(57)【要約】  本明細書には、ｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７と相補的な修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物、並びにこの化合物を使用して疾患及び障害を処置する方法が記載される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
構造：
［オリゴ１］−［ｘ−Ｎ］m−ｘ−［オリゴ２］
（式中、
オリゴ１は７〜１５個の連結したヌクレオシドからなり、且つｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７の核酸塩基配列と相補的であり、ミスマッチが１つ以下である、核酸塩基配列を有し；
オリゴ２は７〜１５個の連結したヌクレオシドからなり、且つｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７の核酸塩基配列と相補的であり、ミスマッチが１つ以下である、核酸塩基配列を有し；
各ｘは、リン酸ジエステル結合及びホスホロチオエート結合から独立に選択され；
各Ｎは、修飾ヌクレオシド及び非修飾ヌクレオシドから独立に選択され；
ｍは、１〜５の整数である）
を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物であって、少なくとも１つのｘがリン酸ジエステル結合である、化合物。
【請求項２】
前記修飾オリゴヌクレオチドが、１５〜３２個、１５〜３０個、１５〜２８個、１５〜２６個、１５〜２４個、又は１５〜２２個、又は１５〜２０個のヌクレオシドからなる、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
オリゴ１が、ｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７の核酸塩基配列と１００％相補的な核酸塩基配列を有する、請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項４】
オリゴ１が、ｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７のシード領域の少なくとも６個、少なくとも７個、又は８個のヌクレオチドと相補的な核酸塩基配列を有する、請求項１〜３の何れか一項に記載の化合物。
【請求項５】
オリゴ２が、ｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７の核酸塩基配列と１００％相補的な核酸塩基配列を有する、請求項１〜４の何れか一項に記載の化合物。
【請求項６】
オリゴ２が、ｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７のシード領域の少なくとも６個、少なくとも７個、又は８個のヌクレオチドと相補的な核酸塩基配列を有する、請求項１〜５の何れか一項に記載の化合物。
【請求項７】
オリゴ１が、ｍｉＲ−１０３及びｍｉＲ−１０７の５’末端の１番目のヌクレオチドとのミスマッチを有する、請求項１、２、４、又は６の何れか一項に記載の化合物。
【請求項８】
オリゴ２が、ｍｉＲ−１０３及びｍｉＲ−１０７の５’末端の１番目のヌクレオチドとのミスマッチを有する、請求項１、２、４、６、又は７の何れか一項に記載の化合物。
【請求項９】
少なくとも２つのｘがリン酸ジエステル結合であるか、又は各ｘがリン酸ジエステル結合である、請求項１〜８の何れか一項に記載の化合物。
【請求項１０】
少なくとも１つのＮが非修飾ヌクレオシドであるか、又は各Ｎが非修飾ヌクレオシドである、請求項１〜９の何れか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
ｍが、１、２、３、４、又は５である、請求項１〜１０の何れか一項に記載の化合物。
【請求項１２】
前記修飾オリゴヌクレオチドの５’末端若しくは３’末端、又はその両方に連結したコンジュゲート部分を含む、請求項１〜１１の何れか一項に記載の化合物。
【請求項１３】
前記修飾オリゴヌクレオチドの前記５’末端又は前記３’末端に連結しているが、その両方には連結していないコンジュゲート部分を含む、請求項１２に記載の化合物。
【請求項１４】
前記コンジュゲート部分が、糖質、コレステロール、脂質、リン脂質、抗体、リポタンパク質、ホルモン、ペプチド、ビタミン、ステロイド、及びカチオン性脂質から選択される少なくとも１つのリガンドを含む、請求項１２又は１３に記載の化合物。
【請求項１５】
ａ）Ｌn−リンカー−ＭＯ
（式中、各Ｌは独立にリガンドであり、且つｎは１〜１０であり；且つＭＯは前記修飾オリゴヌクレオチドである）、
ｂ）Ｌn−リンカー−Ｘ−ＭＯ
（式中、各Ｌは独立にリガンドであり、且つｎは１〜１０であり；Ｘはリン酸ジエステル連結又はホスホロチオエート連結であり；且つＭＯは前記修飾オリゴヌクレオチドである）、又は
ｃ）Ｌn−リンカー−Ｘ1−Ｎm−Ｘ2−ＭＯ
（式中、各Ｌは独立にリガンドであり、且つｎは１〜１０であり；Ｎmの各Ｎは独立に修飾又は非修飾ヌクレオシドであり、且つｍは１〜５であり；Ｘ1及びＸ2は各々独立にリン酸ジエステル連結又はホスホロチオエート連結であり；且つＭＯは前記修飾オリゴヌクレオチドである）
から選択される構造を有する、請求項１２〜１４の何れか一項に記載の化合物。
【請求項１６】
構造：
【化１】
2017523790.tif 000046
（式中、
Ｂは、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（ＲN）−、−Ｚ−Ｐ（Ｚ’）（Ｚ”）Ｏ−、−Ｚ−Ｐ（Ｚ’）（Ｚ”）Ｏ−Ｎm−Ｘ−、及び−Ｚ−Ｐ（Ｚ’）（Ｚ”）Ｏ−Ｎm−Ｙ−から選択され；
ＭＯは前記修飾オリゴヌクレオチドであり；
ＲNは、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、及びベンジルから選択され；
Ｚ、Ｚ’、及びＺ”は各々独立にＯ及びＳから選択され；
Ｎmの各Ｎは独立に修飾又は非修飾ヌクレオシドであり；
ｍは１〜５であり；
Ｘはリン酸ジエステル連結及びホスホロチオエート連結から選択され；
Ｙはリン酸ジエステル連結であり；且つ
波線は前記リンカー及びリガンドの残りとの結合を示す）
を有する、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｘがリン酸ジエステル連結である、請求項１５又は１６に記載の化合物。
【請求項１８】
ｎが１〜５、１〜４、１〜３、若しくは１〜２であるか、又はｎが３である、請求項１５〜１７の何れか一項に記載の化合物。
【請求項１９】
少なくとも１つのリガンドが、糖質、コレステロール、脂質、リン脂質、抗体、リポタンパク質、ホルモン、ペプチド、ビタミン、ステロイド、及びカチオン性脂質から選択される、請求項１５〜１８の何れか一項に記載の化合物。
【請求項２０】
少なくとも１つのリガンドが糖質であり、前記糖質が、任意選択で、マンノース、グルコース、ガラクトース、リボース、アラビノース、フルクトース、フコース、キシロース、Ｄ−マンノース、Ｌ−マンノース、Ｄ−ガラクトース、Ｌ−ガラクトース、Ｄ−グルコース、Ｌ−グルコース、Ｄ−リボース、Ｌ−リボース、Ｄ−アラビノース、Ｌ−アラビノース、Ｄ−フルクトース、Ｌ−フルクトース、Ｄ−フコース、Ｌ−フコース、Ｄ−キシロース、Ｌ−キシロース、α−Ｄ−マンノフラノース、β−Ｄ−マンノフラノース、α−Ｄ−マンノピラノース、β−Ｄ−マンノピラノース、α−Ｄ−グルコフラノース、β−Ｄ−グルコフラノース、α−Ｄ−グルコピラノース、β−Ｄ−グルコピラノース、α−Ｄ−ガラクトフラノース、β−Ｄ−ガラクトフラノース、α−Ｄ−ガラクトピラノース、β−Ｄ−ガラクトピラノース、α−Ｄ−リボフラノース、β−Ｄ−リボフラノース、α−Ｄ−リボピラノース、β−Ｄ−リボピラノース、α−Ｄ−フルクトフラノース、α−Ｄ−フルクトピラノース、グルコサミン、ガラクトサミン、シアル酸、及びＮ−アセチルガラクトサミンから選択される、請求項１９に記載の化合物。
【請求項２１】
構造：
【化２】
2017523790.tif 000047
（式中、Ｎmの各Ｎは独立に修飾又は非修飾ヌクレオシドであり、且つｍは１〜５であり；Ｘ1及びＸ2は各々独立にリン酸ジエステル連結又はホスホロチオエート連結であり；且つＭＯは前記修飾オリゴヌクレオチドである）
を有する、請求項１５〜２０の何れか一項に記載の化合物。
【請求項２２】
オリゴ１及び／又はオリゴ２の各々が、７〜１５個の連結したヌクレオシド、７〜１４個の連結したヌクレオシド、７〜１３個の連結したヌクレオシド、７〜１２個の連結したヌクレオシド、７〜１１個の連結したヌクレオシド、７〜１０個の連結したヌクレオシド、８〜１５個の連結したヌクレオシド、８〜１４個の連結したヌクレオシド、８〜１３個の連結したヌクレオシド、８〜１２個の連結したヌクレオシド、８〜１１個の連結したヌクレオシド、８〜１０個の連結したヌクレオシド、又は１０個の連結したヌクレオシドからなる、請求項１〜２１の何れか一項に記載の化合物。
【請求項２３】
オリゴ１及び／又はオリゴ２の各々が、修飾糖部分を有する少なくとも１つのヌクレオシドを含む、請求項２２に記載の化合物。
【請求項２４】
オリゴ１及び／又はオリゴ２の各々が、非修飾糖部分を有する少なくとも１つのヌクレオシドを含む、請求項２２又は２３に記載の化合物。
【請求項２５】
オリゴ１及び／又はオリゴ２の少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、又は少なくとも８個のヌクレオシドが修飾糖部分を有するか、又はオリゴ１及び／又はオリゴ２の各ヌクレオシドが修飾糖部分を有する、請求項２２〜２４の何れか一項に記載の化合物。
【請求項２６】
各修飾ヌクレオシドが、２’−Ｏ−メチル糖部分、２’−Ｏ−メトキシエチル糖部分、２’−フルオロ糖部分、及び二環式糖部分から独立に選択される、請求項２３〜２５の何れか一項に記載の化合物。
【請求項２７】
各二環式糖部分が、ｃＥｔ糖部分及びＬＮＡ糖部分から独立に選択される、請求項２６に記載の化合物。
【請求項２８】
構造：
【化３】
2017523790.tif 000048
（式中、Ｘはリン酸ジエステル連結であり；Ｎmの各Ｎはデオキシアデノシン（Ａ）であり；ｍは２であり；Ｙはリン酸ジエステル連結であり；且つＭＯは５’−ＣSＡSＡSＵSＧSＣSＵSＧSＣSＡSＡＡＣSＡSＡSＵSＧSＣSＵSＧSＣSＡS−３’であり、添字「Ｓ」が後ろに付く各ヌクレオシドはＳ−ｃＥｔヌクレオシドであり、後ろに添字が付かない各ヌクレオシドはデオキシヌクレオシドであり、且つ２つのＳ−ｃＥｔヌクレオシド間の各ヌクレオシド間結合がホスホロチオエート連結であり、及び残りのヌクレオシド間結合がリン酸ジエステル連結であり；ＹがＭＯの３’末端に連結している）
を含む化合物。
【請求項２９】
構造：
【化４】
2017523790.tif 000049
を有する化合物。
【請求項３０】
請求項１〜２９の何れか一項に記載の化合物と薬学的に許容されるキャリアとを含む医薬組成物。
【請求項３１】
３０ｍｇ、３５ｍｇ、４０ｍｇ、４５ｍｇ、５０ｍｇ、５５ｍｇ、６０ｍｇ、６５ｍｇ、７０ｍｇ、７５ｍｇ、８０ｍｇ、８５ｍｇ、９０ｍｇ、９５ｍｇ、１００ｍｇ、１０５ｍｇ、１１０ｍｇ、１１５ｍｇ、１２０ｍｇ、１２５ｍｇ、１３０ｍｇ、１３５ｍｇ、１４０ｍｇ、１４５ｍｇ、１５０ｍｇ、１５５ｍｇ、１６０ｍｇ、１６５ｍｇ、１７０ｍｇ、１７５ｍｇ、１８０ｍｇ、１８５ｍｇ、１９０ｍｇ、１９５ｍｇ、２００ｍｇの請求項１６３に記載の化合物を含む、請求項３０に記載の医薬組成物。
【請求項３２】
水性組成物又は凍結乾燥組成物である、請求項３０又は３１に記載の医薬組成物。
【請求項３３】
高血糖値を有する被検体の血糖値を低下させるか、又は高グルコース値を生じるリスクがある被検体において高血糖値の発症を予防するか、若しくは遅延させる方法であって、請求項１〜２９の何れか一項に記載の化合物又は請求項３０〜３２の何れか一項に記載の医薬組成物を前記被検体に投与することを含む方法。
【請求項３４】
インスリン抵抗性を有する被検体のインスリン感受性を改善するか、又は被検体においてインスリン抵抗性を生じるリスクがある被検体においてインスリン抵抗性の発症を遅延させる方法であって、請求項１〜２９の何れか一項に記載の化合物又は請求項３０〜３２の何れか一項に記載の医薬組成物を前記被検体に投与することを含む方法。
【請求項３５】
耐糖能障害を有する被検体の耐糖能を改善する方法であって、請求項１〜２９の何れか一項に記載の化合物又は請求項３０〜３２の何れか一項に記載の医薬組成物を前記被検体に投与することを含む方法。
【請求項３６】
被検体の少なくとも１つの代謝障害を処置するか、又は被検体の少なくとも１つの代謝障害の発症を予防するか、若しくは遅延させる方法であって、代謝障害を有する前記被検体に、請求項１〜２９の何れか一項に記載の化合物又は請求項３０〜３２の何れか一項に記載の医薬組成物を投与することを含み、前記代謝障害が、任意選択で、前糖尿病、糖尿病、メタボリックシンドローム、肥満、糖尿病性異脂肪血症、高脂質血症、高血圧症、高トリグリセリド血症、高脂肪酸血症、高コレステロール血症、及び高インスリン血症から選択される、方法。
【請求項３７】
前記被検体が脂肪肝疾患を有し、前記脂肪肝疾患が、任意選択で、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、アルコール性脂肪肝疾患、アルコール性脂肪性肝炎、及び非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）から選択される、請求項３３〜３６の何れか一項に記載の方法。
【請求項３８】
脂肪肝疾患を処置する方法であって、請求項１〜２９の何れか一項に記載の化合物又は請求項３０〜３２の何れか一項に記載の医薬組成物を被検体に投与することを含み、前記脂肪肝疾患が、任意選択で、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、アルコール性脂肪肝疾患、アルコール性脂肪性肝炎、及び非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）から選択される、方法。
【請求項３９】
肝臓トリグリセリドを低下させる方法であって、請求項１〜２９の何れか一項に記載の化合物又は請求項３０〜３２の何れか一項に記載の医薬組成物を被検体に投与することを含む方法。
【請求項４０】
前記被検体が、前糖尿病、糖尿病、メタボリックシンドローム、肥満、糖尿病性異脂肪血症、高脂質血症、高血圧症、高トリグリセリド血症、高脂肪酸血症、高コレステロール血症、及び高インスリン血症のうちから選択される代謝障害を有する、請求項３３〜３５又は３７〜３９の何れか一項に記載の方法。
【請求項４１】
少なくとも１つの追加の治療剤を投与することを含む、請求項３３〜４０の何れか一項に記載の方法。
【請求項４２】
前記少なくとも１つの追加の治療剤が血糖降下剤又は脂質降下剤であり、前記血糖降下剤が、任意選択で、ＰＰＡＲアゴニスト（ガンマ、デュアル、又はパン）、ジペプチジルペプチダーゼ（ＩＶ）阻害剤、ＧＬＰ−Ｉアナログ、インスリン又はインスリンアナログ、インスリン分泌促進物質、ＳＧＬＴ２阻害剤、ヒトアミリンアナログ、ビグアナイド、α−グルコシダーゼ阻害剤、メグリチニド、チアゾリジンジオン、及びスルホニル尿素から選択される、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
治療における請求項１〜２９の何れか一項に記載の化合物又は請求項３０〜３２の何れか一項に記載の医薬組成物の使用。
【請求項４４】
前記治療が、被検体の血糖値の低下、又は被検体における高血糖値の予防である、請求項４３に記載の使用。
【請求項４５】
前記治療が代謝障害の処置であり、前記代謝障害が、任意選択で、前糖尿病、糖尿病、メタボリックシンドローム、肥満、糖尿病性異脂肪血症、高脂質血症、高血圧症、高トリグリセリド血症、高脂肪酸血症、高コレステロール血症、及び高インスリン血症のうちから選択される、請求項４３に記載の使用。
【請求項４６】
前記治療が、被検体における脂肪肝疾患の処置である、請求項４３に記載の使用。
【請求項４７】
前記治療が、前糖尿病、糖尿病、メタボリックシンドローム、肥満、糖尿病性異脂肪血症、高脂質血症、高血圧症、高トリグリセリド血症、高脂肪酸血症、高コレステロール血症、及び高インスリン血症から選択される少なくとも１つの代謝障害を有する被検体、又はインスリン抵抗性、高血糖値若しくは高ＨｂＡ１ｃ値を有する被検体の脂肪肝疾患を処置するためのものである、請求項４３に記載の使用。
【請求項４８】
前記脂肪肝疾患が、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、アルコール性脂肪肝疾患、アルコール性脂肪性肝炎、及び非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）から選択される、請求項４６又は４７に記載の使用。
【請求項４９】
前記治療が、被検体の肝臓トリグリセリドを低下させることを含む、請求項４３〜４８の何れか一項に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
配列表
本出願は、ＥＦＳ−Ｗｅｂ経由で電子形式により出願されるものであり、．ｔｘｔフォーマットで電子形式により提出された配列表を含む。この．ｔｘｔファイルは、２０１５年８月５日に作成された「２０１５−０８−０５＿０１１３８−００１９−００ＰＣＴ＿ＳｅｑＬｉｓｔｉｎｇ．ｔｘｔ」と題される配列表を含み、サイズが４，５９７バイトである。この．ｔｘｔファイルに含まれる配列表は本明細書の一部であり、本明細書によって全体として参照により本明細書に援用される。
【０００２】
本明細書に提供されるのは、代謝障害を治療する方法及び組成物である。
【背景技術】
【０００３】
「成熟型ｍｉＲＮＡ」とも呼ばれるマイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）は、植物及び動物のゲノムにコードされた小さな（約１８〜２４ヌクレオチド長）非コードＲＮＡ分子である。高度に保存された、内因性に発現するｍｉＲＮＡは、場合により、特異的ｍＲＮＡの３’−非翻訳領域（３’−ＵＴＲ）に結合することによって遺伝子の発現を制御する。植物及び動物では、１０００種を超えるｍｉＲＮＡが同定されている。ある種の成熟型ｍｉＲＮＡは、数百ヌクレオチド長になることが多い長い内因性のｍｉＲＮＡ一次転写物（プリ−ｍｉＲＮＡ、ｐｒｉ−ｍｉｒｓ、ｐｒｉ−ｍｉＲ又はプリ−プレ−ｍｉＲＮＡとも呼ばれる）から生じると考えられる（非特許文献１）。
【０００４】
ｍｉＲＮＡの機能解析から、こうした小分子非コードＲＮＡ（ｓｍａｌｌ  ｎｏｎ−ｃｏｄｉｎｇ  ＲＮＡ）が、発生タイミング、器官形成、分化、パターニング、胚形成、増殖制御及びプログラムされた細胞死など動物の様々な生理的学プロセスに寄与していることが明らかになった。ｍｉＲＮＡが関与する特定のプロセスの例として、幹細胞分化、神経発生、血管新生、造血及びエキソサイトーシスが挙げられる（非特許文献２により概説される）。
【０００５】
ｍｉＲＮＡのファミリーは、シード配列として知られる領域、ｍｉＲＮＡの２〜８位のヌクレオチド同一性によって特徴付けることができる。Ｌｅｗｉｓらは、関連するシード配列によって特徴付けられるいくつかのｍｉＲＮＡファミリー、並びにｍｉＲＮＡスーパーファミリーを記載している（非特許文献３）。マイクロＲＮＡのｍｉＲ−１０３とｍｉＲ−１０７とは同一のシード領域を有するため、これらはファミリーメンバーである。従って、これらの２つのマイクロＲＮＡは、全く同じではないにしても、類似した標的遺伝子の組を制御し得る。
【０００６】
ｍｉＲ−１０３及びｍｉＲ−１０７を阻害すると、血糖値が低下し、インスリン感受性が改善されることが示されている。例えば、特許文献１を参照されたい。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】ＰＣＴ公開番号２０１０／１３３９７０  Ａ１号明細書
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Ｌｅｅ，ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．，２００２，２１（１７），４６６３−４６７０
【非特許文献２】Ａｌｖａｒｅｚ−Ｇａｒｃｉａ  ａｎｄ  Ｍｉｓｋａ，Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，２００５，１３２，４６５３−４６６２
【非特許文献３】Ｌｅｗｉｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｅｌｌ．２００５，１２０（１）：１５−２０
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００９】
実施形態１．構造：
［オリゴ１］−［ｘ−Ｎ］m−ｘ−［オリゴ２］
（式中、
オリゴ１は７〜１５個の連結したヌクレオシドからなり、且つｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７の核酸塩基配列と相補的であり、ミスマッチが１つ以下である、核酸塩基配列を有し；
オリゴ２は７〜１５個の連結したヌクレオシドからなり、且つｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７の核酸塩基配列と相補的であり、ミスマッチが１つ以下である、核酸塩基配列を有し；
各ｘは、リン酸ジエステル結合及びホスホロチオエート結合から独立に選択され；
各Ｎは、修飾ヌクレオシド及び非修飾ヌクレオシドから独立に選択され；
ｍは、１〜５の整数である）
を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物であって、少なくとも１つのｘがリン酸ジエステル結合である、化合物。
【００１０】
実施形態２．修飾オリゴヌクレオチドが、１５〜３２個、１５〜３０個、１５〜２８個、１５〜２６個、１５〜２４個、又は１５〜２２個、又は１５〜２０個のヌクレオシドからなる、実施形態１の化合物。
【００１１】
実施形態３．オリゴ１が、ｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７の核酸塩基配列と１００％相補的な核酸塩基配列を有する、実施形態１又は実施形態２の化合物。
【００１２】
実施形態４．オリゴ１が、ｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７のシード領域の少なくとも６個、少なくとも７個、又は８個のヌクレオチドと相補的な核酸塩基配列を有する、実施形態１〜３の何れか１つの化合物。
【００１３】
実施形態５．オリゴ２が、ｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７の核酸塩基配列と１００％相補的な核酸塩基配列を有する、実施形態１〜４の何れか１つの化合物。
【００１４】
実施形態６．オリゴ２が、ｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７のシード領域の少なくとも６個、少なくとも７個、又は８個のヌクレオチドと相補的な核酸塩基配列を有する、実施形態１〜５の何れか１つの化合物。
【００１５】
実施形態７．オリゴ１が、ｍｉＲ−１０３及びｍｉＲ−１０７の５’末端の１番目のヌクレオチドとのミスマッチを有する、実施形態１、２、４、及び６の何れか１つの化合物。
【００１６】
実施形態８．オリゴ２が、ｍｉＲ−１０３及びｍｉＲ−１０７の５’末端の１番目のヌクレオチドとのミスマッチを有する、実施形態１、２、４、６、及び７の何れか１つの化合物。
【００１７】
実施形態９．少なくとも２つのｘがリン酸ジエステル結合である、実施形態１〜８の何れか１つの化合物。
【００１８】
実施形態１０．各ｘがリン酸ジエステル結合である、実施形態１〜９の何れか１つの化合物。
【００１９】
実施形態１１．少なくとも１つのＮが非修飾ヌクレオシドである、実施形態１〜１０の何れか１つの化合物。
【００２０】
実施形態１２．各Ｎが非修飾ヌクレオシドである、実施形態１〜１１の何れか１つの化合物。
【００２１】
実施形態１３．ｍが、１、２、３、４、又は５である、実施形態１〜１２の何れか１つの化合物。
【００２２】
実施形態１４．ｍが、１、２、又は３である、実施形態１〜１３の何れか１つの化合物。
【００２３】
実施形態１５．構造：
［オリゴ１］−［ｘ−Ｎ］m−ｘ−［オリゴ２］−［ｘ−Ｎ］m−ｘ−［オリゴ３］
（式中、
オリゴ１は７〜１５個の連結したヌクレオシドからなり、且つｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７の核酸塩基配列と相補的であり、ミスマッチが１つ以下である、核酸塩基配列を有し；
オリゴ２は７〜１５個の連結したヌクレオシドからなり、且つｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７の核酸塩基配列と相補的であり、ミスマッチが１つ以下である、核酸塩基配列を有し；
オリゴ３は７〜１５個の連結したヌクレオシドからなり、且つ第３のマイクロＲＮＡの核酸塩基配列と相補的であり、ミスマッチが１つ以下である、核酸塩基配列を有し；
各ｘは、リン酸ジエステル結合及びホスホロチオエート結合から独立に選択され；
各Ｎは、修飾ヌクレオシド及び非修飾ヌクレオシドから独立に選択され；
各ｍは独立に１〜５の整数である）
を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物であって、少なくとも１つのｘがリン酸ジエステル結合である、化合物。
【００２４】
実施形態１６．オリゴ１とオリゴ２との間の少なくとも１つのｘがリン酸ジエステル結合であり、且つオリゴ２とオリゴ３との間の少なくとも１つのｘがリン酸ジエステル結合である、実施形態１５の化合物。
【００２５】
実施形態１７．修飾オリゴヌクレオチドが、２３〜５５個、２３〜５０個、２３〜４５個、２３〜４０個、２３〜３５個、２３〜３０個、又は２３〜２６個のヌクレオシドからなる、実施形態１５又は実施形態１６の化合物。
【００２６】
実施形態１８．オリゴ１が、ｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７の核酸塩基配列と１００％相補的な核酸塩基配列を有する、実施形態１５〜１７の何れか１つの化合物。
【００２７】
実施形態１９．オリゴ１が、ｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７のシード領域の少なくとも６個、少なくとも７個、又は８個のヌクレオチドと相補的な核酸塩基配列を有する、実施形態１５〜１８の何れか１つの化合物。
【００２８】
実施形態２０．オリゴ２が、ｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７の核酸塩基配列と１００％相補的な核酸塩基配列を有する、実施形態１５〜１９の何れか１つの化合物。
【００２９】
実施形態２１．オリゴ２が、ｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７のシード領域の少なくとも６個、少なくとも７個、又は８個のヌクレオチドと相補的な核酸塩基配列を有する、実施形態１５〜２０の何れか１つの化合物。
【００３０】
実施形態２２．オリゴ３が、第３のマイクロＲＮＡの核酸塩基配列と１００％相補的な核酸塩基配列を有する、実施形態１５〜２１の何れか１つの化合物。
【００３１】
実施形態２３．オリゴ３が、第３のマイクロＲＮＡのシード領域の少なくとも６個、少なくとも７個、又は８個のヌクレオチドと相補的な核酸塩基配列を有する、実施形態１５〜２２の何れか１つの化合物。
【００３２】
実施形態２４．第３のマイクロＲＮＡがｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７である、実施形態１５〜２３の何れか１つの化合物。
【００３３】
実施形態２５．少なくとも４つのｘがリン酸ジエステル結合である、実施形態１〜２４の何れか１つの化合物。
【００３４】
実施形態２６．オリゴ１とオリゴ２との間の少なくとも２つのｘがリン酸ジエステル結合であり、且つオリゴ２とオリゴ３との間の少なくとも２つのｘがリン酸ジエステル結合である、実施形態２３の化合物。
【００３５】
実施形態２７．各ｘがリン酸ジエステル結合である、実施形態１〜２６の何れか１つの化合物。
【００３６】
実施形態２８．少なくとも１つのＮが非修飾ヌクレオシドである、実施形態１〜２７の何れか１つの化合物。
【００３７】
実施形態２９．オリゴ１とオリゴ２との間の少なくとも１つのＮが非修飾ヌクレオシドであり、且つオリゴ２とオリゴ３との間の少なくとも１つのＮが非修飾ヌクレオシドである、実施形態２８の化合物。
【００３８】
実施形態３０．各Ｎが非修飾ヌクレオシドである、実施形態１〜２９の何れか１つの化合物。
【００３９】
実施形態３１．各ｍが、１、２、３、４、及び５から独立に選択される、実施形態１〜３０の何れか１つの化合物。
【００４０】
実施形態３２．各ｍが、１、２、又は３から独立に選択される、実施形態１〜３１の何れか１つの化合物。
【００４１】
実施形態３３．オリゴ１が、ｍｉＲ−１０３及びｍｉＲ−１０７の５’末端の１番目のヌクレオチドとのミスマッチを有し、及び／又はオリゴ２が、ｍｉＲ−１０３及びｍｉＲ−１０７の５’末端の１番目のヌクレオチドとのミスマッチを有し、及び／又はオリゴ３が、ｍｉＲ−１０３及びｍｉＲ−１０７の５’末端の１番目のヌクレオチドとのミスマッチを有する、実施形態１５〜３２の何れか１つの化合物。
【００４２】
実施形態３４．修飾オリゴヌクレオチドの５’末端又は３’末端、又はその両方に連結したコンジュゲート部分を含む、実施形態１〜３３の何れか１つの化合物。
【００４３】
実施形態３５．修飾オリゴヌクレオチドの３’末端に連結したコンジュゲート部分を含む、実施形態３４の化合物。
【００４４】
実施形態３６．修飾オリゴヌクレオチドの５’末端に連結したコンジュゲート部分を含む、実施形態３４又は実施形態３５の化合物。
【００４５】
実施形態３７．修飾オリゴヌクレオチドの５’末端又は３’末端に連結しているが、その両方には連結していないコンジュゲート部分を含む、実施形態３４の化合物。
【００４６】
実施形態３８．修飾オリゴヌクレオチドの３’末端に連結した第１のコンジュゲート部分と修飾オリゴヌクレオチドの５’末端に連結した第２のコンジュゲート部分とを含む、実施形態３４の化合物。
【００４７】
実施形態３９．コンジュゲート部分が、糖質、コレステロール、脂質、リン脂質、抗体、リポタンパク質、ホルモン、ペプチド、ビタミン、ステロイド、及びカチオン性脂質から選択される少なくとも１つのリガンドを含む、実施形態３４〜３８の何れか１つの化合物。
【００４８】
実施形態４０．構造：
Ｌn−リンカー−ＭＯ
（式中、各Ｌは独立にリガンドであり、且つｎは１〜１０であり；且つＭＯは修飾オリゴヌクレオチドである）
を有する、実施形態３４〜３９の何れか１つの化合物。
【００４９】
実施形態４１．構造：
Ｌn−リンカー−Ｘ−ＭＯ
（式中、各Ｌは独立にリガンドであり、且つｎは１〜１０であり；Ｘはリン酸ジエステル連結又はホスホロチオエート連結であり；且つＭＯは修飾オリゴヌクレオチドである）
を有する、実施形態３４〜３９の何れか１つの化合物。
【００５０】
実施形態４２．構造：
Ｌn−リンカー−Ｘ1−Ｎm−Ｘ2−ＭＯ
（式中、各Ｌは独立にリガンドであり、且つｎは１〜１０であり；Ｎmの各Ｎは独立に修飾又は非修飾ヌクレオシドであり、且つｍは１〜５であり；Ｘ1及びＸ2は各々独立にリン酸ジエステル連結又はホスホロチオエート連結であり；且つＭＯは修飾オリゴヌクレオチドである）
を有する、実施形態３４〜３９の何れか１つの化合物。
【００５１】
実施形態４３．構造：
Ｌn−リンカー−Ｘ−Ｎm−Ｙ−ＭＯ
（式中、各Ｌは独立にリガンドであり、且つｎは１〜１０であり；Ｎmの各Ｎは独立に修飾又は非修飾ヌクレオシドであり、且つｍは１〜５であり；Ｘはリン酸ジエステル連結又はホスホロチオエート連結であり；Ｙはリン酸ジエステル連結であり；且つＭＯは修飾オリゴヌクレオチドである）
を有する、実施形態３４〜３９の何れか１つの化合物。
【００５２】
実施形態４４．構造：
Ｌn−リンカー−Ｙ−Ｎm−Ｙ−ＭＯ
（式中、各Ｌは独立にリガンドであり、且つｎは１〜１０であり；Ｎmの各Ｎは独立に修飾又は非修飾ヌクレオシドであり、且つｍは１〜５であり；各Ｙはリン酸ジエステル連結であり；且つＭＯは修飾オリゴヌクレオチドである）
を有する、実施形態３４〜３９の何れか１つの化合物。
【００５３】
実施形態４５．ｎが１より大きいとき、Ｌn−リンカーが構造：
【化１】
2017523790.tif 000002
（式中、各Ｌは独立にリガンドであり；ｎは１〜１０であり；Ｓは足場であり；且つＱ’及びＱ”は独立に連結基である）
を有する、実施形態４０〜４４の何れかの化合物。
【００５４】
実施形態４６．Ｑ’及びＱ”が、各々、ペプチド、エーテル、ポリエチレングリコール、アルキル、Ｃ1〜Ｃ20アルキル、置換Ｃ1〜Ｃ20アルキル、Ｃ2〜Ｃ20アルケニル、置換Ｃ2〜Ｃ20アルケニル、Ｃ2〜Ｃ20アルキニル、置換Ｃ2〜Ｃ20アルキニル、Ｃ1〜Ｃ20アルコキシ、置換Ｃ1〜Ｃ20アルコキシ、アミノ、アミド、ピロリジン、８−アミノ−３，６−ジオキサオクタン酸（ＡＤＯ）、スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレート、及び６−アミノヘキサン酸から独立に選択される、実施形態４５の化合物。
【００５５】
実施形態４７．足場が２つ、３つ、４つ、又は５つのリガンドを修飾オリゴヌクレオチドに連結する、実施形態４５又は４６の化合物。
【００５６】
実施形態４８．足場が３つのリガンドを修飾オリゴヌクレオチドに連結する、実施形態４７の化合物。
【００５７】
実施形態４９．構造：
【化２】
2017523790.tif 000003
（式中、
Ｂは、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（ＲN）−、−Ｚ−Ｐ（Ｚ’）（Ｚ”）Ｏ−、−Ｚ−Ｐ（Ｚ’）（Ｚ”）Ｏ−Ｎm−Ｘ−、及び−Ｚ−Ｐ（Ｚ’）（Ｚ”）Ｏ−Ｎm−Ｙ−から選択され；
ＭＯは修飾オリゴヌクレオチドであり；
ＲNは、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、及びベンジルから選択され；
Ｚ、Ｚ’、及びＺ”は各々独立にＯ及びＳから選択され；
Ｎmの各Ｎは独立に修飾又は非修飾ヌクレオシドであり；
ｍは１〜５であり；
Ｘはリン酸ジエステル連結及びホスホロチオエート連結から選択され；
Ｙはリン酸ジエステル連結であり；且つ
波線はリンカー及びリガンドの残りとの結合を示す）
を有する、実施形態４０〜４８の何れか１つの化合物。
【００５８】
実施形態５０．Ｘがリン酸ジエステル連結である、実施形態４１〜４９の何れか１つの化合物。
【００５９】
実施形態５１．ｎが１〜５、１〜４、１〜３、又は１〜２である、実施形態４０〜５０の何れか１つの化合物。
【００６０】
実施形態５２．ｎが３である、実施形態４０〜５１の何れか１つの化合物。
【００６１】
実施形態５３．少なくとも１つのリガンドが、糖質、コレステロール、脂質、リン脂質、抗体、リポタンパク質、ホルモン、ペプチド、ビタミン、ステロイド、及びカチオン性脂質から選択される、実施形態４０〜５２の何れか１つの化合物。
【００６２】
実施形態５４．少なくとも１つのリガンドが糖質である、実施形態５３の化合物。
【００６３】
実施形態５５．少なくとも１つのリガンドが、マンノース、グルコース、ガラクトース、リボース、アラビノース、フルクトース、フコース、キシロース、Ｄ−マンノース、Ｌ−マンノース、Ｄ−ガラクトース、Ｌ−ガラクトース、Ｄ−グルコース、Ｌ−グルコース、Ｄ−リボース、Ｌ−リボース、Ｄ−アラビノース、Ｌ−アラビノース、Ｄ−フルクトース、Ｌ−フルクトース、Ｄ−フコース、Ｌ−フコース、Ｄ−キシロース、Ｌ−キシロース、α−Ｄ−マンノフラノース、β−Ｄ−マンノフラノース、α−Ｄ−マンノピラノース、β−Ｄ−マンノピラノース、α−Ｄ−グルコフラノース、β−Ｄ−グルコフラノース、α−Ｄ−グルコピラノース、β−Ｄ−グルコピラノース、α−Ｄ−ガラクトフラノース、β−Ｄ−ガラクトフラノース、α−Ｄ−ガラクトピラノース、β−Ｄ−ガラクトピラノース、α−Ｄ−リボフラノース、β−Ｄ−リボフラノース、α−Ｄ−リボピラノース、β−Ｄ−リボピラノース、α−Ｄ−フルクトフラノース、α−Ｄ−フルクトピラノース、グルコサミン、ガラクトサミン、シアル酸、Ｎ−アセチルガラクトサミンから選択される、実施形態５４の化合物。
【００６４】
実施形態５６．少なくとも１つのリガンドが、Ｎ−アセチルガラクトサミン、ガラクトース、ガラクトサミン、Ｎ−ホルミルガラクトサミン、Ｎ−プロピオニル−ガラクトサミン、Ｎ−ｎ−ブタノイルガラクトサミン、及びＮ−イソ−ブタノイル−ガラクトサミンから選択される、実施形態５４又は実施形態５５の化合物。
【００６５】
実施形態５７．各リガンドがＮ−アセチルガラクトサミンである、実施形態５６の化合物。
【００６６】
実施形態５８．構造：
【化３】
2017523790.tif 000004
（式中、Ｎmの各Ｎは独立に修飾又は非修飾ヌクレオシドであり、且つｍは１〜５であり；Ｘ1及びＸ2は各々独立にリン酸ジエステル連結又はホスホロチオエート連結であり；且つＭＯは修飾オリゴヌクレオチドである）
を有する、実施形態４０〜５７の何れか１つの化合物。
【００６７】
実施形態５９．オリゴ１が、７〜１５個の連結したヌクレオシド、７〜１４個の連結したヌクレオシド、７〜１３個の連結したヌクレオシド、７〜１２個の連結したヌクレオシド、７〜１１個の連結したヌクレオシド、７〜１０個の連結したヌクレオシド、８〜１５個の連結したヌクレオシド、８〜１４個の連結したヌクレオシド、８〜１３個の連結したヌクレオシド、８〜１２個の連結したヌクレオシド、８〜１１個の連結したヌクレオシド、８〜１０個の連結したヌクレオシド、又は１０個の連結したヌクレオシドからなる、実施形態１〜５８の何れか１つの化合物。
【００６８】
実施形態６０．オリゴ１が、修飾糖部分を有する少なくとも１つのヌクレオシドを含む、実施形態５９の化合物。
【００６９】
実施形態６１．オリゴ１が、非修飾糖部分を有する少なくとも１つのヌクレオシドを含む、実施形態５９又は実施形態６０の化合物。
【００７０】
実施形態６２．オリゴ１が、修飾糖部分を有する複数のヌクレオシドと、非修飾糖部分を有する複数のヌクレオシドとを含む、実施形態５９〜６１の何れか１つの化合物。
【００７１】
実施形態６３．オリゴ１の少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、又は少なくとも８個のヌクレオシドが修飾糖部分を有する、実施形態５９〜６２の何れか１つの化合物。
【００７２】
実施形態６４．オリゴ１の各ヌクレオシドが修飾糖部分を有する、実施形態６３の化合物。
【００７３】
実施形態６５．各修飾ヌクレオシドが、２’−Ｏ−メチル糖部分、２’−Ｏ−メトキシエチル糖部分、２’−フルオロ糖部分、及び二環式糖部分から独立に選択される、実施形態６０〜６４の何れか１つの化合物。
【００７４】
実施形態６６．各二環式糖部分が、ｃＥｔ糖部分及びＬＮＡ糖部分から独立に選択される、実施形態６５の化合物。
【００７５】
実施形態６７．各非修飾糖部分が、β−Ｄ−デオキシリボース及びβ−Ｄ−リボースから独立に選択される、実施形態６０〜６６の何れか１つの化合物。
【００７６】
実施形態６８．オリゴ２が、７〜１５個の連結したヌクレオシド、７〜１４個の連結したヌクレオシド、７〜１３個の連結したヌクレオシド、７〜１２個の連結したヌクレオシド、７〜１１個の連結したヌクレオシド、７〜１０個の連結したヌクレオシド、８〜１５個の連結したヌクレオシド、８〜１４個の連結したヌクレオシド、８〜１３個の連結したヌクレオシド、８〜１２個の連結したヌクレオシド、８〜１１個の連結したヌクレオシド、８〜１０個の連結したヌクレオシド、又は１０個の連結したヌクレオシドからなる、実施形態１〜６７の何れか１つの化合物。
