(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ
【化１】
0004177466.tif 000016
の置換された桂皮酸グアニジドまたはその医薬的に許容し得る塩。
上記式において、
置換分Ｒ（１）またはＲ（３）は、
−Ｘa−Ｙb−Ｌn−Ｕ
〔式中、
Ｘは、ＯまたはＳであり；
ａは、０または１であり；
Ｙは、１、２、３、４、５、６、７または８個の炭素原子を有するアルキレンまたはＴであり；
Ｔは、フェニレンであり；
ｂは０または１であり；
ＬはＣkＨ2K（式中、ｋは１、２、３、４、５、６、７または８である）であり；
ｎは０または１であり；
ＵはＮＲ（２４）Ｒ（２５）または５個の炭素原子を有するＮ−含有複素環式基（式中、Ｒ（２４）およびＲ（２５）は相互に独立して、１、２、３、４、５、６、７または８個の炭素原子を有するアルキルである〕であり；そして
他の置換分Ｒ（１）またはＲ（３）、並びにＲ（２）、Ｒ（４）およびＲ（５）のそれぞれは、相互に独立して水素、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮまたは−Ｏp−（ＣＨ2)s−ＣqＦ2q+1〔式中、
ｐは、０であり；
ｓは、０であり；
ｑは、１、２、３、４、５、６、７または８である〕であり；
Ｒ（６）およびＲ（７）は、相互に独立して、水素、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉまたは１、２、３または４個の炭素原子を有するアルキルである。
【請求項２】
化合物が、
（Ｅ）−３−（４−ジメチルアミノフェニル）−２−メチル−プロペン酸グアニジド、
（Ｅ）−３−〔４−（３−ジメチルアミノプロポキシ）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸グアニジド、
（Ｅ）−３−〔４−（３−ピリジルオキシ）−３−（トリフルオロメチル）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸グアニジド、
（Ｅ）−３−〔４−（４−ピリジルチオ）−３−（トリフルオロメチル）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸グアニジド、
（Ｅ）−３−（３−シアノ−４−ジメチルアミノ−２−フルオロ−フェニル）−２−メチル−プロペン酸グアニジド、
（Ｅ）−３−〔４−（３−ジメチルアミノプロポキシ）フェニル〕−２−フルオロ−プロペン酸グアニジド、
（Ｅ）−３−〔４−（４−（２−ジメチルアミノエチレン）フェノキシ）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸グアニジド、
（Ｅ）−３−〔３,５−ジフルオロ−４−（４−（２−ジメチルアミノエチレン）フェノキシ）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸グアニジド、
（Ｅ）−３−〔３,５−ジフルオロ−４−（３−ジメチルアミノ−フェノキシ）フェニル〕−２−フルオロ−プロペン酸グアニジド、
（Ｅ）−３−〔３,５−ジフルオロ−４−（３−ジメチルアミノ−フェノキシ）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸グアニジド、
（Ｅ）−３−〔２,６−ジフルオロ−４−（３−ジメチルアミノフェノキシ）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸グアニジド、および
（Ｅ）−３−〔２,４−ジフルオロ−６−（３−ジメチルアミノフェノキシ）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸グアニジド
からなる群から選択されたものである請求項１記載の式Ｉの化合物。
【請求項３】
式II
【化２】
0004177466.tif 000017
（式中、Ｒ（１）〜Ｒ（７）は、請求項１において定義した通りでありそしてＬは、 Ｃｌ、ＯＨ、ＯＣＨ3および１−イミダゾリルから選ばれる脱離基である）の化合物をグアニジンと反応させることからなる請求項１記載の式Ｉの化合物の製法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、式Ｉ
【化３】
0004177466.tif 000002
の置換された桂皮酸グアニジドまたはその医薬的に許容し得る塩に関するものである。
【０００２】
上記式において、
置換分Ｒ（１）、Ｒ（２）、Ｒ（３）、Ｒ（４）およびＲ（５）の少なくとも１個は、
−Ｘa−Ｙb−Ｌn−Ｕ
〔式中、
Ｘは、ＣＲ（１６）Ｒ（１７）、Ｏ、ＳまたはＮＲ（１８）であり；
Ｒ（１６）、Ｒ（１７）およびＲ（１８）は、相互に独立して、Ｈ、１、２、３または４個の炭素原子を有するアルキルまたは１、２、３または４個の炭素原子を有するペルフルオロアルキルであり；
ａは、０または１であり；
Ｙは、１、２、３、４、５、６、７または８個の炭素原子を有するアルキレン、アルキレン基中に１、２、３、４、５、６、７または８個の炭素原子を有するアルキレン−Ｔ、Ｔまたはアルキレン基中に１、２、３、４、５、６、７または８個の炭素原子を有するＴ−アルキレンであり；
Ｔは、ＮＲ（２０）、Ｏ、Ｓまたはフェニレン（フェニレンは置換されていないかまたはＦ、Ｃｌ、ＣＦ3、メチル、メトキシおよびＮＲ（２１）Ｒ（２２）からなる群から選択された１〜３個の置換分でより置換されており、そしてＲ（２０）、Ｒ（２１）およびＲ（２２）は相互に独立して、Ｈ、１、２、３または４個の炭素原子を有するアルキルまたは１、２、３または４個の炭素原子を有するペルフルオロアルキルである）であり；
ｂは０または１であり；
ＬはＯ、Ｓ、ＮＲ（２３）またはＣkＨ2K（式中、ｋは１、２、３、４、５、６、７または８である）であり；
ｎは０または１であり；
