(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
0004195561.tif 000024
［式中、
Ｒ及びＲ’は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１−８アルキル鎖（−ＳＡＣ）、Ｃ３−１０シクロアルキル（−ＳＣＡＣ）、芳香族（−Ａｒ）、または芳香族で置換されたＣ１−８アルキル鎖（−ＳＡＣ−Ａｒ）を表し；
Ｒ１は、−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒまたは−ＳＡＣ−Ａｒを表すか、あるいは、アミノ酸の側鎖または−（ＣＨ２）ｎＣＯＯＺ（式中、ｎは１または２であり、Ｚは水素、−ＳＡＣ、−Ａｒまたは−ＳＣＡＣである）を表し；
Ｒ３は、−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、−ＳＡＣ−Ａｒまたはアミノ酸の側鎖を表し；
Ｒ２は、−Ｈ、−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒまたは−ＳＡＣ−Ａｒを表すか、あるいはアミノ酸の側鎖を表すか、あるいは−（ＣＨ２）ｎ（Ｏ）ｍＲ５（式中、Ｒ５＝−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、−ＳＡＣ−Ａｒ；ｎ＝０，１または２；ｍ＝０または１）または−（ＣＨ２）ｎＯＣ（＝Ｏ）Ｒ６（式中、Ｒ６＝−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒまたは−ＳＡＣ−Ａｒ；ｎ＝１または２）を表し；
Ｒ４は、
ａ）（１）アミノ酸のキラル炭素に結合されたカルボキシル基がアミン基に結合してアミド結合を形成し、（２）アミノ酸のキラル炭素がＲまたはＳ配置のいずれかを有し、（３）アミノ酸のキラル炭素に結合されたアミノ基が、ホルミル、アセチル、プロピル、シクロプロピルカルボニル、ブチル、メタンスルホニル、エタンスルホニル、プロパンスルホニル、ブタンスルホニル、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、プロピルオキシカルボニル、ブチルオキシカルボニル、メチルカルバモイル、エチルカルバモイル、プロピルカルバモイル、ブチルカルバモイル、ジメチルカルバモイル、ジエチルカルバモイル、ジプロピルカルバモイル、ジブチルカルバモイルまたはシクロプロピルアミノカルボニルで保護されるアミノ基であるか、あるいは当該アミノ基は水素原子で置き換えられていてもよく、（４）側鎖のカルボキシル基が−ＳＡＣまたは−ＳＣＡＣと共にエステル基を形成し得る、アミノ酸残基、
ｂ）−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ７（式中、Ｒ７＝−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、−ＳＡＣ−Ａｒ）、−ＣＯ２Ｒ８（式中、Ｒ８＝水素またはＲ７）、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ８Ｒ８、−ＳＯＲ７、−ＳＯ２Ｒ７または−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−Ａｒ、
ｃ）−（Ｃ＝Ｏ）−Ｌ−ＣＯ２Ｒ８［式中、Ｒ８は、上記のとおりであり、Ｌは、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、フラン、チオフェン、ジアゾ−ル（１，２または１，３）、トリアゾール（１，２，３または１，３，４）、テトラゾール、オキサゾール、イソオキサゾール、チアゾール、イソチアゾール、ジアジン（１，２または１，３または１，４）、トリアジン、−Ｐｈ（−Ｒ９）−（式中、Ｒ９＝Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＨＯ、ＯＨ、ＯＣＨ３、ＣＦ３、ＯＣＦ３、ＣＮ、Ｃ（＝Ｏ）Ｍｅ）、テトラヒドロフラン、テトラヒドロチオフェン、１，４−ジオキサン、−ＣＨ＝Ｃ（Ｒ１０）−（式中、Ｒ１０＝Ｈ、メチル、エチル）、−ＣＨ＝ＣＨＣＨ（Ｒ１０）−、−ＣＨ（ＯＲ１０）ＣＨ２−、−ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２−、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２ＣＨ２−よりなる群から選択される二価（＝二重置換できる）のリンカーを表す］を表し、
Ｒ１及び隣接したＲ’ならびに／またはＲ３及び隣接したＲが互いに連結して環式化合物を形成する場合、Ｒ１−Ｒ’またはＲ３−Ｒは、共に、−（ＣＨ２）ｎ−、−（ＣＨ２）ｎ−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−または−（ＣＨ２）ｎ−ＮＲ１３−（ＣＨ２）ｍ−（式中、ｎ＋ｍ＜９、Ｒ１３＝−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、−ＳＡＣ−Ａｒ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＳＡＣ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＳＣＡＣ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ａｒまたは−Ｃ（＝Ｏ）−ＳＡＣ−Ａｒ）を表し；
Ｘは、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ１４（式中、Ｒ１４＝−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、−ＳＡＣ−Ａｒまたは−ＣＨＮ２）、−ＣＯＮＲ１６Ｒ１７（式中、Ｒ１６及びＲ１７は、それぞれ、−Ｈ、−ＳＡＣ、−Ｏ−ＳＡＣ−、−ＳＣＡＣ、−Ａｒまたは−ＳＡＣ−Ａｒを表す）、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２Ｏ（Ｃ＝Ｏ）Ａｒ’’（式中、Ａｒ’’＝Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩまたはＣＨ３によって２，６−二置換されたフェニル）、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２ＯＲ１８（式中、Ｒ１８は、−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒまたは−ＳＡＣ−Ａｒを表す）または−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ１９（式中、Ｒ１９＝−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒまたは−ＳＡＣ−Ａｒ）を表すか、あるいは、
Ｘは−ＣＯＣＨ２−Ｗを表し、式中、Ｗは、−Ｎ２、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＮＲ２０Ｒ２１または−ＳＲ２２（式中、Ｒ２０、Ｒ２１及びＲ２２は、それぞれ独立して、−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒまたは−ＳＡＣ−Ａｒを表すか、あるいは、Ｒ２０及びＲ２１が連結して環式化合物を形成する）を表す。
式中、Ａｒは、独立して、ベンゼン、ナフタレン、ピリジン、インドール、キノリン、イソキノリン、フラン、チオフェン、ピロール、ピリミジン、イミダゾールまたはベンゾフランを表し、アミノ酸は、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、スレオニン、システイン、メチオニン、プロリン、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、グルタミン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、フェニルアラニン、チロシンおよびトリプトファンからなる群から選択される天然アミノ酸を表す］
のイソオキサゾリン誘導体、その医薬的に許容可能な塩、エステル又は立体化学的異性体。
【請求項２】
Ｒ４が−Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｐＣＯＯＺ（式中、ｐは１〜４であり、Ｚは水素、−ＳＡＣ、−Ａｒまたは−ＳＣＡＣである）を表す請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項３】
Ｒ１が−Ｃ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＺ（式中、ｎは１または２であり、Ｚは水素、−ＳＡＣ、−Ａｒまたは−ＳＣＡＣである）を表す請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項４】
ａ）Ｒ及びＲ’が水素を表し、
ｂ）Ｒ１が−ＣＨ２ＣＯＯＨ、−ＣＨ２ＣＯＯＣＨ３またはＣＨ２ＣＯＯＣＨ２ＣＨ３を表し、
ｃ）Ｒ２が−（ＣＨ２）ｎ（Ｏ）ｍＲ５（式中、Ｒ５＝−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、−ＳＡＣ−Ａｒ；ｎ＝０，１または２；ｍ＝０または１）、ＳＡＣ、Ａｒまたは水素を表し、
ｄ）Ｒ３が−ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）２ＣＯ２Ｈ、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＨ２または−（ＣＨ２）２Ｃ（Ｏ）ＮＨ２を表し、
ｅ）Ｒ４が−Ｃ（＝Ｏ）（Ｏ）ｎＲ２９（式中、ｎ＝０，１；Ｒ２９＝−Ａｒまたは−ＳＡＣ−Ａｒ）、−ＳＯ２Ｒ３０（式中、Ｒ３０＝−Ａｒまたは−ＳＡＣ−Ａｒ）または−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ３１（式中、Ｒ３１＝−Ａｒまたは−ＳＡＣ−Ａｒ）を表すか、あるいは、
ｆ）Ｘが−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨＮ２、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２Ｂｒ、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２Ｃｌ、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２ＯＰｈまたは−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）Ａｒ’’（式中、Ａｒ’’＝２，６−ジクロロフェニル、２，６−ジフルオロフェニルまたは２，６−ジメチルフェニル）を表す、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項５】
以下よりなる群から選択される請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物：
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−フェニルメチルオキシカルボニルアミノ−２−メチル−プロピル］−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−フェニルメチルオキシカルボニルアミノ−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニル−アミノ｝−４−ケト−ペンタン酸；
（２Ｓ）−２−｛３−［（１Ｓ）−１−フェニルメチルオキシカルボニルアミノ−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニル−アミノ｝−コハク酸  １−（Ｎ−メチル−Ｎ−メトキシ）−アミド；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−フェニルメチルオキシカルボニルアミノ−２−メチル−プロピル］−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ジアゾ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−フェニルメチルオキシカルボニルアミノ−２−メチル−プロピル］−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ブロモ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−フェニルメチルオキシカルボニルアミノ−２−メチル−プロピル］−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−１−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ジアゾ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ブロモ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ジアゾ−ペンタン酸（ＬＰ及びＭＰ）；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ブロモ−ペンタン酸（ＬＰ及びＭＰ）；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（ＬＰ及びＭＰ）；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−３−カルボキシ−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（キノリン−２−イル−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−スルホニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２−ナフチルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（１−ナフチルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（２Ｓ）−２−アセチルアミノ−サクシノイルアミノ）−３−カルボキシ−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２−ナフチルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（２−ナフタレンカルボニルアミノ）−プロピル］−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸（ジアステレオマー混合物）；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（フェニルメチルオキシカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ジアゾ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（フェニルメチルオキシカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ブロモ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（フェニルメチルオキシカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（フェニルエチルカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ジアゾ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（フェニルエチルカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ブロモ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（フェニルエチルカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（１−ナフタレンカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ジアゾ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（１−ナフタレンカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ブロモ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（１−ナフタレンカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（１−ナフタレンスルホニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ジアゾ−ペンタン酸（ジアステレオマー混合物）；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（１−ナフタレンスルホニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ブロモ−ペンタン酸（ジアステレオマー混合物）；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（１−ナフタレンスルホニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（ジアステレオマー混合物）；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（（３−インドリル）エチルカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ジアゾ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（（３−インドリル）エチルカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ブロモ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（（３−インドリル）エチルカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（（３−インドリル）メチルカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ジアゾ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（（３−インドリル）メチルカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ブロモ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（（３−インドリル）メチルカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（シンナモイルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ジアゾ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（シンナモイルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ブロモ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（シンナモイルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（フェニルメチルスルホニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ジアゾ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（フェニルメチルスルホニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ブロモ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（フェニルメチルスルホニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−２−イル−カルボニルアミノ）−プロピル］−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ジアゾ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−２−イル−カルボニルアミノ）−プロピル］−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ブロモ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−２−イル−カルボニルアミノ）−プロピル］−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−２−イル−カルボニルアミノ）−プロピル］−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−２−イル−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ジアゾ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−２−イル−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ブロモ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−２−イル−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−２−イル−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−２−イル−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−（１−イミダゾリル−メチル）−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（２−ナフタレンカルボニルアミノ）−プロピル］−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−３−カルボキシ−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（１−ナフタレニルカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（１−ピペリジニル）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（イソキノリン−１−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（イソキノリン−３−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−４−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（ベンゾフラン−２−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（ナフタレン−１−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジフルオロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−３−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（ナフタレン−１−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジメチルベンゾイルオキシ）−ペンタン酸［ジアステレオマー混合物］；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−８−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸［ジアステレオマー混合物］；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（インドール−２−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（インドール−３−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（ナフタレン−１−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（ベンゾフラン−２−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［３−カルボキシ−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−プロピル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（Ｎ−ピペリジン）−ペンタン酸［ジアステレオマー混合物］；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（Ｎ−ピロリジン）−ペンタン酸［ジアステレオマー混合物］；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−ブチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２−ナフチルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−プロピル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸［ジアステレオマー混合物］；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−ヒドロキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸［ジアステレオマー混合物］；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−メトキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸［ジアステレオマー混合物］；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−ｎ−ペンチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−エチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（グルタロイルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソ−オキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；及び
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（フェニルメチルオキシカルボニルアミノ）−プロピル］−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−ペンタン酸メチルエステル。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のイソオキサゾリン誘導体、その医薬的に許容可能な塩、エステルまたは立体化学的異性体を含有するカスパーゼインヒビター。
【請求項７】
活性成分として治療学的有効量の請求項１〜５いずれかに記載の式（Ｉ）のイソオキサゾリン誘導体、その医薬的に許容可能な塩、エステルまたは立体化学的異性体と、医薬的に許容可能な担体とを含有する、炎症またはアポトーシスに起因する疾病を治療するための医薬組成物。
【請求項８】
疾病が、細胞が異常に死滅する疾病、痴呆、脳卒中、ＡＩＤＳによる脳障害、糖尿病、胃潰瘍、肝炎による脳損傷、劇症肝炎（ＦＨＦ）、敗血症、臓器移植拒絶反応、リウマチ性関節炎、虚血性心臓疾患による心臓細胞アポトーシス及び抗炎症よりなる群から選択される請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
疾病がヒトの劇症肝炎である請求項７に記載の組成物。
【請求項１０】
経口投与、経皮投与または非経口注射による投与用の形態である請求項７に記載の組成物。
【請求項１１】
医薬的に許容可能な担体を、治療学的有効量の請求項１〜５のいずれかに記載の式（Ｉ）の化合物と十分に混合することを特徴とする請求項７〜１０のいずれかに記載の医薬組成物の製造法。
【請求項１２】
ヒドロキサモイルクロライド（ＶＩ）をアクリレ−ト誘導体（ＶＩＩ）と反応させてイソオキサゾリン誘導体（ＶＩＩＩ）を得、次いで、イソオキサゾリン誘導体（ＶＩＩＩ）を脱保護し、そこにＲ４を導入して式（ＩＸ）の化合物を得、次いで、式（Ｘ）の化合物と反応させ、必要に応じて、イソキサゾリン誘導体（ＶＩＩＩ）を化合物（Ｘ）と直接反応させて式（Ｉ）の化合物を得、必要に応じて、保護基Ｐ１を有する式（Ｉ）の化合物を、置換基Ｒ４を有する他の化合物に転換することを特徴とする、式（Ｉ）の誘導体、その医薬的に許容可能な塩、エステルまたは立体化学的異性体の製造法：
【化２】
0004195561.tif 000025
［式中、置換基は請求項１と同義である］。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
技術分野
本発明は、蛋白質カスパーゼ（システイニル−アスパルテートプロテイナーゼ）に対するインヒビターとして作用し得る新規イソオキサゾリン誘導体、その医薬的に許容可能な塩、エステル及び立体化学的異性体、その製造法及びカスパーゼインヒビターとしての上記誘導体の用途に関するものである。本発明はまた、イソオキサゾリン誘導体、その医薬的に許容可能な塩、エステル及び立体化学的異性体を含む、炎症及びアポトーシスを防止するための医薬組成物、並びにその製造法に関するものである。本発明に係るイソオキサゾリン誘導体は、カスパーゼによる疾病、例えば、細胞が異常に死滅する疾病、痴呆、脳卒中（cerebral stroke）、ＡＩＤＳ、糖尿病、胃潰瘍、肝炎による肝損傷、敗血症、臓器移植拒絶反応及び抗炎症を治療するために効果的に用いられ得る。
【０００２】
背景技術
自然のあらゆる生物は、発達、分化、成長及び死亡からなるライフサイクルを経験する。最近、ライフサイクルの調節及び疾病の発生に重要な役割を果たすアポトーシスに関与するメカニズムに対して、集中的に研究が行なわれてきた。アポトーシスは多くの要因によって起きるが、主に３種類の細胞シグナル伝達系に起因すると報告されている：その一つは、蛋白質間相互作用によるシグナル伝達系（参照, Muzio M. et al., Cell 85, 817, 1996; Humke E. W. et al., JBC 273, 15702, 1998）であり、第２には、ミトコンドリアを通じたシトクロムＣの細胞質内への取り込み（参照, Liu X. Et al., Cell 86:147, 1996; Li P. et al., Cell 91, 479, 1997）であり、第３には、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＲＫ）酵素のＳＡＰＫ（ストレスにより活性化されるプロテインキナーゼ）活性化による細胞シグナル伝達経路である。この全ての経路は、カスパーゼカスケードを活性化することが知られている。このようなカスパーゼとして、ヒトで約１０種類のアイソザイムが、そしてマウスでは１４種類が同定された（参照, Thornberry N. A. et al., Science 28, 1312 1998; Green D. R. Science 28, 1309, 1998; Ahmad M., et al., Cancer Res. 15, 5201 1998）。この酵素は、酵素活性を持たない酵素前駆体（プロエンザイム）形態で細胞内に存在しており、細胞が損傷されるか、又は細胞壊死につながる物質に曝されると、活性化形態に変換される。活性化された酵素は、二つのポリペプチド（すなわち、約１７−２０ｋＤａの分子量の大きなサブユニット、及び約１０ｋＤａの分子量の小さなサブユニット）が一緒に結合したヘテロ二量体構造を持つ。
【０００３】
現在、カスパーゼは遺伝子同定分析結果及び生化学的特性の見地から三つのグループに分類される；その第１のグループは、サイトカイン活性化のプロセシングを担うカスパーゼ−１、４及び５であり、第２はアポトーシスを生じるカスパーゼ−３、６及び7であり、第３は、アポトーシスのシグナル伝達系の上流で酵素活性化を担うカスパーゼ−８，９及び１０である。
【０００４】
これらのカスパーゼの中で、カスパーゼ−３グループ及びカスパーゼ−８，９，１０などがアポトーシス及び疾病と関連があることが最近報告された（参照, Thornberry N.A. et al, Science, 28, 1312,1998）。
【０００５】
最近の研究結果によれば、カスパーゼは、組織及び細胞によって若干の差はあるが、アポトーシスが開始することによって通常は活性化される。次いで、活性化されたカスパーゼは、細胞内ＣＡＤ（カスパーゼにより活性化されるＤＮＡｓｅ）を活性化させ、最終的に細胞内ＤＮＡを分解して細胞の死滅を生じる（Sakahira H., et al., Nature 1 96, 1998; Enari M et al., Nature 1 43, 1998）。また、これらは、細胞の生存に必要なＰＡＲＰ（ポリ−ＡＤＰリボースポリメラーゼ）のような基質を分解してアポトーシスを促進する。
【０００６】
一方、最近の疾病関連研究によると、痴呆の主要原因とされるベータアミロイド前駆体蛋白質からベータアミロイドペプチドの生産を促進するカスパーゼ−３の活性が、痴呆患者の脳で上昇し、これによって脳細胞のアポトーシスを促進させることが報告された（参照,Kuida K. et al., Nature 28, 368, 1996）。また、カスパーゼの活性化が、例えば、敗血症（参照, Haendeler J. et al., Shock 6, 405, 1996; Lenhoff R.J. et al., 29, 563, 1999）、慢性関節リウマチ（Firestein G.S. et al., J. Clin. Invest 96（3）, 1631, 1995）、脳卒中（参照, Hill I.E. et al., Brain Res. 10, 398, 1995）、ＡＬＳ疾病（参照, Alexianu M.E. et al., J. Neurochem 63, 2365, 1994）、自己免疫疾患（参照, Rieux-Laucat F, et al., Science 2, 1347,（1995））、糖尿病（参照, Juntti-Berggren et al., Science 2, 86, 1993）、肝炎（Haendeler J. et al., Shock 6, 405, 1996）、臓器移植拒絶反応（Koglin J. et al., Transplantation, 27, 904, 1999; Bergese S.D. et al., Transplantation 27, 904, 1999）、胃潰瘍（参照, Slomiany B.L. et al., J. Physiol. Pharmacol. 96, 1631, 1995）などの様々な疾病の直接的な誘発原因になり得ると報告された。
【０００７】
カスパーゼ−１及びカスパーゼ−３の３次元構造、この酵素の触媒メカニズム及び酵素基質特異性（参照, Wilson K.P et al., Nature 370, 270, 1994; Walker N.P.C. et al., Cell 78, 343, 1994; Nature Struc. Biol. 3, 619, 1996）に対する研究は、カスパーゼ−１グループが（Ｐ４）−Ｖａｌ−Ｘ−Ａｓｐ（Ｐ１）のペプチド配列に対してヒドロラーゼ基質特異性を有し、そしてカスパーゼ−３グループが（Ｐ４）Ａｓｐ−Ｘ−Ｘ−Ａｓｐ（Ｐ１）の配列に対してヒドロラーゼ基質特異性を有するということを見出した。
【０００８】
上記アミノ酸配列を模倣するＺ−ＶＡＤ−フルオロメチルケトン及びＺ−ＤＥＶＤ−フルオロメチルケトンが、インヒビターの研究で既に用いられており、カスパーゼの活性化による肝細胞のアポトーシス（参照, Rodriguez I. Et al., J. Exp. Med., 184, 2067, 1996; Rouquet N. et al., Curr Biol. 1, 1192, 1996; Kunstle G. et al., Immunol. Lett 55, 5, 1997）、及び脳虚血による脳細胞のアポトーシスに抑制活性を有することが立証された。しかし、このようなペプチド誘導体は、臨床的適用の場合には、薬物性質において欠陥があるため治療剤として用いられない。
【０００９】
劇症肝炎（Fulminant hepatic failure; FHF）は、肝細胞の大量死滅又は肝機能の突然且つ重篤な障害から引き起こされる臨床的症状である（参照: Trey, C. et al., 1970, Progress in liver disease, Popper, H. and F. Schaffner, eds. Grune and stratton, New York, pp282-298）。ＦＨＦの原因は、肝炎ウイルス感染、薬物及び毒素、アルコール、虚血、代謝性障害、大量悪性浸潤、慢性自己免疫肝炎など多様である。しかし、そのメカニズムは、完全には明らかではない。ＦＨＦの予後は非常に不良であり、一方、その進行は非常に速いので、症状の発現後、１−２週間内に患者が致命的な状態に陥ることが珍しくない（参照, Sherlock, S. 1993, Adv. Intern. Med. 38: 245-267）。従って、大部分のシリーズにおいて全体的な致死率は非常に高い。しかし、肝病変は潜在的に可逆的であり、生存者は通常、完全に回復する。
【００１０】
ＦＨＦに試みられた他の治療策としては、抗生物質、利尿剤、コルチコステロイド、輸血、チャコール(chacoal)血液灌流及びプラスマフェレーシス(plasmaphresis)が挙げられる。しかし、これらの方法のうちのいずれも、制御された研究において効果的であることが示されなかった。近年、肝移植は、この症状の予後を実際に改善させることができる唯一の治療策として一般に受け入れられている。しかし、免疫合併症、ウイルスまたは細菌感染及び移植片アベイラビリティー(graft availability)のような問題のために、肝移植はＦＨＦに対する完全な治療方法にはなり得ない。従って、急性期中に肝細胞を大量の死滅から保護することができる強力な治療剤の開発が、切実に要求されている。
【００１１】
アポトーシスは、特殊な細胞マシーナリー（cellular machinery）によって達成される、一連の異なる形態学的及び生化学的変化によって特徴付けられる細胞死の１類型である。アポトーシスは、過剰であり不必要且つ有害な細胞を除去し、恒常性（homeostasis）を維持するのに必須の過程でありながら、不適切なアポトーシスは、神経変性疾患、虚血性損傷、自己免疫疾患、いくつかの形態の癌等の多くのヒト疾患に関与している。最近、肝細胞のアポトーシスが、ウイルス性肝炎及びアルコール性肝炎並びに劇症肝炎の急性肝不全における肝損傷の主な原因だということが明確になった。アポトーシスシグナルを受けた細胞で発生する数多くの変化が、カスパーゼと呼ばれる一連のシステインプロテアーゼによって遂行される複雑な生化学的反応を反映する。
【００１２】
カスパーゼは、アポトーシスから生きている細胞を保護する蛋白質（例えば、ＤＮＡ断片化を担うヌクレアーゼのインヒビターであるＩCAD／ＤＦＦ４５）と、Ｂｃｌ−２とを不活性化する。同時に、カスパーゼは、細胞構造を直接解体するだけではなく、細胞骨格の調節に関与するさまざまな蛋白質を分解して間接的に細胞構造を再構成することによって、アポトーシスに寄与する。カスパーゼの活性化は、大部分の形態のアポトーシスを開始、進行及び終結する過程と密接に関連しているので、この酵素のファミリーは、過度のアポトーシスまたは不十分なアポトーシスに起因する障害を治療するための魅力的な潜在的標的である。
【００１３】
数種類のカスパーゼインヒビターが同定されている。４つの異なるウイルス性インヒビターのクラス（ＣｒｍＡ，ｐ３５，ＩＡＰファミリ（アポトーシスインヒビター）及びＢ型肝炎ウイルスによってコードされるＨＢｘ蛋白質）が記載されている（参照: Gottlob, K. et al., 1998, J. Biol. Chem. 273: 33347-33353）。しかし、これらの分子は治療剤として適していない。ｚ−ＶＡＤ−ｆｍｋ、ｚ−ＤＥＶＤ−ｆｍｋ及びＡｃ−ＹＶＡＤ−ｃｍｋなどのペプチドベースのカスパーゼインヒビターは、研究での用途に幅広く利用されており、これらのインヒビターは、細胞レベル（参照: Sane, A.T. et al., 1998, Cancer Res. 58: 3066-3072）、ＦａｓまたはＴＮＦαによって引き起こされる肝傷害の齧歯類モデル（参照: Kunstle, G. et al., 1997, Immunol. Lett. 55: 5-10）、または肝移植後の虚血（参照: Cursio, R. et al., 1999, FASEB J. 13: 253-261）においてアポトーシス遮断活性を示した。Petak及び共同研究者らは、二作用性（bifunctional）抗癌剤であるＢＣＮＵ（１，３−ビス（２−クロロエチル）−１−ニトロソウレア）がカスパーゼ抑制活性を保有し、そしてインビトロで薬物誘発性アポトーシスを抑制したと報告した（参照: Petak, I. et al., 1998, Cancer Res. 58: 614-618）。最近、シクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）インヒビターが、ＦＨＦの潜在的な治療剤として注目されている（参照: McCormick, P.A. et al., 1999, Lancet 353: 40-41）。しかし、これらの物質の効力は、未だ臨床的に確認されていない。
【００１４】
