(57)【要約】  本発明は、抗-腫瘍壊死因子アルファ(TNFα)抗体、好ましくは、トランスジェニック非ヒト動物のミルク中に産生されたモノクローナル抗体を含む経口送達用の医薬組成物に関し、これは、有利なことにはカプリル酸と組み合わせることができ、好ましくは、腸における抗体の標的化された放出に適した形態である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
トランスジェニック非ヒト動物のミルク中に産生されたモノクローナル抗-腫瘍壊死因子アルファ(TNFα)抗体を含む経口投与用の医薬組成物。
【請求項２】
腸における、抗体の標的化された放出に適した形態である、請求項1に記載の医薬組成物。
【請求項３】
抗-TNFα抗体がアダリムマブであるか、又はアダリムマブのタンパク質配列を有する、請求項1又は2に記載の医薬組成物。
【請求項４】
トランスジェニック非ヒト動物がヤギである、請求項1から3のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項５】
カプリル酸又はカプリル酸塩を更に含む、請求項1から4のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項６】
炎症性疾患の治療における使用のための、請求項1から5のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項７】
炎症性疾患がクローン病等の炎症性腸疾患である、請求項6に記載の医薬組成物。
【請求項８】
8から200mg、好ましくは8から35又は15から70mgの抗-TNFα抗体の1日用量での経口投与を意図する、請求項6又は7に記載の医薬組成物。
【請求項９】
好ましくは、カプリル酸又はカプリル酸塩の経口投与と組み合わせた、経口投与による炎症性疾患の治療における使用のための抗-TNFα抗体。
【請求項１０】
炎症性疾患が炎症性腸疾患、好ましくはクローン病である、請求項9に記載の抗-TNFα抗体。
【請求項１１】
アダリムマブであるか、又はアダリムマブのタンパク質配列を有する、請求項9又は10に記載の抗-TNFα抗体。
【請求項１２】
トランスジェニック非ヒト動物、好ましくは、ヤギのミルク中に産生されたモノクローナル抗体である、請求項9から11のいずれか一項に記載の抗-TNFα抗体。
【請求項１３】
抗体とカプリル酸又はカプリル酸塩とが、個別、同時又は逐次に投与されることを意図する、請求項9から12のいずれか一項に記載の抗-TNFα抗体。
【請求項１４】
腸における、抗体の標的化された放出に適した形態である、請求項9から13のいずれか一項に記載の抗-TNFα抗体。
【請求項１５】
同じパッケージ内に
-  好ましくは、トランスジェニック非ヒト動物、好ましくはヤギのミルク中に産生されたモノクローナル抗体である、抗-TNFα抗体を含む経口投与用の医薬組成物を収容している第1の容器と、
-  カプリル酸又はカプリル酸塩を含む経口投与用の医薬組成物を収容している第2の容器と
を含むキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗-腫瘍壊死因子アルファ(TNFα)抗体の経口投与に関する。関係する治療用途としては、特に、クローン病等の炎症性腸疾患の治療が挙げられる。
【背景技術】
【０００２】
TNFαは、免疫系の細胞によって分泌され、免疫系の細胞と相互作用する炎症促進性サイトカインである。TNFαは、多くのヒトの疾患、特に、関節リウマチ、クローン病、潰瘍性大腸炎及び多発性硬化症等の慢性炎症性疾患に関与することが示されてきた。いくつかの抗-TNFα抗体が、現在開発中である。以下の2つの抗体が既に販売されている:  皮下又は静脈注射用の形態のインフリキシマブ(Remicade(登録商標))及びアダリムマブ(Humira(登録商標))。
【０００３】
それにもかかわらず、いくつかの研究は、特に、全身経路による抗-TNFα抗体療法には望ましくない副作用、特に結核(Jarequi-Amezagaら、Journal of Crohn's and colitis、2013、7(3):208〜212頁)、又はリステリア(Listeria)(Abreuら、Journal of Crohn's and colitis、2013、7(2):175〜182頁)による、若しくはカンジダ(Candida)(Huangら、Journal of pediatric gastroenterology and nutrition、2013、56(4):e23〜6頁)による感染症等の細菌感染症の発生がある可能性を報告している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】EP 0 264 166
