(57)【要約】  本発明は、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体、特に、抗ＩＬ１３／ＩＬ１７ＡＡ、ＡＦ及びＦＦ抗体、並びに限定するものではないが、中等度から重度の喘息及び／又は好酸球性喘息を治療するための抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体を使用する方法を含むその使用方法を提供する。【選択図】なし
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
第一の半抗体及び第二の半抗体を含む抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７抗体の有効量を患者に投与することを含む、患者において好酸球性疾患を治療する方法であって、ここで第一の半抗体はＩＬ−１７に特異的に結合する第一のＶＨ／ＶＬユニットを含み、かつ第二の半抗体はＩＬ−１３に特異的に結合する第二のＶＨ／ＶＬユニットを含み、第一のＶＨ／ＶＬユニットは、配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、配列番号４３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含み、かつ第二のＶＨ／ＶＬユニットは配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、方法。
【請求項２】
第一のＶＨ／ＶＬユニットが配列番号３９の配列に少なくとも９５％配列同一性を有するＶＨ配列及び配列番号３８の配列に少なくとも９５％配列同一性を有するＶＬ配列を含み、かつ第二のＶＨ／ＶＬユニットが配列番号１３の配列に少なくとも９５％配列同一性を有するＶＨ配列及び配列番号１４の配列に少なくとも９５％配列同一性を有するＶＬ配列を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
第一のＶＨ／ＶＬユニットが配列番号３９の配列に少なくとも９８％配列同一性を有するＶＨ配列及び配列番号３８の配列に少なくとも９８％配列同一性を有するＶＬ配列を含み、かつ第二のＶＨ／ＶＬユニットが配列番号１３の配列に少なくとも９８％配列同一性を有するＶＨ配列及び配列番号１４の配列に少なくとも９８％配列同一性を有するＶＬ配列を含む、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
第一のＶＨ／ＶＬユニットが配列番号３９の配列に少なくとも９９％配列同一性を有するＶＨ配列及び配列番号３８の配列に少なくとも９９％配列同一性を有するＶＬ配列を含み、かつ第二のＶＨ／ＶＬユニットが配列番号１３の配列に少なくとも９９％配列同一性を有するＶＨ配列及び配列番号１４の配列に少なくとも９９％配列同一性を有するＶＬ配列を含む、請求項１から３の何れか一項に記載の方法。
【請求項５】
第一のＶＨ／ＶＬユニットが、配列番号３９のＶＨ配列及び配列番号３８のＶＬ配列を含み、かつ第二のＶＨ／ＶＬユニットが、配列番号１３のＶＨ配列及び配列番号１４のＶＬ配列を含む、請求項１から４の何れか一項に記載の方法。
【請求項６】
抗体がＩｇＧ抗体である、請求項１から５の何れか一項に記載の方法。
【請求項７】
抗体がＩｇＧ１又はＩｇＧ４抗体である、請求項１から６の何れか一項に記載の方法。
【請求項８】
抗体がＩｇＧ４抗体である、請求項１から７の何れか一項に記載の方法。
【請求項９】
第一の半抗体が配列番号７２の配列を含む第一の重鎖及び配列番号７３の配列を含む第一の軽鎖を含み、かつ第二の半抗体が配列番号２１の配列を含む第二の重鎖及び配列番号２２の配列を含む第二の軽鎖を含む、請求項１から８の何れか一項に記載の方法。
【請求項１０】
好酸球性疾患が喘息である、請求項１から９の何れか一項に記載の方法。
【請求項１１】
好酸球性疾患が中等度から重度の喘息である、請求項１から１０の何れか一項に記載の方法。
【請求項１２】
喘息がコルチコステロイドで制御されない、請求項１から１１の何れか一項に記載の方法。
【請求項１３】
コルチコステロイドを患者に投与することを更に含む、請求項１から１２の何れか一項に記載の方法。
【請求項１４】
コルチコステロイドが吸入コルチコステロイドである、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
患者が、２０ｎｇ／ｍｌ以上の血清ペリオスチンレベルを有することが決定されている、請求項１から１４の何れか一項に記載の方法。
【請求項１６】
患者が、５０ｎｇ／ｍｌ以上の血清ペリオスチンレベルを有することが決定されている、請求項１から１５の何れか一項に記載の方法。
【請求項１７】
血清ペリオスチンレベルがＥＬＩＳＡにより決定される、請求項１５又は１６に記載の方法。
【請求項１８】
血清ペリオスチンレベルが、Ｅ４アッセイ又はＥＬＥＣＳＹＳ（登録商標）ペリオスチンアッセイにより決定される、請求項１５から１７の何れか一項に記載の方法。
【請求項１９】
血清ペリオスチンが総ペリオスチンある、請求項１５から１８の何れか一項に記載の方法。
【請求項２０】
患者が少なくとも１５０／μｌの血中好酸球数を有することが決定されている、請求項１から１９の何れか一項に記載の方法。
【請求項２１】
患者が少なくとも２００／μｌの血中好酸球数を有することが決定されている、請求項１から２０の何れか一項に記載の方法。
【請求項２２】
患者が少なくとも３００／μｌの血中好酸球数を有することが決定されている、請求項１から２１の何れか一項に記載の方法。
【請求項２３】
第一の半抗体及び第二の半抗体を含む多重特異性抗体であって、ここで第一の半抗体はＩＬ−１７に特異的に結合する第一のＶＨ／ＶＬユニットを含み、かつ第二の半抗体はＩＬ−１３に特異的に結合する第二のＶＨ／ＶＬユニットを含み、第一のＶＨ／ＶＬユニットは、配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、配列番号４３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含み、かつ第二のＶＨ／ＶＬユニットは配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、多重特異性抗体。
【請求項２４】
第一のＶＨ／ＶＬユニットが配列番号３９の配列に少なくとも９５％配列同一性を有するＶＨ配列及び配列番号３８の配列に少なくとも９５％配列同一性を有するＶＬ配列を含み、かつ第二のＶＨ／ＶＬユニットが配列番号１３の配列に少なくとも９５％配列同一性を有するＶＨ配列及び配列番号１４の配列に少なくとも９５％配列同一性を有するＶＬ配列を含む、請求項２３に記載の多重特異性抗体。
【請求項２５】
第一のＶＨ／ＶＬユニットが配列番号３９の配列に少なくとも９８％配列同一性を有するＶＨ配列及び配列番号３８の配列に少なくとも９８％配列同一性を有するＶＬ配列を含み、かつ第二のＶＨ／ＶＬユニットが配列番号１３の配列に少なくとも９８％配列同一性を有するＶＨ配列及び配列番号１４の配列に少なくとも９８％配列同一性を有するＶＬ配列を含む、請求項２３又は２４に記載の多重特異性抗体。
【請求項２６】
第一のＶＨ／ＶＬユニットが配列番号３９の配列に少なくとも９９％配列同一性を有するＶＨ配列及び配列番号３８の配列に少なくとも９９％配列同一性を有するＶＬ配列を含み、かつ第二のＶＨ／ＶＬユニットが配列番号１３の配列に少なくとも９９％配列同一性を有するＶＨ配列及び配列番号１４の配列に少なくとも９９％配列同一性を有するＶＬ配列を含む、請求項２３から２５の何れか一項に記載の多重特異性抗体。
【請求項２７】
第一のＶＨ／ＶＬユニットは、配列番号３９のＶＨ配列及び配列番号３８のＶＬ配列を含み、かつ第二のＶＨ／ＶＬユニットは、配列番号１３のＶＨ配列及び配列番号１４のＶＬ配列を含む、請求項２３から２６の何れか一項に記載の多重特異性抗体。
【請求項２８】
抗体がＩｇＧ抗体である、請求項２３から２７の何れか一項に記載の多重特異性抗体。
【請求項２９】
抗体がＩｇＧ１又はＩｇＧ４抗体である、請求項２３から２８の何れか一項に記載の多重特異性抗体。
【請求項３０】
抗体がＩｇＧ４抗体である、請求項２３から２９の何れか一項に記載の多重特異性抗体。
【請求項３１】
第一の半抗体が配列番号７２の配列を含む第一の重鎖及び配列番号７３の配列を含む第一の軽鎖を含み、かつ第二の半抗体が配列番号２１の配列を含む第二の重鎖及び配列番号２２の配列を含む第二の軽鎖を含む、請求項２３から３０の何れか一項に記載の多重特異性抗体。
【請求項３２】
（ａ）請求項２３から３１の何れか一項に記載の多重特異性抗体；
（ｂ）請求項２３から３１の何れか一項に記載の多重特異性抗体の第一のＶＨ／ＶＬユニット；又は
（ｃ）請求項２３から３１の何れか一項に記載の多重特異性抗体の第二のＶＨ／ＶＬユニット
をコードする単離された核酸。
【請求項３３】
請求項３２に記載の核酸を含む宿主細胞。
【請求項３４】
宿主細胞が原核細胞、好ましくは大腸菌細胞である、請求項３３に記載の宿主細胞。
【請求項３５】
宿主細胞が真核細胞、好ましくはＣＨＯ細胞である、請求項３３に記載の宿主細胞。
【請求項３６】
宿主細胞が大腸菌細胞である、請求項３３又は３４に記載の宿主細胞。
【請求項３７】
抗体を生成するのに十分な条件下で請求項３３から３６の何れか一項に記載の宿主細胞を培養することを含む、抗体を生成する方法。
【請求項３８】
抗体を回収する工程を更に含む、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
ａ）配列番号１０７の配列；
ｂ）配列番号１０８の配列；又は
ｃ）（ａ）の配列及び（ｂ）の配列
を含む単離された核酸。
【請求項４０】
ａ）配列番号１０５の配列；
ｂ）配列番号１０６の配列；又は
ｃ）（ａ）の配列及び（ｂ）の配列
を含む単離された核酸。
【請求項４１】
ａ）配列番号１０３の配列；
ｂ）配列番号１０４の配列；又は
ｃ）（ａ）の配列及び（ｂ）の配列
を含む単離された核酸。
【請求項４２】
ａ）配列番号９９又は１０１の配列；
ｂ）配列番号１００又は１０２の配列；又は
ｃ）（ａ）の配列及び（ｂ）の配列
を含む単離された核酸。
【請求項４３】
請求項３９又は４１に記載の核酸を含む宿主細胞。
【請求項４４】
請求項４０又は４２に記載の核酸を含む宿主細胞。
【請求項４５】
配列番号１０７又は１０３の配列を含む第一の核酸及び配列番号１０８又は１０４の配列を含む第二の核酸を含む宿主細胞であって、ここで第一の核酸及び第二の核酸が同じ核酸分子又は異なる核酸分子に含まれる、宿主細胞。
【請求項４６】
配列番号１０５、９９又は１０１の配列を含む第一の核酸及び配列番号１０６、１００又は１０２の配列を含む第二の核酸を含む宿主細胞であって、ここで第一の核酸及び第二の核酸が同じ核酸分子又は異なる核酸分子に含まれる、宿主細胞。
【請求項４７】
宿主細胞が原核細胞である、請求項４３から４６の何れか一項に記載の宿主細胞。
【請求項４８】
宿主細胞が真核細胞、好ましくはＣＨＯ細胞である、請求項４３から４６の何れか一項に記載の宿主細胞。
【請求項４９】
宿主細胞が大腸菌細胞である、請求項４７に記載の宿主細胞。
【請求項５０】
半抗体又は多重特異性抗体を生成するのに十分な条件下で請求項４３から４９の何れか一項に記載の宿主細胞を培養することを含む、半抗体又は多重特異性抗体を生成する方法。
【請求項５１】
半抗体又は多重特異性抗体を回収することを更に含む、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
（ｉ）第一の半抗体を生成するのに十分な条件下で、配列番号９９、１０１又は１０５の配列を含む第一の核酸及び配列番号１０６、１００又は１０２の配列を含む第二の核酸を含む宿主細胞を培養すること（第一の核酸及び第二の核酸は同じ核酸分子又は異なる核酸分子に含まれる）、及び（ｉｉ）第二の半抗体を生成するのに十分な条件下で、配列番号１０７又は１０３の配列を含む第一の核酸及び配列番号１０８又は１０４の配列を含む第二の核酸を含む第二の宿主細胞を培養すること（第一の核酸及び第二の核酸は同じ核酸分子又は異なる核酸分子に含まれる）を含む、多重特異性抗体を生成する方法。
【請求項５３】
第一の半抗体を回収すること及び第二の半抗体を回収することを含む、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
多重特異性抗体を生成するのに十分な条件下で、第一の半抗体及び第二の半抗体を含む混合物を形成することを含む、請求項５２又は５３に記載の方法。
【請求項５５】
多重特異性抗体を回収する工程を更に含む、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
（ａ）第一の半抗体を生成するのに十分な条件下で、配列番号１０５、９９又は１０１の配列を含む第一の核酸及び配列番号１０６、１００又は１０２の配列を含む第二の核酸を含む宿主細胞を培養すること（第一の核酸及び第二の核酸は同じ核酸分子又は異なる核酸分子に含まれる）、及び（ｂ）第二の半抗体を生成するのに十分な条件下で、配列番号１０７又は１０３の配列を含む第一の核酸及び配列番号１０８又は１０４の配列を含む第二の核酸を含む第二の宿主細胞を培養すること（第一の核酸及び第二の核酸は同じ核酸分子又は異なる核酸分子に含まれる）；（ｃ）第一の半抗体を回収すること及び第二の半抗体を回収すること；及び（ｄ）多重特異性抗体を生成するのに十分な条件下で、第一の半抗体及び第二の半抗体を含む混合物を形成することを含む、多重特異性抗体を生成する方法。
【請求項５７】
多重特異性抗体を回収する工程を更に含む、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
請求項３７又は３８及び５０から５７の何れか一項に記載の方法により生成される多重特異性抗体。
【請求項５９】
請求項２３から３１及び５８の何れか一項に記載の抗体並びに細胞傷害性薬物を含むイムノコンジュゲート。
【請求項６０】
請求項２３から３１及び５８の何れか一項に記載の抗体並びに薬学的に許容可能な担体を含む薬学的製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願への相互参照
この出願は、３５ Ｕ．Ｓ．Ｃ． １１９のもとで、２０１４年２月２１日に出願された米国仮出願シリアル番号６１／９４２８２３及び２０１４年４月２４日に出願された６１／９８３９４５の利益を主張する。仮出願の各々の内容は、その全体が参照により本明細書に援用される。
【０００２】
配列表
本出願は、ＥＦＳ−Ｗｅｂ経由で提出された配列表を含み、その全体が参照することにより本明細書に援用される。２０１５年２月１９日に作成された前記ＡＳＣＩＩコピーはＰ５７０７Ｒ１−ＷＯ＿ＳＬ．ｔｘｔと命名され、大きさは２２６３２９バイトである。
【０００３】
分野
本発明は、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体、二重特異性抗体を含む組成物及びそれらを使用する方法に関する。
【０００４】
背景
喘息は世界的に発生率が増加している複雑な病気である。他の発症のなかで、喘息患者の気道内における好酸球性炎症が報告されている。疾患の病態生理は、可変気道閉塞、気道炎症、粘液過分泌、及び上皮下線維症によって特徴付けられる。臨床的には、患者は咳、喘鳴、及び息切れを示し得る。多くの患者が現在利用可能な治療法で十分に治療されているが、幾人かの喘息患者は、今日の治療法の使用にもかかわらず、持続的な疾患を持っている。
【０００５】
多くの研究が、喘息及びアレルギーの病因におけるＩＬ−１３及びその受容体に関係している（例えば、Wills-Karp, 2004, Immunol. Rev. 202, 175-190; Brightling et al., 2010, Clin. Exp. Allergy 40, 42-49; Finkelman et al., 2010, J Immunol 184, 1663-1674; Maes et al., 2012, Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 47, 261-270; Steinke and Borish, 2001, Respir. Res. 2, 66-70）。ＩＬ−１３は、２つの受容体に結合し、一つは、ＩＬ−４受容体アルファ（ＩＬ−４Ｒα）とＩＬ−１３受容体アルファ１（ＩＬ−１３Ｒα１）のヘテロダイマーであり、他方はＩＬ−１３受容体アルファ２（ＩＬ−１３Ｒα２）からなる一本鎖受容体である。ＩＬ−１３及びＩＬ−４Ｒα遺伝子の多型は、ＩｇＥレベル、アトピーの有病率、及び喘息の疾患の重症度などの特徴を含む、喘息及びアレルギーに関連している。更に、ＩＬ−１３及びその受容体の発現は、喘息及び他のアレルギー疾患において増加している。また、ＩＬ−１３及びその受容体の中和又は欠乏は、喘息の前臨床モデルにおいて疾患を改善する。
【０００６】
喘息を治療するため、多くの薬物が売りに出されているか又は開発中である。喘息治療のための数多くの標的の一つは、ＩＬ−１３である。ＩＬ−１３は、活性化Ｔ細胞、ＮＫＴ細胞、好塩基球、好酸球、及び肥満細胞により産生される多面的ＴＨ２サイトカインであり、前臨床モデルにおいて喘息の病因に強く関係している。ＩＬ−１３、抗ＩＬ−１３抗体を含むアンタゴニストは、以前に記載されている。例えば、国際特許出願番号ＷＯ２００５／０６２９６７を参照。かかる抗体は、ヒト治療薬として開発されてきた。最近、幾つかの研究は、喘息の治療におけるＩＬ−１３に対するモノクローナル抗体の臨床活性を示している（例えば、Corren et al., 2011, N. Engl. J. Med. 365, 1088-1098; Gauvreau et al., 2011, Am. J. Respir. Crit. Care Med. 183, 1007-1014; Ingram and Kraft, 2012, J. Allergy Clin. Immunol. 130, 829-42; Webb, 2011, Nat Biotechnol 29, 860-863を参照）。これらのうち、ＩＬ−１３活性を中和するヒト化ＩｇＧ４抗体であるレブリキズマブ（ｌｅｂｒｉｋｉｚｕｍａｂ）は、大多数において吸入コルチコステロイド及び長時間作用型β２−アドレナリン受容体アゴニストによる治療にもかかわらず症候性であった喘息患者で肺機能を改善した（Corren et al., 2011, N. Engl. J. Med. 365, 1088-1098）。
【０００７】
増えている証拠は、喘息は複数の経路を関与させ得る不均一な疾患であることが示されている。例えば、ＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆの発現は、重度の喘息に関連することが見出された。加えて、ＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆの両方が、ヒト及びヒト疾患のマウスモデルにおける様々な炎症性及び自己免疫疾患の進行及び病理に対する寄与因子として関与している具体的には、ＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆは炎症反応を誘発し、これによって多数の自己炎症疾患に寄与する、主要なエフェクターサイトカインとして関与している。
【０００８】
ＩＬ−１７Ａ（もともとＣＴＬＡ−８と命名され、ときにはその分野でＩＬ−１７と称される）は、サイトカインのＩＬ−１７ファミリーの原型／創立メンバーである。ＩＬ−１７Ａに加えて、ＩＬ−１７サイトカインファミリーのメンバーは、現在、保存されたＣ末端領域を共有するが、それらのＮ末端セグメントが異なるタンパク質、ＩＬ−１７Ｂ、ＩＬ−１７Ｃ、ＩＬ−１７Ｄ、ＩＬ−１７Ｅ（ＩＬ−２５とも呼ばれる）及びＩＬ−１７Ｆを含む。
【０００９】
ＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆは、配列及び生物学的特性の両方の点において、ファミリーのうち二つの最も密接に関連したメンバーである。ＩＬ−１７Ｆは、アミノ酸レベルでＩＬ−１７Ａと５５％の配列同一性を共有する。ＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆの両方とも、ジスルフィド結合されたホモ二量体として、又はヘテロダイマーとして分泌され、それらはＩＬ−１７ＲＡ及びＩＬ−１７ＲＣからなるヘテロ二量体受容体を介してシグナル伝達する。ＩＬ−１７受容体は種々のＴ細胞サブセット（例えば、Ｔｈ１７ ＣＤ４＋ Ｔ細胞など）上に発現される。
【００１０】
ＩＬ−１７は、喘息において役割を果たし得るという提言にもかかわらず、気道過敏性におけるＩＬ−１７Ａホモ二量体、ＩＬ−１７Ｆホモ二量体又はＩＬ−１７Ａ／Ｆヘテロ二量体の個々の寄与は不明なままである。McKinley et al., 2008, J. Immunol., 181:4089．喘息を治療するためのＩＬ−１７経路を標的とする治療アンタゴニスト抗体の臨床試験は陰性の結果をもたらしている。例えば、Ｋｉｒｓｔｅｎらは、治療用抗ＩＬ−１７Ａ抗体は、開発の初期段階で抗炎症薬の安全性と有効性を試験するための好中球性気道炎症のモデルである、健常ボランティアにおいて、オゾン誘発性の気道好中球増加症に対する治療効果を示すことができなかったことを報告した。Kirsten et al. 2013, European Respiratory Journal, 41:239, Scheerens et al., 2013, Clinical & Experimental Allergy 44:38-46．更に、最近の臨床試験の結果は、治療用抗ＩＬ−１７ＲＡヒト抗体ブロダルマブは、無作為化、二重盲検、プラセボ対照試験において、中等度から重度の喘息を有する被験体において治療効果を生みださないことを示した。Busse et al., 2013, Am. J. Respir. Crit. Care Med. 188:1294-1302を参照。最近の臨床レビュー記事は、同じブロダルマブの試験に言及し、血液の好中球又は好酸球の存在によるサブ表現型検査でさえ、応答者のグループをより良好に同定しなかったことを報告した。Fajt et al., J. Allergy Clin. Immunology, 2014, 135:299．ＩＬ−１７ＲＡは、ＩＬ−１７ＡＡ、ＦＦ及びＡＦヘテロ二量体の受容体成分だけでなく、ＴＨ２炎症において重要な役割を果たし、ＩＬ−１３発現を誘導するＩＬ−２５の受容体成分でもある。Tamachi et al. 2006, Intl. Archives Allergy and Imunol. 140 (suppl 1):59を参照。従って、ＩＬ−１７Ａ及びＦ経路の遮断は、喘息の有効な治療をもたらすことができるかどうかは不明である。
【００１１】
国際公開第２０１３／１０２０４２号は、ＩＬ−１３及びＩＬ−１７Ａを標的とする幾つかの二重可変ドメイン（ＤＶＤ）抗体を記載しており、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７ ＤＶＤ抗体の親和性及びインビトロ中和活性を特徴付けている。国際公開第２０１３／１０２０４２号は、ＤＶＤ二重特異性抗体は、様々な疾患、例えば、感染性疾患、自己免疫疾患、喘息、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、多発性硬化症、敗血症、神経疾患、脊髄損傷、及び腫瘍性疾患を治療するために使用することができることを提案している。しかし、前臨床的結果又は臨床的有効性は、これらの疾患において、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７ＤＶＤ抗体の何れか一を使用するか、又はＩＬ−１３及びＩＬ−１７の両方を標的とする概念を証明するかのどちらによっても実証されていない。
【００１２】
従って、中等度から重度の喘息患者は、代替治療の選択肢をなお必要としている。従って、喘息を治療するためのより良好な治療及び喘息患者を治療する方法を理解するための改良された方法を同定するための必要がある。
【００１３】
気道特発性肺線維症（ＩＰＦ）における別の炎症性疾患は、肺実質の進行間質性線維症によって特徴づけられる拘束性肺疾患であり、米国では約１０万人の患者に影響を及ぼしている（Raghu et al., Am J Respir Crit Care Med 174:810-816 (2006)）。ＩＰＦに関連したこの間質性線維症は、肺機能の進行性の喪失につながり、ほとんどの患者で呼吸不全に起因する死に至る。診断時からの生存期間の中央値は２−３年である（Raghu et al., Am J Respir Crit Care Med 183:788-824 (2011)）。ＩＰＦの病因並びに鍵となる分子及び病態生理学的なドライバーは不明である。ＩＰＦ患者における生存率を延長することが示された唯一の治療法は肺移植である（Thabut et al., Annals of internal medicine 151:767-774 (2009)）。しかし、肺移植はかなりの病的状態と関連している。更に、全てのＩＰＦ患者がそれに適した候補ではなく、かつ適切なドナー肺の相対的な不足がある。多数の試みにもかかわらず、現在までの薬物療法は、ＩＰＦ患者における無作為化プラセボ対照介入試験において、幾つかの介入は、一部の患者における肺機能低下の速度を遅くするように見えるものの、生存期間を延長することが示されていない（Raghu et al., Am J Respir Crit Care Med 183:788-824 (2011); Richeldi et al., The New England J. of Med. 365:1079-1087 (2011)）。
【００１４】
ＩＰＦの患者は、代替治療の選択肢をなお必要としている。従って、ＩＰＦを治療するためのより良好な治療及びＩＰＦ患者を治療する方法を理解するための改良された方法を同定するための必要がある。
【００１５】
本明細書に引用される全ての参考文献は、特許出願及び刊行物を含み、任意の目的のためにその全体が本明細書において参照により援用される。
【発明の概要】
【００１６】
要旨
一態様において、本発明は、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７多重特異性抗体、特に、ＩＬ−１３及びＩＬ−１７ＡＡ、ＡＦ及びＦＦに結合し、阻害する二重特異性抗体を用いた治療方法並びにその抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７多重特異性抗体を提供する。本明細書に記載される本発明は、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体を使用する改善された喘息の治療法の発見に一部基づいている。ある実施態様では、喘息は、好酸球性喘息である。ある実施態様において、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体は、野生型完全長抗体フォーマットを保持するが、二重特異性抗体が各標的への一価結合剤であるという点で、野生型の単一特異性二価抗体とは異なる。しかし、親の単一特異性二価抗体のそれぞれに比較して、二重特異性抗体は、各標的に関して同等の親和性及び効力を維持する。ある実施態様において、本発明はまた、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体は、本明細書で更に記述されるように作成することが困難であったという驚くべき知見に関する。
【００１７】
本発明の一態様において、本明細書に記載される抗体は、医薬として使用のために提供される。幾つかの実施態様において、本明細書に記載される抗体は、好酸球性疾患、ＩＬ−１３媒介性疾患、ＩＬ−１７媒介性疾患及び／又は呼吸器疾患の治療のための医薬の調製において使用のために提供される。幾つかの実施態様において、本明細書に記載される抗体は、好酸球性疾患、ＩＬ−１３媒介性疾患、ＩＬ−１７媒介性疾患及び／又は呼吸器疾患の治療において使用のために提供される。幾つかの実施態様において、好酸球性疾患、ＩＬ−１３媒介性疾患、ＩＬ−１７媒介性疾患及び／又は呼吸器疾患の治療のための医薬の製造における本明細書に記載される抗体の使用が提供される。幾つかの実施態様において、本明細書に記載される抗体の有効量を個体に投与することを含む、好酸球性疾患、ＩＬ−１３媒介性疾患、ＩＬ−１７媒介性疾患及び／又は呼吸器疾患を治療する方法が提供される。ある実施態様において、本明細書に記載される抗体は、好酸球性疾患及び好中球性疾患の治療において使用のために提供される。ある実施態様において、本明細書に記載される抗体は、好酸球性喘息、好中球性疾患、好酸球性及び好中球性喘息、混合型喘息及び／又は混合型顆粒球性喘息の治療において使用のために提供される。ある実施態様において、本明細書に記載の抗体の有効量を、それを必要とする個体に投与することを含む、好酸球性疾患及び好中球性疾患を治療する方法が提供される。ある実施態様において、本明細書に記載の抗体の有効量を、それを必要とする個体に投与することを含む、好酸球性喘息、好中球性疾患、好酸球性及び好中球性喘息、混合型喘息及び／又は混合型顆粒球性喘息を治療する方法が提供される。
【００１８】
ある実施態様において、好酸球性炎症又は疾患に罹患している患者は、一以上の好酸球シグネチャー遺伝子の上昇したレベルを示し得る。ある実施態様において、患者は、対照と比較して、上昇した血清ペリオスチンレベル及び／又はＣＳＦ１（マクロファージコロニー刺激因子１（ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ  ｃｏｌｏｎｙ  ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ  ｆａｃｔｏｒ  １）、Ｅｎｔｒｅｚ  ＩＤ  １４３５）、ＭＥＩＳ２（Ｍｅｉｓ  ホメオボックス  ２（Ｍｅｉｓ  ｈｏｍｅｏｂｏｘ  ２）、Ｅｎｔｒｅｚ  ＩＤ  ４２１２）、ＬＧＡＬＳ１２（レクチン、ガラクトシド結合、可溶性、１２（ｌｅｃｔｉｎ、ｇａｌａｃｔｏｓｉｄｅ−ｂｉｎｄｉｎｇ、ｓｏｌｕｂｌｅ、１２）、Ｅｎｔｒｅｚ  ＩＤ  ８５３２９）、ＩＤＯ１（インドールアミン２，３−ジオキシゲナーゼ１（ｉｎｄｏｌｅａｍｉｎｅ  ２，３−ｄｉｏｘｙｇｅｎａｓｅ  １）、Ｅｎｔｒｅｚ  ＩＤ  ３６２０）、ＴＨＢＳ４（トロンボスポンジン４（ｔｈｒｏｍｂｏｓｐｏｎｄｉｎ  ４）、Ｅｎｔｒｅｚ  ＩＤ  ７０６０）、ＯＬＩＧ２（オリゴデンドロサイト系譜転写因子２（ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅ  ｌｉｎｅａｇｅ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  ｆａｃｔｏｒ  ２）、Ｅｎｔｒｅｚ  ＩＤ  １０２１５）、ＡＬＯＸ１５（アラキドン酸１５−リポキシゲナーゼ（ａｒａｃｈｉｄｏｎａｔｅ  １５−ｌｉｐｏｘｙｇｅｎａｓｅ）、Ｅｎｔｒｅｚ  ＩＤ  ２４６）、ＳＩＧＬＥＣ８（シアル酸結合Ｉｇ様レクチン８（ｓｉａｌｉｃ  ａｃｉｄ  ｂｉｎｄｉｎｇ  Ｉｇ−ｌｉｋｅ  ｌｅｃｔｉｎ  ８）、Ｅｎｔｒｅｚ  ＩＤ  ２７１８１）、ＣＣＬ２３（ケモカイン（Ｃ−Ｃモチーフ）リガンド２３（ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ（Ｃ−Ｃ  ｍｏｔｉｆ） ｌｉｇａｎｄ  ２３）、Ｅｎｔｒｅｚ  ＩＤ  ６３６８）、ＰＹＲＯＸＤ２（ピリジンヌクレオチド−ジスルフィド酸化還元酵素ドメイン２（ｐｙｒｉｄｉｎｅ  ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ−ｄｉｓｕｌｐｈｉｄｅ  ｏｘｉｄｏｒｅｄｕｃｔａｓｅ  ｄｏｍａｉｎ  ２）、Ｅｎｔｒｅｚ  ＩＤ  ８４７９５）、ＨＳＤ３Ｂ７（ヒドロキシ−デルタ−５−ステロイドデヒドロゲナーゼ、３ベータ−ステロイドデルタイソメラーゼ７（ｈｙｄｒｏｘｙ−ｄｅｌｔａ−５−ｓｔｅｒｏｉｄ  ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ、３  ｂｅｔａ−  ａｎｄ  ｓｔｅｒｏｉｄ  ｄｅｌｔａ−ｉｓｏｍｅｒａｓｅ  ７）、Ｅｎｔｒｅｚ  ＩＤ  ８０２７０）、ＳＯＲＤ（ソルビトール脱水素酵素（ｓｏｒｂｉｔｏｌ  ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ）、Ｅｎｔｒｅｚ  ＩＤ  ６６５２）、ＡＳＢ２（ａｎｋｙｒｉｎ  ｒｅｐｅａｔ  ａｎｄ  ＳＯＣＳ  ｂｏｘ  ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ２、Ｅｎｔｒｅｚ  ＩＤ  ５１６７６）、ＣＡＣＮＧ６（カルシウムチャネル、電位依存性、γサブユニット６（ｃａｌｃｉｕｍ  ｃｈａｎｎｅｌ、ｖｏｌｔａｇｅ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ、ｇａｍｍａ  ｓｕｂｕｎｉｔ  ６）、Ｅｎｔｒｅｚ  ＩＤ  ５９２８５）、ＧＰＲ４４（Ｇタンパク質共役型受容体４４（Ｇ ｐｒｏｔｅｉｎ−ｃｏｕｐｌｅｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ４４）、Ｅｎｔｒｅｚ  ＩＤ  １１２５１）、ＭＧＡＴ３（マンノシル（ベータ１，４−）−糖タンパク質β−１，４−Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ（ｍａｎｎｏｓｙｌ（ｂｅｔａ−１，４−）−ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ  ｂｅｔａ−１，４−Ｎ−ａｃｅｔｙｌｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ）、Ｅｎｔｒｅｚ  ＩＤ  ４２４８）、ＳＬＣ４７Ａ１（溶質キャリアファミリー４７、メンバー１（ｓｏｌｕｔｅ  ｃａｒｒｉｅｒ  ｆａｍｉｌｙ  ４７、ｍｅｍｂｅｒ  １）、Ｅｎｔｒｅｚ  ＩＤ  ５５２４４）、ＳＭＰＤ３（スフィンゴミエリンホスホジエステラーゼ３、中性膜（ｓｐｈｉｎｇｏｍｙｅｌｉｎ  ｐｈｏｓｐｈｏｄｉｅｓｔｅｒａｓｅ  ３、ｎｅｕｔｒａｌ  ｍｅｍｂｒａｎｅ）、Ｅｎｔｒｅｚ  ＩＤ  ５５５１２）、ＣＣＲ３（ケモカイン（Ｃ−Ｃモチーフ）受容体３（ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ（Ｃ−Ｃ ｍｏｔｉｆ） ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ３）、Ｅｎｔｒｅｚ  ＩＤ  １２３２）、ＣＬＣ（シャルコー・ライデン結晶タンパク質（Ｃｈａｒｃｏｔ−Ｌｅｙｄｅｎ  ｃｒｙｓｔａｌ  ｐｒｏｔｅｉｎ）、Ｅｎｔｒｅｚ  ＩＤ  １１７８）、ＣＹＰ４Ｆ１２（チトクロームＰ４５０、ファミリー４、サブファミリーＦ、ポリペプチド１２（ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ  Ｐ４５０、ｆａｍｉｌｙ  ４、ｓｕｂｆａｍｉｌｙ  Ｆ、ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ  １２）、Ｅｎｔｒｅｚ  ＩＤ  ６６００２）、及びＡＢＴＢ２（ａｎｋｙｒｉｎ  ｒｅｐｅａｔ  ａｎｄ  ＢＴＢ（ＰＯＺ）  ｄｏｍａｉｎ  ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ２、Ｅｎｔｒｅｚ  ＩＤ  ２５８４１）から選択される一以上の上昇したレベルを示す好酸球性炎症陽性（ＥＩＰ）患者として同定される。代替的に又は付加的に、患者は、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、好中球エラスターゼ、又はＣＥＡＣＡＭ６などの好中球シグネチャー遺伝子の一以上のレベルの上昇を示し得る。従って、ある実施態様において、本明細書において提供される方法は、患者において、血清ペリオスチンの及び／又は好中球シグネチャー遺伝子の一以上又は好酸球シグネチャー遺伝子の一以上のレベルを測定する工程を更に含む。ある実施態様において、本明細書で提供される方法は、患者において、血清ペリオスチンのレベルを測定する工程を更に含む。ある実施態様において、血清ペリオスチンは総ペリオスチンある。ある実施態様において、本明細書で提供される方法は、患者において、血中好酸球数を測定する工程を更に含む。ある実施態様において、本明細書で提供される方法は、患者において、好中球数を測定する工程を更に含む。
【００１９】
幾つかの実施態様において、方法は、ＴＨ２経路阻害剤を個体に投与することを更に含む。幾つかの実施態様において、ＴＨ２経路阻害剤は、ＩＴＫ、ＢＴＫ、ＩＬ−９、ＩＬ−５、ＩＬ−１３、ＩＬ−４、ＯＸ４０Ｌ、ＴＳＬＰ、ＩＬ−２５、ＩＬ−３３、ＩｇＥ、ＩＬ−９受容体、ＩＬ−５受容体、ＩＬ−４受容体アルファ、ＩＬ−１３受容体アルファ１（ＩＬ−１３Ｒα１）、ＩＬ−１３受容体アルファ２（ＩＬ−１３Ｒα２）、ＯＸ４０、ＴＳＬＰ−Ｒ、ＩＬ−７Ｒアルファ、ＩＬ−１７ＲＢ、ＳＴ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＲＴＨ２、ＦｃイプシロンＲＩ、ＦｃイプシロンＲＩＩ／ＣＤ２３、Ｆｌａｐ、Ｓｙｋキナーゼ；ＣＣＲ４、ＴＬＲ９、ＣＣＲ３、ＩＬ５、ＩＬ３、及びＧＭ−ＣＳＦから選択される少なくとも一の標的を阻害する。幾つかの実施態様において、方法は、ＴＨ１７経路阻害剤を個体に投与することを更に含む。幾つかの実施態様において、ＴＨ１７経路阻害剤は、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＩＬ−１７Ａホモ二量体、ＩＬ−１７Ｆホモ二量体、ＩＬ−１７ＡＦヘテロ二量体、ＩＬ−２２、ＩＬ−２１、ＴＧＦ−β、ＩＬ−２３、ＩＬ−２６、ＩＬ−１β受容体、ＩＬ−６受容体、ＩＬ−１７受容体、ＩＬ−１７ＲＡ、ＩＬ−１７ＲＣ、ＩＬ−２２Ｒ１、ＩＬ１０Ｒ２、ＩＬ−２１受容体、ＴＧＦ−β受容体、ＩＬ−２６受容体及びＩＬ−２３受容体（ＩＬ−１２Ｒｂ１、ＩＬ２３Ｒ）から選択される少なくとも一の標的を阻害する。幾つかの実施態様において、中等度から重度の喘息を治療する方法が提供される。幾つかの実施態様において、特発性肺線維症を治療する方法が提供される。ある実施態様において、アトピー性皮膚炎を治療する方法が提供される。幾つかの実施態様において、血清ペリオスチンを有する個体を治療する方法が提供される。幾つかの実施態様において、ペリオスチンが高い喘息を治療する方法が提供される。
【００２０】
本明細書に記載される実施態様の何れかにおいて、好酸球性疾患は、喘息（アスピリン感受性の喘息を含む）、アトピー性喘息、アトピー性皮膚炎、アレルギー性鼻炎（季節性アレルギー性鼻炎を含む）、非アレルギー性鼻炎、喘息、重度の喘息、慢性好酸球性肺炎、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症、セリアック病、チャーグ・ストラウス症候群（結節性動脈周囲炎プラスアトピー）、好酸球性筋痛症候群、好酸球増多症候群、突発性血管浮腫を含む浮腫反応、蠕虫感染症、オンコセルカ皮膚炎、及び好酸球性食道炎、好酸球性胃炎、好酸球性胃腸炎、好酸球性腸炎、好酸球性大腸炎、鼻のミクロポリープ症及びポリポーシス、アスピリン不耐症、喘息及び閉塞性睡眠時無呼吸症候群、慢性喘息、クローン病、強皮症及び心内膜心筋線維症、がん（例えば、神経膠芽腫（例えば多形神経膠芽腫）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ））、アトピー性皮膚炎、アレルギー性鼻炎、喘息、線維症、炎症性腸疾患、肺線維症（硬化症に対する二特発性肺線維症（ＩＰＦ）及び肺線維症を含む）、ＣＯＰＤ、及び肝線維症から選択され得る。幾つかの実施態様において、ＩＬ−１３媒介性疾患は、アトピー性皮膚炎、アレルギー性鼻炎、喘息、線維症、炎症性腸疾患、クローン病、呼吸器疾患、肺の炎症性疾患、肺線維症、特発性肺線維症（ＩＰＦ）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肝線維症、がん、神経膠芽腫、及び非ホジキンリンパ腫から選択される。幾つかの実施態様において、好中球性疾患又はＩＬ−１７媒介性疾患は、アトピー性皮膚炎、アレルギー性鼻炎、喘息、線維症、炎症性腸疾患、クローン病、肺の炎症性疾患、肺線維症、特発性肺線維症（ＩＰＦ）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肝線維症、呼吸器疾患、がん、神経膠芽腫、及び非ホジキンリンパ腫から選択され得る。本明細書に記載される実施態様の何れかにおいて、呼吸器疾患は、喘息、アレルギー性喘息、非アレルギー性喘息、気管支炎、慢性気管支炎、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肺気腫、タバコ誘発性肺気腫、気道炎症、嚢胞性線維症、肺線維症、アレルギー性鼻炎、及び気管支拡張症から選択され得る。
【００２１】
幾つかの実施態様において、本明細書に記載される多重特異性抗体は、喘息又は呼吸器疾患の治療において使用のために提供される。幾つかの実施態様において、喘息は中等度から重度の喘息である。ある実施態様では、喘息は、ＴＨ２が高い喘息である。ある実施態様では、喘息は、Ｔｈ２駆動型喘息である。他のある実施態様では、喘息は、好酸球性喘息である。ある実施態様では、喘息は、アレルギー性喘息である。幾つかの実施態様において、個体は好酸球性炎症陽性（ＥＩＰ）であると決定されている。ある実施態様において、個体は、対照又は基準レベルと比較して、好酸球シグネチャー遺伝子の少なくとも一の上昇したレベルを有すると決定されている。ある実施態様では、喘息は、ペリオスチンが高い喘息である。ある実施態様では、喘息は、好酸球が高い喘息である。幾つかの実施態様において、個体は、高血清ペリオスチンを有する。ある実施態様において、個体は、１８歳以上である。ある実施態様において、個体は、対照又は基準レベルと比較して、血清ペリオスチンの上昇したレベルを有すると決定されている。ある実施態様において、個体は、２０ｎｇ／ｍｌ以上の血清ペリオスチンを有すると決定されている。ある実施態様において、個体は、２５ｎｇ／ｍｌ以上の血清ペリオスチンを有すると決定されている。ある実施態様において、個体は、５０ｎｇ／ｍｌ以上の血清ペリオスチンを有すると決定されている。ある実施態様において、血清ペリオスチンの対照又は基準レベルは、２０ｎｇ／ｍｌ、２５ｎｇ／ｍｌ又は５０ｎｇ／ｍｌである。ある実施態様において、血清ペリオスチンは総ペリオスチンある。ある実施態様において、個体は、対照又は基準の計数又はレベルと比較して、血中好酸球数の上昇したレベルを有すると決定されている。ある実施態様において、個体は、対照又は基準の計数又はレベルと比較して、上昇した喀痰好酸球数を有すると決定されている。ある実施態様において、個体は、少なくとも１５０、少なくとも２００、少なくとも２５０、少なくとも３００又は少なくとも４００／ｕｌを有すると決定されている。幾つかの実施態様において、個体は、対照個体と比較して、次の遺伝子：ＣＸＣＬ１、ＩＬ８、ＣＸＣＬ２、ＣＸＣＬ３、及びＣＳＦ３の少なくとも一、少なくとも二、少なくとも三、少なくとも四、又は全ての上昇した発現又はレベルを有する。幾つかの実施態様において、個体は、対照個体と比較して、高血清ペリオスチン及び次の遺伝子：ＣＸＣＬ１、ＩＬ８、ＣＸＣＬ２、ＣＸＣＬ３、及びＣＳＦ３の少なくとも一、少なくとも二、少なくとも三、少なくとも四、又は全ての上昇した発現又はレベルを有する。ある実施態様において、個体は、高血清ペリオスチン及び高血清又は血漿ＣＸＣＬ１を有する。ある実施態様において、個体は、高血清ペリオスチン及び高血清又は血漿ＩＬ８を有する。ある実施態様において、個体は、高血清ペリオスチン及び高血清又は血漿ＣＸＣＬ２を有する。ある実施態様において、個体は、高血清ペリオスチン及び高血清又は血漿ＣＸＣＬ３を有する。ある実施態様において、個体は、高血清ペリオスチン及び高血清又は血漿ＣＳＦ３を有する。ある実施態様において、個体は、対照又は基準レベルと比較して、血清ペリオスチンの上昇したレベル及び／又は上昇した血中好酸球数及び／又は上昇した血中好中球数を有すると決定されている。ある実施態様において、総ペリオスチンが測定又は決定される。幾つかの実施態様において、上昇した血清ペリオスチンレベルは、総ペリオスチンの少なくとも２０ｎｇ／ｍｌ、少なくとも２５ｎｇ／ｍｌ、少なくとも３０ｎｇ／ｍｌ、少なくとも４０ｎｇ／ｍｌ又は少なくとも５０ｎｇ／ｍｌを指す。ある実施態様において、総ペリオスチンは、当該技術分野で公知の任意の方法、例えばＥＬＩＳＡによって測定又は決定される。幾つかの実施態様において、総ペリオスチンは、本明細書に記載されるＥ４アッセイ又はＥＬＥＣＳＹＳ（登録商標）ペリオスチンアッセイにより決定される。
【００２２】
幾つかの実施態様において、喘息はコルチコステロイドで制御されない。幾つかの実施態様において、コルチコステロイドは吸入コルチコステロイドである。幾つかの実施態様において、吸入コルチコステロイドは、ジプロピオン酸ベクロメタゾン（例えば、Ｑｖａｒ（登録商標））、ブデソニド（例えば、Ｐｕｌｍｉｃｏｒｔ（登録商標））、ブデソニド／ホルモテロールフマル酸塩水和物（例えば、Ｓｙｍｂｉｃｏｒｔ（登録商標））、フルニソリド（例えば、Ａｅｒｏｂｉｄ（登録商標））、プロピオン酸フルチカゾン（例えば、Ｆｌｏｖｅｎｔ（登録商標）、Ｆｌｏｎａｓｅ（登録商標））、プロピオン酸フルチカゾン及びサルメテロール（例えば、Ａｄｖａｉｒ（登録商標））、及びトリアムシノロンアセトニド（例えば、Ａｚｍａｃｏｒｔ（登録商標））から選択される。幾つかの実施態様において、個体はまた、第二コントローラーで治療されている。幾つかの実施態様において、第二コントローラーは長時間作用型気管支拡張薬（ＬＡＢＤ）である。幾つかの実施態様において、ＬＡＢＤは長時間作用型β２アゴニスト（ＬＡＢＡ）、ロイコトリエン受容体アンタゴニスト（ＬＴＲＡ）、長時間作用型ムスカリンアンタゴニスト（ＬＡＭＡ）、テオフィリン、及び経口コルチコステロイド（ＯＣＳ）から選択される。幾つかの実施態様において、ＬＡＢＤは、ブデソニド／ホルモテロールフマル酸塩水和物（例えば、Ｓｙｍｂｉｃｏｒｔ（登録商標））、プロピオン酸フルチカゾン及びサルメテロール（例えば、Ａｄｖａｉｒ（登録商標））、アルホルモテロール酒石酸塩（例えば、Ｂｒｏｖａｎａ（登録商標））、ホルモテロールフマル酸塩（例えば、Ｆｏｒａｄｉｌ（登録商標）、Ｐｅｒｆｏｒｍｉｓｔ（登録商標））、及びサルメテロールキシナホ酸塩（例えば、Ｓｅｒｅｖｅｎｔ（登録商標））から選択される。ある実施態様において、喘息を治療する方法は、本明細書に記載される抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７多重特異性抗体を患者に投与することを含み、更に患者にコルチコステロイドを投与することを含む。
【００２３】
本発明の一態様において、多重特異性抗体が提供され、ここで抗体は第一の半抗体と第二の半抗体を含み、第一の半抗体はＩＬ−１７に特異的に結合する第一のＶＨ／ＶＬユニットを含み、第二の半抗体は、ＩＬ−１３に特異的に結合する第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、第一の半抗体はＩＬ−１３に結合せず、かつ第二の半抗体はＩＬ−１７に結合しない。幾つかの実施態様において、本明細書に提供される多重特異性抗体は、ＩＬ−１７ＡＡ及びＩＬ−１７ＡＦに結合し、ＩＬ−１７ＡＡ及びＩＬ−１７ＡＦ誘導活性を阻害し、及び／又はＩＬ−１３誘導活性を阻害する。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体はＩＬ−１７ＦＦに更に結合する。幾つかの実施態様において、本明細書に提供される多重特異性抗体は、ＩＬ−１７ＡＡ及びＩＬ−１７ＡＦに結合し、ＩＬ−１７ＡＡ及びＩＬ−１７ＡＦ誘導活性を阻害し、かつＩＬ−１３誘導活性を阻害する。ある特定の実施態様において、本明細書に提供される多重特異性抗体は、ＩＬ−１７ＡＡ、ＩＬ−１７ＡＦ及びＩＬ−１７ＦＦに結合し、ＩＬ−１７ＡＡ、ＩＬ−１７ＡＦ、及びＩＬ−１７ＦＦ誘導活性を阻害し、かつＩＬ−１３誘導活性を阻害する。あるそのような実施態様において、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７ＡＡ、ＡＦ及びＦＦ二重特異性抗体は、ＩＬ−１７Ａ又はＩＬ−１７Ｆ単独によって誘導される活性とは対照的にＩＬ−１７Ａ及びＦサイトカインの全てによって誘導される活性を有利にブロックする。幾つかの実施態様において、ＩＬ−１７ＡＡ誘導活性は、インビボ又はインビトロでのＩＬ−１７ＡＡ誘導性遺伝子発現及び／又は細胞の増殖である。幾つかの実施態様において、ＩＬ−１７ＡＦ誘導活性は、インビボ又はインビトロでのＩＬ−１７ＡＦ誘導性遺伝子発現及び／又は細胞の増殖である。幾つかの実施態様において、ＩＬ−１３誘導活性は、インビボ又はインビトロでのＩＬ−１３誘導性遺伝子発現及び／又は細胞の増殖である。幾つかの実施態様において、本明細書において提供される多重特異性抗体はＩＬ−１７ＡＡ、ＩＬ−１７ＡＦ、及びＩＬ−１７ＦＦに結合する。幾つかの実施態様において、本明細書において提供される多重特異性抗体はＩＬ−１７ＦＦ誘導活性を更に阻害する。幾つかのそのような実施態様において、ＩＬ−１７ＦＦ誘導活性は、インビボ又はインビトロでのＩＬ−１７ＦＦ誘導性遺伝子発現及び／又は細胞の増殖である。幾つかの実施態様において、本明細書において提供される多重特異性抗体はＩＬ−１３のＩＬ−１３Ｒα１に対する結合を阻害しない。
【００２４】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体が提供され、ここで第一のＶＨ／ＶＬユニットは、（ａ）配列番号４２又は配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３、及び配列番号４１、４３、８０、８１、及び１１４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；又は（ｂ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３、配列番号５２又は配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；又は（ｃ）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３、及び配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２を含む。
【００２５】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体が提供され、ここで第一のＶＨ／ＶＬユニットは、（ａ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、配列番号４１、４３、８０、８１、及び１１４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び配列番号４２又は配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；又は（ｂ）配列番号５１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、配列番号５２又は配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；又は（ｃ）配列番号６１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。
【００２６】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体が提供され、ここで第一のＶＨ／ＶＬユニットは、（ａ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３；又は（ｂ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、配列番号５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び配列番号５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３；又は（ｃ）配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、配列番号６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。
【００２７】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体が提供され、ここで第一のＶＨ／ＶＬユニットは、（ａ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、配列番号４１、４３、８０、８１、及び１１４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び配列番号４２又は配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３；又は（ｂ）配列番号５１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、配列番号５２又は配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、配列番号５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び配列番号５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３；又は（ｃ）配列番号６１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、配列番号６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。
【００２８】
本発明の一態様において、第一の半抗体及び第二の半抗体を含む多重特異性抗体が提供され、ここで第一の半抗体はＩＬ−１７に特異的に結合する第一のＶＨ／ＶＬユニットを含み、第二の半抗体は、ＩＬ−１３に特異的に結合する第二のＶＨ／ＶＬユニットを含み、第一のＶＨ／ＶＬユニットは、配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、配列番号４１、４３、８０、８１、及び１１４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び配列番号４２又は配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。幾つかの実施態様において、第一の半抗体はＩＬ−１３に結合せず、かつ第二の半抗体はＩＬ−１７に結合しない。幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７多重特異性抗体は、ＩＬ−１３に対する一価結合剤及びＩＬ−１７に対する一価結合剤である抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体である。ある実施態様において、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体は、ＩＬ−１３に対する一価結合剤であり、かつＩＬ−１７ＡＡ、ＡＦ、及びＦＦに対する一価結合剤である。
【００２９】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体が提供され、ここで第一のＶＨ／ＶＬユニットは、（ａ）（ｉ）配列番号３７、３９、８２、８３、及び１１５から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性を有するＶＨ配列；又は（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性を有するＶＬ配列；又は（ｉｉｉ）（ｉ）に記載のＶＨ配列及び（ｉｉ）に記載のＶＬ配列；又は（ｂ）（ｉ）配列番号４８又は５０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性を有するＶＨ配列；又は（ｉｉ）配列番号４９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性を有するＶＬ配列；又は（ｉｉｉ）（ｉ）に記載のＶＨ配列及び（ｉｉ）に記載のＶＬ配列；又は（ｃ）（ｉ）配列番号５８のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性を有するＶＨ配列；又は（ｉｉ）配列番号５９又は６０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性を有するＶＬ配列；又は（ｉｉｉ）（ｉ）に記載のＶＨ配列及び（ｉｉ）に記載のＶＬ配列を含む。
【００３０】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、配列番号３７、３９、４８、５０、５８、８２、８３、及び１１５から選択される配列に対して少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性を有するＶＨ配列を含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、第一のＶＨ／ＶＬユニットは、配列番号３８、４９、５９、及び６０から選択される配列に対して少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性を有するＶＬ配列を含む。幾つかの実施態様において、第一のＶＨ／ＶＬユニットは、（ａ）配列番号３７、３９、８２、８３、及び１１５から選択されるＶＨ配列及び配列番号３８のＶＬ配列；又は（ｂ）配列番号４８又は５０のＶＨ配列及び配列番号４９のＶＬ配列；（ｃ）配列番号５８のＶＨ配列及び配列番号５９又は６０のＶＬ配列；又は（ｄ）配列番号３９のＶＨ配列及び配列番号３８のＶＬ配列を含む。
【００３１】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体が提供され、ここで第二のＶＨ／ＶＬユニットは、（ａ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３、及び配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；又は（ｂ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３、及び配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２を含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体が提供され、ここで第二のＶＨ／ＶＬユニットは、（ａ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；又は（ｂ）配列番号３１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体が提供され、ここで第二のＶＨ／ＶＬユニットは、（ａ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３；又は（ｂ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体が提供され、ここで第二のＶＨ／ＶＬユニットは、（ａ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３；又は（ｂ）配列番号３１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。
【００３２】
本発明の一態様において、多重特異性抗体が提供され、ここで多重特異性抗体は第一の半抗体及び第二の半抗体を含み、ここで第一の半抗体はＩＬ−１７に特異的に結合する第一のＶＨ／ＶＬユニットを含み、第二の半抗体は、ＩＬ−１３に特異的に結合する第二のＶＨ／ＶＬユニットを含み、第二のＶＨ／ＶＬユニットは、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。幾つかの実施態様において、第一の半抗体はＩＬ−１３に結合せず、かつ第二の半抗体はＩＬ−１７に結合しない。