それまでは、新薬の開発は、ヒト肝炎又は肝細胞性損傷と関連した適切な動物モデルへのアベイラビリティーに依存していた。従って、治療剤候補物質の効力を検証するために、ヒトＦＨＦに対して適切な動物モデルを採用することは非常に重要である。２種類の実験肝炎モデルが報告された。一つは、細菌性リポ多糖類とＤ−ガラクトサミンによって誘発された肝損傷であり（参照:Galanos, C. et al., 1979, Proc. Natl. Acad. Sci., 76: 5939; Lehman, V. et al., 1987, J. Exp. Med. 165-657）、もう一方は、最近開発された実験モデルであるＣｏｎＡ誘発性肝炎である（参照: Tiegs, G. et al., 1992, J. Clin. Invest. 90: 196-203; Mizuhara, H. et al., 1994, J. Exp. Med. 179: 1529-1537）。ＣｏｎＡ誘発性肝炎モデルは、多くの点において、特に、病因におけるＦａｓの役割においてヒトＦＨＦを厳密に模倣する。Ｆａｓは肝細胞で多く発現されており、ＦａｓＬは活性化されたＴ細胞で発現されており、そして細胞傷害性リンパ球のエフェクターとして機能している。成熟マウスへのアゴニスト性モノクローナル抗Ｆａｓ抗体の注入は、急速な肝不全を引き起こす。このことは、異常に活性化されたＦａｓ−ＦａｓＬ系が、細胞傷害性Ｔ細胞のような免疫系の活性化により引き起こされ得るヒト劇症肝炎において役割を果たし得ることを示す。ＦＨＦの病因における特定のＣＴＬの関与、Ｆａｓにより媒介されたアポトーシスに対する初代肝細胞のインビトロでの感受性、及びヒト肝炎ウイルスによって形質転換された肝細胞でのＦａｓの過剰発現等の蓄積されたデータが、この仮説と一致している。最近の研究では、Ｆａｓ−ＦａｓＬ系の活性化が、ＣｏｎＡ誘発性肝炎による肝細胞の損傷に重要な役割を果たすことが立証された（参照: Tagawa,Y. et al., 1998, Eur. J. Immunol. 28: 4105-4113）。ＦａｓＬは、ＣｏｎＡ注入が肝臓内Ｔ細胞に優勢に発現された直後に肝臓中に誘導される。これらの結果は、Ｆａｓ−ＦａｓＬ系がＣｏｎＡ誘発性肝炎の進展に重要な因子であることを示す。同時に、ＣｏｎＡ−肝炎の誘導は、ＩＬ−２、ＴＮＦα、ＩＬ−６、ＩＬ−４及びＩＬ−１０などの様々なサイトカイン類の生産と関連する。
【００１５】
発明の開示
本発明者らは、当該分野において公知の構造に対して独特な構造を有するカスパーゼインヒビターに適切な新規の治療剤を開発するために長年鋭意研究を行なった。その結果、本発明者らは、驚くべきことに、公知のインヒビターに対して異なる構造を有し、且つカスパーゼの多様な基質に対して優れた抑制活性を有する式（I）の新規なイソオキサゾリン誘導体を見出し、本発明を完成するに至った。
【００１６】
従って、本発明の目的は、カスパーゼインヒビターとして有用な式（I）の新規イソオキサゾリン化合物、その医薬的に許容可能な塩、エステル及び立体化学的異性体を提供することである。
【００１７】
本発明の他の目的は、式（I）の化合物の製造法を提供することである。
【００１８】
本発明のさらなる他の目的は、式（I）のイソオキサゾリン誘導体、その医薬的に許容可能な塩、エステル及び立体化学的異性体を含むカスパーゼインヒビターを提供することである。
【００１９】
本発明のさらなる他の目的は、活性成分として治療学的有効量の式（I）のイソオキサゾリン誘導体及び医薬的に許容可能な担体を含む、カスパーゼ活性を抑制するための医薬組成物を提供することである。
【００２０】
本発明のさらなる他の目的は、上記イソオキサゾリン誘導体、その医薬的に許容可能な塩、エステル及び立体化学的異性体を含む、炎症及びアポトーシスを防止するための医薬組成物、並びにそれらの製造法を提供することである。
【００２１】
本発明のさらなる目的及び利点は、明細書の以下の内容を通じて明らかになるだろう。
【００２２】
上記は、本発明のより適切な目的のうちのいくつかを概説したものである。これらの目的は、本発明のより適切な特徴のうちのいくつかを単に例示したものとして理解されるべきである。開示された発明を異なる様式で適用するか、又は開示の範囲内で本発明を改変することによって、多くの他の有益な結果を得ることができる。従って、本発明の他の目的及びより完全な理解は、特許請求の範囲に規定された本発明の範囲に加えて、好ましい実施態様の詳細な説明を参照することによって見出され得る。
【００２３】
発明を実施するためのベストモード
本発明を詳細に説明する前に、いくつかの重要な用語を以下のように定義する：
ａ）単純アルキル鎖（Simple Alkyl Chain：以下「ＳＡＣ」という）は、Ｃ1-8を有する炭水化物を意味し、分枝異性体を含む。
ｂ）単純シクロアルキル鎖（Simple CycloAlkyl Chain：以下「ＳＣＡＣ」という）はＣ3-10を有する環式化合物を意味する。
ｃ）アリール基（以下「Ａｒ」という）は、ベンゼン［１：２，３，４，５，６］、ナフタレン［１，２：１，２，３，４，５，６，７，８］、ピリジン［２，３，４：２，３，４，５，６］、インドール［１，２，３，４，５，６，７：１，２，３，４，５，６，７］、キノリン［２，３，４，５，６，７，８：２，３，４，５，６，７，８］、イソキノリン［１，３，４，５，６，７，８：１，３，４，５，６，７，８］、フラン［２，３：２，３，４，５］、チオフェン［２，３：２，３，４，５］、ピロール［１，２，３：１，２，３，４，５］、ピリミジン［２，４，５，６：２，４，５，６］、イミダゾール［１，２，４，５：１，２，４，５］、ベンゾフラン［２，３：２，３，４，５，６，７］などを表し、［  ］（括弧）内で前側の数字は、対応するアリール基が本発明に係るインヒビターに連結される位置を表し、コロン後の後側の数字は、以後定義する置換基Ｙが結合され得る位置を表す。
ｄ）アミノ酸の側鎖は、２０個の天然アミノ酸のキラル炭素に結合される側鎖基（side group）を表す。天然アミノ酸は、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、スレオニン、システイン、メチオニン、プロリン、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、グルタミン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、フェニルアラニン、チロシンおよびトリプトファンからなる。
【００２４】
頻繁に言及する用語を以下のように省略する:
Ｎ−クロロスクシニミド：ＮＣＳ
Ｎ−メチルモルホリン：ＮＭＭ
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド：ＤＭＦ
１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド：ＥＤＣ
１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物：ＨＯＢｔ
トリフルオロ酢酸：ＴＦＡ
ｔ−ブトキシカルボニル：Ｂｏｃ
ベンジルオキシカルボニル：Ｃｂｚ
メチル：Ｍｅ
エチル：Ｅｔ
当量：Ｅｑまたはｅｑ
【００２５】
上記及び以下で用いる用語「立体化学的異性体」とは、式（１）の誘導体が有し得るあらゆる可能な異性体を意味する。他に言及されるか、指示がなければ、化合物の化学的表記は、あらゆる可能な立体化学的異性体の混合物を示し、上記混合物は基本分子構造のあらゆるジアステレオマーを包含する。式（１）の誘導体の立体化学的異性体を本発明の範囲内に含めることを意図する。
【００２６】
上記及び以下で用いる医薬的に許容可能な塩は、式（１）の誘導体を形成し得る治療学的に活性である無毒性塩の形態を含む。
【００２７】
以下、本発明が一層詳細に説明されるだろう。
【００２８】
一つの局面において、本発明は、式（I）の新規イソオキサゾリン誘導体、その医薬的に許容可能な塩、エステル及び立体化学的異性体を提供する。
【００２９】
【化４】
0004195561.tif 000002
【００３０】
式（I）の化合物中、置換基は下記のように定義される：
Ｒ及びＲ'は、それぞれ独立して、水素、単純アルキル鎖（−ＳＡＣ）、単純シクロアルキル（−ＳＣＡＣ）、芳香族（−Ａｒ）、または芳香族で置換された単純アルキル鎖（−ＳＡＣ−Ａｒ）を表し；好ましくは水素を表す。明細書の記載全般にかけて、Ｒ’は他に特に定義されていない限りＲと同義である。
【００３１】
Ｒ1は−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒまたは−ＳＡＣ−Ａｒを表すか、あるいはアミノ酸の側鎖または−（ＣＨ2）nＣＯＯＺ（式中、ｎは１または２であり、Ｚは水素、−ＳＡＣ、−Ａｒまたは−ＳＣＡＣである）を表し；好ましくは−ＣＨ2ＣＯＯＨを表す。
【００３２】
Ｒ3は、−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、−ＳＡＣ−Ａｒまたはアミノ酸の側鎖を表し；好ましくは−ＣＨ（ＣＨ3）2、−ＣＨ2ＣＯＯＨ、−（ＣＨ2）2ＣＯ2Ｈ、−ＣＨ2Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ2または−（ＣＨ2）2Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ2を表す。
【００３３】
Ｒ1またはＲ3の隣接位置が立体中心（stereogenic center）となる場合、両方の立体異性体化合物を本発明の範疇内に含めることが意図される。同様に、２つの形態の化合物が共存する場合（ジアステレオマー化合物の混合物）も本発明の範疇内に含まれる。また、Ｒ1またはＲ3がカルボン酸またはアミノ酸の側鎖残基を有する塩基で構成される場合、その保護形態（例えば、単純エステル（simple ester）など）または医薬的に許容可能な塩の形態もまた本発明に係る化合物の範疇内に含まれる。
【００３４】
Ｒ2は、−Ｈ、−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒまたは−ＳＡＣ−Ａｒを表すか、あるいはアミノ酸の側鎖を表すか、あるいは−（ＣＨ2）n（Ｏ）mＲ5（式中、Ｒ5＝−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、−ＳＡＣ−Ａｒ；ｎ＝０，１または２；ｍ＝０または１）または−（ＣＨ2）nＯＣ（＝Ｏ）Ｒ6（式中、Ｒ6＝−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒまたは−ＳＡＣ−Ａｒ；ｎ＝１または２）を表す。好ましいＲ2は、（ＣＨ2）n（Ｏ）mＡｒ'（式中、ｎ＝０，１または２；ｍ＝０または１；Ａｒ'＝置換されたフェニルまたはイミダゾール）、メチルまたは水素を表す。
【００３５】
Ｒ2に起因する隣接位置が立体中心となる場合、両方の立体異性体化合物が、本発明の化合物の範疇内に含まれる。同様に、２つの形態の化合物が共存する場合（ジアステレオマー化合物の混合物）も本発明に係る化合物の範疇内に含まれる。また、Ｒ2がカルボン酸またはアミノ酸の側鎖残基を有する塩基で構成される場合、その保護形態（例えば、単純エステルなど）または医薬的に許容可能な塩の形態もまた本発明に係る化合物の範疇内に含まれる。
【００３６】
Ｒ４は、
ａ）（１）アミノ酸のキラル炭素に結合されたカルボキシル基がアミン基に結合してアミド結合を形成し、（２）アミノ酸のキラル炭素がＲまたはＳ配置のいずれかを有し、（３）アミノ酸のキラル炭素に結合されたアミノ基がホルミル、アセチル、プロピル、シクロプロピルカルボニル、ブチル、メタンスルホニル、エタンスルホニル、プロパンスルホニル、ブタンスルホニル、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、プロピルオキシカルボニル、ブチルオキシカルボニル、メチルカルバモイル、エチルカルバモイル、プロピルカルバモイル、ブチルカルバモイル、ジメチルカルバモイル、ジエチルカルバモイル、ジプロピルカルバモイル、ジブチルカルバモイルまたはシクロプロピルアミノカルボニルで保護されるアミノ基であるか、あるいは当該アミノ基は水素原子で置き換えられていてもよく、（４）側鎖のカルボキシル基が−ＳＡＣまたは−ＳＣＡＣと共にエステル基を形成し得る、アミノ酸残基、
ｂ）−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ７（式中、Ｒ７＝−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、−ＳＡＣ−Ａｒ）、−ＣＯ２Ｒ８（式中、Ｒ８＝水素またはＲ７）、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ８Ｒ８、−ＳＯＲ７、−ＳＯ２Ｒ７または−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−Ａｒ、
ｃ）−（Ｃ＝Ｏ）−Ｌ−ＣＯ２Ｒ８［式中、Ｌは、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、フラン、チオフェン、ジアゾ−ル（１，２または１，３）、トリアゾール（１，２，３または１，３，４）、テトラゾール、オキサゾール、イソオキサゾール、チアゾール、イソチアゾール、ジアジン（１，２または１，３または１，４）、トリアジン、−Ｐｈ（−Ｒ９）−（式中、Ｒ９＝Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＨＯ、ＯＨ、ＯＣＨ３、ＣＦ３、ＯＣＦ３、ＣＮ、Ｃ（＝Ｏ）Ｍｅ）、テトラヒドロフラン、テトラヒドロチオフェン、１，４−ジオキサン、−ＣＨ＝Ｃ（Ｒ１０）−（式中、Ｒ１０＝Ｈ、メチル、エチル）、−ＣＨ＝ＣＨＣＨ（Ｒ１０）−、−ＣＨ（ＯＲ１０）ＣＨ２−、−ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２−、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２ＣＨ２−よりなる群から選択される二価（＝二重置換できる）のリンカーを表す］を表し、
【００３７】
Ｒ1及び隣接したＲ'ならびに／またはＲ3及び隣接したＲが互いに連結して環式化合物を形成する場合、Ｒ1−Ｒ'またはＲ3−Ｒは、共に、−（ＣＨ2）n−、−（ＣＨ2）n−Ｏ−（ＣＨ2）m−または−（ＣＨ2）n−ＮＲ13−（ＣＨ2）m−（式中、ｎ＋ｍ＜９、Ｒ13＝−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、−ＳＡＣ−Ａｒ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＳＡＣ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＳＣＡＣ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ａｒまたは−Ｃ（＝Ｏ）−ＳＡＣ−Ａｒ）を表し;
【００３８】
Ｘは、−ＣＮ、−ＣＨＯ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ14（式中、Ｒ14＝−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、−ＳＡＣ−Ａｒまたは−ＣＨＮ2）、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ15（式中、Ｒ15＝−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒまたは−ＳＡＣ−Ａｒ）、−ＣＯＮＲ16Ｒ17（式中、Ｒ16及びＲ17は、それぞれ、−Ｈ、−ＳＡＣ、−Ｏ−ＳＡＣ−、−ＳＣＡＣ、−Ａｒまたは−ＳＡＣ−Ａｒを表す）、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ2Ｏ（Ｃ＝Ｏ）Ａｒ"（式中、Ａｒ"＝Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩまたはＣＨ3によって２，６−二置換されたフェニル）、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ2ＯＲ18（式中、Ｒ18は、−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒまたは−ＳＡＣ−Ａｒ）または−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ2ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ19（式中、Ｒ19＝−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒまたは−ＳＡＣ−Ａｒ）を表すか、あるいは、
【００３９】
Ｘは−ＣＯＣＨ2−Ｗを表し、式中、Ｗは、−Ｎ2、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＮＲ20Ｒ21または−ＳＲ22（式中、Ｒ20、Ｒ21及びＲ22は、それぞれ独立して、−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒまたは−ＳＡＣ−Ａｒを表すか、あるいはＲ20及びＲ21が連結して環式化合物を形成する）を表するか；あるいは、Ｗは：
【００４０】
【化５】
0004195561.tif 000003
【００４１】
［式中、Ｙは、−ＯＨ、ＯＲ23（式中、Ｒ23＝−ＳＡＣまたは−ＳＣＡＣ）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ24（式中、Ｒ24＝−Ｈ、−ＳＡＣまたは−ＳＣＡＣ）、−Ｆ、−Ｃｌ、-Ｂｒ、−Ｉ、−ＣＮ、−ＮＣ、−Ｎ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｒ25（式中、Ｒ25＝−ＳＡＣまたは−ＳＣＡＣ）、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ26（式中、Ｒ26＝−ＳＡＣまたは−ＳＣＡＣ）および−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ27Ｒ28（式中、Ｒ27、Ｒ28＝−ＳＡＣまたは−ＳＣＡＣ）を表し、Ｙは、一置換されていても、オーダー（order）及び種類に関係なくその最大限度で多置換されていてもよい］を表す。
【００４２】
式（I）の化合物中で、Ｒ4が−Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ2）pＣＯＯＺ（式中、ｐは１〜４であり、Ｚは水素、−ＳＡＣ、−Ａｒまたは−ＳＣＡＣである）を表す化合物が好ましい。また、Ｒ1が−（ＣＨ2）nＣＯＯＺ（式中、ｎは１または２であり、Ｚは水素、−ＳＡＣ、−Ａｒまたは−ＳＣＡＣである）を表す化合物が好ましい。
【００４３】
式（I）の化合物中でもより好ましい化合物は、
ａ）Ｒ及びＲ’が水素を表し、
ｂ）Ｒ1が−ＣＨ2ＣＯＯＨ、−ＣＨ2ＣＯＯＣＨ3またはＣＨ2ＣＯＯＣＨ2ＣＨ3を表し、
ｃ）Ｒ2が−（ＣＨ2）n（Ｏ）mＲ5（式中、Ｒ5＝−ＳＡＣ、−ＳＣＡＣ、−Ａｒ、−ＳＡＣ−Ａｒ；ｎ＝０，１または２；ｍ＝０または１）、ＳＡＣ、Ａｒまたは水素を表し、
ｄ）Ｒ3が−ＣＨ（ＣＨ3）2、−ＣＨ2ＣＯＯＨ、−（ＣＨ2）2ＣＯ2Ｈ、−ＣＨ2Ｃ（Ｏ）ＮＨ2または−（ＣＨ2）2Ｃ（Ｏ）ＮＨ2を表し、
ｅ）Ｒ4が−Ｃ（＝Ｏ）（Ｏ）nＲ29（式中、ｎ＝０，１；Ｒ29＝−Ａｒまたは−ＳＡＣ−Ａｒ）、−ＳＯ2Ｒ30（式中、Ｒ30＝−Ａｒまたは−ＳＡＣ−Ａｒ）または−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ31（式中、Ｒ31＝−Ａｒまたは−ＳＡＣ−Ａｒ）を表すか、あるいは、
ｆ）Ｘが−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨＮ2、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ2Ｂｒ、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ2Ｃｌ、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ2ＯＰｈまたは−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ2ＯＣ（＝Ｏ）Ａｒ"（式中、Ａｒ"＝２，６−ジクロロフェニル、２，６−ジフルオロフェニルまたは２，６−ジメチルフェニル）を表す化合物である。
【００４４】
最も好ましい化合物は以下よりなる群から選択される。
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−フェニルメチルオキシカルボニルアミノ−２−メチル−プロピル］−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−フェニルメチルオキシカルボニルアミノ−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニル−アミノ｝−４−ケト−ペンタン酸；
（２Ｓ）−２−｛３−［（１Ｓ）−１−フェニルメチルオキシカルボニルアミノ−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニル−アミノ｝−コハク酸  １−（Ｎ−メチル−Ｎ−メトキシ）−アミド；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−フェニルメチルオキシカルボニルアミノ−２−メチル−プロピル］−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ジアゾ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−フェニルメチルオキシカルボニルアミノ−２−メチル−プロピル］−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ブロモ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−フェニルメチルオキシカルボニルアミノ−２−メチル−プロピル］−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ)−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−１−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ジアゾ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ブロモ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ジアゾ−ペンタン酸（ＬＰ及びＭＰ）；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ブロモ−ペンタン酸(ＬＰ及びＭＰ)；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（ＬＰ及びＭＰ）；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−３−カルボキシ−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（キノリン−２−イル−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−スルホニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２−ナフチルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（１−ナフチルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（２Ｓ）−２−アセチルアミノ−サクシノイルアミノ）−３−カルボキシ−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２−ナフチルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（２−ナフタレンカルボニルアミノ）−プロピル］−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸（ジアステレオマー混合物）；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（フェニルメチルオキシカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ジアゾ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（フェニルメチルオキシカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ブロモ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（フェニルメチルオキシカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（フェニルエチルカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ジアゾ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（フェニルエチルカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ブロモ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（フェニルエチルカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（１−ナフタレンカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ジアゾ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（１−ナフタレンカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ブロモ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（１−ナフタレンカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（１−ナフタレンスルホニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ジアゾ−ペンタン酸（ジアステレオマー混合物）；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（１−ナフタレンスルホニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ブロモ−ペンタン酸（ジアステレオマー混合物）；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（１−ナフタレンスルホニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（ジアステレオマー混合物）；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（（３−インドリル）エチルカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ジアゾ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（（３−インドリル）エチルカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ブロモ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（（３−インドリル）エチルカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（（３−インドリル）メチルカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ジアゾ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（（３−インドリル）メチルカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ブロモ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（（３−インドリル）メチルカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（シンナモイルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ジアゾ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（シンナモイルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ブロモ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（シンナモイルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（フェニルメチルスルホニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ジアゾ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（フェニルメチルスルホニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ブロモ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（フェニルメチルスルホニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−２−イル−カルボニルアミノ）−プロピル］−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ジアゾ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−２−イル−カルボニルアミノ）−プロピル］−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ブロモ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−２−イル−カルボニルアミノ）−プロピル］−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−２−イル−カルボニルアミノ）−プロピル］−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−２−イル−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ジアゾ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−２−イル−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−ブロモ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−２−イル−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−２−イル−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−２−イル−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−（１−イミダゾリル−メチル）−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（２−ナフタレンカルボニルアミノ）−プロピル］−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−３−カルボキシ−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（１−ナフタレニルカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（１−ピペリジニル）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（イソキノリン−１−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（イソキノリン−３−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−４−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（ベンゾフラン−２−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（ナフタレン−１−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジフルオロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−３−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（ナフタレン−１−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジメチルベンゾイルオキシ）−ペンタン酸［ジアステレオマー混合物］；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−８−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸［ジアステレオマー混合物］；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（インドール−２−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（インドール−３−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（ナフタレン−１−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（ベンゾフラン−２−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［３−カルボキシ−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ)−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ)−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−プロピル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ)−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（Ｎ−ピペリジン）−ペンタン酸［ジアステレオマー混合物］；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（Ｎ−ピロリジン）−ペンタン酸［ジアステレオマー混合物］；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−ブチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２−ナフチルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−プロピル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸［ジアステレオマー混合物］；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−ヒドロキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸［ジアステレオマー混合物］；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−メトキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸［ジアステレオマー混合物］；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−ｎ−ペンチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−エチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（グルタロイルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソ−オキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸；及び
（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（フェニルメチルオキシカルボニルアミノ）−プロピル］−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−ペンタン酸メチルエステル。
【００４５】
もう一つの局面において、本発明は式（I）の化合物の製造法を提供する。
【００４６】
以下、本発明に係る式（I）のイソオキサゾリン誘導体の製造法が反応スキーム１及び２と関連して説明されるだろう。反応スキームは、概して、本発明に用いられる特定方法を例示するが、単位操作（unit operation）のどのような変形も本発明の精神を逸脱せず、行なわれ得ることが理解されなければならない。従って、本発明は、下記の好ましい実施態様に限定されてはならない。
【００４７】
第１工程で、アミノ保護されたアミノ酸（II）（Novabiochemから市販）を還元させ、Ｎ−保護されたアミノアルコール（III）を得、次いで、これを酸化してＮ−保護されたアミノアルデヒド（IV）を得る。
【００４８】
Ｎ−保護されたアミノアルデヒド（IV）をアルコールと水の混合溶液中でヒドロキシルアミンヒドロクロライド及び炭酸ナトリウムと反応させ、オキシム（V）（syn-及びanti- オキシム）を得る。得られたオキシム誘導体（V）をジメチルホルムアミドの水溶液中でＮＣＳ（Ｎ−クロロスクシニミド）で処理し、ヒドロキサモイルクロライド（VI）を得る。ヒドロキサモイルクロライドの合成に用いられる代表的な置換基として、下記の基が例示され得る：Ｐ1はＣｂｚ、ｔ−Ｂｏｃ、Ｆｍｏｃ、Ｔｅｏｃ（トリメチルシリル−エチルオキシカルボニル）などを表し；ＲはＨを表し、Ｒ3は−ＣＨ2ＣＨ2ＣＯ2Ｂｕ（ｔ）、−ＣＨ2ＣＯ2Ｍｅ、−ＣＨ2ＣＯ2Ｂｕ（ｔ）、−イソプロピル、フェニルメチルなどを表す。
【００４９】
反応スキーム１
【００５０】
【化６】
0004195561.tif 000004
【００５１】
上記反応スキーム１で、商業的に入手可能な化合物（II）〜（VI）に対して下記ａ）〜ｇ）の組合物（combination）が合成され得る。
【００５２】
a) P1 = Cbz, R = H, R3 = i-Pr
b) P1 = t-Boc, R = H, R3 = i-Pr
c) P1 = Fmoc, R = H, R3 = CH2CH2CO2Bu(t)
d) P1 = t-Boc, R = H, R3 = CH2CO2Me
e) P1 = Cbz, R = H, R3 = CH2CO2Bu(t)
f) P1 = Fmoc, R = H, R3 = CH2CO2Bu(t)
g) P1 = Boc or Cbz, R = H, R3 = CH2Ph
【００５３】
反応スキーム２
【００５４】
【化７】
0004195561.tif 000005
【００５５】
第２工程では、次いで、上記で得られたヒドロキサモイルクロライド（VI）をアクリレート誘導体（VII）と反応させてイソオキサゾリン誘導体（VIII）を得る。必要に応じて、イソオキサゾリン誘導体（VIII）はオキシム誘導体（V）から直接合成できる。
【００５６】
保護基Ｐ1を有する化合物（例えば、Ｐ1はＣｂｚ基である）がインヒビターとして用いられ得る場合、イソオキサゾリン誘導体（VIII）を化合物（X）と直接反応させ、式（I）の化合物を得る。保護基Ｐ1を他の置換基に転換させる必要があり、Ｐ1を除去し、そこにＲ4を導入する。
【００５７】
上記反応スキーム２で、下記の置換基の組合物が合成され得る。
【００５８】
化合物（VIII）において、
a) P1=Cbz,R=H,R3=i-Pr,R2=H,P2=Et
b) P1=Cbz,R=H,R3=i-Pr,R2=H,P2=H
c) P1=Cbz,R=H,R3=i-Pr,R2=CH2OPh,P2=Et
d) P1=Cbz,R=H,R3=i-Pr,R2=CH2OPh,P2=H
e) P1=Fmoc,R=H,R3=CH2CH2CO2Bu(t),R2=CH3,P2=CH3(または Et)
f) P1=Teoc,R=H,R3=i-Pr,R2=CH3,P2=H
g) P1=t-Boc,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,P2=Et
h) P1=t-Boc,R=H,R3=i-Pr,R2=PhOCH2,P2=Et
i) P1=t-Boc,R=H,R3=i-Pr,R2=1-ナフチル,P2=Et
j) P1=t-Boc,R=H,R3=i-Pr,R2=2-ナフチル,P2=Et
k) P1=t-Boc,R=H,R3=i-Pr,R2=フェニル,P2=Et
l) P1=t-Boc,R=H,R3=i-Pr,R2=4-ブロモフェニル,P2=Et
m) P1=t-Boc,R=H,R3=i-Pr,R2=AcOCH2,P2=Et
【００５９】
化合物（IX）において、
a) R4=Cbz,R=H,R3=i-Pr,R2=H,P2=Et
b) R4=Cbz,R=H,R3=i-Pr,R2=H,P2=H
c) R4=Cbz,R=H,R3=i-Pr,R2=CH2OPh,P2=Et
d) R4=Cbz,R=H,R3=i-Pr,R2=CH2OPh,P2=H
e) R4=1-ナフトイル,R=H,R3=i-Pr,R2=CH2OPh,P2=Et
f) R4=1-ナフトイル,R=H,R3=i-Pr,R2=CH2OPh,P2=H
g) R4=2-ナフトイル,R=H,R3=i-Pr,R2=CH2OPh,P2=Et
h) R4=2-ナフトイル,R=H,R3=i-Pr,R2=CH2OPh,P2=H
i) R4=2-ナフトイル,R=H,R3=CH2CH2CO2Bu（t）,R2=CH3,P2=CH3
j) R4=2-ナフトイル,R=H,R3=CH2CH2CO2Bu（t）,R2=CH3,P2=H