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Jarequi-Amezagaら、Journal of Crohn's and colitis、2013、7(3):208〜212頁
【非特許文献２】Abreuら、Journal of Crohn's and colitis、2013、7(2):175〜182頁
【非特許文献３】Huangら、Journal of pediatric gastroenterology and nutrition、2013、56(4):e23〜6頁
【非特許文献４】Ayala M、Gavilondo J、Rodriguez M、Fuentes A、Enriquez G、Perez L、Cremata J、Pujol M、Production of plantibodies in Nicotiana plants、Methods Mol Biol、2009;483:103〜34頁
【非特許文献５】Pollock, D.P.、J.P. Kutzko、E. Birck-Wilson、J.L. Williams、Y. Echelard and H.M. Meade.(1999)、Transgenic milk as a method for the production of recombinant antibodies、Journal of Immunological Methods. 231: 147〜157頁
【非特許文献６】Horiuchiら、Rheumatology他、49:1215頁
【非特許文献７】Pintoら、1983、Biol. Cell、47、323〜330頁
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
経口投与用の抗-TNFαポリクローナル抗体の製剤が開発中である。しかしながら、経口投与される抗-TNFα抗体の有効性及び/又は安全性を向上させる必要が依然としてある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、ここで抗-腫瘍壊死因子アルファ(TNFα)抗体、好ましくは、トランスジェニック非ヒト動物のミルク中に産生されたモノクローナル抗体を含む経口投与用の医薬組成物を提案し、これは、有利なことにはカプリル酸と組み合わせることができる。
【０００８】
好ましくは、本組成物は、腸における、抗体の標的化された放出に適した形態である。
【０００９】
好適な実施形態において、抗-TNFα抗体はアダリムマブであるか、又はアダリムマブのタンパク質配列を有する。
【００１０】
本組成物は、炎症性疾患、好ましくは、炎症性腸疾患、より好ましくはクローン病の治療に特に有用である。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
定義:
「治療」又は「治療する」という用語は、疾患若しくは障害又は少なくとも症状における、それらから区別され得る改善又は予防若しくは回復、或いは治療される疾患又は障害と関連づけられる測定可能な身体的パラメーターの少なくとも1つにおける、治療対象において又は治療対象により必ずしも区別できる訳ではない改善又は予防若しくは回復を指す。「治療」又は「治療する」という用語は、疾患又は障害の進行の阻止又は遅延、身体的には例えば区別可能な症状の安定化、生理的には例えば身体的パラメーターの安定化、又はそれらの両方を更に含む。
【００１２】
本発明の意図の範囲内で、「患者」とは、年齢にかかわらずあらゆる哺乳動物、特に、ヒト、男性又は女性を意味する。
【００１３】
「炎症性疾患」という用語は、炎症性要素を有するあらゆる疾患、好ましくは炎症性腸疾患、特に、クローン病及び潰瘍性大腸炎等の慢性炎症性腸疾患を含む。若年性突発性関節炎、関節リウマチ、乾癬、乾癬性リウマチ(psoriatic rheumatism)及び強直性脊椎炎も含まれる。
【００１４】
「組合せ」及び「共投与」という用語は、単一製剤の形態で、又は2つの別々の製剤として抗-TNFα抗体とカプリル酸とを投与することを指す。この投与は同時又は任意の順序で逐次行われてもよい。2つの薬剤は、同時又は連続的に投与されてもよい。
【００１５】
抗-TNFα抗体:
