【手続補正書】
【提出日】平成20年8月20日(2008.8.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の化学式で表される18Fで標識したアミノ酸O-(2-[18F]fluoroethyl)-L-Tyrosineの前駆体の製造方法であって、
【化１】
2007106722.tif 000001
R1はカルボキシル機能基の保護基で、arylalkyl基であり；
R2はアミノ機能基の保護基で、carboxyl基であり；
R3は離脱基で、p-tosyloxy，methane sulfonyloxy  基若しくはtrifluoromethanesulfonyloxy基又は臭素基である。
次の（１）ethylene glycol-1,2-ditosylateの製造過程、及び（２）N-tert-butyloxycarbonyl-(O-tosyloxyethyl)-L-tyrosine  benzylester (t-BOC-(O-tosyloxyethyl)-L-Tyr-OBzl)の製造過程からなることを特徴とする18Fで標識したアミノ酸O-(2-[18F]fluoroethyl)-L-Tyrosineの前駆体の製造方法。
（１）ethylene glycol-1,2-ditosylateの製造過程
(i) toluenesulfonyl chloride (TsCl)をpyridine に加え、
(ii) thylene glycolをpyridineに加え、
(iii) ドライアイス-アセトン浴（約-30℃）中で前者を後者に加え、溶液を-18℃に維持して、2〜3日間反応させ、
(iv) 反応終了後氷水中に注いで攪拌して白色固体を析出させ、
(v) 1N HClを加えてＰＨを6〜7に調整し、
(vi) 白色固体を濾過し、methylene chlorideとnormal hexane  の混合溶液中で再結晶化させて精製してethylene glycol-1,2-ditosylateを得る。
反応式は次のとおりである。
【化２】
2007106722.tif 000002
（２）N-tert-butyloxycarbonyl-(O-tosyloxyethyl)-L-tyrosine  benzylester (t-BOC-(O-tosyloxyethyl)-L-Tyr-OBzl)の製造過程
(i) N-tert-butyloxycarbonyl- L-tyrosine benzylester (t-BOC-L-Tyr-OBzl)をpotassium carbonateとethylene glycol-1,2- ditosylate の混合液に加え、更にanhydrous acetonitrileを加えて90℃で約3.5時間攪拌する。
（ii）反応後（１）の溶液から溶剤を蒸発させ、更にchloroformで抽出して収集し、溶剤を減圧除去して固体残渣を得る。
（iii）methylene chlorideで固体残渣を溶解して、シリカゲルコラムでクロマトグラフィーを行って精製し、
流動相に関する初期条件は100%のCH2Cl2で、未反応のethylene glycol-1,2-ditosylateが流出した後、流動相をCH2Cl2/CHCl3=1/1に変更して粗生成物を分離する。
(iv）粗生成物を減圧下で乾燥して、固体生成物を得る。
(v)粗生成物を最小量のCH2Cl2:CHCl3=8/2により再溶解し、（0.1% triethyl amineを加え）シリカゲルコラムのクロマトグラフィーを行って精製する。
移動相に関する初期条件は、CH2Cl2/CHCl3=8/2（0.1% triethyl amineを添加）で油状の淡黄色の純粋なN-tert-butyloxycarbonyl-(O-tosyloxyethyl)-L-tyrosine benzylester (t-BOC-(O-tosyloxyethyl)-L-Tyr-OBzl)が分離され、
(vi) 生成物を2塩化メチルとアルキル溶液中で再結晶して白色固体を得る。
反応式は次のとおりである。
【化３】
2007106722.tif 000003
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】発明の名称
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の名称】18Fで標識したアミノ酸O-(2-[18F]fluoroethyl)-L-Tyrosineの前駆体の製造方法。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００８】
以下において本発明の実施例を説明する：
実施例：18Fの前駆体t-BOC-(O-tosyloxyethyl)-L-Tyr-Obzlを合成する方法。
１．Ethylene glycol-1,2-ditosylateの製造：
（１）toluenesulfonyl chloride (TsCl) １７ｇ (F.W.=190.65，0.089 mol)を採取して
、pyridine ２０ ｍＬを入れた三角フラスコ（Ａ）中に加える。
