(57)【要約】１種又は複数種のキレート剤と、任意に亜鉛イオン塩とを含む組成物は、パーソナルケア製品、例えば眼科用液剤、ペディキュア用、マニキュア用、又は足病学用の溶液に付随する細菌における増殖又はバイオフィルム形成を抑制するために使用される。本出願の組成物は、ゲル化剤、抗微生物剤、抗生物質又はｐＨ調節剤を含んでもよい。該組成物は、溶液、ゲル、クリーム、ゼリー、粉体、ペースト、ローション、石けん及びクリーナーの形態であってよい。【選択図】図２２
2017519035.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
パーソナルケア製品に付随する細菌における増殖又はバイオフィルム形成を抑制するための組成物であって、
（ａ）ＥＤＴＡ二ナトリウム又は四ナトリウム、ＥＧＴＡ、ＤＴＰＡ、ＥＤＤＨＡ、ＩＤＡ、ＣＤＴＡ、ＨＥＤＴＡ、ＨＥＩＤＡ、ＮＴＡ、クエン酸ナトリウム、クエン酸カリウム、オボトランスフェリン、ラクトフェリン及びセロトランスフェリンからなる群から選択される１種又は複数種のキレート剤と、任意に、
（ｂ）塩化亜鉛、グルコン酸亜鉛、乳酸亜鉛、クエン酸亜鉛、硫酸亜鉛及び酢酸亜鉛からなる群から選択される１種の亜鉛塩と、
を含む群から選択される、組成物。
【請求項２】
前記キレート剤は、ＥＤＴＡ二ナトリウム及びクエン酸ナトリウムの１種又は複数種である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記亜鉛塩は、塩化亜鉛又はクエン酸亜鉛である、請求項１又は２に記載の組成物。
【請求項４】
ａ．  ＥＤＴＡ二ナトリウム及びクエン酸ナトリウムと、
ｂ．  ＥＤＴＡ二ナトリウム及び塩化亜鉛と、
ｃ．  クエン酸ナトリウム及び塩化亜鉛と、
ｄ．  クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ二ナトリウム及び塩化亜鉛と、
からなる群から選択される、請求項２に記載の組成物。
【請求項５】
前記ＥＤＴＡ二ナトリウムは、前記組成物に対して約２５００ｍｇ／Ｌと約１００００ｍｇ／Ｌとの間であり、クエン酸ナトリウムは、前記組成物に対して約５０００ｍｇ／Ｌと約１００００ｍｇ／Ｌとの間であり、かつ塩化亜鉛又はクエン酸亜鉛は、約５００ｍｇ／Ｌと約５０００ｍｇ／Ｌとの間である、請求項１〜４の組成物。
【請求項６】
前記ＥＤＴＡ二ナトリウムは、前記組成物に対して約１００００ｍｇ／Ｌ〜２５０００ｍｇ／Ｌであり、クエン酸ナトリウムは、前記組成物に対して約５００００ｍｇ／Ｌ〜１０００００ｍｇ／Ｌであり、かつ塩化亜鉛又はクエン酸亜鉛は、約１０００ｍｇ／Ｌ〜５０００ｍｇ／Ｌである、請求項１〜４の組成物。
【請求項７】
前記ＥＤＴＡ二ナトリウムは、前記組成物に対して約５０００ｍｇ／Ｌ〜１００００ｍｇ／Ｌであり、クエン酸ナトリウムは、前記組成物に対して約２５０００ｍｇ／Ｌ〜５００００ｍｇ／Ｌであり、かつ塩化亜鉛又はクエン酸亜鉛は、約５００ｍｇ／Ｌ〜１０００ｍｇ／Ｌである、請求項１〜４の組成物。
【請求項８】
前記ＥＤＴＡ二ナトリウムは、前記組成物に対して約１０００ｍｇ／Ｌ〜５０００ｍｇ／Ｌであり、クエン酸ナトリウムは、前記組成物に対して約１００００ｍｇ／Ｌ〜２５０００ｍｇ／Ｌであり、かつ塩化亜鉛又はクエン酸亜鉛は、約１００ｍｇ／Ｌ〜５００ｍｇ／Ｌである、請求項１〜４の組成物。
【請求項９】
前記ＥＤＴＡ二ナトリウムは、前記組成物に対して約５００ｍｇ／Ｌ〜１０００ｍｇ／Ｌであり、クエン酸ナトリウムは、前記組成物に対して約５０００ｍｇ／Ｌ〜１００００ｍｇ／Ｌであり、かつ塩化亜鉛又はクエン酸亜鉛は、約１０ｍｇ／Ｌ〜１００ｍｇ／Ｌである、請求項１〜４の組成物。
【請求項１０】
前記ＥＤＴＡ二ナトリウムは、前記組成物に対して約１００ｍｇ／Ｌ〜５００ｍｇ／Ｌであり、クエン酸ナトリウムは、前記組成物に対して約１０００ｍｇ／Ｌ〜５０００ｍｇ／Ｌであり、かつ塩化亜鉛又はクエン酸亜鉛は、約１０ｍｇ／Ｌ〜１００ｍｇ／Ｌである、請求項１〜４の組成物。
【請求項１１】
前記ＥＤＴＡ二ナトリウムは、前記組成物に対して約１０ｍｇ／Ｌ〜５０ｍｇ／Ｌであり、クエン酸ナトリウムは、前記組成物に対して約１００ｍｇ／Ｌ〜５００ｍｇ／Ｌであり、かつ塩化亜鉛又はクエン酸亜鉛は、約１ｍｇ／Ｌ〜１０ｍｇ／Ｌである、請求項１〜４の組成物。
【請求項１２】
抗微生物性保存剤を更に含む、請求項１〜１１の組成物。
【請求項１３】
前記抗微生物性保存剤は、ソルビン酸カリウム、安息香酸カリウム、安息香酸ナトリウム及び安息香酸の１種又は複数種から選択される、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
前記抗微生物性保存剤は、０．２５ｇ／Ｌから３ｇ／Ｌの間である、請求項１２又は１３に記載の組成物。
【請求項１５】
眼、足又は手の感染の１つ又は複数に付随する細菌及び細菌バイオフィルムに対して使用するための組成物である、請求項１〜１４の組成物。
【請求項１６】
メチシリン耐性スタフィロコッカス・アウレウス（ＭＲＳＡ）、スタフィロコッカス・エピデルミディス、コアグラーゼ陰性ブドウ球菌（ＣｏＮＳ）、バンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）、カルバペネム耐性クレブシエラ・ニューモニエ、シュードモナス・アエルギノーサ、アシネトバクター・バウマニ、メチシリン耐性スタフィロコッカス・シュードインターメディウス（ＭＲＳＰ）、マラセチア・パチデルマティス、サルモネラ・ティフィムリウム、エシェリキア・コリＯ１５７：Ｈ７、リステリア・モノサイトゲネス、カンピロバクター・ジェジュニ、バシラス属の複数菌種、カンジダ・アルビカンス、ストレプトコッカス・アガラクティエ、ストレプトコッカス・ウベリス、エシェリキア・コリ、サルモネラ・コレラスイス、ステノトロフォモナス・マルトフィリア、エンテロコッカス・フェカリス、プロテウス・ミラビリス、クレブシエラ属の複数菌種、エンテロバクター属の複数菌種及びシトロバクター属の複数菌種からなる群から選択される１種又は複数種の感染関連細菌又は酵母に対して使用するための組成物である、請求項１〜１４の組成物。
【請求項１７】
ＥＤＴＡ二ナトリウム及びクエン酸ナトリウムを含み、かつメチシリン耐性スタフィロコッカス・アウレウス（ＭＲＳＡ）、スタフィロコッカス・エピデルミディス、コアグラーゼ陰性ブドウ球菌（ＣｏＮＳ）、バンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）、クレブシエラ・ニューモニエ、シュードモナス・アエルギノーサ、アシネトバクター・バウマニ、メチシリン耐性スタフィロコッカス・シュードインターメディウス（ＭＲＳＰ）、マラセチア・パチデルマティス、エシェリキア・コリＯ１５７：Ｈ７、ストレプトコッカス・アガラクティエ、サルモネラ・コレラスイス、ステノトロフォモナス・マルトフィリア、エンテロコッカス・フェカリス、プロテウス・ミラビリス及びカンジダ・アルビカンスからなる群から選択される１種又は複数種の感染関連細菌又は酵母に対して使用するための組成物である、請求項１〜１４の組成物。
【請求項１８】
ＥＤＴＡ二ナトリウム及び塩化亜鉛を含み、かつシュードモナス・アエルギノーサ、メチシリン耐性スタフィロコッカス・シュードインターメディウス（ＭＲＳＰ）、マラセチア・パチデルマティス及びエシェリキア・コリＯ１５７：Ｈ７からなる群から選択される１種又は複数種の感染関連細菌又は酵母に対して使用するための組成物である、請求項１〜１４の組成物。
【請求項１９】
クエン酸ナトリウム及び塩化亜鉛を含み、かつメチシリン耐性スタフィロコッカス・アウレウス（ＭＲＳＡ）、メチシリン耐性スタフィロコッカス・シュードインターメディウス（ＭＲＳＰ）、マラセチア・パチデルマティス及びエシェリキア・コリＯ１５７：Ｈ７からなる群から選択される１種又は複数種の感染関連細菌又は酵母に対して使用するための組成物である、請求項１〜１４の組成物。
【請求項２０】
クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ二ナトリウム及び塩化亜鉛を含み、かつメチシリン耐性スタフィロコッカス・アウレウス（ＭＲＳＡ）、シュードモナス・アエルギノーサ、メチシリン耐性スタフィロコッカス・シュードインターメディウス（ＭＲＳＰ）、マラセチア・パチデルマティス、エシェリキア・コリＯ１５７：Ｈ７及びリステリア・モノサイトゲネスからなる群から選択される１種又は複数種の感染関連細菌又は酵母に対して使用するための組成物である、請求項１〜１４の組成物。
【請求項２１】
水、緩衝剤、安定化剤、ゲル化剤、界面活性剤、薬草、ビタミン、ミネラル、細胞外マトリックス、抗微生物剤、抗生物質及びｐＨ調節剤からなる群から選択される１種又は複数種の成分を更に含む、請求項１〜２０の組成物。
【請求項２２】
消毒液、浸漬液、ローション、クリーム、軟膏、ゲル及びスプレーの１種又は複数種として調製された、請求項１〜２１の組成物。
【請求項２３】
リポソーム送達系若しくはナノ粒子送達系又は適切なデバイス送達系を含む、請求項１〜２２の組成物。
【請求項２４】
ディスパーシンＢ、アルギン酸リアーゼ、ナイシン、ラクトフェリシン、セロトランスフェリン、オボトランスフェリン、オボアルブミン、オボムコイド、プロタミン硫酸塩、クロルヘキシジン、塩化セチルピリジニウム、トリクロサン、スルファジアジン銀、塩化ベンザルコニウム、過酸化水素、クエン酸、クエン酸カリウム、５−フルオロウラシル、シス−２−デセン酸、ＤＮアーゼＩ、プロテイナーゼＫ、銀、ガリウム、銀、バクテリオシン類及び抗微生物性ペプチド類からなる群から選択される抗感染性化合物を更に含む、請求項１〜２３の組成物。
【請求項２５】
粘度増強剤、潤滑剤、界面活性剤、緩衝剤、保存剤及び塩の１種又は複数種を更に含む、請求項１〜２４の組成物。
【請求項２６】
眼科用液剤である、請求項１〜２５の組成物。
【請求項２７】
前記眼科用液剤は、点眼剤、洗眼液、コンタクトレンズケア溶液、コンタクトレンズ洗浄液、コンタクトレンズ保存液、コンタクトレンズ消毒薬、コンタクトレンズ洗浄保存液及びコンタクトレンズ洗浄消毒保存液、コンタクトレンズ容器並びにコンタクトレンズの１種又は複数種である、請求項２６に記載の組成物。
【請求項２８】
足病学用、マニュキア用又はペディキュア用の溶液である、請求項１〜２５の組成物。
【請求項２９】
溶液、ゲル、クリーム、ゼリー、粉体、ペースト、ローション、石けん及びクリーナーから選択される、請求項２８に記載の組成物。
【請求項３０】
眼のバイオフィルム増殖を予防又は処置する方法であって、請求項２６又は２７に記載の前記組成物を眼科的に使用することを含む、方法。
【請求項３１】
手又は足のバイオフィルム増殖を予防又は処置する方法であって、請求項２８又は２９に記載の前記組成物を足病学用、マニキュア用、又はペディキュア用に使用することを含む、方法。
【請求項３２】
請求項２６又は２７に記載の前記組成物の、眼のバイオフィルム増殖の予防又は処置のための使用。
