(57)【要約】  本開示は、ヒトＣＣＲ４に特異的に結合する抗体、および選択的４−１ＢＢアゴニストを含む併用療法、ならびに癌の処置のための併用療法の使用を記載する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
個体において癌を処置する方法であって、該個体に抗ＣＣケモカイン受容体４（ＣＣＲ４）抗体および４−１ＢＢアゴニストを投与することを含む前記方法。
【請求項２】
４−１ＢＢアゴニストは、４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
抗ＣＣＲ４抗体は、重鎖および軽鎖を含み、該重鎖および該軽鎖はそれぞれ、配列番号１５および配列番号１６を含み；
４−１ＢＢアゴニストは、重鎖および軽鎖を含む４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体であり、該重鎖および該軽鎖はそれぞれ、配列番号２１および配列番号２２を含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
抗ＣＣＲ４抗体および４−１ＢＢアゴニストは同時に、または逐次的に投与される、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
抗ＣＣＲ４抗体は、４−１ＢＢアゴニストとは別の時点に投与される、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
癌は、固形腫瘍である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
癌は、頭部／頸部扁平上皮細胞癌、直腸癌、結腸癌、扁平上皮細胞肺癌、甲状腺癌、膀胱癌、黒色腫、子宮頸癌、前立腺癌、乳癌、子宮／子宮内膜癌、膵癌、肺腺癌、卵巣癌、または乳頭状腎臓癌である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
抗ＣＣＲ４抗体は、約０．５、１、２、３、５、または１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
個体において癌を処置するための、４−１ＢＢアゴニストとの併用のための抗ＣＣケモカイン受容体４（ＣＣＲ４）抗体を含む医薬。
【請求項１０】
個体において癌を処置するための、４−１ＢＢアゴニストとの併用のための抗ＣＣケモカイン受容体４（ＣＣＲ４）抗体を含む医薬であって、
該抗ＣＣＲ４抗体は、重鎖および軽鎖を含み、該重鎖および該軽鎖はそれぞれ、配列番号１５および配列番号１６を含み；
該４−１ＢＢアゴニストは、重鎖および軽鎖を含む４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体であり、該重鎖および該軽鎖はそれぞれ、配列番号２１および配列番号２２を含む、前記医薬。
【請求項１１】
個体において癌を処置するための、抗ＣＣケモカイン受容体４（ＣＣＲ４）抗体との併用のための４−１ＢＢアゴニストを含む医薬。
【請求項１２】
個体において癌を処置するための、抗ＣＣケモカイン受容体４（ＣＣＲ４）抗体との併用のための４−１ＢＢアゴニストを含む医薬であって、
該抗ＣＣＲ４抗体は、重鎖および軽鎖を含み、該重鎖および該軽鎖はそれぞれ、配列番号１５および配列番号１６を含み；
該４−１ＢＢアゴニストは、重鎖および軽鎖を含む４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体であり、該重鎖および該軽鎖はそれぞれ、配列番号２１および配列番号２２を含む、前記医薬。
【請求項１３】
抗ＣＣＲ４抗体は、約０．５、１、２、３、５、または１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項９〜１２のいずれか１項に記載の医薬。
【請求項１４】
抗ＣＣＲ４抗体は、クエン酸緩衝液ｐＨ５．２〜５．８中に４ｍｇ／ｍＬ抗ＣＣＲ４抗体、２２．５ｍｇ／ｍＬグリシン、０．０２％（ｗ／ｖ）ポリソルベート８０を含む液体医薬として製剤化されている、請求項９〜１３のいずれか１項に記載の医薬。
【請求項１５】
癌は、固形腫瘍である、請求項９〜１４のいずれか１項に記載の医薬。
【請求項１６】
癌は、ＣＣＲ４発現の陽性反応を示す、請求項９〜１５のいずれか１項に記載の医薬。
【請求項１７】
抗ＣＣＲ４抗体は、ＫＷ−０７６１である、請求項９〜１６のいずれか１項に記載の医薬。
【請求項１８】
ＫＷ−０７６１は、クエン酸緩衝液ｐＨ５．２〜５．８中に４ｍｇ／ｍＬ抗ＣＣＲ４抗体ＫＷ−０７６１、２２．５ｍｇ／ｍＬグリシン、０．０２％（ｗ／ｖ）ポリソルベート８０を含む液体医薬として製剤化されている、請求項１５に記載の医薬。
【請求項１９】
第１のコンテナ、第２のコンテナ、および添付文書を含むキットであって、
該第１のコンテナは、抗ＣＣケモカイン受容体４（ＣＣＲ４）抗体を含む少なくとも１用量の医薬を含み、
該第２のコンテナは、４−１ＢＢアゴニストを含む少なくとも１用量の医薬を含み、
該添付文書は、医薬を用いて癌個体を処置するための説明書を含む、前記キット。
【請求項２０】
第１のコンテナ、第２のコンテナ、および添付文書を含むキットであって、
該第１のコンテナは、抗ＣＣケモカイン受容体４（ＣＣＲ４）抗体を含む少なくとも１用量の医薬を含み、
該第２のコンテナは、４−１ＢＢアゴニストを含む少なくとも１用量の医薬を含み、
該添付文書は、医薬を用いて癌個体を処置するための説明書を含み、
該抗ＣＣＲ４抗体は、重鎖および軽鎖を含み、該重鎖および該軽鎖はそれぞれ、配列番号１５および配列番号１６を含み；
該４−１ＢＢアゴニストは、重鎖および軽鎖を含む４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体であり、該重鎖および該軽鎖はそれぞれ、配列番号２１および配列番号２２を含む、前記キット。
【請求項２１】
説明書は、医薬が、ＣＣＲ４発現の陽性反応を示す癌を有する個体を処置するのに用いられることが意図されると記載する、請求項１９または２０に記載のキット。
【請求項２２】
癌は、頭部／頸部扁平上皮細胞癌、直腸癌、結腸癌、扁平上皮細胞肺癌、甲状腺癌、膀胱癌、黒色腫、子宮頸癌、前立腺癌、乳癌、子宮／子宮内膜癌、膵癌、肺腺癌、卵巣癌、または乳頭状腎臓癌である、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の方法、使用、またはキット。
【請求項２３】
癌は、ＣＣＲ４発現の陽性反応を示す固形腫瘍であり、頭部／頸部扁平上皮細胞癌、直腸癌、結腸癌、扁平上皮細胞肺癌、甲状腺癌、膀胱癌、黒色腫、子宮頸癌、前立腺癌、乳癌、子宮／子宮内膜癌、膵癌、肺腺癌、卵巣癌、および乳頭状腎臓癌からなる群から選択される、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の方法、使用、またはキット。
【請求項２４】
癌は、進行型または転移性の固形腫瘍である、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の
方法、使用、またはキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１４年５月２１日に出願した米国仮出願第６２／００１，５３４号の利益を主張するものであり、この出願は全て、参照によってその全体が本明細書中に組み入れられる。
【０００２】
本発明は、癌の処置に有用な併用療法に関する。特に、本発明は、ヒトＣＣケモカイン受容体４（ＣＣＲ４）に特異的に結合する抗体、および４−１ＢＢタンパク質のアゴニストを含む併用療法に関する。
【背景技術】
【０００３】
ケモカインは、正常な免疫監視および免疫応答に、そして血液生成、血管形成、ウイルス感染の制御、およびＴ細胞分化における他のいくつかの機能に必須の、基礎的な白血球輸送の重要なコンポーネントとして認識されてきた（非特許文献１〜非特許文献３）。白血球に及ぼす炎症誘発作用の様々な媒介、例えば走化性のトリガリング、顆粒減少、脂質メディエータの合成、およびインテグリン活性化を含めたこの一連の多様な生物活性は、炎症性疾患の開始および維持における重要な役割と共に、ケモカインおよびケモカイン受容体を、治療標的の魅力的な新しいセットとしてきた。
【０００４】
ケモカイン受容体４（ＣＣＲ４）は、非特許文献４および非特許文献５によって同定された。ＣＣＲ４は、７回膜貫通Ｇタンパク質結合受容体であり、Ｔｈ２細胞および調節Ｔ細胞上に選択的に発現される（非特許文献６）。正常な細胞、例えばＴｈ２細胞上でのＣＣＲ４発現は、リガンド、とりわけマクロファージ由来ケモカイン（ＭＤＣ）によって、部分的に調節される（非特許文献７）が、癌細胞上のリガンドによる調節はまだ理解されていない。抗ＣＣＲ４モノクローナル抗体が、エフェクタ型のＦｏｘＰ３＋ＣＤ４＋調節Ｔ細胞を選択的に減少させることで、ヒトにおいて抗腫瘍免疫応答を引き起こすことが示されてきた（非特許文献８）。
【０００５】
ＫＷ−０７６１（モガムリズマブまたはＰＯＴＥＬＩＧＥＯ（商標））が、再発した、または治療抵抗性のＣＣＲ４陽性成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、再発した、または治療抵抗性のＣＣＲ４陽性末梢Ｔ細胞リンパ腫（ＰＴＣＬ）、および皮膚Ｔ細胞リンパ腫（ＣＴＣＬ）について、日本で認可されている。ＫＷ−０７６１は、ＣＣＲ４発現細胞を標的とし、かつＡＤＣＣを介してＣＣＲ４を発現するＴリンパ球を減少させる能力を示した、免疫グロブリンＧ、サブクラス１（ＩｇＧ１）カッパアイソタイプのヒト化モノクローナル抗体である。ＫＷ−０７６１は、定常（Ｆｃ）領域の複合型オリゴ糖からの脱フコシル化によって、ＡＤＣＣ活性を高めた（非特許文献９；特許文献１；特許文献２）。
【０００６】
活性化Ｔ細胞上に発現される誘導可能な共刺激受容体として最初に同定された４−１ＢＢ（ＣＤ１３７およびＴＮＦＲＳＦ９）は、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）受容体スーパーファミリーの膜貫通糖タンパク質である。４−１ＢＢの現在の理解によれば、発現は一般に、活性化依存的であり、そして活性化されたＮＫ細胞およびＮＫＴ細胞、調節Ｔ細胞、樹枝細胞（ＤＣ）（ろ胞ＤＣが挙げられる）、刺激されたマスト細胞、分化骨髄細胞、単球、好中球、好酸球（非特許文献１０）、ならびに活性化Ｂ細胞（非特許文献１１）が挙げられる広いサブセットの免疫細胞を包含することが示される。４−１ＢＢ発現はまた、腫瘍血管系（非特許文献１２；非特許文献１３）およびアテローム動脈硬化性の内皮（非特許文献１４）でも実証されてきた。４−１ＢＢ（４−１ＢＢＬ）を刺激するリガンドは、活性化抗原提示細胞（ＡＰＣ）、脊髄始原細胞、および造血幹細胞上に発現される。
【０００７】
Ｂ細胞受容体結合時における、活性化された正常なヒトＢ細胞上の４−１ＢＢの、そのリガンドとの相互作用は、増殖を刺激し、かつ生存を高める（非特許文献１５）。Ｂ細胞リンパ腫における４−１ＢＢ結合の潜在的影響が、掲載済みの２つの研究において調査されている。いくつかのタイプのヒト原発性ＮＨＬサンプルの評価により、４−１ＢＢは、リンパ腫細胞よりもむしろ浸潤Ｔ細胞上に支配的に発現されることが示された（非特許文献１６）。リツキシマブおよびＮＫ細胞とのＢリンパ腫細胞のインビトロ培養に４−１ＢＢアゴニストを添加すると、リンパ腫の殺滅が増大した（非特許文献１７）。また、カニクイザルにおいてＰＦ−０５０８２５６６（抗４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体）を０．００１〜１００ｍｇ／ｋｇの用量で用いた２つの実験において、Ｂ細胞免疫表現型タイピングが実行された；これらの実験では、末梢血Ｂ細胞数は、変化しないか減少するかのいずれかであった。
【０００８】
４−１ＢＢは、ナイーブＴ細胞の表面上で検出不可能であるが、発現は、活性化と同時に増大する。４−１ＢＢの活性化と同時に、ＴＮＦＲ関連因子（ＴＲＡＦ）ファミリーの生存促進メンバーであるＴＲＡＦ−１およびＴＲＡＦ−２が、４−１ＢＢ細胞質尾部に動員されて、ＮＦκＢ、ならびにＥＲＫ、ＪＮＫおよびｐ３８  ＭＡＰキナーゼを含むマイトジェン活性化タンパク質（ＭＡＰ）キナーゼカスケードの下流活性化がもたらされる。ＮＦｋＢ活性化が、Ｂｃｌ−２ファミリーの生存促進メンバーであるＢｆｌ−１およびＢｃｌ−ＸＬのアップレギュレーションに至る。アポトーシス促進タンパク質Ｂｉｍは、ＴＲＡＦ−１およびＥＲＫに依存して、ダウンレギュレートされる（非特許文献１８）。
【０００９】
報告によれば、４−１ＢＢアゴニストｍＡｂが、共刺激分子の発現を増大させ、かつ細胞溶解性Ｔリンパ球応答を著しく高めて、様々なモデルにおいて抗腫瘍効能をもたらすことが示された。４−１ＢＢアゴニストｍＡｂは、単独療法および併用療法の双方について、予防的かつ治療的セッティングの効能を実証し、そして永続的な抗腫瘍防御的Ｔ細胞記憶応答を確立した（非特許文献１９）。４−１ＢＢアゴニストはまた、種々の自己免疫モデルにおいて、自己免疫反応を阻害する（非特許文献２０）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】Ｓｈｉｔａｒａら、Ｈｕｍａｎ  ＣＤＲ−ｇｒａｆｔｅｄ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ａｎｄ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｆｒａｇｍｅｎｔ  ｔｈｅｒｅｏｆ、米国特許第７，５０４，１０４号
【特許文献２】米国特許第８，４９１，９０１号
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】Ｂａｇｇｉｏｌｉｎｉら、Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １５：６７５（１９９７）
【非特許文献２】Ｚｏｕら、Ｎａｔｕｒｅ  ３９３：５９５（１９９８）
【非特許文献３】Ｔａｃｈｉｂａｎａら、Ｎａｔｕｒｅ  ３９３：５９１（１９９８）
【非特許文献４】Ｐｏｗｅｒら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．  ２７０：１９４９５〜１９５００（１９９５）；Ｇｅｎｂａｎｋ受諾番号Ｘ８５７４０
【非特許文献５】Ｍｅｙｅｒら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．  ２７１（２４）：１４４４５〜１４４５１（１９９６）；Ｇｅｎｂａｎｋ受諾番号Ｘ９４１５１
【非特許文献６】Ｄ’Ａｍｂｒｏｓｉｏら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １６１：５１１１〜５１１５（１９９８）
【非特許文献７】Ｍａｒｉａｎｉら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．  ３４：２３１〜２４０（２００４）
【非特許文献８】Ｓｕｇｉｙａｍａら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．  １１０（４４）：１７９４５〜１７９５０（２０１３）
【非特許文献９】Ｉｓｈｉｉら、Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  １６：１５２０〜３１（２０１０）
【非特許文献１０】Ｗａｎｇら、Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｒｅｖ．  ２２９（１）：１９２〜２１５（２００９）
【非特許文献１１】Ｚｈａｎｇら、Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １８４（２）：７８７〜７９５（２０１０）
【非特許文献１２】Ｂｒｏｌｌ  Ｋら、Ａｍ  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｐａｔｈｏｌ．  １１５（４）：５４３〜５４９（２００１）
【非特許文献１３】Ｓｅａｍａｎら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ  １１（６）：５３９〜５５４（２００７）
【非特許文献１４】Ｏｌｏｆｓｓｏｎら、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  １１７（１０）：１２９２〜１３０１（２００８）
【非特許文献１５】Ｚｈａｎｇら、Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １８４（２）：７８７〜７９５（２０１０）
【非特許文献１６】Ｈｏｕｏｔら、Ｂｌｏｏｄ  １１４（１６）：３４３１〜３４３８（２００９）
【非特許文献１７】Ｋｏｈｒｔら、Ｂｌｏｏｄ  １１７（８）：２４２３〜２４３２（２０１１）
【非特許文献１８】Ｓａｂｂａｇｈら、Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １８０（１２）：８０９３〜８１０１（２００８）
【非特許文献１９】Ｌｙｎｃｈら、Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｒｅｖ．  ２２２：２７７〜２８６（２００８）
【非特許文献２０】Ｖｉｎａｙら、Ｊ  Ｍｏｌ  Ｍｅｄ  ８４（９）：７２６〜７３６（２００６）
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１２】
個体において癌を処置する方法が、本明細書中で提供される。一部の実施形態において、本方法は、個体に抗ＣＣＲ４抗体および４−１ＢＢアゴニストを投与することを含む。
【００１３】
医薬もまた提供される。一部の実施形態において、本医薬は、癌を処置するための、４−１ＢＢアゴニストとの併用のための抗ＣＣＲ４抗体を含む。他の実施形態において、医薬は、癌を処置するための、抗ＣＣＲ４抗体との併用のための４−１ＢＢアゴニストを含む。
【００１４】
他の実施形態が、４−１ＢＢアゴニストと併用して投与された場合に個体において癌を処置する医薬の製造における抗ＣＣＲ４抗体の使用、および抗ＣＣＲ４抗体と併用して投与された場合に個体において癌を処置する医薬の製造における４−１ＢＢアゴニストの使用を提供する。
【００１５】
他の実施形態が、個体において癌を処置する医薬の製造における抗ＣＣＲ４抗体および４−１ＢＢアゴニストの使用を提供する。一部の実施形態において、本医薬は、キットを含み、このキットはまた、個体において癌を処置するための、４−１ＢＢアゴニストと併用して抗ＣＣＲ４抗体を用いるための説明書を含む添付文書を含む。
【００１６】
一部の実施形態において、本方法は、個体に、ＣＤ４＋Ｔ細胞を減少させる剤、および４−１ＢＢアゴニストを含む併用療法を施すことを含む。一部の実施形態において、ＣＤ４＋Ｔ細胞は、ＦｏｘＰ３＋ＣＤ４＋調節Ｔ細胞である。一部の実施形態において、ＣＤ４＋Ｔ細胞を減少させる剤は、ＦｏｘＰ３＋ＣＤ４＋調節Ｔ細胞を選択的に減少させる。一部の実施形態において、本方法は、個体に、ＣＤ４＋Ｔ細胞を減少させる剤、４−１ＢＢアゴニスト、およびＰＤ−１アンタゴニストを含む併用療法を施すことを含む。一部の実施形態において、ＣＤ４＋Ｔ細胞を減少させる剤は、抗ＣＣＲ４抗体または抗ＣＤ４抗体である。
【００１７】
