(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
その光学立体異性体を含む少なくとも１種の式Ｉ
【化１３】
0004156687.tif 000017
〔式中、
Ｒ1はa)  直鎖または分枝鎖状（Ｃ1〜Ｃ5）−アルキル、
b)  （Ｃ1〜Ｃ2）−アルコキシ−（Ｃ1〜Ｃ3）−アルキルまたは
c)  フェニルまたはフェニル−（Ｃ1〜Ｃ2）−アルキル（ここで各フェニル基は置換されていないか、またはそれぞれ１個または２個のハロゲン原子で置換されている）であり、
Ａは非分枝鎖または分枝鎖状（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキレン架橋であり、そして
Ｒ2はa)  直鎖または分枝鎖状（Ｃ1〜Ｃ5）−アルキル、
b)  （Ｃ3〜Ｃ6）−シクロアルキル、
c)  （Ｃ4〜Ｃ8）−シクロアルキルアルキル、
d)  フェニルまたは
e)  フェニル−（Ｃ1〜Ｃ2）−アルキルである〕
で表される化合物またはその生理学的に許容し得る塩を有効成分として含有するショック状態の治療および／または予防用医薬。
【請求項２】
式Ｉにおいて
Ｒ1はa)  直鎖または分枝鎖状（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル、
b)  メトキシメチル、
c)  メトキシエチル、
d)  フェニル、
e)  ４−クロロフェニル、
f)  ベンジルまたは
g)  ４−クロロベンジルであり、
Ａは非分枝鎖状（Ｃ1〜Ｃ3）−アルキレン架橋であり、そして
Ｒ2はa)  直鎖または分枝鎖状（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル、
b)  シクロプロピル、
c)  シクロプロピルメチル、
d)  フェニルまたは
e)  ベンジルである、
化合物の少なくとも１種を含有する請求項１記載の医薬。
【請求項３】
式Ｉにおいて
Ｒ1は直鎖または分枝鎖状（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキルであり、
Ａは非分枝鎖状（Ｃ1〜Ｃ3）−アルキレン架橋であり、そして
Ｒ2は直鎖または分枝鎖状（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル、シクロプロピルまたはシクロプロピルメチルである、
化合物の少なくとも１種を含有する請求項１または２記載の医薬。
【請求項４】
全身性炎症反応症候群、敗血症、敗血症症候群、敗血症性ショック、多器官不全、急性呼吸困難症候群、出血性または外傷性ショック、火傷もしくは脱水ショックまたは再灌流症候群または体外循環中のショック様合併症の治療および／または予防用の請求項１〜３のいずれか１項に記載の医薬。
【請求項５】
非経口、経口、直腸または経皮投与または吸入投与用製剤である請求項１〜４のいずれか１項に記載の医薬。
【請求項６】
式Ｉ
【化１４】
0004156687.tif 000018
において
Ｒ1はa)  （Ｃ1〜Ｃ2）−アルコキシ−（Ｃ1〜Ｃ3）−アルキルまたは
b)  フェニルまたはフェニル−（Ｃ1〜Ｃ2）−アルキル（ここで各フェニル基は置換されていないか、またはそれぞれ１個または２個のハロゲン原子で置換されている)であり、
Ａは非分枝鎖または分枝鎖状（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキレン架橋であり、そして
Ｒ2はa)  直鎖または分枝鎖状（Ｃ1〜Ｃ5）−アルキル、
b)  （Ｃ3〜Ｃ6）−シクロアルキル、
c)  （Ｃ4〜Ｃ8）−シクロアルキルアルキル、
d)  フェニルまたは
e)  フェニル−（Ｃ1〜Ｃ2）−アルキルである、
化合物、その光学立体異性体またはその生理学的に許容し得る塩。
【請求項７】
式Ｉにおいて
Ｒ1はa)  メトキシメチル、
b)  メトキシエチル、
c)  フェニル、
d)  ４−クロロフェニル、
e)  ベンジルまたは
f)  ４−クロロベンジルであり、
Ａは非分枝鎖状（Ｃ1〜Ｃ3）−アルキレン架橋であり、そして
Ｒ2はa)  直鎖または分枝鎖状（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル、
b)  シクロプロピル、
c)  シクロプロピルメチル、
d)  フェニルまたは
e)  ベンジルである、
請求項６記載の化合物。
【請求項８】
請求項６又は７に記載の式Ｉの化合物の製造において、縮合剤なしでまたは塩基性縮合剤の存在下で、またはその塩での形態で式II
【化１５】
0004156687.tif 000019
（式中Ｒ2は式Ｉで定義したとおりである）の３−置換キサンチンを式III
Ｒa−Ｘ                         (III)
（式中Ｒaは還元的にあるいはまた加水分解的に除去可能な、非置換または置換フェニル環を有するベンジル、ベンズヒドリルまたはトリチル基の形態の容易に除去し得る脱離基であり、Ｘは塩素、臭素、ヨウ素またはスルホン酸エステル基もしくはリン酸エステル基である）の試薬と反応させて式VI
【化１６】
0004156687.tif 000020
（式中Ｒ2は式Ｉで定義したとおりであり、Ｒaは式IIIで定義したとおりである）の３,７−ジ置換キサンチンを得、
次いで縮合剤なしでまたは塩基性縮合剤の存在下で、またはその塩の形態での式VIの化合物を式VII
Ｒ1−Ｏ−Ａ−Ｘ                 (VII)
（式中Ｒ1およびＡは式Ｉで定義したとおりであり、Ｘは式IIIで定義したとおりである）のアルキル化剤を使用して式VIII
【化１７】
0004156687.tif 000021
（式中Ｒ1、ＡおよびＲ2は式Ｉで定義したとおりであり、Ｒaは式IIIで定義したとおりである）の１,３,７−トリ置換キサンチンに変換し、
そして最後に式VIIIの中間体からＲaを除去して式Ｉの化合物を生成することからなる前記式Ｉの化合物の製造方法。
【請求項９】
請求項６又は７に記載の式Ｉの化合物の製造において、縮合剤なしでまたは塩基性縮合剤の存在下で、またはその塩の形態での式IV
【化１８】
0004156687.tif 000022
（式中Ｒaは非置換または置換フェニル基を有するベンジルである）の７−置換キサンチンを式Ｖ
Ｒ2−Ｘ                         (Ｖ)
（式中Ｒ2は式Ｉで定義したとおりであり、Ｘは塩素、臭素、ヨウ素またはスルホン酸エステル基もしくはリン酸エステル基である）の試薬と反応させて式VI
【化１９】
0004156687.tif 000023
（式中Ｒ2は式Ｉで定義したとおりであり、Ｒaは式IVで定義したとおりである）の３,７−ジ置換キサンチンを得、
次いで縮合剤なしでまたは塩基性縮合剤の存在下で、またはその塩の形態での式VIの化合物を式VII
Ｒ1−Ｏ−Ａ−Ｘ                 (VII)
（式中Ｒ1およびＡは式Ｉで定義したとおりであり、Ｘは式Ｖで定義したとおりである）
のアルキル化剤を使用して式VIII
【化２０】
0004156687.tif 000024
（式中Ｒ1、ＡおよびＲ2は式Ｉで定義したとおりであり、Ｒaは式IVで定義したとおりである）の１,３,７−トリ置換キサンチンに変換し、
そして最後に式VIIIの中間体からＲaを除去して式Ｉの化合物を生成することからなる前記式Ｉの化合物の製造方法。
【請求項１０】
請求項６又は７に記載の、または請求項８又は９で記載のようにして製造した少なくとも１種の式Ｉの化合物の治療上有効な量を含有する医薬。
【請求項１１】
請求項６又は７に記載の少なくとも１種の式Ｉの化合物を、医薬的に許容することができかつ生理学的に受容し得る賦形剤および添加剤、希釈剤および／または補助剤を用いて適当な投与形態にすることからなる請求項１０記載の医薬の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明はショック疾患の治療および予防用医薬を製造する場合の、１−位の構造的に修飾されたメチル基に少なくとも１個のエーテル官能を有するテオフィリン誘導体の使用、上記置換タイプを有する新規キサンチン化合物およびその製造方法に関する。
ショックとは急性に生起する生体器官の不適切な栄養灌流の状態として定義され、それは常に生命の最大の危険を表す(Med. Mo. Pharm. 1989, 12/9：279-282参照）。
【０００２】
ショックの原因は多様である。心臓性ショックは心筋梗塞、重度の心臓不整脈、心筋機能不全またはその他の心臓疾患、体液損失または置換による血液量減少性ショック（出血性および外傷性ショックならびに火傷および脱水ショック）、微生物（グラム陰性およびグラム陽性菌、真菌、ウイルス、原生動物等）またはそれらの毒素の全身性浸潤、および最後には一般化された抗原抗体反応によるアナフィラキシーショックの結果としての原発性の心不全により生起する。しかし、これら種々の原因にもかかわらず、これら種々の形態のショックの病原論および病像は非常に一様であることが分かっている(Pschyrembel, Klinisches Woerterbuch〔Clinical dictionary〕, Walter de Gruyter-Verlag, 255th Edition, 1986, pages 1513参照）。各細胞機能の疾患は常に、組織への酸素および基質の不適切な供給（虚血）および有毒性代謝産物の不適切な処分の結果として重要な役割を果たす（Medwelt 1989, 40: 519-522参照）。ショックはその過程が実質的に虚血持続期間による機能的疾患である。初期の代償ショック相では、身体は循環のニューロンないしホルモン的に調整された中心と反応し、それにより身体の中心にある各器官（心臓、脳、肺、肝臓、腎臓）はしばらく保護される。その病像は頻脈、まだ正常であるかまたは僅かだけ下がった血圧、気道アルカローシスによる換気亢進および原則として青白い、冷たく湿った皮膚を特徴とする。敗血症ショックでは発熱も起こり、時々震えの痙攣を伴う。それらの代償機序が消耗されると、中心器官の毛細管灌流もまた、ますます害される。これにより第２の代償不全ショック相になり、それは進行性細胞死および機能損失の特徴を有する。ショックの発生は不可逆的である。微小循環領域中の血管浸透性の過激な増大は、体液損失によるヘマトクリットの上昇、間質性浮腫およびメディエータの放出をもたらし、とりわけ末端血管系中で閉塞しつつあるフィブリン血栓を有する、例えば消耗性凝固障害形態の散在性血管内凝固を生起する。心臓搏出量および血圧の一定の減少は循環の完全虚脱を生起する。ショックカスケードの終わりには心臓、肝臓、腎臓または肺の急性不全症（ＡＲＤＳ＝急性呼吸困難症候群）により、または幾つかの器官が同時にそれらの機能を失う場合の多器官不全（ＭＯＦ）により死が起こる。
【０００３】
慣用の治療は臨床上の総合的症状に向けられるが、それには生命の危険を排除する即座の方法例えば容量置換、ＡＲＤＳ予防用の人工呼吸、循環、無痛および鎮静維持のための血管作用薬の投与、酸ベースのバランスでの疾患の矯正、消費性凝固障害を避けるためのヘパリン投与および膜浸透性を減少するためのコルチコステロイドによる処理がある。ショックの原因によるが、さらに別の治療方法には例えば、出血性ショックでの手術および止血、感染病巣の除去および敗血症ショックでの抗生物質による治療、ならびに心臓性ショックでの心臓ペースメーカーおよび大動脈バルーンによるカウンターパルセイションを用いることにより可能な処置も示される。しかし、これら全ての治療方法にもかかわらず、処置の結果は極めて不十分である。すなわち、例えば心筋梗塞による心臓性ショックの場合その死亡率は９０％であり、集中治療部での全般的に最も頻繁な死因である敗血症ショックでは５０％より高い。
