(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
0004195512.tif 000033
〔式中、
R1は水素、ハロゲン、-CF3、C1〜C6アルキルおよびC1〜C6アルコキシよりなる群から各々独立して選択される置換基１〜３個であり；
R2は水素、C1〜C4アルキルおよびC1〜C4アルコキシよりなる群から選択され；
R3は、
0004195512.tif 000034
（ここで、R4は水素、C1〜C4アルキルおよび-CF3よりなる群から選択される）よりなる群から選択される基であり；
Ar1は、
0004195512.tif 000035
（ここで、R5は水素、ハロゲン、-CF3、C1〜C6アルキルおよびC1〜C6アルコキシよりなる群から各々独立して選択される置換基１〜３個であり；R6は水素、ハロゲン、C1〜C6アルキルおよびC1〜C6アルコキシよりなる群から各々独立して選択される置換基１〜２個である）よりなる群から選択される基であり；
R7およびR8は水素であるか、またはそれらが連結している窒素と一緒になってピペリジン、モルホリン、ピペラジン、４−メチルピペラジンまたはピロリジン環を形成する〕
の化合物またはその立体異性体または製薬上許容しうる塩。
【請求項２】
R3が基：
0004195512.tif 000036
（式中R4は請求項１と同様に定義される）である請求項１記載の化合物。
【請求項３】
R3が基：
0004195512.tif 000037
（式中R4は請求項１と同様に定義される）である請求項１記載の化合物。
【請求項４】
R4が水素である請求項３記載の化合物。
【請求項５】
R2がメトキシである請求項４記載の化合物。
【請求項６】
R1が3,4−ジクロロである請求項５記載の化合物。
【請求項７】
R7およびR8が水素である請求項６記載の化合物。
【請求項８】
（Ｒ）−または（Ｓ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジンまたはその混合物である請求項１記載の化合物。
【請求項９】
（Ｒ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジンである請求項８記載の化合物。
【請求項１０】
化合物が（Ｒ）−または（Ｓ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−ピリド−３−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジンまたはその混合物である請求項１記載の化合物。
【請求項１１】
化合物が（Ｒ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−ピリド−３−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジンである請求項１０記載の化合物。
【請求項１２】
請求項１記載の化合物および製薬上許容しうる担体を含有する医薬組成物。
【請求項１３】
喘息治療用の医薬組成物の調製のための、場合により製薬上許容しうる担体と組み合わせた、請求項１記載の化合物の使用。
【請求項１４】
咳の治療用の医薬組成物の調製のための、場合により製薬上許容しうる担体と組み合わせた、請求項１記載の化合物の使用。
【請求項１５】
気管支炎の治療用の医薬組成物の調製のための、場合により製薬上許容しうる担体と組み合わせた、請求項１記載の化合物の使用。
【請求項１６】
疼痛の治療用の医薬組成物の調製のための、場合により製薬上許容しうる担体と組み合わせた、請求項１記載の化合物の使用。
【請求項１７】
医薬の調製のための請求項１記載の化合物の使用。
【請求項１８】
式：
0004195512.tif 000038
（式中R1、R2およびR3は後記のとおりであり、そしてL1はクロロ、ブロモ、ヨード、メシレートおよびトシレートよりなる群から選択される脱離基である）の化合物を、式：
0004195512.tif 000039
（式中、Ar1、R7およびR8は後記のとおりである）の化合物と反応させ、そして、場合により、製薬上許容しうる塩を形成させるか；あるいは、式：
0004195512.tif 000040
（式中R1、Ar1、R7およびR8は後記のとおりである）の化合物を、式：
0004195512.tif 000041
（式中、R2およびR3は後記のとおりであり、そしてY1はヒドロキシル；Ｏ−ヒドロキシスクシンイミドおよびＯ−ヒドロキシベンズトリアゾールよりなる群から選択される活性エステル；クロロ、ブロモおよび無水物よりなる群から選択される活性化脱離基；または混合無水物である）の化合物と反応させ、そして、場合により製薬上許容しうる塩を形成させることからなる、式：
0004195512.tif 000042
〔式中、
R1は水素、ハロゲン、-CF3、C1〜C6アルキルおよびC1〜C6アルコキシよりなる群から各々独立して選択される置換基１〜３個であり；
R2は水素、C1〜C4アルキルおよびC1〜C4アルコキシよりなる群から選択され；
R3は、
0004195512.tif 000043
（ここで、R4は水素、C1〜C4アルキルおよび-CF3よりなる群から選択される）よりなる群から選択される基であり；
Ar1は、
0004195512.tif 000044
（ここで、R5は水素、ハロゲン、-CF3、C1〜C6アルキルおよびC1〜C6アルコキシよりなる群から各々独立して選択される置換基１〜３個であり；R6は水素、ハロゲン、C1〜C6アルキルおよびC1〜C6アルコキシよりなる群から各々独立して選択される置換基１〜２個である）よりなる群から選択される基であり；
R7およびR8は水素であるか、またはそれらが連結している窒素と一緒になってピペリジン、モルホリン、ピペラジン、４−メチルピペラジンまたはピロリジン環を形成する〕
の化合物またはその立体異性体または製薬上許容しうる塩の調製方法。
【発明の詳細な説明】
本発明は、新規な複素環置換ピロリジンアミド誘導体（以下式（１）の化合物と称する）およびその立体異性体および製薬上許容しうるその塩およびタキキニン受容体拮抗剤としてのその使用に関する。このような拮抗剤は喘息、咳および気管支炎を含むタキキニン媒介の疾患および症状の治療において有用である。
発明の背景
ある種の置換ピロリジン誘導体はタキキニン受容体拮抗剤として知られている。われわれは意外にも本発明の複素環置換ピロリジンアミド誘導体が既知化合物よりも大幅に代謝を受けにくいことを発見した。
発明の要旨
本発明は下記式（１）：
0004195512.tif 000002
〔式中、
R1は水素、ハロゲン、-CF3、C1〜C6アルキルおよびC1〜C6アルコキシよりなる群から各々独立して選択される置換基１〜３個であり；
R2は水素、C1〜C4アルキルおよびC1〜C4アルコキシよりなる群から選択され；
R3は、
0004195512.tif 000003
（ここで、R4は水素、C1〜C4アルキルおよび-CF3よりなる群から選択される）よりなる群から選択される基であり；
Ar1は下記：
0004195512.tif 000004
（ここで、R5は水素、ハロゲン、-CF3、C1〜C6アルキルおよびC1〜C6アルコキシよりなる群から各々独立して選択される置換基１〜３個であり；R6は水素、ハロゲン、C1〜C6アルキルおよびC1〜C6アルコキシよりなる群から各々独立して選択される置換基１〜２個である）よりなる群から選択される基であり；
R7およびR8は水素であるか、またはそれらが連結している窒素と一緒になってピペリジン、モルホリン、ピペラジン、４−メチルピペラジンまたはピロリジン環を形成する〕
の新規な複素環置換ピロリジンアミド誘導体およびその立体異性体および製薬上許容しうる塩に関する。
当業者の知るとおり、式（１）の化合物は立体異性体として存在する。式（１）の化合物の１つを本明細書中で指す場合、いずれかの特定の立体異性体または立体異性体の混合物を包含する意味とする。記載する際には化合物は（＋）−および（−）−の記載法またはCahn-Ingold-Prelogの（Ｒ）−または（Ｓ）−の記載法に従って、式（１）の化合物およびその中間体の立体化学を記載する。特に本発明の新規な複素環置換ピロリジンアミド誘導体はピロリジンの３位において無対称であり、（Ｒ）−型または（Ｓ）−型として存在してよく、またはその混合物として存在する。
特定の立体異性体はエナンチオマー的に純粋な、または、エナンチオマー濃縮された出発物質を使用して立体特異的合成を行うことにより調製できる。出発物質または生成物の特定の立体異性体はキラル固定相上のクロマトグラフィー、酵素的分割、または目的に応じて使用される試薬により形成される付加塩の分別結晶のような当業者の知る方法により分割採取できる。
特定の立体異性体を分割採取する有用な方法はStereochemistry of Organic Compounds, E. L. Eliel and S. H. Wilen, Wiley（1994）およびEnantiomers, Racemates, and Resolutions, J. Jacques, A. Collet, and S. H. Wilen, Wiley（1981）に記載されている。
当業者の知るとおり、式（１）の化合物の一部は互変異性体として存在してよい。式（１）の化合物の互変異性体の１つを本発明で指す場合は、いずれの互変異性体およびその混合物をも包含する意味とする。
本明細書においては、
ａ）「ハロゲン」という用語はフッ素原子、塩７素原子、臭素原子またはヨウ素原子を指し；
ｂ）「C1〜C6アルキル」という用語は炭素原子１〜６個を含む分枝鎖または直鎖のアルキル基、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル等を指し；
ｃ）「C1〜C4アルキル」という用語は炭素原子１〜４個を含む分枝鎖または直鎖のアルキル基、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル等を指し；
ｄ）「C1〜C6アルコキシ」という用語は炭素原子１〜６個を含む直鎖または分枝鎖のアルコキシ基、例えば、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ、ｓ−ブトキシ、ｔ−ブトキシ、ペントキシ、ヘキソキシ等を指し；
ｅ）「C1〜C4アルコキシ」という用語は炭素原子１〜４個を含む直鎖または分枝鎖のアルコキシ基、例えば、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ、ｓ−ブトキシ、ｔ−ブトキシ等を指し；
0004195512.tif 000005
ｉ）製造例および実施例では以下の用語はそれぞれ所定の意味を有するものとし、すなわち、「ng」はナノグラム；「μg」はマイクログラム；「mg」はミリグラム；「ｇ」はグラム；「kg」はキログラム；「nmole」または「nmol」はナノモル；「mmol」はミリモル；「mol」はモル；「μL」はマイクロリットル；「mL」はミリリットル；「Ｌ」はリットル；「Rf」は保持ファクター；「℃」はセルシウス度；「bp」は沸点；「mmHg」はミリメートル水銀柱；「mp」は融点；「dec」は分解；
0004195512.tif 000006
は１デシメーターのセルで得られた20℃のナトリウムＤ線の比旋光度；「ｃ」はｇ／mL表示の濃度；「nM」はナノモル；「μM」はマイクロモル；「mM」はミリモル；「Ｍ」はモル；「psi」はポンド／平方インチ；「rpm」は一分当たりの回転数；「HPLC」は高速液体クロマトグラフィー；「HRMS」は高解像度質量スペクトル；「THF」はテトラヒドロフラン；「塩水」は飽和塩化ナトリウム水溶液；「L.O.D.」は乾燥減量；「μCi」はマイクロキューリー；「i.p.」は腹腔内；「i.v.」は静脈内；および「DPM」は分当たり崩壊を指し；
ｊ）下記構造：
0004195512.tif 000007
は基が１位で連結し、Ｒで示される置換基が２、３、４、５または６位のいずれに連結することもできることを指し；