一部の実施形態において、本方法は、個体に、抗ＣＣＲ４抗体、４−１ＢＢアゴニスト、およびＰＤ−１アンタゴニストを含む併用療法を施すことを含む。一部の実施形態において、本方法は、個体に、抗ＣＤ４抗体、４−１ＢＢアゴニスト、およびＰＤ−１アンタゴニストを含む併用療法を施すことを含む。一部の実施形態において、ＰＤ−１アンタゴニストは、ＰＤ−１へのＰＤ−Ｌ１の結合を阻害する。一部の実施形態において、ＰＤ−１アンタゴニストはまた、ＰＤ−１へのＰＤ−Ｌ２の結合を阻害する。先の処置法、医薬、および使用の一部の実施形態において、ＰＤ−１アンタゴニストは、ＰＤ−１に、またはＰＤ−Ｌ１に特異的に結合して、ＰＤ−１へのＰＤ−Ｌ１の結合を遮断するモノクローナル抗体、またはその抗原結合フラグメントである。
【００１８】
併用療法はまた、１つまたはそれ以上の付加的な治療剤を含んでもよい。付加的な治療剤は、例えば、化学療法剤、生物療法剤（ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦＲ、ＥＧＦＲ、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ、他の成長因子受容体、ＣＤ２０、ＣＤ４０、ＣＤ−４０Ｌ、ＣＴＬＡ−４、ＯＸ−４０、４−１ＢＢ、ＰＤ−１、ＴＩＭ−３、ＬＡＧ−３、ＧＩＴＲ、ＣＤ１３７、ＩＣＯＳ、ＣＤ２８、ＣＤ２７、ＨＶＥＭ、ＢＴＬＡ、ＶＩＳＴＡ、ＣＣＲ８、ＴＩＧＩＴ、ＣＤ４、ＡＲＨＧＥＦ６、ＩＫＺＦ１、ＰＴＰＲＣ、ＤＯＣＫ２、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＩＬ２１Ｒ、ＩＬ２ＲＢ、ＮＣＫＡＰ１Ｌ、ＳＬＡＭＦ１、ＩＴＧＡＬ、ＩＬ１０ＲＡ、Ｐ２ＲＹ１０、ＩＬ２ＲＡ、ＦＭＮＬ１、ＤＯＣＫ１０、ＩＴＫ、ＳＡＳＨ３、ＫＩＡＡ０７４８、ＬＣＰ２、ＴＮＦＲＳＦ９（４−１ＢＢ、ＣＤ１３７）、ＣＹＢＢ、およびＣＴＬＡ４に対する抗体が挙げられるが、これらに限定されない）、免疫原性剤（例えば、弱毒化された癌細胞、腫瘍抗原、抗原提示細胞、例えば腫瘍由来の抗原または核酸でパルスされた樹枝状細胞、免疫刺激サイトカイン（例えば、ＩＬ−２、ＩＦＮα２、ＧＭ−ＣＳＦ）、および、ＧＭ−ＣＳＦ等（ただし、これに限定されない）の免疫刺激サイトカインをコードする遺伝子をトランスフェクトされた細胞）であってよい。
【００１９】
一部の実施形態において、抗ＣＣＲ４抗体は、ヒトＣＣＲ４に特異的に結合する。一部の実施形態において、抗ＣＣＲ４抗体は、ＣＤ４＋Ｔ細胞を選択的に減少させることができる。一部の実施形態において、抗ＣＣＲ４抗体は、重鎖および軽鎖を含んでよく、重鎖および軽鎖は、図４に示されるアミノ酸配列（配列番号１５および配列番号１６）を含むが、配列番号１５のＣ末端リジン残基が場合によっては不在であるという条件が付く。
【００２０】
処置法、医薬、および使用の先の実施形態の全てにおいて、４−１ＢＢアゴニストは、４−１ＢＢの細胞外ドメインに結合して、４−１ＢＢを作動させることができる。先の処置法、医薬、および使用の一部の実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、モノクローナル抗体またはその抗原結合フラグメントである。
【００２１】
一部の実施形態において、単離された抗体は、配列番号２６のアミノ酸残基１１５〜１５６内に位置決めされるエピトープにてヒト４−１ＢＢに結合する。一部の実施形態において、抗体は、配列番号２７のＨ−ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号２８のＨ−ＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号２９のＨ−ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、配列番号３０のＬ−ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号３１のＬ−ＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号３２のＬ−ＣＤＲ３アミノ酸配列を含むモノクローナル抗体またはその抗原結合フラグメントである。
【００２２】
一部の実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、配列番号１９に記載される重鎖可変領域アミノ酸配列を含むモノクローナル抗体またはその抗原結合フラグメントである。
【００２３】
一部の実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、配列番号２０に記載される軽鎖可変領域アミノ酸配列を含むモノクローナル抗体またはその抗原結合フラグメントである。
【００２４】
一部の実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、配列番号１９に記載される重鎖可変領域アミノ酸配列を含み、そして配列番号２０に記載される軽鎖可変領域アミノ酸配列をさらに含むモノクローナル抗体またはその抗原結合フラグメントである。
【００２５】
一部の実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、配列番号２１に記載される重鎖アミノ酸配列を含み、そしてさらに配列番号２２に記載される軽鎖アミノ酸配列を含むモノクローナル抗体またはその抗原結合フラグメントであるが、配列番号２１のＣ末端リジン残基が場合によっては不在であるという条件が付く。
【００２６】
本発明の先の処置法、医薬、および使用の一部の実施形態において、個体はヒトであり、癌は固形腫瘍であり、一部の実施形態において、固形腫瘍は、膀胱癌、乳癌、淡明細胞型腎臓癌、結腸癌、頭部／頸部扁平上皮癌、直腸癌、肺扁平上皮癌、甲状腺癌、膀胱癌、子宮頸癌、子宮癌、子宮体癌、肺腺癌、卵巣癌、乳頭状腎臓癌、悪性黒色腫、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、卵巣癌、膵癌、前立腺癌、腎細胞癌、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、またはトリプルネガティブ乳癌である。一部の実施形態において、癌は、進行型の固形悪性腫瘍である。
【００２７】
本発明の先の処置法、医薬、および使用の他の実施形態において、個体はヒトであり、癌はヘム悪性腫瘍であり、一部の実施形態において、ヘム悪性腫瘍は、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、ＥＢＶ陽性ＤＬＢＣＬ、原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、Ｔ細胞／組織球豊富型大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、ホジキンリンパ腫（ＨＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、骨髄細胞白血病−１タンパク質（Ｍｃｌ−１）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、または小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）である。
【００２８】
先の処置法、医薬、および使用のいずれかの一部の実施形態において、癌は、ＣＣＲ４発現の陽性反応を示す。一部の実施形態において、癌は、ＣＣＲ４発現が高い。
【００２９】
先の処置法、医薬、および使用のいずれかの一部の実施形態において、個体はヒトであり、癌は、ヒトＣＣＲ４の陽性反応を示す進行型の固形腫瘍である。
【図面の簡単な説明】
【００３０】
【図１】本発明において有用な、例示的な抗ＣＣＲ４モノクローナル抗体の軽鎖ＣＤＲおよび重鎖ＣＤＲのアミノ酸配列（配列番号１〜６）である。
【図２】本発明において有用な、別の例示的な抗ＣＣＲ４モノクローナル抗体の軽鎖ＣＤＲおよび重鎖ＣＤＲのアミノ酸配列（配列番号７〜１２）である。
【図３】本発明において有用な、例示的な抗ＣＣＲ４モノクローナル抗体の重鎖可変領域および軽鎖可変領域のアミノ酸配列（配列番号１３および配列番号１４）である。
【図４】抗ＣＣＲ４モノクローナル抗体ＫＷ−０７６１の完全長の重鎖および軽鎖のアミノ酸配列（それぞれ配列番号１５および１６）、ならびに抗ＣＣＲ４モノクローナル抗体ＫＷ−０７６１の重鎖可変領域および軽鎖可変領域のアミノ酸配列（それぞれ配列番号１７および１８）である。
【図５】抗ＰＤ−１抗体ニボルマブの重鎖および軽鎖のアミノ酸配列（それぞれ配列番号２３および２４）である。
【図６】４−１ＢＢアゴニスト抗体の重鎖可変領域および軽鎖可変領域のアミノ酸配列（それぞれ配列番号１９および２０）である。
【図７】４−１ＢＢアゴニスト抗体の重鎖ＣＤＲ配列（配列番号２７、２８および２９）および軽鎖ＣＤＲ配列（配列番号３０、３１および３２）のアミノ酸配列である。
【図８】ＰＦ−０５０８２５６６の重鎖および軽鎖のアミノ酸配列（それぞれ配列番号２１および２２）である。
【図９】Ｂ１６黒色腫モデルにおける４−１ＢＢアゴニスト抗体処置、ＰＤ−１アンタゴニスト抗体処置、および併用処置に及ぼす、ＣＤ４＋Ｔ細胞枯渇の効果を示すグラフである。
【図１０】ＣＴ２６結腸腫瘍モデルにおける４−１ＢＢアゴニスト抗体処置、ＰＤ−１アンタゴニスト抗体処置、および併用処置に及ぼす、ＣＤ４＋Ｔ細胞枯渇の効果を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００３１】
略語。発明を実施するための形態および本発明の実施例を通して、以下の略語が用いられる：
ＢＩＤ        一用量を１日２回
ＣＤＲ        相補性決定領域
ＣＨＯ        チャイニーズハムスター卵巣
ＤＦＳ        無病生存
ＤＬＴ        用量制限毒性
ＦＦＰＥ      ホルマリン固定、パラフィン包埋
ＦＲ          フレームワーク領域
ＨＮＳＣ      頭部／頚部扁平上皮癌
ＩｇＧ        免疫グロブリンＧ
ＩＨＣ        免疫組織化学または免疫組織化学的な
ＭＤＳＣ      脊髄由来サプレッサ細胞
ＭＴＤ        最大耐容用量
ＮＣＢＩ      国立バイオテクノロジー情報センター
ＮＣＩ        国立癌研究所
ＯＲ          全奏効
ＯＳ          全生存
ＰＤ          進行性疾患
ＰＦＳ        無増悪生存
ＰＲ          部分奏効
Ｑ１Ｗ        １週毎に一用量
Ｑ２Ｗ        ２週毎に一用量
Ｑ３Ｗ        ３週毎に一用量
Ｑ４Ｗ        ４週毎に一用量
ＱＤ          １日あたり一用量
ＲＥＣＩＳＴ  固形腫瘍の応答評価基準
ＳＤ          疾患の安定
ＶＨ          免疫グロブリン重鎖可変領域
ＶＫ          免疫グロブリンカッパ軽鎖可変領域
【００３２】
Ｉ．定義
本発明がより容易に理解されるように、特定の技術用語および科学用語が、以下で具体的に定義される。本明細書において特に定義されなければ、本明細書中で用いられる他の全ての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般的に理解される意味を有する。
【００３３】
数値的に定義されたパラメータ（例えば、抗ＣＣＲ４抗体または４−１ＢＢアゴニストの用量、または本明細書中に記載される併用療法の処置時間の長さ）を変えるために用いられる場合の「約」とは、パラメータが、そのパラメータについて明示された数値を１０％も下回って、または上回って変化してよいことを意味する。例えば、約５ｍｇ／ｋｇの用量は、４．５ｍｇ／ｋｇから５．５ｍｇ／ｋｇの間で変化してよい。
【００３４】
添付の特許請求の範囲を含む本明細書中で用いられる文言の単数形、例えば「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、文脈が別段の意味を明らかに表さない限り、その対応する複数の参照を含む。
【００３５】
動物、ヒト、実験対象、細胞、組織、臓器、または体液に施されるときの「投与」および「処置」とは、動物、ヒト、対象、細胞、組織、臓器、または体液との、外因的な医薬品、治療薬、診断剤、または組成物の接触を指す。細胞の処置とは、細胞との試薬の接触だけでなく、流体との試薬の接触も包含し、その場合、流体は細胞と接触している。「投与」および「処置」とはまた、試薬、診断薬、結合性化合物による、または別の細胞による、例えば細胞の、インビトロ処置およびエキソビボ処置を意味する。用語「対象」は、任意の生物、好ましくは動物、より好ましくは哺乳類（例えば、ラット、マウス、イヌ、ネコ、ウサギ）、最も好ましくはヒトを含む。
【００３６】
用語「医薬的に許容可能な担体」は、結合分子の送達のための製剤に用いるのに適したあらゆる不活性物質を指す。担体は、抗付着性物質、結合剤、コーティング剤、崩壊剤、充填剤または希釈剤、防腐剤（酸化防止剤、抗菌剤、または抗真菌剤等）、甘味料、吸収遅延剤、湿潤剤、乳化剤、緩衝液等であってよい。医薬的に許容可能な適切な担体の例として、水、エタノール、ポリオール（グリセリン、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等）、デキストロース、植物油（オリーブ油等）、生理食塩水、緩衝液、緩衝生理食塩水、ならびに等張剤、例えば糖、ポリアルコール、ソルビトールおよび塩化ナトリウムが挙げられる。
【００３７】
本明細書中で用いられる用語「抗体」は、所望の生物活性または結合活性を示す、あらゆる形態の免疫グロブリン分子を指す。ゆえにこれは、最も広い意味で用いられ、そして具体的には、モノクローナル抗体（完全長モノクローナル抗体が挙げられる）、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、ヒト化抗体、完全ヒト抗体、キメラ抗体、およびラクダ化（ｃａｍｅｌｉｚｅｄ）単一ドメイン抗体をカバーするが、これらに限定されない。「親抗体（Ｐａｒｅｎｔａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｙ）」は、使用が意図される抗体の修飾前に抗原に免疫系を曝すことによって、例えばヒト治療薬として用いられる抗体のヒト化によって得られる抗体である。本明細書中で用いられる用語「抗体」は、無傷のポリクローナル抗体またはモノクローナル抗体だけでなく、特に明記されない限り、そのあらゆる、特異的結合に関して無傷抗体と競合する抗原結合部分、抗原結合部分を含む融合タンパク質、および抗原認識部位を含む免疫グロブリン分子のその他のあらゆる修飾構成をも包含する。抗原結合部分として、例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｄ、Ｆｖ、ドメイン抗体（ｄＡｂ、例えばサメ抗体およびラクダ抗体）、相補性決定領域（ＣＤＲ）を含むフラグメント、単鎖可変フラグメント抗体（ｓｃＦｖ）、マキシボディ（ｍａｘｉｂｏｄｙ）、ミニボディ（ｍｉｎｉｂｏｄｙ）、イントラボディ（ｉｎｔｒａｂｏｄｙ）、二機能性抗体、三機能性抗体、四機能性抗体、ｖ−ＮＡＲおよびビスｓｃＦｖ、ならびに特異的抗原結合を付与するのに十分な免疫グロブリンの少なくとも一部を含有するポリペプチドが挙げられる。抗体として、あらゆるクラスの抗体、例えばＩｇＧ、ＩｇＡ、またはＩｇＭ（またはそのサブクラス）が挙げられ、その抗体は、特定のクラスのものである必要はない。その重鎖の定常領域の抗体アミノ酸配列に応じて、免疫グロブリンが様々なクラスに割り当てられる。免疫グロブリンの５つの主要なクラスがある：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、およびＩｇＭ。そして、これらのいくつかは、サブクラス（アイソタイプ）、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、およびＩｇＡ２にさらに分割される。様々なクラスの免疫グロブリンに対応する重鎖定常領域はそれぞれ、アルファ、デルタ、イプシロン、ガンマ、およびミューと呼ばれる。様々なクラスの免疫グロブリンのサブユニット構造および三次元構成は、周知である。
【００３８】
本明細書中で用いられる用語「４−１ＢＢ抗体」は、本明細書中で定義される、ヒト４−１ＢＢ受容体に結合することができる抗体を意味する。
【００３９】
本明細書中で用いられる「可変領域」、「Ｖ領域」、または「Ｖ鎖」とは、様々な抗体間で配列が変異しているＩｇＧ鎖のセグメントを意味する。このセグメントは、軽鎖においてＫａｂａｔ残基１０９にまで、そして重鎖において１１３にまで及ぶ。抗体の「可変領域」とは、抗体軽鎖の可変領域または抗体重鎖の可変領域を単独で、または組み合わせて指す。典型的には、重鎖および軽鎖双方の可変領域は、相補性決定領域（ＣＤＲ）とも呼ばれる３つの超可変領域を含み、これらは比較的保存されたフレームワーク領域（ＦＲ）内に位置決めされている。ＣＤＲは通常、フレームワーク領域によってアラインされて、特異的エピトープに結合することが可能である。一般に、Ｎ末端からＣ末端まで、軽鎖および重鎖双方の可変ドメインは、ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、およびＦＲ４を含む。各ドメインへのアミノ酸の割当ては、一般に、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、Ｋａｂａｔら；Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、Ｍｄ．；第５版；ＮＩＨ  Ｐｕｂｌ．  Ｎｏ．９１−３２４２（１９９１）；Ｋａｂａｔ（１９７８）  Ａｄｖ．Ｐｒｏｔ．Ｃｈｅｍ．  ３２：１〜７５；Ｋａｂａｔら（１９７７）  Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．  ２５２：６６０９〜６６１６；Ｃｈｏｔｈｉａら（１９８７）  Ｊ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．  １９６：９０１〜９１７、またはＣｈｏｔｈｉａら（１９８９）  Ｎａｔｕｒｅ  ３４２：８７８〜８８３の定義に従っている。
【００４０】
本明細書中で用いられる用語「超可変領域」は、抗原結合の原因となる抗体のアミノ酸残基を指す。超可変領域は、「相補性決定領域」または「ＣＤＲ」（すなわち、軽鎖可変ドメインにおけるＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２およびＣＤＲＬ３、ならびに重鎖可変ドメインにおけるＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２およびＣＤＲＨ３）のアミノ酸残基を含む。Ｋａｂａｔら（１９９１）  Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、第５版、Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、Ｍｄ．（配列によって抗体のＣＤＲ領域を定義している）参照；また、ＣｈｏｔｈｉａおよびＬｅｓｋ（１９８７）  Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．  １９６：９０１〜９１７（構造によって抗体のＣＤＲ領域を定義している）参照。本明細書中で用いられる用語「フレームワーク」または「ＦＲ」残基は、本明細書中でＣＤＲ残基として定義される超可変領域残基以外の可変ドメイン残基を指す。
【００４１】
