(57)【要約】  本発明は、光を照射する光源照射装置および光を照射して脂肪を分解する方法が記載された説明書を有する脂肪分解用キットおよび皮膚に光を照射する痩身方法に関するものを提供する。明細書によれば、身体に無害な光領域の波長の光を照射して脂肪細胞内の中性脂肪を分解させることができ、安全且つ効果的に脂肪の分解が可能となり、また既存の脂肪分解方法よりも経済的であり且つ簡便であるという利点があるため、痩身方法に利用することができる。
2017515542.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
光を照射する光源照射装置；および光を照射して脂肪を分解する方法が含まれた説明書を含む脂肪分解用キットであって、前記光は、６００ｎｍ超過乃至１５００ｎｍ以下の波長を有するキット。
【請求項２】
光は、皮膚透過度を増幅させるパターンを有する請求項１に記載のキット。
【請求項３】
説明書は、光の照射強度、光の照射時間、照射装置と皮膚との距離、照射方法、および照射部位を含む請求項１に記載のキット。
【請求項４】
光の照射強度は、１Ｊ／ｃｍ２乃至６００Ｊ／ｃｍ２である請求項３に記載のキット。
【請求項５】
光の照射時間は、０．５分乃至６時間である請求項３に記載のキット。
【請求項６】
照射装置と皮膚との距離は０ｃｍ乃至２００ｃｍである請求項３に記載のキット。
【請求項７】
照射方法は、直接照射で行なうか、または皮膚に接触可能な補助手段を介して行なう請求項３に記載のキット。
【請求項８】
補助手段は、フィルタ、シート、フィルム、化粧品、ゲル、およびクリームよりなる群から選択された一つ以上である請求項７に記載のキット。
【請求項９】
照射方法は、針管、カニューレ、およびマイクロニードルよりなる群から選択された一つ以上を利用して行なう請求項３に記載のキット。
【請求項１０】
照射部位は、眼球、口腔、性器、および肛門を除いた脂肪が蓄積され得るすべての皮膚組織である請求項３に記載のキット。
【請求項１１】
皮膚に光を照射することを含む痩身方法であって、前記光は、６００ｎｍ超過乃至１５００ｎｍ以下の波長を有する痩身方法。
【請求項１２】
光は、皮膚透過度を増幅させるパターンを有する請求項１１に記載の痩身方法。
【請求項１３】
光は、１Ｊ／ｃｍ２乃至６００Ｊ／ｃｍ２の強度である請求項１１に記載の痩身方法。
【請求項１４】
照射は、０.５分乃至６時間行なう請求項１１に記載の痩身方法。
【請求項１５】
照射は、皮膚との距離が０ｃｍ乃至２００ｃｍである位置で行なう請求項１１に記載の痩身方法。
【請求項１６】
照射は、直接照射で行なうか、または皮膚に接触可能な補助手段を介して行なう請求項１１に記載の痩身方法。
【請求項１７】
補助手段は、フィルタ、シート、フィルム、化粧品、ゲル、およびクリームよりなる群から選択された一つ以上である請求項１６に記載の痩身方法。
【請求項１８】
照射は、針管、カニューレ、およびマイクロニードルよりなる群から選択された一つ以上を利用して行なう請求項１１に記載の痩身方法。
【請求項１９】
照射は、皮膚皮下脂肪層への光の照射である請求項１１〜請求項１８のいずれか一項に記載の痩身方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本明細書は、脂肪を分解するキットおよび痩身方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
肥満は、消費エネルギーに比べて過剰に摂取したエネルギーが脂肪細胞に中性脂肪として蓄積することで起こるものであって、動脈硬化などの様々な病気を引き起こす原因になるだけでなく、美容上も良くないことから、その予防・改善が強く要求されている。
【０００３】
近年、先進国をはじめとした全世界では肥満者の比率が毎年増加しつつあり、その理由としては、過食、運動不足、ストレスなどが挙げられ、食事制限、運動療法は強い意志や長い間持続する必要があるため、途中であきらめる人が多い。
【０００４】
このような事実から、肥満の予防、改善に役立つ脂肪分解方法乃至脂肪分解促進剤の開発がなされてきている。例えば、天然抽出物から得た成分を用いて脂肪分解を促進する方法が用いられるが、必ずしも十分な効果を奏するとは言えないものであり、また、それらの成分の中では副作用のおそれのある物質もあった。一方、脂肪細胞単位自体で脂肪分解を促進する研究は殆どないのが実情であった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】米国特許出願公開第２０１３−２６８０３５号明細書
【特許文献２】韓国公開特許第１０−２００８−０００６５７４号公報
【特許文献３】国際公開第２０１３／１６９９５５号
【特許文献４】韓国公開特許第１０−２０１３−００９５４１９号公報
【特許文献５】韓国公開特許第１０−２００８−０００６５７４号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
前記したような問題点を解決するために、本発明は、脂肪細胞自体の脂肪分解を可能にすべく、皮膚またはその皮下脂肪層の脂肪細胞に光を照射して脂肪分解をさせる脂肪分解用キットを提供することをその目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
前記したような目的を解決するために、本発明は、光を照射する光源照射装置；および光を照射して脂肪を分解する方法が含まれた説明書を含む脂肪分解用キットを提供する。
【０００８】