【００７７】
実施形態６９．オリゴ２が、修飾糖部分を有する少なくとも１つのヌクレオシドを含む、実施形態６８の化合物。
【００７８】
実施形態７０．オリゴ２が、非修飾糖部分を有する少なくとも１つのヌクレオシドを含む、実施形態６８又は実施形態６９の化合物。
【００７９】
実施形態７１．オリゴ２が、修飾糖部分を有する複数のヌクレオシドと、非修飾糖部分を有する複数のヌクレオシドとを含む、実施形態６８〜７０の何れか１つの化合物。
【００８０】
実施形態７２．オリゴ２の少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、又は少なくとも８個のヌクレオシドが修飾糖部分を有する、実施形態６８〜７１の何れか１つの化合物。
【００８１】
実施形態７３．オリゴ２の各ヌクレオシドが修飾糖部分を有する、実施形態６８の化合物。
【００８２】
実施形態７４．各修飾ヌクレオシドが、２’−Ｏ−メチル糖部分、２’−Ｏ−メトキシエチル糖部分、２’−フルオロ糖部分、及び二環式糖部分から独立に選択される、実施形態６８〜７３の何れか１つの化合物。
【００８３】
実施形態７５．各二環式糖部分が、ｃＥｔ糖部分及びＬＮＡ糖部分から独立に選択される、実施形態７４の化合物。
【００８４】
実施形態７６．各非修飾糖部分が、β−Ｄ−デオキシリボース及びβ−Ｄ−リボースから独立に選択される、実施形態６８〜７５の何れか１つの化合物。
【００８５】
実施形態７７．オリゴ３が、７〜１５個の連結したヌクレオシド、７〜１４個の連結したヌクレオシド、７〜１３個の連結したヌクレオシド、７〜１２個の連結したヌクレオシド、７〜１１個の連結したヌクレオシド、７〜１０個の連結したヌクレオシド、８〜１５個の連結したヌクレオシド、８〜１４個の連結したヌクレオシド、８〜１３個の連結したヌクレオシド、８〜１２個の連結したヌクレオシド、８〜１１個の連結したヌクレオシド、又は８〜１０個の連結したヌクレオシド、又は１０個の連結したヌクレオシドからなる、実施形態１５〜７６の何れか１つの化合物。
【００８６】
実施形態７８．オリゴ３が、修飾糖部分を有する少なくとも１つのヌクレオシドを含む、実施形態７７の化合物。
【００８７】
実施形態７９．オリゴ３が、非修飾糖部分を有する少なくとも１つのヌクレオシドを含む、実施形態７７又は実施形態７８の化合物。
【００８８】
実施形態８０．オリゴ３が、修飾糖部分を有する複数のヌクレオシドと、非修飾糖部分を有する複数のヌクレオシドとを含む、実施形態７７〜７９の何れか１つの化合物。
【００８９】
実施形態８１．オリゴ３の少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、又は少なくとも８個のヌクレオシドが修飾糖部分を有する、実施形態７７〜８０の何れか１つの化合物。
【００９０】
実施形態８２．オリゴ３の各ヌクレオシドが修飾糖部分を有する、実施形態８１の化合物。
【００９１】
実施形態８３．各修飾ヌクレオシドが、２’−Ｏ−メチル糖部分、２’−Ｏ−メトキシエチル糖部分、２’−フルオロ糖部分、及び二環式糖部分から独立に選択される、実施形態７８〜８２の何れか１つの化合物。
【００９２】
実施形態８４．各二環式糖部分が、ｃＥｔ糖部分及びＬＮＡ糖部分から独立に選択される、実施形態８３の化合物。
【００９３】
実施形態８５．各非修飾糖部分が、β−Ｄ−デオキシリボース及びβ−Ｄ−リボースから独立に選択される、実施形態７７〜８４の何れか１つの化合物。
【００９４】
実施形態８６．オリゴ１が核酸塩基配列５’−ＣＡＡＵＧＣＵＧＣＡ−３’（配列番号６）を有する、実施形態１〜８５の何れか１つの化合物。
【００９５】
実施形態８７．オリゴ２が核酸塩基配列５’−ＣＡＡＵＧＣＵＧＣＡ−３’（配列番号６）を有する、実施形態１〜８６の何れか１つの化合物。
【００９６】
実施形態８８．核酸塩基配列５’−ＣＡＡＵＧＣＵＧＣＡＡＡＣＡＡＵＧＣＵＧＣＡ−３’（配列番号７）を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、実施形態１〜８７の何れか１つの化合物。
【００９７】
実施形態８９．オリゴ１が５’−ＣSＡSＡSＵSＧSＣSＵSＧSＣSＡS−３’（配列番号６）であり、添字「Ｓ」が後ろに付く各ヌクレオシドはＳ−ｃＥｔヌクレオシドである、実施形態１〜８８の何れか１つの化合物。
【００９８】
実施形態９０．オリゴ２が５’−ＣSＡSＡSＵSＧSＣSＵSＧSＣSＡS−３’（配列番号６）であり、添字「Ｓ」が後ろに付く各ヌクレオシドはＳ−ｃＥｔヌクレオシドである、実施形態１〜８９の何れか１つの化合物。
【００９９】
実施形態９１．修飾オリゴヌクレオチドが５’−ＣSＡSＡSＵSＧSＣSＵSＧSＣSＡSＡＡＣSＡSＡSＵSＧSＣSＵSＧSＣSＡS−３’（配列番号７）からなり、添字「Ｓ」が後ろに付く各ヌクレオシドはＳ−ｃＥｔヌクレオシドであり、且つ後ろに添字が付かない各ヌクレオシドはデオキシヌクレオシドである、実施形態１〜９０の何れか１つの化合物。
【０１００】
実施形態９２．２つのＳ−ｃＥｔヌクレオシドを連結する各ヌクレオシド間結合が、ホスホロチオエート連結である、実施形態８９〜９１の何れか１つの化合物。
【０１０１】
実施形態９３．あるデオキシヌクレオシドヌクレオシド（ｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ  ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ）を別のヌクレオシドに連結する少なくとも１つのヌクレオシド間結合がリン酸ジエステル連結である、実施形態９１又は実施形態９２の化合物。
【０１０２】
実施形態９４．あるデオキシヌクレオシドヌクレオシド（ｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ  ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ）を別のヌクレオシドに連結する各ヌクレオシド間結合がリン酸ジエステル連結である、実施形態９３の化合物。
【０１０３】
実施形態９５．構造：
【化４】
2017523790.tif 000005
（式中、Ｘはリン酸ジエステル連結であり；Ｎmの各Ｎはデオキシアデノシン（Ａ）であり；ｍは２であり；Ｙはリン酸ジエステル連結であり；且つＭＯは５’−ＣSＡSＡSＵSＧSＣSＵSＧSＣSＡSＡＡＣSＡSＡSＵSＧSＣSＵSＧSＣSＡS−３’（配列番号７）であり、添字「Ｓ」が後ろに付く各ヌクレオシドはＳ−ｃＥｔヌクレオシドであり、後ろに添字が付かない各ヌクレオシドはデオキシヌクレオシドであり、且つ２つのＳ−ｃＥｔヌクレオシド間の各ヌクレオシド間結合がホスホロチオエート連結であり、残りのヌクレオシド間結合がリン酸ジエステル連結である）
を含む化合物。
【０１０４】
実施形態９６．被検体の血糖値を低下させる方法であって、実施形態１〜９５、１４８、１５６〜１６３、１７８、及び１８４の何れか１つの化合物を被検体に投与することを含む方法。
【０１０５】
実施形態９７．被検体が高血糖値を有する、実施形態９６の方法。
【０１０６】
実施形態９８．被検体の血糖値を計測することを含む、実施形態９６又は実施形態９７の方法。
【０１０７】
実施形態９９．被検体が高血糖値を有する、実施形態９６〜９８の何れか１つの方法。
【０１０８】
実施形態１００．血糖値が絶食時血糖値、食後血糖値、全血血糖値、又は血漿血糖値である、実施形態９６〜９９の何れか１つの方法。
【０１０９】
実施形態１０１．血糖値を２００ｍｇ／ｄＬ未満、１７５ｍｇ／ｄＬ未満、１５０ｍｇ／ｄＬ未満、１２５ｍｇ／ｄＬ未満、１２０ｍｇ／ｄＬ未満、１１５ｍｇ／ｄＬ未満、１１０ｍｇ／ｄＬ未満、１０５ｍｇ／ｄＬ未満、又は１００ｍｇ／ｄＬ未満に低下させることを含む、実施形態９６〜１００の何れか１つの方法。
【０１１０】
実施形態１０１．２  被検体のヘモグロビンＡ１ｃ（ＨｂＡ１ｃ）値を８％未満、７．５％未満、７％未満、６．５％未満、６％未満、５．５％未満、５％未満、又は４．５％未満に低下させることを含む、実施形態９６〜１０１の何れか１つの方法。
【０１１１】
実施形態１０２．高グルコース値を生じるリスクがある被検体において高血糖値の発症を予防し、又は遅延させる方法であって、実施形態１〜９５、１４８、１５６〜１６３、１７８、及び１８４の何れか１つの化合物を被検体に投与することを含む方法。
【０１１２】
実施形態１０３．被検体のインスリン感受性を改善する方法であって、実施形態１〜９５、１４８、１５６〜１６３、及び１７８の何れか１つの化合物を被検体に投与することを含む方法。
【０１１３】
実施形態１０４．被検体がインスリン抵抗性を有する、実施形態１０３の方法。
【０１１４】
実施形態１０５．インスリン抵抗性を生じるリスクがある被検体においてインスリン抵抗性の発症を予防し、又は遅延させる方法であって、実施形態１〜９５、１４８、１５６〜１６３、１７８、及び１８４の何れか１つの化合物を被検体に投与することを含む方法。
【０１１５】
実施形態１０６．被検体の耐糖能を改善する方法であって、実施形態１〜９５、１４８、１５６〜１６３、１７８、及び１８４の何れか１つの化合物を被検体に投与することを含む方法。
【０１１６】
実施形態１０７．被検体が耐糖能障害を有する、実施形態１０６の方法。
【０１１７】
実施形態１０８．被検体の少なくとも１つの代謝障害を処置する方法であって、代謝障害を有する被検体に実施形態１〜９５、１４８、１５６〜１６３、１７８、及び１８４の何れか１つの化合物を投与することを含む方法。
【０１１８】
実施形態１０９．被検体の少なくとも１つの代謝障害の発症を予防し、又は遅延させる方法であって、代謝障害を有する被検体に、実施形態１〜９５、１４８、１５６〜１６３、１７８、及び１８４の何れか１つの化合物を投与することを含む方法。
【０１１９】
実施形態１１０．少なくとも１つの代謝障害が、前糖尿病、糖尿病、メタボリックシンドローム、肥満、糖尿病性異脂肪血症、高脂質血症、高血圧症、高トリグリセリド血症、高脂肪酸血症、高コレステロール血症、及び高インスリン血症のうちから選択される、実施形態１０８又は実施形態１０９の方法。
【０１２０】
実施形態１１１．被検体の脂肪細胞分化を増加させる方法であって、実施形態１〜９５、１４８、１５６〜１６３、１７８、及び１８４の何れか１つの化合物を被検体に投与することを含む方法。
【０１２１】
実施形態１１２．被検体の小型脂肪細胞数を増加させる方法であって、実施形態１〜９５、１４８、１５６〜１６３、１７８、及び１８４の何れか１つの化合物を被検体に投与することを含む方法。
【０１２２】
実施形態１１３．被検体の体重を低下させることを含む、実施形態９６〜１１２の何れか１つの方法。
【０１２３】
実施形態１１４．被検体の体脂肪を低下させることを含む、実施形態９６〜１１３の何れか１つの方法。
【０１２４】
実施形態１１５．投与が非経口投与、例えば静脈内投与若しくは皮下投与；又は経口投与を含む、実施形態９６〜１１４の何れか１つの方法。
【０１２５】
実施形態１１６．少なくとも１つの追加の治療剤を投与することを含む、実施形態９６〜１１５の何れか１つの方法。
【０１２６】
実施形態１１７．少なくとも１つの追加の治療剤が血糖降下剤又は脂質降下剤である、実施形態１１６の方法。
【０１２７】
実施形態１１８．血糖降下剤が、ＰＰＡＲアゴニスト（ガンマ、デュアル、又はパン）、ジペプチジルペプチダーゼ（ＩＶ）阻害剤、ＧＬＰ−Ｉアナログ、インスリン又はインスリンアナログ、インスリン分泌促進物質、ＳＧＬＴ２阻害剤、ヒトアミリンアナログ、ビグアナイド、α−グルコシダーゼ阻害剤、メグリチニド、チアゾリジンジオン、及びスルホニル尿素のうちから選択される、実施形態１１７の方法。
【０１２８】
実施形態１１９．少なくとも１つの追加の治療剤が化合物の投与と同時、化合物の投与前、又は化合物の投与後に投与される、実施形態１１６〜１１８の何れか１つの方法。
【０１２９】
実施形態１２０．少なくとも１つの追加の治療剤が化合物より少ない頻度又は化合物より多い頻度で投与される、実施形態１１６〜１１８の何れか１つの方法。
【０１３０】
実施形態１２１．化合物が医薬組成物として投与される、実施形態９６〜１２０の何れか１つの方法。
【０１３１】
実施形態１２２．細胞又は組織のインスリン抵抗性を改善する方法であって、実施形態１〜９５、１４８、１５６〜１６３、１７８、及び１８４の何れか１つの化合物と細胞又は組織を接触させることを含む方法。
【０１３２】
実施形態１２３．細胞又は組織が、肝臓、脂肪、又は骨格筋細胞又は組織である、実施形態１２２の方法。
【０１３３】
実施形態１２４．細胞又は組織のインスリン感受性を増加させる方法であって、実施形態１〜９５、１４８、１５６〜１６３、１７８、及び１８４の何れか１つの化合物と細胞又は組織を接触させることを含む方法。
【０１３４】
実施形態１２５．細胞が脂肪細胞である、実施形態１２４の方法。
【０１３５】
実施形態１２６．脂肪細胞分化を誘導する方法であって、実施形態１〜９５、１４８、１５６〜１６３、１７８、及び１８４の何れか１つの化合物と未分化脂肪細胞を接触させることを含む方法。
【０１３６】
実施形態１２７．実施形態１〜９５、１４８、及び１５６〜１６３の何れか１つの化合物と薬学的に許容されるキャリアとを含む医薬組成物。
【０１３７】
実施形態１２８．被検体が少なくとも１つの代謝障害を有する、実施形態９６〜１０７の何れか１つの方法。
【０１３８】
実施形態１２９．少なくとも１つの代謝障害が、前糖尿病、糖尿病、メタボリックシンドローム、肥満、糖尿病性異脂肪血症、高脂質血症、高血圧症、高トリグリセリド血症、高脂肪酸血症、高コレステロール血症、及び高インスリン血症のうちから選択される、実施形態１２８の方法。
【０１３９】
実施形態１３０．治療において使用される、実施形態１〜９５、１４８、１５６〜１６３、１７８、及び１８４の何れか１つの化合物の使用。
【０１４０】
実施形態１３１．治療が、被検体の血糖値の低下、又は被検体における高血糖値の予防である、実施形態１３０の使用。
【０１４１】
実施形態１３２．治療が代謝障害の処置である、実施形態１３０の使用。
【０１４２】
実施形態１３３．代謝障害が、前糖尿病、糖尿病、メタボリックシンドローム、肥満、糖尿病性異脂肪血症、高脂質血症、高血圧症、高トリグリセリド血症、高脂肪酸血症、高コレステロール血症、及び高インスリン血症のうちから選択される、実施形態１３２の使用。
【０１４３】
実施形態１３４．細胞が肝細胞であるか、又は組織が肝組織である、実施形態１２４の方法。
【０１４４】
実施形態１３５．脂肪肝疾患を処置する方法であって、実施形態１〜９５、１４８、１５６〜１６３、１７８、及び１８４の何れか１つの化合物を被検体に投与することを含む方法。
【０１４５】
実施形態１３６．脂肪肝疾患が、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、アルコール性脂肪肝疾患、アルコール性脂肪性肝炎、及び非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）から選択される、実施形態１３５の方法。
【０１４６】
実施形態１３７．治療が、被検体における脂肪肝疾患の処置である、実施形態１３０〜１３３の何れか１つの使用。
【０１４７】
実施形態１３８．脂肪肝疾患が、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、アルコール性脂肪肝疾患、アルコール性脂肪性肝炎、及び非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）から選択される、実施形態１３７の使用。
【０１４８】
実施形態１３９．肝臓トリグリセリドを低下させる方法であって、実施形態１〜９５、１４８、１５６〜１６３、及び１７９の何れか１つの化合物を被検体に投与することを含む方法。
【０１４９】
実施形態１４０．被検体が脂肪肝疾患を有する、実施形態９６〜１２６、１２８、１２９、１３４、及び１３９の何れか１つの方法。
【０１５０】
実施形態１４１．脂肪肝疾患が、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、アルコール性脂肪肝疾患、アルコール性脂肪性肝炎、及び非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）から選択される、実施形態１４０の方法。
【０１５１】
実施形態１４２．治療が、被検体の肝臓トリグリセリドを低下させることを含む、実施形態１３０の使用。
【０１５２】
実施形態１４３．被検体が脂肪肝疾患を有する、実施形態１４２の使用。
【０１５３】
実施形態１４４．脂肪肝疾患が、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、アルコール性脂肪肝疾患、アルコール性脂肪性肝炎、及び非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）から選択される、実施形態１４３の使用。
【０１５４】
実施形態１４５．代謝障害の処置方法であって、８〜２５個の連結したヌクレオシドの単一領域からなる修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物を被検体に投与することを含み、単一領域の核酸塩基配列がｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７と相補的であり、化合物が、修飾オリゴヌクレオチドの５’末端又は３’末端に連結したコンジュゲート部分を含み、コンジュゲート部分が、肝細胞の細胞取り込みを改善するリガンドを含む、方法。
【０１５５】
実施形態１４６．コンジュゲート部分が、アシアロ糖タンパク質受容体に親和性を有するリガンドを含む、実施形態１４５の方法。
【０１５６】
実施形態１４７．リガンドが、Ｎ−アセチルガラクトサミン、ガラクトース、ガラクトサミン、Ｎ−ホルミルガラクトサミン、Ｎ−プロピオニル−ガラクトサミン、Ｎ−ｎ−ブタノイルガラクトサミン、及びＮ−イソ−ブタノイル−ガラクトサミンから選択される、実施形態１４５又は１４６の方法。
【０１５７】
実施形態１４８．ＹがＭＯの３’末端に連結している、実施形態９５の化合物。
【０１５８】
実施形態１４９．代謝障害を処置する方法であって、８〜２５個の連結したヌクレオシドの単一領域からなる修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物を被検体に投与することを含み、単一領域の核酸塩基配列がｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７と相補的であり、ｍｉＲ−１０３又はｍｉＲ−１０７の５’末端Ａとのミスマッチを含む、方法。
【０１５９】
実施形態１５０．修飾オリゴヌクレオチドの３’末端ヌクレオチドがミスマッチ位置である、実施形態１４９の方法。
【０１６０】
実施形態１５１．修飾オリゴヌクレオチドの３’末端ヌクレオチドが、Ａ、Ｃ、及びＧから選択される、実施形態１４９又は実施形態１５０の方法。
【０１６１】
実施形態１５２．化合物が修飾オリゴヌクレオチドの５’末端又は３’末端に連結したコンジュゲート部分を含み、コンジュゲート部分が、肝細胞の細胞取り込みを改善するリガンドを含む、実施形態１４９〜１５１の何れか１つの方法。
【０１６２】
実施形態１５３．コンジュゲート部分が、アシアロ糖タンパク質受容体に親和性を有するリガンドを含む、実施形態１５２の方法。
【０１６３】
実施形態１５４．リガンドが、Ｎ−アセチルガラクトサミン、ガラクトース、ガラクトサミン、Ｎ−ホルミルガラクトサミン、Ｎ−プロピオニル−ガラクトサミン、Ｎ−ｎ−ブタノイルガラクトサミン、及びＮ−イソ−ブタノイル−ガラクトサミンから選択される、実施形態１５２又は１５３の方法。
【０１６４】
実施形態１５５．修飾オリゴヌクレオチドが、ｍｉＲ−１０３又はｍｉＲ−１０７の５’末端Ａとのミスマッチを除いてｍｉＲ−１０３又はｍｉＲ−１０７と完全に相補的である、実施形態１５２〜１５３の何れか１つの方法。
【０１６５】
実施形態１５６．８〜２５個の連結したヌクレオシドの単一領域からなる修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物であって、単一領域の核酸塩基配列がｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７と相補的であり、ｍｉＲ−１０３及びｍｉＲ−１０７の５’末端Ａとのミスマッチを含む、化合物。
【０１６６】
実施形態１５７．修飾オリゴヌクレオチドの３’末端ヌクレオチドがミスマッチ位置である、実施形態１５６の化合物。
【０１６７】
実施形態１５８．修飾オリゴヌクレオチドの３’末端ヌクレオチドが、Ａ、Ｃ、及びＧから選択される、実施形態１５６又は実施形態１５７の化合物。
【０１６８】
実施形態１５９．化合物が修飾オリゴヌクレオチドの５’末端又は３’末端に連結したコンジュゲート部分を含み、コンジュゲート部分が、肝細胞の細胞取り込みを改善するリガンドを含む、実施形態１５６〜１５８の何れか１つの化合物。
【０１６９】
実施形態１６０．コンジュゲート部分が、アシアロ糖タンパク質受容体に親和性を有するリガンドを含む、実施形態１５９の化合物。
【０１７０】
実施形態１６１．リガンドが、Ｎ−アセチルガラクトサミン、ガラクトース、ガラクトサミン、Ｎ−ホルミルガラクトサミン、Ｎ−プロピオニル−ガラクトサミン、Ｎ−ｎ−ブタノイルガラクトサミン、及びＮ−イソ−ブタノイル−ガラクトサミンから選択される、実施形態１５９又は１６０の化合物。
【０１７１】
実施形態１６２．修飾オリゴヌクレオチドが、ｍｉＲ−１０３又はｍｉＲ−１０７の５’末端Ａとのミスマッチを除いてｍｉＲ−１０３又はｍｉＲ−１０７と完全に相補的である、実施形態１５６〜１６１の何れか１つの化合物。
【０１７２】
実施形態１６３．構造：
【化５】
2017523790.tif 000006
を有する化合物。
【０１７３】
実施形態１６４．実施形態１６３の化合物と薬学的に許容されるキャリアとを含む医薬組成物。
【０１７４】
実施形態１６５．３０ｍｇ、３５ｍｇ、４０ｍｇ、４５ｍｇ、５０ｍｇ、５５ｍｇ、６０ｍｇ、６５ｍｇ、７０ｍｇ、７５ｍｇ、８０ｍｇ、８５ｍｇ、９０ｍｇ、９５ｍｇ、１００ｍｇ、１０５ｍｇ、１１０ｍｇ、１１５ｍｇ、１２０ｍｇ、１２５ｍｇ、１３０ｍｇ、１３５ｍｇ、１４０ｍｇ、１４５ｍｇ、１５０ｍｇ、１５５ｍｇ、１６０ｍｇ、１６５ｍｇ、１７０ｍｇ、１７５ｍｇ、１８０ｍｇ、１８５ｍｇ、１９０ｍｇ、１９５ｍｇ、２００ｍｇの請求項１６３に記載の化合物を含む、実施形態１６４の医薬組成物。
【０１７５】
実施形態１６６．水性組成物である、実施形態１６４又は実施形態１６５の医薬組成物。
【０１７６】
実施形態１６７．凍結乾燥組成物である、実施形態１６４又は実施形態１６５の医薬組成物。
【０１７７】
実施形態１６８．被検体が、前糖尿病、糖尿病、メタボリックシンドローム、肥満、糖尿病性異脂肪血症、高脂質血症、高血圧症、高トリグリセリド血症、高脂肪酸血症、高コレステロール血症、及び高インスリン血症のうちから選択される代謝障害を有する、実施形態１３５、１３６、１３９〜１４１、及び１４５〜１５５の何れか１つの方法。
【０１７８】
実施形態１６９．被検体が、前糖尿病及び２型糖尿病から選択される代謝障害を有する、実施形態１３５、１３６、１３９、１４０、１４１、及び１４５〜１５５の何れか１つの方法。
【０１７９】
実施形態１７０．脂肪肝疾患が、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）及び非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）から選択される、実施形態１３５又は実施形態１４０の方法。
【０１８０】
実施形態１７１．被検体が、前糖尿病及び２型糖尿病から選択される代謝障害を有する、実施形態１７０の方法。
【０１８１】
実施形態１７２．被検体がインスリン抵抗性、高血糖値、又は高ＨｂＡ１ｃ値を有する、実施形態１７０の方法。
【０１８２】
実施形態１７３．治療が、前糖尿病、糖尿病、メタボリックシンドローム、肥満、糖尿病性異脂肪血症、高脂質血症、高血圧症、高トリグリセリド血症、高脂肪酸血症、高コレステロール血症、及び高インスリン血症から選択される少なくとも１つの代謝障害を有する被検体の脂肪肝疾患を処置するためのものである、実施形態１３０の使用。
【０１８３】
実施形態１７４．治療が、前糖尿病及び２型糖尿病から選択される代謝障害を有する被検体の脂肪肝疾患を処置するためのものである、実施形態１３０の使用。
【０１８４】
実施形態１７５．治療が、インスリン抵抗性、高血糖値又は高ＨｂＡ１ｃ値を有する被検体の脂肪肝疾患を処置するためのものである、実施形態１３０の使用。
【０１８５】
実施形態１７６．脂肪肝疾患が、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、アルコール性脂肪肝疾患、アルコール性脂肪性肝炎、及び非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）から選択される、実施形態１７３、１７４及び１７５の何れか１つの使用。
【０１８６】
実施形態１７７．脂肪肝疾患が、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）及び非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）から選択される、実施形態１３７、１４３、１７３、１７４、及び１７５の何れか１つの使用。
【０１８７】
実施形態１７８．化合物が５０〜１５０ｍｇの用量で週１回の頻度で投与される、実施形態９６〜１２１、１２８、１２９、１３５、１３９〜１４１、及び１６８〜１７２の何れか１つの方法。
【０１８８】
実施形態１７９．構造：
【化６】
2017523790.tif 000007
（式中、Ｘはリン酸ジエステル連結であり；Ｎmの各Ｎはデオキシアデノシン（Ａ）であり；ｍは２であり；Ｙはリン酸ジエステル連結であり；ＹはＭＯの３’末端に連結しており；ＭＯは５’−ＣSＡSＡSＵSＧSＣSＵSＧSＣSＡSＡＡＣSＡSＡSＵSＧSＣSＵSＧSＣSＡS−３’（配列番号７）であり、添字「Ｓ」が後ろに付く各ヌクレオシドはＳ−ｃＥｔヌクレオシドであり、後ろに添字が付かない各ヌクレオシドはデオキシヌクレオシドであり、且つ２つのＳ−ｃＥｔヌクレオシド間の各ヌクレオシド間結合がホスホロチオエート連結であり、残りのヌクレオシド間結合がリン酸ジエステル連結である）
からなる、実施形態９５の化合物又はその薬学的に許容される塩。
【０１８９】
実施形態１８０．実施形態１７９の化合物と薬学的に許容されるキャリアとを含む医薬組成物。
【０１９０】
実施形態１８１．８〜２５個の連結したヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む、被検体の代謝障害を処置するための化合物であって、修飾オリゴヌクレオチドの核酸塩基配列がｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７と相補的であり、化合物が、修飾オリゴヌクレオチドの５’末端又は３’末端に連結したコンジュゲート部分を含み、コンジュゲート部分が、肝細胞の細胞取り込みを改善するリガンドを含む、化合物。
【０１９１】
実施形態１８２．コンジュゲート部分が、アシアロ糖タンパク質受容体に親和性を有するリガンドを含む、実施形態１５０の化合物。
【０１９２】
実施形態１８３．リガンドが、Ｎ−アセチルガラクトサミン、ガラクトース、ガラクトサミン、Ｎ−ホルミルガラクトサミン、Ｎ−プロピオニル−ガラクトサミン、Ｎ−ｎ−ブタノイルガラクトサミン、及びＮ−イソ−ブタノイル−ガラクトサミンから選択される、実施形態１５０又は１５１の化合物。
【０１９３】
実施形態１８４．構造：
【化７】
2017523790.tif 000008
（式中、Ｘはリン酸ジエステル連結であり；Ｎmの各Ｎはデオキシアデノシン（Ａ）であり；ｍは２であり；Ｙはリン酸ジエステル連結であり；ＹはＭＯの３’末端に連結しており；且つＭＯは５’−ＣSＡSＡSＵSＧSＣSＵSＧSＣSＡS−３’（配列番号６）であり、添字「Ｓ」が後ろに付く各ヌクレオシドはＳ−ｃＥｔヌクレオシドであり、且つ２つのＳ−ｃＥｔヌクレオシド間の各ヌクレオシド間結合がホスホロチオエート連結である）
からなる、実施形態１５６の化合物又はその薬学的に許容される塩。
【０１９４】
実施形態１８５．実施形態１８４の化合物と薬学的に許容されるキャリアとを含む医薬組成物。
【図面の簡単な説明】
【０１９５】
【図１】３つのＧａｌＮＡｃリガンドを含むコンジュゲート部分の構造である。
【図２Ａ】コンジュゲート型修飾オリゴヌクレオチド構造である。
【図２Ｂ】コンジュゲート型修飾オリゴヌクレオチド構造である。
【図２Ｃ】コンジュゲート型修飾オリゴヌクレオチド構造である。
【図３】実施例に記載するとおり、指示化合物を投与したマウスにおける２週間の時点での空腹時血糖、空腹時インスリン、及びＨＯＭＡ  ＩＲを示す。
【図４】実施例に記載するとおり、指示化合物を投与したマウスにおける３週間の時点での空腹時血糖、空腹時インスリン、及びＨＯＭＡ  ＩＲを示す。
【図５】実施例に記載するとおり、指示化合物を投与したマウスにおける２週間の時点での空腹時血糖、空腹時インスリン、及びＨＯＭＡ  ＩＲを示す。
【図６−１】実施例に記載するとおり、指示化合物を投与したマウスにおける３週間の時点での空腹時血糖、空腹時インスリン、及びＨＯＭＡ  ＩＲを示す。
【図６−２】図６−１の続き。
【図７】実施例に記載するとおり、指示化合物を投与したマウスにおける経口グルコースチャレンジ後の血糖及び血漿インスリンを示す。
【図８】実施例に記載するとおり、指示化合物を投与したマウスにおける肝臓トリグリセリド含量を示す。
【図９−１】図９Ａ−Ｅは、実施例に記載するとおり、指示化合物を投与したＤＩＯマウスにおけるインスリン感受性の改善、及びトリグリセリド低下を示す。
【図９−２】図９−１の続き。
【図１０】実施例に記載するとおり、指示化合物を投与したマウスにおける１週間の時点でのＨＯＭＡ  ＩＲを示す。
【図１１】図１１Ａ−Ｂは、実施例に記載するとおり、指示化合物を投与したｄｂ／ｄｂマウスにおける空腹時血糖及び肝臓トリグリセリドを示す。
【図１２−１】図１２Ａ−Ｅは、実施例に記載するとおり、指示化合物を投与したＤＩＯマウスにおける高インスリン正常血糖クランプ試験を示す。
【図１２−２】図１２−１の続き。
【図１２−３】図１２−２の続き。
【図１３】化合物４７０４３の構造を示す。
【発明を実施するための形態】
【０１９６】
他に記載がない限り、本明細書で使用する技術用語及び科学用語は全て、本発明が属する技術分野の当業者が一般に理解しているのと同じ意味を持つ。具体的な定義がなされていない場合、本明細書に記載の分析化学、有機合成化学並びに創薬化学及び薬化学に関連して使用される用語と、本明細書に記載の分析化学、有機合成化学並びに創薬化学及び薬化学の手順及び技法とは、当該技術分野において公知であり、一般に用いられるものである。本明細書の用語に複数の定義が存在する場合、本セクションの定義が優先する。化学合成、化学分析、医薬品の調製、製剤及び送達、並びに被検体の処置には、標準的な技法を使用することができる。ある種の技法及び手順は、例えば「Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ」Ｅｄｉｔｅｄ  ｂｙ  Ｓａｎｇｖｉ  ａｎｄ  Ｃｏｏｋ，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ  Ｄ．Ｃ．，１９９４；及び「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，」Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．，１８ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，１９９０で確認することができ、更に、これらをいかなる目的においても本明細書に援用する。許容される場合、特許、特許出願、公開された出願及び公報、ＧＥＮＢＡＮＫ配列、ウェブサイト、及び本明細書の開示内容全体を通して参照した他の公開資料は、他に記載がない限り、その全体を援用する。ＵＲＬ又は他のそうした識別子又はアドレスに言及する場合、そうした識別子は変更されることがあり、インターネット上の特定の情報もそれに従う場合があるが、インターネットの検索により、対応する情報を確認することができることが理解されよう。それを参照することにより、そうした情報の利用可能性及び一般への提供が明らかにされる。
【０１９７】
本組成物及び方法を開示し、説明するのに先立ち、本明細書に使用される用語は、特定の実施形態を説明するためのものに過ぎず、限定的であることを意図するものではないことを理解されたい。本明細書及び添付の特許請求の範囲に使用する場合、単数形表現「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」及び「その（ｔｈｅ）」は、文脈上明らかに他の意味に解すべき場合を除き、複数の意味を含むことに留意しなければならない。
【０１９８】
定義
「血糖値」は、被検体の血中のグルコース濃度を意味する。ある種の実施形態では、血糖値は、血液１デシリットル当たりのグルコースのミリグラム数として表される。ある種の実施形態では、血糖値は、血液１リットル当たりのグルコースのｍｍｏｌ数として表される。
【０１９９】
「高血糖値」は、正常値より高い血糖値を意味する。
【０２００】
「絶食時血糖値」は、被検体が所定の時間にわたって絶食した後の血糖値を意味する。例えば、被検体は絶食時血糖値の計測前に少なくとも８時間絶食し得る。
【０２０１】
「食後血糖値」は、被検体が食事を取った後の血糖値を意味する。ある種の実施形態では、食後血糖値は、被検体が食事を取ってから２時間後に計測される。
【０２０２】
「全血血糖値」は、分離に供されていない全血中のグルコース濃度を意味する。
【０２０３】
「血漿血糖値」は、全血を血漿画分と赤血球画分とに分離した後の血漿中のグルコース濃度を意味する。
【０２０４】
「インスリン感受性」は、細胞がインスリン作用に応答してグルコースを取り込む能力を意味する。
【０２０５】
「インスリン抵抗性」は、正常なインスリン量が脂肪、筋肉及び肝細胞からの正常なインスリン応答を生じさせるのに不十分な状態を意味する。脂肪細胞におけるインスリン抵抗性は貯蔵トリグリセリドの加水分解をもたらし、これにより血中の遊離脂肪酸が上昇する。筋肉におけるインスリン抵抗性は、筋細胞による血液からのグルコースの取り込みを低下させる。肝臓におけるインスリン抵抗性はグルコース貯蔵を低下させ、グルコース産生を抑制することができなくなる。遊離脂肪酸の上昇、グルコース取り込みの低下、及びグルコース産生の上昇の何れもが、高血糖値に寄与する。インスリン抵抗性に起因する高い血漿中インスリン値及びグルコース値は、多くの場合にメタボリックシンドローム及び２型糖尿病につながる。
【０２０６】
「インスリン抵抗性を改善する」は、細胞が正常なインスリン応答を生じる能力を増加させることを意味する。ある種の実施形態では、筋細胞においてインスリン抵抗性が改善され、筋細胞のグルコース取り込みの増加につながる。ある種の実施形態では、肝細胞においてインスリン抵抗性が改善され、肝細胞のグルコース貯蔵の増加につながる。ある種の実施形態では、脂肪細胞においてインスリン抵抗性が改善され、トリグリセリドの加水分解の減少、及び結果的に血中の遊離脂肪酸の減少につながる。
【０２０７】
「代謝障害」は、体内の１つ又は複数の代謝過程の変化又は乱れによって特徴付けられる状態を意味する。代謝障害としては、以下に限定されるものではないが、高血糖症、前糖尿病、糖尿病、１型糖尿病、２型糖尿病、肥満、糖尿病性異脂肪血症、メタボリックシンドローム、及び高インスリン血症が挙げられる。「糖尿病」又は「真性糖尿病」は、体がインスリンを産生せず、又はそれを適切に利用しないため、血糖値が異常に高くなる疾患を意味する。ある種の実施形態では、糖尿病は１型糖尿病である。ある種の実施形態では、糖尿病は２型糖尿病である。
【０２０８】
「前糖尿病」は、被検体の血糖値が正常血糖値の被検体のものと比べて高いが、糖尿病と診断するには低く、それ程高くはない状態を意味する。
【０２０９】
「１型糖尿病」は、インスリンの欠乏につながる、膵臓内のランゲルハンス島のインスリン産生β細胞の損失によって特徴付けられる糖尿病（インスリン依存性真性糖尿病又はＩＤＤＭとしても知られる）を意味する。Ｉ型糖尿病は小児又は成人が罹患し得るが、典型的には１０〜１６歳で発病する。
【０２１０】
「２型糖尿病」は、インスリン抵抗性及び相対的インスリン欠乏によって特徴付けられる糖尿病（真性糖尿病２型としても知られ、及び旧称は真性糖尿病２型、非インスリン依存性糖尿病（ＮＩＤＤＭ）、肥満関連糖尿病、又は成人発症型糖尿病）を意味する。
【０２１１】
「肥満」は、除脂肪体重と比べて過剰に多量の体脂肪又は脂肪組織を意味する。体脂肪（又は脂肪過多）の量には、全身にわたる脂肪分布と脂肪組織蓄積物のサイズとの両方が含まれる。体脂肪分布は、皮下脂肪測定、ウエスト対ヒップ周囲比、又は超音波、コンピュータ断層撮影法、若しくは磁気共鳴画像法などの技法によって推定することができる。疾病予防管理センター（Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  ａｎｄ  Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ）によれば、ボディマスインデックス（ＢＭＩ）が３０以上の者が肥満と見なされる。
【０２１２】
「糖尿病性異脂肪血症」又は「異脂肪血症を伴う２型糖尿病」は、２型糖尿病、ＨＤＬ−Ｃの低下、血清トリグリセリドの上昇、及び小型高密度ＬＤＬ粒子の上昇によって特徴付けられる状態を意味する。
【０２１３】
「メタボリックシンドローム」は、脂質のクラスター化及び代謝が原因の非脂質リスク要因によって特徴付けられる状態を意味する。ある種の実施形態では、メタボリックシンドロームは、以下の要因のうちの何れか３つの存在によって特定される：男性で１０２ｃｍより大きい胴囲又は女性で８８ｃｍより大きい胴囲；少なくとも１５０ｍｇ／ｄＬの血清トリグリセリド；男性で４０ｍｇ／ｄＬ未満又は女性で５０ｍｇ／ｄＬ未満のＨＤＬ−Ｃ；少なくとも１３０／８５ｍｍＨｇの血圧；及び少なくとも１１０ｍｇ／ｄＬの空腹時血糖。これらの決定要因は臨床診療において容易に計測することができる（ＪＡＭＡ，２００１，２８５：２４８６−２４９７）。
【０２１４】
「脂肪症」は、肝細胞におけるトリグリセリドの過剰な蓄積によって特徴付けられる状態を意味する。
【０２１５】
「脂肪性肝炎」は、炎症を伴う脂肪症を意味する。
【０２１６】
「非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）」は、アルコールをほとんど乃至全く摂取しない被検体の肝臓における脂肪の蓄積によって特徴付けられる状態を意味する。ある種の実施形態では、ＮＡＦＬＤはインスリン抵抗性及びメタボリックシンドロームに関連する。「非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）」は、肝臓の炎症及び瘢痕を併発する肝臓における脂肪の蓄積によって特徴付けられる状態を意味する。ある種の実施形態では、ＮＡＳＨはＮＡＦＬＤの進行の悪化によって起こる。
【０２１７】
「アルコール性脂肪性肝炎（ＡＳＨ）」は、肝臓の炎症及び瘢痕を併発する肝臓における脂肪の蓄積によって特徴付けられる、アルコールによって引き起こされる状態を意味する。
【０２１８】
