(57)【要約】本明細書では、ＭＥＫ拮抗剤を使用して、癌等の病態を治療するための併用療法が提供される。【選択図】図２Ｄ
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
個体に（ａ）ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）ＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、前記個体における癌の治療方法。
【請求項２】
前記ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び前記ＭＥＫ拮抗剤のそれぞれの量が、ＭＥＫ拮抗剤に対する癌感受性の期間を増大させるため及び／または癌耐性の発生を遅らせるために有効である、請求項１に記載の前記方法。
【請求項３】
前記ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び前記ＭＥＫ拮抗剤のそれぞれの量が、前記ＭＥＫ拮抗剤に対する癌感受性を増大させるため及び／または感受性を回復させるために有効である、請求項１に記載の前記方法。
【請求項４】
個体におけるＭＥＫ拮抗剤での治療に対して耐性を有する癌細胞の治療方法であって、前記個体に有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む、前記方法。
【請求項５】
個体に有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む、前記個体における前記ＭＥＫ拮抗剤に対して耐性を有する癌の治療方法。
【請求項６】
個体に有効量のＦＧＦＲシグナル伝達拮抗剤の拮抗剤及び有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む、前記ＭＥＫ拮抗剤に対する感受性を増大させる及び／または感受性を回復させる方法。
【請求項７】
個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、前記個体における前記ＭＥＫ拮抗剤を含む癌治療の有効性を増大させる方法。
【請求項８】
個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、前記個体における前記ＭＥＫ拮抗剤に対して耐性を有する癌の発生を遅らせる及び／または防止する方法。
【請求項９】
個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、前記ＭＥＫ拮抗剤に対する耐性の発生の増大した可能性を有する癌を有する前記個体の治療方法。
【請求項１０】
個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する前記個体における前記ＭＥＫ拮抗剤に対する感受性を増大させる方法。
【請求項１１】
個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する前記個体における前記ＭＥＫ拮抗剤の感受性の期間を延ばす方法。
【請求項１２】
個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する前記個体における前記ＭＥＫ拮抗剤に対する応答の持続時間を延ばす方法。
【請求項１３】
前記癌が、肺癌（例えば、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ））、乳癌、及び黒色腫から選択される、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項１４】
前記癌が上皮間葉移行を経ている、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項１５】
前記ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤が、抗体阻害剤、低分子阻害剤、結合ポリペプチド阻害剤、及び／またはポリヌクレオチド拮抗剤である、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項１６】
前記ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤が、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤である、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項１７】
前記ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤が、ＦＧＦＲ１ｂ、ＦＧＦＲ１ｃ、ＦＧＦ１、ＦＧＦ２、ＦＧＦ３、ＦＧＦ４、ＦＧＦ５、ＦＧＦ６、及びＦＧＦ１０のうちの１つ以上と結合する、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項１８】
前記ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤が、結合ポリペプチド阻害剤であり、前記結合ポリペプチド阻害剤が、Ｆｃに連結したＦＧＦＲの細胞外ドメインの領域を含む、請求項１５〜１７のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項１９】
前記ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤が低分子であり、前記低分子が、Ｎ−［２−［［４−（ジエチルアミノ）ブチル］アミノ］−６−（３，５−ジメトキシフェネチル）ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル］−Ｎ’−（１，１−ジメチルエチル）−尿素またはその薬学的に許容される塩である、請求項１５〜１７のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項２０】
前記ＭＥＫ拮抗剤がＭＥＫ１阻害剤である、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項２１】
前記ＭＥＫ拮抗剤がＭＥＫ２阻害剤である、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項２２】
前記ＭＥＫ拮抗剤がＭＥＫ１／２阻害剤である、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項２３】
前記ＭＥＫ拮抗剤がコビメチニブである、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項２４】
個体に（ａ）ＰＩＫ３拮抗剤及び（ｂ）ＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、前記個体における癌の治療方法。
【請求項２５】
前記ＰＩＫ３拮抗剤及び前記ＭＥＫ拮抗剤のそれぞれの量が、前記ＭＥＫ拮抗剤に対する癌感受性の期間を増大させるため及び／または癌耐性の発生を遅らせるために有効である、請求項２４に記載の前記方法。
【請求項２６】
前記ＰＩＫ３拮抗剤及び前記ＭＥＫ拮抗剤のそれぞれの量が、前記ＭＥＫ拮抗剤に対する癌感受性を増大させるため及び／または感受性を回復させるために有効である、請求項２４に記載の前記方法。
【請求項２７】
個体におけるＭＥＫ拮抗剤での治療に対して耐性を有する癌細胞の治療方法であって、前記個体に有効量のＰＩＫ３拮抗剤及び有効量の前記ＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む、前記方法。
【請求項２８】
個体に有効量のＰＩＫ３拮抗剤及び有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む、前記個体における前記ＭＥＫ拮抗剤に対して耐性を有する癌の治療方法。
【請求項２９】
個体に有効量のＰＩＫ３拮抗剤及び有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む、前記ＭＥＫ拮抗剤に対する感受性を増大させる及び／または感受性を回復させる方法。
【請求項３０】
個体に（ａ）有効量のＰＩＫ３拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、個体におけるＭＥＫ拮抗剤を含む癌治療の有効性を増大させる方法。
【請求項３１】
個体に（ａ）有効量のＰＩＫ３拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、前記個体における前記ＭＥＫ拮抗剤に対して耐性を有する癌の発生を遅らせる及び／または防止する方法。
【請求項３２】
個体に（ａ）有効量のＰＩＫ３拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、前記ＭＥＫ拮抗剤に対する耐性の発生の増大した可能性を有する癌を有する前記個体の治療方法。
【請求項３３】
個体に（ａ）有効量のＰＩＫ３拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する前記個体における前記ＭＥＫ拮抗剤に対する感受性を増大させる方法。
【請求項３４】
個体に（ａ）有効量のＰＩＫ３拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する前記個体における前記ＭＥＫ拮抗剤の感受性の期間を延ばす方法。
【請求項３５】
個体に（ａ）有効量のＰＩＫ３拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する前記個体における前記ＭＥＫ拮抗剤に対する応答の持続時間を延ばす方法。
【請求項３６】
前記癌が、肺癌（例えば、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ））、乳癌、及び黒色腫から選択される、請求項２４〜３５のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項３７】
前記癌が上皮間葉移行を経ている、請求項２４〜３６のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項３８】
前記ＰＩＫ３拮抗剤が、抗体阻害剤、低分子阻害剤、結合ポリペプチド阻害剤、及び／またはポリヌクレオチド拮抗剤である、請求項２４〜３７のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項３９】
前記ＰＩＫ３拮抗剤がＧＤＣ−００３２である、請求項２４〜３８のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項４０】
前記ＭＥＫ拮抗剤がＭＥＫ１阻害剤である、請求項２４〜３９のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項４１】
前記ＭＥＫ拮抗剤がＭＥＫ２阻害剤である、請求項２４〜３９のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項４２】
前記ＭＥＫ拮抗剤がＭＥＫ１／２阻害剤である、請求項２４〜３９のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項４３】
前記ＭＥＫ拮抗剤がコビメチニブである、請求項２４〜３９のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項４４】
前記方法がＢ−ｒａｆ拮抗剤を更に含む、請求項１〜４３のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項４５】
前記Ｂ−ｒａｆ拮抗剤がベムラフェニブである、請求項４４に記載の前記方法。
【請求項４６】
前記ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び前記ＭＥＫ拮抗剤が相乗効果を提供する、請求項１〜４５のいずれか１項に記載の前記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１４年６月１３日に出願された米国仮出願第６２／０１２，１１６号に関連し、米国特許法第１１９条の下でこの仮出願の優先権の利益を主張する。この仮出願の内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本明細書では、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤を使用して、癌等の病態を治療するための併用療法が提供される。
【背景技術】
【０００３】
癌は依然として人間の健康に対する最も大きな脅威のうちの１つである。米国においては、癌は毎年１３０万人近くの新規患者に発症し、死亡者数のほぼ４分の１を占める、心疾患に次ぐ第２の主な死因である。例えば、乳癌は２番目に一般的な癌の形態であり、米国人女性の間で２番目に死亡率が高い癌である。また、癌は、５年以内の死亡の第１位の原因として、循環器疾患を超え得ることが予想される。固形腫瘍が、これらの死亡のうちのほとんどの原因である。ある特定の癌の医学的治療において著しい進歩があったものの、全ての癌に関する全体的な５年生存率は、過去２０年間で約１０％しか改善されていない。癌または悪性腫瘍は、制御できない様式で急速に転移及び成長し、適時の検出及び治療を非常に困難にする。
【０００４】
タンパク質キナーゼ（ＰＫ）は、癌治療の標的である。それらは、ＡＴＰからの末端（ガンマ）リン酸塩の移行により、タンパク質のチロシン、セリン、及びスレオニン残基上のヒドロキシ基のリン酸化を触媒する酵素である。シグナル伝達経路を通して、これらの酵素は細胞の成長、分化、及び増殖、すなわち、細胞寿命の事実上全ての態様を、ＰＫ活性に応じて何らかの方法で調節する（Ｈａｒｄｉｅ，Ｇ．ａｎｄ  Ｈａｎｋｓ，Ｓ．（１９９５）Ｔｈｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｋｉｎａｓｅ  Ｆａｃｔｓ  Ｂｏｏｋ．Ｉ  ａｎｄ  ＩＩ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）。更に、異常性のＰＫ活性は、乾癬等の比較的命に関わらない疾患から膠芽腫（脳癌）等の非常に悪性の疾患までの範囲に及ぶ多くの障害に関係している。タンパク質キナーゼは、治療的調整のための重要な標的クラスである（Ｃｏｈｅｎ，Ｐ．（２００２）Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ１：３０９）。
【０００５】
ＭＥＫは、ＥＲＫ１及び２上の活性化のために必要とされる、チロシン及びスレオニンをリン酸化する二重特異性キナーゼである。２つの関連する遺伝子は、ＥＲＫへの結合において異なるＭＥＫ１及びＭＥＫ２を符号化する。ＨＥＲ３受容体チロシンキナーゼは、ニューレグリン及びＮＴＡＫにより、結合及び活性化され得る。ＥＧＦＲは、上皮成長因子ファミリーのメンバーのための受容体である、膜貫通の糖タンパク質である。
【０００６】
ＲＡＦ阻害剤はまた、Ｂ−ｒａｆ  Ｖ６００Ｅ突然変異を内部に持つ悪性黒色腫等の標的癌に使用されるが、しかし、それらの臨床的効果は獲得耐性により弱められる。
【０００７】
しかし、ＲＡＦ及びＰＫ阻害剤がある特定の癌の治療に有効であると証明されているが、抗癌剤に対する耐性の比較的急速な獲得は、依然として効果的な癌療法の主な障害となっている。かかる薬剤耐性に対する分子的機序を明らかにする相当な努力により、薬剤排出、薬剤結合が不十分な標的突然変異体の獲得、代わりとなる生存経路の関与、及び後成的な変化を含む種々の機構が明らかとなっている。更に、特定の癌は、様々な程度の現在の治療（例えば、ＲＡＦ及びＰＫ阻害剤）に応答する。
【０００８】
したがって、癌細胞集団内での異質性及び薬剤治療に対して耐性を有する癌細胞の発生に効果的に対処するための、新たな治療方法が必要とされている。
【発明の概要】
【０００９】
インビトロ及びインビボでの癌細胞の成長を阻害することにおける改善した効果が、ＭＥＫを阻害することにより達成され得ることが測定されている。例えば、ＧＤＣ−０９７３（すなわち、コビメチニブ）、若しくはＧＤＣ−０６２３、またはその薬学的に許容される塩が、過剰増殖性障害の治療的処置のために使用され得ることが発見されている。しかし、異なる過剰増殖性障害（例えば、癌）は、コビメチニブ等のＭＥＫ阻害剤に対して、異なる感受性を有する。したがって、過剰増殖性障害の治療的処置のためのＭＥＫ阻害剤の感受性を改善する必要がある。本明細書に記載されるように、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及びＭＥＫ拮抗剤の併用治療は、癌等の過剰増殖性障害の治療において有用である。ある特定の実施形態において、この組み合わせの投与は相乗効果を提供し得る。
【００１０】
具体的に本明細書では、個体に（ａ）ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）ＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、個体における癌の治療方法が提供される。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及びＭＥＫ拮抗剤のそれぞれの量は、ＭＥＫ拮抗剤に対する癌感受性の期間を増大させるため及び／または癌耐性の発生を遅らせるために有効である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及びＭＥＫ拮抗剤のそれぞれの量は、ＭＥＫ拮抗剤を含む癌治療の有効性を増大させるために有効である。例えば、いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及びＭＥＫ拮抗剤のそれぞれの量は、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した有効性のために有効である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及びＭＥＫ拮抗剤のそれぞれの量は、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した寛解（例えば、完全寛解）のために有効である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及びＭＥＫ拮抗剤のそれぞれの量は、ＭＥＫ拮抗剤に対する癌感受性を増大させるため及び／または感受性を回復させるために有効である。
【００１１】
本明細書では、個体に有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む、個体におけるＭＥＫ拮抗剤での治療に対して耐性を有する癌細胞の治療方法もまた提供される。加えて本明細書では、個体に有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む、個体におけるＭＥＫ拮抗剤に対して耐性を有する癌の治療方法が提供される。
【００１２】
本明細書では、個体に有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む、ＭＥＫ拮抗剤に対する感受性を増大させる及び／または感受性を回復させる方法が提供される。
【００１３】
本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、個体におけるＭＥＫ拮抗剤を含む癌治療の有効性を増大させる方法もまた提供される。
【００１４】
本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含み、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した有効性を有する、個体における癌の治療方法が提供される。
【００１５】
加えて、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、個体におけるＭＥＫ拮抗剤に対して耐性を有する癌の発生を遅らせる及び／または防止する方法が提供される。
【００１６】
本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、ＭＥＫ拮抗剤に対する耐性の発生の増大した可能性を有する、癌を有する個体の治療方法が提供される。
【００１７】
本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＭＥＫ拮抗剤に対する感受性を増大させる方法が更に提供される。
【００１８】
本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＭＥＫ拮抗剤の感受性の期間を延ばす方法もまた提供される。
【００１９】
本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＥＧＦＲ拮抗剤に対する応答の持続時間を延ばす方法が提供される。
【００２０】
いずれかの方法におけるいくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、抗体阻害剤、低分子阻害剤、結合ポリペプチド阻害剤、及び／またはポリヌクレオチド拮抗剤である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、結合ポリペプチド阻害剤である。いくつかの実施形態において、結合ポリペプチド阻害剤は、Ｆｃドメインに連結したＦＧＦＲの細胞外ドメインの領域（例えば、免疫グロブリンヒンジ及びＦｃドメインに連結したＦＧＦＲの細胞外ドメインの領域）を含む。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ２シグナル伝達の拮抗剤である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ３シグナル伝達の拮抗剤である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ４シグナル伝達の拮抗剤である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、低分子である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、抗体である。
【００２１】
いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ１ｂ、ＦＧＦＲ１ｃ、ＦＧＦ１、ＦＧＦ２、ＦＧＦ３、ＦＧＦ４、ＦＧＦ５、ＦＧＦ６、及びＦＧＦ１０のうちの１つ以上と、結合及び／または阻害する。いくつかの実施形態において、低分子は、Ｎ−［２−［［４−（ジエチルアミノ）ブチル］アミノ］−６−（３，５−ジメトキシフェネチル）ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル］−Ｎ’−（１，１−ジメチルエチル）−尿素またはその薬学的に許容される塩である。いくつかの実施形態において、低分子は、ＢＧＪ３９８（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＡＺＤ４５４７（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、及び／またはＦＦ２８４（Ｃｈｕｇａｉ／Ｄｅｂｉｏｐｈａｒｍ（Ｄｅｂｉｏ１３４７）である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、抗ＦＧＦ２抗体である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、抗ＦＧＦＲ１抗体である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、抗ＦＧＦＲ１−ＩＩＩｂ抗体である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、抗ＦＧＦＲ１−ＩＩＩｃ抗体である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、１つを超えるＦＧＦＲポリペプチドと結合することが可能な抗ＦＧＦＲ抗体である。
【００２２】
いずれかの方法におけるいくつかの実施形態において、ＭＥＫ拮抗剤はＭＥＫ１の拮抗剤である。いずれかの方法におけるいくつかの実施形態において、ＭＥＫ拮抗剤はＭＥＫ２の拮抗剤である。いずれかの方法におけるいくつかの実施形態において、ＭＥＴ拮抗剤はＭＥＫ１及びＭＥＫ２の拮抗剤である。
【００２３】
ある特定の実施形態において、ＭＥＫ拮抗剤は、ＧＤＣ−０９７３（すなわち、コビメチニブ）若しくはＧＤＣ−０６２３、またはその薬学的に許容される塩である。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ拮抗剤はコビメチニブである。
【００２４】
ＦＧＦＲシグナル伝達のＭＥＫ拮抗剤及び拮抗剤は、同時に投与され得る。ＦＧＦＲシグナル伝達のＭＥＫ拮抗剤及び拮抗剤は、経時的に投与され得る。いくつかの実施形態において、ＭＥＫ拮抗剤は、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤の前に投与される。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、ＭＥＫ拮抗剤の前に投与される。
【００２５】
いくつかの実施形態において、患者の癌は、ＭＥＫ生体指標を発現することが示されている。いくつかの実施形態において、患者の癌は、ＭＥＫ１生体指標を発現することが示されている。いくつかの実施形態において、患者の癌は、ＭＥＫ２生体指標を発現することが示されている。いくつかの実施形態において、患者の癌は、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２のための生体指標を発現することが示されている。
【００２６】
いくつかの実施形態において、患者の癌は、Ｂ−ｒａｆ生体指標を発現することが示されている。Ｂ−ｒａｆ生体指標は、突然変異体Ｂ−ｒａｆであり得る。突然変異体Ｂ−ｒａｆは、恒常的に活性化されたＢ−ｒａｆである。いくつかの実施形態において、突然変異体Ｂ−ｒａｆはＢ−ｒａｆ  Ｖ６００である。Ｂ−ｒａｆ  Ｖ６００は、Ｂ−ｒａｆ  Ｖ６００Ｅであり得る。非限定的な、突然変異体Ｂ−ｒａｆの例示的なリストは、Ｂ−ｒａｆ  Ｖ６００Ｋ（ＧＴＧ＞ＡＡＧ）、Ｖ６００Ｒ（ＧＴＧ＞ＡＧＧ）、Ｖ６００Ｅ（ＧＴＧ＞ＧＡＡ）、及び／またはＶ６００Ｄ（ＧＴＧ＞ＧＡＴ）である。いくつかの実施形態において、突然変異体Ｂ−ｒａｆポリペプチドが検出される。いくつかの実施形態において、突然変異体Ｂ−ｒａｆ核酸が検出される。「Ｖ６００Ｅ」は、Ｂ−ｒａｆのアミノ酸位置６００でのバリンのグルタミンへの置換をもたらす、ヌクレオチド位置１７９９でのＢ−ＲＡＦ（Ｔ＞Ａ）における突然変異を指す。「Ｖ６００Ｅ」はまた、以前の番号付け方式（Ｋｕｍａｒら，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．９：３３６２−３３６８，２００３）の下で「Ｖ５９９Ｅ」（１７９６Ｔ＞Ａ）としても既知である。
【００２７】
いくつかの実施形態において、患者の癌は、ＭＥＫ及びＢ−ｒａｆ生体指標を発現することが示されている。
【００２８】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）ＰＩ３Ｋ拮抗剤及び（ｂ）ＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、個体における癌の治療方法が提供される。いくつかの実施形態において、ＰＩ３Ｋ拮抗剤及びＭＥＫ拮抗剤のそれぞれの量は、ＭＥＫ拮抗剤に対する癌感受性の期間を増大させるため及び／または癌耐性の発生を遅らせるために有効である。いくつかの実施形態において、ＰＩ３Ｋ拮抗剤及びＭＥＫ拮抗剤のそれぞれの量は、ＭＥＫ拮抗剤を含む癌治療の有効性を増大させるために有効である。例えば、いくつかの実施形態において、ＰＩ３Ｋ拮抗剤及びＭＥＫ拮抗剤のそれぞれの量は、ＰＩ３Ｋ拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した有効性のために有効である。いくつかの実施形態において、ＰＩ３Ｋ拮抗剤及びＭＥＫ拮抗剤のそれぞれの量は、ＰＩ３Ｋ拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した寛解（例えば、完全寛解）のために有効である。いくつかの実施形態において、ＰＩ３Ｋ拮抗剤及びＭＥＫ拮抗剤のそれぞれの量は、ＭＥＫ拮抗剤に対する癌感受性を増大させるため及び／または感受性を回復させるために有効である。
【００２９】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤及び有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む、個体におけるＭＥＫ拮抗剤での治療に対して耐性を有する癌細胞の治療方法もまた提供される。加えて、本明細書では、個体に有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤及び有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む、個体におけるＭＥＫ拮抗剤に対して耐性を有する癌の治療方法が提供される。
【００３０】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤及び有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む、ＭＥＫ拮抗剤に対する感受性を増大させる及び／または感受性を回復させる方法が提供される。
【００３１】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与すること含む、個体におけるＭＥＫ拮抗剤を含む癌治療の有効性を増大させる方法が提供される。
【００３２】
本明細書では、個体に（ａ）有効量のＭＥＫ拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含み、ＰＩ３Ｋ拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した有効性を有する、個体における癌の治療方法が提供される。
【００３３】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＭＥＫ拮抗剤及び（ｂ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤を同時に投与することを含む、個体におけるＭＥＫ拮抗剤に対する癌耐性の発生を遅らせる及び／または防止する方法が提供される。
【００３４】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＭＥＫ拮抗剤及び（ｂ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤を同時に投与することを含む、ＭＥＫ拮抗剤に対する耐性の発生の増大した可能性を有する、癌を有する個体の治療方法が提供される。
【００３５】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＭＥＫ拮抗剤及び（ｂ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＭＥＫ拮抗剤に対する感受性を増大させる方法が提供される。
【００３６】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＭＥＫ拮抗剤及び（ｂ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＭＥＫ拮抗剤に対する感受性の期間を延ばす方法もまた提供される。
【００３７】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＭＥＫ拮抗剤及び（ｂ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＭＥＫ拮抗剤に対する応答の持続時間を延ばす方法が提供される。
【００３８】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）ＰＩ３Ｋ拮抗剤及び（ｂ）ＭＥＫ１拮抗剤を同時に投与することを含む、個体における癌の治療方法が提供される。いくつかの実施形態において、ＰＩ３Ｋ拮抗剤及びＭＥＫ１拮抗剤のそれぞれの量は、ＭＥＫ１拮抗剤に対する癌感受性の期間を増大させるため及び／または癌耐性の発生を遅らせるために有効である。いくつかの実施形態において、ＰＩ３Ｋ拮抗剤及びＭＥＫ１拮抗剤のそれぞれの量は、ＭＥＫ１拮抗剤を含む癌治療の有効性を増大させるために有効である。例えば、いくつかの実施形態において、ＰＩ３Ｋ拮抗剤及びＭＥＫ１拮抗剤のそれぞれの量は、ＰＩ３Ｋ拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ１拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した有効性のために有効である。いくつかの実施形態において、ＰＩ３Ｋ拮抗剤及びＭＥＫ１拮抗剤のそれぞれの量は、ＰＩ３Ｋ拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ１拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した寛解（例えば、完全寛解）のために有効である。いくつかの実施形態において、ＰＩ３Ｋ拮抗剤及びＭＥＫ１拮抗剤のそれぞれの量は、癌感受性を増大させるため及び／またはＭＥＫ１拮抗剤に対する感受性を回復させるために有効である。
【００３９】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤及び有効量のＭＥＫ１拮抗剤を投与することを含む、個体におけるＭＥＫ１拮抗剤での治療に対して耐性を有する癌細胞の治療方法もまた提供される。加えて、本明細書では、個体に有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤及び有効量のＭＥＫ１拮抗剤を投与することを含む、個体におけるＭＥＫ１拮抗剤に対して耐性を有する癌の治療方法が提供される。
【００４０】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤及び有効量のＭＥＫ１拮抗剤を投与することを含む、ＭＥＫ１拮抗剤に対する感受性を増加させる及び／または感受性を回復させる方法が提供される。
【００４１】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ１拮抗剤を同時に投与することを含む、個体におけるＭＥＫ１拮抗剤を含む癌治療の有効性を増大させる方法が提供される。
【００４２】
本明細書では、個体に（ａ）有効量のＭＥＫ１拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ１拮抗剤を同時に投与することを含み、ＰＩ３Ｋ拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ１拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した有効性を有する、個体における癌の治療方法が提供される。
【００４３】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＭＥＫ１拮抗剤及び（ｂ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤を同時に投与することを含む、個体におけるＭＥＫ１拮抗剤に対する癌耐性の発生を遅らせる及び／または防止する方法が提供される。
【００４４】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＭＥＫ１拮抗剤及び（ｂ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤を同時に投与することを含む、ＭＥＫ１拮抗剤に対する耐性の発生の増大した可能性を有する、癌を有する個体の治療方法が提供される。
【００４５】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＭＥＫ１拮抗剤及び（ｂ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＭＥＫ１拮抗剤に対する感受性を増大させる方法が提供される。
【００４６】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＭＥＫ１拮抗剤及び（ｂ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＭＥＫ１拮抗剤に対する感受性の期間を延ばす方法もまた提供される。
【００４７】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＭＥＫ１拮抗剤及び（ｂ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＭＥＫ１拮抗剤に対する応答の持続時間を延ばす方法が提供される。
【００４８】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）ＰＩ３Ｋ拮抗剤及び（ｂ）ＭＥＫ２拮抗剤を同時に投与することを含む、個体における癌の治療方法が提供される。いくつかの実施形態において、ＰＩ３Ｋ拮抗剤及びＭＥＫ２拮抗剤のそれぞれの量は、ＭＥＫ２拮抗剤に対する癌感受性の期間を増大させるため及び／または癌耐性の発生を遅らせるために有効である。いくつかの実施形態において、ＰＩ３Ｋ拮抗剤及びＭＥＫ２拮抗剤のそれぞれの量は、ＭＥＫ２拮抗剤を含む癌治療の有効性を増大させるために有効である。例えば、いくつかの実施形態において、ＰＩ３Ｋ拮抗剤及びＭＥＫ２拮抗剤のそれぞれの量は、ＰＩ３Ｋ拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ２拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した有効性のために有効である。いくつかの実施形態において、ＰＩ３Ｋ拮抗剤及びＭＥＫ２拮抗剤のそれぞれの量は、ＰＩ３Ｋ拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ２拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した寛解（例えば、完全寛解）のために有効である。いくつかの実施形態において、ＰＩ３Ｋ拮抗剤及びＭＥＫ２拮抗剤のそれぞれの量は、癌感受性を増大させるため及び／またはＭＥＫ２拮抗剤に対する感受性を回復させるために有効である。
【００４９】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤及び有効量のＭＥＫ２拮抗剤を投与することを含む、個体におけるＭＥＫ２拮抗剤での治療に対して耐性を有する癌細胞の治療方法もまた提供される。加えて、本明細書では、個体に有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤及び有効量のＭＥＫ２拮抗剤を投与することを含む、個体におけるＭＥＫ２拮抗剤に対して耐性を有する癌の治療方法が提供される。
