(57)【要約】本明細書に示されるのは、胎盤由来の接着細胞エクソソームの組成物、ならびにこれを作製及び使用する方法である。一態様では、本明細書に示されるのは、胎盤細胞によって生成されるか、及び／または胎盤細胞、例えば、胎盤由来の接着細胞に由来するエクソソームを含む組成物である。特定の実施形態では、本明細書に示されるエクソソームは、例えば、１、２、３、４、５、６またはそれ以上の継代の間、インビトロで培養された胎盤由来の接着細胞によって生成される。【選択図】図１
2017536096.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒト胎盤由来の接着細胞由来のエクソソームを含む組成物であって、前記エクソソームは、ＣＤ９＋、ＣＤ１０＋、ＣＤ１３＋、ＣＤ２９＋、ＣＤ４４＋、ＣＤ４９ｂ＋、ＣＤ４９ｃ＋、ＣＤ５５＋、ＣＤ５９＋、ＣＤ６３＋、ＣＤ７３＋、ＣＤ８１＋、ＣＤ８２＋、ＣＤ９０＋、ＣＤ９８＋、ＣＤ１０５＋、ＣＤ１４１＋、ＣＤ１４２＋、ＣＤ１５１＋、ＣＤ１６４＋、ＣＤ２９５＋、またはＣＤ２００＋である、前記組成物。
【請求項２】
前記エクソソームが、ＣＤ９＋、ＣＤ１０＋、ＣＤ１３＋、ＣＤ２９＋、ＣＤ４４＋、ＣＤ４９ｂ＋、ＣＤ４９ｃ＋、ＣＤ５５＋、ＣＤ５９＋、ＣＤ６３＋、ＣＤ７３＋、ＣＤ８１＋、ＣＤ８２＋、ＣＤ９０＋、ＣＤ９８＋、ＣＤ１０５＋、ＣＤ１４１＋、ＣＤ１４２＋、ＣＤ１５１＋、ＣＤ１６４＋、ＣＤ２９５＋、及びＣＤ２００＋である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記エクソソームが、ＣＤ３−、ＣＤ１１ｂ−、ＣＤ１４−、ＣＤ１９−、ＣＤ３３−、ＣＤ１９２−、ＨＬＡ−Ａ−、ＨＬＡ−Ｂ−、ＨＬＡ−Ｃ−、ＨＬＡ−ＤＲ−、ＣＤ１１ｃ−またはＣＤ３４−である、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
前記エクソソームが、ＣＤ３−、ＣＤ１１ｂ−、ＣＤ１４−、ＣＤ１９−、ＣＤ３３−、ＣＤ１９２−、ＨＬＡ−Ａ−、ＨＬＡ−Ｂ−、ＨＬＡ−Ｃ−、ＨＬＡ−ＤＲ−、ＣＤ１１ｃ−及びＣＤ３４−である、請求項１〜３のいずれかに記載の組成物。
【請求項５】
前記エクソソームが、非コードＲＮＡ分子を含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項６】
前記ＲＮＡ分子がマイクロＲＮＡである、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
前記マイクロＲＮＡが、ｍｉＲ−２１８−５ｐ、ｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−５６４、ｍｉＲ−１６−５ｐ、ｌｅｔ−７ａ、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−１２４−５ｐ、ｍｉＲ−２２３−３ｐ、ｍｉＲ−６３０、ｍｉＲ−２９６−５ｐ、ｌｅｔ−７ｂ−３ｐまたはｌｅｔ−７ｄ−３ｐである、請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
前記エクソソームが、間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも少なくとも２倍高いレベルで少なくとも１つのマーカー分子を含む、請求項１〜７のいずれかに記載の組成物。
【請求項９】
前記胎盤由来の接着細胞が、３回超継代されている、請求項１〜８のいずれかに記載の組成物。
【請求項１０】
前記胎盤由来の接着細胞が、２４時間を超えて培養物中で維持された、請求項１〜９のいずれかに記載の組成物。
【請求項１１】
前記胎盤由来の接着細胞のうち少なくとも９０％が、非母親由来である、請求項１〜１０のいずれかに記載の組成物。
【請求項１２】
前記胎盤由来の接着細胞のうち少なくとも９９％が、非母親由来である、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１３】
静脈内投与に適切な形態である、請求項１〜１２のいずれかに記載の組成物。
【請求項１４】
前記被験体における血管形成または血管新生の方法であって、前記被験体に対して、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物を投与することを含む、前記方法。
【請求項１５】
前記被験体の免疫系の調節方法であって、前記被験体に対して、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物を投与することを含む、前記方法。
【請求項１６】
前記被験体における疾患または障害組織の修復方法であって、前記被験体に対して、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物を投与することを含む、前記方法。
【請求項１７】
前記被験体がヒトである、請求項１４〜１６のいずれかに記載の方法。
【請求項１８】
接着細胞由来のエクソソームを含む組成物であって、前記エクソソームがＣＤ１０＋及びＣＤ５５＋である、前記組成物。
【請求項１９】
胎盤由来の接着細胞エクソソームに外因性因子をロードする方法であって、外因性因子がエクソソームにロードされるように、胎盤由来の接着細胞エクソソーム及び外因性因子をインキュベートすること含む、前記方法。
【請求項２０】
前記インキュベーションが室温で行われる、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
サポニン透過化のステップを含む、請求項１９または２０に記載の方法。
【請求項２２】
サポニン透過化のステップを含まない、請求項１９または２０に記載の方法。
【請求項２３】
１回以上の凍結／解凍サイクルを含む、請求項１９または請求項２０に記載の方法。
【請求項２４】
超音波処理のステップを含む、請求項１９または請求項２０に記載の方法。
【請求項２５】
押し出しのステップを含む、請求項１９または請求項２０に記載の方法。
【請求項２６】
個体に対して、外因性因子を含む胎盤由来の接着細胞エクソソームを投与する、方法。
【請求項２７】
前記外因性因子が、ヒト抗体、ヒト化抗体もしくはキメラ抗体、またはその抗原結合フラグメントを含む、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記外因性因子が、１つ以上の遺伝子修飾成分を含む、請求項２６に記載の方法。
【請求項２９】
前記遺伝子修飾成分が、ＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムを含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記ＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムが、ガイドＲＮＡ及びエンドヌクレアーゼを含む、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
１つ以上の外因性因子を含む胎盤由来の接着細胞エクソソームを含む組成物。
【請求項３２】
前記外因性因子が、ヒト抗体、ヒト化抗体もしくはキメラ抗体、またはその抗原結合フラグメントを含む、請求項３１に記載の組成物。
【請求項３３】
前記外因性因子が１つ以上の遺伝子修飾成分を含む、請求項３１に記載の組成物。
【請求項３４】
前記遺伝子修飾成分が、ＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムを含む、請求項３３に記載の組成物。
【請求項３５】
前記ＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムが、ガイドＲＮＡ及びエンドヌクレアーゼを含む、請求項３４に記載の組成物。
【請求項３６】
標的細胞への外因性因子の送達方法であって、前記外因性因子が胎盤由来の接着細胞エクソソームにロードされる、前記方法。
【請求項３７】
前記標的細胞が、エクソソームが得られた細胞型以外の細胞である、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記外因性因子が、ヒト抗体、ヒト化抗体もしくはキメラ抗体、またはその抗原結合フラグメントを含む、請求項３６または３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記外因性因子が、１つ以上の遺伝子修飾成分を含む、請求項３６または３７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４０】
前記遺伝子修飾成分が、ＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムを含む、請求項３８に記載の方法。
【請求項４１】
前記ＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムが、ガイドＲＮＡ及びエンドヌクレアーゼを含む、請求項３９に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、その開示が全体として本明細書において参照によって援用される、２０１４年１０月９日出願の米国特許仮出願第号６２／０６２，０４６号の利益を主張する。
【０００２】
（１．分野）
本明細書の開示は、胎盤由来の接着細胞エクソソームの組成物、ならびにこれを作製及び使用する方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
（２．背景）
エクソソームは、生きた細胞由来の小型の非細胞性の小体である。一般には、エクソソームは、５０〜１５０ナノメートル（ｎｍ）の直径であり、真核生物細胞の多小胞体または原形質膜由来のリン脂質二重層から構成される。エクソソームは、丸い形状であってもよいが、また電子顕微鏡及び他の画像化技術を用いて視覚的に特定可能である「カップ形状（ｃｕｐ−ｓｈａｐｅｄ）」体であってもよい。エクソソームは、細胞の代謝及び／または分子機能を支持するためのインタクトな核も必要な細胞成分も含まないが、エクソソームは、タンパク質、核酸、及び他の分子を含んでもよいし、または検出及び単離を補助し得る表面タンパク質で装飾されてもよい。エクソソームの内容物は、それが由来する細胞型を反映し得、かつ由来する細胞の機能的状態を反映する分子マーカーから構成されてもよい。エクソソームは、研究ツールとして、及び治療様式としての見込みがあるが、新規でかつ有用なエクソソームが当該分野では必要とされている。
【発明の概要】
【０００４】
（３．要旨）
一態様では、本明細書において提供されるのは、胎盤の細胞、例えば、胎盤由来の接着細胞によって生成されるか、及び／またはそれに由来する、エクソソームを含む組成物である。特定の実施形態では、本明細書において提供されるエクソソームは、例えば、１、２、３、４、５、６またはそれ以上の継代の間、インビトロで培養された胎盤由来の接着細胞によって生成される。特定の実施形態では、本明細書において提供されるエクソソームは、１継代の間、インビトロで培養された胎盤由来の接着細胞から収集される。他の特定の実施形態では、本明細書において提供されるエクソソームは、２継代の間インビトロで培養された胎盤由来の接着細胞から収集される。他の特定の実施形態では、本明細書において提供されるエクソソームは、３継代の間インビトロで培養された胎盤由来の接着細胞から収集される。他の特定の実施形態では、本明細書において提供されるエクソソームは、４継代の間、インビトロで培養された胎盤由来の接着細胞から収集される。他の特定の実施形態では、本明細書において提供されるエクソソームは、５継代の間、インビトロで培養された胎盤由来の接着細胞から収集される。特定の実施形態では、本明細書において提供されるエクソソームは、６継代の間、インビトロで培養された胎盤由来の接着細胞から収集される。他の特定の実施形態では、本明細書において提供されるエクソソームは、６継代を越えて、インビトロで培養された胎盤由来の接着細胞から収集される。特定の実施形態では、本明細書において提供されるエクソソームは、６継代でプレートされた胎盤由来の接着細胞から収集され、７継代で培養上清から収集される（例えば、採取される）。
【０００５】
本明細書に記載の胎盤由来の接着細胞エクソソームは、特定のマーカーを含む。このようなマーカーは、例えば、エクソソームの特定において、及びそれらを他のエクソソーム、例えば、胎盤由来の接着細胞に由来しないエクソソームから識別するために有用であり得る。セクション５．１．１．を参照のこと。特定の実施形態では、本明細書に提供される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及び／またはＣＤ２００のうち１、２、３、４またはそれ以上を含み、すなわち、このようなエクソソームは、例えば、蛍光活性化細胞分取（ＦＡＣＳ）によって、例えば、フローサイトメトリーによって決定可能であるように、ＣＤ９＋、ＣＤ１０＋、ＣＤ１３＋、ＣＤ２９＋、ＣＤ４４＋、ＣＤ４９ｂ＋、ＣＤ４９ｃ＋、ＣＤ５５＋、ＣＤ５９＋、ＣＤ６３＋、ＣＤ７３＋、ＣＤ８１＋、ＣＤ８２＋、ＣＤ９０＋、ＣＤ９８＋、ＣＤ１０５＋、ＣＤ１４１＋、ＣＤ１４２＋、ＣＤ１５１＋、ＣＤ１６４＋、ＣＤ２９５＋、及び／またはＣＤ２００＋のうちの１、２、３、４またはそれ以上である。さらに、本明細書において提供される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、特定のマーカーの非存在に基づいて特定してもよい。特定の実施形態では、本明細書において提供される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、以下のマーカーのうちの１、２、３、４、またはそれ以上を欠く：ＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及び／またはＣＤ３４、すなわち、このようなエクソソームは、例えば、ＦＡＣＳによるフローサイトメトリーによって、例えば、決定可能であるように、ＣＤ３−、ＣＤ１１ｂ−、ＣＤ１４−、ＣＤ１９−、ＣＤ３３−、ＣＤ１９２−、ＨＬＡ−Ａ−、ＨＬＡ−Ｂ−、ＨＬＡ−Ｃ−、ＨＬＡ−ＤＲ−、ＣＤ１１ｃ−及び／またはＣＤ３４−のうちの１つ以上である。このようなマーカーの有無の決定は、当該分野で公知の方法、例えば、蛍光活性化細胞分取（ＦＡＣＳ）を用いて達成され得る。
【０００６】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、例えば、ＦＡＣＳによる、例えば、フローサイトメトリーによって決定される、ＣＤ５５＋及びＣＤ１０＋である。
【０００７】
特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１０＋及びＣＤ５５＋（例えば、ＦＡＣＳによって決定される）であり、さらに、ＣＤ８２、ＣＤ１４２、ＣＤ４９ｃ、及びＣＤ９０を、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞エクソソームまたは前脂肪細胞の間葉系幹細胞エクソソーム（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載の絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）よりも高レベルでさらに含む。
【０００８】
別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、フローサイトメトリーにより、例えば、ＦＡＣＳによって評価して、検出可能なレベルのＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ６、ＣＤ７、ＣＤ８、ＣＤ１６、ＣＤ２４、ＣＤ２５、ＣＤ２６、ＣＤ２７、ＣＤ３２、ＣＤ３５、ＣＤ３７、ＣＤ３９、ＣＤ４５、ＣＤ４６、ＣＤ５４、ＣＤ５６、ＣＤ６１、ＣＤ７４、ＣＤ８６、ＣＤ８８、ＣＤ９１、ＣＤ９９、ＣＤ１０３、ＣＤ１０８、ＣＤ１１２、ＣＤ１１７、ＣＤ１１９、ＣＤ１２０ａ、ＣＤ１２３、ＣＤ１２６、ＣＤ１３０、ＣＤ１３４、ＣＤ１３８、ＣＤ１４０ａ、ＣＤ１４０ｂ、ＣＤ１４４、ＣＤ１４６、ＣＤ１４７、ＣＤ１５２、ＣＤ１６３、ＣＤ１８３、ＣＤ１８４、ＣＤ１８６、ＣＤ１９１、ＣＤ１９４、ＣＤ１９６、ＣＤｗ１９８、ＣＤ２０２ｂ、ＣＤ２２０、ＣＤ２２１、ＣＤ２３５ａ、ＣＤ２５２、ＣＤ２６６、ＣＤ２７１、ＣＤ２７３、ＣＤ２７４、ＣＤ３１８、ＣＤ３２６、ＣＤ３３３、ＣＤ３３４、ＨＬＡ−ＤＰ、ＨＬＡ−ＤＱ、ＨＬＡ−Ｇ、ＩｇＤ、ＩｇＭ、ＮＧ２、ＰＤＧＦ、及び／またはＳＳＥＡ−３を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ４を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ５を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ６を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ７を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ８を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ１６を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ２４を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ２５を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ２６を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ２７を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ３２を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ３５を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ３７を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ３９を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ４５を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ４６を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ５４を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ５６を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ６１を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ７４を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ８６を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ８８を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ９１を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ９９を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ１０３を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ１０８を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ１１２を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ１１７を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ１１９を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ１２０ａを含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ１２３を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ１２６を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ１３０を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ１３４を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ１３８を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ１４０ａを含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ１４０ｂを含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ１４４を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ１４６を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ１４７を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ１５２を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ１６３を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ１８３を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ１８４を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ１８６を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ１９１を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ１９４を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ１９６を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤｗ１９８を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ２０２ｂを含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ２２０を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ２２１を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ２３５ａを含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ２５２を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ２６６を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ２７１を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ２７３を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ２７４を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ３１８を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ３２６を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ３３３を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ３３４を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＨＬＡ−ＤＰを含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＨＬＡ−ＤＱを含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＨＬＡ−Ｇを含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＩｇＤを含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＩｇＭを含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＮＧ２を含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＰＤＧＦを含まない。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＳＳＥＡ−３。
【０００９】
特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ８２＋であり、かつ、例えば、ＦＡＣＳによる、例えば、フローサイトメトリーによって決定される、低いレベルのＣＤ１４１（すなわち、ＣＤ１４１（低））を含む。
【００１０】
特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、例えば、ＦＡＣＳによって決定できる、等しい数または等価な量で存在する、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞または前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソームに存在するマーカーのレベルよりも少なくとも２倍高いレベルで１つ以上のマーカーを含む。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ１４２、ＣＤ９０、及び／またはＣＤ８２を、例えば、フローサイトメトリーによって、例えば、ＦＡＣＳによって検出可能であるように、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞または前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソーム中に存在する、それぞれ、各々のマーカーのレベルよりも少なくとも２倍高いレベルで含む。
【００１１】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、非胎盤由来の接着細胞エクソソーム中の前記マーカーの量よりも高い量のＣＤ４９ｃ、ＣＤ８２、ＣＤ９０、及び／またはＣＤ１４２を含む。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞由来のエクソソームに存在する当該マーカー（複数可）の量よりも高い量のＣＤ４９ｃ、ＣＤ８２、ＣＤ９０、及び／またはＣＤ１４２を含む（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソームに存在する当該マーカー（複数可）の量より高い量のＣＤ４９ｃ、ＣＤ７３、ＣＤ８２、ＣＤ９０、及び／またはＣＤ１４２を含む。
【００１２】
特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、例えば、ＦＡＣＳによって決定できる、等しい数または等価な量で存在する、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞または前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソームのマーカーのレベルよりも少なくとも２倍低いレベルで１つ以上のマーカーを含む。
【００１３】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、非胎盤由来の接着細胞エクソソーム中の当該マーカー（複数可）の量よりも低い量のＣＤ１６４を含む。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、前脂肪細胞の間葉系幹細胞または絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）由来のエクソソームに存在する当該マーカー（複数可）の量よりも低い量のＣＤ１６４を含む。
【００１４】