【請求項３３】
請求項２８又は２９に記載の前記組成物の、手又は足に関連するバイオフィルム増殖の予防又は処置のための使用。
【請求項３４】
請求項１〜２９の組成物で処理又は含浸されたパーソナルケア用機器。
【請求項３５】
コンタクトレンズ及びコンタクトレンズ容器の１種又は複数種を含む、請求項３４に記載のパーソナルケア用機器。
【請求項３６】
手洗い容器、ブラシ及び足洗い容器の１種又は複数種を含む、請求項３４に記載のパーソナルケア用機器。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
［関連出願の相互参照］
本出願は、２０１４年６月２７日に出願された「抗微生物性−抗バイオフィルム性組成物及び該組成物のパーソナルケア製品のための使用（ANTIMICROBIAL-ANTIBIOFILM COMPOSITIONS AND METHODS OF USE THEREOF FOR PERSONAL CARE PRODUCTS）」と題する米国仮特許出願第６２／０１８，１１４号の利益を主張する。
【０００２】
本発明は、抗微生物性及び抗バイオフィルム性組成物のパーソナルケア製品のための使用方法に関し得る。本発明は更に、キレート剤、亜鉛塩、抗微生物剤及びパーソナルケア用に許容可能な賦形剤を含む、パーソナルケア製品で利用するための組成物の調合方法に関し得る。特に、本発明は、２種以上のキレート剤及び１種の亜鉛塩を含有するパーソナルケア用に許容可能な調合物の効率的な送達方法に関し得る。
【背景技術】
【０００３】
コンタクトレンズは、視力矯正及び／又は眼の異常の補正の手段としてますます多くの人に使用されている。コンタクトレンズは、通常は毎日入れたり外したりせねばならず、毎回の装着の間に洗浄及び消毒がなされ、それには、溶液及び容器が必要とされる。コンタクトレンズの装着及び通常の取り扱い中に、微生物がコンタクトレンズに付着し、保存容器／溶液を汚染することがある。その際、保存容器／溶液中で増殖した微生物は、コンタクトレンズを介して眼に移ることがあり、眼の感染症を引き起こし得る病原体となることがある。これらの沈着物を洗浄し、容器を消毒するために様々な溶液が開発されている。
【０００４】
様々な種類の界面活性剤及び消毒薬を含んだデイリークリーナーが、コンタクトレンズ上のほとんどの沈着物及びデブリを除去する日常使用のために推奨されている。眼に入れる前にレンズを濡らす溶液が、コンタクトレンズに必要である。コンタクトレンズを眼に入れた後に、再び濡らすため、潤滑のため、及び／又はコンタクトレンズ装着者の心地よさを向上させるための眼科用液剤が、点眼ディスペンサーによって眼へと適用されることもある。眼の中のコンタクトレンズに直接加えることによってソフトコンタクトレンズの装着の心地よさを向上させるための溶液は、概して粘度増強剤、潤滑剤、界面活性剤、緩衝剤、保存剤及び塩を含有する。
【０００５】
多目的溶液は、１液の便利さのため、眼にコンタクトレンズを入れる直前に該レンズを洗浄、消毒及びコンディショニングするために一般的に普及している。多目的溶液は、すすがずに湿潤剤として使用するためにも設計されている。つまり、該溶液は、眼への接触のために眼科的に安全でなければならない。このことにより、保存剤又は消毒薬としてその溶液中で使用することができる洗浄剤、殺生物剤、抗細菌剤及び抗バイオフィルム剤の両方の種類及び濃度が或る程度制限される。それというのも、これらは眼に刺激を与える傾向があるからである。それに加えて、表面活性剤は、該溶液の湿潤機能又はコンディショニング機能を妨げてはならない。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
したがって、改善された抗細菌特性及び抗バイオフィルム特性を有する一方で、心地よさ又は眼の組織への毒性レベルの点での安全性に悪影響を及ぼすことなく製品の殺生物効力が維持又は増大された組成物が必要とされる。該組成物は、点眼剤、洗眼液、コンタクトレンズケア溶液又は洗浄液、保存液、消毒薬、洗浄保存液及び洗浄消毒保存液として利用することができる組成を有することも望まれる。
【０００７】
ペディキュア用、マニキュア用、並びに足病学用の機器、例えば足及び手を洗浄及びこすり洗いするための機器並びに足及び手を浸すための容器は、概して、多くの異なる顧客のために何度も再利用される。細菌及び真菌類の蔓延を防ぐために、抗細菌剤及び抗バイオフィルム性溶液を含む殺生物剤は、心地よさ又は顧客及び足病医若しくはマニキュア師の毒性レベルの点での安全性に悪影響を及ぼすことなく、多岐にわたる細菌に対して有効であるほど十分に強力でなければならない。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、点眼剤、洗眼液、コンタクトレンズケア溶液、コンタクトレンズ洗浄液、コンタクトレンズ保存液、コンタクトレンズ消毒薬、コンタクトレンズ洗浄保存液及びコンタクトレンズ洗浄消毒保存液、コンタクトレンズ容器、コンタクトレンズ、並びに足病学用、マニュキア用及びペディキュア用の溶液、ゲル、クリーム、ゼリー、粉体、ペースト、ローション、石けん及びクリーナーを含むパーソナルケア製品の予防、除染又は処理のための組成物及び方法を提供し得る。
【０００９】
本発明の一実施の形態は、（ａ）１種又は複数種のキレート剤と、（ｂ）１種又は２種の金属イオン塩とを含む組成物を提供し得る。
【００１０】
別の実施の形態において、本発明の組成物は、（ａ）少量の少なくとも２種のキレート剤と、（ｂ）少量の少なくとも１種の金属イオン塩とを含み、ここで成分（ａ）及び成分（ｂ）のそれぞれの量が、パーソナルケア製品における細菌感染に対して有効な抗感染性組成物を形成するのに十分なものである。
【００１１】
更に別の実施の形態において、本発明の組成物は、（ａ）少量の少なくとも２種のキレート剤と、（ｂ）少量の少なくとも１種の金属イオン塩と、（ｃ）パーソナルケア用に許容可能な賦形剤とを含む。
【００１２】
本発明の更なる別の実施の形態は、パーソナルケア製品を通じて感染症を引き起こす細菌及び真菌に対して有効な２種のキレート剤と１種又は２種の金属イオン塩とを含む抗感染性組成物を提供し得る。
【００１３】
本発明の組成物は、メチシリン耐性スタフィロコッカス・アウレウス（Staphylococcus aureus）（ＭＲＳＡ）、スタフィロコッカス・エピデルミディス（Staphylococcus epidermidis）、コアグラーゼ陰性ブドウ球菌（staphylococci）（ＣｏＮＳ）、バンコマイシン耐性腸球菌（Enterococci）（ＶＲＥ）、カルバペネム耐性クレブシエラ・ニューモニエ（Klebsiella pneumoniae）、シュードモナス・アエルギノーサ（Pseudomonas aeruginosa）、アシネトバクター・バウマニ（Acinetobacter baumannii）、メチシリン耐性スタフィロコッカス・シュードインターメディウス（Staphylococcus pseudintermedius）（ＭＲＳＰ）、マラセチア・パチデルマティス（Malassezia pachydermatis）、サルモネラ・ティフィムリウム（Salmonella typhimurium）、エシェリキア・コリ（Escherichia coli）Ｏ１５７：Ｈ７、カンジダ・アルビカンス（Candida albicans）、リステリア・モノサイトゲネス（Listeria monocytogenes）、カンピロバクター・ジェジュニ（Campylobacter jejuni）、バシラス属の複数菌種（Bacillus spp.）、ストレプトコッカス・アガラクティエ（Streptococcus agalactiae）、ストレプトコッカス・ウベリス（Streptococcus uberis）、エシェリキア・コリ、サルモネラ・コレラスイス（Salmonella choleraesuis）、ステノトロフォモナス・マルトフィリア（Stenotrophomonas maltophilia）、エンテロコッカス・フェカリス（Enterococcus faecalis）、プロテウス・ミラビリス（Proteus mirabilis）、クレブシエラ属の複数菌種（Klebsiella spp.）、エンテロバクター属の複数菌種（Enterobacter spp.）及びシトロバクター属の複数菌種（Citrobacter spp.）からなる群から選択される１種又は複数種の感染関連細菌又は酵母に対して使用するための組成物とすることができる。
【００１４】
本発明の更なる実施の形態は、パーソナルケア製品中に又はパーソナルケア製品に付帯して見出される細菌及び酵母に対して使用するための少なくとも２種のキレート剤と１種又は２種の金属イオン塩とを含む抗感染性組成物を提供し得る。
【００１５】
一実施の形態においては、上記キレート剤は、組成物に対して約５０００ｍｇ／Ｌと約５００００ｍｇ／Ｌとの間である。一実施の形態においては、上記金属イオン塩は、組成物に対して約１０００ｍｇ／Ｌと約１００００ｍｇ／Ｌとの間である。
【００１６】
上記キレート剤は、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、ＤＴＰＡ、ＥＤＤＨＡ、ＩＤＡ、ＣＤＴＡ、ＨＥＤＴＡ、ＨＥＩＤＡ、ＮＴＡ、クエン酸ナトリウム、クエン酸カリウム、オボトランスフェリン及びラクトフェリンからなる群から選択することができる。上記金属イオン塩は、塩化亜鉛、乳酸亜鉛、クエン酸亜鉛、グルコン酸亜鉛、硫酸亜鉛、酢酸亜鉛、銀イオン又はスルファジアジン銀、硫酸銀、硝酸銀及び炭酸銀からなる群から選択することができる。
【００１７】
別の実施の形態においては、上記キレート剤は、ＥＤＴＡ及びクエン酸ナトリウムであり、かつ金属イオン塩は、塩化亜鉛又は硫酸亜鉛である。ＥＤＴＡは、約１０ｍｇ／ｍｌで存在してよく、かつクエン酸ナトリウムは、約１０ｍｇ／ｍｌで存在してよい。塩化亜鉛又は乳酸亜鉛は、約１ｍｇ／ｍｌで存在してよい。
【００１８】
本組成物は、水、クエン酸緩衝液、クエン酸、安定化剤、着香料、ビタミン、ミネラル、薬草（herbals）、界面活性剤、抗微生物性ペプチド、抗微生物剤及びｐＨ調節剤からなる群から選択される１つ又は複数の成分を更に含むことができる。抗微生物性保存剤は、ソルビン酸カリウム、安息香酸カリウム、安息香酸ナトリウム及び安息香酸から選択することができ、特にコンタクトレンズ洗浄液及び消毒液において使用することができる。抗微生物性保存剤は、０．２５ｇ／Ｌから３ｇ／Ｌまでの範囲の濃度であってよい。
【００１９】
本発明はまた、パーソナルケア製品に対して様々な様式で、例えば消毒液、ローション、クリーム、ゲル、スプレー、熱可逆性ゲルスプレー及びペーストにおいて使用するために適した調合物の調製方法を教示することができる。
【００２０】
本発明は更に、コンタクトレンズ、コンタクトレンズ容器並びにマニキュア用、ペディキュア用、及び足病学用の道具及び容器を含むパーソナルケア製品を処理又は含浸するために適した調合物の調製方法を教示することができる。
