(57)【要約】   膵炎である患畜を識別するのと膵炎の治療方法として、メタンスルホン酸カルシウムを毎日約8〜1300mg/kgの間で投与するか、又は同量の若しくは4-（4-グアニジノ-ベンゾイルオキシ）フェーノール酢酸を投与する事が開示する。毎日達成しなければならない投薬量は、一回の投与でも、2、3、4と分けても、更にもっと分けて投与してもかまわない。治療は、一週間（7日）、一ヶ月（31日）でも数ヶ月でも受けられ、とにかく治療が生活の質を改善させる事ができる限り行う事が出来る。薬は経口用カプセルで服用できる。方法は、犬の膵臓特異的リパーゼの血清濃度を測定し、犬の膵臓に特異なリパーゼの約400μg/l以上の血清濃度を有している場合は、薬の用量を投与して、犬の膵炎の治療にも使用する事が出来る。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
犬類動物膵臓特異的リパーゼの血清濃度を測定し、犬類動物の膵臓特異的リパーゼの血清濃度が400 μg/L又はそれ以上である時に、24時間内にカモスタットの8から200 mg/kgまでのドーズ量を投与することを含む、犬類動物膵炎を治療する方法。
【請求項２】
24時間内に24 mg/kgから200 mg/kgまでのドーズ量である、請求項１に記載の犬類動物膵炎を治療する方法。
【請求項３】
さらに8-12時間毎にカモスタットの投与を含む、請求項１に記載の犬類動物膵炎を治療する方法。
【請求項４】
さらに8時間毎に投与ドーズ量が8 mg/kgから66.7 mg/kgであることを含む、請求項１に記載の犬類動物膵炎を治療する方法。
【請求項５】
ドーズ量が経口投与である、請求項１に記載の犬類動物膵炎を治療する方法。
【請求項６】
犬の治療周期は7から180日間までである、請求項１に記載の犬類動物膵炎を治療する方法。
【請求項７】
生活の質を改善するために犬に対して治療を行う、請求項１に記載の犬類動物膵炎を治療する方法。
【請求項８】
カモスタットの使用剤型はカプセル又は錠剤タブレットである、請求項１に記載の犬類動物膵炎を治療する方法。
【請求項９】
カモスタットの使用ドーズ量は20, 40, 60, 80 ± 10 mgs; 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650 ± 25 mgs; 700, 800, 900,1000, 1100 ± 50 mgs, 1200, 1400, 1600, 又は1800 ±100 mgsである、請求項１に記載の犬類動物膵炎を治療する方法。
【請求項１０】
カモスタットの投与と体重範囲は以下のとおりに共に結束される：ターゲットドーズ量は毎日50 mg/kgであり，18 kgに達する犬のドーズ量が一日２回で計300 mgであり，重量が19から33 kgまでの犬のドーズ量が一日２回で計600 mgであり，重量が34から45 kgまでの犬のドーズ量が一日２回で計900 mgであり，及び重量が46 kgを超える犬が一日２回で計1200 mgである、請求項１に記載の犬類動物膵炎を治療する方法。
【請求項１１】
膵炎患者を鑑別し，及び患者に対する日ドーズ量は8から1300 mg/kgのカモスタット又は等量の4-(4-グアニジノ-べンゾイルオキシ) フェニル酢酸を使用する、膵炎を治療する方法。
【請求項１２】
カモスタット又は4-(4-グアニジノ-べンゾイルオキシ) フェニル酢酸の使用は一回ドーズ量である、膵臓炎を治療する方法。
【請求項１３】
カモスタット又は4-(4-グアニジノ-べンゾイルオキシ) フェニル酢酸の毎日ドーズ量が数回に分けて投与する、請求項11に記載の膵炎を治療する方法。
【請求項１４】
カモスタット又は4-(4-グアニジノ-べンゾイルオキシ) フェニル酢酸の日ドーズ量継続時間が７から180日間である、請求項11に記載の膵炎を治療する方法。
【請求項１５】
犬に対して用いる日ドーズ量は24から200 mg/kgのカモスタット又は等量の4-(4-グアニジノべンゾイルオキシ) フェニル酢酸である、請求項11に記載の膵炎を治療する方法。
【請求項１６】
犬に対して用いる日ドーズ量が24から200 mg/kgで7から180天で継続する、請求項11に記載の膵炎を治療する方法。
【請求項１７】
犬に対して用いるカモスタット日ドーズ量が24から200 mg/kgで１日3回に投与し，また少なくとも７日間繰り返して投与する、請求項11に記載の膵炎を治療する方法。
【請求項１８】
カモスタット又は4-(4-グアニジノべンゾイルオキシ) フェニル酢酸の使用剤型はカプセル又は錠剤である、請求項11に記載の膵炎を治療する方法。
【請求項１９】
カモスタット又は4-(4-グアニジノべンゾイルオキシ) フェニル酢酸は経口投与である、請求項11に記載の膵炎を治療する方法。
【請求項２０】
犬体内の犬類動物膵臓特異的リパーゼの血清濃度を測定し，続いて犬のcPLI血清濃度が400 μg/L又はそれ以上である時に，24時間内にカモスタットに8から200 mg/kgのドーズ量を投与することを含む、少なくとも400 μg/Lの血清cPLIを有する犬において、血清cPLIを400 μg/L以下に低下させる方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
慢性膵炎は、膵臓の慢性炎症性疾患であり、外分泌の損失に伴い実質的に不可逆的な損傷と、最終的には内分泌、線維化と萎縮の組織学的証拠による機能を伴っている事が特徴である。臨床的な膵臓の慢性炎症、慢性膵炎は、食欲の減退、無気力と関連しているか、または、吐き気を催す事もあるが、しばしば無症状のままであり、診断まで行なう事は少なく、診療所の診断では、発病率を過小評価される事がよくある。承認された医薬品が完全に不足しているため、犬の慢性膵炎の治療は、緩和ケアと支持治療に限定されたものになっている。病理組織学的評価に基づく最近の発表によると、検死のために提出された非選択患畜の34%〜64％に慢性膵炎があるという証拠が報告された。犬の慢性膵炎の病原と病因は完全に理解されているが、可能性のある危険因子として遺伝的、遺伝性要因、高中性脂肪血症も含まれる。しかしながら、多くの場合、危険因子は特定できず、病因は不明のままである。
【０００２】
カモスタットメシル酸塩（N、N-ジメチルカルバモイルメチル-4-(4-グアニジノ-ベンゾイルオキシ)フェニル酢酸、メタンスルホン酸(図Ｉ)：
【化１】
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は、顕著な抗トリプシン及び抗プラスミン活性を有する合成セリンプロテアーゼ阻害剤である。それは、非アクティブな4-グアニジノ-ベンゾイルオキシ (GBA) とそのアクティブ抗蛋白代謝4-(4-グアニジノ-ベンゾイルオキシ)フェニル酢酸 (GBPA、フォイ 251) を急速に加水分解する。カモスタットメシル酸塩が膵炎に影響を及ぼすメカニズムは、まだ完全には理解されていないが、ラットモデルの研究においては、カモスタットメシル酸塩がプロ炎症性サイトカインの生成を抑制し、顕著に炎症の徴候を減少させ、慢性膵炎と関連する線維症を抑制する事を示している。ある研究では、全身または局部的な明らかな副作用を起す事なく、カモスタットメシル酸塩がTGF-β1の濃度を減少させ、肝星細胞の活性化と肝線維症も同様に減衰させる事が、観察された。ラットにおける他の研究では、カモスタットメシル酸塩の投与が、膵臓の実質的な肥大及び膵臓湿重量、同様に総体重の増加につながることを示唆した。しかしながら、研究結果に矛盾が見られる。別の症例では、カモスタットメシル酸塩を様々な用量で与えた場合の犬の反応では、体重に差が見られなかったという別の研究が例示されている。
【０００３】
カモスタットメシル酸塩は、1985年以後日本において人間に使用するために承認されている。その『慢性膵炎における急性症状の減少』に示されており、また膵炎の患畜対する、一連の臨床試験に基づくと、痛みの抑制、具体的には腹部の痛みを抑制するという結果が測定した事を示めされている。
【０００４】
肝臓と腎臓は、カモスタットメシル酸塩及びその代謝物ための重要な排泄器官であり、そして血清生化学プロファイルが、犬に対するカモスタットメシル酸塩の毒性を評価するための有用なツールとして役立つかもしれないことを示唆している。細胞レベルで、血液中に膵臓リパーゼが後続漏れし、それに関連した慢性膵炎と腺房細胞損傷に関しては、犬の血清膵臓リパーゼ濃度 (cPL) の測定によって評価できる。この犬のバイオマーカーは、特別な、メインウェストブルック、アイデックスラボラトリーズのSpec cPL（登録商標）テストによって測定する事が出来る。血清中の生理的状況下にいる犬の脾臓特異的リパーゼの濃度が約200μg/L以下の濃度か、約400μg/Lかそれ以上の濃度の場合は、腺房の透過性と漏れの増加につながっており、膵炎と診断できる事を示唆している。
【０００５】
炎症に関する多くの発表と犬の特定の試験において、抗炎症作用は、カモスタットメシル酸塩に起因していると示されている。C反応性蛋白質、S100A12、及びトリプシン様免疫活性(cTLI) 測定は、非特異的炎症と好中球性炎症それぞれの患畜を評価するために利用できる。C-反応性蛋白質は、肝臓で合成された急性相蛋白質であり、全身性炎症の患畜は、影響を受けている器官にかかわらず、濃度が基準値以上に増加する。C-反応性蛋白、犬のS100A12とは対照的に、肝臓の急性相蛋白質ではないが、好中球から分泌されることにより、好中球性炎症を反映している。
【０００６】
形質転換成長因子β1 (TGF-β1)は多機能性サイトカインであり、実質細胞組織の線維形成において重要な役割を果たしている。TGF-β1は、人間の慢性膵炎に伴って後発する線維形成の前兆をアップレギュレートされ、カモスタットメシル酸塩によって抑制されることが示されている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】”FOIPAN”, Standard Commodity Classification No. 873999 of Japan, 2009, internal pp.1-4