ｋ）下記構造：
0004195512.tif 000008
はピリジルまたは置換ピリジルを指し、基は、２位、３位または４位のいずれで連結することもでき、また更に、基が２位で連結している場合は、Ｒで示される置換基は３、４、５または６位のいずれに連結することもできることを指し、基が３位で連結している場合は、Ｒで示される置換基は２、４、５または６位のいずれに連結することもできることを指し、また、基が４位で連結している場合は、Ｒで示される置換基は２、３、５または６位のいずれに連結することもできることを指し；
１）「エナンチオマー余過剰」または「ee」という用語はあるエナンチオマーE1が、２種のエナンチオマーの混合物E1＋E2中で、
｛（E1−E2）÷（E1＋E2）｝×100％＝ee
を満足するように余剰である分のパーセントを指し；
ｍ）「製薬上許容しうるその塩」とは酸付加塩または塩基付加塩のいずれかを指す。
「製薬上許容しうる酸付加塩」という表現は式（１）で示される塩基化合物のいずれかの非毒性の有機または無機の酸の付加塩に適用するものとする。適当な塩を形成する代表的な無機酸には塩酸、臭化水素酸、硫酸およびリン酸、および、酸金属塩例えばオルトリン酸二水素ナトリウムおよび硫酸水素カリウムが包含される。適当な塩を形成する代表的な有機酸にはモノ−、ジ−、およびトリカルボン酸が包含される。このような酸の代表例は、例えば、酢酸、グリコール酸、乳酸、ピルビン酸、マロン酸、コハク酸、グルタール酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、安息香酸、ヒドロキシ安息香酸、フェニル酢酸、ケイ皮酸、サリチル酸、２−フェノキシ安息香酸、ｐ−トルエンスルホン酸およびスルホン酸類、例えば、ベンゼンスルホン酸、メタンスルホン酸、および２−ヒドロキシエタンスルホン酸である。このような塩は水和の形態または実質的に無水の形態のいずれかで存在できる。一般的に上記化合物の酸付加塩は水および種々の親水性有機溶媒に可溶であり、その遊離の塩基形態と比較して一般的に高い融点を示す。
「製薬上許容しうる塩基付加塩」という表現は、式（１）の化合物のいずれかの非毒性の有機または無機の塩基の付加塩に適用するものとする。適当な塩を形成する代表的な塩基にはナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムまたはバリウムの水酸化物のようなアルカリ金属またはアルカリ土類金属の水酸化物；アンモニア、および脂肪族、脂環族または芳香族の有機アミン類、例えばメチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミンおよびピコリンが包含される。一塩基性または二塩基性の塩のいずれかを上記化合物で形成できる。
特定の有用性を有する構造関連化合物のいずれの群についても、特定の基と構造はその最終用途において式（１）の化合物にとって好ましいものである。
式（１）の好ましい実施態様を以下に示す。
１）R2がメトキシである化合物が好ましく；
２）R1が3,4−ジクロロである化合物が好ましく；
３）R3が下記：
0004195512.tif 000009
（式中R4は前に定義したとおりである）の基から選択される基である化合物が好ましく；
４）R3が下記：
0004195512.tif 000010
（式中R4は前に定義したとおりである）の基である化合物が好ましく；
５）R7およびR8が水素である化合物が好ましい。
式（１）の更に好ましい実施態様は式（１）の好ましい実施態様１〜５の１つまたは２つ以上を要件とするか、または、本明細書に示す実施例を参照することにより選択できる。
本発明に含まれる化合物の代表例を以下に示す。例はともにピロリジンの３位における化合物の（Ｒ）−異性体および（Ｓ）−異性体およびその混合物の双方を包含する。ここに列挙するものは代表的なものであり、本発明の範囲を限定する意図はない。
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジメトキシフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（３−メトキシフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（３−クロロフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジフルオロフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（３−フルオロフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（４−フルオロフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジメチルフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−フェニルピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（４−トリフルオロメチルフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−（ピリド−３−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−メトキシフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−（ピリド−３−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（３−メトキシフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−（ピリド−３−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−（ピリド−３−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（３−クロロフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−（ピリド−３−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジフルオロフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−（ピリド−３−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（３−フルオロフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−（ピリド−３−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（４−フルオロフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−（ピリド−３−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジメチルフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−（ピリド−２−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−メトキシフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−（ピリド−２−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（３−メトキシフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−（ピリド−２−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−（ピリド−２−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（３−クロロフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−（ピリド−２−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジフルオロフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−（ピリド−２−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（３−フルオロフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−（ピリド−２−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（４−フルオロフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−（ピリド−２−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジメチルフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−（ピリド−２−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−フェニルピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−（ピリド−４−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−メトキシフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−（ピリド−４−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（３−メトキシフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−（ピリド−４−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−（ピリド−４−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（３−クロロフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−（ピリド−４−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジフルオロフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−（ピリド−４−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（３−フルオロフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−（ピリド−４−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（４−フルオロフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−（ピリド−４−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジメチルフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−（ピリド−４−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−フェニルピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（５−メチル−1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（５−トリフルオロメチル−1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（4H−トリアゾール−４−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン；