特に明記されない限り、本明細書中で用いられる「抗体フラグメント」または「抗原結合フラグメント」とは、完全長抗体と結合する抗原に特異的に結合する能力を保持する、抗体の抗原結合フラグメント、すなわち、抗体フラグメント、例えば１つまたはそれ以上のＣＤＲ領域を保持するフラグメントを指す。抗体結合フラグメントの例として、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、およびＦｖフラグメント；二機能性抗体；線状抗体（ｌｉｎｅａｒ  ａｎｔｉｂｏｄｙ）；単鎖抗体分子、例えばｓｃ−Ｆｖ；ナノボディ、ならびに抗体フラグメントから形成される多重特異性抗体が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４２】
特定の標的タンパク質「に特異的に結合する」抗体とは、他のタンパク質と比較して、その標的に対する優先結合を示す抗体である。しかし、この特異性は、絶対的な結合特異性を必要としない。その結合が、例えば偽陽性等の不所望の結果もたらすことなく、サンプル中の標的タンパク質の存在の決定因子であるならば、抗体が、その意図する標的に「特異的」であると考えられる。本発明に有用な抗体は、非標的タンパク質との親和性よりも少なくとも２倍、好ましくは少なくとも１０倍、より好ましくは少なくとも２０倍、最も好ましくは少なくとも１００倍大きい親和性で、標的タンパク質に結合することとなる。本明細書中で用いられる抗体が、所与のアミノ酸配列、例えば成熟ヒトＰＤ−１またはヒトＰＤ−Ｌ１分子のアミノ酸配列を含むポリペプチドに結合するが、その配列がないタンパク質に結合しない場合に、この配列は、それを含むポリペプチドに特異的に結合するといえる。
【００４３】
「キメラ抗体」とは、重鎖および／または軽鎖の一部が、特定の種（例えばヒト）に由来する抗体、または特定の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体中の対応する配列と同一である、またはこれに相同である一方で、残りの鎖が、別の種（例えばマウス）に由来する抗体、または別の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体中の対応する配列と同一である、またはこれに相同である抗体、ならびにそのような抗体のフラグメントを（これらが所望の生物活性を示す限り）指す。
【００４４】
「ヒト抗体」とは、ヒト免疫グロブリンタンパク質配列のみを含む抗体を指す。ヒト抗体は、マウスにおいて、マウス細胞において、またはマウス細胞に由来するハイブリドーマにおいて産生される場合に、マウス炭水化物鎖を含有してもよい。同様に、「マウス抗体」または「ラット抗体」とはそれぞれ、マウスまたはラットの免疫グロブリン配列のみを含む抗体を指す。
【００４５】
「ヒト化抗体」とは、非ヒト（例えば、マウス）抗体およびヒト抗体の配列を含有する形態の抗体を指す。そのような抗体は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小配列を含有する。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインの実質的に全体を含むこととなり、その中で、超可変ループの全体または実質的に全体が、非ヒト免疫グロブリン超可変ループに相当し、そしてＦＲ領域の全体または実質的に全体が、ヒト免疫グロブリン配列のＦＲ領域である。ヒト化抗体はまた、場合により、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部、典型的にはヒト免疫グロブリンの少なくとも一部を含むこととなる。親の齧歯類抗体からヒト化抗体を識別することが必要な場合には、接頭辞「ｈｕｍ」、「ｈｕ」、または「ｈ」が、抗体クローンの名称に加えられる。ヒト化形態の齧歯類抗体は一般に、親の齧歯類抗体の同じＣＤＲ配列を含むこととなる。しかし、親和性を増大させるために、ヒト化抗体の安定性を増大させるために、または他の理由のために、特定のアミノ酸置換を含んでもよい。
【００４６】
用語「癌」、「癌性の」、または「悪性腫瘍」は、典型的には、調節不能な細胞増殖によって特徴付けられる、哺乳類の生理学的状態を指し、または説明する。癌の例として、癌腫、リンパ腫、白血病、芽腫、および肉腫が挙げられるが、これらに限定されない。そのような癌の複数の具体例として、扁平上皮癌、肺腺癌、頭部／頚部扁平上皮癌、骨髄腫、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、神経膠腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、多発性骨髄腫、消化器（管）癌、直腸癌、腎臓癌、卵巣癌、肝癌、リンパ芽球性白血病、リンパ球性白血病、結腸直腸癌、子宮体癌、腎臓癌、前立腺癌、甲状腺癌、黒色腫、軟骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌、多形神経膠芽腫、骨癌、ユーイング肉腫、子宮頸癌、脳癌、胃癌、膀胱癌、肝癌、乳癌、結腸癌、子宮癌、卵巣癌、および頭頚部癌が挙げられる。悪性であるにせよ良性であるにせよ、そして原発性であるにせよ続発性であるにせよ、４−１ＢＢまたはＣＣＲ４が関係する種々の癌を、本開示によって提供される方法で処置または予防することができる。本発明に従って処置することができる特に好ましい癌として、試験された組織サンプルにおけるＣＣＲ４の発現によって特徴付けられるものが挙げられる。
【００４７】
「生物療法剤」とは、腫瘍の維持および／もしくは増殖を支持する、または抗腫瘍免疫応答を抑制する、あらゆる生物学的経路におけるリガンド／受容体シグナル伝達を遮断する、抗体または融合タンパク質等の生体分子を意味する。
【００４８】
本明細書中で用いられる「ＣＤＲ」とは、特に明記されない限り、Ｋａｂａｔナンバリング系を用いて定義される、免疫グロブリン可変領域中の相補性決定領域を意味する。
【００４９】
「化学療法剤」とは、癌細胞死を引き起こすことができる、または癌細胞の増殖、分裂、修復、および／もしくは機能に干渉することができる化学物質または生体物質を指す。化学療法剤の例として、国際公開第２００６／１２９１６３号および米国特許出願公開第２００６０１５３８０８号に開示されるものが挙げられ、これらの開示は、参照によって本明細書中に組み入れられる。化学療法剤のクラスとして、以下が挙げられるが、これらに限定されない：アルキル化剤、抗代謝薬、キナーゼ阻害剤、紡錘体毒植物アルカロイド、細胞障害性／抗腫瘍抗生物質、トポイソメラーゼ阻害剤、光増感剤、抗エストロゲンおよび選択的エストロゲン受容体モジュレータ（ＳＥＲＭ）、抗プロゲステロン、エストロゲン受容体ダウンレギュレータ（ＥＲＤ）、エストロゲン受容体アンタゴニスト、黄体形成ホルモン放出ホルモンアゴニスト、抗アンドロゲン、アロマターゼ阻害剤、ＥＧＦＲ阻害剤、ＶＥＧＦ阻害剤、異常な細胞増殖または腫瘍増殖に関係する遺伝子の発現を阻害するアンチセンスオリゴヌクレオチド。本発明の処置法に有用な化学療法剤として、細胞増殖抑制剤および／または細胞毒性剤が挙げられる。
【００５０】
本開示によって提供される抗体および組成物は、あらゆる適切な経腸投与経路または非経口投与経路を介して投与することができる。用語「経腸経路」投与は、胃腸管のあらゆる部分を介した投与を指す。経腸経路の例として、経口経路、粘膜経路、頬側経路、直腸経路、または胃内経路が挙げられる。投与の「非経口経路」は、経腸経路以外の投与経路を指す。非経口経路の投与の例として、静脈内投与、筋肉内投与、皮内投与、腹膜内投与、腫瘍内投与、膀胱内投与、動脈内投与、髄腔内投与、包内投与、眼窩内投与、心臓内投与、経気管投与、関節内投与、被膜下投与、くも膜下投与、脊椎内投与、硬膜外投与および胸骨内投与、皮下投与、または局所投与が挙げられる。本開示の抗体および組成物は、あらゆる適切な方法を用いて、例えば経口摂取、経鼻胃管、胃瘻管、注射、注入、移植可能な注入ポンプ、および浸透ポンプによって投与することができる。投与の適切な経路および方法は、いくつかの要因、例えば、用いられることになる特定の抗体、所望される吸収速度、用いられる特定の製剤または投与形態、処置されることになる障害のタイプまたは重篤度、特定の作用部位、および患者の状態に応じて変化してよく、そして当業者が容易に選択することができる。
【００５１】
医薬の投与に関して本明細書中で用いられる用語「同時投与」は、個別の医薬が対象内に同時に存在するような医薬の投与を指す。医薬の（同じ、または別の経路を介した）同時に生じる投与に加えて、同時投与は、異なる時点の医薬の（同じ、または別の経路を介した）投与を含んでもよい。
【００５２】
効果Ａおよび効果Ｂを有する２つの単一化合物に対するＢｌｉｓｓ独立組合せ応答Ｃは、Ｃ＝Ａ＋Ｂ−Ａ＊Ｂであり、式中、各効果は、０から１間の分数における阻害（ｆｒａｃｔｉｏｎａｌ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ）として表される（参照：Ｂｌｉｓｓ（１９３９
）  Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ）。Ｂｌｉｓｓ値は、実験的応答値と算出されたＢｌｉｓｓ独立値との差異であると定義され、併用した２つの化合物が相加的であるか相乗的であるかを示す。
【００５３】
ゼロ（０）のＢｌｉｓｓ値は、相加的であると考えられる。用語「相加的」は、標的化された２つの剤の組合せの結果が、それぞれの剤の個別の合計であることを意味する。
【００５４】
本明細書中で用いられる「Ｃｈｏｔｈｉａ」とは、Ａｌ−Ｌａｚｉｋａｎｉら、ＪＭＢ  ２７３：９２７〜９４８（１９９７）に記載される抗体ナンバリング系を意味する。
【００５５】
「保存的に修飾されたバリアント」または「保存的置換」とは、あるタンパク質中のアミノ酸の、類似した特性（例えば、電荷、側鎖サイズ、疎水性／親水性、骨格配座、および剛性その他）を有する他のアミノ酸との置換であって、そのタンパク質の生物活性または他の所望される性質、例えば抗原親和性および／または特異性を変更することなくその変化が頻繁に起こり得るような置換を指す。当業者は一般に、ポリペプチドの非必須領域中の単一のアミノ酸置換が、生物活性を実質的に変えることはないと認識している（例えば、Ｗａｔｓｏｎら（１９８７）  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｇｅｎｅ、Ｔｈｅ  Ｂｅｎｊａｍｉｎ／Ｃｕｍｍｉｎｇｓ  Ｐｕｂ．Ｃｏ．、２２４頁（第４版）参照）。また、構造的に、または機能的に類似したアミノ酸の置換が生物活性を損なう可能性は、低い。例示的な保存的置換が、以下の表１に示される。
【００５６】
【表１】
2017517506.tif 000002
【００５７】
明細書および特許請求の範囲を通して用いられる「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｓ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」、および「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」または「から本質的になっている（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」等の変形は、特定の投薬レジメン、方法もしくは組成物の基本的な性質または新規の性質を物質的に変更しない、列挙されるあらゆる要素または要素の群の包含、および、列挙される要素と類似する性質または異なる性質の、他の要素の場合による包含を示す。非限定的な例として、列挙されるアミノ酸配列から本質的になる抗ＣＣＲ４抗体はまた、結合化合物の性質に物質的に影響を及ぼさない、１つまたはそれ以上のアミノ酸残基の置換を含む、１つまたはそれ以上のアミノ酸を含んでもよい。
【００５８】
「抗ＣＣＲ４抗体」とは、ＣＣＲ４に特異的に結合する抗体を意味する。
【００５９】
本明細書中で用いられる抗ヒトＣＣＲ４とは、ヒトＣＣＲ４に特異的に結合する抗体を指す。例示的な一ヒトＣＣＲ４分子が、以下の配列からなる：
ＭＮＰＴＤＩＡＤＴＴ  ＬＤＥＳＩＹＳＮＹＹ  ＬＹＥＳＩＰＫＰＣＴ  ＫＥＧＩＫＡＦＧＥＬ  ＦＬＰＰＬＹＳＬＶＦ  ＶＦＧＬＬＧＮＳＶＶ  ＶＬＶＬＦＫＹＫＲＬ  ＲＳＭＴＤＶＹＬＬＮ  ＬＡＩＳＤＬＬＦＶＦ  ＳＬＰＦＷＧＹＹＡＡ  ＤＱＷＶＦＧＬＧＬＣ  ＫＭＩＳＷＭＹＬＶＧ  ＦＹＳＧＩＦＦＶＭＬ  ＭＳＩＤＲＹＬＡＩＶ  ＨＡＶＦＳＬＲＡＲＴ  ＬＴＹＧＶＩＴＳＬＡ  ＴＷＳＶＡＶＦＡＳＬ  ＰＧＦＬＦＳＴＣＹＴ  ＥＲＮＨＴＹＣＫＴＫ  ＹＳＬＮＳＴＴＷＫＶ  ＬＳＳＬＥＩＮＩＬＧ  ＬＶＩＰＬＧＩＭＬＦ  ＣＹＳＭＩＩＲＴＬＱ  ＨＣＫＮＥＫＫＮＫＡ  ＶＫＭＩＦＡＶＶＶＬ  ＦＬＧＦＷＴＰＹＮＩ  ＶＬＦＬＥＴＬＶＥＬ  ＥＶＬＱＤＣＴＦＥＲ  ＹＬＤＹＡＩＱＡＴＥ  ＴＬＡＦＶＨＣＣＬＮ  ＰＩＩＹＦＦＬＧＥＫ  ＦＲＫＹＩＬＱＬＦＫ  ＴＣＲＧＬＦＶＬＣＱ  ＹＣＧＬＬＱＩＹＳＡ  ＤＴＰＳＳＳＹＴＱＳ  ＴＭＤＨＤＬＨＤＡＬ（配列番号２５）（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ：Ｐ５１６７９．１；ＧｅｎＢａｎｋ受諾番号ＮＭ＿００５５０８．２）。
【００６０】
本明細書中で用いられる「フレームワーク領域」または「ＦＲ」とは、ＣＤＲ領域を除いた免疫グロブリン可変領域を意味する。
【００６１】
「相同」とは、最適にアラインされた場合の２つのポリペプチド配列間の配列類似性を指す。２つの比較される配列の双方における位置が、同じアミノ酸モノマーサブユニットによって占有される場合、例えば、２つの異なるＡｂの軽鎖ＣＤＲ中のある位置がアラニンによって占有される場合、２つのＡｂはその位置にて相同である。相同のパーセントは、比較される位置の総数で除した、２つの配列によって共有される相同位置の数×１００である。例えば、配列が最適にアラインされたときに２つの配列中の位置の１０のうち８つが一致する、すなわち相同であれば、２つの配列は８０％相同である。通常、最大相同パーセントを与えるように２つの配列がアラインされて、比較がなされる。例えば、比較は、ＢＬＡＳＴアルゴリズムによって実行することができ、アルゴリズムのパラメータは、それぞれの参照配列の全長にわたるそれぞれの配列間での最も大きな一致を与えるように選択される。
【００６２】
以下の引用は、配列分析にしばしば用いられるＢＬＡＳＴアルゴリズムに関する：ＢＬＡＳＴアルゴリズム：Ａｌｔｓｃｈｕｌ，Ｓ．Ｆ．ら（１９９０）  Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．  ２１５：４０３〜４１０；Ｇｉｓｈ，Ｗ．ら（１９９３）  Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔ．  ３：２６６〜２７２；Ｍａｄｄｅｎ，Ｔ．Ｌ．ら（１９９６）  Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．  ２６６：１３１〜１４１；Ａｌｔｓｃｈｕｌ，Ｓ．Ｆ．ら（１９９７）  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．  ２５：３３８９〜３４０２；Ｚｈａｎｇ，Ｊ．ら（１９９７）  Ｇｅｎｏｍｅ  Ｒｅｓ．  ７：６４９〜６５６；Ｗｏｏｔｔｏｎ，Ｊ．Ｃ．ら（１９９３）  Ｃｏｍｐｕｔ．Ｃｈｅｍ．  １７：１４９〜１６３；Ｈａｎｃｏｃｋ，Ｊ．Ｍ．ら（１９９４）  Ｃｏｍｐｕｔ．Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｓｃｉ．  １０：６７〜７０；アラインメントスコアリングシステム：Ｄａｙｈｏｆｆ，Ｍ．Ｏ．ら  「Ａ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ  ｃｈａｎｇｅ  ｉｎ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ．」於Ａｔｌａｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ（１９７８）第５巻、別冊３．Ｍ．Ｏ．Ｄａｙｈｏｆｆ（編）、３４５〜３５２頁、Ｎａｔｌ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｒｅｓ．Ｆｏｕｎｄ．、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，ＤＣ；Ｓｃｈｗａｒｔｚ，Ｒ．Ｍ．ら  「Ｍａｔｒｉｃｅｓ  ｆｏｒ  ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ  ｄｉｓｔａｎｔ  ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ．」於Ａｔｌａｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ（１９７８）第５巻、別冊３．Ｍ．Ｏ．Ｄａｙｈｏｆｆ（編）、３５３〜３５８頁、Ｎａｔｌ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｒｅｓ．Ｆｏｕｎｄ．、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，ＤＣ；Ａｌｔｓｃｈｕｌ，Ｓ．Ｆ．（１９９１）  Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１９：５５５〜５６５；Ｓｔａｔｅｓ，Ｄ．Ｊ．ら（１９９１）  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３：６６〜７０；Ｈｅｎｉｋｏｆｆ，Ｓ．ら（１９９２）  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８９：１０９１５〜１０９１９；Ａｌｔｓｃｈｕｌ，Ｓ．Ｆ．ら（１９９３）  Ｊ．Ｍｏｌ．Ｅｖｏｌ．  ３６：２９０〜３００；アラインメント統計：Ｋａｒｌｉｎ，Ｓ．ら（１９９０）  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８７：２２６４〜２２６８；Ｋａｒｌｉｎ，Ｓ．ら（１９９３）  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：５８７３〜５８７７；Ｄｅｍｂｏ，Ａ．ら（１９９４）  Ａｎｎ．Ｐｒｏｂ．  ２２：２０２２〜２０３９；およびＡｌｔｓｃｈｕｌ，Ｓ．Ｆ．「Ｅｖａｌｕａｔｉｎｇ  ｔｈｅ  ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ  ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ  ｏｆ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｄｉｓｔｉｎｃｔ  ｌｏｃａｌ  ａｌｉｇｎｍｅｎｔｓ．」於Ｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ（Ｓ．Ｓｕｈａｉ編）（１９９７）１〜１４頁、Ｐｌｅｎｕｍ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ。
【００６３】