【００５０】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤及び有効量のＭＥＫ２拮抗剤を投与することを含む、ＭＥＫ２拮抗剤に対する感受性を増加させる及び／または感受性を回復させる方法が提供される。
【００５１】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ２拮抗剤を同時に投与することを含む、個体におけるＭＥＫ２拮抗剤を含む癌治療の有効性を増大させる方法が提供される。
【００５２】
本明細書では、個体に（ａ）有効量のＭＥＫ２拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ２拮抗剤を同時に投与することを含み、ＰＩ３Ｋ拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ２拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した有効性を有する、個体における癌の治療方法が提供される。
【００５３】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＭＥＫ２拮抗剤及び（ｂ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤を同時に投与することを含む、個体におけるＭＥＫ２拮抗剤に対する癌耐性の発生を遅らせる及び／または防止する方法が提供される。
【００５４】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＭＥＫ２拮抗剤及び（ｂ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤を同時に投与することを含む、ＭＥＫ２拮抗剤に対する耐性の発生の増大した可能性を有する、癌を有する個体の治療方法が提供される。
【００５５】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＭＥＫ２拮抗剤及び（ｂ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＭＥＫ２拮抗剤に対する感受性を増大させる方法が提供される。
【００５６】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＭＥＫ２拮抗剤及び（ｂ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＭＥＫ２拮抗剤に対する感受性の期間を延ばす方法もまた提供される。
【００５７】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＭＥＫ２拮抗剤及び（ｂ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＭＥＫ２拮抗剤に対する応答の持続時間を延ばす方法が提供される。
【００５８】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）ＰＩ３Ｋ拮抗剤及び（ｂ）ＭＥＫ１／２拮抗剤を同時に投与することを含む、個体における癌の治療方法が提供される。いくつかの実施形態において、ＰＩ３Ｋ拮抗剤及びＭＥＫ１／２拮抗剤のそれぞれの量は、ＭＥＫ１／２拮抗剤に対する癌感受性の期間を増大させるため及び／または癌耐性の発生を遅らせるために有効である。いくつかの実施形態において、ＰＩ３Ｋ拮抗剤及びＭＥＫ１／２拮抗剤のそれぞれの量は、ＭＥＫ１／２拮抗剤を含む癌治療の有効性を増大させるために有効である。例えば、いくつかの実施形態において、ＰＩ３Ｋ拮抗剤及びＭＥＫ１／２拮抗剤のそれぞれの量は、ＰＩ３Ｋ拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ１／２拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した有効性のために有効である。いくつかの実施形態において、ＰＩ３Ｋ拮抗剤及びＭＥＫ１／２拮抗剤のそれぞれの量は、ＰＩ３Ｋ拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ１／２拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した寛解（例えば、完全寛解）のために有効である。いくつかの実施形態において、ＰＩ３Ｋ拮抗剤及びＭＥＫ１／２拮抗剤のそれぞれの量は、癌感受性を増大させるため及び／またはＭＥＫ１／２拮抗剤に対する感受性を回復させるために有効である。
【００５９】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤及び有効量のＭＥＫ１／２拮抗剤を投与することを含む、個体におけるＭＥＫ１／２拮抗剤での治療に対して耐性を有する癌細胞の治療方法もまた提供される。加えて、本明細書では、個体に有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤及び有効量のＭＥＫ１／２拮抗剤を投与することを含む、個体におけるＭＥＫ１／２拮抗剤に対して耐性を有する癌の治療方法が提供される。
【００６０】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤及び有効量のＭＥＫ１／２拮抗剤を投与することを含む、ＭＥＫ１／２拮抗剤に対する感受性を増大させる及び／または感受性を回復させる方法が提供される。
【００６１】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ１／２拮抗剤を同時に投与することを含む、個体におけるＭＥＫ１／２拮抗剤を含む癌治療の有効性を増大させる方法が提供される。
【００６２】
本明細書では、個体に（ａ）有効量のＭＥＫ１／２拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ１／２拮抗剤を同時に投与することを含み、ＰＩ３Ｋ拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ１／２拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した有効性を有する、個体における癌の治療方法が提供される。
【００６３】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＭＥＫ１／２拮抗剤及び（ｂ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤を同時に投与することを含む、個体におけるＭＥＫ１／２拮抗剤に対する癌耐性の発生を遅らせる及び／または防止する方法が提供される。
【００６４】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＭＥＫ１／２拮抗剤及び（ｂ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤を同時に投与することを含む、ＭＥＫ１／２拮抗剤に対する耐性の発生の増大した可能性を有する、癌を有する個体の治療方法が提供される。
【００６５】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＭＥＫ１／２拮抗剤及び（ｂ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＭＥＫ１／２拮抗剤に対する感受性を増大させる方法が提供される。
【００６６】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＭＥＫ１／２拮抗剤及び（ｂ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＭＥＫ１／２拮抗剤に対する感受性の期間を延ばす方法もまた提供される。
【００６７】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＭＥＫ１／２拮抗剤及び（ｂ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＭＥＫ１／２拮抗剤に対する応答の持続時間を延ばす方法が提供される。
【００６８】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）ＰＩ３Ｋ拮抗剤及び（ｂ）コビメチニブを同時に投与することを含む、個体における癌の治療方法が提供される。いくつかの実施形態において、ＰＩ３Ｋ拮抗剤及びコビメチニブのそれぞれの量は、コビメチニブに対する癌感受性の期間を増大させるため及び／または癌耐性の発生を遅らせるために有効である。いくつかの実施形態において、ＰＩ３Ｋ拮抗剤及びコビメチニブのそれぞれの量は、コビメチニブを含む癌治療の有効性を増大させるために有効である。例えば、いくつかの実施形態において、ＰＩ３Ｋ拮抗剤及びコビメチニブのそれぞれの量は、ＰＩ３Ｋ拮抗剤無しで（不在下で）有効量のコビメチニブを投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した有効性のために有効である。いくつかの実施形態において、ＰＩ３Ｋ拮抗剤及びコビメチニブのそれぞれの量は、ＰＩ３Ｋ拮抗剤無しで（不在下で）有効量のコビメチニブを投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した寛解（例えば、完全寛解）のために有効である。いくつかの実施形態において、ＰＩ３Ｋ拮抗剤及びコビメチニブのそれぞれの量は、癌感受性を増大させるため及び／またはコビメチニブに対する感受性を回復させるために有効である。
【００６９】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤及び有効量のコビメチニブを投与することを含む、個体におけるコビメチニブでの治療に対して耐性を有する癌細胞の治療方法もまた提供される。加えて、本明細書では、個体に有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤及び有効量のコビメチニブを投与することを含む、個体におけるコビメチニブに対して耐性を有する癌の治療方法が提供される。
【００７０】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤及び有効量のコビメチニブを投与することを含む、コビメチニブに対する感受性を増加させる及び／または感受性を回復させる方法が提供される。
【００７１】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤及び（ｂ）有効量のコビメチニブを同時に投与することを含む、個体におけるコビメチニブを含む癌治療の有効性を増大させる方法が提供される。
【００７２】
本明細書では、個体に（ａ）有効量のコビメチニブ及び（ｂ）有効量のコビメチニブを同時に投与することを含み、ＰＩ３Ｋ拮抗剤無しで（不在下で）有効量のコビメチニブを投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した有効性を有する、個体における癌の治療方法が提供される。
【００７３】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のコビメチニブ及び（ｂ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤を同時に投与することを含む、個体におけるコビメチニブに対する癌耐性の発生を遅らせる及び／または防止する方法が提供される。
【００７４】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のコビメチニブ及び（ｂ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤を同時に投与することを含む、コビメチニブに対する耐性の発生の増大した可能性を有する、癌を有する個体の治療方法が提供される。
【００７５】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のコビメチニブ及び（ｂ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるコビメチニブに対する感受性を増大させる方法が提供される。
【００７６】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のコビメチニブ及び（ｂ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるコビメチニブに対する感受性の期間を延ばす方法もまた提供される。
【００７７】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のコビメチニブ及び（ｂ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるコビメチニブに対する応答の持続時間を延ばす方法が提供される。
【００７８】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）ＦＧＦＲ拮抗剤及び（ｂ）ＭＥＫ１拮抗剤を同時に投与することを含む、個体における癌の治療方法が提供される。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ拮抗剤及びＭＥＫ１拮抗剤のそれぞれの量は、ＭＥＫ１拮抗剤に対する癌感受性の期間を増大させるため及び／または癌耐性の発生を遅らせるために有効である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ拮抗剤及びＭＥＫ１拮抗剤のそれぞれの量は、ＭＥＫ１拮抗剤を含む癌治療の有効性を増大させるために有効である。例えば、いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ拮抗剤及びＭＥＫ１拮抗剤のそれぞれの量は、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ１拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した有効性のために有効である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ拮抗剤及びＭＥＫ１拮抗剤のそれぞれの量は、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ１拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した寛解（例えば、完全寛解）のために有効である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ拮抗剤及びＭＥＫ１拮抗剤のそれぞれの量は、癌感受性を増大させるため及び／またはＭＥＫ１拮抗剤に対する感受性を回復させるために有効である。
【００７９】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に有効量のＦＧＦＲ拮抗剤及び有効量のＭＥＫ１拮抗剤を投与することを含む、個体におけるＭＥＫ１拮抗剤での治療に対して耐性を有する癌細胞の治療方法もまた提供される。加えて、本明細書では、個体に有効量のＦＧＦＲ拮抗剤及び有効量のＭＥＫ１拮抗剤を投与することを含む、個体におけるＭＥＫ１拮抗剤に対して耐性を有する癌の治療方法が提供される。
【００８０】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に有効量のＦＧＦＲ拮抗剤及び有効量のＭＥＫ１拮抗剤を投与することを含む、ＭＥＫ１拮抗剤に対する感受性を増大させる及び／または感受性を回復させる方法が提供される。
【００８１】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲ拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ１拮抗剤を同時に投与することを含む、個体におけるＭＥＫ１拮抗剤を含む癌治療の有効性を増大させる方法が提供される。
【００８２】
本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ１拮抗剤を同時に投与することを含み、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ１拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した有効性を有する、個体における癌の治療方法が提供される。
【００８３】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ１拮抗剤を同時に投与することを含む、個体におけるＭＥＫ１拮抗剤に対する癌耐性の発生を、遅らせる及び／または防止する方法が提供される。
【００８４】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ１拮抗剤を同時に投与することを含む、ＭＥＫ１拮抗剤に対する耐性の発生の増大した可能性を有する、癌を有する個体の治療方法が提供される。
【００８５】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ１拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＭＥＫ１拮抗剤に対する感受性を増大させる方法が提供される。
【００８６】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ１拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＭＥＫ１拮抗剤に対する感受性の期間を延ばす方法もまた提供される。
【００８７】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ１拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＭＥＫ１拮抗剤に対する応答の持続時間を延ばす方法が提供される。
【００８８】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）ＦＧＦＲ拮抗剤及び（ｂ）ＭＥＫ２拮抗剤を同時に投与することを含む、個体における癌の治療方法が提供される。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ拮抗剤及びＭＥＫ２拮抗剤のそれぞれの量は、ＭＥＫ２拮抗剤に対する癌感受性の期間を増大させるため及び／または癌耐性の発生を遅らせるために有効である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ拮抗剤及びＭＥＫ２拮抗剤のそれぞれの量は、ＭＥＫ２拮抗剤を含む癌治療の有効性を増大させるために有効である。例えば、いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ拮抗剤及びＭＥＫ２拮抗剤のそれぞれの量は、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ２拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した有効性のために有効である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ拮抗剤及びＭＥＫ２拮抗剤のそれぞれの量は、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ２拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した寛解（例えば、完全寛解）のために有効である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ拮抗剤及びＭＥＫ２拮抗剤のそれぞれの量は、癌感受性を増大させるため及び／またはＭＥＫ２拮抗剤に対する感受性を回復させるために有効である。
【００８９】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に有効量のＦＧＦＲ拮抗剤及び有効量のＭＥＫ２拮抗剤を投与することを含む、個体におけるＭＥＫ２拮抗剤での治療に対して耐性を有する癌細胞の治療方法もまた提供される。加えて、本明細書では、個体に有効量のＦＧＦＲ拮抗剤及び有効量のＭＥＫ２拮抗剤を投与することを含む、個体におけるＭＥＫ２拮抗剤に対して耐性を有する癌の治療方法が提供される。
【００９０】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に有効量のＦＧＦＲ拮抗剤及び有効量のＭＥＫ２拮抗剤を投与することを含む、ＭＥＫ２拮抗剤に対する感受性を増大させる及び／または感受性を回復させる方法が提供される。
【００９１】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲ拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ２拮抗剤を同時に投与することを含む、個体におけるＭＥＫ２拮抗剤を含む癌治療の有効性を増大させる方法が提供される。
【００９２】
本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ２拮抗剤を同時に投与することを含み、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ２拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した有効性を有する、個体における癌の治療方法が提供される。
【００９３】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ２拮抗剤を同時に投与することを含む、個体におけるＭＥＫ２拮抗剤に対する癌耐性の発生を、遅らせる及び／または防止する方法が提供される。
【００９４】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ２拮抗剤を同時に投与することを含む、ＭＥＫ２拮抗剤に対する耐性の発生の増大した可能性を有する、癌を有する個体の治療方法が提供される。
【００９５】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ２拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＭＥＫ２拮抗剤に対する感受性を増大させる方法が提供される。
【００９６】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ２拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＭＥＫ２拮抗剤に対する感受性の期間を延ばす方法もまた提供される。
【００９７】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ２拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＭＥＫ２拮抗剤に対する応答の持続時間を延ばす方法が提供される。
【００９８】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）ＦＧＦＲ拮抗剤及び（ｂ）ＭＥＫ１／２（すなわち、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２の阻害剤）拮抗剤を同時に投与することを含む、個体における癌の治療方法が提供される。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ拮抗剤及びＭＥＫ１／２（すなわち、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２の阻害剤）拮抗剤のそれぞれの量は、ＭＥＫ１／２（すなわち、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２の阻害剤）拮抗剤に対する癌感受性の期間を増大させるため及び／または癌耐性の発生を遅らせるために有効である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ拮抗剤及びＭＥＫ１／２（すなわち、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２の阻害剤）拮抗剤のそれぞれの量は、ＭＥＫ１／２（すなわち、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２の阻害剤）拮抗剤を含む癌治療の有効性を増大させるために有効である。例えば、いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ拮抗剤及びＭＥＫ１／２（すなわち、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２の阻害剤）拮抗剤のそれぞれの量は、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ１／２（すなわち、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２の阻害剤）拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した有効性のために有効である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ拮抗剤及びＭＥＫ１／２（すなわち、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２の阻害剤）拮抗剤のそれぞれの量は、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ１／２（すなわち、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２の阻害剤）拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した寛解（例えば、完全寛解）のために有効である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ拮抗剤及びＭＥＫ１／２（すなわち、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２の阻害剤）拮抗剤のそれぞれの量は、癌感受性を増大させるため及び／またはＭＥＫ１／２（すなわち、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２の阻害剤）拮抗剤に対する感受性を回復させるために有効である。
【００９９】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に有効量のＦＧＦＲ拮抗剤及び有効量のＭＥＫ１／２（すなわち、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２の阻害剤）拮抗剤を投与することを含む、個体におけるＭＥＫ１／２（すなわち、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２の阻害剤）拮抗剤での治療に対して耐性を有する癌細胞の治療方法もまた提供される。加えて、本明細書では、個体に有効量のＦＧＦＲ拮抗剤及び有効量のＭＥＫ１／２（すなわち、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２の阻害剤）拮抗剤を投与することを含む、個体におけるＭＥＫ１／２（すなわち、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２の阻害剤）拮抗剤に対して耐性を有する癌の治療方法が提供される。
【０１００】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に有効量のＦＧＦＲ拮抗剤及び有効量のＭＥＫ１／２（すなわち、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２の阻害剤）拮抗剤を投与することを含む、ＭＥＫ１／２（すなわち、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２の阻害剤）拮抗剤に対する感受性を増大させる及び／または感受性を回復させる方法が提供される。
【０１０１】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲ拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ１／２（すなわち、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２の阻害剤）拮抗剤を同時に投与することを含む、個体におけるＭＥＫ１／２（すなわち、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２の阻害剤）拮抗剤を含む癌治療の有効性を増大させる方法が提供される。
【０１０２】
本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ１／２（すなわち、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２の阻害剤）拮抗剤を同時に投与することを含み、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ１／２（すなわち、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２の阻害剤）拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した有効性を有する、個体における癌の治療方法が提供される。
【０１０３】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ１／２（すなわち、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２の阻害剤）拮抗剤を同時に投与することを含む、個体におけるＭＥＫ１／２（すなわち、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２の阻害剤）拮抗剤に対する癌耐性の発生を、遅らせる及び／または防止する方法が提供される。
【０１０４】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ１／２（すなわち、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２の阻害剤）拮抗剤を同時に投与することを含む、ＭＥＫ１／２（すなわち、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２の阻害剤）拮抗剤に対する耐性の発生の増大した可能性を有する、癌を有する個体の治療方法が提供される。
【０１０５】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ１／２（すなわち、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２の阻害剤）拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＭＥＫ１／２（すなわち、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２の阻害剤）拮抗剤に対する感受性を増大させる方法が提供される。
【０１０６】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ１／２（すなわち、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２の阻害剤）拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＭＥＫ１／２（すなわち、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２の阻害剤）拮抗剤に対する感受性の期間を延ばす方法もまた提供される。
【０１０７】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ１／２（すなわち、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２の阻害剤）拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＭＥＫ１／２（すなわち、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２の阻害剤）拮抗剤に対する応答の持続時間を延ばす方法が提供される。
【０１０８】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）ＦＧＦＲ拮抗剤及び（ｂ）コビメチニブを同時に投与することを含む、個体における癌の治療方法が提供される。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ拮抗剤及びコビメチニブのそれぞれの量は、コビメチニブに対する癌感受性の期間を増大させるため及び／または癌耐性の発生を遅らせるために有効である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ拮抗剤及びコビメチニブのそれぞれの量は、コビメチニブを含む癌治療の有効性を増大させるために有効である。例えば、いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ拮抗剤及びコビメチニブのそれぞれの量は、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤無しで（不在下で）有効量のコビメチニブを投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した有効性のために有効である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ拮抗剤及びコビメチニブのそれぞれの量は、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤無しで（不在下で）有効量のコビメチニブを投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した寛解（例えば、完全寛解）のために有効である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ拮抗剤及びコビメチニブのそれぞれの量は、癌感受性を増大させるため及び／またはコビメチニブに対する感受性を回復させるために有効である。
【０１０９】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に有効量のＦＧＦＲ拮抗剤及び有効量のコビメチニブを投与することを含む、個体におけるコビメチニブでの治療に対して耐性を有する癌細胞の治療方法もまた提供される。加えて、本明細書では、個体に有効量のＦＧＦＲ拮抗剤及び有効量のコビメチニブを投与することを含む、個体におけるコビメチニブに対して耐性を有する癌の治療方法が提供される。
【０１１０】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に有効量のＦＧＦＲ拮抗剤及び有効量のコビメチニブを投与することを含む、コビメチニブに対する感受性を増加させる及び／または感受性を回復させる方法が提供される。
【０１１１】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲ拮抗剤及び（ｂ）有効量のコビメチニブを同時に投与することを含む、個体におけるコビメチニブを含む癌治療の有効性を増大させる方法が提供される。
【０１１２】
本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のコビメチニブを同時に投与することを含み、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤無しで（不在下で）有効量のコビメチニブを投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した有効性を有する、個体における癌の治療方法が提供される。
【０１１３】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のコビメチニブ拮抗剤を同時に投与することを含む、個体におけるコビメチニブに対する癌耐性の発生を、遅らせる及び／または防止する方法が提供される。
【０１１４】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のコビメチニブを同時に投与することを含む、コビメチニブに対する耐性の発生の増大した可能性を有する、癌を有する個体の治療方法が提供される。
【０１１５】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のコビメチニブを同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるコビメチニブに対する感受性を増大させる方法が提供される。
【０１１６】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のコビメチニブを同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるコビメチニブに対する感受性の期間を延ばす方法もまた提供される。
【０１１７】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のコビメチニブ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるコビメチニブに対する応答の持続時間を延ばす方法が提供される。
