(57)【要約】創傷を治療する方法を提供する。このような方法は、創傷に有効量のＢＲＡＦ阻害剤を接触させるステップを有する。幾つかの態様において、ＢＲＡＦ阻害剤は医薬組成物の一部とすることができる。このような場合、この医薬組成物は、有効量のＢＲＡＦ阻害剤と、医薬的に許容可能なキャリヤとを含むことができる。若干の態様において、この医薬組成物は、軟膏、クリーム液、ゲル、ヒドロゲル、又は噴霧体を含む局所薬剤とする。さらに、幾つかの実施形態において、ＢＲＡＦ阻害剤又はその医薬組成物は、創傷を治療するのに使用する創傷被覆材の一部とすることができる。この場合、この創傷被覆材は、ＢＲＡＦ阻害剤又はその医薬組成物を含浸させる又は塗布することができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
創傷を治療する医薬組成物であって、
創傷治癒を促すのに効果的な有効量のＢＲＡＦ阻害剤、及び
医薬的に許容可能なキャリヤ、
を含む、医薬組成物。
【請求項２】
前記ＢＲＡＦ阻害剤が、構造式（Ｉ）〜（ＩＶ）のうちいずれか１つ、又は該構造式の医薬的に許容可能な塩による構造を有する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記ＢＲＡＦ阻害剤が、ＡＭＧ５４２、ＡＲＱ１９７、ＡＲＱ７３６、ＡＺ６２８、ＣＥＰ−３２４９６、ＧＤＣ−０８７９、ＧＳＫ１１２０２１２、ＧＳＫ２１１８４３６（ダブラフェニブ、タフィンラー（登録商標））、ＬＧＸ８１８（エンコラフェニブ（ｅｎｃｏｒａｆｅｎｉｂ））、ＮＭＳ−Ｐ１８６、ＮＭＳ−Ｐ３４９、ＮＭＳ−Ｐ３８３、ＮＭＳ−Ｐ３９６、ＮＭＳ−Ｐ７３０、ＰＬＸ３６０３（ＲＯ５２１２０５４）、ＰＬＸ４０３２（ベムラフェニブ、ゼルボラフ（登録商標））、ＰＬＸ４７２０（ジフルオロフェニル−スルフォンアミン）、ＰＦ−０４８８０５９４、ＰＬＸ４７３４、ＲＡＦ２６５（ＣＨＩＲ−２６５）、ＲＯ４９８７６５５、ＳＢ５９０８８５、ソラフェニブ、ソラフェニブトシル酸塩、及びＬＸ２８１（ＢＭＳ−９０８６６２）よりなる群から選択される、請求項１又は２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記医薬組成物が、軟膏、クリーム液、ゲル、ヒドロゲル、又は噴霧体を含む局所薬剤である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項５】
１つ以上の付加的治療剤を更に含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記１つ以上の付加的治療剤が、成長因子、糖類、制酸剤、ビタミンＡ、ビタミンＤ、抗菌剤、消毒剤、及び鎮痛剤よりなる群から選択される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記医薬組成物が、創傷被覆材に含浸される又は塗布される、請求項１〜６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記創傷被覆材が、アルギン酸塩被覆材、抗菌性被覆材、包帯、バンドエイド（登録商標）、生合成被覆材、生物学的被覆材、コラーゲン被覆材、複合被覆材、圧迫被覆材、接触層被覆材、発泡体被覆材、ガーゼ被覆材、ハイドロコロイド被覆材、ヒドロゲル被覆材、皮膚シーラント若しくは液状皮膚被覆材、特殊吸収性被覆材、透明フィルム被覆材、又は創傷充填剤である、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記ＢＲＡＦ阻害剤が、ＬＧＸ８１８（エンコラフェニブ）である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
前記ＢＲＡＦ阻害剤が、ＧＳＫ２１１８４３６（ダブラフェニブ、タフィンラー（登録商標））である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記ＢＲＡＦ阻害剤が、ＰＬＸ４０３２（ベムラフェニブ、ゼルボラフ（登録商標））である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記ＢＲＡＦ阻害剤が、増大したＭＡＰＫ賦活化活性を有する、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
ＢＲＡＦ阻害剤を含む創傷被覆材。
【請求項１４】
前記ＢＲＡＦ阻害剤が、構造式（Ｉ）〜（IV）のうちいずれか１つ、又は該構造式の医薬的に許容可能な塩による構造を有する、請求項１３に記載の創傷被覆材。
【請求項１５】
前記ＢＲＡＦ阻害剤が、ＡＭＧ５４２、ＡＲＱ１９７、ＡＲＱ７３６、ＡＺ６２８、ＣＥＰ−３２４９６、ＧＤＣ−０８７９、ＧＳＫ１１２０２１２、ＧＳＫ２１１８４３６（ダブラフェニブ、タフィンラー（登録商標））、ＬＧＸ８１８（エンコラフェニブ（ｅｎｃｏｒａｆｅｎｉｂ））、ＮＭＳ−Ｐ１８６、ＮＭＳ−Ｐ３４９、ＮＭＳ−Ｐ３８３、ＮＭＳ−Ｐ３９６、ＮＭＳ−Ｐ７３０、ＰＬＸ３６０３（ＲＯ５２１２０５４）、ＰＬＸ４０３２（ベムラフェニブ、ゼルボラフ（登録商標））、ＰＬＸ４７２０（ジフルオロフェニル−スルフォンアミン）、ＰＦ−０４８８０５９４、ＰＬＸ４７３４、ＲＡＦ２６５（ＣＨＩＲ−２６５）、ＲＯ４９８７６５５、ＳＢ５９０８８５、ソラフェニブ、ソラフェニブトシル酸塩、及びＬＸ２８１（ＢＭＳ−９０８６６２）よりなる群から選択される、請求項１３又は１４に記載の創傷被覆材。
【請求項１６】
前記ＢＲＡＦ阻害剤が、医薬組成物の一部であり、該医薬組成物が、
有効量のＢＲＡＦ阻害剤、及び
医薬的に容認可能なキャリヤ、
を含む、請求項１３〜１５のいずれか一項に記載の創傷被覆材。
【請求項１７】
前記創傷被覆材が、前記医薬組成物を塗布したものとする、請求項１３〜１６のいずれか一項に記載の創傷被覆材。
【請求項１８】
前記創傷被覆材が、前記医薬組成物で含浸されている、請求項１３〜１６のいずれか一項に記載の創傷被覆材。
【請求項１９】
前記創傷被覆材が、アルギン酸塩被覆材、抗菌性被覆材、包帯、バンドエイド（登録商標）、生合成被覆材、生物学的被覆材、コラーゲン被覆材、複合被覆材、圧迫被覆材、接触層被覆材、発泡体被覆材、ガーゼ被覆材、ハイドロコロイド被覆材、ヒドロゲル被覆材、皮膚シーラント若しくは液状皮膚被覆材、特殊吸収性被覆材、透明フィルム被覆材、又は創傷充填剤である、請求項１３〜１８のいずれか一項に記載の創傷被覆材。
【請求項２０】
１つ以上の付加的治療剤を更に含む、請求項１３〜１９のいずれか一項に記載の創傷被覆材。
【請求項２１】
前記１つ以上の付加的治療剤が、成長因子、糖類、制酸剤、ビタミンＡ、ビタミンＤ、抗菌剤、消毒剤、及び鎮痛剤よりなる群から選択される、請求項２０に記載の創傷被覆材。
【請求項２２】
前記ＢＲＡＦ阻害剤が、ＬＧＸ８１８（エンコラフェニブ）である、請求項１３〜２１のいずれか一項に記載の創傷被覆材。
【請求項２３】
前記ＢＲＡＦ阻害剤が、ＧＳＫ２１１８４３６（ダブラフェニブ、タフィンラー（登録商標））である、請求項１３〜２１のいずれか一項に記載の創傷被覆材。
【請求項２４】
前記ＢＲＡＦ阻害剤が、ＰＬＸ４０３２（ベムラフェニブ、ゼルボラフ（登録商標））である、請求項１３〜２１のいずれか一項に記載の創傷被覆材。
【請求項２５】
前記ＢＲＡＦ阻害剤が、増大したＭＡＰＫ賦活化活性を有する、請求項１３〜２４のいずれか一項に記載の創傷被覆材。
【請求項２６】
患者の創傷を治療する方法において、有効量のＢＲＡＦ阻害剤を前記創傷に接触させるステップを有する、方法。
【請求項２７】
前記ＢＲＡＦ阻害剤が、構造式（Ｉ）〜（IV）のいずれか１つ、又は該構造式の医薬的に許容可能な塩による構造を有する、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記ＢＲＡＦ阻害剤が、ＡＭＧ５４２、ＡＲＱ１９７、ＡＲＱ７３６、ＡＺ６２８、ＣＥＰ−３２４９６、ＧＤＣ−０８７９、ＧＳＫ１１２０２１２、ＧＳＫ２１１８４３６（ダブラフェニブ、タフィンラー（登録商標））、ＬＧＸ８１８（エンコラフェニブ（ｅｎｃｏｒａｆｅｎｉｂ））、ＮＭＳ−Ｐ１８６、ＮＭＳ−Ｐ３４９、ＮＭＳ−Ｐ３８３、ＮＭＳ−Ｐ３９６、ＮＭＳ−Ｐ７３０、ＰＬＸ３６０３（ＲＯ５２１２０５４）、ＰＬＸ４０３２（ベムラフェニブ、ゼルボラフ（登録商標））、ＰＬＸ４７２０（ジフルオロフェニル−スルフォンアミン）、ＰＦ−０４８８０５９４、ＰＬＸ４７３４、ＲＡＦ２６５（ＣＨＩＲ−２６５）、ＲＯ４９８７６５５、ＳＢ５９０８８５、ソラフェニブ、ソラフェニブトシル酸塩、及びＬＸ２８１（ＢＭＳ−９０８６６２）よりなる群から選択される、請求項２６又は２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記ＢＲＡＦ阻害剤が、医薬組成物の一部であり、該医薬組成物が、
有効量のＢＲＡＦ阻害剤、及び
医薬的に容認可能なキャリヤ、
を含む、請求項２６〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
前記医薬組成物が、創傷被覆材を被覆する又は含浸する、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記創傷被覆材が、アルギン酸塩被覆材、抗菌性被覆材、包帯、バンドエイド（登録商標）、生合成被覆材、生物学的被覆材、コラーゲン被覆材、複合被覆材、圧迫被覆材、接触層被覆材、発泡体被覆材、ガーゼ被覆材、ハイドロコロイド被覆材、ヒドロゲル被覆材、皮膚シーラント若しくは液状皮膚被覆材、特殊吸収性被覆材、透明フィルム被覆材、又は創傷充填剤である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記創傷に接触させるステップが、軟膏、クリーム液、ゲル、ヒドロゲル、又は噴霧体の局所投与によって行われる、請求項２６に記載の方法。
【請求項３３】
１つ以上の付加的治療剤を前記ＢＲＡＦ阻害剤と併用して投与するステップを更に有する、請求項２６〜３２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３４】
前記１つ以上の付加的治療剤が、成長因子、糖類、制酸剤、ビタミンＡ、ビタミンＤ、抗菌剤、消毒剤、及び鎮痛剤よりなる群から選択される、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記ＢＲＡＦ阻害剤が、ＬＧＸ８１８（エンコラフェニブ）である、請求項２６〜３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６】
前記ＢＲＡＦ阻害剤が、ＧＳＫ２１１８４３６（ダブラフェニブ、タフィンラー（登録商標））である、請求項２６〜３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７】
前記ＢＲＡＦ阻害剤が、ＰＬＸ４０３２（ベムラフェニブ、ゼルボラフ（登録商標））である、請求項２６〜３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８】
前記ＢＲＡＦ阻害剤が、増大したＭＡＰＫ賦活化活性を有する、請求項２６〜３７のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
［関連出願の相互参照］
本件出願は、２０１４年５月６日出願の米国仮出願第６１／９８９，３９８号の優先権を主張し、この米国仮特許出願の明細書全体は参照によって本明細書に組み入れられるものとする。
【０００２】
［国益陳述］
本発明は、それぞれ国立衛生研究所（ＮＩＨ）が契約発注したＰ０１  ＣＡ１６８５８５，ＣＡ−１６０４２及びＡＩ−２８６９７の下で政府支援によりなされたものである。
【０００３】
本発明は、ＢＲＡＦ阻害剤を含む組成物、及びこの組成物を使用して創傷を治療する分野に関する。
【背景技術】
【０００４】
セリン／スレオニン−タンパク質キナーゼ（“Ｂ−Ｒａｆ”又は“ＢＲＡＦ”）は、シグナル伝達タンパク質キナーゼであり、ＭＡＰキナーゼ／ＥＲＫシグナル伝達経路を調節すること、細胞分化、細胞分裂及び細胞分泌に影響することに関与する。ＢＲＡＦＶ６００Ｅは、共通の発がん性ＢＲＡＦ突然変異体であり、マイトジェン（分裂促進因子）活性化タンパク質キナーゼ（ＭＡＰＫ）経路を経る構造性シグナル伝達、がん細胞増殖促進及びがん細胞延命を誘発する。ＢＲＡＦキナーゼの活性立体配座を阻止する発がん性ＢＲＡＦ阻害剤の臨床開発は、標準的な化学療法に比べて、対象の高い腫瘍反応率及び全生存率の向上をもたらした。それにも係わらず、非メラノーマ性の皮膚がん（例えば、高分化した皮膚扁平上皮がん及び角化棘細胞腫）は、ベムラフェニブ及びダブラフェニブ（ＧＳＫ２１１８４３６）のようなＢＲＡＦ阻害剤で治療した患者の約１５〜３０％に発症する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】国際公開第２０１１／１１７３８１号パンフレット
【特許文献２】国際公開第２０１１／１１９８９４号パンフレット
【特許文献３】国際公開第２０１１／１１７３８１号パンフレット
【特許文献４】国際公開第２０１１／０９７５９４号パンフレット
【特許文献５】国際公開第２０１１／０９７５２６号パンフレット
【特許文献６】国際公開第２０１１／０８５２６９号パンフレット
【特許文献７】国際公開第２０１１／０９０７３８号パンフレット
【特許文献８】国際公開第２０１１／０２５９６８号パンフレット
【特許文献９】国際公開第２０１１／０２５９２７号パンフレット
【特許文献１０】国際公開第２０１１／０２３７７３号パンフレット
【特許文献１１】国際公開第２０１１／０２８５４０号パンフレット
【特許文献１２】国際公開第２０１０／１１１５２７号パンフレット
【特許文献１３】国際公開第２０１０／１０４９７３号パンフレット
【特許文献１４】国際公開第２０１０／１００１２７号パンフレット
【特許文献１５】国際公開第２０１０／０７８４０８号パンフレット
【特許文献１６】国際公開第２０１０／０６５８９３号パンフレット
【特許文献１７】国際公開第２０１０／０３２９８６号パンフレット
【特許文献１８】国際公開第２００９／１１５５７２号パンフレット
【特許文献１９】国際公開第２００９／１０８８３８号パンフレット
【特許文献２０】国際公開第２００９／１１１２７７号パンフレット
【特許文献２１】国際公開第２００９／１１１２７８号パンフレット
【特許文献２２】国際公開第２００９／１１１２７９号パンフレット
【特許文献２３】国際公開第２００９／１１１２８０号パンフレット
【特許文献２４】国際公開第２００９／１０８８２７号パンフレット
【特許文献２５】国際公開第２００９／１１１２６０号パンフレット
【特許文献２６】国際公開第２００９／１００５３６号パンフレット
【特許文献２７】国際公開第２００９／０５９２７２号パンフレット
【特許文献２８】国際公開第２００９／０３９３８７号パンフレット
【特許文献２９】国際公開第２００９／０２１８６９号パンフレット
【特許文献３０】国際公開第２００９／００６４０４号パンフレット
【特許文献３１】国際公開第２００９／００６３８９号パンフレット
【特許文献３２】国際公開第２００８／１４０８５０号パンフレット
【特許文献３３】国際公開第２００８／０７９２７７号パンフレット
【特許文献３４】国際公開第２００８／０５５８４２号パンフレット
【特許文献３５】国際公開第２００８／０３４００８号パンフレット
【特許文献３６】国際公開第２００８／１１５２６３号パンフレット
【特許文献３７】国際公開第２００８／０３０４４８号パンフレット
【特許文献３８】国際公開第２００８／０２８１４１号パンフレット
【特許文献３９】国際公開第２００７／１２３８９２号パンフレット
【特許文献４０】国際公開第２００７／１１５６７０号パンフレット
【特許文献４１】国際公開第２００７／０９０１４１号パンフレット
【特許文献４２】国際公開第２００７／０７６０９２号パンフレット
【特許文献４３】国際公開第２００７／０６７４４４号パンフレット
【特許文献４４】国際公開第２００７／０５６６２５号パンフレット
【特許文献４５】国際公開第２００７／０３１４２８号パンフレット
【特許文献４６】国際公開第２００７／０２７８５５号パンフレット
【特許文献４７】国際公開第２００７／００２４３３号パンフレット
【特許文献４８】国際公開第２００７／００２３２５号パンフレット
【特許文献４９】国際公開第２００６／１２５１０１号パンフレット
【特許文献５０】国際公開第２００６／１２４８７４号パンフレット
【特許文献５１】国際公開第２００６／１２４７８０号パンフレット
【特許文献５２】国際公開第２００６／１０２０７９号パンフレット
【特許文献５３】国際公開第２００６／１０８４８２号パンフレット
【特許文献５４】国際公開第２００６／１０５８４４号パンフレット
【特許文献５５】国際公開第２００６／０８４０１５号パンフレット
【特許文献５６】国際公開第２００６／０７６７０６号パンフレット
【特許文献５７】国際公開第２００６／０５０８００号パンフレット
【特許文献５８】国際公開第２００６／０４０５６９号パンフレット
【特許文献５９】国際公開第２００５／１１２９３２号パンフレット
【特許文献６０】国際公開第２００５／０７５４２５号パンフレット
【特許文献６１】国際公開第２００５／０４９６０３号パンフレット
【特許文献６２】国際公開第２００５／０３７２８５号パンフレット
【特許文献６３】国際公開第２００５／０３７２７３号パンフレット
【特許文献６４】国際公開第２００５／０３２５４８号パンフレット
【特許文献６５】米国特許第８，６４２，７５９号明細書
【特許文献６６】米国特許第８，５５７，８３０号明細書
【特許文献６７】米国特許第８，５０４，７５８号明細書
【特許文献６８】米国特許第７，８６３，２８８号明細書
【特許文献６９】米国特許第７，４９１，８２９号明細書
【特許文献７０】米国特許第７，４８２，３６７号明細書
【特許文献７１】米国特許第７，２３５，５７６号明細書
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】V. R. Belum, A. Fischer, J. N. Choi, M. E. Lacouture, Dermatological adverse events from BRAF inhibitors: a growing problem. Current oncology reports 15, 249 (Jun, 2013).
