(57)【要約】  本発明は、薬理活性を有する式（Ｉ）の化合物またはその互変異性体、その製造方法、医薬組成物およびマラリアなどのある種の寄生原虫感染、特に、熱帯熱マラリア原虫(Plasmodium falciparum)による感染の処置におけるそれらの使用に関する。（Ｒ）−２−（（３−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）チオ）−１−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン。2017538776.tif 000026
2017538776.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2017538776.tif 000024
の化合物：（Ｒ）−２−（（３−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）チオ）−１−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン、またはその互変異性型。
【請求項２】
【化２】
2017538776.tif 000025
〔（Ｒ）−２−（（３−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）チオ）−１−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン〕
である、請求項１に記載の式１の化合物の互変異性型。
【請求項３】
請求項１または２に定義される式（Ｉ）の化合物の薬学上許容可能な塩。
【請求項４】
（ａ）請求項１もしくは２に定義される式（Ｉ）の化合物またその薬学上許容可能な塩と（ｂ）１種類以上の薬学上許容可能な担体とを含んでなる、医薬組成物。
【請求項５】
療法において使用するための、請求項１もしくは２に定義される式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩。
【請求項６】
寄生原虫感染の処置において使用するための、請求項１もしくは２に定義される式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩。
【請求項７】
寄生原虫感染の処置のための薬剤の製造における、請求項１もしくは２に定義される式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩の使用。
【請求項８】
（ａ）請求項１もしくは２に定義される式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩と、（ｂ）少なくとも１種類の抗マラリア薬との組合せ。
【請求項９】
寄生原虫感染に罹患したヒトまたは動物被験体の処置のための方法であって、前記ヒトまたは動物被験体に有効量の請求項１もしくは２に定義される式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩を投与することを含んでなる、方法。
【請求項１０】
寄生原虫感染がマラリアである、請求項５に記載の使用のための化合物、請求項６に記載の使用のための化合物、請求項７に記載の使用のための組合せで使用するための化合物、または請求項８に記載の使用のための化合物。
【請求項１１】
寄生原虫感染が熱帯熱マラリア原虫である、請求項５に記載の使用のための化合物、請求項６に記載の使用のための化合物、請求項７に記載の使用のための組合せで使用するための化合物、または請求項８に記載の使用のための化合物。
【請求項１２】
請求項１に定義される式（Ｉ）の化合物〔（Ｒ）−２−（（３−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）チオ）−１−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン〕またはその塩と、その鏡像異性体：（Ｓ）−２−（（３−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）チオ）−１−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オンまたはその塩とを含んでなる、混合物。
【請求項１３】
請求項２に定義される式（ＩＡ）の化合物〔（Ｒ）−２−（（３−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）チオ）−１−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン〕またはその塩と、その鏡像異性体：（Ｓ）−２−（（３−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）チオ）−１−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オンまたはその塩とを含んでなる、混合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、薬理活性を有する新規なチオトリアゾール化合物、その製造方法、医薬組成物およびマラリアなどのある種の寄生原虫感染、特に、熱帯熱マラリア原虫(Plasmodium falciparum)による感染の処置におけるそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
寄生原虫感染は、ヒトにおけるマラリアならびに鳥類、魚類および哺乳類における種々のコクシジウム症を含む、医学的および獣医学的に重要な多様な疾患の原因である。これらの疾患の多くは、アイメリア属（Eimeria)、タイレリア属(Theileria)、バベシア属(Babesia)、クリプトスポリジウム(Cryptosporidium)、トキソプラズマ(Toxoplasma)の種（例えば、トキソプラズマ・ブルセイ(Toxoplasma brucei)、アフリカ睡眠病およびトキソプラズマ・クルージー(Toxoplasma cruzi)、シャーガス病）、およびマラリア原虫属(Plasmodium)（例えば、熱帯熱マラリア原虫(Plasmodium falciparum)）、および鞭毛虫類(Mastigophora)、例えば、リーシュマニア属の種（例えば、ドノバンリーシュマニア(Leishmania donovani)）による感染により引き起こされる疾患など、宿主の生命を脅かし、畜産において多大な経済損失を招く。懸念が増大している別の寄生生物としてニューモシスティス・カリニ(Pneumocytis carinii)があり、これはＨＩＶ感染宿主を始めとする免疫欠損または免疫不全宿主においてしばしば致死性の肺炎を引き起こし得る。
【０００３】
マラリアは、ヒトにおいて５種のマラリア原虫寄生体により引き起こされ得る、蚊により媒介される疾患であり、そのうち熱帯熱マラリア原虫(Plasmodium falciparum)は最も病原性が高い。２０１３年では、世界のマラリア感染者は推計１億２８００万人であり、マラリア病は推計５８４，０００の死亡の原因であり（それらの９０％がサハラ以南のアフリカ）、幼児および妊婦が最も感染の高い群である。２０１３年に、マラリアは推計４３７，０００人の５歳未満の小児を死に至らせた(WORLD HEALTH ORGANIZATION. (2014). World malaria report. Geneva, Switzerland, World Health Organization)。
【０００４】
従来の処置に対する耐性および現行の処置選択（アルテミシニンに基づく併用療法）に対する耐性の出現は、新規な作用機序を有する新たな治療薬の差し迫った必要性を示す(WORLD HEALTH ORGANIZATION. Joint assessment of the response to artemisinin resistance in the greater Mekong sub-region. November 2011-February 2012. Summary report.)。２０１０に、ＧＳＫは、表現型スクリーニングアプローチにおいて熱帯熱マラリア原虫寄生体の成長を阻害することをすでに示した１３，５００を越える化学化合物の詳細を公開した(Gamo, F.J. et al. (2010) Thousands of chemical starting points for antimalarial lead identification. Nature 465, 305-310)。これらの化合物の分子構造および説明はＴＣＡＭＳ（Ｔｒｅｓ  Ｃａｎｔｏｓ  Ａｎｔｉｍａｌａｒｉａｌ  ｓｅｔ）の名称で閲覧可能なデータベースで公開されている(http://www.ebi.ac.uk/chemblntd)。
【０００５】
ＴＣＡＭＳ化合物コレクションのこのような化合物の１つがＴＣＭＤＣ−１２５１１４（化合物５２４４０４  ＣｈＥＭＢＬデータベース）である：
【化１】
2017538776.tif 000003
