(57)【要約】  実施形態は、被ばく後の対象にＰＩＦペプチドを投与することを含む、急性放射線症候群を治療する方法を対象とする。一部の実施形態は、対象に移植する前に、ＰＩＦペプチドに曝露した骨髄を移植することを含む、被ばく後の急性放射線症候群を治療する方法について記載している。他の実施形態は、臓器、組織、または細胞をＰＩＦペプチドに前曝露することによって、移植された臓器、組織、または細胞の生着を増加させる方法について記載している。【選択図】図１４
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
被ばく後の、それを必要とする対象における急性放射線症候群を治療及び／または予防する方法であって、前記対象に対してＰＩＦペプチド、その模倣物、その薬学的に許容される塩、及びそれらの組み合わせを、治療有効量投与することを含む、方法。
【請求項２】
前記対象が、骨髄移植を受けない、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記治療有効量が、約０．１０ミリグラム／キログラム／日〜約１０．００ミリグラム／キログラム／日である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記治療有効量が、約０．７５ミリグラム／キログラム／日〜約１．５０ミリグラム／キログラム／日である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記治療有効量が、約０．７５ミリグラム／キログラム／日〜約１．００ミリグラム／キログラム／日である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
前記ＰＩＦペプチドが、被ばく後約２４時間以内に投与される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記ＰＩＦペプチドが、約２〜約１４日間の期間にわたって、断続的または持続的に投与される、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記ＰＩＦペプチドが断続的に投与され、投与レジメンが、少なくとも約１２週間にわたる約１日１回または約２日毎に１回の投与を含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記ＰＩＦペプチドが、静脈内、筋肉内、または皮下投与される、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記ＰＩＦペプチドが、間欠注入または持続注入で投与される、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記急性放射線症候群が、致死線量または亜致死線量の被ばくによって引き起こされる、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記急性放射線症候群が、約１００ｒａｄ〜約６０００ｒａｄの放射線量に対する曝露によって引き起こされる、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記急性放射線症候群が、任意の臓器、組織、または細胞に対する損傷を含む、急性被ばくの遅発効果を含む、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
前記ＰＩＦペプチドが、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９と少なくとも８６％の配列相同性を有するアミノ酸配列、その模倣物、及びその薬学的に許容される塩のうちの１つまたはそれらの組み合わせを含む、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９と少なくとも８６％の配列相同性を有するアミノ酸配列、その模倣物、及びその薬学的に許容される塩、ならびにそれらの組み合わせを含むか、またはそれらからなるＰＩＦペプチドを治療有効量含む、急性放射線病または急性放射線症候群の治療のための、薬学的組成物。
【請求項１６】
対象が、骨髄移植を受けない、請求項１５に記載の薬学的組成物。
【請求項１７】
前記治療有効量が、約０．１０ミリグラム／キログラム／日〜約１０．００ミリグラム／キログラム／日である、請求項１５または１６に記載の薬学的組成物。
【請求項１８】
前記治療有効量が、約０．７５ミリグラム／キログラム／日〜約１．５０ミリグラム／キログラム／日である、請求項１５〜１７のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項１９】
前記治療有効量が、約０．７５ミリグラム／キログラム／日〜約１．００ミリグラム／キログラム／日である、請求項１５〜１８のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項２０】
前記ＰＩＦペプチドが、被ばく後２４時間以内に投与される、請求項１５〜１９のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項２１】
前記ＰＩＦペプチドが、約２〜約１４日間の期間にわたって、断続的または持続的に投与される、請求項１５〜２０のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項２２】
前記ＰＩＦペプチドが断続的に投与され、投与レジメンが、少なくとも約１２週間にわたる約１日１回または約２日毎に１回の投与を含む、請求項１５〜２１のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項２３】
前記ＰＩＦペプチドが、静脈内、筋肉内、または皮下投与される、請求項１５〜２２のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項２４】
前記ＰＩＦペプチドが、間欠注入または持続注入で投与される、請求項１５〜２３のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項２５】
前記急性放射線症候群が、致死線量または亜致死線量の被ばくによって引き起こされる、請求項１５〜２４のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項２６】
前記急性放射線症候群が、約１００ｒａｄ〜約６０００ｒａｄの放射線量に対する曝露によって引き起こされる、請求項１５〜２５のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項２７】
前記急性放射線症候群が、任意の臓器、組織、または細胞に対する損傷を含む、急性被ばくの遅発効果を含む、請求項１５〜２６のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項２８】
配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９と少なくとも８６％の配列相同性を有するアミノ酸配列、その模倣物、及びその薬学的に許容される塩、ならびにそれらの組み合わせを含むか、またはそれらからなるＰＩＦペプチドを治療有効量含む薬学的組成物の、急性放射線病または急性放射線症候群を治療するための薬物の製造のための、使用。
【請求項２９】
対象が、骨髄移植を受けないか、または受けていない、請求項２８に記載の使用。
【請求項３０】
前記治療有効量が、約０．１０ミリグラム／キログラム／日〜約１０．００ミリグラム／キログラム／日である、請求項２８または２９に記載の使用。
【請求項３１】
前記治療有効量が、約０．７５ミリグラム／キログラム／日〜約１．５０ミリグラム／キログラム／日である、請求項２８〜３０のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３２】
前記治療有効量が、約０．７５ミリグラム／キログラム／日〜約１．００ミリグラム／キログラム／日である、請求項２８〜３１のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３３】
前記ＰＩＦペプチドが、被ばく後２４時間以内に投与される、請求項２８〜３２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３４】
前記ＰＩＦペプチドが、約２〜約１４日間の期間にわたって、断続的または持続的に投与される、請求項２８〜３３のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３５】
前記ＰＩＦペプチドが断続的に投与され、投与レジメンが、少なくとも約１２週間にわたる約１日１回または約２日毎に１回の投与を含む、請求項３４に記載の使用。
【請求項３６】
前記ＰＩＦペプチドが、静脈内、筋肉内、または皮下投与される、請求項２８〜３５のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３７】
前記ＰＩＦペプチドが、間欠注入または持続注入で投与される、請求項２８〜３６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３８】
前記急性放射線症候群が、致死線量または亜致死線量の被ばくによって引き起こされる、請求項２８〜３７のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３９】
前記急性放射線症候群が、約１００ｒａｄ〜約６０００ｒａｄの放射線量に対する曝露によって引き起こされる、請求項２８〜３８のいずれか一項に記載の使用。
【請求項４０】
前記急性放射線症候群が、任意の臓器、組織、または細胞に対する損傷を含む、急性被ばくの遅発効果を含む、請求項２８〜３９のいずれか一項に記載の使用。
【請求項４１】
被ばく後の急性放射線症候群を治療及び／または予防する方法であって、それを必要とする対象に１つまたは複数の骨髄細胞を移植することを含み、前記１つまたは複数の骨髄細胞が、移植前に、治療有効量のＰＩＦペプチドに前曝露され、前記ＰＩＦペプチドが、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８６％の配列相同性を有するアミノ酸配列、その模倣物、及びその薬学的に許容される塩、ならびにそれらの組み合わせを含むか、またはそれらからなる、方法。
【請求項４２】
前記急性放射線症候群が、致死線量または亜致死線量の被ばくによって引き起こされる、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記急性放射線症候群が、約１００ｒａｄ〜約６０００ｒａｄの放射線量に対する曝露によって引き起こされる、請求項４１または４２に記載の方法。
【請求項４４】
前記急性放射線症候群が、急性被ばくの遅発効果を含む、請求項４１〜４３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４５】
ＰＩＦペプチドの前記治療有効量が、約０．１０ミリグラム／キログラム／日〜約１０．００ミリグラム／キログラム／日である、請求項４１〜４４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４６】
前記１つまたは複数の骨髄細胞が、移植前に、前記骨髄細胞を予備馴化させるのに十分な期間及び条件の下、ある濃度のＰＩＦペプチドに前曝露される、請求項４１〜４５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４７】
前記１つまたは複数の骨髄細胞が、移植前に、前記骨髄細胞のコルチゾール分泌を刺激するのに十分な期間及び条件の下、ある濃度のＰＩＦペプチドに前曝露される、請求項４１〜４６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４８】
前記骨髄が、ＰＩＦが約１０ｎＭ〜約１０００ｎＭの濃度の、ＰＩＦペプチドのうちの１つまたはそれらの組み合わせに、約１時間〜約４時間前曝露される、請求項４１〜４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４９】
前記対象が、最大約８週間以上、前記骨髄移植後にＰＩＦペプチドによる追加的な治療を受けない、請求項４１〜４８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５０】
成人型または若年型のＩ型またはＩＩ型糖尿病を治療及び／または予防する方法であって、それを必要とする対象に１つまたは複数の膵島細胞を移植することを含み、前記膵島細胞が、移植前に、治療有効量のＰＩＦペプチドに前曝露され、前記ＰＩＦペプチドが、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９と少なくとも８６％の配列相同性を有するアミノ酸配列、その模倣物、及びその薬学的に許容される塩、ならびにそれらの組み合わせを含むか、またはそれらからなる、方法。
【請求項５１】
前記対象が、若年型Ｉ型糖尿病を有する、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
前記対象が、成人型Ｉ型糖尿病を有する、請求項５０または５１に記載の方法。
【請求項５３】
前記１つまたは複数の膵島細胞が、移植前に、前記膵島細胞を移植のために予備馴化させるのに十分な期間及び条件の下、ある濃度のＰＩＦペプチドに前曝露される、請求項５０〜５２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５４】
前記１つまたは複数の膵島細胞が、移植前に、前記膵島細胞のコルチゾール分泌を刺激するのに十分な期間及び条件の下、ある濃度のＰＩＦペプチドに前曝露される、請求項５０〜５３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５５】
前記１つまたは複数の膵島細胞が、移植前に、前記膵島細胞のインスリン分泌を刺激するのに十分な期間及び条件の下、ある濃度のＰＩＦペプチドに前曝露される、請求項５０〜５３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５６】
前記１つまたは複数の膵島細胞が、約１０ｎＭ〜約１０００ｎＭの濃度の、ＰＩＦペプチドのうちの１つまたはそれらの組み合わせに、約１時間〜約４時間前曝露される、請求項５０〜５５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５７】
前記対象が、最大約８週間以上、前記膵島細胞移植後にＰＩＦペプチドによる追加的な治療を受けない、請求項５０〜５６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５８】
移植された臓器、組織、または細胞の生着が成功する可能性を増加させる方法であって、それを必要とする対象に臓器、組織、または細胞を移植することを含み、前記臓器、組織、または細胞が、移植前に、ＰＩＦペプチドに前曝露され、前記ＰＩＦペプチドが、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９から選ばれるアミノ酸配列と少なくとも８６％の配列相同性を有するアミノ酸配列、その模倣物、及びその薬学的に許容される塩、ならびにそれらの組み合わせを含むか、またはそれらからなる、方法。
【請求項５９】
前記移植が骨髄移植である、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
前記移植が膵島細胞移植である、請求項５８に記載の方法。
【請求項６１】
前記移植が副腎細胞移植である、請求項５８に記載の方法。
【請求項６２】
前記移植が心臓移植である、請求項５８に記載の方法。
【請求項６３】
治療有効量のＰＩＦペプチドが、前記移植と同時または前記移植後に、前記対象に投与され、前記ＰＩＦペプチドの前記治療有効用量が、約０．１ミリグラム／キログラム〜約１０ミリグラム／キログラムである、請求項５８〜６２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６４】
前記１つまたは複数の臓器、組織、または細胞が、移植前に、前記臓器、組織、または細胞を移植のために予備馴化させるのに十分な期間及び条件の下、ある濃度のＰＩＦペプチドに前曝露される、請求項５８〜６３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６５】
前記１つまたは複数の臓器、組織、または細胞が、移植前に、臓器、組織、または細胞からのコルチゾール分泌を刺激するのに十分な期間及び条件の下、ある濃度のＰＩＦペプチドに前曝露される、請求項５８〜６４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６６】
前記１つまたは複数の膵島細胞が、移植前に、前記臓器、組織、または細胞の内因性ホルモン分泌を刺激するのに十分な期間及び条件の下、ある濃度のＰＩＦペプチドに前曝露される、請求項５８〜６５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６７】
前記１つまたは複数の膵島細胞が、約１０ｎＭ〜約１０００ｎＭの濃度の、ＰＩＦペプチドのうちの１つまたはそれらの組み合わせに、約１時間〜約４時間前曝露される、請求項５８〜６６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６８】
前記臓器、組織、または細胞が、骨髄細胞、皮膚細胞、副腎からの細胞、膵臓細胞、膵島細胞、胃腸細胞、脳細胞、心臓細胞、肺細胞、腎細胞、脾臓細胞、及び肝細胞から選ばれる細胞のうちの１つまたはそれらの組み合わせから選択される、請求項５８〜６７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６９】
前記臓器、組織、または細胞が、骨髄、皮膚、副腎、膵臓、心臓、肺、腎臓、脾臓、及び肝臓から選ばれる臓器のうちの１つまたはそれらの組み合わせから選択される、請求項５８〜６７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７０】
移植を必要とする対象に臓器、組織、または細胞を移植する前に、その生存度を増加させる方法であって、前記臓器、組織、または細胞を、移植前に、治療有効量のＰＩＦペプチドで処理することを含み、前記ＰＩＦペプチドが、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９から選ばれるアミノ酸配列と少なくとも８６％の配列相同性を有するアミノ酸配列、その模倣物、及びその薬学的に許容される塩、ならびにそれらの組み合わせを含むか、またはそれらからなる、方法。
【請求項７１】
対象へのドナー臓器、組織、または細胞の移植片の受け入れの可能性を増加させる方法であって、前記臓器、組織、または細胞を前記対象に移植する前に、前記臓器、組織、または細胞を、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、またはその変異体、またはその薬学的に許容される塩を含む１つ以上の組成物に曝露することを含む、方法。
【請求項７２】
生着される組織の拒絶の可能性を低減する方法であって、前記組織を対象に移植する前に、前記生着される組織を、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、またはその変異体、またはその薬学的に許容される塩を治療有効量含む１つ以上の薬学的組成物に曝露することを含む、方法。
【請求項７３】
対象における造血細胞の生産を増加させる方法であって、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、またはその変異体、またはその薬学的に許容される塩を治療有効量含む１つ以上の薬学的組成物を投与することを含む、方法。
【請求項７４】
前記造血細胞が、赤血球及び血小板からなる群から選択される、請求項７３に記載の方法。
【請求項７５】
血液障害を治療及び／または予防する方法であって、それを必要とする対象に１つまたは複数の造血細胞を移植することを含み、前記造血細胞が、移植前に、治療有効量のＰＩＦペプチドに前曝露され、前記ＰＩＦペプチドが、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９から選ばれるアミノ酸配列と少なくとも８６％の配列相同性を有するアミノ酸配列、その模倣物、及びその薬学的に許容される塩、ならびにそれらの組み合わせを含むか、またはそれらからなる、方法。
【請求項７６】
前記対象が、血液のがんを有するか、またはそれを有する疑いがある、請求項７５に記載の方法。
【請求項７７】
前記対象が、白血病を有するか、またはそれを有する疑いがある、請求項７５または７６に記載の方法。
【請求項７８】
前記対象が、骨髄細胞及び／または血液細胞の欠乏を有するか、またはそれを有する疑いがある、請求項７５〜７７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７９】
前記対象が、放射線により誘発された、骨髄細胞の欠乏を有するか、またはそれを有する疑いがある、請求項７５〜７８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８０】
前記１つまたは複数の造血細胞が、移植前に、前記造血細胞を移植のために予備馴化させるのに十分な期間及び条件の下、ある濃度のＰＩＦペプチドに前曝露される、請求項７５〜７９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８１】
前記１つまたは複数の造血細胞が、移植前に、前記造血細胞からのコルチゾール分泌を刺激するのに十分な期間及び条件の下、ある濃度のＰＩＦペプチドに前曝露される、請求項７５〜８０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８２】
前記１つまたは複数の造血細胞が、約１０ｎＭ〜約１０００ｎＭの濃度の、ＰＩＦペプチドのうちの１つまたはそれらの組み合わせに、約１時間〜約４時間前曝露される、請求項７５〜８１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８３】
前記対象が、最大約８週間以上、移植後にＰＩＦペプチドによる追加的な治療を受けない、請求項７５〜８２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８４】
副腎細胞障害を治療及び／または予防する方法であって、それを必要とする対象に１つまたは複数の副腎細胞を移植することを含み、前記副腎細胞が、移植前に、治療有効量のＰＩＦペプチドに前曝露され、前記ＰＩＦペプチドが、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９から選ばれるアミノ酸配列と少なくとも８６％の配列相同性を有するアミノ酸配列、その模倣物、及びその薬学的に許容される塩、ならびにそれらの組み合わせを含むか、またはそれらからなる、方法。
【請求項８５】
前記対象が、先天性副腎過形成症を有するか、またはそれを有する疑いがある、請求項８４に記載の方法。
【請求項８６】
前記対象が、機能障害ホルモンの分泌の理由と関連付けられるがんを有するか、またはそれを有する疑いがある、請求項８４に記載の方法。
【請求項８７】
前記対象が、副腎の障害を有するか、またはそれを有する疑いがある、請求項８４に記載の方法。
【請求項８８】
前記対象が、下垂体の障害を有するか、またはそれを有する疑いがある、請求項８４に記載の方法。
【請求項８９】
前記１つまたは複数の副腎細胞が、移植前に、前記副腎細胞を移植のために予備馴化させるのに十分な期間及び条件の下、ある濃度のＰＩＦペプチドに前曝露される、請求項８５〜８８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９０】
前記１つまたは複数の副腎細胞が、移植前に、前記副腎細胞からのコルチゾール分泌を刺激するのに十分な期間及び条件の下、ある濃度のＰＩＦペプチドに前曝露される、請求項８５〜８９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９１】
前記１つまたは複数の副腎細胞が、約１０ｎＭ〜約１０００ｎＭの濃度の、ＰＩＦペプチドのうちの１つまたはそれらの組み合わせに、約１時間〜約４時間前曝露される、請求項８５〜９０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９２】
前記対象が、最大約８週間以上、移植後にＰＩＦペプチドによる追加的な治療を受けない、請求項８５〜９１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９３】
心臓障害または心不全を治療及び／または予防する方法であって、それを必要とする対象に１つまたは複数の心臓細胞を移植することを含み、前記心臓細胞が、移植前に、治療有効量のＰＩＦペプチドに前曝露され、前記ＰＩＦペプチドが、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９から選ばれるアミノ酸配列と少なくとも８６％の配列相同性を有するアミノ酸配列、その模倣物、及びその薬学的に許容される塩、ならびにそれらの組み合わせを含むか、またはそれらからなる、方法。
【請求項９４】
前記対象が、鬱血性心不全を有するか、またはそれを有する疑いがある、請求項９３に記載の方法。
【請求項９５】
前記１つまたは複数の心臓細胞が、移植前に、前記心臓細胞を移植のために予備馴化させるのに十分な期間及び条件の下、ある濃度のＰＩＦペプチドに前曝露される、請求項９３または９４に記載の方法。
【請求項９６】
前記１つまたは複数の心臓細胞が、移植前に、前記心臓細胞からのコルチゾール分泌を刺激するのに十分な期間及び条件の下、ある濃度のＰＩＦペプチドに前曝露される、請求項９３〜９５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９７】
前記１つまたは複数の心臓細胞が、約１０ｎＭ〜約１０００ｎＭの濃度の、ＰＩＦペプチドのうちの１つまたはそれらの組み合わせに、約１時間〜約４時間前曝露される、請求項９３〜９６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９８】
前記対象が、最大約８週間以上、移植後にＰＩＦペプチドによる追加的な治療を受けない、請求項９３〜９７のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、「Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｔｒｅａｔｉｎｇ  Ａｃｕｔｅ  Ｒａｄｉａｔｉｏｎ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ」と題される、２０１４年９月１６日に出願された米国仮出願第６２／０５１，０７７号、「ＰＩＦ  Ｂｉｎｄｉｎｇ  ａｓ  ａ  Ｍａｒｋｅｒ  ｆｏｒ  Ｉｍｍｕｎｅ  Ｄｙｓｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ」と題される、２０１５年２月６日に出願された米国仮出願第６２／１１３，２９８号、及び「Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｄａｍａｇｅ」と題される、２０１５年８月２８日に出願された米国仮出願第６２／２１１，６６０号の優先権及び利益を主張する。各出願の内容は、それらそれぞれの全体が、参照により本明細書に組み込まれる。
【発明の概要】
【０００２】
ある実施形態において、対象が被ばくした後に、それを必要とする対象における急性放射線症候群を治療する方法は、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９から選択される移植前因子（ＰＩＦ）ペプチド、その模倣物、及びそれらの組み合わせを治療有効量投与することを含み得る。
【０００３】
ある実施形態において、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９から選択されるＰＩＦペプチド、その模倣物、及びそれらの組み合わせを治療有効量含む薬学的組成物が、急性放射線症候群の治療のために使用され得る。
【０００４】
ある実施形態において、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９から選択されるＰＩＦペプチド、その模倣物、及びそれらの組み合わせを治療有効量含む薬学的組成物が、急性放射線症候群を治療するための薬物の製造のために使用され得る。
【０００５】
ある実施形態において、被ばく後の急性放射線症候群を治療する方法は、それを必要とする対象に１つまたは複数の骨髄細胞を移植することを含み得、この骨髄細胞は、移植前に、治療有効量のＰＩＦペプチドに前曝露され、このＰＩＦペプチドは、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、その模倣物、及びそれらの組み合わせから選択される。
【０００６】
ある実施形態において、心臓障害または心不全を治療及び／または予防する方法は、それを必要とする対象に１つまたは複数の心臓細胞を移植することを含み得、この心臓細胞は、移植前に、治療有効量のＰＩＦペプチドに前曝露され、このＰＩＦペプチドは、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、その模倣物、及びそれらの組み合わせのうちの１つまたはそれらの組み合わせから選択される。
【０００７】
ある実施形態において、副腎細胞障害を治療及び／または予防する方法は、それを必要とする対象に１つまたは複数の副腎細胞を移植することを含み得、この副腎細胞は、移植前に、治療有効量のＰＩＦペプチドに前曝露され、このＰＩＦペプチドは、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、その模倣物、及びそれらの組み合わせのうちの１つまたはそれらの組み合わせから選択される。
【０００８】
ある実施形態において、血液障害を治療及び／または予防する方法は、それを必要とする対象に１つまたは複数の造血細胞を移植することを含み得、この造血細胞は、移植前に、治療有効量のＰＩＦペプチドに前曝露され、このＰＩＦペプチドは、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、その模倣物、及びそれらの組み合わせのうちの１つまたはそれらの組み合わせから選択される。
【０００９】
ある実施形態において、移植を必要とする対象に臓器、組織、または細胞を移植する前に、その生存度を増加させる方法は、この臓器、組織、または細胞を、移植前に、治療有効量のＰＩＦペプチドで処理することを含み得、このＰＩＦペプチドは、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、その模倣物、及びそれらの組み合わせのうちの１つまたはそれらの組み合わせから選択される。
【００１０】
ある実施形態において、対象へのドナー臓器、組織、または細胞の移植片の受け入れの可能性を増加させる方法は、この臓器、組織、または細胞を対象に移植する前に、この臓器、組織、または細胞を、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、またはその変異体、またはその薬学的に許容される塩を含む１つ以上の組成物に曝露することを含み得、このＰＩＦペプチドは、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、その模倣物、及びそれらの組み合わせのうちの１つまたはそれらの組み合わせから選択される。