【非特許文献２】B. Comin-Anduix et al., Modulation of cell signaling networks after CTLA4 blockade in patients with metastatic melanoma. PLoS One 5, e12711 (2010).
【非特許文献３】H. Escuin-Ordinas et al., COX-2 inhibition prevents the appearance of cutaneous squamous cell carcinomas accelerated by BRAF inhibitors. Mol Oncol, (Mar, 2014).
【非特許文献４】K. T. Flaherty et al., Combined BRAF and MEK inhibition in melanoma with BRAF V600 mutations. The New  England journal of medicine 367, 1694 (Nov, 2012).
【非特許文献５】R. Gorodetsky, W. H. McBride, H. R. Withers, Assay of radiation effects in mouse skin as expressed in wound healing. Radiation research 116, 135 (1988).
【非特許文献６】R. Gorodetsky, The use of fibrin based matrices and fibrin microbeads (FMB) for cell based tissue regeneration. Expert Opin Biol Ther 8, 1831 (Dec, 2008).
【非特許文献７】C. A. Hall-Jackson et al., Paradoxical activation of Raf by a novel Raf inhibitor. Chem Biol 6, 559 (Aug, 1999).
【非特許文献８】S. Hanzelmann, R. Castelo, J. Guinney, GSVA: gene set variation analysis for microarray and RNA-seq data. BMC Bioinformatics 14, 7 (2013).
【非特許文献９】G. Hatzivassiliou et al., RAF inhibitors prime wild-type RAF to activate the MAPK pathway and enhance growth. Nature 464, 431 (Mar 18, 2010).
【非特許文献１０】S. J. Heidorn et al., Kinase-dead BRAF and oncogenic RAS cooperate to drive tumor progression through CRAF. Cell 140, 209 (Jan 22, 2010).
【非特許文献１１】M. Holderfield et al., RAF inhibitors activate the MAPK pathway by relieving inhibitory autophosphorylation. Cancer Cell 23, 594 (May 13, 2013).
【非特許文献１２】E. W. Joseph et al., The RAF inhibitor PLX4032 inhibits ERK signaling and tumor cell proliferation in a V600E BRAF-selective manner. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 107, 14903 (Aug 17, 2010).
【非特許文献１３】D. Kim et al., TopHat2: accurate alignment of transcriptomes in the presence of insertions, deletions and gene fusions. Genome Biol 14, R36 (2013).
【非特許文献１４】J. Larkin et al., Combined Vemurafenib and Cobimetinib in BRAF-Mutated Melanoma. New England Journal of Medicine (in press),  (2014).
【非特許文献１５】G. V. Long et al., Combined BRAF and MEK Inhibition Versus BRAF Inhibition Alone in Melanoma. New England Journal of Medicine (in press),  (2014).
【非特許文献１６】R. Nazarian et al., Melanomas acquire resistance to B-RAF(V600E) inhibition by RTK or N-RAS upregulation. Nature 468, 973 (Dec 16, 2010).
【非特許文献１７】P. A. Oberholzer et al., RAS Mutations Are Associated With the Development of Cutaneous Squamous Cell Tumors in Patients Treated With RAF Inhibitors. Journal of clinical oncology : official journal of the American Society of Clinical Oncology 30, 316 (Jan 20, 2012).
【非特許文献１８】P. I. Poulikakos, C. Zhang, G. Bollag, K. M. Shokat, N. Rosen, RAF inhibitors transactivate RAF dimers and ERK signalling in cells with wild-type BRAF. Nature 464, 427 (Mar 18, 2010).
【非特許文献１９】F. Su et al., RAS mutations in cutaneous squamous-cell carcinomas in patients treated with BRAF inhibitors. The New England journal of medicine 366, 207 (Jan 19, 2012).
【非特許文献２０】J. Zavadil et al., Genetic programs of epithelial cell plasticity directed by transforming growth factor-beta. Proc Natl Acad Sci U S A 98, 6686 (Jun 5, 2001).
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
ベムラフェニブのようなＢＲＡＦ阻害剤の、細胞培養、動物モデル及びヒトにおけるＢＲＡＦＶ６００Ｅ突然変異細胞に対する抗腫瘍活性は、リン酸化されたときに活性化するＢＲＡＦの下流エフェクターであるリン酸化ＥＲＫ（ｐＥＲＫ）の阻害で立証された発がん性ＭＡＰＫシグナル伝達の阻害に関連する。しかし、ＢＲＡＦ阻害剤は逆効果を誘発する、すなわち、発がん性ＲＡＳ又はアップレギュレートしたチロシン・キナーゼのような上流経路活性化活量を備える、野生型ＢＲＡＦを有する細胞株においてｐＥＲＫを増加させる。ＢＲＡＦ野生型細胞における、ＲＡＦ阻害剤依存的なＭＡＰＫシグナルの活性化は、「逆説的ＭＡＰＫ経路活性化」として知られており、ＣＲＡＦ経由のシグナル伝達とその結果のＭＡＰＫ経路の過反応を誘導するＲＡＦ二量体形成によって駆動される。非がん性環境において、ＢＲＡＦ阻害剤の皮膚の増殖副作用を利用して、逆説的ＭＡＰＫ活性化を誘発することにより皮膚創傷治癒を促進することが望まれる。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本明細書に記載の実施形態によれば、創傷治療方法を提供する。このような方法は、有効量のＢＲＡＦ阻害剤を創傷に接触させて、創傷治癒を促進するステップを有する。ＢＲＡＦ阻害剤は、ＢＲＡＦの活性を阻害する任意な適当な薬剤とすることができ、これら薬剤としては、とくに、ＡＭＧ５４２、ＡＲＱ１９７、ＡＲＱ７３６、ＡＺ６２８、ＣＥＰ−３２４９６、ＧＤＣ−０８７９、ＧＳＫ１１２０２１２、ＧＳＫ２１１８４３６（ダブラフェニブ、タフィンラー（登録商標））、ＬＧＸ８１８（エンコラフェニブ（ｅｎｃｏｒａｆｅｎｉｂ））、ＮＭＳ−Ｐ１８６、ＮＭＳ−Ｐ３４９、ＮＭＳ−Ｐ３８３、ＮＭＳ−Ｐ３９６、ＮＭＳ−Ｐ７３０、ＰＬＸ３６０３（ＲＯ５２１２０５４）、ＰＬＸ４０３２（ベムラフェニブ、ゼルボラフ（登録商標））、ＰＬＸ４７２０（ジフルオロフェニル−スルフォンアミン）、ＰＦ−０４８８０５９４、ＰＬＸ４７３４、ＲＡＦ２６５（ＣＨＩＲ−２６５）、ＲＯ４９８７６５５、ＳＢ５９０８８５、ソラフェニブ、ソラフェニブトシル酸塩、及びＬＸ２８１（ＢＭＳ−９０８６６２）がある。
【０００９】
幾つかの態様において、ＢＲＡＦ阻害剤は医薬組成物の一部とすることができる。この場合、医薬組成物は、有効量のＢＲＡＦ阻害剤、及び医薬的に容認可能なキャリヤを含むことができる。若干の態様において、医薬組成物は、軟膏、クリーム液、ゲル、ヒドロゲル、又は噴霧（スプレー）を含む局所薬剤とする。
【００１０】
さらに、幾つかの実施形態において、ＢＲＡＦ阻害剤又はＢＲＡＦ阻害剤を含む医薬組成物は、創傷を治療するのに使用する創傷被覆材の一部とすることができる。この場合、ＢＲＡＦ阻害剤又はＢＲＡＦ阻害剤を含む医薬組成物を創傷被覆材に含浸させる又は塗布する。本明細書に記載の実施形態により使用可能な適当な創傷被覆材としては、アルギン酸塩被覆材、抗菌性被覆材、包帯、バンドエイド（登録商標）、生合成被覆材、生物学的被覆材、コラーゲン被覆材、複合被覆材、圧迫被覆材、接触層被覆材、発泡体被覆材、ガーゼ被覆材、ハイドロコロイド被覆材、ヒドロゲル被覆材、皮膚シーラント若しくは液状皮膚被覆材、特殊吸収性被覆材、透明フィルム被覆材、又は創傷充填剤がある。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】図１は、ＢＲＡＦＶ６００Ｅ突然変異メラノーマにおける、ＢＲＡＦ阻害剤の異なる効果を示す概略図であり（図１Ａ）、ＨＲＡＳ突然変異の皮膚扁平上皮がん及び角化棘細胞腫（ｃｕＳＣＣ／ＫＡｓ）を発症するメラノーマ患者のＢＲＡＦ野生型細胞における、ＢＲＡＦ阻害の異なる効果を示す概略図であり（図１Ｂ）、健康被検体のＢＲＡＦ野生型細胞及びＲＡＳ野生型細胞における、ＢＲＡＦ阻害の異なる効果を示す概略図である（図１Ｃ）。
【図２】図２Ａは、ＢＲＡＦ阻害剤がヒトのケラチン生成細胞に逆説的ＭＡＰＫ活性化を誘導し、増殖促進に至ることを示す図である。図２Ａは、自動化顕微鏡分析装置によって、ベムラフェニブ有り又は無しの場合にＨＥＫａの複製培養における異なる時点での、細胞の相対創傷百分率密度として増殖及び擦過傷治癒の定量分析結果を示す。ｔ検定ではＰ値＜０．００４４であり、代表画像を図３Ａに示す。図２Ｂは、ＢＲＡＦ阻害剤がヒトのケラチン生成細胞に逆説的ＭＡＰＫ活性化を誘導し、増殖促進に至ることを示す図である。図２Ｂは、ベムラフェニブ有り又は無しの場合での、ヒト成人上皮ケラチン生成細胞（ＨＥＫａ：ｈｕｍａｎ  ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ  ａｄｕｌｔ  ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅｓ）の０時間（基準）及び２４時間における細胞増殖及び創傷治癒分析の代表的画像を示す。図２Ｃは、ＢＲＡＦ阻害剤がヒトのケラチン生成細胞に逆説的ＭＡＰＫ活性化を誘導し、増殖促進に至ることを示す図である。図２Ｃは、軟寒天内でベムラフェニブに対する曝露又は非曝露の場合に成長したＨＥＫａ及びＭ２４９細胞のコロニー定量化における倍変化を示すグラフである。代表的画像を図３Ｂに示す。図２Ｄは、ＢＲＡＦ阻害剤がヒトのケラチン生成細胞に逆説的ＭＡＰＫ活性化を誘導し、増殖促進に至ることを示す図である。図２Ｄは、ベムラフェニブに対する曝露又は非曝露の場合のＨＥＫａコロニーの平均スポットサイズの増加を示す。図２Ｅは、ＢＲＡＦ阻害剤がヒトのケラチン生成細胞に逆説的ＭＡＰＫ活性化を誘導し、増殖促進に至ることを示す図である。図２Ｅは、ベムラフェニブ及び／又はトラメチニブに対する曝露又は非曝露の場合のＨＥＫａコロニーの平均個数を示す。図２Ｆは、ＢＲＡＦ阻害剤がヒトのケラチン生成細胞に逆説的ＭＡＰＫ活性化を誘導し、増殖促進に至ることを示す図である。図２Ｆは、ＢＲＡＦＶ６００Ｅ突然変異メラノーマ細胞株Ｍ２４９と比較した、ＨＥＫａにおけるｐＥＲＫ及びＫｉ６７の発現レベルのウエスタンブロット分析である。図２Ｇは、ＢＲＡＦ阻害剤がヒトのケラチン生成細胞に逆説的ＭＡＰＫ活性化を誘導し、増殖促進に至ることを示す図である。図２Ｇは、ベムラフェニブ、トラメチニブ、又はベムラフェニブとトラメチニブとの組合せにより処理したときの、ＢＲＡＦＶ６００Ｅ突然変異メラノーマ細胞株Ｍ２４９と比較した、ＨＥＫａにおけるｐＥＲＫ及びｐＭＥＫのウエスタンブロット分析である。図２Ｈは、ＢＲＡＦ阻害剤がヒトのケラチン生成細胞に逆説的ＭＡＰＫ活性化を誘導し、増殖促進に至ることを示す図である。図２Ｈは、媒剤又はＶＥＭ（２μＭ）で処理してｐＥＲＫ及びＫｉ６７で染色した、ＨＥＫａ細胞及びＭ２４９細胞のリン酸基フローサイトメトリー解析を示す。ＨＥＫａ及びＭ２４９における単独のｐＥＲＫ及びＫｉ６７発現のヒストグラムを左側に示す。ｐＥＲＫ及びＫｉ６７の同時発現レベルをパネル中間部に示し、また左側に倍変化を定量化して示す。
【図３】図３は、図２に記載した代表的な実験結果を示す。図３Ａは、ベムラフェニブ有り又は無しの場合のヒト成人上皮ケラチン生成細胞（ＨＥＫａ）における、細胞増殖擦過傷分析の時系列画像を示す。増殖の定量分析は図２Ａに示す。図３Ｂは、ＤＭＳＯ又はＶＥＭで処理したＭ２４９及びＨＥＫａの三次元（３Ｄ）培養画像を示す。
【図４】図４は、図２Ｈで示すデータを得るためのゲーティングストラテジーを示した代表的なリン酸基フローサイトメトリー画像を示す。図４Ａは、Ｍ２４９細胞のリン酸基フローサイトメトリー画像を示す。図４Ｂは、ＨＥＫａ細胞のリン酸基フローサイトメトリー画像を示す。
【図５】図５は、ＢＲＡＦ阻害剤がマウスにおける創傷治癒を促進することを示す。図５Ａは、ＣＨ３マウスでの幾つかの実施形態で行った創傷治癒分析の概略を提示する。図５Ｂは、ＰＢＳ処理したマウス及びＶＥＭ処理したマウスの２日目、６日目及び１４日目の代表的画像を示す。図５Ｃは、１グループあたり８匹のマウスを用いた、３群の複製実験（媒剤（ＤＭＳＯ／アルカリ塩）及びＶＥＭ；実験＃１〜３）での創傷抗張力（ＷＴＳ）を示すグラフのセットと、ベムラフェニブ（ＶＥＭ）及び／又はトラメチニブ（ＴＲＡＭＥ）と、媒剤／対照例としてＤＭＳＯ／生理食塩水（実験＃４）とを使用して行った別個の実験での創傷抗張力（ＷＴＳ）を示すグラフを示す。ＷＴＳは、重量グラム（ｇｆ）で表される（３実験全てのｔ検定で、Ｐ値＜０．０００１）。