ＵはＮＲ（２４）Ｒ（２５）または１、２、３、４、５、６、７、８または９個の炭素原子を有するＮ−含有複素環式基（式中、Ｒ（２４）およびＲ（２５）は相互に独立して、水素、１、２、３、４、５、６、７または８個の炭素原子を有するアルキルまたは１、２、３、４、５、６、７または８個の炭素原子を有するペルフルオロアルキルであるか、またはＲ（２４）およびＲ（２５）は、一緒になって４または５個のメチレン基（その１個のＣＨ2基は酸素、Ｓ、ＮＨ、Ｎ−ＣＨ3またはＮ−ベンジルにより置換されていてもよい）であり、そしてＮ−含有複素環式基は、Ｎ−またはＣ−橋結合しておりそして置換されていないかまたはＦ、Ｃｌ、ＣＦ3、メチル、メトキシおよびＮＲ（２７）Ｒ（２８）からなる群から選択された１〜３個の置換分により置換されている）であり；
Ｒ（２３）、Ｒ（２７）およびＲ（２８）は、相互に独立してＨ、１、２、３または４個の炭素原子を有するアルキルまたは１、２、３または４個の炭素原子を有するペルフルオロアルキルである〕であり；そして
他の置換分Ｒ（１）、Ｒ（２）、Ｒ（３）、Ｒ（４）およびＲ（５）のそれぞれは、相互に独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、−Ｏn−ＣmＨ2m+1、−Ｏp−（ＣＨ2)s−ＣqＦ2q+1または−ＣrＨ2rＲ（１０）〔式中、
ｎは、０または１であり；
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７または８であり；
ｐは、０または１であり；
ｑは、１、２、３、４、５、６、７または８であり；
ｓは、０、１、２、３または４であり；
ｒは、０、１、２、３または４であり；
Ｒ（１０）は、３、４、５、６、７または８個の炭素原子を有するシクロアルキルまたはフェニル（フェニルは置換されていないかまたはＦ、Ｃｌ、ＣＦ3、メチル、メトキシおよびＮＲ（１１）Ｒ（１２）からなる群から選択された１〜３個の置換により置換されており、そしてＲ（１１）およびＲ（１２）は、相互に独立して、Ｈ、１、２、３または４個の炭素原子を有するアルキルまたは１、２、３または４個の炭素原子を有するペルフルオロアルキルである）である〕であり；
Ｒ（６）およびＲ（７）は、相互に独立して、水素、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、１、２、３、４、５、６、７または８個の炭素原子を有するアルキル、１、２、３、４、５、６、７または８個の炭素原子を有するペルフルオロアルキル、３、４、５、６、７または８個の炭素原子を有するシクロアルキルまたはフェニル（この基は、置換されていないかまたはＦ、Ｃｌ、ＣＦ3、メチル、メトキシおよびＮＲ（１４）Ｒ（１５）からなる群から選択された１〜３個の置換分により置換されており、そしてＲ（１４）およびＲ（１５）は、相互に独立してＨ、１、２、３または４個の炭素原子を有するアルキルまたは１、２、３または４個の炭素原子を有するペルフルオロアルキルである）である。
【０００３】
式Ｉの好ましい化合物は、
置換分Ｒ（１）、Ｒ（２）、Ｒ（３）、Ｒ（４）およびＲ（５）の少なくとも１個が、
−Ｘa−Ｙb−Ｌn−Ｕ
〔式中、
Ｘは、ＣＲ（１６）Ｒ（１７）、Ｏ、ＳまたはＮＲ（１８）であり；
Ｒ（１６）、Ｒ（１７）およびＲ（１８）は、相互に独立して、Ｈ、ＣＨ3またはＣＦ3であり；
ａは、０または１であり；
Ｙは、１、２、３、４、５、６、７または８個の炭素原子を有するアルキレン、アルキレン基中に１、２、３、４、５、６、７または８個の炭素原子を有するアルキレン−Ｔ、Ｔおよびアルキレン基中に１、２、３、４、５、６、７または８個の炭素原子を有するＴ−アルキレンであり；
Ｔは、ＮＲ（２０）、Ｏ、Ｓまたはフェニレン（フェニレンは置換されていないかまたはＦ、Ｃｌ、ＣＦ3、メチル、メトキシおよびＮＲ（２１）Ｒ（２２）からなる群から選択された１〜３個の置換分でより置換されており、そしてＲ（２０）、Ｒ（２１）およびＲ（２２）は相互に独立して、Ｈ、ＣＨ3またはＣＦ3である）であり；
ｂは０または１であり；
ＬはＯ、Ｓ、ＮＲ（２３）またはＣkＨ2K（式中、ｋは１、２、３、４、５、６、７または８である）であり；
ｎは０または１であり；
ＵはＮＲ（２４）Ｒ（２５）または１、２、３、４、５、６、７、８または９個の炭素原子を有するＮ−含有複素環式基（Ｒ（２４）およびＲ（２５）は、相互に独立して、Ｈ、１、２、３、４、５、６、７または８個の炭素原子を有するアルキル、１、２、３、４、５、６、７または８個の炭素原子を有するペルフルオロアルキルであるか、またはＲ（２４）およびＲ（２５）は、一緒になって４または５個のメチレン基（その１個のＣＨ2基は酸素、Ｓ、ＮＨ、Ｎ−ＣＨ3またはＮ−ベンジルにより置換されていてもよい）であり、そしてＮ−含有複素環式基は、Ｎ−またはＣ−橋結合しておりそして置換されていないかまたはＦ、Ｃｌ、ＣＦ3、メチル、メトキシおよびＮＲ（２７）Ｒ（２８）からなる群から選択された１〜３個の置換分により置換されている）であり；
Ｒ（２３）、Ｒ（２７）およびＲ（２８）は、相互に独立してＨ、ＣＨ3またはＣＦ3である〕であり；そして
他の置換分Ｒ（１）、Ｒ（２）、Ｒ（３）、Ｒ（４）およびＲ（５）のそれぞれが、相互に独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、−Ｏn−ＣmＨ2m+1、−Ｏp−（ＣＨ2)s−ＣqＦ2q+1または−ＣrＨ2rＲ（１０）
〔式中、
ｎは、０または１であり；
ｍは、０、１、２、３または４であり；
ｐは、０であり；
ｑは、１、２、３、４、５、６、７または８であり；
ｓは、０であり；
ｒは、０、１または２であり；
Ｒ（１０）は、３、４、５、６、７または８個の炭素原子を有するシクロアルキルまたはフェニル（フェニルは置換されていないかまたはＦ、Ｃｌ、ＣＦ3、メチル、メトキシおよびＮＲ（１１）Ｒ（１２）からなる群から選択された１〜３個の置換分で置換されており、そしてＲ（１１）およびＲ（１２）は、相互に独立して、Ｈ、ＣＨ3またはＣＦ3である）である〕であり；
