(57)【要約】  本発明は、式（Ｉ）の化合物に関し、この化合物は、ＢＡＣＥ１酵素の阻害剤である。本発明の個別の態様は、前記化合物を含む医薬組成物、およびＡβ沈着の低減が有益な障害、例えば、アルツハイマー病を治療するための化合物の使用に関する。 2017533251.tif 000058
2017533251.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ
【化４８】
2017533251.tif 000056
（Ａｒは、フェニル、ピリジル、ピリミジル、ピラジニル、イミダゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、チアゾリルおよびイソキサゾリルからなる群から選択され、Ａｒは、任意選択で、１つ以上のハロゲン、ＣＮ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ６フルオロアルキルまたはＣ１〜Ｃ６アルコキシで置換されており；および
Ｒ１およびＲ２は、独立に、水素、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ３フルオロアルキルまたはＣ１〜Ｃ３アルキルである）
の化合物；
またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
前記化合物が、式Ｉａ
【化４９】
2017533251.tif 000057
の化合物；
またはその薬学的に許容される塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１およびＲ２が、独立に、ＦまたはＨである、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
Ａｒが、任意選択で、１個以上のＦ、Ｃｌ、ＣＮ、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ３フルオロアルキルまたはＣ１〜Ｃ３アルコキシで置換されている、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ａｒが、任意選択で置換されたピリジルである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
Ａｒが、任意選択で置換されたピリミジルである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
Ａｒが、任意選択で置換されたピラジニルである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
Ａｒが、任意選択で置換されたオキサゾリルである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９】
以下：
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−５−クロロピコリンアミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−５−フルオロピコリンアミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−５−メトキシピラジン−２−カルボキサミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−１−（ジフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−２−（ジフルオロメチル）オキサゾール−４−カルボキサミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−５−シアノピコリンアミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−２−メチルオキサゾール−４−カルボキサミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−５−メトキシピリミジン−２−カルボキサミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−５−（ジフルオロメチル）ピラジン−２−カルボキサミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４，５−ジフルオロフェニル）−２−メチルオキサゾール−４−カルボキサミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４，５−ジフルオロフェニル）−５−メトキシピラジン−２−カルボキサミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４，５−ジフルオロフェニル）−５−フルオロピコリンアミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４，５−ジフルオロフェニル）−５−クロロピコリンアミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４，５−ジフルオロフェニル）−５−シアノピコリンアミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４，５−ジフルオロフェニル）−５−メトキシピコリンアミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４，５−ジフルオロフェニル）−５−（メトキシ−ｄ３）ピコリンアミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４，５−ジフルオロフェニル）−５−シアノ−３−メチルピコリンアミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−５−（メトキシ−ｄ３）ピコリンアミド（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−５−ブロモピコリンアミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−５−ブロモピコリンアミド
またはその薬学的に許容される塩
からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物と薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。
【請求項１１】
アルツハイマー病（家族性もしくは孤発性）、発症前アルツハイマー病、前駆期アルツハイマー病、軽度認知障害、ダウン症候群および脳アミロイド血管症から選択される疾患を治療する方法であって、前記方法は、それを必要とする患者に、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物を治療有効量投与することを含む方法。
【請求項１２】
アルツハイマー病（家族性もしくは孤発性）、発症前アルツハイマー病、前駆期アルツハイマー病、軽度認知障害、ダウン症候群および脳アミロイド血管症から選択される疾患を治療する医薬の製造のための請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項１３】
治療に使用するための請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１４】
アルツハイマー病（家族性もしくは孤発性）、発症前アルツハイマー病、前駆期アルツハイマー病、軽度認知障害、ダウン症候群および脳アミロイド血管症から選択される疾患を治療するための方法に使用するための、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＢＡＣＥ１阻害剤である化合物を提供する。本発明の別の態様は、前記化合物を含む医薬組成物、ならびに神経変性および認知障害を治療するための化合物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
認知症は、通常の老化現象では説明できない複数の認知領域の障害と、機能の著しい低下と、せん妄がないこととを特徴とする臨床症候群である。さらに、神経精神症状および限局性の神経学的所見が通常認められる。認知症は病因に基づいて細分される。アルツハイマー病（ＡＤ）は、認知症の最も一般的な原因であり、ＡＤと血管性認知症の混合、レヴィー小体型認知症（ＤＬＢ）、および前頭側頭葉型認知症がそれに続く。βアミロイドの沈着および神経原線維変化は、記憶、認知、論理的思考（ｒｅａｓｏｎｉｎｇ）、判断力、および見当識の喪失を特徴とするＡＤに関連する主な病理学的特徴であると考えられている。また、疾患が進行するにつれ、運動、感覚、および言語能力も冒され、ついに複数の認知機能の全般的な障害が起こる。βアミロイドの沈着は大部分、βアミロイド形成経路の一部であるアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）のタンパク質分解の生成物であるＡβペプチドの凝集体であり、Ａβペプチドは１種以上のγセクレターゼによるＡＰＰのＣ末端の切断、およびアスパルチルプロテアーゼ２としても知られるβセクレターゼ１（ＢＡＣＥ１）によるＮ末端の切断により生じる。ＢＡＣＥ１活性はＡＰＰからのＡβペプチドの生成に直接相関する。
【０００３】
研究から、ＢＡＣＥ１の阻害によりＡβペプチドの産生が妨げられることが分かっている。さらに、ＢＡＣＥ１はその基質であるＡＰＰと共にゴルジ体および細胞内区画に共局在する（Ｗｉｌｌｅｍ  Ｍ，ｅｔ  ａｌ．Ｓｅｍｉｎ．Ｃｅｌｌ  Ｄｅｖ．Ｂｉｏｌ，２００９，２０，１７５−１８２）。マウスのノックアウト試験から、動物が健康で生殖能がある間はアミロイドペプチドが生成されないことが分かった（Ｏｈｎｏ  Ｍ，ｅｔ  ａｌ．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．Ｄｉｓ．，２００７，２６，１３４−１４５）。ＡＰＰ過剰発現マウスでＢＡＣＥ１の遺伝的除去（ｇｅｎｅｔｉｃ  ａｂｌａｔｉｏｎ）を行うと、プラークが形成されず、認知障害が抑制されることが分かった（Ｏｈｎｏ  Ｍ，ｅｔ  ａｌ．Ｎｅｕｒｏｎ；２００４，４１，２７−３３）。散発性ＡＤ患者の脳内ではＢＡＣＥ１レベルが上昇する（Ｈａｍｐｅｌ  ａｎｄ  Ｓｈｅｎ，Ｓｃａｎｄ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｌａｂ．Ｉｎｖｅｓｔ．２００９，６９，８−１２）。
【０００４】
これらの収束する知見から、ＢＡＣＥ１の阻害はＡＤならびにＡβ沈着の低減が有効な障害を治療するための治療標的となり得ることが分かっている。
【０００５】
ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａは、２０１２年１０月、ＡＤを治療するための強力な選択されたＢＡＣＥ１阻害剤臨床候補である、ＡＺＤ３８３９の発見を発表した（Ｊｅｐｐｓｓｏｎ，Ｆ．，ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２０１２，２８７，４１２４５−４１２５７）。ＡＺＤ３８３９の発見に繋がる努力は、Ｇｉｎｍａｎ，Ｔ．，ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２０１３，５６，４１８１−４２０５に詳細に記載された。Ｇｉｎｍａｎの刊行物は、ＡＺＤ３８３９の発見および同定に関して克服された問題について記載している。これらの問題は、化合物の血液脳関門の透過性が低く、Ｐ糖タンパク質により排出されるため、脳が曝露されなくなることに関する。
【０００６】
Ｇｉｎｍａｎの原稿では脳の曝露における差が主にコア構造に起因すると仮定され、報告された化合物に関するｉｎ  ｖｉｔｒｏ特性をコアサブタイプにより４つの表に分けて記載した構造活性関係データが提供された。表４に、活性の点から興味深いと考えられた一連のアミジン含有化合物が記載されている。しかし、データから、アミジン含有コアは有利な血液脳関門透過性プロファイルを示さなかったことが示唆される。
【０００７】
Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ  Ｒｏｃｈｅ  ａｎｄ  Ｓｉｅｎａ  Ｂｉｏｔｅｃｈの研究者らもアミジン含有化合物の発見を報告した（Ｗｏｌｔｅｒｉｎｇ，Ｔ．  Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．２０１３，２３，４２３９−４２４３）。これらの化合物（論文中の化合物１７および１８）は、ｉｎ  ｖｉｖｏ効果を有していない（野生型マウスの脳内でＡβ４０低減が認められない）ことが判明した。
【０００８】
ＧｉｎｍａｎらおよびＷｏｌｔｅｒｉｎｇ，Ｔ．Ｊ．らの教示とは異なり、本発明者らは、脳透過性である、一連のアミジン化合物を発見した。従って、本発明は、ＢＡＣＥ１阻害活性を有する新規な化合物、それらの製造、それらの医薬としての使用、およびそれらを含む医薬に関する。
【発明の概要】
【０００９】
本発明の目的は、ＢＡＣＥ１を阻害する化合物を提供することである。従って、本発明は、式Ｉ
【化１】
2017533251.tif 000003
（Ａｒは、フェニル、ピリジル、ピリミジル、ピラジニル、イミダゾリル、ピラゾリル、チアゾリル、オキサゾリルおよびイソキサゾリルからなる群から選択され、Ａｒは、任意選択で、１つ以上のハロゲン、ＣＮ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ６フルオロアルキルまたはＣ１〜Ｃ６アルコキシで置換されており；
Ｒ１およびＲ２は、独立に、水素、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ３フルオロアルキルまたはＣ１〜Ｃ３アルキルである）
の化合物；
またはその薬学的に許容される塩に関する。
【００１０】
本発明の個別の実施形態において、化合物は、実験の項で開示される例示化合物の１つから選択される。
【００１１】
本発明はさらに、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物を提供する。
【００１２】
本発明は、神経変性または認知障害に罹患した被験者を治療する方法を提供し、この方法は、前記被験者に、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩を治療有効量投与することを含む。
【００１３】
一実施形態では、本発明は、神経変性または認知障害の治療のための医薬の製造における式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩の使用に関する。
【００１４】
一実施形態では、本発明の化合物は、式Ｉａ
【化２】
2017533251.tif 000004
の化合物、またはその薬学的に許容される塩である。
【００１５】
一実施形態では、Ｒ１およびＲ２は、独立に、ＦまたはＨであり、特にＲ１がＦで、Ｒ２がＨであるか、またはＲ１およびＲ２の両方がＦである。
【００１６】
一実施形態では、Ａｒは、任意選択で、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ３フルオロアルキルまたはＣ１〜Ｃ３アルコキシから選択される１個以上の置換基で置換されている。
【００１７】
一実施形態では、Ａｒは、任意選択で置換されたフェニルである。
【００１８】
一実施形態では、Ａｒは、任意選択で置換されたピリジルである。
【００１９】
一実施形態では、Ａｒは、任意選択で置換されたピリミジルである。
【００２０】
一実施形態では、Ａｒは、任意選択で置換されたピラジニルである。
【００２１】
一実施形態では、Ａｒは、任意選択で置換されたイミダゾリルである。
【００２２】
一実施形態では、Ａｒは、任意選択で置換されたピラゾリルである。
【００２３】
一実施形態では、Ａｒは、任意選択で置換されたチアゾリルである。
【００２４】
一実施形態では、Ａｒは、任意選択で置換されたオキサゾリルである。
【００２５】
一実施形態では、Ａｒは、任意選択で置換されたイソキサゾリルである。
【００２６】
一実施形態では、化合物は、以下：
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−５−クロロピコリンアミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−５−フルオロピコリンアミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−５−メトキシピラジン−２−カルボキサミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−１−（ジフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−２−（ジフルオロメチル）オキサゾール−４−カルボキサミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−５−シアノピコリンアミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−２−メチルオキサゾール−４−カルボキサミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−５−メトキシピリミジン−２−カルボキサミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−５−（ジフルオロメチル）ピラジン−２−カルボキサミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４，５−ジフルオロフェニル）−２−メチルオキサゾール−４−カルボキサミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４，５−ジフルオロフェニル）−５−メトキシピラジン−２−カルボキサミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４，５−ジフルオロフェニル）−５−フルオロピコリンアミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４，５−ジフルオロフェニル）−５−クロロピコリンアミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４，５−ジフルオロフェニル）−５−シアノピコリンアミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４，５−ジフルオロフェニル）−５−メトキシピコリンアミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４，５−ジフルオロフェニル）−５−（メトキシ−ｄ３）ピコリンアミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４，５−ジフルオロフェニル）−５−シアノ−３−メチルピコリンアミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−５−（メトキシ−ｄ３）ピコリンアミド