【００３３】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体が提供され、ここで第二のＶＨ／ＶＬユニットは、（ａ）（ｉ）配列番号１１又は１３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＨ配列；又は（ｉｉ）配列番号１２又は１４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性を有するＶＬ配列；又は（ｉ）に記載のＶＨ配列及び（ｉｉ）に記載のＶＬ配列；又は（ｂ）（ｉ）配列番号３０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性を有するＶＨ配列；又は（ｉｉ）配列番号２９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性を有するＶＬ配列；又は（ｉ）に記載のＶＨ配列及び（ｉｉ）に記載のＶＬ配列を含む。幾つかの実施態様において、第二のＶＨ／ＶＬユニットは、配列番号１１、１３又は３０のＶＨ配列を含む。幾つかの実施態様において、第二のＶＨ／ＶＬユニットは、配列番号１２、１４又は２９のＶＬ配列を含む。幾つかの実施態様において、第二のＶＨ／ＶＬユニットは、配列番号１１又は１３のＶＨ配列及び配列番号１２又は１４のＶＬ配列；又は配列番号１３のＶＨ配列及び配列番号１４のＶＬ配列；又は配列番号３０のＶＨ配列及び配列番号２９のＶＬ配列を含む。
【００３４】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体が提供され、ここで抗体は、配列番号３９のＶＨ配列及び配列番号３８のＶＬ配列を含む抗体と；又は配列番号５０のＶＨ配列及び配列番号４９のＶＬ配列を含む抗体と；又は配列番号５８のＶＨ配列及び配列番号６０のＶＬ配列を含む抗体とＩＬ−１７に対する結合を競合する。幾つかの実施態様において、抗体はＩＬ−１７Ａホモ二量体及び／又はＩＬ−１７ＡＦへテロ二量体に対する結合を競合する。幾つかの実施態様において、抗体はＩＬ−１７Ｆホモ二量体に対する結合を競合する。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、配列番号１１のＶＨ配列及び配列番号１２のＶＬ配列を含む抗体と；又は配列番号１３のＶＨ配列及び配列番号１４のＶＬ配列を含む抗体と；又は配列番号３０のＶＨ配列及び配列番号２９のＶＬ配列を含む抗体とＩＬ−１３に対する結合を競合する。幾つかの実施態様において、抗体は、配列番号１のアミノ酸７７から８９の範囲内で、又は配列番号１のアミノ酸８２から８９の範囲内で、エピトープに結合する。
【００３５】
幾つかの実施態様において、第一の半抗体及び第二の半抗体を含む多重特異性抗体が提供され、ここで第一の半抗体はＩＬ−１７に特異的に結合する第一のＶＨ／ＶＬユニットを含み、かつ第二の半抗体はＩＬ−１３に特異的に結合する第二のＶＨ／ＶＬユニットを含み、第一のＶＨ／ＶＬは、配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、配列番号４１、４３、８０、８１及び１１４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、配列番号４２又は配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含み、かつ第二のＶＨ／ＶＬユニットは配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。幾つかの実施態様において、第一の半抗体はＩＬ−１３に結合せず、かつ第二の半抗体はＩＬ−１７に結合しない。
【００３６】
幾つかの実施態様において、第一の半抗体及び第二の半抗体を含む多重特異性抗体が提供され、ここで第一の半抗体はＩＬ−１７に特異的に結合する第一のＶＨ／ＶＬユニットを含み、かつ第二の半抗体はＩＬ−１３に特異的に結合する第二のＶＨ／ＶＬユニットを含み、第一のＶＨ／ＶＬは、配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、配列番号４３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含み、かつ第二のＶＨ／ＶＬユニットは配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。幾つかの実施態様において、第一の半抗体はＩＬ−１３に結合せず、かつ第二の半抗体はＩＬ−１７に結合しない。
【００３７】
幾つかの実施態様において、第一の半抗体及び第二の半抗体を含む抗ＩＬ１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体が提供され、ここで第一の半抗体は第一のＶＨ／ＶＬユニットを含み、かつ第二の半抗体は第二のＶＨ／ＶＬユニットを含み、第一のＶＨ／ＶＬユニットは、配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、配列番号４３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含み、かつ第二のＶＨ／ＶＬユニットは配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。ある実施態様において、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体はレブリキズマブのＣＤＲを含む第二のＶＨ／ＶＬのユニットを含む。幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体は、中等度から重度の喘息を有する個体を治療するためのレブリキズマブの有効性を改善する。幾つかの実施態様において、個体は、対照レベルと比較して、総血液又は血清ペリオスチンの上昇したレベル及び／又は上昇した血中好酸球数及び／又は上昇した好中球数を有する。幾つかの実施態様において、個体は、対照レベルと比較して、ＦＥＮＯの上昇したレベルを有する。ある実施態様において、対照レベルは、同じ患者集団の中レベルである。幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３／Ｉｌ−１７二重特異性抗体は、ペリオスチンが高い、中等度から重度の喘息を治療するためのレブリキズマブの有効性を改善する。幾つかの実施態様において、喘息はコルチコステロイドで制御されない。幾つかの実施態様において、コルチコステロイドは吸入コルチコステロイドである。幾つかの実施態様において、第一の半抗体はＩＬ−１３に結合せず、かつ第二の半抗体はＩＬ−１７に結合しない。
【００３８】
幾つかの実施態様において、第一の半抗体及び第二の半抗体を含む多重特異性抗体が提供され、ここで第一の半抗体はＩＬ−１７に特異的に結合する第一のＶＨ／ＶＬユニットを含み、かつ第二の半抗体はＩＬ−１３に特異的に結合する第二のＶＨ／ＶＬユニットを含み、第一のＶＨ／ＶＬユニットは配列番号３９のＶＨ配列及び配列番号３８のＶＬ配列を含み、かつ第二のＶＨ／ＶＬユニットは配列番号１３のＶＨ配列及び配列番号１４のＶＬ配列を含む。幾つかの実施態様において、第一の半抗体はＩＬ−１３に結合せず、かつ第二の半抗体はＩＬ−１７に結合しない。
【００３９】
幾つかの実施態様において、第一の半抗体及び第二の半抗体を含む抗ＩＬ１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体が提供され、ここで第一の半抗体は第一のＶＨ／ＶＬユニットを含み、かつ第二の半抗体は第二のＶＨ／ＶＬユニットを含み、第一のＶＨ／ＶＬユニットは配列番号３９のＶＨ配列及び配列番号３８のＶＬ配列を含み、かつ第二のＶＨ／ＶＬユニットは配列番号１３のＶＨ配列及び配列番号１４のＶＬ配列を含む。幾つかの実施態様において、第一の半抗体はＩＬ−１３に結合せず、かつ第二の半抗体はＩＬ−１７に結合しない。
【００４０】
本発明に記載される実施態様の何れかにおいて、多重特異性抗体はＩｇＧ抗体であり得る。本発明に記載される実施態様の何れかにおいて、多重特異性抗体はＩｇＧ１又はＩｇＧ４抗体であり得る。本発明に記載される実施態様の何れかにおいて、多重特異性抗体はＩｇＧ４抗体であり得る。
【００４１】
本発明に記載される実施態様の何れかにおいて、多重特異性抗体は、第一の重鎖定常領域及び第二の重鎖定常領域を含むことができ、ここで、第一の重鎖定常領域はノブ（ｋｎｏｂ）変異を含み、かつ第二の重鎖定常領域はホール（ｈｏｌｅ）変異を含む。幾つかの実施態様において、第一の重鎖定常領域は、ＩＬ−１７に結合するＶＨ／ＶＬユニットの重鎖可変領域部分に融合される。幾つかの実施態様において、第二の重鎖定常領域は、ＩＬ−１３に結合するＶＨ／ＶＬユニットの重鎖可変領域部分に融合される。幾つかの実施態様において、第一の重鎖定常領域は、ＩＬ−１３に結合するＶＨ／ＶＬユニットの重鎖可変領域部分に融合される。幾つかの実施態様において、第二の重鎖定常領域は、ＩＬ−１７に結合するＶＨ／ＶＬユニットの重鎖可変領域部分に融合される。幾つかの実施態様において、抗体はＩｇＧ１抗体であり、ここでノブ変異はＴ３６６Ｗ変異を含む。幾つかの実施態様において、抗体はＩｇＧ１抗体であり、ここでホール変異は、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖから選択される少なくとも一つ、少なくとも二つ、又は三つの変異を含む。幾つかの実施態様において、抗体はＩｇＧ４抗体であり、ここでノブ変異はＴ３６６Ｗ変異を含む。幾つかの実施態様において、抗体はＩｇＧ４抗体であり、ここでホール変異は、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ変異から選択される少なくとも一つ、少なくとも二つ、又は三つの変異を含む。幾つかの実施態様において、抗体は、配列番号６７の配列を含む第一の重鎖定常領域、及び配列番号６８の配列を含む第二の重鎖定常領域を含む。幾つかの実施態様において、抗体は、配列番号６９の配列を含む第一の重鎖定常領域、及び配列番号７０の配列を含む第二の重鎖定常領域を含む。
【００４２】
幾つかの実施態様において、第一の半抗体及び第二の半抗体を含む多重特異性抗体が提供され、ここで第一の半抗体はＩＬ−１７に特異的に結合し、かつ第二の半抗体はＩＬ−１３に特異的に結合し、抗体は、配列番号７２又は配列番号１１７の配列を含む第一の重鎖、配列番号７３の配列を含む第一の軽鎖、配列番号２１又は配列番号１１６の配列を含む第二の重鎖、及び配列番号２２の配列を含む第二の軽鎖を含む。幾つかの実施態様において、第一の半抗体はＩＬ−１３に結合せず、かつ第二の半抗体はＩＬ−１７に結合しない。
【００４３】
ＶＨ及び重鎖は、Ｎ末端のグルタミンを含んでいてもよく、重鎖はまた、Ｃ末端のリジンを含んでいてもよい。当技術分野で知られているように、Ｎ末端グルタミン残基はピログルタミン酸を形成することができ、Ｃ末端リジン残基は製造工程中にクリッピングされることができる。従って、ある実施態様において、Ｎ末端グルタミンは、任意で除去され得る。加えて、Ｃ末端リジン残基の有無に関わらず、重鎖は両方とも本発明によって意図される。
【００４４】
幾つかの実施態様において、本明細書に記載される多重特異性抗体又は単離された抗体の何れかをコードする単離された核酸が提供される。幾つかの実施態様において、本明細書に記載される多重特異性抗体の何れかの第一のＶＨ／ＶＬユニットをコードする単離された核酸が提供される。幾つかの実施態様において、本明細書に記載される多重特異性抗体の何れかの第二のＶＨ／ＶＬユニットをコードする単離された核酸が提供される。幾つかの実施態様において、単離された核酸を含む宿主細胞が提供される。幾つかの実施態様において、宿主細胞は、原核細胞又は真核細胞である。幾つかの実施態様において、宿主細胞は、大腸菌細胞又はＣＨＯ細胞である。ある実施態様において、多重特異性抗体は、第一のＶＨ／ＶＬユニット及び第二のＶＨ／ＶＬユニットを含み、ここで、第一のＶＨ／ＶＬユニットは、配列番号３９のＶＨ配列及び配列番号３８のＶＬ配列を含み、かつ第二のＶＨ／ＶＬユニットは、配列番号１３のＶＨ配列及び配列番号１４のＶＬ配列を含む。幾つかの実施態様において、抗体を生成するのに十分な条件下で宿主細胞を培養することを含む、抗体を生成する方法が提供される。ある実施態様において、宿主細胞は、大腸菌細胞である。幾つかの実施態様において、宿主細胞は、大腸菌細胞であり、多重特異性抗体は非グリコシル化（ａｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｅｄ）されている。ある実施態様において、この方法は半抗体又は多重特異性抗体を回収することを更に含む。
【００４５】
幾つかの実施態様において、（ａ）配列番号１０７又は１０３又は１１８の配列に対して少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％同一である配列；（ｂ）配列番号１０８又は１０４の配列に対して少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％同一である配列；又は（ｃ）（ａ）の配列及び（ｂ）の配列を含む単離された核酸が提供される。幾つかの実施態様において、（ａ）配列番号１０５又は９９又は１１９の配列に対して少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％同一である配列；（ｂ）配列番号１０６又は１００の配列に対して少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％同一である配列；又は（ｃ）（ａ）の配列及び（ｂ）の配列を含む単離された核酸が提供される。幾つかの実施態様において、（ａ）配列番号１０７又は１０３又は１０８の配列に対して少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％同一である配列を含む第一の核酸及び（ｂ）配列番号１０８又は１０４の配列に対して少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％同一である配列を含む第二の核酸を含む宿主細胞が提供され、ここで第一の核酸及び第二の核酸は、同じ核酸分子又は異なる核酸分子において含まれる。幾つかの実施態様において、（ａ）配列番号１０５又は９９又は１１９の配列に対して少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％同一である配列を含む第一の核酸及び（ｂ）配列番号１０６又は１００の配列に対して少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％同一である配列を含む第二の核酸を含む宿主細胞が提供され、ここで第一の核酸及び第二の核酸は、同じ核酸分子又は異なる核酸分子において含まれる。幾つかの実施態様において、宿主細胞は、原核細胞又は真核細胞である。幾つかの実施態様において、原核細胞は大腸菌細胞であり、真核細胞はＣＨＯ細胞である。幾つかの実施態様において、半抗体又は多重特異性抗体を生成するのに十分な条件下で宿主細胞を培養することを含む、半抗体又は多重特異性抗体を生成する方法が提供される。幾つかの実施態様において、この方法は半抗体又は多重特異性抗体を回収することを更に含む。
【００４６】
幾つかの実施態様において、（ｉ）第一の半抗体を生成するために、配列番号１０５又は９９の配列に対して少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％同一である配列を含む第一の核酸及び配列番号１０６又は１００の配列に対して少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％同一である配列を含む第二の核酸を含む第一の宿主細胞を培養すること、及び第二の半抗体を生成するために、配列番号１０７又は１０３又は１１８の配列に対して少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％同一である配列を含む第一の核酸及び配列番号１０８又は１０４の配列に対して少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％同一である配列を含む第二の核酸を含む第二の宿主細胞を培養することを含む、多重特異性抗体を生成する方法が提供され、ここで第一の核酸及び第二の核酸は、同じ核酸分子又は異なる核酸分子において含まれる。幾つかの実施態様において、（ｉ）第一の半抗体を生成するために、配列番号１０５、９９、１１９又は１０１の配列を含む第一の核酸及び配列番号１０６、１００又は１０２の配列を含む第二の核酸を含む第一の宿主細胞を培養すること、及び（ｉｉ）第二の半抗体を生成するために、配列番号１０７又は１０３又は１１８の配列を含む第一の核酸及び配列番号１０８又は１０４の配列を含む第二の核酸を含む第二の宿主細胞を培養することを含む、多重特異性抗体を生成する方法が提供され、ここで第一の核酸及び第二の核酸は、同じ核酸分子又は異なる核酸分子において含まれる。幾つかの実施態様において、（ｉ）第一の半抗体を生成するために、配列番号１０５又は９９又は１１９の配列を含む第一の核酸及び配列番号１０６又は１００の配列を含む第二の核酸を含む第一の宿主細胞を培養すること、及び（ｉｉ）第二の半抗体を生成するために、配列番号１０７又は１０３又は１１８の配列を含む第一の核酸及び配列番号１０８又は１０４の配列を含む第二の核酸を含む第二の宿主細胞を培養することを含む、多重特異性抗体を生成する方法が提供され、ここで第一の核酸及び第二の核酸は、同じ核酸分子又は異なる核酸分子において含まれる。幾つかの実施態様において、この方法は第一の半抗体を回収すること及び第二の半抗体を回収することを更に含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体を生成するのに十分な条件下で、第一の半抗体及び第二の半抗体を含む混合物を形成することを含む。幾つかの実施態様において、本明細書に記載される方法により生成される多重特異性抗体が提供される。ある実施態様において、多重特異性抗体は、第一のＶＨ／ＶＬユニット及び第二のＶＨ／ＶＬユニットを含み、ここで、第一のＶＨ／ＶＬユニットは、配列番号３９のＶＨ配列及び配列番号３８のＶＬ配列を含み、かつ第二のＶＨ／ＶＬユニットは、配列番号１３のＶＨ配列及び配列番号１４のＶＬ配列を含む。ある実施態様において、同一又は異なる核酸分子は、一以上のベクター、特に発現ベクターとなり得る。
【００４７】
幾つかの実施態様において、イムノコンジュゲートが提供され、ここでイムノコンジュゲートは、本明細書に記載される多重特異性抗体又は単離された抗体の何れか及び細胞傷害性薬物を含む。
【００４８】
幾つかの実施態様において、本明細書に記載される多重特異性抗体又は単離された抗体の何れか及び薬学的に許容可能な担体を含む薬学的製剤が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００４９】
【図１Ａ−Ｃ】図１Ａ−Ｃは、実施例１に記載したように、（Ａ）好中球及び好酸球、（Ｂ）、好酸球及びＩＬ−１７Ａ＋細胞、及び（Ｃ）ＩＬ−１７Ｆ＋及びＩＬ−１７Ａ＋細胞の気管支生検組織数の対比較を示す。
【図２Ａ−Ｂ】図２Ａ−Ｂは、実施例２に記載したように、検出不可能（定量下限値未満；＜ＬＬＯＱ）及び検出可能（定量下限以上、≧ＬＬＯＱ）に関して適合した生検好中球試料中の（Ａ）ＩＬ−１７Ａ及び（Ｂ）ＩＬ−１７Ｆの発現を示す。
【図３】図３は、実施例２に記載したように、英国のコホート気管支生検のマイクロアレイ解析からの特定の好中球関連遺伝子の発現の双方向階層的クラスタリングを示す。白丸は、ステロイドを服用していない喘息患者に対応する。黒丸は、ステロイド（吸入コルチコステロイド（ＩＣＳ）又は経口コルチコステロイド（ＯＣＳ））を服用している喘息患者を示す。
【図４Ａ−Ｃ】図４Ａ−Ｂは、実施例３に記載したように、（Ａ）ＢＯＢＣＡＴ研究からの健常対照及び中等度から重度の喘息患者におけるＣＸＣＬ１レベル、及び（Ｂ）血清ペリオスチンレベルが５０ｎｇ／ｍｌ以下又は５０ｎｇ／ｍｌ超の喘息患者における血漿ＣＸＣＬ１レベルを示す。１６０ｐｇ／ｍｌを超えるＣＸＣＬ１レベル（破線）は、上昇した血清ペリオスチンレベルを有する傾向にある（フィッシャーの正確確率検定によりｐ＝０．０２）。
【図５】図５は、実施例３に記載したように、適合試料において検出不可能（＜ＬＬＯＱ）又は検出可能（≧ＬＬＯＱ）なＩＬ−１７Ａの発現を有する英国のコホートにおける血清ペリオスチンのレベルを示す。血清ペリオスチンは、検出可能な気管支生検ＩＬ−１７Ａ ｍＲＮＡを有する被験体で上昇している（Ｐ＝０．０３、クラスカル・ウォリス）。
【図６Ａ−Ｄ】図６Ａ−Ｄは、実施例４に記載したように、抗ＩＬ−１３抗体、抗ＩＬ−１７ＡＡ／ＡＦ抗体と抗ＩＬ−１７ＦＦ抗体の混合物又は３つ全ての抗体の混合物の投与後のマウスチリダニ喘息モデルにおける気管支肺胞洗浄液中（ＢＡＬ；Ａ、Ｂ）及び血液中（Ｃ、Ｄ）の（Ａ、Ｃ）好酸球数及び（Ｂ、Ｄ）好中球数を示す。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．００５。
【図７Ａ−Ｄ】図７Ａ−Ｄは、実施例６に記載したように、（Ａ）抗ＩＬ−１３ノブ及び抗ＩＬ−１７ホール半抗体の（Ａ）ＳＤＳ−ＰＡＧＥ分析、（Ｂ）二重特異性抗体のＳＥＣ分析、（Ｃ）非還元（レーンＡ）及び還元（レーンｃ）条件の下での二重特異性抗体のＳＤＳ  ＰＡＧＥ分析、及び（Ｄ）二重特異性抗体のＦ（ａｂ’）２断片のＬＣ−ＥＳＩ／ＴＯＦ分析を示す。
【図８Ａ−Ｂ】図８Ａ−Ｂは、実施例８に記載したように、レブリキズマブ及び抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体によるＴＦ−１細胞の（Ａ）ＩＬ−１３誘導性及び（Ｂ）ＩＬ−１３  Ｒ１３０Ｑ誘導性増殖の用量依存的阻害を示す。
【図９Ａ−Ｃ】図９Ａ−Ｃは、実施例８に記載したように、抗ＩＬ−１７抗体及び抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体による正常ヒト包皮線維芽細胞中の（Ａ）ＩＬ−１７ＡＦ誘導性及び（Ｂ）ＩＬ−１７ＡＦ誘導性及び（Ｃ）ＩＬ−１７Ｆ誘導性のＧ−ＣＧＦの発現の用量依存的阻害を示す。
【図１０Ａ−Ｂ】図１０Ａ−Ｂは、実施例９に記載したように、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体による（Ａ）ＩＬ−１３誘導性ＣＣＬ２６発現及び（Ｂ）ＩＬ−１７Ａ誘導性ＣＸＣＬ１発現の双方の用量依存的阻害を示す。
【図１１】図１１は、実施例１０に記載したように、マウスでの抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の単回静脈内投与後の血清濃度を示す。
【図１２】図１２は、実施例１１に記載したように、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の単回静脈内投与後の個々のカニクイザルにおける血清濃度を示す。
【図１３】図１３は、実施例１１に記載したように、カニクイザルへの抗ＩＬは−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の投与後のＩＬ−１７Ａホモ二量体レベルを示す。
【図１４Ａ−Ｃ】図１４Ａ−Ｃは、実施例１３に記載したように、チリダニ喘息モデルマウスにおける、抗ＩＬ−１３抗体、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体、又は抗ＩＬ−１７抗体の投与後の（Ａ）血漿ＴＡＲＣレベル、（Ｂ）血清Ｇ−ＣＳＦレベル、及び（Ｃ）血清ＣＸＣＬ１レベルを示す。
【図１５Ａ−Ｄ】図１５Ａ−Ｄは、実施例５に記載したように、臨床研究におけるプラセボ及びレブリキズマブ群についてのＦＥＶ１のパーセント変化が、ベースラインの好酸球数及び好中球数によって定義された４つのグループにプロットされているグラフを示す（Ａ：好酸球−低及び好中球−高；Ｂ：好酸球−低及び好中球−低；Ｃ：好酸球−高及び好中球−高；及びＤ：好酸球−高及び好中球−低）。これらの分析の基礎となる被験体の数は、それぞれのサブプロットに注釈が付けられている。
【００５０】
詳細な説明
別に規定されない限り、本明細書で使用される技術用語及び科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。Singleton et al., Dictionary of Microbiology and Molecular Biology 2nd ed., J. Wiley &Sons (New York, N.Y. 1994)、及びMarch, Advanced Organic Chemistry Reactions, Mechanisms and Structure 4th ed., John Wiley &Sons (New York, N.Y. 1992)は、本願において使用される多くの用語に対する一般的な指針を当業者に提供する。
【００５１】
特定の定義
本明細書を解釈する目的のために、以下の定義が適用され、適切な場合はいつでも、単数で使用される用語はまたその逆も複数形を含む。以下に記載される任意の定義が参照により本明細書に組み込まれる任意の文書との競合する場合には、以下に記載される定義が統制するべきである。
【００５２】
本明細書及び添付の特許請求の範囲に使用される場合、単数形の「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、文脈から明らかでない限り、複数の指示対象を含む。従って、例えば、「タンパク質」又は「抗体」は、複数のタンパク質又は抗体をそれぞれ包含し；「細胞」への参照は細胞の混合物などを含める。
【００５３】
本明細書で使用される用語「生物学的試料」は、限定されないが、血液、血清、血漿、唾液、気管支肺胞洗浄液、組織生検（例えば、肺試料）、及び鼻腔スワブ又は鼻ポリープを含む鼻試料を含む。
【００５４】
ＦＥＮＯアッセイは、ＦＥＮＯ（分別呼気一酸化窒素）を測定するアッセイを指す。そのレベルは、例えば、２００５年に米国胸部学会（ＡＴＳ）が発行したガイドラインに従っている、手持ち携帯装置のＮＩＯＸ  ＭＩＮＯＴＭ（Ａｅｒｏｃｒｉｎｅ、Ｓｏｌｎａ、Ｓｗｅｄｅｎ）を使用して評価することができる。ＦＥＮＯは他の同様の方法、例えばＦｅＮＯ又はＦＥＮＯで言及されることができ、全てのその類似の異形が同じ意味を持つことが理解されるべきである。
【００５５】
喘息は、可変性と再発性の症状を特徴とする複雑な疾患で、根底にある炎症と関連し得るか又は関連し得ない、可逆性気道閉塞（例えば、気管支拡張による）及び気管支過敏性である。喘息の例としては、アスピリン感受性／悪化喘息、アトピー性喘息、重度の喘息、軽度の喘息、中等度から重度の喘息、コルチコステロイドナイーブ喘息、慢性喘息、コルチコステロイド抵抗性喘息、コルチコステロイド難治性喘息、新たに診断された未治療喘息、喫煙による喘息、コルチコステロイドで制御されない喘息、及び J Allergy Clin Immunol (2010) 126(5):926-938に述べられるような他の喘息を含む。
【００５６】
「好酸球性疾患」とは、過剰の好酸球数に関連する疾患であり、その非定型症状は、体内の局所的又は全身的な好酸球のレベル又は活性に起因して現れる場合がある。ある実施態様において、過剰血中好酸球数は、少なくとも２００／μｌ、少なくとも２５０／μｌ、少なくとも３００／μｌ、又は少なくとも４００／μｌである。ある実施態様において、個体は、対照又は基準レベルと比較して、上昇した血中好酸球数を有すると決定されている。ある実施態様において、個体は、少なくとも１５０／μｌ、少なくとも２００／μｌ、少なくとも２５０／μｌ、少なくとも３００／μｌ又は少なくとも４００／μｌのベースラインの血中好酸球数を有すると決定されている。過剰の好酸球数又は活性に関連する疾患は、限定されないが、喘息（アスピリン感受性の喘息を含む）、アトピー性喘息、アトピー性皮膚炎、アレルギー性鼻炎（季節性アレルギー性鼻炎を含む）、非アレルギー性鼻炎、喘息、重度の喘息、慢性好酸球性肺炎、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症、セリアック病、チャーグ・ストラウス症候群（結節性動脈周囲炎プラスアトピー）、好酸球性筋痛症候群、好酸球増多症候群、突発性血管浮腫を含む浮腫反応、蠕虫感染症（ここでは好酸球は保護の役割を持ち得る）、オンコセルカ皮膚炎、及び好酸球性食道炎、好酸球性胃炎、好酸球性胃腸炎、好酸球性腸炎及び好酸球性大腸炎を含むがこれらに限定されない、好酸球関連消化器疾患、鼻のミクロポリープ症及びポリープ、アスピリン不耐症、喘息及び閉塞性睡眠時無呼吸症候群が挙げられる。好酸球由来の分泌産物はまた、血管新生及び腫瘍における結合組織形成の促進、及び慢性喘息、クローン病、強皮症及び心内膜心筋線維症などの状態で見られる線維化反応に関連している（Munitz A, Levi-Schaffer F. Allergy 2004; 59: 268-75, Adamko et al. Allergy 2005; 60: 13-22, Oldhoff, et al. Allergy 2005; 60: 693-6）。他の例としては、癌（例えば、神経膠芽腫（例えば多形神経膠芽腫）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ））、アトピー性皮膚炎、アレルギー性鼻炎、喘息、線維症、炎症性腸疾患、肺線維症（硬化症に対する二特発性肺線維症（ＩＰＦ）及び肺線維症を含む）、ＣＯＰＤ、肝線維症を含む。ある実施態様において、患者は、対照と比較して、上昇した血清ペリオスチンレベル及び／又はＣＳＦ１、ＭＥＩＳ２、ＬＧＡＬＳ１２、ＩＤＯ１、ＴＨＢＳ４、ＯＬＩＧ２、ＡＬＯＸ１５、ＳＩＧＬＥＣ８、ＣＣＬ２３、ＰＹＲＯＸＤ２、ＨＳＤ３Ｂ７、ＳＯＲＤ、ＡＳＢ２、ＣＡＣＮＧ６、ＧＰＲ４４、ＭＧＡＴ３、ＳＬＣ４７Ａ１、ＳＭＰＤ３、ＣＣＲ３、ＣＬＣ、ＣＹＰ４Ｆ１２、及びＡＢＴＢ２から選択される一以上の上昇したレベルを示す好酸球性炎症陽性（ＥＩＰ）患者として同定される。
【００５７】
「好中球性疾患」は、過剰な好中球数に関連した疾患を意味する。幾つかの実施態様において、非定型の症状は、身体における局所的又は全身的な好中球のレベル又は活性に起因する好中球性疾患で現れることがある。ある実施態様において、過剰血中好中球数は、少なくとも３０００／μｌ、３５００／μｌ、４０００／μｌ、又は４５００／μｌである。ある実施態様において、個体は、対照又は基準レベルと比較して、上昇した血中好中球数を有すると決定されている。ある実施態様において、個体は、少なくとも３０００／μｌ、３５００／μｌ、４０００／μｌ又は４５００／μｌのベースラインの血中好中球数を有すると決定されている。過剰の好中球数又は活性に関連する疾患は、限定されないが、アトピー性皮膚炎、アレルギー性鼻炎、喘息、線維症、炎症性腸疾患、クローン病、肺の炎症性疾患、肺線維症、特発性肺線維症（ＩＰＦ）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肝線維症、呼吸器疾患、がん、神経膠芽腫、及び非ホジキンリンパ腫を含む。本明細書に記載される実施態様の何れかにおいて、呼吸器疾患は、喘息、アレルギー性喘息、非アレルギー性喘息、気管支炎、慢性気管支炎、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肺気腫、タバコ誘発性肺気腫、気道炎症、嚢胞性線維症、肺線維症、アレルギー性鼻炎、及び気管支拡張症から選択され得る。幾つかの実施態様において、個体は、患者集団において、中間ベースライン血中好中球数を超える血中好中球数を有すると決定されている。幾つかの実施態様において、上昇した好中球数を有する個体は、中等度から重度の喘息の患者集団において、中間ベースライン血中好中球数を超えるベースライン血中好中球数を有する。
【００５８】
ＩＬ−１３媒介性疾患とは、過剰のＩＬ−１３レベル又は活性に関連する疾患であり、その非定型症状は、体内の局所的及び／又は全身的なＩＬ−１３のレベル又は活性に起因して現れる場合がある。ＩＬ−１３媒介性疾患の例は、がん（例えば、非ホジキンリンパ腫、神経膠芽腫）、アトピー性皮膚炎、アレルギー性鼻炎、喘息、線維症、炎症性腸疾患、クローン病、肺の炎症性疾患（ＩＰＦなどの肺線維症を含む）、ＣＯＰＤ、及び肝線維症を含む。
【００５９】
ＩＬ−１７媒介性疾患とは、過剰のＩＬ−１７レベル又は活性に関連する疾患であり、その非定型症状は、体内の局所的及び／又は全身的なＩＬ−１７のレベル又は活性に起因して現れる場合がある。ＩＬ−１７媒介性疾患の例は、アトピー性皮膚炎、アレルギー性鼻炎、喘息、線維症、炎症性腸疾患、クローン病、肺の炎症性疾患、肺線維症、特発性肺線維症（ＩＰＦ）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肝線維症、呼吸器疾患、がん、神経膠芽腫、及び非ホジキンリンパ腫を含む。本明細書に記載される実施態様の何れかにおいて、呼吸器疾患は、喘息、アレルギー性喘息、非アレルギー性喘息、気管支炎、慢性気管支炎、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肺気腫、タバコ誘発性肺気腫、気道炎症、嚢胞性線維症、肺線維症、アレルギー性鼻炎、及び気管支拡張症から選択され得る。
【００６０】
喘息様症状は、息切れ、咳（痰の産生及び／又は痰の質及び／又は咳周波数の変化）、喘鳴、胸部絞扼感、気管支収縮及び上記の症状の何れか又はこれらの症状の組み合わせに起因する夜間覚醒からなる群から選択される症状が含まれる（Juniper et al (2000) Am. J. Respir. Crit. Care Med., 162(4), 1330-1334）。
【００６１】
用語「呼吸器疾患」は、限定されないが、喘息（例えば、アレルギー性及び非アレルギー性喘息（例えば、年少の子供たちの中で、例えば呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）による感染による））；気管支炎（例えば、慢性気管支炎）；慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）（例えば、肺気腫（例えば、タバコ誘発性肺気腫）；気道炎症、好酸球増加症、線維症、過剰粘液産生、例えば、嚢胞性線維症、肺線維症、アレルギー性鼻炎を含む状態が含まれる。気道炎症、過度の気道分泌、及び気道閉塞によって特徴づけることができる疾患の例は、喘息、慢性気管支炎、気管支拡張症、及び嚢胞性線維症が挙げられる。
【００６２】
増悪（一般に喘息発作又は急性の喘息とも呼ばれる）は、息切れ、咳（痰の産生及び／又は痰の質及び／又は咳頻度の変化）、喘鳴、胸部絞扼感、上記の症状又はこれらの症状の組み合わせの何れかに起因する夜間覚醒の新規又は進行性の増加の症状の発現である。増悪はしばしば呼気の気流（ＰＥＦ又はＦＥＶ１）の低下によって特徴付けられる。しかし、ＰＥＦの変動性は、増悪からの回復に至るまで又はその最中には増加するかもしれないが、増悪の最中には通常は増加しない。増悪の重症度は、軽度から生命を脅かす範囲に及び、症状及び肺機能の両方に基づいて評価することができる。本明細書に記載されるように重度の喘息増悪は、喘息治療のために以下の入院加療、高コルチコステロイドの使用（例えば、一日のコルチコステロイドの総用量又は５００マイクログラム以上のプロピオン酸フルチカゾン（ＦＰ）又は等価物の一日の総用量を３日間又はそれ以上連続して４倍する）、又は経口／非経口のコルチコステロイドの使用の任意の一又は組み合わせをもたらす増悪を含む。
【００６３】
「ＴＨ２経路阻害剤」又は「ＴＨ２阻害剤」はＴＨ２経路を阻害する薬剤である。ＴＨ２経路阻害剤の例は、ＩＴＫ、ＢＴＫ、ＩＬ−９（例えば、ＭＥＤＩ−５２８）、ＩＬ−５（例えば、メポリズマブ、ＣＡＳ番号１９６０７８−２９−２；レシリズマブ（ｒｅｓｉｌｉｚｕｍａｂ））、ＩＬ−１３（例えば、ＩＭＡ−０２６、ＩＭＡ−６３８（アンルキンズマブとも言う、ＩＮＮ番号９１０６４９−３２−０；ＱＡＸ−５７６；ＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップ），トラロキヌマブ（ＣＡＴ−３５４、ＣＡＳ番号１０４４５１５−８８−９とも言う）；ＡＥＲ−００１、ＡＢＴ−３０８（ヒト化１３Ｃ５．５抗体とも言う）、ＩＬ−４（例えばＡＥＲ−００１、ＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップ）、ＯＸ４０Ｌ、ＴＳＬＰ、ＩＬ−２５、ＩＬ−３３及びＩｇＥ（例えば、ＸＯＬＡＩＲ、ＱＧＥ−０３１；ＭＥＤＩ−４２１２）；及び受容体、例えば：ＩＬ−９受容体、ＩＬ−５受容体（例えば、ＭＥＤＩ−５６３（ベンラリズマブ、ＣＡＳ番号１０４４５１１−０１−４）、ＩＬ−４受容体アルファ（例えば、ＡＭＧ−３１７、ＡＩＲ−６４５）、ＩＬ−１３受容体アルファ１（例えばＲ−１６７１）及びＩＬ−１３受容体アルファ２、ＯＸ４０、ＴＳＬＰ−Ｒ、ＩＬ−７Ｒアルファ（ＴＳＬＰの共受容体）、ＩＬ１７ＲＢ（ＩＬ−２５の受容体）、ＳＴ２（ＩＬ−３３の受容体）、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＲＴＨ２（例えばＡＭＧ−８５３、ＡＰ７６８、ＡＰ−７６１、ＭＬＮ６０９５、ＡＣＴ１２９９６８）、ＦｃｅｐｓｉｌｏｎＲＩ、ＦｃｅｐｓｉｌｏｎＲＩＩ／ＣＤ２３（ＩｇＥの受容体）、Ｆｌａｐ（例えば、ＧＳＫ２１９０９１５）、Ｓｙｋキナーゼ（Ｒ−３４３、ＰＦ３５２６２９９）；ＣＣＲ４（ＡＭＧ−７６１）、ＴＬＲ９（ＱＡＸ−９３５）及びＣＣＲ３、ＩＬ５、ＩＬ３、ＧＭ−ＣＳＦの多重サイトカイン阻害剤（例えば、ＴＰＩ  ＡＳＭ８）から選択される標的の何れか一の活性の阻害剤を含む。上記標的の阻害剤の例は、例えば、国際公開第２００８／０８６３９５号；国際公開第２００６／０８５９３８号；米国特許第７６１５２１３号；米国特許第７５０１１２１号；国際公開第２００６／０８５９３８号；国際公開第２００７／０８０１７４号；米国特許第７８０７７８８号；国際公開第２００５００７６９９号；国際公開第２００７０３６７４５号；国際公開第２００９／００９７７５号；国際公開第２００７／０８２０６８号；国際公開第２０１０／０７３１１９号；国際公開第２００７／０４５４７７号；国際公開第２００８／１３４７２４号；米国特許出願公開第２００９／００４７２７７号；及び国際公開第２００８／１２７２７１号に開示されている。
【００６４】
「ＴＨ１７経路阻害剤」又は「ＴＨ１７阻害剤」はＴＨ１７経路を阻害する薬剤である。ＴＨ１７経路阻害剤の例は、ＩＬ−１β、ＩＬ−６（例えば、トシリズマブ）、ＩＬ−１７Ａ（例えば、セクキヌマブ（ｓｅｃｕｋｉｎｕｍａｂ）、イクセキズマブ（ｉｘｅｋｉｚｕｍａｂ）、ＡＢＴ−１２２）、ＩＬ−１７Ｆ、ＩＬ−１７ＡＦヘテロ二量体、ＩＬ−１７Ｂ、ＩＬ−１７Ｃ、ＩＬ−１７Ｄ、ＩＬ−２２、ＩＬ−２１、ＴＧＦ−β、ＩＬ−２３、ＩＬ−１β受容体、ＩＬ−６受容体、ＩＬ−１７ＲＡ（例えば、ブロダルマブ（ｂｒｏｄａｌｕｍａｂ））、ＩＬ−１７ＲＣ、ＩＬ−１７ＲＢ、ＩＬ−２２Ｒ１、ＩＬ１０Ｒ２、ＩＬ−２１受容体、ＴＧＦ−β受容体、及びＩＬ−２３受容体（ＩＬ−１２Ｒｂ１、ＩＬ２３Ｒ）から選択される標的の何れか一の活性の阻害剤を含む。上記の標的の阻害剤の例としては、例えば、米国特許第７８０７１５号；米国特許第７８３８６３８号；米国特許第８５８０２６５号；米国特許出願公開第２０１４０３１４７４３号；米国特許第８５１９１０７号；米国特許第７８３３５２７号；国際公開第２０１４０４４７５８号；米国特許出願公開第２０１３０００５６５９号；及び国際公開第２０１１０２３６８５号に開示される。
【００６５】
用語「小分子」は、５０ダルトンから２５００ダルトンの間の分子量を有する有機分子を指す。
【００６６】
用語「抗体」は最も広範な意味で使用され、具体的には例えば、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、ポリエピトープ特異性を有する抗体、単鎖抗体、多重特異性抗体及び抗体の断片（抗原結合断片を含む）を網羅する。そのような抗体は、キメラ、ヒト化、ヒト及び合成である。このような抗体及びそれらの生成方法を以下でより詳細に説明する。
【００６７】
用語「半抗体」又は「ヘミマー」は、本明細書で使用される場合、一価の抗原結合ポリペプチドを指す。ある実施態様において、半抗体又はヘミマーは、ＶＨ／ＶＬユニット及び任意で免疫グロブリン定常ドメインの少なくとも一部分を含む。ある実施態様において、半抗体又はヘミマーは、一つの免疫グロブリン軽鎖と結合した一つの免疫グロブリン重鎖、又はその抗原結合断片を含む。ある実施態様において、半抗体又はヘミマーは、単一特異的、すなわち、単一の抗原又はエピトープに結合する。あるそのような実施態様において、半抗体はＩＬ−１３に結合し、ＩＬ−１７に結合しない。ある他の実施態様において、半抗体はＩＬ−１７に結合し、ＩＬ−１３に結合しない。半抗体は、例えば、ラクダ科から生じる単一の可変ドメインを含む抗原結合ドメインを有し得ることを、当業者は容易に理解するであろう。
【００６８】
用語「ＶＨ／ＶＬユニット」は、少なくとも一のＶＨ  ＨＶＲ及び少なくとも一のＶＬ  ＨＶＲを含む抗体の抗原結合領域を指す。ある実施態様において、ＶＨ／ＶＬユニットは、少なくとも一、少なくとも二、又は三つ全てのＶＨ  ＨＶＲ及び少なくとも一、少なくとも二、又は三つ全てのＶＬ  ＨＶＲを含む。ある実施態様において、ＶＨ／ＶＬユニットは、更に、フレームワーク領域（ＦＲ）の少なくとも一部を含む。幾つかの実施態様において、ＶＨ／ＶＬユニットは、三つのＶＨ  ＨＶＲ及び三つのＶＬ  ＨＶＲを含む。幾つかのそのような実施態様において、ＶＨ／ＶＬユニットは、少なくとも一、少なくとも二、少なくとも三、又は四つ全てのＶＨ  ＦＲ及び少なくとも一、少なくとも二、少なくとも三、又は四つ全てのＶＬ  ＦＲを含む。
【００６９】
用語「多重特異性抗体」は、最も広い意味で用いられ、ポリエピトープ特異性を有する（すなわち、一の生物学的分子上の二以上の異なるエピトープに特異的に結合することが可能である又は二以上の異なる生物学的分子上のエピトープに特異的に結合することが可能である）抗原結合ドメインを含む抗体を具体的に網羅する。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体（例えば二重特異性抗体など）の抗原結合ドメインは、二つのＶＨ／ＶＬ単位を含み、ここで、第一のＶＨ／ＶＬユニットは、第一のエピトープに特異的に結合し、第二のＶＨ／ＶＬユニットは、第二のエピトープに特異的に結合し、各ＶＨ／ＶＬユニットは、重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む。かかる多重特異性抗体は、限定されないが、完全長抗体、二以上のＶＬ及びＶＨドメインを有する抗体、Ｆａｂ、Ｆｖ、ｄｓＦｖ、ｓｃＦｖなどの抗体断片、ダイアボディ、二重特異性抗体及びトリアボディ、共有結合的又は非共有結合的に連結されている抗体断片を含む。重鎖定常領域の少なくとも一部及び／又は軽鎖の定常領域の少なくとも一部を更に含むＶＨ／ＶＬユニットはまた、「ヘミマー」又は「半抗体」と称され得る。幾つかの実施態様において、半抗体は、単一重鎖可変領域の少なくとも一部と単一軽鎖可変領域の少なくとも一部を含む。幾つかのそのような実施態様において、２つの半抗体を含み、２つの抗原に結合する二重特異性抗体は、第一の抗原又は第一のエピトープに結合するが、第二の抗原又は第二のエピトープに結合しない第一の半抗体及び第二の抗原又は第二のエピトープに結合するが、第一の抗原又は第一のエピトープに結合しない第二の半抗体を含む。幾つかの実施態様によれば、多特異性抗体は、親和性が５μＭから０．００１ｐＭ、３μＭから０．００１ｐＭ、１μＭから０．００１ｐＭ、０．５μＭから０．００１ｐＭ、又は０．１μＭから０．００１ｐＭである各抗原又はエピトープと結合するＩｇＧ抗体である。幾つかの実施態様において、ヘミマーは、分子内ジスルフィド結合が第二ヘミマーとともに形成されるように重鎖可変領域の十分な部分を含む。幾つかの実施態様において、ヘミマーは、例えば、相補的なホール変異又はノブ変異を含む第２ヘミマー又は半抗体とのヘテロ二量体化を許容するノブ変異又はホール変異を含む。ノブ変異及びホール変異は、以下で更に議論される。
【００７０】
「二重特異性抗体」は、一の生物学的分子上の二つの異なるエピトープに特異的に結合することが可能である又は二つの異なる生物学的分子上のエピトープに特異的に結合することが可能である抗原結合ドメインを含む多重特異性抗体である。二重特異性抗体はまた、本明細書において「二重特異性」を有するとして又は「二重特異的」であるとして言及され得る。特に断らない限り、二重特異的抗体によって結合される抗原が二重特異性抗体名にリストされている順序は任意である。すなわち、幾つかの実施態様において、用語「抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体」及び「抗ＩＬ−１７／ＩＬ−１３二重特異性抗体」は、交換可能に使用されてもよい。幾つかの実施態様において、二重特異性抗体は２つの半抗体を含み、ここで各半抗体は単一の重鎖可変領域及び任意で重鎖定常領域の少なくとも一部、並びに単一の軽鎖可変領域及び任意で軽鎖定常領域の少なくとも一部を含む。ある実施態様において、二重特異性抗体は２つの半抗体を含み、ここで各半抗体は単一の重鎖可変領域及び単一の軽鎖可変領域を含み、かつ二つ以上の単一重鎖可変領域を含まず、二つ以上の単一軽鎖可変領域を含まない。幾つかの実施態様において、二重特異性抗体は２つの半抗体を含み、ここで各半抗体は単一の重鎖可変領域及び単一の軽鎖可変領域を含み、第一の半抗体は第一の抗原に結合し、第二の抗原に結合せず、第二の半抗体は第二の抗原に結合し、第一の抗原に結合しない。
【００７１】
本明細書において使用される「ノブ・イントゥー・ホール（ｋｎｏｂ−ｉｎｔｏ−ｈｏｌｅ）」又は「ＫｎＨ」技術という用語は、インビトロ又はインビボで２つのポリペプチドの相互的な対合を導く技術であって、それらが相互作用する界面において一方のポリペプチドに突起（ノブ）を及び他方のポリペプチドに空洞（ホール）を導入することによる技術を指す。例えば、ＫｎＨは、抗体のＦｃ：Ｆｃ結合界面、ＣＬ：ＣＨ１界面又はＶＨ／ＶＬ界面において導入されている（例えば、米国特許出願公開第２０１１／０２８７００９号、米国特許出願公開第２００７／０１７８５５２号、国際公開第９６／０２７０１１号、国際公開第９８／０５０４３１号及びZhu et al., 1997, Protein Science 6:781-788を参照）。幾つかの実施態様において、ＫｎＨｓは、多重特異性抗体の製造中に２つの異なる重鎖を一緒に対合させることを駆動する。例えば、Ｆｃ領域にＫｎＨを有する多重特異性抗体は、各Ｆｃ領域に連結された単一可変ドメインを更に含むことができ、又は類似したもしくは異なる軽鎖可変領域と対合する異なる重鎖可変ドメインを更に含むことができる。ＫｎＨ技術を用いて、２つの異なる受容体細胞外ドメインを一緒に対合させること、又は（例えばアフィボディ、ペプチボディ及び他のＦｃ融合体を含む）異なる標的認識配列を含む任意の他のポリペプチド配列を対合させることもできる。
【００７２】
本明細書で使用する用語「ノブ変異」は、ポリペプチドが別のポリペプチドと相互作用する界面でポリペプチドに突起（ノブ）を導入する変異を指す。幾つかの実施態様において、他のポリペプチドはホール変異を有する（例えば、米国特許第５７３１１６８号、米国特許第５８０７７０６号、米国特許第５８２１３３３号、米国特許第７６９５９３６号、米国特許第８２１６８０５号（各々はその全体が参照によって本明細書に援用される）を参照）。
【００７３】
本明細書で使用する用語「ホール変異」は、ポリペプチドが別のポリペプチドと相互作用する界面でポリペプチドに空洞（ホール）を導入する変異を指す。幾つかの実施態様において、他のポリペプチドはノブ変異を有する（例えば、米国特許第５７３１１６８号、米国特許第５８０７７０６号、米国特許第５８２１３３３号、米国特許第７６９５９３６号、米国特許第８２１６８０５号（各々はその全体が参照によって本明細書に援用される）を参照）。
【００７４】
抗体は、抗原により誘導される又は抗原と関連した活性、例えばＩＬ−１７及び／又はＩＬ−１３誘導活性などを、その活性が抗体の非存在下で測定された活性と比較して低下した場合「阻害する」。ある実施態様において、抗体は抗原の活性を、抗体の非存在下における活性と比較して抗体の存在下において少なくとも１０％阻害する。幾つかの実施態様において、抗体は活性を少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、又は少なくとも９０％又は１００％阻害する。活性が抗体の非存在下における活性と比較して抗体の存在下において少なくとも５０％低下した場合、抗体は抗原又はその関連する活性を「中和する」と考えられている。幾つかの実施態様において、中和抗体は活性を少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、又は少なくとも９０％又は１００％阻害する。ある実施態様において、ＩＬ−１７及び／又はＩＬ−１３誘導活性は、インビトロ又はインビボでの細胞の増殖である。他のある実施態様において、ＩＬ−１７及び／又はＩＬ−１３誘導活性は、ＩＬ−１７媒介性及び／又はＩＬ−１３媒介性炎症反応又は免疫関連疾患である。ある実施態様において、ＩＬ−１７及び／又はＩＬ−１３誘導活性は、ＩＬ−１７媒介性及び／又はＩＬ−１３媒介性の炎症細胞の浸潤である。
【００７５】
用語「治療薬」は疾患を治療することに用いられる任意の薬剤を指す。治療薬は、例えば、ポリペプチド（例えば、抗体、イムノアドヘシン又はペプチボディ）、標的をコードする核酸分子に結合し得るタンパク質又は核酸分子に結合し得るアプタマー又は小分子（すなわち、ｓｉＲＮＡを）などであり得る。
【００７６】
用語「コントローラー」又は「プリベンター（ｐｒｅｖｅｎｔｏｒ）」は、喘息の炎症を制御するために使用される任意の治療薬を指す。コントローラーの例は、コルチコステロイド、ロイコトリエン受容体アンタゴニスト（例えば、モンテルカスト、ジレウトン、プランルカスト、ザフィルルカストロイコトリエンの合成又は活性を阻害する）、ＬＡＢＡ、コルチコステロイド／ＬＡＢＡの組み合わせ組成物、テオフィリン（アミノフィリンを含む）、クロモグリク酸ナトリウム、ネドクロミルナトリウム、オマリズマブ、ＬＡＭＡ、ＭＡＢＡ（例えば、二官能性ムスカリンアンタゴニスト−ベータ２アゴニスト）、５−リポキシゲナーゼ活性化タンパク質（ＦＬＡＰ）阻害剤、及び酵素ＰＤＥ−４阻害剤（例えば、ロフルミラスト）を含む。「第二コントローラー」は典型的には第一コントローラーとは同一でないコントローラーを指す。
【００７７】
用語「コルチコステロイド節約（ｃｏｒｔｉｃｏｓｔｅｒｏｉｄ  ｓｐａｒｉｎｇ）」又は「ＣＳ」は、他の治療薬の投与に起因する疾患の治療のためにコルチコステロイドを摂取している患者の疾患を治療するために使用されるコルチコステロイドの頻度及び／又は量の減少、又は消失を意味する。「ＣＳ節約剤」は、コルチコステロイドを摂取している患者においてＣＳを生じることが可能な治療薬を指す。
【００７８】
用語「コルチコステロイド」は、限定されないが、フルチカゾン（プロピオン酸フルチカゾン（ＦＰ）を含む）、ベクロメタゾン、ブデソニド、シクレソニド、モメタゾン、フルニソリド、ベタメタゾン及びトリアムシノロンを含む。「吸入コルチコステロイド」は、吸入による送達に適しているコルチコステロイドを意味する。典型的な吸入コルチコステロイドは、フルチカゾン、プロピオン酸ベクロメタゾン、ブデノシド、フロ酸モメタゾン、シクレソニド、フルニソリド、トリアムシノロンアセトニド、及び現在利用可能又は将来利用可能になる他のコルチコステロイドが挙げられる。吸入することができかつ長時間作用型β２−アゴニストと併用されるコルチコステロイドの例は、限定されないが、ブデソニド／ホルモテロール及びフルチカゾン／サルメテロールが含まれる。
【００７９】
コルチコステロイド／ＬＡＢＡ併用薬の例は、フロ酸フルチカゾン／ビランテロールトリフェナターテ（ｖｉｌａｎｔｅｒｏｌ  ｔｒｉｆｅｎａｔａｔｅ）及びインダカテロール／モメタゾンを含む。
【００８０】
用語「ＬＡＢＡ」は、長時間作用型β−２アゴニストを意味し、そのアゴニストは、例えば、サルメテロール、ホルモテロール、バンブテロール、アルブテロール、インダカテロール、アルホルモテロール及びクレンブテロールが含まれる。
【００８１】
用語「ＬＡＭＡ」は長時間作用型ムスカリンアンタゴニストを意味し、そのアゴニストはチオトロピウムを含む。
【００８２】
ＬＡＢＡ／ＬＡＭＡの組み合わせの例は、限定されないが、オロダテロールチオトロピウム（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ’ｓ）及びインダカテロールグリコピロニウム（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）を含む。
【００８３】
用語「ＳＡＢＡ」は、短時間作用型β−２アゴニストを意味し、限定されないが、サルブタモール、レボサルブタモール、フェノテロール、テルブタリン、ピルブテロール、プロカテロール、ビトルテロール、リミテロール、カルブテロール、ツロブテロール及びレプロテロールを含む。
【００８４】
ロイコトリエン受容体アンタゴニスト（時にはｌｅｕｋａｓｔと称する）（ＬＴＲＡ）は、ロイコトリエンを阻害する薬物である。ロイコトリエン阻害剤の例には、モンテルカスト、ジロートン、プランルカスト、及びザフィルルカストが含まれる。
【００８５】
用語「ＦＥＶ１」は、強制呼気の最初の一秒間に吐き出された空気の体積を指す。それは気道閉塞の尺度である。ＦＥＶ１の２０％減少（ＰＣ２０）を誘導するために必要とされるメサコリンの刺激的濃度は気道過敏性の尺度である。ＦＥＶ１は他の同様の方法、例えばＦＥＶ１で留意され得、全てのその類似の異形が同じ意味を持つことが理解されるべきである。
【００８６】
用語「ＦＥＶ１の相対的変化」＝（治療の第１２週でのＦＥＶ１−治療開始前のＦＥＶ１）をＦＥＶ１で割ったもの。
【００８７】
用語「ＰＥＦ」は、最大呼気流量を意味し、これは完全吸気後の最大の強制呼気中に達成される最大流量を指す。これは、気道の機能を測定するために使用することができるパラメーターである。
【００８８】
本明細書で使用する場合、「ＦＶＣ」は、（ＦＥＶ１のように１秒間に排出された空気の量とは対照的に）残留体積に対して完全吸気と最大呼息の間の肺の空気の体積の変化を測定する標準試験を指す「努力肺活量」を指す。これは、機能的な肺気量の測定値である。ＩＰＦ、過敏性肺炎、サルコイドーシス、及び全身性硬化症を含む間質性肺疾患のような拘束性肺疾患の患者において、ＦＶＣは、肺実質の瘢痕に起因して典型的には低減される。
【００８９】
用語「軽度の喘息」は、一般的に１週間に２回未満の症状又は増悪、１ヶ月に２回未満の夜行性の症状を経験する患者を指し、増悪の間に無症候性である。軽度の、断続的な喘息は必要に応じて以下によってしばしば治療される：吸入気管支拡張薬（短時間作用型吸入β２アゴニスト）；既知のトリガーの回避；毎年のインフルエンザワクチン接種；６〜１０年毎の肺炎球菌ワクチン接種；及び場合によっては同定されたトリガーへの曝露の前の吸入β２−アゴニスト、クロモリン、又はネドクロミル。患者が短時間作用型β２アゴニストの必要性が増加している（例えば、急性増悪のために１日に短時間作用型β２−アゴニストを３〜４回以上使用する又は症状のため１月に一以上のキャニスターを使用する）場合、患者は治療に漸増が必要であり得る。
【００９０】
用語「中等度喘息」は、一般に、患者は週２回以上増悪を経験しかつその増悪が睡眠や活動に影響を与える；患者は１ヶ月２回以上喘息のため夜間に覚醒する；患者は短時間作用型吸入β２−アゴニストを毎日又は一日おきに必要とする慢性的な喘息症状を持っている；患者のＰＥＦ又はＦＥＶ１の治療前ベースラインが６０から８０％と予測され、及びＰＥＦ変動が２０から３０％である喘息を指す。
【００９１】
用語「重度の喘息」は、一般に、患者がほぼ継続した症状、頻繁な増悪、喘息に起因する頻繁な夜間覚醒を有し、活動が制限され、ＰＥＦ又はＦＥＶ１ベースラインが６０％未満と予測され、かつＰＥＦ変動が２０〜３０％である喘息を指す。
【００９２】
救助薬の例としては、アルブテロール、ベントリンなどが含まれる。
【００９３】
「耐性」とは、治療薬による治療後にほとんど又は全く有意な改善を示さない疾患を指す。例えば、喘息が制御されないままであるか又はＦＥＶ１が改善しないかを確定するために、高用量のＩＣＳ（例えば、一日のコルチコステロイドの総用量又は５００マイクログラム以上のＦＰ（又は等価物）の一日の総用量を３日間又はそれ以上連続して４倍する）、又は全身のコルチコステロイドによる治療を要する喘息はしばしば重度の難治性喘息と考えられる。
【００９４】
本明細書に提供される治療薬は、非経口、皮下、腹腔内、肺内、及び鼻腔内を含む、任意の適切な手段により投与することができる。非経口注入には、筋肉内、静脈内、動脈内、腹腔内、又は皮下投与が含まれる。幾つかの実施態様では、治療薬は吸入される。幾つかの実施態様によれば、投与は注射、例えば、静脈内又は皮下注射によって与えられる。幾つかの実施態様によれば、治療薬は、注射器（例えば、充填済又は未充填）又はオートインジェクターを使用して投与される。
【００９５】
疾患の予防又は治療のために、治療薬の適量は、治療する疾患のタイプ、疾患の重症度及び過程、治療薬が予防を目的としてか治療を目的として投与されるのかどうか、以前の治療法、患者の病歴、及び薬剤への反応、及び主治医の判断により決定されるであろう。治療剤は、患者に対して、単回、又は一連の治療に渡って適切に投与される。治療薬組成物は良好な医療行為に合致した方法で処方され、投与され、投薬される。これに関連した考慮因子としては、治療すべき具体的な疾患、治療すべき具体的な哺乳動物、個々の患者の臨床状態、疾患の原因、薬剤の送達部位、投与方法、投与スケジュール及び医師にとって既知の他の因子が挙げられる。
【００９６】
「患者の応答」又は「応答」（及びその文法的バリエーション）は、限定しないが、（１）減速及び完全な停止を含む疾患の進行のある程度の阻害；（２）疾患の発現及び／又は症状の数の減少；（３）病変サイズの縮小；（４）隣接末梢器官及び／又は組織への疾患細胞浸潤の阻害（すなわち、減少、減速又は完全停止）；（５）疾患拡散の阻害（すなわち減少、減速又は完全停止）；（６）疾病病変の退縮又はアブレーションを、必ずでは無いが、もたらし得る自己免疫応答の減少；（７）疾患に伴う１以上の症状のある程度の軽減；（８）治療後の無病を提示する期間の増加；及び又は（９）治療後の任意の時点での死亡率の減少を含む、患者に対する利益を示す任意のエンドポイントを使用して評価することができる。
【００９７】
「親和性」とは、分子（例えば、抗体）の単一結合部位とその結合パートナー（例えば、抗原）との間の非共有結合相互作用の総和の強度を指す。本明細書で使用する場合、特に断らない限り、「結合親和性」は、結合対（例えば、抗体と抗原）のメンバー間の１：１の相互作用を反映している本質的な結合親和性を指す。そのパートナーＹに対する分子Ｘの親和性は、一般的に解離定数（Ｋｄ）で表すことができる。親和性は、本明細書に記載したものを含む、当技術分野で知られている一般的な方法によって測定することができる。結合親和性を測定するための特定の事例的及び典型的な実施態様を本明細書に記載する。
【００９８】
「親和性成熟」抗体とは、その改変を有していない親抗体と比較して、抗原に対する抗体の親和性に改良を生じせしめる、その一又は複数の超可変領域（ＨＶＲ）において一又は複数の改変を持つものである。
【００９９】
本明細書で使用される用語「抗ＩＬ−１７抗体」及び「ＩＬ−１７に結合する抗体」は、ＩＬ−１７を標的とし、診断薬剤及び／又は治療的薬剤として有用であるように、ＩＬ−１７Ａホモ二量体、ＩＬ−１７Ｆホモ二量体、及び／又はＩＬ−１７ＡＦへテロ二量体と十分な親和性で結合することができる抗体を指す。幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１７抗体の、無関係な、非ＩＬ−１７タンパク質への結合の程度は、例えば、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）によって測定される場合、抗体のＩＬ−１７への結合の約１０％未満である。ある実施態様において、ＩＬ−１７へ結合する抗体は、解離定数（Ｋｄ）が、≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭ、又は≦０．００１ｎＭ（例えば、１０−８Ｍ未満、例えば、１０−８Ｍから１０−１３Ｍ、例えば、１０−９Ｍから１０−１３Ｍ）である。ある実施態様において、抗ＩＬ−１７抗体は、異なる種由来のＩＬ−１７間で保存されているＩＬ−１７のエピトープに結合する。幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１７抗体は、多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体である。
