(57)【要約】  本発明は、サンプルを直接取り扱うことがなく、且つサンプルの調製の終了時に可撓性容器を再開封することがない、可撓性容器でのサンプルの調製及び分析を含む分析方法に関し、また、この方法の実施を可能にする容器及びキットにも関する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
サンプルの分析方法であって：
ａ）前記サンプル及び培地の可撓性容器への導入；
ｂ）均質化された混合物を得るための前記サンプル及び前記培地の均質化；
ｃ）前記均質化された混合物の増菌；及び
ｄ）前記均質化された混合物の分析システムによる分析
を含む、方法において、
工程ａ）〜ｃ）が、単一容器で行われ；
前記可撓性容器が、工程ａ及びｂ）のいずれかの終了時に密閉され；
モジュールが、工程ｃ）の開始時、その間、又はその終了時に前記可撓性容器に接続され；且つ
工程ｃ）及びｄ）並びに前記モジュールの前記可撓性容器への前記接続が、前記容器の再開封を必要とすることなく行われることを特徴とする、方法。
【請求項２】
前記分析が微生物学的分析であることを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記可撓性容器（１００）が、均質化ゾーン（１０５）、開口部（１０１）、及びソケット（１０６）を備え、前記ソケット（１０６）が、前記均質化ゾーン（１０５）の外部に位置し；
前記モジュール（２００）が、前記可撓性容器の前記ソケット（１０６）に結合可能であり、且つ前記ソケット（１０６）に接続されるように意図されているソケット（２０１）を含むことを特徴とする、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記可撓性容器（１００）の構造の変更が、前記モジュール（２００）の前記ソケット（２０１）に接続されるにように意図されている前記ソケット（１０６）に前記均質化された混合物を接触させるために、前記可撓性容器（１００）の密閉後且つ工程ｄ）の前に行われることを特徴とする、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記可撓性容器の前記ソケット（１０６）が、前記ソケット（１０６）が接続されていないときにはシールされ、且つ前記ソケット（１０６）が前記モジュール（２０１）の前記ソケットに接続されているときには、前記均質化された混合物が通過することを可能にすることを特徴とする、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
前記モジュール（２００）が前記分析システムを含むことを特徴とする、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記分析システムが、細菌及びタンパク質から選択される少なくとも１つの標的分析物の選択的な検出を可能にする検出手段（２０２）を含むことを特徴とする、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記検出手段（２０２）が、好ましくは、抗体、アプタマー、及びファージタンパク質、オリゴ糖、又は小有機分子から選択される特定のリガンドで官能化される特定の光学バイオセンサー又は電気機械バイオセンサーであることを特徴とする、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記サンプルが固体又は半固体であることを特徴とする、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
分析キットであって、
−  均質化ゾーン（１０５）、開口部（１０１）、及びソケット（１０６）を備える少なくとも１つ可撓性容器（１００）であって、前記ソケットが、前記均質化ゾーン（１０５）の外部に位置する、少なくとも１つ可撓性容器（１００）；
−  前記可撓性容器の前記ソケット（１０６）に結合可能であり、且つ前記ソケット（１０６）に接続されるように意図されているソケット（２０１）を含むモジュール（２００）
を含む、分析キット。
【請求項１１】
前記可撓性容器の前記ソケット（１０６）が、前記ソケット（１０６）が接続されていないときにはシールされ、且つ前記ソケット（１０６）が前記モジュール（２０１）の前記ソケットに接続されているときには、前記可撓性容器（１００）に含まれる液体が通過することを可能にすることを特徴とする、請求項１０に記載のキット。
【請求項１２】
前記モジュール（２００）が分析システムを含むことを特徴とする、請求項１０又は１１に記載のキット。
【請求項１３】
前記分析システムが、細菌並びにまたタンパク質、多糖、脂肪酸、及びそれらを構成する又はそれらが産生する核酸から選択される少なくとも１つの標的分析物の選択的な検出を可能にする検出手段（２０２）を含むことを特徴とする、請求項１２に記載のキット。
【請求項１４】
前記検出手段（２０２）が、好ましくは、抗体、アプタマー、及びファージタンパク質、オリゴ糖、又は小有機分子から選択される特定のリガンドで官能化される特定の光学バイオセンサー又は電気機械バイオセンサーであることを特徴とする、請求項１３に記載のキット。
【請求項１５】
均質化ゾーン（１０５）、開口部（１０１）、及び１つ以上のソケット（１０６）を備え、前記ソケット（１０６）が、前記可撓性容器（１００）の前記均質化ゾーン（１０５）の外部に位置する、可撓性容器において、前記ソケット（１０６）が、前記ソケット（１０６）が接続されていないときにはシールされることを特徴とする、可撓性容器。
【請求項１６】
高さの幅に対する比が１〜２．５である、実質的に長方形の形状を有することを特徴とする、請求項１５に記載の可撓性容器。
【請求項１７】
前記均質化ゾーン（１０５）が、前記容器（１００）の表面積の３０％〜９０％を占めることを特徴とする、請求項１５又は１６に記載の可撓性容器。
【請求項１８】
フィルター（１０８）を備えることを特徴とする、請求項１５〜１７のいずれか一項に記載の可撓性容器。
【請求項１９】
前記ソケット（１０５）が、前記可撓性容器（１００）の把持を可能にする固体又は半固体本体を備えることを特徴とする、請求項１５〜１８のいずれか一項に記載の可撓性容器。
【請求項２０】
前記可撓性容器の取り扱いが、自動装置によって行われることを特徴とする、請求項１５〜１９のいずれか一項に記載の少なくとも１つの可撓性容器の分析方法での使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、サンプルを直接取り扱うことがなく、且つサンプルの調製の終了時に可撓性容器を再開封することがない、可撓性容器内でのサンプルの調製及び分析を含む分析方法に関し、また、この方法の実施を可能にする容器及びキットにも関する。
【背景技術】
【０００２】