【０００６】
もう１つのアプローチは、コンピューター支援の薬物設計であった。Shah et al., (Journal of Chemical Modelling (2012), 52(3), 696-710)は、それらの研究の一部として化合物３２を記載している。
【化２】
2017538776.tif 000004
【０００７】
化合物３２は、それらのアッセイで不活性であることが判明した（Ｓｈａｈらのｐ６９８の最終段落「例えば、Ｒ２置換基を欠く化合物（２７〜３４）またはより短いＲ２置換基を有する化合物（３５〜３８）は不活性であった」および同著ｐ６９９の表２を参照）。それが化合物３２上にあった場合のＲ２置換基の位置を以下に示す（１，２，４−トリアゾールシリーズの化合物の一般構造については、Ｓｈａｈらの図２を参照）。
【化３】
2017538776.tif 000005
【０００８】
ＣＨＥＭＢＬ５２４４０４および化合物３２と類似の構造を有する４つの化学ライブラリー化合物もまた公開されているが、既知の活性を持たない。３つはＶｉｔａｓ  Ｍ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ（ウェブサイト：http://www.vitasmlab.com）から入手可能であり、４つ目のものはＥｎａｍｉｎ（ウェブサイト：http://www.enamine.net）から入手可能である。
【化４】
2017538776.tif 000006
【発明の概要】
【０００９】
本発明は、マラリアなどのある種の寄生虫感染、特に、熱帯熱マラリア原虫による感染の化学療法において使用するための新規なチオトリアゾール化合物、その製造方法およびそのような化合物を含んでなる医薬組成物を対象とする。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】
【図２】
【図３】
【発明の具体的説明】
【００１１】
本発明は、式（Ｉ）の化合物：
【化５】
2017538776.tif 000007
〔（Ｒ）−２−（（３−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）チオ）−１−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン〕
またはその塩を提供する。
【００１２】
また、本発明には、薬学上許容可能な塩が含まれる。本発明の特定の実施形態では、式（Ｉ）の化合物の薬学上許容可能な塩は、このような塩が分子により大きな安定性または溶解度を与え、それにより投与形への処方するのを容易にすることから、個々の遊離塩基よりも好ましい場合がある。よって、本発明はまた、式（Ｉ）の化合物の薬学上許容可能な塩も包含する。本明細書で使用する場合、用語「薬学上許容可能な塩」は、対象化合物の所望の生物活性を保持し、最小の所望でない毒物学的効果を示す塩を意味する。好適な塩に対する総説については、Berge et al, J. Pharm. Sci., 1977, 66, 1-19を参照。用語「薬学上許容可能な塩」は、任意の薬学上許容可能な酸または塩基付加塩を含む。これらの薬学上許容可能な塩は、化合物の最終単離および精製中にｉｎ  ｓｉｔｕで、精製された化合物をそれぞれ好適な酸もしくは塩基と個別に反応させることにより調製され得る。塩は、溶液から沈澱させて濾取するか、または溶媒の蒸発により回収してもよい。
【００１３】
よって、さらなる態様によれば、本発明は、その式（Ｉ）の化合物の薬学上許容可能な塩を提供する。
【００１４】
式（Ｉ）の化合物は塩基性官能基を含み、従って、好適な酸での処理により薬学上許容可能な酸付加塩を形成することができる。薬学上許容可能な酸付加塩は、場合により有機溶媒などの好適な溶媒中、式（Ｉ）の化合物と好適な強無機または有機酸（例えば、臭化水素酸、塩酸、硫酸、硝酸、リン酸、過塩素酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸（例えば、２−ナフタレンスルホン酸）との反応により形成させて塩とすることができ、これは通常、例えば結晶化および濾過により単離される。薬学上許容可能な酸付加塩には、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヨウ化水素酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、過塩素酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩またはナフタレンスルホン酸塩（例えば、２−ナフタレンスルホン酸塩）が含まれる。１つの実施形態では、式（Ｉ）の化合物の薬学上許容可能な酸付加塩は、強酸の塩、例えば、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヨウ化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、過塩素酸塩、リン酸塩  ｐ−トルエンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩またはメタンスルホン酸塩である。
【００１５】
式（Ｉ）の化合物の好適な薬学上許容可能な塩には、適当な塩基との一塩基性または二塩基性塩が含まれる。薬学上許容可能な塩基付加塩は、式（Ｉ）の化合物と好適な無機または有機塩基との反応により形成させることができる。薬学上許容可能な塩基付加塩には、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウム、Ｎ−メチルグルカミン、アンモニウムおよびコリン塩が含まれる。
【００１６】
本発明は、その範囲内に、式（Ｉ）の化合物の塩の総ての可能性のある化学量論および非化学量論形態を含む。
【００１７】
式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩は固体または液体として存在してよく、両方とも本発明に含まれる。固体状態では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩は、非晶質もしくは結晶形、またはその混合物のいずれとして存在してもよい。結晶化の際に結晶格子に溶媒分子が組み込まれる、式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩の薬学上許容可能な溶媒和物が形成されてもよいと認識される。溶媒和物は、エタノール、イソプロパノール、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、酢酸、エタノールアミン、および酢酸エチルなどの非水性溶媒を含んでよく、またはそれらは結晶格子に組み込まれる溶媒として水を含んでもよい。結晶格子に組み込まれる溶媒が水である溶媒和物は一般に「水和物」と呼ばれる。
【００１８】
式（Ｉ）の化合物の塩は、好適な溶媒中で、適当な化学量論量の遊離塩基／酸を適当な酸／塩基と接触させることによって調製され得る。式（Ｉ）の化合物の遊離塩基／酸は、例えば、溶液であり、適当な酸／塩基が固体として添加されてもよく、または式（Ｉ）の化合物の遊離塩基／酸と適当な酸／塩基の両方がそれぞれ溶液であってもよい。
【００１９】
式（Ｉ）の化合物の遊離塩基／酸を可溶化するために好適な溶媒には、例えば、イソプロパノールなどのアルコール；アセトンなどのケトン；アセトニトリルまたはトルエンが含まれる。塩基が溶媒中の溶液として加えられる場合には、使用される溶媒はアセトン、メタノールまたは水を含み得る。
【００２０】
式（Ｉ）の化合物の塩は、上記のように得られたその溶液から従来の手段により、固体形態で単離してもよい。例えば、非結晶性塩は、溶液からの沈澱、溶液の噴霧乾燥または凍結乾燥、溶液の蒸発によるガラス質の取得、または油状物の真空乾燥、または遊離塩基と酸の反応から得た融解物の固化によって調製され得る。式（Ｉ）の化合物はまた、噴霧乾燥分散（ＳＤＤ）などの方法を用い、酢酸コハク酸ヒプロメロース（ＨＰＭＣＡＳ）などのポリマーマトリックス中の原薬の非晶質分子分散物として調製してもよい。
【００２１】
式（Ｉ）の化合物の塩は、その塩が限られた溶解度を有する溶媒から直接結晶化することにより、または非結晶性の塩を摩砕もしくはそうでなければ結晶化することにより調製され得る。例えば、アセトン、アセトニトリル、ブタノン、１−ブタノール、エタノール、１−プロパノールもしくはテトラヒドロフランまたはこのような溶媒の混合物などの有機溶媒が使用可能である。塩の収率の改善は、溶媒の一部もしくは全部の蒸発により、または高温下で結晶化とその後の制御された、例えば段階的な冷却により得ることができる。生産プロセスおよび粒径分布の再現性ならびに生成物の形態を改善するためには、沈澱温度およびシーディングの注意深い制御を用いればよい。
【００２２】
医学で使用するために好適な式（Ｉ）の化合物の塩および溶媒和物は、対イオンまたは会合溶媒が薬学的に許容可能なものである。しかしながら、薬学上許容可能でない対イオンまたは会合溶媒を含む塩および溶媒和物も、例えば、式（Ｉ）の化合物または塩、その溶媒和物およびそれらの薬学上許容可能な塩および溶媒和物の調製において中間体として使用するためなど、本発明の範囲内にある。