「抗-TNFα抗体」とは、ヒトTNFαと特異的に結合するあらゆる抗体を意味する。抗体は、以下の定数によりヒトTNFαから解離することが好ましい:1×10-8M未満のKd(好ましくは1×10-9M未満、好ましくは1×10-10M未満、好ましくは1×10-11M未満)及び1×10-3s-1以下のKoff、共に表面プラズモン共鳴試験によって求められる。好ましくは、抗体は中和性であり、特に、その細胞表面にあるTNFp55及びp75受容体との相互作用を妨げることによってTNFαの生物学的機能を中和する。抗体の中和能は標準的な試験によって試験することができ、例えば、標準的なL929インビトロ試験において抗体がヒトTNFαの細胞傷害性を中和し、IC50は1×10-7M以下、好ましくは1×10-8M未満、1×10-9M未満又は1×10-10M未満である。
【００１６】
好ましくは、抗体はモノクローナル抗体である。
【００１７】
抗体は、マウス等の哺乳動物由来の抗体であってもよく、又は好ましくはヒト化されているか、若しくは完全にヒトのものであってもよい。
【００１８】
好適な実施形態において、抗-TNFα抗体は、ヒトモノクローナル抗体である。
【００１９】
優先的に使用される抗-TNFα抗体は、アダリムマブであるか、又はアダリムマブのタンパク質配列を有し、すなわち、軽鎖配列、配列番号1及び重鎖配列、配列番号2を含む。
配列番号1
【化１】
2017519767.tif 000002
配列番号2
【化２】
2017519767.tif 000003
【００２０】
アダリムマブは、2つのカッパ軽鎖及び2つのIgG1重鎖からなる免疫グロブリンG(IgG)である。
【００２１】
抗体は、例えば、インフリキシマブ又はゴリムマブであってもよい。
【００２２】
本発明に使用される抗体は、当業者に既知の任意の技術によって産生してもよく、好ましくは、組換え抗体である。
【００２３】
したがって、特定の実施形態において、抗体は、抗体の重鎖及び/又は軽鎖をコードするヌクレオチド配列の発現及び/又は分泌を可能にする1つ又は複数のベクターを用いてトランスフォームされた宿主細胞における組換えによって産生されてもよい。ベクターは、通常、プロモーター、翻訳開始及び終結シグナル並びに適した転写制御領域を含む。ベクターは宿主細胞において安定した様式で維持され、任意に翻訳されるタンパク質の分泌を規定する特定のシグナルを有してもよい。これらのさまざまな要素は、使用される宿主細胞に準じて当業者によって選択され、最適化される。そのようなベクターは、当業者が一般的に使用する方法によって作製され、得られたクローンは、リポフェクション、エレクトロポレーション、ポリカチオン性薬剤の使用、ヒートショック又は化学的方法等の標準的な方法によって適した宿主に導入することができる。宿主細胞は、原核細胞系又は真核細胞系、例えば、細菌細胞から選択されてもよいが、酵母菌細胞又は動物細胞、特に哺乳動物細胞から選択されてもよい。モノクローナル抗体の産生に好ましい哺乳動物細胞は、ラット系統YB2/0、ハムスター系統CHO、特に、系統CHO dhfr-及びCHO Lec13、PER.C6TM(Crucell)、293、K562、NS0、SP2/0、BHK又はCOSである。昆虫細胞を使用することもできる。
【００２４】
産生の別の様式は、トランスジェニック生物、例えば、植物(Ayala M、Gavilondo J、Rodriguez M、Fuentes A、Enriquez G、Perez L、Cremata J、Pujol M、Production of plantibodies in Nicotiana plants、Methods Mol Biol、2009;483:103〜34頁)における又は特にウサギ、ヤギ又はブタ等のトランスジェニック動物のミルク(Pollock, D.P.、J.P. Kutzko、E. Birck-Wilson、J.L. Williams、Y. Echelard and H.M. Meade.(1999)、Transgenic milk as a method for the production of recombinant antibodies、Journal of Immunological Methods. 231: 147〜157頁)における組換え抗体の発現である。
【００２５】
好適な実施形態によると、本抗体は、この糖タンパク質を産生するよう遺伝子改変された非ヒトトランスジェニック哺乳動物のミルク中に産生される。哺乳動物は、例えば、ヤギ、雌ヒツジ、雌バイソン、バッファロー、ラクダ、ラマ、マウス若しくはラット又は雌ウシ、雌豚、雌ウサギ若しくは雌馬であってもよい。