１−（３−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン；
１−（２−メチル−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−５−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−（モルホリン−４−イルカルボキサミド）ピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−（ピロリジン−１−イルカルボキサミド）ピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−（ピペリジン−１−イルカルボキサミド）ピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−（ピペラジン−１−イルカルボキサミド）ピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン；
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−（４−メトキシピペラジン−１−イルカルボキサミド）ピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン。
上記式（１）の化合物を調製するための一般的合成操作を反応スキームＡ．１およびＡ．２に示す。試薬および出発物質は当業者が容易に入手できるものである。反応スキームＡ．１およびＡ．２においては全ての置換基は特段の記載がない限り前に定義したとおりである。
0004195512.tif 000011
反応スキームＡ．１、工程１では、式２の適切な３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンのヒドロキシ基を適切な脱離基L1に変換し、式２ａの３−（２−L1−エチル）ピロリジンを得る。式２の適切な３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンはR1、R2およびR3が式（１）の最終生成物において望ましいものである。式２の適切な３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンはまた式（１）の最終生成物において望ましい立体化学を有する。式（２）の適切な化合物は本明細書に記載のとおり、また米国特許No.５，340,822号およびPCTWO94／26735に記載のとおり製造できる。適切な脱離基L1は式３のピペリジンと置き換えられて式（１）の化合物または式（１）の保護された化合物を与える基である。適切な脱離基には例えばクロロ、ブロモ、ヨード、メシレート、トシレート等が包含されるがこれらに限定されず、またメシレートが好ましい。ヒドロキシル基からクロロ、ブロモ、ヨード、メシレートおよびトシレートのような脱離基への変換は当業者の知るとおりである。
例えば、L1がブロモである化合物は式２の適切な３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンを４臭化炭素1.0〜1.5モル当量およびトリフェニルホスフィン1.0〜1.75モル当量と接触させることにより形成する（P. J. Kocienski等，J. Org. Chem. 42, 353-355（1977））。反応は式２の３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンをジクロロメタンまたはクロロホルムのような適当な溶媒中四臭化炭素と混合し、次にジクロロメタンまたはクロロホルムのような適当な溶媒中のトリフェニルホスフィンの溶液を添加することにより行う。一般的に反応は−１０℃〜周囲温度の温度で行う。一般的に反応には５分〜24時間を要する。生成物は抽出、蒸発、磨砕、クロマトグラフィーおよび再結晶のような当該分野でよく知られた方法で単離精製できる。
L1がブロモである化合物はまた式２の適切な３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンを僅かにモル過剰のトリフェニルホスフィンジブロミドと接触させることによっても形成される（R. F Borch等，J. Am. Chem. Soc., 99,1612-1619（1977））。反応はテトラヒドロフランおよびジエチルエーテルのような適当な溶媒中で行う。反応はピリジンのような適当な塩基の存在下に行う。一般的に反応は０℃〜50℃の温度で行う。一般的に反応は５分〜24時間を要する。生成物は抽出、蒸発、磨砕、クロマトグラフィーおよび再結晶のような当業者のよく知る方法で単離精製できる。
L1がメシレートである化合物は式２の適切な３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンを１〜２モル当量のメタンスルホニルクロリドに接触させることにより形成する。反応はジクロロメタン、クロロホルム、トルエン、ベンゼンまたはピリジンのような適当な実質的に無水の溶媒中で行う。反応はトリエチルアミン、N,N−ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリンまたはピリジンのような適当な塩基１〜５モル当量の存在下に行う。一般的に反応は−20℃〜50℃の温度で行う。一般的に反応には１時間〜24時間を要する。生成物は抽出、蒸発、磨砕、クロマトグラフィーおよび再結晶のような当業者のよく知る方法で単離精製できる。
L1がヨードである式２ａの物はL1がメシレート、クロロまたはブロモである式２ａの化合物から、Finkelstein反応のような交換反応により製造できる。
例えば、L1がメシレート、クロロまたはブロモである式２ａの化合物をヨウ化ナトリウムまたはヨウ化カリウムのようなヨウ化物塩1.0〜10.0モル当量と接触させる。反応はトルエンまたはブタノンのような適当な溶媒中で行う。一般的に反応は周囲温度〜溶媒還流温度の温度で行う。一般的に反応には１〜24時間を要する。生成物は抽出、蒸発、磨砕、クロマトグラフィーおよび再結晶のような当業者のよく知る方法で単離精製できる。
反応スキームＡ．１の工程２では、式２ａの適切な３−（２−L1−エチル）ピロリジンを式３の適切なピペリジン化合物またはその塩と反応させ式（１）の保護された化合物を得る。式３の適切なピペリジン化合物はAr1、R7およびR8が式（１）の最終生成物において望ましいものである。
例えば、式２ａの適切な３−（２−L1−エチル）ピロリジンを式３の適切なピペリジン化合物またはその塩と接触させ、式（１）の化合物を得る。反応はテトラヒドロフラン、ピリジン、アセトニトリル、トルエンまたはジメチルホルムアミドのような適当な実質的に無水の溶媒中、トリエチルアミン、ピリジンまたはN,N−ジイソプロピルエチルアミンのような適当な塩基1.0〜6.0モル当量を用いて行う。式３の適切なピペリジンの塩を用いる場合は、更にモル当量の適切な塩基を用いる。反応はヨウ化ナトリウムまたはヨウ化カリウムのようなヨウ化物塩を触媒量、0.1〜0.5モル当量添加することにより促進することができる。一般的に反応は周囲温度〜溶媒還流温度の温度で行う。一般的に反応には１〜72時間を要する。生成物は抽出、蒸発、磨砕、クロマトグラフィーおよび再結晶のような当業者のよく知る方法で単離精製できる。
あるいは、トルエン／水混合物、酢酸エチル／水混合物またはテトラヒドロフラン／水混合物のような適当な混合溶媒中、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム、炭酸カリウムまたは重炭酸カリウムのような適当な塩基1.0〜6.0モル当量を用いて行う。上記したとおり、式３の適切なピペリジンの塩を用いる場合は、更にモル当量の適当な塩基を用いる。反応はヨウ化ナトリウムまたはヨウ化カリウムのようなヨウ化物塩を触媒量、0.1〜0.5モル当量添加することにより促進してよい。一般的に反応は周囲温度〜混合溶媒還流温度の温度で行う。一般的に反応には１〜150時間を要する。生成物は抽出、蒸発、磨砕、クロマトグラフィーおよび再結晶のような当業者のよく知る方法で単離精製できる。
更に、式（１）の化合物の製薬上許容しうる塩は当業者のよく知る方法により式（１）の化合物から容易に製造される。
0004195512.tif 000012
反応スキームＡ．２の工程１では、構造18の適切な３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンのアミン官能基を保護して構造４の保護された３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンを得る。構造18の適切な３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンは式（１）の最終生成物においてR1が望ましいものである。構造18の適切な３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンはまた式（１）の最終生成物において望ましい立体化学を有する。適当なアミン保護基の選択は、T. GreeneのProtecting Groups in Organic Synthesisに記載されており、当業者の知るとおりである。スキームＡ．２の工程１では、ｔ−ブトキシカルボニルのようなカーバメート保護基の使用が好ましい。
反応スキームＡ．２の工程２では、構造４の保護された３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンのヒドロキシ基を、反応スキームＡ．１の工程１においてヒドロキシ基から脱離基L1への変換について記載したとおり、適切な脱離基L2に変換して式４ａの３−（２−L2−エチル）ピロリジンを得る。反応スキームＡ．２の工程２では、適切な脱離基L2はクロロ、ブロモ、ヨードおよびメシレートを包含する。
反応スキームＡ．２の工程３では、式４ａの３−（２−L2−エチル）ピロリジンを、反応スキームＡ．１の工程２で記載したとおり式３の適切なピペリジン化合物と反応させて、構造８の保護された３−（２−ピペリジン−１−イル）エチル）ピロリジンを得る。式３の適切なピペリジン化合物は反応スキームＡ．１の工程２に記載したとおりである。
反応スキームＡ．２の工程４では、構造８の保護された３−（２−ピペリジン−１−イル）エチル）ピロリジンを脱保護して構造９の３−（２−ピペリジン−１−イル）エチル）ピロリジンまたはその塩を得る。適当なアミン保護基の除去はT. GreeneのProtecting Groups in Organic Synthesisに記載されており、当業者の知るとおりである。
反応スキームＡ．２の工程５では、構造９の３−（２−ピペリジン−１−イル）エチル）ピロリジンまたはその塩を構造10の適切な酸誘導体でアロイル化して、式（１）の最終生成物を得る。構造10の適切な酸誘導体は、式（１）の最終生成物においてR2およびR3が望ましく、Y1がヒドロキシル；Ｏ−ヒドロキシスクシンイミドまたはＯ−ヒドロキシベンズトリアゾールのような活性エステル；クロロ、ブロモのような活性化脱離基であるもの；または、無水物を形成する構造10の他の酸誘導体；または混合無水物である。
