【手続補正書】
【提出日】平成20年1月31日(2008.1.31)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の段階を含む、向肝性病原体に対する活性について候補薬剤をスクリーニングする方法：
以下を含む、キメラのネズミ科動物宿主に候補薬剤を投与する段階；
機能的に同系のBリンパ球およびTリンパ球を欠く免疫不全のネズミ科動物宿主、
宿主ネズミ科動物肝臓細胞においてウロキナーゼ型プラスミノーゲンアクチベーターのポリペプチドの発現を提供する、ゲノムに組み込まれた導入遺伝子であって、該宿主が該ゲノムに組み込まれた導入遺伝子についてホモ接合である、導入遺伝子、および
ネズミ科動物宿主肝臓に移植されたヒト肝細胞を含むキメラ肝；ならびに、
キメラのネズミ科動物宿主にヒトC型肝炎ウイルス（HCV）を接種する段階であって、キメラのネズミ科動物宿主にヒトHCVを接種することでネズミ科動物宿主にHCV感染が生じる段階；
候補薬剤がHCV感染に及ぼす作用を分析する段階であって、未投与のキメラのネズミ科動物宿主に対するヒトHCVの感染量の低下が、該薬剤の抗HCV活性を意味する段階。
【請求項２】
キメラ宿主が再構成された免疫系をさらに含み、候補薬剤が能動免疫療法に用いる候補ワクチンである、請求項１記載の方法。
【請求項３】
候補薬剤が抗HCV抗体またはそのHCV結合性断片である、請求項１記載の方法。
【請求項４】
キメラ宿主が再構成された免疫系をさらに含み、候補薬剤が治療用ワクチン接種用の候補ワクチンである、請求項１記載の方法。
【請求項５】
キメラ宿主が再構成された免疫系をさらに含み、候補薬剤が免疫療法用の薬剤である、請求項１記載の方法。
【請求項６】
以下の段階を含む、薬剤による肝毒性を評価する方法：
キメラの免疫不全のトランスジェニックのネズミ科動物宿主に候補薬剤を投与する段階であって、宿主が（a）機能的に同系のBリンパ球およびTリンパ球を欠く宿主、（b）ゲノムに組み込まれた、宿主ネズミ科動物肝臓細胞においてウロキナーゼ型プラスミノーゲンアクチベーターのポリペプチドの発現をもたらす導入遺伝子を有する宿主、および（c）宿主の肝臓に移植された正常ヒト肝細胞を有し、該ゲノムに組み込まれた導入遺伝子についてホモ接合である、宿主である段階；および
候補薬剤が、肝機能または肝臓の組織学的所見に及ぼす作用を分析する段階であって、未投与のキメラのネズミ科動物宿主に対して、または候補薬剤投与前の肝機能もしくは組織学的所見に対して、投与を行った宿主における肝機能の低下もしくは肝臓の組織病理学的所見の有害な変化が、対象薬剤が該肝臓細胞に毒性をもつことを示す段階。
【請求項７】
以下を含む、キメラのトランスジェニックマウス：
ウロキナーゼ型プラスミノーゲンアクチベーターのポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含むゲノムを有する免疫不全のトランスジェニックマウスであって、ポリペプチドが宿主マウス肝臓細胞において発現するようにポリヌクレオチドがプロモーターに機能的に連結され、かつ該宿主がポリヌクレオチドについてホモ接合である免疫不全のトランスジェニックマウス；および
マウス宿主肝臓に移植されたヒト肝細胞を含むキメラ肝であって、ヒト肝細胞が該キメラ肝の少なくとも約20%の肝細胞を構成するキメラ肝。
【請求項８】
ヒト肝細胞がキメラ肝の少なくとも約50%の肝細胞を構成する、請求項７記載のキメラのマウス宿主。
【請求項９】
ヒト肝細胞がキメラ肝の少なくとも約40%〜約60%の肝細胞を構成する、請求項７記載のキメラのマウス宿主。
【請求項１０】
ヒト肝細胞がキメラ肝の少なくとも約90%の肝細胞を構成する、請求項７記載のキメラのマウス宿主。