k) R4=2-ナフトイル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,P2=Et
l) R4=2-ナフトイル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,P2=H
m) R4=2-ナフタレンスルホニル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhOCH2,P2=Et
n) R4=2-ナフタレンスルホニル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhOCH2,P2=H
o) R4=2-キノリンカルボニル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhOCH2,P2=Et
p) R4=2-キノリンカルボニル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhOCH2,P2=H
q) R4=2-ナフトイル,R=H,R3=i-Pr,R2=H,P2=Et
r) R4=2-ナフトイル,R=H,R3=i-Pr,R2=H,P2=H
s) R4=ヒドロシンナモイル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,P2=Et
t) R4=ヒドロシンナモイル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,P2=H
u) R4=1-ナフトイル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,P2=Et
v) R4=1-ナフトイル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,P2=H
w) R4=1-ナフタレンスルホニル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,P2=Et
x) R4=1-ナフタレンスルホニル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,P2=H
y) R4=3-インドールアセチル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,P2=Et
z) R4=3-インドールアセチル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,P2=H
aa) R4=3-インドールプロピオニル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,P2=Et
ab) R4=3-インドールプロピオニル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,P2=H
ac) R4=トランス-シンナモイル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,P2=Et
ad) R4=トランス-シンナモイル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,P2=H
ae) R4=フェニルメチルスルホニル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,P2=Et
af) R4=フェニルメチルスルホニル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,P2=H
ag) R4=2-キノリンカルボニル,R=H,R3=i-Pr,R2=H,P2=Et
ah) R4=2-キノリンカルボニル,R=H,R3=i-Pr,R2=H,P2=H
ai) R4=2-キノリンカルボニル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,P2=Et
aj) R4=2-キノリンカルボニル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,P2=H
ak) R4=2-キノリンカルボニル,R=H,R3=i-Pr,R2=1-イミダゾリル,P2=Et
al) R4=1-キノリンカルボニル,R=H,R3=i-Pr,R2=1-イミダゾリル,P2=H
am) R4=COCH2CH2CO2Bu(t),R=H,R3=CH2CH2CO2Bu(t),R2=CH3,P2=CH3
an) R4=COCH2CH2CO2Bu(t),R=H,R3=CH2CH2CO2Bu(t),R2=CH3,P2=H
ao) R4=COCH2CH2CO2Bu(t),R=H,R3=i-Pr,R2=CH3,P2=CH3
ap) R4=COCH2CH2CO2Bu(t),R=H,R3=i-Pr,R2=CH3,P2=H
【００６０】
化合物（X）において、
a) P3=Cbz,R=H,R1=CH2CO2Bu(t),X=CO2Me
b) P3=HCl+H,R=H,R1=CH2CO2Bu(t),X=CO2Me
c) P3=Cbz,R=H,R1=CH2CO2Bu(t),X=COCH2N2
d) P3=Cbz,R=H,R1=CH2CO2Bu(t),X=COCH2Br
e) P3=Cbz,R=H,R1=CH2CO2Bu(t),X=COCH2OPh
f) P3=Cbz,R=H,R1=CH2CO2Bu(t),X=CH(OH)CH2OPh
g) P3=H,R=H,R1=CH2CO2Bu(t),X=CH(OH)CH2OPh
h) P3=Cbz,R=H,R1=CH2CO2Bu(t),
X=CH(OH)CH2OC(O)Ph(2,6-ジクロロ)
i) P3=H,R=H,R1=CH2CO2Bu(t),
X=CH(OH)CH2OC(O)Ph(2,6-ジクロロ)
j) P3=Cbz,R=H,R1=CH2CO2Bu(t),X=CONMe(OMe)
k) P3=H,R=H,R1=CH2CO2Bu(t),X=CONMe(OMe)
l) P3=Cbz,R=H,R1=CH2CO2Bu(t),X=CH(OH)CH2O-(1-ナフチル)
m) P3=H,R=H,R1=CH2CO2Bu(t),X=CH(OH)CH2O-(1-ナフチル)
【００６１】
化合物（I）において、
a) R4=2-ナフトイル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhOCH2,R1=CH2CO2Bu(t),X=CO2H
b) R4=2-ナフトイル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhOCH2,R1=CH2CO2Bu(t),X=C(=O)CH2N2
c) R4=2-ナフトイル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhOCH2,R1=CH2CO2Bu(t),X=C(=O)CH2Br
d) R4=2-ナフトイル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhOCH2,R1=CH2CO2Bu(t),X=C(=O)CH2OPh
e) R4=2-ナフトイル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhOCH2,R1=CH2CO2Bu(t),X=C(=O)CH2OC (=O) Ph(2,6-ジクロロ)
f) R4=2-ナフトイル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhOCH2,R1=CH2CO2Bu(t),X=2-ナフチルオキシメチルカルボニル
g) R4=2-ナフトイル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhOCH2,R1=CH2CO2Bu(t),X=1-ナフチルオキシメチルカルボニル
h)R4=2-ナフトイル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhOCH2,R1=CH2CO2Bu(t),X=CH(OH)CH2OPh
i) R4=1-ナフトイル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhOCH2,R1=CH2CO2Bu(t),X=C(=O)CH2OPh
j) R4=2-ナフタレンスルホニル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhOCH2,R1=CH2CO2Bu(t),X=CH (OH)CH2OPh
k) R4=2-ナフタレンスルホニル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhOCH2,R1=CH2CO2Bu(t),X=C (=O)CH2OPh
l) R4=2-キノリンカルボニル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhOCH2,R1=CH2CO2Bu(t),X=CH (OH)CH2OPh
m) R4=2-キノリンカルボニル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhOCH2,R1=CH2CO2Bu(t),X=CH (OH)CH2OPh
n) R4=2-ナフトイル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,R1=CH2CO2Bu(t),X=C(=O)CH2N2
o) R4=2-ナフトイル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,R1=CH2CO2Bu(t),X=C(=O)CH2Br
p) R4=2-ナフトイル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,R1=CH2CO2Bu(t),X=C(=O)CH2OPh
q) R4=2-ナフトイル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,R1=CH2CO2Bu(t),X=C(=O)CH2OC (=O)-Ph-(2,6-ジクロロ)
r) R4=N-アセチル-β-t-ブチルアスパルチル,R=H,R3=CH2CH2CO2Bu(t),R2= CH3,R1=CH2CO2Bu(t),X=CH(OH)CH2OPh
s) R4=N-アセチル-β-t-ブチルアスパルチル,R=H,R3=CH2CH2CO2Bu(t), R2=CH3,R1=CH2CO2Bu(t),X=C(=O)CH2OPh
t) R4=Cbz,R=H,R3=i-Pr,R2=H,R1=CH2CO2Bu(t),X=C(=O)NMe(OMe)
u) R4=Cbz,R=H,R3=i-Pr,R2=H,R1=CH2CO2Bu(t),X=C(=O)CH3
v) R4=Cbz,R=H,R3=i-Pr,R2=PhOCH2,R1=CH2CO2Bu(t),X=CO2CH3
w) R4=Cbz,R=H,R3=i-Pr,R2=PhOCH2,R1=CH2CO2Bu(t),X=CO2H
10x) R4=Cbz,R=H,R3=i-Pr,R2=PhOCH2,R1=CH2CO2Bu(t),X=C(=O)CH2N2
y) R4=Cbz,R=H,R3=i-Pr,R2=PhOCH2,R1=CH2CO2Bu(t),X=C(=O)CH2Br
z) R4=Cbz,R=H,R3=i-Pr,R2=PhOCH2,R1=CH2CO2Bu(t),X=C(=O)CH2OC(=O)-Ph-2,6-ジクロロ
aa) R4=Cbz,R=H,R3=i-Pr,R2=PhOCH2,R1=CH2CO2Bu(t),X=C(=O)NMe(OMe)
ab) R4=Cbz,R=H,R3=i-Pr,R2=PhOCH2,R1=CH2CO2Bu(t),X=C(=O)CH3
ac) R4=Cbz,R=H,R3=i-Pr,R2=H,R1=CH2CO2Bu(t),X=CO2CH3
ad) R4=Cbz,R=H,R3=i-Pr,R2=H,R1=CH2CO2Bu(t),X=C(=O)CH2OC(=O)Ph（2,6-ジクロロ）
ae) R4=2-ナフトイル,R=H,R3=i-Pr,R2=H,R1=CH2CO2Bu(t),X=C(=O)CH2OPh
af) R4=ヒドロシンナモイル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,R1=CH2CO2Bu(t),X=C(=O) CH2OC(=O)Ph(2,6-ジクロロ)
ag) R4=1-ナフトイル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,R1=CH2CO2Bu(t),X=C(=O)CH2OC (=O)Ph(2,6-ジクロロ)
ah) R4=1-ナフタレンスルホニル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,R1=CH2CO2Bu(t),X=C(=O)CH2OC(=O)Ph(2,6-ジクロロ)
ai) R4=3-インドールアセチル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,R1=CH2CO2Bu(t),X=C(=O)CH2OC(=O)Ph(2,6-ジクロロ)
aj) R4=3-インドールプロピオニル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,R1=CH2CO2Bu(t), X=C(=O)CH2OC(=O)Ph(2,6-ジクロロ)
ak) R4=トランス-シンナモイル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,R1=CH2CO2Bu(t), X=C(=O)CH2OC(=O)Ph(2,6-ジクロロ)
al) R4=フェニルメチルスルホニル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,R1=CH2CO2Bu(t), X=C(=O)CH2OC(=O)Ph(2,6-ジクロロ)
am) R4=2-キノリンカルボニル,R=H,R3=i-Pr,R2=H,R1=CH2CO2Bu(t), X=C(=O)CH2OC(=O)Ph(2,6-ジクロロ)
an) R4=2-キノリンカルボニル,R=H,R3=i-Pr,R2=H,R1=CH2CO2Bu(t), X=C(=O)CH2OPh
ao) R4=2-キノリンカルボニル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,R1=CH2CO2Bu(t), X=C(=O)CH2OC(=O)Ph（2,6-ジクロロ）
ap) R4=2-キノリンカルボニル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,R1=CH2CO2Bu(t), X=C(=O)CH2OPh
aq) R4=2-キノリンカルボニル,R=H,R3=i-Pr,R2=1-イミダゾリル,R1=CH2CO2Bu(t), X=C(=O)CH2OCPh
ar) R4=2-ナフトイル,R=H,R3=i-Pr,R2=H,R1=CH2CO2Bu(t),X=C(=O)CH3
as) R4=COCH2CH2CO2Bu(t),R=H,R3=（CH2CH2CO2Bu(t),R2=CH3,R1=CH2CO2Bu(t), X=C(=O)CH2OPh
at) R4=COCH2CH2CO2Bu(t),R=H,R3=i-Pr,R2=CH3,R1=CH2CO2Bu(t),X=C(=O) CH2OPhau) R4=1-ナフトイル,R=H,R3=i-Pr,R2=PhCH2,R1=CH2CO2Bu(t),X=C(=O)CH2N（CH2）5
【００６２】
反応スキーム２において、化合物（X）の官能基Ｘは、化合物（VIII）または（IX）の合成に含まれる反応の後、いくつかの単位操作によって導入され得るか、あるいは所望の置換基Ｘを既に有する化合物（VIII）または（IX）を後続の反応に進めても良い。
【００６３】
アクリレート誘導体（VII）は、以下の反応スキーム３に記載されるように、２つの方法のいずれか一方で合成され得る。
【００６４】
反応スキーム３
【００６５】
【化８】
0004195561.tif 000006
【００６６】
エステル誘導体（XI）をジエチルオキサレートと反応させてオキサレート誘導体（XII）を得、次いで、これを塩基の存在下で反応させて所望のアクリレート誘導体（VII）を得る。あるいは、これは、公知化合物（XIII）から出発して様々な方法によって合成され得る。すなわち、公知化合物（XIIIa）は容易に化合物（XIIIb）、（VIIe）、（VIIf）、（VIIg）等に転換される。
【００６７】
化合物（XI）及び（XII）において、置換基は下記のように例示される：
a) P2 = Et, R2 = Ph
b) P2 = Et, R2 = 4-ブロモフェニル
c) P2 = Et, R2 = 1-ナフチル
d) P2 = Et, R2 = 2-ナフチル
【００６８】
化合物（VII）及び（XIII）において、下記の置換基の組合物が上記の方法によって合成され得る。
【００６９】
化合物（VII）において、
a) R2 = Ph, P2 = Et
b) R2 = 4-ブロモフェニル, P2 = Et
c) R2 = 1-ナフチル, P2 = Et
d) R2 = 2-ナフチル, P2 = Et
e) R2 = CH2OAc, P2 = Et
f) R2 = CH2Ph, P2 = Et
g) R2 = CH2OPh, P2 = Et
【００７０】
化合物（XIII）において、
a) R2 = Et, Z = OH
b) R2 = Et, Z = Br
【００７１】
以下、本発明の方法によって合成された代表的な化合物をその構造式に従って列挙する。本発明に係る代表的な化合物は、便宜上、発明者によって番号が付されており、ＭＰは脱保護の前工程でＨＰＬＣ由来の極性の高い分画（高極性：more polar fraction）を表し、ＬＰはＨＰＬＣ由来の極性の低い分画（低極性：less polar fraction）を表す。しかし、本発明の化合物の合成を説明するため、および本発明の化合物が上記の方法によって合成できるという事実を例示するためにこれらを提示するが、本発明は、どのような様式であっても、これら列挙した化合物に限定されるべきではない。
【００７２】
【化９】
0004195561.tif 000007
0004195561.tif 000008
0004195561.tif 000009
0004195561.tif 000010
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0004195561.tif 000015
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0004195561.tif 000018
0004195561.tif 000019
0004195561.tif 000020
【００７３】
式（I）のイソオキサゾリン誘導体及びその医薬的に許容可能な塩、エステル及び異性体は有用な薬理学的性質を有する。例えば、これらはカスパーゼに対して抑制活性を有する。抗消炎またはアポトーシス抑制効果などのその薬理学的活性に基づいて、これらは多数の疾患、例えば、細胞が異常に死滅する疾病、痴呆、脳卒中（cerebral stroke）、ＡＩＤＳによる脳障害（brain impairment）、糖尿病、胃潰瘍、肝炎による脳損傷、劇症肝炎（fulminant hepatic failure）(ＦＨＦ)、敗血症、臓器移植拒絶反応、リウマチ性関節炎、虚血性心臓疾患による心臓細胞アポトーシス及び抗炎症治療剤として効果的に用いることができる。
【００７４】
特に、本発明に係る組成物は、好ましくは、劇症肝炎の治療剤として用いることができる。
【００７５】
本発明者らは、以下に詳細に説明するように、式（I）の化合物を用いて、インビトロ及びインビボでのカスパーゼ抑制活性、ＣｏｎＡまたはＴＮＦα／アクチノマイシンＤによって肝疾患が誘発された場合、肝細胞の生存率、肝炎の治療効果、肝細胞アポトーシスの減少及びＰＡＲＰ分解の抑制を調べた。
【００７６】
本発明者らはまた、ＩＦＮγ及び抗Ｆａｓ抗体によってアポトーシスが誘導された場合、本発明に係る式（I）の化合物の細胞生存率への効果について試験を行っており、その結果を既存のカスパーゼインヒビターＡｃ−ＤＥＶＤ−ＣＨＯおよび／またはｚ−ＤＥＶＤ−ｃｍｋと比較した。簡略に、本発明者らはマウスでＣｏｎ Ａによって誘発された急性肝炎（acute hepatic failure）に対する式（I）の新規カスパーゼインヒビターの効力を調べた。その結果、この低分子非ペプチド性インヒビター（non-peptide-based inhibitor）は、カスパーゼ活性だけでなく、インビトロ及びインビボでの肝細胞のアポトーシス死の抑制を示した。これらの結果は、本発明に係る式（I）の化合物が、肝細胞の大量アポトーシス死に起因するヒトＦＨＦの治療剤の候補物質になり得ることを示唆する。
【００７７】
本発明の化合物は、広範なスペクトル活性を有する低分子非ペプチド性カスパーゼインヒビターである（図１及び２参照）。式（I）の化合物がそもそもカスパーゼファミリー酵素の特異的なインヒビターとして考案されたという事実から、式（Ｉ）の化合物はＢＣＮＵまたはＣＯＸ−２インヒビターとは異なる。アポトーシス過程が非常に複雑であり、この過程の幾つかの段階にカスパーゼが決定的に関与することに注目すべきである。また、多くの公知の基質が偶然にも発見されているので、カスパーゼの調節について広く知られていることは比較的少ない。従って、急性ＦＨＦ中に肝細胞の大量アポトーシスを短期間に遮断するために、広範なスペクトルのカスパーゼインヒビターは、特異的なスペクトルのカスパーゼインヒビターよりもさらに強力な効果を発揮し得る。この点で式（I）の化合物は理想的な候補物質であり得る。
【００７８】
本発明者らは、カスパーゼインヒビターである式（I）の化合物のアポトーシス遮断効果を試験するためにＣｏｎＡ誘発性肝炎モデルを用いた。
【００７９】
Ｃｏｎ Ａ誘発性肝炎には幾つかのサイトカイン類、ＩＬ−２、ＩＦＮγ、ＴＮＦα、ＩＬ−６、ＩＬ−４及びＩＬ−１０が関与する。本発明者らは、Ｃｏｎ Ａによって増加した血清ＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−４及びＩＦＮγ濃度に対する式（I）の化合物の効果を評価した。その結果、本発明に係る式（I）の化合物は、図１及び２に示した化合物のカスパーゼ−１−抑制活性に起因する用量依存的な様式でＩＬ−１βレベルを有意に抑制した（図５Ａ参照）。しかし、式（I）の化合物は、ＩＬ−２、ＩＬ−４及びＩＦＮγレベルには有意な影響を及ぼさなかった（図５Ｂ、Ｃ、Ｄ）。これらの結果は、式（I）の化合物がカスパーゼインヒビターとしてその活性を発揮する主要な細胞集団がＦａｓを発現する肝細胞であるという事実に起因し得る。式（I）の化合物は、カスパーゼに関連したアポトーシスから肝細胞を保護したが、活性化されたＴ細胞を直接抑制しなかった。細胞におけるカスパーゼ−３−様プロテアーゼに対する生体基質（biosubstrate）のうちの一つは、ＰＡＲＰ（１１６ｋＤａ）であり、これはアポトーシスを受けている細胞から８５ｋＤａ及び３１ｋＤａ断片に分解される。従って、ＰＡＲＰの８５ｋＤａ分解物の出現はアポトーシスの初期指標として提案された（参照：Lazebnik, Y. A. et al., 1994, Nature 371; 346-347; Kaufmann, S. H. et al,. 1993, Cancer Res. 53: 3976-3985）。
【００８０】
式（I）の化合物は、Ｃｏｎ Ａによって誘発された肝細胞のアポトーシス死に起因するＰＡＲＰの分解を用量依存的な様式で抑制した（図７参照）。ウェスタンブロット分析において、８５ｋＤａ分解物の量は、化合物３３の用量が増加するにつれて次第に減少したが、完全な１１６ｋＤａ  ＰＡＲＰは比較的一定して現れた。実質的にアポトーシスを受けた肝細胞は、全肝質量と比較して、ほんの一部含むと考えられる。この結果は、組織学的調査と一致する。図６に示すように、Ｃｏｎ Ａは、肝細胞に深刻な形態学的及び組織学的変化を引き起こし、アポトーシス性損傷が明確に観察された。しかし、肝細胞の大部分は依然として生存したままであり、アポトーシス細胞は一部を含む。この現象によって、完全な１１６ｋＤａ  ＰＡＲＰがＣｏｎＡ／ビヒクルマウスの肝臓においても出現することが説明される。
【００８１】
一方、本発明者らは、ＩＦＮγ及び抗Ｆａｓ抗体でＦａｓ応答細胞（Fas responsive cell）を処理することによって、人工アポトーシス（artificial poptosis）を誘導し、この細胞に対する式（I）の化合物のアポトーシス抑制活性を評価するための実験を行った。その結果、本発明者らは式（I）の化合物が公知のＡｃ−ＤＥＶＤ−ＣＨＯまたはｚ−ＤＥＶＤ−ｃｍｋに対して２倍以上優れた抑制効果を示すことを発見した（同一濃度での細胞生存率が３５．１％（Ａｃ−ＤＥＶＤ−ＣＨＯ）、４７．３％（ｚ−ＤＥＶＤ−ｃｍｋ）、１００％（化合物３３）であった、表１及び図８参照）。
【００８２】
以上の実験結果から、式（I）の非ペプチド化合物が、幅広いカスパーゼ抑制活性、すなわち、抗消炎及びアポトーシスの防止効果を有し、特に、ヒトＦＨＦでの肝細胞の大量アポトーシスを防止する治療剤として効果的に用いられ得ることに注目する。
【００８３】
式（I）の化合物は新規な非ペプチド性カスパーゼインヒビターである。その広範なスペクトル活性は、ヒトＦＨＦでの肝細胞の大量アポトーシスを遮断する治療剤として有利な性質であり得る。
【００８４】
従って、本発明の化合物は上記の疾病に対する医薬として用いられ得る。医薬としての上記用途または治療法は、疾病を治療するに有効な量の本発明に係る化合物を患者に局所または全身投与することを包含する。
【００８５】
目的の化合物は、投与目的に応じて様々な医薬形態に製剤化できる。上記医薬形態または医薬組成物は、新規であるとみなされ、従って、本発明のさらなる局面を構成する。また、上記組成物の製造も本発明のさらなる局面を構成する。本発明の医薬組成物を製造するために、活性成分として、塩基または塩の形態で有効量の化合物を、投与に望ましい製剤形態に応じて多様な形態を取ることが可能な医薬的に許容可能な担体と十分に混合する。望ましくは、これらの医薬組成物は、好ましくは経口投与用、経皮投与用または非経口注射による投与用として適した単位投薬形態（unit dosage form）である。投与の容易性及び投薬量の均一性から、単位投薬形態で上記医薬組成物を製剤化することが特に有利である。例えば、組成物を経口投薬形態で製造する際、懸濁液、シロップ剤、エリキシル剤及び溶液剤などの経口液体製剤の場合には、例えば、水、グリコール類、オイル類、アルコール類などの通常の医薬的な媒質のいずれを用いてもよく；また、散剤、丸剤、カプセル剤及び錠剤の場合、例えば、澱粉、糖類、カオリン、滑沢剤、結合剤、崩壊剤などの固体担体を用いてもよい。その投与が容易であるがために、錠剤及びカプセル剤が最も有利な経口投薬単位の代表となり、この場合、固体医薬担体が明らかに用いられる。錠剤及び丸剤（fill）は腸溶性のものが望ましい。
【００８６】
非経口組成物の場合、担体は、通常、大部分が少なくとも滅菌水を含むが、例えば、溶解性を補助するために他の成分が含まれていてもよい。注射可能溶液、例えば、滅菌注射水性懸濁液または油性懸濁液は、適切な分散剤、湿潤剤または懸濁剤を用いて製造され得る。この目的のために用いられ得る溶剤には、水、リンゲル液、等張ＮａＣｌ溶液などが挙げられ、また、滅菌固定オイルも溶剤もしくは懸濁媒質として用いられ得る。モノグリセリド、ジグリセリドを含む任意の非興奮性固定オイル（non-excitatory fixed oil）がこのような目的で用いることができ、そしてオレイン酸などの脂肪酸が注射可能製剤に用いることができる。
【００８７】
経皮投与に適した製剤において、担体は、必要に応じて、浸透促進剤及び／または適切な湿潤剤を含み、必要に応じて、これらは任意の天然の適切な添加剤と少量の割合で配合される。該添加剤は皮膚に顕著な悪影響を及ぼさない。該添加剤は、皮膚への投与を促進することができ、そして／または所望の組成物を製造するのに役立ち得る。これらの組成物は、様々な経路、例えば、経皮パッチ、点滴剤（spot-on）または軟膏として投与できる。
【００８８】
本明細書及びその特許請求の範囲で用いられる投薬単位（dosage unit）は、単位投薬量として適切な物理的に分離された単位を意味し、各単位は、必要な医薬担体と関連して所望の治療効果を生じるように計算された所定量の活性成分を含有する。このような投薬単位形態の例は、錠剤、カプセル剤、丸剤、粉末パケット、ウエハース、注射可能溶液または懸濁剤、ティースプーンフル（茶匙１杯：teaspoonful）、テーブルスプーンフル（食匙１杯：tablespoonful）等、及び分離したその複数回投薬である。
【００８９】
細胞が異常に死滅する疾病、痴呆、脳卒中、ＡＩＤＳ、糖尿病、胃潰瘍、肝炎による肝損傷、敗血症、臓器移植拒絶反応及び抗炎症の治療における目的化合物の有用性の観点から、本発明が上記の疾患に罹患した患者を治療する方法を提供し、当該方法が、医薬担体を伴う混合物中の医薬的有効量の式（Ｉ）の化合物、あるいはその医薬的に許容可能な塩、エステルまたは立体化学的異性体の局所もしくは全身投与を包含することは自明である。
【００９０】
関連疾患の治療に熟練した者は、被検体に投与するカスパーゼインヒビター、特に、式（I）の化合物の有効量を容易に決定することができた。一般に、有効量は単位投薬量または分割した投薬量で０．０１ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ体重 日 の範囲であることが予想される。しかし、当業者にとって、このような量の範囲は単なるガイドラインであるだけで、何れの様式でも本発明の範囲または用途を制限しようとするものではないことは明らかである。特定の被検体に対する特定投薬レベルは、用いる特定化合物、被検体の体重、健康状態、摂生、薬剤の投与期間、投与経路、排泄率、薬剤の組み合わせ、疾患の重症度等に依存するだろう。
本発明を以下の実施例してさらに詳細に説明する。これらの実施例は、目的だけを示すために提示され、そしてこれらの実施例が、特許請求の範囲に適切に記載された発明を限定すると解釈されるべきではない。
【００９１】
【実施例】
（Ａ）ヒドロキサモイルクロライド合成（実施例１−４）
実施例１：Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−（Ｓ）−バリナール及びＮ−ｔ−ブトキシ−カルボニル−（Ｓ）−バリナールオキシムの合成
−６０℃、Ｎ2下、乾燥ＣＨ2Ｃｌ2（約２００ｍＬ）中のジメチルスルホキシド（１１．7ｍＬ，３．０ｅｑ）の溶液に、オキサリルクロライド（５．７８ｍＬ，１．２ｅｑ）をゆっくり加えた。１０分後、ＣＨ2Ｃｌ2（３０ｍＬ）中のＮ−ｔ−ブトキシカルボニル−（Ｓ）−バリノ−ル（１１．２３ｇ，５５．２ｍｍｏｌ）の溶液をゆっくり加えて、フラスコを２０ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2で濯いだ。得られた白色懸濁液を約−５０℃で１時間攪拌した。反応溶液をジイソプロピルエチルアミン（２８．８ｍＬ，３．０ｅｑ）で処理して、−２３℃で約２０分間攪拌した後、ヘキサン（４００ｍＬ）で希釈した。混合物を水（１５０ｍＬ）、１Ｎ−ＫＨＳＯ4溶液（×３、トータル１Ｌ）で洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、濃縮した。得られた帯黄色の液体をさらなる精製なしに次工程で直接使用した。
【００９２】
水浴温度でエタノ−ル（６０ｍＬ）−水（３０ｍＬ）中の粗バリナールをヒドロキシルアミンヒドロクロライド（５．７６ｇ，１．５ｅｑ）及びＮａ2ＣＯ3（４．３９ｇ，０．７５ｅｑ）で処理した。反応が１分で多くの固体を生成した後、エタノール−水（１：１，６０ｍＬ）で希釈し、1時間攪拌した。反応溶液を飽和ＮａＣｌ（１００ｍＬ）に注いだ後、酢酸エチル（３００ｍＬ）で２回抽出した。有機抽出物を飽和ＮａＨＣＯ3（１００ｍＬ×２）で洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、濾過し、濃縮して白色粉末（１１．３４ｇ、オキシムの  syn,anti混合物）を得た。
【００９３】
実施例２：（２Ｓ）−2−（ｔ−ブトキシカルボニル）アミノ−１−クロロ−３−メチルブタン−１−オンオキシムの合成
ＤＭＦ（１００ｍＬ）中のＮ−ｔ−ブトキシ−カルボニル−（Ｓ）−バリナールオキシム（１１．３４ｇ）をＮＣＳ（７．７５ｇ）で処理し、温水浴（約４０℃）で１時間攪拌した。ＤＭＦ除去後、残渣を酢酸エチル−ヘキサン（１：１，１５０ｍＬ）で抽出し、水（１００ｍＬ×３）で洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、濾過し、濃縮して表題化合物１３．６９ｇを得た。
【００９４】
実施例３：４−（９−フルオレニルメトキシカルボニル）アミノ−（４Ｓ）−５−ヒドロキシ−ペンタン酸  ｔ−ブチルエステルの合成
０℃、Ｎ2下、乾燥ＴＨＦ（１１０ｍＬ）中のＮ−（９−フルオレニルメトキシカルボニル）−γ−ｔ−ブチルグルタミン酸（８．５１ｇ，２０．０ｍｍｏｌ）及びＮＭＭ（２．４２ｍＬ，１．１ｅｑ）の溶液にイソブチルクロロホルメート（２．７２ｍＬ，１．０５ｅｑ）を加えた。２０分後、反応混合物を、Ｎ2下、−７８℃、ＴＨＦ（１２０ｍＬ）−ＭｅＯＨ（３０ｍＬ）中のＮａＢＨ4（１．５ｇ）溶液に濾過−添加し、乾燥ＴＨＦ（２０ｍＬ）で濯いだ。−７８℃で２．５時間攪拌後、反応物を酢酸（１３ｍＬ）でクエンチした。約５０ｍＬに濃縮した後、残渣を酢酸エチル−ヘキサン（２００ｍＬ，１：１）中に溶解し、水（１５０ｍＬ×２）で洗浄した。水層を酢酸エチル−ヘキサン（１５０ｍＬ，１：１）で再抽出した。合わせた抽出物を飽和ＮａＨＣＯ3（１５０ｍＬ×２）で洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、濾過し、濃縮してガラス状の固体として表題化合物（８．３０ｇ）を得た。粗アルコールを直接用いた。
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.77 (2H, d, J=7.3Hz), 7.66 (2H, d, J = 7.8 Hz), 7.41 (2H, t, J = 7.3 Hz), 7.31 (2H, 擬似 t, J = 7.8, 7.3 Hz), 5.18  (NH, d), 4.41 (2H, m), 4.22 (1H, m), 3.72-3.57 (3H, m), 2.33 (2H, m), 1.93-1.77 (2H, m), 1.45(9H, s).
【００９５】
実施例４：４−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）アミノ−（４Ｓ）−５−クロロ−５−ヒドロキシイミノ−ペンタン酸ｔ−ブチルエステルの合成
−６５℃、Ｎ2下、乾燥ＣＨ2Ｃｌ2（１００ｍＬ）中のＤＭＳＯ（３．０ｍＬ）の溶液にオキサリルクロライド（２．１０ｍＬ，１．２ｅｑ）をゆっくり加えた。１５分後、ＣＨ2Ｃｌ2（５０ｍＬ）中の４−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）アミノ−（４Ｓ）−５−ヒドロキシペンタン酸ｔ−ブチルエステル（８．３０ｇ、２０ｍｍｏｌ）の溶液を加え、乾燥ＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）で濯いだ。得られた溶液を−４０〜−５０℃で２時間攪拌した。この溶液に、ＥｔＮ（ｉ−Ｐｒ）2（１０．４５ｍＬ，３．０ｅｑ）を加えて反応溶液を−１０℃までゆっくり加温し、ＴＬＣでチェックした（アルデヒドへの転換は比較的遅い。約１時間）。反応混合物をヘキサン（３００ｍＬ）で希釈し、水（１５０ｍＬ）で洗浄し、１Ｎ−ＫＨＳＯ4（×３、トータル５００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、濃縮して対応のアルデヒドを得た。
０℃でエタノ−ル（６０ｍＬ）−ＣＨ2Ｃｌ2（３０ｍＬ）−水（１０ｍＬ）中、粗アルデヒドをＨ2ＮＯＨ・ＨＣｌ（２．０８ｇ，１．５ｅｑ）及びＮａ2ＣＯ3（１．６０ｇ、０．７５ｅｑ）で処理した。反応物を室温で３０分間攪拌した後、水（１０ｍＬ）を加えて１時間さらに攪拌した。反応物を追加のＨ2ＮＯＨ・ＨＣｌ（４００ｍｇ）及びＮａ2ＣＯ3（３２０ｍｇ）でさらに攪拌した（１時間）。大部分の揮発物を真空下に除去し、残渣を酢酸エチル（２００ｍＬ）で溶解し、水（１００ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、濾過し、濃縮して、白色粉末状の所望のオキシム（８．３０ｇ，syn＋anti）を得た。
ＤＭＦ（３５ｍＬ）中の粗オキシムをＮＣＳ（２．６７ｇ，２０．０ｍｍｏｌ）で処理した。反応物を温浴（４０℃）で１時間攪拌した。高真空ロータリーエバポレーターにおいてＤＭＦを除去した後、残渣をヘキサン−酢酸エチル（１：１，１５０ｍＬ）で溶解し、水（１００ｍＬ×３）で洗浄して、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、濾過し、濃縮して表題化合物（９．２５ｇ，syn＋anti）を得た。
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.88(1H, s), 7.75(2H, d, J = 7.3Hz), 7.57(2H, m), 7.39(2H, t, J = 7.32Hz), 7.30 (2h, 擬似 t, J = 7.8,7.3Hz), 5.46(1H, d), J = 9.3 Hz), 4.63(1H, m), 4.43-4.38(2H, m), 4.19(1H, m), 2.3(2H, m), 2.03(2H, m), 1.43(9H, s). （主要な異性体について報告されたＮＭＲデータ）
【００９６】
次の化合物は、上記実施例と同じ方法で製造した。
・１−クロロ−３−メチル−（２Ｓ）−２−フェニルメチルオキシカルボニルアミノ−ブタン−１−オン−オキシム、
・３−（ｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−（３Ｓ）−４−クロロ−４−ヒドロキシイミノ−ブタン酸メチルエステル、
・３−（フェニルメチルオキシカルボニルアミノ）−（３Ｓ）−４−クロロ−４−ヒドロキシイミノ−ブタン酸  ｔ−ブチルエステル、及び
・３−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ）−（３Ｓ）−４−クロロ−４−ヒドロキシイミノブタン酸  ｔ−ブチルエステル。
【００９７】
（Ｂ）アクリレート誘導体の合成（実施例５〜８）
実施例５：エチル  ２−アセトキシメチルアクリレートの合成
０℃、Ｎ2下、乾燥ＣＨ2Ｃｌ2（２００ｍＬ）中のエチル  ２−ヒドロキシメチルアクリレート（１７．３ｇ，１３３ｍｍｏｌ，純度  約７０％，参照：Villieras, J. and Rambaud, M. Synthesis, 1982, 914）の溶液を無水酢酸（１８．８ｍＬ，１．５ｅｑ）及びトリエチルアミン（３７ｍＬ，２．０ｅｑ）で処理した。室温で一夜攪拌後、反応物をヘキサン（４００ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ3（３００ｍＬ×２）で洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、濾過し、濃縮した。簡単に蒸留して透明液体として表題化合物４．６ｇを得た。ＮＭＲ分析は、約７０％純度を示した。
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 6.36 (1H, s), 5.84 (1H, s), 4.81(2H, s), 4.25 (2H, q, J = 7.3 Hz), 2.11 (3H, s), 1.31 (3H, t, J = 7.3 Hz)
【００９８】
実施例６：エチル  ２−フェノキシメチルアクリレートの合成
０℃、Ｎ2下、乾燥ＴＨＦ（２０ｍＬ）中のエチル  ２−ブロモメチルアクリレ−ト（２．００ｇ，１０．４ｍｍｏｌ、参照：Villieras, J. and Rambaud, M. Synthesis, 1982, 914）及びフェノ−ル（９７５ｍｇ、１．０ｅｑ）の溶液を無水Ｋ2ＣＯ3（１．４３ｇ，１．０ｍｏｌ ｅｑ）で処理した。反応は１時間観察されなかった。無水ＤＭＦ（２０ｍＬ）を加え、０℃で２時間及び室温で１時間攪拌した。ＤＭＦの蒸発後、水（１００ｍＬ）を加え、反応を酢酸エチル（１００ｍＬ×２）で抽出した。有機抽出物をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、濾過し、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（４０％  ＣＨ2Ｃｌ2／ヘキサン）して表題化合物１．７１２ｇ（８０％）を得た。
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.30 (2H, yt, J = 7.3 Hz), 6.99-6.96 (3H, m), 6.41 (1H, s), 6.01 (1H, s), 4.78 (2H, s), 4.27 (2H, q, J = 7.33 Hz)
【００９９】
実施例７：エチル  ２−ベンジルアクリレートの合成
ＴＨＦ（３０ｍＬ）中のブロモベンゼン（７．１５ｇ，４５．５ｍｍｏｌ）の溶液に、−７８℃、Ｎ2下、ｎ−ＢｕＬｉ（１６．６ｍＬ，ヘキサン中２．５Ｍ，４１．４ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を１０分間攪拌した。ＴＨＦ（３０ｍＬ）中ＣｕＣＮ（３．７１ｇ，４１．４ｍｍｏｌ）の懸濁液に、−７８℃、Ｎ2下、カニューレを通して、リチウム化したベンゼンを加えた。反応混合物を−７８℃で１０分間さらに攪拌し、ＴＨＦ中、エチル  ２−ブロモメチルアクリレ−ト（４．００ｇ，２０．７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温までゆっくり加温して２Ｎ  ＨＣｌでクエンチした。全ての沈澱物を濾別して濾過物をヘキサン（４００ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ3（３００ｍＬ×２）で洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、濾過し、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（２％酢酸エチル−ヘキサン）して表題化合物３．０４（７７％）を得た。
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.34-7.22 (5H, m), 6.26 (1H, s), 5.48(1H, s), 4.22(2H, q, J = 6.3Hz), 3.66 (2H, s), 1.29 (3H, q, J = 6.3 Hz).
