(57)【要約】  本発明は、（Ｉ）及び（II）の中から択一的に選択される、タンパク質のプレニル化の阻害が必要とされる疾患又は障害の治療及び／又は予防における使用のための化合物に関する（式中、Ｒ１は、２−ピリジル、３−ピリジル、又は４−ピリジルであり；Ｒ２は、式（III）、（IV）、及び（Ｖ）を表し；そして、Ｒ５及びＲ６は、水素原子又は（Ｃ１−４）アルキル基を表し；そして、Ｒ７は、アリールカルボニル基、ヘテロアリールカルボニル基、ヘテロアリールアセチル基、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ−カルボニルメチル基、式（VI）の基を表す）。また、式（Ｉ）及び（II）の新規化合物についても開示する。
2017536342.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
【化７４】
2017536342.tif 000083
［式中、
Ｒ１は、２−ピリジル、３−ピリジル、又は４−ピリジルであり；
Ｒ２は、
【化７５】
2017536342.tif 000084
からなる群より選択される基を表し；Ｒ３は、
−  アリールカルボニル基、
−  ヘテロアリールカルボニル基、
−  （Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ−カルボニルメチル基、及び
−
【化７６】
2017536342.tif 000085
基（Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、及びＲｅは、独立して、水素原子、ハロゲン原子、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル基、又は（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ基であり、Ｒａ及びＲｂ、又はＲｂ及びＲｃ、又はＲｃ及びＲｄ、又はＲｄ及びＲｅは、一緒になって、場合により、これらが結合している炭素原子と共に、２個の酸素原子を含むフェニル環に縮合している５員又は６員の環を形成する）からなる群より選択される基を表し、
そして、Ｒ４は、ハロゲン原子によって置換されているフェニル基、又はベンジル基であるが；
ただし、
Ｒ１が２−ピリジルである場合、Ｒ２は４−メチルベンジル基ではない］
及び
【化７７】
2017536342.tif 000086
［式中、
Ｒ５は、水素原子又は（Ｃ１−４）アルキル基を表し；
Ｒ６は、水素原子又は（Ｃ１−４）アルキル基を表し；そして、
Ｒ７は、
−  アリールカルボニル基、
−  （Ｃ１−４）アルキル基及びフェニル基から選択される１個又は２個の基によって場合により置換されているヘテロアリールカルボニル基、
−  ヘテロアリール環においてフェニル基によって場合により置換されているヘテロアリールアセチル基、
−  （Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ−カルボニルメチル基、並びに
−
【化７８】
2017536342.tif 000087
基（Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、及びＲｅは、独立して、水素原子、ハロゲン原子、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル基、又は（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ基であり、Ｒａ及びＲｂ、又はＲｂ及びＲｃ、又はＲｃ及びＲｄ、又はＲｄ及びＲｅは、一緒になって、場合により、これらが結合している炭素原子と共に、２個の酸素原子を含むフェニル環に縮合している５員又は６員の環を形成する）からなる群より選択される基を表すが、
ただし、
Ｒ５及びＲ６が両方メチル基である場合、Ｒ７はインドール−３−イルアセチル基ではない］
の中から択一的に選択される、タンパク質のプレニル化の阻害が必要とされる疾患又は障害の治療及び／又は予防における使用のための、エナンチオマー、ジアステレオマー、及びそれらの混合物（ラセミ混合物を含む）の形態の、化合物又はその薬学的に許容し得る塩のいずれか１つ。
【請求項２】
【化７９】
2017536342.tif 000088
［式中、
Ｒ１は、２−ピリジル、３−ピリジル、又は４−ピリジルであり；
Ｒ２は、
【化８０】
2017536342.tif 000089
からなる群より選択される基を表し；Ｒ３は、
−  アリールカルボニル基、
−  ヘテロアリールカルボニル基、
−  （Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ−カルボニルメチル基、及び
−
【化８１】
2017536342.tif 000090
基（Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｄ、及びＲｅは、独立して、水素原子、ハロゲン原子、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル基、又は（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ基であり、そして、Ｒｃは、水素原子、ハロゲン原子、又は（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ基であり、Ｒａ及びＲｂ、又はＲｂ及びＲｃ、又はＲｃ及びＲｄ、又はＲｄ及びＲｅは、一緒になって、場合により、これらが結合している炭素原子と共に、２個の酸素原子を含むフェニル環に縮合している５員又は６員の環を形成する）からなる群より選択される基を表し、
そして、Ｒ４は、ハロゲン原子によって置換されているフェニル基、又はベンジル基である］
及び
【化８２】
2017536342.tif 000091
［式中、
Ｒ５は、水素原子又は（Ｃ１−４）アルキル基を表し；
Ｒ６は、水素原子又は（Ｃ１−４）アルキル基を表し；そして、
Ｒ７は、
−  アリールカルボニル基、
−  （Ｃ１−４）アルキル基及びフェニル基から選択される１個又は２個の基によって場合により置換されているヘテロアリールカルボニル基、
−  ヘテロアリール環においてフェニル基によって置換されているヘテロアリールアセチル基、
−  （Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ−カルボニルメチル基、並びに
−
【化８３】
2017536342.tif 000092
基（Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、及びＲｅは、独立して、水素原子、ハロゲン原子、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル基、又は（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ基であり、Ｒａ及びＲｂ、又はＲｂ及びＲｃ、又はＲｃ及びＲｄ、又はＲｄ及びＲｅは、一緒になって、場合により、これらが結合している炭素原子と共に、２個の酸素原子を含むフェニル環に縮合している５員又は６員の環を形成する）からなる群より選択される基を表す］
の中から択一的に選択される、請求項１に記載の使用のための化合物。
【請求項３】
式（II）：
【化８４】
2017536342.tif 000093
［式中、
Ｒ５は、水素原子又は（Ｃ１−４）アルキル基を表し；
Ｒ６は、水素原子又は（Ｃ１−４）アルキル基を表し；そして、
Ｒ７は、
−  アリールカルボニル基、
−  （Ｃ１−４）アルキル基及びフェニル基から選択される１個又は２個の基によって場合により置換されているヘテロアリールカルボニル基、
−  ヘテロアリール環においてフェニル基によって置換されているヘテロアリールアセチル基、
−  （Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ−カルボニルメチル基、並びに
−
【化８５】
2017536342.tif 000094
基（Ｒａ、Ｒｃ、及びＲｅは、独立して、水素原子、ハロゲン原子、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル基、又は（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ基であり、Ｒｂ及びＲｄは、独立して、水素原子又は（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ基であり、Ｒａ及びＲｂ、又はＲｂ及びＲｃ、又はＲｃ及びＲｄ、又はＲｄ及びＲｅは、一緒になって、場合により、これらが結合している炭素原子と共に、２個の酸素原子を含むフェニル環に縮合している５員又は６員の環を形成する）からなる群より選択される基を表す］の化合物である、請求項１又は２に記載の使用のための化合物。
【請求項４】
【化８６】
2017536342.tif 000095
（式中、
Ｒ１は、２−ピリジル、３−ピリジル、又は４−ピリジルであり；
Ｒ２は、
【化８７】
2017536342.tif 000096
からなる群より選択される基を表し；Ｒ３は、
【化８８】
2017536342.tif 000097
からなる群より選択される基を表し；そして、Ｒ４は、ハロゲン原子によって置換されているフェニル基、又はベンジル基である）；
【化８９】
2017536342.tif 000098
（式中、
Ｒ５は、水素原子又は（Ｃ１−４）アルキル基を表し；
Ｒ６は、水素原子又は（Ｃ１−４）アルキル基を表し；そして、
Ｒ７は、
【化９０】
2017536342.tif 000099
からなる群より選択される基を表す）
の中から択一的に選択される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項５】
【化９１】
2017536342.tif 000100
（式中、Ｒ２は、
【化９２】
2017536342.tif 000101
からなる群より選択される基を表し；Ｒ３は、
【化９３】
2017536342.tif 000102
からなる群より選択される基を表し；そして、Ｒ４は、ハロゲン原子によって置換されているフェニル基である）；
【化９４】
2017536342.tif 000103
（式中、Ｒ３は、
【化９５】
2017536342.tif 000104
からなる群より選択される基を表す）；
（式中、Ｒ４は、ハロゲン原子によって置換されているフェニル基、又はベンジル基である）
の中から択一的に選択される、請求項１、２、及び４のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項６】
式（I’a）：
【化９６】
2017536342.tif 000105
（式中、Ｒ３は、
【化９７】
2017536342.tif 000106
からなる群より選択される基を表す）の化合物である、請求項１、２、４、及び５のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項７】
式（I’a）：
【化９８】
2017536342.tif 000107
（式中、Ｒ３は、
【化９９】
2017536342.tif 000108
からなる群より選択される基を表す）の化合物である、請求項１、２、４、５、及び６のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項８】
式（II）：
（式中、
Ｒ５は、（Ｃ１−４）アルキル基、好ましくは、メチル基を表し；
Ｒ６は、（Ｃ１−４）アルキル基、好ましくは、メチル基を表し；そして、
Ｒ７は、
【化１００】
2017536342.tif 000109
を表す）の化合物である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項９】
（１）  ｛２−［４−（２−フルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−ピリミジン−４−イル｝−ピリジン−２−イル−アセトニトリル
（２）  ｛２−［４−（４−クロロ−フェニル）−４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−イル］−ピリミジン−４−イル｝−ピリジン−２−イル−アセトニトリル
（３）  ［２−（４−ベンゾイル−ピペリジン−１−イル）−ピリミジン−４−イル］−ピリジン−２−イル−アセトニトリル
（４）  ｛２−［４−（３−メチル−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−ピリミジン−４−イル｝−ピリジン−２−イル−アセトニトリル
（５）  ｛２−［４−（４−フルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−ピリミジン−４−イル｝−ピリジン−２−イル−アセトニトリル
（６）  ｛４−［４−（シアノ−ピリジン−２−イル−メチル）−ピリミジン−２−イル］−ピペラジン−１−イル｝−酢酸エチルエステル
（７）  ｛２−［４−（２，４−ジフルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−ピリミジン−４−イル｝−ピリジン−２−イル−アセトニトリル
（８）  ｛２−［４−（６−フルオロ−４Ｈ−ベンゾ［１，３］ジオキシン−８−イルメチル）−ピペラジン−１−イル］−ピリミジン−４−イル｝−ピリジン−２−イル−アセトニトリル
（９）  ｛２−［４−（３−フルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−ピリミジン−４−イル｝−ピリジン−２−イル−アセトニトリル
（１０）  ｛２−［４−（３，４−ジフルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−ピリミジン−４−イル｝−ピリジン−２−イル−アセトニトリル
（１１）  ピリジン−４−イル−｛６−［４−（チオフェン−２−カルボニル）−ピペラジン−１−イル］−ピリミジン−４−イル｝−アセトニトリル
（１２）  ［２−（４−ベンジル−４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−イル）−ピリミジン−４−イル］−ピリジン−２−イル−アセトニトリル
（１３）  ｛４−［６−（メチル−ｍ−トリル−アミノ）−ピリミジン−４−イル］−ピペラジン−１−イル｝−（１−フェニル−５−プロピル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−メタノン、及び
（１４）  １−｛４−［６−（メチル−ｍ−トリル−アミノ）−ピリミジン−４−イル］−ピペラジン−１−イル｝−２−（２−フェニル−１Ｈ−インドール−３−イル）−エタノン
の中から選択される、請求項１に記載の使用のための化合物。
【請求項１０】
前記疾患又は障害が、早老疾患、神経変性疾患、代謝疾患；ミトコンドリア性疾患、眼疾患、炎症性疾患、心血管疾患、増殖性疾患、免疫疾患、脳梗塞、皮膚老化、ホルモン老化、及びウイルス感染症から選択される、請求項１〜９のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項１１】
前記増殖性疾患が、骨、脳、腎臓、肝臓、副腎、結腸直腸、膀胱、乳房、胃、卵巣、結腸、直腸、前立腺、膵臓、肺、非小細胞肺、小細胞肺、膣、甲状腺、頭頸部の癌及び腫瘍から選択される腫瘍及び癌である、請求項１０に記載の使用のための化合物。
【請求項１２】
医薬としての使用のための、エナンチオマー、ジアステレオマー、及びそれらの混合物（ラセミ混合物を含む）の形態の、請求項１〜８のいずれか一項記載の式（Ｉ）、（II）、（Ia）、（Ib）、（Ic）、（I’a）の化合物、又はそれらの薬学的に許容し得る塩のいずれか１つの中から選択される化合物。
【請求項１３】
エナンチオマー、ジアステレオマー、及びそれらの混合物（ラセミ混合物を含む）の形態の、請求項９記載の化合物（１）〜（１４）又はそれらの薬学的に許容し得る塩のいずれか１つの中から選択される、請求項１２に記載の医薬としての使用のための化合物。
【請求項１４】
エナンチオマー、ジアステレオマー、及びそれらの混合物（ラセミ混合物を含む）の形態の、請求項１〜８のいずれか一項記載の式（Ｉ）、（II）、（Ia）、（Ib）、（Ic）、（I’a）の化合物、又はそれらの薬学的に許容し得る塩のいずれか１つ、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩、トリフルオロ酢酸塩、アスコルビン酸塩、トリフラート、メシル酸塩、トシル酸塩、ギ酸塩、酢酸塩、及びリンゴ酸塩の中から選択される化合物。
【請求項１５】
エナンチオマー、ジアステレオマー、及びそれらの混合物（ラセミ混合物を含む）の形態の、請求項９記載の化合物（１）〜（１４）、又はそれらの薬学的に許容し得る塩のいずれか１つ、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩、トリフルオロ酢酸塩、アスコルビン酸塩、トリフラート、メシル酸塩、トシル酸塩、ギ酸塩、酢酸塩、及びリンゴ酸塩の中から選択される請求項１４記載の化合物。
【請求項１６】
請求項１４又は１５記載の少なくとも１つの化合物、及び少なくとも１つの薬学的に許容し得る賦形剤を含む医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、早老症の予防又は治療を含む、タンパク質のプレニル化の調節解除を伴う疾患又は障害の予防又は治療の分野に関する。
【０００２】
発明の背景
プレニル化は、タンパク質のカルボキシル末端近傍に位置するシステイン残基へのイソプレノイド基の付加からなる。この酵素による翻訳後修飾は、タンパク質の成熟及びプロセシングにとって重要である。両プロセスは、タンパク質の局在及び機能の調節に加えて、タンパク質−タンパク質及び膜−タンパク質の会合の媒介に必須である。プレニル化及び成熟の両方に関与する酵素が欠損している動物の重篤な表現型は、これらプロセスの重要性を強調するものである。更に、プレニル化及び成熟の両プロセスに関与するイソプレニル化されたタンパク質又は酵素をコードしている遺伝子の変化が、癌、神経変性障害、網膜色素変性症、及び早期老化症候群等の重篤なヒト疾患の根底にあることが見出されている。病態におけるイソプレニル化、及びプレニル化後プロセシングに関する最近の研究によって、これら修飾の驚くべき側面及び様々な細胞経路におけるこれらの役割が明らかになっている。処置標的としてのこれら酵素が同定されたことにより、研究者は、インビトロ及びインビボにおいて抗腫瘍剤又は老化防止剤としてのこれらの効果を検証することができるようになった。
【０００３】
ハッチンソン−ギルフォード早老症候群（HGPS）は、心臓発作又は脳卒中によって早期に死亡する、非常に稀な分節性早期老化疾患である。承認済の処置は存在しないが、２００７年に開始された幾つかの最近の単一群臨床試験では、疾患を引き起こすタンパク質であるプロゲリンの毒性を低減することを目的として、タンパク質のファルネシル化の阻害剤が投与されている。処置が患者の生存に影響を与えるかどうかを評価した研究は存在しない。
【０００４】
