２、ヒトＩｇＧ３、ヒトＩｇＧ４、又はヒトＩｇＧ４ｐの重鎖定常領域を含み、重鎖定常領域における１５５、１５７、１６５、１６９、１９７、及び４４２位から選択される一又は複数のアミノ酸残基は、一又は複数のシステイン残基で置き換えられており、番号付けはカバットのＥＵインデックスに従う。ある実施態様において、抗体は配列番号１２又は配列番号１３のアミノ酸配列を含む重鎖定常領域を含み、重鎖定常領域における１５５、１５７、１６５、１６９、１９７、及び４４２位から選択される一又は複数のアミノ酸残基は、一又は複数のシステイン残基で置き換えられており、番号付けはカバットのＥＵインデックスに従う。
【００１９】
上記の化合物のある実施態様において、抗ＣＤ２２抗体の軽鎖の一又は複数のアミノ酸残基は、システイン残基で置き換えられている。ある実施態様において、抗体は軽鎖定常領域（例えば、ヒト軽鎖カッパ定常領域）を含み、抗体の軽鎖定常領域における一又は複数のアミノ酸残基は一又は複数のシステイン残基で置き換えられている。
【００２０】
上記の化合物のある実施態様において、Ｄは、追加されたシステイン残基を経由して（又は介して）Ｔに結合している。いくつかの実施態様において、Ｄは、リンカー部分（−Ａ−Ｌ４−Ｌ３−Ｌ２−Ｘ−Ｌ１−）を通じて結合した追加されたシステイン残基のチオール基を介してＴに結合している。ある実施態様において、Ｄは、薬物がアミノ基を通じてＬ１又はＸに結合しているアミノ含有薬物部分である。ある実施態様において、Ｄは、デュオカルマイシン、ドラスタチン、ツブリシン、ドキソルビシン（ＤＯＸ）、パクリタキセル若しくはマイトマイシンＣ（ＭＭＣ）、又はそのアミノ誘導体である。ある実施態様において、Ｄは、
2017523958.tif 000012
からなる群より選択されるデュオカルマイシンのアミノ誘導体である。ある実施態様において、Ｄは、ドラスタチン（例えば、モノメチルドラスタチン１０）：
2017523958.tif 000013
のアミノ誘導体である。
【００２１】
ある実施態様において、−Ａ−Ｌ４−Ｌ３−Ｌ２−は、
2017523958.tif 000014
である。
【００２２】
ある実施態様において、−Ａ−Ｌ４−Ｌ３−Ｌ２−Ｘ−Ｌ１−Ｄは、
2017523958.tif 000015
である。
【００２３】
ある実施態様において、−Ａ−Ｌ４−Ｌ３−Ｌ２−Ｘ−Ｌ１−Ｄは、
2017523958.tif 000016
である。
【００２４】
ある実施態様において、−Ａ−Ｌ４−Ｌ３−Ｌ２−Ｘ−Ｌ１−Ｄは、
2017523958.tif 000017
である。
【００２５】
上記の化合物のある実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、ヒト化抗体、キメラ抗体、又はヒト抗体である。
【００２６】
ある実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み；
（１）重鎖可変領域は、配列番号２のアミノ酸配列の三の重鎖ＨＶＲ（例えば、配列番号１５、１６、及び１７）を含み、及び／若しくは軽鎖可変領域は、配列番号１のアミノ酸配列の三の軽鎖ＨＶＲ（例えば、配列番号１８、１９、及び２０）を含み；
（２）重鎖可変領域は、配列番号４のアミノ酸配列の三の重鎖ＨＶＲ（例えば、配列番号２１、２２、及び２３）を含み、及び／若しくは軽鎖可変領域は、配列番号３のアミノ酸配列の三の軽鎖ＨＶＲ（例えば、配列番号２４、２５、及び２６）を含み；
（３）重鎖可変領域は、配列番号６のアミノ酸配列の三の重鎖ＨＶＲ（例えば、配列番号２７、２８、及び２９）を含み、及び／若しくは軽鎖可変領域は、配列番号５のアミノ酸配列の三の軽鎖ＨＶＲ（例えば、配列番号３０、３１、及び３２）を含み；
（４）重鎖可変領域は、配列番号８のアミノ酸配列の三の重鎖ＨＶＲ（例えば、配列番号３３、３４、及び３５）を含み、及び／若しくは軽鎖可変領域は、配列番号７のアミノ酸配列の三の軽鎖ＨＶＲ（例えば、配列番号３６、３７、及び３８）を含み；又は
（５）重鎖可変領域は、配列番号１０のアミノ酸配列の三の重鎖ＨＶＲ（例えば、配列番号３９、４０、及び４１）を含み、及び／若しくは軽鎖可変領域は、配列番号９のアミノ酸配列の三の軽鎖ＨＶＲ（例えば、配列番号４２、４３、及び４４）を含む。
【００２７】
ある実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、
（１）重鎖可変領域は配列番号２のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖可変領域は配列番号１のアミノ酸配列を含み；
（２）重鎖可変領域は配列番号４のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖可変領域は配列番号３のアミノ酸配列を含み；
（３）重鎖可変領域は配列番号６のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖可変領域は配列番号５のアミノ酸配列を含み；
（４）重鎖可変領域は配列番号８のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖可変領域は配列番号７のアミノ酸配列を含み；又は
（５）重鎖可変領域は配列番号１０のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖可変領域は配列番号９のアミノ酸配列を含む。
【００２８】
ある実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、重鎖及び軽鎖を含み、
（１）重鎖は、配列番号４６のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖は配列番号４５のアミノ酸配列を含み；
（２）重鎖は、配列番号４７のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖は配列番号４５のアミノ酸配列を含み；
（３）重鎖は、配列番号４９のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖は配列番号４８のアミノ酸配列を含み；
（４）重鎖は、配列番号５０のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖は配列番号４８のアミノ酸配列を含み；
（５）重鎖は、配列番号５２のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖は配列番号５１のアミノ酸配列を含み；
（６）重鎖は、配列番号５３のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖は配列番号５１のアミノ酸配列を含み；
（７）重鎖は、配列番号５５のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖は配列番号５４のアミノ酸配列を含み；又は
（８）重鎖は、配列番号５６のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖は配列番号５４のアミノ酸配列を含み；又は
（９）重鎖は、配列番号１０のアミノ酸配列を含む可変領域と配列番号１２のアミノ酸配列を含む定常領域とを含み、及び／若しくは軽鎖は、配列番号９のアミノ酸配列を含む可変領域と配列番号１１のアミノ酸配列を含む定常領域とを含む。
（１０）重鎖は、配列番号１０のアミノ酸配列を含む可変領域と配列番号１３のアミノ酸配列を含む定常領域とを含み、及び／若しくは軽鎖は、配列番号９のアミノ酸配列を含む可変領域と配列番号１１のアミノ酸配列を含む定常領域とを含む。
【００２９】
ある実施態様において、抗体は、配列番号１２又は配列番号１３のアミノ酸配列を含むヒト重鎖定常領域、及び配列番号１１のアミノ酸配列を含むヒト軽鎖カッパ定常領域を含み、重鎖定常領域におけるＴ１５５、Ｓ１５７、Ｓ１６５、Ｔ１６９、Ｔ１９７、及びＳ４４２から選択される一又は複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられており、番号付けはカバットのＥＵインデックスに従う。これらの実施態様のいくつかにおいて、重鎖定常領域におけるＴ１５５、Ｓ１５７、Ｓ１６５、Ｔ１６９、Ｔ１９７、及びＳ４４２から選択される少なくとも一つ（例えば、一）のアミノ酸残基はシステイン残基で置き換えられている。ある実施態様において、抗体は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、及びＳｃＦｖからなる群より選択される抗原結合断片である。
【００３０】
本開示は、上記の及び本明細書に記載される化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体；及び薬学的に許容される担体を含む薬学的組成物を提供する。
【００３１】
本開示は、細胞を死滅させるために十分な量の本明細書に記載される化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を細胞に投与することを含む、ヒトＣＤ２２を発現する細胞を死滅させる方法を提供する。ある実施態様において、細胞は、がん細胞である。ある実施態様において、がん細胞は、個体（例えば、ヒト）に存在する。ある実施態様において、がん細胞は、ＣＤ２２陽性リンパ腫又は白血病細胞である。
【００３２】
本開示は、本明細書に記載される化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体の有効量を個体に投与することを含む、個体におけるがんを治療する方法を提供する。ある実施態様において、個体はがんを有するか、又はがんを有すると診断されている。ある実施態様において、がんは、ＣＤ２２陽性血液悪性腫瘍である。ある実施態様において、ＣＤ２２陽性血液悪性腫瘍は、Ｂ細胞リンパ腫又は急性リンパ芽球性白血病である。ある実施態様において、個体はヒトである。
【００３３】
本開示は、本明細書に記載される化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を含むキットを提供する。ある実施態様において、キットは、がんの治療における使用説明書を更に含む。
【００３４】
本明細書において、式（ＩＩ）
2017523958.tif 000018
［式中、
Ｄは薬物部分であり；
ＴはＣＤ２２（例えば、ヒトＣＤ２２）に特異的に結合する抗体である標的化部分であり；
Ｒ１は水素、無置換若しくは置換Ｃ１−３アルキル、又は無置換若しくは置換ヘテロシクリルであり；
Ｌ１は結合、第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーであり；
Ｌ２は結合又は第二の自壊性リンカーであって；
ここで、Ｌ１が第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーである場合に、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が第二の自壊性リンカーである場合に、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合又はスペーサーであり；且つ
Ａはアシル単位である］
の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を調製する方法であって、
抗体を化合物Ｚ
2017523958.tif 000019
又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体と反応させることを含む方法が提供される。
【００３５】
本明細書において、式（ＩＩａ）：
2017523958.tif 000020
［式中、
ｐは、１から２０であり；
Ｄは薬物部分であり；
ＴはＣＤ２２（例えば、ヒトＣＤ２２）に特異的に結合する抗体である標的化部分であり；
Ｒ１は水素、無置換若しくは置換Ｃ１−３アルキル、又は無置換若しくは置換ヘテロシクリルであり；
Ｌ１は結合、第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーであり；
Ｌ２は結合又は第二の自壊性リンカーであって；
ここで、Ｌ１が第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーである場合に、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が第二の自壊性リンカーである場合に、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合又はスペーサーであり；且つ
Ａはアシル単位である］
の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を調製する方法であって、
抗体を化合物Ｚ
2017523958.tif 000021
又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体と反応させることを含む方法が提供される。
【００３６】
本明細書における方法（ｍｅｔｈｏｄ）及び方法（ｐｒｏｃｅｓｓ）のある実施態様において、抗体は、一又は複数のスルフヒドリル基を含む。ある実施態様において、抗ＣＤ２２抗体の重鎖の一又は複数のアミノ酸残基は、一又は複数のシステイン残基で置き換えられている。ある実施態様において、重鎖定常領域（例えば、ＣＨ１、ＣＨ２、又はＣＨ３）における一又は複数のアミノ酸残基は、一又は複数のシステイン残基で置き換えられている。ある実施態様において、抗体は重鎖定常領域（例えば、ヒトＩｇＧの重鎖定常領域）を含み、重鎖定常領域における１５５、１５７、１６５、１６９、１９７、及び４４２位から選択される一又は複数のアミノ酸残基は、一又は複数のシステイン残基で置き換えられており、番号付けはカバットのＥＵインデックスに従う。ある実施態様において、抗体は、ヒトＩｇＧ１、ヒトＩｇＧ２、ヒトＩｇＧ３、ヒトＩｇＧ４、又はヒトＩｇＧ４ｐの重鎖定常領域を含み、重鎖定常領域における１５５、１５７、１６５、１６９、１９７、及び４４２位から選択される一又は複数のアミノ酸残基が、一又は複数のシステイン残基で置き換えられており、番号付けはカバットのＥＵインデックスに従う。ある実施態様において、抗体は配列番号１２又は配列番号１３のアミノ酸配列を含む重鎖定常領域を含み、重鎖定常領域における１５５、１５７、１６５、１６９、１９７、及び４４２位から選択される一又は複数のアミノ酸残基は、一又は複数のシステイン残基で置き換えられており、番号付けはカバットのＥＵインデックスに従う。
【００３７】
本明細書における方法（ｍｅｔｈｏｄ）及び方法（ｐｒｏｃｅｓｓ）のある実施態様において、抗体の軽鎖の一又は複数のアミノ酸残基は、一又は複数のシステイン残基で置き換えられている。ある実施態様において、抗体の軽鎖定常領域における一又は複数のアミノ酸残基は、一又は複数のシステイン残基で置き換えられている。
【００３８】
本明細書における方法（ｍｅｔｈｏｄ）又は方法（ｐｒｏｃｅｓｓ）のある実施態様において、Ｄは、追加されたシステイン残基を経由して（又は介して）Ｔに結合している。いくつかの実施態様において、Ｄは、リンカー部分（−Ａ−Ｌ４−Ｌ３−Ｌ２−Ｘ−Ｌ１−）を通じて結合した追加されたシステイン残基のチオール基を介してＴに結合している。
【００３９】
本明細書における方法（ｍｅｔｈｏｄ）又は方法（ｐｒｏｃｅｓｓ）のある実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、ヒト化抗体、キメラ抗体、又はヒト抗体である。ある実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、
（１）重鎖可変領域は、配列番号２のアミノ酸配列の三の重鎖ＨＶＲ（例えば、配列番号１５、１６、及び１７）を含み、及び／若しくは軽鎖可変領域は、配列番号１のアミノ酸配列の三の軽鎖ＨＶＲ（例えば、配列番号１８、１９、及び２０）を含み；
（２）重鎖可変領域は、配列番号４のアミノ酸配列の三の重鎖ＨＶＲ（例えば、配列番号２１、２２、及び２３）を含み、及び／若しくは軽鎖可変領域は、配列番号３のアミノ酸配列の三の軽鎖ＨＶＲ（例えば、配列番号２４、２５、及び２６）を含み；
（３）重鎖可変領域は、配列番号６のアミノ酸配列の三の重鎖ＨＶＲ（例えば、配列番号２７、２８、及び２９）を含み、及び／若しくは軽鎖可変領域は、配列番号５のアミノ酸配列の三の軽鎖ＨＶＲ（例えば、配列番号３０、３１、及び３２）を含み；
（４）重鎖可変領域は、配列番号８のアミノ酸配列の三の重鎖ＨＶＲ（例えば、配列番号３３、３４、及び３５）を含み、及び／若しくは軽鎖可変領域は、配列番号７のアミノ酸配列の三の軽鎖ＨＶＲ（例えば、配列番号３６、３７、及び３８）を含み；又は
（５）重鎖可変領域は、配列番号１０のアミノ酸配列の三の重鎖ＨＶＲ（例えば、配列番号３９、４０、及び４１）を含み、及び／若しくは軽鎖可変領域は、配列番号９のアミノ酸配列の三の軽鎖ＨＶＲ（例えば、配列番号４２、４３、及び４４）を含む。
【００４０】
本明細書における方法（ｍｅｔｈｏｄ）又は方法（ｐｒｏｃｅｓｓ）のある実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、
（１）重鎖可変領域は配列番号２のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖可変領域は配列番号１のアミノ酸配列を含み；
（２）重鎖可変領域は配列番号４のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖可変領域は配列番号３のアミノ酸配列を含み；
（３）重鎖可変領域は配列番号６のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖可変領域は配列番号５のアミノ酸配列を含み；
（４）重鎖可変領域は配列番号８のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖可変領域は配列番号７のアミノ酸配列を含み；又は
（５）重鎖可変領域は配列番号１０のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖可変領域は配列番号９のアミノ酸配列を含む。
【００４１】
ある実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、重鎖及び軽鎖を含み、
（１）重鎖は、配列番号４６のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖は配列番号４５のアミノ酸配列を含み；
（２）重鎖は、配列番号４７のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖は配列番号４５のアミノ酸配列を含み；
（３）重鎖は、配列番号４９のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖は配列番号４８のアミノ酸配列を含み；
（４）重鎖は、配列番号５０のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖は配列番号４８のアミノ酸配列を含み；
（５）重鎖は、配列番号５２のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖は配列番号５１のアミノ酸配列を含み；
（６）重鎖は、配列番号５３のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖は配列番号５１のアミノ酸配列を含み；
（７）重鎖は、配列番号５５のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖は配列番号５４のアミノ酸配列を含み；又は
（８）重鎖は、配列番号５６のアミノ酸配列を含み、及び／若しくは軽鎖は配列番号５４のアミノ酸配列を含み；又は
（９）重鎖は、配列番号１０のアミノ酸配列を含む可変領域と配列番号１２のアミノ酸配列を含む定常領域とを含み、及び／若しくは軽鎖は、配列番号９のアミノ酸配列を含む可変領域と配列番号１１のアミノ酸配列を含む定常領域とを含む。
（１０）重鎖は、配列番号１０のアミノ酸配列を含む可変領域と配列番号１３のアミノ酸配列を含む定常領域とを含み、及び／若しくは軽鎖は、配列番号９のアミノ酸配列を含む可変領域と配列番号１１のアミノ酸配列を含む定常領域とを含む。
【００４２】
本明細書における方法（ｍｅｔｈｏｄ）又は方法（ｐｒｏｃｅｓｓ）のある実施態様において、抗体は、配列番号１２又は配列番号１３のアミノ酸配列を含む重鎖定常領域、及び配列番号１１のアミノ酸配列を含むヒト軽鎖カッパ定常領域を含み、重鎖定常領域におけるＴ１５５、Ｓ１５７、Ｓ１６５、Ｔ１６９、Ｔ１９７、及びＳ４４２位から選択される一又は複数のアミノ酸残基が、システイン残基で置き換えられており、番号付けはカバットのＥＵインデックスに従う。これらの実施態様のいくつかにおいて、重鎖定常領域におけるＴ１５５、Ｓ１５７、Ｓ１６５、Ｔ１６９、Ｔ１９７、及びＳ４４２から選択される少なくとも一つ（例えば、一）のアミノ酸残基が、システイン残基で置き換えられている。
【００４３】
本開示は、化合物が本明細書に記載される方法（ｍｅｔｈｏｄ）又はプロセス（ｐｒｏｃｅｓｓ）によって調製され、抗体が一又は複数のスルフヒドリル基を含む化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を提供する。
【００４４】
本開示は、化合物が本明細書に記載される方法によって調製され、抗体が一又は複数のスルフヒドリル基を含む化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体、及び薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物を提供する。
【００４５】
本明細書に記載した様々な実施態様の特性の一、いくつか、又は全てを組み合わせて、本発明の他の実施態様を形成してもよいと理解される。本発明のこれら及び他の態様は、当業者に明らかとなるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００４６】
【図１】図１は、Ｔａｐ−１８ＨのＮＭＲスペクトルを示す。
【図２】図２は、Ｔａｐ−１８Ｈｒ１のＮＭＲスペクトルを示す。
【図３】図３は、Ｔａｐ−１８Ｈｒ２のＮＭＲスペクトルを示す。
【図４】図４は、Ｂ細胞リンパ腫細胞株Ｄａｕｄｉに由来する異種移植片に対する抗ＣＤ２２（ｈＬＬ２）−ＩｇＧ１−Ｔａｐ１８Ｈｒ１のインビボ抗腫瘍活性を示す。
【図５】図５は、Ｂ細胞リンパ腫細胞株Ｒａｍｏｓに由来する異種移植片に対する抗ＣＤ２２（ｈＬＬ２）−ＩｇＧ１−Ｔａｐ１８Ｈｒ１のインビボ抗腫瘍活性を示す。
【図６】図６は、Ｂ細胞リンパ腫細胞株Ｒａｍｏｓに由来する異種移植片に対する、部位特異的コンジュゲート抗ＣＤ２２−Ｔａｐ１８Ｈｒ１  ＡＤＣのｈＬＬ２−Ｓ１５７Ｃ−ＩｇＧ１−Ｔａｐ１８Ｈｒ１、ｈＬＬ２−Ｓ４４２Ｃ−ＩｇＧ１−Ｔａｐ１８Ｈｒ１、ｈＬＬ２−Ｔ１５５Ｃ−ＩｇＧ４ｐ−Ｔａｐ１８Ｈｒ１、ｈＬＬ２−Ｔ１６９Ｃ−ＩｇＧ４ｐ−Ｔａｐ１８Ｈｒ１、及びｈＬＬ２−Ｓ４４２Ｃ−ＩｇＧ４ｐ−Ｔａｐ１８Ｈｒ１のインビボ抗腫瘍活性を示す。
【図７】図７は、急性リンパ芽球性白血病細胞株ＲＥＨに由来する異種移植片に対する、部位特異的コンジュゲート抗ＣＤ２２−Ｔａｐ１８Ｈｒ１  ＡＤＣのｈＬＬ２−Ｓ１５７Ｃ−ＩｇＧ１−Ｔａｐ１８Ｈｒ１、ｈＬＬ２−Ｔ１５５Ｃ−ＩｇＧ４ｐ−Ｔａｐ１８Ｈｒ１、ｈＬＬ２−Ｔ１６９Ｃ−ＩｇＧ４ｐ−Ｔａｐ１８Ｈｒ１、及びｈＬＬ２−Ｓ４４２Ｃ−ＩｇＧ４ｐ−Ｔａｐ１８Ｈｒ１のインビボ抗腫瘍活性を示す。
【発明を実施するための形態】
【００４７】
定義
以下の用語は、別段の指示がない限り、以下の意味を有する。定義されていないあらゆる用語は、当該技術分野で認識される意味を有する。
【００４８】
「アルキル」とは、１から１０個の炭素原子、好ましくは１から６個の炭素原子を有する一価の飽和脂肪族ヒドロカルビル基を指す。例として、この用語は、直鎖状及び分枝状のヒドロカルビル基、例えば、メチル（ＣＨ３−）、エチル（ＣＨ３ＣＨ２−）、ｎ−プロピル（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２−）、イソプロピル（（ＣＨ３）２ＣＨ−）、ｎ−ブチル（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）、イソブチル（（ＣＨ３）２ＣＨＣＨ２−）、ｓｅｃ−ブチル（（ＣＨ３）（ＣＨ３ＣＨ２）ＣＨ−）、ｔ−ブチル（（ＣＨ３）３Ｃ−）、ｎ−ペンチル（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）、ネオペンチル（（ＣＨ３）３ＣＣＨ２−）、及びｎ−ヘキシル（ＣＨ３（ＣＨ２）５−）を含む。
【００４９】
「アルキレン」とは、好ましくは１から１０個、より好ましくは１から３個の炭素原子を有する、直鎖状又は分枝鎖状の、二価の脂肪族ヒドロカルビレン基を指す。例として、この用語は、メチレン（−ＣＨ２−）、エチレン（−ＣＨ２ＣＨ２−）、ｎ−プロピレン（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）、イソ−プロピレン（−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）−）、（−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＣＨ２−）、（−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−）、（−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＨ−）、（−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２−）等を含む。
【００５０】
「アルケニル」とは、２から１０個の炭素原子、好ましくは２から４個の炭素原子を有し、少なくとも１、好ましくは１から２の二重結合不飽和部位を有する、直鎖状又は分枝状のヒドロカルビル基を指す。例として、この用語は、ビ−ビニル、アリル、及びブタ−３−エン−１−イルを含む。この用語に含まれるものは、シス及びトランス異性体又はこれらの異性体の混合物である。
【００５１】
「アルケニレン」とは、２から１０個の炭素原子、好ましくは２から４個の炭素原子を有し、少なくとも１、好ましくは１から２の二重結合不飽和部位を有する、直鎖状又は分枝状のヒドロカルビレン基を指す。アルケニレンの例は、ビニレン（−ＣＨ＝ＣＨ−）、アリレン（−ＣＨ２Ｃ＝Ｃ−）、及びブタ−３−エン−１−イレン（−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ＝ＣＨ−）を含むが、これらに限定されない。この用語には、これらの異性体のシス及びトランス異性体又は混合物が含まれる。
【００５２】
「アルキニル」とは、２から６個の炭素原子、好ましくは２から３個の炭素原子を有し、少なくとも１、好ましくは１から２の三重結合不飽和部位を有する、直線状又は分枝状のヒドロカルビル基を指す。そのようなアルキニル基の例は、アセチレニル（−Ｃ≡ＣＨ）、及びプロパルギル（−ＣＨ２Ｃ≡ＣＨ）を含む。
【００５３】
「アルキニレン」とは、２から６個の炭素原子、好ましくは２から３個の炭素原子を有し、少なくとも１、好ましくは１から２の三重結合不飽和部位を有する、直線状又は分枝状のヒドロカルビレン基を指す。アルキニレンの例は、アセチレニレン（−Ｃ≡Ｃ−）、及びプロパルギレン（−ＣＨ２Ｃ≡ＣＨ−）を含むが、これらに限定されない。
【００５４】
「アミノ」とは、基−ＮＨ２を指す。
【００５５】
「置換アミノ」とは、少なくとも一のＲは水素ではないことを条件として、各Ｒが、水素、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アルケニル、置換アルケニル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、ヘテロアリール、及びヘテロシクリルからなる群より独立して選択される基−ＮＲＲを指す。
【００５６】
「アリール」とは、単環（例えばフェニル基に存在）又は複数の縮合環（結合点が芳香族環の原子を通じていることを条件として、縮合環は芳香族であっても、そうでなくてもよい）を有する環系（そのような芳香族環系の例は、ナフチル、アントリル及びインダニルを含む）を有する、６から１８個の炭素原子の一価の芳香族炭素環式基を指す。例として、この用語は、フェニル及びナフチルを含む。アリール置換基の定義により別段制約されない限り、そのようなアリール基は、アシルオキシ、ヒドロキシ、チオール、アシル、アルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、置換アルキル、置換アルコキシ、置換アルケニル、置換アルキニル、置換シクロアルキル、置換シクロアルケニル、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アシルアミノ、アルカリール、アリール、アリールオキシ、アジド、カルボキシル、カルボキシルエステル、シアノ、ハロゲン、ニトロ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、アミノアシルオキシ、オキシアシルアミノ、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、スルホニルアミノ、−ＳＯ−アルキル、−ＳＯ−置換アルキル、−ＳＯ−アリール、−ＳＯ−ヘテロアリール、−ＳＯ２−アルキル、−ＳＯ２−置換アルキル、−ＳＯ２−アリール、−ＳＯ２−ヘテロアリール及びトリハロメチルから選択される１から５の置換基、又は１から３の置換基で置換されていてもよい。
【００５７】
「シクロアルキル」とは、縮合、架橋及びスピロ環系を含む単環又は複環を有する、３から１０個の炭素原子の環状アルキル基を指す。適切なシクロアルキル基の例は、例えばアダマンチル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロオクチル等を含む。例として、そのようなシクロアルキル基は、単環構造、例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロオクチル等、又は複環構造、例えばアダマンチル等を含む。
【００５８】
「ヘテロアリール」とは、１から１５個の炭素原子、例えば１から１０個の炭素原子並びに酸素、窒素及び環中の硫黄からなる群より選択される１から１０個のヘテロ原子の芳香族基を指す。そのようなヘテロアリール基は、単環（例えばピリジニル、イミダゾリル若しくはフリル）、又は環系中の複数の縮合環（環系中の少なくとも一の環は芳香族であり、結合点が芳香族環の原子を通じていることを条件として、環系中の少なくとも一の環が芳香族である）（この基の例としては、インドリジニル、キノリニル、ベンゾフラニル、ベンズイミダゾリル又はベンゾチエニル）を有し得る。ある実施態様において、ヘテロアリール基の窒素及び／又は硫黄環原子（複数可）は、Ｎ−オキシド（Ｎ→Ｏ）、スルフィニル又はスルホニル部分を提供するために酸化されていてもよい。例として、この用語は、ピリジニル、ピロリル、インドリル、チオフェニル、及びフラニルを含む。ヘテロアリール置換基の定義により別段制約されない限り、そのようなヘテロアリール基は、アシルオキシ、ヒドロキシ、チオール、アシル、アルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、置換アルキル、置換アルコキシ、置換アルケニル、置換アルキニル、置換シクロアルキル、置換シクロアルケニル、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アシルアミノ、アルカリール、アリール、アリールオキシ、アジド、カルボキシル、カルボキシルエステル、シアノ、ハロゲン、ニトロ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、アミノアシルオキシ、オキシアシルアミノ、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、スルホニルアミノ、−ＳＯ−アルキル、−ＳＯ−置換アルキル、−ＳＯ−アリール、−ＳＯ−ヘテロアリール、−ＳＯ２−アルキル、−ＳＯ２−置換アルキル、−ＳＯ２−アリール及び−ＳＯ２−ヘテロアリール、並びにトリハロメチルから選択される１から５の置換基、又は１から３の置換基で置換されていてもよい。