「グルコース負荷試験」又は「ＧＴＴ」は、血中からグルコースがどの程度速く除去されるかを決定するために行われる試験を意味する。典型的には、この試験には、グルコースの投与と、続く所定の時間にわたる間隔を置いた血中のグルコース値の計測が関わる。「ＩＰＧＴＴ」は、グルコースの腹腔内注射後に行われるＧＴＴを意味する。「ＯＧＴＴ」は、グルコースの経口投与後に行われるＧＴＴを意味する。ある種の実施形態では、ＧＴＴを用いて前糖尿病が試験される。ある種の実施形態では、ＧＴＴを用いて糖尿病を有する被検体が同定される。ある種の実施形態では、ＧＴＴを用いて糖尿病の発症リスクがある被検体が同定される。ある種の実施形態では、ＧＴＴを用いてインスリン抵抗性を有する被検体が同定される。
【０２１９】
「インスリン負荷試験（ＩＴＴ）」は、低血糖値のストレスに対するホルモン応答によってインスリン感受性を計測するために行われる試験を意味する。ある種の実施形態では、ＩＴＴを用いて前糖尿病が試験される。ある種の実施形態では、ＩＴＴを用いて糖尿病を有する被検体が同定される。ある種の実施形態では、ＩＴＴを用いて糖尿病の発症リスクがある被検体が同定される。ある種の実施形態では、ＩＴＴを用いてインスリン抵抗性を有する被検体が同定される。
【０２２０】
「代謝率」は、代謝の速度又は所与の期間で消費されるエネルギーの量を意味する。「基礎代謝率」は、吸収後状態において（即ち、消化器系が活動していないことを意味し、これにはヒトにおいて約１２時間の絶食が必要である）、中立的に温和な環境で安静時に消費されるエネルギーの量を意味する。この吸収後状態におけるエネルギーの放出は、心臓、肺、脳及び残りの神経系、肝臓、腎臓、生殖器官、筋肉及び皮膚などのバイタルな器官が機能するのに十分であるに過ぎない。
【０２２１】
「標的核酸」は、オリゴヌクレオチドがそれとハイブリダイズするように設計される核酸を意味する。
【０２２２】
「標的ＲＮＡ」は、オリゴヌクレオチドがそれと相補的であるＲＮＡを意味する。
【０２２３】
「標的化」は、標的核酸にハイブリダイズする核酸塩基配列の設計及び選択のプロセスを意味する。
【０２２４】
「〜を標的とする」は、標的核酸へのハイブリダイゼーションを可能にする核酸塩基配列を有することを意味する。
【０２２５】
「標的結合」は、マイクロＲＮＡの活性、発現又はレベルを変化させる形でオリゴヌクレオチドと、相補的なマイクロＲＮＡとが相互作用することを意味する。ある種の実施形態では、標的結合は、マイクロＲＮＡの活性が阻害されるように抗ｍｉＲと、相補的なマイクロＲＮＡとが相互作用することを意味する。
【０２２６】
「調節」は、機能、量又は活性の変質を意味する。ある種の実施形態では、調節は機能、量又は活性の増加を意味する。ある種の実施形態では、調節は機能、量又は活性の低下を意味する。
【０２２７】
「発現」は、遺伝子のコードされた情報が、細胞内に存在して機能する構造体に変換される任意の機能及び段階を意味する。
【０２２８】
「５’標的部位」は、特定のオリゴヌクレオチドの最も３’側の核酸塩基と相補的な標的核酸の核酸塩基を意味する。
【０２２９】
「３’標的部位」は、特定のオリゴヌクレオチドの最も５’側の核酸塩基と相補的な標的核酸の核酸塩基を意味する。
【０２３０】
「領域」は、核酸においてヌクレオシドが連結した部分を意味する。ある種の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、標的核酸の領域と相補的な核酸塩基配列を有する。例えば、ある種の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、マイクロＲＮＡステムループ配列の領域と相補的である。ある種の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、マイクロＲＮＡステムループ配列の領域と完全に相補的である。
【０２３１】
「セグメント」は、領域のより小さな部分又は細部分を意味する。
【０２３２】
「マイクロＲＮＡ」は、１８〜２５核酸塩基長の内因性非コードＲＮＡを意味し、これは、酵素ダイサーによるプレ−マイクロＲＮＡの切断産物である。成熟マイクロＲＮＡの例は、ｍｉＲＢａｓｅ（ｈｔｔｐ：／／ｍｉｃｒｏｒｎａ．ｓａｎｇｅｒ．ａｃ．ｕｋ／）として知られるマイクロＲＮＡデータベースに収載されている。ある種の実施形態では、マイクロＲＮＡは「マイクロＲＮＡ」又は「ｍｉＲ」と省略される。
【０２３３】
「プレ−マイクロＲＮＡ」又は「ｐｒｅ−ｍｉＲ」は、ヘアピン構造を有する非コードＲＮＡを意味し、これは、Ｄｒｏｓｈａとして知られる二本鎖ＲＮＡ特異的リボヌクレアーゼによるｐｒｉ−ｍｉＲの切断産物である。
【０２３４】
「ステム−ループ配列」は、ヘアピン構造を有し、且つ成熟マイクロＲＮＡ配列を含有するＲＮＡを意味する。プレ−マイクロＲＮＡ配列とステム−ループ配列とは重複し得る。ステム−ループ配列の例は、ｍｉＲＢａｓｅ（ｈｔｔｐ：／／ｍｉｃｒｏｒｎａ．ｓａｎｇｅｒ．ａｃ．ｕｋ／）として知られるマイクロＲＮＡデータベースに収載されている。
【０２３５】
「プリ−マイクロＲＮＡ」又は「ｐｒｉ−ｍｉＲ」は、二本鎖ＲＮＡ特異的リボヌクレアーゼＤｒｏｓｈａの基質であるヘアピン構造を有する非コードＲＮＡを意味する。
【０２３６】
「マイクロＲＮＡ前駆体」は、ゲノムＤＮＡに由来する転写物であって、且つ１つ又は複数のマイクロＲＮＡ配列を含む非コードの構造化されたＲＮＡを含む転写物を意味する。例えば、ある種の実施形態では、マイクロＲＮＡ前駆体はプレ−マイクロＲＮＡである。ある種の実施形態では、マイクロＲＮＡ前駆体はプリ−マイクロＲＮＡである。
【０２３７】
「マイクロＲＮＡ制御転写物」は、マイクロＲＮＡによって制御される転写物を意味する。
【０２３８】
「モノシストロン性転写物」は、単一のマイクロＲＮＡ配列を含むマイクロＲＮＡ前駆体を意味する。
【０２３９】
「ポリシストロン性転写物」は、２つ以上のマイクロＲＮＡ配列を含むマイクロＲＮＡ前駆体を意味する。
【０２４０】
「シード配列」は、成熟マイクロＲＮＡ配列の５’末端の核酸塩基１〜９のうちの６〜８個の連続する核酸塩基を含む核酸塩基配列を意味する。
【０２４１】
「シードマッチ配列」は、シード配列と相補的であり、且つシード配列と同じ長さの核酸塩基配列を意味する。
【０２４２】
「抗ｍｉＲ」は、マイクロＲＮＡと相補的な核酸塩基配列を有するオリゴヌクレオチドを意味する。ある種の実施形態では、抗ｍｉＲは修飾オリゴヌクレオチドである。
【０２４３】
「抗ｍｉＲ−１０３／１０７」は、ｍｉＲ−１０３及びｍｉＲ１０７と相補的な核酸塩基配列を有するオリゴヌクレオチドを意味する。ある種の実施形態では、抗ｍｉＲ−１０３／１０７はｍｉＲ−１０３及びｍｉＲ−１０７と９０％相補的である。いくつかのそうした実施形態では、抗ｍｉＲ−１０３／１０７オリゴヌクレオチドは１０個の連結したヌクレオシドからなり、ここで９個の連結したヌクレオチドはｍｉＲ−１０３及びｍｉＲ−１０７と完全に相補的であり、及び１個のヌクレオシドはミスマッチである。いくつかのそうした実施形態では、ミスマッチは抗ｍｉＲ−１０３／１０７オリゴヌクレオチドの３’末端に位置する。ある種の実施形態では、抗ｍｉＲ−１０３／１０７はｍｉＲ−１０３及びｍｉＲ−１０７と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％相補的である。ある種の実施形態では、抗ｍｉＲ−１０３／１０７は修飾オリゴヌクレオチドである。
【０２４４】
「完全修飾オリゴヌクレオチド」は、各核酸塩基、各糖、及び／又は各ヌクレオシド間結合が修飾されていることを意味する。
【０２４５】
「均一修飾オリゴヌクレオチド」は、各核酸塩基、各糖、及び／又は各ヌクレオシド間結合がその修飾オリゴヌクレオチド全体にわたって同じ修飾を有することを意味する。
【０２４６】
「ギャップマー」は、連結したヌクレオシドの２つの外部領域間に位置する連結したβ−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドの内部領域を有する修飾オリゴヌクレオチドを意味し、ここで各外部領域の各ヌクレオシドは修飾糖部分を含む。β−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドは修飾核酸塩基を有することも、又は有しないこともある。
【０２４７】
「ギャップ」は、外部領域間に位置するギャップマーの内部領域である。
【０２４８】
「ウィング」は、ギャップマーの内部領域の５’又は３’末端に隣接するギャップマーの外部領域である。
【０２４９】
「対称ギャップマー」は、各外部領域の各ヌクレオシドが同じ糖修飾を含むことを意味する。
【０２５０】
「非対称ギャップマー」は、一方の外部領域の各ヌクレオシドが第１の糖修飾を含み、且つ他方の外部領域の各ヌクレオシドが第２の糖修飾を含むことを意味する。
【０２５１】
「核酸塩基配列」は、典型的には任意の糖、結合及び／又は核酸塩基の修飾と関係なく５’から３’方向に記載された、オリゴマー化合物又は核酸において連続する核酸塩基の順序を意味する。
【０２５２】
「連続する核酸塩基」は、核酸において互いに直接隣接する核酸塩基を意味する。
【０２５３】
「核酸塩基相補性」は、２つの核酸塩基が水素結合を介して非共有結合により対を形成できることを意味する。
【０２５４】
「相補的」は、１つの核酸がもう１つの核酸又はオリゴヌクレオチドにハイブリダイズできることを意味する。ある種の実施形態では、相補的とは、オリゴヌクレオチドが標的核酸にハイブリダイズできることをいう。
【０２５５】
「完全に相補的」は、オリゴヌクレオチドの各核酸塩基が、対応する各々の位置で標的核酸の核酸塩基と対を形成できることを意味する。ある種の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、マイクロＲＮＡと完全に相補的である、即ちオリゴヌクレオチドの各核酸塩基が、対応する各々の位置でマイクロＲＮＡの核酸塩基と相補的である。ある種の実施形態では、各核酸塩基がマイクロＲＮＡステムループ配列の領域内の核酸塩基と相補性を有するオリゴヌクレオチドは、マイクロＲＮＡステムループ配列と完全に相補的である。
【０２５６】
「相補性パーセント」は、同じ長さの標的核酸の部分と相補的なオリゴヌクレオチドの核酸塩基の割合を意味する。相補性パーセントは、オリゴヌクレオチドのうち、対応する位置で標的核酸の核酸塩基と相補的な核酸塩基の数を、オリゴヌクレオチドの核酸塩基の総数で割ることにより計算される。
【０２５７】
「同一性パーセント」は、第１の核酸のうち、対応する位置で第２の核酸の核酸塩基と同一である核酸塩基の数を、第１の核酸の核酸塩基の総数で割った商を意味する。ある種の実施形態では、第１の核酸はマイクロＲＮＡであり、第２の核酸はマイクロＲＮＡである。ある種の実施形態では、第１の核酸はオリゴヌクレオチドであり、第２の核酸はオリゴヌクレオチドである。
【０２５８】
「ハイブリダイズする」は、核酸塩基の相補性により相補的核酸のアニーリングが起こることを意味する。
【０２５９】
「ミスマッチ」は、第１の核酸の核酸塩基が、対応する位置で第２の核酸の核酸塩基と対を形成できないことを意味する。
【０２６０】
核酸塩基配列に関連して、「同一の」は、糖、結合及び／又は核酸塩基の修飾に関係なく、且つ、存在する任意のピリミジンのメチル状態にも関係なく、同じ核酸塩基配列を有することを意味する。
【０２６１】
「ｍｉＲ−１０３」は、配列番号１に記載される核酸塩基配列（ＡＧＣＡＧＣＡＵＵＧＵＡＣＡＧＧＧＣＵＡＵＧＡ）を有する成熟ｍｉＲＮＡを意味する。
【０２６２】
「ｍｉＲ−１０７」は、配列番号２に記載される核酸塩基配列（ＡＧＣＡＧＣＡＵＵＧＵＡＣＡＧＧＧＣＵＡＵＣＡ）を有する成熟ｍｉＲＮＡを意味する。「ｍｉＲ−１０３−１ステム−ループ配列」は、配列番号３に記載される核酸塩基配列
【化８】
2017523790.tif 000009
を有するｍｉＲ−１０３前駆体を意味する。
【０２６３】
「ｍｉＲ−１０３−２」は、配列番号４に記載される核酸塩基配列
【化９】
2017523790.tif 000010
を有するｍｉＲ−１０３前駆体を意味する。
【０２６４】
「ｍｉＲ−１０７ステムループ配列」は、配列番号５に記載される核酸塩基配列
【化１０】
2017523790.tif 000011
を有するｍｉＲ−１０７前駆体を意味する。
【０２６５】
「ｍｉＲ−１０３／ｍｉＲ−１０７」は、配列番号１又は配列番号２の核酸塩基配列を有するマイクロＲＮＡを意味する。
【０２６６】
「オリゴマー化合物」は、複数の連結したモノマーサブユニットを含む化合物を意味する。オリゴマー化合物はオリゴヌクレオチドを含んでいた。
【０２６７】
「オリゴヌクレオチド」は、複数の連結したヌクレオシドを含む化合物を意味し、その各々は、互いに独立に修飾されていても、又は非修飾であってもよい。
【０２６８】
「天然のヌクレオシド間結合」は、ヌクレオシド間の３’から５’のホスホジエステル結合を意味する。
【０２６９】
「ヌクレオシド間結合」は、隣接するヌクレオシド間の共有結合を意味する。
【０２７０】
「連結したヌクレオシド」は、共有結合により連結されたヌクレオシドを意味する。
【０２７１】
「核酸塩基」は、別の核酸塩基と非共有結合的に対を形成することができる複素環部分を意味する。
【０２７２】
「ヌクレオシド」は、核酸塩基が糖部分に結合したものを意味する。
【０２７３】
「ヌクレオチド」は、ヌクレオシドの糖部に共有結合したリン酸基を有するヌクレオシドを意味する。
【０２７４】
いくつかの連結したヌクレオシド「からなる修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物」は、所定の数の連結したヌクレオシドを有する修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物を意味する。従って、化合物は、追加の置換基又はコンジュゲートを含んでもよい。他に記載がない限り、化合物は、修飾オリゴヌクレオチドのヌクレオシド以外に任意の追加のヌクレオシドを含まない。
【０２７５】
「修飾オリゴヌクレオチド」は、天然の末端、糖、核酸塩基及び／又はヌクレオシド間結合に関して１つ又は複数の修飾を有するオリゴヌクレオチドを意味する。修飾オリゴヌクレオチドは、非修飾ヌクレオシドを含んでもよい。
【０２７６】
「修飾オリゴヌクレオチドの領域」は、本明細書に示される修飾オリゴヌクレオチド構造（例えば、［オリゴ１］−［ｘ−Ｎ］m−ｘ−［オリゴ２］又は［オリゴ１］−［ｘ−Ｎ］m−ｘ−［オリゴ２］−［ｘ−Ｎ］m−ｘ−［オリゴ３］）においてオリゴ１、オリゴ２、又はオリゴ３として記載される部分を指す。修飾オリゴヌクレオチドの領域は抗ｍｉＲ−１０３／１０７であってもよい。いくつかの実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの各領域は抗ｍｉＲ−１０３／１０７である。従って、いくつかの実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは構造［抗ｍｉＲ−１０３／１０７］−［ｘ−Ｎ］m−ｘ−［抗ｍｉＲ−１０３／１０７］を有し得る。
【０２７７】
「一本鎖修飾オリゴヌクレオチド」は、相補鎖とハイブリダイズしていない修飾オリゴヌクレオチドを意味する。
【０２７８】
「修飾ヌクレオシド」は、天然に存在するヌクレオシドと何らかの違いを有するヌクレオシドを意味する。修飾ヌクレオシドは修飾糖及び非修飾核酸塩基を有し得る。修飾ヌクレオシドは修飾糖及び修飾核酸塩基を有し得る。修飾ヌクレオシドは天然糖及び修飾核酸塩基を有し得る。
【０２７９】
「２’−修飾ヌクレオシド」は、２−デオキシリボース又はリボースにおいて位置が付番されるときフラノシル環の２’位と均等な位置に任意の修飾を有する糖を含むヌクレオシドを意味する。２’−修飾ヌクレオシドには、限定なしに、二環式糖部分を含むヌクレオシドが含まれることは理解されるべきである。
【０２８０】
「修飾ヌクレオシド間結合」は、天然に存在するヌクレオシド間結合との何らかの違いを意味する。
【０２８１】
「ホスホロチオエートヌクレオシド間結合」は、非架橋原子の１つが硫黄原子であるヌクレオシド間の連結を意味する。
【０２８２】
「ホスホロチオエート連結」は、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合と同じ構造、例えば、−ＯＰ（Ｏ）（Ｓ）Ｏ−を有する２つの化学的部分の間の連結を意味する。
【０２８３】
「リン酸ジエステル連結」は、リン酸ジエステルヌクレオシド間結合と同じ構造、例えば、−ＯＰ（Ｏ）2Ｏ−を有する２つの化学的部分の間の連結を意味する。
【０２８４】
「非修飾核酸塩基」は、ＲＮＡ又はＤＮＡの天然に存在する複素環塩基：プリン塩基アデニン（Ａ）及びグアニン（Ｇ）、及びピリミジン塩基チミン（Ｔ）、シトシン（Ｃ）（５−メチルシトシンを含む）、及びウラシル（Ｕ）を意味する。
【０２８５】
「５−メチルシトシン」は、５位に結合したメチル基を含むシトシンを意味する。
【０２８６】
「修飾核酸塩基」は、非修飾核酸塩基でない任意の核酸塩基を意味する。
【０２８７】
「フラノシル」は、４個の炭素原子及び１個の酸素原子からなる５員環を含む構造を意味する。
【０２８８】
「天然のフラノシル」は、天然のＲＮＡに見られるようなリボフラノシル、又は天然のＤＮＡに見られるようなデオキシリボフラノシルを意味する。
【０２８９】
「糖部分」は、天然のフラノシル又は修飾糖部分を意味する。
【０２９０】
「修飾糖部分」は、置換糖部分又は代用糖を意味する。
【０２９１】
「置換糖部分」は、天然のフラノシルでないフラノシルを意味する。置換糖部分には、以下に限定されるものではないが、天然のフラノシルの２’位、５’位及び／又は４’位に修飾を含む糖部分がある。ある種の置換糖部分は二環式糖部分である。
【０２９２】
「代用糖」は、フラノシルを含まず、且つヌクレオシドの天然のフラノシルの代わりになることができ、その結果得られるヌクレオシドが（１）オリゴヌクレオチドへの取り込み、及び（２）相補的ヌクレオシドへのハイブリダイゼーションが可能である構造を意味する。こうした構造は、異なる数の原子を含む環（例えば、４員環、６員環又は７員環）；フラノシルの酸素と非酸素原子（例えば、炭素、硫黄又は窒素）との交換；又は原子数の変化と酸素の交換との両方などフラノシルの比較的単純な変化を含む。こうした構造は、置換糖部分に記載した置換に対応する置換を更に含んでもよい（例えば、追加の置換基を任意に含む６員の二環式炭素環式代用糖）。代用糖は、より複雑な糖の交換を更に含んでもよい（例えば、ペプチド核酸の非環系）。代用糖は、以下に限定されるものではないが、モルホリノ、シクロヘキセニル及びシクロヘキシトールを含む。
【０２９３】
「β−Ｄ−デオキシリボース」は、天然に存在するＤＮＡ糖部分を意味する。
【０２９４】
「β−Ｄ−リボース」は、天然に存在するＲＮＡ糖部分を意味する。
【０２９５】
「２’−Ｏ−メチル糖」又は「２’−ＯＭｅ糖」は、２’位にＯ−メチル修飾を有する糖を意味する。
【０２９６】
「２’−Ｏ−メトキシエチル糖」又は「２’−ＭＯＥ糖」は、２’位にＯ−メトキシエチル修飾を有する糖を意味する。
【０２９７】
「２’−フルオロ」又は「２’−Ｆ」は、２’位にフルオロ修飾を有する糖を意味する。
【０２９８】
「二環式糖部分」は、４〜７員環の２個の原子を連結して第２の環を形成して、二環式構造を生じさせる架橋を含む、４〜７員環（以下に限定されるものではないが、フラノシル）を含む修飾糖部分を意味する。ある種の実施形態では、４〜７員環は糖環である。ある種の実施形態では４〜７員環はフラノシルである。そうしたある種の実施形態では、架橋はフラノシルの２’−炭素及び４’−炭素を連結する。
非限定的な例示的二環式糖部分として、ＬＮＡ、ＥＮＡ、ｃＥｔ、Ｓ−ｃＥｔ及びＲ−ｃＥｔが挙げられる。
【０２９９】
「ロックド核酸（ＬＮＡ）糖部分」は、フラノース環の２’の原子と４’の原子との間に（ＣＨ2）−Ｏ架橋を含む置換糖部分を意味する。
【０３００】
「ＥＮＡ糖部分」は、フラノース環の２’の原子と４’の原子との間に（ＣＨ2）2−Ｏ架橋を含む置換糖部分を意味する。
【０３０１】
「規制されたエチル（ｃＥｔ）糖部分」は、フラノース環の４’の原子と２’の原子との間にＣＨ（ＣＨ3）−Ｏ架橋を含む置換糖部分を意味する。ある種の実施形態では、ＣＨ（ＣＨ3）−Ｏ架橋は、Ｓ方向に規制される。ある種の実施形態では、ＣＨ（ＣＨ3）−Ｏ架橋はＲ方向に規制される。
【０３０２】
「Ｓ−ｃＥｔ糖部分」は、フラノース環の４’の原子と２’の原子との間にＳ−規制ＣＨ（ＣＨ3）−Ｏ架橋を含む置換糖部分を意味する。
【０３０３】
「Ｒ−ｃＥｔ糖部分」は、フラノース環の４’の原子と２’の原子との間にＲ−規制ＣＨ（ＣＨ3）−Ｏ架橋を含む置換糖部分を意味する。
【０３０４】
「２’−Ｏ−メチル」ヌクレオシドは、２’−Ｏ−メチル糖修飾を含む修飾ヌクレオシドを意味する。
【０３０５】
「２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシド」は、２’−Ｏ−メトキシエチル糖修飾を有する修飾ヌクレオシドを意味する。２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドは、修飾核酸塩基を含んでも、又は非修飾核酸塩基を含んでもよい。
【０３０６】
「２’−フルオロヌクレオシド」は、２’−フルオロ糖修飾を有する修飾ヌクレオシドを意味する。２’−フルオロヌクレオシドは、修飾核酸塩基を含んでも、又は非修飾核酸塩基を含んでもよい。
【０３０７】
「二環式ヌクレオシド」は、二環式糖部分を有する修飾ヌクレオシドを意味する。二環式ヌクレオシドは、修飾核酸塩基を有しても、又は非修飾核酸塩基を有してもよい。
【０３０８】
「ｃＥｔヌクレオシド」は、ｃＥｔ糖部分を含むヌクレオシドを意味する。ｃＥｔヌクレオシドは、修飾核酸塩基を含んでも、又は非修飾核酸塩基を含んでもよい。
【０３０９】
「Ｓ−ｃＥｔヌクレオシド」は、Ｓ−ｃＥｔ糖部分を含むヌクレオシドを意味する。
【０３１０】
「Ｒ−ｃＥｔヌクレオシド」は、Ｒ−ｃＥｔ糖部分を含むヌクレオシドを意味する。
【０３１１】
「非二環式ヌクレオシド」は、二環式糖以外の糖を有するヌクレオシドを意味する。ある種の実施形態では、非二環式ヌクレオシドは天然の糖を含む。ある種の実施形態では、非二環式ヌクレオシドは修飾糖を含む。ある種の実施形態では、非二環式ヌクレオシドはβ−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドである。ある種の実施形態では、非二環式ヌクレオシドは２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドである。
【０３１２】
「β−Ｄ−デオキシリボヌクレオシド」は、天然に存在するＤＮＡヌクレオシドを意味する。
【０３１３】
「β−Ｄ−リボヌクレオシド」は、天然に存在するＲＮＡヌクレオシドを意味する。
【０３１４】
「ＬＮＡヌクレオシド」は、ＬＮＡ糖部分を含むヌクレオシドを意味する。
【０３１５】
「ＥＮＡヌクレオシド」は、ＥＮＡ糖部分を含むヌクレオシドを意味する。
【０３１６】
「モチーフ」は、オリゴヌクレオチドにおける修飾及び／若しくは非修飾の核酸塩基、糖並びに／又はヌクレオシド間結合のパターンを意味する。ある種の実施形態では、モチーフはヌクレオシドパターンである。
【０３１７】
「ヌクレオシドパターン」は、オリゴヌクレオチドにおけるヌクレオシド修飾のパターン又はその領域を意味する。ヌクレオシドパターンは、オリゴヌクレオチドにおけるヌクレオシド修飾の構成を説明するモチーフである。
【０３１８】
「安定化修飾」は、ホスホジエステルヌクレオシド間結合により結合された２’−デオキシヌクレオシドによって与えられる安定性に比べて、ヌクレアーゼの存在下で、修飾オリゴヌクレオチドに強い安定性を与えるヌクレオシドの修飾を意味する。例えば、ある種の実施形態では、安定化修飾は安定化ヌクレオシド修飾である。ある種の実施形態では、安定化修飾はヌクレオシド間結合修飾である。
【０３１９】
「安定化ヌクレオシド」は、２’−デオキシヌクレオシドにより与えられる安定性に比べて、オリゴヌクレオチドに強いヌクレアーゼ安定性を与えるヌクレオシド修飾を意味する。一実施形態では、安定化ヌクレオシドは２’−修飾ヌクレオシドである。
【０３２０】
「安定化ヌクレオシド間結合」は、ホスホジエステルヌクレオシド間結合により与えられる安定性に比べて、オリゴヌクレオチドに改善されたヌクレアーゼ安定性を与えるヌクレオシド間結合を意味する。一実施形態では、安定化ヌクレオシド間結合はホスホロチオエートヌクレオシド間結合である。
【０３２１】
「連結基」は、本明細書で使用されるとき、第１の化学物質を１つ又は複数の共有結合を介して第２の化学物質に結合させる原子又は原子団を指す。
【０３２２】
「リンカー」は、本明細書で使用されるとき、１つ又は複数のリガンドを１つ又は複数の共有結合を介して修飾又は非修飾ヌクレオシドに結合させる原子又は原子団を指す。修飾又は非修飾ヌクレオシドは、本明細書に記載されるとおりの修飾オリゴヌクレオチドの一部であってもよく、或いはリン酸ジエステル結合又はホスホロチオエート結合によって修飾オリゴヌクレオチドに結合していてもよい。いくつかの実施形態では、リンカーは１つ又は複数のリガンドを修飾オリゴヌクレオチドの３’末端に結合させる。いくつかの実施形態では、リンカーは１つ又は複数のリガンドを修飾オリゴヌクレオチドの５’末端に結合させる。いくつかの実施形態では、リンカーは１つ又は複数のリガンドを、修飾オリゴヌクレオチドの３’末端に結合している修飾又は非修飾ヌクレオシドに結合させる。いくつかの実施形態では、リンカーは１つ又は複数のリガンドを、修飾オリゴヌクレオチドの５’末端に結合している修飾又は非修飾ヌクレオシドに結合させる。リンカーが１つ又は複数のリガンドを修飾オリゴヌクレオチドの３’末端に結合させるか、又は修飾オリゴヌクレオチドの３’末端に結合している修飾又は非修飾ヌクレオシドに結合させる場合、いくつかの実施形態では、リンカーの結合点は修飾又は非修飾糖部分の３’炭素であり得る。リンカーが１つ又は複数のリガンドを修飾オリゴヌクレオチドの５’末端に結合させるか、又は修飾オリゴヌクレオチドの５’末端に結合している修飾又は非修飾ヌクレオシドに結合させる場合、いくつかの実施形態では、リンカーの結合点は修飾又は非修飾糖部分の５’炭素であり得る。
【０３２３】
「被検体」は、処置又は治療に選択されるヒト又は非ヒト動物を意味する。
【０３２４】
「それを必要とする被検体」は、被検体が治療又は処置を必要とすると判定される状態を意味する。
【０３２５】
「〜を有する疑いがある被検体」は、疾患の１つ又は複数の臨床徴候を示す被検体を意味する。
【０３２６】
「投与すること」は、被検体に医薬品又は組成物を与えることを意味し、以下に限定されるものではないが、医療専門家による投与及び自己投与を含む。
【０３２７】
「非経口投与」は、注射又は注入による投与を意味する。
【０３２８】
非経口投与は、以下に限定されるものではないが、皮下投与、静脈内投与又は筋肉内投与を含む。
【０３２９】
「皮下投与」は、皮膚直下の投与を意味する。
【０３３０】
「静脈内投与」は、静脈への投与を意味する。
【０３３１】
「心臓内投与」は、心臓への投与を意味する。ある種の実施形態では、心臓内投与はカテーテルによって行われる。ある種の実施形態では、心臓内投与は直視下心臓手術によって行われる。
【０３３２】
「経肺投与」は、肺への投与を意味する。
【０３３３】
「併用投与される」は、２つの薬理効果が患者に同時に現れる任意の方法で２種の薬が併用投与されることをいう。併用投与は、２種の薬を単一の医薬組成物で投与したり、同じ剤形で投与したり、又は同じ投与経路で投与したりする必要はない。２種の薬の作用自体は、同時に現れる必要はない。効果は一定期間重複するのみでよく、同じ長さを持つ必要はない。
【０３３４】
「持続期間」は、活性又はイベントが継続する期間を意味する。ある種の実施形態では、処置の持続期間は、医薬品又は医薬組成物の用量が投与される期間である。
【０３３５】
「治療」は、疾患の処置方法を意味する。ある種の実施形態では、治療は、以下に限定されるものではないが、化学療法、放射線治療、又は医薬品の投与を含む。
【０３３６】
「処置」は、疾患の治癒又は軽減のために使用される１つ又は複数の特定の手順を適用することを意味する。ある種の実施形態では、特定の手順は、１つ又は複数の医薬品の投与である。
【０３３７】
「軽減」は、状態又は疾患の少なくとも１つの指標の重症度を低下させることを意味する。ある種の実施形態では、軽減は、状態又は疾患の１つ又は複数の指標の進行を遅延させる又は遅らせることを含む。指標の重症度は、当業者に公知の主観的基準又は客観的基準により判定することができる。
【０３３８】
「〜を発症するリスクがある」は、被検体がある状態又は疾患を発症しやすい状態にあることを意味する。ある種の実施形態では、状態又は疾患を発症するリスクがある被検体は、その状態又は疾患の１つ又は複数の症状を示すものの、その状態又は疾患と診断されるのに十分な数の症状を示さない。ある種の実施形態では、状態又は疾患を発症するリスクがある被検体は、状態又は疾患の１つ又は複数の症状を示すものの、状態又は疾患と診断するのに必要とされるより少ない程度で示す。
【０３３９】
「〜の発症を予防する」は、疾患又は状態を発症するリスクがある被検体の状態又は疾患の発生を予防することを意味する。ある種の実施形態では、疾患又は状態を発症するリスクがある被検体は、疾患又は状態を既に有する被検体が受けた処置と同様の処置を受ける。
【０３４０】
「〜の発症の遅延させる」は、疾患又は状態を発症するリスクがある被検体の状態又は疾患の発生を遅延させることを意味する。ある種の実施形態では、疾患又は状態を発症するリスクがある被検体は、疾患又は状態を既に有する被検体が受けた処置と同様の処置を受ける。
【０３４１】
「治療薬」は、疾患の治癒、軽減又は予防に使用される医薬品を意味する。
【０３４２】
「用量」は、１回の投与で与えられる医薬品の所定量を意味する。ある種の実施形態では、用量を２以上のボーラス、錠剤又は注射で投与してもよい。例えば、皮下投与が所望であるある種の実施形態では、所望の用量は、１回の注射で容易に与えられない量を必要とする。そうした実施形態では、所望の用量を達成するため２回以上の注射を使用してもよい。ある種の実施形態では、用量は、２回以上の注射で投与して個体の注射部位反応を最小限に抑えてもよい。
【０３４３】
「投薬単位」は、医薬品が与えられる形態を意味する。ある種の実施形態では、投薬単位は、凍結乾燥オリゴヌクレオチドを含むバイアルである。ある種の実施形態では、投薬単位は、再溶解したオリゴヌクレオチドを含むバイアルである。
【０３４４】
「治療有効量」は、動物に治療上の利益を与える医薬品の量をいう。
【０３４５】
「医薬組成物」は、医薬品など個体への投与に好適な物質の混合物を意味する。例えば、医薬組成物は無菌水溶液を含んでもよい。
【０３４６】
「医薬品」は、被検体に投与すると治療効果を与える物質を意味する。
【０３４７】
「医薬活性成分」は、所望の作用を与える医薬組成物中の物質を意味する。
【０３４８】
「薬学的に許容される塩」は、本明細書に提供される化合物の生理学的及び薬学的に許容される塩、即ち、化合物の所望の生物学的活性を保持しており、且つ被検体への投与時に望ましくない毒性効果を有しない塩を意味する。本明細書に提供される化合物の非限定的で例示的な薬学的に許容される塩としては、ナトリウム及びカリウム塩形態が挙げられる。用語「化合物」は、本明細書で使用されるとき、特に具体的に指示されない限り、その薬学的に許容される塩を含む。
【０３４９】
「肝臓機能の改善」は、正常範囲に向けた肝臓機能の変化を意味する。ある種の実施形態では、肝臓機能は、被検体の血液中に見られる分子の測定により評価される。例えば、ある種の実施形態では、肝機能の改善は、肝トランスアミナーゼの血中レベルの低下により測定される。
【０３５０】
「許容可能な安全性プロファイル」は、臨床的に許容できる範囲内にある副作用のパターンを意味する。
【０３５１】
「副作用」は、処置に起因する所望の作用以外の生理反応を意味する。ある種の実施形態では、副作用は、以下に限定されるものではないが、注射部位反応、肝機能検査異常、腎機能異常、肝毒性、腎毒性、中枢神経系異常及びミオパチーを含む。こうした副作用は直接的に検出しても、又は間接的に検出してもよい。例えば、血清中のアミノトランスフェラーゼレベルの上昇から、肝毒性又は肝機能異常が示唆されることがある。例えば、ビリルビンの増加から、肝毒性又は肝機能異常が示唆されることがある。
【０３５２】
「注射部位反応」は、個体の注射部位における皮膚の炎症又は異常な発赤を意味する。
【０３５３】
「被検体のコンプライアンス」は、推奨又は処方された治療が被検体により遵守されることを意味する。
【０３５４】
「遵守する」は、被検体が推奨された治療を遵守することを意味する。
【０３５５】
「推奨された治療」は、疾患の処置、改善、又は予防のため医療専門家によって推奨される治療を意味する。
【０３５６】
概要
代謝障害は、生体の代謝機能の１つ又は複数の異常によって特徴付けられる。ある種の代謝障害は、体による血糖の利用の仕方に欠陥があって、そのため異常に高い血糖値となることに関連する。代謝障害はまた、インスリン産生の欠損、又はインスリンに対する感受性の欠損によって特徴付けることもできる。代謝障害は世界に何百万人もの罹患者がおり、生命を脅かす障害であり得る。そのため、代謝障害を処置し、その発症を予防し、又は遅延させる方法及び組成物が必要とされている。
【０３５７】
ｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７と相補的なオリゴヌクレオチドの投与により、血糖値の改善、糖新生の低下、インスリン感受性の増強、及び血漿コレステロールの低下が得られている。例えば、ＰＣＴ公開番号２０１０／１３３９７０  Ａ１号明細書を参照されたい。これらの効果は、糖尿病／インスリン抵抗性動物モデルで観察された。また、体重の減少も観察されたが、これは体脂肪の減少が原因であった。ｍｉＲ−１０３とｍｉＲ−１０７との違いは１つの核酸塩基であるため、ｍｉＲ−１０３の核酸塩基配列と相補的な配列を有するオリゴヌクレオチドはｍｉＲ−１０３及びｍｉＲ−１０７の両方とハイブリダイズしてその活性を阻害し得る。同様に、ｍｉＲ−１０７の核酸塩基配列と相補的な配列を有するオリゴヌクレオチドはｍｉＲ−１０３及びｍｉＲ−１０７の両方とハイブリダイズしてその活性を阻害し得る。そのため、ｍｉＲ−１０３及びｍｉＲ−１０７の何れか一方又は両方と相補的なオリゴヌクレオチドを使用して、本明細書に記載される表現型の結果を実現し得る。
【０３５８】
ｍｉＲ−１０３、ｍｉＲ−１０７又はそれらの前駆体と相補的なオリゴヌクレオチドを含む化合物を投与すると、１つ又は複数の臨床的に望ましい結果がもたらされ得る。かかる臨床的に望ましい結果には、以下に限定されるものではないが、血糖値の低下、ヘモグロビンＡ１ｃ（ＨｂＡ１ｃ）値の低下、耐糖能の改善、インスリン抵抗性の改善、及び糖新生の低下が含まれる。
【０３５９】
従って、本明細書に提供されるのは、血糖値を低下させ、糖新生を減少させ、インスリン感受性を改善し、及び血漿コレステロールを減少させる方法及び組成物である。本明細書で更に提供されるのは、血糖値の上昇、糖新生の増加、インスリン感受性の障害、及び血漿コレステロールの増加に関連する代謝障害を処置し、その発症を予防し、又は遅延させる方法である。ある種の実施形態では、代謝障害としては、以下に限定されるものではないが、前糖尿病、１型又は２型糖尿病を含めた糖尿病、メタボリックシンドローム、肥満、糖尿病性異脂肪血症、高血糖症、低血糖症、及び高インスリン血症が挙げられる。ある種の実施形態では、代謝障害を有する被検体は脂肪肝疾患を有する。ある種の実施形態では、脂肪肝疾患としては、以下に限定されるものではないが、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、アルコール性脂肪肝疾患、及び非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）が挙げられる。
【０３６０】
本発明は、単一化合物の投与を可能にする新規構造を提供し、この化合物は、各々がマイクロＲＮＡ（これらは同じであっても、又は異なってもよい）に標的化される２つ以上の領域を含む修飾オリゴヌクレオチドを含む。修飾オリゴヌクレオチドは領域間に１つ又は複数のリン酸ジエステル結合及び／又は非修飾ヌクレオシドを含み、これらによって例えば標的組織において修飾オリゴヌクレオチドが少なくとも部分的に分解してその個別の領域になることが可能となり、従って標的組織において各領域がそのそれぞれのマイクロＲＮＡを個別に標的化することが可能となる。
【０３６１】
修飾オリゴヌクレオチドの活性は、修飾オリゴヌクレオチドとその標的ＲＮＡとの間に起こり、且つ所望の薬理学的エンドポイントを生じる特異的ハイブリダイゼーションイベントに基づく。これが起こるためには、ある種の薬物動態学的過程、例えば、標的細胞又は組織へのインタクトな薬物の送達、及び標的ＲＮＡを含有する細胞内への修飾オリゴヌクレオチドの侵入が行われなければならない。修飾オリゴヌクレオチドは、オリゴヌクレオチドの標的細胞又は組織への送達及び／又は細胞取り込みを改善して最終的に効力の増強をもたらす１つ又は複数の部分にコンジュゲートし得る。例えば、細胞表面受容体に対するリガンドであるコンジュゲートを利用することにより、化合物の細胞取り込みの増加を実現し得る。外因性分子（例えば薬物）にコンジュゲートしたリガンドがその細胞表面受容体に結合すると、コンジュゲートした分子の受容体介在性エンドサイトーシスが起こり、それによって外因性分子の膜貫通輸送が促進される。例えば、糖質部分を含むコンジュゲートを修飾オリゴヌクレオチドに共有結合させることにより、肝細胞への標的化された送達を実現し得る。肝細胞の表面に存在するアシアロ糖タンパク質受容体がこの糖質部分を認識して結合すると、コンジュゲートされた修飾オリゴヌクレオチドが細胞膜を通って肝細胞内へと輸送される。このように送達を改善することにより、所望の薬理学的エンドポイントの実現に必要な化合物がより低用量で済むようになるため、修飾オリゴヌクレオチドの効力を増強することができる。
【０３６２】
本明細書に記載されるある種のコンジュゲートには、標的細胞型への送達の改善を提供し、且つ生体内で切断可能であって、生体内投与時に非コンジュゲート型修飾オリゴヌクレオチドを産生するという利点がある。上記に記載したとおり、特定の組織又は細胞型に対するインビボ標的化は、コンジュゲート部分を使用することによって増強し得る。しかしながら、コンジュゲートされた修飾オリゴヌクレオチドがその作用部位に達すると、共有結合的に連結したコンジュゲート部分の全て又は一部の存在により、ある種のコンジュゲート型修飾オリゴヌクレオチドの活性が変化したり、又は標的細胞における半減期など、修飾オリゴヌクレオチドのある種の薬物動態特性を理解するために必要な分析が影響を受けたりし得る。そのため、細胞取り込みを改善するのに十分な安定性があるとともに、標的細胞によって化合物がインターナライズされるとコンジュゲート部分の切断も可能なコンジュゲート部分に結合した修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物の投与が望ましいこともある。従って、本明細書に提供されるのは、切断可能なコンジュゲート部分に連結した修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物であり、このコンジュゲート部分は、修飾オリゴヌクレオチドの効力を改善し、修飾オリゴヌクレオチドのその非コンジュゲート形態での部分的又は完全な遊離を可能にするものである。
【０３６３】
ある種の実施形態では、本明細書に提供されるのは、各々がｍｉＲ−１０３及びｍｉＲ−１０７に標的化される２つの領域を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物である。本化合物は、グルコース値の低下、ＨＯＭＡ−ＩＲの改善及びインスリン感受性の改善からも明らかなとおり、糖尿病の実験モデルで有効である。本化合物は更に、肝臓トリグリセリド値の低下をもたらす。本化合物は、有効性、安全性、溶液中における粘度、及び非特異的マイクロＲＮＡ配列との交差反応性を含めたいくつかの基準に基づき最適化されている。