Ｒ（６）およびＲ（７）は、相互に独立して、水素、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、１、２、３または４個の炭素原子を有するアルキル、１、２、３または４個の炭素原子を有するペルフルオロアルキル、３、４、５、６、７または８個の炭素原子を有するシクロアルキルまたはフェニル（この基は、置換されていないかまたはＦ、Ｃｌ、ＣＦ3、メチル、メトキシおよびＮＲ（１４）Ｒ（１５）からなる群から選択された１〜３個の置換分により置換されており、そしてＲ（１４）およびＲ（１５）は、相互に独立してＨ、ＣＨ3またはＣＦ3である）である化合物またはその医薬的に許容し得る塩である。
【０００４】
式Ｉの特に好ましい化合物は、
置換分Ｒ（２）、Ｒ（３）、Ｒ（４）の少なくとも１個が、
−Ｘa−Ｙb−Ｌn−Ｕ
〔式中、
Ｘは、ＣＲ（１６）Ｒ（１７）、Ｏ、ＳまたはＮＲ（１８）であり；
Ｒ（１６）、Ｒ（１７）およびＲ（１８）は、相互に独立して、Ｈ、ＣＨ3またはＣＦ3であり；
ａは、０または１であり；
Ｙは、１、２、３、４、５、６、７または８個の炭素原子を有するアルキレン、アルキレン基中に１、２、３、４、５、６、７または８個の炭素原子を有するアルキレン−Ｔ、Ｔまたはアルキレン基中に１、２、３、４、５、６、７または８個の炭素原子を有するＴ−アルキレンであり；
Ｔは、ＮＲ（２０）、Ｏ、Ｓまたはフェニレン（フェニレンは置換されていないかまたはＦ、Ｃｌ、ＣＦ3、メチル、メトキシおよびＮＲ（２１）Ｒ（２２）からなる群から選択された１〜３個の置換分により置換されており、そしてＲ（２０）、Ｒ（２１）およびＲ（２２）は相互に独立して、Ｈ、ＣＨ3またはＣＦ3である）であり；
ｂは０または１であり；
ＬはＯ、Ｓ、ＮＲ（２３）またはＣkＨ2K（式中、ｋは１、２、３、４、５、６、７、８である）であり；
ｎは０または１であり；
ＵはＮＲ（２４）Ｒ（２５）または１、２、３、４、５、６、７、８または９個の炭素原子を有するＮ−含有複素環式基（Ｒ（２４）およびＲ（２５）は、相互に独立して、水素、１、２、３または４個の炭素原子を有するアルキルまたはＣＦ3であるか、またはＲ（２４）およびＲ（２５）は、一緒になって４または５個のメチレン基（その１個のＣＨ2基は酸素、Ｓ、ＮＨ、Ｎ−ＣＨ3またはＮ−ベンジルによって置換されていてもよい）であり、そしてＮ−含有複素環式基は、Ｎ−またはＣ−橋結合しておりそして置換されていないかまたはＦ、Ｃｌ、ＣＦ3、メチル、メトキシおよびＮＲ（２７）Ｒ（２８）から選択された１〜３個の置換分により置換されている）であり；
Ｒ（２３）、Ｒ（２７）およびＲ（２８）は、相互に独立してＨ、ＣＨ3またはＣＦ3である〕であり；そして
他の置換分Ｒ（１）、Ｒ（２）、Ｒ（３）、Ｒ（４）およびＲ（５）のそれぞれが相互に独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、−Ｏn−ＣmＨ2m+1またはＣＦ3
〔式中、
ｎは、０または１であり；
ｍは、０、１、２、３または４である〕であり；
Ｒ（６）およびＲ（７）は、相互に独立して、水素、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、１、２、３または４個の炭素原子を有するアルキル、ＣＦ3、５、６または７個の炭素原子を有するシクロアルキルまたはフェニル（この基は、置換されていないかまたはＦ、Ｃｌ、ＣＦ3、メチル、メトキシおよびＮＲ（１４）Ｒ（１５）からなる群から選択された１〜３個の置換分により置換されておりそしてＲ（１４）およびＲ（１５）は、相互に独立してＨ、ＣＨ3またはＣＦ3である）である化合物およびその医薬的に許容し得る塩である。
【０００５】
特に好ましい化合物は、
Ｅ−３−（４−ジメチルアミノフェニル）−２−メチル−プロペン酸グアニジド、
Ｅ−３−〔４−（３−ジメチルアミノプロポキシ）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸グアニジド、
Ｅ−３−〔４−（３−ピリジルオキシ）−３−（トリフルオロメチル）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸グアニジド、
Ｅ−３−〔４−（４−ピリジルチオ）−３−（トリフルオロメチル）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸グアニジド、
Ｅ−３−（３−シアノ−４−ジメチルアミノ−２−フルオロ−フェニル）−２−メチル−プロペン酸グアニジド、
Ｅ−３−〔４−（３−ジメチルアミノプロポキシ）フェニル〕−２−フルオロ−プロペン酸グアニジド、
Ｅ−３−〔４−（４−（２−ジメチルアミノエチレン）フェノキシ）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸グアニジド、
Ｅ−３−〔３,５−ジフルオロ−４−（４−（２−ジメチルアミノエチレン）フェノキシ）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸グアニジド、
Ｅ−３−〔３,５−ジフルオロ−４−（３−ジメチルアミノ−フェノキシ）フェニル〕−２−フルオロ−プロペン酸グアニジド、
Ｅ−３−〔３,５−ジフルオロ−４−（３−ジメチルアミノ−フェノキシ）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸グアニジド、
Ｅ−３−〔２,６−ジフルオロ−４−（３−ジメチルアミノフェノキシ）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸グアニジド、および
Ｅ−３−〔２,４−ジフルオロ−６−（３−ジメチルアミノフェノキシ）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸グアニジド
およびその医薬的に許容し得る塩である。
【０００６】
式Ｉの化合物が、１個または２個以上の不斉中心を含有する場合は、これらはＳおよびＲ配置にあることができる。化合物は、光学異性体、ジアステレオマー、ラセミ体またはこれらの混合物の形態にあることができる。
【０００７】
式Ｉの化合物の二重結合幾何異性体は、ＥおよびＺの両方であることができる。化合物は、混合物としての二重結合異性体の形態にあることができる。