【０００４】
これより臨床医が、原因との因果関係でより適切な治療概念を要望していることが理解される。その概念とは、できる限り早くショックカスケードを中断させ、生存のチャンスを明瞭に改善することにある。
このための有望な出発点は、ショック疾患の進行性過程に基礎をおく複雑な病態生理学的手法により提供される。現在の知識によれば、多数のメディエータ系および炎症性コンピテント細胞がショックの敗血症性および非敗血症性の両形態でのそれぞれの病理学的刺激により活性化され(N. Engl. J. Med. 1993, 328/20；1471-1477）、そしてこの手段により広汎性炎症過程を伴う内皮炎症が生起し、これはまたＳＩＲＳ（全身性炎症反応症候群）と定義される（J. Amer. med. Ass. 1992, 268；3452）。この症候群の中心には、活性化された顆粒球と内皮細胞との間に相補性粘着分子を介して一般化された病理学的相互作用があり、それは進行性の血管損傷を伴って、機能障害を増大させつつ微小循環および器官の損傷疾患をもたらし、最後には多器官不全に終わる。この顆粒球内皮相互作用による血管壁関連の炎症過程を誘発するにつれ、ショックの発現とともに通常の病理学的最終経路を経て敗血症ないし非敗血症が発生する。さらに、ショックの非敗血症形態の過程中に細菌性の移行と言われる細菌またはそれらの有毒産物の血流中への侵入が、最初には非微生物学的に誘発された肺および特に胃腸管の障壁疾患を介して起こり、非敗血症および敗血症の発生が重なることが明確に示されている（Medwelt 1989, 40: 525-532）。
【０００５】
原因の治療介入における最近の試みは、病理徴候の連鎖をできる限り早く中断し、器官損傷の進行を遅れずに防止するようにするために、炎症性メディエータにより維持されている疾患過程での特定の介入をすることを目的とする。大規模臨床研究では例えば、ヒトに適合するようにした組み換え体の、グラム陰性菌の細胞壁からの内毒素（ＬＰＳ＝リポポリサッカリド）に対するネズミおよびヒトモノクロナール抗体およびサイトカインＴＮＦ（腫瘍壊死因子）、遺伝子工学で調製した可溶性ＴＮＦ受容体および組み換えにより製造した生理学的に生起するインターロイキン−１受容体アンタゴニストAntril（1L-1-RA）およびブラジキニンアンタゴニストBradycorのその他のＴＮＦ結合タンパク質に対するネズミおよびヒト双方のモノクロナール抗体が調査されているが、今日まで治療上の解明は明らかとなっていない（Scrip Magazine, 1994, 12月, 50-52)。したがって、極めて複雑な疾患の発生に有効である遮断剤についての徹底的な探索は衰えずに継続しているが、その知識によれば、もしも種々の選択的に活性な医薬の組み合わせるか、または有利にはできるだけ広範囲の薬理作用スペクトルを有する単一薬剤によると、広範囲のシグナルカスケードの特定のメディエータのスイッチイングーオフ（Switching-off）のみに僅かに成功の期待があり、そして治療の進歩は多機能介入から最も期待されそうであることがだんだんと認められている。
【０００６】
抗ショック作用の製剤の試験のために、種々の実験動物モデルを開発した。特に実施可能であり、容易に標準化されかつ予測し得るモデル（Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1979, 76/11：5939-5943）はＣ５７ＢＬ／６マウスでの内毒素（ＬＰＳ）で誘起されるショックであり、そのショックは現実には、ＬＰＳに対する各動物の感受性がガラクトサミン（ＧａｌＮ）の同時投与により非常に増大されるのでヒトでの比較的低い致死量もここでは致命的なショック発生の誘発に十分である限り、臨床状態に従う（DN & P 1993, 6/9：641-646；Biospektrum, 1995, 1/5；46−52）。このモデルにおいてテオフィリン（１,３−ジメチルキサンチン）は許容可能範囲までの投与量で顕著な保護作用を全く示さない。
【０００７】
意外なことに、本発明によればテオフィリン分子の１−位のメチル基に少なくとも１個のエーテル官能を有する置換基を導入すると、同時に許容性が実質的に改善されるとともに非常に効能ある製剤が得られるということが見いだされた。この構造タイプを有する３種の化合物、すなわち、１−位に２−メトキシエチル、２−エトキシエチルまたは３−メトキシプロピル基を有する３−ｎ−プロピルキサンチンは知られており（J. Med. Chem. 1993, 36/10：1380-1386）、それらは気管支拡張性質のために急性喘息発作の治療に適しているはずである。しかしそれらの抗ショック剤としての有用性についての文献は全く存在していない。
【０００８】
本発明はショック疾患、特にＳＩＲＳ（全身性炎症反応症候群）、敗血症、敗血症症候群、敗血症ショック、多器官不全（ＭＯＦ）、ＡＲＤＳ（急性呼吸困難症候群）、出血性または外傷性ショック、火傷もしくは脱水ショックまたは再灌流症候群および体外循環中のショック様合併症の治療および予防用医薬を製造するための少なくとも１種の式Ｉ
【化７】
0004156687.tif 000002
〔式中、
Ｒ1はa)  直鎖または分枝鎖状（Ｃ1〜Ｃ5）−アルキル、
b)  （Ｃ1〜Ｃ2）−アルコキシ−（Ｃ1〜Ｃ3）−アルキルまたは
c)  フェニルまたはフェニル−（Ｃ1〜Ｃ2）−アルキル（ここで各フェニル基は置換されていないか、またはそれぞれ１個または２個のハロゲン原子で置換されている)であり、
Ａは非分枝鎖または分枝鎖状（Ｃ1−Ｃ4）−アルキレン架橋であり、そして
Ｒ2はa)  直鎖または分枝鎖状（Ｃ1〜Ｃ5）−アルキル、
b)  （Ｃ3〜Ｃ6）−シクロアルキル、
c)  （Ｃ4〜Ｃ8）−シクロアルキルアルキル、
d)  フェニルまたは
e)  フェニル−（Ｃ1〜Ｃ2）−アルキルである］
で表される化合物の使用に関する。
使用する式Ｉの好ましい化合物は式中、
【０００９】
Ｒ1はa)  直鎖または分枝鎖状（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル、
b)  メトキシメチル、
c)  メトキシエチル、
d)  フェニル、
e)  ４−クロロフェニル、
f)  ベンジルまたは
g）  ４−クロロベンジルであり、
Ａは非分枝鎖状（Ｃ1〜Ｃ3）−アルキレン架橋であり、そして
Ｒ2はa)  直鎖または分枝鎖状（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル、
b)  シクロプロピル、
c)  シクロプロピルメチル、
d)  フェニルまたは
e)  ベンジルである、
化合物である。
【００１０】
さらに好ましいのは式Ｉにおいて
Ｒ1は直鎖または分枝鎖状（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキルであり、
Ａは非分枝鎖状（Ｃ1〜Ｃ3）−アルキレン架橋であり、そして
Ｒ2は直鎖または分枝鎖状（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル、シクロプロピルまたはシクロプロピルメチルである、
化合物の使用である。
【００１１】
“(Ｃ4〜Ｃ8)−シクロアルキルアルキル”の表示は（Ｃ3〜Ｃ6）−シクロアルキルにより置換されていて、全ての炭素原子の総計が８より小さいかまたは等しいアルキル基の定義を有する。これらはシクロプロピルメチル〜−ペンチル、シクロブチルメチル〜−ブチル、シクロペンチルメチル〜−プロピルおよびシクロヘキシルメチルおよび−エチル基である。ハロゲン原子はヨウ素、臭素、フッ素および好ましくは塩素である。
【００１２】
本発明はまた式Ｉにおいて
Ｒ1はa)  直鎖または分枝鎖状（Ｃ1〜Ｃ5）−アルキル、
b)  （Ｃ1〜Ｃ2）−アルコキシ−（Ｃ1〜Ｃ3）−アルキルまたは
c)  フェニルまたはフェニル−（Ｃ1〜Ｃ2）−アルキル（ここで各フェニル基は置換されていないか、またはそれぞれ１個または２個のハロゲン原子で置換されている)であり、
Ａは非分枝鎖または分枝鎖状（Ｃ1−Ｃ4）−アルキレン架橋であり、そして
Ｒ2はa)  直鎖または分枝鎖状（Ｃ1〜Ｃ5）−アルキル、
b)  （Ｃ3〜Ｃ6）−シクロアルキル、
c)  （Ｃ4〜Ｃ8）−シクロアルキルアルキル、
d)  フェニルまたは
e)  フェニル−（Ｃ1〜Ｃ2）−アルキルである、
新規化合物に関するが、但しa) Ｒ2がｎ−プロピルであり、Ｒ1がメチルまたはエチルでありそしてＡがエチレン架橋であるか、またはb) Ｒ2がｎ−プロピルであり、Ｒ1がメチルでありそしてＡがｎ−プロピレン架橋である式Ｉの化合物は除外する。
【００１３】
好ましい式Ｉの化合物は式中、
Ｒ1はa)  直鎖または分枝鎖状（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル、
b)  メトキシメチル、
c)  メトキシエチル、
d)  フェニル、
e)  ４−クロロフェニル、
f)  ベンジルまたは
g)  ４−クロロベンジルであり、
Ａは非分枝鎖状（Ｃ1〜Ｃ3）−アルキレン架橋であり、そして
Ｒ2はa)  直鎖または分枝鎖状（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル、
b)  シクロプロピル、
c)  シクロプロピルメチル、
d)  フェニルまたは
e)  ベンジルである、
化合物であるが、但しa) Ｒ2がｎ−プロピルであり、Ｒ1がメチルまたはエチルでありそしてＡがエチレン架橋であるか、またはb) Ｒ2がｎ−プロピルであり、Ｒ1がメチルでありそしてＡがｎ−プロピレン架橋である式Ｉの化合物は除外する。
【００１４】
さらに好ましい式Ｉの化合物は式中、
Ｒ1は直鎖または分枝鎖状（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキルであり、
Ａは非分枝鎖状（Ｃ1〜Ｃ3）−アルキレン架橋であり、そして
Ｒ2は直鎖または分枝鎖状（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル、シクロプロピルまたはシクロプロピルメチルである、
化合物であるが、但しa) Ｒ2がｎ−プロピルであり、Ｒ1がメチルまたはエチルであり、そしてＡがエチレン架橋であるか、またはb) Ｒ2がｎ−プロピルであり、Ｒ1がメチルでありそしてＡがｎ−プロピレン架橋である式Ｉの化合物は除外する。
【００１５】
式Ｉの化合物は７−位で脱プロトン化され得、従って塩基性剤で塩および溶媒和物を形成する。このために可能な塩は製薬的に許容し得るアルカリ金属塩およびアルカリ土類金属塩ならびに有機塩基例えばエチレンジアミンまたは塩基性アミノ酸のリジン、オルニチンおよびアルギニンとの塩および溶媒和物が好ましい。すなわち、本発明はまた式Ｉの１,３−ジ置換キサンチンの生理学的に許容し得る塩および／または溶媒和物ならびに抗ショック組成物中における活性化合物としてのそれらの使用にも関する。
Ｒ1および／またはＲ2の位置に非対称分枝鎖状アルキル基を有し、そして／または非対称分枝鎖状アルキレン架橋Ａを有する式Ｉの化合物は１個以上の不斉炭素原子を有するので、立体異性体で存在することができる。従って、本発明は立体異性体的に純粋な化合物およびそれらの混合物の両方、および抗ショック組成物中における活性化合物としてのそれらの使用を包含する。