【図６】図６は、処理後１日目、２日目及び６日目における創傷治癒の病理解析の概略提示である。図６Ａは、ベムラフェニブ（ＶＥＭ）、トラメチニブ（ＴＲＡＭＥ）、又はこれらの組合せ（ＶＥＭ＋ＴＲＡＭＥ）の有り又は無しの場合における顕微鏡写真による代表的Ｈ＆Ｅ画像（２００×）を示す。各グループにおいて、切開創傷の治癒は、同様の標準的なプロセスを含んだ。創傷に隣接する表皮は、過形成及び増殖を行い、またこのプロセスから表皮細胞は中心に向かって遊走し、切開した表皮欠損を封止する。この切開部の隙間は、初期的にフィブリン（線維素）で填隙され、このフィブリンは、線維芽細胞、マクロファージ、多形核細胞及び新生毛細血管によってコロニー形成されている。ベムラフェニブ有りの場合（パネルＶ１、Ｖ２、Ｖ６）、治癒プロセスは加速される。創傷に隣接する表皮の過形成は、ベムラフェニブグループの切開後２日目（パネルＶ２）において、対照試料（パネルＣ２）と比べてより広範囲に及ぶ。皮膚表面の完全性は表皮下層線維症の発症時から６日目に再構築されたが、対照グループ（パネルＣ６）では再構築は不完全であり、真皮修復線維症は存在しない。トラメチニブ単独で処理したグループは、２日目に僅かな傷害部周辺過形成を示し（パネルＭ２）、また６日目には修復の痕はない（パネルＭ６）。ベムラフェニブ＋トラメチニブの組合せグループ（パネルＶＭ１、ＶＭ２、ＶＭ６）においては、２日目の傷害部周辺過形成（パネルＶＭ２）は、ベムラフェニブで処理したグループ（パネルＶ２）よりも小さいが、トラメチニブ単独（Ｍ２）よりも大きい。さらに、６日目に再構築は見られない（パネルＶＭ６）。図６Ｂは、媒剤、ベムラフェニブ、トラメチニブ、又はそれらの組合せによる処理後１日目、２日目及び６日目における、創傷の右側及び左側からの表皮過形成の長さを定量化して示す。各バーは４サンプルからのデータを含む。
【図７】図７は、ベムラフェニブに対する曝露有り又は曝露無しの場合におけるマウスの皮膚創傷治癒の遺伝子発現プロファイルを示す。上部パネルは、ＢＲＡＦ痕跡（シグネチャ）を有する遺伝子の色分け図（ヒートマップ）及び遺伝子セット差異分析（ＧＶＳＡ）を用いて計算した総合富化スコアを示し、下部パネルは、創傷治癒痕跡を有する遺伝子の色分け図及び総ＧＶＳＡスコアを示す。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本発明は、ＢＲＡＦ阻害剤の使用により創傷を治療するための方法、医薬組成物、及び創傷被覆材を提供する。本発明に実施形態によれば、ＢＲＡＦ阻害剤は、医薬組成物の一部として、又は創傷治癒を促進する創傷被覆材の一部として、単独で使用することができる。
【００１３】
現在、ＢＲＡＦ阻害剤は、がんのような疾患及び病状におけるＢＲＡＦの突然変異体に関連して、その抗増殖活性を十分に引き出すのに使用される（図１Ａ参照）。しかし、メラノーマのようながんに対してＢＲＡＦ阻害剤で治療した患者は、ＢＲＡＦの突然変異体に対するＢＲＡＦ阻害剤の抗増殖活性効果にも係わらず、二次的増殖状態を発現することが観察された。
【００１４】
逆説的ＭＡＰＫ活性化は、ＢＲＡＦ阻害剤で治療した患者におけるこれら二次的増殖状態（例えば、侵襲性扁平上皮細胞がん及び角化棘細胞腫）発現の背後にある病原因子である（Su et al. 2012; Oberholzer et al. 2012）。これら二次的皮膚病変部における、非変異ＢＲＡＦの上流のＲＡＳ突然変異が頻発することにより、強力なＲＡＳ−ＧＴＰ活性化が生じ、これによってＥＲＫのリン酸化反応が逆説的に増加され、ＭＡＰＫ経路のアウトプットの増加により、細胞増殖が亢進される（図１Ｂ参照）。逆説的ＭＡＰＫ活性化は、ＲＡＦ阻害剤の特性であり（Hall-Jackson et al. 1999）、ＢＲＡＦプロモーターに対して優先的に結合する結果として、強力な上流ＲＡＳ−ＧＴＰシグナル伝達の状況下で、ＣＲＡＦヘテロ二量体パートナーのトランス活性化が生ずる（Heidorn et al. 2010; Poulikakos et al. 2010; Holderfield et al. 2013）。この結果、ＢＲＡＦ阻害剤療法におけるＢＲＡＦ突然変異転移性メラノーマの患者は、様々な他の皮膚増殖状態を発現し（Belum et al. 2013）、その多くは、逆説的ＲＡＦ活性化の下流効果を阻止するＭＥＫ阻害剤を同時に投与する（Flaherty et al. 2012）ときに改善される。以下の実施例において、がん治療におけるＢＲＡＦ阻害剤の皮膚増殖副作用に対するこの機構的理解をそれ以外の健常体（すなわち、野生型（ｗｔ）ＲＡＳ及びＢＲＡＦ）で活用し、野生型細胞に逆説的ＭＡＰＫ活性化を誘発することにより、皮膚創傷治癒を促進することができることを実証する。
【００１５】
［ＢＲＡＦ阻害剤］
本明細書に記載の実施形態により使用し得るＢＲＡＦ阻害剤は、野生型ＢＲＡＦ又はＢＲＡＦの突然変異体（例えば、ＢＲＡＦＶ６００Ｅ、ＢＲＡＦＶ６００Ｋ、ＢＲＡＦＶ６００Ｄ、ＢＲＡＦＶ６００Ｌ、ＢＲＡＦＶ６００Ｒ）の生物活性の少なくとも一部を選択的に阻害する任意の薬剤を含むことができる。幾つかの態様において、このＢＲＡＦ阻害剤は、ＢＲＡＦにのみ選択性を示すことができる、又はＲＡＦ／ＭＥＫ／ＥＲＫ経路における１つ又は複数の付加的標的に対して阻害活性を有することができるものとする。例えば、一態様において、ＢＲＡＦ阻害剤は、ＲＡＦキナーゼ阻害剤とすることができる、すなわち、この阻害剤は、ＢＲＡＦの他に、ＡＲＡＦ、ＣＲＡＦ、又はその双方のような、ＲＡＦキナーゼに対して阻害活性を有することができる。若干の実施形態において、ＢＲＡＦ阻害剤は、逆説的ＭＡＰＫ活性化活量を亢進させるものが選択される。このようにして、本明細書に記載の実施形態で使用されるＢＲＡＦ阻害剤は、ＢＲＡＦ阻害剤がＭＡＰＫシグナル伝達を増加させることを意味するＭＡＰＫパラドックス活性剤として作用することができる。幾つかの態様において、ＭＡＰＫパラドックス活性剤は、標的ＢＲＡＦキナーゼが、野生型ＢＲＡＦキナーゼであるときにＭＡＰＫシグナル伝達を増加させるＢＲＡＦ阻害剤である。
【００１６】
幾つかのＢＲＡＦキナーゼ阻害剤は、先行技術に記載されており、そのいずれもが本明細書に記載の方法、被覆材及び組成物に使用するのに適合し得る。好適なＢＲＡＦ阻害剤としては、限定しないが、１，２−ジ−シクリル置換アルキン化合物又は誘導体、１−メチル−５−（２−（５−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピリジン−４−イルオキシ）−Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−アミン）、２，６−二置換キナゾリン、キノキサリン、キノリン、及びイソキノリン化合物又は誘導体、４−アミノ−５−オキソ−８−フェニル−５Ｈ−ピリド−［２，３−Ｄ］−ピリミジン化合物又は誘導体、４−アミノ−チエノ［３，２−Ｃ］ピリジン−７−カルボン酸化合物又は誘導体、５−（４−アミノフェニル）−イソキノリン化合物又は誘導体、ベンゼンスルホンアミドチアゾール化合物又は誘導体、ベンズイミダゾール化合物又は誘導体、二環式化合物又は誘導体、ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン化合物又は誘導体の架橋二環複素環式又はスピロ二環複素環式誘導体、シンナミド及びヒドロ−シンナミド化合物又は誘導体、二置換イミダゾール化合物又は誘導体、融合三環式ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン化合物又は誘導体、ヘテロアリール化合物又は誘導体、１Ｈ−ベンゾ［Ｄ］イミダゾール化合物又は誘導体、イミダゾ［４，５−Ｂ］ピリジン化合物又は誘導体、Ｎ−（６−アミノピリジン−３−イル−３−（スルフォンアミド）ベンズアミド化合物又は誘導体、Ｎ−［３−（１−アミノ−５，６，７，８テトラヒドロ−２，４，４Ｂ−トリアザフルオレン−９−イル）−フェニル］ベンズアミド化合物又は誘導体、窒素含有二環式ヘテロアリール化合物又は誘導体、複素環式置換ビスアリール尿素化合物又は誘導体の窒素酸化物、オメガ−カルボキシルアリール置換ジフェニル尿素化合物又は誘導体、オキサゾール化合物又は誘導体、フェネチルアミド化合物又は誘導体、フェニルスルフォンアミド置換ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン化合物又は誘導体、フェニルトリアゾール化合物又は誘導体、複素環式化合物又は誘導体、１ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン化合物又は誘導体、プリン化合物又は誘導体、ピラゾロ［３，４−Ｂ］ピリジン化合物又は誘導体、ピラゾール化合物又は誘導体、ピラゾリン化合物又は誘導体、ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン、ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン化合物又は誘導体、ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン化合物又は誘導体、ピラゾロ［５，１−ｃ］  ［１，２，４］トリアジン化合物又は誘導体、ピラゾリル化合物又は誘導体、ピリミジン化合物又は誘導体、ピロロ化合物又は誘導体、ピロロ［２，３−Ｂ］ピリジン化合物又は誘導体、置換６−フェニル−ピリド［２，３−Ｄ］ピリミジン−７−ワンズ化合物又は誘導体、置換ベンズアゾール化合物又は誘導体、置換ベンズイミダゾール化合物又は誘導体、置換ビスアリール−尿素化合物又は誘導体、チエノピリジン化合物又は誘導体、チエノピリミジン化合物又は誘導体、ピロロピリミジン化合物又は誘導体、チオフェンアミド化合物又は誘導体、及び任意な他の適当なアリール及び／又はヘテロアリール化合物又は誘導体があり���る。幾つかの実施形態において、本明細書に記載のＢＲＡＦ阻害剤は、ＢＲＡＦ阻害剤自体の化合物又は誘導体を含むことができる、又はそれらの医薬的に容認可能な塩又は溶媒和物とすることができる。
【００１７】
本明細書に記載の実施形態により使用し得るＢＲＡＦ阻害剤を開示する幾つかの特許及び特許出願としては、限定しないが、国際公開第２０１１／１１７３８１号、同第２０１１／１１９８９４号、同第２０１１／１１７３８１号、同第２０１１／０９７５９４号、同第２０１１／０９７５２６号、同第２０１１／０８５２６９号、同第２０１１／０９０７３８号、同第２０１１／０２５９６８号、同第２０１１／０２５９２７号、同第２０１１／０２３７７３号、同第２０１１／０２８５４０号、同第２０１０／１１１５２７号、同第２０１０／１０４９７３号、同第２０１０／１００１２７号、同第２０１０／０７８４０８号、同第２０１０／０６５８９３号、同第２０１０／０３２９８６号、同第２００９／１１５５７２号、同第２００９／１０８８３８号、同第２００９／１１１２７７号、同第２００９／１１１２７８号、同第２００９／１１１２７９号、同第２００９／１１１２８０号、同第２００９／１０８８２７号、同第２００９／１１１２６０号、同第２００９／１００５３６号、同第２００９／０５９２７２号、同第２００９／０３９３８７号、同第２００９／０２１８６９号、同第２００９／００６４０４号、同第２００９／００６３８９号、同第２００８／１４０８５０号、同第２００８／０７９２７７号、同第２００８／０５５８４２号、同第２００８／１１５２６３号、同第２００８／０３０４４８号、同第２００８／０２８１４１号、同第２００７／１２３８９２号、同第２００７／１１５６７０号、同第２００７／０９０１４１号、同第２００７／０７６０９２号、同第２００７／０６７４４４号、同第２００７／０５６６２５号、同第２００７／０３１４２８号、同第２００７／０２７８５５号、同第２００７／００２４３３号、同第２００７／００２３２５号、同第２００６／１２５１０１号、同第２００６／１２４８７４号、同第２００６／１２４７８０号、同第２００６／１０２０７９号、同第２００６／１０８４８２号、同第２００６／１０５８４４号、同第２００６／０８４０１５号、同第２００６／０７６７０６号、同第２００６／０５０８００号、同第２００６／０４０５６９号、同第２００５／１１２９３２号、同第２００５／０７５４２５号、同第２００５／０４９６０３号、同第２００５／０３７２８５号、同第２００５／０３７２７３号、同第２００５／０３２５４８号、並びに米国特許第８，６４２，７５９号、同第８，５５７，８３０号、同第７，８６３，２８８号、同第７，４９１，８２９号、同第７，４８２，３６７号、及び同第７，２３５，５７６号がある。これら特許文献の全体は、参照によって本明細書に組み入れられるものとする。
【００１８】
若干の実施形態において、ＢＲＡＦ阻害剤は、ＡＭＧ５４２、ＡＲＱ１９７、ＡＲＱ７３６、ＡＺ６２８、ＣＥＰ−３２４９６、ＧＤＣ−０８７９、ＧＳＫ１１２０２１２、ＧＳＫ２１１８４３６（ダブラフェニブ、タフィンラー（登録商標））、ＬＧＸ８１８（エンコラフェニブ（ｅｎｃｏｒａｆｅｎｉｂ））、ＮＭＳ−Ｐ１８６、ＮＭＳ−Ｐ３４９、ＮＭＳ−Ｐ３８３、ＮＭＳ−Ｐ３９６、ＮＭＳ−Ｐ７３０、ＰＬＸ３６０３（ＲＯ５２１２０５４）、ＰＬＸ４０３２（ベムラフェニブ、ゼルボラフ（登録商標））、ＰＬＸ４７２０（ジフルオロフェニル−スルフォンアミン）、ＰＦ−０４８８０５９４、ＰＬＸ４７３４、ＲＡＦ２６５（ＣＨＩＲ−２６５）、ＲＯ４９８７６５５、ＳＢ５９０８８５、ソラフェニブ、ソラフェニブトシル酸塩、及びＬＸ２８１（ＢＭＳ−９０８６６２）から選択した分子グループから選択することができる。
【００１９】
幾つかの実施形態において、ＢＲＡＦ阻害剤は、以下の構造式（Ｉ）若しくは構造式（ＩＩ）の化学的構造、すなわち、
【化１】
2017514866.tif 000002
（Ｉ）
【化２】
2017514866.tif 000003
（ＩＩ）
を有するものとし、ここで、
【００２０】
Ｒ１は、Ｈ、随意的にシアノ基で置換したＣ３〜Ｃ６シクロアルキル基、随意的にシアノ基で置換したＣ１〜Ｃ３アルキル基、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、ヒドロキシ基、−Ｘ１ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ１ａ、−Ｘ１ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＲ１ａとし、ただしここで、Ｘ１は、それぞれハロ（ｈａｌｏ）基、Ｃ１〜Ｃ４アルキル基、若しくはハロ置換したＣ１〜Ｃ４アルキル基から独立的に選択した１〜３つの基で随意的に置換したＣ１〜Ｃ４アルキレン基とし、またＲ１ａは、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル基、若しくはハロ置換Ｃ１〜Ｃ４アルキル基とし、
Ｒ１ｂは、Ｈ若しくはメチル基とし、
Ｒ２は、Ｈ若しくはハロゲン基とし、
Ｒ３は、Ｈ、ハロゲン基、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ基、Ｃ１〜Ｃ４アルキル基、ハロ置換Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ基、若しくはハロ置換Ｃ１〜Ｃ４アルキル基とし、