【００２１】
上記調合物は、天然又は合成のフレーバリング及び着色剤を含むこともできる。本発明の組成物には、増粘剤、例えばグアーガム、カーボポール、ポリエチレングリコール、プルロニックＦ−１２７、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、キサンタンガム及び他のパーソナルケア用に許容可能な増粘剤を添加することもできる。
【００２２】
他の調合物は、当業者にはすぐさま明らかになるであろう。本発明の組成物は、抗バイオフィルム性酵素（セルラーゼ、β−Ｎ−アセチルグルコナーゼ、ディスパーシンＢ、パパイン、ＤＮアーゼＩ等）、抗微生物性ペプチド、抗生物質類（ゲンタマイシン、シプロフロキサシン、アンピシリン、セファマンドールナファート（cefamendole nafate）、リファンピシン（rifambicin）等）、抗微生物剤（トリクロサン、クロルヘキシジン、第四級アンモニウム化合物、銀、銀塩等）及び他の抗バイオフィルム性化合物を含むことができる。
【００２３】
本発明はまた、組成物中で抗感染性化合物の安定性及び効力を高めるリポソーム送達系又はナノ粒子送達系の使用を教示することもできる。
【００２４】
本発明はまた、本発明の組成物で処理又は含浸されたパーソナルケア製品、例えばコンタクトレンズ、コンタクトレンズ容器、手洗い容器、手洗いブラシ又は足洗いブラシ、及び足洗い容器を教示することもできる。
【図面の簡単な説明】
【００２５】
【図１】メチシリン耐性スタフィロコッカス・アウレウス（ＭＲＳＡ）増殖及びバイオフィルム形成に対する、クエン酸ナトリウム（３ｍｇ／ｍｌ）、ＥＤＴＡ（０．２５ｍｇ／ｍｌ）及びＺｎＣｌ２（０．１ｍｇ／ｍｌ）の単独及び組合せの抑制効果を示す棒グラフである。
【図２】メチシリン耐性スタフィロコッカス・シュードインターメディウス（ＭＲＳＰ）増殖及びバイオフィルム形成に対する、クエン酸ナトリウム（３ｍｇ／ｍｌ）、ＥＤＴＡ（０．１２５ｍｇ／ｍｌ）及びＺｎＣｌ２（０．１ｍｇ／ｍｌ）の単独及び組合せの抑制効果を示す棒グラフである。
【図３】シュードモナス・アエルギノーサ増殖及びバイオフィルム形成に対する、クエン酸ナトリウム（３ｍｇ／ｍｌ）、ＥＤＴＡ（０．２５ｍｇ／ｍｌ）及びＺｎＣｌ２（０．１ｍｇ／ｍｌ）の単独及び組合せの抑制効果を示す棒グラフである。
【図４】リステリア・モノサイトゲネス増殖及びバイオフィルム形成に対する、クエン酸ナトリウム（３ｍｇ／ｍｌ）、ＥＤＴＡ（０．０６２ｍｇ／ｍｌ）及びＺｎＣｌ２（０．１ｍｇ／ｍｌ）の単独及び組合せの抑制効果を示す棒グラフである。
【図５】メチシリン耐性スタフィロコッカス・アウレウス（ＭＲＳＡ）増殖及びバイオフィルム形成に対する、クエン酸ナトリウム（３ｍｇ／ｍｌ）、ＥＤＴＡ（０．２５ｍｇ／ｍｌ）及びＺｎＣｌ２（０．１ｍｇ／ｍｌ）の単独の抑制効果、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの抑制効果を示す棒グラフである。
【図６】メチシリン耐性スタフィロコッカス・シュードインターメディウス（ＭＲＳＰ）増殖及びバイオフィルム形成に対する、クエン酸ナトリウム（３ｍｇ／ｍｌ）、ＥＤＴＡ（０．１２５ｍｇ／ｍｌ）及びＺｎＣｌ２（０．１ｍｇ／ｍｌ）の単独の抑制効果、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの抑制効果を示す棒グラフである。
【図７】シュードモナス・アエルギノーサ増殖及びバイオフィルム形成に対する、クエン酸ナトリウム（３ｍｇ／ｍｌ）、ＥＤＴＡ（０．２５ｍｇ／ｍｌ）及びＺｎＣｌ２（０．１ｍｇ／ｍｌ）の単独の抑制効果、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの抑制効果を示す棒グラフである。
【図８】サルモネラ・コレラスイスＡＴＣＣ  １０７０８増殖及びバイオフィルム形成に対する、クエン酸ナトリウム（３ｍｇ／ｍｌ）、ＥＤＴＡ（０．２５ｍｇ／ｍｌ）及びＺｎＣｌ２（０．１ｍｇ／ｍｌ）の単独の抑制効果、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの抑制効果を示す棒グラフである。
【図９】エシェリキア・コリＯ１５７：Ｈ７増殖及びバイオフィルム形成に対する、クエン酸ナトリウム（３ｍｇ／ｍｌ）、ＥＤＴＡ（０．２５ｍｇ／ｍｌ）及びＺｎＣｌ２（０．１ｍｇ／ｍｌ）の単独の抑制効果、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの抑制効果を示す棒グラフである。
【図１０】エシェリキア・コリＯ１５７：Ｈ７増殖及びバイオフィルム形成に対する、クエン酸ナトリウム（３ｍｇ／ｍｌ）、ＥＤＴＡ（０．２５ｍｇ／ｍｌ）及びＺｎＣｌ２（０．１ｍｇ／ｍｌ）の単独及び組合せの抑制効果を示す棒グラフである。
【図１１】スタフィロコッカス・エピデルミディス増殖及びバイオフィルム形成に対する、クエン酸ナトリウム（３ｍｇ／ｍｌ）、ＥＤＴＡ（０．１２５ｍｇ／ｍｌ）及びＺｎＣｌ２（０．１ｍｇ／ｍｌ）の単独の抑制効果、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの抑制効果を示す棒グラフである。
【図１２】コアグラーゼ陰性ブドウ球菌（ＣｏＮＳ−４２）増殖及びバイオフィルム形成に対する、クエン酸ナトリウム（３ｍｇ／ｍｌ）、ＥＤＴＡ（０．１２５ｍｇ／ｍｌ）及びＺｎＣｌ２（０．１ｍｇ／ｍｌ）の単独の抑制効果、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの抑制効果を示す棒グラフである。
【図１３】ストレプトコッカス・アガラクティエＡＴＣＣ  １２３８６増殖及びバイオフィルム形成に対する、クエン酸ナトリウム（３ｍｇ／ｍｌ）、ＥＤＴＡ（０．２５ｍｇ／ｍｌ）及びＺｎＣｌ２（０．１ｍｇ／ｍｌ）の単独の抑制効果、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの抑制効果を示す棒グラフである。
【図１４】クレブシエラ・ニューモニエ増殖及びバイオフィルム形成に対する、クエン酸ナトリウム（３ｍｇ／ｍｌ）、ＥＤＴＡ（０．１２５ｍｇ／ｍｌ）及びＺｎＣｌ２（０．１ｍｇ／ｍｌ）の単独の抑制効果、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの抑制効果を示す棒グラフである。
【図１５】アシネトバクター・バウマニ増殖及びバイオフィルム形成に対する、クエン酸ナトリウム（３ｍｇ／ｍｌ）、ＥＤＴＡ（０．１２５ｍｇ／ｍｌ）及びＺｎＣｌ２（０．１ｍｇ／ｍｌ）の単独の抑制効果、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの抑制効果を示す棒グラフである。
【図１６】ステノトロフォモナス・マルトフィリア増殖及びバイオフィルム形成に対する、クエン酸ナトリウム（３ｍｇ／ｍｌ）、ＥＤＴＡ（０．２５ｍｇ／ｍｌ）及びＺｎＣｌ２（０．１ｍｇ／ｍｌ）の単独の抑制効果、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの抑制効果を示す棒グラフである。
【図１７】バンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）増殖及びバイオフィルム形成に対する、クエン酸ナトリウム（３ｍｇ／ｍｌ）、ＥＤＴＡ（０．２５ｍｇ／ｍｌ）及びＺｎＣｌ２（０．１ｍｇ／ｍｌ）の単独の抑制効果、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの抑制効果を示す棒グラフである。
【図１８】エンテロコッカス・フェカリス増殖及びバイオフィルム形成に対する、クエン酸ナトリウム（３ｍｇ／ｍｌ）、ＥＤＴＡ（０．２５ｍｇ／ｍｌ）及びＺｎＣｌ２（０．１ｍｇ／ｍｌ）の単独の抑制効果、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの抑制効果を示す棒グラフである。
【図１９】プロテウス・ミラビリス増殖及びバイオフィルム形成に対する、クエン酸ナトリウム（３ｍｇ／ｍｌ）、ＥＤＴＡ（０．２５ｍｇ／ｍｌ）及びＺｎＣｌ２（０．１ｍｇ／ｍｌ）の単独の抑制効果、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの抑制効果を示す棒グラフである。
【図２０】カンジダ・アルビカンス増殖及びバイオフィルム形成に対する、クエン酸ナトリウム（３ｍｇ／ｍｌ）、ＥＤＴＡ（０．２５ｍｇ／ｍｌ）及びＺｎＣｌ２（０．１ｍｇ／ｍｌ）の単独の抑制効果、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの抑制効果を示す棒グラフである。
【図２１】マラセチア・パチデルマティス増殖及びバイオフィルム形成に対する、クエン酸ナトリウム（１．５ｍｇ／ｍｌ）、ＥＤＴＡ（０．１２５ｍｇ／ｍｌ）及びＺｎＣｌ２（０．０５ｍｇ／ｍｌ）の単独の抑制効果、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの抑制効果を示す棒グラフである。
【図２２】マラセチア・パチデルマティス増殖及びバイオフィルム形成に対する、クエン酸ナトリウム（１．５ｍｇ／ｍｌ）、ＥＤＴＡ（０．１２５ｍｇ／ｍｌ）及びＺｎＣｌ２（０．０５ｍｇ／ｍｌ）の単独及び組合せの抑制効果を示す棒グラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
定義
「抗微生物剤」という用語は、細菌及び酵母を含むがこれらに限定されない微生物を死滅させるか又は微生物の成長を抑制する若しくは休止させる化合物又は組成物を指す。
【００２７】
「バイオフィルム」という用語は、自己生産された細胞外高分子マトリックス中に取り囲まれて生物表面又は非生物表面に付着した微生物の組織的群集を指す。バイオフィルム中の細菌は、それらの浮遊性（自由生活性）の対照物と比べて抗生物質／抗微生物剤に対して１０００倍も耐性が高いことがある。
【００２８】
「バイオフィルム形成」という用語は、微生物の表面への付着と、それに続く細胞の多層の発生とを指す。
【００２９】
「抗バイオフィルム」という用語は、微生物バイオフィルム形成の抑制及び事前に形成されたバイオフィルムの破壊又は消散を指す。
【００３０】
「感染」という用語は、体内に通常は存在しない細菌、ウイルス及び寄生虫のような微生物の侵入及び増殖を指す。感染は症状を引き起こさず非顕性であるか、又は症状を引き起こし臨床的に顕性であることがある。体内に生来生存している微生物は感染とみなされない。
【００３１】
