(57)【要約】本発明は、抗腫瘍相乗減毒効果を有する薬用溶液及びそれを含む薬用組成物、及び用途に係るものである。上記の薬用溶液は、重水を溶剤として使用する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
重水を溶剤として使用することを特徴とする薬用溶液。
【請求項２】
重水中におけるジュウテリウム元素の同位体存在度が、１−９９．９％であり、より好ましくは５０−９９．９％であり、最も好ましくは９９−９９．９％であることを特徴とする請求項１に記載の薬用溶液。
【請求項３】
非経口投与に適することを特徴とする請求項１に記載の薬用溶液。
【請求項４】
前記薬用溶液は、塩化ナトリウムを含み、薬用溶液１００ｍｌ当たりに０．１ｇ−５ｇの塩化ナトリウム、好ましくは０．５ｇ−２．５ｇの塩化ナトリウムを含む塩化ナトリウム重水溶液であることを特徴とする請求項１に記載の薬用溶液。
【請求項５】
前記薬用溶液は、重水及び塩化ナトリウムから調製された、塩化カリウムの濃度が、薬用溶液１００ｍｌ当たりに０．９ｇの塩化ナトリウムを含み、且つｐＨが４．５−７．０である塩化ナトリウム重水溶液であることを特徴とする請求項１に記載の薬用溶液。
【請求項６】
前記薬用溶液は、葡萄糖を含み、薬用溶液１００ｍｌ当たりに０．１ｇ−５０ｇの葡萄糖、好ましくは５ｇ−５０ｇの葡萄糖を含む葡萄糖重水溶液であることを特徴とする請求項１に記載の薬用溶液。
【請求項７】
前記薬用溶液は、重水及び葡萄糖から調製された、葡萄糖の濃度が、薬用溶液１００ｍｌ当たりに５ｇ又は１０ｇの葡萄糖を含み、且つｐＨが３．２−６．５である葡萄糖重水溶液であることを特徴とする請求項１に記載の薬用溶液。
【請求項８】
前記薬用溶液は、重水、塩化ナトリウム及び葡萄糖から調製された、薬用溶液１００ｍｌ当たりに０．９ｇの塩化ナトリウム及び５ｇの葡萄糖を含み、且つｐＨが３．５−５．５である葡萄糖塩化ナトリウム重水溶液であることを特徴とする請求項１に記載の薬用溶液。
【請求項９】
前記薬用溶液は、重水、塩化ナトリウム、塩化カリウム及び塩化カルシウムから調製された、薬用溶液１００ｍｌ当たりに０．９ｇの塩化ナトリウム、０．０１２ｇの塩化カリウム、及び０．０２４ｇの塩化カルシウム（ＣａＣｌ２・２Ｈ２Ｏ）を含み、且つｐＨが４．５−７．５であるリンゲル重水溶液であることを特徴とする請求項１に記載の薬用溶液。
【請求項１０】
前記薬用溶液は、重水、乳酸ナトリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム及び塩化カルシウムから調製された、薬用溶液１００ｍｌ当たりに０．３１ｇの乳酸ナトリウム、０．６ｇの塩化ナトリウム、０．０３ｇの塩化カリウム、及び０．０２ｇの塩化カルシウム（ＣａＣｌ２・２Ｈ２Ｏ）を含み、且つｐＨが６．０−７．５である乳酸ナトリウムリンゲル重水溶液であることを特徴とする請求項１に記載の薬用溶液。
【請求項１１】
前記薬用溶液は、重水、  乳酸ナトリウム、葡萄糖、塩化ナトリウム、塩化カリウム及び塩化カルシウムから調製された、薬用溶液１００ｍｌ当たりに０．３１ｇの乳酸ナトリウム、０．６ｇの塩化ナトリウム、０．０３ｇの塩化カリウム、０．０２ｇの塩化カルシウム、及び５ｇの葡萄糖を含み、且つｐＨが３．６−６．５である複合乳酸ナトリウム葡萄糖重水溶液であることを特徴とする請求項１に記載の薬用溶液。
【請求項１２】
前記薬用溶液は、重水及びフルクトースから調製された、薬用溶液５００ｍｌ当たりに２５ｇ−５０ｇのフルクトースを含み、且つｐＨが７．０−７．４であるフルクトース重水溶液であることを特徴とする請求項１に記載の薬用溶液。
【請求項１３】
前記薬用溶液は、重水、フルクトース及び塩化ナトリウムから調製された、薬用溶液１０００ｍｌ当たりに５０ｇのフルクトース及び９ｇの塩化ナトリウムを含み、且つｐＨが４．０−６．５であるフルクトース塩化ナトリウム重水溶液であることを特徴とする請求項１に記載の薬用溶液。
【請求項１４】
前記薬用溶液は、重水、グリセリン、フルクトース及び塩化ナトリウムから調製された、薬用溶液１０００ｍｌ当たりに１００ｇのグリセリン、５０ｇのフルクトース及び９ｇの塩化ナトリウムを含み、且つｐＨが３．０−６．０であるグリセリンフルクトース塩化ナトリウム重水溶液であることを特徴とする請求項１に記載の薬用溶液。
【請求項１５】
前記薬用溶液は、重水、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム及び塩化カルシウムから調製された、薬用溶液５００ｍｌ当たりに１．９ｇの酢酸ナトリウム、３．０ｇの塩化ナトリウム、０．１５ｇの塩化カリウム及び０．１ｇの塩化カルシウム（ＣａＣｌ２・２Ｈ２Ｏ）を含み、且つｐＨが６．０−７．４である酢酸ナトリウムリンゲル重水溶液であることを特徴とする請求項１に記載の薬用溶液。
【請求項１６】
前記薬用溶液は、重水及び炭酸水素ナトリウムから調製された、薬用溶液１００ｍｌ当たりに１−５０ｇの炭酸水素ナトリウム、好ましくは５ｇ−１０ｇの炭酸水素ナトリウム、最も好ましくは５ｇの炭酸水素ナトリウムを含み、且つｐＨが７．５−８．５である炭酸水素ナトリウム重水溶液であることを特徴とする請求項１に記載の薬用溶液。
【請求項１７】
前記薬用溶液は、重水、塩化ナトリウム、塩化カリウム、葡萄糖、燐酸二水素カリウム、燐酸水素二ナトリウム及び炭酸水素ナトリウムから調製された、薬用溶液１００ｍｌ当たりに０．８ｇの塩化ナトリウム、０．０４ｇの塩化カリウム、０．１ｇの葡萄糖、０．００６ｇの燐酸二水素カリウム、０．００４７５ｇの燐酸水素二ナトリウム及び０．０３５ｇの炭酸水素ナトリウムを含み、且つｐＨが６．０−７．５であるハンクス平衡塩重水溶液であることを特徴とする請求項１に記載の薬用溶液。
【請求項１８】
前記薬用溶液は、重水、塩化ナトリウム、塩化カリウム、葡萄糖、燐酸二水素カリウム、燐酸水素二ナトリウム及び炭酸水素ナトリウムから調製された、薬用溶液１００ｍｌ当たりに０．８ｇの塩化ナトリウム、０．０４ｇの塩化カリウム、０．１ｇの葡萄糖、０．００６ｇの燐酸二水素カリウム、０．００４７５ｇの燐酸水素二ナトリウム及び０．２２ｇの炭酸水素ナトリウムを含み、且つｐＨが６．０−７．５であるＥａｇｌｅｓ平衡塩重水溶液であることを特徴とする請求項１に記載の薬用溶液。
【請求項１９】
前記薬用溶液は、重水、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、塩化マグネシウム、酢酸ナトリウム及び枸櫞酸ナトリウムから調製された、薬用溶液１００ｍｌ当たりに０．６４ｇの塩化ナトリウム、０．０７５ｇの塩化カリウム、０．０４８ｇの塩化カルシウム、０．０３ｇの塩化マグネシウム、０．３９ｇの酢酸ナトリウム、０．１７ｇの枸櫞酸ナトリウムを含み、且つｐＨが６．０−７．４である平衡塩重水溶液であることを特徴とする請求項１に記載の薬用溶液。
【請求項２０】
請求項１−１９のいずれか一つに記載の薬用溶液、少なくとも一種の抗腫瘍薬、及び任意の薬学的に利用可能な補助材料を含むであることを特徴とする薬用組成物。
【請求項２１】
前記抗腫瘍薬は、抗腫瘍細胞毒類薬物及びモノクローナル抗体抗腫瘍薬物から選択される請求項２０に記載に記載の薬用組成物。
【請求項２２】
前記抗腫瘍細胞毒類薬物は、抗代謝物、植物由来抗腫瘍薬、腫瘍抗生物質、アルキル化剤、及び白金製剤を含む請求項２１に記載の薬用組成物。
【請求項２３】
抗代謝物は、５−フルオロウラシル、ゲムシタビン、フルオロウリジン、ペメトレキセド、ラルチトレキシド、フルダラビン、シタラビンを含み、前記腫瘍抗生物質は、マイトマイシン、エピルビシン、ピンヤンマイシン、ダウノルビシン、アドリアマイシン、ピラルビシン、アクラルビシンを含み、前記白金製剤は、シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、ネダプラチンを含み、前記植物由来抗腫瘍薬は、パクリタキセル、パクリタキセルリポソーム、パクリタキセルアルブミン型、ドセタキセル、エトポシド、ヒドロキシカンプトテシンを含み、前記アルキル化剤は、チオテパ、カルムスチン、ニムスチン、ホテムスチン、エストラムスチン、シクロホスファミド、ミレランを含む請求項２２に記載の薬用組成物。
【請求項２４】
モノクローナル抗体抗腫瘍薬は、ベバシズマブ、セツキシマブ、トラスツズマブ、パニツムマブ、ニモツズマブ、組み換えヒトエンドスタチンを含む請求項２１に記載の薬用組成物。
【請求項２５】
請求項１−１９のいずれか一つに記載の薬用溶液又は請求項２０−２４のいずれか一つに記載の薬用組成物の抗腫瘍薬物の製造における用途。
【請求項２６】
悪性腫瘍の治療又は予防に用いられる請求項１−１９のいずれか一つに記載の薬用溶液又は請求項２０−２４のいずれか一つに記載の薬用組成物。
【請求項２７】
重水及び少なくとも一種の抗腫瘍薬物を含み、重水及び抗腫瘍薬物が別々に投薬可能、連続投薬可能、又は同時投薬可能であることを特徴とする併用薬物。
【請求項２８】
腫瘍患者に治療有効量の請求項１−１９のいずれか一つに記載の薬用溶液又は請求項２０−２４のいずれか一つに記載の薬用組成物又は請求項２７に記載の併用薬物を投与することを含む悪性腫瘍の治療又は予防方法。
【請求項２９】
前記悪性腫瘍は、肺癌、結直腸癌、原発性肝癌、食道癌、胃癌及び噴門癌、膵臓癌、腎細胞癌、膀胱癌、前立腺癌、頭頸部癌、鼻咽頭癌、子宮頸癌、卵巣癌、乳癌、脳腫瘍、骨及び関節の肉腫、甲状腺癌、皮膚癌、悪性黒色腫、悪性リンパ腫、白血病、各種悪性腫瘍の合併症及び再発（例えば、腫瘍細胞の胸腹骨盤腔への転移及び移植、悪性胸腹骨盤腔内貯溜液）から選択される請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
肺癌は、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）を含み；結直腸癌は、早期結直腸癌、進行期結直腸癌を含み；原発性肝癌は、肝細胞型、肝管細胞型、混合型を含み；食道癌は、腺癌、扁平上皮癌、腺扁平上皮癌、小細胞癌を含み；胃癌及び噴門癌は、腺癌、扁平上皮癌、腺扁平上皮癌、小細胞癌、悪性消化管間質腫瘍を含み；膵臓癌は、導管細胞癌、破骨細胞様巨細胞癌を含み；腎細胞癌は、明細胞癌、乳頭状腎細胞癌を含み；膀胱癌は、尿路上皮癌、扁平上皮癌、腺癌を含み；前立腺癌は、腺癌、導管腺癌、尿路上皮癌、扁平上皮癌を含み；頭頸部癌は、扁平上皮癌、腺癌、腺扁平上皮癌を含み；鼻咽頭癌は、扁平上皮癌、腺癌を含み；子宮頸癌は、扁平上皮癌、腺癌、肉腫を含み；卵巣癌は、上皮性卵巣癌、胚細胞腫瘍、卵巣の性索間質性腫瘍を含み；乳癌は、上皮性腫瘍、間葉系腫瘍、筋上皮腫を含み；脳腫瘍は、原発性脳腫瘍及び転移性脳腫瘍を含み；骨及び関節の肉腫は、軟骨肉腫、骨肉腫、ユーイング肉腫、軟部組織肉腫を含み；甲状腺癌は、乳頭状癌、濾胞状腺癌、髄様癌を含み；皮膚癌は、基底細胞癌及び扁平上皮癌を含み；悪性黒色腫は、表在拡大型黒色腫、結節型黒色腫、末端黒子型黒色腫を含み；悪性リンパ腫は、ホジキンリンパ腫及び非ホジキンリンパ腫を含み；白血病は、急性白血病、慢性白血病を含む請求項２０に記載の薬用溶液又は薬用組成物又は併用薬物。
【請求項３１】
重水の請求項１−１９のいずれか一つに記載の薬用溶液の製造における用途。
【請求項３２】
前記薬用溶液は、広域抗腫瘍相乗剤として抗腫瘍薬効果を相乗できる請求項３１に記載の用途。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬分野に属するものであり、抗腫瘍相乗減毒効果を有する薬用溶液及びそれを含む薬用組成物に係るものである。
【背景技術】
【０００２】
世界保健機関の統計報告によれば、２０１４年の世界中の悪性腫瘍は、発病が１２００万例であり、死亡が８５０万例であった。その為、効果的に悪性腫瘍を制御するのは、医薬従業者にとって難しい急務である。
【０００３】
目下では、悪性腫瘍の治療には、主に手術、放射線治療及び様々な抗腫瘍薬物による化学療法が使用されている。それらの方法には、各自の特徴があるが、一定の制限性が存在する。特に、抗腫瘍薬物で化学療法を行う時、薬効が顕著でないことが多く、例えば、通常の抗腫瘍薬である５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）の臨床的な単独薬剤投与の有効率が僅か１０％のみである。又、多くの抗腫瘍薬物は、顕著的な毒性を有する。毒性が用量と正比例し、治療効果を向上するために、投薬用量を増加する必要が有るが、しかし、それと伴って、薬物毒性も増加するというジレンマに陥っている。その故、抗腫瘍薬物の治療効果の増加、その薬物毒性の軽減を工夫するのは、臨床的な抗腫瘍治療効果を向上する重要な方向である。
【０００４】
多くの従来の抗腫瘍薬物は、薬物の物理的及び化学的性質、薬物動態学及び薬力学等の原因により、注射方式により全身投薬しなければならず、又は局所灌流により注射しなければならない。通常の担体溶液として、生理塩水及び葡萄糖溶液がある。このような溶液は、抗腫瘍薬物の担体溶液のみとし、そのものが抗腫瘍効果を有せず、他の抗腫瘍薬物の薬効も強化できない。
【０００５】
重水（化学名：酸化ジュウテリウム、英語名：Ｄｅｕｔｅｒｉｕｍ  ｏｘｉｄｅ，分子式：Ｄ２Ｏ、分子量：２０．０３、ＣＡＳ番号：７７８９−２０−０である）が、海水から分離することにより得ることができる。正常成人体内に、重水５ｇ程度が含まれる。犬をモデルとする動物実験により、外部由来重水の濃度が体内において３０％以上となる時、毒性反応が発生することが証明された。上記実験を根拠として、理論的には、成人体重６０ｋｇとすれば、人体内の重水が１８ｋｇとなる時、毒性が始まる。人体内に重水１８ｋｇがあるのは、ありえないことである。又、米国のカリフォルニア政府により、カリフォルニア州の化学品カタログに、重水が癌及び生殖成長障害を起こさないことが明確に示されている。その為、重水は、無毒物質［Ｄ．Ｍ．  Ｃｚａｊｋａ：  Ａｍ．  Ｊ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．２０１（１９６１）：  ３５７−３６２；Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ  Ｐｒｏｐｏｓｉｔｉｏｎ  ６５］に属するはずである。Ｇｒｏｓｓ  Ｐ．Ｒ．らにより、２０世紀６０年代に、重水が細胞ＤＮＡデオキシシンターゼを抑制する作用を有することが発見された（Ｓｃｉｅｎｃｅ  １３３（１９６１）：  １１３１−１１３３）。その後、Ｌａｉｓｓｕｅらにより、マウスモデルで重水による抗腫瘍作用が研究された（Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  ４２  （１９８２）  １１２５−１１２９）。Ａｌｔｅｒｍａｔｔらにより、ヒト腫瘍細胞株担癌ヌードマウスモデルで重水の経口服用による動物体内の抗腫瘍作用が研究された（Ｃａｎｃｅｒ  ６２（１９８８）：  ４６２−４６６．Ｉｎｔ．Ｊ．  Ｃａｎｃｅｒ．  ４５（１９９０）：  ４７５−４８０．）。ここ１０年以来、Ｈａｒｔｍａｎｎらにより、重水がｉｎ  ｖｉｔｒｏで膵臓癌細胞増殖を抑制できることが証明された（Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  ２５（２００５）：  ３４０７−３４１２）。Ｂａｈｋらにより、重水がｉｎ  ｖｉｔｒｏで膀胱癌細胞増殖を抑制できることが証明された（Ｊ．Ｉｎｄ．  Ｅｎｇ．Ｃｈｅｍ．  １３（２００７）：５０１−５０７）。
【０００６】
