(57)【要約】  老化皮膚の外観を改善するために、多段階美容レジメンが提供される。皮膚老化の徴候を示す皮膚の目標部分が特定される。皮膚洗浄及び／又は皮膚解毒、及び／又は皮膚水和に関連する１つ又は複数の生物学的テーマについての遺伝的共発現モジュールから導出された固有遺伝子（eigengene）を転写的にアップレギュレートする能力を有する少なくとも１つの活性物質を含む第１の配合物が、皮膚の目標部分に局所的に適用される。皮膚修復及び／又は再構築に関連する１つ又は複数の生物学的テーマについての共発現モジュールから導出された固有遺伝子を転写的にアップレギュレートする能力を有する少なくとも１つの活性物質を含む第２の配合物も、皮膚の目標部分に局所的に適用される。
2017527580.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
老化するヒト皮膚の外観の改善に有効な多段階レジメンであって、前記レジメンが、
（ａ）皮膚老化の徴候を示す皮膚の目標部分を特定する工程と、
（ｂ）皮膚洗浄及び／又は皮膚解毒、及び／又は皮膚水和に関連する１つ又は複数の生物学的テーマについての遺伝的共発現モジュールから導出された固有遺伝子（eigengene）を転写的にアップレギュレートする能力を有する少なくとも１つの活性物質を含む第１の配合物を、前記皮膚の目標部分に局所的に適用する工程と、
（ｃ）皮膚修復及び／又は再構築に関連する１つ又は複数の生物学的テーマについての共発現モジュールから導出された固有遺伝子を転写的にアップレギュレートする能力を有する少なくとも１つの活性物質を含む第２の配合物を、前記皮膚の目標部分に局所的に適用する工程と、を含み、
（ｃ）の適用が、（ｂ）の適用に続いて行われる、レジメン。
【請求項２】
少なくとも１週、少なくとも１ヶ月、及び少なくとも１年から選択される時間枠にわたって投与される、少なくとも毎日及び少なくとも１日２回から選択される投与計画で実施され、好ましくは、投与計画が、少なくとも１週の時間枠にわたって、少なくとも１日１回投与されるものである、請求項１に記載のレジメン。
【請求項３】
前記（ｃ）の適用が、前記（ｂ）の適用の実質的に直後に続く、請求項１に記載のレジメン。
【請求項４】
老化皮膚の外観を改善することが、暦年齢と外見年齢との間の負の不一致（negative discordance）の大きさを減少させることと、暦年齢と外見年齢との間の正の不一致（positive discordance）の大きさを保ち又は増大させることとを含む、請求項１に記載のレジメン。
【請求項５】
遺伝的共発現モジュールが、（ｉ）生物学的年齢と外見年齢との間の正の不一致を示す集団において転写的にアップレギュレートされている遺伝子の集合（a set of genes）と、（ｉｉ）（ｉ）に実質的に表されたテーマから選択される１つ又は複数の生物学的テーマに関連する遺伝子の集合との共通集合（intersecting set）を含む、請求項１に記載のレジメン。
【請求項６】
固有遺伝子が、特異値分解のプロセスによって、共発現モジュールについて得られる、請求項１に記載のレジメン。
【請求項７】
別々に収容された第１のスキンケア組成物及び第２のスキンケア組成物と、前記第１の組成物を皮膚の目標領域に適用した後、前記第２の組成物を前記皮膚の目標領域に適用するための使用説明書と、任意に、前記第１及び／又は前記第２のスキンケア組成物の前記皮膚の目標領域への局所適用をもたらすための少なくとも１つのアプリケータとを含む、化粧料皮膚処置キットであって、
前記第１の組成物が、前記皮膚の目標部分に対して、皮膚洗浄及び／又は皮膚解毒に関連する１つ又は複数の生物学的テーマについての遺伝的共発現モジュールから導出された固有遺伝子を転写的にアップレギュレートする能力を有する少なくとも１つの活性物質を含むように配合され、前記第２の組成物が、皮膚修復及び／又は再構築に関連する１つ又は複数の生物学的テーマについての共発現モジュールから導出された固有遺伝子を転写的にアップレギュレートする能力を有する少なくとも１つの活性物質を含むように配合される、キット。
【請求項８】
前記皮膚洗浄及び／又は皮膚解毒に関連する１つ又は複数の生物学的テーマが、表１に記載される生物学的テーマから選択され、前記皮膚修復及び／又は再構築に関連する１つ又は複数の生物学的テーマが、表２に記載される生物学的テーマから選択され、好ましくは、前記生物学的テーマが、細胞接着を含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載のキット又はレジメン。
【請求項９】
前記皮膚洗浄及び／又は皮膚解毒に関連する１つ又は複数の生物学的テーマについての遺伝的共発現モジュールから導出された固有遺伝子を転写的にアップレギュレートする能力を有する少なくとも１つの活性物質が、パルミトイルペプチド誘導体及びイナゴマメ種子（carob seed）誘導体のうちの１つ又は複数から選択され、前記皮膚修復及び／又は再構築に関連する１つ又は複数の生物学的テーマについての共発現モジュールから導出された固有遺伝子を転写的にアップレギュレートする能力を有する少なくとも１つの活性物質が、パルミトイルペプチド誘導体、ビタミンＢ３化合物、イノンド抽出物（dill extract）誘導体、及びオリーブ油誘導体のうちの１つ又は複数から選択される、請求項７に記載のキット。
【請求項１０】
前記パルミトイルペプチド誘導体が、Ｐａｌ−ＫＴを含み、前記イナゴマメ種子誘導体が、Ｇｌｙｃｏ−Ｒｅｐａｉｒ（商標）を含み、好ましくは、前記Ｐａｌ−ＫＴが、０．０１％〜約１０％の量で配合物中に存在し、前記Ｇｌｙｃｏ−Ｒｅｐａｉｒ（商標）が、０．０００１％〜１５％の量で配合物中に存在する、請求項９に記載のキット。
【請求項１１】
前記パルミトイルペプチド誘導体が、Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳを含み、前記ビタミンＢ３化合物が、ナイアシンアミドを含み、前記イノンド抽出物誘導体が、Ｌｙｓ’ｌａｓｔｉｎｅ（登録商標）Ｖを含み、前記オリーブ油誘導体が、Ｏｌｉｖｅｍ（登録商標）４６０を含み、好ましくは、前記Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳが、０．０１％〜約１０％の量で配合物中に存在し、前記ナイアシンアミドが、０．１％〜約１０％の量で配合物中に存在し、Ｌｙｓ’ｌａｓｔｉｎｅ（登録商標）Ｖが、約０．００１％〜約７．０％の量で配合物中に存在し、前記Ｏｌｉｖｅｍ（登録商標）４６０が、０．０００５〜０．０１％の量で配合物中に存在する、請求項９に記載のキット。
【請求項１２】
ヒト皮膚の所望の美容表現型（cosmetic phenotype）に関連する固有遺伝子を転写的にアップレギュレートするのに有効な薬剤を特定するための方法であって、前記方法が、前記所望の美容表現型を示すヒト皮膚において転写的にアップレギュレートされている遺伝子の集合及び１つ又は複数の生物学的テーマに関連する遺伝子の集合から決定された共発現モジュールについての固有遺伝子を導出する工程と、推定薬剤（putative agent）で皮膚を処置する工程と、前記処置された皮膚中の前記固有遺伝子の転写評価（transcriptional assessment）を行う工程と、前記固有遺伝子が前記処置された皮膚においてアップレギュレートされている場合、前記推定薬剤を有効薬剤として特定する工程と、を含む、方法。
【請求項１３】
所望の美容表現型において差次的に発現されている遺伝子の第１の集合及び前記遺伝子の第１の集合において過剰出現する生物学的過程に関与する遺伝子の第２の集合の共発現モジュールから導出された固有遺伝子であって、好ましくは、プローブ集合が、前記共発現モジュール中の前記遺伝子のそれぞれについて、少なくとも１つのｍＲＮＡプローブを含む、固有遺伝子。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示の主題は、特定のレジメンに従って消費者が使用するとき、増進された老化防止の利益を提供するために、遺伝子発現ネットワーク研究に従って具体的に配合された、多段階美容レジメン及び局所スキンケア組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚は、外環境と内環境との間に高度に調節された界面を提供する、複雑かつ動的な臓器である。皮膚の老化は、多因子プロセスであり、代謝及び異化過程からのフリーラジカル発生などの内因性ストレス因子と、化学品及び紫外線暴露並びに表面におけるフリーラジカルの発生などの外因性ストレス因子との両方の関数として、並びに遺伝子決定論から進行する。しわ、緊張及びはりの喪失、水分保持能力の減少、並びに色素むらの発生は、全てが「老化した皮膚」の外観を実証する周知の加齢に関連する影響である。
【０００３】
