(57)【要約】ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）の活性を調節するのに有用である、特に癌の治療に有用である、あるクラスのペプチドを提供する。ペプチドは、活性基と活性基を細胞に送達するためのカセットとを含む。ＰＡＲＰを切断するプロテアーゼの競合的阻害剤として作用すると考えられる陰性基を有するペプチドも提供する。【選択図】図１８
2017529386.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ１（ＰＡＲＰ−１）の活性を調節可能な環状化合物であって、式１の部分： 
式１：［Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３−］
（式中、Ｘ１は、ＰＡＲＰ−１の切断を阻害可能なペプチド部分であり、
Ｘ２は存在してもしなくてもよく、Ｘ２が存在するときには、Ｘ２はＶａｌ又はＳｅｒから選択され、
Ｘ３とＸ４の一方は、Ｔｒｐ−Ｔｒｐ及びＡｒ１−Ａｒ２から選択され、
Ｘ３とＸ４の他方は、Ａｒｇ−Ａｒｇ、Ｇｐａ−Ｇｐａ、Ｈｃａ−Ｈｃａ及びＡｒ３−Ａｒ４から選択され、
ここで、
Ｈｃａは、ホモシステイン酸のアミノ酸残基であり、
Ｇｐａは、グアニジノフェニルアラニンのアミノ酸残基であり、
Ａｒ１、Ａｒ２、Ａｒ３及びＡｒ４はそれぞれ、アリール側鎖を有するアミノ酸残基であり、前記アリール側鎖は、場合によっては置換されたナフチル基、場合によっては置換された１，２−ジヒドロナフチル基、及び場合によっては置換された１，２，３，４−テトラヒドロナフチル基から独立に選択され、
Ａｚａは、アジド−ホモアラニンのアミノ酸残基である）
又はその塩、誘導体、プロドラッグ若しくは模倣物を含む、環状化合物。
【請求項２】
少なくとも１個の標識成分を含む、請求項１に記載の環状化合物。
【請求項３】
前記少なくとも１個の標識成分が蛍光標識を含む、請求項２に記載の環状化合物。
【請求項４】
前記化合物が、
シクロ−［Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３］
からなる化合物である、又はその塩、誘導体、プロドラッグ若しくは模倣物である、
請求項１から３のいずれか一項に記載の環状化合物。
【請求項５】
Ｘ１が、配列番号２１（式２）、配列番号２２（式３）、配列番号２３（式４）及び配列番号２４（式５）から選択され、
配列番号２１（式２）は−Ｐｒｏ−Ｘ５−Ｘ６−Ｐｒｏ−Ｘ７−Ｐｒｏ−であり、
式中、Ｘ５とＸ７の両方は、酸性側鎖を有するアミノ酸残基であり、又はＸ５とＸ７の両方は、塩基性側鎖を有するアミノ酸残基であり、
前記酸性側鎖を有するアミノ酸残基は、Ｇｌｕ、Ａｚａ及びＨｃａから各々独立に選択され、
Ｘ６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、ＭｅＧｌｙ及び（ＣＨ２）３から選択され、
配列番号２２（式３）は−Ｐｒｏ−Ｘ８−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｘ９−Ｐｒｏ−であり、
式中、Ｘ８及びＸ９は、Ａｓｐ及びＧｌｕから各々独立に選択され、
配列番号２３（式４）は−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−であり、
配列番号２４（式５）は−Ｇｌｙ−Ｘ１１−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｘ１２−Ｘ１３−であり、
式中、Ｘ１１は、Ａｓｐ及びＧｌｕから選択され、
Ｘ１２は、Ａｓｐ、Ｎ−アルキルアスパラギン酸残基、及びＮ−アリールアスパラギン酸残基Ｇｌｕ、Ｎ−アルキルグルタミン酸残基及びＮ−アリールグルタミン酸残基から選択され、
Ｘ１３は、Ｇｌｙ、Ｎ−アルキルグリシン残基、及びＮ−アリールグリシン残基から選択され、
ただし、Ｘ１２がＡｓｐである場合、Ｘ１３は、Ｎ−アルキルグルタミン酸残基又はＮ−アリールグルタミン酸残基である、
請求項１から４のいずれか一項に記載の環状化合物。
【請求項６】
Ｘ１が配列番号２１（式２）である、請求項５に記載の環状化合物。
【請求項７】
Ｘ５がＧｌｕである、請求項６に記載の環状化合物。
【請求項８】
Ｘ５がＨｃａである、請求項６に記載の環状化合物。
【請求項９】
Ｘ７がＧｌｕ又はＨｃａである、請求項６から８のいずれか一項に記載の環状化合物。
【請求項１０】
Ｘ１が、
ｉ．配列番号２  −Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−、
ｉｉ．配列番号４  −Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−、
ｉｉｉ．配列番号２５  −Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−、
ｉｖ．配列番号２６  −Ｐｒｏ−Ｈｃａ−ＭｅＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−、
ｖ．配列番号２７  −Ｐｒｏ−Ａｚａ−ＭｅＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ−、
ｖｉ．配列番号２８  −Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ−、
ｖｉｉ．配列番号４１  −Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−、及び
ｖｉｉｉ．配列番号４２  −Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ
から選択される、請求項６に記載の環状化合物。
【請求項１１】
Ｘ１が−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−（配列番号２）である、請求項１０に記載の環状化合物。
【請求項１２】
Ｘ１が−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−（配列番号４）である、請求項１０に記載の環状化合物。
【請求項１３】
Ｘ１が配列番号２２（式３）であり、Ｘ８がＡｓｐであり、Ｘ９がＡｓｐである、請求項５に記載の環状化合物。
【請求項１４】
Ｘ１が配列番号２４（式５）である、請求項５に記載の環状化合物。
【請求項１５】
Ｘ１１がＡｓｐであり、Ｘ１２がＡｓｐ又はＮ−アルキルアスパラギン酸残基である、請求項１４に記載の環状化合物。
【請求項１６】
Ｘ１が−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−ＮＭｅＡｓｐ−ＭｅＧｌｙ−Ｖａｌ（配列番号２９）であり、式中のＮＭｅＡｓｐがＮ−メチルアスパラギン酸残基である、請求項１５に記載の環状化合物。
【請求項１７】
Ｘ２が存在し、Ｘ２がＶａｌである、請求項１から１６のいずれか一項に記載の環状化合物。
【請求項１８】
Ｘ３がＴｒｐ−Ｔｒｐ及びＡｒ１−Ａｒ２から選択され、Ｘ４がＡｒｇ−Ａｒｇ、Ｇｐａ−Ｇｐａ及びＨｃａ−Ｈｃａから選択される、請求項１から１７のいずれか一項に記載の環状化合物。
【請求項１９】
Ｘ３がＴｒｐ−Ｔｒｐである、請求項１８に記載の環状化合物。
【請求項２０】
Ｘ３がＡｒ１−Ａｒ２である、請求項１から１８のいずれか一項に記載の環状化合物。
【請求項２１】
Ａｒ１及び／又はＡｒ２が、場合によっては置換されたナフチル基を含む、請求項２０に記載の環状化合物。
【請求項２２】
Ａｒ１及び／又はＡｒ２が、グルタミン酸−ガンマ−［２−（１−スルホニル−５−ナフチル）−アミノエチルアミド（「Ｅｄａ」）のアミノ酸残基である、請求項２１に記載の環状化合物。
【請求項２３】
Ｘ４がＡｒｇ−Ａｒｇ、Ｇｐａ−Ｇｐａ又はＨｃａ−Ｈｃａである、請求項１８から２２のいずれか一項に記載の環状化合物。
【請求項２４】
Ｘ３がＡｒ１−Ａｒ２であり、Ｘ４がＡｒ３−Ａｒ４である、請求項１から１７のいずれか一項に記載の環状化合物。
【請求項２５】
Ａｒ１及びＡｒ２が各々Ｅｄａであり、Ａｒ３及びＡｒ４が各々Ｎａｐであり、「Ｎａｐ」が３−アミノ−３−（−２−ナフチル）−プロピオン酸のアミノ酸残基である、請求項２４に記載の環状化合物。
【請求項２６】
Ｘ１が以下の構造：
【化１】
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を有する、又は該構造の誘導体である、請求項１から４のいずれか一項に記載の環状化合物。
【請求項２７】
Ｘ１が以下の構造：
【化２】
2017529386.tif 000008
を有する、又は該構造の誘導体である、請求項１から４のいずれか一項に記載の環状化合物。
【請求項２８】
前記環状化合物が、
ｉ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ］（配列番号１５）、
ｉｉ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｇｐａ−Ｇｐａ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｇｐａ−Ｇｐａ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ］（配列番号１６）、
ｉｉｉ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ］（配列番号１９）、
ｉｖ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ］（配列番号２０）、
ｖ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｇｐａ−Ｇｐａ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｇｐａ−Ｇｐａ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ］（配列番号３０）、
ｖｉ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｎａｐ−Ｎａｐ］（配列番号３１）、
ｖｉｉ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｅｄａ−Ｅｄａ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｅｄａ−Ｅｄａ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｅｄａ−Ｅｄａ］（配列番号３２）、
ｖｉｉｉ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ］（配列番号３３）、
ｉｘ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｈｃａ−Ｈｃａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｈｃａ−Ｈｃａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ］（配列番号３４）、
ｘ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｈｃａ−Ｈｃａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｈｃａ−Ｈｃａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ］（配列番号３５）、
ｘｉ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ａｚａ−ＭｅＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｈｃａ−Ｈｃａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｈｃａ−Ｈｃａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ］（配列番号３６）、
ｘｉｉ．シクロ−［Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−ＭｅＡｓｐ−ＭｅＧｌｙ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ］（配列番号４０）、
ｘｉｉｉ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ］（配列番号４３）、
ｘｉｖ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ］（配列番号４４）、
ｘｖ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｇｐａ−Ｇｐａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｇｐａ−Ｇｐａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｇｐａ−Ｇｐａ］（配列番号４５）、
ｘｖｉ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｅｄａ−Ｅｄａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｅｄａ−Ｅｄａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｅｄａ−Ｅｄａ］（配列番号４６）、
ｘｖｉｉ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｅｄａ−Ｅｄａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｅｄａ−Ｅｄａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｅｄａ−Ｅｄａ］（配列番号４７）、
ｘｖｉｉｉ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｅｄａ−Ｅｄａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｅｄａ−Ｅｄａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｅｄａ−Ｅｄａ］（配列番号４８）、及び
ｘｉｘ．それらの誘導体
から選択され、
「Ｎａｐ」が３−アミノ−３−（−２−ナフチル）−プロピオン酸のアミノ酸残基である、
請求項５に記載の環状化合物。
【請求項２９】
実質的に上述された環状化合物。
【請求項３０】
ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ１（ＰＡＲＰ−１）の活性の調節に使用するための化合物であって、式６の部分：
式６：−Ｐｒｏ−Ｘ１４−Ｘ１５−Ｐｒｏ−Ｘ１６−Ｐｒｏ−
（式中、Ｘ１４及びＸ１６は、側鎖を有するアミノ酸残基、置換基を有するナフチル基、置換基である１，２−ジヒドロナフチル基、置換基を有する１，２，３，４−テトラヒドロナフチル基、及び置換基を有するプロピル基から各々独立に選択され、各側鎖又は置換基は酸性官能基を含み、
Ｘ１５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、ＭｅＧｌｙ及び（ＣＨ２）３から選択される）
を含む、化合物。
【請求項３１】
Ｘ１４及びＸ１６が各々アミノ酸残基である、請求項３０に記載の化合物。
【請求項３２】
Ｘ１４とＸ１６の少なくとも一方がＡｓｐである、請求項３１に記載の化合物。
【請求項３３】
Ｘ１４及び／又はＸ１６がスルホン酸基を含む、請求項３１に記載の化合物。
【請求項３４】
前記化合物が、合計１６〜１８単位を含む環状ペプチド化合物であり、各単位は、アミノ酸残基、場合によっては置換されたナフチル基、場合によっては置換された１，２ジヒドロナフチル基、及び場合によっては置換された１，２，３，４−テトラヒドロナフチル基又は場合によっては置換されたプロピル基である、請求項３０から３３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３５】
式８の構造：
式８：シクロ−［Ｘ１７−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３］
（式中、Ｘ１７は前記式６の部分であり、
Ｘ２、Ｘ３及びＸ４は請求項１に定義され、場合によっては、Ｘ３及びＸ４は請求項１８に定義されている）
を含む、請求項３０から３４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３６】
標識成分を含む、請求項３０から３５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３７】
実質的に上述されたポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ１の活性を調節可能なアニオン性部分を含む化合物。
【請求項３８】
請求項１から３７のいずれか一項に定義された化合物、及び薬剤担体、希釈剤又は賦形剤を含む、医薬組成物。
【請求項３９】
更なる治療薬を含む、請求項３８に記載の医薬組成物。
【請求項４０】
前記更なる治療薬が好気的解糖阻害剤である、請求項３９に記載の医薬組成物。
【請求項４１】
前記好気的解糖阻害剤が２−デオキシグルコースである、請求項４０に記載の医薬組成物。
【請求項４２】
医薬品に使用するための、請求項１から３７のいずれか一項に記載の化合物又は請求項３８から４１のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項４３】
前記化合物又は組成物が癌の治療に使用するためである、請求項４２に記載の使用するための化合物又は医薬組成物。
【請求項４４】
前記化合物又は組成物が更なる治療薬と一緒に投与される、請求項４３に記載の使用するための化合物又は医薬組成物。
【請求項４５】
前記更なる治療薬が好気的解糖阻害剤である、請求項４４に記載の使用するための化合物又は医薬組成物。
【請求項４６】
前記化合物又は組成物が、放射線療法及び／又は手術の使用を更に含む治療計画に使用される、請求項４３から４５のいずれか一項に記載の使用するための化合物又は医薬組成物。
【請求項４７】
前記癌が、乳癌、前立腺癌、結腸直腸癌、膀胱癌、卵巣癌、子宮体癌、子宮頚癌、頭頚部癌、胃癌、膵癌、食道癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、悪性黒色腫、神経芽細胞腫、白血病、リンパ腫、肉腫又は神経膠腫の１つ以上を含む、請求項４３から４６のいずれか一項に記載の使用するための化合物又は医薬組成物。
【請求項４８】
前記癌が、ＰＡＲＰ−１が非癌細胞に比べて上方制御される癌細胞を含む、請求項４３から４７のいずれか一項に記載の使用するための化合物又は医薬組成物。
【請求項４９】
癌の治療用医薬品の製造における請求項１から３７のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項５０】
ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼの活性をインビトロで調節するための、請求項１から３７のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項５１】
癌を治療する方法であって、請求項１から３７のいずれか一項に記載の化合物又は請求項３８から４１のいずれか一項に記載の医薬組成物を患者に投与するステップを含む、方法。
【請求項５２】
更に好気的解糖阻害剤を前記患者に投与するステップを含む、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
更に化学療法、放射線療法及び手術の１つ以上の使用を含む、請求項５１又は請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
前記化合物が標識成分を含み、前記方法が、前記化合物を検出するステップを含む、請求項５１から５３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５５】
前記癌が、乳癌、前立腺癌、結腸直腸癌、膀胱癌、卵巣癌、子宮体癌、子宮頚癌、頭頚部癌、胃癌、膵癌、食道癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、悪性黒色腫、神経芽細胞腫、白血病、リンパ腫、肉腫又は神経膠腫の１つ以上を含む、請求項５１から５４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５６】
前記癌が、ＰＡＲＰ−１が非癌細胞に比べて上方制御される癌細胞を含む、請求項５１から５５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５７】
ｉ．細胞を請求項１から３６のいずれか一項に記載の化合物と接触させるステップ、及び
ｉｉ．前記化合物を検出するステップ
を含む分析方法。
【請求項５８】
前記細胞が少なくとも１個の癌細胞を含む、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
前記方法がウエスタンブロットアッセイを含む、請求項５７又は請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
ステップ（ｉｉ）が蛍光検出を含む、請求項５７から５９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６１】
ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ１（ＰＡＲＰ−１）及び／又は乳酸デヒドロゲナーゼＡ（ＬＤＨＡ）の活性を調節可能な化合物であって、式１の部分：
式１：［Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３−］
（式中、Ｘ１は、ＰＡＲＰ−１の切断を阻害可能なペプチド部分であり、
Ｘ２は存在してもしなくてもよく、Ｘ２が存在するときには、Ｘ２はＶａｌ又はＳｅｒから選択され、
Ｘ３とＸ４の一方は、Ｔｒｐ−Ｔｒｐ及びＡｒ１−Ａｒ２から選択され、
Ｘ３とＸ４の他方は、Ａｒｇ−Ａｒｇ、Ｇｐａ−Ｇｐａ、Ｈｃａ−Ｈｃａ及びＡｒ３−Ａｒ４から選択され、
ここで、
Ｈｃａは、ホモシステイン酸のアミノ酸残基であり、
Ｇｐａは、グアニジノフェニルアラニンのアミノ酸残基であり、
Ａｒ１、Ａｒ２、Ａｒ３及びＡｒ４はそれぞれ、アリール側鎖を有するアミノ酸残基であり、前記アリール側鎖は、場合によっては置換されたナフチル基、場合によっては置換された１，２−ジヒドロナフチル基、及び場合によっては置換された１，２，３，４−テトラヒドロナフチル基から独立に選択され、
Ａｚａは、アジド−ホモアラニンのアミノ酸残基である）
又はその塩、誘導体、プロドラッグ若しくは模倣物を含む、化合物。
【請求項６２】
少なくとも１個の標識成分を含む、請求項６１に記載の化合物。
【請求項６３】
Ｘ１が、配列番号２１（式２）、配列番号２２（式３）、配列番号２３（式４）及び配列番号２４（式５）から選択され、
配列番号２１（式２）は−Ｐｒｏ−Ｘ５−Ｘ６−Ｐｒｏ−Ｘ７−Ｐｒｏ−であり、
式中、Ｘ５とＸ７の両方は、酸性側鎖を有するアミノ酸残基であり、又はＸ５とＸ７の両方は、塩基性側鎖を有するアミノ酸残基であり、
前記酸性側鎖を有するアミノ酸残基は、Ｇｌｕ、Ａｚａ及びＨｃａから各々独立に選択され、
Ｘ６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、ＭｅＧｌｙ及び（ＣＨ２）３から選択され、
配列番号２２（式３）は−Ｐｒｏ−Ｘ８−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｘ９−Ｐｒｏ−であり、
式中、Ｘ８及びＸ９は、Ａｓｐ及びＧｌｕから各々独立に選択され、
配列番号２３（式４）は−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−であり、
配列番号２４（式５）は−Ｇｌｙ−Ｘ１１−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｘ１２−Ｘ１３−であり、
式中、Ｘ１１は、Ａｓｐ及びＧｌｕから選択され、
Ｘ１２は、Ａｓｐ、Ｎ−アルキルアスパラギン酸残基、及びＮ−アリールアスパラギン酸残基Ｇｌｕ、Ｎ−アルキルグルタミン酸残基及びＮ−アリールグルタミン酸残基から選択され、
Ｘ１３は、Ｇｌｙ、Ｎ−アルキルグリシン残基、及びＮ−アリールグリシン残基から選択され、
ただし、Ｘ１２がＡｓｐである場合、Ｘ１３は、Ｎ−アルキルグルタミン酸残基又はＮ−アリールグルタミン酸残基である、
請求項６１又は６２に記載の化合物。
【請求項６４】
Ｘ１が配列番号２１（式２）である、請求項６３に記載の化合物。
【請求項６５】
Ｘ５がＧｌｕ又はＨｃａであり、及び／又はＸ７がＧｌｕ又はＨｃａである、請求項６４に記載の化合物。
【請求項６６】
Ｘ１が、
ｉ．配列番号２  −Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−、
ｉｉ．配列番号４  −Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−、
ｉｉｉ．配列番号２５  −Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−、
ｉｖ．配列番号２６  −Ｐｒｏ−Ｈｃａ−ＭｅＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−、
ｖ．配列番号２７  −Ｐｒｏ−Ａｚａ−ＭｅＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ−、
