(57)【要約】  本発明は、医薬品として使用するための、且つとりわけパーキンソン病及び注意欠陥／多動性障害の治療に有用な特定の用量のＡ２Ａ拮抗剤に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
２〜３ｍｇの用量の医薬品として使用するための、式
【化３】
2017536400.tif 000010
の化合物又はその薬学的な塩。
【請求項２】
前記使用が１回の１日用量である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
前記使用が２ｍｇ又は３ｍｇにおけるものである、請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項４】
前記使用がパーキンソン病を治療するためのものである、請求項１〜３に記載の化合物。
【請求項５】
前記使用がＡＤＨＤを治療するためのものである、請求項１〜３に記載の化合物。
【請求項６】
ＡＤＨＤを治療するのに使用するための、式
【化４】
2017536400.tif 000011
の化合物又はその薬学的な塩。
【請求項７】
２〜３ｍｇの用量で使用される、請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
２ｍｇ又は３ｍｇの用量で使用される、請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
１回の１日用量で使用される、請求項７又は８に記載の化合物。
【請求項１０】
疾病パーキンソン病又はＡＤＨＤを治療するのに使用するための、式
【化５】
2017536400.tif 000012
の化合物又はその薬学的な塩を含む錠剤又は医薬組成物であって、前記治療が２〜３ｍｇの化合物５０４を投与することを含む、錠剤又は医薬組成物。
【請求項１１】
前記化合物が２ｍｇ又は３ｍｇの用量で使用される、請求項１０に記載の錠剤又は医薬組成物。
【請求項１２】
前記化合物が１日１回使用される、請求項１０〜１１に記載の錠剤又は医薬組成物。
【請求項１３】
さらなる賦形剤又は希釈剤を含む、請求項１０に記載の錠剤又は医薬組成物。
【請求項１４】
パーキンソン病又はＡＤＨＤに罹患している患者の治療の方法であって、２〜３ｍｇの式
【化６】
2017536400.tif 000013
の化合物又はその薬学的な塩の投与を含む、方法。
【請求項１５】
２ｍｇ又は３ｍｇの前記化合物が毎日投与される、請求項１４に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、とりわけ２つのパラメーター：注意欠陥・多動性障害の治療のためのＡ２Ａ受容体拮抗剤コンセプトの利用並びにパーキンソン病及び注意欠陥／多動性障害の治療のための特定の用量の前記Ａ２Ａ拮抗剤を包含する。
【背景技術】
【０００２】
Ａ２Ａ受容体拮抗剤は、前頭葉線条体回路に伴う種々の中枢神経系疾患の潜在的な標的として多大な関心を集めてきた。Ａ２Ａ拮抗剤（イストラデフィリン、プレラデナント、及びトザデナント）の臨床開発は、パーキンソン病（ＰＤ）の治療に集中した。
【０００３】
アデノシンＡ２Ａ受容体拮抗剤は、非ドーパミン作動性機序によるＰＤの治療における新たな道筋を示した。ＰＤに関連して、Ａ２Ａ拮抗剤は、前臨床モデルにおいてジスキネジアを悪化させずに運動機能を改善する。臨床データは、ＰＤの運動成分におけるＡ２Ａ拮抗作用の可能性を支持する。さらに、Ａ２Ａ拮抗剤は、前臨床的に、認知機能不全、不安、及びうつを改善させることが示され、それによりＰＤの神経精神学的成分における効能の可能性を強調する。現在までＰＤの治療のために市販されている唯一のＡ２Ａ受容体拮抗剤はイストラデフィリンであり、開始投与量は１日に２０〜４０ｍｇである。
【０００４】
化合物５０４は、開発中の新たなアデノシンＡ２Ａ受容体拮抗剤であり、特許出願国際公開第２００５／０６３７４３号パンフレット（化合物５０４）及び国際公開第２０１０／１２６０８２号パンフレットに開示された。本発明は、とりわけ、１）化合物５０４の新たな驚くほど低い治療用量、２）他のＡ２Ａ拮抗剤と比べて長い半減期、それにより、３）特にＰＤ及び注意欠陥／多動性障害（ＡＤＨＤ）に集中した中枢神経系疾患におけるより長い作用の継続時間及びその用途の支持を開示している。
【０００５】
ＡＤＨＤは、注意力低下、衝動行為、多動性、及び認知機能不全の症状を特徴とする慢性で遺伝性の高い発達障害である。ＡＤＨＤは、世界中で学齢児童の５％〜１０％及び成人の最大５％が罹患する。ＡＤＨＤの病因は未知のままであるが、ＡＤＨＤにおける脳の成熟の遅延、並びに皮質−皮質及び皮質−皮質下回路内の変化した結合性の証拠が出現している。多くの文献が、ＡＤＨＤにおける１）前頭葉線条体ネットワーク及び２）前頭側頭ネットワーク（Ｒｕｂｉａ  Ｋ  ｅｔ  ａｌ，Ａｍ  Ｊ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ．１９９９  Ｊｕｎ；１５６（６）：８９１−６、Ｒｕｂｉａ  Ｋ  ｅｔ  ａｌ，Ａｍ  Ｊ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ．２００５  Ｊｕｎ；１６２（６）：１０６７−７５、及びＲｕｂｉａ  Ｋ，ｅｔ  ａｌ  Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ．２０１１  Ｊｕｌ；３６（８）：１５７５−８６；Ｅｐｓｔｅｉｎ  ＪＮ，ｅｔ  ａｌ，Ｊ  Ｃｈｉｌｄ  Ｐｓｙｃｈｏｌ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ．２００７  Ｓｅｐ；４８（９）：８９９−９１３）における低活性化を示している。ＡＤＨＤにおける前頭葉線条体低活性化は、運動抑制及び干渉抑制（Ａｒｏｎ  ＡＲ，ａｎｄ  Ｐｏｌｄｒａｃｋ  ＲＡ．Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２００６  Ｍａｒ  １；２６（９）：２４２４−３３．；Ｒｕｂｉａ  Ｋ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ａｂｎｏｒｍ  Ｃｈｉｌｄ  Ｐｓｙｃｈｏｌ．２００３  Ｊｕｎ；３１（３）：３０１−１３）、並びに持続性で選択的な注意の過程（Ｓｍｉｔｈ  ＡＢ，ｅｔ  ａｌ  Ａｍ  Ｊ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ．２００６  Ｊｕｎ；１６３（６）：１０４４−５１）に関連していた。
【０００６】