【００２３】
当業者には、最終脱保護段階の前に形成され得る式（Ｉ）の化合物の特定の保護誘導体はそれ自体薬理活性を持たない場合があるが、特定の場合には、経口または非経口投与されると、その後、体内で代謝されて薬理学的に活性な第１の態様で定義された化合物を形成し得ることが認識されるであろう。よって、このような誘導体は「プロドラッグ」ということができる。第１の態様で定義された化合物の保護誘導体およびプロドラッグは総て本発明の範囲内に含まれる。本発明の化合物の好適なプロドラッグの例は、Drugs of Today, Volume 19, Number 9, 1983, pp 499-538およびTopics in Chemistry, Chapter 31, pp 306-316および“Design of Prodrugs”, H. Bundgaard, Elsevier, 1985, Chapter 1に記載されている（これらの文献の開示は引用することにより本明細書の一部とされる）。例えば、Ｈ．  Ｂｕｎｄｇａａｒｄにより“Design of Prodrugs”に記載されているように（この文献の開示は引用することにより本明細書の一部とされる）、当業者に「プロ部分」として知られる特定の部分は、そのような官能基が式（Ｉ）の化合物内に存在する場合には、適当な官能基上に置かれてよいことが、当業者には認識されるであろう。式（Ｉ）の化合物またはそれらの塩もしくは溶媒和物の好適なプロドラッグには、アミド、カルバミン酸塩、アゾ化合物、ホスファミド、グリコシドが含まれる。よって、本発明の１つの態様では、式（Ｉ）の化合物のプロドラッグが提供される。
【００２４】
上記のように、式（Ｉ）の化合物は、その遊離塩基もしくは薬学上許容可能な塩、溶媒和物、またはレシピエントに投与した際に式（Ｉ）の化合物、またはその活性代謝物もしくは残基を（直接的または間接的に）提供し得る式（Ｉ）の化合物のプロドラッグの形態であってよい。このような薬学上許容可能な塩、溶媒和物、およびプロドラッグは、過度な実験を行うことなく当業者に認識可能である。しかしながら、Burger’s Medicinal Chemistry and Drug Discovery, 第5版, Vol 1: Principles and Practiceの教示が参照され、これはこのような誘導体を教示する程度で引用することにより本明細書の一部とされる。
【００２５】
さらに、式（Ｉ）の化合物またはその塩および溶媒和物の結晶形のいくつかは、１以上の多形型で存在する場合があり、それらは本発明に含まれる。
【００２６】
式（Ｉ）の化合物は種々の互変異性型で存在する場合があることもさらに認識されるであろう。可能性のある総ての互変異性体が本発明の範囲内にあるものと企図される。式（Ｉ）の化合物の１回の結晶構造解析では、互変異性型は、
【化６】
2017538776.tif 000008
〔（Ｒ）−２−（（５−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）チオ）−１−（２Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン〕
であることが分かった。
【００２７】
式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩は、マラリア寄生虫である熱帯熱マラリア原虫、アイメリア属の種、ニューモシスティス・カリニ、クルーズトリパノソーマ、ブルーストリパノソーマまたはドノバンリーシュマニアによる寄生原虫感染などの特定の寄生虫感染の処置に有用であり得る。特に、式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩は、熱帯熱マラリア原虫による感染の処置に有用であり得る。よって、本発明は、このような病態を処置する方法を対象とする。従って、療法において使用するための式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩が提供される。
【００２８】
本発明の１つの態様では、寄生原虫感染の処置において使用するための式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩が提供される。
【００２９】
本発明の別の態様では、マラリアの処置において使用するための式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩が提供される。
【００３０】
本発明の別の態様では、熱帯熱マラリア原虫による感染の処置において使用するための式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩が提供される。
【００３１】
本発明の別の態様では、寄生原虫感染の処置のための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩が提供される。
【００３２】
本発明の別の態様では、マラリアの処置のための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩が提供される。
【００３３】
本発明の別の態様では、熱帯熱マラリア原虫による感染の処置のための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩が提供される。
【００３４】
本発明の別の態様では、寄生原虫感染に罹患したヒトまたは動物被験体の処置のための方法であって、前記ヒトまたは動物被験体に有効量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩を投与することを含んでなる方法が提供される。
【００３５】
本発明の別の態様では、マラリアに罹患したヒトまたは動物被験体の処置のための方法であって、前記ヒトまたは動物被験体に有効量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩を投与することを含んでなる方法が提供される。
【００３６】
本発明の別の態様では、熱帯熱マラリア原虫による寄生原虫感染に罹患したヒトまたは動物被験体の処置のための方法であって、前記ヒトまたは動物被験体に有効量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩を投与することを含んでなる方法が提供される。
【００３７】
本発明の処置方法は、安全かつ有効な量の式（Ｉ）の化合物、およびその薬学上許容可能な塩を、それを必要とする患者に投与することを含んでなる。
【００３８】
本明細書で使用する場合、「処置」は、（１）処置される病態もしくは処置される病態の生物学的発現の１以上を改善もしくは予防すること、（２）（ａ）処置される病態につながるもしくはその原因である生物学的カスケードの１以上の点、もしくは（ｂ）処置される病態の生物学的発現の１以上に干渉すること、または（３）処置される病態に関連する症状もしくは影響の１以上を軽減することを意味する。当業者ならば、「予防」は、病態もしくはその生物学的発現の尤度もしくは重篤度を実質的に小さくするため、またはそのような病態もしくはその生物学的発現の発生を遅延させるための薬物の予防的投与を意味するものと理解される。
【００３９】
本明細書で使用する場合、「安全かつ有効な量」は、処置される病態におけるプラスの改変を有意に誘導するのに十分であるが、健全な医学的判断の範囲内で重篤な副作用を回避する（合理的な利益／リスク比で）のに十分に低い化合物の量を意味する。式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩の安全かつ有効な量は、選択される特定の化合物（例えば、その化合物の効力、有効性、および半減期に応じる）；選択される投与経路；処置される感染および／または病態の性質；処置される感染および／または病態の重篤度；処置される患者の齢、大きさ、体重、および健康状態；処置される患者の病歴；処置の期間；併用療法の性質；所望の治療効果および類似の因子によって異なるが、やはり当業者により慣例的に決定可能である。
【００４０】
本明細書で使用する場合、「患者」は、ヒトまたはその他の動物を意味する。
【００４１】
式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩は、全身投与を含むいずれの好適な投与経路により投与されてもよい。全身投与には、経口投与、非経口投与、経皮投与、直腸投与、および吸入による投与が含まれる。非経口投与は、腸内以外の、経皮的、または吸入による、一般に、注射または注入による投与経路を意味する。非経口投与には、静脈内、筋肉内、および皮下注射または注入が含まれる。吸入は、口腔からの吸入であれ鼻腔経路からの吸入であれ、患者の肺への投与を意味する。
【００４２】