【０３６４】
ある種の実施形態では、本明細書に提供されるのは、被検体の血糖値を低下させる方法であって、本明細書に記載される化合物を被検体に投与することを含む方法であり、本化合物は、７〜１２個の連結したヌクレオシドからなり、且つｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７と相補的な核酸塩基配列を有する少なくとも１つの領域を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、本化合物は、２つの領域を有する修飾オリゴヌクレオチドを含み、ここで各領域は、７〜１２個の連結したヌクレオシドからなり、且つｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７と相補的な核酸塩基配列を有する。いくつかの実施形態では、各領域は１０個の連結したヌクレオシドからなり、且つｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７と相補的な核酸塩基配列を有する。
【０３６５】
いくつかの実施形態では、化合物は、構造：
【化１１】
2017523790.tif 000012
（式中、Ｘはリン酸ジエステル連結であり；Ｎmの各Ｎはデオキシアデノシン（Ａ）であり；ｍは２であり；Ｙはリン酸ジエステル連結であり；且つＭＯは５’−ＣSＡSＡSＵSＧSＣSＵSＧSＣSＡSＡＡＣSＡSＡSＵSＧSＣSＵSＧSＣSＡS−３’（配列番号７）であり、添字「Ｓ」が後ろに付く各ヌクレオシドはＳ−ｃＥｔヌクレオシドであり、後ろに添字が付かない各ヌクレオシドはデオキシヌクレオシドであり、且つ２つのＳ−ｃＥｔヌクレオシド間の各ヌクレオシド間結合はホスホロチオエート連結であり、残りのヌクレオシド間結合はリン酸ジエステル連結である）
を含む。ある種の実施形態では、ＹがＭＯの３’末端に連結している。
【０３６６】
ある種の実施形態では、本明細書に提供されるのは、被検体の血糖値を低下させる方法であって、本明細書に記載される化合物を被検体に投与することを含む方法である。
【０３６７】
ある種の実施形態では、本明細書に提供される方法は、血糖値を計測することを含む。血糖値は、本明細書に記載される化合物の投与前及び／又は投与後に計測し得る。血糖値は全血で計測されてもよく、又は血漿で計測されてもよい。血糖値は臨床検査室で計測されてもよく、又は血糖測定器を使用して計測されてもよい。
【０３６８】
ある種の実施形態では、血糖値は、被検体において、被検体が少なくとも８時間絶食しているときに計測される。ある種の実施形態では、血糖値は不定期に計測され、計測のタイミングを飲食物の摂取に合わせることはない。ある種の実施形態では、血糖値は食後の状態で、即ち被検体が食事をした後に計測される。ある種の実施形態では、血糖値は、被検体において、被検体が食事をしてから２時間後に計測される。ある種の実施形態では、血糖値は、被検体の体がどの程度速く血中からグルコースを除去するかを決定するため、被検体にグルコースを投与した後に決まった時間間隔で計測される。血糖値の計測は何れも、全血中又は血漿中で行われ得る。
【０３６９】
ある種の実施形態では、被検体は高血糖値を有する。ある種の実施形態では、被検体は高血糖値を有すると同定される。このような同定は、典型的には医療専門家によって行われる。ある種の実施形態では、高血糖値は１００〜１２５ｍｇ／ｄＬの空腹時血糖値である。ある種の実施形態では、高血糖値は１２６ｍｇ／ｄＬを上回る空腹時血糖値である。ある種の実施形態では、高血糖値は１４０〜１９９ｍｇ／ｄＬの食後２時間グルコース値である。ある種の実施形態では、高血糖値は２００ｍｇ／ｄＬ以上の食後２時間グルコース値である。
【０３７０】
ある種の実施形態では、高血糖値を有する被検体は前糖尿病を有する。ある種の実施形態では、被検体は前糖尿病を有すると同定される。ある種のそうした実施形態では、被検体は１００〜１２５ｍｇ／ｄＬの空腹時血糖値を有する。ある種のそうした実施形態では、被検体は１４０〜１９９ｍｇ／ｄＬの食後２時間血糖値を有する。前糖尿病の診断は、典型的には医療専門家によって行われ、医療専門家は、被検体が前糖尿病であるかどうかを決定する際、血糖値に加えて諸要因を考慮し得る。
【０３７１】
ある種の実施形態では、高血糖値を有する被検体は糖尿病を有する。ある種の実施形態では、被検体の血糖値に応じて被検体が糖尿病を有すると同定される。ある種のそうした実施形態では、被検体は１２６ｍｇ／ｄＬを上回る空腹時血糖値を有する。ある種のそうした実施形態では、被検体は２００ｍｇ／ｄＬ以上の食後２時間血糖値を有する。糖尿病の診断は、典型的には医療専門家によって行われ、医療専門家は、被検体が糖尿病であるかどうかを決定する際、血糖値に加えて諸要因を考慮し得る。
【０３７２】
ある種の実施形態では、本明細書に提供される方法は、本明細書に記載される化合物の投与前に血糖値をモニタすることを含む。ある種の実施形態では、本明細書に提供される方法は、本明細書に記載される化合物の投与後に血糖値を計測することを含む。ある種の実施形態では、被検体は１日１回以上血糖値を計測する。
【０３７３】
ある種の実施形態では、血糖値を低下させる方法は、米国糖尿病協会（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ）又は世界保健機関（Ｗｏｒｌｄ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ）などの医療機関が望ましいと判断する血糖値にまで被検体の血糖値を低下させることを含む。ある種の実施形態では、血糖値は、被検体が食事を摂取する前に計測したときに１３０ｍｇ／ｄＬ未満となるように低下させる。ある種の実施形態では、血糖値は、被検体が食事を摂取した後に計測したときに１８０ｍｇ／ｄＬ未満となるまで低下させる。
【０３７４】
ある種の実施形態では、投与は少なくとも１週間に１回行う。ある種の実施形態では、投与は２週間に１回行う。ある種の実施形態では、投与は３週間に１回行う。ある種の実施形態では、投与は４週間に１回行う。投与頻度は、被検体において望ましい血糖値が実現するように医療専門家が設定し得る。投与頻度は被検体の血糖値に依存し得る。例えば、ある種の実施形態では、被検体が高血糖値を有する場合に投与はより高頻度となり得る。
【０３７５】
ある種の実施形態では、投与レジメンには、負荷期間及び／又は維持期間の間の用量が含まれ得る。負荷期間の間は（いくつかの実施形態では、これは治療開始時に行われ、例えば１〜３週間又はそれ以上続き得る）、単回投与が行われてもよく、又は複数回投与が毎日、２日おき、３日おき、４日おき、５日おき、６日おき、又は毎週行われてもよい。維持期間の間は（いくつかの実施形態では、これは負荷期間の後に続くものであり、数ヵ月間又は数年間、又は被検体の生涯にわたり続き得る）、用量は毎日から３ヵ月おきの範囲にわたる頻度（これには、毎日、２日おき、３日おき、４日おき、５日おき、６日おき、毎週、２週間おき、３週間おき、４週間おき、毎月、２ヵ月おき、又は３ヵ月おきが含まれるものと理解される）で与えられ得る。いくつかの実施形態では、負荷期間は維持期間と比べてより高用量及び／又はより高頻度の用量の投与を含む。
【０３７６】
ＨｂＡ１ｃ値の計測を使用して、時間の経過に伴い被検体の血糖値がどの程度制御されるかを決定し得る。ＨｂＡ１ｃ値は血中の糖化ヘモグロビン量の指標であり、ＨｂＡ１ｃ値の計測前２〜３ヵ月の期間中に被検体の血糖値がどの程度維持されていたかの推定を提供し得る。高いＨｂＡ１ｃ値は、被検体を糖尿病に関連する合併症、例えば、眼疾患、心疾患、腎疾患、神経損傷、又は脳卒中の発症リスクにさらす。そのため、ある種の実施形態では、被検体のＨｂＡ１ｃ値が、医療専門家によって正常と見なされる範囲内にあることが望ましい。ある種の実施形態では、６％以下のＨｂＡ１ｃ値が正常である。ある種の実施形態では、医療専門家は被検体のＨｂＡ１ｃ値が７％以下であることを推奨し得る。ある種の実施形態では、投与によってＨｂＡ１ｃ値が低下する。ある種の実施形態では、投与によって被検体のＨｂＡ１ｃ値が８％未満、７．５％未満、７％未満、６．５％未満、６％未満、５．５％未満、５％未満、又は４．５％未満に低下する。
【０３７７】
ある種の実施形態では、高血糖値を有する被検体はインスリン抵抗性である。インスリンの主な機能の１つは、血糖値を下げることである。細胞がインスリンの効果に感受性を示す被検体は、血糖値を正常範囲に維持するのに比較的少量のインスリンのみを必要とする。インスリン抵抗性の被検体は、同じ血糖降下効果を得るためにより多くのインスリンを必要とする。インスリン抵抗性は高インスリン血症を引き起こし得る。高インスリン血症は、高血圧、心疾患及び心不全、肥満（特に腹部肥満）、骨粗鬆症、及びある種の癌、例えば結腸癌、乳癌、及び前立腺癌に関連し得る。
【０３７８】
インスリン抵抗性は、高インスリン正常血糖クランプとして知られる手順を用いて検出することができ、この手順は、低血糖症を引き起こすことなくインスリン値の増加を補償するために必要なグルコースの量を計測する。この手順の間、毎分１０〜１２０ｍＵ／ｍ２でインスリンが注入される。インスリン注入を補償するため２０％グルコース溶液が注入され、血糖値が５〜５．５ｍｍｏｌ／Ｌに維持される。５〜１０分毎に血糖値を確認することにより、グルコースの注入速度が決定される。肝臓の応答を評価するには低用量インスリン注入がより有用であり、一方、末梢（即ち筋肉及び脂肪）インスリン作用を評価するには高用量インスリン注入が有用である。試験の最後の３０分間におけるグルコース注入速度によってインスリン感受性が決まる。高いレベル（７．５ｍｇ／ｍｉｎ以上）が必要な場合、被検体はインスリン感受性である。極めて低いレベル（４．０ｍｇ／ｍｉｎ以下）は、被検体がインスリン作用に抵抗性であることを示す。４．０〜７．５ｍｇ／ｍｉｎのレベルは確定的でなく、耐糖能障害を示唆する。耐糖能障害はインスリン抵抗性の初期徴候であり得る。この手順においては、グルコーストレーサー、例えば、３−３Ｈグルコース、６，６  ２Ｈ−グルコース、又は１−１３Ｃグルコースを使用し得る。研究環境では、他の放射活性形態のグルコースが用いられてもよい。高インスリン期間の開始前にトレーサーを３時間注入すると、基礎グルコース産生速度を決定することが可能になる。クランプ手順の間は、血漿トレーサー濃度により、インスリン刺激による全身グルコース代謝、並びに生体のグルコース産生（即ち内因性グルコース産生）を計算することが可能である。
【０３７９】
ある種の実施形態では、本明細書に提供されるのは、被検体のインスリン抵抗性を改善する方法であって、本明細書に記載される化合物を被検体に投与することを含む方法である。ある種の実施形態では、被検体はインスリン抵抗性を有する。ある種の実施形態では、本方法は、インスリン抵抗性を有する被検体を選択することを含む。ある種の実施形態では、高血糖値を有する被検体がインスリン抵抗性を有する。ある種の実施形態では、糖尿病を有する被検体がインスリン抵抗性を有する。ある種の実施形態では、２型糖尿病を有する被検体がインスリン抵抗性を有する。ある種の実施形態では、１型糖尿病を有する被検体がインスリン抵抗性を有する。
【０３８０】
ある種の実施形態では、本明細書に提供されるのは、被検体の糖新生を低下させる方法であって、本明細書に記載される化合物を被検体に投与することを含む方法である。ある種の実施形態では、被検体は糖新生が高まっている。ある種の実施形態では、被検体は、糖新生が高まっていると同定される。ある種の実施形態では、投与によって糖新生の低下がもたらされる。ある種の実施形態では、被検体の糖新生の計測にピルビン酸耐性試験が用いられる。ある種の実施形態では、被検体の糖新生の計測に血糖値が用いられる。ある種の実施形態では、被検体において糖新生率が計測される。ある種の実施形態では、糖新生の低下は、糖新生率の低下である。ある種の実施形態では、糖新生率は被検体において投与前に計測される。ある種の実施形態では、糖新生率は被検体において投与後に計測される。
【０３８１】
ある種の実施形態では、本明細書に提供されるのは、被検体の血漿コレステロールを低下させる方法であって、本明細書に記載される化合物を被検体に投与することを含む方法である。ある種の実施形態では、被検体は血漿コレステロールが上昇している。ある種の実施形態では、被検体は、血漿コレステロールが上昇していると同定される。ある種の実施形態では、投与によって血漿コレステロールが低下する。ある種の実施形態では、血漿コレステロールは血漿ＬＤＬコレステロールである。ある種の実施形態では、血漿コレステロールは血漿ＶＬＤＬコレステロールである。
【０３８２】
ある種の実施形態では、本明細書に提供されるのは、被検体の代謝障害を処置する方法であって、本明細書に記載される化合物を被検体に投与することを含む方法である。ある種の実施形態では、被検体は代謝障害を有する。ある種の実施形態では、被検体は、代謝障害を有すると同定される。ある種の実施形態では、代謝障害としては、限定なしに、前糖尿病、糖尿病（１型又は２型糖尿病を含む）、メタボリックシンドローム、肥満、又は糖尿病性異脂肪血症、高血糖症、低血糖症、及び高インスリン血症が挙げられる。ある種の実施形態では、被検体は１つ又は複数の代謝障害と診断される。被検体は、医療専門家に周知の医学的検査の投与後に代謝障害と診断され得る。
【０３８３】
脂肪肝疾患は多くの場合に代謝障害に関連する。ある種の実施形態では、代謝障害を有する被検体は脂肪肝疾患を有する。ある種の実施形態では、脂肪肝疾患は非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）である。ある種の実施形態では、脂肪肝疾患はアルコール性脂肪肝疾患である。ある種の実施形態では、脂肪肝疾患はアルコール性脂肪性肝炎である。ある種の実施形態では、脂肪肝疾患は非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）である。
【０３８４】
ある種の実施形態では、本明細書に提供されるのは、被検体の脂肪肝疾患を処置する方法であって、本明細書に記載される化合物を被検体に投与することを含む方法である。ある種の実施形態では、脂肪肝疾患は、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、アルコール性脂肪肝疾患、アルコール性脂肪性肝炎、及び非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）から選択される。ある種の実施形態では、脂肪肝疾患は、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）及び非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）から選択される。ある種の実施形態では、本明細書に提供されるのは、ＮＡＦＬＤ及び２型糖尿病を有する被検体を処置する方法である。ある種の実施形態では、本明細書に提供されるのは、ＮＡＳＨ及び２型糖尿病を有する被検体を処置する方法である。
【０３８５】
ある種の実施形態では、本明細書に提供されるのは、肝臓トリグリセリドを低下させる方法であって、本明細書に記載される化合物を被検体に投与することを含む方法である。いくつかの実施形態では、被検体は脂肪肝疾患を有する。ある種の実施形態では、脂肪肝疾患は、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、アルコール性脂肪肝疾患、アルコール性脂肪性肝炎、及び非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）から選択される。ある種の実施形態では、脂肪肝疾患は、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）及び非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）から選択される。
【０３８６】
ある種の実施形態では、本明細書に提供されるのは、被検体における代謝障害の発症を予防する方法であって、本明細書に記載される化合物を被検体に投与することを含む方法である。ある種の実施形態では、被検体は代謝障害を生じるリスクがある。ある種の実施形態では、被検体は、代謝障害を生じるリスクがあると同定される。ある種の実施形態では、代謝障害は、前糖尿病、糖尿病（１型又は２型糖尿病を含む）、メタボリックシンドローム、肥満、又は糖尿病性異脂肪血症、高血糖症、低血糖症、高インスリン血症、ケトアシドーシス及びセリアック病である。
【０３８７】
ある種の実施形態では、本明細書に提供されるのは、被検体における代謝障害の発症を遅延させる方法であって、本明細書に記載される化合物を被検体に投与することを含む方法である。ある種の実施形態では、被検体は代謝障害を生じるリスクがある。ある種の実施形態では、被検体は、代謝障害を生じるリスクがあると同定される。ある種の実施形態では、代謝障害としては、限定なしに、前糖尿病、糖尿病（１型又は２型糖尿病を含む）、メタボリックシンドローム、肥満、又は糖尿病性異脂肪血症、高血糖症、低血糖症、及び高インスリン血症が挙げられる。
【０３８８】
ある種の実施形態では、被検体は１つ又は複数の代謝障害を有する。ある種の実施形態では、被検体は１つ又は複数の代謝障害と診断されている。被検体は、医療専門家に周知の医学的検査の投与後に代謝障害と診断され得る。
【０３８９】
被検体の治療反応性は、血糖値試験、グルコース負荷試験、及びＨｂＡ１ｃ試験を含む、代謝障害の診断に使用されるものと同様の試験によって評価し得る。治療反応性はまた、処置後試験結果を処置前試験結果と比較することによっても評価し得る。
【０３９０】
脂肪肝疾患は代謝障害に関連し得る。ある種の実施形態では、脂肪肝疾患は非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）である。ある種の実施形態では、脂肪肝疾患はアルコール性脂肪肝疾患である。ある種の実施形態では、脂肪肝疾患はアルコール性脂肪性肝炎である。ある種の実施形態では、脂肪肝疾患は非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）である。
【０３９１】
ある種の実施形態では、本明細書に提供されるのは、被検体の脂肪肝疾患を処置する方法であって、本明細書に記載される化合物を被検体に投与することを含む方法である。
【０３９２】
ある種の実施形態では、本明細書に提供されるのは、被検体の脂肪肝疾患を予防する方法であって、本明細書に記載される化合物を被検体に投与することを含む方法である。ある種のそうした実施形態では、被検体は脂肪肝疾患を生じるリスクがある。
【０３９３】
ある種の実施形態では、本明細書に提供されるのは、被検体における脂肪肝疾患の発症を遅延させる方法であって、本明細書に記載される化合物を被検体に投与することを含む方法である。ある種のそうした実施形態では、被検体は脂肪肝疾患を生じるリスクがある。
【０３９４】
ある種の化合物及び修飾オリゴヌクレオチド及び修飾オリゴヌクレオチドの領域
いくつかの実施形態では、構造：
［オリゴ１］−［ｘ−Ｎ］m−ｘ−［オリゴ２］
を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物が提供される。いくつかの実施形態では、構造［オリゴ１］−［ｘ−Ｎ］m−ｘ−［オリゴ２］からなる修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物が提供される。いくつかの実施形態では、オリゴ１は７〜１５個の連結したヌクレオシドからなり、且つｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７の核酸塩基配列と相補的であり、ミスマッチが１つ以下である核酸塩基配列を有し；オリゴ２は７〜１５個の連結したヌクレオシドからなり、且つｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７の核酸塩基配列と相補的であり、ミスマッチが１つ以下である核酸塩基配列を有し；各ｘは、リン酸ジエステル結合及びホスホロチオエート結合から独立に選択され；各Ｎは、修飾ヌクレオシド及び非修飾ヌクレオシドから独立に選択され；ｍは、１〜５の整数であり；且つ少なくとも１つのｘはリン酸ジエステル結合である。いくつかの実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは、１５〜３２個、１５〜３０個、１５〜２８個、１５〜２６個、１５〜２４個、又は１５〜２２個、又は１５〜２０個のヌクレオシドからなる。いくつかの実施形態では、オリゴ１は、ｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７の核酸塩基配列と少なくとも８０％、少なくとも９０％、又は１００％相補的な核酸塩基配列を有する。いくつかの実施形態では、オリゴ１は、ｍｉＲ−１０３及びｍｉＲ−１０７の核酸塩基配列と少なくとも８０％、少なくとも９０％、又は１００％相補的な核酸塩基配列を有する。いくつかの実施形態では、オリゴ１は、ｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７のシード領域の少なくとも６個、少なくとも７個、又は８個のヌクレオチドと相補的な核酸塩基配列を有する。いくつかの実施形態では、オリゴ１は、ｍｉＲ−１０３及びｍｉＲ−１０７のシード領域の少なくとも６個、少なくとも７個、又は８個のヌクレオチドと相補的な核酸塩基配列を有する。いくつかの実施形態では、オリゴ２は、ｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７の核酸塩基配列と少なくとも８０％、少なくとも９０％、又は１００％相補的な核酸塩基配列を有する。いくつかの実施形態では、オリゴ２は、ｍｉＲ−１０３及びｍｉＲ−１０７の核酸塩基配列と少なくとも８０％、少なくとも９０％、又は１００％相補的な核酸塩基配列を有する。いくつかの実施形態では、オリゴ２は、ｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７のシード領域の少なくとも６個、少なくとも７個、又は８個のヌクレオチドと相補的な核酸塩基配列を有する。いくつかの実施形態では、オリゴ２は、ｍｉＲ−１０３及びｍｉＲ−１０７のシード領域の少なくとも６個、少なくとも７個、又は８個のヌクレオチドと相補的な核酸塩基配列を有する。
【０３９５】
いくつかの実施形態では、少なくとも２つのｘがリン酸ジエステル結合である。いくつかの実施形態では、各ｘがリン酸ジエステル結合である。いくつかの実施形態では、少なくとも１つのＮが非修飾ヌクレオシドである。いくつかの実施形態では、少なくとも１つのＮが非修飾デオキシリボヌクレオシドである。いくつかの実施形態では、少なくとも１つのＮが非修飾リボヌクレオシドである。いくつかの実施形態では、各Ｎが非修飾ヌクレオシドである。いくつかの実施形態では、各Ｎが非修飾デオキシリボヌクレオシドである。いくつかの実施形態では、各Ｎが非修飾リボヌクレオシドである。いくつかの実施形態では、ｍが、１、２、３、４、又は５である。いくつかの実施形態では、ｍが、１、２、又は３である。いくつかの実施形態では、ｍが１であり、Ｎが非修飾デオキシリボヌクレオシドであり、且つ各ｘがリン酸ジエステル結合である。いくつかの実施形態では、ｍが２であり、各Ｎが非修飾デオキシリボヌクレオシドであり、且つ各ｘがリン酸ジエステル結合である。
【０３９６】
いくつかの実施形態では、オリゴ１とオリゴ２とは同じ核酸塩基配列を有する。そうした実施形態では、オリゴ１及びオリゴ２におけるヌクレオシド修飾のパターン及び／又は数は同じであっても、又は異なってもよい。いくつかの実施形態では、オリゴ１とオリゴ２とは異なる核酸塩基配列を有する。いくつかのそうした実施形態では、オリゴ１及びオリゴ２は、マイクロＲＮＡの重複又は非重複領域を標的化し得る。
【０３９７】
いくつかの実施形態では、構造：
［オリゴ１］−［ｘ−Ｎ］m−ｘ−［オリゴ２］−［ｘ−Ｎ］m−ｘ−［オリゴ３］
を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物が提供される。いくつかの実施形態では、構造：［オリゴ１］−［ｘ−Ｎ］m−ｘ−［オリゴ２］−［ｘ−Ｎ］m−ｘ−［オリゴ３］からなる修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物が提供される。いくつかの実施形態では、オリゴ１は７〜１５個の連結したヌクレオシドからなり、且つｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７の核酸塩基配列と相補的であり、ミスマッチが１つ以下である核酸塩基配列を有し；オリゴ２は７〜１５個の連結したヌクレオシドからなり、且つｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７の核酸塩基配列と相補的であり、ミスマッチが１つ以下である核酸塩基配列を有し；オリゴ３は７〜１５個の連結したヌクレオシドからなり、且つ第３のマイクロＲＮＡの核酸塩基配列と相補的であり、ミスマッチが１つ以下である核酸塩基配列を有し；各ｘは、リン酸ジエステル結合及びホスホロチオエート結合から独立に選択され；各Ｎは、修飾ヌクレオシド及び非修飾ヌクレオシドから独立に選択され；各ｍは独立に１〜５の整数であり；且つ少なくとも１つのｘはリン酸ジエステル結合である。いくつかの実施形態では、第３のマイクロＲＮＡはｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７である。
【０３９８】
いくつかの実施形態では、オリゴ１とオリゴ２との間の少なくとも１つのｘがリン酸ジエステル結合であり、且つオリゴ２とオリゴ３との間の少なくとも１つのｘがリン酸ジエステル結合である。いくつかの実施形態では、各ｘがリン酸ジエステル結合である。いくつかの実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドが、２３〜５５個、２３〜５０個、２３〜４５個、２３〜４０個、２３〜３５個、２３〜３０個、又は２３〜２６個のヌクレオシドからなる。いくつかの実施形態では、オリゴ１は、ｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７の核酸塩基配列と少なくとも８０％、少なくとも９０％又は１００％相補的な核酸塩基配列を有する。いくつかの実施形態では、オリゴ１は、ｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７のシード領域の少なくとも６個、少なくとも７個、又は８個のヌクレオチドと相補的な核酸塩基配列を有する。いくつかの実施形態では、オリゴ２は、ｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７の核酸塩基配列と少なくとも８０％、少なくとも９０％又は１００％相補的な核酸塩基配列を有する。いくつかの実施形態では、オリゴ２は、ｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７のシード領域の少なくとも６個、少なくとも７個、又は８個のヌクレオチドと相補的な核酸塩基配列を有する。いくつかの実施形態では、オリゴ３は、第３のマイクロＲＮＡの核酸塩基配列と少なくとも８０％、少なくとも９０％又は１００％相補的な核酸塩基配列を有する。いくつかの実施形態では、オリゴ３は、第３のマイクロＲＮＡのシード領域の少なくとも６個、少なくとも７個、又は８個のヌクレオチドと相補的な核酸塩基配列を有する。
【０３９９】
いくつかの実施形態では、少なくとも４つのｘがリン酸ジエステル結合である。いくつかの実施形態では、オリゴ１とオリゴ２との間の少なくとも２つのｘがリン酸ジエステル結合であり、且つオリゴ２とオリゴ３との間の少なくとも２つのｘがリン酸ジエステル結合である。いくつかの実施形態では、各ｘがリン酸ジエステル結合である。いくつかの実施形態では、少なくとも１つのＮが非修飾ヌクレオシドである。いくつかの実施形態では、オリゴ１の間の少なくとも１つのＮが非修飾ヌクレオシドであり、且つオリゴ２とオリゴ３との間の少なくとも１つのＮが非修飾ヌクレオシドである。いくつかの実施形態では、各Ｎが非修飾ヌクレオシドである。いくつかの実施形態では、各ｍが、１、２、３、４、及び５から独立に選択される。いくつかの実施形態では、各ｍが、１、２、又は３から独立に選択される。いくつかの実施形態では、各ｍが１であり、各Ｎが非修飾デオキシリボヌクレオシドであり、且つ各ｘがリン酸ジエステル結合である。いくつかの実施形態では、一方又は両方のｍが２であり、各Ｎが非修飾デオキシリボヌクレオシドであり、且つ各ｘがリン酸ジエステル結合である。
【０４００】
いくつかの実施形態では、第１のマイクロＲＮＡ、第２のマイクロＲＮＡ、及び第３のマイクロＲＮＡのうちの少なくとも２つ又は３つ全てが同じである。いくつかの実施形態では、第１のマイクロＲＮＡ、第２のマイクロＲＮＡ、及び第３のマイクロＲＮＡは、各々が互いに異なる。いくつかの実施形態では、マイクロＲＮＡのうちの少なくとも２つが同じであるとき、対応するオリゴは同じ核酸塩基配列を有する。そうした実施形態では、同じ核酸塩基配列を有するオリゴのヌクレオシド修飾のパターン及び／又は数は同じであっても、又は異なってもよい。いくつかの実施形態では、少なくとも２つのマイクロＲＮＡが同じであるとき、対応するオリゴは異なる核酸塩基配列を有する。いくつかのそうした実施形態では、同じマイクロＲＮＡに標的化されるオリゴは、マイクロＲＮＡの重複又は非重複領域を標的化し得る。
【０４０１】
いくつかの実施形態では、オリゴ１は７〜１５個の連結したヌクレオシド、７〜１４個の連結したヌクレオシド、７〜１３個の連結したヌクレオシド、７〜１２個の連結したヌクレオシド、７〜１１個の連結したヌクレオシド、７〜１０個の連結したヌクレオシド、８〜１５個の連結したヌクレオシド、８〜１４個の連結したヌクレオシド、８〜１３個の連結したヌクレオシド、８〜１２個の連結したヌクレオシド、８〜１１個の連結したヌクレオシド、又は８〜１０個の連結したヌクレオシドからなる。いくつかの実施形態では、オリゴ１は９個の連結したヌクレオシドからなる。いくつかの実施形態では、オリゴ１は１０個の連結したヌクレオシドからなる。
【０４０２】
いくつかの実施形態では、オリゴ１は、修飾糖部分を有する少なくとも１つのヌクレオシドを含む。いくつかの実施形態では、オリゴ１は、非修飾糖部分を有する少なくとも１つのヌクレオシドを含む。いくつかの実施形態では、オリゴ１は、修飾糖部分を有する複数のヌクレオシドと、非修飾糖部分を有する複数のヌクレオシドとを含む。いくつかの実施形態では、オリゴ１の少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、又は少なくとも８個のヌクレオシドが修飾糖部分を有する。いくつかの実施形態では、オリゴ１の各ヌクレオシドが修飾糖部分を有する。いくつかの実施形態では、各修飾ヌクレオシドは、２’−Ｏ−メチル糖部分、２’−Ｏ−メトキシエチル糖部分、２’−フルオロ糖部分、及び二環式糖部分から独立に選択される。いくつかの実施形態では、各二環式糖部分は、ｃＥｔ糖部分及びＬＮＡ糖部分から独立に選択される。いくつかの実施形態では、各非修飾糖部分は、β−Ｄ−デオキシリボース及びβ−Ｄ−リボースから独立に選択される。いくつかの実施形態では、オリゴ１は、少なくとも、少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、又は少なくとも８個の二環式ヌクレオシドを含む。いくつかの実施形態では、オリゴ１は、少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、又は少なくとも８個のｃＥｔを含む。いくつかの実施形態では、オリゴ１は、少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、又は少なくとも８個のＬＮＡを含む。いくつかの実施形態では、オリゴ１は１０個の連結した二環式ヌクレオシドからなる。いくつかのそうした実施形態では、各二環式ヌクレオシドは、ｃＥｔ及びＬＮＡから独立に選択される。いくつかの実施形態では、各二環式ヌクレオシドはｃＥｔである。
【０４０３】
いくつかの実施形態では、オリゴ２は７〜１５個の連結したヌクレオシド、７〜１４個の連結したヌクレオシド、７〜１３個の連結したヌクレオシド、７〜１２個の連結したヌクレオシド、７〜１１個の連結したヌクレオシド、７〜１０個の連結したヌクレオシド、８〜１５個の連結したヌクレオシド、８〜１４個の連結したヌクレオシド、８〜１３個の連結したヌクレオシド、８〜１２個の連結したヌクレオシド、８〜１１個の連結したヌクレオシド、又は８〜１０個の連結したヌクレオシドからなる。いくつかの実施形態では、オリゴ２は９個の連結したヌクレオシドからなる。いくつかの実施形態では、オリゴ２は１０個の連結したヌクレオシドからなる。
【０４０４】
いくつかの実施形態では、オリゴ２は、修飾糖部分を有する少なくとも１つのヌクレオシドを含む。いくつかの実施形態では、オリゴ２は、非修飾糖部分を有する少なくとも１つのヌクレオシドを含む。いくつかの実施形態では、オリゴ２は、修飾糖部分を有する複数のヌクレオシドと、非修飾糖部分を有する複数のヌクレオシドとを含む。いくつかの実施形態では、オリゴ２の少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、又は少なくとも８個のヌクレオシドが修飾糖部分を有する。いくつかの実施形態では、オリゴ２の各ヌクレオシドが修飾糖部分を有する。いくつかの実施形態では、各修飾ヌクレオシドは、２’−Ｏ−メチル糖部分、２’−Ｏ−メトキシエチル糖部分、２’−フルオロ糖部分、及び二環式糖部分から独立に選択される。いくつかの実施形態では、各二環式糖部分は、ｃＥｔ糖部分及びＬＮＡ糖部分から独立に選択される。いくつかの実施形態では、各非修飾糖部分は、β−Ｄ−デオキシリボース及びβ−Ｄ−リボースから独立に選択される。いくつかの実施形態では、オリゴ２は、少なくとも、少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、又は少なくとも８個の二環式ヌクレオシドを含む。いくつかの実施形態では、オリゴ２は、少なくとも、少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、又は少なくとも８個のｃＥｔを含む。いくつかの実施形態では、オリゴ２は、少なくとも、少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、又は少なくとも８個のＬＮＡを含む。いくつかの実施形態では、オリゴ２は１０個の連結した二環式ヌクレオシドからなる。いくつかのそうした実施形態では、各二環式ヌクレオシドは、ｃＥｔ及びＬＮＡから独立に選択される。いくつかの実施形態では、各二環式ヌクレオシドはｃＥｔである。いくつかの実施形態では、オリゴ１とオリゴ２とは同じ核酸塩基配列を有し、且つ各々が、１０個の連結したｃＥｔヌクレオシドからなる。
【０４０５】
いくつかの実施形態では、オリゴ３は７〜１５個の連結したヌクレオシド、７〜１４個の連結したヌクレオシド、７〜１３個の連結したヌクレオシド、７〜１２個の連結したヌクレオシド、７〜１１個の連結したヌクレオシド、７〜１０個の連結したヌクレオシド、８〜１５個の連結したヌクレオシド、８〜１４個の連結したヌクレオシド、８〜１３個の連結したヌクレオシド、８〜１２個の連結したヌクレオシド、８〜１１個の連結したヌクレオシド、又は８〜１０個の連結したヌクレオシドからなる。
【０４０６】
いくつかの実施形態では、オリゴ３は、修飾糖部分を有する少なくとも１つのヌクレオシドを含む。いくつかの実施形態では、オリゴ３は、非修飾糖部分を有する少なくとも１つのヌクレオシドを含む。いくつかの実施形態では、オリゴ３は、修飾糖部分を有する複数のヌクレオシドと、非修飾糖部分を有する複数のヌクレオシドとを含む。いくつかの実施形態では、オリゴ３の少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、又は少なくとも８個のヌクレオシドが修飾糖部分を有する。いくつかの実施形態では、オリゴ３の各ヌクレオシドが修飾糖部分を有する。いくつかの実施形態では、各修飾ヌクレオシドは、２’−Ｏ−メチル糖部分、２’−Ｏ−メトキシエチル糖部分、２’−フルオロ糖部分、及び二環式糖部分から独立に選択される。いくつかの実施形態では、各二環式糖部分は、ｃＥｔ糖部分及びＬＮＡ糖部分から独立に選択される。いくつかの実施形態では、各非修飾糖部分は、β−Ｄ−デオキシリボース及びβ−Ｄ−リボースから独立に選択される。いくつかの実施形態では、オリゴ３は、少なくとも、少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、又は少なくとも８個の二環式ヌクレオシドを含む。いくつかの実施形態では、オリゴ３は、少なくとも、少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、又は少なくとも８個のｃＥｔを含む。いくつかの実施形態では、オリゴ３は、少なくとも、少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、又は少なくとも８個のＬＮＡを含む。
【０４０７】
いくつかの実施形態では、第１のマイクロＲＮＡ及び第２のマイクロＲＮＡ、及び存在する場合に第３のマイクロＲＮＡは、各々がｍｉＲ−１０３／１０７である。いくつかの実施形態では、オリゴ１及び／又はオリゴ２は核酸塩基配列５’−ＣＡＡＵＧＣＵＧＣＡ−３’（配列番号６）を有する。いくつかの実施形態では、オリゴ１及びオリゴ２は、各々が核酸塩基配列５’−ＣＡＡＵＧＣＵＧＣＡ−３’（配列番号６）を有する。いくつかの実施形態では、本化合物は、配列５’−ＣSＡSＡSＵSＧSＣSＵSＧSＣSＡSＡＡＣSＡSＡSＵSＧSＣSＵSＧSＣSＡS−３’（配列番号７）からなる修飾オリゴヌクレオチドを含み、ここではオリゴ１が５’−ＣSＡSＡSＵSＧSＣSＵSＧSＣSＡS−３’（配列番号６）であり、オリゴ２が５’−ＣSＡSＡSＵSＧSＣSＵSＧSＣSＡS−３’（配列番号６）であり、且つオリゴ１とオリゴ２とはＡＡによって連結され、添字「Ｓ」が後ろに付く各ヌクレオシドはＳ−ｃＥｔヌクレオシドであり、後ろに添字が付かない各ヌクレオシドはデオキシヌクレオシドである。
【０４０８】
いくつかの実施形態では、オリゴ１及び／又はオリゴ２は核酸塩基配列５’−ＣＡＡＵＧＣＵＧＣＣ−３’（配列番号８）を有する。いくつかの実施形態では、オリゴ１及びオリゴ２は、各々が核酸塩基配列５’−ＣＡＡＵＧＣＵＧＣＣ’（配列番号８）を有する。いくつかの実施形態では、本化合物は、５’−ＣSＡSＡSＵSＧSＣSＵSＧSＣSＣSＡＡＣSＡSＡSＵSＧSＣSＵSＧSＣSＣS−３’（配列番号９）からなる修飾オリゴヌクレオチドを含み、ここではオリゴ１が５’−ＣSＡSＡSＵSＧSＣSＵSＧSＣSＣS−３’（配列番号８）であり、オリゴ２が５’−ＣSＡSＡSＵSＧSＣSＵSＧSＣSＣS−３’（配列番号８）であり、且つオリゴ１とオリゴ２とはＡＡによって連結され、添字「Ｓ」が後ろに付く各ヌクレオシドはＳ−ｃＥｔヌクレオシドであり、後ろに添字が付かない各ヌクレオシドはデオキシヌクレオシドである。いくつかの実施形態では、オリゴ１及び／又はオリゴ２は核酸塩基配列５’−ＣＡＡＵＧＣＵＧＣＧ−３’（配列番号１０）を有する。いくつかの実施形態では、オリゴ１及びオリゴ２は、各々が核酸塩基配列５’−ＣＡＡＵＧＣＵＧＣＡＧ−３’（配列番号１０）を有する。いくつかの実施形態では、本化合物は、配列５’−ＣSＡSＡSＵSＧSＣSＵSＧSＣSＧSＡＡＣSＡSＡSＵSＧSＣSＵSＧSＣSＧS−３’（配列番号１１）からなる修飾オリゴヌクレオチドを含み、ここではオリゴ１が５’−ＣSＡSＡSＵSＧSＣSＵSＧSＣSＧS−３’（配列番号１０）であり、オリゴ２が５’−ＣSＡSＡSＵSＧSＣSＵSＧSＣSＧS−３’（配列番号１０）であり、且つオリゴ１とオリゴ２とはＡＡによって連結され、添字「Ｓ」が後ろに付く各ヌクレオシドはＳ−ｃＥｔヌクレオシドであり、後ろに添字が付かない各ヌクレオシドはデオキシヌクレオシドである。