皮膚の老化が個人の外観及び自尊心に対して有し得る顕著な影響のために、老化皮膚の外観の治療又は改善で有効な化粧剤を特定し、かつ配合物を開発することの継続する努力が行われている。科学者は、皮膚の老化が、複数の生物学的機構からの結果として生じること、及び老化の影響に対抗し又は逆転させることが、多機構的アプローチによって対処されねばならないことを確立した。したがって、過去数十年にわたって、老化皮膚の外観に関わる根本的なプロセスを特定することに基づいて老化防止組成物を処方すること、並びに具体的にこれらのプロセスにおける平衡状態に対抗し、又はより若々しい外観に移行させるスキンケア剤を開発又は特定することに焦点が当てられてきた。
【０００４】
多機構的パラダイムを反映する化粧品開発への初期アプローチは、異なる又は複数の機構に有効であると特定された数個のスキンケア活性物質を含む単一の組成物を配合することであった。適用レジメンは、一般に、同一の配合物の投与又は処置時間枠にわたる複数回の適用を伴った。別の初期製品開発は、朝の保湿剤及び夜のアイクリームの日常的な使用などの既存の消費者習慣と抱き合わせるために、既存の送達製品に特定された活性物質を単純に添加するものであった。ここでは、複数の老化防止スキンケア剤と共に配合された多くの化粧品が使用可能であるが、同一配合物中又は任意の特定の適用レジメンによる配合物間の活性物質によって活性化される生物学的過程の相互作用は、科学的に検討されていない。
【０００５】
最近、テューレーン大学の科学者が、各組成物が、最適な有益な作用と理論的に関連する時間に、特定の活性物質を送達させるように配合された、複数の組成物の毎日適用を伴うレジメンにおける老化防止の有効性を立証した。この研究は、４つの異なる製品処方である洗顔剤、昼用クリーム、夜用クリーム、及びアイクリームの日常的な適用の影響を検討した。各製品は、既知のものであり、確立された機構に基づく利益を有する活性物質を含有し、各製品は、適用のために毎日の好ましい時間帯があるものとして、すでに市場に出されているものであった。実験プロトコルにおいて、対照被験者に、活性物質無しに日焼け止め剤を含む、同一の送達用担体及び賦形剤を含む配合物を提供し（Ｊ  Ｄｒｕｇｓ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ．２０１２；１１（１２）：１４４７〜１４５４）、全ての被験者に、最大３０週間、一日のうちの特定の時間に各配合物を適用することを含むレジメンに従うよう指示した。しかしながら、この試験は、具体的にレジメンによるいかなる影響も考慮又は制御しなかった。実験及び対照被験者の双方が同一の適用レジメンに従い、特定の活性物質の適用の順序の比較及び／又は適用の順序によって付与された（又は侵害された）目標とする効果に及ぼす差異的影響の検討を可能にする対照比較集団がなかった。更に、この試験は、４つの組成物中への８つの活性物質の封入についての理論的な生体機構的根拠に特に言及しているが、適用レジメンを基礎として示唆又は確認された機構の間の若しくはそれらの中の相互影響に基づく科学的な動機付けがない。
【０００６】
老化防止処方物の適用の前に、皮膚洗浄配合物において界面活性剤／石鹸と共に剥離剤の使用を示唆するスキンケアレジメンも当該技術分野において既知である。しかしながら、既知の洗浄配合物は、洗浄に加えて、どんな活性物質又は機構的操作／効果が、第２の配合物中に存在し、その後送達される活性物質への感受性に対して皮膚の更なる刺激をもたらし得るかに関して、科学的洞察力／先見性又は根拠の欠如に悩まされている。最も具体的には、活性物質とそれらが調節／活性化する生物学的過程／機構との間の相互作用に基づく多段階レジメンの一部としての組成物の配合が、考慮されていない。１つには、これは、化粧剤間のより微妙な相互作用及びばらつき並びにそれらが調節するプロセスを理解することが難しいためである。
【０００７】
しかしながら、つい最近、化粧料研究者は、遺伝子転写研究を通して、化粧料用活性物質による生物学的過程の調節を実証することができた。遺伝学及び転写調節の原理は、皮膚老化防止処方物の設計及び検証に適用されている。一般に、これらの研究は、処置皮膚の未処置皮膚に対比するグローバルマイクロアレイ分析及び処置に応答して差次的に調節された遺伝子の特定に基づいていた。本研究者の一部による研究を含む更に精査された研究において、皮膚の健康及び機能に関連することが知られている特定の生物学的経路に関与する遺伝子を転写的に制御するための能力によるスキンケア剤の特定並びに分類に基づく方法及び配合物が、開発及び／又は検証された（例えば、特許出願第１３／０２２１９１号を参照されたい）。しかし、活性物質の相乗作用が観察される場合があったが、活性物質が同時配合されるか、若しくは特定の適用レジメンと並行して又はそれに従って適用されるとき、活性物質間の機構的相互作用及び関係する生物学的過程間の相互影響が考慮されなかった。
【０００８】
驚くべきことに、遺伝的モデルを精巧化する最近開発されたバイオインフォマティクスの原理の適用によって、特定のスキンケア活性物質の適用の順序が操作され、毎日の投与処置時間枠プロトコルにわたる同一活性物質のランダム又は逆の適用に対して増進された老化防止利益を達成することができることが今では判明している。
【０００９】
現在のモデル下では、遺伝子及び遺伝子発現産物は、活性物質による発現調節が関与する生物学的経路、過程又は「テーマ」に従ってグループ分けされ得る。比較的新しいバイオインフォマティクス生成遺伝的モデルによると、経路間の関連性を明らかにするために、「固有遺伝子（eigengene）」を導出することができる（Ｌａｎｇｅｒｆｅｌｄｅｒ及びＨｏｖａｒｔｈ、ＢＭＣ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ２００７、１：５４、１７５２〜０５０９）。固有遺伝子モデル下で、「モジュール」は、生物学的経路、過程又はテーマを形成する相互接続された遺伝子のグループであり、２つ又はそれ以上のモジュールの共通集合（intersecting set）は、「共発現モジュール」と呼ばれる。モジュール又は共発現モジュールの遺伝子発現プロファイルは、「固有遺伝子」によって表されることができ、固有遺伝子ネットワークは、遺伝的共発現モジュール間及び遺伝的共発現モジュール内の関連性を表すよう構築することができる。「固有遺伝子」の導出は、多くのデータ点を単一のベクトルに縮小する。固有遺伝子は、モジュール発現プロファイルの単一の代表的遺伝子への要約として考えられてもよい。固有遺伝子は、モジュールを含む遺伝子間のばらつきを反映する。
【００１０】
本研究者は、化粧料用活性物質によって引き起こされる生物学的過程間の相互作用の微妙な影響であっても、これらの原理を化粧料老化防止配合物及びレジメンの研究に適用することによって試験することができると仮定した。驚くべきことに、老化防止活性物質を含むスキンケア組成物の局所適用の順序が、全体の処置効果の有効性における変化をもたらすこと、及び配合物が、老化防止利益に及ぼすレジメンの効果を最大化するよう開発され得ることを発見した。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１１】
【特許文献１】特許出願第１３／０２２１９１号
【非特許文献】
【００１２】
【非特許文献１】Ｊ  Ｄｒｕｇｓ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ．２０１２；１１（１２）：１４４７〜１４５４
【非特許文献２】Ｌａｎｇｅｒｆｅｌｄｅｒ及びＨｏｖａｒｔｈ、ＢＭＣ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ２００７、１：５４、１７５２〜０５０９
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１３】
したがって、本発明は、所望の老化防止利益を最適化する時間枠において老化防止活性物質を提供するように科学的に設計された化粧料老化防止配合物及びレジメンを提供する。特に、洗浄、解毒、及び水和効果を提供するように配合された組成物の適用後に、修復及び再構築効果を提供するように配合された組成物の適用を行うことを含むレジメンは、増進された老化防止の最終目標結果をもたらす。
【００１４】
本発明の実施形態は、老化するヒト皮膚の外観を改善するために有効な多段階の美容レジメンを提供する。レジメンは、（ａ）皮膚老化の徴候を示す皮膚の目標部分を特定する工程と、（ｂ）皮膚洗浄及び／又は皮膚解毒、及び／又は皮膚水和に関連する１つ又は複数の生物学的テーマについての遺伝的共発現モジュールから導出された固有遺伝子を転写的にアップレギュレートする能力を有する少なくとも１つの活性物質を含む第１の配合物を、皮膚の目標部分に局所的に適用する工程と、（ｃ）皮膚修復及び／又は再構築に関連する１つ又は複数の生物学的テーマについての共発現モジュールから導出された固有遺伝子を転写的にアップレギュレートするための能力を有する少なくとも１つの活性物質を含む第２の配合物を、皮膚の目標部分に局所的に適用する工程と、を含み、（ｃ）の適用は、（ｂ）の適用に続いて行われる。