ｖｉ．配列番号２８  −Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ−、
ｖｉｉ．配列番号４１  −Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−、及び
ｖｉｉｉ．配列番号４２  −Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ
から選択される、請求項６４に記載の化合物。
【請求項６７】
Ｘ１が配列番号２２（式３）であり、Ｘ８がＡｓｐであり、Ｘ９がＡｓｐである、又はＸ１が配列番号２４（式５）である、請求項６６に記載の化合物。
【請求項６８】
Ｘ１が配列番号２４（式５）であり、Ｘ１１がＡｓｐであり、Ｘ１２がＡｓｐ又はＮ−アルキルアスパラギン酸残基である、請求項６３に記載の化合物。
【請求項６９】
Ｘ１が−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−ＮＭｅＡｓｐ−ＭｅＧｌｙ−Ｖａｌ（配列番号２９）であり、式中のＮＭｅＡｓｐがＮ−メチルアスパラギン酸残基である、請求項６８に記載の化合物。
【請求項７０】
Ｘ２が存在し、Ｘ２がＶａｌである、請求項１から３７、４２から４８及び６１から６９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７１】
Ｘ３がＴｒｐ−Ｔｒｐ及びＡｒ１−Ａｒ２から選択され、Ｘ４がＡｒｇ−Ａｒｇ、Ｇｐａ−Ｇｐａ及びＨｃａ−Ｈｃａから選択される、請求項６１から７０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７２】
Ａｒ１及び／又はＡｒ２が、場合によっては置換されたナフチル基を含む、請求項７１に記載の化合物。
【請求項７３】
Ａｒ１及び／又はＡｒ２が、グルタミン酸−ガンマ−［２−（１−スルホニル−５−ナフチル）−アミノエチルアミド（「Ｅｄａ」）のアミノ酸残基である、請求項７２に記載の化合物。
【請求項７４】
Ｘ４がＡｒｇ−Ａｒｇ、Ｇｐａ−Ｇｐａ又はＨｃａ−Ｈｃａである、請求項７１から７３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７５】
Ｘ３がＡｒ１−Ａｒ２であり、Ｘ４がＡｒ３−Ａｒ４である、請求項６１から７０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７６】
Ａｒ１及びＡｒ２が各々Ｅｄａであり、Ａｒ３及びＡｒ４が各々Ｎａｐであり、「Ｎａｐ」が３−アミノ−３−（−２−ナフチル）−プロピオン酸のアミノ酸残基である、請求項７５に記載の化合物。
【請求項７７】
ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ１（ＰＡＲＰ−１）及び／又は乳酸デヒドロゲナーゼＡ（ＬＤＨＡ）の活性の調節に使用するための化合物であって、式６の部分：
式６：−Ｐｒｏ−Ｘ１４−Ｘ１５−Ｐｒｏ−Ｘ１６−Ｐｒｏ−
（式中、Ｘ１４及びＸ１６は、側鎖を有するアミノ酸残基、置換基を有するナフチル基、置換基である１，２−ジヒドロナフチル基、置換基を有する１，２，３，４−テトラヒドロナフチル基、及び置換基を有するプロピル基から各々独立に選択され、各側鎖又は置換基は酸性官能基を含み、
Ｘ１５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、ＭｅＧｌｙ及び（ＣＨ２）３から選択される）
を含む、化合物。
【請求項７８】
Ｘ１４及びＸ１６が各々アミノ酸残基である、請求項７７に記載の化合物。
【請求項７９】
Ｘ１４とＸ１６の少なくとも一方がＡｓｐである、請求項７８に記載の化合物。
【請求項８０】
Ｘ１４及び／又はＸ１６がスルホン酸基を含む、請求項７９に記載の化合物。
【請求項８１】
前記化合物が、合計１６〜１８単位を含むペプチド化合物であり、各単位は、アミノ酸残基、場合によっては置換されたナフチル基、場合によっては置換された１，２ジヒドロナフチル基、及び場合によっては置換された１，２，３，４−テトラヒドロナフチル基又は場合によっては置換されたプロピル基である、請求項７７から８０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８２】
式８の構造： 
式８：［Ｘ１７−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３］
（式中、Ｘ１７は前記式６の部分であり、
Ｘ２、Ｘ３及びＸ４は請求項６１に定義され、場合によっては、Ｘ３及びＸ４は請求項７１に定義されている）
を含む、請求項７７から８１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８３】
標識成分を含む、請求項７７から８２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８４】
実質的に上述されたポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ１（ＰＡＲＰ−１）及び／又は乳酸デヒドロゲナーゼＡ（ＬＤＨＡ）の活性を調節可能なアニオン性部分を含む化合物。
【請求項８５】
請求項６１から８４のいずれか一項に定義された化合物、及び薬剤担体、希釈剤又は賦形剤を含む、医薬組成物。
【請求項８６】
更なる治療薬を含む、請求項８５に記載の医薬組成物。
【請求項８７】
前記更なる治療薬が好気的解糖阻害剤である、請求項８６に記載の医薬組成物。
【請求項８８】
前記好気的解糖阻害剤が２−デオキシグルコースである、請求項８７に記載の医薬組成物。
【請求項８９】
医薬品に使用するための、請求項６１から８４のいずれか一項に記載の化合物又は請求項８５から８８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項９０】
前記化合物又は組成物が癌の治療に使用するためである、請求項８９に記載の使用するための化合物又は医薬組成物。
【請求項９１】
前記化合物又は組成物が更なる治療薬と一緒に投与される、請求項９０に記載の使用するための化合物又は医薬組成物。
【請求項９２】
前記更なる治療薬が好気的解糖阻害剤である、請求項９１に記載の使用するための化合物又は医薬組成物。
【請求項９３】
前記化合物又は組成物が、放射線療法及び／又は手術の使用を更に含む治療計画に使用される、請求項９０から９２のいずれか一項に記載の使用するための化合物又は医薬組成物。
【請求項９４】
癌の治療用医薬品の製造における請求項６１から８４のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項９５】
ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ及び／又は乳酸デヒドロゲナーゼＡ（ＬＤＨＡ）の活性をインビトロで調節するための、請求項６１から８４のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項９６】
癌を治療する方法であって、請求項６１から６４のいずれか一項に記載の化合物又は請求項８５から８８のいずれか一項に記載の医薬組成物を患者に投与するステップを含む、方法。
【請求項９７】
更に好気的解糖阻害剤を前記患者に投与するステップを含む、請求項９６に記載の方法。
【請求項９８】
更に化学療法、放射線療法及び手術の１つ以上の使用を含む、請求項９６又は請求項９７に記載の方法。
【請求項９９】
前記化合物が標識成分を含み、前記方法が、前記化合物を検出するステップを含む、請求項９６から９８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１００】
ｉ．細胞を請求項６１から８３のいずれか一項に記載の化合物と接触させるステップ、及び
ｉｉ．前記化合物を検出するステップ
を含む分析方法。
【請求項１０１】
前記細胞が少なくとも１個の癌細胞を含む、請求項１００に記載の方法。
【請求項１０２】
前記方法がウエスタンブロットアッセイを含む、請求項１００又は請求項１０１に記載の方法。
【請求項１０３】
ステップ（ｉｉ）が蛍光検出を含む、請求項１００から１０２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０４】
ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ１（ＰＡＲＰ−１）及び／又は乳酸デヒドロゲナーゼＡ（ＬＤＨＡ）の活性を調節可能な化合物であって、式１の部分：
式１：［Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３−］
（式中、Ｘ１は、ＰＡＲＰ−１の切断を阻害可能な部分であり、
Ｘ２は存在してもしなくてもよく、Ｘ２が存在するときには、Ｘ２はＶａｌ又はＳｅｒから選択され、
Ｘ３とＸ４の一方は、Ｔｒｐ−Ｔｒｐ及びＡｒ１−Ａｒ２から選択され、
Ｘ３とＸ４の他方は、Ａｒｇ−Ａｒｇ、Ｇｐａ−Ｇｐａ、Ｈｃａ−Ｈｃａ及びＡｒ３−Ａｒ４から選択され、
ここで、
Ｈｃａは、ホモシステイン酸のアミノ酸残基であり、
Ｇｐａは、グアニジノフェニルアラニンのアミノ酸残基であり、
Ａｒ１、Ａｒ２、Ａｒ３及びＡｒ４はそれぞれ、アリール側鎖を有するアミノ酸残基であり、前記アリール側鎖は、場合によっては置換されたナフチル基、場合によっては置換された１，２−ジヒドロナフチル基、及び場合によっては置換された１，２，３，４−テトラヒドロナフチル基から独立に選択され、
Ａｚａは、アジド−ホモアラニンのアミノ酸残基であり、
Ｘ１は、
【化３】
2017529386.tif 000009
若しくは
【化４】
2017529386.tif 000010
の構造を有する、又は該構造の誘導体である）
又はその塩、誘導体、プロドラッグ若しくは模倣物を含む、化合物。
【請求項１０５】
少なくとも１個の標識成分を含む、請求項１０４に記載の化合物。
【請求項１０６】
前記少なくとも１個の標識成分が蛍光標識を含む、請求項１０５に記載の化合物。
【請求項１０７】
前記化合物が、
シクロ−［Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３］
からなる化合物である、又はその塩、誘導体、プロドラッグ若しくは模倣物である、
請求項１０４から１０６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１０８】
前記化合物が、１個以上のペプチド結合のＮＨ基がＣＨ２基で置換された模倣物である、請求項１０４から１０７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１０９】
前記化合物が、１個以上のアミノ酸残基がアリール基で置換された模倣物である、請求項１０４から１０８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１０】
前記アリール基がナフチル基である、請求項１０９に記載の化合物。
【請求項１１１】
前記化合物が模倣物であり、前記アミノ酸残基の１個以上が、場合によっては置換されたナフチル基、場合によっては置換された１，２−ジヒドロナフチル基、置換基を有する場合によっては置換された１，２，３，４−テトラヒドロナフチル基、又は場合によっては置換されたプロピル基で置換された、請求項１０４から１１０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１２】
前記化合物が、２３種のタンパク質構成アミノ酸のいずれかの側鎖を形成する基から選択された置換基を含む模倣化合物である、請求項１０４から１１１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１３】
前記化合物が、前記アミノ酸残基の５０％以下が前記基で置換された模倣化合物である、請求項１１２に記載の化合物。
【請求項１１４】
更に好気的解糖阻害剤を含む、請求項１０３から１１３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１５】
前記好気的解糖阻害剤が２−デオキシグルコース（２−ＤＯＧ）である、請求項１１４に記載の化合物。
【請求項１１６】
医薬品に使用するための、請求項１０３から１１５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１７】
前記組成物が癌の治療に使用するためである、請求項１１６に記載の化合物。
【請求項１１８】
ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ１（ＰＡＲＰ−１）作動物質及び乳酸デヒドロゲナーゼＡ（ＬＤＨＡ）阻害剤を含む、癌の治療のための化合物。
【請求項１１９】
前記ＰＡＲＰ−１作動物質及びＬＤＨＡ阻害剤が単一の治療薬である、請求項１１８に記載の化合物。
【請求項１２０】
前記化合物が、ＰＡＲＰ−１のＤＥＶＤ若しくはＧＤＥＶＤＧ領域に結合することができる、及び／又は該領域を切断から保護することができる、請求項１１８又は１１９に記載の化合物。
【請求項１２１】
前記化合物が、１６〜１８個のアミノ酸を有するペプチド、又はその塩、誘導体、プロドラッグ若しくは模倣物を含む、請求項１１８から１２０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１２２】
配列番号１５又は配列番号１６のアミノ酸配列を含む、請求項１２１に記載の化合物。
【請求項１２３】
前記ペプチドが、前記ＰＡＲＰ−１のＤＥＶＤ又はＧＤＥＶＤＧ領域に結合する４〜６アミノ酸配列、及び／又はＰＡＲＰ切断を阻害する４〜６アミノ酸配列を含む、請求項１２１又は１２２に記載の化合物。
【請求項１２４】
前記化合物が、請求項１から３６及び請求項６１から８３及び請求項１０４から１１３に記載の化合物である、請求項１１８から１２３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１２５】
好気的解糖阻害剤を含む、又は更に含む、請求項１１８から１２４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１２６】
前記好気的解糖阻害剤が２−デオキシグルコース（２−ＤＯＧ）を含む、請求項１２５に記載の化合物。
【請求項１２７】
更に薬剤担体、希釈剤又は賦形剤を含む、請求項１１８から１２６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１２８】
前記化合物が、放射線療法及び／又は手術の使用を更に含む治療計画に使用される、請求項１１８から１２７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１２９】
前記癌が、乳癌、前立腺癌、結腸直腸癌、膀胱癌、卵巣癌、子宮体癌、子宮頚癌、頭頚部癌、胃癌、膵癌、食道癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、悪性黒色腫、神経芽細胞腫、白血病、リンパ腫、肉腫又は神経膠腫の１つ以上を含む、請求項１１８から１２８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１３０】
前記癌が複数の癌又は転移性癌を含む、請求項１１８から１２９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１３１】
癌の治療用医薬品の製造における請求項１１８から１３０のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項１３２】
ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ１（ＰＡＲＰ−１）作動物質及び／又は乳酸デヒドロゲナーゼＡ（ＬＤＨＡ）阻害剤を含む第１の治療薬と、好気的解糖阻害剤を含む第２の治療薬とを含む、癌の治療のための併用療法。
【請求項１３３】
前記第１と第２の治療薬が同時投与用である、請求項１３２に記載の併用療法。
【請求項１３４】
前記化合物が、ＰＡＲＰ−１のＤＥＶＤ若しくはＧＤＥＶＤＧ領域に結合することができる、及び／又は該領域を切断から保護することができる、請求項１３２又は１３３に記載の併用療法。
【請求項１３５】
前記化合物が、１６〜１８個のアミノ酸を有するペプチド、又はその塩、誘導体、プロドラッグ若しくは模倣物を含む、請求項１３２から１３４のいずれか一項に記載の併用療法。
【請求項１３６】
配列番号１６又は配列番号３０のアミノ酸配列を含む、請求項１３５に記載の併用療法。
【請求項１３７】
前記ペプチドが、前記ＰＡＲＰ−１のＤＥＶＤ又はＧＤＥＶＤＧ領域に結合する４〜６アミノ酸配列、及び／又はＰＡＲＰ切断を阻害する４〜６アミノ酸配列を含む、請求項１３５又は１３６に記載の併用療法。
【請求項１３８】
前記併用療法が、請求項１から３６及び請求項６１から８３及び請求項１０４から１１３のいずれか一項に記載の化合物を含む、請求項１３２から１３７のいずれか一項に記載の併用療法。
【請求項１３９】
前記好気的解糖阻害剤が２−デオキシグルコース（２−ＤＯＧ）を含む、請求項１３２から１３８のいずれか一項に記載の併用療法。
【請求項１４０】
前記第１及び第２の治療薬が更に薬剤担体、希釈剤又は賦形剤を含む、請求項１３２から１３９のいずれか一項に記載の併用療法。
【請求項１４１】
前記併用療法が、放射線療法及び／又は手術の使用を更に含む治療計画に使用される、請求項１３２から１４０のいずれか一項に記載の併用療法。
【請求項１４２】
前記癌が、乳癌、前立腺癌、結腸直腸癌、膀胱癌、卵巣癌、子宮体癌、子宮頚癌、頭頚部癌、胃癌、膵癌、食道癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、悪性黒色腫、神経芽細胞腫、白血病、リンパ腫、肉腫又は神経膠腫の１つ以上を含む、請求項１３２から１４１のいずれか一項に記載の併用療法。
【請求項１４３】
前記癌が複数の癌又は転移性癌を含む、請求項１３２から１４４のいずれか一項に記載の併用療法。
【請求項１４４】
癌の治療用医薬品の製造における請求項１３２から１４３のいずれか一項に記載の併用療法の使用。
【請求項１４５】
ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ１（ＰＡＲＰ−１）作動物質又はＰＡＲＰ−１プロテアーゼ競合的阻害剤を含む、癌の治療のための化合物であって、前記化合物が、合計５又は６個のアミノ酸残基の部分、又はその塩、誘導体、プロドラッグ若しくは模倣物を含み、前記部分が、
ｉ．生理ｐＨにおいて正電荷を有することができる側鎖を有する任意の塩基性天然又は非天然アミノ酸残基を含む第２及び第５のアミノ酸残基位置、又は
ｉｉ．生理ｐＨにおいて負電荷を有することができる側鎖を有する任意の酸性天然又は非天然アミノ酸残基を含む第２及び第５のアミノ酸残基位置
を有する、化合物。
【請求項１４６】
前記ｉ．の第２及び／又は第５のアミノ酸残基位置がＡｒｇを含む、請求項１４５に記載の化合物。
【請求項１４７】
前記ｉｉ．の第２及び／又は第５のアミノ酸残基位置がＡｓｐを含む、請求項１４５又は１４６に記載の化合物。
【請求項１４８】
前記ｉｉ．の第２及び／又は第５のアミノ酸残基位置がＧｌｘ及び／又はＨｃａを含む、請求項１４５又は１４６に記載の化合物。
【請求項１４９】
前記化合物が、前記ＰＡＲＰ−１のＤＥＶＤ若しくはＧＤＥＶＤＧ領域に結合することができる、及び／又は該領域を切断から保護することができる、又は前記ＰＡＲＰ−１のＤＥＶＤ若しくはＧＤＥＶＤＧ領域を模倣することができる、請求項１４５から１４８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１５０】
前記化合物が、１６〜１８個のアミノ酸を有するペプチド、又はその塩、誘導体、プロドラッグ若しくは模倣物を含む、請求項１４５から１４９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１５１】
前記ＰＡＲＰ−１プロテアーゼがカスパーゼを含む、請求項１４５から１５０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１５２】
前記カスパーゼがカスパーゼ−３である、請求項１５１に記載の化合物。
【請求項１５３】
前記化合物が、請求項１から３６及び請求項６１から８３及び請求項１０４から１１３のいずれか一項に記載の化合物である、請求項１４５から１５０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１５４】
好気的解糖阻害剤を含む、又は更に含む、請求項１４５から１５３のいずれか一項に記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願は、２０１４年８月６日に出願された英国特許出願第１４１３９４２．２号の優先権を主張するものである。この優先権文献の内容を参照によりその全体を本明細書に援用する。
【０００２】
本発明は、癌の治療に有用なペプチド及びペプチド模倣物、特に、ＡＴＰ枯渇を伴う癌細胞壊死を選択的に引き起こすペプチド及び模倣化合物に関する。
【背景技術】
【０００３】
現在、抗癌薬開発における主な推進力は、幾つかの一般的なヒト癌のゲノム研究によって最近更に活発化した、細胞表面受容体並びに正及び負のシグナル伝達因子の知識の急増に由来する［非特許文献１；非特許文献２；非特許文献３；非特許文献４；非特許文献５］。これらの研究は、多数の遺伝子変異を明らかにし、そのうち数百は、自律的な癌細胞増殖の進化の一因になるシグナル伝達経路上の重要なタンパク質を含むドライバー変異であると考えられる。
【０００４】
多数の潜在的薬剤標的がこの手法によって明らかになりつつあり、幾つかの異なる薬物が任意の１つの標的に対して活性を示す可能性があるので、更に多数の治療薬が潜在的に存在する。
【０００５】
現行の抗癌治療の枠組みは、個々に選択された癌に対するそのゲノム変異パターンに基づく個別の仕様に合わせた薬物療法に向けての進歩を想定している。得られた治療法は、素早く診療に導入されている。しかし、これらの新薬は、一般に、単剤の効力が低く、完全な腫瘍反応がほとんどなく、症例の大部分においては、反応期間中央値が１年未満である。
【０００６】
したがって、より包括的な抗癌治療薬が必要とされている。
【０００７】
変異に由来するシグナル伝達標的の多様性及び異質性とは対照的に、好気的解糖、異数性などのある種の一般化された異常が、癌細胞において長年認められている。これらの変化は、治療開発の潜在的包括的な「アキレス腱」のままである。
【０００８】
好気的解糖は、最初に、Ｏｔｔｏ  Ｗａｒｂｕｒｇ［非特許文献６］によって、癌細胞と正常細胞の全般的相違として記述された。彼は、癌細胞において十分な酸素の存在下でも好気的解糖に特有である、グルコース取り込みの増加、及び乳酸産生を確認した。この知見は、正常細胞に比べた癌細胞における異常な炭水化物代謝を示唆しており、包括的な抗癌標的を提供することができ、引き続き活発に研究されている［非特許文献７による概説］。
【０００９】
癌細胞における炭水化物代謝を治療上の標的にすることができる２つの重要な分子部位は、酵素ヘキソキナーゼ２及び乳酸デヒドロゲナーゼである。
【００１０】
ヘキソキナーゼ２は、細胞膜を通して取り込まれた後にグルコースをリン酸化し、グルコースを解糖のために細胞内に閉じ込める。潜在的に選択的な全身的癌標的としてのヘキソキナーゼ２（ＨＫ２）の重要性が、最近、マウスにおけるＨｋ２欠失実験によって強調された［非特許文献８］。抗癌治療としてのヘキソキナーゼ２阻害が、マウス異種移植モデルにおいて生体内で試みられた［非特許文献９］。２−デオキシグルコースは、それ自体では弱い腫瘍阻害剤であるが、メトホルミンと併用すると広範囲の前臨床癌モデルに対して有効であることが示された［非特許文献１０］。ヘキソキナーゼ２の更なる癌治療阻害剤は、３−ブロモピルバートであるが［非特許文献１１］、これは正常組織毒性の問題がある。
【００１１】
乳酸デヒドロゲナーゼＡ（ＬＤＨＡ：Ｌａｃｔａｔｅ  ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ  Ａ）は、長年、腫瘍において増加することが知られており、ｃ−Ｍｙｃ発癌性転写因子の直接標的として同定された［非特許文献１２］。ＬＤＨＡの阻害剤を抗癌治療法として設計する医薬品化学プログラムが現在進行中である［非特許文献１３］。
【００１２】
無秩序な解糖に加えて、癌細胞におけるエネルギー準位も、ポリＡＤＰ−リボースポリメラーゼの働きによって影響される。
【００１３】
ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ−１［ＰＡＲＰ−１］は、ポリ（ＡＤＰ−リボシル化）触媒活性を有する酵素ファミリーの主要メンバーである（非特許文献１４）。それは、３つの保存された主要なドメイン、すなわち３本のジンクフィンガーを含むＮＨ２末端ＤＮＡ損傷検出及び結合ドメイン、自己修飾ドメイン、及びＣ末端触媒ドメインからなる（非特許文献１５）。
【００１４】
ＰＡＲＰ−１は、一本鎖と二本鎖の両方のＤＮＡ切断部に素早く直接結合する能力を有する、クロマチン結合性の保存された核タンパク質である（非特許文献１６）。両タイプのＤＮＡ切断は、酵素の触媒能を活性化し、ＡＤＰ−リボース部分の枝分れ鎖の共有結合によって広範囲な核タンパク質の活性を調節する（非特許文献１４）。ポリＡＤＰ−リボース鎖の主要な機能は、修復酵素にＤＮＡ損傷の部位を知らせることである。
【００１５】
ＰＡＲＰ−１がＤＮＡ切断部によって活性化されると、それはＮＡＤ＋（ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド）を切断して、ニコチンアミド及びＡＤＰ−リボースを生成し、ＡＤＰ−リボースは鎖切断部に隣接するＤＮＡに結合する鎖を形成する（非特許文献１５）。ＡＤＰ−リボース鎖をＤＮＡ上に形成するＰＡＲＰによるＮＡＤ＋の切断は、細胞の必須エネルギー源であるＡＴＰの産生に利用可能なＮＡＤ＋を減少させる。したがって、ＰＡＲＰ活性は、細胞のＡＴＰレベルを低下させ得る。
【００１６】