Ｒ４は、ハロゲン基、Ｈ、若しくはＣ１〜Ｃ４アルキル基とし、
Ｒ５は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル基、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル基、Ｃ３〜Ｃ８分枝アルキル基、ハロ置換Ｃ１〜Ｃ６アルキル基、ハロ置換Ｃ３〜Ｃ８分枝アルキル基、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル−（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキレン基、若しくはフェニル基とし、ここでフェニル基は、それぞれがハロ基、ＣＨ３、若しくはＣＦ３から独立的に選択した１〜３つの置換基で随意的に置換されるものとし、
Ｒ６は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル基、若しくはハロゲン基とし、また
Ｒ７は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル基、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル基、１−メチル−（Ｃ３〜Ｃ６）−シクロアルキル基、１−（ハロ置換−メチル）−（Ｃ３〜Ｃ６）−シクロアルキル基、Ｃ３〜Ｃ８分枝アルキル基、ハロ置換Ｃ１〜Ｃ６アルキル基、ハロ置換Ｃ３〜Ｃ８分枝アルキル基、若しくはフェニル基とし、ここでフェニル基は、ハロゲン基、Ｃ１〜Ｃ４アルキル基若しくはハロ置換Ｃ１〜Ｃ４アルキル基から選択した１〜３つの置換基で随意的に置換されるものとし、好適には、Ｒ７は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル基、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル基、１−メチル−（Ｃ３〜Ｃ６）−シクロアルキル基、Ｃ３〜Ｃ８分枝アルキル基、若しくはフェニル基とし、ここでフェニル基は、ハロゲン基、Ｃ１〜Ｃ４アルキル基若しくはハロ置換Ｃ１〜Ｃ４アルキル基から選択した１〜３つの置換基で随意的に置換されるものとし、
又は、ＢＲＡＦ阻害剤は、これら構造式の医薬的に容認可能な塩とする。
【００２１】
構造式（Ｉ）の組成における１つの特別な実施形態において、Ｒ１は、随意的にシアノ基で置換したＣ１〜Ｃ３アルキル基、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、ヒドロキシ基、−Ｘ１ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ１ａとし、ただしここで、Ｘ１は、それぞれハロ基、Ｃ１〜Ｃ４アルキル基、若しくはハロ置換Ｃ１〜Ｃ４アルキル基から独立的に選択した１〜３つの基で随意的に置換したＣ１〜Ｃ４アルキレン基とし、またＲ１ａは、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル基、若しくはハロ置換Ｃ１〜Ｃ４アルキル基とし、
Ｒ２は、Ｈ若しくはハロゲン基とし、
Ｒ３は、Ｈ、ハロゲン基、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ基、Ｃ１〜Ｃ４アルキル基、ハロ置換Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ基、若しくはハロ置換Ｃ１〜Ｃ４アルキル基とし、
Ｒ４は、ハロゲン基、Ｈ、若しくはＣ１〜Ｃ４アルキル基とし、
Ｒ５は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル基、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル基、Ｃ３〜Ｃ８分枝アルキル基、ハロ置換Ｃ１〜Ｃ６アルキル基、ハロ置換Ｃ３〜Ｃ８分枝アルキル基とし、
Ｒ６は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル基、若しくはハロゲン基とし、また
Ｒ７は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル基、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル基、１−メチル−（Ｃ３〜Ｃ６）−シクロアルキル基、１−（ハロ置換−メチル）−（Ｃ３〜Ｃ６）−シクロアルキル基、Ｃ３〜Ｃ８分枝アルキル基、ハロ置換Ｃ１〜Ｃ６アルキル基、ハロ置換Ｃ３〜Ｃ８分枝アルキル基、若しくはフェニル基とし、ここでフェニル基は、ハロゲン基、Ｃ１〜Ｃ４アルキル基若しくはハロ置換Ｃ１〜Ｃ４アルキル基から選択した１〜３つの置換基で随意的に置換されるものとし、好適には、Ｒ７は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル基、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル基、１−メチル−（Ｃ３〜Ｃ６）−シクロアルキル基、若しくはフェニル基とし、ここでフェニル基は、ハロゲン基、Ｃ１〜Ｃ４アルキル基若しくはハロ置換Ｃ１〜Ｃ４アルキル基から選択した１〜３つの置換基で随意的に置換されるものとし、
又は、ＢＲＡＦ阻害剤は、これら構造式の医薬的に容認可能な塩とする。
【００２２】
好適な実施形態において、構造式（ＩＩ）であって、
Ｒ１は、−ＣＨ２−（Ｓ）−ＣＨ（ＣＨ３）ＮＨＣ（Ｏ）ＯＣＨ３とし、
Ｒ１ｂは、Ｈとし、
Ｒ２は、Ｈとし、
Ｒ３は、Ｃｌとし、
Ｒ４は、Ｈとし、
Ｒ５は、ＣＨ３とし、
Ｒ６は、Ｆとし、また
Ｒ７は、イソプロピル基とした、該構造式（ＩＩ）の化合物、又は
該化合物の医薬的に容認可能な塩（本明細書において、「ＬＧＸ８１８」又は「エンコラフェニブ（ｅｎｃｏｒａｆｅｎｉｂ）」とも称される）によって得られる。
【００２３】
他の実施形態において、構造式（ＩＩ）であって、
Ｒ２は、Ｈ若しくはＦとし、
Ｒ３は、Ｈ、ハロゲン基、Ｃ１〜Ｃ２アルコキシ基、Ｃ１〜Ｃ２アルキル基、ハロ置換Ｃ１〜Ｃ２アルコキシ基、若しくはハロ置換Ｃ１〜Ｃ２アルキル基とし、
Ｒ４は、Ｈ若しくはメチル基とし、
Ｒ５は、Ｃ１〜Ｃ４アルキル基、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル基、Ｃ３〜Ｃ５分枝アルキル基、ハロ置換Ｃ１〜Ｃ４アルキル基、ハロ置換Ｃ３〜Ｃ６分枝アルキル基、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル−（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキレン基とし、
Ｒ６は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ２アルキル基、若しくはハロゲン基とし、また
Ｒ７は、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル基、１−メチル−（Ｃ３〜Ｃ６）−シクロアルキル基、若しくはＣ３〜Ｃ６分枝アルキル基とした、該構造式（ＩＩ）の化合物、又は
この化合物の医薬的に容認可能な塩によって得られる。
【００２４】
別の実施形態において、構造式（ＩＩ）であって、
Ｒ２は、Ｈとし、
Ｒ３は、Ｈ、Ｃｌ、Ｆ、メトキシ基、メチル基、若しくはジフルオロメトキシ基とし、
Ｒ４は、Ｈとし、
Ｒ５は、メチル基、シクロプロピル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ｓｅｃ−ブチル基、イソブチル基、トリフルオロメチル基、若しくは３，３，３−トリフルオロプロピル基とし、
Ｒ６は、Ｈ、メチル基、Ｆ若しくはＣｌとし、また
Ｒ７は、ｔ−ブチル基、シクロプロピル基、若しくは１−メチルシクロプロピル基とした、該構造式（ＩＩ）の化合物、又は
該化合物の医薬的に容認可能な塩によって得られる。
【００２５】
幾つかの実施形態において、ＢＲＡＦ阻害剤は、以下の構造式（ＩＩＩ）の化学的構造、すなわち、
【化３】
2017514866.tif 000004
（ＩＩＩ）
を有するものとし、ここで、
ａは、０、１、２若しくは３とし、
各Ｒ１は、同一若しくは異なるものとし、またハロ基、アルキル基、ハロアルキル基、−ＯＲ６、−ＣＯ２Ｒ６、−ＮＲ６Ｒ７、及び−ＣＮから独立的に選択されるものとし、
リングＡは、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル基、フェニル基、５〜６員ヘテロ環及び５〜６員ヘテロアリール基から選択されるものとし、ヘテロ環及びヘテロアリール基それぞれは、Ｎ、Ｏ及びＳから選択したヘテロ原子を有するものとし、
Ｑ１、Ｑ２、Ｑ３及びＱ４それぞれは、ＣＨ、ＣＲ２若しくはＮとし、Ｑ１、Ｑ２、Ｑ３及びＱ４のうちせいぜい１つがＮであるものとし、
各Ｒ２は、同一若しくは異なるものとし、またハロ基、アルキル基、ハロアルキル基、及び−ＯＲ６から独立的に選択されるものとし、
Ｗは、−Ｏ−、及び−Ｓ−から選択されるものとし、
Ｒ３は、Ｈ、アルキル基、ハロアルキル−、−アルキレン−ＯＨ、−ＮＲ５Ｒ７、−Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、−アルキレン−Ｃ（Ｏ）−ＯＨ、−アルキレン−ＮＨ２、及びＨｅｔから選択されるものとし、
【００２６】
ただしここで、Ｒ３がＣ３〜Ｃ６シクロアルキル基であるとき、このＣ３〜Ｃ６シクロアルキル基は、１つ又は２つの置換基であって、同一又は異なるものであり、またハロ基、Ｃ１〜Ｃ３アルキル基、ハロ−（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル基、ＯＨ、Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル基、オキソ基、Ｓ−（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル基、ＳＯ２、ＮＨ２、Ｎ（Ｈ）（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル及びＮ（Ｃ１〜Ｃ３アルキル）２から独立的に選択される、該１つ又は２つの置換基で随意的に置換したものとし、
【００２７】
Ｈｅｔは、Ｎ、Ｏ及びＳから選択した１つ又は２つのヘテロ原子を有する５〜６員ヘテロ環であって、１つ又は２つの置換基で随意的に置換した、該５〜６員ヘテロ環とし、また該１つ又は２つの置換基は、同一又は異なるものであり、それぞれがハロ基、Ｃ１〜Ｃ３アルキル基、ハロ−（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル基、Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル基、Ｃ１〜Ｃ３アルキレン−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル基、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ３アルキレン−ＯＨ、オキソ基、ＳＯ２（（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル）、Ｃ１〜Ｃ３アルキレン−ＳＯ２（（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル）、ＮＨ２、Ｎ（Ｈ）（（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル）、Ｎ（Ｃ１〜Ｃ３アルキル）２、ＣＮ及び−ＣＨ２ＣＮから独立的に選択されるものとし、
【００２８】
Ｒ４は、Ｈ、アルキル基、ハロアルキル基、アルケニル基、−ＯＲ６、−Ｒ５−ＯＲ６、−Ｒ５−ＣＯ２Ｒ６、−Ｒ５−ＳＯ２Ｒ６、−Ｒ５−Ｈｅｔ、−Ｒ５−Ｃ（Ｏ）−Ｈｅｔ、−Ｎ（Ｈ）Ｒ８、−Ｎ（ＣＨ３）Ｒ８か及び−Ｒ５−ＮＲ６Ｒ７から選択されるものとし、また各Ｒ５は、同一又は異なるものでありかつ独立的にＣ１〜Ｃ４アルキレン基とし、
【００２９】
各Ｒ６及びＲ７は、同一又は異なるものであり、またＨ、アルキル基、ハロアルキル基、−Ｃ（Ｏ）−アルキル、及び−（ＣＯ）−シクロアルキルから独立的に選択されるものとし、
【００３０】
Ｒ８は、Ｈ、アルキル基（随意的に、−ＯＨで置換した）、ハロアルキル基、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル基、−Ｒ５−（Ｃ３〜Ｃ６）−シクロアルキル、Ｈｅｔ２、−Ｒ５−Ｈｅｔ２、−Ｒ５−ＯＲ６、−Ｒ５−Ｏ−Ｒ５−ＯＲ６、−Ｒ５−Ｃ（Ｏ）２Ｒ６、−Ｒ５−Ｃ（Ｏ）ＮＲ６Ｒ７、−Ｒ５−Ｎ（Ｈ）Ｃ（Ｏ）−Ｒ６、−Ｒ５−Ｎ（Ｈ）Ｃ（Ｏ）−Ｒ５−ＯＲ６、−Ｒ５−Ｎ（Ｈ）Ｃ（Ｏ）２−Ｒ５−Ｒ５−ＮＲ５Ｒ７、−Ｒ５−Ｓ（Ｏ）２Ｒ６、−Ｒ５−ＣＮ、及び−Ｒ５−Ｎ（Ｈ）Ｓ（Ｏ）２Ｒ６から選択されるものとし、
【００３１】
ただしここで、Ｒ８がＣ３〜Ｃ６シクロアルキル基であるとき、このＣ３〜Ｃ６シクロアルキル基は、１つ又は２つの置換基であって、同一又は異なるものであり、またハロ基、Ｃ１〜Ｃ３アルキル基、ハロ−（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル基、ＯＨ、Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル基、オキソ基、Ｓ−（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル基、ＳＯ２（Ｃ１〜Ｃ３アルキル）、ＮＨ２、Ｎ（Ｈ）−（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル及びＮ（Ｃ１〜Ｃ３アルキル）２並びにＮ（Ｈ）ＳＯ２−（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキルから独立的に選択される、該１つ又は２つの置換基で随意的に置換したものとし、
【００３２】
また、Ｈｅｔ２は、Ｎ、Ｏ及びＳから選択した１つ又は２つのヘテロ原子を有する４〜６員ヘテロ環であって、１、２、３、４又は５つのＣ１〜Ｃ３アルキル基、又は１つ若しくは２つの置換基で随意的に置換した、該４〜６員ヘテロ環とし、また該１つ若しくは２つの置換基は、同一又は異なるものであり、それぞれがハロ基、Ｃ１〜Ｃ３アルキル基、ハロ−（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル基、Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル基、Ｃ１〜Ｃ３アルキレン−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ３アルキル）、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ３アルキレン−ＯＨ、オキソ基、ＳＯ２（Ｃ１〜Ｃ３アルキル）、Ｃ１〜Ｃ３アルキレン−ＳＯ２（Ｃ１〜Ｃ３アルキル）、ＮＨ２、Ｎ（Ｈ）−（Ｃ１〜Ｃ３アルキル）、Ｎ（Ｃ１〜Ｃ３アルキル）２、Ｎ（Ｈ）ＳＯ２−（Ｃ１〜Ｃ３アルキル）、Ｃ（Ｏ）（Ｃ１〜Ｃ３アルキル）、ＣＯ２（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）、ＣＮ及び−ＣＨ２ＣＮから独立的に選択されるものとし、