本発明の一実施態様における光は、６００ｎｍ超過乃至１５００ｎｍ以下の波長を有するものであってよい。
【０００９】
本発明の一実施態様における光は、可視光線または赤外線であってよい。
【００１０】
本発明の一実施態様における光は、皮膚透過度を増幅させるパターンを有するものであってよい。
【００１１】
本発明の一実施態様における説明書は、光の照射強度、光の照射時間、照射装置と皮膚との距離、照射方法、および照射部位を含んでいてよい。
【００１２】
本発明の一実施態様における光の照射強度は、１Ｊ／ｃｍ２乃至６００Ｊ／ｃｍ２であってよい。
【００１３】
本発明の一実施態様における光の照射時間は、０.５分乃至６時間であってよい。本発明の一実施態様において、照射装置と皮膚との距離は、０ｃｍ乃至２００ｃｍであってよい。
【００１４】
本発明の一実施態様における照射方法は、直接照射で行なうものであってよい。
【００１５】
本発明の一実施態様における照射方法は、皮膚に接触可能な補助手段を介して行なうものであってよい。
【００１６】
本発明の一実施態様における補助手段は、フィルタ、シート、フィルム、化粧品、ゲル、およびクリームなどよりなる群から選択された一つ以上であってよい。
【００１７】
本発明の一実施態様における照射方法は、針管、カニューレ、およびマイクロニードルよりなる群から選択された一つ以上を利用して行なうものであってよい。
【００１８】
本発明の一実施態様における照射部位は、眼球、口腔、性器、および肛門を除いた脂肪が蓄積され得るすべての皮膚組織であってよい。
【００１９】
また、本明細書は、皮膚に光を照射することを含む痩身方法を提供する。
【００２０】
本発明の一実施態様における光は、１Ｊ／ｃｍ２乃至６００Ｊ／ｃｍ２の強度のものであってよい。
【００２１】
本発明の一実施態様における照射は、０.５分乃至６時間行なっていてよい。
【００２２】
本発明の一実施態様における照射は、皮膚との距離が０ｃｍ乃至２００ｃｍである位置で行なっていてよい。
【００２３】
本発明の一実施態様における照射は、直接照射で行なっていてよい。
【００２４】
本発明の一実施態様における照射は、皮膚に接触可能な補助手段を介して行なっていてよい。
【００２５】
本発明の一実施態様における照射は、皮膚皮下脂肪層への光の照射であってよい。
【００２６】
本発明の一実施態様における皮膚皮下脂肪層は、未分化または分化途中である脂肪細胞、または分化完了した脂肪細胞を含むものであってよい。
【００２７】
本発明の一実施態様における照射は、脂肪細胞のトリグリセリド（Ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ）をグリセロール（Ｇｌｙｃｅｒｏｌ）に分解させることであってよい。
【発明の効果】
【００２８】
本明細書の脂肪分解用キットおよび痩身方法によれば、身体に無害な光領域の波長の光を照射して脂肪細胞内の中性脂肪を分解させることができ、安全且つ効果的に脂肪の分解が可能となり、また既存の脂肪分解方法よりも経済的であり且つ簡便であるという利点があるため、痩身方法に利用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００２９】
【図１】本発明の一実施例に係る光領域の特定波長光処理を細胞分化のすべての段階で実施した後の脂肪細胞から溶出した培地内の総中性脂肪（Ｔｏｔａｌ  ＴＧ）および血清グリセロール（Ｓｅｒｕｍ  Ｇｌｙｃｅｒｏｌ）量の測定結果である。
【図２】本発明の一実施例に係る光領域の特定波長光処理を最終分化完了した脂肪細胞に対して実施した後の脂肪細胞から溶出した培地内の総中性脂肪および血清グリセロール量の測定結果である。
【図３】本発明の一実施例に係る光領域の特定波長光処理を最終分化完了した脂肪細胞に対して実施した後の脂肪細胞内残留中性脂肪（ＴＧ  ｃｏｎｔｅｎｔｓ）の測定結果である。
【図４】光の波長とλｍａｘを例示的に示すものである。
【発明を実施するための形態】
【００３０】
２０１４年４月３０日に出願された韓国特許出願番号１０−２０１４−００５２３１５号は、すべての目的にてその全体が本明細書に参照として取り込まれる。また、本出願は、その全体が本明細書において参照として取り込まれる韓国特許出願番号１０−２０１４−００５２３１５号の利益を主張する。
【００３１】
以下、本明細書の属する技術分野における通常の知識を有する者が本発明を容易に実施できるようにするための、本発明の好適な実施例について詳細に説明する。
【００３２】
本明細書は、光を照射する光源照射装置；および光を照射して脂肪を分解する方法が含まれた説明書を含む脂肪分解用キットを提供する。
【００３３】
本明細書における光は、可視光線または赤外線であってよい。
【００３４】
本発明の一側面における光源照射装置は、電源部；入力部；光源部；センサ；制御部；および表示部を含んでいてよいが、必ずしもこれらに制限されるものではない。
【００３５】
本発明の一側面における入力部は、照射に必要なものであって、光の強度 、照射時間、光の波長、光のパターンを入力できるものであってよい。光源部は、光が生成され照射されるものであってよい。センサは、多様な種類のものを含んでいてよく、照射装置と皮膚との距離を測定するためのものであってよい。制御部は、入力部に入力された内容に応じて光源部を介した光照射を制御するものであってよい。表示部は、入力部を介して入力した内容および皮膚との距離を表示するものであってよい。
【００３６】