【００１１】
ある実施形態において、生着される組織の拒絶の可能性を低減する方法は、この組織を対象に移植する前に、生着される組織を、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、またはその変異体、またはその薬学的に許容される塩を治療有効量含む１つ以上の薬学的組成物に曝露することを含み得、このＰＩＦペプチドは、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、その模倣物、及びそれらの組み合わせのうちの１つまたはそれらの組み合わせから選択される。
【００１２】
対象における造血細胞の生産を増加させる方法は、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、またはその変異体、またはその薬学的に許容される塩を治療有効量含む１つ以上の薬学的組成物を投与することを含み得、このＰＩＦペプチドは、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、その模倣物、及びそれらの組み合わせのうちの１つまたはそれらの組み合わせから選択される。
【００１３】
移植された臓器、組織、または細胞の生着が成功する可能性を増加させる方法は、それを必要とする対象に臓器、組織、または細胞を移植することを含み得、この臓器、組織、または細胞は、移植前に、ＰＩＦペプチドに前曝露され、このＰＩＦペプチドは、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、その模倣物、及びそれらの組み合わせのうちの１つまたはそれらの組み合わせから選択される。
【００１４】
成人型または若年型のＩ型またはＩＩ型糖尿病を治療及び／または予防する方法は、それを必要とする対象に１つまたは複数の膵島細胞を移植することを含み得、この島細胞は、移植前に、治療有効量のＰＩＦペプチドに前曝露され、このＰＩＦペプチドは、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、その模倣物、及びそれらの組み合わせのうちの１つまたはそれらの組み合わせから選択される。
【００１５】
上記実施形態のいずれにおいても、対象は、骨髄移植（ＢＭＴ）を受けても受けなくてもよい。上記実施形態のいずれにおいても、急性放射線症候群は、致死線量または亜致死線量の被ばくによって引き起こされ得る。上記実施形態のいずれにおいても、急性放射線症候群は、約１００ｒａｄ〜約６０００ｒａｄの放射線量に対する曝露によって引き起こされ得る。上記実施形態のいずれにおいても、急性放射線症候群は、任意の臓器、組織、または細胞に対する損傷を含む、急性被ばくの遅発効果を含んでも含まなくてもよい。
【００１６】
ある実施形態において、移植片受容者の、ドナー組織の受け入れの可能性を増加させる方法は、組織を受容者に移植する前に、ＰＩＦペプチドまたはその変異体を含む１つ以上の組成物に、ドナー組織を曝露することを含み得る。
【００１７】
ある実施形態において、生着される組織の拒絶の可能性を低減する方法は、組織を移植する前に、この組織を、ＰＩＦペプチドまたはその変異体を治療有効量含む１つ以上の薬学的組成物に曝露することを含み得る。
【００１８】
ある実施形態において、造血細胞の数が欠乏している対象における造血細胞の生産を増加させる方法は、ＰＩＦペプチドまたはその変異体を治療有効量含む１つ以上の薬学的組成物を投与することを含み得る。一部の実施形態において、造血細胞は、赤血球であり得る。一部の実施形態において、造血細胞は、血小板であり得る。
【００１９】
一部の実施形態において、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩を対象に投与するステップは、少なくとも１つのＰＩＦ分子、その類似体、またはその薬学的に許容される塩を治療有効用量投与することを含む。
【００２０】
一部の実施形態において、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩を対象に投与するステップは、ＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩を、約０．００１ｍｇ／ｋｇ〜約２００ｍｇ／ｋｇの治療有効用量投与することを含む。
【００２１】
一部の実施形態において、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩を対象に投与するステップは、ＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩を、約０．５ｍｇ／ｋｇ〜約５ｍｇ／ｋｇの治療有効用量投与することを含む。
【００２２】
一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩は、化学標的部分（ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｍｏｉｅｔｙ）及び／または放射性部分（ｒａｄｉｏａｃｔｉｖｅ  ｍｏｉｅｔｙ）を含む。
【００２３】
一部の実施形態において、βカテニンの核転座の少なくとも１つの阻害剤またはその薬学的に許容される塩は、以下の同位体のうちの少なくとも１つまたはそれらの組み合わせを含む少なくとも１つの放射性部分を含む：2Ｈ、3Ｈ、13Ｃ、14Ｃ、15Ｎ、16Ｏ、17Ｏ、31Ｐ、32Ｐ、35Ｓ、18Ｆ、及び36Ｃｌ。
【００２４】
一部の実施形態において、本方法は、少なくとも１つの鎮痛剤及び／または１つの抗炎症性化合物を投与することを更に含む。
【００２５】
一部の実施形態において、本方法は、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩を治療有効用量投与する前に、それを投与した後に、あるいはその投与と同時に、少なくとも１つの鎮痛剤及び／または１つの抗炎症性化鉱物を投与することを更に含む。
【００２６】
一部の実施形態において、治療有効用量は、約１．０ｍｇ／ｋｇ〜約５．５ｍｇ／ｋｇであり、ここでｋｇは対象のキログラムであり、ｍｇは治療有効用量のミリグラムである。
【００２７】
一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、その模倣物、もしくはその薬学的に許容される塩、及び／またはそれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、配列番号１、その模倣物、もしくはその薬学的に許容される塩、及び／またはそれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、配列番号２、その模倣物、もしくはその薬学的に許容される塩、及び／またはそれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、配列番号３、その模倣物、もしくはその薬学的に許容される塩、及び／またはそれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、配列番号４、その模倣物、もしくはその薬学的に許容される塩、及び／またはそれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、配列番号５、その模倣物、もしくはその薬学的に許容される塩、及び／またはそれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、配列番号６、その模倣物、もしくはその薬学的に許容される塩、及び／またはそれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、配列番号７、その模倣物、もしくはその薬学的に許容される塩、及び／またはそれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、配列番号８、その模倣物、もしくはその薬学的に許容される塩、及び／またはそれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、配列番号９、その模倣物、もしくはその薬学的に許容される塩、及び／またはそれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、配列番号１０、その模倣物、もしくはその薬学的に許容される塩、及び／またはそれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、配列番号１１、その模倣物、もしくはその薬学的に許容される塩、及び／またはそれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、配列番号１２、その模倣物、もしくはその薬学的に許容される塩、及び／またはそれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、配列番号１３、その模倣物、もしくはその薬学的に許容される塩、及び／またはそれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、配列番号１４、その模倣物、もしくはその薬学的に許容される塩、及び／またはそれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、配列番号１５、その模倣物、もしくはその薬学的に許容される塩、及び／またはそれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、配列番号１６、その模倣物、もしくはその薬学的に許容される塩、及び／またはそれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、配列番号１７、その模倣物、もしくはその薬学的に許容される塩、及び／またはそれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、配列番号１８、その模倣物、もしくはその薬学的に許容される塩、及び／またはそれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、配列番号１９、その模倣物、もしくはその薬学的に許容される塩、及び／またはそれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、配列番号２０、その模倣物、もしくはその薬学的に許容される塩、及び／またはそれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、配列番号２１、その模倣物、もしくはその薬学的に許容される塩、及び／またはそれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、配列番号２１、その模倣物、もしくはその薬学的に許容される塩、及び／またはそれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、配列番号２２、その模倣物、もしくはその薬学的に許容される塩、及び／またはそれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、配列番号２３、その模倣物、もしくはその薬学的に許容される塩、及び／またはそれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、配列番号２４、その模倣物、もしくはその薬学的に許容される塩、及び／またはそれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、配列番号２５、その模倣物、もしくはその薬学的に許容される塩、及び／またはそれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、配列番号２６、その模倣物、もしくはその薬学的に許容される塩、及び／またはそれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、配列番号２７、その模倣物、もしくはその薬学的に許容される塩、及び／またはそれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、配列番号２８、その模倣物、もしくはその薬学的に許容される塩、及び／またはそれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、配列番号２９、その模倣物、もしくはその薬学的に許容される塩、及び／またはそれらの組み合わせを含む。
【００２８】
本開示はまた、それを必要とする対象における急性放射線症候群を治療または予防する方法に関し、本方法は、移植前因子（ＰＩＦ）ペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩と、薬学的に許容される担体とを含む、少なくとも１つの薬学的組成物を対象に投与することを含む。
【００２９】
一部の実施形態において、この薬学的に許容される担体は、無菌であり、かつ発熱物質を含まない水である。
【００３０】
一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、またはその類似体、またはその薬学的に許容される塩のうちの１つまたはそれらの組み合わせの治療有効用量は、約０．２ｍｇ／ｋｇであり、ここでｋｇは対象のキログラムであり、ｍｇは治療有効用量のミリグラムである。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、またはその類似体、またはその薬学的に許容される塩のうちの１つまたはそれらの組み合わせの治療有効用量は、約０．３ｍｇ／ｋｇであり、ここでｋｇは対象のキログラムであり、ｍｇは治療有効用量のミリグラムである。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、またはその類似体、またはその薬学的に許容される塩のうちの１つまたはそれらの組み合わせの治療有効用量は、約０．４ｍｇ／ｋｇであり、ここでｋｇは対象のキログラムであり、ｍｇは治療有効用量のミリグラムである。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、またはその類似体、またはその薬学的に許容される塩のうちの１つまたはそれらの組み合わせの治療有効用量は、約０．５ｍｇ／ｋｇであり、ここでｋｇは対象のキログラムであり、ｍｇは治療有効用量のミリグラムである。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、またはその類似体、またはその薬学的に許容される塩のうちの１つまたはそれらの組み合わせの治療有効用量は、約０．６ｍｇ／ｋｇであり、ここでｋｇは対象のキログラムであり、ｍｇは治療有効用量のミリグラムである。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、またはその類似体、またはその薬学的に許容される塩のうちの１つまたはそれらの組み合わせの治療有効用量は、約０．７ｍｇ／ｋｇであり、ここでｋｇは対象のキログラムであり、ｍｇは治療有効用量のミリグラムである。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、またはその類似体、またはその薬学的に許容される塩のうちの１つまたはそれらの組み合わせの治療有効用量は、約０．７５ｍｇ／ｋｇであり、ここでｋｇは対象のキログラムであり、ｍｇは治療有効用量のミリグラムである。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、またはその類似体、またはその薬学的に許容される塩のうちの１つまたはそれらの組み合わせの治療有効用量は、約０．８ｍｇ／ｋｇであり、ここでｋｇは対象のキログラムであり、ｍｇは治療有効用量のミリグラムである。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、またはその類似体、またはその薬学的に許容される塩のうちの１つまたはそれらの組み合わせの治療有効用量は、約０．９ｍｇ／ｋｇであり、ここでｋｇは対象のキログラムであり、ｍｇは治療有効用量のミリグラムである。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、またはその類似体、またはその薬学的に許容される塩のうちの１つまたはそれらの組み合わせの治療有効用量は、約１．０ｍｇ／ｋｇであり、ここでｋｇは対象のキログラムであり、ｍｇは治療有効用量のミリグラムである。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、またはその類似体、またはその薬学的に許容される塩のうちの１つまたはそれらの組み合わせの治療有効用量は、約１．５ｍｇ／ｋｇであり、ここでｋｇは対象のキログラムであり、ｍｇは治療有効用量のミリグラムである。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、またはその類似体、またはその薬学的に許容される塩のうちの１つまたはそれらの組み合わせの治療有効用量は、約２．０ｍｇ／ｋｇであり、ここでｋｇは対象のキログラムであり、ｍｇは治療有効用量のミリグラムである。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、またはその類似体、またはその薬学的に許容される塩のうちの１つまたはそれらの組み合わせの治療有効用量は、約３．０ｍｇ／ｋｇであり、ここでｋｇは対象のキログラムであり、ｍｇは治療有効用量のミリグラムである。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、またはその類似体、またはその薬学的に許容される塩のうちの１つまたはそれらの組み合わせの治療有効用量は、約４．０ｍｇ／ｋｇであり、ここでｋｇは対象のキログラムであり、ｍｇは治療有効用量のミリグラムである。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、またはその類似体、またはその薬学的に許容される塩のうちの１つまたはそれらの組み合わせの治療有効用量は、約５．０ｍｇ／ｋｇであり、ここでｋｇは対象のキログラムであり、ｍｇは治療有効用量のミリグラムである。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、またはその類似体、またはその薬学的に許容される塩のうちの１つまたはそれらの組み合わせの治療有効用量は、約６．０ｍｇ／ｋｇであり、ここでｋｇは対象のキログラムであり、ｍｇは治療有効用量のミリグラムである。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、またはその類似体、またはその薬学的に許容される塩のうちの１つまたはそれらの組み合わせの治療有効用量は、約７．０ｍｇ／ｋｇであり、ここでｋｇは対象のキログラムであり、ｍｇは治療有効用量のミリグラムである。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、またはその類似体、またはその薬学的に許容される塩のうちの１つまたはそれらの組み合わせの治療有効用量は、約８．０ｍｇ／ｋｇであり、ここでｋｇは対象のキログラムであり、ｍｇは治療有効用量のミリグラムである。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、またはその類似体、またはその薬学的に許容される塩のうちの１つまたはそれらの組み合わせの治療有効用量は、約９．０ｍｇ／ｋｇであり、ここでｋｇは対象のキログラムであり、ｍｇは治療有効用量のミリグラムである。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、またはその類似体、またはその薬学的に許容される塩のうちの１つまたはそれらの組み合わせの治療有効用量は、約１０．０ｍｇ／ｋｇであり、ここでｋｇは対象のキログラムであり、ｍｇは治療有効用量のミリグラムである。
【００３１】
一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、その模倣物、またはそれらの組み合わせは、被ばく後約２４時間以内に投与され得る。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、その模倣物、またはそれらの組み合わせは、約２〜１４日間、断続的または持続的に投与され得る。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、その模倣物、またはそれらの組み合わせは、約２日間、断続的または持続的に投与され得る。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、その模倣物、またはそれらの組み合わせは、約３日間、断続的または持続的に投与され得る。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、その模倣物、またはそれらの組み合わせは、約４日間、断続的または持続的に投与され得る。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、その模倣物、またはそれらの組み合わせは、約５日間、断続的または持続的に投与され得る。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、その模倣物、またはそれらの組み合わせは、約６日間、断続的または持続的に投与され得る。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、その模倣物、またはそれらの組み合わせは、約７日間、断続的または持続的に投与され得る。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、その模倣物、またはそれらの組み合わせは、約８日間、断続的または持続的に投与され得る。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、その模倣物、またはそれらの組み合わせは、約９日間、断続的または持続的に投与され得る。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、その模倣物、またはそれらの組み合わせは、約１０日間、断続的または持続的に投与され得る。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、その模倣物、またはそれらの組み合わせは、約１１日間、断続的または持続的に投与され得る。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、その模倣物、またはそれらの組み合わせは、約１２日間、断続的または持続的に投与され得る。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、その模倣物、またはそれらの組み合わせは、約１３日間、断続的または持続的に投与され得る。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、その模倣物、またはそれらの組み合わせは、約１４日間、断続的または持続的に投与され得る。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、その模倣物、またはそれらの組み合わせは、断続的に投与され得、投与レジメンは、少なくとも約１２週間にわたる約１日１回または約２日毎に１回の投与を含む。
【００３２】
本開示はまた、（ｉ）治療有効用量の、ＰＩＦペプチド、もしくはその類似体、もしくはその薬学的に許容される塩のうちの１つ、またはそれらの組み合わせと、（ｉｉ）薬学的に許容される担体とを含む、薬学的組成物に関する。
【００３３】
一部の実施形態において、この薬学的に許容される担体は、無菌であり、かつ発熱物質を含まない水または乳酸リンゲル液である。
【００３４】
一部の実施形態において、本組成物は更に、１つまたは複数の活性薬剤を治療有効用量含む。
【００３５】
一部の実施形態において、この１つまたは複数の活性薬剤は、抗炎症化合物、αアドレナリン受容体作動薬、抗不整脈化合物、鎮痛性化合物、及び美的化合物（ａｅｓｔｈｅｔｉｃ  ｃｏｍｐｏｕｎｄ）から選ばれる化合物のうちの１つ、またはそれらの組み合わせである。
【００３６】
一部の実施形態において、本組成物は更に、１つまたは複数の幹細胞を含む。
【００３７】
一部の実施形態において、この幹細胞は、自己幹細胞である。
【００３８】
一部の実施形態において、本薬学的組成物は、非経口注射、皮下注射、静脈内注射、筋肉内注射、腹腔内注射を介して、経皮的に、経口的に、口腔に、眼球の経路で、膣内に、吸入によって、蓄積注射によって、または留置剤によって投与される。
【００３９】
一部の実施形態において、本組成物は更に、抗炎症化合物、α−アドレナリン受容体作動薬、抗不整脈化合物、鎮痛性化合物、及び麻酔性化合物から選ばれる活性薬剤のうちの１つ、またはそれらの組み合わせを含む。
【図面の簡単な説明】
【００４０】
【図１Ａ】ＰＩＦが、致死線量の被ばくから保護することを示す。図１Ａ：ＰＩＦで１日２回、８Ｇｙ放射線被ばく後２時間から開始して１４日間にわたって治療されたマウス（Ｃ５７ＢＬ／６、ｎ＝３６）は、１００％の生存率を有していた。対照マウス（ｎ＝１４）は、放射線（ＰＢＳ、ビヒクル）を受けたが、治療は受けず、ＡＲＳを発達させて２３日目までに死亡した。図１Ｂ：雌マウス（ｎ＝１８、雄の場合と同様の結果）を、ＰＩＦで１日２回（低用量：０．７５ｍｇ／ｋｇ、高用量：１．２５ｍｇ／ｋｇ）、８Ｇｙ放射線被ばく後２時間から開始して１４日間にわたって治療した。重要なことに、ＰＩＦ治療群は、正常な血液学的指標を呈し、造血及び免疫機能に対するＰＩＦの保護効果が示された。免疫保護は、リンパ球及び好中球の数の維持によって証明された。加えて、ヘマトクリットレベル及び血小板数の両方が、ＰＩＦ治療群において保存された。ＰＩＦが、致死線量の被ばくから保護することを示す。図１Ｃ、１Ｄ、及び１Ｅ：対照、低用量、及び高用量ＰＩＦ治療の効果を、それぞれ、０〜１９日目の免疫表現型、ＲＢＣ、及び血小板に関して示す。関連する図面の省略形：ＷＢＣ＝白血球、ＮＥ＝好中球、ＬＹ＝リンパ球、ＭＯ＝単球、ＥＯ＝好酸球、ＢＡ＝好塩基球、ＲＢＣ＝赤血球、ＨＢ＝ヘモグロビン、ＨＣＴ＝ヘマトクリット、ＭＣＶ＝平均血球体積、ＭＣＨ＝平均血球ヘモグロビン、ＭＣＨＣ＝平均血球ヘモグロビン濃度、ＰＬＴ＝血小板、ＭＰＶ＝平均血小板体積。
【図１Ｂ】図１Ａの続きである。
【図１Ｃ−１】図１Ａの続きである。
【図１Ｃ−２】図１Ａの続きである。
【図１Ｃ−３】図１Ａの続きである。
【図１Ｃ−４】図１Ａの続きである。
【図１Ｄ−１】図１Ａの続きである。
【図１Ｄ−２】図１Ａの続きである。
【図１Ｄ−３】図１Ａの続きである。
【図１Ｄ−４】図１Ａの続きである。
【図１Ｅ−１】図１Ａの続きである。
【図１Ｅ−２】図１Ａの続きである。
【図１Ｅ−３】図１Ａの続きである。
【図１Ｅ−４】図１Ａの続きである。
【図２Ａ】照射後の生存曲線を示す。マウスは、様々な線量の全身照射を受けた。生存率を、照射後３０日間にわたって監視した。６〜７Ｇｙにおいて、全てのマウスは３０日目に生存していた。図２Ｂは、ＰＩＦが、亜致死線量の照射に続いて血小板数を改善することを示す。６Ｇｙ〜８Ｇｙ照射線量への被ばくに続いて、ＰＩＦでの２４時間持続治療を２週間にわたって開始し、続いて１週間の後治療を行った。ＰＩＦ治療の効果を、ＰＢＳ対照と比較した。血小板数を決定し、６Ｇｙ、７Ｇｙ、及び８Ｇｙ照射に関して示す。
【図２Ｂ】図２Ａの続きである。
【図３Ａ】ＰＩＦが、亜致死線量の照射後に血液学的回復を増強することを示す。マウスに６Ｇｙ線量を照射し、１ｍｇ／ｋｇ／日のＰＩＦまたはＰＢＳのいずれかを、照射後２４時間から開始して２週間にわたって持続的に投与した。この実験のプロトコルを図３Ａに記載する。照射されたマウスのＷＢＣ再構成のフォローアップを図３Ｂに示す。照射後２週間及び４週間のＷＢＣ数を図３Ｃに示す。照射後４週間のリンパ球及び顆粒球のパーセンテージを図３Ｄに示す。結果は、２〜３つの独立した実験を表す。＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１。
【図３Ｂ】図３Ａの続きである。
【図３Ｃ】図３Ａの続きである。
【図３Ｄ】図３Ａの続きである。
【図４Ａ】ＰＩＦが、亜致死線量の照射後に炎症を低減し、Ｂ７Ｈ１の発現を増強することを示す。マウスに６Ｇｙ線量または７Ｇｙ線量のいずれかで照射した。０．７５ｍｇ／ｋｇのＰＩＦまたはＰＢＳのいずれかを、照射後２４時間から開始して１日２回、３日間にわたって皮下的に投与した。この実験のプロトコルを図４Ａに記載する。実験マウスの血清中のＩＬ−１α及びＩＬ−２のレベルを、６Ｇｙ群及び７Ｇｙ群に関してＦｌｏｗＣｙｔｏｍｉｘ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅｘキットにより測定した。結果を、図４Ｂ及び４Ｃにそれぞれ示す。結腸内のｉＮＯＳ及びＢ７Ｈ１  ｍＲＮＡ発現に関するｑＰＣＲ解析を行った。結果を、図４Ｄ及び４Ｅにそれぞれ示す。結果は、２つの独立した実験を表す。＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１。
【図４Ｂ】図４Ａの続きである。
【図４Ｃ】図４Ａの続きである。
【図４Ｄ】図４Ａの続きである。
【図４Ｅ】図４Ａの続きである。
【図５Ａ】実験のスケッチを示す。
【図５Ｂ】図５Ｂは、亜致死線量６Ｇｒｙ照射及び遺伝子発現（マクロ）後２４時間及び４８時間で開始されるｓＰＩＦの効果を比較して、結腸陰窩組織像においてｓＰＩＦの効果を試験したことを示す。
【図５Ｃ】図５Ｃは、ＰＢＳ及び正常マウスと比較して、ｓＰＩＦの効果の統計図表を示す。図５Ｃは、ＰＢＳと比較して、２つの時点の陰窩深度におけるｓＰＩＦの効果が、正常な結腸内で見られるものへと著しく回復されたことを示す。
【図５Ｄ】図５Ｄの統計解析は、ＰＩＦが結腸傷害を逆行させ、正常なマウスとの差異がないことを明示する。
【図５Ｅ】５Ｅは、ｑＰＣＲ  Ｂ７Ｈ１の発現が、正常及びＰＢＳと比較して、増加したＢ７Ｈ１により、ＰＢＳ保護に対して同様に増加したことを示す。結果は、２つの独立した実験を表す。＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１。
【図６Ａ】ＰＩＦが、致死線量照射及び半同種ＢＭＴ後に造血を改善することを示す。マウスに１０Ｇｙ線量を照射し、続いて半同種ＢＭＴを行った。１ｍｇ／ｋｇ／日のＰＩＦまたはＰＢＳのいずれかを、照射後２４時間から開始して２週間にわたって持続的に投与した。この実験のプロトコルを図６Ａに記載する。照射及び移植後３週間の各郡のＷＢＣ数を図６Ｂに示す。照射後３週間のリンパ球及び顆粒球のパーセンテージを図６Ｃに示す。正常、ＰＢＳ治療、及びＰＩＦ治療マウスにおけるＢＭの細胞充実性レベルに関する大腿骨の組織学的検査を、図６Ｄ、６Ｅ、及び６Ｆにそれぞれ示す。１２匹のマウスから１つの代表的な写真。０．７５ｍｍ２断片の大腿骨髄内の脂肪細胞の数を図６Ｇに示す。結果は、２つの独立した実験を要約する（図６Ｄ）。＊Ｐ＜０．０５、＊＊＊＊Ｐ＜０．００１。
【図６Ｂ】図６Ａの続きである。
【図６Ｃ】図６Ａの続きである。
【図６Ｄ】図６Ａの続きである。
【図６Ｅ】図６Ａの続きである。
【図６Ｆ】図６Ａの続きである。
【図６Ｇ】図６Ａの続きである。