ハッチンソン−ギルフォード早老症候群（HGPS）に罹患した小児において早期老化を引き起こす分子機構が同定された（OMIM #176670）ことによって、標的とする再目的化薬（repurposed drugs）を臨床医が試験することができるようになった。しかし、現在まで、適切なインビトロ細胞モデルが存在していないことから、ハイスループットスクリーニング（HTS）を用いて化学成分を広くアッセイすることは不可能である。
【０００５】
HGPSは、LMNA遺伝子のエキソン１１における一塩基置換（De Sandre-Giovannoli et al., 2003, Science, Vol. 300: 2055；Eriksson et al., 2003, Nature, Vol. 423: 293-298） （c.1824C>T, NCBI Reference Sequence: NM_170707.3）に起因する、極めて稀な遺伝疾患である（Merideth et al., 2008, N Engl J Med, VOl. 358: 592-604）。これによって隠れたスプライスドナー部位が活性化されて、プレラミンＡにおける５０個のアミノ酸が欠失し、そして、プロゲリンと呼ばれる毒性型のプレラミンＡタンパク質が生成される（Navarro et al., 2004, Hum Mol Genet, Vol. 13: 2493-2503）。
【０００６】
欠失した配列はその翻訳後成熟に必要であるので、この変異タンパク質が核膜に蓄積し、そして、これが、患者において分節性の早期老化及び老化促進につながる主な機構である。核の形状の無秩序化はHGPS細胞において容易に観察されるが、早期老齢化に加えて、ＤＮＡ修復、細胞の増殖及び分化における欠陥を含む、十分に特徴付けられた一連の細胞機能不全が関連している。
【０００７】
HGPSを引き起こす分子機構の発見から、３つの異なる薬物、すなわち、アミノビスホスホナートであるゾレドロナートに関連するHMG-CoA還元酵素（HMGCR）阻害剤であるプラバスタチン、及びファルネシル基転移酵素阻害剤（FTI）であるロナファーニブが、プレニル化プロセスを標的とするその能力について再目的化されている（Varela et al., 2008, Nat Med, Vol. 14: 767-772；Yang et al., 2005, Proc Natl Acad Sci USA, Vol. 102: 10291-10296；Yang et al., 2010, Journal of lipid research, Vol. 51: 400-405）。過去１０年間にわたって、幾つかの実験的研究によって、プレラミンＡのプレニル化プロセスの阻害が核の形状及びHGPSに関連する他の細胞欠陥の改善と相関していることを示す、これら薬理学的アプローチの妥当性が実際に証明されている。要するに、これら研究は、患者の臨床表現型の若干の部分的改善を明らかにした３つの臨床試験（Capell et al., 2005, Proc Natl Acad Sci USA, Vol. 102: 12879-12884；Capell et al., 2008, Proc Natl Acad Sci USA, Vol. 105: 15902-15907；Glynn and Glover, 2005, Human Mol Genet, Vol. 14: 2959-2969；Varela et al., 2008, Nat Med, Vol. 14: 767-772；Young et al., 2013, Sci Transl Med Vol. 5: 171ps173）の精緻化のきっかけとなり、新規潜在分子を発見することが必須になった（Gordon et al., 2012, Proc Natl Acad Sci USA, Vol. 109: 16666-16671）。
【０００８】
その多分化能及び自己再生特性に起因して、胚幹（ES）細胞及び誘導多能性幹（iPS）細胞は、HTS設定において、インビトロで化学化合物を試験するための無限かつ均質な生物資源を生成する独自の方法を提供する（Desbordes and Studer, 2013, Nat Protoc, Vol. 8: 111-130；Lee et al., 2012, Nat Biotechnol, Vol. 30: 1244-1248）。２０１１年以降、幾つかのグループが、血管平滑筋細胞（VSMC）及び間葉幹細胞（MSC）に分化した後にHGPSの幾つかの局面を繰り返すiPS細胞株の能力を証明した（Liu et al., 2011, Nature, Vol. 472: 221-225；Nissan et al., 2012, Cell Rep, Vol. 2: 1-2；Zhang et al., 2011, Cell Stem Cell, Vol. 8: 31-45）。より最近では、これら細胞を用いて、核の形状の構造、プロゲリンの発現、及び骨芽細胞系に沿ったその早期分化等の典型的な細胞及び分子の欠陥に対する、HGPS患者において現在使用されている薬物の機能的効果をインビトロで評価することができることが示されている（Blondel et al., 2014, Stem cells Transl Med, Vol. 3: 510-519）。
【０００９】
当技術分野では、タンパク質のプレニル化の阻害が必要とされる疾患又は障害の予防又は治療において有用な更なる化合物を入手可能であることが必要とされている。
【００１０】
発明の概要
以後に定義する式（Ｉ）、（II）、（Ia）、（Ib）、（Ic）、及び（I’a）のアミノピリジン化合物のクラスに属する新規化合物が、毒性を有しないと同時に、タンパク質のプレニル化、より正確には、タンパク質のファルネシル化を阻害できることが見出された。
【００１１】
したがって、本発明は、タンパク質のプレニル化の阻害が必要とされる疾患又は障害の治療及び／又は予防における使用のための、以下に定義する式（Ｉ）、（II）、（Ia）、（Ib）、（Ic）、及び（I’a）の化合物に関する。
【００１２】
更に、本発明は、医薬としての使用のための、以下に定義する式（Ｉ）、（II）、（Ia）、（Ib）、（Ic）、及び（I’a）の化合物に関する。
【００１３】
更に、本発明は、以下に定義する式（Ｉ）、（II）、（Ia）、（Ib）、（Ic）、及び（I’a）の化合物自体に関する。
【００１４】
また、本発明は、前記新規化合物のうちの少なくとも１つ、及び少なくとも１つの薬学的に許容し得る賦形剤を含む医薬組成物を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】プレラミンＡの成熟に対する２１６０８個の低分子のハイスループットスクリーニング  同定された５個のプレラミンＡ調節因子（Mono-AP1、Mono-AP2、Mono-AP3、Di-AP1、及びDi-AP2）の用量反応実験。各チャートは、細胞生存率（上の曲線）及びプレラミンＡ陽性核の百分率（下の曲線）を表す。各点は、８個の反復試験試料の百分率の平均+/-SDを表す。
【図２】HGPS欠陥に対する５個のプレラミンＡ調節因子の薬理学的評価  （２Ａ）５個のプレラミンＡ調節因子（Mono-AP1、Mono-AP2、Mono-AP3、Di-AP1、及びDi-AP2）のそれぞれで４８時間処理した後のHGPS MSCにおける核の形状の異常の測定（ラミンＡ／Ｃ免疫染色）。各チャートは、８回の独立した実験の平均+/-SDを表す。  （２Ｂ）５個のプレラミンＡ調節因子（Mono-AP1、Mono-AP2、Mono-AP3、Di-AP1、及びDi-AP2）のそれぞれの存在下で７日間分化させた後のHGPS MSCにおける骨芽細胞分化の測定（アルカリホスファターゼ活性）。各チャートは、８回の独立した実験の平均+/-SDを表す。データは、細胞数に対して正規化する。  （２Ｃ）５個のプレラミンＡ調節因子（Mono-AP1、Mono-AP2、Mono-AP3、Di-AP1、及びDi-AP2）のそれぞれで４８時間処理した後のHGPS MSCにおける細胞増殖の測定（Ki-67免疫染色）。各チャートは、８回の独立した実験の平均+/-SDを表す。
【図３】Mono-APの構造活性相関  （Ａ）１０μM Mono-APドメインを含有する４７個の化合物で４８時間処理した後のHGPS MSCにおけるプレラミンＡで染色された核の自動定量。データを１μM FTI（赤色）と比較する。各値は、４個の反復試験試料の百分率の平均+/-SDを表す。  （Ｂ）HGPS MSCにおけるプレラミンＡの成熟プロセスに対する、陽性として同定された９個のヒット（Mono-AP21、Mono-AP28、Mono-AP26、Mono-AP9、Mono-AP30、Mono-AP25、Mono-AP27、Mono-AP16、Mono-AP24）の用量反応分析。各点は、８個の反復試験試料の百分率の平均+/-SDを表す。  （Ｃ）陽性として同定された９個のヒット（Mono-AP21、Mono-AP28、Mono-AP26、Mono-AP9、Mono-AP30、Mono-AP25、Mono-AP27、Mono-AP16、Mono-AP24）で処理した後のHGPS MSCの細胞生存率。各点は、８個の反復試験試料の百分率の平均+/-SDを表す。
【図４】HMG-CoA還元酵素（HMGCR）、ファルネシルピロリン酸合成酵素（FPPS）、及びファルネシル基転移酵素（FT）に対するMono-APの分子ドッキング  （４Ａ）２５μM Mono-AP1、５０μM Mono-AP2、及び５０μM Mono-AP3の存在下におけるFT活性の測定。１μM ティピファニブ（FTI）をポジティブコントロールとして用いた。結果を、コントロールの百分率で提示する。各点は、８個の反復試験試料の百分率の平均+/-SDを表す。  （４Ｂ）２５μM Mono-AP1、５０μM Mono-AP2、及び５０μM Mono-AP3の存在下におけるFPPS活性の測定。１μM ゾレドロナートをポジティブコントロールとして用いた。結果を、コントロールの百分率で提示する。各点は、８個の反復試験試料の百分率の平均+/-SDを表す。  （４Ｃ）２５μM Mono-AP1、５０μM Mono-AP2、及び５０μM Mono-AP3の存在下におけるHMGCR活性の測定。１μM プラバスタチンをポジティブコントロールとして用いた。結果を、コントロールの百分率で提示する。各点は、８個の反復試験試料の百分率の平均+/-SDを表す。
【図５】プレラミンＡの成熟プロセスに対する５つの検証済化合物の効果  （５Ａ）５個の検証済化合物（Mono-AP1、Mono-AP2、Mono-AP3、Di-AP1、及びDi-AP2）のそれぞれで４８時間処理した後のHGPS MSCにおけるラミンＡ／Ｃ比の遺伝子発現解析。データは、０．１％ DMSO処理したHGPS MSCに対して正規化する。各チャートは、３回の独立した実験の平均+/-SDを表す。  （５Ｂ）５個の検証済化合物（Mono-AP1、Mono-AP2、Mono-AP3、Di-AP1、及びDi-AP2）のそれぞれで４８時間処理した後のHGPS MSCにおけるプロゲリンの発現の遺伝子発現解析。データは、０．１％ DMSO処理したHGPS MSCに対して正規化する。各チャートは、３回の独立した実験の平均+/-SDを表す。
【図６】HDJ2及びhRASのファルネシル化に対するヒットの効果の分析  ５個のプレラミンＡ調節因子（Mono-AP1、Mono-AP2、Mono-AP3、Di-AP1、及びDi-AP2）のそれぞれで４８時間処理した後にGFPの細胞質への（ファルネシル化されていない）局在を示すHGPS MSCの割合の定量。各チャートは、３回の独立した実験の平均+/-SDを表す。
【図７】Mono-APの構造活性相関試験  （７Ａ）２５μM Mono-AP1、２５μM Mono-AP21、及び２５μM Mono-AP28の存在下におけるFT活性の測定。１μM ティピファニブ（FTI）をポジティブコントロールとして用いた。結果を、コントロールの百分率で提示する。各点は、８個の反復試験試料の百分率の平均+/-SDを表す。  （７Ｂ）２５μM Mono-AP1、２５μM Mono-AP21、及び２５μM Mono-AP28の存在下におけるFPPS活性の測定。１μM ゾレドロナートをポジティブコントロールとして用いた。結果を、コントロールの百分率で提示する。各点は、８個の反復試験試料の百分率の平均+/-SDを表す。  （７Ｃ）２５μM Mono-AP1、２５μM Mono-AP21、及び２５μM Mono-AP28の存在下におけるHMGCR活性の測定。１μM プラバスタチンをポジティブコントロールとして用いた。結果を、コントロールの百分率で提示する。各点は、８個の反復試験試料の百分率の平均+/-SDを表す。
【００１６】
発明を実施するための形態
本発明は、タンパク質のプレニル化を阻害し、したがって、タンパク質のプレニル化の阻害を必要とする任意の疾患又は障害を予防又は治療するために有用な新規化合物を提供する。
【００１７】
より正確には、本発明によれば、アミノピリミジンのクラスがタンパク質のプレニル化の阻害剤であることが見出され、その化合物は、本明細書において特定される。
【００１８】
本明細書における実施例に示す通り、これらアミノピリミジン化合物は、毒性を有しないと同時に、タンパク質のプレニル化、より正確には、タンパク質のファルネシル化を効率的に阻害する。
【００１９】
また、これらアミノピリジン化合物によるタンパク質のプレニル化の阻害が、ファルネシルピロリン酸合成酵素（FPPS）等のファルネシル化酵素を包含するプレニル化酵素の特異的ターゲティングによって行われることも本明細書に示す。
【００２０】
早老症に罹患している個体に由来する線維芽細胞を再プログラミングすることによって得られる中胚葉幹細胞の細胞モデルを使用して、これらアミノピリミジン化合物が、特にプレラミンＡのファルネシル化を阻害することによって、正常表現型を回復させ得ることを本明細書に示した。
【００２１】
これら新規アミノピリミジン化合物が、早老症においてみられる核の形状の異常を救済し得ることを本明細書に示す。
【００２２】
また、これら新規アミノピリミジン化合物が、早老症に罹患している個体に由来する中胚葉幹細胞の早期分化の疾患関連表現型を救済することを本明細書に示す。
【００２３】
また、これらアミノピリミジン化合物が、細胞毒性を有しないことを含む、毒性を有しないことも本明細書に示す。なお、これらアミノピリミジン化合物は、細胞増殖に対する効果も細胞のエネルギー代謝に対する効果も低いか又はない。
【００２４】
本発明は、以下の中から択一的に選択される、タンパク質のプレニル化の阻害が必要とされる疾患又は障害の治療及び／又は予防における使用のための、エナンチオマー、ジアステレオマー、及びそれらの混合物（ラセミ混合物を含む）の形態の、化合物又はその薬学的に許容し得る塩のいずれか１つについて記載する：
【化１】
2017536342.tif 000003
［式中、
Ｒ１は、２−ピリジル、３−ピリジル、又は４−ピリジルであり；
Ｒ２は、
【化２】
2017536342.tif 000004
及び
からなる群より選択される基を表し；Ｒ３は、
−  アリールカルボニル基、
−  ヘテロアリールカルボニル基、
−  （Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ−カルボニルメチル基、及び
−
【化３】
2017536342.tif 000005
基（Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、及びＲｅは、独立して、水素原子、ハロゲン原子、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル基、又は（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ基であり、Ｒａ及びＲｂ、又はＲｂ及びＲｃ、又はＲｃ及びＲｄ、又はＲｄ及びＲｅは、一緒になって、場合により、これらが結合している炭素原子と共に、２個の酸素原子を含むフェニル環に縮合している５員又は６員の環を形成する）からなる群より選択される基を表し、
そして、Ｒ４は、ハロゲン原子によって置換されているフェニル基、又はベンジル基である］
及び
【化４】
2017536342.tif 000006
［式中、
Ｒ５は、水素原子又は（Ｃ１−４）アルキル基を表し；
Ｒ６は、水素原子又は（Ｃ１−４）アルキル基を表し；そして、
Ｒ７は、
−  アリールカルボニル基、
−  （Ｃ１−４）アルキル基及びフェニル基から選択される１個又は２個の基によって場合により置換されているヘテロアリールカルボニル基、
−  ヘテロアリール環においてフェニル基によって場合により置換されているヘテロアリールアセチル基、
−  （Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ−カルボニルメチル基、並びに
−
【化５】
2017536342.tif 000007
基（Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、及びＲｅは、独立して、水素原子、ハロゲン原子、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル基、又は（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ基であり、Ｒａ及びＲｂ、又はＲｂ及びＲｃ、又はＲｃ及びＲｄ、又はＲｄ及びＲｅは、一緒になって、場合により、これらが結合している炭素原子と共に、２個の酸素原子を含むフェニル環に縮合している５員又は６員の環を形成する）からなる群より選択される基を表す］。
【００２５】
第１の態様によれば、本発明の発明主題は、以下の中から択一的に選択される、タンパク質のプレニル化の阻害が必要とされる疾患又は障害の治療及び／又は予防における使用のための、エナンチオマー、ジアステレオマー、及びそれらの混合物（ラセミ混合物を含む）の形態の、化合物又はその薬学的に許容し得る塩のいずれか１つに関する：
【化６】
2017536342.tif 000008
［式中、
Ｒ１は、２−ピリジル、３−ピリジル、又は４−ピリジルであり；
Ｒ２は、
【化７】
2017536342.tif 000009
からなる群より選択される基を表し；Ｒ３は、
−  アリールカルボニル基、
−  ヘテロアリールカルボニル基、
−  （Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ−カルボニルメチル基、及び
−
【化８】
2017536342.tif 000010
基（Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、及びＲｅは、独立して、水素原子、ハロゲン原子、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル基、又は（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ基であり、Ｒａ及びＲｂ、又はＲｂ及びＲｃ、又はＲｃ及びＲｄ、又はＲｄ及びＲｅは、一緒になって、場合により、これらが結合している炭素原子と共に、２個の酸素原子を含むフェニル環に縮合している５員又は６員の環を形成する）からなる群より選択される基を表し、
そして、Ｒ４は、ハロゲン原子によって置換されているフェニル基、又はベンジル基であるが；
ただし、
Ｒ１が２−ピリジルである場合、Ｒ２は４−メチルベンジル基ではない］
及び
【化９】
2017536342.tif 000011
［式中、
Ｒ５は、水素原子又は（Ｃ１−４）アルキル基を表し；
Ｒ６は、水素原子又は（Ｃ１−４）アルキル基を表し；そして、