健康上の安全は、重要な社会的課題である。健康上の安全は、定期的且つ標準的であり、多くの場合義務的な微生物学的試験によってある程度保証される。健康上の安全は、様々な分野、例えば、食品加工、環境、又は保健に関連する。食品加工では、例えば、食品及びその環境が、生産の様々な段階で微生物学的試験を受ける。食中毒の主な原因の中で、病原微生物の例として、サルモネラ菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）、リステリア菌（Ｌｉｓｔｅｒｉａ）、さらには腸管出血性大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）株について言及することができる。
【０００３】
特に食品加工業界で行われる分析の目的は、可能な限り迅速且つ十分に安全に、サンプル中の病原体の存在／非存在及び／又は量についての情報を得ることにある。
【０００４】
微生物汚染の性質を区別せずにサンプル中の微生物の存在／非存在を検出することを可能にする分析の「一般的な」方法が存在する（例えば、米国特許第５，７９５，７７３号明細書又は国際公開第２０１０／０１７５１９号パンフレットを参照されたい）。この場合、サンプルの無菌状態又は非無菌状態の検出が問題である。このタイプの一般的な分析は、例えば、ＵＨＴ乳の分析のために食品加工業界で使用され、且つ健常人では無菌状態である血液、脳脊髄液、又は尿のサンプルの分析、他には環境の分野でも一般的に使用されている。
【０００５】
他方、他のサンプル、例えば、食品サンプルなどの場合には、分析するべきサンプルは、多少なりとも微生物フローラを自然に含み得る。これは、特に、殆どの変換又は非変換乳製品の場合に当てはまる。従って、このような製品の安全性を検証するために、全微生物フローラ内の病原細菌種の存在について具体的に研究する必要がある。例えば、リステリア菌（Ｌｉｓｔｅｒｉａ）は、チーズでよく見られ、サルモネラ菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）は、家禽肉でよく見られる。
【０００６】
サンプル、例えば、食品中の対象となる種類の微生物の濃度を評価する必要があり得るため、量的側面も重要である。これらのデータは、病原体によって異なる（欧州連合の官報の規則Ｎｏ．２０７３／２００５を参照されたい）。
【０００７】
サンプル中の病原細菌についてのこの研究を行うためには、通常、容器内でサンプルを適切な液体培地に分散及び／又は希釈（一般的には１０分の１に）することが必要である。従って、サンプルを秤量し、一定量の適切な濃縮液を添加し、次いで、全混合物を均質化する。この均質化は、培地中での食品マトリックスの分散及び求められる微生物の均一な分散を保証するために必要である。この工程は、一般に、均質化を可能にする可撓性容器（バッグ）による手動又は機械的な動作によって行われる。これらの工程（秤量、希釈、均質化）の全ては、「サンプルの調製」を意味する。次いで、得られた混合物を、所与の温度（通常は３７℃）で所与の期間（通常は一晩）インキュベートして求められる微生物を増幅させる。この段階は、「増菌段階」と呼ばれる。この増菌段階の終了時に、サンプルが、一般的には、これに続く容器外のサンプルの分析を行うために容器を開封して取り出される。この分析は、例えば、病原細菌の検出であり得る。固形又は半固形のサンプルの場合には、直接バッグに入れられることもあるフィルターを使用することが有用であり得、分析又は分析を可能にするサンプリングを妨げ得る固形粒子を保持することが可能であり、同時に微生物の通過を可能にする。
【０００８】
従って、結果の取得は、一連の時間及び手間のかかる作業及び操作を必要とし、且つ起こり得るリスク（例えば、操作者、作業環境、又はサンプルの汚染）の源又は誤差の源である。さらに、これらの分析の結果を可能な限り早急に得ることができることは製造者にとって有利である。しかしながら、求められる微生物の検出は、増菌期間の終了時に行われるため、結果は、この増菌段階の終了時及びこれに続く検出段階の終了時にしか得ることができない。
【０００９】
仏国特許第２，６９１，３７４号明細書に、変形可能な材料１及び２から形成された２つの壁並びにフィルター３からなり、３つの縁に沿ってシールされ、バッグを形成するために第４の縁が開いたままである、濾過バッグが記載されている。このフィルターは、粗混合液を含む１つの区画と、濾液を含むもう１つの区画との２つの区画を形成するために２つの壁間にシールされている。このバッグは、サンプルを取り出して分析を行うために開封する必要がある。この作業は、自動にするのが困難であり、且つサンプル及び取扱者の汚染のリスクを高める。
【００１０】
仏国特許第２，９３８，４４９号明細書に、濾液を濾過バッグの開口部側に移動させて濾液の単純なサンプリングを可能にするパイプを有する微生物学用の濾過バッグが示されている。この装置では、バッグは、密閉されず、濾液がパイプを移動できるようにするために開いたままにしなければならない。加えて、このパイプでは、バッグの内容物を容易にディスペンスすること、又はセンサー若しくは自動サンプリングシステムを漏れないようにこのパイプに接続することが不可能である。
【００１１】
米国特許第５，２６６，４８６号明細書に、サンプル、例えば、血液サンプル中に存在する微生物を、これらの微生物の成長から生じる代謝物を検出することによって検出するための容器が示されている。この容器は、任意選択的にこの容器を開封することなく、細菌の存在を間接的に検出することを可能にするが、この容器を固体にする必要があるため、分析するべきサンプルの機械的均質化が不可能である。従って、これにより、この容器の使用が液体サンプルに限定される。
【００１２】
国際公開第２００４／０９２４０１号パンフレットに、サンプル中に存在する細菌の検出の方法、さらには操作者によって一切のサンプリングが行われることなく、増菌段階中にサンプル中に存在する細菌を特異的に検出することができる検出装置も記載されている。しかしながら、この方法にはいくつかの欠点がある：この方法は、機械的均質化装置に適していない検出装置をバッグ内に導入するために、均質化後にこのバッグを開封する必要がある。さらに、この方法は、装置の２つの区画で異なるべき温度の制御を必要とする。
【００１３】
国際公開第２０１２／００４５４０号パンフレットに、増菌段階中のサンプル中の微生物の特異的な検出の方法が記載されている。この方法では、バイオセンサーが、可撓性プラスチック容器内でシールされるか、又は培地中に浸漬される。センサーは、サンプルの高さでシールされるため、センサーが損傷するリスク又は均質化が損なわれるリスクなしに、バッグの内容物を均質化することは不可能である。国際公開第２０１２／００４５４０号パンフレットで提案されている第２の代替案では、バイオセンサーは、バッグ内に封入しなければならない。これにより、特に、バッグ内のバイオセンサーの位置が再現可能でないため、外部との通信に制約が生じる。
【００１４】