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
犬の膵炎の有病率とその治療法の欠如という観点からの新しい治療法の強い必要性の存在
【０００９】
犬の膵炎治療に関する新たな治療方法を開示する。方法は、犬に約400μg/Lかそれ以上の膵臓特異的リパーゼの血清濃度が見られる時、約24時間（毎日）、約8〜200mg/kg のカモスタットメシル酸塩を投与し、犬の膵臓特異的リパーゼの血清中濃度測定を行い、犬に膵炎があり、慢性膵炎治療が必要か確認する。好ましい用量は、24時間で約24〜200mg/kgの範囲である。投薬は、24時間の投与量範囲以内ならば、数回に分けて投与する事ができる。例えば、2回、3回か4回と必要に応じて投与できる。これにより、8mg/kg〜66.7mg/kgは8時間おきに24mg/kg/日〜約200mg/kgの合計の間で理想の量を投与をする事が出来る。薬物は経口カプセル製剤、又は錠剤によって、便利に投与することが出来る。治療は、生活の質を向上させる事が出来る限り、一週間（7日）、更には一ヶ月（約31日）、数ヶ月でも受けられる。
【００１０】
膵炎治療の方法は、患畜の膵炎を識別し治療する事を含み、約8〜1300mg/kgか約24mg/kg〜200mg/kgのカモスタットメシル酸塩か4‐（4‐グアニジノベンゾイルオキシ）フェニル酢酸の毎日の投与も開示している。毎日達成しなければならない投薬量は、一回の投与でも、2、3、4回と分けても、更にもっと分けて投与してもかまわない。治療は、一週間（7日）、一ヶ月（約31日）でも数ヶ月でも受けられ、とにかく治療が生活の質を向上させる事が出来る限り行う事が出来る。薬は経口カプセルで服用することが出来る。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】図1は、（Spec cPL（登録商標）の測定による)犬に特異性リパーゼが400μg/Lかそれ以上あり、最初のサンプルを胃腸実験室に提出し、 12±4日前後再評価した、臨床試験のタイムラインを示したものである。治療前条件を満たす患畜(cPL≧400μg/L)、血清トリグリセリド濃度は＜500mg/dLで、主要な併発症でない）が21〜31日間カモスタットメシル酸塩を受けたものである。これは、治療後の評価が続けられた。
【図２】図 2は、慢性膵炎の疑いのある治療前後の犬とカモスタットメシル酸塩の2つの異なる投与量の(Spec cPL（登録商標）測定による)血清cPLI濃度を示している。ウィルコクソンの符号順位検定は、治療前後の値を比較するために使用した。8 時間ごとに4 mg/kgで治療した犬のcPLI濃度は、治療前（中央値：501μg/L；範囲：344〜6052μg/Ｌ）及び治療後（中央値：453μg/L；範囲：125〜2,836μg/L；n=12；p-値：0.9697）、治療前後で有意な差は認められなかった。しかし、治療前（中央値：882μg/L；範囲：414〜2,024μg/L)及び治療後（中央値：633μg/L；範囲：193〜2,580μg/L；n=17；p-値：0.0232）と数値が出ており、8 時間ごとに8 mg/kgで治療した犬のcPLI濃度、治療前後で有意な差は認められた。最後に、治療前（中央値：690μg/L；範囲：344〜6,052μg/L)及び治療後（中央値：514μg/L；範囲：125〜2,836μg/L；n=29；p-値：0.0903）と数値が出ており、カモスタットメシル酸塩で治療した犬のcPLI濃度にも治療前後で有意な差は認められなかった。
【図３】図3は、慢性膵炎の疑いのある治療前後の犬とカモスタットメシル酸塩の2つの異なる投与量の血清cPLI濃度を示している。ウィルコクソンの符号順位検定は、治療前後の値を比較するために使用した。4mg/kg毎8時間で治療した犬のcPLI濃度は、治療前（中央値：22μg/L；範囲：20〜92μg/L)及び治療後（中央値：28μg/L；範囲：17〜55μg/L；n=11；p-値=0.8311)と数値が出ている。8mg/kg毎8時間で治療した犬のcPLI濃度は、治療前（中央値：35μg/L；範囲：15〜101μg/L)及び治療後（中央値：22μg/L；範囲：6〜81μg/L；n=17；p-値=0.1594)と数値が出ており、治療前（中央値：32μg/L；範囲：15〜101μg/L)及び治療後（中央値：25μg/L；範囲：6〜81μg/L；n=28；p-値=0.2098）と数値が出ており、カモスタットメシル酸塩で治療した犬のcPLI濃度には治療前後で有意な差は認められなかった。
【図４】図4は、慢性膵炎の疑いのある治療前後の犬とカモスタットメシル酸塩の2つの異なる投与量の犬の血清C-反応性蛋白濃度を示したもの。ウィルコクソンによるマッチドペアで記されたランクテストは、治療前後の値を比較するために使用した。4mg/kg毎8時間で治療した犬のC-反応性蛋白濃度は、治療前（中央値：0.8mg/L；範囲：0.1〜30.3mg/L)及び治療後（中央値：0.6mg/L；範囲：0.0〜9.4mg/L；n=12；p-値=0.1543)と数値が出ている。8mg/kg毎8時間で治療した犬のC-反応性蛋白濃度は、治療前（中央値：0.1mg/L；範囲：0.1〜16mg/L)及び治療後（中央値：0.1mg/L；範囲：0.1〜6.8mg/L；n=17；p-値=0.25)と数値が出ており、治療前（中央値：0.2mg/L；範囲：0.1〜30.3mg/L)及び治療後（中央値：0.1mg/L；範囲：0.0〜9.4mg/L；n=29；p-値=0.0595)と数値が出ており、カモスタットメシル酸塩で治療した犬のC-反応性蛋白濃度には治療前後で有意な差は認められなかった。
【図５】図5は、慢性膵炎の疑いのある治療前後の犬とカモスタットメシル酸塩の2つの異なる投与量の血清S100A12濃度を示している。ウィルコクソンの符号順位検定は、治療前後の値を比較するために使用した。8 時間ごとに4 mg/kgで治療した犬の血清S100A12濃度は、治療前（中央値：160μg/L；範囲：52〜1,327μg/L)及び治療後（中央値：88μg/L；範囲：43〜449μg/L；n=11；p-値=0.0010)治療前後で有意な差は認められた。8 時間ごとに8 mg/kgで治療した犬の血清S100A12濃度は、治療前（中央値：147μg/L；範囲：41〜973μg/L)及び治療後（中央値：148μg/L；範囲：58〜746μg/L；n=17；p-値=0.8176)）と数値が出ており、治療前（中央値：154μg/L；範囲：41〜1,327μg/L)及び治療後（中央値：133μg/L；範囲：43〜746μg/L；n=28；p-値=0.1438）と数値が出ており、カモスタットメシル酸塩で治療した犬の血清S100A12濃度には治療前後で有意な差は認められなかった。
【図６】図6は、慢性膵炎の疑いのある治療前後の犬とカモスタットメシル酸塩の2つの異なる投与量の血清TGF-β1濃度を示している。対t検定は、治療前後の値を比較するために使用した。8 時間ごとに4 mg/kgで治療した犬の血清TGF-β1濃度は、治療前（中央値：45ng/mL；SD：±13ng/mL)及び治療後 (中央値：43ng/mL；SD：±8ng/mL；n=12；p-値=0.3679)と数値が出ている。また、8 時間ごとに8 mg/kgで治療した犬の血清TGF-β1濃度は、治療前（中央値：47ng/mL；SD：±20ng/mL)及び治療後 (中央値：40ng/mL；SD±12ng/mL；n=17；p-値=0.1686) と数値が出ており、治療前（中央値：46ng/mL；SD：±17ng/mL)及び治療後 (中央値：41ng/mL；SD：±11ng/mL；n=29；p-値=0.0986)と数値が出ており、カモスタットメシル酸塩で治療した犬の血清TGF-β1濃度には治療前後で有意な差は認められなかった。
【図７】図7は、慢性膵炎の疑いのある治療前後の犬とカモスタットメシル酸塩の2つの異なる投与量の血清コバラミン濃度をを示している。対t検定とウィルコクソンの符号順位検定は、治療前後の値を比較するために使用した。8 時間ごとに4 mg/kgで治療した犬の血清コバラミン濃度は、治療前（中央値：868ng/mL；SD：±108ng/mL)及び治療後(中央値：695ng/L；SD±223ng/L；n=12；p-値=0.0363)と数値が出ている。8 時間ごとに8 mg/kgで治療した犬の血清コバラミン濃度は、治療前（中央値：748ng/mL；SD：±233ng/mL)及び治療後(中央値：629ng/mL；SD：±263ng/L；n=17；p-値=0.0429）と数値が出ており、最後に、治療前（中央値：843ng/L；範囲：262〜1001ng/L)及び治療後（中央値：681ng/L；範囲：220〜1001ng/L；n=29；p-値=0.0007）と数値が出ており、カモスタットメシル酸塩で治療した犬の血清コバラミン濃度には治療前後で有意な差は認められた。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
以下の略語は、この説明の目的のために、以下の定義を行なっておく：
cPL                犬の膵臓特異的リパーゼ
CM                 カモスタットメシル酸塩
cPLI               犬膵リパーゼ免疫反応性
cTLI               犬膵トリプシン様免疫反応性
ECG                心電図
RI                 基準範囲
Spec cPL           犬の膵臓特異的リパーゼ