Ｒ７は、
−  アリールカルボニル基、
−  （Ｃ１−４）アルキル基及びフェニル基から選択される１個又は２個の基によって場合により置換されているヘテロアリールカルボニル基、
−  ヘテロアリール環においてフェニル基によって場合により置換されているヘテロアリールアセチル基、
−  （Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ−カルボニルメチル基、並びに
−
【化１０】
2017536342.tif 000012
基（Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、及びＲｅは、独立して、水素原子、ハロゲン原子、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル基、又は（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ基であり、Ｒａ及びＲｂ、又はＲｂ及びＲｃ、又はＲｃ及びＲｄ、又はＲｄ及びＲｅは、一緒になって、場合により、これらが結合している炭素原子と共に、２個の酸素原子を含むフェニル環に縮合している５員又は６員の環を形成する）からなる群より選択される基を表すが、
ただし、
Ｒ５及びＲ６が両方メチル基である場合、Ｒ７はインドール−３−イルアセチル基ではない］。
【００２６】
好ましい態様によれば、本発明の発明主題は、以下の中から択一的に選択される、タンパク質のプレニル化の阻害が必要とされる疾患又は障害の治療及び／又は予防における使用のための、エナンチオマー、ジアステレオマー、及びそれらの混合物（ラセミ混合物を含む）の形態の、化合物又はその薬学的に許容し得る塩のいずれか１つに関する：
【化１１】
2017536342.tif 000013
［式中、
Ｒ１は、２−ピリジル、３−ピリジル、又は４−ピリジルであり；
Ｒ２は、
【化１２】
2017536342.tif 000014
からなる群より選択される基を表し；Ｒ３は、
−  ヘテロアリールカルボニル基、
−  （Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ−カルボニルメチル基、及び
−
【化１３】
2017536342.tif 000015
基（Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、及びＲｅは、独立して、水素原子、ハロゲン原子、又は（Ｃ１−Ｃ４）アルキル基であり、Ｒａ及びＲｂ、又はＲｂ及びＲｃ、又はＲｃ及びＲｄ、又はＲｄ及びＲｅは、一緒になって、場合により、これらが結合している炭素原子と共に、２個の酸素原子を含むフェニル環に縮合している５員又は６員の環を形成する）からなる群より選択される基を表し、
そして、Ｒ４は、ハロゲン原子によって置換されているフェニル基、又はベンジル基であるが；
ただし、
Ｒ１が２−ピリジルである場合、Ｒ２は４−メチルベンジル基ではない］
及び
【化１４】
2017536342.tif 000016
［式中、
Ｒ５は、水素原子又は（Ｃ１−４）アルキル基を表し；
Ｒ６は、水素原子又は（Ｃ１−４）アルキル基を表し；そして、
Ｒ７は、
−  （Ｃ１−４）アルキル基及びフェニル基から選択される１個又は２個の基によって場合により置換されているヘテロアリールカルボニル基、並びに
−  ヘテロアリール環においてフェニル基によって場合により置換されているヘテロアリールアセチル基、
からなる群より選択される基を表すが、
ただし、
Ｒ５及びＲ６が両方メチル基である場合、Ｒ７はインドール−３−イルアセチル基ではない］。
【００２７】
別の態様によれば、本発明の発明主題は、以下の中から択一的に選択される、タンパク質のプレニル化の阻害が必要とされる疾患又は障害の治療及び／又は予防における使用のための、エナンチオマー、ジアステレオマー、及びそれらの混合物（ラセミ混合物を含む）の形態の、化合物又はその薬学的に許容し得る塩のいずれか１つに関する：
【化１５】
2017536342.tif 000017
［式中、
Ｒ１は、２−ピリジル、３−ピリジル、又は４−ピリジルであり；
Ｒ２は、
【化１６】
2017536342.tif 000018
からなる群より選択される基を表し；Ｒ３は、
−  アリールカルボニル基、
−  ヘテロアリールカルボニル基、
−  （Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ−カルボニルメチル基、及び
−
【化１７】
2017536342.tif 000019
基（Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、及びＲｅは、独立して、水素原子、ハロゲン原子、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル基、又は（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ基であり、Ｒａ及びＲｂ、又はＲｂ及びＲｃ、又はＲｃ及びＲｄ、又はＲｄ及びＲｅは、一緒になって、場合により、これらが結合している炭素原子と共に、２個の酸素原子を含むフェニル環に縮合している５員又は６員の環を形成する）からなる群より選択される基を表し、
そして、Ｒ４は、ハロゲン原子によって置換されているフェニル基、又はベンジル基であるが；
ただし、
Ｒ１が２−ピリジルである場合、Ｒ２は４−メチルベンジル基ではない］
及び
【化１８】
2017536342.tif 000020
［式中、
Ｒ５は、水素原子又は（Ｃ１−４）アルキル基を表し；
Ｒ６は、水素原子又は（Ｃ１−４）アルキル基を表し；そして、
Ｒ７は、
−  アリールカルボニル基、
−  （Ｃ１−４）アルキル基及びフェニル基から選択される１個又は２個の基によって場合により置換されているヘテロアリールカルボニル基、
−  ヘテロアリール環においてフェニル基によって場合により置換されているヘテロアリールアセチル基、
−  （Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ−カルボニルメチル基、並びに
−
【化１９】
2017536342.tif 000021
基（Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、及びＲｅは、独立して、水素原子、ハロゲン原子、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル基、又は（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ基であり、Ｒａ及びＲｂ、又はＲｂ及びＲｃ、又はＲｃ及びＲｄ、又はＲｄ及びＲｅは、一緒になって、場合により、これらが結合している炭素原子と共に、２個の酸素原子を含むフェニル環に縮合している５員又は６員の環を形成する）からなる群より選択される基を表すが、
ただし、
Ｒ５及びＲ６が両方メチル基である場合、Ｒ７はインドール−３−イルアセチル基ではなく、
Ｒ５及びＲ６が両方メチル基である場合、Ｒ７は
【化２０】
2017536342.tif 000022
基ではない］。
【００２８】
別の好ましい態様によれば、本発明の発明主題は、以下の中から択一的に選択される、タンパク質のプレニル化の阻害が必要とされる疾患又は障害の治療及び／又は予防における使用のための、エナンチオマー、ジアステレオマー、及びそれらの混合物（ラセミ混合物を含む）の形態の、化合物又はその薬学的に許容し得る塩のいずれか１つに関する：
【化２１】
2017536342.tif 000023
［式中、
Ｒ１は、２−ピリジル、３−ピリジル、又は４−ピリジルであり；
Ｒ２は、
【化２２】
2017536342.tif 000024
からなる群より選択される基を表し；Ｒ３は、
−  ヘテロアリールカルボニル基、
−  （Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ−カルボニルメチル基、及び
−
【化２３】
2017536342.tif 000025
基（Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、及びＲｅは、独立して、水素原子、ハロゲン原子、又は（Ｃ１−Ｃ４）アルキル基であり、Ｒａ及びＲｂ、又はＲｂ及びＲｃ、又はＲｃ及びＲｄ、又はＲｄ及びＲｅは、一緒になって、場合により、これらが結合している炭素原子と共に、２個の酸素原子を含むフェニル環に縮合している５員又は６員の環を形成する）からなる群より選択される基を表し、
そして、Ｒ４は、ハロゲン原子によって置換されているフェニル基、又はベンジル基であるが；
ただし、
Ｒ１が２−ピリジルである場合、Ｒ２は４−メチルベンジル基ではない］
及び
【化２４】
2017536342.tif 000026
［式中、
Ｒ５は、水素原子又は（Ｃ１−４）アルキル基を表し；
Ｒ６は、水素原子又は（Ｃ１−４）アルキル基を表し；そして、
Ｒ７は、
−  （Ｃ１−４）アルキル基及びフェニル基から選択される１個又は２個の基によって場合により置換されているヘテロアリールカルボニル基、並びに
−  ヘテロアリール環においてフェニル基によって場合により置換されているヘテロアリールアセチル基、
からなる群より選択される基を表すが、
ただし、
Ｒ５及びＲ６が両方メチル基である場合、Ｒ７はインドール−３−イルアセチル基ではなく、
Ｒ５及びＲ６が両方メチル基である場合、Ｒ７は
【化２５】
2017536342.tif 000027
基ではない］。
【００２９】
別の好ましい態様では、本発明の発明主題は、以下の中から択一的に選択される、タンパク質のプレニル化の阻害が必要とされる疾患又は障害の治療及び／又は予防における使用のための、エナンチオマー、ジアステレオマー、及びそれらの混合物（ラセミ混合物を含む）の形態の、化合物又はその薬学的に許容し得る塩のいずれか１つに関する：
【化２６】
2017536342.tif 000028
［式中、
Ｒ１は、２−ピリジル、３−ピリジル、又は４−ピリジルであり；
Ｒ２は、
【化２７】
2017536342.tif 000029
からなる群より選択される基を表し；Ｒ３は、
−  アリールカルボニル基、
−  ヘテロアリールカルボニル基、
−  （Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ−カルボニルメチル基、及び
−
【化２８】
2017536342.tif 000030
基（Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｄ、及びＲｅは、独立して、水素原子、ハロゲン原子、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル基、又は（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ基であり、そして、Ｒｃは、水素原子、ハロゲン原子、又は（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ基であり、Ｒａ及びＲｂ、又はＲｂ及びＲｃ、又はＲｃ及びＲｄ、又はＲｄ及びＲｅは、一緒になって、場合により、これらが結合している炭素原子と共に、２個の酸素原子を含むフェニル環に縮合している５員又は６員の環を形成する）からなる群より選択される基を表し、
そして、Ｒ４は、ハロゲン原子によって置換されているフェニル基、又はベンジル基である］
及び
【化２９】
2017536342.tif 000031
［式中、
Ｒ５は、水素原子又は（Ｃ１−４）アルキル基を表し；
Ｒ６は、水素原子又は（Ｃ１−４）アルキル基を表し；そして、
Ｒ７は、
−  アリールカルボニル基、
−  （Ｃ１−４）アルキル基及びフェニル基から選択される１個又は２個の基によって場合により置換されているヘテロアリールカルボニル基、
−  ヘテロアリール環においてフェニル基によって置換されているヘテロアリールアセチル基、
−  （Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ−カルボニルメチル基、並びに
−
【化３０】
2017536342.tif 000032
基（Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、及びＲｅは、独立して、水素原子、ハロゲン原子、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル基、又は（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ基であり、Ｒａ及びＲｂ、又はＲｂ及びＲｃ、又はＲｃ及びＲｄ、又はＲｄ及びＲｅは、一緒になって、場合により、これらが結合している炭素原子と共に、２個の酸素原子を含むフェニル環に縮合している５員又は６員の環を形成する）からなる群より選択される基を表す］。
【００３０】
特定の実施態様では、本発明の発明主題は、以下の中から択一的に選択される、タンパク質のプレニル化の阻害が必要とされる疾患又は障害の治療及び／又は予防における使用のための、エナンチオマー、ジアステレオマー、及びそれらの混合物（ラセミ混合物を含む）の形態の、化合物又はその薬学的に許容し得る塩のいずれか１つに関する：
【化３１】
2017536342.tif 000033
［式中、
Ｒ１は、２−ピリジル、３−ピリジル、又は４−ピリジルであり；
Ｒ２は、
【化３２】
2017536342.tif 000034
からなる群より選択される基を表し；Ｒ３は、
−  ヘテロアリールカルボニル基、
−  （Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ−カルボニルメチル基、及び
−
【化３３】
2017536342.tif 000035
基（Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｄ、及びＲｅは、独立して、水素原子、ハロゲン原子、又は（Ｃ１−Ｃ４）アルキル基であり、そして、Ｒｃは、水素原子又はハロゲン原子であり、Ｒａ及びＲｂ、又はＲｂ及びＲｃ、又はＲｃ及びＲｄ、又はＲｄ及びＲｅは、一緒になって、場合により、これらが結合している炭素原子と共に、２個の酸素原子を含むフェニル環に縮合している５員又は６員の環を形成する）からなる群より選択される基を表し、
そして、Ｒ４は、ハロゲン原子によって置換されているフェニル基、又はベンジル基である］
及び
【化３４】
2017536342.tif 000036
［式中、
Ｒ５は、水素原子又は（Ｃ１−４）アルキル基を表し；
Ｒ６は、水素原子又は（Ｃ１−４）アルキル基を表し；そして、
Ｒ７は、
−  （Ｃ１−４）アルキル基及びフェニル基から選択される１個又は２個の基によって場合により置換されているヘテロアリールカルボニル基、並びに
−  ヘテロアリール環においてフェニル基によって置換されているヘテロアリールアセチル基
からなる群より選択される基を表す］。
【００３１】
本発明の化合物は、遊離塩基又は薬学的に許容し得る酸の付加塩の形態で存在し得る。
【００３２】
化合物の「薬学的に許容し得る塩」とは、薬学的に許容し得、そして、親化合物の所望の薬理活性を有する塩を意味する。
【００３３】
本発明に係る化合物の好適な薬学的に許容し得る酸付加塩は、塩酸塩、臭化水素酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩、トリフルオロ酢酸塩、アスコルビン酸塩、トリフラート、メシル酸塩、トシル酸塩、ギ酸塩、酢酸塩、及びリンゴ酸塩を含む。
【００３４】
本発明の化合物及びその塩類は、溶媒和物（例えば、水和物）を形成し得、そして、本発明は、全てのこのような溶媒和物を含む。
【００３５】
本発明の状況では、
−  用語「ハロゲン」は、塩化物、フッ化物、臭化物、又はヨウ化物を意味すると理解され、特に、塩化物、フッ化物、又は臭化物を意味し、より好ましくは、フッ化物である。
−  用語「（Ｃ１−Ｃ４）アルキル」とは、本明細書で使用するとき、それぞれ、Ｃ１−Ｃ４の一級（normal）、二級、又は三級の飽和炭化水素を指す。例は、メチル、エチル、１−プロピル、２−プロピルであるが、これらに限定されない。
−  用語「（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ」とは、本明細書で使用するとき、それぞれ、Ｏ−（Ｃ１−Ｃ４）アルキル部分（アルキルは、上に定義したとおりである）を指す。例は、メトキシ、エトキシ、１−プロポキシ、２−プロポキシであるが、これらに限定されない。
−  用語「アリールカルボニル基」という表現における「アリール」は、６〜１０個の環原子の一価の単環式又は二環式の芳香族炭化水素ラジカルを意味すると理解される。例は、フェニル、ナフチルであるが、これらに限定されない。より好ましくは、「アリール」は、フェニルである。
−  用語「ヘテロアリールカルボニル基」及び「ヘテロアリールアセチル基」という表現における「ヘテロアリール」は、本明細書で使用するとき、５〜１０個の環原子（１個以上、好ましくは、１個、２個、又は３個の環原子は、Ｎ、Ｏ、又はＳから選択されるヘテロ原子であり、残りの環原子は炭素である）の一価の単環式又は二環式の芳香族ラジカルを指す。代表的な例は、ピロリル、チエニル、チアゾリル、イミダゾリル、フラニル、インドリル、イソインドリル、オキサゾリル、イソキサゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾキサゾリル、キノリニル、イソキノリニル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアゾリル、テトラゾリル等を含むが、これらに限定されない。好ましくは、ヘテロアリールは、チエニル、フリル、より好ましくは、チエニルである。そして、
−  用語「患者」は、ヒト、又はネコ若しくはイヌ等の哺乳類にも及び得る。
【００３６】
特定の態様では、以下の基
【化３５】
2017536342.tif 000037
は、
【化３６】
2017536342.tif 000038
から選択される基を表し、そして、より好ましくは、
【化３７】
2017536342.tif 000039
から選択される基を表す。
【００３７】
１つの特定の変形例では、本発明は、タンパク質のプレニル化の阻害が必要とされる疾患又は障害の治療及び／又は予防における使用のための、エナンチオマー、ジアステレオマー、及びそれらの混合物（ラセミ混合物を含む）の形態の、上に定義した式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩のいずれか１つを目的とする：
（式中、
Ｒ１は、２−ピリジル、３−ピリジル、又は４−ピリジルであり；
Ｒ２は、
【化３８】
2017536342.tif 000040
からなる群より選択される基を表し；Ｒ３は、
【化３９】
2017536342.tif 000041
からなる群より選択される基を表し；そして、Ｒ４は、ハロゲン原子によって置換されているフェニル基、又はベンジル基である）。
【００３８】
本発明は、更に、タンパク質のプレニル化の阻害が必要とされる疾患又は障害の治療及び／又は予防における使用のための、エナンチオマー、ジアステレオマー、及びそれらの混合物（ラセミ混合物を含む）の形態の、以下に定義する式（Ia）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩のいずれか１つに関する：
【化４０】