【００１５】
他の実施形態は、別々に収容された第１のスキンケア組成物と第２のスキンケア組成物とを含む化粧料皮膚処置キットを対象とする。第１の組成物は、皮膚の目標部分に対する皮膚洗浄及び／又は皮膚解毒、及び／又は皮膚水和に関連する１つ又は複数の生物学的テーマについての遺伝的共発現モジュールから導出された固有遺伝子を転写的にアップレギュレートする能力を有する少なくとも１つの活性物質を、含むように配合される。第２の組成物は、皮膚修復及び／又は再構築に関連する１つ又は複数の生物学的テーマについての共発現モジュールから導出された固有遺伝子を転写的にアップレギュレートするための能力を有する少なくとも１つの活性物質を、含むように配合され、第１の組成物を皮膚の目標領域に適用した後、第２の組成物を皮膚の目標領域に適用するための使用説明書。キットは、任意に、第１及び／又は第２のスキンケア組成物の皮膚の目標領域への局所適用をもたらすための少なくとも１つのアプリケータを含んでもよく、あるいは、容器は、目標領域に直接適用するように、又は目標領域に直接適用するために消費者の指に適用するように設計されてもよい。
【００１６】
広義の実施形態は、ヒトの皮膚の所望の美容表現型（cosmetic phenotypic）に関連する１つ又は複数の生物学的テーマについての遺伝的共発現モジュールから導出された固有遺伝子を転写的にアップレギュレートするのに有効な薬剤を特定することによって、他の美容利益をヒトの皮膚に提供するための類似の方法を提供する。方法は、所望の美容表現型を示す、ヒトの皮膚において転写的にアップレギュレートされている遺伝子の集合（a set of genes）及び１つ又は複数の生物学的テーマに関連する遺伝子の集合から決定された共発現モジュールについての固有遺伝子を導出する工程と、推定薬剤（putative agent）で皮膚を処置する工程と、処置された皮膚中の固有遺伝子の転写評価（transcriptional assessment）を行う工程と、固有遺伝子が処置された皮膚においてアップレギュレートされている場合、推定薬剤を有効薬剤として特定する工程と、を含む。
【００１７】
固有遺伝子、並びに美容条件及び効果についてのバイオマーカー又は標準物質として有用な関連するプローブ集合も提供される。一実施形態では、固有遺伝子は、所望の美容表現型において差次的に発現されている遺伝子の第１の集合及び遺伝子の第１の集合において過剰出現する生物学的過程に関与する遺伝子の第２の集合の共発現モジュールから導出される。
【００１８】
これら及び他の実施形態は、以下の図面及び発明を実施するための形態を参照することによって、より完全に理解されるであろうが、図面及び実施形態は、例示の目的のものであることに留意するべきであり、本明細書に添付された特許請求の範囲によって定義される主題の完全な範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。全ての参考文献（例えば、書籍、研究論文、特許出願、カタログ、データベースなどの印刷された刊行物）は、参照により本明細書に組み込まれる。矛盾又は不一致が生じた場合、補正項に修正されているように、本明細書に準拠することになる。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１Ａ】年齢の「より若い外観」を表す固有遺伝子モジュールについての発現に対するグラフ及び例示の活性物質の固有遺伝子に及ぼす効果を示すチャートである。全表皮におけるより若い外観の遺伝子である。
【図１Ｂ】全真皮におけるより若い外観の遺伝子である。
【図２】美容効果範疇に分けられる「より若い外観」モジュールにおいて過剰出現する２６の生物学的テーマである。
【図３】固有遺伝子表示の導出の概略図である。
【図４】「より若い外観」及び「細胞接着」についての共発現モジュールの固有のグラフ並びに例示の活性物質の固有遺伝子に及ぼす効果を示すチャートである。
【図５Ａ】「より若い外観」及び「エネルギー関連」についての共発現モジュールの固有遺伝子のグラフ並びに例示の活性物質の固有遺伝子に及ぼす効果を示すチャートである。
【図５Ｂ】個々の共発現モジュール遺伝子の年齢の関数としてのグラフである。
【図６Ａ】「より若い外観」及び「皮膚バリア」についての共発現モジュール中の遺伝子のリストである。
【図６Ｂ】「より若い外観」及び「皮膚バリア」についての共発現モジュールの固有のグラフ並びに例示の活性物質の固有遺伝子に及ぼす効果を示すチャートである。
【図７Ａ】「より若い外観」及び「年齢関連」についての共発現モジュール中の遺伝子のリストである。
【図７Ｂ】「より若い外観」及び「年齢関連」についての共発現モジュールの固有のグラフ並びに例示の活性物質の固有遺伝子に及ぼす効果を示すチャートである。
【図８】「洗浄及び解毒」関連遺伝子の固有遺伝子表現を示すグラフ及びチャートである。
【図９】「修復及び再構築」関連遺伝子の固有遺伝子表現を示すグラフ及びチャートである。
【図１０】生物学的テーマによる例示の活性物質の老化防止効果のヒートマップである。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
本明細書は、本発明を特に指摘し、明確に請求する特許請求の範囲をもって結論づけられるが、本発明は以下の説明からよりよく理解されると考えられる。
【００２１】
本明細書で使用される全ての百分率及び比率は、組成物全体の重量によるものであり、特に指定しない限り、全ての測定は２５℃で行われた。本明細書に記載されるいずれの範囲も端点を含み、組み合わせることが可能である。したがって、本明細書全体にわたって提示されるあらゆる範囲には、そのより狭い範囲が全て本明細書に明示的に記載されているかのように、そのより広い範囲内のより狭い範囲が全て含まれる。有効桁の数は、表示された量に対する限定を表すものでも、計測値の精度に対する限定を表すものでもない。全ての測定は、周囲条件において行われると理解される。特に断りがない限り、重量は、列挙されている成分に関連する場合にはいずれも、活性レベルに基づいており、市販の材料に含まれることのあるキャリア又は副生成物を含まない。
【００２２】
本発明の組成物は、本明細書に記載の必須成分並びに任意選択的成分を含む、それらから本質的になる、又はそれらからなることができる。本明細書で使用するとき、「から本質的になる」とは、組成物又は構成成分が、追加成分を含み得ることを意味するが、追加成分が請求項に係る組成物又は方法の基本的かつ新規の特性を実質的に変えない場合に限る。明細書及び添付の特許請求の範囲において使用される単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、文脈が明らかに他の意味を示さない限り、同様に複数形を含むものとする。
【００２３】
組成物について言及する際、「適用する」又は「適用」は、表皮などのヒト皮膚の表面に本発明の組成物を局所的に適用すること又は塗布することを意味する。
【００２４】
「皮膚科学的に許容可能な」は、記載される組成物又は構成成分が、過度の毒性、不適応性、不安定性、アレルギー反応などがなく、ヒトの皮膚組織と接触して使用するのに好適であることを意味する。
【００２５】
「有効量」とは、明白な外観及び／又は触感的利益を顕著に誘導するには十分であるが、重篤な副作用を回避するほどに十分に低い（すなわち、当業者の適切な判断の範囲内で合理的な利益対危険性比を提供する）化合物又は組成物の量を意味する。例えば、ｐａｌ−ＫＴ及びイナゴマメ果実抽出物の有効量とは、肯定的な外観及び／又は触感的利益を顕著に誘導するには十分であるが、重篤な副作用を回避するほどに十分に低い（すなわち、当業者の適切な判断の範囲内で合理的な利益対危険性比を提供する）組み合わせた２つの材料の量を意味する。「有効」である抽出物の量は、抽出物の具体的な供給元（例えば、製造業者）によって異なる場合があり、当業者であれば具体的な抽出物製品の活性レベル（例えば、存在する活性成分のレベル）に基づいて決定することができる。任意の抽出物と同様に、用いられる具体的な抽出物製品中の活性構成成分の濃度は、抽出物製品の最終希釈体積、使用される具体的な抽出方法、個々の植物間の固有のばらつき範囲等の要因、及び当業者に公知の他の一般的な要因に依存する。
【００２６】
「顔の皮膚表面」とは、額、眼窩周囲、頬、口周囲、顎、及び鼻の皮膚表面のうちの１つ又は複数を意味する。
【００２７】
「スキンケア活性物質」又は「活性物質」とは、皮膚に適用したとき皮膚に利益又は改善をもたらす化合物を意味する。
【００２８】