上記の重水抗腫瘍の研究は、主にｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞試験であった。周知のように、薬物研究開発において、候補薬物は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞試験では有効であるにもかからわず、体内では、有効となる確率が万分の１である。ｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞培養をモデルとする研究結果によれば、ドラッガブルの予測可能性は、強くなかった。目下の二つのみの動物研究では、いずれも、伝統的な単純な重水経口服用液を使用し、それが低張溶液である。その作用機序は、体内におけるジュウテリウム元素の含有量を向上させることで、抗腫瘍をする。有効的な体内治療用量を達成するために、動物に重水経口服用液を大きい用量で経口服用させる必要があった。具体的なやり方は、動物試験時に、重水及び飲用水を混合して重水濃度３０％の重水経口服用液とし、飲用水を完全に替えて、動物に随意で自由に飲ませ、数日間乃至数週間後、動物体内のジュウテリウム元素含有量が高いジュウテリウム化状態となり、抗腫瘍効果が始まる。この重水経口服用液は、次の大変な欠点がある：１）目下の臨床有効的な抗腫瘍治療は、多数の抗腫瘍薬物の併用化学療法であるが、しかし、多くの抗腫瘍薬物は、様々な原因で経口服用できないため、重水と多くの抗腫瘍薬物とを併用するのが困難であり、即ち、併用化学療法により患者に対して有効的に治療することができない；２）人それぞれの自由飲水量が異なり、重水を随意で自由に経口服用させると、投薬量を定量化できず、異なる人の治療効果を比較できず、消化、吸收、代謝等の薬物動態学要因に影響されることにより、摂取量が大きく且つ薬効が限られ、ドラッガブルの可能性が小さい；３）患者として、短時間内において大量の重水を飲む必要があり、飲みにくいので、臨床コンプライアンスが悪く、費用も高い；４）多くの中、末期腫瘍患者は、嚥下困難となり、または消化道の手術を受けたため、飲食することができず、况ては、重水を経口服用できない。
【０００７】
更に、多くの腫瘍患者では、罹病の中、末期時、体腔（胸腔、腹腔、骨盤腔、以下同じ）の腫瘍転移再発の発生が約５０％以上を占める。それは、多くの患者の致死の直接要因である。近年、発展してきた胸腹部における腔内温熱灌流化学療法は、腫瘍の胸腹部膜への転移又は再発の予防又は治療において有効的な治療法の一つとなっているが、しかし、目下では、普通の生理塩水で抗腫瘍薬物を溶解又は希釈し、直接に体腔（熱）灌流洗浄投薬しており、治療効果が高くないという問題もあり、生理塩水そのものも相乗抗腫瘍薬作用を有しない。
【０００８】
その故、目下の本分野において、依然として、抗腫瘍作用を有する薬用組成物が求められており、特に、相乗作用を有する溶液を使用する薬用組成物に対するニーズが存在する。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明は、発明者の以下の発見に基づくものである：１）重水で異なる薬用溶液を調製し、他の抗腫瘍薬物を溶解又は希釈し、注射投薬又は体腔（熱）灌流洗浄併用投薬し；  ２）小用量で重水を直接注射し、腫瘍細胞の細胞周期を変え、腫瘍細胞を死亡させ；３）相乗減毒：重水で小用量の抗腫瘍薬を直接溶解又は希釈し、注射投薬又は体腔（熱）灌流洗浄投薬し、大用量の抗腫瘍薬と同様な薬効を取得できるが、大用量の抗腫瘍薬の毒性を回避できる；  ４）ドラッガブルの向上：重水の注射投薬が定量化でき、随意に飲用する場合の定量化指標がないドラッガブルの欠点を克服できる；５）安全：一定用量の重水を直接に体内注射し、又は体腔（熱）灌流洗浄することは、哺乳動物にとって安全である。要するには、重水そのものは、抗腫瘍薬効を有し、多種多様の抗腫瘍薬物と併用することで、相乗的に抗腫瘍効果を明らかに増加し、同時に抗腫瘍薬毒性を低下し、悪性腫瘍の治療に用いられて、意外的な効果を得る。
【００１０】
本発明の一つの態様は、重水を溶剤として使用することを特徴とする薬用溶液を提供することにある。
【００１１】
本発明のもう一つの態様は、本発明の薬用溶液、少なくとも一種の抗腫瘍薬及び任意の薬学的に利用可能な補助材料を含むことを特徴とする薬用組成物を提供することにある。
【００１２】
本発明のもう一つの態様は、重水を溶剤として使用することを特徴とする悪性腫瘍の治療又は予防に用いられる薬用溶液であることにある。
【００１３】
本発明のもう一つの態様は、本発明の薬用溶液、少なくとも一種の抗腫瘍薬及び任意の薬学的に利用可能な補助材料を含むことを特徴とする悪性腫瘍の治療又は予防に用いられる薬用組成物であることにある。
【００１４】
本発明のもう一つの態様は、本発明の薬用溶液又は薬用組成物の抗腫瘍薬の製造における用途を提供することにあることにある。
【００１５】
本発明のもう一つの態様は、重水及び少なくとも一種の抗腫瘍薬物を含み、重水及び抗腫瘍薬物が別々に投薬可能、連続投薬可能、又は同時投薬可能であることを特徴とする併用薬物であることにある。
【００１６】
本発明の又もう一つの態様は、腫瘍患者に治療有効量の本発明の薬用溶液又は薬用組成物又は併用薬物を投与することを含む悪性腫瘍の治療又は予防の方法を提供することにある。
【００１７】
本発明のもう一つの態様は、重水の薬用溶液の製造における用途を提供することにある。
【００１８】
本発明薬用組成物又は併用薬物は、効果的に抗腫瘍でき、且つ従来の抗腫瘍薬物より、毒性が低い。本発明薬用組成物又は併用薬物は、悪性腫瘍の治療又は予防に用いることができる。重水は、相乗的に抗腫瘍薬物の薬効を増加でき；小用量の抗腫瘍薬でも、大用量の抗腫瘍薬と同様な薬効を取得でき、更に、抗腫瘍薬物の用量を減少でき、抗腫瘍薬物の毒性を軽減できる。
【課題を解決するための手段】
【００１９】
本願発明は、次の発明に係る：
【００２０】
発明１．重水を溶剤として使用することを特徴とする薬用溶液。
【００２１】
発明２．非経口投薬に適する発明１に記載の薬用溶液。
【００２２】
発明３．前記薬用溶液は、塩化ナトリウムを含み、１００ｍｌ薬用溶液当たりに０．１ｇ−５ｇの塩化ナトリウム、好ましくは０．５ｇ−２．５ｇの塩化ナトリウムを含む塩化ナトリウム重水溶液であることを特徴とする発明１に記載の薬用溶液。
【００２３】
発明４．前記薬用溶液は、重水と塩化ナトリウムから調製された、塩化ナトリウム濃度が薬用溶液１００ｍｌ当たりに０．９ｇの塩化ナトリウムを含み、且つｐＨが４．５−７．０である塩化ナトリウム重水溶液であることを特徴とする発明１に記載の薬用溶液。
【００２４】
発明５．前記薬用溶液は、葡萄糖がを含み、薬用溶液１００ｍｌ当たりに０．１ｇ−５０ｇの葡萄糖、好ましくは５ｇ−５０ｇの葡萄糖を含む葡萄糖重水溶液であることを特徴とする発明１に記載の薬用溶液。
【００２５】
発明６．前記薬用溶液は、重水及び葡萄糖から調製された、葡萄糖濃度が、薬用溶液１００ｍｌ当たりに５ｇ又は１０ｇの葡萄糖を含み、且つｐＨが３．２−６．５である葡萄糖重水溶液であることを特徴とする発明１に記載の薬用溶液。
【００２６】
発明７．前記薬用溶液は、重水、塩化ナトリウム及び葡萄糖から調製された、薬用溶液１００ｍｌ当たりに０．９ｇの塩化ナトリウム及び５ｇの葡萄糖を含み、且つｐＨが３．５−５．５である葡萄糖塩化ナトリウム重水溶液であることを特徴とする発明１に記載の薬用溶液。
【００２７】
発明８．前記薬用溶液は、重水、塩化ナトリウム、塩化カリウム及び塩化カルシウムから調製された、薬用溶液１００ｍｌ当たりに０．８５ｇの塩化ナトリウム、０．０３ｇの塩化カリウム及び０．０３３ｇの塩化カルシウム（ＣａＣｌ２・２Ｈ２Ｏ）を含み、且つｐＨが４．５−７．５であるリンゲル重水溶液であることを特徴とする発明１に記載の薬用溶液。
【００２８】
発明９．前記薬用溶液は、重水、乳酸ナトリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム及び塩化カルシウムから調製された、薬用溶液１００ｍｌ当たりに０．３１０ｇの乳酸ナトリウム、０．６００ｇの塩化ナトリウム、０．０３０ｇの塩化カリウム及び０．０２０ｇの塩化カルシウム（ＣａＣｌ２・２Ｈ２Ｏ）を含み、且つｐＨが６．０−７．５である乳酸ナトリウムリンゲル重水溶液であることを特徴とする発明１に記載の薬用溶液。
【００２９】
発明１０．前記薬用溶液は、重水、乳酸ナトリウム、葡萄糖、塩化ナトリウム、塩化カリウム及び塩化カルシウムから調製された、薬用溶液１００ｍｌ当たりに０．３１０ｇの乳酸ナトリウム、０．６００ｇの塩化ナトリウム、０．０３０ｇの塩化カリウム、０．０２０ｇの塩化カルシウム及び５ｇの葡萄糖を含み、且つｐＨが３．６−６．５である複合乳酸ナトリウム葡萄糖重水溶液であることを特徴とする発明１に記載の薬用溶液。
【００３０】
発明１１．前記薬用溶液は、重水及びフルクトースから調製された、薬用溶液１０００ｍｌ当たりに５０ｇ−１００ｇのフルクトースを含み、且つｐＨが４．０−６．５であるフルクトース重水溶液であることを特徴とする発明１に記載の薬用溶液。
【００３１】
発明１２．前記薬用溶液は、重水、フルクトース及び塩化ナトリウムから調製された、薬用溶液１０００ｍｌ当たりに５０ｇのフルクトース及び９ｇの塩化ナトリウムを含み、且つｐＨが４．０−６．５であるフルクトース塩化ナトリウム重水溶液であることを特徴とする発明１に記載の薬用溶液。
【００３２】
発明１３．前記薬用溶液は、重水、グリセリン、フルクトース及び塩化ナトリウムから調製された、薬用溶液１０００ｍｌ当たりに１００ｇのグリセリン、５０ｇのフルクトース及び９ｇの塩化ナトリウムを含み、且つｐＨが３．０−６．０であるグリセリンフルクトース塩化ナトリウム重水溶液であることを特徴とする発明１に記載の薬用溶液。
【００３３】
発明１４．前記薬用溶液は、重水、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム及び塩化カルシウムから調製された、薬用溶液５００ｍｌ当たりに１．９ｇの酢酸ナトリウム、３．０ｇの塩化ナトリウム、０．１５ｇの塩化カリウム及び０．１ｇの塩化カルシウム（ＣａＣｌ２・２Ｈ２Ｏ）を含み、且つｐＨが６．０−７．４である酢酸ナトリウムリンゲル重水溶液であることを特徴とする発明１に記載の薬用溶液。
【００３４】
発明１５．前記薬用溶液は、重水及び炭酸水素ナトリウムから調製された、薬用溶液１００ｍｌ当たりに１−５０ｇの炭酸水素ナトリウム、好ましくは５ｇ−１０ｇの炭酸水素ナトリウム、最も好ましくは５ｇの炭酸水素ナトリウムを含み、且つｐＨが７．５−８．５である炭酸水素ナトリウム重水溶液であることを特徴とする発明１に記載の薬用溶液。
【００３５】
発明１６．前記薬用溶液は、重水、塩化ナトリウム、塩化カリウム、葡萄糖、燐酸二水素カリウム、燐酸水素二ナトリウム及び炭酸水素ナトリウムから調製された、薬用溶液１００ｍｌ当たりに０．８ｇの塩化ナトリウム、０．０４ｇの塩化カリウム、０．１ｇの葡萄糖、０．００６ｇの燐酸二水素カリウム、０．００４７５ｇの燐酸水素二ナトリウム及び０．０３５ｇの炭酸水素ナトリウムを含み、且つｐＨが６．０−７．５であるハンクス平衡塩重水溶液であることを特徴とする発明１に記載の薬用溶液。
【００３６】
発明１７．前記薬用溶液は、重水、塩化ナトリウム、塩化カリウム、葡萄糖、燐酸二水素カリウム、燐酸水素二ナトリウム及び炭酸水素ナトリウムから調製された、薬用溶液１００ｍｌ当たりに０．８ｇの塩化ナトリウム、０．０４ｇの塩化カリウム、０．１ｇの葡萄糖、０．００６ｇの燐酸二水素カリウム、０．００４７５ｇの燐酸水素二ナトリウム及び０．２２ｇの炭酸水素ナトリウムを含み、且つｐＨが６．０−７．５であるＥａｇｌｅｓ平衡塩重水溶液であることを特徴とする発明１に記載の薬用溶液。
【００３７】
発明１８．前記薬用溶液は、重水、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、塩化マグネシウム、酢酸ナトリウム及び枸櫞酸ナトリウムから調製された、薬用溶液１００ｍｌ当たりに０．６４ｇの塩化ナトリウム、０．０７５ｇの塩化カリウム、０．０４８ｇの塩化カルシウム、０．０３ｇの塩化マグネシウム、０．３９ｇの酢酸ナトリウム、０．１７ｇの枸櫞酸ナトリウムを含み、且つｐＨが６．０−７．５である平衡塩重水溶液であることを特徴とする発明１に記載の薬用溶液。
【００３８】
発明１９．発明１−１８のいずれか一つに記載の薬用溶液、少なくとも一種の抗腫瘍薬及び任意の薬学的に利用可能な補助材料を含むことを特徴とする薬用組成物。
【００３９】
発明２０．前記抗腫瘍薬は、抗腫瘍細胞毒類薬物及びモノクローナル抗体抗腫瘍薬物から選択されるものである発明１９に記載の薬用組成物。
【００４０】
発明２１．前記抗腫瘍細胞毒類薬物は、抗代謝物、植物由来抗腫瘍薬、腫瘍抗生物質、アルキル化剤及び白金製剤を含む発明２０の薬用組成物。
【００４１】
発明２２．抗代謝物は、５−フルオロウラシル、ゲムシタビン、フルオロウリジン、ペメトレキセド、ラルチトレキシド、フルダラビン、シタラビンを含み、前記腫瘍抗生物質は、マイトマイシン、エピルビシン、ピンヤンマイシン、ダウノルビシン、アドリアマイシン、ピラルビシン、アクラルビシンを含み、前記白金製剤は、シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、ネダプラチンを含み、前記植物由来抗腫瘍薬は、パクリタキセル、パクリタキセルリポソーム、パクリタキセルアルブミン型、ドセタキセル、エトポシド、ヒドロキシカンプトテシンを含み、前記アルキル化剤は、チオテパ、カルムスチン、ニムスチン、ホテムスチン、エストラムスチン、シクロホスファミド、ミレランを含む発明２１に記載の薬用組成物。
【００４２】
発明２３．モノクローナル抗体抗腫瘍薬は、ベバシズマブ、セツキシマブ、トラスツズマブ、パニツムマブ、ニモツズマブ、組み換えヒトエンドスタチンを含む発明２０に記載の薬用組成物。
【００４３】
発明２４．発明１−１８のいずれか一つに記載の薬用溶液、又は発明１９−２３のいずれか一つに記載の薬用組成物の抗腫瘍薬物の製造における用途。
【００４４】
発明２５．悪性腫瘍の治療又は予防に用いられる発明１−１８のいずれか一つに記載の薬用溶液、又は発明１９−２３のいずれか一つに記載の薬用組成物。
【００４５】
発明２６．重水及び少なくとも一種の抗腫瘍薬物を含み、重水及び抗腫瘍薬物が別々に投薬可能、連続投薬可能、又は同時投薬可能であることを特徴とする併用薬物。
【００４６】
発明２７．腫瘍患者に治療有効量の発明１−１８のいずれか一つに記載の薬用溶液、又は発明１９−２３のいずれか一つに記載の薬用組成物又は発明２７に記載の併用薬物を投与することを含む悪性腫瘍の治療又は予防の方法。
【００４７】
発明２８．前記悪性腫瘍は、肺癌、結直腸癌、原発性肝癌、食道癌、胃癌及び噴門癌、膵臓癌、腎細胞癌、膀胱癌、前立腺癌、頭頸部癌、鼻咽頭癌、子宮頸癌、卵巣癌、乳癌、脳腫瘍、骨及び関節の肉腫、甲状腺癌、皮膚癌、悪性黒色腫、悪性リンパ腫、白血病、各種悪性腫瘍の合併症及び再発（例えば、腫瘍細胞の胸腹骨盤腔への転移及び移植、悪性胸腹骨盤腔内貯溜液）から選択される発明２７に記載の方法。
【００４８】
発明２９．肺癌は、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）を含み；結直腸癌は、早期結直腸癌、進行期結直腸癌を含み；原発性肝癌は、肝細胞型、肝管細胞型、混合型を含み；食道癌が腺癌、扁平上皮癌、腺扁平上皮癌、小細胞癌を含み；胃癌及び噴門癌が腺癌、扁平上皮癌、腺扁平上皮癌、小細胞癌、悪性消化管間質腫瘍を含み；膵臓癌は、導管細胞癌、破骨細胞様巨細胞癌；腎細胞癌が淡明細胞癌、乳頭状腎細胞癌を含み；膀胱癌は、尿路上皮癌、扁平上皮癌、腺癌を含み；前立腺癌は、腺癌、導管腺癌、尿路上皮癌、扁平上皮癌を含み；頭頸部癌は、扁平上皮癌、腺癌、腺扁平上皮癌を含み；鼻咽頭癌は、扁平上皮癌、腺癌を含み；子宮頸癌は、扁平上皮癌、腺癌、肉腫を含み；卵巣癌は、上皮性卵巣癌、胚細胞腫瘍、卵巣の性索間質性腫瘍を含み；乳癌は、上皮性腫瘍、間葉系腫瘍、筋上皮腫を含み；脳腫瘍が原発性脳腫瘍及び転移性脳腫瘍を含み、骨及び関節の肉腫は、軟骨肉腫、骨肉腫、ユーイング肉腫、軟部組織肉腫を含み；甲状腺癌は、乳頭状癌、濾胞状腺癌、髄様癌を含み；皮膚癌は、基底細胞癌及び扁平上皮癌を含み；悪性黒色腫は、表在拡大型黒色腫、結節型黒色腫、末端黒子型黒色腫を含み；悪性リンパ腫は、ホジキンリンパ腫及び非ホジキンリンパ腫を含み；白血病は、急性白血病、慢性白血病を含む発明２８に記載の方法。