（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−５−ブロモピコリンアミド
またはその薬学的に許容される塩からなる群から選択される。
【００２７】
個別の実施形態は、上のリストからの化合物またはその薬学的に許容される塩と薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物に関する。
【００２８】
別の実施形態は、神経変性または認知障害を治療する方法に関し、これは、それを必要とする患者に、上のリストからの化合物またはその薬学的に許容される塩を治療有効量投与することを含む。また別の実施形態では、本発明は、神経変性または認知障害を治療する医薬を製造するための、上のリストからの化合物または薬学的に許容される塩の使用に関する。
【００２９】
一実施形態では、本発明は、神経変性または認知障害の治療方法に使用される上のリストからの化合物またはその薬学的に許容される塩に関する。
【００３０】
一実施形態では、本発明は、治療に使用される、上のリストからの化合物またはその薬学的に許容される塩に関する。
【発明を実施するための形態】
【００３１】
発明の詳細な説明
本発明は、式Ｉの化合物がＢＡＣＥ１の阻害剤であり、従って、関連障害の治療に有用であるという発見に基づく。本発明の特定の態様について以下でさらに詳しく説明するが、この説明は、本発明を実施し得る全ての異なる方法、または本発明に追加し得る全ての特徴を詳細に列挙するものではない。従って、以下の明細書は、本発明の幾つかの実施形態を説明しようとするものであり、その全ての順列、組み合わせ、および変形を網羅的に明記するものではない。
【００３２】
本発明で使用する場合、「Ｃ１〜Ｃ６アルキル」という用語は、炭素数１〜６（両端値を含む）の直鎖または分岐の飽和炭化水素を指す。Ｃ１〜Ｃ６アルキルの例としては、メチル、エチル、１−プロピル、２−プロピル、１−ブチル、２−ブチル、２−メチル−２−プロピル、２−メチル−１−プロピル、ｎ−ペンチルおよびｎ−ヘキシルが挙げられるが、これらに限定されるものではない。同様に、直鎖または分岐の「Ｃ１〜Ｃ３アルキル」という用語は、炭素数１〜３（両端値を含む）の直鎖または分岐の飽和炭化水素を指す。そのような置換基の例としては、メチル、エチル、およびｎ−プロピルが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００３３】
同様に、「Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ」という用語は、酸素の結合価が空いている炭素数１〜６（両端値を含む）の直鎖または分岐の飽和アルコキシ基を指す。Ｃ１〜Ｃ６アルコキシの例としては、メトキシ、エトキシ、ｎ−ブトキシ、ｔ−ブトキシおよびｎ−ヘキシルオキシが挙げられるが、これらに限定されるものではない。「Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ」は、任意選択で、１個以上のフッ素原子で置換されている。
【００３４】
本発明で使用する場合、「Ｃ１〜Ｃ６フルオロアルキル」という用語は、１個以上のフッ素原子で置換された炭素数１〜６（両端値を含む）の直鎖または分岐の飽和炭化水素を指す。Ｃ１〜Ｃ６フルオロアルキルの例としては、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチル、１フルオロエチル、モノフルオロメチル、ジフルオロメチル、１，２−ジフルオロエチルおよび３，４ジフルオロヘキシルが挙げられるが、これらに限定されるものではない。同様に、「Ｃ１〜Ｃ３フルオロアルキル」という用語は、炭素原子１個当たり１個以上のフッ素原子で置換された炭素数１〜３（両端値を含む）の直鎖または分岐の飽和炭化水素を指す。
【００３５】
「ハロゲン」という用語は、フッ素、塩素、臭素、およびヨウ素を指す。
【００３６】
「Ｃ２〜Ｃ６アルケニル」という用語は、炭素数２〜６で二重結合を１個有する分岐または非分岐のアルケニル基を指し、エテニル、プロペニル、およびブテニルが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
「Ｃ２〜Ｃ６アルキニル」という用語は、炭素数２〜６で三重結合を１個有する分岐または非分岐のアルキニル基を意味するものとし、エチニル、プロピニル、およびブチニルが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００３７】
本発明で使用する場合、「有効量」という語句は本発明の化合物に適用するとき、目的とする生物学的効果を引き起こすのに十分な量を示すものとする。「治療有効量」という語句は本発明の化合物に適用するとき、障害もしくは疾患状態、または障害もしくは疾患の症状の進行を改善する、緩和する、安定化させる、抑制する、緩速化するまたは遅延させるのに十分な化合物の量を示すものとする。一実施形態では、本発明の方法は、化合物の組み合わせの投与を提供する。このような場合、「有効量」は、目的とする生物学的効果を引き起こすのに十分な本発明の化合物の組み合わせの化合物の量である。
【００３８】
本発明で使用する「治療」または「治療すること」という用語は、疾患または障害の進行もしくは重症度を改善もしくは抑制すること、またはこのような疾患もしくは障害の１つ以上の症状もしくは副作用を改善もしくは抑制することを意味する。本発明で使用する「治療」または「治療すること」はまた、疾患または障害のシステム、病態、または状態の進行を阻害するまたはブロックする、例えば、遅延させる、阻止する、抑える、妨げるまたは妨害することも意味する。本発明の目的では、「治療」または「治療すること」はさらに、有利なまたは所望の臨床結果を得る方法を意味し、「有利なまたは所望の臨床結果」には、部分的であるかまたは全体的であるかに関わらず、症状の軽減、障害または疾患の程度の減少、疾患または障害状態の安定化（即ち、状態が悪化しないこと）、疾患または障害状態の遅延または緩速化、疾患または障害状態の改善または緩和、および、疾患または障害の寛解が含まれるが、これらに限定されるものではない。
【００３９】
本発明はまた、疾患または障害を治療する方法を提供し、この方法は、それを必要とする哺乳動物に、少なくとも１種の本発明の化合物またはその薬学的に許容される塩を治療有効量投与することを含み、疾患または障害は、神経変性または認知疾患若しくは障害である。
【００４０】
本発明の化合物は、前述したように、β−アミロイド沈着および神経原線維濃縮体へのその作用によって、アルツハイマー病の治療に有用であると予想される。これは、患者が、Ａβペプチドの産生に密接に関与する特定の遺伝子に突然変異を有する、家族性アルツハイマー病を含む。しかしながら、Ａβペプチドの凝集体は、家族性アルツハイマー病に限定されず、同様に、より一般的な孤発性アルツハイマー病の重要な病態生理学的特徴でもあることに留意すべきである［Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，６６，３−１１，２０１５］。
【００４１】
本発明の化合物はまた、早期アルツハイマー病、即ち、生物学的および構造的変化が始まっているが、疾患の臨床症状は、明白ではないか、またはまだ発症していない病期の治療に有用であると考えられる。早期アルツハイマー病は、実際には、疾患のいずれかの臨床症状が現れる何年も前に始まっている、早期アルツハイマー病は、前駆期アルツハイマー病、発症前アルツハイマー病および軽度認知障害を含む。軽度認知障害は、アルツハイマー病とは無関係である場合もあるが、アルツハイマー病への移行期であるか、またはアルツハイマー病に起因することが多い。発症前および前駆期アルツハイマー病は、無症候期であり、一般に、アルツハイマー病関連バイオマーカの存在によって診断される。これに関連して、本発明の化合物は、軽度認知障害などの早期アルツハイマー病からアルツハイマー病への進行を遅らせる上で有用であると考えられる。本発明の化合物は、アルツハイマー病に関連する記憶喪失、注意欠陥および認知症の治療に有用であると考えられる。
【００４２】
アルツハイマー病の連続体に加え、他の疾患も、β−アミロイド沈着および神経原線維濃縮体を特徴とする。これは、例えば、ダウン症候群としても知られるトリソミー２１を含む。ダウン症候群に罹患している患者は、過剰染色体２１を有するが、この染色体は、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の遺伝子を含有する。過剰染色体２１は、ＡＰＰの過剰発現を招き、これにより、Ａβペプチドのレベル増加が起こり、これは、最終的にダウン症候群患者に認められるアルツハイマー病の発症のリスクを著しく高める［Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ＆Ｄｅｍｅｎｔｉａ，１１，７００−７０９，２０１］。脳アミロイド血管症もまた、中枢神経系の血管におけるβ−アミロイド沈着および神経原線維濃縮体を特徴とし［Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｒｅｐｏｒｔｓ，６７，１９５−２０３，２０１５］、従って、本発明の化合物で治療可能であると予想される。
【００４３】
一実施形態では、本発明は、アルツハイマー病（家族性もしくは孤発性）、発症前アルツハイマー病、前駆期アルツハイマー病、軽度認知障害、ダウン症候群および脳アミロイド血管症から選択される疾患を治療する方法を提供し、この方法は、それを必要とする患者に、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩を治療有効量投与することを含む。
【００４４】
本発明はさらに、患者のＢＡＣＥ１を阻害する方法であって、それを必要とする患者に、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩を治療有効量投与することを含む方法を提供する。
【００４５】
本発明はまた、アミロイド前駆体タンパク質のβセクレターゼによる切断を阻害する方法であって、このような治療を必要とする患者に、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩を治療有効量投与することを含む方法も提供する。
【００４６】
別の実施形態では、本発明は、アルツハイマー病（家族性もしくは孤発性）、発症前アルツハイマー病、前駆期アルツハイマー病、軽度認知障害、ダウン症候群または脳アミロイド血管症から選択される疾患を治療する医薬を製造するための式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩の使用を提供する。
【００４７】
本発明はさらに、ＢＡＣＥ１を阻害する医薬を製造するための式Ｉの化合物の使用も提供する。本発明はさらに、Ａβペプチドの産生または蓄積を阻害する医薬を製造するための式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩の使用を提供する。
【００４８】
一実施形態では、本発明は、アルツハイマー病（家族性もしくは孤発性）、発症前アルツハイマー病、前駆期アルツハイマー病、軽度認知障害、ダウン症候群または脳アミロイド血管症から選択される疾患を治療する方法に使用される式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００４９】
一実施形態では、本発明は、ＢＡＣＥ１を阻害する方法またはＡβペプチドの産生もしくは蓄積を阻害する方法に使用される式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩に関連する。
【００５０】
別の実施形態では、本発明は、上記治療および使用のいずれかに適した医薬製剤を提供する。
【００５１】
一実施形態では、哺乳動物は、ヒトである。
【００５２】
一実施形態では、患者は、ヒト患者である。
【００５３】
本発明の化合物は、実施例に示すように、ＢＡＣＥ１の強力な阻害剤であり、ラット脳および血漿中のＡβペプチドのレベルを低下することができ、従って、前記化合物は、病理学的特徴が、Ａβ沈着および神経原線維濃縮体を含む神経変性または認知障害、例えば、アルツハイマー病の治療に有用であると考えられる。このような疾患、例えば、アルツハイマー病の治療に有用な別の治療方法と本発明の化合物を組み合わせることが有益である場合もある。
【００５４】
タウタンパク質は、ニューロンに豊富に存在する。タウタンパク質は、可溶性で、しかも高度にリン酸化不安定性であり、チューブリンに結合して、チューブリン集合体、即ち、最終的に微小管構造および安定性の調節およびモジュレーションをもたらす。タウタンパク質は、最も脱リン酸化された状態でしかチューブリンと結合することができないため、リン酸化／脱リン酸化は、チューブリン結合を制御するスイッチとして働く。リン酸化タウは、アルツハイマー病の特徴の１つである神経原線維濃縮体の重要な部分を構成する。いわゆるタウ仮説は、アルツハイマー病の治療方法として、リン酸化タウタンパク質の主成分である、これらの病理学的繊維濃縮体をターゲティングすることを提案している。特に、能動および受動両方の免疫療法が、タウ神経原線維濃縮体をターゲティングする一方法として提案されている。能動免疫療法では、病原性抗原を患者に注射すると、自然免疫系が免疫応答を誘発する。これは、Ｂ細胞の成熟をトリガーし、投与された抗原に対する高いアフィニティ抗体を産生する。受動免疫療法では、自然免疫系のトリガーは、抗原に対する特異的抗体を注入することによって妨げられる。このとき、生来のクリアランス系が、抗体結合リガンドを除去することが示唆されている。アルツハイマー病の治療法としての、リン酸化タウタンパク質をターゲティングする能動および受動免疫療法両者の効力についての実質的なエビデンスが存在する［Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ＆Ｄｅｍｅｎｔｉａ，７（４，ｓｕｐｐｌ）Ｓ４８０−４８１；Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  ３０，１６５５９−１６５５６，２０１０；Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，２７，９１１５−９１２９，２００７］。
【００５５】
一実施形態では、本発明は、神経変性または認知障害、例えば、アルツハイマー病の治療方法を提供し、この方法は、それを必要とする患者に、２つの成分：（１）式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩および（２）能動または受動タウ免疫療法に有用な化合物を治療有効量投与することを含む。前記の受動タウ免疫療法に有用な化合物は、リン酸化タウタンパク質に対する抗体であってもよい。前記の能動タウ免疫療法に有用な化合物は、患者に注射されると、前記患者において抗リン酸化タウタンパク質抗体の産生を誘発するタウタンパク質アミノ酸配列の断片であってもよい。本発明の実施形態に従う投与は同時であってもよいし、または２つの成分の投与の間に時間差があってもよい。
【００５６】
一実施形態では、本発明は、神経変性または認知障害、例えば、アルツハイマー病を治療するための医薬の製造における式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩と、能動または受動タウ免疫療法に有用な化合物の使用に関する。
【００５７】
一実施形態では、本発明は、神経変性または認知障害、例えば、アルツハイマー病の治療方法に使用するための式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩と、能動または受動タウ免疫療法に有用な化合物を提供する。
【００５８】
一実施形態では、本発明は、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩と、能動または受動タウ免疫療法に有用な化合物と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物を提供する。
【００５９】
神経変性または認知障害、例えば、アルツハイマー病を治療するための別の方法は、Ａβペプチドをターゲティングすることである。これは、Ａβペプチドをターゲティングする受動または能動免疫療法のいずれかによって達成することができる［Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，３４，１１６２１−１１６３０，２０１４；Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  ３３，４９２３−４９３４，２０１３］。本発明の化合物との併用で、これは、２つの異なる経路を介して同じ病理学的機構をターゲティングすることを試みるものである。抗Ａβ抗体（患者に直接注射するか、または活性免疫療法の結果として生成する）が、脳内のＡβ沈着を除去すると共に、Ａβペプチドのそれ以上の蓄積が、本発明の化合物により阻止または低減される。