「単離された抗体」および「単離された抗体フラグメント」とは、精製状態を指し、そのような文脈において、名付けられた分子は、他の生体分子、例えば核酸、タンパク質、脂質、炭水化物、または他の材料、例えば細胞残留物および増殖培地が実質的にないことを意味する。通常、用語「単離された」は、本明細書中に記載される結合化合物の実験上の使用または治療上の使用を実質的に妨害する量で存在しない限り、そのような材料の完全な不在、または水、緩衝液、もしくは塩の不在を指すことは意図されない。
【００６４】
本明細書中で用いられる「Ｋａｂａｔ」とは、Ｅｌｖｉｎ  Ａ．Ｋａｂａｔ（（１９９１）  Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、第５版．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、Ｍｄ．）が開発した免疫グロブリンアラインメントおよびナンバリング系を意味する。
【００６５】
本明細書中で用いられる「モノクローナル抗体」、「ｍＡｂ」、または「Ｍａｂ」とは、実質的に均質な抗体の集団を指す。すなわち、その集団を構成する抗体分子は、微かに存在する可能性がある自然突然変異を除いて、アミノ酸配列が同一である。対照的に、従来の（ポリクローナル）抗体の調製物は、典型的には、可変ドメイン、特にＣＤＲ中に様々なアミノ酸配列を有する多数の様々な抗体を含んでおり、これらは多くの場合、様々なエピトープに対して特異的である。修飾子「モノクローナル」は、実質的に均質な抗体集団から得られることとなる抗体の特性を示しており、特定の方法による抗体の産生を必要とすると解釈されるべきでない。例えば、本発明に従って用いることができるモノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒら（１９７５）  Ｎａｔｕｒｅ  ２５６：４９５が最初に記載したハイブリドーマ法によって作出してもよいし、組換えＤＮＡ法（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号参照）によって作出してもよい。「モノクローナル抗体」はまた、例えばＣｌａｃｋｓｏｎら（１９９１）  Ｎａｔｕｒｅ  ３５２：６２４〜６２８およびＭａｒｋｓら（１９９１）  Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．  ２２２：５８１〜５９７に記載される技術を用いて、ファージ抗体ライブラリから単離してもよい。Ｐｒｅｓｔａ（２００５）  Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １１６：７３１も参照。
【００６６】
「患者」または「対象」は、治療が所望され、または臨床試験、疫学調査に参加しており、またはコントロールとして使われる、あらゆる単体の対象を指し、ヒトおよび哺乳類の動物患者、例えばウシ、ウマ、イヌおよびネコが挙げられる。
【００６７】
ヒトＣＣＲ４に結合し、かつ本発明の処置法、医薬および使用に有用であるｍＡｂの例が、例えば、米国特許第８４９１９０２号および米国特許出願公開第２０１１０１７１２１０号に記載されている。本発明の処置法、医薬および使用において抗ＣＣＲ４抗体として有用な特異的抗ヒトＣＣＲ４  ｍＡｂとして、以下が挙げられる：ＫＷ−０７６１、ヒト化ＩｇＧ１  ｍＡｂ、ＣＡＳ登録番号１１５９２６６−３７−１、図４に示される重鎖アミノ酸配列および軽鎖アミノ酸配列を含む；ならびにヒト化抗体ｈｕＣＣＲ４、米国特許出願公開第２０１１０１７１２１０号に記載、図３に示される重鎖可変領域アミノ酸配列および軽鎖可変領域アミノ酸配列を含む。
【００６８】
本発明の処置法、医薬、および使用の一部の実施形態において、抗ＣＣＲ４抗体は、モノクローナル抗体、またはその抗原結合フラグメントであり、これは、以下を含む：（ａ）軽鎖ＣＤＲ配列番号１、２および３、ならびに重鎖ＣＤＲ配列番号４、５および６；または（ｂ）軽鎖ＣＤＲ配列番号７、８および９、ならびに重鎖ＣＤＲ配列番号１０、１１および１２。
【００６９】
本発明の処置法、医薬、および使用の一部の実施形態において、抗ＣＣＲ４抗体は、モノクローナル抗体であり、これは、ヒトＣＣＲ４に特異的に結合し、そして（ａ）配列番号１３を含む重鎖可変領域、および（ｂ）配列番号１４を含む軽鎖可変領域を含む。
【００７０】
本発明の処置法、医薬、および使用の一部の実施形態において、抗ＣＣＲ４抗体は、モノクローナル抗体であり、これは、ヒトＣＣＲ４に特異的に結合し、そして（ａ）配列番号１５を含む重鎖、および（ｂ）配列番号１６を含む軽鎖を含む。
【００７１】
以下の表２は、本発明の処置法、医薬、および使用に用いられる例示的な抗ＣＣＲ４  ｍＡｂのアミノ酸配列のリストを提供し、配列は、図１から図４に示される。
【００７２】
【表２】
2017517506.tif 000003
【００７３】
「維持される応答」とは、本明細書中に記載される治療剤、または併用療法による処置の停止後に維持される治療効果を意味する。一部の実施形態において、維持される応答は、持続期間が、処置持続期間と少なくとも同じであり、または処置持続期間よりも少なくとも約１．５、２．０、２．５、または３倍長い。
【００７４】
用語「相乗効果」または「相乗的な」は、２つの剤の併用の応答が、それぞれの剤の個別の応答の合計よりも高いことを意味するのに用いられる。より詳細には、インビトロセッティングにおいて、相乗効果の一尺度が、「Ｂｌｉｓｓ相乗効果」として知られている。Ｂｌｉｓｓ相乗効果とは、先に定義されるＢｌｉｓｓ値によって決定される「Ｂｌｉｓｓ独立に対する超過」を指す。Ｂｌｉｓｓ値がゼロ（０）よりも大きい、またはより好ましくは０．２よりも大きいと、相乗効果を示すと考えられる。勿論、本明細書中での「相乗効果」の使用はまた、付加的な方法および／または代わりの方法によって測定されるインビトロ相乗効果も包含する。本明細書中での、抗癌効果が挙げられるがこれに限定されない併用のインビトロ生体効果が、併用の構成要素の個別の合計以上であることは、Ｂｌｉｓｓ値との相関を指し得る。ここでも、構成要素の併用が、個別の構成要素の合計以上である活性を実証するかどうかを含む、本明細書中での「相乗効果」の使用は、付加的な方法および／または代わりの方法によって測定することができ、かつ当業者に知られている、または明らかであろう。
【００７５】
「組織切片」とは、組織サンプルの一部またはピース、例えば、正常な組織の、または腫瘍のサンプルからカットされた組織の薄片を指す。
【００７６】
本明細書中で用いられる、癌を「処置する」または「処置すること」とは、抗ＣＣＲ４抗体および４−１ＢＢアゴニストの併用療法を、癌を有する、または癌と診断された対象に施して、少なくとも１つのポジティブな治療効果、例えば癌細胞数の引下げ、腫瘍サイズの縮小、末梢臓器中への癌細胞の浸潤の減速、または腫瘍転移もしくは腫瘍増殖の減速を達成することを意味する。癌のポジティブな治療効果は、いくつかの方法で測定することができる（Ｗ．Ａ．Ｗｅｂｅｒ，Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．  ５０：１Ｓ〜１０Ｓ（２００９）参照）。例えば、腫瘍増殖阻害に関して、ＮＣＩ基準に従えば、Ｔ／Ｃ≦４２％が、最小レベルの抗腫瘍活性である。Ｔ／Ｃ＜１０％は、高い抗腫瘍活性レベルと考えられる（Ｔ／Ｃ（％）＝処置済みの腫瘍容量中央値／コントロールの腫瘍容量中央値×１００である）。一部の実施形態において、本発明の併用によって達成される処置は、ＰＲ、ＣＲ、ＯＲ、ＰＦＳ、ＤＦＳ、およびＯＳのいずれかである。ＰＦＳは、「腫瘍発達までの時間」とも呼ばれ、処置中および処置後の、癌が増殖しない時間の長さを示し、そして、患者がＣＲまたはＰＲを経験した時間の量、および患者がＳＤを経験した時間の量を含む。ＤＦＳは、患者が、処置中および処置後の、疾患なしであり続ける時間の長さを指す。ＯＳは、ナイーブな、または未処置の個体または患者と比較した、推定寿命の延長を指す。一部の実施形態において、本発明の併用に対する応答とは、ＲＥＣＩＳＴ  １．１応答基準を用いて評価されるＰＲ、ＣＲ、ＰＦＳ、ＤＦＳ、ＯＲ、またはＯＳのいずれかである。癌患者を処置するのに有効な本発明の併用の処置レジメンは、患者の疾患状態、年齢、および体重、ならびに対象において抗癌応答を誘発する療法の能力等の要因に従って、変化してよい。本発明のあらゆる態様の実施形態が、全ての対象においてポジティブな治療効果を達成するのに有効であるとはいえないかもしれないが、当該技術において知られているあらゆる統計学的検定、例えばＳｔｕｄｅｎｔのｔ検定、カイ二乗検定、Ｍａｎｎ−Ｗｈｉｔｎｅｙに従うＵ検定、Ｋｒｕｓｋａｌ−Ｗａｌｌｉｓ検定（Ｈ検定）、Ｊｏｎｃｋｈｅｅｒｅ−Ｔｅｒｐｓｔｒａ検定、およびＷｉｌｃｏｘｏｎ検定によって決定される、統計的に有意な数の対象において実行されるべきである。
【００７７】
用語「処置レジメン」、「投薬プロトコル」、および投薬レジメンは、本発明の併用における各治療剤の投与の用量およびタイミングに言及するために、互換的に用いられる。
【００７８】
癌と診断された、または癌を有することが疑われる対象に用いられる「腫瘍」とは、あらゆるサイズの悪性の、もしくは潜在的に悪性の新生物、または組織腫瘤を指し、そして原発腫瘍および続発性新生物を含む。固形腫瘍とは、通常、嚢胞すなわち液体領域を含有しない組織の異常増殖または腫瘤である。様々なタイプの固形腫瘍が、それを形成する細胞のタイプについて名付けられている。固形腫瘍の例として、肉腫、癌腫、およびリンパ腫がある。白血病（血液の癌）は、一般に、固形腫瘍を形成しない（国立癌研究所、Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｅｒｍｓ）。
【００７９】
「腫瘍負荷」とは、「腫瘍荷」とも呼ばれ、体中に分配される腫瘍物質の総量を指す。腫瘍負荷は、リンパ節および骨髄を含む体中の癌細胞の総数、または腫瘍の総サイズを指す。腫瘍負荷は、当該技術において知られている種々の方法によって、例えば、対象からの除去と同時に腫瘍の寸法を、例えばキャリパーを用いて、または体内では、撮像技術、例えば超音波、骨スキャン、コンピュータ断層撮影（ＣＴ）、もしくは磁気共鳴画像（ＭＲＩ）スキャンを用いて測定することによって、判定することができる。
【００８０】
用語「腫瘍サイズ」は、腫瘍の長さおよび幅として測定される腫瘍の総サイズを指す。腫瘍サイズは、当該技術において知られている種々の方法によって、例えば、対象からの除去と同時に腫瘍の寸法を、例えばキャリパーを用いて、または体内では、撮像技術、例えば骨スキャン、超音波、ＣＴまたはＭＲＩスキャンを用いて測定することによって、判定することができる。
【００８１】
４−１ＢＢは、シグナル配列（アミノ酸残基１〜１７）に続いて、細胞外ドメイン（１６９アミノ酸）、膜貫通領域（２７アミノ酸）、および細胞内ドメイン（４２アミノ酸）を含む（Ｃｈｅｕｋ  ＡＴＣら  ２００４  Ｃａｎｃｅｒ  Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ  １１：  ２１５〜２２６）。受容体は、モノマー形態およびダイマー形態で細胞表面上に発現され、おそらく４−１ＢＢリガンドと三量体化してシグナルを出す。
【００８２】
４−１ＢＢは、ナイーブＴ細胞の表面上で検出不可能であるが、発現は、活性化と同時に増大する。４−１ＢＢ活性化と同時に、ＴＮＦＲ関連因子（ＴＲＡＦ）ファミリーの生存促進メンバーであるＴＲＡＦ−１およびＴＲＡＦ−２が、４−１ＢＢ細胞質尾部に動員されて、ＮＦκＢ、ならびにＥＲＫ、ＪＮＫおよびｐ３８  ＭＡＰキナーゼが挙げられるマイトジェン活性化タンパク質（ＭＡＰ）キナーゼカスケードの下流活性化がもたらされる。ＮＦｋＢ活性化が、Ｂｃｌ−２ファミリーの生存促進メンバーであるＢｆｌ−１およびＢｃｌ−ＸＬのアップレギュレーションに至る。アポトーシス促進タンパク質Ｂｉｍは、ＴＲＡＦ−１およびＥｒｋに依存して、ダウンレギュレートされる（２４）。
【００８３】
用語「４−１ＢＢ」および「４−１ＢＢ受容体」は、本出願において互換的に用いられており、あらゆる形態の４−１ＢＢ受容体、ならびにその、４１ＢＢ受容体の少なくとも一部の活性を保持するバリアント、アイソフォーム、および種相同体を指す。したがって、本明細書中で定義され、かつ開示される結合分子は、ヒト以外の種由来の４−１ＢＢに結合することもできる。その他の場合において、結合分子は、ヒト４−１ＢＢに完全に特異的であってよく、種または他のタイプの交差反応性を示し得ない。異なって示されない限り、例えばヒト４１ＢＢへの具体的な言及によって、４１ＢＢとして、例えば、ヒト、イヌ、ネコ、ウマおよびウシといった全ての哺乳類の種の本来の配列４１ＢＢが挙げられる。ある例示的なヒト４−１ＢＢは、２５５アミノ酸のタンパク質（受諾番号ＮＭ＿００１５６１；ＮＰ＿００１５５２）である。完全なヒト４−１ＢＢアミノ酸配列の一実施形態が、配列番号２６に提供される。
【００８４】
本明細書中で用いられる「４−１ＢＢアゴニスト」は、本明細書中で定義されるように、４−１ＢＢへの結合と同時に、（１）４−１ＢＢを刺激する、もしくは活性化する、（２）４−１ＢＢの活性、機能、もしくは存在を高める、増大させる、促進する、誘導する、もしくは長くする、または（３）４−１ＢＢの発現を高める、増大させる、促進する、もしくは誘導する、あらゆる化合物または生体分子を意味する。
【００８５】
本発明の処置法、医薬、および使用のいずれかに有用な４−１ＢＢアゴニストとして、４−１ＢＢに特異的に結合するモノクローナル抗体（ｍＡｂ）、またはその抗原結合フラグメントが挙げられる。４−１ＢＢの代わりの名前または同義語として、ＣＤ１３７およびＴＮＦＲＳＦ９が挙げられる。ヒト個体が処置されることになる本発明の処置法、医薬、および使用のいずれにおいても、４−１ＢＢアゴニストは、４−１ＢＢ介在性応答を増大させる。本発明の処置法、医薬、および使用の一部の実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、細胞障害性Ｔ細胞の応答を著しく高めて、いくつかのモデルにおいて抗腫瘍活性をもたらす。
【００８６】
ｍＡｂは、ヒト抗体、ヒト化抗体、またはキメラ抗体であってよく、そしてヒト定常領域を含んでよい。一部の実施形態において、ヒト定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４定常領域からなる群から選択され、そして一部の実施形態において、ヒト定常領域は、ＩｇＧ１またはＩｇＧ４定常領域である。一部の実施形態において、抗原結合フラグメントは、Ｆａｂ、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびＦｖフラグメントからなる群から選択される。
【００８７】
ヒト４−１ＢＢに結合し、かつ本発明の処置法、医薬、および使用に有用であるｍＡｂの例が、米国特許第８，３３７，８５０号および米国特許出願公開第２０１３−００７８２４０号に記載されている。本発明の処置法、医薬および、使用において４−１ＢＢアゴニストとして有用な特異的抗ヒト４−１ＢＢ  ｍＡｂとして、ＰＦ−０５０８２５６６が挙げられる。ＰＦ−０５０８２５６６は、４−１ＢＢを標的とする完全ヒト化ＩｇＧ２アゴニストモノクローナル抗体である。
【００８８】
本発明の処置法、医薬、および使用の一部の実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、モノクローナル抗体、またはその抗原結合フラグメントであり、以下を含む：（ａ）軽鎖ＣＤＲ配列番号３０、３１および３２、ならびに重鎖ＣＤＲ配列番号２７、２８および２９。
【００８９】
本発明の処置法、医薬、および使用の一部の実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、ヒト４−１ＢＢに特異的に結合し、かつ（ａ）配列番号１９またはそのバリアントを含む重鎖可変領域、および（ｂ）配列番号２０またはそのバリアントからなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含むモノクローナル抗体、またはその抗原結合フラグメントである。重鎖可変領域配列のバリアントは、フレームワーク領域（すなわち、ＣＤＲの外側）において最大１７個に達する保存的アミノ酸置換を有するものを除いた参照配列と同一であり、好ましくは、フレームワーク領域において１０、９、８、７、６、または５個未満の保存的アミノ酸置換を有する。軽鎖可変領域配列のバリアントは、フレームワーク領域（すなわち、ＣＤＲの外側）において最大５個に達する保存的アミノ酸置換を有するものを除いた参照配列と同一であり、好ましくは、フレームワーク領域において４、３、または２個未満の保存的アミノ酸置換を有する。
【００９０】
本発明の処置法、医薬、および使用の一部の実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、ヒト４−１ＢＢに特異的に結合し、かつ（ａ）配列番号２１に記載の重鎖アミノ酸配列、および（ｂ）配列番号２２に記載の軽鎖アミノ酸配列を含むが、配列番号２１のＣ末端リジン残基が場合によっては不在であるという条件が付くモノクローナル抗体である。
【００９１】
「ＰＤ−１アンタゴニスト」は、癌細胞上に発現されるＰＤ−Ｌ１の、免疫細胞（Ｔ細胞、Ｂ細胞またはＮＫＴ細胞）上に発現されるＰＤ−１への結合を遮断し、好ましくは、癌細胞上に発現されるＰＤ−Ｌ２の、免疫細胞により発現されるＰＤ−１への結合もまた遮断するあらゆる化合物または生体分子を意味する。ＰＤ−１およびそのリガンドの代わりの名前または同義語として、以下が挙げられる：ＰＤ−１について、ＰＤＣＤ１、ＰＤ１、ＣＤ２７９、およびＳＬＥＢ２；ＰＤ−Ｌ１について、ＰＤＣＤ１Ｌ１、ＰＤＬ１、Ｂ７Ｈ１、Ｂ７−４、ＣＤ２７４、およびＢ７−Ｈ；そしてＰＤ−Ｌ２について、ＰＤＣＤ１Ｌ２、ＰＤＬ２、Ｂ７−ＤＣ、Ｂｔｄｃ、およびＣＤ２７３。ヒト個体が処置されることになる本発明の処置法、医薬、および使用のいずれにおいても、抗ＰＤ−１抗体は、ヒトＰＤ−１へのヒトＰＤ−Ｌ１の結合を遮断し、好ましくは、ヒトＰＤ−１へのヒトＰＤ−Ｌ１およびヒトＰＤ−Ｌ２双方の結合を遮断する。例示的なヒトＰＤ−１アミノ酸配列は、ＮＣＢＩ遺伝子座番号ＮＰ＿００５００９に見出すことができる。例示的なヒトＰＤ−Ｌ１およびヒトＰＤ−Ｌ２のアミノ酸配列はそれぞれ、ＮＣＢＩ遺伝子座番号ＮＰ＿０５４８６２およびＮＰ＿０７９５１５に見出すことができる。
【００９２】
本発明の処置法、医薬、および使用のいずれかに有用なＰＤ−１アンタゴニストとして、ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１に特異的に結合する、好ましくはヒトＰＤ−１またはヒトＰＤ−Ｌ１に特異的に結合するモノクローナル抗体（ｍＡｂ）、またはその抗原結合フラグメントが挙げられる。ｍＡｂは、ヒト抗体、ヒト化抗体、またはキメラ抗体であってよく、そしてヒト定常領域を含んでよい。一部の実施形態において、ヒト定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４定常領域からなる群から選択され、そして一部の実施形態において、ヒト定常領域は、ＩｇＧ１またはＩｇＧ４定常領域である。一部の実施形態において、抗原結合フラグメントは、Ｆａｂ、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびＦｖフラグメントからなる群から選択される。
【００９３】
実施形態が文言「含む」によって本明細書中で記載される場合には、「からなる」および／または「から本質的になる」の書き方で記載される以外の類似した実施形態も提供されると理解される。
【００９４】