【０４０９】
いくつかの実施形態では、オリゴ１の３’末端とＡＡリンカーとの間及びＡＡリンカーとオリゴ２の５’末端との間のヌクレオシド間結合は、リン酸ジエステルヌクレオシド間結合である。いくつかの実施形態では、ＡＡリンカーのＡ間のヌクレオシド間結合もリン酸ジエステルヌクレオシド間結合である。いくつかの実施形態では、オリゴ１及びオリゴ２内にあるヌクレオシド間のヌクレオシド間結合は全てがホスホロチオエート連結である（即ち、２つのＳ−ｃＥｔヌクレオシド間のヌクレオシド間結合は全てがホスホロチオエート連結である）。いくつかの実施形態では、オリゴ２の３’末端はリンカーを介してコンジュゲート部分に結合している。いくつかの実施形態では、コンジュゲート部分はＧａｌＮＡｃである。いくつかの実施形態では、リンカーはＡＡリンカーであり、ここで各Ａはデオキシアデノシンであり、且つオリゴ２とリンカーとの間、及びＡＡリンカーのＡ間、及びリンカーとコンジュゲート部分との間のヌクレオシド間結合は、リン酸ジエステル連結である。
【０４１０】
ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域（即ち、本明細書に示す構造におけるオリゴ１、オリゴ２、又はオリゴ３）の核酸塩基配列は、標的ＲＮＡの核酸塩基配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、又は１００％相補的である。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域（即ち、本明細書に示す構造におけるオリゴ１、オリゴ２、又はオリゴ３）は、標的ＲＮＡと少なくとも９０％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、又は１００％相補的である。
【０４１１】
ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域（即ち、本明細書に示す構造におけるオリゴ１、オリゴ２、又はオリゴ３）は、修飾糖部分を有する少なくとも１つのヌクレオシドを含む。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域（即ち、本明細書に示す構造におけるオリゴ１、オリゴ２、又はオリゴ３）は、複数の非二環式ヌクレオシドと複数の二環式ヌクレオシドとを含む。
【０４１２】
ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域（即ち、本明細書に示す構造におけるオリゴ１、オリゴ２、又はオリゴ３）のヌクレオシドの少なくとも７０％が修飾糖部分を含む。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域（即ち、本明細書に示す構造におけるオリゴ１、オリゴ２、又はオリゴ３）のヌクレオシドの少なくとも８０％が修飾糖部分を含む。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域（即ち、本明細書に示す構造におけるオリゴ１、オリゴ２、又はオリゴ３）のヌクレオシドの少なくとも９０％が修飾糖部分を含む。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域（即ち、本明細書に示す構造におけるオリゴ１、オリゴ２、又はオリゴ３）のヌクレオシドの少なくとも９５％が修飾糖部分を含む。いくつかの実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域（即ち、本明細書に示す構造におけるオリゴ１、オリゴ２、又はオリゴ３）のヌクレオシドの１００％が修飾糖部分を含む。いくつかの実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域（即ち、本明細書に示す構造におけるオリゴ１、オリゴ２、又はオリゴ３）のヌクレオシドの１００％が二環式ヌクレオシドである。いくつかの実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域（即ち、本明細書に示す構造におけるオリゴ１、オリゴ２、又はオリゴ３）のヌクレオシドの１００％がｃＥｔヌクレオシドである。
【０４１３】
ある種の実施形態では、少なくとも２つの二環式ヌクレオシドが互いに異なる糖部分を含む。ある種の実施形態では、各二環式ヌクレオシドは同種の糖部分を有する。ある種の実施形態では、少なくとも２つの非二環式ヌクレオシドが互いに異なる糖部分を含む。ある種の実施形態では、各非二環式ヌクレオシドは同種の糖部分を有する。
【０４１４】
ある種の実施形態では、各非二環式ヌクレオシドは、β−Ｄ−デオキシリボヌクレオシド、β−Ｄ−リボヌクレオシド、２’−Ｏ−メチルヌクレオシド、２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシド、及び２’−フルオロヌクレオシドから独立に選択される。ある種の実施形態では、各非二環式ヌクレオシドは、β−Ｄ−デオキシリボヌクレオシド、及び２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドから独立に選択される。ある種の実施形態では、各非二環式ヌクレオシドはβ−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドである。
【０４１５】
ある種の実施形態では、二環式ヌクレオシドは、ｃＥｔヌクレオシド、及びＬＮＡヌクレオシド、及びＥＮＡヌクレオシドから選択される。ある種の実施形態では、ｃＥｔヌクレオシドはＳ−ｃＥｔヌクレオシドである。ある種の実施形態では、ｃＥｔヌクレオシドはＲ−ｃＥｔヌクレオシドである。
【０４１６】
ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域（即ち、本明細書に示す構造におけるオリゴ１、オリゴ２、又はオリゴ３）は、複数の修飾ヌクレオシド及び複数のβ−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドを含み、ここで各β−Ｄ−デオキシリボヌクレオシドは修飾又は非修飾核酸塩基を含み得る。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域（即ち、本明細書に示す構造におけるオリゴ１、オリゴ２、又はオリゴ３）はギャップマーである。ある種の実施形態では、各ヌクレオシドの糖部分は修飾糖部分である。ある種の実施形態では、修飾ヌクレオシドは２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドである。ある種の実施形態では、修飾ヌクレオシドはＳ−ｃＥｔヌクレオシドである。
【０４１７】
ある種の実施形態では、２つの領域を含む（即ち、本明細書に示す構造におけるオリゴ１及びオリゴ２を含む）修飾オリゴヌクレオチドは、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、又は３２個の連結したヌクレオシドからなる。いくつかの実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは１５〜３２個の連結したヌクレオシドからなる。いくつかの実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは１５〜３０個の連結したヌクレオシドからなる。いくつかの実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは１５〜２８個の連結したヌクレオシドからなる。いくつかの実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは１５〜２６個の連結したヌクレオシドからなる。いくつかの実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは１５〜２４個の連結したヌクレオシドからなる。いくつかの実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは１５〜２２個の連結したヌクレオシドからなる。いくつかの実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは、１５〜２０個の連結したヌクレオシドからなる。いくつかの実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは２２個の連結したヌクレオシドからなる。いくつかの実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは２４個の連結したヌクレオシドからなる。
【０４１８】
ある種の実施形態では、３つの領域を含む（即ち、本明細書に示す構造におけるオリゴ１、オリゴ２、及びオリゴ３を含む）修飾オリゴヌクレオチドは、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、又は５５個の連結したヌクレオシドからなる。いくつかの実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは２３〜５５個の連結したヌクレオシドからなる。いくつかの実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは２３〜５０個の連結したヌクレオシドからなる。いくつかの実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは２４〜４５個の連結したヌクレオシドからなる。いくつかの実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは２３〜４０個の連結したヌクレオシドからなる。いくつかの実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは２３〜３５個の連結したヌクレオシドからなる。いくつかの実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは２３〜３０個の連結したヌクレオシドからなる。いくつかの実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは２３〜２６個の連結したヌクレオシドからなる。
【０４１９】
ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域（即ち、本明細書に示す構造におけるオリゴ１、オリゴ２、又はオリゴ３）は７〜１５個の連結したヌクレオシドからなる。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は７〜１４個の連結したヌクレオシドからなる。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は７〜１３個の連結したヌクレオシドからなる。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は７〜１２個の連結したヌクレオシドからなる。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は７〜１１個の連結したヌクレオシドからなる。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は７〜１０個の連結したヌクレオシドからなる。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は８〜１５個の連結したヌクレオシドからなる。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は８〜１４個の連結したヌクレオシドからなる。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は８〜１３個の連結したヌクレオシドからなる。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は８〜１２個の連結したヌクレオシドからなる。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は８〜１１個の連結したヌクレオシドからなる。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は８〜１０個の連結したヌクレオシドからなる。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は７個の連結したヌクレオシドからなる。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は８個の連結したヌクレオシドからなる。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は９個の連結したヌクレオシドからなる。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は１０個の連結したヌクレオシドからなる。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は１１個の連結したヌクレオシドからなる。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は１２個の連結したヌクレオシドからなる。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は１３個の連結したヌクレオシドからなる。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は１４個の連結したヌクレオシドからなる。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は１５個の連結したヌクレオシドからなる。
【０４２０】
ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域（即ち、オリゴ１、オリゴ２、及び／又はオリゴ３）の少なくとも１つのヌクレオシド間結合は修飾ヌクレオシド間結合である。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域（即ち、オリゴ１、オリゴ２、及び／又はオリゴ３）の各ヌクレオシド間結合は修飾ヌクレオシド間結合である。ある種の実施形態では、修飾ヌクレオシド間結合はホスホロチオエートヌクレオシド間結合である。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの少なくとも１つのヌクレオシドは修飾核酸塩基を含む。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの少なくとも１つのピリミジンが５−メチル基を含む。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの少なくとも１つのヌクレオシドが５−メチルシトシンを含む。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの各シトシンは５−メチルシトシンである。
【０４２１】
ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域（即ち、本明細書に示す構造のオリゴ１、オリゴ２、及び／又はオリゴ３）が７〜１２個の連結したヌクレオシド長である場合、修飾オリゴヌクレオチドの各ヌクレオシドが修飾糖部分を含む。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域が７〜１０個の連結したヌクレオシド長である場合、修飾オリゴヌクレオチドの各ヌクレオシドが修飾糖部分を含む。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域が８〜１２個の連結したヌクレオシドである場合、修飾オリゴヌクレオチドの各ヌクレオシドが修飾糖部分を含む。
【０４２２】
ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は７個の連結したヌクレオシドからなり、領域の各ヌクレオシドが修飾糖部分を含む。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は８個の連結したヌクレオシドからなり、領域の各ヌクレオシドが修飾糖部分を含む。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は９個の連結したヌクレオシドからなり、領域の各ヌクレオシドが修飾糖部分を含む。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は１０個の連結したヌクレオシドからなり、領域の各ヌクレオシドが修飾糖部分を含む。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は１１個の連結したヌクレオシドからなり、領域の各ヌクレオシドが修飾糖部分を含む。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は１２個の連結したヌクレオシドからなり、領域の各ヌクレオシドが修飾糖部分を含む。ある種の実施形態では、領域の各ヌクレオシドは二環式糖部分を含む。ある種の実施形態では、二環式糖部分はｃＥｔ糖部分である。ある種の実施形態では、ｃＥｔ糖部分はＳ−ｃＥｔ糖部分である。ある種の実施形態では、二環式糖部分はＬＮＡ糖部分である。
【０４２３】
ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は完全に修飾されている。ある種の実施形態では、オリゴヌクレオチドの完全修飾領域は各ヌクレオシドに糖修飾を含む。ある種の実施形態では、オリゴヌクレオチドの完全修飾領域は少なくとも１つの修飾ヌクレオシド間結合を含む。ある種の実施形態では、オリゴヌクレオチドの完全修飾領域は各ヌクレオシドに糖修飾を含み、各ヌクレオシド間結合が修飾ヌクレオシド間結合である。ある種の実施形態では、オリゴヌクレオチドの完全修飾領域は各ヌクレオシドに糖修飾を含み、且つ少なくとも１つのホスホロチオエートヌクレオシド間結合を含む。ある種の実施形態では、オリゴヌクレオチドの完全修飾領域は各ヌクレオシドに糖修飾を含み、各ヌクレオシド間結合がホスホロチオエートヌクレオシド間結合である。ある種の実施形態では、オリゴヌクレオチドの完全修飾領域の各ヌクレオシドは同じ修飾糖部分を含む。
【０４２４】
ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は均一修飾オリゴヌクレオチドである。ある種の実施形態では、オリゴヌクレオチドの均一修飾領域の各ヌクレオシドは同じ糖修飾部分を含む。ある種の実施形態では、オリゴヌクレオチドの均一修飾領域の各ヌクレオシド間結合は、同じ修飾ヌクレオチド間結合を含む。
【０４２５】
ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域はギャップマーである。
【０４２６】
ある種の実施形態では、本明細書に提供されるのは、８〜２５個の連結したヌクレオシドの単一領域からなる修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物であり、ここで単一領域の核酸塩基配列はｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７と相補的であり、且つ化合物は、修飾オリゴヌクレオチドの５’末端又は３’末端に連結したコンジュゲート部分を含み、且つコンジュゲート部分は、肝細胞の細胞取り込みを改善するリガンドを含む。ある種の実施形態では、本明細書に提供されるのは、８〜２５個の連結したヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物であり、ここで修飾オリゴヌクレオチドの核酸塩基配列はｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７と相補的であり、且つ化合物は、修飾オリゴヌクレオチドの５’末端又は３’末端に連結したコンジュゲート部分を含み、且つコンジュゲート部分は、肝細胞の細胞取り込みを改善するリガンドを含む。ある種の実施形態では、コンジュゲート部分は、アシアロ糖タンパク質受容体に親和性を有するリガンドを含む。ある種の実施形態では、リガンドは、Ｎ−アセチルガラクトサミン、ガラクトース、ガラクトサミン、Ｎ−ホルミルガラクトサミン、Ｎ−プロピオニル−ガラクトサミン、Ｎ−ｎ−ブタノイルガラクトサミン、及びＮ−イソ−ブタノイル−ガラクトサミンから選択される。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは８〜２５個の連結したヌクレオシドからなる。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは１２〜２５個の連結したヌクレオシドからなる。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは１５〜３０個の連結したヌクレオシドからなる。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは１５〜２５個の連結したヌクレオシドからなる。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは１５〜１９個の連結したヌクレオシドからなる。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは１５〜１６個の連結したヌクレオシドからなる。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは１９〜２４個の連結したヌクレオシドからなる。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは２１〜２４個の連結したヌクレオシドからなる。
【０４２７】
ある種の実施形態では、単一領域の核酸塩基配列は、ｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７の核酸塩基配列と少なくとも９０％、少なくとも９５％の相補性を有し、又は１００％の相補性を有する。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの核酸塩基配列は、ｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７の核酸塩基配列と少なくとも９０％、少なくとも９５％の相補性を有し、又は１００％の相補性を有する。
【０４２８】
ある種の実施形態では、単一領域からなる修飾オリゴヌクレオチドは、少なくとも１つの修飾糖部分、少なくとも１つの修飾ヌクレオシド間結合、及び／又は少なくとも１つの修飾核酸塩基を有し、これらの各々は、本明細書に記載されるものの何れかから選択され得る。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは、少なくとも１つの修飾糖部分、少なくとも１つの修飾ヌクレオシド間結合、及び／又は少なくとも１つの修飾核酸塩基を有し、これらの各々は、本明細書に記載されるものの何れかから選択され得る。コンジュゲート部分は、本明細書に記載される構造の何れかから選択され得る。
【０４２９】
ある種のコンジュゲート化合物
ある種の実施形態では、本明細書に提供される化合物は、修飾オリゴヌクレオチドの５’末端又は３’末端に連結したコンジュゲート部分を含む。ある種の実施形態では、本化合物は、修飾オリゴヌクレオチドの３’末端に連結したコンジュゲート部分を含む。ある種の実施形態では、本化合物は、修飾オリゴヌクレオチドの５’末端に連結したコンジュゲート部分を含む。ある種の実施形態では、本化合物は、修飾オリゴヌクレオチドの３’末端に連結した第１のコンジュゲート部分と、修飾オリゴヌクレオチドの５’末端に連結した第２のコンジュゲート部分とを含む。
【０４３０】
ある種の実施形態では、コンジュゲート部分は、糖質、コレステロール、脂質、リン脂質、抗体、リポタンパク質、ホルモン、ペプチド、ビタミン、ステロイド、又はカチオン性脂質から選択される少なくとも１つのリガンドを含む。
【０４３１】
リガンドは、任意の好適なリンカーによって修飾オリゴヌクレオチドに共有結合し得る。様々なリンカーが当該技術分野において公知であり、ある種の非限定的で例示的なリンカーが、例えば国際公開第２０１３／０３３２３０号パンフレット及び米国特許第８，１０６，０２２  Ｂ２号明細書に記載される。いくつかの実施形態では、インビボで酵素的切断に抵抗性を有するリンカーが選択され得る。いくつかの実施形態では、インビボで加水分解的切断に抵抗性を有するリンカーが選択され得る。いくつかの実施形態では、インビボで酵素的切断を受けることになるリンカーが選択され得る。いくつかの実施形態では、インビボで加水分解的切断を受けることになるリンカーが選択され得る。
【０４３２】
ある種の実施形態では、本明細書に記載されるコンジュゲート型修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物は、構造：
Ｌ−Ｘ1−Ｎm−Ｘ2−ＭＯ；
（式中、各Ｌはリガンドであり；Ｎmの各Ｎは独立に修飾又は非修飾ヌクレオシドであり、且つｍは１〜５であり；Ｘ1及びＸ2は各々独立にリン酸ジエステル連結又はホスホロチオエート連結であり；且つＭＯは修飾オリゴヌクレオチドである）
を有する。ある種の実施形態では、ｍは１である。ある種の実施形態では、ｍは２である。ある種の実施形態では、ｍは、２、３、４、又は５である。ある種の実施形態では、ｍは、３、４、又は５である。ある種の実施形態では、ｍが１より大きいとき、Ｎmの各修飾又は非修飾ヌクレオシドは、リン酸ジエステルヌクレオシド間結合又はホスホロチオエートヌクレオシド間結合によってＮmの隣接する修飾又は非修飾ヌクレオシドに結合し得る。ある種の実施形態では、ｍは１であり、且つＸ1及びＸ2は各々リン酸ジエステルである。
【０４３３】
ある種の実施形態では、本明細書に記載されるコンジュゲート型修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物は、構造Ａ：
Ｌn−リンカー−ＭＯ；
（式中、各Ｌは独立にリガンドであり、且つｎは１〜１０であり；且つＭＯは修飾オリゴヌクレオチドである）
を有する。
【０４３４】
ある種の実施形態では、本明細書に記載されるコンジュゲート型修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物は、構造Ｂ：
Ｌn−リンカー−Ｘ1−Ｎm−Ｘ2−ＭＯ；
（式中、各Ｌは独立にリガンドであり、且つｎは１〜１０であり；Ｎmの各Ｎは独立に修飾又は非修飾ヌクレオシドであり、且つｍは１〜５であり；Ｘ1及びＸ2は各々独立にリン酸ジエステル連結又はホスホロチオエート連結であり；且つＭＯは修飾オリゴヌクレオチドである）
を有する。ある種の実施形態では、ｍは１である。ある種の実施形態では、ｍは２である。ある種の実施形態では、ｍは、３、４、又は５である。ある種の実施形態では、ｍは、２、３、４、又は５である。ある種の実施形態では、ｍが１より大きいとき、Ｎmの各修飾又は非修飾ヌクレオシドは、リン酸ジエステルヌクレオシド間結合又はホスホロチオエートヌクレオシド間結合によってＮmの隣接する修飾又は非修飾ヌクレオシドに結合し得る。
【０４３５】
ある種の実施形態では、本明細書に記載されるコンジュゲート型修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物は、構造Ｃ：
Ｌn−リンカー−Ｘ−Ｎm−Ｙ−ＭＯ；
（式中、各Ｌは独立にリガンドであり、且つｎは１〜１０であり；Ｎmの各Ｎは独立に修飾又は非修飾ヌクレオシドであり、且つｍは１〜５であり；Ｘはリン酸ジエステル連結又はホスホロチオエート連結であり；Ｙはリン酸ジエステル連結であり；且つＭＯは修飾オリゴヌクレオチドである）
を有する。ある種の実施形態では、ｍは１である。ある種の実施形態では、ｍは２である。ある種の実施形態では、ｍは、３、４、又は５である。ある種の実施形態では、ｍは、２、３、４、又は５である。ある種の実施形態では、ｍが１より大きいとき、Ｎmの各修飾又は非修飾ヌクレオシドは、リン酸ジエステルヌクレオシド間結合又はホスホロチオエートヌクレオシド間結合によってＮmの隣接する修飾又は非修飾ヌクレオシドに結合し得る。
【０４３６】
ある種の実施形態では、本明細書に記載されるコンジュゲート型修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物は、構造Ｄ：
Ｌn−リンカー−Ｙ−Ｎm−Ｙ−ＭＯ；
（式中、各Ｌは独立にリガンドであり、且つｎは１〜１０であり；Ｎmの各Ｎは独立に修飾又は非修飾ヌクレオシドであり、且つｍは１〜５であり；各Ｙはリン酸ジエステル連結であり；且つＭＯは修飾オリゴヌクレオチドである）
を有する。ある種の実施形態では、ｍは１である。ある種の実施形態では、ｍは２である。ある種の実施形態では、ｍは、３、４、又は５である。ある種の実施形態では、ｍは、２、３、４、又は５である。ある種の実施形態では、ｍが１より大きいとき、Ｎmの各修飾又は非修飾ヌクレオシドは、リン酸ジエステルヌクレオシド間結合又はホスホロチオエートヌクレオシド間結合によってＮmの隣接する修飾又は非修飾ヌクレオシドに結合し得る。
【０４３７】
ある種の実施形態では、ｎが１より大きいとき、リンカーは、２つ以上のＬを化合物の残りの部分（即ち、修飾オリゴヌクレオチド（ＭＯ）、Ｘ1−Ｎm−Ｘ2−ＭＯ、Ｘ−Ｎm−Ｙ−ＭＯ等）に連結する能力を有する足場を含む。いくつかのそうした実施形態では、化合物（構造Ａ、Ｂ、Ｃ、又はＤの化合物など）のＬn−リンカー部分は、構造Ｅ：
【化１２】
2017523790.tif 000013
（式中、各Ｌは独立にリガンドであり；ｎは１〜１０であり；Ｓは足場であり；且つＱ’及びＱ”は独立に連結基である）
を含む。
【０４３８】
いくつかの実施形態では、各Ｑ’及びＱ”は、ペプチド、エーテル、ポリエチレングリコール、アルキル、Ｃ1〜Ｃ20アルキル、置換Ｃ1〜Ｃ20アルキル、Ｃ2〜Ｃ20アルケニル、置換Ｃ2〜Ｃ20アルケニル、Ｃ2〜Ｃ20アルキニル、置換Ｃ2〜Ｃ20アルキニル、Ｃ1〜Ｃ20アルコキシ、置換Ｃ1〜Ｃ20アルコキシ、アミノ、アミド、ピロリジン、８−アミノ−３，６−ジオキサオクタン酸（ＡＤＯ）、スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレート、及び６−アミノヘキサン酸から独立に選択される。
【０４３９】
いくつかの実施形態では、足場は、２、３、４、又は５つのリガンドを修飾オリゴヌクレオチドに連結する能力を有する。いくつかの実施形態では、足場は、３つのリガンドを修飾オリゴヌクレオチドに連結する能力を有する。
【０４４０】
非限定的で例示的な構造Ｅは、構造Ｅ（ｉ）：
【化１３】
2017523790.tif 000014
（式中、Ｌ1、Ｌ2、及びＬ3は各々独立にリガンドであり；Ｑ’1、Ｑ’2、Ｑ’3、及びＱ”は各々独立に連結基であり；且つＲ1、Ｒ2、Ｒ3、及びＲ4は各々、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、及び置換Ｃ1〜Ｃ6アルキルから独立に選択される）
である。
【０４４１】
いくつかの実施形態では、Ｑ’1、Ｑ’2、Ｑ’3、及びＱ”は各々、ペプチド、エーテル、ポリエチレングリコール、アルキル、Ｃ1〜Ｃ20アルキル、置換Ｃ1〜Ｃ20アルキル、Ｃ2〜Ｃ20アルケニル、置換Ｃ2〜Ｃ20アルケニル、Ｃ2〜Ｃ20アルキニル、置換Ｃ2〜Ｃ20アルキニル、Ｃ1〜Ｃ20アルコキシ、置換Ｃ1〜Ｃ20アルコキシ、アミノ、アミド、ピロリジン、８−アミノ−３，６−ジオキサオクタン酸（ＡＤＯ）、スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレート、及び６−アミノヘキサン酸から独立に選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、及びＲ4は各々、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、及びブチルから独立に選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、及びＲ4は各々、Ｈ及びメチルから選択される。
【０４４２】
更なる非限定的で例示的な構造Ｅは、構造Ｅ（ｉｉ）：
【化１４】
2017523790.tif 000015
（式中、Ｌ1、Ｌ2、及びＬ3は各々独立にリガンドであり；Ｑ’1、Ｑ’2、Ｑ’3、及びＱ”は各々独立に連結基であり；且つＲ1は、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、及び置換Ｃ1〜Ｃ6アルキルから選択される）
である。
【０４４３】
いくつかの実施形態では、Ｑ’1、Ｑ’2、Ｑ’3、及びＱ”は各々、ペプチド、エーテル、ポリエチレングリコール、アルキル、Ｃ1〜Ｃ20アルキル、置換Ｃ1〜Ｃ20アルキル、Ｃ2〜Ｃ20アルケニル、置換Ｃ2〜Ｃ20アルケニル、Ｃ2〜Ｃ20アルキニル、置換Ｃ2〜Ｃ20アルキニル、Ｃ1〜Ｃ20アルコキシ、置換Ｃ1〜Ｃ20アルコキシ、アミノ、アミド、ピロリジン、８−アミノ−３，６−ジオキサオクタン酸（ＡＤＯ）、スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレート、及び６−アミノヘキサン酸から独立に選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ1は、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、及びブチルから選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ1はＨ又はメチルである。
【０４４４】
更なる非限定的で例示的な構造Ｅは、構造Ｅ（ｉｉｉ）：
【化１５】
2017523790.tif 000016
（式中、Ｌ1、Ｌ2、及びＬ3は各々独立にリガンドであり；Ｑ’1、Ｑ’2、Ｑ’3、及びＱ”は各々独立に連結基であり；且つＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5は各々、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、及び置換Ｃ1〜Ｃ6アルキルから独立に選択される）
である。
【０４４５】
いくつかの実施形態では、Ｑ’1、Ｑ’2、Ｑ’3、及びＱ”は各々、ペプチド、エーテル、ポリエチレングリコール、アルキル、Ｃ1〜Ｃ20アルキル、置換Ｃ1〜Ｃ20アルキル、Ｃ2〜Ｃ20アルケニル、置換Ｃ2〜Ｃ20アルケニル、Ｃ2〜Ｃ20アルキニル、置換Ｃ2〜Ｃ20
アルキニル、Ｃ1〜Ｃ20アルコキシ、置換Ｃ1〜Ｃ20アルコキシ、アミノ、アミド、ピロリジン、８−アミノ−３，６−ジオキサオクタン酸（ＡＤＯ）、スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレート、及び６−アミノヘキサン酸から独立に選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5は各々、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、及びブチルから独立に選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5は各々、Ｈ及びメチルから選択される。
【０４４６】
更なる非限定的で例示的な構造Ｅは、構造Ｅ（ｉｖ）：
【化１６】
2017523790.tif 000017
（式中、Ｌ1及びＬ2は各々独立にリガンドであり；Ｑ’1、Ｑ’2、及びＱ”は各々独立に連結基であり；且つＲ1、Ｒ2、及びＲ3は各々、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、及び置換Ｃ1〜Ｃ6アルキルから独立に選択される）
である。
【０４４７】
いくつかの実施形態では、Ｑ’1、Ｑ’2、及びＱ”は各々、ペプチド、エーテル、ポリエチレングリコール、アルキル、Ｃ1〜Ｃ20アルキル、置換Ｃ1〜Ｃ20アルキル、Ｃ2〜Ｃ20アルケニル、置換Ｃ2〜Ｃ20アルケニル、Ｃ2〜Ｃ20アルキニル、置換Ｃ2〜Ｃ20アルキニル、Ｃ1〜Ｃ20アルコキシ、置換Ｃ1〜Ｃ20アルコキシ、アミノ、アミド、ピロリジン、８−アミノ−３，６−ジオキサオクタン酸（ＡＤＯ）、スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレート、及び６−アミノヘキサン酸から独立に選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3は各々、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、及びブチルから独立に選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3は各々、Ｈ及びメチルから選択される。
【０４４８】
更なる非限定的で例示的な構造Ｅは、構造Ｅ（ｖ）：
【化１７】
2017523790.tif 000018
（式中、Ｌ1及びＬ2は各々独立にリガンドであり；Ｑ’1、Ｑ’2、及びＱ”は各々独立に連結基であり；且つＲ1、Ｒ2、及びＲ3は各々、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、及び置換Ｃ1〜Ｃ6アルキルから独立に選択される）
である。
【０４４９】
いくつかの実施形態では、Ｑ’1、Ｑ’2、及びＱ”は各々、ペプチド、エーテル、ポリエチレングリコール、アルキル、Ｃ1〜Ｃ20アルキル、置換Ｃ1〜Ｃ20アルキル、Ｃ2〜Ｃ20アルケニル、置換Ｃ2〜Ｃ20アルケニル、Ｃ2〜Ｃ20アルキニル、置換Ｃ2〜Ｃ20アルキニル、Ｃ1〜Ｃ20アルコキシ、置換Ｃ1〜Ｃ20アルコキシ、アミノ、アミド、ピロリジン、８−アミノ−３，６−ジオキサオクタン酸（ＡＤＯ）、スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレート、及び６−アミノヘキサン酸から独立に選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3は各々、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、及びブチルから独立に選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3は各々、Ｈ及びメチルから選択される。
【０４５０】
更なる非限定的で例示的な構造Ｅは、構造Ｅ（ｖｉ）：
【化１８】
2017523790.tif 000019
（式中、Ｌ1、Ｌ2、及びＬ3は各々独立にリガンドであり；Ｑ’1、Ｑ’2、Ｑ’3、及びＱ”は各々独立に連結基であり；且つＲ1、Ｒ2、及びＲ3は各々、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、及び置換Ｃ1〜Ｃ6アルキルから独立に選択される）
である。
【０４５１】