【００１６】
本発明はまた、式Ｉの新規化合物を製造するための類似方法にも関する。その基本的な態様はWO 87／00523に記載されている。例えば使用する操作は下記のとおりである。
a) 縮合剤なしでまたは塩基性縮合剤の存在下で、またはその塩での形態で式II
【化８】
0004156687.tif 000003
（Ｒ2は式Ｉで定義したとおりである）の３−置換キサンチンを式III
Ｒa−Ｘ                         (III)
（式中Ｒaは還元的にあるいはまた加水分解的に除去可能な、非置換または置換フェニル環を有するベンジル、ベンズヒドリルまたはトリチル基の形態の容易に除去し得る脱離基であり、Ｘはハロゲン好ましくは塩素、臭素またはヨウ素、あるいはまたスルホン酸エステル基もしくはリン酸エステル基である）の試薬と反応させるか、または
【００１７】
b) 縮合剤なしでまたは塩基性縮合剤の存在下で、またはその塩の形態での式IV
【化９】
0004156687.tif 000004
（式中Ｒaは非置換または置換フェニル基を有するベンジルである）の７−置換キサンチンを式Ｖ
Ｒ2−Ｘ                         (Ｖ)
（式中Ｒ2は式Ｉで定義したとおりであり、Ｘは式IIIで定義したとおりである）の試薬と反応させて式VI
【化１０】
0004156687.tif 000005
（式中Ｒ2は式Ｉで定義したとおりであり、Ｒaは式IIIまたはIVで定義したとおりである）の３,７−ジ置換キサンチンを得、
次いで縮合剤なしでまたは塩基性縮合剤の存在下で、またはその塩の形態での式VIの化合物を式VII
Ｒ1−Ｏ−Ａ−Ｘ                 (VII)
（式中Ｒ1およびＡは式Ｉで定義したとおりであり、Ｘは式IIIで定義したとおりである）のアルキル化剤を使用して式VIII
【化１１】
0004156687.tif 000006
（式中Ｒ1、ＡおよびＲ2は式Ｉで定義したとおりであり、Ｒaは式IIIまたはIVで定義したとおりである）の１,３,７−トリ置換キサンチンに変換し、
そして最後に式VIIIの中間体から脱離基Ｒaを除去して式Ｉの化合物を生成し、次いで場合によりこれを、適切ならば立体異性体の分離後に生理学的に許容し得る塩に変換することからなる。
【００１８】
ここで出発物質として使用する式IIおよびIVのモノ置換キサンチンならびに式III、ＶおよびVIIのアルキル化剤は大部分知られているか、または知られた方法で容易に製造することができる。例えば式IVの７−ベンジルキサンチンはグアノシンからベンジル化、糖基の加水分解的除去およびその後のグアノシン構造のキサンチン構造への変換により入手することができる（Synth. Commun. 1990, 20：2459-2467）。
【００１９】
式VIIの適当なアルキル化剤によるキサンチン構造の１−位へのＲ1−Ｏ−Ａ−側鎖の導入について、Ａがメチレン基（Ａ＝−ＣＨ2−）である化合物は特別好ましいようである。なぜならそれらのハライドは明らかに反応成分として適切に用いることができるが、しかしいずれにせよ大規模使用では毒物学的問題をもたらす可能性がある。従って、この特別の場合には対応するスルホネートの使用が好ましく、それは、支障なく、ほぼ完全に進む１つの反応（J. Org. Chem. 1971, 36: 528-531）において、例えば脂肪族カルボン酸および脂肪族または芳香族のスルホン酸の混合無水物を式IXのジ置換ホルムアルデヒドアセタールと反応させることにより好都合に入手される（J. Amer. Chem. Soc. 1969, 91：5663-5665）。
【化１２】
0004156687.tif 000007
【００２０】
ここでＲ3は例えばメチル、エチルまたはトリフルオロメチルのような脂肪族基または例えばフェニル、４−トリルもしくは４−ブロモフェニルのような芳香族基であるが、メチルまたは４−トリルが好ましい。Ｒ1は式Ｉで定義した意味を有する。この反応は物質中および反応成分に不活性である無水、非プロトン性溶媒中の双方で−２０〜＋４０℃好ましくは０〜２０℃において実施することができる。加水分解に敏感であり、熱に不安定である反応性の高いスルホネートの中間単離は必要ではない。それらは粗生成物として直接、キサンチンVIのアルキル化のために１−位の窒素原子について使用するのが好都合である。他の点では塩基性縮合剤の添加は不必要であることが多い。
【００２１】
式II、IVおよびVIのモノ−およびジ置換キサンチン誘導体とここでの式II、ＶまたはVIIのアルキル化剤との反応は通常、その反応関与物に不活性である希釈剤または溶媒中で実施される。適当なものとしては特に双極性非プロトン性溶媒例えばジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドン、テトラメチル尿素、ヘキサメチルホスホルアミドまたはジメチルスルホキシドがある。しかしまた、ホルムアミド、アセトニトリル、アセトン、ブタノンまたはアルコール類例えばメタノール、エチレングリコールおよびそのモノ−またはジ（Ｃ1〜Ｃ4）アルキルエーテル、エタノール、プロパノール、イソプロパノールおよび種々のブタノール；炭化水素例えばベンゼン、トルエンまたはキシレン；ハロゲン化炭化水素例えばジクロロメタンまたはクロロホルム；ピリジンならびに前記溶媒の混合物またはそれらの水との混合物も使用することが可能である。アルキル化反応は塩基性縮合剤の存在下で実施するのが好都合である。このために適当なのは、例えばアルカリ金属またはアルカリ土類金属の水酸化物、炭酸塩、水素化物、アルコキシドおよび有機塩基例えばトリアルキルアミン例えばトリエチルアミンまたはトリブチルアミン、第４級アンモニウムまたはホスホニウムヒドロキシドおよび場合により置換されたアンモニウムまたはホスホニウム基を結合した架橋樹脂である。しかし、キサンチン誘導体はまたそれらの別個に調製された塩例えばアルカリ金属、アルカリ土類金属または場合により置換されたアンモニウムまたはホスホニウム塩の形態で直接使用することもできる。さらに、キサンチン化合物は、前記無機縮合剤の存在下およびアルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩の形態での双方において、いわゆる相転移触媒例えば第３級アミン、第４級アンモニウム塩またはホスホニウム塩あるいはまたクラウンエーテルを用い、好ましくは相転移触媒作用条件下の２相系において好都合にアルキル化され得る。大抵は商業的に入手し得る適当な相転移触媒はとりわけ、テトラ(Ｃ1〜Ｃ4）アルキル−およびメチルトリオクチルアンモニウムおよびホスホニウム、メチル−ミリスチル−、フェニルおよびベンジル−トリ（Ｃ1〜Ｃ4）アルキル−およびセチルトリメチルアンモニウムおよびまた（Ｃ1〜Ｃ12）アルキル−およびベンジルトリフェニル−ホスホニウム塩である。原則として、より大きくてより対称的な構造の陽イオンを有する化合物がより効果的であることが分かっている。前記方法において、反応は一般に０℃から各場合に使用する反応媒体の沸点までの温度、好ましくは２０℃〜１３０℃で、場合により高められたかまたは下げられた圧力、通常は大気圧で実施される。その反応時間は１時間未満〜数時間であることが可能である。
【００２２】
本発明の式Ｉのキサンチンを得るための式VIIIの化合物からの脱離基Ｒaの除去は、アルカロイドおよびペプチド合成の特に保護基技法に関して詳記されておりそしてそれ故に大いに知られていると思われる標準的条件の下で実施される。フェニル環が場合により置換されているベンジル、ベンズヒドリルまたはトリチル基はその後好ましくは還元により除去される。液体アンモニア中のナトリウムによる特にベンジル化合物の化学的還元の外に、貴金属触媒を用いる接触水素化分解による前記３種のアラルキル基の除去がここでは好ましくは適当である。水素ドナーとしてのギ酸アンモニウムによる分子状水素の置換が適当であることがしばしば分かっている。ここで使用する反応媒質は通常、場合によりギ酸あるいはまたアンモニアを添加することもあるが、低級アルコール；非プロトン性溶媒例えばジメチルホルムアミド；または特に氷酢酸であるが、それらと水との混合物もまた使用できる。適当な水素化触媒は特に活性炭素または硫酸バリウム上のパラジウム黒およびパラジウムであるが、一方他の貴金属例えば白金、ロジウムおよびルテニウムは競合する核水素化のために副反応を生じることが多いので限られた範囲で用いることができるだけである。水素化分解は２０℃〜１００℃および大気圧好ましくは約１０バールの若干過圧の下で実施するのが好都合である。原則として、反応時間としては数分から数時間までの時間が必要である。しかし、別法として、例えば４−メトキシベンジル、ベンズヒドリルまたはトリチル基のような保護基Ｒaの除去は、慣用のプロトン触媒作用で加水分解的に実施することもできる。
【００２３】
立体異性体的に純粋な形態での本発明による式Ｉの化合物の製造は、それ自体知られている方法を用いて各立体異性体を引き続き分離することにより実施するのが好ましい。エナンチオマーとは対照的に、ジアステレオマーは相異なる物理学的および化学的性質を有するので、例えば分別晶出またはクロマトグラフィーによるそれらの混合物の分離には一般的に全く困難はない。他方、ラセマートの各エナンチオマー形態（対掌体）への物理学的分割はさらに別の注意が必要である。すなわち、分別晶出はジアステレオマー塩形成後にのみ、光学活性塩基を使用して実施し、そしてクロマトグラフィー分離はエナンチオマーに対して異なる空間的アフィニティーを表すキラル固定相を使用する時にのみ実施する。
式VIIIの１,３,７−トリ置換キサンチンは本発明の式Ｉの化合物の製造に有用な中間体であり、さらに特にＲaがベンジルの場合には既に式Ｉの最終生成物と同じ薬理学的作用傾向を示し、従ってそれもまた、たとえそれらが水溶解性がより低いが故に非経口的に投与することがより難しいとしても本発明の特許請求の範囲に入る。
【００２４】
本発明の式Ｉの新規化合物は、その有用な薬理性質のために医薬、特にショック疾患の有効な治療および予防的処置を可能にしそしてそれ故に製薬上の価値を実質的に高める医薬における活性化合物として用いるのに非常に適している。それらはそれ自体で、例えばマイクロカプセルの形態で投与するか、または互いの混合物でまたは適当な賦形剤との併用で投与することができる。
従って、本発明はまた、１−位に２−メトキシエチル、２−エトキシエチルまたは３−メトキシプロピルを有する３−ｎ−プロピルキサンチンであって、除外される別の定義を有する医薬用の活性化合物として前述した式Ｉの化合物の少なくとも１種を含有する医薬にも関する。
【００２５】
本発明のさらに別の局面は、ショック疾患の非経口および経口用、しかし場合によってはまた直腸用、経皮用または吸入用の医薬製剤を製造するための式Ｉの化合物の使用である。固形または液体製剤の適当な形態としては例えば顆粒、粉末、錠剤、コーティング錠剤、（マイクロ）カプセル、シロップ、乳剤、懸濁剤、ゲル、活性化合物放出遅延性製剤、坐薬、活性化合物放出性パッチ、エアゾル剤、滴剤およびアンプル形態の注射液または連続注入用注射瓶がある。その製剤中では補助剤例えば賦形剤、崩壊剤、結合剤、コーティング剤、湿潤剤、滑沢剤または潤滑剤、香味剤、甘味剤または溶解剤が慣用的に使用される。頻繁に使用する補助剤としては例えば炭酸マグネシウム、二酸化チタン、ラクトース、マンニトールおよび他の糖、タルク、ラクトプロテイン、ゼラチン、デンプン、ビタミン、セルロースおよびその誘導体、動物ないし植物油、ポリエチレングリコール類および溶剤例えば滅菌水、生理食塩水、アルコール、グリセロールおよび他の多価アルコール（ポリオール）を挙げることができる。