ＡＤＨＤの治療選択肢は、薬物療法（刺激薬及び非刺激薬）、心理教育、及び認知行動療法である。ＡＤＨＤの第一選択及び第二選択の精神薬理学的治療は、持続放出性の刺激薬（メチルフェニデート及びアンフェタミン系）である。刺激薬は、子供及び成人のＡＤＨＤの中核症状欠乏（ｃｏｒｅ  ｓｙｍｐｔｏｍ  ｄｅｆｉｃｉｔｓ）を改善することが一貫して示されてきた。非刺激薬、とりわけアトモキセチンは、ＡＤＨＤにおけるコアドメイン欠乏の治療に効能があることも見出された。ＡＤＨＤ医薬品の作用様式は完全には解明されていないが、現在までにエビデンスにより、刺激薬と非刺激薬との両方の医薬品により観察される利益が緊密に連携して、特に前頭前皮質においてドーパミン（ＤＡ）及びノルエピネフリン（ＮＥ）神経伝達を増加させることが示唆されている。さらに、神経ネットワークレベルでは、メチルフェニデートは持続的注意及び衝動性を改善し、付随して、内側前頭及び側頭機能不全を変化させずに前頭葉線条体ネットワークを正常化させる（Ｒｕｂｉａ  Ｋ，ｅｔ  ａｌ  Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ．２０１１  Ｊｕｌ；３６（８）：１５７５−８６、Ｃｕｂｉｌｌｏ  Ａ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒ  Ｒｅｓ．２０１０  Ｊｕｌ；４４（１０）：６２９−３９、及びＣｕｂｉｌｌｏ  Ａ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｒｅｂ  Ｃｏｒｔｅｘ．２０１４  Ｊａｎ；２４（１）：１７４−８５）。まとめると、現在までのＡＤＨＤ文献は、現在の医薬品が、改善された前頭葉線条体結合性並びに増加した前頭葉前部のＤＡ及びＮＥによりＡＤＨＤのコアドメインの治療において臨床的に効能があるものの、疾患と関連する認知機能不全を含むいくつかの満たされてない要求が完全には対処されていないことを示唆している（Ｇｕａｌｔｉｅｒｉ  ＣＴ，ａｎｄ  Ｊｏｈｎｓｏｎ  ＬＧ．Ｊ  Ａｔｔｅｎ  Ｄｉｓｏｒｄ．２００８  Ｊａｎ；１１（４）：４５９−６９、Ｂｉｄｗｅｌｌ  ＬＣ，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｅｈａｖ．２０１１  Ａｕｇ；９９（２）：２６２−７、及びＳｗａｎｓｏｎ  Ｊ，ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ．２０１１  Ｊａｎ；３６（１）：２０７−２６）。
【０００７】
ＡＤＨＤ患者は有利に刺激薬に反応するが、それらの刺激薬は依存の可能性があり、紅斑をもたらし、黒枠の標記が付いている（濫用の危険性、突然死、及び自殺傾向）。
【０００８】
刺激薬はＡＤＨＤの治療に非常に有効であるが、現在の医薬品の安全性の問題（上記参照）は、安全な新規代替物の特定への著しい関心を強調する。最後に、非常に効能があり１に近い効果量を発揮すると同時に、刺激薬は、製剤によって３〜１６時間活性があり、それにより日中にＡＤＨＤの全症候を緩和する。しかし、ＡＤＨＤは、仕事／学校だけでなく社会生活にとっても苦痛となる疾患であるため、患者の向上した生活の質のために、朝及び晩の社会的及び学問的な機能を維持する２４時間の医薬品が必要である。
【０００９】
アデノシンＡ２Ａ受容体拮抗剤は、ＡＤＨＤの治療用に現在全く市販されていない。最近、Ｖ−８１４４４（国際公開第２００２０５５０８２号パンフレットに開示、化合物１４）が、１００ｍｇの１日２回の投与形式を利用して、Ｉｂ／ＩＩ相概念実証試験で試験された。１日２回の投薬計画の必要性は、Ｖ−８１４４４の５〜７時間の半減期（Ａｂｓｔｒａｃｔｓ／Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ３３３（２０１３），Ａｂｓｔｒａｃｔ  Ｎｏ：９５１）及び約２ｎＭのＫｉの知見により支持されている。
【発明の概要】
【００１０】
本発明は、化合物５０４を、新規な作用様式（ＭｏＡ）を有する低投与量の１日１回ＡＤＨＤ医薬品として強調する。新規なＭｏＡは、ＡＤＨＤにおける認知及び情緒的機能不全に加えて、ＡＤＨＤコアドメイン内の効能の可能性を強調する。さらに、効能を増加させると同時に、５０４は、Ａ２ＡＭｏＡ及び低用量の必要性により副作用の減少をもたらし得る。刺激薬の医薬品は、第一選択及び第二選択の治療であるが、投与量選択における予測可能性がないために、特に成人の集団において低い服薬順守と関連する。５０４化合物は、低く狭い投与量範囲で使用され、医薬品に対する順守を支持するであろう。最後に、１日１回投薬は、刺激薬に比べて改善された朝及び晩の機能を支えるであろう。このように、本発明は、安全で有効な新規ＡＤＨＤ医薬品を提供する。
【００１１】
発明の概要
本発明は、２〜３ｍｇの１日１回用量などの、２〜３ｍｇの用量の医薬品として使用するための、以下の式
【化１】
2017536400.tif 000002
により表される化合物５０４及びその薬学的に許容できる塩に関する。
【００１２】
一態様において、本発明は、ＰＤ又はＡＤＨＤを治療するのに使用するための化合物５０４に関する。
【００１３】
さらに、本発明は、２又は３ｍｇの１日用量などの、２〜３ｍｇの用量で化合物５０４を使用する、ＡＤＨＤ及びＰＤを有する患者の治療の方法に関する。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】薬物動態的及び薬力学的結果。Ｅｍａｘ法を利用して推定された脳切片オートラジオグラフィースキャンの時点でのラット被殻中の受容体占有率対化合物５０４血漿濃度。Ｘ軸は受容体占有率（％）を示す。
【図２】ラットＡ２Ａ占有率及びＭＰＴＰ処置されたマーモセット障害逆転（ｄｉｓａｂｉｌｉｔｙ  ｒｅｖｅｒｓａｌ）スコアに基づく、ＰＤ患者の化合物５０４血漿濃度範囲の予測された治療上有効なＥＣ５０−８０。Ｘ軸は血漿濃度（ｎｇ／ｍｌ）を示し、Ｙ軸（左）はＡ２Ａ％ＲＯ（受容体占有率）を、Ｙ軸（右）は障害逆転を示す。▲  Ａ２Ａ％ＲＯ、−  非線形フィット受容体占有率；■  障害逆転、−  非線形フィット障害逆転。
【図３】Ｅｍａｘを利用して推定されたＰＥＴスキャンの時点での被殻中の受容体占有率対化合物５０４血漿濃度。Ｘ軸はＣＰＥＴ（ｎｇ／ｍｌ）を示し、Ｙ軸は占有率（％）を示す。●  ５ｍｇ、◆  ３ｍｇ、＋  ２ｍｇ、□  １ｍｇ、○  ０．５ｍｇ、−  カーブフィット。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
発明の詳細な説明
用語「化合物５０４」は、以下の式
【化２】
2017536400.tif 000003
による化合物及びその薬学的に許容できる塩を意味するものとする。
【００１６】
脳において、Ａ２Ａ受容体は、線条体、側坐核、淡蒼球、及び嗅球において豊富に発現され、受容体がグルタミン酸及びドーパミンのシナプス伝達の制御に重要な役割を果たす他の脳の領域では低発現レベルである。背側線条体において、Ａ２Ａ受容体は、ドーパミン神経伝達物質系と緊密な物理的且つ機能的相互作用にある。Ａ２Ａ受容体は、ＧＡＢＡ作動性線条体淡蒼球系中型有棘神経細胞上のＤ２受容体と共存し、Ａ２Ａ受容体とＤ２受容体との間の機能的拮抗作用の証拠がある。Ａ２Ａ拮抗作用は、間接出力路（ｉｎｄｉｒｅｃｔ  ｏｕｔｐｕｔ  ｐａｔｈｗａｙ）内でＤ２受容体活性化作用と類似の反応をもたらし得る。このように、Ａ２Ａ受容体拮抗剤は、皮質及び大脳基底核中でドーパミン作動性伝達を増大させる。
【００１７】
ドーパミン作動性活性及びノルアドレナリン作動性活性を有する医薬品は、ドーパミン及びノルエピネフリン再取込みを遮断することによりＡＤＨＤ症状を減少させるようであり、構造イメージング及び機能イメージングの研究は、前頭葉皮質下経路中の機能不全と、ドーパミン作動性系及びノルアドレナリン作動性系における不均衡とがＡＤＨＤの病態生理学の一因であることを示唆している。中枢神経系におけるドーパミン放出に対するＡ２Ａ拮抗剤の影響、及び本明細書に表される結果は、ＡＤＨＤ症状を治療するのに化合物５０４が効果的であろうことを示唆する。実際に、臨床的観察に加えて、ＡＤＨＤにおけるＡ２Ａ受容体の推定される対象は、高血圧自然発症ラット（Ｔａｋａｈａｓｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，２００８，Ｆｒｏｎｔ  Ｂｉｏｓｃｉ  １３：２６１４−２６３２；Ｐｉｒｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００９，Ｂｅｈａｖ  Ｐｈａｒｍ  Ｍａｒｃｈ，Ｖｏｌ  ２０  ，Ｉｓｓｕｅ  ２：１３４−１４５）と、選択的注意の試験、５−選択反応時間課題において測定された認知機能不全を有するラット（Ｈｉｇｇｉｎｓ  ｅｔ  ａｌ  Ｂｅｈａｖ  Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ（２００７）；１８５（１）：３２−４２）との両方において測定された注意欠陥に対するＡ２Ａ拮抗剤の有益な作用を示す前臨床試験により強調されてきた。重要なことに、注意欠陥は、ＡＤＨＤのための治療的意義のある投与量範囲でのメチルフェニデート治療により逆転された。