本発明の態様または実施形態が、選択肢のマーカッシュ群または他のグルーピングの書き方で記載される場合、本発明は、記載される群全体を全体としてだけでなく、群の各メンバーを個々に、そしてメイングループの全ての考えられるサブグループ、および１つまたはそれ以上の群メンバーが不在のメイングループをも包含する。本発明はまた、特許請求される本発明における群メンバーのいずれか１つまたはそれ以上の明確な排除を想定する。
【００９５】
定義されない限り、本明細書中で用いられる全ての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。一致しない場合は、定義を含む本明細書が支配することとなる。本明細書および特許請求の範囲の全体にわたって、文言「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、または「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」もしくは「含んでいる（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」等の変形は、明示される整数または整数の群を包含することを意味するが、他のいかなる整数も整数の群も排除することを意味しないと理解されるであろう。文脈によって必要とされない限り、単数の用語は複数を含むものとし、そして複数の用語は単数を含むものとする。用語「例えば（ｅ．ｇ．）」または、「例えば（ｆｏｒ  ｅｘａｍｐｌｅ）」に続くあらゆる例が、包括的であることも限定となることも意味しない。
【００９６】
例示的な方法および材料が本明細書中に記載されている。しかし、本明細書中に記載されるものと類似した、または等価の方法および材料もまた、本発明の実行または試験に用いることができる。材料、方法および実施例は、説明のためだけのものであり、限定となることは意図されない。
【００９７】
ＩＩ．方法、使用、および医薬
ここで提供されるのは、個体において癌を処置する方法であって、その個体に、抗ＣＣＲ４抗体および４−１ＢＢアゴニストを含む併用療法を施すことを含む方法である。一部の実施形態において、併用療法は、抗ＣＣＲ４抗体、４−１ＢＢアゴニスト、およびＰＤ−１アンタゴニストを含む。
【００９８】
併用療法はまた、１つまたはそれ以上の付加的な治療剤を含んでもよい。付加的な治療剤は、例えば、化学療法剤、生物療法剤（ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦＲ、ＥＧＦＲ、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ、他の成長因子受容体、ＣＤ２０、ＣＤ４０、ＣＤ−４０Ｌ、ＣＴＬＡ−４、ＯＸ−４０、４−１ＢＢ、ＰＤ−１、ＴＩＭ−３、ＬＡＧ−３、ＧＩＴＲ、ＣＤ１３７、ＩＣＯＳ、ＣＤ２８、ＣＤ２７、ＨＶＥＭ、ＢＴＬＡ、ＶＩＳＴＡ、ＣＣＲ８、ＴＩＧＩＴ、ＣＤ４、ＡＲＨＧＥＦ６、ＩＫＺＦ１、ＰＴＰＲＣ、ＤＯＣＫ２、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＩＬ２１Ｒ、ＩＬ２ＲＢ、ＮＣＫＡＰ１Ｌ、ＳＬＡＭＦ１、ＩＴＧＡＬ、ＩＬ１０ＲＡ、Ｐ２ＲＹ１０、ＩＬ２ＲＡ、ＦＭＮＬ１、ＤＯＣＫ１０、ＩＴＫ、ＳＡＳＨ３、ＫＩＡＡ０７４８、ＬＣＰ２、ＴＮＦＲＳＦ９（４−１ＢＢ、ＣＤ１３７）、ＣＹＢＢ、およびＣＴＬＡ４に対する抗体が挙げられるが、これらに限定されない）、免疫原性剤（例えば、弱毒化された癌細胞、腫瘍抗原、抗原提示細胞、例えば腫瘍由来の抗原または核酸でパルスされた樹枝状細胞、免疫刺激サイトカイン（例えば、ＩＬ−２、ＩＦＮα２、ＧＭ−ＣＳＦ）、および、ＧＭ−ＣＳＦ等（ただし、これに限定されない）の免疫刺激サイトカインをコードする遺伝子をトランスフェクトされた細胞）であってよい。
【００９９】
化学療法剤の例として、アルキル化剤、例えばチオテパおよびシクロホスファミド；アルキルスルホネート、例えばブスルファン、インプロスルファン、およびピポスルファン；アジリジン、例えばベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパ、およびウレドーパ；アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミド、およびトリメチローロメラミンが挙げられるエチレンイミンおよびメチラメラミン（ｍｅｔｈｙｌａｍｅｌａｍｉｎｅ）；アセトゲニン（とりわけ、ブラタシンおよびブラタシノン）；カンプトセシン（合成類似体トポテカンが挙げられる）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ−１０６５（そのアドゼレシン、カルゼレシン、およびビゼレシン合成類似体が挙げられる）；クリプトフィシン（特にクリプトフィシン１およびクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成類似体ＫＷ−２１８９およびＣＢＩ−ＴＭＩが挙げられる）；エリュテロビン；パンクラチスタチン；サルコジクチン；スポンギスタチン；ナイトロジェンマスタード、例えばクロラムブシル、クロルナファジン、コロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、塩酸メクロレタミンオキシド、メルファラン、ノベンビチン、フェネステリン、プレドニマスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタード；ニトロソウレア、例えばカルマスティン、クロロゾトシン、ホテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニムスチン；エンジイン抗生物質等の抗生物質（例えば、カリケアマイシン、とりわけカリケアマイシンガンマ１ＩおよびカリケアマイシンｐｈｉＩ１、例えば、Ａｇｎｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．、３３：１８３〜１８６（１９９４）参照；ジネミシンＡが挙げられるジネミシン；クロドロナート等のビスホスホネート；エスペラミシン；ならびにネオカルジノスタチン発色団および関連色素タンパク質エンジイン抗生物質クロモモフォア）、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、オースラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カルミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、ドキソルビシン（モルホリノ−ドキソルビシン、シアノモルホリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシン、およびデオキシドキソルビシンが挙げられる）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシンＣ等のマイトマイシン、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン、ピューロマイシン、クエラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン；抗代謝薬、例えばメトトレキサートおよび５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）；葉酸類似体、例えばデノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキセート；プリン類似体、例えばフルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン；ピリミジン類似体、例えばアンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロキシウリジン；アンドロゲン、例えばカルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン；抗副腎薬（ａｎｔｉ−ａｄｒｅｎａｌ）、例えばアミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン；フロリン酸等の葉酸補液；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトラキセート；デフォファミン；デメコルチン；ジアジクォン；エルフォルミチン；酢酸エリプチニウム；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシウレア；レンチナン；ロニダミン；マイタンシノイド、例えばマイタンシンおよびアンサミトシン；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダモール；ニトラクリン；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ロソキサントロン；ポドフィリン酸；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジクオン；２，２’，２”−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（とりわけＴ−２トキシン、ベラキュリンＡ、ロリジンＡ、およびアングイジン）；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド、例えばパクリタキセルおよびドキセタキセル；クロラムブシル；ゲムシタビン；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；プラチナ類似体、例えばシスプラチンおよびカルボプラチン；ビンブラスチン；プラチナ；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ビノレルビン；ノバントロン；テニポシド；エダトレキサート；ダウノマイシン；アミノプテリン；ゼローダ；イバンドロネート；ＣＰＴ−１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ  ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸等のレチノイド；カペシタビン；ならびに先のいずれかの医薬的に許容可能な塩、酸、または誘導体が挙げられる。また、挙げられるのは、腫瘍に及ぶホルモン作用を調節する、または阻害するように作用する、例えばタモキシフェン、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、およびトレミフェン（フェアストン）が挙げられる、抗エストロゲンおよび選択的エストロゲン受容体モジュレータ（ＳＥＲＭ）等の抗ホルモン剤；副腎においてエストロゲン産生を調節する酵素アロマターゼを阻害するアロマターゼ阻害剤、例えば４（５）−イミダゾール、アミノグルテチミド、メゲストロールアセテート、エクセメスタン、ホルメスタン、ファドロゾール、ボロゾール、レトロゾール、およびアナストロゾール；ならびに抗アンドロゲン、例えばフルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、およびゴセレリン；ならびに先のいずれかの医薬的に許容可能な塩、酸、または誘導体である。
【０１００】
本発明の併用療法における各治療剤は、単独で、または、標準的な医薬実務に従って、その治療剤、ならびに１つもしくはそれ以上の医薬的に許容可能な担体、賦形剤、および希釈剤を含む医薬（本明細書中で医薬組成物とも呼ばれる）中に入れて、投与することができる。
【０１０１】
本発明の併用療法における各治療剤は、同時に（すなわち、同じ医薬に入れて）、併用して（すなわち、あらゆる順序で、一方の直ぐ後に他方が投与されるように別個の医薬に入れて）、またはあらゆる順序で逐次的に、投与することができる。連続投与は、併用療法における治療剤が、異なる剤形（ある剤がタブレットまたはカプセルであり、そして別の剤が滅菌液である）である場合に、かつ／または異なる投薬スケジュールで投与される、例えば、化学療法剤が少なくとも毎日投与され、そして生物療法剤が、より低い頻度で、例えば毎週１回、２週毎に１回、もしくは３週毎に１回投与される場合に、特に有用である。
【０１０２】
投薬量単位は、ｍｇ／ｋｇ（すなわち、ｍｇ／ｋｇ体重）またはｍｇ／ｍ２で表すことができる。ｍｇ／ｍ２投薬量単位は、体表面積の１平方メートルあたりのミリグラム量を指す。
【０１０３】
場合によっては、抗ＣＣＲ４抗体および４−１ＢＢアゴニストは、単一の剤形に配合される、すなわち１つに製剤化（ｃｏ−ｆｏｒｍｕｌａｔｅ）される。
【０１０４】
同時投与した抗ＣＣＲ４抗体および４−１ＢＢアゴニストを、処置または予防の期間を通して維持することができるが、抗癌活性もまた、単離された一化合物の以降の投与（例えば、併用処置後の、４−１ＢＢアゴニストのない抗ＣＣＲ４抗体、または代わりに併用処置後の、抗ＣＣＲ４抗体のない４−１ＢＢアゴニスト）によって、達成することができる。
【０１０５】
一部の実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、抗ＣＣＲ４抗体の投与前に投与される一方、他の実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、抗ＣＣＲ４抗体の投与後に投与される。
【０１０６】
一部の実施形態において、併用療法における治療剤の少なくとも１つは、その剤が同じ癌を処置するための単独療法として用いられる場合に典型的に利用される同じ投薬レジメン（処置の用量、頻度、および持続期間）を用いて、投与される。他の実施形態において、患者は、併用療法における治療剤の少なくとも１つを、その剤が単独療法として用いられる場合よりも低い総量（例えば、より少ない用量、より低い頻度の投薬、かつ／またはより短い処置持続期間）で受ける。
【０１０７】
本発明の併用療法は、腫瘍を取り除く外科手術の前でも後でも用いることができ、そして放射線療法の前でも間でも後でも用いることができる。
【０１０８】
一部の実施形態において、本発明の併用療法は、生物療法剤または化学療法剤で以前に処置されなかった、すなわち処置ナイーブである患者に施される。他の実施形態において、併用療法は、処置を経験した後に応答の維持を達成することができなかった、すなわち生物療法剤または化学療法剤によって事前に治療を受けた患者に施される。
【０１０９】
本発明の併用療法は、典型的には、当該技術において周知である触診によって、または撮像技術、例えばＭＲＩ、超音波、もしくはＣＡＴスキャンよって見出されるほど十分に大きい腫瘍を処置するのに用いられる。一部の実施形態において、本発明の併用療法は、寸法が少なくとも約２００ｍｍ３、３００ｍｍ３、４００ｍｍ３、５００ｍｍ３、７５０ｍｍ３、または最大１０００ｍｍ３である進行期の腫瘍を処置するのに用いられる。
【０１１０】
本発明の併用療法は、好ましくは、ＣＣＲ４発現の陽性反応を示す、癌を有するヒト患者に施される。一部の実施形態において、ＣＣＲ４発現は、患者から取り出された腫瘍サンプルのＦＦＰＥまたは凍結組織切片の免疫組織化学（ＩＨＣ）アッセイにおいて、診断抗ヒトＣＣＲ４抗体を用いて検出される。典型的には、患者の医師は、抗ＣＣＲ４抗体および４−１ＢＢアゴニストによる処置の開始前に、患者から取り出された腫瘍組織サンプルにおけるＣＣＲ４発現を判定するための診断試験を指図するであろうが、医師は、処置の開始後、例えば処置サイクルの完了後の任意の時点に、第１の、または以降の診断試験を指図することができると想定される。
【０１１１】
一実施形態において、投薬レジメンは、特定の患者の状態、応答、および関連する処置に合わせて修正され（これはある意味ではあらゆる療法に関して従来通りである）、そして状態の変化に応じて、かつ／または他の臨床状態を考慮して、調整される必要があるかもしれない。
【０１１２】
一部の実施形態において、本発明の併用療法の投薬レジメン（本明細書中で投与レジメンとも呼ぶ）の選択は、実体の血清または組織の代謝回転速度、徴候のレベル、実体の免疫原性、および処置されることになる個体中の標的細胞、組織または臓器のアクセシビリティが挙げられるいくつかの要因によって決まる。好ましくは、投薬レジメンは、副作用の許容可能なレベルに合わせて、患者に送達される各治療剤の量を最大にする。したがって、併用における生物療法剤および化学療法剤のそれぞれの用量および投薬頻度は、部分的に、特定の治療剤、処置されることになる癌の重篤度、および患者の特性によって決まる。抗体、サイトカイン、および小分子の適切な用量を選択する際のガイダンスが入手可能である。例えば、Ｗａｗｒｚｙｎｃｚａｋ（１９９６）  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｔｈｅｒａｐｙ、Ｂｉｏｓ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｐｕｂ．Ｌｔｄ、Ｏｘｆｏｒｄｓｈｉｒｅ、ＵＫ；Ｋｒｅｓｉｎａ（編）（１９９１）  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ  ａｎｄ  Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ、Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、ＮＹ；Ｂａｃｈ（編）（１９９３）  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ｉｎ  Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  Ｄｉｓｅａｓｅｓ、Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、ＮＹ；Ｂａｅｒｔら（２００３）  Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．  ３４８：６０１〜６０８；Ｍｉｌｇｒｏｍら（１９９９）  Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．  ３４１：１９６６〜１９７３；Ｓｌａｍｏｎら（２００１）  Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．  ３４４：７８３〜７９２；Ｂｅｎｉａｍｉｎｏｖｉｔｚら（２０００）  Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．  ３４２：６１３〜６１９；Ｇｈｏｓｈら（２００３）  Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．  ３４８：２４〜３２；Ｌｉｐｓｋｙら（２０００）  Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．  ３４３：１５９４〜１６０２；Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ’  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  ２００３（Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ’  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ、第５７版）；Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｅｃｏｎｏｍｉｃｓ  Ｃｏｍｐａｎｙ；ＩＳＢＮ：１５６３６３４４５７；第５７版（２００２年１１月）参照。適切な投薬レジメンは、例えば、処置に影響を及ぼすことが当該技術において知られている、もしくは推測される、もしくは処置に影響を及ぼすことが予測されるパラメータまたは要因を用いて、臨床医が決定することができ、そして例えば、患者の病歴（例えば、以前の治療法）、処置されるべき癌のタイプおよびステージ、ならびに併用療法における１つまたはそれ以上の治療剤に対するバイオマーカーの応答によって決まることとなる。
