(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
キュアリング後のバニラ豆からバニラエキストラクトを製造するにあたり、該バニラ豆又は該バニラ豆の抽出物を、タンパク質分解酵素、タンナーゼ、ナリンギナーゼ、クロロゲン酸エステラーゼ、及びヘスペリジン分解酵素から選択される１種以上の酵素で処理することを特徴とするバニラエキストラクトの製造法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、バニラエキストラクトの製造法に関する。
【０００２】
【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】
バニラエキストラクトは、食品や香粧品用の香料として広く用いられ、世界で最も需要の高いエキストラクトの一つである。バニラエキストラクト特有の香気は、キュアリング（収穫直後のバニラ青莢を加温して、熟成を促進させ、乾燥させる）工程を経て形成される。従ってバニラエキストラクトの製造は、キュアリング後のバニラ豆をアルコールなどの溶剤で抽出する方法が一般的であるが、このような方法によって得られるバニラエキストラクトは、香味が単調で芳醇なコク味とボリューム感に乏しく、また渋味・収斂味が生じて、嗜好性に欠けるという欠点があった。
一方、酵素を用いたバニラエキストラクトの製造法については、バニラ青莢粉砕物を酵素処理する方法が提案されている（特表平６−５０２６８５）。しかし、この方法はキュアリング工程を省くことによるコストダウンやバニリンの収量アップを目的とするものであって、キュアリング後のバニラ豆から前記優れた香味を有するバニラエキストラクトを製造するという目的とは全く異なっている。しかも、用いられている酵素もセルラーゼ、ペクチナーゼ、ヘミセルラーゼなどの植物細胞壁分解酵素であり、キュアリング後のバニラ豆をタンパク質分解酵素、渋味・苦み分解酵素又はヘスペリジン分解酵素で処理して、前記優れた香味を有するバニラエキストラクトを製造することについては示唆も開示もされていない。
【０００３】
本発明の目的は、キュアリング後のバニラ豆を特定の酵素で処理して、芳醇なコク味とボリューム感が増強され、渋味・収斂味が低減された、嗜好性の高いバニラエキストラクトを提供することである。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
本発明は、キュアリング後のバニラ豆からバニラエキストラクトを製造するにあたり、該バニラ豆又は該バニラ豆の抽出物を、タンパク質分解酵素、渋味・苦み分解酵素及びヘスペリジン分解酵素から選択される１種以上の酵素で処理することを特徴とするバニラエキストラクトの製造法である。
また本発明は、キュアリング後のバニラ豆又は該バニラ豆の抽出物を、タンパク質分解酵素、渋味・苦み分解酵素及びヘスペリジン分解酵素から選択される１種以上の酵素で処理することにより得られた、芳醇なコク味とボリューム感が増強され、渋味・収斂味が低減された、嗜好性の高いバニラエキストラクトである。
【０００５】
【発明の実施の形態】
以下、本発明を詳細に説明する。
本発明に用いられるバニラ豆は、Vanilla planifolia 由来のブルボン豆、インドネシア豆、メキシコ豆、トンガ豆、バリ豆およびVanilla tahitiense 由来のタヒチ豆などが挙げられるが、産地や品種はとくに限定されない。