「老化した皮膚の外観の改善」又は「老化した皮膚の肌理の改善」とは、皮膚の肌理の外観及び／又は感触において、視覚的及び／又は触覚的に知覚可能な肯定的な変化、又は利益をもたらすことを意味する。これらの用語には、皮膚の老化における１つ又は複数の肌理の兆候の外観を防止又は遅延させることも含む。提供され得る利益としては、以下の：しわ、小じわ、粗く深い線、溝、隆起の外観の改善；皮膚の弾性の喪失、例えば、弾性線維症、たるみ、変形から皮膚の喪失等の症状を生じる機能的皮膚エラスチンの喪失、損傷、及び／又は不活性化に起因する皮膚の弾性の喪失の予防；並びにこれらの組み合わせのうちの１つ又は複数が挙げられるが、これらに限定されないプロセスから生じた結果であり得る。老化皮膚の外観を改善することは、暦年齢と外見年齢との間の負の不一致（negative discordance）の大きさを減少させること、及び暦年齢と外見年齢との間の正の不一致（positive discordance）の大きさを保ち又は増大させることとしても見なされてもよい。負の不一致は、暦年齢が外見年齢よりも低い場合に存在し、正の不一致は、暦年齢が外見年齢よりも高い場合に存在する。上部３０％の女性における正の不一致は、本明細書では「成功加齢（successful aging）」と称される。
【００２９】
「肌理の皮膚老化徴候」としては、老化による皮膚の肌理の望ましくない変化による、全ての外面上の視覚的及び触覚的に認知可能な皮膚の肌理の症状発現、並びに任意の肉眼的又は微視的な影響が挙げられるが、これらに限定されない。これらの徴候は、しわ及び粗く深いしわ、小じわ、皮膚のしわ、溝、隆起、不均一さ又は粗さ等の組織的欠陥の進行；皮膚弾性の喪失；角質繊維；異常分化；過角化；弾性線維症；コラーゲン分解、及び角質層、真皮、又は表皮における他の組織構造の変化；及びこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されないプロセスから生じた結果であり得る。
【００３０】
要素がリストとして提示される場合、要素のそれぞれの部分群もまた開示され、いかなる要素（複数可）も群から除去され得る。簡潔性の目的のためだけに、これらの実施形態の一部が、本明細書に具体的に挙げられているが、本発明は、全てのこのような実施形態を含む。一般に、本発明、又は本発明の態様が、特定の要素、特徴等を含むものと見なされる場合、本発明のある特定の実施形態又は本発明の態様は、このような要素、特徴等からなる、又は本質的になるとも理解されるべきである。
【００３１】
本明細書で使用される、被験者の暦年齢は、誕生から年数で従来的に計側される被験者の年齢である。被験者の外見年齢とは、比較評価プロトコルから判定された、他の被験者と比べての被験者の年齢である。被験者の外見年齢が被験者の暦年齢よりも若い場合に、被験者は正の年齢不一致を示し、被験者の外見年齢が被験者の暦年齢よりも高い場合に、被験者は負の年齢不一致を示す。
【００３２】
本研究者は、驚くべきことに、それによって生物学的過程／経路が活性化される活性物質を含む局所スキンケア組成物の適用の順序が、老化防止処置の全体的有効性における違いをもたらすことを見出した。特に、皮膚の修復及び再構築に関する生物学的過程に関連する活性物質で配合された組成物を適用する前に、皮膚の洗浄、水和、及び解毒に関する生物学的過程に関連する活性物質で配合された組成物を適用することを含むレジメンは、（１）同一の活性物質を含む単一組成物を適用すること、及び（２）同一の組成物を逆の順序で適用することと比較した場合、優れた最終目標結果を提供する。
【００３３】
データ圧縮技術を利用することによって微妙な効果の検出を可能にするバイオインフォマティクスの科学が、初めに、非常に特異的な効果に対して、化粧料組成物の配合に適用された。遺伝子及び遺伝子発現産物は、発現が関与する生物学的経路、過程又は「テーマ」に従ってグループ分けされ得ることが公知である。遺伝子ネットワーク理論のバイオインフォマティクスモデルにおいて、これらのグループ分けは「モジュール」と呼ばれる。２つ又はそれ以上のモジュールの共通集合は、「共発現モジュール」と呼ばれる。モジュール又は共発現モジュールの遺伝子発現プロファイル（トランスクリプトミクスプロファイル）は、「固有遺伝子」によって表されることができ、固有遺伝子ネットワークは、共発現モジュール間の関連性を表すよう構築することができる。
【００３４】
遺伝子共発現ネットワークは、転写物間の関連性に関する情報を提供するために、遺伝子発現マイクロアレイデータから構築することができる。「モジュール」は、生物学的経路、過程、又はテーマを形成する相互接続された遺伝子のグループである。共発現モジュールは、より高次の組織を表す。「固有遺伝子」の導出は、多くのデータ点を単一のベクトルに捕捉する。固有遺伝子は、共モジュールプロファイルの単一の代表的遺伝子への要約として考えられてもよい。固有遺伝子は、遺伝子の非常に選び抜かれた集団から導出され、被験者間のばらつきを説明するために、転写プロファイル全体において見過ごされ得る摂動は、実際には固有遺伝子上で顕著に証明することができる。
【００３５】
実施例１に記載されるプロトコルに従って定義される「より若い外観」の皮膚によって最適に発現される遺伝子の集合を含む第１のモジュールが生成される。集合の解析は、過剰出現する生物学的テーマを明らかにする。「より若い外観」モジュールと特定の過剰出現する生物学的過程又は過剰出現する生物学的過程の関連グループに関連付けられた遺伝子の集合から生成されたモジュールとの交点は、「より若い外観」の皮膚を達成することに具体的に関与する各径路の遺伝子を含む共発現モジュールを提供する。次いで、固有遺伝子が、関心の各共発現モジュールについて導出され、活性物質が、固有遺伝子に及ぼす影響についてテストされ得る。
【００３６】
本発明の一実施形態は、老化するヒト皮膚の外観を改善するために有効な多段階のレジメンを提供する。このレジメンは、（ａ）皮膚老化の徴候を示す皮膚の目標部分を特定する工程と、（ｂ）皮膚洗浄及び／又は皮膚解毒、及び／又は皮膚水和に関連する１つ又は複数の生物学的テーマについての遺伝的共発現モジュールから導出された固有遺伝子を転写的にアップレギュレートする能力を有する少なくとも１つの活性物質を含む第１の配合物を、皮膚の目標部分に局所的に適用する工程と、（ｃ）皮膚修復及び／又は再構築に関連する１つ又は複数の生物学的テーマについての共発現モジュールから導出された固有遺伝子を転写的にアップレギュレートするための能力を有する少なくとも１つの活性物質を含む第２の配合物を、皮膚の目標部分に局所的に適用する工程と、を含み、（ｃ）の適用は、（ｂ）の適用に続いて行われる。具体的な実施形態では、このレジメンは、ステップ（ａ）、それに続く複数のステップ（ｂ）の適用を含む。非常に具体的な実施形態では、このレジメンは、２段階適用レジメンである。いくつかの実施形態では、レジメンは、ステップ（ａ）とステップ（ｂ）との間に洗い落とすことを含む。
【００３７】
レジメンは、１日１回から１日２回まで、例えば、水泳又は多量の汗をかいた後、再度の適用が望ましい場合、最大で１日４回まで変化する投与計画で施される。処置時間枠は、１週から１ヶ月まで、又は１年までの、あるいは化粧料消費者によって画定される未定の時間の長さまでの範囲に及ぶ。非常に具体的な実施形態によると、投与計画は、少なくとも１週の時間枠にわたって投与される少なくとも１日１回である。
【００３８】
ほとんどの場合、レジメンは、（ｂ）の適用の実質的に直後に（ｃ）の適用を行うように実行されるべきである。いくつかの実施形態では、適用間に時間間隔が存在する。具体的な実施形態では、時間間隔は、３０分間を超えるべきではない。
【００３９】
一態様によると、第１の組成物は、「より若い外観」モジュールと、洗浄、水和、及び解毒経路／過程に関する生物学的経路に関連する１つ又は複数のモジュールとの交点から形成された共発現モジュールから導出された固有遺伝子をアップレギュレートする活性物質を含むように配合される。非限定的な例としては、自食作用、エンドペプチダーゼ活性、及びタンパク質分解が挙げられる（図２、表１を参照のこと）。
【００４０】
別の態様では、第２の組成物は、年齢関連モジュールと、修復及び再構築経路／過程に関する生物学的経路、例えば、ＤＮＡ修復、細胞接着、脂質及びアミノ酸合成に関連する１つ又は複数のモジュールとの交点から形成された共発現モジュールから導出された固有遺伝子をアップレギュレートする１つ又は複数の活性物質を含むように配合される（図２、表２を参照のこと）。
【００４１】
本発明の基礎となっている基本原理の例示の目的で、特定の活性物質が開示かつ論議されることに留意するべきであるが、いかなる活性物質も、増進された老化防止効果のために設計された本発明のレジメンにおいて、同様に評価され、分類され、かつ利用されてもよいことが意図される。
【００４２】