【００６０】
一実施形態では、本発明は、神経変性または認知障害、例えば、アルツハイマー病の治療方法を提供し、この方法は、それを必要とする患者に、２つの成分：（１）式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩および（２）能動または受動Ａβペプチド免疫療法に有用な化合物を治療有効量投与することを含む。前記の受動Ａβペプチド免疫療法に有用な化合物は、抗Ａβペプチド抗体、例えば、ゲンテネルマブ、ソラネズマブ、アズカヌマブまたはクレネズマブであってもよい。前記の能動Ａβペプチド免疫療法に有用な化合物は、患者に注射されると、前記患者において抗Ａβペプチド抗体の産生を誘発するＡβペプチドアミノ酸配列の断片であってもよい。本発明の実施形態に従う投与は同時であってもよいし、または２つの成分の投与の間に時間差があってもよい。
【００６１】
一実施形態では、本発明は、神経変性または認知障害、例えば、アルツハイマー病を治療するための医薬の製造における式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩および能動または受動Ａβペプチド免疫療法に有用な化合物の使用に関する。
【００６２】
一実施形態では、本発明は、神経変性または認知障害、例えば、アルツハイマー病の治療方法に使用するための式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩および能動または受動Ａβペプチド免疫療法に有用な化合物を提供する。
【００６３】
一実施形態では、本発明は、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩と、能動または受動Ａβペプチド免疫療法に有用な化合物と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物を提供する。
【００６４】
ＮＭＤＡ（Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸）受容体アンタゴニストであるメマンチンと、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤であるドネペジル、リバスチグミンおよびガラタミンが、アルツハイマー病の治療のために承認された薬剤である。
【００６５】
一実施形態では、本発明は、神経変性または認知障害、例えば、アルツハイマー病の治療方法を提供し、この方法は、それを必要とする患者に、２つの成分：（１）式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩および（２）ＮＭＤＡ受容体アンタゴニストまたはアセチルコリンエステラーゼ阻害剤を治療有効量投与することを含む。本発明の実施形態に従う投与は同時であってもよいし、または２つの成分の投与の間に時間差があってもよい。
【００６６】
一実施形態では、本発明は、神経変性または認知障害、例えば、アルツハイマー病を治療するための医薬の製造における式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩およびＮＭＤＡ受容体アンタゴニストまたはアセチルコリンエステラーゼ阻害剤の使用に関する。
【００６７】
一実施形態では、本発明は、神経変性または認知障害、例えば、アルツハイマー病の治療方法に使用するための式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩およびＮＭＤＡ受容体アンタゴニストまたはアセチルコリンエステラーゼ阻害剤を提供する。
【００６８】
一実施形態では、本発明は、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩と、ＮＭＤＡ受容体アンタゴニストまたはアセチルコリンエステラーゼ阻害剤と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物を提供する。
【００６９】
発作またはてんかん様活動もまた、早期のアルツハイマー病を含むアルツハイマー病に関連しており、海馬過活動の正常化が目標とされる前記てんかん性活動の治療は、アルツハイマー病の治療方法の一部を成し得る［ＪＡＭＡ  Ｎｅｕｒｏｌ，７０，１１５８−１１６６，２０１３；Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  Ｒｅｓ，９３，４５４，４６５，２０１５；Ｎｅｕｒｏｎ，７４，６４７−４７４，２０１２；Ｎｅｕｒｅｐｓｙｃｈｐｈａｒｍ，３５，１０１６−１０２５，２０１０；ＣＮＳ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  Ｔｈｅｒ，１９，８７１−８８１，２０１３］。有用な抗てんかん薬としては、ＮＭＤＡ受容体アンタゴニストおよびイオンチャネルモジュレータ、例えば、トピラマート、レベチラセタムおよびラモトリギンなどが挙げられる。
【００７０】
一実施形態では、本発明は、神経変性または認知障害、例えば、アルツハイマー病の治療方法を提供し、この方法は、それを必要とする患者に、２つの成分：（１）式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩および（２）抗てんかん薬を治療有効量投与することを含む。本発明の実施形態に従う投与は同時であってもよいし、または２つの成分の投与の間に時間差があってもよい。
【００７１】
一実施形態では、本発明は、神経変性または認知障害、例えば、アルツハイマー病を治療するための医薬の製造における式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩および抗てんかん薬の使用に関する。
【００７２】
一実施形態では、本発明は、神経変性または認知障害、例えば、アルツハイマー病の治療方法に使用するための式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩および抗てんかん薬を提供する。
【００７３】
一実施形態では、本発明は、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩と、抗てんかん薬と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物を提供する。
【００７４】
最新のエビデンスは、炎症が、アルツハイマー病の病原において原因となる役割を有していること、ならびに神経炎症は、発生したβアミロイド沈着および神経原線維濃縮体により活性化される受動系ではないが、これもまた病原そのものに寄与することを示している［Ｌａｎｃｅｔ  Ｎｅｕｒｏｌ，１４，３８８−４０５，２０１５；Ｊ  Ａｌｚ  Ｄｉｓ，４４，３８５−３９６，２０１５；Ｎｅｕｒｏｌ，８４，２１６１−２１６８，２０１５］。その結果として、ＮＳＡＩＤ（非ステロイド性抗炎症薬）などの抗炎症薬、エタネルセプトなどのＴＮＦα阻害剤、およびＶＸ−７４５（５−（２，６−ジクロロフェニル）−２−（（２，４−ジフルオロフェニル）チオ）−６Ｈ−ピリミド［１，６−ｂ］ピリダジン−６−オン）などのｐ３８ＭＡＰキナーゼ阻害剤は、アルツハイマー病の治療に有用になり得るということになる。
【００７５】
一実施形態では、本発明は、神経変性または認知障害、例えば、アルツハイマー病の治療方法を提供し、この方法は、それを必要とする患者に、２つの成分：（１）式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩および（２）抗炎症薬を治療有効量投与することを含む。本発明のこの実施形態に従う投与は同時であってもよいし、または２つの成分の投与の間に時間差があってもよい。
【００７６】
一実施形態では、本発明は、神経変性または認知障害、例えば、アルツハイマー病を治療するための医薬の製造における式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩および抗炎症薬の使用に関する。
【００７７】
一実施形態では、本発明は、神経変性または認知障害、例えば、アルツハイマー病の治療方法に使用するための式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩および抗炎症薬を提供する。
【００７８】
一実施形態では、本発明は、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩と、抗炎症薬と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物を提供する。
【００７９】
さらに、タウタンパク質凝集阻害剤、例えば、メチレンブルー（Ｍｅｔｈｙｌｅｎｅ  Ｂｌｕｅ）としても知られるＴＲＸ−０２３７、及びＳＳＲＩ（選択性セロトニン再取り込み阻害剤）、例えば、シタロプラムについて、アルツハイマー病の治療における効力が実証されている［Ｂｅｈａｖ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，２６，３５３−３６８，２０１５；Ｓｃｉ  Ｔｒａｎｓｌ  Ｍｅｄ，６（２３６ｒｅ４），２０１４］。
【００８０】
一実施形態では、本発明は、神経変性または認知障害、例えば、アルツハイマー病の治療方法を提供し、この方法は、それを必要とする患者に、２つの成分：（１）式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩および（２）タウタンパク質凝集阻害剤またはＳＳＲＩを治療有効量投与することを含む。本発明のこの実施形態に従う投与は同時であってもよいし、または２つの成分の投与の間に時間差があってもよい。
【００８１】
一実施形態では、本発明は、神経変性または認知障害、例えば、アルツハイマー病を治療するための医薬の製造における式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩およびタウタンパク質凝集阻害剤またはＳＳＲＩの使用に関する。
【００８２】
一実施形態では、本発明は、神経変性または認知障害、例えば、アルツハイマー病の治療方法に使用するための式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩およびタウタンパク質凝集阻害剤またはＳＳＲＩ薬を提供する。
【００８３】
一実施形態では、本発明は、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩と、タウタンパク質凝集阻害剤またはＳＳＲＩ薬と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物を提供する。
【００８４】
薬学的に許容される塩
本発明はまた、本化合物の塩、典型的には薬学的に許容される塩も含む。このような塩には薬学的に許容される酸付加塩が含まれる。酸付加塩には無機酸および有機酸の塩が含まれる。
【００８５】
好適な無機酸の代表例としては、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、リン酸、硫酸、スルファミン酸、硝酸等が挙げられる。好適な有機酸の代表例としては、ギ酸、酢酸、トリクロロ酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、安息香酸、ケイ皮酸、クエン酸、フマル酸、グリコール酸、イタコン酸、乳酸、メタンスルホン酸、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、マンデル酸、シュウ酸、ピクリン酸、ピルビン酸、サリチル酸、コハク酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、酒石酸、アスコルビン酸、パモ酸、ビスメチレンサリチル酸、エタンジスルホン酸、グルコン酸、シトラコン酸、アスパラギン酸、ステアリン酸、パルミチン酸、ＥＤＴＡ、グリコール酸、ｐ−アミノ安息香酸、グルタミン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、テオフィリン酢酸、および８−ハロテオフィリン（例えば、８−ブロモテオフィリン等）が挙げられる。薬学的に許容される無機酸付加塩または有機酸付加塩のその他の例としては、Ｓ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．１９７７，６６，２に記載の薬学的に許容される塩が挙げられる。
【００８６】
さらに、本発明の化合物は、溶媒和していない形態でも、水、エタノール等の薬学的に許容される溶媒と溶媒和した形態で存在してもよい。
【００８７】
本発明の化合物は１つ以上の不斉中心を有してもよく、任意の光学異性体（即ち、鏡像異性体またはジアステレオマー）は、分離された、純粋な、または部分的に精製された光学異性体、および、ラセミ混合物、即ち立体異性体の混合物を含むその任意の混合物として本発明の範囲内に含まれるものとする。
【００８８】
これに関して、鏡像異性体を明記する場合、化合物はどちらかの鏡像異性体が過剰である、例えば、本質的に純粋な形態であるものと理解される。従って、本発明の一実施形態は、６０％以上、７０％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９６％以上、好ましくは９８％以上の鏡像体過剰率を有する本発明の化合物に関する。
【００８９】
ラセミ体は、既知の方法で、例えば、光学活性な酸を用いてそのジアステレオマー塩を分離し、塩基を用いた処理により光学活性なアミン化合物を遊離することにより光学対掌体に分割することができる。このようなジアステレオマー塩の分離は、例えば、分別結晶により達成することができる。この目的に好適な光学活性な酸としては、ｄ−またはｌ−酒石酸、マンデル酸、またはカンファースルホン酸を挙げることができるが、これらに限定されるものではない。ラセミ化合物を光学対掌体に分割する別の方法は、光学活性なマトリックスでのクロマトグラフィーに基づく。本発明の化合物はまた、キラルアルキル化またはキラルアシル化試薬などのキラル誘導体化試薬からジアステレオマー誘導体を生成・クロマトグラフィー分離した後、キラル補助剤を切断することにより分割してもよい。上記方法のいずれかを適用して、本発明の化合物の光学対掌体自体を分割するか、または合成中間体の光学対掌体を分割してもよく、合成中間体は、後に、本明細書に記載の方法により本発明の化合物である光学分割された最終生成物に変換することができる。
【００９０】
当業者に公知の他の光学異性体分割方法を使用することができる。このような方法には、Ｊ．Ｊａｑｕｅｓ，Ａ．Ｃｏｌｌｅｔ  ａｎｄ  Ｓ．Ｗｉｌｅｎ  ｉｎ  Ｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｓ，Ｒａｃｅｍａｔｅｓ，ａｎｄ  Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８１で検討されたものが含まれる。光学活性な化合物は、光学活性な出発原料から製造することもできる。
【００９１】
医薬組成物
本発明はさらに、治療有効量の式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩と薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物を提供する。本発明はまた、実験の項に開示する特定の化合物の１種またはその薬学的に許容される塩と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物も提供する。
【００９２】
本発明の化合物は、単独で、または薬学的に許容される担体もしくは賦形剤と組み合わせて、単回投与または複数回投与のいずれかで投与することができる。本発明の医薬組成物は、薬学的に許容される担体または希釈剤、ならびに他の任意の公知のアジュバントおよび賦形剤と共に、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２２ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｅｄ．，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ，２０１３に開示されているものなどの従来技術により製剤化することができる。
【００９３】
経口投与用の医薬組成物には、カプセル剤、錠剤、糖衣錠、丸剤、ロゼンジ剤、散剤および顆粒剤などの固体剤形が含まれる。組成物は、適宜、腸溶性コーティングなどのコーティングで被覆して製造されてもよく、または組成物は、当技術分野で周知の方法により、有効成分を放出制御する、例えば、徐放または持続放出するように製剤化されてもよい。経口投与用の液体剤形には、溶液剤、乳剤、懸濁剤、シロップ剤およびエリキシル剤が含まれる。非経口投与用の医薬組成物には、水性および非水性の滅菌注射用溶液剤、分散液剤、懸濁剤または乳剤、および使用前に滅菌注射用溶液剤または分散液剤中で再構成される滅菌粉末も含まれる。他の好適な投与形態としては、坐剤、スプレー剤、軟膏剤、クリーム剤、ゲル剤、吸入剤、皮膚貼付剤および埋め込み剤が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００９４】
典型的な経口投与量は、一日当たり約０．０１〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲である。
【００９５】