【００５９】
ヘテロアリールの例は、ピロール、イミダゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、インドリジン、イソインドール、インドール、プリン、イソキノリン、キノリン、フタラジン、ナフチリジン、キノキサリン、キナゾリン、シンノリン、プテリジン、カルバゾール、カルボリン、フェナントリジン、アクリジン、フェナントロリン、イソチアゾール、フェナジン、イソキサゾール、フェノキサジン、フェノチアジン、ピペリジン、ピペラジン、フタルイミド、４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［ｂ］チオフェン、チアゾール、チオフェン、ベンゾ［ｂ］チオフェン等を含むが、これらに限定されない。
【００６０】
「複素環」、「複素環式」、「ヘテロシクロアルキル」又は「ヘテロシクリル」とは、縮合、架橋、若しくはスピロ環系を含む単環又は複数の縮合環を有し、且つ１から１０個のヘテロ原子を含む３から２０個の環原子を有する、飽和した基又は部分的に不飽和の基を指す。これらの環原子は、炭素、窒素、硫黄、又は酸素からなる群より選択され、ここで、縮合環系において、結合点が非芳香族環を通じていることを条件として、一又は複数の環は、シクロアルキル、アリール、又はヘテロアリールであり得る。ある実施態様において、複素環式基の窒素及び／又は硫黄原子（複数可）は、Ｎ−オキシド、−Ｓ（Ｏ）−、又は−ＳＯ２−部分を提供するために酸化されていてもよい。
【００６１】
複素環の例は、アゼチジン、ジヒドロインドール、インダゾール、キノリジン、イミダゾリジン、イミダゾリン、ピペリジン、ピペラジン、インドリン、１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン、チアゾリジン、モルホリニル、チオモルホリニル（チアモルホリニルとも称される）、１，１−ジオキソチオモルホリニル、ピペリジニル、ピロリジン、テトラヒドロフラニル等を含むが、これらに限定されない。
【００６２】
ヘテロアリール基又は複素環式基が「置換されている」場合、ヘテロアリール置換基又は複素環式置換基の定義により別段制約されない限り、そのようなヘテロアリール基又は複素環式基は、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオケト、カルボキシル、カルボキシルエステル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、スルホニルアミノ、−ＳＯ−アルキル、−ＳＯ−置換アルキル、−ＳＯ−アリール、−ＳＯ−ヘテロアリール、−ＳＯ−ヘテロシクリル、−ＳＯ２−アルキル、−ＳＯ２−置換アルキル、−ＳＯ２−アリール、−ＳＯ２−ヘテロアリール、及び−ＳＯ２−ヘテロシクリルから選択される１から５、又は１から３の置換基で置換され得る。
【００６３】
「ポリアルキレングリコール」とは、直線状又は分枝状のポリアルキレングリコールポリマー、例えばポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、及びポリブチレングリコールを指す。ポリアルキレングリコールのサブユニットは、単一ポリアルキレングリコールユニットである。例えば、ポリエチレングリコールサブユニットの例は、鎖終結点で水素でキャップされた、エチレングリコール、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、又はプロピレングリコール、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−であろう。ポリ（アルキレングリコール）のその他の例は、ＰＥＧ、ＰＥＧ誘導体、例えばメトキシポリ（エチレングリコール）（ｍＰＥＧ）、ポリ（エチレンオキシド）、ＰＰＧ、ポリ（テトラメチレングリコール）、ポリ（エチレンオキシド−コ−プロピレンオキシド）、又はコポリマー及びそれらの組合せを含むが、それらに限定されない。
【００６４】
「ポリアミン」とは、ポリアルキレンイミンにあるような骨格中に包含されているか、又は、ポリビニルアミンにあるようなペンダント基中のモノマー単位においてアミン機能性を有するポリマーを指す。
【００６５】
本明細書中の開示に加えて、用語「置換（された）」は、特定の基又はラジカルを修飾するのに使用される場合、特定の基又はラジカルの一又は複数の水素原子はそれぞれ、互いに独立して、以下に定義される同一又は異なる置換基で置き換えられることも意味し得る。
【００６６】
本明細書中の個々の用語に関して開示された基に加えて、特定の基又はラジカル中飽和炭素原子上の一又は複数の水素（単一の炭素原子上の任意の二の水素は＝Ｏ、＝ＮＲ７０、＝Ｎ−ＯＲ７０、＝Ｎ２又は＝Ｓで置き換えられ得る）を置換する置換基は、別記されない限り、−Ｒ６０、ハロ、＝Ｏ、−ＯＲ７０、−ＳＲ７０、−ＮＲ８０Ｒ８０、トリハロメチル、−ＣＮ、−ＯＣＮ、−ＳＣＮ、−ＮＯ、−ＮＯ２、＝Ｎ２、−Ｎ３、−Ｓ（Ｏ）Ｒ７０、−ＳＯ２Ｒ７０、−ＳＯ３−Ｍ＋、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲ７０、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ７０、−ＯＳＯ３−Ｍ＋、−ＯＳ（Ｏ）２ＯＲ７０、−ＰＯ３２−（Ｍ＋）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）Ｏ−Ｍ＋、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、−Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、−Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｍ＋、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ７０、−Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、−Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ７０、−ＯＣ（Ｓ）Ｒ７０、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−Ｍ＋、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲ７０、−ＯＣ（Ｓ）ＯＲ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、−ＮＲ７０ＣＯ２−Ｍ＋、−ＮＲ７０ＣＯ２Ｒ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、−ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０及び−ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０であって、Ｒ６０は、置換されていてもよいアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール及びヘテロアリールアルキルからなる群より選択され、各Ｒ７０は、独立して水素又はＲ６０であり；各Ｒ８０は、独立してＲ７０あるいは、二のＲ８０’は、それが結合する窒素原子と共に、３員、４員、５員、６員、又は７員ヘテロシクロアルキル（Ｏ、Ｎ及びＳからなる群より選択される同一若しくは異なる追加のヘテロ原子を１から４個含んでいてもよく、そのＮは−Ｈ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１−４アルキル、−ＣＯ２Ｃ１−４アルキル、若しくは−Ｓ（Ｏ）２Ｃ１−４アルキル置換基を有していてもよい）を形成し；且つ各Ｍ＋は、正味単一正電荷を持つ対イオンである。各Ｍ＋は、独立して、例えば、Ｋ＋、Ｎａ＋、Ｌｉ＋等のアルカリイオン；＋Ｎ（Ｒ６０）４等のアンモニウムイオン；［Ｃａ２＋］０．５、［Ｍｇ２＋］０．５、又は［Ｂａ２＋］０．５等のアルカリ土類イオン（下付きの０．５は、そのような二価のアルカリ土類イオンに対する対イオンのうちの一方が実施態様の化合物のイオン化形態であり、他方が塩化物等の典型的な対イオンであり得るか、又は本明細書中に開示される二のイオン化化合物がそのような二価のアルカリ土類イオンに対する対イオンとして作用し得るか、又は実施態様の二重イオン化化合物がそのような二価のアルカリ土類イオンに対する対イオンとして作用し得ることを意味する）であってもよい。
【００６７】
本明細書中の開示に加えて、「置換」アルケン、アルキン、アリール及びヘテロアリール基中の不飽和炭素原子上の水素に対する置換基は、別記されない限り、−Ｒ６０、ハロ、−Ｏ−Ｍ＋、−ＯＲ７０、−ＳＲ７０、−Ｓ−Ｍ＋、−ＮＲ８０Ｒ８０、トリハロメチル、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＣＮ、−ＳＣＮ、−ＮＯ、−ＮＯ２、−Ｎ３、−Ｓ（Ｏ）Ｒ７０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ７０、−ＳＯ３−Ｍ＋、−ＳＯ３Ｒ７０、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ７０、−ＯＳＯ３−Ｍ＋、−ＯＳＯ３Ｒ７０、−ＰＯ３２−（Ｍ＋）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）Ｏ−Ｍ＋、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、−Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、−Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０、−ＣＯ２−Ｍ＋、−ＣＯ２Ｒ７０、−Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、−Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ７０、−ＯＣ（Ｓ）Ｒ７０、−ＯＣＯ２−Ｍ＋、−ＯＣＯ２Ｒ７０、−ＯＣ（Ｓ）ＯＲ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、−ＮＲ７０ＣＯ２−Ｍ＋、−ＮＲ７０ＣＯ２Ｒ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、−ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０及び−ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０であって、置換アルケン又はアルキンの場合、置換基は−Ｏ−Ｍ＋、−ＯＲ７０、−ＳＲ７０、又は−Ｓ−Ｍ＋ではないことを条件として、Ｒ６０、Ｒ７０、Ｒ８０及びＭ＋は先に定義された通りである。
【００６８】
本明細書中の個々の用語に関して開示された置換基に加えて、「置換」ヘテロシクロアルキル及びシクロアルキル基中の窒素原子上の水素に対する置換基は、別記されない限り、−Ｒ６０、−Ｏ−Ｍ＋、−ＯＲ７０、−ＳＲ７０、−Ｓ−Ｍ＋、−ＮＲ８０Ｒ８０、トリハロメチル、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＮＯ、−ＮＯ２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ７０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ７０、−Ｓ（Ｏ）２Ｏ−Ｍ＋、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲ７０、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ７０、−ＯＳ（Ｏ）２Ｏ−Ｍ＋、−ＯＳ（Ｏ）２ＯＲ７０、−ＰＯ３２−（Ｍ＋）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）Ｏ−Ｍ＋、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）（ＯＲ７０）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、−Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、−Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ７０、−Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、−Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ７０、−ＯＣ（Ｓ）Ｒ７０、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲ７０、−ＯＣ（Ｓ）ＯＲ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）ＯＲ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、−ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０及び−ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０であって、Ｒ６０、Ｒ７０、Ｒ８０及びＭ＋は先に定義された通りである。
【００６９】
本明細書中の開示に加えて、ある実施態様において、置換されている基は、１、２、３若しくは４の置換基、１、２若しくは３の置換基、１若しくは２の置換基、又は１の置換基を有する。
【００７０】
上で定義された全ての置換基において、置換基をそれら自体に対する更なる置換基（例えば、それ自体が置換アリール基で置換された置換基としての置換アリール基を有する置換アリール、これは置換アリール基等により更に置換される）で定義することにより導かれたポリマーは、本明細書中に含まれることを意図されていない。そのような場合、かかる置換基の最大数は３である。例えば、本明細書中で特に検討される置換アリール基の一連の置換基は、置換アリール−（置換アリール）−置換アリールに限定される。
【００７１】
別段の指示がない限り、本明細書中に明確に定義されていない置換基の命名法は、官能基の末端部、続いて結合点に向かって隣接する官能基を名づけることにより導かれる。例えば、置換基「アリールアルキルオキシカルボニル」は、（アリール）−（アルキル）−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−基を指す。
【００７２】
一又は複数の置換基を含有する、本明細書中に開示される何れかの基に関し、当然、そのような基は立体的に非現実的な及び／又は合成的に実現不可能な任意の置換又は置換パターンを含有しないことが理解される。加えて、対象化合物は、これらの化合物の置換により生じる全ての立体化学異性体を含む。
【００７３】
用語「薬学的に許容される塩」とは、哺乳動物等の患者に対して投与するための許容される塩（所定の投与レジームに対して許容できる哺乳動物の安全性を有する対イオンを含む塩）を意味する。そのような塩は、薬学的に許容される無機又は有機塩基、及び薬学的に許容される無機又は有機酸に由来し得る。「薬学的に許容される塩」とは、化合物の薬学的に許容される塩を指し、その塩は、当該技術分野でよく知られている様々な有機及び無機対イオンに由来し、単なる例として、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウムテトラアルキルアンモニウム等を含み；分子が塩基機能性を含有する場合は、有機又は無機酸の塩、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、ギ酸塩、酒石酸塩、ベシル酸塩、メシル酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、シュウ酸塩等を含む。
【００７４】
構造において基を描写する波線は、親構造に対する基の結合点を表す。
【００７５】
用語「その塩」とは、酸のプロトンが陽イオン、例えば金属陽イオン又は有機陽イオン等で置き換えられた場合に形成される化合物を意味する。患者への投与が意図されていない中間体化合物の塩に必要とされないが、必要に応じて、塩は薬学的に許容される塩である。例として、本化合物の塩は、化合物が、塩の陰イオン成分としての無機又は有機酸のコンジュゲート塩基と共に、無機又は有機酸によりプロトン化され、陽イオンを形成する塩を含む。
【００７６】
「溶媒和物」とは、溶媒分子と溶質の分子又はイオンとを組み合わせることにより形成された複合体を指す。溶媒は、有機化合物、無機化合物又は両方の混合物であり得る。溶媒のいくつかの例は、メタノール、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、ジメチルスルホキシド及び水を含むが、これらに限定されない。溶媒が水である場合、形成される溶媒和物は水和物である。
【００７７】
「立体異性体」とは、同一の原子連結性と異なる原子の空間配列を有する化合物を指す。立体異性体は、シス−トランス異性体、Ｅ及びＺ異性体、光学異性体、並びにジアステレオマーを含む。
【００７８】
「互変異性体」とは、原子の電子結合及び／又はプロトンの位においてのみ異なる分子の代替形態、例えば、エノール−ケト及びイミン−エナミン互変異性体、又は−Ｎ＝Ｃ（Ｈ）−ＮＨ−環原子配列を含有するヘテロアリール基の互変異性形態、例えば、ピラゾール、イミダゾール、ベンズイミダゾール、トリアゾール、及びテトラテトラゾールを指す。当業者は、他の互変異性環原子配列も可能であることを認識するであろう。
【００７９】
用語「又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体」は、塩、溶媒和物及び立体異性体、例えば、対象化合物の立体異性体の薬学的に許容される塩の溶媒和物の全順列を含むことを意図されることが理解されるであろう。
【００８０】
本明細書中で使用される場合、薬物、化合物、コンジュゲート、薬物コンジュゲート、抗体薬物コンジュゲート若しくは薬学的組成物の「有効用量」又は「有効量」とは、有益な又は所望の結果をもたらすのに十分な量である。予防的使用に関し、有益な若しくは所望の結果は、リスクを排除する若しくは低減する、重症度を緩和する、又は疾患の生化学的、組織学的及び／若しくは行動上の症状、その合併症及び疾患の進行中に出現する中間体病理学的表現型を含む疾患の発病を遅らせる等の結果を含む。治療的使用に関し、有益な若しくは所望の結果は、疾患により生じる一又は複数の症状を減少させる、疾患に罹患している対象の生活の質を向上させる、疾患を治療するのに必要な他の投薬用量を減少させる、例えば標的化を介して別の投薬の効果を増強する、疾患の進行を遅らせる、及び／又は生存期間を延長する等の臨床結果を含む。がん又は腫瘍の場合、有効量の薬物は、がん細胞数を縮小させ；腫瘍の大きさを縮小させ；末梢器官へのがん細胞浸潤を阻害し（すなわち、ある程度遅らせ、好ましくは停止させる）；腫瘍転移を阻害し（すなわち、ある程度遅らせ、好ましくは停止させる）；腫瘍増殖をある程度阻害し；及び／又は障害に関連する一又は複数の徴候をある程度緩和する効果を有し得る。有効投薬量は、一又は複数回の投与で投与され得る。本開示の目的上、薬物、化合物又は薬学的組成物の有効投薬量は、予防的又は治療的処置を直接的又は間接的に達成するのに十分な量である。臨床状況において理解されるように、薬物、化合物又は薬学的組成物の有効投薬量は、別の薬物、化合物又は薬学的組成物と併せて達成されても、そうでなくてもよい。したがって、「有効投薬量」は、一又は複数の治療剤を投与する状況において考慮されてもよく、一又は複数の他の薬剤とのコンジュゲートにおいて所望の結果が達成され得るか又は達成される場合、単一薬剤が有効量で与えられると考えられてもよい。
【００８１】
本明細書中で使用される場合、「〜と併せて」とは、一の治療モダリティーを別の治療モダリティーに加えて投与することを指す。又は、「〜と併せて」とは、一の治療モダリティーを他の治療モダリティーの投与の前、最中若しくは後に、個体に投与することを指す。
【００８２】
本明細書中で使用される場合、「治療」又は「治療する」とは、好ましくは臨床結果を含む有益な又は所望の結果を得るための手法である。本開示の目的上、有益な又は所望の臨床結果は、一又は複数の以下を含むが、これらに限定されない：がん性細胞の増殖を減少させる（若しくは破壊する）こと、疾患により生じる症状を減少させること、疾患に罹患する対象の生活の質を向上させること、疾患を治療するのに必要な他の投薬用量を減少させること、疾患の進行を遅らせること、及び／又は個体の生存期間を延長すること。
【００８３】
本明細書中で使用される場合、「疾患の発病を遅らせること」とは、疾患（例えばがん）の発病を引き延ばす、妨げる、減速させる、遅滞させる、安定させる、及び／又は延期させることを意味する。病歴及び／又は治療されている個体により、この遅れの時間は様々である。当業者にとっては明白であるように、十分な又は有意な遅れには、実質的に、個体が疾患を発病しない予防が含まれる。例えば、末期がん、例えば転移発症は遅らせられ得る。
【００８４】
「個体」又は「対象」は、哺乳類、より好ましくはヒトである。哺乳類は、家畜、競技用動物、ペット（ネコ、イヌ、ウマ等）、霊長類、マウス及びラットも含むが、これらに限定されない。
【００８５】
本明細書中で使用される場合、用語「特異的に認識する」又は「特異的に結合する」とは、測定可能及び再現可能な相互作用、例えば標的と抗体（又は分子若しくは部分）との間の引力又は結合を指し、これは、生物学的分子を含む分子の不均一集団の存在中の標的の存在を決定する。例えば、エピトープと特異的に又は優先的に結合する抗体は、標的若しくは非標的エピトープの他のエピトープに結合するよりも、より高い親和性（affinity、avidity）で、より容易に、及び／又はより長い持続時間で、このエピトープを結合する抗体である。また、例えば、第一の標的と特異的に又は優先的に結合する抗体（又は部分若しくはエピトープ）は、第二の標的と特異的に又は優先的に結合しても、そうでなくてもよい。このように、「特異的な結合」若しくは「優先的な結合」とは、排他的な結合を（含み得るが）必ずしも必要としない。標的と特異的に結合する抗体は、少なくとも約１０３Ｍ−１若しくは１０４Ｍ−１、時には約１０５Ｍ−１若しくは１０６Ｍ−１、他の例では約１０６Ｍ−１若しくは１０７Ｍ−１、約１０８Ｍ−１から１０９Ｍ−１、又は約１０１０Ｍ−１から１０１１Ｍ−１あるいはそれ以上の結合定数を有してもよい。特定のタンパク質と特異的に免疫反応する抗体を選択するための様々なイムノアッセイフォーマットが使用され得る。例えば、固体相ＥＬＩＳＡイムノアッセイは、タンパク質と特異的に免疫反応するモノクローナル抗体を選択するために、常套的に使用される。特定の免疫反応を決定するために使用され得るイムノアッセイフォーマット及び条件についての記載に関しては、例えば、Ｈａｒｌｏｗ及びＬａｎｅ  （１９８８）  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋを参照のこと。
【００８６】
用語「がん」、「腫瘍」、「がん性」及び「悪性」は、本明細書で使用される場合、調節されない細胞増殖によって典型的に特徴づけられる、哺乳動物の生理学的状態を指すか又は表わす。がんの例は、腺癌、リンパ腫、芽細胞腫、メラノーマ及び肉腫を含む癌を含むが、これらに限定されない。更に特定の例は、扁平上皮がん、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、肺腺癌、肺扁平上皮癌、胃腸がん、ホジキン及び非ホジキンリンパ腫、膵臓がん、膠芽細胞腫、子宮頸がん、神経膠腫、卵巣がん、肝がん及び肝細胞癌等の肝臓がん、膀胱がん、乳がん、結腸がん、結腸直腸がん、子宮内膜若しくは子宮癌、唾液腺癌、腎細胞癌及びウィルムス腫瘍等の腎臓がん、基底細胞癌、メラノーマ、中皮腫、前立腺がん、甲状腺がん、精巣がん、食道がん、胆嚢がん、並びに様々な種類の頭頸部がんを含む。
【００８７】
本明細書及び添付の特許請求の範囲において使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、文脈が明らかに他を指さない限り複数形を含む。例えば、「抗体」への言及は、一から多数の抗体、例えばモル量に対する言及であり、当業者に知られているそれらと同等のものなどを含む。
【００８８】
本明細書中の「約」の値又はパラメータへの言及は、その値又はパラメータ自体に対する実施態様を含む（記載する）。例えば、「約Ｘ」との記載には「Ｘ」の記載が含まれる。
【００８９】
本明細書に記載の本発明の態様及び変形形態は、態様及び変形形態「からなる」及び／又は「本質的にからなる」を含む。
【００９０】
別段の規定がない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を持つ。本明細書中に記載されるものと類似又は同等の任意の方法及び物質も本発明の実施又は試験において使用され得るが、好ましい方法及び物質はここに記載される。本明細書中で言及される全ての出版物は、出版物が引用されることに関連する方法及び／又は物質を開示し、記載するために、参照により本明細書に援用される。
【００９１】
別記されない限り、本実施態様の方法及び技術は、当該技術分野でよく知られている従来からの方法に従って、並びに、本明細書を通して引用及び検討される様々な一般的な及びより具体的な参照文献に記載されているように、一般的に実施される。例えば、Ｌｏｕｄｏｎ，  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，  ４ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：  Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，  ２００２，  ｐｐ．  ３６０−３６１，  １０８４−１０８５；Ｓｍｉｔｈ及びＭａｒｃｈ，  Ｍａｒｃｈ’ｓ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，  ５ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，  ２００１を参照のこと。
【００９２】
対象化合物を命名するための本明細書中で使用される命名法は、本明細書中の実施例で説明される。この命名法は、一般的に市販のＡｕｔｏＮｏｍソフトウェア（MDL, San Leandro, Calif.）を使用して生成される。
【００９３】
明確にするために別個の実施態様の文脈中に記載される本発明のある特徴は、一の実施態様中で組合せで提供されてもよいことが理解される。反対に、簡潔にするために一の実施態様の文脈中に記載される本発明の様々な特徴は、別々に又は任意の適切なサブコンビネーションで提供されてもよい。変数により表される化学基に関連する実施態様の全ての組合せは、本発明に特に包含され、且つそのような組合せが安定した化合物（すなわち、単離され、特徴づけられ、生物学的活性に関して試験され得る化合物）を包含する程度に、一つ一つの組合せが個別に且つ明確に開示されるかのように、本明細書中に開示される。加えて、そのような変数を記載する実施態様に列挙される化学基の全てのサブコンビネーションもまた、本発明によって特に包含され、且つ化学基の一つ一つのそのようなサブコンビネーションが個別に且つ明白に本明細書に開示されるかのように、本明細書中に開示される。
【００９４】
詳細な説明
本開示は、適切な条件下で開裂可能であってもよく、親水基を包含してコンジュゲートの溶解度を高める、親水性の自壊性リンカーを有する化合物（抗ＣＤ２２抗体薬物コンジュゲート）を提供する。親水性の自壊性リンカーは、しばしば疎水性である細胞傷害性薬物に関する薬物コンジュゲートの溶解度の増加を提供し得る。薬物コンジュゲートに親水性の自壊性リンカーを使用するその他の利点は、薬物コンジュゲートの安定性の増加及び薬物コンジュゲートの凝集の低下を含む。
【００９５】
本開示は、優れた血清安定性を有し得る抗体薬物コンジュゲートを提供する。例えば、薬物のヒドロキシル基が水性バッファー又はヒト血清中の急速な加水分解の影響を受けやすい不安定な炭素結合を介してスペーサーに結合している、抗体薬物コンジュゲートとは対照的に、ベンジルオキシカルボニル結合を利用した本実施態様の抗体薬物コンジュゲートは、同一条件下で比較的より安定し得、且つ選択的に断片化を受けて、プロテアーゼ、例えばカテプシンＢでの治療の際に薬物を放出し得る。血清安定性は、抗体薬物コンジュゲートに対する望ましい特性であり、不活性な薬物を患者の血清に投与し、リガンドを用いてその不活性な薬物を標的で濃縮させ、次いでその抗体薬物コンジュゲートを標的の付近においてのみ活性型に変換させることが望ましい。
【００９６】
本開示は、低下した凝集を有し得る抗体薬物コンジュゲートを提供する。いくつかの酵素不安定リンカーの関連した疎水性の増加は、特に、高い疎水性を持つ薬物との抗体薬物コンジュゲートの凝集をもたらし得る。親水基をリンカーへ包含することにより、抗体薬物コンジュゲートの凝集が減少されてもよい。
【００９７】
本開示の化合物（抗体薬物コンジュゲート）は、薬物部分、選択された細胞集団（例えば、ＣＤ２２発現細胞）を標的とする能力のある標的化部分、並びに、アシル単位、薬物部分と標的化部分との間に距離を与えるための任意のスペーサー単位、適切な条件下で開裂可能であるペプチドリンカー、親水性の自壊性リンカー、及び任意の第二の自壊性スペーサー又は環化自己脱離リンカーを含むリンカーを含む。それぞれの特徴を以下で説明する。
【００９８】
本開示は、式（Ｉ）：
2017523958.tif 000022
［式中：
Ｄは薬物部分であり；
Ｔは標的化部分であり；
Ｘは疎水性の自壊性リンカーであり；
Ｌ１は結合、第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーであり；
Ｌ２は結合又は第二の自壊性リンカーであって；
ここで、Ｌ１が第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーである場合に、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が第二の自壊性リンカーである場合に、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合又はスペーサーであり；且つ
Ａはアシル単位である］
の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を提供する。
【００９９】
いくつかの実施態様において、標的化部分は、ＣＤ２２（例えば、ヒトＣＤ２２）に特異的に結合する抗体である。いくつかの実施態様において、標的化部分は、薬物部分との結合のために一又は複数の結合部位を有する抗ＣＤ２２抗体である。例えば、標的化部分Ｔは、リンカー−薬物部分（例えば、Ａ−Ｌ４−Ｌ３−Ｌ２−Ｘ−Ｌ１−Ｄ）との結合のために多数の部位を有し得る。このように、式（Ｉａ）：
2017523958.tif 000023
［式中、Ｄ、Ｔ、Ｘ、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４、及びＡが式（Ｉ）に関して定義した通りであり、ｐが１から２０である］の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体も同様に提供される。いくつかの実施態様において、ｐは１から８である。いくつかの実施態様において、ｐは１から６である。いくつかの実施態様において、ｐは１から４である。いくつかの実施態様において、ｐは２から４である。いくつかの実施態様において、ｐは、１、２、３又は４である。いくつかの実施態様において、ｐは２である。いくつかの実施態様において、ｐは３である。いくつかの実施態様において、ｐは４である。
【０１００】
ペプチドリンカー