【００１３】
膵炎の治療方法を開示する。この方法は、最初に膵炎を有する患畜を確定する事必要がある。膵炎の診断のために信頼出来る任意の方法を使用出来る。例えば、膵炎による断続性の下痢、嘔吐の増加、体重減少を含む、減退した食欲不振、無気力、行動の変化、腹部の不快感、糖尿病、膵外分泌不全を伴うかもしれない臨床症状。これら等は、膵炎臨床診断出来るいくつかの例である。膵炎の診断のために使える他の診断法としては、血清cTLI濃度の測定、血清リパーゼ活性、および腹部超音波等が知られている。犬の膵炎の診断のための好ましい方法は、血清cPLI濃度（膵特異的リパーゼ濃度）である。犬におけるcPLI400μg/Lを超える血清濃度は、膵炎を疑える強力な予測因子であり、カモスタットメシル酸塩による治療のために患畜を識別するための好ましい方法である。
【００１４】
一旦膵炎である事が特定できた患畜には、カモスタットメシル酸塩を患畜の治療に有効な用量を投与して治療をする事が出来る。治療有効量は、生活の質の改善と、臨床症状の減少を診ながら、機能的に決定出来る。毎日8mg/kg〜1300mg/kgの投与量の間で、患畜に投与することができます。より好ましいのは、毎日の投与量を約100、235、550、1300mg/kgの量を熟慮する。特に犬においては、毎日の投与量を、約24mg/kg〜約200mg/kgの範囲とする事が好ましい。例えば、約30、40、50、60、70、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180、または190mgの薬を毎日患畜の体重のkｇに基づいて投与する事が出来る。約という単語が一緒に使われている時は、１日の用量 5 mg/kgを意味する。
[0020]   また、カモスタットメシル酸塩の加水分解活性部分、4-（4-グアニジノ-ベンゾイルオキシ）フェニル酢酸、又は、よく知られている、GBPA、FOY-251は、2分子の質量比によって決定される等価量で投与することが出来る。
【００１５】
投与には、服用が好ましい場合は、便利さの範囲内で、適切な大きさのカプセルや錠剤で投与する事が出来る。カプセルのサイズは、投与するカモスタットメシル酸塩の量によって異なる。例えば、#2、#4、及び#12サイズのカプセルを使用出来る。投与は1日の用量又は複数の用量で行なえる。薬剤は2つ、3つ、4つまたはそれ以上の用量で投与する事が出来る。
【００１６】
薬剤は錠剤で投与出来る。適した錠剤は、カモスタットメシル酸塩を100mgと共に、ヒドロキシプロピルセルロース、カルメロースカルシウム、ステアリン酸マグネシウム、ポリオキシエチレン（105）、ポリオキシプロピレングリコール（5）と乳糖水和物等、一つ以上の賦形剤を含めることが出来る。最も好ましい錠剤は、上記の賦形剤全てが含まれているものである。カプセルの状態で一つ以上の錠剤が投与された場合、望ましい用量の投与する事が出来る。カモスタットメシル酸塩の便利な量を、錠剤又ははカプセルに含めることが出来る。例えば20、40、60、80±10mgs；100、150、200、250、300、350、400、450、500、550、600、650±25mgs； 700、800、900、1000、1100±50mgs；1200、1400、1600、又は1800±100mgs等、所望どおりにである。
【００１７】
便利な投与処方は、体重の範囲をも考えつつ使用する事が出来る。従って、18kgまでの犬には、50mg/kg/日の目標投与量、1日2回300mgを投与する事が出来る。19から33kgsまでの犬には、600mgを1日2回投与できる。34から45kgsの犬には900mgを1日2回投与できる。46kgs以上の犬には1200mgsを1日2回 を投与する事が出来る。
【００１８】
あるいは、犬の体重が10から40ポンドの間の場合は一日あたり、カモスタットメシル酸塩の錠剤を3個（100mg）、40から73ポンドの体重の犬は、一日あたり6個（100mg）の錠剤を与えられ、74から100ポンドの犬は、一日あたりの錠剤を9個（100mg）与える事ができ、100ポンド以上の犬には一日あたりの錠剤を、1日あたり12個（100mg）の錠剤を与えることができる。
【００１９】
別の投与処方を次の表に記載する。
【表１Ａ】
2017516744.tif 000004
【表１Ｂ】
2017516744.tif 000005
【表１Ｃ】
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【００２０】
治療は、出来る限り患畜の生活の質を改善する事が出来る。そしてここで言う「生活の質の改善」とは、臨床症状が減少し、そして、もしくは、血清が400μg/L以下のcPLI濃度の事を意味する。治療は、一般に、少なくとも7日間持続させるが、一ヶ月か数ヶ月続ける事も考えられる。例えば、治療は、180日かそれ以上続ける事が出来る。
【００２１】
開示した治療方法は、明らかに膵炎で虚弱になっている犬に特に役立つと思われる。従って、犬の膵炎の治療方法を具体的に示した。この方法では、上記したように、犬の膵臓特異的リパーゼの血清濃度を測定する事も含み、その後犬が約400μg/Lかそれ以上の膵臓特異的リパーゼ血清濃度を有している場合、カモスタットメシル酸塩を24時間で8〜200mg/kg投与出来る。
【００２２】
犬の治療では、毎日カモスタットメシル酸塩を約24〜200mg/kgの用量を、獣医の判断で、1日1回から3回、少なくとも７日間投与する事が好ましい。通常、複数回の投与を行なう患畜には、１日に時間を置きながら投与するのが好ましい。従って、１日に３回投与する場合は、約８時間ごとに与える。この例での８時間の意味には、８時間の前後30分以内を意味する。治療期間は、7日間から31日間（1ヶ月）若しくは、治療によって犬の生活の質を改善できる限り行なえる。
【実施例】
【００２３】
実施例１
カモスタットメシル酸塩塩の二つの異なる投与量(8 時間ごとに4 mg/kgの投与量と8 時間ごとに8 mg/kgの投与量)は、膵炎疑いがある犬の29頭に投与した後、その腺房細胞の損傷、膵臓機能、炎症および線維症の全身マーカーを使って治療効果を評価されることを開示されている。カモスタットメシル酸塩を使って治療効果について、全体的な健康状態、臨床徴候、血清生化学プロファイル、全血球計数、犬の飼い主のアンケートなどの評価指標を通じて評価されたことを考えている。
【００２４】
サンプル集団
犬はテキサス州の消化器系研究室Ａ＆Ｍが最近提出されたスクリーニング意見書により識別される。そのスクリーニング意見書の中には、犬の膵炎を診断するために、イムノアッセイを使って、犬血清で犬膵臓特異的リパーゼを測定され（犬膵臓特異的リパーゼ濃度  ≧400μg/L）、そして膵炎を示すことを提出されていた。その診断試験は、spec CPL（登録商標）テスト(ＩＤＥＸＸ、研究所)として知られている。潜在的な研究参加者の数は、直接に獣医の調査により受験犬を識別された。その調査は、SNAP cPL（登録商標）犬の膵炎迅速試験(ＩＤＥＸＸ、研究所、ウェストブルック、ＭＥ、ＵＳＡ)および付随する臨床徴候を含められていた。委託獣医が、それぞれの適用性を確認されたケースは、血清犬膵臓特異的リパーゼ濃度、血清生化学プロファイルと全血球計数を試験され、あるいは12 ± 4日、初期サンプルが集まられた消化器系研究室へ提出された後、同じ指標を再試験された。仮説により、犬膵臓特異的リパーゼが上昇し続けられることは、慢性膵炎を示すことになった。登録されたケースは、犬膵臓特異的リパーゼ濃度が400 μg/L以上、血清トリグリセリド濃度が 500 mg/dL以下、そして肝臓、腎臓、または他の臓器疾患の兆候がないとわかられていた。診療前検査されたデータと治療開始後、平均3〜5日を過したデータは図 1のように記録された（図 1参照）。犬の血液を取り、研究を登録させるまえに、犬の飼い主の同意を取得するのは必要なことを明らかにしていた。
【００２５】
治療法と犬の飼い主の指示
カモスタットメシル酸塩の投与量は、犬における亜急性毒性試験で安全用量によって設定されていた。登録された犬の12頭が、8 時間ごとに4 mg/kgの投与量のカモスタットカプセル、すなわち、24時間ごとに12mg/kgの総投与量のカモスタットカプセルを投与された。ほかの17頭の犬が、8 時間ごとに8 mg/kg の投与量のカモスタットメシル酸塩カプセル、すなわち、24時間ごとに24mg/kgの総投与量のカモスタットカプセルを与えられた。それぞれのケースは、21日から31日にかけて投薬されていた。この研究に使用されたカモスタットメシル酸塩カプセルが、サイズ#2、#3と#4に至る（犬の体重により）カプスゲル会社（ＮＪ，ＵＳＡ）のハードゼラチンカプセルとを配合された。
【００２６】
試験に登録された犬は自宅で治療されて、そして彼らの全体的な健康状態が飼い主と委託獣医をともに監視されていた。
【００２７】
試験に登録された犬の飼い主は、指示より治療中の犬の食事を変更することを控えて、犬の全体的な健康状態および生活の質を報告することを要求されている。
【００２８】
サンプル解析