【００２６】
製剤は、各単位が活性成分として式Ｉの化合物の特定投与量を含有する投与量単位で調製しかつ投与するのが好ましい。固形投与量単位例えば錠剤、カプセルおよび坐薬の場合には、その投与量は１０００mg未満、好ましくは１００〜６００mgであることができる。アンプル形態中の注射液の場合には３００mg未満、好ましくは２０〜２００mgであることができる。
【００２７】
成人患者の治療の場合には、ヒトでの式Ｉの化合物の活性および生命を脅かす疾患の重度によるが、経口用では１日当たり活性化合物１００〜５０００mg、好ましくは３００〜３０００mgが必要であり、静脈内投与の場合には３０〜３０００mg、好ましくは５０〜２０００mgが必要である。毎日の投与量の投与は、個々の投与量単位または幾つかの少投与量単位の形態での単一投与によるか、または特定の時間間隔での細分化投与量の反復投与により実施することができる。
【００２８】
連続静脈内注入の場合には、１日当たりの投与量は１００〜５０００mg、好ましくは５００〜２０００mgであり、それは毎時体重１kg当たり０.１〜３mg、好ましくは０.３〜１mg／kg／時の注入割合に相当する。
しかし、全ての投与形態の場合において、ある状況下ではより多いかまたはより少ない１日当たりの投与量が適切であることがある。
【００２９】
最後に、臨床的に必要ならば、式Ｉの化合物は他の適当な活性化合物、特にショック発生のカスケード的シグナルでさらに調整的に介入する化合物、例えば腸毒素または内毒素（ＬＰＳ）、単球ＬＰＳ受容体ＣＤ１４またはＬＰＳ−結合タンパク質ＬＢＰに対する抗体；サイトカインネットワークのモジュレーター例えば抗ＴＮＦ抗体、可溶性ＴＮＦ受容体および他のＴＮＦ結合タンパク質、インターロイキン−１（１Ｌ−１）および／またはＴＮＦ産生および／または放出の各阻害剤、ならびにＴＮＦおよび１Ｌ−１受容体のアンタゴニスト；アラキドン酸代謝ならびに凝固および補体カスケードの阻害剤、例えばホスホリパーゼＡ2、シクロオキシゲナーゼおよびリポキシゲナーゼの各阻害剤（例えばステロイドおよび非ステロイド性抗炎症剤例えばイブプロフェン）、ＰＡＦ（血小板活性化因子）、ロイコトリエン、トロンボキサン、トロンビン、フィブリン、ブラジキニンおよびセロトニンの各アンタゴニスト、およびまた抗Ｃ５ａまたは抗Ｃ３ａ抗体；抗凝固剤および血小板凝集阻害剤、例えば抗トロンビンIII、組織プラスミノーゲンアクチベータｔＰＡ−１、ヘパリンおよびまたプロスタサイクリンおよびそのより安定な合成誘導体；溶菌酵素の放出および／または生物学的作用の阻害剤；酸素ラジカルスカベンジャー例えばスーパーオキシドジスムターゼ、カタラーゼ、α−トコフェロールまたはＮ−アセチルシステイン；重金属キレート化剤例えばデフェロキサミン；細胞間粘着阻害剤例えばフィブロネクチンまたは粘着分子ＥＬＡＭ−１、１ＣＡＭ−１、ＶＣＡＭ−１およびＣＤ１１／ＣＤ１８に対する抗体；または抗生物質と一緒に投与され得るか、または前記医薬製剤形態の製剤中に一緒に処方される。
【００３０】
以下に、構造的見解により表１にまとめた式Ｉの化合物の合成を代表製造例を用いてより詳細に説明する。表２には式VIIIで表される有用な中間体化合物が同じようにまとめられている。合成的に製造した全ての中間体および最終生成物について、その構造は1Ｈ−ＮＭＲ分光測定および元素分析または質量スペクトルの両者により確認した。
【００３１】
【実施例】
実施例１
１−メトキシメチル−３−メチルキサンチン（化合物１）
a)  ７−ベンジル−３−メチルキサンチン
２００mlの水に溶解した２０ｇ（０.５モル）の水酸化ナトリウムを５００mlのメタノール中における８３ｇ（０.５モル）の３−メチルキサンチンの懸濁液に加え、反応混合物を７０℃で１時間撹拌し、同じ温度で８５.５ｇ（０.５モル）の臭化ベンジルを滴加して処理し、７０〜８０℃に５時間維持した。次に、混合物を冷却し、吸引フィルター上で冷濾過し、生成物を吸引フィルター上で水洗し、１０００mlの１Ｎ水酸化ナトリウム溶液に熱溶解し、濾過し、撹拌しながら４Ｎ塩酸を使用してゆっくりとpH９.５にした。結晶をまだ温かい溶液から濾過し、塩化物がなくなるまで水洗し、真空乾燥オーブン中で一晩乾燥した。収量：８１.７ｇ（理論量の６３.８％）；融点２６３℃。Ｃ13Ｈ12Ｎ4Ｏ3（ＭＷ＝２５６.２ｇ／モル）。
【００３２】
b)  ７−ベンジル−１−メトキシメチル−３−メチルキサンチン
２.３ｇ（０.１ｇ原子）のナトリウムを２００mlの無水メタノールに溶解し、２５.６ｇ（０.１モル）の工程ａ）からのキサンチンで処理し、混合物を透明な溶液が生成するまで還流下で加熱、冷却し、減圧下で蒸発させ、残留物を乾燥した。このようにして得た７−ベンジル−３−メチルキサンチンのナトリウム塩を３００mlの無水アセトニトリルに溶解し、４０mlのアセトニトリル中における８.８ｇ（０.１１モル）の塩化メトキシメチルの溶液を５０℃で撹拌しながら滴加し、混合物を５０℃でさらに８時間撹拌した。次に、それを冷却し、減圧下で蒸発させ、残留物をクロロホルムに取り、未反応の７−ベンジル−３−メチルキサンチンを振騰により１Ｎ水酸化ナトリウム溶液で抽出し、クロロホルム相を中性になるまで水で洗浄し、乾燥し、減圧下で蒸発させて２２ｇ（理論量の７３.３％）の油状生成物を得た。それは徐々に固化し、沸騰させながら加熱して石油エーテルを加えて酢酸エチルから再結晶することができた。Ｃ15Ｈ16Ｎ4Ｏ3（ＭＷ＝３００.３ｇ／モル）：融点１１４℃。
７−ベンジル−３−メチルキサンチンの１−位へのメトキシメチル基の導入もまた、アルキル化剤としてメトキシメチル４−トルエンスルホネートを使用して行い、それは４−トルエンスルホニルクロライドおよび酢酸ナトリウムまたは４−トルエンスルホン酸および無水酢酸とジメチルホルムアミド中のホルムアルデヒドジメチルアセタールから１−ポット反応で製造し（ＷＯ ８７／００５２３）、現場で７−ベンジル−３−メチルキサンチンと反応させる。
【００３３】
c)  １−メトキシメチル−３−メチルキサンチン（化合物１）
１０.５ｇ（０.０３５モル）の工程ｂ）からの１,３,７−三置換キサンチンを１.５ｇのパラジウム（１０％）／活性炭において２００mlの氷酢酸中、６０℃、３.５バールで４８時間水素化した。冷却した後、混合物を窒素層で覆い、触媒を濾去し、濾液を減圧下で濃縮し、溶離剤としてクロロホルム／メタノール（１０／１）を使用して固体残留物をシリカゲルカラム上で濾過することにより精製した。収量：５.５ｇ（理論量の７４.８％）；融点２１８℃。Ｃ8Ｈ10Ｎ4Ｏ3(ＭＷ＝２１０.２ｇ／モル）。
元素分析値：
計算値：Ｃ ４５.７１％；Ｈ ４.８０％；Ｎ ２６.６６％
実測値：Ｃ ４５.９８％；Ｈ ４.８６％；Ｎ ２６.９８％
【００３４】
実施例２
３−シクロプロピル−１−（２−メトキシエチル）キサンチン(化合物１０)
a)  ７−ベンジル−３−シクロプロピルキサンチン
１１０mlの水に溶解した１０.４ｇ（０.２６モル）の水酸化ナトリウムを３００mlのメタノール中における５０ｇ（０.２６モル）の３−シクロプロピルキサンチンの懸濁液に加え、反応混合物を７０℃で１時間撹拌し、同じ温度で４４.５ｇ（０.２６モル）の臭化ベンジルを滴加して処理し、７０〜８０℃に４時間維持した。次に、１.０４ｇ（０.０２６モル）の水酸化ナトリウムおよび４.４５ｇ（０.０２６モル）の臭化ベンジルを加えた。さらに１時間後、混合物を冷却し、吸引フィルター上で冷濾過し、生成物を吸引フィルター上で水洗した。このようにして得た粗生成物はさらに精製することなく使用することができる。収量：４８ｇ（理論量の６５.４％）；融点２０４℃。Ｃ15Ｈ14Ｎ4Ｏ3（ＭＷ＝２８２.３ｇ／モル）；質量スペクトル：２８３（６０％，Ｍ＋Ｈ）；２４０（２１％）；９１（１００％）。
【００３５】
b)  ７−ベンジル−３−シクロプロピル−１−（２−メトキシエチル）キサンチン
２.２ｇ（１５.９ミリモル）の炭酸カリウムをジメチルホルムアミド中における３ｇ（１１.０ミリモル）の工程ａ）からの７−ベンジル−３−シクロプロピルキサンチンの温溶液に６０℃で加え、混合物を６０℃で１時間撹拌した。１.５１ｇ（１５.９ミリモル）の塩化２−メトキシエチルを滴加し、混合物を８０℃で６時間撹拌した。次に、それを室温まで冷却し、減圧下で濃縮した。油状残留物をジクロロメタンに取り、１Ｎ水酸化ナトリウム溶液を使用して抽出し、中性になるまで水で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、減圧下で濃縮し、そして残留物をさらに精製することなく工程ｃ）で使用した。収量：２.７ｇ（理論量の７１.７％）；融点１１７℃。Ｃ18Ｈ20Ｎ4Ｏ3（ＭＷ＝３４０.４ｇ／モル）；質量スペクトル：３４０（３６％，Ｍ）；２８２（４３％）；１４８（１００％）；９１（８６％）。
【００３６】
c)  ３−シクロプロピル−１−(２−メトキシエチル)キサンチン(化合物１０)
２.２ｇ（６.４５ミリモル）の工程ｂ）からの１,３,７−三置換キサンチンを２５０mlのエタノール中、１.０５ｇのパラジウム（１０％）／活性炭で１２時間水素化した。混合物を窒素層で覆い、触媒を濾去し、濾液を減圧下で濃縮し、そしてトルエン／エタノール（１０／１）を使用して残留物をシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。収量：０.７７ｇ（理論量の４７.７％）；融点２０３℃。Ｃ11Ｈ14Ｎ4Ｏ3（ＭＷ＝２５０.３ｇ／モル）；質量スペクトル：２５０（５５％，Ｍ）；１９２（１００％）；１４９（５６％）；１４８（５８％）；１２１（８２％）；１２０（５６％）。
【００３７】
実施例３
３−ブチル−１−（３−メトキシプロピル）キサンチン（化合物１４）
a)  ７−ベンジル−３−ブチルキサンチン
１００mlの水に溶解した１０ｇ(０.２５モル）の水酸化ナトリウムを３００mlのメタノール中における５２ｇ（０.２５モル）の３−ブチルキサンチンの懸濁液に加え、反応混合物を７０℃で１時間撹拌し、同じ温度で４２.８ｇ（０.２５モル）の臭化ベンジルを滴加して処理し、７０〜８０℃に５時間維持した。次に、１.０ｇ（０.０２５モル）の水酸化ナトリウムおよび４.２８ｇ（０.０２５モル）の臭化ベンジルを加えた。さらに２時間後、混合物を冷却し、１５００mlの水で希釈し、吸引フィルター上で冷濾過し、生成物を吸引フィルター上で水洗し、１０００mlの１Ｎ水酸化ナトリウム溶液に溶解し、溶液を濾過し、撹拌しながら濃塩酸でゆっくりとpH３にした。結晶を溶液から濾過し、塩化物がなくなるまで水洗し、減圧下で乾燥した。収量：５４.１ｇ（理論量の７２.５％）；融点１８７℃。Ｃ16Ｈ18Ｎ4Ｏ2（ＭＷ＝２９８.３ｇ／モル）；質量スペクトル：２９８（１３％，Ｍ）；９１（１００％）。
【００３８】
b)  ７−ベンジル−３−ブチル−１−（３−メトキシプロピル）キサンチン