式（Ｉ）において、Ｌ３はペプチドリンカーである。ある実施態様において、Ｌ３は、１から１０のアミノ酸残基のペプチドリンカーである。ある実施態様において、Ｌ３は、２から４のアミノ酸残基のペプチドリンカーである。ある例において、Ｌ３は、ジペプチドリンカーである。
【０１０１】
アミノ酸残基は、天然に存在するか又は非天然のアミノ酸残基であり得る。用語「天然アミノ酸」及び「天然に存在するアミノ酸」は、Ａｌａ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｕ、Ｐｈｅ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｐｒｏ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｖａｌ、Ｔｒｐ、及びＴｙｒを指す。「非天然アミノ酸」（すなわち、天然には存在しないアミノ酸）は、非制限的な例として、ホモセリン、ホモアルギニン、シトルリン、フェニルグリシン、タウリン、ヨードチロシン、セレノ−システイン、ノルロイシン（「Ｎｌｅ」）、ノルバリン（「Ｎｖａ」）、ベータ−アラニン、Ｌ−又はＤ−ナフタラニン、オルニチン（「Ｏｒｎ」）等を含む。
【０１０２】
アミノ酸は、Ｄ型の天然及び非天然アミノ酸も含む。「Ｄ−」は、天然に存在する（「Ｌ−」）アミノ酸の構造とは対照的に、「Ｄ」（右旋性の）立体構造を有するアミノ酸を指す。特定の立体構造が示されない場合、当業者は、アミノ酸とはＬ−アミノ酸であることを理解するであろう。しかしながら、アミノ酸は、Ｄ−及びＬ−立体構造のラセミ混合物中にあり得る。天然及び非天然アミノ酸は、購入され得るか（Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．；  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｃｈｅｍｔｅｃｈ）又は当該技術分野で知られている方法を使用して合成され得る。アミノ酸置換基は、その生物学的活性が保持される限り、残基の両極性、電荷、溶解度、疎水性、親水性及び／又は両親媒性の性質における類似性に基づいて作製され得る。
【０１０３】
アミノ酸残基配列は、一又は複数の腫瘍関連プロテアーゼによって生じたペプチジル誘導体薬物コンジュゲートから選択的に酵素により切断されるように、特に適合され得る。
【０１０４】
ある実施態様において、Ｌ３は、少なくとも一のリジン又はアルギニン残基を含むペプチドリンカーである。
【０１０５】
ある実施態様において、Ｌ３は、リジン、Ｄ−リジン、シトルリン、アルギニン、プロリン、ヒスチジン、オルニチン及びグルタミンから選択されるアミノ酸残基を含むペプチドリンカーである。
【０１０６】
ある実施態様において、Ｌ３は、バリン、イソロイシン、フェニルアラニン、メチオニン、アスパラギン、プロリン、アラニン、ロイシン、トリプトファン及びチロシンから選択されるアミノ酸残基を含むペプチドリンカーである。
【０１０７】
ある実施態様において、Ｌ３は、バリン−シトルリン、プロリン−リジン、メチオニン−Ｄ−リジン、アスパラギン−Ｄ−リジン、イソロイシン−プロリン、フェニルアラニン−リジン、及びバリン−リジンから選択されるジペプチドリンカーである。ある実施態様において、Ｌ３はバリン−シトルリンである。
【０１０８】
本開示での使用に適した多数の特定のペプチドリンカー分子は、特定の腫瘍関連プロテアーゼによる酵素的切断に関するその選択性において設計され、最適化され得る。本開示での使用のためのあるペプチドリンカーは、プロテアーゼ、カテプシンＢ及びＤに対して最適化されたものである。
【０１０９】
親水性の自壊性リンカー
式（Ｉ）において、Ｘは親水性の自壊性リンカーである。
【０１１０】
本開示の化合物は、スペースを空け、薬物部分及び標的化部分と共有結合し、親水基を包含する親水性の自壊性スペーサー部分を採用しており、これは、化合物の高い溶解度を提供する。いくつかの酵素不安定リンカーの関連した疎水性の増加は、特に、高い疎水性を持つ薬物との薬物コンジュゲートの凝集をもたらし得る。親水基をリンカーへ包含することにより、薬物コンジュゲートの凝集が減少されてもよい。
【０１１１】
自壊性スペーサーは、通常安定している三構成の分子中に二のスペースが空いた化学的部分と共有結合する能力があり、酵素的切断の手段により三構成の分子からスペースが空いた化学的部分のうちの一方を放出し得、且つ酵素的切断に続いて、残りの分子から自発的に切断してスペースが開いた化学的部分のうちの他方を放出し得る、二官能性の化学的部分として定義されてもよい。
【０１１２】
ある実施態様において、Ｘは、ベンジルオキシカルボニル基である。ある実施態様において、Ｘは、
2017523958.tif 000024
［式中、Ｒ１は水素、無置換若しくは置換Ｃ１−３アルキル、又は無置換若しくは置換ヘテロシクリルである］である。
【０１１３】
そのような例において、本開示は、式（ＩＩ）：
2017523958.tif 000025
［式中：
Ｄは薬物部分であり；
Ｔは標的化部分であり；
Ｒ１は水素、無置換若しくは置換Ｃ１−３アルキル、又は無置換若しくは置換ヘテロシクリルであり；
Ｌ１は結合、第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーであり；
Ｌ２は結合、第二の自壊性リンカーであって；
ここで、Ｌ１が第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーである場合に、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が第二の自壊性リンカーである場合に、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合又はスペーサーであり；且つ
Ａはアシル単位である］
の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を提供する。
【０１１４】
いくつかの実施態様において、式（ＩＩａ）：
2017523958.tif 000026
［式中、Ｄ、Ｔ、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４及びＡは、式（ＩＩ）に定義される通りであり、ｐは１から２０である］の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体が提供される。いくつかの実施態様において、ｐは１から８である。いくつかの実施態様において、ｐは１から６である。いくつかの実施態様において、ｐは１から４である。いくつかの実施態様において、ｐは２から４である。いくつかの実施態様において、ｐは１、２、３又は４である。いくつかの実施態様において、ｐは２である。いくつかの実施態様において、ｐは３である。いくつかの実施態様において、ｐは４である。
【０１１５】
式（ＩＩ）又は（ＩＩａ）のある実施態様において、Ｒ１は水素である。ある例において、Ｒ１はメチルである。
【０１１６】
式（Ｉ）又は（Ｉａ）に関して記載されるＤ、Ｔ、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４、及びＡの一つ一つの変化形が、一つ一つの変化形及び組み合わせが個別に記載されているかのように、式（ＩＩ）又は（ＩＩａ）に適用され得ると意図及び理解される。例えば、いくつかの実施態様において、式（ＩＩ）又は（ＩＩａ）の標的化部分は、ＣＤ２２（例えば、ヒトＣＤ２２）に特異的に結合する抗体である。式（Ｉ）に関して記載されたＤ、Ｔ、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４、及びＡの一つの一つ一つの変化形を、必要に応じて、一つ一つの組み合わせが個別に記載されているかのように、式（Ｉ）に関して記載されたＤ、Ｔ、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４、及びＡの別の一つの一つ一つの変化形と組み合わせてもよいと更に意図及び理解される。
【０１１７】
薬物部分の放出は、アミノベンジルオキシカルボニル基の自己脱離反応に基づく。便宜上、結合した薬物及びペプチドと共にアミノベンジルオキシカルボニル基を用いた反応スキームを以下に示す。
2017523958.tif 000027
【０１１８】
スキーム１に関して、ペプチドからの切断の際、アミノベンジルオキシカルボニルが形成され、自発的な１，６脱離を受けてシクロヘキサ−２，５−ジエニミン誘導体及び二酸化炭素を形成し、薬物を放出し得る。
【０１１９】
任意選択的な第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカー
第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーは、薬物部分を放出するために化合物の切断を微調整することを可能にするための追加のリンカーを提供する。
【０１２０】
式（Ｉ）又は（Ｉａ）において、Ｌ１は、結合、第二の自壊性リンカー、又は環化自己脱離リンカーであり；Ｌ２は、結合又は第二の自壊性リンカーであって；ここで、Ｌ１が第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーである場合に、Ｌ２は結合であり；ここで、Ｌ２が第二の自壊性リンカーである場合に、Ｌ１は結合である。したがって、親水性の自壊性リンカーに隣接する任意選択的な第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーが存在する。
【０１２１】
ある実施態様において、Ｌ１は結合であり、且つＬ２は結合である。ある実施態様において、Ｌ１は第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーであり、Ｌ２は結合である。ある実施態様において、Ｌ１は結合であり、Ｌ２は第二の自壊性リンカーである。
【０１２２】
ある実施態様において、式（Ｉ）又は（Ｉａ）では、Ｌ１は結合である。ある実施態様において、Ｌ１は第二の自壊性スペーサー又は環化自己脱離リンカーであり、親水性の自壊性リンカーと薬物部分を分離する。ある実施態様において、Ｌ１はアミノベンジルオキシカルボニルリンカーである。
【０１２３】
ある実施態様において、Ｌ１は：
2017523958.tif 000028
［式中、ｎは、１又は２である］
から選択される。
【０１２４】
ある例において、第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーは、使用され得る多種多様な部分に関する設計潜在性を提供する。例えば、式（ＩＩ）又は（ＩＩａ）において、親水性の自壊性リンカーと薬物部分との間のカルバメート結合（−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｈ）−）結合は、安定した薬物コンジュゲートを提供し、遊離薬物部分を提供するために容易に切断するであろう。親水性の自壊性リンカーは、典型的にはオキシカルボニル基（−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−）で終結する。薬物部分が、カルバメート基を形成するよう反応するために使用され得るアミノ反応基を有する場合、第二の自壊性ユニット又は環化自己脱離リンカーは、採用されてもよいが、必要ではない。しかしながら、薬物がアミノ基を含有せず、他の反応官能基を含有する場合、そのような薬物は、薬物部分とアミノベンジルオキシカルボニル基との間の第二の、中間体自壊性スペーサー又は環化自己脱離リンカーを含めることにより、本実施態様のアミノベンジルオキシカルボニル含有化合物中に包含されていてもよい。
【０１２５】
以下のＬ１の環化自己脱離リンカーは、親水性の自壊性リンカーのアミノベンジルオキシカルボニル基
2017523958.tif 000029
に対するヒドロキシル含有又はチオール含有薬物部分の結合を提供する。
【０１２６】
実施態様の化合物中の環化自己脱離リンカーは、化合物の切断を提供し、薬物部分を放出する。隣接する親水性の自壊性リンカーの脱離メカニズムは、Ｌ１のアミノ基を示すであろう。次いで、アミノ基は、Ｌ１のカルバメート基又はチオカルバメート結合及びヒドロキシル含有又はチオール含有薬物部分を放出する環化反応中の薬物部分と反応し得る。
【０１２７】
ある実施態様において、式（Ｉ）又は（Ｉａ）では、Ｌ２は結合である。ある実施態様において、Ｌ２は第二の自壊性スペーサーであり、親水性の自壊性リンカーとペプチドリンカーを分離する。ある実施態様において、Ｌ２はアミノベンジルオキシカルボニルリンカーである。
【０１２８】
ある実施態様において、Ｌ２は、
2017523958.tif 000030
［式中、ｎは、１又は２である］
から選択される。
【０１２９】
任意選択的なスペーサー
式（Ｉ）又は（Ｉａ）において、Ｌ４は結合又はスペーサーである。ある実施態様において、Ｌ４は結合である。ある実施態様において、Ｌ４はスペーサーであり、それは薬物部分と標的化部分との間に距離を提供し得る。
【０１３０】
ある実施態様において、スペーサーは、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、置換複素環式及びヘテロ原子、並びにそれらの組合せから選択される。スペーサーは、その原子含有量（例えば、炭素原子のみを含有するスペーサー又は炭素原子とスペーサー上に存在する一又は複数のヘテロ原子を含有するスペーサー）において均一又は不均一であり得る。好ましくは、スペーサーは、１から５０個の炭素原子並びに酸素、窒素及び硫黄から選択される０から３０個のヘテロ原子を含有する。スペーサーはまた、キラル若しくはアキラル、直鎖状、分枝状又は環状であってもよい。
【０１３１】
ある実施態様において、Ｌ４は、ポリアルキレングリコール、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、及びポリアミンから選択されるスペーサーである。アルケニレンの例は、ビニレン（−ＣＨ＝ＣＨ−）、アリレン（−ＣＨ２Ｃ＝Ｃ−）、及びブタ−３−エン−１−イレン（−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ＝ＣＨ−）を含むが、これらに限定されない。アルケニレンの例は、アセチレニレン（−Ｃ≡Ｃ−）、及びプロパルギレン（−ＣＨ２Ｃ≡Ｃ−）を含むが、これらに限定されない。
【０１３２】
ある実施態様において、Ｌ４は、ペプチド結合の末端に結合を提供し得る官能基を含むスペーサーである。官能基、例えばＣ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）−ＮＨ、Ｓ（Ｏ）２、及びＳ（Ｏ）２−ＮＨは、ペプチド結合の末端に結合を提供し得る。ある例において、Ｌ４はＬ４ａ−Ｃ（Ｏ）、Ｌ４ａ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ、Ｌ４ａ−Ｓ（Ｏ）２、Ｌ４ａ−Ｓ（Ｏ）２−ＮＨであって、Ｌ４ａはポリアルキレングリコール、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、及びポリアミンから選択される。ある例において、Ｌ４はＬ４ａ−Ｃ（Ｏ）であって、Ｌ４ａはポリアルキレングリコール、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、及びポリアミンから選択される。
【０１３３】
ある実施態様において、Ｌ４はＬ４ａ−Ｃ（Ｏ）であって、Ｌ４ａはポリアルキレングリコールである。ある実施態様において、Ｌ４はＬ４ａ−Ｃ（Ｏ）であって、Ｌ４ａはポリエチレングリコールである。ある実施態様において、スペーサーは−ＣＨ２−（ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２）ｍ−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−の式であって、ｍは０から３０の整数である。
【０１３４】
ある実施態様において、Ｌ４はＬ４ａ−Ｃ（Ｏ）であって、Ｌ４ａはアルキレンである。ある実施態様において、Ｌ４はＬ４ａ−Ｃ（Ｏ）であって、Ｌ４ａはＣ１−１０アルキレン、Ｃ１−８アルキレン、又はＣ１−６アルキレンである。ある実施態様において、Ｌ４はＬ４ａ−Ｃ（Ｏ）であって、Ｌ４ａはＣ４アルキレン、Ｃ５アルキレン、又はＣ６アルキレンである。ある実施態様において、Ｌ４はＬ４ａ−Ｃ（Ｏ）であって、Ｌ４ａはＣ５アルキレンである。
【０１３５】
アシル単位
式（Ｉ）又は（Ｉａ）において、Ａはアシル単位である。ある実施態様において、アシル単位「Ａ」は、硫黄原子を含み、標的化部分に由来する硫黄原子を介して標的化部分に結合される。そのような例において、ジチオ結合は、アシル単位と標的化部分との間で形成される。
【０１３６】
ある実施態様において、Ａは、
2017523958.tif 000031
［式中、Ｑ２はＮＨ又はＯであり、各ｑは独立して１から１０の整数であり、各ｑ１は、独立して１から１０の整数である］から選択される。ある実施態様において、ｑは、２から５の整数、例えば２、３、４、又は５である。いくつかの実施態様において、ｑ１は、２から５の整数、例えば２、３、４、又は５である。
【０１３７】
ある実施態様において、Ａは、
2017523958.tif 000032
［式中Ｑ２はＮＨ又はＯであり、ｑは１から１０の整数である］である。ある例において、ｑは、２から５の数、例えば２、３、４、又は５である。
【０１３８】
ある実施態様において、Ａは
2017523958.tif 000033
［式中、Ｑ２はＮＨ又はＯであり、ｑは１から１０の整数である］である。ある例において、ｑは２から５の数字、例えば、２、３、４、又は５である。
【０１３９】
ある実施態様において、Ａは、
2017523958.tif 000034
［式中、Ｑ２はＮＨ又はＯである］から選択される。
【０１４０】
薬物部分
本実施態様の薬物コンジュゲートは、対応する薬物が効果的である通常の目的に有効であり、標的化部分に固有の能力により、特に有益な所望の細胞に薬物を輸送する優れた有効性を有する。
【０１４１】
本実施態様での使用のための好ましい薬物は、細胞傷害性薬物、例えばがんの治療のために使用されるものなどである。そのような薬物は、一般的に、ＤＮＡ損傷剤、抗代謝物、天然産物及びそれらの類似体を含む。細胞傷害性剤のあるクラスは、例えば、酵素阻害剤、例えば、ジヒドロ葉酸還元酵素阻害剤、チミジル酸合成酵素阻害剤、ＤＮＡインターカレーター、ＤＮＡ切断剤、トポイソメラーゼ阻害剤、薬物のアントラサイクリンファミリー、ビンカ薬物、マイトマイシン、ブレオマイシン、細胞傷害性ヌクレオシド、薬物のプテリジンファミリー、ジイネン、ポドフィロトキシン、分化誘導剤及びタキソールを含む。これらのクラスのある有用な要素は、例えば、メトトレキサート、メトプテリン、ジクロロメトトレキサート、５−フルオロウラシル、６−メルカプトプリン、シトシンアラビノシド、メルファラン、ロイロシン、ロイロシデイン、アクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、マイトマイシンＣ、マイトマイシンＡ、カルミノマイシン、アミノプテリン、タリソマイシン、ポドフィロトキシン及びポドフィロトキシン誘導体（例えばエトポシド又はリン酸エトポシド）、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、タキソール、タキソテールレチノイン酸、酪酸、Ｎ８−アセチルスペルミジン、並びにそれらの類似体を含む。その他の薬物は、ドラスタチン及びデュオカルマイシンを含む。
【０１４２】
当業者は、本発明のコンジュゲートを作成する目的で化合物の反応をより簡便にするために、所望の化合物に対して化学修飾をなしてもよい。
【０１４３】
ある実施態様において、Ｄは、薬物がＬ１又はＸに結合されていることにより、化学的に反応性のある官能基を有する薬物部分である。ある例において、官能基は、第一級アミン、第二級アミン、ヒドロキシル及びスルフヒドリルから選択される。ある例において、官能基は第一級アミン又は第二級アミンである。ある例において、官能基はヒドロキシルである。ある例において、官能基はスルフヒドリルである。
【０１４４】
上記のように、親水性の自壊性リンカーは、典型的にはオキシカルボニル基（−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−）で終結する。したがって、アミノ含有薬物部分は、オキシカルボニル基と容易に反応し、カルバメート基を形成するであろう。ある実施態様において、Ｄはアミノ含有薬物部分であり、薬物は、アミノ基を通じてＬ１又はＸに結合されている。
【０１４５】
しかしながら、薬物部分がアミノ基を含有しない場合、Ｌ１の第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーは、使用され得る多種多様な部分に関する設計可能性を提供し得る。ある実施態様において、Ｄはヒドロキシル含有又はスルフヒドリル含有薬物部分であり、薬物は、ヒドロキシル又はスルフヒドリル基を通じてＬ１に結合されている。
【０１４６】
代表的なアミノ含有薬物は、マイトマイシン−Ｃ、マイトマイシン−Ａ、ダウノルビシン、ドキソルビシン、アミノプテリン、アクチノマイシン、ブレオマイシン、９−アミノカンプトテシン、Ｎ８−アセチルスペルミジン、１−（２−クロロエチル）−１，２−ジメタンスルホニルヒドラジド、タリソマイシン、シタラビン、ドラスタチン及びそれらの誘導体を含む。アミノ含有薬物は、天然にはアミノ基を含有しない薬物のアミノ誘導体も含む。ある実施態様において、Ｄはデュオカルマイシン、ドラスタチン、ツブリシン、ドキソルビシン（ＤＯＸ）、パクリタキセル若しくはマイトマイシンＣ（ＭＭＣ）、又はそのアミノ誘導体である。
【０１４７】
代表的なヒドロキシル含有薬物は、エトポシド、カンプトテシン、タキソール、エスペラマイシン、１，８−ジヒドロキシ−ビシクロ［７．３．１］トリデカ−４−９−ジエン−２，６−ジイン−１３−オン（米国特許第５１９８５６０号）、ポドフィロトキシン、アングイジン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、モルホリン−ドキソルビシン、ｎ−（５，５−ジアセトキシ−ペンチル）ドキソルビシン、デュオカルマイシン及びそれらの誘導体を含む。
【０１４８】
代表的なスルフヒドリル含有薬物は、エスペラマイシン及び６−メルカプトプリン、並びにそれらの誘導体を含む。
【０１４９】
本実施態様における薬物としての使用のための細胞傷害性剤のある基は、以下の式：
2017523958.tif 000035
の薬物を含む。
【０１５０】
標的化部分
本開示において記載されるような標的化部分とは、所与の細胞集団（例えば、ＣＤ２２発現細胞）を特異的に結合する、それと複合体を形成する、それと反応する、又はそれと会合する部分又は分子を指す。本明細書中に記載されるコンジュゲートにおいて、本明細書中に記載される標的化部分は、リンカーを介してコンジュゲート中の薬物部分に結合される。いくつかの実施態様において、標的化部分は、標的化部分がそれと結合し、それと複合体を形成し、それと反応し、又はそれと会合する特定の標的細胞集団に薬物部分（例えば、治療目的で使用される薬物部分）を送達する能力がある。
【０１５１】
いくつかの実施態様において、標的化部分は抗体（又は抗体部分若しくは抗体標的化部分）である。いくつかの実施態様において、標的化部分は、スルフヒドリル（−ＳＨ）基（例えば遊離した反応性スルフヒドリル（−ＳＨ）基）を含むか、又はそのようなスルフヒドリル基を含有するように改変され得る。いくつかの実施態様において、標的化部分は、スルフヒドリル基（例えば遊離した反応性スルフヒドリル基）を有する抗体を含む。いくつかの実施態様において、標的化部分は、遊離したチオール基、例えば遊離したチオール基を有する抗体を含むか、又はそのようなチオ基を含有するように改変され得る。いくつかの実施態様において、標的化部分は、スルフヒドリル基中の硫黄原子を介した、リンカーへのスルフヒドリル基又はチオール基結合を含む。
【０１５２】
いくつかの実施態様において、標的化部分（例えば抗体標的化部分）は、薬物部分への結合に関して一又は複数の結合部位を有する。例えば、標的化部分Ｔ（例えば抗体）は、リンカー−薬物部分（例えば、Ａは標的抗体のスルフヒドリル基への結合に適している、Ａ−Ｌ４−Ｌ３−Ｌ２−Ｘ−Ｌ１−Ｄ）への結合のための複数の部位（例えば複数のスルフヒドリル基）を有し得る。いくつかの実施態様において、標的化部分は、１から２０の結合部位を有し得る。いくつかの実施態様において、標的化部分は、１から２０、１から１０、１から８、１から６、１から４、２から８、２から６、又は２から４の結合部位を有し得る。いくつかの実施態様において、標的化部分は、１、２、３、４、５、６、７、又は８の結合部位を有する。いくつかの実施態様において、標的化部分は、２の結合部位を有する。いくつかの実施態様において、標的化部分は、１の結合部位を有する。いくつかの実施態様において、標的化部分は、４の結合部位を有する。いくつかの例において、ある潜在的な結合部位は薬物部分への結合に利用できなくてもよい。したがって、標的化部分Ｔ中の結合部位の数は、潜在的な結合部位の数よりも少ない数の結合した薬物部分を有する薬物コンジュゲートをもたらす。いくつかの実施態様において、一又は複数の結合部位は薬物部分の結合に利用されてもよい。例えば、抗体標的化部分は、抗体の各鎖上にリンカーを介した薬物部分への結合に利用できる一又は二のスルフヒドリル基を有し得る。
【０１５３】
本明細書中に記載される抗体とは、少なくとも一の抗原認識部位を通じて、免疫グロブリン分子の可変領域に存在する標的（すなわち、ＣＤ２２）に特異的に結合することができる免疫グロブリン分子を指す。本明細書中で使用される場合、用語「抗体」とは、インタクトなポリクローナル又はモノクローナル抗体だけではなく、その抗原結合断片（例えばＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ）、一本鎖、その変異体、抗体部分を含む融合タンパク質、及び抗原認識部位を含む免疫グロブリン分子のその他修正された立体配置を包含する。抗体は、ＩｇＧ、ＩｇＡ、若しくはＩｇＭ（又はそれらのサブクラス）等のあらゆるクラスの抗体を含み、特定のクラスに属している必要はない。その重鎖の定常ドメインの抗体アミノ酸配列に応じて、免疫グロブリンは異なるクラスが割り当てられ得る。免疫グロブリンには５つの主要なクラスがあり：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ及びＩｇＭがあり、これらのいくつかは、更にサブクラス（アイソタイプ）、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２に分けられ得る。免疫グロブリンの異なるクラスに対応する重鎖定常ドメインはそれぞれアルファ、デルタ、エプシロン、ガンマ、及びミューと称される。免疫グロブリンの異なるクラスのサブユニット構造及び三次元立体配位はよく知られている。
【０１５４】
本明細書中に記載される標的化部分（又は抗体標的化部分）中に含まれるか又は使用される抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、抗体断片（例えばＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、Ｆｃ等）、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体（例えば完全ヒト抗体）、一本鎖（ＳｃＦｖ）、二重特異性抗体、多重特異性抗体、その変異体、抗体部分を含む融合タンパク質、及び必要な特異性の抗原認識部位を含む免疫グロブリン分子のその他修正された立体配置を包含し得る。抗体は、マウス、ラット、ラクダ、ヒト、又はその他起源（ヒト化抗体を含む）であってもよい。いくつかの実施態様において、本明細書中に記載される標的化部分（又は抗体標的化部分）中に使用される抗体は、以下のうちの何れか一つである：二重特異性抗体、多重特異性抗体、一本鎖、二官能性、並びに少なくとも一の抗体の超可変領域（ＨＶＲ）又は相補性決定領域（ＣＤＲ）によりもたらされたポリペプチドに対する親和性を有するキメラ及びヒト化分子。本開示中に使用される抗体は、抗体重鎖の可変領域か又は抗体軽鎖の可変領域である単一ドメイン抗体も含む。Ｈｏｌｔら，  Ｔｒｅｎｄｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．  ２１：４８４−４９０，  ２００３。抗体から天然に存在する六のＨＶＲ又はＣＤＲのうちの三を含有する、抗体重鎖の可変領域か又は抗体軽鎖の可変領域を含むドメイン抗体を作製する方法は、当該技術分野で知られている。Ｍｕｙｌｄｅｒｍａｎｓ，  Ｒｅｖ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．  ７４：２７７−３０２，  ２００１を参照のこと。
【０１５５】
いくつかの実施態様において、本明細書中に記載される標的化部分（又は抗体標的化部分）中に含まれるか又は使用される抗体は、モノクローナル抗体である。本明細書中で使用される場合、モノクローナル抗体とは、実質的に均一な抗体の抗体、すなわち、集団を含む個々の抗体が、若干存在してもよい天然に存在する突然変異の可能性を除いて同一であることを指す。更に、異なる決定基（エピトープ）に対する異なる抗体を典型的に含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、モノクローナル抗体は個別抗体の混合物ではない。修飾語「モノクローナル」は、実質的に均一な抗体集団から得られているという抗体の特徴を示し、抗体を何か特定の方法で生成しなければならないことを意味するものではない。例えば、本開示で使用されるモノクローナル抗体は、及びＭｉｌｓｔｅｉｎ，  １９７５，  Ｎａｔｕｒｅ，  ２５６：４９５により最初に記載されたハイブリドーマ法により作製されてもよく、又は、米国特許第４８１６５６７号に記載されるような組換えＤＮＡ法により作製されてもよい。モノクローナル抗体はまた、例えばＭｃＣａｆｆｅｒｔｙら，１９９０，  Ｎａｔｕｒｅ  ３４８：５５２−５５４に記載される技術を使用して生成されるファージライブラリーから単離されてもよい。
【０１５６】
いくつかの実施態様において、本明細書中に記載される標的化部分（又は抗体標的化部分）中に含まれるか又は使用される抗体は、キメラ抗体である。本明細書中で使用される場合、キメラ抗体とは、第一の種から可変領域又は可変領域の一部と第二の種から定常領域を有する抗体を指す。インタクトなキメラ抗体は、キメラ軽鎖の二のコピーとキメラ重鎖の二のコピーを含む。キメラ抗体の生成は当該技術分野で知られている（Cabillyら (1984), Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 81:3273-3277； Harlow及びLane (1988), Antibodies: a Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory）。典型的には、これらのキメラ抗体において、軽鎖及び重鎖の両方の可変領域は、哺乳動物の一種に由来する抗体の可変領域を模倣し、その一方、定常部分は、別の種に由来する抗体中の配列と相同である。そのようなキメラ形態に対する一つの明確な利点は、例えば、可変領域は、非ヒト宿主生物体からの容易に利用できるハイブリドーマ又はＢ細胞を使用して、例えばヒト細胞調製物に由来する定常領域との組み合わせで、現在知られている源に簡便に由来し得る点である。可変領域が調製を容易にする利点を有し、特異性がその源に影響されないのに対し、ヒトである定常領域は、抗体が注入された場合、非ヒト源からの定常領域よりも、ヒト対象からの免疫反応を引き起こす可能性が低い。しかしながら、定義はこの特定の例に限定されない。
【０１５７】