収穫されたバニラ豆（バニラ青莢）には匂いがないが、公知のキュアリングと呼ばれる発酵・乾燥工程を経た後、特有の香気が発現する。本発明では、キュアリング後のバニラ豆が用いられる。キュアリング後のバニラ豆には、長さや色などにより、エクストラ、ファースト、セカンド、サード、フォース、インフェリアのようにグレード分けされて供給されるが、これら以外に低価格で低品質の無選別品などもある。本発明では、これらのいかなるグレードの品質の豆でも用いることができる。すなわち、前記無選別品を用いても、芳醇なコク味とボリューム感が増強され、渋味・収斂味が低減された、嗜好性の高いバニラエキストラクトを製造することができ、また高品質の豆を用いると、前記嗜好性の高いバニラエキストラクトに加え、さらに高級感を有するバニラエキストラクトを製造することができる。
【０００６】
本発明に用いられるキュアリング後のバニラ豆の抽出物は、いかなる方法により得られた抽出物でも良い。すなわち、バニラ豆はそのまま、裁断または粉砕したものなどあらゆる形態のものが用いられ、とくに限定はされない。また裁断または粉砕の仕方は、公知の方法で可能である。バニラ豆の抽出物としては、バニラ豆を、水、メタノール、エタノール、ｎ−プロピルアルコール、イソプロピルアルコール、ブタノール、２−ブタノール、ｔ−ブタノールなどの１価アルコール、エチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン、１、３−ブチレングリコール、１、２−ブチレングリコールなどの多価アルコール、アセトン、酢酸エチル、ヘキサン又はこれらの混合溶剤などに添加し、抽出して得られる抽出物、またこれら抽出物を濃縮して得られる濃縮抽出物、さらにこれら抽出物の溶剤部分を留去して得られるオレオレジンなどを例示することができる。また亜臨界または超臨界炭酸ガスなどで得られた抽出物も例示することができる。前記溶剤の中でも、水、エタノール、エチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン及びこれらの混合物が好ましく、さらには水、エタノール、含水アルコールが好ましい。含水アルコールの水とアルコールとの混合割合は任意に選択すればよいが、通常は重量比で、水：アルコール＝５：９５〜９５：５の範囲が好ましく、さらには２０：８０〜９０：１０が好ましい。
前記溶剤の使用量は、一般的には使用するバニラ豆1重量部に対して１〜２０重量部、好ましくは２〜１０重量部の範囲が挙げられる。
抽出条件は、とくに限定されないが、静置または攪拌下、温度１０℃〜溶剤の沸点温度、好ましくは２０〜６０℃、さらに好ましくは３０〜５０℃、処理時間３０分〜1ヶ月を挙げることができる。
亜臨界または超臨界炭酸ガス抽出の場合の処理条件は、例えば圧力１００〜３００Ｋｇ／ｃｍ２  、温度２０〜６０℃の二酸化炭素を用いて抽出し、常法により抽出ガスを分離槽に導いて抽出物を得ることができる。
得られた抽出物は、そのまま又は濃縮後、次の酵素処理工程に進むことが可能であるが、抽出後、遠心分離、ろ過などの固液分離手段により抽出液を得て、そのまま又は濃縮後、次の酵素処理工程に進むことも可能である。
【０００７】
本発明に用いられる酵素は、タンパク質分解酵素、渋味・苦み分解酵素及びヘスペリジン分解酵素から選択される１種以上の酵素である。
タンパク質分解酵素は、プロテアーゼまたはペプチダーゼともよばれ、ペプチド結合の加水分解反応を触媒する酵素の総称である。この酵素には、セリンプロテアーゼ、システインプロテアーゼ、アスパルテイックプロテアーゼ、金属プロテアーゼなどのエンドペプチダーゼおよびアミノペプチダーゼ、ジペプチダーゼ、ジペプジルアミノペプチダーゼ、ジペプジルカルボキシペプチダーゼ、セリンカルボキシペプチダーゼ、金属カルボキシペプチダーゼなどのエキソペプチダーゼがあるが、好ましくはエンドペプチダーゼが挙げられる。前記酵素の中でも至適ｐＨが、好ましくは酸性〜中性領域、さらに好ましくはｐＨ＝４．０〜６．５の範囲を有する酵素が挙げられる。