2017536342.tif 000042
（式中、Ｒ２は、
【化４１】
2017536342.tif 000043
からなる群より選択される基を表し；Ｒ３は、
【化４２】
2017536342.tif 000044
からなる群より選択される基を表し；そして、Ｒ４は、ハロゲン原子によって置換されているフェニル基である）。
【００３９】
本発明は、更に、タンパク質のプレニル化の阻害が必要とされる疾患又は障害の治療及び／又は予防における使用のための、エナンチオマー、ジアステレオマー、及びそれらの混合物（ラセミ混合物を含む）の形態の、以下に定義する式（Ib）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩のいずれか１つに関する：
【化４３】
2017536342.tif 000045
（式中、Ｒ３は、
【化４４】
2017536342.tif 000046
からなる群より選択される基を表す）。
【００４０】
本発明は、更に、タンパク質のプレニル化の阻害が必要とされる疾患又は障害の治療及び／又は予防における使用のための、エナンチオマー、ジアステレオマー、及びそれらの混合物（ラセミ混合物を含む）の形態の、以下に定義する式（Ic）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩のいずれか１つに関する：
【化４５】
2017536342.tif 000047
（式中、Ｒ４は、ハロゲン原子によって置換されているフェニル基、又はベンジル基である）。
【００４１】
本発明は、更に、タンパク質のプレニル化の阻害が必要とされる疾患又は障害の治療及び／又は予防における使用のための、エナンチオマー、ジアステレオマー、及びそれらの混合物（ラセミ混合物を含む）の形態の、式（I’a）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩のいずれか１つに関する：
【化４６】
2017536342.tif 000048
（式中、Ｒ３は、
【化４７】
2017536342.tif 000049
からなる群より選択される基を表す）。
【００４２】
好ましい実施態様によれば、本発明は、タンパク質のプレニル化の阻害が必要とされる疾患又は障害の治療及び／又は予防における使用のための、エナンチオマー、ジアステレオマー、及びそれらの混合物（ラセミ混合物を含む）の形態の、上に定義した式（I’a）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩のいずれか１つに関する（式中、Ｒ３は、
【化４８】
2017536342.tif 000050
からなる群より選択される基を表す）。
【００４３】
より好ましい実施態様によれば、本発明は、タンパク質のプレニル化の阻害が必要とされる疾患又は障害の治療及び／又は予防における使用のための、エナンチオマー、ジアステレオマー、及びそれらの混合物（ラセミ混合物を含む）の形態の、上に定義した式（I’a）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩のいずれか１つに関する（式中、Ｒ３は、
【化４９】
2017536342.tif 000051
からなる群より選択される基を表す）。
【００４４】
別の特定の変形例では、本発明は、タンパク質のプレニル化の阻害が必要とされる疾患又は障害の治療及び／又は予防における使用のための、エナンチオマー、ジアステレオマー、及びそれらの混合物（ラセミ混合物を含む）の形態の、上に定義した式（II）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩のいずれか１つを目的とする：
［式中、
Ｒ５は、水素原子又は（Ｃ１−４）アルキル基を表し；
Ｒ６は、水素原子又は（Ｃ１−４）アルキル基を表し；そして、
Ｒ７は、
−  アリールカルボニル基、
−  （Ｃ１−４）アルキル基及びフェニル基から選択される１個又は２個の基によって場合により置換されているヘテロアリールカルボニル基、
−  ヘテロアリール環においてフェニル基によって置換されているヘテロアリールアセチル基、
−  （Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ−カルボニルメチル基、並びに
−
【化５０】
2017536342.tif 000052
基（Ｒａ、Ｒｃ、及びＲｅは、独立して、水素原子、ハロゲン原子、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル基、又は（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ基であり、そして、Ｒｂ及びＲｄは、独立して、水素原子又は（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ基であり、Ｒａ及びＲｂ、又はＲｂ及びＲｃ、又はＲｃ及びＲｄ、又はＲｄ及びＲｅは、一緒になって、場合により、これらが結合している炭素原子と共に、２個の酸素原子を含むフェニル環に縮合している５員又は６員の環を形成する）からなる群より選択される基を表す］。
【００４５】
別の特定の変形例では、本発明は、タンパク質のプレニル化の阻害が必要とされる疾患又は障害の治療及び／又は予防における使用のための、エナンチオマー、ジアステレオマー、及びそれらの混合物（ラセミ混合物を含む）の形態の、上に定義した式（II）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩のいずれか１つを目的とする：
（式中、
Ｒ５は、水素原子又は（Ｃ１−４）アルキル基を表し；
Ｒ６は、水素原子又は（Ｃ１−４）アルキル基を表し；そして、
Ｒ７は、
【化５１】
2017536342.tif 000053
からなる群より選択される基を表す）。
【００４６】
好ましい実施態様によれば、本発明は、タンパク質のプレニル化の阻害が必要とされる疾患又は障害の治療及び／又は予防における使用のための、エナンチオマー、ジアステレオマー、及びそれらの混合物（ラセミ混合物を含む）の形態の、上に定義した式（II）の化合物又はその薬学的に許容し得る塩のいずれか１つに関する：
（式中、
Ｒ５は、（Ｃ１−４）アルキル基、好ましくは、メチル基を表し；
Ｒ６は、（Ｃ１−４）アルキル基、好ましくは、メチル基を表し；そして、
Ｒ７は、
【化５２】
2017536342.tif 000054
を表す）。
【００４７】
本発明の好ましい実施態様によれば、タンパク質のプレニル化の阻害が必要とされる疾患又は障害の治療及び／又は予防における使用のための化合物は、エナンチオマー、ジアステレオマー、及びそれらの混合物（ラセミ混合物を含む）の形態の、
（１）  ｛２−［４−（２−フルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−ピリミジン−４−イル｝−ピリジン−２−イル−アセトニトリル、すなわち、Mono-AP1
（２）  ｛２−［４−（４−クロロ−フェニル）−４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−イル］−ピリミジン−４−イル｝−ピリジン−２−イル−アセトニトリル、すなわち、Mono-AP9
（３）  ［２−（４−ベンゾイル−ピペリジン−１−イル）−ピリミジン−４−イル］−ピリジン−２−イル−アセトニトリル、すなわち、Mono-AP16
（４）  ｛２−［４−（３−メチル−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−ピリミジン−４−イル｝−ピリジン−２−イル−アセトニトリル、すなわち、Mono-AP21
（５）  ｛２−［４−（４−フルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−ピリミジン−４−イル｝−ピリジン−２−イル−アセトニトリル、すなわち、Mono-AP24
（６）  ｛４−［４−（シアノ−ピリジン−２−イル−メチル）−ピリミジン−２−イル］−ピペラジン−１−イル｝−酢酸エチルエステル、すなわち、Mono-AP25
（７）  ｛２−［４−（２，４−ジフルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−ピリミジン−４−イル｝−ピリジン−２−イル−アセトニトリル、すなわち、Mono-AP26
（８）  ｛２−［４−（６−フルオロ−４Ｈ−ベンゾ［１，３］ジオキシン−８−イルメチル）−ピペラジン−１−イル］−ピリミジン−４−イル｝−ピリジン−２−イル−アセトニトリル、すなわち、Mono-AP27
（９）  ｛２−［４−（３−フルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−ピリミジン−４−イル｝−ピリジン−２−イル−アセトニトリル、すなわち、Mono-AP28
（１０）  ｛２−［４−（３，４−ジフルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−ピリミジン−４−イル｝−ピリジン−２−イル−アセトニトリル、すなわち、Mono-AP30
（１１）  ピリジン−４−イル−｛６−［４−（チオフェン−２−カルボニル）−ピペラジン−１−イル］−ピリミジン−４−イル｝−アセトニトリル、すなわち、Mono-AP2
（１２）  ［２−（４−ベンジル−４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−イル）−ピリミジン−４−イル］−ピリジン−２−イル−アセトニトリル、すなわち、Mono-AP3
（１３）  ｛４−［６−（メチル−ｍ−トリル−アミノ）−ピリミジン−４−イル］−ピペラジン−１−イル｝−（１−フェニル−５−プロピル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−メタノン、すなわち、Di-AP2、及び
（１４）  １−｛４−［６−（メチル−ｍ−トリル−アミノ）−ピリミジン−４−イル］−ピペラジン−１−イル｝−２−（２−フェニル−１Ｈ−インドール−３−イル）−エタノン、すなわち、Di-AP1、
及びそれらの薬学的に許容し得る塩類の中から選択される。
【００４８】
また、本発明は、上に定義した式（Ｉ）、（II）、（Ia）、（Ib）、（Ic）、及び（I’a）の化合物自体に関する。
【００４９】
したがって、前記化合物（１）、（２）、（３）、（４）、（５）、（６）、（７）、（８）、（９）、（１０）、（１１）、（１２）、（１３）、及び（１４）は、新規であり、そして、塩酸塩、臭化水素酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩、トリフルオロ酢酸塩、アスコルビン酸塩、トリフラート、メシル酸塩、トシル酸塩、ギ酸塩、酢酸塩、及びリンゴ酸塩等のそれらの薬学的に許容し得る塩のいずれか１つと同様に、本発明の一部を形成する。
【００５０】
したがって、本発明は、化合物（１）、（２）、（３）、（４）、（５）、（６）、（７）、（８）、（９）、（１０）、（１１）、（１２）、（１３）、及び（１４）、並びにそれらの薬学的に許容し得る塩類自体にも及ぶ。
【００５１】
式（Ｉ）、（II）、（Ia）、（Ib）、（Ic）、及び（I’a）の化合物は、１つ以上の不斉炭素原子を含んでいてよい。したがって、これらは、上述の通り、エナンチオマー又はジアステレオマーの形態で存在し得る。これらエナンチオマー、ジアステレオマー、及びそれらの混合物（ラセミ混合物を含む）は、本発明の範囲内に包含される。
【００５２】
別の態様によれば、本発明は、医薬としての使用のための、式（Ｉ）、（II）、（Ia）、（Ib）、（Ic）、及び（I’a）の化合物、並びに具体的な化合物（１）、（２）、（３）、（４）、（５）、（６）、（７）、（８）、（９）、（１０）、（１１）、（１２）、（１３）、及び（１４）、並びにそれらの薬学的に許容し得る塩類に関する。
【００５３】
したがって、本発明の新規化合物、すなわち、式（Ｉ）、（II）、（Ia）、（Ib）、（Ic）、及び（I’a）の化合物、並びに上に列挙した具体的な化合物は、医薬として有用であり、より具体的には、タンパク質のプレニル化の阻害が必要とされる疾患又は障害を治療及び／又は予防するために用いることができる。前記疾患又は障害は、ハッチンソン−ギルフォード早老症候群（HGPS）、早老症、神経変性疾患、パーキンソン病、びまん性レヴィー小体病、多系統萎縮症、シャイ−ドレーガー症候群、線条体黒質変性症、オリーブ橋小脳萎縮症、パントテン酸キナーゼ関連神経変性症、認知障害、認知症、リソソーム蓄積症、II型糖原病、ムコ多糖症、ムコリピドーシスII、ムコリピドーシスIII、ムコスルファチドーシス、ＧＭ２活性化タンパク質欠乏症異型ＡＢ、ダノン病、サラ病、テイ−サックス病、サンドホフ病、シンドラー病、神崎病、α−マンノシドーシス、β−マンノシドーシス、フコシドーシス、シアリドーシス、アスパルチルグルコサミン尿症、炭水化物欠乏糖タンパク質症候群、ウォルマン病、ファーバー病、ニーマン−ピック病Ａ型、Ｂ型、及びＣ型、ゴーシェ病、クラッベ病、ファブリー病、多発性スルファターゼ欠損症、ＧＭ１ガングリオシドーシス、ＧＭ２ガングリオシドーシス、ＧＭ３ガングリオシドーシス、ガラクトシアリドーシス、シスチン症、シアル酸蓄積症、濃化異骨症、異染性白質萎縮症、ガラクトシアリドーシス、神経セロイドリポフスチン症、ラクトシルセラミドーシス、ポンペ病、コバラミン欠乏症（cobalamin definiciency）Ｆ型、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、アルツハイマー病；ミトコンドリア性疾患、眼疾患、炎症性疾患、心血管疾患、増殖性疾患、鬱病、不安、免疫疾患、新生物疾患、腫瘍、癌、転移、白血病、癌腫、メラノーマ、肉腫、グリア芽細胞腫、多発性骨髄腫、腺腫、新生物、神経芽細胞腫、腺癌、リンパ腫、骨髄腫、多発性骨髄腫、骨髄異形成症候群、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、慢性骨髄単球性白血病、血管原性骨髄様化生、中皮腫、神経膠腫、アテローム性動脈硬化症、胆石、胆石症、脂肪石灰化肉芽腫症、高コレステロール血症、高リポタンパク血症、コレステロール結晶塞栓症、心筋梗塞症（myocardial infection）、脳梗塞、狭心症、骨粗鬆症、関節炎、関節リウマチ、変形性関節炎、パジェット病、神経線維腫症１型、レオパード症候群、ヌーナン症候群、レギウス症候群、コステロ症候群、遺伝性歯肉線維腫症１型、自己免疫性リンパ増殖症候群、毛細血管奇形−動静脈奇形、皮膚老化、ホルモン老化、光線誘発性早期皮膚老化、老化筋脂肪皮膚（myo-lipo-skin）、拘束性皮膚症、毛髪の変化又は脱毛、脱毛症、デルタ肝炎ウイルス感染症、並びにウイルス感染症を含んでいてよい。
【００５４】
より具体的には、前記腫瘍及び癌は、骨、脳、腎臓、肝臓、副腎、結腸直腸、膀胱、乳房、胃、卵巣、結腸、直腸、前立腺、膵臓、肺、非小細胞肺、小細胞肺、膣、甲状腺、頭頸部の癌及び腫瘍から選択される。
【００５５】
本発明の化合物は、当業者によって実施される有機合成の従来の方法によって調製することができる。以下に概説する一般的な反応順序は、本発明の化合物を調製するのに有用な一般的な方法を表し、そして、範囲又は有用性を限定することを意味するものではない。
【００５６】
スキーム１、２、及び３において以下に説明及び例証する通り、３つのルート、それぞれ、ルートＡ、ルートＢ、及びルートＣが、本発明に係る化合物を回収するのに利用可能である。
【００５７】
【化５３】
2017536342.tif 000055
テトラヒドロフラン（THF）中０．１M 水素化ナトリウム １．１当量の懸濁液に、THF中０．１M ２−ピリジルアセトニトリル、３−ピリジルアセトニル、又は４−ピリジルアセトニル、好ましくは、２−ピリジルアセトニル １当量の溶液を滴下した。混合物を３０分間撹拌し、次いで、氷浴によって０℃に冷却する。ジメチルホルムアミド（DMF）中１M ジクロロピリミジン（例えば、２，４−ジクロロピリミジン） １当量の溶液を滴下し、そして、反応混合物を室温で一晩撹拌する。反応混合物を部分的に蒸発させ、水で希釈し、そして、濃HClでpH７に戻す。溶液を酢酸エチルで抽出し、有機相を乾燥させ、そして、蒸発させて、橙色の固体（ハロゲン化中間体）を与え、これを更に精製することなく用いた。
【００５８】
適切な二級アミンＲ２Ｈ １当量及びジイソプロピルエチルアミン（DIEA） １当量の存在下、０．１Mになるようにハロゲン化中間体をDMFに溶解させ、そして、反応混合物を１３０℃で１時間加熱する。反応媒体を蒸発させ、そして、水／メタノール勾配にてC18半自動装置においてクロマトグラフィーによって生成物を精製する。
【００５９】
ルートＡは、Ｒ１、Ｒ２、及びＲ４が、式（Ｉ）において上に定義した通りであり、Ｒ３が、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシカルボニルメチル基又は
【化５４】
2017536342.tif 000056
基を表し、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、及びＲｅが、式（Ｉ）において上に定義した通りである、式（Ｉ）の化合物に特に好適である。
【００６０】
より具体的には、化合物（１）、（２）、（３）、（４）、（５）、（６）、（７）、（８）、（９）、（１０）及び（１２）は、以下の実験の部分により詳細に示す通り、ルートＡを介して調製することができる。
【００６１】
【化５５】
2017536342.tif 000057
THF中０．１M 水素化ナトリウム １．１当量の懸濁液に、THF中０．１M ２−ピリジルアセトニトリル、３−ピリジルアセトニル、又は４−ピリジルアセトニル、好ましくは、4−ピリジルアセトニル １当量の溶液を滴下する。混合物を３０分間撹拌し、次いで、氷浴によって０℃に冷却する。DMF中１M ４，６−ジクロロピリミジン １当量の溶液を滴下し、そして、反応混合物を室温で一晩撹拌する。反応混合物を部分的に蒸発させ、水で希釈し、そして、濃HClでpH７に戻す。溶液を酢酸エチルで抽出し、有機相を乾燥させ、そして、蒸発させて、橙色の固体を与え、これを更に精製することなく用いた。
【００６２】
ピペラジン ５当量及びDIEA １当量の存在下、０．１Mになるようにハロゲン化中間体をDMFに溶解させ、そして、反応混合物を１３０℃で１時間加熱する。反応媒体を蒸発させ、そして、水／メタノール勾配にてC18半自動装置においてクロマトグラフィーによって生成物を精製する。
【００６３】
DIEA ２当量の存在下、０．２Mで酸をDMFに溶解させる。０．２M Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボラート（TBTU）溶液 １当量を添加し、そして、反応混合物を５分間撹拌する。DMF中０．２Mのアミン当量を添加し、そして、反応媒体を１時間撹拌し、次いで、蒸発させた。残渣を酢酸エチルに再溶解させ、そして、１M Ｎａ２ＣＯ３で洗浄し、次いで、水で洗浄した。有機相を蒸発させ、そして、水／メタノール勾配にてC18で精製した。
【００６４】
ルートＢは、Ｒ１が、式（Ｉ）において上に定義した通りであり、Ｒ２が、
【化５６】
2017536342.tif 000058
であり、Ｒ３が、アリールカルボニル基（例えば、ベンゾイル基）又はヘテロアリールカルボニル基（例えば、チエニルカルボニル基）を表す、式（Ｉ）の化合物に特に好適である。