【０１１８】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）ＰＩ３Ｋ拮抗剤、（ｂ）ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、及び（ｃ）ＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、個体における癌の治療方法が提供される。いくつかの実施形態において、ＰＩ３Ｋ拮抗剤、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、及びＭＥＫ拮抗剤のそれぞれの量は、ＭＥＫ拮抗剤に対する癌感受性の期間を増大させるため及び／または癌耐性の発生を遅らせるために有効である。いくつかの実施形態において、ＰＩ３Ｋ拮抗剤、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、及びＭＥＫ拮抗剤のそれぞれの量は、ＭＥＫ拮抗剤を含む癌治療の有効性を増大させるために有効である。例えば、いくつかの実施形態において、ＰＩ３Ｋ拮抗剤、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、及びＭＥＫ拮抗剤のそれぞれの量は、ＰＩ３Ｋ拮抗剤及び／またはＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した有効性のために有効である。いくつかの実施形態において、ＰＩ３Ｋ拮抗剤、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、及びＭＥＫ拮抗剤のそれぞれの量は、ＰＩ３Ｋ拮抗剤及び／またはＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した寛解（例えば、完全寛解）のために有効である。いくつかの実施形態において、ＰＩ３Ｋ拮抗剤、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、及びＭＥＫ拮抗剤のそれぞれの量は、ＭＥＫ拮抗剤に対する癌感受性を増大させるため及び／または感受性を回復させるために有効である。
【０１１９】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、及びＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む、個体におけるＭＥＫ拮抗剤での治療に対して耐性を有する癌細胞の治療方法もまた提供される。加えて本明細書では、個体に有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、及びＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む、個体におけるＭＥＫ拮抗剤に対して耐性を有する癌の治療方法が提供される。
【０１２０】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、及びＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む、ＭＥＫ拮抗剤に対する感受性を増大させる及び／または感受性を回復させる方法が提供される。
【０１２１】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤、（ｂ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、及び（ｃ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、個体におけるＭＥＫ２拮抗剤を含む癌治療の有効性を増大させる方法が提供される。
【０１２２】
本明細書では、個体に（ａ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤、（ｂ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、及び（ｃ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含み、ＰＩ３Ｋ拮抗剤及び／またはＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した有効性を有する、個体における癌の治療方法が提供される。
【０１２３】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤、（ｂ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、及び（ｃ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、個体におけるＭＥＫ拮抗剤に対する癌耐性の発生を遅らせる及び／または防止する方法が提供される。
【０１２４】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤、（ｂ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、及び（ｃ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、ＭＥＫ拮抗剤に対する耐性の発生の増大した可能性を有する、癌を有する個体の治療方法が提供される。
【０１２５】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤、（ｂ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、及び（ｃ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＭＥＫ拮抗剤に対する感受性を増大させる方法が提供される。
【０１２６】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤、（ｂ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、及び（ｃ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＭＥＫ拮抗剤に対する感受性の期間を延ばす方法もまた提供される。
【０１２７】
特定の実施形態において、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤、（ｂ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、及び（ｃ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＭＥＫ拮抗剤に対する応答の持続時間を延ばす方法が提供される。
【０１２８】
上で具体化した方法のうちのいずれかにおいて、ＭＥＫ阻害剤は、ＭＥＫ１、ＭＥＫ２、またはＭＥＫ１／２（すなわち、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２の阻害剤）阻害剤である。上で具体化した方法のうちのいずれかにおいて、ＭＥＫ阻害剤はＧＤＣ−０７９３（コビメチニブ）である。上で具体化した方法のうちのいずれかにおいて、ＰＩ３Ｋ阻害剤はＧＤＣ−００３２である。上で具体化した方法のうちのいずれかにおいて、ＦＧＦＲシグナル伝達の阻害剤は汎阻害剤（例えば、ＢＧＪ３９８）またはＦＧＦ１特定の拮抗剤である。
【０１２９】
いくつかの実施形態において、本方法は第３または第４の化学療法剤を投与することを含む。ある特定の実施形態において、第３または第４の化学療法剤はＢ−ｒａｆ拮抗剤である。ある特定の実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤は、ソラフェニブ、ＰＬＸ４７２０、ＰＬＸ−３６０３、ＧＳＫ２１１８４３６、ＧＤＣ−０８７９、Ｎ−（３−（５−（４−クロロフェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−カルボニル）−２，４−ジフルオロフェニル）プロパン−１−スルホンアミド、ベムラフェニブ、ＧＳＫ２１１８４３６、ＲＡＦ２６５（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＸＬ２８１、ＡＲＱ７３６、ＢＡＹ７３−４５０６のうちの１つ以上である。更なる実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤はベムラフェニブである。更なる実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤はＧＳＫ２１１８４３６である。Ｂ−ｒａｆ拮抗剤はＢ−ｒａｆ  Ｖ６００Ｅに対して選択的であり得る。いずれかの方法における特定の実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤はベムラフェニブ（Ｄａｉｉｃｈｉ  Ｓａｎｋｙｏ）である。
【０１３０】
いずれかの方法における特定の実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、抗体阻害剤、低分子阻害剤、結合ポリペプチド阻害剤、及び／またはポリヌクレオチド拮抗剤である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、結合ポリペプチド阻害剤である。いくつかの実施形態において、結合ポリペプチド阻害剤は、Ｆｃドメインに連結したＦＧＦＲの細胞外ドメインの領域（例えば、免疫グロブリンヒンジ及びＦｃドメインに連結したＦＧＦＲの細胞外ドメインの領域）を含む。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、低分子である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、抗体である。
【０１３１】
特定の実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲｂ、ＦＧＦＲｃ、ＦＧＦ１、ＦＧＦ２、ＦＧＦ３、ＦＧＦ４、ＦＧＦ５、ＦＧＦ６、及びＦＧＦ１０のうちの２つ以上と結合及び／または阻害する。いくつかの実施形態において、低分子は、Ｎ−［２−［［４−（ジエチルアミノ）ブチル］アミノ］−６−（３，５−ジメトキシフェネチル）ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル］−Ｎ’−（１，１−ジメチルエチル）−尿素またはその薬学的に許容される塩である。いくつかの実施形態において、低分子は、ＢＧＪ３９８（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＡＺＤ４５４７（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、及び／またはＦＦ２８４（Ｃｈｕｇａｉ／Ｄｅｂｉｏｐｈａｒｍ（Ｄｅｂｉｏ１３４７））である。
【０１３２】
特定の実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、抗ＦＧＦＲ抗体である。
【０１３３】
いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲのみと結合及び／または阻害する。
【０１３４】
いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、抗ＦＧＦＲ−ＩＩＩｂ抗体である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、抗ＦＧＦＲ−ＩＩＩｃ抗体である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、１つを超えるＦＧＦＲポリペプチドと結合することが可能な抗ＦＧＦＲ抗体である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲと特異的に結合し任意の他のＦＧＦＲポリペプチドとは結合しない、抗ＦＧＦＲ抗体である。
【０１３５】
ＭＥＫ拮抗剤（複数可）、任意の第３または第４の化学療法剤、及びＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、同時に投与され得る。ＭＥＫ拮抗剤（複数可）、任意の第３または第４の化学療法剤、及びＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、経時的に投与され得る。いくつかの実施形態において、ＭＥＫ拮抗剤は、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤の前に投与される。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、ＭＥＫ拮抗剤の前に投与される。
【０１３６】
いずれかの方法におけるいくつかの実施形態において、癌は肺癌である。いくつかの実施形態において、肺癌はＮＳＣＬＣである。いくつかの実施形態において、癌は乳癌である。いくつかの実施形態において、癌はＨＥＲ２＋乳癌である。いくつかの実施形態において、癌は上皮間葉移行を経ている。
【０１３７】
いずれかの方法におけるいくつかの実施形態において、癌は肺癌である。いくつかの実施形態において、肺癌はＮＳＣＬＣである。いくつかの実施形態において、肺癌は乳癌である。いくつかの実施形態において、肺癌はＨＥＲ２＋乳癌である。いくつかの実施形態において、癌は上皮間葉移行を経ている。
【図面の簡単な説明】
【０１３８】
【図１Ａ】腫瘍細胞及び／または腫瘍内微小環境により分泌される因子が、細胞表面受容体の活性化を通じて薬剤耐性の一因となる。Ａ、１０個の黒色腫細胞株にわたる４４７個の分泌因子のスクリーニングにより、ＦＧＦ、ＨＧＦ、ＮＲＧ１、及びＥＧＦが、Ｂ−ｒａｆ及びＭＥＫ拮抗剤に対する耐性の一因となることが明らかになった。Ｂ、黒色腫細胞株で示されるように、ＦＧＦ２、ＨＧＦ、及びＮＲＧ１は、Ｂ−ｒａｆ−及びＭＥＫ拮抗剤に対する耐性から腫瘍細胞を最も幅広くかつ強力に救出した（Ｒ＝５０〜１００％救出、ＰＲ＝２５〜５０％救出）。Ｃ、Ｍｅｔ、ＦＧＦＲ、及びＥＲＢＢ受容体を標的にする低分子阻害剤が、リガンド媒介の耐性が同族の受容体に対して特異的であることを示す。Ｄ、ＰＬＸ４０３２に対する耐性を促進する分泌された成長因子は、ＭＡＰＫ及びＰＩ３Ｋ経路を再活性化させる。ＦＧＦ２によるＭＡＰＫの活性化、ＨＧＦによるＭＡＰＫ及びＡＫＴの活性化、ならびにＮＲＧ１及びＳＣＦによるＡＫＴの活性化が、ＰＬＸ４０３２の存在下の６２４ＭＥＬ細胞において示される。治療は、５μＭのＰＬＸ４０３２で２４時間、及び５０ｎｇ／ｍＬのＦＧＦ２、ＨＧＦ、ＮＲＧＢ１、またはＳＣＦで１０分間であった。
【図１Ｂ】腫瘍細胞及び／または腫瘍内微小環境により分泌される因子が、細胞表面受容体の活性化を通じて薬剤耐性の一因となる。Ａ、１０個の黒色腫細胞株にわたる４４７個の分泌因子のスクリーニングにより、ＦＧＦ、ＨＧＦ、ＮＲＧ１、及びＥＧＦが、Ｂ−ｒａｆ及びＭＥＫ拮抗剤に対する耐性の一因となることが明らかになった。Ｂ、黒色腫細胞株で示されるように、ＦＧＦ２、ＨＧＦ、及びＮＲＧ１は、Ｂ−ｒａｆ−及びＭＥＫ拮抗剤に対する耐性から腫瘍細胞を最も幅広くかつ強力に救出した（Ｒ＝５０〜１００％救出、ＰＲ＝２５〜５０％救出）。Ｃ、Ｍｅｔ、ＦＧＦＲ、及びＥＲＢＢ受容体を標的にする低分子阻害剤が、リガンド媒介の耐性が同族の受容体に対して特異的であることを示す。Ｄ、ＰＬＸ４０３２に対する耐性を促進する分泌された成長因子は、ＭＡＰＫ及びＰＩ３Ｋ経路を再活性化させる。ＦＧＦ２によるＭＡＰＫの活性化、ＨＧＦによるＭＡＰＫ及びＡＫＴの活性化、ならびにＮＲＧ１及びＳＣＦによるＡＫＴの活性化が、ＰＬＸ４０３２の存在下の６２４ＭＥＬ細胞において示される。治療は、５μＭのＰＬＸ４０３２で２４時間、及び５０ｎｇ／ｍＬのＦＧＦ２、ＨＧＦ、ＮＲＧＢ１、またはＳＣＦで１０分間であった。
【図１Ｃ】腫瘍細胞及び／または腫瘍内微小環境により分泌される因子が、細胞表面受容体の活性化を通じて薬剤耐性の一因となる。Ａ、１０個の黒色腫細胞株にわたる４４７個の分泌因子のスクリーニングにより、ＦＧＦ、ＨＧＦ、ＮＲＧ１、及びＥＧＦが、Ｂ−ｒａｆ及びＭＥＫ拮抗剤に対する耐性の一因となることが明らかになった。Ｂ、黒色腫細胞株で示されるように、ＦＧＦ２、ＨＧＦ、及びＮＲＧ１は、Ｂ−ｒａｆ−及びＭＥＫ拮抗剤に対する耐性から腫瘍細胞を最も幅広くかつ強力に救出した（Ｒ＝５０〜１００％救出、ＰＲ＝２５〜５０％救出）。Ｃ、Ｍｅｔ、ＦＧＦＲ、及びＥＲＢＢ受容体を標的にする低分子阻害剤が、リガンド媒介の耐性が同族の受容体に対して特異的であることを示す。Ｄ、ＰＬＸ４０３２に対する耐性を促進する分泌された成長因子は、ＭＡＰＫ及びＰＩ３Ｋ経路を再活性化させる。ＦＧＦ２によるＭＡＰＫの活性化、ＨＧＦによるＭＡＰＫ及びＡＫＴの活性化、ならびにＮＲＧ１及びＳＣＦによるＡＫＴの活性化が、ＰＬＸ４０３２の存在下の６２４ＭＥＬ細胞において示される。治療は、５μＭのＰＬＸ４０３２で２４時間、及び５０ｎｇ／ｍＬのＦＧＦ２、ＨＧＦ、ＮＲＧＢ１、またはＳＣＦで１０分間であった。
【図１Ｄ】腫瘍細胞及び／または腫瘍内微小環境により分泌される因子が、細胞表面受容体の活性化を通じて薬剤耐性の一因となる。Ａ、１０個の黒色腫細胞株にわたる４４７個の分泌因子のスクリーニングにより、ＦＧＦ、ＨＧＦ、ＮＲＧ１、及びＥＧＦが、Ｂ−ｒａｆ及びＭＥＫ拮抗剤に対する耐性の一因となることが明らかになった。Ｂ、黒色腫細胞株で示されるように、ＦＧＦ２、ＨＧＦ、及びＮＲＧ１は、Ｂ−ｒａｆ−及びＭＥＫ拮抗剤に対する耐性から腫瘍細胞を最も幅広くかつ強力に救出した（Ｒ＝５０〜１００％救出、ＰＲ＝２５〜５０％救出）。Ｃ、Ｍｅｔ、ＦＧＦＲ、及びＥＲＢＢ受容体を標的にする低分子阻害剤が、リガンド媒介の耐性が同族の受容体に対して特異的であることを示す。Ｄ、ＰＬＸ４０３２に対する耐性を促進する分泌された成長因子は、ＭＡＰＫ及びＰＩ３Ｋ経路を再活性化させる。ＦＧＦ２によるＭＡＰＫの活性化、ＨＧＦによるＭＡＰＫ及びＡＫＴの活性化、ならびにＮＲＧ１及びＳＣＦによるＡＫＴの活性化が、ＰＬＸ４０３２の存在下の６２４ＭＥＬ細胞において示される。治療は、５μＭのＰＬＸ４０３２で２４時間、及び５０ｎｇ／ｍＬのＦＧＦ２、ＨＧＦ、ＮＲＧＢ１、またはＳＣＦで１０分間であった。
【図２Ａ】Ｂ−ｒａｆの下流のＭＥＫ／ＥＲＫの再活性化が、Ｂ−ｒａｆ−突然変異体黒色腫における耐性の中心的機構である。Ａ、免疫ブロットにより示されるように、ＦＧＦ２−媒介の耐性にはＭＡＰＫシグナル伝達が必要とされる。ＭＡＰＫシグナル伝達の再活性化は、ＦＧＦ２媒介の救出が、ＰＬＸ４０３２（ベムラフェニブ）の存在下でＭＥＫ及びＥＲＫを活性化させる免疫ブロットで示されるように、ＲＴＫ媒介の耐性の共通の特徴である。Ｂ、ＲＡＦ１（Ｃ−ｒａｆ）の活性化を示す免疫ブロットは、更なるＲＡＦ−ファミリーメンバーがＭＡＰＫ再活性化を媒介し得ることを示唆する。Ｃ、合成致死性の化学的スクリーニングが、１２個の獲得耐性黒色腫細胞株におけるＰＬＸ４０３２に対する耐性を媒介するシグナル伝達経路を同定するために利用された。表は、ＭＥＫ及びＥＲＫの阻害剤で一緒に処理したときの、ＰＬＸ４０３２への感受性における変化を示し、Ｂ−ｒａｆの下流の経路の再活性化を示す。Ｄ、特定の細胞株への、図２Ｃに示される合成致死性の化学的スクリーニングの例である。
【図２Ｂ】Ｂ−ｒａｆの下流のＭＥＫ／ＥＲＫの再活性化が、Ｂ−ｒａｆ−突然変異体黒色腫における耐性の中心的機構である。Ａ、免疫ブロットにより示されるように、ＦＧＦ２−媒介の耐性にはＭＡＰＫシグナル伝達が必要とされる。ＭＡＰＫシグナル伝達の再活性化は、ＦＧＦ２媒介の救出が、ＰＬＸ４０３２（ベムラフェニブ）の存在下でＭＥＫ及びＥＲＫを活性化させる免疫ブロットで示されるように、ＲＴＫ媒介の耐性の共通の特徴である。Ｂ、ＲＡＦ１（Ｃ−ｒａｆ）の活性化を示す免疫ブロットは、更なるＲＡＦ−ファミリーメンバーがＭＡＰＫ再活性化を媒介し得ることを示唆する。Ｃ、合成致死性の化学的スクリーニングが、１２個の獲得耐性黒色腫細胞株におけるＰＬＸ４０３２に対する耐性を媒介するシグナル伝達経路を同定するために利用された。表は、ＭＥＫ及びＥＲＫの阻害剤で一緒に処理したときの、ＰＬＸ４０３２への感受性における変化を示し、Ｂ−ｒａｆの下流の経路の再活性化を示す。Ｄ、特定の細胞株への、図２Ｃに示される合成致死性の化学的スクリーニングの例である。
【図２Ｃ】Ｂ−ｒａｆの下流のＭＥＫ／ＥＲＫの再活性化が、Ｂ−ｒａｆ−突然変異体黒色腫における耐性の中心的機構である。Ａ、免疫ブロットにより示されるように、ＦＧＦ２−媒介の耐性にはＭＡＰＫシグナル伝達が必要とされる。ＭＡＰＫシグナル伝達の再活性化は、ＦＧＦ２媒介の救出が、ＰＬＸ４０３２（ベムラフェニブ）の存在下でＭＥＫ及びＥＲＫを活性化させる免疫ブロットで示されるように、ＲＴＫ媒介の耐性の共通の特徴である。Ｂ、ＲＡＦ１（Ｃ−ｒａｆ）の活性化を示す免疫ブロットは、更なるＲＡＦ−ファミリーメンバーがＭＡＰＫ再活性化を媒介し得ることを示唆する。Ｃ、合成致死性の化学的スクリーニングが、１２個の獲得耐性黒色腫細胞株におけるＰＬＸ４０３２に対する耐性を媒介するシグナル伝達経路を同定するために利用された。表は、ＭＥＫ及びＥＲＫの阻害剤で一緒に処理したときの、ＰＬＸ４０３２への感受性における変化を示し、Ｂ−ｒａｆの下流の経路の再活性化を示す。Ｄ、特定の細胞株への、図２Ｃに示される合成致死性の化学的スクリーニングの例である。
【図２Ｄ】Ｂ−ｒａｆの下流のＭＥＫ／ＥＲＫの再活性化が、Ｂ−ｒａｆ−突然変異体黒色腫における耐性の中心的機構である。Ａ、免疫ブロットにより示されるように、ＦＧＦ２−媒介の耐性にはＭＡＰＫシグナル伝達が必要とされる。ＭＡＰＫシグナル伝達の再活性化は、ＦＧＦ２媒介の救出が、ＰＬＸ４０３２（ベムラフェニブ）の存在下でＭＥＫ及びＥＲＫを活性化させる免疫ブロットで示されるように、ＲＴＫ媒介の耐性の共通の特徴である。Ｂ、ＲＡＦ１（Ｃ−ｒａｆ）の活性化を示す免疫ブロットは、更なるＲＡＦ−ファミリーメンバーがＭＡＰＫ再活性化を媒介し得ることを示唆する。Ｃ、合成致死性の化学的スクリーニングが、１２個の獲得耐性黒色腫細胞株におけるＰＬＸ４０３２に対する耐性を媒介するシグナル伝達経路を同定するために利用された。表は、ＭＥＫ及びＥＲＫの阻害剤で一緒に処理したときの、ＰＬＸ４０３２への感受性における変化を示し、Ｂ−ｒａｆの下流の経路の再活性化を示す。Ｄ、特定の細胞株への、図２Ｃに示される合成致死性の化学的スクリーニングの例である。
【図３Ａ】生存促進性の機構が、ＭＡＰＫ及びＰＩ３Ｋに関わらず、Ｂ−ＲＡＦ突然変異体黒色腫における薬剤耐性を促進する。Ａ及びＢ、低分子スクリーニングは、ＣＯＬＯ８００及びＵＡＣＣ−６２細胞におけるＳＲＣファミリーの活性化を同定した。ＳＲＣ依存性抵抗を提示する細胞株もまた、ＰＩ３Ｋシグナル伝達の阻害により再感作された。Ｃ、アポトーシス抑制経路のメンバーである、ＢＣＬ−ＸＬ及びＢＣＬ−２が同定された。グラフに示されるように、ＰＬＸ４０３２に対する獲得耐性を有するＧ−３６１細胞は、ＢＣＬ−ＸＬ及びＢＣＬ−２阻害剤に対して耐性を有したが、ＰＬＸ４０３２及びＭＥＫｉ（ＧＤＣ−０９７３）に対して耐性を有するＧ−３６１細胞株の変異体は、ＢＣＬ−ＸＬ及びＢＣＬ−２阻害剤に対して感受性を有した。
【図３Ｂ】生存促進性の機構が、ＭＡＰＫ及びＰＩ３Ｋに関わらず、Ｂ−ＲＡＦ突然変異体黒色腫における薬剤耐性を促進する。Ａ及びＢ、低分子スクリーニングは、ＣＯＬＯ８００及びＵＡＣＣ−６２細胞におけるＳＲＣファミリーの活性化を同定した。ＳＲＣ依存性抵抗を提示する細胞株もまた、ＰＩ３Ｋシグナル伝達の阻害により再感作された。Ｃ、アポトーシス抑制経路のメンバーである、ＢＣＬ−ＸＬ及びＢＣＬ−２が同定された。グラフに示されるように、ＰＬＸ４０３２に対する獲得耐性を有するＧ−３６１細胞は、ＢＣＬ−ＸＬ及びＢＣＬ−２阻害剤に対して耐性を有したが、ＰＬＸ４０３２及びＭＥＫｉ（ＧＤＣ−０９７３）に対して耐性を有するＧ−３６１細胞株の変異体は、ＢＣＬ−ＸＬ及びＢＣＬ−２阻害剤に対して感受性を有した。
【図３Ｃ】生存促進性の機構が、ＭＡＰＫ及びＰＩ３Ｋに関わらず、Ｂ−ＲＡＦ突然変異体黒色腫における薬剤耐性を促進する。Ａ及びＢ、低分子スクリーニングは、ＣＯＬＯ８００及びＵＡＣＣ−６２細胞におけるＳＲＣファミリーの活性化を同定した。ＳＲＣ依存性抵抗を提示する細胞株もまた、ＰＩ３Ｋシグナル伝達の阻害により再感作された。Ｃ、アポトーシス抑制経路のメンバーである、ＢＣＬ−ＸＬ及びＢＣＬ−２が同定された。グラフに示されるように、ＰＬＸ４０３２に対する獲得耐性を有するＧ−３６１細胞は、ＢＣＬ−ＸＬ及びＢＣＬ−２阻害剤に対して耐性を有したが、ＰＬＸ４０３２及びＭＥＫｉ（ＧＤＣ−０９７３）に対して耐性を有するＧ−３６１細胞株の変異体は、ＢＣＬ−ＸＬ及びＢＣＬ−２阻害剤に対して感受性を有した。
【図４Ａ】ＬＯＸ−ＩＭＶＩは、ＦＧＦＲ媒介機構によりＰＬＸ４０３２に対して耐性を有するようになる。Ａ、ＬＯＸ−ＩＭＶＩ  ｖｅｍＲ（ベムラフェニブ耐性細胞株）が、ＦＧＦＲ活性に依存していることが示された。Ｂ、ＦＧＦＲ阻害剤に対して耐性を有するように作られたＬＯＸ−ＩＭＶＩ  ｖｅｍＲ細胞は、ＥＧＦＲ活性に依存するようになった。Ｂ及びＣ、ＦＧＦＲ及びＥＧＦＲ阻害剤に対して耐性を有するように作られたＬＯＸ−ＩＭＶＩ  ｖｅｍＲ細胞は、分泌されたＨＧＦにおける同時の増大を伴う、ＭＥＴ及びＭＥＫ阻害剤での再感作を示した。
【図４Ｂ】ＬＯＸ−ＩＭＶＩは、ＦＧＦＲ媒介機構によりＰＬＸ４０３２に対して耐性を有するようになる。Ａ、ＬＯＸ−ＩＭＶＩ  ｖｅｍＲ（ベムラフェニブ耐性細胞株）が、ＦＧＦＲ活性に依存していることが示された。Ｂ、ＦＧＦＲ阻害剤に対して耐性を有するように作られたＬＯＸ−ＩＭＶＩ  ｖｅｍＲ細胞は、ＥＧＦＲ活性に依存するようになった。Ｂ及びＣ、ＦＧＦＲ及びＥＧＦＲ阻害剤に対して耐性を有するように作られたＬＯＸ−ＩＭＶＩ  ｖｅｍＲ細胞は、分泌されたＨＧＦにおける同時の増大を伴う、ＭＥＴ及びＭＥＫ阻害剤での再感作を示した。
【図４Ｃ】ＬＯＸ−ＩＭＶＩは、ＦＧＦＲ媒介機構によりＰＬＸ４０３２に対して耐性を有するようになる。Ａ、ＬＯＸ−ＩＭＶＩ  ｖｅｍＲ（ベムラフェニブ耐性細胞株）が、ＦＧＦＲ活性に依存していることが示された。Ｂ、ＦＧＦＲ阻害剤に対して耐性を有するように作られたＬＯＸ−ＩＭＶＩ  ｖｅｍＲ細胞は、ＥＧＦＲ活性に依存するようになった。Ｂ及びＣ、ＦＧＦＲ及びＥＧＦＲ阻害剤に対して耐性を有するように作られたＬＯＸ−ＩＭＶＩ  ｖｅｍＲ細胞は、分泌されたＨＧＦにおける同時の増大を伴う、ＭＥＴ及びＭＥＫ阻害剤での再感作を示した。
【図５Ａ】１０個の黒色腫細胞株及び１０個の乳癌株のスクリーニングが、薬剤耐性における、ＦＧＦシグナル伝達の役割を決定するために実施された。Ａ及びＢ、安定したｚスコアが、黒色腫及び乳癌細胞株において観察された。Ｃ、ＦＧＦ受容体、それらのサブファミリー、及びそれらのリガンドの要約である。
【図５Ｂ】１０個の黒色腫細胞株及び１０個の乳癌株のスクリーニングが、薬剤耐性における、ＦＧＦシグナル伝達の役割を決定するために実施された。Ａ及びＢ、安定したｚスコアが、黒色腫及び乳癌細胞株において観察された。Ｃ、ＦＧＦ受容体、それらのサブファミリー、及びそれらのリガンドの要約である。
【図５Ｃ】１０個の黒色腫細胞株及び１０個の乳癌株のスクリーニングが、薬剤耐性における、ＦＧＦシグナル伝達の役割を決定するために実施された。Ａ及びＢ、安定したｚスコアが、黒色腫及び乳癌細胞株において観察された。Ｃ、ＦＧＦ受容体、それらのサブファミリー、及びそれらのリガンドの要約である。
【図６Ａ】ＦＧＦ２は、主要なシグナル伝達経路を再活性化させ、耐性を促進し、下流のシグナル伝達の持続した活性化を刺激する。Ａ、ＦＧＦ２に曝露していない細胞と比較した、１０分間、ＦＧＦ２に曝露した細胞の免疫ブロット。Ｂ、ＦＧＦ２に曝露していない細胞と比較した、２４時間、ＦＧＦ２に曝露した細胞の免疫ブロット。
【図６Ｂ】ＦＧＦ２は、主要なシグナル伝達経路を再活性化させ、耐性を促進し、下流のシグナル伝達の持続した活性化を刺激する。Ａ、ＦＧＦ２に曝露していない細胞と比較した、１０分間、ＦＧＦ２に曝露した細胞の免疫ブロット。Ｂ、ＦＧＦ２に曝露していない細胞と比較した、２４時間、ＦＧＦ２に曝露した細胞の免疫ブロット。
【図７Ａ】黒色腫細胞株における、ＦＧＦ分泌因子に媒介されたシグナル伝達の動態。Ａ、細胞株を、ＰＬＸ４０３２（ベムラフェニブ）で４時間、及びＦＧＦで１０分間処理した。Ｂ、６２４ＭＥＬ細胞株を、ＰＬＸ４０３２で２４時間、及びＦＧＦで２４時間処理した。Ｃ、９２８ＭＥＬ細胞株を、ＰＬＸ４０３２で２４時間、及びＦＧＦで２４時間処理した。
【図７Ｂ】黒色腫細胞株における、ＦＧＦ分泌因子に媒介されたシグナル伝達の動態。Ａ、細胞株を、ＰＬＸ４０３２（ベムラフェニブ）で４時間、及びＦＧＦで１０分間処理した。Ｂ、６２４ＭＥＬ細胞株を、ＰＬＸ４０３２で２４時間、及びＦＧＦで２４時間処理した。Ｃ、９２８ＭＥＬ細胞株を、ＰＬＸ４０３２で２４時間、及びＦＧＦで２４時間処理した。
【図７Ｃ】黒色腫細胞株における、ＦＧＦ分泌因子に媒介されたシグナル伝達の動態。Ａ、細胞株を、ＰＬＸ４０３２（ベムラフェニブ）で４時間、及びＦＧＦで１０分間処理した。Ｂ、６２４ＭＥＬ細胞株を、ＰＬＸ４０３２で２４時間、及びＦＧＦで２４時間処理した。Ｃ、９２８ＭＥＬ細胞株を、ＰＬＸ４０３２で２４時間、及びＦＧＦで２４時間処理した。
【図８Ａ】ＦＧＦＲ標的化は、ＦＧＦ２救出を効果的に遮断する。Ａ、下流経路の効果的な遮断は、多くの場合ＦＧＦ２−救出を克服しない。Ｂ、ラパチニブ、ＭＥＫｉ、ＳＭＩ、及びＦＧＦ−２で処理したＡＵ５６５細胞の免疫ブロット（ＨＣＣ１９５４及びＵＡＣＣ−８９３細胞株においても同様な結果が観察される）。
【図８Ｂ】ＦＧＦＲ標的化は、ＦＧＦ２救出を効果的に遮断する。Ａ、下流経路の効果的な遮断は、多くの場合ＦＧＦ２−救出を克服しない。Ｂ、ラパチニブ、ＭＥＫｉ、ＳＭＩ、及びＦＧＦ−２で処理したＡＵ５６５細胞の免疫ブロット（ＨＣＣ１９５４及びＵＡＣＣ−８９３細胞株においても同様な結果が観察される）。
【図９Ａ】獲得耐性の更なる機構は、ＥＲＫ／ＭＥＫ阻害剤（Ａ）に対する感受性及びＥＲＫ／ＭＥＫ阻害剤（Ｂ）に対する非感受性を含む。
【図９Ｂ】獲得耐性の更なる機構は、ＥＲＫ／ＭＥＫ阻害剤（Ａ）に対する感受性及びＥＲＫ／ＭＥＫ阻害剤（Ｂ）に対する非感受性を含む。
【図１０Ａ】分泌因子に媒介された耐性機構は、獲得薬剤耐性モデルにおいて明らかである。Ａ、単一薬剤耐性株の表である。Ｂ、耐性スクリーニングにより予想された、耐性機構の連続的な獲得の証拠である。
【図１０Ｂ】分泌因子に媒介された耐性機構は、獲得薬剤耐性モデルにおいて明らかである。Ａ、単一薬剤耐性株の表である。Ｂ、耐性スクリーニングにより予想された、耐性機構の連続的な獲得の証拠である。
【図１１】薬剤スクリーニングを、ＣＨＬ−１黒色腫細胞について実施した。細胞を、ＤＭＳＯ（対照）、ＧＤＣ−０９７３（すなわち、コビメチニブ）、ＧＤＣ−００３２（ＰＩ３Ｋ−アルファ阻害剤）、ＢＦＪ−３９８（汎ＦＧＦＲ阻害剤）、ＧＤＣ−０９７３、及びＧＤＣ−００３２、またはＧＤＣ−０９７３、ならびにＢＧＪ−３９８で処理した。結果は、ＧＤＣ−０９７３／ＧＤＣ−００３２及びＧＤＣ−０９７３／ＢＧＪ３９８の併用治療の増大した有効性を示した。
【図１２】薬剤スクリーニングを、Ｈｓ８３９．Ｔ黒色腫細胞について実施した。細胞を、ＤＭＳＯ（対照）、ＧＤＣ−０９７３（すなわち、コビメチニブ）、ＧＤＣ−００３２（ＰＩ３Ｋ−アルファ阻害剤）、ＢＦＪ−３９８（汎ＦＧＦＲ阻害剤）、ＧＤＣ−０９７３、及びＧＤＣ−００３２、またはＧＤＣ−０９７３、ならびにＢＧＪ−３９８で処理した。結果は、ＧＤＣ−０９７３／ＧＤＣ−００３２及びＧＤＣ−０９７３／ＢＧＪ３９８の併用治療の増大した有効性を示した。
【図１３】薬剤スクリーニングを、Ｈｓ８９５．Ｔ正常皮膚線維芽細胞について実施した。細胞を、ＤＭＳＯ（対照）、ＧＤＣ−０９７３（すなわち、コビメチニブ）、ＧＤＣ−００３２（ＰＩ３Ｋ−アルファ阻害剤）、ＢＦＪ−３９８（汎ＦＧＦＲ阻害剤）、ＧＤＣ−０９７３、及びＧＤＣ−００３２、またはＧＤＣ−０９７３、ならびにＢＧＪ−３９８で処理した。結果は、ＧＤＣ−０９７３／ＧＤＣ−００３２及びＧＤＣ−０９７３／ＢＧＪ３９８の併用治療の増大した有効性を示した。
【図１４】単一耐性のＳＫ  ＭＥＬ２４ＶｅｍＲ（ベムラフェニブに対して耐性を有するＳＫ  ＭＥＬ２４細胞）を、ベムラフェニブ（すなわち、ＰＬＸ４０３２）、ＢＧＪ３９８、及び／またはコビメチニブ（すなわち、ＧＤＣ−０９７３）で処理した。次いで細胞を処理し、ＦＧＦＲ１、ｐＡＫＴ、ｐＭＥＫ、ｐＥＲＫ、ＰＡＲＰ、ｐＢＡＤ、ＢＩＭ、及びβアクチン（対照）の在／不在をウェスタンブロット法により検出した。
【図１５Ａ】ベムラフェニブ及びコビメチニブに対する二重耐性を有する細胞株（「Ｇ３６１ＲＲ」）を生成し、Ｇ３６１ＲＲ細胞がＢＣＬ−２／ＸＬ阻害剤に対してより感受性が高いことを示すＢＬＣ２／ＸＬ阻害剤スクリーニングを実施した。Ａ、生存能力検査を、ベムラフェニブで処理していないＧ３６１細胞（親、ベムラフェニブまたはコビメチニブ耐性ではない）、ベムラフェニブで処理していないＧ３６１ＶｅｍＲ細胞（ベムラフェニブに対する単一耐性を有するＧ３６１細胞）、及びＢＣＬ−ＸＬ阻害剤の存在下で、ベムラフェニブで処理したＧ３６１ＶｅｍＲ細胞について実施した。Ｂ、生存能力検査を、ベムラフェニブまたはＭＥＫ阻害剤で処理していないＧ３６１細胞、ベムラフェニブまたはＭＥＫ阻害剤で処理していないＧ３６１ＲＲ細胞、及びＢＣＬ−ＸＬ阻害剤の存在下で、ベムラフェニブならびにＭＥＫ阻害剤で処理したＧ３６１ＲＲ細胞について実施した。Ｃ、生存能力検査を、ベムラフェニブで処理していないＧ３６１細胞（親、ベムラフェニブまたはコビメチニブ耐性ではない）、ベムラフェニブで処理していないＧ３６１ＶｅｍＲ細胞（ベムラフェニブに対する単一耐性を有するＧ３６１細胞）、及びＢＣＬ−ＸＬ／ＢＣＬ−２阻害剤の存在下で、ベムラフェニブで処理したＧ３６１ＶｅｍＲ細胞について実施した。Ｄ、生存能力検査を、ベムラフェニブまたはＭＥＫ阻害剤で処理していないＧ３６１細胞、ベムラフェニブまたはＭＥＫ阻害剤で処理していないＧ３６１ＲＲ細胞、及びＢＣＬ−ＸＬ／ＢＣＬ−２阻害剤の存在下で、ベムラフェニブ及びＭＥＫ阻害剤で処理したＧ３６１ＲＲ細胞について実施した。
【図１５Ｂ】ベムラフェニブ及びコビメチニブに対する二重耐性を有する細胞株（「Ｇ３６１ＲＲ」）を生成し、Ｇ３６１ＲＲ細胞がＢＣＬ−２／ＸＬ阻害剤に対してより感受性が高いことを示すＢＬＣ２／ＸＬ阻害剤スクリーニングを実施した。Ａ、生存能力検査を、ベムラフェニブで処理していないＧ３６１細胞（親、ベムラフェニブまたはコビメチニブ耐性ではない）、ベムラフェニブで処理していないＧ３６１ＶｅｍＲ細胞（ベムラフェニブに対する単一耐性を有するＧ３６１細胞）、及びＢＣＬ−ＸＬ阻害剤の存在下で、ベムラフェニブで処理したＧ３６１ＶｅｍＲ細胞について実施した。Ｂ、生存能力検査を、ベムラフェニブまたはＭＥＫ阻害剤で処理していないＧ３６１細胞、ベムラフェニブまたはＭＥＫ阻害剤で処理していないＧ３６１ＲＲ細胞、及びＢＣＬ−ＸＬ阻害剤の存在下で、ベムラフェニブならびにＭＥＫ阻害剤で処理したＧ３６１ＲＲ細胞について実施した。Ｃ、生存能力検査を、ベムラフェニブで処理していないＧ３６１細胞（親、ベムラフェニブまたはコビメチニブ耐性ではない）、ベムラフェニブで処理していないＧ３６１ＶｅｍＲ細胞（ベムラフェニブに対する単一耐性を有するＧ３６１細胞）、及びＢＣＬ−ＸＬ／ＢＣＬ−２阻害剤の存在下で、ベムラフェニブで処理したＧ３６１ＶｅｍＲ細胞について実施した。Ｄ、生存能力検査を、ベムラフェニブまたはＭＥＫ阻害剤で処理していないＧ３６１細胞、ベムラフェニブまたはＭＥＫ阻害剤で処理していないＧ３６１ＲＲ細胞、及びＢＣＬ−ＸＬ／ＢＣＬ−２阻害剤の存在下で、ベムラフェニブ及びＭＥＫ阻害剤で処理したＧ３６１ＲＲ細胞について実施した。
【図１５Ｃ】ベムラフェニブ及びコビメチニブに対する二重耐性を有する細胞株（「Ｇ３６１ＲＲ」）を生成し、Ｇ３６１ＲＲ細胞がＢＣＬ−２／ＸＬ阻害剤に対してより感受性が高いことを示すＢＬＣ２／ＸＬ阻害剤スクリーニングを実施した。Ａ、生存能力検査を、ベムラフェニブで処理していないＧ３６１細胞（親、ベムラフェニブまたはコビメチニブ耐性ではない）、ベムラフェニブで処理していないＧ３６１ＶｅｍＲ細胞（ベムラフェニブに対する単一耐性を有するＧ３６１細胞）、及びＢＣＬ−ＸＬ阻害剤の存在下で、ベムラフェニブで処理したＧ３６１ＶｅｍＲ細胞について実施した。Ｂ、生存能力検査を、ベムラフェニブまたはＭＥＫ阻害剤で処理していないＧ３６１細胞、ベムラフェニブまたはＭＥＫ阻害剤で処理していないＧ３６１ＲＲ細胞、及びＢＣＬ−ＸＬ阻害剤の存在下で、ベムラフェニブならびにＭＥＫ阻害剤で処理したＧ３６１ＲＲ細胞について実施した。Ｃ、生存能力検査を、ベムラフェニブで処理していないＧ３６１細胞（親、ベムラフェニブまたはコビメチニブ耐性ではない）、ベムラフェニブで処理していないＧ３６１ＶｅｍＲ細胞（ベムラフェニブに対する単一耐性を有するＧ３６１細胞）、及びＢＣＬ−ＸＬ／ＢＣＬ−２阻害剤の存在下で、ベムラフェニブで処理したＧ３６１ＶｅｍＲ細胞について実施した。Ｄ、生存能力検査を、ベムラフェニブまたはＭＥＫ阻害剤で処理していないＧ３６１細胞、ベムラフェニブまたはＭＥＫ阻害剤で処理していないＧ３６１ＲＲ細胞、及びＢＣＬ−ＸＬ／ＢＣＬ−２阻害剤の存在下で、ベムラフェニブ及びＭＥＫ阻害剤で処理したＧ３６１ＲＲ細胞について実施した。
【図１５Ｄ】ベムラフェニブ及びコビメチニブに対する二重耐性を有する細胞株（「Ｇ３６１ＲＲ」）を生成し、Ｇ３６１ＲＲ細胞がＢＣＬ−２／ＸＬ阻害剤に対してより感受性が高いことを示すＢＬＣ２／ＸＬ阻害剤スクリーニングを実施した。Ａ、生存能力検査を、ベムラフェニブで処理していないＧ３６１細胞（親、ベムラフェニブまたはコビメチニブ耐性ではない）、ベムラフェニブで処理していないＧ３６１ＶｅｍＲ細胞（ベムラフェニブに対する単一耐性を有するＧ３６１細胞）、及びＢＣＬ−ＸＬ阻害剤の存在下で、ベムラフェニブで処理したＧ３６１ＶｅｍＲ細胞について実施した。Ｂ、生存能力検査を、ベムラフェニブまたはＭＥＫ阻害剤で処理していないＧ３６１細胞、ベムラフェニブまたはＭＥＫ阻害剤で処理していないＧ３６１ＲＲ細胞、及びＢＣＬ−ＸＬ阻害剤の存在下で、ベムラフェニブならびにＭＥＫ阻害剤で処理したＧ３６１ＲＲ細胞について実施した。Ｃ、生存能力検査を、ベムラフェニブで処理していないＧ３６１細胞（親、ベムラフェニブまたはコビメチニブ耐性ではない）、ベムラフェニブで処理していないＧ３６１ＶｅｍＲ細胞（ベムラフェニブに対する単一耐性を有するＧ３６１細胞）、及びＢＣＬ−ＸＬ／ＢＣＬ−２阻害剤の存在下で、ベムラフェニブで処理したＧ３６１ＶｅｍＲ細胞について実施した。Ｄ、生存能力検査を、ベムラフェニブまたはＭＥＫ阻害剤で処理していないＧ３６１細胞、ベムラフェニブまたはＭＥＫ阻害剤で処理していないＧ３６１ＲＲ細胞、及びＢＣＬ−ＸＬ／ＢＣＬ−２阻害剤の存在下で、ベムラフェニブ及びＭＥＫ阻害剤で処理したＧ３６１ＲＲ細胞について実施した。
【発明を実施するための形態】
【０１３９】
Ｉ．定義
対象ポリペプチドの「拮抗剤」（互換的に「阻害剤」と称される）とは、対象ポリペプチドの活性化または機能に干渉する、例えば、対象ポリペプチドが媒介する生物活性を部分的に若しくは完全に遮断、阻害、または媒介する作用物質である。例えば、ポリペプチドＸの拮抗剤とは、ポリペプチドＸが媒介する生物活性を部分的に若しくは完全に遮断、阻害、または中和する任意の分子を指し得る。阻害剤の例としては、抗体、リガンド抗体、低分子拮抗剤、アンチセンス及び阻害ＲＮＡ（例えば、ｓｈＲＮＡ）分子が挙げられる。好ましくは、阻害剤は対象ポリペプチドに結合する抗体または低分子である。特定の実施形態において、阻害剤は対象ポリペプチドに対して、約１，０００ｎＭ以下の結合親和性（解離定数）を有する。別の実施形態において、阻害剤は対象ポリペプチドに対して約１００ｎＭ以下の結合親和性を有する。別の実施形態において、阻害剤は対象ポリペプチドに対して約５０ｎＭ以下の結合親和性を有する。特定の実施形態において、阻害剤は対象ポリペプチドに共有結合している。特定の実施形態において、阻害剤は対象ポリペプチドのシグナル伝達を１，０００ｎＭ以下のＩＣ５０で阻害する。別の実施形態において、阻害剤は対象ポリペプチドのシグナル伝達を５００ｎＭ以下のＩＣ５０で阻害する。別の実施形態において、阻害剤は対象ポリペプチドのシグナル伝達を５０ｎＭ以下のＩＣ５０で阻害する。ある特定の実施形態において、拮抗剤は少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％またはそれ以上で対象ポリペプチドの発現レベルまたは生物活性を低減または阻害する。いくつかの実施形態において、対象ポリペプチドは、ＦＧＦＲ受容体（例えば、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、及び／またはＦＧＦＲ４）またはＦＧＦ（例えば、ＦＧＦ１〜２３）である。いくつかの実施形態において、対象ポリペプチドはＥＧＦＲである。