【００４９】
発明３０．重水の発明１−１８のいずれか一つに記載の薬用溶液の製造における用途。
【００５０】
発明３１．  前記薬用溶液は、広域抗腫瘍相乗剤として抗腫瘍薬効果を相乗できる発明３０の用途。
【発明の効果】
【００５１】
本発明薬用組成物又は併用薬物は、腫瘍浸潤・転移・再発・薬剤耐性の予防・減少に用いることができる。
【図面の簡単な説明】
【００５２】
【図１】重水のヒト結腸癌ＨＣＴ−１１６細胞周期に対する影響を示す；
【図２】ＦＣＭ法による重水のヒト結腸癌ＨＣＴ−１１６細胞周期に対する影響の検出を示す；
【図３】重水のヒト肺癌Ａ５４９細胞周期に対する影響を示す；
【図４】ＦＣＭ法による重水のヒト肺癌Ａ５４９細胞周期に対する影響の検出を示す；
【図５】葡萄糖重水溶液と５−ＦＵとの併用のヒト結腸癌ＨＣＴ−１１６細胞ヌードマウス移植腫瘍腫瘍体積に対する影響を示す。
【図６】葡萄糖重水溶液と５−ＦＵとの併用のヒト結腸癌ＨＣＴ−１１６細胞ヌードマウス移植腫瘍重量に対する影響を示す。
【図７】葡萄糖重水溶液と５−ＦＵとの併用のヒト結腸癌ＨＣＴ−１１６細胞ヌードマウス移植腫瘍の担腫瘍動物体重に対する影響を示す。
【図８】塩化ナトリウム重水溶液とゲムシタビンとの併用のヒト乳癌ＭＣＦ−７細胞ヌードマウス移植腫瘍腫瘍体積に対する影響を示す。
【図９】塩化ナトリウム重水溶液とゲムシタビンとの併用のヒト乳癌ＭＣＦ−７細胞ヌードマウス移植腫瘍に対する影響を示す。
【図１０】塩化ナトリウム重水溶液とゲムシタビンとの併用のヒト乳癌ＭＣＦ−７細胞ヌードマウス移植腫瘍の担腫瘍動物体重に対する影響を示す。
【図１１】塩化ナトリウム重水溶液とゲムシタビンとの併用のヒト肺癌Ａ５４９細胞ヌードマウス移植腫瘍腫瘍体積に対する影響を示す。
【図１２】塩化ナトリウム重水溶液とゲムシタビンとの併用のヒト肺癌Ａ５４９細胞ヌードマウス移植腫瘍重量に対する影響を示す。
【図１３】塩化ナトリウム重水溶液とゲムシタビンとの併用のヒト肺癌Ａ５４９細胞ヌードマウス移植腫瘍の担腫瘍動物体重に対する影響を示す。以上の図において、ＤＪ及びＨＷは、いずれも、重水を示す。
【発明を実施するための形態】
【００５３】
本発明の前記薬用溶液又は薬用組成物において、薬用溶液又は薬用組成物１００ｍｌ当たりに１−９９．９ｍｌの重水、好ましくは９−９９．９  ｍｌの重水、より好ましくは２０−９９．９  ｍｌの重水、より好ましくは３０−９９．９  ｍｌの重水、より好ましくは４０−９９．９  ｍｌの重水、より好ましくは５０−９９．９  ｍｌの重水、より好ましくは６０−９９．９  ｍｌの重水、より好ましくは７０−９９．９  ｍｌの重水、より好ましくは８０−９９．９  ｍｌの重水、より好ましくは９０−９９．９  ｍｌの重水、最も好ましくは９５−９９．９  ｍｌの重水を含む。
【００５４】
本発明に使用される重水は、重水制作所製であり、市販から購入でき、ただし、ジュウテリウム元素は、同位体存在度が１−９９．９％、好ましくは３０−９９．９％、より好ましくは５０−９９．９％、より好ましくは７０−９９．９％であり、最も好ましくは９０−９９．９％である。例えば、米国のＣａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｉｓｏｔｏｐｅ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．提供の、ジュウテリウム元素の同位体存在度が９０−９９．９％（Ｄ９０−９９．９％）である重水を使用できる。
【００５５】
前記薬学的に利用可能な補助材料は、水、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、塩化マグネシウム、乳酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、枸櫞酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、燐酸二水素カリウム、燐酸水素二ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、葡萄糖、フルクトース、アルブミン、リポソーム、ヒアルロン酸、ポリエチレングリコールである。
【００５６】
前記抗腫瘍薬は、抗腫瘍細胞毒類薬物及びモノクローナル抗体抗腫瘍薬物から選択されるものである。
【００５７】
抗腫瘍細胞毒類薬物は、抗代謝物、植物由来抗腫瘍薬、腫瘍抗生物質、アルキル化剤及び白金製剤から選択される。抗代謝物は、５−フルオロウラシル、ゲムシタビン、フルオロウリジン、ペメトレキセド、ラルチトレキシド、フルダラビン、シタラビン、好ましくは５−フルオロウラシル、ゲムシタビン及びペメトレキセドを含む。腫瘍抗生物質は、マイトマイシン、エピルビシン、ピンヤンマイシン、ダウノルビシン、アドリアマイシン、ピラルビシン、アクラルビシンを含み、好ましくはマイトマイシン及びエピルビシンを含む。白金製剤は、シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、ネダプラチンを含み、好ましくはシスプラチン及びオキサリプラチンを含む。植物由来抗腫瘍薬は、パクリタキセル、パクリタキセルリポソーム、パクリタキセルアルブミン型、ドセタキセル、エトポシド、ヒドロキシカンプトテシンを含み、好ましくはパクリタキセル、パクリタキセルリポソーム、パクリタキセルアルブミン型及びドセタキセルを含む。アルキル化剤は、チオテパ、カルムスチン、ニムスチン、ホテムスチン、エストラムスチン、シクロホスファミド、ミレランを含み、好ましくはチオテパ及びカルムスチンを含む。
【００５８】
モノクローナル抗体抗腫瘍薬は、ベバシズマブ、セツキシマブ、トラスツズマブ、パニツムマブ、ニモツズマブ、組み換えヒトエンドスタチンを含み、好ましくはベバシズマブ及び組み換えヒトエンドスタチンを含む。
【００５９】
本発明の薬用溶液は、製薬分野における溶液製造の標準方法により製造され、「中国薬局方」、「米国薬局方」及び「欧州薬局方」における相関標準に合致する。
【００６０】
本発明の薬用溶液と抗腫瘍薬物を配合する時、「中国薬局方」、「米国薬局方」及び「欧州薬局方」に規定される薬用溶液と抗腫瘍薬物の溶解又は希釈の配合比例に従う。
【００６１】
本発明の前記薬用溶液、薬用組成物又は併用薬物の各成分は、別々投与可能、連続投与可能又は同時投与可能である。
【００６２】
本発明の前記薬用溶液又は組成物は、灌流洗浄液、注射液、懸濁液又は乳液又は坐剤に内含された液等の様々な製剤であり、好ましくは灌流洗浄液及び注射液である。
【００６３】
本発明の前記薬用溶液又は薬用組成物は、体腔（熱）灌流洗浄、静脈注射、動脈インターベンション注射、髄膜注射及び腫瘍周囲／腫瘍内注射であり、好ましくは体腔（熱）灌流洗浄投薬及び静脈注射投薬に適用する。静脈注射投薬について、選択される用量が１ｍｌ／ｋｇ−２０ｍｌ／ｋｇである。
【００６４】
前記悪性腫瘍は、肺癌、結直腸癌、原発性肝癌、食道癌、胃癌及び噴門癌、膵臓癌、腎細胞癌、膀胱癌、前立腺癌、頭頸部癌、鼻咽頭癌、子宮頸癌、卵巣癌、乳癌、脳腫瘍、骨及び関節の肉腫、甲状腺癌、皮膚癌、悪性黒色腫、悪性リンパ腫、白血病、各種悪性腫瘍の合併症及び再発（例えば、腫瘍細胞の胸腹骨盤腔への転移及び移植、悪性胸腹骨盤腔内貯溜液）等から選択される。
【００６５】
肺癌は、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）等を含み；結直腸癌は、早期結直腸癌、進行期結直腸癌等を含み；原発性肝癌は、肝細胞型、肝管細胞型、混合型等を含み；食道癌は、腺癌、扁平上皮癌、腺扁平上皮癌、小細胞癌等を含み；胃癌及び噴門癌は、腺癌、扁平上皮癌、腺扁平上皮癌、小細胞癌、悪性消化管間質腫瘍等を含み；膵臓癌は、導管細胞癌、破骨細胞様巨細胞癌、その他等を含み；腎細胞癌は、淡明細胞癌、乳頭状腎細胞癌を含み；膀胱癌は、尿路上皮癌、扁平上皮癌、腺癌等を含み；前立腺癌は、腺癌、導管腺癌、尿路上皮癌、扁平上皮癌を含み；頭頸部癌は、扁平上皮癌、腺癌、腺扁平上皮癌を含み；鼻咽頭癌は、扁平上皮癌、腺癌を含み；子宮頸癌は、扁平上皮癌、腺癌、肉腫を含み；卵巣癌は、上皮性卵巣癌、胚細胞腫瘍 、卵巣の性索間質性腫瘍；乳癌は、上皮性腫瘍、間葉系腫瘍、筋上皮腫を含み；脳腫瘍は、原発性脳腫瘍及び転移性脳腫瘍を含み、骨及び関節の肉腫は、軟骨肉腫、骨肉腫、ユーイング肉腫、軟部組織肉腫を含み；甲状腺癌は、乳頭状癌、濾胞状腺癌、髄様癌を含み；皮膚癌は、基底細胞癌及び扁平上皮癌を含み；悪性黒色腫は、表在拡大型黒色腫、結節型黒色腫、末端黒子型黒色腫を含み；悪性リンパ腫は、ホジキンリンパ腫及び非ホジキンリンパ腫を含み；白血病は、急性白血病、慢性白血病を含む。
【００６６】
本明細書に記載の「含む」は、言及されている物質又は成分のみを含む場合もカバーし、言及されている物質又は成分の他に予期目標の達成を阻害しない他の物質又は成分も含むの場合もカバーする。
【００６７】
特に断らない限り、本明細書において物質量を示す数値は、「約」で修飾されていると理解すべきである。
【００６８】
以下、実施例に基づいて、本発明を更に説明する。本発明の範囲は、それらの実施例に限定されないと理解すべきである。
【００６９】
本願の実施例に使用の細胞株は、いずれも、市販で入手できるものである。
【実施例】
【００７０】
実施例１
０．９ｇの塩化ナトリウムを量り取り、９９ｍｌの重水（Ｄ，９９．８％、米国のＣａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｉｓｏｔｏｐｅ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，  Ｉｎｃ．製、以下同じ）を添加し、塩化ナトリウムを攪拌・溶解し、数滴の水酸化ナトリウム溶液を添加し溶液のｐＨを７．０に調整し、更に最終体積が１００ｍｌになるまで重水を添加し、微多孔膜フィルターで濾過し、瓶充填・封止し、滅菌・消毒して、本発明の薬用溶液１００ｍｌ当たりに０．９ｇの塩化ナトリウムを含む塩化ナトリウム重水溶液を得た。
【００７１】
実施例２
５ｇの葡萄糖を量り取り、９９ｍｌの重水を添加し葡萄糖を攪拌・溶解し、数滴の塩酸溶液を添加しｐＨを５．５に調整し、更に最終体積が１００ｍｌになるまで重水を添加し、微多孔膜フィルターで濾過し、瓶充填・封止し、滅菌・消毒して、本発明の薬用溶液１００ｍｌ当たりに５ｇの葡萄糖を含む葡萄糖重水溶液を得た。
【００７２】
実施例３
１０ｇの葡萄糖を別々に量り取り、９９ｍｌの重水を添加し葡萄糖を攪拌・溶解し、数滴の塩酸溶液を添加しｐＨを５．５に調整し、更に最終体積が１００ｍｌになるまで重水を添加し、微多孔膜フィルターで濾過し、瓶充填・封止し、滅菌・消毒して、本発明の薬用溶液１００ｍｌ当たりに１０ｇの葡萄糖を含む葡萄糖重水溶液を得た。
【００７３】
実施例４
０．９ｇの塩化ナトリウム及び５ｇの葡萄糖をを別々に量り取り、重水９９  ｍｌを添加し、攪拌・溶解し、数滴の塩酸溶液を添加しｐＨを５．０に調整し、さらに最終体積１００  ｍｌになるまで重水を添加し、微多孔膜フィルターで濾過し、瓶充填・封止し、滅菌・消毒して、本発明の薬用溶液１００ｍｌ当たりに０．９ｇの塩化ナトリウム及び５ｇの葡萄糖を含む葡萄糖塩化ナトリウム重水溶液を得た。
【００７４】
実施例５
０．８５ｇの塩化ナトリウム、０．０３ｇの塩化カリウム、０．０３３ｇの塩化カルシウム（ＣａＣｌ２・２Ｈ２Ｏ）を別々に量り取り、９９  ｍｌの重水を添加し、攪拌・溶解し、数滴の水酸化ナトリウム溶液を添加しｐＨを７．０に調整し、更に最終体積が１００ｍｌになるまで重水を添加し、微多孔膜フィルターで濾過し、瓶充填・封止し、滅菌・消毒して、本発明のリンゲル重水溶液を得た。
【００７５】
実施例６
０．３１ｇの乳酸ナトリウム、０．６ｇの塩化ナトリウム、０．０３ｇの塩化カリウム及び０．０２ｇの塩化カルシウム（ＣａＣｌ２・２Ｈ２Ｏ）を別々に量り取り、９９  ｍｌの重水を添加し、攪拌・溶解し、数滴の水酸化ナトリウム溶液を添加しｐＨを７．０に調整し、更に最終体積が１００ｍｌになるまで重水を添加し、微多孔膜フィルターで濾過し、瓶充填・封止し、滅菌・消毒して、本発明の乳酸ナトリウムリンゲル重水溶液を得た。
【００７６】
実施例７
０．３１ｇの乳酸ナトリウム、０．６ｇの塩化ナトリウム、０．０３ｇの塩化カリウム、０．０２ｇの塩化カルシウム（ＣａＣｌ２・２Ｈ２Ｏ）、５ｇの葡萄糖を別々に量り取り、９９  ｍｌの重水を添加し、攪拌・溶解し、数滴の塩酸溶液を添加しｐＨを６．０に調整し、更に最終体積が１００ｍｌになるまで重水を添加し、微多孔膜フィルターで濾過し、瓶充填・封止し、滅菌・消毒して、本発明の複合乳酸ナトリウム葡萄糖リンゲル重水溶液を得た。
【００７７】
実施例８
２５ｇ又は５０ｇのフルクトースを別々に量り取り、４９９  ｍｌの重水を添加し、攪拌・溶解し、数滴の塩酸溶液を添加しｐＨを６．０に調整し、更に最終体積が５００  ｍｌになるまで重水を添加し、微多孔膜フィルターで濾過し、瓶充填・封止し、滅菌・消毒して、本発明の薬用溶液５００ｍｌ当たりに２５ｇ又は５０ｇのフルクトースを含むフルクトース重水溶液を得た。
【００７８】
実施例９
１２．５ｇのフルクトース、２．２５ｇの塩化ナトリウムを別々に量り取り、２４９  ｍｌの重水を添加し、攪拌・溶解し、数滴の塩酸溶液を添加しｐＨを６．０に調整し、更に最終体積が２５０  ｍｌになるまで重水を添加し、微多孔膜フィルターで濾過し、瓶充填・封止し、滅菌・消毒して、本発明のフルクトース塩化ナトリウム重水溶液を得た。
【００７９】
実施例１０
１００ｇのグリセリン、５０ｇのフルクトース、９ｇの塩化ナトリウムを別々に量り取り、９９９  ｍｌの重水を添加し、攪拌・溶解し、数滴の塩酸溶液を添加しｐＨを６．０に調整し、更に最終体積が１０００  ｍｌになるまで重水を添加し、微多孔膜フィルターで濾過し、瓶充填・封止し、滅菌・消毒して、本発明のグリセリンフルクトース塩化ナトリウム重水溶液を得た。
【００８０】
実施例１１
１．９ｇの酢酸ナトリウム、３．０ｇの塩化ナトリウム、０．１５ｇの塩化カリウム及び０．１ｇの塩化カルシウムを別々に量り取り、４９９  ｍｌの重水を添加し、攪拌・溶解し、数滴の水酸化ナトリウム溶液を添加しｐＨを７．０に調整し、更に最終体積が５００  ｍｌになるまで重水を添加し、微多孔膜フィルターで濾過し、瓶充填・封止し、滅菌・消毒して、本発明の複合酢酸ナトリウム重水溶液を得た。
【００８１】
実施例１２
５ｇ又は１０ｇの炭酸水素ナトリウムを別々に量り取り、９９  ｍｌの重水を添加し、攪拌・溶解し、数滴の水酸化ナトリウム溶液を添加しｐＨを８．０に調整し、更に最終体積が１００ｍｌになるまで重水を添加し、微多孔膜フィルターで濾過し、瓶充填・封止し、滅菌・消毒して、本発明の薬用溶液１００ｍｌ当たりに５ｇ又は１０ｇの炭酸水素ナトリウムを含む炭酸水素ナトリウム重水溶液を得た。
【００８２】
実施例１３
０．８ｇの塩化ナトリウム、０．０４ｇの塩化カリウム、０．１ｇの葡萄糖、０．００６ｇの燐酸二水素カリウム、０．００４７５ｇの燐酸水素二ナトリウム、０．０３５ｇの炭酸水素ナトリウムを別々に量り取り、９９  ｍｌの重水を添加し、攪拌・溶解し、数滴の水酸化ナトリウム溶液を添加しｐＨを７．０に調整し、更に最終体積が１００ｍｌになるまで重水を添加し、微多孔膜フィルターで濾過し、瓶充填・封止し、滅菌・消毒して、本発明のハンクス平衡塩重水溶液を得た。
【００８３】
実施例１４