２.１ｇ（１５.２ミリモル）の炭酸カリウムを９０mlのジメチルホルムアミド中における３ｇ（１０.０ミリモル）の工程ａ）からの７−ベンジル−３−ブチルキサンチンの温溶液に６０℃で加え、混合物を６０℃で１時間撹拌した。次に、１.３ｇ（１２.０モル）の塩化３−メトキシプロピルを滴加し、混合物を１００℃で３時間撹拌した。それを室温まで冷却し、水で処理し、ジクロロメタンを使用して抽出した。有機相を水および１Ｎ水酸化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムを使用して乾燥し、減圧下で濃縮した。トルエン／エタノール（３９／１）を使用して油状残留物をシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。収量：３.２ｇ（理論量の８６.５％）；黄色の油状物。Ｃ20Ｈ26Ｎ4Ｏ3（ＭＷ＝３７０.５ｇ／モル）；質量スペクトル：３７１.３（１００％，Ｍ＋Ｈ）；３３９.３（１６％）；２９８.３（１５％）；1H-NMR (DMSO-d6, 200 MHz)：δ=0.90 (t, 3H, CH2CH3), 1.30 (6重線, 2H, CH2CH2CH3), 1.63および1.75 (2つの5重線, 4H, CH2CH2CH2), 3.32 (s, 3H, OCH3), 3.34 (t, 2H, OCH2), 5.48 (s, 2H, ベンゼン. H), 7.25-7.40 (m, 5H, 芳香族. H), 8.26 (s, 1H, N=CH)。
【００３９】
c)  ３−ブチル−１−（３−メトキシプロピル）キサンチン（化合物１４）
０.５ｇ（１.３５ミリモル）の工程ｂ）からの１,３,７−三置換キサンチンを５０mlのエタノール中、０.１ｇのパラジウム（１０％）／活性炭上で５時間水素化した。混合物を窒素層で覆い、触媒を濾去し、濾液を減圧下で濃縮した。残留物をメタノール／メチルｔ−ブチルエーテルから再結晶することができた。収量：０.１９ｇ（理論量の５２.２％）；融点１５７℃。Ｃ13Ｈ20Ｎ4Ｏ3（ＭＷ＝２８０.３ｇ／モル）；質量スペクトル：２８１.３（Ｍ＋Ｈ，１００％）；２４９.２（Ｍ−ＯＭｅ，７０％）。
【００４０】
実施例４
１−エトキシメチル−３−プロピルキサンチン（化合物１８）
a)  ７−ベンジル−３−プロピルキサンチン
４１mlの水に溶解した４.１２ｇ（０.１０３モル）の水酸化ナトリウムを１１２mlのメタノール中における２０ｇ（０.１０３モル）の３−プロピルキサンチンの懸濁液に加え、反応混合物を７０℃で１時間撹拌し、同じ温度で１２.２３ml（０.１０３モル）の臭化ベンジルを滴加して処理し、７０〜８０℃に４時間維持した。混合物を冷却し、吸引フィルター上で冷濾過し、生成物を吸引フィルター上で水洗し、減圧下で乾燥した。収量：２０.３ｇ（理論量の６９.４％）；融点１８６℃。Ｃ15Ｈ16Ｎ4Ｏ2（ＭＷ＝２８４.３ｇ／モル）；質量スペクトル：２８４（１８％，Ｍ）；２４２（１１％）；２１２（１３％）；９１（１００％）。
【００４１】
b)  ７−ベンジル−１−エトキシメチル−３−プロピルキサンチン
１.７１ｇ（１２.０ミリモル）の炭酸カリウムを６０mlのジメチルホルムアミド中における２.２ｇ（７.７ミリモル）の工程ａ）からの７−ベンジル−３−プロピルキサンチンの温溶液に６０℃で加え、混合物を６０℃で１時間撹拌した。０.９３ml（１０.０ミリモル）の塩化エトキシメチルを滴加し、混合物を８０℃で４.５時間撹拌した。さらに０.５ml（５.３ミリモル）の塩化エトキシメチルを加え、混合物を再び６時間撹拌した。次に、１２mlの水および５mlのメタノールを加え、混合物を一晩放置し、６０mlの水をさらに加え、メチルｔ−ブチルエーテルを使用して混合物を３回抽出した。合した有機相を水で２回洗浄し、硫酸マグネシウムを使用して乾燥し、減圧下で濃縮した。ジクロロメタン／メタノール（１９.８／０.２）を使用して粗生成物をシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。収量：２.２８ｇ（理論量の８７％）；融点１１０℃。Ｃ18Ｈ22Ｎ4Ｏ3（ＭＷ＝３４２.４ｇ／モル）；質量スペクトル；３４２（７％，Ｍ）；２９６（１３％）；２８５（３３％）；９１（１００％）。
【００４２】
c)  １−エトキシメチル−３−プロピルキサンチン（化合物１８）
１.７９ｇ（５.２ミリモル）の工程ｂ）からの１,３,７−三置換キサンチンを２００mlのエタノール中、１７９mgのパラジウム（１０％）／活性炭で６.５時間水素化した。混合物を窒素層で覆い、触媒を濾去し、濾液を減圧下で濃縮した。ジクロロメタン／メタノール（１９.８／０.２）を使用して残留物をシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。収量：１.１２ｇ（理論量の８５％）；融点１３４℃。Ｃ11Ｈ16Ｎ4Ｏ3（ＭＷ＝２５２.３ｇ／モル）；質量スペクトル：２５２（２９％，Ｍ）；２０８（４０％）；１９５（１００％）；１６６（６５％）；１３６（５０％）。
【００４３】
実施例５
３−エチル−１−プロポキシメチルキサンチン（化合物２７）
a)  ７−ベンジル−３−エチルキサンチン
最初に１８０ｇ（１モル）の３−エチルキサンチンを１０００mlのジメチルホルムアミドに加え、混合物を撹拌しながら８０℃まで加熱し、８８ｇ（０.６４モル）の炭酸カリウムを加えた後、１３３ｇ（１.０５モル）の塩化ベンジルを１時間にわたって滴加して処理した。次に、それを１００℃で２時間撹拌し、１０００mlの水で処理し、沈殿した生成物を吸引フィルター上で濾過し、塩がなくなるまで水洗し、真空乾燥オーブン中、１００℃で乾燥した。必要ならば、実施例１ａ）と同様にして４Ｎ塩酸を使用して１Ｎ水酸化ナトリウム溶液から再び沈殿させることによりさらに精製することができる。収量：２６２ｇ（理論量の９７％）；融点２１８℃。Ｃ14Ｈ14Ｎ4Ｏ2（ＭＷ＝２７０.３ｇ／モル）。
元素分析値：
計算値：Ｃ ６２.２１％；Ｈ ５.２２％；Ｎ ２０.７３％
実測値：Ｃ ６２.０７％；Ｈ ５.３６％；Ｎ ２０.８４％
【００４４】
b)  ７−ベンジル−３−エチル−１−プロポキシメチルキサンチン
実施例１ｂ）と同様にして、２７ｇ（０.１モル）の７−ベンジル−３−エチルキサンチンをそのナトリウム塩に変換し、アセトニトリル中で１３ｇ（０.１２モル）の塩化プロポキシメチル（１,３,５−トリオキサン、１−プロパノールおよび塩化水素気体から収率６７％で製造した）と反応させ、後処理して３０ｇ（理論量の８７.６％）の分析的に純粋な生成物を得、それは場合により酢酸エチルから再結晶することができた。Ｃ18Ｈ22Ｎ4Ｏ3（ＭＷ＝３４２.４ｇ／モル）；融点９２℃。
元素分析値：
計算値：Ｃ ６３.１４％；Ｈ ６.４８％；Ｎ １６.３６％
実測値：Ｃ ６２.９５％；Ｈ ６.５５％；Ｎ １６.２１％
【００４５】
c)  ３−エチル−１−プロポキシメチルキサンチン（化合物２７）
１７.１ｇ（０.０５モル）の工程ｂ）からの生成物および５ｇ（０.０８モル）のギ酸アンモニウムを３５℃において１５０mlのエタノール中、６ｇのパラジウム（１０％）／活性炭で数日間撹拌した。さらにギ酸アンモニウムを全量が２２ｇ（０.３５モル）になるまで続けて加えることは適当であった。混合物を濾過し、濾液を濃縮し、残留物を炭酸ナトリウム溶液に取り、溶液をクロロホルムで洗浄し、２Ｎ塩酸を使用して水相をpH４にし、生成物をクロロホルムと一緒に振騰することにより抽出し、乾燥し、蒸発させた後、残留物を酢酸エチルから再結晶した。収量：８.６ｇ（理論量の６８.２％）；融点１５９℃。Ｃ11Ｈ16Ｎ4Ｏ3（ＭＷ＝２５２.３ｇ／モル）。
元素分析値：
計算値：Ｃ ５２.３７％；Ｈ ６.３９％；Ｎ ２２.２１％
実測値：Ｃ ５２.８５％；Ｈ ６.８８％；Ｎ ２２.５０％
実施例１ｃ）と同様に水添分解により脱ベンジルして同じ化合物を収率５８.９％で得た。
【００４６】
実施例６
３−イソブチル−１−プロポキシメチルキサンチン（化合物３１）
a)  ７−ベンジルグアニン塩酸塩
４０ml（０.３４モル）の臭化ベンジルを２００mlのジメチルスルホキシド中における４０ｇ（０.１４７モル）のグアノシンの懸濁液に滴加し、混合物を室温で４時間撹拌した。それを１００mlの濃塩酸で処理し、室温で３０分間撹拌した。次に、それを１２００mlのメタノールに注ぎ、沈殿物を吸引濾過し、メタノールで洗浄した。収量：３５.９ｇ（理論量の９２％）；融点＞３２５℃。Ｃ12Ｈ12ＣｌＮ5Ｏ（ＭＷ＝２７７.７ｇ／モル）；塩基：Ｃ12Ｈ11Ｎ5Ｏ（ＭＷ＝２４１.６ｇ／モル）；質量スペクトル：２４２.２（１００％，Ｍ＋Ｈ）。
【００４７】
b)  ７−ベンジルキサンチン
３５.９ｇ（０.１３モル）の工程ａ）からの７−ベンジルグアニン塩酸塩を９０mlの水および８０７mlの氷酢酸の混合物に溶解し、１００℃に加熱した。５０℃まで冷却した後、９０mlの水中における３５.８８ｇ（０.５２モル）の亜硝酸ナトリウムの溶液を一度に加えた。室温で１６時間後、得られた沈殿物を吸引濾過し、吸引フィルター上で水洗し、乾燥した。収量：２６.０ｇ（理論量の８３％）；融点＞２６６℃。Ｃ12Ｈ10Ｎ4Ｏ2（ＭＷ＝２４２.５ｇ／モル）；質量スペクトル：２４３.１（９５％，Ｍ＋Ｈ）；９１（１００％）。
【００４８】
c)  ７−ベンジル−３−イソブチルキサンチン
１.５ｇ（６.２ミリモル）の工程ｂ）からの７−ベンジルキサンチンを５０℃で５０mlのジメチルホルムアミドに溶解し、０.１４９ｇ（６.２ミリモル）の水素化ナトリウムを少しずつ加えて処理し、５０℃で１時間撹拌した。０.６７ml（６.２ミリモル）の臭化イソブチルを滴加し、混合物を８０℃まで加熱した。５時間後、さらに０.２ml（１.８６ミリモル）の臭化イソブチルを加え、混合物をさらに５時間撹拌した。次に、１２mlの水および５mlのメタノールを加え、混合物を室温で２時間撹拌し、さらに６０mlの水を加え、メチルｔ−ブチルエーテルを使用して混合物を３回抽出した。有機相を水で洗浄し、硫酸マグネシウムを使用して乾燥し、減圧下で濃縮し、ジクロロメタン／メタノール（９９／１）を使用して残留物をシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。収量：１.１６ｇ（理論量の６３％）。Ｃ16Ｈ18Ｎ4Ｏ2（ＭＷ＝２９８.３ｇ／モル）。1H-NMR (DMSO-d6, 200 MHz)：δ=0.85 (d, 6H, CH(CH3)2), 2.16 (m, 1H, CH2CH(CH3)2), 3.73 (d, 2H, CH2CH), 5.45 (s, 2H, ベンジル. H), 7.23-7.40 (m, 5H, 芳香族. H), 8.20 (s, 1H, N=CH), 11.13 (s br, 1H, NH)。
【００４９】
d)  ７−ベンジル−３−イソブチル−１−プロポキシメチルキサンチン
０.８６ｇ（６.２ミリモル）の炭酸カリウムを６０mlのジメチルホルムアミド中における１.１６ｇ（３.９ミリモル）の工程ｃ）からの７−ベンジル−３−イソブチルキサンチンの懸濁液に６０℃で加え、混合物をこの温度で１時間撹拌した。次に、０.５６ml（５.１ミリモル）の塩化プロポキシメチルを滴加し、混合物を８０℃で５.５時間撹拌した。１２mlの水および５mlのメタノールを加え、混合物を一晩放置し、６０mlの水をさらに加え、毎回１５０mlのメチルｔ−ブチルエーテルを使用して混合物を４回抽出した。合した有機相を２００mlの水で洗浄し、硫酸マグネシウムを使用して乾燥し、減圧下で濃縮した。ジクロロメタンを使用して粗生成物をシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。収量：１.２ｇ（理論量の８３％）；融点７２℃。Ｃ20Ｈ26Ｎ4Ｏ3（ＭＷ＝３７０.５ｇ／モル）；質量スペクトル：３７０（４０％，Ｍ）；３１０（５５％）；２９９（１００％）；２５６（５５％）；９１（８５％）。