本明細書に記載されたアルキル基およびペルフルオロアルキル基は、直鎖状および分枝鎖状であることができる。
【０００８】
１、２、３、４、５、６、７、８または９個の炭素原子を有するＮ−含有複素環式基は、特にピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、インドリル、イソインドリル、ベンズイミダゾリル、インダゾリル、キノリル、イソキノリル、フタラジニル、キノキサリニル、キナゾリニルおよびシンノリニルである。
【０００９】
Ｎ−含有複素環式基は、特に好ましくは、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニルおよびピリダジニルである。
【００１０】
さらに、本発明は、式II
【化４】
0004177466.tif 000003
（式中、Ｒ（１）〜Ｒ（７）は、上述した意義を有しそしてＬは、求核的に容易に置換することができる脱離基を示す）の化合物をグアニジンと反応させることからなる化合物Ｉの製法に関するものである。
【００１１】
Ｌがアルコキシ、好ましくはメトキシ基、フェノキシ基、フェニルチオ基、メチルチオ基または２−ピリジルチオ基または窒素含有複素環式基、好ましくは１−イミダゾリルである式IIの活性化酸誘導体は、有利には、それ自体既知の方法でそれ等に基づくカルボン酸クロライド（式II、Ｌ＝Ｃｌ）から得られる。このカルボン酸クロライドはそれ自体既知の方法で、例えば塩化チオニルを使用してそれ等に基づくカルボン酸（式II、Ｌ＝ＯＨ）から得ることができる。
【００１２】
式IIのカルボン酸クロライド（Ｌ＝Ｃｌ）に加えて、式IIの他の活性化酸誘導体は、またそれ自体既知の方法でそれ等に基づく安息香酸誘導体（式II、Ｌ＝ＯＨ）から直接製造することもできる。例えば、式IIのメチルエステル（Ｌ＝ＯＣＨ3）は、メタノール中においてガス状ＨＣｌで処理することによって、式IIのイミダゾリド〔Ｌ＝１−イミダゾリル、Staab, Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1,351〜367(1962)〕は、カルボニルジイミダゾールで処理することによって、そして混合無水物IIは、不活性溶剤中においてトリエチルアミンの存在下でＣｌ−ＣＯＯＣ2Ｈ5または塩化トシルで処理することによって得ることができる。そしてまた、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）またはＯ−〔（シアノ（エトキシカルボニル）メチレン）アミノ〕−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムテトラフルオボレート（“ＴＯＴＵ”）〔Proceedings of the 21st European Peptide Symposium, Peptides 1990, Editors E. Giralt and D. Andreu, Escom, Leiden, 1991〕により安息香酸の活性化を行うこともできる。式IIの活性化カルボン酸誘導体を製造する多数の適当な方法が、J. March, Advanced Organic Chemistry, Third Edition (John Wiley & Sons, 1985)、３５０頁において情報出所文献に関して述べられている。
【００１３】
グアニジンと式IIの活性化カルボン酸誘導体との反応は、それ自体既知の方法で、プロトン性または非プロトン性の極性の不活性有機溶剤中で実施される。安息香酸メチルエステル（式II、Ｌ＝ＯＭｅ）とグアニジンとの反応に対しては、２０℃ないし溶剤の沸点の温度におけるメタノール、イソプロパノールまたはＴＨＦが適当であることが証明された。化合物IIと塩を有していないグアニジンとの大部分の反応は、有利には非プロトン性不活性溶剤、例えばＴＨＦ、ジメトキシエタンまたはジオキサン中で実施される。しかしながら、例えばＮａＯＨのような塩基を使用して、水もまた化合物IIとグアニジンとの反応に対する溶剤として使用することもできる。
【００１４】
ＬがＣｌである場合は、反応は、ハロゲン化水素酸を結合させるために、酸捕捉剤を添加して、例えば過剰のグアニジンの形態において有利に実施される。
【００１５】
化合物の基となる式IIの安息香酸誘導体の若干は、既知でありそして文献に記載されている。既知でない式IIの化合物は、文献から知られている方法によって製造することができる。得られたアルケニルカルボン酸を、上述した方法変形法の一つの方法によって反応させて、本発明による化合物Ｉを得る。
【００１６】
若干の置換分は、文献から知られている、例えば、有機スタンナン、有機硼酸または有機ボランまたは有機銅または亜鉛化合物とのアリールハライドまたはアリールトリフレートのパラジウム−媒介クロス−カップリングの方法によって、導入される。
【００１７】
カルボン酸グアニジドＩは、一般に弱塩基でありそして酸と結合して塩を形成することができる。可能な酸付加塩は、すべての薬理学的に許容し得る酸の塩、例えばハライド、特に塩酸塩、乳酸塩、硫酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、酢酸塩、リン酸塩、メチルスルホン酸およびｐ−トルエンスルホン酸塩である。
【００１８】
化合物Ｉは置換されたアシルグアニジンである。
アシルグアニジンのもっとも有望な代表的化合物は、カリウム保持性利尿薬として治療に使用されているピラジン誘導体アミロリドである。例えばジメチルアミロリドまたはエチルイソプロピルアミロリドのようなアミロリド型の多数の他の化合物が、文献で記載されている。
【化５】
0004177466.tif 000004
【００１９】
さらに、アミロリドの抗不整脈性を示す研究が報告されている〔Circulation 79, 1257〜63(1989)〕。しかしながら、抗不整脈薬としての普及した使用は、この作用は弱くそして血圧低下作用および塩排泄作用を伴ないそしてこれらの副作用は心臓不整脈の治療に望ましくないという事実によってはばまれる。アミロリドの抗不整脈性の指示は、また分離された動物の心臓に対する実験において得られている〔Eur. Heart J. 9(suppl. 1)：167(1988)(book of abstracts)〕。すなわち、例えば、ラットの心臓において、人工的に誘発された心室細動はアミロリドにより完全に抑制されるということが見出された。上述したアミロリド誘導体エチルイソプロピルアミロリドは、このモデルにおいて、アミロリドよりいっそう強力である。