【００１８】
インビトロでは、化合物５０４は、以下の表に示される通り、ヒト、マーモセット、齧歯動物、及びイヌのＡ２Ａ受容体に対して高い親和性を有する（０．１＜Ｋｉ［ｎｍｏｌ］＜０．３）。化合物５０４は、他のアデノシン受容体サブタイプに対してだけでなく、受容体、イオンチャネル、及び輸送体を含む広範囲のＣＮＳ標的に対して、非常に選択性のあるＡ２Ａ受容体拮抗剤である。１０μＭでの結合の５０％未満の阻害が、５７のカウンタースクリーン標的のいずれにも見出された。Ａ１受容体に対するＡ２Ａ受容体の選択性は、ヒトでは８７２倍、マーモセットでは２７００倍、ラットでは５００倍、マウスでは９７倍、イヌでは１５９０倍である。種々の他の受容体のサブタイプ（ＤＡ、５ヒドロキシトリプトファン［５−ＨＴ］、アセチルコリン［Ａｃｈ］、ＧＡＢＡ、グルタミン酸［Ｇｌｕ］、アヘン、カンナビノイド）、イオンチャネル（カルシウム、カリウム）及び輸送体（アデノシン、モノアミン、セロトニン、ドーパミン、及びノルエピネフリン）に対しては、ほとんど又は全く親和性が見出されなかった。
【００１９】
【表１】
2017536400.tif 000004
【００２０】
本発明の実施例１に示される通り、化合物５０４の薬物動態的（ＰＫ）／薬力学的（ＰＤ）関係は、ラット線条体Ａ２Ａ占有率（実施例１）及びより臨床的に意義のあるＭＰＴＰ病変マーモセットにおける障害逆転スコア（実施例２）を利用して評価された。
【００２１】
約８０％の受容体占有率を与えるＡ２Ａ拮抗剤の投与は、ほとんどの場合で、臨床的に意義のある応答を誘導するのに十分であると仮定することができる（Ｍｉｈｒａｒａ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｎｕｃｌ  Ｍｅｄ（２００８）４９：１１８３−１１８８及びＢｒｏｏｋｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｓｙｎａｐｓｅ（２００８）６２：６７１−６８１）。
【００２２】
臨床的に意義のある効能に対してこの８０％という最低Ａ２Ａ占有率を仮定することにより、ＰＫ／ＰＤ試験をラット及びマーモセットで実施した。１２５０ｎｇ／ｍＬのＥＣ８０血漿濃度が、図１、実施例１に示される通り、ラット占有率ＥｍａｘＰＫ／ＰＤモデルから予測された。マーモセットでは、対応する１７５ｎｇ／ｍＬのＥＣ８０血漿濃度がＥｍａｘＰＫ／ＰＤモデリング（図２、実施例２）から予測された。これらの値に基づき、０．６〜０．８Ｌ／時の経口クリアランス並びにヒト、ラット及びマーモセットにおける等しい血液：脳比率を仮定して、ヒトの用量範囲を予測できる。このモデルを利用して、１日量が３ｍｇ以上であり、２４ｍｇにもなり得ることが予測された。
【００２３】
１０ｍｇ用量は、このクラスの化合物で観察されるカフェイン様副作用のいずれかを誘導するほど高くなく臨床効果を有するに十分高いと仮定されるため、ＰＫ／ＰＤモデリングに基づいて臨床的に意義があると考えられた。
【００２４】
したがって、第１の安全性及び忍容性試験において、１０ｍｇ用量を試験した。試験は、単一の投与量（１ｍｇ、５ｍｇ、又は１０ｍｇ）を投与された、全体で１７名の健康な若い男性（１８〜４５歳）、１９名の健康な年配の男性（５５〜７５歳）、及び１４名の健康な年配の女性（５５〜７５歳）で実施された無作為、二重盲検、プラセボ対照、単回投与試験であったが、１２名の対象は、単一の投与量５ｍｇを３回の別の機会に投与された（実施例３）。１４Ｃ標識された化合物が若い男性の１０ｍｇ投与量に含められ、食物効果も１０ｍｇで試験された。この試験の結果は、多くの患者が不眠を患い、５ｍｇ用量ですらこれらの副作用が起こったため、１０ｍｇ用量が最大耐性量であったことを示した。
【００２５】
ヒトにおけるこの第１の試験は、１０ｍｇと５ｍｇとの両用量が臨床的に有効であり、そのためＰＫ／ＰＤ占有率データを支持したことを示した。しかし、臨床用量は副作用を起こした。他方で、５ｍｇ未満になると、得られる臨床効果及び受容体占有率に関して懸念を与えた。
【００２６】
臨床的に意義のある用量が、ラット及びマーモセットのＰＫ／ＰＤデータを観察することにより仮定され得るものより低いようであるため、本発明者らは、ヒトにおける陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）試験を実施して化合物５０４のヒト占有率を調査することを決心した（図３、実施例４）。この試験は、トレーサー［１１Ｃ］−ＳＣＨ４４２４１６を使用して健康な若い男性における単回経口投与後のＡ２Ａ受容体での占有率を調査する画像下の、非盲検、ＰＥＴ試験であった。全体で６名の健康な若い男性が０．５ｍｇ〜５ｍｇの単回経口投与量を投与された。驚くべきことに、本発明者らは、有害事象の最低リスクを有する臨床的に効果のある１日量が、ヒトにおいて３ｍｇほどの低い用量、又はさらには２ｍｇの用量で実現可能のようであることを見出した（図３、実施例４）。用量が低ければ、高用量の化合物５０４で観察された有害事象、とりわけ不眠及び睡眠相リズム障害（ｓｌｅｅｐ  ｐｈａｓｅ  ｒｈｙｔｈｍ  ｄｉｓｔｕｒｂａｎｃｅ）だけでなく、５ｍｇ及び１０ｍｇ用量で観察された、めまい、疲労、頭痛、多汗症、起立性低血圧症、及び動悸を含むこのクラスの化合物に関連する他のカフェイン様徴候及び症状が最小限になるため、これは、治療される対象にとって非常に有益である（実施例３）。
【００２７】
したがって、本発明は、０．５ｍｇ〜３ｍｇ、１ｍｇ〜３ｍｇ、２ｍｇ〜３ｍｇ、約２ｍｇ又は２ｍｇなど、３ｍｇ以下の１日用量で医薬品として使用される化合物５０４の使用に関する。とりわけ、化合物はＰＤの治療に使用され得る。
【００２８】
さらなる態様において、化合物は、０．５ｍｇ〜３ｍｇ、１ｍｇ〜３ｍｇ、２ｍｇ〜３ｍｇ、又は約２ｍｇ若しくは２ｍｇなど、３ｍｇ以下の１日用量を含む医薬組成物又は例えば錠剤中で使用され得る。
【００２９】
本発明のさらなる目的は、ＡＤＨＤにおける治療のための化合物５０４を提供することである（実施例５）。化合物５０４は、ＣＧＳ２１６８０誘導性の自発運動の低下の強固なインビボの逆転を引き出すことができる強力な経口的に活性のあるＡ２Ａ受容体拮抗剤であることが示された。適当な用量曝露範囲にわたって、化合物５０４は、Ａ２Ａ受容体の拮抗作用と一致する注意機能（ａｔｔｅｎｔｉｏｎａｌ  ｐｅｒｆｏｍａｎｃｅ）の局面も改善させた。したがって、これらの作用は、注意欠陥の治療における化合物５０４の可能性を支持する。したがって、化合物５０４をＡＤＨＤの治療に使用することができる。１日用量は、０．５ｍｇ〜３ｍｇ、１ｍｇ〜３ｍｇ、２ｍｇ〜３ｍｇ、又は２ｍｇなどの３ｍｇ以下であり得る。
【００３０】
化合物５０４の平均半減期は用量段階にわたって類似しており、１９〜２５時間の範囲であった。したがって、化合物５０４は、１日１回与えることができ、医薬品を服用した２４時間後に対象が朝目覚めるときに作用するという点で、例えばＡＤＨＤを治療するための市販されている他の薬物と非常に異なる。ＡＤＨＤにおけるほとんどの他の薬物は、メチルフェニデートでは２〜１２時間、リスデキサンフェタミンの場合には８〜１４時間のみ作用するため、又は５〜７時間の半減期のため、１日２回与えられる他のＡ２Ａ拮抗剤Ｖ−８１４４４と比較してより定期的に与えられなければならない。