治療前と治療終了には、犬の血液サンプルを採取された。全血球計数のテストは（赤血球計数、ヘマトクリット値、平均赤血球容積、平均赤血球ヘモグロビン、平均赤血球ヘモグロビン濃度、相対および絶対白血球計数、赤血球計数、ヘモグロビン値、血小板の見積もり、赤血球形態、白血球形態および血液寄生虫を含まれている）テキサスでの獣医診断研究所（ＴＶＭＤＬ）に行われた。血清化学物質プロフィールは（グルコース、血中尿素窒素、クレアチニン、カルシウム、リン、アルブミン、総タンパク量、総ビリルビン、アルカリホスファターゼ、アラニンアミノトランスフェラーゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、γ-グルタミルトランスフェラーゼ、コレステロール、トリグリセリド類、グロブリン、ナトリウム、カリウムおよび塩素を含まれている）SIRRUSアナライザーで分析された（スタンバイオ、Boerne、 TX、 USA）。cPLの血清濃度(RI: 0 -200 μg/L；Spec cPL（登録商標）テスト、ＩＤＥＸＸ研究所、ウェストブルック、ＭＥ、ＵＳＡ)、cTLI (RI: 5.7 - 45.2 μg/L； 犬の TLI 二重抗体（登録商標）, シーメンスヘルスケア・ダイアグ株式会社、ロサンゼルス、CA、USA )、コバラミン(RI: 251 - 908 ng/L)、葉酸(RI: 7.7 - 24.4 μg/L； Immulite 2000（登録商標）、シーメンスヘルスケア・ダイアグ株式会社、ディアフィールド、IL、USA)、犬の特定のC-反応性蛋白(RI: 0 - 7.6 mg/L； TRIDELTA開発株式会社、メイヌース、社キルデア株式会、アイルランド)、S100A12 (RI: 56 -331 pg/L；消化器系研究室内ラジオイムノアッセイ)、 TGF-β1 (RI: 38 - 72 ng/mL； Quantikine（登録商標） ELISA, 研究開発システム、ミネアポリス、NE、USA)などのテストは、テキサス州A&M 大学の消化器系研究室に行われた。
【００２９】
さらに、Spec cPL（登録商標）テストの検出限界を超えたサンプルが、希釈されて再分析された。
【００３０】
すべての血清サンプルが冷蔵され、氷パックの中に一晩出荷され、そして、cPLI 、C-反応性蛋白、S100A12 およびTGF-β1テストを終了する前に、ずっと-20℃で保存されていた。
【００３１】
治療前と治療後の診断テスト結果はプリズム6（グラフパッドソフトウェア、ラ・ホーヤ、CA、USA）を使って統計し解析されていた。ガウス分布に対するすべてのデータセットは、ダゴスティーノピアソンオムニバステストで評価された。グループは、通常分散データセットのt検定を用いて比較され、またはガウス分布を仮定されることができないなら、ペアの順位和検定を使用された。平均値および標準偏差は、ガウス分布のデータセットについて報告されていた。中央値と最小/最大値は、ガウス分布を仮定されることができなかったデータ・セットのために報告されていた。有意性閾値は、P=0.05に設定された。
【００３２】
結果
特徴の説明
8 時間ごとに4 mg/kgの投与量のカモスタットメシル酸塩治療グループは、無傷のメスの1頭、卵巣摘出されたメスの7頭、去勢されたオスの4頭で構成され、グループの平均年齢[範囲]が10.5 [2−14] 歳であった。8 時間ごとに8 mg/kgの投与量のカモスタットメシル酸塩治療グループは、無傷のメスの4頭、卵巣摘出されたメスの8頭、去勢されたオスの5頭で構成され、グループの平均年齢[範囲]が10.5 [2−14] 歳であった。治療グループの構成からみれば、70％の犬（20/29）が10歳あるいは10歳以上で、52％の犬 （15/29）が卵巣摘出されたメスであったことが明らかにしていた。また、試験に登録された犬の品種は、ダックスフンド(n=6) 、雑種の犬(n=6)、 ミニチュアシュナウザー(n=3) 、キャバリア・キングチャールズ・スパニエル(n=2)などの最も顕著な品種であったことになっていた。
【００３３】
薬物副作用 
8 時間ごとに4 mg/kgの試験を受けた2頭の犬の腸内のガスが増加したと報告された。
【００３４】
8 時間ごとに4 mg/kgの試験を受けた一頭の犬の前足の一つが掻痒するとい特徴が示し、もう一頭の犬は腸内のガスが増加したと報告された。どちらのグループにも、ほかの副作用があるという臨床徴候がない。
【００３５】
ドロップアウト
最初に登録された34中の5(15%)の犬が治療後の追跡に利用できない。その3はこの試験と関係ない既存状況（例え、進行腫瘍）があったため、安楽死させた。これらの犬は治療前の診断中にその兆候が発見されなく、試験に参加された後、これらの状況が診断された。その１の飼い主は個人の原因で、試験を中止することとなった。その1の飼い主は薬物を投与された2週間後参加していた獣医と予約し、統計分析の役に立てない。
【００３６】
全血球計数および血清生化学プロファイル
治療前及び治療後の全血球計数と血清生化学プロファイルとの間に統計学的な有意な違いがない。しかしながら、1頭の犬の血清Y-GTは35倍の増加を示した。もう一頭の犬の血清アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼは6倍の増加を示した。これらの発見は正規化するかどうかとは言え、この調査に利用できる追跡データはない。
【００３７】
血清膵臓特定リパーゼの濃度（図２）
8 時間ごとに4 mg/kgグループの、治療前(中央値: 501μg/L; 範囲: 344 to 6,052μg/L)と治療後(中央値: 453μg/L; 範囲: 125 to 2,836μg/L)との血cPL濃度値は大きく変わらなかったが、8 時間ごとに8 mg/kgグループの、治療前(中央値: 882μg/L; 範囲: 414 to 2,024μg/L) と治療後 (中央値: 633; 範囲: 193 to 2,580μg/L)との統計学的に有意な変わりが観察された。また、血清cPL濃度は、治療後減少する傾向があったが、試験を受けた全ての犬(n=29; p=0.0562)の、治療前(中央値: 690μg/L; 範囲: 344 to 6,052μg/L)と治療後(中央値: 514μg/L; 範囲: 125 to 2,836μg/L)と統計学的な有意な違いがない。Phisの最新の統計は4 mg/kgと8 mg/kgとのデータポイントを含まれている。
【００３８】
血清 cTLI 濃度(図３)
8 時間ごとに4 mg/kg (n=T 1; p=0.8311)グループの、治療前(中央値: 22μg/L; 範囲: 20 to 92μg/L) と治療後(中央値: 28μg/L; 範囲: 17 to 55μg/L) とのcTLI 濃度値が大きく変わらなかった。8 時間ごとに8 mg/kg (n=17; p=0.1594)グループの、治療前(中央値: 35μg/L; 範囲: 15 to 101μg/L) と治療後(中央値: 24μg/L; 範囲: 15 to 101μg/L)と、試験を受けた全ての犬(n=28; p=0.2098)を結合され、治療前(中央値: 32μg/L; 範囲: 15 to 101μg/L)と治療後(中央値: 25μg/L; 範囲: 6 to 81μg/L)とのcTLI 濃度値も大きく変わらないと観察された。
【００３９】
血清C-反応性蛋白濃度(図４)
8 時間ごとに8 mg/kgグループ(n=12; p=0.1543)の、治療前(中央値: 0.8 mg/L; 範囲: 0.1 to 30.3 mg/L)と治療後(中央値: 0.6 mg/L; 範囲: 0.0 to 9.4 mg/L)と、8 時間ごとに8 mg/kgグループ (n=17; p=0.2500)の、治療前(中央値: 0.1 mg/L; 範囲: 0.1 to 16.0 mg/L) と治療後 (中央値: 0.1 mg/L; 範囲: 0.1 to 6.8 mg/L)とのC-反応性蛋白濃度値は大きく変わらなかった。また、治療後血清C-反応性蛋白濃度が減少する傾向があったが、試験を受けた全ての犬(n=29; p 0.0595)を結合し、治療前 (中央値: 0.2 mg/L; 範囲: 0.1 to 30.3 mg/L)と治療後(中央値: 0.1 mg/L; 範囲: 0.1 to 9.4 mg/L)との統計学的な有意な違いがなかった。
【００４０】
血清S100A12 濃度(図５)
8 時間ごとに4 mg/kgグループ (n=l 1; p=0.0010)の、治療前(中央値: 160μg/L;範囲: 52 to 1327μg/L) と治療後 (中央値: 88μg/L; 範囲: 43 to 449μg/L)との血清S100A12濃度値はかなり減少した。8 時間ごとに8 mg/kg (n=17; p=0.8176)グループの、治療前(中央値: 147μg/L; 範囲: 41 to 973 μg/L)と治療後(中央値: 148 ug/L;範囲: 58 to 746ug/L)と、試験を受けた全ての犬(n=28; p=0.1438)を結合し、治療前(中央値: 154μg/L; 範囲: 41 to 1327μg/L)と治療後(中央値: 133μg/L; 範囲: 43 to 746μg/L)との血清S100A12濃度値が大きく変わらなかった。
【００４１】
血清TGF-pi濃度(図６)
8 時間ごとに4 mg/kgグループ (n=12; p=0.3679)の、治療前(中央値: 45 ng/mL; SD: ± 13ng/mL) と治療後(中央値: 43 ng/mL, SD: ± 8 ng/mL)及び8 時間ごとに8 mg/kgグループ(n=17; p=0.1686)の、治療前(中央値: 47 ng/mL; SD: ± 20 ng/mL)と治療後(中央値: 40 ng/mL; SD: ± 12 ng/mL)の血清TGF-β1濃度値が大きく変わらなかった。また、血清TGF-β1濃度値は減少する傾向があったが、試験を受けた全ての犬(n=29; p=0.0986)を結合し、治療前(中央値: 46 ng/mL; SD: ± 17 ng/mL)と治療後(中央値: 41 ng/mL; SD: ±11 ng/mL)との統計学的な有意な違いがなかった。
【００４２】
血清コバラミン濃度(図７)
8 時間ごとに4 mg/kgグループ(n=12; p=0.0363)にも、治療前(中央値: 868 ng/L; SD: ± 108ng/L)と治療後(中央値: 695 ng/L; SD: ± 223 ng/L)、8 時間ごとに8 mg/kgグループ(n=17; p=0.0429)にも、治療後(中央値: 748 ng/L; SD: ± 233 ng/L)と治療後(中央値: 629 ng/L; SD: ± 263 ng/L)、試験を受けた全ての犬(n=29; p=0.0007)をも結合し、治療前(中央値:843 ng/L; 範囲:262 to 1001 ng/L)と治療後(中央値: 681 ng/L;範囲: 220 to 1001 ng/L)の血清コバラミン濃度値はかなり減少した。