【００２０】
桂皮酸グアニジド（ＲaおよびＲc、およびＲbおよびＲd＝二重結合；Ｒ（１）＝置換されたフェニル）が、ＷＯ ８４／００８７５から知られているが、すべての場合において、これらの化合物は、追加的にグアニジン上においてアルキル基により置換されている（これは、これらの化合物が、ＮＨＥ阻害を示さない理由である）。さらに、−Ｘa−Ｙb−Ｚのような塩基性置換分は、記載されていないかまたは明らかにされていない。
【００２１】
桂皮酸グアニジン（Ｒ＝置換されたフェニル、アルキル＝アルケニレン）が米国特許第２,７３４,９０４号から知られているが、同様に、−Ｘa−Ｙb−Ｚのような塩基性置換分は、記載されていないかまたは明らかにされていない。
【００２２】
ドイツ特許出願Ｐ ４４ ２１ ５３６.３（ＨＯＥ ９４／Ｆ １６８）は、桂皮酸グアニジド（ｘ＝０、ｙ＝０）を提案しているが、置換分Ｒ（１）、Ｒ（２）、Ｒ（４）、Ｒ（５）、Ｒ（Ｃ）またはＲ（Ｄ）の１個は、ペルフルオロアルキル基であらねばならない。さらに、これらの化合物は、塩基性−Ｘa−Ｙb−Ｌn−Ｕ−基を含有していない。
【００２３】
しかしながら、既知である化合物そしてまた提案されている化合物は、望まれるすべての必要条件を満足しないそして例えば水溶性は、なお多少の足りない点がある。
【００２４】
さらに、これらの化合物は、望ましい程度に選択的に作用しない。それ故に、改善された水溶性および選択性の化合物を入手することが望まれている。
【００２５】
これは、例えば酸素欠乏により起きる疾患の治療に対して重要であるような、望ましくないそして不利な塩利尿性(salidiuretic properties)を示さずそして非常に良好な抗不整脈性を有する本発明による化合物によって達成される。化合物の薬理学的性質の結果として、化合物は、梗塞予防および梗塞治療に対するおよび狭心症の治療に対する心臓保護成分を有する抗不整脈薬剤として顕著に適している。この場合、化合物は、また、虚血的に誘発される損傷の発現、特に虚血的に誘発される心臓不整脈の引き金における病理生理学的プロセスを予防的に阻止または非常に減少する。病理学的低酸素および虚血状況に対する化合物の保護作用のために、細胞のＮａ+／Ｈ+交換機構の阻害の結果として、本発明による式Ｉの化合物は虚血により起きるすべての急性または慢性損傷またはこれによって一次的または二次的に誘発される疾患の治療に対する薬剤として使用することができる。これは、外科手術、例えば器官移植に対する薬剤としての化合物の使用に関係する。この場合において、化合物は、除去前および除去中の供与者の器官の保護、ならびに、例えば生理学的溶液による処理中または該溶液中における貯蔵中そしてまたは患者の体への移行中の除去された器官の保護に対して使用することができる。化合物は、同様に、例えば心臓そしてまたは末梢血管における血管形成術外科手術の実施に対して保護作用を有する価値ある薬剤である。虚血的に誘発される損傷に対する化合物の保護作用によって化合物は、また、神経系、特にＣＮＳの虚血症を治療する薬剤として適している。この場合化合物は、例えば発作または脳浮腫の治療に適している。さらに、本発明による式Ｉの化合物は、同様に、例えばアレルギー性、心臓性、血液量不足および細菌性ショックのような形態のショックの治療に適している。
【００２６】
さらに、本発明による式Ｉの化合物は、細胞の増殖、例えば線維芽細胞増殖および血管の平滑筋細胞の増殖に対する強力な阻害作用によって特徴づけられる。それ故に、式Ｉの化合物は、細胞増殖が一次的または二次的原因である疾患に対する価値ある治療剤として適しておりそしてそれ故に化合物は、抗アテローム性動脈硬化症剤および糖尿病後発併発症、癌疾患、線維症疾患、例えば肺線維症、肝線維症または腎線維症、および器官肥大および過形成、特に前立腺肥大または前立腺過形成に対する剤として使用することができる。
【００２７】
本発明による化合物は、多数の疾患（本態性高血圧症、アテローム性動脈硬化症、糖尿病など）において、例えば赤血球、血小板または白血球におけるような容易に測定できる細胞においても上昇する細胞のナトリウム−プロトン交互輸送機構（Ｎａ+／Ｈ+交換体）の有効な阻害剤である。それ故に、本発明による化合物は、例えばある形態の高血圧そしてまたアテローム性動脈硬化症、糖尿病、増殖性疾患などを測定および識別する診断薬として使用されるすぐれた且つ簡単な科学的道具(tool）として適している。さらに、式Ｉの化合物は、高血圧例えば本態性高血圧の発生を予防する予防的治療に適している。
【００２８】
化合物Ｉを含有する医薬は、経口的に、非経口的に、静脈内に、直腸内にまたは吸入によって投与することができそして好ましい投与方法は、特定の疾患の症状に依存する。この場合において、化合物Ｉは、それら自体でまたは医薬補助剤と一緒に獣医医薬およびヒト医薬に使用することができる。
【００２９】
当業者は、専門知識を基にして望ましい医薬処方に適した補助剤に精通している。溶剤、ゲル−形成剤、坐剤基剤、錠剤補助剤および他の活性化合物賦形剤のほかに、例えば抗酸化剤、分散剤、乳化剤、泡止め剤、風味矯正剤、防腐剤、可溶化剤または色素を使用することができる。
【００３０】
経口的使用形態に対しては、活性化合物を、この目的に適した添加剤、例えば賦形剤、安定剤または不活性希釈剤と混合しそして混合物を、慣用の方法によって、錠剤、被覆錠剤、硬ゼラチンカプセルまたは水性、アルコール性または油性溶液のような適当な投与形態にする。使用することのできる不活性賦形剤は、例えばアラビアゴム、マグネシア、炭酸マグネシウム、燐酸カリウム、ラクトース、グルコースまたは澱粉、特にとうもろこし澱粉である。処方は、乾燥顆粒としておよび湿潤顆粒として実施することができる。使用可能な油状賦形剤または使用可能な溶剤は、例えばヒマワリ油または魚肝油のような植物または動物油である。