「パーソナルケア製品」という用語は、点眼剤、洗眼液、コンタクトレンズケア溶液、コンタクトレンズ洗浄液、コンタクトレンズ保存液、コンタクトレンズ消毒薬、コンタクトレンズ洗浄保存液及びコンタクトレンズ洗浄消毒保存液、コンタクトレンズ容器、コンタクトレンズを含む眼科用製品、並びに足病学用、マニュキア用及びペディキュア用の溶液、ゲル、クリーム、ゼリー、粉体、ペースト、ローション、石けん及びクリーナー、並びに手洗い容器、手洗いブラシ及び足洗いブラシ、角質浸漬液及び足洗い容器を指す。
【００３２】
「消毒薬（disinfectants：非生体消毒薬）」という用語は、無生物物体に適用することで、該物体上に生存している微生物を破壊する物質を指す。消毒は、必ずしも全ての微生物を、特に耐性細菌芽胞を死滅させるものではなく、あらゆる種類の生命を死滅させる極端な物理的及び／又は化学的過程である滅菌よりも効果は低い。消毒薬は、体内の微生物を破壊する抗生物質のような他の抗微生物剤及び生組織にいる微生物を破壊する殺菌剤（antiseptics：生体消毒薬）とは異なる。消毒薬は、殺生物剤とも異なる。殺生物剤は、微生物だけに限らないあらゆる形の生命を破壊することを目的とするものである。消毒薬は、微生物の細胞壁／細胞膜を破壊するか、又は代謝及び増殖を妨害することによって作用する。
【００３３】
「抑制」という用語は、パーソナルケア製品に付随する細菌増殖及びバイオフィルム形成を少なくとも減少させることを指す。
【００３４】
「予防」という用語は、特に哺乳動物に病態の素因があることが見出されているが、まだ病態を有するとは診断されていない場合に、哺乳動物において発生する細菌に関連する病態を少なくとも予防することを指す。
【００３５】
「予防量（preventative amount）」は、本明細書で使用される場合、予防的な量（prophylactic amount）、例えばパーソナルケア製品を予防又は保護するのに効果的な量を含む。抗微生物剤と同時に本発明の方法に使用するのに適したペプチドを投与することによって、ペプチド及び／又は抗微生物剤を、抗微生物剤を唯一の有効成分として投与する場合に要求される投与量よりも少ない投与量で投与することができる。より少ない投与量の有効成分を投与することで、関連する副作用を低減することができる。
【００３６】
「金属イオン塩」という用語は、金属イオンの塩、例えば塩化亜鉛、乳酸亜鉛、クエン酸亜鉛、グルコン酸亜鉛、硫酸亜鉛、酢酸亜鉛、銀イオン又はスルファジアジン銀、硫酸銀、硝酸銀及び炭酸銀を指す。
【００３７】
本発明は、抗微生物活性及び抗バイオフィルム活性を提供する抗感染性組成物であって、キレート剤と他の抗微生物剤、例えば抗微生物／抗バイオフィルム性化合物のような他の抗微生物剤、金属イオン塩との組合せを、ゲル化剤、界面活性剤又は安定化剤と一緒に含有する、抗感染性組成物を教示し得る。
【００３８】
新規組成物は、キレート剤と金属イオン塩とを共に組み合わせており、こうして、通常抗微生物性組成物に必要となるであろう量より少量のキレート剤及び／又は金属イオン塩しか使用せずに、大幅な細菌増殖及びバイオフィルムの抑制が実現される。或る特定の用途のために望まれるのであれば、これらの化合物はより高い濃度で使用することができる。
【００３９】
本発明の抗微生物性組成物に使用されるキレート剤の量は１００００ｍｇ／Ｌ〜１０００００ｍｇ／Ｌとすることができる。この上述範囲を超える量を、使用前に希釈する濃縮生成物を調製するのに使用することができる。非濃縮生成物については、本発明に使用されるキレート剤の量は約５０００ｍｇ／Ｌ〜１００００ｍｇ／Ｌであるのが好ましい。この範囲は、約１０００ｍｇ／Ｌ〜５０００ｍｇ／Ｌが好ましい。
【００４０】
キレート剤の使用量は約１０００ｍｇ／Ｌ〜５０００ｍｇ／Ｌであるべきである。組成物を濃縮物として調合する場合には、この範囲を超える量を適用することができる。非濃縮生成物については、本発明に使用されるキレート剤の量は約５００ｍｇ／Ｌ〜５０００ｍｇ／Ｌであるのが好ましい。この範囲は、好ましくは約１０００ｍｇ／Ｌ〜３０００ｍｇ／Ｌ、より好ましくは約２０００ｍｇ／Ｌ〜３０００ｍｇ／Ｌである。
【００４１】
より低い濃度の溶液、例えば眼科用途のための溶液のためには、ＥＤＴＡ二ナトリウムは、組成物に対して約１０ｍｇ／Ｌ〜５０ｍｇ／Ｌであってよく、クエン酸ナトリウムは、組成物に対して約１００ｍｇ／Ｌ〜５００ｍｇ／Ｌであってよく、かつ塩化亜鉛又はクエン酸亜鉛は、約１ｍｇ／Ｌ〜１０ｍｇ／Ｌであってよい。
【００４２】
調製
１つの方法によって、１種又は２種のキレート剤と１種の金属イオン塩とを含む二成分組成物を形成する場合、これらの化合物を下記のように組み合わせることができる。十分に撹拌しながら、キレート剤を水に溶解した後、金属イオン塩を溶解することができる。ただし、添加順序を逆にすることができることに留意されたい。
【００４３】
それに加えて、抗微生物剤／抗微生物性ペプチド、抗生物質、抗バイオフィルム性化合物、第四級アンモニウム化合物及び界面活性剤を、抗微生物性組成物において、有利にキレート剤と組み合わせてもよい。本発明の組成物は、（ａ）少量の少なくとも１種又は２種のキレート剤と、（ｂ）少量の金属イオン塩又は鉄イオン封鎖性糖タンパク質又は抗微生物性ペプチド又は抗生物質又は抗バイオフィルム性化合物と、（ｃ）控えめな量の、安定化剤及び／又はゲル化剤及び／又は界面活性剤からなる群からの少なくとも１種の化合物とを含み、ここで、成分（ａ）、（ｂ）及び（ｃ）のそれぞれの量は、組み合わせることでパーソナルケア製品のために有効な抗感染性組成物を形成するのに十分な量である。
【００４４】
組成物中の有効成分の濃度は、本発明の組成物をパーソナルケア製品に使用する時間を低減するように所望又は必要に応じて変動し得る。有効成分の濃度のこれらの変動は当業者によって容易に決定される。
【００４５】
組成物
本発明は、少なくとも２種のキレート剤及び１種の金属イオン塩を含む、パーソナルケア製品用の独特な増強された抗感染性組成物を含み得る。
【００４６】
一実施形態においては、２種のキレート剤と１種の金属イオン塩とを含有する組成物は、抗微生物性化合物を含む。複数のキレート剤と１種の金属イオン塩とを抗微生物性化合物及び抗バイオフィルム性化合物と一緒に含有する組成物は、パーソナルケア製品に付随する細菌増殖及びバイオフィルム形成に対して増強された抑制効果を有する。本発明の一実施形態においては、増強された抗微生物性−抗バイオフィルム性組成物は、少なくとも１種又は２種のキレート剤と、１種の金属イオン塩と、殺菌剤（例えばトリクロサン、クロルヘキシジン塩、塩化セチルピリジニウム等）、抗生物質及びバクテリオシン（例えばナイシン、エピデルミン、ガリデルミン（gallidennin）、シンナマイシン、デュラマイシン、ラクチシン４８１等）並びに鉄イオン封鎖性糖タンパク質（オボトランスフェリン、ラクトフェリン及びセロトランスフェリン）を含む１種又は複数種の抗微生物剤とを含む。それに加えて、パーソナルケア製品用組成物は、クエン酸塩（例えばクエン酸、クエン酸亜鉛、クエン酸ナトリウム、クエン酸カリウム等）、無機質（例えば無機塩類、例えば塩化亜鉛、グルコン酸亜鉛、乳酸亜鉛、クエン酸亜鉛、硫酸亜鉛、酢酸亜鉛、銀、硫酸銀、スルファジアジン銀、硝酸銀、炭酸銀等）及びトリテルペノイド類（例えばオレアノール酸及びウルソール酸）及びキトサンのような成分を含んでもよい。
【００４７】
一実施形態において、組成物は抗生物質と、１種又は２種のキレート剤と、更に１種の金属イオン塩とを含む。抗生物質は既知である。抗生物質群としては、β−ラクタム阻害剤（例えばペニシリン、アンピシリン、アモキシシリン、メチシリン等）、セファロスポリン類（例えばセファロチン、セファマイシン等）、アミノグリコシド類（例えばストレプトマイシン、トブラマイシン等）、ポリエン類（例えばアンホテリシン、ナイスタチン等）、マクロライド類（例えばエリスロマイシン等）、テトラサイクリン類（例えばテトラサイクリン、ドキシサイクリン等）、ニトロイミダゾール（例えばメトロニダゾール）、キノロン類（例えばナリジクス酸）、リファマイシン類（例えばリファンピン）、及びスルホンアミド類（例えばスルファニルアミド）、芳香族ニトロ化合物（例えばクロラムフェニコール）、及びピリジン類（例えばイソニアジド）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４８】
一実施形態において、組成物は、殺菌剤と、１種又は２種のキレート剤と、１種の金属イオン塩とを含む。殺菌剤は身体の外表面上での微生物を死滅させる又は微生物の増殖を抑制する作用物質である。殺菌剤としては、トリクロサン、クロルヘキシジン塩及び塩化セチルピリジニウムが挙げられるが、これらに限定されない。
【００４９】
一実施形態において、組成物は、抗バイオフィルム性化合物と、１種又は２種のキレート剤と、金属イオン塩とを含む。抗バイオフィルム性化合物としては、ディスパーシンＢ、ＤＮアーゼＩ、プロテイナーゼＫ、アピラーゼ、シス−２−デセン酸、アルギン酸リアーゼ、ラクトフェリン、ガリウム、セルラーゼ及び５−フルオロウラシルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００５０】
一実施形態においては、組成物は、パーソナルケア製品における増殖及びバイオフィルム形成を抑制するために有効である。該組成物は、事前に形成されたバイオフィルムの破壊又は消散にも有効であり、それにより、バイオフィルムに包埋された細菌は、抗微生物剤による死滅をより受けやすくなる。適切な環境条件、例えば湿度及びｐＨにおいて、感染は本発明の実施形態を使用して調節することができる。
【００５１】
本発明の一実施形態は、他のパーソナルケア用に許容可能なビヒクル、希釈剤及び添加剤、例えば酸化防止剤、抗炎症性化合物、ビタミン類、組織分解酵素、緩衝剤及び意図された受容者における等張性を調合物に与える溶質、並びに懸濁剤、界面活性剤及び増粘剤を含み得る水性及び非水性の滅菌懸濁液を含んでもよい。
【００５２】
パーソナルケア調合物
本発明の組成物は、限定されるものではないが、消毒液、ローション、クリーム、ジェル、スプレーを含む、該組成物をパーソナルケア製品に適用／送達するのに適した様々な調合物に添加されてよい。そのような調合物を提供するために、本発明の組成物は、１種又は複数種のパーソナルケア用に許容可能な賦形剤と合される。
【００５３】
１種又は２種のキレート剤及び１種の金属イオン塩を、殺菌剤、抗生物質、抗微生物剤、鉄イオン封鎖性糖タンパク質、バクテリオシン、細胞外マトリックス又はキトサンと組み合わせて含むパーソナルケア用に許容可能な組成物は、いずれの既知の方法によっても調製することができる。
【００５４】
一般的に、抗感染性組成物の製造方法は、パーソナルケア用に許容可能な担体並びに有効量の複数種のキレート剤及び１種の金属イオン塩の両方と、殺菌剤、抗生物質、バクテリオシン、抗微生物性ペプチド又はキトサンとを合することを含み得る。
【００５５】