【００２６】
好ましくは、ミルクはトランスジェニックヤギのミルクである。
【００２７】
トランスジェニック哺乳動物のミルク中に抗体が存在することを可能にする、乳腺による抗体の分泌は、抗体の発現の組織依存的制御を伴う。制御のそのような方法は、当業者に周知である。発現は、動物の特定の組織における糖タンパク質の発現を可能にする配列によって制御される。これらは、特に「WAP」、「β-カゼイン」、「β-ラクトグロブリン」型のプロモーター配列、場合によって、ペプチドシグナル型の配列である。好ましくは、抗体は、5'β-カゼインプロモーターの支配下に2本鎖の配列を含む発現ベクターを使用してトランスジェニックヤギの乳腺において産生される。トランスジェニック動物のミルクから対象のタンパク質を抽出するための方法については、特許EP 0 264 166に記載されている。
【００２８】
有利には、ミルク1リットル当たり4グラムを超える、有利には1リットル当たり5、10、15、20、25、30、35グラムを超える、有利には1リットル当たり最大70グラムの抗体が産生される。
【００２９】
有利には、動物の遺伝子組換えによって、特にトランスジェニックヤギの乳腺において産生される抗体は、例えば、60%超、好ましくは70%超、より好ましくは少なくとも80%の高いレベルのガラクトシル化を含むグリコシル化を有する抗-TNFα抗体の集団の形態である。
【００３０】
更に別の特定の態様によると、集団のすべての抗体のフコシル化のレベルは、少なくとも50%、特に少なくとも60%である。
【００３１】
別の特定の態様によると、集団は、モノガラクトシル化(mono-galactosylated)N-グリカンを含む抗体を含む。
【００３２】
別の特定の態様によると、集団は、二ガラクトシル化(bi-galactosylated)N-グリカンを含む抗体を含む。
【００３３】
別の特定の態様によると、集団の抗体のガラクトシル化のレベルの、集団の抗体のフコシル化のレベルに対する比は1.0から1.4である。
【００３４】
別の特定の態様によると、集団中の抗体の少なくとも35%は二ガラクトシル化N-グリカンを含み、集団中の抗体の少なくとも25%はモノガラクトシル化N-グリカンを含む。
【００３５】
別の特定の態様によると、抗体のシアル化のレベルは、少なくとも50%、好ましくは少なくとも70%又は少なくとも90%である。
【００３６】
更に別の特定の態様によると、抗体は、完全にシアル化されている。
【００３７】
N-グリカンの生合成はタンパク質の場合のようにコーディングによっては制御されず、主に細胞における特定のグリコシルトランスフェラーゼの発現及び活性に依存する。したがって、抗体Fcフラグメント等の糖タンパク質は、通常、同じタンパク質骨格に異なるグリカンをもつグリコフォームの不均質な集団として存在する。
【００３８】
高度にガラクトシル化された抗体の集団は、集団の全抗体のガラクトシル化のレベルが少なくとも50%、少なくとも60%、少なくとも70%、少なくとも80%、少なくとも90%、最大100%のガラクトシル化である抗体集団である。
【００３９】
高度にガラクトシル化された抗体の集団の特定の実施形態によると、集団の全抗体のガラクトシル化のレベルは、少なくとも60%である。
【００４０】
ガラクトシル化のレベルは、以下の式:
【００４１】
【数１】
2017519767.tif 000004
【００４２】
を用いて求めることができ、式中、
-  「n」は、クロマトグラム、例えば、順相高速液体クロマトグラフィー(NP HPLC)スペクトルにより分析されたN-グリカンピークの数であり、
-  「Galの数」は、ピークに対応するグリカンのアンテナ(antenna)に対するガラクトースの数であり、
-  「Aの数」は、ピーク(グリカンに共通する骨格構造の2つのN-アセチル-グルコサミン単位以外)に対応するグリカン形態のアンテナに対するN-アセチル-グルコサミン単位の数であり、
-  「相対表面積の%」は、対応するピークの下の面積の百分率である。
【００４３】
抗体集団の抗体のガラクトシル化のレベルは、例えば、抗体からN-グリカンを遊離することによって、クロマトグラムによりN-グリカンを分解することによって、特定のピークに対応するN-グリカンのオリゴ糖単位を特定することによって、ピークの強度を測定することによって及び上記の式にデータを当てはめることによって求めることができる。
【００４４】
ガラクトシル化された抗体としては、モノガラクトシル化N-グリカン及び二ガラクトシル化N-グリカンを有する抗体が挙げられる。