本発明の化合物は、一般的に、遊離塩基としてまたはその薬学的に許容される塩として使用される。式Ｉの化合物の薬学的に許容される塩は、例えば、式Ｉの遊離塩基の溶液または懸濁液を１モル当量の薬学的に許容される酸で処理することによる従来の方法で製造される。好適な有機酸および無機酸の代表例は前述している。
【００９６】
好適な医薬担体としては、不活性な固体希釈剤または充填剤、滅菌水溶液および様々な有機溶媒が挙げられる。固体担体の例としては、乳糖、白土、ショ糖、シクロデキストリン、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アラビアゴム、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸およびセルロースの低級アルキルエーテルが挙げられる。液体担体の例としては、シロップ、ピーナッツ油、オリーブ油、リン脂質、脂肪酸、脂肪酸アミン、ポリオキシエチレンおよび水が挙げられるが、これらに限定されるものではない。同様に、担体または希釈剤は、モノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン酸グリセリルなどの当技術分野で公知の任意の徐放性材料を単独で含んでもよいし、またはワックスと混合して含んでもよい。式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩と薬学的に許容される担体とを組み合わせることにより形成される医薬組成物は、開示されている投与経路に好適な、様々な剤形で容易に投与される。製剤は、好都合には、薬学の分野で公知の方法により単位剤形で提供することができる。
【００９７】
経口投与用に固体担体を使用する場合、製剤は錠剤化されても、粉末もしくはペレットの形態で硬ゼラチンカプセルに封入されてもよく、または製剤はトローチ剤もしくはロゼンジ剤の形態であってもよい。固体担体の量は非常に様々となるが、投与単位当たり約２５ｍｇ〜約１ｇの範囲となる。液体担体を使用する場合、製剤は、シロップ剤、乳剤、軟ゼラチンカプセル剤、または水性もしくは非水性の液体懸濁剤もしくは溶液剤などの滅菌注射用液剤の形態であってもよい。
【実施例】
【００９８】
実験の項
一般式Ｉ（式中、Ｒ１、Ｒ２およびＡｒは上記定義の通りである）の化合物は、以下の反応スキーム１〜７および実施例に概説した方法で製造することができる。記載する方法では、それ自体、当該技術分野の化学者に公知の、または当業者に明らかとなり得る変形または変更を使用することも可能である。さらに、本発明の化合物を製造する他の方法が、以下の反応スキームおよび実施例に鑑みて当業者に容易に明らかとなるであろう。
【００９９】
例えば、スキーム５は、本発明の化合物の合成中の選択的保護基の使用について説明する。当業者であれば、特定の反応に適切な保護基を選択することができるであろう。さらに、式Ｉの化合物を合成する後述の合成方法に、アミノ基、アミド基、ケト基、およびヒドロキシル基などの置換基を保護・脱保護する方法を組み込むことが必要な場合がある。このような基を保護・脱保護する方法は当該技術分野で周知であり、Ｔ．Ｇｒｅｅｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，１９９１，２ｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋに記載されている。
【０１００】
２種以上の互変異性体の混合物または平衡として存在し得る化合物については、１種の互変異性体のみをスキームに示すが、それは最も安定な互変異性体ではないこともある。鏡像異性体、立体異性体、または幾何異性体として存在し得る化合物については、それらの幾何学的配置を明記し；さもなければ、構造は立体異性体の混合物を示す。
【０１０１】
以下の方法を用いて分析ＬＣ−ＭＳデータを得た。
【０１０２】
方法Ａ：
ＬＣ−ＭＳは、カラムマネージャ、バイナリーソルベントマネージャ、サンプルオーガナイザ、ＰＤＡ検出器（２５４ｎｍで動作）、ＥＬＳ検出器、および正イオンモードで動作するＡＰＰＩ源を備えるＳＱ−ＭＳを含むＷａｔｅｒｓ  ＡｃｑｕｉｔｙからなるＷａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ−ＭＳで行った。
【０１０３】
ＬＣ条件：カラムは、Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＢＥＨ  Ｃ１８  １．７μｍ；２．１×１５０ｍｍで、６０℃で操作し、水＋０．０５％トリフルオロ酢酸（Ａ）と、アセトニトリル＋５％水＋０．０３％トリフルオロ酢酸（Ｂ）とからなる２液グラジエント０．６ｍｌ／分であった。勾配：０．００分：Ｂ１０％；３．００分：Ｂ９９．９％；３．０１分：Ｂ１０％；３．６０分：Ｂ１０％。総分析時間：３．６０分。
【０１０４】
方法Ｂ：
ＬＣ−ＭＳは、カラムマネージャ、バイナリーソルベントマネージャ、サンプルオーガナイザ、ＰＤＡ検出器（２５４ｎｍで動作）、ＥＬＳ検出器、および正イオンモードで動作するＡＰＰＩ源を備えるＴＱ−ＭＳを含むＷａｔｅｒｓ  ＡｃｑｕｉｔｙからなるＷａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ−ＭＳで行った。
【０１０５】
ＬＣ条件：カラムは、Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＢＥＨ  Ｃ１８  １．７μｍ；２．１×５０ｍｍで、６０℃で操作し、水＋０．０５％トリフルオロ酢酸（Ａ）と、アセトニトリル＋５％水＋０．０５％トリフルオロ酢酸（Ｂ）とからなる２液グラジエント１．２ｍｌ／分であった。勾配：０．００分：Ｂ１０％；１．００分：Ｂ１００％；１．０１分：Ｂ１０％；１．１５分：Ｂ１０％。総分析時間１．１５分。
【０１０６】
１Ｈ  ＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ＡＶ−ＩＩＩ−６００装置により６００ＭＨｚで、またはＢｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ＡＶ−ＩＩＩ−４００装置もしくはＶａｒｉａｎ  ４００装置により４００ＭＨｚで記録した。化学シフト値は、相対ｐｐｍ値で表す。複数のＮＭＲシグナルについて次の略称を使用する：ｓ＝シングレット、ｄ＝ダブレット、ｔ＝トリプレット、ｑ＝カルテット、ｄｄ＝ダブルダブレット、ｄｄｄ＝ダブルダブルダブレット、ｄｔ＝ダブルトリプレット、ｂｒ＝ブロード、およびｍ＝マルチプレット。
【０１０７】
一般式ＩＶの化合物は、スキーム１に示すように製造することができる。
【化３】
2017533251.tif 000005
（式中、Ｒ１は、式Ｉで定義した通りであり、Ｒ３は、水素またはニトロ基である）。
【０１０８】
一般式ＩＩＩの化合物（スキーム１）は、一般式ＩＩの化合物を、水酸化カリウムのメタノール溶液などの塩基の溶液中のビス（アセトキシ）ヨードベンゼンなどの酸化剤と反応させた後、形成されたジメチルケタールを脱保護することにより製造することができる。次に、標準的方法を用いて、化合物ＩＩＩのヒドロキシ部分をフッ素で置換することにより、一般式ＩＶの化合物を得ることができる。
【０１０９】
一般式Ｘの化合物は、スキーム２に示すように製造することができる。
【化４】
2017533251.tif 000006
（式中、Ｒ１およびＲ２は、式Ｉで定義した通りであり、Ｒ３は、水素またはニトロ基であり、Ｒ４およびＲ５は、メチルまたはエチルなどのアルキル基である）。
【０１１０】
一般式ＶＩの化合物（スキーム２）は、一般式ＩＶの化合物をＶなどのスルフィンアミドと、ルイス酸／乾燥剤、例えば、チタンテトラエトキシドの存在下で反応させることにより製造することができる。Ｚｎ粉末の存在下またはジエチル亜鉛およびトリス（トリフェニルホスフィン）ロジウム（Ｉ）塩化物の存在下、一般式ＶＩの化合物をブロモジフルオロ酢酸エチルなどの一般式ＶＩＩの化合物で処理すると、一般式ＶＩＩＩの化合物が得られる。一般式ＩＸの化合物は、一般式ＶＩＩＩの化合物から、水素化ジイソブチルアルミニウムなどの還元剤で処理することにより得られる。幾つかの場合、化合物ＩＸは、水和物の形態で平衡状態であり得る。一般式ＩＸの化合物を、塩化リチウムおよび塩基、例えば、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下、２−（ジメトキシホスホリル）−酢酸メチルなどの条件で処理すると、一般式Ｘの化合物が得られる。
【０１１１】
一般式ＸＶの化合物は、スキーム３に示すように製造することができる。
【化５】
2017533251.tif 000007
（式中、Ｒ１およびＲ２は、式Ｉで定義した通りであり、Ｒ５は、メチルまたはエチルなどのアルキル基である）。
【０１１２】
一般式ＸＩの化合物は、一般式Ｘの化合物をパラジウム炭素などの触媒の存在下で水素化することにより得られる。一般式ＸＩＩの化合物は、一般式ＸＩの化合物を酸、例えば、塩酸のメタノール溶液で処理した後、トリエチルアミンまたは炭酸カリウムのメタノール溶液などの塩基で処理することにより得られる。一般式ＸＩＩ（Ｒ３は、水素である）の化合物は、硝酸を用いてニトロ化すると、一般式ＸＩＩＩの化合物を得ることができる。一般式ＸＩＩＩの化合物のニトロ基を還元した後、形成されたアニリン部分（ＸＩＶ）を保護することにより、一般式ＸＶの化合物が得られる。
【０１１３】
一般式ＸＶの化合物は、スキーム４に示すように製造することができる。
【化６】
2017533251.tif 000008
（式中、Ｒ１およびＲ２は、式Ｉで定義した通りであり、Ｒ５は、メチルまたはエチルなどのアルキル基である）。
【０１１４】
一般式ＸＩ（Ｒ３がアミノ基のとき）の化合物は、一般式Ｘ（Ｒ３がアミノ基のとき）の化合物をパラジウム炭素などの触媒の存在下で水素化することにより得られる。一般式ＸＩＶの化合物は、一般式ＸＩ（Ｒ３がニトロのとき）の化合物を酸、例えば、塩酸のメタノール溶液で処理した後、トリエチルアミンまたは炭酸カリウムのメタノール溶液などの塩基で処理することにより得られ、続いてアニリン部分（ＸＩＶ）を保護すると、一般式ＸＶの化合物が得られる。
【０１１５】
一般式ＸＶＩＩの化合物は、スキーム５に示すように製造することができる。
【化７】
2017533251.tif 000009
（式中、Ｒ１およびＲ２は、式Ｉで定義した通りである）。
【０１１６】
一般式ＸＶの化合物をローソン試薬（２，４−ビス（４−メトキシフェニル）−１，３，２，４−ジチアジホスフェタン−２，４−ジスルフィド）などの試薬で処理した後、脱保護すると、一般式ＸＶＩＩの化合物が得られる。
【０１１７】
一般式ＸＶＩＩの化合物は、スキーム６に示すように製造することができる。
【化８】
2017533251.tif 000010
（式中、Ｒ１およびＲ２は、式Ｉで定義した通りである）。
【０１１８】
一般式ＸＩＩＩの化合物をローソン試薬（２，４−ビス（４−メトキシフェニル）−１，３，２，４−ジチアジホスフェタン−２，４−ジスルフィド）などの試薬で処理することにより、一般式ＸＸＩの化合物が得られる。一般式ＸＶＩＩの化合物は、亜ジオン酸ナトリウムなどの還元剤で、またはパラジウム炭素などの触媒の存在下、水素で、一般式ＸＸＩの化合物を還元することにより得ることができる。
【０１１９】
一般式Ｉの化合物は、スキーム７に示すように製造することができる。
【化９】
2017533251.tif 000011
（式中、Ｒ１、Ｒ２およびＡｒは、式Ｉで定義した通りである）。
【０１２０】
一般式ＸＸの化合物は、一般式ＸＶＩＩの化合物を一般式ＸＶＩＩＩのカルボン酸塩化物と反応させることにより、または当該技術分野の化学者に公知の方法を用いて一般式ＸＩＸのカルボン酸と反応させることにより製造することができる。一般式ＸＸの化合物をアンモニアで処理すると、一般式Ｉの化合物が得られる。幾つかの場合、反応を促進するために、ｔｅｒｔ−ブチルヒドロペルオキシドなどの酸化試薬の添加が必要なことがある。
【０１２１】
中間体の製造
中間体：２−（２−フルオロフェニル）−２，２−ジメトキシエタン−１−オール
【化１０】
2017533251.tif 000012
メタノール（１Ｌ）中の水酸化カリウム（９１．４ｇ、１．６３ｍｏｌ）の混合物に、１−（２−フルオロフェニル）エタン−１−オン（５０ｇ、３６２ｍｍｏｌ）のメタノール（３００ｍＬ）溶液を０℃で滴下しながら添加した。次に、ビス（アセトキシ）ヨードベンゼン（１７５ｇ、５４３ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加した。０℃で４時間攪拌した後、水（５００ｍＬ）の添加により反応を停止させた。混合物を濃縮してメタノールを除去した後、水相を酢酸エチル（７００ｍＬ、３回）で抽出し、合わせた有機相を塩水（３００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮した。粗生成物は、さらに精製することなく次の工程で直接使用した。
【０１２２】
同様に、１−（２，３−ジフルオロフェニル）エタン−１−オンから２−（２，３−ジフルオロフェニル）−２，２−ジメトキシエタン−１−オールを製造した。
【０１２３】
中間体：１−（２−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエタン−１−オン
【化１１】
2017533251.tif 000013
２−（２−フルオロフェニル）−２，２−ジメトキシエタン−１−オール（粗生成物、３６２ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（４５０ｍＬ）および水（１５０ｍＬ）に溶解した。次に、ｐ−トルエンスルホン酸（１２５ｇ、７２６ｍｍｏｌ）を室温で少量ずつ添加した。添加した後、混合物を還流しながら５時間攪拌した。水（１５０ｍＬ）と飽和ＮａＨＣＯ３を添加して、反応を停止させた後、混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ、３回）で抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。減圧下で溶媒を除去した後、石油エーテル：酢酸エチル＝２０：１のカラムクロマトグラフィーにより残渣を精製し、１−（２−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエタン−１−オン（４２ｇ、収率７６％、２工程）を得た。
【０１２４】
同様に、２−（２，３−ジフルオロフェニル）−２，２−ジメトキシエタン−１−オールから１−（２，３−ジフルオロフェニル）−２−ヒドロキシエタン−１−オンを製造した。
【０１２５】
中間体：２−フルオロ−１−（２−フルオロフェニル）エタン−１−オン
【化１２】
2017533251.tif 000014
１−（２−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエタン−１−オン（１０ｇ、６４．８８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２００ｍＬ）溶液に、Ｅｔ３Ｎ（ＨＦ）３（１０．４６ｇ、２２７．８ｍｍｏｌ）とＣＦ３（ＣＦ２）３ＳＯ２Ｆ（２９．４ｇ、９７．３２ｍｍｏｌ）を０℃で滴下しながら添加し、溶液を室温で１２時間攪拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝１０：１）は、出発材料が一切存在しないことを示した。混合物をＮａＨＣＯ３の飽和溶液および氷に注ぎ込み、ジクロロメタン（２００ｍＬ、３回）で抽出し、合わせた有機相を塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮した。混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１：０〜１０：１で溶離）により精製し、２−フルオロ−１−（２−フルオロフェニル）エタン−１−オン（６ｇ、収率：５９％）を得た。
【０１２６】
同様に、１−（２，３−ジフルオロフェニル）−２−ヒドロキシエタン−１−オンから１−（２，３−ジフルオロフェニル）−２−フルオロエタン−１−オンを製造した。
【０１２７】
中間体：（Ｒ）−Ｎ−（２−フルオロ−１−（２−フルオロフェニル）エチリデン）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド
【化１３】
2017533251.tif 000015
２−フルオロ−１−（２−フルオロフェニル）エタン−１−オン（６ｇ、３８．４３ｍｍｏｌ）とＴｉ（ＯＥｔ）４（１７．５３ｇ、７６．８６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）溶液に、（Ｒ）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（５．５９ｇ、４６．１２ｍｍｏｌ）を添加し、溶液を７０℃で１２時間攪拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝１０：１）は、出発材料が一切存在しないことを示した。混合物を水（２００ｍＬ）で反応を停止させた後、濾過し、酢酸エチル（２００ｍＬ、４回）で抽出し、合わせた有機相を塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮した。混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１：０〜１０：１で溶離）により精製し、（Ｒ）−Ｎ−（２−フルオロ−１−（２−フルオロフェニル）エチリデン）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（６．９ｇ、収率：６９％）を得た。
【０１２８】
同様に、１−（２，３−ジフルオロフェニル）−２−フルオロエタン−１−オンから（Ｒ）−Ｎ−（１−（２，３−ジフルオロフェニル）−２−フルオロエチリデン）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミドを製造した。