本発明の一側面における光源部は、太陽光透過性物質を含んでいてよい。本発明の一側面における前記太陽光透過性物質は、前記光を透過させるものであれば特にその種類を問わずに使用可能であり、例えば、石英板（Ｑｕａｒｔｚ  Ｐｌａｔｅ）または目標とする光線領域だけを透過させるバンドパスフィルタ（Ｂａｎｄ  ｐａｓｓ  ｆｉｌｔｅｒ）などが使用可能であるが、必ずしもこれらに限定されるものではない。
【００３７】
本発明の一側面における光源部は、ＬＥＤ（発光ダイオード）、ＯＬＥＤ（有機発光ダイオード）、ＬＤ（レーザダイオード）、レーザ、無電極ランプ、ＣＮＴ（炭素ナノチューブ）、ＣＣＦＬ（冷陰極蛍光ランプ）、ＦＦＬ（面光源ランプ）、ＥＥＦＬ（外部電極蛍光ランプ）、白熱ランプ、ハロゲンランプ、蛍光ランプ、タングステンランプ、低圧・高圧ナトリウムランプ、低圧・高圧水銀ランプ、キセノンランプ、メタルハライドランプ、ＨＩＤランプ、遠隔光源照明（光ファイバ、プリズムライト）、キセノンアークランプなどが使用可能であるが、必ずしもこれらに限定されるものではない。
【００３８】
本明細書における光源照射装置は、光が放出可能なあらゆる装置を意味し、仮にそれが光を照射するためのものではなくても、明細書が属する技術分野における通常の知識を有する者が容易に変更して光を照射可能な装置をも含むものとする。光源照射装置は、病院または漢方医院で使用する光線治療器であってもよく、個人用または携帯用光線照射機器であってもよい。
【００３９】
本発明の一実施態様における説明書は、光の照射強度、光の照射時間、照射装置と皮膚との距離、照射方法、および照射部位を含んでいてよい。本発明の一側面における前記説明書は、使用者の状態に応じて前記光の照射強度、照射時間、皮膚との距離のうちの一つ以上を調節する情報を含んでいてよい。
【００４０】
本発明の一実施態様における光の照射強度は、１Ｊ／ｃｍ２乃至６００Ｊ／ｃｍ２であってよい。本発明の一実施態様において、光の照射時間は、０．５分乃至６時間であってよい。照射強度が１Ｊ／ｃｍ２未満であるか、照射時間が０．５分未満である場合は、その照射による効果が微小となる可能性があり、照射強度が６００Ｊ／ｃｍ２超過であるか、照射時間が６時間超過である場合は、その照射によって皮膚に損傷を加え得る。本明細書において、光の照射強度は、１Ｊ／ｃｍ２以上、１０Ｊ／ｃｍ２以上、５０Ｊ／ｃｍ２以上、１００Ｊ／ｃｍ２以上、１５０Ｊ／ｃｍ２以上、２００Ｊ／ｃｍ２以上、または２５０Ｊ／ｃｍ２以上であってよいが、必ずしもこれらに制限されるものではない。本明細書において、光の照射強度は、６００Ｊ／ｃｍ２以下、５５０Ｊ／ｃｍ２以下、５００Ｊ／ｃｍ２以下、４５０Ｊ／ｃｍ２以下、４００Ｊ／ｃｍ２以下、３５０Ｊ／ｃｍ２以下、または３００Ｊ／ｃｍ２以下であってよいが、必ずしもこれらに制限されるものではない。本明細書において、光照射時間は、１０分以上、３０分以上、１時間以上、１時間３０分以上、２時間以上、または２時間３０分以上であってよいが、必ずしもこれらに制限されるものではない。本明細書において、光照射時間は。５時間３０分以下、５時間以下、４時間３０分以下、４時間以下、３時間３０分以下、または３時間以下であってよいが、必ずしもこれらに制限されるものではない。
【００４１】
照射装置と皮膚との距離は、照射装置に備えられたセンサによって測定された照射装置の光源部と皮膚との距離を意味し、本発明の一実施態様において照射装置と皮膚との距離は、０ｃｍ乃至２００ｃｍであってよい。皮膚との距離が０ｃｍ未満の場合、皮膚に当接するのではなく浸透し、２００ｃｍ超過である場合は、照射による効果が微小となる可能性がある。本明細書において照射装置と皮膚との距離は、５ｃｍ以上、１０ｃｍ以上、１５ｃｍ以上、２０ｃｍ以上、２５ｃｍ以上、３０ｃｍ以上、３５ｃｍ以上、４０ｃｍ以上、または４５ｃｍ以上であってよいが、必ずしもこれらに制限されるものでない。本明細書において照射装置と皮膚との距離は、１７０ｃｍ以下、１４０ｃｍ以下、１１０ｃｍ以下、８０ｃｍ以下、７５ｃｍ以下、７０ｃｍ以下、６５ｃｍ以下、６０ｃｍ以下、または５５ｃｍ以下であってよいが、必ずしもこれらに制限されるものでない。
【００４２】
照射方法は、直接照射で行なうか、またはフィルタ、シート、フィルム、化粧品、ゲル、およびクリームよりなる群から選択された一つ以上の補助手段を介して行なうものであってよい。また、照射方法は、針管、カニューレ、およびマイクロニードルよりなる群から選択された一つ以上を利用して行なうものであってよい。
【００４３】
照射部位は、眼球、口腔、性器、および肛門を除いた脂肪が蓄積され得るすべての皮膚組織であってよい。
【００４４】
本明細書は、皮膚またはその皮下脂肪層に光を照射することを含む痩身方法を提供する。
【００４５】
本明細書における「痩身(slimming)」とは、身体またはその部位のうちの一部分の周りまたは厚さをその身長または長さに比べて相対的に小さくすることを意味するものであってよい。また、このような「痩身」は、身体またはその部位のうちの一部分をスリムにしたり、痩せるようにしたり、細くしたりすることであってよく、その過程で体重が減量することもある。
【００４６】
本発明の一実施態様における脂肪細胞（ａｄｉｐｏｃｙｔｅ）とは、一般的に通用する脂肪細胞のことをいい、脂肪を保存する細胞であれば特に限定されるものではない。分化細胞、未分化細胞、および分化途中にある細胞をいずれも含む。
【００４７】
本発明の一実施態様における皮膚は、表皮、真皮、および皮下脂肪層を含むものであり、各層に存在する脂肪細胞が本明細書において光照射の対象とされ得る。
【００４８】