【００６５】
より具体的には、化合物（１１）は、以下の実験の部分により詳細に示す通り、ルートＢを介して調製することができる。
【００６６】
【化５７】
2017536342.tif 000059
エタノール中０．１M ジクロロピリミジン（例えば、４，６−ジクロロピリミジン） １当量の溶液に、エタノール中０．１M Ｒ５−フェニル−Ｎ−Ｒ６（例えば、Ｎ−メチル−ｍ−トルイジン） １当量の溶液を添加した。媒体を４時間還流させ、次いで、部分的に乾燥させ、そして、水で希釈する。溶液を酢酸エチルで抽出し、有機相を乾燥させ、そして、蒸発させて、固体を与え、これを更に精製することなく用いた。
【００６７】
ピペラジン ５当量及びDIEA １当量の存在下、０．１Mになるようにハロゲン化中間体をDMFに溶解させ、そして、反応混合物を１３０℃で１時間加熱する。反応媒体を蒸発させ、そして、水／メタノール勾配にてC18半自動装置においてクロマトグラフィーによって生成物を精製する。
【００６８】
DIEA ２当量の存在下、０．２Mで酸をDMFに溶解させる。０．２M TBTU溶液 １当量を添加し、そして、反応混合物を５分間撹拌する。DMF中０．２Mのアミン当量を添加し、そして、反応媒体を１時間撹拌し、次いで、蒸発させた。残渣を酢酸エチルに再溶解させ、そして、１M Ｎａ２ＣＯ３で洗浄し、次いで、水で洗浄した。有機相を蒸発させ、そして、水／メタノール勾配にてC18で精製した。
【００６９】
ルートＣは、Ｒ５及びＲ６が、式（II）において上に定義した通りであり、そして、Ｒ７が、アリールカルボニル基、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル基及びフェニル基から選択される１個又は２個の基によって場合により置換されているヘテロアリールカルボニル基、並びにヘテロアリール環においてフェニル基によって場合により置換されているヘテロアリールアセチル基である、式（II）の化合物に特に好適である。
【００７０】
より具体的には、化合物（１３）及び（１４）は、以下の実験の部分により詳細に示す通り、ルートＣを介して調製することができる。
【００７１】
本発明に係る幾つかの化合物の化学構造及びデータを、それぞれ、以下の表Ｉ及び表IIに示す。
【００７２】
本発明に係る各化合物（１）〜（１４）の特性評価は、液体クロマトグラフィー−質量分析（LC/MS）を介して実施した。
【００７３】
分析条件は、以下の通りである：
装置：質量分析計Micromass / Waters Platform LCに連結されているWaters 2795 HPLC
カラム：Varian Pursuit C18（２．０×２０．０mm、５マイクロメートル）
流速：０．８mL/分
分析時間：５分間
検出：Waters 996 Diode Array（１８０〜５００nm）
移動相：水／メタノール（９／１（体積））中１０mM ギ酸アンモニウム（pH８）（Ａ）及びメタノール中１０mM ギ酸アンモニウム（Ｂ）。
【００７４】
【表１】
2017536342.tif 000060
【００７５】
エレクトロスプレーイオン化源（ES <+>）を用いて質量スペクトルを得た。
【００７６】
更に、本発明に係る各化合物（１）〜（１４）の純度、分子量、及び保持時間のデータは、表IIに含まれる。
【００７７】
【表２】
2017536342.tif 000061
2017536342.tif 000062
2017536342.tif 000063
【００７８】
【表３】
2017536342.tif 000064
【００７９】
本明細書で指定するアミノピリジン化合物及びそれを含有する医薬組成物の投与方法については、本明細書の他の箇所に記載する。
【００８０】
以下の実施例は、本発明に係る化合物（１）〜（１４）の調製について詳細に説明する。得られた生成物の構造は、少なくともLC-MSによって確認された。
【００８１】
実施例
実施例Ｉ：本発明に係る化合物の調製
上述の通り：
−  化合物（１）、（２）、（３）、（４）、（５）、（６）、（７）、（８）、（９）、（１０）及び（１２）は、ルートＡを介して調製することができ；
−  本発明に係る化合物（１１）は、ルートＢを介して調製することができ；そして、
−  本発明に係る化合物（１３）及び（１４）は、ルートＣを介して調製することができる。
【００８２】
実施例Ｉ−１：Mono-AP1、表Ｉの化合物（１）
工程１
【化５８】
2017536342.tif 000065
テトラヒドロフラン（THF）中０．１M 水素化ナトリウム １．１当量の懸濁液に、THF中０．１M ２−ピリジルアセトニトリル １当量の溶液を滴下した。混合物を３０分間撹拌し、次いで、氷浴によって０℃に冷却する。ジメチルホルムアミド（DMF）中１M ２，４−ジクロロピリミジン １当量の溶液を滴下し、そして、反応混合物を室温で一晩撹拌する。反応混合物を部分的に蒸発させ、水で希釈し、そして、濃HClでpH７に戻す。溶液を酢酸エチルで抽出し、有機相を乾燥させ、そして、蒸発させて、橙色の固体（ハロゲン化中間体）を与え、これを更に精製することなく用いた。収率５５％でハロゲン化中間体が得られる。
【００８３】
工程２
【化５９】
2017536342.tif 000066
１−（２−フルオロ−ベンジル）ピペラジン １当量及びDIEA １当量の存在下、０．１Mになるようにハロゲン化中間体をDMFに溶解させ、そして、反応混合物を１時間かけて１３０℃に加熱する。反応媒体を蒸発させ、そして、水／メタノール勾配にてC18半自動装置においてクロマトグラフィーによって生成物を精製する。収率８２％で化合物（１）が得られる。
【００８４】
実施例Ｉ−２：Mono-AP9、表Ｉの化合物（２）
まず、上記実施例Ｉ−１に記載の通り工程１を実施する。
工程２
【化６０】
2017536342.tif 000067
４−（４−クロロフェニル）ピペリジン−４−オール １当量及びDIEA １当量の存在下、０．１Mになるようにハロゲン化中間体をDMFに溶解させ、そして、反応混合物を１３０℃で１時間加熱する。反応媒体を蒸発させ、そして、水／メタノール勾配にてC18半自動装置においてクロマトグラフィーによって生成物を精製する。収率８０％で化合物（２）が得られる。
【００８５】
実施例Ｉ−３：Mono-AP16、表Ｉの化合物（3）
まず、上記実施例Ｉ−１に記載の通り工程１を実施する。
工程２
【化６１】
2017536342.tif 000068
フェニル−ピペリジン−４−イル−メタノンヒドロクロリド １当量及びDIEA １当量の存在下、０．１Mになるようにハロゲン化中間体をDMFに溶解させ、そして、反応混合物を１３０℃で１時間加熱する。反応媒体を蒸発させ、そして、水／メタノール勾配にてC18半自動装置においてクロマトグラフィーによって生成物を精製する。収率７５％で化合物（３）が得られる。
【００８６】
実施例Ｉ−４：Mono-AP21、表Ｉの化合物（４）
まず、上記実施例Ｉ−１に記載の通り工程１を実施する。
工程２
【化６２】
2017536342.tif 000069
１−（３−メチル−ベンジル）ピペラジン １当量及びDIEA １当量の存在下、０．１Mになるようにハロゲン化中間体をDMFに溶解させ、そして、反応混合物を１時間かけて１３０℃に加熱する。反応媒体を蒸発させ、そして、水／メタノール勾配にてC18半自動装置においてクロマトグラフィーによって生成物を精製する。収率８４％で化合物（４）が得られる。
【００８７】
実施例Ｉ−５：Mono-AP24、表Ｉの化合物（５）
まず、上記実施例Ｉ−１に記載の通り工程１を実施する。
工程２
【化６３】
2017536342.tif 000070
１−（４−フルオロ−ベンジル）ピペラジン １当量及びDIEA １当量の存在下、０．１Mになるようにハロゲン化中間体をDMFに溶解させ、そして、反応混合物を１時間かけて１３０℃に加熱する。反応媒体を蒸発させ、そして、水／メタノール勾配にてC18半自動装置においてクロマトグラフィーによって生成物を精製する。収率７６％で化合物（５）が得られる。
【００８８】
実施例Ｉ−６：Mono-AP25、表Ｉの化合物（６）
まず、上記実施例Ｉ−１に記載の通り工程１を実施する。
工程２
【化６４】
2017536342.tif 000071
１−（３−メチル−ベンジル）ピペラジン １当量及びDIEA １当量の存在下、０．１Mになるようにハロゲン化中間体をDMFに溶解させ、そして、反応混合物を１時間かけて１３０℃に加熱する。反応媒体を蒸発させ、そして、水／メタノール勾配にてC18半自動装置においてクロマトグラフィーによって生成物を精製する。収率８４％で化合物（６）が得られる。
【００８９】
実施例Ｉ−７：Mono-AP26、表Ｉの化合物（７）
まず、上記実施例Ｉ−１に記載の通り工程１を実施する。
工程２
【化６５】
2017536342.tif 000072
１−（２，４−ジフルオロ−ベンジル）ピペラジン １当量及びDIEA １当量の存在下、０．１Mになるようにハロゲン化中間体をDMFに溶解させ、そして、反応混合物を１時間かけて１３０℃に加熱する。反応媒体を蒸発させ、そして、水／メタノール勾配にてC18半自動装置においてクロマトグラフィーによって生成物を精製する。収率８９％で化合物（７）が得られる。
【００９０】
実施例Ｉ−８：Mono-AP27、表Ｉの化合物（８）
まず、上記実施例Ｉ−１に記載の通り工程１を実施する。
工程２
【化６６】
2017536342.tif 000073
１−（６−フルオロ−４Ｈ−ベンゾ［１，３］ジオキシン−８−イルメチル）ピペラジン １当量及びDIEA １当量の存在下、０．１Mになるようにハロゲン化中間体をDMFに溶解させ、そして、反応混合物を１３０℃で１時間加熱する。反応媒体を蒸発させ、そして、水／メタノール勾配にてC18半自動装置においてクロマトグラフィーによって生成物を精製する。収率７４％で化合物（８）が得られる。
【００９１】
実施例Ｉ−９：Mono-AP28、表Ｉの化合物（９）
まず、上記実施例Ｉ−１に記載の通り工程１を実施する。
工程２
【化６７】
2017536342.tif 000074
１−（３−フルオロ−ベンジル）ピペラジン １当量及びDIEA １当量の存在下、０．１Mになるようにハロゲン化中間体をDMFに溶解させ、そして、反応混合物を１時間かけて１３０℃に加熱する。反応媒体を蒸発させ、そして、水／メタノール勾配にてC18半自動装置においてクロマトグラフィーによって生成物を精製する。収率８３％で化合物（９）が得られる。
【００９２】
実施例Ｉ−１０：Mono-AP30、表Ｉの化合物（１０）
まず、上記実施例Ｉ−１に記載の通り工程１を実施する。
工程２
【化６８】
2017536342.tif 000075
１−（３，４−ジフルオロ−ベンジル）ピペラジン １当量及びDIEA １当量の存在下、０．１Mになるようにハロゲン化中間体をDMFに溶解させ、そして、反応混合物を１時間かけて１３０℃に加熱する。反応媒体を蒸発させ、そして、水／メタノール勾配にてC18半自動装置においてクロマトグラフィーによって生成物を精製する。収率８７％で化合物（１０）が得られる。
【００９３】
実施例Ｉ−１１：Mono-AP3、表Ｉの化合物（１２）
まず、上記実施例Ｉ−１に記載の通り工程１を実施する。
工程２
【化６９】
2017536342.tif 000076
４−ベンジル−ピペリジン−４−オール １当量及びジイソプロピルエチルアミン（DIEA） １当量の存在下、０．１Mになるようにハロゲン化中間体をDMFに溶解させ、そして、反応混合物を１時間かけて１３０℃に加熱する。反応媒体を蒸発させ、そして、水／メタノール勾配にてC18半自動装置においてクロマトグラフィーによって生成物を精製する。収率７１％で化合物（１２）が得られる。
【００９４】
実施例Ｉ−１２：Mono-AP2、表Ｉの化合物（１１）
工程１、２、及び３
【化７０】
2017536342.tif 000077
THF中０．１M 水素化ナトリウム １．１当量の懸濁液に、THF中０．１M 4−ピリジルアセトニトリル １当量の溶液を滴下する。混合物を３０分間撹拌し、次いで、氷浴によって０℃に冷却する。DMF中１M ４，６−ジクロロピリミジン １当量の溶液を滴下し、そして、反応混合物を室温で一晩撹拌する。反応混合物を部分的に蒸発させ、水で希釈し、そして、濃HClでpH７に戻す。溶液を酢酸エチルで抽出し、有機相を乾燥させ、そして、蒸発させて、橙色の固体を与え、これを更に精製することなく用いた。
【００９５】
ピペラジン ５当量及びDIEA １当量の存在下、０．１Mになるようにハロゲン化中間体をDMFに溶解させ、そして、反応混合物を１３０℃で１時間加熱する。反応媒体を蒸発させ、そして、水／メタノール勾配にてC18半自動装置においてクロマトグラフィーによって生成物を精製する。収率５０％で中間体生成物が得られる。
【００９６】
DIEA ２当量の存在下、０．２Mで２−チオフェンカルボン酸をDMFに溶解させた。０．２M Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボラート（TBTU）溶液 １当量を添加し、そして、反応混合物を５分間撹拌する。DMF中０．２M アミン中間体 １当量を添加し、そして、反応媒体を１時間撹拌し、次いで、蒸発させる。残渣を酢酸エチルに再溶解させ、そして、１M Ｎａ２ＣＯ３で洗浄し、次いで、水で洗浄した。有機相を蒸発させ、そして、水／メタノール勾配にてC18で生成物を精製した。収率７０％で化合物（１１）が得られる。
【００９７】
実施例Ｉ−１３：Di-AP2、表Ｉの化合物（１３）
工程１及び２：
【化７１】
2017536342.tif 000078
エタノール中０．１M ４，６−ジクロロピリミジン １当量の溶液に、エタノール中０．１M Ｎ−メチル−ｍ−トルイジン １当量の溶液を添加した。媒体を４時間還流させ、次いで、部分的に乾燥させ、そして、水で希釈する。溶液を酢酸エチルで抽出し、有機相を乾燥させ、そして、蒸発させて、固体を与え、これを更に精製することなく用いた。
【００９８】
ピペラジン ５当量及びDIEA １当量の存在下、０．１Mになるようにハロゲン化中間体をDMFに溶解させ、そして、反応混合物を１３０℃で１時間加熱する。反応媒体を蒸発させ、そして、水／メタノール勾配にてC18半自動装置においてクロマトグラフィーによって生成物を精製する。収率５０％で中間体生成物が得られる。
【００９９】
工程３：
【化７２】
2017536342.tif 000079
DIEA ２当量の存在下、０．２Mで１−フェニル−５−プロピル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸をDMFに溶解させる。０．２M TBTU溶液 １当量を添加し、そして、反応混合物を５分間撹拌する。DMF中０．２M アミン中間体 １当量を添加し、そして、反応媒体を１時間撹拌し、次いで、蒸発させる。残渣を酢酸エチルに再溶解させ、そして、１M Ｎａ２ＣＯ３で洗浄し、次いで、水で洗浄した。有機相を蒸発させ、そして、水／メタノール勾配にてC18で生成物を精製した。収率７０％で化合物（１３）が得られる。
【０１００】
実施例Ｉ−１４：Di-AP1、表Ｉの化合物（１４）
実施例Ｉ−１３で上に定義した通り工程１及び工程２を実施する。
工程３：
【化７３】
2017536342.tif 000080
DIEA ２当量の存在下、０．２Mで（２−フェニル−１Ｈ−インドール−３−イル）酢酸をDMFに溶解させる。０．２M TBTU溶液 １当量を添加し、そして、反応混合物を５分間撹拌する。DMF中０．２M アミン中間体 １当量を添加し、そして、反応媒体を１時間撹拌し、次いで、蒸発させる。残渣を酢酸エチルに再溶解させ、そして、１M Ｎａ２ＣＯ３で洗浄し、次いで、水で洗浄した。有機相を蒸発させ、そして、水／メタノール勾配にてC18で生成物を精製した。収率７４％で化合物（１４）が得られる。
【０１０１】
実施例II：薬理学的データ
Ａ．  材料及び方法
線維芽細胞の再プログラミング
この試験で用いた線維芽細胞は、患者13-8243についてはAssistance Publique Hopitaux de Marseilleで実施した患者生検から単離し、そして、コントロールDM4603についてはCoriell Cell Repository (Camden, USA)によって提供された。レトロウイルスベクターを用いて導入されたOCT4、KLF4、SOX2、c-Mycを用いる山中原法を用いて、線維芽細胞をiPS細胞に再プログラミングした（Takahashi et al., 2007, Cell 131, 861-872）。
【０１０２】
多能性幹細胞の培養及び分化
３０００/cm2で播種し、そして、既に記載されている通り（Nissan et al., 2012, Cell reports 2: 1-9）増殖させた、１０mg/mL マイトマイシンＣで不活化したSTOマウス線維芽細胞において、WT及びHGPSのiPS細胞を増殖させた。
【０１０３】
分化については、本発明者らによるグループによって既に公開されている分化についての指向プロトコル（directed protocols）（Nissan et al., 2012, Cell reports 2: 1-9）を用いて、iPSCを間葉幹細胞に分化させた。
【０１０４】
プレラミンＡの局在の細胞ベースアッセイ
黒色３８４ウェル透明底プレート（Corning）に２０００個のHGPS MSCをプレーティングした。４８時間薬物処理した後、細胞を４％ パラホルムアルデヒドで固定した（１５分間、室温）。４℃で一晩、０．１％ triton X-100及び１％ BSA（Sigma-Aldrich, St. Louis, USA）及びウサギ抗プレラミンＡ（ANTOO45, Diatheva）を添加したPBS溶液中で、透過処理、ブロッキング、及び一次ハイブリダイゼーションの工程を同時に行った。種特異的フルオロフォア結合二次抗ウサギ抗体（Invitrogen）で細胞を染色し（１時間、室温）、そして、Hoechst 33342で核を可視化した。洗浄／染色ステーション（ELx405 Biotek, RapidStak Thermo, Multidrop Labsystems）を用いてこれら工程を自動化した。ArrayScan VTI HCS Reader（Cellomics）を用いてプレラミンＡの局在を分析した。第１のチャネルを核の同定（Hoechst 33342染色）に用い、そして、第２のチャネルはプレラミンＡ染色を同定するために用いた。高解像度カメラモードで５倍の対物レンズを用いて写真を取得し、そして、Spot Detector bioapplicationを用いて分析した。Ｚ’＝１−［３（ＳＤＰ＋ＳＤＮ）／（ＭＰ−ＭＮ）］（式中、ＭＰ及びＭＮは、それぞれ、ポジティブコントロール（１μM ティピファニブ）及びネガティブコントロール（０．１％ DMSO）の平均に対応し、そして、ＳＤＰ及びＳＤＮは、これらの標準偏差に対応する）に従って計算したＺ’係数を用いてアッセイのロバストネスを評価した。
【０１０５】
一次スクリーニング処理
Biocell 1800（Agilent）で一次スクリーニングを実施した。このために、０．１％ ゼラチンでコーティングされた黒色３８４ウェル透明底プレートに、１ウェル当たり２０％ FBS培養培地 ３８μLに２０００個のHPGS MSCを播種した。播種の５時間後、化合物ライブラリから２０×化合物 ２μLを細胞アッセイプレートにモノプリケートで移した。各プレートにおいて、ネガティブコントロール（０．１％ DMSO）及びポジティブコントロール（１μM ティピファニブ）を、それぞれ、カラム１及び２に添加した。次いで、プレートを４８時間インキュベートし、次いで、プレラミンＡ検出アッセイ用に処理した。スクリーニングの７２枚のプレートをそれぞれ４８時間処理し、固定し、そして、既に記載されている最適化されたプロトコルを用いて特異的抗プレラミンＡ抗体で染色した。毒性分子の発見を防ぐために、視野当たりの細胞数を並行してモニタリングし、そして、検証及び表現型的な二次表現型の評価前に３０％を超える死亡率を示す候補を除外した。
