【手続補正書】
【提出日】平成20年2月4日(2008.2.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
コレステロール、フィトステロール、デスモステロール、トコトリエノール、トコフェロール、ユビキノン、ならびにβ−カロチン、ルテイン、リコピン、アスタキサンチン、ゼアキサンチン、カンタキサンチンのようなカロテノイドおよびキサントフィル、ならびに共役リノール酸のような脂肪酸、ならびにエイコサペンタエン酸、ドコサペンタエン酸およびドコサヘキサエン酸、アラキドン酸、ステアリドン酸、ジホモガンマリノレン酸およびγ−リノレン酸のようなω−３およびω−６高度不飽和脂肪酸、またはそれらの混合物を少なくとも１５％含み、残留有機溶媒を３ｐｐｍ未満しか含有しない、脂質。
【請求項２】
コレステロール、フィトステロール、デスモステロール、トコトリエノール、トコフェロール、ユビキノン、ならびにβ−カロチン、ルテイン、リコピン、アスタキサンチン、ゼアキサンチン、カンタキサンチンのようなカロテノイドおよびキサントフィル、ならびに共役リノール酸のような脂肪酸、ならびにエイコサペンタエン酸、ドコサペンタエン酸およびドコサヘキサエン酸、アラキドン酸、ステアリドン酸、ジホモガンマリノレン酸およびγ−リノレン酸のようなω−３およびω−６高度不飽和脂肪酸、またはそれらの混合物少なくとも１５％含み、残留有機溶媒を３ｐｐｍ未満しか含有しない、抽出溶媒として有機溶媒を用いずに微生物から得られる脂質。
【請求項３】
前記脂質がドコサヘキサエン酸を少なくとも１５％含む、請求項１または２記載の脂質。
【請求項４】
前記脂質が残留有機溶媒を０．２ppm未満しか含まない、請求項３記載の脂質。
【請求項５】
前記脂質が残留有機溶媒を０．２ppm未満しか含まない、請求項１または２記載の脂質。
【請求項６】
抽出溶媒として有機溶媒を使わないで微生物の発酵ブロスから得られる粗脂質。
【請求項７】
前記脂質がω−３高度不飽和脂肪酸を含む、請求項６記載の脂質。
【請求項８】
前記脂質がドコサヘキサエン酸を少なくとも３７％含む、請求項６記載の脂質。
【請求項９】
請求項６〜８のいずれか一項記載の脂質を処理することにより得られる脂質であって、ここで、前記処理が、精製、脱色、脱ろう、脱臭、及びそれらの組合せからなる群から選択される、脂質。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１８】
好ましくは、微生物は、少なくとも約２０重量％の脂質、より好ましくは少なくとも約３０重量％の脂質、そして最も好ましくは少なくとも約４０重量％の脂質を含む。代わりに、少なくとも約２０％、好ましくは少なくとも約３０％、より好ましくは少なくとも約４０％の脂質が、コレステロール、フィトステロール、デスモステロール、トコトリエノール、トコフェロール、ユビキノン、ならびにβ−カロチン、ルテイン、リコピン、アスタキサンチン、ゼアキサンチン、カンタキサンチンのようなカロテノイドおよびキサントフィル、ならびに共役リノール酸のような脂肪酸、ならびにエイコサペンタエン酸、ドコサペンタエン酸およびドコサヘキサエン酸、アラキドン酸、ステアリドン酸、ジホモガンマリノレン酸およびγ−リノレン酸のようなω−３およびω−６高度不飽和脂肪酸、またはそれらの混合物である。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１９】
本発明の１つの特定の態様では、微生物は、コレステロール、フィトステロール、デスモステロール、トコトリエノール、トコフェロール、ユビキノン、ならびにβ−カロチン、ルテイン、リコピン、アスタキサンチン、ゼアキサンチン、カンタキサンチンのようなカロテノイドおよびキサントフィル、ならびに共役リノール酸のような脂肪酸、ならびにエイコサペンタエン酸、ドコサペンタエン酸およびドコサヘキサエン酸、アラキドン酸、ステアリドン酸、ジホモガンマリノレン酸およびγ−リノレン酸のようなω−３およびω−６高度不飽和脂肪酸、またはそれらの混合物を好ましくは含む脂質の混合物を１時間当たりで１リットル当たり少なくとも約０．１グラム（約０．１ｇ／Ｌ／ｈ）、少なくとも約０．２ｇ／Ｌ／ｈ、さらに好ましくは少なくとも約０．３ｇ／Ｌ／ｈ、最も好ましくは少なくとも約０．４ｇ／Ｌ／ｈで生産することができる。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２１】