【００４３】
血清葉酸
各グループ（データ上に示されていない）の試験に対する治療を観察し、治療前と治療後との血清葉酸の濃度値には変わりはない。
【００４４】
論議
試験の初め、8 時間ごとに4 mg/kgにカモスタットメシル酸塩錠の投与量は、慎重に考慮し、以前公開された亜急性毒性試験により安全だと判断された服用量を選ばれた。それに、カモスタットメシル酸塩錠は前に行った治療グループに何の副作用を引き出さないことを確認された後のみ、8 時間ごとに8 mg/kgに服用量を増加する
【００４５】
驚くことは、カモスタットメシル酸塩錠の治療中、どちらの治療グループにも血清コバラミン濃度はかなり減少した。しかしながら、もっと驚くことは、29の試験を受けた患者の13はこの試験に入る前にコバラミンを補充されたことがある。これはこれらの患者は試験に参加する前、小腸に疾病を同時に存在していたためと診断されたまたは疑われた。血清コバラミン濃度値はかなり減少した原因は連続的にコバラミン補充が治療プロトコルの一部ではないことにあるかもしれない。しかしながら、カモスタットメシル酸塩錠はコバラミン恒常性と血清コバラミン濃度値に対する影響に関する更なる研究が必要である。
【００４６】
4 mg/kg治療グループのただ1人と8 mg/kg治療グループの6人との治療前の血清cTLI濃度が増加した。これは膵炎があった30 〜40%の犬の血清cTLI濃度が増加したことと一致しているとともに、犬の膵炎の診断にとって、血清cTLI濃度が劣った試験である。また、治療前血清cTLI濃度が上昇した患者の数は少なすぎるため、カモスタットメシル酸塩錠はcTLI濃度に影響があるかということは膵管機能の指標とする判断ができない。
【００４７】
参加した犬の飼い主の方々は彼らの犬の生活の質があげたといった声が聞こえた。
【００４８】
推測
臨床徴候による擬似慢性膵炎があり、膵炎診断のカットオフ値以上、約400μg/Lまたはそれ以上のイヌ科の膵臓特定リパーゼの増加した血清濃度の反復測定された29の犬に、4 mgまたは8mg/kgのカモスタットメシル酸塩錠を26 ± 5日以上q 8 hrs (12 or 24 mg/kg q d)与えた。
【００４９】
2倍のカモスタットメシル酸塩錠を投与した犬には副作用が小さいため、一般に犬にとってはこの薬剤は安全だと思われる。また、関連した獣医や犬の飼い主からの報告により、カモスタットメシル酸塩錠を一服24 mg/kg q dの経口投与された犬の生活の質は主観的に上げるそうである。また、24 mg/kgの経口投与の犬は、腺房細胞の損傷の減衰を示しているイヌ科の膵臓特定リパーゼの血清濃度の統計学的な有意な減少を示した。しかしながら、カモスタットメシル酸塩錠は個別の患者に対し、C-反応性蛋白、S100A12またはTGF-β1の血清濃度が明らかに減少したと観察されたにもかかわらず、大した変わりはもたらさなかった。
【００５０】
第2例
犬を対象とし、経口投与を利用し、カモスタットメシル酸塩錠の一回投与及び複数投与の試験
【００５１】
犬向けのカプセルの管理
現在の例は犬に対し、カモスタットメシル酸塩錠の毒性及び最大投薬量を決定します。カモスタットメシル酸塩錠は犬に一回量のカプスルに経口投与され、少なくとも3日間断薬し、約5回を繰り返した。また、犬にカモスタットメシル酸塩錠を14日間、3回/日カプセルで投与し、その潜在毒性が判断できた。
【００５２】
【表２】
2017516744.tif 000007
【００５３】
試験計画は下記の通りとなる：
下記のパラメーター及びエンドポイントは一回投与試験を評した：臨床徴候、体重、体重変化、食物消化、心電計、病理学的パラメーター（血液学、臨床化学、及び尿検査）及び剖検による研究結果である。
【００５４】
【表３】
2017516744.tif 000008
【００５５】
下記のパラメーター及びエンドポイントは複数複数投与試験を評した：臨床徴候、体重、体重変更、食物消耗、心電計、病理学的パラメーター（血液学、臨床化学、及び尿検査）及び剖検による研究結果である。
【００５６】
一回投与試験では:動物は安楽死が実施されるまでに生きていられた。もっとも注目すべき臨床観察は流涎及び200 と250 mg/kgの粘液物質を含む軟便であった。以下の各投与レベルは体重、食物消耗、血液パラメータ、または尿検査パラメータに注目すべき変化はなかった。ECGリズムまたは測定に毒物学的な影響はなかった。臨床化学パラメータの潜在試験物品関連の変化は、以下の250 mg/kgを投与した雄のクレアチニン、総ビリルビン、及び尿素窒素の増加と、200と250 mg/kgを投与した雌ののクレアチンキナーゼの増加に限られた。剖検による研究結果はなかった。これらの研究結果に基づき、200mg/kgの試験は複数投与に実施した。
【００５７】
複数投与試験では:動物は安楽死が実施されるまでに生きていられた。雄は臨床観察により、痩せた外観を持ち、一回吐き気をした。雌臨は床観察により、目から清い分泌物を流出し、一回吐き気及び軟便をした。雄(-9.2%)も雌 (-2.7%)も体重減少という臨床観察があった。食物消耗、血液学的パラメータまたは尿検査パラメータには著しい変化がなかった。ECGリズムまたは測定に毒物学的な影響はなかった。臨床化学パラメータの潜在試験物品関連の変化は、雄も雌もクレアチニンとY-GTの増加に限られた。剖検による研究結果はなかった。
【００５８】
カモスタットメシル酸塩錠は14日間、日に3回、200 mg/kg/日の経口投与を通じ、体重の減少、クレアチニンとY-GTの潜在試験物品関連の増加をもたらした。これらの研究結果に基づき、200 mg/kg/日を高用量レベルにも試験することとなる。
【００５９】
材料及び方法
試験物品
識別:  カモスタットメシル酸塩錠
物理的特徴:  白い粉末
純度:  100％（計算のため、純度の要領計算は正しくない）
保存条件:  5℃を維持するとセットされた冷蔵庫に保存
サプライヤー:  Stason医薬品
【００６０】
コントロール物品
識別:  空カプセル  サイズ＃12
物理的特徴:  トランスペアレント・カプセル
保存条件:  常温としているルームに保存
【００６１】
予備サンプル
試験及びコントロール物品のバッチのため、予備サンプル(1 g/l空カプセル)を集められ、適切なストレージに保存された。
【００６２】
用量製剤化及び分析
試験物品の準備
各動物の適量な試験物品、カモスタットメシル酸塩錠は測られ、ゼラチンカプセル、または最新の体重に基づいたカプセル(均等に分割された)に入れられた。
投薬カプセルは、一回投与の場合、投与の日に準備し、複数投与の場合、週2回準備する必要がある。それに、毎日の投薬のため、違うラベルされたピルビンに入れられ、プラスチックバッグに配置され、投与するまで、5°Cに維持するとセットされた冷蔵庫に保存され、毎日分配される。
投薬するそれぞれの日に、カプセルが配置され冷蔵保存されたバッグは冷蔵庫から取り出し、開封及び投薬される前、室温下で少なくとも30分放置されなければならない。
【００６３】
試験物品の準備及び調剤の詳細は既に試験記録に記載されていた。
【００６４】
試験システム
ニューヨークノースローズのマーシャル・バイオリソーシスから雌ビーグルと雄ビーグルはそれぞれ３頭受け取った。受け取った際にビーグルに対して診断を行い、体重を量った結果、一回投与の動物は６ヶ月になり、7.5kgと8.3kgであり、一方、複数投与の動物は7ヶ月になり、7.4kgと7.6kgである。
【００６５】
監督機関によると、ビーグルが本試験対象として選択された理由は、ビーグルは非齧歯動物であり、前臨床有毒試験に最適であることになる。試験対象となる動物の数は、試験効果を適切に述べるには必要最小限の数に控えた。
【００６６】
試験を行う前の10日間に、動物は設置されたルームに移動し、環境に順応させる。また、ランダム的にグループに分け、試験を行う。健康状況がよくないまたは体重限界に近づいた動物はグループにアサインされない。
【００６７】
試験期間中、動物は個別にステンレススティールのかごに収容され、かごに自動的な注水装置が設置されている。USDA のAnimal Welfare Act (9 CFR, パート 1、 2と 3)に準拠して飼育され、米国学術研究会議の「実験動物の管理と使用に関する指針」に掲載された。
【００６８】
動物のルーム環境は、温度が64°F 〜71°F (18°C 〜22°C) 、湿度が46％〜62％に維持される。特定の場合以外に、明暗周期は12時間明期12時間暗期にする。また、1時間に10回以上の空気交換（空気再循環がない）にする。
【００６９】
試験期間中、PMI Nutrition International Certified Canine Chow No. 5007 （25％のたんぱく質）を1日の配給量にする。また、特定の場合以外に一頭のイヌに毎日2時間、300gの配給量を提供する。餌はイヌのかごに入れられ、2時間〜4時間後に取り上げられる。試験中に毎回の餌入れの用量と終了時間は記録される。サプライヤーは栄養と環境汚染の方面により、餌を分析することで、試験結果に汚染などによる影響を回避することが可能となる。
【００７０】
特定の場合以外に、逆浸透処理と紫外線照射を受けた上水道の水は自動的な注水装置より動物に提供される。周期的に水に対して分析を行う。試験結果に水汚染による影響を回避することが可能となる。
【００７１】
最初から動物にヘラクレスボーンという富化器を提供する。動物のオプラント行動を励ますために、週に3回以上動物に提供する。