【０１４０】
「ポリペプチド」という用語は、本明細書で使用する場合、特に指示がない限り、霊長類（例えば、ヒト）ならびに齧歯類（例えば、マウス及びラット）等の哺乳動物を含む、任意の脊椎動物源からの任意の天然の対象ポリペプチドを指す。この用語は「完全長」の未処理ポリペプチドに加え、細胞中の処理で生じる任意の形態のポリペプチドを包含する。この用語はまた、ポリペプチドの自然発生変異体、例えばスプライス変異体またはアレリック変異体も包含する。
【０１４１】
「ポリヌクレオチド」、または「核酸」は本明細書で互換的に用いられ、任意の長さのヌクレオチドのポリマーを指し、ＤＮＡ及びＲＮＡを含む。ヌクレオチドは、デオキシリボヌクレオチド、リボヌクレオチド、修飾されたヌクレオチド若しくは塩基、及び／若しくはそれらの類似体、またはＤＮＡ若しくはＲＮＡポリメラーゼ、若しくは合成反応によりポリマー中に導入可能な任意の基質であり得る。ポリヌクレオチドは、メチル化ヌクレオチド及びそれらの類似体等の修飾ヌクレオチドを含んでもよい。存在する場合、ヌクレオチド構造への修飾はポリマーの構築の前後において付与され得る。ヌクレオチド配列には、非ヌクレオチド成分が間に入ってもよい。ポリヌクレオチドは合成後、標識結合等によって更に修飾されてもよい。他の種類の修飾には、例えば、「キャップ」、１つ以上の自然発生ヌクレオチドを、類似体であるヌクレオチド間修飾、例えば非荷電性連鎖を有するもの（例えば、メチルホスホネート、ホスホトリエステル、ホスホルアミデート、カルバメート等）及び荷電性連鎖を有するもの（例えば、ホスホロチオエート、ホスホロジチオエート等）、ペンダント部分、例えばタンパク質（例えば、ヌクレアーゼ、毒素、抗体、シグナルペプチド、ｐｌｙ−Ｌ−リジン等）を含有するもの、インターカレーターを有するもの（例えば、アクリジン、ソラレン等）、キレート剤（例えば、金属、放射性金属、ホウ素、酸化的金属等）を含有するもの、アルキル化剤を含有するもの、修飾された連結を含むもの（例えば、アルファアノマー核酸等）等と置換したもの、加えてポリヌクレオチド（複数可）の未修飾形態が含まれる。更に、糖類中に通常存在するヒドロキシル基のうちのいずれかを、例えばホスホネート基、ホスフェート基で置換してよく、標準的な保護基で保護し得、若しくは更なるヌクレオチドへの更なる連鎖を調製するために活性化させてよく、または個体若しくは半個体の支持体に結合し得る。５’及び３’末端のＯＨは、アミン基または１〜２０個の炭素原子の有機キャッピング基部位でリン酸化または置換することができる。他のヒドロキシルもまた、標準的な保護基に誘導体化してもよい。ポリヌクレオチドはまた、当業界において一般的に既知であるリボースまたはデオキシリボース糖類の類似形態も含有することができ、これらには例えば２’−Ｏ−メチル−、２’−Ｏ−アリル、２’−フルオロ−または２’−アジド−リボース、炭素環式糖の類似体、アルファ−アノマー糖、エピマー糖、例えばアラビノース、キシロース類またはリキソース類、ピラノース糖、フラノース糖、セドヘプツロース類、非環式類似体、及びメチルリボシド等の脱塩基ヌクレオシド類似体が含まれる。１つ以上のホスホジエステル結合は代わりの連結基で置換され得る。これらの代替の連結基には、限定されるものではないが、ホスフェートがＰ（Ｏ）Ｓ（「チオエート」）、Ｐ（Ｓ）Ｓ（「ジチオエート」）、「（Ｏ）ＮＲ２」（「アミデート」）、Ｐ（Ｏ）Ｒ、Ｐ（Ｏ）ＯＲ’、ＣＯまたはＣＨ２（「ホルムアセタール」）で置換されている実施形態が含まれ、式中、各ＲまたはＲ’は独立して、水素、または任意にエーテル（−Ｏ−）結合、アリール、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、若しくはアラルジルを含有する置換若しくは非置換のアルキル（炭素数１〜２０）である。ポリヌクレオチド内の全ての結合が同一である必要はない。前述の説明は、ＲＮＡ及びＤＮＡを含む、本明細書で言及する全てのポリヌクレオチドに適用される。
【０１４２】
「低分子」という用語は、約２０００ダルトン以下、好ましくは約５００ダルトン以下の分子量を有する任意の分子を指す。
【０１４３】
「単離した」抗体は、その自然環境における成分から分離した抗体である。いくつかの実施形態において、抗体は、例えば電気泳動（例えば、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、等電点電気泳動（ＩＥＦ）、キャピラリー電気泳動）、またはクロマトグラフィー（例えば、イオン交換または逆相ＨＰＬＣ）により求められるように、純度９５％または９９％を超えて精製される。抗体純度の評価のための方法についての概説については、例えばＦｌａｔｍａｎら，Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．Ｂ  ８４８：７９−８７（２００７）を参照のこと。
【０１４４】
「抗体」という用語は、本明細書において最も広範な意味で用いられ、それらが所望の抗原結合活性を示す限り、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、及び抗体断片を含むが、これらに限定されない、種々の抗体構造を包含する。
【０１４５】
「対象となる抗ポリペプチド抗体」及び対象ポリペプチド「に結合する抗体」という用語は、抗体が、対象ポリペプチドを標的にする診療及び／または治療剤として有用となるように、十分な親和性で対象ポリペプチドに結合することが可能な抗体を指す。一実施形態において、対象となる抗ポリペプチド抗体の、無関係の対象となる非ポリペプチドのタンパク質への結合の程度は、例えばラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）によって測定されるように、抗体の対象ポリペプチドへの結合の約１０％未満である。ある特定の実施形態において、対象ポリペプチドに結合する抗体は、≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭ、または≦０．００１ｎＭ（例えば、１０−８Ｍ以下、例えば１０−８Ｍ〜１０−１３Ｍ、例えば１０−９Ｍ〜１０−１３Ｍ）の解離定数（Ｋｄ）を有する。ある特定の実施形態において、対象となる抗ポリペプチド抗体は、対象ポリペプチド内で異なる種から保存された、対象ポリペプチドのエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、対象ポリペプチドは、ＦＧＦＲ（例えば、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、及び／またはＦＧＦＲ４）及び／またはＦＧＦ（例えば、ＦＧＦ１〜２３）である。いくつかの実施形態において、対象ポリペプチドはＥＧＦＲである。
【０１４６】
「遮断抗体」または「アンタゴニスト抗体」は、それが結合する抗原の生物活性を阻害するまたは低減させる抗体である。好ましい遮断抗体またはアンタゴニスト抗体は、抗原の生物活性を実質的にまたは完全に阻害する。
【０１４７】
「親和性」とは、分子（例えば、抗体）の単一の結合部位とその結合パートナー（例えば、抗原）との間の、総計の非共有結合性相互作用の強度を指す。特に指示がない限り、本明細書で使用する場合、「結合親和性」は、結合対のメンバー（例えば、抗体及び抗原）間の１：１の相互作用を反映する、本来の結合親和性を指す。分子Ｘの、そのパートナーＹに対する親和性は、一般に、解離定数（Ｋｄ）によって表すことができる。親和性は、本明細書に記載される方法を含む、当業界において既知の一般的な方法によって測定することができる。結合親和性を測定するための具体的な例示説明及び例示的な実施形態は、以下に記載されている。
【０１４８】
「抗体断片」とは、無傷抗体の一部分を含み、無傷抗体が結合する抗原に結合する、無傷抗体以外の分子を指す。抗体断片の例としては、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２；ダイアボディ；直鎖状抗体；一本鎖抗体分子（例えば、ｓｃＦｖ）；及び抗体断片から形成される多重特異性抗体が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１４９】
参照抗体と「同一のエピトープに結合する抗体」とは、競合アッセイにおいて、その抗原への参照抗体の結合を５０％以上遮断する抗体、及び逆に、競合アッセイにおいて、その抗原へのこの抗体の結合を５０％以上遮断する参照抗体を指す。
【０１５０】
「キメラ」抗体という用語は、重鎖及び／または軽鎖の一部が特定の源または種に由来する一方で、重鎖及び／または軽鎖の残部が異なる源または種に由来する抗体を指す。
【０１５１】
「完全長抗体」、「無傷抗体」、及び「全抗体」という用語は、本明細書で同じ意味で用いられ、自然抗体の構造と実質的に同様の構造を有する、またはＦｃ領域を含有する重鎖を有する抗体を指す。
【０１５２】
「モノクローナル抗体」という用語は、本発明で使用する場合、実質的に同種の抗体の集団から得られる抗体を指し、すなわち、その集団を構成する個々の抗体は、同一であり、かつ／または同一のエピトープに結合するが、例えば、自然発生の突然変異を含有する、またはモノクローナル抗体調製物の産生中に発生する、可能性のある変異型抗体は例外であり、かかる変異体は一般に少量で存在する。異なる決定基（エピトープ）に対する異なる抗体を典型的に含む、ポリクローナル抗体調製物とは対照的に、モノクローナル抗体調製物の各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基に対するものである。故に、「モノクローナル」という修飾語は、実質的に同種の抗体の集団から得られる抗体の特徴を示し、任意の特定の方法による抗体の産生を必要とするものとして解釈されないものとする。例えば、本発明に従って使用されるモノクローナル抗体は、ハイブリドーマ法、組み換えＤＮＡ法、ファージディスプレイ法、及びヒト免疫グロブリン遺伝子座の全てまたは一部を含有するトランスジェニック動物を利用する方法、モノクローナル抗体を作製するためのかかる方法及び他の例示的な方法を含むが、これらに限定されない、様々な技術によって作製され得る。
【０１５３】
「ヒト抗体」とは、ヒト若しくはヒト細胞によって産生された、またはヒト抗体レパートリーを利用する非ヒト源に由来する、抗体のアミノ酸配列、または他のヒト抗体コード配列に対応する、アミノ酸配列を保有するものである。ヒト抗体のこの定義は、具体的には、非ヒト抗原結合残基を含むヒト化抗体を除外する。
【０１５４】
「ヒト化」抗体とは、非ヒトＨＶＲからのアミノ酸残基及びヒトＦＲからのアミノ酸残基を含むキメラ抗体を指す。ある特定の実施形態において、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインの実質的に全てを含み、そのＨＶＲ（例えば、ＣＤＲ）の全てまたは実質的に全てが、非ヒト抗体のものに対応し、そのＦＲの全てまたは実質的に全てが、ヒト抗体のものに対応する。ヒト化抗体は、任意に、ヒト抗体に由来する抗体定常領域の少なくとも一部分を含んでもよい。抗体、例えば非ヒト抗体の、「ヒト化形態」とは、ヒト化を経ている抗体を指す。
【０１５５】
「免疫複合体」は、細胞毒性剤を含むが、これに限定されない、１つ以上の異種分子（複数可）に結合した抗体である。
【０１５６】
「ＰＬＸ４０３２」及び「ベムラフェニブ」は本明細書で互換的に用いられ、Ｎ−（３−｛［５−（４−クロロフェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］カルボニル｝−２，４−ジフルオロフェニル）プロパン−１−スルホンアミドを指す。
【０１５７】
「Ｂ−ｒａｆ活性化」は、Ｂ−ｒａｆキナーゼの活性化、またはリン酸化を指す。一般的に、Ｂ−ｒａｆ活性化はシグナル伝達をもたらす。
【０１５８】
「Ｂ−ｒａｆ」という用語は、本明細書で使用する場合、特に指示がない限り、任意の天然または変異型（天然または合成のいずれか）Ｂ−ｒａｆポリペプチドを指す。「野生型Ｂ−ｒａｆ」という用語は、一般的に自然発生Ｂ−ｒａｆタンパク質のアミノ酸配列を含むポリペプチドを指す。
【０１５９】
「Ｂ−ｒａｆ変異体」という用語は、本明細書で使用する場合、天然Ｂ−ｒａｆ配列内に１つ以上のアミノ酸突然変異を含むＢ−ｒａｆポリペプチドを指す。任意に、１つ以上のアミノ酸突然変異はアミノ酸置換（複数可）を含む。
【０１６０】
「Ｂ−ｒａｆ拮抗剤」（互換的に「Ｂ−ｒａｆ阻害剤」と称される）とは、Ｂ−ｒａｆ活性化または機能に干渉する作用物質である。特定の実施形態において、Ｂ−ｒａｆ阻害剤は、約１，０００ｎＭ以下の、Ｂ−ｒａｆに対する結合親和性（解離定数）を有する。別の実施形態において、Ｂ−ｒａｆ阻害剤は、約１００ｎＭ以下の、Ｂ−ｒａｆに対する結合親和性を有する。別の実施形態において、Ｂ−ｒａｆ阻害剤は、約５０ｎＭ以下の、Ｂ−ｒａｆに対する結合親和性を有する。別の実施形態において、Ｂ−ｒａｆ阻害剤は、約１０ｎＭ以下の、Ｂ−ｒａｆに対する結合親和性を有する。別の実施形態において、Ｂ−ｒａｆ阻害剤は、約１ｎＭ以下の、Ｂ−ｒａｆに対する結合親和性を有する。特定の実施形態において、Ｂ−ｒａｆ阻害剤は、１，０００ｎＭ以下の、ＩＣ５０でのＢ−ｒａｆシグナル伝達を阻害する。別の実施形態において、Ｂ−ｒａｆ阻害剤は、５００ｎＭ以下の、ＩＣ５０でのＢ−ｒａｆシグナル伝達を阻害する。別の実施形態において、Ｂ−ｒａｆ阻害剤は、５０ｎＭ以下の、ＩＣ５０でのＢ−ｒａｆシグナル伝達を阻害する。別の実施形態において、Ｂ−ｒａｆ阻害剤は、１０ｎＭ以下の、ＩＣ５０でのＢ−ｒａｆシグナル伝達を阻害する。別の実施形態において、Ｂ−ｒａｆ阻害剤は、１ｎＭ以下の、ＩＣ５０でのＢ−ｒａｆシグナル伝達を阻害する。
【０１６１】
「Ｖ６００Ｅ」は、Ｂ−Ｒａｆのアミノ酸位置６００での、グルタミンとバリンとの置換をもたらす、Ｂ−ＲＡＦ遺伝子における突然変異を指す。「Ｖ６００Ｅ」はまた、以前の番号付け方式（Ｋｕｍａｒら，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．９：３３６２−３３６８，２００３）の下で「Ｖ５９９Ｅ」としても既知である。
【０１６２】
「ＭＥＫ阻害剤」または「ＭＥＫ拮抗剤」は、ＭＥＫ活性化及び／または機能に干渉する作用物質である。
【０１６３】
「コビメチニブ及び「ＧＤＣ−０９７３」という用語は、本明細書では互換的に使用され、化合物［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−フェニル］−（（Ｓ）−３−ヒドロキシ−３−ｐｉ−ぺリジン−２−イル−アゼチジン−１−イル）−メタノン及びその薬学的に許容される塩を指す。
【０１６４】
「構成的な」または「恒常的に」という用語は、本明細書で使用され、例えば受容体キナーゼ活性に適用され場合、リガンドまたは他の活性化分子の存在に依存する受容体の連続的なシグナル伝達活性を指す。受容体の性質に応じて、活性の全ては構成的であり得るか、または受容体の活性は他の分子（例えば、リガンド）の結合により更に活性化され得る。受容体の活性化に繋がる細胞的事象は、当業者間で周知である。例えば、活性化は、例えば、二量体化、三量体化等の、より高次の受容体複合体へのオリゴマー化を含み得る。複合体は単一種のタンパク質、すなわちホモマー複合体を含み得る。あるいは、複合体は少なくとも２つの異なるタンパク質種、すなわちヘテロマー複合体を含み得る。複合体形成は、例えば、細胞の表面上での正常型または突然変異型の受容体の過剰発現により引き起こされ得る。複合体形成は、また、特定の突然変異または受容体における突然変異によっても引き起こされ得る。
【０１６５】
「個体応答」または「応答」は、（１）減速及び完全停止を含む、疾患の進行（例えば、癌の進行）をある程度阻害すること、（２）腫瘍サイズの減少、（３）隣接した末梢臓器及び／若しくは組織中への癌細胞の侵入阻害（すなわち低減、減速、または完全停止）、（４）転移阻害（すなわち低減、減速、または完全停止）、（５）疾患または障害（例えば、癌）に関連する１つ以上の症状のある程度の回復、（６）無進行生存の長さの増加、及び／または（９）治療後のある時点での死亡率の低下を含む、個体への有効性を示す任意の終了位置を用いて評価することが可能であるが、これらに限定されない。
【０１６６】
「実質的に同じ」という用語は、本明細書で使用する場合、当業者が、前記値（例えば、Ｋｄ値または発現）により測定した生物学的特性の背景の中で、２つの値の差に生物学的、及び／または統計的有意性がない、若しくはほとんどないと考えるように、２つの数値の類似性の程度が十分に大きいことを表す。該２つの値の差は、例えば、参照／コンパレータ値の関数として、約５０％未満、約４０％未満、約３０％未満、約２０％未満、及び／または約１０％未満である。
【０１６７】
「実質的に異なる」という語句は、本発明で使用する場合、当業者が、該値（例えば、Ｋｄ値）により測定した生物学的特性の背景の中で、２つの値の差が統計的に有意であると考えるように、２つの数値の差の程度が十分に大きいことを意味する。該２つの値の差は、例えば、参照／コンパレータ分子に対する値の関数として、約１０％以上、約２０％以上、約３０％以上、約４０％以上、及び／または約５０％以上である。
【０１６８】
物質／分子、例えば医薬組成物の「有効量」とは、必要な用量及び期間で所望の治療または予防結果を達成するのに有効な量を指す。
【０１６９】
物質／分子の「治療的有効量」は、個体の病状、年齢、性別、及び体重、ならびに物質／分子が個体内で所望の応答を誘発する能力等の要因によって変化し得る。治療的有効量とはまた、物質／分子の任意の毒性または有害作用より、治療的に有益な効果が上回る量である。「予防的有効量」とは、必要な用量及び期間で、所望の予防効果を達成する有効量を指す。必ずしもではないが通常、予防的用量は疾患の初期段階時または前に被験体において使用されるため、予防的有効量は治療的有効量よりも少ない。
【０１７０】
「薬学的製剤」という用語は、その中に含有される有効成分の生物活性を可能にするような形態であり、かつ製剤が投与される被験体に対して許容されない毒性を有する追加の化合物を含有しない配合物を指す。
【０１７１】
「薬学的に許容される担体」とは、有効成分以外の、被験体に無毒の製剤処方中の成分を指す。薬学的に許容される担体としては、緩衝液、賦形剤、安定剤、または防腐剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１７２】
「薬学的に許容される塩」という語句は、本発明で使用する場合、化合物の薬学的に許容される有機または無機の塩を指す。
【０１７３】
本明細書で使用する場合、「治療」（及び例えば「治療する」または「治療すること」等の文法的な変形）とは、治療される個体の自然経過を変えることを目的とした臨床介入を指し、予防のために、または臨床病理の過程の間に行うことができる。治療の望ましい効果としては、疾患の発症または再発の防止、症状の緩和、疾患の任意の直接的または間接的な病理学的結果の減少、転移の予防、疾患進行度の低減、病状の回復または緩和、及び寛解または予後の改善が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、本発明の抗体は、疾患の発症を遅らせる、または疾患の進行を遅くするために使用される。
【０１７４】
「白金製剤」は、例えばカルボプラチン、シスプラチン、及びオキサリプラチン等の白金を含む化学療法剤である。
【０１７５】
「細胞毒性剤」または「化学療法剤」という用語は、作用機構に関わらず癌の治療に有用である、生物学的（例えば、大分子）または化学的（例えば、低分子）化合物である。この用語は、本明細書で使用する場合、細胞機能を阻害若しくは妨げる、及び／または細胞死若しくは細胞破壊を引き起こす物質を指す。該用語は、放射性同位元素（例えば、Ａｔ２１１、Ｉ１３１、Ｉ１２５、Ｙ９０、Ｒｅ１８６、Ｒｅ１８８、Ｓｍ１５３、Ｂｉ２１２、Ｐ３２、Ｐｂ２１２、及びＬｕの放射性同位元素）、化学療法剤または薬物（例えば、メトトレキサート、アドリアマイシン、ビンカアルカロイド（ビンクリスチン、ビンブラスチン、エトポシド）、ドキソルビシン、メルファラン、マイトマイシンＣ、クロラムブシル、ダウノルビシン、若しくは他の挿入剤）、成長阻害剤、核酸分解酵素等の酵素及びその断片、抗生物質、ならびに微生物、菌類、植物、若しくは動物由来の低分子毒素または酵素活性毒素等の毒素を含むことを目的とし、これには、その断片及び／または変異体、ならびに以下に開示される種々の抗腫瘍剤または抗癌剤が含まれる。他の細胞毒性剤を以下に記載する。腫瘍崩壊剤は、腫瘍細胞の破壊の原因となる。
【０１７６】
「個体」または「被験体」は哺乳動物である。哺乳動物としては、家畜（例えば、ウシ、ヒツジ、ネコ、イヌ、及びウマ）、霊長類（例えば、ヒト、及びサル等の非ヒト霊長類）、ウサギ、ならびに齧歯類（例えば、マウス及びラット）が挙げられるが、これらに限定されない。ある特定の実施形態において、個体または被験体はヒトである。
【０１７７】
「癌」及び「癌性の」という用語は、典型的に未制御の細胞増殖により特徴付けられる、哺乳動物における生理的状態を指すかまたは表す。この定義は良性及び悪性癌を含む。「早期癌」または「早期腫瘍」とは、侵襲性若しくは転移性ではない癌、またはステージ０、Ｉ、若しくはＩＩとして分類される癌を意味する。癌の例としては、上皮性悪性腫瘍、リンパ腫、芽細胞腫（髄芽細胞腫及び網膜芽細胞腫を含む）、肉腫（脂肪肉腫及び滑膜細胞肉腫を含む）、神経内分泌腫瘍（カルチノイド腫瘍、ガストリン産生腫瘍、及び島細胞癌）、中皮腫、シュワン細胞腫（聴神経腫瘍を含む）、髄膜腫、腺癌、黒色腫、及び白血病またはリンパ系腫瘍が挙げられるが、これらに限定されない。かかる癌のより具体的な例としては、黒色腫、結腸直腸癌、甲状腺癌（例えば、甲状腺乳頭癌）、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、腹膜の癌、肝細胞癌、胃腸癌を含む胃腸または胃癌、膵臓癌、膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、肝細胞癌、乳癌（転移性乳癌を含む）、結腸癌、直腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜または子宮癌、唾液腺癌、腎臓または腎臓癌、前立腺癌、外陰部癌、甲状腺癌、肝細胞癌、肛門癌、陰茎癌、精巣癌、食道腺癌、胆道の腫瘍、ならびに頭部及び頸部癌が挙げられる。いくつかの実施形態において、癌は、黒色腫；結腸直腸癌；甲状腺癌、例えば乳頭状甲状腺癌；または卵巣癌である。
【０１７８】
「同時に」という用語は、本明細書における、２つ以上の治療剤の投与において、それらの個体への治療効果の時間が重複するように、時間の近接性が十分に高いことを指すために用いられる。したがって、同時投与には１つ以上の他の作用物質（複数可）の投与を中止した後で、１つ以上の作用物質（複数可）の投与を継続する投与レジメンが含まれる。いくつかの実施形態において、同時投与は、並行的、逐次的、及び／または同時的である。
【０１７９】
「低減または阻害する」とは、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、またはそれ以上の全体的な減少を引き起こす能力を意味する。低減または阻害するとは、治療される障害の症状、転移の存在若しくはサイズ、または原発腫瘍のサイズを指すことができる。
【０１８０】
「添付文書」という用語は、指示、使用法、用量、投与、併用療法、かかる治療製品の使用に関する禁忌及び／または警告に関する情報を含有する、治療製品販売用パッケージに通常含まれる説明書を指すために使用される。
【０１８１】
「製品」とは、少なくとも１つの試薬、例えば疾患若しくは障害（例えば、癌）の治療用薬剤、または本明細書に記載される生体指標を特異的に検出するプローブを含む任意の製造物（例えば、パッケージ若しくは容器）またはキットである。ある特定の実施形態において、製造物またはキットは本明細書に記載の方法を実施する一単位として促進、配布、または販売されてよい。
【０１８２】
当業者により理解される通り、本明細書における「約」の値またはパラメータへの言及には、その値またはパラメータ自体に向けられる実施形態が含まれる（かつそれについて記載する）。例えば、「約Ｘ」を指す説明には、「Ｘ」の説明が含まれる。
【０１８３】
本明細書に記載される発明の態様及び実施形態には、態様及び実施形態「からなる」及び／または「から本質的になる」が含まれると理解されている。本明細書で使用する場合、特に指示がない限り、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」には複数への言及が含まれる。
【０１８４】
ＩＩ．方法及び使用
本明細書では、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及びＭＥＫ拮抗剤を利用する方法が提供される。本明細書では、ＭＥＫ拮抗剤及びＰＩＫ３拮抗剤を利用する方法が提供される。本明細書では、ＭＥＫ拮抗剤、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、及びＰＩＫ３阻害剤を利用する方法が提供される。本明細書では、ＭＥＫ拮抗剤及びＢ−ｒａｆ拮抗剤を利用する方法が提供される。本明細書では、ＭＥＫ拮抗剤、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤、及びＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤を利用する方法が提供される。
【０１８５】
具体的に本明細書では、個体に（ａ）ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）ＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、個体における癌の治療方法が提供される。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及びＭＥＫ拮抗剤のそれぞれの量は、ＭＥＫ拮抗剤に対する癌感受性の期間を増大させるため及び／または癌耐性の発生を遅らせるために有効である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及びＭＥＫ拮抗剤のそれぞれの量は、ＭＥＫ拮抗剤を含む癌治療の有効性を増大させるために有効である。例えば、いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及びＭＥＫ拮抗剤のそれぞれの量は、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した有効性のために有効である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及びＭＥＫ拮抗剤のそれぞれの量は、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した寛解（例えば、完全寛解）のために有効である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及びＭＥＫ拮抗剤のそれぞれの量は、癌感受性を増大させるため及び／またはＭＥＫ拮抗剤に対する感受性を回復させるために有効である。
【０１８６】
具体的に、本明細書では、個体に（ａ）ＰＩＫ３拮抗剤及び（ｂ）ＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、個体における癌の治療方法が提供される。いくつかの実施形態において、ＰＩＫ３拮抗剤及びＭＥＫ拮抗剤のそれぞれの量は、ＭＥＫ拮抗剤に対する癌感受性の期間を増大させるため及び／または癌耐性の発生を遅らせるために有効である。いくつかの実施形態において、ＰＩＫ３拮抗剤及びＭＥＫ拮抗剤のそれぞれの量は、ＭＥＫ拮抗剤を含む癌治療の有効性を増大させるために有効である。例えば、いくつかの実施形態において、ＰＩＫ３拮抗剤及びＭＥＫ拮抗剤のそれぞれの量は、ＰＩＫ３拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した有効性のために有効である。いくつかの実施形態において、ＰＩＫ３拮抗剤及びＭＥＫ拮抗剤のそれぞれの量は、ＰＩＫ３拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した寛解（例えば、完全寛解）のために有効である。いくつかの実施形態において、ＰＩＫ３拮抗剤及びＭＥＫ拮抗剤のそれぞれの量は、癌感受性を増大させるため及び／またはＭＥＫ拮抗剤に対する感受性を回復させるために有効である。
【０１８７】
具体的に、本明細書では、個体に（ａ）ＰＩＫ３拮抗剤、（ｂ）ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、及び（ｃ）ＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、個体における癌の治療方法が提供される。いくつかの実施形態において、ＰＩＫ３拮抗剤及びＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤のそれぞれの量は、ＭＥＫ拮抗剤に対する癌感受性の期間を増大させるため及び／または癌耐性の発生を遅らせるために有効である。いくつかの実施形態において、ＰＩＫ３拮抗剤及びＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤のそれぞれの量は、ＭＥＫ拮抗剤を含む癌治療の有効性を増大させるために有効である。例えば、いくつかの実施形態において、ＰＩＫ３拮抗剤、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、及びＭＥＫ拮抗剤のそれぞれの量は、ＰＩＫ３拮抗剤及び／またはＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した有効性のために有効である。いくつかの実施形態において、ＰＩＫ３拮抗剤、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、及びＭＥＫ拮抗剤のそれぞれの量は、ＰＩＫ３拮抗剤及び／またはＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した寛解（例えば、完全寛解）のために有効である。いくつかの実施形態において、ＰＩＫ３拮抗剤、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、及びＭＥＫ拮抗剤のそれぞれの量は、癌感受性を増大させるため及び／またはＭＥＫ拮抗剤に対する感受性を回復させるために有効である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ１ｂ、ＦＧＦＲ１ｃ、ＦＧＦ１、ＦＧＦ２、ＦＧＦ３、ＦＧＦ４、ＦＧＦ５、ＦＧＦ６、及びＦＧＦ１０のうちの１つ以上と、結合及び／または阻害する。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ拮抗剤はＭＥＫ１阻害剤である。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ拮抗剤はＭＥＫ２阻害剤である。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ阻害剤はＭＥＫ１／２阻害剤である。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ阻害剤はＧＤＣ−０９７３（コビメチニブ）である。ある特定の実施形態において、ＰＩＫ３拮抗剤はＧＤＣ−００３２である。ある特定の実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤は、ベムラフェニブ（すなわち、ＰＬＸ４０３２）、ソラフェニブ、ＰＬＸ４７２０、ＰＬ−３６０３、ＧＳＫ２１１８４３６、ＧＤＣ−０８７９、Ｎ−（３−（５−（４−クロロフェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−カルボニル）−２，４−ジフルオロフェニル）プロパン−１−スルホンアミド、ＧＳＫ２１１８４３６、ＲＡＦ２６５（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＸＬ２８１、ＡＲＱ７３６、ＢＡＹ７３−４５０６のうちの１つ以上である。ある特定の実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤はＢ−ｒａｆ  Ｖ６００Ｅに対して選択的であり得る。いくつかの実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤はベムラフェニブ（すなわち、ＰＬＸ４０３２）である。
【０１８８】
本明細書では、個体に有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む、個体におけるＭＥＫ拮抗剤及び／またはＢ−ｒａｆ拮抗剤での治療に対して耐性を有する癌細胞の治療方法が提供される。本明細書では、個体に有効量のＰＩＫ３拮抗剤及び有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む、個体におけるＭＥＫ拮抗剤及び／またはＢ−ｒａｆ拮抗剤での治療に対して耐性を有する癌細胞の治療方法が提供される。本明細書では、個体に有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む、個体におけるＭＥＫ拮抗剤及び／またはＢ−ｒａｆ拮抗剤に対して耐性を有する癌の治療方法もまた提供される。本明細書では、個体に有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤及び有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む、個体におけるＭＥＫ拮抗剤及び／またはＢ−ｒａｆ拮抗剤に対して耐性を有する癌の治療方法が提供される。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ１ｂ、ＦＧＦＲ１ｃ、ＦＧＦ１、ＦＧＦ２、ＦＧＦ３、ＦＧＦ４、ＦＧＦ５、ＦＧＦ６、及びＦＧＦ１０のうちの１つ以上と、結合及び／または阻害する。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ拮抗剤はＭＥＫ１阻害剤である。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ拮抗剤はＭＥＫ２阻害剤である。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ阻害剤はＭＥＫ１／２阻害剤である。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ阻害剤はＧＤＣ−０９７３（コビメチニブ）である。ある特定の実施形態において、ＰＩＫ３拮抗剤はＧＤＣ−００３２である。ある特定の実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤は、ベムラフェニブ（すなわち、ＰＬＸ４０３２）、ソラフェニブ、ＰＬＸ４７２０、ＰＬ−３６０３、ＧＳＫ２１１８４３６、ＧＤＣ−０８７９、Ｎ−（３−（５−（４−クロロフェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−カルボニル）−２，４−ジフルオロフェニル）プロパン−１−スルホンアミド、ＧＳＫ２１１８４３６、ＲＡＦ２６５（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＸＬ２８１、ＡＲＱ７３６、ＢＡＹ７３−４５０６のうちの１つ以上である。ある特定の実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤はＢ−ｒａｆ  Ｖ６００Ｅに対して選択的であり得る。いくつかの実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤はベムラフェニブ（すなわち、ＰＬＸ４０３２）である。
【０１８９】
本明細書では、個体に有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む、ＭＥＫ拮抗剤及び／またはＢ−ｒａｆ拮抗剤に対する、感受性を増大させる及び／または感受性を回復させる方法もまた提供される。本明細書では、個体に有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤及び有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む、ＭＥＫ拮抗剤及び／またはＢ−ｒａｆ拮抗剤に対する、感受性を増大させる及び／または感受性を回復させる方法もまた提供される。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ１ｂ、ＦＧＦＲ１ｃ、ＦＧＦ１、ＦＧＦ２、ＦＧＦ３、ＦＧＦ４、ＦＧＦ５、ＦＧＦ６、及びＦＧＦ１０のうちの１つ以上と、結合及び／または阻害する。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ拮抗剤はＭＥＫ１阻害剤である。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ拮抗剤はＭＥＫ２阻害剤である。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ阻害剤はＭＥＫ１／２阻害剤である。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ阻害剤はＧＤＣ−０９７３（コビメチニブ）である。ある特定の実施形態において、ＰＩＫ３拮抗剤はＧＤＣ−００３２である。ある特定の実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤は、ベムラフェニブ（すなわち、ＰＬＸ４０３２）、ソラフェニブ、ＰＬＸ４７２０、ＰＬ−３６０３、ＧＳＫ２１１８４３６、ＧＤＣ−０８７９、Ｎ−（３−（５−（４−クロロフェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−カルボニル）−２，４−ジフルオロフェニル）プロパン−１−スルホンアミド、ＧＳＫ２１１８４３６、ＲＡＦ２６５（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＸＬ２８１、ＡＲＱ７３６、ＢＡＹ７３−４５０６のうちの１つ以上である。ある特定の実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤はＢ−ｒａｆ  Ｖ６００Ｅに対して選択的であり得る。いくつかの実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤はベムラフェニブ（すなわち、ＰＬＸ４０３２）である。
【０１９０】