例えば構造９の３−（２−ピペリジン−１−イル）エチル）ピロリジンまたはその塩をＯ−ヒドロキシスクシンイミドまたはＯ−ヒドロキシベンズトリアゾールおよびカップリング剤例えばジシクロヘキシルカルボジイミドまたは１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩と、ついで、Y1がヒドロキシである構造10の適切な酸誘導体0.9〜1.3モル当量と接触させる。反応はジクロロメタンまたはクロロホルムのような適当な溶媒中で行う。反応は、カップリング剤または構造９の３−（２−ピペリジン−１−イル）エチル）ピロリジンの塩を使用する場合は、必要に応じて塩基の存在下に行い、各々1.0〜1.1当量を使用する。適当な塩基には、Ｎ−メチルモルホリン、トリエチルアミンおよびN,N−ジイソプロピルエチルアミンが包含される。反応は一般的に−10℃〜周囲温度の温度で行う。一般的に、反応には１〜24時間を要する。生成物は抽出、蒸発、磨砕、クロマトグラフィーおよび再結晶のような当業者のよく知る方法で単離精製できる。
また例えば、構造９の３−（２−ピペリジン−１−イル）エチル）ピロリジンまたはその塩をハロゲン化物、無水物、または混合無水物の形態の構造10の適切な酸誘導体１〜1.1モル当量と接触させる。反応はテトラヒドロフラン、ジクロロメタン、アセトン、酢酸エチル、トルエンまたはジエチルエーテルのような適当な溶媒中で行う。反応はＮ−メチルモルホリン、炭酸ナトリウム、トリエチルアミン、N,N−ジイソプロピルエチルアミン、炭酸カリウムまたは重炭酸ナトリウムのような塩基の存在下に行う。反応は一般的に−78℃〜周囲温度の温度で行う。一般的に反応には１〜24時間を要する。生成物は抽出、蒸発、磨砕、クロマトグラフィーおよび再結晶のような当業者のよく知る方法で単離精製できる。
あるいは、例えば構造９の３−（２−ピペリジン−１−イル）エチル）ピロリジンまたはその塩をハロゲン化物、無水物、または混合無水物の形態の構造10の適切な酸誘導体１〜1.1モル当量と、Schotten-Baumann条件下に接触させる。反応はトルエン／水、アセトン／水、テトラヒドロフラン／水または酢酸エチル／水のような適当な混合溶媒中で行う。反応は、炭酸カリウム、重炭酸カリウム、重炭酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウムのような塩基の存在下に行う。反応は一般的に−20℃〜50℃の温度で行う。一般的に反応には15分〜24時間を要する。生成物は抽出、蒸発、磨砕、クロマトグラフィーおよび再結晶のような当業者のよく知る方法で単離精製できる。
更に式（１）の化合物の製薬上許容しうる塩は当業者の知る方法により式（１）の化合物から容易に製造される。
反応スキームＢは反応スキームＡ．１において出発物質として使用した構造２のアルコールおよび反応スキームＡ．２で出発物質として使用した構造18の３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンの製造のための一般的方法である。試薬および出発物質は当業者が容易に入手できるものである。反応スキームＢにおいては、全ての置換基は特段の記載がない限り前に定義したとおりである。
0004195512.tif 000013
反応スキームＢの工程１では、構造５の適切なニトリルをエチルブロモアセテートでビスアルキル化して、構造14のニトリルビスエステル化合物を得る。構造５の適切なニトリルは式（１）の最終生成物においてR1が望ましいものである。
例えば構造５の適切なニトリルをエチルブロモアセテート2.0〜3.0モル当量と接触させる。反応はナトリウムビス（トリメチルシリル）アミドまたはリチウムジイソプロピルアミドのような適当な塩基約2.0〜3.0モル当量の存在下に行う。反応はテトラヒドロフランのような適当な溶媒中で行う。反応は一般的に−78℃〜０℃の温度で行う。一般的に反応には１〜72時間を要する。生成物は抽出、蒸発、磨砕、クロマトグラフィーおよび再結晶のような当業者のよく知る方法で単離精製できる。
反応スキームＢの工程２では、構造14のニトリルビスエステル化合物を還元し環化して、構造15の５−オキソ−３−酢酸エステルピロリジンを得る。環化は還元後に自発的に起こるか、または、中間体アミンの単離後の別工程で行ってよい。
例えば、構造14のニトリルエステル化合物を、過剰量の適切な還元剤、例えば塩化コバルト（II）六水和物の存在下のナトリウムボロハイドライド；適当な触媒、例えばラネーニッケルまたは酸化白金の存在下の水素；またはボラン錯体、例えばボランジメチルスルフィド錯体と、接触させる。
塩化コバルト存在下のナトリウムボロハイドライドを使用する場合は、反応はメタノール、またはエタノールのような適当な溶媒中に行う。反応は一般的に０℃〜50℃の温度で行う。一般的に反応には１〜72時間を要する。一般的に環化は上記条件下で自発的に起こる。生成物は水性の酸による抽出、蒸発、磨砕、クロマトグラフィーおよび再結晶のような当業者のよく知る方法で単離精製できる。
ラネーニッケルを使用する場合は、反応は、エタノール／水性水酸化アンモニウム水溶液またはメタノール／水酸化アンモニウム水溶液のようなアンモニア含有の適当な溶媒中で行う。反応は一般的に周囲温度〜70℃の温度で行う。反応はParr水素化装置のような加圧下に反応を行うために設計された装置中、15psi〜300psiの圧力で水素を用いて行う。一般的に環化は上記条件下で自発的に起こる。濾過または蒸発により触媒を慎重に除去することにより生成物を単離できる。生成物は抽出、蒸発、磨砕、クロマトグラフィーおよび再結晶のような当業者のよく知る方法で単離精製できる。
酸化白金を使用する場合は、反応はエタノール、メタノール、クロロホルム、エタノール／クロロホルム混合物、またはメタノール／クロロホルム混合物のような適当な溶媒中実施する。反応は一般的に周囲温度〜50℃の温度で行う。反応はParr水素化装置のような加圧下に反応を行うために設計された装置中、15psi〜120psiの圧力で水素を用いて行う。一般的にアミン中間体は上記条件下で得られ、濾過または蒸発により触媒を慎重に除去することにより生成物が単離される。アミン中間体はエタノール、メタノール、トルエンまたはクロロベンゼンのような適当な溶媒中加熱することにより環化する。反応は一般的に50℃〜溶媒還流温度の温度で行う。一般的に反応には８〜48時間を要する。生成物は抽出、蒸発、磨砕、クロマトグラフィーおよび再結晶のような当業者のよく知る方法で単離精製できる。
あるいは例えば構造14のニトリルビスエステル化合物をボランまたはボランジメチルスルフィド錯体のようなボラン錯体と接触させる。反応はジエチルエーテルまたはテトラヒドロフランのような適当な溶媒中行う。反応は一般的に−20℃〜溶媒還流温度の温度で行う。一般的に反応には１〜72時間を要する。生成物はクエンチング、抽出、蒸発、磨砕、蒸留、クロマトグラフィーおよび再結晶のような当業者のよく知る方法で単離精製できる。
反応スキームＢの工程３において、構造15の５−オキソ−３−酢酸エステルピロリジンを還元して構造18の３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンとする。
例えば、構造15の５−オキソ−３−酢酸エステルピロリジンをリチウムアルミニウムハイドライド、水素化アルミニウムまたはボランジメチルスルフィド錯体のような適当な還元剤の過剰量と接触させる。十分な量の還元剤を用いてエステルおよびアミド官能基の双方を還元する。反応はテトラヒドロフランまたはジエチルエーテルのような適当な溶媒中行う。反応は一般的に０℃〜溶媒還流温度の温度で行う。一般的に反応には１〜72時間を要する。生成物はボランアルミニウム複合体のクエンチング、抽出、蒸発、磨砕、クロマトグラフィーおよび再結晶のような当業者のよく知る方法で単離精製できる。
反応スキームＢの工程４では、構造18の３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンを、適切なアロイルハライド、アリール無水物、またはアリール混合無水物でアロイル化し、構造２のアルコールとする。適切なアリール酸、アリールエステル、アロイルハライド、アロイル無水物またはアロイル混合無水物、X1−C（O）−Ph1は、Ph1が式（１）で望ましいR2およびR3を有する置換フェニルであり、X1がヒドロキシル；活性エステル、例えばＯ−ヒドロキシスクシンイミドまたはＯ−ヒドロキシベンズトリアゾールエステル；活性化脱離基、例えばクロロ、ブロモ；または無水物を形成する基−C（O）−Ph1；または無水混合物であるものである。
例えば、構造18の３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンを、適切なアロイルハライド、アリール無水物またはアリール混合無水物の１〜1.1モル当量と接触させる。反応はテトラヒドロフラン、ジクロロメタン、アセトン、酢酸エチル、トルエンまたはジエチルエーテルのような適当な溶媒中行う。反応はＮ−メチルモルホリン、炭酸ナトリウム、トリエチルアミン、N,N−ジイソプロピルエチルアミン、炭酸カリウムまたは重炭酸ナトリウムのような塩基の存在下に行う。反応は一般的に−78℃〜周囲温度の温度で行う。一般的に反応には１〜24時間を要する。生成物は抽出、蒸発、磨砕、クロマトグラフィーおよび再結晶のような当業者のよく知る方法で単離精製できる。
あるいは、例えば、構造18の３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンを、適切なアロイルハライド、アリール無水物またはアリール混合無水物の１〜1.1モル当量と、Schotten-Baumann条件下に接触させる。反応はトルエン／水、アセトン／水、テトラヒドロフラン／水または酢酸エチル／水のような適当な混合溶媒中で行う。反応は、炭酸カリウム、重炭酸カリウム、重炭酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウムのような塩基の存在下に行う。反応は一般的に−20℃〜50℃の温度で行う。一般的に反応には15分〜24時間を要する。生成物は抽出、蒸発、磨砕、クロマトグラフィーおよび再結晶のような当業者のよく知る方法で単離精製できる。
反応スキームＣは反応スキームＡ．１およびＡ．２で出発物質として使用した構造３のピペリジン化合物の製造のための合成方法を示す。
0004195512.tif 000014
反応スキームＣでは、式21の適切に保護されたビス−（２−クロロエチル）アミンを式５ａの適切なアリールアセトニトリルでアルキル化して式22の保護された４−アリール−４−シアノピペリジンを得る。式21の適切に保護されたビス−（２−クロロエチル）アミンは保護基Pg1が（C1−C4）−アルキル、ベンジル、置換ベンジル、ｐ−トルエンスルホニル、ベンゼンスルホニルまたはカーバメート例えばｔ−ブトキシカルボニルまたはエトキシカルボニルであるものである。式５ａの適切なアリールアセトニトリルはAr1が式（１）の最終生成物で望ましいものである。この種のアルキル化は当業者のよく知るものであり、例えばT. Cammack and P. C. Reeves, J. Heterocyclic Chem. 23, 73-75（1986）およびC. V. Bercz and R. D. Ice, Pharmaceutical Sci., 21, 1316-1317（1972）に記載されている。
例えば、式21の適切に保護されたビス−（２−クロロエチル）アミンを式５ａの適切なアリールアセトニトリルと接触させる。反応はナトリウムアミド、水素化ナトリウム、ナトリウムヘキサメチルジシラジド、カリウムｔ−ブトキシド、およびリチウムジイソプロピルアミドのような塩基２〜４モル当量の存在下に行う。反応はジメチルスルホキシドまたはテトラヒドロフランのような溶媒中で行う。反応はヨウ化ナトリウムまたはヨウ化カリウムのような適当な触媒0.01〜0.5モル当量の存在下に行う。反応は一般的に０℃〜80℃の温度で行う。一般的に反応には１〜72時間を要する。生成物は抽出、蒸発、磨砕、クロマトグラフィーおよび再結晶のような当業者のよく知る方法で単離精製できる。