【００３１】
皮下または静脈内投与に対しては、活性化合物を、必要に応じてこの目的に対して慣用の物質、例えば可溶化剤、乳化剤または他の補助剤と一緒に、溶解、懸濁または乳化する。使用可能な溶剤は、例えば水、生理食塩溶液またはアルコール例えば、エタノール、プロパノールおよびグリセロールならびにさらにまた糖溶液、例えばグルコースまたはマンニトールの溶液、またはさもなければ、上述した種々な溶剤の混合物である。
【００３２】
医薬的に許容し得る溶剤、例えば、特に、エタノールまたは水またはこのような溶剤の混合物中の活性化合物の溶液、懸濁液または乳濁液は、例えばエアロゾルまたはスプレーの形態で投与される医薬処方として適している。
【００３３】
必要な場合は、処方は、また、追加的に、他の医薬補助剤、例えば界面活性剤、乳化剤および安定剤ならびに発射ガスを含有する。このような処方は、普通約０.１〜１０重量％、特に約０.３〜３重量％の濃度で活性化合物を含有する。
【００３４】
投与される式Ｉの活性化合物の投与量および投与の頻度は、使用される化合物の力価および作用持続期間、そしてさらにまた、処理される疾患の性質および程度、および処理される哺乳動物の性別、年令、体重および個々の応答に依存する。
【００３５】
平均して、約７５kgの体重の患者に対する式Ｉの化合物の１日当たりの投与量は、体重１kg当たり少なくとも０.００１mg、好ましくは０.０１mg／kg〜１０mg／kg好ましくは１mg／kgである。急性の疾患の発生に対しては、例えば心筋梗塞にかかった直後に、１日当たり４個体用量に達するより高い用量そして特により高い頻度の投与が必要である。例えば集中治療病室の梗塞患者の場合においては特に静脈内使用に対して２００mg／日に達する量が必要なことがある。
【００３６】
略号のリスト
ＭｅＯＨ    メタノール
ＤＭＦ      Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＥＩ        電子衝撃
ＤＣｌ      脱着−化学イオン化
ＲＴ        室温
ＥＡ        酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）
ｍｐ        融点
ＨＥＰ      ｎ−ヘプタン
ＤＭＥ      ジメトキシエタン
ＥＳ        電子スプレー
ＦＡＢ      高速原子衝撃
ＣＨ2Ｃｌ2  ジクロロメタン
ＴＨＦ      テトラヒドロフラン
ｅｑ．      当量
【００３７】
実験の部
アルケニルカルボン酸グアニジド（Ｉ）の製造に対する一般的指針
変形方法１Ａ：アルケニルカルボン酸（式II、Ｌ＝ＯＨ）から
式IIのカルボン酸誘導体１.０当量を、無水のＴＨＦ（５ml／ミリモル）に溶解または懸濁しそしてそれから、カルボニルジイミダゾール１.１当量を加える。混合物を室温で２時間撹拌した後に、グアニジン５.０当量を、反応溶液に導入する。一夜撹拌した後に、ＴＨＦを減圧下（回転蒸発器中で）で留去し、水を加え、pHを２Ｎ ＨＣｌで６〜７となしそして相当するグアニジド（式Ｉ）を濾去する。このようにして得られたカルボン酸グアニジンは、水性、メタノール性またはエーテル性の塩酸または他の医薬的に許容し得る酸で処理することによって、相当する塩に変換することができる。
【００３８】
変形方法１Ｂ：アルケニルカルボン酸アルキルエステル（式II、Ｌ＝Ｏ−アルキル）から
式IIのカルボン酸アルキルエステル１.０当量およびグアニジン（遊離塩基）５.０当量を、イソプロパノールに溶解またはＴＨＦに懸濁しそして溶液または懸濁液を、変換が完了するまで（薄層により監視；典型的反応時間２〜５時間）、還流下で沸騰させる。溶剤を減圧下（回転蒸発器）で留去し、残留物をＥＡにとりそして混合物を、ＮａＨＣＯ3溶液で３回洗浄する。混合物をＮａ2ＳＯ4上で乾燥し、溶剤を真空中で留去しそして残留物を適当な移動相、例えばＥＡ／ＭｅＯＨ（５：１）を使用してシリカゲル上でクロマトグラフィー処理する。（塩形成については、変形方法Ａを参照）。
【００３９】
実施例１
Ｅ−３−（４−ジメチルアミノフェニル）−２−メチル−ペロペン酸グアニジド塩酸塩
【化６】
0004177466.tif 000005
（１ａ）．ホスホノプロピオン酸トリエチル１当量を、０℃でヘキサン中のｎ−ブチルリチウム１当量で脱プロトン化しそしてそれから４−ジメチルアミノベンズアルデヒド１当量を室温で加えた。アルデヒドが完全に反応した後、混合物を水で処理しそしてトルエンと一緒に振盪することにより３回抽出した。合した有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥した後、溶剤を真空中で除去しそして残留する粗製生成物を、溶離剤としてＥＡ／ＨＥＰ混合物を使用してシリカゲル上でクロマトグラフィー処理することによって分離した。Ｅ−３−（４−ジメチルアミノ−フェニル）−２−メチル−アクリル酸エチルを単離した。オレンジ色〜黄色の油。ＭＳ ２３３（Ｍ+）。
（１ｂ）．（１ａ）からのエステルを、標準法（メタノール中の水酸化ナトリウム）によって加水分解した。Ｅ−３−（ジメチルアミノ−フェニル）−２−メチル−アクリル酸を単離した。融点１９０〜１９４℃。ＭＳ ２０５（Ｍ+）。
（１ｃ）．（１ｂ）からのカルボン酸を変形方法１Ａにしたがって、桂皮酸グアニジド塩酸塩に変換した。融点１９４℃。ＭＳ ２４７（Ｍ＋１)+。
【００４０】
実施例２
Ｅ−３−〔４−（３−（ジメチルアミノプロポキシ）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸グアニジド二塩酸塩
【化７】
0004177466.tif 000006
（２ａ）．実施例（１ａ）と同様にして、４−（３−ジメチルアミノプロポキシ）ベンズアルデヒドからＥ−３−〔４−（３−ジメチルアミノプロポキシ）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸エチルを製造した。黄色の油。ＭＳ ２９１（Ｍ+）。