【００３１】
例えば錠剤の使用による経口投与を例とする、療法に最も効果的な投与経路を選択することが望ましい。
【００３２】
錠剤などの経口投与に好適な製剤は、例えば、賦形剤（例えば、ラクトース及びマンニトール）、崩壊剤（例えば、スターチ）、滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム）、結合剤（例えば、ヒドロキシプロピルセルロース）、界面活性剤（例えば、脂肪酸エステル）、及び可塑剤（例えば、グリセリン）を使用して製造できる。
【００３３】
非経口製剤は、経口製剤の上記説明に記載された賦形剤、崩壊剤、滑沢剤、結合剤、界面活性剤、及び可塑剤から選択される１種以上の補助的な成分及び希釈剤、防腐剤、香料なども含み得る。
【００３４】
上述の用途の場合、一般に、化合物５０４又はその薬学的に許容できる塩は、経口投与されても、非経口投与されてもよい。
【００３５】
これに関連して、用語「治療」及び「治療すること」は、疾病に対応する目的の患者の管理及び手当を意味する。この用語は、症状若しくは合併症の緩和、疾病の進行の遅延、症状及び合併症の緩和若しくは軽減、並びに／又は疾病の治癒若しくは根絶のための活性化合物の投与など、患者が罹患している所与の疾病の全スペクトルの治療を含むものとする。治療すべき患者は、好ましくは哺乳動物、とりわけヒトである。これに関連して、「疾病」は、障害、病態、機能障害、機能不全などと同義に使用できる。
【実施例】
【００３６】
実施例１
ラットにおける線条体のＡ２Ａ占有率をエクスビボオートラジオグラフィーにより調査した
試験は、雄のラット（雄のＣＤラット（８週齢、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｊａｐａｎ）への化合物５０４の単回経口投与後の線条体中の受容体占有率を調査した。トリチウム標識されたＳＣＨ５８５６１（０．３ｎｍｏｌ／Ｌ、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ製）を、Ａ２Ａ受容体をイメージングするためのトレーサーとして使用した。受容体占有率を、化合物５０４を投与したラットから得た脳切片と共にトレーサーをインキュベートすることにより決定した。
【００３７】
化合物５０４（０．０６ｍｇ／ｍＬ）を５ｍＬ／ｋｇ（０．３ｍｇ／ｋｇ）の体積でラットに経口投与し、投与の６時間及び８時間後にジエチルエーテルにより麻酔した。その後、動脈血及び静脈血を、ヘパリンを含むチューブに回収した。その直後に脳を取り除き、ＯＣＴコンパウンドに包埋し、ドライアイスにより冷却した２−メチルブタン中で凍結させた。凍結した脳を使用まで−８０℃で保存した。
【００３８】
ほぼブレグマ１．２ｍｍでの頭頂の切片（２０μｍ）を、クライオミクロトーム（Ｃｏｌｄｔｏｍｅ、設定温度−２０℃）、Ｓａｋｕｒａ）を使用して調製し、スライドグラスに載せた（Ｓｕｐｅｒ  Ｆｒｏｓｔ、松浪硝子；グラスあたり２又は３つの切片）。スライドグラス上に集めた脳切片を−８０℃で保存した。トレーサーを０．１又は０．３ｎｍｏｌ／Ｌで含む７０μＬの反応溶液を脳切片に適用し、室温において事前に設定した時間にわたりインキュベートした。トレーサーを含む反応液を、シリコーン処理された道具で取り扱った。トレーサーとのインキュベーション後、脳切片を１分間にわたり氷冷洗浄溶液により３回洗浄し、氷冷水で２回すすいだ。トレーサーの非特異的結合を、薬物により処置されていないラットから調製した脳切片と共に、０．１ｍｍｏｌ／ｌのＮＥＣＡの存在下で同じ反応を実施することにより評価した。脳切片を室温で乾燥させ、カセット中でイメージングプレート（ＢＡＳ−ＴＲ２０４０、富士フィルム）に露光し、シールドボックス中に約２４時間置いた。以下の条件で放射能を記録した：解像度：５０μｍ；階調：２５６；感度：１００００；ラチチュード：５。
【００３９】
血漿試料の較正曲線を、化合物５０４をアセトニトリルで希釈して、０．０１、０．０３、０．１、１、１０、及び３０μｇ／ｍＬの化合物５０４を含む溶液を調製することにより作成した。溶液を１体積％のアセトニトリル濃度で対照血漿試料に加えて、０．１、０．３、１、１０、１００、及び３００ｎｇ／ｍＬの化合物５０４を含む血漿試料を調製した。これらの血漿試料を較正曲線試料として使用した。
【００４０】
血漿試料を事前処理するために、内部標準（Ｉ．Ｓ．）をアセトニトリルに溶解させて、０．０３μｇ／ｍＬのＩ．Ｓ．溶液を調製した。血漿試料を、必要な場合は随時、対照血漿で希釈した。０．１ｍＬの血漿試料に１０μＬのＩ．Ｓ．溶液及び１ｍＬの１０ｍｍｏｌ／Ｌ酢酸アンモニウムを加え、撹拌して事前処理用の試料を調製した。Ｏａｓｉｓ  ＨＬＢ  Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ  Ｐｌａｔｅ（３０ｍｇ、Ｗａｔｅｒｓ）を使用して試料を事前処理した。各ウェルを連続的に１ｍＬのメタノール及び水で調整した。事前処理用の１ｍｌの試料をウェルにロードした。各ウェルを１ｍＬの５体積％のメタノールで洗浄した後、分析物を１ｍＬのアセトニトリルで溶出した。溶出液を窒素ガス気流下で蒸発させ、残渣を０．１ｍＬの再構成された溶液に再溶解させた。ＵＮＦＩＬＴＥＲ（０．４５μｍ親水性ＰＶＤＦ、Ｗｈａｔｍａｎ）を使用して、試料を４℃、約１８００×Ｇで５分間遠心分離した。濾液のアリコートを分析に使用した。
【００４１】
線条体中のＡ２Ａ受容体占有率を、以下の式を使用して計算した。
Φ（％）＝（１−（ＰＳＬＫＷ−ＢＧ／Ａ）／（ＰＳＬＣｔｒｌ−ＢＧ／Ａ））×１００
式中、ＰＳＬＫＷ−及びＰＳＬＣｔｒｌは、それぞれ化合物５０４未処置及び処置された動物のＲＯＩにおけるＰＳＬ値である。ＰＬＳは、トレーサーの検出のための輝尽性ルミネッセンスであり、ＲＯＩは、線条体中のトレーサー測定のための関心領域である。
【００４２】
各動物中の受容体占有率として、２又は３つの切片（４〜６つのＲＯＩ）の平均値を使用した。
【００４３】
血漿中の化合物５０４の濃度と捕捉体（ｃａｐｔｏｒ）占有率との関係を図１に示す。ＥＣ５０は１２１ｎｇ／ｍＬであった（９５％信頼区間、１１３〜１２８ｎｇ／ｍＬ）。
【００４４】
実施例２
ＭＰＴＰ病変マーモセット中のＡ２Ａ占有率
化合物５０４のＰＫ／ＰＤ関係を、８０％ヒト線条体Ａ２Ａ占有率がパーキンソン治療に必要であるという予測により、より臨床的に意義のあるＭＰＴＰ（１−メチル−４−フェニル−１，２，３，６−テトラヒドロピリジン）病変マーモセットモデルにおける障害逆転スコアを利用して評価した（Ｒｏｓｅ  ｅｔ  ａｌ（２００６）Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊ  Ｐａｒｍ，５４６，８２−８７；Ｕｃｈｉｄａ  ｅｔ  ａｌ（２０１４）Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｓｃｉ，１２４，４８０−４８５；Ｋａｎｄａ  ｅｔ  ａｌ（２００）Ｅｘｐ  Ｎｅｕｒｏｌ，１６２，３２１−３２７）。
【００４５】
マーモセットをＰＫ／ＰＤ測定に使用する前に、マーモセットにいくつかのＭＰＴＰレジメンを与えた（単一のＭＰＴＰレジメン：３連続日で１日あたり２ｍｇ／ｋｇ、皮下）。
【００４６】
最初に、ラット血漿濃度対受容体占有率の関係を、セミコンパートメントＰＫモデル（平衡半減期＜０．５時間）を使用する潜在的なヒステリシスを評価した後で、エクスビボ切片オートラジオグラフィーに基づく側頭線条体のＡ２Ａ占有率（０．３ｍｇ／ｋｇでの）のＰＫ／ＰＤモデリングにより（Ｅｍａｘ効果モデル）確立した。ラット線条体の占有率のＥＣ８０を、ＰＫ／ＰＤモデリングから１２５０ｎｇ／ｍＬであると予測した（図１も参照）。