国際公開第２０１１／１３３６９４号パンフレットに、アプタマーを用いることによってサルモネラ・エンテリカ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｅｎｔｅｒｉｃａ）の検出のための電気化学的な方法及び専用の装置も記載されている。しかしながら、この装置は、剛性サンプル容器を使用し、特に前記サンプルが固体又は半固体の場合にはこのサンプルの従来の均質化、及び分析するべき懸濁液の容器への移送を行うために操作者の介入も必要とする。従って、サンプルの均質化の終了時に容器を開封することなく、連続した調製及び増菌工程を同じ容器で行うことは不可能である。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
従って、容易に自動化することができ、且つ汚染のリスクを低減する、固体又は半固体のサンプルを調製、輸送、希釈、均質化、及び分析するためのプロセスが存在しない。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本出願人は、これまでに知られている方法の欠点の解消を可能にするサンプルの分析方法を開発した。従って、本発明は、サンプルの分析方法、可撓性容器、及び分析キットにも関する。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１ａ−１ｅ】本発明による可撓性容器の様々な実施形態を示す。
【図２ａ−２ｅ】本発明による方法の実施を例示する。
【図３】本発明による方法の実施を例示する。
【図４】本発明による方法の実施を例示する。
【図５ａ−５ｃ】それぞれサルモネラ属菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｓｐｐ．）を含む容器Ａ、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）Ｏ１５７：Ｈ７を含む容器Ｂ、及び汚染物質を含まない容器Ｃに含められた牛ひき肉の３つのサンプルにおけるサルモネラ属菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｓｐｐ）及び大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）Ｏ１５７：Ｈ７についての同時研究で得られた結果を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
本発明によるサンプルの分析方法は、
ａ）サンプル及び培地の可撓性容器への導入；
ｂ）均質化された混合物を得るためのサンプル及び培地の均質化；
ｃ）均質化された混合物の増菌；及び
ｄ）均質化された混合物の分析システムによる分析
を含み、
工程ａ）〜ｃ）が、単一容器で行われ；
可撓性容器が、工程ａ）及びｂ）のいずれかの終了時に密閉され；
モジュールが、工程ｃ）の開始時、その間、又はその終了時に可撓性容器に接続され；且つ
工程ｃ）及びｄ）並びにモジュールの可撓性容器への接続が、容器の再開封を必要とすることなく行われることを特徴とする。
【００１９】
本発明によると、均質化は、容器及び／又は内容物の単純な撹拌による均質化だけではない。「均質化」という語は、容器の機械的な変形による内容物の均質化も意味するものとする。容器の機械的な変形によるこのような均質化は、内容物が、固体、半固体、又はペースト状の場合の圧壊、粉砕、混練、及び混合動作だけではなく、液体又は懸濁液の混合作業も包含する。
【００２０】
一実施形態によると、いくつかの容器が、分析方法中にモジュールに接続され、従って、各容器に含まれる混合物の同時分析が可能となる。
【００２１】
この方法は、増菌工程後の容器の再開封を必要とすることなく、サンプルの均質化を含む全ての工程を単一容器で行うという利点を有する。従って、操作者による介入の回数及び増菌された後の操作者の均質化された混合物への曝露を低減することができ、これにより、汚染のリスクが限定され、しかもプロセスをより容易に自動化することが可能になる。この方法はまた、増菌工程が開始されると容器を再開封する必要がないため、容易に自動化することができる。従って、バッグを自動装置で容易に取り扱うこと、並びに収集及び／又は分析作業を行うことが可能となるが、これらは現在、容器を再開封する必要があるため本質的に手動で行われている。
【００２２】
サンプルの調製の工程ａ）では、所与の分子量を有する分析するべきサンプルが、可撓性容器に導入される。
【００２３】
分析するべきサンプルの性質及び濃度は、特に制限されない。サンプルは、液体であってもよく、又は少なくとも部分的にペースト状若しくは固体であってもよい。サンプルは、例えば、食品加工製品、例えば、肉ベースの製品、魚ベースの製品、乳製品、卵ベースの製品、又は植物製品に由来し得る。サンプルはまた、環境標本（生産水、作業表面）又は一次生産サンプル（動物の便、ブーツ抜き取り検体（ｂｏｏｔ  ｓｗａｂ）、孵化場からの水）であり得る。サンプルはまた、ヒト標本（血液、尿、便、肺痰など）に由来してもよく、又は化粧品及び製薬産業からのサンプルでもよい。培地がサンプルに加えられる。培地は、標的分析物の成長を促進するために最も適切な培地から選択される。非限定的な例として、培地は、緩衝ペプトン水（ＢＰＷ）、トリプシン大豆カゼインブロス（ＴＳＢ）、脳−心臓注入ブロス（ＢＨＩ）、Ｄｅｍｉ−Ｆｒａｓｅｒブロス、及びＢｏｌｔｏｎブロスから選択することができる。
【００２４】
可撓性容器は、特に機械的均質化に適した任意の可撓性容器であり得る。本発明のために、「可撓性容器」又は「バッグ」という語は、特に、可撓性材料、例えば、可撓性プラスチックから形成され、且つ上部が開く容器として定義される。典型的には、本発明の容器は、２つの多角形、好ましくは本質的に三角形のプラスチックシートを含む。前記シートは、それらの縁部で互いにシールされ、シートの１つの縁部は、開口部を形成するために自由である。開口部を有する容器の縁部は、容器の上部として定義される。開口部の反対側の縁部は、容器の底部として定義される。残りの縁部は、容器の横縁部として定義される。残りの説明として、容器の上部は、開口部側に位置する容器の部分を指し、容器の下部は、容器の底部側に位置する容器の部分を指す。容器の底部は、ベローズを形成し得る。しかしながら、理想的な均質化を可能にするために、容器の底部は、ベローズを有しておらず、２つのプラスチックシートの単純なシーリングから形成されている。本発明の容器は、例えば、Ｓｔｏｍａｃｈｅｒ（登録商標）バッグタイプの均質化装置に適した均質化バッグタイプの容器である。容器は、好ましくは、１〜２．５の高さの幅に対する比率を有する。例えば、容器の寸法は、７〜１２ｃｍの幅に対して１２〜１８ｃｍの高さ（１５×１０±２ｃｍ）、１４〜２４ｃｍの幅に対して２５〜３５ｃｍの高さ（３０×１９±５ｃｍ）、及び２８〜４８ｃｍの幅に対して４８〜６８ｃｍの高さ（５８×３８±１０ｃｍ）から選択される。
【００２５】