アポトーシスは、エネルギー依存プロセスである活性な「細胞自殺」である。ＰＡＲＰ活性の結果としてのＡＴＰの枯渇は、アポトーシスに必要なエネルギーを細胞から奪い得る。したがって、アポトーシスプロセスの成功の重要な一構成要素は、ＰＡＲＰを切断してＡＴＰ枯渇を防止することである。切断は、ポリ（ＡＤＰ−リボシル化）を不活性化し、幾つかのカスパーゼ、特にカスパーゼ−３によって行われる（非特許文献１７）。カスパーゼ−３は、１１３−ｋＤａ  ＰＡＲＰタンパク質をＡｓｐ２１４アミノ酸とＧｌｙ２１５アミノ酸の間のＤＥＶＤ部位［Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ａｓｐ２１４−Ｇｌｙ２１５（配列番号１）］で切断して、２個の断片８９及び２４ｋＤａポリペプチドを生成する。
【００１７】
ＰＡＲＰの切断断片は、ＰＡＲＰ活性の抑制に寄与するように見える。というのは、ｐ８９及びｐ２４は、それぞれ完全なＰＡＲＰのホモ会合（ｈｏｍｏ−ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ）及びＤＮＡ結合を阻害するからである（非特許文献１８）。
【００１８】
高レベルのＡＴＰは、細胞がアポトーシスするのを可能にするが、低レベルのＡＴＰは、細胞をアポトーシスから壊死に向かわせる（非特許文献１９）。ＰＡＲＰは、マウス線維芽細胞においてＡＴＰ枯渇による壊死性死の媒介物質であることが示された。ＰＡＲＰ欠損マウス（ＰＡＲＰ−／−）の線維芽細胞は、ＡＴＰ枯渇及び壊死性死から保護される（非特許文献２０）。
【００１９】
要約すると、ＰＡＲＰは、修復酵素による認識のためにポリＡＤＰ−リボース鎖によってＤＮＡ切断部に目印を付ける１１３−ｋＤａタンパク質である。ポリＡＤＰ−リボースは、アポトーシスに必要なＡＴＰの枯渇を招き、壊死による細胞死を潜在的に招き得るＮＡＤの分解によって形成される。
【００２０】
異数性は、癌細胞に特有であり、正常細胞には存在しない別の全体的な変化である［非特許文献２１］。異数性は、正常細胞に見られる半数染色体数の倍数から逸脱した異常な染色体数として厳密に定義される［非特許文献２２］。
【００２１】
多数の研究が、異数性は、正常細胞の悪性転換の原因の固有の構成要素であるのか、又はこの悪性変化に頻繁に付随する遺伝子不安定性の結果であるのかという疑問に向けられている［非特許文献２３］。しかし、重要な点は、異数性が、異数性に先行する異常な有糸分裂［非特許文献２４］又は異数体染色体の分離異常［非特許文献２５］の対応する結果として、癌細胞に見られる著しいＤＮＡ損傷の発現であることである。
【００２２】
癌細胞と正常細胞の明確な相違は、激しい損傷を受けたゲノムを有する癌細胞が、正常細胞よりもはるかに多くのＤＮＡ修復を必要とすることである。ＤＮＡ修復プロセスの主な構成要素は、ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ−１［ＰＡＲＰ−１］によってＤＮＡ損傷に「目印を付けること（ｆｌａｇｇｉｎｇ）」である。
【００２３】
したがって、ｍＲＮＡ発現によって測定されるＰＡＲＰ活性の増加が、正常組織よりも正常組織から生じる多種多様なヒト癌に認められることは驚くことではない［非特許文献２６］。
【００２４】
したがって、癌細胞は、無秩序な炭水化物代謝、並びに繰り返しの細胞倍加及びその多量のＤＮＡ損傷の修復に必要な多量のエネルギー需要の結果として、正常細胞に比べてエネルギーが不足した状態で働く。さらに、各繰り返しの癌細胞分裂に必要なエネルギーは、このエネルギー不足の更なる負担になると予想される。
【００２５】
癌細胞に存在し、正常細胞には存在しない、上記の全体的なエネルギー不足標的を利用することができる抗癌治療法に対するある役割が、未達成ではあるが存在する。
【００２６】
ＰＡＲＰ活性の増加は、Ｋ５６２細胞［非特許文献２７］及びカスパーゼカスケードがｚＶＡＤ−ｆｍｋによって阻害された、シアン化物に被毒したＣＸ細胞［非特許文献２８］においてＤＮＡ損傷を生じるアスコルビン酸／メナジオン誘導性酸化ストレスに続いて細胞壊死を招くことが示された。しかし、これらの場合、ＰＡＲＰ機能を維持することに加えて、ＤＮＡ損傷又は酸化ストレスも細胞壊死が起こるのに必要である。カスパーゼ阻害剤ｚＶＡＤ−ｆｍｋ単独では壊死を起こさなかった。同様に、サバイビン［非特許文献２９］、ＤＥＶＤ−ＣＨＯ［非特許文献３０］などの別のカスパーゼ阻害剤もそれ自体では壊死を起こさない。さらに、ＸＩＡＰカスパーゼ阻害剤の小分子拮抗物質は、カスパーゼ活性を刺激するが、壊死ではなくアポトーシスを誘導する［非特許文献３１］。
【００２７】
したがって、カスパーゼ阻害剤などのＰＡＲＰ作動物質は、活性なＰＡＲＰを維持するのにもかかわらず、それ自体では細胞壊死を誘導しないように見える。さらに、ＰＡＲＰを点変異によってＤＥＶＤ部位におけるカスパーゼ切断に非感受性にしても、それ自体では壊死を起こさなかった。壊死は、ＴＮＦ−αを添加したときにのみ生じた［非特許文献３２］。
【００２８】
要約すると、幾つかのＰＡＲＰ作動物質を記述したが、どれもそれ自体では細胞壊死を起こさないものの、別の薬剤と組み合わせると壊死を起こし得る。ここでは、初めて、ＡＴＰ枯渇によってそれ自体で第２の薬剤を必要とせずに癌細胞死を起こすことができるＰＡＲＰ作動物質を記述する。
【００２９】
ＰＡＲＰ機能を利用する現在の試みは、治療法上、ポリ（ＡＤＰ−リボシル化）を防止し、したがってＤＮＡ損傷性治療薬の効果を増強し、壊死よりもアポトーシスを招く、ＰＡＲＰ阻害剤の開発に集中している（非特許文献１４；非特許文献３３；非特許文献１８）。
【００３０】
最初の市販ＰＡＲＰ阻害剤の一つは、オラパリブ（ＡＺＤ２２８１）（４−［３−（４−シクロプロパンカルボニルピペラジン−１−カルボニル）−４−フルオロベンジル］−２Ｈ−フタラジン−１−オン）であった（非特許文献３４）。オラパリブは、ＤＮＡ損傷性薬物テモゾロマイドの潜在的賦活薬として前臨床及び臨床的に研究された（非特許文献３５）。
【００３１】
配列番号２（ＰＲＧＰＲＰ）を小さいペプチドに含むと、広範囲のヒトインビトロ癌細胞系に対しては選択的に制癌性であるが、正常な二倍体ヒト角化細胞、線維芽細胞又は不死化ＭＲＣ５−ｈＴＥＲＴ細胞に対しては選択的制癌性ではないことが示された（非特許文献３６及び特許文献１）。
【００３２】
これらの環状ペプチドの広範で選択的な抗癌活性は、ヘキサペプチド配列内のアルギニンに大きく依存することが報告された。それは、アミノ酸配列が配列番号３（Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ）に変化することによって、どちらかのアルギニンでＬ−ＮＧ−モノメチル−アルギニン又はグルタミン酸を置換するのと同様に、制癌能力を取り除くからである。
【００３３】
プロテオームにおけるペプチド配列の多重度を考慮すると、配列ＰＲＧＰＲＰ（配列番号２）又は極めて類似した配列が幾つかのタンパク質のペプチド鎖内に無作為に発生する可能性もある。例えば、Ｄ−アミノ酸配列ＰＲＫＰＲＰ（配列番号５）をＪｕｎ結合ペプチド（ＪＢＰ：Ｊｕｎ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｐｅｐｔｉｄｅ）に見ることができ［特許文献２］、ヘキサペプチドＰＲＧＰＲＰ（配列番号２）をｂｂｃ３遺伝子の推定アミノ酸配列に見ることもできる［特許文献３；非特許文献３７］。
【００３４】
しかし、タンパク質内のペプチド配列の存在は、ペプチド又はタンパク質内の他のアミノ酸配列と異なって、タンパク質全体の特定の機能活性の原因であるのが特にこの配列であることを意味するものではない。特定のアミノ酸配列の機能性は、想定ではなく証明される必要がある。ＣＤＫ４においてタンパク質の外部ループ上に位置するヘキサペプチドＰＲＧＰＲＰ（配列番号２）の場合、この機能性は、壊死による選択的癌細胞死滅であり、この活性は、配列をＰＲＲＰＧＰ（配列番号３）に変化させることなどのＰＲＧＰＲＰ（配列番号２）における特定の変化によって、又は一方のアルギニンのグアニジウム領域におけるＮ−モノ−メチル化によって、取り除かれる。しかし、ＪＢＰのＰＲＫＰＲＰ（配列番号５）領域もＢＢＣ３のＰＲＧＰＲＰ（配列番号２）領域も機能性の具体的な実験的証拠はない。さらに、ＪＰＢ分子全体は、正常な神経細胞を虚血性壊死から保護する。これは、壊死を招くＣＤＫ４由来のＰＲＧＰＲＰ系環状ペプチドとは逆の活性である。さらに、ＢＢＣ３はＰＲＧＰＲＰ配列（配列番号２）を含むが、タンパク質全体は、ＢＣＬ抗アポトーシス性タンパク質ファミリーのメンバーの機能を妨げることによって、正常な神経細胞におけるアポトーシスを引き起こす。ＪＢＰもＢＢＣ３も、ＰＲＧＰＲＰ（配列番号２）と極めて類似した又は同一の配列を含むが、正常細胞に比べて癌細胞の選択的壊死を引き起こすことはないことが示された。
【００３５】
既述の環状ペプチド（特許文献１）は、活性なＰＲＧＰＲＰ部位（配列番号２）（「弾頭（ｗａｒｈｅａｄ）」）、及びＰＲＧＰＲＰアミノ酸配列（配列番号２）を含むＣＤＫ４における外部化（ｅｘｔｅｒｎａｌｉｓｅｄ）ループと寸法が類似した１６〜１８アミノ酸環状ペプチドを形成する「骨格」で構成された。
【００３６】
ＰＲＧＰＲＰ（配列番号１）「弾頭」は、それ自体が両親媒性である。環状ペプチドにおいて「骨格」の非両親媒性アミノ酸配列と結合すると、生成した環状ペプチドは不活性であった［非特許文献３６］。すなわち、
配列番号６：Ｃｙｃ−［ＡＡＡＧＧＧＰＲＧＰＲＰＧＧＧＡＡＡ］  不活性
配列番号７：Ｃｙｃ−［ＧＧＧＧＧＧＰＲＧＰＲＰＧＧＧＧＧＧ］  不活性
配列番号８：Ｃｙｃ−［ＧＧＧＧＧＧＰＲＧＰＲＰＧＧＧＧＧＧ］  不活性
配列番号９：Ｃｙｃ−［ＡＡＧＰＧＧＰＲＧＰＲＰＧＧＰＧＡＡ］  不活性
【００３７】
それに対して、両親媒性ＡＬＫＬＡＬＫＬＡＬ「骨格」（配列番号１０）を導入すると、活性ＰＲＧＰＲＰ環状ペプチドの産生に成功した。
【００３８】
しかしながら、両親媒性「骨格」の長さ及び組成のわずかな相違は、生理活性の大きな相違になり得る。すなわち、ＮＣＩ−Ｈ４６０ヒト非小細胞肺癌細胞の死滅に関して、極めて類似した環状ペプチドが逆の活性を示した。すなわち、
配列番号１１：Ｃｙｃ−［ＰＲＧＰＲＰＶＫＬＡＬＫＬＡＬＫＬＡＬ］（「ＴＨＲ５２」）不活性
配列番号１２：Ｃｙｃ−［ＰＲＧＰＲＰＶＫＬＡＬＫＬＡＬＫＦＰ］（「ＴＨＲ５３」）活性
配列番号１３：Ｃｙｃ−［ＰＲＧＰＲＰＶＡＬＫＬＡＬＫＬＡＬ］（「ＴＨＲ５４」）活性
【００３９】
理論に拘泥するものではないが、両親媒性「骨格」のらせん構造は、「弾頭」を生理活性に最適な立体構造に制限する可能性がある。さらに、「骨格」と「弾頭」におけるアミノ酸配列の正確な組合せは、ペプチド全体の生理活性に影響を及ぼし得る。したがって、最適な「骨格」／「弾頭」の組合せは、本明細書に記載の請求項に係る化合物が完全な環状ペプチドとして最も有効に働くと予想されるように期待される。
【００４０】
環状ペプチドＴＨＲ５３、その類似体ＴＨＲ５４（ここでは、ＨＩＬＲ−００１とも称する）、及びＴＨＲ７９（Ｃｙｃ−［ＰＲＧＰＲＰｖａｌｋｌａｌｋａｌａｌ］（配列番号１４）［非特許文献３６及び特許文献１］は、広範囲のヒト癌細胞系を選択的に死滅させたが、ＩＣ５０が１００〜２００μＭの範囲である低比活性の問題があった。これらの低比活性は、インビトロでは有望な抗癌治療可能性を示すが、必要な全身投与量がマウスにおいて容認されるものよりも高い恐れがあるので、異種移植ヒト癌に対する生体内での試験を不可能にする。
【００４１】
したがって、ＴＨＲ５３及びＴＨＲ５４の選択的癌細胞死滅能力を保持し、比活性がより高い、新しい環状ペプチドが必要である。更に活性なペプチド部分も必要である。
【００４２】
特許文献２は、プロテインキナーゼ阻害剤、より具体的にはプロテインキナーゼｃ−Ｊｕｎアミノ末端キナーゼの阻害剤を開示している。
【００４３】
特許文献４は、ＰＡＲＰ活性化物質をスクリーニングする方法を開示している。
【００４４】
特許文献１は、ＣＤＫ４ペプチド領域及び細胞貫通領域を含む環状ペプチドを開示している。
【００４５】
非特許文献３８は、サイクリン依存性キナーゼ４の非キナーゼドメインと相同な配列を有するヘキサペプチドの選択的抗癌活性を開示している。
【００４６】
非特許文献３９は、ｃ−Ｊｕｎ  Ｎ末端キナーゼ（ＪＮＫ：ｃ−Ｊｕｎ  Ｎ−ｔｅｒｍｉｎａｌ  ｋｉｎａｓｅ）阻害剤ＸＧ−１０２が成体ラットにおける脳虚血後に高圧酸素の神経保護を強化することを述べている。
【００４７】
非特許文献４０は、カスパーゼによるポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ切断の失敗によって、壊死が誘導され、アポトーシスが増大することを述べている。
【００４８】
特許文献５は、例えば、薬物、他の治療薬又は診断薬などの水不溶性物質をパッケージングする方法を開示している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００４９】
【特許文献１】国際公開第２００９／１１２５３６号
【特許文献２】米国特許出願公開第２００７／００６０５１４Ａ１号
【特許文献３】国際公開第００／２６２２８号
【特許文献４】国際公開第２００６／０７８５０３号
【特許文献５】国際公開第９９／１８９９８号
【非特許文献】
【００５０】
【非特許文献１】Ｐｌｅａｓａｎｃｅら、Ｎａｔｕｒｅ（２００９）４６３：１９１〜１９６
【非特許文献２】Ｓｊｏｅｂｌｏｍら、Ｓｃｉｅｎｃｅ（２００６）３１４：２６８〜２７４
【非特許文献３】Ｇｒｅｅｎｍａｎら、Ｎａｔｕｒｅ（２００７）４４６：１５３〜１５８
【非特許文献４】Ｊｏｎｅｓら、Ｓｃｉｅｎｃｅ（２００８）３２１：１８０１〜１８０６
【非特許文献５】Ｇｅｒｌｉｎｇｅｒら、（２０１２）３６６：８８３〜８９２
【非特許文献６】Ｗａｒｂｕｒｇら、Ｊ  Ｇｅｎ  Ｐｈｙｓｉｏｌ（１９２７）８：５１９〜５３０
【非特許文献７】Ｄａｎｇら、Ｊ  ｍｏｌ  Ｍｅｄ（２０１１）８９：２０５〜２１２
【非特許文献８】Ｒｏｓ及びＳｃｈｕｌｚｅ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｉｓｃｏｖ；（２０１３）３：１１０５〜１１０７
【非特許文献９】Ｘｕら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ；（２００５）６５：６１３〜６２１
【非特許文献１０】Ｃｈｅｏｎｇら、Ｍｏｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ（２０１１）１０：２３５０〜２３６２
【非特許文献１１】Ｋｏら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｌｅｔｔ（２００１）１７３：８３〜９１
【非特許文献１２】Ｌｅら、ＰＮＡＳ（２０１０）１０７：２０３７〜２０４２
【非特許文献１３】Ｇｒａｎｃｈｉら、Ｊ．Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ（２０１１）５４：１５９９〜１６１２
【非特許文献１４】Ｍｕｎｏｚ−Ｇａｍｅｚら、Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｊ（２００５）；３８６：１１９〜１２５
【非特許文献１５】Ｊａｖｌｅ及びＣｕｒｔｉｎ、Ｂｒｉｔ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ（２０１１）：１０５：１１４〜１２２
【非特許文献１６】Ｃｈｅｒｎｅｙら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ．１９８７；８４：８３７０〜８３７４
【非特許文献１７】Ｈｅｒｃｅｇ及びＷａｎｇ、Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ（１９９９）；１９：５１２４〜５１３３
【非特許文献１８】Ｇｒａｚｉａｎｉ及びＳｚａｂｏ  ２００５、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｒｅｓ．（２００５）；５２：１０９〜１１８
【非特許文献１９】Ｅｇｕｃｈｉ  Ｙ、Ｓｈｉｍｉｚｕ  Ｓ、Ｔｓｕｊｉｍｏｔｏ  Ｙ、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ（１９９７）；５７：１８３５〜１８４０
【非特許文献２０】Ｈａ及びＳｎｙｄｅｒ  １９９９、Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ（１９９９）：９６：１３９７８〜１３９８２
【非特許文献２１】Ｄｕｅｓｂｅｒｇ及びＲａｓｎｉｋ．Ｃｅｌｌ  Ｍｏｔｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  ｔｈｅ  Ｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎ（２０００）４７：８１〜１０７
【非特許文献２２】Ｈｏｌｌａｎｄ及びＣｌｅｖｅｌａｎｄ  ＥＭＢＯ  ｒｅｐｏｒｔｓ（２０１２）１３：５０１〜５１４
【非特許文献２３】Ｌｉ  ＰＮＡＳ（２０００）９７：３２３６〜３２４１；Ｋｎａｕｓ及びＫｌｅｉｎ  Ｊ  Ｂｉｏｓｃｉ（２０１２）３７：２１１〜２２０
【非特許文献２４】Ｇａｎｅｍ及びＰｅｌｌｍａｎ  Ｊ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ（２０１２）１９９：８７１〜８８１
【非特許文献２５】Ｊｅｎｓｓｅｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ９２０１１）３３３：１８９５〜１８９８
【非特許文献２６】Ｏｓｓｏｖｓｋａｙａら、Ｇｅｎｅｓ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ（２０１０）１：８１２〜８２１
【非特許文献２７】Ｖｅｒｒａｘら、Ｉｎｔ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ（２００７）１２０：１１９２〜１１９７
【非特許文献２８】Ｐｒａｂｈａｋａｒａｎら、Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ（２００４）１９５：１９４〜２０２
【非特許文献２９】Ｈｅｎｓｌｅｙら、Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ（２０１３）３９４：８３１〜８４３
【非特許文献３０】Ｃｏｅｌｈｏら、Ｂｒｉｔ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ（２０００）８３：６４２〜６２９
【非特許文献３１】Ｓｃｈｉｍｍｅｒら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ  ９２００４）５：２５〜３５
【非特許文献３２】Ｈｅｒｃｅｇ及びＷａｎｇ  Ｍｏｌｅｃ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ（１９９９）２１９：５１２４〜５１３３
【非特許文献３３】Ｐｌｕｍｍｅｒ、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．（２００５）；６：３６４〜３６８
【非特許文献３４】Ｍｅｎｅａｒら、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（２００８）；５１：６５８１〜９１
【非特許文献３５】Ｋｈａｎら、Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ（２０１１）；１０４：７５０〜７５５
【非特許文献３６】Ｗａｒｅｎｉｕｓら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃａｎｃｅｒ（２０１１）；１０：７２〜８８
【非特許文献３７】Ｒｅｉｍｅｒｔｚら、Ｊｏｕｒｎａｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（２００３）１６２：５８７〜５９８
【非特許文献３８】Ｗａｒｅｎｉｕｓら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃａｎｃｅｒ  ２０１１、１０〜７２）
【非特許文献３９】Ｌｉｕら、Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ（２０１０）、３６、２１１〜２２４
【非特許文献４０】Ｈｅｒｃｅｇ及びＷａｎｇ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、１９９９年７月、５１２４〜５１３３ページ）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００５１】
本明細書において提供するのは、ＡＴＰレベルの低下を伴う壊死によって癌細胞を死滅させるあるクラスのアニオン性／カチオン性ＰＡＲＰ依存性薬剤である。
【課題を解決するための手段】
【００５２】
第１の態様においては、本発明は、請求項１に記載の環状化合物を提供する。ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ１（ＰＡＲＰ−１）の活性を調節可能な環状化合物であって、式１の部分又はその塩、誘導体、プロドラッグ若しくは模倣物を含む環状化合物を提供する。
【００５３】
式１：［Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３−］
【００５４】
式中、Ｘ１は、ＰＡＲＰ−１の切断を阻害可能なペプチド部分であり、
Ｘ２は存在してもしなくてもよく、Ｘ２が存在するときには、Ｘ２はＶａｌ又はＳｅｒから選択され、
Ｘ３とＸ４の一方は、Ｔｒｐ−Ｔｒｐ及びＡｒ１−Ａｒ２から選択され、
Ｘ３とＸ４の他方は、Ａｒｇ−Ａｒｇ、Ｇｐａ−Ｇｐａ、Ｈｃａ−Ｈｃａ及びＡｒ３−Ａｒ４から選択され、
ここで、
Ｈｃａは、ホモシステイン酸のアミノ酸残基であり、
Ｇｐａは、グアニジノフェニルアラニンのアミノ酸残基であり、
Ａｒ１、Ａｒ２、Ａｒ３及びＡｒ４はそれぞれ、アリール側鎖を有するアミノ酸残基であり、アリール側鎖は、場合によっては置換されたナフチル基、場合によっては置換された１，２−ジヒドロナフチル基、及び場合によっては置換された１，２，３，４−テトラヒドロナフチル基から独立に選択され、
Ａｚａは、アジド−ホモアラニンのアミノ酸残基である。
【００５５】
特に好ましくは、Ｘ３はＴｒｐ−Ｔｒｐ及びＡｒ１−Ａｒ２から選択され、Ｘ４はＡｒｇ−Ａｒｇ、Ｇｐａ−Ｇｐａ及びＨｃａ−Ｈｃａから選択される。
【００５６】
第２の態様においては、本発明は、請求項３０に記載のポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ１の活性を調節可能な化合物を提供する。ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ１の活性を調節可能な化合物であって、式６の部分を含む化合物を提供する。
【００５７】
式６：−Ｐｒｏ−Ｘ１４−Ｘ１５−Ｐｒｏ−Ｘ１６−Ｐｒｏ−
【００５８】
式中、Ｘ１４及びＸ１６は、側鎖を有するアミノ酸残基、置換基を有するナフチル基、及び置換基を有するプロピル基から各々独立に選択され、各側鎖又は置換基は、酸性官能基を含み、Ｘ１５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、ＭｅＧｌｙ及び（ＣＨ２）３から選択される。
【００５９】
第３の態様においては、本発明は、本発明の第１及び／又は第２の態様に係る化合物を含む医薬組成物を提供する。
【００６０】
第４の態様においては、本発明は、医薬品に使用するための、本発明の第１から第３の態様のいずれかに記載の化合物及び組成物を提供する。化合物及び組成物は、癌の治療に使用するためのものであり得る。
【００６１】
第５の態様においては、本発明は、請求項５１に記載の方法を提供する。本発明の第１から第３の態様のいずれかに記載の化合物及び組成物を患者に投与するステップを含む癌治療方法を提供する。
【００６２】
第６の態様においては、本発明は、請求項５７に記載の方法を提供する。細胞を本発明の第１又は第２の態様の化合物と接触させるステップ、及び化合物を検出するステップを含む分析方法を提供する。
【００６３】
本発明の更なる適用可能領域は、以下に示す詳細な説明から明らかになるはずである。詳細な説明及び具体例は、本発明の好ましい実施形態を示す。
【００６４】
本発明は、詳細な説明及び以下の添付図面から更に理解されるはずである。
【図面の簡単な説明】
【００６５】
【図１】自動ペプチド合成によってペプチドに組み込むための保護されたグアニジノフェニルアラニン（Ｇｐａ）及びホモシステイン酸（Ｈｃａ）の構造を示す図である。
【図２】自動ペプチド合成によって環状ペプチドに組み込むための保護されたアジドホモアラニン及び３−アミノ−３−（−２−ナフチル）−プロピオン酸の構造を示す図である。
【図３】ＨＩＬＲ−００１（配列番号１３）、ＨＩＬＲ−０２５（配列番号１５）及びＨＩＬＲ−０３０（配列番号１６）のＩＣ５０プロット（対照に対する％対Ｌｏｇ［Ｍ］）を示す図であり、ＷＷＲＲＷＷＲＲＷＷ両親媒性カセット（配列番号１７）を含むＨＩＬＲ−０２５配列（配列番号１５）の活性は、ＨＩＬＲ−００１よりも高く、Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｇｐａ−Ｇｐａ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｇｐａ−Ｇｐａ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ（配列番号１８）カセットを有するＨＩＬＲ−０３０の活性は、ＨＩＬＲ−０２５（配列番号１５）よりも更に高いことを示す。ＨＩＬＲ−Ｄ−０８（配列番号３１）のＩＣ５０プロットも示す。