【００４７】
第２に、ＭＰＴＰ処置マーモセット（０．１〜３ｍｇ／ｋｇ）の血漿濃度対障害逆転スコアのＰＫ／ＰＤモデリング（Ｅｍａｘ効果モデル）を、フィットされたラット占有率曲線から外挿された＞５０％のＡ２Ａ占有率に相当する１７５ｎｇ／ｍＬという予測されたＥＣ８０により確立した。ヒト投与量予測のためのＥＣ８０Ａ２Ａ占有率に必要な血漿濃度に関連するマーモセットにおける線条体の占有率データが全くない状態で、３〜２４ｍｇの１日量範囲を、ラット線条体の占有率の予測されたＥＣ５０−８０血漿濃度及びマーモセット障害逆転スコアに基づいて確立した。
【００４８】
図２に、ラットＡ２Ａ占有率及びＭＰＴＰ処置マーモセット障害逆転スコアに基づくＰＤ患者における予測された治療上有効なＥＣ５０−８０化合物５０４血漿濃度範囲を示す。
【００４９】
実施例３
安全性及び忍容性試験
試験の主な目的は、ボディマス指数（ＢＭＩ）が１９以上２９ｋｇ／ｍ２以下である、１８歳以上４５歳以下の健康な若い男性と、５５歳以上７５歳以下の年配の男性及び女性とに単回投与として与えられた化合物５０４の安全性及び忍容性を調査することであった。試験は、３つのパート：パートＡ、Ｂ、及びＣで実施した。
【００５０】
パートＡ及びＢは、それぞれ若い健康な男性と年配の男性及び女性とにおける安全性及び忍容性を決定するための単一用量漸増であった。３つの投与量（コホートＡ１〜Ａ３）を健康な若い男性で試験した：１ｍｇ（Ｎ＝６）、５ｍｇ（Ｎ＝６）、及び１０ｍｇ（Ｎ＝５）；プラセボ（Ｎ＝８、合計で３つのコホート）。１４Ｃ標識された化合物５０４（２５０ｎＣｉ）を、健康な若い男性に与えられる１０ｍｇ投与量に含めた。２つの投与量（コホートＢ１及びＢ２）を、健康な年配の男性及び女性で試験した：５ｍｇ（Ｎ＝９名の男性／４名の女性）、１０ｍｇ（Ｎ＝４名の男性／４名の女性）；プラセボ（Ｎ＝６名の男性／４名の女性、全体で３つのコホート）。パートＣにおいて、反復された単回投与を利用して、可能性のある食物の効果及び化合物５０４の投与後の対象内変動を調査した。全部で１２名の健康な年配の男性（Ｎ＝６）及び女性（Ｎ＝６）はそれぞれ、３回の別の機会に５ｍｇの化合物５０４の単回投与を無作為に受け取った。１回の機会には、化合物５０４をＦＤＡ標準高脂肪朝食後に投与し、２回の機会には、化合物５０４を一晩絶食後に投与した。少なくとも７日の休薬期間が各用量投与を分離した。パートＡ及びＢにおいて化合物５０４を経口溶液（０．２５ｍｇ／ｍＬ）として投与し、パートＣにおいて化合物５０４を固形製剤（５ｍｇカプセル）として投与した。
【００５１】
試験のパートＡ、Ｂ、及びＣにおいて決定された化合物５０４の薬物動態パラメーターを以下にまとめる。
【００５２】
【表２】
2017536400.tif 000005
【００５３】
【表３】
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【００５４】
【表４】
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【００５５】
パートＡ及びＢの結果は、化合物５０４が各投与量で迅速に吸収され、ｔｍａｘ中央値が投与後０．７５〜１．７５時間であることを示した。Ｃｍａｘに到達した後、化合物５０４の血漿濃度は、投与のおよそ５時間後まで横ばい状態であった。その後、平均血漿濃度は下がったが、個別の血漿濃度は変動した。ＡＵＣ０−２４及びＣｍａｘにより決定される化合物５０４への曝露は、投与量範囲１〜１０ｍｇでほぼ用量に比例して増加したようであった。平均のｔ１／２は投与量にわたって類似であり、１９〜２５時間の範囲であった。
【００５６】
パートＢにおいて、男性と女性との間で化合物５０４への曝露で顕著な差は全くなかった。平均ｔ１／２は、全般的に、両性間で類似であり、５及び１０ｍｇ投与量の間で類似であった。
【００５７】
健康な若い対象と年配の対象との間で、化合物５０４の薬物動態プロファイルに明らかな差は全くなかった。
【００５８】
パートＣにおいて、食物は化合物５０４の吸収を遅くさせた。中央値ｔｍａｘは、摂食状態においておよそ２〜３時間遅く起こった。平均Ｃｍａｘは、絶食状態よりも摂食状態においておよそ２３％低かった。ＡＵＣ０−ｉｎｆ及びＡＵＣ０−ｔに基づく全体的な曝露は、絶食状態に比べて摂食状態において、化合物５０４の５ｍｇの投与後に統計的に有意に異なってはいなかった。各食事状態において、化合物５０４への全体的な曝露（平均ＡＵＣの検討に基づく）は、女性よりも男性で高いようであった。男性では、絶食投与にわたる対象内変動（ＣＶ％）は低く、ＡＵＣ０−ｉｎｆ及びＣｍａｘでそれぞれ２７％及び１６％であった。女性では、変動性は高く、ＡＵＣ０−ｉｎｆ及びＣｍａｘでそれぞれ５９％及び２３％のＣＶ％であった。
【００５９】
パートＡにおいて、１、５、及び１０ｍｇの化合物５０４の単回投与を健康な若い男性に投与した。
【００６０】
全体で、化合物５０４投与群の１７名の対象のうち１３名が３６のＡＥを有し、プラセボ群の８名の対象のうち２人が３のＡＥ（有害事象）を有した。
【００６１】
不眠は最もよくみられた有害事象であり、化合物５０４の５ｍｇ群の４名の対象に、及び化合物５０４の１０ｍｇ群の５名全員の対象により報告された。不眠は、プラセボ群の対象にも、化合物５０４の１ｍｇ群の対象にも報告されなかった。不眠は、一般的に投与後およそ１４〜１６時間で報告され、およそ２３：００〜０１：００の時刻に相当した。不眠の８つの事象は軽度であり、１つは中程度であった。不眠は、一般的に２．５〜６．２５時間内に解消した。２名の対象において、不眠はおよそ２日間続いた。
【００６２】
パートＢにおいて、５ｍｇ及び１０ｍｇの化合物５０４の単回投与を健康な年配の男性及び女性に投与した。
【００６３】
全体で、化合物５０４投与群の２１名の対象のうち１６名が５３のＡＥを有し、プラセボ群の１０名の対象のうち５名が７のＡＥを有した。
【００６４】
化合物５０４の１０ｍｇ群で３名の対象が５つの重度な有害事象を有した。１名の女性が、不眠、感情の変動（ａｆｆｅｃｔ  ｌａｂｉｌｉｔｙ）、及び落ち着きのなさを有した。１名の男性が血圧上昇を有した。１名の女性が心室期外収縮を有した。心室期外収縮は遠隔測定法の間に起こり（およそ投与３時間後）、期外収縮は間欠的に投与の１日と４時間後まで見られた。対象は、試験完了後、独立した外部の心臓専門医にまわされ、対象は診察され、類似の事象がホルター心電図記録で投薬から５１日後に検出された。
【００６５】
パートＢの化合物５０４投与群で最高の発生率を有するＡＥは不眠及び落ち着きのなさであり、試験のパートＡの知見と一致した。１０ｍｇ投与量は、年配の対象において最大耐用量に近いと考えられた。
【００６６】
パートＣにおいて、健康な年配の対象に投与された５ｍｇの化合物５０４の単回投与は、摂食及び絶食状態で与えられる場合に安全であり、かつ忍容された。
【００６７】
全体で、１２名の対象のうち１１名が９０のＡＥを有し、そのうち１５の事象が中程度であり、３つの事象が重度であった。３つの重度の事象：落ち着きのなさ、感情の変動、及び注意力障害は１名の対象に起こり、それぞれ化合物５０４（５ｍｇ、絶食）の第３の単回投与後の投与後３０分、１時間、及び１時間に起こった。事象は、治療なしに１．５日後に解消し、この時間の間、対象は中程度の不安及び軽度の不眠も有した。
【００６８】
最高の発生率を有するＡＥは不眠であり、軽度不眠の１２の事象及び中程度不眠の２の事象があった。この知見は、試験のパートＡ及びＢの知見と一致した。
【００６９】