あるいは例えば、式21の適切に保護されたビス−（２−クロロエチル）アミンを相変換条件下式５ａの適切なアリールアセトニトリルと接触させる。反応は水中、または、有機相および無機相よりなる溶媒系で行ってよい。反応は水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウムのような水酸化物塩基の存在下に行う。反応は臭化テトラブチルアンモニウム、硫酸水素テトラブチルアンモニウム、ヘキサデシルトリブチルホスホニウムブロミド、ベンジルトリメチルアンモニウムクロリド等のような第４アンモニウムおよびホスホニウム塩を含む適当な触媒の存在下に行う。反応は激しく攪拌しながら行い、一般的に０℃〜100℃の温度で行う。一般的に反応には１〜24時間を要する。生成物は抽出、蒸発、磨砕、クロマトグラフィーおよび再結晶のような当業者のよく知る方法で単離精製できる。
反応スキームＣの任意の工程２では、構造22の４−アリール−４−シアノピペリジンを加水分解して構造23の４−アリールピペリジン−４−カルボン酸とする。ニトリルから酸への加水分解は、当業者のよく知るとおり酸性または塩基性の条件下で行ってよい。保護基と適合する加水分解条件の選択は当業者の知るとおりである。当業者の知るとおり、工程２の前または後にアミン保護基Pg1の除去が必要となる場合がある。例えばPg1がベンジルである場合は、保護基を除去することによりニトリルの加水分解を促進し、その後、加水分解の後に再導入してもよい。除去する場合は、加水分解後にベンジルまたは別の保護基として保護基を再導入することにより式23の４−アリールピペリジン−４−カルボン酸を得る、あるいは、反応スキームＣの工程１および２で用いた保護基を除去して別の保護基と置き換えることにより反応スキームＣの工程４の化合物24の脱保護を容易にすることができる。アミン保護基の除去および導入は当業者のよく知るものであり、T. GreenによりProtecting Groups in Organic Synthesis, Wiley-Interscience（1981）に記載されている。
反応スキームＣの工程３では、式23の４−アリールピペリジン−４−カルボン酸は適切なアミンとアミド化反応し、式24の保護された４−アリール−４−カルボキサミドピペリジンを生成する。適切なアミンは式（１）の最終生成物で望まれるR7およびR8を与えるものである。このような適切なアミンにはアンモニア、ピペリジン、ピロリジン、４−メチルピペラジン、ピペラジンおよびモルホリンが包含される。
アミド化反応は、式23の酸を介して進行するか、または、式23の化合物の酸官能基をまず活性化中間体；例えば無水物；置換リン酸の混合無水物、例えばジアルキルリン酸、ジフェニルリン酸、ハロリン酸；脂肪族カルボン酸、例えばギ酸、酢酸、プロピオン酸、酪酸、イソ酪酸、ピバル酸、２−エトキシ酪酸などの混合無水物；活性エステル、例えばフェノールエステル、ｐ−ニトロフェノールエステル、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、Ｎ−ヒドロキシフタルイミドエステル、１−ヒドロキシベンズトリアゾールエステル等；活性アミド、例えばイミダゾール、ジメチルピラゾール、トリアゾールまたはテトラゾール；または、ジシクロヘキシルカルボジイミドまたは１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミドのようなカップリング剤の存在下に形成した中間体に変換してよい。活性中間体は製造して直接使用するか、または、製造して単離した後に、適切なカルボキシ置換環状アミンを添加してよい。あるいは、活性中間体を製造単離精製した後に、適切なカルボキシ置換環状アミンを添加してよい。活性中間体の使用と形成は当業者の知るとおりである。
例えば、式23の酸化合物を、僅かにモル過剰量の適切なアミンまたはその塩および１−ヒドロキシベンゾトリアゾールと、僅かにモル過剰量のカップリング剤、例えばジシクロヘキシルカルボジイミドまたは１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミドの存在下に接触させる。反応は、N,N−ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、または、トリエチルアミンのような適当な塩基の存在下に行い、適切なアミンの塩を使用する場合は、添加する適当な塩基のモル量を更に増加させる。反応はジクロロメタン、クロロホルムまたはジメチルホルムアミドのような適当な溶媒中で行う。生成物は抽出、蒸発、クロマトグラフィーおよび再結晶のような当業者のよく知る方法で単離精製できる。
あるいは例えば、式23の酸をＮ−メチルモルホリンのような適当な塩基1.2〜1.7当量とテトラヒドロフランのような適当な溶媒中で接触させる。上記したとおり、適切なアミンの塩を使用する場合は、添加する適当な塩基のモル量を増加させる。反応混合物は−50℃〜０℃の温度に冷却し、好ましくは−25℃〜−20℃の温度に冷却し、その後、イソブチルクロロホルメート1.2〜1.7当量を添加する。反応混合物を30〜３時間攪拌放置し、混合無水物を形成させる。−50℃〜０℃の温度に維持しながら適切なアミンを添加する。アミンの添加終了後、反応混合物を室温に戻す。一般的に反応には２〜48時間を要する。生成物は抽出、蒸発、クロマトグラフィーおよび再結晶のような当業者のよく知る方法で単離精製できる。
反応スキームＣの工程４では、式24の保護された４−アリール−４−カルボキサミドピペリジンを脱保護して式３のピペリジンを得る。アミン保護基の除去は当業者のよく知るものであり、T. GreenによりProtecting Groups in Organic Synthesis, Wiley-Interscience（1981）に記載されている。
反応スキームＣの任意の工程５では、式22の４−アリール−４−シアノピペリジンを加水分解し脱保護してR7およびR8が水素である式３のピペリジンを得る。反応スキームＣの任意の工程５では、Pg1がベンジルである式22の４−アリール−４−シアノピペリジンを使用するのが好ましい。
例えば式22の適切な４−アリール−４−シアノピペリジンを塩基性の過酸化水素と接触させ、４−アリール−４−カルボン酸アミドピペリジンＮ−オキシドを得る。ニトリルからカルボキサミドへの加水分解のための塩基性の過酸化水素の使用は当業者のよく知るとおりである。Reagents for Organic Synthesis, Fieser and Fieser, John Wiley and Sons, Inc.（1967）。水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウムのようなアルカリ金属の水酸化物がこの反応のための適当な塩基である。反応は水、エタノール、メタノール、水／エタノール混合物または水／メタノール混合物のような適当な溶媒中で行う。反応は０℃〜適当な溶媒の還流温度の温度で行う。一般的に、反応には約４時間〜４日を要する。生成物は抽出、蒸発、磨砕、クロマトグラフィーおよび再結晶のような当業者のよく知る方法で単離精製できる。４−アリール−４−カルボン酸アミドピペリジンＮ−オキシドを還元し脱保護してR7およびR8が水素である式３のピペリジンを得る。アミンの脱保護とアミン酸化物の還元は同時に行ってよく、または順次行ってもよい。アミン酸化物の還元は当業者の知るとおりである。Ｎ−オキシドの還元の後、アミン保護基Pg1を除去する。ベンジルまたは置換ベンジルのようなアミン保護基の除去は当業者の知るとおりであり、T. GreenによりProtecting Groups in Organic Synthesis, Wiley-Interscience（1981）に記載されている。生成物は濾過、抽出、蒸発、磨砕、クロマトグラフィーおよび再結晶のような当業者のよく知る方法で単離精製できる。
以下の実施例および調製例は式（１）の化合物の典型的な合成を示すものである。これらの実施例は例示のみを意図しており、本発明の範囲を限定するものではない。
製造例１
２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイルクロリド
２−ヒドロキシ−５−ニトロ安息香酸（21.5ｇ，117ミリモル）、炭酸カリウム（162.3ｇ，1.174ミリモル）、およびヨウ化メチル（136.8ｇ，96.4ミリモル）をアセトン中（500ml）で化合させる。還流下に加熱する。18時間後、反応混合物を周囲温度に冷却し、ヨウ化メチル（136.8ｇ，96.4ミリモル）を添加する。更に還流下に加熱する。56時間後、反応混合物を周囲温度に冷却し、濾過し、アセトンで洗浄し、濾液を真空下に蒸発させ残留物を得る。残留物をエタノールから再結晶させ２番目の残留物を得る。二番目の残留物をクロロホルム（約100ml）と合わせ、濾過し、濾液を真空下に蒸発させ、メチル２−メトキシ−５−ニトロベンゾエートを得る。Rf＝0.38（シリカゲル、酢酸エチル／ヘキサン  １／１）。
メチル２−メトキシ−５−ニトロベンゾエート（13.3ｇ，63ミリモル）とメタノールを合わせる。５％パラジウム／炭素（0.66ｇ）を添加する。50psiで加圧装置中水素添加する。17時間後、セライトで濾過して触媒を除去し、濾液を真空下に蒸発させ、残留物を得る。残留物とジクロロメタンを合わせ、水で抽出する。有機層をNa2SO4上に乾燥し、濾過し、真空下に蒸発させてメチル２−メトキシ−５−アミノベンゾエートを得る。Rf＝0.18（シリカゲル、酢酸エチル／メタノール  １／１）。
元素分析値（C9H11NO3として）：
計算値：C 59.66；H 6.12；N, 7.73
測定値：C 59.44；H 6.04；N, 7.62
メチル２−メトキシ−５−アミノベンゾエート（3.94ｇ，21.7ミリモル）とトリエチルオルトホルメート（12.8ｇ，86.7ミリモル）を氷酢酸（20ml）中で化合させる。20時間後、反応混合物を真空下に濃縮し、エタノールを除去する。氷酢酸（20ml）およびアジ化ナトリウム（5.64ｇ，86.7ミリモル）を添加する。70℃に加熱する。１時間後、氷酢酸（10ml）を添加し、70℃に加熱する。更に1時間の後、反応混合物を周囲温度に冷却し、水（500ml）で希釈する。固体を濾取し、水で洗浄し、乾燥し、メチル２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾエートを得る。
メチル２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾエート（2.86ｇ，12.2ミリモル）と水酸化ナトリウム１Ｍ水溶液（13.43ml，13.43ミリモル）をメタノール／水（100ml，５：１v/v）中で化合させる。還流下に加熱する。４時間後、真空下に濃縮してメタノールの大部分を除去し、水（50ml）を添加し、１Ｍ塩酸水溶液を用いてpHを約４に調節する。真空下に蒸発して固体とし、固体を水でスラリーとし、濾過し、乾燥して２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）安息香酸を得る。
あるいは、メチル2-メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾエート（13.3ｇ，56.8ミリモル）とメタノール（150ml）を合わせる。水酸化ナトリウムの１Ｍ水溶液（62.5ml，62.5ミリモル）を添加する。還流下に加熱する。30分後、メタノール（50ml）および水（50ml）を添加し、還流下加熱を続ける。１時間後真空下に濃縮し、溶媒の大部分を除去する。１Ｍ塩酸水溶液でpHを約１〜２とし、固体を得る。濾過して固体を集め、水で洗浄し、乾燥して２−メトキシ−５−（1H−テトラゾル−１−イル）安息香酸を得る。
２−メトキシ−５−（1H−テトラゾル−１−イル）安息香酸（1.2ｇ，5.5ミリモル）をジクロロメタン（40ml）と化合させる。オキサリルクロリド（0.72ml，8.25ミリモル）を滴加し、その後、ジメチルホルムアミド（３滴）を加える。４時間後真空下に蒸発させ標題化合物を得る。
製造例２
４−フェニルピペリジン−４−カルボン酸モルホリンアミド塩酸塩