【００３３】
またＲ９及びＲ１０は、Ｈ及びアルキル基から独立的に選択されるものとした、該構造式（ＩＩＩ）の化合物、又は
この化合物の医薬的に容認可能な塩とする。
【００３４】
好適な実施形態において、構造式（ＩＩＩ）であって、
ａは、２とし、
Ｒ１は、Ｆとし、
各Ｒ２は、Ｆとし、
Ｒ３は、ｔ−ブチル基とし、
Ｒ４は、Ｎ（Ｈ）Ｒ８とし、
Ｒ８は、Ｈとし、また
Ｗは、Ｓ（本明細書において「ＧＳＫ２１１８４３６」「ダブラフェニブ」又は「タフィンラー（登録商標）」と称する）とした、該構造式（ＩＩＩ）の化合物、又は
該化合物の医薬的に容認可能な塩によって得られる。
【００３５】
幾つかの実施形態において、ＢＲＡＦ阻害剤は、以下の構造式（ＩＶ）の化学的構造、すなわち、
【化４】
2017514866.tif 000005
（ＩＶ）
を有するものとし、ここで、
【００３６】
Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、水素、ハロゲン基、随意的に置換した低級アルキル基、随意的に置換した低級アルケニル基、随意的に置換した低級アルキニル基、随意的に置換したシクロアルキル基、随意的に置換したヘテロシクロアルキル基、随意的に置換したアリール基、随意的に置換したヘテロアリール基、−ＣＮ、−ＮＯ２、ＣＲａＲｂＲ２６、及び−ＬＲ２６よりなるグループから独立的に選択されるものとし、
【００３７】
Ｒ３は、水素、ハロゲン基、随意的に置換した低級アルキル基、随意的に置換した低級アルケニル基、随意的に置換した低級アルキニル基、随意的に置換したシクロアルキル基、随意的に置換したヘテロシクロアルキル基、随意的に置換したアリール基、随意的に置換したヘテロアリール基、−ＣＮ、−ＮＯ２、ＣＲａＲｂＲ２６、−ＬＲ２６及び−Ａ−Ａｒ−Ｌ１−Ｒ２４よりなるグループから独立的に選択されるものとし、
【００３８】
Ａは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＣＲａＲｂ−、−ＮＲ１−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｓ（Ｏ）−、及び−Ｓ（Ｏ）２−よりなるグループから選択されるものとし、
【００３９】
Ｒ１は、水素、低級アルキル基、シクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、アリール基、ヘテロアリール基、−Ｃ（Ｏ）Ｒ７、−Ｃ（Ｓ）Ｒ７、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ７、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ７、−Ｃ（Ｓ）ＮＨＲ７、及び−Ｓ（Ｏ）２ＮＨＲ７よりなるグループから選択されるものとし、ここで、低級アルキル基は、フルオロ基、−ＯＨ、−ＮＨ２、低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、モノ−アルキルアミノ基、ジ−アルキルアミノ基、及び−ＮＲ８Ｒ９よりなるグループから選択される１つ以上の置換基で随意的に置換したものとし、ここで、低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、モノ−アルキルアミノ基、又はジ−アルキルアミノ基のアルキル鎖は、フルオロ基、−ＯＨ、−ＮＨ２、低級アルコキシ基、フルオロ置換低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、フルオロ置換低級アルキルチオ基、モノ−アルキルアミノ基、ジ−アルキルアミノ基、及びシクロアルキルアミノ基よりなるグループから選択される１つ以上の置換基で随意的に置換したものとし、しかし、これは、アルコキシ基のＯ、チオアルキル基のＳ、又はモノ若しくはジ−アルキルアミノ基のＮに結合される、アルキル鎖炭素のいかなる置換基もフルオロ基であるという条件、さらに、Ｒ１が低級アルキル基であり、−ＮＲ１−のＮに結合される低級アルキル炭素のいかなる置換基もフルオロ基であるという条件の下におけるものであり、またここで、シクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、アリール基、又はヘテロアリール基は、ハロゲン、−ＯＨ、−ＮＨ２、低級アルキル基、フルオロ置換低級アルキル基、低級アルコキシ基、フルオロ置換低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、フルオロ置換低級アルキルチオ基、モノ−アルキルアミノ基、ジ−アルキルアミノ基、及びシクロアルキルアミノ基よりなるグループから選択される１つ以上の置換基で随意的に置換したものとし、Ｒ７は、低級アルキル基、シクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、アリール基、ヘテロアリール基よりなるグループから選択されるものとし、ここで、低級アルキル基は、フルオロ基、−ＯＨ、−ＮＨ２、低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、モノ−アルキルアミノ基、ジ−アルキルアミノ基、及び−ＫＲ８Ｒ９よりなるグループから選択される１つ以上の置換基で随意的に置換したものとし、しかし、これは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ７、−Ｃ（Ｓ）ＮＨＲ７、又は−Ｓ（Ｏ）２ＮＨＲ７のＮに結合される、アルキル炭素のいかなる置換基もフルオロ基であるという条件の下におけるものであり、ここで、低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、モノ−アルキルアミノ基、又はジ−アルキルアミノ基のアルキル鎖は、フルオロ基、−ＯＨ、−ＮＨ２、低級アルコキシ基、フルオロ置換低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、フルオロ置換低級アルキルチオ基、モノ−アルキルアミノ基、ジ−アルキルアミノ基、及びシクロアルキルアミノ基よりなるグループから選択される１つ以上の置換基で随意的に置換したものとし、しかし、これは、アルコキシ基のＯ、チオアルキル基のＳ、又はモノ若しくはジ−アルキルアミノ基のＮに結合される、アルキル鎖炭素のいかなる置換基もフルオロ基であるという条件の下におけるものであり、またここで、シクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、アリール基、及びヘテロアリール基は、ハロゲン、−ＯＨ、−ＮＨ２、低級アルキル基、フルオロ置換低級アルキル基、低級アルコキシ基、フルオロ置換低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、フルオロ置換低級アルキルチオ基、モノ−アルキルアミノ基、ジ−アルキルアミノ基、及びシクロアルキルアミノ基よりなるグループから選択される１つ以上の置換基で随意的に置換したものとし、
【００４０】
Ａｒは、随意的に置換したアリーレン基及び随意的に置換したヘテロアリーレン基よりなるグループから選択されるものとし、
【００４１】
各生起におけるＬは、−（ａｌｋ）ａ−Ｓ−（ａｌｋ）ｂ−、−（ａｌｋ）ａ−Ｏ−（ａｌｋ）ｂ−、−（ａｌｋ）ａ−ＮＲ２５−（ａｌｋ）ｂ−、−（ａｌｋ）ａ−Ｃ（Ｏ）−（ａｌｋ）ｂ−、−（ａｌｋ）ａ−Ｃ（Ｓ）−（ａｌｋ）ｂ−、−（ａＵｃ）ａ−Ｓ（Ｏ）−（ａｌｋ）ｂ−、−（ａｌｋ）ａ−Ｓ（Ｏ）２（ａｌｋ）ｂ−、−（ａｌｋ）ａ−ＯＣ（Ｏ）（ａｌｋ）ｂ−、−（ａｌｋ）ａ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（ａｌｋ）ｂ−、−（ａｌｋ）ａ−ＯＣ（Ｓ）（ａｌｋ）ｂ−、−（ａｌｋ）ａ−Ｃ（Ｓ）Ｏ（ａｌｋ）ｂ−、−（ａｌｋ）ａ−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２５−（ａｌｋ）ｂ−、−（ａｌｋ）ａ−Ｃ（Ｓ）ＮＲ２５−（ａｌｋ）ｂ−、−（ａｌｋ）ａ−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ２５−（ａｌｋ）ｂ−、−（ａｌｋ）ａ−ＮＲ２５Ｃ（Ｏ）−（ａｌｋ）ｂ−、−（ａｌｋ）ａ−ＮＲ２５Ｃ（Ｓ）−（ａｌｋ）ｂ−、−（ａｌｋ）ａ−ＮＲ２５Ｓ（Ｏ）２−（ａｌｋ）ｂ−、−（ａｌｋ）ａ−ＮＲ２５Ｃ（Ｏ）Ｏ−（ａｌｋ）ｂ−、−（ａｌｋ）ａ−ＮＲ２５Ｃ（Ｓ）Ｏ−（ａｌｋ）ｂ−、−（ａｌｋ）ａ−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ２５−（ａｌｋ）ｂ−、−（ａｌｋ）ａ−ＯＣ（Ｓ）ＮＲ２５−（ａｌｋ）ｂ−、−（ａｌｋ）ａ−ＮＲ２５Ｃ（Ｏ）ＮＲ２５−（ａｌｋ）ｂ−、−（ａｌｋ）ａ−ＮＲ２５Ｃ（Ｓ）ＮＲ２５−（ａｌｋ）ｂ−、及び−（ａｌｋ）ａ−ＮＲ２５Ｓ（Ｏ）２ＮＲ２５−（ａｌｋ）ｂ−よりなるグループから独立的に選択されるものとし、ａ及びｂは独立的に０又は１とし、ａｌｋは、Ｃ１〜Ｃ３アルキレン基、又はフルオロ基、−ＯＨ、−ＮＨ２、低級アルキル基、低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、モノ−アルキルアミノ基、ジ−アルキルアミノ基、及び−ＫＲ８Ｒ９よりなるグループから選択される１つ以上の置換基で随意的に置換したＣ１〜Ｃ３アルキレン基とし、ここで、低級アルキル基、又は低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、モノ−アルキルアミノ基、若しくはジ−アルキルアミノ基のアルキル鎖は、フルオロ基、−ＯＨ、−ＮＨ２、低級アルコキシ基、フルオロ置換低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、フルオロ置換低級アルキルチオ基、モノ−アルキルアミノ基、ジ−アルキルアミノ基、及びシクロアルキルアミノ基よりなるグループから選択される１つ以上の置換基で随意的に置換したものとし、しかし、これは、アルコキシ基のＯ、チオアルキル基のＳ、又はモノ若しくはジ−アルキルアミノ基のＮに結合される、アルキル鎖炭素のいかなる置換基もフルオロ基であるという条件の下におけるものであり、
【００４２】
Ｌ１は−（ＣＲａＲｂ）ｖ−又はＬとし、ただしここで、ｖは１、２又は３とし、各生起におけるＲａ及びＲｂは、水素、フルオロ基、−ＯＨ、−ＮＨ２、低級アルキル基、低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、モノ−アルキルアミノ基、ジ−アルキルアミノ基、及び−ＮＲ８Ｒ９よりなるグループから選択される１つ以上の置換基で随意的に置換したものとし、ここで、低級アルキル基、低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、モノ−アルキルアミノ基、若しくはジ−アルキルアミノ基のアルキル鎖は、フルオロ基、−ＯＨ、−ＮＨ２、低級アルコキシ基、フルオロ置換低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、フルオロ置換低級アルキルチオ基、モノ−アルキルアミノ基、ジ−アルキルアミノ基、及びシクロアルキルアミノ基よりなるグループから選択される１つ以上の置換基で随意的に置換したものとし、しかし、これは、アルコキシ基のＯ、チオアルキル基のＳ、又はモノ若しくはジ−アルキルアミノ基のＮに結合される、アルキル鎖炭素のいかなる置換基もフルオロ基であるという条件の下におけるものとする、又は同一若しくは異なる炭素におけるＲａ及びＲｂのいずれの２つも結合して３〜７員単環式シクロアルキル基若しくは５〜７員単環式ヘテロシクロアルキル基を形成し、またＲａ及びＲｂのいずれか他方は、水素、フルオロ基、−ＯＨ、−ＮＨ２、低級アルキル基、低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、モノ−アルキルアミノ基、ジ−アルキルアミノ基、及び−ＮＲ８Ｒ９よりなるグループから独立的に選択されるものとし、ここで、低級アルキル基、低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、モノ−アルキルアミノ基、若しくはジ−アルキルアミノ基のアルキル鎖は、フルオロ基、−ＯＨ、−ＮＨ２、低級アルコキシ基、フルオロ置換低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、フルオロ置換低級アルキルチオ基、モノ−アルキルアミノ基、ジ−アルキルアミノ基、及びシクロアルキルアミノ基よりなるグループから選択される１つ以上の置換基で随意的に置換したものとし、しかし、これは、アルコキシ基のＯ、チオアルキル基のＳ、又はモノ若しくはジ−アルキルアミノ基のＮに結合される、アルキル鎖炭素のいかなる置換基もフルオロ基であるという条件の下におけるものであり、またここで、３〜７員単環式シクロアルキル基若しくは５〜７員単環式ヘテロシクロアルキル基は、ハロゲン、−ＯＨ、−ＮＨ２、低級アルキル基、フルオロ置換低級アルキル基、低級アルコキシ基、フルオロ置換低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、フルオロ置換低級アルキルチオ基、モノ−アルキルアミノ基、ジ−アルキルアミノ基、及びシクロアルキルアミノ基よりなるグループから選択される１つ以上の置換基で随意的に置換したものとし、
【００４３】
Ｒ８及びＲ９は窒素と結合し、この窒素に対してＲ８及びＲ９が付着して、フルオロ基、−ＯＨ、−ＮＨ２、低級アルキル基、フルオロ置換低級アルキル基、低級アルコキシ基、フルオロ置換低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、フルオロ置換低級アルキルチオ基よりなるグループから選択される１つ以上の置換基で随意的に置換した５〜７員ヘテロシクロアルキル基を形成するものとし、
【００４４】
各生起におけるＲ２５は、水素、随意的に置換した低級アルキル基、随意的に置換したシクロアルキル基、随意的に置換したヘテロシクロアルキル基、随意的に置換したアリール基、及び随意的に置換したヘテロアリール基とし、
【００４５】
各生起におけるＲ２４及びＲ２６は、Ｌ又はＬｉにおけるＳ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）２、Ｃ（Ｏ）、若しくはＣ（Ｓ）のいずれにも結合しない条件の下における水素、随意的に置換した低級アルキル基、Ｒ２４又はＲ２６が随意的に置換した低級アルケニル基であるとき、そのアルケン炭素のいずれもがＬ又はＬｉにおけるＮ、Ｓ、Ｏ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）２、Ｃ（Ｏ）、若しくはＣ（Ｓ）のいずれにも結合しない条件の下における随意的に置換した低級アルケニル基、Ｒ２４又はＲ２６が随意的に置換した低級アルキニル基であるとき、そのアルキン炭素のいずれもがＬ又はＬｉにおけるＮ、Ｓ、Ｏ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）２、Ｃ（Ｏ）、若しくはＣ（Ｓ）のいずれにも結合しない条件の下における随意的に置換した低級アルキニル基、随意的に置換したシクロアルキル基、随意的に置換したヘテロシクロアルキル基、随意的に置換したアリール基、随意的に置換したヘテロアリール基よりなるグループから独立的に選択されるものとし、また