０．８ｇの塩化ナトリウム、０．０４ｇの塩化カリウム、０．１ｇの葡萄糖、０．００６ｇの燐酸二水素カリウム、０．００４７５ｇの燐酸水素二ナトリウム、０．２２ｇの炭酸水素ナトリウムを別々に量り取り、９９  ｍｌの重水を添加し、攪拌・溶解し、数滴の水酸化ナトリウム溶液を添加しｐＨを７．０に調整し、更に最終体積が１００ｍｌになるまで重水を添加し、微多孔膜フィルターで濾過し、瓶充填・封止し、滅菌・消毒して、本発明のＥａｇｌｅｓ重水溶液を得た。
【００８４】
実施例１５
０．６４ｇの塩化ナトリウム、０．０７５ｇの塩化カリウム、０．０４８ｇの塩化カルシウム、０．０３ｇの塩化マグネシウム、０．３９ｇの酢酸ナトリウム、０．１７ｇの枸櫞酸ナトリウムを別々に量り取り、９９  ｍｌの重水を添加し、攪拌・溶解し、数滴の水酸化ナトリウム溶液を添加しｐＨを７．０に調整し、更に最終体積が１００ｍｌになるまで重水を添加し、微多孔膜フィルターで濾過し、瓶充填・封止し、滅菌・消毒して、本発明の複合平衡塩重水溶液を得た。
【００８５】
実施例１６
重水によるｉｎ  ｖｉｔｒｏのヒト腫瘍細胞成長の抑制の研究（ＭＴＴ（チアゾリルブルー）法）：  
細胞株：表１に使用される各型腫瘍細胞株は、いずれも、ＮＡＮＪＩＮＧ  ＫＥＹＧＥＮ  ＢＩＯＴＥＣＨ．  ＣＯ．，  ＬＴＤから入手したものであり、いずれも、Ｕ．Ｓ．  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ  Ｌｉｎｅ由来であり、いずれも、市販されており、以下同じである。
【００８６】
方法：
１．  ３〜４日間培養した、指数増殖期にある培養細胞を一瓶取り、適量の０．２５％  Ｔｒｙｐｓｉｎ−ＥＤＴＡ液を添加し、壁に付着した細胞を脱落させ、１０％ウシ胎仔血清を含むＲＰＭＩ  １６４０培養液ｌ０ｍｌで懸濁液に調製した。
２．  血球計数板で細胞をカウントしたところ、一般的に、活細胞が９７％以上であるはずであった。
３．  完全培地で細胞懸濁液を希釈し、１×１０４個細胞／ｍｌの懸濁液に調製した。
４．  １２穴細胞培養プレートを取り、各穴に細胞懸濁液３００μｌを添加した。細胞添加過程を４時間以内に制御すべきであった。プレートを３７℃に置いて、５％ＣＯ２インキュベーターにおいて２４時間培養した。
５．  米国のＣａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｉｓｏｔｏｐｅ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，  Ｉｎｃ．から入手された重水で粉末状ＲＰＭＩ  Ｍｅｄｉｕｍ  １６４０（米国Ｇｉｂｃｏ  Ｌｉｆｅ  Ｃｏｍｐａｎｙ，番号：３１８００−０２２）を溶解し、表１に示す濃度で細胞培養液（以下の実施例において特に断らない限り、培養液はいずれも粉末状ＲＰＭＩ  Ｍｅｄｉｕｍ  １６４０及び重水で調製されたものである。）とし、それぞれを細胞培養プレート内に添加した。
６．  細胞培養プレートを３７℃、５％ＣＯ２を含む空気及び１００％湿度のインキュベーターで３日間インキュベーションした。
７．  無血清ＲＰＭＩ１６４０培養液でＭＴＴを１ｍｇ／ｍｌ溶液に調製し、各穴に２００μｌを添加し、３７℃で４時間インキュベーションし、ＭＴＴをホルマザンに還元した。
８．  上澄液を吸い出し、２００μｌ  ＤＭＳＯを添加し、ホルマザンを溶解させ、フラットシェーカーで均一に振った。
９．  マイクロプレートリーダーで参照波長４５０ｎｍ、検出波長５７０ｎｍで穴ごとの吸光度を検出した。
１０．  実験を１回繰り返した。
【００８７】
結果計算：生理塩水で対照処理された腫瘍細胞を対照群し、重水の腫瘍細胞に対する成長抑制率を計算した。重水の異なる含有量と細胞に対する成長抑制率をプロットして、用量反応グラフを得ることができ、該グラフから重水の半数抑制濃度（ＩＣ５０）を求めた。
腫瘍細胞成長抑制率％＝（１−ＯＤ実験／ＯＤ対照）×１００％
【００８８】
【表１（ａ−１）】
2017516854.tif 000002
【００８９】
【表１（ａ−２）】
2017516854.tif 000003
【００９０】
表１（ｂ）に重水の異なる種類の腫瘍細胞に対するＩＣ５０及びＩＣ１０（体積百分率含有量で示す）を示す。
【００９１】
【表１（ｂ−１）】
2017516854.tif 000004
【００９２】
【表１（ｂ−２）】
2017516854.tif 000005
【００９３】
表１７（ｂ）の結果から分かるように、重水の異なる種類の腫瘍細胞に対するＩＣ５０、ＩＣ１０は、それぞれ異なった。
【００９４】
結果から示されるように、重水は、多種の癌細胞株成長に対して一定の抑制作用を有し、重水含有量が高ければ高いほど、腫瘍細胞成長に対する抑制作用が顕著となった。
【００９５】
実施例１７
重水と５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）との併用のｉｎ  ｖｉｔｒｏのヒト結腸癌ＨＣＴ−１１６細胞（中等薬剤耐性株）成長に対する抑制作用：  
細胞株：ヒト結腸癌細胞ＨＣＴ−１１６、ＮＡＮＪＩＮＧ  ＫＥＹＧＥＮ  ＢＩＯＴＥＣＨ．  ＣＯ．，  ＬＴＤから入手。
被験薬品：５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、実施例１で製造された塩化ナトリウム重水溶液。
方法：塩化ナトリウム重水溶液を取り、表２に示す含有量で５−フルオロウラシルを希釈し、細胞培養プレートに添加し、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで腫瘍細胞成長を抑制し、ＭＴＴ法を行い、実験方法は、実施例１６と同じであった。
実験を１回繰り返した。
【００９６】
結果：５−ＦＵのヒト結腸癌ＨＣＴ−１１６細胞（中等薬剤耐性株）に対して一定の抑制成長作用を有し、重水と併用した場合、抗腫瘍作用を顕著的に増加できることが発見された。結果を表２に示す。
【００９７】
【表２】
2017516854.tif 000006
【００９８】
結果から示されるように、表２から分かるように、重水は、５−ＦＵとの併用により、薬剤耐性株腫瘍細胞（中等薬剤耐性株）成長に対する抑制を増加し、特に５−ＦＵが低濃度である場合、重水の相乗効果がより顕著となり、その故、重水が抗薬剤耐性の相乗効果を有した。
【００９９】
実施例１８
重水と５−フルオロウラシル又はゲムシタビンとの併用のヒト結腸癌ＨＣＴ−１１６細胞、ヒト肺癌細胞Ａ５４９浸潤に対する抑制作用（Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ法）  
細胞株：ヒト結腸癌ＨＣＴ−１１６細胞及びヒト肺癌Ａ５４９細胞は、ＮＡＮＪＩＮＧ  ＫＥＹＧＥＮ  ＢＩＯＴＥＣＨ．  ＣＯ．，  ＬＴＤから入手した。
被験薬品：ゲムシタビン（ＧＥＭ）、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、実施例１で製造された塩化ナトリウム重水溶液。
【０１００】
方法：
細胞培養
１．  細胞回復
１．１．  ３７℃〜４０℃の温水を調製し、液体窒素から凍結保存バイアルを取り出し、直ちに３７℃〜４０℃温水に入れ、凍結保存液が完全に溶解するまで素早く振った；
１．２．  細胞凍結保存懸濁液を遠心チューブ内に転移し、約５ｍｌの培養液を添加し、軽くパーカッションし、均一に混合した；
１．３．  細胞懸濁液を８００〜１０００ｒ／ｍｉｎで５ｍｉｎ遠心分離して、上澄液を捨てた；
１．４．  細胞沈殿内に完全培養液を添加し、軽くパーカッションし、均一に混合し、細胞懸濁液を培養瓶内に転移し、培養液を補足し、培養を行った。
Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ検出細胞浸潤
１．  細胞処理群によって被験薬品を別々に添加し：生理塩水単独でゲムシタビン又は５−ＦＵを希釈し；又は塩化ナトリウム重水溶液を取り、表３に示す含有量でゲムシタビン（重水＋ゲムシタビン）又は５−ＦＵ（重水＋５−ＦＵ）を希釈し、Ａ５４９及びＨＣＴ１１６細胞のそれぞれに作用し、その後、細胞を３７℃に置いて、５％ＣＯ２培養器中で２４ｈインキュベートした；
２．  細胞を上記被験薬品により２４ｈインキュベート処理した後、血清を取り除いて、不完全培地を使用し続けて細胞を２４ｈ飢餓培養した；
３．  事前にＭａｔｒｉｇｅｌマトリゲルを４℃で放置して一晩融化させておいた；
４．  その後、融化されたＭａｔｒｉｇｅｌゲルを不完全培地で一倍希釈し、Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ上室に３０ｕＬ希釈されたＭａｔｒｉｇｅｌを添加し、３７℃で１２０ｍｉｎインキュベートし、Ｍａｔｒｉｇｅｌをゲルに重合させた；
５．  異なる群の細胞を消化し、カウントし、不完全培地で細胞密度を１×１０５個／ｍｌに調整し、細胞懸濁液１００μｌを取り、Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室の上室に添加し、下室に２０％ＦＢＳを含む培養基５００μｌを添加した；
６．  ２４穴細胞培養プレートを３７℃、５％ＣＯ２培養器に置いて２４時間培養した；
７．  細胞カウント：綿棒でマトリゲル及び上室内の細胞を拭き取り、ｔｒａｎｓｗｅｌｌｓを除去し、反転させ、空気乾燥し、２４穴プレートに０．１％クリスタルバイオレットを含有する溶液５００μｌを添加し、そこに小室を置いて、膜を染料に沈めて、３７℃で３０ｍｉｎ保持した後、取り出し、ＰＢＳ洗浄し、直径に三つの視野を取り、撮影（拡大倍率２００Ｘ）し、カウントした。
８．  実験を１回繰り返した。
結果
【０１０１】
【表３】
2017516854.tif 000007
【０１０２】
表３は、重水（１．８％）を例として、細胞培養液内の重水濃度が１．８％（ｖ／ｖ）であることを示し、以下同じである。
【０１０３】
結果から示されるように、重水そのものは、Ａ５４９、ＨＣＴ−１１６細胞浸潤を抑制する作用を有し、該抑制作用が含有量と正比例した。
【０１０４】
【表４】
2017516854.tif 000008
【０１０５】
表４は、５−ＦＵ  （０．１９５ｕｇ／ｍｌ）を例として、生理塩水を溶媒とし、５−ＦＵの濃度が０．１９５ｕｇ／ｍｌであることを示す。
【０１０６】
【表５】
2017516854.tif 000009
【０１０７】
表５は、重水（３０％）＋５−ＦＵ（０．１９５ｕｇ／ｍｌ）を例として、細胞培養液内の重水濃度が３０％（ｖ／ｖ）であり、５−ＦＵ濃度が０．１９５ｕｇ／ｍｌであることを示し、以下同じである。
【０１０８】
結果から示されるように、３０％重水と５−ＦＵとの併用は、顕著的にＨＣＴ−１１６細胞浸潤を抑制でき、特に、５−ＦＵの濃度が０．１９５ｕｇ／ｍｌのみである場合、両者を併用すれば、顕著的にＨＣＴ−１１６細胞浸潤を抑制できた。
【０１０９】
【表６】
2017516854.tif 000010
【０１１０】
【表７】
2017516854.tif 000011
【０１１１】
結果から示されるように、重水は、ゲムシタビンと併用した場合、  Ａ５４９細胞浸潤を顕著的に抑制し、特に、ゲムシタビンの濃度が１．９５ｎＭのみである場合、両者の併用により、Ａ５４９細胞浸潤を顕著的に抑制できた。
【０１１２】
以上の結果から、重水は、多種の腫瘍細胞転移を抑制する効果を有し、用量と正比例し、その他薬物と併用して、腫瘍細胞転移を共同抑制できることが示された。
【０１１３】
実施例１９
重水のヒト肺癌Ａ５４９細胞及び結腸癌ＨＣＴ−１１６細胞周期に対する影響
材料
ヒト肺腺癌細胞Ａ５４９及び結腸癌細胞ＨＣＴ−１１６細胞は、ＮＡＮＪＩＮＧ  ＫＥＹＧＥＮ  ＢＩＯＴＥＣＨ．  ＣＯ．，  ＬＴＤから入手し、３７℃、５％ＣＯ２、飽和湿度の培養器で培養した。
ＫＧＡ５１１細胞周期検出キットは、中国ＮＡＮＪＩＮＧ  ＫＥＹＧＥＮ  ＢＩＯＴＥＣＨ．  ＣＯ．，  ＬＴＤから入手した。
フローサイトメトリーは、美国Ｂｅｃｔｏｎ−Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎから入手したＦＡＣＳ  Ｃａｌｉｂｕｒである。
被験薬品：ゲムシタビン（ＧＥＭ）、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、実施例１で製造された塩化ナトリウム重水溶液。
【０１１４】
方法
細胞培養
１  細胞回復
１．１  ３７℃〜４０℃の温水を調製し、液体窒素から細胞凍結保存バイアルを取り出し、直ちに３７℃〜４０℃温水に投入し、凍結保存液が完全に溶解するまで素早く振った；
１．２細胞凍結保存懸濁液を遠心チューブ内に転移し、約５ｍｌの培養液を添加し、軽くパーカッションし、均一に混合した；
１．３  細胞懸濁液を８００〜１０００ｒ／ｍｉｎで５ｍｉｎ遠心分離して、上澄液を捨てた；
１．４  細胞沈殿内に完全培養液を添加し、軽くパーカッションし、均一に混合し、細胞懸濁液を培養瓶内に転移し、培養液を補足し、培養を行った。
２  細胞継代
２．１  培養瓶中における細胞被覆率が８０％−９０％に達した時、当初の原培養基を吸い取った；
２．２適当のトリプシン（０．２５％）を添加し、１−２分間消化した；
２．３  細胞が丸くなった後、等体積の血清含有培養基を添加し、消化を終了した；
２．４  ピペットマンで細胞をパーカッションし、全ての細胞をサスペンションさせ、その後、細胞を１５ｍｌの遠心チューブに吸い込み、１０００ｒｐｍ  で５分間遠心分離した；
２．５上澄液を捨てて、１−２ｍｌ培養基を添加し、改めて細胞をサスペンションし、培養瓶に転移して、続けて培養した。
ＰＩ単染色法による細胞周期の検出
１対数増殖期の細胞を消化し、六穴プレートに接種し、翌日、細胞が壁に付着した後、群によって相応的な被験薬品を含む細胞培養基を設置・添加し、同時に陰性対照群を確立した；
２被験薬品を７２ｈ作用させた後、０．２５％パンクレアチン（ＥＤＴＡ非含有）で消化し、細胞を収集した；
３  細胞を１回ＰＢＳ洗浄し（２０００ｒｐｍで５ｍｉｎ遠心分離）、５×１０５細胞を収集した；
４  製造された単細胞懸濁液を体積分数７０％のエタノールで２時間（又は一晩）  固定し、４℃で保存し、染色前にＰＢＳで固定液を洗い取った（必要があれば、細胞懸濁液を２００メッシュスクリーンで一回濾過した）；
５  １００μＬ  ＲＮａｓｅ  Ａを添加し、３７℃で３０ｍｉｎ水浴した；
６  さらに４００μＬ  ＰＩを添加し、染色し、均一に混合し、４℃で３０ｍｉｎ遮光した；
７  装置で検出し、励起波長４８８ｎｍにおける赤色蛍光を記録した。
結果
【０１１５】
【表８】
2017516854.tif 000012
【０１１６】
【表９】
2017516854.tif 000013
【０１１７】
５−ＦＵ及びゲムシタビンは、細胞毒類代謝抗腫瘍薬であり、主にＤＮＡ合成期、即ちＳ期腫瘍細胞に作用し、表８及び表９の結果及び図１−４から分かるように、重水は、腫瘍細胞がＳ期からＧ２期へ入るのを阻害し、重水と５−ＦＵ及びゲムシタビンとを併用したことにより、５−ＦＵ及びゲムシタビンがＳ期腫瘍細胞をより効果的に殺滅し、Ｓ期腫瘍細胞が顕著的に減少し、相乗作用を発揮する。
【０１１８】
実施例２０
重水と５−フルオロウラシルとの併用の腹膜灌流（洗浄）のエールリッヒ腹水腫瘍（ＥＡＣ）マウスに対する薬効実験
被験動物：ＩＣＲマウス、週齡：４−５ｗ、性別：雄性、Ｓｈａｎｇｈａｉ  Ｓｕｐｅｒ  −−  Ｂ＆Ｋ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  ａｎｉｍａｌ  Ｃｏｒｐ．Ｌｔｄ．から入手した。
細胞株：エールリッヒ腹水腫瘍細胞株は、ＮＡＮＪＩＮＧ  ＫＥＹＧＥＮ  ＢＩＯＴＥＣＨ．  ＣＯ．，  ＬＴＤから入手した。
