(57)【要約】  本発明は、ウイルス性皮膚疾患、特に単純ヘルペスウイルス１型および帯状ヘルペスの治療方法であって、ウイルス性皮膚疾患を患っている被検者の皮膚へのタンポポの水抽出物、水／アルコール抽出物または天然植物油抽出物の治療的量の局所投与を含む、治療方法に関する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ウイルス性皮膚疾患、特に単純ヘルペスウイルス１型および帯状ヘルペスの治療方法であって、ウイルス性皮膚疾患を患っている被検者の皮膚へのタンポポの水抽出物、水／アルコール抽出物または天然植物油抽出物の治療的量の局所投与を含む、治療方法。
【請求項２】
前記抽出物が、モウコタンポポ（蒲公英：Ｔａｒａｘａｃｕｍ  Ｍｏｎｇｏｌｉｃｕｍ）の水系抽出物を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記抽出物が、モウコタンポポ（蒲公英）の水／アルコール系抽出物を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記抽出物が、次の構造：
【化１】
2017517543.tif 000003
を有する化合物を含む、請求項１乃至３のいずれかに記載の方法。
【請求項５】
前記抽出物が、次の構造：
【化２】
2017517543.tif 000004
を有する化合物を含む、請求項１乃至３のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
前記抽出物が、次の構造：
【化３】
2017517543.tif 000005
を有する化合物を含む、請求項１乃至３のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
ヘルペスウイルス性皮膚疾患の治療方法であって、ヘルペスウイルス性皮膚疾患を患っている被検者の皮膚への蒲公英の水系抽出物、水／アルコール系抽出物または天然植物油系抽出物の担体中での治療有効量の局所投与を含む、治療方法。
【請求項８】
前記ヘルペスウイルス性皮膚疾患が、単純ヘルペスウイルス１型または帯状ヘルペスによって引き起こされる、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記抽出物が、次の構造：
【化４】
2017517543.tif 000006
を有する化合物を含む、請求項７または８に記載の方法。
【請求項１０】
前記抽出物が、次の構造：
【化５】
2017517543.tif 000007
を有する化合物を含む、請求項７または８に記載の方法。
【請求項１１】
前記抽出物が、次の構造：
【化６】
2017517543.tif 000008
を有する化合物を含む、請求項７または８に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、特定のウイルス性皮膚疾患の治療、特に単純ヘルペスウイルス１型（ＨＳＶ−１）、および帯状疱疹（ｓｈｉｎｇｌｅｓ）または水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）として一般に知られる帯状ヘルペス（ｈｅｒｐｅｓ  ｚｏｓｔｅｒ）の治療に関する。
【背景技術】
【０００２】
ウイルス性皮膚疾患は、特にヘルペスウイルスによって引き起こされる疾患および／または感染症を含み、通称では単にヘルペスとも呼ばれる。ヘルペスウイルスは、脊椎動物、特に哺乳動物、とりわけ、ヒト、ウマ、ブタ、ウシ、ヤギ、ヒツジ、ネコおよびイヌに広範に存在する。
【０００３】
ヒト病原性ヘルペスウイルス（ＨＨＶ）は、アルファヘルペスウイルス、ベータヘルペスウイルスおよびガンマヘルペスウイルス（ＨＨＶ１〜ＨＨＶ８）に分類され、このうちアルファウイルスおよびガンマウイルスは動物、例えば、ウマ（ウマへルペスウイルス）、ウシ（ウシへルペスウイルス）、ブタ（ブタへルペスウイルス）、ネコ（ネコへルペスウイルス）、イヌ（イヌへルペスウイルス）およびニワトリ（トリへルペスウイルス１型）などの動物に感染し得るウイルスでもある。
【０００４】
ヒト病原性ヘルペスウイルスのうち、ヒトに感染するもの、特にアルファヘルペスウイルスは極めて重大である。アルファヘルペスウイルスとして、単純ヘルペスウイルス１型（ＨＳＶ−１）、単純ヘルペスウイルス２型（ＨＳＶ−２）および水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）が挙げられる。