【図４】ＨＩＬＲ−Ｄ−０２（Ｃｙｃ−［Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ］（配列番号１９）及びＨＩＬＲ−Ｄ−０６（Ｃｙｃ−［Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ］）（配列番号２０）のＩＣ５０プロット（対照に対する％対Ｌｏｇ［Ｍ］）を示す図であり、「弾頭」の陰性基が有効であることを示す。
【図５】ＰＡＲＰ標準活性曲線（光出力対精製ＰＡＲＰ酵素の単位のプロット）を示す図である。
【図６】ＰＡＲＰ活性に対するオラパリブ及び３−アミノベンズアミドの効果を示す図である。
【図７】ＰＡＲＰ活性に対する異なる濃度のオラパリブの効果を９６時間の時間経過にわたり示す図である。
【図８】オラパリブ及びパクリタキセルのＩＣ５０分析を示す図である。
【図９】ＮＣｌ−ＮＣＩ−Ｈ４６０細胞に対するＰＡＲＰ阻害剤オラパリブと組み合わせたＨＩＬＲ−００１の効果を９６時間の時間経過にわたり示す図である。オラパリブは、ＨＩＬＲ−００１によって誘導されるＡＴＰの低下をある程度逆転させ、その結果、癌細胞壊死の程度が低下する。
【図１０】Ａｃ−ＤＥＶＤ−ＣＨＯに対するカスパーゼ−３の用量反応を示す図である。
【図１１】カスパーゼ−３活性に対するＡｃ−ＤＥＶＤ−ＣＨＯ及びＨＩＬＲ−０３０の効果を示す図である。
【図１２】カスパーゼ−３活性に対するＡｃ−ＤＥＶＤ−ＣＨＯ及びＨＩＬＲ−０３０の効果を更に示す図である。
【図１３】ＣＤＫ４外部ループのＰＲＧＰＲＰ（配列番号２）領域とＰＡＲＰのＤＥＶＤ領域の整列、及びＧＤＥＶＤＧ相同体（ＨＩＬＲ−Ｄ−０１）によるＮＣＩ−Ｈ４６０細胞の軽度ではあるがかなりの死滅を示す図である。
【図１４】示した環状ペプチドのペプチド模倣相同体を示す図である。
【図１５】２−デオキシグルコース（２−ＤＯＧ）を本発明に係る環状化合物と同時投与する効果を示す図である。
【図１６】ＨＩＬＲ−０２５、ＨＩＬＲ−Ｄ−０７又はＤＭＳＯ対照で処理されたＮＣ１  Ｈ４６０ヒト非小細胞肺癌細胞の形態変化を示す図である。
【図１７】２４及び９６時間におけるＬＤＨ活性に対するＨＩＬＲ−０２５及びＨＩＬＲ−０３０のＩＣ５０用量の阻害効果を示す図である。
【図１８】ＨＩＬＲ化合物の作用の推定部位を示す細胞呼吸の簡単な略図である。ＰＡＲＰに対するアゴニスト作用を伴うＬＤＨＡの阻害は、細胞ＡＴＰレベルを低下させ得る。６デオキシグルコースによるヘキソキナーゼの阻害は、ＨＩＬＲ環状ペプチドのＡＴＰ低減活性を更に増強する。
【発明を実施するための形態】
【００６６】
配列リストフリーテキスト
配列番号２、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３７、４１及び４２は、制癌性基である。
【００６７】
配列番号３及び４は、比較用ペプチドである。
【００６８】
配列番号５は、Ｊｕｎ結合ペプチドの部分配列である。
【００６９】
配列番号６、７、８、９、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１９、２０、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３９及び４３〜４８は、環状ペプチドである。
【００７０】
配列番号１０、１７、１８、３８及び３９はカセットである。
【００７１】
添付の配列の一部は、非標準非天然アミノ酸残基を含む。配列リストにおいて確認される非天然アミノ酸残基は、グアニジノフェニルアラニン、ホモシステイン酸、アジドホモアラニン、Ｎ−メチルアスパラギン酸、３−アミノ−３−（２−ナフチル）−プロピオン酸の残基、及びグルタミン酸ガンマ−［２−（１−スルホニル−５−ナフチル）−アミノエチルアミドの残基である。
【００７２】
配列番号２１を参照すると、位置（２）を記述するフリーテキストは、「ホモシステイン酸、アジドホモアラニン及びグルタミン酸から選択される塩基性残基又は酸性残基」と記述している。位置（３）を記述するフリーテキストは、「Ｇｌｙ、Ａｌａ、ＭｅＧｌｙ及び（ＣＨ２）３から選択される」と記述している。位置（５）を記述するフリーテキストは、「残基２が酸性である場合、グルタミン酸及びホモシステイン酸から選択される酸性残基。残基２が塩基性である場合、塩基性残基」と記述している。
【００７３】
配列番号２４を参照すると、位置（２）を記述するフリーテキストは、「Ａｓｐ及びＧｌｕから選択される」と記述している。位置（５）を記述するフリーテキストは、「Ａｓｐ、Ｎ−アルキルＡｓｐ、Ｎ−アリールＡｓｐ、Ｇｌｕ、Ｎ−アルキルＧｌｕ、Ｎ−アリールＧｌｕから選択される」と記述している。位置（６）を記述するフリーテキストは、「Ｇｌｙ、Ｎ−アルキルＧｌｙ、Ｎ−アリールＧｌｙから選択される」と記述している。
【００７４】
配列番号３７を参照すると、位置（２）を記述するフリーテキストは、「酸性側鎖を有する任意の天然又は非天然アミノ酸」と記述している。位置（３）を記述するフリーテキストは、「Ｇｌｙ、Ａｌａ、ＭｅＧｌｙ及び（ＣＨ２）３から選択される」と記述している。位置（５）を記述するフリーテキストは、「酸性側鎖を有する任意の天然又は非天然アミノ酸」と記述している。
【００７５】
詳細な説明
本開示は、ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ１の活性を調節可能な化合物を提供する。該化合物は、所与の細胞内のポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ１活性全体を増加させ得る。該化合物は、カスパーゼ、特にカスパーゼ３によるＰＡＲＰ−１の切断を防止し得る。実施例でより詳細に考察するように、本明細書に記載の化合物は、癌細胞における好気的解糖も阻害すると考えられる。本発明に係る環状化合物は、以前の環状ペプチドよりも比活性が改善される。
【００７６】
本開示は、ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ１（ＰＡＲＰ−１）の活性を調節可能な環状化合物であって、式１の部分又はその塩、誘導体、プロドラッグ若しくは模倣物を含む環状化合物を提供する。
【００７７】
式１：［Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３−］
【００７８】
式中、Ｘ１は、ＰＡＲＰ−１の切断を阻害可能なペプチド部分であり、
Ｘ２は存在してもしなくてもよく、Ｘ２が存在するときには、Ｘ２はＶａｌ又はＳｅｒから選択され、
Ｘ３とＸ４の一方は、Ｔｒｐ−Ｔｒｐ及びＡｒ１−Ａｒ２から選択され、
Ｘ３とＸ４の他方は、Ａｒｇ−Ａｒｇ、Ｇｐａ−Ｇｐａ、Ｈｃａ−Ｈｃａ及びＡｒ３−Ａｒ４から選択され、
ここで、
Ｈｃａは、ホモシステイン酸のアミノ酸残基であり、
Ｇｐａは、グアニジノフェニルアラニンのアミノ酸残基であり、
Ａｒ１及びＡｒ２は、アリール側鎖を有するアミノ酸残基であり、アリール側鎖は、場合によっては置換されたナフチル基、場合によっては置換された１，２−ジヒドロナフチル基、及び場合によっては置換された１，２，３，４−テトラヒドロナフチル基から各々独立に選択され、
Ａｚａは、アジド−ホモアラニンのアミノ酸残基である。
【００７９】
特に好ましくは、Ｘ３はＴｒｐ−Ｔｒｐ及びＡｒ１−Ａｒ２から選択され、Ｘ４はＡｒｇ−Ａｒｇ−、Ｇｐａ−Ｇｐａ、Ｈｃａ−Ｈｃａ及びＡｒ３−Ａｒ４から選択される。
【００８０】
本開示を通して、略語「Ｈｃａ」は、ホモシステイン酸のアミノ酸残基を指す。略語「Ｇｐａ」は、グアニジノフェニルアラニンのアミノ酸残基を指す。「Ａｚａ」は、アジドホモアラニンを指す。「Ｎａｐ」は、３−アミノ−３−（−２−ナフチル）−プロピオン酸のアミノ酸残基である。「Ｅｄａ」は、下記アミノ酸残基であり、
【００８１】
【化１】
2017529386.tif 000003
【００８２】
すなわち、グルタミン酸ガンマ−［２−（１−スルホニル−５−ナフチル）−アミノエチルアミドの残基である。
【００８３】
Ｈｃａ、Ｇｐａ及びＡｚａを、Ｎａｐ、Ｅｄａなどのアリール側鎖を有するアミノ酸残基と一緒に、本明細書では非天然アミノ酸と称する。本開示の化合物中には少なくとも１種の非天然アミノ酸を含むことが好ましい。これは、非天然アミノ酸を含む化合物が、酵素による分解に対して天然アミノ酸のみからなる化合物よりも一般に耐性があるからである。
【００８４】
好ましくは、環状化合物は、シクロ−［Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３］又はその塩、誘導体、プロドラッグ若しくは模倣物からなる。
【００８５】
環状化合物は、標識成分を含むことができる。標識成分は蛍光標識とすることができる。
【００８６】
標識成分は、環状化合物の検出を可能にする。標識成分の例としては、蛍光標識、放射性標識、質量標識及びビオチンが挙げられる。適切な標識成分としては、タンパク質及びペプチド用の従来の標識が挙げられる。当業者は、タンパク質及びペプチド用の標識に精通しているはずである。
【００８７】
標識成分は、使用する所望の検出方法に応じて選択することができる。例えば、環状化合物を酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ：ｅｎｚｙｍｅ−ｌｉｎｋｅｄ  ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ  ａｓｓａｙ）で検出しようとする場合、標識成分は、適切には、ビオチンを含む。別の設定では、環状化合物をウエスタンブロットアッセイ、ゲル電気泳動アッセイなどで検出しようとする場合、標識成分は、適切には、蛍光標識である。別のクラスの標識及び別のアッセイタイプも本明細書では企図される。
【００８８】
環状化合物がＡｒ１−Ａｒ２及び／又はＡｒ３−Ａｒ４を含む設定では、１個以上のアリール側鎖が置換基を含むことができ、置換基は、蛍光標識、放射性標識、質量標識及びビオチンから選択される標識である。あるいは、１個以上のアリール側鎖が、アリール側鎖が蛍光標識として機能するように選択された置換基を含むことができる。この設定では、置換基をスルホン酸基とすることができる。アリール側鎖を含む蛍光非天然アミノ酸の一例はＥｄａである。
【００８９】
化合物に標識成分を入れると、細胞による化合物の取り込みを分析することができる。標識成分を入れると、化合物の作用機序をより詳細に解明することも可能になる。標識化合物と接触した細胞を分析すると、化合物を含む処方に入れる添加剤、賦形剤、同時活性剤（ｃｏ−ａｃｔｉｖｅｓ）、用量及び剤形を最適化することもできる。
【００９０】
本明細書に開示した環状化合物は、しばしば「弾頭」と称される活性配列、及び弾頭を細胞に送達するカセットを含む。
【００９１】
Ｘ１は、ＰＡＲＰ−１の切断を阻害可能なペプチド部分である活性配列である。本明細書では、ペプチド部分という用語は、ペプチド及びペプチド模倣部分を指すのに使用される。好ましくは、Ｘ１はペプチド部分である。本明細書に定義した活性配列Ｘ１は、ＰＡＲＰに結合してその切断を防止するか、又はＰＡＲＰを切断するプロテアーゼを競合的に阻害すると考えられる。ＰＡＲＰは、ＤＮＡ修復経路に関与する。ＰＡＲＰの作用機序は、ＮＡＤを消費して、ＡＴＰ枯渇を招く。癌細胞は、大規模なＤＮＡ損傷を有し、ＰＡＲＰ活性の上方制御を必要とする。癌細胞におけるＰＡＲＰの不活性化を防止すると、細胞のＡＴＰが枯渇し、壊死を招く。ＰＡＲＰの不活性化を防止しても、正常細胞はほとんどＤＮＡ損傷を受けないので、正常細胞のＡＴＰは枯渇しない。理論に拘泥するものではないが、本発明者は、本開示に係る化合物が、したがって、ＰＡＲＰの活性を調節することによって、癌細胞における壊死を選択的に引き起こすことを発見した。化合物は、追加の機序によっても癌細胞にストレスを与え、壊死を更に促進し得ると考えられる。理論に拘泥するものではないが、実施例に示した証拠は、追加の機序が癌細胞における炭水化物代謝経路、特に好気的解糖経路に関係し得ることを示唆する。
【００９２】
Ｘ１は、適切には、ＰＡＲＰのＤＥＶＤ領域に結合可能な部分である。この設定においては、Ｘ１は、合計５又は６個のアミノ酸残基、好ましくは６個のアミノ酸残基を含むペプチド部分とすることができる。配列中の第２及び第５のアミノ酸残基は、塩基性アミノ酸残基とすることができる。塩基性アミノ酸残基は、生理ｐＨにおいて正電荷を有することができる側鎖を有する任意の天然又は非天然アミノ酸とすることができる。好ましい塩基性アミノ酸はアルギニンである。理論に拘泥するものではないが、配列中の第２及び第５のアミノ酸として正荷電アミノ酸を含むと、図１３に示すように、部分がＰＡＲＰ−１のＤＥＶＤ領域に結合可能になると考えられる。
【００９３】
適切なＸ１部分としては、特許文献１においてＣＤＫ４ペプチド領域として記述されたものが挙げられる。
【００９４】
あるいは、Ｘ１をアニオン性活性部分とすることができる。アニオン性活性部分は、合計５〜６個のアミノ酸残基、好ましくは合計６個のアミノ酸残基を含むことができる。第２及び第５のアミノ酸残基は酸性とすることができる。アニオン性活性部分は、カスパーゼ−３などのＰＡＲＰを切断するプロテアーゼの競合的阻害剤として作用すると考えられる。
【００９５】
Ｘ１は、合計６個のアミノ酸残基を含むペプチド部分とすることができ、第２及び第５のアミノ酸残基は、どちらも塩基性かどちらも酸性である。当業者は、活性剤の存在下で酵素活性を決定する従来のアッセイに精通しているはずである。Ｘ１部分は、癌細胞の死滅に有効である。したがって、適切な活性を有するＸ１基を細胞生死判別法によって同定することができる。細胞生存度を測定する方法は、蛍光検出と一緒にａｌａｍａｒＢｌｕｅ（登録商標）細胞生存度試薬（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．）（レサズリン）の使用を含む。典型的な実験手順を下記実施例に詳述する。癌細胞死滅比活性は、各薬剤の半値抑制濃度（ＩＣ５０）値の比較によって決定される（図３及び４参照）。環状化合物は、ＩＣ５０が７５μＭ以下、又は５０μＭ以下、又は３０μＭ以下、又は１５μＭ以下、又は１０μＭ以下とすることができる。
【００９６】
好ましくは、Ｘ１は、配列番号２１（式２）、配列番号２２（式３）、配列番号２３（式４）及び配列番号２４（式５）から選択される。
【００９７】
配列番号２１（式２）は−Ｐｒｏ−Ｘ５−Ｘ６−Ｐｒｏ−Ｘ７−Ｐｒｏ−であり、
式中、Ｘ５とＸ７の両方は、酸性側鎖を有するアミノ酸残基であり、又はＸ５とＸ７の両方は、塩基性側鎖を有するアミノ酸残基であり、
酸性側鎖を有するアミノ酸残基は、Ｇｌｕ、Ａｚａ及びＨｃａから各々独立に選択され、
Ｘ６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、ＭｅＧｌｙ及び（ＣＨ２）３から選択され、
配列番号２２（式３）は−Ｐｒｏ−Ｘ８−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｘ９−Ｐｒｏ−であり、
式中、Ｘ８及びＸ９は、Ａｓｐ及びＧｌｕから各々独立に選択され、
配列番号２３（式４）は−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−であり、
配列番号２４（式５）は−Ｇｌｙ−Ｘ１１−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｘ１２−Ｘ１３−であり、
式中、Ｘ１１は、Ａｓｐ及びＧｌｕから選択され、
Ｘ１２は、Ａｓｐ、Ｎ−アルキルアスパラギン酸残基、Ｎ−アリールアスパラギン酸残基、Ｇｌｕ、Ｎ−アルキルグルタミン酸残基及びＮ−アリールグルタミン酸残基から選択され、
Ｘ１３は、Ｇｌｙ、Ｎ−アルキルグリシン残基、及びＮ−アリールグリシン残基から選択され、
ただし、Ｘ１２がＡｓｐである場合、Ｘ１３は、Ｎ−アルキルグルタミン酸残基又はＮ−アリールグルタミン酸残基である。
【００９８】
式２のＸ１部分が特に好ましい。
【００９９】
式２の部分においては、Ｘ５及びＸ７は、好ましくは、Ｇｌｕ及びＨｃａから各々独立に選択される。一設定においては、Ｘ５はＧｌｕであり、Ｘ７はＧｌｕである。別の設定においては、Ｘ５はＧｌｕであり、Ｘ７はＨｃａである。更なる設定においては、Ｘ５はＨｃａであり、Ｘ７はＧｌｕである。別の設定においては、Ｘ５はＨｃａ又はＡｚａであり、Ｘ７はＨｃａ又はＡｚａである。
【０１００】
別の設定においては、Ｘ５とＸ７はどちらも塩基性側鎖を有するアミノ酸残基である。塩基性アミノ酸の例としては、Ａｒｇ、Ｌｙｓ及びＨｉｓが挙げられる。この設定においては、Ｘ５及びＸ７は、好ましくはＡｒｇである。Ｘ６は、好ましくは、グリシン残基又はサルコシン（Ｎ−メチルグリシン）残基である。最も好ましくは、Ｘ６はＧｌｙである。
【０１０１】
式２の具体的なＸ１部分としては、−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−（配列番号２）、−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−（配列番号４）、−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−（配列番号２５）、−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−ＭｅＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−（配列番号２６）、−Ｐｒｏ−Ａｚａ−ＭｅＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ−（配列番号２７）、−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ−（配列番号２８）、−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−（配列番号４１）及び−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ（配列番号４２）が挙げられる。これらの部分のうち、−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−（配列番号２）及び−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−（配列番号４）が好ましく、Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ（配列番号２５）が特に好ましい。
【０１０２】
あるいは、Ｘ１部分を式３（配列番号２２）の部分とすることができる。
【０１０３】
式３は−Ｐｒｏ−Ｘ８−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｘ９−Ｐｒｏ−であり、
Ｘ８及びＸ９は、Ａｓｐ及びＧｌｕから独立に選択され、好ましくはＡｓｐである。
【０１０４】
あるいは、Ｘ１部分を式５（配列番号２５）の部分： 
−Ｇｌｙ−Ｘ１１−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｘ１２−Ｘ１３−
とすることができる。
【０１０５】
アミノ酸残基Ｘ１２とＸ１３の少なくとも一方は、カスパーゼ１によるＸ１２−Ｘ１３ペプチド結合の切断を防止する、又は減少させる化学修飾を含まなければならない。したがって、Ｘ１２がＡｓｐである場合、Ｘ１３は、Ｎ−アルキル又はＮ−アリールグルタミン酸残基である。Ｘ１２又はＸ１３残基中に存在し得る適切なＮ−アルキル基としては、Ｃ１〜Ｃ６線状又は分岐アルキル基及びＣ４〜Ｃ６シクロアルキル基が挙げられる。好ましくは、Ｎ−アルキル基は、Ｃ１〜Ｃ３線状アルキル基、最も好ましくはメチルである。
【０１０６】
好ましくは、Ｘ１１はＡｓｐであり、Ｘ１２はＡｓｐ又はＮ−メチルＡｓｐである。最も好ましくは、式５の部分は−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−ＮＭｅＡｓｐ−ＭｅＧｌｙ−Ｖａｌ−（配列番号２９）である。
【０１０７】
更に別の設定においては、Ｘ１は、下記の本開示の第２の態様の考察に記載のように、式６の部分である。
【０１０８】
式１の部分は、場合によってはＸ２基を含む。Ｘ２基は、リンカーとして機能すると考えられる。Ｘ２基は、存在する場合、適切にはＶａｌ又はＳｅｒから選択される。Ｘ２基は、好ましくは存在し、好ましくはＶａｌである。式１の部分の誘導体においては、Ｘ２は、存在する場合、任意のアミノ酸残基とすることができる。
【０１０９】
式１で記載された配列Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３は、カセットである。カセットは、化合物の細胞取り込みを改善し、及び／又は弾頭を生理活性の最適な確認に制限することができる。適切には、カセットは両親媒性である。カセットは、環状化合物が水に溶解できるように十分に親水性であり、細胞による環状化合物の取り込みを可能にするように十分に親油性であることが望ましい。
【０１１０】
Ｘ３とＸ４の一方は、Ｔｒｐ−Ｔｒｐ及びＡｒ１−Ａｒ２から選択される。Ｘ３とＸ４の他方は、Ａｒｇ−Ａｒｇ、Ｇｐａ−Ｇｐａ、Ｈｃａ−Ｈｃａ及びＡｒ３−Ａｒ４から選択される。
【０１１１】
Ｘ３とＸ４の具体的設定については後述するが、記述する設定のすべてを単にＸ３とＸ４を交換するだけで変更できることを理解されたい。簡略のため、Ｘ３とＸ４の交換によって得ることができる代替形態については、以下では十分には記述しない。それでも、それらは本開示の一部を形成する。例として、特に好ましい設定においては、Ｘ３はＴｒｐ−Ｔｒｐ及びＡｒ１−Ａｒ２から選択され、Ｘ４はＡｒｇ−Ａｒｇ、Ｇｐａ−Ｇｐａ及びＨｃａ−Ｈｃａから選択される。Ｘ４はＡｒ３−Ａｒ４であることも可能である。これらの設定を補う交換の構成においては、Ｘ３は、代わりにＡｒｇ−Ａｒｇ、Ｇｐａ−Ｇｐａ、Ｈｃａ−Ｈｃａ及びＡｒ３−Ａｒ４から選択され、Ｘ４は、代わりにＴｒｐ−Ｔｒｐ及びＡｒ１−Ａｒ２から選択される。
【０１１２】
Ａｒ１、Ａｒ２、Ａｒ３及びＡｒ４はそれぞれ、アリール側鎖を有する非天然アミノ酸残基である。各アリール側鎖は、場合によっては置換されたナフチル基、場合によっては置換された１，２−ジヒドロナフチル基、及び場合によっては置換された１，２，３，４−テトラヒドロナフチル基から独立に選択することができる。好ましいアリール基は、場合によっては置換されたナフチル基である。１個以上のアリール側鎖は、場合によっては、標識成分として作用するように構成することができる。
【０１１３】
Ａｒ１、Ａｒ２、Ａｒ３及びＡｒ４は、３−アミノ−３−アリール−プロピオン酸又は２−アミノ−２−アリール酢酸のアミノ酸残基から選択することができる。代替のアミノ酸残基としては、以下の構造を有するグルタミン酸誘導体が挙げられる。
【０１１４】
【化２】
2017529386.tif 000004
【０１１５】
式中、Ｒは、場合によっては置換されたナフチル基、場合によっては置換された１，２−ジヒドロナフチル基、及び場合によっては置換された１，２，３，４−テトラヒドロナフチル基から選択される。
【０１１６】
一般に、アリール基が置換基を含む場合、親油性置換基が好ましい。親油性置換基の例としては、アルキル基、アルケン基及びアルキン基が挙げられる。こうした基は、例えば、合計１〜５個の炭素原子を含むことができ、線状でも分枝でもよい。極性又は荷電置換基は、許容されるが、細胞による化合物の取り込み速度が低下し得る。一般に、極性又は荷電側鎖は、アリール側鎖が標識成分として作用する設定でのみ含まれる。
【０１１７】
化合物が標識成分を含む設定においては、置換基は、存在する場合、アリール側鎖が標識成分として作用するように構成することができる。この設定においては、アリール側鎖は、好ましくは、蛍光標識を務めるように構成される。例えば、Ａｒ１及び／又はＡｒ２をＥｄａ残基とすることができる。Ｅｄａ残基は蛍光性である。
【０１１８】
好ましくは、Ａｒ１及びＡｒ２は、３−アミノ−３−アリール−プロピオン酸のアミノ酸残基である。最も好ましくは、Ａｒ１及びＡｒ２は、３−アミノ−３−（−２−ナフチル）−プロピオン酸（「Ｎａｐ」）のアミノ酸残基である。ナフチル側鎖を有する市販Ｆｍｏｃ保護非天然アミノ酸の構造を図２に示す。
【０１１９】
一設定においては、Ｘ３はＡｒ１−Ａｒ２であり、Ｘ４はＡｒ３−Ａｒ４であり、Ａｒ１及びＡｒ２はそれぞれＥｄａであり、Ａｒ３及びＡｒ４はそれぞれＮａｐである。
【０１２０】
一設定においては、Ｘ３はＴｒｐ−Ｔｒｐであり、Ｘ４は、Ａｒｇ−Ａｒｇ、Ｇｐａ−Ｇｐａ及びＨｃａ−Ｈｃａから選択される。この設定においては、Ｘ４は、好ましくは、Ａｒｇ−Ａｒｇ又はＧｐａ−Ｇｐａである。
【０１２１】
特に好ましい設定においては、Ｘ３はＮａｐ−Ｎａｐであり、Ｘ４はＡｒｇ−Ａｒｇである。
【０１２２】
適切には、式１の部分を含む環状化合物は、合計酸１００以下のアミノ酸残基、好ましくは５０個以下のアミノ酸残基、より好ましくは２５個以下のアミノ酸残基を含む。更により好ましくは、環状化合物は、合計１６〜１８個のアミノ酸残基を含む。環状化合物は、シクロ−［Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３］からなることができる。好ましい化合物の例は、以下の通りである。
【０１２３】
シクロ−［Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ］（配列番号１５）、
シクロ−［Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｇｐａ−Ｇｐａ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｇｐａ−Ｇｐａ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ］（配列番号１６）、
シクロ−［Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ］（配列番号１９）、
シクロ−［Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ］（配列番号２０）、