被験薬品：  ５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、実施例１で製造された塩化ナトリウム重水溶液。
【０１１９】
実験方法：
１．  モデルの製造：ＥＡＣ腹水液を取り、濃度を１  ｘ  １０７個／ｍｌに調整し、０．１ｍｌ／１匹でマウス腹腔に接種した。
２．  群分け及び投薬：接種３日後、動物をランダムに群分けた。同時に、各群マウスに投薬し始めた。投薬方案を表１０に示す。
【０１２０】
【表１０】
2017516854.tif 000014
【０１２１】
表１０において、「塩化ナトリウム重水溶液０．１  ｍｌ／匹＋  ５−ＦＵ２０ｍｇ／ｋｇ」は、１匹のマウスごとに塩化ナトリウム重水溶液０．１  ｍｌを投与し、且つ２０ｍｇ／ｋｇの投薬量となるように５−ＦＵを塩化ナトリウム重水溶液に溶解したことを示す。
【０１２２】
３．  観測指標
投薬終了後、各群から各３匹のマウスの腹水を抽出し、腹水体積及び腹水中腫瘍細胞数を計算し、残りの各群動物を続けて飼養し、各群動物の生存期間中央値（即ち、ｍｅｄｉａｎ  ｓｕｒｖｉｖａｌ  ｔｉｍｅ，ＭＳＴ）を観察し、各群の生存期間を評価した。
治療群と対照群との比較は、Ｔ／Ｃ（％）で示され、計算式が次のとおりである：
【０１２３】
【数１】
2017516854.tif 000015
【０１２４】
Ｔ  ＭＳＴ：治療群ＭＳＴ；Ｃ  ＭＳＴ：陰性対照群ＭＳＴ。
評価標準の限界を１２５％とし、Ｔ／Ｃ％≧１２５％  の場合、有効とし、逆に、無効とした。
【０１２５】
４．  統計処理
平均値を  Ｘ±ＳＤで示し、群間分析を  ｔ検定で統計学処理し、ＳＰＳＳ  （  Ｓｔａｆｆｓｔｉｃａｌ  Ｐａｃｋａｇｅ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｓｏｃｉａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ）  １７．０を使用し、結果を統計分析した。
【０１２６】
５．  結果：
５．１  生存期の指標：腹腔内注射投薬の動物生存日数に対する影響
【０１２７】
【表１１】
2017516854.tif 000016
【０１２８】
【表１２】
2017516854.tif 000017
【０１２９】
結果から示されるように、重水塩化ナトリウム溶液＋  ５−ＦＵ併用群は、生理塩水対照群と比べると、生存期間中央値が延長し、Ｐ値＜０．０１，Ｔ／Ｃ（％）≧１５０％であり；単独５−ＦＵ群より優れた。
【０１３０】
塩化ナトリウム重水溶液で腹腔洗浄しておいてからに腹腔内注射投薬すると、マウス生存期間中央値が顕著的に延長でき、塩化ナトリウム重水溶液のみで腹腔内注射投薬することによる生存期間中央値を超え、それぞれが、２９．１±３．１日ｖｓ．  ２４．１±２．７日であり；３４．５±３．３日ｖｓ．  ２５．７±２．６日であり、各Ｐ値＜０．０５であった。それから示されるように、重水で腹腔洗浄しておいてから注射投薬することは、優位性を有した。
【０１３１】
５．２  腹水指標：投薬終了後、頚椎脱臼法で実験における各群から各３匹のマウスを処死し、通常の消毒をし、無菌条件下で開腹し、腹水を収集し、体積を計算した。
【０１３２】
【表１３】
2017516854.tif 000018
【０１３３】
【表１４】
2017516854.tif 000019
【０１３４】
結果から示されるように、生理塩水対照群と比べると、塩化ナトリウム重水溶液群の腹水量が減少し、Ｐ＜０．０５であり；塩化ナトリウム重水溶液＋  ５−ＦＵ併用群と５−ＦＵ単独投与群とを比較すると、腹水体積も減少し、それぞれが：７．０±１．３ｍｌ，５．９±０．５ｍｌ，４．７±０．３ｍｌ  ｖｓ  ６．９±０．９ｍｌ，各Ｐ＜０．０５であった。
【０１３５】
塩化ナトリウム重水溶液を腹腔洗浄してから腹腔内注射投薬する群は、腹水量が、未洗浄の腹腔内注射投薬群より少なく、それぞれが、５．８±０．７ｍｌ  ｖｓ．７．０±１．３ｍｌ；３．３±０．１ｍｌ  ｖｓ．５．９±０．５ｍｌ；２．６±０．１ｍｌ  ｖｓ．  ４．７±０．３ｍｌ；各Ｐ＜０．０１であった。重水で腹腔洗浄しておいてから投薬することの優位性が示された。
【０１３６】
実施例２１
重水とシスプラチンとの併用及び重水とシスプラチンとの併用及びエピルビシンによる担癌ラットの腹腔内保留式温熱（４２℃）洗浄の肝癌Ｈ２２腹水腫瘍に対する抑制作用
実験方法：
動物：昆明マウス、週齡：４−５ｗ、性別：雄性、Ｓｈａｎｇｈａｉ  Ｓｕｐｅｒ  −−  Ｂ＆Ｋ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  ａｎｉｍａｌ  Ｃｏｒｐ．Ｌｔｄ．から入手。
細胞株：肝癌Ｈ２２腹水腫瘍細胞株は、ＮＡＮＪＩＮＧ  ＫＥＹＧＥＮ  ＢＩＯＴＥＣＨ．  ＣＯ．，  ＬＴＤから入手した。
モデルの製造：１×１０７／ｍｌ  Ｈ２２腫瘍細胞懸濁液０．２ｍｌ（Ｈ２２細胞数２×１０６含有）をマウス腹腔に接種した。
被験薬品：シスプラチン、エピルビシン、実施例５で製造されたリンゲル重水溶液。
群分け及び投薬：接種７−８日後、マウスがモデルとなった後、ランダムに群分け（各群１８匹）した。
シスプラチン、エピルビシンを４２℃リンゲル重水溶液に溶解し、担癌ラット腹腔を洗浄した。
１）．  空白対照群（４２℃の普通リンゲル注射液、１０ｍｌ／ｋｇ）；
２）．  慣用化学療法群（シスプラチン  ０．６ｍｇ／ｋｇ  ＋４２℃の普通リンゲル注射液１０ｍｌ／ｋｇ）；
３）．  重水小用量＋シスプラチン群（４２℃リンゲル重水溶液５ｍｌ／ｋｇ＋シスプラチン０．６ｍｇ／ｋｇ  ）；
４）．  重水中用量＋シスプラチン群（４２℃リンゲル重水溶液２０ｍｌ／ｋｇ＋シスプラチン０．６ｍｇ／ｋｇ  ）；
５）．  重水高用量＋シスプラチン群（４２℃リンゲル重水溶液４０ｍｌ／ｋｇ＋シスプラチン０．６ｍｇ／ｋｇ  ）；
６）．  重水小用量＋シスプラチン群＋エピルビシン（４２℃リンゲル重水溶液５ｍｌ／ｋｇ＋シスプラチン０．６ｍｇ／ｋｇ＋エピルビシン０．２ｍｇ／ｋｇ）；
７）．  重水中用量＋シスプラチン群＋エピルビシン（４２℃リンゲル重水溶液２０ｍｌ／ｋｇ＋シスプラチン０．６ｍｇ／ｋｇ＋エピルビシン０．２ｍｇ／ｋｇ）；
８）．  重水高用量＋シスプラチン群＋エピルビシン（４２℃リンゲル重水溶液４０ｍｌ／ｋｇ＋シスプラチン０．６ｍｇ／ｋｇ＋エピルビシン０．２ｍｇ／ｋｇ）。
上記組成物でマウス腹腔を洗浄し、投与後、１０分間腹腔内で保留することを３回反複して、一日おきに１回、５回継続投与し、毎日投薬前にマウスの体重、腹囲を測定し、マウスの日常生活状態を観察した。投薬終了２４ｈ後（１１日目）、各群から各８匹のマウスを処死し、腹水量を測定し、マウスを解剖して、腹腔臓器及び肺臓の転移様子を観察した。残りのマウスについて、生存期間を観察し、寿命延長率を計算した。
４．  観測指標：実施例２１と同じであった。
５．  統計処理：実施例２１と同じであった。
６．  結果：
【０１３７】
【表１５】
2017516854.tif 000020
【０１３８】
【表１６】
2017516854.tif 000021
【０１３９】
シスプラチンは、抗腫瘍薬プラチン系製剤の代表であり、エピルビシンは、広域スペクトル抗腫瘍抗生物質であり、重水は、広域スペクトル抗腫瘍相乗作用を有する。結果から示されるように、腹腔内温熱（４２℃）重水とシスプラチン及びエピルビシンとの併用による洗浄は、担Ｈ２２腹水腫瘍マウスの生存期間を顕著的に延長でき、担Ｈ２２腹水腫瘍マウス腹水の生成を抑制し、担腫瘍マウスの生存質量を改善し、抗腫瘍薬效を有した。
【０１４０】
実施例２２
重水とオキサリプラチンとの併用及び重水とオキサリプラチン及びマイトマイシンとの併用による腹腔内保留式温熱（４２℃）洗浄の担癌ラット腹腔の肉腫Ｓ１８０（腹水型）に対する抑制作用
実験方法：
動物：昆明マウス、週齡：４−５ｗ、性別：雄性、Ｓｈａｎｇｈａｉ  Ｓｕｐｅｒ  −−  Ｂ＆Ｋ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  ａｎｉｍａｌ  Ｃｏｒｐ．Ｌｔｄ．から入手。
細胞株：肉腫Ｓ１８０（腹水型）細胞株は、ＮＡＮＪＩＮＧ  ＫＥＹＧＥＮ  ＢＩＯＴＥＣＨ．  ＣＯ．，  ＬＴＤから入手した。
モデルの製造：１×１０７／ｍｌ  Ｓ１８０腫瘍細胞懸濁液０．２ｍｌをマウス腹腔に接種した。
被験薬品：オキサリプラチン、マイトマイシン、実施例２製造された葡萄糖重水溶液。
群分け及び投薬：接種７−８日後、マウスがモデルとなった後、ランダムに群分け（各群１２匹）した。
オキサリプラチン、マイトマイシンを４２℃の葡萄糖重水溶液内に溶解し、担癌ラット腹腔を洗浄した。
１）．  空白対照群（４２℃の普通５％葡萄糖注射液、５ｍｌ／ｋｇ）；  
２）．  慣用化学療法群（オキサリプラチン  ０．８ｍｇ／ｋｇ  ＋４２℃の普通５％葡萄糖注射液５ｍｌ／ｋｇ）；  
３）．  重水小用量＋オキサリプラチン群（４２℃の葡萄糖重水溶液５ｍｌ／ｋｇ＋オキサリプラチン０．８ｍｇ／ｋｇ  ）；  
４）．  重水中用量＋オキサリプラチン群（４２℃の葡萄糖重水溶液２０ｍｌ／ｋｇ＋オキサリプラチン０．８ｍｇ／ｋｇ  ）；  
５）．  重水高用量＋オキサリプラチン群（４２℃の葡萄糖重水溶液４０ｍｌ／ｋｇ＋オキサリプラチン０．８ｍｇ／ｋｇ）。
６）．  重水小用量＋オキサリプラチン群＋マイトマイシン（４２℃の葡萄糖重水溶液５ｍｌ／ｋｇ＋オキサリプラチン０．８ｍｇ／ｋｇ＋マイトマイシン０．４ｍｇ／ｋｇ）；  
７）．  重水中用量＋オキサリプラチン群＋マイトマイシン（４２℃の葡萄糖重水溶液２０ｍｌ／ｋｇ＋オキサリプラチン０．８ｍｇ／ｋｇ＋マイトマイシンｍｇ／ｋｇ）；  
８）．  重水高用量＋オキサリプラチン群＋マイトマイシン（４２℃の葡萄糖重水溶液４０ｍｌ／ｋｇ＋オキサリプラチン０．８ｍｇ／ｋｇ＋マイトマイシンｍｇ／ｋｇ）。
異なる組み合わせを併用した４２℃の葡萄糖重水溶液で腹腔を洗浄し、投与後、腹腔内を１０分間保留することを３回反複して、１日おきに１回、５回継続投薬し、毎日投薬前にマウスの体重、腹囲を測定し、マウスの日常生活状態を観察した。投薬終了２４ｈ後（１１日目）、各群から各４匹のマウスを処死し、腹水量を測定し、マウスを解剖し、腹腔臓器及び肺臓の転移様子を観察した。残りのマウスの生存期間を観察し、寿命延長率を計算した。
４．  観測指標：実施例２１と同じであった。
５．  統計処理：実施例２１と同じであった。
６．  結果：
【０１４１】
【表１７】
2017516854.tif 000022
【０１４２】
【表１８】
2017516854.tif 000023
【０１４３】
オキサリプラチンは、三代目の抗腫瘍薬プラチナ系製剤であり、マイトマイシンは、抗腫瘍抗生物質であり、Ｇ０−Ｓ期腫瘍細胞に対して敏感であり、重水は、広域スペクトル抗腫瘍相乗作用を有し、Ｓ期腫瘍細胞に対しても敏感であり、併用により抗腫瘍薬效が強化する。結果から示されるように、重水とオキサリプラチン、マイトマイシンとの併用による腹腔内温熱（４２℃）重水洗浄は、同様に、担肉腫Ｓ１８０マウスの生存期間を延長でき、担肉腫Ｓ１８０マウス腹水の生成を抑制できた。実施例２１及び実施例２２から分かるように、重水とプラチナ系製剤、抗腫瘍抗生物質との併用は、異なる腫瘍の成長の抑制への一般的適用性があった。
【０１４４】
実施例２３
重水と５−フルオロウラシルとの併用による静脈注射のヒト結腸癌ＨＣＴ−１１６細胞ヌードマウス移植腫瘍成長に対する抑制作用
動物：ＢＡＬＢ／ｃヌードマウス、マウス齢：６−７週、体重：１８−２０ｇ、性別：雌性であった。ＳＨＡＮＧＨＡＩ  ＳＬＡＣ  ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹ  ＡＮＩＭＡＬ  ＣＯ．  ＬＴＤから入手した。
細胞株：ヒト結腸癌ＨＣＴ−１１６細胞は、ＮＡＮＪＩＮＧ  ＫＥＹＧＥＮ  ＢＩＯＴＥＣＨ．  ＣＯ．，  ＬＴＤから入手した。
被験薬品：５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、実施例２で製造された葡萄糖重水（５％）溶液（１００ｍｌ当たりに５ｇの葡萄糖を含む）。
実験方法：
１  モデルの製造
通常手順で腫瘍種を取り、回復培養し、培養したＨＣＴ−１１６細胞懸濁液を収集し、濃度が１×１０７個／ｍｌになるように無菌生理塩水を添加し、０．１ｍｌ／１匹でヌードマウスの右側腋窩皮下に接種した。
２  群分類及び投薬方案
ヌードマウス移植腫瘍は、カリパスで移植腫瘍直径を測定し、接種１０日後、腫瘍が１００−１１０ｍｍ３に成長した時、各群８匹で動物をランダムに群分けした。同時に投薬を始め、尾静脈注射投薬し、３日ごとに１回、２１日間継続投薬した。腫瘍径の測定方法を使用して、被験サンプルの抗腫瘍効果を動的観察し、動物体重を記録し、被験サンプルの毒性を観察した。投薬２１日後、直ちにヌードマウスを処死し、手術で腫瘍塊を剥り取って重量を量り、撮影した。同時に骨髄有核細胞を通常手法で分離し、細胞ＤＮＡを抽出し、ＵＶ−２６０紫外線分光光度計でＯＤ値を測定し、ＯＤ値をＤＮＡ含有量の代表値とし、被験サンプルのＤＮＡ合成の抑制に対する影響を観察した。
【０１４５】
実験において、各群８匹で合計７群を設置した：
（１）陰性対照群：５％葡萄糖注射液１０  ｍｌ／ｋｇ。
（２）パクリタキセル陽性薬対照群：生理塩水でパクリタキセルを希釈した（８ｍｇ／ｋｇ）。
（３）５−ＦＵ大用量陽性対照群：５％葡萄糖注射液で５−ＦＵ（３０ｍｇ／ｋｇ）を希釈した。
（４）５−ＦＵ小用量対照群：５％葡萄糖注射液で５−ＦＵ（１２  ｍｇ／ｋｇ）を希釈した。
（５）試験群１：葡萄糖重水溶液（５  ｍｌ／ｋｇ）で５−ＦＵ（１２  ｍｇ／ｋｇ）を希釈した。
（６）試験群２：葡萄糖重水溶液（１０  ｍｌ／ｋｇ）で５−ＦＵ（１２  ｍｇ／ｋｇ）を希釈した。
（７）試験群３：葡萄糖重水溶液（２０  ｍｌ／ｋｇ）で５−ＦＵ（１２  ｍｇ／ｋｇ）を希釈した。
【０１４６】
３  観測指標
（１）相対的腫瘍体積で抗腫瘍活性を評価した：
腫瘍体積（ｔｕｍｏｒ  ｖｏｌｕｍｅ，ＴＶ）の計算式：
ＴＶ＝１／２×ａ×ｂ２（ただし、ａは、長さを表し、ｂは、幅を表す）。
測定の結果により、次の計算式で相対的腫瘍体積（ｒｅｌａｔｉｖｅ  ｔｕｍｏｒ  ｖｏｌｕｍｅ，ＲＴＶ）を計算した。
ＲＴＶ＝Ｖｔ／Ｖ０
（ただし、Ｖ０は、ケージに分けて投薬した時（即ち、ｄ０）に測定された腫瘍体積であり、Ｖｔは、各測定時の腫瘍体積である）。
【０１４７】
相対腫瘍増殖率Ｔ／Ｃ（％）の計算式は、次のとおりである：
【０１４８】
【数２】
2017516854.tif 000024
【０１４９】
ＴＲＴＶ：治療群ＲＴＶ；ＣＲＴＶ：陰性対照群ＲＴＶ
治療効果評価標準：Ｔ／Ｃ％＞４０％を無効とし；Ｔ／Ｃ％≦４０％、且つ統計学処理後Ｐ＜０．０５を有効とした。
（２）腫瘍重量で薬物抗腫瘍活性を評価した：
腫瘍成長抑制率（％）の計算式は、次のとおりである：
【０１５０】
【数３】
2017516854.tif 000025
【０１５１】
評価標準：腫瘍成長抑制率＜４０％を無効とし、腫瘍成長抑制率≧４０％、且つ統計学処理後Ｐ＜０．０５を有効とした。
（３）骨髄ＤＮＡ含有量で薬物の骨髓に対する抑制作用を観察し、薬物毒性をモニターした。
【０１５２】
４  統計処理
平均値を  Ｘ±ＳＤで示し、群間分析をｔ検定で統計学処理を行い、ＳＰＳＳ  （  Ｓｔａｆｆｓｔｉｃａｌ  Ｐａｃｋａｇｅ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｓｏｃｉａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ）  １７．０で結果を統計分析した。
【０１５３】
５  結果