【０１２９】
中間体：（Ｓ）−３−（（（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチルスルフィニル）アミノ）−２，２，４−トリフルオロ−３−（２−フルオロフェニル）ブタン酸エチル
【化１４】
2017533251.tif 000016
（Ｒ）−Ｎ−（２−フルオロ−１−（２−フルオロフェニル）エチリデン）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（１０ｇ、３８．６ｍｍｏｌ）、トリス（トリフェニルホスフィン）ロジウム（Ｉ）塩化物（１．０１ｇ、１．２ｍｍｏｌ）および２−ブロモ−２，２−ジフルオロ酢酸エチル（１５．７ｇ、７７．１ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（２００ｍＬ）溶液に、Ｅｔ２Ｚｎ（７７．１ｍＬ、ヘキサンの１Ｍ溶液、７７．１ｍｍｏｌ）をＮ２下、０℃で１時間攪拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝１０：１）は、（Ｒ）−Ｎ−（２−フルオロ−１−（２−フルオロフェニル）エチリデン）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミドが一切存在しないことを示した。混合物を水（１００ｍＬ）で反応停止させた後、濾過し、酢酸エチル（２００ｍＬ、３回）で抽出し、合わせた有機相を塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮した。混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝２０：１〜５：１で溶離）により精製し、黄色の油として（Ｓ）−３−（（（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチルスルフィニル）アミノ）−２，２，４−トリフルオロ−３−（２−フルオロフェニル）ブタン酸エチル（１３ｇ、収率：８８％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：δ  ７．５９−７．５７（ｍ，１Ｈ），７．４４−７．４２（ｍ，１Ｈ），７．２１（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．１４−７．１０（ｍ，１Ｈ），５．５２−５．３７（ｍ，１Ｈ），５．２４−５．１０（ｍ，２Ｈ），４．３５（ｑ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），１．３６−１．２３（ｍ，１２Ｈ）．
【０１３０】
同様に、（Ｒ）−Ｎ−（１−（２，３−ジフルオロフェニル）−２−フルオロエチリデン）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミドから（Ｓ）−３−（（（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチルスルフィニル）アミノ）−３−（２，３−ジフルオロフェニル）−２，２，４−トリフルオロブタン酸エチルを製造した。
【０１３１】
中間体：（Ｒ）−２−メチル−Ｎ−（（Ｓ）−１，３，３−トリフルオロ−２−（２−フルオロフェニル）−４−オキソブタン−２−イル）プロパン−２−スルフィンアミド
【化１５】
2017533251.tif 000017
（Ｓ）−３−（（（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチルスルフィニル）アミノ）−２，２，４−トリフルオロ−３−（２−フルオロフェニル）ブタン酸エチル（１２ｇ、３１．３０ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（２００ｍＬ）溶液に、ＤＩＢＡＬ−Ｈ（水素化ジイソブチルアルミニウム）（６２．６ｍＬ、ＴＨＦの１Ｍ溶液、６２．６ｍｍｏｌ）を−７８℃で滴下しながら添加した。溶液をＮ２下、−７８℃で２時間攪拌した。混合物を水（１００ｍＬ）で反応停止させた後、濾過し、酢酸エチル（２００ｍＬ、４回）で抽出し、合わせた有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮することにより、粗（Ｒ）−２−メチル−Ｎ−（（Ｓ）−１，３，３−トリフルオロ−２−（２−フルオロフェニル）−４−オキソブタン−２−イル）プロパン−２−スルフィンアミド（１０．６ｇ）を取得し、これは、さらに精製することなく次の工程で使用した。
【０１３２】
同様に、（Ｓ）−３−（（（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチルスルフィニル）アミノ）−３−（２，３−ジフルオロフェニル）−２，２，４−トリフルオロブタン酸エチルから（Ｒ）−Ｎ−（（Ｓ）−２−（２，３−ジフルオロフェニル）−１，３，３−トリフルオロ−４−オキソブタン−２−イル）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミドを製造した。
【０１３３】
中間体：（Ｓ）−５−（（（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチルスルフィニル）アミノ）−４，４，６−トリフルオロ−５−（２−フルオロフェニル）へクス−２−エン酸メチル
【化１６】
2017533251.tif 000018
アセトニトリル（２００ｍＬ）中のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（４．８ｇ、３７．４９ｍｍｏｌ）とＬｉＣｌ（１．６ｇ、３７．４９ｍｍｏｌ）の混合物に、２−（ジメトキシホスホリル）−酢酸メチル（７．９ｇ、３７．４９ｍｍｏｌ）を添加し、続いて（Ｒ）−２−メチル−Ｎ−（（Ｓ）−１，３，３−トリフルオロ−２−（２−フルオロフェニル）−４−オキソブタン−２−イル）プロパン−２−スルフィンアミド（１０．６ｇ、３１．２４ｍｍｏｌ）を混合物に０℃で添加した。混合物を２５℃に昇温させてから、１２時間攪拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝３：１）は、出発材料が一切存在しないことを示した。減圧下で溶媒を除去し、残渣を酢酸エチル（５００ｍＬ、３回）で抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝５：１〜１：１）により精製し、（Ｓ）−５−（（（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチルスルフィニル）アミノ）−４，４，６−トリフルオロ−５−（２−フルオロフェニル）へクス−２−エン酸メチル（８ｇ、収率：７５％、２工程）を得た。
【０１３４】
同様に、（Ｒ）−Ｎ−（（Ｓ）−２−（２，３−ジフルオロフェニル）−１，３，３−トリフルオロ−４−オキソブタン−２−イル）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミドから（Ｓ）−５−（（（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチルスルフィニル）アミノ）−５−（２，３−ジフルオロフェニル）−４，４，６−トリフルオロへクス−２−エン酸メチル−スルフィンアミドを製造した。
【０１３５】
中間体：（Ｓ）−５−（（（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチルスルフィニル）アミノ）−４，４，６−トリフルオロ−５−（２−フルオロフェニル）−ヘキサン酸メチル
【化１７】
2017533251.tif 000019
（Ｓ）−５−（（（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチルスルフィニル）アミノ）−４，４，６−トリフルオロ−５−（２−フルオロフェニル）へクス−２−エン酸メチル（８ｇ、２０．２３ｍｍｏｌ）の酢酸エチル（１０００ｍＬ）溶液に、Ｐｄ／Ｃ（５ｇ、１０％）を添加した。混合物を５０ｐｓｉＨ２下、３０℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳは、出発材料が一切存在しないことを示した。この混合物を濾過し、減圧濃縮することにより、粗（Ｓ）−５−（（（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチルスルフィニル）アミノ）−４，４，６−トリフルオロ−５−（２−フルオロフェニル）−ヘキサン酸メチル（８．０４ｇ）を取得し、これをさらに精製することなく、次の工程で直接使用した。
【０１３６】
同様に、（Ｓ）−５−（（（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチルスルフィニル）アミノ）−５−（２，３−ジフルオロフェニル）−４，４，６−トリフルオロへクス−２−エン酸メチルスルフィンアミドから（Ｓ）−５−（（（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチルスルフィニル）アミノ）−５−（２，３−ジフルオロフェニル）−４，４，６−トリフルオロヘキサン酸メチルを製造した。
【０１３７】
中間体：（Ｓ）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）−６−（２−フルオロフェニル）ピペリジン−２−オン
【化１８】
2017533251.tif 000020
（Ｓ）−５−（（（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチルスルフィニル）アミノ）−４，４，６−トリフルオロ−５−（２−フルオロフェニル）−ヘキサン酸メチル（８．０ｇ、２０．１３ｍｏｌ）のメタノール（２００ｍＬ）溶液に、ＨＣｌ／メタノール（１００ｍＬ）を添加し、この溶液を２０℃で２時間攪拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝３：１）は、出発材料が一切存在しないことを示した。減圧下で溶媒を除去し、残渣をキシレン（２００ｍＬ）に溶解した後、溶液にＥｔ３Ｎ（５ｍＬ）を添加した。溶液をＮ２下、１１０℃で１２時間攪拌した。減圧下で溶媒を除去した。混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝３：１〜０：１で溶離）により精製し、（Ｓ）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）−６−（２−フルオロフェニル）ピペリジン−２−オン（４．１ｇ、２工程で収率７７％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：δ  ７．５５−７．５３（ｍ，１Ｈ），７．４８−７．４６（ｍ，１Ｈ），７．３１−７．２９（ｍ，１Ｈ），７．２０−７．１７（ｍ，１Ｈ），６．４９（ｓ，１Ｈ），５．２５−５．２２（ｍ，１Ｈ），５．１３−５．１１（ｍ，１Ｈ），２．７５−２．７１（ｍ，２Ｈ），２．３６−２．２８（ｍ，２Ｈ）．
【０１３８】
同様に、（Ｓ）−５−（（（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチルスルフィニル）アミノ）−５−（２，３−ジフルオロフェニル）−４，４，６−トリフルオロヘキサン酸メチルから（Ｓ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−オンを製造した。
【０１３９】
中間体：（Ｓ）−５，５−ジフルオロ−６−（２−フルオロ−５−ニトロフェニル）−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−オン
【化１９】
2017533251.tif 000021
（Ｓ）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）−６−（２−フルオロフェニル）ピペリジン−２−オン（３．５ｇ、１３．４ｍｍｏｌ）をＴＦＡ（２３ｍＬ）に懸濁させた。懸濁液を０℃に冷却し、濃縮Ｈ２ＳＯ４（５．５ｍＬ）を添加した。最後に、６５％ＨＮＯ３（１．０ｍＬ、１４．７ｍｍｏｌ）を５分かけて滴下しながら添加した。溶液を０℃で１０分間攪拌した。ＬＣＭＳは、出発材料が一切ないことを示した。溶液を５０ｇの氷に注ぎ、５Ｎ  ＮａＯＨを用いて、ｐＨ＞１１に塩基性化した。懸濁液を酢酸エチル（２００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（５０ｍＬ）および水（１００ｍＬ）の溶液で洗浄した後、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮して、（Ｓ）−５，５−ジフルオロ−６−（２−フルオロ−５−ニトロフェニル）−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−オン（４ｇ、収率９８％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）：δ  ８．７３（ｓ，１Ｈ），８．４１−８．３４（ｍ，２Ｈ），７．６４−７．５９（ｍ，１Ｈ），５．３５−５．２０（ｍ，１Ｈ），４．９２−４．７８（ｍ，１Ｈ），２．５７−２．５０（ｍ，２Ｈ），２．３４−２．３０（ｍ，２Ｈ）．
【０１４０】
同様に、（Ｓ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−オンから（Ｓ）−６−（２，３−ジフルオロ−５−ニトロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−オンを製造した。
【０１４１】
中間体：（Ｓ）−６−（５−アミノ−２−フルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−オン
【化２０】
2017533251.tif 000022
（Ｓ）−５，５−ジフルオロ−６−（２−フルオロ−５−ニトロフェニル）−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−オン（４ｇ、１３．０６ｍｍｏｌ）の酢酸エチル（２００ｍＬ）溶液に、Ｐｄ／Ｃ（２ｇ、１０％）を添加し、この混合物を５０ｐｓｉＨ２下、３０℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳは、出発材料が一切ないことを示した。混合物を濾過し、減圧濃縮することにより、粗（Ｓ）−６−（５−アミノ−２−フルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−フルオロメチル）ピペリジン−２−オン（３．６ｇ）を取得し、これをさらに精製することなく、次の工程で使用した。
【０１４２】
中間体：（Ｓ）−（３−（３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−６−オキソピペリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
【化２１】
2017533251.tif 000023
（Ｓ）−６−（５−アミノ−２−フルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−オン（３．６ｇ、１３．０３ｍｍｏｌ）の無水ジクロロメタン（１００ｍＬ）および飽和ＮａＨＣＯ３（７２ｍＬ）水溶液の溶液に、Ｂｏｃ２Ｏ（８．５３ｇ、３９．０９ｍｍｏｌ）を添加し、溶液を２０℃で１２時間攪拌した。混合物を水（５０ｍＬ）で反応停止させた後、ジクロロメタン（１００ｍＬ、３回）で抽出し、合わせた有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮した。混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝２０：１〜１０：１）により精製し、（Ｓ）−（３−（３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−６−オキソピペリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（４．９ｇ、２工程で収率９４％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）：δ  ９．５１（ｓ，１Ｈ），８．３７（ｓ，１Ｈ），７．６６−７．６５（ｍ，１Ｈ），７．５３（ｓ，１Ｈ），７．１６−７．１１（ｍ，１Ｈ），５．２２（ｄｄ，Ｊ＝４８．０，９．２Ｈｚ，１Ｈ），４．６９（ｄｄ，Ｊ＝４８．０，９．２Ｈｚ，１Ｈ），２．５０−２．１６（ｍ，４Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ）．
【０１４３】
中間体：（Ｓ）−（３−（３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−６−チオキソピペリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
【化２２】
2017533251.tif 000024
（Ｓ）−（３−（３，３−ジフルオロ−２−（２−フルオロメチル）−６−オキソピペリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（２．３ｇ、６．１１ｍｍｏｌ）の無水トルエン（５０ｍＬ）溶液に、ローソン試薬（２，４−ビス（４−メトキシフェニル）−１，３，２，４−ジチアジホスフェタン−２，４−ジスルフィド）（１．３６ｇ、３．３６ｍｍｏｌ）を添加し、溶液をＮ２下、９０℃で１２時間攪拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝３：１）は、出発材料が一切ないことを示した。溶液を酢酸エチル（５０ｍＬ、３回）で抽出し、合わせた有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１０：１〜３：１）により精製し、（Ｓ）−（３−（３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−６−チオキソピペリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（２．１５ｇ、収率：９０％）を得た。