【００４５】
高度にガラクトシル化された抗体の集団の特定の態様によると、集団は、モノガラクトシル化N-グリカンを含む抗体を含み、シアル化されていてもよく、又はされていなくてもよい。高度にガラクトシル化された抗体の集団の特定の態様によると、抗体のN-グリカンのうちの少なくとも1%、少なくとも5%、少なくとも10%、少なくとも15%、少なくとも20%、少なくとも25%、少なくとも30%、少なくとも40%、少なくとも50%、少なくとも60%、少なくとも70%、少なくとも80%、少なくとも90%、最大100%がモノガラクトシル化N-グリカンを含む。本発明の更に別の特定の実施形態によると、高度にガラクトシル化された抗体の集団において、抗体のうち少なくとも25%がモノガラクトシル化N-グリカンを含む。
【００４６】
高度にガラクトシル化された抗体の集団の特定の態様によると、集団は、二ガラクトシル化N-グリカンを含む抗体を含み、シアル化されていてもよく、又はされていなくてもよい。高度にガラクトシル化された抗体の集団の特定の態様によると、抗体のN-グリカンのうち少なくとも1%、少なくとも5%、少なくとも10%、少なくとも15%、少なくとも20%、少なくとも25%、少なくとも30%、少なくとも40%、少なくとも50%、少なくとも60%、少なくとも70%、少なくとも80%、少なくとも90%、最大100%が二ガラクトシル化N-グリカンを含む。本発明の更に別の特定の実施形態によると、高度にガラクトシル化された抗体の集団において、抗体のうちの少なくとも35%が二ガラクトシル化N-グリカンを含む。
【００４７】
高度にガラクトシル化された抗体の集団の更に別の態様によると、集団は、モノガラクトシル化N-グリカンを含み、シアル化されていてもよく、又はされていなくてもよい抗体と、二ガラクトシル化N-グリカンを含み、シアル化されていてもよく、又はされていなくてもよい抗体とを含む。
【００４８】
高度にガラクトシル化された抗体の集団の特定の態様によると、抗体のN-グリカンのうち少なくとも1%、少なくとも5%、少なくとも10%、少なくとも15%、少なくとも20%、少なくとも25%、少なくとも30%、少なくとも40%、少なくとも50%、少なくとも60%、少なくとも70%、少なくとも80%、少なくとも90%、最大99%がモノガラクトシル化N-グリカンを含み、抗体のN-グリカンのうち少なくとも1%、少なくとも5%、少なくとも10%、少なくとも15%、少なくとも20%、少なくとも25%、少なくとも30%、少なくとも40%、少なくとも50%、少なくとも60%、少なくとも70%、少なくとも80%、少なくとも90%、最大99%が二ガラクトシル化N-グリカンを含む。
【００４９】
高度にガラクトシル化された抗体の集団の別の特定の態様によると、抗体のうちの少なくとも25%がモノガラクトシル化N-グリカンを含み、抗体のうちの少なくとも35%が二ガラクトシル化N-グリカンを含む。
【００５０】
好適な実施形態において、抗-TNFα抗体は、シアリルトランスフェラーゼの産生のための、外来性の場合によってはトランスジェニックでもある抗-TNFα抗体の乳腺における産生のためのトランスジェニック哺乳動物の乳腺上皮細胞によって産生される。そのように産生された治療効果のある抗体は、ガラクトシル化のレベルが高く、場合によっては、Fcフラグメントに結合したそのグリカン残基にある末端アルファ-2,6シアル酸結合のレベルが増加している。
【００５１】
特定の実施形態において、抗体は、マンノース含有量が高いグリコシル化プロファイルを有する。本明細書中で使用される場合、「マンノース含有量が高いグリコシル化プロファイル」とは、少なくとも1つのオリゴマンノースを含む抗体又は抗体の少なくとも30%が少なくとも1つのオリゴマンノースを含む抗体の組成物を指す。特定の実施形態において、抗体の糖の少なくとも30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%以上が非フコシル化オリゴマンノースである。他の実施形態において、抗体の糖の50%未満、40%、30%、20%、10%、5%以下がフコースを含む。別の実施形態において、抗体は、フコース含有量が低く、オリゴマンノース含有量が高い。したがって、他の実施形態において、抗体の糖の少なくとも30%、40%、50%、60%、70%、80%又は90%以上がオリゴマンノースであり、抗体の糖の50%、40%、30%、20%、10%又は5%未満がフコースを含む。したがって、別の実施形態において、抗体の糖の少なくとも30%、40%、50%、60%、70%、80%又は90%以上が非フコシル化オリゴマンノースであり、抗体の糖の50%、40%、30%、20%、10%又は5%未満がフコースを含む。