【００４６】
好適な実施形態において、構造式（ＩＩＩ）であって、
Ｒ２は、Ｈとし、
Ｒ３は、−Ａ−Ａｒ−Ｌ１−Ｒ２４とし、
Ａは、−Ｃ（Ｏ）−とし、
Ａは、２，４−ジフルオロフェニルとし、
Ｌ１は、−ＳＯ２−とし、
Ｒ４は、Ｈとし、
Ｒ５は、４−クロロフェニルとし、
Ｒ６は、Ｈとし、
Ｒ２４は、ｎ−プロピル（本明細書では、「ＰＬＸ４０３２」、「ベムラフェニブ」又は「ゼルボラフ（登録商標）」）とした、該構造式（ＩＩＩ）の化合物、又は
該化合物の医薬的に容認可能な塩によって得られる。
【００４７】
他の実施形態において、当業者であれば、従来既知の体外、体内、コンピュータ内又は他のスクリーニング方法を用いて新規なＢＲＡＦ阻害剤を生成又は同定できるであろう。例えば、野生型ＢＲＡＦのＢＲＡＦ阻害剤は、小分子、ペプチド、又は核酸のトレーニングセットから、ＭＡＰＫシグナル伝達カスケード（例えば、ＭＥＫ及び／又はＥＲＫ）におけるＢＲＡＦからの下流における分子のリン酸化反応を検出する分析を用いて同定することができる。ＢＲＡＦ阻害剤はＢＲＡＦ発現及び／又はシグナル伝達機能を抑制又は阻害するよう作用し、これによりＭＥＫ及びＥＲＫにおけるリン酸化反応を減少することができる。このような実施形態で使用できる数種類のリン酸化反応分析が利用可能あり、これら分析としては、限定しないが、キナーゼ活性分析（例えば、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍ（登録商標）社、Ｐｒｏｍｅｇａ（登録商標）社、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（登録商標）社によって市販されているもの）；ウエスタンブロット法、酵素免疫吸着分析（ＥＬＩＳＡ）、フローサイトメトリー、免疫細胞化学、免疫組織化学のような免疫測定に使用するためのリン酸化部位特異的抗体；質量分析、プロテオミクス、及びリンタンパク質多重分析がある。若干の実施形態において、本明細書に記載の実施形態に使用するためのＢＲＡＦ阻害剤は、ＭＡＰＫ経路を活性化する候補阻害剤の能力を測定するスクリーニング方法を用いて同定することができる。このＭＡＰＫ経路活性化は、ＣＲＡＦをトランス（転写）活性化することによって達成することができる。がん及び異常ＢＲＡＦ発現に関連する他の疾患の治療に使用する一般的ＢＲＡＦ阻害剤スクリーニングとは対照的に、このようにして同定されたＢＲＡＦ阻害剤（本明細書において、ＭＡＰＫ逆説的活性剤とも称する）は、ＭＡＰＫ逆説的活性化を活用して、皮膚細胞の増大した増殖を誘発することによって皮膚創傷治癒を促進することができる。
【００４８】
本明細書で使用する用語「医薬的に容認可能な塩」は、本発明による化合物の被検対象に適用する上で安全かつ有効であり、また所望の生物学的活性を有する塩を意味する。医薬的に容認可能な塩は、本発明化合物に存在する酸性基又は塩基性基の塩を含む。医薬的に容認可能な塩は、限定しないが、フッ化水素酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硝酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、過リン酸塩、イソニコチン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、パントテン酸塩、酸性酒石酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチジン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、サッカリン酸塩、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、およびパモ酸塩（すなわち、１，１１−メチレン−ビス−（２−ヒドロキシ−３−ナフトエ酸））、アルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウム、亜鉛、及びジエタノールアミンの塩がある。本発明の若干の化合物は、様々なアミノ酸により医薬的に容認可能な塩を形成することができる。医薬的に容認可能な塩に対する再検討としては、“Berge, et al.,66 J. Pharm. Sci. 1-19 (1977)”を参照されたく、この非特許文献は参照によって本明細書に組み入れられるものとする。
【００４９】
［医薬組成物］
幾つかの実施形態において、上述のＢＲＡＦ阻害剤のうち１つ以上は医薬組成物の一部とすることができる。幾つかの態様において、少なくとも１つのＢＲＡＦ阻害剤、及び医薬的に容認可能なキャリヤを含むことができる。本明細書に使用する用語「医薬的に容認可能なキャリヤ」は、医薬的に容認可能な材料、組成物又は媒剤、例えば、液体若しくは固体の増量剤、希釈剤、賦形剤、溶媒、又はカプセル封入材料であって、ＢＲＡＦ阻害剤を１つの場所、体液、組織、臓器（内部若しくは外部）、人体部分から他の場所、体液、組織、臓器、人体部分に搬送又は輸送するのに関与するものを意味する。
【００５０】
幾つかの実施形態において、医薬組成物は、医薬的に容認可能なキャリヤと、及び構造式（Ｉ）若しくは構造式（ＩＩ）に基づくＢＲＡＦ阻害剤又はその医薬的に容認可能な塩を含む。幾つかの実施形態において、ＢＲＡＦ阻害剤は、ＬＧＸ８１８（エンコラフェニブ）又はその塩若しくは誘導体とする。
【００５１】
幾つかの実施形態において、医薬組成物は、医薬的に容認可能なキャリヤと、及び構造式（ＩＩＩ）若しくは構造式（ＩＩＩ）に基づくＢＲＡＦ阻害剤又はその医薬的に容認可能な塩を含む。幾つかの実施形態において、ＢＲＡＦ阻害剤は、ＧＳＫ２１１８４３６（ダブラフェニブ、タフィンラー（登録商標））又はその塩若しくは誘導体とする。
【００５２】
幾つかの実施形態において、医薬組成物は、医薬的に容認可能なキャリヤと、及び構造式（ＩＶ）若しくは構造式（ＩＶ）に基づくＢＲＡＦ阻害剤又はその医薬的に容認可能な塩を含む。幾つかの実施形態において、ＢＲＡＦ阻害剤は、ＰＬＸ４０３２（ベムラフェニブ、ゼルボラフ（登録商標））又はその塩若しくは誘導体とする。
【００５３】
各キャリヤは、製剤における他の成分、例えば、ＢＲＡＦ阻害剤と共存でき、また生体系の組織又は臓器に接触しても過剰な毒性、炎症、アレルギー反応、免疫原性、又は他の問題若しくは合併症を引き起こすことなく、合理的な損益比と釣り合って使用するのに適する意味において「医薬的に容認可能」である。
【００５４】
医薬的に容認可能なキャリヤとして供することができる材料の幾つかの例としては、（１）例えば、ラクトース、グルコース及びスクロースのような、糖類、（２）例えば、コーンスターチ及びジャガイモでんぷんのような、でんぷん、（３）例えば、カルボキシルメチル・セルロース・ナトリウム、エチルセルロース及び酢酸セルロースのような、セルロース及びその誘導体、（４）粉末化したトラガカント、（５）麦芽、（６）ゼラチン、（７）タルク、（８）例えば、ココアバター及び坐薬ワックスのような、賦形剤、（９）例えば、ピーナッツ油、綿実油、サフラワー油、ゴマ油、オリーブ油、コーン油及び大豆油のような、オイル、（１０）例えば、プロピレン・グリコールのような、グリコール、（１１）例えば、グリセリン、ソルビトール、マンニトール及びポリエチレン・グリコールのような、ポリオール、（１２）例えば、オレイン酸エチル及びラウリン酸エチルのような、エステル、（１３）寒天、（１４）例えば、水酸化マグネシウム及び水酸化アルミニウムのような、緩衝剤、（１５）アルギン酸、（１６）発熱物質を含まない水、（１７）等張食塩水、（１８）リンガー溶液、（１９）エチルアルコール及びプロパンアルコールのような、アルコール、（２０）リン酸緩衝液、並びに（２１）アセトンのような医薬的に容認可能な製剤に使用される他の無毒な共存可能物質がある。
【００５５】
医薬的に容認可能な組成物は、生理学的状態に近似させるのに必要な医薬的に容認可能な補助物質、例えば、ｐＨ調整及び緩衝剤、毒性調整剤等を含むことができ、例えば、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、乳酸ナトリウム、等々を含むことができる。さらに、医薬組成物の製剤としては、湿潤剤、着色剤、離型剤、コーティング剤、芳香剤、防腐剤、酸化防止剤、又は他の補助成分があり得る。
【００５６】
一実施形態において、医薬的に容認可能なキャリヤは、水溶性キャリヤ、例えば、緩衝食塩水等とする。若干の実施形態において、医薬的に容認可能なキャリヤは、極性溶剤、例えば、アセトン及びアルコールとする。若干の態様において、医薬的に容認可能なキャリヤは、経皮性、局所的エアロゾル性、吸入可能性、又は他の適当な投与モード、例えば、以下に説明するような投与ルートを可能にする、容易にする、若しくは高めることができるのに好適な材料とすることができる。
【００５７】
これら製剤におけるＢＲＡＦ阻害剤の濃度は、広範囲に変動できるものであり、また主に流体体積、粘性、本体重量等に基づいて、選択した特別な投与モード及び生体系の要求に従って、選択することができる。概して医薬組成物に存在するＢＲＡＦ阻害剤の量は、治療効果をもたらすものとする。例えば、幾つかの実施形態において、医薬組成物におけるＢＲＡＦ阻害剤の体積あたりの重量（ｗ／ｖ）又は重量パーセント（ｗｔ％）は、約０．００１％〜１００％、約０．００１％〜９０％、約０．００１％〜８０％、約０．００１％〜７０％、約０．００１％〜６０％、約０．００１％〜５０％、約０．００１％〜４０％、約０．００１％〜３０％、約０．００１％〜２０％、約０．００１％〜１０％、約０．００１％〜１％、約０．０１％〜１００％、約０．０１％〜９０％、約０．０１％〜８０％、約０．０１％〜７０％、約０．０１％〜６０％、約０．０１％〜５０％、約０．０１％〜４０％、約０．０１％〜３０％、約０．０１％〜２０％、約０．０１％〜１０％、約０．０１％〜１％、約０．１％〜１００％、約０．１％〜９０％、約０．１％〜８０％、約０．１％〜７０％、約０．１％〜６０％、約０．１％〜５０％、約０．１％〜４０％、約０．１％〜３０％、約０．１％〜２０％、約０．１％〜１０％、約０．１％〜１％、約１％〜１００％、約１％〜９０％、約１％〜８０％、約１％〜７０％、約１％〜６０％、約１％〜５０％、約１％〜４０％、約１％〜３０％、約１％〜２０％、約１％〜１０％、約１％〜５％、約１％〜４％、約１％〜３％、約１％〜２％、約０．１％〜０．９％、約０．１％〜０．８％、約０．１％〜０．７％、約０．１％〜０．６％、約０．１％〜０．５％、約０．１％〜０．４％、約０．１％〜０．３％、約０．１％〜０．２％、約０．２％〜１％、約０．３％〜１％、約０．４％〜１％、約０．５％〜１％、約０．６％〜１％、約０．７％〜１％、約０．８％〜１％、約０．９％〜１％、の間とすることができる。
【００５８】
他の実施形態において、医薬組成物におけるＢＲＡＦ阻害剤の濃度は、約１ｎＭ、２ｎＭ、３ｎＭ、４ｎＭ、５ｎＭ、６ｎＭ、７ｎＭ、８ｎＭ、９ｎＭ、１０ｎＭ、２０ｎＭ、３０ｎＭ、４０ｎＭ、５０ｎＭ、６０ｎＭ、７０ｎＭ、８０ｎＭ、９０ｎＭ、１００ｎＭ、２００ｎＭ、３００ｎＭ、４００ｎＭ、５００ｎＭ、６００ｎＭ、７００ｎＭ、８００ｎＭ、９００ｎＭ、１μＭ、２μＭ、３μＭ、４μＭ、５μＭ、６μＭ、７μＭ、８μＭ、９μＭ、１０μＭ、２０μＭ、３０μＭ、４０μＭ、５０μＭ、６０μＭ、７０μＭ、８０μＭ、９０μＭ、１００μＭ、２００μＭ、３００μＭ、４００μＭ、５００μＭ、６００μＭ、７００μＭ、８００μＭ、９００μＭ、１ｍＭ、２ｍＭ、３ｍＭ、４ｍＭ、５ｍＭ、６ｍＭ、７ｍＭ、８ｍＭ、９ｍＭ、１０ｍＭ、２０ｍＭ、３０ｍＭ、４０ｍＭ、５０ｍ、６０ｍＭ、７０ｍＭ、８０ｍＭ、９０ｍＭ、１００ｍＭ、２００ｍＭ、３００ｍＭ、４００ｍＭ、５００ｍＭ、６００ｍＭ、７００ｍＭ、８００ｍＭ、９００ｍＭ、又は１Ｍとすることができる。幾つかの態様において、被験体（ヒト又は他の哺乳動物）における治療的効果を生ずるＢＲＡＦ阻害剤の濃度（モル濃度又はｗｔ％）は、以下の実施例で説明するような、インビトロデータ若しくはインビボデータから、細胞培養及び／又は動物実験から推定することができる。
【００５９】
幾つかの態様において、医薬組成物は、さらに、少なくとも１種類の追加的治療剤を含むことができる。１種類又は複数のＢＲＡＦ阻害剤の他に、医薬組成物の一部として含めることができる適当な治療剤としては、以下のものに限定しないが、成長因子（例えば、組み換え血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ；Ｒｅｇｒａｎｅｘ（登録商標）／ベカプレルミンのゲル））、魚表皮に基づくＭａｒｉＧｅｎオメガ３組織−再生技術、糖類、制酸薬、ビタミンＡ、ビタミンＤ、抗菌剤及び消毒剤（例えば、酢酸、酸性化亜硝酸塩、アクチコート７、アクアセル−Ａｇ、抗微生物ペプチド、バシトラシン、ＢＣＴＰナノエマルション、カデキソマーヨウ素、ヨウ素、セトリミド、クロルヘキシジン、精油、フラマセリウム（ｆｌａｍｍａｃｅｒｉｕｍ）、ＦＰＱＣ、フシジン酸、ゲンタマイシン、グルコン酸塩、ヘキサクロロフェン、蜂蜜、ヨウ素化合物、ヨードチンキ、リポソーム型ヨウ素、酢酸マフェニド、メトロニダゾール、ムピロシン、ムピロシンカルシウム、硫酸ネオマイシン、ネオスポリン、ニトロフラゾン、ナイスタチン、ファージ療法、パパイヤ、プロバイオティクス、ポリミキシンＢ、ポビドンヨウ素、レタパムリン、次亜塩素酸ナトリウム、過酸化水素、銀、ＳＩＬＶＥＲＣＥＬ、銀製羊膜、硝酸銀、銀製包帯、銀発泡体、銀スルファジアジン、スルファセタミドＮａ＋、及び超酸化水）、並びに、発赤剤（例えば、サリチル酸塩、ニコチン酸塩、カプサイシン、唐辛子）、ＮＳＡＩＤｓ（例えば、イブプロフェン、ジクロフェナク、フェルビナク、ケトプロフェン、ピロキシカム、ナプロキセン、フルビプロフェン）、ヒドロコルチゾン、塩化ベンザルコニウム、ベンジダミン、ムコ多糖多硫化物、サリチルアミド、フェノール、冷却スプレー、カラミン、及び局所麻酔（例えば、リドカイン、リグノカイン、プリロカイン、ベンゾカイン、プラモキシン、ジブカイン）のような、鎮痛剤がある。
【００６０】
［創傷被覆材］
本明細書に記載のＢＲＡＦ阻害剤及びその医薬組成物は、１種類又は複数の創傷被覆材と組み合わせて、又は関連させて使用することができる。若干の実施形態において、１種類又は複数のＢＲＡＦ阻害剤又はその医薬組成物は、創傷被覆材に含浸させる又は塗布して使用する。以下に説明するようないかなる創傷被覆材は、１種類又は複数のＢＲＡＦ阻害剤、又は１種類又は複数のＢＲＡＦ阻害剤を含む医薬組成物を含浸させる又は塗布することができる。このような医薬組成物は先に詳細に説明している。
【００６１】
一実施形態において、１種類以上のＢＲＡＦ阻害剤を含む医薬組成物を含浸させる又は塗布した創傷被覆材は、単独創傷治癒被覆材として、又は個別にラップする創傷治癒被覆材のセットとして販売することができる。このような場合、被覆材及びＢＲＡＦ阻害剤をともに単独被覆材ユニットとして供給し、創傷部に当てがうとき、被覆材の一般的創傷治癒特性（止血、痛み軽減、更なる損傷又は傷害からの保護、感染症からの保護）を与えるだけでなく、創傷治癒機能を高める及び／又は促進するよう作用する。
【００６２】