【０１００】
幾つかの実施態様において、抗ＩＬ１７抗体は、ＩＬ−１７Ａホモ二量体に結合することができる。幾つかの実施態様において、抗ＩＬ１７抗体は、ＩＬ−１７Ａホモ二量体及びＩＬ−１７ＡＦへテロ二量体に結合することができる。幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１７抗体は、ＩＬ−１７Ａホモ二量体、ＩＬ−１７Ｆホモ二量体及びＩＬ−１７ＡＦへテロ二量体に結合することができる。幾つかのそのような実施態様において、ＩＬ−１７Ａホモ二量体、ＩＬ−１７Ｆホモ二量体及びＩＬ−１７ＡＦへテロ二量体に結合することができる抗ＩＬ−１７抗体は、ＩＬ−１７Ａ及びＦ抗体又はＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆ交差反応性抗体又はＩＬ−１７Ａ／Ｆ交差反応性抗体と称することができる。あるそのような実施態様において、ＩＬ−１７Ａ及びＦ交差反応性抗体は、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−１７Ｆ及び／又はＩＬ−１７ＡＦヘテロ二量体上の同一又は類似のエピトープに結合する。ある実施態様において、ＩＬ−１７Ａ及びＦ交差反応性抗体は、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−１７Ｆ及び／又はＩＬ−１７ＡＦヘテロ二量体上の同一又は類似のエピトープと十分な親和性で結合する。特定の有利な実施態様において、ＩＬ−１７Ａ及びＦ交差反応性抗体又は二重特異性抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７抗体は、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−１７Ｆ及びＩＬ−１７ＡＦと高い親和性で結合する。ＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆの構造は報告されている。Hymowitz et al., 2001, Embo J, 20(19):5332-41, Ely et al., 2009, Nature Immunology 10(12):1245-1252、及びLiu et al., 2013, Nature Communications DOI: 10.1038/ ncomms2880を参照。ＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆの表面領域に存在するアミノ酸残基を含む類似又は同一のエピトープは、構造から推定することができる。
【０１０１】
用語「抗ＩＬ−１３抗体」及び「ＩＬ−１３に結合する抗体」は、抗体が、ＩＬ−１３を標的とし、診断薬剤及び／又は治療的薬剤として有用であるように、十分な親和性でＩＬ−１３に結合することができる抗体を指す。幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３抗体の、無関係な、非ＩＬ−１３タンパク質への結合の程度は、例えば、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）によって測定される場合、抗体のＩＬ−１３への結合の約１０％未満である。ある実施態様において、ＩＬ−１３へ結合する抗体は、解離定数（Ｋｄ）が、≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭ、又は≦０．００１ｎＭ（例えば、１０−８Ｍ未満、例えば、１０−８Ｍから１０−１３Ｍ、例えば、１０−９Ｍから１０−１３Ｍ）である。ある実施態様において、抗ＩＬ−１３抗体は、異なる種由来のＩＬ−１３間で保存されているＩＬ−１３のエピトープに結合する。幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３抗体は、多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体である。
【０１０２】
本明細書における用語「抗体」は最も広い意味で用いられ、様々な抗体構造を包含し、限定されないが、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば二重特異性抗体）、及び、所望の抗原結合活性を示す限り、抗体断片を含む。
【０１０３】
「抗体断片」は、インタクトな抗体が結合する抗原に結合するインタクトな抗体の一部を含む、インタクトな抗体以外の分子を指す。抗体断片の例としては、限定されないが、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２；ダイアボディ；直鎖状抗体；単鎖抗体分子（例えばｓｃＦｖ）；及び抗体断片から形成された多重特異性抗体を含む。
【０１０４】
競合アッセイは、標的抗原への結合について参照抗体と競合する抗体を同定するために使用され得る。ある実施態様では、このような競合する抗体は、参照抗体によって結合される同じエピトープ（例えば線状又はコンホメーションエピトープ）に結合する。抗体が結合するエピトープをマッピングするための詳細な典型的な方法が、例えば、Morris (1996) “Epitope Mapping Protocols," in Methods in Molecular Biology vol. 66 (Humana Press, Totowa, NJ）に提供されている。
【０１０５】
参照抗体と「同一のエピトープに結合する抗体」とは、競合アッセイにおいて５０％以上、参照抗体のその抗原への結合をブロックする抗体を指し、逆に参照抗体は、競合アッセイにおいて５０％以上、その抗体のその抗原への結合をブロックする（時にはクロスブロッキングと称される）。典型的な競合アッセイが、本明細書において提供される。競合分析及びエピトープマッピングのための適切なアッセイには、限定されないが、クロスブロッキングアッセイ、競合ＥＬＩＳＡ又はビアコア、ＮＭＲ、及びＸ線結晶学を含む。
【０１０６】
本明細書における目的のための「アクセプターヒトフレームワーク」とは、下記に定義されるように、ヒト免疫グロブリンフレームワーク又はヒトコンセンサスフレームワークから得られる軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）フレームワーク又は重鎖可変ドメイン（ＶＨ）フレームワークのアミノ酸配列を含有するフレームワークである。ヒト免疫グロブリンのフレームワーク又はヒトコンセンサスフレームワーク「に由来する」アクセプターヒトフレームワークは、その同一のアミノ酸配列を含んでもよく、又はそれはアミノ酸配列の変化を含み得る。幾つかの実施態様において、アミノ酸変化の数は、１０以下、９以下、８以下、７以下、６以下、５以下、４以下、３以下、又は２以下である。幾つかの実施態様において、ＶＬアクセプターヒトフレームワークは、ＶＬのヒト免疫グロブリンのフレームワーク配列又はヒトコンセンサスフレームワーク配列に、配列が同一である。
【０１０７】
用語「キメラ」抗体は、重鎖及び／又は軽鎖の一部分が特定の起源又は種から由来し、一方重鎖及び／又は軽鎖の残りが異なる起源又は種から由来する抗体を指す。
【０１０８】
抗体の「クラス」は、その重鎖が保有する定常ドメイン又は定常領域のタイプを指す。抗体の５つの主要なクラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ，及びＩｇＭがあり、これらのうちの幾つかは、「サブクラス」（アイソタイプ）（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２）へと更に分割され得る。免疫グロブリンの異なるクラスに対応する重鎖定常ドメインは、それぞれα、δ、ε、γ、及びμと呼ばれる。
【０１０９】
本明細書で用いられる「細胞傷害性薬物」という用語は、細胞の機能を阻害又は阻止し及び／又は細胞死又は破壊を生ずる物質を指す。細胞傷害性薬物は、限定されないが、放射性同位体（例えば、Ａｔ２１１、Ｉ１３１、Ｉ１２５、Ｙ９０、Ｒｅ１８６、Ｒｅ１８８、Ｓｍ１５３、Ｂｉ２１２、Ｐ３２、Ｐｂ２１２及びＬｕの放射性同位体）；化学療法剤又は薬物（例えば、メトトレキセート、アドリアマイシン、ビンカアルカロイド（ビンクリスチン、ビンブラスチン、エトポシド）、ドキソルビシン、メルファラン、マイトマイシンＣ、クロラムブシル、ダウノルビシン又は他の挿入剤）；成長阻害剤、酵素及びその断片、例えば核酸分解酵素など；抗生物質；小分子毒素などの毒素、又は細菌、真菌、植物又は動物由来の酵素活性毒素（それらの断片及び／又はその変異体を含む）；及び様々な抗腫瘍剤又は抗癌剤を包含する。
【０１１０】
「エフェクター機能」とは、抗体のアイソタイプにより変わる、抗体Ｆｃ領域に起因する生物学的活性を指す。抗体のエフェクター機能の例には、Ｃ１ｑ結合及び補体依存性細胞障害（ＣＤＣ）；Ｆｃ受容体結合；抗体依存性細胞媒介性細胞障害（ＡＤＣＣ）；貪食作用；細胞表面受容体（例えば、Ｂ細胞受容体）のダウンレギュレーション；及びＢ細胞活性化が含まれる。
【０１１１】
薬剤、例えば、薬学的製剤の「有効量」は、例えば、所望の治療的又は予防的結果を達成するために、必要な用量及び期間で有効な量を指す。
【０１１２】
用語「Ｆｃ領域」は、定常領域の少なくとも一部を含む、免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を定義するために使用される。その用語は、天然配列Ｆｃ領域と変異体Ｆｃ領域を含む。幾つかの実施態様において、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は、Ｃｙｓ２２６又はＰｒｏ２３０から重鎖のカルボキシル末端まで伸長する。しかし、Ｆｃ領域のＣ末端リジン（Ｌｙｓ４４７）は存在しているか、又は存在していない場合がある。本明細書に明記されていない限り、Ｆｃ領域又は定常領域内のアミノ酸残基の番号付けは、Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD, 1991に記載されるように、ＥＵインデックスとも呼ばれるＥＵ番号付けシステムに従う。
【０１１３】
「フレームワーク」又は「ＦＲ」は、高頻度可変領域（ＨＶＲ）残基以外の可変ドメイン残基を意味する。可変ドメインのＦＲは、一般的に４つのＦＲのドメイン：ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、及びＦＲ４からなる。従って、ＨＶＲ配列及びＦＲ配列は、一般に次のＶＨ（又はＶＬ）の配列：ＦＲ１−Ｈ１（Ｌ１）−ＦＲ２−Ｈ２（Ｌ２）−ＦＲ３−Ｈ３（Ｌ３）−ＦＲ４に現れる。
【０１１４】
用語「完全長抗体」、「インタクトな抗体」及び「全抗体」は、本明細書中で互換的に使用され、天然型抗体構造と実質的に類似の構造を有するか、又は本明細書で定義されるＦｃ領域を含む重鎖を有する抗体を指す。
【０１１５】
用語「宿主細胞」、「宿主細胞株」及び「宿主細胞培養」は互換的に使用され、外因性の核酸が導入された細胞を指し、そのような細胞の子孫を含める。宿主細胞は、「形質転換体」及び「形質転換された細胞」を含み、継代の数に関係なく、それに由来する一次形質転換細胞及び子孫が含まれる。子孫は親細胞と核酸含量が完全に同一ではないかもしれないが、突然変異が含まれる場合がある。最初に形質転換された細胞においてスクリーニング又は選択されたものと同じ機能又は生物活性を有する変異型子孫が本明細書において含まれる。
【０１１６】
「ヒト抗体」は、ヒト又はヒト細胞により産生されるか、又はヒト抗体のレパートリー又は他のヒト抗体をコードする配列を利用した非ヒト起源に由来する抗体のアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を有するものである。ヒト抗体のこの定義は、非ヒト抗原結合残基を含むヒト化抗体を特に除外する。
【０１１７】
「ヒトコンセンサスフレームワーク」とは、ヒト免疫グロブリンＶＬ又はＶＨフレームワーク配列の選択において最も一般的に存在するアミノ酸残基を表すフレームワークである。一般的には、ヒト免疫グロブリンＶＬ又はＶＨ配列の選択は、可変ドメイン配列のサブグループからのものである。一般的には、配列のサブグループは、Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, NIH Publication 91-3242, Bethesda MD (1991), vols. 1-3にあるサブグループである。幾つかの実施態様において、ＶＬについて、サブグループは上掲のＫａｂａｔらにあるサブグループカッパＩである。幾つかの実施態様において、ＶＨについて、サブグループは上掲のＫａｂａｔらにあるサブグループＩＩＩである。
【０１１８】
「ヒト化」抗体は、非ヒトＨＶＲ由来のアミノ酸残基、及びヒトＦＲ由来アミノ酸残基を含むキメラ抗体を指す。ある実施態様において、ヒト化抗体は、少なくとも一つ、典型的には二つの可変ドメインの実質的に全てを含み、ＨＶＲ（例えば、ＣＤＲ）の全て又は実質的に全てが、非ヒト抗体のものに対応し、ＦＲの全て又は実質的に全てが、ヒト抗体のものに対応する。ヒト化抗体は、任意で、ヒト抗体由来の抗体定常領域の少なくとも一部を含んでもよい。抗体の「ヒト化型」、例えば、非ヒト抗体は、ヒト化を遂げた抗体を指す。
【０１１９】
本明細書で使用される用語「超可変領域」又は「ＨＶＲ」は、配列が超可変（「相補性決定領域」又は「ＣＤＲ」）であるか、及び／又は構造的に定義されたループ（「超可変ループ」）を形成するか、及び／又は抗原接触残基（「抗原接触」）を含む抗体可変ドメインの各領域を指す。一般的に、抗体は、６つのＨＶＲ：ＶＨ（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）に３つ、及びＶＬ（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）に３つを含む。本明細書における典型的なＨＶＲは
（ａ）アミノ酸残基２６−３２（Ｌ１）、５０−５２（Ｌ２）、９１−９６（Ｌ３）、２６−３２（Ｈ１）、５３−５５（Ｈ２）、及び９６−１０１（Ｈ３）で生じる超可変ループ（Chothia and Lesk, J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987)）；
（ｂ）アミノ酸残基２４−３４（Ｌ１）、５０−５６（Ｌ２）、８９−９７（Ｌ３）、３１−３５ｂ（Ｈ１）、５０−６５（Ｈ２）、及び９５−１０２（Ｈ３）で生じるＣＤＲ（Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991)）；
（ｃ）アミノ酸残基２７ｃ−３６（Ｌ１）、４６−５５（Ｌ２）、８９−９６（Ｌ３）、３０−３５ｂ（Ｈ１）、４７−５８（Ｈ２）、及び９３−１０１（Ｈ３）で生じる抗原接触（MacCallum et al. J. Mol. Biol. 262: 732-745 (1996)）；及び
（ｄ）ＨＶＲアミノ酸残基４６−５６（Ｌ２）、４７−５６（Ｌ２）、４８−５６（Ｌ２）、４９−５６（Ｌ２）、２６−３５（Ｈ１）、２６−３５ｂ（Ｈ１）、４９−６５（Ｈ２）、９３−１０２（Ｈ３）、及び９４−１０２（Ｈ３）を含む、（ａ）、（ｂ）、及び／又は（ｃ）の組み合わせ、を含む。
【０１２０】
特に断らない限り、可変ドメイン内のＨＶＲ残基及び他の残基（例えば、ＦＲ残基）は、上掲のＫａｂａｔらに従い、本明細書において番号が付けられる。
【０１２１】
「イムノコンジュゲート」は、一以上の異種分子にコンジュゲートした抗体であり、限定されないが、細胞傷害性薬物を含む。
【０１２２】
「個体」又は「被験体」は、哺乳動物である。哺乳動物は、限定されないが、家畜動物（例えば、ウシ、ヒツジ、ネコ、イヌ、ウマ）、霊長類（例えば、ヒト、及びサルなどの非ヒト霊長類）、ウサギ、げっ歯類（例えば、マウス及びラット）を含む。ある実施態様において、個体又は被験体はヒトである。
【０１２３】
「単離された」抗体は、その自然環境の成分から分離されたものである。幾つかの実施態様において、抗体は、例えば、電気泳動（例えば、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、等電点電気泳動（ＩＥＦ）、キャピラリー電気泳動）又はクロマトグラフィー（例えば、イオン交換又は逆相ＨＰＬＣ）により決定されるように、９５％以上又は９９％の純度に精製される。抗体純度の評価法の総説としては、例えばFlatman et al., J. Chromatogr. B 848:79-87 (2007)を参照のこと。
【０１２４】
「単離された」核酸は、その自然環境の成分から分離された核酸分子を指す。単離された核酸は、核酸分子を通常含む細胞に含まれる核酸分子を含むが、しかし、その核酸分子は、染色体外又はその自然の染色体上の位置とは異なる染色体位置に存在している。
【０１２５】
「抗ＩＬ−１７抗体をコードする単離された核酸」は、抗体の重鎖及び軽鎖（又はその断片）をコードする一以上の核酸分子を指し、単一のベクター又は別個のベクター内のそのような核酸分子、及び宿主細胞の一以上の位置に存在するそのような核酸分子を含む。
【０１２６】
「抗ＩＬ−１３抗体をコードする単離された核酸」は、抗体の重鎖及び軽鎖（又はその断片）をコードする一以上の核酸分子を指し、単一のベクター又は別個のベクター内のそのような核酸分子、及び宿主細胞の一以上の位置に存在するそのような核酸分子を含む。
【０１２７】
本明細書で使用される用語「モノクローナル抗体」とは、実質的に均一な抗体の集団から得られる抗体を意味し、すなわち、例えば、天然に生じる変異を含み、又はモノクローナル抗体製剤の製造時に発生し、一般的に少量で存在している変異体などの、可能性のある変異体抗体を除き、集団を構成する個々の抗体は同一であり、及び／又は同じエピトープに結合する。異なる決定基（エピトープ）に対する異なる抗体を典型的に含むポリクローナル抗体の調製物とは異なり、モノクローナル抗体の調製物の各モノクローナル抗体は、抗原の単一の決定基に対するものである。「モノクローナル」なる修飾語句は、抗体の、実質的に均一な抗体の集団から得られたものであるという特性を示し、抗体を何か特定の方法で生産しなければならないと解釈されるべきものではない。例えば、モノクローナル抗体は、限定されないが、ハイブリドーマ法、組換えＤＮＡ法、ファージディスプレイ法、ヒト免疫グロブリン遺伝子座の全部又は一部を含むトランスジェニック動物を利用する方法を含む様々な技術によって作成され、モノクローナル抗体を作製するためのそのような方法及び他の例示的な方法は、本明細書に記載されている。幾つかの実施態様において、モノクローナル抗体は、多重特異性（例えば二重特異性）抗体である。
【０１２８】
「ネイキッド抗体」とは、異種の部分（例えば、細胞傷害性部分）又は放射性標識にコンジュゲートしていない抗体を指す。ネイキッド抗体は薬学的製剤中に存在してもよい。
【０１２９】
「天然型抗体」は、天然に生じる様々な構造をとる免疫グロブリン分子を指す。例えば、天然型ＩｇＧ抗体は、ジスルフィド結合している２つの同一の軽鎖と２つの同一の重鎖から成る、約１５０，０００ダルトンのヘテロ四量体糖タンパク質である。Ｎ末端からＣ末端に、各重鎖は、可変重鎖ドメイン又は重鎖可変ドメインとも呼ばれる可変領域（ＶＨ）、続いて３つの定常ドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３）を有する。同様に、Ｎ末端からＣ末端に、各軽鎖は、可変軽鎖ドメイン又は軽鎖可変ドメインとも呼ばれる可変領域（ＶＬ）、続いて軽鎖定常領域とも呼ばれる定常軽鎖（ＣＬ）ドメインを有する。抗体の軽鎖は、その定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、カッパ（κ）とラムダ（λ）と呼ばれる、２つのタイプの何れかに割り当てることができる。
【０１３０】
用語「添付文書」は、効能、用法、用量、投与、併用療法、禁忌についての情報、及び／又はそのような治療用製品の使用に関する警告を含む、治療用製品の商用パッケージに慣習的に含まれている説明書を指すために使用される。用語「添付文書」はまた、意図される用途、試験の原理、試薬の調製及び取り扱い、検体の収集及び調製、アッセイのキャリブレーション及びアッセイ手順、アッセイの感度と特異性などの性能と精度のデータに関する情報を含む、治療用製品のコマーシャルパッケージに慣習的に含まれている説明書を指すためにも使用される。
【０１３１】
「参照ポリペプチド配列に関する「パーセント（％）アミノ酸配列同一性」は、配列を整列させ、最大のパーセント配列同一性を得るために必要ならば間隙を導入した後、如何なる保存的置換も配列同一性の一部と考えないとした、参照ポリペプチドのアミノ酸残基と同一である候補配列中のアミノ酸残基のパーセントとして定義される。パーセントアミノ酸配列同一性を決定する目的のためのアラインメントは、当業者の技量の範囲にある種々の方法、例えばＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ−２、ＡＬＩＧＮ、又はＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェアのような公に入手可能なコンピュータソフトウェアを使用することにより達成可能である。当業者であれば、比較される配列の全長に対して最大のアラインメントを達成するために必要な任意のアルゴリズムを含む、アラインメントを測定するための適切なパラメーターを決定することができる。しかし、ここでの目的のためには、％アミノ酸配列同一性値は、配列比較コンピュータプログラムＡＬＩＧＮ−２を用いて得られる。ＡＬＩＧＮ−２配列比較コンピュータプログラムはジェネンテク社によって作成され、ソースコードは米国著作権庁、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ  Ｄ．Ｃ．、２０５５９に使用者用書類とともに提出され、米国著作権登録番号ＴＸＵ５１００８７の下で登録されている。ＡＬＩＧＮ−２プログラムはジェネンテク社、Ｓｏｕｔｈ  Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａを通して公的に入手可能であり、ソースコードからコンパイルしてもよい。ＡＬＩＧＮ−２プログラムは、ＵＮＩＸ（登録商標）オペレーティングシステム、特にデジタルＵＮＩＸ（登録商標） Ｖ４．０Ｄでの使用のためにコンパイルされる。全ての配列比較パラメーターは、ＡＬＩＧＮ−２プログラムによって設定され変動しない。
【０１３２】
アミノ酸配列比較にＡＬＩＧＮ−２が用いられる状況では、与えられたアミノ酸配列Ａの、与えられたアミノ酸配列Ｂとの、又はそれに対する％アミノ酸配列同一性（あるいは、与えられたアミノ酸配列Ｂと、又はそれに対して或る程度の％アミノ酸配列同一性を持つ又は含む与えられたアミノ酸配列Ａと言うこともできる）は次のように計算される：
分率Ｘ／Ｙの１００倍
ここで、Ｘは、Ａ及びＢのプログラムアラインメントにおいて、配列アラインメントプログラムＡＬＩＧＮ−２によって同一であると一致したスコアのアミノ酸残基の数であり、ＹはＢの全アミノ酸残基の全数である。アミノ酸配列Ａの長さがアミノ酸配列Ｂの長さと一致しない場合、ＡのＢに対する％アミノ酸配列同一性は、ＢのＡに対する％アミノ酸配列同一性とは一致しないと評価されるであろう。特に断らない限りは、ここで使用される全ての％アミノ酸配列同一性値は、直前のパラグラフに記載したように、ＡＬＩＧＮ−２コンピュータプログラムを用いて得られる。
【０１３３】
用語「薬学的製剤」は、その中に有効で含有される活性成分の生物学的活性を許容するような形態であって、製剤を投与する被験体にとって許容できない毒性である他の成分を含まない調製物を指す。
【０１３４】
「薬学的に許容可能な担体」は、被験体に非毒性であり、有効成分以外の薬学的製剤中の成分を指す。薬学的に許容可能な担体は、限定されないが、緩衝剤、賦形剤、安定剤、又は保存剤を含む。
【０１３５】
特に断らない限り、本明細書で使用する用語「ＩＬ−１７」は、ＩＬ−１７Ａホモ二量体、ＩＬ−１７Ｆホモ二量体、及び／又はＩＬ−１７ＡＦヘテロ二量体を指す。特に断らない限り、用語ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−１７ＡＡ、ＩＬ−１７ＡＡホモ二量体、及びＩＬ−１７Ａホモ二量体は、交換可能に使用される。特に断らない限り、用語ＩＬ−１７Ｆ、ＩＬ−１７ＦＦ、ＩＬ−１７ＦＦホモ二量体、及びＩＬ−１７Ｆホモ二量体は、交換可能に使用される。特に断らない限り、用語ＩＬ−１７ＡＦ、ＩＬ−１７ＡＦヘテロ二量体、及びＩＬ−１７Ａ／Ｆヘテロ二量体は、交換可能に使用される。特に断らない限り、本明細書で使用する用語ＩＬ−１７は、霊長類（例えばヒト）及びげっ歯類（例えば、マウス、ラット）などの哺乳動物を含む任意の脊椎動物由来の任意の天然型ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−１７Ｆ及び／又はＩＬ−１７ＡＦへテロ二量体を指す。その用語は、「完全長」で未処理のＩＬ−１７、並びに細胞内でのプロセシングから生じた任意の形態のＩＬ−１７を含む。その用語はまた、天然に存在するＩＬ−１７の変異体、例えば、スプライス変異体又は対立遺伝子変異体を包含する。例示的なヒトＩＬ−１７Ａのアミノ酸配列は、配列番号７及び８に示される。例示的なヒトＩＬ−１７Ｆのアミノ酸配列は、配列番号９及び１０に示される。ある実施態様において、ＩＬ−１７の配列は、外因性、すなわち、非天然のシグナルペプチドを含む。ある実施態様において、ＩＬ−１７タンパク質は、シグナルペプチドを含まない成熟タンパク質である。
【０１３６】
特に断らない限り、本明細書で使用する用語「ＩＬ−１３」は、霊長類（例えばヒト）及びげっ歯類（例えば、マウス、ラット）などの哺乳動物を含む任意の脊椎動物起源由来の任意の天然型ＩＬ−１３を指す。その用語は、「完全長」で未処理のＩＬ−１３、並びに細胞内でのプロセシングから生じた任意の形態のＩＬ−１３を含む。その用語はまた、天然に存在するＩＬ−１３の変異体、例えば、スプライス変異体又は対立遺伝子変異体を包含する。例示的なヒトＩＬ−１３のアミノ酸配列は、配列番号１及び２、及びＳｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔアクセッション番号Ｐ３５２２５．２に示される。例示的なカニクイザルＩＬ−１３のアミノ酸配列は、配列番号４に示される。ある実施態様において、ＩＬ−１３の配列は、外因性、すなわち、非天然のシグナルペプチドを含む。ある実施態様において、ＩＬ−１３タンパク質は、シグナルペプチドを含まない成熟タンパク質である。
【０１３７】
本明細書で用いられるように、「治療」（及び「治療する（ｔｒｅａｔ）」又は「治療している（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」など文法上の変形）は、治療されている個体の自然経過を変えようと試みる臨床的介入を指し、予防のために、又は臨床病理の過程においての何れかで実行できる。治療の望ましい効果には、疾患の発生又は再発を予防すること、症状の緩和、症状の軽減、疾患のいかなる直接的又は間接的病理学的結果も減少すること、転移を予防すること、疾患進行の速度を減少すること、疾患状態の寛解又は緩和、及び寛解又は予後改善が含まれるが、これらに限定されない。幾つかの実施態様において、抗体は、疾患の発症を遅延させるか又は疾患の進行を遅くするために使用される。
【０１３８】
用語「可変領域」又は「可変ドメイン」は、抗体の抗原への結合に関与する抗体の重鎖又は軽鎖のドメインを指す。天然型抗体の可変重鎖ドメイン及び軽鎖（それぞれＶＨ及びＶＬ）は、４つの保存されたフレームワーク領域（ＦＲ）と３つの超可変領域（ＨＶＲ）を含む各ドメインを持ち、一般的に似たような構造を有する。（例えば、Kindt et al. Kuby Immunology, 6th ed., W.H. Freeman and Co. ９１頁、 (2007)を参照）。単一のＶＨ又はＶＬドメインは、抗原−結合特異性を付与するのに十分であり得る。更に、特定の抗原に結合する抗体は、相補的なＶＬ又はＶＨドメインのそれぞれのライブラリーをスクリーニングするために、抗原に特異的に結合する抗体からのＶＨ又はＶＬドメインを用いて単離することができる。例えば、Portolano et al., J. Immunol. 150:880-887 (1993); Clarkson et al., Nature 352:624-628 (1991)を参照。
【０１３９】
本明細書で使用される、用語「ベクター」は、それがリンクされている別の核酸を伝播することができる核酸分子を指す。この用語は、自己複製核酸構造としてのベクター、並びにそれが導入された宿主細胞のゲノムに組み込まれたベクターを含む。ある種のベクターは、それらが動作可能なように連結されている核酸の発現を導くことができる。このようなベクターは、本明細書では「発現ベクター」と言う。
【０１４０】
組成物及び方法
ある実施態様において、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に結合する二重特異性抗体が提供される。抗体は、例えば、呼吸器疾患（例えば、喘息及びＩＰＦなど）、好中球性疾患、ＩＬ−１７媒介性疾患、及びＩＬ−１３媒介性疾患を含む好酸球性疾患の診断又は治療のために有用である。例えば、米国特許出願公開第２０１２／０１４１４９２号、米国特許第８７１５６６９号又は国際公開第２００９／１３６２８６号（各々はその全体が参照によって本明細書に援用される）を参照。
【０１４１】
本明細書に記載されるように、好酸球の高い喘息患者集団の中で、好中球が高いサブグループと好中球が低いサブグループを同定することができる。ΔＦＥＶ１％によって測定されるように、抗ＩＬ−１３アンタゴニストのレブリキズマブは好酸球が高くかつ好中球が低いサブグループ内で高い治療効果を示したが、一方レブリキズマブは、好酸球が高くかつ好中球が高いサブグループ内では有効性が低い。図１５Ｃ及びＤを参照。このように、区分けされた別のグループである代わりに、好中球の高い喘息は好酸球性喘息と共存することができ、これは、中等度から重度の喘息を治療するための、本明細書に記載される抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の利点及びその使用を更にサポートする。従って、ある実施態様において、本発明は、本明細書に記載される個体に多重特異性抗体を投与することを含む、喘息、特に中等度から重度の喘息を、それを必要とする個体において治療する方法を提供し、ここで多重特異性抗体はレブリキズマブよりも個体において改善された有効性を示している。幾つかの実施態様において、喘息は、好酸球性喘息、Ｔｈ２高喘息、Ｔｈ２駆動型喘息又はＩＬ−１３高喘息である。幾つかの実施態様において、個体は、対照又は基準レベルと比較して、上昇した血中好酸球数及び／又は血中好中球数を有する。ある実施態様において、個体は血中に少なくとも１５０又は少なくとも３００好酸球／ｕｌで血中好酸球数を有する。ある実施態様において、個体は、患者集団の少なくとも中間血中好中球数である血中好中球数を有する。ある実施態様において、個体は、血中の少なくとも３８００好中球／ｕｌを有する。
【０１４２】
例示的な抗ＩＬ−１７抗体
幾つかの実施態様において、ＩＬ−１７に結合する単離された抗体が提供される。幾つかの実施態様において、単離されたＩＬ−１７抗体又は交差反応性抗ＩＬ−１７Ａ及びＦ抗体が提供され、ここで抗体はＩＬ−１７Ａホモ二量体、ＩＬ−１７Ｆホモ二量体、及び任意でＩＬ−１７ＡＦヘテロ二量体を結合する。幾つかの実施態様において、単離されたＩＬ−１７抗体又は交差反応性抗ＩＬ−１７Ａ及びＦ抗体は、ＩＬ−１７Ａホモ二量体、ＩＬ−１７Ｆホモ二量体、及びＩＬ−１７ＡＦヘテロ二量体を結合する。
【０１４３】
抗体１５Ｅ６及び１５Ｅ６ＦＫ
幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１７抗体は、（ａ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号４１、４３、８０、８１、及び１１４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号４２又は配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一、二、三、四、五、又は六つのＨＶＲを含む。
【０１４４】
幾つかの実施態様において、（ａ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号４１、４３、８０、８１、及び１１４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；及び（ｃ）配列番号４２又は配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも一つのＶＨ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＨ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む抗体が提供される。幾つかの実施態様において、抗体は、配列番号４２又は配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。幾つかの実施態様において、抗体は、配列番号４２又は配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、及び配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。幾つかの実施態様において、抗体は、配列番号４２又は配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３、及び配列番号４１、４３、８０、８１、及び１１４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２を含む。更なる実施態様において、抗体は、（ａ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号４１、４３、８０、８１、及び１１４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；及び（ｃ）配列番号４２又は配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。
【０１４５】
幾つかの実施態様において、抗体は、（ａ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号４１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；及び（ｃ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。幾つかの実施態様において、抗体は、（ａ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；及び（ｃ）配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。幾つかの実施態様において、抗体は、（ａ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号８０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；及び（ｃ）配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。幾つかの実施態様において、抗体は、（ａ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号８１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；及び（ｃ）配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。幾つかの実施態様において、抗体は、（ａ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号１１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；及び（ｃ）配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。
【０１４６】
幾つかの実施態様において、（ａ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一つのＶＬ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＬ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む抗体が提供される。幾つかの実施態様において、抗体は、（ａ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。
【０１４７】
幾つかの実施態様において、抗体は、（ａ）（ｉ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号４１、４３、８０、及び８１から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２又は配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される少なくとも一つのＶＨ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＨ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含むＶＨドメイン；及び（ｂ）（ｉ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される少なくとも一つのＶＬ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＬ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含むＶＬドメインを含む。
【０１４８】
幾つかの実施態様において、（ａ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号４１、４３、８０、８１、及び１１４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号４２又は配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号４７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む抗体が提供される。
【０１４９】
幾つかの実施態様において、（ａ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号４７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む抗体が提供される。
【０１５０】
幾つかの実施態様において、（ａ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号８０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号４７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む抗体が提供される。幾つかの実施態様において、（ａ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号８１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号４７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む抗体が提供される。幾つかの実施態様において、（ａ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号１１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号４７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む抗体が提供される。
【０１５１】
配列番号８０を含む本明細書に記載される何れかの実施態様において、ＸはＮを除く任意のアミノ酸であり得る。配列番号８０を含む本明細書に記載される何れかの実施態様において、ＸはＧ、Ａ、Ｑ、Ｈ、Ｄ、Ｋ、Ｓ、及びＲから選択され得る。配列番号８０を含む本明細書に記載される何れかの実施態様において、ＸはＧ、Ａ、Ｑ、Ｄ、及びＳから選択され得る。配列番号８０を含む本明細書に記載される何れかの実施態様において、ＸはＤ、Ｓ及びＱから選択され得る。配列番号８１を含む本明細書に記載される何れかの実施態様において、ＸはＳ又はＴを除く任意のアミノ酸であり得る。配列番号８１を含む本明細書に記載される何れかの実施態様において、Ｘは、Ａ、Ｇ、Ｐ、Ｎ及びＶから選択され得る。配列番号８１を含む本明細書に記載される何れかの実施態様において、Ｘは、Ａ、Ｇ及びＮから選択され得る。配列番号１１４を含む本明細書に記載される何れかの実施態様において、ＸはＤ、Ｓ又はＱから選択され得る。幾つかの実施態様において、配列番号４３のＮＷＳモチーフは、ＮＰＳに変更される。
【０１５２】
幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１７抗体は、配列番号３７、３９、８２、８３、及び１１５から選択されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含む。ある実施態様において、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の同一性を有するＶＨ配列は、参照配列に対して置換（例えば保存的置換）、挿入、又は欠失を含むが、その配列を含む抗ＩＬ−１７抗体はＩＬ−１７へ結合する能力を保持する。ある実施態様において、配列番号３７において、合計１から１０のアミノ酸が、置換され、挿入され、及び／又は欠失している。ある実施態様において、配列番号３９において、合計１から１０のアミノ酸が、置換され、挿入され、及び／又は欠失している。ある実施態様において、配列番号８２において、合計１から１０のアミノ酸が、置換され、挿入され、及び／又は欠失している。ある実施態様において、配列番号８３において、合計１から１０のアミノ酸が、置換され、挿入され、及び／又は欠失している。ある実施態様において、配列番号１１５において、合計１から１０のアミノ酸が、置換され、挿入され、及び／又は欠失している。ある実施態様において、置換、挿入、又は欠失は、ＨＶＲ外の（すなわちＦＲ内の）領域で生じる。任意で、抗ＩＬ−１７抗体は、配列番号３７のＶＨ配列を含み、その配列の翻訳後修飾を含む。任意で、抗ＩＬ−１７抗体は、配列番号３９のＶＨ配列を含み、その配列の翻訳後修飾を含む。任意で、抗ＩＬ−１７抗体は、配列番号８２のＶＨ配列を含み、その配列の翻訳後修飾を含む。任意で、抗ＩＬ−１７抗体は、配列番号８３のＶＨ配列を含み、その配列の翻訳後修飾を含む。任意で、抗ＩＬ−１７抗体は、配列番号１１５のＶＨ配列を含み、その配列の翻訳後修飾を含む。特定の実施態様において、重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号４１、４３、８０、８１、及び１１４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；及び（ｃ）配列番号４２又は配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、一つ、二つ、又は三つのＨＶＲを含む。ある実施態様において、ＶＨ配列は、配列番号４０、４１、４２、４３、４４、８０、８１、及び１１４から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも６０％、６４％、６５％、６８％、７０％、７５％、８０％、８２％、８５％、８８％、９０％、９２％、９３％、９４％、１００％の配列同一性を有するＨＶＲ配列を含み、ここで抗体はＩＬ−１７に結合する能力を保持している。ある実施態様において、ＶＨ配列は、配列番号４３に対して少なくとも９４％配列同一異性を有するＨＶＲ−Ｈ２配列を含む。ある実施態様において、ＶＨ配列は、グリコシル化されていない配列番号４３のアミノ酸配列を有するＨＶＲ−Ｈ２を含む。一実施態様において、ＶＨ配列は、配列番号８０、８１、又は１１４のアミノ酸配列を有するＨＶＲ−Ｈ２を含む。
【０１５３】
幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１７抗体が提供され、該抗体は、配列番号３８のアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む。ある実施態様において、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の同一性を有するＶＬ配列は、参照配列に対して置換（例えば保存的置換）、挿入、又は欠失を含むが、その配列を含む抗ＩＬ−１７抗体はＩＬ−１７へ結合する能力を保持する。ある実施態様において、配列番号３８において、合計１から１０のアミノ酸が、置換され、挿入され、及び／又は欠失している。ある実施態様において、置換、挿入、又は欠失は、ＨＶＲ外の（すなわちＦＲ内の）領域で生じる。任意で、抗ＩＬ−１７抗体は、配列番号３８のＶＬ配列を含み、その配列の翻訳後修飾を含む。特定の実施態様において、ＶＬは、（ａ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｂ）配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される一、二、又は三つのＨＶＲを含む。ある実施態様において、ＶＬ配列は、配列番号４５、４６、及び４７から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも６０％、６４％、６５％、６８％、７０％、７５％、８０％、８２％、８５％、８８％、９０％、９２％、９３％、９４％、１００％の配列同一性を有するＨＶＲ配列を含み、ここで抗体はＩＬ−１７に結合する能力を保持している。
【０１５４】
幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１７抗体が提供され、該抗体は、上記に与えられた実施態様の何れかに記載されるＶＨ、及び上記に与えられた実施態様の何れかに記載されるＶＬを含む。幾つかの実施態様において、抗体は、配列番号３７及び配列番号３８のそれぞれＶＨとＶＬ配列を含み、それらの配列の翻訳後修飾を含む。幾つかの実施態様において、抗体は、配列番号３９及び配列番号３８のそれぞれＶＨとＶＬ配列を含み、それらの配列の翻訳後修飾を含む。幾つかの実施態様において、抗体は、配列番号８２及び配列番号３８のそれぞれＶＨとＶＬ配列を含み、それらの配列の翻訳後修飾を含む。幾つかの実施態様において、抗体は、配列番号８３及び配列番号３８のそれぞれＶＨとＶＬ配列を含み、それらの配列の翻訳後修飾を含む。幾つかの実施態様において、抗体は、配列番号１１５及び配列番号３８のそれぞれＶＨとＶＬ配列を含み、それらの配列の翻訳後修飾を含む。
【０１５５】
配列番号８２を含む本明細書に記載される何れかの実施態様において、ＸはＮを除く任意のアミノ酸であり得る。配列番号８２を含む本明細書に記載される何れかの実施態様において、ＸはＧ、Ａ、Ｑ、Ｈ、Ｄ、Ｋ、及びＲから選択され得る。配列番号８２を含む本明細書に記載される何れかの実施態様において、ＸはＧ、Ａ、及びＱから選択され得る。配列番号８３を含む本明細書に記載される何れかの実施態様において、ＸはＳ又はＴを除く任意のアミノ酸であり得る。配列番号８３を含む本明細書に記載される何れかの実施態様において、ＸはＡ、Ｇ、Ｐ又はＶであり得る。配列番号１１５を含む本明細書に記載される何れかの実施態様において、ＸはＤ、Ｓ又はＱであり得る。
【０１５６】
幾つかの実施態様において、配列番号３９のＶＨ配列及び配列番号３８のＶＬ配列を含む抗ＩＬ−１７抗体と、ＩＬ−１７への結合を競合する抗体が提供される。幾つかの実施態様において、本明細書において提供される抗ＩＬ−１７抗体と同一エピトープに結合する抗体が提供される。例えば、ある実施態様において、配列番号３９のＶＨ配列及び配列番号３８のＶＬ配列を含む抗ＩＬ−１７抗体と同一エピトープに結合する抗体が提供される。
【０１５７】
幾つかの実施態様において、上記実施態様の何れかに記載の抗ＩＬ−１７抗体は、キメラ、ヒト化又はヒト抗体を含むモノクローナル抗体である。幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１７抗体は、抗体断片、例えば、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、ｓｃＦｖ、ダイアボディ、又はＦ（ａｂ’）２断片である。幾つかの実施態様において、抗体は、全長抗体、例えば、本明細書において定義されるインタクトなＩｇＧ１又はＩｇＧ４抗体、又は他の抗体クラス又はアイソタイプである。
【０１５８】
幾つかの実施態様において、以下のセクション１−７で説明されるように、上記実施態様の何れかに記載の抗ＩＬ−１７抗体は、単独又は組み合わせで、任意の特徴を組み込むことができる：
【０１５９】
抗体３０Ｄ１２及び３０Ｄ１２ＢＦ
幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１７抗体は、（ａ）配列番号５１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号５２又は配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一、二、三、四、五、又は六つのＨＶＲを含む。
【０１６０】
幾つかの実施態様において、（ａ）配列番号５１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号５２又は配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；及び（ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも一つのＶＨ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＨ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む抗体が提供される。幾つかの実施態様において、抗体は、配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。幾つかの実施態様において、抗体は、配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、及び配列番号５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。幾つかの実施態様において、抗体は、配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３、及び配列番号５２又は配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２を含む。幾つかの施態様において、抗体は、（ａ）配列番号５１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号５２又は配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；及び（ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。幾つかの実施態様において、抗体は、（ａ）配列番号５１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；及び（ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。幾つかの実施態様において、抗体は、（ａ）配列番号５１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；及び（ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。
【０１６１】
幾つかの実施態様において、（ａ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一つのＶＬ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＬ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む抗体が提供される。幾つかの実施態様において、抗体は、（ａ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。
【０１６２】
幾つかの実施態様において、抗体は、（ａ）（ｉ）配列番号５１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号５２又は配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される少なくとも一つのＶＨ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＨ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含むＶＨドメイン、及び（ｂ）（ｉ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される少なくとも一つのＶＬ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＬ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含むＶＬドメインを含む。
【０１６３】
幾つかの実施態様において、（ａ）配列番号５１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号５２又は配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号５７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む抗体が提供される。幾つかの実施態様において、（ａ）配列番号５１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号５７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む抗体が提供される。
【０１６４】
幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１７抗体は、配列番号４８又は配列番号５０のアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含む。ある実施態様において、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の同一性を有するＶＨ配列は、参照配列に対して置換（例えば保存的置換）、挿入、又は欠失を含むが、その配列を含む抗ＩＬ−１７抗体はＩＬ−１７へ結合する能力を保持する。ある実施態様において、配列番号４８において、合計１から１０のアミノ酸が、置換され、挿入され、及び／又は欠失している。ある実施態様において、配列番号５０において、合計１から１０のアミノ酸が、置換され、挿入され、及び／又は欠失している。ある実施態様において、置換、挿入、又は欠失は、ＨＶＲ外の（すなわちＦＲ内の）領域で生じる。任意で、抗ＩＬ−１７抗体は、配列番号４８のＶＨ配列を含み、その配列の翻訳後修飾を含む。任意で、抗ＩＬ−１７抗体は、配列番号５０のＶＨ配列を含み、その配列の翻訳後修飾を含む。特定の実施態様において、ＶＨは、（ａ）配列番号５１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号５２又は配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；及び（ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される一、二、又は三つのＨＶＲを含む。ある実施態様において、ＶＨ配列は、配列番号５１、５２、５３、及び５４から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも６０％、６４％、６５％、６８％、７０％、７５％、８０％、８２％、８５％、８８％、９０％、９２％、９３％、９４％、１００％の配列同一性を有するＨＶＲ配列を含み、ここで抗体はＩＬ−１７に結合する能力を保持している。
【０１６５】
幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１７抗体が提供され、該抗体は、配列番号４９のアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む。ある実施態様において、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の同一性を有するＶＬ配列は、参照配列に対して置換（例えば保存的置換）、挿入、又は欠失を含むが、その配列を含む抗ＩＬ−１７抗体はＩＬ−１７へ結合する能力を保持する。ある実施態様において、配列番号４９において、合計１から１０のアミノ酸が、置換され、挿入され、及び／又は欠失している。ある実施態様において、置換、挿入、又は欠失は、ＨＶＲ外の（すなわちＦＲ内の）領域で生じる。任意で、抗ＩＬ−１７抗体は、配列番号４９のＶＬ配列を含み、その配列の翻訳後修飾を含む。特定の実施態様において、ＶＬは、（ａ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｂ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される一、二、又は三つのＨＶＲを含む。ある実施態様において、ＶＬ配列は、配列番号５５、５６、及び５７から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも６０％、６４％、６５％、６８％、７０％、７５％、８０％、８２％、８５％、８８％、９０％、９２％、９３％、９４％、１００％の配列同一性を有するＨＶＲ配列を含み、ここで抗体はＩＬ−１７に結合する能力を保持している。
【０１６６】
幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１７抗体が提供され、該抗体は、上記に与えられた実施態様の何れかに記載されるＶＨ、及び上記に与えられた実施態様の何れかに記載されるＶＬを含む。幾つかの実施態様において、抗体は、配列番号４８及び配列番号４９のそれぞれＶＨとＶＬ配列を含み、それらの配列の翻訳後修飾を含む。幾つかの実施態様において、抗体は、配列番号５０及び配列番号４９のそれぞれＶＨとＶＬ配列を含み、それらの配列の翻訳後修飾を含む。
【０１６７】
幾つかの実施態様において、配列番号５０のＶＨ配列及び配列番号４９のＶＬ配列を含む抗ＩＬ−１７抗体と、ＩＬ−１７への結合を競合する抗体が提供される。幾つかの実施態様において、本明細書において提供される抗ＩＬ−１７抗体と同一エピトープに結合する抗体が提供される。例えば、ある実施態様において、配列番号５０のＶＨ配列及び配列番号４９のＶＬ配列を含む抗ＩＬ−１７抗体と同一エピトープに結合する抗体が提供される。
【０１６８】