式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩は、１回のみ、または複数の用量が所与の期間、種々の時間間隔で投与される投与計画に従って投与され得る。例えば、用量は、１日に１回、２回、３回、または４回投与され得る。用量は、所望の治療効果が達成されるまで、または所望の治療効果を維持するために無期限に投与され得る。用量はまた、意図される処置の性質に従って（ここで、「処置」は上記で定義される通り）、例えば、処置される病態の予防に比べて多い用量の化合物が改善のために与えられてよい。本発明の化合物の好適な投与計画は、吸収、分布、および半減期など、その化合物の薬物動態によって異なり、当業者により決定可能である。加えて、本発明の化合物の好適な投与計画は、そのような投与計画が実施される期間を含め、化合物の投与経路、処置される病態、処置される病態の重篤度、処置される患者の齢および健康状態、処置される患者の病歴、併用療法があればその性質、所望の治療効果、ならびに当業者の知識および専門の範囲にある類似の因子によって異なる。当業者には、好適な投与計画が投与計画に対する個々の患者の応答を考慮して、または個々の患者が変更を必要とすれば経時的に調整を必要とする場合があることが理解されるであろう。また、式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩が、以下にさらに述べられるような１種類以上の付加的活性治療薬と組み合わせて投与される場合、本発明の化合物の投与計画は、必要に応じ、１種類以上の付加的活性治療薬の性質および量に従って変更可能であることも認識されるであろう。
【００４３】
典型的な１日用量は、選択される特定の投与経路に応じて変更可能である。経口投与に典型的な１日用量は、約２５〜約１０００ｍｇ／ｋｇの範囲であると予想される。
【００４４】
本発明の化合物はまた、他の活性治療薬と組み合わせて使用してもよい。よって、本発明は、さらなる態様において、式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩をさらなる活性治療薬とともに含んでなる組合せを提供する。式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩が、同じ病態に対して活性な第２の活性治療薬と併用される場合、各化合物の用量は、その化合物が単独で使用される場合とは異なり得る。適当な用量は当業者ならば容易に認識できる。処置において使用するために要される本発明の化合物の量は、処置される病態の性質ならびに患者の齢および状態によって異なり、最終的には担当の医師または獣医の裁量にあることが認識されるであろう。
【００４５】
式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩は単独で使用しても、または他の抗寄生虫薬、例えば抗マラリア薬などの１種類以上の付加的な活性治療薬と併用してもよい。
【００４６】
このような他の活性治療薬には、抗マラリア薬、（例えば、クロロキン、メフロキン、プリマキン、ピリメタミン、キニーネ、アルテミシニン、ハロファントリン、ドキシサイクリン、アモジアキン、アトバコン、タフェノキンダプソン、プログアニル、スルファドキシン、シクログアニル）およびファンシダールなどが含まれる。
【００４７】
上記に言及される組合せは、好都合には、医薬処方物の形態で使用するために提要されてよく、よって、上記で定義された組合せを薬学上許容可能な担体および／または賦形剤とともに含んでなる医薬処方物は、本発明のさらなる態様を含んでなる。このような組合せの個々の成分は、任意の便宜な経路により、個別または組合せ医薬処方物で逐次または同時に投与してよい。
【００４８】
投与が逐次である場合、式（Ｉ）の化合物もしくはその薬学上許容可能な塩、または１種類以上の付加的な活性治療薬のいずれを最初に投与してもよい。投与が同時である場合、組合せを同じまたは異なる医薬組成物で投与してもよい。同じ処方物に組み合わされる場合には、式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩と１種類以上の付加的な活性治療薬は安定でかつ互いに、またその処方物の他の成分と適合しなければならないことが認識されるであろう。式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩と１種類以上の付加的な活性治療薬が個別に処方される場合には、１種類以上の付加的な活性治療薬は、任意の便宜な処方物で、好都合には当技術分野でそのような化合物に関して知られている様式で提供され得る。
【００４９】
組成物
式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩は、必ずしも必要ではないが、通常は、患者への投与前に医薬組成物へと処方される。１つの態様において、本発明は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩を含んでなる医薬組成物を対象とする。別の態様では、本発明は、（ａ）式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩と、（ｂ）１種類以上の薬学上許容可能な担体および／または賦形剤とを含んでなる医薬組成物を対象とする。別の態様では、本発明は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩を含んでなる医薬組成物を提供する。さらなる態様において、本発明は、（ａ）式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩と、（ｂ）１種類以上の薬学上許容可能な担体とを含んでなる医薬組成物を提供する。
【００５０】
担体および／または賦形剤は、その処方物の他の成分と適合し、かつ、そのレシピエントに有害でないという意味で「許容可能」でなければならない。
【００５１】
本発明の医薬組成物は、バルク形態で調製および包装してよく、この場合には、安全かつ有効な量の本発明の化合物が抜き取られ、その後、粉末またはシロップなどとともに患者に与えられる、あるいは、本発明の医薬組成物は、単位投与形で調製および包装してもよく、この場合には、各物理的離散単位は安全かつ有効な量の本発明の化合物を含有する。単位投与形で調製される場合、本発明の医薬組成物は一般に、約０．１〜１０００ｍｇ、別の態様では０．１ｍｇ〜約５００ｍｇの本発明の化合物を含有する。
【００５２】
本発明の医薬組成物は一般に、１種類の式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩を含有する。しかしながら、特定の実施形態では、本発明の医薬組成物は、２種類以上の式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩を含有する。例えば、特定の実施形態では、本発明の医薬組成物は、２種類の本発明の化合物を含有する。加えて、本発明の医薬組成物は、場合により、１種類以上の付加的な活性治療化合物をさらに含んでなってもよい。本発明の医薬組成物は一般に、２種類以上の薬学上許容可能な賦形剤を含有する。しかしながら、特定の実施形態では、本発明の医薬組成物は、１種類の薬学上許容可能な賦形剤を含有する。
【００５３】
式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩、および薬学上許容可能な賦形剤または賦形剤は一般に、所望の投与経路により患者に投与するのに適合した投与形に処方される。例えば、投与形には、（１）錠剤、カプセル剤、カプレット剤、丸剤、トローチ剤、散剤、シロップ剤、エリキシル剤、懸濁液、溶液、エマルション、サシェ剤、およびカシェ剤などの経口投与用に適合されたもの；（２）無菌溶液、懸濁液、および再構成用粉末などの非経口投与用に適合されたもの；（３）経皮パッチなどの経皮投与用に適合されたもの；（４）坐剤などの直腸投与用に適合されたもの；ならびに（５）エアゾールおよび溶液などの吸入用に適合されたものが含まれる。
【００５４】
好適な薬学上許容可能な賦形剤は、選択された特定の投与形によって異なる。加えて、好適な薬学上許容可能な賦形剤は、組成物中で機能し得る特定の機能に関して選択され得る。例えば、ある種の薬学上許容可能な賦形剤は、均一な投与形の製造を助けるそれらの能力のために選択され得る。ある種の薬学上許容可能な賦形剤は、安定な投与形の製造を助けるそれらの能力のために選択され得る。ある種の薬学上許容可能な賦形剤は、患者に投与された際に式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩をある器官または身体部分から別の器官または身体部分に運搬または輸送するのを助けるそれらの能力のために選択され得る。ある種の薬学上許容可能な賦形剤は、患者のコンプライアンスを高めるそれらの能力のために選択され得る。
【００５５】