【図７Ａ】ＰＩＦで前治療されたＢＭが、致死線量の照射及び異種ＢＭＴ後に血液学的回復を増強することを示す。ドナーＢＭ細胞を、ＰＩＦで移植前に２時間にわたってインキュベートした。マウスに１０Ｇｙ線量を照射し、続いてＰＩＦで前治療されたＢＭの移植片を異種ＢＭＴ移植した。このマウスに追加の治療を付与しなかった。この実験のプロトコルを図７Ａに記載する。照射及び移植後３週間（図７Ｂ）及び４週間（図７Ｃ）のＷＢＣ及びリンパ球数を示す。結果は、３つの独立した実験を表す。＊Ｐ＜０．０５。図３Ｄは、大腿骨を示す。図３Ｅ、３Ｆ、及び３Ｇは、ＰＩＦが、間葉系幹細胞（ＭＳＣ）の調節機能を増強することを示す。抗ＣＤ３抗体で活性化されたＣＦＳＥ染色マウス脾細胞を、以前にＰＩＦで（２時間）インキュベートしたＭＳＣまたは対照と共に、４日間にわたって（５０：１の比で）培養した。細胞増殖を、フローサイトメトリーを使用して解析した。図３Ｇのグラフは、対照（ＭＳＣを含まない活性化脾細胞）と比較して、増殖細胞の％、３つの実験の要約を示す。Ｈ  ＰＩＦは、ＰＢＳと比較して、移植後の重量回復を促進する（＊Ｐ＜０．０５）。
【図７Ｂ】図７Ａの続きである。
【図７Ｃ】図７Ａの続きである。
【図７Ｄ】図７Ａの続きである。
【図７Ｅ】図７Ａの続きである。
【図７Ｆ】図７Ａの続きである。
【図７Ｇ】図７Ａの続きである。
【図８Ａ】ＰＩＦが、Ｍ１マクロファージ分化を、Ｍ２様表現型にシフトさせることを示す。腹腔マクロファージを、Ｍ１分化の場合はＧＭ−ＣＳＦ（１０ｎｇ／ｍＬ）及びＬＰＳ（１０ｎｇ／ｍＬ）と共に、またはＭ２分化の場合は、Ｍ−ＣＳＦ（１０ｎｇ／ｍＬ）及びＩＬ−４（１０ｎｇ／ｍＬ）と共に、２０時間にわたってＰＩＦの存在下または不在下のいずれかで培養した。分化した細胞のｉＮＯＳ（図８Ａ）、ＣＯＸ−２（図８Ｂ）、及びアルギナーゼ（図８Ｃ）ｍＲＮＡ発現のｑＰＣＲ解析を行った。ＦＡＣＳ解析によるＦ４８０（図８Ｄ）及びＣＤ１１ｂ（図８Ｅ）のＭ１マクロファージｇＭＦＩの％を示す。結果は、５〜６つの独立した実験を表す。＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊＊Ｐ＜０．００１。
【図８Ｂ】図８Ａの続きである。
【図８Ｃ】図８Ａの続きである。
【図８Ｄ】図８Ａの続きである。
【図８Ｅ】図８Ａの続きである。
【図９Ａ】ＣＤ１６／３２（図２Ａ）及びＣＤ２０６（図２Ｂ）のＦＡＣＳ解析を示す。腹腔マクロファージを、Ｍ１分化の場合はＧＭ−ＣＳＦ（１０ｎｇ／ｍＬ）及びＬＰＳ（１０ｎｇ／ｍＬ）と共に、またはＭ２分化の場合は、Ｍ−ＣＳＦ（１０ｎｇ／ｍＬ）及びＩＬ−４（１０ｎｇ／ｍＬ）と共に、２０時間にわたって培養した。実線はＭ１を表し、破線はＭ２マクロファージを表す。４つの独立した実験から１つの代表的な図面。
【図９Ｂ】図９Ａの続きである。
【図１０】包括的結腸ゲノムのヒートマップ及びクラスター解析を示す。濃い灰色は、治療または条件の組と比較して、発現の相対減少を表す。薄い灰色は、その条件の治療と比較して、発現の増加を表す。縦列１は、被ばく＋ｓＰＩＦの存在下での遺伝子の発現と、被ばく単独での治療の存在下での遺伝子の発現とを比較する、遺伝子発現のヒートマップを示す。縦列２は、負の対照（ＰＢＳ）動物からの遺伝子発現と、被ばくで治療された動物からの遺伝子発現との相対量の比較解析を示す。縦列３は、未治療のマウスと比較して、被ばくと共にｓＰＩＦによって引き起こされた相対遺伝子発現変化を示す。いくつかの経路が影響を受けた。遺伝子は、ｓＰＩＦによって最も影響を受け、遺伝子は、ミトコンドリア機能と関連付けられ遺伝子は、ストレスに対する応答と関連付けられ、遺伝子は、タンパク質−ＲＮＡ相互作用と関連付けられた。
【図１１】ＰＩＦの結合パートナーである、ＩＤＥのＰＩＦ突然変異体の分化シフトアッセイ解析に関するデータを示す。ＰＩＦ突然変異体１及び３は、インスリン分解酵素（ＩＤＥ）に結合する。
【図１２】ＰＩＦの結合パートナーである、Ｋｖ１．３βのＰＩＦ突然変異体の分化シフトアッセイ解析に関するデータを示す。下パネルは、１０マイクロモル濃度のＰＩＦ突然変異体（左側）対２０μモル濃度のＰＩＦ（右側）におけるＴｍの変化を示す。
【図１３】ラットにおける長期的な致死線量５０Ｇｙ被ばくに対する効果を試験するために、ＰＩＦの注入を使用する実験プロトコルを示す。いつどのように臓器移植が評価されるかを説明するプロトコル及び投薬レジメンのフローチャートを示す。
【図１４】ラットにおける１９週間の研究までの体重に対する、致死線量の被ばくに続くＰＩＦ治療の効果を示す。ＰＩＦは、ＰＢＳと対比して、実験の最後にラット重量を増加させる（＊＜０．０５）。ナイーブマウスの一元配置ＡＮＯＶＡ（分散分析）プロットを示し、マウスにＸ線を照射し、ＰＩＦで治療した。ｎ＝９〜１２マウス。ホルム・シダック事後検定を、＜０．０５の信頼区間で行った。照射されたＰＩＦ治療動物は、照射されただけの動物よりも体重において高得点を得た。
【図１５】２２週間にわたって測定された期間で対照と比較して、ＰＩＦ治療動物のカプラン・マイヤー曲線を示す。致死線量の被ばくに続くＰＩＦ治療ラットの生存曲線を示す。対照との差異は認められなかった。対照、開始：ｎ＝１２、終了：ｎ＝１２Ｘ線、開始：ｎ＝１２、終了：ｎ＝１０ＰＩＦ、開始：ｎ＝１０、終了：ｎ＝９
【図１６】マウスの左室壁厚さ及び直径を示す。超音波検査を受けて、心機能の画像を示す。
【図１７】超音波検査結果：体重に対して正規化された左室を形態学的に示す。これらの結果は、ＰＩＦが、５ヶ月目に左室肥大を改善することを示す。ＢＷ：体重、ＡＷＴｓ：前壁厚さ−収縮期、ＡＷＴｄ：前壁厚さ−拡張期、ＰＷＴｓ：後壁厚さ−収縮期、ＰＷＴｄ：後壁厚さ−拡張期、ＳＷＴｓ：隔壁厚さ−収縮期、ＳＷＴｄ：隔壁厚さ−拡張期。二元反復測定ＡＮＯＶＡは全て多重対比較。ホルム・シダック事後検定；対対照、ｐ＜０．０５、＃対Ｘ線、ｐ＜０．０５群と時間因子との間の有意な相互作用（ｎ＝９〜１２）。致死線量の被ばくに続く心指標のＰＩＦ効果を示す。ＰＩＦは、ＰＢＳ壁厚さと比較して、収縮機能及び拡張機能の両方を改善する。
【図１８】５か月目の臓器重量及び長さ−体重、心臓重量、脛骨長を示す。順位に基づく一元ＡＮＯＶＡ、全て対。ホルム・シダック事後検定。＊対対照、ｐ＜０．０５、＃対Ｘ線、ｐ＜０．０５、ｎ＝９〜１２。致死線量の被ばくに続くラット重量指標に対するＰＩＦ効果を示し、ＰＢＳと対比してラットの重量を増加させることを明示する。
【図１９】５ヶ月目の臓器重量−胸膜液、肺、腎臓、肝臓、及び胸腺重量を示す。順位に基づく一元ＡＮＯＶＡ、全て対。ホルム・シダック事後検定、＊対対照、ｐ＜０．０５、＃対Ｘ線、ｐ＜０．０５、ｎ＝９〜１２。致死線量の被ばくに続くラット臓器重量に対するＰＩＦ効果を示す。ＰＩＦは、腎臓成長を促進する。
【図２０】未治療の細胞と比較して、副腎細胞培養物に対するＰＩＦの効果を示す。ＰＩＦで治療されたＢＡＣ細胞は、ＰＩＦに前被ばくされたとき、培養中の増加した生存度を有し、ウシ副腎細胞（一次）生存度、アポトーシス、及び増殖に対するＰＩＦ効果を示す。
【図２１】ウシ副腎細胞（一次）コルチゾール分布に対するＰＩＦ効果を示す。ＢＡＣ副腎細胞に対するＰＩＦの効果は、基礎コルチゾール分泌と関連する。コルチゾールレベルは、ＰＩＦが培養中に細胞に被ばくされると増加する。
【図２２】培養中のＩＮＳ−１（ラット島インスリン生成細胞）に対するＰＩＦの効果を示す。細胞生存度は、未治療のままのＩＮＳ−１細胞と比較して、培養中に増加する。０．０１、０．１、及び１．０マイクログラム／ｍＬの培養培地におけるＰＩＦの線量を治療に使用した。ＰＩＦは、インスリノーマ細胞生存度、ならびに生存度を促進することを示す。
【発明を実施するための形態】
【００４１】
急性放射線症候群（ＡＲＳ）は、放射線病としても知られるが、身体全体または身体の一部に対する高線量の照射の後に生じる。被ばくは、骨髄の完全崩壊、胃腸（ＧＩ）管の粘膜障壁及び陰窩への損傷、皮膚火傷、ならびに中枢神経系傷害を引き起こし得、不可逆的な神経学的及び心血管損傷、最終的には死につながる。被ばくは、造血細胞等の急速ターンオーバー細胞に特に有害であり、リンパ球は、枯渇する最初の下位系統である。個々の臓器損傷を監視することができるが、ＡＲＳに関するより好適な見解は、全身炎症反応によって引き起こされる多臓器不全症候群の概念である。多くの報告が、炎症誘発性サイトカインの放射線により誘発された生成が、血液及び末梢リンパ系組織における放射線療法関連傷害に寄与することを示している。
【００４２】
イオン化放射線により誘発された傷害の複雑性を考慮すると、有効なＡＲＳ療法が欠けている。治療のための現在の臨床アプローチは、炎症メディエーターの生成を阻害し、炎症反応の開始を抑制することである。現在の管理としては、輸血、流体及び電解質投与、抗生物質、ならびに抗ウイルス療法が挙げられる。これらの治療は、広汎性免疫抑制を引き起こし、患者を日和見感染の危険に置く。血球減少の患者は、顆粒球コロニー刺激因子または顆粒球マクロファージコロニー刺激因子を受けて、低線量被ばくに続いて有効な残留造血前駆細胞から免疫系を再集合させる。不応答者及び続く致死線量の被ばくは、造血幹細胞移植（ＨＳＣＴ）を必要とする。しかしながら、かかる移植は、しばしば免疫抑制薬の過小または過剰使用に起因して、移植片対白血球（ＧＶＬ）効果の低下に加えて、有害な移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）につながる。ＡＲＳは、現在、限られた対策しか有していない。
【００４３】
骨髄移植（ＢＭＴ）は、血液学的悪性疾患及び遺伝性血球障害、例えば、限定されないが、リンパ腫、リンパ球性白血病、骨髄腫、白血病、貧血症、血友病、地中海貧血症、鎌状赤血球症、多発性硬化症、強皮症、脊髄形成異常症候群、及び骨髄増殖性疾患のための治療として使用され得る。自家（自己）及び同種（ドナー）の２種類の骨髄移植が存在する。
【００４４】
骨髄以外の臓器、組織、または細胞の移植を使用して、ＡＲＳによって起こり得る多臓器不全を含む、受容者の様々な生理学的欠陥を治療することもできる。かかる臓器、組織、または細胞としては、皮膚、脳、心臓、肺、腎臓、胃腸管、脾臓、肝臓、膵臓、膵島細胞、副腎、及びそれらの組み合わせを挙げることができるが、これらに限定されない。
【００４５】
対象が移植を必要とする場合、自家移植、同種移植、半同種移植、または異種移植が使用されてもよい。異種移植の場合において、例えば、移植に使用可能なヒト臓器の現在の大幅な不足に起因して、ブタドナーからの島細胞または他の細胞、臓器、もしくは組織が移植されてもよい。移植のための臓器、組織、または細胞の完全適合は、移植拒絶反応、または骨髄の場合は生着の失敗、または逆に移植片対宿主疾患（ＧＶＨＤ）の発達を予防するための主要な追及事項である。しかしながら、現在の療法は限られ、生着不全及び他の主要な合併症が依然として起こっている。免疫抑制剤の導入は、移植の分野を著しく進歩させ、患者の長期的な回復を可能にするが、患者は、生涯にわたる免疫抑制剤療法を必要とし、これが毒性副作用と関連付けられる。
【００４６】
標的臓器もしくは細胞を苦しめる疾患が寛解期にある場合、または治療される病態が標的臓器、組織、もしくは細胞に関与しない場合は、自家移植が可能であり得る。ＢＭＴを含む自家移植において、組織は、移植前に患者から抽出され、「パージ」して居残る悪性細胞を除去することができる（疾患が標的臓器、組織、または細胞に罹患している場合）。患者が化学療法または放射線を受けた後、幹細胞を患者に移植し戻す。自家移植は、患者が高用量の化学療法及び放射線を受けるのを可能にする。骨髄または末梢血液移植を伴う高用量の化学療法または放射線療法は、例えば、白血病及びリンパ腫に関する治癒率を改善した。一旦、患者が化学療法または放射線を受けると、患者は、血球を生成する能力が制限され得る。自家移植は、患者が血球及び血小板の生成を活発に始めるのを可能にする。
【００４７】
哺乳類の妊娠は、母体の免疫系が非常に効率的な方法で胎児と相互作用し、それが双方にとって有益であるという独特な生理学的事象である。妊娠は免疫パラドックスであり、移植片対宿主または宿主対移植片効果を示さない。この現象に関与する因子は、広く研究されてはいるものの、まだ完全に解明されたわけではない。新規の胚由来因子である移植前因子（ＰＩＦ−１）は、受精後すぐに母体による妊娠の認識をもたらすことで、妊娠の免疫寛容を引き起こし得る。
【００４８】
妊娠以外のＰＩＦの治療的実用性を置き換えるために、天然ペプチド活性を模倣する１５アミノ酸（ＭＶＲＩＫＰＧＳＡＮＫＰＳＤＤ）合成ＰＩＦ類似体（ｓＰＩＦ）を生成した（及びｃＧＭＰグレードに向上させた）。これは、自己免疫性、移植、及び急性放射線症候群の前臨床モデルにおけるｓＰＩＦ効果に関する詳細な検査を可能にし、完全な局所及び全身効能を示す。ヒト免疫細胞に対するｓＰＩＦの効果を調べ、その局所及び全身作用機序の重要な要素を決定する研究は良好であった。有益な移植片対白血病を保存する一方で、半同種移植片対宿主モデルにおいて予防及び逆行させるｓＰＩＦの効能が記録された。ＦＤＡ指定された包括的毒性学研究は、短い循環半減期に加えて、超生理的（ヒトの４００〜４０００倍）用量で高い安全性プロファイル（マウス及びイヌ）を明示した（Ｃｏｖａｎｃｅ）。ＦＤＡは、免疫奇病に対する大学主催の臨床治験を行うために、ｓＰＩＦに対してＦＡＳＴ  ＴＲＡＣＫ指定を認めた。合成ＰＩＦ−１（ｓＰＩＦ）は、天然ペプチドの効果を複製し、活性化した末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）増殖及びサイトカイン分泌に対して強力な免疫調節効果を及ぼし、ＰＢＭＣにおける新規部位を通じて作用し、既知の免疫抑制薬とは区別される効果を有した。したがって、ＰＩＦは、移植片対白血病を有効にする一方で、ＧＶＨＤの発達を予防することができる。理論に束縛されるものではないが、ＰＩＦは、移植された骨髄幹細胞に結合し、それらが迅速に統合されるのを助け、正常な血球及び血小板の生成を開始することができる。
【００４９】
移植は、受容者に完全に適合するドナー臓器、組織、または細胞で理想的に行われるが、依然として約７０％の患者が様々な強度のＧＶＨＤを発症する。したがって、移植患者は、移植後及び恐らくは残りの人生にわたって免疫抑制療法を受ける。急性ＧＶＨＤの他に、慢性ＧＶＨＤ及び拒絶反応は、追加の深刻な合併症である。しかしながら、それらの病態は、治療することがより困難であり、急性ＧＶＨＤと比較した場合に高い罹患率及び致死率を有する。したがって、ＰＩＦの使用は、自家移植、同種移植、半同種移植、または異種移植を可能にすることができ、それにより生着を向上させ、ＧＶＨＤまたは長期的な臓器拒絶反応を予防する。
【００５０】
臨床的に、移植における主要な問題は、移植された細胞が機能的になるまで長期間にわたって起こる。その間に、患者はしばしば深刻な感染にかかり、死亡する場合がある。ＰＩＦは、傷害の起源またはどの臓器が標的であるかに関わらず、炎症の根本に対応する。ＰＩＦ投与は、移植に続く生着期間及び生着に関連する炎症を低減することができる。ＰＩＦは、良好な移植片生着につながり得る。理論に束縛されるものではないが、妊娠中のＰＩＦの活性と同様に、妊娠以外のＰＩＦは、生着を促進し、新たに組み込まれた臓器、組織、または細胞が機能的になるのを可能にする。更に、ＰＩＦの投与は、自家移植を受けたマウスにおいて完全な重量回復を可能にし得、これはナイーブマウスの場合に相当する。
【００５１】
ｓＰＩＦは、マウス同種骨髄移植（ＢＭＴ）モデルにおいて示されるように、有益なＧＶＬ効果を保存する一方で、有害なＧＶＨＤ発達を予防することができる。そのモデルにおいて、短期ｓＰＩＦ療法は、減少した炎症促進性肝サイトカイン及びケモカイン遺伝子、ならびに循環する炎症促進性ＩＬ１７ａレベルに加えて、皮膚炎、肝炎、及び結腸潰瘍に対する４ヶ月効能保護につながる。ｓＰＩＦはまた、相乗性ＢＭＴを促進することが示された。
【００５２】
ｓＰＩＦは、全体免疫を規制し、活性化された免疫に作用するナイーブ単球／マクロファージを標的として、混合リンパ球反応（ＭＬＲ）、優先的ＴＨ２サイトカインバイアスにつながる増殖を遮断する一方で、必要なＴＨ１応答を保存する。マウスマクロファージにおいて、増加したＢ７Ｈ１（Ｔ細胞上のＰＤ−１に結紮される）及び減少したｉＮＯＳ遺伝子（ＮＯＳ２、一酸化窒素合成酵素）の発現が記された（Ａｚａｒ  ｅｔ  ａｌ，２０１３）。ｓＰＩＦは、タンパク質−ジ−イソメラーゼ／チオレドキシン（ＰＤＩ／Ｔ）及び熱衝撃タンパク質（ＨＳＰ）を標的として、酸化ストレスを低減し、タンパク質の誤った折り畳みを予防することにより、前臨床モデルにおいて観察されるＰＩＦ保護に対して重要な洞察を提供する。インビトロ及び前臨床モデルの両方における観察は、ｓＰＩＦがＡＲＳに対する保護において有効であり得ることを支持する。
【００５３】
本組成物及び本方法について記載する前に、本発明が、記載される特定のプロセス、組成物、または方法論に限定されるものではなく、これらは変化し得るものであることを理解されたい。本記載において使用される用語は、特定の見解または実施形態のみを記載するためのものであって、本発明の範囲を制限することを意図するものではなく、本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲によってのみ制限されるものである。別途定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術的及び科学的用語は当業者によって一般的に理解される意味と同じ意味を有する。本明細書に記載される方法及び材料と同様または同等の任意の方法及び材料が、本発明の実施形態の実践または試験において使用され得るが、これより、好ましい方法、デバイス、及び材料について記載する。本明細書において言及される全ての刊行物は、その全体が参照により組み込まれる。本明細書の内容はいずれも、本発明が従来の発明による開示に先行する権利がないことの承認として解釈されるべきではない。
【００５４】
本明細書及び添付の特許請求の範囲において使用する場合、単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」、及び「その（ｔｈｅ）」は、文脈が別途明確に規定しない限り、複数への参照を含むものである。したがって、例えば、１つの「ペプチド」への参照は１つ以上のペプチド及びそれらの同等物への参照であることは、当業者にとって既知であり、他もまた同様である。
【００５５】
本明細書で使用する場合、「約」という用語は、使用されている数の数値のプラスまたはマイナス１０％を意味する。したがって、約５０％は４０％〜６０％の範囲にあることを意味する。
【００５６】
治療薬と併せて使用する場合、「投与する」は、標的臓器、組織、もしくは細胞内、またはそれらに治療薬を直接投与すること、あるいは標的とする臓器、組織、または細胞に対して、治療薬がポジティブに影響を与えるように、患者にその治療薬を投与することを意味する。したがって、本明細書で使用する場合、「投与する」という用語は、移植前因子（ＰＩＦ）と併せて使用する場合は、限定されるものではないが、標的臓器、組織、もしくは細胞内、またはそれらにＰＩＦを提供すること；治療薬が標的臓器、組織、または細胞に到達するように、例えば静脈注射によって患者に対して全身的にＰＩＦを提供すること；標的組織に対して、ＰＩＦをそのコード配列の形態で提供すること（例えば、いわゆる遺伝子治療技法によって）を含み得る。「投与する」ことは、非経口、経口、もしくは局所投与、または他の既知の技法と組み合わせたような方法によって達成され得る。
【００５７】
本明細書で使用する場合、「動物」、「患者」、及び「対象」という用語は、限定されるものではないが、ヒト、ならびに野生動物、飼育動物、及び家畜等の非ヒト脊椎動物を含む。一部の実施形態において、「動物」、「患者」、及び「対象」という用語は、ヒトを指し得る。一部の実施形態において、「動物」、「患者」、及び「対象」という用語は、非ヒト哺乳動物を指し得る。一部の実施形態において、「動物」、「患者」、及び「対象」という用語は、イヌ、ネコ、ブタ、ウシ、ウマ、ヤギ、ヒツジ、または他の家畜化された非ヒト哺乳動物を指し得る。一部の実施形態において、対象は、悪性型のがんを有すると診断された、またはそれを有する疑いがあるヒト患者である。一部の実施形態において、対象は、臓器不全を有すると診断された、またはそれを有する疑いがあるヒト患者である。一部の実施形態において、対象は、肝不全、腎不全、コルチゾールレベルの不均衡と関連付けられる任意の疾患、若年型もしくは成人型糖尿病（Ｉ型またはＩＩ型）、または心不全を有すると診断された、またはそれを有する疑いがあるヒト患者である。一部の実施形態において、対象は、島細胞移植、腎移植、もしくは副腎細胞移植、血液細胞移植、骨髄移植、または心臓移植を必要とするとして特定された、またはそれを必要とする疑いがあるヒト患者である。
【００５８】
「免疫調節」とは、本発明の化合物が、免疫系の１つ以上の態様を改変（調節）する能力を指す。免疫系は、感染から、及び外来抗原から、リンパ球、マクロファージ、及びに多重細胞間相互作用によって、及び免疫細胞に対して自己分泌、傍分泌、及び内分泌効果を有する、リンフォカイン及び抗体を含む可溶性因子を精緻化することによって互いに規制する他の抗原提示細胞を伴う細胞性及び体液性機序により、生物を保護するように機能する。
【００５９】
「改善する」という用語は、本発明が、提供、適用、または投与を受けた、対象、臓器、組織、または細胞の、外観、形態、特徴、及び／または物理的特性のいずれかを変化させることを伝えるのに使用される。例えば、形態の変化は、以下、ＡＲＳの１つ以上の症状の減少；移植された臓器、組織、または細胞の生着の増加；移植された臓器、組織、または細胞の許容の増加；自家移植、同種移植、半同種移植、または異種移植と関連付けられる移植片に対する宿主免疫応答の低減；移植片対白血病の増加；最小移植片対宿主疾患を伴わないか、または伴う、移植片対白血病の増加；免疫抑制剤の必要性の低減または排除；及び化学療法及び放射線療法からの早急な回復のうちのいずれか単独で、または組み合わせで明示され得る。
【００６０】
「阻害する」という用語は、症状の発症の予防、症状の緩和、または、疾患、病態、もしくは障害を排除するための本発明の化合物の投与を含む。
【００６１】
本明細書で用いる場合、「ペプチド」、「ポリペプチド」、及び「タンパク質」という用語は交換可能に使用され、アミド結合または非アミド等価物により共有結合で連結された２つ以上のアミノ酸を指す。本発明のペプチドは、任意の長さであり得る。例えば、ペプチドは、約２〜約１００以上の残基を有してもよく、長さが例えば５〜１２、１２〜１５、１５〜１８、１８〜２５、２５〜５０、５０〜７５、７５〜１００以上等であってもよい。好ましくは、ペプチドは、約２〜約１８残基である。本発明のペプチドは、ｌ−及びｄ−異性体、ならびにｌ−及びｄ−異性体の組み合わせを含む。ペプチドは、典型的にはタンパク質の翻訳後処理と関連付けられる修飾、例えば、環化（例えば、ジスルフィドまたはアミド結合）、リン酸化、グリコシル化、カルボキシル化、ユビキチン化、ミリスチル化、または脂質化修飾を含んでもよい。
【００６２】
「薬学的に許容される」は、担体、希釈剤、または賦形剤が、製剤または組成物の他の成分と適合し、かつそれらの受容者にとって有害であってはならないことを意味する。
【００６３】
別途指示されない限り、「骨髄」という用語は、赤色髄及び黄色髄からなり、幹細胞を含有する骨の中空内部において見出される柔軟な組織を意味する。
【００６４】
本明細書で使用する場合、「治療薬」は、患者の望ましくない病態または疾患を、治療する、治す、寛解する、予防する、または改善するために活用される薬剤を意味する。一部には、本発明の実施形態は、ＡＲＳの１つ以上の症状を減少させること、自家移植、同種移植、半同種移植、もしくは異種移植における移植された臓器、組織、または細胞の許容の増加、及び／または自家移植、同種移植、半同種移植、もしくは異種移植における臓器、組織、または細胞の拒絶反応の減少を対象とする。
【００６５】
組成物（例えば、ＰＩＦペプチド）の「治療有効量」または「有効量」は、所望の効果を達成するように、すなわち、自家移植、同種移植、半同種移植、もしくは異種移植における臓器、組織、もしくは細胞の許容を改善、増加、もしくは可能にするように、及び／またはＡＲＳの１つ以上の症状を減少させるか、またはドナー臓器、組織、もしくは細胞が移植される前にそれらの生存度を増加させるように計算された既定量である。本方法によって企図される活性は、必要に応じて、医学治療的及び／または予防的治療の両方を含む。治療的及び／または予防的効果を得るために本発明に従って投与される化合物の具体的な投与量は、無論、例えば、投与される化合物、投与経路、及び治療される病態を含む症例を取り巻く特定の状況によって決定される。本化合物は広い投与量範囲にわたって有効であり、例えば、一日当たりの投与量は、通常、０．００１〜１０ｍｇ／ｋｇの範囲内に収まり、より通常は０．０１〜１ｍｇ／ｋｇの範囲内である。一部の実施形態において、ＰＩＦ、またはＰＩＦ類似体もしくはペプチドの治療有効用量は、約０．１ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．４ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、０．７ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、０．９ｍｇ／ｋｇ、及び１ｍｇ／ｋｇである。しかしながら、投与される有効量は、治療される病態、投与される化合物の選択、及び選択された投与経路を含む、関連する状況に照らして医師によって決定されること、したがって、上記投与量の範囲は本発明の範囲をいかなる形であれ制限することを意図するものではないことが理解されるであろう。本発明の実施形態の化合物の治療有効量は、典型的には、生理学的に許容できる賦形剤組成物で投与される場合に、有効な全身濃度または組織における局所濃度を達成するのに十分であるような量である。
【００６６】
本明細書で使用する場合、「治療する」、「治療される」、または「治療」という用語は、治療的処置及び予防的または予防手段の両方を指すものであり、ここにおける目的は、望ましくない生理学的病態、障害、または疾患を、予防もしくは減速させる（減少させる）、または有益もしくは望ましい臨床結果を得ることである。本発明の目的において、有益または望ましい臨床結果としては、限定されるものではないが、症状の緩和；病態、障害、または疾患の程度の縮減；病態、障害、または疾患の状態の安定化（すなわち、悪化させないこと）；病態、障害、もしくは疾患の発症における遅延、またはそれらの進行の減速；病態（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）、障害、または病態（ｄｉｓｅａｓｅ  ｓｔａｔｅ）の寛解；及び病態、障害、または疾患の、検出可能であるかもしくは検出不可能であるかに関わらない鎮静（部分または全体）、または強化もしくは改善が挙げられる。治療は、過剰なレベルの副作用を伴わずに臨床的に有意な応答を誘発することを含む。治療はまた、治療を受けなかった場合に予想される生存と比較して、生存を延長させることを含む。
【００６７】
一般的に言えば、「組織」という用語は、特定の機能の実行において一体化される、同様に特殊化された細胞の任意の集合を指す。
【００６８】
本出願は、化合物を説明する。いかなる特定の理論にも束縛されないが、本明細書に記載される化合物は、ＰＩＦの１つまたは複数の受容体を介して、ＰＩＦ介在シグナル伝達の差動薬として作用する。したがって、これらの化合物は、限定されないが、急性放射線症候群の治療、及び急性放射線被ばくの遅発効果において重要な治療利益を提供するシグナル伝達経路を調節する。本開示の化合物は、非溶媒和形態ならびに溶媒和形態（水和形態を含む）で存在し得る。本開示の化合物はまた、酸付加塩及び／または塩基付加塩を含むが、これらに限定さない薬学的に許容される塩の両方を形成することができる。更に、本開示の化合物は、非晶質形態（非結晶形態）を含む様々な固体状態で、及びクラスレート、プロドラッグ、多形体、生物加水分解性エステル、ラセミ混合物、非ラセミ混合物の形態で、または光学的に純粋なエナンチオマー及びジアステレオマーを含むが、これらに限定されない精製された立体異性体として存在し得る。一般に、これらの形態の全ては、上述される通り、化合物の遊離塩基または遊離酸形態の代替形態として使用することができ、本開示の範囲内に包含されることが意図される。
【００６９】
「多形体」は、化合物の固体結晶形態を指す。同じ化合物の異なる多形体は、異なる物理的、化学的、及び／または分光学的特性を呈し得る。異なる物理的特性としては、安定性（例えば、熱または光に対する）、圧縮性及び密度（製剤化及び製品製造において重要）、ならびに溶解率（バイオアベイラビリティに影響を及ぼし得る）が挙げられるが、これらに限定されない。多形体の異なる物理的特性は、それらの処理に影響を及ぼし得る。一部の実施形態において、薬学的組成物は、本明細書に開示される組成物のうちのいずれかの少なくとも１つの多形体を含む。
【００７０】
上記の通り、本開示の化合物は、特に薬学的に許容される塩、エステル、アミド、またはプロドラッグとして投与され得る。「塩」という用語は、本開示の化合物の無機塩及び有機塩を指す。これらの塩は、化合物の最終単離及び精製中に原位置で、または遊離塩基もしくは遊離酸形態の精製された化合物を、好適な有機もしくは無機塩基もしくは酸と別個に反応させ、それにより形成された塩を単離することによって調製され得る。代表的な塩としては、臭化水素酸塩、塩酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、硝酸塩、酢酸塩、オキサル酸塩、パルミチン酸塩、ステアリン酸塩、ラウリン酸塩、ホウ酸塩、安息香酸塩、乳酸塩、リン酸塩、トシル酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、ナフチル酸塩、メシル酸塩、グルコヘプトン酸塩、ラクトビオン酸塩、及びラウリルスルホン酸塩等が挙げられる。これらの塩は、例えば、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム等のアルカリ及びアルカリ土類金属に基づく陽イオン、ならびにアンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、エチルアミン等を含むが、これらに限定されない非毒性アンモニウム、四級アンモニウム、及びアミン陽イオンを含んでもよい。例えば、Ｓ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅ，ｅｔ  ａｌ．，″Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ，″Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ，６６：１−１９（１９７７）を参照されたい。「塩」という用語は、無機及び／または有機酸で形成された酸性塩、ならびに無機及び／または有機塩基で形成された塩基塩を指す。これらの酸及び塩基の例は、当業者に周知である。かかる酸付加塩は、通常は薬学的に許容されるが、薬学的に許容されない酸の塩でも、当該化合物の調製及び精製においては実用的であり得る。塩としては、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、クエン酸、酒石酸、乳酸、ピルビン酸、酢酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、メタンスルホン酸、及びベンゼンスルホン酸から形成されたものが挙げられる。
【００７１】