（２ｂ）．（２ａ）からのエステルを、標準法（メタノール中の水酸化ナトリウム）にしたがって加水分解した。Ｅ−３−〔４−（３−ジメチルアミノプロポキシ）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸を単離した。融点＞１９０℃。ＭＳ ２６４（Ｍ＋１)+。
（２ｃ）．（２ｂ）からのカルボン酸を、変換方法１Ａにしたがって、桂皮酸グアニジド二塩酸塩に変換した。融点２１６℃。ＭＳ ３０５（Ｍ＋１)+。
【００４１】
実施例３
Ｅ−３−〔４−（３−ピリジルオキシ）−３−（トリフルオロメチル）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸グアニジド二塩酸塩
【化８】
0004177466.tif 000007
（３ａ）．実施例（１ａ）と同様にして、４−フルオロ−３−トリフルオロメチルベンズアルデヒドから、Ｅ−２−メチル−３−（４−フルオロ−３−トリフルオロメチル−フェニル）プロペン酸エチルを製造した。黄色の油。ＭＳ ２７７（Ｍ＋１)+。
（３ｂ）．（３ａ）からのエステル、炭酸カリウム３当量および３−ヒドロキシピリジン１.１当量をＤＭＦ中で３時間還流下で加熱した。標準処理および精製後、Ｅ−３−〔４−（３−ピリジルオキシ）−３−（トリフルオロメチル）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸エチルを得た。黄色の油。ＭＳ ３５２（Ｍ＋１)+。
（３ｃ）．（３ｂ）からのエステルを標準条件下でプロペン酸に変換した。融点１３３℃。ＭＳ ３２３（Ｍ＋１)+。
（３ｄ）．（３ｃ）からのカルボン酸の変換を、一般的指針１Ａにしたがって、実施した。吸湿性の固体。融点５４℃。ＭＳ ３６５（Ｍ＋１)+。
【００４２】
実施例４
Ｅ−３−〔４−（４−ピリジルチオ）−３−（トリフルオロメチル）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸グアニジド二塩酸塩
【化９】
0004177466.tif 000008
（４ａ）．（３ａ）からのエステルを、（３ｂ）と同様にして４−メルカプトピリジンと反応させた。Ｅ−３−〔４−（４−ピリジルチオ）−３−（トリフルオロメチル）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸エチルを単離した。黄色の油。ＭＳ ３６８（Ｍ＋１)+。
（４ｂ）．標準加水分解して遊離のカルボン酸（４ｃ）（無色の固体；融点＞２００℃）を得た後に、これを、変形方法１Ａにしたがってグアニジドに変換した。無色の結晶。融点１０９℃。
【００４３】
実施例５
Ｅ−３−（３−シアノ−４−ジメチルアミノ−２−フルオロ−フェニル）−２−メチル−プロペン酸グアニジド塩酸塩
【化１０】
0004177466.tif 000009
実施例５の化合物は、３−シアノ−４−ジメチルアミノ−２−フルオロ−ベンズアルデヒドから出発して、実施例１と同様にして製造した。
Ｅ−３−（３−シアノ−４−ジメチルアミノ−２−フルオロ−フェニル）−２−メチル−プロペン酸エチル５ａ：無色の油。ＭＳ ２７７（Ｍ＋１)+。
Ｅ−３−（３−シアノ−４−ジメチルアミノ−２−フルオロ−フェニル）−２−メチル−プロペン酸５ａ：ＭＳ ２４９（Ｍ＋１)+。
Ｅ−３−（３−シアノ−４−ジメチルアミノ−２−フルオロ−フェニル）−２−メチル−プロペン酸グアニジド塩酸塩：融点２２１℃。ＭＳ ２９０（Ｍ＋１)+。
【００４４】
実施例６
Ｅ−３−〔４−（３−ジメチルアミノプロポキシ）フェニル〕−２−フルオロ−プロペン酸グアニジド二塩酸塩
【化１１】
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（６ａ）．アルファ−フルオロ誘導体Ｅ−３−〔４−（３−ジメチルアミノプロポキシ）フェニル〕−２−フルオロ−プロペン酸エチルを文献(Cousseau等、Tetrahedron Letters 34, 1993, 6903)から知られている方法にしたがって、４−（３−ジメチルアミノプロポキシ）ベンズアルデヒドから出発して合成した。無色の油。ＭＳ ２９６（Ｍ＋１)+。
（６ｂ）．（６ａ）からのエステルを、変形方法１Ｂによって、グアニジドに変換した。融点＞２００℃。ＭＳ ３０９（Ｍ＋１)+。
【００４５】
実施例７
Ｅ−３−〔４−（４−（２−ジメチルアミノエチレン）フェノキシ）フェニル〕−２−メチルプロペン酸グアニジド二塩酸塩
【化１２】
0004177466.tif 000011
（７ａ）．（１ａ）に相当する方法で、４−フルオロベンズアルデヒドから、Ｅ−３−〔４−フルオロフェニル〕−２−メチル−プロペン酸エチルを製造した。無色の油。ＭＳ ２０９（Ｍ＋１)+。
（７ｂ）．（７ａ）からのエステル、炭酸カリウム３当量および４−（２−ジメチルアミノエチレン）フェノール１.１当量を、ＤＭＦ中で一夜還流下で加熱した。処理およびクロマトグラフィー処理後、Ｅ−３−〔４−（４−（２−ジメチルアミノエチレン）フェノキシ）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸エチルを単離した。無色の油。ＭＳ ３５４（Ｍ＋１)+。
（７ｃ）．（７ｂ）からのエステルの加水分解によって、Ｅ−３−〔４−（４−（２−ジメチルアミノエチレン）フェノキシ）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸を得た。無色の結晶。融点＞２２０℃。ＭＳ ３２６（Ｍ＋１)+。
（７ｄ）．（７ｃ）からの遊離カルボン酸を、変形方法１Ａに相当する方法で、グアニジドに変換した。無色の結晶。融点１７０〜１７５℃。ＭＳ ３６７（Ｍ＋１)+。
【００４６】
実施例８
Ｅ−３−〔３,５−ジフルオロ−４−（４−（２−ジメチルアミノエチレン）フェノキシ）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸グアニジド二塩酸塩
【化１３】
0004177466.tif 000012