（２）ethylene glycol １．１ ｍＬ (F.W.=62.07，0.018 mol)を取って、pyridine ３０
ｍＬを入れた三角フラスコ（Ｂ）中に加える。
（３）ドライアイス-アセトン溶液の温度で（約−３０）、三角フラスコ（Ａ）の溶液
を（Ｂ）に加えて、直ちに三角フラスコを−１８に置き、２〜３日間反応させる。
（４）反応完了後、氷水と砕氷を入れた５００ ｍＬのビーカーに、三角フラスコ（Ｂ）
の反応物を加えて攪拌すると白い固体が析出する。
（５）適量の1N HClを上記のビーカーに入れて、ＰＨ６〜７に調整する。
（６）濾過によって白い固体が得られた後、methylene chlorideとnormal hexaneの混合
溶液中で再結晶化させて精製すると収率８０％でethylene glycol-1,2-ditosylate ５．
３３ ｇが得られた。
【化４】
2007106722.tif 000004
ethylene glycol-1,2-ditosylateの合成反応式。
２. t-BOC-(O-tosyloxyethyl)-L-Tyr-Obzlの製造：
t-BOC-L-Tyr-Obzlを原料として、t-BOC-(O-tosyloxyethyl)-L-Tyr-Obzlを合成する反応過
程は以下の化学式５の通りである：
【化５】
2007106722.tif 000005
t-BOC-L-Tyr-Obzlを原料としてt-BOC-(O-tosyloxyethyl)-L-Tyr-Obzlを合成する反応式。
(１) N-tert-butyloxycarbonyl- L-tyrosine benzylester (t-BOC-L-Tyr-OBzl) ４５０
ｍｇ ( F.W.=361, 1.24 mmol )を２０ ｍｇの potassium carbonateと１．３８４ｇの et
hylene glycol-1,2- ditosylate (F.W.=370.35，3.73 mmol)を容量５０ ｍＬの丸底フラ
スコに入れて、更に２５ ｍＬの anhydrous acetonitrileを加えて９０で３．５時間程
度攪拌する。
（２）反応終了後、回転する蒸発器（Rota vapor）で溶剤を蒸発させていって、更にchlo
roformで抽出を行う (5ｍＬ× ３)。Chloroform抽出物を取り出して、負圧の下で溶剤を
除去する。
（３）最小量のmethylene chlorideで残留物を溶解して、シリカゲルコラムでクロマトグ
ラフィーを行う；移動相に関する初期条件は１００％のＣＨ2Ｃｌ2で、ethylene glycol-
1,2-ditosylateが流出した後、移動相をＣＨ2Ｃｌ2／CHCl3＝１／１に変更すると粗精製
物が溶離され出したので、更に減圧して乾燥させて固体状の粗精製物が得られた。
（４）この粗精製物を最小量のＣＨ2Ｃｌ2：ＣＨＣｌ3＝８／２の溶解溶剤でシリカゲル
コラムのクロマトグラフィーを行う。移動相に関する初期条件はＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨＣｌ3
＝８／２（０．１％ triethyl amine）を加えると油状の淡い黄色物質(３９８ ｍｇ)とし
て純粋な
N-tert-butyloxycarbonyl-(O-tosyloxyethyl)-L-tyrosine  benzylester (t-BOC-(O-tosy
loxyethyl)-L-Tyr-OBzl)が溶離され、２塩化メチルと自身のアルキル溶液の中で再結晶し
て精製すると融点が８５〜８６で、収率６０．１％の白色の固体が得られた。
（５）Nuclear Magnetic Resonance (NMR)：t-BOC-(O-tosyloxyethyl)-L-Tyr-OBzl 20 ｍ
ｇを採取し、０．６ｍＬ CDCl3に溶解して1H-NMR spectrum（化学式５）を測定する。1H 
NMR (CDCl3) ・.80 (d, 2H, J=8.4 Hz, Haryl), 7.31 (m, 7H, Haryl), 6.89 (d, 2H, J
=8.4 Hz, Haryl), 6.62 (d, 2H, J=8.4 Hz, Haryl), 5.15 (d, 1H, 12.2 Hz, CH of benz
yl), 5.08 (d, 1H, 12.2 Hz, CH of benzyl), 4.92 (d, 1H, J=8.0Hz, NH), 4.54 (m, 1H
, CH), 4.33 (t, 2H, J=4.6 Hz, CH2), 4.07 (t, 2H, J=4.6 Hz, CH2), 2.99 (d, 2H, J=
5.8 Hz, CH2 of Tyr), 2.43 (s, 3H, CH3 of toluene), 1.39 (s, 9H, CH3 of t-BOC)。
（６）元素分析：t-BOC-(O-tosyloxyethyl)-L-Tyr-Obzlの分子式は、C30H35NO8Sで、元素
分析計算値はC, 63.27; H, 6.15; N, 2.46、実測値は：C, 63.34; H, 5.62; N, 2.33であ
った。