移植腫瘍体積で抗腫瘍活性を評価した：結果から示されるように、重水と小用量の５−ＦＵとの併用は、移植腫瘍に対して良い腫瘍抑制作用を有し、投薬２１日後、それぞれの結果として、葡萄糖重水溶液（５ｍｌ／ｋｇ）と５−ＦＵ群との併用：腫瘍体積１．２２±０．１５ｃｍ３；葡萄糖重水溶液（１０  ｍｌ／ｋｇ）  と５−ＦＵ群との併用：腫瘍体積１．４５±０．２５ｃｍ３；葡萄糖重水溶液（２０  ｍｌ／ｋｇ）  と５−ＦＵ群との併用：腫瘍体積１．２７±０．２４  ｃｍ３  であり、陰性対照群と比較すると、各Ｔ／Ｃ＜４０％であった。小用量の５−ＦＵ単独群は、腫瘍体積が２．２７±０．３０  ｃｍ３と減少し、Ｔ／Ｃが８０．９１％で、＞４０％となり、薬学的有効標準に達しなかった。それから分かるように、重水と５−ＦＵとの併用の場合、重水により５−ＦＵの抗腫瘍効果を顕著的に向上した。結果を図５に示す。
【０１５４】
移植腫瘍重量で抗腫瘍活性を評価した：結果から示されるように、重水と小用量の５−ＦＵとの併用は、移植腫瘍に対して良い腫瘍抑制作用を有し、投薬２１日後、それぞれの結果として、葡萄糖重水溶液（５ｍｌ／ｋｇ）と５−ＦＵとの併用の場合、抑制率が５６．３２％であり；葡萄糖重水溶液（１０  ｍｌ／ｋｇ）と５−ＦＵとの併用の場合、抑制率が５３．７０％であり；葡萄糖重水溶液（２０  ｍｌ／ｋｇ）と５−ＦＵとの併用の場合、抑制率が５４．２２％であり；陰性対照群腫瘍重量と比較すると、各Ｔ／Ｃ＞４０％、Ｐ＜０．００１であり；全て薬学的有効標準に達した。小用量の５−ＦＵ単独群の場合、抑制率が２３．６４％、薬学的有効標準に達しなかった。それから分かるように、重水と５−ＦＵとの併用の場合、重水により、５−ＦＵの抗腫瘍効果を顕著的に向上した。その結果を表１９及び図６に示す。
【０１５５】
【表１９】
2017516854.tif 000026
【０１５６】
腫瘍成長抑制率＞４０％であり、薬学的有効であった。
【０１５７】
毒性減少：重要なのは、大用量のパクリタキセル及び５−ＦＵ陽性対照群において、腫瘍成長の抑制が顕著的であるが、担腫瘍マウスの体重の低下が顕著的であり、１８．４±０．５ｇから１６．８±０．９ｇ及び１７．４±０．５ｇのそれぞれに低下し、骨髄ＤＮＡ含有量も減少した。このことは、パクリタキセル及び５−ＦＵの動物に対する毒性は、顕著的であることが示された。一方、葡萄糖重水溶液は、１／３の５−ＦＵ（１０ｍｇ／ｋｇ）用量のみと併用すれば、大用量のパクリタキセル及び５−ＦＵ（３０ｍｇ／ｋｇ）と同様の薬効（等效性）を達成でき、投薬期間に担腫瘍マウスの体重が減少せず、骨髄ＤＮＡ含有量も減少せず、パクリタキセル及び５−ＦＵの大用量投薬時による相応毒性がなかった。抗腫瘍薬毒性は、臨床患者に大きい傷害を与え、まして、受け入れない虚弱的な患者、高齢患者がおり、その為、副作用が小さく、殺傷効果が強い化学療法薬物を探すのが腫瘍治療分野において早急な解決の待たれる難題となった。その為、重水と小用量の５−ＦＵとの併用は、顕著的な臨床使用の優位性を有した。結果を表１９、  図７に示す。
【０１５８】
実施例２４
重水とゲムシタビンとの併用による静脈注射のヒト乳癌ＭＣＦ−７細胞ヌードマウス移植腫瘍成長に対する抑制作用
動物：ＢＡＬＢ／ｃヌードマウス、６−７週、体重：１８−２０ｇ、性別：雌性であり、ＳＨＡＮＧＨＡＩ  ＳＬＡＣ  ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹ  ＡＮＩＭＡＬ  ＣＯ．  ＬＴＤから入手。
細胞株：ヒト乳癌ＭＣＦ−７細胞は、ＮＡＮＪＩＮＧ  ＫＥＹＧＥＮ  ＢＩＯＴＥＣＨ．  ＣＯ．，  ＬＴＤから入手した。
被験薬品：ゲムシタビン（ＧＥＭ）、実施例１で製造された塩化ナトリウム重水溶液。
実験方法：
１  モデルの製造
通常手順で、腫瘍種を取り、回復培養し、培養されたＭＣＦ−７細胞懸濁液を収集し、濃度が１×１０７個／ｍｌになるように無菌生理塩水を添加し、０．１ｍｌ／１匹でヌードマウスの右側腋窩皮下に接種した。
２  群分類及び投薬方案
ヌードマウス移植腫瘍は、カリパスで移植腫瘍直径を測定し、接種１０日後、腫瘍が１００−１１０ｍｍ３に成長した時、各群８匹で動物をランダムに群分けした。同時に投薬を始め、尾静脈注射投薬し、３日ごとに１回、２１日間継続投薬した。腫瘍径の測定方法を使用して、被験サンプルの抗腫瘍効果を動的観察した。同時に動物体重を記録し、被験サンプルの毒性を観察した。投薬２１日後、直ちにヌードマウスを処死し、手術で腫瘍塊を剥り取って重量を量り、撮影した。同時に骨髄有核細胞を通常手法で分離し、細胞ＤＮＡを抽出し、ＵＶ−２６０紫外線分光光度計でＯＤ値を測定し、ＯＤ値をＤＮＡ含有量の代表値とし、被験サンプルのＤＮＡ合成の抑制に対する影響を観察した。
【０１５９】
実験において、各群８匹で合計７群を設置した：  
実験において、合計７群を設置した：  
（１）陰性対照群：生理塩水１０  ｍｌ／ｋｇ。
（２）パクリタキセル陽性対照群：生理塩水でパクリタキセル（８ｍｇ／ｋｇ）を希釈した。
（３）ゲムシタビン陽性対照群：生理塩水でゲムシタビン（２０ｍｇ／ｋｇ）を希釈した。
（４）ゲムシタビン小用量対照群：生理塩水でゲムシタビン（１０ｍｇ／ｋｇ）を希釈した。
（５）試験群１：塩化ナトリウム重水溶液（５  ｍｌ／ｋｇ）でゲムシタビン（１０ｍｇ／ｋｇ）を希釈した。
（６）試験群２：塩化ナトリウム重水溶液（１０  ｍｌ／ｋｇ）でゲムシタビン（１０ｍｇ／ｋｇ  ）を希釈した。
（７）試験群３：塩化ナトリウム重水溶液（２０  ｍｌ／ｋｇ）でゲムシタビン（１０ｍｇ／ｋｇ）を希釈した。
３    観測指標は、実施例２３と同じであった。
４    統計処理は、実施例２３と同じであった。
【０１６０】
５  結果
移植腫瘍体積で抗腫瘍活性を評価した：塩化ナトリウム重水溶液と小用量ゲムシタビンとの併用は、移植腫瘍に対して良い腫瘍抑制作用を有し、投薬２１日後、それぞれの結果として、塩化ナトリウム重水溶液（５ｍｌ／ｋｇ）とゲムシタビン群との併用：腫瘍体積１．９４９±０．４９１ｃｍ３であり；塩化ナトリウム重水溶液（１０  ｍｌ／ｋｇ）とゲムシタビン群との併用：腫瘍体積１．７４３±０．５０３ｃｍ３であり；塩化ナトリウム重水溶液（２０  ｍｌ／ｋｇ）とゲムシタビン群との併用：腫瘍体積１．６７１±０．３８６  ｃｍ３であり、陰性対照群と比較すると、各Ｔ／Ｃ＜４０％であり、薬学的有効標準に達した。小用量のゲムシタビン単独群は、腫瘍体積が僅かに減少し、２．７５７±０．３４２  ｃｍ３であり、Ｔ／Ｃが６０．３９％で、＞４０％となり、薬学的有効標準に達しなかった。重水とゲムシタビンとの併用の場合、重水により顕著的にゲムシタビンの抗腫瘍効果を向上した。結果を図８に示す。
【０１６１】
移植腫瘍重量で抗腫瘍活性を評価した：塩化ナトリウム重水溶液と小用量ゲムシタビンとの併用は、移植腫瘍に対して良い腫瘍抑制作用を有し、投薬２１日後、それぞれの結果として、塩化ナトリウム重水溶液（５ｍｌ／ｋｇ）とゲムシタビンとの併用の場合の抑制率が４８．８２％であり；塩化ナトリウム重水溶液（１０  ｍｌ／ｋｇ）とゲムシタビンとの併用の場合の抑制率が  ５７．７８％であり；塩化ナトリウム重水溶液（２０  ｍｌ／ｋｇ）とゲムシタビンとの併用の場合の抑制率が  ６０．７０％であり；陰性対照群と比較すると、Ｐ＜０．００１であり；各Ｔ／Ｃ＞４０％であり、薬学的有効標準に達した。小用量のゲムシタビン単独群は、腫瘍重量が僅かに減少し、抑制率が３９．１８％、＜４０％であり、薬学的有効標準に達しなかった。それから分かるように、重水は、小用量ゲムシタビンの作用効果を顕著的に向上した。その結果を表２０及び図９に示す。
【０１６２】
【表２０】
2017516854.tif 000027
【０１６３】
腫瘍成長抑制率＞４０％、薬学的有効であった。
【０１６４】
毒性減少：重要なのは、実験期間に、陰性対照群は、担腫瘍マウスの平均体重が３．３ｇと増加したが；パクリタキセル陽性対照及びゲムシタビン陽性対照群は、腫瘍重量の減少が顕著的であったが、担腫瘍マウスの体重の増加が少なく、骨髄ＤＮＡ含有量の増加も少なかった。このことは、パクリタキセル及びゲムシタビンは、動物に対して一定の毒性を有することが示された。塩化ナトリウム重水溶液と１／２の用量のゲムシタビン（１０ｍｇ／ｋｇ）との併用は、パクリタキセル（８ｍｇ／ｋｇ）及び大用量ゲムシタビン（２０ｍｇ／ｋｇ）と同様の薬効（等效性）を達成できたが、担腫瘍マウス体重の増加が陰性対照群と類似し、骨髄ＤＮＡ含有量も増加し、パクリタキセル及びゲムシタビンの大用量投与時による相応的な毒性がなかった。抗腫瘍薬毒性は、臨床患者に大きい傷害を与え、まして、受け入れない虚弱的な患者、高齢患者がおり、臨床的な抗腫瘍化学療法の難題の一つとなり、その為、重水と小用量ゲムシタビンとの併用は、顕著的な臨床使用の優位性を有した。その結果を表２０及び図１０に示す。
【０１６５】
５−ＦＵ及びゲムシタビンが細胞毒類抗腫瘍薬のうちの抗代謝物であり、実施例２３及び実施例２４から分かるように、重水は、抗代謝類抗腫瘍薬と併用でき、異なる腫瘍成長の抑制への一般的適用性があった。
【０１６６】
実施例２５
重水とゲムシタビンとの併用による静脈注射のヒト肺癌Ａ５４９細胞ヌードマウス移植腫瘍成長に対する抑制作用
動物：ＢＡＬＢ／ｃヌードマウス、６−７週、体重：１８−２０ｇ、性別：雌性であり、ＳＨＡＮＧＨＡＩ  ＳＬＡＣ  ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹ  ＡＮＩＭＡＬ  ＣＯ．  ＬＴＤ  から入手した。
細胞株：ヒト肺癌Ａ５４９細胞は、ＮＡＮＪＩＮＧ  ＫＥＹＧＥＮ  ＢＩＯＴＥＣＨ．  ＣＯ．，  ＬＴＤから入手した。
被験薬品：ゲムシタビン（ＧＥＭ）、実施例１で製造された塩化ナトリウム重水溶液。
１．  腫瘍種を取り、回復させ、接種し、無菌生理塩水を添加し、細胞懸濁液を製造し、動物の右上肢の腋窩皮下に接種した。接種腫瘍細胞数が、約５×１０６／匹であった。
２  群分類及び投薬方案
ヌードマウス移植腫瘍は、カリパスで移植腫瘍直径を測定し、接種１０日後、腫瘍が１００−１１０ｍｍ３に成長した時、各群８匹で動物をランダムに群分けした。同時に投薬を始め、尾静脈注射投薬し、３日ごとに１回、２１日間継続投薬した。腫瘍径の測定方法を使用して、被験サンプルの抗腫瘍効果を動的観察した。同時に動物体重を記録し、被験サンプルの毒性を観察した。投薬２１日後、直ちにヌードマウスを処死し、手術で腫瘍塊を剥り取って重量を量り、撮影した。
【０１６７】
実験において、合計７群を設置した：
（１）生理塩水対照群：生理塩水１０  ｍｌ／ｋｇ。
（２）パクリタキセル陽性対照群：生理塩水でパクリタキセル（８ｍｇ／ｋｇ）を希釈した。
（３）ゲムシタビン陽性対照群：生理塩水でゲムシタビン（２０ｍｇ／ｋｇ）を希釈した。
（４）ゲムシタビン小用量対照群：生理塩水でゲムシタビン（１０ｍｇ／ｋｇ）を希釈した。
（５）試験群１：塩化ナトリウム重水溶液（５  ｍｌ／ｋｇ）でゲムシタビン（１０ｍｇ／ｋｇ）を希釈した。
（６）試験群２：塩化ナトリウム重水溶液（１０  ｍｌ／ｋｇ）でゲムシタビン（１０ｍｇ／ｋｇ  ）を希釈した。
【０１６８】
（７）試験群３：塩化ナトリウム重水溶液（２０  ｍｌ／ｋｇ）でゲムシタビン（１０ｍｇ／ｋｇ）を希釈した。
３    観測指標は、実施例２３と同じであった。
４    統計処理は、実施例２３と同じであった。
【０１６９】
５  結果：
移植腫瘍体積及び腫瘍重量で抗腫瘍活性を評価した：結果から示されるように、投薬２１日後、ゲムシタビン小用量単独群は、生理塩水対照群と比較すると、腫瘍重量が２．２３  ±  ０．２ｇのと減少し、抑制率が２３．６％であったが、まだ薬学的有効標準に達しなかった。塩化ナトリウム重水注射液とゲムシタビンとの併用であれば、生理塩水対照群と比較すると、移植腫瘍のいずれもに対して良い腫瘍抑制作用を有し、腫瘍重量に顕著的な差異があり；それぞれの結果として、塩化ナトリウム重水溶液５ｍｌとゲムシタビンとの併用：腫瘍重量１．３４±０．３８ｇであり、腫瘍増殖率５４．２２％であり；塩化ナトリウム重水溶液１０  ｍｌとゲムシタビンとの併用：腫瘍重量１．３５±０．３４ｇであり、腫瘍増殖率５３．７０％であり；塩化ナトリウム重水溶液２０  ｍｌとゲムシタビンとの併用：腫瘍重量１．２８±０．４６ｇであり、腫瘍増殖率５６．３２％であり；各Ｐ＜０．００１であり；いずれも薬学的有効標準に達した。その結果を図１１、１２に示す。
【０１７０】
【表２１】
2017516854.tif 000028
【０１７１】
重要なのは、パクリタキセル陽性対照群及びゲムシタビン陽性対照群では、腫瘍重量の減少が顕著的であるが、それぞれの腫瘍重量が０．９４  ±  ０．２５及び１．０４±０．１３ｇであり、それぞれの腫瘍増殖率が６７．９７及び  ６４．５４％であるが；担腫瘍マウスの体重が殆ど増加しなかった。このことは、パクリタキセル及びゲムシタビンは、動物に対する毒性が顕著的であることが示された。重水と小用量ゲムシタビンとの併用は、大用量のパクリタキセル及びゲムシタビンと同様の有効性を達成でき、相応毒性も有せず、投薬期において担腫瘍マウス体重が増加した。その結果を表２１及び図１３に示す。
【０１７２】
実施例２６
重水とパクリタキセルとの併用は、静脈注射のヒト卵巣癌ＳＫＯＶ３細胞ヌードマウス移植腫瘍成長に対する抑制作用
動物：ＢＡＬＢ／ｃヌードマウス、マウス齢：６−７週、体重：１８−２０ｇ、性別：雌性であり、ＳＨＡＮＧＨＡＩ  ＳＬＡＣ  ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹ  ＡＮＩＭＡＬ  ＣＯ．  ＬＴＤから入手。
細胞株：卵巣癌ＳＫＯＶ３細胞は、ＮＡＮＪＩＮＧ  ＫＥＹＧＥＮ  ＢＩＯＴＥＣＨ．  ＣＯ．，  ＬＴＤから入手した。
被験薬品：パクリタキセル、実施例１で製造された塩化ナトリウム重水溶液。
実験方法：
１．  腫瘍種を取り、回復させ、接種したこと
腫瘍種を取り、回復させ、接種し、無菌生理塩水を添加し、細胞懸濁液を製造し、動物の右上肢の腋窩皮下に接種した。接種腫瘍細胞数が、約５×１０６／匹であった。
２．群分類及び投薬方案
ヌードマウス移植腫瘍は、カリパスで移植腫瘍直径を測定し、接種１０日後、腫瘍が１００−１１０ｍｍ３に成長した時、動物をランダムに群分けた。同時に投薬を始め、尾静脈注射投薬し、３日ごとに１回、２１日間継続投薬した。動物体重を記録し、被験サンプルの毒性を観察した。投薬２１日後、直ちにヌードマウスを処死し、手術で腫瘍塊を剥り取って重量を量った。
【０１７３】
実験において、各群５匹で合計６群を設置した：
（１）生理塩水対照群：生理塩水１０  ｍｌ／ｋｇ。
（２）パクリタキセル陽性対照群：生理塩水でパクリタキセル（８ｍｇ／ｋｇ）を希釈した。
（３）塩化ナトリウム重水溶液（１０  ｍｌ／ｋｇ）  
（４）試験群１：塩化ナトリウム重水溶液（５  ｍｌ／ｋｇ）でパクリタキセル（８ｍｇ／ｋｇ）を希釈した。
（５）試験群２：塩化ナトリウム重水溶液（１０  ｍｌ／ｋｇ）でパクリタキセル（８ｍｇ／ｋｇ）を希釈した。
（６）試験群３：塩化ナトリウム重水溶液（２０  ｍｌ／ｋｇ）でパクリタキセル（８ｍｇ／ｋｇ）を希釈した。
３    観測指標は、実施例２３と同じであった。
４    統計処理は、実施例２３と同じであった。
結果を表２２に示す。
【０１７４】
【表２２】
2017516854.tif 000029
【０１７５】
パクリタキセルは、重要的な抗腫瘍植物薬であり、パクリタキセル、パクリタキセルリポソーム、パクリタキセルアルブミン型、ドセタキセルを含む異なる種類があり、作用機序が類似する。結果から示されるように、投薬２１日後、塩化ナトリウム重水溶液１０  ｍｌ／ｋｇ  と２０ｍｌ／ｋｇ  とパクリタキセル８ｍｇ／ｋｇとの併用群は、モデル群（生理塩水）と比較すると、担腫瘍ヌードマウスヒト卵巣癌ＳＫＯＶ３細胞移植腫瘍に対して良い腫瘍抑制作用を有し、腫瘍腫瘍重量に顕著的な差異があり、２１日目の腫瘍抑制率Ｔ／Ｃが５４．９％であり、Ｐ＜０．００１であり；パクリタキセル８ｍｇ／ｋｇ単独群は、モデル群と比較すると、やや減少したが、薬効標準である＞４０％に達しなかった。塩化ナトリウム重水溶液５  ｍｌ／ｋｇ  ＋パクリタキセル１２ｍｇ／ｋｇ併用群は、モデル群（生理塩水）と比較すると、やや減少したが、薬効標準である＞４０％に達しなかった。重水は、広域抗腫瘍相乗剤として、抗腫瘍植物薬の薬効も強化した。