本発明の一実施形態を調合するために、様々な担体及び賦形剤を使用することができ、それらはよく知られている。そのようなパーソナルケア用に許容可能なビヒクルには、限定されるものではないが、水、エタノール、保水剤、例えばポリプロピレングリコール、グリセロール及びソルビトール、ゲル化剤、例えばセルロース誘導体、ポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレンブロックコポリマー、カルボキシメチルセルロース、プルロニックＦ−１２７、アルギン酸ナトリウム、ポリエチレングリコール、増粘剤、例えばカーボポール（商標）９３４が含まれる。
【００５６】
処理方法
パーソナルケア製品の処理又は消毒において使用するために、成分の好ましい濃度範囲は、以下を含んでよい：
（ｉ）クエン酸ナトリウム：（ａ）５００００ｍｇ／Ｌ〜１０００００ｍｇ／Ｌ、（ｂ）２５０００ｍｇ／Ｌ〜５００００ｍｇ／Ｌ、（ｃ）１００００ｍｇ／Ｌ〜２５０００ｍｇ／Ｌ、（ｄ）５０００ｍｇ／Ｌ〜１００００ｍｇ／Ｌ、及び（ｅ）１０００ｍｇ／Ｌ〜５０００ｍｇ／Ｌ
（ｉｉ）ＥＤＴＡ二ナトリウム：（ａ）１００００ｍｇ／Ｌ〜２５０００ｍｇ／Ｌ、（ｂ）５０００ｍｇ／Ｌ〜１００００ｍｇ／Ｌ、（ｃ）１０００ｍｇ／Ｌ〜５０００ｍｇ／Ｌ、（ｄ）５００ｍｇ／Ｌ〜１０００ｍｇ／Ｌ、及び（ｅ）１００ｍｇ／Ｌ〜５００ｍｇ／Ｌ
（ｉｉｉ）塩化亜鉛：（ａ）１０００ｍｇ／Ｌ〜５０００ｍｇ／Ｌ、（ｂ）５００ｍｇ／Ｌ〜１０００ｍｇ／Ｌ、（ｃ）１００ｍｇ／Ｌ〜５００ｍｇ／Ｌ、及び（ｄ）１０ｍｇ／Ｌ〜１００ｍｇ／Ｌ。
【００５７】
一実施形態においては、１種又は複数種のキレート剤及び１種の金属イオン塩は一緒になって、本明細書に記載されるように、担体と、１種又は複数種のキレート剤及び１種の金属イオン塩を有効成分として含む有効量の組成物とを含むパーソナルケア用に許容可能な医薬品として調合される。
【００５８】
本発明の更なる実施形態においては、増強されたパーソナルケア製品には、抗生物質耐性の懸念及び生体適合性／安全性の問題は何ら存在しない。また、１種又は２種のキレート剤（ＥＤＴＡ及びクエン酸ナトリウム）及び１種の金属イオン塩（塩化亜鉛又は硫酸亜鉛又は乳酸亜鉛）を含む本発明の組成物は、ＧＲＡＳ（一般に安全とみなされている）ステータスを有し、これらの全ての成分は食品添加物だけでなく飼料添加物でもある。
【００５９】
本発明は、下記実施例を参照してより良好に理解することができる。これらの実施例は本発明の特定の実施形態を代表するものであることが意図され、本発明の範囲を限定するものではない。
【実施例】
【００６０】
実施例１：メチシリン耐性スタフィロコッカス・アウレウス（ＭＲＳＡ）増殖及びバイオフィルム形成に対する、クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ及び塩化亜鉛の単独及び組合せの抑制効果
【００６１】
Ｓ．アウレウスの一夜ブロス培養物を、ＴＳＢ中で増殖させて、接種物として使用した。それぞれの化合物が存在しない場合、及びそれぞれの化合物が個別に存在する場合（クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛）、及びそれぞれの化合物が一緒に存在する場合（塩化ナトリウム＋ＥＤＴＡ＋塩化亜鉛）における、ＴＳＢを含む９６ウェルのマイクロプレートに接種し、３７℃で２４時間にわたりインキュベートした。浮遊性細胞の増殖を、Labsystems社製のＭｕｌｔｉｓｋａｎ  Ａｓｃｅｎｔマイクロプレートリーダーを使用して６００ｎｍでの吸光度に基づき測定した。バイオフィルムを、ウェル中の培地を破棄し、該ウェルを水で３回すすぎ、そして結合されている細胞をクリスタルバイオレットで染色することによって測定した。次いで、該色素を、３３％酢酸で可溶化し、６３０ｎｍでの吸光度を、マイクロタイタープレートリーダーを使用して測定した。クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ及び塩化亜鉛を含む組成物は、バイオフィルム形成に対して、クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛の単独の場合と比べて増強された抑制効果を示した（図１）。
【００６２】
実施例２：メチシリン耐性スタフィロコッカス・シュードインターメディウス（ＭＲＳＰ）増殖及びバイオフィルム形成に対する、クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ及び塩化亜鉛の単独及び組合せの抑制効果
【００６３】
メチシリン耐性Ｓ．シュードインターメディウスの一夜ブロス培養物を、ＴＳＢ中で増殖させて、接種物として使用した。それぞれの化合物が存在しない場合、及びそれぞれの化合物が個別に存在する場合（クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛）、及びそれぞれの化合物が一緒に存在する場合（塩化ナトリウム＋ＥＤＴＡ＋塩化亜鉛）における、ＴＳＢを含む９６ウェルのマイクロプレートに接種し、３７℃で２４時間にわたりインキュベートした。浮遊性細胞の増殖を、Labsystems社製のＭｕｌｔｉｓｋａｎ  Ａｓｃｅｎｔマイクロプレートリーダーを使用して６００ｎｍでの吸光度に基づき測定した。バイオフィルムを、ウェル中の培地を破棄し、該ウェルを水で３回すすぎ、そして結合されている細胞をクリスタルバイオレットで染色することによって測定した。次いで、該色素を、３３％酢酸で可溶化し、６３０ｎｍでの吸光度を、マイクロタイタープレートリーダーを使用して測定した。クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ及び塩化亜鉛を含む組成物は、バイオフィルム形成に対して、クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛の単独の場合と比べて増強された抑制効果を示した（図２）。
【００６４】
実施例３：シュードモナス・アエルギノーサ増殖及びバイオフィルム形成に対する、クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ及び塩化亜鉛の単独及び組合せの抑制効果
【００６５】
Ｐ．アエルギノーサの一夜ブロス培養物を、ＴＳＢ中で増殖させて、接種物として使用した。それぞれの化合物が存在しない場合、及びそれぞれの化合物が個別に存在する場合（クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛）、及びそれぞれの化合物が一緒に存在する場合（塩化ナトリウム＋ＥＤＴＡ＋塩化亜鉛）における、ＴＳＢを含む９６ウェルのマイクロプレートに接種し、３７℃で２４時間にわたりインキュベートした。浮遊性細胞の増殖を、Labsystems社製のＭｕｌｔｉｓｋａｎ  Ａｓｃｅｎｔマイクロプレートリーダーを使用して６００ｎｍでの吸光度に基づき測定した。バイオフィルムを、ウェル中の培地を破棄し、該ウェルを水で３回すすぎ、そして結合されている細胞をクリスタルバイオレットで染色することによって測定した。次いで、該色素を、３３％酢酸で可溶化し、６３０ｎｍでの吸光度を、マイクロタイタープレートリーダーを使用して測定した。クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ及び塩化亜鉛を含む組成物は、バイオフィルム形成に対して、クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛の単独の場合と比べて増強された抑制効果を示した（図３）。
【００６６】
実施例４：リステリア・モノサイトゲネス増殖及びバイオフィルム形成に対する、クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ及び塩化亜鉛の単独及び組合せの抑制効果
【００６７】
Ｌ．モノサイトゲネスの一夜ブロス培養物を、ＴＳＢ中で増殖させて、接種物として使用した。それぞれの化合物が存在しない場合、及びそれぞれの化合物が個別に存在する場合（クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛）、及びそれぞれの化合物が一緒に存在する場合（塩化ナトリウム＋ＥＤＴＡ＋塩化亜鉛）における、ＴＳＢを含む９６ウェルのマイクロプレートに接種し、３７℃で２４時間にわたりインキュベートした。浮遊性細胞の増殖を、Labsystems社製のＭｕｌｔｉｓｋａｎ  Ａｓｃｅｎｔマイクロプレートリーダーを使用して６００ｎｍでの吸光度に基づき測定した。バイオフィルムを、ウェル中の培地を破棄し、該ウェルを水で３回すすぎ、そして結合されている細胞をクリスタルバイオレットで染色することによって測定した。次いで、該色素を、３３％酢酸で可溶化し、６３０ｎｍでの吸光度を、マイクロタイタープレートリーダーを使用して測定した。クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ及び塩化亜鉛を含む組成物は、バイオフィルム形成に対して、クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛の単独の場合と比べて増強された抑制効果を示した（図４）。
【００６８】
実施例５：メチシリン耐性スタフィロコッカス・アウレウス（ＭＲＳＡ）増殖及びバイオフィルム形成に対する、クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ及びＺｎＣｌ２の単独の抑制効果、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの抑制効果
【００６９】
Ｓ．アウレウス（ＭＲＳＡ）の一夜ブロス培養物を、ＴＳＢ中で増殖させて、接種物として使用した。それぞれの化合物が存在しない場合、及びそれぞれの化合物が個別に存在する場合（クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛）、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの場合における、ＴＳＢを含む９６ウェルのマイクロプレートに接種し、３７℃で２４時間にわたりインキュベートした。浮遊性細胞の増殖を、Labsystems社製のＭｕｌｔｉｓｋａｎ  Ａｓｃｅｎｔマイクロプレートリーダーを使用して６００ｎｍでの吸光度に基づき測定した。バイオフィルムを、ウェル中の培地を破棄し、該ウェルを水で３回すすぎ、そして結合されている細胞をクリスタルバイオレットで染色することによって測定した。次いで、該色素を、３３％酢酸で可溶化し、６３０ｎｍでの吸光度を、マイクロタイタープレートリーダーを使用して測定した。クエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡの組合せ及びクエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２の組合せは、バイオフィルム形成に対して、クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛の単独の場合と比べて増強された抑制効果を示した（図５）。