【０１００】
実施例８：エチル  ２−（４−ブロモフェニル）アクリレートの合成
表題化合物を公知の手順（Helvetica Chimica Acta 1986, 69 2048）によって製造した。
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.46 (2H, d), 7.29 (2H, d), 6.37 (1H, s), 5.90 (1H, s), 4.29 (2H, q), 1.33 (3H, t)
【０１０１】
次の化合物を同様に製造した。
・エチル  ２−（１−ナフチル）アクリレート
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.86 (2H, t, J = 7.3 Hz), 7.44 (1H, d, J = 8.8 Hz), 7.48-7.43 (3H, m), 7.37 (1H, d, J = 6.8 Hz), 6.70 (1H, d, J = 2.0 Hz), 5.89 (1H, d, J = 2.0 Hz), 4.22 (2H, q, J = 7.3 Hz), 1.21 (3H, t, J = 7.3 Hz),
【０１０２】
・エチル  ２−（２−ナフチル）アクリレート
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.95 (1H, s), 7.90-7.86 (3H, m), 7.59-7.52 (3H, m), 6.47 (1H, d, J = 1.0Hz), 6.06 (1H, d, J = 1.0 Hz), 4.38 (2H, q, J = 6.8 Hz), 1.40 (3H, t, J = 6.8Hz).
【０１０３】
エチル  ２−ブチルアクリレート
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.11 (s, 1H), 5.49 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 4.19 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 2.29 (m, 2H), 1.45-1.28 (m, 7H), 0.90 (t, J = 7.3 Hz, 3H).
【０１０４】
エチル  ２−プロピルアクリレート
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 6.12 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 5.49 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 4.20 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 2.27 (m, 2H), 1.49 (m, 2H), 1.29 (t, J = 7.3 Hz, 3H), 0.92 (t, J = 7.3 Hz, 3H).
【０１０５】
エチル  ２−エチルアクリレート
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 6.11 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 5.50 (s, 1H), 4.20 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 2.32 (m, 2H), 1.29 (t, J = 6.9 Hz, 3H), 1.07 (t, J = 7.4 Hz, 3H).
【０１０６】
エチル  ２−ペンチルアクリレート
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ6.12 (s, 1H), 5.50 (s, 1H), 4.21 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 2.29 (m, 2H), 1.51-1.13 (m, 9H), 0.89 (t, J = 6.8 Hz, 3H).
【０１０７】
（Ｃ）イソオキサゾリン合成の一般的な手順（実施例９及び１０）
実施例９：３−（（１Ｓ）−1−フェニルメチルオキシカルボニルアミノ−２−メチルプロピル）−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボン酸エチルエステルの合成
−７８℃、Ｎ2下、乾燥エーテル（１０ｍＬ）中の（２Ｓ）−２−フェニルメチルオキシカルボニルアミノ−１−クロロ−３−メチルブタン−１オンオキシム（６４０ｍｇ，２．２５ｍｍｏｌ）及びエチル  ２−フェノキシメチルアクリレ−ト（４６４ｍｇ）の溶液をトリエチルアミン（６２７ｕＬ，２．０ｅｑ）で処理した。反応物を一夜攪拌して室温までゆっくり加温した。水（１００ｍＬ）を加え、反応物を酢酸エチル（１００ｍＬ×２）で抽出し、水（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、濾過し、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（１５％  酢酸エチル−ヘキサン）により、ジアステレオマーの１：１混合物として表題化合物８５１ｍｇ（８３％）を得た。
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.34(7H, m), 6.98 (1H, t, J = 7.3Hz), 6.89 (2H, d, J = 7.7Hz), 5.61 (1H, d, J = 9.3 Hz), 5.15-5.08 (2H, m), 4.50 (1H, br s), 4.33-4.22 (4H, m), 3.60-3.54(1H, m), 3.32-3.27(1H, m), 2.10 (1H, m), 1.29 (3H, m), 1.02-0.94 (6H, m).
【０１０８】
次の化合物を同様に製造した。
・エチル  ３−[（１Ｓ）−１−フェニルメチルオキシカルボニルアミノ−２−メチル−プロピル]−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボキシレート（ジアステレオマー）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.45-7.15 (m, 10H), 5.07 (m, 2.5H), 4.90 (d, 0.5H), 4.30-4.18 (m, 3H), 3.36-2.88 (m, 4H), 1.95-1.80 (m, 1H), 1.27 (m, 3H), 0.86-0.55 (m, 6H).
【０１０９】
・３−[（１Ｓ）−１−ｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−メチル−プロピル]−５−（２−ナフチル）−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボン酸エチルエステル
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.97(1H, s), 7.86-7.82 (3H, m), 7.52-7.48 (3H, m), 4.93 (1H, br), 4.37 (1H, m), 4.25 -4.18 (2H, m), 4.10-4.05 (1H, ツーダブレット, J=17.1, 17.6 Hz), 3.28-3.22 (1H, ツーダブレット, J = 17.1, 17.1 Hz), 2.05 (1H, m), 1.43 ((H, s), 1.24-1.20 (3H, m), 0.98-0.91 (6H, m).
【０１１０】
・３−[（１Ｓ）−ｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−メチル−プロピル]−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボン酸エチルエステル（約１：１  ジアステレオマー）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.25 (5H, m), 4.82 and 4.60 (1H, two m), 4.25-4.15 (3H, m), 3.38-3.29 (2H, m), 3.10 (1H, m), 2.90 (1H, m), 1.43 and 1.42 (9H, two s), 1.27 (3H, m), 0.90-0.80 (6H, m).
【０１１１】
・５−アセトキシメチル−３−[（１Ｓ）−ｔ−ブトキシ−カルボニルアミノ−２−メチル−プロピル]−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボン酸エチルエステル
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 4.93 (1H, br), 4.44-4.26 (5H, m), 3.50 (1H, m), 3.10 (1H, m), 2.08 (4H, s + br 1H), 1.46 (9H, s), 1.32-1.30 (3H, m), 1.02-0.96 (6H, m).
【０１１２】
・エチル  ３−[２−メチル−（１Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）−プロピル]−５−ブチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボキシレート（ジアステレオマー混合物）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ4.96 & 4.87 (two br s, 1H), 4.34-4.18 (m, 3H), 3.42-3.36 (m, 1H), 2.90-2.83 (m, 1H), 2.02 (m, 1H), 1.91 (m, 2H), 1.43 (s, 9H), 1.37-1.26 (m, 7H), 0.98-0.87 (m, 9H).
【０１１３】
・エチル  ３−[２−メチル−（１Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）−プロピル]−５−プロピル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボキシレート（ジアステレオマー混合物）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 4.96-4.86 (m, 1H), 4.33-4.18 (m, 3H), 3.42-3.36 (m, 1H), 2.90-2.83 (m, 1H), 2.02 (m, 1H), 1.89 (m, 2H), 1.43 (s, 9H), 1.29 (m, 5H), 0.98-0.87 (m, 9H).
【０１１４】
・メチル  ３−[２−メチル−（１Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）−プロピル]−５−メトキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボキシレート（ジアステレオマー混合物）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 4.92 (m, 1H), 4.35 (m, 1H), 3.80 & 3.79 (two s, 3H), 3.40 (s, 3H), 3.88-3.13 (m, 4H), 2.04 (m, 1H), 1.44 (s, 9H), 0.99-0.91 (m, 6H).
【０１１５】
・エチル  ３−[２−メチル−（１Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）−プロピル]−５−ｎ−ペンチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボキシレート（ジアステレオマー混合物）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ4.95& 4.88 (two br s, 1H), 4.30-4.17 (m, 3H), 3.42-3.36 (m, 1H), 2.89-2.83 (m, 1H), 2.02 (m, 1H), 1.90 (m, 2H), 1.43 (s, 9H), 1.28 (m, 9H), 0.98-0.85 (m, 9H).
【０１１６】
・エチル  ３−[２−メチル−（１Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）−プロピル]−５−エチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボキシレート（ジアステレオマー混合物）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ4.96& 4.88 (two br s, 1H), 4.31-4.18 (m, 3H), 3.42-3.36 (m, 1H), 2.89-2.80 (m, 1H), 2.03 (m, 1H), 1.94 (m, 2H), 1.43 (s, 9H), 1.29 (m, 3H), 0.97-0.86 (m, 9H).
【０１１７】
実施例１０：３−[（１Ｓ）−１−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ）−３−ｔ−ブトキシカルボニル−プロピル]−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボン酸メチルエステルの合成
−７８℃、Ｎ2下、乾燥エーテル中の４−（９−フルオレニルメトキシカルボニル）アミノ−（４Ｓ）−５−クロロ−５−ヒドロキシ−イミノ−ペンタン酸ｔ−ブチルエステル（３．４４ｇ，７．５０ｍｍｏｌ）及びメチルメタクリレート（２．４０ｍＬ，３．０ｅｑ）の溶液をＥｔＮ（ｉ−Ｐｒ）2（１．９６ｍＬ，１．５ｅｑ）で処理した。前述したように同様に処理した後、２５−３０％酢酸エチル／ヘキサンでフラッシュクロマトグラフィーしてジアステレオマー混合物として表題化合物３．４６ｇ（８９％全収率）を得た。
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.77 (2H, d, J=7.3Hz), 7.59 (2H, d, J =7.3Hz), 7.40 (2H, t, J = 7.3Hz), 7.31 (2H, t, J =7.3 Hz), 5.34 (1H, m), 4.58-4.38 (3H, m), 4.21 (1H, m), 3.78 (3H, s), 3.48 (1H, m), 2.90-2.81 (1H, m), 2.42-2.27 (2H, m), 2.18 (1H, m), 1.93 (1H, m), 1.63 (3H, s), 1.45 (9H, s)
【０１１８】
（Ｄ）イソオキサゾリンの変換（脱保護、Ｐ4基の導入、エステル基の加水分解）（実施例１１及び１２）
【０１１９】
実施例１１：３−｛２−メチル−（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−プロピル｝−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボン酸エチルエステルの合成
０℃、Ｎ2下、乾燥ＣＨ2Ｃｌ2（１０ｍＬ）中の３−｛（１Ｓ）−１−（ｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル｝−５−フェノキシ−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボン酸エチルエステル（２．００ｇ、４．７６ｍｍｏｌ）の溶液をＴＦＡ（６ｍＬ）で処理し、1．５時間攪拌した。揮発物の除去後、残渣を酢酸エチル（２００ｍＬ）で溶解し、飽和ＮａＨＣＯ3（１００ｍＬ×２）で洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、濾過し、濃縮した。０℃、ＤＭＦ（２０ｍＬ）中、粗生成物、ＥＤＣ（１．０９ｇ，１．２ｅｑ）、２−ナフトエ酸（９８３ｍｇ，１．２ｅｑ）及びＨＯＢｔ（７７１ｍｇ，１．２ｅｑ）の溶液にトリエチルアミン（６６３ｕＬ，１．０ｅｑ）を加えた。反応物を室温で一夜攪拌した。真空下で揮発物を除去した後、残渣を酢酸エチル（２５０ｍＬ）で溶解し、水（１００ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（１００ｍＬ×２）で洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、濾過し、濃縮した。２５−３３％酢酸エチル／ヘキサンでのフラッシュクロマトグラフィーにより表題化合物２．０４ｇ（９０％）を得た。
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.30 (1H,s), 7.93-7.84 (4H, m), 7.58-7.52 (2H, m), 7.29-7.22 (2H, m), 7.00-6.81 (4H, m), 5.06-5.01 (1H, m), 4.36-4.24 (4H, m), 3.68-3.61 (1H, m), 3.43-3.39 (1H, m), 2.28 (1H, m), 1.31-1.26 (3H, m), 1.12-1.05 (6H, m).
【０１２０】
イソオキサゾリン−５−カルボン酸エステルの加水分解:蒸留したＴＨＦ（４０ｍＬ）（完全に溶解していない）中の上記化合物（２．０４ｇ）を１Ｎ−ＮａＯＨ（５．２ｍＬ，１．２ｅｑ）で処理した。４時間後（約５０％完了）、追加の１Ｎ−ＮａＯＨ（１．０ｍＬ）を加えた。一夜攪拌した後、反応物を濃１Ｎ−ＨＣｌで中和した。残渣をＣＨ2Ｃｌ2（＞７００ｍＬ）で溶解し、水で洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、濾過し、濃縮して遊離カルボン酸１．９４ｇ（１０３％）を得、これを次の工程に直接用いた。
【０１２１】
次の化合物を同様に製造した。
・３−｛２−メチル−（１Ｓ）−１−（ナフタレン−１−カルボニルアミノ）−プロピル｝−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボン酸エチルエステル
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.23 (1H, d, J = 8.3 Hz), 7.93-7.86 (2H, m), 7.66 (1H, m), 7.54-7.42 (3H, m), 7.29-7.25 (2H, m), 7.00-6.90 (3H, m), 6.49 (1H, m), 5.13-5.09 (1H, m), 4.40-4.26 (4H, m), 3.69-3.64 (1H, m), 3.44-3.41 (1H, m), 2.28 (1H, m), 1.32-1.01 (9H, m).
【０１２２】
・３−｛２−メチル−（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−プロピル｝−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボン酸エチルエステル
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.30 (1H, s), 7.94-7.83 (4H, m), 7.59-7.53 (2H, m), 6.80-6.70 (NH, two d), 5.07-5.03 (2H, m), 4.28-4.21 (2H, m), 3.37-3.33 (2H, m), 2.28 (1H, m), 1.34-1.25 (3H, m), 1.12-1.02 (6H, m).
【０１２３】
・３−[（１Ｓ）−1−（1−ナフタレンカルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル]−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボン酸エチルエステル（ジアステレオマー）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.28 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.94-7.86 (m, 2H), 7.61-7.11 (m, 9H), 6.36 (d, J = 9.3 Hz, 0.5H), 6.09 9d, J = 9.3 Hz, 0.5H), 4.94-4.85 (m, 1H), 4.27-4.21 (m, 2H), 3.49-2.98 (m, 4H), 2.15 & 1.97 (two m, 1H), 1.30-1.26 (m, 3H), 1.03-0.59 (m, 6H).
【０１２４】
・エチル  ３−[（１Ｓ）−1−フェネチルカルボニルアミノ−２−メチル−プロピル]−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボキシレート（ジアステレオマー）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.28-7.17 (m, 10H), 5.74 & 5.50 (two d, J = 9.3 Hz, NH), 4.58-4.52 (m, 1H), 4.24-4.20 (m, 2H), 3.34-3.25 (m, 2H), 3.11-2.82 (m, 4H), 2.52-2.45 (m, 2H), 1.93 &1.75 (two m, 1H), 1.29-1.25 (m, 3H), 0.79-0.41 (m, 6H).
【０１２５】
・３−[（１Ｓ）−１−（１−ナフタレンスルホニルアミノ）−２−メチル−プロピル]−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボン酸エチルエステル（ジアステレオマー）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.68-8.64 (m, 1H), 8.29-8.25 (m, 1H), 8.07 (m, 1H), 7.93 (m, 1H), 7.71-7.52 (m, 3H), 7.23-6.98 (m, 5H), 5.27 & 5.19 (two m, 1H), 4.12-4.07 (m, 2H), 3.75 & 3.66 (two m, 1H), 3.16-2.43 (m, 4H), 1.77-1.62 (m, 1H), 1.25-1.16 (m, 3H), 0.86-0.57 (m, 6H).
【０１２６】
・３−[（１Ｓ）−１−（インドール−３−イル−エチルカルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル]−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボン酸エチルエステル（ジアステレオマー）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.16-8.12 (m, 1H), 7.62-7.56 (m, 1H), 7.36-6.94 (m, 9H), 5.71 (d, J = 9.3 Hz, 0.5H), 5.42 (d, J = 8.8 Hz, 0.5H), 4.56-4.50 (m, 1H), 4.25-4.17 (m, 2H), 3.30-2.51 (m, 8H), 1.89-1.70 (m, 1H), 1.28-1.24 (m, 3H), 0.73-0.41 (m, 6H).
【０１２７】
・３−[（１Ｓ）−１−（インドール−３−イル−メチルカルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル]−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボン酸エチルエステル（ジアステレオマー）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.56 & 8.52 (two br s, 1H), 7.55-7.05 (m, 10H), 5.98-5.91 (m, 1H), 4.57 (m, 1H), 4.22-4.15 (m, 2H), 3.73 (m, 2H), 3.28-2.79 (m, 4H), 1.87-1.68 (m, 1H), 1.27-1.20 (m, 3H), 0.75-0.34 (m, 6H).
【０１２８】
・３−[（１Ｓ）−１−（シンナモイルアミノ）−２−メチル−プロピル]−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボン酸エチルエステル（ジアステレオマー）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.61-7.23 (m, 11H), 6.40-6.34 (m, 1H), 6.06 (d, J = 8.8 Hz, 0.5H), 5.81 (d, J = 9.3 Hz, 0.5H), 4.76-4.69 (m, 1H), 4.26-4.19 (m, 2H), 3.42-2.94 (m, 4H), 2.06 & 1.88 (two m, 1H), 1.28-1.24 (m, 3H), 0.93-0.57 (m, 6H).
【０１２９】
・３−[（１Ｓ）−１−（フェニルメチルスルホニルアミノ）−２−メチル−プロピル]−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボン酸エチルエステル（ジアステレオマー）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.35-7.16 (m, 10H), 4.66-4.61 (m, 1H), 4.25 (m, 2H), 4.11-3.84 (m, 3H), 3.71-2.82 (m, 4H), 1.80 & 1.70 (two m, 1H), 1.28 (m, 3H), 0.85-0.58 (m, 6H).
【０１３０】
・メチル  ３−[２−メチル−（１Ｓ）−１−（４−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルブタノイルアミノ）−プロピル]−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボキシレート（ジアステレオマー混合物）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 6.05-5.99 (two d, 1H), 4.71 (m, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.49-3.44 (m, 1H), 2.87-2.80 (m, 1H), 2.27 (m, 4H), 2.07 (m, 1H), 1.92 (m, 2H), ~1.6 (s, 3H), 1.43 (s, 9H), 1.29 (m, 3H), 0.99-0.86 (m, 6H).
【０１３１】
・エチル  ３−[２−メチル−（１Ｓ）−１−（３−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルプロパノイルアミノ）−プロピル]−５−エチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボキシレート（ジアステレオマー混合物）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 6.20-6.15 (two d, 1H), 4.68 (m, 1H), 4.21 (m, 2H), 3.40-3.36 (m, 1H), 2.90-2.82 (m, 1H), 2.57 (m, 2H), 2.46 (m, 2H), 2.07 (m, 1H), 1.94 (m, 2H), 1.43 (s, 9H), 1.29 (m, 3H), 0.96-0.88 (m, 9H).
【０１３２】
・エチル  ３−[２−メチル−（１Ｓ）−１−（３−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルプロパノイルアミノ）−プロピル]−５−ｎ−ペンチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボキシレート（ジアステレオマー混合物）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 6.18-6.13 (two d, 1H), 4.68 (m, 1H), 4.23 (m, 2H), 3.41-3.36 (m, 1H), 2.90-2.82 (m, 1H), 2.57 (m, 2H), 2.46 (m, 2H), 2.08 (m, 1H), 1.88 (m, 2H), 1.43 (s, 9H), 1.28 (m, 9H), 0.96-0.85 (m, 9H).
【０１３３】
・メチル  ３−[２−メチル−（１Ｓ）−１−（３−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルプロパノイルアミノ）−プロピル]−５−メトキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボキシレート（ジアステレオマー混合物）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 6.17 (m, 1H), 4.71 (m, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.72-3,65 (m, 2H), 3.39 (two s, 3H), 3.39-3.34 (m, 1H), 3.17-3.12 (m, 1H), 2.57 (m, 2H), 2.46 (m, 2H), 2.08 (m, 1H), 1.43 (s, 9H), 0.97-0.88 (m, 6H).
【０１３４】
・３−[２−メチル−（１Ｓ）−１−アミノ−プロピル]−５−（２−ナフチル）−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボン酸エチルエステル（約１．３：１  ジアステレオマー）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.99 (1H, s), 7.86-7.82 (3H, m), 7.53-7.49 (3H, m), 4.25-4.02 (3H, m), 3.55-3.48 (1H, two d, J = 7.3, 6.8Hz), 3.35 (0.45H, d, J=17.1 Hz), 3.19 (0.55H, d, J = 17.1Hz), 1.78 (1H, m), 1.22 (3H, t, J = 7.3 Hz), 0.96-0.82 (6H, m)
【０１３５】
実施例１２：３−｛（１Ｓ）−１−（２−ナフトイルアミノ）−３−ｔ−ブトキシカルボニルプロピル｝−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボン酸メチルエステルの合成
【０１３６】
室温でＤＭＦ（８．０ｍＬ）中の３−[（１Ｓ）−１−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ）−３−ｔ−ブトキシカルボニル−プロピル]−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボン酸メチルエステル（４４０ｍｇ，０．８４２ｍｍｏｌ）の溶液をピペリジン（２．５ｍＬ）で５分間処理した。濃縮後、残渣をＤＭＦ（１０ｍＬ）中に溶解し、２−ナフトエ酸（１７４ｍｇ，１．２ｅｑ）、ＥＤＣ（２１０ｍｇ，１．３ｅｑ）、ＨＯＢｔ（１４８ｍｇ，１．３ｅｑ）及びトリエチルアミン（０．３５ｍＬ，３．０ｅｑ）で処理した後、一夜攪拌した（０℃〜室温）。通常の後処理の後、クロマトグラフィーにより表題化合物１３３ｍｇ及び２６０ｍｇ（約５０％  純度）の混合物を得た。
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.33 (1H, s), 7.92-7.83 (4H, m), 7.58-7.48 (2H, m), 7.34 (1H, d, J=7.8Hz), 5.04 (1H, m), 3.78 及び 3.74 (3H, two s), 3.62-3.53 (1H, two d, J=17.1, 17.6Hz), 3.00-2.96 (1H, two d, J =17.1, 17.6 Hz), 2.56-2.08 (4H, m), 1.63 及び 1,59 (3H, two s), 1.41 及び 1.40 (9H, two s)
【０１３７】
（Ｅ）アスパラギン酸誘導体の合成（実施例１３〜１８）
実施例１３：Ｎ−フェニルメチルオキシカルボニル−β−ｔ−ブチルアスパラギン酸（Ｎ−メトキシ）メチルアミドの合成
０℃、ＤＭＦ（２０ｍＬ）中のＮ−ベンジルオキシカルボニル−β−ｔ−ブチルアスパラギン酸（２．０ｇ，６．２ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミンヒドロクロライド（７２４ｍｇ，１．２ｅｑ）及びＨＯＢｔ（１．００ｇ，１．２ｅｑ）の溶液をＥＤＣ（１．４２ｇ，１．２ｅｑ）及びトリエチルアミン（１．２９ｍＬ，１．５ｅｑ）で処理した。一夜攪拌（０℃〜室温）した後、反応物を水（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル−ヘキサン（１：１，１００ｍＬ×２）で抽出し、水（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、濾過し、濃縮した。酢酸エチル−ヘキサン（３：７）でのフラッシュクロマトグラフィーにより表題化合物２．０３９ｇ（９０％）を得た。
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.36-7.31 (5H, m), 5.70 (1H, br), 5.16-5.08 (3H, m), 3.80 (3H, s), 3.23 (3H, s), 2.74-2.71(1H, m), 2.59 -2.57 (1H, m), 1.43 (9H, s).
【０１３８】
実施例１４：β−ｔ−ブチルアスパラギン酸Ｎ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミンアミドの合成
Ｎ−フェニルメチルオキシカルボニル−β−ｔ−ブチルアスパラギン酸（Ｎ−メトキシ）メチルアミドの通常の水素化（Ｈ2バルーン，１０％Ｐｄ／Ｃ，ＥｔＯＨ）によって表題化合物（１００％）を得た。
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 4.13 (1H, m), 3.77 (3H, s), 3.22 (3H, s), 2.71-2.67 (1H, m), 2.42-2.38 (1H, m), 1.46 (9H, s)
【０１３９】
実施例１５：Ｎ−フェニルメチルオキシカルボニル−β−ｔ−ブチルアスパラギン酸メチルエステルの合成
Ｎ−ベンジルメチルオキシカルボニル−β−ｔ−ブチルアスパラギン酸をジアゾメタン／エーテルで処理して所望のメチルエステル（１００％）を得た。
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.35-7.27 (5H, m), 5.75 (1H, d), 5.13 (2H, s), 4.60 (1H, m), 3.75 (3H, m), 2.90 (1H, m), 2.76 (1H, m), 1.42 (9H, s).
【０１４０】
実施例１６：β−ｔ−ブチルアスパラギン酸メチルエステルヒドロクロライドの合成
Ｎ−フェニルメチルオキシカルボニル−β−ｔ−ブチルアスパラギン酸メチルエステルの通常の水素化（Ｈ2バルーン，１０％Ｐｄ／Ｃ，ＥｔＯＨ−ＨＣｌ）によってヒドロクロライド塩として所望の生成物を得た。
【０１４１】
実施例１７：（３Ｓ）−３−フェニルメチルオキシカルボニルアミノ−４−ヒドロキシ−５−フェノキシ−ペンタン酸  ｔ−ブチルエステルの合成
−１５℃、Ｎ2下、乾燥ＴＨＦ（６０ｍＬ）中のＮ−フェニルメチルオキシカルボニル−β−ｔ−ブチル−アスパラギン酸（５．０３ｇ，１５．６ｍｍｏｌ）、ＮＭＭ（１．９０ｍＬ，１７．１ｍｍｏｌ）の溶液をイソブチルクロロホルメート（２．１２ｍＬ，１６．３ｍｍｏｌ）で処理し、得られた懸濁液を２０分間攪拌した。０℃で混合物に乾燥ジアゾメタン／エーテル（２．０ｅｑの１−メチル−３−ニトロ−１−ニトロソ−グアニジン，６０ｍＬから合成した）を加えて３０分間攪拌した。ジアゾケトン合成が完了したとき（ＴＬＣ分析）、そこに３０％ＨＢｒ／ＡｃＯＨ（６．４２ｍＬ，２．０ｅｑ）を０℃で導入した（３０−６０分間攪拌した）。反応物を酢酸エチルで抽出し、飽和ＮａＨＣＯ3（×２）、ブラインで洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、濾過し、濃縮してブロモメチルケトン誘導体（６．４ｇ）を得た。
【０１４２】
室温、ＤＭＦ（１８ｍＬ）中のブロモメチルケトン（４．３６ｇ）及びフェノール（１．１３ｇ，１．１ｅｑ）を新たに乾燥したＫＦ（１．５８ｇ，２．５ｅｑ）で処理して２時間攪拌した。通常の抽出後処理によって粗フェノキシケトンを得た。−７８℃でメタノール（２０ｍＬ）中の粗フェノキシケトンを、ＭｅＯＨ（４０ｍＬ）中のＮａＢＨ4（４１２ｍｇ）で処理した（７８℃〜室温で２時間）。反応物を酢酸でクエンチした。通常の抽出後処理の後、フラッシュクロマトグラフィー（酢酸エチル−ヘキサン＝１：５）によってジアステレオマー混合物として表題化合物２．５８ｇ（５７％）を得た。
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.36-7.26 (7H, m), 6.98-6.87 (3H, m), 5.71-5.53 (NH, two d), 5.10 (2H, s), 4.24-3.92 (4H, m), 2.70-2.63 (2H, m), 1.44 and 1.43 (9H, two s).
【０１４３】
次の化合物を同様に製造した。
・（３Ｓ）−３−フェニルメチルオキシカルボニルアミノ−４−ヒドロキシ−５−（１−ナフチル）オキシ−ペンタン酸  ｔ−ブチルエステル
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.21 (1H, m), 7.80 (1H, m), 7.50-7.33 (9H, m), 6.80 (1H, m), 5.73 及び 5.55 (1H, two d, J = 8.3 Hz), 5.10 (2H, s), 4.30-4.15 (4H, m), 2.76-2.69 (2H, m), 1.44 (9H, s).
【０１４４】
実施例１８：（３Ｓ）−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−フェノキシ−ペンタン酸  ｔ−ブチルエステルの合成
【０１４５】
（３Ｓ）−３−フェニルメチルオキシカルボニルアミノ−４−ヒドロキシ−５−フェノキシ−ペンタン酸  ｔ−ブチルエステルの通常の水素化（Ｈ2バルーン，Ｐｄ／Ｃ，ＥｔＯＨ）によって所望の生成物（１００％）を得た。
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.29-7.26 (2H, m), 6.97-6.90 (3H, m), 4.08-3.82 (3H, m), 3.43 (1H, m), 2.63-2.37 (2H+NH2+OH, m), 1.46 及び 1.45 (9H, two s).
【０１４６】
以下の化合物を同様に製造した。
【０１４７】
・（３Ｓ）−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−（１−ナフチル）オキシ−ペンタン酸  ｔ−ブチルエステル
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.22 (1H, m), 7.80 (1H, m), 7.50-7.34 (4H, m), 6.84 (1H, m), 4.26-4.20 (2H, m), 4.03-3.94 (1H, m), 3.51 (1H, m), 2.70-2.40 (2H, m), 1.47 及び 1.46 (9H, two s).
【０１４８】
（Ｆ）イソオキサゾリン誘導体及びアスパラギン酸誘導体のカップリング及びその更なる変換（実施例１９〜２４）
【０１４９】
実施例１９：（２Ｓ）−２−｛３−[（１Ｓ）−１−フェニルメチルオキシカルボニルアミノ−２−メチル−プロピル]−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニル−アミノ｝−コハク酸  ４−ｔ−ブチルエステル  １−（Ｎ−メチル−Ｎ−メトキシ）アミドの合成
【０１５０】
ＴＨＦ（６．６ｍＬ）中の３−[（１Ｓ）−１−フェニルメチルオキシカルボニルアミノ−２−メチル−プロピル]−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボン酸エチルエステル（５０２ｍｇ，１．１０ｍｍｏｌ）の溶液を１Ｎ−ＮａＯＨ（１．３３ｍＬ）で処理した。室温で２．５時間攪拌した後、反応溶液を１Ｎ−ＨＣｌ（１．３３ｍＬ）でクエンチした後、真空下で濃縮した。残渣を飽和ＮａＣｌ（５０ｍＬ＋２−３ｍＬの１Ｎ−ＨＣｌ）と共に酢酸エチル（１００ｍＬ×２）で抽出し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、濾過し、濃縮して３−[（１Ｓ）−１−フェニルメチル−オキシカルボニルアミノ−２−メチルプロピル]−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボン酸４７６ｍｇ（１０１％）を得た。
０℃、ＤＭＦ（５ｍＬ）中の粗酸（３２０ｍｇ，０．７５ｍｍｏｌ）及びβ−ｔ−ブチルアスパラギン酸Ｎ−メチル−（Ｎ−メトキシ−アミド（２０９ｍｇ，１．２ｅｑ）をＨＯＢｔ（１２２ｍｇ，１．２ｅｑ）、ＥＤＣ（１７２ｍｇ，１．２ｅｑ）及びトリエチルアミン（０．３１ｍＬ，３．０ｅｑ）で処理した後、３時間攪拌した（０℃〜室温）。濃縮し、通常の後処理の後、フラッシュクロマトグラフィーによって低極性の異性体（１６０ｍｇ）及び高極性の異性体（２１３ｍｇ，３３％）を得た。
高極性の異性体：1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.64 (1H, d), 7.35-7.24 (7H, m), 6.95 (1H, t, J = 7.3 Hz), 6.88 (2H, d, J = 7.8 Hz), 5.55 (1H, d), 5.18-5.08 (3H, m), 4.44 (1H, m), 4.32-4.25 (2H, m), 3.75 (3H, s), 3.32-3.25 (2H, m), 3.12 (3H, s), 2.77-2.71(1H, m), 2.62-2.56 (1H, m), 2.12 (1H, m), 1.44 (9H, s), 1.03-0.91 (6H, m).