【０１１３】
本発明の併用療法における生物療法剤は、連続的な注入によって、または間隔をおいた、例えば毎日の、１日おきの、毎週３回の、もしくは毎週、２週に、３週に、毎月、隔月に１回その他の投薬によって、投与してよい。毎週の総用量は、一般に、少なくとも約０．０５μｇ／ｋｇ、０．２μｇ／ｋｇ、０．５μｇ／ｋｇ、１μｇ／ｋｇ、１０μｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ体重またはそれ以上である。例えば、Ｙａｎｇら（２００３）  Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．  ３４９：４２７〜４３４；Ｈｅｒｏｌｄら（２００２）  Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．  ３４６：１６９２〜１６９８；Ｌｉｕら（１９９９）  Ｊ．Ｎｅｕｒｏｌ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．Ｐｓｙｃｈ．  ６７：４５１〜４５６；Ｐｏｒｔｉｅｌｊｉら（２００３）  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．  ５２：１３３〜１４４参照。
【０１１４】
併用療法において抗ＣＣＲ４抗体として抗ヒトＣＣＲ４  ｍＡｂを利用する一部の実施形態において、投薬レジメンは、処置の過程を通して約７日（±２日）、１４日（±２日）、約２１日（±２日）、または約３０日（±２日）の間隔で、約０．５、１、２、３、５、または１０ｍｇ／ｋｇの用量にて、抗ヒトＣＣＲ４  ｍＡｂを投与することを含む。
【０１１５】
併用療法において抗ＣＣＲ４抗体として抗ヒトＣＣＲ４  ｍＡｂを利用する一部の実施形態において、投薬レジメンは、約０．００５ｍｇ／ｋｇから約１０ｍｇ／ｋｇの用量に患者内用量を漸増させて、抗ヒトＣＣＲ４  ｍＡｂを投与することを含む。用量を漸増させる他の実施形態において、投薬間の間隔は、次第に、例えば、第１の投薬と第２の投薬との間で約３０日（±２日）、第２の投薬と第３の投薬との間で約１４日（±２日）、短くされる。ある実施形態において、投薬間隔は、第２の投薬以降の投薬について、約１４日（±２日）とされる。ある実施形態において、投薬間隔は、第２の投薬以降の投薬について、約７日（±２日）とされる。
【０１１６】
一部の実施形態において、対象は、本明細書中に記載される抗ＣＣＲ４抗体のいずれかを含む医薬が、静脈内（ＩＶ）注入で投与される。
【０１１７】
一部の実施形態において、併用療法における抗ＣＣＲ４抗体は、ＫＷ−０７６１であり、これは、以下からなる群から選択される用量にて静脈内投与される：約０．５ｍｇ／ｋｇをＱ２Ｗ、１ｍｇ／ｋｇをＱ２Ｗ、２ｍｇ／ｋｇをＱ２Ｗ、３ｍｇ／ｋｇをＱ２Ｗ、５ｍｇ／ｋｇをＱ２Ｗ、１０ｍｇ／ｋｇをＱ２Ｗ、１ｍｇ／ｋｇをＱ３Ｗ、２ｍｇ／ｋｇをＱ３Ｗ、３ｍｇ／ｋｇをＱ３Ｗ、５ｍｇ／ｋｇをＱ３Ｗ、および１０ｍｇ／ｋｇをＱ３Ｗ。一部の実施形態において、抗ＣＣＲ４抗体は、０．１〜５０ｍＭクエン酸緩衝液ｐＨ４〜７中に０．０１〜１５０ｍｇ／ｍＬ  ＫＷ−０７６１、１０〜３０ｍｇ／ｍＬグリシンを含む液体医薬として投与され、２００〜２５０ｍＬの生理食塩水中に溶解した、選択された用量の医薬が、ＩＶ注入によって約２時間にわたって投与される。別の実施形態において、抗ＣＣＲ４抗体は、クエン酸緩衝液ｐＨ５．２〜５．８中に４ｍｇ／ｍＬ  ＫＷ−０７６１、２２．５ｍｇ／ｍＬグリシン、０．０２％（ｗ／ｖ）ポリソルベート８０を含む液体医薬として投与され、２００〜２５０ｍＬの生理食塩水中に溶解した、選択された用量の医薬が、ＩＶ注入によって約２時間にわたって投与される。
【０１１８】
一部の実施形態において、併用療法における抗ＣＣＲ４抗体は、ＫＷ−０７６１であり、これは、０．５ｍｇ／ｋｇをＱ１Ｗ、０．５ｍｇ／ｋｇをＱ２Ｗ、１ｍｇ／ｋｇをＱ１Ｗ、１ｍｇ／ｋｇをＱ２Ｗ、２ｍｇ／ｋｇをＱ２Ｗ、３ｍｇ／ｋｇをＱ２Ｗ、５ｍｇ／ｋｇをＱ２Ｗ、１０ｍｇ／ｋｇをＱ２Ｗ、１ｍｇ／ｋｇをＱ３Ｗ、２ｍｇ／ｋｇをＱ３Ｗ、３ｍｇ／ｋｇをＱ３Ｗ、５ｍｇ／ｋｇをＱ３Ｗ、および１０ｍｇ／ｋｇをＱ３Ｗからなる群から選択される用量にて液体医薬に入れられて投与される。一部の実施形態において、ＫＷ−０７６１は、１０ｍＭヒスチジン緩衝液ｐＨ  ５．５中に２５ｍｇ／ｍｌ  ＫＷ−０７６１、７％（ｗ／ｖ）スクロース、０．０２％（ｗ／ｖ）ポリソルベート８０を含む液体医薬として投与され、選択された用量の医薬が、約３０分間にわたってＩＶ注入によって投与される。別の実施形態において、ＫＷ−０７６１は、０．１〜５０ｍＭクエン酸緩衝液ｐＨ４〜７中に０．０１〜１５０ｍｇ／ｍＬ  ＫＷ−０７６１、１０〜３０ｍｇ／ｍＬグリシンを含む液体医薬として投与され、２００〜２５０ｍＬの生理食塩水中に溶解した、選択された用量の医薬が、ＩＶ注入によって約２時間にわたって投与される。別の実施形態において、ＫＷ−０７６１は、クエン酸緩衝液ｐＨ５．２〜５．８中に４ｍｇ／ｍＬ  ＫＷ−０７６１、２２．５ｍｇ／ｍＬグリシン、０．０２％（ｗ／ｖ）ポリソルベート８０を含む液体医薬として投与され、２００〜２５０ｍＬの生理食塩水中に溶解した、選択された用量の医薬が、ＩＶ注入によって約２時間にわたって投与される。
【０１１９】
一部の実施形態において、併用療法における４−１ＢＢアゴニストは、ＰＦ−０５０８２５６６であり、これは、０．２４ｍｇ／ｍｌをＱ２Ｗ、１．２ｍｇ／ｋｇをＱ２Ｗ、２．４ｍｇ／ｋｇをＱ２Ｗ、３ｍｇ／ｋｇをＱ２Ｗ、５ｍｇ／ｋｇをＱ２Ｗ、１０ｍｇをＱ２Ｗ、０．２４ｍｇ／ｍｌをＱ３Ｗ、１．２ｍｇ／ｋｇをＱ３Ｗ、２．４ｍｇ／ｋｇをＱ３Ｗ、３ｍｇ／ｋｇをＱ３Ｗ、５ｍｇ／ｋｇをＱ３Ｗ、および１０ｍｇをＱ３Ｗからなる群から選択される用量（固定等用量を含む）にて液体医薬に入れられて投与される。一部の実施形態において、ＰＦ−０５０８２５６６は、液体医薬として投与され、選択された用量の医薬が、ＩＶ注入によって約６０分間にわたって投与される。
【０１２０】
ＰＦ−０５０８２５６６と併用されるＫＷ−０７６１の最適用量は、これらの剤の１つまたは双方の用量漸増によって同定することができる。
【０１２１】
一実施形態において、ＫＷ−０７６１は、１．０ｍｇ／ｋｇをＱ２Ｗの開始用量にて投与され、ＰＦ−０５０８２５６６は、０．２４ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、１．２ｍｇ／ｋｇ、２．４ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇの用量にて、または固定等用量にてＱ４Ｗ投与される。
【０１２２】
別の実施形態において、ＫＷ−０７６１は、０．５ｍｇ／ｋｇをＱ３Ｗの開始用量にて投与され、ＰＦ−０５０８２５６６は、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、１．２ｍｇ／ｋｇ、２．４ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、または１０ｍｇ／ｋｇの開始用量にてＱ３Ｗ投与される。
【０１２３】
さらに別の実施形態において、ＰＦ−０５０８２５６６は、０．３ｍｇ／ｋｇをＱ４Ｗの開始用量にて投与され、ＫＷ−０７６１は、１ｍｇ／ｋｇをＱ２Ｗの開始用量にて投与され、開始用量の併用が、患者によって許容されない場合、ＫＷ−０７６１の用量が、０．５ｍｇ／ｋｇをＱ２Ｗに引き下げられ、かつ／またはＰＦ−０５０８２５６６の用量が、０．３ｍｇ／ｋｇをＱ４Ｗに引き下げられる。
【０１２４】
一部の実施形態において、処置は、４週のサイクルにおいて施される。一部の実施形態において、ＰＦ−０５０８２５６６は、４週毎に（Ｑ４Ｗ）、各サイクルの１日目に投与される。一部の実施形態において、ＰＦ−０５０８２５６６は、１時間の静脈内（ＩＶ）注入として投与される。一部の実施形態において、ＰＦ−０５０８２５６６の開始用量は、１．２ｍｇ／ｋｇである。
【０１２５】
一部の実施形態において、ＫＷ−０７６１は、１ｍｇ／ｋｇの用量で、４週連続で毎週（ＱＷ）（１、８、１５および２２日目）投与されてから、隔週（１日および１５日目）の投薬が続く。一部の実施形態において、ＰＦ−０５０８２５６６は、１時間のＩＶ注入剤として投与される。
【０１２６】
一部の実施形態において、薬物が同時投与される各投薬サイクルの１日目に、ＫＷ−０７６１の注入は、ＰＦ−０５０８２５６６の注入が完了してから、かつポストＰＦ−０５０８２５６６およびプレＫＷ−０７６１のＰＫ血液サンプルが引き抜かれてから３０分（±１０分）後に開始される。
【０１２７】
一部の実施形態において、ＫＷ−０７６１は、第１のサイクルにおいて毎週（すなわち、１、８、１５、２２日目に）、１時間の静脈内注入剤として投与される。別の実施形態において、サイクル２以降、ＫＷ−０７６１は、２週毎に（すなわち、全てのサイクルの１および１５日目に）投与される。一部の実施形態において、１日目に、ＫＷ−０７６１の注入は、ＰＦ−０５０８２５６６の注入が完了してから、かつポストＰＦ−０５０８２５６６およびプレＫＷ−０７６１の薬物動態血液サンプルが引き抜かれてから３０分（±１０分）後に開始される。
【０１２８】
一部の実施形態において、投薬レジメンは、以下の表３に示される用量組合せの１つである。
【０１２９】
【表３】
2017517506.tif 000004
【０１３０】
一部の実施形態において、２４ケ月の処置（おおよそ２４サイクル）の完了までに、疾患の進行、患者の拒絶、容認できない毒性が確認されなければ、研究薬物による処置は継続する（どれが最初に起ころうとも、研究は早期に終結してよい）。
【０１３１】
重大な毒性の場合、投薬を遅らせてよく、かつ／または引き下げてよい。一部の実施形態において、用量の修正が、サイクル内であってよい。例えば、十分な回復まで、投薬を中断してよく、そして必要な場合には、所与の処置サイクル中に投薬を引き下げてよい。別の実施形態において、投薬をサイクル間で修正してよい。例えば、次のサイクル投与は、新しいサイクルが開始される予定であるときに残存する毒性が原因で、遅れてよい。さらに別の実施形態において、投薬が、次のサイクルにおいて修正される。例えば、先のサイクルにおいて経験した毒性に基づいて、用量の減少を以降のサイクルに必要としてよい。一部の実施形態において、ＰＦ−０５０８２５６６および／またはＫＷ−０７６１による処置は、全ての毒性が、本明細書中に記載される限度内で回復した後に、再開することができる。
【０１３２】
一部の実施形態において、前述の範囲の下限を下回る投薬量レベルで十分すぎるかもしれない一方、その他の場合において、当業者により決定されるさらにより大用量を利用してよい。
【０１３３】
一部の実施形態において、処置サイクルは、併用処置の１日目から始まって、３週間または４週間持続する。薬物が同時投与される処置サイクルの全ての日に、ＫＷ−０７６１のＩＶ注入は好ましくは、ＰＦ−０５０８２５６６の注入が完了してから３０分後に開始される。これ以外にも、ＫＷ−０７６１は、ＰＦ−０５０８２５６６の注入完了後、ＩＶ注入によって投与される。本発明はまた、ＰＦ−０５０８２５６６およびＫＷ−０７６１の同時ＩＶ注入が意図される。
【０１３４】
一部の実施形態において、併用療法は、好ましくは少なくとも１２週間（３つの４週間サイクルまたは４つの３週間サイクル）、より好ましくは少なくとも２４週間、さらにより好ましくは、患者がＣＲを達成してから少なくとも２から４週間、施される。
【０１３５】
別の実施形態において、併用療法に対する応答が、ＲＥＣＩＳＴバージョン１．１およびｉｒＲＣを用いて評価される。腫瘍評価は、全ての知られている、または疑われる疾患部位を含むこととなる。一実施形態において、撮像が、胸、腹部、および骨盤のＣＴスキャンまたはＭＲＩスキャン；脳のＣＴスキャンまたはＭＲＩスキャン、および骨のスキャン（必要な場合）を含んでよい。さらに別の実施形態において、ＣＴスキャンは、医学的な理由で禁忌でない限り、造影剤で実行される。別の実施形態において、同定かつ報告された各病変をベースラインにて特徴付けるのに用いられた同じ撮像技術が、後の腫瘍評価に利用される。別の実施形態において、抗腫瘍活性が、ベースラインにて行われた放射線学的腫瘍評価によって、最大１年までは８週毎に、その後３ケ月毎に、そして疾患進行が疑われる（例えば、症状が悪化する）場合はいつでも、処置中に評価される。さらに別の実施形態において、応答（ＣＲ／ＰＲ）の確認は、初期応答から短くとも４週後になされる。一部の実施形態において、疾患評価の許容可能な時間ウィンドウは、Ｃ１Ｄ１から始めて、スクリーニングのために、処置中の最大７日（すなわち、スクリーニング時間ウィンドウは、レジストレーション以前の最大３５日である）±７日である。別の実施形態において、タイミングは暦日に従い、サイクルの開始の際の遅れについて調整されるべきでない。
【０１３６】
一部の実施形態において、本発明の併用療法による処置に選ばれた患者は、進行型の固形悪性腫瘍と診断されている。好ましくは、患者は、進行型の腫瘍について、事前の全身療法を受けていない。
【０１３７】
本発明はまた、先に記載される抗ＣＣＲ４抗体、および医薬的に許容可能な賦形剤を含む医薬を提供する。抗ＣＣＲ４抗体が、生物療法剤、例えばｍＡｂである場合、アンタゴニストは、従来の細胞培養および回収／精製技術を用いて、ＣＨＯ細胞中に産生させることができる。
【０１３８】
一部の実施形態において、抗ＣＣＲ４抗体を含む、抗ＣＣＲ４抗体としての医薬が、液体製剤として提供され、または、使用前に注入用蒸留水により凍結乾燥粉末を復元することによって製造される。一部の実施形態において、ＫＷ−０７６１を含む医薬がガラスバイアル内に提供されて、約５０ｍｇのＫＷ−０７６１を含有する。
【０１３９】
本発明はまた、４−１ＢＢアゴニスト抗体および医薬的に許容可能な賦形剤を含む医薬を提供する。４−１ＢＢアゴニスト抗体は、米国特許第８，３３７，８５０号に記載されるようにして調製することができる。
【０１４０】
一部の実施形態において、４−１ＢＢアゴニスト抗体は、静脈内（ＩＶ）注入を可能にするために、１０ｍｇ／ｍＬの濃度に製剤化される。市販の製剤は、ｐＨ  ５．５のＬ−ヒスチジン緩衝液を、α，α−トレハロース二水和物、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム二水和物、およびポリソルベート８０と共に含有し得る。
【０１４１】
本明細書中に記載される抗ＣＣＲ４および４−１ＢＢ医薬は、第１のコンテナおよび第２のコンテナ、ならびに添付文書を含むキットとして提供することができる。第１のコンテナは、抗ＣＣＲ４抗体を含む少なくとも１用量の医薬を含有し、第２のコンテナは、４−１ＢＢアゴニストを含む少なくとも１用量の医薬を含有し、添付文書、またはラベルは、この医薬を用いて癌患者を処置するための説明書を含む。第１のコンテナおよび第２のコンテナは、同じまたは異なる形状（例えば、バイアル、シリンジ、およびボトル）および／もしくは材料（例えば、プラスチックまたはガラス）で構成することができる。キットはさらに、医薬を投与する際に有用であり得る他の材料、例えば希釈剤、フィルター、ＩＶバッグおよびライン、ニードル、ならびにシリンジを含んでよい。キットの一部の実施形態において、抗ＣＣＲ４抗体は、ＫＷ−０７６１であり、説明書は、医薬が、ＣＣＲ４発現の陽性反応を示す癌を有する患者を処置するのに用いられることが意図されると記載する。
【０１４２】
以下に記載される例示的な特定の実施形態が挙げられる、本発明のこれらの態様および他の態様は、本明細書中に含有される教示から明らかであろう。
【０１４３】
本発明の例示的な特定の実施形態
１．個体において癌を処置する方法であって、該個体に、抗ＣＣＲ４抗体および４−１ＢＢアゴニストを含む併用療法を施すことを含む前記方法。
２．個体において癌を処置するための、４−１ＢＢアゴニストとの併用のための抗ＣＣＲ４抗体を含む医薬。
３．個体において癌を処置するための、抗ＣＣＲ４抗体との併用のための４−１ＢＢアゴニストを含む医薬。
４．医薬的に許容可能な賦形剤をさらに含む、実施形態３または４の医薬。
５．４−１ＢＢアゴニストと併用して投与された場合に個体において癌を処置する医薬の製造における抗ＣＣＲ４抗体の使用。
６．抗ＣＣＲ４抗体と併用して投与された場合に個体において癌を処置する医薬の製造における４−１ＢＢアゴニスト化合物の使用。
７．個体において癌を処置する医薬の製造における抗ＣＣＲ４抗体および４−１ＢＢアゴニストの使用。
８．第１のコンテナ、第２のコンテナ、および添付文書を含むキットであって、該第１のコンテナは、抗ＣＣＲ４抗体を含む少なくとも１用量の医薬を含み、該第２のコンテナは、４−１ＢＢアゴニストを含む少なくとも１用量の医薬を含み、該添付文書は、医薬を用いて癌個体を処置するための説明書を含む、前記キット。
９．説明書は、医薬が、例えば免疫組織化学（ＩＨＣ）アッセイによって、ＣＣＲ４発現の陽性反応を示す癌を有する個体を処置するのに用いられることが意図されると記載する、実施形態８のキット。
１０．個体はヒトであり、抗ＣＣＲ４抗体は、ヒトＣＣＲ４に特異的に結合してＣＤ４＋細胞を減少させるモノクローナル抗体である、実施形態１〜９のいずれかの方法、医薬、使用、またはキット。
１１．抗ＣＣＲ４抗体は、ＫＷ−０７６１またはｈｕＣＣＲ４である、実施形態９の方法、医薬、使用、またはキット。
１２．個体はヒトであり、抗ＣＣＲ４抗体は、ヒトＣＣＲ４に特異的に結合するモノクローナル抗体である、実施形態１〜９のいずれかの方法、医薬、使用、またはキット。
１３．抗ＣＣＲ４抗体はＣＤ４＋細胞を減少させる、実施形態１２の方法、医薬、使用、またはキット。
１４．モノクローナル抗体、またはその抗原結合フラグメントは：（ａ）配列番号１、２および３の軽鎖ＣＤＲ、ならびに配列番号４、５および６の重鎖ＣＤＲ；または（ｂ）配列番号７、８および９の軽鎖ＣＤＲ、ならびに配列番号１０、１１および１２の重鎖ＣＤＲを含む、実施形態１３の方法、医薬、使用、またはキット。
１５．モノクローナル抗体、またはその抗原結合フラグメントは、配列番号７、８および９の軽鎖ＣＤＲ、ならびに配列番号１０、１１および１２の重鎖ＣＤＲを含む、実施形態１３の方法、医薬、使用、またはキット。
１６．抗ＣＣＲ４抗体は、重鎖および軽鎖を含み、該重鎖は配列番号１５を含み、該軽鎖は配列番号１６を含む、実施形態１３の方法、医薬、使用、またはキット。
１７．抗ＣＣＲ４抗体は、重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含み、該重鎖可変領域は配列番号１７を含み、該軽鎖可変領域は配列番号１８を含む、実施形態１３の方法、医薬、使用、またはキット。
１８．癌は、固形腫瘍である、実施形態１０〜１７のいずれかの方法、医薬、使用、またはキット。