これら酵素は大部分が市販されており、容易に入手が可能である。例えば、オリエンターゼ ＯＮＳ 、オリエンターゼ２０Ａ、オリエンターゼ９０Ｎ 、オリエンターゼ１０ＮＬ 、ヌクレイシン (以上、阪急バイオインダストリー社製）、フレーバーザイム１,０００Ｌ、アルカラーゼ２.４Ｌ、ニュートラーゼ０.５Ｌ（以上、ノボノルディスクバイオインダストリー社製）、コクラーゼＰ（三共社製）、パパインＷ-４０、プロテアーゼＭ「アマノ」、プロテアーゼＡ「アマノ」、プロテアーゼＮ「アマノ」、プロテアーゼＰ「アマノ」、ペプチダーゼＲ「アマノ」、ペプチダーゼ７２３、ヌクレアーゼ「アマノ」（以上、天野製薬社製）などが挙げられる。
【０００８】
渋味・苦み分解酵素は、渋味成分、苦み成分または渋味・苦み成分を分解する反応を触媒する酵素の総称である。この酵素には、タンナーゼ、ナリンギナーゼ、クロロゲン酸エステラーゼなどがある。
タンナーゼは、渋味成分であるタンニン、ｍ−ガロイル没食子酸、没食子酸メチルなどのエステル結合を加水分解する反応を触媒する酵素であり、アスペルギルス属やペニシリウム属などに属するタンナーゼ生産菌から得たタンナーゼが好適である。これら酵素は市販されており、容易に入手が可能である。例えば、タンナーゼ「三共」（三共社製）、タンナーゼ「キッコーマン」-ＫＴＦＨ（キッコーマン社製）が挙げられる。
ナリンギナーゼは、柑橘類の苦み成分であるナリンギンを分解する反応を触媒する酵素である。これら酵素は市販されており、容易に入手が可能である。例えば、ナリンギナーゼ「アマノ」（天野製薬社製）、クミタナーゼ（田辺製薬社製）が挙げられる。
クロロゲン酸エステラーゼは、果汁やコーヒーなどの渋味・苦み成分であるクロロゲン酸に代表されるヒドロキシシンナミック酸エステル系のポリフェノールを分解する反応を触媒する酵素である。市販されている酵素としては、例えばクロロゲン酸エステラーゼ（キッコーマン社製）が挙げられる。
【０００９】
ヘスペリジン分解酵素は、ヘスペリジンをラムノースとヘスペリジン−７−グリコサイドに分解する反応を触媒する酵素である。市販されている酵素としては、例えばヘスペリジナーゼ「タナベ」２号（田辺製薬社製）が挙げられる。
【００１０】
バニラ豆を前記の酵素で処理する場合、バニラ豆と、酵素と、溶剤とを混合するが、これらの混合順序はとくに限定されない。バニラ豆はそのまま、裁断または粉砕したものなどあらゆる形態のものが用いられ、とくに限定はされない。また裁断または粉砕は、公知の方法で可能であり、好ましくは後記溶剤中で行われる。溶剤としては、水、メタノール、エタノール、ｎ−プロピルアルコール、イソプロピルアルコール、ブタノール、２−ブタノール、ｔ−ブタノールなどの１価アルコール、エチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン、１、３−ブチレングリコール、１、２−ブチレングリコールなどの多価アルコール、アセトン、酢酸エチル、ヘキサン又はこれらの混合溶剤などが用いられる。前記溶剤の中でも、含水溶剤、水、エタノール、エチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン及びこれらの混合物が好ましく、さらには水、含水溶剤が好ましく、とくには水、含水アルコールが好ましい。含水アルコールを含む含水溶剤の水と溶剤との混合割合は任意に選択すればよいが、通常は重量比で、水：溶剤＝６０：４０〜１００：０の範囲が好ましく、さらには８０：２０〜１００：０、とくには９０：１０〜１００：０が好ましい。
【００１１】
前記溶剤の使用量は、一般的には使用するバニラ豆1重量部に対して１〜２０重量部、好ましくは２〜１０重量部の範囲が挙げられる。