幾つかの実施態様において、上記実施態様の何れかに記載の抗ＩＬ−１７抗体は、キメラ、ヒト化又はヒト抗体を含むモノクローナル抗体である。幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１７抗体は、抗体断片、例えば、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、ｓｃＦｖ、ダイアボディ、又はＦ（ａｂ’）２断片である。幾つかの実施態様において、抗体は、全長抗体、例えば、本明細書において定義されるインタクトなＩｇＧ１又はＩｇＧ４抗体、又は他の抗体クラス又はアイソタイプである。
【０１６９】
幾つかの実施態様において、以下のセクション１−７で説明されるように、上記実施態様の何れかに記載の抗ＩＬ−１７抗体は、単独又は組み合わせで、任意の特徴を組み込むことができる。
【０１７０】
抗体３９Ｆ１２及び３９Ｆ１２Ａ
幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１７抗体は、（ａ）配列番号６１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一、二、三、四、五、又は六つのＨＶＲを含む。
【０１７１】
幾つかの実施態様において、（ａ）配列番号６１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；及び（ｃ）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも一つのＶＨ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＨ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む抗体が提供される。幾つかの実施態様において、抗体は、配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。幾つかの実施態様において、抗体は、配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、及び配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。幾つかの実施態様において、抗体は、配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３、及び配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２を含む。幾つかの実施態様において、抗体は、（ａ）配列番号６１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；及び（ｃ）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。
【０１７２】
幾つかの実施態様において、（ａ）配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一つのＶＬ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＬ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む抗体が提供される。幾つかの実施態様において、抗体は、（ａ）配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。
【０１７３】
幾つかの実施態様において、抗体は、（ａ）（ｉ）配列番号６１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される少なくとも一つのＶＨ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＨ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含むＶＨドメイン、及び（ｂ）（ｉ）配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される少なくとも一つのＶＬ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＬ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含むＶＬドメインを含む。
【０１７４】
幾つかの実施態様において、（ａ）配列番号６１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号６６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む抗体が提供される。
【０１７５】
幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１７抗体は、配列番号５８のアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含む。ある実施態様において、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の同一性を有するＶＨ配列は、参照配列に対して置換（例えば保存的置換）、挿入、又は欠失を含むが、その配列を含む抗ＩＬ−１７抗体はＩＬ−１７へ結合する能力を保持する。ある実施態様において、配列番号５８において、合計１から１０のアミノ酸が、置換され、挿入され、及び／又は欠失している。ある実施態様において、置換、挿入、又は欠失は、ＨＶＲ外の（すなわちＦＲ内の）領域で生じる。任意で、抗ＩＬ−１７抗体は、配列番号５８のＶＨ配列を含み、その配列の翻訳後修飾を含む。特定の実施態様において、ＶＨは、（ａ）配列番号６１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｃ）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される一、二、又は三つのＨＶＲを含む。ある実施態様において、ＶＨ配列は、配列番号６１、６２、及び６３から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも６０％、６４％、６５％、６８％、７０％、７５％、８０％、８２％、８５％、８８％、９０％、９２％、９３％、９４％、１００％の配列同一性を有するＨＶＲ配列を含み、ここで抗体はＩＬ−１７に結合する能力を保持している。
【０１７６】
幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１７抗体が提供され、該抗体は、配列番号５９又は配列番号６０のアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む。ある実施態様において、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の同一性を有するＶＬ配列は、参照配列に対して置換（例えば保存的置換）、挿入、又は欠失を含むが、その配列を含む抗ＩＬ−１７抗体はＩＬ−１７へ結合する能力を保持する。ある実施態様において、配列番号５９において、合計１から１０のアミノ酸が、置換され、挿入され、及び／又は欠失している。ある実施態様において、配列番号６０において、合計１から１０のアミノ酸が、置換され、挿入され、及び／又は欠失している。ある実施態様において、置換、挿入、又は欠失は、ＨＶＲ外の（すなわちＦＲ内の）領域で生じる。任意で、抗ＩＬ−１７抗体は、配列番号５９のＶＬ配列を含み、その配列の翻訳後修飾を含む。任意で、抗ＩＬ−１７抗体は、配列番号６０のＶＬ配列を含み、その配列の翻訳後修飾を含む。特定の実施態様において、ＶＬは、（ａ）配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｂ）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される一、二、又は三つのＨＶＲを含む。ある実施態様において、ＶＬ配列は、配列番号６４、６５、及び６６から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも６０％、６４％、６５％、６８％、７０％、７５％、８０％、８２％、８５％、８８％、９０％、９２％、９３％、９４％、１００％の配列同一性を有するＨＶＲ配列を含み、ここで抗体はＩＬ−１７に結合する能力を保持している。
【０１７７】
幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１７抗体が提供され、該抗体は、上記に与えられた実施態様の何れかに記載されるＶＨ、及び上記に与えられた実施態様の何れかに記載されるＶＬを含む。幾つかの実施態様において、抗体は、配列番号５８及び配列番号５９のそれぞれＶＨとＶＬ配列を含み、それらの配列の翻訳後修飾を含む。幾つかの実施態様において、抗体は、配列番号５８及び配列番号６０のそれぞれＶＨとＶＬ配列を含み、それらの配列の翻訳後修飾を含む。
【０１７８】
幾つかの実施態様において、配列番号５８のＶＨ配列及び配列番号６０のＶＬ配列を含む抗ＩＬ−１７抗体と、ＩＬ−１７への結合を競合する抗体が提供される。幾つかの実施態様において、本明細書において提供される抗ＩＬ−１７抗体と同一エピトープに結合する抗体が提供される。例えば、ある実施態様において、配列番号５８のＶＨ配列及び配列番号６０のＶＬ配列を含む抗ＩＬ−１７抗体と同一エピトープに結合する抗体が提供される。
【０１７９】
幾つかの実施態様において、上記実施態様の何れかに記載の抗ＩＬ−１７抗体は、キメラ、ヒト化又はヒト抗体を含むモノクローナル抗体である。幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１７抗体は、抗体断片、例えば、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、ｓｃＦｖ、ダイアボディ、又はＦ（ａｂ’）２断片である。幾つかの実施態様において、抗体は、全長抗体、例えば、本明細書において定義されるインタクトなＩｇＧ１又はＩｇＧ４抗体、又は他の抗体クラス又はアイソタイプである。
【０１８０】
幾つかの実施態様において、以下のセクション１−７で説明されるように、上記実施態様の何れかに記載の抗ＩＬ−１７抗体は、単独又は組み合わせで、任意の特徴を組み込むことができる。
【０１８１】
例示的な抗ＩＬ−１３抗体
幾つかの実施態様において、ＩＬ−１３に結合する単離された抗体が提供される。幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３抗体は、（ａ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一、二、三、四、五、又は六つのＨＶＲを含む。例えば、米国特許第８０８８６１８号及び国際公開第２００５／０６２９６７号（各々はその全体が参照によって本明細書に援用される）を参照。
【０１８２】
幾つかの実施態様において、（ａ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；及び（ｃ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも一つのＶＨ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＨ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む抗体が提供される。幾つかの実施態様において、抗体は、配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。幾つかの実施態様において、抗体は、配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、及び配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。幾つかの実施態様において、抗体は、配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３、及び配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２を含む。幾つかの実施態様において、抗体は、（ａ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；及び（ｃ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。
【０１８３】
幾つかの実施態様において、（ａ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一つのＶＬ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＬ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む抗体が提供される。幾つかの実施態様において、抗体は、（ａ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。
【０１８４】
幾つかの実施態様において、抗体は、（ａ）（ｉ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される少なくとも一つのＶＨ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＨ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含むＶＨドメイン、及び（ｂ）（ｉ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される少なくとも一つのＶＬ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＬ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含むＶＬドメインを含む。
【０１８５】
幾つかの実施態様において、（ａ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号２０から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む抗体が提供される。
【０１８６】
上記実施態様の何れかにおいて、抗ＩＬ−１３抗体はヒト化される。幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３抗体は、上記実施態様の何れかにおけるＨＶＲを含み、更に、アクセプターヒトフレームワーク、例えばヒト免疫グロブリンのフレームワーク又はヒトコンセンサスフレームワークを含む。幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３抗体は、上記実施態様の何れかに記載されるＨＶＲを含み、更に、配列番号１３のＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３，及び／又はＦＲ４配列を含むＶＨを含む。幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３抗体は、上記実施態様の何れかに記載されるＨＶＲを含み、更に、配列番号１４のＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、及び／又はＦＲ４配列を含むＶＬを含む。幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３抗体は、上記実施態様の何れかに記載されるＨＶＲを含み、更に、配列番号１１のＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３，及び／又はＦＲ４配列を含むＶＨを含む。幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３抗体は、上記実施態様の何れかに記載されるＨＶＲを含み、更に、配列番号１２のＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、及び／又はＦＲ４配列を含むＶＬを含む。
【０１８７】
幾つかの実施態様において、ＩＬ−１３に対する抗ＩＬ１３抗体の結合は、ＩＬ−１３Ｒα１／ＩＬ−４Ｒαにより媒介されるＩＬ−１３の細胞内シグナル伝達を阻害する。幾つかのそのような実施態様において、抗ＩＬ−１３抗体は、ＩＬ−１３Ｒα１に対するＩＬ−１３の結合を阻害しない。幾つかのそのような実施態様において、抗ＩＬ−１３抗体は、ＩＬ−４Ｒαに対するＩＬ−１３の結合を阻害する。幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３抗体はレブリキズマブである。Ultsch et al., 2013, J. Mol. Biol. 425:1330-1339を参照。幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３抗体は、軽鎖（配列番号１４）におけるＭ４Ｌ置換及び重鎖（配列番号１３）におけるＱ１Ｅ置換を含む。
【０１８８】
幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３抗体は、配列番号１３のアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含む。ある実施態様において、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の同一性を有するＶＨ配列は、参照配列に対して置換（例えば保存的置換）、挿入、又は欠失を含むが、その配列を含む抗ＩＬ−１３抗体はＩＬ−１３へ結合する能力を保持する。ある実施態様において、配列番号１３において、合計１から１０のアミノ酸が、置換され、挿入され、及び／又は欠失している。ある実施態様において、置換、挿入、又は欠失は、ＨＶＲ外の（すなわちＦＲ内の）領域で生じる。幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３抗体は、配列番号１３のＶＨ配列を含み、その配列の翻訳後修飾を含む。幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３抗体は、配列番号１１のＶＨ配列を含み、その配列の翻訳後修飾を含む。幾つかの実施態様において、ＶＨは、（ａ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｃ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される一、二又は三つのＨＶＲを含む。
【０１８９】
幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３抗体が提供され、該抗体は、配列番号１４のアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む。ある実施態様において、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の同一性を有するＶＬ配列は、参照配列に対して置換（例えば保存的置換）、挿入、又は欠失を含むが、その配列を含む抗ＩＬ−１３抗体はＩＬ−１３へ結合する能力を保持する。ある実施態様において、配列番号１４において、合計１から１０のアミノ酸が、置換され、挿入され、及び／又は欠失している。ある実施態様において、置換、挿入、又は欠失は、ＨＶＲ外の（すなわちＦＲ内の）領域で生じる。幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３抗体は、配列番号１４のＶＬ配列を含み、その配列の翻訳後修飾を含む。幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３抗体は、配列番号１２のＶＬ配列を含み、その配列の翻訳後修飾を含む。幾つかの実施態様において、ＶＬは、（ａ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｂ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される一、二、又は三つのＨＶＲを含む。
【０１９０】
ある実施態様において、ＶＨ配列は、配列番号１５、１６、及び１７から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも６０％、６４％、６５％、６８％、７０％、７５％、８０％、８２％、８５％、８８％、９０％、９２％、９３％、９４％、１００％の配列同一性を有するＨＶＲ配列を含み、ここで抗体はＩＬ−１３に結合する能力を保持している。ある実施態様において、ＶＬ配列は、配列番号１８、１９、及び２０から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも６０％、６４％、６５％、６８％、７０％、７５％、８０％、８２％、８５％、８８％、９０％、９２％、９３％、９４％、１００％の配列同一性を有するＨＶＲ配列を含み、ここで抗体はＩＬ−１３に結合する能力を保持している。
【０１９１】
幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３抗体が提供され、該抗体は、上記に与えられた実施態様の何れかに記載されるＶＨ、及び上記に与えられた実施態様の何れかに記載されるＶＬを含む。幾つかの実施態様において、抗体は、配列番号１３又は配列番号１１のＶＨ配列、及び配列番号１４又は配列番号１２のＶＬ配列を含み、それらの配列の翻訳後修飾を含む。
【０１９２】
幾つかの実施態様において、配列番号１３のＶＨ配列及び配列番号１４のＶＬ配列を含む抗ＩＬ−１３抗体と、ＩＬ−１３への結合を競合する抗体が提供される。幾つかの実施態様において、本明細書において提供される抗ＩＬ−１３抗体と同一エピトープに結合する抗体が提供される。例えば、Ultsch, M. et al., Structural Basis of Signaling Blockade by Anti-IL-13 Antibody Lebrikizumab, J. Mol. Biol. (2013), dx.doi.org/10.1016/j.jmb.2013.01.024を参照。幾つかの実施態様において、本明細書において提供される抗ＩＬ−１３抗体と同一エピトープに結合する抗体が提供される。例えば、ある実施態様において、配列番号１３のＶＨ配列及び配列番号１４のＶＬ配列を含む抗ＩＬ−１３抗体と同一エピトープに結合する抗体が提供される。ある実施態様において、ＩＬ−１３（配列番号１）のアミノ酸７７から８９の範囲内にあるエピトープ（それはＹＣＡＡＬＥＳＬＩＮＶＳＧ（配列番号６）である）に結合する抗体が提供される。ある実施態様において、ＩＬ−１３（配列番号１）のアミノ酸８２から８９の範囲内にあるエピトープ（それはＥＳＬＩＮＶＳＧ（配列番号５）である）に結合する抗体が提供される。
【０１９３】
別の例示的な抗ＩＬ−１３抗体は、１１Ｈ４及びｈｕ１１Ｈ４ｖ６を含むそのヒト化バージョンである。Ｍｕ１１Ｈ４は、配列番号２６及び２５のアミノ酸配列をそれぞれ含む、重鎖及び軽鎖可変領域を含む。ヒト化ｈｕ１１Ｈ４ｖ６は、配列番号３０及び２９のアミノ酸配列をそれぞれ含む、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む。ヒト化ｈｕ１１Ｈ４ｖ６は、配列番号２８及び２７のアミノ酸配列をそれぞれ含む、重鎖及び軽鎖を含む。
【０１９４】
幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３抗体は、（ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一、二、三、四、五、又は六つのＨＶＲを含む。
【０１９５】
幾つかの実施態様において、（ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；及び（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも一つのＶＨ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＨ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む抗体が提供される。幾つかの実施態様において、抗体は、配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。幾つかの実施態様において、抗体は、配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、及び配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。幾つかの実施態様において、抗体は、配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３、及び配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２を含む。幾つかの実施態様において、抗体は、（ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；及び（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。
【０１９６】
幾つかの実施態様において、（ａ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一つのＶＬ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＬ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む抗体が提供される。幾つかの実施態様において、抗体は、（ａ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。
【０１９７】
幾つかの実施態様において、抗体は、（ａ）（ｉ）配列番号３１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される少なくとも一つのＶＨ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＨ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含むＶＨドメイン、及び（ｂ）（ｉ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される少なくとも一つのＶＬ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＬ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含むＶＬドメインを含む。
【０１９８】
幾つかの実施態様において、（ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号３６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む抗体が提供される。
【０１９９】
上記実施態様の何れかにおいて、抗ＩＬ−１３抗体はヒト化される。幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３抗体は、上記実施態様の何れかにおけるＨＶＲを含み、更に、アクセプターヒトフレームワーク、例えばヒト免疫グロブリンのフレームワーク又はヒトコンセンサスフレームワークを含む。幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３抗体は、上記実施態様の何れかに記載されるＨＶＲを含み、更に、配列番号３０のＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３，及び／又はＦＲ４配列を含むＶＨを含む。幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３抗体は、上記実施態様の何れかに記載されるＨＶＲを含み、更に、配列番号２９のＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、及び／又はＦＲ４配列を含むＶＬを含む。
【０２００】
幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３抗体は、配列番号３０のアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含む。ある実施態様において、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の同一性を有するＶＨ配列は、参照配列に対して置換（例えば保存的置換）、挿入、又は欠失を含むが、その配列を含む抗ＩＬ−１３抗体はＩＬ−１３へ結合する能力を保持する。ある実施態様において、配列番号３０において、合計１から１０のアミノ酸が、置換され、挿入され、及び／又は欠失している。ある実施態様において、置換、挿入、又は欠失は、ＨＶＲ外の（すなわちＦＲ内の）領域で生じる。任意で、抗ＩＬ−１３抗体は、配列番号３０のＶＨ配列を含み、その配列の翻訳後修飾を含む。特定の実施態様において、ＶＨは、（ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される一、二、又は三つのＨＶＲを含む。
【０２０１】
幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３抗体が提供され、該抗体は、配列番号２９のアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む。ある実施態様において、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の同一性を有するＶＬ配列は、参照配列に対して置換（例えば保存的置換）、挿入、又は欠失を含むが、その配列を含む抗ＩＬ−１３抗体はＩＬ−１３へ結合する能力を保持する。ある実施態様において、配列番号２９において、合計１から１０のアミノ酸が、置換され、挿入され、及び／又は欠失している。ある実施態様において、置換、挿入、又は欠失は、ＨＶＲ外の（すなわちＦＲ内の）領域で生じる。任意で、抗ＩＬ−１３抗体は、配列番号２９のＶＬ配列を含み、その配列の翻訳後修飾を含む。特定の実施態様において、ＶＬは、（ａ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｂ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される一、二、又は三つのＨＶＲを含む。
【０２０２】
ある実施態様において、ＶＨ配列は、配列番号３１、３２、及び３３から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも６０％、６４％、６５％、６８％、７０％、７５％、８０％、８２％、８５％、８８％、９０％、９２％、９３％、９４％、１００％の配列同一性を有するＨＶＲ配列を含み、ここで抗体はＩＬ−１３に結合する能力を保持している。ある実施態様において、ＶＬ配列は、配列番号３４、３５、及び３６から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも６０％、６４％、６５％、６８％、７０％、７５％、８０％、８２％、８５％、８８％、９０％、９２％、９３％、９４％、１００％の配列同一性を有するＨＶＲ配列を含み、ここで抗体はＩＬ−１３に結合する能力を保持している。
【０２０３】
幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３抗体が提供され、該抗体は、上記に与えられた実施態様の何れかに記載されるＶＨ、及び上記に与えられた実施態様の何れかに記載されるＶＬを含む。幾つかの実施態様において、抗体は、配列番号３０及び配列番号２９のそれぞれＶＨとＶＬ配列を含み、それらの配列の翻訳後修飾を含む。
【０２０４】
幾つかの実施態様において、配列番号３０のＶＨ配列及び配列番号２９のＶＬ配列を含む抗ＩＬ−１３抗体と、ＩＬ−１３への結合を競合する抗体が提供される。幾つかの実施態様において、本明細書において提供される抗ＩＬ−１３抗体と同一エピトープに結合する抗体が提供される。例えば、Ultsch, M. et al., Structural Basis of Signaling Blockade by Anti-IL-13 Antibody Lebrikizumab, J. Mol. Biol. (2013), dx.doi.org/10.1016/j.jmb.2013.01.053を参照。幾つかの実施態様において、本明細書において提供される抗ＩＬ−１３抗体と同一エピトープに結合する抗体が提供される。例えば、ある実施態様において、配列番号３０のＶＨ配列及び配列番号２９のＶＬ配列を含む抗ＩＬ−１３抗体と同一エピトープに結合する抗体が提供される。
【０２０５】
幾つかの実施態様において、上記実施態様の何れかに記載の抗ＩＬ−１３抗体は、キメラ、ヒト化又はヒト抗体を含むモノクローナル抗体である。幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３抗体は、抗体断片、例えば、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、ｓｃＦｖ、ダイアボディ、又はＦ（ａｂ’）２断片である。幾つかの実施態様において、抗体は、全長抗体、例えば、本明細書において定義されるインタクトなＩｇＧ１又はＩｇＧ４抗体、又は他の抗体クラス又はアイソタイプである。
【０２０６】
幾つかの実施態様において、以下のセクション１−７で説明されるように、上記実施態様の何れかに記載の抗ＩＬ−１３抗体は、単独又は組み合わせで、任意の特徴を組み込むことができる。
【０２０７】
例示的な抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体
幾つかの実施態様において、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含む多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体のような）が提供される。幾つかの実施態様において、抗原結合ドメインは、他の標的に特異的には結合しない。ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に結合する多重特異性抗体は、抗ＩＬ−１７抗体について本明細書に記載される実施態様の何れかに記載される可変領域の第一の組（ＶＨ及びＶＬ；ＶＨ／ＶＬユニットとも称する）、及び抗ＩＬ−１３抗体について本明細書に記載される実施態様の何れかに記載される可変領域の第二の組（ＶＨ及びＶＬ；ＶＨ／ＶＬユニットとも称する）幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体は、（ｉ）第一のＶＨ／ＶＬユニット及び重鎖定常領域の少なくとも一部及び／又は軽鎖定常領域の少なくとも一部を含む第一の半抗体、並びに第二のＶＨ／ＶＬユニット及び重鎖定常領域の少なくとも一部及び／又は軽鎖定常領域の少なくとも一部を含む第二の半抗体を含む。幾つかの実施態様において、第一の半抗体はＩＬ−１７に結合するがＩＬ−１３に結合せず、かつ第二の半抗体はＩＬ−１３に結合するがＩＬ−１７に結合しない。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、天然の抗体フォーマットを維持し、かつ二重可変ドメイン（ＤＶＤ）抗体ではない。例えば、ＰＣＴ公報番号第２０１３／１０２０４２号を参照。国際公開第２０１３／１０２０４２号は、各標的への結合の結合活性に寄与し得る、ＩＬ−１３に対する二価結合剤でありかつＩＬ−１７Ａに対する二価結合剤であるＩＬ−１３及びＩＬ−１７Ａに対する二重特異的抗原結合タンパク質を記述する。本発明の幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体は、ＩＬ−１３に対する一価結合剤であり、かつＩＬ−１７ＡＡ、ＡＦ、及びＦＦに対する一価結合剤である。本明細書中で議論するように、各半抗体が、ＩＬ−１３及びＩＬ−１７（ＩＬ−１７ＡＡ、ＡＦ、ＦＦ）のそれぞれに対する一価結合剤を含む二重特異性抗体は、親の二価の単一特異性抗体の各々と比較して、同等の結合活性及び効力を維持することが更に発見された。以下に更に記述されるように、幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体は、第一のＶＨ／ＶＬユニット及び第二のＶＨ／ＶＬユニットを含み、ここで第一のＶＨ／ＶＬユニットは、ＩＬ−１７に結合し、かつ配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、配列番号４３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含み、かつ第二のＶＨ／ＶＬユニットは、ＩＬ−１３に結合し、かつ配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含み、ここでＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体は、ＩＬ１３及びＩＬ−１７ＡＡ、ＡＦ及びＦに結合しかつ阻害する。
【０２０８】
１５Ｅ６又は１５Ｅ６ＦＫを含む多重特異性抗体
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号３７、３９、８２、８３、及び１１５から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨ（重鎖可変ドメイン）を含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＬ（軽鎖可変ドメイン）を含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２０９】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号３７のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＬを含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号３９のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＬを含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号８２のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＬを含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号８３のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＬを含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号１１５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＬを含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２１０】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号３７のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＬを含む抗体と、ＩＬ−１７に対する結合を競合する第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２１１】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号１３又は配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＨ（重鎖可変ドメイン）を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号１４又は配列番号１２のアミノ酸配列を含むＶＬ（軽鎖可変ドメイン）を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号１３又は配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号１４又は配列番号１２のアミノ酸配列を含むＶＬを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号１４のアミノ酸配列を含むＶＬを含む抗体と、ＩＬ−１３に対する結合を競合する第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号１のアミノ酸８２から８９からなるＩＬ−１３のエピトープに結合する第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号１のアミノ酸７７から８９からなるＩＬ−１３のエピトープに結合する第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２１２】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号３０のアミノ酸配列を含むＶＨ（重鎖可変ドメイン）を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号２９のアミノ酸配列を含むＶＬ（軽鎖可変ドメイン）を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号３０のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２９のアミノ酸配列を含むＶＬを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号３０のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２９のアミノ酸配列を含むＶＬを含む抗体と、ＩＬ−１３に対する結合を競合する第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２１３】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで、抗体は、配列番号３７、３９、８２、及び１１５から選択されるアミノ酸配列を含む第一のＶＨ及び配列番号３８のアミノ酸配列を含む第一のＶＬを含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含み；かつ配列番号１３又は配列番号１１のアミノ酸配列を含む第二のＶＨ及び配列番号１４又は配列番号１２のアミノ酸配列を含む第二のＶＬを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２１４】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで、抗体は、配列番号３７、３９、８２、及び１１５から選択されるアミノ酸配列を含む第一のＶＨ及び配列番号３８のアミノ酸配列を含む第一のＶＬを含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含み；かつ配列番号３０のアミノ酸配列を含む第二のＶＨ及び配列番号２９のアミノ酸配列を含む第二のＶＬを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２１５】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号３７、３９、８２、８３、及び１１５から選択されるアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有するＶＨ及び配列番号３８のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有するＶＬを含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。ある実施態様において、上記配列において、合計１から１０のアミノ酸が、置換、挿入及び／又は欠失している。ある実施態様において、置換、挿入、又は欠失は、ＨＶＲ外の（すなわちＦＲ内の）領域で生じる。
【０２１６】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号１３のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有するＶＨ及び配列番号１４のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有するＶＬを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号３０のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有するＶＨ及び配列番号２９のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有するＶＬを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。ある実施態様において、上記配列において、合計１から１０のアミノ酸が、置換、挿入及び／又は欠失している。ある実施態様において、置換、挿入、又は欠失は、ＨＶＲ外の（すなわちＦＲ内の）領域で生じる。
【０２１７】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号３７、３９、８２、８３、及び１１５から選択されるアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有する第一のＶＨ及び配列番号３８のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有する第一のＶＬを含む第一のＶＨ／ＶＬユニット；及び配列番号１３のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有する第二のＶＨ及び配列番号１４のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有する第二のＶＬを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。ある実施態様において、上記配列において、合計１から１０のアミノ酸が、置換、挿入及び／又は欠失している。ある実施態様において、置換、挿入、又は欠失は、ＨＶＲ外の（すなわちＦＲ内の）領域で生じる。
【０２１８】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号３７、３９、８２、８３、及び１１５から選択されるアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有する第一のＶＨ及び配列番号３８のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有する第一のＶＬを含む第一のＶＨ／ＶＬユニット；及び配列番号３０のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有する第二のＶＨ及び配列番号２９のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有する第二のＶＬを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。ある実施態様において、上記配列において、合計１から１０のアミノ酸が、置換、挿入及び／又は欠失している。ある実施態様において、置換、挿入、又は欠失は、ＨＶＲ外の（すなわちＦＲ内の）領域で生じる。
【０２１９】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号４１、４３、８０、８１、及び１１４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号４２又は配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一、二、三、四、五、又は六つのＨＶＲを含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２２０】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一、二、三、四、五、又は六つのＨＶＲを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一、二、三、四、五、又は六つのＨＶＲを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２２１】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号４１、４３、８０、８１、及び１１４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号４２又は配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一、二、三、四、五、又は六つのＨＶＲを含む第一のＶＨ／ＶＬユニット；及び（ａ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一、二、三、四、五、又は六つのＨＶＲを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２２２】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号４１、４３、８０、８１、及び１１４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号４２又は配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一、二、三、四、五、又は六つのＨＶＲを含む第一のＶＨ／ＶＬユニット；及び（ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一、二、三、四、五、又は六つのＨＶＲを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２２３】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号４１、４３、８０、８１、及び１１４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；及び（ｃ）配列番号４２又は配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも一つのＶＨ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＨ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２２４】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも一つのＶＨ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＨ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも一つのＶＨ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＨ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２２５】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号４１、４３、８０、８１、及び１１４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号４２又は配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも一つのＶＨ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＨ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む第一のＶＨ／ＶＬユニット；及び（ａ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも一つのＶＨ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＨ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号４１、４３、８０、８１、及び１１４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号４２又は配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも一つのＶＨ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＨ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む第一のＶＨ／ＶＬユニット；及び（ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも一つのＶＨ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＨ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２２６】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一つのＶＬ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＬ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２２７】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一つのＶＬ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＬ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一つのＶＬ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＬ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２２８】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一つのＶＬ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＬ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第一のＶＨ／ＶＬユニット；及び（ａ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一つのＶＬ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＬ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一つのＶＬ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＬ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第一のＶＨ／ＶＬユニット；及び（ａ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一つのＶＬ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＬ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２２９】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号４１、４３、８０、８１、及び１１４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号４２又は配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される三つのＶＨ  ＨＶＲ配列；及び（ａ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される三つのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２３０】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される三つのＶＨ  ＨＶＲ配列；及び（ａ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される三つのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２３１】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される三つのＶＨ  ＨＶＲ配列；及び（ａ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される三つのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２３２】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号４１、４３、８０、８１、及び１１４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号４２又は配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される三つのＶＨ  ＨＶＲ配列；及び（ｄ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号４７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される三つのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第一のＶＨ／ＶＬユニット；及び（ａ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される三つのＶＨ  ＨＶＲ配列；及び（ａ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される三つのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２３３】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号４１、４３、８０、８１、及び１１４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号４２又は配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される三つのＶＨ  ＨＶＲ配列；及び（ｄ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号４７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される三つのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第一のＶＨ／ＶＬユニット；及び（ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される三つのＶＨ  ＨＶＲ配列；及び（ａ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される三つのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２３４】