特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、１つ以上の核酸を含む。一実施形態では、当該核酸は、非コードＲＮＡである。別の実施形態では、当該非コードＲＮＡは、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）である。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、以下：ｍｉＲ−２１８−５ｐ、ｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−５６４、ｍｉＲ−１６−５ｐ、ｌｅｔ−７ａ、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−１２４−５ｐ、ｍｉＲ−２２３−３ｐ、ｍｉＲ−６３０、ｍｉＲ−２９６−５ｐ、ｌｅｔ−７ｂ−３ｐ及びｌｅｔ−７ｄ−３ｐからなる群より選択される１つ以上のｍｉＲＮＡを含む。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲ−２１８−５ｐであるｍｉＲＮＡを含む。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲ−１３３ｂであるｍｉＲＮＡを含む。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲ−４２２ａであるｍｉＲＮＡを含む。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲ−５６４、ｍｉＲ−１６−５ｐであるｍｉＲＮＡを含む。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｌｅｔ−７ａであるｍｉＲＮＡを含む。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲ−９２であるｍｉＲＮＡを含む。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲ−１４２−３ｐであるｍｉＲＮＡを含む。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲ−４５１であるｍｉＲＮＡを含む。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲ−１２４−５ｐであるｍｉＲＮＡを含む。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲ−２２３−３ｐであるｍｉＲＮＡを含む。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲ−６３０であるｍｉＲＮＡを含む。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲ−２９６−５ｐであるｍｉＲＮＡを含む。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｌｅｔ−７ｂ−３ｐであるｍｉＲＮＡを含む。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｌｅｔ−７ｄ−３ｐであるｍｉＲＮＡを含む。別の特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、１つ以上のｍｉＲＮＡである、ｍｉＲ−２１８−５ｐ、ｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−４２２ａ、及び／またはｍｉＲ−５６４を含む。別の特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、１つ以上のｍｉＲＮＡであるｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−１６−５ｐ、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−２２３−３ｐ、ｍｉＲ−２９６−５ｐ、及び／またはｍｉＲ−Ｌｅｔ−７ｄ＊／Ｌｅｔ−７ｄ−３ｐを含む。他の特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、１つ以上のｍｉＲＮＡであるｍｉＲ−５９１、ｍｉＲ−２１８−５ｐ、ｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−４２２ａ、及び／またはｍｉＲ−５６４を含む。別の特定の実施形態では、当該１つ以上のｍｉＲＮＡは、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞に存在する、相当するｍｉＲＮＡのレベルよりも少なくとも２倍高いレベルで存在する。他の特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、特異的なｍｉＲＮＡについてＲＴ−ＰＣＲに供され、対照のＲＮＡ（例えば、ＲＮＵ４４）と比較した場合、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞エクソソーム中の同じｍｉＲＮＡよりも１．１、２、５、１０、１００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００、１１００もしくは１２００倍高いレベルで、または絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞エクソソーム中の同じｍｉＲＮＡよりも１．１〜２、２〜５、２〜１０、５〜１０、１０〜１００、１００〜５００、５００〜６００、６００〜７００、７００〜８００、８００〜９００、９００〜１０００、１０００〜１１００、もしくは１１００〜１２００倍高いレベルで含まれる。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも少なくとも１．１倍高いレベルで少なくとも１つのマーカーを含む。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも少なくとも２倍高いレベルで少なくとも１つのマーカーを含む。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも少なくとも５倍高いレベルで少なくとも１つのマーカーを含む。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも少なくとも１０倍高いレベルで少なくとも１つのマーカーを含む。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも少なくとも１００倍高いレベルで少なくとも１つのマーカーを含む。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも少なくとも５００倍高いレベルで少なくとも１つのマーカーを含む。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも少なくとも６００倍高いレベルで少なくとも１つのマーカーを含む。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも少なくとも７００倍高いレベルで少なくとも１つのマーカーを含む。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも少なくとも８００倍高いレベルで少なくとも１つのマーカーを含む。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも少なくとも９００倍高いレベルで少なくとも１つのマーカーを含む。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも少なくとも１０００倍高いレベルで少なくとも１つのマーカーを含む。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも少なくとも１１００倍高いレベルで少なくとも１つのマーカーを含む。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソームは、間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも少なくとも１２００倍高いレベルで少なくとも１つのマーカーを含む。
【００１５】
一実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、エンドグリン（Ｅｎｄｏｇｌｉｎ）、レプチン（Ｌｅｐｔｉｎ）、アンジオポイエチン−２（Ａｎｇｉｏｐｏｉｅｔｉｎ−２）、Ｇ−ＣＳＦ、ホリスタチン（Ｆｏｌｌｉｓｔａｔｉｎ）、ＦＧＦ−２、ＨＧＦ、ＶＥＧＦ−Ａ、ＩＬ−８及び／またはＥＧＦの群から選択される１つ以上の血管形成性タンパク質を含む。
【００１６】
本明細書にさらに提供されるのは、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームを含むエクソソームの集団である。特定の実施形態では、本明細書において提供されるエクソソームの集団は、胎盤由来の接着細胞エクソソームのそれらの含量に対して純粋または実質的に純粋であり、例えば、エクソソームの集団は、約９０％、９５％、９８％、９９％、または１００％の胎盤由来の接着細胞エクソソームを含む。別の特定の実施形態では、本明細書において提供されるエクソソームの集団は、本明細書において提供される胎盤由来の接着細胞エクソソーム、及び１つ以上の他の種類のエクソソーム、例えば、胎盤由来の接着細胞以外の細胞由来のエクソソームを含む。
【００１７】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供されるのは、胎盤由来の接着細胞エクソソームの集団であり、ここで当該集団中のエクソソームのうち約７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％が、例えば、ＦＡＣＳによって決定できる、ＣＤ９＋、ＣＤ１０＋、ＣＤ１３＋、ＣＤ２９＋、ＣＤ４４＋、ＣＤ４９ｂ＋、ＣＤ４９ｃ＋、ＣＤ５５＋、ＣＤ５９＋、ＣＤ６３＋、ＣＤ７３＋、ＣＤ８１＋、ＣＤ８２＋、ＣＤ９０＋、ＣＤ９８＋、ＣＤ１０５＋、ＣＤ１４１＋、ＣＤ１４２＋、ＣＤ１５１＋、ＣＤ１６４＋、ＣＤ２９５＋、及び／またはＣＤ２００＋のうちの１つ以上である。
【００１８】
本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、エクソソームの単離に適切な当該分野で公知の任意の方法によって単離され得る。セクション５．２．を参照のこと。例えば、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、遠心分離（例えば、密度依存超遠心）、ポリマー同時沈降（例えば、Ｓｙｓｔｅｍ  ＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓによるＥｘｏＱｕｉｃｋ−ＴＣエクソソーム沈殿試薬）、濾過（例えば、高速液体クロマトグラフィー、及びゲル濾過クロマトグラフィー）、抗体捕獲、または蛍光活性化細胞分取（ＦＡＣＳ）によって単離され得る。特定の実施形態では、本明細書において提供される胎盤由来の接着細胞エクソソームの単離及び精製は、実質的に純粋な胎盤由来の接着細胞エクソソーム集団、例えば、胎盤由来の接着細胞エクソソーム集団であり、これは、例えば、本明細書において提供される胎盤由来の接着細胞エクソソームと会合する１つ以上のマーカー（例えば、表面マーカー及び／またはｍｉＲＮＡ）の存在によって決定され、少なくとも９９％、９８％、９７％、９６％、９５％、９４％、９３％、９２％、９１％、または９０％純粋である。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソーム集団は、少なくとも９９％純粋である。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソーム集団は、少なくとも９８％純粋である。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソーム集団は、少なくとも９７％純粋である。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソーム集団は、少なくとも９６％純粋である。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソーム集団は、少なくとも９５％純粋である。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソーム集団は、少なくとも９４％純粋である。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソーム集団は、少なくとも９３％純粋である。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソーム集団は、少なくとも９２％純粋である。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソーム集団は、少なくとも９１％純粋である。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞エクソソーム集団は、少なくとも９０％純粋である。
【００１９】
また本明細書に提供されるのは、胎盤由来の接着細胞エクソソームを含む組成物である。このような組成物は一般には、胎盤由来の接着細胞エクソソームが由来する胎盤の細胞を含まない。さらに、このような組成物は一般には、胎盤由来の接着細胞エクソソームが由来した細胞培養物由来の細胞培養上清を含まない。
【００２０】
特定の実施形態では、精製された胎盤由来の接着細胞エクソソームを、その必要な被験体に対する投与に適切な医薬組成物に製剤化する。特定の実施形態では、当該被験体はヒトである。本明細書に提供される胎盤由来の接着細胞エクソソーム含有の医薬組成物は、その必要な被験体に対して局所に、全身に、皮下に、非経口的に、静脈内に、筋肉内に、局部に、経口的に、皮内に、経皮的にまたは鼻腔内に投与されるように製剤化されてもよい。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される胎盤由来の接着細胞エクソソーム含有医薬組成物は局所投与のために製剤化される。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される胎盤由来の接着細胞エクソソーム含有医薬組成物は、全身的な皮下投与のために製剤化される。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される胎盤由来の接着細胞エクソソーム含有医薬組成物は、非経口投与のために製剤化される。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される胎盤由来の接着細胞エクソソーム含有医薬組成物は、筋肉内投与のために製剤化される。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される胎盤由来の接着細胞エクソソーム含有医薬組成物は、局所投与のために製剤化される。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される胎盤由来の接着細胞エクソソーム含有医薬組成物は、経口投与のために製剤化される。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される胎盤由来の接着細胞エクソソーム含有医薬組成物は、皮内投与のために製剤化される。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される胎盤由来の接着細胞エクソソーム含有医薬組成物は、経皮投与のために製剤化される。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される胎盤由来の接着細胞エクソソーム含有医薬組成物は、鼻腔内投与のために製剤化される。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される胎盤由来の接着細胞エクソソーム含有医薬組成物は、静脈内投与のために製剤化される。
【００２１】
ある特定の実施形態では、本明細書において提供されるエクソソームが由来する胎盤由来の接着細胞は、ＣＤ３４−、ＣＤ１０＋、ＣＤ１０５＋及びＣＤ２００＋である。別の実施形態では、本明細書において提供されるエクソソームが由来する胎盤由来の接着細胞は、１つ以上の遺伝子を、骨髄由来の間葉系幹細胞よりも少なくとも２倍高いレベルで発現し、ここで当該１つ以上の遺伝子は、以下の内の１つ以上である：ＡＣＴＧ２、ＡＤＡＲＢ１、ＡＭＩＧＯ２、ＡＲＴＳ−１、Ｂ４ＧＡＬＴ６、ＢＣＨＥ、Ｃ１１ｏｒｆ９、ＣＤ２００、ＣＯＬ４Ａ１、ＣＯＬ４Ａ２、ＣＰＡ４、ＤＭＤ、ＤＳＣ３、ＤＳＧ２、ＥＬＯＶＬ２、Ｆ２ＲＬ１、ＦＩＪ１０７８１、ＧＡＴＡ６、ＧＰＲ１２６、ＧＰＲＣ５Ｂ、ＨＬＡ−Ｇ、ＩＣＡＭ１、ＩＥＲ３、ＩＧＦＢＰ７、ＩＬ１Ａ、ＩＬ６、ＩＬ１８、ＫＲＴ１８、ＫＲＴ８、ＬＩＰＧ、ＬＲＡＰ、ＭＡＴＮ２、ＭＥＳＴ、ＮＦＥ２Ｌ３、ＮＵＡＫ１、ＰＣＤＨ７、ＰＤＬＩＭ３、ＰＪＰ２、ＲＴＮ１、ＳＥＲＰＩＮＢ９、ＳＴ３ＧＡＬ６、ＳＴ６ＧＡＬＮＡＣ５、ＳＬＣ１２Ａ８、ＴＣＦ２１、ＴＧＦＢ２、ＶＴＮ、及び／またはＺＣ３Ｈ１２Ａ。別の実施形態では、本明細書において提供されるエクソソームが由来する胎盤由来の接着細胞は、１つ以上の遺伝子を骨髄由来の間葉系幹細胞よりも少なくとも２倍高いレベルで発現し、ここで当該１つ以上の遺伝子は、ＬＯＶＬ２、ＳＴ３ＧＡＬ６、ＳＴ６ＧＡＬＮＡＣ５、及び／またはＳＬＣ１２Ａ８のうちの１つ以上である。別の実施形態では、本明細書において提供されるエクソソームが由来する胎盤由来の接着細胞は、１つ以上の遺伝子を骨髄由来の間葉系幹細胞よりも少なくとも２倍高いレベルで発現し、ここで当該１つ以上の遺伝子は、ＣＰＡ４、ＴＣＦ２１、ＶＴＮ、Ｂ４ＧＡＬＴ６、ＦＬＪ１０７８１、及び／またはＮＵＡＫ１のうちの１つ以上である。
【００２２】
特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、血清（例えば、ウシ胎仔血清）を含む胎盤由来の接着細胞培養物から単離される。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、血清を欠く胎盤由来の接着細胞培養物から単離される。
【００２３】
特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームが単離される胎盤由来の接着細胞は、当該エクソソームが単離される前に、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１６、１８、または２０回継代された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、少なくとも１回継代された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、少なくとも２回継代された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、少なくとも３回継代された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、少なくとも４回継代された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、少なくとも５回継代された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、少なくとも６回継代された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、少なくとも７回継代された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、少なくとも８回継代された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、少なくとも９回継代された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、少なくとも１０回継代された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、少なくとも１２回継代された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、少なくとも１４回継代された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、少なくとも１６回継代された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、少なくとも１８回継代された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、少なくとも２０回継代された。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームが単離される胎盤由来の接着細胞は、当該エクソソームが単離される前に、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８または４０倍以上の集団倍加の間増殖された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、１倍の集団倍加のために増殖された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、２倍の集団倍加のために増殖された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、３倍の集団倍加のために増殖された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、４倍の集団倍加のために増殖された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、５倍の集団倍加のために増殖された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、６倍の集団倍加のために増殖された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、７倍の集団倍加のために増殖された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、８倍の集団倍加のために増殖された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、９倍の集団倍加のために増殖された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、１０倍の集団倍加のために増殖された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、１２倍の集団倍加のために増殖された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、１４倍の集団倍加のために増殖された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、１６倍の集団倍加のために増殖された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、１８倍の集団倍加のために増殖された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、２０倍の集団倍加のために増殖された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、２２倍の集団倍加のために増殖された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、２４倍の集団倍加のために増殖された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、２６倍の集団倍加のために増殖された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、２８倍の集団倍加のために増殖された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、３０倍の集団倍加のために増殖された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、３２倍の集団倍加のために増殖された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、３４倍の集団倍加のために増殖された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、３６倍の集団倍加のために増殖された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、３８倍の集団倍加のために増殖された。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、４０倍の集団倍加のために増殖された。
【００２４】
特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームが単離される胎盤由来の接着細胞は、元来は少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９９％、または１００％が致死である。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、元来は、少なくとも８０％が致死である。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、元来は、少なくとも９０％が致死である。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、元来は、少なくとも９５％が致死である。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、元来は、少なくとも９９％が致死である。ある特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、元来は、少なくとも１００％が致死である。
【００２５】
別の態様では、本明細書に提供されるのは、本明細書に記載の胎盤由来の接着細胞エクソソーム及び／または胎盤由来の接着細胞エクソソームを含む医薬組成物の使用である。セクション５．４．を参照のこと。
【００２６】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載の胎盤由来の接着細胞エクソソーム及び／または胎盤由来の接着細胞エクソソームを含む医薬組成物を用いて、その必要な被験体における疾患及び／または病態を処置及び／または予防する。特定の実施形態では、本明細書に記載の胎盤由来の接着細胞エクソソーム及び／または胎盤由来の接着細胞エクソソームを含む医薬組成物を用いて、その必要な被験体において、血管形成及び／または血管新生を促進する。別の特定の実施形態では、本明細書に記載の胎盤由来の接着細胞エクソソーム及び／または胎盤由来の接着細胞エクソソームを含む医薬組成物を用いて、その必要な被験体において免疫活性を調節する（例えば、免疫応答を増大するか、または免疫応答を低下する）。別の特定の実施形態では、本明細書に記載の胎盤由来の接着細胞エクソソーム及び／または胎盤由来の接着細胞エクソソームを含む医薬組成物を用いて、その必要な被験体における、組織損傷、例えば、急性または慢性の損傷によって生じる組織障害を修復する。
【００２７】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載の、由来の接着細胞エクソソーム及び／または胎盤由来の接着細胞エクソソームを含む医薬組成物は、その必要な被験体における疾患及び／または病態を処置及び／または予防するための方法での使用のためである。別の実施形態では、本明細書に記載の胎盤由来の接着細胞エクソソームを含む医薬組成物は、その必要な被験体における疾患及び／または病態を処置するための方法での使用のためである。別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームを含む医薬組成物は、その必要な被験体における疾患及び／または病態を予防するための方法における使用のためである。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームを含む医薬組成物は、その必要な被験体における血管形成及び／または血管新生を促進するための方法における使用のためである。別の特定の実施形態では、本明細書に記載の胎盤由来の接着細胞エクソソームを含む医薬組成物は、その必要な被験体において免疫活性を調節する（例えば、免疫応答を増大するか、または免疫応答を低下する）ための方法での使用のためである。別の特定の実施形態では、本明細書に記載の胎盤由来の接着細胞エクソソームを含む医薬組成物は、その必要な被験体における、組織損傷、例えば、急性または慢性の損傷によって生じる組織障害を修復するための方法での使用のためである。
【００２８】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載の胎盤由来の接着細胞エクソソーム及び／または胎盤由来の接着細胞エクソソームを含む医薬組成物は、細胞保護剤として用いられる。別の態様では、本明細書に記載の胎盤由来の接着細胞エクソソーム及び／または胎盤由来の接着細胞エクソソームを含む医薬組成物は、薬学的用途に適切なキットの形態で提供される。セクション５．５を参照のこと。
【００２９】
別の実施形態では、本明細書に提供されるのは、外因性因子、例えば、薬剤を胎盤由来の接着細胞エクソソームにロードする方法である。一実施形態では、このような方法は、胎盤由来の接着細胞エクソソーム及び外因性因子、例えば、薬剤をインキュベートするステップ、例えば、サポニン透過化、凍結／解凍サイクル、超音波処理、または押し出しの有無において室温でインキュベートするステップを包含する。特定の実施形態では、この外因性因子、例えば、薬剤は、室温でのインキュベーションによって胎盤由来の接着細胞エクソソームにロードされる。特定の実施形態では、インキュベーション、例えば、室温でのインキュベーションは、エクソソームのサポニン透過化なしで行う。特定の実施形態では、インキュベーション、例えば、室温でのインキュベーションは、胎盤由来の接着細胞エクソソームのサポニン透過化で行う。特定の実施形態では、外因性因子、例えば、薬剤を、凍結／解凍サイクル、例えば、１、２、３、４、５回以上の凍結／解凍サイクルによってエクソソームにロードする。特定の実施形態では、外因性因子、例えば、薬剤を、超音波処理によって、胎盤由来の接着細胞エクソソームにロードする。特定の実施形態では、外因性因子、例えば、薬剤を、押し出しによって胎盤由来の接着細胞エクソソームにロードする。特定の実施形態では、外因性因子を、エレクトロポレーションによって胎盤由来の接着細胞エクソソームにロードする。特定の実施形態では、外因性因子、例えば、薬剤を、胎盤由来の接着細胞エクソソームにロードする方法は、当該の任意の組み合わせを包含する。
【００３０】
特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームにロードされた外因性因子、例えば、薬剤は、ポリペプチドを含む。特定の実施形態では、外因性因子、例えば、薬剤は、結合剤、例えば、抗体、例えば、ヒト抗体、ヒト化抗体もしくはキメラ抗体、またはその抗原結合フラグメントなどである。特殊な実施形態では、抗体は、一価特異的、二価特異的もしくは多価特異的抗体、またはその抗原結合フラグメントである。さらに他の特定の実施形態では、抗体またはその抗原結合フラグメントは、単鎖抗体またはＦａｂフラグメントである。特定の実施形態では、抗体またはその抗原結合フラグメントは、標的細胞、例えば、エクソソームが得られた細胞型以外の細胞へは、胎盤由来の接着細胞エクソソームの補助なしでは内部移行しない。
【００３１】
特定の実施形態では、外因性因子、例えば本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームにロードされた薬剤は、１つ以上の核酸を含む。特定の実施形態では、この１つ以上の核酸は、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはｍｉＲＮＡを含む。
【００３２】