いくつかの実施態様において、本明細書中に記載される標的化部分（又は抗体標的化部分）中に含まれるか又は使用される抗体は、ヒト化抗体である。本明細書中で使用される場合、ヒト化抗体とは、特異的なキメラ免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖、又は非ヒト免疫グロブリン由来の最小限の配列を含有するそれらの断片（例えばＦｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２若しくはその他抗体の抗原結合配列）である非ヒト（例えばマウス）抗体の形態を指す。大抵の場合、ヒト化抗体は、レシピエントのＨＶＲ又はＣＤＲ由来の残基が、非ヒト種、例えば、所望の特異性、親和性、及び能力を有するマウス、ラット又はウサギのＨＶＲ又はＣＤＲ（ドナー抗体）由来の残基により置き換えられているヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。いくつかの例においては、ヒト免疫グロブリンのＦｖフレームワーク領域（ＦＲ）の残基は、対応する非ヒト残基によって置き換えられている。更に、ヒト化抗体は、レシピエント抗体にも移入されたＨＶＲ又はＣＤＲ又はフレームワーク配列にも見られないが、抗体パフォーマンスを更に改良し最適化するために含まれる残基を含んでもよい。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも一つ、典型的には二つの可変ドメインの全てを実質的に含み、ＨＶＲ若しくはＣＤＲ領域の全て又は実質的に全てが非ヒト免疫グロブリンのものに対応し、ＦＲ領域の全て又は実質的に全てがヒト免疫グロブリンコンセンサス配列のものである。また、ヒト化抗体は、最適には、免疫グロブリン、通常はヒト免疫グロブリンの定常領域又はドメイン（Ｆｃ）の少なくとも一部を含む。抗体は国際公開第９９／５８５７２号に記載されるように修飾されたＦｃ領域を有してもよい。ヒト化抗体のその他形態は、元の抗体に関して変更された一又は複数のＨＶＲ又はＣＤＲ（一、二、三、四、五、六）を有し、これは、元の抗体からの一又は複数のＨＶＲ又はＣＤＲ「に由来する」一又は複数のＨＶＲ又はＣＤＲとも称される。
【０１５８】
いくつかの実施態様において、本明細書中に記載される標的化部分（又は抗体標的化部分）中に含まれるか又は使用される抗体は、ヒト抗体である。本明細書中で使用される場合、ヒト抗体とは、ヒトによって産生される抗体のアミノ酸配列に相当するアミノ酸配列を有する抗体を意味し、及び／又は当該技術分野で知られるヒト抗体を作製するための任意の技術を使用して作製されている。本明細書中で使用されるヒト抗体は、少なくとも一のヒト重鎖ポリペプチド又は少なくとも一のヒト軽鎖ポリペプチドを含む抗体を含む。そのような例の一つは、マウスの軽鎖及びヒト重鎖ポリペプチドを含む抗体である。ヒト抗体は、当技術分野で公知の様々な技術を用いて産生することができる。一実施態様において、ヒト抗体は、ヒト抗体を発現させるファージライブラリーから選択される（Vaughanら, 1996, Nature Biotechnology, 14:309-314；Sheets ら, 1998, PNAS, (USA) 95:6157-6162；Hoogenboom及びWinter, 1991, J. Mol. Biol., 227:381；Marksら, 1991, J. Mol. Biol., 222:581）。ヒト抗体はまた、内因性の免疫グロブリン遺伝子が部分的に又は完全に不活性化されている、マウス等のトランスジェニック動物にヒト免疫グロブリン遺伝子座を導入することにより、作製され得る。この手法は、米国特許第５５４５８０７号；同第５５４５８０６号；同第５５６９８２５号；同第５６２５１２６号；同第５６３３４２５号；及び同第５６６１０１６号に記載されている。あるいは、ヒト抗体は、標的抗原に対する抗体を産生する不死化ヒトＢリンパ球により調製されてもよい（そのようなＢリンパ球は個体から回収されてもよく、又はインビトロで免疫化されてもよい）。例えば、Ｃｏｌｅら，  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ，  Ａｌａｎ  Ｒ．  Ｌｉｓｓ，  ｐ．  ７７  （１９８５）；  Ｂｏｅｒｎｅｒら，  １９９１，  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．，  １４７（１）：８６−９５；及び米国特許第５７５０３７３号を参照のこと。
【０１５９】
いくつかの実施態様において、本明細書中に記載される標的化部分（又は抗体標的化部分）中に含まれるか又は使用される抗体は、ＣＤ２２（例えば、ヒトＣＤ２２）に特異的に結合する。いくつかの実施態様において、本明細書に記載される標的化部分（又は抗体標的化部分）に含まれるか又は使用される抗体は、ＣＤ２２の細胞外ドメイン（例えば、ヒトＣＤ２２の細胞外ドメイン）に特異的に結合する。本明細書で使用されるように、「ＣＤ２２」は、野生型配列及び天然に存在する変異体配列の両方を指す。本発明の抗体によって認識されるＣＤ２２の非制限的な例は、ヒトＣＤ２２（タンパク質データベースの寄託番号：ＮＰ＿００１７６２．２；ＧｅｎＢａｎｋ  Ｎｏ．：ＮＭ＿００１７７１．３）であり、そのアミノ酸配列を以下に提供する：
ＭＨＬＬＧＰＷＬＬＬＬＶＬＥＹＬＡＦＳＤＳＳＫＷＶＦＥＨＰＥＴＬＹＡＷＥＧＡＣＶＷＩＰＣＴＹＲＡＬＤＧＤＬＥＳＦＩＬＦＨＮＰＥＹＮＫＮＴＳＫＦＤＧＴＲＬＹＥＳＴＫＤＧＫＶＰＳＥＱＫＲＶＱＦＬＧＤＫＮＫＮＣＴＬＳＩＨＰＶＨＬＮＤＳＧＱＬＧＬＲＭＥＳＫＴＥＫＷＭＥＲＩＨＬＮＶＳＥＲＰＦＰＰＨＩＱＬＰＰＥＩＱＥＳＱＥＶＴＬＴＣＬＬＮＦＳＣＹＧＹＰＩＱＬＱＷＬＬＥＧＶＰＭＲＱＡＡＶＴＳＴＳＬＴＩＫＳＶＦＴＲＳＥＬＫＦＳＰＱＷＳＨＨＧＫＩＶＴＣＱＬＱＤＡＤＧＫＦＬＳＮＤＴＶＱＬＮＶＫＨＴＰＫＬＥＩＫＶＴＰＳＤＡＩＶＲＥＧＤＳＶＴＭＴＣＥＶＳＳＳＮＰＥＹＴＴＶＳＷＬＫＤＧＴＳＬＫＫＱＮＴＦＴＬＮＬＲＥＶＴＫＤＱＳＧＫＹＣＣＱＶＳＮＤＶＧＰＧＲＳＥＥＶＦＬＱＶＱＹＡＰＥＰＳＴＶＱＩＬＨＳＰＡＶＥＧＳＱＶＥＦＬＣＭＳＬＡＮＰＬＰＴＮＹＴＷＹＨＮＧＫＥＭＱＧＲＴＥＥＫＶＨＩＰＫＩＬＰＷＨＡＧＴＹＳＣＶＡＥＮＩＬＧＴＧＱＲＧＰＧＡＥＬＤＶＱＹＰＰＫＫＶＴＴＶＩＱＮＰＭＰＩＲＥＧＤＴＶＴＬＳＣＮＹＮＳＳＮＰＳＶＴＲＹＥＷＫＰＨＧＡＷＥＥＰＳＬＧＶＬＫＩＱＮＶＧＷＤＮＴＴＩＡＣＡＡＣＮＳＷＣＳＷＡＳＰＶＡＬＮＶＱＹＡＰＲＤＶＲＶＲＫＩＫＰＬＳＥＩＨＳＧＮＳＶＳＬＱＣＤＦＳＳＳＨＰＫＥＶＱＦＦＷＥＫＮＧＲＬＬＧＫＥＳＱＬＮＦＤＳＩＳＰＥＤＡＧＳＹＳＣＷＶＮＮＳＩＧＱＴＡＳＫＡＷＴＬＥＶＬＹＡＰＲＲＬＲＶＳＭＳＰＧＤＱＶＭＥＧＫＳＡＴＬＴＣＥＳＤＡＮＰＰＶＳＨＹＴＷＦＤＷＮＮＱＳＬＰＹＨＳＱＫＬＲＬＥＰＶＫＶＱＨＳＧＡＹＷＣＱＧＴＮＳＶＧＫＧＲＳＰＬＳＴＬＴＶＹＹＳＰＥＴＩＧＲＲＶＡＶＧＬＧＳＣＬＡＩＬＩＬＡＩＣＧＬＫＬＱＲＲＷＫＲＴＱＳＱＱＧＬＱＥＮＳＳＧＱＳＦＦＶＲＮＫＫＶＲＲＡＰＬＳＥＧＰＨＳＬＧＣＹＮＰＭＭＥＤＧＩＳＹＴＴＬＲＦＰＥＭＮＩＰＲＴＧＤＡＥＳＳＥＭＱＲＰＰＰＤＣＤＤＴＶＴＹＳＡＬＨＫＲＱＶＧＤＹＥＮＶＩＰＤＦＰＥＤＥＧＩＨＹＳＥＬＩＱＦＧＶＧＥＲＰＱＡＱＥＮＶＤＹＶＩＬＫＨ（配列番号１４）。
【０１６０】
いくつかの実施態様において、本明細書に記載される抗ＣＤ２２抗体は、ヒト細胞（例えば、ヒトがん細胞）の細胞表面に発現される成熟ＣＤ２２（例えば、ヒトＣＤ２２）に結合する。いくつかの実施態様において、本明細書に記載される抗ＣＤ２２抗体は、ヒトリンパ腫細胞又はヒト白血病細胞の細胞表面に発現される成熟ＣＤ２２に結合する。
【０１６１】
抗ＣＤ２２抗体及びそのアミノ酸配列の例を以下の表１に提供する。
2017523958.tif 000036
【０１６２】
ＩｇＧ４ｐは、Ｓｅｒ２２８のＰｒｏへの突然変異（Ｓ２２８Ｐ）を有するヒトＩｇＧ４抗体を指し、これによってインビボでＦａｂアームの別のＩｇＧ４との交換が防止される（Stubenrauchら(2010)Drug Metab. Dispos.38(1):84-91）。
【０１６３】
ｈＬＬ２、ｈ１０Ｆ４、ｇ５／４４、ｈＨＢ２２．７、及びＲＦＢ４の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域のアミノ酸配列を以下に提供する。各重鎖又は軽鎖のＣＤＲには下線が付されている。
配列番号１（ｈＬＬ２軽鎖可変領域）
ＤＩＱＬＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＭＳＣＫＳＳＱＳＶＬＹＳＡＮＨＫＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＦＴＩＳＳＬＱＰＥＤＩＡＴＹＹＣＨＱＹＬＳＳＷＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ
配列番号２（ｈＬＬ２重鎖可変領域）
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＳＹＷＬＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＹＩＮＰＲＮＤＹＴＥＹＮＱＮＦＫＤＫＡＴＩＴＡＤＥＳＴＮＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＦＹＦＣＡＲＲＤＩＴＴＦＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ
配列番号３（ｈ１０Ｆ４軽鎖可変領域）
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＳＳＱＳＩＶＨＳＶＧＮＴＦＬＥＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＦＱＧＳＱＦＰＹＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ
配列番号４（ｈ１０Ｆ４重鎖可変領域）
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＹＥＦＳＲＳＷＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＧＲＩＹＰＧＤＧＤＴＮＹＳＧＫＦＫＧＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＧＳＳＷＤＷＹＦＤＶＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
配列番号５（ｇ５／４４軽鎖可変領域）
ＤＶＱＶＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＳＳＱＳＬＡＮＳＹＧＮＴＦＬＳＷＹＬＨＫＰＧＫＡＰＱＬＬＩＹＧＩＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＬＱＧＴＨＱＰＹＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ
配列番号６（ｇ５／４４重鎖可変領域）
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＲＦＴＮＹＷＩＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＧＩＮＰＧＮＮＹＡＴＹＲＲＫＦＱＧＲＶＴＭＴＡＤＴＳＴＳＴＶＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＴＲＥＧＹＧＮＹＧＡＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
配列番号７（ｈＨＢ２２．７軽鎖可変領域）
ＤＩＶＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＳＶＴＮＤＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＹＡＳＮＲＹＴＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＤＹＲＳＰＷＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫ
配列番号８（ｈＨＢ２２．７重鎖可変領域）
ＱＶＱＬＥＥＳＧＧＧＶＶＲＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＤＤＹＧＶＮＷＩＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＴＩＩＷＧＤＧＲＴＤＹＮＳＡＬＫＳＲＦＴＶＳＲＮＮＳＮＮＴＬＳＬＱＭＮＳＬＴＴＥＤＴＡＶＹＹＣＶＲＡＰＧＮＲＡＭＥＹＷＧＱＧＶＬＶＴＶＳＳ
配列番号９（ＲＦＢ４軽鎖可変領域）
ＤＩＱＭＴＱＴＴＳＳＬＳＡＳＬＧＤＲＶＴＩＳＣＲＡＳＱＤＩＳＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰＤＧＴＶＫＬＬＩＹＹＴＳＩＬＨＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＳＬＴＩＳＮＬＥＱＥＤＦＡＴＹＦＣＱＱＧＮＴＬＰＷＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ
配列番号１０（ＲＦＢ４重鎖可変領域）
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＳＬＫＬＳＣＡＡＳＧＦＡＦＳＩＹＤＭＳＷＶＲＱＴＰＥＫＲＬＥＷＶＡＹＩＳＳＧＧＧＴＴＹＹＰＤＴＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＬＹＬＱＭＳＳＬＫＳＥＤＴＡＭＹＹＣＡＲＨＳＧＹＧＳＳＹＧＶＬＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＡ
ヒトカッパ定常ドメインを含む軽鎖、ヒトＩｇＧ１定常ドメインを含む重鎖、及びヒトＩｇＧ４ｐ定常ドメインを含む重鎖のアミノ酸配列を以下に提供する。
配列番号１１（ヒトカッパ軽鎖定常ドメイン）
ＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
配列番号１２（ヒトＩｇＧ１重鎖定常ドメイン）
ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
配列番号１３（ヒトＩｇＧ４ｐ重鎖定常ドメイン）
ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ
配列番号４５（ｈＬＬ２軽鎖）
ＤＩＱＬＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＭＳＣＫＳＳＱＳＶＬＹＳＡＮＨＫＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＦＴＩＳＳＬＱＰＥＤＩＡＴＹＹＣＨＱＹＬＳＳＷＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
配列番号４６（ヒトＩｇＧ１定常ドメインを含むｈＬＬ２重鎖）
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＳＹＷＬＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＹＩＮＰＲＮＤＹＴＥＹＮＱＮＦＫＤＫＡＴＩＴＡＤＥＳＴＮＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＦＹＦＣＡＲＲＤＩＴＴＦＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
配列番号４７（ヒトＩｇＧ４ｐ定常ドメインを含むｈＬＬ２重鎖）
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＳＹＷＬＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＹＩＮＰＲＮＤＹＴＥＹＮＱＮＦＫＤＫＡＴＩＴＡＤＥＳＴＮＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＦＹＦＣＡＲＲＤＩＴＴＦＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ
配列番号４８（ｈ１０Ｆ４軽鎖）
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＳＳＱＳＩＶＨＳＶＧＮＴＦＬＥＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＦＱＧＳＱＦＰＹＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
配列番号４９（ヒトＩｇＧ１定常ドメインを含むｈ１０Ｆ４重鎖）
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＹＥＦＳＲＳＷＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＧＲＩＹＰＧＤＧＤＴＮＹＳＧＫＦＫＧＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＧＳＳＷＤＷＹＦＤＶＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
配列番号５０（ヒトＩｇＧ４ｐ定常ドメインを含むｈ１０Ｆ４重鎖）
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＹＥＦＳＲＳＷＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＧＲＩＹＰＧＤＧＤＴＮＹＳＧＫＦＫＧＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＧＳＳＷＤＷＹＦＤＶＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ
配列番号５１（ｇ５／４４軽鎖）
ＤＶＱＶＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＳＳＱＳＬＡＮＳＹＧＮＴＦＬＳＷＹＬＨＫＰＧＫＡＰＱＬＬＩＹＧＩＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＬＱＧＴＨＱＰＹＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
配列番号５２（ヒトＩｇＧ１定常ドメインを含むｇ５／４４重鎖）
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＲＦＴＮＹＷＩＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＧＩＮＰＧＮＮＹＡＴＹＲＲＫＦＱＧＲＶＴＭＴＡＤＴＳＴＳＴＶＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＴＲＥＧＹＧＮＹＧＡＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
配列番号５３（ヒトＩｇＧ４ｐ定常ドメインを含むｇ５／４４重鎖）
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＲＦＴＮＹＷＩＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＧＩＮＰＧＮＮＹＡＴＹＲＲＫＦＱＧＲＶＴＭＴＡＤＴＳＴＳＴＶＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＴＲＥＧＹＧＮＹＧＡＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ
配列番号５４（ｈＨＢ２２．７軽鎖）
ＤＩＶＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＳＶＴＮＤＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＹＡＳＮＲＹＴＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＤＹＲＳＰＷＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
配列番号５５（ヒトＩｇＧ１定常ドメインを含むｈＨＢ２２．７重鎖）
ＱＶＱＬＥＥＳＧＧＧＶＶＲＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＤＤＹＧＶＮＷＩＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＴＩＩＷＧＤＧＲＴＤＹＮＳＡＬＫＳＲＦＴＶＳＲＮＮＳＮＮＴＬＳＬＱＭＮＳＬＴＴＥＤＴＡＶＹＹＣＶＲＡＰＧＮＲＡＭＥＹＷＧＱＧＶＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
配列番号５６（ヒトＩｇＧ４ｐ定常ドメインを含むｈＨＢ２２．７重鎖）
ＱＶＱＬＥＥＳＧＧＧＶＶＲＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＤＤＹＧＶＮＷＩＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＴＩＩＷＧＤＧＲＴＤＹＮＳＡＬＫＳＲＦＴＶＳＲＮＮＳＮＮＴＬＳＬＱＭＮＳＬＴＴＥＤＴＡＶＹＹＣＶＲＡＰＧＮＲＡＭＥＹＷＧＱＧＶＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ
【０１６４】
抗ＣＤ２２抗体ｈＬＬ２、ｈ１０Ｆ４、ｇ５／４４、ｈＨＢ２２．７、及びＲＦＢ４のＣＤＲを以下の表２及び３に提供する。
2017523958.tif 000037
2017523958.tif 000038
【０１６５】
いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、抗体ｈＬＬ２、ｈ１０Ｆ４、ｇ５／４４、又はｈＨＢ２２．７であるか、又はこれらの抗体の何れかに由来する抗体である。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、抗体ＲＦＢ４に由来する抗体、例えばヒト化又はキメラ抗体である。抗体ｈＬＬ２、ｈ１０Ｆ４、ｇ５／４４、ｈＨＢ２２．７、及びＲＦＢ４の軽鎖及び重鎖可変配列は、表１において上記の通りである。ヒト化ＲＦＢ４ｓｃＦｖ（可変領域の一本鎖断片）の例が記載されている。例えば、Ｋｒａｕｓｓ，  ＪらＰｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，  １６（１０）：７５３−７５９，  ２００３を参照のこと；Ｋｒａｕｓｓ，  Ｊ．らによって記載されたヒト化ＲＦＢ４ｓｃＦｖ及びその断片（例えば、重鎖可変領域、軽鎖可変領域等）に対応する配列は、参照により本明細書に援用される。Ｋｒａｕｓｓらによって記載されたヒト化ＲＦＢ４ｓｃＦｖの何れか一つの重鎖可変領域を、ヒト重鎖定常領域（例えば、配列番号１２又は配列番号１３を含むヒトＩｇＧ１又はヒトＩｇＧ４ｐ）と組み合わせて、ＲＦＢ４のヒト化重鎖を形成してもよい。Ｋｒａｕｓｓらによって記載されたヒト化ＲＦＢ４ｓｃＦｖの何れか一つの軽鎖可変領域を、ヒト軽鎖定常領域（例えば、配列番号１１を含むヒトカッパ軽鎖）と組み合わせて、ＲＦＢ４のヒト化軽鎖を形成してもよい。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、抗体ｈＬＬ２、ｈ１０Ｆ４、ｇ５／４４、ｈＨＢ２２．７、又はＲＦＢ４（又はＫｒａｕｓｓらによって記載されたヒト化ＲＦＢ４ｓｃＦｖを含むこれらの抗体の何れか一つに由来する抗体）の軽鎖又は重鎖からの一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）、例えば表２及び３に上記のＨＶＲ（又はＣＤＲ）配列を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、抗体ｈＬＬ２、ｈ１０Ｆ４、ｇ５／４４、ｈＨＢ２２．７、又はＲＦＢ４（又はＫｒａｕｓｓらによって記載されたヒト化ＲＦＢ４ｓｃＦｖを含むこれらの抗体の何れか一つに由来する抗体）の軽鎖及び重鎖からの一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）、例えば表２及び３に上記のＨＶＲ（又はＣＤＲ）配列を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、抗体ｈＬＬ２、ｈ１０Ｆ４、ｇ５／４４、ｈＨＢ２２．７、又はＲＦＢ４（Ｋｒａｕｓｓによって記載されたヒト化ＲＦＢ４ｓｃＦｖ、及びそれに由来する抗体を含む）の断片又は領域を含む。一つの実施態様において、断片は、抗体ｈＬＬ２、ｈ１０Ｆ４、ｇ５／４４、ｈＨＢ２２．７、又はＲＦＢ４（Ｋｒａｕｓｓらによって記載されたヒト化ＲＦＢ４ｓｃＦｖを含む）の軽鎖可変領域を含む。別の実施態様において、断片は、抗体ｈＬＬ２、ｈ１０Ｆ４、ｇ５／４４、ｈＨＢ２２．７、又はＲＦＢ４（Ｋｒａｕｓｓらによって記載されたヒト化ＲＦＢ４ｓｃＦｖを含む）の重鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、抗体ｈＬＬ２、ｈ１０Ｆ４、ｇ５／４４、ｈＨＢ２２．７、又はＲＦＢ４（Ｋｒａｕｓｓらによって記載されたヒト化ＲＦＢ４ｓｃＦｖを含む）の軽鎖及び重鎖可変領域を含む。更に別の実施態様において、断片は、抗体ｈＬＬ２、ｈ１０Ｆ４、ｇ５／４４、ｈＨＢ２２．７、又はＲＦＢ４（Ｋ��ａｕｓｓらによって記載されたヒト化ＲＦＢ４ｓｃＦｖに由来する軽鎖又は重鎖を含む）の軽鎖及び重鎖からの一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む。更に別の実施態様において、断片は、抗体ｈＬＬ２、ｈ１０Ｆ４、ｇ５／４４、ｈＨＢ２２．７、又はＲＦＢ４（Ｋｒａｕｓｓらによって記載されたヒト化ＲＦＢ４ｓｃＦｖに由来する軽鎖又は重鎖を含む）の軽鎖及び重鎖からの一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む。いくつかの実施態様において、抗体ｈＬＬ２、ｈ１０Ｆ４、ｇ５／４４、ｈＨＢ２２．７、又はＲＦＢ４に由来する一又は複数のＨＶＲ（又はＣＤＲ）は、ｈＬＬ２、ｈ１０Ｆ４、ｇ５／４４、ｈＨＢ２２．７、又はＲＦＢ４（Ｋｒａｕｓｓらによって記載されたヒト化ＲＦＢ４ｓｃＦｖを含む）の少なくとも一つ、少なくとも二つ、少なくとも三つ、少なくとも四つ、少なくとも五つ、又は少なくとも六つのＨＶＲ（又はＣＤＲ）と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、又は少なくとも約９９％同一である。
【０１６６】
いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号２からの一、二若しくは三のＨＶＲ（若しくはＣＤＲ）を含む重鎖可変領域及び／又は配列番号１からの一、二若しくは三のＨＶＲ（若しくはＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号２からの三のＨＶＲ（若しくはＣＤＲ）を含む重鎖可変領域及び／又は配列番号１からの三のＨＶＲ（若しくはＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号２からの一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号１からの一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号２からの一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む重鎖可変領域、及び配列番号１からの一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号１５、１６、及び１７から選択される一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号１８、１９、及び２０から選択される一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号１５、１６、及び１７から選択される一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む重鎖可変領域、並びに配列番号１８、１９、及び２０から選択される一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号２からの三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号１からの三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号２からの三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む重鎖可変領域、及び配列番号１からの三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号１５に記載の重鎖可変領域（ＶＨ）ＣＤＲ１配列、配列番号１６に記載のＶＨ  ＣＤＲ２配列、及び配列番号１７に記載のＶＨ  ＣＤＲ３配列を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号１８に記載の軽鎖可変領域（ＶＬ）ＣＤＲ１配列、配列番号１９に記載のＶＬ  ＣＤＲ２配列、及び配列番号２０に記載のＶＬ  ＣＤＲ３配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号１５に記載のＶＨ  ＣＤＲ１配列、配列番号１６に記載のＶＨ  ＣＤＲ２配列、及び配列番号１７に記載のＶＨ  ＣＤＲ３配列を含む重鎖可変領域、並びに配列番号１８に記載のＶＬ  ＣＤＲ１配列、配列番号１９に記載のＶＬ  ＣＤＲ２配列、及び配列番号２０に記載のＶＬ  ＣＤＲ３配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１６７】
いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号２の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／又は配列番号１の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／又は配列番号１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号２の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、又は配列番号１の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号２の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号１の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１６８】
いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号４６若しくは配列番号４７の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖、及び／又は配列番号４５の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号４６若しくは配列番号４７のアミノ酸配列を含む重鎖、及び／又は配列番号４５のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号４６若しくは配列番号４７の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖、又は配列番号４５の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号４６若しくは配列番号４７の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号４５の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号４６又は配列番号４７のアミノ酸配列を含む重鎖を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号４５のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号４６又は配列番号４７のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号４５のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施態様において、抗体はヒト化抗体である。