４−シアノ−４−フェニルピペリジン塩酸塩（20.0ｇ，89.8ミリモル）と水酸化カリウム（1.2Ｌ，３Ｍ，3.6モル）の水溶液を合わせる。還流下に加熱する。15時間後、反応混合物を氷浴で冷却し、12Ｍの塩酸水溶液を用いてpHを約２に調節し、固体とした。固体を濾取し、乾燥し、４−フェニルピペリジン−４−カルボン酸塩酸塩：Rf＝0.2（シリカゲル、85／10／５，クロロホルム／メタノール／酢酸）を得る。
元素分析値（C12H16NO2・HClとして）：
計算値：C 59.63；H 6.67；N 5.79
測定値：C 58.19；H 6.52；N 5.72
４−フェニルピペリジン−４−カルボン酸塩酸塩（2.49ｇ，10ミリモル）、N,N−ジイソプロピルエチルアミン（1.91mL，11ミリモル）、およびジ−ｔ−ブチルジカーボネート（2.4ｇ，11ミリモル）をジメチルホルムアミド（100ml）中で化合させる。30時間後、反応混合物を酢酸エチルで希釈し、１Ｍ塩酸水溶液で抽出する。有機層をMgSO4上に乾燥し、濾過し、真空下に濃縮し、乾燥し、１−ｔ−ブトキシカルボニル−４−フェニルピペリジン−４−カルボン酸：Rf＝0.48（シリカゲル、ジクロロメタン中６％メタノール、ニンヒドリンで茶色に染色）を得る。
元素分析値（C17H24NO4として）：
計算値：C 66.86；H 7.59；N 4.59
測定値：C 66.56；H 7.72；N 4.52
１−ｔ−ブトキシカルボニル−４−フェニルピペリジン−４−カルボン酸（1.22ｇ，４ミリモル）およびテトラヒドロフラン（40ml）を合わせる。−10℃に冷却する。トリエチルアミン（0.61mnl，4.4ミリモル）次いでイソブチルクロロホルメート（0.57mL，4.4ミリモル）を添加する。添加終了後、周囲温度に戻す。15時間後反応混合物を濾過し、固体をテトラヒドロフランで洗浄し、濾液を−10℃に冷却する。モルホリン（0.87ｇ，10ミリモル）を添加する。0.5時間後、周囲温度に戻す。15時間後、反応混合物を濾過し、濾液を酢酸エチルで希釈し、重炭酸ナトリウム飽和水溶液で３回抽出する。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、真空下に濃縮して１−ｔ−ブトキシカルボニル−４−フェニルピペリジン−４−カルボン酸モルホリンアミドを得る。
あるいは、１−ｔ−ブトキシカルボニル−４−フェニルピペリジン−４−カルボン酸（1.22g，４ミリモル）、N,N−ジイソプロピルエチルアミン（0.77ml，4.4ミリモル）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（0.84ｇ，4.4ミリモル）および１−ヒドロキシベンズトリアゾール水和物（0.59ｇ，4.4ミリモル）をジクロロメタン（40ml）中で化合させる。12時間後、モルホリン（0.87ｇ，10ミリモル）を添加する。15時間後、反応混合物を濾過し、濾液を酢酸エチルで希釈し、重炭酸ナトリウム飽和水溶液で３回抽出する。有機層を硫酸マグネシウム上に乾燥し、濾過し、真空下に濃縮し、１−ｔ−ブトキシカルボニル−４−フェニルピペリジン−４−カルボン酸モルホリンアミドを得る。
１−ｔ−ブトキシカルボニル−４−フェニルピペリジン−４−カルボン酸モルホリンアミド（３ミリモル）とジクロロメタン（20ml）と合わせる。ジオキサン中の塩酸の溶液（10ml，４Ｍ，40ミリモル）を添加する。18時間後、真空下に蒸発させ、標題化合物を得る。
製造例２の方法で以下の物質も調製できる。
ａ）ピペリジンを用いて４−フェニルピペリジン−４−カルボン酸ピペリジンアミド塩酸塩；
ｂ）ピロリジンを用いて４−フェニルピペリジン−４−カルボン酸ピロリジンアミド塩酸塩；
ｃ）ピペラジンを用いて４−フェニルピペリジン−４−カルボン酸ピペラジンアミド塩酸塩；
ｄ）４−メチルピペラジンを用いて４−フェニルピペリジン−４−カルボン酸４−メチルピペラジンアミド塩酸塩。
実施例１
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−（モルホリン−４−イルカルボキサミド）ピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジメトキシフェニル）ピロリジン
0004195512.tif 000015
１．１  ３−シアノ−３−（3,4−ジメトキシフェニル）ペンタン二酸ジエチルエステルの合成
3,4−ジメトキシフェニルアセトニトリル（20ｇ，113ミリモル）および無水テトラヒドロフラン（100ml）を合わせる。ドライアイス／アセトン浴で冷却する。ナトリウムビス（トリメチルシリル）アミドの溶液（226ml，テトラヒドロフラン中１Ｍ，226ミリモル）を滴加する。添加終了後、反応混合物を10℃に加温し、15分間攪拌する。ドライアイス／アセトン浴中で冷却し、エチルブロモアセテート（37.7ｇ，226ミリモル）を滴加する。エチルブロモアセテートの添加が終了した後、反応混合物を周囲温度に戻す。18時間後、反応混合物をジエチルエーテルと水との間に分配する。有機層を水および塩化アンモニウム飽和水溶液で抽出する。有機層を分離し、MgSO4上に乾燥し、真空下に濃縮し、残留物を得る。残留物をシリカゲル上のクロマトグラフィーに付し、33％酢酸エチル／ヘキサンで溶離する。残存する溶媒を真空下82℃で除去し、標題化合物：Rf＝0.37（シリカゲル、33％酢酸エチル／ヘキサン）を得る。
元素分析値（C18H23NO6として）：
計算値：C 61.88；H 6.64；N 4.01
測定値：C 61.79；H 6.62；N 3.91
１．２（３−（3,4−ジメトキシフェニル）−５−オキソピロリジン−３−イル）酢酸エチルエステル
３−シアノ−３−（3,4−ジメトキシフェニル）ペンタン二酸ジエチルエステル（1.3ｇ，3.24ミリモル）および塩化コバルト（II）６水和物（1.54ｇ，6.48ミリモル）をメタノール（50ml）中で合わせる。氷浴で温度を−20℃未満に維持しながらナトリウムボロハイドライド（2.17ｇ，57ミリモル）を少しづつ添加する。添加終了後、反応混合物を18時間周囲温度で放置する。反応混合物を真空下に蒸発させ、残留物を得る。ジクロロメタンおよび１Ｍ塩酸溶液との間で分配する。水層を数回ジクロロメタンで抽出し、有機層を合わせ、Na2SO4上に乾燥し、濾過し、真空下に濃縮し、残留物を得る。残留物をシリカゲル上のクロマトグラフィーに付し、20／１酢酸エチル／メタノールで溶離する。残存する溶媒を真空下82℃で除去し、標題化合物：Rf＝0.74（シリカゲル、５／１酢酸エチル／メタノール）を得る。融点；116〜118℃。
元素分析値（C16H21NO5として）：
計算値：C 62.53；H 6.89；N 4.56
測定値：C 62.52；H 6.85；N 4.50
１．３（３−（3,4−ジメトキシフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンの合成
リチウムアルミニウムハイドライド（0.99ｇ，26.0ミリモル）および無水テトラヒドロフラン（20ml）を合わせる。無水テトラヒドロフラン（40ml）中の溶液として（３−（3,4−ジメトキシフェニル）−５−オキソピロリジン−３−イル）酢酸エチルエステル（2.0ｇ，6.5ミリモル）をゆっくり添加する。添加終了後、還流下に加熱する。18時間後、氷浴中で冷却する。反応混合物の温度が20℃を超えないような速度で水（１ml）を滴加する。10℃に冷却し水酸化ナトリウムの15％溶液（1.0ml）を添加する。水（３ml）を添加する。15分後、反応混合物を濾過し、濾液を真空下に濃縮し、標題化合物を得る。Rf＝0.68（シリカゲル、５／１酢酸エチル／メタノール）。
分析用試料を以下のとおり製造する。３−（3,4−ジメトキシフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（0.51ｇ，2.20ミリモル）およびシュウ酸（0.18ｇ，2.00ミリモル）をテトラヒドロフラン（70ml）中で合わせる。18時間後、濾過し乾燥する。ジエチルエーテル（100ml）で磨砕し、濾過し、真空下81℃で乾燥し、シュウ酸塩として標題化合物を得る。融点：140〜142℃。
元素分析値（C14H21NO3・C2H2O4として）：
計算値：C 56.30；H 6.79；N 4.10
測定値：C 56.15；H 6.76；N 4.13
１．４．１  １−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（3,4−ジメトキシフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンの合成
３−（3,4−ジメトキシフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（2.27ｇ，9.03ミリモル）およびＮ−メチルモルホリン（2.48ml，22.6ミリモル）を無水ジクロロメタン（100ml）中で化合させる。反応混合物を塩・氷浴で−５℃に冷却する。ジクロロメタン（30ml）中の溶液として２−（メトキシ）−５−（1H−テトラゾル−１−イル）ベンゾイルクロリド（9.5ミリモル）をゆっくり添加する。周囲温度に戻す。18時間後、反応混合物を炭酸カリウムの飽和溶液で抽出する。有機層をNaSO4上に乾燥し、濾過し、真空下に濃縮し、標題化合物を得る。
１．４．２  １−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（3,4−ジメトキシフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンの合成
３−（3,4−ジメトキシフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（5.34ｇ，21.2ミリモル）および炭酸ナトリウム（1.24ｇ，11.7ミリモル）を酢酸エチル／水（４／１）（120ml）中で合わせる。反応混合物を塩・氷浴で−５℃に冷却する。反応混合物の温度が０℃を超えないような速度で酢酸エチル（60ml）中の溶液として２−メトキシ−５−（1H−テトラゾル−１−イル）ベンゾイルクロリド（22.3ミリモル）をゆっくり添加しする。反応温度を約０℃に維持する。18時間後、有機層を分離する。有機層を２回、１Ｍの塩酸水溶液、重炭酸ナトリウム飽和溶液、水および塩化ナトリウム飽和溶液で抽出する。有機層をNa2SO4上に乾燥し、濾過し、真空下に濃縮し、残留物を得る。水層を合わせ、重炭酸ナトリウム飽和溶液で中和する。中和した水層をジクロロメタンで抽出する。有機層をNa2SO4上に乾燥し、濾過し、真空下に濃縮し、標題化合物を得る。
１．５  １−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（3,4−ジメトキシフェニル）−３−（２−メタンスルホニルオキシエチル）ピロリジンの合成
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（3,4−ジメトキシフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（0.43ｇ，0.97ミリモル）、トリエチルアミン（3.3ml，2.4ミリモル）および無水ジクロロメタン（30ml）を化合させる。反応混合物を塩・氷浴で−５℃に冷却する。反応混合物の温度が２℃を超えないような速度で、メタンスルホニルクロリド（0.082ml，1.06ミリモル）をゆっくり添加する。周囲温度に戻す。18時間後、氷を添加して反応をクエンチングする。有機層を分離し、３回１Ｍ塩酸溶液で、２回重炭酸ナトリウム飽和溶液で抽出する。有機層をNa2SO4上に乾燥し、濾過し、真空下に濃縮し、標題化合物を得る。
１．６  １−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−（モルホリン−４−イルカルボキサミド）ピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジメトキシフェニル）ピロリジンの合成