前記酵素の使用量は、とくに限定されず、またその酵素活性によって異なるが、バニラ豆１００重量部に対して０．００１〜１０重量部、好ましくは０．０１〜５重量部である。
酵素処理条件は、酵素反応が進行する限りとくに限定されないが、温度１０〜６０℃、好ましくは２０〜５０℃、処理時間３０分〜１週間を挙げることができる。なお、ｐＨ条件も酵素反応が進行する限りとくに限定されないが、好ましい範囲としては、例えばタンパク質分解酵素では、ｐＨ２〜１０、さらに好ましくはｐＨ３〜８、渋味・苦み分解酵素のタンナーゼは、ｐＨ３〜７、さらに好ましくはｐＨ４〜７、同じくナリンギナーゼは、ｐＨ２〜６、さらに好ましくはｐＨ３〜６、同じくクロロゲン酸エステラーゼは、ｐＨ３〜８、さらに好ましくはｐＨ４〜８、ヘスペリジン分解酵素は、ｐＨ２〜６、さらに好ましくはｐＨ３〜６を挙げることができる。
前記酵素処理において、バニラ豆は酵素の作用を受けると同時に、バニラ豆の香味成分も溶媒により抽出される。
【００１２】
酵素処理終了後、酵素処理液は、例えば７５〜９５℃に加熱して、酵素を失活させることが好ましい。得られた酵素処理抽出物は、遠心分離などの方法によりバニラ豆などの固形物から分離され、バニラエキストラクトが製造される。
なお、前記酵素処理抽出物は、バニラ豆と分離する前に、さらにエタノールを加えて再抽出される場合もあり、このことによりバニラエキストラクトのトップ立ちの増強など、香りのバラエテイ化を図ることができる。この場合のエタノールの使用量は、再抽出時の溶剤組成中、エタノールが５〜５０重量％になる量が好ましい。このエタノールによる再抽出法は、酵素処理を水又は、重量比で水：溶剤＝９５：５〜１００：０の含水溶剤で行った場合に好ましく適用される。
【００１３】
次にバニラ豆の抽出物を酵素で処理する場合について述べる。この場合、前記バニラ豆の抽出物に酵素を作用させるが、この時の溶剤としては、水および含水溶剤が好ましく挙げられる。この含水溶剤の水とアルコールなどの溶剤との混合割合は、好ましくは水：溶剤＝７０：３０〜１００：０、さらに好ましくは８５：１５〜１００：０の範囲が挙げられる。
このような組成に調整する方法としては、最初からこのような組成の抽出溶剤を使用したり、また任意の溶媒による抽出物を減圧濃縮または減圧乾燥固化後、追加する溶剤の組成を調整する方法を例示することができる。
前記酵素の使用量は、とくに限定されず、またその酵素活性によって異なるが、バニラ豆抽出物を得るのに用いられたバニラ豆の重量に注目して、そのバニラ豆１００重量部に対して０．００１〜１０重量部、好ましくは０．０１〜５重量部である。
温度、ｐＨ、処理時間などの処理条件は、とくに限定されず、前記バニラ豆を酵素で処理する場合に記載した内容と同じである。
酵素処理終了後、酵素処理液は、例えば７５〜９５℃に加熱して、酵素を失活させることが好ましい。
【００１４】
以上の方法で得られたバニラエキストラクトは、必要があれば濃縮液状、ペースト状、オイル状、粉末状その他の任意の形態にして、各種飲食品や化粧品などに利用する事ができる。とくに、水蒸気蒸留法、膜濃縮法、樹脂吸着法、減圧濃縮法、超臨界抽出法などの濃縮法を利用して、さらに優れたバニラエキストラクトを得ることも可能である。
本発明のバニラエキストラクトは、例えばアイスクリームなどの冷菓類、チョコレート、ビスケット、プリンなどの菓子類、各種飲料類、化粧品類、家庭用品類および医薬品類などに用いられる。
【００１５】
【実施例】
以下、本発明を実施例に基づいて説明する。なお、本発明は実施例に限定されるものではない。
【００１６】
実施例１