【００７２】
週に2回以上、動物はルームの特定場所に移動され、雄雌は異なるグループで個別に運動させる。試験期間中に周期的な診察は必要ではないが、獣医の診察が随時に利用するようが可能となる。
【００７３】
試験計画
【表４】
2017516744.tif 000009
【００７４】
一回投与の試験では、径口投与の薬剤は適切な動物に投与され、少なくとも3日間を周期にする。その為、薬剤投与時間は1日目、5日目、9日目、15日目と19日目になる。薬剤の用量は動物の体重により異なる。初めて薬剤を投与する日は試験の1日目にする。
【００７５】
複数投与の試験では、1日目から14日目までの間、経口投与の薬剤は日に3回程度で適切な動物に投与され、8時間(±30分間)ごとに管理される。薬剤の用量は動物の体重により異なる。初めて薬剤を投与する日は試験の1日目にする。
【００７６】
経口投与は人間や動物に対して最適な方法となるため、試験方法として利用された。
【００７７】
一回投与試験では、最初の投与量はある30日間の試験結果により決められた。その試験は、FOY-305 （カモスタットメシルと相当）が経口投与の形で毎日10、30、100と300 mg/kgのレベルに分けられている。毎日300 mg/kgの投与量の場合、嘔吐現象が発見され、食物摂取量が大幅に減少し、死亡に至ることがある。激しい胃腸障害と異食も観察された。毎日10、 30と100 mg/kgの場合、重大な毒性が発見されていない。
【００７８】
投与量は前回の投与レベルの結果により修正される。複数投与の場合、投与レベルは一回投与試験の結果により決められる。
【００７９】
試験手順、観察、測定-一回投与の場合
【００８０】
試験期間中、日に2回（朝と昼）に動物の健康/死亡と瀕死の状況は観察される。
【００８１】
第一週に毎日、薬剤投与後、1−3時間が経ったら、動物はかごから移動され、詳細な臨床観察が行われる。1日目、5日目、9日目、15日目、19日目と22日目に動物に対して体重を量り、それ以外ランダム的に量ることもある。安楽死の場合を除き、試験期間中に毎日動物の食物摂取量が観察される。誘導I、If、111、aVR、aVLとaVpと50 mm/secondの記録紙速度を利用し、すべての動物の心電図を獲得する。心電図の測定は1日目、5日目、9日目、15日目と19日目に行い、治療前が一回、治療後の3時間程度後にする。誘導IIの場合のみ、認定の専門心臓獣医より評価する。
【００８２】
血液は頸静脈の静脈穿刺により収集され、夜通しの小便はかごの排水装置より収集される。サンプルが収集された後、病理実験室に転送され、検査される。サンプル収集前の日に、動物は絶食するが、水を飲むことが許される。テーブル5によりサンプルを収集する。
【００８３】
【表５】
2017516744.tif 000010
【００８４】
テーブル 6に記載されているパラメータにより血液サンプルを分析する.
【表６】
2017516744.tif 000011
【００８５】
血清は血液から獲得され、テーブル7に記載されているパラメータの分析に用いられる。
【表７】
2017516744.tif 000012
【００８６】
尿サンプルはテーブル8にリストされているパラメータの分析に用いられる。
【表８】
2017516744.tif 000013
【００８７】
最終手順はテーブル9に記載されている。
【表９】
2017516744.tif 000014
【００８８】
一回投与の試験では動物は死ぬことがない。
【００８９】
一回投与の試験では、動物は安楽死が実施されるまでに生きていられた。臨床病理パラメータの分析用サンプルは上記のように収集され、安楽死はナトリウムペントバルビタールを注射し、放血することで実現される。また、検死前の夜通しでは、動物は絶食される。
【００９０】
一回投与試験では、全面的な検死が行われる。その中に、死体と筋骨格システム、すべての表面と開口部、脳の頭蓋内腔と表面、胸、腹部と骨盤腔および関連臓器と組織などの査定がある。検死は認定された獣医監督より行う。
【００９１】
試験手順、観察、測定 - 複数投与の場合
試験期間中、日に2回（朝と昼）に動物の健康/死亡と瀕死の状況は観察される。第一週に投与する際に、日に一回動物の全身的な症状を観察する。一回投与した後、次回から投与するたびに、1−3時間程度で観察を行う。また、週に一回に動物はかごから移動され、詳細的な臨床観察を行われる。すべての動物は1日目、4日目、8日目、11日目と15日目に体重が量られ、それ以外ランダム的に体重が量られることもある。絶食の体重は検死の日に記録される。安楽死の場合を除き、毎日動物の食物摂取量が観察される。
【００９２】
誘導I、II、111、aVR、aVLとaVFと50 mm/secondの記録紙速度を利用し、すべての動物の心電図を獲得する。心電図の測定は1日目一回（治療前）と14日目（一回目の投与後で、おおよそ3時間が経った後）に行われる。誘導IIの場合のみ、認定の専門心臓獣医より評価する。
【００９３】
血液は頸静脈の静脈穿刺により収集され、夜通しの小便はかごの排水装置より収集される。サンプルが収集された後、病理実験室に転送され、検査される。サンプル収集前の日に、動物は絶食するが、水を飲むことが許される。テーブル10によりサンプルを収集する。
【００９４】
【表１０】
2017516744.tif 000015
【００９５】
テーブル 11に記載されているパラメータにより血液サンプルを分析する.
【表１１】
2017516744.tif 000016
【００９６】
血清は血液から獲得され、テーブル12に記載されているパラメータの分析に用いられる。
【表１２】
2017516744.tif 000017
【００９７】
尿サンプルはテーブル13にリストされているパラメータの分析に用いられる。
【表１３】
2017516744.tif 000018
【００９８】
最終手順はテーブル14に記載されている。
【表１４】
2017516744.tif 000019
【００９９】
試験では動物は死ぬことがない。
【０１００】
複数投与の試験では、動物は安楽死が実施されるまでに生きていられる。臨床病理パラメータの分析用サンプルは上記のように収集され、安楽死はナトリウムペントバルビタールを注射し、放血することで実現される。また、検死前の夜通しでは、動物は絶食される。
【０１０１】
複数投与試験では、全面的な検死が行われる。その中に、死体と筋骨格システム、すべての表面と開口部、脳の頭蓋内腔と表面、胸、腹部と骨盤腔および関連臓器と組織などの査定がある。検死は認定された獣医監督より行う。
【０１０２】
別段の指示がない限り、テーブル15にある代表的な組織サンプルはすべての複数投与試験の対象動物から収集され、10％の中性緩衝ホルマリンに保存される。
【表１５】
2017516744.tif 000020
【０１０３】
コンピュータ化されたシステム
試験に利用された重要なコンピュータ化されたシステムが記載されている。
【表１６】
2017516744.tif 000021
結果
ドーズ量を増やすフェーズ
【０１０４】
全部の動物は予定の安楽死まで生きていました。
【０１０５】
安楽死したあとその日に、10 mg/kgの状態で、雌犬の軟便を発見しました。
【０１０６】
30 mg/kgの状態で、今まで医学上の発見がないです。
【０１０７】
安楽死をしたあとその日、100 mg/kgの状態で、雌犬に眼の分泌物を明らかに発見した。投薬した後、雌犬のケージに少しカプセル/試験品を発見した。 [00108] 200 mg/kgの状態で、雄犬と雌犬に少し流涎と軟便及びムコイド軟便材料を発見しました。そして、続いて雌犬に眼の分泌物を発見していました。
【０１０８】
250 mg/kgの状態で、安楽死をしたばかり、雌犬と雄犬にひどい流涎を発見しました。そして、雄犬のムコイド軟便材料とか、雌犬の眼の放電も一緒に発見しました。
【０１０９】
違う状態でも、明確的な体重変化がない。
【０１１０】
違う研究でも、明確的な消化力の変化がない。
【０１１１】
全部の犬の冠動脉リズムはそのままで。サイクル１(10 mg/lcg)をしたあと、左軸の誤差変化を雄犬に発見した。ときとき、通常の犬にもこの軸を変化できる。研究している途中、心室脱分極を発見したことがない。ECGsレコードしているとき、心拍数、PRインターバール、QRSデュレーション、QTインターバール、QTcは全部通常の状態である。
【０１１２】
どの研究しても、特に血液学上のパラメータで毒物学的な変化がない。
【０１１３】
臨床医学
臨床医学パラメータの潜在的なテストに関する変化がクレアチニンまで限定する。
250mg/kgの条件で研究してから、雄に全部のビリルビンとカルバミド窒素を発見し、
200 と250 mg/kgの条件で研究したから、雌に多くなったクレアチンキナーゼを発見した。
【０１１４】
どの研究の後でも、尿検査のパラメータ上の毒物学的な有意な変化がない。
【０１１５】
２２日、解剖発見がない。
【０１１６】
複数投与の段階
【０１１７】
全部の動物が１５日の予定の安楽死まで生きていた。
【０１１８】
医学上の発見
【０１１９】
雄に医学上の発見の表現が明確ではないし、嘔吐物があります。雌に眼の分泌物と嘔吐物や粘液糞便の現象があります。
【０１２０】
研究の一日目から１５日目まで雄犬(-9.2%) と雌犬(-2.7%)の体重減少が見られる。
【０１２１】
研究中、明確的な消化力の変化がない。
【０１２２】
全部の犬の冠動脉リズムはそのままである。先に治療を受けた雄犬に心房パラメータ去極化を発見した。正常の犬にもときときこの乱れるリズムを発見する。研究の最後日(Day 14)に、左軸の誤差変化を雄犬に発見した。ときとき、正常の犬にもこの軸変化を発見でる。研究している途中、心室分極化を発見したことがない。ECGsレコードしているとき、心拍数、PRインターバール、QRSデュレーション、QTインターバール、QTcは全部通常の状態である。