一部の実施形態において、ＰＩＦまたはＰＩＦ類似体またはＰＩＦ突然変異体のいずれかを含む組成物の塩は、遊離塩基またはその塩、エナンチオマー、もしくはラセミ化合物を、適切な酸の１つ以上の相当物と反応させることによって形成されてもよい。一部の実施形態において、本開示の薬学的に許容される塩は、少なくとも１つの塩基性基または少なくとも１つの塩基性ラジカルを有する類似体を指す。一部の実施形態において、本開示の薬学的に許容される塩は、酸付加塩を形成する、遊離アミノ基、遊離グアニジノ基、ピラジニルラジカル、またはピリジルラジカルを含む。一部の実施形態において、本開示の薬学的に許容される塩は、（例えば）塩酸、硫酸、もしくはリン酸等の無機酸を有するか、または好適な有機カルボン酸もしくはスルホン酸、例えば、トリフルオロ酢酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、ヒドロキシマレイン酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、もしくはオキサル酸等の脂肪族モノもしくはジカルボン酸、またはアルギニンもしくはリジン等のアミノ酸、安息香酸、２−フェノキシ−安息香酸、２−アセトキシ安息香酸、サリチル酸、４−アミノサリチル酸等の芳香族カルボン酸、マンデル酸もしくは桂皮酸等の芳香族−脂肪族カルボン酸、ニコチン酸もしくはイソニコチン酸等のヘテロ芳香族カルボン酸、メタン、エタン、もしくは２−ヒドロキシエタンスルホン酸等の脂肪族スルホン酸、または芳香族スルホン酸、例えば、ベンゼン−、ｐ−トルエン、もしくはナフタレン−２−スルホン酸を有する、対象化合物の酸付加塩である類似体を指す。いくつかの塩基性基が存在する場合、モノまたはポリ酸付加塩が形成され得る。この反応は、塩が不溶性である溶媒もしくは培地中で、または塩が可溶性である溶媒、例えば、水、ジオキサン、エタノール、テトラヒドロフラン、もしくはジエチルエーテル、または溶媒の混合物中で実行されてもよく、これは真空下または冷凍乾燥によって除去されてもよい。この反応は、メタセシスプロセスでもあり得るか、またはイオン交換樹脂上で実行されてもよい。一部の実施形態において、塩は、患者によって生理的に耐えられるものであり得る。本開示による塩は、それらの無水形態で、または水和結晶形態で見出され得る（すなわち、１つ以上の水分子と複合されるか、もしくは結晶化される）。
【００７２】
本開示の化合物の薬学的に許容されるエステルの例としては、Ｃ1〜Ｃ8アルキルエステルが挙げられる。許容されるエステルとしては、Ｃ5〜Ｃ7シクロアルキルエステル、ならびにベンジル等のアリールアルキルエステルも挙げられる。Ｃ1〜Ｃ4アルキルエステルが一般に使用される。本開示の化合物のエステルは、当該技術分野において周知の方法に従って調製され得る。本開示の化合物の薬学的に許容されるアミドの例としては、アンモニア、一級Ｃ1〜Ｃ8アルキルアミン、及び二級Ｃ1〜Ｃ8ジアルキルアミンが挙げられる。二級アンモニウムの場合、アミンは、少なくとも１つの窒素原子を含有する５員または６員ヘテロシクロアルキル基の形態であってもよい。アンモニア、Ｃ1〜Ｃ3一級アルキルアミン、及びＣ1〜Ｃ2ジアルキル二級アミン由来のアミドが一般に使用される。本開示の化合物のアミドは、当業者に周知の方法に従って調製され得る。
【００７３】
本明細書で使用する場合、「保存的」アミノ酸置換は、下の表Ａ、Ｂ、またはＣに記載されるように定義され得る。本開示のＰＩＦ化合物は、保存的置換（核酸またはアミノ酸配列のいずれかから）は、本開示のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドの修飾によって導入された。アミノ酸は、物理的特性ならびにタンパク質二次及び三次質構造への寄与に従って分類され得る。保存的置換は、当該技術分野において、１つのアミノ酸の、類似した特性を有する別のアミノ酸への置換として認識される。一部の実施形態において、保存的置換は、当該技術分野において、１つの核酸の、類似する特性を有するか、またはコードされる場合は類似する結合親和性を有する別の核酸への置換として認識される。例示の保存的置換を表１に記載する。
【表１】
2017529396.tif 000003
【００７４】
代替として、保存的アミノ酸は、表２に記載される通り、Ｌｅｈｎｉｎｇｅｒ（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ；Ｗｏｒｔｈ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｉｎｃ．ＮＹ，Ｎ．Ｙ．（１９７５），ｐｐ．７１−７７）に記載される通りに分類することができる。
【表２】
2017529396.tif 000004
【００７５】
代替として、例示の保存的置換を表３に記載する。
【表３】
2017529396.tif 000005
【００７６】
本明細書で用いる場合、「ペプチド」、「ポリペプチド」、及び「タンパク質」という用語は交換可能に使用され、アミド結合または非アミド等価物により共有結合で連結された２つ以上のアミノ酸を指す。本開示のペプチドは、任意の長さであり得る。例えば、ペプチドは、約２〜約１００以上の残基を有してもよく、長さが例えば５〜１２、１２〜１５、１５〜１８、１８〜２５、２５〜５０、５０〜７５、７５〜１００以上等であってもよい。好ましくは、ペプチドは、長さが約２〜約１８残基である。本開示のペプチドはまた、ｌ−及びｄ−異性体、ならびにｌ−及びｄ−異性体の組み合わせを含む。ペプチドは、典型的にはタンパク質の翻訳後処理と関連付けられる修飾、例えば、環化（例えば、ジスルフィドまたはアミド結合）、リン酸化、グリコシル化、カルボキシル化、ユビキチン化、ミリスチル化、または脂質化修飾を含んでもよい。一部の実施形態において、本開示の組成物または薬学的組成物は、表１に示されるＰＩＦ配列のうちの任意の１つまたはそれらの組み合わせと約７０％、約７５％、約７９％、約８０％、約８５％、約８６％、約８７％、約９０％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％以上の相同性を共有する、表１に示される任意のＰＩＦ配列の類似体に関する。一部の実施形態において、ＰＩＦまたはＰＩＦペプチドは、配列番号１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９から選択されるアミノ酸配列、または任意のかかるアミノ酸配列に対して約７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％相同である、その機能的断片を指し得る。一部の実施形態において、ＰＩＦは、配列番号２０に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％相同である配列を含む、それから本質的になる、またはそれからなるアミノ酸配列を指し得る。一部の実施形態において、ＰＩＦは、配列番号２１に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％相同である配列を含む、それから本質的になる、またはそれからなるアミノ酸配列を指し得る。一部の実施形態において、ＰＩＦは、配列番号２２に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％相同である配列を含む、それから本質的になる、またはそれからなるアミノ酸配列を指し得る。一部の実施形態において、ＰＩＦは、配列番号２３に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％相同である配列を含む、それから本質的になる、またはそれからなるアミノ酸配列を指し得る。一部の実施形態において、ＰＩＦは、配列番号２４に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％相同である配列を含む、それから本質的になる、またはそれからなるアミノ酸配列を指し得る。一部の実施形態において、ＰＩＦは、配列番号２５に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％相同である配列を含む、それから本質的になる、またはそれからなるアミノ酸配列を指し得る。一部の実施形態において、ＰＩＦは、配列番号２６に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％相同である配列を含む、それから本質的になる、またはそれからなるアミノ酸配列を指し得る。一部の実施形態において、ＰＩＦは、配列番号２７に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％相同である配列を含む、それから本質的になる、またはそれからなるアミノ酸配列を指し得る。一部の実施形態において、ＰＩＦは、配列番号２８に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％相同である配列を含む、それから本質的になる、またはそれからなるアミノ酸配列を指し得る。一部の実施形態において、ＰＩＦは、配列番号２９に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％相同である配列を含む、それから本質的になる、またはそれからなるアミノ酸配列を指し得る。一部の実施形態において、ＰＩＦ変異体は、ＸＶＺＩＫＰＧＳＡＮＫＰＳＤ、ＸＶＺＩＫＰＧＳＡＮＫＰＳ  ＸＶＺＩＫＰＧＳＡＮＫＰ  ＸＶＺＩＫＰＧＳＡＮＫ  ＸＶＺＩＫＰＧＳＡＮ、ＸＶＺＩＫＰＧＳＡ、ＸＶＺＩＫＰＧＳ、ＸＶＺＩＫＰＧ、ＸＶＺＩＫＰ、ＸＶＺＩＫ、ＸＶＺＩ、ＸＶＺから選択される配列を含み、式中、Ｘは非天然アミノ酸または天然型アミノ酸である。一部の実施形態において、ＰＩＦ変異体は、ＸＶＺＩＫＰＧＳＡＮＫＰＳＤ、ＸＶＺＩＫＰＧＳＡＮＫＰＳ  ＸＶＺＩＫＰＧＳＡＮＫＰ  ＸＶＺＩＫＰＧＳＡＮＫ  ＸＶＺＩＫＰＧＳＡＮ、ＸＶＺＩＫＰＧＳＡ、ＸＶＺＩＫＰＧＳ、ＸＶＺＩＫＰＧ、ＸＶＺＩＫＰ、ＸＶＺＩＫ、ＸＶＺＩ、ＸＶＺから選択される配列を含み、式中、Ｚがアルギニンである場合Ｘはメチオニンではなく、Ｘがメチオニンである場合Ｚはアルギニンではない点を除いて、Ｘは非天然アミノ酸または天然型アミノ酸である。一部の実施形態において、ＰＩＦ類似体または変異体は、合成である、すなわち合成的に作製される。
【００７７】
本明細書に開示されるペプチドは、アミノ酸の構造的類似体及び機能的類似体を有する化合物、例えば、合成もしくは非天然アミノ酸（ノルロイシン等）、またはアミノ酸類似体、または非天然側鎖を有するペプチド模倣物を更に含むが、この模倣物が本開示の化合物と１つ以上の機能または活性を共有することを条件とする。したがって、本開示の化合物は、「模倣物」及び「ペプチド模倣物」形態を含む。本明細書で使用する場合、「非天然側鎖」は、アミノ酸のポリペプチド鎖の骨格を構成しない、α−炭素原子、β−炭素原子、またはγ−炭素原子に共有結合で結合する原子の修飾鎖または合成鎖である。ペプチド類似体は、ノルバリン、ｔｅｒｔ−ブチルグリシン、フェニルグリシン、Ｈｅ、７−アザトリプトファン、４−フルオロフェニルアラニン、Ｎ−メチル−メチオニン、Ｎ−メチル−バリン、Ｎ−メチル−アラニン、サルコシン、Ｎ−メチル−ｔｅｒｔ−ブチルグリシン、Ｎ−メチル−ロイシン、Ｎ−メチル−フェニルグリシン、Ｎ−メチル−イソロイシン、Ｎ−メチル−トリプトファン、Ｎ−メチル−７−アザトリプトファン、Ｎ−メチル−フェニルアラニン、Ｎ−メチル−４−フルオロフェニルアラニン、Ｎ−メチル−トレオニン、Ｎ−メチル−チロシン、Ｎ−メチル−バリン、Ｎ−メチル−リジン、ホモシステイン、及びＴｙｒから選ばれる非天然アミノ酸のうちの１つまたはそれらの組み合わせを含み得、Ｘａａ２は、不在であるか、またはＡｌａ、Ｄ−Ａｌａ、Ｎ−メチル−アラニン、Ｇｌｕ、Ｎ−メチル−グルタメート、Ｄ−Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、サルコシン、ノルロイシン、Ｌｙｓ、Ｄ−Ｌｙｓ、Ａｓｎ、Ｄ−Ａｓｎ、Ｄ−Ｇｌｕ、Ａｒｇ、Ｄ−Ａｒｇ、Ｐｈｅ、Ｄ−Ｐｈｅ、Ｎ−メチル−フェニルアラニン、Ｇｌｎ、Ｄ−Ｇｌｎ、Ａｓｐ、Ｄ−Ａｓｐ、Ｓｅｒ、Ｄ−Ｓｅｒ、Ｎ−メチル−セリン、Ｔｈｒ、Ｄ−Ｔｈｒ、Ｎ−メチル−トレオニン、Ｄ−Ｐｒｏ  Ｄ−Ｌｅｕ、Ｎ−メチル−ロイシン、Ｄ−Ｉｌｅ、Ｎ−メチル−イソロイシン、Ｄ−Ｖａｌ、Ｎ−メチル−バリン、ｔｅｒｔ−ブチルグリシン、Ｄ−ｔｅｒｔ−ブチルグリシン、Ｎ−メチル−ｔｅｒｔ−ブチルグリシン、Ｔｒｐ、Ｄ−Ｔｒｐ、Ｎ−メチル−トリプトファン、Ｄ−Ｔｙｒ、Ｎ−メチル−チロシン、１−アミノシクロプロパンカルボン酸、１−アミノシクロブタンカルボン酸、１−アミノシクロペンタンカルボン酸、１−アミノシクロヘキサンカルボン酸、４−アミノテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−カルボン酸、アミノイソ酪酸、（５）−２−アミノ−３−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）プロパン酸、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｎ−メチル−グルタメート、２−アミノペンタン酸、２−アミノヘキサン酸、２−アミノヘプタン酸、２−アミノオクタン酸、２−アミノノナン酸、２−アミノデカン酸、２−アミノウンデカン酸、２−アミノドデカン酸、オクチルグリシン、トラネキサム酸、アミノ吉草酸、及び２−（２−アミノエトキシ）酢酸からなる群から選択される。アラニンの天然側鎖またはＲ基はメチル基である。一部の実施形態において、本組成物の非天然側鎖は、水素原子のうちの１つ以上が重水素原子によって置き換えられているメチル基である。非天然側鎖については、当該技術分野において以下の刊行物：ＷＯ／２���１３／１７２９５４、ＷＯ２０１３１２３２６７、ＷＯ／２０１４／０７１２４１、ＷＯ／２０１４／１３８４２９、ＷＯ／２０１３／０５０６１５、ＷＯ／２０１３／０５０６１６、ＷＯ／２０１２／１６６５５９、米国出願第２０１５００９４４５７号、Ｍａ，Ｚ．，及びＨａｒｔｍａｎ，Ｍ．Ｃ．（２０１２）．Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｕｎｎａｔｕｒａｌ  Ｃｙｃｌｉｃ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｌｉｂｒａｒｉｅｓ  ｖｉａ  ｍＲＮＡ  Ｄｉｓｐｌａｙ．Ｉｎ  Ｊ．Ａ．Ｄｏｕｔｈｗａｉｔｅ  ＆  Ｒ．Ｈ．Ｊａｃｋｓｏｎ（Ｅｄｓ．），Ｒｉｂｏｓｏｍｅ  Ｄｉｓｐｌａｙ  ａｎｄ  Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ：Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ（ｐｐ．３６７−３９０）．Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ．で開示されており、これら全ては、その全体が参照により組み込まれる。
【００７８】
「模倣物」、「ペプチド模倣物（ｐｅｐｔｉｄｅ  ｍｉｍｅｔｉｃ）」、及び「ペプチド模倣物（ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃ）」という用語は、本明細書では交換可能に使用され、概して、選択された天然ペプチドまたはタンパク質機能ドメイン（例えば、結合モチーフまたは活性部位）の、三次構造の結合構造または活性を模倣するペプチド、部分ペプチド、または非ペプチド分子を指す。これらのペプチド模倣物は、組換えによって、または化学的に修飾されたペプチド、及び小分子薬剤模倣物等の非ペプチド剤を含み、これについては下で更に記載する。「類似体」という用語は、少なくとも１つのα−アミノ酸及び少なくとも１つの非天然アミノ酸を含む任意のポリペプチドを指し、ポリペプチドは、天然に存在する全長ＰＩＦタンパク質と構造的に類似し、類似体がベースとする天然に存在する全長タンパク質の生化学的活性または生物学的活性を共有する。一部の実施形態において、本組成物、薬学的組成物、及びキットは、表４に示されるＰＩＦ配列のうちの任意の１つまたはそれらの組み合わせと、約７０％、約７５％、約７９％、約８０％、約８５％、約８６％、約８７％、約９０％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％以上の相同性を共有するペプチドまたはペプチド模倣物を含み、１つまたは複数のアミノ酸残基が、非天然アミノ酸残基または非天然側鎖を有するアミノ酸残基である。一部の実施形態において、２つのシステイン残基の間にループが形成される、ペプチドまたはペプチド模倣物が提供される。一部の実施形態において、ペプチド模倣物は、天然ペプチドとの多くの類似点、例えば、既知の２０タンパク質新生アミノ酸の中で見出されないアミノ酸側鎖、分子の末端または内部部分の間の環化を生じさせるために使用される非ペプチド系リンカー、メチル基（Ｎ−メチル化）または他のアルキル基によるアミド結合ヒドロゲン部分の置換、化学基または化学治療もしくは酵素治療に耐性のある結合でのペプチド結合の置換、Ｎ末端及びＣ末端修飾、及び非ペプチド性伸長との接合（例えば、ポリエチレングリコール、脂質、炭水化物、ヌクレオシド、ヌクレオチド、ヌクレオシド塩基、様々な小分子、またはリン酸塩もしくは硫酸塩基）を有し得る。本明細書で使用する場合、「環化ペプチド模倣物」または「環化ポリペプチド模倣物」という用語は、その構造の一部として、ループ、架橋部分、及び／または内部結合等の１つ以上の環状特徴を有するペプチド模倣物を指す。本明細書で使用する場合、「架橋部分」という用語は、アミノ酸上の１つの原子または原子の組み合わせを、アミノ酸残基の外側の任意の他の原子に化学的に結合する化学部分を指す。例えば、アミノ酸三次構造の場合、架橋部分は、１つのアミノ酸側鎖を別の連続または非連続アミノ酸側鎖と化学的に結合する化学部分であり得る。
【００７９】
一部の実施形態において、ループが、以下からなる群から選択される架橋部分を含む、ペプチドまたはペプチド模倣物が提供される。
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【００８０】
式中、各Ｘは、独立して、環が２つより多くのＮを含有しないように、ＮまたはＣＨであり、各Ｚは、独立して、結合、ＮＲ、Ｏ、Ｓ、ＣＨ２、Ｃ（Ｏ）ＮＲ、ＮＲＣ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）ｖＮＲ、ＮＲＳ（Ｏ）ｖであり、各ｍは、独立して、０、１、２、及び３から選択され、各ｖｉｓは、独立して、１及び２から選択され、各Ｒは、独立して、Ｈ及びＣ1〜Ｃ6から選択され、各架橋部分は、独立して選択されたＣ0〜Ｃ6スペーサーによってペプチドに接続される。
【００８１】
一部の実施形態において、本開示のＰＩＦペプチドは、２０個の遺伝的にコードされたアミノ酸（即ちＤアミノ酸）の、１つ以上の天然型側鎖を、他の側鎖、例えばアルキル、低級アルキル、環状４−、５−、６−から７員環アルキル、アミド、低級アルキルアミド、ジ（低級アルキル）アミド、低級アルコキシ、ヒドロキシ、カルボキシ、及びそれらの低級エステル誘導体等の基、ならびに４−、５−、６−から７員複素環で置換することにより修飾されて、ペプチド模倣物を生成する。例えば、プロリン類似体は、プロリン残基の環の大きさを、５員から４、６、または７員に変えることで形成され得る。環状基は、飽和であっても不飽和であってもよく、不飽和である場合は、芳香族であっても非芳香族であってもよい。複素環基は、１つ以上の窒素、酸素、及び／または硫黄ヘテロ原子を含有してもよい。かかる基の例としては、フラザニル、フリル、イミダゾリジニル、イミダゾリル、イミダゾリニル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、モルホリニル（例えばモルホリノ）、オキサゾリル、ピペラジニル（例えば、１−ピペラジニル）、ピペリジル（例えば、１−ピペリジル、ピペリジノ）、ピラニル、ピラジニル、ピラゾリジニル、ピラゾリニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリジル、ピリミジニル、ピロリジニル（例えば、１−ピロリジニル）、ピロリニル、ピロリル、チアジアゾリル、チアゾリル、チエニル、チオモルホリニル（例えばチオモルホリノ）、及びトリアゾリルが挙げられる。これらの複素環基は、置換されていても非置換であってもよい。基が置換される場合、その置換基は、アルキル、アルコキシ、ハロゲン、酸素、置換または非置換のフェニルであり得る。ペプチド模倣物はまた、リン酸化、スルホン化、ビオチン化、または他の部分の付加または除去によって化学的に修飾されたアミノ酸残基を有してもよい。
【００８２】
更なる実施形態において、式Ｒ1−Ｒ2−Ｒ3−Ｒ4−Ｒ5−Ｒ6−Ｒ7−Ｒ8−Ｒ9−Ｒ10−Ｒ11−Ｒ12−Ｒ13−Ｒ14−Ｒ15の化合物が提供され、式中、Ｒ1は、ＭｅｔまたはＭｅｔの模倣物であり、Ｒ2は、ＶａｌまたはＶａｌの模倣物であり、Ｒ3は、ＡｒｇもしくはＡｒｇの模倣物、または任意のアミノ酸であり、Ｒ4は、ＩｌｅまたはＩｌｅの模倣物であり、Ｒ5は、ＬｙｓまたはＬｙｓの模倣物であり、Ｒ6は、ＰｒｏまたはＰｒｏの模倣物であり、Ｒ7は、ＧｌｙまたはＧｌｙの模倣物であり、Ｒ8は、ＳｅｒまたはＳｅｒの模倣物であり、Ｒ9は、ＡｌａまたはＡｌａの模倣物であり、Ｒ10は、ＡｓｎまたはＡｓｎの模倣物であり、Ｒ11は、ＬｙｓまたはＬｙｓの模倣物であり、Ｒ12は、ＰｒｏまたはＰｒｏの模倣物であり、Ｒ13は、ＳｅｒまたはＳｅｒの模倣物であり、Ｒ14は、ＡｓｐまたはＡｓｐの模倣物であり、Ｒ15は、ＡｓｐまたはＡｓｐの模倣物である。更なる実施形態において、式Ｒ1−Ｒ2−Ｒ3−Ｒ4−Ｒ5−Ｒ6−Ｒ7−Ｒ8−Ｒ9−Ｒ10を含む化合物が提供され、式中、Ｒ1は、ＳｅｒまたはＳｅｒの模倣物であり、Ｒ2は、ＧｌｎまたはＧｌｎの模倣物であり、Ｒ3は、ＡｌａまたはＡｌａの模倣物であり、Ｒ4は、ＶａｌまたはＶａｌの模倣物であり、Ｒ5は、ＧｌｎまたはＧｌｎの模倣物であり、Ｒ6は、ＧｌｕまたはＧｌｕの模倣物であり、Ｒ7は、ＨｉｓまたはＨｉｓの模倣物であり、Ｒ8は、ＡｌａまたはＡｌａの模倣物であり、Ｒ9は、Ｓｅｒの模倣物であり、Ｒ10は、ＴｈｒまたはＴｈｒの模倣物である。式Ｒ1−Ｒ2−Ｒ3−Ｒ4−Ｒ5−Ｒ6−Ｒ7−Ｒ8−Ｒ9−Ｒ10−Ｒ11−Ｒ12−Ｒ13−Ｒ14−Ｒ15−Ｒ16−Ｒ17−Ｒ18を含む化合物が提供され、式中、Ｒ1は、ＳｅｒまたはＳｅｒの模倣物であり、Ｒ2は、ＧｌｙまたはＧｌｙの模倣物であり、Ｒ3は、ＩｌｅまたはＩｌｅの模倣物であり、Ｒ4は、ＶａｌまたはＶａｌの模倣物であり、Ｒ5は、ＩｌｅまたはＩｌｅの模倣物であり、Ｒ6は、ＴｙｒまたはＴｙｒの模倣物であり、Ｒ7は、ＧｌｎまたはＧｌｎの模倣物であり、Ｒ8は、ＴｙｒまたはＴｙｒの模倣物であり、Ｒ9は、ＭｅｔまたはＭｅｔの模倣物であり、Ｒ10は、ＡｓｐまたはＡｓｐの模倣物であり、Ｒ11は、ＡｓｐまたはＡｓｐの模倣物であり、Ｒ12は、ＡｒｇまたはＡｒｇの模倣物であり、Ｒ13は、ＴｙｒまたはＴｙｒの模倣物であり、Ｒ14は、ＶａｌまたはＶａｌの模倣物であり、Ｒ15は、ＧｌｙまたはＧｌｙの模倣物であり、Ｒ16は、ＳｅｒまたはＳｅｒの模倣物であり、Ｒ17は、ＡｓｐまたはＡｓｐの模倣物であり、Ｒ18は、ＬｅｕまたはＬｅｕの模倣物であり、また式Ｒ1−Ｒ2−Ｒ3−Ｒ4-R−Ｒ5−Ｒ6−Ｒ7−Ｒ8−Ｒ9を含む化合物が提供され、式中、Ｒ1は、ＶａｌまたはＶａｌの模倣物であり、Ｒ2は、ＩｌｅまたはＩｌｅの模倣物であり、Ｒ3は、ＩｌｅまたはＩｌｅの模倣物であり、Ｒ4は、ＩｌｅまたはＩｌｅの模倣物であり、Ｒ5は、ＡｌａまたはＡｌａの模倣物であり、Ｒ6は、ＧｌｎまたはＧｌｎの模倣物であり、Ｒ7は、ＴｙｒまたはＴｙｒの模倣物であり、Ｒ8は、ＭｅｔまたはＭｅｔの模倣物であり、Ｒ9は、ＡｓｐまたはＡｓｐの模倣物である。一部の実施形態において、Ｒ3は、ＡｒｇまたはＡｒｇの模倣物ではない。
【００８３】
対応する天然ペプチドと同じまたは類似の所望の生物学的活性を有するが、溶解性、安定性、及び／または加水分解またはタンパク質分解に対する感受性に関して、当該ペプチドよりも有利な活性を有するペプチド模倣物を構築するのに、様々な技術が利用可能である、（例えば、Ｍｏｒｇａｎ  ＆  Ｇａｉｎｏｒ，Ａｎｎ．Ｒｅｐ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｒｎ，２４，２４３−２５２，１９８９を参照されたい）。ある特定のペプチド模倣化合物は、本開示のペプチドのアミノ酸配列に基づいている。多くの場合、ペプチド模倣化合物は、選択されたペプチドの三次元構造に基づいた、三次元構造（すなわち、「ペプチドモチーフ」）を有する合成化合物である。ペプチドモチーフは、ペプチド模倣化合物に所望の生物学的活性、すなわち、ＰＩＦ受容体への結合を提供し、当該模倣化合物の結合活性は、実質的に低下せず、多くの場合、模倣物がモデルとした天然ペプチドの活性と同一あるいはそれより大きい。ペプチド模倣化合物は、それらの治療への応用を高める更なる特性を有し得、これらの特性としては、例えば向上した細胞透過性、より良好な親和性及び／または結合活性、ならびに延長された生物学的半減期などがある。
【００８４】
ペプチド模倣のデザイン戦略は当該技術分野において容易に入手可能である（例えば、Ｒｉｐｋａ  ＆  Ｒｉｃｈ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｃｈｅｒｎ．Ｂｉｏｉ．２，４４１−４５２，１９９８、Ｈｒｕｂｙ  ｅｔ  ａｌ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｉ．１，１１４−１１９，１９９７、Ｈｒｕｂｙ  ＆  Ｂａｉｓｅ，Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｒｎ．９，９４５−９７０，２０００を参照されたい）。ペプチド模倣物の一つのクラスは、部分的または完全に非ペプチドであるが、原子対原子でペプチド主鎖を模倣し、同様に天然アミノ酸残基の側鎖基の機能を模倣する側鎖基を含む、主鎖である。いくつかのタイプの化学結合、例えば、エステル、チオエステル、チオアミド、レトロアミド、還元したカルボニル、ジメチレン、及びケトメチレン結合は、プロテアーゼ耐性ペプチド模倣物の構築におけるペプチド結合にとって概して有用な代替物であることが当該技術分野において既知である。ペプチド模倣物の別のクラスは、別のペプチドまたはタンパク質に結合するが、必ずしも天然ペプチドの構造的模倣物ではない、非ペプチド小分子を含む。更に別のクラスのペプチド模倣物が、コンビナトリアルケミストリー、及び大規模な化合物ライブラリーの生成から生じている。これらは、天然ペプチドとは構造的に無関係であるものの、非ペプチド足場上に配置されて、元のペプチドの「地形学的（ｔｏｐｏｇｒａｐｈｉｃａｌ）」模倣体として機能する、必要な官能基を保有する新規のテンプレートを概して有する（Ｒｉｐｋａ  ＆  Ｒｉｃｈ，１９９８、上記）。
【００８５】
ｎＰＩＦ（配列番号１）と呼ばれる、特定された第１の天然ＰＩＦ化合物は、１５アミノ酸ペプチドである。このペプチドの合成版、ｓＰＩＦ（配列番号１３）は、天然ペプチド、ｎＰＩＦ（配列番号Ｉ）に類似した活性を示した。このペプチドは、マラリア寄生虫であるスポロゾイト周囲タンパク質の小領域に相同である。第２のＰＩＦペプチド（配列番号７）は、１３アミノ酸を含み、受容体相互作用因子（ＳＭＲＴ）として特定される、甲状腺及びレチノイン酸転写共抑制因子と呼ばれる巨大タンパク質の短部分と相同性を共有し、この合成版は、ｓＰＩＦ−２（配列番号１４）である。大３の別個のペプチド、ｎＰＩＦ−３（配列番号１０）は、１８アミノ酸からなり、逆転写の小部分に一致し、このペプチドの合成版は、ｓＰＩＦ−３（配列番号１５）である。ｎＰＩＦ−４（配列番号１２）は、逆転写酵素の小部分と相同性を共有する。
【００８６】
天然及び合成両方のＰＩＦペプチドのリストが、下の表４に提供される。様々なＰＩＦペプチド及びスクランブルしたＰＩＦペプチドに対する抗体も提供されている。
【表４】
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【００８７】
本開示の一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドが提供される。かかるＰＩＦペプチドは、急性放射線症候群（ＡＲＳ）、急性放射線被ばくの遅発効果、またはそれに関連する病態に有用であり得る。
【００８８】
別の実施形態において、ＰＩＦペプチドを含む薬学的組成物が提供される。一部の実施形態において、薬学的組成物は、治療有効量のＰＩＦペプチドまたはその薬学的に許容される塩を含む。一部の実施形態において、薬学的組成物は、表４の配列識別子のうちのいずれか１つ以上を含むペプチドを含まない。一部の実施形態において、薬学的組成物は、配列番号１を含むか、またはそれからなるペプチドを含まない。
【００８９】
別の実施形態において、急性放射線症候群、急性放射線被ばくの遅発効果、またはそれに関連する病態を治療する方法が提供される。好ましい実施形態において、この方法は、有効量のＰＩＦペプチドを、それを必要とする対象に投与することを含む。
【００９０】
更なる実施形態において、有効量のＰＩＦペプチドを、１つ以上の免疫療法、抗てんかん薬、利尿薬、または降圧薬もしくは化合物と併せて、それを必要とする対象に投与することを含む、ＡＲＳを治療するための方法が提供される。かかる組み合わせは、いずれかの成分単独の治療の効果を増強し得るか、またはより少ない副作用をもたらし得る、及び／またはより低い用量のいずれかの成分をもたらし得る。
【００９１】
ＰＩＦ−１の作用は、ＴＣＲ、カルシウムチャネル、またはＰＫＣ経路、大部分の免疫抑制剤が作用する機序、及び様々な自己免疫疾患に関連するＣＤ４＋／ＣＤ２５＋細胞（Ｔ  ｒｅｇ）から独立しているように思われる。一方で、ＰＩＦ−１の作用は、ＮＦＡＴ−１抑制に関与し得る。
【００９２】
最後に、新規の胚由来ペプチド、ＰＩＦは、短期間治療に続いて、低用量で寛容原性状態を創出し、いくつかの別個の深刻な自己免疫モデルにおいて長期的な保護につながる。この効果は、明らかな毒性なしに発揮される。
【００９３】
指定された適応症の治療的処置のために、ＰＩＦペプチドがそのように投与され得るか、または非経口、経皮、直腸、鼻腔、局所静脈投与、または好ましくは経口投与のための単位投薬形態で薬学的組成物に化合及び製剤化され得る。かかる薬学的組成物は、当該技術分野において周知の様式で調製され、薬学的担体と共に、少なくとも１種の活性ＰＩＦペプチドを含む。本明細書全体にわたって使用するとき、「活性化合物」という用語は、化学式の化合物またはそれらの薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物を指す。
【００９４】
かかる組成物において、活性化合物は、「活性成分」として知られている。組成物を作製することにおいて、活性成分は、通常は担体と混合されるか、または担体によって希釈されるか、またはカプセル、小袋、紙、もしくは他の容器の形態であり得る担体内に封入される。担体が希釈剤として機能する場合、活性成分のためのビヒクル、賦形剤、または媒質として作用する固体、半固体、または液体材料であってもよい。したがって、組成物は、錠剤、ピル、粉末、トローチ、小袋、カシェット、乳液、エマルジョン、溶液、シロップ、懸濁液、軟質及び硬質ゼラチンカプセル、滅菌注入溶液、及び滅菌パッケージ化粉末の形態であり得る。
【００９５】
「薬学的調製物」及び「薬学的組成物」という用語は、哺乳動物、例えば、ヒトへの投与に適した調製物を含む。本開示の化合物が医薬品として哺乳動物、例えば、ヒトに投与される場合、それらは、そのままで、または例えば、約０．１〜約９９．５％の活性成分を、薬学的に許容される担体と併せて含有する薬学的組成物として付与され得る。
【００９６】
「薬学的に許容される」という表現は、生理的に耐性があり、ヒトに投与された場合、典型的に、アレルギー反応または同様の不都合な反応、例えば急性胃蠕動、眩暈等を生成しない分子実体及び組成物を指す。好ましくは、本明細書で使用する場合、「薬学的に許容される」という用語は、連邦もしくは州政府の規制当局によって承認されたか、または動物及びより具体的にはヒトにおける使用のための、米国薬局方もしくは他の一般に認識される薬局方に列挙されることを意味する。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチド、模倣物、またはその薬学的に許容される塩、及び少なくとも１つの薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物。