【００５０】
e)  ３−イソブチル−１−プロポキシメチルキサンチン（化合物３１）
８５９mg（２.３２ミリモル）の工程ｄ）からの１,３,７−三置換キサンチンを２２mlのエタノール中、８６mgのパラジウム（１０％）／活性炭で６時間水素化した。混合物を窒素層で覆い、触媒を濾去し、濾液を減圧下で濃縮した。ジクロロメタン／メタノール（１９／１）を使用して残留物をシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。収量：５８８mg（理論量の９０％）；融点１４１℃。Ｃ13Ｈ20Ｎ4Ｏ3（ＭＷ＝２８０.３ｇ／モル）；質量スペクトル：２８０（２５％，Ｍ）；２２２（３７％）；２０９（１００％）；１６６（８５％）；１３６（５５％）。
【００５１】
実施例７
３−フェニル−１−プロポキシメチルキサンチン（化合物３２）
a)  ７−ベンジル−３−フェニルキサンチン
５.３mlの水中における０.５３ｇ（１３.２ミリモル）の水酸化ナトリウムの溶液を１８mlのメタノール中における３.０ｇ（１３.２ミリモル）の３−フェニルキサンチンの懸濁液に加え、混合物を７０℃で１時間撹拌した。次に、それを１.５６ml（１３.２ミリモル）の臭化ベンジルを滴加して処理し、７０℃で７時間撹拌し、冷却した後、沈殿物を吸引濾過し、水で洗浄し、５０mlの１Ｎ水酸化ナトリウム溶液に溶解し、不溶性物質を濾去し、そして４Ｎ塩酸を使用して溶液をpH８〜９に調整した。得られた沈殿物を吸引濾過し、水で洗浄し、ジクロロメタン／メタノール（７９／１）を使用してシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。収量：１.１３ｇ（理論量の２７％）；融点２５０℃。Ｃ18Ｈ14Ｎ4Ｏ2（ＭＷ＝３１８.６ｇ／モル）；質量スペクトル：３１９（１００％，Ｍ＋Ｈ）；９１（１９％）。
【００５２】
b)  ７−ベンジル−３−フェニル−１−プロポキシメチルキサンチン
０.４５ｇ（３.２６ミリモル）の炭酸カリウムを２０mlのジメチルホルムアミド中における０.６５ｇ（２.０４ミリモル）の工程ａ）からの７−ベンジル−３−フェニルキサンチンの懸濁液に６０℃で加え、混合物をこの温度で１時間撹拌した。０.２９ml（２.６５ミリモル）の塩化プロポキシメチルを滴加し、混合物を８０℃で１.５時間撹拌した。次に、２０mlの水を加え、毎回２４mlのメチルｔ−ブチルエーテルを使用して混合物を３回抽出し、合した有機相を毎回１２mlの水で２回洗浄し、硫酸マグネシウムを使用して乾燥し、減圧下で濃縮した。ヘプタン／酢酸エチル（５／７）を使用して粗生成物をシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。収量：０.６９ｇ（理論量の８７％）；融点１０３℃。Ｃ22Ｈ22Ｎ4Ｏ3（ＭＷ＝３９０.４ｇ／モル）；質量スペクトル：３９１.２（１００％，Ｍ＋Ｈ）；３３１.２（１２％）；２４１.１（２５％）。
【００５３】
c)  ３−フェニル−１−プロポキシメチルキサンチン（化合物３２）
５３５mg（１.３７ミリモル）の工程ｂ）からの１,３,７−三置換キサンチンを２０mlのエタノール中、５０mgのパラジウム（１０％）／活性炭上で水素化した。混合物を窒素層で覆い、触媒を濾去し、濾液を減圧下で濃縮した。ジクロロメタン／メタノール（１９／０.３）を使用して残留物をシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。収量：２３２mg（理論量の５６％）；融点２２０℃。Ｃ15Ｈ16Ｎ4Ｏ3（ＭＷ＝３００.３ｇ／モル）；質量スペクトル：３００（２３％，Ｍ）；２４２（６８％）；２２９（５５％）；１８５（１００％）。
【００５４】
実施例８
３−シクロプロピルメチル−１−プロポキシメチルキサンチン（化合物３４）
a)  ７−ベンジル−３−シクロプロピルメチルキサンチン
２００mlのジメチルホルムアミド中における７ｇ（２９.０ミリモル）の実施例６ｂ）からの７−ベンジルキサンチンの溶液を５０℃に加熱し、０.６９ｇ（２９.０ミリモル）の水素化ナトリウムを少しずつ加えて処理し、５０℃で１時間撹拌した。２.７６ml（２９.０ミリモル）の臭化シクロプロピルメチルをこの懸濁液に加え、温度を８０℃まで上げた。８０℃で７時間後、１ml（１１.０ミリモル）の臭化シクロプロピルメチルを再び加えた。さらに６時間後、２４mlの水および１０mlのメタノールを加え、混合物を一晩放置し、再び１２０mlの水で処理し、毎回３００mlのメチルｔ−ブチルエーテルを使用して３回抽出した。有機相を水で洗浄し、硫酸マグネシウムを使用して乾燥し、減圧下で濃縮した。ジクロロメタン／メタノール（９９／１）を使用して粗生成物をシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。収量：４.８ｇ（理論量の５６％）；融点１８５℃。Ｃ16Ｈ16Ｎ4Ｏ2（ＭＷ＝２９６.４ｇ／モル）；質量スペクトル：２９７.３（１００％，Ｍ＋Ｈ））。
【００５５】
b)  ７−ベンジル−３−シクロプロピルメチル−１−プロポキシメチルキサンチン
１.１２ｇ（８.１ミリモル）の炭酸カリウムを６０mlのジメチルホルムアミド中における１.５ｇ（５.０６ミリモル）の工程ａ）からの７−ベンジル−３−シクロプロピルメチルキサンチンの溶液に６０℃で加え、混合物をこの温度で１時間撹拌した。次に、７２２μl（６.５８ミリモル）の塩化プロポキシメチルを滴加し、混合物を８０℃で４時間撹拌した。１２mlの水および５mlのメタノールを加え、混合物を５０℃で２時間撹拌した。６０mlの水をさらに加え、メチルｔ−ブチルエーテルを使用して混合物を３回抽出し、合した有機相を水で２回洗浄し、硫酸マグネシウムを使用して乾燥し、減圧下で濃縮した。ジクロロメタン／メタノール（１９.８／０.２）を使用して粗生成物をシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。収量：１.３２ｇ（理論量の７１％)；融点８８℃。Ｃ20Ｈ24Ｎ4Ｏ3（ＭＷ＝３６８.４ｇ／モル）；質量スペクトル：３６８（９％，Ｍ）；３１０（１１％）；２９７（１３％）；９１(１００％)。
【００５６】
c)  ３−シクロプロピルメチル−１−プロポキシメチルキサンチン(化合物34)
９３８mg（２.５５ミリモル）の工程ｂ）からの１,３,７−三置換キサンチンを６０mlのエタノール中、１３０mgのパラジウム（１０％）／活性炭で１５時間水素化した。混合物を窒素層で覆い、触媒を濾去し、濾液を減圧下で濃縮した。ジクロロメタン／メタノール（３９／１）を使用して残留物をシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。収量：６７１mg（理論量の９５％）；融点１３２℃。Ｃ13Ｈ18Ｎ4Ｏ3（ＭＷ＝２７８.３ｇ／モル）；質量スペクトル：２７８（２６％，Ｍ）；２２０（８０％）；２０７（６４％）；１３６（８７％）；１２２（６７％）；５５（１００％）。
【００５７】
実施例９
１−（２−プロポキシエチル）−３−プロピルキサンチン（化合物３７）
a)  ７−ベンジル−１−（２−プロポキシエチル）−３−プロピルキサンチン
１.７ｇ（１２.４８ミリモル）の炭酸カリウムを７０mlのジメチルホルムアミド中における２.２ｇ（７.８ミリモル）の７−ベンジル−３−プロピルキサンチン（実施例４ａ）に従って製造した）の懸濁液に６０℃で加え、混合物をこの温度で１時間撹拌した。次に、１.３ml（１０.１４ミリモル）の塩化２−プロポキシエチルを滴加し、混合物を８０℃で１０時間撹拌した。１.２mlのメタノールおよび１４mlの水を加え、混合物を一晩放置し、さらに７０mlの水で処理し、毎回８４mlのメチルｔ−ブチルエーテルを使用して３回抽出した。合した有機相を毎回４２mlの水で２回洗浄し、硫酸マグネシウムを使用して乾燥し、減圧下で濃縮した。ジクロロメタン／メタノール（１９／０.１）を使用して粗生成物をシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。収量：２.３ｇ（理論量の８０％）；融点５５℃。Ｃ19Ｈ24Ｎ4Ｏ3（ＭＷ＝３５６.４ｇ／モル）；質量スペクトル：３５６（１０％，Ｍ）；２９７（１５％）；２８５（３８％）；９１（１００％）。
【００５８】
b)  １−（２−プロポキシエチル）−３−プロピルキサンチン（化合物３７）
１.７５ｇ（４.７ミリモル）の工程ａ）からの１,３,７−三置換キサンチンを７５mlのエタノール中、０.２ｇのパラジウム（１０％）／活性炭上で６時間水素化した。混合物を窒素層で覆い、触媒を濾去し、濾液を減圧下で濃縮した。ジクロロメタン／メタノール（３８／１）を使用して残留物をシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。収量：０.９３ｇ（理論量の７０％）；融点１３７℃。Ｃ13Ｈ20Ｎ4Ｏ3（ＭＷ＝２８０.６ｇ／モル）；質量スペクトル：２８１.３（４５％，Ｍ＋Ｈ）；２２１.２（１００％）。
【００５９】
実施例１０
１−ブトキシメチル−３−イソプロピルキサンチン（化合物４２）
a)  ７−ベンジル−３−イソプロピルキサンチン
６０mlのジメチルホルムアミド中における実施例６ｂ）からの３.５ｇ（１.４５ミリモル）の７−ベンジルキサンチンの溶液を５０℃まで加熱し、０.３５ｇ（１.４５ミリモル）の水素化ナトリウムを少しずつ加えて処理し、２０mlのジメチルホルムアミドで希釈し、５０℃で１時間撹拌した。１.３６ml（１.４５ミリモル）の２−ブロモプロパンをこの懸濁液に加え、温度を８０℃まで上げた。反応中、全部で４.９１ml（５２.３ミリモル）の２−ブロモプロパンをさらに加えた。８０℃で１６時間後、１０mlの水および２mlのメタノールを加え、混合物を１０分間撹拌し、さらに７０mlの水で処理し、毎回７０mlのメチルｔ−ブチルエーテルを使用して３回抽出した。有機相を水で洗浄し、硫酸マグネシウムを使用して乾燥し、減圧下で濃縮した。ジクロロメタン／メタノール（１９／０.４）を使用して粗生成物をシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。収量：１.１７ｇ（理論量の２９％）；融点２１９℃。Ｃ15Ｈ18Ｎ4Ｏ2（ＭＷ＝２８６.６ｇ／モル）；質量スペクトル：２８５.２（１００％，Ｍ＋Ｈ）。
【００６０】
b)  ７−ベンジル−１−ブトキシメチル−３−イソプロピルキサンチン
０.５８３ｇ（４.２２ミリモル）の炭酸カリウムを２０mlのジメチルホルムアミド中における０.７５ｇ（２.６４ミリモル）の工程ａ）からの７−ベンジル−３−イソプロピルキサンチンの懸濁液に６０℃で加え、混合物をこの温度で１時間撹拌した。次に、０.４２ｇ（３.４３ミリモル）の塩化ブトキシメチルを滴加し、混合物を８０℃で６時間撹拌した。さらに０.１１ｇ（０.８７ミリモル）の塩化ブトキシメチルを加え、混合物を再び５時間撹拌した。２０mlの水を加え、毎回３０mlのメチルｔ−ブチルエーテルを使用して混合物を３回抽出し、合した有機相を毎回２０mlの水で２回洗浄し、硫酸マグネシウムを使用して乾燥し、減圧下で濃縮した。ヘプタン／酢酸エチル（２／１）を使用して粗生成物をシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。収量：０.６６ｇ（理論量の６８％）；油状物。Ｃ20Ｈ26Ｎ4Ｏ2（ＭＷ＝３７０.７ｇ／モル）；質量スペクトル：３７１.４（１００％，Ｍ＋Ｈ）；２９７.２（３３％）。1H-NMR (DMSO-d6, 200 MHz)：δ=0.82 (t, 3H, (CH2)3CH3), 1.48 (d, 6H, CH(CH3)2), 1.14-1.56 (m, 4H, CH2(CH2)2CH3), 3.50 (t, 2H, OCH2), 5.06 (m, 1H, CH(CH3)2), 5.30 (s, 2H, ベンジル. H), 5.50 (s, 2H, OCH2N), 7.24-7.43 (m, 5H, 芳香族. H), 8.31 (s, 1H, N=CH)。