本発明の一実施態様における光は、光領域全体の波長に該当する光線であれば特に限定されるものではない。また、光は、熱が除外された光の波長単独のものであってよい。光の波長万からも脂肪分解を促進させることができる。
【００４９】
本明細書において使用される照射光線は、光領域のうちでも６００ｎｍ超過乃至１５００ｎｍ以下の波長を有するものであってよく、具体的に、本明細書における光は、６００ｎｍ超過乃至１５００ｎｍ以下の範囲の実数を波長として有するものであってよい。本明細書における光領域は、６００ｎｍ超過、６０５ｎｍ以上、６１０ｎｍ以上、６１５ｎｍ以上、６２０ｎｍ以上、６２５ｎｍ以上、６３０ｎｍ以上、６４０ｎｍ以上、６４１ｎｍ以上、６４３ｎｍ以上、６４５ｎｍ以上、６４７ｎｍ以上、６４９ｎｍ以上、６５０ｎｍ以上、６６０ｎｍ以上、６７０ｎｍ以上、６８０ｎｍ以上、６９０ｎｍ以上、７００ｎｍ以上、７１０ｎｍ以上、７３０ｎｍ以上、７５０ｎｍ以上、７７０ｎｍ以上、７９０ｎｍ以上、８００ｎｍ以上、８５０ｎｍ以上、９００ｎｍ以上、９５０ｎｍ以上、１０００ｎｍ以上、１０５０ｎｍ以上、１１００ｎｍ以上、１１５０ｎｍ以上、１２００ｎｍ以上、１２５０ｎｍ以上、１３００ｎｍ以上、１３５０ｎｍ以上、１４００ｎｍ以上、１４５０ｎｍ以上、または１５００ｎｍ以上であってよい。本明細書における光領域は、２０００ｎｍ以下、１６００ｎｍ以下、１５００ｎｍ以下、１４５０ｎｍ以下、１４００ｎｍ以下、１３５０ｎｍ以下、１３００ｎｍ以下、１２５０ｎｍ以下、１２００ｎｍ以下、１１５０ｎｍ以下、１１００ｎｍ以下、１０５０ｎｍ以下、１０００ｎｍ以下、９５０ｎｍ以下、９００ｎｍ以下、８５０ｎｍ以下、８００ｎｍ以下、７９０ｎｍ以下、７７０ｎｍ以下、７５０ｎｍ以下、７３０ｎｍ以下、７１０ｎｍ以下、７００ｎｍ以下、６９０ｎｍ以下、６８０ｎｍ以下、６７０ｎｍ以下、６６０ｎｍ以下、６５０ｎｍ以下、６４８ｎｍ以下、６４６ｎｍ以下、６４４ｎｍ以下、６４２ｎｍ以下、６４０ｎｍ以下、６３５ｎｍ以下、６３０ｎｍ以下、６２５ｎｍ以下、６２０ｎｍ以下、６１５ｎｍ以下、６１０ｎｍ以下、６０５ｎｍ以下、または６０１ｎｍ以下であってよい。本明細書における光領域は、６００ｎｍ超過乃至７００ｎｍ以下であるときに最も好ましい。
【００５０】
また、本発明の一側面における前記光は、前記した波長の数値を最大エネルギー波長（λｍａｘ）として有するものであってよい。具体的に、本発明の一側面における前記光は、その光のλｍａｘを基準として、±１００ｎｍの波長領域を有するものであってよい。より具体的に、本発明の一側面における前記光は、その光のλｍａｘを基準として、±９０ｎｍ以下、±８０ｎｍ以下、±７０ｎｍ以下、±６０ｎｍ以下、±５０ｎｍ以下、±４０ｎｍ以下、±３０ｎｍ以下、±２０ｎｍ以下、±１０ｎｍ以下、または±５ｎｍ以下の波長領域を有するものであってよい。例えば、本発明の一側面における光の波長は、λｍａｘが６６０ｎｍである場合に６００ｎｍ超過乃至７００ｎｍ以下；λｍａｘが７４０ｎｍである場合に７００ｎｍ〜８００ｎｍ；λｍａｘが８５０ｎｍである場合に８００ｎｍ〜９００ｎｍ；λｍａｘが９４０ｎｍである場合に９００ｎｍ〜１,０００ｎｍ；λｍａｘが１,０５０ｎｍである場合に１,０００ｎｍ〜１,１００ｎｍ；λｍａｘが１,１５０ｎｍである場合に１,１００ｎｍ〜１,２００ｎｍ；λｍａｘが１,２５０ｎｍである場合に１,２００ｎｍ〜１,３００ｎｍ；λｍａｘが１,３５０ｎｍである場合に１,３００ｎｍ〜１,４００ｎｍの領域のものであってよい。
【００５１】
本明細書における最大エネルギー波長、すなわちλｍａｘは、特定領域の波長を有する光のうちで最もエネルギーの高い波長のことを意味する。具体的に、λｍａｘは、光の波長範囲がｘ軸を波長、ｙ軸を光のエネルギーとする正規分布グラフのような鐘状に存在する場合において、そのエネルギーが最も高い最高点（ｐｅａｋ）での波長を意味する。例えば、図４の各光波長領域において、点線にて示した部分がλｍａｘを意味する。
【００５２】
本明細書の一側面において、照射は、未分化脂肪細胞から分化細胞へと移る段階または分化の中間過程にある脂肪細胞の脂肪形成過程を抑制あるいは生成される脂肪を分解させることができ、分化完了以後の脂肪細胞の脂肪を分解させることができる。脂肪細胞自体の分化前、途中、以後に光照射を実施するすべての場合に脂肪形成の抑制あるいは分解効果が確認でき、皮膚またはその皮下脂肪層に光照射を実施する場合には、皮膚内に存在する多様な分化段階にある種々の脂肪細胞に対して脂肪分解効果を持つ。
【００５３】
脂肪細胞が未分化細胞である場合、照射は、脂肪細胞の分化以前または分化途中にある皮膚、またはその皮下脂肪層に実施されていてよい。分化途中に実施される場合、分化途中の何時でも照射を実施してよく、照射は１回だけ実施すればよく、２回以上実施してもよい。
【００５４】
具体的に、脂肪細胞の未分化細胞にＰＢＳ（Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  Ｂｕｆｆｅｒｅｄ  Ｓａｌｉｎｅ）培地で光を照射する段階；前記脂肪細胞を分化用カクテル培地で１乃至３日間培養した後、再びＰＢＳ（Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  Ｂｕｆｆｅｒｅｄ  Ｓａｌｉｎｅ）培地で光を照射する段階；前記脂肪細胞をインスリン培地で２乃至４日間培養後、再びＰＢＳ（Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  Ｂｕｆｆｅｒｅｄ  Ｓａｌｉｎｅ）培地で光を照射する段階；および前記脂肪細胞をＦＢＳ（ｆｅｔａｌ  ｂｏｖｉｎｅ  ｓｅｒｕｍ）培地で１乃至３日間培養する段階；を含んでいてよいが、必ずしもこれに限定されるものではない。