【０１０６】
化合物ライブラリ
化合物ライブラリは、３８４ウェルプレートフォーマットで流通している４つの異なるライブラリに属する２１，６０８個の化合物を含み、そして、Prestwick Chemical (Illkirch, France)、LOPAC (Sigma-Aldrich, St. Louis, USA)、CHEM-X-INFINITY (Romainville, France)、及びCurie Institute (Orsay, France)から入手した。Prestwick Chemicalライブラリは、１１２０個のFDAによって承認されている薬物を含んでいる。このライブラリは、２つの濃度：０．２μM及び５μMで試験した。LOPACライブラリ（Sigma-Aldrich）は、１２８０個の薬理学的活性化合物のコレクションを含んでいる。このライブラリは、２つの濃度：０．２μM及び１０μMで試験した。Chem-X-Infinityライブラリは、約３０個の異なる化学ファミリーに属する１０５６８個の有機低分子で構成されている。このライブラリは、５μMの濃度で試験した。Institute Curieライブラリは、抗HIV、抗キナーゼ、タンパク質−タンパク質相互作用、ホスファターゼ阻害剤を含む様々な処置標的に対する最適化プログラム中に得られた８，６４０個の低分子を含んでいる。このライブラリは、２〜１５μMを含む濃度に対応する２，５μg/mLで試験した。
【０１０７】
データ解析
Spotfireソフトウェア（Tibco Co）に接続された専用Hiscreenアプリケーション（Discngine, Paris, France）を用いてスクリーニングのデータ解析を実施した。プレラミンＡ核パラメータの百分率に対するＺ’係数を各プレートについて計算することによって、スクリーニングのロバストネスを評価した。プレラミンＡ核を有する細胞の百分率及び視野当たりの細胞数に関連する生データを、DMSOコントロールの平均に対して正規化した。これら正規化されたデータに対して、Ｚスコアプレート及びＺスコアラン法を並行して用いて、ヒットの選択を実施した。Ｚスコアプレート及び／又はＺスコアランが３以上であり、そして、DMSO条件に比べて細胞数が３０％超減少しなかったヒットのみを、後続の検証工程のために選択した。これら後者を、一次スクリーニングと同じ濃度にてクアドロプリケートで再試験した。次いで、検証されたヒットを、その効果、効力、及び毒性を並行して調べるために、段階的濃度で試験した。
【０１０８】
骨芽細胞分化
３８４ウェルプレート中のMSC培養培地に６００細胞／ウェルでMSCを播種し、そして、既に記載されている通り処理した。７２時間後、MSC培地を、様々な薬物を含むか又は含まないSTEMPRO骨形成誘導培地（Invitrogen）に交換した。７日間処理した後、細胞を９５％ エタノールで固定し、そして、アルカリホスファターゼの比色基質である５−ブロモ−４−クロロ−３−インドリルホスファート／ニトロブルーテトラゾリウム（NBT）（Sigma-Aldrich）又はこの酵素の発色基質（吸光度４０５nm）であるｐ−ニトロフェニルホスファート（pNPP）（Pierce Biotechnology）のいずれかを添加することによって染色した。
【０１０９】
免疫細胞化学
４工程プロトコルにおいて、細胞を４％ パラホルムアルデヒドで固定（１５分間、室温）した後、０．１％triton X-100及び１％ BSA（Sigma-Aldrich, St. Louis, USA）を添加したPBS中で透過処理及びブロッキングを行った。一次抗体をブロッキングバッファ中室温で１時間インキュベートした。抗体は、マウス抗ラミンＡ／Ｃ（クローンJOL2、Millipore, Billerica, USA）、ウサギ抗プレラミンＡ（ANTOO45, Diatheva）、及び抗Ki67（クローンKi-S5, MAB4190, Millipore, Billerica, USA）を含んでいた。細胞を種特異的フルオロフォア結合二次抗体（Invitrogen）で染色（１時間、室温）し、そして、Hoechst 33342で核を可視化した。
【０１１０】
ATP測定
HPGS及びコントロールMSCを９６ウェルプレート（3917, Corning）に播種（５０００細胞／ウェル）し、そして、様々な薬物で処理した。独自の用量で４８時間処理した後、製造業者の推奨に従ってCellTiter Glo（登録商標）（Promega）を用いてATP含量を測定した。Analyst GTマルチモードプレートリーダー（Molecular devices）を用いて発光を測定した。並行して、自動顕微鏡を用いて各ウェルにおけるHoechst 33342で染色された核をカウントした。利用した結果は、ATP測定値とカウントされた核の数との比で与える。
【０１１１】
ウエスタンイムノブロッティング
MSCの全細胞溶解物を収集し、SDS-PAGEによって分離し、そして、液体転写法によってPVDFメンブレンに転写した。室温で１時間、１×０．１％ tweenトリス緩衝生理食塩水（TTBS）中１０％ スキムミルク（Bio-Rad）でブロットをブロッキングした。用いた一次抗体は、マウス抗ラミンＡ／Ｃ １：２００（Millipore, JOL2）、ウサギ、抗プレラミンＡ １／１００（ANTOO45, Diatheva）、及びβ−アクチン １／２０００００（Sigma）であった。メンブレンを４℃で一晩インキュベートした。セイヨウワサビペルオキシダーゼ結合種特異的二次抗体（GE-Healthcare, Little Chalfont, UK）、続いて、化学発光増強ウエスタンブロッティング検出試薬（Perkin-Elmer, Waltham, USA）を用いて抗原抗体結合を検出した。
【０１１２】
定量PCR
製造業者のプロトコルに従ってRNeasy Mini抽出キット（Qiagen, Courtaboeuf, France）を用いて全RNAを単離した。ゲノムDNAの増幅を回避するために、オンカラムDNase I切断を実施した。Nanodrop技術を用いてRNAのレベル及び品質をチェックした。Superscript III逆転写キット（Invitrogen）を用いる逆転写用にRNA 合計５００ngを用いた。製造業者の指示書に従って、ABI 7900システム（Applied biosystem）及びTaqMan gene expression Master Mix（Roche）を用いてQ-PCR分析を実施した。遺伝子発現の定量は、DeltaCt Methodに基づいており、そして、18Sの発現（Assay HS_99999901_S1）に対して正規化した。PCRプライマーは、S. Rodriguez及び共同研究者によって既に記載されている通りであった（Rodriguez S et al., 2009, Eur J Hum Genet, VOL 17(7): 928-37）。プライマー配列は、ラミンＡ（エキソン１１／１２）、5’-TCTTCTGCCTCCAGTGTCACG-3’（配列番号１）及び5’-AGTTCTGGGGGCTCTGGGT-3’（配列番号２）；ラミンＣ（エキソン９／１０）、5’- CAACTCCACTGGGGAAGAAGTG-3’（配列番号３）及び5’-CGGCGGCTACCACTCAC-3’（配列番号４）、並びにプロゲリン（エキソン１１／１２）、5’-ACTGCAGCAGCTCGGGG-3’ （配列番号５）及び5’-TCTGGGGGCTCTGGGC-3’（配列番号６）であった。
【０１１３】
Taqman MGBプローブ配列は、ラミンＡ（エキソン１１）、5’-ACTCGCAGCTACCG-3’（配列番号７）；ラミンＣ（エキソン１０）、5’-ATGCGCAAGCTGGTG-3’（配列番号８）、及びプロゲリン（エキソン１１）、5’- CGCTGAGTACAACCT-3’（配列番号９）であった。LMNA遺伝子座アッセイのためのレポーター及びクエンチャー色素は、５’  ６ＦＡＭ及び３’−非蛍光クエンチャー色素（NFQ; Applied Biosystems）であった。
【０１１４】
分子ドッキング
構造解析及びドッキング試験は、Protein Data Bankから入手可能な結晶構造に基づく。HMGCRのＣ鎖及びＤ鎖の構造は、ピロール系阻害剤との複合体から抽出した（PDB id：2Q1L、分解能２．０５Å）。hFPPSを、その３個のマグネシウム原子は含むが、その共結晶化リガンドは除いて、結晶構造（PDB id：1YV5、分解能２．００Å）を用いてモデル化した。その亜鉛カチオンは維持するが、その阻害剤は除いて、ファルネシル基転移酵素の結晶構造（PDB id：3E37、分解能１．０８Å）を用いた。これら両構造について、水素原子を付加し、そして、実験的共結晶化リガンドの質量中心を用いて結合部位の中心を規定し、そこで配座探索を実施した。配座探索を増加させるために遺伝的アルゴリズム（GA）のラン数を１０から２００に増加させたことを除いて、ドッキングパラメータのデフォルト値を用いて、全てのドッキング計算にAutoDock 4.2.1を用いた。次いで、得られた独立GAランを、カットオフ２．０Åでクラスタリング解析を用いて処理した。
【０１１５】
HMGCR比色活性アッセイ
製造業者のプロトコルに従ってHMGCoA Reductase Assay Kit （Sigma-Aldrich）を用いてHMGCR活性を測定した。このアッセイは、基質HMG CoAの存在下におけるHMGCRの触媒サブユニットによるNADPHの酸化を表す、３４０nmにおける吸光度の減少の分光光度測定に基づいている。
【０１１６】
FPPS及びFT活性アッセイのための細胞溶解物の調製
HGPS MSCの細胞ペレットを２５mM Tris-HCl（pH７．４）、１mM DTT、１mM MgCl2、１mM EDTA、１mM PMSFに再懸濁させ、そして、４℃で１０分間、１０，０００×ｇで遠心分離した。ローリー法を用いてタンパク質含量を求めた。全タンパク質 １００μgを含有する細胞溶解物のアリコートを、３７℃で３０分間、試験した物質と共にインキュベートした。
【０１１７】
FPPS活性アッセイ
Krisansら（Krisans et al., 1994, The Journal of biological chemistry VOL. 269: 14165-14169）及びGuptaら（Gupta et al., 1999, Eur J Med Chem, VOL. 43: 2751-2767）によって記載されている手順に幾つかの改変を加えて、FPPSアッセイを実施した。簡潔に述べると、２５mmol/L Hepes、pH＝７、２mmol/L MgCl2、１mmol/L ジチオスレイトール、５mmol/L KF、１％ ノクチル−β−グルコピラノシド、３．３μmol/L [4-14C] IPP（１８Ci/mmol）、３μmol/L 非標識IPP、及び２０μmol/L ゲラニル二リン酸を含有する１５０μL中でFPPSをアッセイした。処理した又は未処理の細胞溶解物 ４０μLを添加することによって反応を開始させ、そして、３７℃で４５分間インキュベートした。キャリアとして１００μg/mol ファルネソールを含有する８０％ エタノール中２．５mol/L HCl １５０μLを添加することによって反応を停止させた。３７℃で３０分間サンプルを加水分解して、FPPをファルネソールに変換し、そして、１０％ NaOH １５０μLを添加することによって中和した。反応生成物（ファルネソール）をＮ−ヘキサン １mLに抽出し、そして、放射活性をカウントするために有機相のアリコート（２００μL）を用いた。平行サンプルをアッセイして、全放射活性及び非特異的放射活性を評価した。全ての実験において、酵素アッセイはトリプリケートで実施した。
【０１１８】
FT活性アッセイ
Farnesyltransferase [3H] SPA酵素アッセイ（Amersham Life Science, Buckinghamshire, England）によってFT活性を求めた。簡潔に述べると、５０mmol/L Hepes、３０mmol/L MgCl2、２０mmol/L KCl、及び５mmol/Lを含有するアッセイバッファ ２０μL、[3H]-FPP（１２pmol） ２０μL、及びビオチンラミンＢ ２０μL中でFT活性をアッセイした。処理した又は未処理の細胞溶解物 ４０μLを添加することによって反応を開始させ、そして、３７℃で１時間インキュベートした。SPAビーズを含有する停止試薬 １５０μLを添加することによって反応を停止させ、シンチレーションカウンターでカウントした。FT活性は、全タンパク質１ミリグラム当たり１分間当たりのビオチンラミンＢペプチドに取り込まれた[3H]-FPPのピコモル（pmol/min/mg prot）として表した。平行サンプルをアッセイして、全放射活性及び非特異的放射活性を評価した。全ての実験において、酵素アッセイはトリプリケートで実施した。
【０１１９】
ファルネシル化されたタンパク質の測定。化合物の存在下、HGPS MSCをClick-IT（登録商標）ファルネシルアルコール（Life technologies）で４８時間処理した。製造業者のプロトコルに従って、Alexa Fluor（登録商標）555 azide（Life technologies）を用いて、ファルネシル化されたタンパク質を二次的に明らかにした。
【０１２０】
表面プラズモン共鳴
２５℃でBIAcore 3000機器を用いて表面プラズモン共鳴（SPR）を測定した。FPPS（２８００RU）をCM5チップのフローセルに固定化した。ランニングバッファは、HBSEP pH７．４（２０mM Hepes、１５０mM NaCl、及び０．００５％ P20）であった。１０mM グリシン（pH３．０）を用いて再生を実施した。FPPS結合剤の親和性を求めるための測定は、１．９５nM〜５μMの濃度で注入した化合物を用いて実施した。Scrubber2（Biologic software）及びBIAevalソフトウェア（BIAcore）を用いてデータを評価した。
【０１２１】
Rasファルネシル化の測定
Ｃ末端でGFPと融合している哺乳類hRasのCaaXボックスをコードしているプラスミドを過剰発現しているHGPS MSCにおけるGFPの局在を分析することによって、Rasのファルネシル化を測定した。
【０１２２】
ライブセルイメージング
９６ウェルプレートに２５００細胞／ウェルでHGPS MSCを播種し、そして、薬物の存在下で７日間培養した。IncuCyte ZOOM顕微鏡（Essen Bioscience）を用いて細胞密度をモニタリングした。各値は、３つの独立したウェルで撮影した４枚の写真の細胞密度の平均に対応する。
【０１２３】
統計解析
統計解析は、ダネット比較検定を用いて、一元配置分散分析（ANOVA）によって実施した。ｐ＜０．０５の値を有意であるとみなした（＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１）。
【０１２４】
Ｂ  結果
Ｂ．１．  ハイスループットスクリーニングによるプレラミンＡのファルネシル化の阻害剤の同定
この試験は、既に記載の通り（Blondel et al., 2014, Stem Cells Transl Med, VOL. 3: 510-519）分化させ、そして、１０代継代して増幅させた後に用いたHGPS iPS細胞に由来するMSCにおいて実施した。薬物スクリーニングストラテジは、核への局在がファルネシル化の阻害と直接相関しているという仮定の下、プレラミンＡの細胞内局在の検出に基づいていた。３８４ウェルプレートにおいてプレラミンＡの発現及び局在をロバストに定量するためにハイスループット免疫染色アッセイを開発した。０．１％ DMSO及びFTI（１μM ティピファニブ）を、それぞれ、ネガティブコントロール及びポジティブコントロールとして用いた。３８４ウェルプレートにおいてFTIで処理したHGPS MSCのプレラミンＡを均質かつ再現可能に染色するために、薬物スクリーニングアッセイを最適化した。アッセイの品質管理は、ネガティブコントロールとポジティブコントロールとの間の０．８を超えるＺ’係数の計算によってアッセイした。次いで、スクリーニング手順の様々な工程後に、４つの異なる化合物ライブラリから２１，６０８個の低分子を試験した。薬理学的処理の４８時間後に核マトリクス区画においてプレラミンＡ染色を示したHGPS MSCの比率を測定する自動イメージングプラットフォームを用いて、プレラミンＡの局在の定量を実施した。
【０１２５】
細胞生存率に３０％を超える影響を与えることなく、試験した化合物全ての平均の標準偏差の３倍よりも効果が優れていた場合、その化合物を潜在候補とみなした。これによって、５９個のヒットの第１のリストが得られた。再試験実験では、これら候補のうちの４３個を除外したが、その理由は、毒性であったか又は偽陽性であるとみなされたためであった。
【０１２６】
段階的に投薬量を増やしてその有効性及び毒性を評価することによって、１６個の検証された化合物について薬物スクリーニングプロセスを完了したところ、５個が細胞毒性を有さずに５０％を超える有効性を有することが明らかになった（図１）。EC50は１μM〜３４μMの範囲であり、最高非毒性用量におけるプラトーでは、核へのプレラミンＡの局在が８０％を超えていた（図１）。毒性を示さずにプレラミンＡが核に局在する最高有効濃度として各化合物の最適濃度を定め、そして、その後の二次アッセイ及び機能アッセイで用いた。ウエスタンブロット分析によって、５個の化合物（Mono-AP1、Mono-AP2、Mono-AP3、Di-AP1、及びDi-AP2）のそれぞれで処理した細胞においてプレラミンＡの増加が確認されたが、１個（Di-AP1）を除いて、様々な処理後にラミンＡもプロゲリンのmRNA発現も増加しなかったことを示す定量PCRによって、薬物が翻訳後に効果を発揮することが明らかになった（図５Ａ及び５Ｂ）。免疫染色によって、これら薬物のいずれかの存在下において、タンパク質レベルでプロゲリンの発現に対する効果がないことが確認された。
【０１２７】
５個のヒットの化学構造解析によってこれらのうちの５個が、それぞれMono-AP及びDi-APと命名した、１個、２個、又は４個の窒素原子が結合しているアミノピリミジン基（AP）を含有していることが示された。細胞毒性の測定によって、これらがいずれも処置用量で毒性を有しないことが証明された。最後に、２個の他のプレニル化されたタンパク質HDJ2及びhRasに対しても同様の効果が観察されたことによって、プレラミンＡのファルネシル化に対する選択性が存在しないことが証明された。HDJ2のウエスタンブロット分析によって、Mono-AP1、Mono-AP2、Mono-AP3、Di-AP1、及びDi-AP2処理後に、タンパク質の非ファルネシル化形態が増加することが明らかになった。Ｃ末端でGFPと融合している哺乳類hRasのCaaXボックスをコードしているプラスミドを過剰発現しているHGPS MSCにおけるその局在によって測定したとき、hRasのファルネシル化は、全ての化合物の存在下において、非ファルネシル化CAAXボックスの著しい増加を示した。これら結果は、モノアミノピリミジン処理後のHGPS MSCにおけるファルネシル化されたタンパク質のレベルの全体的な減少によって確認された。