本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、個体におけるＭＥＫ拮抗剤及び／またはＢ−ｒａｆ拮抗剤を含む癌治療の有効性を増大させる方法が提供される。本明細書では、個体に（ａ）有効量のＰＩＫ３拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、個体におけるＭＥＫ拮抗剤及び／またはＢ−ｒａｆ拮抗剤を含む癌治療の有効性を増大させる方法が更に提供される。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ１ｂ、ＦＧＦＲ１ｃ、ＦＧＦ１、ＦＧＦ２、ＦＧＦ３、ＦＧＦ４、ＦＧＦ５、ＦＧＦ６、及びＦＧＦ１０のうちの１つ以上と、結合及び／または阻害する。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ拮抗剤はＭＥＫ１阻害剤である。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ拮抗剤はＭＥＫ２阻害剤である。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ阻害剤はＭＥＫ１／２阻害剤である。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ阻害剤はＧＤＣ−０９７３（コビメチニブ）である。ある特定の実施形態において、ＰＩＫ３拮抗剤はＧＤＣ−００３２である。ある特定の実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤は、ベムラフェニブ（すなわち、ＰＬＸ４０３２）、ソラフェニブ、ＰＬＸ４７２０、ＰＬ−３６０３、ＧＳＫ２１１８４３６、ＧＤＣ−０８７９、Ｎ−（３−（５−（４−クロロフェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−カルボニル）−２，４−ジフルオロフェニル）プロパン−１−スルホンアミド、ＧＳＫ２１１８４３６、ＲＡＦ２６５（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＸＬ２８１、ＡＲＱ７３６、ＢＡＹ７３−４５０６のうちの１つ以上である。ある特定の実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤はＢ−ｒａｆ  Ｖ６００Ｅに対して選択的であり得る。いくつかの実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤はベムラフェニブ（すなわち、ＰＬＸ４０３２）である。
【０１９１】
本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤、及び／またはＢ−ｒａｆ拮抗剤を同時に投与することを含み、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び／またはＢ−ｒａｆ拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して、増大した有効性を有する、個体における癌の治療方法が提供される。加えて、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、個体におけるＭＥＫ拮抗剤に対して耐性を有する癌の発生を遅らせる及び／または防止する方法が提供される。
【０１９２】
本明細書では、個体における癌の治療であって、個体に（ａ）有効量のＰＩＫ３拮抗剤、及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤、ならびに／またはＢ−ｒａｆ拮抗剤、ならびに／または有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤を同時に投与することを含み、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び／またはＢ−ｒａｆ拮抗剤及び／またはＰＩＫ３拮抗剤無しで（不在下で）有効量のＭＥＫ拮抗剤を投与することを含む標準的な治療と比較して増大した有効性を有する、癌治療が提供される。加えて、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＰＩＫ３拮抗剤、及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤、ならびに／または有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、ならびに／または有効量のＢ−ｒａｆ拮抗剤を同時に投与することを含む、個体におけるＭＥＫ拮抗剤に対して耐性を有する癌の発生を遅らせる及び／または防止する方法が提供される。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ１ｂ、ＦＧＦＲ１ｃ、ＦＧＦ１、ＦＧＦ２、ＦＧＦ３、ＦＧＦ４、ＦＧＦ５、ＦＧＦ６、及びＦＧＦ１０のうちの１つ以上と、結合及び／または阻害する。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ拮抗剤はＭＥＫ１阻害剤である。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ拮抗剤はＭＥＫ２阻害剤である。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ阻害剤はＭＥＫ１／２阻害剤である。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ阻害剤はＧＤＣ−０９７３（コビメチニブ）である。ある特定の実施形態において、ＰＩＫ３拮抗剤はＧＤＣ−００３２である。ある特定の実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤は、ベムラフェニブ（すなわち、ＰＬＸ４０３２）、ソラフェニブ、ＰＬＸ４７２０、ＰＬ−３６０３、ＧＳＫ２１１８４３６、ＧＤＣ−０８７９、Ｎ−（３−（５−（４−クロロフェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−カルボニル）−２，４−ジフルオロフェニル）プロパン−１−スルホンアミド、ＧＳＫ２１１８４３６、ＲＡＦ２６５（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＸＬ２８１、ＡＲＱ７３６、ＢＡＹ７３−４５０６のうちの１つ以上である。ある特定の実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤はＢ−ｒａｆ  Ｖ６００Ｅに対して選択的であり得る。いくつかの実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤はベムラフェニブ（すなわち、ＰＬＸ４０３２）である。
【０１９３】
本明細書では、個体に（ａ）ＭＥＫ拮抗剤、及び（ｂ）有効量のＢ−ｒａｆ拮抗剤、ならびに／または有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤を同時に投与することを含む、ＭＥＫ拮抗剤に対する耐性の発生の増大した可能性を有する、癌を有する個体の治療方法が提供される。本明細書では、個体に（ａ）ＭＥＫ拮抗剤及び（ｂ）有効量のＰＩＫ３拮抗剤を同時に投与することを含む、ＭＥＫ拮抗剤に対する耐性の発生の増大した可能性を有する、癌を有する個体の治療方法が提供される。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ１ｂ、ＦＧＦＲ１ｃ、ＦＧＦ１、ＦＧＦ２、ＦＧＦ３、ＦＧＦ４、ＦＧＦ５、ＦＧＦ６、及びＦＧＦ１０のうちの１つ以上と、結合及び／または阻害する。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ拮抗剤はＭＥＫ１阻害剤である。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ拮抗剤はＭＥＫ２阻害剤である。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ阻害剤はＭＥＫ１／２阻害剤である。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ阻害剤はＧＤＣ−０９７３（コビメチニブ）である。ある特定の実施形態において、ＰＩＫ３拮抗剤はＧＤＣ−００３２である。ある特定の実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤は、ベムラフェニブ（すなわち、ＰＬＸ４０３２）、ソラフェニブ、ＰＬＸ４７２０、ＰＬ−３６０３、ＧＳＫ２１１８４３６、ＧＤＣ−０８７９、Ｎ−（３−（５−（４−クロロフェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−カルボニル）−２，４−ジフルオロフェニル）プロパン−１−スルホンアミド、ＧＳＫ２１１８４３６、ＲＡＦ２６５（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＸＬ２８１、ＡＲＱ７３６、ＢＡＹ７３−４５０６のうちの１つ以上である。ある特定の実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤はＢ−ｒａｆ  Ｖ６００Ｅに対して選択的であり得る。いくつかの実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤はベムラフェニブ（すなわち、ＰＬＸ４０３２）である。
【０１９４】
本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＭＥＫ拮抗剤に対する感受性を増大させる方法が更に提供される。本明細書では、個体に（ａ）有効量のＰＩＫ３拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＭＥＫ拮抗剤に対する感受性を増大させる方法が提供される。加えて、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＭＥＫ拮抗剤の感受性の期間を延ばす方法が提供される。加えて、本明細書では、個体に（ａ）有効量のＰＩＫ３拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＭＥＫ拮抗剤の感受性の期間を延ばす方法が提供される。ある特定の実施形態において、本方法はＢ−ｒａｆ拮抗剤を含んでもよい。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ１ｂ、ＦＧＦＲ１ｃ、ＦＧＦ１、ＦＧＦ２、ＦＧＦ３、ＦＧＦ４、ＦＧＦ５、ＦＧＦ６、及びＦＧＦ１０のうちの１つ以上と、結合及び／または阻害する。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ拮抗剤はＭＥＫ１阻害剤である。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ拮抗剤はＭＥＫ２阻害剤である。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ阻害剤はＭＥＫ１／２阻害剤である。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ阻害剤はＧＤＣ−０９７３（コビメチニブ）である。ある特定の実施形態において、ＰＩＫ３拮抗剤はＧＤＣ−００３２である。ある特定の実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤は、ベムラフェニブ（すなわち、ＰＬＸ４０３２）、ソラフェニブ、ＰＬＸ４７２０、ＰＬ−３６０３、ＧＳＫ２１１８４３６、ＧＤＣ−０８７９、Ｎ−（３−（５−（４−クロロフェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−カルボニル）−２，４−ジフルオロフェニル）プロパン−１−スルホンアミド、ＧＳＫ２１１８４３６、ＲＡＦ２６５（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＸＬ２８１、ＡＲＱ７３６、ＢＡＹ７３−４５０６のうちの１つ以上である。ある特定の実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤はＢ−ｒａｆ  Ｖ６００Ｅに対して選択的であり得る。いくつかの実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤はベムラフェニブ（すなわち、ＰＬＸ４０３２）である。
【０１９５】
本明細書では、（ａ）有効量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＭＥＫ拮抗剤に対する応答の持続時間を延ばす方法もまた提供される。本明細書では、（ａ）有効量のＰＩ３Ｋ拮抗剤及び（ｂ）有効量のＭＥＫ拮抗剤を同時に投与することを含む、癌を有する個体におけるＭＥＫ拮抗剤に対する応答の持続時間を延ばす方法もまた提供される。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ１ｂ、ＦＧＦＲ１ｃ、ＦＧＦ１、ＦＧＦ２、ＦＧＦ３、ＦＧＦ４、ＦＧＦ５、ＦＧＦ６、及びＦＧＦ１０のうちの１つ以上と、結合及び／または阻害する。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ拮抗剤はＭＥＫ１阻害剤である。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ拮抗剤はＭＥＫ２阻害剤である。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ阻害剤はＭＥＫ１／２阻害剤である。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ阻害剤はＧＤＣ−０９７３（コビメチニブ）である。ある特定の実施形態において、ＰＩＫ３拮抗剤はＧＤＣ−００３２である。ある特定の実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤は、ベムラフェニブ（すなわち、ＰＬＸ４０３２）、ソラフェニブ、ＰＬＸ４７２０、ＰＬ−３６０３、ＧＳＫ２１１８４３６、ＧＤＣ−０８７９、Ｎ−（３−（５−（４−クロロフェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−カルボニル）−２，４−ジフルオロフェニル）プロパン−１−スルホンアミド、ＧＳＫ２１１８４３６、ＲＡＦ２６５（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＸＬ２８１、ＡＲＱ７３６、ＢＡＹ７３−４５０６のうちの１つ以上である。ある特定の実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤はＢ−ｒａｆ  Ｖ６００Ｅに対して選択的であり得る。いくつかの実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤はベムラフェニブ（すなわち、ＰＬＸ４０３２）である。
【０１９６】
いずれかの方法におけるいくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、抗体阻害剤、低分子阻害剤、結合ポリペプチド阻害剤、及び／またはポリヌクレオチド拮抗剤である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、結合ポリペプチド阻害剤である。いくつかの実施形態において、結合ポリペプチド阻害剤は、Ｆｃに連結したＦＧＦＲの細胞外ドメインの領域（例えば、ＦＰ−１０３９（Ｆｉｖｅ  Ｐｒｉｍｅ））を含む。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ２シグナル伝達の拮抗剤である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ３シグナル伝達の拮抗剤である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ４シグナル伝達の拮抗剤である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、低分子である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、抗体である。
【０１９７】
いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ１ｂ、ＦＧＦＲ１ｃ、ＦＧＦ１、ＦＧＦ２、ＦＧＦ３、ＦＧＦ４、ＦＧＦ５、ＦＧＦ６、及びＦＧＦ１０のうちの１つ以上と、結合及び／または阻害する。いくつかの実施形態において、低分子は、Ｎ−［２−［［４−（ジエチルアミノ）ブチル］アミノ］−６−（３，５−ジメトキシフェネチル）ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル］−Ｎ’−（１，１−ジメチルエチル）−尿素またはその薬学的に許容される塩である。いくつかの実施形態において、低分子は、ＢＧＪ３９８（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＡＺＤ４５４７（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、及び／またはＦＦ２８４（Ｃｈｕｇａｉ／Ｄｅｂｉｏｐｈａｒｍ（Ｄｅｂｉｏ１３４７）である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、抗ＦＧＦ２抗体である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、抗ＦＧＦＲ１抗体である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、抗ＦＧＦＲ１−ＩＩＩｂ抗体である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、抗ＦＧＦＲ１−ＩＩＩｃ抗体である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、１つを超えるＦＧＦＲポリペプチドと結合することが可能な抗ＦＧＦＲ抗体である。
【０１９８】
本発明で使用する療法に対して耐性を有する癌としては、療法に対する応答性のない、及び／または著しい応答（例えば、部分応答及び／若しくは完全応答）を生み出す能力が低下した癌が挙げられる。耐性は、治療法の過程において生じる獲得耐性であってよい。いくつかの実施形態では、獲得薬剤耐性は、一過性、及び／または可逆的薬剤耐性である。治療に対する一過性及び／または可逆的薬剤耐性としては、治療法の休憩後に、治療に対する感受性を回復可能な薬剤耐性が挙げられる。いくつかの実施形態において、獲得耐性は持続耐性である。療法に対する持続耐性としては、薬剤耐性を付与する遺伝子変化が挙げられる。
【０１９９】
本明細書で使用される療法に対して感受性を有する癌としては、応答性がある、ならびに／または著しい応答（例えば、部分応答及び／または完全応答）を生み出すことが可能な癌が挙げられる。
【０２００】
療法に対する耐性の獲得及び／または感受性の維持を評価する測定方法は、当業界において既知であり、実施例に記載されている。薬剤耐性等の耐性の獲得及び／または感受性の維持における変化を、実施例及びＳｈａｒｍａらにて記載されたようにして、薬剤耐性がある存続生物の成長をアッセイすることにより評価してもよい。持続耐性及び／または拡大した存続生物等の耐性の獲得及び／または感受性の維持における変化は、実施例及びＳｈａｒｍａらにて記載されたようにして、薬剤耐性がある拡大した存続生物の成長をアッセイすることにより評価されてもよい。いくつかの実施形態において、耐性は、ＩＣ５０、ＥＣ５０の変化、または薬剤耐性がある存続生物及び／若しくは薬剤耐性がある拡大した存続生物における腫瘍成長の減少で示されてもよい。いくつかの実施形態において、変化は、約５０％、約１００％、及び／または約２００％のいずれかより大きい。加えて、耐性の獲得及び／または感受性の維持における変化を、例えば、応答、応答の持続時間、及び／または療法に対する進行時間（例えば、部分応答及び完全応答）を評価することにより、インビボで評価してもよい。耐性の獲得及び／または感受性の維持における変化は、応答の変化、応答の持続時間、及び／または多くの個体における療法に対する進行時間、例えば部分応答及び完全応答に基づいてよい。
【０２０１】
いずれかの方法におけるいくつかの実施形態において、癌は固形腫瘍癌である。いくつかの実施形態において、癌は肺癌（例えば、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ））である。いくつかの実施形態において、癌は乳癌（例えば、ＨＥＲ２陽性乳癌）である。いくつかの実施形態において、癌は黒色腫である。いくつかの実施形態において、癌は上皮組織の癌である。いくつかの実施形態において、癌は腺癌である。本明細書に記載される併用療法のいずれかにおける癌は、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及びＢ−ｒａｆ拮抗剤を含む治療方法を開始するとき、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤を単独で含む治療方法に対して感受性（感受性の例としては、応答性がある及び／または著しい寛解（例えば、部分的な寛解及び／または完全寛解）を生み出すことが可能であることが挙げられるが、これらに限定されない）を有し得る。本明細書に記載される併用療法のいずれかにおける癌は、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及びＢ−ｒａｆ拮抗剤を含む治療方法を開始するとき、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤を単独で含む治療方法に対して耐性（耐性の例としては、応答性がない及び／または低下した能力及び／または著しい寛解（例えば、部分的寛解及び／または完全寛解）を生み出すことが不可能であることが挙げられるが、これらに限定されない）を有しない場合がある。いくつかの実施形態において、癌は上皮間葉移行（ＥＭＴ）を経ている。いくつかの実施形態において、ＥＭＴは、上皮関連タンパク質／ＲＮＡ（例えば、Ｅ−カドヘリン）及び／または間葉関連タンパク質／ＲＮＡ（例えば、ビタミン）の発現をアッセイすることにより検出される。いくつかの実施形態において、癌は、野生型Ｂ−ｒａｆを有する（すなわち、Ｂ−ｒａｆにおいて突然変異を有しない癌）。いくつかの実施形態において、癌はＢ−ｒａｆにおいて突然変異を有する。いくつかの実施形態において、突然変異体Ｂ−ｒａｆは、恒常的に活性化されたＢ−ｒａｆである。いくつかの実施形態において、突然変異体Ｂ−ｒａｆはＢ−ｒａｆ  Ｖ６００である。いくつかの実施形態において、Ｂ−ｒａｆ  Ｖ６００はＢ−ｒａｆ  Ｖ６００Ｅである。いくつかの実施形態において、突然変異体Ｂ−ｒａｆは、Ｂ−ｒａｆ  Ｖ６００Ｋ（ＧＴＧ＞ＡＡＧ）、Ｖ６００Ｒ（ＧＴＧ＞ＡＧＧ）、Ｖ６００Ｅ（ＧＴＧ＞ＧＡＡ）、及び／またはＶ６００Ｄ（ＧＴＧ＞ＧＡＴ）のうちの１つ以上である。
【０２０２】
いずれかの方法におけるいくつかの実施形態において、上記の実施形態のうちのいずれかに従う個体はヒトであり得る。
【０２０３】
いずれかの方法におけるいくつかの実施形態では、上述の併用療法は、併用投与（２つ以上の治療剤が同一または別々の製剤に含まれる）、及び個別投与を包含してよく、この場合、本発明の拮抗剤の投与は、追加の治療剤及び／またはアジュバントの投与前に、同時に、逐次的に、及び／またはそれに続いて実施してもよい。いくつかの実施形態において、併用療法は、更に、放射線療法及び／または追加の治療剤を含む。
【０２０４】
ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、ＭＥＫ拮抗剤、ＰＩＫ３拮抗剤、及びＢ−ｒａｆ拮抗剤は、経口、非経口、肺内、及び鼻腔内、ならびに局所治療のために所望の場合病巣内投与を含む、任意の好適な手段により投与され得る。非経口注入としては、筋肉内静脈内、静脈内、動脈内、腹腔内、または皮下投与が挙げられる。投薬は、部分的には、投与が短期的なものか長期にわたるものかに応じて、例えば静脈内または皮下注射等の注射による、任意の好適な経路により行うことができる。種々の時点における単一または複数投与、ボーラス投与、及びパルス注入が挙げられるがこれらに限定されない種々の投与が、本明細書において考慮される。
【０２０５】
本明細書に記載されるＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤（例えば、抗体、結合ポリペプチド、及び／または低分子）、ＭＥＫ拮抗剤、ＰＩＫ３拮抗剤、ならびにＢ−ｒａｆ拮抗剤は、良好な医療業務に合わせた方法で配合、投薬、及び投与され得る。本文脈で考慮すべき要因としては、治療される特定の障害、治療される特定の哺乳動物、個々の患者の臨床状態、障害の原因、作用物質の送達部位、投与方法、投与スケジュール、及び医師にとって既知の他の要因が挙げられる。ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤（例えば、抗体、結合ポリペプチド、及び／または低分子）、ＭＥＫ拮抗剤、ＰＩＫ３拮抗剤、及びＢ−ｒａｆ拮抗剤は、必要ではないが、問題になっている障害を防止または治療するために現在使用されている１つ以上の作用物質と共に任意に配合される。かかる他の作用物質の有効量は、製剤内に存在するＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤（例えば、抗体、結合ポリペプチド、及び／または低分子）、ＭＥＫ拮抗剤、ＰＩＫ３拮抗剤、及び／またはＢ−ｒａｆ拮抗剤の量、障害または治療の種類、ならびに上述の他の因子に依存する。これらは通常、本明細書に記載される同一用量及び投与経路、若しくは本明細書で記載される１〜９９％の用量、または実験的／臨床的に適切と決定される任意の用量及び任意の経路で使用される。
【０２０６】
疾患の予防または治療に対し、本明細書に記載されるＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤（例えば、抗体、結合ポリペプチド、及び／または低分子）、ＭＥＫ拮抗剤、ＰＩＫ３拮抗剤、及びＢ−ｒａｆ拮抗剤の適切な用量は（単独で、または１つ以上の他の更なる治療剤との組み合わせで使用されるとき）、治療する疾患の種類、疾患の重症度及び経過、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤（例えば、抗体、結合ポリペプチド、及び／または低分子）、ＭＥＫ拮抗剤、ＰＩＫ３拮抗剤、及びＢ−ｒａｆ拮抗剤は、防止的または治療的目的で投与されるかどうか、薬歴、患者の病歴ならびにＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤（例えば、抗体、結合ポリペプチド、及び／または低分子）、ＭＥＫ拮抗剤、ＰＩＫ３拮抗剤、ならびにＢ−ｒａｆ拮抗剤に対する寛解、ならびに主治医の自由裁量に依存する。ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤（例えば、抗体、結合ポリペプチド、及び／または低分子）、ＭＥＫ拮抗剤、ＰＩＫ３拮抗剤、及びＢ−ｒａｆ拮抗剤は、一度にまたは一連の治療において患者に好適に投与される。数日間またはそれ以上にわたる反復投与において、状態に応じ、治療は通常、病徴の所望の抑制が生じるまで続けられる。かかる用量は、断続的に、例えば毎週若しくは３週間ごとに（例えば、患者が約２〜２０、または例えば約６用量のＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及びＢ−ｒａｆ拮抗剤を受け取るように投与してもよい。最初の多めの投与量、それに続いてより少ない用量を１回以上投与してもよい。代表的な投与（ｄｏｓｉｎｇ）レジメンには投与（ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｉｎｇ）が含まれる。しかし、他の投薬レジメンも有用である。この療法の進行は、従来技術及びアッセイによって容易に監視される。
【０２０７】
上記の製剤または治療方法のうちのいずれかは、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤（例えば、抗体、結合ポリペプチド、及び／または低分子）、ＭＥＫ拮抗剤、ＰＩＫ３拮抗剤、及びＢ−ｒａｆ拮抗剤として、免疫複合体を使用して実行することができることが理解されている。
【０２０８】
ＩＩＩ．治療用組成物
本明細書では、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤（例えば、抗体、結合ポリペプチド、及び／または低分子）、ＭＥＫ拮抗剤、ＰＩＫ３拮抗剤、及びＢ−ｒａｆ拮抗剤を含む組み合わせが提供される。特定の実施形態において、本明細書では、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤（例えば、抗体、結合ポリペプチド、及び／または低分子）及びＭＥＫ拮抗剤を含む組み合わせが提供される。特定の実施形態において、本明細書では、ＭＥＫ拮抗剤及びＰＩＫ３拮抗剤を含む組み合わせが提供される。特定の実施形態において、本明細書では、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤（例えば、抗体、結合ポリペプチド、及び／または低分子）、ＭＥＫ拮抗剤、及びＢ−ｒａｆ拮抗剤を含む組み合わせが提供される。ある特定の実施形態において、この組み合わせは、単独で投与される標的治療剤の有効性を増大させる。ある特定の実施形態において、この組み合わせは、標的治療剤に対する癌耐性の発生を遅らせる及び／または防止する。ある特定の実施形態において、この組み合わせは、癌を有する個体における標的治療剤の感受性の期間を延ばす。
【０２０９】
本明細書では、本明細書に記載される併用療法方法において有用である、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及びＭＥＫ拮抗剤が提供される。本明細書では、本明細書に記載される併用療法方法において有用である、ＰＩＫ３拮抗剤及びＭＥＫ拮抗剤が提供される。本明細書では、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤を更に含み得る、本明細書に記載される任意の組み合わせが提供される。
【０２１０】
いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、及び／またはＭＥＫ拮抗剤、及び／またはＰＩＫ３拮抗剤、及び／またはＢ−ｒａｆ拮抗剤は、抗体、結合ポリペプチド、結合低分子、及び／またはポリヌクレオチドである。
【０２１１】
種々のＦＧＦＲ及びＦＧＦのアミノ酸配列は、当業界において既知であり、公的に入手可能である。例えば、ＦＧＦＲ１（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  Ｐ１１３６２−１、Ｐ１１３６２−２、Ｐ１１３６２−３、Ｐ１１３６２−４、Ｐ１１３６２−５、Ｐ１１３６２−６、Ｐ１１３６２−７、Ｐ１１３６２−８、Ｐ１１３６２−９、Ｐ１１３６２−１０、Ｐ１１３６２−１１、Ｐ１１３６２−１２、Ｐ１１３６２−１３、Ｐ１１３６２−１４、Ｐ１１３６２−１５、Ｐ１１３６２−１６、Ｐ１１３６２−１７、Ｐ１１３６２−１８、Ｐ１１３６２−１９、Ｐ１１３６２−２０、及び／またはＰ１１３６２−２１）、ＦＧＦＲ２（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  Ｐ２１８０２−１（すなわち、ＦＧＦＲ２−ＩＩＩｃ）、Ｐ２１８０２−２、Ｐ２１８０２−３（すなわち、ＦＧＦＲ２−ＩＩＩｂ）、Ｐ２１８０２−４、Ｐ２１８０２−５、Ｐ２１８０２−６、Ｐ２１８０２−７、Ｐ２１８０２−８、Ｐ２１８０２−９、Ｐ２１８０２−１０、Ｐ２１８０２−１１、Ｐ２１８０２−１２、Ｐ２１８０２−１３、Ｐ２１８０２−１４、Ｐ２１８０２−１５、Ｐ２１８０２−１６、Ｐ２１８０２−１７、Ｐ２１８０２−１８、Ｐ２１８０２−１９、Ｐ２１８０２−２０、Ｐ２１８０２−２１、Ｐ２１８０２−２２、及び／またはＰ２１８０２−２３）、ＦＧＦＲ３（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  Ｐ２２６０７−１（すなわち、ＦＧＦＲ３−ＩＩＩｃ）、Ｐ２２６０７−２（すなわち、ＦＧＦＲ３−ＩＩＩｂ）、Ｐ２２６０７−３、及び／またはＰ２２６０７−４）、ＦＧＦＲ４（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  Ｐ２２４５５−１及び／またはＰ２２４５５−２）、ＦＧＦ１（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  Ｐ０５２３０−１及び／またはＰ０５２３０−２）、ＦＧＦ２（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  Ｐ０９０３８−１、Ｐ０９０３８−２、Ｐ０９０３８−３、及び／またはＰ０９０３８−４）、ＦＧＦ３（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  Ｐ１１４８７）、ＦＧＦ４（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  Ｐ０８６２０）、ＦＧＦ５（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  Ｐ１２０３４−１及び／またはＰ１２０３４−２）、ＦＧＦ６（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  １０７６７）、ＦＧＦ７（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  Ｐ２１７８１）、ＦＧＦ８（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  Ｐ５５０７５−１、Ｐ５５０７５−２、Ｐ５５０７５−３及び／またはＰ５５０７５−４）、ＦＧＦ９（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  Ｐ３１３７１）、ＦＧＦ１０（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  Ｏ１５５２０）、ＦＧＦ１１（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  Ｑ９２９１４）、ＦＧＦ１２（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  Ｐ６１３２８−１及び／またはＰ６１３２８−２）、ＦＧＦ１３（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  Ｑ９２９１３−１、Ｑ９２９１３−２、Ｑ９��９１３−３、Ｑ９２９１３−４、及び／またはＱ９２９１３−５）、ＦＧＦ１４（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  Ｑ９２９１５−１及び／またはＱ９２９１５−２）、ＦＧＦ１６（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  Ｏ４３３２０）、ＦＧＦ１７（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  Ｏ６０２５８−１及び／またはＯ６０２５８−２）、ＦＧＦ１８（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  Ｏ７６０９３）、ＦＧＦ１９（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  Ｏ９５７５０）、ＦＧＦ２０（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  Ｑ９ＮＰ９５）、ＦＧＦ２１（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  Ｑ９ＮＳＡ１）、ＦＧＦ２２（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  Ｑ９ＨＣＴ０）、及び／またはＦＧＦ２３（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  Ｑ９ＧＺＶ９）を参照のこと。
【０２１２】
いずれかの方法におけるいくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、抗体阻害剤、低分子阻害剤、結合ポリペプチド阻害剤、及び／またはポリヌクレオチド拮抗剤である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、結合ポリペプチド阻害剤である。いくつかの実施形態において、結合ポリペプチド阻害剤は、Ｆｃに連結したＦＧＦＲの細胞外ドメインの領域を含む。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、低分子である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、抗体である。
【０２１３】
いずれかの方法におけるいくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ１−ＩＩＩｂ、ＦＧＦＲ１−ＩＩＩｃ、ＦＧＦ１、ＦＧＦ２、ＦＧＦ３、ＦＧＦ４、ＦＧＦ５、ＦＧＦ６、及びＦＧＦ１０のうちの１つ以上と結合及び／または阻害する。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ１（例えば、ＦＧＦＲ１−ＩＩＩｂ及び／またはＦＧＦＲ１−ＩＩＩｃ）と結合及び／または阻害する。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦ２と結合及び／または阻害する。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦ５と結合及び／または阻害する。
【０２１４】
いずれかの方法におけるいくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、結合ポリペプチドである。いくつかの実施形態において、結合ポリペプチドは、ＦＧＦＲ１ポリペプチド及び融合因子の細胞外ドメインを含むＦＧＦＲ１融合タンパク質である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１はＦＧＦＲ１−ＩＩＩｂである。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１はＦＧＦＲ１−ＩＩＩｂである。いくつかの実施形態において、細胞外ドメインは、ＦＧＦＲ１−ＩＩＩｃの２２〜３６０または２２〜５９２のアミノ酸からなる。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１融合タンパク質は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、ＵＳ７６７８８９０に記載されるタンパク質である。