実施例４
Ａ２Ａ受容体占有率を調査するヒトのＰＥＴ試験
試験は、若い健康な男性において化合物５０４の単回経口投薬後に、［１１Ｃ］−ＳＣＨ４４２４１６をトレーサー化合物として使用してＡ２Ａ受容体占有率を調査する非盲検の陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）試験として設計された。
【００７０】
試験は、スクリーニング期間、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）スキャン、安全性ベースライン、治療期間（ベースラインＰＥＴスキャン、化合物５０４投薬、及び２回の治療ＰＥＴスキャン）、及び経過観察からなっていた。
【００７１】
試験には、それぞれ２名の対象を含む３つのコホートがあった。コホートＡ１中の２名の対象は５ｍｇの化合物５０４を受け取り、コホートＡ２において、１名の対象は０．５ｍｇの化合物５０４を受け取り、１名の対象は１ｍｇの化合物５０４を受け取り、コホートＡ３において、１名の対象は２ｍｇの化合物５０４を受け取り、１名の対象は３ｍｇの化合物５０４を受け取った。
【００７２】
対象の数、化合物５０４の投与量、及び評価時点を見直し、先のコホートから得た予備的な薬物動態的、薬力学的並びに安全性及び忍容性データに基づいて調整した。
【００７３】
スクリーニング期間（−２８日目〜−４日目）において、安全性スクリーニング手順を実施し、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）スキャン（−２１日目〜−２日目）後に対象適格性を確認した。適格な対象を−１日目にクリニックに入院させた。１日目に、化合物５０４の単回投与を受ける前に、ベースラインＰＥＴスキャンを実施した。第２のＰＥＴスキャン（ＰＥＴ２）は、投与のおよそ２時間後に実施し、これは、最大の化合物５０４血漿濃度の推定される時間（ｔｍａｘ）であった。コホートＡ１の対象は、投与のおよそ２４時間後に第３のＰＥＴスキャン（ＰＥＴ３）を有し、コホートＡ２及びＡ３の対象は、投与のおよそ２６時間後に第３のＰＥＴスキャン（ＰＥＴ３）を有した。対象は、各ＰＥＴスキャンの直前にＰＥＴトレーサー［１１Ｃ］−ＳＣＨ４４２４１６を受け取った。
【００７４】
全対象を、−１日目〜４日目の投与後７２時間の安全性評価の完了までクリニックに拘束した。経過観察評価を６日目に実施した（１日前及び２日後まで）。各対象で、スクリーニングから経過観察までの試験の全期間は、およそ２．５〜３．５週間であった。
【００７５】
ＰＥＴトレーサー、［１１Ｃ］−ＳＣＨ４４２４１６は、放射線医薬品として、１１ｍＬの滅菌及びパイロジェンフリーのタイプ１ガラスバイアル中に静脈内投与用の液剤として提供された。［１１Ｃ］−ＳＣＨ４４２４１６溶液は、１０％までのエタノール及び９０％の生理食塩水からなり、およそ２０ｍＬの生理食塩水／エタノール溶液中の静脈内ボーラス剤として、およそ２０秒にわたり投与した。各対象は、各ＰＥＴスキャンにおいて最大で５００ＭＢｑの［１１Ｃ］−ＳＣＨ４４２４１６を受け取った。
【００７６】
所定の時点で、血液試料を化合物５０４の薬物濃度分析用に抜き取り、安全性及び忍容性を評価した。
【００７７】
主な組入れ基準
ボディマス指数（ＢＭＩ）が１８．５〜３０ｋｇ／ｍ２（両端を含む）である２５〜５５歳（両端を含む）の男性。
【００７８】
薬物動態的評価
化合物５０４の以下の薬物動態パラメーターを各対象で計算した：零から無限までの血漿濃度−時間曲線下面積（ＡＵＣ０−ｉｎｆ）；零から時間ｔｌａｓｔまでの血漿濃度−時間曲線下面積（ＡＵＣ０−ｔ）；最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）；各投与後ＰＥＴスキャンに対して計算されたＰＥＴスキャニングの時点での血漿濃度（ＣＰＥＴ）；経口クリアランス（ＣＬ／Ｆ）；血漿中の見かけの消失半減期（ｔ１／２）；Ｃｍａｘの発生に対応する公称時間（ｔｍａｘ）；最後の定量可能な濃度の時間（ｔｌａｓｔ）及び見かけの分布容積（Ｖｚ／Ｆ）。
【００７９】
薬力学評価
単純化参照組織法（ｓｉｍｐｌｉｆｉｅｄ  ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  ｔｉｓｓｕｅ  ｍｅｔｈｏｄ（ＳＲＴＭ））を利用して、ＰＥＴデータを分析した。この方法は、標的受容体がないこと以外標的に富む領域に類似している参照領域（この場合は小脳）を仮定した。利用したＳＲＴＭ装置は、非置換性成分に対する結合能（ＢＰＮＤ）を直接推定し、これは特異的結合の尺度として考えることができる。
【００８０】
次いで、関心領域（ＲＯＩ）中の受容体占有率（ＲＯ）を、
ＲＯ＝１００×（１−ＢＰＮＤ（投与後）／ＢＰＮＤ（ベースライン））
として直接計算できる。背側の被殻及び淡蒼球は、最高の特異的シグナルを有する２つのＲＯＩであったため、これらのＲＯＩに対してＲＯを計算した。
【００８１】
統計の方法論
以下の解析対象集団を利用した：
総被験者集団（ＡＳＴＳ）  −  化合物５０４を投与され、そのため［１１Ｃ］−ＳＣＨ４４２４１６を投与された全対象。
【００８２】
薬力学集団（ｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎａｍｉｃｓ  ｓｅｔ）（ＰＤＳ）  −  少なくとも１つの正当なＩＭＰ後ＰＥＴスキャン及び対応するＣＰＥＴの正当な評価を有した全対象。
【００８３】
化合物５０４の薬物動態パラメーターを、ノンコンパートメント分析を利用して推定した。
【００８４】
結合能及び推定されたＲＯを列記し、ＣＰＥＴに対してグラフで表した。
【００８５】
化合物５０４の血漿濃度と推定されたＡ２Ａ受容体占有率との間の経時的な関係を、Ｅｍａｘモデルを適用して回帰により分析し、調査した。
【００８６】
結果
図３は、Ｅｍａｘを利用して推定したＰＥＴスキャンの時点での被殻中の受容体占有率対化合物５０４血漿濃度を示す。
【００８７】
化合物５０４は、１〜２時間のｔｍａｘで迅速に吸収され、これは、最初の投与後ＰＥＴスキャン（ＰＥＴ２）の時間に相当した。推定されたＥｍａｘ及びＥＣ５０値は、被殻中で８８％及び３１．０ｎｇ／ｍＬ並びに淡蒼球中で１０１％及び６８．９ｎｇ／ｍＬであった。Ｅｍａｘモデルは、全般的に被殻データに良好にフィットしているようであり、変動性は淡蒼球データで高かった。両解析集団の残りのプロットは、モデルの仮定が不適切であることを示唆する証拠を全く示さなかった。
【００８８】
これらのデータから、３ｍｇ以下の用量が８０％の占有率に達するのに十分であることが明らかである。
【００８９】
実施例５
この試験の目的は、注意の試験、５−選択反応時間課題（５−ＣＳＲＴＴ；Ｒｏｂｂｉｎｓ，Ｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ（Ｂｅｒｌ）（２００２）１６３（３−４）：３６２−８０．）におけるロングエバンスラットの作業に対する化合物５０４を調査することである。
【００９０】
試験は３相からなっていた。
（１）選択的Ａ２Ａ受容体作動剤ＣＧＳ２１６８０により誘導される自発運動の低下に対する化合物５０４の調査（Ｈｉｇｇｉｎｓ  ｅｔ  ａｌ  Ｂｅｈａｖ  Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ（２００７）；１８５（１）：３２−４２）。この試験は、中枢を介したＡ２Ａ受容体媒介性応答を機能的に遮断するのに必要な化合物５０４の投与量を確立する薬力学アッセイとして機能する。化合物５０４の血漿濃度も、行動試験と等しい時点で測定して、薬物の薬理学的に意義のある投与量での血漿曝露を決定した。