低極性の異性体：1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.65 (1H, d, J = 8.3 Hz), 7.36-7.23 (7H, m), 6.95 (1H, t, J = 7.3 Hz), 6.88 (2H, d, J = 8.3 Hz), 5.19-5.11 (4H, m), 4.46 (1H, m), 4.33-4.22 (2H, ABq, J =10.3 Hz), 3.75 (3H, s), 3.33 (2H, s), 3.23 (3H, s), 2.73 (1H, m), 2.57 (1H, m), 2.07 (1H, m), 1.43 (9H, s), 1.03-0.92 (6H, m).
【０１５１】
実施例２０：（３Ｓ）−３−｛３−［（1Ｓ）−１−フェニルメチルオキシカルボニルアミノ−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニル−アミノ｝−４−ケト−ペンタン酸  ｔ−ブチルエステルの合成
０℃〜室温でＴＨＦ（５ｍＬ）＋ＬｉＣｌ飽和ＴＨＦ（２ｍＬ）中の（２Ｓ）−２−｛３−［（１Ｓ）−１−フェニルメチルオキシカルボニルアミノ−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニル−アミノ｝−コハク酸  ４−ｔ−ブチルエステル  １−（Ｎ−メチル−Ｎ−メトキシ）アミド（１１０ｍｇ，０．１７ｍｍｏｌ）の低極性の異性体の溶液に過剰量のＭｅＭｇＢｒ（エーテル中３．０Ｍ，＞３．０ｅｑ）で処理して表題化合物を得た（４４ｍｇ，４３％）。
低極性の異性体から：1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.00 (1H, d, J = 9.3 Hz), 7.36-7.24 (7H, m), 6.96 (1H, t, J = 7.2 Hz), 6.87 (2H, d, J = 8.3 Hz), 5.26 (1H, d, J = 8.8 Hz), 5.12-5.09 (2H, m), 4.66 (1H, m), 4.43 (1H, d, J= 9.8 Hz), 4.21 (1H, d, J = 9.8 Hz0, 3.37-3.19 (2H, ABq, J = 18.0 Hz), 2.88 (1H, m), 2.58 (1H, m), 2.25 (3H, s), 2.03 (1H, m), 1.42 (9H, s), 0.99-0.89 (6H, m).
【０１５２】
（２Ｓ）−２−｛３−［（１Ｓ）−１−フェニルメチルオキシ−カルボニルアミノ−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニル−アミノ｝−コハク酸  ４−ｔ−ブチルエステル  １−（Ｎ−メチル−Ｎ−メトキシ）アミド（１３５ｍｇ）の高極性の異性体を同様に処理して対応のメチルケトン５２ｍｇ（４１％）を得た。
【０１５３】
実施例２１：（２Ｓ）−２−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニル−アミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニル−アミノ｝−コハク酸  ４−ｔ−ブチルエステル  １−メチルエステルの合成
【０１５４】
ＤＭＦ（１９ｍＬ）中、３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニル−メチル−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボン酸（２．１４ｇ，５．０７ｍｍｏｌ）、アスパラギン酸  β−ｔ−ブチルエステルメチルエステルヒドロクロライド（１．４６ｇ，１．２ｅｑ）、ＥＤＣ（１．１７ｇ，１．２ｅｑ）及びＨＯＢｔ（８２２ｍｇ，１．２ｅｑ）の溶液をトリエチルアミン（２．１２ｍＬ，３．０ｅｑ）で処理し、一夜攪拌した。通常の後処理の後、フラッシュクロマトグラフィー（４０−５０％、酢酸エチル−ヘキサン）によって白色の泡状の表題化合物（２．９４ｇ，９４％）を得た。
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.30 及び 8.25 (1H, two s), 7.96-7.79 (4H, m), 7.65-7.54 (3H, m), 7.31-7.18 (5H, m), 6.76 (0.5H, d, J = 9.3 Hz), 6.43 (0.5H, d, J = 8.8 Hz), 4.96-4.70 (2H, m), 3.71 and 3.60 (3H, two s), 3.45-3.14 (4H, m), 3.08-2.34 (2H, m), 2.15 (1H, m), 1.47 及び1.44 (9H, two s), 1.04-0.88 (6H, m).
【０１５５】
上記化合物を上述の方法によって加水分解（ＴＨＦ中、１Ｎ−ＮａＯＨ）して対応のカルボン酸（１００％）を得た。
【０１５６】
次のエステル及び遊離カルボン酸を同様に製造した。
・（２Ｓ）−２−{３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェノキシ−メチル−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニル−アミノ}−コハク酸  ４−ｔ−ブチルエステル  １−メチルエステル
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.33 and 8.30 (1H, two s), 7.95-7.74 (5H, m), 7.59-7.53 (2H, m), 7.28-7.22 (2H, m), 6.99-6.89 (3.5H, m), 6.71 (0.5H, d, J = 8.8 Hz), 5.08-5.01 (1H, m), 4.83-4.79 (1H, m), 4.39-4.29 (2H, m), 3.76 及び 3.64 (3H, two s), 3.44 (2H, s), 2.97-2.93 (1H, m), 2.74-2.69 (1H, m), 2.34-2.23 (1H, m), 1.45 及び 1.42 (9H, two s), 1.15-1.01 (6H, m).
【０１５７】
上記化合物の加水分解により遊離カルボン酸を得た。
・（２Ｓ）−２−{３−［（１Ｓ）−１−（フェニルメチルオキシカルボニル）−アミノ−２−メチル−プロピル］−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニル−アミノ}−コハク酸  ４−ｔ−ブチルエステル  １−メチルエステル
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.59-7.49 (1H, m), 7.38-7.32 (5H, m), 5.25-4.95 (4H, m), 4.86 (1H, m), 4.48 (1H, m), 3.76 及び 3.67 (3H, two s), 3.29 (2H, m), 2.92 (1H, m), 2.71-2.62 (1H, m), 2.04 (1H, m), 1.48 (9H, s), 1.01-0.85 (6H, m)
【０１５８】
・（２Ｓ）−２−{３−［（１Ｓ）−１−フェネチルカルボニルアミノ−２−メチル−プロピル］−５−フェニルメチル−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ}−コハク酸  ４−ｔ−ブチルエステル−１−メチルエステル（ジアステレオマー）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.56 (d, J = 8.3 Hz, 0.5H), 7.47 (d, J = 9.3 Hz, 0.5 H), 7.28-7.18 (m, 10H), 5.83 & 5.44 (two d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.70-4.52 (m, 2H), 3.68 & 3.65 (two s, 3H), 3.33-2.28 (m, 10H), 1.89 (m, 1H), 1.43 & 1.42 (two s, 9H), 0.79-0.63 (m, 6H).
【０１５９】
・（２Ｓ）−２−{３−［（１Ｓ）−１−（１−ナフタレンカルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェニルメチル−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ}−コハク酸  ４−ｔ−ブチルエステル−１−メチルエステル（ジアステレオマー）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.27 (m, 1H), 7.92-7.85 (m, 2H), 7.61-7.15 (m, 10H), 6.45 & 6.05 (two d, NH), 4.99-4.85 (m, 1H), 4.70 (m, 1H), 3.69 & 3.52 (two s, 3H), 3.50-2.32 (m, 6H), 2.12 (m, 1H), 1.40 & 1.39 (two s, 9H), 1.05-0.80 (m, 6H).
【０１６０】
・（２Ｓ）−２−{３−［（１Ｓ）−１−（１−ナフタレンスルホニルアミノ−２−メチル−プロピル］−５−フェニルメチル−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ}−コハク酸  ４−ｔ−ブチルエステル−１−メチルエステル（ジアステレオマー）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.69-8.62 (m, 1H), 8.33-7.94 (m, 3H), 7.70-7.47 (m, 3H), 7.20-7.05 (m, 5H), 5.32 & 5.15 (two m, 1H), 4.68 & 4.54 (two m, 1H), 3.85 & 3.59 (two m, 1H), 3.82 & 3.62 (two s, 3H), 3.23-1.75 (m, 7H), 1.40 & 1.34 (two s, 9H), 0.85-0.48 (m, 6H).
【０１６１】
・（２Ｓ）−２−{３−［（１Ｓ）−１−フェニルメチルオキシカルボニルアミノ−２−メチル−プロピル］−５−フェニルメチル−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ}−コハク酸  ４−ｔ−ブチルエステル−１−メチルエステル（ジアステレオマー）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.53-7.49 (two d, 1H), 7.35-7.25 (m, 10H), 5.09-5.07 (m, 2.5 H), 4.88 (d, 0.5 H), 4.69 (m, 1H), 4.34 & 4.23 (two m, 1H), 3.68 &3.63 (two s, 3H), 3.36-2.23 (m, 6H), 1.89 & 1.70 (two m, 1H), 1.42 & 1.40 (two s, 9H), 0.88-0.73 (m, 6H).
【０１６２】
・（２Ｓ）−２−{３−［（１Ｓ）−１−（インドール−３−イル−エチルカルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェニルメチル−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニル−アミノ}−コハク酸  ４−ｔ−ブチルエステル  １−メチルエステル（ジアステレオマー）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.54 & 8.38 (two br s, 1H), 7.62-6.97 (m, 1H), 5.83 (d, J = 8.8 Hz, 0.5H), 5.20 (d, J = 9.3 Hz, 0.5H), 4.73-4.69 (m, 1H), 4.61 & 4.48 (two m, 1H), 3.71 & 3.59 (two s, 3H), 3.28-2.26 (m, 10H), 1.87-1.75 (m, 1H), 1.43 &1.42 (two s, 9H), 0.78-0.50 (m, 6H).
【０１６３】
・（２Ｓ）−２−{３−［（１Ｓ）−１−（インドール−３−イル−メチルカルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェニルメチル−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ}−コハク酸  ４−ｔ−ブチルエステル−１−メチルエステル（ジアステレオマー）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.37 & 8.26 (two br s, 1H), 7.54-7.12 (m, 11H), 5.95 (d, J = 8.8 Hz, 0.5H), 5.76 (d, J = 1.5 Hz, 0.5H), 4.68-4.51 (m, 2H), 3.78-3.68 (m, 2H), 3.66 & 3.62 (two s, 3H), 3.28-2.21 (m, 6H), 1.80 (m, 1H), 1.41 & 1.37 (two s, 9H), 0.75-0.46 (m, 6H).
【０１６４】
・（２Ｓ）−２−{３−［（１Ｓ）−１−（シンナモイルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェニルメチル−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ}−コハク酸  ４−ｔ−ブチルエステル−１−メチルエステル（ジアステレオマー）
1H-NMR  (500 MHz, CDCl3) δ 7.63-7.25 (m, 12H), 6.43-6.32 (two d, J = 15.6 Hz, 1H), 6.09 & 5.68 (two d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.78-4.70 (m, 1H), 3.69 & 3.68 (two s, 3H), 3.35-2.31 (m, 6H), 2.03 (m, 1H), 1.43 & 1.40 (two s, 9H), 0.92-0.76 (m, 6H).
【０１６５】
・（２Ｓ）−２−{３−［（１Ｓ）−１−（フェニルメチルスルホニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェニルメチル−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ}−コハク酸  ４−ｔ−ブチルエステル−１−メチルエステル（ジアステレオマー）
1H-NMR  (500 MHz, CDCl3) δ 7.67 & 7.60 (two d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.40-7.17 (m, 10H), 3.71 & 3.55 (two s, 3H), 3.37-2.23 (m, 6H), 1.70 (m, 1H), 1.42 & 1.47 (two s, 9H), 0.91-0.65 (m, 6H).
【０１６６】
実施例２２：（３Ｓ）−３−{３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニル−アミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニル−アミノ}−４−ケト−５−（２,６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸−ｔ−ブチルエステルの合成
【０１６７】
０℃、Ｎ2下、乾燥ＴＨＦ（ｘｍＬ）中の（２Ｓ）−２−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−４，５−ジヒドロ−５−フェニルメチル−イソオキサゾール−５−カルボニル−アミノ｝−コハク酸  ４−ｔ−ブチルエステル（２．８６ｇ、４．７５ｍｍｏｌ）及びＮＭＭ（０．５７ｍＬ、１．１ｅｑ）の溶液をイソブチルクロロホルメ−ト（０．６５ｍＬ、１．０５ｅｑ）で処理して２０分間攪拌した。０℃で溶液にジアゾメタンを加え、３０分間攪拌した。（ＴＬＣ分析）。反応（１時間）を完了するのに追加のジアゾメタンが必要だった。ジアゾケトン形成の完了後、３０％  ＨＢｒ／ＡｃＯＨ（４．０ｍＬ、４．０ｅｑ）を０℃で加えて反応物を1時間攪拌した。反応物を酢酸エチル（×２）で抽出し、有機層を水、飽和ＮａＨＣＯ3及びブラインで洗浄し、乾燥（無水Ｎａ2ＳＯ4）し、濾過し、濃縮して黄色固体３．３６ｇを得た。固体の半分（約２．３７５ｍｍｏｌ）を、室温、Ｎ2下、ＤＭＦ（１０ｍＬ）中、無水ＫＦ（３４５ｍｇ，２．５ｅｑ）及び２，６−ジクロロ安息香酸（５４５ｍｇ，１．２ｅｑ）と反応させた。通常の後処理の後、フラッシュクロマトグラフィーによってジアステレオマー混合物として表題化合物（１．５３ｇ）を得た。分取ＨＰＬＣ（３８％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって低極性のジアステレオマー（５８５ｍｇ）及び高極性のジアステレオマー（３５８ｍｇ）を得た。
低極性のジアステレオマー：1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.28 (1H, s), 7.84-7.80 (4H, m), 7.55-7.46 93H, m), 7.29-7.24 98H, m), 6.87 (1H, d, J = 8.8 Hz), 5.05-4.93 (3H, m), 4.73 (1H, m), 3.54 (1H, d, J = 18.1 Hz), 3.34 (1H, d, J = 13.7 Hz), 3.19 (1H, d, J = 14.2 Hz), 3.11 (1H, d, J = 17.6 Hz), 2.74-2.70 (1H, m), 2.29-2.24 (2H, m), 1.39 (9H, s), 1.02 (3H, d, J = 6.4 Hz), 0.92 (3H, d, J = 6.8 Hz).
高極性のジアステレオマー：1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.28 (1H, s), 7.97-7.75 (5H, m), 7.62-7.57 (2H, m), 7.37-7.22 (8H, m), 6.56 (1H, d, J = 8.3 Hz), 4.94 (1H, m), 4.78 (1H, m), 4.51-4.42 (2H, m), 3.51-3.43 (2H, m), 3.24-3.15 (2H, m), 2.99-2.95 (1H, m), 2.56-2.52 (1H, m), 2.18 (1H, m), 1.45 (9H, s), 1.02 (3H, d, J = 6.8 Hz), 0.97 (3H, d, J = 6.4 Hz).
【０１６８】
以下の化合物を同様に製造した。
・（３Ｓ）−３−{３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェノキシメチル−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニル−アミノ}−４−ケト−５−（２,６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸−ｔ−ブチルエステル
低極性のジアステレオマー：1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.29 (1H, s), 7.85-7.81 (5H, m), 7.54-7.46 (2H, m), 7.31-7.23 (5H, m), 6.98-6.87 (4H, m), 5.13-5.03 (3H, m), 4.90 (1H, m), 4.39-4.27 (2H, ABq, J = 9.3 Hz), 3.51 (1H, d, J = 17.6 Hz), 3.41 (1H, d, J = 17.6 Hz), 2.94-2.78 (2H, m), 2.38 (1H, m), 1.41 99H, s), 1.12-1.08 (6H, two d, J = 6.4 Hz).
高極性のジアステレオマー：1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.30 (1H, s), 8.11 (1H, d, J = 8.8 Hz), 7.93-7.83 (4H, m), 7.59-7.53 (2H, m), 7.33-7.22 (5H, m), 6.97-6.91 (3H, m), 6.77 (1H, d, J = 8.8 Hz), 5.37 (1H, d, J = 17.1 Hz), 5.16 (1H, d, J = 17.1 Hz), 5.01-4.95 (2H, m), 4.53 (1H, d, J = 9.8 Hz), 4.25 (1H, d, J = 9.8 Hz), 3.50 (1H, d, J = 7.6 Hz), 3.32 (1H, d, J = 7.6 Hz), 3.04-3.00 (1H, dd, J = 17.1, 4.9 Hz), 2.73-7.68 (1H, dd, 17.1, 5.4 Hz), 2.24 (1H, m), 1.47 (9H, s), 1.10-1.03 (6H, two d, J = 6.4 Hz).
【０１６９】
・（３Ｓ）−３−{３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（フェニルメチルオキシカルボニルアミノ）−プロピル］−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニル−アミノ}−４−ケト−５−（２,６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸−ｔ−ブチルエステル（ジアステレオマー混合物）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.72-7.60 (1H, m), 7.37-7.30 (8H, m), 5.40 (0.5H, d), 5.23-4.85 (6.5H, m), 4.40 (1H, m), 3.30 (2H, m), 2.92-2.65 (2H, m), 2.10-1.98 (1H, m), 1.44 (9H, s), 1.00-0.87 (6H, m).
【０１７０】
以下の化合物を同様に製造した。
・（３Ｓ）−３−{３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−２−イル−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェノキシメチル−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ}−４−ケト−５−（２,６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸−ｔ−ブチルエステル
高極性の異性体：1H-NMR  (500 MHz, CDCl3) δ 8.59 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.31 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.13 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.98 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.88 9d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.78 (m, 1H), 7.63 (m, 1H), 7.22-7.15 (m, 4H), 6.96-6.81 (m, 6H), 4.99-4.81 (m, 4H), 4.40 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 4.21 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 3.44 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 3.24 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 3.03 (dd, J = 17.0, 4.6 Hz, 1H), 2.76 (dd, J = 17.0, 5.5 Hz, 1H), 2.30(m, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.10 (m, 6H)
低極性の異性体：1H-NMR  (500 MHz, CDCl3) δ 8.68 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.32-8.26 (m, 2H), 8.17 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.91 (m, 2H), 7.80 (m, 1H), 7.66 (m, 1H), 7.28 (m, 4H), 7.02-6.87 (m, 6H), 5.01-4.77 (m, 4H), 4.38-4.30 (m, 2H), 3.50-3.38 (ABq, J = 17.9 Hz, 2H), 3.06-3.02 (m, 1H), 2.84-2.80 (m, 1H), 2.34 (m, 1H), 1.44 (s, 9H), 1.14 (m, 6H)
【０１７１】
・（３Ｓ）−３−{３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−２−イル−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェノキシメチル−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ}−４−ケト−５−（２,６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸。
高極性の異性体から：1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.01 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 8.87 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.55 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.18-8.07 (m, 3H), 7.87 (m, 1H), 7.73 (m, 1H), 7.28-7.14 (m, 4H), 6.96-6.75 (m, 6H), 5.00-4.75 (m, 4H), 4.42 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 4.22 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 3.47-3.35 (ABq, J = 17.9 Hz, 2H), 2.82 (dd, J = 17.0, 6.4 Hz, 2.56 (m, 1H), 2.33 (m, 1H), 0.98 (m, 6H).
低極性の異性体から：1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.06 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 8.88 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 8.57 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.22-8.07 (m, 3H), 7.87 (m, 1H), 7.73 (m, 1H), 7.17 (m, 4H), 6.91-6.78 (m, 6H), 4.98-4.90 (ABq, J = 17.9 Hz, 2H), 4.77 (m, 2H), 4.35 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 4.20 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 3.47-3.35 (ABq, J = 18.3 Hz, 2H), 2.89 (dd, J = 17.0, 6.4 Hz, 2.61 (dd, J =17.0, 6.4, 1H), 2.31 (m, 1H), 0.98 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 0.90 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
【０１７２】
・（３Ｓ）−３−{３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（１−ナフタレンカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ}−４−ケト−５−（２,６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸  ｔ−ブチルエステル
高極性の異性体：1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.29 (d, J = 8.3 Hz), 7.94 (d, J = 8.3 Hz), 7.88 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 7.61-7.44 (m, 4H), 7.35-7.18 (m, 8H), 6.23 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.95 (m, 1H), 4.76 (m, 1H), 4.49-4.41 (ABq, J = 17.5 Hz, 2H), 3.49-3.41 (m, 2H), 3.22-3.12 (m, 2H), 2.92 (dd, J = 17.0, 4.2 Hz, 1H), 2.52 (dd, J = 17.0, 5.1 Hz, 1H), 2.13 (m, 1H), 1.37 (s, 9H), 1.04 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 0.91 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
低極性の異性体：1H-NMR  (500 MHz, CDCl3) δ 8.24 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.83 (m, 2H), 7.57-7.47 (m, 4H), 7.38-7.22 (m, 9H), 6.64 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 5.00-4.87 (m, 3H), 4.72 (m, 1H), 3.60 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 3.36 (d, J = 14.2 Hz, 1H), 3.20 (d, J = 14.2 Hz, 1H), 3.12 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.69 (dd, J = 17.0, 4.6 Hz, 1H), 2.28-2.18 (m, 2H), 1.38 (s, 9H), 1.06 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.88 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
【０１７３】
・（３Ｓ）−３−{３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（シンナモイルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ}−４−ケト−５−（２,６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸  ｔ−ブチルエステル（高極性の異性体）
1H-NMR  (500 MHz, CDCl3) δ 7.72 (d, 1H), 7.62 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 7.50 (m, 1H), 7.38-7.21 (m, 12H), 6.39 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 5.90 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.76 (m. 2H), 4.49-4.41 (ABq, J = 17.4 Hz, 2H), 3.42-3.38 (m, 2H), 3.17 (d, J = 14.2 Hz, 1H), 3.09 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.91 (dd, J = 17.4, 4.6 Hz, 1H), 2.52 (dd, J = 17.4, 5.0 Hz, 1H), 2.04 (m, 1H), 1.41 (s, 9H), 0.90 (m, 6H).
低極性の異性体：1H-NMR  (500 MHz, CDCl3) δ 7.61 (d, 1H), 7.52 (d, 1H), 7.41 (d, 1H), 7.28 (m, 12H), 6.64-6.41 (m, 2H), 5.09-4.99 (ABq, J = 17.4 Hz, 2H), 4.81 (m, 1H), 4.69 (m, 1H), 3.50 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 3.34 (d, J = 14.2 Hz, 1H), 3.17 (d, J = 14.2 Hz, 1H), 3.04 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.74 (dd, J = 17.0, 4.2 Hz, 1H), 2.22 (m, 2H), 1.39 (s, 9H), 0.97-0.88 (m, 6H).
【０１７４】
・（３Ｓ）−３−{３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（フェニルメチルスルホニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ}−４−ケト−５−（２,６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸  ｔ−ブチルエステル
高極性の異性体：1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.77 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 7.38-7.23 (m, 13H), 4.80-4.63 (m, 2H), 4.56-4.46 (ABq, J = 17.1 Hz, 2H), 4.21-4.10 (m, 2H), 3.83 (m, 2H), 3.41-3.37 (m, 1H), 3.19 (d, J = 14.2 Hz, 1H), 2.90-2.83 (m, 2H), 2.53 (m, 1H), 1.76 (m, 1H), 1.41 (s, 9H), 0.83 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.77 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
低極性の異性体：1H-NMR  (500 MHz, CDCl3) δ 7.64 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.36-7.26 (m, 13H), 5.05-4.95 (m, 3H), 4.74 (m, 1H), 4.17 (m, 2H), 3.96 (m, 1H), 3.41-2.99 (m, 4H), 2.70 (m, 1H), 2.19 (m, 1H), 1.79 (m, 1H), 1.39 (s, 9H), 0.86 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.77 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
【０１７５】
・（３Ｓ）−３−{３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−２−イル−カルボニルアミノ）−プロピル］−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ}−４−ケト−５−（２,６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸  ｔ−ブチルエステル
高極性の異性体：1H-NMR  (500 MHz, CDCl3) δ 8.59 (d, J = 8.7 hz, 1H), 8.31 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.12 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.78-7.72 (m, 2H), 7.62 (m, 1H), 7.33-7.27 (m, 3H), 5.20-5.05 (m, 3H), 4.92-4.89 (m, 2H), 3.47-3.34 (m, 2H), 2.95 (dd, J = 17.0, 4.6 Hz, 1H), 2.73 (dd, J = 17.0, 5.1 Hz, 1H), 2.28 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.07 (m, 6H).
低極性の異性体：1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.58 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 8.28-8.24 (m, 2H), 8.12 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.75-7.59 (m, 3H), 7.31-7.25 (m, 3H), 5.12-4.89 (m, 5H), 3.46-3.41 (m, 2H), 2.92 (dd, J = 17.0, 5.1 Hz, 1H), 2.78 (dd, J = 17.0, 5.5 Hz, 1H), 2.30 (m, 1H), 1.44 (s, 9H), 1.10 (m, 6H)
【０１７６】
・（３Ｓ）−３−{３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−２−イル−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ}−４−ケト−５−（２,６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸  ｔ−ブチルエステル
高極性の異性体：1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.52 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 8.32 9d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.12 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.80-7.63 (m, 3H), 7.36-7.18 (m, 8H), 4.82 (m, 1H), 4.72 (m, 1H), 4.47-4.37 (ABq, J = 17.0 Hz, 2H), 3.47 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 3.41 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 3.19 (d, J = 14.2 Hz, 1H), 3.14 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.94 (dd, J = 17.4, 4.1 Hz, 1H), 2.53 (dd, J = 17.0, 5.0 Hz, 1H), 2.18 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 0.98 (m, 6H).
低極性の異性体：1H-NMR  (500 MHz, CDCl3) δ 8.52 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 8.28-8.23 (m, 2H), 8.12 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.73 (m, 1H), 7.62-7.55 (m, 2H), 7.31-7.17 (m, 8H), 5.06-4.98 (ABq, J = 17.0 Hz, 2H), 4.84 (m, 1H), 4.69 (m, 1H), 5.54 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 3.29 (d, J = 14.2 H, 1H), 3.16 (d, J = 14.2 Hz, 1H), 3.10 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.70 (dd, J = 17.0, 4.1 Hz, 1H), 2.21 (m, 1H), 2.11 (dd, J = 17.0, 5.1 Hz, 1H), 1.38 (s, 9H), 0.98 (m, 6H).
【０１７７】
・（３Ｓ）−３−{３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−２−イル−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ}−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸  ｔ−ブチルエステル
高極性の異性体：1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.47 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 8.32 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.25 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.13 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.78 (m, 1H), 7.69 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.64 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 7.29-7.17 (m, 4H), 7.06 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 6.96 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 4.81-4.72 (m, 2H), 4.47-4.28 (ABq, J = 17.9 Hz, 2H), 3.42 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 3.34 (d, J = 14.2 Hz, 1H), 3.15 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 3.10 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.94 (dd, J = 17.4, 4.1 Hz, 1H), 2.64 (dd, J = 17.4, 5.5 Hz, 1H), 2.15 (m, 1H), 1.43 (s, 9H), 0.95 (m, 6H).
低極性の異性体：1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.50 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 8.24 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.18 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.10 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.74 (m, 1H), 7.62-7.56 (m, 2H), 7.29-7.16 (m, 5H), 6.88 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 4.81-4.66 (m, 4H), 3.46 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 3.29 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 3.15 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 3.07 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.76 (dd, J = 17.0, 4.1 Hz, 1H), 2.21-2.09 (m, 2H), 1.37 (s, 9H), 0.93 (m, 6H).
【０１７８】
・（３Ｓ）−３−{３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（２−ナフタレンカルボニルアミノ）−プロピル］−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ}−４−ケト−ペンタン酸  ｔ−ブチルエステル
ジアステレオマー混合物：1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.29 (m, 1H), 7.96-7.50 (m, 7H), 6.85-6.73 (m, 1H), 5.10-4.97 (m, 2H), 4.66 (m, 1H), 3.40 (m, 2H), 2.94-2.60 (m, 2H), 2.32-2.14 (m, 1H), 2.22 & 2.10 (two s, 3H), 1.43 & 1.42 (two s, 9H), 1.10-0.95 (m, 6H).
【０１７９】
実施例２３：（３Ｓ）−３−{３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニル−アミノ）−プロピル］−５−フェノキシメチル−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニル−アミノ}−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸  ｔ−ブチルエステルの合成
ＤＭＦ（５ｍＬ）中の３−[２−メチル−（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−プロピル]−５−フェノキシメチル−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボン酸（１．００ｇ、２．２４ｍｍｏｌ）および（３Ｓ）−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−フェノキシ−ペンタン酸  ｔ−ブチルエステル（６３０ｍｇ、１．０ｅｑ）、ＥＤＣ（５５８ｍｇ，１．３ｅｑ）、ＨＯＢｔ（３９４ｍｇ，１．３ｅｑ）及びトリエチルアミン（０．９４ｍＬ，３．０ｅｑ）を通常のＥＤＣカップリングによって表題化合物を製造した。通常の後処理の後、フラッシュクロマトグラフィーによってカップリング生成物１．４４ｇを得た。室温、Ｎ2下、乾燥ＣＨ2Ｃｌ2（２５ｍＬ）中にカップリング生成物及びDess−Martin試薬（２．１５ｇ，２．５ｍｏｌ  ｅｑ）を１時間攪拌し、次いで、イソプロピルアルコ−ル（３ｍＬ）でクエンチした。通常の抽出後処理の後、フラッシュクロマトグラフィー（３６％  酢酸エチル−ヘキサン）によってジアステレオマ−混合物として表題化合物１．２７ｇを得た。分取ＨＰＬＣ（３６％  酢酸エチル−ヘキサン，１０ｍＬ／分  ２７８ｎｍ  ＵＶ検出）により低極性（３５２ｍｇ）及び高極性（５３６ｍｇ）ジアステレオマーを得た。
低極性のジアステレオマー：1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.29 (1H, s), 7.93-7.81 (5H, m), 7.58-7.51 (2H, m), 7.28-7.21 94H, m), 6.99-6.76 (7H, m), 5.00-4.98 (2H, m), 4.79-4.66 (2H, ABq, J = 16.6 Hz), 4.35-4.29 (2H, ABq, J = 10.3 Hz), 3.40 (2H, s), 3.02-2.98 (1H, dd, J = 16.6, 4.9 Hz), 2.84-2.79 (1H, dd, J = 16.6, 4.7 Hz), 2.30 (1H, m), 1.41 (9H, s), 1.12-1.07 (6H, two d, J = 6.8 Hz).