【００５５】
また、脂肪細胞の未分化細胞を１乃至３日間培養した後、ＰＢＳ（Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  Ｂｕｆｆｅｒｅｄ  Ｓａｌｉｎｅ）培地で光を照射する段階；前記脂肪細胞を分化用カクテル培地で１乃至３日間培養してから、インスリン培地で２乃至４日間培養後、ＦＢＳ（ｆｅｔａｌ  ｂｏｖｉｎｅ  ｓｅｒｕｍ）培地で１乃至３日間培養する段階；を含んでいてよいが、必ずしもこれに限定されるものではない。
【００５６】
また、脂肪細胞の未分化細胞を１乃至３日間培養してから、分化用カクテル培地で１乃至３日間培養した後、ＰＢＳ（Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  Ｂｕｆｆｅｒｅｄ  Ｓａｌｉｎｅ）培地で光を照射する段階；および前記脂肪細胞をインスリン培地で２乃至４日間培養後、ＦＢＳ（ｆｅｔａｌ  ｂｏｖｉｎｅ  ｓｅｒｕｍ）培地で１乃至３日間培養する段階；を含んでいてよいが、必ずしもこれに限定されるものではない。
【００５７】
さらに、脂肪細胞の未分化細胞を１乃至３日間培養してから、分化用カクテル培地で１乃至３日間培養した後、インスリン培地で２乃至４日間培養後、再びＰＢＳ（Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  Ｂｕｆｆｅｒｅｄ  Ｓａｌｉｎｅ）培地で光を照射する段階；および前記脂肪細胞をＦＢＳ（ｆｅｔａｌ  ｂｏｖｉｎｅ  ｓｅｒｕｍ）培地で１乃至３日間培養する段階；を含んでいてよいが、必ずしもこれに限定されるものではない。
【００５８】
このような場合、分化した以後の脂肪細胞で生成された脂肪を分解することができるだけでなく、未分化細胞の分化段階での脂肪の生成を抑制するようにすることができる。これは、後述する実験例から確認することができる。
【００５９】
また、照射は、脂肪細胞分化完了後に実施されてよい。
【００６０】
具体的に、脂肪細胞の未分化細胞を１乃至３日間培養した後、分化用カクテル培地で１乃至３日間培養し、インスリン培地で２乃至４日間培養した後、ＦＢＳ（ｆｅｔａｌ  ｂｏｖｉｎｅ  ｓｅｒｕｍ）培地で１乃至３日間培養する段階；および前記脂肪細胞にＰＢＳ（Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  Ｂｕｆｆｅｒｅｄ  Ｓａｌｉｎｅ）培地で光を照射する段階；を含んでいてよいが、必ずしもこれに限定されるものではない。
【００６１】
脂肪細胞の未分化細胞がカクテル培地、インスリン培地、ＦＢＳ培地で培養されながら細胞分化が完了して分化細胞になり、このような分化細胞に光を照射するのである。
【００６２】
分化脂肪細胞に光を照射する場合、脂肪細胞で生成された脂肪分解を促進することができる。これは、後述する実験例から確認することができる。
【００６３】
本明細書における分化用カクテル培地は、細胞の増殖から分化への状態変化を起こす培地であれば特に限定されるものではないか、ＦＢＳ（ｆｅｔａｌ  ｂｏｖｉｎｅ  ｓｅｒｕｍ）、インスリン（ｉｎｓｕｌｉｎ）、３-イソブチル-１-メチルキサンチン（ＩＢＭＸ）、およびデキサメタゾン（ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ、ＤＥＸ）からなる群より選択される一つ以上を含有する培地であってよい。脂肪細胞の分化条件上、含有物のそれぞれの濃度は変動可能である。具体的に、１０％ＦＢＳ（ｆｅｔａｌ  ｂｏｖｉｎｅ  ｓｅｒｕｍ）、１０ｍｇ／ｍｌインスリン（ｉｎｓｕｌｉｎ）、０．５ｍＭ３-イソブチル-１-メチルキサンチン（ＩＢＭＸ）、および１ｍＭデキサメタゾン（ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ、ＤＥＸ）を含有する４．５ｇ／Ｌグルコース含有ＤＭＥＭが好ましい。
【００６４】
本明細書におけるインスリン培地は脂肪細胞内に脂肪球（袋）を形成する役割をし、ＦＢＳ培地は脂肪球に脂肪を満たしてエネルギーを供給する役割をする。
【００６５】
本明細書における前記照射は、特に限定されるものではないか、脂肪細胞がＰＢＳ（Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  Ｂｕｆｆｅｒｅｄ  Ｓａｌｉｎｅ）培地にあるときに実施されることが好ましい。これは、光の波長が脂肪細胞に特別な制限条件なしに当たることが重要であり、これによって脂肪分解効果を完全に適用させることが核心であるところ、一般の培地を使用する場合、培地に含有された種々の成分によって光の干渉あるいは散乱などの現象が生じ、これは、光の特定波長の完全な脂肪細胞への伝達の邪魔となって、波長の明確な効果をみることができないためである。反面、ＰＢＳ（Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  Ｂｕｆｆｅｒｅｄ  Ｓａｌｉｎｅ）培地は、干渉あるいは散乱などの現象を防止し、光の特定波長の伝達力に優れている。
【００６６】