特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームにロードされた外因性因子、例えば、薬剤は、１つ以上の遺伝子修飾成分を含む。特定の実施形態では、１つ以上の遺伝子修飾成分は、ＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムを含む。さらに特異的な実施形態では、ＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、ガイドＲＮＡを含む。さらに特異的な実施形態では、ＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、エンドヌクレアーゼを含む。さらに特異的な実施形態では、ＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、ガイドＲＮＡ及びエンドヌクレアーゼを含む。さらに特異的な実施形態では、ＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、Ｃａｓ９を含む。さらに特異的な実施形態では、ＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、Ｃｐｆ１を含む。特定の実施形態では、１つ以上の遺伝子修飾成分は、ジンクフィンガーヌクレアーゼを含む。特定の実施形態では、１つ以上の遺伝子修飾成分は、転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）システムを含む。
【００３３】
別の実施形態では、本明細書に提供されるのは、標的細胞に対して外因性因子、例えば、薬剤を送達する方法であって、ここでこの外因性因子が、胎盤由来の接着細胞エクソソームにロードされる。特定の実施形態では、この標的細胞は、エクソソームが得られた細胞型以外の細胞である。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームにロードされた外因性因子、例えば、薬剤は、ポリペプチドを含む。特定の実施形態では、外因性因子、例えば、薬剤は、結合剤、例えば、ヒト抗体、ヒト化抗体もしくはキメラ抗体、またはその抗原結合フラグメントのような抗体などである。特殊な実施形態では、抗体は、一価特異的、二価特異的もしくは多価特異的抗体、またはその抗原結合フラグメントである。さらに他の特定の実施形態では、抗体またはその抗原結合フラグメントは、単鎖抗体またはＦａｂフラグメントである。特定の実施形態では、抗体またはその抗原結合フラグメントは、胎盤由来の接着細胞エクソソームの補助なしでは、標的細胞、例えば、エクソソームが得られた細胞型以外の細胞に内部移行されない。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームにロードされた外因性因子、例えば、薬剤は、１つ以上の核酸を含む。特定の実施形態では、この１つ以上の核酸は、ｓｉＲＮＡまたはｍｉＲＮＡを含む。特定の実施形態では、この本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームにロードされた外因性因子、例えば、薬剤は、１つ以上の遺伝子修飾成分を含む。特定の実施形態では、この１つ以上の遺伝子修飾成分は、ＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムを含む。さらに特異的な実施形態では、このＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、ガイドＲＮＡを含む。さらに特異的な実施形態では、ＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、エンドヌクレアーゼを含む。さらに特異的な実施形態では、このＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、ガイドＲＮＡ及びエンドヌクレアーゼを含む。さらに特異的な実施形態では、ＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、Ｃａｓ９を含む。さらに特異的な実施形態では、このＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、Ｃｐｆ１を含む。特定の実施形態では、この１つ以上の遺伝子修飾成分は、ジンクフィンガーヌクレアーゼを含む。特定の実施形態では、この１つ以上の遺伝子修飾成分は、転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）システムを含む。
【００３４】
別の実施形態では、本明細書に提供されるのは、被験体、例えば、ヒトに対して、外因性因子、例えば、薬剤を含むエクソソームを投与する方法である。特定の実施形態では、この外因性因子、例えば、薬剤は、ポリペプチドを含む。特定の実施形態では、この外因性因子、例えば、薬剤は、結合剤、例えば、抗体、例えば、ヒト抗体、ヒト化抗体もしくはキメラ抗体、またはその抗原結合フラグメントなどである。特殊な実施形態では、この抗体は、一価特異的、二価特異的もしくは多価特異的抗体、またはその抗原結合フラグメントである。さらに他の特定の実施形態では、この抗体またはその抗原結合フラグメントは、単鎖抗体またはＦａｂフラグメントである。特定の実施形態では、この抗体またはその抗原結合フラグメントは、エクソソームの補助なしで、標的細胞には内部移行されない。特定の実施形態では、この本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームにロードされた外因性因子、例えば、薬剤は、１つ以上の核酸を含む。特定の実施形態では、この１つ以上の核酸は、ｓｉＲＮＡまたはｍｉＲＮＡを含む。特定の実施形態では、この本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームにロードされた外因性因子、例えば、薬剤は、１つ以上の遺伝子修飾成分を含む。特定の実施形態では、この１つ以上の遺伝子修飾成分は、ＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムを含む。さらに特異的な実施形態では、このＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、ガイドＲＮＡを含む。さらに特異的な実施形態では、このＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、エンドヌクレアーゼを含む。さらに特異的な実施形態では、このＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、ガイドＲＮＡ及びエンドヌクレアーゼを含む。さらに特異的な実施形態では、このＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、Ｃａｓ９を含む。さらに特異的な実施形態では、このＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、Ｃｐｆ１を含む。特定の実施形態では、この１つ以上の遺伝子修飾成分は、ジンクフィンガーヌクレアーゼを含む。特定の実施形態では、この１つ以上の遺伝子修飾成分は、転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）システムを含む。
【００３５】
別の実施形態では、本明細書に提供されるのは、１つ以上の外因性因子、例えば、薬剤をロードされた胎盤由来の接着細胞エクソソームを含む組成物である。特定の実施形態では、この外因性因子、例えば、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームに組み込まれた薬剤は、ポリペプチドを含む。特定の実施形態では、この外因性因子、例えば、薬剤は、結合剤、例えば、抗体、例えば、ヒト抗体、ヒト化抗体もしくはキメラ抗体、またはその抗原結合フラグメントなどである。特殊な実施形態では、この抗体は、一価特異的、二価特異的もしくは多価特異的抗体、またはその抗原結合フラグメントである。さらに他の特定の実施形態では、この抗体またはその抗原結合フラグメントは、単鎖抗体またはＦａｂフラグメントである。特定の実施形態では、この抗体またはその抗原結合フラグメントは、エクソソームの補助なしでは標的細胞に内部移行しない。特定の実施形態では、この本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームにロードされた外因性因子、例えば、薬剤は、１つ以上の核酸を含む。特定の実施形態では、この１つ以上の核酸は、ｓｉＲＮＡまたはｍｉＲＮＡを含む。特定の実施形態では、この本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームにロードされた外因性因子、例えば、薬剤は、１つ以上の遺伝子修飾成分を含む。特定の実施形態では、この１つ以上の遺伝子修飾成分は、ＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムを含む。さらに特異的な実施形態では、このＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、ガイドＲＮＡを含む。さらに特異的な実施形態では、このＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、エンドヌクレアーゼを含む。さらに特異的な実施形態では、このＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、ガイドＲＮＡ及びエンドヌクレアーゼを含む。さらに特異的な実施形態では、このＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、Ｃａｓ９を含む。さらに特異的な実施形態では、このＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、Ｃｐｆ１を含む。特定の実施形態では、この１つ以上の遺伝子修飾成分は、ジンクフィンガーヌクレアーゼを含む。特定の実施形態では、この１つ以上の遺伝子修飾成分は、転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）システムを含む。
【図面の簡単な説明】
【００３６】
【図１】胎盤由来の接着細胞エクソソームの存在を実証するエクソソーム抗体アレイの結果を示す。上側のパネル：絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞由来の陽性対照；下側のパネル胎盤由来の接着細胞エクソソーム。
【００３７】
【図２Ａ】胎盤由来の接着細胞エクソソームの顕微鏡写真であって、矢印は、エクソソームの共通の識別特徴であるカップ形の構造を示している。
【図２Ｂ】ナノ粒子トラッキングアッセイで決めた、胎盤由来の接着細胞エクソソームのサイズ分布を示す。
【００３８】
【図３】図３Ａ〜図３Ｄは、既知の分子の溶出プロファイル（図３Ａ）を、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（図３Ｂ）または血清を含んでいるかまたは欠いている培養条件下で単離した（図３Ｃ及び図３Ｄ）、本明細書に記載の非絨毛性の胎盤由来の接着細胞由来のエクソソームと比較して示す。
【００３９】
【図４Ａ】絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞から単離されたエクソソームに含まれるか、または本明細書に記載のエクソソーム由来の種々のマイクロＲＮＡのレベルを示す。
【図４Ｂ】本明細書に記載されるエクソソームに、またはエクソソーム内に含まれる種々の血管形成タンパク質のレベルを示す。
【図４Ｃ】本明細書に記載されるエクソソームに、またはエクソソーム内に含まれる種々の血管形成タンパク質のレベルを示す。
【００４０】
【図５】本明細書において記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームが、血液の特定の細胞によって取り込まれる能力を示す。
【００４１】
【図６】ヒト血管内皮細胞の増殖に対する胎盤由来の接着細胞エクソソーム及び胎盤由来の接着細胞の効果を示す。
【００４２】
【図７Ａ】胎盤由来の接着細胞または胎盤由来の接着細胞のエクソソームとともにインキュベーションした後、ＬＰＳ刺激ヒト血液によってインビトロで生成された種々のサイトカイン及びケモカインのレベルを示す。
【図７Ｂ】胎盤由来の接着細胞または胎盤由来の接着細胞のエクソソームとともにインキュベーションした後、ＬＰＳ刺激ヒト血液によってインビトロで生成された種々のサイトカイン及びケモカインのレベルを示す。
【００４３】
【図８】図８Ａ〜図８Ｇは、血管内皮細胞の成長及び増殖に対する胎盤由来の接着細胞エクソソームの効果を示す。図８Ａ及び図８Ｂは、当該エクソソームを、血清を含むか（図８Ａ）または欠いているか（図８Ｂ）いずれかの胎盤由来の接着細胞培養から収集したとき、胎盤由来の接着細胞エクソソームが培養された血管細胞の管形成及び分岐を促進する能力を示す。図８Ｃは、胎盤由来の接着細胞エクソソームとの同時培養後、ＶＥＧＦ経路遺伝子の相対的発現を示す。影が濃いほど、発現が高いことに相当し、陽性の対照である白の進入は例外である（すなわち、１８Ｓ、ＧＡＰＤＨ、ＨＰＲＴ１、及びＧＵＳＢ）。図８Ｄ〜図８Ｇは、胎盤由来の接着細胞または胎盤由来の接着細胞エクソソームとの血管内皮細胞の同時培養後の経時的なＶＥＧＦ経路遺伝子についての遺伝子発現の変化を示す。培養されたＨＵＶＥＣを胎盤由来の接着細胞培養上清（×印）、５０μｇの胎盤由来の接着細胞エクソソーム（三角）、または対照として培養培地（ひし形）とともにインキュベートした。
【００４４】
【図９Ａ】胎盤由来の接着細胞または胎盤由来の接着細胞エクソソームとともに同時培養した後、単球由来マクロファージによって分泌されるＴＮＦ−α及びＭＣＰ−１の相対レベルを示す。
【図９Ｂ】胎盤由来の接着細胞または胎盤由来の接着細胞エクソソームとともに同時培養された後、マクロファージによって分泌されたＴＮＦ−α及びＩＬ−８（それぞれ、左側及び真ん中）の分泌のレベルを示す。また、単球由来マクロファージからのＩＬ−８分泌に対する、インタクトまたは溶解された胎盤由来の接着細胞エクソソームの効果も示している（図９Ｂ、右側）。
【発明を実施するための形態】
【００４５】
５．詳細な説明
５．１  胎盤由来接着細胞エクソソーム
本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームを選択して、下記のとおり、それらの形態学及び／または分子マーカーによって特定してもよい。本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、当該分野で公知のエクソソーム、例えば、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞由来のエクソソーム、例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載のエクソソームとは別個である。従って、本明細書において用いる場合、「胎盤由来の接着細胞エクソソーム」という用語は、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞から得られるエクソソームまたはそれに由来するエクソソームを含むことは意味しない。
【００４６】
特定の実施形態では、本明細書において記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームの集団は、細胞、例えば、有核細胞、例えば胎盤の細胞、例えば、胎盤由来の接着細胞を含まない。
【００４７】
５．１．１．胎盤由来接着細胞エクソソームマーカー  
本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、当該エクソソームを特定及び／または単離するために用いられ得るマーカーを含む。これらのマーカーは、例えば、タンパク質であっても、核酸であっても、単糖類分子であっても、グリコシル化タンパク質であっても、脂質分子であってもよく、モノマー型で存在しても、オリゴマー型で存在しても、及び／または多量体型で存在してもよい。特定の実施形態では、このマーカーは、エクソソームが由来する胎盤由来の接着細胞によって生成される。特定の実施形態では、このマーカーは、エクソソームが由来する胎盤由来の接着細胞によって提供されるが、マーカーは、当該細胞によって高レベルで発現されることはない。特異的な実施形態では、本明細書において記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームのマーカーは、対照のマーカー分子と比較した場合、もとの細胞との比較で、エクソソーム中で高い。別の特異的な実施形態では、本明細書において記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームのマーカーは、別の細胞型（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞及び前脂肪細胞の間葉系幹細胞）から得られたエクソソームと比較して当該エクソソーム中で富化されており、ここでは、エクソソームは同一の方法を通じて得られ、ここでエクソソームが由来する細胞は、同一の条件下で維持される。
【００４８】
エクソソームの三次元構造によって、エクソソームの表面上のマーカーの保持、及び／またはエクソソーム内にマーカーが含まれることが可能になる。同様に、マーカー分子は、部分的にエクソソーム内に存在しても、部分的にエクソソームの外面上に存在しても、及び／またはエクソソームのリン脂質二重層を横切って存在してもよい。特異的な実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームに関連するマーカーはタンパク質である。特定の実施形態では、このマーカーは、エクソソームリン脂質二重層中に固定されるか、またはエクソソームリン脂質二重層を横切って固定され、そのためこのタンパク質分子の一部は、エクソソーム内であるが、同じ分子の一部は、エクソソームの外面に露出されている膜貫通タンパク質である。特定の実施形態では、このマーカーは、全体がエクソソーム内に含まれる。別の特異的な実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームに関連するマーカーは核酸である。特定の実施形態では、当該核酸は、非コードＲＮＡ分子、例えば、ｍｉｃｒｏ−ＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）である。
【００４９】
５．１．１．１．表面マーカー
本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、それらの特定を可能にし、かつそれらのもとの胎盤由来の接着細胞ならびに他の細胞及び非細胞材料を含まない胎盤由来の接着細胞エクソソームの実質的に純粋な集団を単離／獲得するために用いられ得る表面マーカーを含む。エクソソーム表面マーカー組成物を決定するための方法は、当該分野で公知である。例えば、エクソソームの表面マーカーは、蛍光活性化細胞分取（ＦＡＣＳ）またはウエスタンブロッティングによって検出され得る。
【００５０】
本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、それらを当該分野で公知の他のエクソソームから識別することを可能にする別個の表面マーカーを含む。特異的な実施形態では、本明細書において提供される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、以下のマーカーのうち１、２、３、４、５またはそれ以上を含む：ＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、ＣＤ２００（例えば、ＦＡＣＳによって決定可能）。
【００５１】
１つの特異的な実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、例えば、フローサイトメトリーによって、例えば、ＦＡＣＳによって決定されるようにＣＤ５５＋及びＣＤ１０＋である。
【００５２】
特異的な実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１０＋及びＣＤ５５＋（例えば、ＦＡＣＳによって決定される）であり、さらに絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞エクソソームまたは前脂肪細胞の間葉系幹細胞エクソソーム（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）よりも高レベルでＣＤ８２、ＣＤ１４２、ＣＤ４９ｃ、及びＣＤ９０を含む。
【００５３】
ある特異的な実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ９＋である。別の特異的な実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１０＋である。別の特異的な実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１３＋である。別の特異的な実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ２９＋である。別の特異的な実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ４４＋である。別の特異的な実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ４９ｂ＋である。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ４９ｃ＋である。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ５５＋である。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ５９＋である。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ６３＋である。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ７３＋である。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ８１＋である。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ８２＋である。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ９０＋である。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ９８＋である。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１０５＋である。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１４１＋である。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１４２＋である。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１５１＋である。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１６４＋である。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ２９５＋である。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ２００＋である。このようなマーカーの存在の決定は、例えば、フローサイトメトリーによって、例えば、ＦＡＣＳによって行ってもよい。別の実施形態では、本明細書に記載されるのは、上述の表面マーカーの任意の組み合わせを含む胎盤由来の接着細胞エクソソームの集団である。
【００５４】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ９＋であり、さらに、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００からなる群より選択される１つ以上のマーカーを含む。
【００５５】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１０＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含む。
【００５６】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソーム  は、ＣＤ１３＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含む。
【００５７】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ２９＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含む。
【００５８】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ４４＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含む。
【００５９】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ４９ｂ＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含む。
【００６０】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ４９ｃ＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含む。
【００６１】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ５５＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含む。
【００６２】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ５９＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含む。
【００６３】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ６３＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含む。
【００６４】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ７３＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含む。
【００６５】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ８１＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含む。
【００６６】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ８２＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含む。
【００６７】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ９０＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含む。
【００６８】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ９８＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含む。
【００６９】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１０５＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含む。
【００７０】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１４１＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含む。
【００７１】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１４２＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含む。
【００７２】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１５１＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含む。
【００７３】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１６４＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含む。
【００７４】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ２９５＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含む。
【００７５】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ２００＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１６４、及びＣＤ２９５の群から選択される１つ以上のマーカーを含む。
【００７６】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ４９ｂ＋、ＣＤ４９ｃ＋、ＣＤ９８＋、ＣＤ２９＋、ＣＤ１４２＋、ＣＤ１０＋、ＣＤ４７＋、ＣＤ５５＋、ＣＤ９０＋、ＣＤ１４７＋、ＣＤ１５１＋、ＣＤ１６６＋、ＣＤ８２＋及びＣＤ２００＋である。
【００７７】
別の実施形態では、本明細書に記載されるのは、上述の表面マーカーの任意の組み合わせを含む胎盤由来の接着細胞エクソソームの集団である。
【００７８】