【０１２８】
HGPS関連欠陥に対する５個のヒットの機能的効果
５個のヒットを、核の形状の異常から救済する能力について評価した。HGPS MSCを様々な化合物の存在下で４８時間処理し、そして、ラミンＡ／Ｃを染色した。Mono-AP1、Mono-AP2、及びMono-AP3が最も有効な３個の化合物であり、ポジティブコントロールとして用いたFTIティピファニブとそれほど変わらないレベルでHGPS MSCの核の形状の欠陥を回復させた。また、Di-AP2もこの病理学的構造欠陥を有意に回復させたが、Di-AP1は効果がなかった（図２Ａ）。HGPS MSCは、骨芽細胞系への早期分化を示す（Blondel et al., 2014, Stem Cells Transl Med VOL. 3: 510-519；Scaffidi and Misteli, 2008, Nat Cell Biol VOL. 10, 452-459）。したがって、７日間の骨芽細胞分化後にアルカリホスファターゼ活性を測定することを介して、この機能障害に対する５個のヒットのそれぞれの効果をモニタリングした。全ての化合物がこの表現型を強力に救済することができ、Mono-AP1及びDi-AP1のレベルは、FTI処理後に観察されたものとそれほど異ならなかった（図２Ｂ）。
【０１２９】
細胞増殖及びエネルギー代謝を測定することによって、５個の化合物の潜在的な有害効果を評価した。Ki-67陽性増殖細胞の定量からは、化合物で処理したMSCの増殖減少は明らかにならなかった（図２Ｃ）。その代わり、Di-AP1がKi-67陽性細胞の数を６５％まで増加させることができたことは興味深い。結果は、Mono-AP1、Mono-AP2、及びMono-AP3がFTIティピファニブよりも細胞増殖抑制性が低いことを示す、長期ライブセルイメージング培養で確認された。HGPS MSCのATP含量を測定したところ、これら分子のいずれもエネルギー代謝に対する有害効果を有しないことが明らかになった。対照的に、Di-AP1は、ATP含量を増加させた。
【０１３０】
モノアミノピリミジンの作用機序
Mono-APが、有害効果を誘導することなく、試験した２つの機能上の欠陥から救済するための最も有効な化合物であったので、薬物の作用機序に関するこの試験の最後の部分は、Mono-APに焦点を当てた。
【０１３１】
この目的のために、４７個の化学アナログのライブラリは、Mono-AP1（｛２−［４−（２−フルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−ピリミジン−４−イル｝−ピリジン−４−イル−アセトニトリル）に由来しており、そして、プレラミンＡのファルネシル化に関して１０μMの濃度で評価した。この実験セットによって、９個の化合物がプレラミンＡの局在に対して２０％を超える効果を示したことが明らかになった（図３Ａ）。これら９個の第二世代Mono-APの用量反応実験は、これらのうちの２個、Mono-AP21及びMono-AP28のみが、Mono-AP1よりも有効であることを示し、それぞれ、EC50は１．５μM及び２μMであった（図３Ｂ及び３Ｃ）。Mono-AP21及びMono-AP28で処理した後、HGPS MSCにおける核の形状の欠陥及び早期骨形成の救済について類似の能力が観察された。
【０１３２】
Mono-AP25のように、−ＣＨ２ＣＯ２Ｅｔ等の官能化鎖でピペラジン核に付加されているベンジル基の置換によって、有効性が低下した（図３Ｂ）。
【０１３３】
最後に、化合物を最適化するための潜在経路を強調するために、タンパク質のプレニル化を制御している３つの重要な酵素、HMG-CoA還元酵素（HMGCR）、ファルネシルピロリン酸合成酵素（FPPS）、及びファルネシル基転移酵素（FT）を用いてMono-AP1、Mono-AP2、及びMono-AP3の直接相互作用を仮想的に評価した。Mono-APの３つの酵素との結合エネルギーの計算は、FPPS及びFTの活性部位とは潜在的相互作用を示したが、HMGCRとは示さなかった（図５Ｂ）。FPPSに対するMono-AP1及びMono-AP3のドッキングによって、FPPSのMg2+カチオンとのカチオン−ｐｉ相互作用におけるこれら化合物のフェニルドメインの主な役割が明らかになった。電子供与基（Me、OMe、又はNH2）のような適切な置換は、Mono-AP3のフェニルドメインのMg2+カチオンへの結合を強化することができる。Mono-AP1は、FTについてMono-AP2及びMono-AP3よりも高い親和性を示したが、それは、アミノ酸Y861B及びS599Bとの水素結合の存在に起因するものである。最後に、生化学実験によって、Mono-APによるFPPS及びFTの直接阻害が確認されたが、HMGCRでは確認されず、FT活性は２０％、そして、FPPS活性は４０％減少した（図４Ａ、４Ｂ、及び４Ｃ、図７Ａ、７Ｂ、及び７Ｃ）。
【０１３４】
Mono-AP（Mono-AP1及びMono-AP2）のFPPSとの相互作用は、表面プラズモン共鳴（SPR）実験によって確認された。したがって、FPPSをCM5チップに固定化し、そして、そのMono-APとの相互作用をBiacoreプラットフォームで測定した。これら実験の結果から、Mono-AP1及びMono-AP2とFPPSとの直接相互作用が確認され、そして、両相互作用について平衡解離（Kd）及び会合（Ka）定数を計算することができた（以下の表Ａを参照）。
【０１３５】
【表４】
2017536342.tif 000081
【０１３６】
Mono-APの存在下で３つの酵素FT、FPPS、及びHMGCRの生化学的活性を測定することによって、分子ドッキング及びSPR結果の検証を実施した。生化学試験の結果から、Mono-APによってFPPS及びFTの両方の直接阻害が確認されたが、HMGCRでは確認されず、FT活性は２０％〜３０％減少し、そして、FPPS活性は４０％〜５０％減少した。
【０１３７】
最後に、用量反応実験によって、FT及びFPPSの酵素活性に対するMono-AP1、2、及び3のIC50の値が０，３５〜９，３２μMの範囲であると求めることができた（以下の表Ｂを参照）。
【０１３８】
IC50値は、試験したアミノピリジン化合物について測定された最高阻害効果の５０％を誘導する、前記アミノピリジン化合物の濃度に対応する。
【０１３９】
【表５】
2017536342.tif 000082
【０１４０】
本明細書における実施例の主な結果は、HGPSに関連する病理学的表現型を救済することができるファルネシル化阻害剤の新規ファミリーを見出すことである（図６）。HGPSの処置のために使用できる可能性に加えて、この結果は、ファルネシル化阻害剤で既に処置されている障害のための新たな種類の分子を強調するものである。また、創薬のためのiPS細胞誘導体の独自の可能性を強調する。
【０１４１】
ミスプロセシングされたプレラミンＡのＣ末端に異常なファルネシル化モチーフが残存していることが、HGPSにおけるプロゲリンの毒性を引き起こす主な分子機構である（Cau et al., 2014, Semin Cell Dev Biol.）。この発見後、幾つかのチームが、FTIとビスホスホナート及びスタチンの組合せとを用いる独立な前臨床及び臨床試験を設計することによって、幾つかの公知のプレニル化阻害剤の重要性を証明した（Gordon et al., 2012, Proc Natl Acad Sci USA VOL. 109: 16666-16671；Varela et al., 2008, Nat Med VOL. 14: 767-772）。FTIに基づく臨床試験の結果から、患者における多少の限定的改善が明らかになったが、それにもかかわらず、より有効かつより毒性の低い新規分子の必要性が強調された（Gordon et al., 2012, Proc Natl Acad Sci USA VOL. 109: 16666-16671）。本試験は、１つの特定の酵素を標的とするのではなく、プレラミンＡのプレニル化のプロセス全体を標的とする、このような化合物を同定することが可能であるという仮定に基づいていた。
【０１４２】
興味深いことに、２１，６０８個の低分子のスクリーニングから得られた全ヒットの中でも、３個（１個のスタチン及び２個のキノリン）はプレラミンＡファルネシル化調節因子として他の研究で既に同定されていたので（Varela et al., 2008, Nat Med VOL. 14: 767-772；Yang et al., 2005, Proc Natl Acad Sci USA VOL. 102: 10291-10296.）、内部標準とした。実際、ＱＣは、元々、RASファルネシル化阻害剤として報告されており、したがって、癌において抗増殖剤としてそれを処置的に使用することが示唆された（Jasinski et al., 2008, Invest New Drugs VOL. 26: 223-232.）。また、ＱＣは、熱帯熱マラリア原虫（plasmodium falciparum）におけるファルネシル基転移酵素を阻害する能力についてマラリア患者において評価されており（Eastman et al., 2006, Journal of lipid research VOL. 47: 233-240；Gupta and Prabhakar, 2008, Eur J Med Chem VOL. 43: 2751-2767；Nallan et al., 2005, J Med Chem VOL. 48, 3704-3713；Van Voorhis et al., 2007, Antimicrobial agents and chemotherapy 51, 3659-3671）、そして、最近、そのファルネシル化に干渉する能力と一致して、HGPS患者の線維芽細胞における核の形状の異常を改善すると評価された（Capell et al., 2005, Proc Natl Acad Sci USA Vol. 102, 12879-12884）。更に、コレステロールレベルを低下させ、そして、心血管障害を予防するためのHMGCR阻害剤としてヒトで広く処方されているスタチン（Goldstein and Brown, 1990, Nature VOL. 343: 425-430）も、潜在的HGPS処置剤として記載されている（Varela et al., 2008, Nat Med VOL. 14, 767-772）。
【０１４３】
ハイスループット薬物スクリーニングの最も目覚ましい結果は、同定された５個の化合物が共通の化学構造、アミノピリミジン基を共有しているという事実であった。４７個の関連する化学物質のセットのその後の分析は、初期リストに９個の他の化合物を加えることによって、この結果を補強した。文献に記載されているアミノピリミジンについて、異なる標的及び作用機序が存在する可能性が高いとしても、他の最近の研究がその化合物ファミリーの処置可能性を強調していることは興味深い。過去１０年間にわたって、アミノピリミジンは、B-Raf（Mathieu et al., 2012, J Med Chem VOL. 55:2869-2881）、JAK（Tyner et al., 2010, Blood VOL. 115, 5232-5240）、CDK1/2阻害剤（Ryu et al., 2011, Bioorg Med Chem Lett VOL. 21: 7185-7188）、又はEGFR及びErbB-2（Xu et al., 2008, Bioorg Med Chem Lett VOL. 18: 4615-4619.）の非常に強力な阻害剤であると報告されてきた。また、アミノピリミジンであるニロチニブは、慢性骨髄性白血病患者の大部分について第一選択処置標的であるBcr-Ablチロシンキナーゼ阻害剤（TKI）を阻害することも報告されている（Verstovsek et al., 2005, Cancer VOL. 104: 1230-1236）。
【０１４４】
ドッキング試験によって、ピリミジンアナログがゲラニル転移酵素に結合し得ることが示唆されており、これは、タンパク質のプレニル化の調節における関与を示唆している（Ethiraj et al., 2013, Chem Biol Drug Des VOL. 82: 732-742）。また、ピリミジン基のビスホスホナートへの付加、チエノピリミジンは、ファルネシルピロリン酸合成酵素のアリルサブポケットへのその結合を増加させることも示されている（Leung et al., 2013, J Med Chem VOL. 56: 7939-7950）。本結果は、アミノピリミジンがタンパク質のプレニル化の阻害剤であると記載しており、これは、ビスホスホナートの非存在下においてこのプロセスを調節する能力を明らかにするものである。ドッキングの結果は一致していたが、その理由は、該ドッキングの結果が、Mono-APがFPPS及びFTの活性部位に対して強い親和性を示した結果、生化学実験において、FT及びFPPSの活性がそれぞれ２０％及び４０％低下したことを示したためである。
【０１４５】
１９７８年に真菌でタンパク質のプレニル化機構が発見されてから（Kamiya et al., 1978, Biochem Biophys Res Commun VOL. 83: 1077-1083）、１００個を超えるタンパク質が、プレニル化を受けることが実験的に確認され、その中でも、低分子GTPAseであるRho、Ras、Rac、及びCdc24が顕著であった（Lane and Beese, 2006, Journal of lipid research VOL. 47: 681-699）。これら低分子GTPAseは、多くの細胞事象、例えば、細胞内シグナル伝達、増殖、炎症、及び運動において必須であるので、処置的展望を有するプレニル化を阻害する化合物を同定するために多くの努力が行われてきた。ファルネシル化の阻害剤の抗癌薬としての処置的使用は１９８２年に最初に示唆され、ヒト癌遺伝子としてRAS多重遺伝子ファミリーが同定され、そして、その後、これらが悪性形質転換活性を発現するためにファルネシル化を必要とすることが証明された（Bos, 1989, Proc Natl Acad Sci USA VOL. 102: 12879-12884.）。実験的研究がファルネシル基転移酵素阻害剤の処置可能性を楽にすると思われるが、その理由は、該ファルネシル基転移酵素阻害剤が、状況に応じて、アポトーシス、細胞周期停止を誘導するか、又は細胞増殖、細胞遊走、及び血管形成を阻害するためである（Berndt et al., 2011, Nat Rev Cancer VOL. 11: 775-791）。したがって、２０００年から、４個の異なるFTI、すなわち、ティピファニブ、ロナファーニブ、BMS□214662、及びL□778123を用いて、様々な癌適応症における少なくとも７５個の臨床試験が実施されている（William et al., 2012, Journal of medicinal chemistry 55, 169-196）。しかし、これら臨床試験の大部分は成功しなかった。一例として、進行固形癌（Van Cutsem et al., 2004, journal of the American Society of Clinical Oncology 22, 1430-1438）又は急性骨髄性白血病（Chevallier et al., 2009, Leuk Res VOL. 33: 1124-1126.）の患者で寿命の有意な増加は観察されなかった。大部分の薬物が非常に狭い処置濃度域を示し、患者で使用したものに近い用量で毒性がみられたので、失敗についての１つの解釈は、患者における投薬量が最適ではなかった可能性がある。最適なベネフィット／リスク比という目的の達成に向けて、Mono-APが細胞毒性を誘導することなくファルネシル化に対してティピファニブと同程度有効であったという事実は楽観的な材料となる。失敗の別の原因は、ファルネシル基転移酵素に対する活性が制限されていたことであった可能性があるが、その理由は、FTIの存在下においてN-Ras及びK-Rasの二者択一のプレニル化（すなわち、ゲラニルゲラニル化）が存在し得るためである。これは、FPPS又はHMGCRを標的とすることが報告されている汎用プレニル化阻害剤の開発につながった。今日まで、病院で最も一般的に用いられているFPPSの阻害剤は、無機ピロリン酸の化学的に安定なアナログである、ビスホスホナートクラスの全てのメンバーである（Burr and Russell, 2011, Bone VOL. 49: 1）。これら化合物は、骨吸収を阻害するので、骨粗鬆症用の処置剤として主に用いられている。異なる分子機構を有する２つの主な化合物群が存在する。第１の群は、恐らくミトコンドリアATP転位酵素に干渉することによって、ピロリン酸を模倣し、そして、破骨細胞を阻害し、最終的にはその死を引き起こす非窒素ビスホスホナート、例えば、クロドロナート及びエチドロナートを含む（Lehenkari et al., 2002, Mol Pharmacol VOL. 61: 1255-1262.）。第２の群である窒���含有化合物（N-BP）、例えば、ゾレドロナートは、FPPSの阻害を通して特定の代謝反応に干渉する。したがって、これらは、これら標的によって制御される様々な細胞プロセスを調節し、そして、細胞形態、細胞骨格の配置、膜ラフリング、小胞の輸送、及びアポトーシスを含む破骨細胞の機能にとって重要である（Ridley et al., 1992, Cell VOL. 70: 389-399）（Ridley et al., 1992, Cell VOL. 70: 401-410）。より最近では、早老性線維芽細胞における核の形状の異常の改善を示す、新たな種類のFPPS阻害剤N6−イソペンテニルアデノシンが報告された（Bifulco et al., 2013, The FEBS journal VOL. 280: 6223-6232）。この研究では、本発明者らは、Mono-APがFPPS及びFTの両方に結合することを証明し、複数の部位におけるタンパク質のプレニル化を標的とすることによって更に別の作用機序を加えた。その結果、そして、既存のプレニル化阻害剤と同様に、プレラミンＡに対する特異性が存在しないことに起因する不所望の副作用を避けるために、処置の観点でMono-APを使用する可能性をモニタリングする必要がある。
【０１４６】