【０１４４】
中間体：（Ｓ）−６−（５−アミノ−２−フルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−チオン
【化２３】
2017533251.tif 000025
（Ｓ）−（３−（３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−６−チオキソピペリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（５．５ｇ、１４．０２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１００ｍＬ）溶液にＨＣｌ／メタノール（５０ｍＬ）を添加し、溶液を２０℃で２時間攪拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝２：１）は、出発材料が一切ないことを示した。減圧下で溶媒を除去し、残渣をジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を用いて溶液をｐＨ＝７〜８に塩基性化してから、溶液をジクロロメタン（１００ｍＬ、３回）で抽出し、合わせた有機層を塩水で洗浄した後、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮した。残渣をジクロロメタン（２０ｍＬ）に分散した後、濾過し、濾過物を減圧乾燥することにより、白色の固体として（Ｓ）−６−（５−アミノ−２−フルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−チオン（１．７４ｇ）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨＺ）：δ  １０．６９（ｓ，１Ｈ），６．９２−６．８７（ｍ，１Ｈ），６．６０−６．５８（ｍ，１Ｈ），６．５１−６．４９（ｍ，１Ｈ），５．３５−５．３３（ｍ，１Ｈ），５．２３−５．１８（ｍ，２Ｈ），４．７２（ｄｄ，Ｊ＝４８．０，１０．０Ｈｚ，１Ｈ），３．２９−２．９２（ｍ，２Ｈ），２．２４−２．１９（ｍ，２Ｈ），［α］20D＝−１９２（ｃ＝０．１ｇ／１００ｍＬ，ＥｔＯＨ）．
【０１４５】
中間体：（Ｓ）−６−（２，３−ジフルオロ−５−ニトロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−チオン
【化２４】
2017533251.tif 000026
ローソン試薬（０．８１ｇ、２．０ｍｍｏｌ）を（Ｓ）−６−（２，３−ジフルオロ−５−ニトロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−オン（０．５９ｇ、１．８２ｍｍｏｌ）のトルエン（２５ｍｌ）溶液に添加した。反応混合物を１１０℃で一晩攪拌した。反応混合物を室温に冷却し、飽和ＮａＨＣＯ３（水溶液）に注ぎ込んだ。混合物を酢酸エチルで抽出した。有機相を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮した。粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘプタン）により精製して、（Ｓ）−６−（２，３−ジフルオロ−５−ニトロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−チオン（０．５８ｇ、純度６５％、収率６１％）を得た。
【０１４６】
中間体：（Ｓ）−６−（５−アミノ−２，３−ジフルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−チオン
【化２５】
2017533251.tif 000027
亜ジオン酸ナトリウム（１．１６ｇ、６．６５ｍｍｏｌ）と炭酸カリウム（０．４５９ｇ、３．３２ｍｍｏｌ）を水（５．００ｇ、５ｍｌ、２７８ｍｍｏｌ）に溶解した。反応混合物を０℃に冷却した。（Ｓ）−６−（２，３−ジフルオロ−５−ニトロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−チオン（０．５８ｇ、１．１１ｍｍｏｌ、純度６５％）のエタノール（５ｍｌ）溶液を滴下しながら添加した。反応混合物を室温で３０分間攪拌した。水を添加した。混合物を酢酸エチルで抽出した。有機相を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮した。残渣を酢酸エチルに溶解し、シリカゲルのプラグを介して濾過してから、減圧濃縮した。粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘプタン）により精製して、（Ｓ）−６−（５−アミノ−２，３−ジフルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−チオン（１０５ｍｇ、３５％）を得た。
【０１４７】
中間体：５−（メトキシ−ｄ３）ピコリン酸メチル
【化２６】
2017533251.tif 000028
アルゴン下、５−ヒドロキシピコリン酸メチル（２．８８ｇ、１８．８ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（１０８ｍｌ）に溶解した。炭酸カリウム（７．２０ｇ、５２．１ｍｍｏｌ）を添加し、オレンジ色の懸濁液を室温で４５分間攪拌した。ヨードメタン−ｄ３（１．４１ｍｌ、２２．６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を２時間攪拌した。水を添加した。混合物を酢酸エチルで抽出した。有機相を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘプタン：酢酸エチル）により精製して、５−（メトキシ−ｄ３）ピコリン酸メチルを得た。
【０１４８】
中間体：５−（メトキシ−ｄ３）ピコリン酸
【化２７】
2017533251.tif 000029
５−（メトキシ−ｄ３）ピコリン酸メチル（２００ｍｇ、１．１７５ｍｍｏｌ）を水（１．５ｍｌ）および１，４−ジオキサン（３ｍｌ）に溶解した。水酸化リチウム（７０．０４ｍｇ、２．９４ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を１時間攪拌した。反応混合物を約２ｍｌまで蒸発させて、ジエチルエーテルで抽出した。有機相を１Ｍ  ＮａＯＨで抽出し、合わせた水相を６Ｎ  ＨＣｌ（水溶液）でｐＨ２に酸性化した。混合物を氷浴で冷却すると、沈殿物が形成された。沈殿物を収集し、５−（メトキシ−ｄ３）ピコリン酸を得た。
【０１４９】
本発明の化合物の製造
実施例１：（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−５−クロロピコリンアミド（化合物１）
【化２８】
2017533251.tif 000030
５−クロロピコリン酸（０．２４３ｇ、１．５４０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１２ｍＬ）溶液に、ＨＡＴＵ（１−［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジニウム３−オキシドヘキサフルオロホスフェート）（０．８６ｇ、２．３ｍｍｏｌ）を添加し、この溶液を５分間撹拌した。次に、（Ｓ）−６−（５−アミノ−２−フルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−フルオロメチル）ピペリジン−２−チオン（０．３ｇ、１．０２６ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン）（０．９０ｍｌ、５．１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌した。飽和塩化アンモニウム水溶液を添加し、混合物を酢酸エチルで抽出した。有機相を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘプタン：酢酸エチル）で精製し、（Ｓ）−５−クロロ−Ｎ−（３−（３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−６−チオキソピペリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）ピコリンアミドを取得し、これを７Ｍアンモニアのメタノール（１２ｍＬ）溶液に溶解した。混合物を５０℃で一晩攪拌し、減圧濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘプタン：酢酸エチル）で精製することにより、（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−５−クロロピコリンアミド（０．２３ｇ、収率５５％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  １０．７５（ｓ，１Ｈ），８．８０（ｄｄ，Ｊ＝２．４，０．６Ｈｚ，１Ｈ），８．２１（ｄｄ，Ｊ＝８．４，２．４Ｈｚ，１Ｈ），８．１６（ｄｄ，Ｊ＝８．４，０．６Ｈｚ，１Ｈ），７．８９（ｄｄｄ，Ｊ＝１１．７，６．６，３．８Ｈｚ，１Ｈ），７．８６（ｄｄ，Ｊ＝６．６，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．１６（ｄｄ，Ｊ＝１１．７，８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．１０（ｓ，２Ｈ），５．０２−４．８８（ｍ，１Ｈ），４．７９（ｄｄ，Ｊ＝４５．９，８．８Ｈｚ，１Ｈ），２．５３−２．５０（ｍ，２Ｈ），２．１８−１．９７（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４１５（ＭＨ＋）；ｔＲ＝０．５２分（方法Ａ）
【０１５０】
実施例１と同様に以下の化合物を製造した：
実施例２：（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−５−フルオロピコリンアミド（化合物２）
【化２９】
2017533251.tif 000031
（Ｓ）−６−（５−アミノ−２−フルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−チオンおよび５−フルオロピコリン酸から製造。１Ｈ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ  １０．８５（ｓ，１Ｈ），８．７６（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），８．２６（ｄｄ，Ｊ＝８．６，４．４Ｈｚ，１Ｈ），８．１５（ｍ，１Ｈ），８．００（ｔｄ，Ｊ＝８．７，２．８Ｈｚ，２Ｈ），７．３３（ｄｄ，Ｊ＝１１．８，９．１Ｈｚ，１Ｈ），５．１５（ｄｄｄ，Ｊ＝５４．９，４６．５，９．２Ｈｚ，２Ｈ），２．５８−２．４６（ｍ，２Ｈ），２．４６−２．２３（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）３９９．２（ＭＨ＋）；ｔＲ＝０．４９分（方法Ｂ）
【０１５１】
実施例３：（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−５−メトキシピラジン−２−カルボキサミド（化合物３）
【化３０】
2017533251.tif 000032
（Ｓ）−６−（５−アミノ−２−フルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−チオンおよび５−メトキシピラジン−２−カルボン酸から製造。１Ｈ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ  １０．７１（ｓ，１Ｈ），８．９１（ｄ，Ｊ＝１．３Ｈｚ，１Ｈ），８．４３（ｄ，Ｊ＝１．３Ｈｚ，１Ｈ），８．０６（ｍ，１Ｈ），７．９８（ｍ，１Ｈ），７．２９（ｄｄ，Ｊ＝１１．６，９．１Ｈｚ，１Ｈ），５．１１（ｄｄｄ，Ｊ＝９４．４，４６．２，８．７Ｈｚ，２Ｈ），４．０３（ｓ，３Ｈ），２．５５−２．４８（ｍ，２Ｈ），２．４２−２．１９（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４１２（ＭＨ＋）；ｔＲ＝０．４７分（方法Ａ）
【０１５２】
実施例４：（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−１−（ジフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド（化合物４）
【化３１】
2017533251.tif 000033
（Ｓ）−６−（５−アミノ−２−フルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−チオンおよび１−（ジフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸から製造。１Ｈ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ  １０．４６（ｓ，１Ｈ），８．４２（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ），８．０４−７．７６（ｍ，３Ｈ），７．１５（ｄｄ，Ｊ＝１１．７，８．６Ｈｚ，１Ｈ），７．０２（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ），６．１６（ｓ，２Ｈ），５．０６−４．７２（ｍ，２Ｈ），２．５４−２．４９（ｍ，２Ｈ），２．２０−１．９８（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４２０（ＭＨ＋）；ｔＲ＝０．４６分（方法Ａ）
【０１５３】
実施例５：（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−２−（ジフルオロメチル）オキサゾール−４−カルボキサミド（化合物５）
【化３２】
2017533251.tif 000034
（Ｓ）−６−（５−アミノ−２−フルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−チオンおよび２−（ジフルオロメチル）オキサゾール−４−カルボン酸から製造。１Ｈ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ  １０．５４（ｓ，１Ｈ），９．０４（ｓ，１Ｈ），７．９３（ｓ，１Ｈ），７．８６（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４７−７．２１（ｍ，２Ｈ），５．０４（ｄｄ，Ｊ＝９４．５，４６．０Ｈｚ，２Ｈ），２．５５−２．４９（ｍ，２Ｈ），２．２４（ｄｄ，Ｊ＝６８．４，４．９Ｈｚ，２Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４２１（ＭＨ＋）；ｔＲ＝０．４６分（方法Ａ）
【０１５４】
実施例６：（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−５−シアノピコリンアミド（化合物６）
【化３３】
2017533251.tif 000035
（Ｓ）−６−（５−アミノ−２−フルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−チオンおよび５−シアノピコリン酸から製造。１Ｈ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ  １０．９５（ｓ，１Ｈ），９．２１（ｄｄ，Ｊ＝２．０，０．８Ｈｚ，１Ｈ），８．５９（ｄｄ，Ｊ＝８．２，２．０Ｈｚ，１Ｈ），８．２９（ｄｄ，Ｊ＝８．２，０．８Ｈｚ，１Ｈ），８．０３−７．９０（ｍ，２Ｈ），７．２３（ｓ，１Ｈ），４．９７（ｄｄ，Ｊ＝９４．５，４５．１Ｈｚ，２Ｈ），２．５４−２．４８（ｍ，２Ｈ），２．２９−２．０３（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４０６（ＭＨ＋）；ｔＲ＝０．４７分（方法Ａ）
【０１５５】
実施例７：（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−２−メチルオキサゾール−４−カルボキサミド（化合物７）
【化３４】
2017533251.tif 000036
（Ｓ）−６−（５−アミノ−２−フルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−チオンおよび２−メチルオキサゾール−４−カルボン酸から製造。トリフルオロ酢酸塩の１Ｈ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ  １０．９７（ｓ，１Ｈ），１０．３８（ｓ，１Ｈ），９．７１（ｓ，１Ｈ），９．１６（ｓ，１Ｈ），８．６８（ｓ，１Ｈ），８．０９（ｍ，１Ｈ），７．９４（ｄｄ，Ｊ＝７．０，２．５Ｈｚ，１Ｈ），７．３２（ｄｔ，Ｊ＝１２．１，９．０Ｈｚ，１Ｈ），５．３７−４．９９（ｍ，２Ｈ），３．１０−２．９６（ｍ，２Ｈ），２．５３（ｓ，３Ｈ），２．４９−２．３１（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）３８５（ＭＨ＋）；ｔＲ＝０．４３分（方法Ａ）
【０１５６】
実施例８：（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−５−メトキシピリミジン−２−カルボキサミド（化合物８）