いくつかの実施形態では、Ｑ’1、Ｑ’2、Ｑ’3、及びＱ”は各々、ペプチド、エーテル、ポリエチレングリコール、アルキル、Ｃ1〜Ｃ20アルキル、置換Ｃ1〜Ｃ20アルキル、Ｃ2〜Ｃ20アルケニル、置換Ｃ2〜Ｃ20アルケニル、Ｃ2〜Ｃ20アルキニル、置換Ｃ2〜Ｃ20アルキニル、Ｃ1〜Ｃ20アルコキシ、置換Ｃ1〜Ｃ20アルコキシ、アミノ、アミド、ピロリジン、８−アミノ−３，６−ジオキサオクタン酸（ＡＤＯ）、スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレート、及び６−アミノヘキサン酸から独立に選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3は各々、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、及びブチルから独立に選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3は各々、Ｈ及びメチルから選択される。
【０４５２】
更なる非限定的で例示的な構造Ｅは、構造Ｅ（ｖｉｉ）：
【化１９】
2017523790.tif 000020
（式中、Ｌ1、Ｌ2、及びＬ3は各々独立にリガンドであり；Ｑ’1、Ｑ’2、Ｑ’3、及びＱ”は各々独立に連結基であり；Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3は各々独立に、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、及び置換Ｃ1〜Ｃ6アルキルから選択され；且つＺ及びＺ’は各々、Ｏ及びＳから独立に選択される）
である。
【０４５３】
いくつかの実施形態では、Ｑ’1、Ｑ’2、Ｑ’3、及びＱ”は各々、ペプチド、エーテル、ポリエチレングリコール、アルキル、Ｃ1〜Ｃ20アルキル、置換Ｃ1〜Ｃ20アルキル、Ｃ2〜Ｃ20アルケニル、置換Ｃ2〜Ｃ20アルケニル、Ｃ2〜Ｃ20アルキニル、置換Ｃ2〜Ｃ20アルキニル、Ｃ1〜Ｃ20アルコキシ、置換Ｃ1〜Ｃ20アルコキシ、アミノ、アミド、ピロリジン、８−アミノ−３，６−ジオキサオクタン酸（ＡＤＯ）、スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレート、及び６−アミノヘキサン酸から独立に選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3は各々、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、及びブチルから独立に選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3は各々、Ｈ及びメチルから選択される。いくつかの実施形態では、少なくとも１つのＰ原子上のＺ又はＺ’はＳであり、及びＺ又はＺ’の他方はＯである（即ち、ホスホロチオエート連結）。いくつかの実施形態では、各−ＯＰ（Ｚ）（Ｚ’）Ｏ−はホスホロチオエート連結である。いくつかの実施形態では、Ｚ及びＺ’は両方ともに少なくとも１つのＰ原子上においてＯである（即ち、リン酸ジエステル連結）。いくつかの実施形態では、各−ＯＰ（Ｚ）（Ｚ’）Ｏ−はリン酸ジエステル連結である。
【０４５４】
更なる非限定的で例示的な構造Ｅは、構造Ｅ（ｖｉｉｉ）：
【化２０】
2017523790.tif 000021
（式中、Ｌ1、Ｌ2、及びＬ3は各々独立にリガンドであり；Ｑ’1、Ｑ’2、Ｑ’3、及びＱ”は各々独立に連結基であり；且つＲ1、Ｒ2、Ｒ3、及びＲ4は各々、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、及び置換Ｃ1〜Ｃ6アルキルから独立に選択される）
である。
【０４５５】
いくつかの実施形態では、Ｑ’1、Ｑ’2、Ｑ’3、及びＱ”は各々、ペプチド、エーテル、ポリエチレングリコール、アルキル、Ｃ1〜Ｃ20アルキル、置換Ｃ1〜Ｃ20アルキル、Ｃ2〜Ｃ20アルケニル、置換Ｃ2〜Ｃ20アルケニル、Ｃ2〜Ｃ20アルキニル、置換Ｃ2〜Ｃ20アルキニル、Ｃ1〜Ｃ20アルコキシ、置換Ｃ1〜Ｃ20アルコキシ、アミノ、アミド、ピロリジン、８−アミノ−３，６−ジオキサオクタン酸（ＡＤＯ）、スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレート、及び６−アミノヘキサン酸から独立に選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、及びＲ4は各々、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、及びブチルから独立に選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、及びＲ4は各々、Ｈ及びメチルから選択される。
【０４５６】
非限定的で例示的な足場及び／又は足場を含むリンカー、及びそれらの合成については、例えば、国際公開第２０１３／０３３２３０号パンフレット、米国特許第８，１０６，０２２  Ｂ２号明細書、米国特許出願公開第２０１２／０１５７５０９  Ａ１号明細書；米国特許第５，９９４，５１７号明細書；米国特許第７，４９１，８０５  Ｂ２号明細書；米国特許第８，３１３，７７２  Ｂ２号明細書；Ｍａｎｏｈａｒａｎ，Ｍ．，Ｃｈａｐｔｅｒ  １６，Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｄｒｕｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｃｒｏｏｋｅ，Ｓ．Ｔ．，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，２００１，３９１−４６９に記載さ
れる。
【０４５７】
いくつかの実施形態では、本化合物のＬn−リンカー部分は、構造Ｆ：
【化２１】
2017523790.tif 000022
（式中、
Ｂは、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（ＲN）−、−Ｚ−Ｐ（Ｚ’）（Ｚ”）Ｏ−、−Ｚ−Ｐ（Ｚ’）（Ｚ”）Ｏ−Ｎm−Ｘ−、及び−Ｚ−Ｐ（Ｚ’）（Ｚ”）Ｏ−Ｎm−Ｙ−から選択され；
ＭＯは修飾オリゴヌクレオチドであり；
ＲNは、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、及びベンジルから選択され；
Ｚ、Ｚ’、及びＺ”は各々、Ｏ及びＳから独立に選択され；
Ｎmの各Ｎは独立に修飾又は非修飾ヌクレオシドであり；
ｍは１〜５であり；
Ｘはリン酸ジエステル連結及びホスホロチオエート連結から選択され；
Ｙはリン酸ジエステル連結であり；且つ
波線はリンカー及び１つ又は複数のリガンドの残りとの結合を示す）
を含む。
【０４５８】
ある種の実施形態では、波線は、上記の構造Ｅとの結合を示す。
【０４５９】
ある種の実施形態では、ｎは１〜５、１〜４、１〜３、又は１〜２である。ある種の実施形態では、ｎは１である。ある種の実施形態では、ｎは２である。ある種の実施形態では、ｎは３である。ある種の実施形態では、ｎは４である。ある種の実施形態では、ｎは５である。
【０４６０】
いくつかの実施形態では、本化合物のＬn−リンカー部分は、構造Ｇ：
【化２２】
2017523790.tif 000023
（式中、
Ｂは、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（ＲN）−、−Ｚ−Ｐ（Ｚ’）（Ｚ”）Ｏ−、−Ｚ−Ｐ（Ｚ’）（Ｚ”）Ｏ−Ｎm−Ｘ−、及び−Ｚ−Ｐ（Ｚ’）（Ｚ”）Ｏ−Ｎm−Ｙ−から選択され；
ＭＯは修飾オリゴヌクレオチドであり；
ＲNは、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、及びベンジルから選択され；
Ｚ、Ｚ’、及びＺ”は各々、Ｏ及びＳから独立に選択され；
Ｎmの各Ｎは独立に修飾又は非修飾ヌクレオシドであり；
ｍは１〜５であり；
Ｘはリン酸ジエステル連結及びホスホロチオエート連結から選択され；
Ｙはリン酸ジエステル連結であり；
各Ｌは独立にリガンドであり；ｎは１〜１０であり；Ｓは足場であり；且つＱ’及びＱ”は独立に連結基である）
を含む。
【０４６１】
いくつかの実施形態では、各Ｑ’及びＱ”は、ペプチド、エーテル、ポリエチレングリコール、アルキル、Ｃ1〜Ｃ20アルキル、置換Ｃ1〜Ｃ20アルキル、Ｃ2〜Ｃ20アルケニル、置換Ｃ2〜Ｃ20アルケニル、Ｃ2〜Ｃ20アルキニル、置換Ｃ2〜Ｃ20アルキニル、Ｃ1〜Ｃ20アルコキシ、置換Ｃ1〜Ｃ20アルコキシ、アミノ、アミド、ピロリジン、８−アミノ−３，６−ジオキサオクタン酸（ＡＤＯ）、スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレート、及び６−アミノヘキサン酸から独立に選択される。
【０４６２】
化合物の（例えば、構造Ｆ又はＧの）非限定的で例示的なＬn−リンカー部分は、以下の構造Ｈ：
【化２３】
2017523790.tif 000024
（式中、波線は、修飾オリゴヌクレオチド（ＭＯ）との結合、例えば構造Ｂの、Ｘ1との結合、又は例えば構造Ｃ、若しくはＤの、Ｘ若しくはＹとの結合を示す）
に示される。
【０４６３】
化合物の更なる非限定的で例示的なＬn−リンカー部分は以下の構造に示され、式中、波線の結合は、例えば構造Ａの、修飾オリゴヌクレオチド（ＭＯ）との結合；例えば構造Ｂの、Ｘ1との結合；例えば構造Ｃの、Ｘとの結合；又は例えば構造Ｄの、Ｙとの結合を示す。
【化２４】
2017523790.tif 000025
【化２５】
2017523790.tif 000026
【化２６】
2017523790.tif 000027
【化２７】
2017523790.tif 000028
【０４６４】
ある種の実施形態では、各リガンドは糖質である。糖質コンジュゲート型修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物は、細胞表面レクチンによって認識されると、細胞膜を通って細胞内へと輸送される。ある種の実施形態では、細胞表面レクチンはＣ型レクチンである。ある種の実施形態では、Ｃ型レクチンはクッパー細胞上に存在する。ある種の実施形態では、Ｃ型レクチンはマクロファージ上に存在する。ある種の実施形態では、Ｃ型レクチンは内皮細胞上に存在する。ある種の実施形態では、Ｃ型レクチンは単球上に存在する。ある種の実施形態では、Ｃ型レクチンは白血球上に存在する。ある種の実施形態では、Ｃ型レクチンは樹状細胞上に存在する。ある種の実施形態では、Ｃ型レクチンはＢ細胞上に存在する。コンジュゲートは、Ｃ型レクチンを発現する任意の細胞型への抗ｍｉＲ−１２２化合物の取り込みを促進し得る。
【０４６５】
ある種の実施形態では、Ｃ型レクチンはアシアロ糖タンパク質受容体（ＡＳＧＰＲ）である。ある種の実施形態では、コンジュゲートは、以下に限定されるものではないが、ガラクトース又はガラクトース誘導体を含む、ＡＳＧＰＲに対して親和性を有する１つ又は複数のリガンドを含む。ある種の実施形態では、ＡＳＧＰＲに対して親和性を有するリガンドは、Ｎ−アセチルガラクトサミン、ガラクトース、ガラクトサミン、Ｎ−ホルミルガラクトサミン、Ｎ−プロピオニル−ガラクトサミン、Ｎ−ｎ−ブタノイルガラクトサミン、又はＮ−イソ−ブタノイル−ガラクトサミンである。このようなコンジュゲートは、ＡＳＧＰＲを発現する細胞、例えば肝細胞及び樹状細胞への化合物の取り込みを促進する。
【０４６６】
ある種の実施形態では、リガンドは、マンノース、グルコース、ガラクトース、リボース、アラビノース、フルクトース、フコース、キシロース、Ｄ−マンノース、Ｌ−マンノース、Ｄ−ガラクトース、Ｌ−ガラクトース、Ｄ−グルコース、Ｌ−グルコース、Ｄ−リボース、Ｌ−リボース、Ｄ−アラビノース、Ｌ−アラビノース、Ｄ−フルクトース、Ｌ−フルクトース、Ｄ−フコース、Ｌ−フコース、Ｄ−キシロース、Ｌ−キシロース、α−Ｄ−マンノフラノース、β−Ｄ−マンノフラノース、α−Ｄ−マンノピラノース、β−Ｄ−マンノピラノース、α−Ｄ−グルコフラノース、β−Ｄ−グルコフラノース、α−Ｄ−グルコピラノース、β−Ｄ−グルコピラノース、α−Ｄ−ガラクトフラノース、β−Ｄ−ガラクトフラノース、α−Ｄ−ガラクトピラノース、β−Ｄ−ガラクトピラノース、α−Ｄ−リボフラノース、β−Ｄ−リボフラノース、α−Ｄ−リボピラノース、β−Ｄ−リボピラノース、α−Ｄ−フルクトフラノース、α−Ｄ−フルクトピラノース、グルコサミン、ガラクトサミン、シアル酸、及びＮ−アセチルガラクトサミンから選択される糖質である。
【０４６７】
ある種の実施形態では、リガンドは、Ｎ−アセチルガラクトサミン、ガラクトース、ガラクトサミン、Ｎ−ホルミルガラクトサミン、Ｎ−プロピオニル−ガラクトサミン、Ｎ−ｎ−ブタノイルガラクトサミン、及びＮ−イソ−ブタノイル−ガラクトサミンから選択される。
【０４６８】
ある種の実施形態では、リガンドはＮ−アセチルガラクトサミンである。
【０４６９】
ある種の実施形態では、化合物は、構造：
【化２８】
2017523790.tif 000029
（式中、Ｎmの各Ｎは独立に修飾又は非修飾ヌクレオシドであり、且つｍは１〜５であり；Ｘ1及びＸ2は各々独立にリン酸ジエステル連結又はホスホロチオエート連結であり；且つＭＯは修飾オリゴヌクレオチドである）
を含む。ある種の実施形態では、ｍは１である。ある種の実施形態では、ｍは２である。ある種の実施形態では、ｍは、３、４、又は５である。ある種の実施形態では、ｍは、２、３、４、又は５である。ある種の実施形態では、ｍが１より大きいとき、Ｎmの各修飾又は非修飾ヌクレオシドは、リン酸ジエステルヌクレオシド間結合又はホスホロチオエートヌクレオシド間結合によってＮmの隣接する修飾又は非修飾ヌクレオシドに結合し得る。
【０４７０】
ある種の実施形態では、化合物は、構造：
【化２９】
2017523790.tif 000030
（式中、Ｘはリン酸ジエステル連結又はホスホロチオエート連結であり；Ｎmの各Ｎは独
立に修飾又は非修飾ヌクレオシドであり、且つｍは１〜５であり；Ｙはリン酸ジエステル連結であり；且つＭＯは修飾オリゴヌクレオチドである）
を含む。ある種の実施形態では、ｍは１である。ある種の実施形態では、ｍは２である。ある種の実施形態では、ｍは、３、４、又は５である。ある種の実施形態では、ｍは、２、３、４、又は５である。ある種の実施形態では、ｍが１より大きいとき、Ｎmの各修飾又は非修飾ヌクレオシドは、リン酸ジエステルヌクレオシド間結合又はホスホロチオエートヌクレオシド間結合によってＮmの隣接する修飾又は非修飾ヌクレオシドに結合し得る。
【０４７１】
ある種の実施形態では、化合物は、構造：
【化３０】
2017523790.tif 000031
（式中、Ｘはリン酸ジエステル連結であり；Ｎmの各Ｎは独立に修飾又は非修飾ヌクレオシドであり、且つｍは１〜５であり；Ｙはリン酸ジエステル連結であり；且つＭＯは修飾オリゴヌクレオチドである）
を含む。ある種の実施形態では、ｍは１である。ある種の実施形態では、ｍは２である。ある種の実施形態では、ｍは、３、４、又は５である。ある種の実施形態では、ｍは、２、３、４、又は５である。ある種の実施形態では、ｍが１より大きいとき、Ｎmの各修飾又は非修飾ヌクレオシドは、リン酸ジエステルヌクレオシド間結合又はホスホロチオエートヌクレオシド間結合によってＮmの隣接する修飾又は非修飾ヌクレオシドに結合し得る。
【０４７２】
いくつかの実施形態では、化合物は、構造：
【化３１】
2017523790.tif 000032
（式中、Ｘはリン酸ジエステル連結であり；Ｎmの各Ｎはデオキシアデノシン（Ａ）であ
り；ｍは２であり；Ｙはリン酸ジエステル連結であり；且つＭＯは５’−ＣSＡSＡSＵSＧSＣSＵSＧSＣSＡSＡＡＣSＡSＡSＵSＧSＣSＵSＧSＣSＡS−３’（配列番号７）であり、添字「Ｓ」が後ろに付く各ヌクレオシドはＳ−ｃＥｔヌクレオシドであり、後ろに添字が付かない各ヌクレオシドはデオキシヌクレオシドであり、且つ２つのＳ−ｃＥｔヌクレオシド間の各ヌクレオシド間結合がホスホロチオエート連結であり、残りのヌクレオシド間結合がリン酸ジエステル連結である）
を含む。いくつかの実施形態では、ＹがＭＯの３’末端に連結している。
【０４７３】
いくつかの実施形態では、化合物は、構造：
【化３２】
2017523790.tif 000033
（式中、Ｘはリン酸ジエステル連結であり；Ｎmの各Ｎはデオキシアデノシン（Ａ）であり；ｍは２であり；Ｙはリン酸ジエステル連結であり；且つＭＯは５’−ＣSＡSＡSＵSＧSＣSＵSＧSＣSＡSＡＡＣSＡSＡSＵSＧSＣSＵSＧSＣSＡS−３’（配列番号７）であり、添字「Ｓ」が後ろに付く各ヌクレオシドはＳ−ｃＥｔヌクレオシドであり、後ろに添字が付かない各ヌクレオシドはデオキシヌクレオシドであり、且つ２つのＳ−ｃＥｔヌクレオシド間の各ヌクレオシド間結合がホスホロチオエート連結であり、残りのヌクレオシド間結合がリン酸ジエステル連結であり；且つ式中、ＹがＭＯの３’末端に連結している）
を含む。
【０４７４】
いくつかの実施形態では、化合物は、構造：
【化３３】
2017523790.tif 000034
（式中、Ｘはリン酸ジエステル連結であり；Ｎmの各Ｎはデオキシアデノシン（Ａ）であり；ｍは２であり；Ｙはリン酸ジエステル連結であり；且つＭＯは５’−ＣSＡSＡSＵSＧSＣSＵSＧSＣSＡSＡＡＣSＡSＡSＵSＧSＣSＵSＧSＣSＡS−３’（配列番号７）であり、添字「Ｓ」が後ろに付く各ヌクレオシドはＳ−ｃＥｔヌクレオシドであり、後ろに添字が付かない各ヌクレオシドはデオキシヌクレオシドであり、且つ２つのＳ−ｃＥｔヌクレオシド間の各ヌクレオシド間結合がホスホロチオエート連結であり、残りのヌクレオシド間結合がリン酸ジエステル連結であり；且つ式中、ＹがＭＯの３’末端に連結している）
からなるか、又はその薬学的に許容される塩である。
【０４７５】
いくつかの実施形態では、化合物は、構造：
【化３４】
2017523790.tif 000035
（式中、Ｎmの各Ｎは独立に修飾又は非修飾ヌクレオシドであり、且つｍは１〜５であり；Ｘ1及びＸ2は各々独立にリン酸ジエステル連結又はホスホロチオエート連結であり；且つＭＯは修飾オリゴヌクレオチドである）
を有する。
【０４７６】
ある種の実施形態では、Ｘ1及びＸ2の少なくとも一方はリン酸ジエステル連結である。ある種の実施形態では、Ｘ1及びＸ2の各々はリン酸ジエステル連結である。
【０４７７】
ある種の実施形態では、ｍは１である。ある種の実施形態では、ｍは２である。ある種の実施形態では、ｍは、２、３、４、又は５である。ある種の実施形態では、ｍは、３、４、又は５である。ある種の実施形態では、ｍが１より大きいとき、Ｎmの各修飾又は非修飾ヌクレオシドは、リン酸ジエステルヌクレオシド間結合又はホスホロチオエートヌクレオシド間結合によってＮmの隣接する修飾又は非修飾ヌクレオシドに結合し得る。ある種の実施形態では、ｍが２であるとき、Ｎmのヌクレオシドはリン酸ジエステルヌクレオシド間結合によって連結される。
【０４７８】
本明細書に記載される実施形態の何れかでは、ＮmはＮ’pＮ”であり、式中、各Ｎ’は独立に修飾又は非修飾ヌクレオシドであり、且つｐは０〜４であり；且つＮ”は、非修飾糖部分を含むヌクレオシドである。
【０４７９】
ある種の実施形態では、ｐは０である。ある種の実施形態では、ｐは、１、２、３、又は４である。ある種の実施形態では、ｐが１、２、３、又は４であるとき、各Ｎ’は非修飾糖部分を含む。
【０４８０】
ある種の実施形態では、非修飾糖部分はβ−Ｄ−リボース又はβ−Ｄ−デオキシリボースである。
【０４８１】
ある種の実施形態では、ｐが１、２、３、又は４である場合、Ｎ’がプリン核酸塩基を含む。ある種の実施形態では、Ｎ”がプリン核酸塩基を含む。ある種の実施形態では、プリン核酸塩基は、アデニン、グアニン、ヒポキサンチン、キサンチン、及び７−メチルグアニンから選択される。ある種の実施形態では、Ｎはβ−Ｄ−デオキシリボアデノシン又はβ−Ｄ−デオキシリボグアノシンである。ある種の実施形態では、Ｎ”はβ−Ｄ−デオキシリボアデノシン又はβ−Ｄ−デオキシリボグアノシンである。いくつかの実施形態では、ｐは１であり、且つＮ’及びＮ”は各々β−Ｄ−デオキシリボアデノシンである。
【０４８２】
ある種の実施形態では、ｐが１、２、３、又は４である場合、Ｎ’がピリミジン核酸塩基を含む。ある種の実施形態では、Ｎ”がピリミジン核酸塩基を含む。ある種の実施形態では、ピリミジン核酸塩基は、シトシン、５−メチルシトシン、チミン、ウラシル、及び５，６−ジヒドロウラシルから選択される。
【０４８３】
本明細書に記載される実施形態の何れかでは、各Ｎの糖部分は、β−Ｄ−リボース、β−Ｄ−デオキシリボース、２’−Ｏ−メトキシ糖、２’−Ｏ−メチル糖、２’−フルオロ糖、及び二環式糖部分から独立に選択される。ある種の実施形態では、各二環式糖部分は、ｃＥｔ糖部分、ＬＮＡ糖部分、及びＥＮＡ糖部分から独立に選択される。ある種の実施形態では、ｃＥｔ糖部分はＳ−ｃＥｔ糖部分である。ある種の実施形態では、ｃＥｔ糖部分はＲ−ｃＥｔ糖部分である。本明細書に記載される何れかの実施形態では、各Ｎの糖部分は、β−Ｄ−リボース、β−Ｄ−デオキシリボース、及び２’−フルオロ糖から独立に選択され得る。
【０４８４】
ある種の実施形態では、化合物は、構造：
【化３５】
2017523790.tif 000036
（式中、Ｘはリン酸ジエステル連結であり；ｍは１であり；ＮmのＮはβ−Ｄ−デオキシリボアデノシンであり；Ｙはリン酸ジエステル連結であり；且つＭＯは修飾オリゴヌクレオチドである）
を含む。
【０４８５】
ある種の実施形態では、化合物は、構造：
【化３６】
2017523790.tif 000037
（式中、Ｘはリン酸ジエステル連結であり；ｍは２であり；Ｎmの各Ｎはβ−Ｄ−デオキシリボアデノシンであり；Ｎのヌクレオシドはリン酸ジエステルヌクレオシド間結合によって連結され；Ｙはリン酸ジエステル連結であり；且つＭＯは修飾オリゴヌクレオチドである）
を含む。
【０４８６】
修飾オリゴヌクレオチドとのコンジュゲーションの更なる部分としては、フェナジン、フェナントリジン、アントラキノン、アクリジン、フルオレセイン類、ローダミン類、クマリン類、及び色素が挙げられる。ある種の実施形態では、コンジュゲート基は修飾オリゴヌクレオチドに直接結合する。
【０４８７】
ある種の代謝産物
化合物は、インビトロ又はインビボでエキソヌクレアーゼ及び／又はエンドヌクレアーゼに曝露されると、化合物全体にわたって種々の位置で切断を受け得る。このような切断の産物は親化合物の活性をある程度保持することができ、そのため活性代謝産物と見なされる。従って、本明細書に記載される方法において化合物の代謝産物を使用し得る。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチド（非コンジュゲート型又はコンジュゲート型）が５’末端及び／又は３’末端で切断を受け、親修飾オリゴヌクレオチドと比べて５’末端及び／又は３’末端のヌクレオチドが１、２、又は３個少ない代謝産物が生じる。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドが５’末端で切断を受け、その５’末端ヌクレオチドが遊離して、親修飾オリゴヌクレオチドと比べて５’末端のヌクレオチドが１個少ない代謝産物が生じる。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドが５’末端で切断を受けて２個の５’末端ヌクレオシドが遊離し、親修飾オリゴヌクレオチドと比べて５’末端のヌクレオチドが２個少ない代謝産物が生じる。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドが３’末端で切断を受け、その３’末端ヌクレオチドが遊離して、親修飾オリゴヌクレオチドと比べて３’末端のヌクレオチドが１個少ない代謝産物が生じる。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドが３’末端で切断を受け、２個の３’末端ヌクレオシドが遊離して、親修飾オリゴヌクレオチドと比べて３’末端のヌクレオチドが２個少ない代謝産物が生じる。
【０４８８】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される修飾オリゴヌクレオチドは、領域（即ち、本明細書に記載する構造におけるオリゴ１、オリゴ２、及び／又はオリゴ３）の間の切断を受け、領域が互いに分離する。例えば、修飾オリゴヌクレオチドが構造［オリゴ１］−［ｘ−Ｎ］m−ｘ−［オリゴ２］を有する場合、いくつかの実施形態では、切断によってオリゴ１及びオリゴ２が生じ、ここでは一方又は両方のオリゴが［ｘ−Ｎ］mの１つ又は複数のヌクレオチドを含むこともあり、又は一方又は両方のオリゴが［ｘ−Ｎ］mのいかなるヌクレオチドも含まないこともある。同様に、修飾オリゴヌクレオチドが構造［オリゴ１］−［ｘ−Ｎ］m−ｘ−［オリゴ２］−［ｘ−Ｎ］m−ｘ−［オリゴ３］を有する場合、いくつかの実施形態では、切断によってオリゴ１、オリゴ２、及びオリゴ３が生じ、ここではオリゴの１つ又は複数が［ｘ−Ｎ］mの１つ又は複数のヌクレオチドを含むこともあり、又は１つ若しくは複数のオリゴが［ｘ−Ｎ］mのいかなるヌクレオチドも含まないこともある。いくつかの実施形態では、切断は部分的で、［オリゴ１］−［ｘ−Ｎ］m−ｘ−［オリゴ２］及びオリゴ３、又はオリゴ１及び−［オリゴ２］−［ｘ−Ｎ］m−ｘ−［オリゴ３］が生じることもあり、この場合も一方又は両方の部分が［ｘ−Ｎ］mの１つ又は複数のヌクレオチドを含み得る。いくつかの実施形態では、切断は標的組織で起こる。いくつかの実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの各領域は全体としての修飾ヌクレオチドより安定している。
【０４８９】
コンジュゲート部分に連結した修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物はまた、修飾オリゴヌクレオチドとリガンドとの間のリンカー内の部位でも切断を受け得る。ある種の実施形態では、切断により、コンジュゲート部分の一部を含む親修飾オリゴヌクレオチドが生じる。ある種の実施形態では、切断により、修飾オリゴヌクレオチドとリガンドとの間のリンカーの１つ又は複数のサブユニットを含む親修飾オリゴヌクレオチドが生じる。例えば、化合物が構造Ｌn−リンカー−Ｎm−Ｐ−ＭＯを有する場合、いくつかの実施形態では、切断により、Ｎmの１つ又は複数のヌクレオチドを含む親修飾オリゴヌクレオチドが生じる。いくつかの実施形態では、コンジュゲート型修飾オリゴヌクレオチドの切断により、親修飾オリゴヌクレオチドが生じる。いくつかのそうした実施形態、例えば、化合物が構造Ｌn−リンカー−Ｎm−Ｐ−ＭＯを有する場合、いくつかの実施形態では、切断により、Ｎmのヌクレオチドを全く含まない親修飾オリゴヌクレオチドが生じる。
【０４９０】
ある種のマイクロＲＮＡ標的
ある種の実施形態では、マイクロＲＮＡに標的化される修飾オリゴヌクレオチドの領域の各核酸塩基は、マイクロＲＮＡ、又はその前駆体の核酸塩基配列における対応する各位置の核酸塩基と塩基対合を行う能力を有する。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域の核酸塩基配列は、その標的マイクロＲＮＡ又は前駆体配列と比べて１つ又は複数のミスマッチ塩基対を有し得るが、その標的配列とのハイブリダイズ能は保持したままである。
【０４９１】
ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は、マイクロＲＮＡステム−ループ配列など、マイクロＲＮＡ前駆体の核酸塩基配列と相補的な核酸塩基配列を有する。マイクロＲＮＡ前駆体配列内には成熟マイクロＲＮＡが含まれるため、マイクロＲＮＡと相補的な核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドの領域はまた、対応するマイクロＲＮＡ前駆体の領域とも相補的である。
【０４９２】
ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域の連結したヌクレオシドの数は、マイクロＲＮＡ又はその前駆体の長さ未満である。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は、マイクロＲＮＡ又はその前駆体の領域と相補的な核酸塩基配列を有する。マイクロＲＮＡの長さ未満であるいくつもの連結したヌクレオシドを有する修飾オリゴヌクレオチドの領域は（ここで修飾オリゴヌクレオチドの各核酸塩基はマイクロＲＮＡ核酸塩基配列の対応する位置の各核酸塩基と相補的である）、マイクロＲＮＡ核酸塩基配列の領域と完全に相補的な核酸塩基配列を有するものと見なされる。例えば、１２個の連結したヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドの領域は（ここではヌクレオシド１〜１２の核酸塩基が、各々、２３核酸塩基長のマイクロＲＮＡの対応する位置と相補的である）、マイクロＲＮＡの核酸塩基配列の１２核酸塩基領域と完全に相補的である。修飾オリゴヌクレオチドのこのような領域は、マイクロＲＮＡの２２核酸塩基部分と１００％の相補性の核酸塩基配列を有する。更に、修飾オリゴヌクレオチドのこのような領域は、マイクロＲＮＡと１００％相補的であると見なされる。
【０４９３】
ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの核酸塩基配列の領域は、マイクロＲＮＡの核酸塩基配列の領域と完全に相補的である。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの８個の連続する核酸塩基が、各々、マイクロＲＮＡの８個の連続する核酸塩基と相補的である。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの９個の連続する核酸塩基が、各々、マイクロＲＮＡの９個の連続する核酸塩基と相補的である。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの１０個の連続する核酸塩基が、各々、マイクロＲＮＡの１０個の連続する核酸塩基と相補的である。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの１１個の連続する核酸塩基が、各々、マイクロＲＮＡの１１個の連続する核酸塩基と相補的である。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの１２個の連続する核酸塩基が、各々、マイクロＲＮＡの１２個の連続する核酸塩基と相補的である。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの１３個の連続する核酸塩基が、各々、マイクロＲＮＡの１３個の連続する核酸塩基と相補的である。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの１４個の連続する核酸塩基が、各々、マイクロＲＮＡの１４個の連続する核酸塩基と相補的である。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの１５個の連続する核酸塩基が、各々、マイクロＲＮＡの１５個の連続する核酸塩基と相補的である。
【０４９４】
ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域はシード配列と相補的な核酸塩基配列を含み、即ちこの領域はシードマッチ配列を含む。ある種の実施形態では、シード配列は７量体シード配列である。ある種の実施形態では、７量体シード配列はマイクロＲＮＡの核酸塩基１〜６である。ある種の実施形態では、７量体シード配列はマイクロＲＮＡの核酸塩基２〜７である。ある種の実施形態では、７量体シード配列はマイクロＲＮＡの核酸塩基３〜８である。ある種の実施形態では、シード配列は７量体シード配列である。ある種の実施形態では、７量体シード配列は、マイクロＲＮＡの核酸塩基１〜７である。ある種の実施形態では、７量体シード配列はマイクロＲＮＡの核酸塩基２〜８である。ある種の実施形態では、シード配列は８量体シード配列である。ある種の実施形態では、８量体シード配列はマイクロＲＮＡの核酸塩基１〜８である。ある種の実施形態では、８量体シード配列はマイクロＲＮＡの核酸塩基２〜９である。
【０４９５】
ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域の核酸塩基配列は本明細書に掲載するマイクロＲＮＡ核酸塩基配列、又はその前駆体と１００％相補的である。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は、マイクロＲＮＡ、又はその前駆体の核酸塩基配列と比べて１つのミスマッチを有する核酸塩基配列を有する。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は、マイクロＲＮＡ、又はその前駆体の核酸塩基配列と比べて２つのミスマッチを有する核酸塩基配列を有する。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域は、マイクロＲＮＡ、又はその前駆体の核酸塩基配列と比べて２つ以下のミスマッチを有する核酸塩基配列を有する。ある種の実施形態では、ミスマッチを有する核酸塩基は連続している。ある種の実施形態では、ミスマッチを有する核酸塩基は連続していない。
【０４９６】
ある種の核酸塩基配列
本明細書に記載する任意の核酸塩基配列は、以下に限定されるものではないが、実施例及び配列表に見られるものを含め、核酸に対するいかなる修飾とも無関係である。そのため、配列番号によって定義される核酸は、独立に、１つ又は複数の糖部分、１つ又は複数のヌクレオシド間結合、及び／又は１つ又は複数の核酸塩基に対する１つ又は複数の修飾を含み得る。
【０４９７】
本出願に添付される配列表では、各核酸塩基配列は必要に応じて「ＲＮＡ」又は「ＤＮＡ」の何れかとして特定されるが、実際には、それらの配列は、任意に組み合わせた化学修飾によって修飾され得る。当業者は、修飾オリゴヌクレオチドを記述するためのこのような「ＲＮＡ」又は「ＤＮＡ」の指示がやや恣意的であることを容易に理解するであろう。例えば、２’−ＯＨ糖部分とチミン塩基とを含むヌクレオシドを含むオリゴヌクレオチドは、修飾糖（ＤＮＡの天然２’−Ｈに対する２’−ＯＨ）を有するＤＮＡと記載することもでき、又は修飾塩基（ＲＮＡの天然ウラシルに対するチミン（メチル化ウラシル））を有するＲＮＡと記載することもできる。
【０４９８】
従って、以下に限定されるものではないが、配列表に提供されるものを含む、本明細書に提供される核酸配列は、以下に限定されるものではないが、修飾核酸塩基を有するそうした核酸を含め、任意に組み合わせた天然又は修飾ＲＮＡ及び／又はＤＮＡを含有する核酸を包含することが意図される。更なる例として、限定なしに、核酸塩基配列「ＡＴＣＧＡＴＣＧ」を有するオリゴマー化合物には、修飾されているか、それとも修飾されていないかに関わらず、以下に限定されるものではないが、ＲＮＡ塩基を含むそのような化合物、例えば配列「ＡＵＣＧＡＵＣＧ」を有するもの及び「ＡＵＣＧＡＴＣＧ」などいくつかのＤＮＡ塩基といくつかのＲＮＡ塩基と有するもの及び他の修飾塩基を有するオリゴマー化合物、例えば「ＡＴmeＣＧＡＵＣＧ」（式中、meＣは、５位にメチル基を含むシトシン塩基を示す）を含む、そのような核酸塩基配列を有する任意のオリゴマー化合物が包含される。
【０４９９】
ある種の合成方法
修飾オリゴヌクレオチドは、当該技術分野において公知の自動固相合成方法で作製し得る。固相合成においては、固体支持体に共有結合的に連結されたヌクレオシドにホスホラミダイト単量体が逐次的にカップリングする。このヌクレオシドは、修飾オリゴヌクレオチドの３’末端ヌクレオシドである。典型的には、カップリングサイクルには以下の４つの工程が含まれる：脱トリチル化（酸による５’−ヒドロキシル保護基の除去）、カップリング（活性ホスホロアミダイトと支持体に結合したヌクレオシド又はオリゴヌクレオチドとの結合）、酸化又は硫化（酸化剤又は硫化剤による新しく形成された亜リン酸トリエステルの変換）、及びキャッピング（未反応５’−ヒドロキシル基のアセチル化）。最終的なカップリングサイクルの後、固体支持体に結合したオリゴヌクレオチドは脱トリチル化工程に供され、続いて固体支持体からのオリゴヌクレオチドの遊離と塩基からの保護基の除去とを同時に行う切断及び脱保護工程に供される。固体支持体はろ過によって除去され、ろ液が濃縮され、得られた溶液はアイデンティティ及び純度に関して試験される。次にオリゴヌクレオチドは、例えば陰イオン交換樹脂が充填されたカラムを使用して精製される。
【０５００】
ＧａｌＮＡｃコンジュゲート型修飾オリゴヌクレオチドは、非コンジュゲート型オリゴヌクレオチドを生成した固相合成と同様の自動固相合成で作製し得る。ＧａｌＮＡｃコンジュゲート型オリゴヌクレオチドの合成においては、固体支持体に共有結合的に連結されたＧａｌＮＡｃコンジュゲートにホスホラミダイト単量体が逐次的にカップリングする。ＧａｌＮＡｃコンジュゲートの合成及びＧａｌＮＡｃコンジュゲート固体支持体については、例えば米国特許第８，１０６，０２２号明細書（１つ又は複数のＧａｌＮＡｃ部分を含むコンジュゲートを含む、糖質含有コンジュゲートの合成の記載及び固体支持体に共有結合的に連結したコンジュゲートの合成の記載に関して全体として本明細書において参照により援用される）に記載される。
【０５０１】
本明細書に提供されるのは、式（Ｉ）：
【化３７】
2017523790.tif 000038
（式中、Ｎmの各Ｎは独立に修飾又は非修飾ヌクレオシドであり、且つｍは１〜５であり；Ｘ1及びＸ2は各々独立にリン酸ジエステル連結又はホスホロチオエート連結であり；且つＭＯは修飾オリゴヌクレオチドである）
に示される構造を有するＧａｌＮＡｃコンジュゲート型修飾オリゴヌクレオチドの作製する方法であって、
式ＩＶに示されるとおりのコンジュゲートを含む固体支持体を提供する工程；
反応性ヒドロキシルの生成に有効な条件下でＤＭＴ基を脱保護する工程；
【化３８】
2017523790.tif 000039
逐次的なホスホラミダイトカップリング工程を実施してＮmを形成する工程；
逐次的なホスホラミダイトカップリング工程を実施してＭＯを形成する工程；及び
コンジュゲート型修飾オリゴヌクレオチドを固体支持体から遊離させる工程
を含む方法である。
【０５０２】
ある種の修飾
本明細書に提供されるのは、構造［オリゴ１］−［ｘ−Ｎ］m−ｘ−［オリゴ２］又は［オリゴ１］−［ｘ−Ｎ］m−ｘ−［オリゴ２］−［ｘ−Ｎ］m−ｘ−［オリゴ３］を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物である。本明細書で更に提供されるのは、構造［オリゴ１］−［ｘ−Ｎ］m−ｘ−［オリゴ２］又は［オリゴ１］−［ｘ−Ｎ］m−ｘ−［オリゴ２］−［ｘ−Ｎ］m−ｘ−［オリゴ３］からなる修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物である。いくつかの実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドはコンジュゲート部分に結合する。修飾オリゴヌクレオチドは、核酸塩基、糖、及び／又はヌクレオシド間結合に１つ又は複数の修飾を含み得る。修飾核酸塩基、糖、及び／又はヌクレオシド間結合は、望ましい特性、例えば、細胞取り込みの増強、他のオリゴヌクレオチド又は核酸標的に対する親和性の増強及びヌクレアーゼの存在下における安定性の増加が理由で、非修飾型より優位に選択され得る。
【０５０３】
ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは１つ又は複数の修飾ヌクレオシドを含む。ある種の実施形態では、修飾ヌクレオシドは安定化ヌクレオシドである。安定化ヌクレオシドの例は、糖修飾ヌクレオシドである。
【０５０４】
ある種の実施形態では、修飾ヌクレオシドは修飾糖部分を含む。ある種の実施形態では、修飾糖部分を含む修飾ヌクレオシドは非修飾核酸塩基を含む。ある種の実施形態では、修飾糖は修飾核酸塩基を含む。ある種の実施形態では、修飾ヌクレオシドは２’−修飾ヌクレオシドである。