【００６１】
c)  １−ブトキシメチル−３−イソプロピルキサンチン（化合物４２）
６６０mg（１.７８ミリモル）の工程ｂ）からの１,３,７−三置換キサンチンを６０mlのエタノール中、８６mgのパラジウム（１０％）／活性炭で１４時間水素化した。混合物を窒素層で覆い、触媒を濾去し、濾液を減圧下で濃縮した。ジクロロメタン／メタノール（１９／０.３）を使用して残留物をシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。収量：４１６mg（理論量の８３％）；融点１３１℃。Ｃ13Ｈ20Ｎ4Ｏ3（ＭＷ＝２８０.３ｇ／モル）；質量スペクトル：２８１.２（１００％，Ｍ＋Ｈ）；２０７.２（３０％）。
【００６２】
実施例１１
１−イソブトキシメチル−３−メチルキサンチン（化合物４８）
a)  ７−ベンジル−１−イソブトキシメチル−３−メチルキサンチン
１.９ｇ（１４.０８ミリモル）の炭酸カリウムを５０mlのＮ−メチルピロリドン中における２.２５ｇ（８.８ミリモル）の７−ベンジル−３−メチルキサンチン（実施例１ａ）に従って製造した）の懸濁液に６０℃で加え、混合物をこの温度で１時間撹拌した。次に、１.４ｇ（１１.４４ミリモル）の塩化イソブトキシメチルを滴加し、混合物を８０℃で３時間撹拌した。さらに０.５ｇ（４.４ミリモル）の塩化イソブトキシメチルを加え、混合物を再び２時間撹拌した。５０mlの水を加え、毎回６０mlのメチルｔ−ブチルエーテルを使用して混合物を３回抽出した。合した有機相を毎回３０mlの水で２回洗浄し、硫酸マグネシウムを使用して乾燥し、減圧下で濃縮した。ジクロロメタン／メタノール（１９／０.２）を使用して粗生成物をシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。収量：２.５４ｇ（理論量の８５％)；融点７６℃。Ｃ18Ｈ22Ｎ4Ｏ3（ＭＷ＝３４２.４ｇ／モル）；質量スペクトル：３４３.３(１００％，Ｍ＋Ｈ)；２６９.２（８８％）；１７９.１（２４％）。
【００６３】
b)  １−イソブトキシメチル−３−メチルキサンチン（化合物４８）
２.１ｇ（６.１４ミリモル）の工程ａ）からの１,３,７−三置換キサンチンを５０mlのエタノール中、０.４ｇのパラジウム（１０％）／活性炭で２５時間水素化した。混合物を窒素層で覆い、触媒を濾去し、濾液を減圧下で濃縮した。ジクロロメタン／メタノール（１９／０.３）を使用して残留物をシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。収量：０.５９ｇ（理論量の３８％）；融点１６０℃。Ｃ11Ｈ16Ｎ4Ｏ3（ＭＷ＝２５２.３ｇ／モル）；質量スペクトル：２５２（７％，Ｍ）；１９６（１０％）；１８０（１００％）；１７９（８８％）；１６７（５６％）。
【００６４】
実施例１２
１−sec−ブトキシメチル−３−エチルキサンチン（化合物５２）
a)  ７−ベンジル−１−sec−ブトキシメチル−３−エチルキサンチン
２.４５ｇ（１８.０ミリモル）の炭酸カリウムを６０mlのジメチルホルムアミド中における３.０ｇ（１１.０ミリモル）の７−ベンジル−３−エチルキサンチン（実施例５ａ）に従って製造した）の懸濁液に６０℃で加え、混合物をこの温度で１時間撹拌した。１.７７ｇ（１４.０ミリモル）の塩化sec−ブトキシエチルを滴加し、混合物を８０℃で５時間撹拌した。０.７ｇ（５.５ミリモル）の塩化sec−ブトキシメチルを再び加え、混合物をさらに３時間撹拌した。１２mlの水および５mlのメタノールを加え、混合物を５０℃で２時間撹拌した。さらに６０mlの水を加え、毎回２００mlのメチルｔ−ブチルエーテルを使用して混合物を３回抽出し、合した有機相を２００mlの水で洗浄し、硫酸マグネシウムを使用して乾燥し、減圧下で濃縮した。ジクロロメタン／メタノール（１９.８／０.２）を使用して粗生成物をシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。収量：３.２９ｇ（理論量の８４％）；油状物；Ｃ10Ｈ24Ｎ4Ｏ3（ＭＷ＝３５６.４ｇ／モル）；質量スペクトル：３５６（４％，Ｍ）；２８４（７１％）；２７１（３２％）；９１（１００％）。1H-NMR (DMSO-d6, 200 MHz)：δ-0.73 (t, 3H, CH2CH3), 1.05 (d, 3H, CHCH3), 1.21 (t, 3H, NCH2CH3), 1.35 (5重線, 2H, CHCH2CH3), 3.57 (6重線, 1H, CHCH2), 4.02 (q, 2H, NCH2CH3), 5.30 (AB系, 2H, OCH2N), 5.50 (s, 2H, ベンジル. H), 7.23-7.40 (m, 5H, 芳香族. H), 8.32 (s, 1H, N=CH)。
【００６５】
b)  １−sec−ブトキシメチル−３−エチルキサンチン（化合物５２）
２.７３ｇ（７.６６ミリモル）の工程ａ）からの１,３,７−三置換キサンチンを１００mlのエタノール中、２７３mgのパラジウム（１０％）／活性炭で１２.５時間水素化した。混合物を窒素層で覆い、触媒を濾去し、濾液を減圧下で濃縮した。ジクロロメタン／メタノール（１９.７／０.３）を使用して残留物をシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。収量：１.８２ｇ（理論量の８９％）；融点１８９℃。Ｃ12Ｈ18Ｎ4Ｏ3（ＭＷ＝２６６.３ｇ／モル）；質量スペクトル：２６６（４％，Ｍ）；１９４（８７％）；１９３（１００％）；１８１（６３％）；１３６（８７％）。
【００６６】
実施例１３
１−（２−メトキシエトキシメチル）−３−メチルキサンチン（化合物５３）
a)  ７−ベンジル−１−（２−メトキシエトキシメチル）−３−メチルキサンチン
５００mlのアセトニトリル中における２５.６ｇ（０.１モル）の７−ベンジル−３−メチルキサンチン（実施例１ａ）に従って製造した）、１５.２ｇ（０.１１モル）の炭酸カリウムおよび１６.２ｇ（０.１３モル）の塩化２−メトキシエトキシメチルの混合物を５０℃で撹拌しながら５時間加熱し、実施例１ｂ）と同様に後処理し、得られた油状生成物を溶離剤としてクロロホルム／メタノール（１０／１）を使用してシリカゲルカラム上で濾過することにより精製した。収量：２２.８ｇ（理論量の６６.２％）；油状物；Ｃ17Ｈ20Ｎ4Ｏ4（ＭＷ＝３４４.３ｇ／モル）。
元素分析値：
計算値：Ｃ ５９.２９％；Ｈ ５.８５％；Ｎ １６.２７％
実測値：Ｃ ５９.０１％；Ｈ ５.９３％；Ｎ １６.０２％
【００６７】
b)  １−(２−メトキシエトキシメチル)−３−メチルキサンチン(化合物５３)
２２.７ｇ（０.０６６モル）の工程ａ）からの化合物を実施例１ｃ）に従って水添分解により脱ベンジルし、クロマトグラフィーにより精製し、エタノールから再結晶した後、１０.９ｇの最終生成物（理論量の６５％）を得た。Ｃ10Ｈ14Ｎ4Ｏ4（ＭＷ＝２５４.３ｇ／モル）；融点１８８℃。
元素分析値：
計算値：Ｃ ４７.２４％；Ｈ ５.５５％；Ｎ ２２.０４％
実測値：Ｃ ４７.２２％；Ｈ ５.４５％；Ｎ ２２.０６％
【００６８】
実施例１４
３−エチル−１−（２−（２−メトキシエトキシ）エチル）キサンチン（化合物５６）
１４ｇ（０.０３７モル）の７−ベンジル−３−エチル−１−（２−（２−メトキシエトキシ）エチル）キサンチンを７−ベンジル−３−エチルキサンチン（実施例５ａ）に従って製造した）および１−ブロモ−２−（２−メトキシエトキシ）エタン（実施例２ｂ）に従って製造した）から理論量の９８％の収率で製造した。Ｃ19Ｈ24Ｎ4Ｏ4（ＭＷ＝３７２.４ｇ／モル）；ジイソプロピルエーテルから再結晶後の融点：６４℃。
元素分析値：
計算値：Ｃ ６１.２８％；Ｈ ６.５０％；Ｎ １５.０４％
実測値：Ｃ ６１.４４％；Ｈ ６.４９％；Ｎ １５.２６％
【００６９】
そして、実施例１ｃ）と同様にして水添分解により脱ベンジルした。得られた粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製することなく直接、酢酸エチルから再結晶した。収量：７.５ｇ（理論量の７１.８％）；融点１４０℃；Ｃ12Ｈ18Ｎ4Ｏ4（ＭＷ＝２８２.３ｇ／モル）。
元素分析値：
計算値：Ｃ ５１.０５％；Ｈ ６.４３％；Ｎ １９.８５％
実測値：Ｃ ５１.５１％；Ｈ ６.３７％；Ｎ １９.８７％
【００７０】
実施例１５
３−メチル−１−（２−フェノキシエチル）キサンチン（化合物６０）
a)  ７−ベンジル−３−メチル−１−（２−フェノキシエチル）キサンチン
２.６ｇ（１８.７２ミリモル）の炭酸カリウムを７０mlのジメチルホルムアミド中における３.０ｇ（１１.７ミリモル）の７−ベンジル−３−メチルキサンチン（実施例１ａ）に従って製造した）の懸濁液に６０℃で加え、混合物をこの温度で１時間撹拌した。３.１ｇ（１５.２１ミリモル）の臭化２−フェノキシエチルを滴加し、混合物を８０℃で５時間撹拌した。粗製混合物を濾過し、濾液を減圧下で濃縮し、残留物をジクロロメタンに取り、溶液を１Ｎ水酸化ナトリウム溶液で１回、水で２回洗浄した。硫酸マグネシウムを使用して有機相を乾燥し、減圧下で濃縮した。ヘプタン／酢酸エチル（１／２）を使用して粗生成物をシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。収量：３.５２ｇ（理論量の８０％）。融点１４１℃。Ｃ21Ｈ20Ｎ4Ｏ3（ＭＷ＝３７６.４ｇ／モル）；質量スペクトル：３７６（２％，Ｍ）；２８３（１００％）；９１（８７％）。
【００７１】
b)  ３−メチル−１−（２−フェノキシエチル）キサンチン（化合物６０）
３.０ｇ（８.０ミリモル）の工程ａ）からの１,３,７−三置換キサンチンを５００mlのエタノール中、０.３ｇのパラジウム（１０％）／活性炭上で６時間水素化した。混合物を窒素層で覆い、触媒を濾去し、濾液を減圧下で濃縮した。ヘプタン／酢酸エチル（１／１０）を使用して残留物をシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。収量：１.０９ｇ（理論量の４８％）；融点２０７℃。Ｃ14Ｈ14Ｎ4Ｏ3（ＭＷ＝２８６.３ｇ／モル）；質量スペクトル：２８７.２（４５％，Ｍ＋Ｈ）；１９３.１（１００％）。
【００７２】
実施例１６
１−（４−クロロフェノキシメチル）−３−メチルキサンチン（化合物６５）
a)  ７−ベンジル−１−（４−クロロフェノキシメチル）−３−メチルキサンチン