【０００５】
単純ヘルペスウイルスＨＳＶ−１およびＨＳＶ−２によって引き起こされる皮膚疾患としては、例えば、いずれも主にＨＳＶ−１によって引き起こされる口唇ヘルペス（熱性疱疹または唇ヘルペスとも呼ばれる）および鼻ヘルペス、ヘルペス性角結膜炎、ヘルペス性口内炎、顔面ヘルペス、咽頭ヘルペス、陰部ヘルペス、肛門周囲ヘルペス、殿部ヘルペスが挙げられる。水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）は、例えば、水痘および帯状疱疹などを引き起こす。
【０００６】
ウイルス学者の推定によると、世界の全人口中８０％がＨＳＶ−１不顕性感染者であり、３０％がＨＳＶ−２不顕性感染者である。ＨＳＶ−１およびＨＳＶ−２は、互いに密接に関連しており、高確率で同一のヌクレオチド配列を有している。ＨＳＶ−１は主に口腔および顔面の領域に感染するが、ＨＳＶ−２は主に生殖器の領域で発生する。
【０００７】
アルファヘルペスウイルスは通常、上皮細胞、例えば皮膚細胞、粘液細胞および粘膜細胞などに最初に感染し、次いで宿主細胞内でウイルスの顕著な複製が生じ、感染した宿主細胞は死に至る。
【０００８】
例えば、ＨＳＶ−１は顔および口の皮膚細胞および／または粘膜細胞に広がり、通常は局所的な損傷、すなわち小水疱の形態での損傷を引き起こす。短期間のうちに、抗体は小水疱中のウイルスを中和するが、一方で体液性免疫応答が起こり得る前に、感染した宿主細胞の溶菌によってウイルスが放出される。溶菌によって放出されたウイルスは、口の神経終末上の受容体に付着することによって、特定の神経細胞（ニューロン）にも感染し、顔面神経（三叉神経）の神経節に到達し得る。ウイルスＤＮＡはアクソン内に浸入し、神経細胞の細胞質に入り込み、最終的に細胞核に到達すると、神経細胞のゲノム内にウイルスＤＮＡを組み込み、ウイルス遺伝子の発現をごく少数に留める潜伏状態に移行する（溶原化サイクル）。種々の外部刺激によって、ウイルスの再活性化、すなわち、潜伏状態および／または溶原化サイクルから、最終的に神経細胞の破壊（溶菌化）を招く溶菌サイクルへの移行が生じ得る。このような刺激として、例えば、免疫抑制、ストレス、ホルモン変動、物理的または精神的ストレス、発熱（熱性疱疹と呼ばれる理由でもある）、紫外線、組織の損傷および多くの場合に免疫学上の弱体化が挙げられる。ＨＳＶ−１のこのような活性化の発生率は、遺伝因子と環境因子の両方に依存すると考えられており、また年齢とホルモン変動の両方が関与している可能性がある。活性化の一環として発生する後代ウイルスは、最初にアクソンによって元の皮膚感染の部位および／または領域へと移送され、そこで皮膚細胞および／または粘膜細胞の感染および複製によって小水疱または疱疹（熱性疱疹）を再び産生する。これらのウイルスが免疫系によって再び中和された場合でも、ゲノム内にウイルスＤＮＡが統合されたまま（潜伏状態）である別の神経細胞は絶えず感染下にあるため、ＨＳＶ−１を免疫系によって身体から完全に排除することは不可能である。
【０００９】
へルペスウイルス性皮膚疾患は、以下により詳細に説明するような、特にウイルス複製に介入する、抗ウイルス活性成分を用いて一般に治療される。
【００１０】
したがって、抗ウイルス活性成分の開発において、ひいてはウイルス性皮膚疾患の予防および／または治療においても重要となる一般的手法は、ウイルス複製サイクルに介入して、宿主細胞のウイルス感染または宿主細胞内のウイルス核酸の複製を、例えば、ウイルス核酸によってコードされるウイルスタンパク質の発現を阻害することによって阻害することである。
【００１１】
ここ数十年にわたり、このような抗ウイルス活性成分、いわゆるウイルス増殖抑制剤（ｖｉｒｕｓｔａｔｉｃｓ）が開発されてきた。ウイルス増殖抑制剤の多くは、例えば、酵素ＤＮＡポリメラーゼ、逆転写酵素またはプロテアーゼなどを阻害して、それによりウイルスの複製および／または合成された長鎖のウイルスタンパク質から、より小さいタンパク質セグメントへのプロセシングを阻止する。本明細書では、これらの治療法の例を、特にＨＩＶ感染症の治療に関して記載する。しかしながら、ヘルペスウイルスＨＳＶ−１またはＨＳＶ−２によって引き起こされるウイルス性皮膚疾患の治療分野では、全身投与または局所投与されるウイルス増殖抑制剤も知られている。例としては、活性成分アシクロビル、バラシクロビル、ホスカルネットおよびペンシクロビルが挙げられる。