【００５２】
特定の態様によると、マンノース含有オリゴ糖は、Man5からMan9に及び、数はマンノース残基の数を示す。例えば、マンノース含有オリゴ糖としては、Man5、Man6、Man7、Man8及びMan9を挙げることができる。特定の実施形態において、遺伝子導入で産生されたアダリムマブ等の抗体は、Man6含有量が高い。特定の実施形態において、主要な糖はMan5である。特定の実施形態において、砂糖の少なくとも10%、15%以上はMan5である。有利には、糖の少なくとも20%はMan5である。他の実施形態において、主要な糖はMan6である。特定の実施形態において、遺伝子導入で産生された抗体の糖の少なくとも10%、15%以上はMan6である。有利には、糖の少なくとも20%はMan6である。他の実施形態において、主要な糖はMan7である。特定の実施形態において、糖の少なくとも10%、15%以上はMan7である。有利には、糖の少なくとも20%はMan7である。
【００５３】
ガラクトース又はマンノースのレベルが高いプロファイルを有する抗体は、上記のとおり、FcγRIIIa(CD16)受容体に対する親和性が高いため特に好ましい。親和性が高いとは、スキャッチャード解析又はBIAcore技術(ラベルフリー表面プラズモン共鳴に基づく技術)によって測定した場合の少なくとも2×106M-1と等しい、好ましくは少なくとも2×107M-1、2×108M-1又は2×109M-1と等しい親和性を意味する。この受容体は、ナチュラルキラー細胞、マクロファージ、好中球及び肥満細胞を含む多くの免疫細胞に見られる。
【００５４】
CD16に対するこの親和性は、高度にガラクトシル化されていない、又は高度にマンノシル化されていない抗体と比較して、補体依存性細胞傷害(CDC)若しくは抗体依存性細胞媒介性細胞傷害(ADCC)活性又は標的細胞食作用現象を改善することができる。特定の実施形態において、乳腺上皮細胞において産生された抗-TNFα抗体の集団は、可溶性TNFαとの結合に関して、乳腺上皮細胞でない細胞において産生された抗体よりも優れている。特定の実施形態において、乳腺細胞において産生された抗-TNFα抗体の集団は、膜貫通型TNFαとの結合に関して、乳腺上皮細胞でない細胞において産生された抗体よりも優れている。可溶性TNFα又は膜貫通型TNFαとの結合のレベルを測定するための試験は十分に確立されている(例えば、Horiuchiら、Rheumatology他、49:1215頁を参照のこと)。
【００５５】
カプリル酸との組合せ:
好適な実施形態において、好ましくは、トランスジェニック非ヒト動物のミルク中に産生されたモノクローナル抗体である抗-TNFα抗体は、カプリル酸と組み合わせて投与される。
【００５６】
オクタン酸とも称するカプリル酸は、8個の炭素原子を含む飽和直鎖脂肪酸である。
【００５７】
カプリル酸は、酸の形態又はカプリル酸塩の形態で使用してもよい。薬学的に許容されるあらゆる塩、例えば、カプリル酸ナトリウム又はカリウムを想定することができる。
【００５８】
本発明によると、特定の作用メカニズムに縛られることを望まないが、カプリル酸には、インサイツにおいて殺菌(特に抗菌性、抗真菌性及び抗ウイルス性)活性をもたらす効果があり、有利なことには腸管腔でのTNFαの中和に続いて感染症又は重複感染のリスクを防ぐことができる。抗-TNF抗体とカプリル酸との組合せには、向上した抗炎症効果もある。カプリル酸は、胃腸管における抗体の急速過ぎる分解から保護することによって抗体の効果を向上させることもでき、最終的に組成物の抗炎症効果を更に増強することができる。
【００５９】
したがって、本発明は、目的として抗-TNFα抗体と、カプリル酸又はカプリル酸塩とを含む経口投与用の医薬組成物も有する。
【００６０】
本発明の別の目的は、カプリル酸(又はカプリル酸塩)の経口投与と組み合わせた、経口投与による炎症性疾患の治療に使用するための抗-TNFα抗体を対象とする。
【００６１】
抗体と、カプリル酸(又はカプリル酸塩)とは、個別、同時又は逐次投与を意図する。
【００６２】
本発明の別の目的は、同じパッケージ内に、
-  抗-TNFα抗体を含む経口投与用の医薬組成物を収容している第1の容器と、
-  カプリル酸(又はカプリル酸塩)を含む経口投与用の医薬組成物を収容している第2の容器と
を含むキットである。
【００６３】