バニラ豆（ブルボン豆; 約１ｃｍにカット）２０ｇとイオン交換水９８ｇにタンナーゼ「三共」（三共社製）０.２ｇを加えて、４０℃で１日間の酵素処理を行った。続いて、熱失活後、その酵素処理物は、９５容量％アルコール１１ｇを加えて、４０℃で１日間、再抽出した。そして、その抽出物は、遠心分離（５,２００ｒｐｍ×１０分間）を行い、バニラ豆などをろ過して、バニラエキストラクトを７９ｇ調製した。
【００１７】
実施例２
バニラ豆（ブルボン豆; 約１ｃｍにカット）２０ｇとアルコール水溶液（水：アルコール＝９３：７）９８ｇにペプチダーゼ７２３（天野製薬社製）０.２ｇを加えて、４０℃で１日間の酵素処理を行った。続いて、熱失活後、遠心分離（５,２００ｒｐｍ×１０分間）を行い、バニラ豆などをろ過して、バニラエキストラクトを６４ｇ調製した。
【００１８】
比較例１、２
実施例１、２で、酵素を使用しない以外は同様な操作を行って、バニラエキストラクトを調製した。
【００１９】
香味評価１
実施例１および比較例１で調製したバニラエキストラクトを、アイスクリームの生地に各々１％づつ賦香し、本発明品１および比較品１を得た。専門パネラー１０名によって、本発明品１と比較品１を２点比較法で評価した。その結果を表１に示す。なお、表中の数字は人数を示し、総合評価は味と匂いの両面から嗜好性を加味して行った。
【００２０】
【表１】
0004106429.tif 000002
【００２１】
香味評価２
実施例２および比較例２で調製したバニラエキストラクトを、アイスクリームの生地に各々１％づつ賦香し、本発明品２および比較品２を得た。専門パネラー１０名によって、本発明品２と比較品２を２点比較法で評価した。その結果を表２に示す。なお、表中の数字は人数を示し、総合評価は味と匂いの両面から嗜好性を加味して行った。
【００２２】
【表２】
0004106429.tif 000003
表１，２の結果から、本発明の実施例１と２のバニラエキストラクトが、比較例１と２の酵素未処理品より官能特性に優れていることがわかる。
【００２３】
実施例３
バニラ豆（ブルボン豆; ミキサーで粉砕）５６０ｇとイオン交換水１,１２０ｇにナリンギナーゼ「アマノ」（天野製薬社製）５.７ｇと コクラーゼＰ（三共社製）０.８ｇを加えて、攪拌（１６０ｒｐｍ）下、４０℃で４時間酵素処理を行った。続いて、熱失活を施して酵素反応を終了させた。その後、その処理物中の５９１ｇは、同量の９５容量％アルコールを加えて、２５℃で３日間、再抽出した。そして、その抽出物は、遠心分離（７,０００ｒｐｍ×１０分間）を行い、バニラ豆などをろ過して、バニラエキストラクトを８９４ｇ調製した。
【００２４】
香味評価３
実施例３で調製したバニラエキストラクトおよび市販のバニラエキストラクトを、アイスクリームの生地に１％づつ賦香して、発明品３および市販品を得た。専門パネラー５名によって、市販品を３点とする５点評価法によって評価し、得られた点数の平均値を表３に示す。なお、総合評価は味と匂いの両面から嗜好性を加味して行った。
【００２５】
【表３】
0004106429.tif 000004
【００２６】
実施例４
バニラ豆（インドネシア豆; 約５ｍｍにカット）１００ｇに５０重量％アルコール４００ｇを加えて、４０℃で３日間、抽出した。その後、遠心分離（５,２００ｒｐｍ×５分間）し、ろ過して、抽出物３５３ｇを得た。その抽出物は、減圧濃縮後、アルコール濃度が５重量％になるようにイオン交換水を適量加えた。ついで、ヘスペリジナーゼ「タナベ」２号（田辺製薬社製）１．７ｇを加えて、４０℃で６時間酵素処理を行った。続いて、熱失活後、その酵素処理物は、ろ過して、バニラエキストラクトを調製した。このバニラエキストラクトは、渋味・収斂味が低減して、芳醇なコク味や広がりのあるボリューム感が増強されていた。
【００２７】
【発明の効果】
本発明により、芳醇なコク味とボリューム感が増強され、渋味・収斂味が低減された、嗜好性の高いバニラエキストラクトを得ることができる。