【００９７】
「薬学的に許容される担体」という表現は、当該技術分野において認識され、本開示の化合物を哺乳動物に投与するのに適した薬学的に許容される材料、組成物、またはビヒクルを含む。担体としては、対象薬剤を１つの臓器または身体部分から別の臓器または身体部分へと運ぶまたは輸送することに関与する、液体または固体充填剤、希釈剤、賦形剤、溶媒、またはカプセル化材料が挙げられる。各担体は、製剤の他の成分と適合可能であるという意味で、「許容され」なければならず、患者に有害であってはならない。薬学的に許容される担体として機能し得る材料のいくつかの例としては、ラクトース、グルコース、及びスクロース等の糖；トウモロコシデンプン及びジャガイモデンプン等のデンプン；カルボキシメチルセルロース、エチルセルロース、及び酢酸セルロース等のセルロース及びその誘導体；粉末状トラガカント；麦芽；ゼラチン；タルク；ココアバター及び坐薬蝋等の賦形剤；ピーナッツ油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、コーン油、及び大豆油等の油；プロピレングリコール等のグリコール；グリセリン、ソルビトール、マンニトール、及びポリエチレングリコール等のポリオール；オレイン酸エチル及びラウリン酸エチル等のエステル；アガー；水酸化マグネシウム及び水酸化アルミニウム等の緩衝剤；アルギニン酸；パイロジェンを含まない水；等張生理食塩水；リンガー溶液；エチルアルコール；リン酸緩衝溶液；ならびに薬学的製剤中で用いられる他の非毒性適合性物質が挙げられる。好適な薬学的担体は、Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎによる″Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ′ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ″に記載され、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。一部の実施形態において、この薬学的に許容される担体は、無菌であり、かつ発熱物質を含まない水である。一部の実施形態において、この薬学的に許容される担体はリンゲルラクテートであり、これは乳酸リンゲル液として知られる場合もある。
【００９８】
湿潤剤、乳化剤、及び潤沢剤、例えば、ラウリル硫酸ナトリウム及びステアリン酸マグネシウム、ならびに着色剤、剥離剤、コーティング剤、甘味剤、香味剤、及び芳香剤、保存剤、及び抗酸化剤もまた、組成物中に存在し得る。
【００９９】
薬学的に許容される抗酸化剤の例としては、アスコルビン酸、塩酸システイン、重硫酸ナトリウム、メタ重硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウム等の水溶性抗酸化剤；パルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、レシチン、没食子酸プロピル、α−トコフェロール等の油溶性抗酸化剤；及びクエン酸、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ソルビトール、酒石酸、リン酸等の金属キレート剤が挙げられる。
【０１００】
本開示の製剤は、経口、鼻腔、局所、頬、舌下、直腸、膣、及び／または非経口投与に適したものを含む。これらの製剤は、便宜的に単位投薬形態で提示されてもよく、調剤の分野において周知の任意の方法によって調製され得る。単一投薬形態を生成するために担体材料と組み合わされ得る活性成分の量は、一般に、治療効果をもたらす化合物の量となる。一般に、１００パーセントのうち、この量は、活性成分の約１パーセント〜約９９パーセント、好ましくは約５パーセント〜約７０パーセント、最も好ましくは約１０パーセント〜約３０パーセントの範囲となる。
【０１０１】
好適な担体、賦形剤、及び希釈剤の一部の例としては、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、デンプン、アカシアガム、アルギニン酸リン酸カルシウム、サリチル酸カルシウム、微結晶セルロース、ポリビニルピロリドン、セルロース、トラガカント、ゼラチン、シロップ、メチルセルロース、メチル及びプロピルヒドロキシ安息香酸塩、タルク、ステアリン酸マグネシウム、水、及び鉱物油が挙げられる。製剤は、追加として、潤沢剤、湿潤剤、乳化剤、及び懸濁剤、保存剤、甘味剤、または香味剤を含み得る。組成物は、当該技術分野において周知の手順を用いることによる患者への投与後に、活性成分の迅速、持続、または遅延放出をもたらすように製剤化され得る。
【０１０２】
経口投与の場合、化合物は、担体及び希釈剤と混和され得るか、錠剤に成形され得るか、またはゼラチンカプセルに封入され得る。混合物は、代替として、１０％水性グルコース溶液、等張生理食塩水、滅菌水等の液体に溶解され、静脈内に、または注入によって投与され得る。
【０１０３】
免疫障害の治療のための阻害量の活性化合物の局所送達は、標的部位に、またはその付近に化合物を投与する様々な技法によって行われ得る。局所送達技法の例は、限定することを意図しないが、使用可能な技法の例示である。例としては、局所送達カテーテル、部位特異的担体、留置剤、直接注入、または直接適用、例えば、局所適用が挙げられる。
【０１０４】
留置剤による局所送達は、罹患した部位に薬剤を収容するマトリックスの外科的配置を説明する。留置されたマトリックスは、拡散、化学反応、または溶媒活性剤によって薬剤を放出する。
【０１０５】
例えば、いくつかの態様において、本開示は、ＰＩＦペプチド及び薬学的に許容される担体もしくは希釈剤を含む薬学的組成物、または有効量の、ＰＩＦペプチドを含む薬学的組成物を対象とする。
【０１０６】
投与の具体的形態は、徴候に左右される。特定の投与経路及び用量レジメンの選択は、最適な臨床応答を得るために、臨床医に既知の方法に従って、臨床医によって調整または用量決定されるべきである。投与される化合物の量は、治療上有効な量である。投与されるべき投与量は、治療される対象の特徴、例えば、治療される特定の哺乳動物またはヒト、年齢、体重、健康状態、併用治療があればその種類、及び治療の頻度に左右され、当業者により（例えば、臨床医により）容易に決定され得る。
【０１０７】
本開示の化合物及び好適な担体を含有する医薬製剤は、本開示のポリマーまたはコポリマーを有効量含む、固体剤形（錠剤、カプセル剤、カシェ剤、ペレット、丸剤、粉末、及び顆粒剤を含むが、これらに限定されない）、局所用剤形（溶液、粉末、液体エマルジョン、液体懸濁液、半固体、軟膏、ペースト、クリーム、ゲル、ゼリー、及び発泡体を含むが、これらに限定されない）、ならびに非経口用剤形（溶液、懸濁液、エマルジョン、及び乾燥粉末を含むが、これらに限定されない）であり得る。活性成分は、かかる製剤中に、薬学的に許容される希釈剤、充填剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、界面活性剤、疎水性ビヒクル、水溶性ビヒクル、乳化剤、緩衝剤、湿潤剤、保湿剤、可溶化剤、防腐剤等と共に含有され得ることも当該技術分野において既知である。投与のための手段及び方法は当該技術分野において公知であり、当業者は手引きとして様々な薬理学の参考文献を参照し得る。例えば、Ｍｏｄｅｒｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ，Ｂａｎｋｅｒ  ＆  Ｒｈｏｄｅｓ，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．（１９７９）；  及び  Ｇｏｏｄｍａｎ  ＆  Ｇｉｌｍａｎ’ｓ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，６ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，ＭａｃＭｉｌｌａｎ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９８０）を参考にし得る。
【０１０８】
本開示の化合物は、例えば大量瞬時注射または持続注入による、非経口投与用に製剤化されてもよい。本化合物は、所定の期間にわたって、皮下持続注入によって投与されてもよい。注射用製剤は、防腐剤を添加して、単位剤形、例えばアンプルで提示されてもよく、または複数回投与容器で提示されてもよい。本組成物は、懸濁液、溶液、または油性もしくは水性ビヒクル中のエマルジョン等の形態をとることができ、懸濁化剤、安定化剤、及び／または分散剤等の製剤化剤（ｆｏｒｍｕｌａｔｏｒｙ  ａｇｅｎｔ）を含有してもよい。
【０１０９】
本化合物は、経口投与用に、これらの化合物を当該技術分野において周知の薬学的に許容される担体と組み合わせることにより、容易に製剤化し得る。かかる担体は、本開示の化合物を、治療される患者による経口摂取用に、錠剤、丸剤、糖衣錠、カプセル、液体、ゲル、シロップ、スラリー、懸濁液等として製剤化し得る。経口用の医薬調製物は、固体の賦形剤を添加して、任意に、得られた混合物を粉砕し、必要に応じて、適切な補助剤を添加後、顆粒の混合物を処理して、錠剤または糖衣錠の芯剤を得ることで得られる。好適な賦形剤としては、充填剤、例えばラクトース、スクロース、マンニトール、及びソルビトールを含むがこれらに限定されない糖類；トウモロコシ澱粉、小麦澱粉、米澱粉、馬鈴薯澱粉、ゼラチン、トラガカントゴム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、及びポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）を含むがこれらに限定されないセルロース調製物等が挙げられるが、これらに限定されない。所望される場合、例えば架橋ポリビニルピロリドン、寒天、またはアルギン酸またはアルギン酸ナトリウム等のその塩等の崩壊剤が添加され得るが、これらに限定されない。
【０１１０】
糖衣錠芯剤は、好適なコーティングを提供され得る。この目的のために、濃縮糖溶液を使用することができ、これは任意に、アラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、カルボポールゲル、ポリエチレングリコール、及び／または二酸化チタン、ラッカー溶液、ならびに好適な有機溶媒または溶媒混合物を含有し得る。染料または顔料を、識別用または活性化合物の用量の異なる組み合わせを特徴付けるために、錠剤または糖衣錠コーティングに添加してもよい。
【０１１１】
経口で使用できる医薬調製物としては、ゼラチン製のプッシュ−フィットカプセル、ならびにゼラチン及びグリセロールまたはソルビトール等の可塑剤で構成される軟質秤量カプセル剤（ｓｏｆｔ，ｓｃａｌｅｄ  ｃａｐｓｕｌｅ）が挙げられるが、これらに限定されない。プッシュ−フィットカプセルは、活性成分を、例えばラクトース等の充填剤、例えば澱粉等の結合剤、及び／または例えばタルクもしくはステアリン酸マグネシウム等の滑沢剤、ならびに任意に安定化剤と混和させて含有し得る。軟質カプセルでは、活性化合物は、脂肪油、流動パラフィン、または液体ポリエチレングリコール等の好適な液体中に溶解または懸濁させ得る。加えて、安定化剤を添加してもよい。経口投与のための全ての製剤は、かかる投与にとって好適な投与量であるべきである。
【０１１２】
口腔投与用には、本組成物は、従来型の様式で製剤化された、例えば錠剤またはロゼンジの形態を取り得る。
【０１１３】
吸入による投与用には、本開示に従って使用するための化合物は、加圧パックまたは噴霧器からエアロゾルスプレーのプレゼンテーション（実射）形態で、好適な噴射剤、例えばジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素、または他の好適な気体を使用することで、簡便に送達される。加圧エアロゾルの場合、投与量単位は、計量された量を送達するためのバルブを提供することで決定することができる。吸入器（ｉｎｈａｌｅｒ）または注入器（ｉｎｓｕｆｆｌａｔｏｒ）で使用する、例えば、ゼラチンのカプセル及びカートリッジは、本化合物とラクトースまたは澱粉等の好適な粉末基剤との粉末混合物を含有するよう製剤化し得る。
【０１１４】
本開示の化合物はまた、例えば、ココアバターまたは他のグリセリド等の従来型の坐剤基剤を含有する、坐剤または停留浣腸剤等の直腸用組成物に製剤化されてもよい。
【０１１５】
先述の製剤に加えて、本開示の化合物はまた、持続性（デポー）調製物として製剤化することもできる。かかる長時間作用性製剤は、移植（例えば、皮下または筋肉内）または筋肉内注射によって投与し得る。
【０１１６】
デポー注射は約１〜約６箇月またはそれ以上の間隔で投与し得る。したがって、例えば、本化合物は、好適なポリマー性または疎水性材料（例えば許容される油中のエマルジョンとして）またはイオン交換樹脂と共に、あるいは難溶性誘導体、例えば難溶性塩として製剤化され得る。
【０１１７】
経皮投与においては、本開示の化合物は、例えば、プラスターに適用されてもよく、または結果的に当該生物に供給される経皮治療システムによって適用されてもよい。
【０１１８】
本化合物の医薬組成物はまた、好適な固相またはゲル相担体または賦形剤を含み得る。かかる担体または賦形剤の例としては、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、様々な糖類、澱粉、セルロース誘導体、ゼラチン、及び例えばポリエチレングリコール等のポリマーが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１９】
経口投与の場合、類似体は、薬学的に許容される非経口ビヒクルと併せて、例えば、溶液、懸濁液、エマルジョン、または凍結乾燥粉末として製剤化され得る。かかるビヒクルの例は、水、生理食塩水、リンガー溶液、デキストロース溶液、及び５％ヒト血清アルブミンである。リポソーム及び非水性ビヒクル、例えば、固定油が使用されてもよい。ビヒクルまたは凍結乾燥粉末は、等張性（例えば、塩化ナトリウム、マンニトール）及び化学安定性（例えば、緩衝剤及び保存剤）を維持する添加剤を含有してもよい。製剤は、一般に使用される技法によって滅菌される。例えば、注入による投与に適した非経口組成物は、１．５重量％の類似体を０．９％塩化ナトリウム溶液に溶解することによって調製される。
【０１２０】
本開示は、筋内、舌下、静脈内、腹腔内、髄腔内、膣内、尿道内、皮内、頬内、吸入経由、噴霧器経由、及び皮下注入経由を含む、投与経路に関する。代替として、薬学的組成物は、様々な手段によって、個体から除去される細胞に導入され得る。かかる手段としては、例えば、微粒子銃、及びリポソームまたは他のナノ粒子デバイスが挙げられる。
【０１２１】
経口投与のための固体投薬形態としては、カプセル、錠剤、ピル、粉末、及び顆粒が挙げられる。固体投薬形態において、類似体は、一般に、少なくとも１つの不活性な薬学的に許容される担体、例えば、スクロース、ラクトース、デンプン、または他の一般に安全と認められる（ＧＲＡＳ）添加剤と混和される。かかる投薬形態は、通常の実践と同様に、不活性な希釈剤以外の追加の物質、例えば、マグネシウムステート等の潤沢剤を含むこともできる。カプセル、錠剤、及びピルの場合、投薬形態は、緩衝剤を含んでもよい。錠剤及びピルは、追加として、当該技術分野において既知の技法を使用して、腸溶性コーティングと共に、または制御放出形態で調製され得る。
【０１２２】
経口投与のための液体投薬形態は、水等の当該技術分野において一般に使用される不活性な希釈剤を含有するエリキシルを含む、薬学的に許容されるエマルジョン、溶液、懸濁液、及びシロップが挙げられる。これらの組成物は、１つ以上の補助剤、例えば、湿潤剤、乳化剤、懸濁剤、甘味剤、香味剤、または芳香剤を含むこともできる。
【０１２３】
本発明の別の実施形態において、本発明の組成物を使用して、Ｉ型成人または若年性糖尿病、多発性硬化症、クローン病、または自己免疫肝炎に罹患しているか、または罹患し易い患者を治療する。
【０１２４】
当業者であれば、適切な投薬量の組成物及び薬学的組成物が、治療される個体及び目的に応じて異なり得ることを認識するであろう。例えば、個々の患者の年齢、体重、及び病歴が、治療の治療効果に影響を及ぼし得る。更に、より低い投薬量の組成物は、症状の一時的な停止をもたらすために必要とされ得る一方、より大きな用量は、疾患、障害、または適応症と関連付けられる症状の完全停止をもたらすために必要とされ得る。有能な医師は、これらの因子を考慮し、投薬レジメンを調製して、用量が過剰な実験なしに所望の治療転帰を達成することを保証することができる。臨床医及び／または治療医は、個々の患者の応答と併せて、いつどのように治療を中断、調整、及び／または終了するかが分かるであろう。投薬量はまた、薬学的組成物のために選択される特定の類似体の強度に依存し得る。
【０１２５】
組成物または薬学的組成物の用量は異なり得る。組成物の用量は、１日１回であり得る。一部の実施形態において、１日当たり複数用量が対象に投与されてもよい。一部の実施形態において、総投薬量は、少なくとも２つの適用期間で投与される。一部の実施形態において、この期間は、１時間、１日、１ヶ月、１年、１週間、または２週間の期間であり得る。本発明の追加の実施形態において、総投薬量は、２つ以上の別個の適用期間で、または別個の用量で１時間、１日、１ヶ月、１年、１週間、または２週間の期間にわたって投与される。
【０１２６】
一部の実施形態において、対象は、対象の重量１ｋｇ当たり約０．０００１ｍｇ〜約５０００ｍｇの日用量範囲で本組成物が提供されるように、本組成物を投与され得る。対象に投与される用量はまた、１日当たりで投与される、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩の総量の観点から測定されてもよい。一部の実施形態において、対象は、１日当たり約０．００１〜約３０００ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１日当たり最大約２０００ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１日当たり最大約１８００ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１日当たり最大約１６００ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１日当たり最大約１４００ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１日当たり最大約１２００ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１日当たり最大約１０００ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１日当たり最大約８００ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１回の用量当たり約０．００１ミリグラム〜約７００ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１回の用量当たり最大約７００ミリグラムの、ＰＩＦペプチドまたはＰＩＦ類似体を投与される。一部の実施形態において、対象は、１回の用量当たり最大約６００ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１回の用量当たり最大約５００ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１回の用量当たり最大約４００ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１回の用量当たり最大約３００ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１回の用量当たり最大約２００ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１回の用量当たり最大約１００ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１回の用量当たり最大約５０ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩を投与される。
【０１２７】
一部の実施形態において、対象は、対象の重量１ｋｇ当たり約０．０００１ｍｇ〜約５０００ｍｇの日用量範囲で、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩を含む本組成物が投与されるように、本組成物を投与され得る。一部の実施形態において、ＰＩＦ類似体またはその薬学的に許容される塩を含む本組成物は、対象の重量１ｋｇ当たり最大約４５０ｍｇの日用量で投与される。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩を含む本組成物は、対象の重量１ｋｇ当たり最大約４００ｍｇの日用量で投与される。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩を含む本組成物は、対象の重量１ｋｇ当たり最大約３５０ｍｇの日用量で投与される。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩を含む本組成物は、対象の重量１ｋｇ当たり最大約３００ｍｇの日用量で投与される。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩を含む本組成物は、対象の重量１ｋｇ当たり最大約２５０ｍｇの日用量で投与される。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩を含む本組成物は、対象の重量１ｋｇ当たり最大約２００ｍｇの日用量で投与される。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩を含む本組成物は、対象の重量１ｋｇ当たり最大約１５０ｍｇの日用量で投与される。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩を含む本組成物は、対象の重量１ｋｇ当たり最大約１００ｍｇの日用量で投与される。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩を含む本組成物は、対象の重量１ｋｇ当たり最大約５０ｍｇの日用量で投与される。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩を含む本組成物は、対象の重量１ｋｇ当たり最大約２５ｍｇの日用量で投与される。
【０１２８】
一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩を含む本組成物は、対象の重量１ｋｇ当たり最大約１０ｍｇの日用量で投与される。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩を含む本組成物は、対象の重量１ｋｇ当たり最大約５ｍｇの日用量で投与される。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩を含む本組成物は、対象の重量１ｋｇ当たり最大約１ｍｇの日用量で投与される。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩を含む本組成物は、対象の重量１ｋｇ当たり最大約０．１ｍｇの日用量で投与される。
【０１２９】
一部の実施形態において、ＰＩＦ類似体またはその薬学的に許容される塩を含む本組成物は、対象の重量１ｋｇ当たり最大約０．０１ｍｇの日用量で投与される。一部の実施形態において、ＰＩＦ類似体またはその薬学的に許容される塩を含む本組成物は、対象の重量１ｋｇ当たり最大約０．００１ｍｇの日用量で投与される。対象に投与される用量はまた、１日当たりで投与される、ＰＩＦペプチドまたはＰＩＦ類似体の総量の観点から測定されてもよい。
【０１３０】
一部の実施形態において、それを必要とする対象は、１日当たり約１ｎｇ〜約５００μｇの類似体またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、それを必要とする対象は、１日当たり約１ｎｇ〜約１０ｎｇの類似体またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、それを必要とする対象は、１日当たり約１０ｎｇ〜約２０ｎｇの類似体またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、それを必要とする対象は、１日当たり約１０ｎｇ〜約１００ｎｇの類似体またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、それを必要とする対象は、１日当たり約１００ｎｇ〜約２００ｎｇの類似体またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、それを必要とする対象は、１日当たり約２００ｎｇ〜約３００ｎｇの類似体またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、それを必要とする対象は、１日当たり約３００ｎｇ〜約４００ｎｇの類似体またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、それを必要とする対象は、１日当たり約４００ｎｇ〜約５００ｎｇの類似体またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、それを必要とする対象は、１日当たり約５００ｎｇ〜約６００ｎｇの類似体またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、それを必要とする対象は、１日当たり約６００ｎｇ〜約７００ｎｇの類似体またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、それを必要とする対象は、１日当たり約８００ｎｇ〜約９００ｎｇの類似体またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、それを必要とする対象は、１日当たり約９００ｎｇ〜約１μｇの類似体またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、それを必要とする対象は、１日当たり約１μｇ〜約１００μｇの類似体またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、それを必要とする対象は、１日当たり約１００μｇ〜約２００μｇの類似体またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、それを必要とする対象は、１日当たり約２００μｇ〜約３００μｇの類似体またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、それを必要とする対象は、１日当たり約３００μｇ〜約４００μｇの類似体またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、それを必要とする対象は、１日当たり約４００μｇ〜約５００μｇの類似体またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、それを必要とする対象は、１日当たり約５００μｇ〜約６００μｇの類似体またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、それを必要とする対象は、１日当たり約６００μｇ〜約７００μｇの類似体またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、それを必要とする対象は、１日当たり約８００μｇ〜約９００μｇの類似体またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、それを必要とする対象は、１日当たり約９００μｇ〜約１ｍｇの類似体またはその薬学的塩を投与される。
【０１３１】
一部の実施形態において、それを必要とする対象は、１日当たり約０．０００１〜約３０００ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１日に最大約２０００ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１日当たり最大約１８００ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１日当たり最大約１６００ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１日当たり最大約１４００ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１日当たり最大約１２００ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１日当たり最大約１０００ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１日当たり最大約８００ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１回の用量当たり約０．０００１ミリグラム〜約７００ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１回の用量当たり最大約７００ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１回の用量当たり最大約６００ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１回の用量当たり最大約５００ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１回の用量当たり最大約４００ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１回の用量当たり最大約３００ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１回の用量当たり最大約２００ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１回の用量当たり最大約１００ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１回の用量当たり最大約５０ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１回の用量当たり最大約２５ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１回の用量当たり最大約１５ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩を投与される。
【０１３２】
一部の実施形態において、対象は、１回の用量当たり最大約１０ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１回の用量当たり最大約５ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１回の用量当たり最大約１ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１回の用量当たり最大約０．１ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩を投与される。一部の実施形態において、対象は、１回の用量当たり最大約０．００１ミリグラムの、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩を投与される。