抗-TNFα抗体と、カプリル酸(若しくはカプリル酸塩)とは、同じ医薬組成物内で組み合わされてもよい、又は同時若しくは逐次に投与可能な別々の組成物の形態で使用されてもよい。特に、これらは、個別に、すなわち、同時に又は独立して、例えば、時間を空けてのいずれかで投与されてもよい。医薬組成物又は栄養補助食品型組成物の形態のカプリル酸(又はカプリル酸塩)が本発明に使用されてもよい。
【００６４】
治療製剤及び用途:
本発明の組成物は、経口投与に通常使用される任意のガレノスの形態(galenic form)、特に、錠剤、カプセル、粉末の形態又は任意の固体経口用調製物の形態若しくは任意の液体経口用調製物の形態で存在してもよい。
【００６５】
好適な実施形態において、本組成物は、腸における標的化された放出に適したガレノスの形態で存在する。「腸」とは、本明細書においては、腸のあらゆる部分、特に結腸を意味する。そのような組成物は、感染部位(特に小腸又は結腸)における局所作用を可能にするため、炎症性腸疾患の治療に特に有用である。更に、これらは、抗体の血流への移行を制限して、抗-TNFα抗体に関連する副作用を制限する。
【００６６】
活性成分が腸でのみ、好ましくは結腸でのみ放出される経口投与薬剤を調製するためのいくつかの戦略が存在する。
【００６７】
特定の戦略は、薬剤の基材との共有結合又はpH感受性ポリマーによるコーティングを含む。結腸の細菌によって分解される賦形剤及びビヒクルを使用することもできる。
【００６８】
特定の実施形態において、抗-TNFα抗体は、pH感受性ポリマーによりコーティングされた錠剤又はカプセルのような固体剤形剤として製剤化されてもよい。pHは、胃では約1から3であるが、小腸及び結腸では上昇して7に近い値に到達する。酸性のpHでは不溶性であるが、中性又はアルカリ性のpHでは可溶性である最も一般的に使用されるポリマーは、メタクリル酸誘導体、特に、ポリマーEudragit(登録商標)L及びSである。
【００６９】
別の実施形態において、結腸の微生物によって(特にアゾレダクターゼ及びグリコシダーゼのような細菌酵素によって)分解され得る、親水性度の高いポリマー、例えばアゾポリマーによりコーティングされた製剤も使用することができる。
【００７０】
ゲル及びヒドロゲル、特に多糖ベースのヒドロゲルも使用することができる。
【００７１】
抗-TNFα抗体がカプリル酸(又はカプリル酸塩)と組み合わされる場合、抗-TNFα抗体を含む剤形は、任意に組み合わされるカプリル酸を含む剤形と異なってもよい。
【００７２】
好ましくは、抗-TNFα抗体は、錠剤又はカプセルの形態で投与される。好ましくは、カプリル酸は、カプセルの形態で投与される。
【００７３】
本発明の組成物は、その他の治療薬剤を含んでも、又はそれと組み合わせてもよいが、これは好ましい様式ではない。
【００７４】
本発明による組成物は、有利には1つ又は複数の薬学的に許容される賦形剤又はビヒクルを含む。例えば、製薬的用途に適合し、当業者に既知の生理的食塩水、生理溶液、等張液及び緩衝液等を挙げることができる。本組成物は、分散剤、可溶化剤、安定剤、保存料等から選択される1つ又は複数の薬剤又はビヒクルを含んでもよい。製剤(液体及び/又は注射剤及び/又は固体)に使用できる薬剤又はビヒクルは、特にメチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリソルベート80、マンニトール、ゼラチン、ラクトース、植物油、アラビアゴム等である。本組成物は、ガレノスの形態又は持続放出及び/若しくは遅延放出をもたらすデバイスによって任意に製剤化されてもよい。このタイプの製剤には、セルロース、カーボネート又はデンプン等の薬剤が有利に使用される。
【００７５】
投与量は、とりわけ、患者の体重及び年齢並びに当業者によって評価される疾患の重症度により変化する場合もある。
【００７６】
好適な実施形態において、抗体の用量は、体重に対して約0.02mg/kgから約100mg/kg、すなわち、55から80kgの重量の人に対しては1日当たり約1mgから約8gの範囲である。
【００７７】