例示の第１の組成物は、Ｐａｌ−ＫＴ（パルミトイル−リシン−スレオニン）及びＧｌｙｃｏ−Ｒｅｐａｉｒ（商標）（イナゴマメ種子（carob seed）抽出物のブランド）、並びにこれらの組み合わせから選択される皮膚活性物質を含む。例示の第２の組成物は、Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ（パルミトイル−リシン−スレオニン−リシン−セリン）、Ｏｌｉｖｅｍ（登録商標）４６０（オリーブ油抽出物のブランド）、Ｌｙｓ’ｌａｓｔｉｎｅ（登録商標）Ｖ（イノンド抽出物（dill extract）のブランド）、及びこれらの組み合わせから選択される皮膚活性物質を含む。
【００４３】
（予告的）実施例４で実証されるように、第２の組成物に先立っての第１の配合物の局所適用を含む第１のレジメンによる適用は、第１の組成物に先立っての第２の組成物の適用を含む第２のレジメンによる適用と比べるとき、増進された老化防止効果をもたらす。しかしながら、この増進は、適用間の時間が１〜１０分である場合に最大であり、適用間の時間間隔が約３０分を超える場合にゼロに減少する。とりわけ、より若く見える皮膚は、両方のレジメンによって達成されるが、第１のレジメンに従う適用は、第２のレジメンを超える統計的に有意な効果がある。この効果は、送達用担体とは無関係である。
【００４４】
理論に束縛されるものではないが、本研究者は、統計的に有意な差は、各配合物によって達成される生物学的過程／経路間の相互影響に起因するものであり得ると仮定する。例えば、皮膚が老化すると、ＵＶ照射への暴露などの内部傷害及び外部傷害の両方からの繰り返されるストレスからの損傷されたタンパク質の蓄積を含む多くの変化が細胞／組織内で発生する。積極的相互影響の一例において、皮膚の構造成分を再構築かつ再生する過程全体が、先ず、角質細胞及び線維芽細胞などの皮膚細胞から損傷した物質を洗浄、水和、及び解毒することによって最大化され得、これにより、新たに形成された構造成分が再生組織に組み込まれ得る。積極的な相互影響の別の例において、第１の組成物による皮膚の水和もまた、第２の組成物の増進された効果に寄与することができる。高度に水和された細胞環境は、洗浄及び解毒に関与する生物学的経路に関連する最適な酵素活性を好む。１つの非常に具体的な例では、タンパク質分解過程を誘引する活性物質が第１の組成物中に配合され、一方、中和剤が第２の組成物中で他のペプチド活性物質と共に配合され、これにより、他のペプチド活性物質が、第１の組成物の適用によって誘引されたタンパク質分解酵素の酵素性／分解性効果を受けることはない。本発明の非常に具体的な実施形態によると、第１の組成物は、ジペプチド活性物質を含み、第２の組成物は、ペンタペプチド活性物質の再構築活性を保つために、パルマトイル−ペンタペプチドなどのより長鎖のペプチドと共に配合されるオリーブ抽出物を含む。非常に具体的な実施形態では、第１の組成物は、Ｐａｌ−ＫＴを含み、第２の組成物は、Ｏｌｉｖｅｍ（登録商標）４６０及びＰａｌ−ＫＴＴＫＳを含む。
【００４５】
レジメンの特定の実施形態によって達成される生物学的過程間の積極的な相互影響の別の例では、水和された皮膚環境が、第１の組成物の適用から作り出され得る。この実施形態の態様によると、他の活性物質、特により大型のペプチドの、ＤＮＡ修復、細胞接着、脂質及びアミノ酸合成を含む修復及び再構築過程／経路が起こり得る表皮及び真皮区画への送達で補助するために、オリーブ油抽出物が第２の組成物中に含まれる。具体的な実施形態によると、第１の組成物は、皮膚に水和状態を付与するために、イナゴマメ種子抽出物及び／又はジペプチドを含み、その後、ペンタペプチド、イノンド抽出物、ビタミンＢ３化合物、及びこれらの組み合わせから選択される１つ又は複数の活性物質と組み合わせてオリーブ油抽出物を含む第２の組成物が適用される。非常に具体的な実施形態では、第１の組成物は、Ｐａｌ−ＫＴ及びＧｌｙｃｏ−Ｒｅｐａｉｒ（商標）ブランドのイナゴマメ抽出物を含み、第２の組成物は、Ｏｌｉｖｅｍ（登録商標）４６０ブランドのオリーブ油抽出物、Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ、ナイアシンアミド、及びＬｙｓ’ｌａｓｔｉｎｅ（登録商標）Ｖブランドのイノンド抽出物を含む。
【００４６】
キットも提供される。一実施形態によると、別々に収容された第１のスキンケア組成物と第２のスキンケア組成物とを含む化粧料皮膚処置キットが提供される。第１の組成物は、皮膚の目標部分に対する皮膚洗浄及び／又は皮膚解毒に関連する１つ又は複数の生物学的テーマについての遺伝的共発現モジュールから導出された固有遺伝子を転写的にアップレギュレートする能力を有する少なくとも１つの活性物質を含むように配合され、第２の組成物は、皮膚修復及び／又は再構築に関連する１つ又は複数の生物学的テーマについての共発現モジュールから導出された固有遺伝子を転写的にアップレギュレートするための能力を有する少なくとも１つの活性物質を含み、キットは、第１の組成物を皮膚の目標領域に適用した後、第２の組成物を皮膚の目標領域に適用するための使用説明書を含む。キットは、任意に、第１及び／又は第２のスキンケア組成物の皮膚の目標領域への局所適用をもたらすために、少なくとも１つのアプリケータを含んでもよい。本発明の具体的な実施形態によるキットは、皮膚洗浄及び／又は皮膚解毒に関連する生物学的テーマが、図２、表３に記載される生物学的テーマから選択されるものもの、並びに皮膚修復及び／又は再構築に関連する１つ又は複数の生物学的テーマが、図２、表２に記載される生物学的テーマから選択されるものを含む。
【００４７】
具体的なキットの実施形態の第１の組成物は、皮膚洗浄及び／又は皮膚解毒に関連する１つ又は複数の生物学的テーマについての遺伝的共発現モジュールから導出された固有遺伝子を転写的にアップレギュレートする能力を有する少なくとも１つの活性物質を含むように配合される。非常に具体的な実施形態では、この活性物質は、パルミトイルペプチド誘導体及びイナゴマメ種子誘導体のうちの１つ又は複数を含み、より具体的な実施形態では、パルミトイルペプチド誘導体は、Ｐａｌ−ＫＴを含み、イナゴマメ種子抽出物は、Ｇｌｙｃｏ−Ｒｅｐａｉｒ（商標）を含む。具体的なキットの実施形態の第２の組成物は、皮膚修復及び／又は再構築に関連する１つ又は複数の生物学的テーマについての遺伝的共発現モジュールから導出された固有遺伝子を転写的にアップレギュレートする能力を有する少なくとも１つの活性物質を含むように配合される。非常に具体的な実施形態によると、この活性物質は、パルミトイルペプチド誘導体、ビタミンＢ３化合物、イノンド抽出物誘導体、及びオリーブ油誘導体のうちの１つ又は複数から選択され、より具体的な実施形態では、パルミトイルペプチド誘導体化合物は、Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳを含み、ビタミンＢ３化合物は、ナイアシンアミドを含み、イノンド抽出物誘導体は、Ｌｙｓ’ｌａｓｔｉｎｅ（登録商標）Ｖを含み、オリーブ油誘導体は、Ｏｌｉｖｅｍ（登録商標）４６０を含む。
【００４８】
キットは、少なくとも１つのアプリケータを含んでもよく、いくつかの実施形態では、各配合物に対して異なるアプリケータを含む。このアプリケータは、配合物容器の一部であっても、又は配合物容器に組み込まれてもよく、若しくは、着脱自在に取り外し可能であっても、使い捨て又は再使用可能であってもよく、あるいは、独立したアプリケータであってもよい。スキンケア組成物の局所適用のためのアプリケータは、当該技術分野において周知である。
【００４９】
ヒト皮膚の所望の美容表現型に関連する固有遺伝子を転写的にアップレギュレートするために有効な薬剤を特定するための方法も開示される。方法は、所望の美容表現型を示す、ヒトの皮膚において転写的にアップレギュレートされている遺伝子の集合及び１つ又は複数の生物学的テーマに関連する遺伝子の集合から決定された共発現モジュールについての固有遺伝子を導出する工程と、推定薬剤で皮膚を処置する工程と、処置された皮膚中の固有遺伝子の転写評価を行う工程と、固有遺伝子が処置された皮膚においてアップレギュレートされている場合、推定薬剤を有効薬剤として特定する工程と、を含む。本発明の基本原理は、老化防止効果に加えて、多くの美容概念に対して増進された利益を有するレジメンを提供するために応用できると考えられる。
【００５０】
特定のレジメンに従って組成物中に配合される例示の活性物質は、以下により詳細に論じられるが、本発明の態様により有効であると特定された他の活性物質が、例示の活性物質に加えて、又は例示の活性物質に代えて、組成物中に含まれてもよく、例示の活性物質は、本発明の基本原理を例証するためだけに記載されるものであることを理解するべきである。
【００５１】
オリーブ油抽出物／誘導体