【０２１５】
いずれかの方法におけるいくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、抗体である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、抗ＦＧＦ２抗体である。いくつかの実施形態において、融合因子はＦｃポリペプチドである。いくつかの実施形態において、抗体は、例えば参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、ＵＳ２００９０３０４７０７に記載されるようなＦＧＦ２抗体であり、例えばハイブリドーマＰＴＡ−８８６４及び／またはそのヒト化抗体により産生された抗体である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、抗ＦＧＦＲ１抗体である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、抗ＦＧＦＲ１−ＩＩＩｂ抗体である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、抗ＦＧＦＲ１−ＩＩＩｃ抗体である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、１つを超えるＦＧＦＲポリペプチドと結合することが可能な抗ＦＧＦＲ１抗体である。
【０２１６】
いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、低分子である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、Ｎ−［２−［［４−（ジエチルアミノ）ブチル］アミノ］−６−（３，５−ジメトキシフェネチル）ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル］−Ｎ’−（１，１−ジメチルエチル）−尿素またはその薬学的に許容される塩である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、ＢＧＪ３９８（Ｎｏｖａｒｔｉｓ、すなわち、３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素及び／またはその薬学的に許容される塩；ＣＡＳ＃８７２５１１−３４−７）である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、ＡＺＤ４５４７（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ；すなわち、Ｎ−（５−（３，５−ジメトキシフェネチル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−４−（３Ｓ，５Ｒ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル）ベンズアミド及び／またはその薬学的に許容される塩）である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ１シグナル伝達の拮抗剤は、ＦＦ２８４（Ｃｈｕｇａｉ／Ｄｅｂｉｏｐｈａｒｍ（Ｄｅｂｉｏ１３４７））である。
【０２１７】
いずれかの方法におけるいくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ２シグナル伝達の拮抗剤である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ２シグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ２−ＩＩＩｂ、ＦＧＦＲ２−ＩＩＩｃ、ＦＧＦ１、ＦＧＦ２、ＦＧＦ３、ＦＧＦ４、ＦＧＦ６、ＦＧＦ７、ＦＧＦ９、ＦＧＦ１０、ＦＧＦ１７、ＦＧＦ１８、及びＦＧＦ２２のうちの１つ以上と結合及び／または阻害する。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ２シグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ２（例えば、ＦＧＦＲ２−ＩＩＩｂ及び／またはＦＧＦＲ２−ＩＩＩｃ）と結合及び／または阻害する。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ２シグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦ２と結合及び／または阻害する。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ２シグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦ９と結合及び／または阻害する。
【０２１８】
いずれかの方法におけるいくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ２シグナル伝達の拮抗剤は、結合ポリペプチドである。いくつかの実施形態において、結合ポリペプチドは、ＦＧＦＲ２ポリペプチド及び融合因子の細胞外ドメインを含むＦＧＦＲ２融合タンパク質である。例としては、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、ＷＯ２００８／０６５５４３及びＷＯ２００７／０１４１２３に記載されたものが挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ２シグナル伝達の拮抗剤は、抗ＦＧＦＲ２抗体である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ２シグナル伝達の拮抗剤は、抗ＦＧＦＲ２−ＩＩＩｂ抗体である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ２シグナル伝達の拮抗剤は、抗ＦＧＦＲ２−ＩＩＩｃ抗体である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ２シグナル伝達の拮抗剤は、１つを超えるＦＧＦＲポリペプチドと結合することが可能な、抗ＦＧＦＲ２抗体である。ＦＧＦＲ２抗体の例は当業界において既知であり、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、ＵＳ８，１０１，７２３、ＵＳ８，１０１，７２１、ＷＯ２００１／７９２６６、ＷＯ２００７／１４４８９３、及びＷＯ２０１０／０５４２６５に記載される抗体を含むが、これらに限定されない。
【０２１９】
いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ２シグナル伝達の拮抗剤は、低分子である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ２シグナル伝達の拮抗剤は、ＢＧＪ３９８（Ｎｏｖａｒｔｉｓ、すなわち、３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素及び／またはその薬学的に許容される塩；ＣＡＳ＃８７２５１１−３４−７）である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ２シグナル伝達の拮抗剤は、ＡＺＤ４５４７（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ；すなわち、Ｎ−（５−（３，５−ジメトキシフェネチル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−４−（３Ｓ，５Ｒ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル）ベンズアミド及び／またはその薬学的に許容される塩）である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ２シグナル伝達の拮抗剤は、ＦＦ２８４（Ｃｈｕｇａｉ／Ｄｅｂｉｏｐｈａｒｍ（Ｄｅｂｉｏ１３４７））である。
【０２２０】
いずれかの方法におけるいくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ３シグナル伝達の拮抗剤である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ３シグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ３−ＩＩＩｂ、ＦＧＦＲ３−ＩＩＩｃ、ＦＧＦ１、ＦＧＦ２、ＦＧＦ４、ＦＧＦ８、ＦＧＦ９、ＦＧＦ１７、ＦＧＦ１８、及びＦＧＦ２３のうちの１つ以上と結合及び／または阻害する。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ３シグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ３（例えば、ＦＧＦＲ３−ＩＩＩｂ及び／またはＦＧＦＲ３−ＩＩＩｃ）と結合及び／または阻害する。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ３シグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦ２と結合及び／または阻害する。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ３シグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦ９と結合及び／または阻害する。
【０２２１】
いずれかの方法におけるいくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ３シグナル伝達の拮抗剤は、結合ポリペプチドである。いくつかの実施形態において、結合ポリペプチドは、ＦＧＦＲ３ポリペプチドと融合因子との細胞外ドメインを含むＦＧＦＲ３融合タンパク質である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ３シグナル伝達の拮抗剤は、抗ＦＧＦＲ３抗体である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ３シグナル伝達の拮抗剤は、抗ＦＧＦＲ３−ＩＩＩｂ抗体である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ３シグナル伝達の拮抗剤は、抗ＦＧＦＲ３−ＩＩＩｃ抗体である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ３シグナル伝達の拮抗剤は、１つを超えるＦＧＦＲポリペプチドと結合することが可能な抗ＦＧＦＲ３抗体である。ＦＧＦＲ３抗体の例は当業界において既知であり、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、ＵＳ８，１０１，７２１、ＷＯ２０１０／１１１３６７、ＷＯ２００１／７９２６６、ＷＯ２００２／１０２８５４、ＷＯ２００２／１０９７２、ＷＯ２００７／１４４８９３、ＷＯ２０１０／００２８６２、及び／またはＷＯ２０１０／０４８０２６に記載される抗体を含むが、これらに限定されない。
【０２２２】
いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ３シグナル伝達の拮抗剤は、低分子である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ３シグナル伝達の拮抗剤は、ＢＧＪ３９８（Ｎｏｖａｒｔｉｓ、すなわち、３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素及び／またはその薬学的に許容される塩；ＣＡＳ＃８７２５１１−３４−７）である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ３シグナル伝達の拮抗剤は、ＡＺＤ４５４７（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ；すなわち、Ｎ−（５−（３，５−ジメトキシフェネチル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−４−（３Ｓ，５Ｒ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル）ベンズアミド及び／またはその薬学的に許容される塩）である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ３シグナル伝達の拮抗剤は、ＦＦ２８４（Ｃｈｕｇａｉ／Ｄｅｂｉｏｐｈａｒｍ（Ｄｅｂｉｏ１３４７））である。いずれかの方法におけるいくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ３拮抗剤は、ブリバニブ、ドビチニブ（Ｄｏｖｉｔｉｎｉｂ）（ＴＫＩ−２５８）、及び／またはＨＭ−８０８７１Ａである。
【０２２３】
いずれかの方法におけるいくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ４シグナル伝達の拮抗剤である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ４シグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ４−ＩＩＩｂ、ＦＧＦＲ４−ＩＩＩｃ、ＦＧＦ１、ＦＧＦ２、ＦＧＦ４、ＦＧＦ６、ＦＧＦ８、ＦＧＦ９、ＦＧＦ１６、ＦＧＦ１７、ＦＧＦ１８、及びＦＧＦ１９のうちの１つ以上と結合及び／または阻害する。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ４シグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ４（例えば、ＦＧＦＲ４−ＩＩＩｂ及び／またはＦＧＦＲ４−ＩＩＩｃ）と結合及び／または阻害する。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ４シグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦ２と結合及び／または阻害する。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ４シグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦ９と結合及び／または阻害する。
【０２２４】
いずれかの方法におけるいくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ４シグナル伝達の拮抗剤は、結合ポリペプチドである。いくつかの実施形態において、結合ポリペプチドは、ＦＧＦＲ４ポリペプチド及び融合因子の細胞外ドメインを含む、ＦＧＦＲ４融合タンパク質である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ４シグナル伝達の拮抗剤は、抗ＦＧＦＲ４抗体である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ４シグナル伝達の拮抗剤は、１つを超えるＦＧＦＲポリペプチドと結合することが可能な抗ＦＧＦＲ４抗体である。ＦＧＦＲ４抗体の例は当業界において既知であり、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、ＷＯ２００８／０５２７９６及びＷＯ２００５／０３７２３５に記載される抗体を含むが、これらに限定されない。
【０２２５】
いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ４シグナル伝達の拮抗剤は、低分子である。いくつかの実施形態において、弱いＦＧＦＲ４シグナル伝達の拮抗剤は、ＢＧＪ３９８（Ｎｏｖａｒｔｉｓ、すなわち、３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素及び／またはその薬学的に許容される塩；ＣＡＳ＃８７２５１１−３４−７）である。いくつかの実施形態において、弱いＦＧＦＲ４の拮抗剤は、ＡＺＤ４５４７（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ；すなわち、Ｎ−（５−（３，５−ジメトキシフェネチル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−４−（３Ｓ，５Ｒ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル）ベンズアミド及び／またはその薬学的に許容される塩）である。いくつかの実施形態において、弱いＦＧＦＲ４の拮抗剤はＦＦ２８４（Ｃｈｕｇａｉ／Ｄｅｂｉｏｐｈａｒｍ（Ｄｅｂｉｏ１３４７））である。
【０２２６】
例示的なＦＧＦＲ拮抗剤は当業界において既知であり、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、ＵＳ５２８８８５５、ＵＳ６３４４５４６、ＷＯ９４／２１８１３、ＵＳ２００７０２７４９８１、ＷＯ２００５／０６６２１１、ＷＯ２０１１／０６８８９３、ＵＳ５２２９５０１、ＵＳ６６５６７２８、ＵＳ７６７８８９０、ＷＯ９５／０２１２５８、ＵＳ６９２１７６３、ＵＳ６７１３４７４、ＵＳ６６１０６８８、ＵＳ６２９７２３８、ＵＳ２０１３００５３３７６、ＵＳ２０１３００３９８５５、ＵＳ２０１３００４４９２、ＵＳ２０１２０３１６１３７、ＵＳ２０１２０２５１５３８、ＵＳ２０１２０１９５８５１、ＵＳ２０１１０１２９５２４、ＵＳ２０１１００５３９３２、ＵＳ２００５０２２７９２１、ＥＰ１７６１５０５、ＷＯ２０１２／１２５１２４、ＷＯ２０１２／１２３５８５、ＷＯ２０１１／０９９５７６、ＷＯ２０１１／０３５９２２、ＷＯ２００９１４８９２８、ＷＯ２００８／１４９５２１、ＷＯ２００５／０７９３９０、ＷＯ２００３／０８００６４、ＷＯ２００８／０７５０６８（具体的には実施例８０）、ＷＯ２００５／０８０３３０を含むが、これらに限定されない。
【０２２７】
いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ／ＦＧＦに対する特定の阻害剤、例えば特定のＦＧＦＲ１に対する阻害剤であり得る。いくつかの実施形態において、阻害剤は、二重阻害剤または汎阻害剤であり得、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤は、ＦＧＦＲ／ＦＧＦ及び１つ以上の他の標的ポリペプチドならびに／または１つ以上のＦＧＦＲ／ＦＧＦを阻害する。
【０２２８】
ある特定の実施形態において、ＭＥＫ拮抗剤はＭＥＫ１阻害剤である。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ拮抗剤はＭＥＫ２阻害剤である。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ阻害剤はＭＥＫ１／２阻害剤である。ある特定の実施形態において、ＭＥＫ阻害剤はＧＤＣ−０９７３（コビメチニブ）である。ある特定の実施形態において、ＰＩＫ３拮抗剤はＧＤＣ−００３２である。
【０２２９】
本明細書に記載される方法において有用なＢ−ｒａｆ拮抗剤もまた、本明細書で提供される。
【０２３０】
例示的なＢ−ｒａｆ拮抗剤としては、当業界において既知のもの、例えば、ベムラフェニブ（Ｚｅｌｏｂｒａｆ（登録商標）及びＰＬＸ４０３２としても既知である）ソラフェニブ、ＰＬＸ４７２０、ＰＬＸ３６０３、ＧＳＫ２１１８４３６、ＧＤＣ−０８７９、Ｎ−（３−（５−（４−クロロフェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−カルボニル）−２，４−ジフルオロフェニル）プロパン−１−スルホンアミド、及びＷＯ２００７／００２３２５、ＷＯ２００７／００２４３３、ＷＯ２００９１１１２７８、ＷＯ２００９１１１２７９、ＷＯ２００９１１１２７７、ＷＯ２００９１１１２８０、ならびに米国特許第７，４９１，８２９号に記載されているものが挙げられる。他のＢ−ｒａｆ拮抗剤としては、ＧＳＫ２１１８４３６、ＲＡＦ２６５（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＸＬ２８１、ＡＲＱ７３６、ＢＡＹ７３−４５０６が挙げられる。いくつかの実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤は選択的Ｂ−ｒａｆ拮抗剤である。いくつかの実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤はＢ−ｒａｆ  Ｖ６００の選択的拮抗剤である。いくつかの実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤はＢ−ｒａｆ  Ｖ６００Ｅの選択的拮抗剤である。いくつかの実施形態において、Ｂ−ｒａｆ  Ｖ６００は、Ｂ−ｒａｆ  Ｖ６００Ｅ、Ｂ−ｒａｆ  Ｖ６００Ｋ、及び／またはＶ６００Ｄである。いくつかの実施形態において、Ｂ−ｒａｆ  Ｖ６００はＢ−ｒａｆ  Ｖ６００Ｒである。
【０２３１】
Ｂ−ｒａｆ拮抗剤は、低分子阻害剤であり得る。低分子阻害剤は、好ましくは、本明細書で画定されるようなポリペプチドまたは抗体以外の、具体的にＢ−ｒａｆと結合する有機分子である。いくつかの実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤はキナーゼ阻害剤である。いくつかの実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤は、抗体、ペプチド、ペプチド模倣、アプトマー（ａｐｔｏｍｅｒ）、またはポリヌブレオチド（ｐｏｌｙｎｕｂｌｅｏｔｉｄｅ）である。
【０２３２】
本方法で有用な抗Ｂ−ｒａｆ抗体としては、Ｂ−ｒａｆに対して十分な親和性及び特異性を持って結合し、かつＢ−ｒａｆ活性を低減または阻害可能な抗体が挙げられる。選択された抗体は通常、Ｂ−ｒａｆに対して十分強力な結合親和性を有し、例えば、該抗体はヒトＢ−ｒａｆに、１００ｎＭ〜１ｐＭのＫｄ値で結合してもよい。抗体親和性は例えば、表面プラズモン共鳴に基づくアッセイ（ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２００５／０１２３５９号に記載されているようなＢＩＡｃｏｒｅアッセイ等）；酵素免疫測定法（ＥＬＩＳＡ）；及び競合アッセイ（例えば、ＲＩＡ）により測定してもよい。
【０２３３】
いくつかの実施形態において、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤は、Ｂ−ｒａｆに対する特定の阻害剤であり得る。いくつかの実施形態において、阻害剤は、二重阻害剤または汎阻害剤であり得、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤はＢ−ｒａｆ及び１つ以上の他の標的ポリペプチドを阻害する。
【０２３４】
Ａ．抗体
本明細書では、ＦＧＦＲ（例えば、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、及び／またはＦＧＦＲ４）、ＦＧＦ（例えば、ＦＧＦ１〜２３）、ＭＥＫ１、ＭＥＫ２、ＭＥＫ１／２、ＰＩＫ３、及び／または本明細書に記載される方法で使用するためのＢ−ｒａｆ等の、対象ポリペプチドと結合する単離した抗体が提供される。上記の実施形態のうちのいずれかにおいて、抗体はヒト化している。更に、上記の実施形態のうちのいずれかによる抗体はモノクローナル抗体であり、キメラ、ヒト化またはヒト抗体を含む。一実施形態において、抗体は、抗体断片、例えばＦｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、ｓｃＦｖ、ダイアボディ、またはＦ（ａｂ’）２断片である。別の実施形態において、抗体は完全長抗体、例えば「完全ＩｇＧ１」抗体、または本明細書に定義する他の抗体クラス若しくはアイソタイプである。
【０２３５】
更なる態様では、上記の実施形態のいずれかによる抗体は、以下の項に記載する機能のいずれかを、単独でまたは組み合わせて導入してもよい。
【０２３６】
１．抗体親和性
ある特定の実施形態において、本明細書で提供される抗体は、≦１μΜ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭ、または≦０．００１ｎＭの解離定数（Ｋｄ）（例えば、１０−８Ｍ以下、例えば１０−８Ｍ〜１０−１３Ｍ、例えば１０−９Ｍ〜１０−１３Ｍ）を有する。一実施形態において、Ｋｄは、放射性標識抗原結合アッセイ（ＲＩＡ）により測定される。一実施形態において、ＲＩＡは、対象抗体のＦａｂ版、及びその抗原と共に実施する。例えば、抗原に対するＦａｂの溶液結合親和性は、非標識抗原の滴定系の存在下で、最小濃度の（１２５Ｉ）標識抗原によりＦａｂを平衡化し、次いで、結合した抗原を抗Ｆａｂ抗体でコーティングされたプレート（例えば、Ｃｈｅｎら，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２９３：８６５−８８１（１９９９）を参照のこと）で捕捉することにより測定する。アッセイについての条件を確立するために、ＭＩＣＲＯＴＩＴＥＲ（登録商標）マルチウェルプレート（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を、５０ｍＭの炭酸ナトリウム（ｐＨ９．６）中の５μｇ／ｍＬの捕捉抗Ｆａｂ抗体（Ｃａｐｐｅｌ  Ｌａｂｓ）で一晩コーティングし、その後室温（約２３℃）で２〜５時間、ＰＢＳ中の２％（ｗ／ｖ）ウシ血清アルブミンで遮断した。非吸着プレート（Ｎｕｎｃ＃２６９６２０）中で、１００ｐＭまたは２６ｐＭの［１２５Ｉ］抗原を、対象Ｆａｂの連続希釈液と混合し（例えば、Ｐｒｅｓｔａら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５７：４５９３−４５９９（１９９７）にある、抗ＶＥＧＦ抗体であるＦａｂ−１２の評価と一致する）。次いで、対象Ｆａｂを一晩インキュベートするが、確実に平衡状態に到達するように、インキュベーションを更に長い期間（例えば、約６５時間）継続してもよい。その後、インキュベーションのため、混合物を室温にて捕捉プレートに移す（約１時間）。次いで、溶液を次いで除去し、プレートをＰＢＳ中の０．１％ポリソルベート２０（ＴＷＥＥＮ−２０（登録商標））で８回洗浄する。プレートが乾燥すると、１５０μＬ／ウェルのシンチラント（ＭＩＣＲＯＳＣＩＮＴ−２０（商標）；Ｐａｃｋａｒｄ）を添加し、プレートをＴＯＰＣＯＵＮＴ（商標）ガンマカウンター（Ｐａｃｋａｒｄ）で１０回計数する。濃度が最大結合の２０％以下である各Ｆａｂを、競合結合アッセイでの使用のために選択する。
【０２３７】
別の実施形態によれば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）表面プラズモン共鳴アッセイを使用してＫｄを測定する。例えば、約１０の応答単位（ＲＵ）にて固定化抗原ＣＭ５小片を用いて、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）−２０００またはＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）−３０００（ＢＩＡｃｏｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、ＮＪ）を用いるアッセイを２５℃にて実施する。一実施形態において、供給業者の取扱説明書に従って、カルボキシメチル化デキストランバイオセンサーチップ（ＣＭ５，ＢＩＡＣＯＲＥ，Ｉｎｃ．）をＮ−エチル−Ｎ’−（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）、及びＮ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）により活性化させる。５μＬ／分の流量で注入する前に、１０ｍＭの酢酸ナトリウム（ｐＨ４．８）により、抗原を５μｇ／ｍＬ（約０．２μＭ）まで希釈して、約１０応答単位（ＲＵ）の共役タンパク質を得る。抗原の注入後、１Ｍのエタノールアミンを注入して未反応基を遮断する。動力学測定のために、０．０５％ポリソルベート２０（ＴＷＥＥＮ−２０（商標））界面活性剤（ＰＢＳＴ）と共に、２５℃にて、約２５μＬ／分の流量で、２倍のＦａｂ連続希釈液（０．７８ｎＭ〜５００ｎＭ）をＰＢＳ中に注入する。簡単な１：１のラングミュア結合モデル（ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）評価ソフトウェアバージョン３．２）を使用して、会合及び解離センサーグラムを同時に一致させることにより、会合速度（ｋｏｎ）及び解離速度（ｋｏｆｆ）を計算する。平衡解離定数（Ｋｄ）をｋｏｆｆ／ｋｏｎの比率として算出する。例えばＣｈｅｎら，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２９３：８６５−８８１（１９９９）を参照のこと。上記表面プラズモン共鳴アッセイにより会合速度が１０６Ｍ−１ｓ−１を超える場合、会合速度は、ストップトフロー分光光度計（Ａｖｉｖ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）または撹拌キュベットを備えた８０００−シリーズＳＬＭ−ＡＭＩＮＣＯ（商標）分光光度計（ＴｈｅｒｍｏＳｐｅｃｔｒｏｎｉｃ）等の分光計で測定されるように、抗原濃度が増加する存在下で、２５oＣにおける、ＰＢＳ中の２０ｎＭの抗抗原抗体（Ｆａｂ形態）（ｐＨ７．２）の蛍光発光強度における増減を測定する蛍光消光技術（励起＝２９５ｎｍ、発光＝３４０ｎｍ、１６ｎｍバンドパス）を使用することによって測定され得る。
【０２３８】
２．抗体断片
ある特定の実施形態において、本明細書で提供される抗体は抗体断片である。抗体断片としては、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、及びｓｃＦｖ断片、ならびに以下に記載する他の断片が挙げられるがこれらに限定されない。ある特定の抗体断片の概説については、ＨｕｄｓｏｎらＮａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９−１３４（２００３）にも記載されている。ｓｃＦｖ断片の概説については、例えば、Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ｖｏｌ．１１３，Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ  ａｎｄ  Ｍｏｏｒｅ  ｅｄｓ．，（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ），ｐｐ．２６９−３１５（１９９４）中のＰｌｕｃｋｔｈuｎを参照のこと；また、ＷＯ９３／１６１８５；ならびに米国特許第５，５７１，８９４号及び同第５，５８７，４５８号も参照のこと。サルベージ受容体結合エピトープ残基を含み、インビボ半減期が増加したＦａｂ及びＦ（ａｂ’）２断片の議論には、米国特許第５，８６９，０４６号を参照のこと。
【０２３９】
ダイアボディとは、二価または二重特異的であり得る２つの抗原結合部位を有する抗体断片である。例えば、ＥＰ４０４，０９７；ＷＯ１９９３／０１１６１、Ｈｕｄｓｏｎら，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９−１３４（２００３）、及びＨｏｌｌｉｎｇｅｒら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９０：６４４４−６４４８（１９９３）を参照のこと。また、三重特異性抗体及び四重特異性抗体は、Ｈｕｄｓｏｎら，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９−１３４（２００３）にも記載されている。
【０２４０】
単一ドメイン抗体とは、抗体の重鎖可変領域の全部若しくは一部、または軽鎖可変領域の全部若しくは一部を含む抗体断片である。ある特定の実施形態において、単一ドメイン抗体はヒト単一ドメイン抗体である（Ｄｏｍａｎｔｉｓ，Ｉｎｃ．，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ；例えば、米国特許第６，２４８，５１６号を参照のこと）。
【０２４１】
抗体断片は、本明細書に記載されるように、無傷抗体のタンパク分解消化、及び宿主細胞（例えば、大腸菌またはファージ）の組み換えによる産生を含むが、これらに限定されない、各種技術により製造可能である。
【０２４２】
３．キメラ及びヒト化抗体
ある特定の実施形態において、本明細書において提供する抗体はキメラ抗体である。ある特定のキメラ抗体は、例えば、米国特許第４，８１６，５６７号、及びＭｏｒｒｉｓｏｎら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１−６８５５（１９８４））に記載されている。一実施例では、キメラ抗体は、非ヒト可変領域（例えば、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、またはサル等の非ヒト霊長類由来の可変領域）、及びヒト定常領域を含む。更なる実施例では、キメラ抗体は、クラスまたはサブクラスが親抗体のそれらから変更している「クラススイッチ」抗体である。キメラ抗体としては、その抗原結合断片が挙げられる。
【０２４３】
ある特定の実施形態において、キメラ抗体はヒト化抗体である。一般的に、非ヒト抗体は、親非ヒト抗体の特異性及び親和性を保持しながら、ヒトに対する免疫原性は低下させるためにヒト化される。通常、ヒト化抗体は、ＨＶＲ、例えばＣＤＲ（またはその一部）が非ヒト抗体に由来し、ＦＲ（またはその一部）はヒト抗体配列に由来する１つ以上の可変領域を含む。ヒト化抗体はまた、任意に、ヒト定常領域の少なくとも一部も含むであろう。いくつかの実施形態において、ヒト化抗体におけるいくつかのＦＲ残基は、非ヒト抗体（例えば、ＨＶＲ残基が由来する抗体）からの対応する残基で置換され、例えば、抗体の特異性または親和性が回復または改善される。
【０２４４】
ヒト化抗体及びその作成方法は、例えば、Ａｌｍａｇｒｏ及びＦｒａｎｓｓｏｎ，Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．１３：１６１９−１６３３（２００８）に概説されており、更に、例えば、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎら，Ｎａｔｕｒｅ３３２：３２３−３２９（１９８８）、Ｑｕｅｅｎら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８６：１００２９−１００３３（１９８９）、米国特許第５，８２１，３３７号、同第７，５２７，７９１号、同第６，９８２，３２１号、及び同第７，０８７，４０９号、Ｋａｓｈｍｉｒｉら，Ｍｅｔｈｏｄｓ３６：２５−３４（２００５）（特異性決定領域（ＳＤＲ）グラフトを記載）、Ｐａｄｌａｎ，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２８：４８９−４９８（１９９１）（「リサーフェシング（ｒｅｓｕｒｆａｃｉｎｇ）」を記載）、Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａら，Ｍｅｔｈｏｄｓ３６：４３−６０（２００５）（「ＦＲシャッフリング」を記載）、ならびにＯｓｂｏｕｒｎら，Ｍｅｔｈｏｄｓ３６：６１−６８（２００５）及びＫｌｉｍｋａら，Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，８３：２５２−２６０（２０００）（ＦＲシャッフリングに対する「誘導選択（ｇｕｉｄｅｄ  ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ）」アプローチを記載）に詳しく記載されている。
【０２４５】
ヒト化に使用され得るヒトフレームワーク領域としては、「ベストフィット」法を用いて選択されたフレームワーク領域（例えば、Ｓｉｍｓら  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２２９６（１９９３）を参照のこと）、軽鎖または重鎖可変領域の特定のサブグループのヒト抗体のコンセンサス配列に由来するフレームワーク領域（例えば、Ｃａｒｔｅｒら  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８９：４２８５（１９９２）；及びＰｒｅｓｔａら  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５１：２６２３（１９９３）を参照のこと）；ヒト成熟（体細胞変異した）フレームワーク領域またはヒト生殖細胞系列フレームワーク領域（例えば、Ａｌｍａｇｒｏ  ａｎｄ  Ｆｒａｎｓｓｏｎ，Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．１３：１６１９−１６３３（２００８）を参照のこと）；ならびにＦＲライブラリーをスクリーニングすることによって誘導されるフレームワーク領域（例えば、Ｂａｃａら，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：１０６７８−１０６８４（１９９７）及びＲｏｓｏｋら，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１：２２６１１−２２６１８（１９９６）を参照のこと）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２４６】
４．ヒト抗体
ある特定の実施形態において、本明細書において提供する抗体はヒト抗体である。ヒト抗体は、当業界において既知の種々の技術を使用して産生することができる。ヒト抗体は、ｖａｎ  Ｄｉｊｋ及びｖａｎ  ｄｅ  Ｗｉｎｋｅｌ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５：３６８−７４（２００１）及びＬｏｎｂｅｒｇ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０：４５０−４５９（２００８）に全般的に記載されている。
【０２４７】
ヒト抗体は、抗原チャレンジに応答してヒト可変領域を有する無傷なヒト抗体または無傷抗体を産生するように修飾されたトランスジェニック動物に、免疫原を投与することにより調製してもよい。かかる動物は、典型的に、内因性免疫グロブリン遺伝子座を置き換えるか、または染色体外に存在する、若しくは動物の染色体に無作為に組み込まれるヒト免疫グロブリン遺伝子座の全てまたは一部を含有する。かかるトランスジェニックマウスでは、内因性免疫グロブリン遺伝子座は、概して、不活性化されてきた。トランスジェニック動物からヒト抗体を得る方法の概説については、Ｌｏｎｂｅｒｇ，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２３：１１１７−１１２５（２００５）を参照のこと。例えば、ＸＥＮＯＭＯＵＳＥ（商標）技術を記載する米国特許第６，０７５，１８１号及び同第６，１５０，５８４号；ＨｕＭａｂ（登録商標）技術を記載する米国特許第５，７７０，４２９号；Ｋ−Ｍ  ＭＯＵＳＥ（登録商標）技術を記載する米国特許第７，０４１，８７０号、及びＶｅｌｏｃｉＭｏｕｓｅ（登録商標）技術を記載する米国特許出願公開第ＵＳ２００７／００６１９００号）も参照のこと。かかる動物により生成される無傷抗体のヒト可変領域を、例えば異なるヒト定常領域を組み合わせることにより、更に修飾してもよい。