シクロ−［Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｇｐａ−Ｇｐａ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｇｐａ−Ｇｐａ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ］（配列番号３０）、
シクロ−［Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｎａｐ−Ｎａｐ］（配列番号３１）、
シクロ−［Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｅｄａ−Ｅｄａ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｅｄａ−Ｅｄａ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｅｄａ−Ｅｄａ］（配列番号３２）、
シクロ−［Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ］（配列番号３３）、
シクロ−［Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｈｃａ−Ｈｃａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｈｃａ−Ｈｃａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ］（配列番号３４）、
シクロ−［Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｈｃａ−Ｈｃａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｈｃａ−Ｈｃａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ］（配列番号３５）、
シクロ−［Ｐｒｏ−Ａｚａ−ＭｅＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｈｃａ−Ｈｃａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｈｃａ−Ｈｃａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ］（配列番号３６）、及び
シクロ−［Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−ＭｅＡｓｐ−ＭｅＧｌｙ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ］（配列番号４０）。
【０１２４】
好ましい化合物の追加の例は、以下の通りである。
【０１２５】
シクロ−［Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ］（配列番号４３）、
シクロ−［Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ］（配列番号４４）、
シクロ−［Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｇｐａ−Ｇｐａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｇｐａ−Ｇｐａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｇｐａ−Ｇｐａ］（配列番号４５）、
シクロ−［Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｅｄａ−Ｅｄａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｅｄａ−Ｅｄａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｅｄａ−Ｅｄａ］（配列番号４６）、
シクロ−［Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｅｄａ−Ｅｄａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｅｄａ−Ｅｄａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｅｄａ−Ｅｄａ］（配列番号４７）、及び
シクロ−［Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｅｄａ−Ｅｄａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｅｄａ−Ｅｄａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｅｄａ−Ｅｄａ］（配列番号４８）。
【０１２６】
本明細書に定義した環状化合物の塩、誘導体、プロドラッグ又は模倣物である化合物も本明細書では企図される。
【０１２７】
環状化合物がイオン性官能基を含むときには、化合物を適切な対イオンとの塩の形で提供することができる。対イオンは、好ましくは、薬学的に許容される対イオンである。当業者は、塩の調製に精通しているはずである。
【０１２８】
化合物が酸性官能基を含む場合、対イオンは、例えば、アルカリ金属又はアルカリ土類金属イオンとすることができる。酸性化合物の好ましい対イオンはナトリウムである。
【０１２９】
環状化合物が塩基性アミノ酸残基を含む場合、強酸又は弱酸と一緒に塩を形成することができる。例えば、化合物を塩酸塩、クエン酸水素塩、トシル酸水素塩（ｈｙｄｒｏｇｅｎ  ｔｏｓｙｌａｔｅ  ｓａｌｔ）などとして提供することができる。
【０１３０】
本明細書に記載の化合物の誘導体も企図される。
【０１３１】
誘導体は、本明細書に定義した化合物と実質的に類似した構造及び機能を有する化合物であるが、例えば、１個以上の保護基、及び／又はアミノ酸残基の最高２つの付加、省略又は置換を含むことによって、定義された構造からわずかに逸脱した化合物である。
【０１３２】
本明細書では「誘導体」という用語は、化合物中に存在するアミノ酸側鎖が保護アミノ酸側鎖として与えられる化合物を包含する。当業者は、保護基の使用に精通しているはずである。
【０１３３】
誘導体は、更に、本明細書に定義した化合物と８７％、８８％、９３％、９４％又は９９％を超える配列相同性を有する化合物を包含する。本明細書に定義した化合物の誘導体を形成するために、１個のアミノ酸残基を省略、置換又は挿入することができる。２個のアミノ酸残基を省略、置換又は挿入することができる。
【０１３４】
本明細書に定義した幾つかの化合物は、Ｎ−アルキル及び／又はＮ−アリール基を有するアミノ酸残基を含む。誘導体は、１個以上のＮ−アルキル又はＮ−アリール基が改変された化合物を包含する。Ｎ−アリール又はＮ−アルキル基は、（例えば、アルキル−ＣＨ２−をエーテル酸素で置換することによって）ヘテロ原子、又は（例えば、アルキル−ＣＨ２−を−ＣＨＣｌ−で置換することによって）ハロゲン、ヒドロキシル基などの置換基を含むように改変することができる。
【０１３５】
環状化合物のプロドラッグも本明細書では企図される。プロドラッグは、生体内で代謝されて環状化合物を生成する化合物である。当業者は、プロドラッグの調製に精通しているはずである。
【０１３６】
ペプチド模倣物も本明細書では企図される。ペプチド模倣物は、本明細書に定義した化合物と類似した形状及び極性を有する有機化合物であって、実質的に類似した機能を有する有機化合物である。模倣物は、１個以上のペプチド結合のＮＨ基がＣＨ２基で置換された化合物とすることができる。模倣物は、１個以上のアミノ酸残基がナフチル基などのアリール基で置換された化合物とすることができる。一般に、ペプチド模倣物は、アミノ酸残基の１個以上が、場合によっては置換されたナフチル基、場合によっては置換された１，２−ジヒドロナフチル基、置換基を有する場合によっては置換された１，２，３，４−テトラヒドロナフチル基、又は場合によっては置換されたプロピル基で置換されたペプチドの誘導体と考えることができる。置換基は、存在する場合、一般に、２３種のタンパク質構成アミノ酸（ｐｒｏｔｅｉｎｏｇｅｎｉｃ  ａｍｉｎｏ  ａｃｉｄ）のいずれかの側鎖を形成する基から選択される。適切には、アミノ酸残基の５０％以下、好ましくは２５％以下がこれらの基で置換される。
【０１３７】
Ｘ１基の模倣物の例を図１３に示す。
【０１３８】
第２の態様においては、本開示は、ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ１の活性を調節可能な化合物であって、式６の部分を含む化合物を提供する。
【０１３９】
式６は−Ｐｒｏ−Ｘ１４−Ｘ１５−Ｐｒｏ−Ｘ１６−Ｐｒｏ−であり、
式中、Ｘ１４及びＸ１６は、側鎖を有するアミノ酸残基、置換基を有するナフチル基、置換基である１，２−ジヒドロナフチル基、置換基を有する１，２，３，４−テトラヒドロナフチル基、及び置換基を有するプロピル基から各々独立に選択され、各側鎖又は置換基は酸性官能基を含み、
Ｘ１５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、ＭｅＧｌｙ及び（ＣＨ２）３から選択される。
【０１４０】
式６の部分は、アニオン性弾頭部分であり、すなわち、式６の部分は、ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ１の活性を調節することができる。理論に拘泥するものではないが、アニオン性弾頭部分は、ＰＡＲＰを切断するプロテアーゼの競合的阻害剤として作用すると考えられる。驚くべきことに、アニオン性弾頭基は、有用な活性を示すことが判明した。
【０１４１】
好ましくは、Ｘ１４、Ｘ１５及びＸ１６はそれぞれアミノ酸残基である。この設定においては、式６は、配列番号３７である。Ｘ１４及びＸ１６は、例えば、Ａｓｐ、Ｇｌｕ及びＨｃａから独立に選択することができる。好ましくは、Ｘ１５がＧｌｙであるときには、Ｘ１４及びＸ１６の１個以上はＧｌｕでない。
【０１４２】
Ｘ１４及びＸ１６の１個以上は、スルホン酸基を含むことができる。スルホン酸基を含む化合物は、特に有効であることが判明した。スルホン酸基を含むアミノ酸残基の一例はＨｃａである。
【０１４３】
あるいは、スルホン酸基は、ナフチル基、１，２−ジヒドロナフチル基、１，２，３，４−テトラヒドロナフチル基又はプロピル基上の置換基として存在することができる。
【０１４４】
式６の部分が、置換基を有するナフチル基、置換基である１，２−ジヒドロナフチル基、置換基を有する１，２，３，４−テトラヒドロナフチル基、及び置換基を有するプロピル基の１個以上を主鎖中で構成する設定においては、生成した化合物をペプチド模倣物とみなすことができる。
【０１４５】
化合物は、合計１６〜１８単位を含む環状化合物とすることができ、各単位は、アミノ酸残基、場合によっては置換されたナフチル、１，２−ジヒドロナフチル若しくは１，２，３，４−テトラヒドロナフチル基、又は場合によっては置換されたプロピル基である。好ましくは、化合物中の単位の各々はアミノ酸残基である。最も好ましくは、化合物は式８のものである。
【０１４６】
式８はシクロ−［Ｘ１７−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３］であり、
式中、Ｘ１７は式６の部分であり、Ｘ２、Ｘ３及びＸ４は上で定義したとおりである。
【０１４７】
式６の部分を含む環状化合物の塩、誘導体、プロドラッグ及び模倣物も提供する。
【０１４８】
第３の態様においては、本開示は、本明細書に定義した化合物を含む医薬組成物を提供する。医薬組成物は、更に薬剤担体、希釈剤又は賦形剤を含む。当業者は、医薬組成物の処方に精通しているはずである。任意の適切な担体、希釈剤又は賦形剤を使用することができる。担体、希釈剤及び賦形剤の組合せを使用することができる。
【０１４９】
組成物は、任意の所望の投与法、例えば、経口投与法又は非経口投与法のために処方することができる。
【０１５０】
一設定においては、組成物は、米国特許出願公開第２００３／０１６１８８３号に定義された送達成分である賦形剤を含むことができる。
【０１５１】
場合によっては、医薬組成物は、更なる治療薬を含む。好ましくは、更なる治療薬は、好気的解糖阻害剤である。本開示の組成物と好気的解糖阻害剤を同時投与すると、癌の治療に使用したときに、相加又は相乗効果を生じる。好ましい好気的解糖阻害剤は２−デオキシグルコース（２−ＤＯＧ）である。２−デオキシグルコースは、一般に、生体内で忍容性が良好である。２−デオキシグルコースを本開示の組成物と組み合わせて投与すると、本開示の化合物の投与量を削減することができる。
【０１５２】
好ましくは、本開示の化合物及び医薬組成物は、医薬品用である。好ましくは、化合物及び組成物は、癌を治療する方法における使用のためであり、該方法は、患者に化合物又は組成物を投与するステップを含む。該方法は、さらに、放射線療法及び／又は手術の使用などの癌の治療のための従来法の使用を含むことができる。本発明の化合物及び組成物は、他の化学療法剤の使用を含む方法の一部としての投与用に処方することができる。
【０１５３】
以下でより詳細に考察する、本開示の化合物の推定上の作用機序によれば、化合物は、広範囲な癌の治療に有用である。化合物は、複数の癌又は転移性癌に罹患した患者の治療に有用であり得るということになる。
【０１５４】
本開示の化合物はＰＡＲＰ−１の活性を調節するので、本開示の化合物及び組成物は、ＰＡＲＰ−１が非癌細胞に比べて上方制御される癌細胞を含む癌の治療に使用するのに特に適合している。ＰＡＲＰ−１を上方制御し得る癌としては、乳癌、結腸癌、子宮体癌、食道癌、腎癌、肺癌、卵巣癌、直腸癌、胃癌、甲状腺癌及び精巣癌が挙げられる。
【０１５５】
本開示の化合物及び組成物は、癌に罹患した患者の治療に使用することができ、癌は、乳癌、前立腺癌、結腸直腸癌、膀胱癌、卵巣癌、子宮体癌、子宮頚癌、頭頚部癌、胃癌、膵癌、食道癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、悪性黒色腫、神経芽細胞腫、白血病、リンパ腫、肉腫又は神経膠腫の１つ以上を含む。好ましくは、癌は、乳癌、結腸癌、子宮体癌、食道癌、腎癌、肺癌、卵巣癌、直腸癌、胃癌、甲状腺癌及び精巣癌から選択される。
【０１５６】
ＰＡＲＰ−１の活性をインビトロで調節する本明細書に定義した化合物の使用も本明細書で提供される。使用は、例えば、細胞培養物又は組織試料と本明細書に定義した化合物の接触を含むことができる。細胞培養物又は組織試料は、不死化ヒト細胞、場合によっては癌細胞を含むことができる。組織試料は、例えば、癌に罹患した患者の生検材料とすることができる。
【０１５７】
更に別の一態様においては、本発明は、細胞を本開示の化合物と接触させるステップ、及び化合物を検出するステップを含む、分析方法を提供する。適切には、化合物は標識成分を含む。
【０１５８】
細胞を添加剤、賦形剤又は同時活性剤と接触させることができる。これによって、例えば、細胞による化合物の取り込みに対する添加剤、賦形剤及び同時活性剤の効果を調べることができる。
【０１５９】
検出方法は、適宜選択することができる。化合物が標識成分を含むときには、適切な検出方法は、その成分の性質に応じて選択される。言うまでもなく、方法は、追加の中間ステップを含むことができる。分析方法は、例えば、細胞を調べる従来のアッセイで使用されたステップを含むことができる。一設定においては、方法は、ウエスタンブロット分析を含む。
【０１６０】
化合物を検出する説明的な一方法は、蛍光検出である。この設定においては、化合物は、適切には、蛍光性である標識成分を含む。トリプトファン残基も蛍光能力がある。
【０１６１】
一般に、分析方法はインビトロで行われる。試料は細胞培養物とすることができる。試料は、患者から得られる生検材料とすることができ、又はこうした生検材料から誘導することができる。細胞が患者から得られる設定においては、分析を診断に応用することができる。
【０１６２】
理論に拘泥するものではないが、本開示の化合物の作用様式を説明する以下の機序が示唆される。
【０１６３】
正常細胞におけるＰＲＧＰＲＰ機能
Ｃｄｋ４とそのサイクリンＤパートナーは、網膜芽細胞腫タンパク質（ｐＲｂ）及び関連ｐＲｂファミリーメンバーをリン酸化することによって細胞分裂を開始し（Ｈａｒｂｏｕｒら、Ｃｅｌｌ（１９９９）；９８：８５９〜８６９）、Ｅ２Ｆ−１及びＤＮＡ合成用の関連酵素の誘導に関与する関連タンパク質を放出する（Ｃｌａｓｓｏｎ及びＨａｒｌｏｗ；Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｃａｎｃｅｒ（２００２）２：９１０〜９１７）分子プロセスを惹起する。しかし、細胞増殖の促進に加えて、Ｅ２Ｆはアポトーシスを誘導し得る（Ｎｅｖｉｎｓら、Ｈｕｍ  Ｍｏｌ  Ｇｅｎｅｔ．（２００１）；１０：６９９〜７０３）。
【０１６４】
正常二倍体細胞においては、Ｃｄｋ４のキナーゼ領域がＲｂタンパク質及び関連ファミリーメンバーをリン酸化すると、Ｃｄｋ４のＰＲＧＰＲＰ領域（配列番号２）は、Ｅ２Ｆ−１によるアポトーシスを防ぐことが提案されている。アポトーシスに対する保護は、ＰＡＲＰのＤＥＶＤ領域（配列番号１）に結合し、したがってＰＡＲＰが切断されないようにその部位におけるカスパーゼ−３（及び他の）結合を妨げるＰＲＧＰＲＰ（配列番号２）によって行われる。カスパーゼによるＰＡＲＰ−１の切断は、アポトーシスの顕著な特徴であると考えられる［Ｋａｕｆｍａｎｎ  ＳＨら、「ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼの特異的タンパク質切断：化学療法によるアポトーシスの初期マーカ（Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃ  ｃｌｅａｖａｇｅ  ｏｆ  ｐｏｌｙ（ＡＤＰ−ｒｉｂｏｓｅ）  ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ：ａｎ  ｅａｒｌｙ  ｍａｒｋｅｒ  ｏｆ  ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）」、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  １９９３、５３：３９７６〜３９８５。Ｔｅｗａｒｉ  Ｍら、「ＣＥＤ−３の哺乳類ホモログであるＹａｍａ／ＣＰＰ３２ベータは、細胞死基質（ｄｅａｔｈ  ｓｕｂｓｔｒａｔｅ）ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼを切断するＣｒｍＡ阻害プロテアーゼである（Ｙａｍａ／ＣＰＰ３２  ｂｅｔａ，ａ  ｍａｍｍａｌｉａｎ  ｈｏｍｏｌｏｇ  ｏｆ  ＣＥＤ−３，ｉｓ  ａ  ＣｒｍＡ  ｉｎｈｉｂｉｔａｂｌｅ  ｐｒｏｔｅａｓｅ  ｔｈａｔ  ｃｌｅａｖｅｓ  ｔｈｅ  ｄｅａｔｈ  ｓｕｂｓｔｒａｔｅ  ｐｏｌｙ（ＡＤＰ−ｒｉｂｏｓｅ）ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ）」、Ｃｅｌｌ  １９９５、８１：８０１〜８０９］。したがって、ＰＡＲＰ切断に「ブレーキを掛ける」ことによって、ＣＤＫ４のＰＲＧＰＲＰドメインが過剰なアポトーシスに対して介在する。
【０１６５】
正常細胞においては、ＤＮＡ損傷がほとんどないので、最少のポリ（ＡＤＰ−リボシル化）しか存在せず、ＰＲＧＰＲＰで保護された非切断ＰＡＲＰは、ＮＡＤ＋を枯渇させず、ＮＡＤ＋は十分な高レベルのままである。
【０１６６】
初期多段階発癌におけるＰＲＧＰＲＰ機能：
幾つかの報告の示すところによれば、Ｃｄｋ４は、Ｃｄｋ２又はＣｄｋ６とは対照的に、その機能的な存在が腫瘍形成の成功に必須である唯一のサイクリン依存性キナーゼであるように見える（非特許文献３６）。
【０１６７】
要約すると、マウスにおけるＣｄｋ４遺伝子ノックアウトは、正常な皮膚角化細胞増殖に対する作用なしに、Ｃｄｋ２及びＣｄｋ６の継続的な存在にもかかわらず、化学的に誘導される表皮発癌を完全に抑止する（Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ−Ｐｕｅｂｌａら、２００２；Ａｍ  Ｊ  Ｐａｔｈｏｌ（２００２）；１６１：４０５〜４１１）。さらに、ＣＤＫ２（Ｍａｃｉａｓら、２００７；Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ２００７、６７：９７１３〜９７２０）ではなくＣＤＫ４（Ｍｉｌｉａｎｉ  ｄｅ  Ｍａｒｖａｌら；Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．（２００４）；２４：７５３８〜７５４７）の切除は、ｍｙｃによって媒介される経口腫瘍形成を阻害する。さらに、サイクリンＤ１ではなくＣｄｋ４の過剰発現は、マウス皮膚発癌を促進し（Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ−Ｐｕｅｂｌａら、１９９９；Ｃｅｌｌ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｄｉｆｆｅｒ１９９９、１０：４６７〜４７２）、高いＣｄｋ２活性は、角化細胞増殖を誘導するにもかかわらず、腫瘍原性ではない（Ｍａｃｉａｓら、２００８）。
【０１６８】
多段階発癌は、細胞増殖と細胞生存の両方の調節解除の結果として起こる（Ｅｖａｎ及びＶｏｕｓｄｅｎ２００１；Ｎａｔｕｒｅ（２００１）；４１１：３４２〜３４８）。活性化変異は、細胞分裂を促進する遺伝子で起こり、不活性化変異は癌抑制遺伝子で起こる。しかし、Ｅ２Ｆ因子の調節解除を招く経路を活性化し、増大した細胞増殖を促進することができる変異は、アポトーシスも促進し得る（Ｑｕｉｎら、１９９４；Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ（１９９４）；９１：１０９１８〜１０９２２、Ｓｈａｎら、１９９４；Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ（１９９４）；１４：８１６６〜８１７３）。発癌の進行が成功するには、細胞は、アポトーシスを回避しながら増殖を最大にできなければならない（Ｌｏｗｅ及びＬｉｎ２０００；Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ（２０００）；２１：４８５〜４９５）。
【０１６９】
上記知見の説明は、発癌中には細胞増殖と同様にアポトーシスの可能性が高いということであろう。ＤＥＶＤに結合し、ＰＡＲＰ切断を防止することによって、ＰＲＧＰＲＰモチーフは、アポトーシスを阻害して、腫瘍の形成を可能にする。ＰＲＧＰＲＰの非存在下では、アポトーシスの増加が腫瘍形成を防止する。発癌の初期にはＤＮＡ損傷は極めて少なく、細胞分裂は抑制されず、細胞は好気的解糖下で作動せず、したがって、ＰＡＲＰ切断の防止が壊死を生じるとは考えられない。
【０１７０】
Ｃｄｋ４の存在が発癌の成功に必須であるように見えるという所見は、したがって、Ｃｄｋ４のキナーゼ活性の観点ではなく、ＰＲＧＰＲＰモチーフを含む外部化ループの活動によって説明され、ＰＲＧＰＲＰモチーフは、ＰＡＲＰのＤＥＶＤ領域に結合し、アポトーシスを最少にし、細胞増殖の増大を進行させる。
【０１７１】
Ｃｄｋ４及びそのＰＲＧＰＲＰ（配列番号２）部位の非存在下では、発癌プロセスは、細胞不死化ではなく、アポトーシスで終わる可能性がある。
【０１７２】
十分に発達した癌細胞におけるＣＤＫ４のＰＲＧＰＲＰ領域の効果：
樹立癌細胞のＤＮＡが著しく損傷を受けていることが過去１０年で次第に明らかになった（Ｗａｒｅｎｉｕｓ；Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．（２００２）；２２：２６５１〜２６５６）。この高レベルのＤＮＡ損傷は、初期発癌の特徴ではないが、広範囲の臨床癌で観察された（非特許文献２；Ｇｒｅｅｎｍａｎら、２００７；非特許文献４；Ｇｅｒｌｉｎｇｅｒら、Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ（２０１２）；３６６：８８３〜８９２）。ＨｉｌＲｏｓ研究に使用された細胞系は、同様の進行癌から誘導され、したがってやはり同様の多量のＤＮＡ損傷を示す。
【０１７３】
著しいＤＮＡ損傷は、ＰＡＲＰを刺激して、複数の部位におけるポリ（ＡＤＰ−リボシル化）を実行して、利用可能なＮＡＤ＋を使い切ると予想される。ＰＡＲＰ−１の上方制御は、乳癌、結腸癌、子宮体癌、食道癌、腎癌、肺癌、卵巣癌、皮膚癌、直腸癌、胃癌、甲状腺癌及び精巣癌を含めて、多数の腫瘍タイプにおいて記述されている（非特許文献２６）。細胞も、ＤＥＶＤ部位におけるＰＡＲＰのカスパーゼ切断を含むアポトーシス経路を活性化し、したがってポリ（ＡＤＰ−リボシル化）を不活性化し、十分なＮＡＤ＋がアポトーシスに必要なＡＴＰを産生できるようにすることによって、ＤＮＡ損傷に反応する。したがって、こうした進行癌細胞の生存は、アポトーシス死する傾向と壊死性死する傾向のバランスに左右される。
【０１７４】
さらに、癌細胞の無制限の分裂は、正常細胞とは対照的に、新しい細胞巨大分子の合成及び有糸分裂の遂行に多くのエネルギーを必要とする。
【０１７５】
最後に、癌細胞におけるワールブルグ効果によって、それらがミトコンドリアのＡＴＰ産生よりも好気的解糖（２００倍にも増加し得る）にはるかに依存するようになる。
【０１７６】
ＰＡＲＰ切断を阻害することによって、本開示の化合物は、細胞のエネルギー供給にストレスを加える。しかし、ＰＡＲＰ作動物質（及びカスパーゼ阻害剤）は、本開示の化合物に見られる癌細胞壊死を起こさない。壊死が起きるには更なるストレスが必要である。したがって、本開示のペプチドは、癌細胞に特有である好気的解糖に関与する乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ：ｌａｃｔａｔｅ  ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ）などのＰＡＲＰに対する追加の標的を有する可能性がある。
【０１７７】