本明細書に係る光照射は、非侵襲性または侵襲性であってよい。非侵襲性照射は、皮膚上に直接的に光を照射するものであって、照射される光の波長により皮膚表皮および下部表皮、真皮などの浅いところに位置する脂肪細胞に達するようにする。侵襲性照射は、公知の侵襲性技術であれば特に限定されるものではなくて、皮膚に挿入するための切断面を有する針管、カニューレ（ｃａｎｎｕｌａ）、またはマイクロニードルなどを皮膚に挿入した状態で光を照射し、より深いところ、例えば表皮から５mm以上の深さのところに位置する脂肪細胞に光が達するようにすることができる。
【００６７】
また、本明細書に係る光照射時の脂肪細胞への波長伝達力乃至透過度を増大させることができる補助手段を皮膚に塗布することができる。補助手段は、皮膚に当接可能なものであって、本明細書に係る可視光線の照射は、該補助手段を介して実行されていてよい。また、本明細書に係る光照射は、皮膚透過度を増幅させる特定パターンの光を利用して脂肪細胞への波長伝達力乃至透過度を増大させることができる。
【００６８】
本明細書における特定領域波長の光照射は、脂肪細胞のトリグリセリド（Ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ）をグリセロール（Ｇｌｙｃｅｒｏｌ）に分解させる。中性脂肪であるトリグリセリドの分解率が上昇しながら脂肪分解効能が示されるようになる。
【００６９】
本明細書は、身体に無害な光領域の波長の光を照射して脂肪細胞内中性脂肪を分解させることから、安全且つ効果的に脂肪の分解が可能となり、また既存の脂肪分解方法よりも経済的であり且つ簡便であるという利点があるため、痩身方法として効果的に使用することができる。
【００７０】
以下の実施例を通じて本発明をより詳細に説明する。なお、実施例は本発明を例示するためのものに過ぎず、これらだけに本発明の範囲が限定されるものではない。
【００７１】
［実施例１］
全段階光処理（Ｗｈｏｌｅ  ｓｔａｇｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）
１−１．未分化脂肪細胞の培養
ＡＴＣＣ（ＣＬ-１７３）から購入したネズミの３Ｔ３-Ｌ１未分化線維芽細胞（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ）を準備した。未分化細胞（Ｐｒｅａｄｉｐｏｃｙｔｅ  ｃｅｌｌ）を１０％ＣＯ２を含有する湿気あるインキュベータで１０％仔ウシ血清（ｃａｌｆ  ｓｅｒｕｍ）（Ｇｉｂｃｏ  ＢＲＬ、ＮＹ、ＵＳＡ）を含有する４．５ｇ／Ｌグルコース含有ＤＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ'ｓ  ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｅａｇｌｅ'ｓ  ｍｅｄｉｕｍ）（ＰＡＡ、オーストリア）で２日間培養した。
【００７２】
１−２．脂肪細胞の分化
前記１−１で得た未分化脂肪細胞は、分化実験のために分化用カクテル培地として、１０％ＦＢＳ（ｆｅｔａｌ  ｂｏｖｉｎｅ  ｓｅｒｕｍ）（ＰＡＡ、オーストリア）、１０ｍｇ／ｍｌインスリン（ｉｎｓｕｌｉｎ）（シグマアルドリッチ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）、セントルイス（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ）、米国）、０．５ｍＭ３-イソブチル-１-メチルキサンチン（ＩＢＭＸ）（シグマアルドリッチ、セントルイス、米国）、および１ｍＭデキサメタゾン（ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ、ＤＥＸ）（シグマアルドリッチ、セントルイス、米国）を含有する４．５ｇ／Ｌグルコース含有ＤＭＥＭに取り替えした。培養２日後に培地を１０％ＦＢＳおよび１０ｍｇ／ｍｌインスリンを含有する４．５ｇ／Ｌグルコース含有ＤＭＥＭに取り替え、細胞を３日間培養した。それから２日間インスリンなしで１０％ＦＢＳを含有する４．５ｇ／Ｌグルコース含有ＤＭＥＭ内で培養した。
【００７３】
１−３．光放出
１）前記１−１で得た培養された未分化細胞（Ｐｒｅａｄｉｐｏｃｙｔｅ）を、カクテル培地への取り替え前にＰＢＳ（Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  Ｂｕｆｆｅｒｅｄ  Ｓａｌｉｎｅ、ＣａＣｌ2およびＭｇＣｌ2なし）（ウェルジン社（Ｗｅｌｇｅｎｅ）、韓国）で２回洗浄（ｗａｓｈｉｎｇ）後、再び新しいＰＢＳに浸漬してλｍａｘが６６０ｎｍ、７４０ｎｍ、８５０ｎｍ、９４０ｎｍ、１,０５０ｎｍ、１,１５０ｎｍ、１,２５０ｎｍ、１,３５０ｎｍである波長の光を１０％ＣＯ２を含有する湿気のあるインキュベータでそれぞれ１時間処理実施した。光を処理する際に照射距離は５ｃｍ、その照射量は１０Ｊ／ｃｍ２にして処理した。対照群（Ｃｏｎｔｒｏｌ；ＣＴＬ）は、光処理がないことを除く全ての条件が同一である。
【００７４】
２）光処理後の実験群および対照群は、双方とも同一にそれぞれ前記１−２で使用されたのと同じカクテル培地に取り替えて２日間培養した。
【００７５】
３）カクテル培地で４８時間培養された細胞をＰＢＳで２回洗浄後、再びＰＢＳに浸漬して１時間、それぞれ段階１）と同じ波長での光処理を実施した後、インスリン（Ｉｎｓｕｌｉｎ）培地に取り替えて３日間培養した。
【００７６】
４）インスリン培地で３日間培養された細胞をＰＢＳで２回洗浄後、再びＰＢＳに浸漬して１時間、それぞれ段階１）と同じ波長での光処理を実施してから、ＦＢＳ培地に取り替えて２日間培養した後、培養された細胞をＰＢＳで２回洗浄し、再びＰＢＳに浸漬して１時間、それぞれ段階１）と同じ波長での光処理を実施した。