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（3,4−ジメトキシフェニル）−３−（２−メタンスルホニルオキシエチル）ピロリジン（1.64ミリモル）、４−フェニルピペリジン−４−カルボン酸モルホリンアミド塩酸塩（1.97ミリモル）、ヨウ化ナトリウム（0.25ｇ，1.64ミリモル）およびN,N−ジイソプロピルエチルアミン（0.84ｇ，6.6ミリモル）をアセトニトリル（12ml）中で化合させる。還流下に加熱する。10時間後、冷却し、反応混合物を酢酸エチルで希釈する。３回塩化アンモニウム飽和水溶液で、２回重炭酸ナトリウム飽和水溶液で、そして塩水で抽出する。有機層をNa2SO4上に乾燥し、濾過し、真空下に蒸発させ、標題化合物を得る。
製造例３
４−フェニルピペリジン−４−カルボン酸アミド塩酸塩
チオニルクロリド（25.4ｇ，130ミリモル）とクロロホルム（20ml）を合わせる。クロロホルム（20ml）中のN,N−ビス（２−ヒドロキシエチル）ベンジルアミン（15.4ｇ，130ミリモル）の溶液を約1時間かけて添加する。添加終了後、還流下に加熱する。１時間後、反応混合物を周囲温度に冷却し、ジエチルエーテルを添加して固体を形成する。固体を濾取し、ジエチルエーテルで洗浄し、乾燥し、N,N−ビス（２−クロロエチル）ベンジルアミン塩酸塩を得る。
フェニルアセトニトリル（40ミリモル）および水酸化ナトリウム水溶液（60ml，50重量％）を化合させる。N,N−ビス（２−クロロエチル）ベンジルアミン塩酸塩（11.28ｇ，42ミリモル）とヘキサデシルトリエチルホスホニウムブロミド（1.02ｇ，２ミリモル）を添加する。100℃に加熱し、激しく攪拌する。１時間後、反応混合物を周囲温度に冷却する。水を添加し、希釈した反応混合物を６Ｍの塩酸水溶液で酸性化する。酸性化した反応混合物をジエチルエーテルで抽出する。水層のpHを固体の水酸化カリウムを用いて約12とし、酢酸エチルで抽出する。酢酸エチル層を分離し、MgSO4上に乾燥し、濾過し、真空下に蒸発させ、残留物を得る。残留物と塩酸溶液をメタノール中で合わせる。真空下に蒸発させ１−ベンジル−４−フェニル−４−シアノピペリジン塩酸塩を得る。
あるいは４−フェニル−４−シアノピペリジン塩酸塩（10ｇ，44.9ミリモル）、ベンジルブロミド（5.4ml，45.4ミリモル）および炭酸カリウム（25.5ｇ，182.3ミリモル）をテトラヒドロフラン／水（80ml／20ml）中で合わせる。18時間後、反応混合物を水とジクロロメタンとの間に分配する。有機層を分離し、水で抽出し、MgSO4上に乾燥し、濾過し、真空下に蒸発させ、残留物を得る。残留物をヘキサンから再結晶し、固体として１−ベンジル−４−フェニル−４−シアノピペリジンを得る。融点73〜74℃。
１−ベンジル−４−フェニル−４−シアノピペリジン（535ｇ，1940ミリモル）、水酸化ナトリウム水溶液（85ml，50重量％）およびエタノール（５Ｌ）を化合させる。50℃に加熱する。加熱を止め、反応混合物の温度が50℃を超えないような速度で過酸化水素溶液（856ml，水中30重量％）を添加する。過酸化水素の添加終了後、反応混合物の温度を50℃に維持する。20時間後、反応混合物を水（３Ｌ）で希釈し、35℃で真空下に濃縮し、エタノールを除去する。反応混合物を周囲温度に冷却し、固体とする。固体を濾取し、水で洗浄し、風乾して、１−ベンジル−４−フェニルピペリジン−４−カルボン酸アミドＮ−オキシドを得る。
１−ベンジル−４−フェニルピペリジン−４−カルボン酸アミドＮ−オキシド（529ｇ，1700ミリモル）、10％Pd／C（25ｇ）および酢酸（５Ｌ）をオートクレーブ中で化合させる。オートクレーブを窒素フラッシュし、次に水素255psiを充填する。100psiを超える圧力を維持するために必要な水素をオートクレーブに再充填する間攪拌する。水素の消費が終了した時点で、オートクレーブを窒素でフラッシュし、触媒を濾別する。濾液を真空下に蒸発させ、残留物を得る。残留物を酢酸エチル（５Ｌ）に溶解し、12Ｍの塩酸水溶液（150ml）を添加して酸性化し、15分間還流下に加熱する。混合物を５℃に冷却し、固体とする。固体を濾取し、酢酸エチルで洗浄し、風乾して標題化合物を得る。
実施例２
（Ｒ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン
0004195512.tif 000016
２．１．１  ３−シアノ−３−（3,4−ジクロロフェニル）ペンタンジ酸ジエチルエステルの合成
実施例１．１の方法により、3,4−ジクロロフェニルアセトニトリル（30.0ｇ，0.161モル）を用いて製造する。ジエチルエーテルから再結晶させることにより精製し、標題化合物を得る。Rf＝0.28（シリカゲル、20％酢酸エチル／ヘキサン）。融点；68〜69℃。
元素分析値（C16H17C12NO4として）：
計算値：C 53.65；H 4.78；N 3.91
測定値：C 53.69；H 4.79；N 3.93
２．１．２  ３−シアノ−３−（3,4−ジクロロフェニル）ペンタンジ酸ジエチルエステルの合成
ナトリウムビス（トリメチルシリル）アミド（480lb，THF中１Ｍ）を約−10℃に冷却し、攪拌する。反応混合物の温度が約10℃を超えないような速度で、メチルｔ−ブチルエーテル中の3,4−ジクロロフェニルアセトニトリルの溶液（34.5重量％、溶液125 lb）を添加する。エチルブロモアセテート（94 lb）およびメチルｔ-ブチルエーテル（約125 lb）を合わせ、約−18℃に冷却し、次に60〜90分間かけて上記で製造した溶液を添加する。クロマトグラフィーで測定して反応が終了した後、水（18 gal）を添加する。pHが約４となるまで12Ｍの塩酸水溶液を添加する。pHが３未満に低下した場合は、水酸化ナトリウムの20％水溶液を使用してpHを約４まで上昇させる。層を分離させ有機層を塩水で抽出する。約40℃で真空下に蒸発させ、残留物を得る。残留物とイソプロパノール（約45 lb）を合わせ、約40℃で真空下に蒸発させ残留物を得る。イソプロパノール（190 lb）を添加し、約35℃に加温し、次に約−10℃まで冷却し、固体とする。固体を濾取し、冷イソプロパノールで洗浄し、遠心分離し、イソプロパノールを含有する湿潤したケーキとして標題化合物を得る。
２．２．１（３−（3,4−ジクロロフェニル）−５−オキソピロリジン−３−イル）酢酸エチルエステルの合成
実施例１．２の方法により、３−シアノ−３−（3,4−ジクロロフェニル）ペンタンジ酸ジエチルエステル（10ｇ，28ミリモル）を用いて調製する。順次３％メタノール／ジクロロメタン、次いで６％メタノール／ジクロロメタンを溶離剤とするシリカゲル上のクロマトグラフィーにより精製し、標題化合物を得る。
２．２．２（３−（3,4−ジクロロフェニル）−５−オキソピロリジン−３−イル）酢酸エチルエステルの合成
３−シアノ−（３−（3,4−ジクロロフェニル）ペンタンジ酸ジエチルエーテル（32ｇ，89ミリモル）と（150ml）をParr容器内で合わせる。ラネーニッケル（100ｇ）および濃アンモニア水溶液（40ml）を添加する。24時間50psiで水素添加する。セライトパッドで濾過し固体をエタノールで洗浄する。濾液を真空下に蒸発させ、残留物を得る。６％メタノール／ジクロロメタンを溶離剤とするシリカゲル上のクロマトグラフィーに付し、標題化合物を得る。Rf＝0.34（シリカゲル、６％メタノール／ジクロロメタン）。融点；87〜90℃。
元素分析値（C14H15C12NO3として）：
計算値：C 53.18；H 4.78；N 4.43
測定値：C 53.34；H 4.71；N 4.51
２．２．３（３−（3,4−ジクロロフェニル）−５−オキソピロリジン−３−イル）酢酸エチルエステルの合成
ラネーニッケル（24 lb）および濃アンモニア水溶液（19 lb）を合わせる。３−シアノ−３−（3,4−ジクロロフェニル）ペンタンジ酸ジエチルエステル（15 lb）および（117 lb）の溶液を加圧反応容器中に添加する。35℃で200psiで水素添加する。20時間後、冷却し、容器を換気し、窒素パージし、濾過する。固体をエタノールで洗浄する。濾液を真空下に蒸発させ、残留物を得る。酢酸エチルに溶解することにより残留物を結晶化させ、溶液をヘプタンで磨砕し、固体を得る。固体を集めて標題化合物を得る。
元素分析値（C14H15C12NO3として）：
計算値：C 53.18；H 4.78；N 4.43
測定値：C 53.18；H 4.72；N 4.46
２．２．４（３−（3,4−ジクロロフェニル）−５−オキソピロリジン−３−イル）酢酸エチルエステルの合成
３−シアノ−３−（3,4−ジクロロフェニル）ペンタンジ酸ジエチルエステル（6.7kg，イソプロパノール含有湿潤ケーキ、約３％L.O.D.）および３Ｃエタノール（52kg）を加圧反応容器中で化合させる。水中ラネーニッケル（17.5kg，活性触媒約11kg）および濃アンモニア水溶液（8.7kg）を添加する。35℃および200psiで水素添加する。反応が終了した時点で、冷却し、反応容器を換気し、窒素パージする。フィルターバッグで濾過し、エタノールで洗浄し、次に0.2ミクロンのカートリッジフィルターで濾過し、固体をエタノールで洗浄する。濾液を真空下に蒸発させ、標題化合物を得る。
２．２．５（３−（3,4−ジクロロフェニル）−５−オキソピロリジン−３−イル）酢酸エチルエステルの合成
ラネーニッケル（水で２回、エタノールで２回洗浄、3.6kg）、３−シアノ−３−（3,4−ジクロロフェニル）ペンタン二酸ジエチルエステル（1260ｇ，3.51モル）、エタノール（９Ｌ）および濃アンモニア水溶液（1.6Ｌ）を５ガロンのオートクレーブ中で化合させる。55psiで水素添加する。20時間後、容器を換気し、窒素パージし、濾過する。固体をエタノール（約１Ｌ）で洗浄する。濾液を真空下に蒸発させ、残留物を得る。残留物を酢酸エチル（10Ｌ）と合わせ、２回水（１Ｌ）で、次いで塩水で抽出する。有機層をMgSO4上に乾燥し、濾過し、真空下に濃縮し、残留物を得る。残留物を酢酸エチル（約1.8Ｌ）およびヘプタン（約7.2Ｌ）から結晶化させ、固体を得る。固体を集め標題化合物を得る。融点98〜99℃。
２．３．１（３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンの合成
リチウムアルミニウムハイドライドの溶液（450ml，テトラヒドロフラン中１Ｍ，450ミリモル）を氷／アセトン浴中−10℃に冷却する。テトラヒドロフラン（35ml）中の硫酸（12ml，99.999％，225.3ミリモル）の溶液を滴加する（テトラヒドロフランに硫酸を添加する際、および、硫酸／テトラヒドロフラン溶液をリチウムアルミニウムハイドライド溶液に添加する際には注意を要する）。添加終了後、１時間攪拌する。周囲温度に戻し２時間攪拌する。テトラヒドロフラン（70ml）中の（３−（3,4−ジクロロフェニル）−５−オキソピロリジン−３−イル）酢酸エチルエステル（23.2ｇ，73.4ミリモル）の溶液を滴加する。36時間45〜50℃に加熱する。氷浴中で冷却する。テトラヒドロフラン／水（1／1、70ml）の溶液を滴加する。濾過し、フィルターケーキをテトラヒドロフランおよびジクロロメタンで洗浄し、濾液を回収する。フィルターケーキとテトラヒドロフラン／水／15％水酸化ナトリウム溶液（１Ｌ／70mL／20mL）を合わせ、２時間激しく攪拌する。濾過し、濾液を上記で得られた濾液と合わせる。合わせた濾液を真空下に濃縮し、残留物を得る。残留物をジクロロメタンに溶解し、MgSO4で乾燥し、濾過し、真空下に濃縮し、残留物を得る。残留物をジエチルエーテルから再結晶させ、標題化合物を得る。Rf＝0.27（シリカゲル、９／１／0.2ジクロロメタン／メタノール／水酸化アンモニウム）。融点；91〜94℃。
元素分析値（C12H15C12NOとして）：
計算値：C 55.40；H 5.81；N 5.38
測定値：C 55.64；H 5.88；N 5.20