癌細胞においては、好気的解糖に切り換えると、そのエネルギー系がＬＤＨの作用によって産生されるＮＡＤの供給に大きく依存するようになる［図１８参照］。この状況においては、癌細胞は、ポリＡＤＰ−リボシル化に使用されるＮＡＤに対する上方制御された活性なＰＡＲＰの競合的要求に極めて敏感になる。その作用がＨＩＬＲ環状ペプチドについて本明細書に記述したようなものである化合物は、ＬＤＨを阻害し、ＮＡＤの利用能を低下させると同時に、ＰＡＲＰを刺激し、そのＮＡＤ利用を高めて、グルコース−６リン酸からピルビン酸への解糖エムデン・マイヤーホフ経路のためのＮＡＤを不足させることによって、癌細胞に対して選択的に毒性になる可能性がある。
【０１７８】
理論に拘泥するものではないが、本開示のペプチドは、癌細胞の全体的な弱みの２つ、すなわち、多量のＤＮＡ損傷を修復する必要性と好気的解糖への切り換えを攻撃することによって、癌細胞を死滅させ得ることが示唆される。
【実施例】
【０１７９】
以下、本発明を以下の説明のための実施例を参照して更に詳細に記述する。
実施例１：改善された比活性
３種の環状ペプチド（ＨＩＬＲ−００１（配列番号１３）、ＨＩＬＲ−０２５（配列番号１５）及びＨＩＬＲ−０３０（配列番号１６））を従来の自動ペプチド合成技術によって純度＞９５％で調製した。ＨＩＬＲ−００１（配列番号１３）は、非特許文献３６に従って製造された比較化合物である。ＨＩＬＲ−０２５（配列番号１５）及びＨＩＬＲ−０３０（配列番号１６）は、（Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ）又は（Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｇｐａ−Ｇｐａ）繰り返しを含む環状化合物である。化合物の活性を以下のように試験した。
【０１８０】
１）１０％ＦＢＳを補充したＨａｍのＦ１２培地でＮＣＩ−Ｈ４６０細胞を増殖させた。
２）細胞を収集し、９６ウェルプレートに５００細胞／ウェルで蒔いた。
３）化合物を原液から調製し、２００μＭから始まる２倍希釈で細胞に直接添加した。最終ＤＭＳＯ濃度は０．２％であった。
４）細胞を化合物と一緒に３７℃５％ＣＯ２で加湿雰囲気で９６時間増殖させた。
５）次いで、レサズリン色素組成物（ＡｌａｍａｒＢｌｕｅ（登録商標）細胞生存度試薬（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．））１０％（ｖ／ｖ）を添加し、更に４時間インキュベートし、蛍光生成物をＢＭＧ  ＦＬＵＯｓｔａｒプレートリーダーによって検出した。
６）ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍにおける４パラメータロジスティック方程式によってデータを分析する前に、培地のみのバックグラウンドの読みを減算した。結果を図１１に示す。ＨＩＬＲ−３０のＩＣ５０を６μＭと測定した。
【０１８１】
図３に示すように、新しい「骨格」配列ＷＷＲＲＷＷＲＲＷＷ（配列番号１７）をＰＲＧＰＲＰ（配列番号２）と一緒に環状ＨＩＬＲ−０２５に挿入すると、ＴＨＲ５４（ＨＩＬＲ−００１）に比べて比活性が増加し、ＩＣ５０用量が９８μＭから１５μＭに減少した。グアニジノ−フェニルアラニンをアルギニンの代わりに用いてＨＩＬＲ−０３０を生成することによって「骨格」をより親油性にする更なる改変は、比活性を更に改善して、ＩＣ５０が６．０μＭになった。
【０１８２】
アルギニン及びトリプトファンを含むオリゴマー線状配列は、以前に、好結果の細胞内取り込み性を有することが記述された。すなわち、ＲＲＷＲＲＷＷＲＲＷＷＲＲＷＲＲ（配列番号３８）［Ｄｅｒｏｓｓｉら、Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ（１９９８）８：８４〜８７］。パッセンジャーペプチドの細胞取り込みを増強する手段としての環状アルギニン／トリプトファンペプチドも記述されている：［Ｃｙｃ−（ＷＲＷＲＷＲＷＲ）（配列番号３９）Ｓｈｉｒａｚｉら、Ｍｏｌ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ（２０１３）１０：２００８〜２０２０］。
【０１８３】
しかし、アルギニン及びトリプトファンのどの配列が細胞取り込みの改善に最も有効であるかは文献からは不明であった。単量体又は二量体トリプトファンと交互のアルギニン二量体は、Ｄｅｒｏｓｓｉら（上記）によって線状の細胞内部に取り入れられたペプチドにおいて記述されたが、Ｓｈｅｒａｚｉらによって記述された環状（ＷＲ）４ペプチドでは、単一のアルギニンとトリプトファンを交互にした。（ＷＷＲＲ）Ｘ配列を「骨格」に有する環状ペプチドが、ＡＬＫＬ配列を有するものよりも活性でなくてはならない演繹的又は明白な実験上の理由はなかった。
【０１８４】
さらに、ＰＲＧＰＲＰ「弾頭」（配列番号２）とカスパーゼ−１のＤＥＶＤ領域の結合は、図１３に示すように、アルギニン残基の位置取りに依存する。当初は、アルギニン残基が骨格に存在すると、ＰＲＧＰＲＰ弾頭（配列番号２）とその生物学的標的の結合を完成させる、又は妨害すると考えられた。驚くべきことに、それは本当ではない。
【０１８５】
実施例２：ＰＡＲＰ依存細胞毒性
本発明者は、ＰＲＧＰＲＰ環状ペプチドによるＰＡＲＰ活性の調節が、少なくとも部分的には、ヒト非小細胞肺癌におけるＡＴＰの減少とそれに続く壊死の原因であり得ると仮定した。したがって、ＨＩＬＲａ環状ペプチドは、ＰＡＲＰ依存性であり得る。その場合、これは、オラパリブなどのＰＡＲＰ阻害剤によって逆転されるはずであると想定された。
【０１８６】
この状況においては、オラパリブは、ＨＩＬＲａ環状ペプチドによって誘導される細胞死を減少／防止すると考えられる。
【０１８７】
したがって、試験を実施して、単体の、又はオラパリブと同時インキュベートした、ＨＩＬＲ−００１［ｃｙｃ−（Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｌｕｅ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｌｅｕ］（配列番号１３）（Ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、フランス、ＳＡＳ、７  Ｒｕｅ  ｄｅ  Ｂｏｕｌｏｇｎｅ、６７１００、ストラスブール、フランス）］にそれぞれ７２時間及び９６時間さらされたＮＣＩ−Ｈ４６０ヒト非小細胞肺癌細胞のＡＴＰレベル及び細胞死に対する効果を調べた。
【０１８８】
インビトロＰＡＲＰ検量線を最初に作成した［図５］。
【０１８９】
手順：
１）１０％ＦＢＳを補充したＨａｍのＦ１２培地でＮＣＩ−Ｈ４６０細胞を増殖させた。
２）細胞を収集し、１０ｃｍの皿に１ｘ１０６細胞／皿で蒔いた。
３）オラパリブを原液から調製し、細胞に直接添加して、グラフに示した最終濃度を得た。ＤＭＳＯ含有量を濃度０．１％で一定に維持した。
４）細胞をオラパリブ又はビヒクル対照と一緒に３７℃、５％ＣＯ２で４時間、２４時間、４８時間又は９６時間インキュベートした。
５）細胞を異なる時点で収集し、時間経過が完了するまで細胞ペレットを−８０℃で貯蔵した。
６）細胞ペレットを解凍し、５０μｌＰＡＲＰ溶解緩衝剤に溶解させた。
７）試料のタンパク質濃度をＢＣＡアッセイによって定量化した。
８）次いで、Ｔｒｅｖｉｇｅｎ製ヒストン被覆片ウェル（Ｈｉｓｔｏｎｅ−Ｃｏａｔｅｄ  Ｓｔｒｉｐ  Ｗｅｌｌｓ）を用いた汎用化学発光ＰＡＲＰアッセイキット（Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  Ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ  ＰＡＲＰ  Ａｓｓａｙ  Ｋｉｔ）（Ｃａｔ＃４６７６−０９６−Ｋ）を用いて、製造者の指示に従って、細胞及び組織抽出物におけるＰＡＲＰ活性について試料４０μｇを二つ組で評価した。
９）４つの試験濃度のオラパリブ及び２つの濃度の３−アミノベンズアミドを、上記キットを用いたインビトロアッセイにおいて製造者の指示に従って、ＰＡＲＰ阻害剤アッセイ手順について二つ組で評価した。
１０）発光生成物をＢＭＧ  ＦＬＵＯｓｔａｒプレートリーダーによって検出した。
【０１９０】
９０％を超えるＰＡＲＰを阻害するのに必要な最低濃度のオラパリブを３−アミノベンズアミドと比較し［図６］、オラパリブによるＰＡＲＰ阻害の時間経過をプロットした［図７］。
【０１９１】
次いで、ＮＣＩ−Ｈ４６０ヒト非小細胞癌に対するオラパリブそれ自体のインビトロ細胞毒性を試験した［図８］。
【０１９２】
手順：
１）１０％ＦＢＳを補充したＨａｍのＦ１２培地でＮＣＩ−Ｈ４６０細胞を増殖させた。
２）細胞を収集し、９６ウェルプレートに５００細胞／ウェルで蒔いた。
３）オラパリブを原液から調製し、３０μＭから始まる片対数希釈で細胞に直接添加した。最終ＤＭＳＯ濃度は０．３％であった。
４）細胞を化合物と一緒に３７℃５％ＣＯ２で加湿雰囲気で９６時間増殖させた。
５）次いで、ＡｌａｍａｒＢｌｕｅ（登録商標）細胞生存度試薬（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．）１０％（ｖ／ｖ）を添加し、更に４時間インキュベートし、蛍光生成物をＢＭＧ  ＦＬＵＯｓｔａｒプレートリーダーによって検出した。
６）ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍにおける４パラメータロジスティック方程式によってデータを分析した。
【０１９３】
用量３０ｎＭのオラパリブは、ＮＣＩ−Ｈ４６０細胞に無毒であり、細胞ＰＡＲＰ活性の８０％超を阻害することが判明した。この用量のオラパリブを９６時間のＨＩＬＲ−００１アッセイによる同時インキュベーション用に選択した。
【０１９４】
４つの濃度のオラパリブを試験し、細胞ＰＡＲＰ活性の用量依存的減少がすべての時点で認められた。４つの試験濃度のオラパリブ及び２つの濃度の対照化合物３−アミノベンズアミドを精製ＰＡＲＰ酵素を用いたインビトロアッセイで試験した。このアッセイは、細胞ＰＡＲＰアッセイと並行して実施され、正の対照として働いた。
【０１９５】
ＨＩＬＲ−０３０によって媒介されるＮＣＩ−Ｈ４６０におけるＡＴＰ枯渇及び壊死に対するオラパリブの効果：
４つの濃度のＨＩＬＲ−００１を３０ｎＭオラパリブの存在又は非存在下で試験した。各時点において細胞生存度をａｌａｍａｒＢｌｕｅ（登録商標）及びＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏの２つのアッセイ読み取りによって測定した。ａｌａｍａｒＢｌｕｅ（登録商標）から蛍光生成物への変換は、細胞の代謝活性の読み取りとして役立ち、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏは、存在するＡＴＰの定量化に基づく。
【０１９６】
手順：
１）１０％ＦＢＳを補充したＨａｍのＦ１２培地でＮＣＩ−Ｈ４６０細胞を増殖させた。
２）細胞を収集し、９６ウェルプレートに５００細胞／ウェルで蒔いた。
３）ＨＩＬＲ−００１を１０ｍＭ原液から調製し、２００μＭから始まる２倍希釈で細胞に直接添加した。オラパリブを１０ｍＭ原液から調製し、細胞に３０ｎＭで直接添加した。合計最終ＤＭＳＯ濃度は０．２５％であった。
４）細胞を化合物と一緒に３７℃５％ＣＯ２で加湿雰囲気で２４、４８、７２又は９６時間増殖させた。
５）次いで、ＡｌａｍａｒＢｌｕｅ（登録商標）１０％（ｖ／ｖ）を添加し、更に４時間インキュベートし、蛍光生成物をＢＭＧ  ＦＬＵＯｓｔａｒプレートリーダーによって検出した。
６）二つ組プレート上で、培地を細胞から除去し、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−ＧｌｏをＰＢＳに希釈し（１：１０）、１００μｌを細胞に添加した。
７）プレートをオービタルシェーカー上で２分間混合し、更に１０分間室温でインキュベートした。次いで、発光シグナルをＢＭＧ  ＦＬＵＯｓｔａｒプレートリーダーによって測定した。
【０１９７】
ＨＩＬＲ−００１を単一の薬剤として試験すると、代謝活性（ａｌａｍａｒＢｌｕｅ（登録商標））の用量依存的減少が認められた。これは、より遅い時点で特に明らかであり、以前に発表された結果（非特許文献３６）と一致した。
【０１９８】
３０ｎＭオラパリブは、ＡＴＰレベルをある程度回復させ（Ｃｅｌｌ  Ｔｉｔｒｅ  Ｇｌｏ）、５０μＭ  ＨＩＬＲ−００１によって媒介される細胞死を逆転させ（ａｌａｍａｒＢｌｕｅ（登録商標））［図９］、その活性がこの用量レベルにおいてＰＡＲＰ依存性であることを示した。より高いＨＩＬＲ−００１用量（１００μＭ及び２００μＭ）では、オラパリブは、ＡＴＰレベルや癌細胞死に影響せず、ＨＩＬＲ−００１の制癌作用が、ＰＡＲＰ機能に対するその効果を含む機序によって一部しか説明されない可能性があることを示した。
【０１９９】
上記実験は、ＰＡＲＰ活性が、ＰＲＧＰＲＰペプチドが癌細胞壊死を引き起こす機序において重要な役割を果たし、この活性が、特定のＰＡＲＰ阻害剤によって部分的に逆転され得るという驚くべき知見を実証している。したがって、ＰＲＧＰＲＰペプチドとＰＡＲＰの相互作用は、癌細胞壊死の十分な要件ではないが、必要なものである。
【０２００】
実施例３：ＤＥＶＤの競合阻害
ＰＡＲＰ活性は、ＤＥＶＤ部位に切断が存在するか否かによって制御される。切断ＰＡＲＰは、そのポリ（ＡＤＰ−リボース）リン酸化活性に関して不活性化される。オラパリブなどのポリ（ＡＤＰ−リボース）リン酸化阻害剤は、切断ＰＡＲＰに対して効果がないと予想される。したがって、ＰＲＧＰＲＰ（配列番号２）は、完全なＤＥＶＤ領域を有する完全なＰＡＲＰに作用する可能性がある。さらに、ＨＩＬＲ−００１の活性は、ＰＡＲＰのＤＥＶＤ領域に結合し、したがってこの領域をカスパーゼ結合及びタンパク質切断から保護するＰＲＧＰＲＰ（配列番号２）によって説明し得ることが提案される。
【０２０１】
ペプチド内の領域の二次及び三次構造配向全般を考慮せずに、ＰＡＲＰのＧＤＥＶＤＧ領域（配列番号１）におけるアスパラギン酸アニオンの線状配列がカチオン性アルギニンとかなり接近して整列し［図１３］、これらのアルギニンがＰＲＧＰＲＰ（配列番号２）の制癌効果に重要であることが示された（非特許文献３６）ことは注目される。
【０２０２】
ＤＥＶＤが、ＰＲＧＰＲＰ（配列番号２）の下流標的である場合、ＤＥＶＤ部位におけるＰＡＲＰ切断を保護し得るＰＲＧＰＲＰと無関係な分子も、ＮＣＩ−Ｈ４６０細胞毒性の一因になり得る。
【０２０３】
ＧＤＥＶＤＧ（配列番号１）との相同性によって、ＰＡＲＰをＤＥＶＤ部位［Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ａｓｐ２１４−Ｇｌｙ２１５］（配列番号１）で切断するカスパーゼ及び関連分子に競合的に結合し得る環状ペプチドが設計された。切断は、Ａｓｐ２１４とＧｌｙ２１５アミノ酸の間で起こり、２個の断片８９及び２４ｋＤａポリペプチドが生成する。
【０２０４】
メチルアミド結合を切断部位に有するＧＤＥＶＤＧヘキサペプチドＨＩＬＲ−Ｄ−０１（Ｃｙｃ−［Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−ＮＭｅＡｓｐ−Ｓａｒｃ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ］（配列番号４０）がこうして構築され、これを、ＰＲＧＰＲＰ（配列番号１）の代わりに、ＰＲＧＰＲＰ比活性を高めることが先に見いだされた（実施例１）改善されたカセットに挿入した。
【０２０５】
ＨＩＬＲ−Ｄ−０１は、弱いが意義のある用量関連細胞死滅を示し、ＰＡＲＰ切断の阻止が癌細胞壊死の誘導に寄与し得ることを示した［図１３］。
【０２０６】
実施例４：カスパーゼ阻害
ＨＩＬＲペプチドのＰＡＲＰ依存性が、ＰＡＲＰ切断の阻害によって維持されるＰＡＲＰ活性によるものであるかどうかを更に試験するために、Ｐｒｏｍｅｇａ製Ａｐｏ−ＯＮＥ均一カスパーゼ−３／７試薬を用いたアッセイを、ある範囲の用量のＨＩＬＲ−０３０の存在下で行った。ＤＥＶＤ−ＣＨＯを正の対照として使用した。
【０２０７】
Ｐｒｏｍｅｇａキットは、カスパーゼ３／７酵素活性を支持する緩衝剤、及びカスパーゼ−３／７基質ローダミン１１０、ビス−（Ｎ−ＣＢＺＬ−アスパルチル−Ｌ−グルタミル−Ｌ−バリル−Ｌ−アスパラギン酸アミド；Ｚ−ＤＥＶＤ−Ｒ１１０）からなる。Ｚ−ＤＥＶＤ−Ｒ１１０は、アッセイ前に蛍光基質前駆体（ｐｒｏ−ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ  ｓｕｂｓｔｒａｔｅ）として存在し、カスパーゼ−３／７活性によるＤＥＶＤペプチドの連続した切断及び除去、並びに４９９ｎｍにおける励起によって、ローダミン１１０脱離基が蛍光性になる。発生する蛍光生成物の量は、試料中で起きたカスパーゼ−３／７切断の量に比例すると報告されている。（試薬供給源は、Ｅｎｚｏ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｃａｔ  Ｎｏ：ＢＭＬ−ＳＥ１６９−５０００）；Ａｐｏ−ＯＮＥ（登録商標）均一カスパーゼ−３／７アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｃａｔ  Ｎｏ：Ｇ７７９０）；対照化合物Ａｃ−ＤＥＶＤ−ＣＨＯ  Ｓｉｇｍａ  Ｃａｔ  Ｎｏ：Ａ０８３５であった）。
【０２０８】
３８４ウェルプレート形式を用いて、使用したすべてのプレートリーダー利得設定において酵素反応を検出可能であった。１０Ｕの酵素が反応において存在すると、利得設定１０００で最大検出可能シグナルを超えた。使用した最高利得設定においては、０．０１〜１０単位のカスパーゼ−３を反応に使用したときに、蛍光シグナルの経時的増加が観察可能であった。この範囲内で、反応の初速度は、反応において存在する酵素の総量に正比例した。０．３Ｕ、０．１Ｕ及び０．０３Ｕの酵素をプレートリーダー利得設定１０００による最適化の次の段階に進めた。
【０２０９】
最適な組換えヒトカスパーゼ３酵素活性を滴定によって求め、酵素用量０．０３〜０．３０単位の初期組換え酵素動力学の直線性が示された。この範囲内で、反応の初速度は、反応において存在する酵素の総量に正比例した。ＤＭＳＯ耐性アッセイも行い、最終アッセイにおける１％を超えるＤＭＳＯ濃度は、反応の初速度を低下させるようにみえたが、速度は５０分間直線的であることが示された。
【０２１０】
これらのパラメータ内では、蛍光シグナルの増加は約５０分間直線的であり、初速度を強い相関係数で計算することができ、使用される酵素の量を経済的に維持することができた。
【０２１１】
Ａｃ−ＤＥＶＤ−ＣＨＯは、カスパーゼ−３の活性を用量依存的に阻害し、阻害剤の仕様書に従って予想される範囲内のＩＣ５０を示した［図１０］。０．１又は０．３Ｕの酵素に対するアッセイでも同様の阻害剤ＩＣ５０が得られた。すべての後続の実験においては、０．１Ｕの酵素を使用し、５分ごとに２時間読み取るようにプレートリーダー設定を調節した。
【０２１２】
ＤＥＶＤ−ＣＨＯ対照又はＨＩＬＲ−０３０を基質又はヒト組換えカスパーゼ−３と下表の手順に従って２時間同時インキュベートした。
【０２１３】
【表１】
2017529386.tif 000005
【０２１４】
ＤＥＶＤ−ＣＨＯとＨＩＬＲ−０３０のどちらも、カスパーゼ−３活性を用量依存的に阻害した［図１１、１２］。
【０２１５】
実施例５：アニオン性／カチオン性「弾頭」
ＨＩＬＲ−Ｄ−０２（Ｃｙｃ−［Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ］）（配列番号１９）をＨＩＬＲ−０２５の負の対照として設計し、ＮＣＩ−Ｈ４６０ヒト非小細胞癌細胞に対してインビトロで試験した。
【０２１６】
驚くべきことに、ＨＩＬＲ−Ｄ−０２は、ＮＣＩ−Ｈ４６０細胞に対して細胞毒性を示し、ＩＣ５０が３８μＭであった。［図４Ａ］。アルギニンの高電荷カチオン性グアニジウム基で陰性基を置換しても一般に制癌分子を生じ得ることを確認するために、ＨＩＬＲ−０２５のアルギニンをホモシステイン酸残基で置換することによって、グアニジウム基の代わりにスルホン酸基を有する更なるＨＩＬＲ−０２５環状ペプチドカチオン性類似体を合成した。この環状ペプチドＨＩＬＲ−Ｄ−０６は、ＨＩＬＲ−Ｄ−０２よりも更に効果的にＮＣＩ−Ｈ４６０細胞を死滅させ、ＩＣ５０が２５μＭであった［図４Ｂ］。したがって、本明細書に記載の環状ペプチド内の同じ部位におけるアニオン性基とカチオン性基はどちらもインビトロで癌細胞死滅を引き起こし得ると言えるように見える。
【０２１７】
アニオン性ヘキサペプチドＰＥＧＰＥＰ（配列番号４）は以前に不活性であると報告されたので［非特許文献３６］、この結果は驚くべきことである。活性陰性基の活性は、アニオン性ヘキサペプチドと癌細胞の接触時間が不十分であり、使用したＰＥＧＰＥＰ（配列番号４）の濃度も不十分であったので、以前の試験では認められなかったと考えられる。短い線状ペプチドを利用するときには高い投与量が必要であることが多い。本開示の環状ペプチドに含まれるカセット配列は、細胞への活性部分の送達を強化して、より低投与量の使用を可能にすると考えられる。
【０２１８】
理論に拘泥するものではないが、これらの環状ペプチドは、それらの推定上の標的（単数又は複数）との静電気結合によって相互作用し、競合阻害又は「デコイ」機序の両方によって作用することができ、したがって、アニオン性「弾頭」とカチオン性「弾頭」の両方の類似の効果を説明できることが提案される。
【０２１９】
ＨＩＬＲ環状ペプチドは、ＰＡＲＰのＤＥＶＤ領域と相互作用して、それを切断から保護し、ＰＡＲＰ活性を保持する可能性がある。これは、これらの薬剤の癌細胞壊死活性に必要であるが、それらの完全な作用機序を説明するのには不十分である。これらのＨＩＬＲペプチドが部分的ＰＡＲＰ作動物質であるという提案は、別のＰＡＲＰ作動物質について以前に報告されたものと一致する（上記参照）。したがって、ＨＩＬＲ環状ペプチドは、ａ）ＰＡＲＰ及びｂ）細胞ＡＴＰレベルの非ＰＡＲＰエフェクターに対する潜在的二重活性を有するように見える。理論に拘泥するものではないが、この追加のＰＡＲＰ活性の２つの可能な候補は、アルギニンが活性酵素部位内のアセチルＣｏＡの結合に重要な役割を果たす酵素乳酸デヒドロゲナーゼ、及びヘキソキナーゼ２であり得る。
【０２２０】
実施例６：２−デオキシグルコースと組み合わせた本発明の化合物の効果
本発明に係る化合物は、ＮＡＤ／ＡＴＰ枯渇の結果として壊死による細胞死を引き起こすように見えたので、それらの活性は、化合物を解糖阻害剤と一緒に投与することによって増強することができると仮定された。したがって、解糖阻害剤２−デオキシグルコース（２−ＤＯＧ）の存在及び非存在下でのＨＩＬＲ−０２５（配列番号１５）及びＨＩＬＲ−Ｄ−０７ナトリウム塩（配列番号３０）の細胞死滅能力を評価した。
【０２２１】
ＨＩＬＲ−０２５（配列番号１５）はカチオン性ＰＲＧＰＲＧＰ（配列番号２）弾頭を含み、ＨＩＬＲ−Ｄ−０７（配列番号３０）はアニオン性弾頭を有する。
【０２２２】
ＮＣＩ−Ｈ４６０ヒト非小細胞肺癌細胞を単体の、又は３．１２５ｍｍｏｌ  ２−ＤＯＧと組み合わせた、ＨＩＬＲ−０２５又はＨＩＬＲ−Ｄ−０７と接触させ、細胞生存をＡｌａｍａＢｌｕｅ（登録商標）細胞生存度試薬（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．）を用いて製造者の指示に従って判定した。これらの試験の結果を図１５に示す。
【０２２３】
ＨＩＬＲ−０２５とＨＩＬＲ−Ｄ０７の両方の細胞死滅能力は、２−ＤＯＧとの同時投与によって増強されることが判明した。２−ＤＯＧは、生体内で忍容性が良好であり、本明細書に開示した環状ペプチドの活性の増強に使用することができる。ＨＩＬＲ−０２５とＨＩＬＲ−Ｄ−０７に対して得られた類似の結果は、これらのペプチドが、関連した作用機序を有することを示唆する。
【０２２４】
アニオン性弾頭の作用機序を更に調べるために、ＮＣＩ  Ｈ４６０ヒト非小細胞肺癌の培養物をＨＩＬＲ−０２５及びＨＩＬＲ−Ｄ−０７にさらし、光学顕微鏡法によって観察した。比較細胞培養物をＤＭＳＯで処理して負の対照とした。細胞培養物の光学顕微鏡写真を図１６に示す。
【０２２５】
本開示に係る環状化合物にさらされた細胞培養物には著しい形態変化が認められた。非特許文献３６においてＴＨＲ５３に起因すると報告されたものに類似した環状形態が観察された。これは、ＴＨＲ５３、ＨＩＬＲ−０２５及びＨＩＬＲ−Ｄ−０７が、関連した作用機序を有することを示唆する。
【０２２６】
実施例７．乳酸デヒドロゲナーゼＡ［ＬＤＨＡ］の活性に対するＴＨＲ環状ペプチドＨＩＬＲ−０２５及びＨＩＬＲ−０３０の効果。
ＬＤＨＡは、ピルビン酸を乳酸に転化し、１分子のＮＡＤを生成する（図１８参照）。このＮＡＤは、ＡＴＰが産生されるグリセルアルデヒドリン酸デヒドロゲナーゼステップにおいてエムデン・マイヤーホフ経路に再び入る。ＮＡＤがない場合、嫌気性解糖経路におけるこのステップが起きず、主にこの経路に依拠する癌細胞から高エネルギーのＡＴＰ分子が取り除かれる。このため、２種の環状ペプチドＨＩＬＲ−０２５及びＨＩＬＲ−０３０をＬＤＨ活性の可能な阻害剤として調べた。
【０２２７】
ＬＤＨ活性アッセイを２つの試験化合物（ＨＩＬＲ−０２５及びＨＩＬＲ−０３０）で処理されたＮＣＩ−Ｈ４６０細胞に由来する試料について２４時間又は９６時間実施した。より高い試験化合物濃度で、特により遅い時点においてかなりの細胞死が認められた。したがって、ＢＣＡアッセイを行って、各ＬＤＨアッセイ溶解物中に存在するタンパク質の総量を推定し、これを使用して、酵素活性データを規格化した。細胞生存度の指標として、Ａｌａｍａｒ  ｂｌｕｅアッセイも両方の時点で実施して、追加の基準点とした。
【０２２８】
以下の手順を使用した。
１）１０％ＦＢＳを補充したＨａｍのＦ１２培地でＮＣＩ−Ｈ４６０細胞を増殖させた。
２）細胞を収集し、９６ウェルプレートに５００細胞／ウェル（９６時間の時点）又は２４時間の時点で５０００細胞／ウェルで蒔いた。
３）Ｈｉｌｒｏｓ化合物をＤＭＳＯ原液から調製し、細胞に濃度４０、２０、１０、５及び２．５μＭで直接添加した。
４）平行プレートを組み立てた。
・ＬＤＨアッセイの場合、１つのアッセイ濃度当たり１０組のウェルを使用した。
・Ａｌａｍａｒ  Ｂｌｕｅアッセイには３つ組ウェルを使用した。