【０１３３】
対象に投与される用量はまた、調製される液体１オンス当たりの、投与されるＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩の総量の観点から測定されてもよい。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩は、溶液１オンス当たり約２．５グラムの濃度である。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩は、溶液１オンス当たり約２．２５グラムの濃度である。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩は、溶液１オンス当たり約２．２５グラムの濃度である。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩は、溶液１オンス当たり約２．０グラムの濃度である。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩は、溶液１オンス当たり約１．９グラムの濃度である。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩は、溶液１オンス当たり約１．８グラムの濃度である。一部の実施形態において、ＰＩＦ類似体またはその薬学的塩は、溶液１オンス当たり約１．７グラムの濃度である。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩は、溶液１オンス当たり約１．６グラムの濃度である。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩は、溶液１オンス当たり約１．５グラムの濃度である。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩は、溶液１オンス当たり約１．４グラムの濃度である。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩は、溶液１オンス当たり約１．３グラムの濃度である。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩は、溶液１オンス当たり約１．２グラムの濃度である。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩は、溶液１オンス当たり約１．１グラムの濃度である。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩は、溶液１オンス当たり約１．０グラムの濃度である。
【０１３４】
一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩は、溶液１オンス当たり約０．９グラムの濃度である。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩は、溶液１オンス当たり約０．８グラムの濃度である。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩は、溶液１オンス当たり約０．７グラムの濃度である。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩は、溶液１オンス当たり約０．６グラムの濃度である。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩は、溶液１オンス当たり約０．５グラムの濃度である。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩は、溶液１オンス当たり約０．４グラムの濃度である。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩は、溶液１オンス当たり約０．３グラムの濃度である。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩は、溶液１オンス当たり約０．２グラムの濃度である。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩は、溶液１オンス当たり約０．１グラムの濃度である。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩は、溶液１オンス当たり約０．０１グラムの濃度である。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩は、調製される溶液１オンス当たり約０．００１グラムの濃度である。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩は、調製される溶液１オンス当たり約０．０００１グラムの濃度である。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩は、調製される溶液１オンス当たり約０．００００１グラムの濃度である。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドもしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的塩は、調製される溶液１オンス当たり約０．０００００１グラムの濃度である。
【０１３５】
投薬量は、調製される液体製剤の１リットル当たりの類似体の質量に関して測定され得る。当業者であれば、治療を必要とする対象の治療と関連付けられる、任意の上述の障害を治療または予防するために所望される生体活性の強度に応じて、用量中の類似体の濃度を増加または減少させることができる。例えば、本発明の一部の実施形態は、５ｍＬの液体製剤当たり最大０．００００１グラムの類似体、及び５ｍＬの液体製剤当たり最大約１０グラムの類似体を含み得る。
【０１３６】
一部の実施形態において、請求される発明の薬学的組成物は、ＰＩＦペプチド以外の少なくとも１つまたは複数の活性剤、その薬学的に許容される塩の類似体を含む。一部の実施形態において、活性剤は、任意に、プロテアーゼ開裂可能なリンカー（Ｐｒｏ−Ｐｒｏまたはシツリン−バリン  ジ−α−アミノ酸リンカー）によって本明細書に開示されるＰＩＦペプチドまたはＰＩＦ類似体に共有結合される。一部の実施形態において、１つまたは複数の活性剤は、抗炎症性化合物、α−アドレナリン作動性作動薬、抗不整脈化合物、鎮痛性化合物、及び麻酔性化合物から選択される化合物のうちの１つまたは組み合わせである。
【表５】
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2017529396.tif 000011
【０１３７】
本開示の化合物は、他の活性成分、例えば、補助剤、または他の適合性薬物もしくは化合物等と組み合わせて投与することもでき、かかる組み合わせは、本明細書に記載される方法の所望の効果を達成することにおいて望ましいか、または有利であるように思われる。ＰＩＦペプチドを、移植前に任意の細胞、組織、または臓器に曝露するとき、曝露は、約１〜約１２時間の間であってもよい。一部の実施形態において、ＰＩＦを、移植前に予備馴化細胞に曝露するステップは、約２〜約４時間である。一部の実施形態において、ＰＩＦを、移植前に予備馴化細胞に曝露するステップは、約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２時間以上である。一部の実施形態において、ＰＩＦを、移植前に臓器、組織、または細胞に曝露するステップは、移植前の約１時間〜約４８時間の間で起こる。一部の実施形態において、ＰＩＦを、移植が起こる前に臓器、組織、または細胞に曝露するステップは、移植が起こる前の約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１５、２０、２５、３５、４５、または約５０時間である。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、臓器、組織、または細胞の生存度を増加させ、良好な移植の可能性を増加させ、受容者の許容を低減するのに十分な時間及び条件下において臓器、組織、または細胞に曝露される。一部の実施形態において、臓器、組織、または細胞は、本明細書に開示される薬学的組成物のうちの１つまたは組み合わせに、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０以上にわたって、及び／またはほぼ室温で曝露される。一部の実施形態において、臓器、組織、または細胞は、本明細書に開示される薬学的組成物のうちの１つまたは組み合わせに、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０以上にわたって、及び／または約４℃で曝露される。一部の実施形態において、臓器、組織、または細胞は、本明細書に開示される薬学的組成物のうちの１つまたは組み合わせに、約４℃〜約４０℃で曝露される。
【０１３８】
本明細書で使用する場合、「急性放射線症候群」及び「急性放射線病」という用語は、致死線量または亜致死線量の放射線被ばくと関連付けられる任意の急性または慢性症状を指すように交換可能に使用され得る。
【０１３９】
本明細書で使用する場合、「島細胞」という用語は、膵臓の任意のホルモン生成領域からの細胞を指す。
【０１４０】
本明細書で使用する場合、「造血細胞」という用語は、任意の型の血球を生物内で生じ得る任意の細胞を指す。一部の実施形態において、造血細胞は、造血幹細胞である。一部の実施形態において、造血細胞は、血球に分化することができる多能性前駆細胞である。一部の実施形態において、造血細胞は、骨髄細胞である。一部の実施形態において、造血細胞は、誘発された多能性幹細胞、胚細胞、または間葉系細胞から分化された血球である。
【０１４１】
本明細書で使用する場合、「副腎細胞」という用語は、副腎の任意のホルモン生成領域からの任意の細胞を指す。
【０１４２】
本明細書で使用する場合、「心細胞」という用語は、心臓または血管の任意の部分からの任意の細胞を指す。一部の実施形態において、造血細胞は、誘発された多能性幹細胞、胚幹細胞、または間葉系幹細胞から分化された心細胞である。
【０１４３】
本明細書で使用する場合、「予備馴化」という用語は、その移植または使用前に臓器、組織、または細胞を治療するプロセスを指す。任意の臓器、組織、または細胞は、１回以上予備馴化され得る。
【０１４４】
本明細書で使用する場合、「副腎細胞障害」という用語は、任意の副腎細胞の任意の機能不全、及び／またはかかる機能不全と関連付けられる症状を指す。一部の実施形態において、副腎細胞障害は、副腎細胞移植を必要とするクッシング病である。一部の実施形態において、この障害は、副腎採用移植を必要とする任意の疾患である。
【０１４５】
本明細書で使用する場合、「血液障害」という用語は、任意の血液もしくは血液成分の任意の機能不全、及び／またはかかる機能不全と関連付けられる症状を指す。一部の実施形態において、血液障害は、白血病等の血液のがんである。一部の実施形態において、対象は、多発性硬化症またはクローン病等の免疫障害を有し得るか、または有することが疑われ、それにより、子通じまたは循環する免疫細胞集団の移植が、この疾患を治療するか、または進行を防ぐ。
【０１４６】
本明細書で使用する場合、「心障害」という用語は、任意の心臓もしくは心臓成分の任意の機能不全、及び／またはかかる機能不全と関連付けられる症状を指す。一部の実施形態において、心臓障害は、鬱血性心不全である。
【０１４７】
本発明の実施形態は、急性放射線症候群（ＡＲＳ）を治療するためのＰＩＦの使用を対象とする。ある特定の実施形態において、ＡＲＳを治療する方法は、それを必要とする対象組織、臓器、または細胞にＰＩＦペプチドを投与することを含む。一部の実施形態において、ＡＲＳは、意図的な放射線被ばくから、例えば、がんの治療のための放射線療法の場合に生じ得る。一部の実施形態において、ＰＩＦは、放射線療法またはその組み合わせの前、後、またはそれと併せて投与されてもよい。一部の実施形態において、ＡＲＳは、意図的でない放射線被ばくから生じ得る。一部の実施形態において、放射線被ばくに続くＡＲＳを治療する方法は、それを必要とする対象組織、臓器、または細胞にＰＩＦを投与することを含み得る。一部の実施形態において、放射線により誘発された臓器損傷を治療する方法は、それを必要とする対象組織、臓器、または細胞にＰＩＦを投与することを含み得る。一部の実施形態において、臓器損傷は、体内の任意の臓器に対してであり得る。一部の実施形態において、臓器損傷は、体の重要臓器に対してであり得る。一部の実施形態において、臓器損傷は、皮膚、脳、心臓、肺、腎臓、脾臓、肝臓、胃腸管、または膵臓への損傷であり得る。一部の実施形態において、急性放射線被ばく（ＤＥＡＲＥ）の遅発効果を治療する方法は、それを必要とする対象組織、臓器、または細胞にＰＩＦを投与することを含み得る。一部の実施形態において、放射線被ばく後のＡＲＳの発達を阻害するか、または予防する方法は、それを必要とする対象組織、臓器、または細胞にＰＩＦを投与することを含み得る。一部の実施形態において、ＡＲＳを治療する方法は、それを必要とする対象に骨髄を移植することを含み、この骨髄は、移植前にＰＩＦに曝露される。一部の実施形態において、対象は、臓器、組織、または細胞移植を受けない。一部の実施形態において、対象は、骨髄移植を受けない。
【０１４８】
一部の実施形態は、自家移植、同種移植、半同種移植、または異種移植における骨髄または任意の臓器、組織、もしくは細胞の許容を改善するための免疫調節剤としてのＰＩＦの使用を対象とする。骨髄または任意の他の臓器、組織、または細胞の改善された許容は、移植患者の生存の増強、及び自家移植、同種移植、半同種移植、及び異種移植の幅広い使用を可能にし得る。一部の実施形態は、移植された臓器、組織、または細胞の生着を増加させる方法を対象とし、それを必要とする対象にＰＩＦペプチドを投与することを含む。一部の実施形態は、移植された臓器、組織、または細胞の生着を増加させる方法を対象とし、当該臓器、組織、または細胞を、移植前にＰＩＦペプチドに前曝露することを含む。一部の実施形態において、対象は、ＡＲＳを治療するために、臓器、組織、または細胞移植を必要とし得る。
【０１４９】
一部の実施形態において、放射線被ばくに続いて、がんを有する患者のＡＲＳを治療する方法は、ＰＩＦを対象に投与することを含む。一部の実施形態において、対象の放射線被ばくは、放射線療法ががんの治療のために使用される場合等、意図的であってもよい。一部の実施形態において、がんを有する対象は、ＰＩＦの投与前、投与中、または投与に続いて、骨髄または任意の他の臓器の移植を受けない。
【０１５０】
一部の実施形態において、放射線被ばく後のケモカイン及びサイトカインの発現の上昇を予防する方法は、それを必要とする対象にＰＩＦを投与することを含む。一部の実施形態において、放射線被ばくに続いて免疫細胞機能を改善する方法は、それを必要とする対象にＰＩＦを投与することを含む。一部の実施形態において、ＰＩＦは、自己投与されてもよい。一部の実施形態において、放射線被ばくに続いて肝機能を増加させる方法は、それを必要とする対象にＰＩＦを投与することを含む。一部の実施形態において、放射線被ばくに続いて肝酵素レベルを正常化させる方法は、それを必要とする対象にＰＩＦを投与することを含む。一部の実施形態において、放射線の確率的影響を治療または予防する方法は、それを必要とする対象にＰＩＦを投与することを含む。一部の実施形態において、放射線の確率的影響としては、がん、腫瘍、遺伝子損傷、またはそれらの組み合わせが挙げられ得る。
【０１５１】
一部の実施形態において、ＰＩＦは、予防剤として、付随物として、被ばくの直後に、臓器損傷の後、またはそれらの組み合わせで投与されてもよい。かかる実施形態において、ＰＩＦは、前事象情報がない場合から、遅れて到着した情報が入手可能になり得、損傷が起こる場合にまで及ぶ、一連の損傷を網羅する有効なＡＲＳ／ＤＥＡＲＥ対策であり得る。一部の実施形態において、ＰＩＦは、ＡＲＳに存在するもの等の免疫態様に対応するだけでなく、一般にかかる放射線被ばく（臓器損傷）に起因して、更にＰＩＦが、急性放射線被ばく（ＤＥＡＲＥ）の頻繁な遅発効果である、移植片対宿主（ＧＶＨＤ）ならびに移植片対白血病（ＧＶＬ）に対する保護をもたらすことが示された移植後の後の時点で起こる、関連病理学的態様に対応することができる。他の例において、ＰＩＦが保存剤として投与され得る偽の情報または非特異的情報の場合、ＰＩＦが本来非毒性であると考えられるため、最小の有害反応が予想され得るか、または有害反応は予想されない場合がある。
【０１５２】
前述の実施形態において、放射線被ばくは、致死線量の放射線への被ばくを含み得る。前述の実施形態において、放射線被ばくは、非致死線量の放射線への被ばくを含み得る。前述の実施形態において、放射線量は、約１００ラッド〜約３０００ラッド、約２００ラッド〜約３０００ラッド、約５００ラッド〜約３０００ラッド、約８００ラッド〜約３０００ラッド、約１０００ラッド〜約３０００ラッド、約１００ラッド〜約１０００ラッド、約２００ラッド〜約１０００ラッド、約５００ラッド〜約１０００ラッド、約１００ラッド〜約５０００ラッド、約１００ラッド〜約６０００ラッド、及び端点を含めて、これらの値のうちのいずれかの間の任意の範囲であり得る。
【０１５３】
前述の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、放射線被ばく前に、それと同時に、またはそれに続いて投与されてもよい。
【０１５４】
一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、治療有効量で投与されるか、または前曝露される。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、対象が移植を受けた後、対象が移植を受ける前、対象が移植を受けている間、またはそれらの組み合わせで投与される。一部の実施形態において、対象は、対象が移植を受ける前、対象が移植を受けている間、またはそれらの組み合わせで、ＰＩＦペプチドの二次投与を含み得る、二次治療を受けてもよい。
【０１５５】
前述の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日、約０．５ｍｇ／ｋｇ／日、０．７５ｍｇ／ｋｇ／日、１ｍｇ／ｋｇ／日、２ｍｇ／ｋｇ／日、４ｍｇ／ｋｇ／日、６ｍｇ／ｋｇ／日、８ｍｇ／ｋｇ／日、１０ｍｇ／ｋｇ／日、２０ｍｇ／ｋｇ／日、または端点を含めて、これらの値のうちのいずれかの間の任意の範囲の用量で投与され得る。かかる用量は、単一用量として、または単一日に分割用量として投与されてもよい。
【０１５６】
前述の実施形態において、ＰＩＦは、１回、限定された期間にわたって、または維持療法として（病態が改善するか、治癒するまで長期間にわたって、または対象の生涯にわたって）投与されてもよい。限定された期間は、１週間、２週間、３週間、４週間、及び最長１年であり得、端点を含めて、かかる値の間の任意の期間を含む。一部の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、約１日、約３日間、約１週間、約１０日間、約２週間、約１８日間、約３週間、または端点を含めて、これらの値のうちのいずれかの間の任意の範囲にわたって投与され得る。
【０１５７】
前述の実施形態において、ＰＩＦは、１日１回、１日２回、１日３回、１日４回、またはそれ以上投与されてもよい。
【０１５８】
前述の実施形態において、ＰＩＦペプチドは、放射線被ばく前、放射線被ばくの約６時間以内、放射線被ばくの約１２時間以内、放射線被ばくの約１８時間以内、放射線被ばくの約２４時間以内、放射線被ばくの約３０時間以内、放射線被ばくの約３６時間以内、放射線被ばくの約４２時間以内、放射線被ばくの約４８時間以内、または端点を含めて、これらの値のうちのいずれかの間の任意の範囲内で投与され得る。
【０１５９】
一部の実施形態において、ＰＩＦは、上に定義されるＰＩＦペプチドを含む薬学的組成物、及び薬学的に許容される担体もしくは希釈剤、または上に定義される化合物を含む、有効量の薬学的組成物として投与されるか、または提供される。
【０１６０】
本明細書に開示される方法は、本明細書に開示される化合物、組成物、調製物、及びキットのうちのいずれかと共に使用することができる。
【０１６１】
一部の実施形態において、本開示は、急性放射線症候群を治療するための方法に関し、それを必要とする対象に、有効量の本明細書に記載される組成物を投与することを含む。
【０１６２】
一部の実施形態において、本開示は、放射線被ばくに続いて急性放射線症候群を治療するための方法に関し、それを必要とする対象に骨髄を移植することを含み、当該骨髄は、有効量の本明細書に記載される組成物に前曝露される。
【０１６３】
一部の実施形態において、本開示は、移植された臓器、組織、または細胞を生着を増加させるための方法に関し、それを必要とする対象に臓器、組織、または細胞を移植することを含み、当該臓器、組織、または細胞は、移植前に有効量の本明細書に記載される組成物に前曝露される。
【０１６４】
一部の実施形態において、本開示は、対象へのドナー臓器、組織、または細胞の移植片の許容の可能性を増加させる方法に関し、臓器、組織、または細胞を対象に移植する前に、当該臓器、組織、または細胞を、本明細書に記載される１つ以上の組成物に曝露することを含む。
【０１６５】
一部の実施形態において、本開示は、生着された組織の拒絶反応の可能性を低減する方法に関し、組織を対象に移植する前に、本明細書に記載される組成物のうちの１つ以上の組織を曝露することを含む。
【０１６６】
一部の実施形態において、本開示は、減損数の造血細胞を有する対象における造血細胞の生成を増加させる方法に関し、本明細書に記載される１つ以上の薬学的組成物を投与することを含む。
【０１６７】
ある実施形態において、組成物は、それを必要とする対象に１日１回投与される。別の実施形態において、組成物は、隔日、３日毎、または１週間に１回投与される。別の実施形態において、組成物は、１日２回投与される。更に別の実施形態において、組成物は、１日３回または１日４回投与される。更なる実施形態において、組成物は、少なくとも１日１回、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２週間にわたって投与される。なおも更なる実施形態において、組成物は、少なくとも１日１回、少なくとも４、６、８、１０、１２、または２４ヶ月等の、より長期間にわたって投与される。一部の実施形態において、投与は、１日最低１回、２回、３回、または４回での投薬量１０〜５０ｍｇの組成物を含むが、これに限定されない。一部の実施形態において、組成物は、１週間に１回、隔週１回、または月１回投与される。任意に、投与は、全ての症状が医療関係者によって解決及び排除されるまで継続する。
【０１６８】
一部の実施形態において、組成物は、放射線被ばくの１、２、３、５、または７日以内に投与される。他の実施形態において、組成物は、ＡＲＳの症状の出現の１、２、３、５、または７日以内に投与される。
【０１６９】
一部の実施形態において、組成物は、更なる治療の必要がないほど病態が改善するまで、少なくとも１日１回投与される。別の実施形態において、組成物は、病態の全ての症状が解決されるまで投与される。更なる実施形態において、組成物は、対象が無症状になった後、少なくとも１、２、３、６、８、１０、または１２、または２４ヶ月にわたって投与される。
【０１７０】
本開示の組成物は、急性放射線症候群を治療するため、ならびに移植前に臓器、細胞、または組織を予備馴化するために投与される場合、有用かつ有効である。組成物中に存在する各成分の量は、治療上有効な量、すなわち、投与された場合に病態（例えば、ＡＲＳ）の有効な治療をもたらす量となる。治療有効量は、対象ならびに傷害の重症度及び性質に応じて異なり、当業者によってルーチン的に決定され得る。
【０１７１】
一部の実施形態において、本開示は、米国特許第７，７２３，２８９号、同第７，７２３，２９０号、同第８，２２２，２１１号、同第８，４５４，９６７号、同第９，０９７，７２５号（各々が参照によりそれら全体が組み込まれる）に記載される適応症のうちのいずれかを治療するか、または予防する方法に関し、本明細書に開示されるＰＩＦペプチド、類似体、またはその薬学的に許容される塩のうちのいずれか１つまたは複数を含む組成物または薬学的組成物を投与することを含む。
【０１７２】
一部の方法において、本開示は、幹細胞の分化及び／または増殖を刺激することを必要とする対象において、それを行う方法に関し、本明細書に開示されるＰＩＦペプチド、類似体、またはその薬学的に許容される塩のうちのいずれか１つまたは複数を含む組成物または薬学的組成物を投与することを含む。
【０１７３】
一部の実施形態において、本開示は、米国特許第７，２７３，７０８号、同第７，６９５，９７７号、同第７，６７０，８５２号、同第７，６７０，８５１号、同第７，６７８，５８２号、同第７，６７０，８５０号、同第８，０１２，７００号（各々が参照によりそれら全体が組み込まれる）に開示される方法のうちのいずれかに関し、本明細書に開示されるＰＩＦペプチド、類似体、またはその薬学的に許容される塩のうちのいずれか１つまたは複数を含む組成物または薬学的組成物を投与することを含む。本開示はまた、米国特許第７，７８９，２８９号、同第７，７２３，２９０号、同第８，２２２，２１１号、及び同第８，４５４，９６７号を、参照によりそれら全体を組み込む。
【０１７４】
一部の実施形態において、本開示は、急性放射線症候群の治療のための、治療有効量または用量の少なくとも１つのＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩、及び薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物に関する。
【０１７５】
一部の実施形態において、本開示は、移植前の臓器、組織、または細胞の予備馴化のための医薬品の製造における、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩、及び薬学的に許容される担体を含む、治療有効量または用量の、本明細書に開示される組成物のうちのいずれか１つまたは複数の使用に関する。
【０１７６】
一部の実施形態において、本開示は、急性放射線症候群の治療のための医薬品の製造における、治療有効量または用量の少なくとも１つのＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩、及び薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物の使用に関する。
【０１７７】
一部の実施形態において、本開示は、対象が急性放射線症候群を有しているか、または有していると疑われる場合、免疫調節効果を誘発することを必要とする対象において、それを行う方法に関する。
【０１７８】
一部の実施形態において、本開示は、ＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩を含む、本明細書に開示される組成物のうちの少なくとも１つまたは複数を投与することによって、急性放射線症候群を治療する方法に関する。
【０１７９】
一部の実施形態において、本開示は、治療有効量または用量の、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩を含む、本明細書に開示される組成物のうちの１つまたは複数を投与することによって、急性放射線症候群を治療する方法に関する。
【０１８０】
一部の実施形態において、本開示は、治療有効量または用量の、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩、及び薬学的に許容担体を含む、薬学的組成物の投与によって、急性放射線症候群を治療する方法に関する。
【０１８１】
一部の実施形態において、本開示は、急性放射線症候群の治療のための、治療有効量または用量の、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩、及び薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物に関する。
【０１８２】
一部の実施形態において、本開示は、急性放射線症候群の治療のための医薬品の製造における、治療有効量または用量の、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩、及び薬学的に許容される担体を含む、本明細書に開示される組成物のうちのいずれか１つまたは複数の使用に関する。
【０１８３】
一部の実施形態において、本開示は、急性放射線症候群の治療のための医薬品の製造における、治療有効量または用量の、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩、及び薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物の使用に関する。
【０１８４】
一部の実施形態において、本開示は、対象が急性放射線症候群を有するか、または有していると疑われる場合、免疫調節効果を誘発することを必要とする対象において、それを行う方法に関する。
【０１８５】
一部の実施形態において、本開示は、ＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩を含む、本明細書に開示される組成物のうちの少なくとも１つまたは複数を投与することによって、移植片対宿主疾患を治療する方法に関する。
【０１８６】
一部の実施形態において、本開示は、治療有効量または用量の、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩を含む、本明細書に開示される組成物のうちの１つまたは複数を投与することによって、移植片対宿主疾患を治療する方法に関する。
【０１８７】
一部の実施形態において、本開示は、治療有効量または用量の、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩、及び薬学的に許容担体を含む、薬学的組成物の投与によって、移植片対宿主疾患を治療する方法に関する。
【０１８８】
一部の実施形態において、本開示は、移植片対宿主疾患の治療のための、治療有効量または用量の、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩、及び薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物に関する。
【０１８９】
一部の実施形態において、本開示は、移植片対宿主疾患の治療のための医薬品の製造における、治療有効量または用量の、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩、及び薬学的に許容される担体を含む、本明細書に開示される組成物のうちのいずれか１つまたは複数の使用に関する。
【０１９０】
一部の実施形態において、本開示は、移植片対宿主疾患の治療のための医薬品の製造における、治療有効量または用量の、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩、及び薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物の使用に関する。
【０１９１】
一部の実施形態において、本開示は、対象が移植片対宿主疾患を有するか、または有していると疑われる場合、免疫調節効果を誘発することを必要とする対象において、それを行う方法に関する。