容器の開口部は、分析するべきサンプルの容器への導入を可能にする十分な大きさにしなければならない。容器の開口部は、可撓性容器が液体、半固体、又は固体材料で満たすことが可能でなければならない。この開口部は、分析するべきサンプルのサイズによって、２ｃｍ超、さらには５ｃｍ超、１０ｃｍ超、又は１５ｃｍ超の周囲を有し得る。この開口部は、容器の上側の全て又は一部に配置することができる。
【００２６】
さらに、可撓性容器は、増菌工程の終了時に容器の再開封を必要とすることなく、モジュールに接続することができなければならない。「容器を再開封する」という語は、容器の内容物の外部環境への曝露となる容器に対する作業を意味するものとする。「モジュール」という語は、後の分析のために可撓性容器又は収集システムに直接接続することができる分析システムを意味するものとする。
【００２７】
従って、容器はソケットを含む。本発明の目的においては、「ソケット」という語は、シールされ、好ましくは可逆的に容器を分析システムに物理的に連結することを可能にする接続要素を有する剛性機械的手段を意味するものとする。好ましくは、ソケットは、ソケットが接続されていないときにはシールされた状態であり、モジュールに接続されると、均質化された混合物が通過できる通過状態である。より優先的には、ソケットは、可逆的な接続を可能にする、即ち、モジュールが取り外されると再びシールされる。従って、例えば、確認の測定若しくは別の分析を行うため、又は汚染のリスクを回避しながらサンプルを取り出すためにモジュールを交換することが可能である。より具体的には、容器のソケットは、例えば、それぞれ、モジュールに配置された相補的なソケット雄型要素と協働するように意図されている雌型要素、又はこの相補的なソケットの雌型要素と協働するように意図されている雄型要素からなる。特定の一実施形態では、ソケットは、可撓性容器の把持を可能にする固体本体を備える。従って、容器は、自動装置によって容易に取り扱うことができる。好ましくは、バッグの取り扱いは、工程ａ）〜ｄ）の少なくとも１つの間、より優先的には少なくとも工程ｂ）〜ｄ）の間、自動装置によって行われる。
【００２８】
特定の一実施形態では、開口部は、接続手段を備え、ソケットは、ストッパーに配置され、ストッパー自体が接続手段を備え、この接続手段は、開口部の接続手段に接続可能であり、且つこの接続手段に接続されるように意図されている。「接続手段」という語は、互いにシールして、任意選択により可逆的に２つの要素を物理的に連結することを可能にする任意のコネクタを意味するものとする。この２つの要素は、一般に、互いに連結されるように意図されている要素の一方にそれぞれ配置される２つの相補的な部分から形成され、これらの２つの相補的な部分は、互いに接続することが可能であり、且つ互いに接続されるように意図されている。接続手段は、機械的接続手段、例えば、ねじ山又はクリップ型の取付けシステムであり得る。
【００２９】
容器は、表面の全て又は一部に１つ以上のフィルターを備え得る。特に、フィルターは、容器を形成するプラスチックの２つのシート間でシールされたシートから形成される。フィルターは、開口部の高さで容器にシールされたパウチから形成することもできる。フィルターは、容器の内部を２つの堆積部に分割し、第１の体積部は、好ましくは、開口部に開口し、且つ第２の体積部は、ソケットに開口している。フィルターは、固体粒子を保持するのに十分な孔を有する。フィルターは、好ましくは、５０〜５００μｍの孔を有する。
【００３０】
均質化工程ｂ）は、均質化装置によって機械的に、又は容器の圧迫及び振盪によって手動で行うことができる。機械的均質化は、本質的に固形又はペースト状のサンプルの分析に特に適している。好ましくは、均質化は、当業者に公知の機械的均質化装置、例えば、Ｓｔｏｍａｃｈｅｒ（登録商標）バッグによって行われる。この均質化工程の終了時に、サンプル及び培地が、懸濁液とも呼ばれる均質化された混合物を形成する。
【００３１】
この均質化を行うことができるようにするために、容器は、均質化ゾーンを備える。「均質化ゾーン」という語は、均質化、特に、Ｓｔｏｍａｃｈｅｒ（登録商標）バッグタイプの均質化装置による機械的均質化に有用な容器のゾーンを定義する。この均質化ゾーンは、一般的には、容器の下部、典型的には下半分、又は容器の下３分の１にも配置される。例えば、均質化ゾーンは、長方形と定義され、この長方形の３つの辺は、容器の底部及び容器の横縁部に一致し、第４の辺は、容器の底部から１０〜５０ｃｍ上、好ましくは１５〜４０ｃｍ上に位置する直線に一致する。均質化ゾーンの表面積は、一般に、可撓性容器の表面積の３０％〜９０％、好ましくは５０％〜８０％に相当する。例えば、１５×１０ｃｍ±２ｃｍのサイズの容器の場合、均質化ゾーンは、１０×１０ｃｍ±２ｃｍのサイズであり；３０×１９ｃｍ±５ｃｍのサイズの容器の場合、均質化ゾーンは、１９×１９ｃｍ±５ｃｍのサイズであり；及び５８×３８ｃｍ±１０ｃｍのサイズの容器の場合、均質化ゾーンは、３８×３８ｃｍ±１０ｃｍのサイズである。さらに、均質化ゾーンは、好ましくは、容器が満たされると、９０ｃｍ３を超える体積を画定する。例えば、１５×１０ｃｍ±２ｃｍのサイズの容器の場合、均質化ゾーンは、好ましくは、９０〜１２０ｃｍ３の体積を画定し；３０×１９ｃｍ±５ｃｍのサイズの容器の場合、均質化ゾーンは、好ましくは、２２０〜２８０ｃｍ３の体積を画定し；及び５８×３８ｃｍ±１０ｃｍのサイズの容器の場合、均質化ゾーンは、好ましくは、３３７０〜３４９０ｃｍ３の体積を画定する。
【００３２】
可撓性容器のソケットは、均質化ゾーンの外部に位置しなければならない。ソケットは、容器の上部に位置してもよく、又は下部に位置してもよい。好ましくは、ソケットは、均質化ゾーンの上方の容器の上部、例えば、開口部の近傍に位置する。ソケットは、容器の１つの縁部から延びた付属部に位置し得る。好ましくは、容器の１つの横縁部に位置するが、付属部は、容器の底部に位置してもよい。ソケットは、分離手段によって容器の内部から隔離することができる。分離手段は、容器とは異なる装置、例えば、クランプ若しくはロッドからなってもよく、又は容器に組み込まれる、例えば、ジッパー若しくはジップファスナーであってもよい。
【００３３】
工程ａ）又はｂ）の終了時の可撓性容器の密閉は、この容器のシールされた又は事実上シールされた密閉を可能にする任意の密閉手段によって行うことができる。「事実上シールされた密閉」という語は、特に病原体は遮断するが、ガスに対しては実質的に透過性であり得る密閉を意味するものとする。密閉手段は、容器とは異なる密閉装置、例えば、Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅが販売するＢａｇＣｌｉｐ（登録商標）タイプのクランプ又はロッドからなり得る。これらの密閉手段も容器に組み込んでよい。この場合、密閉手段は、例えば、Ｆｌｅｘｉｃｏが販売するＭｉｎｉｇｒｉｐにおける、例えば、開口部の高さでバッグの内面に配置され、シールされた密閉を確実にするために互いに協働するように意図されている一連のリブ及び溝によって形成されたジッパー又はジップファスナーであり得る。密閉手段はまた、開口部に一致するストッパーからなり得る。この場合、ストッパー及び開口部は、好ましくは、互いに接続可能であり、且つ互いに接続されるように意図されている接続手段を有する。密閉はまた、開口部の高さでの容器の壁のヒートシールによって行うこともできる。