【請求項１１】
ヒト肝細胞が少なくとも約8週間機能する、請求項７記載のキメラのマウス宿主。
【請求項１２】
ヒト肝細胞が少なくとも約15週間機能する、請求項７記載のキメラのマウス宿主。
【請求項１３】
プロモーターがマウスアルブミンプロモーターである、請求項７記載のキメラのマウス宿主。
【請求項１４】
宿主の免疫不全がscid変異によって引き起される、請求項７記載のキメラのマウス宿主。
【請求項１５】
宿主がベージュ変異をさらに含む、請求項13記載のキメラのマウス宿主。
【請求項１６】
以下の段階を含む、薬剤による肝毒性を評価する方法：
ウロキナーゼ型プラスミノーゲンアクチベーターのポリペプチドをコードし、ポリペプチドがマウス肝臓細胞において発現するようにプロモーターに機能的に連結されるポリヌクレオチドを含む導入遺伝子を含むゲノムを有するキメラのトランスジェニック免疫不全マウスに候補薬剤を投与する段階であって、マウスが導入遺伝子についてホモ接合であり、かつこのマウスがヒト肝細胞を含むキメラ肝をさらに含み、ヒト肝細胞がキメラ肝の少なくとも約20%の肝細胞を構成する段階；および
候補薬剤がヒトの肝機能またはヒトの肝臓の組織学的所見に及ぼす作用を分析する段階であって、薬剤の非存在下に対する、薬剤の存在下における肝機能の低下または肝臓の組織病理学的所見の有害な変化が、薬剤がヒト肝臓細胞に毒性をもつことを示す段階。
【請求項１７】
ヒト肝細胞がキメラ肝の少なくとも約20%の肝細胞を構成する、請求項16記載の方法。
【請求項１８】
ヒト肝細胞がキメラ肝の少なくとも約50%の肝細胞を構成する、請求項16記載の方法。
【請求項１９】
ヒト肝細胞がキメラ肝の少なくとも約40%〜約60%の肝細胞を構成する、請求項16記載の方法。
【請求項２０】
ヒト肝細胞がキメラ肝の少なくとも約90%の肝細胞を構成する、請求項16記載の方法。
【請求項２１】
マウスへの移植後、ヒト肝細胞が少なくとも約8週間機能する、請求項16記載の方法。
【請求項２２】
マウスへの移植後、ヒト肝細胞が少なくとも約15週間機能する、請求項16記載の方法。
【請求項２３】
導入遺伝子が、ネズミ科動物ウロキナーゼ型プラスミノーゲンアクチベーターに機能的に連結されたネズミ科動物アルブミンプロモーターをコードするヌクレオチド配列を含む、請求項16記載の方法。
【請求項２４】
トランスジェニック免疫不全マウスの免疫不全がscid変異によって引き起される、請求項16記載の方法。
【請求項２５】
分析する段階が、候補薬剤がヒトの肝機能に及ぼす作用を分析することを含む、請求項16記載の方法。
【請求項２６】
分析する段階が、候補薬剤がヒトの肝臓の組織学的所見に及ぼす作用を分析することを含む、請求項16記載の方法。
【請求項２７】
ヒトの肝機能が、α-1アンチトリプシンの量を評価することにより分析される、請求項25記載の方法。
【請求項２８】
以下の段階を含む、血中脂質の低下を達成する活性について候補薬剤をスクリーニングする方法：
以下を含む、キメラのネズミ科動物宿主に候補薬剤を投与する段階；
機能的に同系のBリンパ球およびTリンパ球を欠く免疫不全のネズミ科動物宿主、
宿主ネズミ科動物肝臓細胞においてウロキナーゼ型プラスミノーゲンアクチベーターのポリペプチドの発現を提供する、ゲノムに組み込まれた導入遺伝子であって、該宿主が該ゲノムに組み込まれた導入遺伝子についてホモ接合である、導入遺伝子、および
ネズミ科動物宿主肝臓に移植されたヒト肝細胞を含むキメラ肝；並びに、
候補薬剤が血清中のapoB100リポタンパク質に及ぼす作用を分析する段階であって、候補薬剤投与前のapoB100値に対して、候補薬剤投与後のapoB100値の低下の検出が、候補薬剤が血中脂質の低下に活性をもつことを意味する段階。