【化３５】
2017533251.tif 000037
（Ｓ）−６−（５−アミノ−２−フルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−チオンおよび５−メトキシピリミジン−２−カルボン酸から製造。トリフルオロ酢酸塩の１Ｈ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ  １０．８９（ｓ，１Ｈ），１０．８１（ｓ，１Ｈ），９．６７（ｓ，１Ｈ），８．９１（ｓ，１Ｈ），８．７４（ｓ，２Ｈ），８．１６（ｄｄｄ，Ｊ＝８．９，４．０，２．７Ｈｚ，１Ｈ），７．９９（ｄｄ，Ｊ＝７．０，２．５Ｈｚ，１Ｈ），７．３６（ｄｄ，Ｊ＝１２．１，９．０Ｈｚ，１Ｈ），５．２１（ｄｄｄ，Ｊ＝５５．４，４５．９，１０．０Ｈｚ，２Ｈ），４．０４（ｓ，３Ｈ），３．１１−２．９７（ｍ，２Ｈ），２．５０−２．３１（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４１２（ＭＨ＋）；ｔＲ＝０．４２分（方法Ａ）
【０１５７】
実施例９：（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−５−（ジフルオロメチル）ピラジン−２−カルボキサミド（化合物９）
【化３６】
2017533251.tif 000038
（Ｓ）−６−（５−アミノ−２−フルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−チオンおよび５−（ジフルオロメチル）ピラジンン−２−カルボン酸から製造。トリフルオロ酢酸塩の１Ｈ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ  １１．１４（ｓ，１Ｈ），１１．００（ｓ，１Ｈ），９．７２（ｓ，１Ｈ），９．４２（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），９．１８（ｓ，１Ｈ），９．１１（ｓ，１Ｈ），８．１９（ｄｄｄ，Ｊ＝８．９，３．９，２．７Ｈｚ，１Ｈ），８．０６（ｄｄ，Ｊ＝７．０，２．５Ｈｚ，１Ｈ），７．４０（ｄｄ，Ｊ＝１２．０，９．０Ｈｚ，１Ｈ），７．２８（ｔ，Ｊ＝５３．９Ｈｚ，１Ｈ），５．２１（ｄｄｄ，Ｊ＝５５．５，４６．０，１０．０Ｈｚ，２Ｈ），３．１２−２．９７（ｍ，２Ｈ），２．５１−２．３２（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４３２（ＭＨ＋）；ｔＲ＝０．４８分（方法Ａ）
【０１５８】
実施例１０：（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４，５−ジフルオロフェニル）−２−メチルオキサゾール−４−カルボキサミド（化合物１０）
【化３７】
2017533251.tif 000039
（Ｓ）−６−（５−アミノ−２，３−ジフルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−チオンおよび２−メチルオキサゾール−４−カルボン酸から製造。１Ｈ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ  １０．４４（ｓ，１Ｈ），８．６７（ｓ，１Ｈ），７．９６（ｄｄｄ，Ｊ＝１２．２，６．６，２．６Ｈｚ，１Ｈ），７．６９−７．６５（ｍ，１Ｈ），６．１７（ｓ，２Ｈ），４．８７（ｔｄ，Ｊ＝４６．０，８．９Ｈｚ，２Ｈ），２．５５−２．４９（ｍ，２Ｈ），２．５２（ｓ，３Ｈ），２．１９−１．９６（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４０３（ＭＨ＋）；ｔＲ＝０．４６分（方法Ａ）
【０１５９】
実施例１１：（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４，５−ジフルオロフェニル）−５−メトキシピラジン−２−カルボキサミド（化合物１１）
【化３８】
2017533251.tif 000040
（Ｓ）−６−（５−アミノ−２，３−ジフルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−チオンおよび５−メトキシピラジン−２−カルボン酸から製造。１Ｈ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ  １０．７７（ｓ，１Ｈ），８．８９（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），８．４２（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），８．０３（ｄｄｄ，Ｊ＝１２．０，６．６，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．７９−７．７１（ｍ，１Ｈ），６．１８（ｓ，２Ｈ），５．０３−４．７０（ｍ，２Ｈ），４．０２（ｓ，３Ｈ），２．５５−２．４９（ｍ，２Ｈ），２．２３−１．９５（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４３０（ＭＨ＋）；ｔＲ＝０．５２分（方法Ａ）
【０１６０】
実施例１２：（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４，５−ジフルオロフェニル）−５−フルオロピコリンアミド（化合物１２）
【化３９】
2017533251.tif 000041
（Ｓ）−６−（５−アミノ−２，３−ジフルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−チオンおよび５−フルオロピコリン酸から製造。１Ｈ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ  １０．８９（ｓ，１Ｈ），８．７４（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），８．２４（ｄｄ，Ｊ＝８．７，４．６Ｈｚ，１Ｈ），８．０６（ｍ，１Ｈ），７．９９（ｔｄ，Ｊ＝８．７，２．８Ｈｚ，１Ｈ），７．７６−７．７２（ｍ，１Ｈ），６．２３（ｓ，２Ｈ），４．９８−４．８１（ｍ，２Ｈ），２．５２−２．５０（ｍ，２Ｈ），２．２２−１．９７（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４１７（ＭＨ＋）；ｔＲ＝０．５２分（方法Ａ）
【０１６１】
実施例１３：（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４，５−ジフルオロフェニル）−５−クロロピコリンアミド（化合物１３）
【化４０】
2017533251.tif 000042
（Ｓ）−６−（５−アミノ−２，３−ジフルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−チオンおよび５−クロロピコリン酸から製造。１Ｈ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ  １０．９６（ｓ，１Ｈ），８．７９（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），８．２２−８．１４（ｍ，２Ｈ），８．１２−８．０４（ｍ，１Ｈ），７．７５（ｓ，１Ｈ），６．３８（ｓ，２Ｈ），５．０４−４．８０（ｍ，２Ｈ），２．５６−２．４９（ｍ，２Ｈ），２．１１（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４３３（ＭＨ＋）；ｔＲ＝０．５５分（方法Ａ）
【０１６２】
実施例１４：（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４，５−ジフルオロフェニル）−５−シアノピコリンアミド（化合物１４）
【化４１】
2017533251.tif 000043
（Ｓ）−６−（５−アミノ−２，３−ジフルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−チオンおよび５−シアノピコリン酸から製造。１Ｈ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ  １１．１０（ｓ，１Ｈ），９．２２（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ），８．６０（ｄｄ，Ｊ＝８．２，２．０Ｈｚ，１Ｈ），８．３０（ｄｄ，Ｊ＝１３．０，４．９Ｈｚ，１Ｈ），８．０６（ｄｄｄ，Ｊ＝１２．０，６．６，２．５Ｈｚ，１Ｈ），７．８０−７．７６（ｍ，１Ｈ），６．１８（ｓ，２Ｈ），５．００−４．７７（ｍ，２Ｈ），２．５１（ｄｄ，Ｊ＝３．５，１．７Ｈｚ，２Ｈ），２．２０−１．９９（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４２４（ＭＨ＋）；ｔＲ＝０．４９分（方法Ｂ）
【０１６３】
実施例１５：（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４，５−ジフルオロフェニル）−５−メトキシピコリンアミド（化合物１５）
【化４２】
2017533251.tif 000044
（Ｓ）−６−（５−アミノ−２，３−ジフルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−チオンおよび５−メトキシピコリン酸から製造。１Ｈ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ  １０．７２（ｓ，１Ｈ），８．４０（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），８．１３（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ），８．０５（ｄｄｄ，Ｊ＝１２．２，６．６，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．７３−７．６８（ｍ，１Ｈ），７．６３（ｄｄ，Ｊ＝８．７，２．９Ｈｚ，１Ｈ），６．１５（ｓ，２Ｈ），４．９９−４．７７（ｍ，２Ｈ），３．９４（ｓ，３Ｈ），２．５５−２．４７（ｍ，２Ｈ），２．２０−１．９８（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４２９（ＭＨ＋）；ｔＲ＝０．５１分（方法Ｂ）
【０１６４】
実施例１６：（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４，５−ジフルオロフェニル）−５−（メトキシ−ｄ３）ピコリンアミド（化合物１６）
【化４３】
2017533251.tif 000045
（Ｓ）−６−（５−アミノ−２，３−ジフルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−チオンおよび５−（メトキシ−ｄ３）ピコリン酸から製造。１Ｈ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ  １０．７２（ｓ，１Ｈ），８．４０（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），８．１３（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ），８．０５（ｄｄｄ，Ｊ＝１２．２，６．６，２．６Ｈｚ，１Ｈ），７．７３−７．６９（ｍ，１Ｈ），７．６２（ｄｄ，Ｊ＝８．７，２．９Ｈｚ，１Ｈ），６．１７（ｓ，２Ｈ），５．００−４．７５（ｍ，２Ｈ），２．２０−２．００（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４３２．１（ＭＨ＋）；ｔＲ＝０．５４（方法Ｂ）
【０１６５】
実施例１７：（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４，５−ジフルオロフェニル）−５−シアノ−３−メチルピコリンアミド（化合物１７）
【化４４】
2017533251.tif 000046
（Ｓ）−６−（５−アミノ−２，３−ジフルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−チオンおよび５−シアノ−３−メチルピコリン酸から製造。１Ｈ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ  １０．９８（ｓ，１Ｈ），９．００（ｄｄ，Ｊ＝１．９，０．６Ｈｚ，１Ｈ），８．４２（ｄｄ，Ｊ＝１．９，０．７Ｈｚ，１Ｈ），８．１２−７．９９（ｍ，１Ｈ），７．５７（ｓ，１Ｈ），６．１９（ｓ，２Ｈ），４．８８（ｄｄｄ，Ｊ＝５４．２，４６．８，８．０Ｈｚ，２Ｈ），２．５５（ｓ，３Ｈ），２．２４−１．９９（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４３８．１（ＭＨ＋）；ｔＲ＝０．５５（方法Ｂ）
【０１６６】
実施例１８：（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−５−（メトキシ−ｄ３）ピコリンアミド（化合物１８）
【化４５】
2017533251.tif 000047
（Ｓ）−６−（５−アミノ−２−フルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−チオンおよび５−（メトキシ−ｄ３）ピコリン酸から製造。１Ｈ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ  １０．５２（ｓ，１Ｈ），８．３９（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ），８．１３（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ），７．９２−７．８８（ｍ，１Ｈ），７．８４（ｄｄ，Ｊ＝６．９，２．７Ｈｚ，１Ｈ），７．６１（ｄｄ，Ｊ＝８．７，２．９Ｈｚ，１Ｈ），７．１４（ｄｄ，Ｊ＝１１．８，８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．１１（ｓ，２Ｈ），５．０２−４．８８（ｍ，１Ｈ），４．７９（ｄｄ，Ｊ＝４６．０，８．９Ｈｚ，１Ｈ），２．１８−１．９６（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４１４．１（ＭＨ＋）；ｔＲ＝０．４９（方法Ｂ）
【０１６７】
実施例１９：（Ｓ）−Ｎ−（３−（６−アミノ−３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−２，３，４，５−テトラヒドロピリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）−５−ブロモピコリンアミド（化合物１９）
【化４６】
2017533251.tif 000048
（Ｓ）−６−（５−アミノ−２−フルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−チオンおよび５−ブロモピコリン酸から製造。１Ｈ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ  １０．７４（ｓ，１Ｈ），８．８７（ｄｄ，Ｊ＝２．３，０．７Ｈｚ，１Ｈ），８．３３（ｄｄ，Ｊ＝８．４，２．３Ｈｚ，１Ｈ），８．０８（ｄｄ，Ｊ＝８．４，０．６Ｈｚ，１Ｈ），７．９０（ｄｄｄ，Ｊ＝８．７，４．０，２．９Ｈｚ，１Ｈ），７．８６（ｄｄ，Ｊ＝６．９，２．７Ｈｚ，１Ｈ），７．１５（ｄｄ，Ｊ＝１１．８，８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．１０（ｓ，２Ｈ），４．９５（ｄｄｄ，Ｊ＝４８．４，８．８，２．５Ｈｚ，１Ｈ），４．７９（ｄｄ，Ｊ＝４６．０，８．９Ｈｚ，１Ｈ），２．５２−２．４８（ｍ，２Ｈ），２．１８−１．９５（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４５９．１（ＭＨ＋）；ｔＲ＝０．５３（方法Ｂ）
【０１６８】
立体化学
ヘプタンと酢酸エチルの混合物から（Ｓ）−５−ブロモ−Ｎ−（３−（３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−６−チオキソピペリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）ピコリンアミドを再結晶することにより結晶を得た。（Ｓ）−５−ブロモ−Ｎ−（３−（３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−６−チオキソピペリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）ピコリンアミドの構造は、前記結晶をＸ線結晶構造解析することにより解明した。その構造は、（Ｓ）−５−ブロモ−Ｎ−（３−（３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−６−チオキソピペリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）ピコリンアミドの絶対配置を示す。（Ｓ）−５−ブロモ−Ｎ−（３−（３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−６−チオキソピペリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）ピコリンアミドは、実施例１と同様に、（Ｓ）−６−（５−アミノ−２−フルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−チオンおよび５−ブロモピコリン酸から出発して製造した。
【化４７】
2017533251.tif 000049