【０５０５】
ある種の実施形態では、２’−修飾ヌクレオシドは二環式糖部分を含む。ある種の実施形態では、二環式糖部分はα配置のＤ糖である。ある種の実施形態では、二環式糖部分はβ配置のＤ糖である。ある種の実施形態では、二環式糖部分はα配置のＬ糖である。ある種の実施形態では、二環式糖部分はβ配置のＬ糖である。
【０５０６】
ある種の実施形態では、二環式糖部分は２’−炭素原子と４’−炭素原子との間に架橋基を含む。ある種の実施形態では、架橋基は１〜８個の連結したビラジカル基を含む。ある種の実施形態では、二環式糖部分は１〜４個の連結したビラジカル基を含む。ある種の実施形態では、二環式糖部分は２又は３個の連結したビラジカル基を含む。ある種の実施形態では、二環式糖部分は、２個の連結したビラジカル基を含む。こうした４’から２’の糖置換基の例には、−［Ｃ（Ｒa）（Ｒb）］n−、−［Ｃ（Ｒa）（Ｒb）］n−Ｏ−、−Ｃ（ＲaＲb）−Ｎ（Ｒ）−Ｏ−又は−Ｃ（ＲaＲb）−Ｏ−Ｎ（Ｒ）−；４’−ＣＨ2−２’、４’−（ＣＨ2）2−２’、４’−（ＣＨ2）3−２’；  ４’−（ＣＨ2）−Ｏ−２’（ＬＮＡ）；４’−（ＣＨ2）−Ｓ−２’；４’−（ＣＨ2）2−Ｏ−２’（ＥＮＡ）；４’−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｏ−２’（ｃＥｔ）及び４’−ＣＨ（ＣＨ2ＯＣＨ3）−Ｏ−２’、並びにこれらのアナログ（例えば、２００８年７月１５日に発行された米国特許第７，３９９，８４５号明細書を参照されたい）；４’−Ｃ（ＣＨ3）（ＣＨ3）−Ｏ−２’及びこれらのアナログ、（例えば、２００９年１月８日に公開された国際公開第２００９／００６４７８号パンフレットを参照されたい）；４’−ＣＨ2−Ｎ（ＯＣＨ3）−２’及びこれらのアナログ（例えば、２００８年１２月１１日に公開された国際公開第２００８／１５０７２９号パンフレットを参照されたい）；４’−ＣＨ2−Ｏ−Ｎ（ＣＨ3）−２’（例えば、２００４年９月２日に公開された米国特許出願公開第２００４／０１７１５７０号明細書を参照されたい）；Ｒが各々独立にＨ、保護基又はＣ1〜Ｃ12アルキルである４’−ＣＨ2−Ｏ−Ｎ（Ｒ）−２’及び４’−ＣＨ2−Ｎ（Ｒ）−Ｏ−２’−；ＲがＨ、Ｃ1〜Ｃ12アルキル又は保護基である４’−ＣＨ2−Ｎ（Ｒ）−Ｏ−２’（２００８年９月２３日に発行された米国特許第７，４２７，６７２号明細書を参照されたい）；４’−ＣＨ2−Ｃ（Ｈ）（ＣＨ3）−２’（例えば、Ｃｈａｔｔｏｐａｄｈｙａｙａ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，２００９，７４，１１８−１３４を参照されたい）；並びに４’−ＣＨ2−Ｃ（＝ＣＨ2）−２’及びこれらのアナログ（２００８年１２月８日に公開された国際公開第２００８／１５４４０１号パンフレットを参照されたい）があるが、これに限定されるものではない。
【０５０７】
ある種の実施形態では、こうした４’から２’の架橋は独立に、−［Ｃ（Ｒa）（Ｒb）］n−、−Ｃ（Ｒa）＝Ｃ（Ｒb）−、−Ｃ（Ｒa）＝Ｎ−、−Ｃ（＝ＮＲa）−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｏ−、−Ｓｉ（Ｒa）2−、−Ｓ（＝Ｏ）x−及び−Ｎ（Ｒa）−から独立に選択される１個又は２〜４個の連結した基を含み；
式中、
ｘは０、１又は２であり；
ｎは１、２、３又は４であり；
Ｒa及びＲbは各々独立に、Ｈ、保護基、ヒドロキシル、Ｃ1〜Ｃ12アルキル、置換Ｃ1〜Ｃ12アルキル、Ｃ2〜Ｃ12アルケニル、置換Ｃ2〜Ｃ12アルケニル、Ｃ2〜Ｃ12アルキニル、置換Ｃ2〜Ｃ12アルキニル、Ｃ5〜Ｃ20アリール、置換Ｃ5〜Ｃ20アリール、複素環ラジカル、置換複素環ラジカル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、Ｃ5〜Ｃ7脂環式ラジカル、置換Ｃ5〜Ｃ7脂環式ラジカル、ハロゲン、ＯＪ1、ＮＪ1Ｊ2、ＳＪ1、Ｎ3、ＣＯＯＪ1、アシル（Ｃ（＝Ｏ）−Ｈ）、置換アシル、ＣＮ、スルホニル（Ｓ（＝Ｏ）2−Ｊ1）又はスルホキシル（Ｓ（＝Ｏ）−Ｊ1）であり；且つ
Ｊ1及びＪ2は各々独立に、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ12アルキル、置換Ｃ1〜Ｃ12アルキル、Ｃ2〜Ｃ12アルケニル、置換Ｃ2〜Ｃ12アルケニル、Ｃ2〜Ｃ12アルキニル、置換Ｃ2〜Ｃ12アルキニル、Ｃ5〜Ｃ20アリール、置換Ｃ5〜Ｃ20アリール、アシル（Ｃ（＝Ｏ）−Ｈ）、置換アシル、複素環ラジカル、置換複素環ラジカル、Ｃ1〜Ｃ12アミノアルキル、置換Ｃ1〜Ｃ12アミノアルキル又は保護基である。
【０５０８】
二環式糖部分を含むヌクレオシドは、二環式ヌクレオシド又はＢＮＡという。ある種の実施形態では、二環式ヌクレオシドとして、下記に図示するように、（Ａ）α−Ｌ−メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡ；（Ｂ）β−Ｄ−メチレンオキシ（４’−ＣＨ2−Ｏ−２’）ＢＮＡ；（Ｃ）エチレンオキシ（４’−（ＣＨ2）2−Ｏ−２’）ＢＮＡ；（Ｄ）アミノオキシ（４’−ＣＨ2−Ｏ−Ｎ（Ｒ）−２’）ＢＮＡ；（Ｅ）オキシアミノ（４’−ＣＨ2−Ｎ（Ｒ）−Ｏ−２’）ＢＮＡ；（Ｆ）メチル（メチレンオキシ）（４’−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｏ−２’）ＢＮＡ（規制されたエチル又はｃＥｔとも呼ばれる）；（Ｇ）メチレン−チオ（４’−ＣＨ2−Ｓ−２’）ＢＮＡ；（Ｈ）メチレン−アミノ（４’−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−２’）ＢＮＡ；（Ｉ）メチル炭素環式（４’−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−２’）ＢＮＡ；（Ｊ）ｃ−ＭＯＥ（４’−ＣＨ2−ＯＭｅ−２’）ＢＮＡ、及び（Ｋ）プロピレン炭素環式（４’−（ＣＨ2）3−２’）ＢＮＡがあるが、これに限定されるものではない。
【化３９】
2017523790.tif 000040
式中、Ｂｘは核酸塩基部分であり、Ｒは独立にＨ、保護基又はＣ１〜Ｃ１２アルキルである。
【０５０９】
ある種の実施形態では、２’−修飾ヌクレオシドはハロ、アリル、アミノ、アジド、ＳＨ、ＣＮ、ＯＣＮ、ＣＦ3、ＯＣＦ3、Ｏ−、Ｓ−、又はＮ（Ｒm）−アルキル；Ｏ−、Ｓ−、又はＮ（Ｒm）−アルケニル；Ｏ−、Ｓ−、又はＮ（Ｒm）−アルキニル；Ｏ−アルキレニル−Ｏ−アルキル、アルキニル、アルカリル、アラルキル、Ｏ−アルカリル、Ｏ−アラルキル、Ｏ（ＣＨ2）2ＳＣＨ3、Ｏ−（ＣＨ2）2−Ｏ−Ｎ（Ｒm）（Ｒn）又はＯ−ＣＨ2−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒm）（Ｒn）から選択される２’−置換基を含み、式中、Ｒm及びＲnは各々独立に、Ｈ、アミノ保護基又は置換若しくは非置換Ｃ1〜Ｃ10アルキルである。これらの２’−置換基は更に、ヒドロキシル、アミノ、アルコキシ、カルボキシ、ベンジル、フェニル、ニトロ（ＮＯ2）、チオール、チオアルコキシ（Ｓ−アルキル）、ハロゲン、アルキル、アリール、アルケニル及びアルキニルから独立に選択される１つ又は複数の置換基で置換されていてもよい。
【０５１０】
ある種の実施形態では、２’−修飾ヌクレオシドは、Ｆ、ＮＨ2、Ｎ3、ＯＣＦ3、Ｏ−ＣＨ3、Ｏ（ＣＨ2）3ＮＨ2、ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2、Ｏ−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2、ＯＣＨ2ＣＨ2ＯＣＨ3、Ｏ（ＣＨ2）2ＳＣＨ3、Ｏ−（ＣＨ2）2−Ｏ−Ｎ（Ｒm）（Ｒn）、−Ｏ（ＣＨ2）2Ｏ（ＣＨ2）2Ｎ（ＣＨ3）2及びＮ−置換アセトアミド（Ｏ−ＣＨ2−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒm）（Ｒn）から選択される２’−置換基を含み、Ｒm及びＲnは各々独立に、Ｈ、アミノ保護基又は置換若しくは非置換Ｃ1〜Ｃ10アルキルである。
【０５１１】
ある種の実施形態では、２’−修飾ヌクレオシドは、Ｆ、ＯＣＦ3、Ｏ−ＣＨ3、ＯＣＨ2ＣＨ2ＯＣＨ3、２’−Ｏ（ＣＨ2）2ＳＣＨ3、Ｏ−（ＣＨ2）2−Ｏ−Ｎ（ＣＨ3）2、−Ｏ（ＣＨ2）2Ｏ（ＣＨ2）2Ｎ（ＣＨ3）2、及びＯ−ＣＨ2−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｈ）ＣＨ3から選択される２’−置換基を含む。
【０５１２】
ある種の実施形態では、２’−修飾ヌクレオシドは、Ｆ、Ｏ−ＣＨ3、及びＯＣＨ2ＣＨ2ＯＣＨ3から選択される２’−置換基を含む。
【０５１３】
ある種の実施形態では、修飾糖部分を含むヌクレオシドは４’−チオ修飾ヌクレオシドである。ある種の実施形態では、修飾糖部分を含むヌクレオシドは４’−チオ−２’−修飾ヌクレオシドである。４’−チオ修飾ヌクレオシドは、４’−Ｏが４’−Ｓで置換されたβ−Ｄ−リボヌクレオシドを有する。４’−チオ−２’−修飾ヌクレオシドは、２’−ＯＨが２’−置換基で置換された４’−チオ修飾ヌクレオシドである。好適な２’−置換基は、２’−ＯＣＨ3、２’−Ｏ−（ＣＨ2）2−ＯＣＨ3、及び２’−Ｆを含む。
【０５１４】
ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチド（又は修飾オリゴヌクレオチドの領域）は１つ又は複数のヌクレオシド間修飾を含む。ある種の実施形態では、オリゴヌクレオチドの各ヌクレオシド間結合は修飾ヌクレオシド間結合である。ある種の実施形態では、修飾ヌクレオシド間結合はリン原子を含む。
【０５１５】
ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは、少なくとも１つのホスホロチオエートヌクレオシド間結合を含む。ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの領域の各ヌクレオシド間結合はホスホロチオエートヌクレオシド間結合である。
【０５１６】
ある種の実施形態では、修飾ヌクレオシド間結合はリン原子を含まない。ある種の実施形態では、ヌクレオシド間結合は、短鎖アルキルのヌクレオシド間結合により形成される。ある種の実施形態では、ヌクレオシド間結合は、シクロアルキルのヌクレオシド間結合により形成される。ある種の実施形態では、ヌクレオシド間結合は、ヘテロ原子とアルキルとが混合したヌクレオシド間結合により形成される。ある種の実施形態では、ヌクレオシド間結合は、ヘテロ原子とシクロアルキルとが混合したヌクレオシド間結合により形成される。ある種の実施形態では、ヌクレオシド間結合は、１つ又は複数の短鎖ヘテロ原子のヌクレオシド間結合により形成される。ある種の実施形態では、ヌクレオシド間結合は、１つ又は複数の複素環のヌクレオシド間結合により形成される。ある種の実施形態では、ヌクレオシド間結合はアミド骨格を有する。ある種の実施形態では、ヌクレオシド間結合はＮ、Ｏ、Ｓ及びＣＨ2の各構成部分が混合している。
【０５１７】
ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは１つ又は複数の修飾核酸塩基を含む。
【０５１８】
ある種の実施形態では、修飾核酸塩基は、５−ヒドロキシメチルシトシン、７−デアザグアニン及び７−デアザアデニンから選択される。ある種の実施形態では、修飾核酸塩基は、７−デアザ−アデニン、７−デアザグアノシン、２−アミノピリジン及び２−ピリドンから選択される。ある種の実施形態では、修飾核酸塩基は、５−置換ピリミジン、６−アザピリミジン、並びにＮ−２、Ｎ−６及びＯ−６置換プリン、例えば２アミノプロピルアデニン、５−プロピニルウラシル及び５−プロピニルシトシンから選択される。
【０５１９】
ある種の実施形態では、修飾核酸塩基は多環式複素環を含む。ある種の実施形態では、修飾核酸塩基は三環式複素環を含む。ある種の実施形態では、修飾核酸塩基はフェノキサジン誘導体を含む。ある種の実施形態では、フェノキサジンは更に修飾されて、当該技術分野においてＧクランプ（Ｇ−ｃｌａｍｐ）として知られる核酸塩基を形成していてもよい。
【０５２０】
ある種の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは、特性、例えばヌクレアーゼ安定性を増強するためオリゴヌクレオチドの一方又は両方の末端に結合した１つ又は複数の安定化基を含む。安定化基にはキャップ構造が含まれる。これらの末端修飾はオリゴヌクレオチドをエキソヌクレアーゼ分解から保護し、細胞内における送達及び／又は局在化を促進し得る。キャップは５’末端（５’−キャップ）、又は３’末端（３’−キャップ）に存在してもよく、又は両方の末端に存在してもよい。キャップ構造は、例えば逆位デオキシ脱塩基キャップを含む。
【０５２１】
好適なキャップ構造としては、４’，５’−メチレンヌクレオチド、１−（β−Ｄ−エリスロフラノシル）ヌクレオチド、４’−チオヌクレオチド、炭素環式ヌクレオチド、１，５−アンヒドロヘキシトールヌクレオチド、Ｌ−ヌクレオチド、α−ヌクレオチド、修飾塩基ヌクレオチド、ホスホロジチオエート連結、スレオペントフラノシルヌクレオチド、非環式３’，４’−セコヌクレオチド、非環式３，４−ジヒドロキシブチルヌクレオチド、非環式３，５−ジヒドロキシペンチルヌクレオチド、３’−３’−逆位ヌクレオチド部分、３’−３’−逆位脱塩基部分、３’−２’−逆位ヌクレオチド部分、３’−２’−逆位脱塩基部分、１，４−ブタンジオールホスフェート、３’−ホスホルアミデート、ヘキシルホスフェート、アミノヘキシルホスフェート、３’−リン酸、３’−ホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、架橋メチルホスホネート部分、及び非架橋メチルホスホネート部分、５’−アミノ−アルキルホスフェート、１，３−ジアミノ−２−プロピルホスフェート、３−アミノプロピルホスフェート、６−アミノヘキシルホスフェート、１，２−アミノドデシルホスフェート、ヒドロキシプロピルホスフェート、５’−５’−逆位ヌクレオチド部分、５’−５’−逆位脱塩基部分、５’−ホスホルアミデート、５’−ホスホロチオエート、５’−アミノ、架橋及び／又は非架橋５’−ホスホルアミデート、ホスホロチオエート、及び５’−メルカプト部分が挙げられる。
【０５２２】
ある種の医薬組成物
本明細書に提供される化合物は何れも、医薬組成物として調製し得る。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、化合物の薬学的に許容される塩を使用して調製される。非限定的で例示的な薬学的に許容される塩としては、ナトリウム及びカリウムが挙げられる。いくつかの実施形態では、医薬組成物は本明細書に提供される化合物（その薬学的に許容される塩を含む）と薬学的に許容されるキャリア又は希釈剤とを含む。非限定的で例示的な希釈剤としては、例えば、滅菌水及び滅菌生理食塩水、例えばリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）が挙げられる。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、滅菌水中に製剤化された本明細書に提供される化合物の薬学的に許容される塩を含む。
【０５２３】
ある種の実施形態では、医薬組成物は、投薬単位の形態（例えば、錠剤、カプセル剤、ボーラス等）で投与される。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、２５ｍｇ〜８００ｍｇ、２５ｍｇ〜７００ｍｇ、２５ｍｇ〜６００ｍｇ、２５ｍｇ〜５００ｍｇ、２５ｍｇ〜４００ｍｇ、２５ｍｇ〜３００ｍｇ、２５ｍｇ〜２００ｍｇ、２５ｍｇ〜１００ｍｇ、１００ｍｇ〜８００ｍｇ、２００ｍｇ〜８００ｍｇ、３００ｍｇ〜８００ｍｇ、４００ｍｇ〜８００ｍｇ、５００ｍｇ〜８００ｍｇ、６００ｍｇ〜８００ｍｇ、１００ｍｇ〜７００ｍｇ、１５０ｍｇ〜６５０ｍｇ、２００ｍｇ〜６００ｍｇ、２５０ｍｇ〜５５０ｍｇ、３００ｍｇ〜５００ｍｇ、３００ｍｇ〜４００ｍｇ及び４００ｍｇ〜６００ｍｇから選択される範囲内の用量で、本明細書において提供される化合物を含む。ある種の実施形態では、こうした医薬組成物は、２５ｍｇ、３０ｍｇ、３５ｍｇ、４０ｍｇ、４５ｍｇ、５０ｍｇ、５５ｍｇ、６０ｍｇ、６５ｍｇ、７０ｍｇ、７５ｍｇ、８０ｍｇ、８５ｍｇ、９０ｍｇ、９５ｍｇ、１００ｍｇ、１０５ｍｇ、１１０ｍｇ、１１５ｍｇ、１２０ｍｇ、１２５ｍｇ、１３０ｍｇ、１３５ｍｇ、１４０ｍｇ、１４５ｍｇ、１５０ｍｇ、１５５ｍｇ、１６０ｍｇ、１６５ｍｇ、１７０ｍｇ、１７５ｍｇ、１８０ｍｇ、１８５ｍｇ、１９０ｍｇ、１９５ｍｇ、２００ｍｇ、２０５ｍｇ、２１０ｍｇ、２１５ｍｇ、２２０ｍｇ、２２５ｍｇ、２３０ｍｇ、２３５ｍｇ、２４０ｍｇ、２４５ｍｇ、２５０ｍｇ、２５５ｍｇ、２６０ｍｇ、２６５ｍｇ、２７０ｍｇ、２７０ｍｇ、２８０ｍｇ、２８５ｍｇ、２９０ｍｇ、２９５ｍｇ、３００ｍｇ、３０５ｍｇ、３１０ｍｇ、３１５ｍｇ、３２０ｍｇ、３２５ｍｇ、３３０ｍｇ、３３５ｍｇ、３４０ｍｇ、３４５ｍｇ、３５０ｍｇ、３５５ｍｇ、３６０ｍｇ、３６５ｍｇ、３７０ｍｇ、３７５ｍｇ、３８０ｍｇ、３８５ｍｇ、３９０ｍｇ、３９５ｍｇ、４００ｍｇ、４０５ｍｇ、４１０ｍｇ、４１５ｍｇ、４２０ｍｇ、４２５ｍｇ、４３０ｍｇ、４３５ｍｇ、４４０ｍｇ、４４５ｍｇ、４５０ｍｇ、４５５ｍｇ、４６０ｍｇ、４６５ｍｇ、４７０ｍｇ、４７５ｍｇ、４８０ｍｇ、４８５ｍｇ、４９０ｍｇ、４９５ｍｇ、５００ｍｇ、５０５ｍｇ、５１０ｍｇ、５１５ｍｇ、５２０ｍｇ、５２５ｍｇ、５３０ｍｇ、５３５ｍｇ、５４０ｍｇ、５４５ｍｇ、５５０ｍｇ、５５５ｍｇ、５６０ｍｇ、５６５ｍｇ、５７０ｍｇ、５７５ｍｇ、５８０ｍｇ、５８５ｍｇ、５９０ｍｇ、５９５ｍｇ、６００ｍｇ、６０５ｍｇ、６１０ｍｇ、６１５ｍｇ、６２０ｍｇ、６２５ｍｇ、６３０ｍｇ、６３５ｍｇ、６４０ｍｇ、６４５ｍｇ、６５０ｍｇ、６５５ｍｇ、６６０ｍｇ、６６５ｍｇ、６７０ｍｇ、６７５ｍｇ、６８０ｍｇ、６８５ｍｇ、６９０ｍｇ、６９５ｍｇ、７００ｍｇ、７０５ｍｇ、７１０ｍｇ、７１５ｍｇ、７２０ｍｇ、７２５ｍｇ、７３０ｍｇ、７３５ｍｇ、７４０ｍｇ、７４５ｍｇ、７５０ｍｇ、７５５ｍｇ、７６０ｍｇ、７６５ｍｇ、７７０ｍｇ、７７５ｍｇ、７８０ｍｇ、７８５ｍｇ、７９０ｍｇ、７９５ｍｇ及び８００ｍｇから選択される用量で、本明細書において提供される化合物を含む。そうしたある種の実施形態では、医薬組成物は、２５ｍｇ、５０ｍｇ、７５ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、６００ｍｇ、７００ｍｇ及び８００ｍｇから選択される用量の、本明細書において提供される化合物を含む。
【０５２４】
ある種の実施形態では、本明細書に提供される化合物を含む医薬組成物は、１０ｍｇ／ｋｇ以下、９ｍｇ／ｋｇ以下、８ｍｇ／ｋｇ以下、７．５ｍｇ／ｋｇ以下、７ｍｇ／ｋｇ以下、６．５ｍｇ／ｋｇ以下、６ｍｇ／ｋｇ以下、５．５ｍｇ／ｋｇ以下、５ｍｇ／ｋｇ以下、４．５ｍｇ／ｋｇ以下、４ｍｇ／ｋｇ以下、３．５ｍｇ／ｋｇ以下、３ｍｇ／ｋｇ以下、２．５ｍｇ／ｋｇ以下、２ｍｇ／ｋｇ以下、１．５ｍｇ／ｋｇ以下、１ｍｇ／ｋｇ以下、０．７５ｍｇ／ｋｇ以下、０．５ｍｇ／ｋｇ以下、又は０．２５ｍｇ／ｋｇ以下の用量で投与される。
【０５２５】
ある種の実施形態では、医薬品は、好適な希釈剤、例えば滅菌注射用水又は滅菌注射用生理食塩水で再構成される滅菌凍結乾燥化合物である。再構成された製剤は、生理食塩水中に希釈した後に皮下注射として、又は静脈内注入として投与される。凍結乾燥薬物製剤は、注射用水、又は注射用生理食塩水に調製されて、調製中に酸又は塩基でｐＨ７．０〜９．０に調整されて、次に凍結乾燥された化合物からなる。凍結乾燥化合物は、２５〜８００ｍｇのオリゴヌクレオチドであり得る。これは、２５、５０、７５、１００、１２５、１５０、１７５、２００、２２５、２５０、２７５、３００、３２５、３５０、３７５、４２５、４５０、４７５、５００、５２５、５５０、５７５、６００、６２５、６５０、６７５、７００、７２５、７５０、７７５、及び８００ｍｇの修飾された凍結乾燥オリゴヌクレオチドを包含することが理解される。更に、いくつかの実施形態では、凍結乾燥化合物は、２５ｍｇ〜８００ｍｇ、２５ｍｇ〜７００ｍｇ、２５ｍｇ〜６００ｍｇ、２５ｍｇ〜５００ｍｇ、２５ｍｇ〜４００ｍｇ、２５ｍｇ〜３００ｍｇ、２５ｍｇ〜２００ｍｇ、２５ｍｇ〜１００ｍｇ、１００ｍｇ〜８００ｍｇ、２００ｍｇ〜８００ｍｇ、３００ｍｇ〜８００ｍｇ、４００ｍｇ〜８００ｍｇ、５００ｍｇ〜８００ｍｇ、６００ｍｇ〜８００ｍｇ、１００ｍｇ〜７００ｍｇ、１５０ｍｇ〜６５０ｍｇ、２００ｍｇ〜６００ｍｇ、２５０ｍｇ〜５５０ｍｇ、３００ｍｇ〜５００ｍｇ、３００ｍｇ〜４００ｍｇ、又は４００ｍｇ〜６００ｍｇの範囲の量で存在する。凍結乾燥薬物製剤は２ｍＬ  タイプＩ、透明ガラスバイアル（硫酸アンモニウム処理済み）に包装され、ブロモブチルゴム栓で封がされ、アルミニウムＦＬＩＰ−ＯＦＦ（登録商標）オーバーシールで密閉される。
【０５２６】
ある種の実施形態では、本明細書に提供される医薬組成物は化合物を治療有効量で含む。ある種の実施形態では、治療有効量は、疾患の症状を予防し、軽減し、又は改善するのに十分であるか、又は治療下の被検体の生存を延長させるのに十分である。治療有効量の決定は、十分に当業者の能力の範囲内である。
【０５２７】
ある種の実施形態では、本明細書に提供される医薬組成物は、医薬組成物に通常見られる他の補助成分を当該技術分野で確立された使用レベルで更に含んでもよい。このため、例えば、組成物は、適合性がある追加の医薬活性物質、例えば、鎮痒薬、収斂薬、局所麻酔薬又は抗炎症薬を含んでもよいし、また、様々な剤形の本発明の組成物を物理的に配合するのに有用な追加物質、例えば色素、着香剤、防腐剤、酸化防止剤、乳白剤、粘度付与剤及び安定剤を含んでもよい。しかしながら、こうした物質は、加える際に、本発明の組成物の成分の生物活性を必要以上に阻害するものであってはならない。こうした製剤は滅菌し、必要に応じて、助剤、例えば、製剤のオリゴヌクレオチド（単数又は複数）と有害な相互作用を起こさない滑沢剤、防腐剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、浸透圧を調節するための塩、緩衝液、着色料、矯味矯臭剤及び／又は芳香物質及び同種のものを含んでもよい。
【０５２８】
核酸治療剤には脂質部分が種々の方法で使用されてきた。１つの方法では、カチオン性脂質と中性脂質との混合物で作られた、予め形成されたリポソーム又はリポプレックスに核酸を導入する。別の方法では、中性脂質の存在なしにＤＮＡとモノ−又はポリ−カチオン性脂質との複合体を形成する。ある種の実施形態では、脂質部分は、特定の細胞又は組織への医薬品の分布が増加するように選択する。ある種の実施形態では、脂質部分は、脂肪組織への医薬品の分布が増加するように選択する。ある種の実施形態では、脂質部分は、筋肉組織への医薬品の分布が増加するように選択する。
【０５２９】
ある種の実施形態では、イントラリピッドを使用してオリゴヌクレオチドを含む医薬組成物を調製する。イントラリピッドは、静脈内投与用に調製された脂肪乳剤である。イントラリピッドは、１０％大豆油、１．２％卵黄リン脂質、２．２５％グリセリン及び注射用水からなる。更に、ｐＨを調整するため水酸化ナトリウムが加えられているため、最終製品のｐＨ範囲は６〜８．９になっている。
【０５３０】
ある種の実施形態では、本明細書に提供される医薬組成物は、核酸と複合体化したポリアミン化合物又は脂質部分を含む。こうした調製物は、脂質調製物の開示内容についてその全体を本明細書に援用する国際公開第２００８／０４２９７３号パンフレットに記載されている。いくつかの別の調製物については、脂質調製物の開示内容についてその全体を本明細書に援用するＡｋｉｎｃ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ２６，５６１−５６９（０１  Ｍａｙ  ２００８）に記載されている。
【０５３１】
ある種の実施形態では、本明細書に提供される医薬組成物は、１つ又は複数の化合物、及び１種又は複数種の賦形剤を含む。そうしたある種の実施形態では、賦形剤は、水、塩溶液、アルコール、ポリエチレングリコール、ゼラチン、ラクトース、アミラーゼ、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ケイ酸、粘性パラフィン、ヒドロキシメチルセルロース及びポリビニルピロリドンから選択される。
【０５３２】
ある種の実施形態では、本明細書に提供される医薬組成物は、以下に限定されるものではないが、混合工程、溶解工程、造粒工程、糖衣錠製造工程、水簸工程、乳化工程、カプセル充填工程、封入工程又は錠剤化工程を含む既知の技術を用いて調製される。
【０５３３】
ある種の実施形態では、本明細書に提供される医薬組成物は液体（例えば、懸濁剤、エリキシル剤及び／又は溶液剤）である。こうした実施形態の一部では、液体医薬組成物は、当該技術分野において公知の成分、以下に限定されるものではないが、水、グリコール、油、アルコール、着香剤、防腐剤及び着色剤を用いて調製される。
【０５３４】
ある種の実施形態では、本明細書に提供される医薬組成物は固体（例えば、散剤、錠剤及び／又はカプセル剤）である。こうした実施形態の一部では、１つ又は複数のオリゴヌクレオチドを含む固体医薬組成物は、当該技術分野において公知の成分、以下に限定されるものではないが、デンプン、糖、希釈液、造粒剤、滑沢剤、バインダー及び崩壊剤を用いて調製される。
【０５３５】
ある種の実施形態では、本明細書に提供される医薬組成物はデポ調製物として製剤化される。ある種のこうしたデポ調製物は典型的には非デポ調製物より長く作用する。ある種の実施形態では、こうした調製物は、埋入（例えば皮下又は筋肉内）又は筋肉内注射により投与される。ある種の実施形態では、デポ調製物は、好適なポリマー材料若しくは疎水性材料（例えば許容可能な油に溶かしたエマルジョン）又はイオン交換樹脂を用いて、或いは、やや溶けにくい誘導体、例えば、やや溶けにくい塩として調製される。
【０５３６】
ある種の実施形態では、本明細書に提供される医薬組成物は、送達系を含む。送達系の例には、リポソーム及びエマルジョンがあるが、これに限定されるものではない。ある種の送達系は、疎水性化合物を含む医薬組成物などある種の医薬組成物の調製に有用である。ある種の実施形態では、ある種の有機溶媒、例えばジメチルスルホキシドが使用される。
【０５３７】
ある種の実施形態では、本明細書に提供される医薬組成物は、本明細書において提供される１つ又は複数の化合物を特異的な組織又は細胞型に送達するように設計された１つ又は複数の組織特異的送達分子を含む。例えば、ある種の実施形態では、医薬組成物は、組織特異的抗体でコーティングされたリポソームを含む。
【０５３８】
ある種の実施形態では、本明細書に提供される医薬組成物は、共溶媒系を含む。こうした共溶媒系の一部は、例えば、ベンジルアルコール、非極性界面活性剤、水混和性有機ポリマー及び水相を含む。ある種の実施形態では、こうした共溶媒系は、疎水化合物に使用される。こうした共溶媒系の非限定的な例として、３％ｗ／ｖベンジルアルコール、８％ｗ／ｖの非界面活性剤Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ  ８０（商標）及び６５％ｗ／ｖポリエチレングリコール３００を含む無水エタノールの溶液であるＶＰＤ共溶媒系がある。こうした共溶媒系の比率は、溶解性及び毒性の特性を大きく変えなければ、かなり多岐にわたってもよい。更に、共溶媒の成分の種類も多岐にわたってもよい。例えば、Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ  ８０（商標）の代わりに他の界面活性剤を使用してもよく、ポリエチレングリコールの分子量も多岐にわたってもよい。ポリエチレングリコールの代わりに他の生体適合性ポリマー、例えば、ポリビニルピロリドンを使用してもよい。更にデキストロースの代わりに他の糖又は多糖類を使用してもよい。
【０５３９】
ある種の実施形態では、本明細書に提供される医薬組成物は徐放系を含む。こうした徐放系の非限定的な例として、固体疎水性ポリマーの半透性マトリックスがある。ある種の実施形態では、徐放系は、その化学的性質に応じて数時間、数日、数週又は数ヶ月の期間にわたり医薬品を放出することができる。
【０５４０】
ある種の実施形態では、本明細書に提供される医薬組成物は経口投与用に調製される。こうした実施形態の一部では、医薬組成物は、修飾オリゴヌクレオチドを含む１種又は複数種の化合物を１種又は複数種の薬学的に許容されるキャリアと組み合わせることにより製剤化される。こうしたキャリアの一部を用いると、被検体の経口摂取を目的として医薬組成物を錠剤、丸剤、糖衣錠、カプセル剤、液体剤、ゲル剤、シロップ剤、スラリー剤、懸濁剤及び同種のものとして製剤化することができる。ある種の実施形態では、経口使用のための医薬組成物は、オリゴヌクレオチドと１種又は複数種の固体賦形剤とを混合することによる得られる。好適な賦形剤には、充填剤、例えば糖、例えばラクトース、スクロース、マンニトール又はソルビトール；セルロース調製物、例えば、トウモロコシデンプン、コムギデンプン、コメデンプン、ポテトスターチ、ゼラチン、トラガントゴム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチル−セルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、及び／又はポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）があるが、これに限定されるものではない。ある種の実施形態では、こうした混合物を任意に粉砕し、助剤を任意に加える。ある種の実施形態では、医薬組成物は、錠剤又は糖衣錠の素錠が得られるように形成する。ある種の実施形態では、崩壊剤（例えば、架橋ポリビニルピロリドン、寒天又はアルギン酸又はその塩、例えばアルギン酸ナトリウム）を加える。
【０５４１】
ある種の実施形態では、糖衣錠の素錠にコーティングを施す。そうしたある種の実施形態では、任意にアラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、カーボポールゲル、ポリエチレングリコール及び／又は二酸化チタン、ラッカー溶液、並びに好適な有機溶媒又は溶媒混合物を含んでもよい濃縮糖液を使用してもよい。錠剤又は糖衣錠コーティングには色材又は色素を加えてもよい。
【０５４２】
ある種の実施形態では、経口投与用の医薬組成物は、ゼラチンで作られたプッシュフィット（ｐｕｓｈ−ｆｉｔ）カプセル剤である。こうしたプッシュフィット（ｐｕｓｈ−ｆｉｔ）カプセル剤の一部は、１種又は複数種の充填剤、例えばラクトース、バインダー、例えばデンプン、及び／又は滑沢剤、例えばタルク又はステアリン酸マグネシウム、並びに任意に安定剤と混合された本発明の１つ又は複数の医薬品を含む。ある種の実施形態では、経口投与用の医薬組成物は、ゼラチン及び可塑剤、例えばグリセロール又はソルビトールで作られた密封された軟カプセル剤である。ある種の軟カプセル剤では、本発明の１つ又は複数の医薬品は、好適な液体、例えば脂肪油、流動パラフィン又は液体ポリエチレングリコールに溶解又は懸濁される。更に、安定剤を加えてもよい。
【０５４３】
ある種の実施形態では、医薬組成物は口腔内投与用に調製される。こうした医薬組成物の一部は、従来の方法で製剤化された錠剤又はロゼンジである。
【０５４４】
ある種の実施形態では、医薬組成物は、注射による投与（例えば、静脈内、皮下、筋肉内等）用に調製される。こうした実施形態の一部では、医薬組成物は、キャリアを含み、水溶液、例えば水又は生理学的に適合性の緩衝液、例えばハンクス液、リンゲル液又は生理食塩水緩衝液中で製剤化される。ある種の実施形態では、他の成分（例えば、溶解を促進するか又は防腐剤としての役割を果たす成分）も含まれる。ある種の実施形態では、適切な液体キャリア、懸濁化剤及び同種のものを用いて注射用懸濁液を調製する。ある種の注射用医薬組成物は、単位剤形、例えば、アンプル又は複数用量容器で提供される。ある種の注射用医薬組成物は、油性若しくは水性ビヒクル中の懸濁液、溶液又はエマルジョンであり、製剤添加剤、例えば懸濁剤、安定化剤及び／又は分散剤を含んでもよい。注射用医薬組成物に使用するのに好適なある種の溶媒には、親油性溶媒及び脂肪油、例えばゴマ油、合成脂肪酸エステル、例えばオレイン酸エチル又はトリグリセリド、並びにリポソームがあるが、これに限定されるものではない。水性注射懸濁液は、懸濁液の粘度を高める物質、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトール又はデキストランを含んでもよい。任意に、こうした懸濁液は、好適な安定剤、又は医薬品の溶解性を高めて高濃縮溶液の調製を可能にする作用物質を更に含んでもよい。
【０５４５】
ある種の実施形態では、医薬組成物は経粘膜投与用に調製される。こうした実施形態の一部では、製剤中にバリアを透過するのに適切な浸透剤を使用する。こうした浸透剤は一般に当該技術分野において公知である。
【０５４６】
ある種の実施形態では、本明細書に記載されるとおりの化合物を含む組成物が提供され、ここで粘度レベルは６０ｃＰ未満である。ある種の実施形態では、本組成物は５０ｃＰ未満の粘度レベルを有する。ある種の実施形態では、本組成物は４０ｃＰ未満の粘度レベルを有する。ある種の実施形態では、本組成物は３０ｃＰ未満の粘度レベルを有する。ある種の実施形態では、本組成物は２０ｃＰ未満の粘度レベルを有する。ある種の実施形態では、粘度レベルが２０ｃＰ未満であると、いくつかの実施形態において皮下注射に好適である、約２００ｍｇ／ｍＬの化合物濃度が可能となる。
【０５４７】
ある種の実施形態では、本明細書に提供される１つ又は複数の化合物はプロドラッグとして投与される。ある種の実施形態では、プロドラッグは生体内投与時に、生物学的、薬学的又は治療的により活性が高い形態のオリゴヌクレオチドに化学的又は酵素的に変換される。ある種の実施形態では、プロドラッグは対応する活性形態と比べて投与が容易であるため有用である。例えば、場合によっては、プロドラッグは、対応する活性形態と比べて（例えば、経口投与による）バイオアベイラビリティがより高いものであり得る。ある種の実施形態では、プロドラッグは細胞膜を通じた送達が優れている。ある種の実施形態では、プロドラッグは、所望の細胞型、組織、又は器官への修飾オリゴヌクレオチドの送達を促進する。ある種の実施形態では、プロドラッグは、コンジュゲート型修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物である。場合によっては、プロドラッグは、対応する活性形態と比較して溶解度が向上したものであり得る。ある種の実施形態では、プロドラッグは、対応する活性形態と比べて水溶性が低い。ある種の実施形態では、プロドラッグはエステルである。ある種のそうした実施形態では、エステルは、投与時に代謝的に加水分解されてカルボン酸となる。場合によっては、カルボン酸を含有する化合物が、対応する活性形態である。ある種の実施形態では、プロドラッグは、酸性基に結合した短鎖ペプチド（ポリアミノ酸）を含む。そうした実施形態のある種のものでは、投与時にペプチドが切断され、対応する活性形態が形成される。
【０５４８】
ある種の実施形態では、プロドラッグは、生体内投与時に活性化合物が再生されるように薬学的に活性な化合物を修飾することによって生成される。プロドラッグは、薬物の代謝安定性又は輸送特性を改変し、副作用又は毒性を遮蔽し、薬物の香味を改善し、及び／又は薬物の他の特性又は性質を改変するように設計することができる。生体内での薬力学的過程及び薬物代謝の知識のおかげで、この技術分野の当業者は、薬学的に活性な化合物が分かれば、化合物のプロドラッグを設計することができる（例えば、Ｎｏｇｒａｄｙ（１９８５）Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ａ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ｐａｇｅｓ  ３８８−３９２を参照されたい）。ある種の実施形態では、プロドラッグは、修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物であり、生体内投与時におけるコンジュゲート部分の切断及び修飾オリゴヌクレオチドの再生が可能であるようにコンジュゲート部分に連結している。切断可能なコンジュゲート部分に連結した修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物、例えば、本明細書に記載される構造Ｂ、Ｃ、Ｄ、（Ｉ）、又は（ＩＩ）の化合物は、生体内投与時に修飾オリゴヌクレオチドをその非コンジュゲート形態で遊離し得る。
【０５４９】
ある種の投与経路
ある種の実施形態では、被検体への投与は非経口投与を含む。ある種の実施形態では、被検体への投与は静脈内投与を含む。ある種の実施形態では、被検体への投与は皮下投与を含む。
【０５５０】
ある種の実施形態では、被検体への投与は、動脈内、肺、経口、直腸、経粘膜、腸、経腸、局所、経皮、坐薬、くも膜下腔内、脳室内、腹腔内、鼻腔内、眼内、筋肉内、髄内、及び腫瘍内投与を含む。
【０５５１】
ある種の追加の治療剤
代謝障害の治療剤は、２つ以上の治療剤を含み得る。そのため、ある種の実施形態では、本発明は、代謝障害を処置する方法であって、ｍｉＲ−１０３及び／又はｍｉＲ−１０７、又はその前駆体と相補的な少なくとも１つの領域を含む化合物を、それを必要とする被検体に投与することを含み、且つ少なくとも１つの追加の医薬品を投与することを更に含む方法を提供する。
【０５５２】
ある種の実施形態では、追加の医薬品は血糖降下剤である。
【０５５３】
ある種の実施形態では、血糖降下剤は、ＰＰＡＲアゴニスト（ガンマ、デュアル、又はパン）、ジペプチジルペプチダーゼ（ＩＶ）阻害剤、ＧＬＰ−Ｉアナログ（アルビグルチド（Ｅｐｅｒｚａｎ（登録商標）、ＧＳＫ）など）、インスリン又はインスリンアナログ、インスリン分泌促進物質、ＳＧＬＴ２阻害剤、ヒトアミリンアナログ、ビグアナイド、α−グルコシダーゼ阻害剤、メグリチニド、チアゾリジンジオン、又はスルホニル尿素である。
【０５５４】
ある種の実施形態では、血糖降下剤は、長時間作用型インスリン、例えばインスリングラルギン（Ｌａｎｔｕｓ（登録商標）、Ｓａｎｏｆｉ−Ａｖｅｎｔｉｓ）又はインスリンデテミル（Ｌｅｖｅｍｉｒ（登録商標）、Ｎｏｖｏ  Ｎｏｒｄｉｓｋ）である。ある種の実施形態では、追加の治療剤はインスリンポンプを含む。
【０５５５】
ある種の実施形態では、血糖降下剤はＧＬＰ−Ｉアナログである。ある種の実施形態では、ＧＬＰ−Ｉアナログはエキセンディン−４又はリラグルチドである。
【０５５６】
ある種の実施形態では、血糖降下剤はスルホニル尿素である。ある種の実施形態では、スルホニル尿素は、アセトヘキサミド、クロルプロパミド、トルブタミド、トラザミド、グリメピリド、グリピジド、グリブリド、又はグリクラジドである。
【０５５７】
ある種の実施形態では、血糖降下剤はビグアナイドである。ある種の実施形態では、ビグアナイドはメトホルミンである。ある種の実施形態では、血糖値は、メトホルミン単独での処置後に観察される乳酸アシドーシスと比較したとき、乳酸アシドーシスの増加なしに低下する。
【０５５８】
ある種の実施形態では、血糖降下剤はメグリチニドである。ある種の実施形態では、メグリチニドはナテグリニド又はレパグリニドである。
【０５５９】
ある種の実施形態では、血糖降下剤はチアゾリジンジオンである。ある種の実施形態では、チアゾリジンジオンは、ピオグリタゾン、ロシグリタゾン、又はトログリタゾンである。ある種の実施形態では、血糖値は、ロシグリタゾン処置単独で観察されるより大きく体重が増加することなしに低下する。
【０５６０】
ある種の実施形態では、血糖降下剤はα−グルコシダーゼ阻害剤である。ある種の実施形態では、α−グルコシダーゼ阻害剤はアカルボース又はミグリトールである。