ヒト多能性幹細胞の発見以降、疾患特異的疾患が薬物の検証及び発見のための主なツールになっている。特に、他の細胞モデルと比べたとき、この細胞の十分に認められている利点は、ヒト起源であり、生理学的又は病理学的に形質転換されていない状態であり、そして、無制限に自己再生する能力を有し、そして、理論的に生物の任意の細胞表現型を誘導できることである。HTSを通じた創薬に関して、多能性幹細胞誘導体も、特異的生化学的標的の代わりに又は加えて表現型形質をアッセイする可能性を提供する。過去１０年間にわたって、この能力を用いて幾つかの研究が行われている。多能性幹細胞に対する最初の薬物スクリーニングは、幹細胞維持（Andrews et al., 2010, Nat Rev Cancer VOL. 11: 775-791；Desbordes et al., 2008, Cell Stem Cell VOL. 2: 602-612）又は細胞分化（Zhu et al., 2009, Cell Stem Cell VOL. 4: 416-426）を調節する化合物の同定に焦点を当てたものであった（Shan et al., 2013, Nat Chem Biol VOL. 9: 514-520）。より最近では、様々な表現型薬物スクリーニングが登場し、本研究は、心肥大（Carlson et al., 2013, J Biomol Screen VOL. 18: 1203-121）及び家族性自律神経失調症（これについては、潜在的処置剤としてKF-86466が同定されている）（Lee et al., 2012, Nat Biotechnol VOL. 30: 1244-1248.）等の特定の疾患の潜在的処置経路を見出すことを目的とした１つの更なる成功例をそれに追加する。既にこれを独自のものにしている全てのこれら利点に加えて、これら細胞が機能試験を受けやすいという事実を強調することは興味深い。これは本論文にも当てはまるので、二次アッセイが、その他の点でより還元主義的な（reductionist）一次薬物スクリーニングアッセイの生理学的検証を補足し、そして、提供することができる。ここで、このことによって、本発明者らは、HGPSに関連する表現型形質に関する全ての候補ヒット化合物を直ちに逆スクリーニングする能力が得られた。その上で、コスト及び時間効率的に、化合物に優先順位をつけ、そして、構造活性相関試験の実施に向けて最も有望なものを選択することができた。
【０１４７】
したがって、本発明に開示する化合物に対して実施した試験の結果は、該化合物が、タンパク質のプレニル化の阻害が必要とされる疾患又は障害を治療及び／又は予防するのに有用であり得ることを示す。特に、前記疾患又は障害は、ハッチンソン−ギルフォード早老症候群（HGPS）、早老症、神経変性疾患、パーキンソン病、びまん性レヴィー小体病、多系統萎縮症、シャイ−ドレーガー症候群、線条体黒質変性症、オリーブ橋小脳萎縮症、パントテン酸キナーゼ関連神経変性症、認知障害、認知症、リソソーム蓄積症、II型糖原病、ムコ多糖症、ムコリピドーシスII、ムコリピドーシスIII、ムコスルファチドーシス、ＧＭ２活性化タンパク質欠乏症異型ＡＢ、ダノン病、サラ病、テイ−サックス病、サンドホフ病、シンドラー病、神崎病、α−マンノシドーシス、β−マンノシドーシス、フコシドーシス、シアリドーシス、アスパルチルグルコサミン尿症、炭水化物欠乏糖タンパク質症候群、ウォルマン病、ファーバー病、ニーマン−ピック病Ａ型、Ｂ型、及びＣ型、ゴーシェ病、クラッベ病、ファブリー病、多発性スルファターゼ欠損症、ＧＭ１ガングリオシドーシス、ＧＭ２ガングリオシドーシス、ＧＭ３ガングリオシドーシス、ガラクトシアリドーシス、シスチン症、シアル酸蓄積症、濃化異骨症、異染性白質萎縮症、ガラクトシアリドーシス、神経セロイドリポフスチン症、ラクトシルセラミドーシス、ポンペ病、コバラミン欠乏症Ｆ型、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、アルツハイマー病；ミトコンドリア性疾患、眼疾患、炎症性疾患、心血管疾患、増殖性疾患、鬱病、不安、免疫疾患、新生物疾患、腫瘍、癌、転移、白血病、癌腫、メラノーマ、肉腫、グリア芽細胞腫、多発性骨髄腫、腺腫、新生物、神経芽細胞腫、腺癌、リンパ腫、骨髄腫、多発性骨髄腫、骨髄異形成症候群、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、慢性骨髄単球性白血病、血管原性骨髄様化生、中皮腫、神経膠腫、アテローム性動脈硬化症、胆石、胆石症、脂肪石灰化肉芽腫症、高コレステロール血症、高リポタンパク血症、コレステロール結晶塞栓症、心筋梗塞症、脳梗塞、狭心症、骨粗鬆症、関節炎、関節リウマチ、変形性関節炎、パジェット病、神経線維腫症１型、レオパード症候群、ヌーナン症候群、レギウス症候群、コステロ症候群、遺伝性歯肉線維腫症１型、自己免疫性リンパ増殖症候群、毛細血管奇形−動静脈奇形、皮膚老化、ホルモン老化、光線誘発性早期皮膚老化、老化筋脂肪皮膚、拘束性皮膚症、毛髪の変化又は脱毛、脱毛症、デルタ肝炎ウイルス感染症、並びにウイルス感染症を含んでいてよい。
【０１４８】
より具体的には、前記腫瘍及び癌は、骨、脳、腎臓、肝臓、副腎、結腸直腸、膀胱、乳房、胃、卵巣、結腸、直腸、前立腺、膵臓、肺、非小細胞肺、小細胞肺、膣、甲状腺、頭頸部の癌及び腫瘍から選択される。
【０１４９】
したがって、本発明の請求される化合物は、タンパク質のプレニル化の阻害が必要とされ、そして、早老疾患、神経変性疾患、代謝疾患；ミトコンドリア性疾患、眼疾患、炎症性疾患、心血管疾患、増殖性疾患、免疫疾患、脳梗塞、皮膚老化、ホルモン老化、及びウイルス感染症から選択し得る疾患又は障害を治療及び／又は予防するのに有用である。
【０１５０】
早老疾患は、ハッチンソン−ギルフォード早老症候群、ミュルビヒル−スミス早老症様症候群、及びヴィーデマン−ラウテンシュトラウス新生児早老症候群の中から選択してよい。
【０１５１】
例えば、神経変性疾患の中でも、認知症、運動ニューロン疾患、主に中枢神経系を障害する全身性萎縮症、テイ−サックス病、伝播性海綿状脳症、毛細血管拡張性運動失調症、常染色体優性小脳性運動失調症、バッジョ−吉成症候群、バッテン病、皮質基底核変性症、クロイツフェルト−ヤコブ病、致死性家族性不眠症、１７番染色体に連鎖している前頭側頭型認知症及びパーキンソニズム、近位筋優位遺伝性運動感覚ニューロパチー、乳児レフスム病、歩行運動失調、ライム運動失調、マチャド−ジョセフ病、脳橋及び小脳形成不全を伴う精神遅滞及び小頭症、多系統萎縮症、神経有棘赤血球症、ニーマン−ピック病、橋小脳形成不全、ピルビン酸脱水素酵素欠乏症、タンパク質凝集、レフサム病、サンドホフ病、シャイ−ドレーガー症候群、脊髄小脳失調症、脊髄の亜急性連合性脊髄変性症、脊髄性筋萎縮症、亜急性硬化性汎脳炎、脊髄癆、中毒性脳症、中毒性白質脳症、ハリネズミふらつき症候群、脳炎、てんかん、遺伝性脳障害、頭部及び脳の形成異常、水頭症、パーキンソン病、多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症（ALS又はルー−ゲーリック病）、ハンチントン病、プリオン病、及びアルツハイマー病に言及してよい。
【０１５２】
例として、代謝疾患の中でも、リソソーム蓄積症、肥満、甲状腺機能低下症、甲状腺機能亢進症、糖尿病、低脂血症、ガラクトース血症、フェニルケトン尿症、及びシアル酸蓄積症に言及してよい。
【０１５３】
リソソーム蓄積症の中でも、ガングリオシドーシス（gangliodoses）、ゴーシェ病、ニーマン−ピック病、ファブリー病、セラミド蓄積症（リポグラヌロマトーシス（lipograbulomatosis）、ファーバー病）、スルファチドーシス（異染性白質萎縮症）、ムコスルファチドーシス（多発性スルファターゼ欠損症、オースチン病）、球様細胞、白質萎縮症（クラッベ病）、ハーラー（ムコ多糖症（MPS）IH）、シャイエ病（MPS IS又はIV）、ハンター（MPS II）、サンフィリポ（MPS III）、モルキオ（MPS IV）、マロトー−ラミー（MPS VI）、スライ（MPS VII）、糖原病II型又はグリコーゲン蓄積症II型（ポンペ病としても知られている）に言及してよい。
【０１５４】
シアル酸蓄積症は、小児遊離シアル酸蓄積症（ISSD）、サラ病、及び中間重篤度のサラ病から選択し得る。
【０１５５】
ミトコンドリア病としては、アルパーズ病、バート症候群、致死性小児心筋症、ベータ酸化欠陥、カルニチン−アシル−カルニチン欠乏症、カルニチン欠乏症、コエンザイムQ10欠乏症、複合体Ｉ欠乏症、複合体II欠乏症、複合体III欠乏症、複合体IV欠乏症、複合体Ｖ欠乏症、CPEO、CPT I欠乏症、CPT II欠乏症、KSS、乳酸アシドーシス、LBSL−白質萎縮症、LCAD、LCHAD、リー病、ルフト病、MAD／グルタル酸尿症II型、MCAD、MELAS、MIRAS、ミトコンドリア細胞症、ミトコンドリアDNA枯渇、ミトコンドリア脳症、ミトコンドリア筋症、真性糖尿病及び難聴（DAD又はDMDF）、ピアソン症候群、ピルビン酸カルボキシラーゼ欠乏症、ピルビン酸脱水素酵素欠乏症、POLG変異、呼吸鎖、レーベル遺伝性視神経症、運動失調、網膜色素変性（retinis pigmentosa）、下垂症、筋神経性胃腸脳症、ほぐれた赤色ぼろ線維を伴うミオクローヌスてんかん（MERRF)、SCAD、SCHAD、及びVLCADに言及してよい。
【０１５６】
眼疾患は、眼瞼外反、兎眼症（lagophtalmos）、眼瞼皮膚弛緩症、眼瞼下垂症、眼瞼の黄色板腫、眼瞼の皮膚炎、リーシュマニア症、ロア糸状虫症、オンコセルカ症、及びシラミ症における眼瞼の寄生虫外寄生、ヘルペスウイルス感染症、ハンセン病、伝染性軟属腫、イチゴ腫、帯状疱疹、及び結核の眼瞼における合併症、膿痂疹の眼瞼における合併症、涙腺炎、流涙症、甲状腺異常による眼球突出（exophtalmos）、結膜炎、強膜炎、角膜炎、角膜潰瘍、角膜擦過傷、雪眼炎、アーク目、タイゲソン表在性点状角膜症（keratopathy superficial punctuate keratopathy）、角膜血管新生、フックスジストロフィー、乾性角結膜炎、虹彩炎、ブドウ膜炎、白内障、脈絡網膜炎症、脈絡網膜瘢痕、脈絡膜変性、遺伝性脈絡膜ジストロフィ、脈絡膜の出血及び破裂、脈絡膜剥離、脈絡網膜炎、網膜剥離、網膜分離症、網膜動脈閉塞、網膜静脈閉塞、網膜症、加齢性黄斑変性症、周辺部網膜変性、網膜色素変性、網膜出血、レチナール層の分離、黄斑浮腫、緑内障、飛蚊症、レーベル遺伝性視神経症、視神経乳頭ドルーゼン、斜視、眼麻痺、内斜視、外斜視、遠視、近視、乱視、不同視、老視、遠近調節の障害、弱視、レーベル先天性黒内障、暗点、色覚異常、夜盲症、盲目、充血、及びアーガイルロバートソン瞳孔の中から選択し得る。
【０１５７】
例えば、炎症性疾患の中でも、アルツハイマー、強直性脊椎炎、関節炎（変形性関節炎、関節リウマチ（RA）、乾癬性関節炎）、喘息、アテローム性動脈硬化症、クローン病、結腸炎、皮膚炎、憩室炎、線維筋痛、肝炎、過敏性腸症候群（IBS）、全身性エリテマトーデス（SLE）、腎炎、パーキンソン病、潰瘍性大腸炎に言及してよい。
【０１５８】
例として、心血管疾患の中でも、冠動脈疾患（CAD）、例えば、狭心症及び心筋梗塞（一般的に、心臓発作として知られている）、脳卒中、高血圧性心疾患、リウマチ性心疾患、心筋症、心房細動、先天性心疾患、心内膜炎、大動脈瘤、末梢動脈疾患、及び静脈血栓症に言及してよい。
【０１５９】
増殖性疾患は、新生物疾患、腫瘍、癌、転移から選択し得る。
【０１６０】
より具体的には、上で説明した通り、前記腫瘍及び癌は、骨、脳、腎臓、肝臓、副腎、結腸直腸、膀胱、乳房、胃、卵巣、結腸、直腸、前立腺、膵臓、肺、非小細胞肺、小細胞肺、膣、甲状腺、頭頸部の癌及び腫瘍から選択し得る。
【０１６１】
例として、癌は、白血病、癌腫、メラノーマ、肉腫、グリア芽細胞腫、多発性骨髄腫、腺腫、新生物、神経芽細胞腫、腺癌、リンパ腫、骨髄腫、多発性骨髄腫、骨髄異形成症候群、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、慢性骨髄単球性白血病、血管原性骨髄様化生、中皮腫、及び神経膠腫の中から選択し得る。
【０１６２】
免疫疾患は、急性播種性脳脊髄炎（ADEM）、急性壊死性出血性白質脳炎、アジソン病、無ガンマグロブリン血症、円形脱毛症、アミロイドーシス、強直性脊椎炎、抗GBM／抗TBM腎炎、抗リン脂質症候群（APS）、自己免疫性血管性浮腫、自己免疫性再生不良性貧血、自己免疫性自律神経障害、自己免疫性肝炎、自己免疫性高脂血症、自己免疫性免疫不全、自己免疫性内耳疾患（AIED）、自己免疫性心筋炎、自己免疫性卵巣炎、自己免疫性膵炎、自己免疫性網膜症、自己免疫性血小板減少性紫斑病（ATP）、自己免疫性甲状腺疾患、自己免疫性じんま疹、軸索及び神経ニューロパチー、バロー病、ベーチェット病、水疱性類天疱瘡、心筋症、キャッスルマン病、セリアック病、シャーガス病、慢性疲労症候群、慢性炎症性脱髄性多発ニューロパチー（CIDP）、慢性再発性多巣性骨髄炎（Chronic recurrent multifocal ostomyelitis）（CRMO）、チャーグ−ストラウス症候群、瘢痕性類天疱瘡／良性粘膜類天疱瘡、クローン病、コーガン症候群、寒冷凝集素症、先天性心ブロック、コクサッキー心筋炎、CREST病、本態性混合型クリオグロブリン血症、脱髄性ニューロパチー、疱疹状皮膚炎、皮膚筋炎、ドヴィック病（視神経脊髄炎）、円板状紅斑性狼瘡、ドレスラー症候群、子宮内膜症、好酸球性食道炎、好酸球性筋膜炎、結節性紅斑、実験的アレルギー性脳脊髄炎、エヴァンス症候群、線維筋痛、線維化肺胞炎、巨細胞性動脈炎（側頭動脈炎）、巨細胞性心筋炎、糸球体腎炎、グッドパスチャー症候群、多発血管炎性肉芽腫症（GPA）（以前はウェゲナー肉芽腫症と呼ばれていた）、グレーブス病、ギラン−バレー症候群、橋本脳症、橋本甲状腺炎、溶血性貧血、ヘノッホ−シェーンライン紫斑病、妊娠性疱疹、低ガンマグロブリン血症、特発性血小板減少性紫斑病（ITP)、IgA腎症、IgG4関連硬化性疾患、免疫調節性リポタンパク質、封入体筋炎、間質性膀胱炎、若年性関節炎、若年性糖尿病（１型糖尿病）、若年性筋炎、川崎症候群、ランバート−イートン症候群、白血球破砕性血管炎、扁平苔癬、硬化性苔癬、木質性結膜炎、線状IgA病（LAD）、ループス（SLE）、ライム病、慢性メニエール病、顕微鏡的多発性血管炎、混合結合組織病（MCTD）、モーレン潰瘍、ムッハ−ハーベルマン病、多発性硬化症、重症筋無力症、筋炎、ナルコレプシー、視神経脊髄炎（ドヴィック病）、好中球減少症、眼瘢痕性類天疱瘡、視神経炎、回帰性リウマチ、PANDAS（小児自己免疫性溶連菌関連性精神神経障害）、腫瘍随伴性小脳変性症、発作性夜間血色素尿症（PNH）、パリーロンバーグ症候群、パーソネージ−ターナー症候群（Parsonnage-Turner syndrome）、扁平部炎（周辺性ブドウ膜炎）、天疱瘡、末梢性ニューロパチー、静脈周囲脳脊髄炎、悪性貧血、POEMS症候群、結節性多発性動脈炎、Ｉ型、II型、及びIII型多腺性自己免疫症候群、リウマチ性多発筋痛症、多発性筋炎、心筋梗塞後症候群、心膜切開後症候群、月経疹、原発性胆汁性肝硬変、原発性硬化性胆管炎、乾癬、乾癬性関節炎、特発性肺線維症、壊疽性膿皮症、赤芽球癆、レイノー現象、反応性関節炎、反射性交感神経性ジストロフィー、ライター症候群、再発性多発性軟骨炎、むずむず脚症候群、後腹膜線維症、リウマチ熱、関節リウマチ、サルコイドーシス、シュミット症候群、強膜炎、強皮症、シェーグレン症候群、精子及���精巣の自己免疫、全身硬直症候群、亜急性細菌性心内膜炎（SBE）、スザック症候群、交感性眼炎、高安動脈炎、側頭動脈炎／巨細胞性動脈炎、血小板減少性紫斑病（TTP）、トローザ−ハント症候群、横断性脊髄炎、１型糖尿病、潰瘍性大腸炎、未分化結合組織疾患（UCTD）、ブドウ膜炎、脈管炎、小水疱水疱性皮膚病、白斑、及びヴェゲナー肉芽腫症（現在は多発血管炎性肉芽腫症（GPA）と呼ばれている）の中から選択し得る。
【０１６３】
皮膚老化は、光線誘発性早期皮膚老化及び老化筋脂肪皮膚から選択し得る。
【０１６４】
例えば、ウイルス感染症の中でも、水痘、流感（インフルエンザ）、ヒト免疫不全ウイルス（HIV/AIDS）、ヒト乳頭腫ウイルス（HPV）、感染性単核球症、流行性耳下腺炎、麻疹及び風疹、帯状疱疹、ウイルス性下痢症（ウイルス性胃腸炎）、ウイルス性肝炎、ウイルス性髄膜炎、デング熱、チクングンヤ熱、ウイルス性肺炎、鳥インフルエンザ；感冒、サイトメガロウイルス（CMV）感染症、エボラウイルス感染症、マールブルグウイルス感染症、ハンタウイルス感染症、単純ヘルペスウイルス感染症、感染性単核球症、ラッサ熱及び南アメリカ出血熱、中東呼吸器症候群（MERS）、ポリオ、ヘルペス後神経痛、重症急性呼吸器症候群（SARS）、天然痘、H1N1豚インフルエンザ、及び黄熱病に言及してよい。
【０１６５】
この目的のために、タンパク質のプレニル化の阻害、より正確には、タンパク質のファルネシル化の阻害が必要とされる疾患又は障害、特に、HGPS及び早老症、並びに既に言及した疾患に罹患している患者に、有効量の前記化合物を投与してよい。
【０１６６】
また、本発明は、タンパク質のプレニル化の阻害、より正確には、タンパク質のファルネシル化の阻害が必要とされる疾患又は障害、特に、HGPS及び早老症に加えて、既に言及した全ての疾患の治療及び／又は予防を目的とする医薬組成物を製造するための、少なくとも、上に定義した式（Ｉ）、（II）、（Ia）、（Ib）、（Ic）、及び（I’a）のうちのいずれか１つの化合物、並びに上に定義した化合物（１）〜（１４）の中から選択される化合物、又は本発明に係るその薬学的に許容し得る塩の１つの使用に関する。
【０１６７】
また、本発明は、上に定義した式（Ｉ）、（II）、（Ia）、（Ib）、（Ic）、及び（I’a）の新規化合物の中から選択される化合物、並びに上に定義した化合物（１）〜（１４）、又はこれらの任意の薬学的に許容し得る塩を少なくとも含む医薬組成物を包含する。
【０１６８】
したがって、これら医薬組成物は、有効量の前記化合物と、１つ以上の医薬賦形剤とを含有する。
【０１６９】
前述の賦形剤は、剤形及び所望の投与モードに従って選択される。
【０１７０】
この状況では、前記医薬組成物は、活性物質 ０．１〜１０００mgを毎日投与することを可能にする用量で、適切な賦形剤と共に、経腸又は非経口投与に好適な任意の医薬形態、例えば、素錠又はコーティング錠、硬ゼラチン、軟シェルカプセル剤、及び他のカプセル剤、坐剤、又は飲用可能な、例えば、懸濁剤、シロップ剤、又は注射液若しくは注射懸濁液の形態で存在し得る。
【０１７１】
本発明は、更に、タンパク質のプレニル化の阻害、より正確には、タンパク質のファルネシル化の阻害が必要とされる疾患又は障害、特に、HGPS、早老症、又は既に言及した疾患のうちのいずれか１つに罹患している患者を処置する方法であって、これらに罹患している患者に、有効量の式（Ｉ）、（II）、（Ia）、（Ib）、（Ic）、及び（I’a）、並びに（１）〜（１４）のうちのいずれか１つの化合物、又はその薬学的に許容し得る塩類を投与する工程を少なくとも含む方法に関する。
【図１−Ｍｏｎｏ−ＡＰ１】
2017536342.tif 000110
【図１−Ｍｏｎｏ−ＡＰ２】
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【図１−Ｍｏｎｏ−ＡＰ３】
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【図１−Ｄｉ−ＡＰ１】
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【図１−Ｄｉ−ＡＰ２】
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【図１−ＦＴＩ】
2017536342.tif 000115
【図２Ａ】
2017536342.tif 000116
【図２Ｂ】
2017536342.tif 000117
【図２Ｃ】
2017536342.tif 000118
【図３Ａ】
2017536342.tif 000119
【図３Ｂ】
2017536342.tif 000120
【図３Ｃ】
2017536342.tif 000121
【図４】
2017536342.tif 000122
【図５】
2017536342.tif 000123
【図６】
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【図７】
2017536342.tif 000125
【配列表】
2017536342000001.app
【国際調査報告】
2017536342.tif 000126
2017536342.tif 000127
2017536342.tif 000128