【００７７】
１−４．中性脂肪およびグリセロール測定用培地の回収
前記１−３の光処理の実施後に培養された細胞をＰＢＳで２回洗浄し、次いで、培地に溶出した総中性脂肪およびグリセロールを測定するために２％ＢＳＡ（ｂｏｖｉｎｅ  ｓｅｒｕｍ  ａｌｂｕｍｉｎ）（シグマアルドリッチ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）、セントルイス（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ）、米国）を含有する１,０００ｍｇ／Ｌグルコース含有ＤＭＥＭ（ＰＡＡ、オーストリア）の栄養制限培地で６時間培養した後、対照群であるＣＴＬと実験群であるλｍａｘが６６０ｎｍ、７４０ｎｍ、８５０ｎｍ、９４０ｎｍ、１,０５０ｎｍ、１,１５０ｎｍ、１,２５０ｎｍ、１,３５０ｎｍの波長の光を処理した細胞から培養培地を回収した。
【００７８】
［実施例２］
細胞分化段階後の光処理
２−１．未分化脂肪細胞の培養
前記実施例１−１と同じ方法にて未分化細胞を得た。
【００７９】
２−２．脂肪細胞の分化
前記実施例１−２と同じ方法にて脂肪細胞を分化した。
【００８０】
２−３．光放出
前記２−２で得た分化した脂肪細胞をＰＢＳに浸漬して１時間、それぞれＣＴＬ、λｍａｘが６６０ｎｍ、７４０ｎｍ、８５０ｎｍ、９４０ｎｍ、１,０５０ｎｍ、１,１５０ｎｍ、１,２５０ｎｍ、１,３５０ｎｍの波長の光処理後、１−４のような栄養制限培地で６時間培養した。光を処理する際に照射距離は５ｃｍ、その照射量は１０Ｊ／ｃｍ２にして処理した。
【００８１】
２−４．中性脂肪およびグリセロール測定用培地の回収
前記実施例１−４と同じ方法にて対照群であるＣＴＬと実験群であるλｍａｘが６６０ｎｍ、７４０ｎｍ、８５０ｎｍ、９４０ｎｍ、１,０５０ｎｍ、１,１５０ｎｍ、１,２５０ｎｍ、１,３５０ｎｍの波長の光を処理した細胞から培養培地を回収した。
【００８２】
［実験例１］細胞から培地に溶出した総中性脂肪およびグリセロール（Ｇｌｙｃｅｒｏｌ）の測定
前記実施例１および２において光処理後に回収した栄養制限培地に溶出した中性脂肪およびグリセロールの量をそれぞれＴｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ  ｒｅａｇｅｎｔ（シグマアルドリッチ、米国）とＦｒｅｅ  Ｇｌｙｃｅｒｏｌ  Ｒｅａｇｅｎｔ（シグマアルドリッチ、米国）を利用して測定し計算した。グリセロールの量は、培地とＦｒｅｅ  Ｇｌｙｃｅｒｏｌ  Ｒｅａｇｅｎｔを混合して１５分間反応させた後、５４０ｎｍの波長で吸光度を測定することで求めた。溶出した中性脂肪の量は、リパーゼ（ｌｉｐａｓｅ）を利用して間接測定した。先ず、溶出した中性脂肪をリパーゼ（ｌｉｐａｓｅ）を利用してグリセロールと脂肪酸とに分解させた後にグリセロールの量を測定した。この測定値からリパーゼ（ｌｉｐａｓｅ）処理前の光処理によって既に溶出していたグリセロールの量を差し引くことによって溶出した中性脂肪の量だけを求めた。
【００８３】
実施例１に関する実験結果は図１および表１に、実施例２に関する実験結果は図２および表２に表した。表１および表２は、それぞれ図１および図２に基づくものであり、各図の対照群（ＣＴＬ）実験結果を１００％として、各照射波長に対する結果の相対値をパーセント（％）に表したものである。図１、図２、表１および表２における波長の数値はλｍａｘ値を示す。
【００８４】
【表１】
2017515542.tif 000003
【００８５】
【表２】
2017515542.tif 000004
【００８６】
前記実施例１に係る結果である図１および表１から分かるように、分化前過程での光処理時に処理した全波長で脂肪分解効果が確認でき、特にλｍａｘが６６０ｎｍの波長の光処理時に溶出した中性脂肪の量は対照群に比べて１５０．４％に増加し、培地に分解されて溶出したグリセロールの量は対照群に比べて１６０．６％に増加して最も高い分解効果を示している。また、最も小さい分解効果を示したλｍａｘが１,３５０ｎｍの波長の場合でも溶出した中性脂肪の量は対照群に比べて１１５.２％であり、溶出したグリセロールの量は対照群に比べて１２１.２％であって脂肪分解効果があることが確認された。これらの結果は、いずれも統計的に有意性のあるものである。
【００８７】
また、前記実施例２に係る結果である図２および表２から分かるように、分化完了後の光処理時でも処理した全波長で脂肪分解効果が確認でき、特にλｍａｘが６６０ｎｍの波長の光処理時に溶出した中性脂肪の量は対照群に比べて約２１９．８％に増加し、培地に分解されて溶出したグリセロールの量は対照群に比べて３３３．３％に増加して最も高い分解効果を示すことを確認した。また、最も小さい分解効果を示したλｍａｘが１,３５０ｎｍの波長の光処理時でも溶出した中性脂肪の量は対照群に比べて１３９．６％であり、培地に分解されて溶出したグリセロールの量は対照群に比べて統計的有意性のあるように１８１.５％に増加することを確認した。したがって、最終的に分化が完了した脂肪細胞に、本発明に係る光を照射する場合でも極めて顕著な脂肪分解効果があることを確認し、これらの結果は、いずれも統計的に有意性のあるものである。
【００８８】
［実験例２］細胞内残留中性脂肪（Ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ）の測定