様々な実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７に結合する第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む第一のヘミマーを含み、ここで第一のヘミマーは、重鎖定常領域内にノブ変異を含み、第二のヘミマーは、ＩＬ−１３に結合する第二のＶＨ／ＶＬユニットを含み、第二のヘミマーは、重鎖定常領域内にホール変異を含む。様々な実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７に結合する第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む第一のヘミマーを含み、ここで第一のヘミマーは、重鎖定常領域内にホール変異を含み、第二のヘミマーは、ＩＬ−１３に結合する第二のＶＨ／ＶＬユニットを含み、第二のヘミマーは、重鎖定常領域内にノブ変異を含む。幾つかの実施態様において、ホール変異を含む重鎖定常領域は、配列番号６８（ＩｇＧ１）又は配列番号７０（ＩｇＧ４）に示される配列を有する。幾つかの実施態様において、ノブ変異を含む重鎖定常領域は、配列番号６７（ＩｇＧ１）又は配列番号６９（ＩｇＧ４）に示される配列を有する。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、配列番号７１、７２、８４、及び８５から選択されるアミノ酸配列を有する第一の重鎖及び配列番号７３の配列を有する第一の軽鎖を含む第一のヘミマー並びに配列番号２１又は２３の配列を有する第二の重鎖及び配列番号２２又は２４の配列を有する第二の軽鎖を含む第二のヘミマーを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、配列番号７１、７２、８４、及び８５から選択されるアミノ酸配列を有する第一の重鎖及び配列番号７３の配列を有する第一の軽鎖を含む第一のヘミマー並びに配列番号２１の配列を有する第二の重鎖及び配列番号２２の配列を有する第二の軽鎖を含む第二のヘミマーを含む。
【０２３５】
配列番号８０、８２、又は８４を含む本明細書に記載される何れかの実施態様において、ＸはＮを除く任意のアミノ酸であり得る。配列番号８０、８２、又は８４を含む本明細書に記載される何れかの実施態様において、ＸはＡ、Ｇ、Ｑ、Ｈ、Ｄ、Ｋ、及びＲから選択され得る。配列番号８０、８２、又は８４を含む本明細書に記載される何れかの実施態様において、ＸはＡ、Ｇ、及びＱから選択され得る。配列番号８１、８３、又は８５を含む本明細書に記載される何れかの実施態様において、ＸはＳ又はＴを除く任意のアミノ酸であり得る。配列番号８１、８３、又は８５を含む本明細書に記載される何れかの実施態様において、ＸはＡ、Ｇ、Ｐ又はＶであり得る。配列番号１１４又は１１５を含む本明細書に記載される何れかの実施態様において、ＸはＤ、Ｓ又はＱであり得る。
【０２３６】
幾つかの実施態様において、上記実施態様の何れかに記載の抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７多重特異性抗体は、キメラ、ヒト化又はヒト抗体を含むモノクローナル抗体である。幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７多重特異性抗体は、抗体断片、例えば、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、ｓｃＦｖ、ダイアボディ、又はＦ（ａｂ’）２断片である。幾つかの実施態様において、抗体は、全長抗体、例えば、本明細書において定義されるインタクトなＩｇＧ１又はＩｇＧ４抗体、又は他の抗体クラス又はアイソタイプである。
【０２３７】
幾つかの実施態様において、以下のセクション１−７で説明されるように、上記実施態様の何れかに記載の抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７多重特異性抗体は、単独又は組み合わせで、任意の特徴を組み込むことができる。
【０２３８】
３０Ｄ１２又は３０Ｄ１２ＢＦを含む多重特異性抗体
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号４８及び５０から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨ（重鎖可変ドメイン）を含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号４９のアミノ酸配列を含むＶＬ（軽鎖可変ドメイン）を含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２３９】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号４８のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号４９のアミノ酸配列を含むＶＬを含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号５０のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号４９のアミノ酸配列を含むＶＬを含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２４０】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号５０のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号４９のアミノ酸配列を含むＶＬを含む抗体と、ＩＬ−１７に対する結合を競合する第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２４１】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号１３又は配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＨ（重鎖可変ドメイン）を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号１４又は配列番号１２のアミノ酸配列を含むＶＬ（軽鎖可変ドメイン）を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号１３又は配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号１４又は配列番号１２のアミノ酸配列を含むＶＬを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号１４のアミノ酸配列を含むＶＬを含む抗体と、ＩＬ−１３に対する結合を競合する第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号１のアミノ酸８２から８９からなるＩＬ−１３のエピトープに結合する第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号１のアミノ酸７７から８９からなるＩＬ−１３のエピトープに結合する第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２４２】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号３０のアミノ酸配列を含むＶＨ（重鎖可変ドメイン）を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号２９のアミノ酸配列を含むＶＬ（軽鎖可変ドメイン）を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号３０のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２９のアミノ酸配列を含むＶＬを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号３０のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２９のアミノ酸配列を含むＶＬを含む抗体と、ＩＬ−１３に対する結合を競合する第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２４３】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで、抗体は、配列番号４８又は配列番号５０のアミノ酸配列を含む第一のＶＨ及び配列番号４９のアミノ酸配列を含む第一のＶＬを含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含み；かつ配列番号１３又は配列番号１１のアミノ酸配列を含む第二のＶＨ及び配列番号１４又は配列番号１２のアミノ酸配列を含む第二のＶＬを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２４４】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで、抗体は、配列番号４８又は配列番号５０のアミノ酸配列を含む第一のＶＨ及び配列番号４９のアミノ酸配列を含む第一のＶＬを含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含み；かつ配列番号３０のアミノ酸配列を含む第二のＶＨ及び配列番号２９のアミノ酸配列を含む第二のＶＬを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２４５】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号４８又は配列番号５０のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有するＶＨ及び配列番号４９のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有する第一のＶＬを含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。ある実施態様において、上記配列において、合計１から１０のアミノ酸が、置換、挿入及び／又は欠失している。ある実施態様において、置換、挿入、又は欠失は、ＨＶＲ外の（すなわちＦＲ内の）領域で生じる。
【０２４６】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号１３のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有するＶＨ及び配列番号１４のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有するＶＬを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号３０のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有するＶＨ及び配列番号２９のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有するＶＬを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。ある実施態様において、上記配列において、合計１から１０のアミノ酸が、置換、挿入及び／又は欠失している。ある実施態様において、置換、挿入、又は欠失は、ＨＶＲ外の（すなわちＦＲ内の）領域で生じる。
【０２４７】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号４８又は配列番号５０のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有する第一のＶＨ及び配列番号４９のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有する第一のＶＬを含む第一のＶＨ／ＶＬユニット；及び配列番号１３のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有する第二のＶＨ及び配列番号１４のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有する第二のＶＬを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。ある実施態様において、上記配列において、合計１から１０のアミノ酸が、置換、挿入及び／又は欠失している。ある実施態様において、置換、挿入、又は欠失は、ＨＶＲ外の（すなわちＦＲ内の）領域で生じる。
【０２４８】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号４８又は配列番号５０のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有する第一のＶＨ及び配列番号４９のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有する第一のＶＬを含む第一のＶＨ／ＶＬユニット；及び配列番号３０のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有する第二のＶＨ及び配列番号２９のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有する第二のＶＬを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。ある実施態様において、上記配列において、合計１から１０のアミノ酸が、置換、挿入及び／又は欠失している。ある実施態様において、置換、挿入、又は欠失は、ＨＶＲ外の（すなわちＦＲ内の）領域で生じる。
【０２４９】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号５１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号５２又は配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一、二、三、四、五、又は六つのＨＶＲを含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２５０】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一、二、三、四、五、又は六つのＨＶＲを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一、二、三、四、五、又は六つのＨＶＲを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２５１】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号５１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号５２又は配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一、二、三、四、五、又は六つのＨＶＲを含む第一のＶＨ／ＶＬユニット；及び（ａ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一、二、三、四、五、又は六つのＨＶＲを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２５２】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号５１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号５２又は配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一、二、三、四、五、又は六つのＨＶＲを含む第一のＶＨ／ＶＬユニット；及び（ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一、二、三、四、五、又は六つのＨＶＲを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２５３】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号５１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号５２又は配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；及び（ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも一つのＶＨ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＨ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２５４】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも一つのＶＨ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＨ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも一つのＶＨ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＨ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２５５】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号５１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号５２又は配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも一つのＶＨ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＨ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む第一のＶＨ／ＶＬユニット；及び（ａ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも一つのＶＨ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＨ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号５１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号５２又は配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも一つのＶＨ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＨ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む第一のＶＨ／ＶＬユニット；及び（ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも一つのＶＨ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＨ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２５６】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一つのＶＬ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＬ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２５７】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一つのＶＬ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＬ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一つのＶＬ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＬ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２５８】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一つのＶＬ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＬ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第一のＶＨ／ＶＬユニット；及び（ａ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一つのＶＬ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＬ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一つのＶＬ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＬ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第一のＶＨ／ＶＬユニット；及び（ａ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一つのＶＬ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＬ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２５９】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号５１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号５２又は配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される三つのＶＨ  ＨＶＲ配列；及び（ｄ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号５７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される三つのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２６０】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される三つのＶＨ  ＨＶＲ配列；及び（ａ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される三つのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２６１】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される三つのＶＨ  ＨＶＲ配列；及び（ａ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される三つのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２６２】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号５１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号５２又は配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される三つのＶＨ  ＨＶＲ配列；及び（ｄ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号５７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される三つのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第一のＶＨ／ＶＬユニット；及び（ａ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される三つのＶＨ  ＨＶＲ配列；及び（ａ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される三つのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２６３】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号５１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号５２又は配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される三つのＶＨ  ＨＶＲ配列；及び（ｄ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号５７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される三つのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第一のＶＨ／ＶＬユニット；及び（ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される三つのＶＨ  ＨＶＲ配列；及び（ａ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される三つのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２６４】
様々な実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７に結合する第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む第一のヘミマーを含み、ここで第一のヘミマーは、重鎖定常領域内にノブ変異を含み、第二のヘミマーは、ＩＬ−１３に結合する第二のＶＨ／ＶＬユニットを含み、第二のヘミマーは、重鎖定常領域内にホール変異を含む。様々な実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７に結合する第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む第一のヘミマーを含み、ここで第一のヘミマーは、重鎖定常領域内にホール変異を含み、第二のヘミマーは、ＩＬ−１３に結合する第二のＶＨ／ＶＬユニットを含み、第二のヘミマーは、重鎖定常領域内にノブ変異を含む。幾つかの実施態様において、ホール変異を含む重鎖定常領域は、配列番号６８（ＩｇＧ１）又は配列番号７０（ＩｇＧ４）に示される配列を有する。幾つかの実施態様において、ノブ変異を含む重鎖定常領域は、配列番号６７（ＩｇＧ１）又は配列番号６９（ＩｇＧ４）に示される配列を有する。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、配列番号７４又は７５の配列を有する第一の重鎖及び配列番号７６の配列を有する第一の軽鎖を含む第一のヘミマー並びに配列番号２１又は２３の配列を有する第二の重鎖及び配列番号２２又は２４の配列を有する第二の軽鎖を含む第二のヘミマーを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、配列番号７４又は７５の配列を有する第一の重鎖及び配列番号７６の配列を有する第一の軽鎖を含む第一のヘミマー並びに配列番号２１の配列を有する第二の重鎖及び配列番号２２の配列を有する第二の軽鎖を含む第二のヘミマーを含む。
【０２６５】
幾つかの実施態様において、上記実施態様の何れかに記載の抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７多重特異性抗体は、キメラ、ヒト化又はヒト抗体を含むモノクローナル抗体である。幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７多重特異性抗体は、抗体断片、例えば、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、ｓｃＦｖ、ダイアボディ、又はＦ（ａｂ’）２断片である。幾つかの実施態様において、抗体は、全長抗体、例えば、本明細書において定義されるインタクトなＩｇＧ１又はＩｇＧ４抗体、又は他の抗体クラス又はアイソタイプである。
【０２６６】
幾つかの実施態様において、以下のセクション１−７で説明されるように、上記実施態様の何れかに記載の抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７多重特異性抗体は、単独又は組み合わせで、任意の特徴を組み込むことができる。
【０２６７】
３９Ｆ１２又は３９Ｆ１２Ａを含む多重特異性抗体
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで、抗体は、配列番号５８のアミノ酸配列を含むＶＨ（重鎖可変ドメイン）を含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号５９及び６０から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ（軽鎖可変ドメイン）を含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２６８】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号５８のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号５９のアミノ酸配列を含むＶＬを含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号６０のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号５９のアミノ酸配列を含むＶＬを含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２６９】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号５８のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号６０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む抗体と、ＩＬ−１７に対する結合を競合する第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２７０】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号１３又は配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＨ（重鎖可変ドメイン）を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号１４又は配列番号１２のアミノ酸配列を含むＶＬ（軽鎖可変ドメイン）を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号１３又は配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号１４又は配列番号１２のアミノ酸配列を含むＶＬを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号１４のアミノ酸配列を含むＶＬを含む抗体と、ＩＬ−１３に対する結合を競合する第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号１のアミノ酸８２から８９からなるＩＬ−１３のエピトープに結合する第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号１のアミノ酸７７から８９からなるＩＬ−１３のエピトープに結合する第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２７１】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号３０のアミノ酸配列を含むＶＨ（重鎖可変ドメイン）を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号２９のアミノ酸配列を含むＶＬ（軽鎖可変ドメイン）を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号３０のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２９のアミノ酸配列を含むＶＬを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号３０のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２９のアミノ酸配列を含むＶＬを含む抗体と、ＩＬ−１３に対する結合を競合する第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２７２】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで、抗体は、配列番号５８のアミノ酸配列を含む第一のＶＨ及び配列番号５９又は配列番号６０のアミノ酸配列を含む第一のＶＬを含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含み；かつ配列番号１３又は配列番号１１のアミノ酸配列を含む第二のＶＨ及び配列番号１４又は配列番号１２のアミノ酸配列を含む第二のＶＬを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２７３】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで、抗体は、配列番号５８のアミノ酸配列を含む第一のＶＨ及び配列番号５９又は配列番号６０のアミノ酸配列を含む第一のＶＬを含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含み；かつ配列番号３０のアミノ酸配列を含む第二のＶＨ及び配列番号２９のアミノ酸配列を含む第二のＶＬを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２７４】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号５８のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有するＶＨ及び配列番号５９又は配列番号６０のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有する第一のＶＬを含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。ある実施態様において、上記配列において、合計１から１０のアミノ酸が、置換、挿入及び／又は欠失している。ある実施態様において、置換、挿入、又は欠失は、ＨＶＲ外の（すなわちＦＲ内の）領域で生じる。
【０２７５】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号１３のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有するＶＨ及び配列番号１４のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有するＶＬを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号３０のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有するＶＨ及び配列番号２９のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有するＶＬを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。ある実施態様において、上記配列において、合計１から１０のアミノ酸が、置換、挿入及び／又は欠失している。ある実施態様において、置換、挿入、又は欠失は、ＨＶＲ外の（すなわちＦＲ内の）領域で生じる。
【０２７６】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号５８のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有する第一のＶＨ及び配列番号５９又は配列番号６０のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有する第一のＶＬを含む第一のＶＨ／ＶＬユニット；及び配列番号１３のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有する第二のＶＨ及び配列番号１４のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有する第二のＶＬを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。ある実施態様において、上記配列において、合計１から１０のアミノ酸が、置換、挿入及び／又は欠失している。ある実施態様において、置換、挿入、又は欠失は、ＨＶＲ外の（すなわちＦＲ内の）領域で生じる。
【０２７７】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、配列番号５８のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有する第一のＶＨ及び配列番号５９又は配列番号６０のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有する第一のＶＬを含む第一のＶＨ／ＶＬユニット；及び配列番号３０のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有する第二のＶＨ及び配列番号２９のアミノ酸配列に少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％配列同一性を有する第二のＶＬを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。ある実施態様において、上記配列において、合計１から１０のアミノ酸が、置換、挿入及び／又は欠失している。ある実施態様において、置換、挿入、又は欠失は、ＨＶＲ外の（すなわちＦＲ内の）領域で生じる。
【０２７８】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号６１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一、二、三、四、五、又は六つのＨＶＲを含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２７９】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一、二、三、四、五、又は六つのＨＶＲを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一、二、三、四、五、又は六つのＨＶＲを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２８０】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号６１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一、二、三、四、五、又は六つのＨＶＲを含む第一のＶＨ／ＶＬユニット；及び（ａ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一、二、三、四、五、又は六つのＨＶＲを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２８１】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号６１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一、二、三、四、五、又は六つのＨＶＲを含む第一のＶＨ／ＶＬユニット；及び（ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一、二、三、四、五、又は六つのＨＶＲを含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２８２】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号６１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも一つのＶＨ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＨ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２８３】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも一つのＶＨ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＨ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも一つのＶＨ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＨ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２８４】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号６１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも一つのＶＨ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＨ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む第一のＶＨ／ＶＬユニット；及び（ａ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも一つのＶＨ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＨ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号６１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも一つのＶＨ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＨ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む第一のＶＨ／ＶＬユニット；及び（ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも一つのＶＨ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＨ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２８５】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一つのＶＬ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＬ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２８６】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一つのＶＬ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＬ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一つのＶＬ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＬ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２８７】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一つのＶＬ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＬ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第一のＶＨ／ＶＬユニット；及び（ａ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一つのＶＬ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＬ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一つのＶＬ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＬ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第一のＶＨ／ＶＬユニット；及び（ａ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも一つのＶＬ  ＨＶＲ配列、少なくとも二つのＶＬ  ＨＶＲ配列、又は三つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２８８】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号６１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される三つのＶＨ  ＨＶＲ配列；及び（ｄ）配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号６６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される三つのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２８９】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される三つのＶＨ  ＨＶＲ配列；及び（ａ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される三つのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２９０】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される三つのＶＨ  ＨＶＲ配列；及び（ａ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される三つのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２９１】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号６１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される三つのＶＨ  ＨＶＲ配列；及び（ｄ）配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号６６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される三つのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第一のＶＨ／ＶＬユニット；及び（ａ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される三つのＶＨ  ＨＶＲ配列；及び（ａ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される三つのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２９２】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合ドメインを含み、ここで抗体は、（ａ）配列番号６１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される三つのＶＨ  ＨＶＲ配列；及び（ｄ）配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号６６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される三つのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第一のＶＨ／ＶＬユニット；及び（ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される三つのＶＨ  ＨＶＲ配列；及び（ａ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｂ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｃ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される三つのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む第二のＶＨ／ＶＬユニットを含む。
【０２９３】
様々な実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７に結合する第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む第一のヘミマーを含み、ここで第一のヘミマーは、重鎖定常領域内にノブ変異を含み、第二のヘミマーは、ＩＬ−１３に結合する第二のＶＨ／ＶＬユニットを含み、第二のヘミマーは、重鎖定常領域内にホール変異を含む。様々な実施態様において、多重特異性抗体は、ＩＬ−１７に結合する第一のＶＨ／ＶＬユニットを含む第一のヘミマーを含み、ここで第一のヘミマーは、重鎖定常領域内にホール変異を含み、第二のヘミマーは、ＩＬ−１３に結合する第二のＶＨ／ＶＬユニットを含み、第二のヘミマーは、重鎖定常領域内にノブ変異を含む。幾つかの実施態様において、ホール変異を含む重鎖定常領域は、配列番号６８（ＩｇＧ１）又は配列番号７０（ＩｇＧ４）に示される配列を有する。幾つかの実施態様において、ノブ変異を含む重鎖定常領域は、配列番号６７（ＩｇＧ１）又は配列番号６９（ＩｇＧ４）に示される配列を有する。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、配列番号７７の配列を有する第一の重鎖及び配列番号７８又は７９の配列を有する第一の軽鎖を含む第一のヘミマー並びに配列番号２１又は２３の配列を有する第二の重鎖及び配列番号２２又は２４の配列を有する第二の軽鎖を含む第二のヘミマーを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体は、配列番号７７の配列を有する第一の重鎖及び配列番号７８又は７９の配列を有する第一の軽鎖を含む第一のヘミマー並びに配列番号２１の配列を有する第二の重鎖及び配列番号２２の配列を有する第二の軽鎖を含む第二のヘミマーを含む。
【０２９４】
幾つかの実施態様において、上記実施態様の何れかに記載の抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７多重特異性抗体は、キメラ、ヒト化又はヒト抗体を含むモノクローナル抗体である。幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７多重特異性抗体は、抗体断片、例えば、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、ｓｃＦｖ、ダイアボディ、又はＦ（ａｂ’）２断片である。幾つかの実施態様において、抗体は、全長抗体、例えば、本明細書において定義されるインタクトなＩｇＧ１又はＩｇＧ４抗体、又は他の抗体クラス又はアイソタイプである。
【０２９５】
幾つかの実施態様において、以下のセクション１−７で説明されるように、上記実施態様の何れかに記載の抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７多重特異性抗体は、単独又は組み合わせで、任意の特徴を組み込むことができる。
【０２９６】
１．抗体親和性
ある実施態様において、本明細書において与えられる抗体は、抗原に対する解離定数（Ｋｄ）が、≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭ、又は≦０．００１ｎＭ（例えば、１０−８Ｍ以下、例えば、１０−８Ｍから１０−１３Ｍ、例えば、１０−９Ｍから１０−１３Ｍ）である。
【０２９７】
幾つかの実施態様において、Ｋｄは放射性標識抗原結合アッセイ（ＲＩＡ）によって測定される。幾つかの実施態様において、ＲＩＡは、目的の抗体のＦａｂバージョン及びその抗原により実施される。例えば、非標識抗原の滴定系列の存在下で、最小濃度の（１２５Ｉ）−標識抗原にてＦａｂを均衡化して、抗Ｆａｂ抗体コートプレートと結合した抗原を捕獲することによって抗原に対するＦａｂの溶液結合親和性を測定する（例としてChen, et al., J. Mol. Biol. 293:865-881(1999)を参照）。アッセイの条件を決めるために、ＭＩＣＲＯＴＩＴＥＲ（登録商標）マルチウェルプレート（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を５μｇ／ｍｌの捕獲抗Ｆａｂ抗体（Ｃａｐｐｅｌ  Ｌａｂｓ）を含む５０ｍＭ炭酸ナトリウム（ｐＨ９．６）にて一晩コートして、その後２％（ｗ／ｖ）のウシ血清アルブミンを含むＰＢＳにて室温（およそ２３℃）で２〜５時間、ブロックする。非吸着プレート（Ｎｕｎｃ ＃２６９６２０）に、１００ｐＭ又は２６ｐＭの［１２５Ｉ］抗原を段階希釈した目的のＦａｂと混合する（例えば、Presta et al., Cancer Res. 57:4593-4599 (1997)の抗ＶＥＧＦ抗体、Ｆａｂ−１２の評価と一致する）。ついで目的のＦａｂを一晩インキュベートする；しかし、インキュベーションは平衡状態に達したことを確認するまでに長時間（例えばおよそ６５時間）かかるかもしれない。その後、混合物を捕獲プレートに移し、室温で（例えば１時間）インキュベートする。次いで、溶液を除去し、プレートをＰＢＳ中の０．１％ポリソルベート２０（ＴＷＥＥＮ−２０（登録商標））で８回洗浄する。プレートが乾燥したときに、１５０μｌ／ウェルのシンチラント（ＭＩＣＲＯＳＣＩＮＴ−２０ＴＭ；Ｐａｃｋａｒｄ）を添加し、プレートを１０分間ＴＯＰＣＯＵＮＴのＴＭガンマカウンター（Ｐａｃｋａｒｄ）でカウントする。最大結合の２０％以下を与える各Ｆａｂの濃度が、競合的結合アッセイで使用するために選択される。
【０２９８】
幾つかの実施態様によれば、Ｋｄは、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）表面プラズモン共鳴アッセイを用いて測定される。例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）−２０００又はＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）−３０００（ＢＩＡｃｏｒｅ、Ｉｎｃ．、Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、ＮＪ）を用いるアッセイが、〜１０反応単位（ＲＵ）で固定した抗原ＣＭ５チップを用いて２５℃で実施される。幾つかの実施態様において、カルボキシメチル化デキストランバイオセンサーチップ（ＣＭ５、ＢＩＡｃｏｒｅ  Ｉｎｃ．）を、提供者の指示書に従ってＮ−エチル−Ｎ’−（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）及びＮ−ヒドロキシスクシニミド（ＮＨＳ）で活性化する。抗原を１０ｍＭ酢酸ナトリウム（ｐＨ４．８）で５μｇ／ｍｌ（〜０．２μＭ）に希釈し、結合したタンパク質の反応単位（ＲＵ）がおよそ１０になるように５μｌ／分の流速で注入する。抗原の注入後、反応しない群をブロックするために１Ｍのエタノールアミンを注入する。動力学的な測定のために、Ｆａｂの２倍の段階希釈（０．７８ｎＭから５００ｎＭ）を、２５℃で、およそ２５μｌ／分の流速で０．０５％ポリソルベート２０（ＴＷＥＥＮ−２０ＴＭ）界面活性剤（ＰＢＳＴ）を含むＰＢＳに注入する。会合及び解離のセンサーグラムを同時にフィットさせることによる単純一対一ラングミュア結合モデル（simple one-to-one Langmuir binding model）（ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎソフトウェアバージョン３．２）を用いて、会合速度（ｋｏｎ）と解離速度（ｋｏｆｆ）を算出する。平衡解離定数（Ｋｄ）をｋｏｆｆ／ｋｏｎ比として算出する。例えば、 Chen et al., J. Mol. Biol. 293:865-881 (1999)を参照。上記の表面プラスモン共鳴アッセイによる結合速度が１０６Ｍ−１ ｓ−１を上回る場合、分光計、例えば、流動停止を備えた分光光度計（stop-flow equipped spectrophometer）（Ａｖｉｖ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）又は撹拌キュベットを備えた８０００シリーズＳＬＭ−ＡＭＩＮＣＯＴＭ分光光度計（ＴｈｅｒｍｏＳｐｅｃｔｒｏｎｉｃ）で測定される、漸増濃度の抗原の存在下にて、ＰＢＳ（ｐＨ７．２）中、２５℃の、２０ｎＭの抗抗原抗体（Ｆａｂ型）の蛍光放出強度（励起＝２９５ｎｍ；放出＝３４０ｎｍ、帯域通過＝１６ｎｍ）の増加又は減少を測定する蛍光消光技術を用いて結合速度を測定することができる。
【０２９９】
２．抗体断片