【０１９２】
一部の実施形態において、本開示は、ＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩を含む、本明細書に開示される組成物のうちの少なくとも１つまたは複数を投与することによって炎症を治療する方法に関する。
【０１９３】
一部の実施形態において、本開示は、治療有効量または用量の、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩を含む、本明細書に開示される組成物のうちの１つまたは複数を投与することによって、炎症を治療する方法に関する。
【０１９４】
一部の実施形態において、本開示は、治療有効量または用量の、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩、及び薬学的に許容担体を含む、薬学的組成物の投与によって炎症を治療する方法に関する。
【０１９５】
一部の実施形態において、本開示は、炎症の治療のための、治療有効量または用量の、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、その類似体もしくは模倣物、またはその薬学的に許容される塩、及び薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物に関する。
【０１９６】
一部の実施形態において、本開示は、炎症の治療のための医薬品の製造における、治療有効量または用量の、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩、及び薬学的に許容される担体を含む、本明細書に開示される組成物のうちのいずれか１つまたは複数の使用に関する。
【０１９７】
一部の実施形態において、本開示は、炎症の治療のための医薬品の製造における、治療有効量または用量の、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩、及び薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物の使用に関する。
【０１９８】
一部の実施形態において、本開示は、対象が炎症を有しているか、または有していると疑われる場合、免疫調節効果を誘発することを必要とする対象において、それを行う方法に関する。
【０１９９】
一部の実施形態において、本開示は、ＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩を含む、本明細書に開示される組成物のうちの少なくとも１つまたは複数を投与することによって自己免疫疾患を治療する方法に関する。
【０２００】
一部の実施形態において、本開示は、治療有効量または用量の、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩を含む、本明細書に開示される組成物のうちの１つまたは複数を投与することによって自己免疫疾患を治療する方法に関する。
【０２０１】
一部の実施形態において、本開示は、治療有効量または用量の、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩、及び薬学的に許容担体を含む、薬学的組成物の投与によって自己免疫疾患を治療する方法に関する。
【０２０２】
一部の実施形態において、本開示は、自己免疫疾患の治療のための、治療有効量または用量の、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩、及び薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物に関する。
【０２０３】
一部の実施形態において、本開示は、自己免疫疾患の治療のための医薬品の製造における、治療有効量または用量の、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩、及び薬学的に許容される担体を含む、本明細書に開示される組成物のうちのいずれか１つまたは複数の使用に関する。
【０２０４】
一部の実施形態において、本開示は、自己免疫疾患の治療のための医薬品の製造における、治療有効量または用量の、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩、及び薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物の使用に関する。
【０２０５】
一部の実施形態において、本開示は、対象が自己免疫疾患を有しているか、または有していると疑われる場合、免疫調節効果を誘発することを必要とする対象において、それを行う方法に関する。
【０２０６】
一部の実施形態において、本開示は、ＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩を含む、本明細書に開示される組成物のうちの少なくとも１つまたは複数を投与することによって炎症障害を治療する方法に関する。
【０２０７】
一部の実施形態において、本開示は、治療有効量または用量の、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩を含む、本明細書に開示される組成物のうちの１つまたは複数を投与することによって炎症障害を治療する方法に関する。
【０２０８】
一部の実施形態において、本開示は、治療有効量または用量の、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩、及び薬学的に許容担体を含む、薬学的組成物の投与によって炎症障害を治療する方法に関する。
【０２０９】
一部の実施形態において、本開示は、炎症障害の治療のための、治療有効量または用量の、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩、及び薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物に関する。
【０２１０】
一部の実施形態において、本開示は、炎症障害の治療のための医薬品の製造における、治療有効量または用量の、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩、及び薬学的に許容される担体を含む、本明細書に開示される組成物のうちのいずれか１つまたは複数の使用に関する。
【０２１１】
一部の実施形態において、本開示は、炎症障害の治療のための医薬品の製造における、治療有効量または用量の、少なくとも１つのＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩、及び薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物の使用に関する。
【０２１２】
一部の実施形態において、本開示は、対象が炎症障害を有しているか、または有していると疑われる場合、免疫調節効果を誘発することを必要とする対象において、それを行う方法に関する。
【０２１３】
一部の実施形態において、本開示は、ＰＩＦペプチド、その類似体、またはその薬学的に許容される塩を含む、本明細書に開示される組成物のうちの少なくとも１つまたは複数を投与することによって反復性緊張外傷を治療する方法に関する。
【０２１４】
本発明の一部の実施形態に従って、製剤は、キットの一部として供給されてもよい。一部の実施形態において、キットは、ＰＩＦペプチド及び／もしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩を含み、当該ＰＩＦペプチド及び／もしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩は、非天然アミノ酸を含むか、または配列番号２０に対して少なくとも７０％相同である。別の実施形態において、当該キットは、再水和混合物と共に、類似体の薬学的に許容される塩を含む。別の実施形態において、類似体の薬学的に許容される塩は、１つの容器内にある一方、再水和混合物は、第２の容器内にある。再水和混合物は、乾燥形態で供給されてもよく、水または他の液体溶媒を添加して、投与前に懸濁液または溶液を形成することができる。再水和混合物は、少なくとも１用量の下剤を摂取する対象への組成物の投与前に、本発明の凍結乾燥した不溶性の塩を溶解するように設計された混合物である。別の実施形態において、当該キットは、薬学的に許容される塩を経口で使用可能なピル形態で含む。
【０２１５】
当該キットは、調製及び投与のための指示と共に、２つ以上の容器、パック、または分注器を含み得る。一部の実施形態において、当該キットは、本明細書に記載される１つまたは複数の薬学的組成物を含む、少なくとも１つの容器と、シリンジ等の組成物の送達のための手段を含む、第２の容器と、を含む。一部の実施形態において、当該キットは、溶液中の類似体を含むか、または凍結乾燥もしくは乾燥され、再水和混合物を付随する組成物を含む。一部の実施形態において、類似体及び再水和混合物は、１つ以上の追加の容器内にあり得る。
【０２１６】
当該キット内に含まれるこれらの組成物は、任意の種類の容器内に供給されてもよく、それにより、異なる成分の貯蔵寿命が保存され、容器の材料によって吸収または改変されない。例えば、好適な容器としては、ガラス、有機ポリマー（例えば、ポリカーボネート、ポリスチレン、ポリプロピレン、セラミック、金属、または試薬もしくは食品を保持するために典型的に用いられる他の材料）から成形加工され得る簡素な瓶；アルミニウムまたは合金等のホイルで裏張りされた内部からなり得るエンベロープが挙げられる。他の容器としては、試験管、バイアル、フラスコ、及びシリンジが挙げられる。これらの容器は、容易に除去可能な膜によって分離された２つの区画を有してもよく、膜を除去する際に、組成物の成分が混合するのを許す。除去可能な膜は、ガラス、プラスチック、ゴム、または他の不活性材料であってもよい。
【０２１７】
キットは、指示書と共に供給されてもよい。指示は、紙または他の基材に印刷され得る、及び／またはフロッピーディスク、ＣＤ−ＲＯＭ、ＤＶＤ−ＲＯＭ、ジップディスク、ビデオテープ、オーディオテープ、または他の可読メモリ記憶デバイス等の電子可読媒体として供給されてもよい。詳細な指示は、キットと物理的に関連付けられていなくてもよく、代わりに、使用者は、キットの製造者もしくは配給者によって指定されるインターネットのウェブサイトに誘導され得るか、または電子メールとして供給され得る。
【０２１８】
別の実施形態において、投与される薬学的製剤、すなわち、ＰＩＦペプチド及び／もしくはＰＩＦ類似体、またはその薬学的に許容される塩と、保管中及び使用前に製剤を収容するために任意に密封された容器（例えば、バイアル、瓶、パウチ、エンベロープ、缶、管、噴霧器、エアロゾル缶等）と、本明細書に開示される適応症のうちの１つ以上を治療するために有効な方法で薬物投与を実行する指示書と、を含む、パッケージ化されたキットが提供される。指示は、典型的に、パッケージ挿入物、ラベル上、及び／またはキットの他の構成要素上の文書による指示である。
【０２１９】
製剤の種類及び意図される投与形態に応じて、当該キットは、製剤を投与するためのデバイス（例えば、経皮送達デバイス）を含んでもよい。投与デバイスは、点滴器、綿棒、または噴霧器もしくはエアロゾル缶のノズルもしくは噴出口であってもよい。製剤は、本明細書に記載される任意の好適な製剤であり得る。例えば、製剤は、管内に収容される単位投薬量の活性剤、またはゲルもしくは軟膏を含有する経口投薬形態であってもよい。当該キットは、異なる投薬量の同じ薬剤の複数製剤を含有してもよい。当該キットはまた、異なる活性剤の複数製剤を含有してもよい。
【０２２０】
本キットはまた、典型的に、個々のキット構成要素、すなわち、薬学的投与形態、投与デバイス（含まれる場合）、及び文書による使用指示書をパッケージ化するための手段を含む。かかるパッケージ化手段は、厚紙または紙の箱、プラスチックまたはホイルパウチ等の形態を取り得る。
【０２２１】
使用される方法及び材料を例証する本開示及び実施形態は、以下の非限定例を参照することにより更に理解され得る。
【実施例】
【０２２２】
材料及び方法：
以下の材料及び方法を使用して、本明細書に記載される実験を行った。
【０２２３】
ＡＲＳマウスモデル：Ｃ５７ＢＬ／６マウス（６〜７または８〜９週齢の雌）及びＦ１（Ｃ５７ＢＬ／６×バルブ／ｃ）マウス（１０〜１１週齢の雌）を、Ｈａｒｌａｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  Ｌｔｄ（Ｉｓｒａｅｌ）から入手した。この研究は、エルサレムのヘブライ大学の施設内動物愛護委員会によって承認された倫理条件下で行った。マウスは、病原体を含まない条件で保持し、監視した。Ｃ５７ＢＬ／６系統からのマウスは、単一用量の亜致死線量（６Ｇｒｙ）または致死線量（１０Ｇｒｙ）の全身照射により、線量率（０．３Ｇｒｙ／分）で、臨床６ＭＥＶ（Ｌｉｎｅａｒ  Ｖａｒｉａｎ  ＣＬ−６）（Ｖａｒｉａｎ  ｍｅｄｉｃａｌ  ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ，ＣＡ，ＵＳＡ）を使用して全身照射を受けた。
【０２２４】
ｓＰＩＦ＊：合成ＰＩＦ（ＭＶＲＩＫＰＧＳＡＮＫＰＳＤＤ）は、Ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  Ｌｅｗｉｓｖｉｌｌｅ，ＮＪ  ＵＳＡから入手した。ペプチドは、ＨＰＬＣ／質量分析（ｓＰＩＦ専有）によって記録されるように、＞９５％に精製した。
【０２２５】
統計解析：インビボ研究からのデータは、平均±ＳＥＭとして表す。インビトロ研究からのデータは、平均±ＳＤとして表す。両側スチューデントｔ検定またはマン・ホイットニー検定を使用して、対照との単一比較を行った。一元配置反復測定分散分析ＡＮＯＶＡに続いて、ボンフェローニの多重比較検定を多群設計に使用した。Ｐ＜０．０５を統計的に有意であると見なした。データの取り扱い及び統計的処理は、Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ  Ｅｘｃｅｌ及びＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用して行った。遺伝子発現は、ΔΔＣｔ法に基づいて決定し、ｑＢＡＳＥ＋ソフトウェアによって計算した。結果は、各実行に含まれる標準参照試料からの倍率変化として表される。遺伝子発現の解析は、非パラメトリックマン・ホイットニーＵ検定を介して計算した。Ｐ＜０．０５を有意と見なした。ヒートマップに続いて個々の遺伝子を使用して結腸グローバル遺伝子解析を行った後、Ｐ＜０．０５を有意として設定し、群間の差異を決定した。
【０２２６】
ＡＲＳにおける長期的な亜致死線量ｓＰＩＦ実験：造血回復の解析：マウスは、全身照射（６Ｇｒｙ）を受けた。２４時間後、ＰＩＦまたはＰＢＳ（１ｍｇ／ｋｇ／日）を、皮下移植されたＡｌｚｅｔ浸透圧ポンプ（Ｍｏｄｅｌ  １００２、Ｄｕｒｅｃｔ  Ｃｏｒｐ．，ＣＡ）を使用して、２週間にわたって持続的に（０．２５ｍＬ／時）Ｃ５７ＢＬ／６マウスに投与した。これに続いて、いかなる追加の治療もなく２週間の治療後観察を行った。いずれの実験においても抗生物質を投与しなかった。各マウスの造血プロファイルを、犠牲死させるまで毎週調べた。犠牲死時の最長４週間まで毎週、マウスの尾から出血させて、１００μＬの血液をＥＤＴＡコーティングした管に収集した。認証されたＢＣ−２８００  Ｖｅｔ  Ａｕｔｏ  Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ解析器（Ｍｉｎｄｒａｙ，Ｍａｈｗａｈ，ＮＪ  ＵＳＡ）を使用して、差異を有するＣＢＣを行った。結果を正常マウスと比較した。
【０２２７】
ＡＲＳにおける短期的な亜致死線量ｓＰＩＦ実験：造血発生結腸及び全身性サイトカイン：マウスに照射した（６または７Ｇｒｙ）。照射後２４時間または４８時間に、０．７５ｍｇ／ｋｇのｓＰＩＦを、１日２回、３日間にわたって皮下的に注入した。実験の最後にマウスを犠牲死させ、組織学的検査、Ｉｌｌｕｍｉｎａグローバルゲノム解析、及びＲＴ−ＰＣＲのために結腸組織を除去した。加えて、サイトカイン解析のために血清を除去した。結果を正常マウスと比較した。亜致死線量の長期的ＡＲＳ実験の場合、ｓＰＩＦ（１ｍｇ／ｋｇ／日：Ａｌｚｅｔ浸透圧ポンプ；モデル１００２、Ｄｕｒｅｃｔ  Ｃｏｒｐ．，ＣＡ）またはＰＢＳを、１４日間にわたって注入し、続いて治療後１４日間の観察を行った。造血プロファイルを、１００μＬの尾血を収集することによって毎週調べた。認証されたＢＣ−２８００  Ｖｅｔ  Ａｕｔｏ  Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ解析器（Ｍｉｎｄｒａｙ，Ｍａｈｗａｈ，ＮＪ  ＵＳＡ）を使用して、百分率でのＣＢＣを行った。
【０２２８】
ｓＰＩＦは、致死線量の照射及び半同種ＢＭＴ後に長期的な造血回復を誘導した：ＣＢＣ及び脛骨組織学解析：マウスに致死線量（１０Ｇｒｙ）を照射した。照射後１日目に、ドナーマウスＦ１（Ｃ５７ＢＬ／６×バルブ／ｃ）からの骨髄（ＢＭ）単核細胞を、大腿骨及び脛骨をＰＢＳ（Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ）で洗い流すことによって収集した。単核細胞は、Ｌｙｍｐｈｏｐｒｅｐ法を使用することによって単離した。合計８＊１０６個のＢＭ細胞を、照射された受容者マウスの尾静脈に投与した。ＢＭＴに続いて、前述される通り、体重減少、皮膚の荒れ、及び生存についてマウスを毎日監視した。犠牲死時の最長４週間まで週１回、マウスの尾から出血させて、１００μＬの血液をＥＤＴＡコーティングした毛細管に収集した。認証されたＢＣ−２８００  Ｖｅｔ  Ａｕｔｏ  Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ解析器（Ｍｉｎｄｒａｙ，Ｍａｈｗａｈ，ＮＪ  ＵＳＡ）を使用して、百分率でのＣＢＣを行った。結果を正常マウスと比較した。
【０２２９】
ｓＰＩＦ予備馴化された同種ＢＭＴ：ＰＩＦで予備馴化されたＢＭが、ＢＭＴ後に更なる治療なしにＢＭＴの生着を改善し得るかどうかを決定した。マウスは、全身照射（１０Ｇｒｙ）を受けた。２４時間後、ＢＭ細胞を、移植前に２時間だけｓＰＩＦに曝露した後、受容者マウスの尾静脈への播種前に細胞を洗い流した。対照として、ＢＭ細胞を移植前にＰＢＳに曝露した。移植後に、マウスは、最長４週間にわたっていかなる更なる治療も受けなかった。犠牲死に続いて、総ＷＢＣ数及びリンパ球濃度を行った。結果をＰＢＳと対照とで比較した。
【０２３０】
ｓＰＩＦは、ＭＳＣ規制機能をもたらす：抗ＣＤ３抗体で活性化されたＣＦＳＥ染色マウス脾細胞を、４日間にわたって（５０：１の比で）培養し、以前にｓＰＩＦで（２時間）インキュベートしたＭＳＣまたは対照に曝露した。細胞増殖は、フローサイトメトリーを使用して解析した。対照（ＭＳＣを含まない活性化された脾細胞）と比較して、ｓＰＩＦで前治療されたＭＳＣを比較することによって、細胞増殖％に関するデータを解析した。
【０２３１】
ｓＰＩＦで治療された大腿骨の組織学的解析：マウスに１０Ｇｒｙを照射し、２４時間後にｓＰＩＦ治療を開始して、１４日間にわたって継続し（Ａｌｚｅｔポンプ）、続いて１４日間の後治療を行った。更なる治療なしにｓＰＩＦで予備馴化されたＢＭＴも同様に研究した。研究の最後に、ＷＢＣ及び大腿骨試料を、犠牲死後のマウスから入手し、４％中性緩衝ホルマリン中に固定した。試料を脱灰した後、パラフィンに埋め込み、１０ミクロン厚の断片に切断して、ヘマトキシリン及びエオシン（Ｈ＆Ｅ）で染色した。結果を、ＰＢＳ治療マウス及び正常マウスと比較した。
【０２３２】
ｓＰＩＦ治療された血清サイトカイン評価：末梢血からの循環サイトカインレベルを、製造者のプロトコルに従って、マウスＴｈ１／Ｔｈ２  １０ｐｌｅｘ  ＦｌｏｗＣｙｔｏｍｉｘ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅｘキット（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣＡ，ＵＳＡ）を使用することにより決定した。
【０２３３】
ｓＰＩＦ治療された結腸組織像及び陰窩深度の決定亜致死線量の照射（６Ｇｒｙ）に続いて、ｓＰＩＦ治療を、照射後２４時間または４８時間から開始して、２時間または３時間継続した。犠牲死に続いて、結腸を採取し、ＰＢＳ中で広範囲にわたって洗浄して腸内容物を除去した。十二指腸を、パラフィン埋め込み前に１０％中性緩衝ホルマリン中に固定した。試料を、ヘマトキシリン及びエオシン（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇｈ，ＰＡ）のためにルーチン的に５ｍｍ断片に処理し、陰窩深度を決定した。顕著に、陰窩深度は、放射線被ばく後の回復のマーカーとして報告された。この解析の場合、デジタルカメラを備えたＢＸ５１顕微鏡（Ｏｌｙｍｐｕｓ，Ｔｏｋｙｏ，Ｊａｐａｎ）を使用し、１０倍対物レンズを使用して画像を取得した。ＩｍａｇｅＪソフトウェアを以前に報告されたように使用して、これらの画像を解析した。治療後２４時間及び４８時間後のｓＰＩＦ治療の効果を、ＰＢＳ及び正常マウスと比較した。
【０２３４】
ｓＰＩＦ遺伝子解析：ＲＴ−ｑＰＣＲ解析マクロファージ及び結腸組織：ｓＰＩＦは、マクロファージを標的とし、肝臓内の酸化ストレス遺伝子を低減するＧＶＨＤモデルにおいて有効である。したがって、被ばく後（６Ｇｒｙ）２４〜４８時間後の短期的亜致死線量マウスからの結腸試料中の遺伝子発現を、ＰＢＳ及び正常マウスと比較して、ｓＰＩＦへの曝露に続いて決定した。これは、２つの独立した実験群において実行した。加えて、インビトロで２４時間のｓＰＩＦへの曝露に続いて、マクロファージにおいても多くの遺伝子を決定し、マクロファージの極性を決定した。製造者のプロトコルに従って、ＲＮｅａｓｙ（登録商標）ミニキットカラム（ＱＩＡＧＥＮ，Ｈｉｌｄｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用して、総ＲＮＡを抽出し、１μｇの総ＲＮＡを使用し、以前に報告された通りに製造者の指示に従って、高容量ｃＤＮＡキット（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｇｒａｎ  Ｉｓｌａｎｄ，ＮＹ，ＵＳＡ）を使用してｃＤＮＡを合成した。Ｂ７Ｈ１、ＮＯＳ２、及びＡｒｇ−１の転写レベルの検出は、ＴａｑＭａｎ遺伝子発現アッセイキット（Ａｐｐｌｉｅｄ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用して行った。ＨＰＲＴ−１を、ハウスキーピング遺伝子転写物として使用し、内因性制御を正常化した。全てのプライマーは、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓから購入した。ＡＢＩ  Ｐｒｉｓｍ  ７９００配列システム（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用して、リアルタイムＰＣＲ反応を実行した。ＳｔｅｐＯｎｅソフトウェアバージョン２．２（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）によってデータを解析した。ＤａｔａＡｓｓｉｓｔソフトウェアｖ３．０１．Ｂｅｎｊａｍｉｎｉ−Ｈｏｃｈｂｅｒｇ法を使用して、データセットｐ値を調整した。
【０２３５】
ｓＰＩＦ保護的シグナル伝達経路：結腸Ｉｌｌｕｍｉｎａ遺伝子アレイ：ｓＰＩＦの保護的シグナル伝達経路の説明をまとめるために、グローバル遺伝子アレイを行った。亜致死線量の放射線（６Ｇｒｙ）に続いて、２４時間目に、１日２回のｓＰＩＦ注入を７２時間にわたって投与した。放射線に続くｓＰＩＦの効果を、ＰＢＳ治療された対照と比較した。照射していない正常なマウスは、追加の対照として機能した。犠牲死に続いて、３０ｍｇの結腸組織（Ｎ＝４〜５治療群）を切除し、Ｆａｓｔｐｒｅｐ  １２０組織ホモジナイザー（４．０ｍ／秒で３０ｓ）内の細胞溶解緩衝液（Ｑｉａｇｅｎ，Ｈｏｍｂｒｅｃｈｔｉｋｏｎ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）中で均質化した。総ＲＮＡを、ＰｕｒｅＬｉｎｋ  ＲＮＡミニキット（Ａｍｂｉｏｎ，カタログ番号１２１８３０１８Ａ）を使用して細胞から抽出した。総ＲＮＡ（２５０ｎｇ）を、製造者の指示に従って、ＴｏｔａｌＰｒｅｐ  ＲＮＡ増幅キット（ＡＭＩＬ  １７９１，Ａｍｂｉｏｎ）を使用して、ｃＲＮＡ中に増幅させた。増幅後、１．５μｇのｃＲＮＡを、ハイブリダイゼーション対照と混合し、それをＭｏｕｓｅＲｅｆ−８アレイ（ＢＤ−２０２−０２０２，Ｉｌｌｕｍｉｎａ，ＵＳＡ）にハイブリダイズした。このアレイを、ロッキングプラットフォームを有するハイブリダイゼーションオーブン内で５８℃で１６時間にわたってハイブリダイズした。次いで、アレイチップを、ストレプトアビジン−Ｃｙ３で染色する前に、一連の洗浄を受けた。染色後、最終洗浄及び乾燥を受けた。Ｉｌｌｕｍｉｎａ  ＨｉＳｃａｎ走査装置を使用して、このアレイを走査した。
【０２３６】
ｓＰＩＦにより誘発されたマクロファージシフト極性化：細胞単離及びインビトロマクロファージ分化：ｓＰＩＦが、炎症促進性から調節性表現型へのマクロファージ極性化のシフトを誘発する能力を決定するために、以下の実験を実行した。腹腔マクロファージは、１ｍＬの３％  Ｂｒｅｗｅｒチオグリコレート媒質（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｓｔ  Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ，ＵＳＡ）を腹腔内的に注入することによってＣ５７ＢＬ／６マウスから採取した。４日後に、マウスを犠牲死させ、５ｍＬ  ＰＢＳで洗浄することにより、腹腔から腹腔細胞を収集した。細胞（１．４×１０６細胞／ｍＬ）を、６ウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ  Ｃｏｓｔａｒ，Ｃｏｒｎｉｎｇ，ＮＹ  ＵＳＡ）の上に分注し、５％  ＣＯ２中、３７℃で７５分間インキュベートした。非粘着性細胞を破棄し、１０％ウシ胎仔血清（Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ，Ｋｉｂｕｔｚ，Ｂｅｉｔ  Ｈａｅｍｅｋ，Ｉｓｒａｅｌ）を含有するＲＰＭＩ−１６４０（Ｇｉｂｃｏ，Ｇｒａｎｄ  Ｉｓｌａｎｄ，ＮＹ，ＵＳＡ）を添加した。Ｍ１炎症促進性分化研究の場合、１０ｎｇ／ｍＬ（ＧＭ−ＣＳＦ）及び１０ｎｇ／ｍＬのリポ多糖（ＬＰＳ）（ＰｅｐｒｏｔＴｅｃｈ，Ｒｏｃｋｙ  Ｈｉｌｌ，ＮＪ，ＵＳＡ）を、培養培地に添加した後、５％  ＣＯ２中、３７℃で２０時間インキュベートした。代替として、Ｍ２調節性分化の場合、１０ｎｇ／ｍＬのＸＸＸＸ（Ｍ−ＣＳＦ）及び１０ｎｇ／ｍＬのＩＬ−４（ＰｅｐｒｏｔＴｅｃｈ）を培地に添加した。ｓＰＩＦを、分化因子と一緒に培地に添加した。
【０２３７】
フローサイトメトリー分化マクロファージ解析：２０時間の培養後のＭ１からＭ２への分化に対するｓＰＩＦの効果を決定するために、（ＩＬ４及びＧＭＳＣＦ）による分化マクロファージを、トリプシン−ＥＤＴＡ溶液（Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ，Ｉｓｒａｅｌ）を使用することによって採取した。細胞を、４℃で染色した。細胞内染色の場合、細胞を１％パラホルムアルデヒド（Ｅｌｅｃｔｒｏｎ  Ｍｉｃｒｏｃｏｐｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｈａｔｆｉｅｌｄ，ＰＡ  ＵＳＡ）中に固定し、次いでサポニン化（番号ＳＩＧＭＡ−Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ  ＵＳＡ）によって透過処理した。以下の抗体、抗マウスＣＤ１１ｂ  ＡＰＣ（ＳｏｕｔｈｅｒｎＢｉｏｔｅｃｈ，Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ，ＡＬ，ＵＳＡ）、抗マウスＦ４／８０  Ｐａｃｉｆｉｃ  Ｂｌｕｅ（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ，ＵＳＡ）、抗マウスＣＤ２０６  ＦＩＴＣ（ＡｂＤ  Ｓｅｒｏｔｅｃ，Ｒａｌｅｉｇｈ，ＮＣ，ＵＳＡ）、抗マウスＣＤ１６／３２  ＰＥ、及び抗マウスＣＤ２３  ｅＦｌｕｏｒ  ６６０（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）を使用した。ＭＡＣＳＱｕａｎｔ（登録商標）解析装置（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃｈ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ，ＵＳＡ）を使用して、フローサイトメトリーを行った。
【０２３８】
実施例１：
致死線量放射線からのＰＩＦの保護が明示された（図１Ａ）。マウス（Ｃ５７ＢＬ／６、ｎ＝３６）を、低用量ＰＩＦ（０．７５ｍｇ／ｋｇ）または高用量ＰＩＦ（１．２５ｍｇ／ｋｇ）２回／日で、致死線量８Ｇｙの照射後２時間から開始して１４日間治療した。かかる被ばくは、治療を停止した後２週間で１００％の生存率につながった。それとは反対に、放射線及び（ＰＢＳ、ビヒクル）を受けたが、ＰＩＦ治療を受けていない対照マウス（ｎ＝雄１４、雌７）は、ＡＲＳを発症し、２３日目までに死亡した（生存率０％）。図１Ｂは、グローバルＷＢＣ数が、１２日目には既に非常に低いグローバルＷＢＣ数であった対照群と比較して、両方のＰＩＦ治療群において、９日目と比較して０日目に保存されたことを示す。図１Ｃは、ＰＩＦ０．７５ｍｇ／ｋｇ  ２回／日（低用量、高用量：０．７５ｍｇ／ｋｇ）で、８Ｇｙ放射線被ばく後２時間から開始して１４日間治療された雌マウス（ｎ＝９、雄と同様の結果）からのデータを示す。上パネルは、０〜１９日目に測定された免疫表現型を示す。第２のパネルは、合計の％として表された同じ免疫プロファイルを示す。第３のパネルは、詳細な赤血球指標（血球数、ヘモグロビン、ヘマトクリット、及びＲＢＣ体積）を示す。下パネルは、血小板数及び体積を有する。図１Ｄ及び１Ｅは、ＰＩＦ治療群において、２９日目、すなわちＰＩＦ投与を停止した後２週間まで測定した場合、免疫表現型、ＲＢＣ、及び血小板数が保存されたことを示す。
【０２３９】
実施例２：
Ｃ５７ＢＬ／６マウスの生存に対する照射のｓＰＩＦ効果：用量設定実験：本研究に使用されるＣ５７ＢＬ／６マウスは、比較的放射線耐性のある株である。第１に、様々な線量（６〜１０Ｇｒｙ）の全身照射に被ばくされたマウスにおける生存曲線を評価することによって、当実験に必要な放射線強度を決定した（図２）。６Ｇｒｙへの被ばく後は、全てのマウス（ｎ＝１０）が３０日目に生存していたが、１０Ｇｒｙへの被ばく後は、全てのマウス（ｎ＝１０）が３０日以内に死亡した。Ｂは、ＰＩＦが７Ｇｙの被ばくに続いて血小板数を改善することを示した。したがって、６Ｇｒｙは、血液学的プロファイル、サイトカイン発現、及び遺伝子発現に対するｓＰＩＦの効果を決定するために、亜致死線量として定義され、１０Ｇｒｙは、ＢＭ移植研究の場合の致死線量として定義された。加えて、ＰＩＦは、ＡＲＳ設定において最初に試験されたため、ｓＰＩＦを単独療法として使用することによって、及び放射線後の感染予防において重要な役割を有する抗生物質の伝統的使用なしに、以下の研究を実行した。そのようなものとして、ｓＰＩＦ作用に関与した特定の機序は、明確に分析することができた。
【０２４０】
実施例３：