創傷治癒を促進し、開放創傷部を保護し、痛みを軽減し、また感染症及び／又は汚染から保護する数種類の好適な創傷被覆材は、従来既知であり、かつ使用されており、これらのうちのいずれも本明細書記載の実施形態により使用することができる。適当な創傷被覆材の例としては、以下のものに限定しないが、アルギン酸塩被覆材、抗菌性被覆材、包帯、バンドエイド（登録商標）、生合成被覆材、生物学的被覆材、コラーゲン被覆材、複合被覆材、圧迫被覆材、接触層被覆材、発泡体被覆材、ガーゼ被覆材、ハイドロコロイド被覆材、ヒドロゲル被覆材、皮膚シーラント／液状皮膚被覆材、特殊吸収性被覆材、透明フィルム被覆材、創傷充填剤がある。幾つかの実施形態において、１種類以上のＢＲＡＦ阻害剤を含浸させた又は塗布した複数の創傷被覆材を創傷部に使用することができる。他の態様において、創傷被覆材は、それぞれが１種類以上のＢＲＡＦ阻害剤又はその組成物を含む局所的軟膏、ゲル、スプレー、ペースト、液体又は他の製剤物と組み合わせて使用することができる。
【００６３】
幾つかの実施形態において、創傷被覆材は、上述した１種類又は複数のＢＲＡＦ阻害剤を単独に又は医薬組成物の一部として含浸させる又は塗布する。創傷被覆材に含浸させる又は塗布するのに使用し得る１種類又は複数のＢＲＡＦ阻害剤は、ＡＭＧ５４２、ＡＲＱ１９７、ＡＲＱ７３６、ＡＺ６２８、ＣＥＰ−３２４９６、ＧＤＣ−０８７９、ＧＳＫ１１２０２１２、ＧＳＫ２１１８４３６（ダブラフェニブ、タフィンラー（登録商標））、ＬＧＸ８１８（エンコラフェニブ（ｅｎｃｏｒａｆｅｎｉｂ））、ＮＭＳ−Ｐ１８６、ＮＭＳ−Ｐ３４９、ＮＭＳ−Ｐ３８３、ＮＭＳ−Ｐ３９６、ＮＭＳ−Ｐ７３０、ＰＬＸ３６０３（ＲＯ５２１２０５４）、ＰＬＸ４０３２（ベムラフェニブ、ゼルボラフ（登録商標））、ＰＬＸ４７２０（ジフルオロフェニル−スルフォンアミン）、ＰＦ−０４８８０５９４、ＰＬＸ４７３４、ＲＡＦ２６５（ＣＨＩＲ−２６５）、ＲＯ４９８７６５５、ＳＢ５９０８８５、ソラフェニブ、ソラフェニブトシル酸塩、及びＬＸ２８１（ＢＭＳ−９０８６６２）のうちの１つ又は複数から選択する。含浸させた又は塗布した創傷被覆材は創傷部に直接当てがい、この被覆材が１種類以上のＢＲＡＦ阻害剤の治療効果を創傷部与えるようにする。
【００６４】
幾つかの実施形態において、創傷被覆材は、構造式（Ｉ）若しくは構造式（ＩＩ）に基づくＢＲＡＦ阻害剤又はその医薬的に容認可能な塩を、単独に又は医薬組成物の一部として含浸させる、又は塗布する。幾つかの実施形態において、ＢＲＡＦ阻害剤は、ＬＧＸ８１８（エンコラフェニブ）又はその塩若しくは誘導体とする。
【００６５】
幾つかの実施形態において、創傷被覆材は、構造式（ＩＩＩ）基づくＢＲＡＦ阻害剤又はその医薬的に容認可能な塩を、単独に又は医薬組成物の一部として含浸させる、又は塗布する。幾つかの実施形態において、ＢＲＡＦ阻害剤は、ＧＳＫ２１１８４３６（ダブラフェニブ、タフィンラー（登録商標））、又はその塩若しくは誘導体とする。
【００６６】
幾つかの実施形態において、創傷被覆材は、構造式（ＩＶ）に基づくＢＲＡＦ阻害剤又はその医薬的に容認可能な塩を、単独に又は医薬組成物の一部として含浸させる、又は塗布する。幾つかの実施形態において、ＢＲＡＦ阻害剤は、ＰＬＸ４０３２（ベムラフェニブ、ゼルボラフ（登録商標））又はその塩若しくは誘導体とする。
【００６７】
［使用方法］
幾つかの実施形態において、上述のＢＲＡＦ阻害剤は、単独に又は医薬組成物の一部として、被験体の創傷を治療する方法に使用することができる。本明細書に記載するこのような方法は任意なタイプの創傷を治療するのに使用することができ、これらタイプとしては、以下のものに限定しないが、急激な非穿通性創傷（例えば、擦り傷、裂創、挫傷）、急激な穿通性創傷（例えば、刺し傷、表面的切り傷、引っかき傷若しくは挫傷、外科手術切開創傷、銃創）、熱的創傷（例えば、火傷、日焼け、及び凍傷）、潰瘍（例えば、慢性糖尿病による潰瘍、褥瘡／床擦れ）、化学薬品による創傷、動物又は昆虫による咬傷及び刺し傷、及び電気的創傷がある。
【００６８】
創傷治療方法は、１種類又は複数のＢＲＡＦ阻害剤の有効量を創傷に接触させ、創傷治癒を促進するステップを有することができる。本明細書に記載の方法に使用し得る適当なＢＲＡＦ阻害剤としては、限定しないが、上述したものがある。若干の態様において、１種類又は複数のＢＲＡＦ阻害剤は、ＡＭＧ５４２、ＡＲＱ１９７、ＡＲＱ７３６、ＡＺ６２８、ＣＥＰ−３２４９６、ＧＤＣ−０８７９、ＧＳＫ１１２０２１２、ＧＳＫ２１１８４３６（ダブラフェニブ、タフィンラー（登録商標））、ＬＧＸ８１８（エンコラフェニブ（ｅｎｃｏｒａｆｅｎｉｂ））、ＮＭＳ−Ｐ１８６、ＮＭＳ−Ｐ３４９、ＮＭＳ−Ｐ３８３、ＮＭＳ−Ｐ３９６、ＮＭＳ−Ｐ７３０、ＰＬＸ３６０３（ＲＯ５２１２０５４）、ＰＬＸ４０３２（ベムラフェニブ、ゼルボラフ（登録商標））、ＰＬＸ４７２０（ジフルオロフェニル−スルフォンアミン）、ＰＦ−０４８８０５９４、ＰＬＸ４７３４、ＲＡＦ２６５（ＣＨＩＲ−２６５）、ＲＯ４９８７６５５、ＳＢ５９０８８５、ソラフェニブ、ソラフェニブトシル酸塩、及びＬＸ２８１（ＢＭＳ−９０８６６２）のうち、１つ又は複数から選択することができる。
【００６９】
幾つかの実施形態において、本明細書に記載の方法に使用し得るＢＲＡＦ阻害剤は、構造式（Ｉ）若しくは構造式（ＩＩ）に基づく阻害剤又はその医薬的に容認可能な塩とする。幾つかの実施形態において、ＢＲＡＦ阻害剤は、ＬＧＸ８１８（エンコラフェニブ）又はその塩若しくは誘導体とする。
【００７０】
幾つかの実施形態において、本明細書に記載の方法に使用し得るＢＲＡＦ阻害剤は、構造式（ＩＩＩ）基づくＢＲＡＦ阻害剤又はその医薬的に容認可能な塩とする。幾つかの実施形態において、ＢＲＡＦ阻害剤は、ＧＳＫ２１１８４３６（ダブラフェニブ、タフィンラー（登録商標））、又はその塩若しくは誘導体とする。
【００７１】
幾つかの実施形態において、本明細書に記載の方法に使用し得るＢＲＡＦ阻害剤は、構造式（ＩＶ）に基づくＢＲＡＦ阻害剤又はその医薬的に容認可能な塩とする。幾つかの実施形態において、ＢＲＡＦ阻害剤は、ＰＬＸ４０３２（ベムラフェニブ、ゼルボラフ（登録商標））又はその塩若しくは誘導体とする。
【００７２】
本明細書に記載した方法によれば、１種類又は複数のＢＲＡＦ阻害剤又はその医薬組成物を創傷に接触させるステップは、任意な送給又は投与ルートで行うことができる。創傷治療のため、ＢＲＡＦ阻害剤又はその医薬組成物を従来既知の任意な投与ルートによって送給又は投与することができ、投与ルートとしては、以下のものに限定しないが、口、鼻、局所的、エアロゾル、経粘膜、表皮、経皮、真皮、眼、肺、皮下、及び／又は吸入がある。医薬組成物は、投与方法に基づいて種々の単位剤形で投与することができる。例えば、経皮投与に適した単位剤形としては、含浸させた又は塗布したパッチ、包帯、ガーゼ、又は本明細書に記載した任意な被覆材がある。
【００７３】
幾つかの実施形態によれば、ＢＲＡＦ阻害剤又はその医薬組成物は、各投与ルートに適した製剤又は調合物の形式で被験体に施すことができる。本発明方法に有用な製剤としては、１種類又は複数のＢＲＡＦ阻害剤、そのＢＲＡＦ阻害剤用の１種類又は複数の医薬的に容認可能なキャリヤ、及び随意的に、１種類又は複数の追加治療剤若しくは追加成分を含有することができる。この製剤は、単位剤形として存在させることができ、また医薬における従来既知の任意な方法によって調合することができる。キャリヤ材料と組み合わせて単独剤形をなす有効成分量は、治療している被験体、及び特別な投与モードに基づいて変化する。キャリヤ材料と組み合わせて医薬的に有効な用量をなすＢＲＡＦ阻害剤の量は、概して治療効果を発揮するＢＲＡＦ阻害剤の量とする。
【００７４】
幾つかの実施形態において、製剤は、口の創傷又は痛みを治療する口投与に適するものとすることができる。このような実施形態において、製剤は、固体剤形（例えば、カプセル、カシェー剤（薬用オブラート）、ピル、タブレット、トローチ剤（風味付け基剤を使用し、通常スクロース及びアカシア若しくはトラガカント）、粉末、顆粒）、又は液体剤形（例えば、含水若しくは非含水液体の溶液若しくは懸濁液として、水中油型若しくは油中水滴型の液体エマルション若しくはマイクロエマルションとして、エリキシル剤若しくはシロップ剤として、トローチ剤として（ゼラチン及びグリセリン、又はスクロース及びアカシアのような不活性基剤を使用して）、及び／又は洗口液、等々）、とすることができ、これらそれぞれは、有効成分として所定量のＢＲＡＦ阻害剤を含有することができる。
【００７５】
口投与用の固体剤形（例えば、カプセル、タブレット、ピル、糖衣錠、粉末、顆粒等々）において、ＢＲＡＦ阻害剤は、クエン酸ナトリウム若しくは第二リン酸カルシウムのような１種類又は複数の医薬的に容認可能なキャリヤと混合することができ、及び／又は以下のうちの任意なもの、すなわち、（１）でんぷん、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、及び／又はケイ酸のような、増量剤若しくは体質顔料、（２）例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニル・ピロリドン、スクロース及び／又はアカシアのような、結合剤、（３）グリセロールのような、保湿剤、（４）寒天、炭酸カルシウム、ポテト若しくはタピオカのでんぷん、アルギン酸、若干のケイ酸塩、及び炭酸ナトリウムのような、崩壊剤、（５）パラフィンのような、溶液遅延剤、（６）第４級アンモニウム化合物のような、吸収促進剤、（７）例えば、アセチルアルコール及びグリセロールモノステアレートのような湿潤剤、（８）カオリン及びベントナイト粘土のような、吸収剤、（９）タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固形ポリエチレン・グリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、及びそれらの混合物のような潤滑剤、（１０）着色剤、のうち任意なものと混合することができる。カプセル、タブレット及びピルの場合、医薬組成物は、さらに、緩衝剤を含有することができる。類似タイプの固形組成物は、さらに、ラクトース又は乳糖のような賦形剤、並びに高分子量ポリエチレン・グリコールを用いて、軟質及び硬質の充填ゼラチンカプセルの増量剤として使用することができる。
【００７６】
液体剤形において、ＢＲＡＦ阻害剤は、従来一般的に使用された、例えば、薬剤を可溶化する水、若しくは他の溶剤及び乳化剤のような不活性希釈液と混合し、例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレン・グリコール、１，３−ブチレン・グリコール、オイル（とくに、綿実油、ピーナッツ油、コーン油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油、ゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレン・グリコール、ソルビタンの脂肪酸エステル、及びそれらの混合物と混合することができる。不活性希釈液の他に、経口組成物は、さらに、湿潤剤のようなアジュバント、乳化及び懸濁剤、甘味剤、香味剤、着色剤、芳香剤及び防腐剤を含有することができる。さらに、懸濁液は、例えば、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレン・ソルビトール及びソルビタンエステル、微結晶性セルロース、メタ水酸化アルミニウム、ベントナイト、寒天、及びトラガカント、並びにそれらの混合物を含有できる。
【００７７】
幾つかの実施形態において、ＢＲＡＦ阻害剤組成物における局所的、経皮的、表皮、又は真皮投与のための製剤としては、粉末、スプレー、軟膏、ペースト、クリーム、ローション、ジェル、溶液、パッチ、被覆材、及び吸入剤がある。有効成分は、無菌状態の下で医薬的に容認可能なキャリヤ、及び任意な防腐剤、緩衝剤、又は必要とされる推進剤と混合することができる。このような軟膏、ペースト、クリーム、及びジェルは、ＢＲＡＦ阻害剤組成物の他に、賦形剤、例えば、動物性及び植物性の油脂、オイル、ワックス、パラフィン、でんぷん、トラガカント、セルロース誘導体、ポリエチレン・グリコール、シリコーン、ベントナイト、ケイ酸、タルク及び酸化亜鉛、又はそれらの組合せを含有できる。粉末及びスプレーは、ＢＲＡＦ阻害剤組成物の他に、賦形剤、例えば、ラクトース、タルク、ケイ酸、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウム、及びポリアミド粉末、又はこれら物質の組合せを含有できる。スプレーは、付加的に普通の推進剤、例えば、クロロフルオロ炭化水素、ブタン及びプロパンのような揮発性の非置換炭化水素を含有することができる。
【００７８】
若干の態様において、ＢＲＡＦ阻害剤又はその医薬組成物はエアロゾルによって投与することができる。これは、ＢＲＡＦ阻害剤を含有する、水性エアロゾル、リポソーム調剤、固形粒子又は粉末を調合することによって達成する。非水性（例えば、フッ化炭素推進剤）懸濁液を使用できる。ソニック噴霧器も使用することができる。水性エアロゾルは、ＢＲＡＦ阻害剤の水溶液又は懸濁液を普通の医薬的に容認可能なキャリヤ及び安定剤とともに調製することによって形成する。キャリヤ及び安定剤としては、特別な化合物の要件に基づいて変化するが、一般的には非イオン界面活性剤（Ｔｗｅｅｎ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃｓ、又はポリエチレン・グリコール）、緩衝剤、塩、糖類、糖アルコールがある。エアロゾルは、概して等張液から調合する。
【００７９】
経皮パッチ又は創傷被覆材もＢＲＡＦ阻害剤又はその医薬組成物を創傷部位に送給するのに使用することができる。使用し得る創傷被覆材の例は先に詳述している。このような製剤は、適切な媒剤に薬剤を溶解させる又は分散させることによって形成することができる。吸収促進剤も使用して皮膚を通過するペプチド模倣薬の流束を増加させることができる。このような流束は、流速制御薄膜を設ける、又はポリマーマトリクス若しくはゲルにペプチド模倣薬を分散させることによって制御することができる。
【００８０】
幾つかの実施形態において、創傷を治療するのに使用されるＢＲＡＦ阻害剤又はその医薬組成物は創傷被覆材の一部とする。幾つかの態様において、このことは、ＢＲＡＦ阻害剤又はその医薬組成物を使用して、上述の創傷被覆材の全部又は一部にわたり被覆する又は含浸させることを意味する。この実施形態により使用し得る創傷被覆材としては、アルギン酸塩被覆材、抗菌性被覆材、包帯、バンドエイド（登録商標）、生合成被覆材、生物学的被覆材、コラーゲン被覆材、複合被覆材、圧迫被覆材、接触層被覆材、発泡体被覆材、ガーゼ被覆材、ハイドロコロイド被覆材、ヒドロゲル被覆材、皮膚シーラント若しくは液状皮膚被覆材、特殊吸収性被覆材、透明フィルム被覆材、又は創傷充填剤がある。
【００８１】