【０１６９】
いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号４からの一、二、若しくは三のＨＶＲ（若しくはＣＤＲ）を含む重鎖可変領域、及び／又は配列番号３からの一、二、若しくは三のＨＶＲ（若しくはＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号から４の三のＨＶＲ（若しくはＣＤＲ）を含む重鎖可変領域、及び／又は配列番号３からの三のＨＶＲ（若しくはＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号４からの一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号３からの一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号４からの一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む重鎖可変領域、及び配列番号３からの一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号２１、２２、及び２３から選択される一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号２４、２５、及び２６から選択される一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号２１、２２、及び２３から選択される一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む重鎖可変領域、並びに配列番号２４、２５、及び２６から選択される一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号４からの三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号３からの三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号４からの三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む重鎖可変領域、及び配列番号３からの三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号２１に記載のＶＨ  ＣＤＲ１配列、配列番号２２に記載のＶＨ  ＣＤＲ２配列、及び配列番号２３に記載のＶＨ  ＣＤＲ３配列を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号２４に記載のＶＬ  ＣＤＲ１配列、配列番号２５に記載のＶＬ  ＣＤＲ２配列、及び配列番号２６に記載のＶＬ  ＣＤＲ３配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号２１に記載のＶＨ  ＣＤＲ１配列、配列番号２２に記載のＶＨ  ＣＤＲ２配列、及び配列番号２３に記載のＶＨ  ＣＤＲ３配列を含む重鎖可変領域、並びに配列番号２４に記載のＶＬ  ＣＤＲ１配列、配列番号２５に記載のＶＬ  ＣＤＲ２配列、及び配列番号２６に記載のＶＬ  ＣＤＲ３配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１７０】
いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号４の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／又は配列番号３の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／又は配列番号３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号４の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、又は配列番号３の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号４の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号３の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１７１】
いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号４９若しくは配列番号５０の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖、及び／又は配列番号４８の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号４９若しくは配列番号５０のアミノ酸配列を含む重鎖、及び／又は配列番号４８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号４９若しくは配列番号５０の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖、又は配列番号４８の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号４９若しくは配列番号５０の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号４８の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号４９又は配列番号５０のアミノ酸配列を含む重鎖を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号４８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号４９又は配列番号５０のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号４８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体はヒト化抗体である。
【０１７２】
いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号６からの一、二、若しくは三のＨＶＲ（若しくはＣＤＲ）を含む重鎖可変領域、及び／又は配列番号５の一、二、若しくは三のＨＶＲ（若しくはＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号６からの三のＨＶＲ（若しくはＣＤＲ）を含む重鎖可変領域、及び／又は配列番号５からの三のＨＶＲ（若しくはＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号６からの一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号５からの一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号６からの一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む重鎖可変領域、及び配列番号５からの一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号２７、２８、及び２９から選択される一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号３０、３１、及び３２から選択される一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号２７、２８、及び２９から選択される一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む重鎖可変領域、並びに配列番号３０、３１、及び３２から選択される一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号６からの三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号５からの三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号６からの三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む重鎖可変領域、及び配列番号５からの三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号２７に記載のＶＨ  ＣＤＲ１配列、配列番号２８に記載のＶＨ  ＣＤＲ２配列、及び配列番号２９に記載のＶＨ  ＣＤＲ３配列を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号３０に記載のＶＬ  ＣＤＲ１配列、配列番号３１に記載のＶＬ  ＣＤＲ２配列、及び配列番号３２に記載のＶＬ  ＣＤＲ３配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号２７に記載のＶＨ  ＣＤＲ１配列、配列番号２８に記載のＶＨ  ＣＤＲ２配列、及び配列番号２９に記載のＶＨ  ＣＤＲ３配列を含む重鎖可変領域、並びに配列番号３０に記載のＶＬ  ＣＤＲ１配列、配列番号３１に記載のＶＬ  ＣＤＲ２配列、及び配列番号３２に記載のＶＬ  ＣＤＲ３配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１７３】
いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号６の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／又は配列番号５の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／又は配列番号５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号６の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、又は配列番号５の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号６の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号５の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１７４】
いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号５２若しくは配列番号５３の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖、及び／又は配列番号５１の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号５２若しくは配列番号５３のアミノ酸配列を含む重鎖、及び／又は配列番号５１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号５２若しくは配列番号５３の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖、又は配列番号５１の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号５２若しくは配列番号５３の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号５１の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号５２又は配列番号５３のアミノ酸配列を含む重鎖を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号５１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号５２又は配列番号５３のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号５１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、ヒト化抗体である。
【０１７５】
いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号８からの一、二、若しくは三のＨＶＲ（若しくはＣＤＲ）を含む重鎖可変領域、及び／又は配列番号７からの一、二、若しくは三のＨＶＲ（若しくはＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号８からの三のＨＶＲ（若しくはＣＤＲ）を含む重鎖可変領域、及び／又は配列番号７からの三のＨＶＲ（若しくはＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号８からの一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号７からの一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号８からの一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む重鎖可変領域、及び配列番号７からの一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号３３、３４、及び３５から選択される一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号３６、３７、及び３８から選択される一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号３３、３４、及び３５から選択される一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む重鎖可変領域、並びに配列番号３６、３７、及び３８から選択される一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号８からの三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号７からの三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号８からの三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む重鎖可変領域、及び配列番号７からの三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号３３に記載のＶＨ  ＣＤＲ１配列、配列番号３４に記載のＶＨ  ＣＤＲ２配列、及び配列番号３５に記載のＶＨ  ＣＤＲ３配列を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号３６に記載のＶＬ  ＣＤＲ１配列、配列番号３７に記載のＶＬ  ＣＤＲ２配列、及び配列番号３８に記載のＶＬ  ＣＤＲ３配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号３３に記載のＶＨ  ＣＤＲ１配列、配列番号３４に記載のＶＨ  ＣＤＲ２配列、及び配列番号３５に記載のＶＨ  ＣＤＲ３配列を含む重鎖可変領域、並びに配列番号３６に記載のＶＬ  ＣＤＲ１配列、配列番号３７に記載のＶＬ  ＣＤＲ２配列、及び配列番号３８に記載のＶＬ  ＣＤＲ３配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１７６】
いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号８の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／又は配列番号７の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／又は配列番号７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号８の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、又は配列番号７の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号８の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号７の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１７７】
いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号５５若しくは配列番号５６の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖、及び／又は配列番号５４の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号５５若しくは配列番号５６のアミノ酸配列を含む重鎖、及び／又は配列番号５４のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号５５若しくは配列番号５６の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖、又は配列番号５４の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号５５若しくは配列番号５６の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号５４の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号５５又は配列番号５６のアミノ酸配列を含む重鎖を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号５４のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号５５又は配列番号５６のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号５４のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、ヒト化抗体である。
【０１７８】
いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号１０からの一、二、若しくは三のＨＶＲ（若しくはＣＤＲ）を含む重鎖可変領域、及び／又は配列番号９からの一、二、若しくは三のＨＶＲ（若しくはＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号１０からの三のＨＶＲ（若しくはＣＤＲ）を含む重鎖可変領域、及び／又は配列番号９からの三のＨＶＲ（若しくはＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号１０からの一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号９からの一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号１０からの一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む重鎖可変領域、及び配列番号９からの一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号３９、４０、及び４１から選択される一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号４２、４３、及び４４から選択される一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号３９、４０、及び４１から選択される一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む重鎖可変領域、並びに配列番号４２、４３、及び４４から選択される一、二、又は三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号１０からの三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号９からの三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号１０からの三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む重鎖可変領域、及び配列番号９からの三のＨＶＲ（又はＣＤＲ）を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号３９に記載のＶＨ  ＣＤＲ１配列、配列番号４０に記載のＶＨ  ＣＤＲ２配列、及び配列番号４１に記載のＶＨ  ＣＤＲ３配列を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号４２に記載のＶＬ  ＣＤＲ１配列、配列番号４３に記載のＶＬ  ＣＤＲ２配列、及び配列番号４４に記載のＶＬ  ＣＤＲ３配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、配列番号３９に記載のＶＨ  ＣＤＲ１配列、配列番号４０に記載のＶＨ  ＣＤＲ２配列、及び配列番号４１に記載のＶＨ  ＣＤＲ３配列を含む重鎖可変領域、並びに配列番号４２に記載のＶＬ  ＣＤＲ１配列、配列番号４３に記載のＶＬ  ＣＤＲ２配列、及び配列番号４４に記載のＶＬ  ＣＤＲ３配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１７９】
いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号１０の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／又は配列番号９の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／又は配列番号９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号１０の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、又は配列番号９の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号１０の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号９の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、若しくは少なくとも約９９％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１８０】
いくつかの実施態様において、抗体はヒト化抗体である。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号１２若しくは配列番号１３のアミノ酸配列を含む重鎖、及び／又は配列番号１１のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、ヒト化抗体である。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号１２又は配列番号１３のアミノ酸配列を含む重鎖を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号１１のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、配列番号１２又は配列番号１３のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号１１のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施態様において、抗体は、キメラ抗体である。いくつかの実施態様において、抗体はヒト化抗体である。いくつかの実施態様において、抗体は、Ｋｒａｕｓｓ Ｊ.ら，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，  １６（１０）：  ７５３−７５９，  ２００３に記載されるヒト化ｓｃＦｖの何れか一つに由来するヒト化抗体である。
【０１８１】
いくつかの実施態様において、本明細書に記載される標的化部分（又は抗体標的化部分）に含まれる又は使用される抗ＣＤ２２抗体は、がん細胞（例えば、ＣＤ２２陽性血液悪性腫瘍（例えば、Ｂ細胞リンパ腫、びまん性Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、濾胞性リンパ腫、及び急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ））によって発現されるＣＤ２２（例えば、ヒトＣＤ２２）に特異的に結合する。
【０１８２】
本明細書中で使用される場合、配列に関する「パーセント（％）アミノ酸配列同一性」及び「相同性」とは、配列を整列させ、最大のパーセント配列同一性を得るために必要ならば間隙を導入した後、如何なる保存的置換も配列同一性の一部と考えないとした、特定の配列中のアミノ酸残基と同一である候補配列中のアミノ酸残基のパーセントを指す。パーセントアミノ酸配列同一性を決定する目的のためのアラインメントは、当業者の技量の範囲にある種々の方法、例えばＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ−２、ＡＬＩＧＮ、又はＭＥＧＡＬＩＧＮ（商標）（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェアのような公に入手可能なコンピュータソフトウェアを使用することにより達成可能である。当業者であれば、比較される配列の完全長に対して最大のアラインメントを達成するために必要な任意のアルゴリズムを含む、アラインメントを測定するための適切なパラメータを決定することができる。
【０１８３】
いくつかの実施態様において、本明細書中に記載されるＣＤＲは、カバットＣＤＲ、コチアＣＤＲ、又は接触ＣＤＲである。いくつかの実施態様において、ＣＤＲはカバットＣＤＲである。いくつかの実施態様において、ＣＤＲはコチアＣＤＲである。その他の実施態様において、ＣＤＲはカバット及びＣｈｏｃｉａ  ＣＤＲの組合せである（「組合せＣＤＲ」又は「拡大ＣＤＲ」とも称される）。言い換えれば、一以上のＣＤＲを含有する所与の実施態様に関し、ＣＤＲは、カバット、Ｃｈｏｃｈｉａ及び／又は組合せの何れかであってもよい。ＣＤＲを決定する方法は、当分野で知られている。
【０１８４】
抗体の可変領域とは、抗体軽鎖の可変領域若しくは抗体重鎖の可変領域の単独又は組合せを指す。一般的に、可変領域は、抗原結合を媒介し、特定の抗体の特定の抗原に関する特異性を定義する。可変領域は、「超可変領域」（「ＨＶＲ」）（例えばそれぞれ９〜１２アミノ酸長であるＨＶＲ）と呼ばれる極度の可変性のより短い領域で分割されている、フレームワーク領域（ＦＲ）（例えば１５〜３０個のアミノ酸のＦＲ）と呼ばれる比較的不変のストレッチを有してもよい。いくつかの実施態様において、天然の重鎖及び軽鎖の可変ドメインは、それぞれ四つのＦＲを含み、大部分がベータシート立体配置をとり三つの超可変領域により繋がっており、この三つの超可変領域はベータシート構造と繋がり、場合によってはβシート構造の一部を形成している、ループを形成する。各鎖における超可変領域は、ＦＲにより互いに極めて近接した状態で保持されてもよく、他の鎖由来の超可変領域と共に、抗体の抗原結合部位の形成に寄与してもよい（Kabatら, Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991)を参照のこと）。定常ドメインは、抗原との抗体の結合には直接関わっていなくてもよいが、抗体依存性細胞性細胞傷害（ＡＤＣＣ）における抗体の関与など、多様なエフェクター機能を呈してもよい。抗体の定常領域とは、抗体軽鎖の定常領域若しくは抗体重鎖の定常領域の単独又は組合せを指す。抗体の定常領域は、一般的に、構造安定性並びに抗体鎖会合、分泌、経胎盤可動性、及び補体結合等のその他生物学的機能を提供するが、抗原に対する結合には関係していない。定常領域の遺伝子中のアミノ酸配列及び対応するエクソン配列は、それが由来する種に依拠することになるが、アロタイプをもたらすアミノ酸配列中の変異体は、種における特定の定常領域に比較的限定されることになる。各鎖の可変領域は、結合ポリペプチド配列により定常領域につながっている。結合配列は、軽鎖遺伝子中の「Ｊ」配列、及び重鎖遺伝子中の「Ｄ」配列と「Ｊ」配列との組み合わせによりコードされる。
【０１８５】
用語「超可変領域」（「ＨＲＶ」）とは、本明細書中で使用される場合、抗原結合性を生じる抗体のアミノ酸残基を指す。超可変領域は、一般的に、「相補性決定領域」又は「ＣＤＲ」からのアミノ酸残基（例えば、ＶＬの残基２４−３４（Ｌｌ）、５０−５６（Ｌ２）及び８９−９７（Ｌ３）、並びにＶＨの残基約３１−３５Ｂ（Ｈ１）、５０−６５（Ｈ２）及び９５−１０２（Ｈ３）（一実施態様において、Ｈ１は約３１−３５）；  Ｋａｂａｔら，  Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ．  ５ｔｈ  Ｅｄ．  Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，  Ｂｅｔｈｅｓｄａ，  ＭＤ．  （１９９１））、及び／又は「超可変ループ」からの残基（例えば、ＶＬの残基２６−３２（Ｌ１）、５０−５２（Ｌ２）及び９１−９６（Ｌ３）、並びにＶＨの残基２６−３２（Ｈ１）、５３−５５（Ｈ２）及び９６−１０１（Ｈ３）；Ｃｈｏｔｈｉａ及びＬｅｓｋ  Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  １９６：９０１−９１７（１９８７））を含む。ＣＤＲを決定するための方法が多数あり、例えば、異種間配列変化に基づく手法（すなわち、Kabatら Sequences of Proteins of Immunological Interest, (5th ed., 1991, National Institutes of Health, Bethesda MD)）；及び抗原抗体複合体の結晶学的研究に基づく手法（Al-lazikaniら(1997)J. Mol. Biol. 273:927-948)）がある。カバット相補性決定領域（ＣＤＲ）であるＨＶＲは、配列変化に基づいており、最も一般的に使用されている（Kabatら、上記）。Ｃｈｏｔｈｉａは、代わりに構造的ループの位置に言及している（Chothia及びLesk J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987)）。ＡｂＭ  ＨＶＲは、カバットＣＤＲとコチア構造的ループの間の妥協を表し、Ｏｘｆｏｒｄ  ＭｏｌｅｃｕｌａｒのＡｂＭ抗体モデリングソフトウェアにより使用される。「接触」ＨＶＲは、利用できる複合体結晶構造の解析に基づく。本明細書中で使用される場合、ＣＤＲは、該手法のうちの何れかにより、又は該手法のうちの二若しくは三の組合せにより定義されるＣＤＲであってもよい。ＣＤＲは、カバットＣＤＲ、コチアＣＤＲ、又は接触ＣＤＲであってもよい。これらの各ＨＶＲからの残基は以下に記される。
2017523958.tif 000039
【０１８６】
ＨＶＲは次のような「拡大ＨＶＲ」を含んでもよい：ＶＬの２４−３６又は２４−３４（Ｌ１）、４６−５６又は５０−５６（Ｌ２）及び８９−９７又は８９−９６（Ｌ３）と、ＶＨの２６−３５（Ｈ１）、５０−６５又は４９−６５（好ましい実施態様）（Ｈ２）及び９３−１０２、９４−１０２、又は９５−１０２（Ｈ３）。可変ドメイン残基には、これらの拡大ＨＶＲ各々を定義するために、上記のＫａｂａｔらに従って番号を付した。