【００１２】
ウイルス増殖抑制剤を用いたウイルス性皮膚疾患の予防および／または治療として、次の２つの手法が一般に知られている。（１）全身投与：ウイルス増殖抑制剤の全身投与によって、活性成分が細胞核内でのウイルス核酸の複製、または宿主細胞の細胞質内に完全なウイルスを形成するウイルス粒子の組立てを阻害するため、宿主細胞に存在するウイルスの活性化を顕著に低減させることができる。（２）局所投与：ウイルスによる初期感染領域へのウイルス増殖抑制剤の局所投与によって、例えば、ＨＳＶ−１感染の場合に結果として生じる熱性疱疹などにおいて、別のルートへのウイルス複製を活性化の初期段階で予防でき、その結果、熱性疱疹のより急速な腫脹減退をもたらすことができる。
【００１３】
ウイルス増殖抑制剤の投与に関して、いずれの方法にもいくつかの重大な欠点がある。全身投与では、有効な治療のために比較的高い投与量を必要とし、それによって処置された生物に対する重篤な副作用、例えば非特異的免疫応答および自己免疫反応などを伴う。アシクロビルの場合、多数のこのような副作用が、文献から既知である。したがって、長期治療も反復治療も望ましくなく、患者の期待するものとはなり得ない。局所投与では、ウイルス感染領域、例えば熱性疱疹に対して、時間単位当たりに放出できる生物学的利用能の活性成分（ウイルス抑制薬）の量が極めて低い。こうしたウイルス増殖抑制剤の生物学的利用能の低さは、有効な局所処置にとって重大な障壁である。極めて低い水溶性を有するアシクロビルの場合、生物学的利用能が低い原因は、例えば、活性成分の経皮輸送に劣るためである。ウイルス増殖抑制剤の活性成分の供給を改善するためのプロドラッグ概念である、ウイルス抑制薬の種々の化学修飾は、この現象について何ら改善をもたらしてきていない。
【００１４】
先行技術に関する前述の説明は、主に特許文献１から得ている。この特許文献には、へルペスウイルス性疾患を患っている被検者の皮膚に重水を局所投与することにより、へルペスウイルス性皮膚疾患の治療に重水を使用することが提案されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１５】
【特許文献１】米国特許第８，６０９，１４７号明細書
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本発明は、へルペスウイルス性皮膚疾患の治療のための代替的かつ改善された方法を提供する。より詳細には、本発明者は、タンポポ草、すなわち葉および根の水抽出物および水／アルコール抽出物が、単純ヘルペスウイルス１型（ＨＳＶ−１）および帯状ヘルペス（ＶＺＶ）の治療のための局所治療として予想外に使用し得ることを見出した。
【００１７】
より詳細には、本発明者は、タンポポの水抽出物、水／アルコール抽出物および天然植物油抽出物が、局所的に塗布されるとき単純ヘルペスおよび帯状ヘルペスの両方を予想外に緩和することを見出した。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
本発明の更なる特徴および利点は、次の添付図面を参照して以下の詳細な説明からわかる。
【００１９】
【図１】既知のヌクレオシド類似体のＭＳ／ＭＳスペクトルである。
【図２】既知のヌクレオシド類似体のＭＳ／ＭＳスペクトルである。
【図３】既知のヌクレオシド類似体のＭＳ／ＭＳスペクトルである。
【図４】複数種のヌクレオシド標準物質およびモウコタンポポ抽出物に含まれるヌクレオシドのＬＣ／ＭＳ／ＭＳ分析図である。
【図５】既知のヌクレオシドと、モウコタンポポに含まれる新規ヌクレオシド類似体とを比較しているＬＣ／ＭＳ／ＭＳ分析図である。この新規ヌクレオシドの推定構造は、赤枠で囲まれている。
【図６】既知のヌクレオシドと、モウコタンポポに含まれる別の種類の新規ヌクレオシド類似体とを比較しているＬＣ／ＭＳ／ＭＳ分析図である。この新規ヌクレオシドの推定構造は、赤枠で囲まれている。
【図７】既知のヌクレオシドと、モウコタンポポに含まれるさらに別の種類の新規ヌクレオシド類似体とを比較しているＬＣ／ＭＳ／ＭＳ分析図である。この新規ヌクレオシドの推定構造は、赤枠で囲まれている。
【図８】本発明で使用する一般的な同定手順のフローチャートである。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