・すべてのウェルの最終ＤＭＳＯ濃度は０．２％であった。
５）細胞を化合物と一緒に３７℃５％ＣＯ２で加湿雰囲気で２４又は９６時間増殖させた。
６）アッセイ（２４又は９６時間）の最後に、Ａｌａｍａｒ  ｂｌｕｅ１０％（ｖ／ｖ）を１セットのプレートに添加し、更に４時間インキュベートし、ＢＭＧ  ＦＬＵＯｓｔａｒプレートリーダーによって蛍光生成物を検出した。
７）ＬＤＨアッセイの場合、細胞を各ウェルからトリプシン処理によって収集し、複数組のウェルからの細胞を貯蔵し、次いで遠心分離によってペレット化した。
８）細胞ペレットを氷冷ＰＢＳでリンスし、（キット中の）１５０μｌＬＤＨアッセイ緩衝剤に再懸濁させ、液体窒素で急速凍結して、細胞溶解を促進した。
９）試料を急速解凍し、細胞溶解物を１０，０００ｘｇで１０分間４℃で遠心分離して清澄にした。
１０）上清（ｃｌｅａｒｅｄ  ｌｙｓａｔｅ）のＬＤＨ活性をＬＤＨ活性キット（Ａｂｃａｍ、ａｂ１０２５２６）によって測定した。
１１）ＬＤＨ活性アッセイ反応物の調製後、製造者の指示に従って、４５０ｎｍにおける吸光度を初回に測定して、（Ａ４５０）初期を求めた。
１２）更なる吸光度を３分間隔で１５分まで読み取った。
１３）酵素活性を計算するための最終測定［（Ａ４５０）最終］を、最も活性な試料が検量線の線形範囲を超えた最後から２番目の時点の読みから得た。
１４）各試料のＴ初期からＴ最終までの測定値の変化を計算した：ｌ１Ａ４５０＝（Ａ４５０）最終−（Ａ４５０）初期。
１５）ＮＡＤＨ検量線を使用して、各試料のｌ１Ａ４５０を内挿して、Ｔ初期とＴ最終の間でキナーゼアッセイによって産生されたＮＡＤＨ量（Ｂ）を求めた。
１６）各試料のＬＤＨ活性を以下の式によって求めた。
【０２２９】
【数１】
2017529386.tif 000006
【０２３０】
ａ．残留上清のタンパク質含有量をＢＣＡアッセイ（ＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）によって測定した。
ｂ．データをＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍによって解析した。
【０２３１】
上記アッセイの結果を図１７に示す。データによれば、ＨＩＬＲ−０２５及びＨＩＬＲ−０３０は、ＬＤＨの活性を阻害するのに有効であり、ＨＩＬＲ−０２５のＩＣ５０は１６μＭであり、ＨＩＬＲ−０３０のＩＣ５０は２２μＭであった。これは、本発明の環状ペプチドが癌細胞の嫌気性解糖経路を更に標的にしていることを示唆する。
【０２３２】
ＬＤＨ活性は、一般に、ミリ単位／ｍｌで表される。ＬＤＨ活性の１単位は、乳酸からピルビン酸への転化を触媒して、１．０μモル／分のＮＡＤＨを３７℃で産生する酵素の量と定義され、したがって１ｍＵ／ｍｌ＝１ｎｍｏｌｅ／ｍｉｎ／ｍｌである。この試験のＬＤＨ活性データは、ｍＵ／ｍｌ形式で示され、さらに、各溶解物の総タンパク質濃度に対して規格化されている（ｍＵ／ｍｇ）。細胞生存度をＡｌａｍａｒ  Ｂｌｕｅによって並行してモニターした。
【図１】
2017529386.tif 000011
【図２】
2017529386.tif 000012
【図３】
2017529386.tif 000013
【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
2017529386.tif 000017
【図８】
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【図９】
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【図１０】
2017529386.tif 000020
【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
2017529386.tif 000023
【図１４】
2017529386.tif 000024
【図１５】
2017529386.tif 000025
【図１６】
2017529386.tif 000026
【図１７】
2017529386.tif 000027
【図１８】
2017529386.tif 000028
【配列表】
2017529386000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成29年4月12日(2017.4.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ１（ＰＡＲＰ−１）の活性を調節可能な環状化合物であって、式１の部分： 
式１：［Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３−］
（式中、Ｘ１は、ＰＡＲＰ−１の切断を阻害可能なペプチド部分であり、
Ｘ２は存在してもしなくてもよく、Ｘ２が存在するときには、Ｘ２はＶａｌ又はＳｅｒから選択され、
Ｘ３とＸ４の一方は、Ｔｒｐ−Ｔｒｐ及びＡｒ１−Ａｒ２から選択され、
Ｘ３とＸ４の他方は、Ａｒｇ−Ａｒｇ、Ｇｐａ−Ｇｐａ、Ｈｃａ−Ｈｃａ及びＡｒ３−Ａｒ４から選択され、
ここで、
Ｈｃａは、ホモシステイン酸のアミノ酸残基であり、
Ｇｐａは、グアニジノフェニルアラニンのアミノ酸残基であり、
Ａｒ１、Ａｒ２、Ａｒ３及びＡｒ４はそれぞれ、アリール側鎖を有するアミノ酸残基であり、前記アリール側鎖は、場合によっては置換されたナフチル基、場合によっては置換された１，２−ジヒドロナフチル基、及び場合によっては置換された１，２，３，４−テトラヒドロナフチル基から独立に選択され、
Ａｚａは、アジド−ホモアラニンのアミノ酸残基である）
又はその塩、誘導体、プロドラッグ若しくは模倣物を含む、環状化合物。
【請求項２】
少なくとも１個の標識成分を含む、請求項１に記載の環状化合物。
【請求項３】
前記少なくとも１個の標識成分が蛍光標識を含む、請求項２に記載の環状化合物。
【請求項４】
前記化合物が、
シクロ−［Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３］
からなる化合物である、又はその塩、誘導体、プロドラッグ若しくは模倣物である、
請求項１から３のいずれか一項に記載の環状化合物。
【請求項５】
Ｘ１が、配列番号２１（式２）、配列番号２２（式３）、配列番号２３（式４）及び配列番号２４（式５）から選択され、
配列番号２１（式２）は−Ｐｒｏ−Ｘ５−Ｘ６−Ｐｒｏ−Ｘ７−Ｐｒｏ−であり、
式中、Ｘ５とＸ７の両方は、酸性側鎖を有するアミノ酸残基であり、又はＸ５とＸ７の両方は、塩基性側鎖を有するアミノ酸残基であり、
前記酸性側鎖を有するアミノ酸残基は、Ｇｌｕ、Ａｚａ及びＨｃａから各々独立に選択され、
Ｘ６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、ＭｅＧｌｙ及び（ＣＨ２）３から選択され、
配列番号２２（式３）は−Ｐｒｏ−Ｘ８−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｘ９−Ｐｒｏ−であり、
式中、Ｘ８及びＸ９は、Ａｓｐ及びＧｌｕから各々独立に選択され、
配列番号２３（式４）は−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−であり、
配列番号２４（式５）は−Ｇｌｙ−Ｘ１１−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｘ１２−Ｘ１３−であり、
式中、Ｘ１１は、Ａｓｐ及びＧｌｕから選択され、
Ｘ１２は、Ａｓｐ、Ｎ−アルキルアスパラギン酸残基、及びＮ−アリールアスパラギン酸残基Ｇｌｕ、Ｎ−アルキルグルタミン酸残基及びＮ−アリールグルタミン酸残基から選択され、
Ｘ１３は、Ｇｌｙ、Ｎ−アルキルグリシン残基、及びＮ−アリールグリシン残基から選択され、
ただし、Ｘ１２がＡｓｐである場合、Ｘ１３は、Ｎ−アルキルグルタミン酸残基又はＮ−アリールグルタミン酸残基である、
請求項１から４のいずれか一項に記載の環状化合物。
【請求項６】
Ｘ１が配列番号２１（式２）である、請求項５に記載の環状化合物。
【請求項７】
Ｘ５がＧｌｕである、請求項６に記載の環状化合物。
【請求項８】
Ｘ５がＨｃａである、請求項６に記載の環状化合物。
【請求項９】
Ｘ７がＧｌｕ又はＨｃａである、請求項６から８のいずれか一項に記載の環状化合物。
【請求項１０】
Ｘ１が、
ｉ．配列番号２  −Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−、
ｉｉ．配列番号４  −Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−、
ｉｉｉ．配列番号２５  −Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−、
ｉｖ．配列番号２６  −Ｐｒｏ−Ｈｃａ−ＭｅＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−、
ｖ．配列番号２７  −Ｐｒｏ−Ａｚａ−ＭｅＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ−、
ｖｉ．配列番号２８  −Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ−、
ｖｉｉ．配列番号４１  −Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−、及び
ｖｉｉｉ．配列番号４２  −Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ
から選択される、請求項６に記載の環状化合物。
【請求項１１】
Ｘ１が−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−（配列番号２）である、請求項１０に記載の環状化合物。
【請求項１２】
Ｘ１が−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−（配列番号４）である、請求項１０に記載の環状化合物。
【請求項１３】
Ｘ１が配列番号２２（式３）であり、Ｘ８がＡｓｐであり、Ｘ９がＡｓｐである、請求項５に記載の環状化合物。
【請求項１４】
Ｘ１が配列番号２４（式５）である、請求項５に記載の環状化合物。
【請求項１５】
Ｘ１１がＡｓｐであり、Ｘ１２がＡｓｐ又はＮ−アルキルアスパラギン酸残基である、請求項１４に記載の環状化合物。
【請求項１６】
Ｘ１が−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−ＮＭｅＡｓｐ−ＭｅＧｌｙ−Ｖａｌ（配列番号２９）であり、式中のＮＭｅＡｓｐがＮ−メチルアスパラギン酸残基である、請求項１５に記載の環状化合物。
【請求項１７】
Ｘ２が存在し、Ｘ２がＶａｌである、請求項１から１６のいずれか一項に記載の環状化合物。
【請求項１８】
Ｘ３がＴｒｐ−Ｔｒｐ及びＡｒ１−Ａｒ２から選択され、Ｘ４がＡｒｇ−Ａｒｇ、Ｇｐａ−Ｇｐａ及びＨｃａ−Ｈｃａから選択される、請求項１から１７のいずれか一項に記載の環状化合物。
【請求項１９】
Ｘ３がＴｒｐ−Ｔｒｐである、請求項１８に記載の環状化合物。
【請求項２０】
Ｘ３がＡｒ１−Ａｒ２である、請求項１から１８のいずれか一項に記載の環状化合物。
【請求項２１】
Ａｒ１及び／又はＡｒ２が、場合によっては置換されたナフチル基を含む、請求項２０に記載の環状化合物。
【請求項２２】
Ａｒ１及び／又はＡｒ２が、グルタミン酸−ガンマ−［２−（１−スルホニル−５−ナフチル）−アミノエチルアミド（「Ｅｄａ」）のアミノ酸残基である、請求項２１に記載の環状化合物。
【請求項２３】
Ｘ４がＡｒｇ−Ａｒｇ、Ｇｐａ−Ｇｐａ又はＨｃａ−Ｈｃａである、請求項１８から２２のいずれか一項に記載の環状化合物。
【請求項２４】
Ｘ３がＡｒ１−Ａｒ２であり、Ｘ４がＡｒ３−Ａｒ４である、請求項１から１７のいずれか一項に記載の環状化合物。
【請求項２５】
Ａｒ１及びＡｒ２が各々Ｅｄａであり、Ａｒ３及びＡｒ４が各々Ｎａｐであり、「Ｎａｐ」が３−アミノ−３−（−２−ナフチル）−プロピオン酸のアミノ酸残基である、請求項２４に記載の環状化合物。
【請求項２６】
Ｘ１が以下の構造：
【化１】
2017529386.tif 000029
を有する、又は該構造の誘導体である、請求項１から４のいずれか一項に記載の環状化合物。
【請求項２７】
Ｘ１が以下の構造：
【化２】
2017529386.tif 000030
を有する、又は該構造の誘導体である、請求項１から４のいずれか一項に記載の環状化合物。
【請求項２８】
前記環状化合物が、
ｉ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ］（配列番号１５）、
ｉｉ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｇｐａ−Ｇｐａ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｇｐａ−Ｇｐａ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ］（配列番号１６）、
ｉｉｉ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ］（配列番号１９）、
ｉｖ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ］（配列番号２０）、
ｖ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｇｐａ−Ｇｐａ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｇｐａ−Ｇｐａ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ］（配列番号３０）、
ｖｉ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｎａｐ−Ｎａｐ］（配列番号３１）、
ｖｉｉ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｅｄａ−Ｅｄａ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｅｄａ−Ｅｄａ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｅｄａ−Ｅｄａ］（配列番号３２）、
ｖｉｉｉ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ］（配列番号３３）、
ｉｘ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｈｃａ−Ｈｃａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｈｃａ−Ｈｃａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ］（配列番号３４）、
ｘ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｈｃａ−Ｈｃａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｈｃａ−Ｈｃａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ］（配列番号３５）、
ｘｉ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ａｚａ−ＭｅＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｈｃａ−Ｈｃａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｈｃａ−Ｈｃａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ］（配列番号３６）、
ｘｉｉ．シクロ−［Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−ＭｅＡｓｐ−ＭｅＧｌｙ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ］（配列番号４０）、
ｘｉｉｉ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ］（配列番号４３）、
ｘｉｖ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ］（配列番号４４）、
ｘｖ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｇｐａ−Ｇｐａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｇｐａ−Ｇｐａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｇｐａ−Ｇｐａ］（配列番号４５）、
ｘｖｉ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｅｄａ−Ｅｄａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｅｄａ−Ｅｄａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｅｄａ−Ｅｄａ］（配列番号４６）、
ｘｖｉｉ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｅｄａ−Ｅｄａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｅｄａ−Ｅｄａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｅｄａ−Ｅｄａ］（配列番号４７）、
ｘｖｉｉｉ．シクロ−［Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｅｄａ−Ｅｄａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｅｄａ−Ｅｄａ−Ｎａｐ−Ｎａｐ−Ｅｄａ−Ｅｄａ］（配列番号４８）、及び
ｘｉｘ．それらの誘導体
から選択され、
「Ｎａｐ」が３−アミノ−３−（−２−ナフチル）−プロピオン酸のアミノ酸残基である、
請求項５に記載の環状化合物。
【請求項２９】
実質的に上述された環状化合物。
【請求項３０】
ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ１（ＰＡＲＰ−１）の活性の調節に使用するための化合物であって、式６の部分：
式６：−Ｐｒｏ−Ｘ１４−Ｘ１５−Ｐｒｏ−Ｘ１６−Ｐｒｏ−
（式中、Ｘ１４及びＸ１６は、側鎖を有するアミノ酸残基、置換基を有するナフチル基、置換基である１，２−ジヒドロナフチル基、置換基を有する１，２，３，４−テトラヒドロナフチル基、及び置換基を有するプロピル基から各々独立に選択され、各側鎖又は置換基は酸性官能基を含み、
Ｘ１５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、ＭｅＧｌｙ及び（ＣＨ２）３から選択される）
を含む、化合物。
【請求項３１】
Ｘ１４及びＸ１６が各々アミノ酸残基である、請求項３０に記載の化合物。
【請求項３２】
Ｘ１４とＸ１６の少なくとも一方がＡｓｐである、請求項３１に記載の化合物。
【請求項３３】
Ｘ１４及び／又はＸ１６がスルホン酸基を含む、請求項３１に記載の化合物。
【請求項３４】
前記化合物が、合計１６〜１８単位を含む環状ペプチド化合物であり、各単位は、アミノ酸残基、場合によっては置換されたナフチル基、場合によっては置換された１，２ジヒドロナフチル基、及び場合によっては置換された１，２，３，４−テトラヒドロナフチル基又は場合によっては置換されたプロピル基である、請求項３０から３３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３５】
式８の構造：
式８：シクロ−［Ｘ１７−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３］
（式中、Ｘ１７は前記式６の部分であり、
Ｘ２、Ｘ３及びＸ４は請求項１に定義され、場合によっては、Ｘ３及びＸ４は請求項１８に定義されている）
を含む、請求項３０から３４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３６】
標識成分を含む、請求項３０から３５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３７】
実質的に上述されたポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ１の活性を調節可能なアニオン性部分を含む化合物。
【請求項３８】
請求項１から３７のいずれか一項に定義された化合物、及び薬剤担体、希釈剤又は賦形剤を含む、医薬組成物。
【請求項３９】
更なる治療薬を含む、請求項３８に記載の医薬組成物。
【請求項４０】
前記更なる治療薬が好気的解糖阻害剤である、請求項３９に記載の医薬組成物。
【請求項４１】
前記好気的解糖阻害剤が２−デオキシグルコースである、請求項４０に記載の医薬組成物。
【請求項４２】
医薬品に使用するための、請求項１から３７のいずれか一項に記載の化合物又は請求項３８から４１のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項４３】
前記化合物又は組成物が癌の治療に使用するためである、請求項４２に記載の使用するための化合物又は医薬組成物。
【請求項４４】
前記化合物又は組成物が更なる治療薬と一緒に投与される、請求項４３に記載の使用するための化合物又は医薬組成物。
【請求項４５】
前記更なる治療薬が好気的解糖阻害剤である、請求項４４に記載の使用するための化合物又は医薬組成物。
【請求項４６】
前記化合物又は組成物が、放射線療法及び／又は手術の使用を更に含む治療計画に使用される、請求項４３から４５のいずれか一項に記載の使用するための化合物又は医薬組成物。
【請求項４７】
前記癌が、乳癌、前立腺癌、結腸直腸癌、膀胱癌、卵巣癌、子宮体癌、子宮頚癌、頭頚部癌、胃癌、膵癌、食道癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、悪性黒色腫、神経芽細胞腫、白血病、リンパ腫、肉腫又は神経膠腫の１つ以上を含む、請求項４３から４６のいずれか一項に記載の使用するための化合物又は医薬組成物。
【請求項４８】
前記癌が、ＰＡＲＰ−１が非癌細胞に比べて上方制御される癌細胞を含む、請求項４３から４７のいずれか一項に記載の使用するための化合物又は医薬組成物。
【請求項４９】
癌の治療用医薬品の製造における請求項１から３７のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項５０】
ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼの活性をインビトロで調節するための、請求項１から３７のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項５１】
癌を治療する方法であって、請求項１から３７のいずれか一項に記載の化合物又は請求項３８から４１のいずれか一項に記載の医薬組成物を患者に投与するステップを含む、方法。
【請求項５２】
更に好気的解糖阻害剤を前記患者に投与するステップを含む、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
更に化学療法、放射線療法及び手術の１つ以上の使用を含む、請求項５１又は請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
前記化合物が標識成分を含み、前記方法が、前記化合物を検出するステップを含む、請求項５１から５３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５５】
前記癌が、乳癌、前立腺癌、結腸直腸癌、膀胱癌、卵巣癌、子宮体癌、子宮頚癌、頭頚部癌、胃癌、膵癌、食道癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、悪性黒色腫、神経芽細胞腫、白血病、リンパ腫、肉腫又は神経膠腫の１つ以上を含む、請求項５１から５４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５６】
前記癌が、ＰＡＲＰ−１が非癌細胞に比べて上方制御される癌細胞を含む、請求項５１から５５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５７】
ｉ．細胞を請求項１から３６のいずれか一項に記載の化合物と接触させるステップ、及び
ｉｉ．前記化合物を検出するステップ
を含む分析方法。
【請求項５８】
前記細胞が少なくとも１個の癌細胞を含む、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
前記方法がウエスタンブロットアッセイを含む、請求項５７又は請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
ステップ（ｉｉ）が蛍光検出を含む、請求項５７から５９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６１】
ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ１（ＰＡＲＰ−１）及び／又は乳酸デヒドロゲナーゼＡ（ＬＤＨＡ）の活性を調節可能な化合物であって、式１の部分：
式１：［Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３−］
（式中、Ｘ１は、ＰＡＲＰ−１の切断を阻害可能なペプチド部分であり、
Ｘ２は存在してもしなくてもよく、Ｘ２が存在するときには、Ｘ２はＶａｌ又はＳｅｒから選択され、