ある実施態様において、本明細書で提供される抗体は抗体断片である。抗体断片は、限定されないが、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ，及びｓｃＦｖ断片、及び下記の他の断片を含む。特定の抗体断片の総説については、Hudson et al. Nat. Med. 9:129-134 (2003)を参照。ｓｃＦｖ断片の総説については、例えば、Pluckthun, in The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, vol. 113, Rosenburg and Moore eds., (Springer-Verlag, New York), pp. 269-315 (1994)を参照；また、国際公開第９３／１６１８５号；及び米国特許第５５７１８９４号及び第５５８７４５８号も参照。サルベージ受容体結合エピトープ残基を含み、かつインビボ半減期を増加させたＦａｂ及びＦ（ａｂ’）２断片の議論については、米国特許第５８６９０４６号を参照のこと。
【０３００】
ダイアボディーは、二価又は二重特異性であってもよい２つの抗原結合部位を有する抗体断片である。例えば、欧州特許第４０４０９７号；国際公開第１９９３／０１１６１号； Hudson et al., Nat. Med. 9:129-134 (2003)；及びHollinger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 6444-6448 (1993)を参照。トリアボディ及びテトラボディもまた Hudson et al., Nat. Med. 9:129-134 (2003)に記載されている。
【０３０１】
単一ドメイン抗体は、抗体の、重鎖可変ドメインの全て又は一部を含む抗体断片、又は軽鎖可変ドメインの全て又は一部を含む抗体断片である。ある実施態様において、単一ドメイン抗体は、ヒト単一ドメイン抗体である（Ｄｏｍａｎｔｉｓ、Ｉｎｃ．、Ｗａｌｔｈａｍ、ＭＡ；例えば、米国特許第６２４８５１６号（Ｂ１）を参照）。
【０３０２】
抗体断片は様々な技術で作成することができ、限定されないが、本明細書に記載するように、インタクトな抗体の分解、並びに組換え宿主細胞（例えば、大腸菌やファージ）による生産を含む。
【０３０３】
３．キメラ及びヒト化抗体
ある実施態様において、本明細書で提供される抗体は、キメラ抗体である。特定のキメラ抗体は、例えば、米国特許第４８１６５６７号；及びMorrison et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 81:6851-6855 (1984)に記載される。一例において、キメラ抗体は、非ヒト可変領域（例えば、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、又はサル等の非ヒト霊長類由来の可変領域）及びヒト定常領域を含む。更なる例において、キメラ抗体は、クラス又はサブクラスが親抗体のものから変更された「クラススイッチ」抗体である。キメラ抗体は、その抗原結合断片を含む。
【０３０４】
ある実施態様において、キメラ抗体は、ヒト化抗体である。典型的には、非ヒト抗体は、ヒトに対する免疫原性を低減するために、親の非ヒト抗体の特異性と親和性を保持したまま、ヒト化されている。一般に、ヒト化抗体は、ＨＶＲ、例えば、ＣＤＲ（又はその一部）が、非ヒト抗体から由来し、ＦＲ（又はその一部）がヒト抗体配列に由来する、一以上の可変ドメインを含む。ヒト化抗体はまた、任意で、ヒト定常領域の少なくとも一部をも含む。幾つかの実施態様において、ヒト化抗体の幾つかのＦＲ残基は、抗体特異性又は親和性を回復もしくは改善するめに、非ヒト抗体（例えば、ＨＶＲ残基が由来する抗体）由来の対応する残基で置換されている。
【０３０５】
ヒト化抗体及びそれらの製造方法は、例えば、Almagro and Fransson, Front. Biosci. 13:1619-1633 (2008)に総説され、更に、 Riechmann et al., Nature 332:323-329 (1988); Queen et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 86:10029-10033 (1989)；米国特許第５８２１３３７号、第７５２７７９１号、第６９８２３２１号、及び第７０８７４０９号； Kashmiri et al., Methods 36:25-34 (2005) （特異性決定領域（ＳＤＲ）グラフティングを記述）； Padlan, Mol. Immunol. 28:489-498 (1991) （「リサーフェシング」を記述）； Dall'Acqua et al., Methods 36:43-60 (2005) （「ＦＲシャッフリング」を記述）；及びOsbourn et al., Methods 36:61-68 (2005)及びKlimka et al., Br. J. Cancer, 83:252-260 (2000) （ＦＲのシャッフリングへの「誘導選択」アプローチを記述）に記載されている。
【０３０６】
ヒト化に用いられ得るヒトフレームワーク領域は、限定されないが、「ベストフィット」法を用いて選択されるフレームワーク領域（例えば、Sims et al. J. Immunol. 151:2296 (1993)）；軽鎖又は重鎖の可変領域の特定のサブグループのヒト抗体のコンセンサス配列由来のフレームワーク領域（例えば、Carter et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89:4285 (1992)；及びPresta et al. J. Immunol., 151:2623 (1993)を参照）；ヒト成熟（体細胞変異）フレームワーク領域又はヒト生殖細胞系フレームワーク領域（例えば、Almagro and Fransson, Front. Biosci. 13:1619-1633 (2008)を参照）；及びＦＲライブラリースクリーニング由来のフレームワーク領域（例えば、Baca et al., J. Biol. Chem. 272:10678-10684 (1997)及び Rosok et al., J. Biol. Chem. 271:22611-22618 (1996)を参照）を含む。
【０３０７】
４．ヒト抗体
ある実施態様において、本明細書で提供される抗体は、ヒト抗体である。ヒト抗体は、当技術分野で周知の様々な技術を用いて生成することができる。ヒト抗体は、van Dijk and van de Winkel, Curr. Opin. Pharmacol. 5: 368-74 (2001) 及びLonberg, Curr. Opin. Immunol. 20:450-459 (2008)に一般的に記載されている。
【０３０８】
ヒト抗体は、抗原投与に応答して、インタクトなヒト抗体又はヒト可変領域を持つインタクトな抗体を産生するように改変されたトランスジェニック動物に、免疫原を投与することにより調製することができる。このような動物は、典型的には、内因性免疫グロブリン遺伝子座を置換するか、又は染色体外に存在するか若しくは動物の染色体にランダムに組み込まれている、ヒト免疫グロブリン遺伝子座の全て又は一部を含む。このようなトランスジェニックマウスでは、内因性免疫グロブリン遺伝子座は一般的に不活性化されている。トランスジェニック動物からヒト抗体を得るための方法の総説については、 Lonberg, Nat. Biotech. 23:1117-1125 (2005)を参照。また、例えば、ＸＥＮＯＭＯＵＳＥＴＭ技術を記載している、米国特許第６０７５１８１号及び６１５０５８４号；ＨｕＭａｂ（登録商標）技術を記載している米国特許第５７７０４２９号；Ｋ−Ｍ  ＭＯＵＳＥ（登録商標）技術を記載している米国特許第７０４１８７０号及び、ＶｅｌｏｃｉＭｏｕｓｅ（登録商標）技術を記載している米国特許出願公開第２００７／００６１９００号）を参照。このような動物で生成されたインタクトな抗体由来のヒト可変領域は、例えば、異なるヒト定常領域と組み合わせることにより、更に改変される可能性がある。
【０３０９】
ヒト抗体は、ハイブリドーマベース法によって作製することができる。ヒトモノクローナル抗体の産生のためのヒト骨髄腫及びマウス−ヒトヘテロ細胞株が記載されている。（例えば、Kozbor J. Immunol., 133: 3001 (1984); Brodeur et al., Monoclonal Antibody Production Techniques and Applications, pp. 51-63 (Marcel Dekker, Inc., New York, 1987)；及びBoerner et al., J. Immunol., 147: 86 (1991)を参照）。ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術を介して生成されたヒト抗体はまた、Li et al., PNAS USA, 103:3557-3562 (2006)に記載される。更なる方法は、例えば、米国特許第７１８９８２６号（ハイブリドーマ細胞株からのモノクローナルヒトＩｇＭ抗体の産生を記載している）及びNi, Xiandai Mianyixue, 26(4):265-268 (2006) （ヒト−ヒトハイブリドーマを記載している）に記載されたものを含む。ヒトハイブリドーマ技術（トリオーマ技術）もまた、Vollmers and Brandlein, Histology and Histopathology, 20(3):927-937 (2005)及びVollmers and Brandlein, Methods and Findings in Experimental and Clinical Pharmacology, 27(3):185-91 (2005)に記載される。
【０３１０】
ヒト抗体はまた、ヒト由来のファージディスプレイライブラリーから選択されたＦｖクローン可変ドメイン配列を単離することによって生成され得る。このような可変ドメイン配列は、次に所望のヒト定常ドメインと組み合わせてもよい。抗体ライブラリーからヒト抗体を選択するための技術を以下に説明する。
【０３１１】
５．ライブラリー由来抗体
本明細書に記載される抗体は、所望の活性又は活性（複数）を有する抗体についてコンビナトリアルライブラリーをスクリーニングすることによって単離することができる。例えば、様々な方法が、ファージディスプレイライブラリーを生成し、所望の結合特性を有する抗体についてのライブラリーをスクリーニングするために、当該技術分野で知られている。そのような方法は、例えば、Hoogenboom et al. in Methods in Molecular Biology 178:1-37 (O'Brien et al., ed., Human Press, Totowa, NJ, 2001)に総説され、更に、例えば、McCafferty et al., Nature 348:552-554; Clackson et al., Nature 352: 624-628 (1991); Marks et al., J. Mol. Biol. 222: 581-597 (1992); Marks and Bradbury, in Methods in Molecular Biology 248:161-175 (Lo, ed., Human Press, Totowa, NJ, 2003); Sidhu et al., J. Mol. Biol. 338(2): 299-310 (2004); Lee et al., J. Mol. Biol. 340(5): 1073-1093 (2004); Fellouse, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 101(34): 12467-12472 (2004)；及びLee et al., J. Immunol. Methods 284(1-2): 119-132(2004)に記載されている。
【０３１２】
特定のファージディスプレイ法において、ＶＨ及びＶＬ遺伝子のレパートリーがポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）により個別にクローニングされ、ファージライブラリーにランダムに再結合され、その後、Winter et al., Ann. Rev. Immunol., 12: 433-455 (1994)に記載されるように、抗原結合ファージについてスクリーニングすることができる。ファージは、通常、抗体断片を、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片、又はＦａｂ断片の何れかとして提示する。免疫された起源からのライブラリーは、ハイブリドーマを構築する必要性を伴うことなく免疫原に高親和性抗体を提供する。代わりに、Griffiths et al., EMBO J, 12: 725-734 (1993)に記載されるように、ナイーブなレパートリーが、任意の免疫感作無しで、広範囲の非自己抗原及び自己抗原に対して抗体の単一起源を提供するために（例えば、ヒトから）クローン化することができる。最後に、ナイーブなライブラリーはまた、Hoogenboom and Winter, J. Mol. Biol., 227: 381-388 (1992)に記載されるように、非常に可変なＣＤＲ３領域をコードし、インビトロで再構成を達成するために、幹細胞由来の未転位Ｖ遺伝子セグメントをクローニングし、ランダム配列を含むＰＣＲプライマーを使用することにより合成することができる。ヒト抗体ファージライブラリーを記述する特許公報は、例えば、米国特許第５７５０３７３号、及び米国特許出願公開第２００５／００７９５７４号、第２００５／０１１９４５５号、第２００５／０２６６０００号、第２００７／０１１７１２６号、第２００７／０１６０５９８号、第２００７／０２３７７６４号、第２００７／０２９２９３６号、及び第２００９／０００２３６０号を含む。
【０３１３】
ヒト抗体ライブラリーから単離された抗体又は抗体断片は、本明細書でヒト抗体又はヒト抗体の断片とみなされる。
【０３１４】
６．多重特異性抗体
ある実施態様において、本明細書で提供される抗体は、多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体である。多重特異性抗体は、少なくとも二つの異なる部位に対して結合特異性を有するモノクローナル抗体である。ある実施態様において、結合特異性の一つはＩＬ−１７に対してであり、他はＩＬ−１３に対してである。ある実施態様において、結合特異性の一つはＩＬ−１７Ａホモ二量体、ＩＬ−１７Ｆホモ二量体、及びＩＬ−１７ＡＦヘテロ二量体に対してであり、他はＩＬ−１３に対してである。二重特異性抗体はまた細胞に対して細胞傷害性薬物を局在化させるために用いることができる。二重特異性抗体は、全長抗体又は抗体断片として調製することができる。
【０３１５】
多重特異性抗体を作製するための技術は、限定されないが、異なる特異性を有する２つの免疫グロブリン重鎖−軽鎖対の組換え共発現（Milstein and Cuello, Nature 305: 537 (1983)、国際公開第９３／０８８２９号、及びTraunecker et al., EMBO J. 10: 3655 (1991)を参照）及び「ノブ・イン・ホール（ｋｎｏｂ−ｉｎ−ｈｏｌｅ）」エンジニアリング（例えば、米国特許第５７３１１６８号；米国特許出願公開第２０１１／０２８７００９号を参照）を含む。多重特異抗体はまた、抗体のＦｃ−ヘテロ２量体分子を作成するための静電ステアリング効果を操作すること（国際公開第２００９／０８９００４号（Ａ１））；２つ以上の抗体又は断片を架橋すること（例えば米国特許第４６７６９８０号、及びBrennan et al., Science, 229: 81 (1985)を参照）；二重特異性抗体を生成するためにロイシンジッパー又はコイルドコイルを使用すること（例えば、Kostelny et al., J. Immunol., 148(5):1547-1553 (1992)及び国際公開第２０１１／０３４６０５号を参照）；単一のＶＨ／ＶＬユニットにおいてＣＬドメイン及びＶＨドメイン間でフューリンが切断可能なテザー（ｔｅｔｈｅｒ）を使用すること（例えば、国際公開第２０１３／１１９９６６号及び国際公開第２０１３／０５５９５８号を参照）；二重特異性抗体断片を作製するため、「ダイアボディ」技術を使用すること（例えば、Hollinger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90:6444-6448 (1993)を参照）；二重特異性抗体を作製するために免疫グロブリンドメインのクロスオーバーを使用すること；単鎖Ｆｖ（ｓＦｖ）ダイマーを使用すること（例えば、Gruber et al., J. Immunol., 152:5368 (1994)を参照）；及び、例えばTutt et al. J. Immunol. 147: 60 (1991)に記載されているように、三重特異性抗体を調製することによって作製することができる。
【０３１６】
「オクトパス抗体」を含む、３つ以上の機能性抗原結合部位を持つ改変抗体もまた本明細書に含まれる（例えば、米国特許出願公開第２００６／００２５５７６号（Ａ１）を参照）。
【０３１７】
本明細書中の抗体又は断片はまた、例えばＩＬ−１７並びにその他の異なる抗原、例えばＩＬ−１３（例えば米国特許出願公開第２００８／００６９８２０号参照）に結合する抗原結合部位を含む、「二重作用（Ｄｕａｌ  Ａｃｔｉｎｇ）ＦＡｂ」又は「ＤＡＦ」を含む。ＤＡＦ二重特異性抗体フォーマットは、二重特異性抗体においてしばしば遭遇する問題である鎖の誤対合の問題を排除し、なおかつ天然の抗体フォーマットを維持する。
【０３１８】
ノブ・イントゥー・ホール
多重特異性抗体を産生する方法としてのノブ・イントゥー・ホールの使用は、例えば、米国特許第５７３１１６８号、国際公開第２００９／０８９００４号、米国特許出願公開第２００９／０１８２１２７号、米国特許出願公開第２０１１／０２８７００９号、Marvin and Zhu, Acta Pharmacol. Sin. (2005) 26(6):649-658、及びKontermann (2005) Acta Pharmacol. Sin., 26:1-9に記載される。簡潔な非限定的な議論が本明細書において提供される。
【０３１９】
「突起」とは、ヘテロ多量体を安定させ、それによって、例えばホモ多量体形成よりもヘテロ多量体形成を支持するように、第一のポリペプチドの界面から突き出し、従って隣接界面（すなわち、第二のポリペプチドの界面）の代償空洞内に配置可能である少なくとも一つのアミノ酸側鎖を指す。突起は、元の界面に存在し得るか又は（例えば界面をコードする核酸を変更することで）合成的に導入することができる。幾つかの実施態様において、第一のポリペプチドの界面をコードする核酸は、突起をコードするために改変される。これを達成するために、第一のポリペプチドの界面において少なくとも一の「元の」アミノ酸残基をコードする核酸が、元のアミノ酸残基より大きい側鎖体積を有する少なくとも一つの「移入」アミノ酸残基をコードする核酸に置換される。複数の元の残基及びそれに対応する移入残基が存在し得ることが理解されるであろう。種々のアミノ酸残基の側鎖の体積が、例えば、米国特許出願公開第２０１１／０２８７００９号の表１又は米国特許第７６４２２２８号の表１に示される。
【０３２０】
幾つかの実施態様において、突起の形成のための移入残基は、アルギニン（Ｒ）、フェニルアラニン（Ｆ）、チロシン（Ｙ）及びトリプトファン（Ｗ）から選択される天然に生じるアミノ酸残基である。幾つかの実施態様において、移入残基はトリプトファン又はチロシンである。幾つかの実施態様において、突起の形成のための元の残基は、アラニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グリシン、セリン、トレオニン又はバリンなど小さな側鎖の体積を有する。例えば、米国特許第７６４２２２８号を参照。
【０３２１】
「空洞（ｃａｖｉｔｙ）」は、第二のポリペプチドの界面から窪み、従って、第一のポリペプチドの隣接界面上の対応する突起を収容する少なくとも一つのアミノ酸側鎖を指す。空洞は、元の界面に存在し得るか又は（例えば界面をコードする核酸を変更することで）合成的に導入することができる。幾つかの実施態様において、第二のポリペプチドの界面をコードする核酸は、空洞をコードするために改変される。これを達成するために、第二のポリペプチドの界面において少なくとも一の「元の」アミノ酸残基をコードする核酸が、元のアミノ酸残基より小さい側鎖体積を有する少なくとも一つの「移入」アミノ酸残基をコードするＤＮＡに置換される。複数の元の残基及びそれに対応する移入残基が存在し得ることが理解されるであろう。幾つかの実施態様において、空洞の形成のための移入残基は、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、スレオニン（Ｔ）及びバリン（Ｖ）から選択される天然に生じるアミノ酸残基である。幾つかの実施態様において、移入残基は、セリン、アラニン又はスレオニンである。幾つかの実施態様において、空洞の形成のための元の残基は、チロシン、アルギニン、フェニルアラニン又はトリプトファンなど大きな側鎖の体積を有する。
【０３２２】
突起は、空洞内に「配置することが可能」であり、このことは、第一ポリペプチド及び第二ポリペプチドのそれぞれの界面上の突起と空洞の空間的位置、及びその突起と空洞の大きさが、界面での第一ポリペプチド及び第二ポリペプチドの正常な会合を著しくを乱すことなく、その突起が空洞中に配置され得るようなものであることを意味している。Ｔｙｒ、Ｐｈｅ及びＴｒｐなどの突起は通常、界面の軸から垂直に延びておらず、好適なコンフォメーションをとっていないので、対応する空洞と突起の位置合わせは、幾つかの例において、Ｘ線結晶構造解析又は核磁気共鳴（ＮＭＲ）により得られたものなど三次元構造に基づく突起／空洞の対のモデリングに依存し得る。このことは、当該技術分野において広く受け入れられている技術を用いて達成することができる。
【０３２３】
幾つかの実施態様において、ＩｇＧ１定常領域中のノブ変異は、Ｔ３６６Ｗである。幾つかの実施態様において、ＩｇＧ１定常領域中のホール変異は、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ及びＹ４０７Ｖから選択される一以上の変異を含む。幾つかの実施態様において、ＩｇＧ１定常領域中のホール変異は、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ及びＹ４０７Ｖを含む。配列番号６７は、ノブ変異を有する典型的なＩｇＧ１定常領域を示し、配列番号６８は、ホール変異を有する典型的なＩｇＧ１定常領域を示す。
【０３２４】
幾つかの実施態様において、ＩｇＧ４定常領域中のノブ変異は、Ｔ３６６Ｗである。幾つかの実施態様において、ＩｇＧ４定常領域中のホール変異は、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ及びＹ４０７Ｖから選択される一以上の変異を含む。幾つかの実施態様において、ＩｇＧ４定常領域中のホール変異は、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ及びＹ４０７Ｖを含む。配列番号６９は、ノブ変異を有する典型的なＩｇＧ４定常領域を示し、配列番号７０は、ホール変異を有する典型的なＩｇＧ４定常領域を示す。例えば、米国特許第７６４２２２８号を参照。
【０３２５】
７．抗体変異体
ある実施態様において、本明細書で提供される抗体のアミノ酸配列変異体が企図される。例えば、抗体の結合親和性及び／又は他の生物学的特性を改善することが望まれ得る。抗体のアミノ酸配列変異体は、抗体をコードするヌクレオチド配列に適切な改変を導入することにより、又はペプチド合成によって調製することができる。このような改変は、例えば、抗体のアミノ酸配列内における、残基の欠失、及び／又は挿入及び／又は置換を含む。最終構築物が、所望の特性、例えば、抗原結合を有していることを条件として、欠失、挿入、及び置換の任意の組み合わせが、最終構築物に到達させるために作成され得る。
【０３２６】
置換、挿入、及び欠失変異体
ある実施態様において、一つ以上のアミノ酸置換を有する抗体変異体が提供される。置換型変異誘発の対象となる部位は、ＨＶＲ及びＦＲを含む。保存的置換は、表１の「保存的置換」の見出しの下に示されている。より実質的な変更が、表１の「典型的な置換」の見出しの下に与えられ、アミノ酸側鎖のクラスを参照して以下に更に説明される。アミノ酸置換は、目的の抗体に導入することができ、その産物は、所望の活性、例えば、抗原結合の保持／改善、免疫原性の減少、又はＡＤＣＣ又はＣＤＣの改善についてスクリーニングされる。
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【０３２７】
アミノ酸は共通の側鎖特性に基づいてグループに分けることができる：
（１）疎水性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
（２）中性の親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；
（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
（４）塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
（５）鎖配向に影響する残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；
（６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ．
【０３２８】
非保存的置換は、これらの分類の一つのメンバーを他の分類に交換することを伴うこととなる。
【０３２９】
置換変異体の一つのタイプは、親抗体（例えば、ヒト化又はヒト抗体など）の一以上の超可変領域残基の置換を含む。一般的には、更なる研究のために選択され得られた変異体は、親抗体と比較して、特定の生物学的特性の改変（例えば、改善）（例えば、親和性の増加、免疫原性を減少）を有し、及び／又は親抗体の特定の生物学的特性を実質的に保持しているであろう。典型的な置換型変異体は、親和性成熟抗体であり、例えば、本明細書に記載されるファージディスプレイに基づく親和性成熟技術を用いて、簡便に生成され得る。簡潔に言えば、一つ以上のＨＶＲ残基が変異し、変異体抗体は、ファージ上に表示され、特定の生物学的活性（例えば、結合親和性）についてスクリーニングされる。
【０３３０】
改変（例えば、置換）は、例えば抗体の親和性を向上させるために、ＨＶＲで行うことができる。このような改変は、ＨＶＲの「ホットスポット」、すなわち、体細胞成熟過程中に高頻度で変異を受けるコドンにコードされた残基で（例えばChowdhury, Methods Mol. Biol. 207:179-196 (2008)を参照）、及び／又はＳＤＲ（ａ−ＣＤＲ）で行うことができ、得られた変異体ＶＨ又はＶＬが結合親和性について試験される。二次ライブラリから構築し選択し直すことによる親和性成熟が、例えばHoogenboom et al. in Methods in Molecular Biology 178:1-37 (O'Brien et al., ed., Human Press, Totowa, NJ, (2001)に記載されている。親和性成熟の幾つかの実施態様において、多様性が、種々の方法（例えば、変異性ＰＣＲ、鎖シャッフリング、又はオリゴヌクレオチド指定突然変異誘発）の何れかにより、成熟のために選択された可変遺伝子中に導入される。次いで、二次ライブラリーが作成される。次いで、ライブラリーが、所望の親和性を持つ抗体変異体を同定するためにスクリーニングされる。多様性を導入するする別の方法は、幾つかのＨＶＲ残基（例えば、一度に４から６残基）がランダム化されたＨＶＲを標的としたアプローチを含む。抗原結合に関与するＨＶＲ残基は、例えばアラニンスキャニング突然変異誘発、又はモデリングを用いて、特異的に同定され得る。特に、ＣＤＲ−Ｈ３及びＣＤＲ−Ｌ３がしばしば標的にされる。
【０３３１】
ある実施態様において、置換、挿入、又は欠失は、そのような改変が抗原に結合する抗体の能力を実質的に低下させない限りにおいて、一以上のＨＶＲ内で生じる可能性がある。例えば、実質的に結合親和性を低下させない保存的改変（例えば本明細書で与えられる保存的置換）をＨＶＲ内で行うことができる。このような改変は、ＨＶＲ「ホットスポット」又はＳＤＲの外側であってもよい。ある実施態様において、アミノ酸置換が、免疫グロブリン分子の一以上の翻訳後修飾を改変又は排除するために又は抗体産生収率を向上させるために導入することができる。上記に与えられた変異体ＶＨ又はＶＬ配列の所定の実施態様において、各ＨＶＲは不変であるか、又はわずか１個、２個又は３個のアミノ酸置換が含まれているかの何れかである。
【０３３２】
突然変異誘発のために標的とすることができる抗体の残基又は領域を同定するための有用な方法は、Cunningham and Wells (1989) Science, 244:1081-1085により説明されるように、「アラニンスキャニング変異誘発」と呼ばれる。この方法では、標的残基の残基又はグループ（例えば、ａｒｇ、ａｓｐ、ｈｉｓ、ｌｙｓ及びｇｌｕなどの荷電残基）が同定され、抗原と抗体との相互作用が影響を受けるかどうかを判断するために、中性又は負に荷電したアミノ酸（例えば、アラニン又はポリアラニン）に置換される。更なる置換が、最初の置換に対する機能的感受性を示すアミノ酸の位置に導入され得る。代わりに、又は更に、抗原抗体複合体の結晶構造が、抗体と抗原との接触点を同定する。そのような接触残基及び隣接残基が、置換の候補として標的とされるか又は排除され得る。変異体はそれらが所望の特性を含むかどうかを決定するためにスクリーニングされ得る。
【０３３３】
アミノ酸配列挿入は、一残基から百以上の残基を含有するポリペプチド長にわたるアミノ及び／又はカルボキシル末端融合、並びに単一又は複数のアミノ酸残基の配列内挿入を含む。末端挿入の例としては、Ｎ末端メチオニン残基を有する抗体が含まれる。抗体分子の他の挿入変異体は、酵素に対する抗体のＮ末端又はＣ末端への融合（例えばＡＤＥＰＴの場合）、又は抗体の血清半減期を増加させるポリペプチドへの融合を含む。
【０３３４】
グリコシル化変異体
ある実施態様において、本明細書で提供される抗体は、抗体がグリコシル化される程度を増加又は減少させるように改変される。抗体へのグリコシル化部位の付加又は欠失は、一以上のグリコシル化部位が作成又は削除されるようにアミノ酸配列を変えることによって簡便に達成することができる。
【０３３５】
抗体がＦｃ領域を含む場合には、それに付着する糖を変えることができる。哺乳動物細胞によって生成された天然型抗体は、典型的には、Ｆｃ領域のＣＨ２ドメインのＡｓｎ２９７にＮ−結合により一般的に付着した分岐鎖、二分岐オリゴ糖を含んでいる。例えば、Wright et al. TIBTECH 15:26-32 (1997)を参照。オリゴ糖は、様々な炭水化物、例えば、二分岐オリゴ糖構造の「幹」のＧｌｃＮＡｃに結合した、マンノース、Ｎ−アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）、ガラクトース、シアル酸、並びにフコースを含み得る。幾つかの実施態様において、本明細書で提供される抗体のオリゴ糖の改変は、一定の改善された特性を有する抗体変異体を作成するために行われ得る。
【０３３６】
幾つかの実施態様において、抗体変異体は、Ｆｃ領域に（直接又は間接的に）付着されたフコースを欠いた糖鎖構造を有して提供される。例えば、このような抗体のフコース量は、１％から８０％、１％から６５％、５％から６５％、又は２０％から４０％であり得る。フコースの量は、例えば、国際公開第２００８／０７７５４６号に記載されているように、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析法によって測定されるＡｓｎ２９７に付着している全ての糖構造の合計（例えば、コンプレックス、ハイブリッド及び高マンノース構造）に対して、Ａｓｎ２９７の糖鎖中のフコースの平均量を計算することによって決定することができる。Ａｓｎ２９７は、Ｆｃ領域（Ｆｃ領域残基のＥＵ番号付け）でおよそ２９７の位置に位置するアスパラギン残基を指し、しかし、Ａｓｎ２９７もまた位置２９７の上流又は下流のおよそ±３アミノ酸に、すなわち抗体の軽微な配列変異に起因して、位置２９４と３００の間に配置され得る。このようなフコシル化変異体はＡＤＣＣ機能を改善させた可能性がある。例えば、米国特許出願公開第２００３／０１５７１０８号（Ｐｒｅｓｔａ、Ｌ．）；米国特許出願公開第２００４／００９３６２１号（協和発酵工業株式会社）を参照。「脱フコシル化」又は「フコース欠損」抗体変異体に関連する出版物の例としては、米国特許出願公開第２００３／０１５７１０８号；国際公開第２０００／６１７３９号；国際公開第２００１／２９２４６号；米国特許出願公開第２００３／０１１５６１４号；米国特許出願公開第２００２／０１６４３２８号；米国特許出願公開第２００４／００９３６２１号；米国特許出願公開第２００４／０１３２１４０号；米国特許出願公開第２００４／０１１０７０４号；米国特許出願公開第２００４／０１１０２８２号；米国特許出願公開第２００４／０１０９８６５号；国際公開第２００３／０８５１１９号；国際公開第２００３／０８４５７０号；国際公開第２００５／０３５５８６号；国際公開第２００５／０３５７７８号；国際公開第２００５／０５３７４２号；国際公開第２００２／０３１１４０号；Okazaki et al. J. Mol. Biol. 336:1239-1249 (2004); Yamane-Ohnuki et al. Biotech. Bioeng. 87: 614 (2004)が含まれる。脱フコシル化抗体を産生する能力を有する細胞株の例としては、タンパク質フコシル化を欠損しているＬｅｃ１３  ＣＨＯ細胞（Ripka et al. Arch. Biochem. Biophys. 249:533-545 (1986)；米国特許出願公開第２００３／０１５７１０８号（Ａ１）、Ｐｒｅｓｔａ、Ｌ；及び国際公開第２００４／０５６３１２号（Ａ１）、Ａｄａｍｓら、特に実施例１１）、及びノックアウト細胞株、例えばアルファ−１、６−フコシルトランスフェラーゼ遺伝子、ＦＵＴ８、ノックアウトＣＨＯ細胞（例えば、Yamane-Ohnuki et al. Biotech. Bioeng. 87: 614 (2004); Kanda, Y. et al., Biotechnol. Bioeng., 94(4):680-688 (2006)；及び国際公開第２００３／０８５１０７号を参照）を含む。
【０３３７】
抗体変異体は、例えば、抗体のＦｃ領域に結合した二分岐オリゴ糖がＧｌｃＮＡｃによって二分されている二分オリゴ糖を更に備えている。このような抗体変異体はフコシル化を減少させ、及び／又はＡＤＣＣ機能を改善している可能性がある。そのような抗体変異体の例は、例えば、国際公開第２００３／０１１８７８号（Ｊｅａｎ−Ｍａｉｒｅｔｔら）；米国特許第６６０２６８４号（Ｕｍａｎａら）；及び米国特許出願公開第２００５／０１２３５４６号（Ｕｍａｎａら）に記載されている。Ｆｃ領域に結合したオリゴ糖内に少なくとも１つのガラクトース残基を持つ抗体変異体も提供される。このような抗体変異体はＣＤＣ機能を改善させた可能性がある。このような抗体変異体は、例えば、国際公開第１９９７／３００８７号（Ｐａｔｅｌら）；国際公開第１９９８／５８９６４号（Ｒａｊｕ、Ｓ．）；及び国際公開第１９９９／２２７６４号（Ｒａｊｕ、Ｓ．）に記載されている。
【０３３８】
Ｆｃ領域変異体
ある実施態様において、一以上のアミノ酸改変を、本明細書で提供される抗体のＦｃ領域に導入することができ、それによってＦｃ領域変異体を生成する。Ｆｃ領域の変異体は、１つ又は複数のアミノ酸位置においてアミノ酸修飾（例えば置換）を含むヒトＦｃ領域の配列（例えば、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４のＦｃ領域）を含んでもよい。
【０３３９】
幾つかの実施態様において、重鎖定常領域などの抗体定常領域は、多重特異性抗体の形成を促進する、ノブ変異及び／又はホール変異を含む。非限定的で例示的なノブ変異及びホール変異、及びノブ・イントゥー・ホール技術は、一般に、例えば、米国特許第５７３１１６８号、国際公開第２００９／０８９００４号、米国特許出願公開第２００９／０１８２１２７号、米国特許出願公開第２０１１／０２８７００９号、Marvin and Zhu, Acta Pharmacol. Sin. (2005) 26(6):649-658、及びKontermann (2005) Acta Pharmacol. Sin., 26:1-9に記載されている。特定の非限定的で例示的なノブ変異及びホール変異は本明細書において議論される。
【０３４０】
ある実施態様において、インビボにおける抗体の半減期が重要であるが、ある種のエフェクター機能（例えば補体及びＡＤＣＣなど）が不要又は有害である適応のための望ましい候補とならしめる、全てではないが一部のエフェクター機能を有する抗体変異体が提供される。インビトロ及び／又はインビボでの細胞毒性アッセイを、ＣＤＣ活性及び／又はＡＤＣＣ活性の減少／枯渇を確認するために行うことができる。例えば、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）結合アッセイは、抗体がＦｃγＲ結合を欠くが（それゆえ、おそらくＡＤＣＣ活性を欠く）、ＦｃＲｎ結合能力を保持していることを確認するために行うことができる。ＡＤＣＣを媒介する初代細胞、ＮＫ細胞は、ＦｃγＲＩＩＩのみを発現するのに対し、単球はＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ及びＦｃγＲＩＩＩを発現する造血細胞におけるＦｃＲの発現は、Ravetch and Kinet, Annu. Rev. Immunol. 9:457-492 (1991)の４６４頁の表３に要約されている。目的の分子のＡＤＣＣ活性を評価するためのインビトロアッセイの非限定的な例は、米国特許第５５００３６２号（例えば、Hellstrom, I. et al. Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 83:7059-7063 (1986)を参照）及びHellstrom, I et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 82:1499-1502 (1985); 5,821,337 (Bruggemann, M. et al., J. Exp. Med. 166:1351-1361 (1987)を参照）に説明される。あるいは、非放射性アッセイ法を用いることができる（例えば、フローサイトメトリー用のＡＣＴＩＴＭ非放射性細胞傷害性アッセイ（ＣｅｌｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ｉｎｃ． Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ、ＣＡ；及びＣｙｔｏＴｏｘ ９６（登録商標）非放射性細胞毒性アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）を参照）。このようなアッセイに有用なエフェクター細胞には、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞が含まれる。あるいは、又は更に、目的の分子のＡＤＣＣ活性は、Clynes et al., PNAS USA 95:652-656 (1998)に開示されるように、インビボで、例えば動物モデルにおいて評価することができる。Ｃ１ｑ結合アッセイはまた、抗体が体Ｃ１ｑを結合することができないこと、従って、ＣＤＣ活性を欠いていることを確認するために行うことができる。例えば、国際公開第２００６／０２９８７９号及び国際公開第２００５／１００４０２号のＣ１ｑ及びＣ３ｃ結合ＥＬＩＳＡを参照。補体活性化を評価するために、ＣＤＣアッセイを行うことができる（例えば、Gazzano-Santoro et al., J. Immunol. Methods 202:163 (1996); Cragg, M.S. et al., Blood 101:1045-1052 (2003)；及びCragg, M.S. and M.J. Glennie, Blood 103:2738-2743 (2004)を参照）。ＦｃＲｎ結合、及びインビボでのクリアランス／半減期の測定はまた、当該分野で公知の方法を用いて行うことができる（例えば、Petkova, S.B. et al., Int'l. Immunol. 18(12):1759-1769 (2006)を参照）。
【０３４１】
エフェクター機能が減少した抗体は、Ｆｃ領域の残基２３８、２６５、２６９、２７０、２９７、３２７、３２９の一つ以上の置換を有するものが含まれる（米国特許第６７３７０５６号）。そのようなＦｃ変異体は、残基２６５（Ｄ）及び２９７（Ｎ）のアラニンへの置換を有する、いわゆる「ＤＡＮＡ」Ｆｃ変異体を含む、アミノ酸位置２６５、２６９、２７０、２９７及び３２７の２以上での置換を有するＦｃ変異体を含む（米国特許第７３３２５８１号）。
【０３４２】
ＦｃＲへの改善又は減少させた結合を持つ特定の抗体変異体が記載されている。（例えば、米国特許第６７３７０５６号；国際公開第２００４／０５６３１２号、及びShields et al., J. Biol. Chem. 9(2): 6591-6604 (2001)を参照）。
【０３４３】
ある実施態様において、抗体変異体はＡＤＣＣを改善する一以上のアミノ酸置換、例えば、Ｆｃ領域の位置２９８、３３３、及び／又は３３４における置換（ＥＵの残基番号付け）を含む。
【０３４４】
幾つかの実施態様において、例えば、米国特許第６１９４５５１号、国際公開第９９／５１６４２号、及びIdusogie et al. J. Immunol. 164: 4178-4184 (2000)に記述されるように、改変された（すなわち、改善され又は減少した）Ｃ１ｑ結合及び／又は補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を生じる、Ｆｃ領域における改変がなされる。
【０３４５】
増加した半減期を持ち、胎仔への母性ＩｇＧの移送を担う、新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）への結合が改善された抗体（Guyer et al., J. Immunol. 117:587 (1976)及びKim et al., J. Immunol. 24:249 (1994)）が、米国特許出願公開第２００５／００１４９３４号（Ａ１）（Ｈｉｎｔｏｎら）に記載されている。これらの抗体は、ＦｃＲｎへのＦｃ領域の結合を改善する一以上の置換を有するＦｃ領域を含む。このようなＦｃ変異体は、Ｆｃ領域の残基：２３８、２５６、２６５、２７２、２８６、３０３、３０５、３０７、３１１、３１２、３１７、３４０、３５６、３６０、３６２、３７６、３７８、３８０、３８２、４１３、４２４又は４３４の一以上の置換、例えば、Ｆｃ領域の残基４３４の置換を有するものを含む（米国特許第７３７１８２６号）。
【０３４６】
Ｆｃ領域の変異体の他の例に関しては、Duncan & Winter, Nature 322:738-40 (1988)；米国特許第５６４８２６０号；米国特許第５６２４８２１号；及び国際公開第９４／２９３５１号も参照のこと。
【０３４７】
幾つかの実施態様において、抗体の定常領域は、本明細書において議論される一以上の変異（例えば、ノブ及び／又はホール変異及び／又は安定性を増大させる変異及び／又はＡＤＣＣを減少させる変異など）を含む。
【０３４８】
システイン操作抗体変異体
ある実施態様において、抗体の１つ以上の残基がシステイン残基で置換されている、システイン操作抗体、例えば、「ｔｈｉｏＭＡｂ（複数）」を作成することが望まれ得る。特定の実施態様において、置換された残基は、抗体のアクセス可能な部位で生じる。それらの残基をシステインで置換することにより、反応性チオール基は、それによって抗体のアクセス可能な部位に配置され、本明細書中で更に記載されるように、イムノコンジュゲートを作成するために、例えば薬物部分又はリンカー−薬物部分などの他の部分に抗体をコンジュゲートするために使用することができる。ある実施態様において、一以上の以下の残基がシステインで置換され得る：軽鎖のＶ２０５（Ｋａｂａｔの番号付け）；重鎖のＡ１１８（ＥＵ番号付け）；及び重鎖Ｆｃ領域のＳ４００（ＥＵ番号付け）。システイン操作抗体は、例えば、米国特許第７５２１５４１号に記載のように生成され得る。
【０３４９】
抗体誘導体
ある実施態様において、本明細書で提供される抗体は、当技術分野で知られ、容易に入手される追加の非タンパク質部分を含むように更に改変することができる。抗体の誘導体化に適した部分としては、限定されないが、水溶性ポリマーを含む。水溶性ポリマーの非限定的な例は、限定されないが、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、エチレングリコール／プロピレングリコールの共重合体、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ−１，３−ジオキソラン、ポリ−１，３，６−トリオキサン、エチレン／無水マレイン酸共重合体、ポリアミノ酸（単独重合体又はランダム共重合体の何れか）及びデキストラン又はポリ（ｎ−ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロピレングリコール単独重合体、プロピレンオキシド／エチレンオキシド共重合体、ポリオキシエチル化ポリオール（例えばグリセロール）、ポリビニルアルコール及びこれらの混合物を包含する。ポリエチレングリコールプロピオンアルデヒドはその水中での安定性のために製造上の利点を有し得る。ポリマーは何れかの分子量のものであってよく、そして分枝鎖又は未分枝鎖であってよい。抗体に結合するポリマーの数は変動してよく、そして、一以上の重合体が結合する場合は、それらは同じか又は異なる分子であることができる。一般的に、誘導体化に使用するポリマーの数及び／又は種類は、限定されないが、向上させるべき抗体の特定の特性又は機能、抗体誘導体が限定された条件下で治療に使用されるのか等を含む検討事項に基づいて決定することができる。
【０３５０】
幾つかの実施態様において、放射線への曝露によって選択的に加熱されてもよい抗体と非タンパク質性部分とのコンジュゲートが提供される。幾つかの実施態様において、非タンパク質部分はカーボンナノチューブである（Kam et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 102: 11600-11605 (2005)）。放射線は、任意の波長であって良いが、限定されないものの、通常の細胞に害を与えないが、抗体−非タンパク質部分の近位細胞が死滅される温度に非タンパク質部分を加熱する波長が含まれる。
【０３５１】
組換え方法及び組成物
抗体は、例えば米国特許第４８１６５６７号で説明したように、組換えの方法及び組成物を用いて製造することができる。幾つかの実施態様において、本明細書に記載される抗ＩＬ−１７抗体をコードする単離された核酸が提供される。幾つかの実施態様において、本明細書に記載される抗ＩＬ−１３抗体をコードする単離された核酸が提供される。幾つかの実施態様において、本明細書に記載される抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７抗体をコードする単離された核酸が提供される。このような核酸は、抗体のＶＬを含むアミノ酸配列、及び／又は抗体のＶＨを含むアミノ酸配列（例えば、抗体の軽鎖及び／又は重鎖）をコードし得る。幾つかの実施態様において、そのような核酸を含む一以上のベクター（例えば、発現ベクター）が提供される。幾つかの実施態様において、そのような核酸を含む宿主細胞が提供される。一実施態様において、宿主細胞は、（１）抗体のＶＬを含むアミノ酸配列、及び抗体のＶＨを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含むベクター、又は（２）抗体のＶＬを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含む第一ベクター、及び抗体のＶＨを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含む第二ベクターを含む（例えば、それらにより形質転換される）。
【０３５２】
幾つかの実施態様において、宿主細胞は、真核生物、例えばチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、又はリンパ系細胞（例えば、Ｙ０、ＮＳ０、Ｓｐ２０細胞）である。幾つかの実施態様において、抗体を作る方法が提供され、その方法は、上記のように、抗体の発現に適した条件下で、抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を培養することを含み、及び必要に応じて、宿主細胞（又は宿主細胞培養培地）から抗体を回収することを含む。
【０３５３】
幾つかの実施態様において、多重特異性抗体を作る方法が提供され、その方法は、抗体の発現に適した条件下で、多重特異性抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を培養することを含み、任意で、宿主細胞（又は宿主細胞培養培地）から多重特異性抗体を回収することを含む。幾つかの実施態様において、多重特異性抗体を作成する方法が提供され、ここで、方法は、第一のＶＨ／ＶＬユニットの発現に適した条件下で、多重特異性抗体（もしあれば、ときには「ヘミマー」又は「半抗体」と称される定常領域を含む）の第一のＶＨ／ＶＬユニットをコードする核酸を含む第一の宿主細胞を培養すること、及び任意で、宿主細胞（又は宿主細胞培養培地）から第一のＶＨ／ＶＬユニットを回収すること、並びに第二のＶＨ／ＶＬユニットの発現に適した条件下で、多重特異性抗体（もしあれば、ときには「ヘミマー」又は「半抗体」と称される定常領域を含む）の第二のＶＨ／ＶＬユニットをコードする核酸を含む第二の宿主細胞を培養すること、及び任意で、宿主細胞（又は宿主細胞培養培地）から第二のＶＨ／ＶＬユニットを回収することを含む。幾つかの実施態様において、方法は、単離された第一のＶＨ／ＶＬユニット及び単離された第二のＶＨ／ＶＬユニットから多重特異性抗体を構築することを更に含む。そのようなアセンブリーは、幾つかの実施態様において、２つのＶＨ／ＶＬユニット（又はヘミマー又は半抗体）間の分子内ジスルフィドを形成する還元工程を含み得る。多重特異性抗体を生成する非限定的で例示的な方法は、例えば、米国特許出願公開第２０１１／０２８７００９号、米国特許出願公開第２００７／０１９６３６３号、米国特許出願公開第２００７／０１７８５５２号、米国特許第５７３１１６８号、国際公開第９６／０２７０１１号、国際公開第９８／０５０４３１号、国際公開第２０１３／０５５９５８号、国際公開第２０１１／１３３８８６号、及びZhu et al., 1997, Protein Science 6:781-788に記述される。非限定的で例示的な方法はまた、以下の実施例に記述される。
【０３５４】
抗ＩＬ−１７抗体、抗ＩＬ−１３抗体又は抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の組換え生産のために、例えば上述したように、抗体をコードする核酸が単離され、宿主細胞内での更なるクローニング及び／又は発現のために一以上のベクターに挿入される。このような核酸は、容易に単離され、従来の手順を用いて（例えば、抗体の重鎖と軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合できるオリゴヌクレオチドプローブを使用することによって）配列決定することができる。
【０３５５】
抗体をコードするベクターのクローニング又は発現に適切な宿主細胞は、本明細書に記載の原核細胞又は真核細胞を含む。例えば、特に、グリコシル化及びＦｃエフェクター機能が必要ない場合には、抗体は、細菌で産生することができる。細菌における抗体断片及びポリペプチドの発現については、例えば、米国特許第５６４８２３７号、第５７８９１９９号及び第５８４０５２３号を参照。（また、大腸菌における抗体の発現を説明している、Charlton, Methods in Molecular Biology, Vol. 248 (B.K.C. Lo, ed., Humana Press, Totowa, NJ, 2003), pp. 245-254も参照）。発現の後、抗体は可溶性画分において細菌の細胞ペーストから単離され、更に精製することができる。
【０３５６】
原核生物に加えて、糸状菌又は酵母菌のような真核微生物は、そのグリコシル化経路が、「ヒト化」されている菌類や酵母菌株を含む抗体をコードするベクターのための、適切なクローニング宿主又は発現宿主であり、部分的又は完全なヒトのグリコシル化パターンを有する抗体の生成をもたらす。Gerngross, Nat. Biotech. 22:1409-1414 (2004)、及びLi et al., Nat. Biotech. 24:210-215 (2006)を参照。
【０３５７】
グリコシル化抗体の発現に適した宿主細胞はまた、多細胞生物（無脊椎動物と脊椎動物）から派生している。無脊椎動物細胞の例としては、植物及び昆虫細胞が挙げられる。多数のバキュロウイルス株が同定され、これらは特にＳｐｏｄｏｐｔｅｒａ  ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ細胞のトランスフェクションのために、昆虫細胞と組み合わせて使用することができる。
【０３５８】
植物細胞培養もまた宿主として利用することができる。例えば、米国特許第５９５９１７７号、第６０４０４９８号、第６４２０５４８号、第７１２５９７８号及び第６４１７４２９号（トランスジェニック植物における抗体産生に関するＰＬＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳＴＭ技術を記載）を参照。
【０３５９】
脊椎動物細胞もまた宿主として用いることができる。例えば、懸濁液中で増殖するように適合した哺乳動物細胞株は有用であり得る。有用な哺乳動物宿主細胞株の他の例は、ＳＶ４０（ＣＯＳ−７）で形質転換されたサル腎臓ＣＶ１株；ヒト胚腎臓株（Graham et al., J. Gen Virol. 36:59 (1977)に記載された２９３細胞又は２９３細胞；ベビーハムスター腎臓細胞（ＢＨＫ）；マウスのセルトリ細胞（Mather, Biol. Reprod. 23:243-251 (1980)に記載されるＴＭ４細胞）；サル腎細胞（ＣＶ１）；アフリカミドリザル腎細胞（ＶＥＲＯ−７６）；ヒト子宮頚癌細胞（ＨＥＬＡ）；イヌ腎臓細胞（ＭＤＣＫ；バッファローラット肝臓細胞（ＢＲＬ ３Ａ）；ヒト肺細胞（Ｗ１３８）；ヒト肝細胞（ＨｅｐＧ２）、マウス乳腺腫瘍（ＭＭＴ０６０５６２）；例えばMather et al., Annals N.Y. Acad. Sci. 383:44-68 (1982)に記載されるＴＲＩ細胞；ＭＲＣ５細胞；及びＦＳ４細胞である。他の有用な哺乳動物宿主細胞株は、ＤＨＦＲ− ＣＨＯ細胞（Urlaub et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77:4216 (1980)）を含むチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞；及びＹ０、ＮＳ０及びＳｐ２／０などの骨髄腫細胞株を含む。抗体産生に適した特定の哺乳動物宿主細胞系の総説については、例えば、Yazaki and Wu, Methods in Molecular Biology, Vol. 248 (B.K.C. Lo, ed., Humana Press, Totowa, NJ), pp. 255-268 (2003)を参照。
【０３６０】
例示的なアッセイ
結合アッセイ及びその他のアッセイ
幾つかの実施態様において、本明細書に提供される抗体は、例えばＥＬＩＳＡ、ウエスタンブロット法など公知の方法により、その抗原結合活性について試験される。
【０３６１】
幾つかの実施態様において、競合アッセイを、ＩＬ−１７に対する結合について本明細書に記載されるＩＬ−１７抗体と競合する抗体を同定するために用いることができる。幾つかの実施態様において、競合アッセイを、ＩＬ−１７及び／又はＩＬ−１３に対する結合について本明細書に記載される抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体と競合する抗体を同定するために用いることができる。幾つかの実施態様において、ＩＬ−１７はＩＬ−１７Ａである。幾つかの実施態様において、ＩＬ−１７はＩＬ−１７ＡＦヘテロ二量体である。幾つかの実施態様において、ＩＬ−１７はＩＬ−１７Ｆである。ある実施態様において、このような競合抗体は、ＩＬ−１７結合のために、配列番号３９を含むＶＨアミノ酸配列及び配列番号３８を含むＶＬアミノ酸配列を含む抗体により結合される同一のエピトープ（例えば、直鎖状又は立体構造エピトープ）に結合する。ある実施態様において、このような競合抗体は、ＩＬ−１３結合のために、配列番号１３を含むＶＨアミノ酸配列及び配列番号１４を含むＶＬアミノ酸配列を含む抗体により結合される同一のエピトープ（例えば、直鎖状又は立体構造エピトープ）に結合する。ある実施態様において、このような競合抗体は、ＩＬ−１３結合のために、配列番号３０を含むＶＨアミノ酸配列及び配列番号２９を含むＶＬアミノ酸配列を含む抗体により結合される同一のエピトープ（例えば、直鎖状又は立体構造エピトープ）に結合する。ある実施態様において、このような競合抗体は、ＩＬ−１７結合のために、配列番号３９を含むＶＨアミノ酸配列及び配列番号３８を含むＶＬアミノ酸配列を含む抗体により結合される同一のエピトープ（例えば、直鎖状又は立体構造エピトープ）に結合し、かつ、ＩＬ−１３結合のために、配列番号１３を含むＶＨアミノ酸配列及び配列番号１４を含むＶＬアミノ酸配列を含む抗体により結合される同一のエピトープ（例えば、直鎖状又は立体構造エピトープ）に結合する二重特異性抗体である。ある実施態様において、このような競合抗体は、エピトープのアミノ酸残基の少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、若しくはそれ以上、又は全てに結合する。ある実施態様において、そのような競合二重特異性抗体は、配列番号３９を含むＶＨアミノ酸配列及び配列番号３８を含むＶＬアミノ酸配列並びに配列番号１３を含むＶＨアミノ酸配列及び配列番号１４を含むＶＬアミノ酸配列を含む二重特異性抗体の、ＩＬ−１３及び／又はＩＬ−１７に対する結合を１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％又は１００％減少させる。抗体が結合するエピトープをマッピングするための詳細な典型的な方法が、Morris (1996) “Epitope Mapping Protocols," in Methods in Molecular Biology vol. 66 (Humana Press, Totowa, NJ)に提供されている。
【０３６２】
例示的な競合アッセイにおいて、固定化ＩＬ−１７は、ＩＬ−１７に結合する第一の標識抗体（例えば、配列番号３９を含むＶＨアミノ酸配列及び配列番号３８を含むＶＬアミノ酸配列（又は配列番号４０、４３、４４、４５、４６、４７を含むアミノ酸配列を含む対応するＣＤＲ）を含む抗体）、並びにＩＬ−１７への結合について第一の抗体と競合するその能力について試験されている第二の未標識抗体を含む溶液中でインキュベートされる。第二抗体はハイブリドーマ上清中に存在してもよい。対照として、固定化ＩＬ−１７が、第二の未標識の抗体でなく、第一の標識された抗体を含む溶液中でインキュベートされる。第一の抗体のＩＬ−１７への結合を許容する条件下でインキュベートした後、過剰の未結合の抗体が除去され、固定化ＩＬ−１７に結合した標識の量が測定される。もし、固定化ＩＬ−１７に結合した標識の量が、対照試料と比較して試験試料中で実質的に減少している場合、それは、第二抗体が、ＩＬ−１７への結合に対して、第一の抗体と競合していることを示している。Harlow and Lane (1988) Antibodies: A Laboratory Manual ch.14 (Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, NY)を参照。