【０１２３】
プレテストデータと比較して、１５日の研修で、特に血液学上のパラメータで毒物学的な有意な変化がない。
【０１２４】
臨床医学
【０１２５】
臨床医学パラメータの潜在的なテストに関する変化がクレアチニンまで限定する。１５日の研究したあと、雌と雄にγ-グルタミルトランスフェラーゼも限定する。
【０１２６】
プレテストデータと比較して、１５日の研究で、特に血液学上のパラメータで毒物学的な有意な変化がない。
【０１２７】
１５日、解剖発見がない。
【０１２８】
結論
結論として、１４日続けて一日3回の200 mg/kg/日カモスタットメシル酸塩を投与し、体重が減少したり、クレアチニンとγ-グルタミルトランスフェラーゼ関する潜在的なテストが増えた。この結果に基づいて、200 mg/kg/日をハイレベルの試験品とした。
【０１２９】
例３：
鼠を対象とし、経口投与にて、カモスタットメシル酸塩錠の一回投与及び複数投与の試験
【０１３０】
この研究の目的は鼠に少なくとも７日の研究期間を４サイクル後の潜在的な膵炎の治療エージェントとしてのカモスタットメシル酸塩の毒性を確定するのである。そして、７日に毎日３回鼠に投与し、潜在的なカモスタットメシル酸塩の毒性を確定した。
【０１３１】
研究は下記のように設計した：
【表１７】
2017516744.tif 000022
【０１３２】
この研究の一回投与段階で下記パラメータとエンドポイントを評価した：臨床兆し、体重、体重変化、消化力、解剖発見
【表１８】
2017516744.tif 000023
【０１３３】
この研究の複数投与段階で下記パラメータとエンドポイントを評価した：臨床微候、体重、体重変化、食物消化、解剖発見
【０１３４】
一回投与段階：全部の動物は８日の予定安楽死まで生きていた。そして、臨床に関するテストの発見がない。全部の動物は体重増えた。そして、消化力に見える変化がないし、100, 550や1300 mg/kgの研究でも見える解剖発見がない。この結果に基づいて、複数投与の段階で同じレベルの投薬をテストした。
【０１３５】
複数投与段階：全部の動物は８日の予定安楽死まで生きていた。1300 mg/kg/日の研究が終わりに、大体全部の動物は痩せた。1300 mg/kg/日の研究で 、雄 (-31%) と雌 (-34%) の消化力が弱なった。一緒に、 研究の始めから８日まで雄犬(-15%) と雌犬(- 13%) の体重も減りました。毒物学的な有意な解剖発見がない。
【０１３６】
結論として、７日に続けてモスタットメシル酸塩を毎日3回で投与し、体重も、消化力低下になる。体重減少と繋げて、臨床兆しや解剖発見はないため。1300 mg/kg/日を試験品の適切なハイ投与レベルにする。
【０１３７】
材料と方法
試験品
【０１３８】
識別:             カモスタットメシル酸塩
物理的の説明：    白い粉末
純度:             100% (計算の為)
保存条件:         5°Cを設定する冷蔵庫に保存する
ベンダー:        Stason医薬品
【０１３９】
識別:           テストの上水道からRODI水を取ります。
ベンダー:       測定設備開発の所から取得した。
【０１４０】
試験品の各ロットにつきまして、ひとつのサンプルを集めてから適切な条件に保存します。
【０１４１】
RODIをコントロール品として、テスト上水道設備からとります。投与してるとき、続けてコントロール品を撹拌する
【０１４２】
適切な濃度で試験品投与製剤を準備して、投与レベルの要求をミットする。一回投与研究の為に、先に各投薬に投与製剤を準備します。複数投与を研究する為に、投与製剤を準備次第、5°Cを設定する冷蔵庫に保存して、投与の日にディスペンスします。投与の前に、投与製剤を冷蔵庫から取り出して、少なくとも３０分を撹拌する。投与している時も、投与製剤を続けて撹拌するべきである。
【０１４３】
分析の為に、テーブル１９に示すように投与製剤を集める。
【表１９】
2017516744.tif 000024
【０１４４】
分析の為に、アンビエント条件でサンプルを分析試験室の測定設備に入れて分析する。HPLCは検証分析のプロセスを使って、下記分析を説明する。
【０１４５】
重複セットのサンプルのトップ、ミドル、ボトム（各1 mL）の各サンプリング時間で分析試験室に送る。ただ濃度分析を要求して、ミドルから製剤をサンプリングする。主なサンプルの濃度は理論的な濃度の± 10%以内や同じになると納得できる。± 15%になると、全部のサンプルの濃度は納得できる。各サンプリングロケーションの主なバリューホモジェネーティーが5%より少ないと、ホモジェネーティーの結果が納得できる。分析の結果を受けてから、バックアップサンプルを捨てます。
【０１４６】
この前の研究に使ったブラケット濃度を同じ条件に準備して保存する時、この試験品は安定と証明する為に、安定な分析を実施した。
【０１４７】
トータル18雄と 24雌のハンウィスター鼠はCharles River Laboratories, Raleigh, NC.から受けた。受けてから、この鼠たちに調べて体重を量った。一回投与段階の動物は投与の初期で、年齢は８ウィーク、そして、体重は176 g と255 gの間である。複数投与段階の動物は投与の初期で、年齢は８ウィーク、そして、体重は172 g と259 gの間である。
【０１４８】
ハンウィスター鼠を今回の研究のモデル動物にする原因は監督組織は臨床前毒性テストにこのげっ歯類を受けられる。
【０１４９】
このテストの適切な特性の結果として、この研究にミニマム数の動物を使いました。この課題を完成する為に、必要ない動物を要求しないとこの研究を設計した。
【０１５０】
試験室での研究に、動物は一番適切な基礎を提供した。そして、監督にも支持すると要求した。現在、生きている動物を使わない研究は存在しない。
【０１５１】
ランダム化の後、ケージカードと耳タッグで各動物を識別する。
【０１５２】
一回投与段階で、６日のあと動物は彼たちにデサインした家になじめた。そして、複数投与の段階で１０日である。
【０１５３】
似ているグループを取るため、満足するランダム化のスキームをデザインして動物を研究に使います。雄と雌を別々にランダムした。悪い体調や極端の体重範囲になると、グループに使わない。
【０１５４】
到着次第、ランダムまで動物を別々に家にハウスに設置する。ランダムの後、オートオーターリングバブルを持っている適切なベーデイング設備があるポリカーボネートケージに動物を集まりますめる（同じ性別の動物を３名以上＆同じ投薬グループを一緒）。家設置と面倒見るはUSDA動物福祉法律 (9 CFR, パート1, 2, 及び 3) によって指定ます。国際研究委員会が発表するGuide for the Care and Use of Laboratory Animalsの内容と一緒である（ワシントン・D.C.: ナショナルアカデミープレスNRC (National Research Council); 2011.）
【０１５５】
指定のプロセスで中断される以外に、69°F 〜71°F (21°C 〜 22°C) の温度と45% 〜56% の湿度と12時間ライト/12時間ダークのサイクルを維持した。動物のルームに100%の新鮮な空気（再循環なし）に一時間１０やより多くのエアチェンジを維持していた。
【０１５６】
この研究を通じて、指定のプロセスで中断される以外にPMI栄養国際認証したげっ歯類チョウアドリブNo. 5CR4 (14% タンパク質)を提供した。研究している途中使ったダイエットの各バッチのナンバーと期限を残した。環境汚染物と栄養成分を提供するサプライヤーはこのフィードを分析した。ダイエットの各ロットのメーカはこの飲食分析の結果を提供する。そして、テスト設備のファイルにある。以上の分析に基づいて、研究の実施や解釈に影響する汚染物がなくなった。
【０１５７】
逆浸透と紫外線照射で治療して、市上水はオーターリングシステムを通じて各動物に適合する（指定のプロセス以外）。この水に定期的な分析を実施した。以上の分析はテスト設備のファイルにある。水には知らない汚染物はこの研究の成果を影響するという考えがある。
【０１５８】
研究プロセスや活動に影響される以外、心理的/環境エンリッチメントの為に、動物に咀嚼物質を提供した。
【０１５９】
獣医面倒はこの研究の全過程に適切する。しかし、治療を要求しない。
【０１６０】
実験設計
【表２０】
2017516744.tif 000025
【表２１】
2017516744.tif 000026
【０１６１】
ドーズ量を増やす検討については，試験サンプルを経口ゾンデという方式によって，適切な動物に対して単回投与する。次のドーズ量レベル/グループに入る前に少なくとも3日間の観察期間を保持する。各動物のドーズ量体積は最新の体重測量を基礎にする。ゾンデカヌラが接続される一つの注射器を用いて投与する。各グループ投与の初日が検討の初日であることと指定される。
【０１６２】
複数投与の検討については，1日間から7日間の内に，試験サンプルと対照サンプルを経口ゾンデという方式によって，適切な動物に対して一日３回に投与する。投与間隔は8時間±30分間である。各動物のドーズ量体積は最新の体重測量を基礎にする。ゾンデカヌラが接続される注射器を用いて投与する。各グループ投与の初日が検討の初日であることと指定される。
【０１６３】
観察期間でドーズ量処方を接続的に撹拌する
【０１６４】
経口の暴露アプローチを選択することは，所望のヒト暴露アプローチためである。
【０１６５】