本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは一般には、表面マーカーＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃまたはＣＤ３４を含まない。従って、一実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ３−である。別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１１ｂ−である。別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１４−である。別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１９−である。別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ３３−である。別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１９２−である。別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＨＬＡ−Ａ−である。別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＨＬＡ−Ｂ−である。別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＨＬＡ−Ｃ−である。別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＨＬＡ−ＤＲ−である。別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１１ｃ−である。別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ３４−である。
【００７９】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ３−であり、かつＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択される１つ以上のマーカーを含まない。
【００８０】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１１ｂ−であり、かつＣＤ３、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択される１つ以上のマーカーを含まない。
【００８１】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１４−であり、かつＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択される１つ以上のマーカーを含まない。
【００８２】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１９−であり、かつＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択される１つ以上のマーカーを含まない。
【００８３】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ３３−であり、かつＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択される１つ以上のマーカーを含まない。
【００８４】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１９２−であり、かつＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択される１つ以上のマーカーを含まない。
【００８５】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＨＬＡ−Ａ−であり、かつＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択される１つ以上のマーカーを含まない。
【００８６】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＨＬＡ−Ｂ−であり、かつＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択される１つ以上のマーカーを含まない。
【００８７】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＨＬＡ−Ｃ−であり、かつＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択される１つ以上のマーカーを含まない。
【００８８】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＨＬＡ−ＤＲ−であり、かつＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択される１つ以上のマーカーを含まない。
【００８９】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１１ｃ−であり、かつＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ及びＣＤ３４の群から選択される１つ以上のマーカーを含まない。
【００９０】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ３４−であり、かつＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ及びＣＤ１１ｃの群から選択される１つ以上のマーカーを含まない。
【００９１】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ３−、ＣＤ１１ｂ−、ＣＤ１４−、ＣＤ１９−、ＣＤ３３−、ＣＤ１９２−、ＨＬＡ−Ａ−、ＨＬＡ−Ｂ−、ＨＬＡ−Ｃ−、ＨＬＡ−ＤＲ−、ＣＤ１１ｃ−及びＣＤ３４−である。
【００９２】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ９＋であり、かつさらにＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含み、一方ではさらにＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択されるマーカーの１つ以上を欠いている。
【００９３】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１０＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含み、一方ではさらに、ＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択されるマーカーの１つ以上を欠いている。
【００９４】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１３＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含み、一方ではさらに、ＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択されるマーカーの１つ以上を欠いている。
【００９５】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ２９＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含み、一方ではさらに、ＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択されるマーカーの１つ以上を欠いている。
【００９６】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ４４＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含み、一方ではさらに、ＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択されるマーカーの１つ以上を欠いている。
【００９７】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ４９ｂ＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含み、一方ではさらに、ＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択されるマーカーの１つ以上を欠いている。
【００９８】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ４９ｃ＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含み、一方ではさらに、ＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択されるマーカーの１つ以上を欠いている。
【００９９】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ５５＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含み、一方ではさらに、ＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択されるマーカーの１つ以上を欠いている。
【０１００】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ５９＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含み、一方ではさらに、ＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択されるマーカーの１つ以上を欠いている。
【０１０１】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ６３＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含み、一方ではさらに、ＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択されるマーカーの１つ以上を欠いている。
【０１０２】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ７３＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含み、一方ではさらに、ＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択されるマーカーの１つ以上を欠いている。
【０１０３】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ８１＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含み、一方ではさらに、ＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択されるマーカーの１つ以上を欠いている。
【０１０４】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ８２＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含み、一方ではさらに、ＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択されるマーカーの１つ以上を欠いている。
【０１０５】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ９０＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含み、一方ではさらに、ＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択されるマーカーの１つ以上を欠いている。
【０１０６】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ９８＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含み、一方ではさらに、ＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択されるマーカーの１つ以上を欠いている。
【０１０７】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１０５＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含み、一方ではさらに、ＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択されるマーカーの１つ以上を欠いている。
【０１０８】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１４１＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含み、一方ではさらに、ＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択されるマーカーの１つ以上を欠いている。
【０１０９】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１４２＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含み、一方ではさらに、ＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択されるマーカーの１つ以上を欠いている。
【０１１０】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１５１＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含み、一方ではさらに、ＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択されるマーカーの１つ以上を欠いている。
【０１１１】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１６４＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含み、一方ではさらに、ＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択されるマーカーの１つ以上を欠いている。  
【０１１２】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ２９５＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、及びＣＤ２００の群から選択される１つ以上のマーカーを含み、一方ではさらに、ＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択されるマーカーの１つ以上を欠いている。
【０１１３】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ２００＋であり、かつさらにＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１６４、及びＣＤ２９５の群から選択される１つ以上のマーカーを含み、一方ではさらに、ＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択されるマーカーの１つ以上を欠いている。
【０１１４】
別の実施形態では、本明細書に記載されるのは、上述の表面マーカーの任意の組み合わせを含む、胎盤由来の接着細胞エクソソームの集団である。
【０１１５】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ９＋、ＣＤ１０＋、ＣＤ１３＋、ＣＤ２９＋、ＣＤ４４＋、ＣＤ４９ｂ＋、ＣＤ４９ｃ＋、ＣＤ５５＋、ＣＤ５９＋、ＣＤ６３＋、ＣＤ７３＋、ＣＤ８１＋、ＣＤ８２＋、ＣＤ９０＋、ＣＤ９８＋、ＣＤ１０５＋、ＣＤ１４１＋、ＣＤ１４２＋、ＣＤ１５１＋、ＣＤ１６４＋、ＣＤ２９５＋、及びＣＤ２００＋であり、一方ではさらに、ＣＤ３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ及びＣＤ３４の群から選択されるマーカーの１つ以上を欠いている。
【０１１６】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ３−、ＣＤ１１ｂ−、ＣＤ１４−、ＣＤ１９−、ＣＤ３３−、ＣＤ１９２−、ＨＬＡ−Ａ−、ＨＬＡ−Ｂ−、ＨＬＡ−Ｃ−、ＨＬＡ−ＤＲ−、ＣＤ１１ｃ−及びＣＤ３４−  であるが、一方ではさらに、ＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ２９５、及びＣＤ２００の群から選択されるマーカーの１つ以上を含んでいる。
【０１１７】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ９＋、ＣＤ１０＋、ＣＤ１３＋、ＣＤ２９＋、ＣＤ４４＋、ＣＤ４９ｂ＋、ＣＤ４９ｃ＋、ＣＤ５５＋、ＣＤ５９＋、ＣＤ６３＋、ＣＤ７３＋、ＣＤ８１＋、ＣＤ８２＋、ＣＤ９０＋、ＣＤ９８＋、ＣＤ１０５＋、ＣＤ１４１＋、ＣＤ１４２＋、ＣＤ１５１＋、ＣＤ１６４＋、ＣＤ２９５＋、ＣＤ２００＋、ＣＤ３−、ＣＤ１１ｂ−、ＣＤ１４−、ＣＤ１９−、ＣＤ３３−、ＣＤ１９２−、ＨＬＡ−Ａ−、ＨＬＡ−Ｂ−、ＨＬＡ−Ｃ−、ＨＬＡ−ＤＲ−、ＣＤ１１ｃ−及びＣＤ３４−である。
【０１１８】
別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ６、ＣＤ７、ＣＤ８、ＣＤ１６、ＣＤ２４、ＣＤ２５、ＣＤ２６、ＣＤ２７、ＣＤ３２、ＣＤ３５、ＣＤ３７、ＣＤ３９、ＣＤ４５、ＣＤ４６、ＣＤ５４、ＣＤ５６、ＣＤ６１、ＣＤ７４、ＣＤ８６、ＣＤ８８、ＣＤ９１、ＣＤ９９、ＣＤ１０３、ＣＤ１０８、ＣＤ１１２、ＣＤ１１７、ＣＤ１１９、ＣＤ１２０ａ、ＣＤ１２３、ＣＤ１２６、ＣＤ１３０、ＣＤ１３４、ＣＤ１３８、ＣＤ１４０ａ、ＣＤ１４０ｂ、ＣＤ１４４、ＣＤ１４６、ＣＤ１４７、ＣＤ１５２、ＣＤ１６３、ＣＤ１８３、ＣＤ１８４、ＣＤ１８６、ＣＤ１９１、ＣＤ１９４、ＣＤ１９６、ＣＤｗ１９８、ＣＤ２０２ｂ、ＣＤ２２０、ＣＤ２２１、ＣＤ２３５ａ、ＣＤ２５２、ＣＤ２６６、ＣＤ２７１、ＣＤ２７３、ＣＤ２７４、ＣＤ３１８、ＣＤ３２６、ＣＤ３３３、ＣＤ３３４、ＨＬＡ−ＤＰ、ＨＬＡ−ＤＱ、ＨＬＡ−Ｇ、ＩｇＤ、ＩｇＭ、ＮＧ２、ＰＤＧＦ、及び／またはＳＳＥＡ−３を含まない。
【０１１９】
特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ８２＋であり、かつ例えば、ＦＡＣＳによる、例えば、フローサイトメトリーによって決定される、低いレベルのＣＤ１４１（すなわち、ＣＤ１４１（低））を含む。
【０１２０】
特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、例えば、ＦＡＣＳによって決定できる、当該分野で公知のエクソソームよりも多い量で表面マーカーを含む。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、非胎盤由来の接着細胞エクソソーム中の当該マーカー（複数可）の量よりも高い量のＣＤ４９ｃ、ＣＤ８２、ＣＤ９０、及び／またはＣＤ１４２を含む。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、前脂肪細胞の間葉系幹細胞または絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）のいずれか由来のエクソソーム中に存在する当該マーカー（複数可）の量よりも高い量のＣＤ４９ｃ、ＣＤ８２、ＣＤ９０、及び／またはＣＤ１４２を含む。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソームに存在する当該マーカー（複数可）の量よりも高い量のＣＤ４９ｃ、ＣＤ７３、ＣＤ８２、ＣＤ９０、及び／またはＣＤ１４２を含む。
【０１２１】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、非胎盤由来の接着細胞エクソソーム中の当該マーカー（複数可）の量よりも低い量のＣＤ１６４を含む。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、前脂肪細胞の間葉系幹細胞または絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）由来のエクソソームに存在する当該マーカー（複数可）の量よりも低い量のＣＤ１６４を含む。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１６４を、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）または前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍または１０倍低いレベルで含む（ここでＣＤ１６４含量は、同じ実験条件下で測定し（例えば、フローサイトメトリーによって、例えば、ＦＡＣＳによって）、ここでこのエクソソームは、同様の条件下で回収し、ここでこの起源の細胞は、同様の条件下で増殖する）。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１６４を、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）または前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも２倍〜３倍、３倍〜４倍、４倍〜５倍、５倍〜６倍、６倍〜７倍、７倍〜８倍、８倍〜９倍または９倍〜１０倍低いレベルで含む（ここでＣＤ１６４含量は、同じ実験条件下で測定し（例えば、フローサイトメトリーによって、例えば、ＦＡＣＳによって）、ここでこのエクソソームは、同様の条件下で回収し、ここでこの起源の細胞は、同様の条件下で増殖する）。ある特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１６４を、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）または前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍または１０倍低いレベルで含む（ここでＣＤ１６４含量は、同じ実験条件下で測定し（例えば、フローサイトメトリーによって、例えば、ＦＡＣＳによって）、ここでは、同じ数及び／または量のエクソソームを各サンプルについて用いる）。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１６４を、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）または前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも２倍〜３倍、３倍〜４倍、４倍〜５倍、５倍〜６倍、６倍〜７倍、７倍〜８倍、８倍〜９倍または９倍〜１０倍低いレベルで含む（ここでＣＤ１６４含量は、同じ実験条件下で測定し（例えば、フローサイトメトリーによって、例えば、ＦＡＣＳによって）、ここでは、同じ数及び／または量のエクソソームを各サンプルについて用いる）。
【０１２２】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ４９ｃを、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）または前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍または１０倍高いレベルで含む（ここでＣＤ４９ｃ含量は、同じ実験条件下で測定し（例えば、フローサイトメトリーによって、例えば、ＦＡＣＳによって）、ここでこのエクソソームは、同様の条件下で回収し、ここでこの起源の細胞は、同様の条件下で増殖する）。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ４９ｃを、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）または前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも２倍〜３倍、３倍〜４倍、４倍〜５倍、５倍〜６倍、６倍〜７倍、７倍〜８倍、８倍〜９倍または９倍〜１０倍高いレベルで含む（ここでＣＤ４９ｃ含量は、同じ実験条件下で測定し（例えば、フローサイトメトリーによって、例えば、ＦＡＣＳによって）、ここでこのエクソソームは、同様の条件下で回収し、ここでこの起源の細胞は、同様の条件下で増殖する）。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ４９ｃを、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）または前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍または１０倍高いレベルで含む（ここでＣＤ４９ｃ含量は、同じ実験条件下で測定し（例えば、フローサイトメトリーによって、例えば、ＦＡＣＳによって）、ここでは、同じ数及び／または量のエクソソームを各サンプルについて用いる）。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ４９ｃを、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）または前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも２倍〜３倍、３倍〜４倍、４倍〜５倍、５倍〜６倍、６倍〜７倍、７倍〜８倍、８倍〜９倍または９倍〜１０倍高いレベルで含む（ここでＣＤ４９ｃ含量は、同じ実験条件下で測定し（例えば、フローサイトメトリーによって、例えば、ＦＡＣＳによって）、ここでは、同じ数及び／または量のエクソソームを各サンプルについて用いる）。
【０１２３】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ７３を、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）または前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍または１０倍高いレベルで含む（ここでＣＤ７３含量は、同じ実験条件下で測定し（例えば、フローサイトメトリーによって、例えば、ＦＡＣＳによって）、ここでこのエクソソームは、同様の条件下で回収し、ここでこの起源の細胞は、同様の条件下で増殖する）。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ７３を、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）または前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも２倍〜３倍、３倍〜４倍、４倍〜５倍、５倍〜６倍、６倍〜７倍、７倍〜８倍、８倍〜９倍または９倍〜１０倍高いレベルで含む（ここでＣＤ７３含量は、同じ実験条件下で測定し（例えば、フローサイトメトリーによって、例えば、ＦＡＣＳによって）、ここでこのエクソソームは、同様の条件下で回収し、ここでこの起源の細胞は、同様の条件下で増殖する）。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ７３を、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）または前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍または１０倍高いレベルで含む（ここでＣＤ７３含量は、同じ実験条件下で測定し（例えば、フローサイトメトリーによって、例えば、ＦＡＣＳによって）、ここでは、同じ数及び／または量のエクソソームを各サンプルについて用いる）。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ７３を、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）または前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも２倍〜３倍、３倍〜４倍、４倍〜５倍、５倍〜６倍、６倍〜７倍、７倍〜８倍、８倍〜９倍または９倍〜１０倍高いレベルで含む（ここでＣＤ７３含量は、同じ実験条件下で測定し（例えば、フローサイトメトリーによって、例えば、ＦＡＣＳによって）、ここでは、同じ数及び／または量のエクソソームを各サンプルについて用いる）。
【０１２４】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ８２を、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）または前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍または１０倍高いレベルで含む（ここでＣＤ８２含量は、同じ実験条件下で測定し（例えば、フローサイトメトリーによって、例えば、ＦＡＣＳによって）、ここでこのエクソソームは、同様の条件下で回収し、ここでこの起源の細胞は、同様の条件下で増殖する）。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ８２を、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）または前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも２倍〜３倍、３倍〜４倍、４倍〜５倍、５倍〜６倍、６倍〜７倍、７倍〜８倍、８倍〜９倍または９倍〜１０倍高いレベルで含む（ここでＣＤ８２含量は、同じ実験条件下で測定し（例えば、フローサイトメトリーによって、例えば、ＦＡＣＳによって）、ここでこのエクソソームは、同様の条件下で回収し、ここでこの起源の細胞は、同様の条件下で増殖する）。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ８２を、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）または前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍または１０倍高いレベルで含む（ここでＣＤ８２含量は、同じ実験条件下で測定し（例えば、フローサイトメトリーによって、例えば、ＦＡＣＳによって）、ここでは、同じ数及び／または量のエクソソームを各サンプルについて用いる）。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ８２を、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）または前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも２倍〜３倍、３倍〜４倍、４倍〜５倍、５倍〜６倍、６倍〜７倍、７倍〜８倍、８倍〜９倍または９倍〜１０倍高いレベルで含む（ここでＣＤ８２含量は、同じ実験条件下で測定し（例えば、フローサイトメトリーによって、例えば、ＦＡＣＳによって）、ここでは、同じ数及び／または量のエクソソームを各サンプルについて用いる）。