（８ａ）．３,４,５−トリフルオロベンズアルデヒドから出発して、実施例１に相当する方法で、Ｅ−３−〔３,４,５−トリフルオロフェニル〕−２−メチル−プロペン酸エチルを製造した。無色の油。ＭＳ ２４５（Ｍ＋１)+。
（８ｂ）．（８ａ）のエステル、炭酸カリウム３当量および４−（２−ジメチルアミノエチレン）フェノール１.１当量を、ＤＭＦ中で１５０〜１７５℃で４時間撹拌した。標準処理および精製によって、Ｅ−３−〔３,５−ジフルオロ−４−（４−（２−ジメチルアミノエチレン）フェノキシ）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸エチルを得た。無色の油。ＭＳ ３９０（Ｍ＋１)+。
（８ｃ）．（８ｂ）からのエステルを、変形方法１Ｂによってグアニジドに変換した。無色の固体。融点＞２３０℃。ＭＳ ４０３（Ｍ＋１)+。
【００４７】
実施例９
Ｅ−３−〔３,５−ジフルオロ−４−（４−（２−ジメチルアミノエチレン）フェノキシ）フェニル〕−２−フルオロ−プロペン酸グアニジド二塩酸塩
【化１４】
0004177466.tif 000013
（９ａ）．３,４,５−トリフルオロベンズアルデヒドから出発して、実施例６と同様にして、Ｅ−３−〔３,４,５−トリフルオロフェニル〕−２−フルオロプロペン酸エチルを得た。融点＞５５℃。ＭＳ ２４９（Ｍ＋１)+。
（９ｂ）．（９ａ）のエステル、炭酸カリウム３当量および４−（２−ジメチルアミノエチレン）フェノール１.１当量を、ＤＭＦ中で４時間還流下で加熱した。標準処理および精製によって、Ｅ−３−〔３,５−ジフルオロ−４−（４−（２−ジメチルアミノエチレン）フェノキシ）フェニル〕−２−フルオロ−プロペン酸エチルを得た。無色の油。ＭＳ ３９４（Ｍ＋１)+。
（９ｃ）．（９ｂ）からのエチルエステルを、変形方法１Ｂと同様にして、グアニジドに変換した。無色の固体。融点２１５℃。ＭＳ ４０７（Ｍ＋１)+。
【００４８】
実施例１０
Ｅ−３−〔３,５−ジフルオロ−４−（３−ジメチルアミノフェノキシ）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸グアニジド塩酸塩
【化１５】
0004177466.tif 000014
（10ａ）．（８ａ）からのエステル、炭酸カリウム３当量および３−ジメチルアミノフェノール１.１当量を、ＤＭＦ中において１５０℃で５時間撹拌した。処理および精製後に、Ｅ−３−〔３,５−ジフルオロ−４−（３−ジメチルアミノフェノキシ）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸エチルを単離した。無色の油。ＭＳ ３６２（Ｍ＋１)+。
（１０ｂ）．（１０ａ）からのエステルを、変形方法１Ｂによって、グアニジドに変換した。融点１５０〜１６０℃。ＭＳ ３７５（Ｍ＋１)+。
【００４９】
実施例１１および１２
Ｅ−３−〔２,６−ジフルオロ−４−（３−ジメチルアミノフェノキシ）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸グアニジドおよびＥ−３−〔２,４−ジフルオロ−６−（３−ジメチルアミノフェノキシ）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸グアニジド
【化１６】
0004177466.tif 000015
（１１ａ／１２ａ）：２,４,６−トリフルオロベンズアルデヒドから出発して、実施例(８ａ)と同様にして、Ｅ−３−〔２,４,６−トリフルオロフェニル〕−２−メチル−プロペン酸エチルを合成した。無色の油。ＭＳ ２４５(Ｍ＋１)+。
（１１ｂ／１２ｂ）：（１１ａ／１２ａ）からのエステル、炭酸カリウム３当量および３−ジメチルアミノフェノール１.１当量を、ＤＭＦ中において１５０℃で３時間撹拌した。Ｅ−３−〔２,６−ジフルオロ−４−（３−ジメチルアミノフェノキシ）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸およびＥ−３−〔２,４−ジフルオロ−６−（３−ジメチルアミノフェノキシ）フェニル〕−２−メチル−プロペン酸のエチルエステルの異性体混合物を単離した。無色の油。ＭＳ ３６２（Ｍ＋１)+。
（１１ｃ／１２ｃ）：（１１ｂ／１２ｂ）からのエステルの混合物を、変形方法１Ｂによって、特定のグアニジドに変換しそして混合物として単離した。固体。ＭＳ ３７５（Ｍ＋１)+。
【００５０】
薬理学的データ：
ウサギの赤血球のＮａ+／Ｈ+交換体の阻害剤：
Ｎａ+／Ｈ+交換による赤血球へのＮａ+流入を炎光測光法によって測定することができるようにＮａ+／Ｈ+交換を活性化するために、白色ニュージーランドウサギ(lvanovas)に６週間コレステロールの２％を有する食餌を与えた。血液を耳動脈からとりそしてヘパリンカリウムの２５IU／mlによって非凝血性にした。それぞれの試料の一部を、遠心分離によるヘマトクリットの二重測定に対して使用した。それぞれの場合において１００μｌのアリコートを、赤血球の初期Ｎａ+含量の測定に対して使用した。
アミロリド−感受性ナトリウム流入を測定するために、それぞれの血液試料１００μｌを、高浸透圧塩／シュクロース培地（ミリモル／リットル：１４０ ＮａＣｌ、３ ＫＣｌ、１５０シュクロース、０.１ウアバイン、２０トリス−ヒドロキシメチル−アミノメタン）５ml中でpH７.４および３７℃でそれぞれインキュベートした。それから、赤血球を氷冷ＭｇＣｌ2／ウアバイン溶液（ミリモル／リットル：１１２ＭｇＣｌ2、０.１ウアバイン）で３回洗浄しそして蒸留水２.０ml中で溶血した。細胞内ナトリウム含量を炎光測光法によって測定した。
正味のＮａ+流入は、当初ナトリウムレベルおよびインキュベーション後の赤血球のナトリウム含量の間の差によって計算した。アミロリドにより阻害することのできるナトリウム流入は、アミロリドの３×１０-4モル／リットルを使用しておよび使用しないでインキュベートした後の赤血球のナトリウム含量の差から見出した。この操作はまた、本発明による化合物に対して可能であった。
【００５１】
Ｎａ+／Ｈ+交換体の阻害の結果：
実施例 ＩＣ50〔μmol／リットル〕
１             ＜１
２             ＜１