【００３４】
増菌工程ｃ）は、標的分析物の成長を促進する条件下で、均質化された混合物を含む可撓性容器を入れることを含む。典型的には、可撓性容器は、従来の微生物学的分析のために２０〜４５℃のインキュベーターに配置される。
【００３５】
モジュールは、工程ｃ）の開始時、その間、又はその終了時に、即ち、増菌工程の前、その間、又はその後に可撓性容器に接続される。このため、本発明によるモジュールは、可撓性容器のソケットに接続可能であり、且つこのソケットに接続されるように意図されているソケットを含む。可撓性容器のソケットとモジュールのソケットとが互いに接続されると、モジュールは、可撓性容器の内部にアクセスすることができる。換言すれば、可撓性容器とモジュールとが連通するため、均質化された混合物が、容器を開封することなく、容器の内部からモジュールに自由に移動することができる。好ましくは、ソケットは、分析システムが容器に接続されるときに下向きに配置される。従って、均質化された混合物をソケットに接触させるために、可撓性容器の構造の変更が必要であり得る。特に、ソケットが容器の上部に位置する場合、容器に含まれる均質化された混合物がソケットに接触するように、１つの横縁部が実質的に水平になるように容器を配置するか、又は容器を完全に回転させる必要さえあり得る。場合によっては、モジュールは、均質化中に損傷するリスクがなければ、工程ａ）又は工程ｂ）の前に可撓性容器に接続することもできる。
【００３６】
工程ｄ）では、均質化された混合物の分析は、分析システムによって行われる。好ましくは、分析は、例えば、増菌中に連続的に、即ち、リアルタイム又は一定の時間間隔で行われる。この場合、工程ｄ）は、工程ｃ）の間に行うことができる。
【００３７】
第１の実施形態では、モジュールは、分析システム又はその一部を含む。従って、分析システムは、モジュールのソケットを介して容器に直接接続することができる。分析システムは、点滴分析システムとすることができる。この場合、モジュールは、好ましくは、増菌工程の前又は後に接続される。分析システムは、連続分析システムとすることもできる。この場合、モジュールは、好ましくは、増菌工程の前に容器に接続され、増菌工程中は接続されたままである。
【００３８】
第２の実施形態では、モジュールは、収集システムを含む。従って、均質化された混合物のサンプルは、分析システムによる後続の分析のために、モジュールが可撓性容器に接続されている間に収集システムによって採集される。この場合、収集システムは、好ましくは、バッグが一切開封されることなく、増菌工程の前又は後に接続される。
【００３９】
これらの２つの実施形態では、分析システムは、サンプルの分析、特に生物学的分析、化学的分析、物理化学的分析、又は微生物学的分析を可能にする任意のシステムであり得る。好ましくは、分析システムは、微生物学的分析システム、特に、寒天培地接種機、自動分子生物学的装置、自動免疫酵素分析装置、質量分析計、フローサイトメトリー、免疫クロマトグラフィー検査、又は電気化学、圧電、若しくは光学センサーである。分析システムは、好ましくは、マーカーを用いずにリアルタイムで分析物の直接検出を可能にする光学的方法、例えば、表面プラズモン共鳴、干渉法若しくは光導波路に基づいた方法、又は水晶微量天秤法を実施する。この趣旨で、分析システムは、検出手段を有利に含む。分析システムは、検出手段を固体粒子のあらゆる付着から保護するために、検出手段の上流に配置された薄膜も含み得る。分析システムは、検出手段によって検出される信号を測定し、且つ任意選択的に遮断するための測定ユニットも含み得る。この場合、測定ユニットは、検出手段を備える本発明によるモジュールとは異なり得る。
【００４０】
特定の一実施形態では、検出手段は、特定の標的分析物の選択的な検出を可能にする１つ以上の特定のバイオセンサー、特に、光学バイオセンサー又は電気化学バイオセンサーも含む。本出願では、バイオセンサーは、分析物を検出し、且つ／又は分析物と相互作用し得る少なくとも１つのリガンド、及び化学信号又は生体信号を容易に解釈可能な物理的信号に変換する変換手段からなる。変換手段は、電気化学、光学、音響学、熱量測定、電磁気学、又は圧電のプロセスに非網羅的に基づき得る。バオイセンサーは、抗体、アプタマー、ファージタンパク質、抗原、オリゴ糖、及び小有機分子から選択される特定のリガンドで官能化され得る。例えば、国際公開第２０１２／０７３２０２号パンフレット又は同第２０１３／０６０９８９号パンフレットに記載のバイオセンサーを、本発明による検出手段として使用することができる。バイオセンサーは、異なるセンサーを含み得るいくつかの検出ゾーンを備え得る。様々な検出ゾーンは、同じ標的分析物用としてもよく、又は異なる標的分析物用としてもよい。１つ以上の検出ゾーンは、基準（陰性対照）としても役立ち得る。
【００４１】
標的分析物は、細菌並びにまたタンパク質、多糖、脂肪酸、及びそれらを構成する又はそれらが産生する核酸から選択することができる。好ましくは、標的分析物は、病原細菌、例えば、サルモネラ菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）、リステリア菌（Ｌｉｓｔｅｒｉａ）、及び腸管出血性大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）株、ならびにこれらのタンパク質代謝産物、特にこれらのタンパク質毒から選択される。
【００４２】
特定の一実施形態では、検出手段は、モジュールが容器に接続されたときに、この検出手段が容器の内部にくる又は容器の内部と直接連通するように、モジュールのソケットに直接配置される。従って、分析工程は、容器内で直接行うことができる。好ましくは、モジュールのソケットは、検出手段が配置されたシャフトを備え、このシャフトは、モジュールが容器に接続されると容器の内部に進入する。分析工程中、容器は、検出手段が均質化された混合物の中心にくるように配置される。従って、沈殿する又は表面を流れる固体粒子との検出手段の接触を回避することができる。
【００４３】
特定の一実施形態では、容器は、例えば、いくつかの分析システムの接続を可能にするいくつかのソケットを備え、同じ均質化された混合物に対していくつかの分析を同時に行うことができる。
【００４４】
別の特定の一実施形態では、分析システムは、例えば、いくつかの均質化された混合物の分析を可能にするために、いくつかの容器に同時に接続することができる。
【００４５】
さらに、測定ユニットが、検出手段を含むモジュールとは異なる場合、測定ユニットを、いくつかのモジュールで共有することができる。従って、いくつかのサンプルの分析を１つの測定ユニットで連続的に行うことが可能であり、前記ユニットは、各モジュールを用いて一定の時間間隔で連続的に測定を行う。