【００７０】
実施例６：メチシリン耐性スタフィロコッカス・シュードインターメディウス（ＭＲＳＰ）増殖及びバイオフィルム形成に対する、クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ及びＺｎＣｌ２の単独の効果、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの効果
【００７１】
ＭＲＳＰの一夜ブロス培養物を、ＴＳＢ中で増殖させて、接種物として使用した。それぞれの化合物が存在しない場合、及びそれぞれの化合物が個別に存在する場合（クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛）、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの場合における、ＴＳＢを含む９６ウェルのマイクロプレートに接種し、３７℃で２４時間にわたりインキュベートした。浮遊性細胞の増殖を、Labsystems社製のＭｕｌｔｉｓｋａｎ  Ａｓｃｅｎｔマイクロプレートリーダーを使用して６００ｎｍでの吸光度に基づき測定した。バイオフィルムを、ウェル中の培地を破棄し、該ウェルを水で３回すすぎ、そして結合されている細胞をクリスタルバイオレットで染色することによって測定した。次いで、該色素を、３３％酢酸で可溶化し、６３０ｎｍでの吸光度を、マイクロタイタープレートリーダーを使用して測定した。クエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡの組合せ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２の組合せ及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せは、バイオフィルム形成に対して、クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛の単独の場合と比べて増強された抑制効果を示した（図６）。
【００７２】
実施例７：シュードモナス・アエルギノーサ増殖及びバイオフィルム形成に対する、クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ及びＺｎＣｌ２の単独の抑制効果、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの抑制効果
【００７３】
Ｐ．アエルギノーサの一夜ブロス培養物を、ＴＳＢ中で増殖させて、接種物として使用した。それぞれの化合物が存在しない場合、及びそれぞれの化合物が個別に存在する場合（クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛）、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの場合における、ＴＳＢを含む９６ウェルのマイクロプレートに接種し、３７℃で２４時間にわたりインキュベートした。浮遊性細胞の増殖を、Labsystems社製のＭｕｌｔｉｓｋａｎ  Ａｓｃｅｎｔマイクロプレートリーダーを使用して６００ｎｍでの吸光度に基づき測定した。バイオフィルムを、ウェル中の培地を破棄し、該ウェルを水で３回すすぎ、そして結合されている細胞をクリスタルバイオレットで染色することによって測定した。次いで、該色素を、３３％酢酸で可溶化し、６３０ｎｍでの吸光度を、マイクロタイタープレートリーダーを使用して測定した。クエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡの組合せ及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せは、バイオフィルム形成に対して、クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛の単独の場合と比べて増強された抑制効果を示した（図７）。
【００７４】
実施例８：サルモネラ・コレラスイスＡＴＣＣ  １０７０８に対する、クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ及びＺｎＣｌ２の単独の抑制効果、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの抑制効果
【００７５】
Ｓ．コレラスイスＡＴＣＣ  １０７０８の一夜ブロス培養物を、ＴＳＢ中で増殖させて、接種物として使用した。それぞれの化合物が存在しない場合、及びそれぞれの化合物が個別に存在する場合（クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛）、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの場合における、ＴＳＢを含む９６ウェルのマイクロタイタープレートに接種し、３７℃で２４時間にわたりインキュベートした。浮遊性細胞の増殖を、Labsystems社製のＭｕｌｔｉｓｋａｎ  Ａｓｃｅｎｔマイクロプレートリーダーを使用して６００ｎｍでの吸光度に基づき測定した。バイオフィルムを、ウェル中の培地を破棄し、該ウェルを水で３回すすぎ、そして結合されている細胞をクリスタルバイオレットで染色することによって測定した。次いで、該色素を、３３％酢酸で可溶化し、６３０ｎｍでの吸光度を、マイクロタイタープレートリーダーを使用して測定した。クエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡの組合せは、バイオフィルム形成に対して、クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡの単独の場合と比べて増強された抑制効果を示した（図８）。
【００７６】
実施例９：エシェリキア・コリＯ１５７：Ｈ７に対する、クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ及びＺｎＣｌ２の単独の抑制効果、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの抑制効果
【００７７】
Ｅ．コリＯ１５７：Ｈ７の一夜ブロス培養物を、ＴＳＢ中で増殖させて、接種物として使用した。それぞれの化合物が存在しない場合、及びそれぞれの化合物が個別に存在する場合（クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛）、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの場合における、ＴＳＢを含む９６ウェルのマイクロタイタープレートに接種し、３７℃で２４時間にわたりインキュベートした。浮遊性細胞の増殖を、Labsystems社製のＭｕｌｔｉｓｋａｎ  Ａｓｃｅｎｔマイクロプレートリーダーを使用して６００ｎｍでの吸光度に基づき測定した。バイオフィルムを、ウェル中の培地を破棄し、該ウェルを水で３回すすぎ、そして結合されている細胞をクリスタルバイオレットで染色することによって測定した。次いで、該色素を、３３％酢酸で可溶化し、６３０ｎｍでの吸光度を、マイクロタイタープレートリーダーを使用して測定した。クエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡの組合せ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２の組合せ及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せは、バイオフィルム形成に対して、クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛の単独の場合と比べて増強された抑制効果を示した（図９）。
【００７８】
実施例１０：エシェリキア・コリＯ１５７：Ｈ７に対する、クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ及びＺｎＣｌ２の単独及び組合せの抑制効果
【００７９】
Ｅ．コリＯ１５７：Ｈ７の一夜ブロス培養物を、ＴＳＢ中で増殖させて、接種物として使用した。それぞれの化合物が存在しない場合、及びそれぞれの化合物が個別に存在する場合（クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛）、及びそれぞれの化合物が一緒に存在する場合（塩化ナトリウム＋ＥＤＴＡ＋塩化亜鉛）における、ＴＳＢを含む９６ウェルのマイクロタイタープレートに接種し、３７℃で２４時間にわたりインキュベートした。浮遊性細胞の増殖を、Labsystems社製のＭｕｌｔｉｓｋａｎ  Ａｓｃｅｎｔマイクロプレートリーダーを使用して６００ｎｍでの吸光度に基づき測定した。バイオフィルムを、ウェル中の培地を破棄し、該ウェルを水で３回すすぎ、そして結合されている細胞をクリスタルバイオレットで染色することによって測定した。次いで、該色素を、３３％酢酸で可溶化し、６３０ｎｍでの吸光度を、マイクロタイタープレートリーダーを使用して測定した。クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ及びＺｎＣｌ２を含む組成物は、バイオフィルム形成に対して、クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛の単独の場合と比べて増強された抑制効果を示した（図１０）。
【００８０】
実施例１１：スタフィロコッカス・エピデルミディスに対する、クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ及びＺｎＣｌ２の単独の抑制効果、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの抑制効果
【００８１】
Ｓ．エピデルミディスの一夜ブロス培養物を、ＴＳＢ中で増殖させて、接種物として使用した。それぞれの化合物が存在しない場合、及びそれぞれの化合物が個別に存在する場合（クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛）、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの場合における、ＴＳＢを含む９６ウェルのマイクロタイタープレートに接種し、３７℃で２４時間にわたりインキュベートした。浮遊性細胞の増殖を、Labsystems社製のＭｕｌｔｉｓｋａｎ  Ａｓｃｅｎｔマイクロプレートリーダーを使用して６００ｎｍでの吸光度に基づき測定した。バイオフィルムを、ウェル中の培地を破棄し、該ウェルを水で３回すすぎ、そして結合されている細胞をクリスタルバイオレットで染色することによって測定した。次いで、該色素を、３３％酢酸で可溶化し、６３０ｎｍでの吸光度を、マイクロタイタープレートリーダーを使用して測定した。クエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡの組合せは、バイオフィルム形成に対して、クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡの単独の場合と比べて増強された抑制効果を示した（図１１）。