好適な薬学上許容可能な賦形剤には、下記の種の賦形剤：結合剤、崩壊剤、滑沢剤、流動促進剤、造粒剤、被覆剤、湿潤剤、溶媒、補助溶媒、沈殿防止剤、乳化剤、甘味剤、香味剤、矯味剤、着色剤、固化防止剤、湿潤剤、キレート剤、可塑剤、増粘剤、抗酸化剤、保存剤、安定剤、界面活性剤、および緩衝剤が含まれる。当業者は、ある種の薬学上許容可能な賦形剤が２つ以上の機能を果たすことがあり、どのくらいの賦形剤が処方物中に存在するか、および他にどんな成分が処方物中に存在するかによって別の機能を果たすことがあることを認識するであろう。
【００５６】
当業者は、本発明で使用するための適当な量で好適な薬学上許容可能な賦形剤を選択できるだけの当技術分野の知識と技量を有する。加えて、薬学上許容可能な賦形剤を記載し、好適な薬学上許容可能な賦形剤の選択に有用であり得る、当業者に利用可能ないくつかの情報源がある。例としては、Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company)、The Handbook of Pharmaceutical Additives (Gower Publishing Limited)、およびThe Handbook of Pharmaceutical Excipients (the American Pharmaceutical Association and the Pharmaceutical Press)が挙げられる。
【００５７】
本発明の医薬組成物は、当業者に公知の技術および方法を用いて調製される。当技術分野で慣用される方法のいくつかはRemington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company)に記載されている。
【００５８】
１つの態様において、本発明は、安全かつ有効な量の本発明の化合物と担体を含んでなる、液体、錠剤、トローチ剤またはカプセル剤などの固体または液体経口投与形を対象とする。好適な希釈剤および増量剤には一般に、ラクトース、スクロース、デキストロース、マンニトール、ソルビトール、デンプン（例えば、コーンスターチ、ジャガイモデンプン、およびアルファー化デンプン）、セルロースおよびその誘導体（例えば、微晶質セルロース）、硫酸カルシウム、および第二リン酸カルシウムが含まれる。液体投与形は一般に、液体担体、例えば、エタノール、オリーブ油、グリセリン、グルコース（シロップ）または水（例えば、香味剤、沈澱防止剤、または着色剤を添加）中の、化合物または薬学上許容可能な誘導体の懸濁液または溶液からなる。組成物が錠剤またはトローチ剤の形態である場合、固体処方物を調製するために慣用されるいずれの医薬担体も使用可能である。このような担体の例には、ステアリン酸マグネシウム、白土、タルク、ゼラチン、アラビアガム、ステアリン酸、デンプン、ラクトースおよびスクロースが挙げられる。組成物がカプセル剤の形態である場合、例えば、上述の担体または半固体、例えば、カプリン酸のモノジグリセリド、Ｇｅｌｕｃｉｒｅ（商標）およびＬａｂｒａｓｏｌ（商標）、または例えばゼラチンなどの硬カプセル剤皮を用いるいずれの慣例のカプセル封入も好適である。組成物が例えばゼラチンなどの軟剤皮カプセル剤の形態である場合には、例えば、水性ガムまたはオイルなどの、分散液または懸濁液を調製するために慣用されるいずれの医薬担体も考えることができ、軟カプセル剤皮中に封入することができる。
【００５９】
経口固体投与形は、結合剤の形態で賦形剤をさらに含んでなり得る。好適な結合剤には、デンプン（例えば、コーンスターチ、ジャガイモデンプン、およびアルファー化デンプン）、ゼラチン、アラビアガム、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸、トラガカントガム、グアーガム、ポビドン、ならびにセルロースおよびその誘導体（例えば、微晶質セルロース）が挙げられる。経口固体投与形は、崩壊剤の形態の賦形剤を含んでなってもよい。好適な崩壊剤には、クロスポビドン、グリコール酸ナトリウムデンプン、クロスカルメロース、アルギン酸、およびカルボキシメチルセルロースナトリウムが含まれる。経口固体投与形は、滑沢剤の形態の賦形剤をさらに含んでなってもよい。好適な滑沢剤には、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、およびタルクが含まれる。
【００６０】
本発明により、医薬組成物を調製する方法がさらに提供され、その方法は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩もしくは溶媒和物を薬学上許容可能な担体および／または賦形剤と混合することを含んでなる。
【００６１】
経口投与用の製剤は、活性化合物の制御放出／長期放出をもたらすように適宜処方することができる。
【００６２】
方法
酸塩化物形成およびアミド形成の一般手順は、文献に記載され(J. Chem. Res. 2008 (22), 530-533)、出発材料として適当な市販の酸およびアニリンを使用する。
【００６３】
式（Ｉ）の化合物は、不斉または非不斉経路により合成され得る。
【００６４】
両タイプの合成では、３−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−チオン（中間体２）が以下の方法を用いて製造され得る。
【化７】
2017538776.tif 000009
【００６５】
非不斉合成では、２−クロロ−１−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オンおよび３−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−チオン（中間体２）を一緒に反応させた後に、式（Ｉ）の化合物のキラル分離を行えばよい。
【化８】
2017538776.tif 000010
【００６６】
不斉合成では、（Ｓ）−２−クロロ−１−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン（中間体３）は、塩化（２Ｓ）−２−クロロプロパノイルをインドールに加え、これを次に３−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−チオン（中間体２）に加えて式（Ｉ）の化合物とすることにより製造することができる。
【化９】
2017538776.tif 000011
【００６７】
式（Ｉ）の化合物が上記で概略を示したものと類似の方法を用いて、または本明細書に示される実施例で詳説される試験手順を参照して製造され得ることは当業者には容易に明白である。式（Ｉ）の化合物の製造に関するさらなる詳細は実施例に示される。
【００６８】
適当な走査および保護を用い、式（Ｉ）の化合物の合成は上記のものと類似の方法によって達成される。いずれの特定の場合にも、特定の保護基が必要な場合がある。好適な保護基は、T W Greene and P G M Wuts ‘Protective Groups in Organic Synthesis’, 第3版 (1999), J Wiley and Sonsに見出すことができるが、これに限定されない。
【実施例】
【００６９】
実験
略語
本発明を記載する上で、化学元素は元素の周期表に従って特定される。本明細書で使用される略語および記号は、化学分野の熟練者によるこのような略語および記号の一般的な使用に従う。本明細書では以下の略語を使用する：
Ａｎｈ          無水
Ａｑ．          水性
ＡＵＣ          濃度−時間曲線下面積
ＡＷＣｌ        抗マラリア全細胞スクリーニング
ｃａｔ．        触媒
ｃｏｎｃ．      濃
ＤＣＭ          ジクロロメタン
ＤＭＦ          ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ−ｄ６  重水素化ジメチルスルホキシド
ＥＤ９０        寄生虫血の９０パーセントを根絶する用量
ＥＳ  ＭＳ      エレクトロスプレー質量分析
ＥｔＯＡｃ      酢酸エチル
ＦａＳＳＩＦ    絶食状態の人工腸液
ＦｅＳＳＩＦ    摂食状態の人工腸液
ｇ              グラム
ｈ              時間
ＨＣｌ          塩酸
ＨＰＬＣ        高速液体クロマトグラフィー
ＨＴＳ          ハイスループットスクリーニング
ｉＰｒＯＨ      ２−プロパノール
Ｌ              リットル
Ｍ              モル
ｕＭ            マイクロモル
ｕｇ            マイクログラム
ＭｅＯＨ        メタノール
ｍｉｎ（ｓ）    分
ｍＬ            ミリリットル
ｍｍｏｌ        ミリモル
ｍｇ            ミリグラム
ＭＨｚ          メガヘルツ
ＭＷ            マイクロ波
Ｎ              規定
ＮａＨＣＯ３    重炭酸ナトリウム
ＮａＣｌ        塩化ナトリウム
ＨＰＬＣ        高速液体クロマトグラフィー
１Ｈ  ＮＭＲ    プロトン核磁気共鳴法
ＰＢＳ          リン酸緩衝溶液