【０３６３】
更なる例示的な競合アッセイにおいて、固定化ＩＬ−１３は、ＩＬ−１３に結合する第一の標識抗体（例えば、配列番号１３を含むＶＨアミノ酸配列及び配列番号１４を含むＶＬアミノ酸配列（又は配列番号１５、１６、１７、１８、１９、２０を含むアミノ酸配列を含む対応するＣＤＲ）を含む抗体又は配列番号３０を含むＶＨアミノ酸配列及び配列番号２９を含むＶＬアミノ酸配列（又は配列番号３１、３２、３３、３４、４５、３６を含むアミノ酸配列を含む対応するＣＤＲ）を含む抗体）、及びＩＬ−１３への結合について第一の抗体と競合する能力について試験されている第二の未標識抗体を含む溶液中でインキュベートされる。第二抗体はハイブリドーマ上清中に存在してもよい。対照として、固定化ＩＬ−１３が、第二の未標識の抗体でなく、第一の標識された抗体を含む溶液中でインキュベートされる。第一の抗体のＩＬ−１３への結合を許容する条件下でインキュベートした後、過剰の未結合の抗体が除去され、固定化ＩＬ−１３に結合した標識の量が測定される。もし、固定化ＩＬ−１３に結合した標識の量が、対照試料と比較して試験試料中で実質的に減少している場合、それは、第二抗体が、ＩＬ−１３への結合に対して、第一の抗体と競合していることを示している。
【０３６４】
活性のアッセイ
幾つかの実施態様において、生物学的活性を有する抗ＩＬ−１７抗体及び抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体を同定するためのアッセイが提供される。生物学的活性は、例えば、ＩＬ１７Ｒａ及び／又はＲｃに結合するＩＬ−１７ＡＡ、ＩＬ−１７ＡＦ、及び／又はＩＬ−１７ＦＦの阻害；ＩＬ−１７ＡＡ、ＩＬ−１７ＡＦ、及び／又はＩＬ−１７ＦＦ誘導性細胞増殖の阻害；ＩＬ−１７ＡＡ、ＩＬ−１７ＡＦ、及び／又はＩＬ−１７ＦＦ誘導性Ｇ−ＣＳＦ発現の阻害；ＩＬ−１７ＡＡ、ＩＬ−１７ＡＦ、及び／又はＩＬ−１７ＦＦ誘導性ＣＸＣＬ１、ＣＸＣＬ２、又はＣＸＣＬ３発現の阻害；ＩＬ−１７ＡＡ、ＩＬ−１７ＡＦ、及び／又はＩＬ−１７ＦＦ誘導性ＩＬ−６又はＩＬ−８発現の阻害；ＩＬ−１７ＡＡ、ＩＬ−１７ＡＦ、及び／又はＩＬ−１７ＦＦ誘導性ＮＦ−κＢ発現の阻害；喘息を阻害する活性；及び特発性肺線維症（ＩＰＦ）を阻害する活性；ＩＬ−１７ＡＡ、ＩＬ−１７ＡＦ、及び／又はＩＬ−１７ＦＦ誘導性好中球動員の阻害を含み得る。幾つかの実施態様において、生物学的活性は、例えば、ＩＬ−１３受容体（例えば、ＩＬ−４Ｒα及びＩＬ−１３Ｒα１を含むヘテロ二量体受容体）へのＩＬ−１３結合の阻害、ＩＬ−１３誘導性ＳＴＡＴ６リン酸化の阻害、ＩＬ−１３誘導性ＣＣＬ２６発現の阻害、ＩＬ−１３誘導性細胞増殖の阻害、ＩｇＥへのＢ細胞のＩＬ−１３誘導性スイッチングの阻害、ＩＬ−１３誘導性粘液産生の阻害、喘息を阻害する活性、ＩＰＦを阻害する活性、及びＩＬ−１３誘導性好酸球動員の阻害を含む。幾つかの実施態様において、生物学的活性は、例えば、ＩＬ−１３誘導性ＳＴＡＴ６リン酸化の阻害、ＩＬ−１３誘導性細胞増殖の阻害、ＩｇＥへのＢ細胞のＩＬ−１３誘導性スイッチングの阻害、ＩＬ−１３誘導性粘液産生の阻害、喘息の活動の阻害、及びＩＰＦの活動の阻害を含み、それぞれの場合において、ＩＬ−１３受容体（例えば、ＩＬ−４ＲαとＩＬ−１３Ｒα１を含むヘテロ二量体受容体）へのＩＬ−１３の結合の阻害を伴わない。インビボ及び／又はインビトロにおいてそのような生物学的活性を有する抗体もまた提供される。かかる生物学的活性の試験のための非限定的で例示的なアッセイが本明細書に記載され及び／又は当技術分野において周知である。
【０３６５】
イムノコンジュゲート
幾つかの実施態様において、一以上の細胞傷害性薬物にコンジュゲートされた抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体を含むイムノコンジュゲートが提供される。かかる非限定的で例示的な細胞傷害性薬物は、化学療法剤又は薬物、増殖阻害剤、毒素（例えば、タンパク質毒素、細菌、真菌、植物、又は動物起源の酵素活性毒素、又はそれらの断片）及び放射性同位体を含む。
【０３６６】
幾つかの実施態様において、イムノコンジュゲートは、抗体−薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）であって、そこでは抗体は、限定されないが、メイタンシノイド（例えば、米国特許第５２０８０２０号、第５４１６０６４号及び欧州特許ＥＰ０ ４２５２３５ Ｂ１を参照）；モノメチルアウリスタチン薬物部分ＤＥ及びＤＦ（ＭＭＡＥ及びＭＭＡＦ）（例えば、米国特許第５６３５４８３号及び５７８０５８８号及び７４９８２９８号を参照）などのアウリスタチン；ドラスタチン；カリケアマイシン又はその誘導体（例えば、米国特許第５７１２３７４号、５７１４５８６号、５７３９１１６号、５７６７２８５号、５７７０７０１号、５７７０７１０号、５７７３００１号、及び５８７７２９６号；Hinman et al., Cancer Res. 53:3336-3342 (1993)；及びLode et al., Cancer Res. 58:2925-2928 (1998)を参照）；ダウノマイシン又はドキソルビシンなどのアントラサイクリン（例えば、Kratz et al., Current Med. Chem. 13:477-523 (2006); Jeffrey et al., Bioorganic & Med. Chem. Letters 16:358-362 (2006); Torgov et al., Bioconj. Chem. 16:717-721 (2005); Nagy et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97:829-834 (2000); Dubowchik et al., Bioorg. & Med. Chem. Letters 12:1529-1532 (2002); King et al., J. Med. Chem. 45:4336-4343 (2002)；及び米国特許第６６３０５７９号を参照）；メトトレキサート；ビンデシン；ドセタキセル、パクリタキセル、ラロタキセル、テセタキセル、及びオルタタキセルなどのタキサン；トリコテセン；及びＣＣ１０６５を含む一つ以上の薬物とコンジュゲートしている。
【０３６７】
幾つかの実施態様において、イムノコンジュゲートは、酵素的に活性な毒素又はその断片にコンジュゲートした、本明細書に記載の抗体を含み、限定されないが、ジフテリアＡ鎖、ジフテリア毒素の非結合活性断片、（緑膿菌からの）外毒素Ａ鎖、リシンＡ鎖、アブリンＡ鎖、モデクシン（ｍｏｄｅｃｃｉｎ）Ａ鎖、アルファ−サルシン、アレウリテス・フォーディ（Ａｌｅｕｒｉｔｅｓ  ｆｏｒｄｉｉ）タンパク質、ジアンチン（ｄｉａｎｔｈｉｎ）タンパク質、フィトラカ・アメリカーナ（Ｐｈｙｔｏｌａｃａ  ａｍｅｒｉｃａｎａ）タンパク質（ＰＡＰＩ、ＰＡＰＩＩ、及びＰＡＰ−Ｓ）、モモルディカ・チャランチア（ｍｏｍｏｒｄｉｃａ  ｃｈａｒａｎｔｉａ）阻害剤、クルシン（ｃｕｒｃｉｎ）、クロチン（ｃｒｏｔｉｎ）、サパオナリア・オフィシナリス（ｓａｐａｏｎａｒｉａ  ｏｆｉｃｉｎａｌｉｓ）阻害剤、ゲロニン（ｇｅｌｏｎｉｎ）、ミトゲリン（ｍｉｔｏｇｅｌｌｉｎ）、レストリクトシン（ｒｅｓｔｒｉｃｔｏｃｉｎ）、フェノマイシン（ｐｈｅｎｏｍｙｃｉｎ）、エノマイシン（ｅｎｏｍｙｃｉｎ）及びトリコテセン（ｔｒｉｃｏｔｈｅｃｅｎｅ）が含まれる。
【０３６８】
幾つかの実施態様において、イムノコンジュゲートは、放射性コンジュゲートを形成するために放射性原子にコンジュゲートした本明細書に記載されるような抗体を含む。様々な放射性同位体が、放射性複合体の生産用に利用可能である。例としては、Ａｔ２１１、Ｉ１３１、Ｉ１２５、Ｙ９０、Ｒｅ１８６、Ｒｅ１８８、Ｓｍ１５３、Ｂｉ２１２、Ｐ３２、Ｐｂ２１２及びＬｕの放射性同位体を含む。検出のためにコンジュゲートを使用するとき、それはシンチグラフィー試験のための放射性原子、例えばｔｃ９９ｍ又はＩ１２３、又は核磁気共鳴（ＮＭＲ）画像化（磁気共鳴画像法、ｍｒｉとしても知られている）のためのスピン標識、例えば再び、ヨウ素−１２３、ヨウ素−１３１、インジウム−１１１、フッ素−１９、炭素−１３、窒素−１５、酸素−１７、ガドリニウム、マンガン又は鉄を含んでよい。
【０３６９】
抗体と細胞傷害性薬物のコンジュゲートは、種々の二官能性タンパク質カップリング剤、例えばＮ−スクシンイミジル−３−（２−ピリジルジチオ）プロピオナート（ＳＰＤＰ）、スクシンイミジル−４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシラート（ＳＭＣＣ）、イミノチオラン（ＩＴ）、イミドエステル類の二官能性誘導体（例えばジメチルアジピミダートＨＣＬ）、活性エステル類（例えば、スベリン酸ジスクシンイミジル）、アルデヒド類（例えば、グルタルアルデヒド）、ビスアジド化合物（例えば、ビス（ｐ−アジドベンゾイル）ヘキサンジアミン）、ビス−ジアゾニウム誘導体（例えば、ビス−（ｐ−ジアゾニウムベンゾイル）エチレンジアミン）、ジイソシアネート（例えば、トリエン−２，６−ジイソシアネート）、及び二活性フッ素化合物（例えば、１，５−ジフルオロ−２，４−ジニトロベンゼン）を使用して作製することができる。Vitetta et al., Science 238:1098 (1987)に記載されるように、例えば、リシンイムノトキシンを調製することができる。カーボン−１４−標識１−イソチオシアナトベンジル−３−メチルジエチレントリアミン五酢酸（ＭＸ−ＤＴＰＡ）は、放射性ヌクレオチドの抗体へのコンジュゲーションのためのキレート剤の例である。国際公開第９４／１１０２６号を参照。リンカーは、細胞中に細胞毒性薬物の放出を容易にする「切断可能なリンカー」であり得る。例えば、酸に不安定なリンカー、ペプチダーゼ過敏性リンカー、光解離性リンカー、ジメチルリンカー又はジスルフィド含有リンカー（Chari et al., Cancer Res. 52:127-131 (1992)；米国特許第５２０８０２０号）が使用され得る。
【０３７０】
本明細書において、イムノコンジュゲート又はＡＤＣは、限定されないが、市販の（例えばＰｉｅｒｃｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ｉｎｃ．、Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、ＩＬ．、Ｕ．Ｓ．Ａからの）、ＢＭＰＳ、ＥＭＣＳ、ＧＭＢＳ、ＨＢＶＳ、ＬＣ−ＳＭＣＣ、ＭＢＳ、ＭＰＢＨ、ＳＢＡＰ、ＳＩＡ、ＳＩＡＢ、ＳＭＣＣ、ＳＭＰＢ、ＳＭＰＨ、スルホ−ＥＭＣＳ、スルホ−ＧＭＢＳ、スルホ−ＫＭＵＳ、スルホ−ＭＢＳ、スルホ−ＳＩＡＢ、スルホ−ＳＭＰＢ、及びスルホ−ＳＭＰＢ、ＳＶＳＢ（スクシンイミジル（４−ビニルスルホン）ベンゾエート）を含むクロスリンカー試薬を用いて調製されるコンジュゲートを明示的に意図する。
【０３７１】
診断及び検出のための方法及び組成物
ある実施態様において、本明細書で提供される抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の何れかは、生物学的試料中のＩＬ−１７及び／又はＩＬ−１３の存在を検出するのに有用である。本明細書で使用する「検出」という用語は、定量的又は定性的検出を包含する。ある実施態様において、生物学的試料は、血清、血漿、鼻腔スワブ、気管支肺胞洗浄液及び痰などの細胞又は組織を含む。
【０３７２】
幾つかの実施態様において、診断又は検出の方法に使用される抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体が提供される。更なる態様において、生物学的試料中のＩＬ−１７及び／又はＩＬ−１３の存在を検出する方法が提供される。ある実施態様において、本方法は、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体のＩＬ−１３及び／又はＩＬ−１７への結合を許容する条件下で、本明細書に記載される抗ＩＬ−１７／ＩＬ−１３二重特異性抗体と生物学的試料を接触させること、及び複合体が抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体とＩＬ−１７及び／又はＩＬ−１３との間に形成されているかどうかを検出することを含む。そのような方法は、インビトロ又はインビボでの方法であり得る。幾つかの実施態様において、例えばＩＬ−１７及び／又はＩＬ−１３が患者の選択のためのバイオマーカーであるなど、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体が、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体、又は任意の他のＴＨ２経路阻害剤による治療に好適な被験体を選択するために使用される。
【０３７３】
抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体を用いて診断することができる例示的な疾患が本明細書に提供される。
【０３７４】
ある実施態様において、標識された抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体が提供される。標識は、限定されるものではないが、（例えば、蛍光標識、発色団標識、高電子密度標識、化学発光標識、放射性標識など）直接検出される標識又は部分、並びに、例えば、酵素反応又は分子間相互作用を介して間接的に検出される酵素又はリガンドのような部分が含まれる。典型的な標識は、限定されないが、ラジオアイソトープ３２Ｐ、１４Ｃ、１２５Ｉ、３Ｈ、及び１３１Ｉ、フルオロフォア、例えば希土類キレート又はフルオレセイン及びその誘導体、ローダミン及びその誘導体、ダンシル、ウンベリフェロン、ルシェフェラーゼ、例えばホタルルシェフェラーゼ及び細菌ルシェフェラーゼ（米国特許第４７３７４５６号）、ルシェフェリン、２，３−ジヒドロフタルジネジオン、西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）、アルカリフォスファターゼ、β−ガラクトシダーゼ、グルコアミラーゼ、リゾチーム、糖オキシダーゼ、例えばグルコースオキシダーゼ、ガラクトースオキシダーゼ、及びグルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ、ヘテロサイクリックオキシダーゼ、例えばウリカーゼ及びキサンチンオキシダーゼ、色素前駆体を酸化する過酸化水素を利用する酵素、例えばＨＲＰ、ラクトペルオキシダーゼ、又はマイクロペルオキシダーゼと共役したもの、ビオチン／アビジン、スピンラベル、バクテリオファージラベル、安定な遊離ラジカルなどが含まれる。
【０３７５】
薬学的製剤
本明細書に記載の抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の薬学的処方物は、所望の程度の純度を有するその抗体と任意の薬学的に許容される一以上の担体（Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed.: Williams and Wilkins PA, USA (1980)）とを、凍結乾燥製剤又は水性溶液の形態で混合することによって調製される。薬学的に許容される担体は、使用される投薬量及び濃度でレシピエントに毒性でなく、そしてこれには、限定しないが、リン酸塩、クエン酸塩及び他の有機酸のような緩衝液；アスコルビン酸及びメチオニンを含む抗酸化剤；防腐剤（例えば、オクタデシルジメチオルベンジルアンモニウムクロライド；ヘキサメトニウムクロライド；塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、フェノール、ブチル又はベンジルアルコール；アルキルパラベン、例えば、メチル又はプロピルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３−ペンタノール；及びｍ−クレゾール）；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド；タンパク質、例えば、血清アルブミン、ゼラチン、又は免疫グロブリン；親水性ポリマー、例えば、ポリビニルピロリドン；アミノ酸、例えば、グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン又はリジン；マンノサッカライド、ジサッカライド、及びグルコース、マンノース又はデキストリンを含む他の炭水化物；キレート剤、例えば、ＥＤＴＡ；糖、例えば、スクロース、マンニトール、トレハロース又はソルビトール；塩形成対イオン、例えば、ナトリウム；金属錯体（例えば、Ｚｎ−タンパク質錯体）；及び／又はポリエチレングリコール（ＰＥＧ）等の非イオン性界面活性剤が挙げられる。本明細書における典型的な薬学的に許容される担体は、水溶性の中性アクティブヒアルロニダーゼ糖タンパク質（ｓＨＡＳＥＧＰ）などの介在性薬物分散剤、例えば、ｒＨｕＰＨ２０（ＨＹＬＥＮＥＸ（登録商標）、Ｂａｘｔｅｒ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ、Ｉｎｃ．）などのヒト可溶性ＰＨ−２０ヒアルロニダーゼ糖タンパク質を更に含む。所定の典型的なｓＨＡＳＥＧＰ及び使用法は、ｒＨｕＰＨ２０を含み、米国特許出願公開第２００５／０２６０１８６号及び第２００６／０１０４９６８に開示されている。幾つかの実施態様において、ｓＨＡＳＥＧＰは、コンドロイチナーゼなどの一以上の付加的なグルコサミノグリカナーゼと組み合わされる。
【０３７６】
典型的な凍結乾燥抗体製剤は、米国特許第６２６７９５８号に記載されている。水性の抗体製剤は、米国特許第６１７１５８６号及び国際公開第２００６／０４４９０８号に記載されているものが含まれ、後者の製剤はヒスチジン−酢酸緩衝液を含む。
【０３７７】
本明細書の製剤はまた、治療を受けている特定の徴候のために必要な一以上の活性成分、好ましくは、互いに悪影響を及ぼさない相補的活性を持つものが含まれる場合がある。例えば、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体を有するコントローラー及び／又はＴＨ２経路阻害剤を更に提供することが所望され得る。このような活性成分は、意図した目的のために有効な量で組み合わされ適切に存在する。
【０３７８】
活性成分は、例えば、コアセルベーション技術又は界面重合法によって、例えばそれぞれヒドロキシメチルセルロース又はゼラチン−マイクロカプセル及びポリ（メチルメタクリレート（ｍｅｔｈｙｌｍｅｔｈａｃｙｌａｔｅ））マイクロカプセルにより、コロイド薬物送達系に（例えばリポソーム、アルブミンミクロスフィア、ミクロエマルジョン、ナノ粒子及びナノカプセル）又はマクロ・エマルジョンで調製されたマイクロカプセルに封入されてもよい。このような技術は、Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. (1980)に開示される。
【０３７９】
徐放性製剤が調製されてもよい。徐放性調製物の好適な例には、抗体を含有する固体疎水性ポリマーの半透過性マトリックスが含まれ、このマトリックスは成形品、例えばフィルム、又はマイクロカプセルの形態である。
【０３８０】
インビボ投与に使用される製剤は、一般的に無菌である。無菌性は、例えば、滅菌濾過膜を通して濾過することにより達成することができる。
【０３８１】
治療方法及び組成物
本明細書で提供される抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の何れかを、治療方法で使用することができる。
【０３８２】
ある実施態様において、本発明は、それを必要とする患者において好酸球及び好中球性炎症又は疾患を治療する方法を提供する。好酸球性炎症は、アレルギー性及び非アレルギー性の両方の、様々な疾患に関連している（Gonlugur (2006) Immunol. Invest. 35(1):29-45）。炎症は、損傷に対する生体組織の修復応答である。炎症反応の特徴は、組織自体で生産される特定の化学物質に起因する損傷した組織中の白血球の蓄積である。好酸球白血球は、アレルギー性疾患、寄生虫感染症、及び腫瘍性疾患のような広範囲の症状において蓄積する（Kudlacz et al., (2002) Inflammation 26: 111-119）。好酸球白血球は、免疫系の構成要素であり、粘膜表面の防御的な要素である。それらは、抗原だけでなく、寄生虫、化学物質、及び外傷に応答する。組織の好酸球及び組織の好中球数が血清ペリオスチンレベルと正に相関していることが見出された。例えば、米国特許出願公開第２０１２／０１５６１９４号を参照。好酸球性炎症を有する患者は、幾つかの実施態様において、米国特許出願公開第２０１２／０１５６１９４号に記載されているように、例えば、全血清ペリオスチンレベルを測定することによって同定することができる。
【０３８３】
本明細書に示されるように、ＩＬ−１７及び好中球性炎症は、重度の制御されない喘息においてＩＬ−１３及び好酸球性炎症と正に相関している。肺ＩＬ−１７はまた、吸入コルチコステロイドを服用している個体において中等度から重度の喘息における組織好中球レベルと関連している。更に、ＩＬ−１７レベルは、血清ペリオスチン濃度と相関している。
【０３８４】
抗ＩＬ−１７ＲＡ抗体によるＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆ経路の遮断は、喘息を有する被験体において治療効果を生じなかったことが以前にＢｕｓｓｅらによって報告された。Busse et al., 2013, Am. J. Respir. Crit. Care Med. 188:1294．著者は、高気管支拡張剤可逆性サブグループにおいてのみ名義的有意性を有するＡＣＱの変化が観察されたことを指摘したが、一方、高可逆性サブグループ解析の結果の有意性は不明のままである。
【０３８５】
対照的に、本発明は、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体を、それを必要とする個体に投与することを含む、喘息又は呼吸器疾患を治療する方法を提供し、ここで個体は、参照又は対照レベルと比較して上昇した好酸球数又は上昇した血清ペリオスチンレベルを有すると決定されている。ペリオスチンは、Ｔｈ２のバイオマーカーであり、ペリオスチンの上昇したレベルを有する患者は、ＩＬ−１３媒介性疾患を有する可能性があり、かつＩＬ−１３が高い患者集団である可能性がある。本明細書に記載されるように、ペリオスチンが高い患者集団におけるレブリキズマブ、抗ＩＬ−１３治療用抗体の治療効果は不均一である。好酸球−高（ペリオスチン−高）患者集団は更に、好中球−高及び好中球−低のサブグループに分割することができ、そのレブリキズマブは好酸球−高及び好中球−低のサブグループにおいてより有効であり、かつ好酸球−高及び好中球−高のサブグループでは有効性が低かった。
【０３８６】
従って、幾つかの実施態様において、本発明は、本明細書に記載の抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の有効量を個体に投与することを含む、個体における喘息又は呼吸器疾患を治療するための方法を提供する。幾つかの実施態様において、喘息は中等度から重度の喘息である。幾つかの実施態様において、個体は、高血清ペリオスチンを有する。幾つかの実施態様において、個体は、対照又は基準レベルと比較して、上昇した血清ペリオスチンを有する。幾つかの実施態様において、個体は、更に任意で、ＣＸＣＬ１、ＩＬ８、ＣＸＣＬ２、ＣＸＣＬ３、及びＣＳＦ３の少なくとも一つの上昇したレベルを有する。幾つかの実施態様において、個体は、対照又は基準レベルと比較して、上昇した血清ペリオスチン及びＣＸＣＬ１の上昇したレベルを有する。
【０３８７】
幾つかの実施態様において、個体において好酸球性疾患、好中球性疾患、ＩＬ−１３媒介性疾患、ＩＬ−１７媒介性疾患、及び／又は呼吸器疾患を治療する方法において使用のための抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体が提供される。幾つかの実施態様において、本方法は、本明細書に記載の抗体の有効量を個体に投与することを含む。
【０３８８】
幾つかの実施態様において、方法は、ＴＨ２経路阻害剤を個体に投与することを更に含む。幾つかの実施態様において、ＴＨ２経路阻害剤は、ＩＴＫ、ＢＴＫ、ＩＬ−９、ＩＬ−５、ＩＬ−１３、ＩＬ−４、ＯＸ４０Ｌ、ＴＳＬＰ、ＩＬ−２５、ＩＬ−３３、ＩｇＥ、ＩＬ−９受容体、ＩＬ−５受容体、ＩＬ−４受容体アルファ、ＩＬ−１３受容体アルファ１（ＩＬ−１３Ｒα１）、ＩＬ−１３受容体アルファ２（ＩＬ−１３Ｒα２）、ＯＸ４０、ＴＳＬＰ−Ｒ、ＩＬ−７Ｒアルファ、ＩＬ−１７ＲＢ、ＳＴ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＲＴＨ２、ＦｃイプシロンＲＩ、ＦｃイプシロンＲＩＩ／ＣＤ２３、Ｆｌａｐ、Ｓｙｋキナーゼ；ＣＣＲ４、ＴＬＲ９、ＣＣＲ３、ＩＬ５、ＩＬ３、及びＧＭ−ＣＳＦから選択される少なくとも一の標的を阻害する。幾つかの実施態様において、中等度から重度の喘息を治療する方法が提供される。幾つかの実施態様において、特発性肺線維症を治療する方法が提供される。幾つかの実施態様において、対照又は基準レベルと比較して、高い又は上昇した血清ペリオスチンを用いて個体を治療する方法が提供される。幾つかの実施態様において、ペリオスチンが高い喘息を治療する方法が提供される。血清ペリオスチンのレベルを決定する方法は、例えば、米国特許出願公開第２０１２／０１５６１９４号に提供される。
【０３８９】
幾つかの実施態様において、個体において喘息又は呼吸器疾患を治療する方法が提供され、ここで、喘息又は呼吸器疾患はコルチコステロイドで制御されない。限定されない例示的なコルチコステロイドは、吸入コルチコステロイド、例えばジプロピオン酸ベクロメタゾン（例えば、Ｑｖａｒ（登録商標））、ブデソニド（例えば、Ｐｕｌｍｉｃｏｒｔ（登録商標））、ブデソニド／ホルモテロールフマル酸塩水和物（例えば、Ｓｙｍｂｉｃｏｒｔ（登録商標））、フルニソリド（例えば、Ａｅｒｏｂｉｄ（登録商標））、プロピオン酸フルチカゾン（例えば、Ｆｌｏｖｅｎｔ（登録商標）、Ｆｌｏｎａｓｅ（登録商標））、プロピオン酸フルチカゾン及びサルメテロール（例えば、Ａｄｖａｉｒ（登録商標））、及びトリアムシノロンアセトニド（例えば、Ａｚｍａｃｏｒｔ（登録商標））などを含む。幾つかの実施態様において、患者はまた、第二コントローラーで治療される。第二コントローラーは、幾つかの実施態様において、長時間作用型気管支拡張薬（ＬＡＮＤ）であってもよい。限定されない例示的な長時間作用型気管支拡張薬は、長時間作用型β２アゴニスト（ＬＡＢＡ）、ロイコトリエン受容体アンタゴニスト（ＬＴＲＡ）、長時間作用型ムスカリンアンタゴニスト（ＬＡＭＡ）、テオフィリン、及び経口コルチコステロイド（ＯＣＳ）を含む。限定されない例示的なＬＡＢＤは、ブデソニド／ホルモテロールフマル酸塩水和物（例えば、Ｓｙｍｂｉｃｏｒｔ（登録商標））、プロピオン酸フルチカゾン及びサルメテロール（例えば、Ａｄｖａｉｒ（登録商標））、アルホルモテロール酒石酸塩（例えば、Ｂｒｏｖａｎａ（登録商標））、ホルモテロールフマル酸塩（例えば、Ｆｏｒａｄｉｌ（登録商標）、Ｐｅｒｆｏｒｍｉｓｔ（登録商標））、及びサルメテロールキシナホ酸塩（例えば、Ｓｅｒｅｖｅｎｔ（登録商標））を含む。ある実施態様において、方法は、コルチコステロイドを患者に投与することを更に含む。
【０３９０】
ある実施態様において、医薬として使用のための抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体が提供される。ある実施態様において、喘息、ＩＰＦ、呼吸器疾患、好酸球性疾患、好中球性疾患、ＩＬ−１３媒介性疾患、又はＩＬ−１７媒介性疾患の治療において使用のための抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体が提供される。ある実施態様において、治療の方法に使用のための抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体が提供される。ある実施態様において、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の有効量を個体に投与することを含む、喘息、呼吸器疾患、好酸球性疾患、好中球性疾患、ＩＬ−１３媒介性疾患、又はＩＬ−１７媒介性疾患を有する個体を治療する方法において使用のための、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体が提供される。一つのそのような実施態様において、本方法は、例えば後述するように、少なくとも一の付加的治療剤の有効量を個体に投与することを更に含む。
【０３９１】
上記実施態様の何れかに記載の「個体」又は「患者」は、好ましくはヒトである。ある実施態様において、個体又は患者は、喘息又は呼吸器疾患の治療を必要としているか又は喘息又は呼吸器疾患を発症する危険性が高い。ある実施態様において、喘息患者は、高レベルのペリオスチン発現を示す。ある実施態様において、喘息患者は、対照又は参照レベルと比較して、ペリオスチンの上昇したレベルを示す。
【０３９２】
ある実施態様において、患者は中等度から重度の喘息に罹患する。
【０３９３】
ある実施態様において、好酸球性炎症又は疾患に罹患している患者は、「好酸球性疾患を診断し治療する方法（Methods of Diagnosing and Treating Eosinophilic Disorders）」と題し、その全体が参照により本明細書に援用される、２０１３年１０月２３日に出願された６１／８９４８３１及び２０１４年１０月２２日に出願されたＰＣＴ／ＵＳ１４／６１７５９に記載されるように、好酸球のシグネチャー遺伝子の一以上の上昇したレベルを示し得る。ある実施態様において、患者は、対照患者と比較して、上昇した血清ペリオスチンレベル及び／又はＣＳＦ１、ＭＥＩＳ２、ＬＧＡＬＳ１２、ＩＤＯ１、ＴＨＢＳ４、ＯＬＩＧ２、ＡＬＯＸ１５、ＳＩＧＬＥＣ８、ＣＣＬ２３、ＰＹＲＯＸＤ２、ＨＳＤ３Ｂ７、ＳＯＲＤ、ＡＳＢ２、ＣＡＣＮＧ６、ＧＰＲ４４、ＭＧＡＴ３、ＳＬＣ４７Ａ１、ＳＭＰＤ３、ＣＣＲ３、ＣＬＣ、ＣＹＰ４Ｆ１２、及びＡＢＴＢ２から選択される一以上の上昇したレベルを示す好酸球性炎症陽性（ＥＩＰ）患者として同定される。例えば、全体が参照によって本明細書に援用される米国特許出願公開第２０１２／０１５６１９４号を参照。代替的に又は付加的に、患者は、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、好中球エラスターゼ、又はＣＥＡＣＡＭ６などの好中球シグネチャー遺伝子の一以上のレベルの上昇を示し得る。
【０３９４】
Ｔｈ２駆動型／好酸球性喘息サブフェノタイプの非侵襲的バイオマーカーの中には、血清ペリオスチン、分別呼気一酸化窒素（ＦｅＮＯ）、及び末梢血好酸球数がある。Arron et al. (2013) Adv Pharmacol 66: 1-49を参照。ある実施態様において、好酸球性喘息に罹患している患者は、対照又は基準レベルと比較して、総血清又は血漿ペリオスチンの高いレベル又は上昇したレベルを示す。ある実施態様において、ＥＩＰの患者は、血清又は血漿ペリオスチンレベルについて試験された患者を指し、ここで、血清又は血漿ペリオスチンレベルは、患者集団の血清又は血漿ペリオスチンレベルの中間又は平均と等しいか又はそれより大きい（高ペリオスチンと呼ばれることがある）。ある実施態様において、例えば本明細書に記載されるようなＥＬＩＳＡ又はサンドイッチイムノアッセイを使用して血清又は血漿ペリオスチンレベルについて試験された患者は、２０ｎｇ／ｍｌ以上の総ペリオスチンレベルを有するであろう（好酸球陽性）。ある実施態様において、患者は５０ｎｇ／ｍｌ以上の総ペリオスチンレベルを有するであろうある実施態様によれば、ＥＩＰである患者の総ペリオスチンレベルは、血清又は血漿中に、２１ｎｇ／ｍｌ以上、２２ｎｇ／ｍｌ以上、２３ｎｇ／ｍｌ以上、２４ｎｇ／ｍｌ以上、２５ｎｇ／ｍｌ以上、２６ｎｇ／ｍｌ以上、２７ｎｇ／ｍｌ以上、２８ｎｇ／ｍｌ以上、２９ｎｇ／ｍｌ以上、３０ｎｇ／ｍｌ以上、３１ｎｇ／ｍｌ以上、３２ｎｇ／ｍｌ以上、３３ｎｇ／ｍｌ以上、３４ｎｇ／ｍｌ以上、３５ｎｇ／ｍｌ以上、３６ｎｇ／ｍｌ以上、３７ｎｇ／ｍｌ以上、３８ｎｇ／ｍｌ以上、３９ｎｇ／ｍｌ以上、４０ｎｇ／ｍｌ以上、４１ｎｇ／ｍｌ以上、４２ｎｇ／ｍｌ以上、４３ｎｇ／ｍｌ以上、４４ｎｇ／ｍｌ以上、４５ｎｇ／ｍｌ以上、４６ｎｇ／ｍｌ以上、４７ｎｇ／ｍｌ以上、４８ｎｇ／ｍｌ以上、４９ｎｇ／ｍｌ以上、５０ｎｇ／ｍｌ以上、５１ｎｇ／ｍｌ以上、５２ｎｇ／ｍｌ以上、５３ｎｇ／ｍｌ以上、５４ｎｇ／ｍｌ以上、５５ｎｇ／ｍｌ以上、５６ｎｇ／ｍｌ以上、５７ｎｇ／ｍｌ以上、５８ｎｇ／ｍｌ以上、５９ｎｇ／ｍｌ以上、６０ｎｇ／ｍｌ以上、６１ｎｇ／ｍｌ以上、６２ｎｇ／ｍｌ以上、６３ｎｇ／ｍｌ以上、６４ｎｇ／ｍｌ以上、６５ｎｇ／ｍｌ以上、６６ｎｇ／ｍｌ以上、６７ｎｇ／ｍｌ以上、６８ｎｇ／ｍｌ以上、６９ｎｇ／ｍｌ以上及び７０ｎｇ／ｍｌ以上からなる群から選択することができる。ＥＩＰの状態は患者の状態を表し、状態を決定するために使用されるアッセイのタイプに依存しないことを理解すべきである。従って、米国特許出願公開第２０１２／０１５６１９４号に示されるＥＬＩＳＡアッセイ及びＥｌｅｃｓｙｓ（登録商標）ペリオスチンアッセイなどの他のペリオスチンのアッセイを含む他の好酸球性炎症の診断アッセイが、好酸球性炎症状態について試験するため及び総ペリオスチンレベルを測定するために使用され又は使用されるために開発することができる。また、本明細書にその全体が参照することにより援用されるJia et al., 2012, J. Allergy Clin. Immunol. 130:647-654、及び米国特許出願公開第２０１２／０１５６１９４号を参照。例示的な総ペリオスチンアッセイの手順を以下に示す。
【０３９５】
米国特許出願公開第２０１２／０１５６１９４号の実施例４（本明細書にその全体が参照することにより援用される）は、非常に敏感である（感度１．８８ｎｇ／ｍｌ）ペリオスチン捕捉ＥＬＩＳＡアッセイ（Ｅ４アッセイ）を提供する。抗体は、ｎＭの親和性で、ペリオスチンのアイソフォーム１〜４を認識する。
【０３９６】
Ｅ４アッセイ：精製モノクローナル抗体、２５Ｄ４（ハイブリドーマ又はＣＨＯ細胞株から発現されるコート抗体、配列番号１２１（ＶＨ）及び１２２（ＶＬ））の８０ｕＬをリン酸緩衝生理食塩水で２ｕｇ／ｍＬの最終濃度まで希釈する。マイクロタイタープレートをウェルあたりコート抗体１００μＬで２〜８℃で一晩覆いコーティングする。プレートを４００μＬの洗浄緩衝液（ＰＢＳ／０．０５％のＴｗｅｅｎ（ポリソルベート２０）により室温で洗浄緩衝液のサイクルあたりウェル毎に３回洗浄する。プレートにブロッキング緩衝液をウェルあたり２００μＬ添加する。覆われたプレートを室温で１．５時間振とうしながらインキュベートする。
【０３９７】
ｒｈｕＰｅｒｉｏｓｔｉｎの標準曲線を用意する（ｒｈｕＰｅｒｉｏｓｔｉｎの標準ストック＝アッセイ希釈液（ＰＢＳ／０．５％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）／０．０５％ポリソルベート２０／０．０５％ＰｒｏＣｌｉｎ３００、ｐＨ７．４）中でのｒｈｕＰｅｒｉｏｓｔｉｎアイソフォーム１、Ｒ＆Ｄ  ｓｙｓｔｅｍｓ  ＃３５４８−Ｆ２、５．２５ｎｇ／ｍｌ）。標準曲線希釈液＝ＰＢＳ／０．５％ＢＳＡ／０．０５％ポリソルベート２００、０５％ＰｒｏＣｌｉｎ３００、ｐＨ７．４。例えば：
2017507939.tif 000004
【０３９８】
対照（Ｃｏｎｔｒｏｌ）及び試料を調製する。３つの対照：スパイクソースコントロール（Ｓｐｉｋｅ  Ｓｏｕｒｃｅ  Ｃｏｎｔｒｏｌ）（ｒｈｕＰｅｒｉｏｓｔｉｎ完全長、アイソフォーム１、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ＃３５４８−Ｆ２）、正常マトリックスコントロール（Ｎｏｒｍａｌ  Ｍａｔｒｉｘ  Ｃｏｎｔｒｏｌ）（正常ヒト血清プール、Ｂｉｏｒｅｃｌａｍａｔｉｏｎ、Ｉｎｃ．）、高マトリックスコントロール（Ｈｉｇｈ  Ｍａｔｒｉｘ  Ｃｏｎｔｒｏｌ）（正常ヒト血清プール、１００ｎｇ／ｍｌ ｒｈｕＰｅｒｉｏｓｔｉｎ  ｓｐｉｋｅを加える）。例えば、
【０３９９】
１０μＬ  対照（又は試料）血清＋１．９９ｍＬ  試料／対照希釈液＝１：２００
３００μＬ  １：２００希釈＋３００μＬ  試料／対照希釈液＝１：４００
３００μＬ  １：４００希釈＋３００μＬ  試料／対照希釈液＝１：８００
３００μＬ  １：８００希釈＋３００μＬ  試料／対照希釈液＝１：１６００
各希釈は１回実行される。
【０４００】
正常ヒト血清プールを使用して、マトリックスコントロールを構築する。正常コントロールとしてスパイクされていないプールされたヒト血清を使用する。上述のようにプールした血清に１００ｎｇ／ｍＬ  ｒｈｕＰＯＳＴＮをスパイクすることにより高コントロールを生成する。プレート毎の各コントロールに対する４つの希釈の平均値、標準偏差（ＳＤ）、及び分散の％係数（ＣＶ、パーセントで表す）を計算する。ＣＶは、複製の平均についての反復測定の分散の大きさを定量化している。％ＣＶ＝１００＊（標準偏差／平均）．プレート間の精度を決定するために、全てのプレートに渡るこれらの平均濃度を評価する。このコントロール表は、その後、各コントロールの平均濃度の±２０％まで許容分散を設定して、正常及び高コントロールの合格／不合格の基準を定めるために使用される。
【０４０１】
洗浄緩衝液（ＰＢＳ／０．０５％ポリソルベート２０）のサイクルあたりウェルあたり４００μＬでプレートを３回洗浄する。希釈した標準液（ウェルを複製）、コントロール（全ての４つの希釈液）、及び試料（全ての４つの希釈液）をプレートに、ウェルあたり１００μＬ添加する。カバーされたプレートは室温で２時間振とうしながら、室温でインキュベートする。８０ｕＬの検出ＭＡｂストックＩ（ビオチン化マウス抗ヒトペリオスチン、モノクローナル抗体２３Ｂ９（ＶＨ：配列番号１２３、ＶＬ：配列番号１２４、アッセイ希釈液中で７．５ｕｇ／ｍｌ）をアッセイ希釈液＝５０ｎｇ／ｍＬで１２ｍＬに希釈する。洗浄緩衝液のサイクルあたりウェルあたり４００μＬでプレートを４回洗浄する。希釈した検出モノクローナル抗体をプレートにウェルあたり１００μＬ添加する。覆われたプレートを室温で１時間振とうしながらインキュベートする。アッセイ希釈液中で１：８０に希釈された８０ｕＬのストレプトアビジンＨＲＰストックＩ（ＡＭＤＥＸストレプトアビジン−ＨＲＰ、ＧＥヘルスケア＃ＲＰＮ４４０１、約１ｍｇ／ｍｌ）をアッセイ希釈液＝１：１２ｋで１２ｍＬへ希釈する。洗浄緩衝液のサイクルあたりウェルあたり４００μＬでプレートを４回洗浄する。希釈したストレプトアビジンＨＲＰをプレートにウェルあたり１００μＬ添加する。覆われたプレートを室温で４５分間振とうしながらインキュベートする。キルケガードベリー（Ｋｉｒｋｅｇａａｒｄ  ａｎｄ  Ｐｅｒｒｙ）（ＫＰＬ）２ステップＴＭＢ試薬を室温にする；混ぜない。洗浄緩衝液のサイクルあたりウェルあたり４００μＬでプレートを４回洗浄する。ＫＰＬのＴＭＢ基質コンポーネントの等量を混ぜ、プレートに、ウェルあたり１００μＬ追加する。振とうしながら室温で２０分間プレートをインキュベートする。１Ｍリン酸をプレートにウェルあたり１００μＬ添加する。４５０ｎｍの読み取り波長と６５０ｎｍの参照波長を使用してプレートを読む。
【０４０２】
アイソフォーム１（総ペリオスチンではない）に対する抗体を用いたペリオスチンアッセイが、類似の抗体捕捉フォーマットを使用して別の喘息患者の試料で試験された。予備的な結果では、ペリオスチンのアイソフォーム１は総ペリオスチン（Ｔｏｔａｌ  Ｐｅｒｉｏｓｔｉｎ）としてＴＨ２炎症に対するマーカーのようには堅牢でないことを示している（データ非表示）。
【０４０３】
あるいは、総ペリオスチンの定量的検出は自動化ロシュｃｏｂａｓ  ｅ６０１Ｅｌｅｃｓｙｓ（登録商標）アナライザ（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ  ＧｍｂＨ）（ＥＬＥＣＳＹＳ（登録商標）ペリオスチンアッセイ）で評価される。例えば、全体が参照によって本明細書に援用される米国特許出願公開第２０１２／０１５６１９４号の実施例７を参照。試験は、分析物のペリオスチンが、ペリオスチン上の２つの異なるエピトープに結合する２つのモノクローナル抗体の間に挟まれているサンドイッチ形式で行われる。一つの抗体がビオチン化され、ストレプトアビジンコート磁気ビーズへの免疫複合体の取り込みを可能にしている。第二抗体は、シグナル伝達部分としての錯化ルテニウムカチオンを有し、結合した免疫複合体の電圧依存電気化学発光検出を可能にする。使用される例示的試薬は以下に示される：
−ビーズ（Ｍ）：ストレプトアビジンでコーティングされた磁性微粒子０．７２ｍｇ／ｍＬ；防腐剤。
−試薬１（Ｒ１）：抗ペリオスチン抗体−ビオチン：
この精製されたマウスモノクローナル抗体は、米国特許出願公開第２０１２／０１５６１９４号の実施例４に係るコーティング抗体２５Ｄ４に対応し、ビオチン化形態＞１．０ｍｇ／Ｌ；ＴＲＩＳ緩衝液＞１００ｍｍｏｌ／Ｌ、ｐＨ７．０；保存剤で使用される。
−試薬２（Ｒ２）：抗ペリオスチン−抗体〜Ｒｕ（ｂｐｙ）：
この精製されたマウスモノクローナル抗ペリオスチン抗体は、米国特許出願公開第２０１２／０１５６１９４号の実施例４に係る検出抗体２３Ｂ９に対応し、（（トリス（２，２’−ビピリジル）ルテニウム（ＩＩ）錯体（Ｒｕ（ｂｐｙ））複合体で標識された）標識形態＞１．０ｍｇ／Ｌ；ＴＲＩＳ緩衝液＞１００ｍｍｏｌ／Ｌ、ｐＨ７．０；保存剤で使用される。
【０４０４】
イムノアッセイは、２つのインキュベーションを用いて行うことができる。約９分間の第１のインキュベーションにおいて、２０μＬ試料中のペリオスチンとビオチン化モノクローナル抗ペリオスチン抗体（Ｒ１）は複合体を形成する。更に９分間の第２のインキュベーションにおいて、ルテニル化モノクローナル抗ペリオスチン抗体（Ｒ２）とストレプトアビジンでコーティングされた微粒子（Ｍ）が、３員環サンドイッチ複合体が形成され、ビオチンとストレプトアビジンとの相互作用を介して固相（微粒子）に結合されるように、第１のインキュベーションのバイアルに加えられる。
【０４０５】
反応混合物が測定セル内に吸引され、ここで微小粒子が白金電極の表面に磁気的に捕捉される。非結合物質は洗い流され、細胞はトリプロピルアミンを含む試薬であるＰｒｏＣｅｌｌで流される。電極への電圧の印加は、次いで、光電子増倍管によって測定される化学発光放出を誘導する。
【０４０６】
結果は、試薬バーコードを介して提供されるマスターカーブと２点校正とによって生成される機器固有の検量線を介して決定される。キャリブレーター１は分析物無しであり、キャリブレーター２はバッファリングマトリックスに５０ｎｇ／ｍＬの組換えヒトペリオスチンが含まれる。キャリブレーションを確認するために、約３０〜８０ｎｇ／ｍＬのペリオスチンを持つ２つのコントロールが採用されている。
【０４０７】
本明細書で使用される用語「総ペリオスチン（Ｔｏｔａｌ  Ｐｅｒｉｏｓｔｉｎ）」は、ペリオスチンの少なくともアイソフォーム１、２、３、及び４を指す。ヒトペリオスチンアイソフォーム１、２、３、及び４は以下のアミノ酸配列：ＮＰ＿００６４６６（配列番号１０９）；ＮＰ＿００１１２９４０６（配列番号１１０）、ＮＰ＿００１１２９４０７（配列番号１１１）、及びＮＰ＿００１１２９４０８（配列番号１１２）（それぞれＮＣＢＩデータベースによる）を含むとして当業者に知られており、アイソフォーム５は一部が配列決定されている。アイソフォーム５は、配列番号１１３のアミノ酸配列を含む。一実施態様において、ペリオスチンのアイソフォームはヒトペリオスチンである。更なる実施態様において、総ペリオスチンなる用語は、アイソフォーム１〜４に加えてヒトペリオスチンのアイソフォーム５を含む。他の実施態様において、総ペリオスチンは、全血清ペリオスチン又は全血漿ペリオスチンである（すなわち、全血液から得られた血清試料又は全血液から得られた血漿試料のそれぞれからの総ペリオスチンで、全血液は患者から得られる）。幾つかの実施態様において、総ペリオスチンは、Ｅ４アッセイ又はＥＬＥＣＳＹＳ（登録商標）アッセイにより決定される。
【０４０８】
幾つかの実施態様において、医薬の製造又は調製における抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の使用が提供される。一実施態様において、医薬は、喘息、呼吸器疾患、好酸球性疾患、ＩＬ−１３媒介性疾患、又はＩＬ−１７媒介性疾患の治療用である。更なる実施態様において、医薬は、喘息、呼吸器疾患、好酸球性疾患、好中球性疾患、ＩＬ−１３媒介性疾患、又はＩＬ−１７媒介性疾患を有する個体に、医薬の有効量を投与することを含む、喘息、ＩＰＦ、呼吸器疾患、好酸球性疾患、ＩＬ−１３媒介性疾患、又はＩＬ−１７媒介性疾患を治療する方法において使用のためである。一つのそのような実施態様において、本方法は、例えば後述するように、少なくとも一の付加的治療剤の有効量を個体に投与することを更に含む。
【０４０９】
幾つかの実施態様において、上記治療法の何れかにおいて使用のための、本明細書に記載される抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の何れかを含む薬学的製剤が提供される。幾つかの実施態様において、薬学的製剤は、本明細書で提供される抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の何れかと薬学的に許容可能な担体とを含む。幾つかの実施態様において、薬学的製剤は、本明細書で提供される抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の何れかと、少なくとも一の付加的治療剤を、例えば後述するように含む。
【０４１０】
本明細書において提供される抗体は、治療において、単独で、又は他の薬剤と組み合わせて使用することができる。例えば、本明細書において提供される抗体は少なくとも一の付加的な治療剤と同時投与され得る。ある実施態様において、付加的治療剤は、ＴＨ２阻害剤及び／又はＴＨ１７阻害剤である。ある実施態様において、付加的治療剤は、コルチコステロイド、ロイコトリエン受容体アンタゴニスト、ＬＡＢＡ、コルチコステロイド／ＬＡＢＡの組み合わせ組成物、テオフィリン、クロモグリク酸ナトリウム、ネドクロミルナトリウム、オマリズマブ、ＬＡＭＡ、ＭＡＢＡ（例えば、二官能性ムスカリンアンタゴニスト−ベータ２アゴニスト）、５−リポキシゲナーゼ活性化タンパク質（ＦＬＡＰ）阻害剤、又は酵素ＰＤＥ−４阻害剤である。
【０４１１】
上記のこうした併用療法は、併用投与（二以上の治療剤が、同一又は別々の製剤に含まれている）、及び、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の投与が、付加的治療剤又は薬剤の投与の前、同時、及び／又はその後に起きうる分離投与を包含する。幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の投与、及び付加的治療剤の投与は、互いに、約１カ月以内、又は約１、２若しくは３週間以内、又は約１、２、３、４、５、若しくは６日以内に生じる。
【０４１２】
幾つかの実施態様において、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体は、神経膠芽腫又は非ホジキンリンパ腫などのがんを治療することにおいて使用される。幾つかの実施態様において、本明細書において提供される抗体はまた放射線治療と併用して用いることができる。
【０４１３】
抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体（及び任意の付加的な治療剤）は、任意の適切な手段によって投与することができ、経口、肺内、及び鼻腔内、及び局所治療が所望される場合、病巣内投与が含まれる。非経口注入には、筋肉内、静脈内、動脈内、腹腔内、又は皮下投与が含まれる。投薬は、その投与が短期間か又は長期であるかどうかに部分的に依存し、任意の適切な経路、例えば、静脈内又は皮下注射などの注射により行うことができる。限定されないが、様々な時間点にわたる、単一又は複数回投与、ボーラス投与、パルス注入を含む様々な投与スケジュールが本明細書で考えられている。
【０４１４】
抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体は、良好な医療行為に合致した方法で処方され、投与され、投薬される。これに関連した考慮因子としては、治療すべき具体的な疾患、治療すべき具体的な哺乳動物、個々の患者の臨床状態、疾患の原因、薬剤の送達部位、投与方法、投与スケジュール及び医師にとって既知の他の因子が挙げられる。抗体は、必要ではないが任意で、問題となる疾患の予防又は治療のために、現在使用中の一又は複数の薬剤ともに処方される。そのような他の薬剤の有効量は製剤中に存在する抗体の量、疾患又は治療の種類及び上記した他の要因に依存する。これらは一般的には本明細書に記載されるのと同じ用量及び投与経路において、又は、本明細書に記載された用量の１％から９９％で、又は経験的に／臨床的に妥当であると決定された任意の用量及び任意の経路により使用される。
【０４１５】
疾患の予防又は治療のためには、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の適切な用量（単独で使用されるか、又は、一以上の更なる治療的薬剤との組み合わされる場合）は、治療すべき疾患の種類、抗体の種類、疾患の重症度及び経過、抗体を予防又は治療目的のいずれにおいて投与するか、以前の治療、患者の臨床的履歴及び抗体に対する応答性、及び担当医の判断に依存する。抗体は一時的又は一連の治療にわたって患者に適切に投与される。当業者は、疾患の種類及び重症度に応じて、抗体の適切な用量を決定することができる。抗ＩＬ−１３抗体についての非限定的で例示的な用量は、例えば、ＰＣＴ公開番号国際公開第２０１２／０８３１３２号に記載される。抗体の投与のための一般的な指針は、例えば、Bai et al., Clinical Pharmacokinetics, 51: 119-135 (2012) 及びDeng et al., Expert Opin. Drug Metab. Toxicol. 8(2):141-160 (2012)に見いだすことができる。抗体療法の進行は、一般的な技術及びアッセイにより容易にモニターされ得る。
【０４１６】
上記の製剤又は治療方法の何れかが、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の代わりか又はそれに加えて、イムノコンジュゲートを用いて行うことができることが理解される。
【０４１７】
製造品
幾つかの実施態様において、上述した疾患の治療、予防、及び／又は診断に有用な物質を含む製造品が提供される。製造品は、容器と容器上ないしは容器に付随するラベル又は添付文書を含んでなる。好適な容器は、例としてボトル、バイアル、シリンジ、ＩＶ輸液バッグ等を含む。容器はガラス又はプラスチックなどの様々な物質から形成されうる。容器は、疾患の治療、予防、及び／又は診断に有効である、それ自体か、又はその他の組成物と併用される化合物を収容し、無菌のアクセスポートを有し得る（例えば、容器は皮下注射針による穴あきストッパーを有する静脈内溶液バッグ又はバイアルであってよい）。組成物中の少なくとも一の活性薬剤は抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体である。ラベル又は添付文書は、組成物が選択した症状の治療のために使用されることを示している。更に、製造品は、（ａ）組成物が抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体を包含する組成物を含む第一の容器；及び（ｂ）組成物が更なる細胞障害性又はその他の治療的薬剤を包含する組成物を含む第ニの容器を含み得る。幾つかの実施態様において、製造品は、組成物が、特定の病状を治療するのに使用可能であることを示した添付文書を更に含んでいてよい。別法として、又は加えて、製造品は、薬学的に許容される緩衝液、例えば注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝化塩水、リンガー溶液及びデキストロース溶液を含む第二（又は第三）の容器を更に含んでもよい。更に、他の緩衝液、希釈剤、フィルター、針、及びシリンジを含む、商業上及び使用者の見地から望ましい他の材料を含んでもよい。
【０４１８】
文脈が明確に指示しない限り、本明細書に開示される全ての実施態様は、互いに組み合わせることができる。
【０４１９】
上記の製造品の何れかは、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の代わりか又はそれに加えて、本発明のイムノコンジュゲートを含み得ることが理解される。
【実施例】
【０４２０】
以下は本発明の方法及び組成物の例である。上記に与えられる一般的な説明を前提として、様々な他の実施態様が実施され得ることが理解される。
【０４２１】
実施例１  ＩＬ−１７ＡＦ及び好中球性炎症は共存し、重度の制御されない喘息においてＩＬ−１３及び好酸球性炎症と相関している。
ＢＯＢＣＡＴ研究は、喘息患者のコホートにおける気道炎症の指標と非侵襲的バイオマーカーとの間の関係を特徴付けるために設計された多施設観察研究である。ＢＯＢＣＡＴコホートは、気道好酸球増加症の指標としての血液ペリオスチンレベルに関して以前に説明されている。Jia et al., 2012, J. Allergy Clin Immunol, 130: 647-654を参照。研究参加者はカナダ、米国、及び欧州における１８のセンターから募集された。各研究サイトでの治験審査委員会は、プロトコールを承認し、全ての被験者は書面によるインフォームドコンセントを提供した。
【０４２２】
患者ごとに２つの気管支内生検をホルマリンで固定し、前述したように、その後の切片化と染色のためにパラフィンの単一のブロックに包埋された。例えば、Hauber et al., 2003, J. Allergy Clin. Immunology 112:58-63; Al-Ramli, 2009, J. Allergy Clin Immunol, 123: 1185-1187; Prefontaine et al., 2009, J. Immunol., 183: 5094-5103; Letuve et al., 2006, J. Allergy Clin Immunol, 117: 590-596; Shikotra et al., 2012, J. Allergy Clin Immunol, 129: 104-111を参照。細胞（好酸球、好中球、又は示されるように、サイトカインについて陽性染色細胞）をカウントし、生検組織のｍｍ２あたりの絶対数として表された。
【０４２３】
全ての分析において、肺の種々の区画における免疫組織化学（ＩＨＣ）によって顆粒球レベル及び陽性染色細胞の分布が、必要に応じて記述統計学を用いて特徴付けられた。陽性染色細胞間の相関はＳｐｅａｒｍａｎの順位相関として与えられる。
【０４２４】
以前の報告は、健常対照及び／又は軽度の喘息患者と比較して重度の喘息患者からの気管支生検組織における標準的なＴｈ１７サイトカインであるＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆのレベルを分析するために免疫組織化学（ＩＨＣ）を使用していた。例えば、Doe et al., 2010, Chest, 138: 1140-1147; Al-Ramli, 2009, J. Allergy Clin Immunol, 123: 1185-1187を参照。これらのサイトカインのためのＩＨＣはＢＯＢＣＡＴ研究からの生検で行われ、適合生検組織中においてサイトカインと顆粒球の間の分布及び関係について調べられた。図１を参照。各測定はコホート内の値の範囲にわたって検出可能であった。有意な正の相関が組織の好中球と好酸球数との間で観察された（図１Ａ、ｒＳ＝０．６８、Ｐ＝４．２ｘ１０−９；Arron et al, 2014, Eur Respir J, 43:627を参照）。この適用では、我々は、気管支生検において好酸球数とＩＬ−１７Ａの染色細胞の数は相関することを初めて示すと信じている（図１Ｂ、ｒＳ＝０．３９、Ｐ＝３．２ｘ１０−３）。我々はまた、気管支内生検においてＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆに対して染色する細胞は相関することを示す（図１Ｃ、ｒＳ＝０．５６、Ｐ＝９．０ｘ１０−６）。これまでに、気道の好酸球は血清ペリオスチン、血中好酸球、及び呼気一酸化窒素（ＦｅＮＯ）と正に相関すると示されている。国際公開第２００９／１２４０９０号及びJia et al, 2012, J. Allergy Clin Immunol,130:647-54を参照。要約すると、ここで提示された研究は、ヒト肺組織生検では、組織の好酸球はＩＬ１７Ａ＋細胞と正に相関し、かつＩＬ１７Ａ＋細胞はＩＬ１７Ｆ＋細胞と正に相関することを明確に示している。
【０４２５】
実施例２  肺のＩＬ−１７ＡＦは、吸入コルチコステロイド（ＩＣＳ）について中等度から重度の喘息における組織の好中球と関連している
英国の研究のための喘息患者が募集され、臨床評価が前述のようにレスター大学（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｌｅｉｃｅｓｔｅｒ）及びクイーンズ大学ベルファスト（Ｑｕｅｅｎｓ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｂｅｌｆａｓｔ）で行われた。Shikotra et al., 2012, J. Allergy Clin Immunol, 129: 104-111を参照。
【０４２６】
患者ごとに２つの気管支内生検をホルマリンで固定し、前述したように、その後の切片化と染色のためにパラフィンの単一のブロックに包埋された。例えば、Hauber et al., 2003, J. Allergy Clin. Immunology 112:58-63; Al-Ramli, 2009, J. Allergy Clin Immunol, 123: 1185-1187; Prefontaine et al., 2009, J. Immunol., 183: 5094-5103; Letuve et al., 2006, J. Allergy Clin Immunol, 117: 590-596; Shikotra et al., 2012, J. Allergy Clin Immunol, 129: 104-111を参照。細胞（好酸球、好中球、又は示されるように、サイトカインについて陽性染色細胞）をカウントし、生検組織のｍｍ２あたりの絶対数として表された。
【０４２７】
初代正常ヒト気管支上皮（ＮＨＢＥ）細胞は、Ｌｏｎｚａ（Ｗａｌｋｅｒｓｖｉｌｌｅ、ＭＤ）から購入した。Ｃｏｒｎｉｎｇ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓから６．５ｍｍ直径の０．４μＭの孔密度のトランスウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ、ＮＹ）が、Ａｄｖａｎｃｅｄ  ＢｉｏＭａｔｒｉｘ（Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）からの１００μｇ／ｍｌの  ＰｕｒｅＣｏｌを用いてコラーゲンコーティングされた。ＮＨＢＥは、トランスウェルに播種され、９６時間又はコンフルエントになるまで無血清気管支上皮細胞増殖培地（ＢＥＧＭ、Ｌｏｎｚａ）中で維持された。頂端培地は除去され、細胞はＰｎｅｕｍａｃｕｌｔ完全気液界面（ＡＬＩ）培地（Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ）により側底に送り込まれ、２１日間分化された。
【０４２８】
ＴａｑＭａｎ（登録商標）遺伝子発現アッセイ（ＴａｑＭａｎ  Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ａｓｓａｙｓ）（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ、Ｃａｌｉｆ）を購入し、ＩＬ−１７Ａ（ｉｄ：Ｈｓ９９９９９０８２＿ｍ１）及びＩＬ−１７Ｆ（ｉｄ：Ｈｓ００３６９４００＿ｍ１）に対して製造元の指示に従って実施した。Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ  Ｕｓｅｒ  Ｂｕｌｌｅｔｉｎ  Ｎｏ．２（Ｐ／Ｎ ４３０３８５９）に記載のように、相対的な発現レベルは、２（−ΔΔＣＴ）法によって決定された。定量限界（ＬＯＱ）以下の発現レベルは、その標的遺伝子のＣＴ（サイクル閾値）値が、１）４０又は２）モックＲＴ（逆転写）陰性対照の平均ＣＴ値の小さい方の値より大きいか又は等しい人のものであった。