【０１８７】
いくつかの実施態様において、抗体は、重鎖又は軽鎖（例えば、重鎖及び／若しくは軽鎖定常領域、並びに／又は重鎖及び／若しくは軽鎖可変領域）において遊離のシステインアミノ酸を含むシステイン操作抗体である。抗体中の遊離システインアミノ酸の操作は、特定の部位で薬物分子を有する（すなわち、部位特異的コンジュゲーション）抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）化合物等の抗体コンジュゲート化合物を更に可能にする、反応性の求電子的機能を提供し得る。システイン操作抗体及びシステイン操作抗体の生成手段の例は、Ｊｕｎｕｔｕｌａ,  ＪＲら,  （２００８）  Ｎａｔ.  Ｂｉｏｔｅｃｈ.  ２６（８）：９２５−９３２；Ｌｙｏｎｓ，  Ａら，  （１９９０）  Ｐｒｏｔ．  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  ３（８）：７０３−７０８；及びＳｔｉｍｍｅｌ，  ＪＢら，  （２０００）  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．  ２７５（３９）：３０４４５−３０４５０により提供される。いくつかの実施態様において、システイン残基の反応性チオール基が、抗体の折り畳み若しくは集合にほとんど影響を及ぼさないか又は全く影響を及ぼさず、且つ抗原結合を有意に変更しないことを条件として、抗体は、（例えば定常領域における）重鎖又は（例えば定常領域における）軽鎖上のアミノ酸残基（例えば、天然に存在するアミノ酸）を一又は複数のシステイン残基と置換するために操作される。いくつかの実施態様において、システイン残基は、新たに導入、操作されたシステインチオール基の反応性に関して評価される。チオール反応性値は、相対的な、０から１．０の範囲の数値であり、任意のシステイン操作抗体に関して測定され得る。いくつかの実施態様において、本発明のシステイン操作抗体のチオール反応性値は、約０．６から１．０；０．７から１．０；又は０．８から１．０の何れか一つである。部位特異的コンジュゲートに関するシステイン操作抗体は国際公開第２００６／０３４４８８号、国際公開第２０１０／１４１９０２号、国際公開第２０１３／０９３８０９号、国際公開第２００８／０３８０２４号、国際公開第２００８／０７０５９３号、国際公開第２００９／０９２０１１号、国際公開第２０１１／００５４８１号及び国際公開第２０１１／１５６３２８号により提供される。
【０１８８】
システイン操作抗体は、一又は複数のアミノ酸残基をシステインで置き換えてシステイン操作抗体をコードすることにより、親抗体の核酸配列を突然変異させること；システイン操作抗体を発現させること；及びシステイン操作抗体を単離することにより調製され得る。いくつかの実施態様において、システイン操作抗体は抗体断片；例えばＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、又は一本鎖（ＳｃＦｖ）抗体である。いくつかの実施態様において、抗体は、アミノ酸残基Ｓ１５７、Ｔ１６９及びＳ４４２（ＥＵ番号付け）の一又は複数のシステイン置換基を含むように操作される。本発明のいくつかの実施態様において、本明細書に記載される抗体（例えば、抗体ｈＬＬ２、ｈ１０Ｆ４、ｇ５／４４、ｈＨＢ２２．７、又はＲＦＢ４抗体に由来するヒト化若しくはキメラ抗体）又はこれらの抗体の何れかに由来する抗体は、一又は複数の遊離のシステイン残基を含むように操作されている。操作されたシステイン残基はまた、「追加されたシステイン残基」とも呼ばれる。
【０１８９】
いくつかの実施態様において、ＩｇＧ重鎖の任意の一又は複数の以下の位置における一又は複数のアミノ酸残基は、ＫａｂａｔらのＥＵインデックス（1991, NIH Publication 91-3242, National Technical Information Service, Springfield, VA、以下「カバット」と称する）に従って付番されたシステイン残基：４０、４３、８４、８８、１０３、１１２、１１３、１１４、１１５、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１６１、１６８、１７２、２３４、２３５、２３７、２３９、２４６、２４９、２６５、２６７、２６９、２７０、２７６、２７８、２８２、２８３、２８４、２８７、２８９、２９２、２９３、２９７、２９８、２９９、３００、３０２、３０３、３１２、３１４、３１５、３１８、３２０、３２４、３２６、３２７、３３０、３３２、３３３、３３４、３３５、３３６、３３７、３３９、３４５、３４７、３５４、３５５、３５６、３５８、３５９、３６０、３６１、３６２、３７０、３７３、３７６、３７８、３８０、３８２、３８３、３８４、３８６、３８８、３９８、３９０、３９２、３９３、４００、４０１、４０４、４１１、４１３、４１４、４１６、４１８、４１９、４２１、４２２、４２８、４３１、４３２、４３７、４３８、４３９、４４０、４４２、４４３、及び４４４で置き換えられる。
【０１９０】
いくつかの実施態様において、ＩｇＧ重鎖の以下の位置の組合せにおける一、二、三、四、五、六、七、八、九若しくは十、又はそれ以上のアミノ酸残基は、カバットのＥＵインデックスに従って付番されたシステイン残基：４０、４３、８４、８８、１０３、１１２、１１３、１１４、１１５、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１６１、１６８、１７２、２３４、２３５、２３７、２３９、２４６、２４９、２６５、２６７、２６９、２７０、２７６、２７８、２８２、２８３、２８４、２８７、２８９、２９２、２９３、２９７、２９８、２９９、３００、３０２、３０３、３１２、３１４、３１５、３１８、３２０、３２４、３２６、３２７、３３０、３３２、３３３、３３４、３３５、３３６、３３７、３３９、３４５、３４７、３５４、３５５、３５６、３５８、３５９、３６０、３６１、３６２、３７０、３７３、３７６、３７８、３８０、３８２、３８３、３８４、３８６、３８８、３９８、３９０、３９２、３９３、４００、４０１、４０４、４１１、４１３、４１４、４１６、４１８、４１９、４２１、４２２、４２８、４３１、４３２、４３７、４３８、４３９、４４０、４４２、４４３、及び４４４で置き換えられる。
【０１９１】
いくつかの実施態様において、ＩｇＧ１重鎖（例えば、ヒトＩｇＧ１、ヒトＩｇＧ２、ヒトＩｇＧ３、ヒトＩｇＧ４、又はヒトＩｇＧ４ｐ）の以下の位置：Ｔ１５５、Ｓ１５７、Ｓ１６５、Ｔ１６９、Ｔ１９７、及びＳ４４２の何れかの一若しくは複数の位置で一若しくは複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられており、並びに／又はＩｇＧ１軽鎖のＶ２０５が、システイン残基で置き換えられており、番号付けはカバットのＥＵインデックスに従う。突然変異の位置（ＥＵ番号付け）及びアミノ酸の隣接配列を以下の表４に列挙する。
2017523958.tif 000040
【０１９２】
いくつかの実施態様において、本明細書に記載される抗ＣＤ２２抗体は、配列番号１２又は配列番号１３に記載のアミノ酸配列を含む重鎖定常領域を含む。いくつかの実施態様において、本明細書に記載される抗ＣＤ２２抗体は、配列番号１１のアミノ酸配列を含む軽鎖定常領域を含む。いくつかの実施態様において、本明細書に記載される抗ＣＤ２２抗体は、配列番号１２又は配列番号１３のアミノ酸配列を含む重鎖定常領域、及び配列番号１１のアミノ酸を含む軽鎖定常領域を含む。
【０１９３】
部位特異的コンジュゲーションのための操作されたシステインであり得るＩｇＧ重鎖上の追加の位置（ＥＵ番号付け）は、１１８−２１５、２３４−２３９、２４６、２４８、２４９、２５４、２６５、２６７、２６９、２７０、２７３、２７６、２７８、２７９、２８２、２８３、２８４、２８６、２８７、２８９、２９２、２９３、２９４、２９７、２９８、２９９、３００、３０２、３０３、３１２、３１４、３１５、３１８、３２０、３２４、３２６、３２７、３３０、３３２−３３７、３３９、３４１−４４７位（ＵＳ２０１２／０１４８５８０Ａ１；国際公開第２０１３／０９３８０９Ａ１号；ＵＳ２００９／０２５８４２０Ａ１；ＵＳ７５２１５４１Ｂ２；ＵＳ７８５５２７５Ｂ２；ＵＳ２０１１／０１３７０１７Ａ１；ＵＳ２０１２／０２１３７０５Ａ１；ＵＳ２０１１／００３３３７８Ａ１；ＵＳ８４５５６２２Ｂ２に記載されている）を含む。
【０１９４】
部位特異的コンジュゲーションのための操作されたシステインであり得るＩｇＧ軽鎖の追加の位置（ＥＵ番号付け）は、１０８−２１１（国際公開第２０１３／０９３８０９Ａ１号；ＵＳ２００９／０２５８４２０Ａ１；ＵＳ７８５５２７５Ｂ２；ＵＳ８４５５６２２Ｂ２に記載されている）を含む。
【０１９５】
いくつかの実施態様において、ＩｇＧラムダ軽鎖の一又は複数の以下の位置における一又は複数のアミノ酸残基は、カバットのＥＵインデックスに従ってシステイン残基：７、１５、２０、２２、２５、４３、１１０、１１１、１２５、１４４、１４９、１５５、１５８、１６１、１６８、１８５、１８８、１８９、１９１、１９７、２０５、２０６、２０７、２０８及び２１０で置き換えられる。
【０１９６】
いくつかの実施態様において、ＩｇＧラムダ軽鎖の以下の位置の組合せにおける一、二、三、四、五、六、七、八、九若しくは十、又はそれ以上のアミノ酸残基は、カバットのＥＵインデックスに従って、システイン残基：７、１５、２０、２２、２５、４３、１１０、１１１、１２５、１４４、１４９、１５５、１５８、１６１、１６８、１８５、１８８、１８９、１９１、１９７、２０５、２０６、２０７、２０８及び２１０で置き換えられる。
【０１９７】
いくつかの実施態様において、ＩｇＧカッパ軽鎖の一又は複数の以下の位置における一又は複数のアミノ酸残基は、カバットの番号付けに従ってシステイン残基：７、１５、２０、２２、２５、４３、１１０、１１１、１４４、１６８、１８３及び２１０で置き換えられる。
【０１９８】
いくつかの実施態様において、ＩｇＧカッパ軽鎖の以下の位置の組合せにおける一、二、三、四、五、六、七、八、九若しくは十、又はそれ以上のアミノ酸残基は、カバットの番号付けに従って、システイン残基：７、１５、２０、２２、２５、４３、１１０、１１１、１４４、１６８、１８３及び２１０で置き換えられる。
【０１９９】
いくつかの実施態様において、抗体は単離されている。単離された抗体とは、その自然環境の成分から単離され、分離され、及び／又は回収された抗体を指す。いくつかの実施態様において、抗体は実質的に純粋である。用語「実質的に純粋」とは、少なくとも５０％純粋（すなわち、混入物が存在しない）、より好ましくは少なくとも９０％純粋、より好ましくは少なくとも９５％純粋、より好ましくは少なくとも９８％純粋、より好ましくは少なくとも９９％純粋である物質を指してもよい。いくつかの実施態様において、抗体はモノクローナル抗体である。いくつかの実施態様において、抗体はヒト化抗体である。いくつかの実施態様において、抗体はキメラ抗体である。いくつかの実施態様において、抗体はヒト抗体である。いくつかの実施態様において、抗体は、ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、又はＩｇＧ４）である。いくつかの実施態様において、抗体は、ヒトＩｇＧ、例えばヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施態様において、抗体は、ＩｇＧ４ｐ定常ドメインを含むヒトＩｇＧである。
【０２００】
共有結合によって抗体がその抗原結合免疫特異性を保持することが可能となる限り、本明細書中に記載される抗体は、任意の型の分子の共有結合により修飾されている類似体及び誘導体を更に含んでもよい。例えば、抗体の誘導体及び類似体は、例えば、グリコシル化、アセチル化、ペグ化、リン酸化、アミド化、既知の保護基／ブロッキング基による誘導体化、タンパク質分解的切断、細胞リガンド又はその他タンパク質に対する結合等により更に修飾されたものを含む。化学修飾は、特異的な化学的切断、アセチル化、処方等を含むがこれらに限定されない既知の技術によって行われ得る。加えて、類似体又は誘導体は、一又は複数の非天然アミノ酸を含み得る。
【０２０１】
いくつかの実施態様において、式（Ｉ）−（Ｖ）の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体中の抗体標的化部分Ｔは、追加の薬物部分と更に結合し得るように、薬物部分と部分的にコンジュゲートされている。したがって、いくつかの実施態様において、式（Ｉ）の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体は、式（Ｉａ）の化合物又はその塩若しくはその溶媒和物若しくは立体異性体を包含することが意図される。同様に、式（ＩＩ）の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体は、式（ＩＩａ）の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を包含することが意図され；式（ＩＩＩ）の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体は、式（ＩＩＩａ）の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を包含することが意図され；式（ＩＶ）の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体は、式（ＩＶａ）の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を包含することが意図され；且つ式（Ｖ）の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体は、式（Ｖａ）の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を包含することが意図される。
【０２０２】
標的化部分（例えば抗体、ポリペプチド、ペプチド又は非ペプチジル部分）を作製する方法は、米国特許第７６７４６０５号、同第７９８２０１７号、ＰＣＴ／ＵＳ２００７／０１３５８７（国際公開第２００７／１４６１７２号）、又はＰＣＴ／ＵＳ２００８／０８７５１５（国際公開第２００９／０７９６４９号）に記載されている方法のように当該技術分野で知られている。
【０２０３】
代表的なリンカー
ある例において、式（Ｉ）、（Ｉａ）、（ＩＩ）又は（ＩＩａ）の化合物中の「−Ａ−Ｌ４−Ｌ３−Ｌ２−」又は「−Ａ−Ｌ４−Ｌ３−」部分は：
2017523958.tif 000041
である。
【０２０４】
ある例において、式（Ｉ）、（Ｉａ）、（ＩＩ）又は（ＩＩａ）の化合物中の「−Ａ−Ｌ４−Ｌ３−Ｌ２−」又は「−Ａ−Ｌ４−Ｌ３−」部分は：
2017523958.tif 000042
である。
【０２０５】
ある例において、式（Ｉ）、（Ｉａ）、（ＩＩ）又は（ＩＩａ）の化合物中の「−Ａ−Ｌ４−Ｌ３−Ｌ２−」又は「−Ａ−Ｌ４−Ｌ３−」部分は：
2017523958.tif 000043
である。
【０２０６】
ある例において、式（Ｉ）、（Ｉａ）、（ＩＩ）、又は（ＩＩａ）の化合物における「−Ａ−Ｌ４−Ｌ３−Ｌ２−Ｘ−Ｌ１−Ｄ」部分は、
2017523958.tif 000044
である。
【０２０７】
そのような例において、本開示は、式（ＩＩＩ）：
2017523958.tif 000045
［式中、Ｔは標的化部分である］
の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を提供する。ある例において、式（ＩＩＩ）中、Ｔは抗体である。いくつかの実施態様において、Ｔは抗ＣＤ２２抗体である。いくつかの実施態様において、Ｔは、抗体ｈＬＬ２、ｈ１０Ｆ４、ｇ５／４４、ｈＨＢ２２．７、又はその誘導体である。いくつかの実施態様において、Ｔは、抗体ＲＦＢ４の誘導体（例えば、ヒト化抗体又はキメラ抗体）である。いくつかの実施態様において、式（ＩＩＩａ）：
2017523958.tif 000046
［式中、Ｔは標的化部分であり、ｐは１から２０である］の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体が提供される。いくつかの実施態様において、ｐは１から８である。いくつかの実施態様において、ｐは１から６である。いくつかの実施態様において、ｐは１から４である。いくつかの実施態様において、ｐは２から４である。いくつかの実施態様において、ｐは１、２、３又は４である。いくつかの実施態様において、ｐは２である。いくつかの実施態様において、ｐは３である。いくつかの実施態様において、ｐは４である。ある例において、式（ＩＩＩａ）中、Ｔは抗体であり、抗体の重鎖及び／又は軽鎖の一又は複数のアミノ酸残基はシステイン残基で置き換えられていてもよい。ある実施態様において、抗体は、抗ＣＤ２２抗体である。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、ｈＬＬ２、ｈ１０Ｆ４、ｇ５／４４、ｈＨＢ２２．７、若しくはその誘導体である、又は抗体の重鎖及び／若しくは軽鎖の一若しくは複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられているｈＬＬ２、若しくは抗体の重鎖及び／若しくは軽鎖の一若しくは複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられているｈ１０Ｆ４、若しくは抗体の重鎖及び／若しくは軽鎖の一若しくは複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられているｇ５／４４、若しくは抗体の重鎖及び／若しくは軽鎖の一若しくは複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられているｈＨＢ２２．７である。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、ＲＦＢ４の誘導体（例えば、ヒト化抗体若しくはキメラ抗体）、又は抗体の重鎖及び／若しくは軽鎖の一若しくは複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられているＲＦＢ４の誘導体（例えば、ヒト化抗体若しくはキメラ抗体）である。
【０２０８】
ある実施態様において、式（Ｉ）又は式（Ｉａ）の化合物、例えば式（ＩＩＩ）又は（ＩＩＩａ）の化合物は、合成中間体、例えば式（ＶＩ）の化合物若しくはその塩若しくは溶媒和物、及び／又は式（ＩＸ）の化合物若しくはその塩若しくは溶媒和物を使用して調製することができる。
2017523958.tif 000047
【０２０９】
ある例において、式（Ｉ）、（Ｉａ）、（ＩＩ）又は（ＩＩａ）の化合物中の「−Ａ−Ｌ４−Ｌ３−Ｌ２−Ｘ−Ｌ１−Ｄ」部分は：
2017523958.tif 000048
である。
【０２１０】
そのような例において、本開示は、式（ＩＶ）：
2017523958.tif 000049
［式中、Ｔは標的化部分である］の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を提供する。ある例において、式（ＩＶ）中、Ｔは抗体である。いくつかの実施態様において、Ｔは抗ＣＤ２２抗体である。いくつかの実施態様において、抗体は、抗体ｈＬＬ２、ｈ１０Ｆ４、ｇ５／４４、ｈＨＢ２２．７、又はその誘導体である。いくつかの実施態様において、抗体は、抗体ＲＦＢ４の誘導体（例えば、ヒト化抗体又はキメラ抗体）である。
【０２１１】
いくつかの実施態様において、式（ＩＶａ）：
2017523958.tif 000050
［式中、Ｔは標的化部分であり、ｐは１から２０である］の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体が提供される。いくつかの実施態様において、ｐは１から８である。いくつかの実施態様において、ｐは１から６である。いくつかの実施態様において、ｐは１から４である。いくつかの実施態様において、ｐは２から４である。いくつかの実施態様において、ｐは１、２、３又は４である。いくつかの実施態様において、ｐは２である。いくつかの実施態様において、ｐは３である。いくつかの実施態様において、ｐは４である。ある例において、式（ＩＶａ）中、Ｔは抗体であり、抗体の重鎖及び／又は軽鎖の一又は複数のアミノ酸残基はシステイン残基で置き換えられていてもよい。ある実施態様において、抗体は抗ＣＤ２２抗体である。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、ｈＬＬ２、ｈ１０Ｆ４、ｇ５／４４、ｈＨＢ２２．７、若しくはその誘導体、又は抗体の重鎖及び／若しくは軽鎖の一若しくは複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられているｈＬＬ２、若しくは抗体の重鎖及び／若しくは軽鎖の一若しくは複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられているｈ１０Ｆ４、若しくは抗体の重鎖及び／若しくは軽鎖の一若しくは複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられているｇ５／４４、若しくは抗体の重鎖及び／若しくは軽鎖の一若しくは複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられているｈＨＢ２２．７である。いくつかの実施態様において、抗ＣＤ２２抗体は、ＲＦＢ４の誘導体（例えば、ヒト化抗体若しくはキメラ抗体）、又は抗体の重鎖及び／若しくは軽鎖の一若しくは複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられているＲＦＢ４の誘導体（例えば、ヒト化抗体若しくはキメラ抗体）である。
【０２１２】
ある実施態様において、式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物、例えば式（ＩＶ）又は（ＩＶａ）の化合物は、合成中間体、例えば式（ＶＩＩ）の化合物若しくはその塩若しくは溶媒和物、及び／又は式（Ｘ）の化合物若しくはその塩若しくは溶媒和物を使用して調製することができる。
2017523958.tif 000051
【０２１３】
ある例において、式（Ｉ）、（Ｉａ）、（ＩＩ）又は（ＩＩａ）の化合物中の「−Ａ−Ｌ４−Ｌ３−Ｌ２−Ｘ−Ｌ１−Ｄ」部分は：
2017523958.tif 000052
である。
【０２１４】
そのような例において、本開示は、式（Ｖ）：
2017523958.tif 000053
［式中、Ｔは標的化部分である］の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を提供する。ある例において、式（Ｖ）中、Ｔは抗体である。いくつかの実施態様において、抗体は抗ＣＤ２２抗体である。いくつかの実施態様において、抗体は、抗体ｈＬＬ２、ｈ１０Ｆ４、ｇ５／４４、ｈＨＢ２２．７、又はその誘導体である。いくつかの実施態様において、抗体は、抗体ＲＦＢ４の誘導体（例えば、ヒト化抗体又はキメラ抗体）である。いくつかの実施態様において、式（Ｖａ）：
2017523958.tif 000054
［式中、Ｔは標的化部分であり、ｐは１から２０である］の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体が提供される。いくつかの実施態様において、ｐは１から８である。いくつかの実施態様において、ｐは１から６である。いくつかの実施態様において、ｐは１から４である。いくつかの実施態様において、ｐは２から４である。いくつかの実施態様において、ｐは１、２、３又は４である。いくつかの実施態様において、ｐは２である。いくつかの実施態様において、ｐは３である。いくつかの実施態様において、ｐは４である。ある例において、式（Ｖａ）中、Ｔは抗体であり、抗体の重鎖及び／又は軽鎖の一又は複数のアミノ酸残基はシステイン残基で置き換えられていてもよい。ある実施態様において、抗体は、抗ＣＤ２２抗体である。いくつかの実施態様において、抗体は、抗体ｈＬＬ２、ｈ１０Ｆ４、ｇ５／４４、ｈＨＢ２２．７、若しくはその誘導体、又は抗体の重鎖及び／若しくは軽鎖の一若しくは複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられているｈＬＬ２、若しくは抗体の重鎖及び／若しくは軽鎖の一若しくは複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられているｈ１０Ｆ４、若しくは抗体の重鎖及び／若しくは軽鎖の一若しくは複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられているｇ５／４４、若しくは抗体の重鎖及び／若しくは軽鎖の一若しくは複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられているｈＨＢ２２．７である。いくつかの実施態様において、抗体は、ＲＦＢ４の誘導体（例えば、ヒト化抗体若しくはキメラ抗体）、又は抗体の重鎖及び／若しくは軽鎖の一若しくは複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられているＲＦＢ４の誘導体（例えば、ヒト化抗体若しくはキメラ抗体）である。
【０２１５】
ある実施態様において、式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物、例えば式（Ｖ）又は（Ｖａ）の化合物は、合成中間体、例えば式（ＶＩＩＩ）の化合物若しくはその塩若しくは溶媒和物、及び／又は式（ＸＩ）の化合物若しくはその塩若しくは溶媒和物を使用して調製することができる。
2017523958.tif 000055
【０２１６】
ある実施態様において、式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）の化合物、又は本明細書に記載されるその任意の変化形は、式（ＸＩＩ）
2017523958.tif 000056
［式中、ＲはＮＯ２又はＮＨ２である］
の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を使用して調製することができる。
【０２１７】
式（Ｉ）−（Ｖ）又は（Ｉａ）−（Ｖａ）の化合物は、薬学的に許容される塩として調製及び／又は製剤化され得る。薬学的に許容される塩は、遊離塩基の所望の薬理的活性を有する化合物の遊離塩基形態の非毒性の塩である。これらの塩は、無機又は有機酸に由来してもよい。薬学的に許容される塩の非限定的な例は、硫酸塩、ピロ硫酸塩、重硫酸塩、亜硫酸塩、亜硫酸水素塩、リン酸塩、一水素リン酸塩、二水素リン酸塩、メタリン酸塩、ピロリン酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、酢酸塩、プロピオン酸塩、デカン酸塩、カプリル酸塩、アクリル酸塩、ギ酸塩、イソブチル酸塩、カプロン酸塩、ヘプタン酸塩、プロピオル酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、スベリン酸塩、セバシン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、ブチン−１，４−二酸塩、ヘキシン−１，６−二酸塩、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、フタル酸塩、スルホン酸塩、メチルスルホン酸塩、プロピルスルホン酸塩、ベシル酸塩、キシレンスルホン酸塩、ナフタレン−１−スルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホン酸塩、フェニル酢酸塩、フェニルプロピオン酸塩、フェニルブチル酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、γ−ヒドロキシブチル酸塩、グリコール酸塩、酒石酸塩、及びマンデル酸塩を含む。他の適した薬学的に許容される塩のリストは、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ‘ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，  １７ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，  Ｅａｓｔｏｎ，  Ｐａ．，  １９８５にある。
【０２１８】
塩基性窒素を含有する式（Ｉ）−（Ｖ）又は（Ｉａ）−（Ｖａ）の何れか一つの化合物に関し、薬学的に許容される塩は、当該技術分野で利用できる適切な方法により調製されてもよく、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、硝酸、ボロン酸、リン酸等の無機酸を有するか、又は酢酸、フェニル酢酸、プロピオン酸、ステアリン酸、乳酸、アスコルビン酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、イセチオン酸、コハク酸、バレリアン酸、フマル酸、マロン酸、ピルビン酸、シュウ酸、グリコール酸、サリチル酸、オレイン酸、パルミチン酸、ラウリン酸、ピラノシジル酸（例えばグルクロン酸若しくはガラクツロン酸）、アルファ−ヒドロキシ酸（例えばマンデル酸、クエン酸若しくは酒石酸）、アミノ酸（例えばアスパラギン酸若しくはグルタミン酸）、芳香族酸（例えば安息香酸、２−アセトキシ安息香酸、ナフトエ酸若しくは桂皮酸）、スルホン酸（例えばラウリルスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸若しくはエタンスルホン酸）等の有機酸を有する遊離基、あるいは本明細書中で例として挙げられたような酸の任意の互換性のある混合物、並びにこの技術において通常のレベルを考慮すると同等物若しくは許容される置換基としてみなされるその他酸及びその混合物の処理により調製されてもよい。
【０２１９】
また、式（Ｉ）−（Ｖ）若しくは（Ｉａ）−（Ｖａ）の一又は複数の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体も提供される。式（Ｉ）−（Ｖ）若しくは（Ｉａ）−（Ｖａ）の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体において、標的化部分は、薬物部分に結合するための一又は複数の結合部位を有し得る。標的化部分中の結合部位への可触性及びコンジュゲートを形成する際の薬物部分の相対濃度に応じて、結合部位の一部分は、形成されたコンジュゲートにおける薬物部分に結合されなくてもよい。各標的化部分に数多くの薬物部分を有する化合物の混合物を形成してもよい。したがって、式（Ｉａ）−（Ｖａ）の一若しくは複数の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を含む組成物も提供される。例えば、４の結合部位を有する標的分子に関して、組成物は、ｐが１である式（Ｉａ）の化合物、ｐが２である式（Ｉａ）の化合物、ｐが３である式（Ｉａ）の化合物、及びｐが４である式（Ｉａ）の化合物から選択される一又は複数の化合物を含んでもよい。組成物中の化合物の相対的な量は、薬物部分と標的化部分との間の所望の比率を達成するよう調整されてもよい。いくつかの実施態様において、組成物は、主に一又は二の化合物を含む。
【０２２０】
本発明の化合物又は組成物中の「薬物抗体比」（ＤＡＲ）は、化合物又は組成物中の薬物部分と化合物又は組成物中の抗体との間のモル比率として定義される。抗体が一以上の結合部位を有する場合、一以上の薬物部分が各抗体に結合されてもよい。いくつかの例において、一以上の抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）分子を含む混合物が得られる。抗体薬物コンジュゲートの薬物抗体比は、当該技術分野で知られる分析的方法、例えば、Ｊｅｆｆｒｅｙら，  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ．  Ｃｈｅｍ．  ２４（７）：１２５６−１２６３  （２０１３）；及びＳｕｎら，  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ．  Ｃｈｅｍ．  １６（５）：１２８２−１２９０  （２００５）に記載される方法により測定され得る。いくつかの実施態様において、本明細書中で詳述される一又は複数のＡＤＣを含む組成物は、約０．５から約６、約１から約５、約１から約４、約１．５から約３．５、又は約２から約４の平均ＤＡＲを有する。いくつかの実施態様において、組成物は、約１．５から約３．５、又は約２から約３．５、又は約２．７から約３．５、又は約２から約３、又は約３から約３．３、又は約２、又は約３の平均ＤＡＲを有する。いくつかのその他好ましい実施態様において、組成物は、約２．５±１０％（例えば、約２．２５から約２．７５）の平均ＤＡＲを有する。いくつかの実施態様において、標的化抗体は、システイン操作結合部位を含有し、組成物は、約１．６から約２．１、又は約２．０の平均ＤＡＲを有する。