ドーズ量を増やす検討については，最初のドーズ量レベルが発起人の提供する情報に基づいて選択される。前の検討の中に，FOY-305 (カモスタットに相当する)を毎日100, 235, 550と1300 mg/kgのドーズ量で経口的にラットに90日間と１８０日間まで用いる。試験サンプルの治療を受ける全てのグループの中に，投与した後に直ちに唾液分泌が多すぎることが観察される。毎日に1300 mg/kgで，投与から30分間後までラットが口で毛を整理することと自発活動が僅かに低下することが観察される。投与回数の増やしに伴い，毎日550 と1300 mg/kgの時に投与に対する抵抗挙動を表現する。毎日550と1300 mg/kgのドーズ量は体重の増やしを抑制する。試験サンプルの治療を受ける全てのグループの動物の膵臓重量が増やされる。回復期間が終わった時に，膵臓重量がまた増やしている；ただし，まだ90 日間と180日間のドーズ量が終わった時に観察される状況に達していない。試験サンプルの治療を受ける全てのグループの中に，膵臓炎が伴う小葉細胞肥大は病理組織学検査に観察される細胞内酵素原顆粒と関連する。その他，毎日550と1300 mg/kgのドーズ量で小葉細胞の空胞が形成することが観察される。回復期間に伴い，対照サンプルと試験サンプル治療を用いるグループの間に顕著の差がない。
【０１６６】
複数投与の検討については，ドーズ量レベルはドーズ量を増やす検討結果に基づいて選択される。
【０１６７】
複数投与の検討の中に1日3回の投与方式は臨床を模擬するために策定される投与プロトコールである。
【０１６８】
生物体内過程，観察結果と測量値- ドーズ量を増やす検討
毎日二回に動物たちの全体なる健康状況と死亡率を観察し，朝1回と午後1回で，全体の検討過程を貫く。動物たちを籠から取り出して，ランダム日及び1日間から8日間の内に詳細なる臨床観察を行う；投与の当日に投与してから１時間から3時間後を含む。ランダム日及び1日間から8日間の内に各動物の重量を測量する。3日目から全体なる検討期間を貫いて，毎週に定量に各動物の食物消費を測量する。最終過程は表22の概要を参考してください。
【０１６９】
【表２２】
2017516744.tif 000027
【０１７０】
検討期間に動物の死亡がない。安楽死を予定する前に，ドーズ量を増やす検討の中に生存した動物の最終体重が記録され，続いて二酸化炭素の吸入により動物たちに安楽死を実施し，続いて瀉血する。
【０１７１】
ドーズ量を増やす検討の中の動物が完全なる死体解剖検査により実施され，死体及び筋肉骨格システムと；全ての外面と孔口と；頭蓋腔と大脳と；及び胸郭，腹部と骨盤腔及び関連する器官と組織に対して評価を行うことを含む；死体解剖検査が必ず資格検証を持つ獣医師病理医の監視で行う。
【０１７２】
生物体内過程，観察結果と測量値- 数回投与検討
【０１７３】
毎日2回に動物たちの全体なる健康状況と死亡率を観察し，朝１回と午後１回で，全体の検討過程を貫く。
【０１７４】
臨床観察
毎日１回に，１週目から全体投与期間内まで籠辺観察を行う。全体の投与期間で，第一の日ドーズ量の１から３時間後にこれらの観察を行う。
【０１７５】
動物たちを籠から取り出して，ランダム日及び1日間から8日間内に詳細の臨床観察を行う。ランダム日（4日目）及び1日間から8日間内に各動物たちの重量を測量する。4日目から全体の投与期間を貫いて，毎週定量に各動物の食物消費を測量する。最終過程は表23を参考してください。
【表２３】
2017516744.tif 000028
【０１７６】
検討期間に動物の死亡がない。安楽死を予定する前に，複数投与検討の中に生存した動物の最終体重が記録され，続いて二酸化炭素の吸入により動物たちに安楽死を実施し，続いて瀉血する。もし可能であれば，ドーズ量グループに跨って動物たちに安楽死を実施し，このように一日内に各グループの動物に対して検死できる。
【０１７７】
数回投与検討の中の動物が完全なる死体解剖検査により実施され，死体及び筋肉骨格システムと；全ての外面と孔口と；頭蓋腔と大脳と；及び胸郭，腹部と骨盤腔及び関連する器官と組織に対して評価を行うことを含む；死体解剖検査が必ず資格検証を持つ獣医師病理医の監視で行う。
【０１７８】
表の中に識別される代表性組織サンプルが全ての動物から採集され，しかも可能となる将来の評価を行うために10%の中性緩衝ホルマリンに保存される。
【０１７９】
【表２４】
2017516744.tif 000029
コンピュータシステム
検討中に用いられるコンピュータシステムリフトは以下のとおりである。本検討過程中に用いられる全てのコンピュータシステムはすでに検証された；ある特定システムが全ての必要を満たせない時に，適当な管理とプログラム化制御を用いてデータの品質と完全性を保証する。
【０１８０】
【表２５】
2017516744.tif 000030
統計学分析
【０１８１】
ドーズ量を増やす検討については，データは動物の個体データを代表する。説明統計数字，平均値と標準偏差を報告する必要がある。
【０１８２】
複数投与の検討については，列記する変数に対して，予定時点に収集された数値データに対して分析を行い，性別と時点によって表示される。できるだけ説明統計数字，平均値と標準偏差（適切と考えられる状況又は%CV又はSE）を報告する。もし可能であれば，以下のマトリクスに基づいて推論統計を行いてもよいが，半定量データ，及び3つの観察値より少ないいずれのグループを含まない。
【０１８３】
【表２６】
2017516744.tif 000031
【０１８４】
以下のペア比較を策定する：
第2グループ 対 第1グループ 
第3グループ 対 第1グループ 
第4グループ 対 第1グループ
【０１８５】
Levene試験が慣用的にグループ差分パラメータが5%顕著レベルと想定される均一性評価に用いられ，一つの総ユニラテラルAN OVA F試験又はKruskal-Wallis 試験(もしパラメータ想定に該当しない)を用いて少なくとも3つのグループの5%顕著レベルのデータセットと比較する。もし全体試験が顕著であれば，両面Dunnett或Dunn試験を用いてそれぞれ上記のペア比較を行う。両面t試験又はWilcoxon 分級-合計試験を用いてそれぞれ２つのグループのデータセット比較を行う。報告に基づいて全ての顕著なペア比較の顕著レベルが0.1%, 1%,と5%である。
【０１８６】
結果
全ての分析した検討サンプルはそれらの理論濃度± 10%の許容基準(個体数値が± 15%の内又は等しい)の内又はその基準に等しい時にいずれも平均濃度がある。均一性に対して，各試験グループにおける全てのサンプルのRSD濃度がいずれも<5%の許容基準の内にある。
【０１８７】
ドーズ量を増やすフェーズ
全ての動物を8日目まで生存させて予定の安楽死を実施する。
【０１８８】
臨床観察
試験サンプルに関わる臨床観察を記録していない。550 mg/kgである時に，１つの動物が脱毛を発生することが観察される；しかし，脱毛が実験ラットの中の一般的現象であるため，試験サンプルに関わるとは見なさない。1300 mg/kgである時に，2日目に１つの動物が立ち毛と異常な呼吸声を発生する。この動物の初日投与期間に，数が確定されていない試験サンプルを使用しない；そのため，これらの臨床徴候は投与期間に動物が試験サンプルに対する要望に由来する可能性があり，直接的に試験サンプルによることを見なさない。全体の検討期間に，１日目から８日目までの期間内に全ての動物の体重が増やして且つ食物消化について顕著な変化がない。
【０１８９】
検死の中に顕著な肉眼発見がない。１つの1300 mg/kg の雄動物の胸腺内に暗い変色が観察される；しかし，これは試験サンプルに関わるとは見なさなく，実験ラットの中に一般的な発見からである。
【０１９０】
複数投与の段階
全ての動物を８日目まで生存させて予定の安楽死を実施し，しかも毎日0, 100又は550 mg/kgの動物の中に臨床観察結果を記録しない。毎日1300 mg/kgの時に，８日目に3/3の雄と2/3の雌が痩せていることを記録する。
【０１９１】
毎日1300 mg/kgの時に，１日目から８日目まで体重が低下(雄-15%，雌-13%)することを記録する。その他，４日目から８日目までの雄動物と５日目から８日目までの雌動物の平均体重は対照グループと比較して顕著に低下する。８日目に雄動物と雌動物の体重はそれぞれ対照グループより25%と19%以下である。
【０１９２】
毎日100又は550 mg/kgの時に対照グループと比較して，平均体重について統計学の顕著意味又は毒物学意味の差分がなく，また８日目の平均体重が対照グループの4.4%の内にある。
【０１９３】
１日目から７日目までの平均消化について統計学の顕著差分がない；しかし，毎日1300 mg/kg時の雄と雌動物の中に，食物消化はそれぞれ対照グループより31%と34%以下であり，また体重も相応に低下する。
【０１９４】
検討期間に，毒物学意味の肉眼検死発見を記録しない。
【０１９５】
毎日1300 mg/kg時に１つの雄動物の精嚢が比較的小さいことを記録して，発病率が比較的低く及び病理組織学の検査に乏しいため，動物の性成熟度に関わる可能性があり，試験サンプルに関わるとは見なさない。
【０１９６】
結論
とにかく，カモスタットを毎日３回に経口投与して７日間続いていくと体重と食物消化の低下となる。不良の臨床徴候又は肉眼検死で体重の低下と関わることが発見していないからである。そのため毎日1300 mg/kgが本試験サンプルの大ドーズ量レベルと選定される。
【図１】
2017516744.tif 000032
【図２】
2017516744.tif 000033
【図３】
2017516744.tif 000034
【図４】
2017516744.tif 000035
【図５】
2017516744.tif 000036
【図６】
2017516744.tif 000037
【図７】
2017516744.tif 000038
【国際調査報告】
2017516744.tif 000039
2017516744.tif 000040
2017516744.tif 000041
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