【０４２９】
ＲＮＡは、Ａｇｉｌｅｎｔ（Ｓａｎｔａ  Ｃｌａｒａ、ＣＡ）の２色全ヒトゲノム４ｘ４４ｋ（Ｗｈｏｌｅ  Ｈｕｍａｎ  Ｇｅｎｏｍｅ  ４×４４ｋ）遺伝子発現マイクロアレイで増幅され、Shikotra et al., 2012, J. Allergy Clin Immunol, 129: 104-111に説明されるように製造業者の指示に従って実施された。
【０４３０】
全ての分析において、肺の種々の区画における免疫組織化学（ＩＨＣ）によって顆粒球レベル及び陽性染色細胞の分布が、必要に応じて記述統計学を用いて特徴付けられた。
【０４３１】
気道に関連するインビトロ系におけるＩＬ−１７Ａの作用を調べるために、ＮＨＢＥ細胞は、気管支上皮細胞の粘膜繊毛多列上皮への分化を促進する気液界面（ＡＬＩ）で増殖させた。ＡＬＩで培養されたＮＨＢＥ細胞は、ＲＮＡの単離の前に２４時間、ＩＬ−１７Ａ（１０ｎｇ／ｍｌ）及びＴＮＦα（１０ｎｇ／ｍＬ）により刺激された。遺伝子発現マイクロアレイ解析が行われ、差次的に発現される遺伝子のうち、ＩＬ−１７Ａ＋ＴＮＦα刺激が特定の好中球関連遺伝子を上方制御することが発見された。表２を参照。
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ＣＳＦ３は、顆粒球コロニー刺激因子、造血前駆細胞から好中球分化に関与するサイトカインをコードする。ＣＸＣＬ１、２、３、及び８は、分化した好中球に発現する受容体であるＣＸＣＲ１及びＣＸＣＲ２に結合し、好中球遊走を促進するケモカインをコードする。
【０４３２】
英国のコホートからの気管支生検組織におけるＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７ＦのｍＲＮＡの発現をｑＰＣＲによって評価した。試験した試料の大部分の発現レベルは検出されなかった：７２％（６１のうち４４）及び７５％（６１のうち４６）が＜定量下限（ＬＬＯＱ）であった。我々は検出不能（＜ＬＬＯＱ）対検出可能（＞ＬＬＯＱ）なＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆの発現を有する試料中でＩＨＣによって得られた利用可能な適合組織好中球数を比較し（６１例のうち５０）、わずかに有意な上昇を観察した。図２Ａ（ＩＬ−１７Ａ；Ｐ＝０．０８）及び図２Ｂ（ＩＬ−１７Ｆ；Ｐ＝０．０８７）を参照。英国コホートでは、相関がＩＨＣによる組織の好中球数とｑＰＣＲによるＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆの発現との間に存在し、すなわち検出可能な好中球数を示すＩＨＣ試料はまたｑＰＣＲにより高いＩＬ−１７Ａ又はＩＬ−１７Ｆの発現を示している。
【０４３３】
特定のＩＬ−１７誘導性、好中球関連遺伝子（ＣＸＣＬ１／２／３、ＩＬ８、ＣＳＦ３）の遺伝子発現は、気管支生検のマイクロアレイデータの両方向階層的クラスタリングによって調べられた。図３を参照。遺伝子は、個々の患者の試料において相関していることが判明した；つまり、全ての遺伝子の比較的上昇したレベルを発現する被験体を同定することができた。遺伝子の最も高い協調的発現を有する被験体は、全て中等度から重度の喘息をもっており、かつ吸入コルチコステロイド（ＩＣＳ）を服用していた。更に、一組の遺伝子が英国コホートにおいて組織の好中球と相関していた（Ｓｐｅａｒｍａｎ  ρ＝０．３９０２；ｐ＝０．０１１７）。結果は、上昇した好中球数、上昇したＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆの発現、及び上昇した好中球関連遺伝子の発現がＩＣＳを服用する患者のサブセットで観察されたことを示している。
【０４３４】
実施例３  ＩＬ−１７ＡＦバイオマーカーは、高血清ペリオスチンと関連している
ＢＯＢＣＡＴ研究と英国の研究はそれぞれ実施例１及び２に記載されている。
【０４３５】
ＴａｑＭａｎ（登録商標）遺伝子発現アッセイ（ＴａｑＭａｎ  Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ａｓｓａｙｓ）（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ、Ｃａｌｉｆ）を購入し、ＩＬ−１７Ａ（ｉｄ：Ｈｓ９９９９９０８２＿ｍ１）及びＩＬ−１７Ｆ（ｉｄ：Ｈｓ００３６９４００＿ｍ１）に対して製造元の指示に従って実施した。Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ  Ｕｓｅｒ  Ｂｕｌｌｅｔｉｎ  Ｎｏ．２（Ｐ／Ｎ ４３０３８５９）に記載のように、相対的な発現レベルは、２(-ΔΔCT)法によって決定された。定量限界（ＬＯＱ）以下の発現レベルは、その標的遺伝子のＣＴ値が、１）４０又は２）モックＲＴ陰性対照の平均ＣＴ値の小さい方の値より大きいか又は等しい人のものであった。
【０４３６】
ＲＮＡは、Ａｇｉｌｅｎｔ（Ｓａｎｔａ  Ｃｌａｒａ、ＣＡ）の２色全ヒトゲノム４ｘ４４ｋ（Ｗｈｏｌｅ  Ｈｕｍａｎ  Ｇｅｎｏｍｅ ４ｘ４４ｋ）遺伝子発現マイクロアレイで増幅され、Shikotra et al., 2012, J. Allergy Clin Immunol, 129: 104-111に説明されるように製造業者の指示に従って実施された。
【０４３７】
血清ペリオスチンの測定は、前述のように実施された。例えば、Jia et al., 2012, J. Allergy Clin Immunol, 130: 647-654を参照。
【０４３８】
定量的サンドイッチ酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）キットは、ヒト血漿試料中のＣＸＣＬ１／ＧＲＯａ濃度を測定することを特徴とした（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｑｕａｎｔｉｋｉｎｅ  ＥＬＩＳＡ  ｋｉｔ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｈｕｍａｎ  ＣＸＣＬ１／ＧＲＯ  ａｌｐｈａ  Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ、カタログ＃ＤＧＲ００）。簡潔には、ヒトＣＸＣＬ１に特異的なモノクローナル抗体を９６ウェルマイクロプレート上にコーティングした。標準物質、品質コントロール、及び試料を調製し、アッセイ希釈液を含むウェルに加えた。室温でのインキュベーション後、プレートは過剰な未結合の試薬を除去するために洗浄され、検出試薬の適切な希釈物、西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）に結合した抗ヒトＣＸＣＬ１ポリクローナル抗体が添加された。室温でインキュベーションし、プレートを洗浄した後、３，３’，５，５’テトラメチルベンジジン（ＴＭＢ）を含む基質溶液が発色現像のために添加された。酵素反応は、硫酸の添加により停止させ、現像された色の強度は、６５０ｎｍの参照波長を用いて４５０ｎｍで測定した。ヒト血漿中において、このアッセイの感度は３０ｐｇ／ｍｌであると決定された。
【０４３９】
全ての分析において、肺の種々の区画における免疫組織化学（ＩＨＣ）によって顆粒球レベル及び陽性染色細胞の分布が、必要に応じて記述統計学を用いて特徴付けられた。
【０４４０】
ＩＬ−１７誘導性の転写物によりコードされるタンパク質のレベルが、末梢血中で上昇したレベルで検出可能であったかどうかを決定するために、我々は、中等度から重度の喘息患者（Ｎ＝６５）及び健康な対照被験体（Ｎ＝２２）のＢＯＢＣＡＴコホートにおける血漿ＣＸＣＬ１レベルを評価した。健常対照では、血漿ＣＸＣＬ１は１０／２２の被験体（４５％）で定量下限（ＬＯＱ）未満であったが、一方喘息患者では、血漿ＣＸＣＬ１は１６／６５の被験体（２５％）でＬＯＱ未満であった。検出可能な血漿ＣＸＣＬ１レベルを有する被験体のうち、喘息患者におけるレベルは健常対照よりも有意に高かった。図４Ａを参照。検出可能な血漿ＣＸＣＬ１レベルを有する喘息被験体のうち、高度に上昇したＣＸＣＬ１レベル（＞１６０ｐｇ／ｍｌ）を有するものにおいて、上昇した血清ペリオスチンレベル（＞５０ｎｇ／ｍｌ）を有する傾向があった。図４Ｂを参照。結果は、断定的に、血漿中の上昇したＣＸＣＬ１レベルを有する重度の喘息患者は、上昇した血清ペリオスチンレベルを有する傾向にあったことを示している（フィッシャーの正確確率検定によりｐ＝０．０２）。
【０４４１】
英国のコホート喘息患者における血清ペリオスチンの測定は、適合気管支生検におけるＩＬ−１７Ａの発現レベルと比較された。ＩＬ−１７ＡのｍＲＮＡレベルがＬＬＯＱ未満であったものに比較して、ＩＬ−１７ＡのｍＲＮＡの検出可能なレベルを有する被験体は、血清ペリオスチンの上昇したレベルを有していた（ｐ＝０．０３）。図５を参照。
【０４４２】
実施例４  マウスチリダニ喘息モデルにおける抗ＩＬ−１３及び抗ＩＬ−１７抗体の独立した相加的活性
マウスチリダニ喘息モデルは８−９週齢のＣ５７ＢＬ６マウス（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、Ｓａｃｒａｍｅｎｔｏ、ＣＡ）において、チリダニ抽出物（Ｄｆ抽出物、ロット＃１１４２１８、Ｇｒｅｅｒ  Ｌａｂｓ  Ｉｎｃ．）を１００μｇ／５０μＬのＰＢＳで週３回鼻腔内曝露することにより誘導された。抗体治療のために、ＩｇＧ１対照抗体（６００μｇの対照抗体／マウス／注射）、抗ＩＬ−１３  ＩｇＧ１抗体（ジェネンテック抗体２６２Ａ５−１、２００μｇの抗体／マウス／注射）、及び／又は抗ＩＬ−１７ＦＦ  ＩｇＧ１抗体（ジェネンテック抗体２８Ｅ１２）と組み合わせた抗ＩＬ−１７ＡＡ／ＡＦ  ＩｇＧ１抗体（ジェネンテック抗体１６Ｈ４．４Ｆ３）が、２週間の感作期間中に週３回腹腔内注射を介して２００μｇ／抗体／マウス（合計が６００μｇの抗体／マウス／注射）で投与された。最後の曝露の２４時間後、血液及び気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）は、全ての及び分画の白血球計数のために回収された。完全な血球計数はＳｙｓｍｅｘ  ＸＴ−２０００ｉＶ自動血液学分析装置を用いて実施された。ＢＡＬＦの全て及び分画の細胞数はそれぞれフローサイトメトリー（ＦａｃｓＣａｌｉｂｅｒ３）及び顕微鏡下での２００  Ｗｒｉｇｈｔ−Ｇｉｅｍｓａ染色細胞のマニュアルの計数によって決定された。計算された細胞数をグラフ化し、統計分析はＰｒｉｓｍソフトウェア（Ｇｒａｐｈｐａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）を用いて実施された。
【０４４３】
図６に示すように、ＢＡＬ中の計算された好酸球（Ａ）及び好中球（Ｂ）の数は、抗ＩＬ−１３抗体治療は減少した好酸球数をもたらしたが好中球数は変化せず、一方抗ＩＬ−１７抗体治療（抗ＩＬ−１７ＡＡ／ＡＦ及びＩＬ−１７ＦＦ抗体との併用療法）は減少した好中球数をもたらしたが好酸球数は変化しなかったことを示した。抗ＩＬ−１３及び抗ＩＬ−１７抗体との併用療法は、ＩＬ−１３及びＩＬ−１７抗体の個々の作用と一致した好酸球数及び好中球数の両方の減少へとつながった。減少は、対照と比較して統計的に有意である。末梢血では、抗ＩＬ−１３抗体治療は、増加した好酸球数（図６Ｃ）につながったが、一方抗ＩＬ−１７抗体治療は好酸球数に影響を与えることなく、統計的に有意な好中球数の減少（図６Ｄ）につながった。これらの結果は、ＩＬ−１３及びＩＬ−１７ＡＡ／ＡＦ／ＦＦは、好酸球及び好中球に対して独立した活性を有しており、かつＩＬ−１３及びＩＬ−１７ＡＡ／ＡＦ／ＦＦの組み合わせた中和は、ＩＬ−１３又はＩＬ−１７ＡＡ／ＡＦ／ＦＦのどちらか単独の中和よりも生物学のより広い範囲を阻害することを示している。図６において、＊は統計的に有意である。
【０４４４】
実施例５  臨床試験データは好酸球が高い喘息及びレブリキズマブ治療への応答における不均一性を示す
結果は、臨床試験試料から分析されたデータと一致している。これまで我々は、ヒト化抗ＩＬ−１３抗体レブリキズマブは、吸入コルチコステロイド療法によって制御されない中等度から重度の喘息を有する患者において、特に血清ペリオスチンの上昇したレベルを有する患者においてＦＥＶ１を効果的に改善することを示した。Corren et al., 2011, N. Engl. J. Med. 365:1088-98を参照のこと。ここではペリオスチンが高いとは、患者集団内において中間血清ペリオスチンよりも高い血清ペリオスチンのレベルを指す。本明細書に記載されるように、ペリオスチンは治療応答を高めるものの、ペリオスチンが高い患者群内におけるレブリキズマブに対する応答は均質ではないことが更に発見された。
【０４４５】
我々は、レブリキズマブの第２相試験、ＭＩＬＬＹにおいて中等度から重度の喘息患者におけるＩＬ−１３阻害時の肺機能改善（ＦＥＶ１）の強化のためベースラインの血中好中球レベルと組み合わせて、ベースラインでの血清ペリオスチン、血中好酸球及びＦｅＮＯを含めたＴｈ２バイオマーカーを調べた。ＭＩＬＬＹは、吸入グルココルチコイド療法にもかかわらず不十分に制御された喘息を有する成人におけるレブリキズマブ（抗ＩＬ−１３）の無作為化、二重盲検、プラセボ対照試験であった（Corren et al., 2011, N. Engl. J. Med. 365:1088-98）。検討中の被験体は、治療企図（ＩＴＴ）集団の中の者であった。
【０４４６】
図１５は、好酸球数及び好中球数によって分割されるレブリキズマブ治療を受けた患者におけるＦＥＶ１のパーセント変化の結果を示す。血中好酸球数は、中央検査室で自動血液分析装置において完全血球算定（ＣＢＣ）の一部として評価された。血中好中球数は、自動血液分析装置において完全血球算定（ＣＢＣ）の一部として評価された。好酸球が高い群は、同じ患者集団内において中間好酸球数以上でベースライン好酸球数を有する患者であり（この場合２１０／μｌ）、好酸球が低い群は、中間好酸球数未満のベースライン好酸球数を有する患者である。好中球が高い群は、同じ患者集団内において中間好中球数以上でベースライン好中球数を有する患者であり（この場合３８９０／μｌ）、好中球が低い群は、中間好中球数未満のベースライン好中球数を有する患者である。
【０４４７】
図１５に示すように、レブリキズマブは低好酸球数を有する患者よりも高いベースライン好酸球数を有する患者においてより有効であった。図１５ＤをＡ、Ｂと比較されたい。好酸球が高い群内において、低い好中球数を有する患者はレブリキズマブによりＦＥＶ１のパーセント変化の著しい改善を示したが（図１５Ｄ）；しかし、高いベースライン好中球数を有する好酸球が高い患者は、低いベースライン好中球数を有していた好酸球が高い群内の患者と比較してレブリキズマブにより減少した利益を示した。図１５ＣをＤと比較されたい。同様の傾向は、ベースラインペリオスチンレベル及びＦｅＮＯで分割された患者において観察された（データ非表示）。
【０４４８】
図１５の結果は、図１Ｂ及びＣとともに、抗ＩＬ−１３抗体、例えばレブリキズマブは、好中球アンタゴニスト、例えば抗ＩＬ１７抗体と組み合わせて、中等度から重度の喘息を有する患者に利益を更にもたらすことができ、及び／又はレブリキズマブの有効性を更に改善することを示唆する。以下に、二重特異性抗ＩＬ−１３／抗ＩＬ−１７抗体の生成を説明する。
【０４４９】
実施例６  抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７  ＩｇＧ４二重特異性抗体の生成
我々は以前に、大腸菌内で、２つの異なる軽鎖を有するヒトＩｇＧ１の二重特異性抗体を生成する技術を確立した（Yu et al., 2011, Sci Transl Med 3, 84ra44）。この方法は、免疫グロブリン重鎖のヘテロ二量体化を促進するためにｋｎｏｂｓ−ｉｎｔｏ−ｈｏｌｅｓ技術（Ridgway et al., 1996, Protein Eng. 9, 617-621; Atwell et al., 1997, J Mol Biol 270, 26-35）を利用する。軽鎖誤対合の無い２つの異なる軽鎖の使用を可能にするために、我々は別々の大腸菌細胞内においてヘミマーとして各アームを培養した。我々は、ヒトＩｇＧ４のホールとして抗ＩＬ−１７アームの及びヒトＩｇＧ４のノブとして抗ＩＬ−１３アームの発現を可能にするベクター中に抗ＩＬ−１７及び抗ＩＬ−１３親抗体をサブクローニングすることによって、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体を生成するこのアプローチを適用した。ＩｇＧ４のノブ重鎖定常領域の配列は配列番号６９に示され、及びＩｇＧ４のホール重鎖定常領域の配列は配列番号７０に示される。
【０４５０】
我々は、以前に作製され特徴づけられているレブリキズマブを二重特異性抗体の抗ＩＬ−１３  ＣＤＲのもとにした。例えば、ＰＣＴ公開番号ＷＯ２００５／０６２９６７Ａ２を参照。レブリキズマブは、１０ｐＭの検出限界未満であるビアコア由来のＫｄで可溶性ヒトＩＬ−１３に結合する。ＩＬ−１３へのレブリキズマブの結合は、ＩＬ−１３Ｒα１へのサイトカインの結合を阻害しないが、ヘテロ二量体シグナル伝達コンピテントＩＬ−４Ｒα／ＩＬ−１３Ｒα１複合体のその後の形成をブロックする（Ultsch, M. et al., 2013, J. Mol. Biol., dx.doi.org/10.1016/j.jmb.2013.01.024; Corren et al., 2011, N. Engl. J. Med. 365, 1088-1098）。二重特異性抗体において、抗ＩＬ−１３抗体は、レブリキズマブと比較して、ＦＲ領域に２つの逸脱を有していた：重鎖にＱ１Ｅ及び軽鎖にＭ４Ｌ。配列番号１３及び１４をそれぞれ参照。二つの改変が、単一抗ＩＬ−１３半抗体において組み合わされ、得られた半抗体は、野生型抗ＩＬ−１３半抗体に対して改善された収率及びフォールディングを有することが見出された。
【０４５１】
抗体発現のために、大腸菌株６４Ｂ４を用いた。一晩培養物はＬＢ（１００μｇ／ｍｌのカルベニシリン）中で３０℃で増殖せられ、５ｍｌのＣＲＡＰ培地（１００μｇ／ｍｌのカルベニシリン）に１：１００に希釈され（Simmons et al., 2002, J. Immunol. Methods, 263: 133-147）、３０℃で２４時間増殖された。
【０４５２】
ＳＤＳ−ＰＡＧＥによる非還元分析のために、ＣＲＡＰ発現培地の２００μｌがペレット化され、ＮＲ−溶解緩衝液（８８μｌのＰｏｐＣｕｌｔｕｒｅ試薬（Ｎｏｖａｇｅｎ）、１０μｌの１００ｍＭのヨードアセトアミド、２μｌのｌｙｓｏｎａｓｅ試薬（ＥＭＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ））１００μｌに再懸濁させた。試料は、室温で１５分間インキュベートされ、次いで不溶性成分をペレット化するために９３００ｒｃｆで回転された。５０μｌの上清を新しいチューブに移し、５０μｌの２×ＬＤＳ試料緩衝液（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）と混合された。次いで、試料は９５℃で５分間加熱され、５μｌがＮｕＰＡＧＥ  ４−１２％Ｂｉｓ−Ｔｒｉｓ／ＭＥＳゲル（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）にロードされた。ゲルはニトロセルロース膜上にｉＢｌｏｔ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）によって転送され、ＩＲＤｙｅ８００ＣＷがコンジュゲートした抗ヒト（Ｈ＆Ｌ）抗体（Ｒｏｃｋｌａｎｄ）を用いてイムノブロットされ、ＬＩＣＯＲオデッセイイメージャーを用いて画像化された。
【０４５３】
図７Ａは、ノブ及びホール半抗体のＳＤＳ−ＰＡＧＥ分析を示す。ＩＬ−１７半抗体の重鎖及び軽鎖のコドン最適化バージョンも作製され、発現について試験された。元のコード配列及びコドン最適化コード配列の配列は配列番号９９から１０２に示される。抗ＩＬ−１７半抗体のＣＤＲは、配列番号４０、４３、４４、４５、４６及び４７に示される。米国特許出願公開第２０１２／０１４１４９２号又は米国特許第８７１５６６９号を参照。それぞれの培養中で、半抗体種が主なバンドであった。元のコード配列は、抗体産生のスケールアップのために選択された。
【０４５４】
１０Ｌの発酵槽へのスケールアップのために、初期スターター培養液（５００ｍｌ）を固定相に増殖させ、１０Ｌの発酵に植菌するために使用された（Simmons et al., 2002, J. Immunol. Methods, 263: 133-147）。１０Ｌの流加培養物を増殖させ、全ブロスはマイクロフルイディクスを介して回収された。溶解した細胞は、その後、０．８％ＰＥＩの最終濃度（ｖ／ｖ）で４℃で一晩処置された。各混合物は、続いて２０分間、１５０００×ｇで遠心分離され、その後０．２２μｍのフィルターを通して濾過された。各半抗体は、その後２５０ｍＬのＭａｂＳＵＲＥ  ＳＥＬＥＣＴカラムに捕獲された（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）。カラムを５０ｍＭのＴＲＩＳ ｐＨ８．０、１５０ｍＭのＮａＣｌからなる平衡化緩衝液の１０カラム容量（ＣＶ）で平衡化し、続いて２つの異なる洗浄緩衝液（第一は５０ｍＭのＴＲＩＳ ｐＨ８．０、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％のＴｒｉｔｏｎ Ｘ−１００、０．０５％のＴｒｉｔｏｎ Ｘ−１１４、第二は２５ｍＭのクエン酸ナトリウムｐＨ６．０からなる）で洗浄した。各群は、０．１５Ｍの酢酸ナトリウムｐＨ２．７に溶出され、次いで、１：１０  １Ｍのアルギニン／コハク酸ｐＨ８．７を使用してｐＨ５．０に滴定された。
【０４５５】
各半抗体の同一性は、飛行時間型（ＬＣ−ＥＳＩ／ＴＯＦ）分析により液体クロマトグラフィーエレクトロスプレーイオン化により確認された。純度は４〜２０％のトリス−グリシンＳＤＳ−ＰＡＧＥゲルにより分析された。凝集体の量は、ＳＥＣにより決定された。
【０４５６】
最初の評価の最中に、我々は抗ＩＬ−１７半抗体は７よりも高いｐＨで沈殿を形成することを見出した。半抗体は捕捉され、その後、低いｐＨでプロテインＡカラムから溶出され、溶出液は、酸化還元反応において二重特異性抗体の構築を行うためにｐＨ８．５に調整された。抗ＩＬ−１７半抗体溶出液の約２０％は、ｐＨ調整後の沈殿のために失われた。抗ＩＬ−１３半抗体と対合するために利用可能な抗ＩＬ−１７半抗体の減少は２つの半抗体の比率の間の不均衡を生じ、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性の収率を減少させた。構築の後、二重特異性抗体は、陽イオン交換クロマトグラフィーによって精製された。他の二重特異性抗体とは異なり、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の一部は不可逆的に陽イオン交換樹脂ＳＰＨＰに結合した。上記の観察の結果、形成された二重特異性の割合は、約１０％で非常に低かった。
【０４５７】
構築の前及び間に抗ＩＬ−１７半抗体の溶解性及び安定性を改善するために、幾つかの条件、例えば、溶出半抗体に１００ｍＭ、２５０ｍＭ、３５０ｍＭ及び５００ｍＭで異なる濃度のアルギニンを添加すること、４％のポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）を添加すること、及び／又は０．５のｐＨ単位の増分でｐＨ８．５から１０へｐＨを増加させることが試験された。約ｐＨ９で高濃度のアルギニン（０．５Ｍ）がＩＬ−１７半抗体の溶解度を大きく増加させ、かつｐＨ誘導性の沈殿を１％未満まで減少させることが見出された。ｐＨ８．５で５００ｍＭのアルギニンもまた良好な結果につながった。我々はまた、形成された二重特異性の割合は、ｐＨ８．５で０．５Ｍのアルギニンの添加によるジスルフィド酸化のためのｐＨ調整の前に抗ＩＬ−１７半抗体と抗ＩＬ−１３半抗体とを組み合わせることによって増加させることができることを見出した。更に、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性が疎水性相互作用カラムに不可逆的に結合しなかったので、我々は陽イオン交換カラムを疎水性相互作用カラムと置き換えた。改良された方法に従う場合、形成された二重特異性抗体の割合は１０％から６５％に増加した。
【０４５８】
一つの例示的な実験において、抗ＩＬ−１７半抗体は抗ＩＬ−１３と１：１の比で組み合わされ、次いで０．５Ｍアルギニン／コハク酸ｐＨ８．７に滴定され、その後新たに調製した還元剤、還元Ｌ−グルタチオン（ＧＳＨ）が１：２００のモル比を達成するように添加された。混合物を３日間室温で放置した。酸化還元に続いて、構築された二重特異性は、３０ＣＶの勾配を用いて４５ｍＬのＨＩＣ  ＰｒｏＰａｃ １０カラム（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）で精製された。ランニング緩衝液は、２５ｍＭのリン酸カリウム、１Ｍの硫酸アンモニウムｐＨ６．５、溶出緩衝液は、２５ｍＭのリン酸カリウムｐＨ６．５、２５％イソプロパノールであった。３ｍＬの画分を集め、ピーク画分を、純度を分析するために４−２０％トリス−グリシンＳＤＳ  ＰＡＧＥにより分離し、それに応じてプールした。プールは、次いで１０ｍｇ／ｍＬに濃縮され、ＰＢＳ中に透析された。濃縮された二重特異性プールをカラムクロマトグラフィーによりエンドトキシンを除去するために更に精製した。予想外に、凝集体が精製工程の間に再び観察された。凝集体を減少させるために、トリトンＸ−１１４を０．１％（ｖ／ｖ）の最終濃度でタンパク質プールにスパイクした。プールは、完全に混合され、氷上で５分間インキュベートされ、続いて１５分間、３７℃で加熱された。続いて、この混合物は３，０００×ｇで２５℃で１０分間遠心分離され、水層は吸引され、残りのトリトンＸ−１１４を除去するためのゲル濾過に通した。トリトンＸ−１１４の添加は、全ての検出可能な凝集体を除去した。
【０４５９】
純度は４〜２０％のトリス−グリシンＳＤＳ−ＰＡＧＥゲルによって分析され、凝集体レベルはＳＥＣによって決定された。構築された二重特異性の同一性は、そのインタクトな還元型でＬＣ−ＥＳＩ／ＴＯＦにより確認された。ホモ二量体及びヘテロ二量体の理論的質量は互いに数ダルトンの範囲内であるため、二重特異性はまた、Ｆａｂｒｉｃａｔｏｒを使用してＦｃを除去した後に分析された。インタクトな抗体は、ｐＨ６．５でタンパク質１ｕｇ当たり１単位のＦａｂｒｉｃａｔｏｒにより処置され、４時間３７℃でインキュベートされた。Ｆ（ａｂ’）２の同一性は、ＬＣ−ＥＳＩ／ＴＯＦにより確認された。
【０４６０】
図７Ｂは、単一の優勢な種を明らかにするＳＥＣ分析を示す。図７（ｃ）は、（レーンａ）非還元及び（レーンｃ）還元条件下における二重特異性抗体のＳＤＳ  ＰＡＧＥ分析を示す。レーンｂは、分子量マーカーを示す。図７Ｄは、Ｆ（ａｂ’）２断片のＬＣ−ＥＳＩ／ＴＯＦ分析及びＩＬ−１７ホモ二量体、ＩＬ−１３ホモ二量体、及び抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性Ｆ（ａｂ’）２の理論的分子量を示す。
【０４６１】
実施例７  抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体のサイトカイン結合親和性
ヒト及びカニクイザルＩＬ−１３サイトカインに対する抗ＩＬ−１７／抗ＩＬ−１３二重特異性抗体の結合親和性は、ＢＩＡｃｏｒｅＴＭ−Ｔ２００装置を用いて測定された。抗ＩＬ−１３抗体は、ＣＭ５バイオセンサーチップ上にコーティングされたマウス抗ヒトＦｃ抗体（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  カタログ＃ＢＲ−１００８−３９）によって捕捉され、約５００応答単位（ＲＵ）を達成した。ヒトＩＬ−１３、ヒトＩＬ−１３Ｒ１３０Ｑ（アレルギーや喘息に関連する一般的なＩＬ−１３変異体、Vladich et al., 2005, J. Clin Invest., 115:747-754を参照）、及びカニクイザルＩＬ−１３の４倍連続希釈（５０ｎＭから４９ｐＭ）が、３０μｌ／分の流速で２５℃にてＨＢＳ−Ｐ緩衝液（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に注入された。会合速度（ｋｏｎ）及び解離速度（ｋｏｆｆ）は単純な一対一のラングミュア結合モデルを用いて計算した（ＢＩＡｃｏｒｅ  Ｔ２００評価用ソフトウェアのバージョン ２．０）。平衡解離定数（ＫＤ）はｋｏｆｆ／ｋｏｎの比として算出した。結果を表３に示す。
2017507939.tif 000006
【０４６２】
様々なＩＬ−１７サイトカインに対する抗ＩＬ−１７／抗ＩＬ−１３二重特異性抗体の結合親和性は、ＢＩＡｃｏｒｅＴＭ−Ｔ２００装置を用いて表面プラズモン共鳴（ＳＲＰ）により測定された。抗ＩＬ−１７／抗ＩＬ−１３抗体は、ＣＭ５バイオセンサーチップ上にコーティングされたマウス抗ヒトＦｃ抗体（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  カタログ＃ＢＲ−１００８−３９）によって捕捉され、約５００応答単位（ＲＵ）を達成した。反応速度測定のために、ヒトＩＬ−１７ＡＡ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、カタログ＃３１７−ＩＬＢ−０５０）、ヒトＩＬ−１７ＡＦヘテロ二量体、ヒトＩＬ−１７ＦＦ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、カタログ＃１３３５−ＩＬ−０２５／ＣＦ）、カニクイザルＩＬ−１７ＡＡ、カニクイザルＩＬ−１７ＡＦ、及びカニクイザルＩＬ−１７ＦＦの５倍連続希釈（２０ｎＭから３２ｐＭ）が、３０μｌ／分の流量で２５℃にてＨＢＳ−Ｐ緩衝液（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に注入された。会合速度（ｋｏｎ）及び解離速度（ｋｏｆｆ）は単純な一対一のラングミュア結合モデルを用いて計算した（ＢＩＡｃｏｒｅ Ｔ２００評価用ソフトウェアのバージョン ２．０）。平衡解離定数（ＫＤ）はｋｏｆｆ／ｋｏｎの比として算出した。結果を表４に示す。
2017507939.tif 000007
【０４６３】
実施例８  抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体によるサイトカイン誘導性増殖の阻害
ＴＦ−１細胞におけるＩＬ−１３誘導性活性に対する抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の作用を以下のように研究した。ヒトＴＦ−１細胞（赤白血病細胞、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ、ＭＮ）が、５％ＣＯ２を含む３７℃での加湿インキュベーター中で、１０％熱不活化ウシ胎児血清（ＦＢＳ）（カタログ番号ＳＨ３００７１．０３、ＨｙＣｌｏｎｅ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｉｎｃ．、Ｌｏｇａｎ、ＵＴ）；及び１Ｘペニシリン：ストレプトマイシン：グルタミン（カタログ番号１０３７８−０１６、Ｇｉｂｃｏ  Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｃｏｒｐ．、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）及び２ｎｇ／ｍＬのｒｈＧＭ−ＣＳＦ（カタログ番号２１５−ＧＭ、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ、ＭＮ）を含有するＲＰＭＩ  １６４０増殖培地中で培養された。アッセイ培地は、２ｎｇ／ｍｌのｒｈＧＭ−ＣＳＦを含まない増殖培地である。以下の最終濃度、１０ｎｇ／ｍｌのヒトＩＬ−１３又は１０ｎｇ／ｍｌのヒトＩＬ−１３  Ｒ１３０Ｑで指定されるようにサイトカインがアッセイ培地に添加された。
【０４６４】
抗体は、９６ウェル組織培養プレート（カタログ番号３５３０７２、Ｆａｌｃｏｎ  ＢＤ、Ｆｒａｎｋｌｉｎ  Ｌａｋｅｓ、Ｎｊ）において、ヒトサイトカインを含有するアッセイ培地中に３．３倍に連続希釈された。プレートは３７°Ｃで２０分間インキュベートされた。ＴＦ−１細胞はアッセイ培地で２回洗浄され、２．５×１０５細胞／ｍｌの最終容量で再懸濁された。ＴＦ−１細胞の５０μｌを各ウェルに添加する。ウェル当たり総容量は１００μＬであった。プレートを、ウェルあたり１μＣｉの３Ｈチミジンを添加する前に、３７℃で、５％のＣＯ２を含む加湿インキュベーター中で４日間インキュベートした。更なる４時間のインキュベーション後、増殖を、３Ｈチミジンの取り込みによって測定した。細胞関連放射能をシンチレーション計数により定量化した。結果は、重複試料の平均として表される。カレイダグラフを使用してグラフが作り出され、統計解析が行われた（Ｓｙｎｅｒｇｙ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ、Ｒｅａｄｉｎｇ、ＰＡ）。
【０４６５】
実験の結果は図８に示される。抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体は、ＴＦ−１細胞のＩＬ−１３誘導性（図８Ａ）及びＩＬ−１３  Ｒ１３０Ｑ−誘導性（図８Ｂ）増殖をレブリキズマブと同等の効力で用量依存的に阻害した。表５は、各抗体及び各サイトカインのＩＣ９０の結果を示す。
2017507939.tif 000008
【０４６６】
正常なヒト包皮線維芽細胞のＩＬ−１７誘導性増殖に対する抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の作用を以下のように研究した。正常ヒト包皮線維芽細胞（ＮＨＦＦ）の凍結アリコートは、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（カタログ番号Ｃ−００４−５Ｃ、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）から入手し、低血清成長サプリメント（Ｌｏｗ  Ｓｅｒｕｍ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ）（ＬＳＧＳ；カタログ番号Ｓ００３１０、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）を補充した培地１０６（カタログ番号Ｍ１０６５００、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）中で増殖させた。組み換えヒトＩＬ−１７ＡＡ及びＩＬ−１７  ＦＦはＲ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓから入手し（ＩＬ−１７ＡＡ：３１７−ＩＬＢ−０５０及びＩＬ−１７ＦＦ：１３３５−ＩＬ−０２５／ＣＦ）、製造業者の指示に従い４ｍＮのＨＣｌ中で再構成された。組み換えヒトＩＬ−１７ＡＦが生成され、社内で精製された。
【０４６７】
アッセイが行われた前日に、ＮＨＦＦのアリコートは解凍され、９６ウェル平底組織培養プレート中のＬＳＧＳを補充した培地１０６の１００μＬ中に０．１２５ｘ１０６細胞／ウェルで播種され、付着のために３７℃で一晩インキュベートされた。アッセイの朝に、培地は１００μＬ／ウェルで新鮮な培地と交換され、細胞は平衡化のため２＋時間更にインキュベートされた。
【０４６８】
抗体は、最高濃度として５０μｇ／ｍｌから開始して連続的に１：３に希釈された。１０×ワーキングストックが、５００μｇ／ｍｌで作製され、連続希釈が組織培養培地中で行われた。サイトカインもまた組織培養培地中で１０×ワーキングストックとして調製された。ＩＬ−１７ＡＡは、１．６ｎｇ／ｍｌの最終濃度に対して１６ｎｇ／ｍｌに、ＩＬ−１７ＡＦは、１２５ｎｇ／ｍｌの最終濃度に対して１．２５ｕｇ／ｍｌで、及びＩＬ−１７ＦＦは、１．５ｕｇ／ｍｌの最終濃度に対して１５ｕｇ／ｍｌで希釈された。抗体及びサイトカインのワーキングストックストックが各々１０μＬ／１００μＬ／ウェルで添加され、２４時間培養された。上清を回収し、新鮮な９６ウェル丸底プレートに移し、分析まで−８０℃で凍結させた。
【０４６９】
Ｇ−ＣＳＦ  ＥＬＩＳＡは、製造業者の指示に従ってＲ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ、ＭＮ．カタログ番号ＤＹ２１４）から購入した市販のキットを使用して行った。データは、ＩＣ５０及びＩＣ９０値を計算するために、Ｅｘｃｅｌ（Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ、Ｒｅｄｍｏｎｄ、ＷＡ）及びＰｒｉｓｍ（Ｇｒａｐｈｐａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）ソフトウェアを使用して分析された。
【０４７０】
実験の結果は図９に示される。ＩＬ−１７ＡＡ（０．０５ｎＭと同等の１．６ｎｇ／ｍｌ）、ＩＬ−１７ＡＦ（４ｎＭと同等の１２５ｎｇ／ｍｌ）、及びＩＬ−１７ＦＦ（５０ｎＭと同等の１．５μｇ／ｍｌ）はＮＨＦＦ細胞におけるサイトカイン依存性のＧ−ＣＳＦの発現を誘発する（それぞれ、図９Ａ、Ｂ、及びＣの白い四角を参照）。ＩｇＧ４対照抗体は、Ｇ−ＣＳＦの発現には影響を及ぼさなかったが、抗ＩＬ−１７親抗体及び抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の両方とも用量依存的にＩＬ−１７の３つ全てのアイソフォームによって誘導されたＧ−ＣＳＦの発現を阻害した。表６は、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体によるＩＬ−１７誘導性Ｇ−ＣＳＦ発現の阻害のＩＣ９０を示す。
2017507939.tif 000009
ＩＬ−１７ＡＦへテロ二量体及びＩＬ−１７Ｆホモ二量体は、強固な応答を誘発するために、高いサイトカインの濃度を必要とする。その応答の阻害のためのＩＣ９０は、ＩＬ−１７ＡＦ及びＩＬ−１７Ｆのそれぞれにおいて抗体：サイトカインのモル比が〜２及び〜１で生じる。
【０４７１】
実施例９  抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体によるＩＬ−１３及びＩＬ−１７の両方の中和
同じアッセイでＩＬ−１３及びＩＬ−１７の両方を中和する抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の活性はＢＥＡＳ−２Ｂ細胞アッセイで評価された。ＣＣＬ２６ｍＲＮＡレベルは、ＩＬ−１３応答を評価するために使用され、ＣＸＣＬ１分泌は、ＩＬ−１７応答を評価するためにＥＬＩＳＡによって測定された。
【０４７２】
ＢＥＡＳ−２Ｂヒト気管支上皮細胞はＡＴＣＣから入手し（カタログ番号ＡＴＣＣ  ＣＲＬ−９６０９、Ｍａｎａｓｓａｓ、ＶＡ）、十分に補充されたＢＥＧＭ培地（カタログ番号ＣＣ−３１７０、Ｌｏｎｚａ、Ｗａｌｋｅｒｓｖｉｌｌｅ、ＭＤ）中でコラーゲン処理された組織培養フラスコ中で増殖させた組み換えヒトＩＬ−１３は社内で生成され、組み換えヒトＩＬ−１７ＡＡ（カタログ番号ＩＬ−１７ＡＡ：３１７−ＩＬＢ−０５０）及びＴＮＦα（カタログ番号２１０−ＴＡ−００５／ＣＦ）はＲ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ、ＭＮ）から入手した。
【０４７３】
ＢＥＡＳ−２Ｂ細胞の凍結アリコートは解凍され、完全ＢＥＧＭ培地中でコラーゲン処理した９６ウェル平底プレートに１０４細胞／ウェルで播種され、コンフルエンスになるまで２〜３日間増殖させた。次いで、培地をヒドロコルチゾンを欠く新鮮なＢＥＧＭ培地と置換し、ステロイド離脱のために更に２〜３日間培養した。アッセイの日に、培地を１００μＬ／ウェルでヒドロコルチゾンを欠く新鮮なＢＥＧＭと置換し、３７℃で数時間平衡化した。
【０４７４】
ＩＬ−１７線維芽細胞アッセイのために上記のように抗体希釈を行った。サイトカインについては、ＩＬ−１３（１００ｎｇ／ｍｌ）、ＩＬ−１７ＡＡ（１６ｎｇ／ｍｌ）、及びＴＮＦα（１ｎｇ／ｍｌ）の１０×ワーキングストックが調製され、それぞれ１０ｎｇ／ｍｌ、１．６ｎｇ／ｍｌ、及び０．１ｎｇ／ｍｌの最終濃度のためにウェルに添加され、３７℃で培養された。２４時間後、上清を回収し、−８０℃で凍結し、ウェル中の培地の残りを吸引し、付着細胞を含有するウェルをＲＮａｓｅを含まない冷却ＰＢＳで１回洗浄し、吸引し、ｃＤＮＡ合成のためにＣｅｌｌｓ−ｔｏ−ｃＤＮＡ ＩＩキット（カタログ番号ＡＭ１７２３、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）を用いて製造業者のプロトコールに従って処理した。
【０４７５】
ヒトＣＣＬ２６のためのＴａｑｍａｎプライマー及びプローブは、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓから購入し（カタログ番号４３３１１８２；Ａｓｓａｙ  ＩＤ：Ｈｓ００１７１１４６＿ｍ１）、内部対照ＲＰＬ１９のものは社内で設計して生成された（フォワードプライマー５’−ＡＧＣ  ＧＧＡ  ＴＴＣ  ＴＣＡ  ＴＧＧ  ＡＡＣ  Ａ−３’（配列番号９６）；リバースプライマー５’−ＣＴＧ  ＧＴＣ  ＡＧＣ  ＣＡＧ  ＧＡＧ  ＣＴＴ−３’（配列番号９７）；及びプローブ５’−ＴＣＣ  ＡＣＡ  ＡＧＣ  ＴＧＡ  ＡＧＧ  ＣＡＧ  ＡＣＡ  ＡＧＧ−３’（配列番号９８））。Ｔａｑｍａｎ  ｑＰＣＲ反応は、ＴａｑＭａｎ  Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  ＰＣＲ  Ｍａｓｔｅｒ  Ｍｉｘ（カタログ番号４３０４４３７、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）を使用して、２０μＬの容量／反応に設定され、及びＰＣＲ反応は、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ７５００リアルタイムＰＣＲシステムを用いて行われた。相対量（ＲＱ）の値は、ベースラインの応答として処理された無刺激状態に対する実験値の正規化されたデルタサイクル閾値（ｄＣＴ）値の比として算出された。ＲＱ値は、ＩＣ９０値を計算するために、Ｐｒｉｓｍにおいてｌｏｇ［Ａｂ］に対してプロットされた。
【０４７６】
ＢＥＡＳ−２Ｂ培養からの上清を、製造者の指示に従ってＲ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（カタログ番号ＤＹ２７５）から購入したキットを用いたＥＬＩＳＡによってＣＸＣＬ１について分析した。データは、ＩＣ５０及びＩＣ９０値を計算するために、Ｅｘｃｅｌ及びＰｒｉｓｍソフトウェアを使用して分析された。ＣＸＣＬ１の濃度は、ＩＣ９０値を計算するために、Ｐｒｉｓｍにおいてｌｏｇ［Ａｂ］に対してプロットされた。
【０４７７】
実験の結果は図１０に示される。抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体は、用量依存的にＣＣＬ２６の発現（図１０Ａ）及びＣＸＣＬ１の発現（図１０Ｂ）の両方を阻害し、二重特異性抗体は、同じアッセイにおいてＩＬ−１３及びＩＬ−１７の両方を中和することができることを示唆している。ＩＣ９０値は、非線形回帰によって計算され、表７に示される。
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ＣＣＬ２６の発現のためのＩＣ９０の値（０．０４μｇ／ｍｌ）は、上述のＩＬ−１３アッセイにおける二重特異性抗体のＩＣ９０に類似しているが（表５参照）、ＣＸＣＬ１の発現のためのＩＣ９０の値（０．１９μｇ／ｍｌ）は、上述のＩＬ−１７細胞アッセイにおける二重特異性抗体のＩＣ９０に類似している（表６参照）。
【０４７８】
実施例１０  マウスへの投与後の抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の薬物動態
Ｃ５７ＢＬ／６Ｎマウスにおける単回静脈内（ＩＶ）投与後の抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の薬物動態が評価された。２０．４から２２．１９グラムの重量範囲の９匹の雌Ｃ５７ＢＬ／６Ｎマウスに、尾静脈を介して、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の１０ｍｇ／ｋｇの単回ＩＶボーラス投与が投与された。投与後に以下の時点で、血液はｎ＝３マウス／時点から採取され、血清に処理された：５分；２、８及び２４時間；３、７、１０、１４及び２１日。以下に説明するように、各血清試料中の抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の濃度はＥＬＩＳＡによって決定された。ナイーブ−プールアプローチ（ｎａｉｖｅ−ｐｏｏｌｅｄ  ａｐｐｒｏａｃｈ）及びノンコンパートメント解析（ＮＣＡ）（Ｎｏｎ  Ｃｏｍｐａｒｔｍｅｎｔａｌ  Ａｎａｌｙｓｉｓ）を使用するＰｈｏｅｎｉｘ  ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ  ｖ６（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ；Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ、ＣＡ）を使用して、群の抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の血清濃度対時間のプロファイルが薬物動態を評価するために使用された。以下のＰＫパラメーターが決定された：
Ｃｍａｘ：観察された最大血清濃度
・  ＡＵＣｌａｓｔ：０日目から測定可能な抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の血清濃度を有する最終時点までの血清濃度−時間曲線下面積。
・  ＣＬ：クリアランス
【０４７９】
各マウスＰＫ血清試料中の抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の濃度はヒトＩｇＧについてサンドイッチＥＬＩＳＡによって決定された。このアッセイでは、ヒツジ抗ヒトＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）（カタログ  ＡＵ００３ＣＵＳ０１、Ｂｉｎｄｉｎｇ  ｓｉｔｅ；Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ、ＵＫ）及びヤギ抗ヒトＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）ＨＲＰ（カタログ Ａ８０−３１９Ｐ−１２、Ｂｅｔｈｙｌ；Ｍｏｎｔｇｏｍｅｒｙ、ＴＸ）は、それぞれ捕捉及び検出抗体として使用された。投薬動物のための抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の同一ロットを標準として使用した。ヒトＩｇＧ  ＥＬＩＳＡは、０．３９−２５ｎｇ／ｍＬのアッセイ範囲で最大１０％Ｃの５７ＢＬ／６マウス血清マトリックスまで耐容性を示した。最小定量可能濃度は、未濃縮マウス血清中で０．０３９μｇ／ｍＬであると決定された（１／１００の最小試料希釈を説明している）。
【０４８０】
実験の結果は図１１に示される。プールされたアプローチは、ＰＫを評価するために使用されたので、単一のＰＫパラメーター推定値のみ図１１に示される。Ｃ５７ＢＬ／６Ｎマウスにおける単回ＩＶ投与後、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７は、投与後最初の２４時間で血清濃度の急激な低下を示し、その後の２０日間にわたって漸減が続いた。Ｃｍａｘは２１１μｇ／ｍＬであり、血清中濃度−時間曲線下面積（ＡＵＣｌａｓｔ）は１６１０日 ｘ μｇ／ｍＬであった。クリアランス（ＣＬ）は６．２ｍＬ／日／ｋｇであった。
【０４８１】
実施例１１  カニクイザルにおける薬物動態
カニクイザルにおける単回静脈内（ＩＶ）投与後の抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の薬物動態が評価された。２．８−３．７ｋｇの体重範囲を有する１５匹の雄カニクイザルが３群（ｎ＝５／群）に分けられた。各群の全ての動物は、ビヒクル対照（群１）あるいは３又は３０ｍｇ／ｋｇの抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体（それぞれ群２及び３）の単回ＩＶ用量が投与された。投与後に以下の時点で、血液は採取され、血清に処理された：投与前；１５分；１、２、４、８及び２４時間；３、７、１０、１４及び２１日。以下に説明するように、各血清試料中の抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の濃度はＥＬＩＳＡによって決定された。以下に記載されるように、血清はまた、抗治療抗体（ＡＴＡ）の存在について試験された。Ｐｈｏｅｎｉｘ  ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ  ｖ６（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ；Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ、ＣＡ）を使用して、個々の動物に対する抗ＩＬ−１３／Ｉｌ−１７二重特異性抗体の血清濃度対時間のプロファイルが薬物動態を評価するために使用され、個々及び群の平均の薬物動態パラメーターが報告された。以下のＰＫパラメーターが決定された：
・  Ｃｍａｘ：観察された最大血清濃度
・  ＡＵＣｌａｓｔ：０日目から測定可能な抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７の血清濃度を有する最終時点までの血清濃度−時間曲線下面積。
・  ＣＬ：クリアランス
・  Ｖｓｓ：定常状態における分布容積
【０４８２】
マウス薬物動態研究のために上記のように個々のカニクイザルの血清試料中の抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の濃度がサンドイッチヒトＩｇＧ  ＥＬＩＳＡによって分析された。ヒトＩｇＧ  ＥＬＩＳＡは、０．３９−２５ｎｇ／ｍＬのアッセイ範囲で最大５％のカニクイザル血清マトリックスまで耐容性を示した。最小定量可能濃度は、未濃縮カニクイザル血清中で０．０３９μｇ／ｍＬであると決定された（１／１００の最小試料希釈を説明している）。
【０４８３】
カニクイザル血清試料中の抗治療抗体（ＡＴＡ）は、均一な架橋ＥＬＩＳＡを用いて検出され、ここでＡＴＡは、ビオチン化抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体とジゴキシゲニン（ＤＩＧ）標識された抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体とを架橋させることを許された。ビオチン抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体及びＤＩＧ抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体は、ＥＺ−連結スルホ−ＮＨＳ−Ｌｃ−ビオチン（カタログ ２１３２７、Ｐｉｅｒｃｅ；Ｒｏｃｈｅｓｔｅｒ、ＮＹ）及び３−アミノ−３−デオキシジゴキシゲニン  ヘミスクシンイミド、スクシンイミジル  エステル（カタログ Ａ２９５２、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ；Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）をそれぞれを使用して製造業者のプロトコールに従って社内で調製された。試料は最初にビオチン抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体及びＤＩＧ抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体と４℃で一晩インキュベートした。抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体ＡＴＡ免疫複合体は、その後、２μｇ／ｍＬのニュートラアビジン（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ；Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、ＩＬ）でプレコーティングされたＮｕｎｃ  Ｍａｘｉｓｏｒｐ  ３８４ウェルプレート上に捕獲され、西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）標識マウス抗ＤＩＧ抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｉｍｍｕｎｏｒｅｓｅａｒｃｈ；Ｗｅｓｔ  Ｇｒｏｖｅ、ＰＡ）を使用して検出された。基質の３，３’，５，５’テトラメチルベンジジン（ＴＭＢＥ−１０００、Ｍｏｓｓ；Ｐａｓａｄｅｎａ、ＭＤ）とインキュベートした後、各試料ウェルの吸光度（光学密度、ＯＤ）を得た。アッセイカットポイント（後述）以上のＯＤを有する試料は、陽性とみなされた。このアッセイは、血清マトリックスの２％まで許容され、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の５０μｇ／ｍｌの存在下で未濃縮血清中０．６μｇ／ｍｌのＡＴＡを検出することができた。
【０４８４】
アッセイカットポイントを定義するために、個々のＯＤは３２の薬物未投与カニクイザルの血清試料のパネルについて得られた（Ｂｉｏｒｅｃｌａｍａｔｉｏｎ；Ｗｅｓｔｂｕｒｙ、ＮＹ）。また、陰性対照（プールされたナイーブカニクイザル血清、Ｂｉｏｒｅｃｌａｍａｔｉｏｎ）のＯＤは、同じアッセイプレートから得られた。各動物は、個々のＯＤ比を与えるために陰性対照のＯＤで個々のＯＤを割ることによって正規化され、比率の平均値が求められた。カットポイント係数はこの値に１．６５倍の標準偏差を加えて算出した。３つの別々の実験を実行し、アッセイカットポイント係数は、結果を平均することによって１．９であると決定された。試料を分析する場合、各アッセイプレートのカットポイントは、同じプレート上の陰性対照の平均ＯＤにより、このカットポイント係数を乗算することによって決定された。このエッセイのために計算されたカットポイントは、約５％の推定偽陽性率を与えた。
【０４８５】
実験の結果は図１２及び表８に示される。表８は、図１２に示される各動物に投与される用量を示す。
2017507939.tif 000011
【０４８６】
ビヒクル対照で処置された動物（群１）の抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の血清濃度は報告可能未満（ＬＴＲ）であることが見出され、従って薬物動態学的分析はこれらの動物について行われなかった。
【０４８７】
群の平均Ｃｍａｘは、群２及び３についてそれぞれ８９．９±１０７及び１０５０±１０２μｇ／ｍＬであった。群の平均ＡＵＣｌａｓｔは、群２及び３についてそれぞれ４９９±１０７及び５５００±５７１日＊μｇ／ｍＬであった。Ｃｍａｘ及びＡＵＣの両方が用量に比例して増加することが観察された。群の平均クリアランス（ＣＬ）は、群２及び３についてそれぞれ６．１２±１．３３及び５．５０±０．５６７ｍＬ／日／ｋｇであった。群の平均Ｖｓｓは、群２及び３についてそれぞれ４３．１±１２．１及び２３．４±６．５１であった。
【０４８８】
抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体で処置された１０匹のうち、８匹は抗治療抗体に対して陽性の結果がでた（群２で３／５動物及び群３で５／５動物）。
【０４８９】
実施例１２  カニクイザルにおけるＩＬ−１７ＡＡの標的結合
カニクイザルのＰＫ研究は、上記の実施例１１に記載されている。ＥＬＩＳＡは、標的結合を実証するためにカニクイザル血清中の総ＩＬ−１７ＡＡを定量化するために開発された。ＩＬ−１７ＡＡに特異的な抗体が捕捉及び検出のために使用され、社内で作成された組み換えカニクイザルＩＬ−１７ＡＡがアッセイ標準及び対照を調製するために使用された。血清は、ベースライン値のために−７日及び０日で、並びに投与後１、３、８、１１、１５、２２、２９、及び３６日目に採取され、これらの試料の総ＩＬ−１７ＡＡレベルが決定された。
【０４９０】
結果を図１３に示す。血清中の遊離ＩＬ−１７ＡＡは、サイトカインに典型的な非常に短い半減期を有しており、ベースラインでのアッセイ検出限界以下である。血清ＩＬ−１７ＡＡが抗体に結合されている場合、抗体の長い半減期を獲得し、検出可能になるであろう。カニクイザルＰＫ研究では、ＩＬ−１７ＡＡレベルはベースラインでは検出できず、ＩＬ−１７ＡＡレベルの頑強な増加は、抗ＩＬ−１３／ＩＬ−１７二重特異性抗体の投与後に観察され、ＩＬ−１７ＡＡの結合を確認した。作用は両方の用量で見られ、用量依存的であった。応答は、上記の薬物動態の結果と相関していた。
【０４９１】
実施例１３  マウスチリダニ喘息モデルにおける抗ＩＬ−１７、抗ＩＬ−１３、及び抗ＩＬ−１３プラス抗ＩＬ−１７抗体の有効性
マウスチリダニ（ＨＤＭ）喘息モデルは実施例４に上述されるように実質的に実施された。バイオマーカーレベルは、製造業者のプロトコールに従って、以下のアッセイを使用して、血清及び血漿中で測定された：ＴＡＲＣ（Ｒ＆Ｄ、ＭＣＣ１７０）、ＣＸＣＬ１（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ、ＭＣＹＴＯＭＡＧ−７０Ｋ）、及びＧ−ＣＳＦ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ、ＭＣＹＴＯＭＡＧ−７０Ｋ）。
【０４９２】
血清ＴＡＲＣレベルは第２相研究におけるレブリキズマブ治療後に減少することが示された。例えば、Corren et al., 2011, New England J. Medicine 365:1088-98及び米国特許出願公開第２０１２／０１５６１９４号を参照。図１４Ａに示すように、ＨＤＭモデルにおいて、血漿ＴＡＲＣレベルは、抗ＩＬ−１３抗体又は抗ＩＬ−１３抗体プラス抗ＩＬ−１７抗体処置後に下降線をたどったが、抗ＩＬ−１７抗体処置後は下降線をたどらず、ＩＬ−１３経路特異的な調節を確認した。同様に、図１４Ｂ及び図９Ｃに示されるように、ＩＬ−１７経路のバイオマーカー、Ｇ−ＣＳＦ及びＣＸＣＬ１は、抗ＩＬ−１７抗体及び抗ＩＬ−１３抗体プラス抗ＩＬ−１７抗体処置後に血清中で有意に減少した。図１４において、＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．００５、及び＊＊＊ｐ＜０．０００５。
【０４９３】
前述の発明は、理解を明確にする目的のために、例示と実施例によりある程度詳細に記載してきたが、説明及び実施例は、本発明の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。本明細書に引用される全ての特許及び科学文献の開示は、参照によりその全体が明示的に援用される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７Ｂ】
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【図７Ｄ】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５Ａ−Ｂ】
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【図１５Ｃ−Ｄ】
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【図７】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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