ＯＬＩＶＥＭ（登録商標）ブランドオリーブ油誘導体などのオリーブ油抽出物／誘導体は、とりわけ抗酸化活性、及び他の中和活性を提供すると考えられ、それは環境傷害に対する保護をもたらし得る（例えば、Ｓｋｉｎ  Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ  Ｃｏｎｆｉｒｍ  ｔｈｅ  Ａｎｔｉ−Ｏｘｉｄａｎｔ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  Ｏｌｉｖｅ  Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ  ａｎｄ  Ｙｅａｓｔ  Ｆｅｒｍｅｎｔ  Ｆｉｌｔｒａｔｅ、Ｆｉｎｌａｙら、Ｐ＆Ｇ  ６７ｔｈ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ  ｏｆ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ（２００９）を参照のこと）。具体的なオリーブ油抽出物／誘導体としては、Ｂ＆Ｔ  ＳＲＬからＯｌｉｖｅｍ（登録商標）４００、Ｏｌｉｖｅｍ（登録商標）４５０、又はＯｌｉｖｅｍ（登録商標）４６０として入手可能なオリーブ油ＰＥＧ−７カルボン酸ナトリウムが含まれる。
【００５２】
ＯＬＩＶＥＭ（登録商標）４６０は、６０％（無防腐系）活性濃度で設計された極めて穏やかなオリーブ系界面活性剤である。これは、発泡、洗浄、及び可溶化特性を有するオリーブ油から誘導されたアニオン性界面活性剤である。これは、溶液中で非イオン性挙動を示す。この泡はクリーミーで、細かく泡立ち、穏やかに洗浄する。オリーブ油抽出物は、０．１ｐｐｍ〜５ｐｐｍ、０．２５ｐｐｍ〜３ｐｐｍ、及び０．５ｐｐｍ〜２．５ｐｐｍの量で、若しくは０．０００５〜０．０１重量％として組成物中に含まれてもよい。非常に具体的な実施形態では、組成物は、０．６３ｐｐｍ、２．５ｐｐｍ、又は０．００１％のＯｌｉｖｅｍ（登録商標）ブランドのオリーブ油抽出物を含む。
【００５３】
ビタミンＢ３化合物
ビタミンＢ３化合物は、スキンケア活性物質として知られており、いくつかの化粧品スキンケア利益を提供すると考えられている（例えば、Ｂｉｓｓｅｔｔら、「Ｎｉａｃｉｎａｍｉｄｅ：Ａ  Ｂ  Ｖｉｔａｍｉｎ  ｔｈａｔ  Ｉｍｐｒｏｖｅｓ  Ａｇｉｎｇ  Ｆａｃｉａｌ  Ｓｋｉｎ  Ａｐｐｅａｒａｎｃｅ」、及びＤｒａｅｌｏｓ、「Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｓｉｔｕａｔｉｏｎｓ  Ｃｏｎｄｕｃｉｖｅ  ｔｏ  Ｐｒｏａｃｔｉｖｅ  Ｓｋｉｎ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ａｎｔｉ−Ａｇｉｎｇ  Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ」を参照のこと）。ビタミンＢ３化合物は、酸化防止及び美白効果を有するものとして知られている。本発明の組成物態様は、１つ又は複数のビタミンＢ３化合物、及びそれらの塩並びに誘導体を含んでもよい。前述のビタミンＢ３化合物の非限定的な例としては、ニコチン酸エステルが挙げられ、ニコチン酸の非血管拡張性エステル、ニコチニルアミノ酸、カルボン酸のニコチニルアルコールエステル、ニコチン酸Ｎ−オキシド、ナイアシンアミド、及びそれらの塩並びに誘導体、及びそれらの混合物が含まれる。具体的な実施形態では、ビタミンＢ３化合物は、ナイアシンアミドである。
【００５４】
組成物は、組成物の約０．０１重量％〜約５０重量％の、あるいは約０．１重量％〜約１０重量％、あるいは約０．５重量％〜約１０重量％、あるいは約１重量％〜約５重量％、あるいは約２重量％〜約５重量％のビタミンＢ３化合物を含んでよい。具体的な実施形態によると、組成物は、２５０μＭのナイアシンアミドを含むように配合される。
【００５５】
イナゴマメ果実抽出物
本発明のイナゴマメ果実抽出物（ＩＮＣＩ名：Ｃｅｒａｔｏｎｉａ  ｓｉｌｉｑｕａ果実抽出物；ＣＡＳ番号：８４９６１−４５−５）は、マメ科Ｆａｂａｃｅａｅに属するイナゴマメの木で成長する卵形の非多肉質のインゲン様の鞘から作製される。イナゴマメは、オリゴガラクトマンナンが豊富であり、これは、重要な生物学的活性物質であると考えられている。イナゴマメ果実の鞘には、一般的に、「イナゴマメナッツ（carob nuts）」と呼ばれる大きな種子が入っている。本明細書に用いるのに好適なイナゴマメ果実抽出物は、当該技術分野において既知のプロセスを用いて、果実の鞘、種子、又はこれらの組み合わせから得ることができる。イナゴマメ果実抽出物は、例えば、水、増粘剤、湿潤剤、溶媒、可溶化剤等の他の好適な材料を含んでよい。本明細書で使用するのに好適なイナゴマメ果実抽出物は、商品名Ｇｌｙｃｏ−Ｒｅｐａｉｒ（商標）でＳｉｌａｂ  Ｓ．Ａ．（Ｆｒａｎｃｅ）により商用に製造されている。この特定の抽出物製品は、約９４％の水と、５％のイナゴマメ果実抽出物と、１％の他の材料とを含有する。
【００５６】
イナゴマメ果実抽出物は、全組成物の０．０００１重量％〜１５重量％、０．０００２重量％〜１０重量％、０．００１重量％〜１５重量％、０．０２５重量％〜１０重量％、０．０５重量％〜１０重量％、０．０５重量％〜５重量％、又は更には０．１重量％〜５重量％の量で本明細書の組成物中に含まれ得る。非常に具体的な実施形態では、Ｇｌｙｃｏ−Ｒｅｐａｉｒ（商標）ブランドのイナゴマメ果実抽出物は、組成物の１重量％で含まれる。
【００５７】
イノンド抽出物
本発明のいくつかの組成物態様は、改善された皮膚弾性及び皮膚のハリの増加を含む、皮膚に美容利益を提供することが知られている、１つ又は複数の種類のイノンド抽出物を含んでもよい。本明細書で使用される「イノンド抽出物」とは、イノンド、イノンド種子、ディリー（dilly）、ディル（peucedanum graveolens）、蒔羅（anethum graveolens）、インドディル（anethum sowa）、及び関連する合成並びに誘導物質を指す。
【００５８】
イノンド抽出物は、エラスチン官能性を回復し、ＬＯＸＬ（老化の際の皮膚弾性における主要成分）を活性化する。老化した皮膚におけるＬＯＸＬレベルの回復は、皮膚弾性及びはりを復元し、たるみを防止する。イノンドの水性抽出物は、活性な、用量反応性かつ再生可能な材料であり、ＬＯＸＬ遺伝子発現（ＲＴ−ＰＣＲ）において２倍の増加を、エラスチン遺伝子発現において１．５倍の増加を生じることが見出されている。独自開発の３Ｄ皮膚モデル（ＢＡＳＦ  ＢＣのＭｉｍｅｓｋｉｎ（商標）皮膚モデル）において、０．０７５０％のイノイド抽出物は、４週間でＬＯＸＬ  ｍＲＮＡ（６４％）及びＬＯＸＬタンパク質（１２％）において有意な（ｐ＜０．００１）増加を生じ、透過型電子顕微鏡によって検出されるエラスチンを含有する微小線維を生成する。イノンド抽出物（０．０７５０％）は、４週後に、対照に対して弾性における有意な（ｐ＜０．０１）２９％の増加を生じた。
【００５９】
本発明の組成物態様は、組成物の約０．００１重量％〜約７．０重量％のイノンド抽出物を、より具体的には約０．０１〜５．０重量％、最も具体的には約０．０５〜２．５重量％のイノンド抽出物を含んでもよい。非常に具体的な実施形態では、イノンド抽出物は、ＢＡＳＦから市販されているＬｙｓ’ｌａｓｔｉｎｅ（登録商標）Ｖにおいてｐｅｕｃｅｄａｎｕｍ  ｇｒａｖｅｏｌｅｎｓとして存在し、組成物の１重量％として含まれる。
【００６０】
ペプチド及びペプチド誘導体
本発明の組成物態様は、１つ又は複数のペプチドを含み得る。本明細書で、「ペプチド」とは、１０個以下のアミノ酸を含有するペプチド、その誘導体、異性体、及び金属イオン（例えば、銅、亜鉛、マンガン及びマグネシウム）のような他の種との錯体を指す。本明細書で使用するとき、ペプチドとは、天然起源ペプチド及び合成ペプチドの両方を指す。ペプチドは、ジ−、トリ−、テトラ−、ペンタ−、及びヘキサ−ペプチド、それらの塩類、異性体、誘導体、並びにそれらの混合物であり得る。有用なペプチド誘導体の例としては、大豆タンパク質由来のペプチド（Ｓｉｌａｂ，ＦｒａｎｃｅからのＲｉｄｕｌｉｓｓｅ  Ｃ（商標））、カルノシン（β−アラニン−ヒスチジン）、パルミトイル−リジン−トレオニン（ｐａｌ−ＫＴ）及びパルミトイル−リジン−トレオニン−トレオニン−リジン−セリン（ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ、１００ｐｐｍのｐａｌ−ＫＴＴＫＳを含有するＭＡＴＲＩＸＹＬ（登録商標）として知られている組成物内で入手可能）、パルミトイル−グリシン−グルタミン−プロリン−アルギニン（ｐａｌ−ＧＱＰＲ、ＲＩＧＩＮ（登録商標）として知られている組成物内で入手可能））、これら３つはＳｅｄｅｒｍａ（Ｆｒａｎｃｅ）から入手可能、アセチル−グルタメート−グルタメート−メチオニン−グルタミン−アルギニン−アルギニン（Ａｃ−ＥＥＭＱＲＲ；Ａｒｇｉｒｅｌｉｎｅ（登録商標）、並びにＣｕ−ヒスチジン−グリシン−グリシン（Ｃｕ−ＨＧＧ、ＩＡＭＩＮ（登録商標）としても知られている）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００６１】