１９．癌は、膀胱癌、乳癌、淡明細胞型腎臓癌、頭部／頸部扁平上皮癌、直腸癌、肺扁平上皮癌、悪性黒色腫、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、卵巣癌、膵癌、前立腺癌、腎細胞癌、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、またはトリプルネガティブ乳癌である、実施形態１０〜１７のいずれかの方法、医薬、使用、またはキット。
２０．個体は、進行型の固形悪性腫瘍について以前に処置されていない、実施形態１０〜１７のいずれかの方法、医薬、使用、またはキット。
２１．癌は、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、ホジキンリンパ腫（ＨＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、骨髄細胞白血病−１タンパク質（Ｍｃｌ−１）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）または小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）である、実施形態１０〜１７のいずれかの方法、医薬、使用、またはキット。
２２．４−１ＢＢアゴニストは、配列番号１９および配列番号２０のそれぞれ重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含むモノクローナル抗体である、実施形態１０〜２１のいずれかの方法、医薬、使用、またはキット。
２３．４−１ＢＢアゴニストは、配列番号３０、３１および３２の軽鎖ＣＤＲ、ならびに配列番号２７、２８および２９の重鎖ＣＤＲを含むモノクローナル抗体である、実施形態１０〜２１のいずれかの方法、医薬、使用、またはキット。
２４．４−１ＢＢアゴニストは、重鎖および軽鎖を含むモノクローナル抗体であり、該重鎖は配列番号２１を含み、該軽鎖は配列番号２２を含む、実施形態１０〜２１のいずれかの方法、医薬、使用、またはキット。
２５．癌は、ヒトＣＣＲ４の陽性反応を示す、実施形態１０〜２２のいずれかの方法、医薬、使用、またはキット。
２６．ヒトＣＣＲ４発現が高められる、実施形態２３の方法、医薬、使用、またはキット。
２７．抗ＣＣＲ４抗体は、ＫＷ−０７６１またはｈｕＣＣＲ４である、実施形態１４の方法、医薬、使用、またはキット。
２８．ＫＷ−０７６１は、クエン酸緩衝液ｐＨ５．２〜５．８中に４ｍｇ／ｍＬ抗ＣＣＲ４抗体、２２．５ｍｇ／ｍＬグリシン、０．０２％（ｗ／ｖ）ポリソルベート８０を含む液体医薬として製剤化されている、実施形態２５の方法、医薬、使用、またはキット。
２９．４−１ＢＢアゴニストは、ＰＦ−０５０８２５６６である、実施形態１〜２６のいずれかの方法、医薬、使用、またはキット。
３０．抗ＣＣＲ４抗体は、約０．５、１、２、３、５、または１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、実施形態１〜２６のいずれかの方法、医薬、使用、またはキット。
３１．抗ＣＣＲ４抗体はＫＷ−０７６１であり、４−１ＢＢアゴニストはＰＦ−０５０８２５６６であり、個体は進行型の悪性固形腫瘍と診断され、該抗ＣＣＲ４抗体および４−１ＢＢアゴニストの用量は、以下の表における組合せ用量からなる群から選択される、実施形態１〜２６のいずれかの方法、医薬、使用、またはキット：
【０１４４】
【表４】
2017517506.tif 000005
【０１４５】
一般的な方法
分子生物学において標準的な方法が、Ｓａｍｂｒｏｏｋ、ＦｒｉｔｓｃｈおよびＭａｎｉａｔｉｓ（１９８２  ＆  １９８９  第２版、２００１  第３版）  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ，Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ、ＮＹ；ＳａｍｂｒｏｏｋおよびＲｕｓｓｅｌｌ（２００１）  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ、第３版、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ、ＮＹ；Ｗｕ（１９９３）  Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  ＤＮＡ、第２１７巻、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）に記載されている。標準的な方法はまた、Ａｕｓｂｅｌら（２００１）  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、第１〜４巻、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、ＮＹにも見られ、細菌細胞におけるクローニングおよびＤＮＡ突然変異誘発（第１巻）、哺乳類細胞および酵母におけるクローニング（第２巻）、複合糖質およびタンパク質の発現（第３巻）、ならびにバイオインフォマティクス（第４巻）を記載している。
【０１４６】
免疫沈降、クロマトグラフィー、電気泳動、遠心分離、および結晶化が挙げられるタンパク質精製法が記載されている（Ｃｏｌｉｇａｎら（２０００）  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｃｉｅｎｃｅ、第１巻、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ）。化学分析、化学修飾、翻訳後修飾、融合タンパク質の産生、タンパク質のグリコシル化が記載されている（例えば、Ｃｏｌｉｇａｎら（２０００）  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｃｉｅｎｃｅ、第２巻、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ；Ａｕｓｕｂｅｌら（２００１）  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、第３巻、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．、ＮＹ、ＮＹ、１６．０．５〜１６．２２．１７頁；Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｃｏ．（２００１）  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  ｆｏｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ；４５〜８９頁；Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｂｉｏｔｅｃｈ（２００１）  ＢｉｏＤｉｒｅｃｔｏｒｙ、Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、Ｎ．Ｊ．、３８４〜３９１頁参照）。ポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体の生産、精製、および断片化が記載されている（Ｃｏｌｉｇａｎら（２００１）  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、第１巻、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ；ＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ（１９９９）  Ｕｓｉｎｇ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ、ＮＹ；ＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ、上記）。リガンド／受容体相互作用を特徴付ける標準的な技術が入手可能である（例えば、Ｃｏｌｉｇａｎら（２００１）  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、第４巻、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ，Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ参照）。
【０１４７】
モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、およびヒト化抗体を調製することができる（例えば、ＳｈｅｐｅｒｄおよびＤｅａｎ（編）（２０００）  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ、Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖ．Ｐｒｅｓｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、ＮＹ；ＫｏｎｔｅｒｍａｎｎおよびＤｕｂｅｌ（編）（２００１）  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ；ＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ（１９８８）  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ、ＮＹ、１３９〜２４３頁；Ｃａｒｐｅｎｔｅｒら（２０００）  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １６５：６２０５；Ｈｅら（１９９８）  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １６０：１０２９；Ｔａｎｇら（１９９９）  Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．  ２７４：２７３７１〜２７３７８；Ｂａｃａら（１９９７）  Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．  ２７２：１０６７８〜１０６８４；Ｃｈｏｔｈｉａら（１９８９）  Ｎａｔｕｒｅ  ３４２：８７７〜８８３；ＦｏｏｔｅおよびＷｉｎｔｅｒ（１９９２）  Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．  ２２４：４８７〜４９９；米国特許第６，３２９，５１１号参照）。
【０１４８】
ヒト化の代案として、ファージ上に提示されるヒト抗体ライブラリ、またはトランスジェニックマウスにおけるヒト抗体ライブラリを用いるものがある（Ｖａｕｇｈａｎら（１９９６）  Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．  １４：３０９〜３１４；Ｂａｒｂａｓ（１９９５）  Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  １：８３７〜８３９；Ｍｅｎｄｅｚら（１９９７）  Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  １５：１４６〜１５６；ＨｏｏｇｅｎｂｏｏｍおよびＣｈａｍｅｓ（２０００）  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｔｏｄａｙ  ２１：３７１〜３７７；Ｂａｒｂａｓら（２００１）  Ｐｈａｇｅ  Ｄｉｓｐｌａｙ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ；Ｋａｙら（１９９６）  Ｐｈａｇｅ  Ｄｉｓｐｌａｙ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ；ｄｅ  Ｂｒｕｉｎら（１９９９）  Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．  １７：３９７〜３９９）。
【０１４９】
抗原の精製は、抗体の産生に必須でない。動物を、注目する抗原を有する細胞で免疫化することができる。免疫化された動物から脾細胞を単離して、この脾細胞を骨髄腫細胞株と融合させてハイブリドーマを産生することができる（例えば、Ｍｅｙａａｒｄら（１９９７）  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ７：２８３〜２９０；Ｗｒｉｇｈｔら（２０００）  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  １３：２３３〜２４２；Ｐｒｅｓｔｏｎら、上記；Ｋａｉｔｈａｍａｎａら（１９９９）  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １６３：５１５７〜５１６４参照）。
【０１５０】
抗体は、例えば、小薬物分子、酵素、リポソーム、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）に結合することができる。抗体は、治療、診断、キット、または他の目的に有用であり、例えば、色素、放射性同位元素、酵素、または金属、例えばコロイド金に結合する抗体が挙げられる（例えば、Ｌｅ  Ｄｏｕｓｓａｌら（１９９１）  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １４６：１６９〜１７５；Ｇｉｂｅｌｌｉｎｉら（１９９８）  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １６０：３８９１〜３８９８；ＨｓｉｎｇおよびＢｉｓｈｏｐ（１９９９）  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １６２：２８０４〜２８１１；Ｅｖｅｒｔｓら（２００２）  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １６８：８８３〜８８９参照）。
【０１５１】
蛍光活性化細胞ソーティング（ＦＡＣＳ）が挙げられるフローサイトメトリー法が利用可能である（例えば、Ｏｗｅｎｓら（１９９４）  Ｆｌｏｗ  Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｆｏｒ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ、Ｈｏｂｏｋｅｎ、ＮＪ；Ｇｉｖａｎ（２００１）  Ｆｌｏｗ  Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ、第２版；Ｗｉｌｅｙ−Ｌｉｓｓ、Ｈｏｂｏｋｅｎ、ＮＪ；Ｓｈａｐｉｒｏ（２００３）  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ｆｌｏｗ  Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ、Ｈｏｂｏｋｅｎ、ＮＪ参照）。例えば診断試薬として用いられる、核酸プライマーおよびプローブ、ポリペプチド、ならびに抗体が挙げられる核酸を修飾するのに適した蛍光試薬が入手可能である（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓｙ（２００３）  Ｃａｔａｌｏｇｕｅ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、Ｅｕｇｅｎｅ、ＯＲ；Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（２００３）  Ｃａｔａｌｏｇｕｅ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）。
【０１５２】
免疫系の組織学の標準的な方法が記載されている（例えば、Ｍｕｌｌｅｒ−Ｈａｒｍｅｌｉｎｋ（編）（１９８６）  Ｈｕｍａｎ  Ｔｈｙｍｕｓ：Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｖｅｒｌａｇ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、ＮＹ；Ｈｉａｔｔら（２０００）  Ｃｏｌｏｒ  Ａｔｌａｓ  ｏｆ  Ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ、Ｐｈｉｌａ、ＰＡ；Ｌｏｕｉｓら（２００２）  Ｂａｓｉｃ  Ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ：Ｔｅｘｔ  ａｎｄ  Ａｔｌａｓ、ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、ＮＹ参照）。
【０１５３】
例えば、抗原性フラグメント、リーダ配列、タンパク質の折畳み、機能ドメイン、グリコシル化部位、および配列アラインメントを決定するソフトウェアパッケージおよびデータベースが入手可能である（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ、Ｖｅｃｔｏｒ  ＮＴＩ（登録商標）Ｓｕｉｔｅ（Ｉｎｆｏｒｍａｘ，Ｉｎｃ．、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、ＭＤ）；ＧＣＧ  Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ  Ｐａｃｋａｇｅ（Ａｃｃｅｌｒｙｓ，Ｉｎｃ．、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）；ＤｅＣｙｐｈｅｒ（登録商標）（ＴｉｍｅＬｏｇｉｃ  Ｃｏｒｐ．、Ｃｒｙｓｔａｌ  Ｂａｙ、Ｎｅｖａｄａ）；Ｍｅｎｎｅら（２０００）  Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ  １６：７４１〜７４２；Ｍｅｎｎｅら（２０００）  Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  Ｎｏｔｅ  １６：７４１〜７４２；Ｗｒｅｎら（２００２）  Ｃｏｍｐｕｔ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｐｒｏｇｒａｍｓ  Ｂｉｏｍｅｄ．  ６８：１７７〜１８１；ｖｏｎ  Ｈｅｉｊｎｅ（１９８３）  Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．  １３３：１７〜２１；  ｖｏｎ  Ｈｅｉｊｎｅ（１９８６）  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．  １４：４６８３〜４６９０参照）。
【実施例１】
【０１５４】
併用処置
この実施例は、動物癌モデルにおける４−１ＢＢアゴニスト抗体の抗腫瘍活性に及ぼすＣＤ４＋Ｔ細胞の枯渇の効果を示す。
【０１５５】