２.５９ｇ（１９.０ミリモル）の炭酸カリウムを５０mlのジメチルホルムアミド中における３.０ｇ（１２.０ミリモル）の７−ベンジル−３−メチルキサンチン（実施例１ａ）に従って製造した）の懸濁液に６０℃で加え、混合物をこの温度で１時間撹拌した。２.６９ｇ（１５.０ミリモル）の塩化４−クロロフェノキシメチルを滴加し、混合物を８０℃で８時間撹拌した。粗製混合物を濾過し、濾液を減圧下で濃縮し、残留物をジクロロメタンに取り、溶液を１Ｎ水酸化ナトリウム溶液で１回、水で２回洗浄した。硫酸マグネシウムを使用して有機相を乾燥し、減圧下で濃縮した。ジクロロメタン／メタノール（１９.８／０.２）を使用して粗生成物をシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。収量：４.１５ｇ（理論量の８７％）；融点９６℃。Ｃ20Ｈ17ＣｌＮ4Ｏ3（ＭＷ＝３９６.８ｇ／モル）；質量スペクトル：３９８（２％，37Ｃｌ，Ｍ）；３９６（６％，35Ｃｌ，Ｍ）；２６９（１００％）；９１（７２％）。
【００７３】
b)  １−(４−クロロフェノキシメチル)−３−メチルキサンチン(化合物６５)
３.３７ｇ（８.５ミリモル）の工程ａ）からの１,３,７−三置換キサンチンを４５０mlのエタノール中、０.３４ｇのパラジウム（１０％）／活性炭上で５時間水素化した。混合物を窒素層で覆い、触媒を濾去し、濾液を減圧下で濃縮した。水／アセトニトリル（７／３）を使用して残留物をＲＰ−１８カラム上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。収量：０.９１ｇ（理論量の３４％）；融点２１８℃。Ｃ13Ｈ11ＣｌＮ4Ｏ3（ＭＷ＝３０６.７ｇ／モル）；質量スペクトル：３０９.１（６％，37Ｃｌ，Ｍ＋Ｈ）；３０７.１（１９％，35Ｃｌ，Ｍ＋Ｈ）；１７９.１（１００％）；１６７.１（１１％）。
【００７４】
実施例１７
１−ベンジルオキシメチル−３−メチルキサンチン（化合物６８）
a)  ３−メチル−７−トリチルキサンチン
０.６２ｇ（２５.８８ミリモル）の水素化ナトリウムを６０℃で８５mlのジメチルホルムアミド中における３.９ｇ（２３.５ミリモル）の３−メチルキサンチンの懸濁液に少しずつ加え、混合物をこの温度で１.５時間撹拌し、９０℃に加熱した。３０mlのジメチルホルムアミド中における６.６ｇ（２３.６７ミリモル）の塩化トリチルを加え、混合物を９０℃で３時間撹拌した。固体を吸引しながら熱濾過し、濾液を減圧下で濃縮し、残留物を１Ｎ水酸化ナトリウム溶液に取り、混合物を８０℃に加熱し、固体を吸引濾過した。２Ｎ塩酸を使用して濾液をpH４〜５にした。このようにして生成した沈殿物をジクロロメタン／メタノール（１９／０.２）を使用してシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。収量：６.５５ｇ（理論量の６８％)；融点２４２℃。Ｃ25Ｈ20Ｎ4Ｏ2（ＭＷ＝４０８.７ｇ／モル）；質量スペクトル：４０９.１（２１％，Ｍ＋Ｈ）；２４４.２（１７％）；２４３.２（１００％）；１６７.０（１７％)。
【００７５】
b)  １−ベンジルオキシメチル−３−メチル−７−トリチルキサンチン
１.３ｇ（９.４４ミリモル）の炭酸カリウムを６０℃で５０mlのジメチルホルムアミド中における２.４ｇ（５.９ミリモル）の工程ａ）からの３−メチル−７−トリチルキサンチンの溶液に加え、混合物をこの温度で１時間撹拌した。１.０６ml（７.６７ミリモル）の塩化ベンジルオキシメチルを滴加し、混合物を８０℃で７時間撹拌した。次に、５０mlの水を加え、混合物を毎回６０mlのメチルｔ−ブチルエーテルを使用して３回抽出した。合した有機相を毎回３０mlの水で２回洗浄し、硫酸マグネシウムを使用して乾燥し、減圧下で濃縮した。ヘプタン／酢酸エチル（３／２）を使用して粗生成物をシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。収量：１.５７ｇ（理論量の５１％）；融点１６４℃。Ｃ33Ｈ28Ｎ4Ｏ3（ＭＷ＝５２８.９ｇ／モル）；質量スペクトル：５３５.２（７４％，Ｍ＋Ｌｉ）；２４３.１（１００％）。
【００７６】
c)  １−ベンジルオキシメチル−３−メチルキサンチン（化合物６８）
１.１mlのエタノールおよび２.２mlの１Ｎ塩酸の混合物を１１mlのエタノール中における１.２ｇ（２.２７ミリモル）の工程ｂ）からの１,３,７−三置換キサンチンの懸濁液に加えた。混合物を還流下で１.５時間沸騰させ、減圧下で濃縮し、ジクロロメタン／メタノール（１９／０.５）を使用して残留物をシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。収量：０.６ｇ（理論量の９２％）；融点２０８℃。Ｃ14Ｈ14Ｎ4Ｏ3（ＭＷ＝２８６.３ｇ／モル）；質量スペクトル：２８７.２（５７％，Ｍ＋Ｈ）；２５７.１（７７％）；１７９.１（１００％）；９１.１（２４％）。
【００７７】
実施例１８
１−（２−（４−クロロベンジルオキシ）エチル）−３−メチルキサンチン（化合物７０）
a)  １−（２−（４−クロロベンジルオキシ）エチル）−３−メチル−７−トリチルキサンチン
１.３ｇ（９.４４ミリモル）の炭酸カリウムを６０℃で５０mlのＮ−メチルピロリドン中における２.４ｇ（５.９ミリモル）の３−メチル−７−トリチルキサンチン（実施例１７ａ）に従って製造した）の溶液に加え、混合物をこの温度で１時間撹拌した。１.５７ｇ（７.６７ミリモル）の塩化２−（４−クロロベンジルオキシ）エチルを滴加し、混合物を８０℃で１時間撹拌した。さらに１.０ｇ（４.９ミリモル）の塩化２−（４−クロロベンジルオキシ）エチルを加え、混合物をさらに１時間撹拌した。次に、５０mlの水を加え、混合物を毎回６０mlのメチルｔ−ブチルエーテルを使用して３回抽出し、合した有機相を毎回３０mlの水で２回洗浄し、硫酸マグネシウムを使用して乾燥し、減圧下で濃縮した。ヘプタン／酢酸エチル（３／２）を使用して粗生成物をシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。収量：２.１３ｇ（理論量の６３％）；融点１７９℃。Ｃ34Ｈ29ＣｌＮ4Ｏ3（ＭＷ＝５７７.１ｇ／モル）；質量スペクトル：５８５（５％，37Ｃl, Ｍ＋Ｌｉ）；５８３.２（８％，35Ｃｌ，Ｍ＋Ｌｉ）；２４３.１（１００％）。
【００７８】
b)  １−（２−（４−クロロベンジルオキシ）エチル）−３−メチルキサンチン（化合物７０）
１.４mlのエタノールおよび２.８mlの１Ｎ塩酸の混合物を１４mlのエタノール中における１.３ｇ（２.２６ミリモル）の工程ａ）からの１,３,７−三置換キサンチンの懸濁液に加えた。混合物を還流下で１時間沸騰させ、減圧下で濃縮し、ジクロロメタン／メタノール（１９／０.５）を使用してシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。収量：０.７２ｇ（理論量の９５％）；融点１５２℃。Ｃ15Ｈ15ＣｌＮ4Ｏ3（ＭＷ＝３３４.７ｇ／モル）；質量スペクトル：３３６（１％，37Ｃｌ，Ｍ）；３３４（２％，35Ｃｌ，Ｍ）；１９４（１００％）；１７９（２５％）；１６６（６５％）。
【００７９】
【表１】
0004156687.tif 000008
【００８０】
【表２】
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【００８１】
【表３】
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【００８２】
【表４】
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【００８３】
【表５】
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【００８４】
【表６】
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【００８５】
【表７】
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【００８６】
薬理試験および結果
式Ｉの化合物の著しい抗ショック作用は、Ｃ５７ＢＬ／６マウスについて内毒素（ＬＰＳ）により誘起された致死ショックの確立したモデルで死亡率の減少により証明された。
実験を実施するには、ホスフェートバッファーの生理食塩水溶液０.２ml中のサルモネラアボルツスエキ（Salmonella abortus equi）由来のＬＰＳ、１０ngとガラクトサミン７.５mgとの混合物を各動物に静脈注射で投与した。それにより原則として６〜９時間以内に死亡した。ＬＰＳ刺激を施す１時間前に試験製剤を１００mg／kgの投与量で腹腔内投与した。対照群（ｎ＝１０）の動物はこれの代わりに純粋な０.９％食塩水をプラシーボとして摂取した。製剤の作用を評価するには、ＬＰＳ投与の４８時間後に処置群（ｎ＝１０）中で生き残っている動物の数を測定し、これより死亡率抑制％を対照群の死亡率に関して決定した。実験結果は表３に示すとおりである。
【００８７】
【表８】
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【００８８】
より広範な薬理スクリーニング中において、式Ｉの化合物はさらに中枢神経系の虚血関連の細胞死を継続的に抑制することもできるということを示すこともさらに可能であった。従って、それらはまた脳血管疾患例えば卒中、一時的な虚血発作（ＴＩＡ）、多梗塞性痴呆、血管および変性（アルツハイマー）成分を有する混合型の痴呆、脊髄損傷、頭の負傷の結果としての脳損傷、および心搏動停止後のニューロン損傷、（新生児の）窒息および蘇生ならびに脳に供給する主動脈の領域中での外科的な血管介入（例えばバイパス手術）の治療および予防にも適している。
【００８９】
とりわけ、アレチネズミの完全な一過性虚血モデルにおいて式Ｉによるテオフィリン誘導体のニューロン保護作用を証明することは確かに可能であった。この発見はまた驚きであった。なぜなら、同等な実験条件下でテオフィリンそれ自体はアレチネズミ（J. Cereb. Blood Flow Metab. 1987, 7/1: 74-81）でもラット（J. Cereb. Blood Flow Metab. 1994, 14/1: 166-173）でも虚血性神経細胞損傷を抑制せず、むしろその損傷をさらに増大させるからである。
【００９０】
実験を実施するには、ドイツ動物保護法のガイドラインによって実施し、体重６０〜７０ｇの雄スナネズミ３０匹を任意に、それぞれ１５匹の動物からなる２つのグループに分けた。各試験物質を虚血期間３０分後に第１グループの動物に腹腔内投与し、一方未処置対照群とした第２グループの動物は同一容量の賦形剤のみを摂取した。一時的な前脳虚血を誘起させるために、各動物を熱せられた手術台に仰臥に固定し、通常の両頸動脈を慎重に露出し、微細動脈瘤クリップを用いて３分間閉じた。３分の虚血期間後７日目に各動物をハロセイン麻酔薬の下で断頭し、脳を迅速かつ慎重に取り出し、最初にカルノア液（エタノール／クロロホルム／酢酸＝６／３／１）中に浸すことにより固定し、次いでパラフィン中に包埋した。引き続き、海馬状隆起を通過する厚さが４〜６μmの頭頂部分をブレグマの高さに適当に調製し、そしてこれらをヘマトキシリンおよびエオシンで染色した。この後に、海馬状隆起のＣＡ１領域中の錐体細胞のエオシン好性壊死の程度を、盲実験中の光顕微鏡検査法により半定量的な組織病理学上の点数（０＝なし、１＝僅かに、２＝中程度、３＝重い、４＝完全な壊死）を用いて決定した。神経保護作用に使用した評価変数は、未処置対照群と比較した場合の製剤群の組織病理学上の平均点の変化率(％)であった。実験の結果は表４に示すとおりである。
【００９１】
【表９】
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