本明細書で使用される場合、「アルコール」は、低級アルコール、好ましくはＣ１〜Ｃ４アルコールを意味する。また、天然植物油は、好ましくは亜麻油であり、または例示として挙げる他の市販の油、例えばアーモンド油、ココナッツ油、ホホバ油、レモン油、オリーブ油、セサミシード油およびヒマワリ油を意味する。
【実施例】
【００２１】
調製および抽出プロトコル
乾燥タンポポ（原産国モンゴル）を刻み、蒸留水中またはメタノール中のいずれかで煮沸して抽出した（１２５０ｍＬの水またはメタノールに対して５０ｇのタンポポ）。１：１、１：２、１：５、１：１０の範囲内の各種希釈液を、３０分間ウイルスと接触させた後、抽出物をピペット採取することにより、脱イオン水およびアルコール抽出物をＨＳＶ−１について試験した。次に、ＭＲＣ−５細胞の入った試験管にウイルスをピペット滴下し、各試験管の細胞変性効果を観察した。濃度１：１および１：２のＴＭ抽出物は、ウイルス増殖を阻止した。
【００２２】
帯状疱疹の場合、脱イオン水を用いた以外は、同様の方法で植物を調製した。帯状疱疹と診断された個人が、タオルにＴＭ液体抽出物を含ませ、２時間ごとに、または必要に応じて、１回２０分間、身体にタオルで抽出物を当てた。１日または２日間、必要に応じて実施した。２日以内に、帯状疱疹は消えた。
【００２３】
図８に示す一般的な手順に従って、ＬＣ／ＭＳおよびＵＶ装置にて、抽出物の採取および分画を行った。次に、各種希釈液を３０分間ウイルスと接触させた後、ＭＲＣ−５細胞が入っている試験管の中へ溶液をピペット滴下することにより、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳを使用して分析された脱イオン水抽出物を（上記と同じ希釈倍率で）ＨＳＶ−１について試験した。各試験管の細胞変性効果（ＣＰＥ）を観察した。
【００２４】
モンゴル産タンポポの異なるバッチおよび油を含む異なる抽出液について同様の結果が見られ、結果の再現性を確認した。理論に束縛されるものではないが、タンポポ抽出物に含有された特定のヌクレオシド類が、観察された効果に対して大きく寄与し得ると考えられる。これらの寄与化合物を単離し、それぞれの推定構造を図５〜図７に示した。ただし、抽出物の他の成分も関与している場合も考えられる。
【図１】
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【図２】
2017517543.tif 000010
【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【手続補正書】
【提出日】平成28年12月28日(2016.12.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヘルペスウイルス性皮膚疾患を治療するための医薬組成物であって、担体中に蒲公英の水系抽出物、水／アルコール系抽出物または天然植物油系抽出物を含む、医薬組成物。
【請求項２】
前記ヘルペスウイルス性皮膚疾患が、単純ヘルペスウイルス１型または帯状ヘルペスによって引き起こされる、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記抽出物が、モウコタンポポ（蒲公英：Ｔａｒａｘａｃｕｍ  Ｍｏｎｇｏｌｉｃｕｍ）の水系抽出物を含む、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
前記抽出物が、モウコタンポポ（蒲公英）の水／アルコール系抽出物を含む、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項５】
前記抽出物が、次の構造：
【化１】
2017517543.tif 000017
を有する化合物を含む、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項６】
前記抽出物が、次の構造：
【化２】
2017517543.tif 000018
を有する化合物を含む、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項７】
前記抽出物が、次の構造：
【化３】
2017517543.tif 000019
を有する化合物を含む、請求項１または２に記載の組成物。
【国際調査報告】
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