図１：（Ｓ）−５−ブロモ−Ｎ−（３−（２−（ジフルオロメチル）−３，３−ジフルオロ−６−チオキソピペリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）ピコリンアミドのＸ線構造
【０１６９】
このようにして、例示した本発明の化合物の絶対配置を合理化することができる。（Ｓ）−５−ブロモ−Ｎ−（３−（３，３−ジフルオロ−２−（フルオロメチル）−６−チオキソピペリジン−２−イル）−４−フルオロフェニル）ピコリンアミドは、例示した本発明の化合物１〜９および例示した本発明の化合物１８の出発材料である（Ｓ）−６−（５−アミノ−２−フルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−チオンから製造した。例示した本発明の化合物の残りは、（Ｓ）−６−（５−アミノ−２，３−ジフルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−チオンから製造した。（Ｓ）−６−（５−アミノ−２，３−ジフルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−チオンは、（Ｓ）−６−（５−アミノ−２−フルオロフェニル）−５，５−ジフルオロ−６−（フルオロメチル）ピペリジン−２−チオンと同じ方法により製造したため、同じ絶対および相対立体化学を有していなければならない。
【０１７０】
薬理学的試験
ＢＡＣＥ１結合アッセイ
結合アッセイは、Ｆｒｅｅｓｔｙｌｅ  ＨＥＫ２９３細胞から組換え発現させた後、精製したビオチン化型のヒトＢＡＣＥ１を用いるＳＰＡベースのアッセイとして行った。結合アッセイは、白色透明底３８４プレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ  ♯３６５３）内の５０ｍＭ  ＮａＣｌおよび０．０３％Ｔｗｅｅｎ−２０を含有する５０ｍＭ酢酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ４．５）中で行った。１０ｎＭ（最終濃度）放射性リガンド（［３Ｈ］−Ｎ−（（１Ｓ，２Ｒ）−１−ベンジル−３−シクロプロピルアミノ−２−ヒドロキシプロピル）−５−（メタンスルホニルメチルアミノ）−Ｎ−（（Ｒ）−１−フェニルエチル）イソフタルアミド）（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅから購入したＴＲＱ１１５６９）を、所定の濃度の試験化合物、６ｎＭ（最終濃度）ヒトＢＡＣＥ１、および２５μｇストレプトアビジン被覆ＰＶＴコアＳＰＡビーズ（ＲＰＮＱ０００７、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）と全容積４０μｌとなるように混合した。Ｃ５０測定アッセイでは幾つかの濃度の各試験化合物を試験した。プレートを室温で１時間インキュベートし、Ｗａｌｌａｃ  Ｔｒｉｌｕｘカウンターで計数した。全結合および非特異的結合は、バッファーおよび１μＭ（最終濃度）の高親和性ＢＡＣＥ１参照阻害剤（Ｓ）−６−［３−クロロ−５−（５−プロパ−１−イニルピリジン−３−イル）チオフェン−２−イル］−２−イミノ−３，６−ジメチルテトラヒドロピリジン−４−オンをそれぞれ用いて、測定した。各試験化合物について、ＩＣ５０値（放射性リガンドの特異的結合の５０％阻害をもたらす濃度）は濃度反応曲線から求め、式Ｋｉ＝ＩＣ５０／（１＋Ｌ／Ｋｄ）（式中、ＬおよびＫｄは、それぞれ、アッセイに使用した放射性リガンドの最終濃度および放射性リガンドの解離定数である）からＫｉを算出するのに使用した。放射性リガンドのＫｄは飽和結合実験から求めた。
【０１７１】
【表１】
2017533251.tif 000050
【０１７２】
ＢＡＣＥ１効力アッセイ
効力アッセイは、市販のＢＡＣＥ１キット（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｐ２９８５）を用いるＦＲＥＴベースのアッセイとして行った。１０μＭ（最終濃度）の試験化合物２μｌとキットのＢＡＣＥ１酵素（最終濃度３ｎＭ）１５μｌとを室温で１５分間予備インキュベートした後、キットの基質（最終濃度２５０ｎＭ）１５μｌを添加し、室温でさらに９０分間インキュベートした。その後、Ｐｈｅｒａｓｔａｒ（Ｅｘ５４０／Ｅｍ５９０）でアッセイプレートを読み取った。試験化合物の存在下で観測された酵素活性を、それぞれバッファーおよび１０μＭ（最終濃度）の高親和性ＢＡＣＥ１参照阻害剤（Ｓ）−６−［３−クロロ−５−（５−プロパ−１−イニルピリジン−３−イル）チオフェン−２−イル］−２−イミノ−３，６−ジメチルテトラヒドロピリジン−４−オンの存在下で観測された酵素活性に対して標準化した。試験化合物の効力は１０μＭ（最終濃度）で評価し、式、％阻害＝１００％−標準化した酵素活性（単位：％）を用いて酵素活性の阻害率と定義した。
【０１７３】
【表２】
2017533251.tif 000051
【０１７４】
ＢＡＣＥ１阻害後のラットの脳および血漿中のＡβペプチドレベルの評価。
動物。
全てのラットの世話および実験手順は、デンマーク立法府に従い、Ｌｕｎｄｂｅｃｋ  Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ  Ｓｔａｆｆにより承認された。ラットは、１２／１２時間の明／暗サイクルで、食餌と水を自由摂取できるようにしてバリア施設内で飼育した。
【０１７５】
未処置ラットの治療
体重約２５０ｇの若齢成体雄性スプラーグドーリー（Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙ）ラットはＣｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒから購入し、溶媒（１０％ＨＰβＣＤ＋１Ｍ  ＭｅＳＯ４、ｐＨ２．５）または試験化合物（溶媒に溶解）０〜３０ｍｇ／ｋｇを強制経口投与（ｐ．ｏ）のみで与えた。化合物は５ｍｌ／ｋｇの量で投与する。各治療条件について、５〜１０匹の動物のコホート研究を行った。
【０１７６】
獣医スタッフは、治療を受ける動物の毒性の徴候を注意深く監視した。監視パラメータには、体重、身体的外観、外被外観の変化、非誘発挙動の発生、および外部刺激に対する反応の鈍化または過剰反応が含まれた。
【０１７７】
組織採取。
最初に投与した後Ｔ＝１８０分の時点で、動物を気絶させ、ギロチンで断頭した。動物の断頭後、体幹血液をＥＤＴＡコートしたチューブに採取した。血液を２２００Ｇで、４℃で１５分間遠心分離し、血漿を採取し、−８０℃で凍結した。血液をＡβ  ＥＬＩＳＡおよびＤＭＰＫ分析用のアリコートに分けた。犠牲にした直後に、脳を摘出し、２つに分割した。右脳半球はドライアイスで急速凍結し、−８０℃で貯蔵した。左半分は切断し；前脳前部（ｆｒｏｎｔ  ｆｏｒｅｂｒａｉｎ）はＡβ  ＥＬＩＳＡ用に取り、残部はＤＭＰＫ分析用に使用した。これらの試料もドライアイスで急速凍結し、分析に使用するまで−８０℃で貯蔵した。
【０１７８】
組織処理。
皮質試料を氷上で少し解凍した後、それらを、約５〜７秒間速度５に設定した少量用分散装置（Ｔ１０  ｂａｓｉｃ  ＵＬＴＲＡ−ＴＵＲＲＡＸ（登録商標））を用いてホモジナイズした。組織をその重量の１０倍の容積中で処理した、例えば、組織１００ｍｇをホモジナイズバッファー１０００μＬ中でホモジナイズした。ホモジナイズバッファー：５０ｍｌＭｉｌｌｉ  Ｑ水＋５０ｎＭ  ＮａＣｌ＋０．２％ジエチルアミン（ＤＥＡ）＋Ｃｏｍｐｌｅｔｅ  Ｐｒｏｔｅａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｃｏｃｋｔａｉｌ、１錠＋１ｎＭ  フッ化４−（２−アミノエチル）ベンゼンスルホニル塩酸塩不可逆的セリンプロテアーゼ阻害剤（ＡＥＢＳＦ）。
【０１７９】
ホモジナイズした後、試料を４５０μＬずつ１．５ｍｌエッペンドルフ管に採取し、氷上に置き、０．５％ＮＰ−４０（５０ｕｌ）を全ての試料に添加した後、それらを氷上で３０分間インキュベートした。その後、全ての試料を、超音波ホモジナイザを用いて２０ｋＨｚの均質な音（ＳＯＮＯＰＬＵＳ  ＨＤ２０７０，Ｂａｎｄｅｌｉｎ  Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ）１０パルス、１２〜１３％の出力設定で音波処理し、Ａβ種を全て抽出した。次いで、試料を２００００Ｇで、４℃で２０分間遠心分離した（Ｏｌｅ  Ｄｉｃｈ  １５７  ＭＰＲＦ  Ｍｉｃｒｏ  ｃｅｎｔｒｉｆｕｇｅ）。遠心分離した後、上清２８５μＬをピペットで６００μＬマイクロチューブに移し、１Ｍ  Ｔｒｉｓ−ＨＣＬバッファー１５μＬで中和した。
【０１８０】
ＥＬＩＳＡプロトコル。
ＷＡＫＯ２９４−６２５０１ヒト／ラットＡベータアミロイド（４０）キットを全てのＥＬＩＳＡ分析に使用した。血漿試料３０μＬまたは前述のように作成した皮質上清３０μＬを、氷上で６００μＬマイクロチューブに入れた。これに８Ｍ尿素（ＡｐｐｌｉＣｈｅｍ  Ａ１０４９，９０２５）３０μＬを添加し、２倍希釈した。血漿上清と皮質上清の両方を氷上で３０分間インキュベートした。標準列は、キットに提供された標準ペプチドストック溶液と、１．６Ｍ尿素（８Ｍ尿素２００μＬ＋標準希釈剤８００μＬ）および０．８Ｍ尿素（８Ｍ尿素４００μＬ＋標準希釈剤３６００μＬ）を含有する標準希釈剤とから調製した。１００ｐｍｏｌ／ｍｌ〜０ｐｍｏｌ／ＬのＡβ４０の２倍系列希釈をアッセイ用に調製した。
【０１８１】
尿素と共にインキュベートした後、キットの５倍標準希釈剤を添加することにより全ての試料をさらに希釈した。これは、標準希釈剤２４０μＬを試料／尿素混合物６０μＬに添加した後、それを十分混合することにより行った。希釈した各試料１００μＬをピペットでＥＬＩＳＡプレートの指定されたウェルにデュプリケートで移した。次いで、プレートを被覆して、４℃で終夜インキュベートした。翌日、使用する前にＥＬＩＳＡキットを室温にした。インキュベートしたプレートは、Ｍｉｌｌｉ  Ｑ水で希釈した２０×洗浄液で５回洗浄した。ＨＲＰコンジュゲート１００μＬを各ウェルに加え、プレートを被覆し、４℃で１時間インキュベートした。洗浄を再び５回繰り返した。３，３’，５，５’−テトラメチルベンジジン（ＴＭＢ）溶液１００μＬを各ウェルに加え、プレートを被覆し、暗所にて室温で３０分間インキュベートした。次に、停止液１００μＬを各ウェルに加え、ウェルに停止液を添加して３０分以内にプレートを分光光度計（Ｌａｂｓｙｓｔｅｍｓ  Ｍｕｌｔｉｓｃａｎ  Ａｓｃｅｎｔ）で、４５０ｎｍの波長で読み取った。
【０１８２】
既知の濃度の合成Ａβ４０を含有する標準物質から作成した標準曲線に基づいて、試料中のＡβペプチドの濃度を測定した。当業者には、ジエチルアミン（ＤＥＡ）および尿素での抽出により、それぞれ可溶性Ａβおよび不溶性Ａβが遊離されることが分かるであろう。ＥＬＩＳＡキットはバリデーションが行われ、広く使用されているため、治療条件およびアッセイ条件が各被検化合物について同じである限り、アッセイは被検化合物について一貫性のあるロバストなデータが得られ、不一致が最小限になるものと認められている。
【０１８３】
データ解析
試料中のＡβ４０の濃度を求めるために、プレートに添加した試料の補間値に２０を乗じるが、それはＤＥＡ、尿素、および中和溶液の容積を合計したときの希釈に相当する。値は、溶媒処理された動物と比較したＡβ４０の変化率として算出される。
【０１８４】
脳および血漿サンプルの生体分析
ＵｌｔｒａＰｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  ＬＣ（登録商標）（ＵＰＬＣ（登録商標））クロマトグラフィーを用いて、血漿および脳ホモジネートにおけるＴＣを決定した後、タンデム−ＭＳ（ＭＳ／ＭＳ）検出を実施した。
【０１８５】
装置：
Ｔｅｃａｎ  Ｇｅｎｅｓｉｓ  ＲＳＰ  ２００；Ｂｉｏｍｅｋ  ＮＸＰ，Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ；Ｓｉｇｍａ  ４Ｋ１５遠心分離機；Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ，Ｗａｔｅｒｓ；Ｓｃｉｅｘ  ＡＰＩ４０００  ＴＱ，Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ；ＭＳソフトウエア：Ａｎａｌｙｓｔバージョン１．４．１
【０１８６】
化学薬品
アセトニトリル、ＨＰＬＣ−グレード、Ｆｌｕｋａ、Ｎｏ．３４９６７Ｎ；メタノール、ＨＰＬＣ−グレード、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，ロット９００３Ｓ；ギ酸、ＨＰＬＣ−グレード、Ｒｉｅｄｅｌ−ｄｅ  Ｈａｅｅｎ、ロット５１６６０；精製水、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｓｙｎｅｒｇｙ  ＵＶ
【０１８７】
サンプル調製
脳ホモジネートは、脳１：４（ｖ／ｖ）を水：２−プロパノール：ＤＭＳＯ（５０：３０：２０ｖ／ｖ／ｖ）と共に均質化した後、遠心分離し、上清を回収することにより調製した。較正標準およびＱＣサンプルは、ハミルトン（Ｈａｍｉｌｔｏｎ）ロボットを用いて調製した。Ｂｉｏｍｅｋロボットを用いて、１５０μＬのＩＳＴＤのアセトニトリル（１ｎｇ／ｍＬＩＳＴＤ）溶液を２５μＬの較正標準、ＱＣサンプルおよび試験サンプル（血漿および脳ホモジネート）に添加した。遠心分離（６２００ｇ、４℃、２０分）後、各サンプルからの１００μＬの上澄みを新しいプレートに移し、Ｂｉｏｍｅｋロボット（メソッドファイルＩｎＶｉｖｏ導入）を用いて、０．１％ギ酸を含む１００μＬの水と混合した。急速遠心分離（６２００ｇ、４℃、５分）の後、サンプルをオートサンプラー内に配置した。
【０１８８】
ＵＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析
ＭＳ／ＭＳ検出は、正イオンエレクトロスプレーイオン化モードのＡｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ  Ｓｃｉｅｘ  ＡＰＩ  ４０００装置を用いて実施した。ＴＣおよびＩＳＴＤは、親＞娘質量と電荷の比（ｍ／ｚ）で検出した。ネブライザーおよび衝突ガスには窒素を使用した。ピーク面積は、１．００〜１０００ｎｇ／ｍＬの血漿および５．００〜５０００ｎｇ／ｇの脳の範囲（希釈のために補正）内で分析物の血漿および脳濃度と線形的に相関した。血漿／脳サンプル薬物濃度が１０００ｎｇ／ｍＬまたは５０００ｎｇ／ｇを超えた場合、分析の前にサンプルをブランク血漿／脳ホモジネートで適切に希釈した。
【０１８９】
クロマトグラフィーシステム
分析カラム：
Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＨＳＳ  Ｃ１８  ＳＢ（ｐＨ２〜８）１．８μｍ、２．１×３０ｍｍ。
移動相Ａ：０．１％ギ酸水溶液または０．１％水酸化アンモニウム水溶液
移動相Ｂ：アセトニトリルと０．１％ギ酸水溶液または０．１％水酸化アンモニウム水溶液。
弱洗浄：メタノール
強洗浄：アセトニトリル／イソプロパノール／ギ酸（５０／５０／２ｖ／ｖ／ｖ）
流量：０．６ｍＬ／分
分析時間：３分
空費見込み（ｔｏ  ｗａｓｔｅ）：０〜０．５分
温度：４０℃
【０１９０】
【表３】
2017533251.tif 000052
【０１９１】
化合物１１および１５は、用量１０ｍｇ／ｋｇｐ．ｏ．で投与し、投与から３時間後に脳および血漿サンプルを収集し、前述した通りに以下の曝露を測定した。
【０１９２】
【表４】
2017533251.tif 000053
【０１９３】
【表５】
2017533251.tif 000054
【０１９４】
表３および４に示されるように、本発明の化合物は、脳血液関門を透過することができ、ＣＮＳにおいて効果を示す。
【０１９５】
ＭＤＣＫ−ＭＤＲ１アッセイ
試験化合物の透過性をＭＤＣＫ−ＭＤＲ１細胞において評価したが、これらの細胞は、９６トランスウェルプレート内に密集まで（４〜６日）培養した。試験化合物は、輸送バッファー（ＨＢＳＳ＋１％ＢＳＡ）で０．５μＭの濃度に希釈し、細胞単層の頂端または基底側に塗布した。３７℃、９５％の相対湿度を有する５％ＣＯ２で、６０分のインキュベーション時間にわたり、ＡからＢ方向またはＢからＡ方向の試験化合物の透過を３回反復して測定した。トランスウェルプレートのレシーバおよびドナーウェルの両方での分析物／ＩＳのピーク面積比に基づくＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析により、試験化合物を定量した。
【０１９６】
見掛け透過係数Ｐａｐｐ（ｃｍ／ｓ）は、式：
Ｐａｐｐ＝（ｄＣｒ／ｄｔ）×Ｖｒ／（Ａ×Ｃ０）
（式中、ｄＣｒ／ｄｔは、時間の関数としてのレシーバチャンバ内の化合物の蓄積濃度（μＭ／ｓ）であり；Ｖｒは、レシーバチャンバ内の溶液量であり（頂端側が０．０５ｍＬ；基底側が０．２５ｍＬ）；Ａは、輸送のための表面積、即ち、単層の面積の場合、０．０８０４ｃｍ２であり；Ｃ０は、ドナーチャンバ内の初期濃度（μＭ）である）
を用いて計算した。
【０１９７】
化合物は、流出比（Ｐａｐｐ  ＢＡ／Ｐａｐｐ  ＡＢ）が≧２であるとき、Ｐｇｐ基質に分類される。
【０１９８】
【表６】
2017533251.tif 000055
【０１９９】
表５に示されるように、例示した本発明の化合物の大部分が、２未満のＭＤＣＫ−ＭＤＲ１流出比を有しており、従って、血液脳関門を通過することができると考えられる（Ｅ  Ｋｅｒｎｓ，Ｌ  Ｄｉ，Ｄｒｕｇ−ｌｉｋｅ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ：Ｃｏｎｃｅｐｔｓ，Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ（２００８）Ｅｌｓｅｖｉｅｒ）。
【国際調査報告】
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