高極性のジアステレオマー：1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.29 (1H, s), 7.99-7.82 (5H, m), 7.59-7.53 (2H, m), 7.26-7.18 (4H, m), 6.97-6.83 (6H, m ), 6.68 (1H, d, J = 8.3 Hz), 5.01-4.95 (3H, m), 4.83 (1H, d, J = 17.1 Hz), 4.42 (1H, d, J = 9.8 Hz), 4.23 (1H, d, J = 9.8 Hz), 3.49-3.32 (2H, ABq, J = 18.1 Hz), 3.06-3.02 (1H, dd, J = 17.1, 4.4 Hz), 2.76-2.72 (1H, dd, J = 17.1, 5.4 Hz), 2.24 (1H, m), 1.45 (9H, s), 1.10-1.02 (6H, two d, J = 6.8 Hz).
【０１８０】
以下の化合物を同様に製造した。
・（３Ｓ）−３−{３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェノキシメチル−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニル−アミノ}−４−ケト−５−（２−ナフチルオキシ）−ペンタン酸−ｔ−ブチルエステル
低極性のジアステレオマー：1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.27(1H, s), 7.89 (8H, m), 7.56-7.26 (6H, m), 7.23-6.87 (5H, m), 6.74 (1H, d, J = 9.3 Hz), 5.04-4.95 (2H, m), 4.92-4.80 (2H, ABq, J = 16.6 Hz), 4.37-4.30 (2H, ABq, J = 23.4, 10.3 Hz), 3.43-3.38 (2H, ABq, J = 22.5, 17.8 Hz), 3.05-3.00 (1H, dd, J = 16.6, 4.9 Hz), 2.86-2.82 (1H, dd, J = 16.6, 4.9 Hz), 2.25 (1H, m), 1.42 (9H, s), 1.09-1.05 (6H, two d, J = 6.8, 6.7 Hz).
高極性のジアステレオマー：1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.30 (1H, s), 8.02-7.55 (10H, m), 7.41-7.05 (6H, m), 6.89-6.66 (4H, m), 5.10-4.94 (4H, m), 4.41 (1H, d, J = 9.8 Hz), 4.23 91H, d, J = 10.3 Hz), 3.50-3.34 (2H, ABq, J = 17.6 Hz), 3.09-3.05 (1H, dd, J = 17.1, 4.4 Hz), 2.79-2.74 (1H, dd, J = 17.1, 5.4 Hz), 2.25 (1H, m), 1.45 (9H, s), 1.10-1.02 (6H, two d, J = 6.8 Hz).
【０１８１】
・（３Ｓ）−３−{３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−２−イル−カルボニルアミノ）−プロピル］−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ}−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸  ｔ−ブチルエステル
高極性の異性体：1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.60 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 8.32-8.25 (m, 2H), 8.13 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.79-7.62 (m, 3H), 7.27 (m, 2H), 6.97 (m, 1H), 6.88 (m, 2H), 5.04-4.72 (m, 5H), 3.48-3.34 (m, 2H), 3.00 (dd, J = 17.0, 4.6 Hz, 1H), 2.77 (dd, J = 17.0, 5.5 Hz, 1H), 2.27 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.06 (m, 6H).
低極性の異性体：1H-NMR  (500 MHz, CDCl3) δ 8.58 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 8.27 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.13 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.78-7.59 (m, 3H), 7.22 (m, 2H), 6.92 (m, 1H), 6.82 (m, 2H), 5.04-4.88 (m, 3H), 4.82-4.69 (ABq, J = 17.0 Hz, 2H), 3.45-3.33 (m,2H), 2.99 (dd, J = 16.5, 4.6 Hz, 1H), 2.78 (dd, J = 16.5, 5.1 Hz, 1H), 2.26 (m, 1H), 1.42 (s, 9H), 1.06 (m, 6H)
【０１８２】
・ｔ−ブチル  （３Ｓ）−３−{３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルプロパノイルアミノ）−プロピル］−５−ｎ−ペンチル−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ}−４−ケト−５−（２,６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタノエート；低極性異性体（化合物８９ＬＰ前駆体）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.67 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.32 (m, 3H), 6.42 (m, 1H), 5.20-5.05 (ABq, J = 17.0 Hz, 2H), 4.90 (m, 1H) 4.67 (m, 1H), 3.38 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.92 (m, 2H), 2.78 (m, 1H), 2.53 (m, 2H), 2.40 (m, 2H), 2.18 (m, 1H), 2.03 (m, 1H), 1.79 (m, 1H), 1.44 (s, 9H), 1.41 (s, 9H), 1.26 (m, 6H), 0.94 (m, 6H), 0.86 (t, J = 6.9 Hz, 3H).
【０１８３】
・ｔ−ブチル  （３Ｓ）−３−{３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルプロパノイルアミノ）−プロピル］−５−ｎ−ペンチル−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ}−４−ケト−５−（２,６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタノエート；高極性異性体（化合物９０ＭＰ前駆体）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.76 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.31 (m, 3H), 6.17 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 5.17-5.07 (ABq, J = 17.0 Hz, 2H), 4.87 (m, 1H) 4.65 (m, 1H), 3.30 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.96-2.90 (m, 2H), 2.69 (m, 1H), 2.56 (m, 2H), 2.45 (m, 2H), 2.03 (m, 2H), 1.81 (m, 1H), 1.43 (s, 9H), 1.41 (s, 9H), 1.26 (m, 6H), 0.94-0.86 (m, 9H).
【０１８４】
・ｔ−ブチル  （３Ｓ）−３−{３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルプロパノイルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ}−４−ケト−５−（２,６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタノエート；低極性異性体（化合物８５ＬＰ前駆体）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ7.51 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.34-7.22 (m, 8H), 6.37 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 5.10-4.98 (ABq, J = 17.4 Hz, 2H), 4.70 (m, 1H) 4.61 (m, 1H), 3.46 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 3.31 (d, J = 14.2 Hz, 1H), 3.14 (d, J = 14.2 Hz, 1H), 2.99 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.73 (m, 1H), 2.53 (m, 2H), 2.40 (m, 2H), 2.18 (m, 1H), 2.09 (m, 1H), 1.42 (s, 9H), 1.39 (s, 9H), 0.90 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 0.84 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
【０１８５】
・ｔ−ブチル  （３Ｓ）−３−{３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルプロパノイルアミノ）−プロピル］−５−エチル−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ}−４−ケト−５−（２,６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタノエート；低極性異性体（化合物９１ＬＰ前駆体）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ7.68 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.32 (m, 3H), 6.42 (d, J = 9.2, 1H), 5.21-5.05 (ABq, J = 17.0 Hz, 2H), 4.91 (m, 1H) 4.67 (m, 1H), 3.37 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.94 (m, 2H), 2.79 (m, 1H), 2.53 (m, 2H), 2.40 (m, 2H), 2.18 (m, 1H), 2.07 (m, 1H), 1.86 (m, 1H), 1.43 (s, 9H), 1.41 (s, 9H), 0.94 (m, 9H).
【０１８６】
・ｔ−ブチル  （３Ｓ）−３−{３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルプロパノイルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ}−４−ケト−５−（２,６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタノエート；低極性異性体（化合物７３ＬＰ前駆体）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ7.66 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.32 (m, 3H), 6.44 (d, J = 9.2, 1H), 5.20-5.04 (ABq, J = 17.0 Hz, 2H), 4.88 (m, 1H) 4.67 (m, 1H), 3.46 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.94-2.76 (m, 3H), 2.53 (m, 2H), 2.40 (m, 2H), 2.19 (m, 1H), 1.62 (s, 3H), 1.43 (s, 9H), 1.41 (s, 9H), 0.95 (m, 6H).
【０１８７】
・ｔ−ブチル  （３Ｓ）−３−{３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルプロパノイルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ}−４−ケト−５−（２,６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタノエート；高極性異性体（化合物７４ＭＰ前駆体）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ7.74 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.33 (m, 3H), 6.18 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 5.18-5.05 (ABq, J = 16.5 Hz, 2H), 4.87 (m, 1H) 4.65 (m, 1H), 3.38 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.93-2.89 (m, 2H), 2.71 (m, 1H), 2.57 (m, 2H), 2.46 (m, 2H), 2.02 (m, 1H), 1.66 (s, 3H), 1.58 (s, 9H), 1.46 (s, 9H), 0.95-0.86 (m, 6H).
【０１８８】
・ｔ−ブチル  （３Ｓ）−３−{３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルプロパノイルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ}−４−ケト−５−（２,６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタノエート；高極性異性体（化合物８６ＭＰ前駆体）
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ7.68 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.30 (m, 8H), 6.07 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.72 (m, 1H), 4.60 (m, 1H), 4.45-4.36 (ABq, J = 17.0 Hz, 2H), 3.40-3.32 (m, 2H), 3.17 (d, J = 14.2 Hz, 1H), 3.06 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 2.60-2.38 (m, 5H), 1.98 (m, 1H), 1.44 (s, 9H), 1.41 (s, 9H), 0.88-0.82 (m, 6H).
【０１８９】
実施例２４：（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−ベンジルオキシカルボニルアミノ−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニル−アミノ｝−４−ケト−ペンタン酸の合成
０℃、ＣＨ2Ｃｌ2（２ｍＬ）中の（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−フェニルメチルオキシカルボニルアミノ−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４,５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニル−アミノ｝−４−ケト−ペンタン酸  ｔ−ブチルエステル（低極性ジアステレオマー）（４４ｍｇ）の溶液をＴＦＡ（１ｍＬ）で処理した。反応混合物を室温までゆっくり加温しながら２時間攪拌した。濃縮して表題化合物（化合物１０，定量）を得た。
1H NMR (500 MHz, CD3OD) δ 7.35-6.90 (10H, m), 5.11 (2H, s), 4.53 (1H, m), 4.47 (1H, m), 4.23 (2H, dd), 2.86 (1H, dd), 2.54 (1H, dd), 2.24 (3H, s), 2.00 (1H, m), 1.00 and 0.97 (6H, two d); MS [M+Na]+ 562
【０１９０】
以下の化合物を低極性の異性体から同様に製造した。
・（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−フェニルメチルオキシカルボニルアミノ−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニル−アミノ｝−４−ケト−ペンタン酸（化合物１１）
1H NMR (500 MHz, ) δ 8.76 (1H,d, J = 7.8 Hz), 7.76 (1H, d, J = 8.8 Hz), 7.36-6.87 (10H, m), 5.06 (2H, m), 4.50 (1H, m), 4.32 (1H, m), 4.16 (2H, m), 3.21 (2H, app s), 2.79 (1H, m), 2.06 (3H, s), 1.89 (1H, m), 0.91 (3H, d, J = 6.3 Hz), 0.80 (3H, d, J = 6.3 Hz).
【０１９１】
以下の最終化合物を対応のｔ−ブチルエステルの類似ＴＦＡ脱保護によって得た。
・（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−フェニルメチルオキシカルボニルアミノ−２−メチル−プロピル］−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−ペンタン酸（化合物３、ジアステレオマー混合物）
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8. 49 (1H, m), 7.72 (1H, m), 7.35 (5H, m), 5.03 (3H, m), 4.40 (1H, m), 4.15 (1H, m), 3.24 (2H, m), 2.54 (2H, m), 2.04 及び 1.95 (3H, wo s), 1.88 (1H, m), 0.90-0.81 (6H, m): MS [M+Na]+ 456
【０１９２】
・（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−フェニルメチルオキシカルボニルアミノ−２−メチル−プロピル］−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物１４、ジアステレオマー混合物）
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.58 (1H, br s), 7.75 (1H, m), 7.61-7.30 (8H, m), 5.30-5.00 (5H, m), 4.70 (1H, m), 4.16 (1H, m), 2.66 (2H, m), 1.90 (1H, m), 0.95-0.79 (6H, m): MS [M+Na]+ 644
【０１９３】
・（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−１−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸（化合物１７、ジアステレオマー混合物）
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.92-8.55 (2H, m), 8.15-7.98 (3H, m), 7.63-7.55 (4H, m), 7.25-7.15 (4H, m), 6.95-6.74 (6H, m), 5.20-4.15 (6H, m), 2.80-2.55 (2H, m), 2.05 (1H, m), 1.05-0.89 (6H, m): MS [M+Na]+ 674.
【０１９４】
・（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸（化合物１８）
低極性のｔ−ブチルエステルから： 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.93 (1H, d, J = 7.8 Hz), 8.79 (1H, d, J = 8.3 Hz), 8.48 (1H, s), 8.05-7.94 (4H, m), 7.64-7.58 (2H, m), 7.30-7.17 (4H, m), 6.94-6.83 (6H, m), 4.96 (2H, app s), 4.78 (1H, m), 4.73 (1H, m), 4.36 (1H, d, J = 10.2 Hz), 4.22 (1H, d, J = 10.2 Hz), 3.37 (2H, app s), 2.91 (1H, dd, J = 16.6, 6.4 Hz), 2.62 (1H, dd, J = 16.6, 5.9 Hz), 2.12 (1H, m), 1.00 (3H, d, J = 6.3 Hz), 0.87 93H, d, J = 6.3 Hz): MS [M+Na]+  674
高極性のｔ−ブチルエステルから： 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.88 (1H, d, J = 8.3 Hz), 8.79 (1H, d, J = 8.8 Hz), 8.43 (1H, s), 8.00-7.80 (4H, m), 7.61 (2H, m), 7.23-7.17 94H, m), 6.93-6.77 (6H, m), 4.99 (1H, d, J = 17.6 Hz), 4.86 (1H, d, J = 18.1 Hz), 4.79 (1H, m), 4.72 (1H, m0, 4.43 (1H, d, J = 10.7 Hz), 4.20 (1H, d, J = 10.2 Hz), 2.81 (1H, dd), 2.56 (1H, dd), 2.17 (1H, m), 1.01 (3H, d, J = 6.3 Hz), 0.99 (3H, d, J = 6.3 Hz): MS [M+Na]+  674
【０１９５】
・（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−１−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物２７）
低極性のｔ−ブチルエステルから： 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.08 (1H, d, J = 7.8 Hz), 8.87 (1H, d, J = 8.8 Hz), 8.55 (1H, s), 8.10-8.01 (4H, m), 7.68 7.58 (5H, m), 7.26 (2H, t, J = 7.8 Hz), 6.98-6.92 (3H, m), 5.27 (2H, ABq, J = 16.6 Hz0, 4.82-4.78 (2H, m), 4.43 (1H, d, J = 10.7 Hz), 4.29 (1H, d, J = 10. 3 Hz), 3.44 (2H, ABq, J = 18.1 Hz), 3.01 (1H, dd, J = 17.1, 6.4 Hz), 2.67 (1H, dd, J = 17.1, 6.3 Hz), 2.21 (1H, m), 1.07 (3H, d, J = 6.2 Hz), 0.97 (3H, d, J = 6.2 Hz): MS [M+Na]+  770
高極性のｔ−ブチルエステルから： 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.97 (1H, d, J = 7.8 Hz), 8.85 (1H, d, J = 8.3 hz), 8.50 (1H, s), 8.09-7.96 (4H, m), 7.67-7.60 (5H, m), 7.32 (2H, t, J = 6.3 Hz), 7.00 (3H, m), 5.38 (1H, d, J = 17.1 Hz), 5.13 (1H, d, J = 17.1 Hz), 4.92 (1H, d, J = 6.3 Hz), 4.79 (1H, t, J = 7.8 Hz), 4.55 (1H, d, J = 9.7 Hz), 4.28 (1H, d, J = 8.7 Hz), 3.48 (1H, d, J = 18.1 Hz), 3.38 (1H, d, J = 18.1 Hz), 2.87 (1H, dd, J = 17.1, 4.9 Hz), 2.60 (1H, dd, J = 17.1, 4.9 Hz), 2.25 (1H, m), 1.07 (6H, m): MS [M+Na]+  770
【０１９６】
・（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸（化合物２３、ジアステレオマー）
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.72-8.55 (2H, m), 8.38 (1H, s), 8.04-7.85 (4H, m), 7.62 (2H, m), 7.25-7.12 (7H, m), 6.91-6.70 (3H, m), 4.79-4.51 (4H, m), 3.40-3.05 (4H, m), 2.73-2.23 (2H, m), 2.01 (1H, m), 0.94-0.70 (6H, m): MS [M+Na]+ 658
【０１９７】
・（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物２８）
低極性のｔ−ブチルエステルから： 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.68 (1H, d, J = 8.8 Hz), 8.59 (1H, d, J = 8.3 Hz), 8.40 (1H, s), 8.05-7.87 (4H, m), 7.63-7.54 (5H, m), 7.21-7.13 (5H, m), 5.98 (2H, ABq, J = 17.1 Hz), 4.74 (1H, m), 4.64 (1H, m), 3.25-3.10 (4H, m), 2.62 (1H, dd, J = 17.1, 6.3 Hz), 2.37 (1H, dd, J = 16.6, 5.4 Hz), 2.06 (1H, m), 0.93 (3H, d, J = 6.8 Hz), 0.83 (3H, d, J = 6.2 Hz): MS [M+Na]+ 754
高極性のｔ−ブチルエステルから： 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.72 (1H, d, J = 8.3 Hz), 8.59 91H, d, J = 8.8 Hz), 8.41 (1H, s), 8.01-7.87 (4H, m), 7.62-7.53 (5H, m), 7.29-7.21 (5H, m), 4.70-4.55 (4H, m), 3.44-3.10 (4H, m), 2.72-2.67 (1H, dd, J = 16.6, 7.3 Hz), 2.38-2.34 (1H, dd, J = 16.6, 7.3 Hz), 2.05 (1H, m), 0.97 (3H, d, J = 6.3 Hz), 0.79 (3H, d, J = 6.3 Hz); MS [M+Na]+ 754.
【０１９８】
・（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（キノリン−２−イル−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−ペンタン酸（化合物２２、ジアステレオマー混合物）
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.06 (1H, m), 8.82 91H, br), 8.57 (1H, m), 8.16-7.74 95H, m), 7.26-7.12 (4H, m), 6.89-6.69 (6H, m), 5.10-4.70 (4H, m), 4.48-4.20 (2H, m), 2.87-2.53 (2H, m), 2.32 (1H, m), 0.98-0.85 (6H, m): MS [M+Na]+ 675, [M+H]+ 653.
【０１９９】
・（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２−ナフチルオキシ）−ペンタン酸（化合物２５）
低極性のｔ−ブチルエステルから： 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.96 (1H, d, J = 7.8 Hz), 8.77 (1H, d, J = 8.3 Hz), 8.47 (1H, s), 8.03-7.57 (9H, m), 7.44 (1H, t, J = 6.8 Hz), 7.34 (1H, t, J = 7.8 Hz), 7.17-7.13 (4H, m), 6.88-6.82 (3H, m), 5.09 (2H, ABq), 4.84 (1H, m), 4.72 (1H, m), 4.38 (1H, d, J = 10.2 Hz), 4.23 (1H, d, J = 10.7 Hz), 2.94 (1H, dd, J = 17.1, 6.8 Hz), 2.65 (1H, dd, J = 16.6, 5.9 Hz), 2.12 (1H, m), 0.97 (3H, d, J = 6.3 Hz), 0.85 (3H, d, J = 6.3 Hz): MS [M+Na]+ 724
高極性のｔ−ブチルエステルから： 1H NMR (50oC, 300 MHz, DMSO-d6) δ 8.72 (1H, d), 8.63 (1H, d), 8.41 (1H, s), 7.94-6.72 (19H, m), 5.03 (2H, ABq), 4.88 (1H, m), 4.74 (1H, m), 4.42 91H, d), 4.19 (1H, m), 3.38 (2H, ABq), 2.88 (1H, dd), 2.65 (1H, dd), 2.19 (1H, m), 1.02 (6H, two d):MS [M+Na]+ 724
13C NMR (50oC, 300 MHz, DMSO-d6) δ 202.1, 171.6, 170.7, 166.6, 159.3, 158.0, 155.6, 134.1, 133.9, 132.0, 131.6, 129.3, 129.1, 128.7, 127.7, 127.5, 127.3, 126.5, 126.2, 124.2, 123.6, 121.1, 118.1, 114.5, 107.4, 87.5, 70.2, 52.9, 34.4, 29.6, 19.4, 18.9.
高極性のジアステレオマーのメチルエステル： 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.29 (1H, s), 8.02-6.68 (20H, m), 5.09-4.95 (2H, ABq, J = 16.6 Hz), 5.10 (1H, m), 5.01(1H, m), 4.34 (2H, ABq, J = 10.3 Hz), 3.70 (3H, s), 3.50-3.33 (2H, ABq, J = 17.6 Hz), 3.13 (1H, dd, J = 17.1, 4.9 Hz), 2.90 (1H, dd, J = 17.1, 5.9 Hz), 2.23 (1H, m), 1.08 and 1.02 (6H, two d, J = 6.8 Hz).
【０２００】
・（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−５−フェノキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（１−ナフチルオキシ）−ペンタン酸（化合物２４、ジアステレオマー混合物）
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.02-8.18(3H, m), 8.05-6.80 (18H, m), 5.15-4.15 (6H, m), 2.90-2.55 (2H, m), 2.14 (1H, m), 1.05-0.82 (6H, m).
【０２０１】
・（３Ｓ）−３−｛３−［（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−２−メチル−プロピル］−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２−ナフチルオキシ）−ペンタン酸（化合物２９、ジアステレオマー混合物）
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.95-8.46 (3H, m), 8.09-7.07 (13H, m), 5.21-4.75 (5H, m), 2.95-2.64 (2H, m), 2.19 (1H, m): MS [M+H]+  596
【０２０２】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（２−ナフタレンカルボニルアミノ）−プロピル］−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸（化合物３０、ジアステレオマー混合物）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.76-8.69 (m, 2H), 8.45 (m, 1H), 8.04-7.90 (m, 5H), 7.61 (m, 2H), 7.31-7.19 (m, 2H), 6.97-6.81 (m, 3H), 5.09-4.68 (m, 5H), ~3.3 (m, 2H), 2.82 (m, 1H), 2.64 (m, 1H), 2.15 ((m, 1H), 1.00-0.84 (m, 6H): MS [M+Na] = 568
【０２０３】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（フェニルエチルカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−(２，６−ジクロロベンゾイルオキシ)−ペンタン酸（化合物３２、ジアステレオマー混合物）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.48 (br s, 1H), 8.00 (m, 1H), 7.61-7.54 (m, 3H), 7.30-7.15 (m, 11H), 4.93-4.32 (m, 4H), 3.34-2.90 (m, 4H), 2.78 (m, 1H), 1.78 (m, 1H), 0.90-0.60 (m, 6H): MS [M+Na] = 732
【０２０４】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（１−ナフタレンカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−(２，６−ジクロロベンゾイルオキシ)−ペンタン酸（化合物３３）
高極性のｔ−ブチルエステルから： 1H-NMR  (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.80 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.63 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 8.02 (m, 3H), 7.64-7.20 (m, 12H), 4.81-4.55 (m, 4H), 3.39 (m, 2H), 3.12 (m, 2H), 2.73 (m, 1H), 2.43 (m, 1H), 1.98 (m, 1H), 0.99 (d, J = 4.6 Hz, 3H), 0.79 (d, J = 4.5 Hz, 3H): MS [M+Na] = 754
低極性のｔ−ブチルエステルから： 1H-NMR  (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.77 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.62 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.08-7.97 (m, 4H), 7.61-7.21 (m, 12H), 5.00 (m, 2H), 4.77-4.67 (m, 2H), 3.39-3.27 (m, 2H), 3.15-3.11 (m, 2H), 2.64 (m, 1H), 2.40 (m, 1H), 1.99 (m, 1H), 0.96 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.85 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
【０２０５】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（シンナモイルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ}−４−ケト−５−(２，６−ジクロロベンゾイルオキシ)−ペンタン酸（化合物３８）
高極性のｔ−ブチルエステルから：1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.55 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.28 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.60-7.19 (m, 14H), 6.70 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 4.71-4.49 (m, 4H), ~3.3 (m, 2H), 3.08 (m, 2H), 2.71 (m, 1H), 2.40 (m, 1H), 1.90 (m, 1H), 0.86 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.74 (d, J = 6.4 Hz, 3H): MS [M+H] = 708
低極性ｔ−ブチルエステルから： 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.53 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.28 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.61-7.16 (m, 14H), 6.69 (d, J = 16.9 Hz, 1H), 4.99-4.92 (ABq, J = 17.4 Hz, 2H), 4.72 (m, 1H), 4.53 (m, 1H), 3.36 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 3.23 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 3.10-3.04 (m, 2H), 2.61 (dd, J = 17.0, 6.4 Hz, 1H), 2.37 (dd, J = 17.0, 6.0 Hz, 1H), 1.90 (m, 1H), 0.79 (m, 6H).
【０２０６】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（フェニルメチルスルホニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−(２，６−ジクロロベンゾイルオキシ)−ペンタン酸（化合物３９、ジアステレオマー）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.75 and 7.69 (m, 1H), 7.61-7.13 (m, 13H), 5.00 and 4.70 (m, 1H), 4.64 (m, 2H), 4.22-3.78 (m, 4H), 1.79 (m, 1H), 0.90 (m, 6H):MS [M+H] = 732.
【０２０７】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−２−イル−カルボニルアミノ）−プロピル］−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ)−ペンタン酸（化合物４０）
高極性の異性体から： 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.94 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 8.75 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 8.55 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.18-8.05 (m, 3H), 7.85 (m, 1H), 7.55 (m, 3H), 5.22-5.06 (m, 3H), 4.83-4.70 (m, 2H), 3.35 (m, 2H), 2.80 (m, 1H), 2.61 (m, 1H), 2.31 (m, 1H), 0.95 (m, 6H):MS [M+H] = 643
低極性の異性体から： 1H-NMR  (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.07 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 8.76 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.56 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.20-8.07 (m, 3H), 7.87 (m, 1H), 7.72 (m, 1H), 7.62-7.54 (m, 3H),  5.21-5.06 (m, 3H), 4.84-4.70 (m, 2H), 3.44-3.27 (m, 2H), 2.85 (dd, J = 17.0, 6.0, 1H), 2.66 (dd, J = 17.0, 6.9 Hz, 1H), 2.29 (m, 1H), 0.98 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 0.90 (d, J = 6.4 Hz, 6H)
【０２０８】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−２−イル−カルボニルアミノ）−プロピル］−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸（化合物４１）
高極性の異性体から： 1H-NMR  (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.95 (d, 1H), 8.72 (d, 1H), 8.55 (d, 1H), 8.20-8.05 (m, 3H), 7.86 (m, 1H), 7.72 (m, 1H), 7.24-6.74 (m, 5H), 5.11-4.70 (m, 5H), 3.34 (m, 2H), 2.80 (m, 1H), 2.62 (m, 1H), 2.30 (m, 1H), 0.95 (m, 6H):MS [M+H] = 547
低極性の異性体から： 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.03 (d, 1H), 8.74 (d, 1H), 8.56 (d, 1H), 8.20-8.07 (m, 3H), 7.87 (m, 1H), 7.73 (m, 1H), 7.23 (m, 2H), 6.88 (m, 3H), 5.09-4.71 (m, 5H), 3.34 (m, 2H), 2.85 (m, 1H), 2.65 (m, 1H), 2.27 (m, 1H), 0.96-0.87 (m, 6H).
【０２０９】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−２−イル−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物４２）
高極性の異性体から： 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.91 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 8.59-8.52 (m, 2H), 8.17-8.06 (m, 3H), 7.87 (m, 1H), 7.72 (m, 1H), 7.58-7.53 (m, 5H), 4.69-4.51 (m, 4H), 3.40 (m, 2H), 3.16 (m, 1H), 2.69 (m, 1H), 2.37 (m, 1H), 2.19 (m, 1H), 0.91-0.80 (m, 6H): MS [M+H] = 733
低極性の異性体から： 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.92 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 8.56(m, 2H), 8.19-8.07 (m, 3H), 7.87 (m, 1H), 7.73 (m, 1H), 7.60-7.54 (m, 3H), 7.22-7.07 (m, 5H), 5.01-4.93 (ABq, J = 16.5 Hz, 2H), 4.75-4.62 (m, 2H), 3.46 (d, J = 18.4 Hz, 1H), 3.23-3.07 (m, 3H), 2.62 (dd, J = 17.0, 6.9 Hz, 1H), 2.37 (dd, J = 17.0, 6.0 Hz, 1H), 2.21 (m, 1H), 0.86-0.83 (m, 6H).
【０２１０】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−２−イル−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸（化合物４３）
高極性の異性体から： 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.91 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 8.62 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.52 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.15 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.07 (m, 2H), 7.86 (m, 1H), 7.72 (m, 1H), 7.26-7.09 (m, 7H), 6.86 (m, 1H), 6.69 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 4.71-4.63 (m, 2H), 4.54-4.46 (ABq, J = 17.9 Hz, 2H), 3.42 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 3.29 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 3.15 (d, J = 18.4 Hz, 1H), 3.09 (d, J = 14.3 Hz, 1H), 2.72 (dd, J = 17.0, 6.9 Hz, 1H), 2.36 (dd, J = 17.0, 6.0 Hz, 1H), 2.15 (m, 1H), 0.88 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 0.75 (d, J = 6.9 Hz, 3H): MS [M+H] = 637
低極性の異性体から： 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.88 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 8.54 (m, 2H), 8.18-8.06 (m, 3H), 7.87 (m, 1H), 7.72 (m, 1H), 7.28-6.78 (m, 10H), 4.78-4.63 (m, 4H), 3.45 (d, J = 18.3 Hz, 1H), 3.26-3.06 (m, 3H), 2.66-2.62 (dd, J = 17.0, 6.9 Hz, 1H), 2.44-2.39 (dd, J = 17.0, 5.5 Hz, 1H), 2.17 (m, 1H), 0.80 (m, 6H).
【０２１１】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−２−イル−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−（１−イミダゾリルメチル）−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸（化合物４４、ジアステレオマー混合物）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.09-6.60 (m, 16H), 4.92-4.62 (m, 6H), 3.50 (m, 2H), 2.85-2.20 (m, 3H), 0.93 (m, 6H): MS [M+H] = 627
【０２１２】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（２−ナフタレンカルボニルアミノ）−プロピル］−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−ペンタン酸（化合物４５、ジアステレオマー混合物）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.77 (m.1H), 8.45 (m, 2H), 8.07-7.89 (m, 4H), 7.61 (m, 2H), 5.06 (m, 1H), 4.72 (m, 1H), 4.46 & 4.38 (two m, 1H), ~3.3 (m, イソオキサゾリン CH2), 2.62 (m, 1H), ~2.49 (m, 1H), 2.13 (m, 1H), 2.09 & 2.05 (two s, 3H), 1.01-0.84 (m, 6H).