【００９１】
（２）（１）で確立された投与量に基づき、化合物５０４を、作業の別個な局面に対する薬物の効果を測定するように設計された５−ＣＳＲＴＴの４つの変形体で試験した。（Ａ）標準的な条件下での試験、すなわち、動物が訓練された最終的条件と等しく、すなわち、刺激持続時間（ＳＤ）０．７５秒、試行間間隔（ＩＴＩ）５秒、１００試行。この条件の目的は、標準的な条件下での作業に対する薬物効果を測定することである。（Ｂ）延長された（長い）ＩＴＩの条件下での試験、すなわち、低いイベント発生率（ｅｖｅｎｔ  ｒａｔｅ）、ＳＤ  ０．３秒、ＩＴＩ  ５、７．５、１０秒、１２０試行。この条件の目的は、動物がその反応を遅らせなければならない低いイベント発生率下での作業に対する薬物の効果を測定することである。（Ｃ）短いＩＴＩの条件下での試験、すなわち、高いイベント発生率、ＳＤ  ０．３秒、ＩＴＩ  ３、４、５秒、１２０試行。この条件の目的は、動物が知覚情報を迅速に処理しなければならない高いイベント発生率下での作業に対する薬物効果を測定することである。（Ｄ）延長された試行の条件下での試験、すなわち、ＳＤ  ０．３秒、ＩＴＩ  ５秒、２５０試行。この条件の目的は、持続的注意又は警戒を試験する、延長された試行下での作業に対する薬物効果を測定することである。
【００９２】
（３）試験装置に十分に慣らされたラットのベースライン自発運動活性に対する化合物５０４の調査。
【００９３】
０．０１、０．０３、０．０６、０．１ｍｇ／ｋｇの投与量を、蒸留水中の０．５ｗ／ｖ％メチルセルロース４００（粘度：４００ｃＰ）の剤形で試験した。薬物を５ｍｌ／ｋｇの体積で経口投与した。
【００９４】
第１相：
月齢３か月の６０匹の雄のロングエバンスラットを、群あたりＮ＝１０ラットの６群に割り当てた。６群を以下の表に列記する。
【００９５】
【表５】
2017536400.tif 000008
【００９６】
化合物５０４を活動性試験の６０分前に強制経口投与により投与した。ＣＧＳ２１６８０を活動性試験の１０分前に皮下投与した。ラットの自発的な活動性をモニターする活動性試験を自動のＭｅｄ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ活動性試験チャンバーで２０分間測定した。トラッキングアリーナ（ｔｒａｃｋｉｎｇ  ａｒｅｎａ）は幅１７インチ×長さ１７インチ×高さ１２インチの寸法であり、センサーバーはフロアの１インチ上に固定されて移動距離を探知し、第２のセットのセンサーバーはフロア上６インチに位置して垂直方向の動き及び立ち上がり活動を測定した。トラッキングソフトウェアに設定したパラメーターは、解像度  −  ５０ｍｓ、ボックスサイズ  −  ４ビーム、休止遅延時間  −  ５００ｍｓ、及び歩行トリガー  −  ２であった。
【００９７】
１週間の休薬期間後、活動性試験に使用される２０匹のラットを、群あたりｎ＝５の４つの新たな群に再び割り当て、それぞれ、活動性試験に使用した投与量（０．０１、０．０３、０．０６、及び０．１ｍｇ／ｋｇ）の化合物５０４で処置した。最低で４００μＬの全血を薬物投与後１０分、２０分、６０分、及び１２０分に、すなわち活動性試験（及び第２相：５−選択実験）と一致する時点で伏在静脈の出血により回収した。血液を回収し、Ｋ３  ＥＤＴＡチューブに移した。チューブを室温でおよそ２分間静置し、遠心分離まで氷上に配置した。血液を遠心分離機中において３，５００ｒｐｍの速度で１５分間にわたり４℃で回転させた。血漿を分離し、ラベルの付いた０．７５ｍｌのＭａｔｒｉｘチューブに入れて、蓋をした。血漿チューブをＭａｔｒｉｘラックに入れ、−８０℃の冷凍機中で保存した。心臓穿刺による採血後、最後の時点（薬物投与後１２０分）で脳組織を取り出し、中線に沿って二等分した。小脳のない一方の半球を１５ｍｌの事前に秤量した脳チューブに入れ、もう一方の部分を処分した。脳チューブを秤量し、ドライアイス上で冷凍し、−８０℃で保存した。脳組織及び血漿試料をドライアイス上で治験依頼者に発送した。化合物５０４の血液及び脳レベルは、治験依頼者により実施される予定であった。
【００９８】
第２相：
１６匹の実験されたことがない雄のロングエバンスラットを、およそ２〜３か月の期間にわたり５−ＣＳＲＴＴにおける漸近的な作業をするように訓練した。ラットを、０．７５秒の最終刺激持続時間（ＳＤ）、５秒の試行間間隔（ＩＴＩ）、５秒の制限時間（ＬＨ）、セッションあたり１００試行に訓練した。これらの条件下での標的作業レベルは、８０％超の正確度及び２０％未満の不完全の範囲であった。化合物５０４による薬物試験は、作業が安定になると始まった。
【００９９】
群の動物が訓練されると、種々の実験課題に従って（以下の表２参照）複数の薬物試験を、同じコホートのラットで試験した。第１相の成果に基づいて化合物５０４の投与量を確立した。試験設計は、４つの実験でできており、それぞれの実験は２〜３週間継続し、各実験の間に入る１週間の期間があった。
【０１００】
【表６】
2017536400.tif 000009
【０１０１】
第３相：
１６匹の雄のロングエバンスラットを、３回の９０分のセッションにわたり、Ｍｅｄ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ試験活動性チャンバー（幅１７インチ×長さ１７インチ×高さ１２インチ）に慣らした。化合物５０４及びアンフェタミン（１ｍｇ／ｋｇ）の効果を、各処置サイクルの間に２〜３日の休薬期間を有する反復測定デザインを利用して、９０分のセッションにわたり運動挙動で調査した。全セッションの総移動距離及び立ち上がり回数が主な尺度であった。４種の投与量（０．０１、０．０３、０．０６、及び０．１ｍｇ／ｋｇ）の化合物５０４、単回投与（１ｍｇ／ｋｇ）のアンフェタミン、及びビヒクル対照を試験した。
【０１０２】
結果
Ａ２Ａ受容体作動剤ＣＧＳ２１６８０
ＣＧＳ２１６８０（例えば、Ｍｅｒｃｋ  Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから入手可能）（１ｍｇ／ｋｇ  ＳＣ）による事前処置は、ビヒクルにより事前処置されたラットで強固な自発運動の低下をもたらした。いずれも２０分の試験期間にわたり測定された総移動距離及び立ち上がりと定義された自発運動活性は、ビヒクル処置対照と比べて、それぞれ９２％及び９９％減少した。ＣＧＳ２１６８０の５０分前に経口投与された化合物５０４（０．０１〜０．１ｍｇ／ｋｇ）は、およそ（未計算）０．０６ｍｇ／ｋｇのＥＤ５０でＣＧＳ−自発運動の低下の用量依存性拮抗作用をもたらした。より高い０．１ｍｇ／ｋｇの投与量で、化合物５０４は、ＣＧＳ−誘導性の自発運動の低下を完全に逆転させた。化合物５０４の類似の効果を、立ち上がりの尺度及び歩行のエピソードに対しても認めた。正式な分析は、移動距離（Ｆ５，５６＝３３．９、Ｐ＜０．０１）、立ち上がり（Ｆ５，５６＝３５．１、Ｐ＜０．０１）及び歩行のエピソード（Ｆ５，５６＝３７．７、Ｐ＜０．０１）に対する処置の主な効果を明らかにした。それぞれの場合で、化合物５０４は、０．１ｍｇ／ｋｇ投与量がビヒクルベースラインである場合に０．０６及び０．１ｍｇ／ｋｇの投与量でＣＧＳ−自発運動の低下を大幅に逆転させた。
【０１０３】
化合物５０４により事前処置された動物から得た生物分析の尺度はＩＶＳにより実施したものではなかったが、これらのデータを行動の尺度との比較のために本報告に含める。化合物５０４は、投与量範囲０．０１〜０．１ｍｇ／ｋｇにわたり、規則的な投与量−血漿曝露関係を示した。ＣＧＳ−自発運動の低下の逆転と血漿［薬物］との間のほぼ直線の関係は、試験の時間に相当する６０分と９０分との両方のサンプリング期間で明らかであった。範囲１５０〜４００ｎｇ／ｍｌの血漿レベルは、これらの時点で、０．０３〜０．１ｍｇ／ｋｇ化合物５０４の薬理活性のある投与量範囲にわたって達成された。