【００８２】
実施例１２：コアグラーゼ陰性ブドウ球菌（ＣｏＮＳ−４２）に対する、クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ及びＺｎＣｌ２の単独の抑制効果、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの抑制効果
【００８３】
ＣｏＮＳ−４２の一夜ブロス培養物を、ＴＳＢ中で増殖させて、接種物として使用した。それぞれの化合物が存在しない場合、及びそれぞれの化合物が個別に存在する場合（クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛）、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの場合における、ＴＳＢを含む９６ウェルのマイクロタイタープレートに接種し、３７℃で２４時間にわたりインキュベートした。浮遊性細胞の増殖を、Labsystems社製のＭｕｌｔｉｓｋａｎ  Ａｓｃｅｎｔマイクロプレートリーダーを使用して６００ｎｍでの吸光度に基づき測定した。バイオフィルムを、ウェル中の培地を破棄し、該ウェルを水で３回すすぎ、そして結合されている細胞をクリスタルバイオレットで染色することによって測定した。次いで、該色素を、３３％酢酸で可溶化し、６３０ｎｍでの吸光度を、マイクロタイタープレートリーダーを使用して測定した。クエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡの組合せは、バイオフィルム形成に対して、クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡの単独の場合と比べて増強された抑制効果を示した（図１２）。
【００８４】
実施例１３：ストレプトコッカス・アガラクティエＡＴＣＣ  １２３８６に対する、クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ及びＺｎＣｌ２の単独の抑制効果、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの抑制効果
【００８５】
Ｓ．アガラクティエの一夜ブロス培養物を、ＴＳＢ中で増殖させて、接種物として使用した。それぞれの化合物が存在しない場合、及びそれぞれの化合物が個別に存在する場合（クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛）、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの場合における、ＴＳＢを含む９６ウェルのマイクロタイタープレートに接種し、３７℃で２４時間にわたりインキュベートした。浮遊性細胞の増殖を、Labsystems社製のＭｕｌｔｉｓｋａｎ  Ａｓｃｅｎｔマイクロプレートリーダーを使用して６００ｎｍでの吸光度に基づき測定した。バイオフィルムを、ウェル中の培地を破棄し、該ウェルを水で３回すすぎ、そして結合されている細胞をクリスタルバイオレットで染色することによって測定した。次いで、該色素を、３３％酢酸で可溶化し、６３０ｎｍでの吸光度を、マイクロタイタープレートリーダーを使用して測定した。クエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡの組合せは、バイオフィルム形成に対して、クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡの単独の場合と比べて増強された抑制効果を示した（図１３）。
【００８６】
実施例１４：クレブシエラ・ニューモニエに対する、クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ及びＺｎＣｌ２の単独の抑制効果、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの抑制効果
【００８７】
Ｋ．ニューモニエの一夜ブロス培養物を、ＴＳＢ中で増殖させて、接種物として使用した。それぞれの化合物が存在しない場合、及びそれぞれの化合物が個別に存在する場合（クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛）、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの場合における、ＴＳＢを含む９６ウェルのマイクロタイタープレートに接種し、３７℃で２４時間にわたりインキュベートした。浮遊性細胞の増殖を、Labsystems社製のＭｕｌｔｉｓｋａｎ  Ａｓｃｅｎｔマイクロプレートリーダーを使用して６００ｎｍでの吸光度に基づき測定した。バイオフィルムを、ウェル中の培地を破棄し、該ウェルを水で３回すすぎ、そして結合されている細胞をクリスタルバイオレットで染色することによって測定した。次いで、該色素を、３３％酢酸で可溶化し、６３０ｎｍでの吸光度を、マイクロタイタープレートリーダーを使用して測定した。クエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡの組合せは、バイオフィルム形成に対して、クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡの単独の場合と比べて増強された抑制効果を示した（図１４）。
【００８８】
実施例１５：アシネトバクター・バウマニに対する、クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ及びＺｎＣｌ２の単独の抑制効果、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの抑制効果
【００８９】
Ａ．バウマニの一夜ブロス培養物を、ＴＳＢ中で増殖させて、接種物として使用した。それぞれの化合物が存在しない場合、及びそれぞれの化合物が個別に存在する場合（クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛）、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの場合における、ＴＳＢを含む９６ウェルのマイクロタイタープレートに接種し、３７℃で２４時間にわたりインキュベートした。浮遊性細胞の増殖を、Labsystems社製のＭｕｌｔｉｓｋａｎ  Ａｓｃｅｎｔマイクロプレートリーダーを使用して６００ｎｍでの吸光度に基づき測定した。バイオフィルムを、ウェル中の培地を破棄し、該ウェルを水で３回すすぎ、そして結合されている細胞をクリスタルバイオレットで染色することによって測定した。次いで、該色素を、３３％酢酸で可溶化し、６３０ｎｍでの吸光度を、マイクロタイタープレートリーダーを使用して測定した。クエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡの組合せは、バイオフィルム形成に対して、クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡの単独の場合と比べて増強された抑制効果を示した（図１５）。
【００９０】
実施例１６：ステノトロフォモナス・マルトフィリアに対する、クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ及びＺｎＣｌ２の単独の抑制効果、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの抑制効果
【００９１】
Ｓ．マルトフィリアの一夜ブロス培養物を、ＴＳＢ中で増殖させて、接種物として使用した。それぞれの化合物が存在しない場合、及びそれぞれの化合物が個別に存在する場合（クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛）、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの場合における、ＴＳＢを含む９６ウェルのマイクロタイタープレートに接種し、３７℃で２４時間にわたりインキュベートした。浮遊性細胞の増殖を、Labsystems社製のＭｕｌｔｉｓｋａｎ  Ａｓｃｅｎｔマイクロプレートリーダーを使用して６００ｎｍでの吸光度に基づき測定した。バイオフィルムを、ウェル中の培地を破棄し、該ウェルを水で３回すすぎ、そして結合されている細胞をクリスタルバイオレットで染色することによって測定した。次いで、該色素を、３３％酢酸で可溶化し、６３０ｎｍでの吸光度を、マイクロタイタープレートリーダーを使用して測定した。クエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡの組合せは、バイオフィルム形成に対して、クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡの単独の場合と比べて増強された抑制効果を示した（図１６）。
【００９２】
実施例１７：バンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）に対する、クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ及びＺｎＣｌ２の単独の抑制効果、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの抑制効果
【００９３】
ＶＲＥの一夜ブロス培養物を、ＴＳＢ中で増殖させて、接種物として使用した。それぞれの化合物が存在しない場合、及びそれぞれの化合物が個別に存在する場合（クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛）、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの場合における、ＴＳＢを含む９６ウェルのマイクロタイタープレートに接種し、３７℃で２４時間にわたりインキュベートした。浮遊性細胞の増殖を、Labsystems社製のＭｕｌｔｉｓｋａｎ  Ａｓｃｅｎｔマイクロプレートリーダーを使用して６００ｎｍでの吸光度に基づき測定した。バイオフィルムを、ウェル中の培地を破棄し、該ウェルを水で３回すすぎ、そして結合されている細胞をクリスタルバイオレットで染色することによって測定した。次いで、該色素を、３３％酢酸で可溶化し、６３０ｎｍでの吸光度を、マイクロタイタープレートリーダーを使用して測定した。クエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡの組合せは、バイオフィルム形成に対して、クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡの単独の場合と比べて増強された抑制効果を示した（図１７）。