【０２２１】
薬学的組成物及び治療方法
治療目的上、実施態様の薬学的組成物は、式（Ｉ）−（Ｖ）若しくは（Ｉａ）−（Ｖａ）の少なくとも一の化合物又はその薬学的に許容される塩を含む。薬学的組成物は、一又は複数の薬学的に許容される賦形剤又は薬学的に許容される担体を更に含んでもよい。薬学的に許容される賦形剤は、非毒性であり、そうでなければ対象への投与に関して生物学的に適している物質である。そのような賦形剤は、本明細書に記載される化合物の投与を容易にし、活性成分と互換性がある。薬学的に許容される賦形剤の例は、安定剤、潤滑剤、界面活性剤、希釈剤、酸化防止剤、結合剤、着色料、充填剤、乳化剤又は呈味改変剤を含む。好ましい実施態様において、実施態様による薬学的組成物は無菌の組成物である。薬学的組成物は既知の配合技術又は当業者が利用できるようになる配合技術を使用して調製されてもよい。
【０２２２】
無菌の組成物は実施態様により検討もされており、そのような組成物を支配する国及び地方の規制に従う組成物を含む。
【０２２３】
本明細書中に記載される薬学的組成物及び化合物は、溶液、乳液、懸濁液、分散液、又は適切な薬学的溶媒若しくは担体中のシクロデキストリン等の包接錯体として、あるいは、様々な剤形の調製に関して当該技術分野で知られている従来からの方法に従って丸薬、錠剤、ロゼンジ、坐剤、サシェ、ドラジェ、顆粒、粉末、再構成用粉末、又は固形担体を伴うカプセルとして製剤化されてもよい。実施態様の薬学的組成物は、経口、非経口、経直腸、経鼻、局所若しくは眼球経路等の適切な送達経路により、又は吸入により投与されてもよい。好ましくは、組成物は、静脈内投与又は経口投与のために製剤化される。
【０２２４】
経口投与に関して、実施態様の化合物は、錠剤又はカプセル等の固形形態で、又は溶液、乳液若しくは懸濁液として提供されてもよい。経口組成物を調製するために、実施態様の化合物は例えば、一日当たり約０．０１から約５０ｍｇ／ｋｇ、又は一日当たり約０．０５から約２０ｍｇ／ｋｇ、又は一日当たり約０．１から約１０ｍｇ／ｋｇの投薬量を生じるように製剤化されてもよい。経口錠剤は、互換性のある薬学的に許容される賦形剤、例えば希釈剤、崩壊剤、結合剤、潤滑剤、甘味料、香味料、着色料及び保存料と混合された活性成分（複数可）を含んでもよい。適切な不活性な充填剤は、炭酸ナトリウム及び炭酸カルシウム、リン酸ナトリウム及びリン酸カルシウム、ラクトース、澱粉、糖類、グルコース、メチルセルロース、ステアリン酸マグネシウム、マンニトール、ソルビトール等を含む。典型的な液体経口賦形剤は、エタノール、グリセロール、水等を含む。澱粉、ポリビニル−ピロリドン（ＰＶＰ）、デンプングリコール酸ナトリウム、微結晶性セルロース、及びアルギン酸は典型的な崩壊剤である。結合剤は澱粉及びゼラチンを含んでもよい。潤滑剤は、存在する場合、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、又はタルクであってもよい。必要である場合、錠剤は、消化管での吸収を遅らせるために、モノステアリン酸グリセリン若しくはジステアリン酸グリセリル等の物質でコーティングされてもよく、又は腸溶コーティングでコーティングされてもよい。
【０２２５】
経口投与のためのカプセルは、硬質及び軟質ゼラチンカプセルを含む。硬質ゼラチンカプセルを調製するために、活性成分（複数可）は固体、半固体又は液体の希釈剤と混合されてもよい。軟質ゼラチンカプセルは、活性成分を水、油例えば落花生油若しくはオリーブ油、流動パラフィン、短鎖脂肪酸のモノグリセリドとジグリセリドの混合物、ポリエチレングリコール４００、又はプロピレングリコールと混合させることにより調製されてもよい。
【０２２６】
経口投与のための液体は、懸濁液、溶液、乳液又はシロップの形態であってもよく、使用前に水又はその他適切なビヒクルとの再構成のための乾燥製品として凍結乾燥又は提示されてもよい。そのような液体組成物は、薬学的に許容される賦形剤、例えば懸濁剤（例えばソルビトール、メチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ゼラチン、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ステアリン酸アルミニウムゲル等）；非水性ビヒクル、例えば油（例えばアーモンド油若しくはヤシ油）、プロピレングリコール、エチルアルコール又は水；保存料（例えばメチル若しくはプロピルｐ−ヒドロキシベンゾエート又はソルビン酸）；湿潤剤、例えばレシチン；並びに、必要であれば、香味料若しくは着色料を含有してもよい。
【０２２７】
実施態様の組成物は、坐薬のような直腸投与のために製剤化されてもよい。実施態様の薬剤は、静脈内、筋肉内、腹腔内、鼻腔内又は皮下経路を含む非経口使用のために、適切なｐＨ及び等張性に緩衝された無菌の水溶液若しくは懸濁液中で、又は非経口的に許容される油中で提供されてもよい。適切な水性ビヒクルは、リンゲル液及び等張の塩化ナトリウムを含む。そのような形態は、アンプル若しくは使い捨て注入器具等の単位投与形態、適切な用量が取り出され得るバイアル等の複数回投与形態、又は固体形態若しくは注射可能な製剤を調製するのに使用され得る予備濃縮物で提示されてもよい。実例となる注入量は、数分から数日の範囲の期間にわたり薬学的担体と混合された薬剤の約１から１０００μｇ／ｋｇ／分の範囲である。
【０２２８】
実施態様の薬学的組成物は、鼻腔、吸入又は経口投与のために、例えば、適切な担体も含有するスプレー製剤を使用して投与されてもよい。
【０２２９】
実施態様の化合物は、局所適用のために、好ましくは、クリーム若しくは軟膏又は局所投与に適した同様のビヒクルとして製剤化される。本発明の化合物は、局所投与のために、ビヒクルに対して約０．１％から約１０％の薬物の濃度で薬学的担体と混合されてもよい。実施態様の薬剤の別の投与様式は、経皮送達に作用するパッチ製剤を利用してもよい。
【０２３０】
本開示は、細胞を死滅させるのに十分な有効量の式（Ｉ）−（Ｖ）の化合物、又は式（Ｉａ）−（Ｖａ）の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を細胞に投与することを含む、ＣＤ２２を発現する細胞を死滅させる方法を提供する。ある実施態様において、細胞はがん細胞である。ある実施態様において、がん細胞は、ＣＤ２２陽性血液悪性細胞（例えば、リンパ腫又は白血病）である。
【０２３１】
別の態様において、本開示は、式（Ｉ）−（Ｖ）の化合物、又は式（Ｉａ）−（Ｖａ）の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体の有効量を個体に投与することを含む、個体におけるがんを治療する方法を提供する。本明細書中に記載される方法によって治療され得るがんの例は、腺癌、リンパ腫、芽細胞腫、メラノーマ、及び肉腫を含むカルシノーマを含むがこれらに限定されない。そのようながんのより特定の例は、扁平上皮がん、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、肺腺癌、肺扁平上皮癌、胃腸がん、ホジキンリンパ腫及び非ホジキンリンパ腫、膵臓がん、膠芽細胞腫、子宮頸がん、神経膠腫、卵巣がん、肝臓がん、例えば肝細胞癌及び肝がん、膀胱がん、乳がん、結腸がん、結腸直腸がん、子宮内膜癌又は子宮癌、唾液腺癌、腎臓がん、例えば腎細胞癌及びウィルムス腫瘍、基底細胞癌、メラノーマ、中皮腫、前立腺がん、甲状腺がん、精巣がん、食道がん、胆嚢がん、及び様々な型の頭頚部がんを含むがこれらに限定されない。
【０２３２】
がんを治療する方法のある実施態様において、がんは、ＣＤ２２陽性血液悪性腫瘍である。ある実施態様において、ＣＤ２２陽性血液悪性腫瘍は、Ｂ細胞リンパ腫又は急性リンパ芽球性白血病である。ある実施態様において、個体はがんを有する、又はがんを有すると診断されている。ある実施態様において、個体は、ＣＤ２２陽性血液悪性腫瘍を有する、又はＣＤ２２陽性血液悪性腫瘍を有すると診断されている。ある実施態様において、個体はヒトである。いくつかの実施態様において、方法は、化合物を投与する前に、がん細胞上のＣＤ２２の発現レベルを検出する工程を更に含む。いくつかの実施態様において、化合物は、腹腔内、静脈内、筋肉内、皮下、髄腔内、脳室内、経口、経腸、非経口、鼻腔内、皮内、舌下、又は吸入によって投与される。
【０２３３】
キット
本開示は、がんの治療又は予防において有用な、式（Ｉ）−（Ｖ）又は式（Ｉａ）−（Ｖａ）の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を含む一又は複数の容器を含む薬学的パック又はキットを提供する。キットはがんの治療における使用説明書を更に含み得る。
【０２３４】
本開示は、本実施態様の一又は複数の薬学的組成物の成分を含む一又は複数の容器を含む薬学的パック又はキットも提供する。そのような容器（複数可）に関連してもよいものは、医薬品若しくは生物学的製品の製造、使用又は販売を規制する行政機関により規定された形態の注記であってもよく、その注記はヒトへの投与に関する製造、使用又は販売の当局による承認を反映させる。
【０２３５】
薬物コンジュゲートの合成
実施態様はまた、対象化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を調製するのに有用な方法及び中間体に向けられている。
【０２３６】
開示された化合物を合成するのに有用な一般的に知られる化学合成スキーム及び条件を提供する多くの一般的な参照文献が入手可能である（例えばSmith及びMarch, March’s Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, Fifth Edition, Wiley-Interscience, 2001を参照のこと）。
【０２３７】
本明細書中に記載されるような化合物は、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、分取薄層クロマトグラフィー、フラッシュカラムクロマトグラフィー及びイオン交換クロマトグラフィー等のクロマトグラフィー手段を含む当該技術分野で知られる手段の何れかにより精製され得る。順相及び逆相並びにイオン樹脂を含む任意の適切な固相が使用され得る。最も典型的には、開示された化合物は、シリカゲル及び／又はアルミニウムクロマトグラフィーを介して精製される。例えば、Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｔｏ  Ｍｏｄｅｒｎ  Ｌｉｑｕｉｄ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，  ２ｎｄ  ｅｄ．，Ｌ．  Ｒ．  Ｓｎｙｄｅｒ及びＪ．  Ｊ．  Ｋｉｒｋｌａｎｄ編，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，  １９７９；及びＴｈｉｎ  Ｌａｙｅｒ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，  Ｅ．  Ｓｔａｈｌ  （編），  Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  １９６９を参照のこと。
【０２３８】
対象化合物の調製のための方法の何れかの間、関係する分子の何れかの感受性又は反応基を保護することが必要及び／又は所望とされてもよい。これは、Ｔ．  Ｗ．  Ｇｒｅｅｎｅ及びＰ．  Ｇ．  Ｍ．  Ｗｕｔｓ，  “Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，”  ４ｔｈｅｄ．，  Ｗｉｌｅｙ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  ２００６等の標準的な著作物に記載されるような従来の保護基の手段により達成され得る。保護基は、当該技術分野で知られる方法を使用して、後に続く簡便な段階で除去されてもよい。
【０２３９】
実施態様の方法において有用な例示的な化学物質は、本明細書中の一般的な調製のための実例となる合成スキーム及び後に続く特定の実施例を参照することにより、記載されることになる。当業者は、本明細書中の様々な化合物を得るためには、最終的な所望の置換基が、所望の生成物を得るために必要に応じて、保護の有無にかかわらず、反応スキームを通じて運ばれるように出発物質が適切に選択されてもよいことを認識するであろう。あるいは、最終的な所望の置換基の代わりに、反応スキームを通じて運ばれ得、所望の置換基で必要に応じて置き換えられ得る適切な基を用いることが必要又は所望とされてもよい。更に、当業者は、以下のスキームに示される変換が、特定のペンダント基の機能性と互換性のある任意の順序で実施されてもよいことを認識するであろう。一般スキームに表される反応のそれぞれは、好ましくは、約０℃から使用される有機溶媒の還流温度で実行される。別段の記載がない限り、変数は式（Ｉ）に関して上で定義された通りである。
【０２４０】
本実施態様のコンジュゲートは、親水性の自壊性スペーサーを含むリンカーを通じて薬物部分を抗体と結合させることにより構築されてもよい。
【０２４１】
式（Ｉ）の化合物のリンカー部分に関する代表的な合成は以下のスキームに記載され、特定の実施例が続く。
2017523958.tif 000057
【０２４２】
４−ニトロベンゼンアルデヒドからの化合物Ｃの合成がスキーム２で上記に示す。ＳＯＣｌ２、ＰＣｌ３、又はＰＣｌ５等の塩素化剤を使用して、４−ニトロフェニルグリコール酸を対応する酸塩化物に変換する。次いで、酸塩化物を１−メチルピペラジンと反応させ、ケトンアミド中間体を得る。あるいは、ＥＤＣＩ等のカップリング剤を使用して、４−ニトロフェニルグリコール酸を１−メチルピペラジンとカップリングさせ得る。ケトンアミド中間体はケト基を含有し、次いでこれをＤＩＢＡＬ−Ｈ、ＢＨ３、ＬｉＡｌＨ４−ＡｌＣｌ３、ＬｉＡｌＨ４−ＢＦ３−Ｅｔ２Ｏ、又はホウ化水素ナトリウム等の還元試薬を用いて還元して、化合物Ｃを生成する。
2017523958.tif 000058
【０２４３】
スキーム３に関し、化合物Ｃのニトロ基を還元して、パラジウム、ニッケル又は白金等の触媒での接触水素化により、化合物Ｉ中のアニリン基を得る。適切な水素化触媒の例は、Ｐｄ／Ｃ及びＲａｎｅｙニッケルを含む。
2017523958.tif 000059
スキーム４に関し、化合物Ｉは本実施態様の化合物中の親水性の自壊性リンカー部分を提供する。化合物Ｉのアミノ基は、化合物Ｘを生成するための標準的なペプチドカップリング条件を通じて化合物Ｗと反応し得る。ＤＩＥＡ等の塩基又は当業者に知られているその他塩基の存在下、適切な溶媒中でＥＤＣＩ／ＨＯＢｔ、ＨＯＢｔ、ＰｙＢＯＰ、ＨＡＴＵ若しくはＢＥＭ（Carpino, L. A. J. Am. Chem. Soc. 1993, 115, 4397. Carpino, L. A.；El-Faham, A. J. Am. Chem. Soc. 1995, 117, 5401. Li, P.；Xu, J. C. J. Pept. Res. 2001, 58, 129.）等の試薬が使用され得る。
【０２４４】
更にスキーム４に関し、４−ニトロフェニルクロロホルメートを使用して、化合物Ｘのヒドロキシル基を活性炭酸塩に変換する。化合物Ｙを用いて、アミノ基を有する薬物と反応させることにより化合物Ｚを生成し得る。薬物がアミノ基を含有しない場合、第二の、中間体自壊性スペーサー又は環化自己脱離リンカーは、上記のように薬物部分とアミノベンジルオキシカルボニル基との間に位置し得る。
【０２４５】
ある実施態様において、以下のスキーム５に関し、リンカーの−Ｌ３−Ｌ２−部分は化合物Ｉに結合される。次いで、−Ａ−Ｌ４−部分が結合される。
2017523958.tif 000060
【０２４６】
本実施態様の化合物を調製するための方法は、バッファー中の抗体の溶液を調製すること及びＴＣＥＰ等の還元剤の溶液で処理することを含む。遊離チオールの量を決定する。遊離チオールの量が所定量に達した場合、部分的に還元した抗体はリンカー−薬物部分でアルキル化される。
【０２４７】
いくつかの実施態様において、式（Ｉ）又は（Ｉａ）：
2017523958.tif 000061
［式中、Ｄ、Ｔ、Ｘ、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４、Ａ及びｐは、適用できる場合、式（Ｉ）又は（Ｉａ）のために定義された通りであり、標的化部分Ｔを含む化合物を式：Ａ−Ｌ４−Ｌ３−Ｌ２−Ｘ−Ｌ１−Ｄの化合物と反応させることを含む］の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を調製するための方法が提供される。いくつかの実施態様において、ＴはＣＤ２２（例えば、ヒトＣＤ２２）に特異的に結合する抗体である。いくつかの実施態様において、方法によって生成される化合物が提供される。更に、この方法により生成される一又は複数の化合物を含む組成物が提供される。
【０２４８】
いくつかの実施態様において、式（ＩＩ）又は（ＩＩａ）：
2017523958.tif 000062
［式中、Ｄ、Ｔ、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４、Ａ及びｐは、適用できる場合、式（ＩＩ）又は（ＩＩａ）のために定義された通りであり、一又は複数の遊離チオール（又はスルフヒドリル基）を生じさせる抗体を化合物Ｚ：
2017523958.tif 000063
又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体と反応させることを含む］の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を調製するための方法が提供される。ある実施態様において、一又は複数の遊離チオール（又はスルフヒドリル基）を有する抗体は抗ＣＤ２２抗体である。いくつかの実施態様において、一又は複数の遊離チオール（又はスルフヒドリル基）を有する抗体は、ｈＬＬ２、ｈ１０Ｆ４、ｇ５／４４、ｈＨＢ２２．７、若しくはその誘導体、又は抗体の重鎖及び／若しくは軽鎖の一若しくは複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられているｈＬＬ２、若しくは抗体の重鎖及び／若しくは軽鎖の一若しくは複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられているｈ１０Ｆ４、若しくは抗体の重鎖及び／若しくは軽鎖の一若しくは複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられているｇ５／４４、若しくは抗体の重鎖及び／若しくは軽鎖の一若しくは複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられているｈＨＢ２２．７である。いくつかの実施態様において、一又は複数の遊離チオール（又はスルフヒドリル基）を有する抗体は、ＲＦＢ４の誘導体（例えば、ヒト化抗体又はキメラ抗体）、又は抗体の重鎖及び／若しくは軽鎖の一若しくは複数のアミノ酸残基がシステイン残基で置き換えられているＲＦＢ４の誘導体（例えば、ヒト化抗体又はキメラ抗体）である。いくつかの実施態様において、該方法は、本明細書中で詳述されるような化合物Ｚを調製するための方法を更に含む。いくつかの実施態様において、該方法は、本明細書中で詳述されるような化合物Ｚをもたらす一又は複数の合成中間体（例えば化合物Ｙ及び化合物Ｘ）を調製するための方法を更に含む。いくつかの実施態様において、本明細書中で詳述される方法の何れかにより生成される化合物が更に提供される。本明細書中で詳述される方法の何れかにより生成される一又は複数の化合物を含む組成物が更に提供される。
【０２４９】
いくつかの実施態様において、式（ＩＩ）
2017523958.tif 000064
［式中、
Ｄは薬物部分であり；
Ｔは抗体であり；
Ｒ１は水素、無置換若しくは置換Ｃ１−３アルキル、又は無置換若しくは置換ヘテロシクリルであり；
Ｌ１は結合、第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーであり；
Ｌ２は結合又は第二の自壊性リンカーであって；
ここで、Ｌ１が第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーである場合に、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が第二の自壊性リンカーである場合に、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合又はスペーサーであり；且つ
Ａはアシル単位である］
の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を調製する方法であって、
抗体を化合物Ｚ
2017523958.tif 000065
又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体と反応させることを含む方法が提供される。いくつかの実施態様において、Ｔは、ＣＤ２２（例えば、ヒトＣＤ２２）に特異的に結合する抗体である。
【０２５０】
いくつかの実施態様において、式（ＩＩａ）：
2017523958.tif 000066
［式中、
ｐは、１から２０であり；
Ｄは薬物部分であり；
Ｔは抗体であり；
Ｒ１は水素、無置換若しくは置換Ｃ１−３アルキル、又は無置換若しくは置換ヘテロシクリルであり；
Ｌ１は結合、第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーであり；
Ｌ２は結合又は第二の自壊性リンカーであって；
ここで、Ｌ１が第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーである場合に、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が第二の自壊性リンカーである場合に、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合又はスペーサーであり；且つ
Ａはアシル単位である］
の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を調製する方法であって、
抗体を化合物Ｚ
2017523958.tif 000067
又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を抗体と反応させることを含む方法が提供される。いくつかの実施態様において、Ｔは、ＣＤ２２（例えば、ヒトＣＤ２２）に特異的に結合する抗体である。
【０２５１】
化合物を調製する方法及び／又は本明細書中で詳述される化合物を調製する方法の何れかにより生成される化合物が更に提供される。化合物を調製する方法及び／又は本明細書中で詳述される化合物を調製する方法の何れかにより生成される一又は複数の化合物を含む組成物（例えば薬学的組成物）もまた提供される。
【０２５２】
本開示は、スキーム４及び５中の化合物及び中間体の調製のための方法を提供する。スキーム４及び５中に提示される化合物は、完全原子価を有する又は、適切な場合、任意の保護基若しくは脱離基で適切に覆われていることを意図されている。例えば、「化合物ＴＡＰ−１８Ｈの合成」のスキームに示されるＬ３−Ｌ２は
2017523958.tif 000068
であり得る。
【０２５３】
本開示は、化合物Ｘ：
2017523958.tif 000069
［式中、
Ｒ１は水素、無置換若しくは置換Ｃ１−３アルキル、又は無置換若しくは置換ヘテロシクリルであり；
Ｌ２は結合又は第二の自壊性リンカーであり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合又はスペーサーであり；且つ
Ａはアシル単位である］
又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を調製する方法であって、
化合物Ｗ：Ａ−Ｌ４−Ｌ３−Ｌ２及び化合物Ｉ
2017523958.tif 000070
を反応させることを含む方法を提供する。
【０２５４】
本開示は、化合物Ｚ：
2017523958.tif 000071
［式中：
Ｄは薬物部分であり；
Ｒ１は水素、無置換若しくは置換Ｃ１−３アルキル、又は無置換若しくは置換ヘテロシクリルであり；
Ｌ１は結合、第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーであり；
Ｌ２は結合又は第二の自壊性リンカーであって；
ここで、Ｌ１が第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーである場合に、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が第二の自壊性リンカーである場合に、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合又はスペーサーであり；且つ
Ａはアシル単位である］
又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を調製する方法であって
化合物Ｘ：
2017523958.tif 000072
をＬ１−Ｄを含む化合物と反応させることを含む方法を提供する。
【０２５５】
いくつかの実施態様において、化合物Ｚを調製する方法は、カルボン酸活性化剤の存在下で化合物Ｘを反応させて、化合物Ｙａ
2017523958.tif 000073
［式中、Ｌｖが脱離基である］
を形成すること、及び
Ｌ１−Ｄを含む化合物を化合物Ｙａと反応させることを含む。いくつかの実施態様において、カルボン酸活性化剤は、クロロギ酸ｐ−ニトロフェニルであり、Ｌｖはｐ−ニトロフェニルである。当該技術分野で公知の他のカルボン酸活性化剤、例えばビス（４／ｐ−ニトロフェニル）炭酸塩、ホスゲン、トリホスゲン／ビス（トリクロロメチル炭酸塩）、クロロギ酸トリクロロメチル、Ｎ，Ｎ‘−ジスクシンイミジル炭酸塩、及び１，１’−カルボニルジイミダゾールを、クロロギ酸ｐ−ニトロフェニルの代わりに使用することができる。
【０２５６】
いくつかの実施態様において、化合物Ｚを調製する方法は、化合物Ｘとクロロギ酸ｐ−ニトロフェニルを反応させて、化合物Ｙ
2017523958.tif 000074
を形成すること、及びＬ１−Ｄを含む化合物を化合物Ｙと反応させることを含む。
【０２５７】
本開示は、化合物Ｘ１：
2017523958.tif 000075
［式中、
Ｒ１は水素、無置換若しくは置換Ｃ１−３アルキル、又は無置換若しくは置換ヘテロシクリルであり；
Ｌ２は結合又は第二の自壊性リンカーであり；且つ
Ｌ３はペプチドリンカーである］
又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を調製する方法であって、
化合物Ｗ１：Ｌ３−Ｌ２、及び化合物Ｉ
2017523958.tif 000076
を反応させることを含む、方法が提供される。
【０２５８】
本開示は、化合物Ｙ１
2017523958.tif 000077
［式中、
Ｒ１は水素、無置換若しくは置換Ｃ１−３アルキル、又は無置換若しくは置換ヘテロシクリルであり；
Ｄは薬物部分であり、
Ｌ１は結合、第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーであり；
Ｌ２は結合又は第二の自壊性リンカーであって；
ここで、Ｌ１が第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーである場合に、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が第二の自壊性リンカーである場合に、Ｌ１は結合であり；及び
Ｌ３はペプチドリンカーである］
又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を調製する方法であって、
化合物Ｘ１
2017523958.tif 000078
及びＬ１−Ｄを含む化合物を反応させることを含む方法を提供する。いくつかの実施態様において、反応は、クロロギ酸ｐ−ニトロフェニルの存在下で行われる。いくつかの実施態様において、反応は、ビス（４／ｐ−ニトロフェニル）炭酸塩、ホスゲン、トリホスゲン／ビス（トリクロロメチル炭酸塩）、クロロギ酸トリクロロメチル、Ｎ，Ｎ‘−ジスクシンイミジル炭酸塩、及び１，１’−カルボニルジイミダゾールからなる群より選択される化合物の存在下で行われる。
【０２５９】
本開示は、化合物Ｚ
2017523958.tif 000079
［式中、
Ｄは薬物部分であり、
Ｒ１は水素、無置換若しくは置換Ｃ１−３アルキル、又は無置換若しくは置換ヘテロシクリルであり；
Ｌ１は結合、第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーであり；
Ｌ２は結合又は第二の自壊性リンカーであって；
ここで、Ｌ１が第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーである場合に、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が第二の自壊性リンカーである場合に、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合又はスペーサーであり；且つ
Ａはアシル単位である］
又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を調製する方法であって、
化合物Ｙ１
2017523958.tif 000080
及びＡ−Ｌ４を含む化合物を反応させることを含む方法を提供する。
【０２６０】
本開示は、式：
2017523958.tif 000081
［式中、
Ｒ１は水素、無置換若しくは置換Ｃ１−３アルキル、又は無置換若しくは置換ヘテロシクリルであり；
Ｌ２は結合又は第二の自壊性リンカーであり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり；
Ｌ４は結合又はスペーサーであり；且つ
Ａはアシル単位である］
の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を提供する。
【０２６１】
本開示は、式
2017523958.tif 000082
［式中、
Ｒ１は水素、無置換若しくは置換Ｃ１−３アルキル、又は無置換若しくは置換ヘテロシクリルであり；
Ｄは薬物部分であり；
Ｌ１は結合、第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーであり；
Ｌ２は結合又は第二の自壊性リンカーであって；
ここで、Ｌ１が第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーである場合に、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が第二の自壊性リンカーである場合に、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーであり：
Ｌ４は結合又はスペーサーであり；且つ
Ａはアシル単位である］
の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を提供する。
【０２６２】
本開示は、式
2017523958.tif 000083
［式中、
Ｒ１は水素、無置換若しくは置換Ｃ１−３アルキル、又は無置換若しくは置換ヘテロシクリルであり；
Ｌ２は結合又は第二の自壊性リンカーであり；且つ
Ｌ３はペプチドリンカーである］
の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を提供する。