【０２４８】
ヒト抗体はまた、ハイブリドーマに基づく方法によっても作製することができる。ヒトモノクローナル抗体の産生のためのヒト骨髄腫及びマウス−ヒトヘテロ骨髄腫細胞株が記載されている。（例えば、Ｋｏｚｂｏｒ  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３３：３００１（１９８４）、Ｂｒｏｄｅｕｒら，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ｐｐ．５１−６３（Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８７）、及びＢｏｅｒｎｅｒら，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４７：８６（１９９１）を参照のこと）。ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術を介して生成されたヒト抗体も、Ｌｉら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１０３：３５５７−３５６２（２００６）に記載されている。更なる方法としては、例えば、米国特許第７，１８９，８２６号（ハイブリドーマ細胞株からのモノクロナールヒトＩｇＭ抗体の産生を記載）、及びＮｉ，Ｘｉａｎｄａｉ  Ｍｉａｎｙｉｘｕｅ，２６（４）：２６５−２６８（２００６）（ヒト−ヒトハイブリドーマを記載）に記載されるようなものが挙げられる。ヒトハイブリドーマ技術（Ｔｒｉｏｍａ  ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）も、Ｖｏｌｌｍｅｒｓ  ａｎｄ  Ｂｒａｎｄｌｅｉｎ，Ｈｉｓｔ．＆Ｈｉｓｔｏｐａｔｈ．，２０（３）：９２７−９３７（２００５）及びＶｏｌｌｍｅｒｓ  ａｎｄ  Ｂｒａｎｄｌｅｉｎ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｆｉｎｄ  Ｅｘｐ．Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，２７（３）：１８５−９１（２００５）に記載されている。
【０２４９】
ヒト抗体は、ヒト由来のファージディスプレイライブラリーから選択されたＦｖクローン可変ドメイン配列を単離することによっても生成され得る。その後、かかる可変領域配列を、所望のヒト定常ドメインと組み合わせてもよい。抗体ライブラリーからヒト抗体を選択する技術を以下に記載する。
【０２５０】
５．ライブラリー由来の抗体
抗体は、コンビナトリアルライブラリーを所望の活性（複数可）を有する抗体についてスクリーニングすることによって単離され得る。例えば、ファージディスプレイライブラリーを生成し、かかるライブラリーを所望の結合特徴を所有する抗体についてスクリーニングするための種々の方法が、当業界において既知である。かかる方法は、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍら  Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１７８：１−３７（Ｏ’Ｂｒｉｅｎら，版．，Ｈｕｍａｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００１）において概説されており、例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙら，Ｎａｔｕｒｅ３４８：５５２−５５４、Ｃｌａｃｋｓｏｎら，Ｎａｔｕｒｅ３５２：６２４−６２８（１９９１）、Ｍａｒｋｓら，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１−５９７（１９９２）、Ｍａｒｋｓ  ａｎｄ  Ｂｒａｄｂｕｒｙ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２４８：１６１−１７５（Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００３）、Ｓｉｄｈｕら，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３８（２）：２９９−３１０（２００４）、Ｌｅｅら，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０（５）：１０７３−１０９３（２００４）、Ｆｅｌｌｏｕｓｅ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ１０１（３４）：１２４６７−１２４７２（２００４）、ならびにＬｅｅら，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ２８４（１−２）：１１９−１３２（２００４）に記載されている。
【０２５１】
ある特定のファージディスプレイ法では、ＶＨ及びＶＬ遺伝子のレパートリーがポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）により別々にクローニングされ、ファージライブラリーにおいて無作為に再結合され、これを、その後、Ｗｉｎｔｅｒら，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１２：４３３−４５５（１９９４）に記載されているように、抗原結合ファージについてスクリーニングすることができる。ファージは、典型的に、抗体断片を、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片またはＦａｂ断片のいずれかとして提示する。免疫化された供給源からのライブラリーは、ハイブリドーマを構築することを必要とせずに、免疫原に対して高親和性の抗体を提供する。あるいは、ＧｒｉｆｆｉｔｈｓらのＥＭＢＯ  Ｊ，１２：７２５−７３４（１９９３）に記載されるように、ナイーブレパートリーを（例えば、ヒトから）クローニングして、いかなる免疫付与もなしに、単一供給源の抗体から広範囲の非自己抗原及び自己抗原まで提供することができる。最終的に、ナイーブライブラリーは、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ａｎｄ  Ｗｉｎｔｅｒ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２７：３８１−３８８（１９９２）に記載されるように、幹細胞から再構成されていないＶ遺伝子セグメントをクローニングして、高度可変ＣＤＲ３領域を符号化し、かつインビトロでの再構成を達成するランダム配列を含有するＰＣＲプライマーを用いることによって合成的に作製することもできる。ヒト抗体ファージライブラリーを記載している特許文献としては、例えば、米国特許第５，７５０，３７３号、ならびに米国特許公開第２００５／００７９５７４号、同第２００５／０１１９４５５号、同第２００５／０２６６０００号、同第２００７／０１１７１２６号、同第２００７／０１６０５９８号、同第２００７／０２３７７６４号、同第２００７／０２９２９３６号、及び同第２００９／０００２３６０号が挙げられる。
【０２５２】
本明細書において、ヒト抗体ライブラリーから単離された抗体または抗体断片は、ヒト抗体またはヒト抗体断片と見なされる。
【０２５３】
６．多重特異性抗体
ある特定の実施形態において、本明細書において提供する抗体は、多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体である。多重特異性抗体は、少なくとも２つの異なる部位に対する結合特異性を有するモノクローナル抗体である。ある特定の実施形態において、結合特異性のうちの１つは、ＦＧＦＲ（例えば、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、及び／またはＦＧＦＲ４）、ＦＧＦ（例えば、ＦＧＦ１〜２３）、ＭＥＫ１、ＭＥＫ２、ＭＥＫ１／２、ＰＩＫ３、及び／またはＢ−ｒａｆ等の対象ポリペプチドであり、他の結合特異性は、任意の他の抗原に対するものである。ある特定の実施形態において、二重特異性抗体は、ＦＧＦＲ／ＦＧＦ及び／またはＢ−ｒａｆ、若しくはＦＧＦＲ／ＦＧＦ及び／またはＭＥＫ１、若しくはＦＧＦＲ／ＦＧＦ及び／またはＭＥＫ２、若しくはＦＧＦＲ／ＦＧＦ及び／またはＭＥＫ１／２、若しくはＰＩＫ３及び／またはＭＥＫ１、若しくはＰＩＫ３及び／またはＭＥＫ２、若しくはＰＩＫ３及び／またはＭＥＫ１／２等の、対象ポリペプチドの２つの異なるエピトープと結合し得る。二重特異性抗体は、ＦＧＦＲ（例えば、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、及び／またはＦＧＦＲ４）、ＦＧＦ（例えば、ＦＧＦ１〜２３）、ＭＥＫ１、ＭＥＫ２、ＭＥＫ１／２、ＰＩＫ３、及び／またはＢ−ｒａｆ等の、対象ポリペプチドを発現する細胞に対して、細胞毒性剤を局在化するためにもまた使用され得る。二重特異性抗体は、完全長抗体または抗体断片として調製することができる。
【０２５４】
多重特異性抗体を作製するための技術としては、異なる特異性を有する２つの免疫グロブリン重鎖−軽鎖対の組み換え共発現（Ｍｉｌｓｔｅｉｎ  ａｎｄ  Ｃｕｅｌｌｏ，Ｎａｔｕｒｅ３０５：５３７（１９８３）を参照のこと）、ＷＯ９３／０８８２９、及びＴｒａｕｎｅｃｋｅｒら，ＥＭＢＯ  Ｊ．１０：３６５５（１９９１）、ならびに「ノブ−イン−ホール」技術（例えば、米国特許第５，７３１，１６８号を参照のこと）が挙げられるが、これらに限定されない。多重特異性抗体はまた、抗体Ｆｃヘテロ二量体分子を作製するための組み換え静電的ステアリング効果（ＷＯ２００９／０８９００４Ａ１）；２つ以上の抗体または断片の架橋（例えば、米国特許第４，６７６，９８０号、及びＢｒｅｎｎａｎら，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２２９：８１（１９８５）を参照のこと）；二重特異性抗体の産生のためのロイシンジッパーの使用（例えば、Ｋｏｓｔｅｌｎｙら，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４８（５）：１５４７−１５５３（１９９２）を参照のこと）；二重特異性抗体断片を作製するための「ダイアボディ」技術の使用（例えば、Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９０：６４４４−６４４８（１９９３）を参照のこと）；ならびに一本鎖Ｆｖ（ｓＦｖ）二量体の使用（例えば、Ｇｒｕｂｅｒら，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５２：５３６８（１９９４）を参照のこと）；ならびに、例えば、ＴｕｔｔらＪ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：６０（１９９１）に記載されているような三重特異性抗体の調製により作製してもよい。
【０２５５】
「オクトパス抗体」を含む３つ以上の機能的抗原結合部位を有する組み換え抗体もまた、本明細書に含まれる（例えば、ＵＳ２００６／００２５５７６Ａ１を参照のこと）。
【０２５６】
本明細書の抗体または断片は、ＦＧＦＲ（例えば、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、及び／またはＦＧＦＲ４）、ＦＧＦ（例えば、ＦＧＦ１〜２３）、ＭＥＫ１、ＭＥＫ２、ＭＥＫ１／２、ＰＩＫ３、及び／またはＢ−ｒａｆに加え、ＦＧＦＲ、ＭＥＫ１、ＭＥＫ２、ＭＥＫ１／２、ＰＩＫ３、及び／またはＢ−ｒａｆを含むがこれらに限定されない、別の異なる抗原（例えば、ＵＳ２００８／００６９８２０を参照のこと）等の、対象ポリペプチドと結合する抗原結合部位を含む「二重作用ＦＡｂ」または「ＤＡＦ」もまた含む。
【０２５７】
７．抗体変異体
ａ）グリコシル化変異体
ある特定の実施形態において、本明細書において提供される抗体は、抗体がグリコシル化される度合いを増大または減少させるように改変される。抗体へのグリコシル化部位の付加または欠失は、アミノ酸配列を、１つ以上のグリコシル化部位が作製または除去されるように改変させることによって、簡便に達成され得る。
【０２５８】
抗体がＦｃ領域を含む場合、そこに結合される炭水化物が改変され得る。哺乳動物細胞により産生される自然抗体は、典型的には、Ｆｃ領域のＣＨ２ドメインのＡｓｎ２９７に対してＮ結合により一般的に結合する分枝状、二分岐のオリゴ糖を含む。例えば、Ｗｒｉｇｈｔら  ＴＩＢＴＥＣＨ１５：２６−３２（１９９７）を参照のこと。オリゴ糖は、種々の炭水化物、例えばマンノース、Ｎ−アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）、ガラクトース、及びシアル酸、ならびに二分岐オリゴ糖構造の「幹」のＧｌｃＮＡｃに結合するフコースを含んでもよい。いくつかの実施形態において、本発明の抗体におけるオリゴ糖の修飾が、ある特定の改善された特性を有する抗体変異体を作製するために、なされ得る。
【０２５９】
一実施形態において、Ｆｃ領域に（直接または間接的に）結合したフコースを欠く炭水化物構造を有する抗体変異体が提供される。例えば、かかる抗体におけるフコースの量は、１％〜８０％、１％〜６５％、５％〜６５％、または２０％〜４０％であってもよい。フコースの量は、例えばＷＯ２００８／０７７５４６に記載されるＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析により測定されるように、Ａｓｎ２９７（例えば、複合体、ハイブリッド、及びハイマンノース構造体）に結合した全ての糖鎖構造の合計に対してＡｓｎ２９７の糖鎖内のフコースの平均量を計算することによって測定される。Ａｓｎ２９７とは、Ｆｃ領域内の約２９７位（Ｆｃ領域残基のＥＵ番号付け）に位置するアスパラギン残基を指すが、Ａｓｎ２９７はまた、抗体中の軽度の配列変異により、アミノ酸の２９７位の約±３上流または下流に、すなわち、２９４位〜３００位の間に位置してもよい。かかるフコシル化変異体は改善されたＡＤＣＣ機能を有し得る。例えば、米国特許公開第ＵＳ２００３／０１５７１０８号（Ｐｒｅｓｔａ，Ｌ．）；同第ＵＳ２００４／００９３６２１号（Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ  Ｋｏｇｙｏ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ）を参照のこと。「脱フコシル化」または「フコース欠失」抗体変異体に関連した刊行物の例としては、ＵＳ２００３／０１５７１０８、ＷＯ２０００／６１７３９、ＷＯ２００１／２９２４６、ＵＳ２００３／０１１５６１４、ＵＳ２００２／０１６４３２８、ＵＳ２００４／００９３６２１、ＵＳ２００４／０１３２１４０、ＵＳ２００４／０１１０７０４、ＵＳ２００４／０１１０２８２、ＵＳ２００４／０１０９８６５、ＷＯ２００３／０８５１１９、ＷＯ２００３／０８４５７０、ＷＯ２００５／０３５５８６、ＷＯ２００５／０３５７７８、ＷＯ２００５／０５３７４２、ＷＯ２００２／０３１１４０、Ｏｋａｚａｋｉら  Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３６：１２３９−１２４９（２００４）、Ｙａｍａｎｅ−Ｏｈｎｕｋｉら，Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇ．８７：６１４（２００４）が挙げられる。脱フコシル化抗体を産生可能な細胞株の例としては、タンパク質フコシル化で欠失したＬｅｃ１３  ＣＨＯ細胞（Ｒｉｐｋａら  Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．２４９：５３３−５４５（１９８６）、米国特許出願第ＵＳ２００３／０１５７１０８Ａ１号、Ｐｒｅｓｔａ，Ｌ、及びＷＯ２００４／０５６３１２Ａ１，Ａｄａｍｓらの特に実施例１１）、及びアルファ−１，６−フコシルトランスフェラーゼ遺伝子、ＦＵＴ８、ノックアウトＣＨＯ細胞等のノックアウト細胞株（例えば、Ｙａｍａｎｅ−Ｏｈｎｕｋｉら  Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇ．８７：６１４（２００４）、Ｋａｎｄａ，Ｙら，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．，９４（４）：６８０−６８８（２００６）、及びＷＯ２００３／０８５１０７を参照のこと）が含まれる。
【０２６０】
抗体変異体は、更に、例えば抗体のＦｃ領域に結合した二分岐のオリゴ糖がＧｌｃＮＡｃにより二分されている二分岐オリゴ糖と共に提供される。かかる抗体変異体は、フコシル化が低減され、及び／またはＡＤＣＣ機能が改善され得る。かかる抗体変異体の例は、例えば、ＷＯ２００３／０１１８７８（Ｊｅａｎ−Ｍａｉｒｅｔら）、米国特許第６，６０２，６８４号（Ｕｍａｎａら）、及びＵＳ２００５／０１２３５４６（Ｕｍａｎａら）に記載されている。Ｆｃ領域に結合したオリゴ糖内の少なくとも１つのガラクトース残基を有する抗体変異体もまた、提供される。かかる抗体変異体は、改善されたＣＤＣ機能を有し得る。かかる抗体変異体の例は、例えば、ＷＯ１９９７／３００８７（Ｐａｔｅｌら）、ＷＯ１９９８／５８９６４（Ｒａｊｕ，Ｓ．）、及びＷＯ１９９９／２２７６４（Ｒａｊｕ，Ｓ．）に記載されている。
【０２６１】
ｂ）Ｆｃ領域変異体
ある特定の実施形態において、１つ以上のアミノ酸修飾を、本明細書において提供する抗体のＦｃ領域に導入し、それにより、Ｆｃ領域変異体を生成してもよい。Ｆｃ領域変異体は、１つ以上のアミノ酸位置においてアミノ酸修飾（例えば、置換）を含むヒトＦｃ領域配列（例えば、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４  Ｆｃ領域）を含んでもよい。
【０２６２】
ある特定の実施形態では、本発明は、いくつかであるが全てではないエフェクター機能を有する抗体変異体を企図し、これは、抗体を、インビボでの抗体の半減期は重要であるが、ある特定のエフェクター機能（例えば、補体及びＡＤＣＣ）は不要かまたは有害である用途のために望ましい候補とする。インビトロ及び／またはインビボ細胞毒性アッセイを実施して、ＣＤＣ及び／またはＡＤＣＣ活性の低下／枯渇を確認することができる。例えば、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）結合アッセイを実施して、抗体がＦｃγＲ結合を欠失している（そのためＡＤＣＣ活性も欠失している可能性がある）が、ＦｃＲｎ結合能は保持していることを確認することができる。ＡＤＣＣ、ＮＫ細胞を媒介する主な細胞は、Ｆｃ（ＲＩＩＩのみを発現するが、単球はＦｃ（ＲＩ、Ｆｃ（ＲＩＩ、及びＦｃ（ＲＩＩＩを発現する。造血細胞内でのＦｃＲ発現は、Ｒａｖｅｔｃｈ  ａｎｄ  Ｋｉｎｅｔ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９：４５７−４９２（１９９１）の４６４頁、表３に要約されている。対象分子のＡＤＣＣ活性を評価するインビトロアッセイの非限定例は、米国特許第５，５００，３６２号（例えば、Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ，Ｉら  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８３：７０５９−７０６３（１９８６）を参照のこと）及びＨｅｌｌｓｔｒｏｍ，Ｉら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８２：１４９９−１５０２（１９８５）、同第５，８２１，３３７号（Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ，Ｍら，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１６６：１３５１−１３６１（１９８７）を参照のこと）に記載されている。あるいは、非放射性アッセイ法を用いてもよい（例えば、フローサイトメトリー用ＡＣＴＩ（商標）非放射性細胞毒性アッセイ（ＣｅｌｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ，ＣＡ、及びＣｙｔｏＴｏｘ９６（登録商標）非放射性細胞毒性アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）を参照のこと）。かかるアッセイに有用なエフェクター細胞としては、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞が挙げられる。あるいは、または更に、対象分子のＡＤＣＣ活性は、例えば、ＣｌｙｎｅｓらＰｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９５：６５２−６５６（１９９８）に開示されているような動物モデルにおいて、インビボで評価してもよい。また、Ｃ１ｑ結合アッセイを実施して、抗体がＣ１ｑに結合できず、そのためＣＤＣ活性を欠失することを確認してもよい。例えば、ＷＯ２００６／０２９８７９及びＷＯ２００５／１００４０２におけるＣ１ｑ及びＣ３ｃ結合ＥＬＩＳＡを参照のこと。補体活性化を評価するために、ＣＤＣアッセイを実施してもよい（例えば、Ｇａｚｚａｎｏ−Ｓａｎｔｏｒｏら，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ２０２：１６３（１９９６）、Ｃｒａｇｇ，Ｍ．Ｓら，Ｂｌｏｏｄ１０１：１０４５−１０５２（２００３）、及びＣｒａｇｇ，Ｍ．Ｓ．ａｎｄ  Ｍ．Ｊ．Ｇｌｅｎｎｉｅ，Ｂｌｏｏｄ１０３：２７３８−２７４３（２００４）を参照のこと）。当業界において既知の方法を使用して、ＦｃＲｎ結合及びインビボクリアランス／半減期の決定も行うことができる（例えば、Ｐｅｔｋｏｖａ，Ｓ．Ｂ．ら．，Ｉｎｔ’ｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１８（１２）：１７５９−１７６９（２００６）を参照のこと）。
【０２６３】
低減したエフェクター機能を有する抗体は、Ｆｃ領域残基２３８、２６５、２６９、２７０、２９７、３２７、及び３２９のうちの１つ以上の置換を有するものを含む（米国特許第６，７３７，０５６号）。かかるＦｃ突然変異体は、アミノ酸位２６５、２６９、２７０、２９７、及び３２７のうちの２つ以上での置換を有するＦｃ突然変異体を含み、アラニンへの残基２６５及び２９７の置換基を有するいわゆる「ＤＡＮＡ」Ｆｃ突然変異体を含む（米国特許第７，３３２，５８１号）。
【０２６４】
ＦｃＲへの改善または低下した結合を有するある特定の抗体変異体が記載される。（例えば、米国特許第６，７３７，０５６号、ＷＯ２００４／０５６３１２、及びＳｈｉｅｌｄｓら，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．９（２）：６５９１−６６０４（２００１）を参照のこと）。ある特定の実施形態において、抗体変異体は、ＡＤＣＣを改善する１つ以上のアミノ酸置換基、例えばＦｃ領域の位置２９８、３３３、及び／または３３４（残基のＥＵ番号付け）で置換基を有するＦｃ領域を含む。いくつかの実施形態では、例えば、米国特許第６，１９４，５５１号、ＷＯ９９／５１６４２、及びＩｄｕｓｏｇｉｅら  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６４：４１７８−４１８４（２０００）に記載されるように、Ｃ１ｑ結合及び／または補体依存性細胞毒性（ＣＤＣ）の改変（すなわち、改善または低下のいずれか）をもたらす改変が、Ｆｃ領域になされる。
【０２６５】
半減期が増大し、新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）への結合が改善した、母体ＩｇＧを胎児に移行する役割を果たす抗体（Ｇｕｙｅｒら，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１１７：５８７（１９７６）及びＫｉｍら，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４：２４９（１９９４））が、ＵＳ２００５／００１４９３４Ａ１（Ｈｉｎｔｏｎら）に記載されている。これらの抗体は、ＦｃＲｎへのＦｃ領域の結合を改善する１つ以上の置換基を有するＦｃ領域を含む。かかるＦｃ変異体は、２３８、２５６、２６５、２７２、２８６、３０３、３０５、３０７、３１１、３１２、３１７、３４０、３５６、３６０、３６２、３７６、３７８、３８０、３８２、４１３、４２４、または４３４のＦｃ領域残基のうちの１つ以上での置換基、例えばＦｃ領域残基４３４の置換基を有するものを含む（米国特許第７，３７１，８２６号）。Ｆｃ領域変異体のその他の例に関しては、Ｄｕｎｃａｎ＆Ｗｉｎｔｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ３２２：７３８−４０（１９８８）、米国特許第５，６４８，２６０号、米国特許第５，６２４，８２１号、及びＷＯ９４／２９３５１も参照のこと。
【０２６６】
ｃ）システイン操作抗体変異体
ある特定の実施形態において、例えばＴＨＩＯＭＡＢ（商標）技術を使用して、抗体の１つ以上の残基がシステイン残基により置換されている、システイン操作抗体を作製することが望ましい場合がある。特定の実施形態において、置換される残基が、抗体の接触可能な部位で生じる。これらの残基をシステインで置換することによって、反応性チオール基が抗体の接触可能な部位に配置され、抗体を薬物部分またはリンカー−薬物部分等の他の部分に結合させ、本明細書に更に記載されるように免疫複合体を作製するために使用され得る。ある特定の実施形態において、任意の１つ以上の以下の残基をシステインで置換してもよい：軽鎖のＶ２０５（カバット番号付け）；重鎖のＡ１１８（ＥＵ番号付け）；及び重鎖Ｆｃ領域のＳ４００（ＥＵ番号付け）。更なる抗体は、参照によりその全体が本明細書に含まれる、米国特許第７，５２１，５４１号及び米国特許公開第２０１１０３０１３３４号に記載されるように、システイン置換を考慮して設計され得る。システイン操作抗体は、例えば、米国特許第７，５２１，５４１号に記載されているように産生してもよい。
【０２６７】
Ｂ．免疫複合体
更に、ＦＧＦＲ（例えば、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、及び／またはＦＧＦＲ４）、ＦＧＦ（例えば、ＦＧＦ１〜２３）、ＭＥＫ１、ＭＥＫ２、ＭＥＫ１／２、ＰＩＫ３、またはＢ−ｒａｆ等の対象ポリペプチドに結合する抗体を含み、化学療法剤若しくは薬物、成長阻害剤、毒素（例えば、タンパク質毒素、微生物、菌類、植物、若しくは動物由来の酵素活性毒素、またはこれらの断片）、あるいは本明細書に記載される方法で使用する放射性同位元素等の１つ以上の細胞毒性剤に結合した免疫複合体が、本明細書に提供される。
【０２６８】
一実施形態では、免疫複合体は、抗体薬物複合体（ＡＤＣ）であり、抗体が、マイタンシノイド（米国特許第５，２０８，０２０号、同第５，４１６，０６４号、及び欧州特許第ＥＰ０４２５２３５Ｂ１号を参照のこと）；モノメチルオーリスタチン薬物部分ＤＥ及びＤＦ（ＭＭＡＥ及びＭＭＡＦ）等のオーリスタチン（米国特許第５，６３５，４８３号、同第５，７８０，５８８号、及び同第７，４９８，２９８号を参照のこと）；ドラスタチン；カリケアマイシンまたはその誘導体（米国特許第５，７１２，３７４号、同第５，７１４，５８６号、同第５，７３９，１１６号、同第５，７６７，２８５号、同第５，７７０，７０１号、同第５，７７０，７１０号、同第５，７７３，００１号、及び同第５，８７７，２９６号、Ｈｉｎｍａｎら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５３：３３３６−３３４２（１９９３）、及びＬｏｄｅら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５８：２９２５−２９２８（１９９８）を参照のこと）；ダウノマイシンまたはドキソルビシン等のアントラサイクリン（Ｋｒａｔｚら，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１３：４７７−５２３（２００６）、Ｊｅｆｆｒｅｙら，Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔｅｒｓ１６：３５８−３６２（２００６）、Ｔｏｒｇｏｖら，Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．１６：７１７−７２１（２００５）、Ｎａｇｙら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９７：８２９−８３４（２０００）、Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋら，Ｂｉｏｏｒｇ．＆Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔｅｒｓ１２：１５２９−１５３２（２００２）、Ｋｉｎｇら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４５：４３３６−４３４３（２００２）、及び米国特許第６，６３０，５７９号を参照のこと）；メトトレキサート；ビンデシン；ドセタキセル、パクリタキセル、ラロタキセル、テセタキセル、及びオルタタキセル等のタキサン；トリコテセン；ならびにＣＣ１０６５を含む１つ以上の薬物に結合している。
【０２６９】
別の実施形態において、免疫複合体は、ジフテリアＡ鎖、ジフテリア毒素の非結合活性断片、エキソトキシンＡ鎖（緑膿菌からのもの）、リジンＡ鎖、アブリンＡ鎖、モデシンＡ鎖、アルファサルシン、シナアブラギリのタンパク質、ジアンチンタンパク質、ヨウシュヤマゴボウのタンパク質（ＰＡＰＩ、ＰＡＰＩＩ、及びＰＡＰ−Ｓ）、ツルレイシ阻害剤、クルシン、クロチン、サボンソウ阻害剤、ゲロニン、ミトゲリン、レストリクトシン、フェノマイシン、エノマイシン（ｅｎｏｍｙｃｉｎ）、ならびにトリコテセンが含まれるが、これらに限定されない、酵素活性毒素またはこれらの断片に結合する本明細書に記載される抗体を含む。
【０２７０】
別の実施形態において、免疫複合体は、放射性原子に結合して、放射性複合体を形成する本明細書に記載される抗体を含む。種々の放射性同位元素が、放射性複合体の産生に利用可能である。例としては、Ａｔ２１１、Ｉ１３１、Ｉ１２５、Ｙ９０、Ｒｅ１８６、Ｒｅ１８８、Ｓｍ１５３、Ｂｉ２１２、Ｐ３２、Ｐｂ２１２、及びＬｕの放射性同位元素が含まれる。放射性複合体を検出用に用いる場合、例えば、Ｔｃ９９ｍ若しくはＩ１２３等のシンチグラフィ検査用放射性原子、またはヨウ素１２３、ヨウ素１３１、インジウム１１１、フッ素１９、炭素１３、窒素１５、酸素１７、ガドリニウム、マンガン、若しくは鉄等の核磁気共鳴（ＮＭＲ）画像法（磁気共鳴映像法、ｍｒｉとしても既知である）用のスピン標識を含んでもよい。
【０２７１】
Ｎ−サクシニミジル−３−（２−ピリジルジチオ）プロピオネート（ＳＰＤＰ）、サクシニミジル−４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレート（ＳＭＣＣ）、イミノチオラン（ＩＴ）、イミドエステルの二官能性誘導体（ジメチルアジプイミデート塩酸塩等）、活性エステル（ジスクシンイミジルスベレート等）、アルデヒド（グルタルアルデヒド等）、ビスアジド化合物（ビス（ｐ−アジドベンゾイル）ヘキサンジアミン等）、ビスジアゾニウム誘導体（ビス−（ｐ−ジアゾニウムベンゾイル）−エチレンジアミン等）、ジイソシアネート（トルエン２，６−ジイソシアネート等）、及びビス活性フッ素化合物（１，５−ジフルオロ−２，４−ジニトロベンゼン）等の、種々の二官能性タンパク質カップリング剤を用いて、抗体及び細胞毒性剤の複合体を作製してもよい。例えば、リジン免疫毒素は、Ｖｉｔｅｔｔａら，Ｓｃｉｅｎｃｅ２３８：１０９８（１９８７）に記載されているようにして調製することができる。炭素１４で標識した１−イソチオシアナトベンジル−３−メチルジエチレントリアミン五酢酸（ＭＸ−ＤＴＰＡ）は、抗体への放射性ヌクレオチドの結合用の代表的なキレート剤である。ＷＯ９４／１１０２６を参照のこと。リンカーは、細胞中の細胞毒性薬の放出を促進する「開裂可能なリンカー」であってもよい。例えば、酸に不安定なリンカー、ペプチダーゼ感受性リンカー、感光性リンカー、ジメチルリンカー、またはジスルフィド含有リンカー（Ｃｈａｒｉら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５２：１２７−１３１（１９９２）、米国特許第５，２０８，０２０号）を使用してもよい。
【０２７２】
本明細書における免疫複合体またはＡＤＣは、限定されないが、（例えば、Ｐｉｅｒｃｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ．，Ｕ．Ｓ．Ａから）市販されているＢＭＰＳ、ＥＭＣＳ、ＧＭＢＳ、ＨＢＶＳ、ＬＣ−ＳＭＣＣ、ＭＢＳ、ＭＰＢＨ、ＳＢＡＰ、ＳＩＡ、ＳＩＡＢ、ＳＭＣＣ、ＳＭＰＢ、ＳＭＰＨ、スルホＥＭＣＳ、スルホＧＭＢＳ、スルホＫＭＵＳ、スルホＭＢＳ、スルホＳＩＡＢ、スルホＳＭＣＣ、及びスルホＳＭＰＢ、及びＳＶＳＢ（スクシンイミジル−（４−ビニルスルホン）ベンゾエート）を含むが、これらに限定されない、架橋試薬を用いて調製されたかかる複合体を明示的に企図する。
【０２７３】
Ｃ．結合ポリペプチド
結合ポリペプチドは、好ましくは、具体的に、ＦＧＦＲ（例えば、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、及び／またはＦＧＦＲ４）、ＦＧＦ（例えば、ＦＧＦ１〜２３）、ＭＥＫ１、ＭＥＫ２、ＭＥＫ１／２、ＰＩＫ３、及び／またはＢ−ｒａｆと結合するポリペプチドであり、本明細書に記載される方法で使用するためにもまた提供される。いくつかの実施形態において、結合ポリペプチドは、ＦＧＦＲ（例えば、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、及び／またはＦＧＦＲ４）及び／またはＦＧＦ（例えば、ＦＧＦ１〜２３）拮抗剤、ＭＥＫ１拮抗剤、ＭＥＫ２拮抗剤、ＭＥＫ１／２拮抗剤、ＰＩＫ３拮抗剤、及び／またはＢ−ｒａｆ拮抗剤である。結合ポリペプチドは、既知のポリペプチド合成法を用いて化学合成を行ってもよく、または組み換え技術を用いて調製及び精製を行ってもよい。結合ポリペプチドは、通常、少なくとも約５個の長さのアミノ酸であるか、あるいは少なくとも約６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、または１００個の長さのアミノ酸か若しくはそれ以上であり、ここで、結合可能なかかる結合ポリペプチドは好ましくは本明細書に記載されるように、例えばＦＧＦＲ（例えば、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ならびに／またはＦＧＦＲ４）、ＦＧＦ（例えば、ＦＧＦ１〜２３）、ＭＥＫ１、ＭＥＫ２、ＭＥＫ１／２、ＰＩＫ３、若しくはＢ−ｒａｆを特異的に標的にする。結合ポリペプチドは、既知の技術を用いる過度な実験をすることなく同定され得る。これに関し、ポリペプチド標的に特異的に結合可能な結合ポリペプチドに対するポリペプチドライブラリーをスクリーニングするための技術は、当業界において周知であることに留意すべきである（例えば、米国特許第５，５５６，７６２号、同第５，７５０，３７３号、同第４，７０８，８７１号、同第４，８３３，０９２号、同第５，２２３，４０９号、同第５，４０３，４８４号、同第５，５７１，６８９号、同第５，６６３，１４３号；ＰＣＴ公開第ＷＯ８４／０３５０６号及び同第ＷＯ８４／０３５６４号、Ｇｅｙｓｅｎら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，８１：３９９８−４００２（１９８４）、Ｇｅｙｓｅｎら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，８２：１７８−１８２（１９８５）、Ｇｅｙｓｅｎら，ｉｎ  Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｓ  Ａｎｔｉｇｅｎｓ，１３０−１４９（１９８６）、Ｇｅｙｓｅｎら，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．，１０２：２５９−２７４（１９８７）、Ｓｃｈｏｏｆｓら，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４０：６１１−６１６（１９８８）、���ｗｉｒｌａ，Ｓ．Ｅら（１９９０）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８７：６３７８、Ｌｏｗｍａｎ，Ｈ．Ｂら（１９９１）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３０：１０８３２、Ｃｌａｃｋｓｏｎ，Ｔら（１９９１）Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４、Ｍａｒｋｓ，Ｊ．Ｄら（１９９１），Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１、Ｋａｎｇ，Ａ．Ｓら（１９９１）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８８：８３６３、ならびにＳｍｉｔｈ，Ｇ．Ｐ．（１９９１）Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，２：６６８を参照のこと）。
【０２７４】
ペプチドライブラリーの生成及びこれらのライブラリーのスクリーニング方法は、米国特許第５，７２３，２８６号、同第５，４３２，０１８号、同第５，５８０，７１７号、同第５，４２７，９０８号、同第５，４９８，５３０号、同第５，７７０，４３４号、同第５，７３４，０１８号、同第５，６９８，４２６号、同第５，７６３，１９２号、及び同第５，７２３，３２３号にも開示されている。
【０２７５】
Ｄ．結合低分子
本明細書では、上述の方法で使用するための、ＦＧＦＲ（例えば、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、及び／またはＦＧＦＲ４）、ＦＧＦ（例えば、ＦＧＦ１〜２３）、ＭＥＫ１、ＭＥＫ２、ＭＥＫ１／２、ＰＩＫ３、及び／またはＢ−ｒａｆの低分子拮抗剤として使用するための結合低分子が提供される。
【０２７６】