前記実験例１において栄養制限培地を回収後に残留した細胞に３．７％ホルムアルデヒド溶液（ｆｏｒｍａｌｄｅｈｙｄｅ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ）（シグマアルドリッチ、セントルイス、米国）を２４時間処理して常温で固定し、０．５ｇ  ＯＲＯ（Ｏｉｌ  Ｒｅｄ  Ｏ）（シグマアルドリッチ、セントルイス、米国）を１００ｍｌプロピレングリコール（ｐｒｏｐｙｌｅｎｅ  ｇｌｙｃｏｌ）（シグマアルドリッチ、セントルイス、米国）に溶かした溶液を１ｍｌ入れて１時間染色した。前記ＯＲＯで染色された細胞から残留染色剤を除去し、蒸溜水で３回洗浄後、イソプロピルアルコール（ｉｓｏｐｒｏｐｙｌ  ａｌｃｏｈｏｌ、ＩＰＡ）（シグマアルドリッチ、セントルイス、米国）を５００ｍｌ入れて１時間細胞に染色されていた染色剤を抽出した。再び前記ＯＲＯが抽出されたＩＰＡを４９０ｎｍで吸光度分析を実施した。このような結果を図３および表３に表した。表３の場合、図３に基づくものであって、対照群（ＣＴＬ）の実験結果を１００％として、各照射波長に対する結果の相対値をパーセント（％）で表したものである。表３および図３における波長の数値はλｍａｘ値を示す。
【００８９】
【表３】
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【００９０】
図３および表３から分かるように、分化した脂肪細胞内残留トリグリセリド（中性脂肪）量は、処理した全ての波長で減少している結果を示し、このような結果から脂肪分解効果を確認することができた。最も高い分解効果を示したλｍａｘが６６０ｎｍの波長の光処理時の脂肪細胞内残留中性脂肪の量は、対照群に比べて統計的有意性のあるように５０．３％に減少したことが確認され、最も小さい分解効果を示したλｍａｘが１,３５０ｎｍの波長の光処理時でも脂肪細胞内残留脂肪の量は、対照群に比べて統計的有意性のあるように７９．８％に減少したことが確認された。前記結果は、いずれも統計的に有意性のあるものである。
【００９１】
前記実験例１および２の結果から特定波長の光を分化段階中にあるか、または分化が完了した脂肪細胞に照射することは、脂肪細胞内にある中性脂肪をグリセロールに分解する顕著な効果があり、脂肪細胞内の中性脂肪を細胞の外に溶出させるのに顕著な効果があることを確認することができる。したがって、本発明に係る光を処理する場合、脂肪分解に効果があることが分かる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
2017515542.tif 000009
【手続補正書】
【提出日】平成28年10月31日(2016.10.31)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
光を照射する光源照射装置；および光を照射して脂肪を分解する方法が含まれた説明書を含む脂肪分解用キットであって、前記光は、６００ｎｍ超過乃至１５００ｎｍ以下の波長を有するキット。
【請求項２】
光は、皮膚透過度を増幅させるパターンを有する請求項１に記載のキット。
【請求項３】
説明書は、光の照射強度、光の照射時間、照射装置と皮膚との距離、照射方法、および照射部位を含む請求項１または２に記載のキット。
【請求項４】
光の照射強度は、１Ｊ／ｃｍ２乃至６００Ｊ／ｃｍ２である請求項３に記載のキット。
【請求項５】
光の照射時間は、０．５分乃至６時間である請求項３または４に記載のキット。
【請求項６】
照射装置と皮膚との距離は０ｃｍ乃至２００ｃｍである請求項３〜５のいずれか一項に記載のキット。
【請求項７】
照射方法は、直接照射で行なうか、または皮膚に接触可能な補助手段を介して行なう請求項３〜６のいずれか一項に記載のキット。
【請求項８】
補助手段は、フィルタ、シート、フィルム、化粧品、ゲル、およびクリームよりなる群から選択された一つ以上である請求項７に記載のキット。
【請求項９】
照射方法は、針管、カニューレ、およびマイクロニードルよりなる群から選択された一つ以上を利用して行なう請求項３〜８のいずれか一項に記載のキット。
【請求項１０】
照射部位は、眼球、口腔、性器、および肛門を除いた脂肪が蓄積され得るすべての皮膚組織である請求項３〜９のいずれか一項に記載のキット。
【請求項１１】
皮膚に光を照射することを含む痩身方法であって、前記光は、６００ｎｍ超過乃至１５００ｎｍ以下の波長を有する痩身方法。
【請求項１２】
光は、皮膚透過度を増幅させるパターンを有する請求項１１に記載の痩身方法。
【請求項１３】
光は、１Ｊ／ｃｍ２乃至６００Ｊ／ｃｍ２の強度である請求項１１または１２に記載の痩身方法。
【請求項１４】
照射は、０.５分乃至６時間行なう請求項１１〜１３のいずれか一項に記載の痩身方法。
【請求項１５】
照射は、皮膚との距離が０ｃｍ乃至２００ｃｍである位置で行なう請求項１１〜１４のいずれか一項に記載の痩身方法。
【請求項１６】
照射は、直接照射で行なうか、または皮膚に接触可能な補助手段を介して行なう請求項１１〜１５のいずれか一項に記載の痩身方法。
【請求項１７】
補助手段は、フィルタ、シート、フィルム、化粧品、ゲル、およびクリームよりなる群から選択された一つ以上である請求項１６に記載の痩身方法。
【請求項１８】
照射は、針管、カニューレ、およびマイクロニードルよりなる群から選択された一つ以上を利用して行なう請求項１１〜１７のいずれか一項に記載の痩身方法。
【請求項１９】
照射は、皮膚皮下脂肪層への光の照射である請求項１１〜１８のいずれか一項に記載の痩身方法。
【国際調査報告】
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