【０１７６】
実施例２７
重水とチオテパとの併用による静脈注射のヒト膀胱癌５６３７細胞ヌードマウス移植腫瘍成長に対する抑制作用
動物：ＢＡＬＢ／ｃヌードマウス、マウス齢：６−７週、体重：１８−２０ｇ、性別：雌性であり、ＳＨＡＮＧＨＡＩ  ＳＬＡＣ  ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹ  ＡＮＩＭＡＬ  ＣＯ．  ＬＴＤから入手。
細胞株：ヒト膀胱癌５６３７細胞は、ＮＡＮＪＩＮＧ  ＫＥＹＧＥＮ  ＢＩＯＴＥＣＨ．  ＣＯ．，  ＬＴＤから入手した。
被験薬品：チオテパ、実施例１で製造された塩化ナトリウム重水溶液。
【０１７７】
実験方法：
１．  腫瘍種を取り、回復させ、接種したこと
腫瘍種を取り、回復させ、接種し、無菌生理塩水を添加し、細胞懸濁液を製造し、動物の右上肢の腋窩皮下に接種した。接種腫瘍細胞数が約５×１０６／匹であった。
２．群分類及び投薬方案
ヌードマウス移植腫瘍は、カリパスで移植腫瘍直径を測定し、接種１０日後、腫瘍が１００−１１０ｍｍ３に成長した時、動物をランダムに群分けた。同時に投薬を始め、尾静脈注射投薬し、３日ごとに１回、２１日間継続投薬した。動物体重を記録し、被験サンプルの毒性を観察した。投薬２１日後、直ちにヌードマウスを処死し、手術で腫瘍塊を剥り取って重量を量った。
【０１７８】
実験において、各群５匹で合計６群を設置した：
（１）生理塩水対照群：生理塩水１０  ｍｌ／ｋｇ。
（２）パクリタキセル陽性対照群：生理塩水でチオテパ（０．２ｍｇ／ｋｇ）を希釈した。
（３）試験群１：塩化ナトリウム重水溶液（１  ｍｌ／ｋｇ）でチオテパ（０．２ｍｇ／ｋｇ）を希釈した。
（４）試験群２：塩化ナトリウム重水溶液（１０  ｍｌ／ｋｇ）でチオテパ（０．２ｍｇ／ｋｇ）を希釈した。
（５）試験群３：塩化ナトリウム重水溶液（２０  ｍｌ／ｋｇ）でチオテパ（０．２ｍｇ／ｋｇ）を希釈した。
３    観測指標は、実施例２３と同じであった。
４    統計処理は、実施例２３と同じであった。
【０１７９】
結果から示されるように、投薬２１日後、塩化ナトリウム重水溶液１０ｍｌ／ｋｇと２０ｍｌ／ｋｇとの二つの用量のそれぞれとチオテパ０．２ｍｇ／ｋｇとの併用の場合は、モデル群（生理塩水）と比較すると、担腫瘍ヌードマウスヒト膀胱癌５６３７３細胞移植腫瘍に対して良い腫瘍抑制作用を有し、腫瘍腫瘍重量に顕著的な差異があり、２１日目の腫瘍抑制率Ｔ／Ｃのそれぞれが４７．０％及び６３．４％、Ｐ＜０．０１及びＰ＜０．００１であり；チオテパ０．２ｍｇ／ｋｇ単独群は、モデル群と比較すると、有効差異がなかった。塩化ナトリウム重水溶液５  ｍｌ／ｋｇ  ＋チオテパ０．２ｍｇ／ｋｇ併用群は、モデル群（生理塩水）と比較すると、有効差異がなかった。結果を表２３に示す。
【０１８０】
【表２３】
2017516854.tif 000030
【０１８１】
チオテパは、エチレンイミン類アルキル化剤であり、グアニン結合に参与し、ＤＮＡ合成を影響し、多種の腫瘍細胞に対して有効であり、特に膀胱癌細胞に対して、重水とチオテパとの併用の場合、チオテパによる抗膀胱癌５６３７３細胞効果の相乗的な向上が見られ、癌細胞成長抑制率を単独投与場合の３９％から５４％−６３．４％に向上させた。このことは、重水は、広域抗腫瘍相乗剤としての機能が検証されたが、非常に小さい用量（１  ｍｌ／ｋｇ）の場合には、  効果が顕著的ではなかった。
【０１８２】
実施例２８
重水とベバシズマブの併用による静脈注射のヒト膵臓癌ＰＡＮＣ−１細胞ヌードマウス移植腫瘍の微小血管密度に対する抑制作用
動物：ＢＡＬＢ／ｃヌードマウス、マウス齢：６−７週、体重：１８−２０ｇ、性別：雌性であった。ＳＨＡＮＧＨＡＩ  ＳＬＡＣ  ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹ  ＡＮＩＭＡＬ  ＣＯ．  ＬＴＤから入手した。
細胞株：ヒト膵臓癌ＰＡＮＣ−１細胞は、ＮＡＮＪＩＮＧ  ＫＥＹＧＥＮ  ＢＩＯＴＥＣＨ．  ＣＯ．，  ＬＴＤから入手した。
被験薬品：ベバシズマブ（Ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ，Ａｖａｓｔｉｎ，  Ｒｏｃｈｅ社）、実施例１で製造された塩化ナトリウム重水溶液。
【０１８３】
実験方法：
１  モデルの製造
通常手順で、腫瘍種を取り、回復培養し、培養されたＰＡＮＣ−１細胞懸濁液を収集し、濃度が１×１０７個／ｍｌになるように無菌生理塩水を添加し、０．１ｍｌ／１匹でヌードマウスの右側腋窩皮下に接種した。
２  群分類及び投薬方案
カリパスでヌードマウス移植腫瘍の直径を測定し、接種１０日後、腫瘍が１００−１１０ｍｍ３に成長した時、動物をランダムに群分けた。同時に投薬を始め、３日ごとに１回、１４日間継続尾静脈注射投薬した。動物体重を記録し、被験サンプルの毒性を観察した。投薬１４日後、１週間停薬し、ヌードマウスを処死し、手術で腫瘍塊を剥り取り、重量を量り、微小血管密度（ＭＶＤ）を検査し、標準的なＥｎＶｉｓｉｏｎＴＭ法で染色を行い、Ｗｅｉｄｎｅｒ微小血管方法で微小血管量をカウントし、１００倍鏡下で全視野を観察し、腫瘍の微小血管密度最高領域を選択し、カウントし、４００倍鏡下で三つの高倍率視野内の微小血管数をカウントし、その平均値をＭＶＤ値とした。
【０１８４】
実験において、各群５匹で合計４群を設置した：  
（１）陰性対照群：０．９％塩化ナトリウム注射液１０  ｍｌ／ｋｇ。
（２）ベバシズマブ陽性対照群：０．９％塩化ナトリウム注射液でベバシズマブを希釈した（５ｍｇ／ｋｇ）。
（３）試験群１：塩化ナトリウム重水溶液（１０  ｍｌ／ｋｇ）でベバシズマブを希釈した（５ｍｇ／ｋｇ）。
（４）試験群２：塩化ナトリウム重水溶液（２０  ｍｌ／ｋｇ）でベバシズマブを希釈した（５ｍｇ／ｋｇ）。
３    観測指標は、実施例２３と同じであった。
４    統計処理は、実施例２３と同じであった。
５    結果を表２４、２５に示す。
【０１８５】
【表２４】
2017516854.tif 000031
【０１８６】
【表２５】
2017516854.tif 000032
【０１８７】
腫瘍組織成長時、大量の血液供給が必要であり、ベバシズマブは、微小血管成長抑制剤であり、腫瘍組織内の微小血管成長が抑制された場合、微小血管が減少し、血液供給が減少する。結果から示されるように、重水は、広域抗腫瘍相乗剤として、ベバシズマブによる腫瘍組織微小血管密度（ＭＶＤ）減少の作用も強化でき、膵臓癌ＰＡＮＣ−１細胞の血液供給を減少でき、更に腫瘍成長を抑制できた。
【０１８８】
実施例２９
薬物安全性研究：塩化ナトリウム重水溶液の静脉投薬の毒性試験
試験方法：  
６−７週齡のＳＤラットは、雌雄各半分であり、雄：２８０−３３８ｇであり、雌：２１２−２６８ｇであり、北京維通利華実験動物公司から入手した。
被験品：実施例１で製造された塩化ナトリウム重水溶液。
【０１８９】
試験一  単回投薬毒性の観察
投薬：最大投薬量法により、実施例１で製造された塩化ナトリウム重水溶液を２  ｍｌ／１００ｇ使用し、投薬速度２ｍｌ／ｍｉｎで雌雄各半分の合計２０匹ラットにＩＶプッシュした。対照群（雌雄各半分、合計１０匹ラット）に同体積の０．９％  塩化ナトリウム注射液を投与した。
【０１９０】
【表２６】
2017516854.tif 000033
【０１９１】
試験結果：
１．一般症状観察
ラット塩化ナトリウム重水溶液の単回静脉投薬毒性試験において、最大投薬体積２０ｍｌ／ｋｇで被験物を投与した。投薬後、被験品群の動物は、皆直ちに活動減少、呼吸過多及び尿量増加の症状が出現した。上記症状は、投薬後１時間内回復し、他の顕著的な異常状況が発見されなかった。
毎日少なくとも一回、１４日間連続観察したところ、動物は、外部徴候、行為活動、糞性状のいずれにも異常が発見されず、死亡が発見されなかった。
２．体重
試験期間に、動物は、一般状况良好であり、体重の増加傾向が正常であった。
【０１９２】
【表２７】
2017516854.tif 000034
【０１９３】
【表２８】
2017516854.tif 000035
【０１９４】
考察：被験品である塩化ナトリウム重水溶液のラットの単回静脉投薬毒性試験において、塩化ナトリウム重水溶液を投与し、最大投薬体積２０ｍｌ／ｋｇで被験物を投与した。投薬後、活動減少、呼吸過多等の症状が発見され、その他の被験品投薬による毒性が発見されず、２週間連続観察したところ、動物体重の増加が正常であり、死亡現象が出現しなかった。本試験結果により、被験品である塩化ナトリウム重水溶液のラットの単回静脉投薬は、最小致死量（ＭＬＤ）が２０ｍｌ／ｋｇ超であった。
【０１９５】
試験２  複数回の反復投薬による毒性観察
投薬：最大投薬量法を複数回反復し、実施例１で製造された塩化ナトリウム重水溶液を２  ｍｌ／１００ｇ使用し、投薬速度２ｍｌ／ｍｉｎ  で１日１回、５日間継続ＩＶプッシュした。合計２０匹のラットは、雌雄各半分であった。対照群（合計１０匹ラット、雌雄各半分）に同体積の０．９％塩化ナトリウム注射液を投与した。
【０１９６】
【表２９】
2017516854.tif 000036
【０１９７】
試験結果：
１．一般症状観察
ラットの塩化ナトリウム重水溶液の複数回反複静脉投薬の毒性試験において、最大投薬体積２０ｍｌ／ｋｇで被験物を１日１回、５日間継続投与し、毎回投薬後、被験品群動物に、皆直ちに活動減少、呼吸過多及び小便量増多の症状が出現し、上記症状が投薬後１時間内回復し、他の顕著的な異常状況が発見されなかった。
毎日少なくとも１回、三ヶ月連続観察したところ、動物は、外部徴候、行為活動、糞性状のいずれにも異常が発見されず、死亡が発見されなかった。
２．体重
試験期間に、動物は、一般状况が良好であり、体重の増加傾向が正常であった。
【０１９８】
【表３０】
2017516854.tif 000037
【０１９９】
【表３１】
2017516854.tif 000038
【０２００】
被験品である塩化ナトリウム重水溶液によるラットの複数回反複静脉投薬の毒性試験において、塩化ナトリウム重水溶液を投与し、最大投薬体積２０ｍｌ／ｋｇで被験物を投与した。投薬後、活動減少、呼吸過多等の症状が発見され、他の被験品投薬による毒性が発見されず、三ヶ月連続観察したところ、動物体重の増加が正常であり、死亡現象が出現しなかった。本試験結果により、被験品である塩化ナトリウム重水溶液によるラットの複数回反複静脉投薬は、最小致死量（ＭＬＤ）が２０ｍｌ／ｋｇ超であった。
【０２０１】
本願発明の幾つかの面を示して考察したが、しかし、当業者が注意すべきことは、本発明の原理及び精神から逸脱されない条件下で、上記内容を変更してよい。その為、本発明の範囲は、請求の範囲及びそれと均等する範囲に限定される。
【図１】
2017516854.tif 000039
【図２】
2017516854.tif 000040
【図３】
2017516854.tif 000041
【図４】
2017516854.tif 000042
【図５】
2017516854.tif 000043
【図６】
2017516854.tif 000044
【図７】
2017516854.tif 000045
【図８】
2017516854.tif 000046
【図９】
2017516854.tif 000047
【図１０】
2017516854.tif 000048
【図１１】
2017516854.tif 000049
【図１２】
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【図１３】
2017516854.tif 000051
【手続補正書】
【提出日】平成29年2月7日(2017.2.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００７】
更に、多くの腫瘍患者では、罹病の中、末期時、体腔（例えば、胸腔、腹腔、骨盤腔等）の腫瘍転移再発の発生が約５０％以上を占める。それは、多くの患者の致死の直接要因である。近年、発展してきた胸腹部における腔内温熱灌流化学療法は、腫瘍の胸腹部膜への転移又は再発の予防又は治療において有効的な治療法の一つとなっているが、しかし、目下では、普通の生理塩水で抗腫瘍薬物を溶解又は希釈し、直接に体腔（熱）灌流洗浄投薬しており、治療効果が高くないという問題もあり、生理塩水そのものも相乗抗腫瘍薬作用を有しない。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３８】
発明１９．  灌流洗浄液、注射液、懸濁液、乳液又は坐剤である発明１−１８のいずれか一つに記載の薬用溶液。
発明２０．  前記の灌流洗浄液の温度が、４０℃〜４５℃であり、好ましくは４２℃±２．５℃、更に好ましくは４２℃である発明１９に記載の薬用溶液。
発明２１．  前記の注射液の用量が、１ｍｌ／ｋｇ〜２０ｍｌ／ｋｇである発明１９に記載の薬用溶液。
発明２２．発明１−２１のいずれか一つに記載の薬用溶液、少なくとも一種の抗腫瘍薬及び任意の薬学的に利用可能な補助材料を含むことを特徴とする薬用組成物。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３９】
発明２３．前記抗腫瘍薬は、抗腫瘍細胞毒類薬物及びモノクローナル抗体抗腫瘍薬物から選択されるものである発明２２に記載の薬用組成物。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４０】
発明２４．前記抗腫瘍細胞毒類薬物は、抗代謝物、植物由来抗腫瘍薬、腫瘍抗生物質、アルキル化剤及び白金製剤を含む発明２３の薬用組成物。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４１】
発明２５．抗代謝物は、５−フルオロウラシル、ゲムシタビン、フルオロウリジン、ペメトレキセド、ラルチトレキシド、フルダラビン、シタラビンを含み、前記腫瘍抗生物質は、マイトマイシン、エピルビシン、ピンヤンマイシン、ダウノルビシン、アドリアマイシン、ピラルビシン、アクラルビシンを含み、前記白金製剤は、シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、ネダプラチンを含み、前記植物由来抗腫瘍薬は、パクリタキセル、パクリタキセルリポソーム、パクリタキセルアルブミン型、ドセタキセル、エトポシド、ヒドロキシカンプトテシンを含み、前記アルキル化剤は、チオテパ、カルムスチン、ニムスチン、ホテムスチン、エストラムスチン、シクロホスファミド、ミレランを含む発明２４に記載の薬用組成物。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４２】
発明２６．モノクローナル抗体抗腫瘍薬物は、ベバシズマブ、セツキシマブ、トラスツズマブ、パニツムマブ、ニモツズマブ、組み換えヒトエンドスタチンを含む発明２３に記載の薬用組成物。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４３】
発明２７．発明１−２１のいずれか一つに記載の薬用溶液、又は発明２２−２６のいずれか一つに記載の薬用組成物の抗腫瘍薬物の製造における用途。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４４】