【０１２５】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ９０を、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）または前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍または１０倍高いレベルで含む（ここでＣＤ９０含量は、同じ実験条件下で測定し（例えば、フローサイトメトリーによって、例えば、ＦＡＣＳによって）、ここでこのエクソソームは、同様の条件下で回収し、ここでこの起源の細胞は、同様の条件下で増殖する）。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ９０を、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）または前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも２倍〜３倍、３倍〜４倍、４倍〜５倍、５倍〜６倍、６倍〜７倍、７倍〜８倍、８倍〜９倍または９倍〜１０倍高いレベルで含む（ここでＣＤ９０含量は、同じ実験条件下で測定し（例えば、フローサイトメトリーによって、例えば、ＦＡＣＳによって）、ここでこのエクソソームは、同様の条件下で回収し、ここでこの起源の細胞は、同様の条件下で増殖する）。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ９０を、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）または前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍または１０倍高いレベルで含む（ここでＣＤ９０含量は、同じ実験条件下で測定し（例えば、フローサイトメトリーによって、例えば、ＦＡＣＳによって）、ここでは、同じ数及び／または量のエクソソームを各サンプルについて用いる）。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ９０を、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）または前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも２倍〜３倍、３倍〜４倍、４倍〜５倍、５倍〜６倍、６倍〜７倍、７倍〜８倍、８倍〜９倍または９倍〜１０倍高いレベルで含む（ここでＣＤ９０含量は、同じ実験条件下で測定し（例えば、フローサイトメトリーによって、例えば、ＦＡＣＳによって）、ここでは、同じ数及び／または量のエクソソームを各サンプルについて用いる）。
【０１２６】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１４２を、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）または前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍または１０倍高いレベルで含む（ここでＣＤ１４２含量は、同じ実験条件下で測定し（例えば、フローサイトメトリーによって、例えば、ＦＡＣＳによって）、ここでこのエクソソームは、同様の条件下で回収し、ここでこの起源の細胞は、同様の条件下で増殖する）。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１４２を、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）または前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも２倍〜３倍、３倍〜４倍、４倍〜５倍、５倍〜６倍、６倍〜７倍、７倍〜８倍、８倍〜９倍または９倍〜１０倍高いレベルで含む（ここでＣＤ１４２含量は、同じ実験条件下で測定し（例えば、フローサイトメトリーによって、例えば、ＦＡＣＳによって）、ここでこのエクソソームは、同様の条件下で回収し、ここでこの起源の細胞は、同様の条件下で増殖する）。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１４２を、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）または前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍または１０倍高いレベルで含む（ここでＣＤ１４２含量は、同じ実験条件下で測定し（例えば、フローサイトメトリーによって、例えば、ＦＡＣＳによって）、ここでは、同じ数及び／または量のエクソソームを各サンプルについて用いる）。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１４２を、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）または前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも２倍〜３倍、３倍〜４倍、４倍〜５倍、５倍〜６倍、６倍〜７倍、７倍〜８倍、８倍〜９倍または９倍〜１０倍高いレベルで含む（ここでＣＤ１４２含量は、同じ実験条件下で測定し（例えば、フローサイトメトリーによって、例えば、ＦＡＣＳによって）、ここでは、同じ数及び／または量のエクソソームを各サンプルについて用いる）。
【０１２７】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ９０、ＣＤ１４２及びＣＤ８２を、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）または前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍または１０倍高いレベルで含む（ここでＣＤ４９Ｃ、ＣＤ９０、ＣＤ１４２及びＣＤ８２含量は、同じ実験条件下で測定し（例えば、フローサイトメトリーによって、例えば、ＦＡＣＳによって）、ここでこのエクソソームは、同様の条件下で回収し、ここでこの起源の細胞は、同様の条件下で増殖する）。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ４９Ｃ、ＣＤ９０、ＣＤ１４２及びＣＤ８２を、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）または前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも２倍〜３倍、３倍〜４倍、４倍〜５倍、５倍〜６倍、６倍〜７倍、７倍〜８倍、８倍〜９倍または９倍〜１０倍高いレベルで含む（ここでＣＤ４９Ｃ、ＣＤ９０、ＣＤ１４２及びＣＤ８２含量は、同じ実験条件下で測定し（例えば、フローサイトメトリーによって、例えば、ＦＡＣＳによって）、ここでこのエクソソームは、同様の条件下で回収し、ここでこの起源の細胞は、同様の条件下で増殖する）。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ４９Ｃ、ＣＤ９０、ＣＤ１４２及びＣＤ８２を、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）または前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍または１０倍高いレベルで含む（ここでＣＤ４９Ｃ、ＣＤ９０、ＣＤ１４２及びＣＤ８２含量は、同じ実験条件下で測定し（例えば、フローサイトメトリーによって、例えば、ＦＡＣＳによって）、ここでは、同じ数及び／または量のエクソソームを各サンプルについて用いる）。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ４９Ｃ、ＣＤ９０、ＣＤ１４２及びＣＤ８２を、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）または前脂肪細胞の間葉系幹細胞由来のエクソソームよりも２倍〜３倍、３倍〜４倍、４倍〜５倍、５倍〜６倍、６倍〜７倍、７倍〜８倍、８倍〜９倍または９倍〜１０倍高いレベルで含む（ここでＣＤ４９Ｃ、ＣＤ９０、ＣＤ１４２及びＣＤ８２含量は、同じ実験条件下で測定し（例えば、フローサイトメトリーによって、例えば、ＦＡＣＳによって）、ここでは、同じ数及び／または量のエクソソームを各サンプルについて用いる）。
【０１２８】
本明細書に記載されるエクソソームのマーカーに加えて、本明細書において記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、さらに特定の他のエクソソームのマーカーを含んでもよい。例えば、特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、本明細書に記載の任意のマーカーの組み合わせに加えて、エクソソームの表面マーカーＦＬＯＴ１、ＡＬＩＸ、ＡＮＸＡ５、及びＴＳＧ１０１を含む。別の実施形態では、本明細書に開示されるのは、上述の表面マーカーの任意の組み合わせを含む、胎盤由来の接着細胞エクソソームの組成物である。
【０１２９】
５．１．１．２．ＭｉｃｒｏＲＮＡ
特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、１つ以上の核酸分子、例えば、１つ以上の非コードＲＮＡ分子を含む。特定の実施形態では、本明細書において提供される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）を含む。一般には、ｍｉＲＮＡは、広範な細胞機能を調節し、疾患及び代謝の調節にかかわる、１７〜２２ヌクレオチド（ｎｔ）の非コードＲＮＡである。ｍｉＲＮＡレベルを検出する方法は、当該分野で周知、例えば、リアルタイムＰＣＲ（ＲＴ−ＰＣＲ）、例えば、Ｔａｑｍａｎアッセイである。他の特定の実施形態では、胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲＮＡｓであって、ＲＴ−ＰＣＲに供され、そして対照のＲＮＡと比較された場合、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞中の同じｍｉＲＮＡよりも１．１、２、５、１０、１００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００、１１００または１２００倍高いレベルで含まれるか、または絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞中の同じｍｉＲＮＡよりも１．１〜２、２〜５、２〜１０、５〜１０、１０〜１００、１００〜５００、５００〜６００、６００〜７００、７００〜８００、８００〜９００、９００〜１０００、１０００〜１１００もしくは１１００〜１２００倍高いレベルで含まれる。
【０１３０】
特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、以下のｍｉＲＮＡのうち１、２、３、４またはそれ以上の検出可能なレベルを含む：ｍｉＲ−２１８−５ｐ、ｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−５６４、ｍｉＲ−１６−５ｐ、ｌｅｔ−７ａ、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−１２４−５ｐ、ｍｉＲ−２２３−３ｐ、ｍｉＲ−６３０、ｍｉＲ−２９６−５ｐ、ｌｅｔ−７ｂ−３ｐ及びｌｅｔ−７ｄ−３ｐ。一実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのｍｉＲ−２１８−５ｐを含む。別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのｍｉＲ−１３３ｂを含む。別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのｍｉＲ−４２２ａを含む。別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのｍｉＲ−５６４を含む。別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのｍｉＲ−１６−５ｐを含む。別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのｌｅｔ−７ａを含む。別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのｍｉＲ−９２を含む。別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのｍｉＲ−１４２−３ｐを含む。別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのｍｉＲ−４５１を含む。別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのｍｉＲ−１２４−５ｐを含む。別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのｍｉＲ−２２３−３ｐを含む。別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのｍｉＲ−６３０を含む。別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのｍｉＲ−２９６−５ｐを含む。別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのｌｅｔ−７ｂ−３ｐを含む。別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのｌｅｔ−７ｄ−３ｐを含む。
【０１３１】
一実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのｍｉＲ−２１８−５ｐを含み、かつさらにｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−５６４、ｍｉＲ−１６−５ｐ、ｌｅｔ−７ａ、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−１２４−５ｐ、ｍｉＲ−２２３−３ｐ、ｍｉＲ−６３０、ｍｉＲ−２９６−５ｐ、ｌｅｔ−７ｂ−３ｐ及びｌｅｔ−７ｄ−３ｐの群から選択される１つ以上の検出可能なレベルのｍｉＲＮＡを含む。
【０１３２】
別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのｍｉＲ−１３３を含み、かつさらにｍｉＲ−２１８−５ｐ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−５６４、ｍｉＲ−１６−５ｐ、ｌｅｔ−７ａ、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−１２４−５ｐ、ｍｉＲ−２２３−３ｐ、ｍｉＲ−６３０、ｍｉＲ−２９６−５ｐ、ｌｅｔ−７ｂ−３ｐ及びｌｅｔ−７ｄ−３ｐの群から選択される１つ以上の検出可能なレベルのｍｉＲＮＡを含む。
【０１３３】
別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのｍｉＲ−４２２ａを含み、かつさらにｍｉＲ−２１８−５ｐ、ｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−５６４、ｍｉＲ−１６−５ｐ、ｌｅｔ−７ａ、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−１２４−５ｐ、ｍｉＲ−２２３−３ｐ、ｍｉＲ−６３０、ｍｉＲ−２９６−５ｐ、ｌｅｔ−７ｂ−３ｐ及びｌｅｔ−７ｄ−３ｐの群から選択される１つ以上の検出可能なレベルのｍｉＲＮＡを含む。
【０１３４】
別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのｍｉＲ−５６４を含み、かつさらにｍｉＲ−２１８−５ｐ、ｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−１６−５ｐ、ｌｅｔ−７ａ、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−１２４−５ｐ、ｍｉＲ−２２３−３ｐ、ｍｉＲ−６３０、ｍｉＲ−２９６−５ｐ、ｌｅｔ−７ｂ−３ｐ及びｌｅｔ−７ｄ−３ｐの群から選択される１つ以上の検出可能なレベルのｍｉＲＮＡを含む。
【０１３５】
別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのｍｉＲ−１６−５ｐを含み、かつさらにｍｉＲ−２１８−５ｐ、ｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−５６４、ｌｅｔ−７ａ、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−１２４−５ｐ、ｍｉＲ−２２３−３ｐ、ｍｉＲ−６３０、ｍｉＲ−２９６−５ｐ、ｌｅｔ−７ｂ−３ｐ及びｌｅｔ−７ｄ−３ｐの群から選択される１つ以上の検出可能なレベルのｍｉＲＮＡを含む。
【０１３６】
別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのｌｅｔ−７ａを含み、かつさらにｍｉＲ−２１８−５ｐ、ｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−５６４、ｍｉＲ−１６−５ｐ、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−１２４−５ｐ、ｍｉＲ−２２３−３ｐ、ｍｉＲ−６３０、ｍｉＲ−２９６−５ｐ、ｌｅｔ−７ｂ−３ｐ及びｌｅｔ−７ｄ−３ｐの群から選択される１つ以上の検出可能なレベルのｍｉＲＮＡを含む。
【０１３７】
別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのｍｉＲ−９２を含み、かつさらにｍｉＲ−２１８−５ｐ、ｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−５６４、ｍｉＲ−１６−５ｐ、ｌｅｔ−７ａ、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−１２４−５ｐ、ｍｉＲ−２２３−３ｐ、ｍｉＲ−６３０、ｍｉＲ−２９６−５ｐ、ｌｅｔ−７ｂ−３ｐ及びｌｅｔ−７ｄ−３ｐの群から選択される１つ以上の検出可能なレベルのｍｉＲＮＡを含む。
【０１３８】
別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのｍｉＲ−１４２−３ｐを含み、かつさらにｍｉＲ−２１８−５ｐ、ｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−５６４、ｍｉＲ−１６−５ｐ、ｌｅｔ−７ａ、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−１２４−５ｐ、ｍｉＲ−２２３−３ｐ、ｍｉＲ−６３０、ｍｉＲ−２９６−５ｐ、ｌｅｔ−７ｂ−３ｐ及びｌｅｔ−７ｄ−３ｐの群から選択される１つ以上の検出可能なレベルのｍｉＲＮＡを含む。
【０１３９】
別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのｍｉＲ−４５１を含み、かつさらにｍｉＲ−２１８−５ｐ、ｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−５６４、ｍｉＲ−１６−５ｐ、ｌｅｔ−７ａ、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−１２４−５ｐ、ｍｉＲ−２２３−３ｐ、ｍｉＲ−６３０、ｍｉＲ−２９６−５ｐ、ｌｅｔ−７ｂ−３ｐ及びｌｅｔ−７ｄ−３ｐの群から選択される１つ以上の検出可能なレベルのｍｉＲＮＡを含む。
【０１４０】
別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのｍｉＲ−１２４−５ｐを含み、かつさらにｍｉＲ−２１８−５ｐ、ｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−５６４、ｍｉＲ−１６−５ｐ、ｌｅｔ−７ａ、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−２２３−３ｐ、ｍｉＲ−６３０、ｍｉＲ−２９６−５ｐ、ｌｅｔ−７ｂ−３ｐ及びｌｅｔ−７ｄ−３ｐの群から選択される１つ以上の検出可能なレベルのｍｉＲＮＡを含む。
【０１４１】
別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのｍｉＲ−２２３−３ｐを含み、かつさらにｍｉＲ−２１８−５ｐ、ｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−５６４、ｍｉＲ−１６−５ｐ、ｌｅｔ−７ａ、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−１２４−５ｐ、ｍｉＲ−６３０、ｍｉＲ−２９６−５ｐ、ｌｅｔ−７ｂ−３ｐ及びｌｅｔ−７ｄ−３ｐの群から選択される１つ以上の検出可能なレベルのｍｉＲＮＡを含む。
【０１４２】
別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのｍｉＲ−６３０を含み、かつさらにｍｉＲ−２１８−５ｐ、ｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−５６４、ｍｉＲ−１６−５ｐ、ｌｅｔ−７ａ、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−１２４−５ｐ、ｍｉＲ−２２３−３ｐ、ｍｉＲ−２９６−５ｐ、ｌｅｔ−７ｂ−３ｐ及びｌｅｔ−７ｄ−３ｐの群から選択される１つ以上の検出可能なレベルのｍｉＲＮＡを含む。
【０１４３】
別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのｍｉＲ−２９６−５ｐを含み、かつさらにｍｉＲ−２１８−５ｐ、ｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−５６４、ｍｉＲ−１６−５ｐ、ｌｅｔ−７ａ、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−１２４−５ｐ、ｍｉＲ−２２３−３ｐ、ｍｉＲ−６３０、ｌｅｔ−７ｂ−３ｐ及びｌｅｔ−７ｄ−３ｐの群から選択される１つ以上の検出可能なレベルのｍｉＲＮＡを含む。
【０１４４】
別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのｌｅｔ−７ｂ−３ｐを含み、かつさらにｍｉＲ−２１８−５ｐ、ｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−５６４、ｍｉＲ−１６−５ｐ、ｌｅｔ−７ａ、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−１２４−５ｐ、ｍｉＲ−２２３−３ｐ、ｍｉＲ−６３０、ｍｉＲ−２９６−５ｐ及びｌｅｔ−７ｄ−３ｐの群から選択される１つ以上の検出可能なレベルのｍｉＲＮＡを含む
【０１４５】
別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのｌｅｔ−７ｄ−３ｐを含み、かつさらにｍｉＲ−２１８−５ｐ、ｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−５６４、ｍｉＲ−１６−５ｐ、ｌｅｔ−７ａ、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−１２４−５ｐ、ｍｉＲ−２２３−３ｐ、ｍｉＲ−６３０、ｍｉＲ−２９６−５ｐ及びｌｅｔ−７ｂ−３ｐの群から選択される１つ以上の検出可能なレベルのｍｉＲＮＡを含む。
【０１４６】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲ−２１８−５ｐ、ｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−５６４、ｍｉＲ−１６−５ｐ、ｌｅｔ−７ａ、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−１２４−５ｐ、ｍｉＲ−２２３−３ｐ、ｍｉＲ−６３０、ｍｉＲ−２９６−５ｐ、ｌｅｔ−７ｂ−３ｐ及びｌｅｔ−７ｄ−３ｐを含む。
【０１４７】
特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、他の細胞（例えば、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞、例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）のエクソソームから、それらが含むｍｉＲＮＡに基づいて識別され得る。
【０１４８】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲ−１３３ｂを、エクソソーム及びそれが由来する細胞を同様の条件下で処理した場合、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）由来のエクソソームと比較したとき、少なくとも２倍高いレベルで含む。
【０１４９】
別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲ−４２２ａを、エクソソーム及びそれが由来する細胞を同様の条件によって処理した場合、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）由来のエクソソームと比較したとき、少なくとも２倍高いレベルで含む。
【０１５０】
別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲ−１６−５ｐを、エクソソーム及びそれが由来する細胞を同様の条件によって処理した場合、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）由来のエクソソームと比較したとき、少なくとも２倍高いレベルで含む。
【０１５１】
別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｌｅｔ−７ａを、エクソソーム及びそれが由来する細胞を同様の条件によって処理した場合、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）由来のエクソソームと比較したとき、少なくとも２倍高いレベルで含む。
【０１５２】
別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲ−９２を、エクソソーム及びそれが由来する細胞を同様の条件によって処理した場合、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）由来のエクソソームと比較したとき、少なくとも２倍高いレベルで含む。
【０１５３】
別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲ−１４２−３ｐを、エクソソーム及びそれが由来する細胞を同様の条件によって処理した場合、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）由来のエクソソームと比較したとき、少なくとも２倍高いレベルで含む。
【０１５４】
別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲ−４５１を、エクソソーム及びそれが由来する細胞を同様の条件によって処理した場合、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）由来のエクソソームと比較したとき、少なくとも２倍高いレベルで含む。
【０１５５】
別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲ−１２４−５ｐを、エクソソーム及びそれが由来する細胞を同様の条件によって処理した場合、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）由来のエクソソームと比較したとき、少なくとも２倍高いレベルで含む。
【０１５６】
別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲ−２２３−３ｐを、エクソソーム及びそれが由来する細胞を同様の条件によって処理した場合、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）由来のエクソソームと比較したとき、少なくとも２倍高いレベルで含む。
【０１５７】
別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲ−６３０を、エクソソーム及びそれが由来する細胞を同様の条件によって処理した場合、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）由来のエクソソームと比較したとき、少なくとも２倍高いレベルで含む。
【０１５８】
別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲ−２９６−５ｐを、エクソソーム及びそれが由来する細胞を同様の条件によって処理した場合、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）由来のエクソソームと比較したとき、少なくとも２倍高いレベルで含む。