【００４６】
別の実施形態によると、いくつかの容器は、各容器内に含まれる混合物の同時分析を可能にする単一モジュールに接続される。
【００４７】
本発明による方法は、機械的均質化を必要とする、少なくとも部分的に固体又はペースト状であるサンプルの分析に特に適している。好ましい一実施形態では、本発明によるサンプルの分析方法は、
ａ）サンプル及び培地の可撓性容器への導入；
ｂ）培地中でサンプルの均質化された混合物を得るための、均質化装置によるサンプルの手動又は機械的均質化；
ｃ）均質化された混合物の増菌；及び
ｄ）均質化された混合物の分析システムによる分析
を含み、
工程ａ）〜ｄ）が、単一容器で行われ；
可撓性容器が、工程ａ）及びｂ）のいずれかの終了時に密閉され；
分析システムが、工程ｃ）の前に可撓性容器に直接接続され；且つ
工程ｃ）及びｄ）並びに分析システムの可撓性容器への接続が、容器の再開封を必要とすることなく行われることを特徴とする。
【００４８】
より優先的には、本発明は、分析物の検出によるサンプルの微生物学的分析の方法に関し、この方法は、
ａ）サンプル及び培地の可撓性容器への導入；
ｂ）均質化された混合物を得るための、均質化装置によるサンプル及び培地の手動又は機械的均質化；
ｃ）均質化された混合物の増菌；及び
ｄ）検出手段を含む分析システムによる、均質化された混合物の分析
を含み、
工程ａ）〜ｄ）が、単一容器で行われ；
可撓性容器が、工程ａ）及びｂ）のいずれかの終了時に密閉され；
分析システムが、工程ｃ）の開始時に可撓性容器に直接接続され；
均質化された混合物が、工程ｃ）の間に検出手段に接触され、及び均質化された混合物の分析が、工程ｃ）の間に連続的に行われ；且つ
工程ｃ）及びｄ）並びに分析システムの可撓性容器への接続が、容器の再開封を必要とすることなく行われることを特徴とする。
【００４９】
本発明はまた、上記の可撓性容器にも関する。本発明による可撓性容器は、均質化ゾーン、開口部、及びソケットを備え、前記ソケットは、均質化ゾーンの外部に位置する。典型的には、可撓性容器は、開口部を備える上縁部、この上縁部に隣接した２つの横縁部、及び上縁部の反対側の底部によって画定される本質的に長方形の形状を有する。均質化ゾーンは、一般に、容器の下部に位置する。均質化ゾーンは、例えば、可撓性容器の表面積の３０％〜９０％、好ましくは５０％〜８０％を占める長方形に相当し、均質化ゾーンの縁部の１つは、好ましくは、容器の底部に接合される。ソケットは、均質化ゾーンの外部に位置する。ソケットは、一般に、容器の上縁部、横縁部、又は底部の１つに位置する。好ましくは、ソケットは、上縁部に近接して、容器の横縁部の１つに位置する。特定の一実施形態では、容器の開口部は、接続手段を備え、ソケットは、開口部の接続手段に接続可能であり、且つこの接続手段に接続されるように意図されている接続手段を備えたストッパーに配置する。
【００５０】
特定の一実施形態では、ソケットは、可撓性容器の把持を可能にする固体本体を備える。従って、容器は、自動装置によって容易に取り扱うことができる。結果として、本発明は、分析方法における少なくとも１つの可撓性容器の使用にも関し、この使用は、前記可撓性容器の取り扱いが自動装置によって行われることを特徴とする。
【００５１】
図１ａ〜図１ｅは、本発明による容器の様々な実施形態を例示している。可撓性容器１００は、互いにシールされた本質的に長方形の２つの可撓性プラスチックシートから形成され、且つバッグの上縁部の開口部１０１、この開口部１０１の反対側の底部１０２、並びに２つの横縁部１０３及び１０４を有する。可撓性容器は、特に機械的均質化装置によってその内容物の均質化を可能にするように意図されている均質化ゾーン１０５を含む。
【００５２】
第１の実施形態では、均質化ゾーン１０５は、容器１００の下部に位置している。均質化ゾーン１０５は、容器１００の横縁部１０３から他方の横縁部１０４への第１の方向、及び容器１０４の底部から、例えば、容器の底部から１０〜５０ｃｍの距離に位置する上端への第２の方向に延びた本質的に長方形のゾーンを包含する。図１ａによって例示されている第１の代替案では、容器１００は、均質化ゾーン１０５の上方の、横縁部１０３の上部に位置するソケット１０６を備える。図１ｂに例示されている第２の代替案では、容器１００は、開口部１０１の縁部と一方の横縁部１０３との間の切断角部１０７を備え、この切断角部１０７は、均質化ゾーン１０５の上方にある。ソケット１０６は、切断角部１０７に位置している。容器１００は、例えば、開口部１０１の高さにシールされたフィルター１０８も備え、このフィルターは、内部を２つの容積部に分割し、第１の容積部が開口部１０１に開口し、且つ第２の容積部がソケット１０６に開口している。図１ｃに例示されている第３の代替案では、容器１００は、一方の横縁部１０３に付属部１０９を備える。この付属部は、容器の底部１０２に近接した、容器の下部に配置することができる。ソケット１０６は、付属部１０９に配置されている。付属部は、分離手段（不図示）によって容器の内部から隔離することができる。容器は、フィルター（不図示）を備え得る。フィルターは、図１ｂに例示されているように、例えば、開口部１０１の高さにシールしてもよく、又は付属部１０９の入口に配置してもよい。
【００５３】
図１ｄに例示されている第２の実施形態では、均質化ゾーン１０５は、容器１００の下部に位置している。均質化ゾーン１０５は、本質的に第１の実施形態に記載されているゾーンを包含するが、一方の横縁部１０３を含まない。ソケット１０６は、均質化ゾーン１０５の外部の横縁部１０３に位置している。容器は、図１ｂに例示されているようにフィルター（不図示）を備え得る。
【００５４】
図１ｅに例示されている第３の実施形態では、均質化ゾーン１０５は、容器の底部１０２に位置している。均質化ゾーン１０５は、容器１００の横縁部１０３から他方の横縁部１０４への第１の方向、及び、例えば、１０〜５０ｃｍの高さへの第２の方向に延びた実質的に長方形のゾーンを包含する。ソケット１０６は、均質化ゾーンの外部の、バッグの底部１０２に位置している。容器は、図１ｂに例示されているようにフィルター（不図示）を備え得る。
【００５５】
本発明による容器は、特に、サンプルの調製の観点から、試験室で使用される手順を変更することなく、しかも増菌の終了時に容器を再開封する必要なく、従って作業環境及び操作者のあらゆる汚染を防止するという利点を有する。
【００５６】