Ｘ３とＸ４の一方は、Ｔｒｐ−Ｔｒｐ及びＡｒ１−Ａｒ２から選択され、
Ｘ３とＸ４の他方は、Ａｒｇ−Ａｒｇ、Ｇｐａ−Ｇｐａ、Ｈｃａ−Ｈｃａ及びＡｒ３−Ａｒ４から選択され、
ここで、
Ｈｃａは、ホモシステイン酸のアミノ酸残基であり、
Ｇｐａは、グアニジノフェニルアラニンのアミノ酸残基であり、
Ａｒ１、Ａｒ２、Ａｒ３及びＡｒ４はそれぞれ、アリール側鎖を有するアミノ酸残基であり、前記アリール側鎖は、場合によっては置換されたナフチル基、場合によっては置換された１，２−ジヒドロナフチル基、及び場合によっては置換された１，２，３，４−テトラヒドロナフチル基から独立に選択され、
Ａｚａは、アジド−ホモアラニンのアミノ酸残基である）
又はその塩、誘導体、プロドラッグ若しくは模倣物を含む、化合物。
【請求項６２】
少なくとも１個の標識成分を含む、請求項６１に記載の化合物。
【請求項６３】
Ｘ１が、配列番号２１（式２）、配列番号２２（式３）、配列番号２３（式４）及び配列番号２４（式５）から選択され、
配列番号２１（式２）は−Ｐｒｏ−Ｘ５−Ｘ６−Ｐｒｏ−Ｘ７−Ｐｒｏ−であり、
式中、Ｘ５とＸ７の両方は、酸性側鎖を有するアミノ酸残基であり、又はＸ５とＸ７の両方は、塩基性側鎖を有するアミノ酸残基であり、
前記酸性側鎖を有するアミノ酸残基は、Ｇｌｕ、Ａｚａ及びＨｃａから各々独立に選択され、
Ｘ６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、ＭｅＧｌｙ及び（ＣＨ２）３から選択され、
配列番号２２（式３）は−Ｐｒｏ−Ｘ８−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｘ９−Ｐｒｏ−であり、
式中、Ｘ８及びＸ９は、Ａｓｐ及びＧｌｕから各々独立に選択され、
配列番号２３（式４）は−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−であり、
配列番号２４（式５）は−Ｇｌｙ−Ｘ１１−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｘ１２−Ｘ１３−であり、
式中、Ｘ１１は、Ａｓｐ及びＧｌｕから選択され、
Ｘ１２は、Ａｓｐ、Ｎ−アルキルアスパラギン酸残基、及びＮ−アリールアスパラギン酸残基Ｇｌｕ、Ｎ−アルキルグルタミン酸残基及びＮ−アリールグルタミン酸残基から選択され、
Ｘ１３は、Ｇｌｙ、Ｎ−アルキルグリシン残基、及びＮ−アリールグリシン残基から選択され、
ただし、Ｘ１２がＡｓｐである場合、Ｘ１３は、Ｎ−アルキルグルタミン酸残基又はＮ−アリールグルタミン酸残基である、
請求項６１又は６２に記載の化合物。
【請求項６４】
Ｘ１が配列番号２１（式２）である、請求項６３に記載の化合物。
【請求項６５】
Ｘ５がＧｌｕ又はＨｃａであり、及び／又はＸ７がＧｌｕ又はＨｃａである、請求項６４に記載の化合物。
【請求項６６】
Ｘ１が、
ｉ．配列番号２  −Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−、
ｉｉ．配列番号４  −Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−、
ｉｉｉ．配列番号２５  −Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−、
ｉｖ．配列番号２６  −Ｐｒｏ−Ｈｃａ−ＭｅＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−、
ｖ．配列番号２７  −Ｐｒｏ−Ａｚａ−ＭｅＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ−、
ｖｉ．配列番号２８  −Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ−、
ｖｉｉ．配列番号４１  −Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｃａ−Ｐｒｏ−、及び
ｖｉｉｉ．配列番号４２  −Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｚａ−Ｐｒｏ
から選択される、請求項６４に記載の化合物。
【請求項６７】
Ｘ１が配列番号２２（式３）であり、Ｘ８がＡｓｐであり、Ｘ９がＡｓｐである、又はＸ１が配列番号２４（式５）である、請求項６６に記載の化合物。
【請求項６８】
Ｘ１が配列番号２４（式５）であり、Ｘ１１がＡｓｐであり、Ｘ１２がＡｓｐ又はＮ−アルキルアスパラギン酸残基である、請求項６３に記載の化合物。
【請求項６９】
Ｘ１が−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−ＮＭｅＡｓｐ−ＭｅＧｌｙ−Ｖａｌ（配列番号２９）であり、式中のＮＭｅＡｓｐがＮ−メチルアスパラギン酸残基である、請求項６８に記載の化合物。
【請求項７０】
Ｘ２が存在し、Ｘ２がＶａｌである、請求項１から３７、４２から４８及び６１から６９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７１】
Ｘ３がＴｒｐ−Ｔｒｐ及びＡｒ１−Ａｒ２から選択され、Ｘ４がＡｒｇ−Ａｒｇ、Ｇｐａ−Ｇｐａ及びＨｃａ−Ｈｃａから選択される、請求項６１から７０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７２】
Ａｒ１及び／又はＡｒ２が、場合によっては置換されたナフチル基を含む、請求項７１に記載の化合物。
【請求項７３】
Ａｒ１及び／又はＡｒ２が、グルタミン酸−ガンマ−［２−（１−スルホニル−５−ナフチル）−アミノエチルアミド（「Ｅｄａ」）のアミノ酸残基である、請求項７２に記載の化合物。
【請求項７４】
Ｘ４がＡｒｇ−Ａｒｇ、Ｇｐａ−Ｇｐａ又はＨｃａ−Ｈｃａである、請求項７１から７３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７５】
Ｘ３がＡｒ１−Ａｒ２であり、Ｘ４がＡｒ３−Ａｒ４である、請求項６１から７０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７６】
Ａｒ１及びＡｒ２が各々Ｅｄａであり、Ａｒ３及びＡｒ４が各々Ｎａｐであり、「Ｎａｐ」が３−アミノ−３−（−２−ナフチル）−プロピオン酸のアミノ酸残基である、請求項７５に記載の化合物。
【請求項７７】
ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ１（ＰＡＲＰ−１）及び／又は乳酸デヒドロゲナーゼＡ（ＬＤＨＡ）の活性の調節に使用するための化合物であって、式６の部分：
式６：−Ｐｒｏ−Ｘ１４−Ｘ１５−Ｐｒｏ−Ｘ１６−Ｐｒｏ−
（式中、Ｘ１４及びＸ１６は、側鎖を有するアミノ酸残基、置換基を有するナフチル基、置換基である１，２−ジヒドロナフチル基、置換基を有する１，２，３，４−テトラヒドロナフチル基、及び置換基を有するプロピル基から各々独立に選択され、各側鎖又は置換基は酸性官能基を含み、
Ｘ１５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、ＭｅＧｌｙ及び（ＣＨ２）３から選択される）
を含む、化合物。
【請求項７８】
Ｘ１４及びＸ１６が各々アミノ酸残基である、請求項７７に記載の化合物。
【請求項７９】
Ｘ１４とＸ１６の少なくとも一方がＡｓｐである、請求項７８に記載の化合物。
【請求項８０】
Ｘ１４及び／又はＸ１６がスルホン酸基を含む、請求項７９に記載の化合物。
【請求項８１】
前記化合物が、合計１６〜１８単位を含むペプチド化合物であり、各単位は、アミノ酸残基、場合によっては置換されたナフチル基、場合によっては置換された１，２ジヒドロナフチル基、及び場合によっては置換された１，２，３，４−テトラヒドロナフチル基又は場合によっては置換されたプロピル基である、請求項７７から８０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８２】
式８の構造： 
式８：［Ｘ１７−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３］
（式中、Ｘ１７は前記式６の部分であり、
Ｘ２、Ｘ３及びＸ４は請求項６１に定義され、場合によっては、Ｘ３及びＸ４は請求項７１に定義されている）
を含む、請求項７７から８１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８３】
標識成分を含む、請求項７７から８２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８４】
実質的に上述されたポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ１（ＰＡＲＰ−１）及び／又は乳酸デヒドロゲナーゼＡ（ＬＤＨＡ）の活性を調節可能なアニオン性部分を含む化合物。
【請求項８５】
請求項６１から８４のいずれか一項に定義された化合物、及び薬剤担体、希釈剤又は賦形剤を含む、医薬組成物。
【請求項８６】
更なる治療薬を含む、請求項８５に記載の医薬組成物。
【請求項８７】
前記更なる治療薬が好気的解糖阻害剤である、請求項８６に記載の医薬組成物。
【請求項８８】
前記好気的解糖阻害剤が２−デオキシグルコースである、請求項８７に記載の医薬組成物。
【請求項８９】
医薬品に使用するための、請求項６１から８４のいずれか一項に記載の化合物又は請求項８５から８８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項９０】
前記化合物又は組成物が癌の治療に使用するためである、請求項８９に記載の使用するための化合物又は医薬組成物。
【請求項９１】
前記化合物又は組成物が更なる治療薬と一緒に投与される、請求項９０に記載の使用するための化合物又は医薬組成物。
【請求項９２】
前記更なる治療薬が好気的解糖阻害剤である、請求項９１に記載の使用するための化合物又は医薬組成物。
【請求項９３】
前記化合物又は組成物が、放射線療法及び／又は手術の使用を更に含む治療計画に使用される、請求項９０から９２のいずれか一項に記載の使用するための化合物又は医薬組成物。
【請求項９４】
癌の治療用医薬品の製造における請求項６１から８４のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項９５】
ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ及び／又は乳酸デヒドロゲナーゼＡ（ＬＤＨＡ）の活性をインビトロで調節するための、請求項６１から８４のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項９６】
癌を治療する方法であって、請求項６１から６４のいずれか一項に記載の化合物又は請求項８５から８８のいずれか一項に記載の医薬組成物を患者に投与するステップを含む、方法。
【請求項９７】
更に好気的解糖阻害剤を前記患者に投与するステップを含む、請求項９６に記載の方法。
【請求項９８】
更に化学療法、放射線療法及び手術の１つ以上の使用を含む、請求項９６又は請求項９７に記載の方法。
【請求項９９】
前記化合物が標識成分を含み、前記方法が、前記化合物を検出するステップを含む、請求項９６から９８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１００】
ｉ．細胞を請求項６１から８３のいずれか一項に記載の化合物と接触させるステップ、及び
ｉｉ．前記化合物を検出するステップ
を含む分析方法。
【請求項１０１】
前記細胞が少なくとも１個の癌細胞を含む、請求項１００に記載の方法。
【請求項１０２】
前記方法がウエスタンブロットアッセイを含む、請求項１００又は請求項１０１に記載の方法。
【請求項１０３】
ステップ（ｉｉ）が蛍光検出を含む、請求項１００から１０２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０４】
ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ１（ＰＡＲＰ−１）及び／又は乳酸デヒドロゲナーゼＡ（ＬＤＨＡ）の活性を調節可能な化合物であって、式１の部分：
式１：［Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３−］
（式中、Ｘ１は、ＰＡＲＰ−１の切断を阻害可能な部分であり、
Ｘ２は存在してもしなくてもよく、Ｘ２が存在するときには、Ｘ２はＶａｌ又はＳｅｒから選択され、
Ｘ３とＸ４の一方は、Ｔｒｐ−Ｔｒｐ及びＡｒ１−Ａｒ２から選択され、
Ｘ３とＸ４の他方は、Ａｒｇ−Ａｒｇ、Ｇｐａ−Ｇｐａ、Ｈｃａ−Ｈｃａ及びＡｒ３−Ａｒ４から選択され、
ここで、
Ｈｃａは、ホモシステイン酸のアミノ酸残基であり、
Ｇｐａは、グアニジノフェニルアラニンのアミノ酸残基であり、
Ａｒ１、Ａｒ２、Ａｒ３及びＡｒ４はそれぞれ、アリール側鎖を有するアミノ酸残基であり、前記アリール側鎖は、場合によっては置換されたナフチル基、場合によっては置換された１，２−ジヒドロナフチル基、及び場合によっては置換された１，２，３，４−テトラヒドロナフチル基から独立に選択され、
Ａｚａは、アジド−ホモアラニンのアミノ酸残基であり、
Ｘ１は、
【化３】
2017529386.tif 000031
若しくは
【化４】
2017529386.tif 000032
の構造を有する、又は該構造の誘導体である）
又はその塩、誘導体、プロドラッグ若しくは模倣物を含む、化合物。
【請求項１０５】
少なくとも１個の標識成分を含む、請求項１０４に記載の化合物。
【請求項１０６】
前記少なくとも１個の標識成分が蛍光標識を含む、請求項１０５に記載の化合物。
【請求項１０７】
前記化合物が、
シクロ−［Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ３］
からなる化合物である、又はその塩、誘導体、プロドラッグ若しくは模倣物である、
請求項１０４から１０６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１０８】
前記化合物が、１個以上のペプチド結合のＮＨ基がＣＨ２基で置換された模倣物である、請求項１０４から１０７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１０９】
前記化合物が、１個以上のアミノ酸残基がアリール基で置換された模倣物である、請求項１０４から１０８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１０】
前記アリール基がナフチル基である、請求項１０９に記載の化合物。
【請求項１１１】
前記化合物が模倣物であり、前記アミノ酸残基の１個以上が、場合によっては置換されたナフチル基、場合によっては置換された１，２−ジヒドロナフチル基、置換基を有する場合によっては置換された１，２，３，４−テトラヒドロナフチル基、又は場合によっては置換されたプロピル基で置換された、請求項１０４から１１０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１２】
前記化合物が、２３種のタンパク質構成アミノ酸のいずれかの側鎖を形成する基から選択された置換基を含む模倣化合物である、請求項１０４から１１１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１３】
前記化合物が、前記アミノ酸残基の５０％以下が前記基で置換された模倣化合物である、請求項１１２に記載の化合物。
【請求項１１４】
更に好気的解糖阻害剤を含む、請求項１０３から１１３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１５】
前記好気的解糖阻害剤が２−デオキシグルコース（２−ＤＯＧ）である、請求項１１４に記載の化合物。
【請求項１１６】
医薬品に使用するための、請求項１０３から１１５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１７】
前記組成物が癌の治療に使用するためである、請求項１１６に記載の化合物。
【請求項１１８】
ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ１（ＰＡＲＰ−１）作動物質及び乳酸デヒドロゲナーゼＡ（ＬＤＨＡ）阻害剤を含む、癌の治療のための化合物。
【請求項１１９】
前記ＰＡＲＰ−１作動物質及びＬＤＨＡ阻害剤が単一の治療薬である、請求項１１８に記載の化合物。
【請求項１２０】
前記化合物が、ＰＡＲＰ−１のＤＥＶＤ若しくはＧＤＥＶＤＧ領域に結合することができる、及び／又は該領域を切断から保護することができる、請求項１１８又は１１９に記載の化合物。
【請求項１２１】
前記化合物が、１６〜１８個のアミノ酸を有するペプチド、又はその塩、誘導体、プロドラッグ若しくは模倣物を含む、請求項１１８から１２０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１２２】
配列番号１５又は配列番号１６のアミノ酸配列を含む、請求項１２１に記載の化合物。
【請求項１２３】
前記ペプチドが、前記ＰＡＲＰ−１のＤＥＶＤ又はＧＤＥＶＤＧ領域に結合する４〜６アミノ酸配列、及び／又はＰＡＲＰ切断を阻害する４〜６アミノ酸配列を含む、請求項１２１又は１２２に記載の化合物。
【請求項１２４】
前記化合物が、請求項１から３６及び請求項６１から８３及び請求項１０４から１１３に記載の化合物である、請求項１１８から１２３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１２５】
好気的解糖阻害剤を含む、又は更に含む、請求項１１８から１２４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１２６】
前記好気的解糖阻害剤が２−デオキシグルコース（２−ＤＯＧ）を含む、請求項１２５に記載の化合物。
【請求項１２７】
更に薬剤担体、希釈剤又は賦形剤を含む、請求項１１８から１２６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１２８】
前記化合物が、放射線療法及び／又は手術の使用を更に含む治療計画に使用される、請求項１１８から１２７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１２９】
前記癌が、乳癌、前立腺癌、結腸直腸癌、膀胱癌、卵巣癌、子宮体癌、子宮頚癌、頭頚部癌、胃癌、膵癌、食道癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、悪性黒色腫、神経芽細胞腫、白血病、リンパ腫、肉腫又は神経膠腫の１つ以上を含む、請求項１１８から１２８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１３０】
前記癌が複数の癌又は転移性癌を含む、請求項１１８から１２９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１３１】
癌の治療用医薬品の製造における請求項１１８から１３０のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項１３２】
ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ１（ＰＡＲＰ−１）作動物質及び／又は乳酸デヒドロゲナーゼＡ（ＬＤＨＡ）阻害剤を含む第１の治療薬と、好気的解糖阻害剤を含む第２の治療薬とを含む、癌の治療のための併用療法。
【請求項１３３】
前記第１と第２の治療薬が同時投与用である、請求項１３２に記載の併用療法。
【請求項１３４】
前記化合物が、ＰＡＲＰ−１のＤＥＶＤ若しくはＧＤＥＶＤＧ領域に結合することができる、及び／又は該領域を切断から保護することができる、請求項１３２又は１３３に記載の併用療法。
【請求項１３５】
前記化合物が、１６〜１８個のアミノ酸を有するペプチド、又はその塩、誘導体、プロドラッグ若しくは模倣物を含む、請求項１３２から１３４のいずれか一項に記載の併用療法。
【請求項１３６】
配列番号１６又は配列番号３０のアミノ酸配列を含む、請求項１３５に記載の併用療法。
【請求項１３７】
前記ペプチドが、前記ＰＡＲＰ−１のＤＥＶＤ又はＧＤＥＶＤＧ領域に結合する４〜６アミノ酸配列、及び／又はＰＡＲＰ切断を阻害する４〜６アミノ酸配列を含む、請求項１３５又は１３６に記載の併用療法。
【請求項１３８】
前記併用療法が、請求項１から３６及び請求項６１から８３及び請求項１０４から１１３のいずれか一項に記載の化合物を含む、請求項１３２から１３７のいずれか一項に記載の併用療法。
【請求項１３９】
前記好気的解糖阻害剤が２−デオキシグルコース（２−ＤＯＧ）を含む、請求項１３２から１３８のいずれか一項に記載の併用療法。
【請求項１４０】
前記第１及び第２の治療薬が更に薬剤担体、希釈剤又は賦形剤を含む、請求項１３２から１３９のいずれか一項に記載の併用療法。
【請求項１４１】
前記併用療法が、放射線療法及び／又は手術の使用を更に含む治療計画に使用される、請求項１３２から１４０のいずれか一項に記載の併用療法。
【請求項１４２】
前記癌が、乳癌、前立腺癌、結腸直腸癌、膀胱癌、卵巣癌、子宮体癌、子宮頚癌、頭頚部癌、胃癌、膵癌、食道癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、悪性黒色腫、神経芽細胞腫、白血病、リンパ腫、肉腫又は神経膠腫の１つ以上を含む、請求項１３２から１４１のいずれか一項に記載の併用療法。
【請求項１４３】
前記癌が複数の癌又は転移性癌を含む、請求項１３２から１４４のいずれか一項に記載の併用療法。
【請求項１４４】
癌の治療用医薬品の製造における請求項１３２から１４３のいずれか一項に記載の併用療法の使用。
【請求項１４５】
ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ１（ＰＡＲＰ−１）作動物質又はＰＡＲＰ−１プロテアーゼ競合的阻害剤を含む、癌の治療のための化合物であって、前記化合物が、合計５又は６個のアミノ酸残基の部分、又はその塩、誘導体、プロドラッグ若しくは模倣物を含み、前記部分が、
ｉ．生理ｐＨにおいて正電荷を有することができる側鎖を有する任意の塩基性天然又は非天然アミノ酸残基を含む第２及び第５のアミノ酸残基位置、又は
ｉｉ．生理ｐＨにおいて負電荷を有することができる側鎖を有する任意の酸性天然又は非天然アミノ酸残基を含む第２及び第５のアミノ酸残基位置
を有する、化合物。
【請求項１４６】
前記ｉ．の第２及び／又は第５のアミノ酸残基位置がＡｒｇを含む、請求項１４５に記載の化合物。
【請求項１４７】
前記ｉｉ．の第２及び／又は第５のアミノ酸残基位置がＡｓｐを含む、請求項１４５又は１４６に記載の化合物。
【請求項１４８】
前記ｉｉ．の第２及び／又は第５のアミノ酸残基位置がＧｌｘ及び／又はＨｃａを含む、請求項１４５又は１４６に記載の化合物。
【請求項１４９】
前記化合物が、前記ＰＡＲＰ−１のＤＥＶＤ若しくはＧＤＥＶＤＧ領域に結合することができる、及び／又は該領域を切断から保護することができる、又は前記ＰＡＲＰ−１のＤＥＶＤ若しくはＧＤＥＶＤＧ領域を模倣することができる、請求項１４５から１４８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１５０】
前記化合物が、１６〜１８個のアミノ酸を有するペプチド、又はその塩、誘導体、プロドラッグ若しくは模倣物を含む、請求項１４５から１４９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１５１】
前記ＰＡＲＰ−１プロテアーゼがカスパーゼを含む、請求項１４５から１５０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１５２】
前記カスパーゼがカスパーゼ−３である、請求項１５１に記載の化合物。
【請求項１５３】
前記化合物が、請求項１から３６及び請求項６１から８３及び請求項１０４から１１３のいずれか一項に記載の化合物である、請求項１４５から１５０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１５４】
好気的解糖阻害剤を含む、又は更に含む、請求項１４５から１５３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１５５】
前記好気的解糖阻害剤が２−デオキシグルコース（２−ＤＯＧ）を含む、請求項１５４に記載の化合物。
【請求項１５６】
更に薬剤担体、希釈剤又は賦形剤を含む、請求項１４５から１５５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１５７】
前記化合物が、放射線療法及び／又は手術の使用を更に含む治療計画に使用される、請求項１４５から１５６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１５８】
前記癌が、乳癌、前立腺癌、結腸直腸癌、膀胱癌、卵巣癌、子宮体癌、子宮頚癌、頭頚部癌、胃癌、膵癌、食道癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、黒色腫、悪性黒色腫、神経芽細胞腫、白血病、リンパ腫、肉腫又は神経膠腫の１つ以上を含む、請求項１４５から１５６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１５９】
前記癌が複数の癌又は転移性癌を含む、請求項１４５から１５８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１６０】
癌の治療用医薬品の製造における請求項１４５から１５９のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【国際調査報告】
2017529386.tif 000033
2017529386.tif 000034
2017529386.tif 000035
2017529386.tif 000036