Ｐ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ    熱帯熱マラリア原虫
Ｐｆ            熱帯熱マラリア原虫
ｒｔ            室温
ｒｐｍ          毎分回転数
ｓａｔ．        飽和
ＳＧＦ          人工胃液
ＴＨＦ          テトラヒドロフラン
ＵＰＬＣ        超高速液体クロマトグラフィー
℃              セ氏度
［３Ｈ］ヒポキサンチン    トリチウム化ヒポキサンチン
δｐｐｍ        ｐｐｍでの化学シフト
【００７０】
化合物の製造
実施例
以下の実施例で本発明を説明する。これらの実施例は、本発明の範囲の限定を意図するものではなく、本発明の化合物、組成物、および方法を製造および使用するために当業者に指針を与える。本発明の特定の実施形態を記載するが、当業者ならば、本発明の趣旨および範囲から逸脱することなく種々の変更および改変をなし得ることを理解するであろう。
【００７１】
材料が市販されていた場合、これを化合物名の後の括弧内に大文字で示す。例えば、中間体１の製造では、塩化オキサリルはＡＬＤＲＩＣＨから購入したので、それは塩化オキサリル（ＡＬＤＲＩＣＨ）と記載される。
【００７２】
中間体１：２−（３，５−ジクロロイソニコチノイル）ヒドラジンカルボチオアミド
【化１０】
2017538776.tif 000012
【００７３】
ｉ）ＤＣＭ（５００ｍｌ）中、３，５−ジクロロイソニコチン酸（ＭＡＮＣＨＥＳＴＥＲ、５０ｇ、２６０．４２ｍｍｏｌ）の懸濁液に、塩化オキサリル（ＡＬＤＲＩＣＨ、２４．２４ｍｌ、２８６．４６２ｍｍｏｌ）および３０滴のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）を加えた。この反応混合物を室温で３時間撹拌した。ＣＨ３ＣＮ中ＮＨＭｅ２を用いるＵＰＬＣは、反応が完了したことを示した。溶媒を真空蒸発させて目的生成物を帯緑色固体の（３，５−ジクロロピリジン−４−カルボニルクロリド）として得、それ以上精製せずに次の工程に使用した。
【００７４】
ｉｉ）Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（３３０ｍＬ）中、チオセミカルバジド、９９％（ＡＬＤＲＩＣＨ、２３．７３５ｇ、２６０．４２ｍｍｏｌ）およびピリジン（２１．０２ｍＬ、２６０．４２ｍｍｏｌ）の溶液を０℃に冷却し（氷浴）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（１２０ｍＬ）中、塩化３，５−ジクロロピリジン−４−カルボニルの懸濁液を、カニューレを介して０℃で滴下した。この反応物を３時間８０℃に加熱した。ＵＰＬＣは、反応が完了したことを示した。それをＧｅｎｅｖａｃ中、乾固するまで減圧下で濃縮し、粗材料を黄色固体とし得た。この固体を２５０ｍｌの冷水に少量ずつ注いだ。得られた白色懸濁液を遠心分離し、白色固体を分離し、空気流下で乾燥させ、所望の化合物である２−（３，５−ジクロロイソニコチノイル）ヒドラジンカルボチオアミド（６９．９３ｇ、ＵＰＬＣおよびＮＭＲによれば収率＝８４％、純度＝８３％）を得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6)δppm: 10.95 (s, 1 H), 10.00 (s, 1H), 8.86 (m, 1H), 8.78 (s, 2 H), 7.92 (m, 1H) [ES+ MS] m/z 265 (M+H)
【００７５】
中間体２：３−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−チオン
【化１１】
2017538776.tif 000013
【００７６】
方法Ａ
１ＭのＮａＯＨの水溶液２ｌ中、２−（３，５−ジクロロイソニコチノイル）ヒドラジンカルボチオアミド（中間体１、１３５．４８ｇ、４２６．６１ｍｍｏｌ）の混合物を、３．５ＬのＰａｒｒ内で１１０℃（槽内Ｔｓｅｔｔｅｄ＝１２０℃、Ｔｍｅａｓｕｒｅｄ＝１１０℃）内で４０時間加熱した。次に、この溶液を、０℃、撹拌下、反応器を水で洗浄しながら４Ｌのフラスコに移し、２００ｍｌの濃ＨＣｌで酸性した。水性懸濁液をＧｅｎｅＶａｃで回転乾燥させた後、水溶液を除去し、４７．７１ｇの３−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−チオンを灰色の固体として得た（ＵＰＬＣおよびＮＭＲによれば純度＝９７％）。生成物をそれ以上精製せずに次の工程で使用した。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6)δppm: 14.11 (s, 1H). 13.95 (s, 1H) 8.91 (s, 2H)。[ES+ MS] m/z 247 (M+)
【００７７】
方法Ｂ
１Ｎ水酸化ナトリウム（１６．９７ｍｌ、１６．９７ｍｍｏｌ）中、２−（３，５−ジクロロイソニコチノイル）ヒドラジンカルボチオアミド（中間体１、３．０ｇ、１１．３２ｍｍｏｌ）の懸濁液を反応容器に入れ、これを密閉し、マイクロ波Ｓｙｎｔｈｏｓ  ３０００装置を用い、６０分間１５０℃に加熱した。この反応混合物を、０℃で中性ｐＨまで６Ｎ  ＨＣｌを加えることにより注意深く酸性化した後、減圧下で４分の３まで濃縮した。固体を濾過し、水およびＤＣＭで洗浄し、３−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−チオンを淡黄色固体として得た（１．６３ｇ）。母液を減圧下で４分の３まで濃縮し、新たな固体を濾過し、水およびＤＣＭで洗浄し、さらなる３−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−チオンを淡黄色固体（５３４ｍｇ）、黄色固体として得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6)δppm: 14.20-14.02 (br.s., 2H), 8.97 (s, 2H)。
【００７８】
中間体３：（Ｓ）−２−クロロ−１−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン
【化１２】
2017538776.tif 000014
【００７９】
ｉ）ＤＣＭ（６５ｍｌ）中、（２Ｓ）−２−クロロプロパン酸（ＡＬＤＲＩＣＨ、４．１７ｇ、８９．６ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、塩化オキサリル（ＡＬＤＲＩＣＨ、３．５７ｍｌ、４２．２ｍｍｏｌ）およびＤＭＦ（ＡＬＤＲＩＣＨ、２５滴）を加えた。この溶液を室温で２時間撹拌した。次に、反応物をロータベーパー（Ｐ＝３５０ｍｍＢａｒ、Ｔｂａｔｈ＝２８℃）で少し濃縮し、中間体（塩化（２Ｓ）−２−クロロプロパノイル）の粗溶液を得、これをそれ以上精製せずにそのまま以下の工程で使用した（工程Ａ）。
【００８０】
ｉｉ）−１０℃で、ＤＣＭ（６５ｍｌ）中、インドール（ＡＬＤＲＩＣＨ，１０．０ｇ、８５．３ｍｍｏｌ）の溶液を、塩化ジエチルアルミニウム溶液（トルエン中１．８Ｍ）（ＡＬＤＲＩＣＨ、２９．４ｍｍｏｌ、１６．４ｍｌ）に１０分かけて滴下し、この混合物を同じ温度でさらに５分間撹拌した。この溶液を−１０℃で冷却後、ＤＣＭ中、塩化（２Ｓ）−２−クロロプロパノイルの濃縮溶液（工程ｉ）を１５分かけて滴下した。反応混合物を１．５時間撹拌し、この時間に反応温度は徐々に室温に温まった。反応物を０℃にてＭｅＯＨおよびＮａＨＣＯ３溶液で注意深く急冷した（エタンの発生）。次に、生成物を水相からＥｔＯＡｃ（３００ｍｌで３回）で抽出した。回収した有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、ロータベーパーで蒸発させ、１７．２ｇの（Ｓ）−２−クロロ−１−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン（灰色固体、ＵＰＬＣによれば純度９４％）を得、これをそれ以上精製せずに次の工程で使用した。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6)δppm: 11.00 (s, 1 H), 8.5 (d, 1H), 8.20 (m, 1H), 7.51 (m, 1H), 7.25 (m, 2H),5.57 (q, 1H), 1.65 (d, 3H). [ES+ MS] m/z 207 (M+)
【００８１】
実施例１：２−（（３−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）チオ）−１−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン
【化１３】
2017538776.tif 000015
【００８２】