（発明の詳細な説明）
本発明は、微生物から脂質を抽出、回収、単離、または取得するプロセスに関する。本発明のプロセスは、様々な微生物から様々な脂質（例えばコレステロール、フィトステロール、デスモステロール、トコトリエノール、トコフェロール、ユビキノン、ならびにβ−カロチン、ルテイン、リコピン、アスタキサンチン、ゼアキサンチン、カンタキサンチンのようなカロテノイドおよびキサントフィル、ならびに共役リノール酸のような脂肪酸、ならびにエイコサペンタエン酸、ドコサペンタエン酸、およびドコサヘキサエン酸、アラキドン酸、ステアリドン酸、ジホモガンマリノレン酸およびγ−リノレン酸またはその混合物のようなω−３およびω−６高度不飽和脂肪酸、より好ましくはドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、および／またはドコサペンタエン酸（ＤＰＡ）（即ちＤＰＡのω−３型）のようなω−３高度不飽和脂肪酸）を抽出すること、特に比較的大量のＤＨＡを含む脂質を該脂質を生産する微生物から抽出すること；ならびにアラキドン酸やドコサペンタエン酸（ＤＰＡ）（即ちＤＰＡのω−６型）のようなω−６高度不飽和脂肪酸を該脂肪酸を生産する微生物から抽出することに適用される。比較的大量のω−３高度不飽和脂肪酸を生産する例示的な微生物が、本願と同一の出願人に譲渡され、いずれもＢａｒｃｋａｙに付与された米国特許第５，３４０，５９４号および第５，３４０，７４２号に開示されている。また、比較的大量のアラキドン酸を生産する例示的な微生物が、本願と同一の出願人に譲渡され、Ｂａｒｃｌａｙに付与された米国特許第５，５８３，０１９号に開示されている。上記の開示された特許はすべて、引用によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２２】
しかしながら、簡潔さのために、この発明の詳細な説明は、ω−３高度不飽和脂肪酸を含む脂質を、該脂質を生産する微生物から抽出するケース、特に、比較的多量のＤＮＡを生産する微生物から脂質を抽出するケースを、便宜および例示の目的で示す。しかしながら、本発明は全体としてそのように限定されるものではなく、当業者には、本発明の概念を、本明細書で論じた技術に従って様々な脂質組成物を生産する他の微生物に適用できることを認識できることは当然である。これらの微生物には、リン脂質；遊離脂肪酸；脂肪酸のトリグリセリドを含む脂肪酸のエステル；ステロール、色素（例えばカロテノイドとオキシカロテノイド）および他の脂質；ならびにフィトステロール、得る語ステロール、リポ酸、およびβ−カロチン、トコトリエノールおよびトコフェロールを含む抗酸化剤のような脂質関連化合物のような様々な脂質を生産する、真菌類、原核生物、藻類および細菌類のような微生物が含まれる。好ましい脂質および脂質関連化合物には、コレステロール、フィトステロール、デスモステロール、トコトリエノール、トコフェロール、ユビキノン、ならびにβ−カロチン、ルテイン、リコピン、アスタキサンチン、ゼアキサンチン、カンタキサンチンのようなカロテノイドおよびキサントフィル、ならびに共役リノール酸のような脂肪酸、ならびにエイコサペンタエン酸、ドコサペンタエン酸およびドコサヘキサエン酸、アラキドン酸、ステアリドン酸、ジホモガンマリノレン酸およびγ−リノレン酸のようなω−３およびω−６高度不飽和脂肪酸、またはそれらの混合物が含まれるが、それらに限定されるわけではない。簡潔さのために、別段述べられていなければ、用語「脂質」は、脂質および／または脂質関連化合物のことを指す。本発明で使用するのに適する可能性のある他の脂質および微生物は、当業者に容易に明らかとなるであろう。