結合低分子は、好ましくは本明細書に記載するＦＧＦＲ（例えば、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、及び／またはＦＧＦＲ４）、ＦＧＦ（例えば、ＦＧＦ１〜２３）、ＭＥＫ１、ＭＥＫ２、ＭＥＫ１／２、ＰＩＫ３、及び／またはＢ−ｒａｆに特異的に結合する、本明細書に定義する結合ポリペプチドまたは抗体以外の有機分子であることが好ましい。結合有機低分子は、周知の方法を用いて同定及び化学的に合成されてもよい（例えば、ＰＣＴ公開第ＷＯ００／００８２３号及び同第ＷＯ００／３９５８５号）。結合有機低分子は、通常サイズが約２０００ダルトン未満、あるいはサイズが約１５００、約７５０、約５００、約２５０、または約２００ダルトン未満であり、ここで、好ましくは本明細書に記載されるポリペプチドに特異的に結合可能なかかる有機低分子は、既知の技術を使用して過度な実験をすることなく、同定してもよい。これに関し、対象ポリペプチドに結合可能な分子に対する有機低分子ライブラリーのスクリーニング技術は当業界において周知であることに留意すべきである（例えば、ＰＣＴ公開第ＷＯ００／００８２３号及び同第ＷＯ００／３９５８５号）。結合有機低分子は、例えば、アルデヒド、ケトン、オキシム、ヒドラゾン、セミカルバゾン、カルバジド、第一級アミン、第二級アミン、第三級アミン、Ｎ−置換ヒドラジン、ヒドラジド、アルコール、エーテル、チオール、チオエーテル、ジスルフィド、カルボン酸、エステル、アミド、尿素、カルバメート、炭酸塩、ケタール、チオケタール、アセタール、チオアセタール、ハロゲン化アリール、スルホン酸アリール、ハロゲン化アルキル、スルホン酸アルキル、芳香族化合物、複素環式化合物、アニリン、アルケン、アルキン、ジオール、アミノアルコール、オキサゾリジン、オキサゾリン、チアゾリジン、チアゾリン、エナミン、スルホンアミド、エポキシド、アジリジン、イソシアネート、塩化スルホニル、ジアゾ化合物、酸塩化物等である。
【０２７７】
Ｅ．拮抗剤ポリヌクレオチド
本明細書に記載される方法で使用するポリヌクレオチド拮抗剤もまた、本明細書で提供される。ポリヌクレオチドは、アンチセンス核酸及び／またはリボザイムであってもよい。アンチセンス核酸は、ＦＧＦＲ（例えば、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、及び／またはＦＧＦＲ４）、ＦＧＦ（例えば、ＦＧＦ１〜２３）、ＭＥＫ１、ＭＥＫ２、ＭＥＫ１／２、ＰＩＫ３、及び／またはＢ−ｒａｆ遺伝子等の、対象遺伝子のＲＮＡ転写物の少なくとも一部に相補的な配列を含む。しかし、完全な相補性は好ましいものの必要ではない。
【０２７８】
本明細書で言及される「ＲＮＡの少なくとも一部に相補的な」配列とは、ＲＮＡをハイブリダイズさせて安定した二本鎖を形成可能な十分な相補性を有する配列を指し、二本鎖のアンチセンス核酸の場合、二本鎖ＤＮＡの一本鎖をこのように試験してもよい、または三本鎖形成をアッセイしてもよい。ハイブリダイゼーション能力は、アンチセンス核酸相補性の程度、及び長さの両方に依存する。通常、核酸のハイブリダイゼーションが大きくなればなるほど、より多くの塩基がＲＮＡとミスマッチし、安定した二本鎖（または場合により三本鎖）を含有する場合があり、依然としてそれらを形成する。当業者は、ハイブリダイズした複合体の融点を測定する標準的な手順を使用して、許容範囲のミスマッチの程度を確認することができる。
【０２７９】
メッセージの５’末端、例えば５’未翻訳配列に相補的であり、ＡＵＧ開始コドンを含むポリヌクレオチドは、翻訳阻害で最も効率的に作用するはずである。しかし、ｍＲＮＡの３’未翻訳配列に相補的な配列も同様に、ｍＲＮＡの翻訳阻害に効果的であることが示されている。一般にはＷａｇｎｅｒ，Ｒ．，１９９４，Ｎａｔｕｒｅ３７２：３３３−３３５を参照のこと。したがって、遺伝子の５’または３’未翻訳、未コード領域のいずれかに相補的なオリゴヌクレオチドは、内因性ｍＲＮＡの翻訳を阻害するアンチセンスアプローチに使用され得る。ｍＲＮＡの５’未翻訳領域に相補的なポリヌクレオチドは、ＡＵＧ開始コドンの補体を含まなければならない。ｍＲＮＡコード領域に相補的なアンチセンスポリヌクレオチドは、さほど効果のない翻訳阻害剤であるが、本発明で使用することができる。ｍＲＮＡの５’、または３’コード領域をハイブリダイズするように設計されたか否かに関わらず、アンチセンス核酸は少なくとも６個の長さのヌクレオチドを有さなければならず、好ましくは６〜５０個にわたる長さのヌクレオチドのオリゴヌクレオチドである。特定の態様では、オリゴヌクレオチドは、少なくとも１０個のヌクレオチド、少なくとも１７個のヌクレオチド、少なくとも２５個のヌクレオチド、または少なくとも５０個のヌクレオチドである。
【０２８０】
Ｆ．抗体及び結合ポリペプチド変異体
ある特定の実施形態では、本明細書で提供する抗体及び／または結合ポリペプチドのアミノ酸配列変異体が企図される。例えば、結合親和性、ならびに／または抗体及び／または結合ポリペプチドの他の生物学的性質を改善するのが望ましい場合がある。抗体及び／または結合ポリペプチドのアミノ酸配列変異体を、抗体及び／若しくは結合ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列に適切な修飾を行うことで、またはペプチド合成により調製してもよい。かかる修飾には例えば、抗体及び／または結合ポリペプチドのアミノ酸配列内での残基の欠失、及び／または挿入、及び／または置換が挙げられる。最終構造が所望の特性、例えば抗原結合を有する場合、欠失、挿入、及び置換の任意の組み合わせを行い、最終構造に到達することができる。
【０２８１】
ある特定の実施形態において、１つ以上のアミノ酸置換基を有する抗体変異体及び／または結合ポリペプチド変異体を提供する。置換の突然変異を誘発させる対象部位としては、ＨＶＲ及びＦＲが挙げられる。表１において、見出し「好ましい置換」の下に保存的置換を示す。更に相当の変更を表１の見出し「代表的置換」の下に、かつアミノ酸側鎖クラスに関して以下に記載をする通りに示す。アミノ酸置換基を抗体及び／または対象ポリペプチド、ならびに所望の活性、例えば抗原結合の維持／向上、免疫原性の低下、またはＡＤＣＣ若しくはＣＤＣの向上のためにスクリーニングをした生成物に導入してもよい。
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【０２８２】
アミノ酸を一般的な側鎖の特性に従って分類してもよい：
（１）疎水性：ノルロイシン、メチオニン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン
（２）中性親水性：システイン、セリン、スレオニン、アスパラギン、グルタミン
（３）酸性：アスパラギン酸、グルタミン酸
（４）塩基性：ヒスチジン、リジン、アルギニン
（５）鎖配向に影響を与える残基：グリジン、プロリン
（６）芳香族：トリプトファン、チロシン、フェニルアラニン。
【０２８３】
非保存的置換には、これらのクラスの１つのメンバーを他のクラスと交換することを伴う。
【０２８４】
Ｇ．抗体及び結合ポリペプチド誘導体
ある特定の実施形態では、本明細書において提供する抗体及び／または結合ポリペプチドを更に修飾して、当業界において既知であり速やかに入手可能な、更なる非タンパク質性部分を含有させてもよい。抗体及び／または結合ポリペプチドの誘導体化に好適な部分としては、水溶性ポリマーが挙げられるが、これに限定されない。水溶性ポリマーの非限定例としては、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、エチレングリコール／プロピレングリコールのコポリマー、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ−１，３−ジオキソラン、ポリ−１，３，６−トリオキサン、エチレン／無水マレイン酸コポリマー、ポリアミノ酸（ホモポリマーまたはランダムコポリマーのいずれか）、及びデキストランまたはポリ（ｎ−ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロプロピレングリコールホモポリマー、ポリプロピレンオキシド／エチレンオキシドコポリマー、ポリオキシエチレンポリオール（例えば、グリセロール）、ポリビニルアルコール、ならびにこれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。ポリエチレングリコールプロピオンアルデヒドは、その水中での安定性のため、製造において利点を有し得る。ポリマーは任意の分子量であってよく、かつ分枝または非分枝であってよい。抗体及び／または結合ポリペプチドに結合したポリマーの数は異なり、１つを超えるポリマーが結合している場合、それらは、同一であるかまたは異なる分子であることができる。一般に、誘導体化に使用されるポリマーの数及び／または種類は、これらに限定されるわけではないが、改善される抗体及び／または結合ポリペプチドの特定の性質または機能、抗体誘導体及び／または結合ポリペプチド誘導体が規定される状態下の療法に使用されるかどうか、等を含む事項に基づき決定することができる。
【０２８５】
別の実施形態において、放射線照射により選択的に加熱され得る、非タンパク質性部分への抗体及び／または結合ポリペプチドの複合体が提供される。一実施形態において、非タンパク質性部分はカーボンナノチューブである（Ｋａｍら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ１０２：１１６００−１１６０５（２００５））。放射線は任意の波長であってよく、限定するものではないが、通常の細胞に害を与えないが、抗体及び／または結合ポリペプチド−非タンパク質様部分に近位の細胞が死滅させられる温度まで非タンパク質様部分を加熱する波長が含まれる。
【０２８６】
ＩＶ．スクリーニング及び／または所望の機能を有するＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤を同定する方法
抗体、結合ポリペプチド、及び／または低分子を含む、本明細書に記載される方法において使用するＦＧＦＲ（例えば、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、及び／またはＦＧＦＲ４）、ＦＧＦ（例えば、ＦＧＦ１〜２３）、ＭＥＫ１、ＭＥＫ２、ＭＥＫ１／２、ＰＩＫ３、及び／またはＢ−ｒａｆ等の対象ポリペプチドの更なる拮抗剤が上に記載された。本明細書において提供する抗体、結合ポリペプチド、及び／または結合低分子等の更なる拮抗剤は、当業界において既知の種々のアッセイにより、その物理的／化学的性質及び／または生物活性を同定、スクリーニング、または特性決定してもよい。
【０２８７】
ある特定の実施形態では、ＦＧＦＲ（例えば、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、及び／またはＦＧＦＲ４）及び／またはＦＧＦ（例えば、ＦＧＦ１〜２３）ポリペプチドの原子座標を含むメモリを含むコンピュータシステムが、ＦＧＦＲシグナル伝達のリガンド結合部位を有する化合物を合理的に同定するモデルとして有用である。かかる化合物は、例えば、新規に設計するか、または既知の化合物の改質により設計するかのいずれかであってもよい。他の場合、結合化合物を、既知の化合物が、ＦＧＦＲ（例えば、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、及び／またはＦＧＦＲ４）及び／またはＦＧＦ（例えば、ＦＧＦ１〜２３）の分子モデルと「ドッキングする」かどうかを判定することにより同定してもよい。かかるドッキング法は一般に、当業界において既知である。
【０２８８】
ＦＧＦＲシグナル伝達の結晶構造データをコンピュータモデリング技術と共に使用し、結晶構造データの分析により、種々のＦＧＦＲ（例えば、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、及び／またはＦＧＦＲ４）及び／またはＦＧＦ（例えば、ＦＧＦ１〜２３）結合化合物の結合モデルを開発することができる。部位モデルは、部位表面の三次元トポグラフィー、ならびにファン・デル・ワールス接触、静電相互作用、及び水素結合機会等の要因を特徴付ける。次に、コンピュータシミュレーション技術を使用して、モデル部位と相互作用するように設計されている、プロトン、ヒドロキシル基、アミン基、二価のカチオン、芳香族及び脂肪族官能基、アミド基、アルコール基等が挙げられるが、これらに限定されない、官能基の相互作用位置をマッピングする。これらの基を、候補化合物が部位に特異的に結合するであろうという予測を立てて、ファーマコフォアまたは候補化合物の中に設計してもよい。したがって、ファーマコフォアの設計には、ファーマコフォアに含まれ、水素結合、ファン・デル・ワールス、静電、及び共有結合の相互作用を含む利用可能な種類の化学的相互作用のいずれかまたはその全てにより、部位と相互作用する候補化合物の能力を考慮することを伴うが、一般に、ファーマコフォアは非共有結合機構による部位と相互作用する。
【０２８９】
ファーマコフォアまたは候補化合物の、ＦＧＦＲ（例えば、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、及び／またはＦＧＦＲ４）及び／またはＦＧＦ（例えば、ＦＧＦ１〜２３）ポリペプチドへの結合能力は、実際の合成に加え、コンピュータモデリング技術の使用により分析することができる。十分な結合エネルギー（一実施例では、約１０−２Ｍまたはそれ以上の標的の解離定数に対応する結合エネルギー）により標的（例えば、ＦＧＦＲ（例えば、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、及び／またはＦＧＦＲ４）及び／またはＦＧＦ（例えば、ＦＧＦ１〜２３）ポリペプチド結合部位）に結合することがコンピュータモデリングにより示されるこれらの化合物のみを合成して、それらのＦＧＦＲ（例えば、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、及び／またはＦＧＦＲ４）及び／またはＦＧＦ（例えば、ＦＧＦ１〜２３）、ポリペプチドへの結合能力及びＦＧＦＲシグナル伝達阻害能力、また該当する場合、当業者に既知の、及び／または本明細書に記載される酵素アッセイを使用した酵素機能を試験してもよい。したがって、コンピュータによる評価工程は、十分な親和性を有するＦＧＦＲ（例えば、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、及び／またはＦＧＦＲ４）及び／またはＦＧＦ（例えば、ＦＧＦ１〜２３）ポリペプチドに想定外に結合する、不必要な化合物の合成を回避する。
【０２９０】
ＦＧＦＲシグナル伝達ファーマコフォアまたは候補化合物を、化学成分または断片を、ＦＧＦＲ（例えば、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、及び／またはＦＧＦＲ４）及び／またはＦＧＦ（例えば、ＦＧＦ１〜２３）ポリペプチドにおける個々の結合標的部位と会合する能力でスクリーニングして選択する一連の工程を用いてコンピュータにより評価し、設計してもよい。当業者は、化学成分または断片の、ＦＧＦＲ（例えば、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、及び／またはＦＧＦＲ４）及び／またはＦＧＦ（例えば、ＦＧＦ１〜２３）ポリペプチド、より詳細にはＦＧＦＲ（例えば、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、及び／またはＦＧＦＲ４）及び／またはＦＧＦ（例えば、ＦＧＦ１〜２３）ポリペプチドの標的部位と会合する能力をスクリーニングする幾つかの方法の１つを使用してもよい。該工程は例えば、ＦＧＦＲ（例えば、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、及び／またはＦＧＦＲ４）及び／またはＦＧＦ（例えば、ＦＧＦ１〜２３）ポリペプチド座標に基づく、コンピュータスクリーン上の標的部位、または当該技術分野において既知のこれらの座標のサブセットの目視検査により開始してもよい。
【０２９１】
癌細胞死を誘発する拮抗剤を選択するために、例えばヨウ化プロピジウム（ＰＩ）、トリパンブルーまたは７ＡＡＤの取り込みにより示される膜の結合性の喪失を、基準物質と比較して評価してもよい。ＰＩ取り込みアッセイを、補体及び免疫エフェクター細胞の不存在下で実施してもよい。腫瘍細胞を培地のみ、または適切な併用療法を含有する培地でインキュベートする。細胞を３日間インキュベートする。各処理の後、細胞集塊除去のために、細胞を洗浄して、３５ｍｍのストレーナを取り付けた１２×７５チューブ（チューブ当たり１ｍＬ、処理群当たり３チューブ）中に分取する。次いで、チューブにＰＩ（１０μｇ／ｍｌ）を入れる。試料はＦＡＣＳＣＡＮ（登録商標）フローサイトメーター及びＦＡＣＳＣＯＮＶＥＲＴ（登録商標）ＣｅｌｌＱｕｅｓｔソフトウェア（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）を使用して分析してもよい。ＰＩ取り込みにより測定されるように、培地のみ及び／または単剤療法と比較して、統計的に有意なレベルの細胞死を誘発するような拮抗剤を、細胞死誘発抗体、結合ポリペプチド、または結合低分子として選択してもよい。
【０２９２】
スクリーニング及び／または同定法のいずれかにおけるいくつかの実施形態では、ＦＧＦＲ（例えば、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、及び／またはＦＧＦＲ４）及び／またはＦＧＦ（例えば、ＦＧＦ１〜２３）の候補拮抗剤は、抗体、結合ポリペプチド、結合低分子、またはポリヌクレオチドである。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ（例えば、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、及び／またはＦＧＦＲ４）及び／またはＦＧＦ（例えば、ＦＧＦ１〜２３）の拮抗剤は、抗体である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲ（例えば、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、及び／またはＦＧＦＲ４）及び／またはＦＧＦ（例えば、ＦＧＦ１〜２３）の拮抗剤は、低分子である。
【０２９３】
Ｖ．薬学的製剤
本明細書に記載される、ＭＥＫ拮抗剤及び／またはＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、ＰＩＫ３拮抗剤、及び／またはＢ−ｒａｆ拮抗剤の薬学的製剤は、所望の純度を有するかかる抗体を１つ以上の任意の薬学的に許容される担体と混合することにより、凍結乾燥製剤または水溶液の形態で調製される（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  第１６版，Ｏｓｏｌ，Ａ．版．（１９８０））。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及び／またはＭＥＫ拮抗剤は、結合低分子、抗体、結合ポリペプチド、及び／またはポリヌクレオチドである。いくつかの実施形態において、ＭＥＫ拮抗剤及び／またはＢ−ｒａｆ拮抗剤は、結合低分子、抗体、結合ポリペプチド、及び／またはポリヌクレオチドである。いくつかの実施形態において、ＭＥＫ拮抗剤及び／またはＰＩＫ３拮抗剤は、結合低分子、抗体、結合ポリペプチド、及び／またはポリヌクレオチドである。薬学的に許容される担体は、一般に、使用される用量及び濃度でレシピエントに対して無毒であり、これらには、リン酸塩、クエン酸塩、及び他の有機酸塩の緩衝液；アスコルビン酸及びメチオニンを含む抗酸化剤；防腐剤（塩化オクタデシルジメチルベンジルアンモニウム；塩化ヘキサメトニウム；塩化ベンザルコニウム；塩化ベンゼトニウム；フェノール、ブチル、若しくはベンジルアルコール；メチル若しくはプロピルパラベン等のアルキルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３−ペンタノール；及びｍ−クレゾール等）；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチン、若しくは免疫グロブリン等のタンパク質；ポリビニルピロリドン等の疎水性ポリマー；グリジン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、若しくはリジン等のアミノ酸；グルコース、マンノース、若しくはデキストランを含む単糖類、二糖類、及び他の炭水化物；ＥＤＴＡ等のキレート剤；スクロース、マンニトール、トレハロース、若しくはソルビトール等の糖類；ナトリウム等の塩形成対イオン；金属錯体（例えば、亜鉛−タンパク質複合体）；ならびに／またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）等の非イオン界面活性剤が挙げられるが、これらに限定されない。本明細書における例示的な薬学的に許容される担体は、更に、可溶性中性活性ヒアルロニダーゼ糖タンパク質（ｓＨＡＳＥＧＰ）等の介在性薬剤分散剤、例えば、ｒＨｕＰＨ２０（ＨＹＬＥＮＥＸ（登録商標）、Ｂａｘｔｅｒ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｉｎｃ．）等のヒト可溶性ＰＨ−２０ヒアルロニダーゼ糖タンパク質を含む。ｒＨｕＰＨ２０を含む、ある特定の例示的なｓＨＡＳＥＧＰ及び使用方法は、米国特許公開第２００５／０２６０１８６号及び同第２００６／０１０４９６８号に記載されている。一態様において、ｓＨＡＳＥＧＰは、コンドロイチン分解酵素等の、１つ以上の更なるグルコサミノグリカナーゼと結合する。
【０２９４】
例示的な凍結乾燥製剤は、米国特許第６，２６７，９５８号に記載されている。水性抗体製剤としては、米国特許第６，１７１，５８６号及びＷＯ２００６／０４４９０８に記載されるものが挙げられ、後者の製剤には、ヒスチジンアセテート緩衝液が含まれる。
【０２９５】
本明細書における製剤はまた、治療される特定の指示で必要な１つを超える有効成分、好ましくは互いに悪影響を及ぼさない相補的な活性を含有するものを含んでもよい。かかる有効成分は、意図する目的に対して有効な量の組み合わせで適切に存在する。
【０２９６】
有効成分は、例えば、液滴形成技術または界面重合によって配合されたマイクロカプセル、例えば、それぞれヒドロキシメチルセルロースまたはゼラチンマイクロカプセル及びポリ−（メチルメタクリレート）マイクロカプセル中、コロイド薬物送達系（例えば、リポソーム、アルブミン小球体、マイクロエマルション、ナノ粒子及びナノカプセル）中、あるいはマクロエマルション中に封入されてもよい。かかる技術は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  第１６版，Ｏｓｏｌ，Ａ．版．（１９８０）に開示されている。
【０２９７】
持続放出配合物を配合してもよい。持続放出配合物の好適な例は、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤及びＢ−ｒａｆ拮抗剤を含有する固体疎水性ポリマーの半透性マトリックスを含み、そのマトリックスは、造形品、例えばフィルムまたはマイクロカプセルの形態である。
【０２９８】
インビボ投与で使用する製剤は通常滅菌されている。滅菌は例えば、滅菌濾過膜を通す濾過により速やかに達成され得る。
【０２９９】
ＶＩ．製造物品
本発明の別の態様では、上記疾患の治療、予防及び／または診断に有用な材料を含有する製造物品を提供する。該製造物品は、容器、及び容器上にあるまたは付属するラベルまたは添付文書を含む。好適な容器としては、例えば、ボトル、バイアル、シリンジ、静注液バッグ等が挙げられる。容器はガラスまたはプラスチック等の種々の材料から形成してもよい。容器は組成物それ自体、または状態の治療、予防及び／若しくは診断に効果的な他の組成物と組み合わせた組成物を保持し、かつ、滅菌点検口を有してもよい（例えば、容器は静注液バッグまたは皮下注射針で貫通可能なストッパを有するバイアルであってよい）。組成物における少なくとも１つの活性剤は、ＭＥＫ拮抗剤及び本明細書に記載されるＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、Ｂ−ｒａｆ拮抗剤、またはＰＩＫ３拮抗剤からなる群から選択される１つ以上の更なる作用物質である。ラベルまたは添付文書は、組成物が最適な状態の治療に使用されることを示す。更に、製造物品は、（ａ）中に組成物を含有する第１の容器（この組成物はＭＥＫ拮抗剤及びＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、ＰＩＫ３拮抗剤、ならびにＢ−ｒａｆ拮抗剤からなる群から選択される１つ以上の更なる作用物質を含む）、及び（ｂ）中に組成物を含有する第２の容器（この組成物は更なる細胞毒性またはそうでなければ治療剤を含む）を含み得る。製造物品は、（ａ）中に組成物を含有する第１の容器（この組成物はＭＥＫ拮抗剤を含む）、（ｂ）中に組成物を含有する第２の容器（この組成物はＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、ＰＩＫ３拮抗剤、及びＢ−ｒａｆ拮抗剤からなる群から選択される１つ以上の更なる作用物質を含む）、ならびに任意に（ｃ）更なる細胞毒性またはそうでなければ治療剤を含む、第３の容器を含み得る。
【０３００】
いくつかの実施形態では、製造物品は容器、前記容器上のラベル、及び前記容器内に含有される組成物を含み、ここで、組成物は、１つ以上の試薬（例えば、１つ以上の生体指標若しくはプローブに結合する一次抗体、及び／または本明細書に記載される１つ以上の生体指標に結合するプライマー）サンプル内に１つ以上の生体指標が存在することを評価するために組成物を使用可能であることを示す、容器上のラベル、ならびにサンプル内に１つ以上の生体指標が存在することを評価するための試薬の使用説明書を含む。製造物品は更に、サンプルの配合及び試薬の利用のための取扱説明書及び材料のセットを含むことができる。いくつかの実施形態において、製造物品は更に一次及び二次抗体の両方といった試薬を含んでもよく、ここで二次抗体はラベル、例えば酵素標識に結合している。いくつかの実施形態において、製造物品は、本明細書に記載される１つ以上の生体指標に結合した、１つ以上のプローブ及び／またはプライマーを含む。
【０３０１】
いずれかの製造物品におけるいくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、ＭＥＫ拮抗剤、ＰＩＫ３拮抗剤、及び／またはＢ−ｒａｆ拮抗剤は、抗体、結合ポリペプチド、結合低分子、またはポリヌクレオチドである。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、ＭＥＫ拮抗剤、ＰＩＫ３拮抗剤、及び／またはＢ−ｒａｆ拮抗剤は低分子である。いくつかの実施形態において、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、ＭＥＫ拮抗剤、ＰＩＫ３拮抗剤、及び／またはＢ−ｒａｆ拮抗剤は抗体である。いくつかの実施形態において、抗体はモノクローナル抗体である。いくつかの実施形態において、抗体はヒト、ヒト化、またはキメラ抗体である。いくつかの実施形態において、抗体は抗体断片であり、この抗体断片はＦＧＦＲシグナル伝達及び／または阻害剤と結合する。
【０３０２】
本発明の本実施形態における製造物品は更に、組成物を特定の状態の治療に使用可能であることを示す添付文書を含んでもよい。あるいは、または更に、製造物品は更に、注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸塩−緩衝生理食塩水、リンゲル液及びデキストロース溶液等の製薬上許容できる緩衝液を含む第２（または第３）の容器を含んでもよい。更に、他の緩衝液、希釈剤、フィルター、針、及びシリンジを含む、商業的及び使用者の視点から所望の他の物質を含んでもよい。
【０３０３】
製造物品内のその他の任意成分としては、１つ以上の緩衝液（例えば、遮断緩衝液、洗浄緩衝液、基質緩衝液等）、酵素標識により化学的に変化する基質等の他の試薬（例えば、色素体）、エピトープ修復溶液、対照サンプル（陽性及び／または陰性対照）、対照スライド（複数可）等が挙げられる。
【０３０４】
上記の製造物品のうちのいずれかが、ＦＧＦＲシグナル伝達の拮抗剤、ＭＥＫ拮抗剤、ＰＩＫ３拮抗剤、及び／またはＢ−ｒａｆ拮抗剤の代わりに、またはそれに加えて、本明細書に記載される免疫複合体を含み得ることが理解されている。
【実施例】
【０３０５】
以下は本発明の方法及び組成物の実施例である。上述の概要を考慮して、種々の他の実施形態を実施してもよいと理解されている。
【０３０６】
実施例１
ＦＧＦシグナル伝達及び耐性を、１０個のＨＥＲ２＋乳癌細胞株及び１０個のＢ−ｒａｆ突然変異体黒色腫細胞株において検査した（図５）。１０個のＨＥＲ２＋乳癌細胞株のうちの７個を、ＦＧＦ２により救出した（図５Ａ）。１０個のＢ−ｒａｆ  ＨＥＲ２＋乳癌細胞株のうちの８個を、ＦＧＦ２により救出した（図５Ｂ）。その後の分析は、Ｖ６００Ｅ突然変異を有する黒色腫株の５０〜７０％を、ＦＧＦ２（ｎ＝３０）により救出したことを測定した。
【０３０７】
更に、ＦＧＦ２が主要なシグナル伝達経路を再活性化させ、耐性を促進することを測定した（図６）。これは、ＨＥＲ２＋乳癌細胞をラパチニブ（２μＭ）の存在または不在下で１０分間、ＦＧＦ２（５０ｎｇ／ｍＬ）に曝露する細胞アッセイにおいて示された（図６Ａ）。同様に、ＨＥＲ２＋乳癌細胞をラパチニブ（２μＭ）の存在または不在下で２４時間、ＦＧＦ２（５０ｎｇ／ｍＬ）に曝露するアッセイを実施した（図６Ｂ）。これらの実験に基づき、ＦＧＦ２が下流シグナル伝達の持続した活性化を刺激することを測定した。
【０３０８】
実施例２
シグナル伝達を媒介する分泌因子の動態及びフィードバック機構もまた検査した。ＦＧＦＲ標的化が、ＦＧＦ２救出を効果的に遮断したことが示された。
【０３０９】
３個の細胞株（６２４ＭＥＬ、９２８ＭＥＬ、及びＬＯＸ  ＩＭＶＩ）を、（５μＭ）ＰＬＸ４０３２（すなわち、ベムラフェニブ）に４時間曝露し、次いで分泌された（５０ｎｇ／ｍＬ）ＦＧＦ（亜型１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１６、１７、１８、１９、２０、２１、及び２２）に１０分間曝露した。免疫ブロットを準備し、ｐ−ＭＥＫ及びｐ−ＥＲＫに関して調べた。多くのＦＧＦが、ＭＡＰＫ経路を活性化させるが、耐性は促進しないことを測定した（図７Ａ）。６２４ＭＥＬ及び９８２ＭＥＬ細胞株を、５μＭのＰＬＸ４０３２に２４時間曝露し、５０ｎｇ／ｍＬのＦＧＦ（亜型１、２、４、６、８、９、１７、及び１８）に２４時間曝露し、次いで免疫ブロットのために処理した。免疫ブロットを、ｐ−ＭＥＫ及びｐ−ＥＲＫに関して調べた。シグナルの寿命増大が、重要な役割を果たし得るが、更なる因子が獲得薬剤耐性に関わることを測定した（図７Ｂ）。
【０３１０】
ＦＧＦ−救出の下流媒介物に関連したフィードバック機構もまた検査した（図８）。ＢＴ−４７４乳癌細胞を、ｐ３８、ＰＩ３Ｋ、ＭＥＫ、及びＦＧＦＲのうちの１つ以上の阻害剤の存在または不在下で、２μＭのラパチニブまたは２μＭのラパチニブに加えて５０ｎｇ／ｍＬのＦＧＦ２で処理した（図８Ａ）。細胞を、また、ｐ３８、ＰＩ３Ｋ、ｐ３８及びＰＩ３Ｋ、またはＦＧＦＲの、２μＭのラパチニブ、ＭＥＫの阻害剤、及び／または低分子阻害剤で前処理し、次いで１０分間、５０ｎｇ／ｍＬのＦＧＦ２で刺激した。前処理し、刺激した細胞を処理し、ｐ−ＨＥＲ２、ｐＭＥＫ、ＭＥＫ、ｐ−ＥＲＫ、ＥＲＫ、ｐ９０ＲＳＫ（ｐＳ３８０）、ｐ９０ＲＳＫ、ｐ−ｐ３８ＭＡＰＫ（Ｔ１８０／Ｙ１８２）、ｐ３８ＭＡＰＫ、ｐ−Ａｋｔ（Ｓ４７３）、Ａｋｔ、及びβ−アクチンに関して調べた免疫ブロットを実施した（図８Ｂ）。同様な前処理／刺激実験もまた、ＨＣＣ−１９５４及びＵＡＣＣ−８９３乳癌細胞株を使用して実施した。
【０３１１】
下流経路の効果的な遮断が、多くの場合ＦＧＦ２−救出を克服せず、複数のフィードバック及び代償機構が明らかであることを測定した。更に、ＦＧＦＲ標的化のみがＦＧＦ２救出を効果的に遮断することを測定した。
【０３１２】
実施例３
実験をＣＨＬ−１黒色腫細胞について実施し、細胞増殖についての単薬剤及び二薬剤治療の効果を測定した（図１１）。細胞を、ＤＭＳＯ（対照）、ＧＤＣ−０９７３、ＧＤＣ−００３２、ＢＧＪ３９８、ＧＤＣ−０９７３及びＧＤＣ−００３２、またはＧＤＣ−０９７３、ならびにＢＧＪ３９８で処理した。７、１４、２１、２８、及び３５日目、または細胞が１００％に近いコンフルエントに達するまで、細胞増殖を観察した。結果は、ＢＧＪ３９８で処理した細胞は１４日目にコンフルエントに達し、ＤＭＳＯまたはＧＤＣ−００３２単独で処理した細胞は７日目にコンフルエントに達し、ＧＤＣ−０９７３単独で処理した細胞は、２８日目にコンフルエントに達したことを示した。対照的に、ＧＤＣ−０９７３、及びＧＤＣ−００３２、またはＧＤＣ−０９７３とＢＧＪ３９８との組み合わせの併用療法で処理した細胞は、３５日間を通して一度もコンフルエントに達しなかった。
【０３１３】
したがって、ＧＤＣ−０９７３、及びＧＤＣ−００３２、ならびにＧＤＣ−０９７３とＢＧＪ３９８との組み合わせの併用療法が、ＣＨＬ−１黒色腫細胞における単剤治療と比較して、細胞増殖を防止する／遅らせる、及び／または細胞死を促進する点でより有効であった。
【０３１４】
実施例４
実験をＨｓ８９３．Ｔ黒色腫細胞について実施し、細胞増殖についての単薬剤及び二薬剤治療の効果を測定した（図１２）。細胞を、ＤＭＳＯ（対照）、ＧＤＣ−０９７３、ＧＤＣ−００３２、ＢＧＪ３９８、ＧＤＣ−０９７３及びＧＤＣ−００３２、またはＧＤＣ−０９７３、ならびにＢＧＪ３９８で処理した。細胞増殖を、７、１４、２１、２８、及び３５日目に観察した。実施例３からのＣＨＬ−１細胞（図１１）とは異なり、Ｈｓ８９３．Ｔ細胞の結果は、単剤及び２剤治療でコンフルエントに達しなかった。しかし、ＤＭＳＯまたは単剤治療のうちの１つで処理した細胞は、ＧＤＣ−０９７３及びＧＤＣ−００３２またはＧＤＣ−０９７３とＢＧＪ３９８との組み合わせの併用療法で処理したそれらの細胞と比較して、より大きな増殖及び／または低下した細胞死を提示した。
【０３１５】
したがって、ＧＤＣ−０９７３、及びＧＤＣ−００３２、ならびにＧＤＣ−０９７３とＢＧＪ３９８との組み合わせの併用療法が、ＨＳ８９３．Ｔ黒色腫細胞における単剤治療と比較して、細胞増殖を防止する／遅らせる及び／または細胞死を促進する点でより有効であった。
【０３１６】
実施例５
実験を、ＨＳ８９５．Ｔ正常皮膚線維芽細胞について実施し、細胞増殖についての単薬剤及び二薬剤治療の効果を測定した（図１３）。細胞を、ＤＭＳＯ（対照）、ＧＤＣ−０９７３、ＧＤＣ−００３２、ＢＧＪ３９８、ＧＤＣ−０９７３及びＧＤＣ−００３２、またはＧＤＣ−０９７３、ならびにＢＧＪ３９８で処理した。７、１４、２１、２８、及び３５日目、または細胞が１００％に近いコンフルエントに達するまで、細胞増殖を観察した。結果は、ＢＧＪ３９８及びＤＭＳＯで処理した細胞が、２８日目にコンフルエントに達したことを示した。ＧＤＣ−０９７３、ＧＤＣ−００３２、ＧＤＣ−０９７３、及びＧＤＣ−００３２、及びＧＤＣ−０９７３、ならびにＢＧＪ３９８で処理した細胞は、３５日間を通して一度もコンフルエントに達しなかった。しかし、ＧＤＣ−０９７３／ＧＤＣ−００３２及びＧＤＣ−０９７３／ＢＧＪ３９８の二重治療は、単剤治療と比較して、著しく低い増殖（及び／または著しく多い死）を示した。
【０３１７】
したがって、ＧＤＣ−０９７３、及びＧＤＣ−００３２、ならびにＧＤＣ−０９７３とＢＧＪ３９８との組み合わせの併用療法は、ＨＳ８９５．Ｔ正常皮膚線維芽細胞における単剤治療と比較して、細胞増殖を防止する／遅らせる、及び／または細胞死を促進する点でより有効であった。
【０３１８】
実施例６
ベムラフェニブ（「ＳＫ  ＭＥＬ２４ＶｅｍＲ」）に対して耐性を有する黒色腫細胞株を作製した。ＳＫ  ＭＥＬ２４ＶｅｍＲ細胞を、ベムラフェニブ（ＰＬＸ４０３２）、ＢＧＪ３９８、ＧＤＣ−０９７３、ＢＧＪ３９８及びＧＤＣ−０９７３、ベムラフェニブ及びＢＧＪ３９８、ベムラフェニブ及びＧＤＣ−０９７３、またはベムラフェニブ、ＢＧＪ３９８、ならびにＧＤＣ−０９７３で処理した。全ての治療条件において、ベムラフェニブの濃度は５μＭであり、ＢＧＪ３９８の濃度は１μＭであり、及びＧＤＣ−０９７３の濃度は０．５μＭであった。全ての治療のための曝露時間は２４時間であった。
【０３１９】
次いで細胞を処理し、ＦＧＦＲ１、ｐＡＫＴ、ｐＭＥＫ、ｐＥＲＫ、ＰＡＲＰ、ｐＢＡＤ、ＢＩＭ、及びβ−アクチンをウェスタンブロット法の使用に関して調べた。図１４に示されるように、ＧＤＣ−０９７３でＳＫ  ＭＥＬ２４ＶｅｍＲ細胞を阻害することは、より低いｐＥＲＫレベルをもたらすと思われる。更に、ｐＥＲＫレベルは、細胞をＭＥＫ及びＦＧＦＲ阻害剤で処理したとき（すなわち、ＧＤＣ−０９７３及びＢＧＪ３９８の併用療法）、更に低下した。
【０３２０】
実施例７
ベムラフェニブ及びコビメチニブに対する二重耐性（すなわち、ＰＬＸ４０３２及びＧＤＣ−０９７３に対する耐性）を有する細胞株を生成した。細胞生存能力アッセイを、親細胞株（すなわち、Ｇ３６１）、単一のベムラフェニブ耐性細胞株（すなわち、Ｇ３６１ＶｅｍＲ）、及び二重ベムラフェニブ及びコビメチニブ耐性細胞株（すなわち、Ｇ３６１ＲＲ）について実施した。生存能力アッセイの間、細胞をＢＣＬ−ＸＬ阻害剤（図１５Ａ及び１５Ｂ）またはＢＣＬ−ＸＬ／ＢＣＬ−２阻害剤（図１５Ｃ及び１５Ｄ）のいずれかで処理した。阻害剤スクリーニング／生存能力アッセイの結果は、親または単一耐性ベムラフェニブ細胞株と比較して、二重耐性モデルが、ＢＣＬ−２／ＸＬ阻害剤に対してより感受性が高いことを示した。
【０３２１】
前述の発明が、理解を明瞭にするために、実例及び実施例として、いくつか詳細に記載されてはいるが、これらの説明及び実施例は本発明の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。本明細書で引用した全ての特許及び科学文献の開示は、その全体が参照として明示的に援用される。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図１Ｃ】
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【図１Ｄ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図２Ｄ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図４Ｃ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図５Ｃ】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図７Ｃ】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図９Ａ】
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【図９Ｂ】
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【図１０Ａ】
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【図１０Ｂ】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５Ａ】
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【図１５Ｂ】
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【図１５Ｃ】
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【図１５Ｄ】
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【国際調査報告】
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