確立されたＢ１６Ｆ１０腫瘍に対する併用免疫療法の抗腫瘍効能を評価するために、以前に報告された、ＣＴ２６モデル（Ｅｓｃｕｉｎ−Ｏｒｄｉｎａｓら、Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ  Ｃａｎｃｅｒ、２０１３；１：１４）、ならびに抗ＰＤ−１および抗ＬＡＧ−３の投薬レジメン（Ｗｏｏら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、２０１２；７２：９１７〜２７；Ｃｕｒｒａｎら、ＰｌｏＳ  Ｏｎｅ．  ２０１１；６：ｅ１９４９９）において効能を示した先行研究に基づいて、抗４−１ＢＢ投薬レジメンを選択した。掲載されている結果とも一致して、抗４−１ＢＢ、抗ＰＤ−１、または抗ＬＡＧ−３単独では、これらの単一剤処置を５０〜１５４ｍｍ３のサイズの腫瘍で始めた場合に、Ｂ１６Ｆ１０腫瘍増殖を一貫して阻害しなかった（データ示さず）。抗ＰＤ−１を抗ＬＡＧ−３と併用すると、アイソタイプコントロールに対して５４％の腫瘍増殖阻害（ＴＧＩ）が生じた（ｐ＜０．００１）が、この処置後もマウスは腫瘍フリーとはならなかった。対照的に、動物に抗４−１ＢＢ抗体および抗ＰＤ−１抗体を併用して投与した場合、アイソタイプコントロールに対して８５％ＴＧＩの劇的な効能が生じ（ｐ＜０．０００１）、処置した１０頭の動物のうちの７頭が腫瘍フリーであった（データ示さず）。そのような注目に値する組合せ効能は、再現性がある：異なる実験者による独立した研究において（腫瘍サイズが６４〜２０９ｍｍ３）、平均腫瘍負荷は、併用処置群において引き下げられ、研究終了時の偏回帰について、２／１０頭の動物が完全に腫瘍フリーであり、４／１０頭の動物が継続中であった（データ示さず）。さらに、処置を非常に大きな腫瘍（サイズが１２６〜３５０ｍｍ３）に施した場合、有意なＴＧＩ（コントロール群に対して５１％、ｐ＜０．０００１）が、抗４−１ＢＢ／抗ＰＤ−１併用についてのみ観察されたが、抗ＰＤ−１／抗ＬＡＧ−３併用は効果がなかった（データ示さず）。
【０１５６】
同様に、抗４−１ＢＢ／抗ＰＤ−１併用のロバストな抗腫瘍効果が、ＭＣ３８結腸癌モデルにおいて観察された（データ示さず）。研究終了時（腫瘍移植後２１日目）、併用処置のＴＧＩは、ＰＢＳコントロールに対して６３％であった。単剤単独処置と比較した場合に抑制も有意であった（抗４−１ＢＢ単独に対してｐ＜０．０５、抗ＰＤ−１単独に対してｐ＜０．００１）。
【０１５７】
抗４−１ＢＢ／抗ＰＤ−１併用処置に必要とされる免疫細胞サブセットを決定するために、抗体を用いて、担Ｂ１６Ｆ１０マウスにおいてＣＤ４＋Ｔ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞のいずれかを、またはＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞の双方を同時に減少させた。０日目に、Ｃ５７ＢＬ／６マウスに、１×１０６のＢ１６Ｆ１０をｓ．ｃ．接種した。マウスを群あたり１０頭の動物の群に無作為化した。平均腫瘍容量は約８０ｍｍ３であった（１０日目）。以前に記載されたように（Ｂｕｔｌｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、２０１２；１３：１８８〜９５）、担Ｂ１６Ｆ１０マウスに、抗ＣＤ４（ＧＫ１．５、ＢｉｏＸｃｅｌｌ）および／または抗ＣＤ８（５３．５．８、ＢｉｏＸｃｅｌｌ）を投与した。簡潔に、１００μｇのアイソタイプコントロールＩｇＧまたは抗ＣＤ４  ｍＡｂおよび／もしくは抗ＣＤ８  ｍＡｂを、１１、１６、および２１日目にｉ．ｐ．投与した。抗４−１ＢＢ（１ｍｇ／ｋｇ）／抗ＰＤ−１（１０ｍｇ／ｋｇ）ｍＡｂを、１２、１７および２２日目に投薬した。腫瘍サイズを、１週につき２〜３回測定した。
【０１５８】
抗４−１ＢＢアゴニスト抗体＋抗ＰＤ−１アンタゴニスト抗体併用処置後の腫瘍増殖を比較した（図９）。各処置群の平均±ＳＥＭを図９に示す。ＣＤ８＋Ｔ細胞がない場合、腫瘍抑制は完全に排除された。興味深いことに、ＣＤ４＋Ｔ細胞の枯渇が、抗腫瘍活性を高めた（抗４−１ＢＢ／抗ＰＤ−１群に対してｐ＜０．０５）。これらのデータは、Ｔｒｅｇ細胞枯渇が、４−１ＢＢアゴニストの抗腫瘍活性を高めることを示す。
【０１５９】
別個の実験において、ＣＴ２６結腸腫瘍モデルにおける抗４−１ＢＢ／抗ＰＤ−１併用処置に及ぼすＣＤ４＋Ｔ細胞の枯渇の効果を評価した（図１０）。ＣＤ８＋Ｔ細胞がない場合、腫瘍抑制は完全に排除された。Ｂ１６黒色腫モデルにおけるように、ＣＤ４＋Ｔ細胞の枯渇が、抗腫瘍活性を高めた。
【０１６０】
これらの結果は、４−１ＢＢアゴニスト抗体の抗腫瘍活性を、腫瘍モデルにおいて、Ｔｒｅｇ細胞またはＣＤ４＋Ｔ細胞の枯渇によって強化することができることを実証している。
【０１６１】
材料および方法
マウス。６〜８週齢のメスＣ５７ＢＬ／６マウスを、Ｔｈｅ  Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから購入した。Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｏｆ  Ｒｉｎａｔ、Ｓｏｕｔｈ  Ｓａｎ  ＦｒａｎｃｉｓｃｏおよびＷｏｒｌｄｗｉｄｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ（ＷＲＤ）、Ｌａ  Ｊｏｌｌａ、Ｐｆｉｚｅｒ  Ｉｎｃ．によって承認されているプロトコルに従って、マウスを維持し、全ての動物実験を行った。
【０１６２】
細胞株。Ｂ１６Ｆ１０メラノーマ細胞株を、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）から購入した。ＭＣ３８結腸癌腫細胞株は、ＵＣＬＡ、Ｌｏｓ  Ａｎｇｅｌｅｓ、ＣａｌｉｆｏｒｎｉａのＡｎｔｏｎｉ  Ｒｉｂａｓ博士から好意によって提供していただいた。１０％ウシ胎児血清、２ｍＭ  Ｌ−グルタミンを補ったＤＭＥＭ培地中で、空気中５％ＣＯ２の雰囲気下で３７℃にて細胞を培養し、Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ａｎｉｍａｌ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ（ＲＡＤＩＬ）（Ｃｏｌｕｍｂｉａ、ＭＯ）にて病原体についてＩＭＰＡＣＴ試験を行った。指数増殖期に入って増殖している病原体フリー細胞を回収して、腫瘍接種に用いた。
【０１６３】
免疫療法およびフローサイトメトリー用の抗体。治療ラット抗マウス４−１ＢＢ  ｍＡｂ（クローンＭＡＢ９３７１）を、Ｒ＆Ｄ  ｓｙｓｔｅｍｓから購入した。ラット抗マウスＰＤ−１  ｍＡｂ（クローンＲＭＰ１−１４）およびラットＩｇＧ２ａアイソタイプコントロールを、ＢｉｏＸｃｅｌｌから購入した。ラット抗マウスＬＡＧ−３  ｍＡｂ（クローンｅＢｉｏＣ９Ｂ７Ｗ）を、ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅから購入した。
【０１６４】
細胞表面染色または細胞内染色に用いるモノクローナル抗体を、ＢＤ  ＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓまたはｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅから購入した。Ｔ細胞を特徴付けるのに用いたモノクローナル抗体は、ハムスター抗マウスＣＤ３ε−Ａｌｅｘａフルーア４８８（クローン１４５−２Ｃ１１）、ラット抗マウスＣＤ４−ＰｅｒＣＰ−Ｃｙ５．５（クローンＲＭ４−５）、ラット抗マウスＣＤ８α−ＡＰＣ−Ｈ７（クローン５３−６．７）、ラット抗マウスＣＤ２５−ＢＤ  Ｈｏｒｉｚｏｎ  Ｖ４５０（クローンＰＣ６１）、ハムスター抗マウスＣＤ１３７（４−１ＢＢ）−ＡＰＣ（クローン１７Ｂ５）、ハムスター抗マウスＣＤ２７９（ＰＤ−１）−ＢＤ  Ｈｏｒｉｚｏｎ  ＰＥ−ＣＦ５９４（クローンＪ４３）、ラット抗マウスＦｏｘＰ３−Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ７００（クローンＦＪＫ−１６ｓ）、ラット抗マウスＥｏｍｅｓ−ＰＥ（クローン：Ｄａｎ１１ｍａｇ）、ハムスター抗マウスＫＬＲＧ１−ＰｅｒＣＰ−Ｃｙ５．５（クローン２Ｆ１）、およびラット抗マウスＮＫ−１．１−ＰＥ−Ｃｙ７（クローンＰＫ１３６）であった。ＭＤＳＣ特徴付けのためのｍＡｂは、ラット抗マウスＣＤ４５−ＡＰＣ−Ｃｙ７（クローン３０−Ｆ１１）、ラット抗マウスＣＤ１１ｂ−Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ４８８（クローンＭ１／７０）、ラット抗マウスＬｙ−６Ｇ（Ｇｒ−１）−ＰｅｒＣＰ−Ｃｙａｎｉｎｅ５．５（クローンＲＢ６−８Ｃ５）、およびラット抗マウスＦ４／８０−ＰＥ（クローンＢＭ８）であった。ＬＩＶＥ／ＤＥＡＤ  Ｆｉｘａｂｌｅ  Ｂｌｕｅ  Ｄｅａｄ  Ｃｅｌｌ  Ｓｔａｉｎ  Ｋｉｔ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いて、生細胞を死細胞から分離した。
【０１６５】
フローサイトメトリーを用いた免疫細胞表現型タイピング。担腫瘍マウスから脾臓を回収して、氷冷ＰＢＳ中単細胞懸濁液に機械的に解離させた。脾細胞を、Ｒｅｄ  Ｂｌｏｏｄ  Ｃｅｌｌ  Ｌｙｓｉｎｇ  Ｂｕｆｆｅｒ  Ｈｙｂｒｉ−Ｍａｘ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）で処理して、赤血球を取り除き、ＰＢＳで２回洗浄し、２％ＦＢＳおよび０．９％ＮａＮ３を補ったＰＢＳ中に再懸濁させた。約１×１０６個の脾細胞のアリコートを、１０μｇ／ｍＬのマウスＢＤ  Ｆｃ  Ｂｌｏｃｋ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）と１０分間プレインキュベートしてから、表現型タイピングｍＡｂカクテルを加えて、免疫細胞を特異的に染色した。
【０１６６】
マウスｔｕｍｏｒ  ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｋｉｔおよびＧｅｎｔｌｅＭＡＣＳ  Ｄｉｓｓｏｃｉａｔｏｒを用いて、製造者の説明書（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃ）に従って、腫瘍浸潤リンパ球を調製した。
【０１６７】
細胞を４℃で３０分間インキュベートすることによって、細胞表面抗原を標識付けした。ＦｏｘＰ３／Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｓｔａｉｎｉｎｇ  Ｂｕｆｆｅｒセットを用いて、製造者のプロトコル（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）に従って、細胞内染色を実行した。ＬＳＲ  Ｆｏｒｔｅｓｓａ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を用いてフローサイトメトリーデータを取得し、ＦｌｏｗＪｏ（ＴｒｅｅＳｔａｒ  Ｉｎｃ．）を用いて分析した。
【０１６８】
インビボ腫瘍効能研究。０．１ｍｌの無血清ＤＭＥＭ培地またはＰＢＳ中１×１０６個のＢ１６Ｆ１０細胞またはＭＣ３８細胞を、Ｃ５７ＢＬ／６マウスの右脇腹に皮下接種した。腫瘍が５０〜１５４ｍｍ３のサイズに達したときに、処置を始めた。抗４−１ＢＢ（１ｍｇ／ｋｇ）、抗ＰＤ−１（１０ｍｇ／ｋｇ）、および抗ＬＡＧ−３（１０ｍｇ／ｋｇ）抗体を単独で、または併用して、５日間隔で２回、腹膜内に（ｉ．ｐ．）投与した。より大きな腫瘍（１２６〜３５０ｍｍ３の範囲）を処置する研究において、抗体を３日間隔で４回、ｉ．ｐ．付与した。キャリパーを用いて腫瘍サイズを二次元で測定し、以下の式を用いて、容量をｍｍ３で表した：Ｖ＝０．５Ｌ×Ｗ２、式中ＬおよびＷはそれぞれ、腫瘍の長径および短径である。
【実施例２】
【０１６９】
遺伝子発現プロファイリング：ヒト腫瘍においてＦＯＸＰ３  ｍＲＮＡと相関するヒト遺伝子の分析
この実施例は、ヒト腫瘍におけるＦＯＸＰ３  ｍＲＮＡとのＣＣＲ４  ｍＲＮＡの相関を示す。
【０１７０】
Ｔｈｅ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ａｔｌａｓ（ＴＣＧＡ）由来のＲＮＡ−Ｓｅｑデータを分析して、ヒト腫瘍におけるヒト遺伝子とＦＯＸＰ３  ｍＲＮＡとの相関を同定した。以下の表５は、ヒト遺伝子のリストを、３つの腫瘍型にわたって、ＦＯＸＰ３  ｍＲＮＡ（腫瘍ＲＮＡｓｅｑデータ）との平均相関係数の順に提供する。より高い相関係数値は、潜在的により高い、Ｔｒｅｇを減少させる効能を示す。太字の遺伝子は、活性化されたＴｒｅｇ細胞と関連する周知の遺伝子である。
【０１７１】
ＴＣＧＡ由来の複数の固形腫瘍ＲＮＡ−ＳｅｑデータにわたるＦＯＸＰ３との相関分析に基づいて、ＣＣＲ４を、Ｔｒｅｇ細胞を減少させる魅力的な標的として同定した。ＣＣＲ４は、ＦＯＸＰ３相関係数値が、ＨＮＳＣ腫瘍、結腸腫瘍、および直腸腫瘍においてそれぞれ０．８５７、０．８３７、および０．８５６と、比較的高い（表５）。この研究において同定された、Ｔｒｅｇ細胞を減少させるための他の標的として、以下が挙げられる：ＣＣＲ８、ＩＣＯＳ、ＴＩＧＩＴ、ＣＤ４、ＣＤ２８、ＡＲＨＧＥＦ６、ＩＫＺＦ１、ＰＴＰＲＣ、ＤＯＣＫ２、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＩＬ２１Ｒ、ＩＬ２ＲＢ、ＮＣＫＡＰ１Ｌ、ＳＬＡＭＦ１、ＩＴＧＡＬ、ＩＬ１０ＲＡ、Ｐ２ＲＹ１０、ＩＬ２ＲＡ、ＦＭＮＬ１、ＤＯＣＫ１０、ＩＴＫ、ＳＡＳＨ３、ＫＩＡＡ０７４８、ＬＣＰ２、ＴＮＦＲＳＦ９（４−１ＢＢ、ＣＤ１３７）、ＣＹＢＢおよびＣＴＬＡ４。
【０１７２】
【表５】
2017517506.tif 000006
【実施例３】
【０１７３】
遺伝子発現プロファイリング：抗ＣＣＲ４抗体の処置に適した癌型の同定
この実施例は、ヒト腫瘍におけるヒト遺伝子ｍＲＮＡとＦＯＸＰ３  ｍＲＮＡとの相関を示す。
【０１７４】
Ｔｈｅ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ａｔｌａｓ（ＴＣＧＡ）由来のＲＮＡ−Ｓｅｑデータを分析して、ヒト腫瘍におけるＣＣＲ４  ｍＲＮＡとＦＯＸＰ３  ｍＲＮＡとの、そしてＣＴＬＡ４  ｍＲＮＡとＦＯＸＰ３  ｍＲＮＡとの相関を同定した。以下の表６は、ＴＣＧＡにおいて入手可能な全ての腫瘍型にわたって、相関係数を提供する。
【０１７５】
この分析に基づいて、抗ＣＣＲ４抗体および４−１ＢＢアゴニストによる処置について示される癌型として、以下が挙げられる：頭部／頸部扁平上皮細胞癌、直腸癌、結腸癌、扁平上皮細胞肺癌、甲状腺癌、膀胱癌、黒色腫、子宮頸癌、前立腺癌、乳癌、子宮／子宮内膜癌、膵癌、肺腺癌、卵巣癌、および乳頭状腎臓癌。
【０１７６】
【表６】
2017517506.tif 000007
【実施例４】
【０１７７】
担腫瘍マウスへの抗ＣＣＲ４抗体および４−１ＢＢアゴニストの同時投与．
この実施例は、動物癌モデルにおける、４−１ＢＢアゴニストと併用した抗ＣＣＲ４抗
体処置を示す。
【０１７８】
一研究において、Ｃ５７ＢＬ６マウスに、１×１０６ＭＣ３８マウス結腸カルシノーマ細胞を皮下移植した。腫瘍増殖を監視し、腫瘍が１５０ｍｍ３の平均サイズに達したときに、動物を８頭の４群に無作為化し、アイソタイプコントロール、１ｍｇ／ｋｇのラット抗マウス４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ＃ＭＡＢ９３７１）、１０ｍｇ／ｋｇの抗マウスＣＣＲ４抗体、または二者の同時組合せを、合計２用量について、５日毎に１回、腹膜内に投薬した。キャリパーを用いて腫瘍サイズを二次元で測定し、以下の式を用いて、容量をｍｍ３で表した：Ｖ＝０．５Ｌ×Ｗ２、式中ＬおよびＷはそれぞれ、腫瘍の長径および短径である。コントロールの腫瘍サイズが１０００ｍｍ３に達したときに、研究を終了した。併用処置の効能を、４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体、抗マウスＣＣＲ４抗体、または二者の同時併用で処置した動物を比較することによって、評価した。
【実施例５】
【０１７９】
優先順位決定指標：患者の選択戦略の遂行
この実施例は、抗ＣＣＲ４抗体／４−１ＢＢアゴニスト併用処置について患者を選択する戦略を示す。
【０１８０】
抗ＣＣＲ４療法は、抗腫瘍応答を抑制するＴｒｅｇを減少させる。４−１ＢＢは、抗腫瘍Ｔ細胞活性を増幅する。先の実施例１によって実証される効果に基づいて、４−１ＢＢアゴニストと併用した抗ＣＣＲ４抗体は、いずれかの単剤よりも大きくなるように応答を高めることとなる。
【０１８１】
Ｔｒｅｇ（ＦＯＸＰ３＋）含量が高い腫瘍を、これらの研究に優先した。患者を、対となる投薬前後のフレッシュな生検における腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）の評価によって、選択した。免疫組織化学分析を行って、腫瘍浸潤Ｔ細胞の位置および活性化状態を判定した。４−１ＢＢ／ＣＣＲ４比を、ベースラインにて、そして処置後に評価した。ＣＤ４、ＣＤ８、ＦｏｘＰ３、ＰＤ−１、およびＰＤ−Ｌ１を平行して評価した。
【０１８２】
表７は、配列リスト中の配列の簡潔な記載を提供する。
【０１８３】
【表７】
2017517506.tif 000008
【実施例６】
【０１８４】
併用処置
この実施例は、抗ＣＣＲ４抗体／４−１ＢＢアゴニストによる併用処置を示す。
【０１８５】
ＰＦ−０５０８２５６６を、各サイクルの１日目に、１時間の静脈内（ＩＶ）注入剤として、４週毎に（Ｑ４Ｗ）投与した。ＰＦ−０５０８２５６６の開始用量は、１．２ｍｇ／ｋｇとなった。
【０１８６】
ＫＷ−０７６１を、１時間のＩＶ注入剤として、毎週（ＱＷ）、４週間連続で（１、８、１５、および２２日目）、続いて隔週投薬（１および１５日目）で、１ｍｇ／ｋｇの用量で与えた。
【０１８７】
薬物が同時投与される各投薬サイクルの１日目に、ＫＷ−０７６１注入を、ＰＦ−０５０８２５６６注入の完了から、そしてポストＰＦ−０５０８２５６６およびプレＫＷ−０７６１のＰＫ血液サンプルを引き抜いてから３０分（±１０分）後に始めた。
【０１８８】
本明細書中で引用される全ての参考文献が、参照によって組み入れられるがその程度は、個々の各刊行物、データベースエントリ（例えば、Ｇｅｎｂａｎｋ配列またはＧｅｎｅＩＤエントリ）、特許出願、または特許が、参照によって組み入れられることが具体的に、かつ個々に示されているのと同じである。参照による組入れのこの陳述は、個々のいずれの刊行物、データベースエントリ（例えば、Ｇｅｎｂａｎｋ配列またはＧｅｎｅＩＤエントリ）、特許出願、または特許に関する３７Ｃ．Ｆ．Ｒ．§１．５７（ｂ）（１）に従うことが出願人によって意図されており、これらはそれぞれ、たとえそのような引用が、参照による組入れに関する特別の陳述に直ぐに隣接していないとしても、３７Ｃ．Ｆ．Ｒ．§１．５７（ｂ）（２）に従って明らかに認識される。明細書内の参照による組入れに関する特別の陳述の包含は、たとえあったとしても、参照による組入れのこの大まかな陳述をいかなる形であれ弱めない。本明細書中の参考文献の引用は、参考文献が、関連する先行技術であるという承認として意図されないし、これらの刊行物または文献の内容または日付に関していかなる承認も構成しない。
【図１】
2017517506.tif 000009
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
2017517506.tif 000016
【図９】
2017517506.tif 000017
【図１０】
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【配列表】
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【国際調査報告】
2017517506.tif 000019
2017517506.tif 000020
2017517506.tif 000021