本発明による可撓性容器は、本発明による分析方法に適している。図２ａ〜図２ｅは、本発明による方法の実施の一例を例示している。工程ａ）の後、容器１００は、固体又は半固体サンプル１及び培地２を含み、且つシール３によって密閉されている。容器１００は、サンプル１及び培地２が、容器１００の下部において均質化ゾーン１０５内にくるように垂直位置にある（図２ａ）。均質化工程ｂ）の後に、サンプル１及び培地２が均質化された混合物４を形成する。サンプル１の粉砕で生じた残留粒子５が、フィルター１０８に保持されている（図２ｂ）。シール３は、工程ａ）ではなく工程ｂ）の後に非常に容易に形成できることに留意されたい。検出手段２０２を備えた分析システムを含むモジュール２００のソケット２０１は、工程ｃ）の開始時に容器１００のソケット１０６に接続される（図２ｃ）。図２ｃでは、検出手段は、分析システムが容器に接続されると容器内に位置する。別法では、検出手段は、分析システムの区画内に配置することができ、この分析システムは、容器の外部に維持されるが、この分析システムが容器に接続されると容器の内部に直接連通する。増菌工程ｃ）の間に懸濁液４の連続的な分析を可能にするために、容器１００は、均質化された混合物が検出手段２０２と接触できるように配置される。例えば、図２ｄでは、容器は、ソケット１０６に近接した横縁部１０３に水平方向に配置される。別法では、容器を１８０度回転させて、シール３を下側にすることができる。分析が終了すると、分析システムを含むモジュール２００を、収集システムを含むモジュール２００’（図２ｅ）と交換することができる。従って、増菌された均質化混合物の画分を、別の確認分析法による結果を確認するためにサンプリングすることができ、これは、容器を取り扱う操作者が、病原微生物で汚染された可能性のある増菌された混合物に接触しなくても可能である。
【００５７】
より具体的には、図１ａによる容器は、２５ｍｌの生乳の分析に使用することができる。容器は、例えば、幅１７ｃｍ、高さ３２ｃｍの長方形の一般的な形状を有する（図１ａ）。均質化ゾーン１０５は、１７×１８ｃｍの寸法である。ソケット１０６は、底部１０２から１８ｃｍを超えた位置にある。
【００５８】
このような分析のプロトコルは、
−  ２５ｍｌの生乳及び２２５ｍｌの緩衝ペプトン水の容器への導入；
−  均質化された混合物を得るための、均質化ゾーン１０５の手動の混練又は機械的均質化；
−  ロッドの使用又はシーリングによる容器の密閉；
−  均質化された混合物をソケットに接触させるために、横縁部１０３を下向きにするための容器の９０度回転；
−  サルモネラ菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）及び腸管出血性大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）のリアルタイム検出用のバイオセンサーを含む、モジュールの容器のソケットへの接続。バイオセンサーは、例えば、抗サルモネラ菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）、抗腸管出血性大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）、及び抗ウサギＩｇＧリガンド（後者は陰性対照として使用される）で官能化される、国際公開第２０１３／０６０９８９号パンフレットに記載されているようなバイオセンサーであり得る；
−  ４１．５℃の恒温チャンバに容器を入れることによる均質化された混合物の増菌；及び
−  欧州特許第２，６４６，５６５号明細書に記載の表面プラズモンの物理的現象を基礎として用いる光学読み取りによる、サルモネラ菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）及び腸管出血性大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）のリアルタイム分析。
【００５９】
同様に、図１ｂに従った容器は、３７５ｇのひき肉の分析に使用することができる。このような容器は、例えば、その上側角部の１つで切断された、幅３８ｃｍ、高さ５５ｃｍの長方形の一般的な形状を有する。切断された角部１０７は、１８ｃｍの寸法であり、上縁部は、寸法が２９ｃｍの開口部１０１を備え、切断された角部に隣接した横縁部１０３は、４０ｃｍの寸法である。ソケット１０６は、開口部１０１から８ｃｍ離れて、切断された角部１０７に位置し、均質化ゾーン１０５は、３８×３８ｃｍの寸法である。２５０μｍの孔を有するフィルターは、２つの容積部に容器を分割し、第１の容積部が開口部に開口し、且つ第２の容積部がソケットに開口している。このような分析のプロトコルは、
−  ３７５ｇのひき肉及び３３７５ｍｌの緩衝ペプトン水の容器への導入；
−  均質化された混合物を得るための、Ｓｔｏｍａｃｈｅｒ（登録商標）型のパドル混練機を用いた６０秒間の均質化ゾーンの混練；
−  ソケットがシールから２〜１０ｃｍに位置するようにする開口部のシーリングによるシール式容器の密閉；
−  サルモネラ菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）及び腸管出血性大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）のリアルタイム検出用のバイオセンサーを含む、モジュールの容器のソケットへの接続；
−  均質化された混合物を切断された角部１０７に位置するソケット１０６に接触させて増菌された均質化混合物の画分を収集するために、開口部１０１を有する上縁部を下向きにするための容器の１８０度の回転；
−  ４１．５℃の恒温チャンバに容器を入れることによる均質化された混合物の増菌；
−  サルモネラ菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）及び腸管出血性大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）のリアルタイム分析；
−  陽性の結果の場合における、分析システムを含むモジュールの取り外し、及び増菌された均質化混合物の画分を収集するための収集システムを含むモジュールの接続；
−  サルモネラ菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）及び／又は腸管出血性大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）の検出を確認するための、病原体を検出するＰＣＲ又はその他の迅速な方法による増菌された均質化混合物の画分の分析。
【００６０】
さらに、図３は、一定間隔でのいくつかの容器の分析を同時に監視するための分析システムを例示している。図３では、検出手段（不図示）を含むモジュール２００は、可撓性容器１００のそれぞれに接続されている。可撓性容器１００は、可動支持体６に配置され、この可動支持体６は、測定ユニット７が測定を行うのに十分な期間、モジュール２００のそれぞれを測定ユニット７に連続的に提示する。
【００６１】
別の実施形態によると、図４は、多くの異なるゾーンに分散され、物理的に接続されていない検出手段２０２（不図示）及びいくつかのソケット２０１を含む同じモジュール２００に接続されたいくつかの容器１００の同時分析を可能にする分析システムを例示している。従って、各容器１００からの混合物は、検出手段２０２（不図示）を備える単一ゾーンに接続され、分析は、各容器で別々に行われる。その結果、測定ユニット７が、各容器の均質化された混合物の別々であるが同時の分析を可能にする。