【０５６１】
ある種の実施形態では、血糖降下剤は、ＰＴＰ１Ｂを標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチドである。ある種の実施形態では、血糖降下剤は、ＳＧＬＴ２を標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチドである。
【０５６２】
ある種の実施形態では、追加の治療剤は抗肥満剤である。ある種の実施形態では、抗肥満剤は、オルリスタット、シブトラミン、又はリモナバンである。
【０５６３】
ある種の実施形態では、追加の治療剤は治療的な生活様式の変更である。ある種の実施形態では、治療的な生活様式の変更には、運動レジメン及び／又は食事が含まれる。
【０５６４】
ある種の実施形態では、追加の医薬品の用量は、その追加の医薬品を単独で投与する場合に投与されるであろう用量と同じである。
【０５６５】
ある種の実施形態では、追加の医薬品の用量は、その追加の医薬品を単独で投与する場合に投与されるであろう用量より低い。ある種の実施形態では、追加の医薬品の用量は、その追加の医薬品を単独で投与する場合に投与されるであろう用量より高い。
【０５６６】
追加の医薬品の更なる例としては、以下に限定されるものではないが、コルチコステロイド類、例えば、以下に限定されるものではないが、プレドニゾン；免疫グロブリン、例えば、以下に限定されるものではないが、静注用免疫グロブリン（ＩＶＩｇ）；鎮痛薬（例えば、アセトアミノフェン）；抗炎症剤、例えば、以下に限定されるものではないが、非ステロイド系抗炎症薬（例えば、イブプロフェン、ＣＯＸ−Ｉ阻害剤、及びＣＯＸ−２阻害剤）；サリチル酸塩；抗生物質；抗ウイルス薬；抗真菌剤；抗糖尿病剤（例えば、ビグアナイド類、グルコシダーゼ阻害剤、インスリン、スルホニル尿素、及びチアゾリデンジオン類（ｔｈｉａｚｏｌｉｄｅｎｅｄｉｏｎｅｓ））；アドレナリン作動性修飾因子；利尿薬；ホルモン類（例えば、アナボリックステロイド、アンドロゲン、エストロゲン、カルシトニン、プロゲスチン、ソマトスタン（ｓｏｍａｔｏｓｔａｎ）、及び甲状腺ホルモン）；免疫調節薬；筋弛緩薬；抗ヒスタミン薬；骨粗鬆症薬剤（例えば、ビホスホネート類（ｂｉｐｈｏｓｐｈｏｎａｔｅｓ）、カルシトニン、及びエストロゲン類）；プロスタグランジン類、抗新生物剤；精神治療剤；鎮静剤；有毒オーク又はドクウルシ製剤；抗体；及びワクチンが挙げられる。
【０５６７】
ある種の実施形態では、追加の治療剤は脂質降下治療剤である。ある種のそうした実施形態では、脂質降下治療剤は治療的な生活様式の変更である。ある種のそうした実施形態では、脂質降下治療剤はＬＤＬアフェレーシスである。
【０５６８】
ある種のキット
本明細書に提供される任意の化合物は、キット内に存在してもよい。このキットはまた、本明細書に提供される化合物の使用説明書も含み得る。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される化合物はバイアル中に存在してもよい。複数の、例えば１０本のバイアルが、例えば調剤パックに存在してもよい。いくつかの実施形態では、バイアルは、シリンジで利用可能であるように製造される。
【０５６９】
いくつかの実施形態では、キットは、被検体に対する本明細書に提供される化合物の投与に用いられ得る。その場合、本明細書に提供される化合物に加えて、本キットは以下の１つ又は複数を更に含み得る：シリンジ、アルコール消毒綿、綿ボール、及び／又はガーゼパッド。いくつかの実施形態では、本化合物は、バイアル内ではなく、むしろプレフィルドシリンジ内（例えば、２７ゲージの、針ガード付き２分の１インチ針を伴う単回投与シリンジなど）に存在し得る。複数の、例えば１０本のプレフィルドシリンジが、例えば調剤パックに存在してもよい。本キットはまた、化合物の投与に関する説明書も含み得る。
【０５７０】
ある種の実験モデル
ある種の実施形態では、本発明は、本発明の化合物を実験モデルで使用及び／又は試験する方法を提供する。当業者は、そのような実験モデルのプロトコルを選択及び変更して本発明の医薬品を評価することができる。
【０５７１】
一般に、化合物は初めに培養細胞で試験される。好適な細胞型としては、インビボで化合物の送達が所望される細胞型に関連するものが挙げられる。例えば、本明細書に記載される方法の研究に好適な細胞型としては、初代肝細胞、初代脂肪細胞、前脂肪細胞、分化脂肪細胞、ＨｅｐＧ２細胞、Ｈｕｈ７細胞、Ｈｅｐ３ｂ、ＳＮＵ４４９、３Ｔ３Ｌ１細胞、及びＣ２Ｃ１２細胞（マウス筋芽細胞）が挙げられる。
【０５７２】
ある種の実施形態では、化合物がｍｉＲＮＡの活性を妨げる程度が培養細胞で評価される。ある種の実施形態では、ｍｉＲＮＡ活性の阻害は、ｍｉＲＮＡのレベルを計測することによって評価し得る。或いは、予想される、又はバリデートされたｍｉＲＮＡ標的のレベルが計測されてもよい。ｍｉＲＮＡ活性が阻害されると、ｍｉＲＮＡ標的のｍＲＮＡ及び／又はタンパク質が増加し得る。更に、ある種の実施形態では、ある種の表現型の結果が計測されてもよい。例えば、好適な表現型の結果には、インスリンのシグナル伝達が含まれる。
【０５７３】
本明細書に記載される方法の試験に好適な実験動物モデルとしては、以下が挙げられる：ｏｂ／ｏｂマウス（糖尿病、肥満及びインスリン抵抗性のモデル）、ｄｂ／ｄｂマウス（糖尿病、肥満及びインスリン抵抗性のモデル）、高脂肪食負荷Ｃ５７Ｂｌ６／Ｊマウス、ＫＫａｙマウス、ＮＺＯ系マウスモデル、化学誘発糖尿病マウスモデル、ズッカー糖尿病ラット、及びａＰ２−ＳＲＥＢＰトランスジェニックマウス。
【０５７４】
ある種の定量化アッセイ
化合物がその１つ又は複数の標的ＲＮＡの活性に及ぼす効果は、当該技術分野において公知の種々の方法によって評価し得る。ある種の実施形態では、これらの方法を用いてインビトロ又はインビボで細胞又は組織中のマイクロＲＮＡレベルが定量化される。
【０５７５】
ある種の実施形態では、マイクロアレイ解析によって標的レベル及び／又は活性の変化が計測される。ある種の実施形態では、標的レベル及び／又は活性の変化は、ＴａｑＭａｎ（登録商標）マイクロＲＮＡアッセイ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）などの、いくつかの市販のＰＣＲアッセイのうちの１つによって計測される。
【０５７６】
抗ｍｉＲ化合物のインビトロ活性は、ルシフェラーゼ細胞培養アッセイを用いて評価し得る。このアッセイでは、マイクロＲＮＡルシフェラーゼセンサーコンストラクトが、目的のマイクロＲＮＡの１つ又は複数の結合部位、及びルシフェラーゼ遺伝子を含有するように操作される。マイクロＲＮＡがルシフェラーゼセンサーコンストラクトにおけるそのコグネイト部位に結合すると、ルシフェラーゼ発現が抑制される。細胞に適切な抗ｍｉＲが導入されると、抗ｍｉＲが標的マイクロＲＮＡに結合して、ルシフェラーゼ発現の抑制が軽減される。従って、このアッセイでは、目的の抗ｍｉＲの有効な阻害剤である抗ｍｉＲが、ルシフェラーゼ発現の増加を引き起こし得る。
【０５７７】
抗ｍｉＲ化合物の活性は、マイクロＲＮＡの標的のｍＲＮＡ及び／又はタンパク質レベルを計測することによって評価し得る。マイクロＲＮＡが１つ又は複数の標的ＲＮＡ内のそのコグネイト部位に結合して、標的ＲＮＡの抑制がもたらされ、従ってマイクロＲＮＡが阻害される結果、マイクロＲＮＡの標的のｍＲＮＡ及び／又はタンパク質のレベルが増加する（即ち、抑制解除）。１つ又は複数の標的ＲＮＡの抑制解除は、インビボ又はインビトロで計測し得る。
【実施例】
【０５７８】
以下の実施例は、本発明のいくつかの実施形態を詳細に説明するため提供される。しかしながら、それらの実施例が本発明の広義の範囲を限定するものと解釈されてはならない。
【０５７９】
当業者であれば、この発見の根底にある原理を用いて本発明の趣旨から逸脱することなく様々な化合物を設計することは容易であろう。
【０５８０】
提供される場合、統計的有意性は以下のとおり定義される：****＝＜０．０００１のｐ値；***＝０．０００１〜０．００１のｐ値；**＝０．００１〜０．０１のｐ値；*＝０．０１〜０．０５のｐ値。
【０５８１】
本実施例の全体を通じて、特に指示されない限り、コンジュゲート化合物の投薬量又は濃度は、化合物の一部ではなく、化合物全体の量を指す。例えば、体重１ｋｇ当たり５ｍｇ／ｋｇ用量は、５ｍｇのコンジュゲート型修飾オリゴヌクレオチドを意味する。
【０５８２】
実施例１：抗ｍｉＲ−１０３／１０７化合物スクリーニング
先行研究において、インスリン感受性及び耐糖能障害のマウスモデルでコレステロールコンジュゲート２’−ＯＭｅ修飾抗ｍｉＲ−１０３／１０７化合物が試験されている。この化合物による処置後に有効性が観察されたものの、有効性を実現するのに必要な用量は高く、また静脈内投与も必要であったが、これは糖尿病などの慢性疾患の処置に不都合となる可能性がある。更なる研究において２’−ＭＯＥ／２’−フルオロ修飾抗ｍｉＲ−１０３／１０７化合物が試験されているが、しかしながら２’−フルオロ修飾を含む化合物は動物への投与に免疫刺激を引き起こし得る。効果的で投与に都合が良く、且つ安全な治療剤が必要であることを踏まえ、候補治療剤となる抗ｍｉＲ−１０３／１０７化合物についてスクリーニングを実施した。インスリン抵抗性及び糖尿病モデルにおける有効性、関連配列のマイクロＲＮＡとの交差反応性、炎症の刺激、粘度、及び薬物動態プロファイルを含めた複数の特性を評価した。
【０５８３】
様々な長さ及び化学組成を有する数百個の化合物を設計した。これらの化合物を複数のアッセイで試験して、インビトロ阻害活性、インビトロ細胞生存度、代謝安定性（即ち肝臓ライセートにおけるエンドヌクレアーゼ活性に対する抵抗性）、インビボ免疫刺激活性（ＩＦＩＴ及び／又はＯＡＳＬのインビボ誘導によって計測するときの）、粘度、関連疾患モデルにおける有効性、安全性、及び薬物動態を評価する。これらの設計した数百個の化合物のうち、僅か数個の化合物のみが、評価した特性全ての選択基準を満たした。
【０５８４】
実施例２：ｍｉＲ−１５ファミリー内の抗ｍｉＲ−１０３化合物の交差反応性
可能性のある治療剤候補の選択基準の１つは、同様の核酸塩基配列を有するマイクロＲＮＡと交差反応性がないことであった。ｍｉＲ−１０３及びｍｉＲ−１０７の核酸塩基１〜６はｍｉＲ−１５ファミリーのメンバー（これには、ｍｉＲ−１５ａ、ｍｉＲ−１５ｂ、ｍｉＲ−１６、ｍｉＲ−１９５、ｍｉＲ−４９７、ｍｉＲ−５０３、ｍｉＲ−４２４、及びｍｉＲ−６４６が含まれる（以下の表を参照されたい））の核酸塩基２〜７と同一である。シード領域外の配列類似性はほとんどないが、シード領域を標的化することの重要性から、抗ｍｉＲ−１０３／１０７化合物がｍｉＲ−１５ファミリーメンバーも阻害する能力を評価して、抗ｍｉＲ−１０３／１０７化合物がｍｉＲ−１５ファミリーメンバーも阻害することはないことを確かめた。ｍｉＲ−１５ファミリーメンバーは腫瘍抑制因子としての役割を果たすことが提案されているため、ｍｉＲ−１５ファミリーメンバーの不用意な阻害は回避することが好ましい。
【０５８５】
【表１】
2017523790.tif 000041
【０５８６】
ルシフェラーゼアッセイにおけるｍｉＲ−１６を阻害する能力、及び／又はｍｉＲ−１６とハイブリダイズする能力（抗ｍｉＲがＡｇｏ複合体の標的ｍｉＲと会合する能力を計測する生化学アッセイによる）について、化合物を試験した。ｍｉＲ−１５ファミリーの代表的なメンバーとしてｍｉＲ−１６を選択した。
【０５８７】
化合物がｍｉＲ−１６とハイブリダイズする能力の試験から、ｍｉＲ−１０７及びｍｉＲ−１０３のヌクレオチド１〜６と完全な相補性を有する化合物がｍｉＲ−１６とハイブリダイズ可能であることが観察された。ｍｉＲ−１０３／１０７の１位と相補的な位置（ｍｉＲ−１６及びその関連ファミリーメンバーの２位に対応する）にミスマッチを導入するとｍｉＲ−１６との結合が低下し得るかどうかを決定するため、抗ｍｉＲ−１０３／１０７配列に対する変化を試験した。以下の表Ａ中、関連性のある核酸塩基位置には下線を引く。
【０５８８】
【表２】
2017523790.tif 000042
【０５８９】
この位置の核酸塩基をＵからＡに変えると、抗ｍｉＲはもはやｍｉＲ−１６にハイブリダイズしないことが観察された。このミスマッチが、ｍｉＲ−１０３／１０７の活性を阻害する化合物の能力に大きい影響を及ぼすことはなかった。従って、ｍｉＲ−１５ファミリーメンバーとの交差反応性が最小限乃至全くない、ｍｉＲ−１０３／１０７を阻害した抗ｍｉＲ核酸塩基配列が同定された。種々の長さ及びヌクレオシド糖組成（ｃＥｔ、２’−ＭＯＥ、２’−ＯＭｅ、及びＤＮＡ）のいくつもの抗ｍｉＲ−１０３／１０７化合物で交差反応性の消失が観察されたことから、核酸塩基を変化させる効果が抗ｍｉＲの化学修飾とは無関係であることが示唆される。２’−Ｆ／２’−ＭＯＥ修飾化合物で例外が観察され、これは化合物の３’末端にミスマッチを有するにも関わらず交差反応性を保持した。
【０５９０】
同様に、３’末端の核酸塩基をＵからＣに変えると、抗ｍｉＲはもはやｍｉＲ−１６にハイブリダイズせず、更にこのミスマッチがｍｉＲ−１０３／１０７の活性を阻害する化合物の能力に大きくは影響しないことが観察された。従って、ｍｉＲ−１０３／１０７の５’末端位置に対向する位置における核酸塩基の複数の変化について、効力を同時に保持しながら交差反応性が消失することが観察された。
【０５９１】
実施例３：インスリン抵抗性モデルにおける有効性
抗ｍｉＲ−１０３／１０７化合物がグルコース値及びインスリン値に及ぼす効果を決定するため、耐糖能障害及び２型糖尿病のモデルである高脂肪食負荷肥満マウス（食餌誘発性肥満マウス又はＤＩＯマウスとも称される）に化合物を投与する。研究は、以下に記載するとおり、このモデルに標準的なプロトコルに従い行う。
【０５９２】
ＤＩＯモデルの一般的なプロトコル
高脂肪（キロカロリーの６０％が脂肪による−Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｄｉｅｔ  ＲＤ１２４９２）のマウスを、同程度のベースライン体重、血糖及びインスリンに基づき処置群に無作為化する。次に動物に週１回、４ｍＬ／ｋｇの容積で肩甲下領域近傍に皮下注射によって投薬する。体重を計測し、毎週モニタする。
【０５９３】
４〜６時間絶食後に空腹時血糖及び空腹時血漿インスリンを毎週計測する。例えば、初回、２回目の用量の２日後又は３日後（第１週）の血液採取について、動物は４時間絶食させ、手持形グルコメータ（ＧＥ１００）を使用して尾部を僅かに傷付けることによって血糖を計測する。グルコース及びインスリンのための最終的な血液採取は、最終回用量の２〜４日後である。研究によっては、第３週の間に経口グルコース負荷試験（ＯＧＴＴ）を実施する。経口グルコース負荷試験（ＯＧＴＴ）は、グルコース投与後にグルコースがどの程度速く血液から除去されるかを決定する。４時間絶食後、空腹時血糖及びインスリンの計測のため血液を採取する。次に、各動物に２ｇ／ｋｇのデキストロースを投与する。デキストロースの経口投与後３０分でグルコース及びインスリンの計測のため再び血液を採取する。４週間の投与後（合計５用量）、最終回用量の７２〜９６時間後に動物を犠牲にする。或いは、動物には合計６又は７用量の投与を行ってもよい。
【０５９４】
ＰＫ分析のため、肝臓、腎臓及び脂肪（精巣上体及び皮下沈着物）を採取する。
【０５９５】
標的遺伝子発現のため、肝臓及び脂肪（精巣上体、皮下及び褐色脂肪）を採取する。
【０５９６】
トリグリセリド値のため、肝臓も採取する。血清分析のため、血液を採取する。
【０５９７】
インスリン抵抗性スコア（ＨＯＭＡ−ＩＲ）は、以下の式により計算することができる：空腹時血漿グルコース（ｍｇ／ｄｌ）×空腹時血清インスリン（ｎｇ／ｍｌ）／１６．３４。低ＨＯＭＡ−ＩＲ値は高インスリン感受性の指標となる一方、高ＨＯＭＡ−ＩＲ値は低インスリン感受性（インスリン抵抗性）の指標となる。
【０５９８】
インスリン感受性は、高インスリン正常血糖クランプアッセイを用いて評価し得る。このアッセイでは、カテーテルを挿入されたマウスがグルコース及びインスリンの注入を受ける。インスリンが一定の高レベルで注入され（高インスリン血）、一方でグルコースが血糖を一定の正常値（正常血糖値）に維持するように可変的な速度で注入される。グルコース注入速度がインスリンに対する感受性の指標となり、例えばグルコース注入速度が増すと、インスリンに対する感受性の増加の指標となる。高脂肪食を２０週間与えられるＤＩＯマウスについては、典型的な注入速度は５〜１０ｍｇ／ｋｇ／ｍｉｎである。正常食を２４週間与えられる正常マウスについては、典型的な注入速度は３０〜４０ｍｇ／ｋｇ／ｍｉｎである。
【０５９９】
ＤＩＯモデルにおける抗ｍｉＲ−１０３／１０７化合物スクリーニング
２’−Ｆ／２’−ＭＯＥ修飾化合物（化合物９７２４３、以下）は、以前、インスリン抵抗性及び糖尿病マウスモデルで有効性を実証したが、しかしながらこの化合物は、インビボアッセイでＩＦＩＴ遺伝子の発現を誘導し、且つｍｉＲ−１６配列とハイブリダイズするため、治療剤候補としては不適な化合物である。しかしながら、その有効性のため、インスリン抵抗性マウスモデルにおけるこの化合物を、少なくとも有効であったものとしての、更には免疫刺激を引き起こさなかったとともに、ｍｉＲ−１５ファミリーとの交差反応性を示さない化合物のインビボスクリーニングのベンチマークとして使用した。
【０６００】
化合物９７２４３は、構造：ＴEＧEＡFＵFＡFＧFＣFＣFＣFＵFＧFＵFＡEmＣEＡEＡFＵFＧFＣFＵFＧFmＣEＴE（配列番号２３）を有する（式中、添字「Ｆ」は２’−フルオロヌクレオシドを示し、添字「Ｅ」は２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドを示し、全ての連結はホスホロチオエートであり、及び添字「ｍ」は５−メチルシトシンを示す）。
【０６０１】
化合物１２７４３（以下の表Ｂにおける構造）を設計し、合成し、インビトロルシフェラーゼ及びＩＦＩＴアッセイにおいて試験した。これらのアッセイでこの化合物の結果が良好であったため、その有効性を更に試験した。この試験では、ＤＩＯマウス（高脂肪食を約１５週間与えられる）を、体重、空腹時インスリン及び空腹時血糖に基づき処置群に分けた。処置は６〜７日に１回皮下投与し、合計５回の処置とした。研究８日目、及びその後は週１回、４時間絶食後に血液を採取してグルコース又はインスリンを計測した。ＤＩＯ（例えば、図３、化合物１２７４３の２週間データ；図４、化合物１２７４３の３週間データ）及びｄｂ／ｄｂモデルにおいてＨＯＭＡ−ＩＲ計算値によって決定するとき、及びＤＩＯモデルにおいて高インスリン正常血糖クランプによって決定するとき、化合物１２７４３はインスリン感受性を改善した。化合物１２７４３による処置後、肝臓トリグリセリドも低下した。
【０６０２】
化合物１２７４３による阻害後のｍｉＲ−１０３／１０７の直接の標的遺伝子の発現レベルの分析から、脂肪組織及び肝組織の両方で、化合物の媒介による活性が明らかになった。
【０６０３】
有効性が更に向上した化合物を同定し、肝臓への抗ｍｉＲの送達を増強するため、ＧａｌＮＡｃコンジュゲート抗ｍｉＲ化合物を合成して試験した。コンジュゲート型抗ｍｉＲ−１０３／１０７化合物は、図２の構造を修飾オリゴヌクレオチドの３’末端にコンジュゲートすることによって形成した。化合物構造は以下の表に示し、添字の添字「Ｅ」は２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドを示し、添字「Ｓ」はＳ−ｃＥｔヌクレオシドを示し、全ての連結はホスホロチオエートであり、且つ添字「ｍ」は５−メチルシトシンを示す。
【０６０４】
【表３】
2017523790.tif 000043
【０６０５】
抗ｍｉＲがコンジュゲート構造から遊離する能力について、コンジュゲート化合物を試験した。化合物をＤＩＯマウスに投与し、肝組織の代謝産物を計測した。化合物１９８４３は効率的に代謝され、非コンジュゲート抗ｍｉＲになった。対照的に、化合物１９７４３は非コンジュゲート抗ｍｉＲへの効率的な代謝がなかったことから、２つのＤＮＡ  Ａヌクレオシドを介して連結したコンジュゲートが、１つのＤＮＡ  Ａヌクレオシドを介して連結されたコンジュゲートよりも効率的に代謝されることが示唆される。異なる抗ｍｉＲ−１０３／１０７化合物を用いた更なる研究を実施し、抗ｍｉＲ−１０３／１０７化合物について、２つのＤＮＡ  Ａヌクレオシドの存在が単一のＤＮＡ  Ａヌクレオシドと比べてより効率的な切断につながることを確認した。
【０６０６】
ＤＩＯモデルにおける有効性について化合物を試験した。上述のとおり、非コンジュゲート抗ｍｉＲである化合物１２７４３は、ＤＩＯモデルにおいてインスリン感受性の改善をもたらした。化合物１９８４３はＧａｌＮＡｃコンジュゲート型の化合物１２７４３であり（上記の表を参照されたい）、化合物１２７４３についての上記の記載と同じ研究で試験した。
【０６０７】
先行研究（Ｔｒａｊｋｏｖｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ２０１１）では、ｍｉＲ−１０３／１０７阻害後のインスリン感受性の改善が肝組織における活性よりむしろ、主として脂肪細胞組織における活性によって左右されることが示唆された。更に、ｍｉＲ−１０３及びｍｉＲ−１０７は脂肪組織及び脳組織での発現が最も高く、肝組織では低レベルであることが認められる。ＧａｌＮＡｃコンジュゲーションによって肝組織（例えば肝細胞）への化合物の送達が偏るため、意外にも、インスリン感受性の改善により決定するとき（図３、化合物１９８４３の２週間データ；図４、化合物１９８４３の３週間データ）、ＧａｌＮＡｃとのコンジュゲーションによって有効性が３〜５倍改善されることが観察された。肝臓トリグリセリドも統計的に有意に低下した。
【０６０８】
ＧａｌＮＡｃコンジュゲート化合物の代謝産物を計測し、３’Ａを保持している代謝産物が観察された。３’Ａの存在により、ｍｉＲ−１５ファミリーのメンバーに対してより高い親和性を有する化合物となり得るため、３’Ａを含有する代謝産物の交差反応性について試験したが、しかしながら交差反応性はなかった。
【０６０９】
化合物９７２４３のＧａｌＮＡｃコンジュゲーションが化合物のプロファイルを改善し得るかどうかを決定するため、２’−Ｆ／２−ＭＯＥ修飾抗ｍｉＲ化合物を以下のとおり３’末端でＧａｌＮＡｃにコンジュゲートした（表Ｃ）。
【０６１０】
【表４】
2017523790.tif 000044
【０６１１】
この化合物はまた、３’末端にＵの代わりにＡを有し、このミスマッチの導入が交差反応性を低下又は消失させるかどうかを決定した。この化合物は、空腹時血糖、空腹時血漿インスリン、及びＨＯＭＡ  ＩＲによって計測するとき、ＤＩＯモデルにおいて実に有効性を呈したが、他の化合物と比べて有効性の発生は遅延した。加えて、この化合物は、３’末端にＡ核酸塩基が存在するにも関わらず、インビトロアッセイでＩＦＩＴの発現を誘導し、ｍｉＲ−１６との交差反応性を呈した。従って、この化合物は、非コンジュゲート化合物９７２４３と同様に、治療剤の好適な候補とは見なさなかった。
【０６１２】
ＤＩＯモデルにおいて有効であった化合物１２７４３及び１９８４３は、実にｍｉＲ−１６との交差反応性を呈した。これを踏まえ、抗ｍｉＲの３’末端にＵの代わりにＡを有する更なる化合物（表Ｄに示すとおり）を設計した。ＧａｌＮＡｃとのコンジュゲーション後におけるこの予想外の有効性の改善により、これらの更なる化合物も３’末端でＧａｌＮＡｃにコンジュゲートした。化合物４５９４３の抗ｍｉＲ部分は、同様にＧａｌＮＡｃにコンジュゲートした化合物１２７４３及び１９８４３の９ヌクレオシド部分である。
【０６１３】
【表５】
2017523790.tif 000045
【０６１４】
化合物４５９４３及び４７０４３をＤＩＯモデルで試験した。
【０６１５】
図３及び図４に示されるとおり、化合物４５９４３は２週間又は３週間の時点で空腹時血糖、空腹時インスリンが低下せず、又はＨＯＭＡ  ＩＲが改善しなかった。肝臓トリグリセリドは低下しなかった。従って、ＧａｌＮＡｃにコンジュゲートしたこの化学修飾９ヌクレオシド抗ｍｉＲはインスリン抵抗性マウスモデルにおいて有効でなかった。従って、トランケート型の活性化合物１２７４３は活性を保持しなかった。
【０６１６】
化合物４７０４３は以下のとおり試験した。Ｃ５７ＢＬ／６マウスに高脂肪食（６０％のｋｃａｌが脂肪による）を約１５週間与えた。各８匹のマウスの群を以下のとおり処置した：（１）ＰＢＳ；（２）３ｍｇ／ｋｇの化合物４７０４３；（３）１０ｍｇ／ｋｇの化合物４７０４３。
【０６１７】
治療前日、４時間絶食後に血液を採取し、動物を処置群に分けた。処置は週１回、皮下注射によって７回の処置にわたり（研究０、５、１３、１９、２６、３３、及び３６日目、初回処置日が０日目である）投与した。研究８、１５、２１、２８、及び３２日目、空腹時血糖及び空腹時インスリンの計測のため、毎週４〜６時間絶食後に血液を採取した。研究２１日目（又は第３週の終わり）に、４時間絶食後に経口グルコース負荷試験（ＯＧＴＴ）を実施し、経口グルコース投与の直前及び３０分後に血液を採取した。研究３９日目に動物を犠牲にした。図５、図６、及び図７に示されるとおり、化合物４７０４３は、空腹時血糖、空腹時インスリン、及びＨＯＭＡ  ＩＲの低下（これらは併せてインスリン感受性の改善を示す）によって決定するとき、ＤＩＯモデルにおいて３ｍｇ／ｋｇもの低い用量で有意な有効性を呈した。加えて、図６及び図７に示されるとおり、化合物４７０４３による処置後に経口耐糖能が改善した。
【０６１８】
４７０４３で処置したＤＩＯマウスにおいて、肝臓トリグリセリド含量も計測した。肝臓からアセトンでトリグリセリドを抽出し、比色アッセイ（Ｉｎｆｉｎｉｔｙ  Ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ  Ｌｉｑｕｉｄ  Ｒｅａｇｅｎｔ）によって計測した。図８に示すとおり、肝臓トリグリセリド含量はＰＢＳによる処置と比べて化合物４７０４３による処置後に低下した。
【０６１９】
化合物４７０４３による処置によってインスリン感受性が有意に改善したため、ｍｉＲ−１６との交差反応性を試験した。３’末端にＵの代わりにＡを有する抗ｍｉＲが交差反応性を示さないという観察と一致して、化合物４７０４３とｍｉＲ−１６との間に交差反応性は観察されなかった。
【０６２０】
化合物４７０４３を安全性試験で更に評価した。野生型マウスに単回の３００ｍｇ／ｋｇ用量の化合物を注射した。注射の３日後、マウスを犠牲にし、組織及び血液を採取した。肝組織におけるＩＦＩＴ及びＯＡＳＬ  ｍＲＮＡ値を計測した。体重と比較するため脾臓重量を計測した。血中のＡＬＴレベルを計測した。化合物４７０４３はＩＦＩＴ、ＯＡＳＬ、脾臓重量又はＡＬＴの増加を呈しなかった。異なる抗ｍｉＲ構造（例えば糖修飾の数及び配置）を有する、ｍｉＲ−１０３／１０７を標的とする他の化合物は、実にこれらの安全性パラメータの増加を呈した。
【０６２１】
化合物４７０４３の粘度を計測した。２３０ｍｇ／ｇの濃度未満では、粘度は２０ｃＰ未満であり、皮下注射によって投与し得る約２００ｍｇ／ｍＬの投与溶液濃度が可能であった。逆に、異なる抗ｍｉＲ構造（例えば糖修飾の数及び配置）を有する化合物は粘性が高く、そのため化合物は皮下注射による投与が困難なものとなった。これらのデータは、抗ｍｉＲの構造（糖修飾の種類、数及び配置）がその粘度に影響を及ぼすことを更に実証しており、これは皮下注射によって投与し得る化合物の選択において重要な考慮点である。
【０６２２】
４７０４３の意図される活性代謝産物は、完全ｃＥｔ  １０ｍｅｒ（ＣSＡSＡSＵSＧSＣSＵSＧSＣSＡS；配列番号６）である。野生型マウスにおいて化合物４７０４３の薬物動態プロファイルも評価し、（１）抗ｍｉＲがどの程度効率的にコンジュゲートから切断されるか；（２）隣接するｃＥｔ  １０ｍｅｒがどの程度効率的に遊離するか；（３）Ｄ
ＮＡ  Ａヌクレオシドが完全ｃＥｔ  １０ｍｅｒに結合したまま留まるかどうか；及び（４）意図される活性代謝産物の安定性を決定した。単回用量の化合物４７０４３を皮下投与した７日後、親化合物及び代謝産物の計測のため、肝及び腎組織並びに血漿を採取した。肝臓では、化合物の９０％が代謝されてｃＥｔ  １０ｍｅｒ（約２２％）又はＤＮＡ  Ａ（１０ｍｅｒの５’末端又は３’末端の何れかにある）を有するｃＥｔ  １０ｍｅｒ（約６７％）になったことが観察された。腎臓では、化合物の約５０％が代謝されてｃＥｔ  １０ｍｅｒ又はＤＮＡ  Ａ（１０ｍｅｒの５’末端又は３’末端の何れかにある）を有するｃＥｔ  １０ｍｅｒになった。オリゴヌクレオチドは、概して腎組織における蓄積レベルが最も高く、次が肝組織である。化合物４７０４３については、腎臓対肝臓比が０．５であった。対照的に、異なる抗ｍｉＲ構造を有する化合物は異なる代謝産物を呈し、ある場合にはより高い腎臓対肝臓比を呈した。例えば、ｃＥｔ、２’−ＭＯＥ及びＤＮＡ糖部分を有する１９ヌクレオシド長の抗ｍｉＲは、３つのＤＮＡヌクレオシドの存在に起因して化合物の中央で代謝され易かった。この位置での切断により、意図される活性代謝産物（完全１９ｍｅｒ）が代謝され、そのため有効性が低下した。この化合物はまた、１．５のより高い腎臓対肝臓比も呈した。
【０６２３】
有効性及び安全性データに基づき、化合物４７０４３が、インスリン感受性を改善し、且つ肝臓トリグリセリドを低下させるための候補薬剤として同定された。
【０６２４】
実施例４：ＤＩＯ有効性研究
化合物４７０４３を更に評価するため、化合物の更なる投薬量をＤＩＯマウスモデルで試験した。
【０６２５】
Ｃ５７ＢＬ／６マウスに高脂肪食（６０％ｋｃａｌが脂肪による）を約１５週間与えた。各８匹のマウスの群を以下のとおり処置した：（１）ＰＢＳ；（２）１．７ｍｇ／ｋｇの化合物４７０４３；（３）５ｍｇ／ｋｇの化合物４７０４３；（４）１５ｍｇ／ｋｇの化合物４７０４３；及び（５）４５ｍｇ／ｋｇの化合物４７０４３。４匹の正常（脂肪のない）マウスの群を更なる対照群として使用した。
【０６２６】
投与開始前、４時間絶食後に血液を採取し、空腹時血糖、空腹時インスリン及び体重に基づき動物を処置群に分けた。治療は週１回、皮下注射によって合計７用量を投与した。初回用量の１０日後（２用量後）、及びその後は研究の残りの期間にわたって毎週、空腹時血糖及び空腹時インスリンの計測のため４〜６時間絶食後に血液を採取した。研究の７つ目の最終回用量の３日後に動物を犠牲にした。１、２、３、４、及び５週間の処置後に、空腹時血糖及び空腹時インスリンを使用してＨＯＭＡ−ＩＲを計算した。５週間の処置後の時点で経口グルコース負荷試験（ＯＧＴＴ）を実施した。このＯＧＴＴでは、血液は複数の時間点にわたって採取するのでなく、単一の時間点、経口グルコース投与の３０分後に採取して、大容積の血液が必要なインスリンの計測を可能にした。研究の終了時、肝臓トリグリセリドの計測のため肝組織を採取した。
【０６２７】
図９Ａに示されるとおり、毎週のＨＯＭＡ−ＩＲによって評価するとき、化合物４７０４３は用量反応的にインスリン感受性を改善した。
【０６２８】
図９Ｂに示されるとおり、化合物４７０４３で処置すると、グルコースチャレンジに応答した特に高用量の化合物におけるインスリンの分泌量の低下からも明らかなとおり、インスリン感受性が増加した。血糖値が低下する傾向が観察されたことから、経口投与後に体がグルコースを除去する能力が改善することが指摘される（図９Ｃ）。
【０６２９】
肝臓トリグリセリド含量も計測した。肝臓からアセトンでトリグリセリドを抽出し、比色アッセイ（Ｉｎｆｉｎｉｔｙ  Ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ  Ｌｉｑｕｉｄ  Ｒｅａｇｅｎｔ）によって計測した。図９Ｄに示されるとおり、ＰＢＳによる処置と比べて化合物４７０４３による５週間の処置後に肝臓トリグリセリド含量が低下する傾向が観察された。
【０６３０】
肝臓トリグリセリドはまた、独立したＤＩＯ研究においても計測し、この研究においても同様に、１０週間の処置後にトリグリセリドが低下する傾向が観察され、１５ｍｇ／ｋｇ及び４５ｍｇ／ｋｇ用量で統計的に有意な低下があった（図９Ｅ）。
【０６３１】
化合物４７０４３の単回用量の効果を試験するため、ＤＩＯモデルで更なる研究を実施し、マウスを以下のとおり処置した：（１）ＰＢＳ；（２）化合物４７０４３、１０ｍｇ／ｋｇ；（３）化合物４７０４３、３０ｍｇ／ｋｇ；（４）化合物４７０４３、６０ｍｇ／ｋｇ；（５）化合物４７０４３、１００ｍｇ／ｋｇ。体重、空腹時血糖、空腹時インスリン及びＨＯＭＡ−ＩＲに基づきマウスを８匹の群に分けた。単回用量のＰＢＳ又は化合物を投与し、１週間後、４時間絶食後に血液を採取した。空腹時血漿インスリン及び空腹時血漿グルコースを使用してＨＯＭＡ−ＩＲを計算した。
【０６３２】
図１０に示されるとおり、化合物４７０４３の単回用量後、ＨＯＭＡ−ＩＲの統計的に有意な低下が観察された。
【０６３３】
実施例５：ｄｂ／ｄｂ有効性研究
ｄｂ／ｄｂモデルにおけるｍｉＲ−１０３／１０７の阻害、肥満、糖尿病、及び異脂肪血症の遺伝モデル。
【０６３４】
化合物４７０４３を以下のとおり試験した。体重、空腹時インスリン及び空腹時血糖に基づき約７週齢のｄｂ／ｄｂマウス（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を処置群に分けた。マウスには、研究全体を通じて正常げっ歯類固形飼料を与えた。各８匹のマウスの群を以下のとおり処置した：（１）ＰＢＳ；（２）週２回の１０ｍｇ／ｋｇの化合物４７０４３（用量間は３日又は４日）；（３）週２回の３０ｍｇ／ｋｇの化合物４７０４３（用量間は３日又は４日）；（４）週１回の３０ｍｇ／ｋｇの化合物４７０４３。処置は９週間継続した。グルコース計測のため、週２回処置群が２用量を受けた後及び週１回処置群が１用量を受けた後１週間で開始して、週１回の頻度で４時間絶食後に血液を採取した。ｄｂ／ｄｂモデルではβ細胞の不全が起こる可能性があることに起因して、これらの動物においてインスリン値はインスリン感受性の改善についての信頼性のある指標ではないため、この研究ではインスリン値は計測しなかった。研究の終了時、肝臓トリグリセリドの計測のため肝組織を採取した。
【０６３５】
図１１Ａに示されるとおり、予想どおりｄｂ／ｄｂモデルにおいて時間が経つと疾患の重症度が増すことに起因して、ＰＢＳ処置マウスは研究の全経過にわたって空腹時血糖値の増加を呈した。対照的に、化合物４７０４３で処置したｄｂ／ｄｂマウスにおける空腹時血糖値は増加しなかったのみならず、研究中に空腹時血糖値が低下した。従って、この研究では、化合物４７０４３による処置によって、ｄｂ／ｄｂマウスが加齢に伴い発症する重篤な高血糖症が好転したことが実証された。このモデルの疾患の進行は急速であるため、２つの処置群は週２回の投与を含んだ。しかしながら、週１回投与及び週２回投与の両方について３０ｍｇ／ｋｇ用量は同様の有効性を示した。
【０６３６】
肝臓トリグリセリド含量も計測した。肝臓からアセトンでトリグリセリドを抽出し、比色アッセイ（Ｉｎｆｉｎｉｔｙ  Ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ  Ｌｉｑｕｉｄ  Ｒｅａｇｅｎｔ）によって計測した。図１１Ｂに示されるとおり、ＰＢＳによる処置と比べて化合物４７０４３による処置後に肝臓トリグリセリド含量が低下する傾向が観察された。
【０６３７】
この研究により、ＤＩＯモデルに加え、異なる糖尿病モデルで化合物４７０４３の有効性が確認された。
【０６３８】
実施例６：ＤＩＯモデルにおける高インスリン正常血糖クランプアッセイ
インスリン感受性は、高インスリン正常血糖クランプアッセイを用いて評価し得る。このアッセイでは、カテーテルを挿入されたマウスがグルコース及びインスリンの注入を受ける。インスリンが一定の高レベルで注入され（高インスリン血）、一方でグルコースが血糖を一定の正常値（正常血糖値）に維持するように可変的な速度で注入される。グルコース注入速度がインスリンに対する感受性の指標となり、例えばグルコース注入速度が増すと、インスリンに対する感受性の増加の指標となる。高脂肪食を２０週間与えられるＤＩＯマウスについては、典型的な注入速度は５〜１０ｍｇ／ｋｇ／ｍｉｎである。正常食を２４週間与えられる正常マウスについては、典型的な注入速度は３０〜４０ｍｇ／ｋｇ／ｍｉｎである。
【０６３９】
ＤＩＯマウスにおいて化合物４７０４３をクランプアッセイで試験した。６時間絶食後、約２１週齢のマウスをベースライン空腹時血糖、空腹時インスリン及び体組成に関して評価した。以下のとおりの処置のため、マウスを各１３〜１４匹のマウスの群に配した：（１）ＰＢＳ；（２）化合物４７０４３、３ｍｇ／ｋｇ；（２）化合物４７０４３、１０ｍｇ／ｋｇ；（３）化合物４７０４３、３０ｍｇ／ｋｇ；化合物４７０４３、６０ｍｇ／ｋｇ。処置は週１回、合計５用量にわたって皮下投与した。５つ目の最終回用量の２４時間後、一晩絶食後にクランプ手順を実施した。インスリンを４ｍＵ／ｋｇ／ｍｉｎの一定速度で注入した。計測するパラメータには、１２０分の注入期間全体にわたる２０分間隔でのグルコース注入速度（図１２Ａ）；クランプ下グルコース注入速度、これは、グルコース注入速度が安定したとき、７０分から１２０分の時点における、注入期間のうちの「クランプ下」にある部分の間の平均グルコース注入速度である（図１２Ｂ）；全身グルコース代謝回転（図１２Ｃ）；クランプ下肝グルコース産生（図１２Ｄ）；及び褐色脂肪グルコース取り込み（図１２Ｅ）が含まれた。
【０６４０】
図１２に示されるとおり、化合物４７０４３で処置するとグルコース注入速度が用量反応的に改善されたことから、インスリンに対する感受性の増加が示される（即ち、体がより多量のグルコースを取り扱うより高い能力を有する）。加えて、全身グルコース代謝回転が改善した。肝グルコース産生が低下した一方で褐色脂肪グルコース取り込みが増加したことから、肝臓及び末梢組織（例えば脂肪）がインスリン感受性の改善に寄与することが示唆される。
【０６４１】
これのこの結果は、化合物４７０４３がインスリン感受性を改善していることの更なるエビデンスを提供する。
【０６４２】
前述の説明から、当業者には、本明細書に記載されるものに加えて、本発明の様々な変形形態が明らかであろう。そのような変形形態も添付の特許請求の範囲内にあることが意図される。本出願に引用される各文献（以下に限定されるものではないが、学術誌論文、米国及び米国外の特許、特許出願公開、国際特許出願公開、ＧＥＮＢＡＮＫ（登録商標）受託番号などを含む）は、全体として参照により本明細書に具体的に援用される。
【図１】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６−１】
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【図６−２】
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【図７】
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【図８】
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【図９−１】
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【図９−２】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２−１】
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【図１２−２】
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【図１２−３】
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【図１３】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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