本明細書に使用する用語「有効量」とは、所望効果を生ずるＢＲＡＦ阻害剤の量を意味する。例えば、細胞集団をインビトロ（例えば、細胞培養）内での薬効を研究するため、又は生体外若しくはインビトロで所望の治療効果を生ずるため有効量のＢＲＡＦ阻害剤に接触させることができる。ＢＲＡＦ阻害剤の有効量を使用して、被験体における治療効果を生ぜしめる、例えば、標的条件を治療する、その条件に関連する症状を緩和する、又は所望の生理的効果を生ずるようにすることができる。例えば、ＢＲＡＦ阻害剤の有効量は創傷治癒を促進する量とすることができる。このような場合、ＢＲＡＦ阻害剤の有効量は、「治療に効果的な量」、「治療に効果的な濃度」、又は「治療に効果的な用量」である。この精密有効量又は治療に効果的な量は、或る被験体若しくは細胞集団における治療の有効性の点で最も効果的な結果を生み出すＢＲＡＦ阻害剤の量である。この量は様々な要因によって変動し、これら要因としては、以下のものに限定しないが、ＢＲＡＦ阻害剤の特性（活量、薬物動態、薬力学、及び生体利用効率を含む）、被験体の生理学的条件（年齢、性別、創傷タイプ及び状態、全身的な身体状態、所与用量に対する反応性、及び薬剤タイプ）若しくは細胞、製剤における医薬的に容認可能なキャリヤの性質、及び投与ルート。さらに、有効量又は治療有効量は、ＢＲＡＦ阻害剤を単独で投与するか、又は複合ドラッグ治療若しくは他の治療方法あるいはモダリティとの併用で投与するかに基づいて変化し得る。臨床及び薬理学における当業者であれば、日常実験により、すなわち、ＢＲＡＦ阻害剤の投与に反応する細胞又は被験体をモニタリングし、またこれに応じて用量を調整することによって、有効量又は治療有効量を決定することができる。参考まで追加資料として、Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st Edition, Univ. of Sciences in Philadelphia (USIP), Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, PA, 2005を参照されたく、参照によってその全体がそのまま本明細書に組み入れられるものとする。
【００８２】
創傷の「治療する」又は「処置」は、急性的若しくは慢性的に創傷、障害若しくは疾患した組織の構造及び機能を、治癒、保護、修復、又は回復するのに役立つ何らかの薬剤又は被覆材を使用、病状阻止、病状発症又は発現速度を遅延、創傷による二次的疾患発現リスクの防止若しくは減少、創傷部位に存在する感染症の抗菌的殺菌、創傷に関連する痛み及び他の症状の防止若しくは遅延、創傷に関連する痛み及び他の症状の軽減若しくは終結、創傷の完全若しくは部分的な退縮、又はそれらの組合せを意味するものとすることができる。
【００８３】
幾つかの実施形態において、上述のＢＲＡＦ阻害剤又はその医薬組成物は、１種類又は複数の付加的治療剤と組み合せて、又は関連させて投与若しくは送給することができる。ＢＲＡＦ阻害剤及び治療剤は、互いに付加的又は相乗的に作用することができる。本明細書に使用する用語「組み合わせて」又は「関連させて」は、同一被験体における同一創傷を、２種類以上の薬剤、被覆材、ドラッグ、治療レジメ、治療モダリティ、又はそれらの任意な順序及び任意な回数の適用での組合せを使用して治療する過程を意味する。このことは、同時投与、並びに数日にも及ぶ可能性を含めて一時的な間隔をおいた順序での投与を含む。２種類以上の薬剤、被覆材、ドラッグ、治療レジメ、治療モダリティ、又はそれらの組合せは、単一適用又は投与の一部とする、又は別個に適用又は投与することができる。例えば、ＢＲＡＦ阻害剤は、医薬組成物又は製剤の成分として投与することができる。製剤のこの組成物は、単独局所的組成物として適用すべき１種類以上の付加的治療剤を含有することができる、又は代案として、この組成物は、１種類以上の付加的治療剤を含有する二次的医薬組成物又は製剤で創傷に適用することができる。その医薬組成物又は製剤を適用した後に、創傷被覆材を局所的組成物に適用することができる。他の実施例において、ＢＲＡＦ阻害剤は、単独で又は医薬組成物の一部として創傷被覆材に含浸させるのに使用することができる。組合せ治療は、さらに、薬剤、ドラッグ、治療レジメ又は治療モダリティのうち任意の１つ若しくは複数の単一回より多い回数の投与もあり得る。さらに、２種類以上の薬剤、被覆材、ドラッグ、治療レジメ、治療モダリティ又はそれらの組合せの投与は、同一又は異なる投与ルートによって行うことができる。
【００８４】
ＢＲＡＦ阻害剤及びその医薬組成物と組み合わせて又は関連させて投与又は送給し得る適当な治療剤としては、以下のものに限定しないが、成長因子（例えば、組み換え血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ；Ｒｅｇｒａｎｅｘ（登録商標）／ベカプレルミンのゲル））、魚表皮に基づくＭａｒｉＧｅｎオメガ３組織−再生技術、糖類、制酸薬、ビタミンＡ、ビタミンＤ、抗菌剤及び消毒剤（例えば、酢酸、酸性化亜硝酸塩、アクチコート７、アクアセル−Ａｇ、抗微生物ペプチド、バシトラシン、ＢＣＴＰナノエマルション、カデキソマーヨウ素、ヨウ素、セトリミド、クロルヘキシジン、精油、フラマセリウム（ｆｌａｍｍａｃｅｒｉｕｍ）、ＦＰＱＣ、フシジン酸、ゲンタマイシン、グルコン酸塩、ヘキサクロロフェン、蜂蜜、ヨウ素化合物、ヨードチンキ、リポソーム型ヨウ素、酢酸マフェニド、メトロニダゾール、ムピロシン、ムピロシンカルシウム、硫酸ネオマイシン、ネオスポリン、ニトロフラゾン、ナイスタチン、ファージ療法、パパイヤ、プロバイオティクス、ポリミキシンＢ、ポビドンヨウ素、レタパムリン、次亜塩素酸ナトリウム、過酸化水素、銀、ＳＩＬＶＥＲＣＥＬ、銀製羊膜、硝酸銀、銀製包帯、銀発泡体、銀スルファジアジン、スルファセタミドＮａ＋、及び超酸化水）、並びに、発赤剤（例えば、イブプロフェン、ジクロフェナク、フェルビナク、ケトプロフェン、ピロキシカム、ナプロキセン、フルビプロフェン）、ヒドロコルチゾン、塩化ベンザルコニウム、ベンジダミン、ムコ多糖多硫化物、サリチルアミド、フェノール、冷却スプレー、カラミン、及び局所麻酔（例えば、リドカイン、リグノカイン、プリロカイン、ベンゾカイン、プラモキシン、ジブカイン）のような、鎮痛剤がある。
【００８５】
以下の実施例は、本発明の様々な実施形態を説明しようとするものである。したがって、本明細書で説明した特定の実施形態は、本発明を限定するものと解すべきではない。当業者には、様々な均等物、改変及び変更を特許請求の範囲から逸脱することなく行うことができること、また均等物実施形態も本発明に含まれるべきものであること明らかであろう。例えば、以下の実施例はベムラフェニブ処理で行った実験を企図するものであるが、当業者であれば、同様の結果を生ずるためベムラフェニブに代えて他のＢＲＡＦ阻害剤を使用できることは理解できるであろう。さらに、本明細書に引用したすべての参照文献は、参照により記載どおりに本明細書に組み入れられるものとする。
【実施例】
【００８６】
ＢＲＡＦ阻害剤は、ＢＲＡＦＶ６００Ｅ突然変異転移性黒色腫患者の治療に高い活性を有し、その主な副作用は、角化亢進から侵襲性浸潤性扁平上皮がんに至るまでの一連の皮膚増殖性変化が現れることである。これら副作用における病原性根拠は、ＭＡＰＫ経路の逆説的ＭＡＰＫ活性化が介在し、この逆説的ＭＡＰＫ活性化において、ＢＲＡＦ阻害剤は、ＢＲＡＦが野生型である細胞において、ＭＡＰＫ経路シグナル伝達を増加させる。以下に示す試験において、この現象を、皮膚細胞の増殖の亢進を誘導することによって皮膚創傷治癒を促進するために利用した。ＢＲＡＦ阻害剤であるベムラフェニブは、擦過傷分析において、ヒトのケラチン生成細胞の増殖及び遊走を促進した。この増殖及び遊走の促進は、ＥＲＫリン酸化反応の亢進及び細胞周期の進行によって介在された。遺伝子発現プロファイリングによって評価したように、創傷治癒のマウスモデルにおいて局所的にベムラフェニブを適用すると、逆説的ＭＡＰＫ活性化によって創傷の抗張力が改善した。このように、局所的ＢＲＡＦ阻害剤は、皮膚創傷治癒を促進する用途とすることができる。
【００８７】
［実施例１：ＢＲＡＦ阻害剤はインビトロ擦過傷部位を被蓋するケラチン生成細胞の再生を促進する］
９６ウェル−プレートで培養したヒト成人上皮ケラチン生成細胞（ＨＥＫａ）に擦過傷分析を行った。この場合、ケラチン生成細胞増殖が擦過傷を再生または被蓋をする。ＢＲＡＦ阻害剤であるベムラフェニブの有り又は無しの下での複製培養物を、自動化顕微鏡アナライザとともにインキュベータ内に配置し、原初擦過傷における有核細胞数を経時的に記録した。ベムラフェニブの存在は、原初擦過傷の被蓋において統計学的に有意な改善を誘発し、この改善は、研究開始後６時間、８時間、１２時間で明確に明らかとなった（図２Ａ及び図３Ａ参照）。ベムラフェニブ存在下で培養したＨＥＫａの増殖有利性は、各ウェルの中央部に播種器ストッパを有する９６ウェル−プレートを使用して明らかとなり、ベムラフェニブで処理した増殖ケラチン生成細胞が２４時間経過後にウェルの中心を被蓋する一方で、対照例で処理したウェルは中央に細胞が欠けている状態を継続した。亢進した遊走は、トラメチニブ、ＭＥＫ阻害剤をベムラフェニブで処理した培養に添加することによって阻害した（図２Ｂ「ＴＲＡＭＥ」参照）。さらに、３次元軟寒天コロニー分析におけるＨＥＫａコロニーは、ベムラフェニブに対する曝露の際に増殖する一方で、ＢＲＡＦＶ６００Ｅ突然変異黒色腫株Ｍ２４９はコロニーの減少があった（図２Ｃ及び図３Ｂ）。ＨＥＫａコロニーは個数が増加するだけでなく、平均スポットサイズも大幅に増加した（ｔ検定によりｐ＝０．００７、図２Ｄ参照）。トラメチニブの添加により、ベムラフェニブによって誘発されたＨＥＫａコロニーの個数及びサイズが減少した（図２Ｅ参照）。これら培養を使用して、逆説的ＭＡＰＫ活性化及び細胞増殖をウエスタンブロット分析（図２Ｆ〜２Ｇ参照）及びリン酸基フローサイトメトリー解析（図２Ｈ及び図４Ａ〜４Ｂ参照）によって分析した。双方の分析によって、ベムラフェニブは、ＢＲＡＦＶ６００Ｅ突然変異転移性ヒト黒色腫細胞株Ｍ２４９における予期したｐＥＲＫ減少、及び細胞周期抑止を誘導し、一方で、ＨＥＫａ細胞においてｐＥＲＫの逆説的増加及び細胞周期進行があった（ｔ検定によるｐ＝０．０２２５）。
【００８８】
［実施例２：ＢＲＡＦ阻害剤は上皮細胞の逆説的増殖に起因する皮膚創傷の治癒を促進する］
Ｃ３Ｈマウスにおける制御した創傷治癒分析において、２．５ｃｍ背中皮膚創傷を生じさせ、また媒剤対照例（ＤＭＳＯ／生理食塩水）又は媒剤中の２ｍＭのベムラフェニブ懸濁液（この薬剤の臨床等級ピルを粉砕することによって得た）のいずれかを充填した。皮膚創傷は０日目に外科クリップで留め、またマウスを１４日目まで追跡調査した（図５Ａ〜５Ｂ参照）。この時間経過にわたりベムラフェニブ懸濁液又は媒剤対照例を、試験グループの２４匹マウス又は対照グループの２４匹マウスにそれぞれ１日おきに、マウス毎に合計７回投与を局所的に適用した。１４日目にマウスを安楽死させ、また創傷を含む皮膚を切除し、２０ｍｍストリップの各ストリップに水平創傷サンプルを取り付けた。創傷抗張力（ＷＴＳ：ｗｏｕｎｄ  ｔｅｎｓｉｌｅ  ｓｔｒｅｎｇｔｈ）は、ストリップを伸張させ、ＷＴＳをグラム重量（ｇｆ）で記録する張力計を使用して分析した。３つの独立した複製実験において、ベムラフェニブで処理したマウスは、生理食塩水対照例と比較して、統計学的に有意なＷＴＳ向上があった（ｔ検定による５２．６％、３２．９％、及び４２．８％、ｔ検定によるｐ＜０．０００１、図５Ｃ、実験例＃１〜３参照）。個別皮膚創傷分析において、ベムラフェニブで処理したＷＴＳの３７％向上（ｔ検定によるｐ＝０．０１ｖｓ．媒剤対照例）は、１ｍｇ／ｋｇのトラメチニブ添加によって部分的に逆転した（図５Ｂ、「ＴＲＡＭＥ」、「ＶＥＭ＋ＴＲＡＭＥ」参照）。これら創傷に関して、ＷＴＳは、媒剤対照例と比較して２９％減少した（ｔ検定によるｐ＜０．０００１、図５Ｃ、実験例＃４参照）。
【００８９】
創傷及びそれらの周辺の面積を、２名の病理学者が組織学的にＨ＆Ｅ染色によって分析し、治癒している創傷の両側サイドにおける表皮過形成の範囲を処理後１日目、２日目及び６日目に測定した（図６Ａ及び６Ｂ参照）。処理後１日目において、創傷に隣接する表皮炎症は、ベムラフェニブの存在下ではより広範囲に及び、２日目に強力で迅速な再上皮形成が始まった。６日目において、表面完全性がベムラフェニブ処理グループで再構築されるとともに、媒体、トラメチニブ又は組合せで処理したマウスでは修復性線維症の証左は観察されなかった。トラメチニブで処理したマウス、又はベムラフェニブ及びトラメチニブで処理したマウスには治癒又は再上皮形成の兆候は観察されず、また、とくにトラメチニブ単独で処理したマウスには創傷に潰瘍を生じた（図６Ａ参照）。１日目及び２日目には、ベムラフェニブグループからの皮膚は、他の処理グループよりも一層長い距離にわたり表皮過形成を示す傾向があるとともに（１ウェイＡＮＯＶＡにより、それぞれｐ＝０．０１３２及びｐ＝０．０３３８）、６日目にはベムラフェニブグループは、より迅速な創傷消散に一致して表皮過形成がより少なかった（１ウェイＡＮＯＶＡによりｐ＝０．００１２；図４Ｂ参照）。６日目には、対照例の創傷の６．７９％が再上皮形成を示した一方で、ベムラフェニブ処理創傷の１００％が完全に再上皮形成を示した。トラメチニブ単独で処理したグループ、並びにベムラフェニブ及びトラメチニブの組合せで処理したグループには何らの再上皮形成も観察されなかった。
【００９０】
［実施例３：ＢＲＡＦ阻害剤はＭＡＰＫ及び創傷治癒経路のアウトプットを促進する］
ベムラフェニブ又は媒体のいずれかで処理したマウスから得た皮膚サンプルを、ＲＮＡ−Ｓｅｑ解析によってＭＡＰＫ及び創傷治癒経路アウトプットにおける変化を分析した。ＭＡＰＫの遺伝子アウトプットは、突然変異したＢＲＡＦＶ６００Ｅの下流の発がん性ＭＡＰＫシグナル伝達をＢＲＡＦ阻害剤を用いてブロックすることによって特異的に変調させた転写産物に関する公開データ、又は、公開された皮膚創傷治癒遺伝子痕跡（シグネチャ）と比較した。図７に遺伝子発現色分け図（ヒートマップ）で示したように、２日目（「Ｄ２」）にはベムラフェニブ処理によるＢＲＡＦ痕跡の僅かな増加があったが、創傷治癒痕跡にはほとんど変化がなかった。６日目（「Ｄ６」）には、それぞれに対応する対照例と比較して、ベムラフェニブ処理したサンプルにおいては、双方の痕跡が大幅に富化した。ＢＲＡＦ痕跡及び創傷治癒痕跡の双方におけるより顕著な減少は、ベムラフェニブ処理した創傷でより迅速な創傷治癒と調和して観測された。遺伝子セット差異分析（ＧＶＳＡ）による痕跡富化スコアは同一傾向を示した。
【００９１】
総括すると、上述の実施例１〜３に記載の研究は、ＢＲＡＦ阻害剤による逆説的ＭＡＰＫ活性化の現象は、皮膚創傷治癒を亢進するのに活用できることを実証している。このことは、前がん性又は悪性が臨床的問題とならない擦り傷、外科手術切開、及び糖尿病性皮膚潰瘍のような皮膚創傷の治癒を促進するのに使用できる。 
【図１】
2017514866.tif 000006
【図２−１】
2017514866.tif 000007
【図２−２】
2017514866.tif 000008
【図２−３】
2017514866.tif 000009
【図２−４】
2017514866.tif 000010
【図３】
2017514866.tif 000011
【図４】
2017514866.tif 000012
【図５−１】
2017514866.tif 000013
【図５−２】
2017514866.tif 000014
【図６】
2017514866.tif 000015
【図７】
2017514866.tif 000016
【国際調査報告】
2017514866.tif 000017
2017514866.tif 000018
2017514866.tif 000019
2017514866.tif 000020