【００６２】
従って、図４に従った同じ共通のモジュールに接続されたいくつかの容器を、２５ｇの牛ひき肉の分析に使用することができる。容器は、例えば、幅１９ｃｍ、高さ３５ｃｍの長方形の一般的な形状を有する。ソケット１０６は、底部１０２から２６ｃｍを超えて離れた縁部１０３に位置する。分析システムを含むモジュール２００は、例えば、３つの容器のソケット１０６に接続可能であり、且つソケット１０６に接続されるように意図されている３つのソケット２０１を有する。３つのソケットのそれぞれは、検出手段２０２に独立して接続される（この場合は、サルモネラ属菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｓｐｐ）及び大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）Ｏ１５７：Ｈ７に対する抗体並びにウサギＩｇＧに対する抗体）。
【００６３】
このような分析のプロトコルは、
−  ２５ｇの牛ひき肉のサンプル及び２２５ｍｌの緩衝ペプトン水の３つの容器（Ａ、Ｂ、Ｃ）への導入；
−  １０ｃｆｕ（コロニー形成単位）のネズミチフス菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）での容器Ａの接種、及び３ｃｆｕ（コロニー形成単位）の大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）Ｏ１５７：Ｈ７での容器Ｂの接種（容器Ｃには微生物培養物が添加されない）；
−  均質化された混合物を得るための、Ｓｔｏｍａｃｈｅｒ（登録商標）型のパドル混練機を用いた６０秒間の各容器の均質化ゾーンの混練；
−  シーリングによる容器の密閉；
−  均質化された混合物をソケット２０１に接触させるために、底部１０２を上向きにするための各容器の１８０度の回転；
−  サルモネラ属菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｓｐｐ．）及び大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）Ｏ１５７：Ｈ７のリアルタイム検出用の検出手段２０２（バイオセンサー）を含む、共通のモジュール２００への容器のソケットの接続；
−  接続された容器の３７℃の恒温チャンバに容器を入れることによる均質化された混合物の増菌；且つ
−  欧州特許第２，６４６，５６５号明細書に記載の表面プラズモン共鳴イメージング法によるサルモネラ属菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｓｐｐ．）及び大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）Ｏ１５７：Ｈ７のリアルタイム分析。
【００６４】
容器Ａ、Ｂ、及びＣの３つの牛ひき肉のサンプルについてのサルモネラ属菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｓｐｐ）及び大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）Ｏ１５７：Ｈ７の研究で得られた結果がそれぞれ、図５ａ、図５ｂ、及び図５ｃに示されている。本明細書では、検出手段により、各容器において様々な微生物の並列の検出を同時に行うことが可能になることが観察された。
【００６５】
本発明は、上記の可撓性容器及びモジュールを含む分析キットにも関する。
【００６６】
本発明によると、分析キットは、
−  均質化ゾーン、開口部、及びソケットを備える少なくとも１つの可撓性容器であって、前記ソケットが、この均質化ゾーンの外部に位置する、少なくとも１つの可撓性容器；
−  可撓性容器のソケットに接続可能であり、且つこのソケットに接続されるように意図されているソケットを含むモジュール
を含む。
【００６７】
モジュールは、好ましくは、上で定義された検出手段を含む検出モジュールである。検出手段は、例えば、細菌及びタンパク質から選択される少なくとも１つの標的分析物の選択的な検出を可能にする。別法では、モジュールは、上で定義された収集システムを含む収集モジュールであり得る。
【００６８】
本発明によるキットは、特に、食品加工分野、環境分野、又は健康分野でのサンプルの微生物学的分析に使用することができる。本発明によるキットは、特に、本発明による方法の実施による、機械的均質化工程を必要とする固体又は半固体サンプルの分析に特に適している。
【００６９】
本発明はまた、容器を開封することなく、単一可撓性容器における調製工程（特に均質化）、増菌工程、及び任意選択的に分析工程の全てを行うことを可能にする。
【００７０】
特定の一実施形態によると、本発明はまた、単一モジュールの使用により、いくつかの容器で均質化された混合物を別々且つ同時に分析することも可能にする。
【００７１】
従って、汚染のリスクが低下するだけではなく、分析の実施が、必要な作業数の削減によって単純化される。この単純化により、分析の自動化が容易になる。特定の一実施形態では、本発明によるキットはまた、増菌工程の間、リアルタイムで分析を行うことを可能にする。これにより、陽性応答に必要な時間が短縮され、陽性応答は、標的分析物の存在が検出されると直ちに得ることができる。最後に、分析システムが可撓性容器とは別に用意されるため、例えば、容器を再開封することなく陽性結果を確認するために、求められる標的分析物に適した分析システムを選択すること、又は任意選択的に分析システムを変更することが可能となる。
【図１ａ】
2017515498.tif 000003
【図１ｂ】
2017515498.tif 000004
【図１ｃ】
2017515498.tif 000005
【図１ｄ】
2017515498.tif 000006
【図１ｅ】
2017515498.tif 000007
【図２ａ】
2017515498.tif 000008
【図２ｂ】
2017515498.tif 000009
【図２ｃ】
2017515498.tif 000010
【図２ｄ】
2017515498.tif 000011
【図２ｅ】
2017515498.tif 000012
【図３】
2017515498.tif 000013
【図４】
2017515498.tif 000014
【図５ａ】
2017515498.tif 000015
【図５ｂ】
2017515498.tif 000016
【図５ｃ】
2017515498.tif 000017
【国際調査報告】
2017515498.tif 000018
2017515498.tif 000019
2017515498.tif 000020
2017515498.tif 000021
2017515498.tif 000022
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