【０１５９】
別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｌｅｔ−７ｂ−３ｐを、エクソソーム及びそれが由来する細胞を同様の条件によって処理した場合、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）由来のエクソソームと比較したとき、少なくとも２倍高いレベルで含む。
【０１６０】
別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｌｅｔ−７ｄ−３ｐを、エクソソーム及びそれが由来する細胞を同様の条件によって処理した場合、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）由来のエクソソームと比較したとき、少なくとも２倍高いレベルで含む。
【０１６１】
他の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲ−１３３ｂ、さらにｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−１６−５ｐ、ｌｅｔ−７ａ、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−２２３−３ｐ、ｍｉＲ−６３０、ｍｉＲ−２９６−５ｐ、ｌｅｔ−７ｂ−３ｐ及びｌｅｔ−７ｄ−３ｐの群から選択される１つ以上のｍｉＲＮＡを、エクソソーム及びそれが由来する細胞を同様の条件によって処理した場合、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）由来のエクソソームと比較したとき、少なくとも２倍高いレベルで含む。
【０１６２】
一実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲ−４２２ａ、さらにｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−１６−５ｐ、ｌｅｔ−７ａ、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−２２３−３ｐ、ｍｉＲ−６３０、ｍｉＲ−２９６−５ｐ、ｌｅｔ−７ｂ−３ｐ及びｌｅｔ−７ｄ−３ｐの群から選択される１つ以上のｍｉＲＮＡを、エクソソーム及びそれが由来する細胞を同様の条件によって処理した場合、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）由来のエクソソームと比較したとき、少なくとも２倍高いレベルで含む。
【０１６３】
一実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲ−１６−５ｐ、さらにｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｌｅｔ−７ａ、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−２２３−３ｐ、ｍｉＲ−６３０、ｍｉＲ−２９６−５ｐ、ｌｅｔ−７ｂ−３ｐ及びｌｅｔ−７ｄ−３ｐの群から選択される１つ以上のｍｉＲＮＡを、エクソソーム及びそれが由来する細胞を同様の条件によって処理した場合、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）由来のエクソソームと比較したとき、少なくとも２倍高いレベルで含む。
【０１６４】
一実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｌｅｔ−７ａ、さらにｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−１６−５ｐ、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−２２３−３ｐ、ｍｉＲ−６３０、ｍｉＲ−２９６−５ｐ、ｌｅｔ−７ｂ−３ｐ及びｌｅｔ−７ｄ−３ｐの群から選択される１つ以上のｍｉＲＮＡを、エクソソーム及びそれが由来する細胞を同様の条件によって処理した場合、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）由来のエクソソームと比較したとき、少なくとも２倍高いレベルで含む。
【０１６５】
一実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲ−９２、さらにｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−１６−５ｐ、ｌｅｔ−７ａ、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−２２３−３ｐ、ｍｉＲ−６３０、ｍｉＲ−２９６−５ｐ、ｌｅｔ−７ｂ−３ｐ及びｌｅｔ−７ｄ−３ｐの群から選択される１つ以上のｍｉＲＮＡを、エクソソーム及びそれが由来する細胞を同様の条件によって処理した場合、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）由来のエクソソームと比較したとき、少なくとも２倍高いレベルで含む。
【０１６６】
一実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、さらにｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−１６−５ｐ、ｌｅｔ−７ａ、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−２２３−３ｐ、ｍｉＲ−６３０、ｍｉＲ−２９６−５ｐ、ｌｅｔ−７ｂ−３ｐ及びｌｅｔ−７ｄ−３ｐの群から選択される１つ以上のｍｉＲＮＡを、エクソソーム及びそれが由来する細胞を同様の条件によって処理した場合、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）由来のエクソソームと比較したとき、少なくとも２倍高いレベルで含む。
【０１６７】
一実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲ−４５１、さらにｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−１６−５ｐ、ｌｅｔ−７ａ、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−２２３−３ｐ、ｍｉＲ−６３０、ｍｉＲ−２９６−５ｐ、ｌｅｔ−７ｂ−３ｐ及びｌｅｔ−７ｄ−３ｐの群から選択される１つ以上のｍｉＲＮＡを、エクソソーム及びそれが由来する細胞を同様の条件によって処理した場合、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）由来のエクソソームと比較したとき、少なくとも２倍高いレベルで含む。
【０１６８】
一実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲ−２２３−３ｐ、さらにｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−１６−５ｐ、ｌｅｔ−７ａ、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−６３０、ｍｉＲ−２９６−５ｐ、ｌｅｔ−７ｂ−３ｐ及びｌｅｔ−７ｄ−３ｐの群から選択される１つ以上のｍｉＲＮＡを、エクソソーム及びそれが由来する細胞を同様の条件によって処理した場合、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）由来のエクソソームと比較したとき、少なくとも２倍高いレベルで含む。
【０１６９】
一実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲ−６３０、さらにｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−１６−５ｐ、ｌｅｔ−７ａ、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−２２３−３ｐ、ｍｉＲ−２９６−５ｐ、ｌｅｔ−７ｂ−３ｐ及びｌｅｔ−７ｄ−３ｐの群から選択される１つ以上のｍｉＲＮＡを、エクソソーム及びそれが由来する細胞を同様の条件によって処理した場合、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）由来のエクソソームと比較したとき、少なくとも２倍高いレベルで含む。
【０１７０】
一実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲ−２９６−５ｐ、さらにｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−１６−５ｐ、ｌｅｔ−７ａ、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−２２３−３ｐ、ｍｉＲ−６３０、ｌｅｔ−７ｂ−３ｐ及びｌｅｔ−７ｄ−３ｐの群から選択される１つ以上のｍｉＲＮＡを、エクソソーム及びそれが由来する細胞を同様の条件によって処理した場合、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）由来のエクソソームと比較したとき、少なくとも２倍高いレベルで含む。
【０１７１】
一実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｌｅｔ−７ｂ−３ｐ、さらにｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−１６−５ｐ、ｌｅｔ−７ａ、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−２２３−３ｐ、ｍｉＲ−６３０、ｍｉＲ−２９６−５ｐ及びｌｅｔ−７ｄ−３ｐの群から選択される１つ以上のｍｉＲＮＡを、エクソソーム及びそれが由来する細胞を同様の条件によって処理した場合、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）由来のエクソソームと比較したとき、少なくとも２倍高いレベルで含む。
【０１７２】
一実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｌｅｔ−７ｄ−３ｐ、さらにｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−１６−５ｐ、ｌｅｔ−７ａ、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−２２３−３ｐ、ｍｉＲ−６３０、ｍｉＲ−２９６−５ｐ及びｌｅｔ−７ｂ−３ｐの群から選択される１つ以上のｍｉＲＮＡを、エクソソーム及びそれが由来する細胞を同様の条件によって処理した場合、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）由来のエクソソームと比較したとき、少なくとも２倍高いレベルで含む。
【０１７３】
別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ｍｉＲ−１３３ｂ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−１６−５ｐ、ｌｅｔ−７ａ、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−２２３−３ｐ、ｍｉＲ−６３０、ｍｉＲ−２９６−５ｐ、ｌｅｔ−７ｂ−３ｐ及びｌｅｔ−７ｄ−３ｐ、または前述のいずれかの組み合わせを、エクソソーム及びそれが由来する細胞を同様の条件によって処理した場合、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（例えば、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞）由来のエクソソームと比較したとき、少なくとも２倍高いレベルで含む。
【０１７４】
５．１．１．３．血管形成タンパク質
特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、血管形成を促進する１つ以上のタンパク質を含む。例えば、ＥＬＩＳＡベースの方法、例えば、ＡｎｇｉｏＳｅｃｒｅｔｏｍｅ  Ｍｉｌｌｉｐｌｅｘ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）を用いて、血管形成タンパク質レベルを検出する方法は、当該分野で周知である。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームに関連する血管形成タンパク質の存在及び相対レベルは、以下のセクション６．２．４．３によって決定される。
【０１７５】
一実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、エンドグリン、レプチン、アンジオポイエチン−２、Ｇ−ＣＳＦ、ホリスタチン、ＦＧＦ−２、ＨＧＦ、ＶＥＧＦ−Ａ、ＩＬ−８及びＥＧＦの群から選択される１つ以上の血管形成タンパク質を含む。別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、エンドグリン、レプチン、アンジオポイエチン−２、Ｇ−ＣＳＦ、ホリスタチン、ＦＧＦ−２、ＨＧＦ、ＶＥＧＦ−Ａ、ＩＬ−８及びＥＧＦの群から選択される１つ以上の血管形成タンパク質を、エクソソームを欠いている培養培地よりも高いレベルで含む。別の実施形態では、当該血管形成タンパク質は、１０ｐｇ／ｍｌ、５０ｐｇ／ｍｌ、１００ｐｇ／ｍｌ、５００ｐｇ／ｍｌ、１，０００ｐｇ／ｍｌ、２，０００ｐｇ／ｍｌ、４，０００ｐｇ／ｍｌ、６，０００ｐｇ／ｍｌ、８，０００ｐｇ／ｍｌ、１０，０００ｐｇ／ｍｌ、１２，０００ｐｇ／ｍｌ、１４，０００ｐｇ／ｍｌ、１６，０００ｐｇ／ｍｌ、１８，０００ｐｇ／ｍｌ、２０，０００ｐｇ／ｍｌ、２５，０００ｐｇ／ｍｌ、３０，０００ｐｇ／ｍｌ、３５，０００ｐｇ／ｍｌ、４０，０００ｐｇ／ｍｌ、４５，０００ｐｇ／ｍｌ、もしくは５０，０００ｐｇ／ｍｌまたはそれ以上の濃度で培養培地中に存在する。別の実施形態では、当該血管形成タンパク質は、１０ｐｇ／ｍｌ〜５０ｐｇ／ｍｌ、５０ｐｇ／ｍｌ〜１００ｐｇ／ｍｌ、１００ｐｇ／ｍｌ〜５００ｐｇ／ｍｌ、５００ｐｇ／ｍｌ〜１，０００ｐｇ／ｍｌ、１，０００ｐｇ／ｍｌ〜２，０００ｐｇ／ｍｌ、２，０００ｐｇ／ｍｌ〜４，０００ｐｇ／ｍｌ、４，０００ｐｇ／ｍｌ〜６，０００ｐｇ／ｍｌ、６，０００ｐｇ／ｍｌ〜８，０００ｐｇ／ｍｌ、８，０００ｐｇ／ｍｌ〜１０，０００ｐｇ／ｍｌ、１０，０００ｐｇ／ｍｌ、１２，０００ｐｇ／ｍｌ、１２，０００ｐｇ／ｍｌ〜１４，０００ｐｇ／ｍｌ、１４，０００ｐｇ／ｍｌ〜１６，０００ｐｇ／ｍｌ、１６，０００ｐｇ／ｍｌ〜１８，０００ｐｇ／ｍｌ、１８，０００ｐｇ／ｍｌ〜２０，０００ｐｇ／ｍｌ、２０，０００ｐｇ／ｍｌ〜２５，０００ｐｇ／ｍｌ、２５，０００ｐｇ／ｍｌ〜３０，０００ｐｇ／ｍｌ、３０，０００ｐｇ／ｍｌ〜３５，０００ｐｇ／ｍｌ、３５，０００ｐｇ／ｍｌ〜４０，０００ｐｇ／ｍｌ、４０，０００ｐｇ／ｍｌ、４５，０００ｐｇ／ｍｌまたは４５，０００ｐｇ／ｍｌ〜５０，０００ｐｇ／ｍｌの濃度で培養培地中に存在する。
【０１７６】
５．１．２  エクソソームの大きさ及び識別特徴
特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、約５０ｎｍ〜１５０ｎｍの直径である。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、当該分野で公知の方法（例えば、電子顕微鏡及びＮａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ  Ｔｒａｃｋｉｎｇ  Ａｓｓａｙ）によって決定した場合、約７０ｎｍ〜１５０ｎｍの直径、約１００ｎｍ〜１５０ｎｍの直径、または約１３０ｎｍ〜１４５ｎｍの直径である。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、細胞細片及び／または非細胞細片から、それらの大きさに基づいて識別できる。特定の実施形態では、本明細書に記載のエクソソームは、それらの形状によって識別可能であり、例えば、本明細書に記載されるエクソソームは、当該分野で公知の画像化技術（例えば、電子顕微鏡）によって見れば、カップ形である。
【０１７７】
特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、それらの分子組成（例えば、表面マーカータンパク質またはｍｉＲＮＡ分子）に基づいて特定され得る。セクション５．１．１．を参照のこと。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、それらの分子プロファイル（例えば、それらが含む表面マーカータンパク質及び／またはｍｉＲＮＡ分子）に基づいて、他のエクソソーム（すなわち、非胎盤由来の接着細胞エクソソーム）から識別できる。セクション５．１．１．を参照のこと。
【０１７８】
５．１．３．胎盤由来接着細胞
本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、胎盤由来の接着細胞（例えば、それらの開示が全体として参照によって本明細書に援用される米国特許第７，４６８，２７６号；同第８，０５７，７８８号及び同第８，２０２，７０３号に開示される胎盤由来の接着細胞）に由来する。
【０１７９】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ３４−、ＣＤ１０＋、ＣＤ１０５＋及びＣＤ２００＋の胎盤由来の接着細胞に由来する。
【０１８０】
別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは骨髄由来の間葉系幹細胞よりも少なくとも２倍高いレベルで１つ以上の遺伝子を発現する胎盤由来の接着細胞に由来し、ここでこの遺伝子は、ＡＣＴＧ２、ＡＤＡＲＢ１、ＡＭＩＧＯ２、ＡＲＴＳ−１、Ｂ４ＧＡＬＴ６、ＢＣＨＥ、Ｃ１１ｏｒｆ９、ＣＤ２００、ＣＯＬ４Ａ１、ＣＯＬ４Ａ２、ＣＰＡ４、ＤＭＤ、ＤＳＣ３、ＤＳＧ２、ＥＬＯＶＬ２、Ｆ２ＲＬ１、ＦＩＪ１０７８１、ＧＡＴＡ６、ＧＰＲ１２６、ＧＰＲＣ５Ｂ、ＨＬＡ−Ｇ、ＩＣＡＭ１、ＩＥＲ３、ＩＧＦＢＰ７、ＩＬ１Ａ、ＩＬ６、ＩＬ１８、ＫＲＴ１８、ＫＲＴ８、ＬＩＰＧ、ＬＲＡＰ、ＭＡＴＮ２、ＭＥＳＴ、ＮＦＥ２Ｌ３、ＮＵＡＫ１、ＰＣＤＨ７、ＰＤＬＩＭ３、ＰＪＰ２、ＲＴＮ１、ＳＥＲＰＩＮＢ９、ＳＴ３ＧＡＬ６、ＳＴ６ＧＡＬＮＡＣ５、ＳＬＣ１２Ａ８、ＴＣＦ２１、ＴＧＦＢ２、ＶＴＮ、及びＺＣ３Ｈ１２Ａからなる群より選択される。別の実施形態では、本明細書に記載されるエクソソームが由来する胎盤由来の接着細胞は、１つ以上の遺伝子を、骨髄由来の間葉系幹細胞よりも少なくとも２倍高いレベルで発現し、ここで当該１つ以上の遺伝子は、ＬＯＶＬ２、ＳＴ３ＧＡＬ６、ＳＴ６ＧＡＬＮＡＣ５、及び／またはＳＬＣ１２Ａ８のうちの１つ以上である。別の実施形態では、本明細書において提供されるエクソソームが由来する胎盤由来の接着細胞は、１つ以上の遺伝子を、骨髄由来の間葉系幹細胞よりも少なくとも２倍高いレベルで発現し、ここで当該１つ以上の遺伝子は、ＣＰＡ４、ＴＣＦ２１、ＶＴＮ、Ｂ４ＧＡＬＴ６、ＦＬＪ１０７８１、及び／またはＮＵＡＫ１のうちの１つ以上である。
【０１８１】
特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、培養物中で増殖される胎盤由来の接着細胞、例えば、組織培養基板に結合された胎盤由来の接着細胞から、または生きている生物体（例えば、哺乳動物、例えば、ヒト）に投与された胎盤由来の接着細胞から得られる。特定の実施形態では、細胞を、血清の存在下で培養する。別の特定の実施形態では、細胞を、血清の非存在下で培養する。
【０１８２】
一実施形態では、本明細書において提供される胎盤由来の接着細胞エクソソームが由来する胎盤由来の接着細胞は、実質的にもともと胎児由来であり、例えば、胎盤由来の接着細胞は、約または少なくとも９０％、９５％、９９％もしくは１００％がもともと胎児由来である。別の実施形態では、本明細書において提供される胎盤由来の接着細胞エクソソームが由来する胎盤由来の接着細胞は、混合物に由来し、例えば、胎盤由来の接着細胞は、胎児及び母親の両方に由来する。
【０１８３】
特定の実施形態では、本明細書において提供される胎盤由来の接着細胞エクソソームが由来する胎盤由来の接着細胞は、胎盤由来の接着細胞由来のエクソソームの単離の前に継代された。特定の実施形態では、本明細書において提供される胎盤由来の接着細胞エクソソームが由来する胎盤由来の接着細胞は、胎盤由来の接着細胞由来のエクソソームの単離の前に、約または少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１６、１８もしくは２０回継代された。特定の実施形態では、本明細書において提供されるエクソソームは、６回継代の間インビトロで培養された胎盤由来の接着細胞から収集される。特定の実施形態では、本明細書において提供されるエクソソームは、６継代で胎盤由来の接着細胞から収集され、７継代で培養上清から収集される。
【０１８４】
特定の実施形態では、本明細書において提供される胎盤由来の接着細胞エクソソームが由来する胎盤由来の接着細胞は、胎盤由来の接着細胞由来のエクソソームの単離の前に増殖された。特定の実施形態では、本明細書において提供される胎盤由来の接着細胞エクソソームが由来する胎盤由来の接着細胞は、胎盤由来の接着細胞由来のエクソソームの単離の前に、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８または４０集団倍加以上に増殖された。
【０１８５】
ある特定の実施形態では、本明細書において提供される胎盤由来の接着細胞エクソソームが由来する胎盤由来の接着細胞は、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞ではないか、及び／または絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞を含まず、例えば、本明細書において提供される胎盤由来の接着細胞エクソソームが由来する胎盤由来の接着細胞は、Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１に記載される絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞ではない。別の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞が由来する供給源は、絨毛膜絨毛を含まない。
【０１８６】
５．２．胎盤由来接着細胞エクソソームを単離する方法
５．２．１  培地からエクソソームを得る方法
本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、セクション５．１．３．に記載される例えば、胎盤由来の接着細胞から生成され得る。特定の実施形態では、このような胎盤由来の接着細胞の培養は、培養培地中へのエクソソームの堆積を生じ、ここで当該エクソソームは、本明細書に記載され、かつ当該分野で公知の技術を用いて培養培地から単離され得る。本明細書において記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームの単離は、サイズ濾過を用い、密度依存遠心分離を用い、かつ当該分野で公知の他の方法を用いることによって、胎盤由来の接着細胞エクソソームと会合する特定の表面マーカー分子に基づいて達成され得る。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームの単離は、培養培地中に存在する混入の細胞性物質及び非細胞性物質からエクソソーム集団を実質的に精製する２つ以上の技術を組み合わせてもよい。
【０１８７】
５．２．１．１．超遠心分離によるエクソソームの単離
ある特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、超遠心分離を用いて細胞培養培地の他の成分から分離される。特定の実施形態では、胎盤由来の接着細胞の培養物から収集された培養培地を単離して、培養培地中に存在する細胞性物質及び非細胞性物質から胎盤由来の接着細胞エクソソームを分離するのに十分な時間、高速（例えば、１００，０００×ｇ）で遠心分離する。特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、胎盤由来の接着細胞エクソソームの単離のために培養培地を収集する前に、血清（例えば、ウシ胎仔血清）の存在下で培養される。別の特定の実施形態では、この胎盤由来の接着細胞は、胎盤由来の接着細胞エクソソームの単離のために培養培地を収集する前に、血清（例えば、ウシ胎仔血清）の非存在下で培養される。一実施形態では、胎盤由来の接着細胞の培養物から収集された培養培地は、下の実施例１の方法によって単離されて遠心分離される。
【０１８８】
５．２．１．２．蛍光活性化細胞分取によるエクソソームの単離
本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、１つ以上の表面マーカータンパク質を含有することに基づいて、及び／または１つ以上の表面マーカータンパク質を欠くことに基づいて単離及び／または精製され得る。具体的には、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、非胎盤由来の接着細胞エクソソーム、または胎盤由来の接着細胞エクソソーム（目的の表面マーカーを含まない）から実質的に単離され得る。例えば、特定の組み合わせの表面マーカーを含む胎盤由来の接着細胞エクソソームの１つの小集団は、表面マーカーの固有のまたは実質的に異なる組み合わせを含むエクソソーム（例えば、胎盤由来の接着細胞エクソソーム）の１つ以上の追加的な集団から単離されてもよい。従って、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、本明細書に記載される表面マーカーの任意の組み合わせに基づいて単離されても、及び／または精製されてもよい。セクション５．１．１．を参照のこと。
【０１８９】
一実施形態では、蛍光活性化細胞分取（ＦＡＣＳ）を使用して、エクソソームに存在する細胞表面マーカーに特異的な抗体を用いて、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームを分離するか、及び／または精製する。細胞及びエクソソームを単離するためにＦＡＣＳを用いる方法は、当該分野で公知である。
【０１９０】
一実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームを精製／単離する方法は、本明細書に記載されるエクソソームの集団と固体基板（例えば、ラテックスビーズ）とを、当該エクソソームと当該基板との間の複合体の作製（例えば、パッシブ吸着反応による）を可能にするのに十分な時間及び条件下で接触させるステップを包含する。別の特定の実施形態では、当該エクソソームと当該基板との間の複合体の作製（例えば、パッシブ吸着反応による）を可能にするのに十分な時間及び条件下で、固体基板（例えば、ラテックスビーズ）と接触されたエクソソームの集団を、本明細書に記載される方法（例えば、本明細書に記載されるＦＡＣＳ法）によって分離する。
【０１９１】
別の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、２部分の「サンドイッチ」検出技術を用いて、精製されるか、及び／または単離されてもよい。特定の実施形態では、部分的に精製されるか、または精製されていない集団中のエクソソームは、最初に基板、例えば、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームの表面上に存在するタンパク質に特異的な抗体でコーティングされているビーズの集団（例えば、ラテックスビーズの集団）と接触される。特定の実施形態では、ＣＤ６３を特異的に認識する抗体を用いて、このような方法を用いて、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームを単離する。別の特定の実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩ分子ファミリーのメンバーを特異的に認識する抗体を用いて、このような方法を用いて本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームを単離する。最初の接触ステップの後、基板に結合されたエクソソームを、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームの表面に存在する表面マーカータンパク質に特異的な第二の分子によって接触させる。特定の実施形態では、この表面分子は、テトラスパニンであり、かつ当該抗体は、蛍光標識された抗体である。別の特定の実施形態では、この表面分子は、ＦＬＯＴ１、ＡＬＩＸ、ＡＮＸＡ５、ＴＳＧ１０１、アネキシンＶ、ＣＤ３、ＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１３、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ２９、ＣＤ３３、ＣＤ４４、ＣＤ４６、ＣＤ４７、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６３、ＣＤ７３、ＣＤ８１、ＣＤ９０、ＣＤ９８、ＣＤ１０５、ＣＤ１４２、ＣＤ１４７、ＣＤ１５１、ＣＤ１６４、ＣＤ１６６、ＣＤ１９２、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ３４、ＣＤ４９ｄまたはＣＤ２００のうちのいずれか１つである。
【０１９２】
５．２．１．３．サイズ排除クロマトグラフィーを用いるエクソソームの単離
本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、サイログロブリン二量体、サイログロブリン単量体、免疫グロブリン（例えば、ＩｇＧ）、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、ミオグロブリン、及びウラシルを含む、培養培地中に存在する共通の混入物から単離、及び／または精製され得る（セクション６．３を参照のこと）。一実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームを、サンプル中で、共通の培養培地混入物（例えば、サイログロブリン、ＩｇＧ、ＢＳＡ、ミオグロブリンまたはウラシル）から、０．５ｍＬ／分の流速でＨＰＬＣで当該サンプルを流したとき、画分収集の開始後、１０分〜１１分または１１分〜１２分で収集した画分中で、サイズ排除カラム（例えば、ＴＳＫ  Ｇｕａｒｄ  ＳＷＸＬカラム）によって、識別する。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、当該サンプルを０．５ｍＬ／分の流速でＨＰＬＣで流した後、サイズ排除カラム（例えば、ＴＳＫ  Ｇｕａｒｄ  ＳＷＸＬカラム）から収集したサンプルの最初の検出可能なピーク中に溶出する。