３−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−チオン（中間体２、５８９ｍｇ、２．３８４ｍｍｏｌ）を４ｍＬ  ＮａＯＨ  １Ｎに懸濁させた後、室温で１５ｍＬ  ＥｔＯＨに溶かした２−クロロ−１−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン（ＳＡＮＴＩＬＡＢＳ、４５０ｍｇ、２．１６７ｍｍｏｌ）を加えた。次に、反応混合物を８０℃で３時間加熱した。反応混合物からエタノールを除去し、得られた水溶液をＥｔＯＡｃ（２×１０ｍＬ）で抽出した。この生成物の一部はＡｃＯＥｔ中に見られたが、不純物の大部分はＥｔＯＡｃで除去され、目的生成物は少量の不純物とともに主として水層に残った。次に、水層をＤＣＭ（７ｍＬ）で抽出した(extracted)。その後、水溶液を１Ｎ  ＨＣｌを加えることにより酸性化し、次に、それをＥｔＯＡｃ（３×１０ｍＬ）で抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮し、２−（（３−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）チオ）−１−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン（７３０ｍｇ、８１％）を得た。
【００８３】
実施例１のラセミ混合物を半分取キラルＨＰＬＣにより分離し、実施例２を得た（方法Ｃ参照）。
【００８４】
実施例２：（Ｒ）−２−（（３−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）チオ）−１−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン
【化１４】
2017538776.tif 000016
【００８５】
方法Ｃ
２−（（３−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）チオ）−１−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン（実施例１、６００ｍｇ、１．４３ｍｍｏｌ）を半分取キラルＨＰＬＣ（カラム  Ｃｈｉｒａｌｐａｃｋ  ＩＣ  ２０×２５０ｎｍ、無勾配ヘプタン：ｉＰｒＯＨ  ９０：１０、時間３０分、波長２５４ｎｍ、流速１８ｍＬ／分）により分離し、（Ｒ）−２−（（３−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）チオ）−１−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン（最初に溶出した化合物）（ｅ．ｅ＞９９％）を得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6)δppm: 14.81 (s, 1 H), 12.19 (s, 1H), 8.89 (s, 2H), 8.49 (d, 1H), 8.25-8.23 (m, 1H), 7.56-7.54 (m, 1H), 7.29 (m 2H), 5.37 (q, 1H),4.43 (br.s., 1H), 3.84 (m, 1H), 1.70 (d, 3H) [ES+ MS] m/z 418 (M+H) （ｅ．ｅ＞９９％、絶対立体配置をａｂ  ｉｎｉｔｉｏ  ＶＣＤ分析により確認した）。
【００８６】
方法Ｄ
ＤＭＦ（２８０ｍＬ）中、（２Ｓ）−２−クロロ−１−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン（中間体３、２６．０ｇ、９６．４ｍｍｏｌ）の溶液に、３−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−チオン（中間体２、２６．７ｇ、９１．８ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（ＡＬＤＲＩＣＨ、３３．３ｇ、２４１ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を室温で１．５時間撹拌した後、さらなる３−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−チオン（中間体２、１．６ｇ、４．６ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を室温でさらに１．５時間撹拌した。次に、２００ｍＬの水を加え、少量の不純物を１２０ｍＬのＤＣＭで抽出した。その後、この水溶液のｐＨを、固体ＮａＨＣＯ３を加えてｐＨ＝７に調整し、この水溶液から生成物をＥｔＯＡｃ（５５０ｍＬで９回）で抽出した。回収した有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させた後、溶媒をロータベーパーで除去して粗生成物を得、これをフラッシュクロマトグラフィー（Ｉｓｏｌｅｒａ、ＳＮＡＰ  １５００ｇ  ＳｉＯ２、溶出剤＝シクロヘキサン中ＥｔＯＡｃ、３０％から６０％）により精製した。回収した生成物含有画分をロータベーパーで溶媒８０ｍＬまで濃縮したところ、白色固体が生じ、母液を濃縮し、１０．２ｇの（Ｒ）−２−（（３−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）チオ）−１−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン（ｅ．ｒ＝８７／１３）を帯黄色固体として得た。
【００８７】
９．７ｇの（Ｒ）−２−（（３−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）チオ）−１−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン（ｅ．ｒ＝８７／１３）をフラスコ内、室温で、２８ｍＬのｉＰｒＯＨで可溶化した。次に、このフラスコを冷蔵庫にて５℃で一晩放置した。その後、有機溶液を除去し、固体を１０ｍＬのＤＣＭで洗浄し、５．９６ｇの（Ｒ）−２−（（３−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）チオ）−１−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン（ｅ．ｒ＝９９／１）を得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6)δppm: 14.81 (s, 1 H), 12.19 (s, 1H), 8.89 (s, 2H), 8.49 (d, 1H), 8.25-8.23 (m, 1H), 7.56-7.54 (m, 1H), 7.29 (m 2H), 5.37 (q, 1H),4.43 (br.s., 1H), 3.84 (m, 1H), 1.70 (d, 3H) [ES+ MS] m/z 418 (M+H)
【００８８】
実施例３：（Ｒ）−２−（（３−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）チオ）−１−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン
【化１５】
2017538776.tif 000017
【００８９】
実施例１と同様にして作製した化合物（１５８．６ｍｇ）をアセトニトリル（１ｍｌ）に懸濁させ、約５〜１０ｍｇの先行バッチの化合物を種結晶とし、室温で撹拌した。１時間後、ＭｅＣＮ（０．６ｍｌ）を加えた。数日後、スラリーのおよそ１／３を新しいバイアル（バイアル２）にデカントした。水を加え（２滴）、そのバイアルをＴｈｅｒｍｉｘ内の温度周期に置いた。少量の固体がバイアル２に存在したところで、溶液を、２つの通し孔を備えた蓋付きの新しいバイアル（バイアル３）にデカントし、ゆっくり蒸発させた。溶液が蒸発して固体となったところで、それをＲａｍａｎ分光法により分析し、フォーム１と一致することが分かった（実施例４Ａ参照）。
【００９０】
この固体を結晶構造および分子構造を１５０（２）Ｋで採取した三次元Ｘ線回折データから決定した。この研究から、原子の結合、キラル中心の絶対立体配置、および互変異性体の存在が確認された。
【００９１】
結晶データおよび精密化の概要：Ｃ１８Ｈ１３Ｃｌ２Ｎ５ＯＳ；Ｍ＝４１８．２９；無色のラス；０．４４×０．１４×０．０７ｍｍ；斜方晶；空間群Ｐ２１２１２１（＃１９）；ａ＝７．０７４０４（８）Å、ｂ＝１５．０２５４９（１８）Å、ｃ＝１６．９９９８（２）Å、α＝β＝γ＝９０°、Ｖ＝１８０６．９２（４）Å；Ｚ＝４；Ｄｃａｌｃ＝１．５３８Ｍｇｍ−３；λ＝１．５４１７８Å；θｍａｘ＝６６．８７°；採取反射＝１２９６６；独立反射＝３２００；Ｒｉｎｔ＝０．０３００；被覆率＝９９．７％；制約＝０；パラメーター＝２５４；Ｓ＝１．０４９；Ｒ１［Ｉ＞２σ（Ｉ）］＝０．０２１７；ｗＲ２（全データ）＝０．０５５３；絶対構造パラメーター＝−０．０１３（１０）；および最大差ピークおよびホール＝０．１９６および−０．１４７ｅÅ−３。
【００９２】
実施例４
ＰＸＲＤ、ＤＳＣおよびＴＧＡの装置および取得詳細
粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）。ＰＸＲＤ回折図形を、ＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ  Ｘ’Ｐｅｒｔ  Ｐｒｏ回折装置を用い、Ｓｉゼロバックグラウンドウエハーにて取得した。回折図形は総て、Ｃｕ  Ｋα（４５ｋＶ／４０ｍＡ）線およびステップサイズ０．０２  ２θおよびＸ’ｃｅｌｅｒａｔｏｒ（商標）ＲＴＭＳ（Ｒｅａｌ  Ｔｉｍｅ  Ｍｕｌｔｉ−Ｓｔｒｉｐ）検出器を用いて採取した。そうではないことが記載されない限り、所望でない放射線を低減するためにニッケルフィルターを使用した。入射ビーム側(incidental beam side）の立体配置：固定発散スリット（１／４°）、０．０４ラッドソーラースリット、散乱防止スリット（１／４°）、および１０ｍｍビームマスク。回折ビーム側の立体配置：固定発散スリット（１／４°）および０．０４ラッドソーラースリット。ピーク位置はＨｉｇｈｓｃｏｒｅソフトウエアを用いて決定し、２シータ角（２θ）として表される各ピーク位置の許容誤差はおよそ±０．１°２θである。
【００９３】
示差走査熱量測定（ＤＳＣ）。ＤＳＣは、オートサンプラーおよび冷蔵冷却システムを備えたＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｑ１００示差走査熱量計を用い、４０ｍＬ／分Ｎ２パージ下で行った。ＤＳＣサーモグラムは、クリンプＡｌパンにて１５℃／分で取得した。
【００９４】
熱重量分析（ＴＧＡ）。ＴＧＡサーモグラムは、ＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｑ５００熱重量分析計を用い、４０ｍＬ／分Ｎ２パージ下、ＰｔまたはＡｌパンにて１５℃／分で取得した。
【００９５】
実施例４Ａ：式（Ｉ）の化合物のドーム１の特性決定
式（Ｉ）の化合物の固体形態のＰＸＲＤスペクトルを図１に示す。
【００９６】
式（Ｉ）の化合物の特徴的なＰＸＲＤ角およびｄ−間隔を表１に記録する。
【００９７】
【表１】
2017538776.tif 000018
【００９８】
フォーム１の示差走査熱量測定および熱重量分析：
ＤＳＣ加熱曲線は、１９６．２６℃の開始温度で融解吸熱を示した。
【００９９】
ＴＧＡ加熱曲線は、およそ２３０℃まで無視できる重量損失を示した。
【０１００】
実施例４Ｂ：式（Ｉ）の化合物のフォーム２の特性決定
式（Ｉ）の化合物の固体形態のＰＸＲＤスペクトルを図２に示す。
【０１０１】
式（Ｉ）の化合物の特徴的なＰＸＲＤ角およびｄ−間隔を表２に記録する。
【０１０２】
【表２】
2017538776.tif 000019
【０１０３】
フォーム２の示差走査熱量測定および熱重量分析：
ＤＳＣ加熱曲線は、２０２．７５℃の開始温度で融解吸熱を示した。
【０１０４】
ＴＧＡ加熱曲線は、およそ２２０℃まで無視できる重量損失を示した。
【０１０５】
実施例４Ｃ：式（Ｉ）の化合物のフォーム３の特性決定
式（Ｉ）の化合物の固体形態のＰＸＲＤスペクトルを図３に示す。
【０１０６】
式（Ｉ）の化合物の特徴的なＰＸＲＤ角およびｄ−間隔を表３に記録する。
【０１０７】
【表３】
2017538776.tif 000020
【０１０８】
フォーム３の示差走査熱量測定およびｋ熱重量分析：
ＤＳＣ加熱曲線は、２０３．５８℃の開始温度で融解吸熱を示した。
【０１０９】
ＴＧＡ加熱曲線は、およそ２２０℃まで無視できる重量損失を示した。
【０１１０】
生物学的アッセイ
本発明の化合物は、所与の薬理学的効果を有するために必要とされる化合物の濃度を決定するためのいくつかの生物学的アッセイのうちの１つで試験すればよい。これらのアッセイを以下に記載する。
【０１１１】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ効力
熱帯熱マラリア原虫成長阻害アッセイ
熱帯熱マラリア原虫に感染した赤血球の化合物に対する感受性を、［３Ｈ］ヒポキサンチン組み込み法を用い、０．５％寄生虫血（リングステージ）の接種物および２％ヘマトクリットで、３反復で決定した。寄生虫を、５％Ａｌｂｕｍａｘを添加したＲＰＭＩ  １６４０、２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳで増殖させた。プレートを３７℃、５％ＣＯ２、５％Ｏ２、９０％Ｎ２でインキュベートする。インキュベーション２４時間後、［３Ｈ］ヒポキサンチンを加え、プレートをさらに２４時間インキュベートする。この期間の後、プレートを、ＴＯＭＴＥＣセルハーベスター９６を用いてグラスファイバーフィルター上に採取する。フィルターを乾燥させ、シンチレーションシート上で融解し、結合した放射活性を、Ｗａｌｌａｃ  Ｍｉｃｒｏｂｅｔａ  Ｔｒｉｌｕｘ（モデル１４５０  ＬＳ−Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）の使用によって定量する。ＩＣ５０は、Ｇｒａｆｉｔ  ５プログラム（Ｇｒａｆｉｔプログラム；Ｅｒｉｔｈａｃｕｓ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ、ホーリー、サリー、英国）を用いて決定する。
【０１１２】
【表４】
2017538776.tif 000021
【０１１３】
ｉｎ  ｖｉｖｏ有効性
熱帯熱マラリア原虫ｉｎ  ｖｉｖｏ有効性アッセイ
抗マラリアｉｎ  ｖｉｖｏ有効性を、熱帯熱マラリア原虫マウスモデルを用い、熱帯熱マラリア原虫（マラリア原虫Jimenez-Diaz, M.B., Mulet, T., Viera, S., Gomez, V., Garuti, H., Ibanez, J., Alvarez-Doval, A., Shlutz, D.L., Martinez, A., Improved Murine Model Of Malaria Using Plasmodium falciparum (Competent Strains and Non-Myelodepleted NOD-scid IL2R_null Mice Engrafted with Human Erythrocytes) Antimicrob. Agents Chemother 2009, 53 (10), 4533-4536に記載の手順に従って決定した。
【０１１４】
【表５】
2017538776.tif 000022
【０１１５】
生物学的関連培地での溶解度評価
化合物の平衡溶解度を、４つの生物学的関連流体：絶食状態の（人工腸液（ＦａＳＳＩＦ）、摂食状態の人工腸液（ＦｅＳＳＩＦ）、人工胃液（ＳＧＦ）およびリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中、室温で４時間の時点で測定した。
【０１１６】
溶媒およびバッファー
ＨＰＬＣ級の有機溶媒を使用した。超純水（Ｍｉｌｌｉ−Ｑ級）を使用した。バッファーは、超純水で調製し、０．４５μナイロンフィルターを用いて濾過した。
【０１１７】
Ｉ．手順
平衡溶解度の決定（所望の溶媒中での化学安定性を推定することが問題ではない）
ａ）１ｍｇの固体化合物を１本の４ｍＬガラスバイアル中に秤量し、新しく調製した１ｍＬの対応する培地（ＳＧＦ、ＦａＳＳＩＦ、ＦｅＳＳＩＦまたはＰＢＳ）を加えた。これらのサンプルは総て２反復で調製した。
ｂ）これらのサンプルを室温で４時間撹拌した（ローラーミキサー）。必要であれば、その過剰を維持するためにさらなる固体化合物（０．１ｍｇ）を追加した（飽和溶液）。
ｃ）４時間後、サンプルを遠心分離し（１００００ｒｐｍ、１０分）、上清をＨＰＬＣバイアルに移し、ＬＣ−ＭＳにより分析した（必要であれば移動相で予め希釈）。
ｄ）各サンプルの最終溶液のｐＨを、ｐＨメーター（ＷＴＷ  ｐＨ３３０ｉおよびｐＨ電極Ｓｅｎｔｉｘ  ４１）を用いて測定した。
【０１１８】
分析的定量のためのＬＣ−ＭＳアッセイ
総ての上清をＬＣ−ＭＳにより分析した。これらのサンプルの定量は、１ｍｇ／ｍＬ  ＤＭＳＯ（Ａｌｄｒｉｃｈ化合物タロ群参照：２７６８５−５）保存溶液から、クロマトグラフィーで使用する移動相で希釈することによって得た検量線に対して行った。溶解度範囲に応じて、定量にはＵ．Ｖ．（１μｇ／ｍＬ〜１００μｇ／ｍＬ）またはＭＳ（１μｇ／ｍＬ〜１ｎｇ／ｍＬ）検出器を用いた。
【０１１９】
データの分析
総てのＬＣ−ＭＳデータの分析をＭａｓｓＬｙｎｘ  ３．４ソフトウエアおよびＡｎａｌｙｓｔ  １．４．２で行った。データの統計分析およびグラフィック分析は、マイクロソフト・エクセルを用いて行った。各化合物の濃度（μＭ）および溶解度（μｇ／ｍｌ）を、サンプルからのピーク面積と検量線からのピーク面積を用いて計算した。
【０１２０】
【表６】
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【図１】
2017538776.tif 000027
【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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