更に好適な実施形態において、抗体の用量は、体重に対して約0.16mg/kgから約32mg/kg、すなわち1日当たり約8.75mgから約2.5gの範囲である。更に好適な実施形態において、抗体の用量は、体重に対して約0.16mg/kgから約13mg/kg、すなわち、1日当たり約8.75mgから約1gの範囲である。更に好適な実施形態において、抗体の用量は、体重に対して約0.16mg/kgから約6.5mg/kg、すなわち、約8.75mgから約520mgの範囲である。更に好適な実施形態において、抗体の用量は、体重に対して約0.16mg/kgから約3.2mg/kg、すなわち、約8.75mgから約256mgの範囲である。更に好適な実施形態において、抗体の用量は、体重に対して約0.16mg/kgから約1.3mg/kg、すなわち、約8.75mgから約104mgの範囲である。更に好適な実施形態において、抗体の用量は、体重に対して約0.16mg/kgから約0.64mg/kg、すなわち、約8.75mgから約51mgの範囲である。
【００７８】
一般に、有利な用量は、1日当たり8から200mg、好ましくは、1日当たり8から35又は15から70mgの用量である。
【００７９】
好適な実施形態において、カプリル酸(又はカプリル酸塩)の用量は、1日当たり0.01mg/kgから約500mg/kg、例えば、0.1mg/kgから300mg/kg、すなわち0.1mgから20gの範囲である。
【００８０】
患者は、例えば、10mgから500mgの間、好ましくは、1日当たり8から200mg、好ましくは、1日当たり8から35又は15から70mgの例えば、抗-TNFα抗体(好ましくはアダリムマブ)の1日用量を投与されてもよい。
【００８１】
投与されるカプリル酸(又はカプリル酸塩)の用量は、好ましくは100mgから4gの間、好ましくは200mgから2gの間、好ましくは300mgから1.5gの間、好ましくは750mgから1250mgの間、更に優先的には900mgから1100mgの間であってもよい。これは、1日用量又は1週間当たり1回若しくは複数回服用される用量であってもよい。
【００８２】
特定の実施形態において、抗体及びカプリル酸(又はカプリル酸塩)は、少なくとも1:1、好ましくは5:1、好ましくは10:1、好ましくは15:1、好ましくは20:1と等しいカプリル酸の抗体に対する質量比で使用することができる。
【００８３】
2つの薬剤が逐次に投与される場合、用量は、少なくとも2つの個別投与として同じ日に投与され、或いは、例えば、薬剤の一方が最初の日に投与され、2番目の薬剤が次の日又はその次の日に投与される。
【００８４】
以下の実施例及び添付の図面は、本発明の範囲を限定することなく、本発明を説明する。
【図面の簡単な説明】
【００８５】
【図１】さまざまな条件に供されたCaco-2細胞によるインターロイキン-8の分泌レベルを示すヒストグラムである。分泌は、カプリル酸+抗-TNF抗体の組合せの存在下において最も強く阻害されている。
【実施例】
【００８６】
Caco-2株に対する抗炎症効果
材料及び方法:
結腸癌細胞株であるCaco-2細胞は、確立されたヒト腸管上皮の細胞モデルである(Pintoら、1983、Biol. Cell、47、323〜330頁)。これらの細胞は、インターロイキン-1ベータ(IL-1ベータ)による活性化後に、炎症性腸疾患の発病において重要なインターロイキンの1つであるインターロイキン-8(IL-8)を分泌する。
【００８７】
本発明者らは、上皮細胞のモデルとしてCaco-2細胞株を使用し、インターロイキン-1ベータ(IL-1ベータ)による活性化後のこれらの細胞によるインターロイキン-8(IL-8)の分泌に対する、本発明による組成物の効果を評価した。
【００８８】
そのために、24ウェルプレートに入れたCaco-2細胞を、細胞がコンフルエントで、安定した分化状態になるまで14日間培養した。14日目に、この細胞を、カプリル酸、遺伝子導入で産生された抗-TNF抗体(アダリムマブ)及びこれら2つの組合せの存在下において前培養した。24時間後に、その細胞を、1ng/ml IL-1ベータにより12時間刺激した。培養上清中に存在するIL-8レベルを、ELISAによって測定した。
【００８９】
結果:
抗-TNF抗体の添加は、IL-8のレベルの低下、したがって、抗炎症性の可能性をもたらした。カプリル酸+抗-TNF抗体の組合せは、IL-8分泌のより強力な阻害物質のようであり、より強い抗炎症効果を示す(図面を参照のこと)。
【００９０】
培養14日後の分化したCaco-2細胞の使用及びIL-1ベータの添加により、インビボにおける腸の炎症と類似のインビトロ条件を再現することができる。観察された結果は、本発明による組成物にインビボにおいて潜在的に治療上の利益があることを示している。
【図１】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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