ｓＰＩＦは、治療後長期間にわたって亜致死線量の照射後に血液学的回復を促進する：亜致死線量の照射の結果として、遅い回復と関連付けられる長期的な造血抑制である。ｓＰＩＦがＷＢＣプロファイルを回復する能力を決定した（図３Ａ）。６Ｇｒｙ照射後２４時間の早期ｓＰＩＦ投与（１ｍｇ／ｋｇ／日で２週間）は、急速な回復につながり、ＰＢＳ対照と比較して、総循環ＷＢＣの再構成を著しく改善した（図３Ｂ）。これは、ＷＢＣが、ＰＢＳ治療群における２５０細胞／μＬと比較して、ｓＰＩＦ治療群において６００細胞／μＬの平均値に到達した場合、照射後２週間目に既に明らかであった。かかる６００ＷＢＣ／μＬのレベルは、これらのマウスが、この時点で既にそれほど免疫低下状態でないことを示す。特にｓＰＩＦの保護的効果は、２週間の治療を過ぎて拡大し、犠牲死の時点で治療後２週間の照射後４週間でも著しい差異が観察された（図３Ｃ）。更に、投与後２週間で、ｓＰＩＦは、リンパ球数を増加させたが、循環顆粒球のパーセンテージを、正常な未治療群（対照）において観察されるレベル近くまで低減した（図３Ｄ）。それとは反対に、模擬ＰＢＳ治療群において、ｓＰＩＦ治療群と比較して、リンパ球数はより低く、顆粒球数は著しく増加した。好中球数の低減、すなわち、適合性免疫応答において見出されるリンパ球の増加と関連付けられる炎症応答は、正常なマウスにおいて見られるものに対して、有益な回復された免疫プロファイルを反映する。リンパ球集合が、被ばくに続いて長期的に影響を受け、高い易感染性につながるため、これは特に関連している。これらの結果は、亜致死線量の被ばく後に全身免疫細胞プロファイルを回復することにおける長期的なｓＰＩＦの有効性を明示する。
【０２４１】
実施例４：
短期的なｓＰＩＦは、亜致死線量の照射後に全身炎症促進性サイトカインレベルを低減する：全身炎症応答は、電離放射線に素早く追従する。したがって、６Ｇｙまたは７Ｇｒｙ照射後２４時間で開始し、３日間だけ投与されるｓＰＩＦの効果を調べた。（図４Ａ）ｓＰＩＦは、ＰＢＳと比較して、主要な炎症促進性サイトカインＩＬ−２及びＩＬ１α循環レベルの著しい低減につながった。（図４Ｂ及び４Ｃ）。加えて、正常マウスにおけるレベルと比較した場合、両方のサイトカインレベルの差異は認められなかった。他のサイトカインに対する効果は有意でなかった。これらの結果は、被ばく後早期の全身炎症環境におけるｓＰＩＦにより誘発された低減が、ＡＲＳ発達からの保護において重要な役割を果たすことを示唆する。
【０２４２】
実施例５：
ｓＰＩＦ局所及び全身保護：亜致死線量被ばく後の結腸陰窩回復を促進する：ＡＲＳは、ＧＩ炎症及び損傷を素早くもたらし、ｓＰＩＦは、長期的な致死線量照射後の過酷なマウスＧＶＨＤモデルにおいてＧＩ路潰瘍及び肝炎症を改善する。上記の実験は、ｓＰＩＦが、全身炎症媒介物質を低減することにおいて保護的であり、長期的な回復につながることをインビボ及びインビトロの両方で実証した。しかしながら、ＰＩＦの効果も局所的であるかどうか、高い細胞ターンオーバーを有する結腸という臓器を標的とするかどうか、及びどれがＡＲＳによってしばしば影響を受けるかは知られていない。被ばく後２４時間または４８時間における亜致死線量の被ばく（６Ｇｒｙ）後２日間または３日間の短期的なｓＰＩＦ注入は、図５Ａに示されるように、結腸炎症から保護する。使用されたモデルは、ｓＰＩＦが、結腸炎症を著しく低減し、結腸陰窩形態を回復したことを示す（図５Ｂ及び５Ｃ）。注目すべきことに、保護効果は、照射後４８時間においてのみ、ｓＰＩＦ治療が開始された場合にも観察された。Ｄは、ＰＩＦ陰窩回復が正常なマウスの場合と同様であることを示す。Ｅ．ＰＩＦは、ｉＮＯＳ酸化ストレス遺伝子を低減する一方で、結腸においてＢ７Ｈ１保護遺伝子を促進する（ＲＴＰＣＲ）。この効果は、ＰＩＦ治療が治療後４８時間で開始された場合に認められた。これは、ｓＰＩＦが統合された全身（造血、サイトカイン）及び局所保護の両方を発揮するという見解を支持する。
【０２４３】
実施例６：
ｓＰＩＦは、酸化ストレスを低減し、ミトコンドリア機能、免疫応答を調節することによって結腸回復を促進する。上記データは、ｓＰＩＦが、結腸構造を回復する放射線の損傷効果を低減する一方で、全身炎症促進性免疫応答を低減して長期的な造血を可能にする、二重の局所及び全身効果を有することを示した。したがって、ＮＯＳ２及びＢ７Ｈ１に対するＲＴ  ＰＣＲ（図５Ｄ及び５Ｅ）効果及びグローバルゲノム解析（図１０）の両方を使用して、主に２つの挿入項目である局所保護及び結腸機能を調べることに焦点を当てた。ｓＰＩＦ治療は（亜致死線量と比較して）、いくつかの経路の著しい変調をもたらした（図１０）。興味深いことに、これらの遺伝子は、主に３つの群に分類され、それらは、免疫調節及びアポトーシスシグナル伝達、細胞内エネルギー移行、及び効果的な代謝機能に必要とされるタンパク質−ＲＮＡ相互作用に関与し得る。最初の２つは、防御効果に関連し、後者は修復機序に関連する。
【０２４４】
下の表５は、グローバル結腸ゲノムのクラスター解析を詳述する。この解析は、ｓＰＩＦ対ＰＢＳ及び正常マウスを比較した。いくつかの経路が影響を受けた。上の表４は、特定された個々の経路及びそれらの順位を示す。主要な経路のミトコンドリア機能、ストレスへの応答、及びタンパク質−ＲＮＡ相互作用のクラスター解析を行った。（「Ｆｌｕｏｒ」＝蛍光測定）。遺伝子名は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、Ｉｌｌｕｍｉｎａ  ＭｏｕｓｅＲｅｆ−８アレイ指示冊子（ＢＤ−２０２−０２０２、Ｉｌｌｕｍｉｎａ，ＵＳＡ）において識別された遺伝子に対応する。簡潔に言うと、亜致死線量の放射線（６Ｇｒｙ）に続いて、２４時間目に、１日２回のｓＰＩＦ注入を７２時間にわたって投与した。放射線に続くｓＰＩＦの効果を、ＰＢＳ治療された対照と比較した。照射していない正常なマウスは、追加の対照として機能した。犠牲死に続いて、３０ｍｇの結腸組織（ＰＩＦ及びＰＢＳの場合、Ｎ＝７、正常マウスの場合、Ｎ＝３）を切除し、Ｆａｓｔｐｒｅｐ  １２０組織ホモジナイザー（４．０ｍ／秒で３０ｓ）内の細胞溶解緩衝液（Ｑｉａｇｅｎ，Ｈｏｍｂｒｅｃｈｔｉｋｏｎ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）中で均質化した。総ＲＮＡを、ＰｕｒｅＬｉｎｋ  ＲＮＡミニキット（Ａｍｂｉｏｎ，カタログ番号１２１８３０１８Ａ）を使用して細胞から抽出した。総ＲＮＡ（２５０ｎｇ）を、製造者の指示に従って、ＴｏｔａｌＰｒｅｐ  ＲＮＡ増幅キット（ＡＭＩＬ  １７９１，Ａｍｂｉｏｎ）を使用して、ｃＲＮＡ中に増幅させた。増幅後、１．５μｇのｃＲＮＡを、ハイブリダイゼーション対照と混合し、それをＭｏｕｓｅＲｅｆ−８アレイ（ＢＤ−２０２−０２０２，Ｉｌｌｕｍｉｎａ，ＵＳＡ）にハイブリダイズした。このアレイを、ロッキングプラットフォームを有するハイブリダイゼーションオーブン内で５８℃で１６時間にわたってハイブリダイズした。次いで、アレイチップを、ストレプトアビジン−Ｃｙ３で染色する前に、一連の洗浄を受けた。染色後、最終洗浄及び乾燥を受けた。Ｉｌｌｕｍｉｎａ  ＨｉＳｃａｎ走査装置を使用して、このアレイを走査した。
【０２４５】
【表６】
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【０２４６】
実施例７：
ｓＰＩＦは、結腸炎症を予防し、一酸化窒素（ＮＯＳ２）を下方調節し、ＨＳＰ及びＢ７Ｈ１発現を上方調節して代謝機能を可能にする：結腸組織像（図５Ｂ）は、ｓＰＩＦが、結腸陰窩を回復することによって、炎症から保護することを示した。ｓＰＩＦは、肝臓及びマクロファージの両方における酸化ストレス及びｅＮＯＳ（ＮＯＳ２）経路を通じた一酸化窒素（ＮＯ）の形成から保護することにおいて重要な役割を果たす。ｓＰＩＦは、結腸においても同様に、ＮＯＳ２遺伝子発現を下方調節した（図５Ｅ）。ＮＯＳＩＰ遺伝子を促進することによって、ＮＯＳ１及びＮＯＳ３がこれらの酵素の活性を減衰するアクチン細胞骨格に転座されると、ＮＯ生成は減少した。増加したＰＴＳ（６−ピルボイルテトラヒドロプテリン合成酵素）、ＤＤＡＨ１、及びＳＰＲ、ならびに減少したＷＡＳＬ（ウィスコット・アルドリッチ症候群）遺伝子は、ＮＯＳ２活性を更に制限する。加えて、ＮＤＯＦＡ１２及び６調節性ミトコンドリア膜呼吸系ＮＡＤＨ脱水素酵素の非触媒サブユニット発現も同様に減少した。低減された酸化ストレスに加えて、ｓＰＩＦはまた、ｓＰＩＦによって標的されることも知られているＨＳＰａｌａ及びＨＳＰＡ８遺伝子を増加させることによって、タンパク質の誤った折り畳みを予防し、インビボでも調節される。Ｂ７Ｈ１発現によって示される局所結腸に固有の免疫系は、全身免疫性及びＢ７Ｈ１から独立し、結腸炎症からの主要な保護因子として報告された。注目すべきことに、ｓＰＩＦは、対照と比較してＢ７Ｈ１遺伝子発現を促進した（図５Ｅ）。Ｂ７Ｈ１の増加は、模擬物においてより高く、強力な保護応答を示す。著しい保護は、ｓＰＩＦ療法が放射線後わずか４８時間で開始された場合にも認められた。最高の発現遺伝子は、ＣＦＤであり、結腸損傷の結果である感染から保護する補体Ｄ因子である。これは、追加の抗アポトーシス効果を有するＯＬＦＭ４の効果によって結合される。局所代謝を優先するために、ＳＣＤ１及びＣＹＰ３Ａ１１及びＡＴＰ５ｆｉの上方調節は、かかる重要なタスクに必要なエネルギーを提供する。上方調節される主な遺伝子の中で、脂肪酸及び選択的アミノ酸代謝に関与するのはＡＣＡＡ２であり、特に果糖代謝に関与するのはＫＨＫであった。溶質輸送に関与するＳｌｃ５ａ６発現も上方調節された。このデータは、ｓＰＩＦにより誘発された結腸保護が、遺伝子発現を促進する増強された代謝と関連付けられることを示す。
【０２４７】
実施例８：
ｓＰＩＦは、致死線量の照射に続いて半同種ＢＭＴ後に造血回復を増強する：高レベル（致死線量）の放射線に被ばくした患者の場合、造血幹細胞移植がルーチン的に考慮される。ドナーは、急な通知で入手可能でなければならないため、ハプロタイプ一致の同種移植が唯一のオプションであり得る。したがって、致死線量の全身照射に続いて、親から子への移植に類似する半同種ＢＭＴ後の造血回復に対するｓＰＩＦの効果を評価することが決定される。移植片対宿主反応が生成される臨床状況を模倣するために、Ｆ１（Ｃ５７ＢＬ／６×バルブ／ｃ）マウスを、１０Ｇｒｙの全身照射に被ばくさせた後、翌日にＣ５７ＢＬ／６ＢＭ細胞を静脈内投与した。（図６Ａ）ｓＰＩＦ（１ｍｇ／ｋｇ／日）またはＰＢＳを、Ａｌｚｅｔ浸透圧ポンプを使用し、照射後２４時間から開始して２週間にわたって持続的に投与した（０．２５ｍＬ／時）。臨床病態及び造血回復を、照射後４週間まで追跡した。この実験は、更に、ｓＰＩＦがＷＢＣの低減を予防するかどうか、及び／またはＢＭ再集合回復造血においても有効であるかどうかを明示することを目的とする。ＢＭＴに続く照射後３週間で、ｓＰＩＦは、ＰＢＳ治療群と比較して、末梢血中の総ＷＢＣの回復を著しく増加させた（図６Ｂ）。加えて、ｓＰＩＦ治療は、ＰＢＳ治療対照マウスと比較して、リンパ球／顆粒球比を改善した（図６Ｃ）。このＷＢＣ比は、亜致死線量の照射に続いて見出されたものと同様であった。血液学的回復に対するｓＰＩＦの効果を更に評価するために、大腿骨の組織学的検査も行った。骨髄細胞充実性における有意差は、照射後４週間、及びＢＭＴでは治療後２週間で観察された。正常、ＰＢＳ、及びＰＩＦ治療されたマウスの大腿骨からの骨髄の組織学的画像を、図６Ｄ、６Ｅ、及び６Ｆにそれぞれ提示する。ｓＰＩＦ治療群の大腿骨ＢＭ切片における脂肪細胞数は、ＰＢＳ対照マウスと比較して著しく低く（図６Ｇ）、ｓＰＩＦ治療群におけるＢＭ細胞の回復の改善を示す。注目すべきことに、ｓＰＩＦ治療群における脂肪細胞の数は、正常マウスにおいて観察されるものと同様であった。かかる観察は、致死線量の照射後に、ＰＩＦと結合されたＢＭＴが、循環ならびに骨髄貯留部の両方を急速に回復するのを助けることができることを示す。
【０２４８】
実施例９：
ｓＰＩＦ前治療された同種骨髄の移植は、長期的な致死線量の照射後に血液学的再構成を増強する：ｓＰＩＦは免疫応答を調節する。したがって、ｓＰＩＦが移植された骨髄細胞に対して、それらの生着を改善する直接的な影響を有するかどうかを調べた。あるいは、ｓＰＩＦは、ＢＭＴ生着を促進することによって、その免疫調節特性を受容者において発揮することによってのみ血液学的再構成につながる。かかる重要な問題に対処するために、ドナーＢＭ細胞（同種）を、ｓＰＩＦで２時間、培養物中でプレインキュベートし、次いで細胞を、移植前に洗い流した。受容者は、致死線量で（１０Ｇｒｙ）照射され、２４時間後に予備馴化されたＢＭ移植片を移植された。追加の治療は投与されなかった。（図７Ａ）
【０２４９】
ＢＭは、ｓＰＩＦで移植前に２時間だけインキュベートしたが、ｓＰＩＦ治療細胞を受ける実験群は、移植後３週間及び４週間で総ＷＢＣ数、特にリンパ球数の増強された再構成を示した（図７Ｂ及び７Ｃ）。この効果が、改善された骨髄細胞によって発揮されたかどうかを更に調べた（図７Ｄ、Ｅ、Ｆ）。データは、ｓＰＩＦが、大腿骨中の脂肪細胞の存在を低減させることによってＢＭの回復をもたらしたことを示した。ＢＭＴに続いてｓＰＩＦベースの予備馴化がインビボで有効であったため、この保護に関与した可能性のある機序を更に調べた。ＢＭ抗原性に対するｓＰＩＦ前治療の効果を調べた。ＭＳＣで２時間プレインキュベートされたｓＰＩＦを、培養物中の、抗ＣＤ３抗体によって活性化されたＣＦＳＥ標識された脾細胞に添加し、増殖に対する効果を評価した。（図７Ｇ）フローサイトメトリーデータは、かかる予備馴化が、増殖細胞の数を低減することにおいて著しい効果を有することを記録した。図７Ｆは、ＭＳＣのＰＩＦ予備馴化が、Ｂ細胞及びＴ細胞へのそれらの分化につながることを示す。図７Ｈは、移植後５日目に調べたときに、ＰＩＦが体重喪失を予防することを示す。
【０２５０】
これは、ＢＭ細胞に対するｓＰＩＦの短期的被ばくが、移植後に更なる治療を長期的に必要とすることなく、有効な生着をもたらすのに十分であることを明示した。これは、培養物中のｓＰＩＦの短期的な直接効果が、インビボでの長期的な生着促進効果に換算され得ることを示唆する。
【０２５１】
実施例１０：
ｓＰＩＦは、マクロファージ分化を改変する：ＡＲＳにおける免疫応答の重要性及び単球に対するｓＰＩＦの免疫調節効果を考慮して、インビトロでのマクロファージに対するｓＰＩＦの効果を試験した。ＰＩＦがマクロファージ内でＢ７Ｈ１を上方調節し、Ｔ細胞増殖に対する免疫調節効果を反映することを以前に示されていた。この上方調節は、活性化されたＴ細胞との共培養に続くｓＰＩＦプライムマクロファージが低減された増殖をもたらしたため、更に確認された。現在の実験は、亜致死線量及び致死線量の両方のＡＲＳモデルにおけるｓＰＩＦの保護効果が、マクロファージ極性のシフトに起因し、それにより電離放射線に続く炎症応答を低減するかどうかを調べることを目的とした。マクロファージは、免疫応答の重要な媒介物質であり、炎症性（Ｍ１）及び調節性（Ｍ２）マクロファージに分化し得る。したがって、Ｃ５７ＢＬ／６マウスから腹腔マクロファージを入手し、それらをｓＰＩＦの存在下でＭ１またはＭ２表現型に分化させた（図８及び９）。予想通りに、ｓＰＩＦは、Ｍ１分化マクロファージにおいて、ｉＮＯＳ（ＮＯＳ２）及びＣＯＸ−２遺伝子の発現（それぞれ図８Ａ及び８Ｂ）を著しく減少させ、Ｍ２調節性マクロファージのマーカーであるアルギナーゼ−１の発現を増強した（図８Ｃ）。追加として、ＦＡＣＳ解析は、Ｍ２マクロファージ表現型に類似させるように、マクロファージ細胞表面ＣＤ１１ｂ及びＦ４／８０発現の下方調節を確認した（図８Ｄ及び８Ｅ）。図９は、ＰＩＦがＣＤ１６／３２及びＣＤ２０６の発現をシフトすることを示し、Ｍ２へのシフトを更に証明する。集約的に、これらの結果は、ｓＰＩＦが、Ｍ１／Ｍ２マクロファージを標的とすることによって、照射されたマウスにおいて免疫応答を調節し得ることを示唆する。
【０２５２】
ＰＩＦは、致死線量で照射された心臓に対して保護する。１／１放射線により誘発された心疾患（ＲＩＨＤ）は、放射線療法中の懸念である。関与する病理機序は、内皮損傷に起因する冠状動脈の進行性アテローム性動脈硬化であり、小血管及び心筋細胞の喪失に起因する心筋の拡散損傷は、線維症に置き換えられる。マウスモデルにおいて、マクロ血管介在性及び拡散放射線心臓損傷に関する、心機能研究（心エコー）との平行研究、生存体重、皮膚治癒の時間依存的評価を評価した。新生ラット１０〜１２／群を、心臓を特異的に標的とする５０Ｇｙの致死線量の放射線に被ばくさせた。後次に、ｓＰＩＦの持続送達を、Ａｌｚｅｔポンプを使用して移植した。ポンプは、ＰＩＦを２週間にわたって１ｍｇ／ｋｇ／日で放出した。（プロトコルのスケッチを図１３に記載する）。照射されたラットよりもｓＰＩＦ治療された動物の照射及び手術の部位において、より速い毛髪の成長が認められた。２週間の長いＰＩＦ治療後のＰＩＦ治療された動物において、Ａｌｚｅｔポンプの移植の数日後に、創傷がより早く治癒した。ＰＩＦ治療された動物の毎日の活動はより高く、照射群の他の動物よりもはるかに活発であった。
【０２５３】
実施例１１：
ＰＩＦコアペプチド配列の調査：ＰＩＦｗｔのインシリコドッキングは、ＫＣＮＡＢ１（Κｖ１．３β）四量体の鎖Ａが、３つの他の鎖よりもＰＩＦ標的となる可能性が高いことを明らかにする。ドッキングされたＰＩＦｗｔのインシリコ突然変異誘発：Κｖ１．３βインターフェースもまた、Ｍ＊ＲＩＫＰ＊Ｎの重要性を明らかにするが（Ｍ１、Ｉ４、Ｋ５、Ｐ６、及びＮ１０における突然変異が、最強のインターフェース攪乱物質である）、四量体ドメイン間で類似性を示さない。ａ．ＰＩＦのＦｌｅｘＰｅｐＤｏｃｋサーバードッキングは、ＰＩＦが、鎖Ａに結合する場合により安定していることを示唆した。ｂ．突然変異時にＰＩＦ配列のどのアミノ酸が、より高いエネルギーＰＩＦ−Ｋｖ１．３Ｐ：Ａ〜Ｄ複合体を生じ、したがってより安定性の低い構造をもたらすかを予測するために、ＢｅａｔＭｕｓｉｃサーバーを、インシリコ突然変異誘発に使用した。したがって、２つの推定突然変異体、突然変異体−１：Ｐ６→Ｅ６、及び突然変異体−３：Ｉ４→Ｇ４を想定した。ｃ．表は、考慮される突然変異体を表し、それらのうちの２つは、リガンド−受容体攪乱物質のオプションとしてのそれらの推定の使用可能性に基づいて合成された。突然変異体１（Ｐ６→Ｅ６）は、Κｖ１．３βの鎖Ｄにより特異的であり、その形態はまた、高エネルギーの結合及びインターフェーススコアを有していた。突然変異体３（Ｉ４→Ｇ４）は、Κｖ１．３βの鎖Ａとの結合を攪乱することが予測される。いくつかのＰＩＦ標的を使用するインシリコ突然変異誘発に関する更なる詳細を有する例もまた、ＲＩＫＰがコア配列であることを示唆する。これらの突然変異体の検証を、ＰＩＦ−ＩＤＥの別の標的に関して図１１に示す（分化シフトアッセイに関するデータを示す）。突然変異体の検証は、図１２にも示され、これはΚｖ１．３βに関する分化シフトアッセイデータを示す。
【０２５４】
柔軟なインシリコドッキング（アルゴリズム＃２：ＣＡＢＳドック−これは、モデルではなくＰＩＦ配列のみが提供される分子モデリングアプローチであり、その分子ダイナミクス及び柔軟性のシミュレーションを使用して、ペプチドが結合する場所を探す）モデルを、柔軟なインシリコドッキング（アルゴリズム＃１：ＦｌｅｘＰｅｐＤｏｃｋ）と、ＦｌｅｘＰｅｐＤｏｃｋからのＰＩＦｗｔを、ＣＡＢＳドックにおいて得られるＦＬＡＧ−ＧＧ−ＰＩＦ−ＨＡモデル上に投影することによって比較した。注目すべきことに、両方のアルゴリズム（性質上極めてはっきりした）は、Κｖ１．３βにおいて、両方の型のモデルのインターフェースにおいて共有されるコンセンサス配列ＲＩＫＰと同じ「ポケット」に結合するが、反対方向であると予測する。このデータは、二重タグ付けされたＰＩＦが、大部分の場合において、ＰＩＦ  ｗｔ標的に結合することができると示唆する。ＩＤＥ結合及びΚｖ１．３βに結合されたＰＩＦｗｔ対ＰＩＦｍｕｔ−１／３を研究した。
【０２５５】
実施例１２．
図１４は、２週間の持続的注入及び後次の週２回の注入に続いて、ｓＰＩＦが、研究の１９週後の対照と比較して、ラットの体重を改善することを示した。この効果は、ビヒクル治療されたラットに対して有意であった。成長曲線は、非照射ラットと同様であった。
【０２５６】
図１５は、致死線量の照射後、研究の最後までｓＰＩＦ生存率が保存されることを示し、ＰＢＳ治療されたラットの場合よりもわずかに低い。
【０２５７】
図１６は、ｓＰＩＦが致死線量の照射に続いて作用し得ることの心指標を説明する。
【０２５８】
図１７は、ｓＰＩＦが、多くの心指標に作用する致死線量の放射線から保護することを示す。ＡＷＴ−収縮時及び拡張時の両方の前壁厚。加えて、拡張中のＰＷＴ厚さを低減する（Ｐ＜０．０５）。
【０２５９】
図１８は、ｓＰＩＦが、ＰＢＳ治療された対照と比較してラットの体重を著しく改善したことを示す。
【０２６０】
図１９は、ｓＰＩＦが、ＰＢＳ対照と比較して腎臓重量を増加させることを示す。Ｐ＜０．０５
【０２６１】
ＰＩＦ注入は、異所性心移植片拒絶反応から保護する。マウスバルブ／ｃは、受容者（５７Ｂｌ／６）の腹腔に心同種移植片を移植され、血管を腹部大動脈に付着させる。移植に続いて、ｓＰＩＦの１日２回の注入を行い、聴診器を使用して心拍を判定することにより、移植された心臓の活動を判定する。ｓＰＩＦの効果を、ＰＢＳ治療された対照と比較した。データは、ｓＰＩＦが、拒絶反応を著しく遅延させたことを示した。９＋／−０．５２  ＳＥ対７＋／−０（Ｎ＝１８  ｓＰＩＦ及びＮ＝５対照）、Ｐ＜０．００２（ＤＦ１７）。
【０２６２】
ＰＩＦは、主要な副腎細胞生存度及びコルチゾール分泌を促進する：バイオ人工副腎の基礎。２１−ヒドロキシラーゼの欠乏に起因する先天性副腎過形成（ＣＡＨ）は、ヒトにおける最も一般的な遺伝的内分泌障害であり、晩年に神経内分泌の混乱、男性化、及び代謝疾患の臨床症状と共に提示する。患者は、低血圧危機、低血糖症、面皰、及び不妊症を罹患する場合がある。
【０２６３】
グルココルチコイド置換による現在の治療オプションは、症状を部分的に反転させるにすぎず、過剰なグルココルチコイド治療の不快な副作用を呈し得る。異なる治療アルゴリズムにも関わらず、ＣＡＨの管理は、依然として主な治療課題であり、両側性副腎摘出等の激烈な治療手段を必要とする（Ｍｅｒｋｅら、１９９９）。副腎細胞移植は、そのような患者に対する実行可能な治療代替案である。しかしながら、この戦略は、ヒトドナー臓器の持続的欠失及び慢性免疫抑制の必要性によって著しく制限される。
【０２６４】
それらの問題を解決するための方法のうちの１つは、異種細胞の移植であり得る。異種移植における顕著な進歩は、アルギン酸中でマイクロカプセル化された異種細胞の適用に基づく。この方法は、細胞療法のための有望なプラットフォームを提供する（Ｄｏｌｇｉｎら、２０１４）。細胞マイクロカプセル化は、免疫抑制剤（Ｎｅｕｆｅｌｄら、２０１３）なしに宿主免疫系による攻撃から移植された細胞を保護すること、及び免疫付与から受容体を保護することを目的とする。移植が、外科的手術によるのではなく、単純な注入手順によって達成され得ることは今後の利点である。一次ウシ副腎細胞へのＰＩＦ曝露は、有効な副腎移植を可能にするために適したソースであり得る。
【０２６５】
４つのウシ副腎から単離された一次ウシ副腎皮質細胞（ＢＡＣ）に関する実験。生存度、アポトーシス、及び増殖アッセイの場合、ＢＡＣを９６ウェルプレートに播種した（１ウェル当たり１×１０4細胞、６重複）。コルチゾール生成アッセイの場合、細胞を２４ウェルプレートに播種した（１ウェル当たり５×１０4細胞、３重複）。ＰＩＦを生理食塩水に溶解し、０．１μｇ／ｍＬ濃度で使用した。ある細胞群は、細胞単離の直後にＰＩＦ含有媒質を受けた（ＰＩＦ  ｄ０）。別の細胞群は、細胞単離後２４時間にＰＩＦ含有媒質を受けた（ＰＩＦ  ｄ１）。対照細胞は、ＰＩＦを受けなかった。治療の開始後３日目に、ＸＴＴ細胞増殖アッセイ（Ｒｏｃｈｅ）を使用して生存度を評価した。治療の開始後３日目に、ＢｒｄＵ細胞増殖アッセイ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）を使用して増殖を測定した。治療の開始後３日目にカスパーゼ−Ｇｌｏ３／７アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用し、カスパーゼ３／７活性の決定によってアポトーシスをアッセイした。刺激されたコルチゾールの場合、３ｎｇ／ｍＬのＡＣＴＨ（Ｓｙｎａｃｔｈｅｎ）を使用した。上澄み中のコルチゾールを、ＥＩＡ（ＩＢＬ）によって測定する。図２０のデータは、培養中のＰＩＦが、細胞生存度を高める一方で、アポトーシスを低減することを示す。図２１のデータは、ＰＩＦが、これらの細胞によってコルチゾール分泌を著しく促進することを示し、効果は、培養物への添加の１日後に最も顕著であった。この指示的データは、副腎細胞の予備馴化が、宿主への移植前に重要であり得ることを示し、したがって、バイオ人工副腎を開発する可能性を開く。
【０２６６】
ＰＩＦを使用するラットインスリノーマ細胞に対する実験−島移植の基礎ＰＩＦは、インビトロ及びインビボの両方でグローバル免疫応答を調節する［１５〜１７］。ＰＩＦは、養子移入及び自然発症する疾患の両方において、ＮＯＤマウスにおける糖尿病の発達を長期的に予防する。平行試験されたＰＩＦｓｃｒは、効果がない。保存された島構造及びインスリン発現は、増加した膵ＰＤＩ／チオレドキシン及びＨＳＰタンパク質レベルと関連付けられる。これは、ＴＨ１及びＴＨ２サイトカインレベルの両方の変化によって反映された全身免疫調節と結合される。最近示されたように（Ｂａｒｎｅａ  ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ  ２０１４）、ＰＩＦは、共有された結合部位を通じてＰＤＩ／Ｔ及びＨＳＰを直接標的とする。したがって、移植保護に重要な酸化ストレス及びタンパク質の誤った折り畳みに対して観察される保護は、機構的に真実味がある。生存可能な島細胞をＩ型糖尿病の患者に移植する能力を有することは、現在まで、かかるアプローチが、ドナー細胞の入手可能性、ならびに移植後に持続的免疫抑制の必要性があり、生着したにも関わらず、移植された細胞がこれらの患者に長期的に適切なインスリンを提供することができないことの両方によって制限されるため、主要な進歩である。
【０２６７】
ＰＩＦ投与Ｉｎｓ−１細胞の経路２４を実験に使用した。生存度、アポトーシス、及び増殖アッセイの場合、細胞を９６ウェルプレートに播種した（１ウェル当たり１×１０4細胞、６重複）。ＰＩＦは、３つの濃度、０．０１μｇ／ｍＬ、０．１μｇ／ｍＬ、及び１μｇ／ｍＬで使用した。基質を含有する媒質を毎日変えた。生存度は、ＸＴＴ細胞増殖アッセイ（Ｒｏｃｈｅ）を使用して評価した。増殖は、ＢｒｄＵ細胞増殖アッセイ（Ｒｏｃｈｅ）を使用して測定した。アポトーシスは、カスパーゼ−Ｇｌｏ３／７アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して、カスパーゼ３／７活性の決定によってアッセイした。結果は、試験されたモデルにおいて起こるプロセスの評価に関する回帰解析によって解析した。細胞に対するＰＩＦの効果の評価のために、関連試料に対してウィルコクソン符号順位検定、ならびにスピアマン順位相関及びスチューデントｔ検定を使用した。図２２は、ＰＩＦが、４８時間でのインスリノーマ細胞の生存度、及び０．１μｇ／ｍＬの低濃度での増殖を促進することを示す。アポトーシスの増加は、培養条件下で頻繁に発生する不良品質の細胞の排除を示す。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図１Ｃ−１】
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【図１Ｃ−２】
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【図１Ｃ−３】
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【図１Ｃ−４】
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【図１Ｄ−１】
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【図１Ｄ−２】
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【図１Ｄ−３】
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【図１Ｄ−４】
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【図１Ｅ−１】
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【図１Ｅ−２】
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【図１Ｅ−３】
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【図１Ｅ−４】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図３Ｄ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図４Ｃ】
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【図４Ｄ】
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【図４Ｅ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図５Ｃ】
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【図５Ｄ】
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【図５Ｅ】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図６Ｃ】
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【図６Ｄ】
2017529396.tif 000052
【図６Ｅ】
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【図６Ｆ】
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【図６Ｇ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図７Ｃ】
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【図７Ｄ】
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【図７Ｅ】
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【図７Ｆ】
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【図７Ｇ】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図８Ｃ】
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【図８Ｄ】
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【図８Ｅ】
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【図９Ａ】
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【図９Ｂ】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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2017529396.tif 000084
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