【００９４】
実施例１８：エンテロコッカス・フェカリスに対する、クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ及びＺｎＣｌ２の単独の抑制効果、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの抑制効果
【００９５】
Ｅ．フェカリスの一夜ブロス培養物を、ＴＳＢ中で増殖させて、接種物として使用した。それぞれの化合物が存在しない場合、及びそれぞれの化合物が個別に存在する場合（クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛）、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの場合における、ＴＳＢを含む９６ウェルのマイクロタイタープレートに接種し、３７℃で２４時間にわたりインキュベートした。浮遊性細胞の増殖を、Labsystems社製のＭｕｌｔｉｓｋａｎ  Ａｓｃｅｎｔマイクロプレートリーダーを使用して６００ｎｍでの吸光度に基づき測定した。バイオフィルムを、ウェル中の培地を破棄し、該ウェルを水で３回すすぎ、そして結合されている細胞をクリスタルバイオレットで染色することによって測定した。次いで、該色素を、３３％酢酸で可溶化し、６３０ｎｍでの吸光度を、マイクロタイタープレートリーダーを使用して測定した。クエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡの組合せは、バイオフィルム形成に対して、クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡの単独の場合と比べて増強された抑制効果を示した（図１８）。
【００９６】
実施例１９：プロテウス・ミラビリスに対する、クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ及びＺｎＣｌ２の単独の抑制効果、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの抑制効果
【００９７】
Ｐ．ミラビリスの一夜ブロス培養物を、ＴＳＢ中で増殖させて、接種物として使用した。それぞれの化合物が存在しない場合、及びそれぞれの化合物が個別に存在する場合（クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛）、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの場合における、ＴＳＢを含む９６ウェルのマイクロタイタープレートに接種し、３７℃で２４時間にわたりインキュベートした。浮遊性細胞の増殖を、Labsystems社製のＭｕｌｔｉｓｋａｎ  Ａｓｃｅｎｔマイクロプレートリーダーを使用して６００ｎｍでの吸光度に基づき測定した。バイオフィルムを、ウェル中の培地を破棄し、該ウェルを水で３回すすぎ、そして結合されている細胞をクリスタルバイオレットで染色することによって測定した。次いで、該色素を、３３％酢酸で可溶化し、６３０ｎｍでの吸光度を、マイクロタイタープレートリーダーを使用して測定した。クエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡの組合せは、バイオフィルム形成に対して、クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡの単独の場合と比べて増強された抑制効果を示した（図１９）。
【００９８】
実施例２０：カンジダ・アルビカンスに対する、クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ及びＺｎＣｌ２の単独の抑制効果、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの抑制効果
【００９９】
Ｃ．アルビカンスの一夜ブロス培養物を、ＴＳＢ中で増殖させて、接種物として使用した。それぞれの化合物が存在しない場合、及びそれぞれの化合物が個別に存在する場合（クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛）、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの場合における、ＴＳＢを含む９６ウェルのマイクロタイタープレートに接種し、３７℃で２４時間にわたりインキュベートした。浮遊性細胞の増殖を、Labsystems社製のＭｕｌｔｉｓｋａｎ  Ａｓｃｅｎｔマイクロプレートリーダーを使用して６００ｎｍでの吸光度に基づき測定した。バイオフィルムを、ウェル中の培地を破棄し、該ウェルを水で３回すすぎ、そして結合されている細胞をクリスタルバイオレットで染色することによって測定した。次いで、該色素を、３３％酢酸で可溶化し、６３０ｎｍでの吸光度を、マイクロタイタープレートリーダーを使用して測定した。クエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡの組合せは、バイオフィルム形成に対して、クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡの単独の場合と比べて増強された抑制効果を示した（図２０）。
【０１００】
実施例２１：マラセチア・パチデルマティスに対する、クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ及びＺｎＣｌ２の単独の抑制効果、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの抑制効果
【０１０１】
マラセチア・パチデルマティスの一夜ブロス培養物を、サブローデキストロースブロス中で増殖させて、接種物として使用した。それぞれの化合物が存在しない場合、及びそれぞれの化合物が個別に存在する場合（クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛）、並びにクエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せの場合における、ＴＳＢを含む９６ウェルのマイクロタイタープレートに接種し、３７℃で２４時間にわたりインキュベートした。浮遊性細胞の増殖を、Labsystems社製のＭｕｌｔｉｓｋａｎ  Ａｓｃｅｎｔマイクロプレートリーダーを使用して６００ｎｍでの吸光度に基づき測定した。バイオフィルムを、ウェル中の培地を破棄し、該ウェルを水で３回すすぎ、そして結合されている細胞をクリスタルバイオレットで染色することによって測定した。次いで、該色素を、３３％酢酸で可溶化し、６３０ｎｍでの吸光度を、マイクロタイタープレートリーダーを使用して測定した。クエン酸ナトリウム＋ＥＤＴＡの組合せ、クエン酸ナトリウム＋ＺｎＣｌ２の組合せ及びＥＤＴＡ＋ＺｎＣｌ２の組合せは、バイオフィルム形成に対して、クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛の単独の場合と比べて増強された抑制効果を示した（図２１）。
【０１０２】
実施例２２：マラセチア・パチデルマティスに対する、クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ及びＺｎＣｌ２の単独及び組合せの抑制効果
【０１０３】
マラセチア・パチデルマティスの一夜ブロス培養物を、サブローデキストロースブロス中で増殖させて、接種物として使用した。それぞれの化合物が存在しない場合、及びそれぞれの化合物が個別に存在する場合（クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛）、及びそれぞれの化合物が一緒に存在する場合（塩化ナトリウム＋ＥＤＴＡ＋塩化亜鉛）における、ＴＳＢを含む９６ウェルのマイクロタイタープレートに接種し、３７℃で２４時間にわたりインキュベートした。浮遊性細胞の増殖を、Labsystems社製のＭｕｌｔｉｓｋａｎ  Ａｓｃｅｎｔマイクロプレートリーダーを使用して６００ｎｍでの吸光度に基づき測定した。バイオフィルムを、ウェル中の培地を破棄し、該ウェルを水で３回すすぎ、そして結合されている細胞をクリスタルバイオレットで染色することによって測定した。次いで、該色素を、３３％酢酸で可溶化し、６３０ｎｍでの吸光度を、マイクロタイタープレートリーダーを使用して測定した。クエン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ及びＺｎＣｌ２を含む組成物は、バイオフィルム形成に対して、クエン酸ナトリウム又はＥＤＴＡ又は塩化亜鉛の単独の場合と比べて増強された抑制効果を示した（図２２）。
【図１】
2017519035.tif 000003
【図２】
2017519035.tif 000004
【図３】
2017519035.tif 000005
【図４】
2017519035.tif 000006
【図５】
2017519035.tif 000007
【図６】
2017519035.tif 000008
【図７】
2017519035.tif 000009
【図８】
2017519035.tif 000010
【図９】
2017519035.tif 000011
【図１０】
2017519035.tif 000012
【図１１】
2017519035.tif 000013
【図１２】
2017519035.tif 000014
【図１３】
2017519035.tif 000015
【図１４】
2017519035.tif 000016
【図１５】
2017519035.tif 000017
【図１６】
2017519035.tif 000018
【図１７】
2017519035.tif 000019
【図１８】
2017519035.tif 000020
【図１９】
2017519035.tif 000021
【図２０】
2017519035.tif 000022
【図２１】
2017519035.tif 000023
【図２２】
2017519035.tif 000024
【国際調査報告】
2017519035.tif 000025
2017519035.tif 000026
2017519035.tif 000027
2017519035.tif 000028
2017519035.tif 000029