【０１０４】
第２相：５−選択反応時間課題により測定した注意機能に対する化合物５０４の効果
およそ１０週間の期間にわたり、１６匹の雄のロングエバンスラットを５−ＣＳＲＴＴに対して訓練した。この群のうち、１５匹が、０．７５秒ＳＤ、５秒ＩＴＩ、１００試行、５秒ＬＨの最終ベースライン条件下で、８０％超の正反応及び２０％未満の不完全な試行という作業基準を確実に満たした。そのため、試験の大多数では、試料サイズは１５であり、全ラットが釣合の取れた順序で各処置を受けた。
【０１０５】
標準条件：化合物５０４（０．０１〜１ｍｇ／ｋｇ経口）を、最初に、標準的なベースライン条件下で５−ＣＳＲＴＴ作業で評価した。全部で１５匹のラットをこの試験コホートに使用した。処置の主な効果は、正確な潜時（Ｆ４，５６＝３．２６、Ｐ＝０．０２）及び尚早反応（Ｆ４，５６＝３．５３、Ｐ＝０．０１）で認められた。化合物５０４は、投与量０．０３〜０．１ｍｇ／ｋｇで反応する速度を著しく増加させ（すなわち、減少した正確な潜時）、尚早反応を増加させたが、これは０．１ｍｇ／ｋｇ投与量で有意に達したのみであった。正確％、正反応／誤反応数、不完全、マガジン潜時（ｍａｇａｚｉｎｅ  ｌａｔｅｎｃｙ）などの他の全尺度は、試験した投与量の化合物５０４により影響されなかった。
【０１０６】
長いＩＴＩ：次に、化合物５０４（０．０３〜０．０６ｍｇ／ｋｇ経口）を長いＩＴＩの条件下で試験した。コホートサイズは１５であった。ＩＴＩを延長することは、尚早反応（Ｆ２，２８＝９３．３、Ｐ＜０．０１）、並びに正解／不正解な試行及び不完全の数（Ｆ２，２８＞７．９、Ｐ＜０．０１）にも有意な効果を有したが、正確％及び正確な潜時は影響されなかった。化合物５０４（０．０６ｍｇ／ｋｇ）により増加した尚早反応（Ｆ２，２８＝４．２５、Ｐ＝０．０２）以外、いずれの尺度に対しても化合物５０４又はＬｕ×ＩＴＩ相互作用の主な効果はなかった。具体的には、長いＩＴＩ下で正確度を低下させる化合物５０４の有意でない傾向がこの同じ投与量で明らかであった（Ｆ２，２８＝２．６２、Ｐ＝０．０９）。
【０１０７】
この実験のデータを複数のＩＴＩで平均して処置に関しても分析した。処置の唯一の主な効果は尚早反応（Ｆ２，２８＝４．２４、Ｐ＝０．０２）であった。
【０１０８】
短いＩＴＩ：化合物５０４（０．０３〜０．０６ｍｇ／ｋｇ経口）を短いＩＴＩの条件下で試験した。コホートサイズは１４であった（１匹のラットは、作業の一貫性のなさのために除いた）。ＩＴＩを減少させることが課題の困難さを増加させる状況で、ＩＴＩを減少させることは、尚早反応、正確／不正確な試行数、不完全（Ｆ２，２６＞３．４２、Ｐ＜０．０５）に著しい効果を与えた。正確パーセントはＩＴＩにより影響を受けた（Ｆ２，２６＝３．６１、Ｐ＝０．０４）。正確％、誤反応、不完全、尚早反応に対する処置の主な効果が認められ（Ｆ２，２６＞４．９１、Ｐ＜０．０１）、それは、化合物５０４が、短い（３秒）ＩＴＩで特に、選択の正確度の点でこの条件下で作業を改善させたことを反映した。
【０１０９】
この実験のデータを複数のＩＴＩで平均して処置に関しても分析した。処置の主な効果は、正確％、誤反応数、不完全、尚早反応（Ｆ２，２６＞４．７５、Ｐ＜０．０１）の尺度に認められ、化合物５０４は各尺度で作業を改善させ、すなわち、正確％を増加させ、誤反応及び不完全を減少させた。正確な潜時の有意性は境界領域であり（Ｆ２，２６＝３．３１、Ｐ＝０．０５）、化合物５０４が反応速度を増加させる傾向を反映している。
【０１１０】
延長された２５０の試行：化合物５０４（０．０３〜０．１ｍｇ／ｋｇ経口）を、延長された２５０の試行の条件下で試験した。セッションの持続期間にわたり作業を評価する重要性のため、これらのデータを５０試行の５ブロックに整理した試行で表す。コホートサイズは１３であり、２匹のラットを作業の一貫性のなさのために除いた。
【０１１１】
これらのセッションの過程にわたり、ビヒクルにより事前処置したラットは最初の１５０試行にわたり（ビン１〜３）およそ８０正確％の反応で安定したレベルで作業したが、この正確度はビン５までに５２＋１０正確度％に低下し、４／１３ラットは、第５のビンの間、正確な試行を全く完了できなかった。正反応は、ビン１〜３における平均２５〜２７反応からビン５において１４．６＋３．３反応に低下した。不完全、すなわち開始されたが完了されなかった試行もセッションにわたって増加し、ビン１において８．２＋１．４の不完全がビン５までに１９．１＋４．４に増加した。ラットが２５０試行スケジュールに等しい期間に２５０のフードペレットに自由にアクセスできる場合、全ペレットが消費されるため、報酬獲得のこの低下が食欲の充足によるものではないことに留意することが重要である。むしろ、低下は、警戒又は課題を続ける動機の低下を反映している可能性がある。
【０１１２】
化合物５０４（０．０３〜０．１ｍｇ／ｋｇ経口）による事前処置は、特に、０．０６〜０．１ｍｇ／ｋｇ投与量で、ビン４及び５にわたり、正確％及び正反応数の低下及び不完全の増加に対して保護した。化合物５０４の０．１ｍｇ／ｋｇ投与後、全ラットがビン５において少なくとも１３の正確な試行を完了した。そのため、有意な処置×ビン相互作用が正反応数（Ｆ１２，１４４＝４．５８、Ｐ＜０．０１）及び不完全（Ｆ１２，９６＝３．２７、Ｐ＜０．０１）に認められ、化合物５０４事前処置後のビン４及び５での改善された作業（より高いヒット率）を反映している。合計の正確な試行も、ビヒクル対照に比べて、化合物５０４（０．１ｍｇ／ｋｇ）事前処置ラットにおいて有意に増加した。正確パーセントの有意性は境界領域であった（事前処置×ビン相互作用：Ｆ１２，１４４＝１．５４、Ｐ＝０．１）。
【０１１３】
第３相：慣れたラットにおける自発運動活性に対する化合物５０４の効果：アンフェタミンとの比較
化合物５０４（０．０１〜１ｍｇ／ｋｇ経口）は、９０分の試験セッションにわたり移動距離（Ｆ５，７０＝２１．７、Ｐ＜０．０１）及び立ち上がり数（Ｆ５，７０＝１７．９、Ｐ＜０．０１）として測定された自発運動活性の用量依存性の増加をもたらした。この効果の大きさは、０．０６〜０．１ｍｇ／ｋｇ投与量で横ばいであった。化合物５０４の効果量は、同じ試験に含められた単一急性投与量のアンフェタミン（１ｍｇ／ｋｇ  ＩＰ）より著しく低かった。
【０１１４】
化合物５０４及びアンフェタミンによりもたらされた自発運動活性変化の経時変化も評価した。化合物５０４活性は、最初の１０分のタイムビンの間にピークとなり、９０分のセッションにわたり徐々に低下した。効果の時間的パターンは、化合物５０４の全投与量で類似であった。
【０１１５】
化合物５０４は、範囲１００〜４５０ｎｇ／ｍｌの血漿濃度に相当する０．０１〜０．１ｍｇ／ｋｇの範囲の投与量で、ＣＧＳ２１６８０誘導性の自発運動の低下の強固なインビボの逆転を引き出すことができる強力で経口的に活性のあるＡ２Ａ受容体拮抗剤であることが示された。この同じ投与量（及び場合により曝露）範囲にわたり、化合物５０４は、Ａ２Ａ受容体の拮抗作用と一致する、５−ＣＳＲＴＴで測定されたラットの注意機能の局面も改善した。具体的には、ｓＩＴＩプロトコル下での増加した正確度及び正反応数、すなわち高いイベント発生率、及び持続的注意／警戒の改善を示唆する延長された試行にわたって作業を改善することである。したがって、これらの効果は、ＡＤＨＤの治療における化合物５０４の可能性を支持する。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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