【０２１３】
・(３Ｓ)−３−{３−[(１Ｓ)−１−（サクシノイルアミノ）−３−カルボキシ−プロピル]−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ}−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸（化合物４６、ジアステレオマー混合物）
1H-NMR  (500 MHz,DMSO-d6) δ 8.56-8.52 (m, 1H), 8.15 (m, 1H), 7.27 (m, 2H), 6.97-6.82 (m, 3H), 4.96-4.83 (m, 2H), 4.77 (m, 1H), 4.58 (m, 1H), 3.58-2.22 (m, 10H), 2.0-1.74 (m, 2H), 1.47 & 1.45 (two s, 3H):MS [M+Na] = 558.
【０２１４】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸（化合物４７、ジアステレオマー混合物）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.62-8.52 (m, 1H), 8.06 (m, 1H), 7.27 (m, 2H), 6.96-6.81 (m, 3H), 4.94-4.72 (m, 3H), 4.43-4.32 (m, 1H), 3.38-3.22 (m, 1H), 2.94-2.78 (m, 2H), 2.70-2.22 (m, 5H), 1.95-1.77 (m, 1H), 1.48 & 1.46 (two s, 3H), 0.86-0.70 (m, 6H): MS [M+Na] = 528.
【０２１５】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（１−ナフタレニルカルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（１−ピペリジニル）−ペンタン酸（化合物４８、ジアステレオマー）
1H-NMR  (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.75 (m, 1H), 8.47 and 8.29 (m, 1H), 8.03-7.23 (m, 12H), 4.65 (m, 2H), 3.11-2.99 (m, 2H), 2.26-2.18 (m, 4H), 1.97 (m, 1H), 1.64-0.79 (m, 12H):MS [M+H] = 627.
【０２１６】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（イソキノリン−１−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物４９ＬＰ）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ9.03 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 8.74 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.60-8.56 (m, 2H), 8.07-8.03 (m, 2H), 7.83 (m, 1H), 7.73 (m, 1H), 7.61-7.53 (m, 3H), 7.22-7.17 (m, 5H), 5.01-4.93 (ABq, J = 17.0 Hz, 2H), 4.74-4.63 (m, 2H), 3.41 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 3.23 (d, J = 14.2 Hz, 1H), 3.13 (d, J = 17,9 Hz, 1H), 3.09 (d, J = 14.2 Hz, 1H), 2.60 (m, 1H), 2.36 (m, 1H), 2.10 (m, 1H), 0.91 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 0.84 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
【０２１７】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（イソキノリン−１−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物５０ＭＰ：４９ＬＰの立体異性体）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ9.04 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 8.65-8.60 (m, 2H),
8.53 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.05-8.00 (m, 2H), 7.82 (m, 1H), 7.72 (m, 1H), 7.60-7.53 (m, 3H), 7.30-7.17 (m, 5H), 4.75-4.53 (m, 4H), 3.5-3.3 (m, 2H, 溶媒ピーク下に埋もれる), 3.13 (m, 2H), 2.68 (m, 1H), 2.41 (m, 1H), 2.04 (m, 1H), 0.95 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.78 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
【０２１８】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（イソキノリン−３−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物５１ＬＰ）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ9.40 (s, 1H), 8.99 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 8.56 (m, 2H), 8.26 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 8.17 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.90-7.81 (m, 2H), 7.60-7.53 (m, 3H), 7.20-7.07 (m, 5H), 5.01-4.92 (ABq, J = 17.0 Hz, 2H), 4.73-4.66 (m, 2H), ~3.4 (m, 1H, 溶媒ピーク下に埋もれる), 3.23-3.05 (m, 3H), 2.60 (m, 1H), 2.34 (m, 1H), 2.19 (m, 1H), 0.82 (m, 6H).
【０２１９】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（イソキノリン−３−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物５２ＭＰ：化合物５１の立体異性体）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ9.39 (s, 1H), 8.97 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 8.58 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.24 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.13 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.88-7.81 (m, 2H), 7.58-7.53 (m, 3H), 7.27-7.18 (m, 5H), 4.72-4.49 (m, 4H), 3.6-3.3 (m, 2H, 溶媒ピーク下に埋もれる), 3.19-3.08 (m, 2H), 2.67 (m, 1H), 2.34 (m, 1H), 2.18 (m, 1H), 0.87 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 0.78 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
【０２２０】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（イソキノリン−４−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物５３ＬＰ）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ9.02 (m, 2H), 8.63 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.10 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.01 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.83 (m, 1H), 7.69 (m, 1H), 7.61-7.53 (m, 3H), 7.44 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 7.31-7.20 (m, 6H), 4.98 (m, 2H), 4.76-4.65 (m, 2H), 3.37 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 3.29 (d, J = 14.2 Hz, 1H), 3.15-3.11 (m, 2H), 2.63 (m, 1H), 2.39 (m, 1H), 1.99 (m, 1H), 0.93 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 0.85 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
【０２２１】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（イソキノリン−４−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物５４ＭＰ：化合物５３ＬＰの立体異性体）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ9.05 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.96 (d, J = 4.1 Hz, 1H), 8.64 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.08 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.99 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.82 (m, 1H), 7.69-7.48 (m, 5H), 7.31-7.20 (m, 5H), 4.80-4.55 (m, 4H), 3.6-3.3 (m, 2H, 溶媒ピーク下に埋もれる), 3.14-3.09 (m, 2H), 2.72 (m, 1H), 2.41 (m, 1H), 1.95 (m, 1H), 0.96 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 0.78 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
【０２２２】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（ベンゾフラン−２−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物５５ＬＰ）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.83 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 8.56 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.61-7.33 (m, 6H), 7.20-7.04 (m, 5H), 5.00-4.92 (m, 2H), 4.73 (m, 1H), 4.56 (m, 1H), ~3.37 (m, 1H), 3.23-3.05 (m, 3H), 2.61 (m, 1H), 2.36 (m, 1H), 2.08 (m, 1H), 0.88-0.78 (m, 6H).
【０２２３】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（ベンゾフラン−２−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物５６：化合物５５ＬＰの立体異性体）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.83 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 8.55 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.64 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.58-7.43 (m, 5H), 7.33-7.18 (m, 6H), 4.69-4.55 (m, 4H), 3.43-3.30 (m, 2H), 3.12-3.07 (m, 2H), 2.69 (m, 1H), 2.37 (m, 1H), 2.06 (m, 1H), 0.90 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.74 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
【０２２４】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（ナフタレン−１−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジフルオロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物５７ＬＰ）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ8.77 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 8.64 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.06-7.95 (m, 3H), 7.69-7.44 (m, 5H), 7.26 (m, 7H), 5.02-4.90 (ABq, J = 17.0 Hz, 2H), 4.71 (m, 2H), 3.30-3.10 (m, 4H), 2.65 (m, 1H), 2.39 (m, 1H), 1.99 (m, 1H), 0.94 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 0.84 (d, J = 6.0 Hz, 3H).
【０２２５】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジメチルベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物６１：ジアステレオマー混合物）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ8.82-8.76 (m, 1H), 8.65 (m, 1H), 8.08-7.95 (m, 3H), 7.59-7.46 (m, 4H), 7.33-7.06 (m, 8H), 4.98-4.49 (m, 4H), 3.42-3.09 (m, 4H), 2.76-2.39 (m, 2H), 2.28 & 2.25 (two s, 6H), 1.98 (m, 1H), 0.99-0.76 (m, 6H).
【０２２６】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（キノリン−８−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物６２：ジアステレオマー混合物）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ11.19-11.08 (m, 1H), 9.04 (m, 1H), 8.65-8.50 (m, 3H), 8.22 (m, 1H), 7.80-7.51 (m, 5H), 7.30-7.06 (m, 5H), 5.00-4.47 (m, 4H), 3.46-3.02 (m, 4H), 2.73-2.34 (m, 2H), 2.11 (m, 1H), 1.00-0.80 (m, 6H).
【０２２７】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（インドール−２−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物６３ＬＰ）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ11.58 (s, 1H), 8.56 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.49 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.64-7.53 (m, 4H), 7.43 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.24-7.03 (m, 8H), 5.00-4.92 (ABq, J = 17.0 Hz, 2H), 4.74-4.56 (m, 2H), ~3.5 (m, 1H, 溶媒ピーク下に埋もれる), 3.23 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 3.15-3.06 (m, 2H), 2.60 (m, 1H), 2.35 (m, 1H), 2.02 (m, 1H), 0.90 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.81 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
【０２２８】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（インドール−２−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物６４ＭＰ：化合物６３ＬＰの立体異性体）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ11.56 (s, 1H), 8.54 (m, 2H), 7.60-7.02 (m, 13H) 4.71-4.51 (m, 4H), , 3.41-3.31 (m, 2H), 3.15-3.07 (m, 2H), 2.67 (m, 1H), 2.38 (m, 1H), 2.05 (m, 1H), 0.92 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 0.77 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
【０２２９】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（インドール−３−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物６５ＬＰ）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ11.61 (s, 1H), 8.56 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.08 (m, 2H), 7.91 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.62-7.54 (m, 3H), 7.43 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.22-7.00 (m, 7H), 4.95 (m, 2H), 4.72-4.61 (m, 2H), ~3.4 (m, 1H, 溶媒ピーク下に埋もれる), 3.23 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 3.13-3.06 (m, 2H), 2.61 (m, 2H), 2.34 (m, 1H), 1.99 (m, 1H), 0.91 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.81 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
【０２３０】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（インドール−３−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物６６ＭＰ：化合物６５ＬＰの立体異性体）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ11.60 (s, 1H), 8.54 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.11-8.06 (m, 2H), 7.91 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.60-7.05 (m, 11H), 4.71-4.47 (m, 4H), 3.33 (m, 2H), 3.09 (m, 2H), 2.68 (m, 2H), 2.39 (m, 1H), 2.00 (m, 1H), 0.93 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.78 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
【０２３１】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（ナフタレン−１−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物６７ＬＰ）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ8.86 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 8.73 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.11-7.98 (m, 3H), 7.64-7.54 (m, 7H), 5.17-5.08 (ABq, J = 17.0 Hz, 2H), 4.81-4.70 (m, 2H), ~3.4 (m, 1H, buried under solvent peaks), 3.05 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.87 (m, 1H), 2.65 (m, 1H), 2.02 (m, 1H), 1.55 (s, 3H), 1.00 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.87 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
【０２３２】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（ナフタレン−１−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物６８ＭＰ：化合物６７ＬＰの立体異性体）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ8.84 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.69 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.06-7.96 (m, 3H), 7.62-7.52 (m, 7H), 5.23-5.11 (ABq, J = 17.0 Hz, 2H), 4.82-4.67 (m, 2H), 3.6-3.4 (m, 1H, 溶媒ピーク下に埋もれる), 3.00 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.82 (m, 1H), 2.58 (m, 1H), 2.05 (m, 1H), 1.56 (s, 3H), 1.01-0.93 (m, 6H).
【０２３３】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（ベンゾフラン−２−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物６９ＬＰ）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ8.91 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.70 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.62-7.54 (m, 4H), 7.48 (m, 1H), 7.34 (m, 1H), 5.16-5.07 (ABq, J = 17.0 Hz, 2H), 4.79 (m, 1H), 4.61 (m, 1H), 3.44 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 3.02 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.87 (dd, J = 17.0, 6.0 Hz, 1H), 2.65 (dd, J = 17.0, 7.4 Hz, 1H), 2.11 (m, 1H), 1.50 (s, 3H), 0.94 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 0.83 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
【０２３４】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（ベンゾフラン−２−カルボニルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物７０ＭＰ：化合物６９ＬＰの立体異性体）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ8.86 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.62 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.60-7.52 (m, 4H), 7.45 (m, 1H), 7.31 (m, 1H), 5.14-5.07 (ABq, J = 17.0 Hz, 2H), 4.71 (m, 1H), 4.62 (m, 1H), 3.44 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 3.00 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.79 (dd, J = 17.0, 6.4 Hz, 1H), 2.56 (dd, J = 17.0, 6.0 Hz, 1H), 2.16 (m, 1H), 1.53 (s, 3H), 0.95-0.91 (m, 6H).
【０２３５】
・（３Ｓ）−３−｛３−［３−カルボキシ−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物７１ＬＰ）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ8.60 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.15 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.61-7.54 (m, 3H), 5.16-5.08 (ABq, J = 17.0 Hz, 2H), 4.78 (m, 1H), 4.62 (m, 1H), 3.31 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.90 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.85 (dd, J = 17.0, 6.0 Hz, 1H), 2.64 (dd, J = 17.0, 6.9 Hz, 1H), 2.44 (m, 2H), 2.33 (m, 2H), 2.24 (m, 2H), 1.90-1.76 (m, 2H), 1.46 (s, 3H).
【０２３６】
・（３Ｓ）−３−｛３−［３−カルボキシ−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物７２ＭＰ：化合物７１ＬＰの立体異性体）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ8.55 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.16 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.62-7.55 (m, 3H), 5.21-5.09 (ABq, J = 17.0 Hz, 2H), 4.76 (m, 1H), 4.58 (m, 1H), 3.23 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.95 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.83 (dd, J = 17.0, 6.5 Hz, 1H), 2.62 (dd, J = 17.0, 6.4 Hz, 1H), 2.44 (m, 2H), 2.33 (m, 2H), 2.25 (m, 2H), 1.96 (m, 1H), 1.80 (m, 1H), 1.50 (s, 3H).
【０２３７】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物７３ＬＰ）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.66 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.10 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.62-7.57 (m, 3H), 5.14-5.05 (ABq, J = 17.0 Hz, 2H), 4.77 (m, 1H), 4.36 (m, 1H), 3.31 (d, J = 18.4 Hz, 1H), 2.92 (d, J = 18.4 Hz, 1H), 2.87-2.83 (m, 1H), 2.66-2.61 (m, 1H), 2.44 (m, 1H), 2.37 (m, 1H), 1.84 (m, 1H), 1.48 (s, 3H), 0.87 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.77 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
【０２３８】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物７４ＭＰ：化合物７３ＬＰの立体異性体）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ8.56 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.08 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.62-7.57 (m, 3H), 5.19-5.08 (ABq, J = 17.0 Hz, 2H), 4.75 (m, 1H), 4.40 (m, 1H), 3.30 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.93 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.82 (m, 1H), 2.60 (m, 1H), 2.44-2.31 (m, 4H), 1.92 (m, 1H), 1.51 (s, 3H), 0.86-0.84 (m, 6H).
【０２３９】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−プロピル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物７５ＬＰ）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.64 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.09 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.60 (m, 3H), 5.17-5.04 (ABq, J = 17.0 Hz, 2H), 4.83 (m, 1H), 4.37 (m, 1H), 3.25 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.95 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.85 (dd, J = 17.0, 5.5 Hz, 1H), 2.65 (dd, J = 16.5, 7.4 Hz, 1H), 2.46-2.35 (m, 4H), 1.84 (m, 2H), 1.70 (m, 1H), 1.36-1.15 (m, 2H), 0.88-0.76 (m, 9H).
【０２４０】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−プロピル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物７６ＭＰ：化合物７５ＬＰの立体異性体）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.59 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.62-7.54 (m, 3H), 5.12 (m, 2H), 4.74 (m, 1H), 4.40 (m, 1H), 3.24 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.95 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.82 (dd, J = 17.0, 6.9 Hz, 1H), 2.59 (m, 1H), 2.44-2.30 (m, 4H), 1.92 (m, 2H), 1.71 (m, 1H), 1.38-1.20 (m, 2H), 0.85 (m, 9H).
【０２４１】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−ブチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物７９ＬＰ）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ8.63 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 8.09 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.62-7.57 (m, 3H), 5.17-5.05 (ABq, J = 17.0 Hz, 2H), 4.83 (m, 1H), 4.37 (m, 1H), 3.25 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.95 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.85 (dd, J = 17.0, 5.5 Hz, 1H), 2.65 (dd, J = 17.0, 7.3 Hz, 1H), 2.45-2.35 (m, 4H), 1.84 (m, 2H), 1.71 (m, 1H), 1.28-1.14 (m, 4H), 0.88-0.76 (m, 9H).
【０２４２】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−ブチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物８０ＭＰ：化合物７９ＬＰの立体異性体）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ8.58 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.61-7.54 (m, 3H), 5.18-5.08 (ABq, J = 17.0 Hz, 2H), 4.76 (m, 1H), 4.40 (m, 1H), 3.24 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.95 (d, J = 18.3 Hz, 1H), 2.83 (dd, J = 16.5, 6.4 Hz, 1H), 2.59 (dd, J = 17.0, 6.4 Hz, 1H), 2.44-2.30 (m, 4H), 1.92 (m, 2H), 1.73 (m, 1H), 1.36-1.16 (m, 4H), 0.87-0.83 (m, 9H).
【０２４３】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−カルボキシ−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２−ナフチルオキシ）−ペンタン酸（化合物８１ＬＰ）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ8.67 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.08 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.83 (m, 2H), 7.73 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.46 (m, 1H), 7.36 (m, 1H), 7.18 (m, 2H), 5.01 (m, 2H), 4.83 (m, 1H), 4.34 (m, 1H), 3.30 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 2.93-2.87 (m, 2H), 2.67 (dd, J = 17.0, 6.4 Hz, 1H), 2.45-2.34 (m, 4H), 1.79 (m, 1H), 1.49 (s, 3H), 0.80 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.68 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
【０２４４】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−カルボキシ−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２−ナフチルオキシ）−ペンタン酸（化合物８２ＭＰ：化合物８１ＬＰの立体異性体）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.58 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 8.08 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.83 (m, 2H), 7.73 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.46 (m, 1H), 7.35 (m, 1H), 7.18 (m, 2H), 5.04 (m, 2H), 4.82 (m, 1H), 4.40 (m, 1H), 3.33 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 2.95-2.82 (m, 2H), 2.65 (m, 1H), 2.44-2.27 (m, 4H), 1.91(m, 1H), 1.51 (s, 3H), 0.86-0.83 (m, 6H).
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−プロピル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−フェノキシ−ペンタン酸（化合物８３：ジアステレオマー混合物）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ8.57 (m, 1H), 8.06 (m, 1H), 7.26 (m, 2H), 6.94 (m, 1H), 6.83 (m, 2H), 4.92-4.71 (m, 3H), 4.41-4.34 (m, 1H), 3.26-3.21 (m, 1H), 2.96-2.78 (m, 2H), 2.67-2.56 (m, 1H), 2.44-2.25 (m, 4H), 1.92-1.66 (m, 3H), 1.40-1.16 (m, 2H), 0.88-0.70 (m, 9H).
【０２４５】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−ヒドロキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物８４：ジアステレオマー混合物）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ8.57 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.08 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.59 (m, 3H), 5.24-5.09 (m, 2H), 4.80 (m, 1H), 4.40 (m, 1H), 3.78 (m, 1H), 3.56 (m, 1H), 3.16-3.03 (m, 2H), 2.79 (m, 1H), 2.60 (m, 1H), 2.44-2.33 (m, 4H), 1.90 (m, 1H), 0.86-0.76 (m, 6H).
【０２４６】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物８５ＬＰ）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ8.51 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.59 (m, 3H), 7.25 (m, 5H), 4.92 (ABq, J = 17.0 Hz, 2H), 4.70 (m, 1H), 4.34 (m, 1H), 3.34-3.20 (m, 2H), 3.07-3.02 (m, 2H), 2.58 (m, 1H), 2.44-2.30 (m, 5H), 1.82 (m, 1H), 0.81-0.73 (m, 6H).
【０２４７】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−フェニルメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物８６ＭＰ：化合物８５ＬＰのジアステレオマー）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ8.49 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.60 (m, 3H), 7.28-7.19 (m, 5H), 4.70 (m, 1H), 4.60-4.51 (ABq, J = 17.4 Hz, 2H), 4.36 (m, 1H), 3.32-3.26 (m, 2H), 3.07-3.02 (m, 2H), 2.73-2.68 (m, 1H), 2.42-2.28 (m, 5H), 1.82 (m, 1H), 0.83 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 0.69 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
【０２４８】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−メトキシメチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物８７：ジアステレオマー混合物）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.80 & 8.65 (two m, 1H), 8.10 & 7.97 (two m, 1H), 7.60 (m, 3H), 5.24-5.03 (m, 2H), 4.84 & 4.68 (two m, 1H), 4.39 (m, 1H), 3.78-3.51 (m, 2H), ~3.35 (two s, 3H), 3.20-2.99 (m, 2H), 2.91-2.50 (m, 2H),  2.44-2.34 (m, 4H), 1.85 (m, 1H), 0.87 (m, 6H).
【０２４９】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−ｎ−ペンチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物８９ＬＰ）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.64 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.10 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.60 (m, 3H), 5.16-5.05 (ABq, J = 16.5 Hz, 2H), 4.80 (m, 1H), 4.36 (m, 1H), 3.24 (d, J = 17.5 Hz, 1H), 2.94 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.85 (m, 1H), 2.64 (m, 1H), 2.45-2.36 (m, 4H), 1.84 (m, 2H), 1.70 (m, 1H), 1.23 (m, 6H), 0.86-0.76 (m, 6H).
【０２５０】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−ｎ−ペンチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物９０ＭＰ：化合物８９ＬＰのジアステレオマー）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.59 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.60 (m, 3H), 5.18-5.08 (ABq, J = 16.5 Hz, 2H), 4.76 (m, 1H), 4.40 (m, 1H), 3.24 (d, J = 18.3 Hz, 1H), 2.95 (d, J = 18.3 Hz, 1H), 2.82 (m, 1H), 2.58 (m, 1H), 2.44-2.30 (m, 4H), 1.92 (m, 2H), 1.72 (m, 1H), 1.23 (m, 6H), 0.85 (m, 6H).
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−エチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物９１ＬＰ）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ8.66 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.10 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.62-7.56 (m, 3H), 5.17-5.05 (ABq, J = 16.5 Hz, 2H), 4.84 (m, 1H), 4.36 (m, 1H), 3.25 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.95 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.85 (m, 1H), 2.65 (m, 1H), 2.45-2.35 (m, 4H), 1.91-1.71 (m, 3H), 0.88-0.74 (m, 9H).
【０２５１】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（サクシノイルアミノ）−プロピル］−５−エチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物９２ＭＰ：化合物９１ＬＰのジアステレオマー）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ8.59 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 8.08 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.62-7.54 (m, 3H), 5.17-5.09 (ABq, J = 17.0 Hz, 2H), 4.75 (m, 1H), 4.40 (m, 1H), 3.23 (d, J = 18.3 Hz, 1H), 2.95 (d, J = 17.8 Hz, 1H), 2.83 (m, 1H), 2.61 (m, 1H), 2.46-2.28 (m, 4H), 1.93 (m, 2H), 1.77 (m, 1H), 0.88-0.80 (m, 9H).
【０２５２】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（グルタロイルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物９３ＬＰ）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ8.66 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.61-7.54 (m, 3H), 5.14-5.05 (ABq, J = 16.5 Hz, 2H), 4.79 (m, 1H), 4.40 (m, 1H), 3.32 (d, J = 17.5 Hz, 1H), 2.90-2.83 (m, 2H), 2.63 (m, 1H), 2.18 (m, 4H), 1.85 (m, 1H), 1.72 (m, 2H), 1.48 (s, 3H), 0.86 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 0.77 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
【０２５３】
・（３Ｓ）−３−｛３−［２−メチル−（１Ｓ）−１−（グルタロイルアミノ）−プロピル］−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソオキサゾール−５−カルボニルアミノ｝−４−ケト−５−（２，６−ジクロロベンゾイルオキシ）−ペンタン酸（化合物９４ＭＰ：化合物９３ＬＰのジアステレオマー）
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ8.58 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.62-7.54 (m, 3H), 5.18-5.08 (ABq, J = 17.0 Hz, 2H), 4.76 (m, 1H), 4.41 (m, 1H), 3.31 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 2.92 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 2.80 (m, 1H), 2.60 (m, 1H), 2.16 (m, 4H), 1.91 (m, 1H), 1.70 (m, 2H), 1.51 (s, 3H), 0.85 (m, 6H).