発明２８．悪性腫瘍の治療又は予防に用いられる発明１−２１のいずれか一つに記載の薬用溶液、又は発明２２−２６のいずれか一つに記載の薬用組成物。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４５】
発明２９．重水及び少なくとも一種の抗腫瘍薬物を含み、重水及び抗腫瘍薬物が別々に投薬可能、連続投薬可能、又は同時投薬可能であることを特徴とする併用薬物。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４６】
発明３０．腫瘍患者に治療有効量の発明１−２１のいずれか一つに記載の薬用溶液、又は発明２２−２６のいずれか一つに記載の薬用組成物又は発明２９に記載の併用薬物を投与することを含む悪性腫瘍の治療又は予防の方法。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４７】
発明３１．前記悪性腫瘍は、肺癌、結直腸癌、原発性肝癌、食道癌、胃癌及び噴門癌、膵臓癌、腎細胞癌、膀胱癌、前立腺癌、頭頸部癌、鼻咽頭癌、子宮頸癌、卵巣癌、乳癌、脳腫瘍、骨及び関節の肉腫、甲状腺癌、皮膚癌、悪性黒色腫、悪性リンパ腫、白血病、各種悪性腫瘍の合併症及び再発（例えば、腫瘍細胞の胸腹骨盤腔への転移及び移植、悪性胸腹骨盤腔内貯溜液）から選択される発明３０に記載の方法。
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４８】
発明３２．肺癌は、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）を含み；結直腸癌は、早期結直腸癌、進行期結直腸癌を含み；原発性肝癌は、肝細胞型、肝管細胞型、混合型を含み；食道癌が腺癌、扁平上皮癌、腺扁平上皮癌、小細胞癌を含み；胃癌及び噴門癌が腺癌、扁平上皮癌、腺扁平上皮癌、小細胞癌、悪性消化管間質腫瘍を含み；膵臓癌は、導管細胞癌、破骨細胞様巨細胞癌；腎細胞癌が淡明細胞癌、乳頭状腎細胞癌を含み；膀胱癌は、尿路上皮癌、扁平上皮癌、腺癌を含み；前立腺癌は、腺癌、導管腺癌、尿路上皮癌、扁平上皮癌を含み；頭頸部癌は、扁平上皮癌、腺癌、腺扁平上皮癌を含み；鼻咽頭癌は、扁平上皮癌、腺癌を含み；子宮頸癌は、扁平上皮癌、腺癌、肉腫を含み；卵巣癌は、上皮性卵巣癌、胚細胞腫瘍、卵巣の性索間質性腫瘍を含み；乳癌は、上皮性腫瘍、間葉系腫瘍、筋上皮腫を含み；脳腫瘍が原発性脳腫瘍及び転移性脳腫瘍を含み、骨及び関節の肉腫は、軟骨肉腫、骨肉腫、ユーイング肉腫、軟部組織肉腫を含み；甲状腺癌は、乳頭状癌、濾胞状腺癌、髄様癌を含み；皮膚癌は、基底細胞癌及び扁平上皮癌を含み；悪性黒色腫は、表在拡大型黒色腫、結節型黒色腫、末端黒子型黒色腫を含み；悪性リンパ腫は、ホジキンリンパ腫及び非ホジキンリンパ腫を含み；白血病は、急性白血病、慢性白血病を含む発明３１に記載の方法。
【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４９】
発明３３．重水の発明１−２１のいずれか一つに記載の薬用溶液の製造における用途。
【手続補正１４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５０】
発明３４．  前記薬用溶液は、広域抗腫瘍相乗剤として抗腫瘍薬効果を相乗できる発明３３の用途。
【手続補正１５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１４０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１４０】
実施例２２
重水とオキサリプラチンとの併用及び重水とオキサリプラチン及びマイトマイシンとの併用による腹腔内保留式温熱（４２℃）洗浄の担癌ラット腹腔の肉腫Ｓ１８０（腹水型）に対する抑制作用
実験方法：
動物：昆明マウス、週齡：４−５ｗ、性別：雄性、Ｓｈａｎｇｈａｉ  Ｓｕｐｅｒ  −−  Ｂ＆Ｋ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  ａｎｉｍａｌ  Ｃｏｒｐ．Ｌｔｄ．から入手。
細胞株：肉腫Ｓ１８０（腹水型）細胞株は、ＮＡＮＪＩＮＧ  ＫＥＹＧＥＮ  ＢＩＯＴＥＣＨ．  ＣＯ．，  ＬＴＤから入手した。
モデルの製造：１×１０７／ｍｌ  Ｓ１８０腫瘍細胞懸濁液０．２ｍｌをマウス腹腔に接種した。
被験薬品：オキサリプラチン、マイトマイシン、実施例２で製造された葡萄糖重水溶液。
群分け及び投薬：接種７−８日後、マウスがモデルとなった後、ランダムに群分け（各群１２匹）した。
オキサリプラチン、マイトマイシンを４２℃の葡萄糖重水溶液内に溶解し、担癌ラット腹腔を洗浄した。
１）．  空白対照群（４２℃の普通５％葡萄糖注射液、５ｍｌ／ｋｇ）；  
２）．  慣用化学療法群（オキサリプラチン  ０．８ｍｇ／ｋｇ  ＋４２℃の普通５％葡萄糖注射液５ｍｌ／ｋｇ）；  
３）．  重水小用量＋オキサリプラチン群（４２℃の葡萄糖重水溶液５ｍｌ／ｋｇ＋オキサリプラチン０．８ｍｇ／ｋｇ  ）；  
４）．  重水中用量＋オキサリプラチン群（４２℃の葡萄糖重水溶液２０ｍｌ／ｋｇ＋オキサリプラチン０．８ｍｇ／ｋｇ  ）；  
５）．  重水高用量＋オキサリプラチン群（４２℃の葡萄糖重水溶液４０ｍｌ／ｋｇ＋オキサリプラチン０．８ｍｇ／ｋｇ）。
６）．  重水小用量＋オキサリプラチン群＋マイトマイシン（４２℃の葡萄糖重水溶液５ｍｌ／ｋｇ＋オキサリプラチン０．８ｍｇ／ｋｇ＋マイトマイシン０．４ｍｇ／ｋｇ）；  
７）．  重水中用量＋オキサリプラチン群＋マイトマイシン（４２℃の葡萄糖重水溶液２０ｍｌ／ｋｇ＋オキサリプラチン０．８ｍｇ／ｋｇ＋マイトマイシン０．４ｍｇ／ｋｇ）；  
８）．  重水高用量＋オキサリプラチン群＋マイトマイシン（４２℃の葡萄糖重水溶液４０ｍｌ／ｋｇ＋オキサリプラチン０．８ｍｇ／ｋｇ＋マイトマイシン０．４ｍｇ／ｋｇ）。
異なる組み合わせを併用した４２℃の葡萄糖重水溶液で腹腔を洗浄し、投与後、腹腔内を１０分間保留することを３回反複して、１日おきに１回、５回継続投薬し、毎日投薬前にマウスの体重、腹囲を測定し、マウスの日常生活状態を観察した。投薬終了２４ｈ後（１１日目）、各群から各４匹のマウスを処死し、腹水量を測定し、マウスを解剖し、腹腔臓器及び肺臓の転移様子を観察した。残りのマウスの生存期間を観察し、寿命延長率を計算した。
４．  観測指標：実施例２１と同じであった。
５．  統計処理：実施例２１と同じであった。
６．  結果：
【手続補正１６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１４１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１４１】
【表１７】
2017516854.tif 000052
【手続補正１７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１４２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１４２】
【表１８】
2017516854.tif 000053
【手続補正１８】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
重水を溶剤として使用し、重水におけるジュウテリウム元素の同位体存在度が５０％〜９９．９％である薬用溶液。
【請求項２】
前記同位体存在度が９９％〜９９．９％である請求項１に記載の薬用溶液。
【請求項３】
１００ｍｌ当たり０．１ｇ〜５ｇの塩化ナトリウムを含塩化ナトリウム重水溶液である請求項１に記載の薬用溶液。
【請求項４】
１００ｍｌ当たり０．５ｇ〜２．５ｇの塩化ナトリウムを含む塩化ナトリウム重水溶液である請求項３に記載の薬用溶液。
【請求項５】
１００ｍｌ当たり０．９ｇの塩化ナトリウムを含み、且つｐＨが４．５〜７．０に調整された塩化ナトリウム重水溶液であることを特徴とする請求項１に記載の薬用溶液。
【請求項６】
１００ｍｌ当たり０．１ｇ〜５０ｇの葡萄糖を含む葡萄糖重水溶液である請求項１に記載の薬用溶液。
【請求項７】
１００ｍｌ当たり５ｇ〜５０ｇの葡萄糖を含む葡萄糖重水溶液である請求項６に記載の薬用溶液。
【請求項８】
１００ｍｌ当たり５ｇ又は１０ｇの葡萄糖を含み、且つｐＨが３．２〜６．５に調整された葡萄糖重水溶液であることを特徴とする請求項６に記載の薬用溶液。
【請求項９】
１００ｍｌ当たり０．９ｇの塩化ナトリウム及び５ｇの葡萄糖を含み、且つｐＨが３．５〜５．５に調整された葡萄糖塩化ナトリウム重水溶液である請求項１に記載の薬用溶液。
【請求項１０】
１００ｍｌ当たり０．９ｇの塩化ナトリウム、０．０１２ｇの塩化カリウム、及び０．０２４ｇの塩化カルシウム（ＣａＣｌ２・２Ｈ２Ｏ）を含み、且つｐＨが４．５〜７．５に調整されたリンゲル重水溶液である請求項１に記載の薬用溶液。
【請求項１１】
１００ｍｌ当たり０．８ｇの塩化ナトリウム、０．０４ｇの塩化カリウム、０．１ｇの葡萄糖、０．００６ｇの燐酸二水素カリウム、０．００４７５ｇの燐酸水素二ナトリウム及び０．２２ｇの炭酸水素ナトリウムを含み、且つｐＨが６．０〜７．５に調整されたＥａｇｌｅｓ平衡塩重水溶液である請求項１に記載の薬用溶液。
【請求項１２】
１００ｍｌ当たりに１〜５０ｇの炭酸水素ナトリウムを含み、且つｐＨが７．５〜８．５に調整された炭酸水素ナトリウム重水溶液である請求項１に記載の薬用溶液。
【請求項１３】
１００ｍｌ当たり５ｇ〜１０ｇの炭酸水素ナトリウムを含む炭酸水素ナトリウム重水溶液である請求項１２に記載の薬用溶液。
【請求項１４】
１００ｍｌ当たり５ｇの炭酸水素ナトリウムを含む炭酸水素ナトリウム重水溶液である請求項１３に記載の薬用溶液。
【請求項１５】
灌流洗浄液、注射液、懸濁液、乳液又は坐剤である請求項１〜請求項１４のいずれか１項に記載の薬用溶液。
【請求項１６】
３９℃〜４５℃の灌流洗浄液である請求項１５に記載の薬用溶液。
【請求項１７】
４２℃±２．５℃の灌流洗浄液である請求項１６に記載の薬用溶液。
【請求項１８】
４２℃の灌流洗浄液である請求項１７に記載の薬用溶液。
【請求項１９】
用量１ｍｌ／ｋｇ〜２０ｍｌ／ｋｇの注射液である請求項１５に記載の薬用溶液。
【請求項２０】
請求項１〜請求項１９のいずれか一項に記載の薬用溶液と、少なくとも一種の抗腫瘍薬と、を含む抗腫瘍薬用組成物。
【請求項２１】
薬学的に利用可能な補助材料をさらに含む請求項２０に記載の抗腫瘍薬用組成物。
【請求項２２】
前記抗腫瘍薬は、抗代謝物、植物由来抗腫瘍薬、腫瘍抗生物質、アルキル化剤、白金製剤、及びモノクローナル抗体抗腫瘍薬物からなる群より選択される請求項２０又は請求項２１に記載に記載の抗腫瘍薬用組成物。
【請求項２３】
前記抗代謝物は、５−フルオロウラシル、ゲムシタビン、フルオロウリジン、ペメトレキセド、ラルチトレキシド、フルダラビン、及びシタラビンからなる群より選択され、
前記腫瘍抗生物質は、マイトマイシン、エピルビシン、ピンヤンマイシン、ダウノルビシン、アドリアマイシン、ピラルビシン、及びアクラルビシンからなる群より選択され、
前記白金製剤は、シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、及びネダプラチンからなる群より選択され、
前記植物由来抗腫瘍薬は、パクリタキセル、パクリタキセルリポソーム、パクリタキセルアルブミン型、ドセタキセル、エトポシド、及びヒドロキシカンプトテシンからなる群より選択され、
前記アルキル化剤は、チオテパ、カルムスチン、ニムスチン、ホテムスチン、エストラムスチン、シクロホスファミド、及びミレランからなる群より選択され、
前記モノクローナル抗体抗腫瘍薬物は、ベバシズマブ、セツキシマブ、トラスツズマブ、パニツムマブ、ニモツズマブ、及び組み換えヒトエンドスタチンからなる群より選択される請求項２２に記載の抗腫瘍薬用組成物。
【請求項２４】
重水及び少なくとも一種の抗腫瘍薬物を含み、重水及び抗腫瘍薬物が別々に投薬可能、連続投薬可能、又は同時投薬可能である併用薬物。
【請求項２５】
抗腫瘍に用いられる、請求項１〜請求項１９のいずれか一項に記載の薬用溶液、請求項２０〜請求項２３のいずれか一項に記載の抗腫瘍薬用組成物、又は請求項２４に記載の併用薬物。
【請求項２６】
灌流洗浄液、注射液、懸濁液、乳液又は坐剤である請求項２５に記載の薬用溶液、抗腫瘍薬用組成物又は併用薬物。
【請求項２７】
３９℃〜４５℃の灌流洗浄液である請求項２５に記載の薬用溶液、抗腫瘍薬用組成物又は併用薬物。
【請求項２８】
４２℃±２．５℃の灌流洗浄液である請求項２７に記載の薬用溶液、抗腫瘍薬用組成物又は併用薬物。
【請求項２９】
４２℃の灌流洗浄液である請求項２８に記載の薬用溶液、薬用組成物又は併用薬物。
【請求項３０】
非経口で投薬される請求項２５に記載の薬用溶液、薬用組成物又は併用薬物。
【請求項３１】
体腔灌流洗浄、静脈注射、動脈インターベンション注射、髄膜注射又は腫瘍内／腫瘍周囲注射により投薬される請求項３０に記載の薬用溶液、薬用組成物又は併用薬物。
【請求項３２】
用量１ｍｌ／ｋｇ〜２０ｍｌ／ｋｇの注射液である請求項３１に記載の薬用溶液、薬用組成物又は併用薬物。
【請求項３３】
肺癌、結直腸癌、原発性肝癌、食道癌、胃癌及び噴門癌、膵臓癌、腎細胞癌、膀胱癌、前立腺癌、頭頸部癌、鼻咽頭癌、子宮頸癌、卵巣癌、乳癌、脳腫瘍、骨及び関節の肉腫、甲状腺癌、皮膚癌、悪性黒色腫、悪性リンパ腫、白血病、各種悪性腫瘍の合併症及び再発からなる群より選択される悪性腫瘍に対して用いられる請求項２５〜請求項３２のいずれか一項に記載の薬用溶液、薬用組成物又は併用薬物。
【請求項３４】
前記各種悪性腫瘍の合併症及び再発が、腫瘍細胞の胸腔、腹腔、骨盤腔への再発、転移及び移植、並びに悪性胸腹骨盤腔内貯溜液からなる群より選択される請求項３３に記載の薬用溶液、薬用組成物又は併用薬物。
【請求項３５】
前記肺癌は、小細胞肺癌、及び非小細胞肺癌からなる群より選択され；
前記結直腸癌は、早期結直腸癌、及び進行期結直腸癌からなる群より選択され；
前記原発性肝癌は、肝細胞型、肝管細胞型、及び混合型からなる群より選択され；
前記食道癌は、腺癌、扁平上皮癌、腺扁平上皮癌、及び小細胞癌からなる群より選択され；
前記胃癌及び噴門癌は、腺癌、扁平上皮癌、腺扁平上皮癌、小細胞癌、及び悪性消化管間質腫瘍からなる群より選択され；
前記膵臓癌は、導管細胞癌、及び破骨細胞様巨細胞癌からなる群より選択され；
前記腎細胞癌は、明細胞癌、及び乳頭状腎細胞癌からなる群より選択され；
前記膀胱癌は、尿路上皮癌、扁平上皮癌、及び腺癌からなる群より選択され；
前記前立腺癌は、腺癌、導管腺癌、尿路上皮癌、及び扁平上皮癌からなる群より選択され；
前記頭頸部癌は、扁平上皮癌、腺癌、及び腺扁平上皮癌からなる群より選択され；
前記鼻咽頭癌は、扁平上皮癌、及び腺癌からなる群より選択され；
前記子宮頸癌は、扁平上皮癌、腺癌、及び肉腫からなる群より選択され；
前記卵巣癌は、上皮性卵巣癌、胚細胞腫瘍、及び卵巣の性索間質性腫瘍からなる群より選択され；
前記乳癌は、上皮性腫瘍、間葉系腫瘍、及び筋上皮腫からなる群より選択され；
前記脳腫瘍は、原発性脳腫瘍及び転移性脳腫瘍からなる群より選択され；
前記骨及び関節の肉腫は、軟骨肉腫、骨肉腫、ユーイング肉腫、及び軟部組織肉腫からなる群より選択され；
前記甲状腺癌は、乳頭状癌、濾胞状腺癌、及び髄様癌からなる群より選択され；
前記皮膚癌は、基底細胞癌及び扁平上皮癌からなる群より選択され；
前記悪性黒色腫は、表在拡大型黒色腫、結節型黒色腫、及び末端黒子型黒色腫からなる群より選択され；
前記悪性リンパ腫は、ホジキンリンパ腫及び非ホジキンリンパ腫からなる群より選択され；
前記白血病は、急性白血病、及び慢性白血病からなる群より選択される、請求項３３又は請求項３４に記載の薬用溶液、薬用組成物又は併用薬物。
【国際調査報告】
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