ＰＡＬ−ＫＴなどの特定のペプチドは、小じわ及びしわの外観の改善などの皮膚老化防止利益を提供し得る物質として広く認識される（例えば、Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  Ｂｉｏｍａｒｋｅｒ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ  ｔｏ  ａ  Ｎｅｗ  Ａｎｔｉ−Ａｇｉｎｇ  Ｐｅｐｔｉｄｅ，ＰＡＬ−ＫＴ、Ｏｓｂｏｒｎｅら、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ  ６７ｔｈ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ  Ｍｅｄｉａ  Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ、２００９を参照のこと）。組成物は、約１×１０-6％〜約２０％、あるいは約０．０１％〜約１０％、あるいは約０．１％〜約５％のペプチド、及び代替的に約１〜約２％のペプチドを含んでもよい。具体的な実施形態では、この組成物は、約０．１％〜約２％のペプチド含んでもよい。ペンタペプチド含有組成物、Ｍａｔｒｉｘｙｌ（登録商標）を利用する具体的な実施形態では、得られる組成物は、組成物の約０．０１重量％〜約５０重量％、より好ましくは約０．０５重量％〜約２０重量％、更により好ましくは約０．１重量％〜約１０重量％のＭａｔｒｉｘｙｌ（登録商標）を含有する。
【００６２】
本発明の態様による組成物は、本発明の趣旨から逸脱することなく、多種多様な追加の任意成分を含んでもよい。特に、本明細書に用いるのに好適な任意成分としては、化粧料組成物で使用するのに安全であることが知られている任意の成分（例えば、皮膚軟化剤、保湿剤ビタミン類；ペプチド類；並びに糖アミン、日焼け止め活性物質（又は日焼け止め剤）、紫外線吸収材、着色剤、界面活性剤、膜形成組成物、及びレオロジー変性剤）が含まれる。本組成物で使用するのに好適な任意成分のいくつかの非限定的な例は、２００８年２月２８日出願のＭｉｌｌｉｋｉｎらによる米国特許公開第ＵＳ２００８／０２０６３７３号、米国特許第５，９９７，８９０号、米国特許第６，４９２，３２６号、及び米国特許第６，６９６，０４９号に開示され、これら全ては、化粧料スキンケア組成物を目的とし、これらの開示全体が、この参照により本明細書に組み込まれる。本発明の非常に具体的な実施形態による例示的な組成物が、実施例４に記載される。
【００６３】
例示の活性物質に向けられる具体的な実施形態の範囲は、より低い範囲値を含むが、本発明のいくつかの実施形態による組成物は、任意の特定の活性物質を含まなくてもよいこと、及び活性物質が、全体の配合物設計に従って含まれる場合にこの範囲を適用されることが理解される。
【実施例】
【００６４】
以下の実施例は、具体的な実施形態による本発明のレジメンの態様を総じて例示する。特に、これらの実施例は、複数の組成物（各組成物が活性物質の異なる集合を含む）を特定のレジメン順序で適用することによって、逆の順序での適用と対比して、全ての活性物質を含む単一組成物の適用と対比して、皮膚に対する改善された老化防止効果が達成されることを立証する。それぞれ別個の組成物を、活性物質が関与する生物学的過程に従って選択される活性物質を含むように配合する。この選択は、「若い外観」に関連する遺伝子及び生物学的過程／経路遺伝子について共発現モジュールから導出された固有遺伝子に基づく、固有遺伝子解析を用いる評価において行われる。関連付けられたテーマは、特定の順序で活性化されるときに、互いに補完し合い、逆の順序では反作用効果を示す場合がある。
【００６５】
実施例１．以下の実施例は、暦年齢よりも外観が「若く」、「平均的に」、及び「年上に」見えると認められた女性における、顔の表皮及び表皮トランスクリプトームの年齢依存性における差、並びに「より若い外観」発現モジュール及びモデルを表す固有遺伝子の生成を例示する。
【００６６】
顔の皮膚の生検を、２０〜７０歳の範囲の女性ボランティアから得た。レーザ捕獲顕微解剖を用いて、ＲＮＡを表皮及び真皮組織から抽出した。Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ  ＨＧ−Ｕ２１９プローブアレイを用いて、トランスクリプトームプロファイルを得た。本明細書で「外見年齢」とも称される「認識された外観年齢」を、実験目的を知らない採点者（naive graders）からの顔のデジタル画像の相対的スコアにおける一致に基づいて推定し、被験者集団を、被験者の下部３０％を不成功加齢者と表し、中間部４０％を平均的加齢者と表し、上部３０％を成功加齢者と表して、３つの加齢者の範疇にグループ分けした。図１Ａ及び１Ｂに示すように、ＡＮＯＶＡ及びＡＮＣＯＶＡ回帰モデルにより、ほぼ２０００個の遺伝子が、認識された外観と有意な関連（＜０．０５のｐ値）を有することを見出した。図１Ａは、表皮に関連する「より若い外観」モジュールを説明し、一方図１Ｂは真皮に関連する「より若い外観」モジュールを明記する。本発明の実施形態による固有遺伝子の導出を、図３に概略的に示す。２６の過剰出現する生物学的テーマを、遺伝子集合濃縮解析（図２）に基づいて、表皮試料から特定した。
【００６７】
実施例２．インビトロにおいて遺伝子に関連する外観に及ぼす美容活性物質の処置効果を評価するために、トランスクリプトームプロファイルを、特定の美容活性物質で処置された培養ヒト角質細胞において判定した。共発現モジュールを、「より若い外観」の遺伝子集合モジュール及びいくつかの生物学的過程／テーマモジュールのそれぞれについて判定した。特異値分解を、全ての被験者に対する主発現のばらつきを表すその固有遺伝子を得るために、共発現モジュールについてのトランスクリプトームプロファイルに適用した。ナイアシンアミド、ｐａｌ−ＫＴ、Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ、Ｌｙｓ’ｌａｓｔｉｎｅ（登録商標）Ｖブランドのイノンド抽出物、Ｏｌｉｖｅｍ（登録商標）４６０ブランドのオリーブ油抽出物、Ｇｌｙｃｏ−Ｒｅｐａｉｒ（商標）ブランドのイナゴマメ果実抽出物、及びＨ２６を含む例示の美容活性物質の処置効果を、固有遺伝子に及ぼす処置の影響を判定することによって評価した。試験を行った生物学的過程は、細胞接着、皮膚バリア、エネルギー関連、及び年齢関連を含んだ。これらの過程のそれぞれは、過程範疇内のテーマ又は経路に関連するものとして前に特定された遺伝子集合を有する。この試験の目標は、どの活性物質が、本発明の実施形態によるどのステップに含まれるべきであるかを判定することである。特定の生物学的過程又はテーマについての有効性、及びそのテーマの、主に「洗浄、水和、及び解毒」機能の一部としての特定又は主に「修復及び再構築」機能の一部としての特定が、活性物質が老化防止レジメンステップ１又はステップ２に配合されるべきであるかを判定する上での因子である。
【００６８】
細胞接着過程における「より若い外観」遺伝子の固有遺伝子表現を図４に示す。様々な濃度における７つの例示の美容活性物質、並びに対照担体の固有遺伝子に及ぼす効果も図示されている。「成功した加齢効果」は、固有遺伝子に対する処置効果によって定義される。例えば、図４において、「細胞接着及び結合」テーマについての固有遺伝子は、発現レベルがより年上の外観の個人において加齢と共に低下するが、標準的な個人でははるかに少なく、より若く見える個人では変化がほとんど観察されない。図４の右側の箱ひげ図は、ｐａｌ−ＫＴ及びｐａｌ−ＫＴＴＫＳの両方が、固有遺伝子を著しくアップレギュレートすることを示し、これは、これらの活性物質が、「細胞接着及び結合」テーマに対する効果を介して成功加齢を支援することを示唆している。
【００６９】
同様に、エネルギー関連過程における「より若い外観」遺伝子の固有遺伝子表現及び例示の活性物質の固有遺伝子に及ぼす効果を、図５Ａ並びに５Ｂに示す。「皮膚バリア」機能における「より若い外観」遺伝子の固有遺伝子表現及び例示の活性物質の固有遺伝子に及ぼす効果を、図６Ａ並びに６Ｂに示す。「年齢関連」過程における「より若い外観」遺伝子の固有遺伝子表現及び例示の活性物質の固有遺伝子に及ぼす効果を、図７Ａ並びに７Ｂに示す。
【００７０】
これらの試験からの注目すべき観察は、Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ及びＯｌｉｖｅｍ（登録商標）４６０が、細胞結合集合及び細胞接着過程に関連する固有遺伝子発現を著しく増加させることが観察されたことを含み、このことは、Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ及びＯｌｉｖｅｍ（登録商標）４６０による処置が、これらの生物学的過程を介して顔の外観の成功加齢を促進することを示唆している。成功加齢に関する効果はまた、皮膚バリア形成におけるＰａｌ−ＫＴ、防御応答におけるＬｙｓ’ｌａｓｔｉｎｅ（登録商標）Ｖ、及びタンパク質輸送過程におけるＧｌｙｃｏ−Ｒｅｐａｉｒ（商標）についても特定された。これらの結果は、活性物質の特定の組み合わせで組成物を配合することが、補完過程を通して利益をもたらし得ることを示唆している。