【０２５４】
薬理学的実験例
本発明に係る化合物の薬理学的効力を、下記実験例によって評価した。ＣｏｎＡをBoehringer Mannheim GmbH（Mannheim, Germany）から購入した。カスパーゼのペプチドベースの基質（カスパーゼ−１用のＡｃ−ＹＶＡＤ−ｐＮＡ、カスパーゼ−２用のＡｃ−ＶＤＶＡＤ、カスパーゼ−３，７，８及び９用のＡｃ−ＤＥＶＤ−ｐＮＡ、カスパーゼ−４用のＡｃ−ＬＥＶＤ−ｐＮＡ、及びカスパーゼ−６用のＡｃ−ＶＥＩＤ−ｐＮＡ）並びにペプチドベースのカスパーゼインヒビター（Ａｃ−ＤＥＶＤ−ｆｍｋ、ｚ−ＶＡＤ−ＣＨＯ）を、Alexis Co.（San Diego, CA）から購入した。Ａｃ−ＤＥＶＤ−ＣＨＯ及びｚ−ＤＥＶＤ−ｃｍｋをBachemから購入した；抗Ｆａｓ抗体をOncor（カタログ番号Ａ８０５０）から購入した；ＷＩ３８細胞をATCCから入手した；ＩＦＮ-γをLG Pharmaceuticals（大韓民国）から購入した。他に言及がない限り、全ての細胞培養培地及び補充物を、Gibco BRL(Tsuen Wan、Hong Kong)から購入した。組換えヒトカスパーゼ（１−４、６−１０）を、Garcia-Calvo Mらの"Purification and catalytic properties of human capase family members", Cell Death Differ., 1999, Apr. ; 6(4): 362-9）に記述された方法によって製造した。特に、カスパーゼ−３，−６，−７及び−８は商業的に購入可能である（Pharmingen, SanDiego, CA, USA, カスパーゼ−３:６６２８１Ｔ、カスパーゼ−６：６６２９１Ｔ、カスパーゼ−７：６６３０１Ｔ、カスパーゼ−８：６６３１１Ｔ）。
【０２５５】
実験例１：カスパーゼ抑制活性に対するスクリーニング
本実験例で、ヒトカスパーゼ遺伝子を発現ベクターｐＥＴにクローニングした後、形質転換されたバクテリアから組換えカスパーゼを精製して、次いで実験に用いた（Thornberry, N.A., et al., Nature, 1992, 356, 768. Thornberry, N.A. Methods in Enzymology, 1994, 615.）。
【０２５６】
酵素活性を公知の方法で測定した（Walker N.P.C. et al., Cell 1994, 78, 343）。簡略には、１０ｎｇの組換え蛋白質を５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ（ｐＨ７．０）、１ｍＭ  ＤＴＴ、０．５ｍＭ  ＥＤＴＡ、１〜１００μＭの酵素基質を含有する１０％グリセロール緩衝液、Ａｃ−ＹＶＡＤ−ＡＭＣまたはＡｃ−ＤＥＶＤ−ＡＭＣと混合し、次いで３７℃で単離されたＡＭＣによる変化を記録した。３８０ｎｍで励起され、４６０ｎｍで放出される蛍光変化を測定して、カスパーゼに対する抑制活性を初期酵素反応速度から計算した（範囲；Ｋｉ＜１００ｎｍ）。
【０２５７】
実験例２：カスパーゼに対する細胞内抑制効力についてのスクリーニング
ＬＰＳにより刺激された末梢リンパ球においてＩＬ−1β生成に対する化合物の効果をスクリーニングすることによって、カスパーゼ−１に対する抑制活性を決定した。簡略には、５００，０００細胞／ｍｌのヒト末梢リンパ球を、多様な濃度の試験化合物で２時間処理した後、１０ｎｇ／ｍｌのＬＰＳで処理した。細胞を１２時間インキュベートした後、培地からの上清サンプルを、１００ｎｇ／ウェルのヒトＩＬ−1β抗体がコーティングされている免疫抗体分析（Amersham）によって分析した（範囲：ＣＩＣ50：０．１〜１０μＭ）。
【０２５８】
これまでは、アポトーシスに対する化合物の効力をＭＴＴアッセイによって定量したが、ここでは、細胞の死滅を誘導する抗Ｆａｓ抗体ＣＨ１１で処理されたＪｕｒｋａｔ  Ｔ細胞において、化合物の濃度による細胞の死滅及び生存の比率を分析した（有効範囲；１．０〜１０μＭ）。
【０２５９】
【表１】
0004195561.tif 000021
0004195561.tif 000022
【０２６０】
実験例３：肝細胞の単離及び培養
Sprague-Dawley雄ラット（Hanlan Sprague-Dawley）を、MacMicking et al., 1995, Cell 81: 641-650）により記載される通りに処理及び飼育し、肝細胞の供給源として用いた。ラットの肝細胞を、Stadler et al., Arch. Biochem. Biophys. 302: 4-11）に記載される通りに単離、精製及び培養した。１０％仔牛血清を含有し、ＨＥＰＥＳ  １５ｍＭ（ｐＨ７．４）、インスリン１μＭ、Ｌ−グルタミン２ｍＭ、ペニシリン１００単位／ｍｌ及びストレプトマイシン１００μｇ／ｍｌを補充したウィリアムス培地Ｅ（Williams medium E）に、高度に精製された肝細胞（純度＞９８％、トリパンブルー排除法による生存率＞９８％）を懸濁した。細胞生存率試験に関しては、コラーゲンでコーティングされた１２−ウェルプレートに細胞を１ウェル当たり２×１０5細胞の密度で加え、又は酵素アッセイに関しては１００ｍｌ皿(dishes)当たり５×１０6細胞の密度で細胞を加えた。
【０２６１】
実験例４：無細胞系における、カスパーゼ活性の抑制についてのインビトロアッセイ
ペプチドベースの発色性基質の、各酵素によるタンパク質分解性切断を測定することによってカスパーゼ活性を試験した。組換えヒトカスパーゼをアッセイ緩衝液（グリセロール２０％（ｖ／ｖ）を含有するＨＥＰＥＳ  １００ｍＭ，ｐＨ７．４）中でＤＴＴ  ５ｍＭと共に室温で２０分間予備インキュベートした。酵素分画（２μｌ（４０５ｎｍ／ｈでの吸光度が０．２の触媒活性を含有））を、９６−ウェルプレートにおいて、化合物３３  １００μＭの存在または不在下で２００μＭの発色性基質１５０μｌとともに混合した。この混合物を３７℃でインキュベートした。マイクロプレートリーダーにおいて１時間の間、酵素的に放出されたｐＮＡの吸光度を、４０５ｎｍで不連続的に測定した。初期速度からカスパーゼ活性を計算した（平均±ＳＥ）（ｎ＝４、ここでｎは実験の反復回数を表す）。その結果、本発明の化合物は、カスパーゼ−２だけを除いて、試験された全てのカスパーゼの活性をほとんど完全に抑制した（図１）。この結果は、本発明の化合物が、広範囲のカスパーゼインヒビターであることを示す。
【０２６２】
実験例５：ラット肝細胞における、カスパーゼ活性抑制についてのインビボアッセイ
新しく単離したラット肝細胞を、ＴＮＦα  ２，０００単位／ｍｌ及びアクチノマイシンＤ  １００ｎｇ／ｍｌで処理して、細胞のアポトーシスを誘導した。１０時間後に細胞を回収した。凍結及び融解を３回繰り返すことによって細胞を溶解し、そして４℃、１２，０００ｘｇで２０分間遠心分離することによって、細胞質ゾル溶液を得た。細胞質ゾル（蛋白質  約２μｇ）を化合物３３  １００μＭの存在または不在下で、グリセロール  ２０％及びＤＴＴ  ５ｍＭを含有するＨＥＰＥＳ緩衝液（１００ｍＭ，ｐＨ７．４）中の特異発色性基質２００μＭと混合して、そして３７℃でインキュベートした。４０５ｎｍでの増加した吸光度を測定することによって、カスパーゼ活性をアッセイした。
【０２６３】
その結果、Ａｃ−ＤＥＶＤ−ｐＮＡ（カスパーゼ−３，７，８及び９）、Ａｃ−ＬＥＶＤ−ｐＮＡ（カスパーゼ−４）及びＡｃ−ＶＥｍ−ｐＮＡ（カスパーゼ−６）に対しては強い酵素活性が検出され、そしてＡｃ−ＶＤＶＡＤ（カスパーゼ−２）に対しては中程度の酵素活性が検出された（図２）。本発明の化合物は、これらの増幅されたカスパーゼ活性をほぼ完全に抑制しており、そしてその活性は、ペプチドベースのカスパーゼインヒビターＡｃ−ＤＥＶＤ−ｆｍｋ及びｚ−ＶＡＤ−ＣＨＯに匹敵するものであった（図２）。Ａｃ−ＹＶＡＤ−ｐＮＡ（カスパーゼ−１）に関しては、検出された酵素の活性は相対的に低かった。しかし、本発明の化合物は、カスパーゼ−１様活性の７４．１％を抑制した。
【０２６４】
実験例６：単離されたラット肝細胞における細胞生存率の増加についてのインビトロアッセイ
カスパーゼインヒビター（化合物３３）１００μＭの存在または不在下で、この細胞を、ＴＮＦα  ２，０００単位／ｍｌ及びアクチノマイシンＤ  １００ｎｇ／ｍｌで１２時間処理した。その後、クリスタルバイオレット染色法によって細胞生存率を測定した（ｎ＝４）。
【０２６５】
その結果、本発明の化合物は、ラット肝細胞の死滅を防いだ（平均±ＳＥ）（図３）。この実験の結果は、本発明の化合物がＴＮＦα及びアクチノマイシンＤによって誘導されるアポトーシスによる死滅から肝細胞を保護したことを示す。
【０２６６】
実験例７：ＣｏｎＡ誘発性急性肝炎マウスに対する効果
工程１：血液サンプルの製造
6週齢のBalb/c 雌マウス（Charles River Laboratory，大阪，日本）を２２℃及び５５％の相対湿度下で、１２時間ずつ昼夜リズムを変えながら飼育し、ここで飼料及び水を自由に摂取させた。発熱物質（pyrogen）を除去した生理食塩水にＣｏｎＡを２．５ｍｇ／ｍｌの濃度で溶解し、上記マウスに尾静脈を通じて、ＣｏｎＡを基準に２０ｍｇ／ｋｇの量で注射した。化合物３３が溶解されているビヒクル（vehicle）（オリーブ油と１０％ＤＭＳＯとから構成される）またはビヒクル単独を、ＣｏｎＡ注射１時間前及び注射４時間後に実験動物に２回腹腔内注射した。ＣｏｎＡ注射の２４時間後に、動物を頚椎脱臼によって屠殺し、そして肝臓及び血液サンプルを得た。
【０２６７】
工程２：血漿アミノトランスフェラーゼ活性についてのアッセイ
工程1で取得した血液サンプルを、ＣｏｎＡ注入の２４時間後に回収した。製造業者の説明書に従ってＡｕｔｏｋｉｔ（Youngdong Pharmaceutical Co, Seoul, Korea）を使用して、血漿ＡＳＴ及びＡＬＴ活性を測定した。
【０２６８】
独立した２回の実験を行って結果を確認した。両実験において、ＣｏｎＡは、血清ＡＳＴ及びＡＬＴ活性を急激に上昇させ、そして化合物３３は、用量依存的な様式でこの上昇した酵素活性を抑制することが確認された（図４Ａ、Ｂ）。２番目の実験（図４参照）では、ＣｏｎＡ／ビヒクル群とＣｏｎＡ／化合物３３  ４ｍｇ／ｋｇ群との間の差異は、統計学的に有意な水準に達しなかった（ＡＳＴ：ｐ＝０．２９７２、ＡＬＴ：ｐ＝０．１３７８）。なぜなら各マウスの酵素活性が、若干の変動を示したからである。しかし、化合物３３  ２０ｍｇ／ｋｇ用量の群では、ＡＳＴ及びＡＬＴ活性は、ＣｏｎＡ／ビヒクル群に比べ、明確に減少した（ＡＳＴ：ｐ＝０．０１７４，ＡＬＴ：ｐ＝０．００１１）。１番目の実験（図４Ａ）では、化合物３３がＡＳＴ活性を若干増加させたが、この増加は、統計学的に有意的な水準に至っていなかった（ｐ＝０．１０３３）。これらの結果は、化学式（I）の化合物がインビボにおいてＣｏｎＡによって誘発されたＡＳＴ及びＡＬＴ活性の上昇を抑制したが、それ自身が深刻な肝毒性を引き起こさなかったことを示す。
【０２６９】
工程３：サイトカインアッセイ
大部分の肝疾患病因が不明確であるが、幾つかの証拠は、サイトカイン類が肝損傷に直接的に関与し得るか、又は免疫系の活性化を通じて関与し得ることを示唆しており、そしてサンドイッチＥＬＩＳＡによって、ＴＮＦα、ＩＬ−２、ＩＬ−４及びＩＦＮγを含むサイトカイン類は、肝疾患を患う患者を増加させることが報告された（参照: Chisari, F.V., 1992, Mol. Genet. Med . 2: 67-104; Fukuda, R. et al., Clin. Exp. Iｍmunolol. 100: 446-451; Yoshioka, K. et al., Hepatology 10: 769-773）。従って、本発明者らは、ＣｏｎＡによって増加した血清サイトカイン濃度に対する本発明の化合物の効果を確認した。
【０２７０】
工程１でのＣｏｎＡ注入の６時間後に、血液サンプルを回収した。マウスの血漿ＩＬ−１β（Endogen, Inc., Bostone, MA）、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＦＮγ（Pharmingen, SanDiego, CA）量を、ＥＬＩＳＡキットを用いて測定した。アッセイを、製造業者に記述された通りに厳密に行った。各サンプルを２回決定した。
【０２７１】
実験結果は、本発明の化合物がＣｏｎＡによって誘発されたＩＬ−１βの増加を用量依存的な様式で抑制することが示された（図５参照）。それまでは、本発明の化合物は、用量依存的な傾向でＩＬ−４濃度を適度に減少させたが、処理群間の差は、統計学的に有意的な水準に至っていなかった。一方、本発明の化合物はＩＬ−２及びＩＦＮγにあまり影響を及ぼさなかった。本発明の化合物自体は、ビヒクルを単独で用いる場合に比べ、４つ全てのサイトカインを減少させたが、その差は統計学的に有意な水準に至っていなかった（４つ全てのサイトカインに対して０．０５＜ｐ＜０．９５）。
【０２７２】
実験例８：組織検査及びアポトーシスの検出
本発明者らは、本発明の化合物が特に肝細胞でアポトーシス遮断効果を示すことを確認するために、マウス肝臓でのアポトーシス細胞の優勢度を評価した。種々の用量の化合物３３の存在または不在下においてマウスをＣｏｎＡで処理して［Ａ及びＧ：ＣｏｎＡ及びビヒクル処理、Ｂ及びＨ：ＣｏｎＡ及び化合物３３  ４ｍｇ／ｋｇ処理、Ｃ及びＩ：ＣｏｎＡ及び化合物３３  ２０ｍｇ／ｋｇ処理、Ｄ及びＪ：ＣｏｎＡ及び化合物３３  １００ｍｇ／ｋｇ処理］、凍結した肝切片を調製した。また、マウスをＰＢＳ及びビヒクルで処理（Ｅ及びＫ）するか、又はＰＢＳ及び化合物３３  １００ｍｇ／ｋｇで処理（Ｆ及びＬ）して、凍結した肝切片を調製した。新しく切除されたマウス肝臓を、直ちに４℃で一晩中２５％スクロース溶液に浸し、次いで液化窒素下で凍結して、４μｍに凍結切開した。
【０２７３】
組織検査のために、１％パラホルムアルデヒド緩衝液で肝切片を固定し、ヘマトキシリン及びエオシンで染色した（図６Ａ〜Ｆ）。肝臓中のアポトーシス細胞を観察するために、ＡｐｏｐＴａｇインサイチュアポトーシスペルオキシダーゼ検出キット（terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling: TUNEL assay）（Oncor, Gaithersburg, MD）及びＤＡＫＯ  ｌｉｑｕｉｄ  ＤＡＢ（DAKO, Carpinteria, CA）を用いて、凍結した肝臓を染色した（図６Ｇ〜Ｌ）。染色を製造業者の説明書に従って行った。染色を完了した後、サンプルを光学顕微鏡を使用して観察した。各写真は、１群当たり１０匹のマウスから得られた代表的な結果を表す。組織検査は、ＣｏｎＡが肝細胞に深刻な形態学的及び組織学的変化を誘発し（図６Ａ）、アポトーシス性病変が影響を受けた肝臓を通して明確に検出可能であったことを示した（図６Ｇ）。しかし、本発明の化合物（化合物３３）で処理した肝臓では、アポトーシス性病変は用量依存的に減少し（図６Ｂ〜Ｄ）、そして化合物３３の用量を増加させることによって細胞組織が次第に回復した（図６Ｈ〜Ｊ）。これらの結果は、本発明の化合物がＣｏｎＡの致命的なアポトーシス効果から肝細胞を保護していることを示した。
【０２７４】
実験例９：ウェスタンブロット
本実験では、ＣｏｎＡ及び種々の用量の式（I）の化合物で処理されたマウスから取得した肝細胞溶解物における８５ｋＤａ分解物のウェスタンブロット分析での外観によって、ＰＡＲＰの分解を調べた。
【０２７５】
ＣｏｎＡまたはＰＢＳと種々の用量の化合物３３とで処理した、新しく回収された肝臓を、冷たいＰＢＳで洗浄し、そして１％  Ｎｏｎｉｄｅｔ  Ｐ−４０、０．１％  ＳＤＳ、１ｍＭ  ＰＭＳＦ及びプロテアーゼインヒビター混合錠剤ＣｏｍｐｌｅｔｅTM（Beohnger Mannheim、製造業者の説明書に従って使用）を含有する、１重量あたり３容量のＰＢＳ中にホモジナイズした。ホモジネートを氷上で３０分間インキュベートした。その後、サンプルを１６，０００ｘｇ、４℃で３０分間遠心分離した。上清を新しいチューブに移して、さらに３０分間遠心分離した。回収した溶解物を、４℃で一晩中プロテインＧ−セファロース（Pharmacia, Uppsala, Sweden）と共に穏やかに振盪してインキュベートすることによって、事前に清澄にした。４℃、１０００ｘｇで３０秒間遠心分離して上清を回収し、７％  ＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル上で分離し、ニトロセルロース膜へ転写した。５％スキムミルク及び０．１％  ツイーン２０を含有するＰＢＳ中で、穏やかに振盪しながら１時間かけて室温でブロットをブロッキングした。膜を、１：１０００に希釈したモノクローナル抗ＰＡＲＰ抗体（Pharmingen）と共に穏やかに振盪して一晩中インキュベートした。ＰＢＳ−ツイーンで３回洗浄した後、ブロットをヤギ抗マウスＩｇＧ西洋ワサビペルオキシダーゼ（１：１０００希釈）とハイブリダイズさせた。ＰＢＳ−ツイーンで３回洗浄した後、ＥＣＬウェスタンブロッティングキット（Amersham-Pharmacia Biotech, San Francisco, CA）を用いてシグナルを発色させ、そしてオートラジオグラフィーで可視化した。
【０２７６】
組織検査によると、本発明の化合物は、ＣｏｎＡによって誘発された肝細胞のアポトーシスによる死滅によって引き起こされたＰＡＲＰ分解を抑制した（図７）。また、化合物のアポトーシス遮断効果は、用量依存的な様式なものであった。
【０２７７】
実験例１０：アポトーシス保護に対するカスパーゼインヒビターの効果
本発明に係る化合物のアポトーシス保護に対する効果を確認するために次のように実験した。
【０２７８】
ＷＩ３８細胞（ヒト胎児性肺繊維芽細胞）を、１０ｃｍ直径の皿においてコンフルエントに到達するまで増殖させた（培地：ＤＭＥＭ−１０％  ＦＢＳ含有）。細胞を１日目に２４ウェルプレートに播種し、そして培地容量を４００μｌに維持しつつ一晩インキュベートした。２日目にＩＦＮγ  ２００ユニット／ｍｌで細胞を処理した後、１２時間以上インキュベートした。３日目には、ＤＭＳＯ中に１０ｍＭストック化合物を希釈した後、試験化合物を１００μｌずつ細胞に添加して、それぞれ、５０、１０、２及び０．４μＭの最終濃度にした。化合物が細胞内に入っていくことを可能にする条件で細胞を２時間インキュベートし、そして抗Ｆａｓ抗体を４０ｎｇ／ウェルで処理した（抗体を処理して２時間後、アポトーシスが誘導され、そして培養を一晩中継続した）。コントロールは、Ｆａｓ抗体で処理されなかった。４日目に、細胞を顕微鏡で観察した後、１ウェル当たり３００μｌずつ培地を加え、次いでＸＴＴ  ｗｏｒｋｉｎｇ溶液１５０μｌを加え、続けて２時間培養した。発色後、上清を１００−２００μｌずつ９６ウェルプレートに移して、４９０ｎｍでの吸光度をＥＬＩＳＡプレートリーダーで測定した。、ブランクについては、培地のみを含むウェルにＸＴＴ溶液を加えた。コントロール群（Ｆａｓ抗体を処理しなかった場合に１００％）と比較してプロットを決定した。その結果を下記表２に示す。
【０２７９】
【表２】
0004195561.tif 000023
【０２８０】
上記表２の結果から理解されるように、ＩＦＮγと抗Ｆａｓ抗体を一緒に処理した場合には、１５％の細胞のみが生存したのに対し、既存のカスパーゼインヒビターＡｃ−ＤＥＶＤ−ＣＨＯ（可逆的なインヒビター）またはｚ−ＤＥＶＤ−ｃｍｋ（非可逆的なインヒビター）５０μＭで処理した場合には、それぞれ３５．１％及び４７．３％の生存比であった。しかし本発明に係る化合物２２、化合物２８及び化合物３３を同一濃度で処理した場合には、それぞれ７８％、９０％、１００％の生存比であった。従って、本発明に係るカスパーゼインヒビターが、既存の薬物に比べ、遥かに強力にアポトーシスを防いだことが判る（図８参照）。
【０２８１】
実験例１１：抗Ｆａｓ抗体によって誘導された肝アポトーシスに対するカスパーゼインヒビターの効果
工程Ａ：動物処理
抗Ｆａｓ抗体（Ｊｏ２）１０μｇを静脈内投与する１時間前に、オリーブ油及び１０％  ＤＭＳＯで構成されたビヒクルに溶解した化合物３３ＭＰ、またはビヒクル単独を、３−４週齢のＣ５７ＢＬ／６雌マウス（１８−２０ｇ）に腹腔内注入した。Ｊｏ２抗体を静脈内注入して４時間後、血液収集及び肝分離のために、動物をイソフルレン吸入麻酔下に置いた。また、０．２μｇ／２０ｇのＴＮＦα及び１２ｍｇ／２０ｇのＤ−ガラクトサミン（ＴＮＦα／ＧａｌＮ）及び化合物３３ＭＰまたはその塩形態（化合物３３ＭＰ−Ｎａ）をマウスに腹腔内注入した。８時間後、血液及び肝組織を麻酔した動物から分離した。肝組織をスナップ（snap）凍結して使用時まで−８０℃で保存した。４℃、１２，０００ｘｇで１０分間遠心分離して血液から血漿を分離して、−８０℃で保存した。動物致死性に対する一部実験で、マウスにＴＮＦα／ＧａｌＮを腹腔内注射し、そしてＴＮＦα／ＧａｌＮを注射する１時間前に、注射と同時に、注射して２時間または４時間後に、カスパーゼインヒビターを注入した。
【０２８２】
工程Ｂ：ＤＮＡ断片化
組織全体（０．５ｇ）を氷冷溶解緩衝液（Ｔｒｉｓ  ５ｍＭ  ＥＤＴＡ  ２０ｍＭ，０．５％  トリトン−Ｘ  １００，ｐＨ８．０）中にホモジネートした。溶解物を４℃、１２，０００ｘｇで２０分間遠心分離した。上清を得て、フェノールとクロロホルムの混合物で２回抽出した。１／１０体積の３Ｍ酢酸ナトリウムを溶液に添加して、そして同体積のイソプロパノールを添加することによりＤＮＡを沈澱させた。−２０℃で一晩中保存した後、４℃、１２，０００ｘｇで１５分間遠心分離してＤＮＡペレットを入手し、７５％エタノールで２回洗浄した。ペレットを乾燥させて、１００μｌの２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ８．０に再懸濁させた。ＲＮＡを、ＤＮａｓｅフリーＲＮａｓｅ（０．１ｍｇ／ｍｌ）で、３７℃で１時間分解した後、サンプル（１５ｍｌ）を、４５０ｍＭトリスボレート＋ＥＤＴＡ（ＴＢＥ）、ｐＨ８．０緩衝液中で１．２％アガロースゲルを通じて電気泳動させた。ＤＮＡをＵＶ光によって可視化して撮影した。
【０２８３】
工程Ｃ：酵素アッセイ
プロテアーゼインヒビター（アプロチニン５μｇ／ｍｌ、ペプスタチンＡ  ５μｇ／ｍｌ、ロイペプチン１０μｇ／ｍｌ、及びＰＭＳＦ  ０．５ｍＭ）を含有する１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ緩衝液に肝組織をホモジネートし、３回の凍結／融解サイクルによって溶解した。４℃、１２，０００ｘｇで２０分間遠心分離して細胞質ゾル画分を取得した。蛋白質濃度をＢＣＡ蛋白質アッセイ試薬（pierce, Rockford, IL）で測定した。蛋白質２００μｇを含有する細胞質ゾルを、プロテアーゼインヒビターを含有する１５０μｌの１００ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４中の２００ｍＭ合成基質Ａｃ−ＤＥＶＤ−ｐＮＡと９６−ウェルプレートで混合して、反応を３７℃で１時間行った。４０５ｎｍでの増加した吸光度を測定することによって、細胞質ゾルのカスパーゼ−３様活性をアッセイした。アスパルテートアミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）の血漿レベルを各酵素分析キット（Sigma）を使用してスペクトロフォトメトリによって分析した。
【０２８４】
工程Ｄ：肝細胞の培養及び処理
コラゲナーゼ分解方法を使用してSpragye-Dawly雄ラットから初代ラット肝細胞を単離及び精製した。肝細胞を４℃、１，０００ｘｇで１０分間遠心分離して３０％パーコール（Percoll）勾配で精製した。高度に精製された肝細胞（純度＞９８％、トリパンブルー排除法による生存率＞９５％）を、１０％仔牛血清、１μＭ  インスリン、２ｍＭ  Ｌ−グルタミン、１５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１００ユニット／ｍｌペニシリン、及び１００μｇ/ｍｌ  ストレプトマイシンが補充されたウィリアムス培地Ｅに懸濁した。細胞生存度分析に関しては、１２−ウェルプレートにおいてコラーゲンによりコーティングされた組織培養プレートに、細胞を１ウェル当たり２×１０5細胞の密度で加え、酵素分析に関しては、１００ｍｍ皿当たり５×１０6細胞の密度で細胞を加えた。１８時間の予備培養後、細胞を２，０００ユニット／ｍｌ  ＴＮＦα及び０．２μｇ／ｍｌアクチノマイシン（ＡｃｔＤ）で処理した。カスパーゼ活性及び細胞生存率を、カスパーゼ基質Ａｃ−ＤＥＶＤ−ｐＮＡを使用するカロリメトリ（colorimetry）及びクリスタル・バイオレット染色方法によってそれぞれ８時間及び１２時間目に測定した。
【０２８５】
図９Ａの結果から理解されるように、抗体注射１時間前に０．４ｍｇ／２０ｇ、１ｍｇ／２０ｇの化合物３３ＭＰ、またはビヒクル単独（オリーブ油及び１０％ＤＭＳＯ）を注射したマウスの肝臓でのアポトーシス（ＤＮＡ断片化によって決定される）は、抗体注射４時間後に、抗Ｆａｓ抗体を注射した動物で明らかに増加した。化合物３３ＭＰによる処理は、用量依存的な様式において肝臓でのアポトーシスを抑制した。抑制は、周知のペプチドカスパーゼインヒビターＺ−ＶＡＤ−ｆｍｋのものより高かった。同様に、肝臓酵素ＡＳＴの放出は、抗Ｆａｓ抗体で処理した動物で増加した（図９Ｂ）。酵素放出は、また化合物３３ＭＰの注射によって著しく抑制された。抑制効果はＺ−ＶＡＤ−ｆｍｋのものより高かった。これらの結果は、化合物３３ＭＰが抗Ｆａｓ抗体により誘導された肝損傷から肝臓を保護できることを表す。カスパーゼ−３様プロテアーゼの活性化がアポトーシスの実行段階に必要とされることから、抗Ｆａｓ抗体注射後に、４０５ｎｍでカスパーゼ−３様基質Ａｃ−ＤＥＶＤ−ｐＮＡの加水分解生成物を測定することによってカスパーゼ−３様活性を評価した。カスパーゼ活性は、抗体で処理された肝組織で約２５倍増加した（図１０）。増加した活性は、化合物３３ＭＰ処理によって妨げられた。また、抗Ｆａｓ抗体で処理した動物の大部分（８５％）が２４時間以内に死亡したのに対し、化合物３３ＭＰによる処理は、死亡率を約３０％減少させた（図１１）。この抑制は、Ｚ−ＶＡＤ−ｆｍｋのものより効果的であった。この結果は、化合物３３ＭＰによるカスパーゼ活性の抑制及び／または活性化の抑制が、抗Ｆａｓ抗体で誘導されたアポトーシスによる死亡からマウスを保護するのに十分であることを示唆する。
【０２８６】
肝機能不全及び障害は、内毒素血症及び敗血症の間で共通する問題である。一般的に、プロ炎症性（proinflammatory）サイトカイン、特にＴＮＦαが肝損傷及び死亡に重要であることが受け入れられている。本発明者らは、ＴＮＦαによって媒介される肝毒性に対する化合物３３ＭＰの効果を調べた。ＴＮＦα／ＡｃｔＤによる処理は、肝組織にＤＮＡ断片化を誘導し、そしてこの毒性は、化合物３３ＭＰの投与によって著しく減少した（図１２Ａ）。ＴＮＦα／ＡｃｔＤ処理に伴うＡＳＴの放出もまた、化合物３３ＭＰによる処理で抑制された（図１２Ｂ）。化合物３３ＭＰの保護効果は、Ｚ−ＶＡＤ−ｆｍｋのものより高かった。ＴＮＦα／ＡｃｔＤにより媒介された肝毒性は、カスパーゼ−３様活性の増加を伴った（図１３）。増加したカスパーゼ活性は、化合物３３ＭＰによって抑制され、これはＺ−ＶＡＤ−ｆｍｋよりも高い抑制効果を表した。これらのデータは、化合物３３ＭＰによるプロアポトーシス性（proapoptotic）カスパーゼ活性の抑制がアポトーシスＤＮＡ断片化による肝損傷の抑制と相関することを示す。劇症の肝臓の損傷及び破壊は、動物の死亡と関連しているため、本発明者らは、ＴＮＦα／ＡｃｔＤにより媒介されたマウスの死亡に対する本発明の化合物の効果を調べた。ＴＮＦα／ＡｃｔＤ及びビヒクル（オリーブ油及び１０％ＤＭＳＯ）を注入したときに、大部分のマウス（約８０％、６匹のうちの１匹）が２４時間以内に死亡したのに対し、化合物３３ＭＰで処理した動物のうちの８０％が生存した（図１４）。同様の結果が、Ｚ−ＶＡＤ−ｆｍｋの注射によって得られた。従って、本結果は、本発明に係る新規の非ペプチドカスパーゼインヒビターが劇症肝損傷の治療に治療的に適用され得ることを示唆する。
【０２８７】
本発明者らは、溶解度を増加させるために、化合物３３ＭＰのナトリウム塩形態を製造し、ＴＮＦα／ＡｃｔＤで処理した初代ラット肝細胞におけるカスパーゼ活性及び細胞生存度に対する、この化合物（化合物３３ＭＰ−Ｎａ）の効果を調べた。カスパーゼ−３様活性は、ＴＮＦα／ＡｃｔＤで８時間処理した後に、培養された肝細胞で増加した（図１５Ａ）。この増加は、１００μＭ化合物３３ＭＰ−Ｎａを添加することによって抑制され、そしてこの抑制は、化合物３３ＭＰ、Ａｃ−ＤＥＶＤ−ｃｈｏ、またはＺ−ＶＡＤ−ｆｍｋのものと異ならなかった。ＴＮＦα／ＡｃｔＤによる処理は、培養された肝細胞の生存度を約３０％減少したのに対し、全てのカスパーゼインヒビターは、ＴＮＦα／ＡｃｔＤによって誘導された肝細胞アポトーシスに対して同様の保護効果を示した（図１５Ｂ）。これらの結果は、化合物３３ＭＰ−Ｎａの細胞保護効果が非塩形態のものと異ならないことを示す。
【０２８８】
疾病症状の診断後に治療薬物を投与した。本発明者らは、予め誘導された肝細胞毒性に対する本発明の化合物の保護効果を調べた。肝細胞をまずＴＮＦα／ＡｃｔＤで処理して、次いで化合物３３ＭＰ−Ｎａの１００μＭを異なる時点で添加した。ＴＮＦα／ＡｃｔＤ処理の１２時間後、細胞生存度をクリスタルバイオレット染色法によって測定した。ＴＮＦα／ＡｃｔＤ処理後０〜６時間以内に化合物３３ＭＰ−Ｎａを添加したときには、細胞生存度は減少しなかった（図１６）。ＴＮＦα／ＡｃｔＤ処理の６時間後に化合物３３ＭＰ−Ｎａを添加すると、時間依存的な様式において細胞生存度が減少した。化合物３３ＭＰ−ＮａとＺ−ＶＡＤ−ｆｍａｋとの間で相異した結果が得られなかった。ＴＮＦα/ＡｃｔＤでマウスを処理することは高い死亡率（９５％）を誘発した。この死亡率は、ＴＮＦα/ＡｃｔＤ注射の１時間前、０時間、または２時間後に化合物３３ＭＰ−Ｎａを注射したとき有意に減少した（約８０％）（図１７）。致死チャレンジの４時間後に投与されたときには、化合物３３ＭＰ−Ｎａは依然として部分的な保護（５０％）を提供した。また、ＴＮＦα／ＡｃｔＤを注射した動物において１０−１４時間以内に生じる死は、非生存化合物３３ＭＰ−Ｎａについては、２４時間まで著しく遅延した（データを示していない）。
【０２８９】
抗Ｆａｓ抗体及びＴＮＦαによって媒介される肝細胞アポトーシスの両方を抑制する上記結果は、カスパーゼ抑制薬剤の単純なガレニク（galenic）製剤が、非調節アポトーシスに関与する急性肝疾病に対する新しい有望な治療ストラテジーを提供するという強力な証拠を提供する。本発明の化合物及びその塩形態の両方ともが、劇症肝損傷及び死亡に対する有望な治療薬物として用いることが出来る。
【図面の簡単な説明】
【図１】  図１は、組換えカスパーゼ−１，−２，−３，−４，−６，−７，−８及び−９に対する本発明の化合物の抑制活性を示すグラフである。
【図２】  図２は、ＴＮＦα及びアクチノマイシンＤ処理によってアポトーシスが誘導されたラット肝細胞における、本発明の化合物のカスパーゼ抑制活性を示すグラフである。
【図３】  図３は、ＴＮＦα及びアクチノマイシンＤ処理によってアポトーシスが誘導されたラット肝細胞におけるアポトーシスの予防に対する、本発明の化合物の効果を示すグラフである。
【図４】  図４は、インビボでＣｏｎＡによって上昇したＡＳＴ及びＡＬＴ活性に対する、本発明の化合物の用量依存的な抑制活性を示したものである（ここで、クロスバーは各群の平均値を示し、そしてスチューデントｔ検定によってｐ値を計算した）。
【図５】  図５は、インビボでＣｏｎＡによって上昇したサイトカイン類に対する、用量依存的な抑制活性を示したものである（ここで、クロスバーは各群の平均値を示し、そしてスチューデントｔ検定によってｐ値を計算した）。
【図６】  図６は、ＣｏｎＡ処理マウス肝臓の形態学的及び組織学的変化とアポトーシス性病変に対する本発明の化合物の抑制活性を示す写真である。
【図７】  図７は、ＣｏｎＡによって誘発されたアポトーシスでの肝細胞の死滅によって引き起こされたＰＡＲＰ分解に対する本発明の化合物の抑制活性を示す電気泳動像である（各レーンは、１群当たり１０匹のマウスのうちの代表的なものを示したものである）。
【図８】  図８は、ＩＦＮγ及び抗Ｆａｓ抗体によって誘導されたアポトーシスからの、本発明の化合物の肝臓保護を表すグラフで示したものである。
【図９】  図９は、抗Ｆａｓ抗体によって誘導されたアポトーシスからの、本発明の化合物の肝臓保護を示したものである。
【図１０】  図１０は、抗−Ｆａｓ抗体で処理された肝組織におけるカスパーゼ−３様活性に対する、本発明の化合物の抑制活性を示したグラフである。
【図１１】  図１１は、抗Ｆａｓ抗体によって誘導された致死からの、本発明の化合物によるマウスの保護を示したものである。
【図１２】  図１２は、ＴＮＦαによって誘導されたアポトーシスからの、本発明の化合物によるマウス肝臓の保護をグラフで示したものである。
【図１３】  図１３は、本発明の化合物がＴＮＦαによって処理された肝臓においてカスパーゼ−３様活性を抑制することをグラフで示したものである。
【図１４】  図１４は、本発明の化合物がＴＮＦαによって誘導された致死からマウスを保護することをグラフで示したものである。
【図１５】  図１５は、本発明の化合物が、初代培養ラット肝細胞においてＴＮＦα／アクチノマイシンＤによって誘導されたカスパーゼ活性化及びアポトーシスを抑制することをグラフで示したものである。
【図１６】  図１６は、本発明の化合物が、ＴＮＦα／アクチノマイシンＤによって予め誘導された肝細胞アポトーシスを防ぐことをグラフで示したものである。
【図１７】  図１７は、本発明の化合物がＴＮＦα／ＤａＩＮによって媒介される致死を防ぐことをグラフで示したものである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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