【０１９３】
エクソソームの単離は、サイズ、例えば、約５０〜１５０ｎｍの直径に基づいてもよい。従って、エクソソームのサイズによって、サイズ排除クロマトグラフィーと組み合わせた高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）などの技術を使用して、実質的に純粋なエクソソームの集団を単離すること、及び／または単離されるエクソソーム集団の純度を決定することが可能になる。具体的には、本明細書に記載される方法の１つによって精製されるか及び／または単離されるエクソソームを、ＨＰＬＣによって引き続いて精製して、混入している高分子及び他の望ましくない混入物を除去してもよい。ＨＰＬＣ及びサイズ排除クロマトグラフィーを用いて、分子の混合された集団を分離する方法は、当該分野で周知であり、かつこれは半多孔性基板及びイオン／ｐＨ勾配に依拠して、混合された集団の種々の成分を示差的に分離する。
【０１９４】
一実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソーム（例えば、培養培地から以前に単離されているエクソソーム）は、ＨＰＬＣ（例えば、Ａｇｉｌｅｎｔ  １２００  Ｓｅｒｉｅｓ  ＬＣシステムを用いる）を含む方法を用いてさらに精製される。特定の実施形態では、当該方法はさらに、サイズ排除クロマトグラフィーカラム（例えば、ＴＳＫ  Ｇｕａｒｄ  ＳＷＸＬ及び／またはＴＳＫゲルＧ４０００，Ｔｏｓｏｈ  Ｃｏｒｐ．）及び緩衝液（例えば、２０ｍＭのＫ２ＰＯ４、１５０ｍＭのＮａＣｌ、ｐＨ７．２）を、固定流速（例えば、０．５ｍｌ／分）で用いるステップを包含する。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、５０〜１５０ｎｍの直径を有する。
【０１９５】
５．２．２．インビボの抗体捕獲
特定の実施形態では、本明細書において記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、本明細書において記載される胎盤由来の接着細胞または胎盤由来の接着細胞のエクソソームの導入後に、被験体（例えば、マウスまたはヒト）から単離される。一実施形態では、被験体（例えば、マウス）に、本明細書に記載されるエクソソームに含まれるか、またはその上にあるタンパク質に対して特異的な抗体を注射し、ここでこのような抗体は、第二の高親和性分子（例えば、ビオチン）に結合される。当該被験体（例えば、マウス）にはさらに、本明細書に記載の胎盤由来の接着細胞及び／または単離される胎盤由来の接着細胞を注射する（例えば、静脈内注射、腹腔内注射または筋肉内注射）。当該胎盤由来の接着細胞がエクソソームを生成するために十分な時間の後、この被験体（例えば、マウス）由来の血液を単離し、これには、本明細書に記載のような胎盤由来の接着細胞エクソソーム及びエクソソームタンパク質に特異的な抗体を含む複合体を含んでいる。当該抗体エクソソーム複合体は、前記抗体に結合された第二の高親和性分子（例えば、ビオチン）に特異的である基質（例えば、ストレプトアビジン）を含むことによって精製してもよく、得られた抗体−エクソソーム複合体は、本明細書に記載の任意の方法によってさらに精製してもよい。
【０１９６】
５．２．３．定量
本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞培養物から単離されたエクソソームを定量して、総収率を決定してもよい。エクソソーム収率を定量する方法は、当該分野で公知であり、かつこれには、Ｂｒａｄｆｏｒｄアッセイ、ＢＣＡアッセイ、分光光度法（例えば、ＮａｎｏＤｒｏｐ分光光度計を用いる）、直接酵素連結免疫吸着アッセイ（例えば、ＣＤ６３／ＣＤ９／ＣＤ８１  ＥｘｏＥＬＩＳＡ（Ｓｙｓｔｅｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ））、画像化技術、例えば、Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ  Ｔｒａｃｋｉｎｇ  Ａｎａｌｙｓｉｓ（例えば、Ｎａｎｏｓｉｇｈｔ  ＬＭ１０（Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）または電気的インピーダンスベースの測定、例えば、ｑＮａｎｏ（ＩＺＯＮ））が挙げられる。これらの方法によれば、エクソソームの収率は、単離された材料の総量（例えば、１日あたり１細胞あたりに単離されたエクソソーム材料の質量）として、または規定容積の培養培地中の個々の粒子の数（例えば、１ｍＬの培養培地あたりのエクソソーム粒子）として決定してもよい。
【０１９７】
５．２．４．収率
本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、本明細書に記載の方法にしたがって単離してもよいし、それらの収率は、定量されてもよい。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、１リットルの培養培地（例えば、血清の有無の培養培地）あたり約０．５〜５．０ｍｇの濃度で単離される。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、１リットルの培養培地（例えば、血清を含有する培養培地）あたり約２〜３ｍｇの濃度で単離される。別の特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、１リットルの培養培地（例えば、血清を欠いている培養培地）あたり約０．５〜１．５ｍｇの濃度で単離される。
【０１９８】
５．２．５．貯蔵及び保存
本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、長期保管を可能にする条件、またはエクソソームの分解を阻害する条件に置いて保存してもよい。
【０１９９】
特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、適切な温度で緩衝化剤を含む組成物中で上記の方法による収集後に保管され得る。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、例えば、約−２０℃または約−８０℃で凍結保管される。
【０２００】
特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、例えば、小さい容器、例えば、アンプル（例えば、２ｍＬのバイアル）中に凍結保存してもよい。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、約０．１ｍｇ／ｍＬ〜約１０ｍｇ／ｍＬの濃度で凍結保存される。
【０２０１】
特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、約−８０℃〜約−１８０℃の温度で凍結保存される。凍結保存されたエクソソームを、使用のために解凍する前に液体窒素に移してもよい。いくつかの実施形態では、例えば、アンプルが一旦約−９０℃に達すれば、それらを液体窒素保管領域に移す。凍結保存はまた、制御速度の冷凍庫を用いて行ってもよい。凍結保存されたエクソソームは、使用前に約２５℃〜約４０℃の温度で解凍してもよい。
【０２０２】
特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームは、短期間の間、約４℃〜約２０℃の温度で保管される（例えば、２週間未満）。
【０２０３】
５．３．組成物
本明細書にさらに提供されるのは、組成物、例えば、本明細書において提供される胎盤由来の接着細胞エクソソームを含む、医薬組成物である。例えば、セクション５．１．を参照のこと。本明細書に記載される組成物は、エクソソームでの処置が有益である被験体（例えば、ヒト被験体）における特定の疾患及び障害の処置に有用である。セクション５．４．１．を参照のこと。
【０２０４】
特定の実施形態では、本明細書において提供される胎盤由来の接着細胞エクソソームを含むことに加えて、本明細書に記載される組成物（例えば、医薬組成物）は、薬学的に許容される担体を含む。本明細書において用いる場合、「薬学的に許容される」という用語は、動物における、及びさらに具体的には、ヒトにおける使用のための、連邦政府の規制機関もしくは合衆国政府によって承認されるか、米国薬局方、または他の一般に認識される薬局方に列挙されることを意味する。薬学的に許容される担体の文脈で、本明細書で用いられる「担体」という用語は、薬学的組成物とともに投与される、希釈液、アジュバント、賦形剤またはビヒクルを指す。生理食塩水溶液及びデキストロース及びグリセロールの水溶液をまた、特に注射可能溶液のための液体担体として使用してもよい。適切な賦形剤としては、デンプン、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、モルト、コメ、小麦粉、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、モノステアリン酸グリセロール、タルク、塩化ナトリウム、脱脂粉乳、グリセロール、プロピレン、グリコール、水、エタノールなどが挙げられる。適切な医薬的担体の例は、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」に、ＪＰ  ＲｅｍｉｎｇｔｏｎおよびＡＲ  Ｇｅｎｎａｒｏが、１９９０，第１８版に記載している。
【０２０５】
特定の実施形態では、本明細書に記載される組成物はさらに、１つ以上の緩衝液、例えば、生理食塩水、リン酸塩緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）、ダルベッコのＰＢＳ（ＤＰＢＳ）、及び／またはクロースリン酸塩グルタミン酸塩緩衝液を含む。他の実施形態では、本明細書に記載される組成物は、緩衝液を含まない。特定の実施形態では、本明細書に記載される組成物はさらにプラズマライトを含む。
【０２０６】
特定の実施形態では、本明細書に記載される組成物はさらに、１つ以上の塩、例えば、塩化ナトリウム、塩化カルシウム、リン酸ナトリウム、グルタミン酸ナトリウム（ｍｏｎｏｓｏｄｉｕｍ  ｇｌｕｔａｍａｔｅ）、及びアルミニウム塩（例えば、水酸化アルミニウム、リン酸アルミニウム、ミョウバン（硫酸アルミニウムカリウム）、またはこのようなアルミニウム塩の混合物）を含む。他の実施形態では、本明細書に記載される組成物は、塩を含まない。
【０２０７】
本明細書に記載される組成物は、投与のための指示と一緒に容器、パックまたは分配器中に含まれてもよい。
【０２０８】
本明細書に記載される組成物は、使用前に保管されてもよく、例えば、この組成物は、凍結保管されてもよいし（例えば、約−２０℃または約−８０℃で）；凍結された条件（例えば、約４℃）で保管されてもよいし；または室温で保管されてもよい。
【０２０９】
５．３．１．製剤及び投与経路
疾患または病態の処置及び／または予防における治療用途に有効である胎盤由来の接着細胞エクソソーム（セクション５．１を参照のこと）または本明細書に記載される組成物（セクション５．３を参照のこと）の量は、疾患の性質に依存し、かつ標準的な臨床技術によって決定できる。被験体に投与すべき、胎盤由来の接着細胞エクソソーム、またはその組成物の正確な投与量はまた、投与の経路及び処置されるべき疾患または病態の重篤性に依存しており、かつ施術者及び各々の被験者の環境の判定によって決定すべきである。例えば、有効な投薬量は、投与の手段、標的部位、患者の生理学的状態（年齢、体重、及び健康を含む）、患者がヒトであるか動物であるか、投与される他の医薬、ならびに処置が予防的であるかまたは治療的であるか次第で変化し得る。処置投薬量は、必要に応じて、安全性及び有効性を最適化するために滴定される。
【０２１０】
本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソーム（セクション５．１を参照のこと）、またはその組成物（セクション５．３を参照のこと）の量は、当該分野で公知の種々の経路を介して行ってもよい。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソーム、またはその組成物は、局所（ｌｏｃａｌ）投与、全身的投与、皮下投与、非経口投与、静脈内投与、筋肉内投与、局所（ｔｏｐｉｃａｌ）投与、経口投与、皮内投与、経皮投与、または鼻腔内投与によって投与される。特定の実施形態では、当該投与は、静脈内注射を介する。特定の実施形態では、当該投与は、皮下注射を介する。特定の実施形態では、当該投与は、局所である。別の特定の実施形態では、胎盤由来の接着細胞エクソソーム、またはその組成物は、細胞外基質を含む製剤中で投与される。別の特定の実施形態では、胎盤由来の接着細胞エクソソーム、またはその組成物は、１つ以上の追加的な送達デバイス、例えば、ステントと組み合わせて投与される。別の特定の実施形態では、胎盤由来の接着細胞エクソソーム、またはその組成物は、局所的に、例えば、低酸素組織（例えば、虚血性疾患の処置では）、または流入領域リンパ節などの、当該エクソソームもしくは組成物で処置されるべき領域の部位で、もしくはその周囲で投与される。
【０２１１】
５．４．使用の方法
５．４．１．血管形成から利益がある疾患の処置
本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソーム（セクション５．１を参照のこと）、及びその組成物（セクション５．３を参照のこと）は、血管形成を促進し、従って、血管形成から利益がある疾患及び障害を処置するために用いられ得る。従って、本明細書に提供されるのは、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソーム、またはその組成物を用いて、その必要な被験体において血管形成を促進する方法である。本明細書において用いる場合、「処置する（ｔｒｅａｔ）」という用語は、被験体における疾患、障害もしくは病態、またはその任意のパラメーターもしくは症状の時間経過における重篤度の治癒、寛解、改善、軽減または低減を包含する。特定の実施形態では、本明細書に提供される方法によって処置される被験体は、哺乳動物、例えば、ヒトである。
【０２１２】
一実施形態では、本明細書に提供されるのは、被験体において血管新生または血管形成を誘導する方法であって、本明細書において提供される胎盤由来の接着細胞エクソソームまたはその組成物をその被験体に投与するステップを包含する方法である。従って、本明細書に提供される方法を用いて、血管形成／血管新生の増大から利益のある被験体における疾患及び障害を処置してもよい。血管形成の増大から利益があり、従って、胎盤由来の接着細胞エクソソーム及び本明細書に記載される組成物で処置され得るこのような疾患／病態の例としては、限定するものではないが、心筋梗塞、うっ血性心不全、末梢動脈疾患、重症下肢虚血、末梢血管疾患、左心低形成症候群、糖尿病性の足の潰瘍、静脈性潰瘍または動脈性潰瘍が挙げられる。
【０２１３】
一実施形態では、本明細書に提供されるのは、例えば、末梢血管系で、血流が破壊されている被験体を処置する方法であり、当該方法は、この被験体に対して、本明細書において提供される胎盤由来の接着細胞エクソソームまたはその組成物を投与するステップを包含する。特定の実施形態では、本明細書において提供される方法は、本明細書において提供される胎盤由来の接着細胞エクソソームまたはその組成物を用いて虚血を有する被験体を処置するステップを包含する。特定の実施形態では、この虚血は、末梢動脈疾患（ＰＡＤ）であり、例えば、重症下肢虚血（ＣＬＩ）である。特定の他の実施形態では、この虚血は、末梢血管疾患（ＰＶＤ）、末梢動脈疾患、虚血性血管疾患、虚血性心疾患、または虚血性腎疾患である。
【０２１４】
５．４．２．患者集団
特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソーム（セクション５．１を参照のこと）は、本明細書に記載される任意の疾患または病態のための治療の必要な被験体に投与される（セクション５．４．１を参照のこと）。別の実施形態では、本明細書に記載される組成物（セクション５．３を参照のこと）は、本明細書に記載される任意の疾患または病態のための治療の必要な被験体に投与される。特定の実施形態では、当該被験体はヒトである。
【０２１５】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームまたは組成物は、血管形成及び／または血管新生を増大する治療の必要な被験体（例えば、ヒト）に投与される。
【０２１６】
５．５．キット
本明細書に提供されるのは、医薬的パックまたはキットであって、これは、本明細書に記載される医薬組成物、すなわち、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームを含む組成物の１つ以上の成分を充填された１つ以上の容器を備える。このような容器（複数可）には必要に応じて、医薬品または生物製剤の製造、使用または販売を規制する政府機関が定める形態の注意書きを伴う場合があり、この注意書きは、ヒトの投与に関する製造、使用または販売の機関による承認を反映している。
【０２１７】
本明細書に記載されるキットは、上記の方法で用いてもよい（セクション５．４を参照のこと）。本明細書に記載される組成物は、個体に対して容易に投与可能な形態で調製されてもよい。例えば、この組成物は、医薬用途に適切である容器内に含まれてもよい。このような容器は、例えば、滅菌のプラスチックバッグ、フラスコ、ジャー、またはこの組成物を容易に分注できる他の容器であってもよい。例えば、この容器は、血液バッグまたはレシピエントに対する液体の静脈内投与に適切な他のプラスチックの医学的に許容されるバッグであってもよい。
【０２１８】
５．６．送達システム
本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソーム、及びその組成物は、薬剤（複数可）、例えば、エクソソームに対して外因性の薬剤（複数可）とともにロードされてもよい。このようなエクソソーム及びその組成物は、例えば、標的細胞、例えば、エクソソームを得た細胞型以外の細胞中に採取してもよく、それによって、外因性因子（複数可）、例えば、薬剤（複数可）を標的細胞中に送達してもよい。
【０２１９】
従って、本明細書に提供されるのは、胎盤由来の接着細胞エクソソームに、外因性因子、例えば、薬剤をロードする方法である。一実施形態では、このような方法は、胎盤由来の接着細胞エクソソーム及び外因性因子、例えば、薬剤をインキュベートするステップ、例えば室温で、サポニン透過化、凍結／解凍サイクル、超音波処理、または押し出しの有無でインキュベートするステップを包含する。例えば、参照によって本明細書に援用される、Ｈａｎｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，２０１５，Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ２０７：１８−３０を参照のこと。特定の実施形態では、外因性因子、例えば、薬剤は、室温でのインキュベーションによって、胎盤由来の接着細胞エクソソーム中にロードされる。特定の実施形態では、外因性因子、例えば、薬剤は、１０℃、１５℃、１８℃、２０℃、２２℃、２５℃、２８℃、３０℃、３５℃、または４０℃でのインキュベーションによって胎盤由来の接着細胞エクソソーム中にロードされる。特定の実施形態では、インキュベーション、例えば、室温でのインキュベーションは、胎盤由来の接着細胞エクソソームのサポニン透過化なしで行う。特定の実施形態では、インキュベーション、例えば、室温でのインキュベーションは、胎盤由来の接着細胞エクソソームのサポニン透過化とともに行う。特定の実施形態では、外因性因子、例えば、薬剤を、凍結／解凍サイクル、例えば、１、２、３、４、５回以上の凍結／解凍サイクルによって胎盤由来の接着細胞エクソソーム中にロードする。特定の実施形態では、外因性因子、例えば、薬剤を、超音波処理によって胎盤由来の接着細胞エクソソーム中にロードする。特定の実施形態では、外因性因子、例えば、薬剤を、押し出しによって、胎盤由来の接着細胞エクソソーム中にロードする。特定の実施形態では、外因性因子、例えば、薬剤を、エレクトロポレーションによって、胎盤由来の接着細胞エクソソーム中にロードする。特定の実施形態では、外因性因子、例えば、薬剤を用いてエクソソームをロードする方法は、上記の任意の組み合わせを包含する。
【０２２０】
特定の実施形態では、本明細書において記載される胎盤由来の接着細胞胎盤由来の接着細胞エクソソームに組み込まれた外因性因子、例えば、薬剤は、ポリペプチドを含む。特定の実施形態では、この外因性因子、例えば、薬剤は、結合剤、例えば、抗体、例えば、ヒト抗体、ヒト化抗体もしくはキメラ抗体、またはその抗原結合フラグメントなどである。特殊な実施形態では、この抗体は、一価特異的、二価特異的もしくは多価特異的抗体、またはその抗原結合フラグメントである。さらに他の特定の実施形態では、抗体またはその抗原結合フラグメントは、単鎖抗体またはＦａｂフラグメントである。特定の実施形態では、抗体またはその抗原結合フラグメントは、胎盤由来の接着細胞エクソソームの補助なしでは標的細胞中に内部移行しない。
【０２２１】
特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームにロードされた外因性因子、例えば、薬剤は、１つ以上の核酸を含む。特定の実施形態では、この１つ以上の核酸は、ｓｉＲＮＡまたはｍｉＲＮＡを含む。
【０２２２】
特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームにロードされた外因性因子、例えば、薬剤は、１つ以上の遺伝子修飾成分を含む。特定の実施形態では、１つ以上の遺伝子修飾成分は、ＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムを含む。さらに特異的な実施形態では、ＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、ガイドＲＮＡを含む。さらに特異的な実施形態では、このＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、エンドヌクレアーゼを含む。さらに特異的な実施形態では、ＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、ガイドＲＮＡ及びエンドヌクレアーゼを含む。さらに特異的な実施形態では、ＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、Ｃａｓ９を含む。さらに特異的な実施形態では、このＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、Ｃｐｆ１を含む。特定の実施形態では、１つ以上の遺伝子修飾成分は、ジンクフィンガーヌクレアーゼを含む。特定の実施形態では、１つ以上の遺伝子修飾成分は、転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）システムを含む。
【０２２３】
別の実施形態では、本明細書に提供されるのは、標的細胞に対して、外因性因子、例えば、薬剤を送達する方法であって、ここではこの外因性因子は、胎盤由来の接着細胞エクソソームにロードされている。特定の実施形態では、この標的細胞は、エクソソームが得られた細胞型以外の細胞である。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームにロードされた、外因性因子、例えば、薬剤は、ポリペプチドを含む。特定の実施形態では、外因性因子、例えば、薬剤は、結合剤、例えば、抗体、例えば、ヒト抗体、ヒト化抗体もしくはキメラ抗体、またはその抗原結合フラグメントなどである。特殊な実施形態では、この抗体は、一価特異的、二価特異的もしくは多価特異的抗体、またはその抗原結合フラグメントである。さらに他の特定の実施形態では、抗体またはその抗原結合フラグメントは、単鎖抗体またはＦａｂフラグメントである。特定の実施形態では、この抗体またはその抗原結合フラグメントは、標的細胞、例えば、エクソソームが得られた細胞型以外の細胞へ、胎盤由来の接着細胞エクソソームの補助なしでは内部移行しないであろう。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームにロードされた外因性因子、例えば、薬剤は、１つ以上の核酸を含む。特定の実施形態では、この１つ以上の核酸は、ｓｉＲＮＡを含む。特定の実施形態では、本明細書に記載されるこの胎盤由来の接着細胞エクソソームにロードされた外因性因子、例えば、薬剤は、１つ以上の遺伝子修飾成分を含む。特定の実施形態では、この１つ以上の遺伝子修飾成分は、ＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムを含む。さらに特異的な実施形態では、このＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、ガイドＲＮＡを含む。さらに特異的な実施形態では、このＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、エンドヌクレアーゼを含む。さらに特異的な実施形態では、このＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、ガイドＲＮＡ及びエンドヌクレアーゼを含む。さらに特異的な実施形態では、このＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、Ｃａｓ９を含む。さらに特異的な実施形態では、このＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、Ｃｐｆ１を含む。特定の実施形態では、この１つ以上の遺伝子修飾成分は、ジンクフィンガーヌクレアーゼを含む。特定の実施形態では、この１つ以上の遺伝子修飾成分は、転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）システムを含む。
【０２２４】
本明細書に提供されるのは、被験体、例えば、ヒトに対して、外因性因子、例えば、薬剤を含んでいる個々の胎盤由来の接着細胞エクソソームを投与する方法である。特定の実施形態では、外因性因子、例えば、薬剤は、ポリペプチドを含む。特定の実施形態では、この外因性因子、例えば、薬剤は、結合剤、例えば、抗体、例えば、ヒト抗体、ヒト化抗体もしくはキメラ抗体、またはその抗原結合フラグメントなどである。特殊な実施形態では、この抗体は、一価特異的、二価特異的もしくは多価特異的抗体、またはその抗原結合フラグメントである。さらに他の特定の実施形態では、この抗体またはその抗原結合フラグメントは、単鎖抗体またはＦａｂフラグメントである。特定の実施形態では、この抗体またはその抗原結合フラグメントは、標的細胞へは、胎盤由来の接着細胞エクソソームの補助なしでは内部移行しないであろう。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームにロードされた外因性因子、例えば、薬剤は、１つ以上の核酸を含む。特定の実施形態では、この１つ以上の核酸は、ｓｉＲＮＡまたはｍｉＲＮＡを含む。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームにロードされた外因性因子、例えば、薬剤は、１つ以上の遺伝子修飾成分を含む。特定の実施形態では、この１つ以上の遺伝子修飾成分は、ＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムを含む。さらに特異的な実施形態では、このＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、ガイドＲＮＡを含む。さらに特異的な実施形態では、このＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、エンドヌクレアーゼを含む。さらに特異的な実施形態では、このＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、ガイドＲＮＡ及びエンドヌクレアーゼを含む。さらに特異的な実施形態では、このＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、Ｃａｓ９を含む。さらに特異的な実施形態では、このＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、Ｃｐｆ１を含む。特定の実施形態では、この１つ以上の遺伝子修飾成分は、ジンクフィンガーヌクレアーゼを含む。特定の実施形態では、この１つ以上の遺伝子修飾成分は、転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）システムを含む。
【０２２５】
また本明細書に提供されるのは、１つ以上の外因性因子、例えば、薬剤をロードされた胎盤由来の接着細胞エクソソームを含む組成物である。特定の実施形態では、外因性因子、例えば、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームに組み込まれた薬剤は、ポリペプチドを含む。特定の実施形態では、外因性因子、例えば、薬剤は、結合剤、例えば、抗体、例えば、ヒト抗体、ヒト化抗体もしくはキメラ抗体、またはその抗原結合フラグメントなどである。特殊な実施形態では、この抗体は、一価特異的、二価特異的もしくは多価特異的抗体、またはその抗原結合フラグメントである。さらに他の特定の実施形態では、この抗体またはその抗原結合フラグメントは、単鎖抗体またはＦａｂフラグメントである。特定の実施形態では、この抗体またはその抗原結合フラグメントは、標的細胞へは胎盤由来の接着細胞エクソソームの補助なしでは内部移行しないであろう。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームにロードされた外因性因子、例えば、薬剤は、１つ以上の核酸を含む。特定の実施形態では、この１つ以上の核酸は、ｓｉＲＮＡまたはｍｉＲＮＡを含む。特定の実施形態では、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームにロードされた外因性因子、例えば、薬剤は、１つ以上の遺伝子修飾成分を含む。特定の実施形態では、この１つ以上の遺伝子修飾成分は、ＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムを含む。さらに特異的な実施形態では、このＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、ガイドＲＮＡを含む。さらに特異的な実施形態では、このＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、エンドヌクレアーゼを含む。さらに特異的な実施形態では、このＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、ガイドＲＮＡ及びエンドヌクレアーゼを含む。さらに特異的な実施形態では、このＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、Ｃａｓ９を含む。さらに特異的な実施形態では、このＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓシステムは、Ｃｐｆ１を含む。特定の実施形態では、この１つ以上の遺伝子修飾成分は、ジンクフィンガーヌクレアーゼを含む。特定の実施形態では、この１つ以上の遺伝子修飾成分は、転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）システムを含む。