【００７１】
実施例３．以下の実施例は、洗浄、水和、及び解毒過程に関する生物学的過程／テーマに関連する遺伝子を表す固有遺伝子の導出（図８）並びに皮膚修復及び再構築に関する生物学的過程／テーマに関連する遺伝子を表す固有遺伝子の導出（図９）、及び固有遺伝子に及ぼす異なるスキンケア活性物質の処置効果の評価（図１０）を例証する。生成されたデータは再グループ分けされ、どの活性物質が、老化防止レジメンの特定のステップに含まれるべきかを評価した。外観遺伝子及び過程遺伝子から導出された共発現モジュールの固有遺伝子解析に基づいて、２つの配合物を比較試験用に選択した。
【００７２】
生物学的過程例示の活性物質を２つの提案された組成物に分割し、これは、それぞれに関係する生物学的過程が、２つの一般的なグループのうちの１つの範囲内に入るかどうかに基づいた。一般的な解析において、２６のテーマは、「洗浄及び解毒」、「修復及び再構築」、並びに「その他」にグループ分けされる。「洗浄及び解毒」グループは、タンパク質異化過程及び自食作用などの不要物除去及び再利用の役割を有するテーマを含み、一方「修復及び再構築」グループは、細胞接着、結合、及びＤＮＡ修復などの皮膚発生及び修復過程のテーマを含む。これらのテーマ及びグループ内に含まれる遺伝子及び対応するプローブ集合を、表４に明記する。
【００７３】
図８は、「洗浄及び解毒」について共発現モジュールから導出された固有遺伝子及び３つの外観モジュールのそれぞれが、より年上の外観の個人の中で大きな割合で減少して、外観グループの中で異なる年齢依存性を示すことを明らかにしている。Ｐａｌ−ＫＴは、固有遺伝子を著しくアップレギュレートし、このことは、Ｐａｌ−ＫＴによる処置が、「洗浄及び解毒」モジュール遺伝子を介して成功加齢を支援することを示唆している。Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ及びＯｌｉｖｅｍ（登録商標）４６０も固有遺伝子をアップレギュレートするが、ｐａｌ−ＫＴよりも少ない程度である。
【００７４】
３０１の「修復及び再構成」関連遺伝子からなる共発現モジュールから導出された固有遺伝子（図９）もまた、「洗浄及び解毒」のもの（図８）と同様なパターンを示す。このグループでは、Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ及びＯｌｉｖｅｍ（登録商標）４６０は、固有遺伝子を著しくアップレギュレートし、Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ及びＯｌｉｖｅｍ（登録商標）４６０処置が、「再構築及び修復」関連遺伝子を介して成功加齢を支援することを示唆する。ｐａｌ−ＫＴもまた、固有遺伝子をアップレギュレートしたが、Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ及びＯｌｉｖｅｍ（登録商標）４６０よりも少ない程度であった。図５は、Ｐａｌ−ＫＴ及びＯｌｉｖｅｍ（登録商標）４６０が、外観関連遺伝子全体にわたる強い老化防止利益を立証することを示している。
【００７５】
更に、個々の活性物質を、機構両立性について検査した。図１０は、互いに独立する提案された組成物の両方に対する成功加齢効果を示すヒートマップを明記する。組成物活性物質を、影響されるテーマに対してプロットし、ここでは、強度は、効果の強さを示し、赤点及び青い点は、それぞれ正及び負の効果を示す。
【００７６】
実施例４．以下の実施例は、本発明の態様による例示的な組成物を提供する。レジメンステップは、これが少なくとも２段階レジメンの一部として、皮膚の目標領域に適用される場合、「ステップ１」と称され、これがステップ１の組成物後に皮膚の目標領域に適用される場合、レジメンは「ステップ２」と称されるが、非限定的な例としては、濯ぎ及び／又は乾燥が含まれる追加の活動は、レジメンステップ１及び２の前に、これらの間に並びに／又はこれらの後に実施されてもよいことが理解される。
【００７７】
配合例
【００７８】
【表１】
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【００７９】
【表２】
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【００８０】
【表３】
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【００８１】
【表４】
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【００８２】
実施例５．以下の予告的実施例は、「洗浄及び解毒」過程を標的とするように配合された達成される、レジメンに基づく増進された老化防止利益を、異なる順序のレジメンによって達成される効果と比較することによって例証する。３つの組成物が配合される。組成物Ａは、有効量のＰａｌ−ＫＴ及びＧｌｙｃｏ−Ｒｅｐａｉｒ（商標）ブランドのイナゴマメ果実抽出物を含む。組成物Ｂは、有効量組成物を適用し、その後、「修復及び再構築」過程を標的とするように配合された組成物を適用することによってのＯｌｉｖｅｍ（登録商標）４６０ブランドのオリーブオイル抽出物、Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ、Ｌｙｓ’ｌａｓｔｉｎｅ（登録商標）Ｖブランドのイノンド抽出物、及びナイアシンアミドを含む。組成物Ｃは、組成物Ａ及びＢ中の全ての活性物質を含む。送達用担体を単体で含む対照組成物もまた配合される。実験及び対照被験者の等しい数を有する３つのレジメンが評価される。全ての投与は、７週の処置時間枠に渡る、朝の慣例の一部として、１日当たり一回である。
【００８３】
レジメン１：Ａを適用し、水ですすぎ、直後にＢを適用する；
レジメン２：Ｂを適用し、水ですすぎ、直後にＡを適用する；
レジメン３：Ｃを適用し、水ですすぎ、直後にＣを適用する；
【００８４】
４５〜６５才の年齢の、１２０名の女性を補充し、潜在的な干渉条件に関して許可を取った。眼の周囲の目標皮膚の外接領域を、デジタルプログラムによって年齢特性密度に関して類別し、各被験者への基点を得た。２０名の実験被験者及び２０名の対照被験者は、各レジメンに従うように命じられた。試験は、二重盲検プロトコルの下で行われた。７週の終わりに、被験者は目標皮膚の年齢特性密度に関して再評価された。
【００８５】
結果：全てのレジメンに関して、実験グループは対照グループに対して統計的に有意な改善を示した。レジメン１の実験グループは、レジメン２の実験グループに対してより優れた老化防止利益を示すレジメン３の実験グループに対して、増進された老化防止利益を示す。これらの結果は、科学的に配合された組成物の適用順序の機能として驚くべきかつ予想外の、増進された老化防止利益を実証する。
【００８６】
本明細書で開示する寸法及び値は、列挙された正確な数値に厳密に限られるとして理解されるべきではない。むしろ、特に断らない限り、そのような各寸法は、記載された値及びその値の周辺の機能的に同等の範囲の両方を意味するものとする。例えば、「４０ｍｍ」として開示される寸法は、「約４０ｍｍ」を意味することを意図する。
【００８７】
相互参照される又は関連する任意の特許又は特許出願、及び本願が優先権又はその利益を主張する任意の特許出願又は特許などの、本願に引用される全ての文書は、除外又は限定することを明言しない限りにおいて、参照によりその全容が本願に援用される。いずれの文献の引用も、こうした文献が本願で開示又は特許請求される任意の発明に対する先行技術であることを容認するものではなく、また、こうした文献が、単独で、あるいは他の任意の参照文献との任意の組み合わせにおいて、こうした発明のいずれかを教示、示唆又は開示していることを容認するものでもない。更に、本文書における用語の任意の意味又は定義が、参照することによって組み込まれた文書内の同じ用語の意味又は定義と競合する程度に、本文書におけるその用語に与えられた意味又は定義が適用されるものとする。
【００８８】
以上、本発明の特定の諸実施形態を図示、説明したが、本発明の趣旨及び範囲から逸脱することなく他の様々な変更及び改変を行いうる点は当業者には自明であろう。したがって、本発明の範囲内に含まれるそのような全ての変更及び修正は、添付の特許請求の範囲にて網羅することを意図したものである。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【国際調査報告】
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