【０２６３】
本開示は、式
2017523958.tif 000084
［式中、
Ｒ１は水素、無置換若しくは置換Ｃ１−３アルキル、又は無置換若しくは置換ヘテロシクリルであり；
Ｄは薬物部分であり、
Ｌ１は結合、第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーであり；
Ｌ２は結合又は第二の自壊性リンカーであって；
ここで、Ｌ１が第二の自壊性リンカー又は環化自己脱離リンカーである場合に、Ｌ２は結合であり；
ここで、Ｌ２が第二の自壊性リンカーである場合に、Ｌ１は結合であり；
Ｌ３はペプチドリンカーである］
の化合物又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体を提供する。
【０２６４】
本明細書は、当業者が本発明を実践することができるように十分に考慮されている。本明細書に示され、説明される内容に加えて、本発明の様々な変更が前述の説明から当業者に明らかとなるが、それらは添付の特許請求の範囲内に含まれる。本明細書において引用した全ての出版物、特許、及び特許出願は、全ての目的に関して参照により全体が本明細書に援用される。
【実施例】
【０２６５】
本発明は、説明のために提供され、制限的であることを意味しない、以下の実施例を参照して更に理解することができる。
【０２６６】
実施例１：  実施例２〜５についての材料及び方法
リンカー−薬物の合成
化合物Ｔａｐ−１８Ｈの合成を以下のスキームに示す。中間体化合物Ｍ及びＯの合成も以下のスキームに示す。
2017523958.tif 000085
2017523958.tif 000086
【０２６７】
化合物Ｔａｐ−１８Ｈの合成スキームに関して、ＰＣｌ５か、又はＥＤＣｌとＮｉＰｒ２Ｅｔが入ったＤＭＦか、又は２−クロロ−４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジンが入ったＣＨ２Ｃｌ２及びＮ−メチルモルホリンをカップリング剤として使用して、市販の４−ニトロフェニルグリオキシル酸を、Ｎ−メチルピペラジンと縮合させ、所望のケトアミドを生成した。典型的な手順において、ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍｌ）、Ｎ−メチルモルホリン（１５ｍｍｏｌ）に２−クロロ−４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン（５ｍｍｏｌ）が入った溶液を連続撹拌下で０−５℃で添加した。３０−４０分後、白色の懸濁液が形成され、この混合物に４−ニトロフェニルグリオキシル酸が入ったＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍｌ）を添加し、透明な溶液の形成をもたらした。混合物を１時間撹拌した後、Ｎ−メチルピペラジン（５ｍｍｏｌ）を室温で添加した。反応（ＴＬＣ、１０分間）の完了後、混合物を１０％のＮａＨＣＯ３水溶液（２×１０ｍｌ）、続いてＨ２Ｏ（３×１０ｍｌ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で溶媒を除去して粗生成物を得、これを再結晶化又はカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝８：２）により更に精製した。
【０２６８】
ＴＨＦ又はＤＩＢＡＬ−Ｈ又は水素化ホウ素ナトリウムの存在下、ＬｉＡｌＨ４の０．５当量でケトンアミド化合物を更に還元してニトロ化合物Ｃを生成した［B. P. Bandgar及びS. S. Pandit, Tetrahedron Letters 44 (2003) 3855-3858］。
【０２６９】
ＳｎＣｌ２での処理か又はメタノール中の触媒としてのＰｄ／Ｃ（１０％ｗ／ｗ）との接触水素化により、室温で約６−１１時間、収率６５−８１％でニトロ化合物Ｃをアニリン化合物Ｉに還元した。それをＲＢ０４−５０  Ｒｅａｃｔｏｒ  Ｂを備えるＭｕｌｔｉＭａｘＩＲシステムを使用した以下の手順を通じて得た。反応器を初めに３５ｍｌのメタノール、０．０３ｍｇの１０％Ｐｄ／Ｃ及び０．０２５２モルのニトロ化合物Ｃで充填し、水素を６．３バールの気圧まで反応器中に添加した（Ｈ２、ｃｏｎｓｔ．）。
【０２７０】
化合物Ｍの合成のスキームに関して、Ｂｏｃ保護Ｌ−バリンをＮ−ヒドロキシスクシンイミドとＥＤＡＣ−ＨＣｌが入ったＤＣＭ又はＮ−ヒドロキシスクシンイミドとＥＤＣが入ったＤＣＭで処理し、スクシンイミドエステルを得た。この活性化エステルをＬ−シトルリン及びＣＨ３ＣＮ、Ｈ２Ｏ、ＮａＨＣＯ３と反応させ、Ｂｏｃ保護化合物Ｍを得た。
【０２７１】
化合物Ｔａｐ−１８Ｈの合成のスキームに関して、アニリン化合物Ｉを、ＤＣＣ／ＨＯＢｔが入ったＤＭＦを用いて、室温で３２時間Ｂｏｃ保護化合物Ｍとカップリングさせ、化合物Ｎ（収率７８−８２％）を得たか又は、ＰＳ−カルボジイミドとカップリングさせた（この反応において、２当量のＰＳ−カルボジイミド及び１．７当量のＨＯＢｔが入ったＤＣＭの存在下、１．５当量のアニリン化合物Ｉで１００ｍｇの化合物Ｍから出発させて、２４時間、化合物Ｎの合成を行った）。ＬＣ／ＭＳによる分析は、所望の質量を有するピーク及びおよそ５０−６０％の変換を示した。
【０２７２】
カップリングした生成物である化合物Ｎを４−ニトロフェニルクロロホルメートで、２，６−ルチジンが入ったＤＣＭの存在下、室温で８時間反応させて炭酸塩化合物Ｐを得、ＬＣ／ＭＳは所望の質量を有するピークを示した。
【０２７３】
ＨＯＡｔとＥｔ３Ｎが入ったＤＭＦの存在下のモノメチルドラスタチン１０での炭酸塩化合物Ｐの処理は、化合物Ｑの形成をもたらした。
【０２７４】
化合物Ｏの合成のスキームに関して、βアラニンを無水マレイン酸が入ったＤＭＦで処理し、そのように得た酸をＤＣＣカップリング下、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）と反応させ、ＮＨＳ−エステルを得た。市販のｔ−ｂｏｃ−Ｎ−アミド−ｄＰＥＧ４−酸中のＢＯＣ保護基をＴＦＡでの処理により除去し、アミンのＴＦＡ塩を得、これを先で合成させたＮＨＳエステルと反応させた。そのように得たカルボキシル酸を単離させ、ＥＤＣＩを使用してＮ−ヒドロキシスクシンイミドとカップリングさせ、ＮＨＳエステル化合物Ｏを得た。
【０２７５】
化合物Ｔａｐ−１８Ｈの合成のスキームに関して、化合物Ｑ中のＢｏｃ保護基をＴＦＡで除去し、無水アセトニトリル及びＮａＨＣＯ３中、室温で１２−３６時間、遊離アミンをＮＨＳエステル化合物Ｏとカップリングさせ、最終生成物Ｔａｐ−１８Ｈを収率３５−４５％で生成させた。
【０２７６】
図１はＴａｐ−１８ＨのＮＭＲスペクトルを示す。
【０２７７】
化合物ＴＡＰ−１８Ｈｒ１の合成
Ｔａｐ−１８Ｈｒ１を以下の式を用いて合成した。図２はＴａｐ−１８Ｈｒ１のＮＭＲスペクトルを示す。
2017523958.tif 000087
【０２７８】
化合物ＴＡＰ−１８Ｈｒ２の合成
Ｔａｐ−１８Ｈｒ２を以下の式を用いて合成した。図３はＴａｐ−１８Ｈｒ２のＮＭＲスペクトルを示す。
2017523958.tif 000088
【０２７９】
細胞株
ヒトＢ細胞リンパ腫細胞Ｄａｕｄｉ（Ｂｉｏｒｅｓｏｕｒｃｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｅｎｔｅｒ（ＢＣＲＣ）、カタログ番号６０１９２）、Ｒａｊｉ（ＡＴＣＣ、カタログ番号ＣＣＬ−８６）、Ｒａｍｏｓ（ＢＣＲＣ、カタログ番号６０２５２）、ＲＬ（ＡＴＣＣ、カタログ番号ＣＲＬ−２２６１）を、１０％ＦＢＳ（ＧＩＢＣＯ、カタログ番号２６１４０）、１００Ｕ／ｍＬペニシリン／１００μｇ／ｍＬストレプトマイシン（ＧＩＢＣＯ、カタログ番号１５１４０）、及び１ｍＭピルビン酸ナトリウム（ＧＩＢＣＯ、カタログ番号１１３６０）が補充されたＲＰＭＩ培地１６４０（ＧＩＢＣＯ、カタログ番号２２４００）中で培養した。ヒト急性リンパ芽球性白血病細胞ＲＥＨ（ＤＳＭＺ、カタログ番号ＡＣＣ２２）を、２０％ＦＢＳ（ＧＩＢＣＯ、カタログ番号２６１４０）、１００Ｕ／ｍＬペニシリン／１００μｇ／ｍＬストレプトマイシン（ＧＩＢＣＯ、カタログ番号１５１４０）が補充されたＲＭＰＩ培地１６４０（ＧＩＢＣＯ、カタログ番号２２４００）中で培養した。ヒト急性リンパ芽球性白血病細胞ＮＡＬＭ−６（ＤＳＭＺ、カタログ番号ＡＣＣ１２８）を、１０％ＦＢＳ（ＧＩＢＣＯ、カタログ番号２６１４０）、１００Ｕ／ｍＬペニシリン／１００μｇ／ｍＬストレプトマイシン（ＧＩＢＣＯ、カタログ番号１５１４０）が補充されたＲＰＭＩ培地１６４０（ＧＩＢＣＯ、カタログ番号２２４００）中で培養した。ヒトＴ細胞白血病細胞Ｊｕｒｋａｔ（ＢＣＲＣ、カタログ番号６０４２４）を、１０％ＦＢＳ（ＨｙＣｌｏｎｅ、カタログ番号ＳＨ３００７１．０３）及び１００Ｕ／ｍＬペニシリン／１００μｇ／ｍＬストレプトマイシン（ＧＩＢＣＯ、カタログ番号１５１４０）が補充されたＲＰＭＩ培地１６４０（ＧＩＢＣＯ，カタログ番号２２４００）中で培養した。
【０２８０】
ｈＬＬ２野生型抗体の生成
表５に示されるｈＬＬ２のＶＨ及びＶＬ断片をそれぞれ、重鎖及び軽鎖のＮｈｅＩ部位及びＡｖｒＩＩ部位を介して、ｐｃＤＮＡ５−ＦＲＴ−ｈＩｇＧ１κ又はｐｃＤＮＡ５−ＦＲＴ−ｈＩｇＧ４ｐκベクターに挿入した。ｈＬＬ２の重鎖及び軽鎖遺伝子の両方を含有する完全集合したプラスミドｈＬＬ２／ｐｃＤＮＡ５−ＦＲＴ−ｈＩｇＧ１、又はｈＬＬ２／ｐｃＤＮＡ５−ＦＲＴ−ｈＩｇＧ４ｐを使用して、ｈＬＬ２抗体を発現させた。
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配列番号１（ｈＬＬ２軽鎖可変領域）
ＤＩＱＬＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＭＳＣＫＳＳＱＳＶＬＹＳＡＮＨＫＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＦＴＩＳＳＬＱＰＥＤＩＡＴＹＹＣＨＱＹＬＳＳＷＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ
配列番号２（ｈＬＬ２重鎖可変領域）
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＳＹＷＬＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＹＩＮＰＲＮＤＹＴＥＹＮＱＮＦＫＤＫＡＴＩＴＡＤＥＳＴＮＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＦＹＦＣＡＲＲＤＩＴＴＦＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ
【０２８１】
ｈＬＬ２システイン変異体の生成
システイン残基を部位特異的突然変異誘発法によってｈＬＬ２抗体に導入した。簡潔には、オーバーラップＰＣＲによって突然変異誘発を実施した。ヌクレオチドを変化させたプライマーを組み込むことによって、所望の塩基に特異的変化を導入することができる。プライマーが伸長すると、得られたアンプリコンに突然変異が作り出された。突然変異の位置（ＥＵ番号付け）及びアミノ酸の隣接配列を以下の表６に列挙する。Ｔ１５５Ｃ、Ｓ１５７Ｃ、Ｓ１６５Ｃ、Ｔ１６９Ｃ、及びＳ４４２Ｃを、更なる試験において例として使用した。
2017523958.tif 000090
【０２８２】
ｈＬＬ２抗体を発現する安定な細胞株の生成
ｈＬＬ２−システイン（ｈＬＬ２−Ｃｙｓ）の野生型及び変異体を、Ｆｌｐ−Ｉｎ  ＣＨＯ細胞（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カタログ番号Ｒ７５８−０７）において安定に発現及び生成させた。システイン置換抗体変異体のＤＮＡ配列を、ｐｃＤＮＡ５／ＦＲＴベクター（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カタログ番号Ｖ６０１０−２０）に挿入して、製造業者によって提供される標準手順書に従ってｐＯＧ４４（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カタログ番号Ｖ６００５−２０）と同時トランスフェクトした。確立された細胞株の培養上清を収集して、プロテインＡセファロースビーズ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、カタログ番号１７−５２８０−０４）によって精製した。精製されたタンパク質をＳＤＳ−ＰＡＧＥ及びサイズ排除クロマトグラフィーによって分析して、抗体の品質を確保した。
【０２８３】
ｈＬＬ２−ＩｇＧ１抗体の通常のコンジュゲーション
ｈＬＬ２−ＩｇＧ１抗体を、２．２５等量のＴＣＥＰ（Ａｃｒｏｓ  Ｏｒｇａｎｉｃｓ、カタログ番号３６３８３０１００）の入った０．０２５Ｍホウ酸ナトリウムｐＨ８、０．０２５Ｍ  ＮａＣｌ、１ｍＭ  ＤＴＰＡ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、カタログ番号Ｄ６５１８）で３７℃で２時間還元した。１．０ｍｇ／ｍＬ溶液に関して２８０ｎｍで１．６２の吸光度値を使用してタンパク質濃度を数値化し、１４６，５１４ｇ／ｍｏｌの分子量を使用してモル濃度を決定した。生成されたｍＡｂ−システインチオールの濃度を、ＤＴＮＢ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（商標）Ｐｉｅｒｃｅ（商標）、カタログ番号２２５８２）で滴定して決定した。典型的に、ｍＡｂあたり３のチオールが得られた。部分的に還元された抗体を１．０モル濃度のマレイミドカプロイル−薬物／ｍＡｂ−システインチオール又はマレイミド−薬物／ｍＡｂ−システインチオールによってアルキル化した。アルキル化反応を４℃で１２−１６時間実施した。システイン（最終濃度１ｍＭ）を使用して、任意の未反応物の余剰マレイミドカプロイル−薬物又はマレイミド−薬物をクエンチした。Ｔａｐ１８Ｈｒ１コンジュゲーション混合物を初めに、結合バッファー、１０ｍＭリン酸ナトリウム、１０ｍＭＮａＣｌ、５％ＤＭＳＯ、ｐＨ７．０で５倍希釈して、ヒドロキシアパタイトカラム（マクロプレップセラミックタイプＩ  ４０μｍ、ＢｉｏＲａｄ、Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，  ＣＡ）に、コンジュゲート抗体２０ｍｇあたりヒドロキシアパタイト１ｍＬのローディング容量で適用した。カラムを先に５カラム容量の結合バッファーで平衡化した。試料の適用に続き、カラムを３カラム容量の結合バッファーで洗浄し、次いで５カラム容量の１０ｍＭリン酸ナトリウム、１０ｍＭ  ＮａＣｌ、ｐＨ７．０で平衡化した。次いで、結合したＡＤＣを２００ｍＭリン酸ナトリウム、１０ｍＭＮａＣｌ、ｐＨ７．０で溶出した。溶出後、ＨｉＰｒｅｐ（商標）２６／１０脱塩カラム（任意選択的）を使用して、バッファーをダルベッコリン酸緩衝生理食塩水に交換した。
【０２８４】
ｈＬＬ２−Ｃｙｓ変異体の部位特異的コンジュゲーション
導入されたシステインのリンカーペイロード（すなわち、薬物部分に結合したリンカーを含む分子）を特異的にコンジュゲートするために、還元／酸化手順を使用した。培養条件の際に起こり得る、導入されたシステイン部位のシステイン又はグルタチオンを除去するために、ｈＬＬ２−Ｃｙｓ変異体を初めに、１ｍＭ  ＤＴＰＡ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、カタログ番号Ｄ６５１８）を含有するＰＢＳ中で１０−１５倍モル過剰のＴＣＥＰ（Ａｃｒｏｓ  Ｏｒｇａｎｉｃｓ、カタログ番号３６３８３０１００）で３７℃で２−５時間処理した。次いで、抗体を、タンパク質に対して２０−３０倍モル過剰のデヒドロアスコルビン酸（ＤＨＡ）（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、カタログ番号２６１５５６）で、室温で３−５時間再酸化して、鎖間ジスルフィド結合を確実に再形成させた。次いで、マレイミド結合薬物ペイロード、Ｔａｐ１８Ｈｒ１を添加して、処理した抗体における遊離のチオールと反応させた。余剰ペイロードをＮ−アセチル−Ｌ−システイン（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、カタログ番号Ａ７２５０）によってクエンチして、ＣＨＴセラミックヒドロキシアパタイトビーズ（Ｂｉｏ−Ｒａｄ、カタログ番号１５７−００４０）を使用して、コンジュゲート抗体を精製した。
【０２８５】
逆相ＨＰＬＣ分析による薬物抗体比（ＤＡＲ）の決定
逆相ＨＰＬＣ（ＲＰ−ＨＰＬＣ）の還元及び変性からなる方法を開発して、様々な軽鎖及び重鎖種を分離及び定量して、コンジュゲートＡＤＣのＤＡＲを決定した。ＨＰＬＣ分析の前に、コンジュゲート試料を６Ｍグアニジン塩酸塩及び２０ｍＭ  ＤＴＴで５０℃未満で１５分間加熱して処理した。処理したコンジュゲート試料１００μｇをＰＬＲＰ−Ｓカラム（２．１×１５０ｍｍ、８μｍ、１０００Å、Ａｌｉｇｅｎｔ）に適用した。流速を０．８ｍＬ／分に設定して、カラム温度を、分析を通して一定の８０℃に設定した。溶媒Ａは０．０５％トリフルオロ酢酸が入ったＭｉｌｌｉＱ水であり、溶媒Ｂは０．０４％トリフルオロ酢酸の入ったアセトニトリルであった。方法は以下からなった：アイソクラチック２５％Ｂを３ｍｌ；５０％Ｂへ２５ｍｌの直線勾配；９５％Ｂへ２ｍｌの直線勾配；２５％Ｂへ１ｍｌの直線勾配；及びアイソクラチック２５％Ｂを２ｍｌ。この方法において、余剰のＤＴＴを用いたＡＤＣの前処理は、鎖内及び鎖間ジスルフィドを切断し、０又は１の薬物を有する軽鎖（Ｌ０及びＬ１）、及び０、１、２、又は３の薬物を有する重鎖（Ｈ０、Ｈ１、Ｈ２、及びＨ３）の分離を可能にする。各分離種のピークは、その溶出時間及びＵＶスペクトルによって指定された（Ａ２４８／２８０比は薬物のローディングと共に増加する）。試験されたＡＤＣのＲＰ−ＨＰＬＣプロファイルにおける個々のピーク面積に基づいて計算されたＤＡＲはそれぞれ、通常のコンジュゲーション及び部位特異的コンジュゲーションに関して２．７−３．５及び１．５８−２．０１であった。
【０２８６】
ｈＬＬ２−Ｃｙｓ変異体及びＴａｐ１８Ｈｒ１コンジュゲートのがん細胞に対する結合
６×１０４−１×１０５細胞／ウェルを、ｖ−底９６ウェルプレートに播種して、１００μｌの非コンジュゲートＡｂ又は滴定した濃度のＡＤＣ又は１０μｇ／ｍＬのアイソタイプコントロール抗体ヒトＩｇＧと共にインキュベートした。４℃で３０−６０分インキュベートした後、細胞を２００μｌのＦＡＣＳバッファー（１％ＦＢＳを含有する１×ＰＢＳ）で１回洗浄後、１μｇ／ｍｌヤギＦ（ａｂ’）２−抗ヒトＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）−ＲＰＥ（Ｓｏｕｔｈｅｒｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈ、カタログ番号２０４３−０９）が入ったＦＡＣＳバッファーで染色し、次いで、４℃で３０−６０分間インキュベートした。細胞をＦＡＣＳバッファーで１回洗浄して、フローサイトメーター（ＢＤ  ＬＳＲ、ＢＤ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）で分析した。
【０２８７】
インビトロＷＳＴ−１細胞傷害性アッセイ
Ｂ細胞リンパ腫細胞（Ｄａｕｄｉ、Ｒａｊｉ、Ｒａｍｏｓ、ＲＬ）、急性リンパ芽球性白血病（ＲＥＨ）、及びＪｕｒｋａｔ細胞をそれぞれ、９６ウェルマイクロタイタープレートに２×１０４及び２．５×１０４細胞／ウェルで播種した。Ｔａｐ１８ＨｒコンジュゲートＡＤＣ又は非コンジュゲート抗体を、最終容積２００μＬ／ウェル中で表記の最終濃度で三重複製又は６重複製で添加した。次いで、細胞を３７℃、５％ＣＯ２でインキュベートし、製造業者の指示に従い細胞増殖試薬ＷＳＴ−１（Ｒｏｃｈｅ、カタログ番号１１６４４８０７００１）により７２又は９６時間で細胞生存を検出した。簡潔には、インキュベーション終了後、１００μＬの培地を取り出し、１０μＬ／ウェルのＷＳＴ−１を試験細胞株に添加した。最適な発色後（未治療コントロールのＯＤ４５０≧１．５の場合）、４５０ｎｍでの吸光度（ＯＤ４５０値）を分光光度計（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ、ＶＥＲＳＡｍａｘマイクロプレートリーダー）により測定した。複製の平均を得、バックグラウンド（培地コントロール）を差し引いた。次いで、得られたＯＤ４５０値を使用して、以下の式：［ＯＤ４５０未治療−ＯＤ４５０試料］／［ＯＤ４５０未治療］＊１００に従って、％阻害を計算した。
【０２８８】
がん異種移植モデルにおけるＡＤＣ治療
ｈＬＬ２−Ｔａｐ１８Ｈｒ１によって治療したＤａｕｄｉ及びＲａｍｏｓ
皮下異種移植片モデルを確立するために、１×１０７細胞のＤａｕｄｉ又はＲａｏｍｓを雌性Ｃ．Ｂ−１７ＳＣＩＤマウス（Ｌａｓｃｏ、台北、台湾）の右脇腹に移植した。平均腫瘍体積が１００ｍｍ３に達したとき、マウスを無作為に群分けして、ビヒクル又はＡＤＣを１００μｌ中に３ｍｇ／ｋｇで静脈内投与した（第１日として記録）。二垂直寸法中キャリパーで腫瘍体積を週に２回測定し、式（０．５２＊長さ＊幅＊幅）に従って計算した。
【０２８９】
Ｔａｐ１８Ｈｒ１をコンジュゲートしたｈＬＬ２−Ｃｙｓ変異体によって治療したＲａｍｏｓ
皮下異種移植片モデルを確立するために、１×１０７細胞のＲａｏｍｓ細胞を雌性Ｃ．Ｂ−１７ＳＣＩＤマウス（Ｌａｓｃｏ、台北、台湾）の右脇腹に移植した。平均腫瘍体積が１１５ｍｍ３に達したとき、マウスを無作為に群分けして（第１日として記録）、ビヒクル又はＡＤＣを１００μｌ中に８．９μｇ／ｋｇの等量の薬物用量で静脈内投与した（すなわち、注射される用量を、モノメチルドラスタチン−１０の等量が投与されるように調節した）。二垂直寸法中キャリパーで腫瘍体積を週に２回測定し、式（０．５２＊長さ＊幅＊幅）に従って計算した。
【０２９０】
Ｔａｐ１８Ｈｒ１をコンジュゲートしたｈＬＬ２−Ｃｙｓ変異体によって治療したＲＥＨ
皮下異種移植片モデルを確立するために、１×１０７のＲＥＨ細胞をマトリゲル（登録商標）と１：１で混合して、雌性Ｃ．Ｂ−１７ＳＣＩＤマウス（Ｌａｓｃｏ、台北、台湾）の右脇腹に移植した。平均腫瘍体積が約１００ｍｍ３に達したとき、マウスを無作為に群分けして（第１日として記録）、ビヒクル又はＡＤＣを１００μｌ中に８．９μｇ／ｋｇの同等の薬物用量で静脈内投与した（すなわち、注射される用量を、モノメチルドラスタチン−１０の等量が投与されるように調節した）。二垂直寸法中キャリパーで腫瘍体積を週に２回測定し、式（０．５２＊長さ＊幅＊幅）に従って計算した。
【０２９１】
実施例２：  抗ＣＤ２２−ＩｇＧ１／ＩｇＧ４ｐ−Ｔａｐ１８Ｈｒ１  ＡＤＣ及び抗ＣＤ２２−ＩｇＧ１／ＩｇＧ４ｐのＣＤ２２発現細胞株に対する結合親和性
ｈＬＬ２−Ｔａｐ１８Ｈｒ１の結合活性
ｈＬＬ２−ＩｇＧ１−Ｔａｐ１８Ｈｒ１  ＡＤＣの結合親和性を、ＣＤ２２発現がん細胞株（Ｄａｕｄｉ、Ｒａｊｉ、Ｒａｍｏｓ、ＲＬ、ＲＥＨ、及びＮＡＬＭ−６）において評価した。表７のデータは、抗ｈＬＬ２−ＩｇＧ１−Ｔａｐ１８Ｈｒ１がこれらの細胞に有意に結合することを示しており、Ｂ細胞リンパ腫細胞株におけるＣＤ２２発現レベルが様々であることを示唆している：Ｄａｕｄｉ＞Ｒａｊｉ＞Ｒａｍｏｓ＞ＲＬ。ｈＬＬ２−ＩｇＧ１−Ｔａｐ１８Ｈｒ１及びｈＬＬ２−ＩｇＧ１は試験した各Ｂ細胞リンパ腫細胞株に対して同程度の平均蛍光強度（ＭＦＩ）で結合することから、コンジュゲーションは、抗原ＣＤ２２に対する結合親和性を変化させなかった。これらの結果は、ｈＬＬ２−ＩｇＧ１−Ｔａｐ１８Ｈｒ１がｈＬＬ２−ＩｇＧ１の抗原反応性を保持して、多数のＢ細胞リンパ腫細胞株及びＡＬＬ細胞株に有効に結合することを実証する。
2017523958.tif 000091
【０２９２】
薬物コンジュゲーションを有する又は有しないｈＬＬ２−Ｃｙｓ変異体の結合能をＤａｕｄｉ及びＲＥＨがん細胞において評価した。表８のデータは、ｈＬＬ２−ＩｇＧ１システイン変異体がｈＬＬ２−ＩｇＧ１  Ａｂと同等にＤａｕｄｉ細胞に結合することを示している。表９のデータは、ｈＬＬ２−ＩｇＧ１システイン変異体がｈＬＬ２−ＩｇＧ１  Ａｂと同等にＲＥＨ細胞に結合することを示している。加えて、部位特異的コンジュゲートｈＬＬ２−ＩｇＧ１１  ＡＤＣはまた、非コンジュゲート抗体の抗原反応性を保持したが、ｈＬＬ２−Ｓ４４２Ｃ−ＩｇＧ１は、他の変異体よりわずかに低い親和性を示した。
2017523958.tif 000092
2017523958.tif 000093
【０２９３】
表１０（Ｄａｕｄｉに結合）及び表１１（ＲＥＨに結合）のデータは、ｈＬＬ２−ＩｇＧ４ｐシステイン変異体の結合が、ｈＬＬ２−ＩｇＧ４ｐ  Ａｂの結合と同等であるが、ｈＬＬ２−ＩｇＧ１の結合と比較すると低いことを示している。このことは、減少した結合活性がシステイン突然変異よりむしろＩｇＧ４アイソタイプに起因したことを示している。一般的に、部位特異的コンジュゲートｈＬＬ２−ＩｇＧ４ｐ  ＡＤＣは、抗体の抗原反応性を保持した。ＩｇＧ１変異体と同様に、ｈＬＬ２−Ｓ４４２Ｃ−ＩｇＧ４ｐもまた、他のＩｇＧ４ｐ変異体よりわずかに低い親和性を示した。
2017523958.tif 000094
2017523958.tif 000095
【０２９４】
実施例３：  ＣＤ２２発現細胞株におけるｈＬＬ２−ＩｇＧ１−Ｔａｐ１８Ｈｒ１  ＡＤＣ及びｈＬＬ２２−ＩｇＧ１のインビトロ細胞傷害性
ｈＬＬ２−ＩｇＧ１−Ｔａｐ１８Ｈｒ１のインビトロ細胞傷害活性を、ＣＤ２２陽性がん細胞株（Ｄａｕｄｉ、Ｒａｊｉ、Ｒａｍｏｓ、ＲＬ、及びＲＥＨ）及びＣＤ２２陰性細胞株（Ｊｕｒｋａｔ）において評価した。ネイキッドｈＬＬ２−ＩｇＧ１抗体の細胞傷害性も同時に試験した（表１２）。３．３及び１．１μｇ／ｍＬでは、ｈＬＬ２−ＩｇＧ１−Ｔａｐ１８Ｈｒ１は、ＣＤ２２陽性Ｂ細胞リンパ腫細胞（Ｄａｕｄｉ、Ｒａｊｉ、Ｒａｍｏｓ、及びＲＬ）を死滅させるのに、非コンジュゲート抗体ｈＬＬ２−ＩｇＧ１よりはるかに強力であった。試験した細胞株において、ＡＤＣに対する感受性の順序は、Ｒａｍｏｓ＞Ｄａｕｄｉ＞ＲＬ＞Ｒａｊｉであり、表７に示される発現レベルとは正確に相関しなかった。１０μｇ／ｍＬでは、ｈＬＬ２−ＩｇＧ１−Ｔａｐ１８Ｈｒ１は、ＣＤ２２陽性急性リンパ芽球性白血病細胞ＲＥＨを死滅させるのに、非コンジュゲート抗体ｈＬＬ２−ＩｇＧ１より高い力価を示した。ＣＤ２２陰性細胞株Ｊｕｒｋａｔにおいて毒性は観察されなかった。これらの結果は、ｈＬＬ２−ＩｇＧ１−Ｔａｐ１８Ｈｒ１が抗原特異性を保持して、標的がん細胞に細胞傷害性薬物を送達したことを実証する。
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【０２９５】
部位特異的コンジュゲートｈＬＬ２−Ｔａｐ１８Ｈｒ１のインビトロ細胞傷害活性も同様にＤａｕｄｉ、Ｒａｍｏｓ、ＲＥＨ、及びＮＡＬＭ−６細胞において評価した。表１３は、ＩｇＧ１変異体を示し、表１４は、ＩｇＧ４ｐ変異体を示す。３．３及び１．１μｇ／ｍＬでは、部位特異的コンジュゲートは、ＣＤ２２陽性Ｂ細胞リンパ腫細胞（Ｄａｕｄｉ、Ｒａｍｏｓ）を死滅させるのに強力であったが、ＣＤ２２陰性細胞株（Ｊｕｒｋａｔ）は死滅させなかった。結合親和性はわずかにより低かったが、ｈＬＬ２−Ｓ４４２Ｃ−ＩｇＧ１−Ｔａｐ１８Ｈｒ１は、Ｄａｕｄｉ及びＲａｍｏｓ細胞において、他のシステイン変異体と類似の程度の細胞傷害性を誘導した。１０μｇ／ｍＬの部位特異的コンジュゲートは、ＣＤ２２陽性急性リンパ芽球性白血病細胞ＲＥＨ及びＮＡＬＭ−６細胞を死滅させるのに強力であったが、ＣＤ２２陰性Ｊｕｒｋａｔ細胞は死滅させなかった。これらの結果は、部位特異的コンジュゲートｈＬＬ２−Ｔａｐ１８Ｈｒ１  ＡＤＣが、抗原特異性をもって標的がん細胞に細胞傷害性薬物を送達することができることを実証する。
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【０２９６】
実施例４：  ｈＬＬ２−ＩｇＧ１−Ｔａｐ１８Ｈｒ１によって治療したＤａｕｄｉ及びＲａｍｏｓ異種移植片モデル
Ｂ細胞リンパ腫がん細胞株Ｄａｕｓｉ及びＲａｍｏｓに由来する異種移植片モデルにおいて、ｈＬＬ２−Ｔａｐ１８Ｈｒ１−ＩｇＧ１の力価をインビボで評価した。接種した平均腫瘍サイズが約１００ｍｍ３に達したとき、マウスに、ＰＢＳ（ビヒクル）又はＡＤＣの１回用量３ｍｇ／ｋｇを静脈内に治療した（図４−５において第１日として矢印で記録）。Ｄａｕｄｉ異種移植片（図４）では、ビヒクル群の腫瘍は急速に成長して、第７日に５００ｍｍ３に達したが、ｈＬＬ２−ＩｇＧ１−Ｔａｐ１８Ｈｒ１群は、第５日で腫瘍成長の遅延を示し、平均腫瘍サイズは第９日から＜９０ｍｍ３へと更に抑制された。試験終了時、７匹中４匹のマウスが、腫瘍の完全退縮のままであった（完全退縮（ＣＲ）：ＣＲ数／総数）。Ｒａｍｏｓ異種移植片（図５）では、ビヒクル群の腫瘍は、急速に成長して、第６日に５００ｍｍ３に達したが、ｈＬＬ２−ＩｇＧ１−Ｔａｐ１８Ｈｒ１により、第５日で腫瘍の抑制が起こり、この群では全てのマウス（６／６）が第１２日以降に完全退縮を示した（完全退縮（ＣＲ）：ＣＲ数／総数）。両方の異種移植片モデルにおいて、体重は、ＡＤＣ治療群では不変であり、ビヒクル群では腫瘍負荷の重量によりわずかに増加した。併せると、データは、ｈＬＬ２−ＩｇＧ１−Ｔａｐ１８Ｈｒ１が、ＳＣＩＤマウスに移植した抗原陽性腫瘍の成長を１回の注射で有効に阻害することができることを実証する。
【０２９７】
実施例５：  Ｔａｐ１８Ｈｒ１をコンジュゲートしたｈＬＬ２−Ｃｙｓ変異体で治療したＲａｍｏｓ、ＲＥＨ異種移植片
ｈＬＬ２部位特異的コンジュゲートＡＤＣの力価を、Ｒａｍｏｓ細胞株及びＲＥＨ細胞株に由来する異種移植片においてインビボで評価した。Ｒａｍｏｓ異種移植片モデルにおいて、平均腫瘍体積が１１５ｍｍ３に達したとき、二つの部位特異的コンジュゲートＩｇＧ変異体（Ｓ１５７Ｃ、Ｓ４２２Ｃ）、及び三つのＩｇＧ４ｐ変異体（Ｔ１５５Ｃ、Ｔ１６９Ｃ、Ｓ４４２Ｃ）をそれぞれ、１００μＬ中に８．９μｇ／ｋｇの等量の薬物用量で静脈内に１回注射した（図６において第１日として矢印で示す）。図６に示すように、部位特異的コンジュゲート変異体で治療したマウスは全て、ビヒクル群と比較して腫瘍成長の有意な遅延を示した（治療の第６日以降、ｐ値≦０．０５）。ＡＤＣ治療群では体重は不変のままであったが、ビヒクル群では腫瘍負荷の重量によりわずかに増加した。ＲＥＨ異種移植片モデルにおいて、平均腫瘍体積が１００ｍｍ３に達したとき、一つの部位特異的コンジュゲートＩｇＧ１変異体（Ｓ１５７Ｃ）及び三つのＩｇＧ４ｐ変異体（Ｔ１５５Ｃ、Ｔ１６９Ｃ、Ｓ４４２Ｃ）を、１００μＬ中に８．９μｇ／ｋｇのほぼ等量の薬物用量で静脈内に１回注射した（図７において第１日として矢印で示す）。図７に示すように、部位特異的コンジュゲート変異体によって治療したマウスは全て、ビヒクル群と比較して腫瘍成長の有意な遅延を示した（治療の第１６日以降、ｐ値≦０．０５）。ＡＤＣ治療群では体重は不変のままであったが、ビヒクル群では腫瘍負荷の重量によりわずかに増加した。データは、ｈＬＬ２−ＩｇＧ１−Ｔａｐ１８Ｈｒ１  ＡＤＣがＳＣＩＤマウスに移植した抗原陽性腫瘍の成長を１回の注射で有効に阻害できることを実証する。
参考文献
1.Carter, PJ and Senter, PD. Antibody-drug conjugates for cancer therapy. Cancer J. 2008; 14: 154-169.
2.Teicher, BA. Antibody-drug conjugate targets. Current cancer Drug Targets 2009, 9: 982-1004.
3.Ducry, L and Stump, B. Antibody-drug conjugates: linking cytotoxic payloads to monoclonal antibodies. Bioconjugate chem., 2010, 21: 5-13
4.Koblinski, JE., Ahram, M and Sloane, BF. Unraveling the role of proteases in cancer. Clin. Chem. Acta 2000; 291:113-135.
【０２９８】
本明細書において引用した全ての特許、特許出願、文書、及び記事は、参照により全体が本明細書に援用される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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