【実施例】
【０２２６】
６．実施例
【０２２７】
６．１．実施例１：エクソソームを単離する方法
胎盤由来の接着細胞エクソソームは、以下の方法によって、ＣＤ１０＋、ＣＤ２００＋、ＣＤ１０５＋、ＣＤ３４−の胎盤由来の接着細胞培養物から単離した。
【０２２８】
ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）は、１０，０００×ｇで１時間、次いで１００，０００×ｇで１８時間４℃での超遠心分離によって、混入しているウシのエクソソームを枯渇させた。得られた上清を、貯蔵及び使用の前、０．２μｍのフィルターを通してろ過した。エクソソームを枯渇したＦＢＳを、ダルベッコの改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）と２４時間混合して、増殖培地を生成した。増殖培地を３７℃に温め、胎盤由来の接着細胞を、３００〜１，０００細胞／ｃｍ２の密度でプレートして、３日間、または細胞培養プラットフォームデバイス（Ｃｏｒｎｉｎｇ  ＣＥＬＬＳＴＡＣＫ  １０−Ｔｒａｙ、ＣＥＬＬＢＩＮＤコーティング）中で８０％コンフルエントまで培養した。胎盤由来の接着細胞エクソソームを、６回継代でプレートして、培養上清を７回継代で収集した。本明細書に記載されるエクソソームを単離するために用いた胎盤由来の接着細胞の胎盤の供給源は、絨毛膜絨毛を含まず、従って、胎盤由来の接着細胞エクソソームを生成するために用いた胎盤由来の接着細胞は、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞を含まない。
【０２２９】
培養上清の除去後、細胞培養単層をＰＢＳで洗浄し、無血清培地（ＤＭＥＭ及び１×グルタミン）を再補充した。４８時間後、無血清培養上清を収集して、下に記載のようにエクソソーム富化及び単離手順に供した。得られた細胞単層を、細胞カウント、エクソソーム収率比較及び比較研究のために回収した。
【０２３０】
コンフルエントな血清含有及び無血清の培養物からの上清を収集して、５００ｍＬのチューブ中で、４００×ｇで５〜１５分間、４℃で遠心分離した。次いで、遠心分離した上清を、新しい５００ｍＬのチューブに移して、３０００×ｇで２０〜６０分、４℃で遠心分離した。次いで上清を、適切な超遠心チューブに移して、１００，０００×ｇで６０分間、４℃で遠心分離した。得られたエクソソーム枯渇の上清の少量のアリコートを、さらなる解析のために保存して、残りは廃棄した。エクソソームを含有するペレットを、ＰＢＳまたは注射可能な生理食塩水中に再懸濁し、超遠心分離を繰り返した。その上清を廃棄して、得られたペレットを、ＰＢＳまたは注射可能な生理食塩水に再懸濁して、下に記載の実施例によって解析した。再懸濁されたペレットは、ＦＢＳを含有する培養物から単離された場合、「増殖エクソソーム」、またはＦＢＳを欠いている培養物から単離された場合「無血清エクソソーム」と呼ぶ。
【０２３１】
単離されるエクソソーム組成物を、２ｍＬの凍結バイアルにアリコートにして、−２０〜−８０℃で保管した。
【０２３２】
６．２．実施例２：胎盤由来接着細胞エクソソームの確認
本明細書に提示される結果によって、実施例１の細胞培養上清から単離された非細胞性物質はエクソソームであることが実証される。
【０２３３】
６．２．１．エクソソームのマーカー抗体アレイを用いる検出
胎盤由来の接着細胞エクソソームを、セクション６．１．のとおり単離した。単離した物質の４００マイクログラムを、製造業者のプロトコールによって、Ｅｘｏ−Ｃｈｅｃｋ（商標）エクソソーム抗体アレイ（Ｓｙｓｔｅｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を用いて解析した。エクソソーム溶解液を、抗体アレイ上で一晩インキュベートして、そのサンプルを、Ｋｏｄａｋ  Ｇｅｌ−Ｌｏｇｉｃシステムを用いて画像化し、２分の露光後に発色させた。図１（底部）に示されるとおり、胎盤由来の接着細胞エクソソーム物質は、４つのマーカーＦＬＯＴ−１、ＡＬＩＸ、ＡＮＸＡ５及びＴＳＧ１０１についての検出可能シグナルを生じた。アレイキットの一部として含まれる陽性対照サンプルの使用は、同様にこれらのマーカーの検出可能シグナルを生じた（図１の上側）。
【０２３４】
６．２．２．胎盤由来の接着細胞エクソソームサンプルの形状及び大きさの特徴付け
単離されたエクソソームを、陰性染色して、透過電子顕微鏡（ＴＥＭ）を用いて画像化し（図２Ａ）、両方ともエクソソームの特徴である約１００ｎｍの直径で、カップ形の形状（矢印）である場合が多い、別個の本体として存在することを見出した。精製されたエクソソームをさらに、ナノ粒子トラッキング解析（ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ  ｔｒａｃｋｉｎｇ  ａｎａｌｙｓｉｓ：ＮＴＡ）によって解析して、単離される集団のサイズ分布を決定した。図２Ｂに示されるとおり、胎盤由来の接着細胞エクソソームは、他の細胞型から単離されたエクソソームの既知の大きさと一致する、１３９ｎｍの平均サイズであった。
【０２３５】
形態学的特徴及び特定されたタンパク質マーカーによって、上記の方法を用いて胎盤由来の接着細胞から単離された物質がエクソソームであることが実証された。
【０２３６】
６．３．実施例３：胎盤由来接着細胞エクソソームの精製
６．３．１．サイズ排除高速液体クロマトグラフィーによるエクソソーム精製
胎盤由来の接着細胞エクソソームを、セクション６．１と同様に単離し、さらに、サイズ排除高速液体クロマトグラフィー（ＳＥ−ＨＰＬＣ）によって解析した。絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞（ＭＳＣ）からのエクソソームの溶出プロファイルを、血清含有（「増殖上清」）及び無血清（「無血清上清」）の胎盤由来の接着細胞培養物から得たエクソソームと比較した。エクソソーム調製物の溶出プロファイル（図３Ｂ〜図３Ｄ、矢印）を、既知の培養培地混入物の溶出ピークと比較して解析した（図３Ａ）。
【０２３７】
絨毛膜絨毛ＭＳＣエクソソームは、検出可能なレベルの混入物サイログロブリン及びＢＳＡを含んだ（図３Ｂ）。増殖上清の胎盤由来の接着細胞エクソソームはまた、検出可能なレベルのサイログロブリン及びＢＳＡ（図３Ｃ）を含んだが、無血清上清の胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルではなんらこのような混入物を含まなかった（図３Ｄ）。増殖上清または無血清培養物のいずれかから単離されたエクソソームの溶出プロファイルを、陽性対照のエクソソームのものと一致するピークで特徴付けた。無血清培養物エクソソームの場合には、溶出プロファイルは、予想されるエクソソーム溶出画分における単一の種として存在した（図３Ｄ）。これらの結果によって、さらに、単離される胎盤由来の接着細胞の微小胞がエクソソームであること、及び無血清条件で増殖された細胞から単離されたエクソソームが、ＦＢＳの存在下で増殖された細胞から調製されたエクソソームと比較して代表的な混入物を欠くことが実証される。
【０２３８】
６．４．実施例４：胎盤由来接着細胞エクソソーム分子マーカー
本研究では、ＦＡＣＳを用いて、細胞表面マーカーのどのパネルが、エクソソームの表面に含まれるか、及び他の細胞型由来のエクソソームと比較して、胎盤由来の接着細胞エクソソームに対してどの表面マーカーが固有であるかを検査した。
【０２３９】
表面マーカータンパク質に加えて、エクソソームは、ｍｉＲＮＡを含む小さい核酸を含んでもよいことが知られている。エクソソーム内に含まれるｍｉＲＮＡの組成物は、エクソソームが由来した細胞型の間で異なってもよく、ｍｉＲＮＡの存在及び量は、リアルタイムＰＣＲ（ＲＴ−ＰＣＲ）を含めて、当該分野で公知の方法によって決定され得る。この研究では、胎盤由来の接着細胞エクソソームのｍｉＲＮＡ含量を検査して、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞由来のエクソソームと比較した。
【０２４０】
６．４．１．胎盤由来の接着細胞エクソソーム表面マーカー
セクション６．１のように単離した胎盤由来の接着細胞エクソソームを、ＦＡＣＳによって解析して、表面マーカーの組成物を、絨毛膜絨毛ＭＳＣまたは前脂肪細胞ＭＳＣのいずれかから単離されたエクソソームと比較した。これらの３つの細胞型由来のエクソソームは、いくつかの表面マーカーを示差的に含むことが確認された（表１）。ＦＡＣＳ解析を用いて、胎盤由来の接着細胞由来のエクソソームは、絨毛膜絨毛ＭＳＣまたは前脂肪細胞ＭＳＣ由来のエクソソームと比較して、これらのエクソソームが固有かまたは富化されている多数のマーカーを含むことを見出した。エクソソーム絨毛膜絨毛ＭＳＣまたは前脂肪細胞ＭＳＣから単離されたエクソソームと比較して、胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＣＤ１０及びＣＤ５５（その両方とも両方の間葉系幹細胞エクソソーム集団では欠けていた）を含んだ。胎盤由来の接着細胞エクソソームはまた、高レベルのＣＤ４９ｃ、ＣＤ８２、ＣＤ９０、及びＣＤ１４２、例えば、０．５〜１対数の高レベルを、２つの間葉系幹細胞エクソソーム集団と比較して含んだ（表１）。逆に、胎盤由来の接着細胞エクソソームは、２つの間葉系幹細胞エクソソーム集団と比較して、低いレベルの、例えば、０．５〜１対数低いレベルのＣＤ１６４を含んだ（表１）。胎盤由来の間葉系幹細胞エクソソームはまた、前脂肪細胞ＭＳＣエクソソームで検出されなかった、検出可能なレベルのＣＤ２９５を含んだ（示さず）。表１に示すとおり、各々の進入における「＋」の記号の数は、示したマーカーのレベルと相関しているが、「−」の記号は、示したマーカーが検出可能なレベルではないことを示す。
表１：前脂肪細胞ＭＳＣエクソソーム及び絨毛膜絨毛ＭＳＣエクソソームと比較した胎盤由来の接着細胞エクソソームの表面抗原
【表１】
2017536096.tif 000003
【０２４１】
６．４．２．胎盤由来接着細胞エクソソームｍｉＲＮＡマーカー
６．４．２．１．胎盤由来の接着細胞エクソソーム及び絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞エクソソームは、それらのｍｉＲＮＡ含量が異なる
胎盤由来の接着細胞エクソソームを、製造業者のプロトコール（Ｓｙｓｔｅｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）によるＥｘｏｑｕｉｃｋ（商標）沈殿方法を用いて単離した。培養上清は、３０００×ｇで１５分間遠心分離し、得られたペレットを廃棄した。２ミリリットルの得られた上清を、１０ｍｌの組織培養上清に添加し、反転して混合した。得られた混合物を、４℃で一晩インキュベートした。インキュベーション後、その混合物を３０分間１５００×ｇで遠心分離し、その上清を廃棄して、ペレットを単離した。残りの液体を、１５００×ｇでさらに５分間の遠心分離後の吸引によって除去した。そのペレットを、２００ｕｌのＰＢＳ中に再構築した。
【０２４２】
単離された胎盤由来の接着細胞エクソソーム及び絨毛膜絨毛ＭＳＣエクソソーム（Ｓａｌｏｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：７，ｅ６８４５１）を溶解して、ＲＮＡを、製造業者の指示に従って、Ａｍｂｉｏｎ’ｓ  ｍｉｒＶａｎａ  ｍｉＲＮＡ単離キット（カタログ番号１５６６）を用いて単離した。要するに、エクソソームを、溶解／結合緩衝液（Ｌｙｓｉｓ／Ｂｉｎｄｉｎｇ  Ｂｕｆｆｅｒ）（ｍｉＲＮＡホモジネート添加物（Ｈｏｍｏｇｅｎａｔｅ  Ａｄｄｉｔｉｖｅ）を補充）を用いて、氷上で１０分間溶解し、ＲＮＡを、酸−フェノール：クロロホルム抽出物を用いて単離し、エタノール洗浄で沈殿させた。５０ナノグラムの精製ＲＮＡを、逆転写して、１７のｍｉＲＮＡについてのプローブセット及び対照のＲＮＡ  ＲＮＵ４４を用いて、ＴａｑＭａｎ（登録商標）ｑＰＣＲシステム（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）によってサンプルを増幅した。各々のサンプルについてＣｔ値を算出した。
【０２４３】
図４Ａに示すとおり、胎盤由来の接着細胞エクソソームは、絨毛膜絨毛ＭＳＣと比較して、３つの群の各々で解析した、高ベルの全てのｍｉＲＮＡを含む。これらのデータによってさらに、本明細書に記載される胎盤由来の接着細胞エクソソームが、ｍｉＲＮＡ含量に基づいて、絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞エクソソームとは別個であることが示される。ｍｉＲＮＡ  ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−１６−５ｐ、ｍｉＲ−２９６−５ｐ、ｍｉＲ−２３３−３ｐ、ｍｉＲ−９２、Ｌｅｔ−７ｄ＊、ｍｉＲ−４２２ａ、及びｍｉＲ−１３３ｂは全てが、胎盤由来の接着細胞エクソソームと比較して、絨毛膜絨毛間葉細胞エクソソームについて２を超えるＣｔ値の相違を示したことが示され（表２を参照のこと）、これによって、胎盤由来の接着細胞エクソソーム中のこれらのｍｉＲＮＡの有意に高い存在が示される。示されるデータは、三連で行った１つの実験由来である。
表２：胎盤由来の接着細胞エクソソーム及び絨毛膜絨毛の間葉系幹細胞エクソソーム由来のｍｉＲＮＡのＣｔ値
【表２】
2017536096.tif 000004
【０２４４】
６．４．３．胎盤由来接着細胞エクソソームは、血管形成タンパク質を含む
血管形成の分泌されたサイトカインについての胎盤エクソソームの含量をプロファイリングするために、Ａｎｇｉｏｐｌｅｘを、Ｈｕｍａｎ  Ｍａｇ  Ｂｅａｄキット，ＨＡＧＰ１ＭＡＧ−１２Ｋ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）を用いて行った。このキットは、以下の１７のサイトカインを検出するための分析物を備える：レプチン、エンドグリン、ホリスタチン、ＨＧＦ、アンジオポイエチン−２、Ｇ−ＣＳＦ、ＦＧＦ−１、ＦＧＦ−２、ＶＥＧＦ−Ａ、ＶＥＧＦ−Ｃ、ＶＥＧＦ−Ｄ、ＥＧＦ、エンドセリン−１、ＢＭＰ−９、ＩＬ−８、ＨＢ−ＥＧＦ、及びＰＬＧＦ。エクソソームは、製造業者の示唆されるプロトコールに従って解析した。
【０２４５】
増殖エクソソーム及び無血清エクソソームは、実施例１に記載のとおり単離した。そのエクソソームは、血管形成分析物検出プロファイリングのために１０．８×に希釈した、ＰＢＳ中に含まれる１００μｇのタンパク質濃度の調製物を用いて調製した。エクソソームを、表面マーカー解析のためにエクソソームを分散する水浴中で、またはエクソソーム内解析のためにエクソソームを溶解するプローブを用いて超音波処理した。比較のために、増殖培地除去した細胞（「富化前馴化（ｐｒｅ−ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄ）」）ならびにエクソソーム及び他の細片を除去するために超遠心分離した増殖培地（「エクソソーム枯渇（ｅｘｏｓｏｍｅ  ｄｅｐｌｅｔｅｄ）」）を、同じ方法を用いて解析した。
【０２４６】
胎盤由来の接着細胞エクソソームは、検出可能なレベルのいくつかのサイトカインを提示しており、これには、ＨＧＦ及びＶＥＧＦ−Ａ（図４Ｂ）、エンドグリン及びレプチン（図４Ｃ）、アンジオポイエチン−２、Ｇ−ＣＳＦ、ホリスタチン、ＦＧＦ−２、及びＩＬ−８（示さず）を含む。これらのサイトカインのほぼ全てが、試験された全ての増殖培地中で低レベルで存在し、これは、このサイトカインレベルが特にエクソソームに関連することを示している。これらのデータによって、胎盤由来の接着細胞エクソソームが、血管形成を促進することが公知のタンパク質因子を含むことが示される。
【０２４７】
６．５．実施例５：胎盤由来接着細胞エクソソーム標識及び細胞取り込み
単離された胎盤由来の接着細胞エクソソームが、培養された細胞へそれらの内容物を送達できるか否かを決定するために、エクソソームの取り込みアッセイを、ＴｒｕＣｕｌｔｕｒｅチューブに採取した血液を用いて行った。単離した胎盤由来の接着細胞エクソソーム（セクション６．１を参照のこと）を、１ｍｌのエクソソーム懸濁物に２μｌのＰＫＨ２６を添加することによって、２μＭのフルオロフォアＰＫＨ２６を用いて標識して、暗野で、５分間室温でインキュベートした。エクソソームを、製造業者の指示に従って、Ｃｅｎｔｒｉｃｏｎ  １０ｋＤａ分子量カットオフカラムを用いて回収した。標識したエクソソームを、２００μｌのＴｒｕＣｕｌｔｕｒｅ血液調製物に添加し、３７℃で５％のＣＯ２中で２４時間インキュベートした。インキュベーション後、１００μｌの血液を、暗野で室温で１５分間、白血球系列の特異的な抗体で染色した。インキュベーション後、赤血球をＡＣＫ溶解溶液で溶解し、ＰＢＳ、１％ＦＢＳで３×洗浄した。特定の白血球集団へのエクソソーム取り込みは、ＦｌｏｗＪｏソフトウェア及びＰＫＨ２６蛍光における系列特異的なゲーティングによって決定した。図５に示すとおり、ＰＫＨ２６について陽性染色されたいくつかの系列の種類によって、胎盤由来の接着細胞エクソソームが、培養細胞によって取り込まれ得ることが示されている。
【０２４８】
６．６．実施例６：胎盤由来接着細胞エクソソームは、ヒト血管内皮細胞の増殖を増強する
ヒト血管内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）を、マトリゲル上に１４，０００細胞／ウェルの濃度でプレートし、血清なしの漸増量の胎盤由来の接着細胞エクソソーム（セクション６．１を参照のこと）、血清なしの３×１０４個の胎盤由来の接着細胞、または培養培地単独のいずれかとともにインキュベートした。図６に示すとおり、ＨＵＶＥＣの増殖は、培養物に添加した胎盤由来の接着細胞エクソソームの濃度と相関した。これらのデータによって、胎盤由来の接着細胞エクソソームが、培養されたヒト細胞の増殖を増強し得ることが示される。
【０２４９】
６．７．実施例７：全血におけるサイトカイン産生に対するエクソソーム媒介性の効果
６．７．１．実験デザイン
免疫原性の刺激の結果としての血液中のサイトカイン発現に関するインビトロモデルを用いた。培養チューブ中では、２ｍｌのＭｙｒｉａｄ  ＲＢＭ  ＴｒｕＣｕｌｔｕｒｅ（商標）培地を、１ｍｌの全ヒト血液及び漸増量の胎盤由来の接着細胞エクソソーム（０、６、１２、２４、４７及び９４μｇ／ｍｌ）または胎盤由来の接着細胞（２．５、５、１０、２０または４０×１０３細胞）とともに、２４時間の１０ｎｇ／ｍｌのリポポリサッカライド（ＬＰＳ）での刺激前に１時間インキュベートした。培養された血液中で産生されたサイトカインは、ＨＣＹＴＯＭＡＧ−６０Ｋ｜ＭＩＬＬＩＰＬＥＸ  ＭＡＰ  Ｈｕｍａｎ  Ｃｙｔｏｋｉｎｅ／Ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ  Ｍａｇｎｅｔｉｃ  Ｂｅａｄ  Ｐａｎｅｌ  −  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅｘ  Ａｓｓａｙ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）を用いて検出した。
【０２５０】
６．７．２．胎盤由来接着細胞及び胎盤由来接着細胞エクソソームは、全血中のサイトカイン産生を変更する
図７Ａに示されるとおり、胎盤由来の接着細胞及び胎盤由来の接着細胞エクソソームは、特定のサイトカインのレベルを用量依存性の方式で低下する。増殖促進性のサイトカインＴＮＦ−α、ＩＬ−１２ｐ４０、ＭＩＰ１ｂ及びＩＬ−１Ｂは全てが、漸増量の胎盤由来の接着細胞または胎盤由来の接着細胞エクソソームとともに、ＬＰＳ刺激性の全血中でインキュベートされた場合に低下した。逆に、ＭＣＰ１レベルは、胎盤由来の接着細胞及び胎盤由来の接着細胞エクソソームの両方によって、刺激された全血中で増大され、このことは、胎盤由来の接着細胞及び胎盤由来の接着細胞エクソソームが、培養された細胞中でサイトカイン産生に影響し得ることを示している。
【０２５１】
６．７．３．胎盤由来接着細胞及び胎盤由来接着細胞のエクソソームは、刺激された血液におけるサイトカインのサブセットを示差的に調節する
図７Ｂに示されるとおり、胎盤由来の接着細胞エクソソームは、胎盤由来の接着細胞の存在下で増強される特定のサイトカインのレベルを増強しない。炎症に関連するサイトカインである、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−６、ＩＬ−８及びＧＭ−ＣＳＦは、刺激された全血中の胎盤由来の接着細胞エクソソームの存在では増強されなかった。この知見によって、胎盤由来の接着細胞エクソソームは、それらが誘導された細胞の影響よりも培養された血液に対して異なる影響を発揮することが示される。
【０２５２】
６．８．実施例８：胎盤由来接着細胞のエクソソームは、インビトロで血管形成を促進する。
ヒト血管内皮細胞（ＨＵＶＥＣｓ）は３継代または４継代で、４８ウェルのマイクロタイターディッシュに、１ウェルあたり２８，０００細胞の密度でプレートした。細胞は、０．５ｍＬのＰＢＤかまたはＥＢＭ−２培養培地（Ｌｏｎｚａ）のいずれかの中で、ＧＲＦ−Ｍａｔｒｉｇｅｌ上で３日間維持した。次いで、ＨＵＶＥＣを、血清含有（「増殖エクソソーム」）または無血清（「ＳＦエクソソーム」）のいずれかの胎盤由来の接着細胞培養物から単離した種々の濃度の胎盤由来の接着細胞とともにインキュベートした。ＨＵＶＥＣ増殖パターンには、結節形成及び管部分の長さ（ｔｕｂｅ  ｓｅｇｍｅｎｔ  ｌｅｎｇｔｈ）（血管形成能の代わり）を含み、これを、全部で１８〜１９時間の間、２時間ごとにモニターした。ＨＵＶＥＣ増殖パラメーターを、ＩｎｃｕＣｙｔｅ生細胞画像化システム（Ｅｓｓｅｎ  ＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅ）を用いて決定し、ＩｍａｇｅＪを用いて定量した。
【０２５３】
６．８．１．増殖エクソソーム及び無血清エクソソームは、ＨＵＶＥＣ管形成を促進する。
図８Ａに示すとおり、増殖エクソソームは、管部分の長さ及び分岐ポイントの頻度を、培養されたＨＵＶＥＣにおいて、用量依存性の方式で増大した。ＰＢＳとともにインキュベートしたＨＵＶＥＣと比較して、５μｇ／ウェル〜１００μｇ／ウェルにおよぶ濃度における単離された精製されたエクソソームは、管部分の長さを増大した（８Ａ、左）。同様に、増殖エクソソームで処置されたＨＵＶＥＣは、ＰＢＳで処置したＨＵＶＥＣと比較して結節の数が多かった（８Ａ、右側）。
【０２５４】
増殖エクソソームで観察された結果と同様に、無血清培養物から単離された胎盤由来の接着細胞エクソソームは、ＨＵＶＥＣの管部分の長さ及び分岐ポイント頻度を増大した。図８Ｂに示されるとおり、５μｇ／ウェル〜１００μｇ／ウェルの濃度におよぶエクソソームの存在下で培養されたＨＵＶＥＣは、ＰＢＳの存在下で培養されたＨＵＶＥＣと比較して、管部分の長さ（８Ｂ、左）、及び分岐ポイント頻度を増大した（８Ｂ、右側）。これらの結果、単離される胎盤由来の接着細胞エクソソームが、血管細胞増殖及び血管分岐頻度をインビトロで増殖し得ることが示され、これによって、血管形成促進因子として胎盤由来の接着細胞エクソソームの役割が示される。
【０２５５】
６．８．２．胎盤由来接着細胞エクソソームは、ＨＵＶＥＣ細胞で遺伝子発現を変更する。
継代３のＨＵＶＥＣ細胞（Ｌｏｎｚａ  Ｌｏｔ  ８Ｆ３２６５；０３２５１４ＡＲ）を、完全ＥＧＭ−２培地で４継代まで増殖させた。細胞を回収し、フィブロネクチンコーティングされたプレートに高密度で播種し、約１００％コンフルエントまで３時間結合させた。細胞を、ＥＢＭ−２培地中で約２時間血清の非存在下で培養した。培養したＨＵＶＥＣを、胎盤由来の接着細胞培養上清、５０μｇの胎盤由来の接着細胞エクソソーム、または対照として培養培地とともにインキュベートした。ＨＵＶＥＣ上清及び細胞溶解液を、４、２４、及び４８時間収集し、遺伝子発現をこれらの早期、中期及び後期の時点で解析した。
【０２５６】
ＲＮＡは、製造業者の推奨するプロトコールにしたがって、Ｑｉａｇｅｎ’ｓ  Ｒｎｅａｓｙ  Ｍｉｎｉ  Ｋｉｔ（カタログ番号７４１３４）を用いて単離した。３．５ｕｇのＲＮＡを、ＶＩＬＯ  ＲＴ  ＭＭを用いて逆転写し、４０ｎｇのｃＤＮＡを、Ｔａｑｍａｎ  Ｆａｓｔ  Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  ＰＣＲ  Ｍａｓｔｅｒ  Ｍｉｘ及びＴａｑｍａｎ  Ｈｕｍａｎ  ＶＥＧＦ  Ｐａｔｈｗａｙ  Ａｒｒａｙ  ９６ウェルＦａｓｔ  Ｐｌａｔｅｓを用いて、ＲＴ−ＰＣＲによって解析した。
【０２５７】
ＶＥＧＦ経路アレイの結果を、図８Ｃに示す（影が濃いほど、高い発現レベルを示す）。とりわけ、ＨＵＶＥＣは、いずれの条件下でもＡＣＴＡ１、ＢＡＤ、ＣＡＳＰ９、ＭＡＰ２Ｋ１、ＰＬＣＧ１、及びＳＨＣ１を発現できなかったが、２６／４４ＶＥＧＦ経路遺伝子は、胎盤由来の接着細胞エクソソーム及び／または胎盤由来の接着細胞培養上清で処置されたＨＵＶＥＣで上方制御された（図８Ｃ）。重要なことに、これらの遺伝子のうちの多くが、血管形成で重要な役割を果たすことが公知である。
【０２５８】
いくつかの遺伝子発現のサブクラスは、胎盤由来の接着細胞エクソソーム及び／または胎盤由来の接着細胞培養上清によって、（ｉ）細胞運動性（図８Ｄ）、（ｉｉ）細胞増殖（図８Ｅ−Ｆ）、及び（ｉｉｉ）一酸化窒素産生、細胞透過性及び細胞生存（図８Ｇ）に関連する遺伝子を含む対照処置のＨＵＶＥＣと比較して変更された。これらの結果によって、胎盤由来の接着細胞エクソソームは、血管細胞の遺伝子発現プログラムを、例えば、増殖状態へ変更し得ることが示される。これらの結果によってまた、エクソソームの効果は、胎盤由来の接着細胞培養上清によって誘導される効果とは別個であり得ることも実証される。
【０２５９】
６．８．３．実施例９：胎盤由来接着細胞エクソソームは、マクロファージにおけるサイトカイン産生を変更する
単離された単球を、ＧＭ−ＣＳＦの存在下で、マクロファージへ分化されるまで７〜１０日間培養した。５×１０４個のマクロファージを、胎盤由来の接着細胞エクソソームまたは胎盤由来の接着細胞及び１００ｎｇ／ｍＬのＬＰＳとともに２２〜２４時間同時培養した。分泌されたサイトカインを、ヒト免疫多重パネル（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，ＨＣＹＴＯ−ＭＡＧ−６０Ｋ）を用いてプロファイリングした。アッセイは、Ｌｕｍｉｎｅｘ  ＦｌｅｘＭＡＰ−３Ｄシステムを用いて製造業者のプロトコールによって行った。
【０２６０】
図９Ａに示されるとおり、胎盤由来の接着細胞及び胎盤由来の接着細胞エクソソームは、単球由来のマクロファージによって産生される特異的なサイトカインのレベルを用量依存性の方式で変更した。具体的には、ＴＮＦ−α及びＭＣＰ−１は両方とも、漸増量の胎盤由来の接着細胞エクソソームとともに、ＬＰＳ刺激のマクロファージの存在下でインキュベートされた場合、低下した。胎盤由来の接着細胞は、マクロファージ培養物中のＭＣＰ−１のレベルを低下しなかった。
【０２６１】
図９Ｂに示されるとおり（左の中心）、胎盤由来の接着細胞エクソソーム及び胎盤由来の接着細胞は両方とも、培養されたマクロファージにおいてＴＮＦ−α分泌を抑制したが、胎盤由来の接着細胞エクソソームは、培養されたマクロファージ中で、サイトカイン分泌（例えば、ＩＬ−８分泌）を広範に抑制し、胎盤由来の接着細胞は抑制しなかった。特に、これは、全血中で観察されたサイトカイン発現における変化と対照的である（実施例７を参照のこと）。これらの結果、胎盤由来の接着細胞エクソソームは、エクソソームが由来する細胞から、別個の方式で、培養された免疫細胞中でのサイトカイン発現を変更し得ることが示される。単球由来のマクロファージを、溶解された胎盤由来の接着細胞エクソソームとともにインキュベートした場合、ＩＬ−８抑制は、インタクトな胎盤由来の接着細胞エクソソームとともにインキュベートされた培養物と比較したとき減弱されている（図９Ｂ、右側）。これらの結果によって、観察されるエクソソームの効果はエクソソーム自体の存在に起因するのであり、単にエクソソームを作製する構成要素の混合物に起因するのではないことが示される。
【０２６２】
均等物：
本開示は、本明細書に記載される特定の実施形態による範囲に限定されるものではない。実際、本明細書に提供される主題の種々の改変は、記載されるものに加えて、前述の説明及び添付の図面から当業者に明白であろう。このような改変は、添付の特許請求の範囲内におさまるものとする。
【０２６３】
種々の刊行物、特許及び特許出願を本明細書に引用しており、その開示は、その全体が参照によって本明細書に援用される。
【図１】
2017536096.tif 000005
【図２Ａ】
2017536096.tif 000006
【図２Ｂ】
2017536096.tif 000007
【図３Ａ】
2017536096.tif 000008
【図３Ｂ】
2017536096.tif 000009
【図３Ｃ】
2017536096.tif 000010
【図３Ｄ】
2017536096.tif 000011
【図４Ａ】
2017536096.tif 000012
【図４Ｂ】
2017536096.tif 000013
【図４Ｃ】
2017536096.tif 000014
【図５】
2017536096.tif 000015
【図６】
2017536096.tif 000016
【図７Ａ】
2017536096.tif 000017
【図７Ｂ】
2017536096.tif 000018
【図８Ａ】
2017536096.tif 000019
【図８Ｂ】
2017536096.tif 000020
【図８Ｃ】
2017536096.tif 000021
【図８Ｄ】
2017536096.tif 000022
【図８Ｅ】
2017536096.tif 000023
【図８Ｆ】
2017536096.tif 000024
【図８Ｇ】
2017536096.tif 000025
【図９Ａ】
2017536096.tif 000026
【図９Ｂ】
2017536096.tif 000027
【国際調査報告】
2017536096.tif 000028
2017536096.tif 000029
2017536096.tif 000030