２．３．２（Ｓ）−３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩および（Ｒ）−３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩の分割
３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（1.0ｇ，38.5ミリモル）とブタノンを合わせる。ブタノン（80ml）中の（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸（1.6ｇ，38.0ミリモル）の溶液を添加する。還流下に加熱する。15分後、周囲温度に冷却し、次に更に塩−氷浴中で冷却する。形成した固体を濾過し、ブタノンで洗浄する。水／メタノールから固体を再結晶し、（Ｓ）−（−）−３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩を得る。融点；201〜204℃（分解）。
0004195512.tif 000017
単結晶のX線回折分析により（Ｓ）−型であることが確認される。抽出で得られた遊離アミンの分析用試料をCHIRALPAK AD 25cm×0.46cmカラムを用いたペンタン／メタノール／トリエチルアミン（80／10／0.1）を溶離剤とする流量1.0ml／分のHPLC分析に付すことにより、96％のエナンチオマー余剰（96％ee）、（Ｓ）−型異性体の保持時間11.2分、（Ｒ）−型異性体の保持時間14.5分が得られる。
２．３．３（Ｓ）−３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩および（Ｒ）−３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン塩酸塩の分割
（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸（0.8ｇ，19ミリモル）と12Ｍ塩酸水溶液（0.16ml，19ミリモル）を水／メタノール（10ml）／（10ml）中で化合させる。還流下に加熱する。メタノール（10ml）中の３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（1.0ｇ，38.5ミリモル）の溶液を滴加する。15分後、ゆっくり周囲温度に冷却する。形成した固体を濾過し、水で洗浄し、（Ｓ）−３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩を得る。融点；201〜204℃（分解）。実施例２．３．２に記載したとおりのHPLC分析によれば、97％エナンチオマー余剰（97％ee）である。
２．３．４（Ｓ）−３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩の合成および分割
３−（3,4−ジクロロフェニル）−５−オキソピロリジン−３−イル）酢酸エチルエステル（40 lb）とテトラヒドロフラン（260 lb）を合わせる。容器を窒素パージする。ボランジメチルスルフィド錯体の溶液（38 lb，テトラヒドロフラン中２Ｍ溶液）を添加する。還流下に加熱する。60時間後、内部温度が約70℃に上昇するまで加熱し、次にメタノール（650 lb）を用いて反応をゆっくりクエンチングする。水（650 lb）を添加する。メタンスルホン酸（16 lb）を添加する。還流下に加熱し、蒸留物を除去して、残存するテトラヒドロフランの大部分を除去する。メタノール（約18gal）を（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸（32 lb）と合わせる。還流下に加熱し、上記の残留物の入った容器に移す。結晶種を添加し、ゆっくり10℃まで冷却して固体とする。固体を回収し、メタノール（145 gal）および水（145gal）と合わせる。還流下に加熱する。１時間後ゆっくり10℃まで冷却し、固体とする。固体を回収し、乾燥し、標題化合物を得る。
２．４．１（Ｓ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンの合成
（Ｓ）−３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩（0.14ｇ，0.21ミリモル）、酢酸エチル（15ml）、アセトニトリル（６ml）、水（６ml）および重炭酸ナトリウム（0.09ｇ，1.03ミリモル）を合わせる。塩−氷浴中０℃に冷却する。２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイルクロリド（0.21ミリモル）を添加する。30分後周囲温度に加温する。周囲温度で30分の後、酢酸エチルと塩水との間で反応混合物を分配する。有機層を１Ｍ塩酸溶液、次いで重炭酸ナトリウム飽和水溶液で抽出する。有機層をMgSO4で乾燥し、濾過し、真空下に蒸発させ、標題化合物を得る。
２．４．２（Ｓ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンの合成
（Ｓ）−３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩（6.0ｇ，8.84ミリモル）、水（40ml）、水酸化ナトリウム（0.335ｇ，8.87ミリモル）および重炭酸ナトリウム（3.73ｇ，8.87ミリモル）を合わせる。約０℃に冷却する。アセトン（12ml）中の２−メトキシ−５−（1H−テトラゾル−１−イル）ベンゾイルクロリド（9.7ミリモル）の溶液を約15分かけて添加する。３時間後、反応混合物を酢酸エチルと塩水との間で分配する。有機層を１Ｍ水酸化ナトリウム溶液、重炭酸ナトリウム飽和溶液、１Ｍ塩酸溶液、次いで塩水で抽出する。有機層をMgSO4で乾燥し、濾過し、真空下に蒸発させ、標題化合物を得る。
２．４．３（Ｓ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾル−１−イル）ベンゾイル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンの合成
（Ｓ）−３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩（1.20ｇ，1.77ミリモル）と重炭酸ナトリウム（0.75ｇ，8.9ミリモル）をアセトン／水（５ml／５ml）中で合わせる。氷浴中で冷却する。アセトン（20ml）中の２−メトキシ−５−（1H−トリアゾル−１−イル）ベンゾイルクロリド（0.37ｇ，1.6ミリモル）を添加する。30分後、周囲温度に戻す。５時間後、反応混合物を濾過し、濾液を酢酸エチルで抽出する。有機層を重炭酸ナトリウム飽和水溶液次いで塩水で抽出する。有機層をMgSO4で乾燥し、濾過し、真空下に蒸発させ、残留物を得る。残留物をシリカゲル上のクロマトグラフィーに付し、順次、酢酸エチル、３％メタノール／ジクロロメタン、次いで６％メタノール／ジクロロメタンで溶離し、標題化合物を得る。Rf＝0.38（シリカゲル、６％メタノール／ジクロロメタン）。
２．５．１（Ｓ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−メタンスルホニルオキシエチル）ピロリジンの合成
（Ｓ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンとメタンスルホニルクロリドを用いて実施例１．５の方法により製造し、標題化合物を得る。
２．５．２（Ｓ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−メタンスルホニルオキシエチル）ピロリジンの合成
（Ｓ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（600mg，1.3ミリモル）およびN,N−ジイソプロピルエチルアミン（0.5ml，2.87ミリモル）をジクロロメタン（13ml）中で化合させる。氷浴中で冷却する。メタンスルホニルクロリド（0.12ml，1.55ミリモル）を滴加する。15分後、更にメタンスルホニルクロリド（0.03mL，0.39モル）を添加する。30分後、５％重炭酸ナトリウム溶液と水で抽出する。有機層をMgSO4で乾燥し、濾過し、真空下に濃縮し、標題化合物を得る。Rf＝0.15（シリカゲル、酢酸エチル）。
２．５．３（Ｓ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−メタンスルホニルオキシエチル）ピロリジンの合成
（Ｓ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（200mg，0.44ミリモル）およびＮ−メチルモルホリン（0.97ml）をトルエン（10ml）中で化合させる。メタンスルホニルクロリド（0.066g，0.57ミリモル）を滴加する。12時間後トルエン（20ml）で希釈し、１Ｍ塩酸溶液および５％重炭酸ナトリウム溶液で抽出する。有機層をMgSO4で乾燥し、濾過し、真空下に濃縮し、標題化合物を得る。
２．６  １−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジンの合成
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）-3-（2-メタンスルホニルオキシエチル）ピロリジンおよび４−フェニルピペリジン−４−カルボン酸アミド塩酸塩を用いて実施例１．６の方法で製造し、標題化合物を得る。
実施例３
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−フェニルピロリジン
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３．１．１  ３−シアノ−３−フェニルペンタン二酸ジエチルエステルの合成
実施例１．１の方法によりフェニルアセトニトリル（5.85ｇ，50.0ミリモル）を用いて製造する。シリカゲル上のクロマトグラフィーに付し、ヘキサン中20％酢酸エチルで溶離し、標題化合物を得る。Rf＝0.23（シリカゲル、ヘキサン中20％酢酸エチル）
３．１．２  ３−シアノ−３−フェニルペンタン二酸ジエチルエステルの合成
フェニルアセトニトリル（5.85ｇ，50.0ミリモル）とテトラヒドロフラン（140ml）とを化合させる。約５℃に冷却する。ナトリウムビス（トリメチルシリル）アミドの溶液（800ml，テトラヒドロフラン中１Ｍ，800ミリモル）を滴加する。添加終了後、反応混合物を周囲温度に戻し、１時間攪拌放置する。反応混合物の温度が約20℃を超えないような速度で、上記溶液をカニューレでテトラヒドロフラン（500ml）中のエチルブロモアセテート（84.5m，762ミリモル）の冷却（−８℃）溶液に移す。周囲温度で攪拌放置する。18時間後、ジエチルエーテル（1.5Ｌ）で希釈し、塩化アンモニウムの飽和水溶液、ついで水、次いで塩化ナトリウムの飽和水溶液で抽出する。有機層をMgSO4で乾燥し、濾過し、真空下に濃縮し、残留物を得る。残留物をバルブ対バルブ（bulb-to-bulb）蒸留により蒸留し、標題化合物を得る。沸点；140〜150℃、0.2mmHg。
３．１．３  ３−シアノ−３−フェニルペンタン二酸ジエチルエステルの合成
フェニルアセトニトリル（175.5ｇ，1.5モル）とテトラヒドロフラン（1.95Ｌ）を合わせる。約０℃に冷却する。ナトリウムビス（トリメチルシリル）アミドの溶液（3.2Ｌ，テトラヒドロフラン中１Ｍ，3.2モル）を約15分かけて滴加する。添加終了後、反応混合物を周囲温度に戻し、１時間攪拌放置する。上記溶液を約45分間かけてテトラヒドロフラン（1.95Ｌ）中のエチルブロモアセテート（510ｇ，3.05モル）の冷却（約−20℃）溶液に移す。周囲温度に戻し、攪拌放置する。18時間後、ジエチルエーテル（３Ｌ）および水（1.5Ｌ）で希釈する。２回塩化アンモニウム飽和水溶液（2.25Ｌ）次いで塩水で抽出する。有機層をMgSO4で乾燥し、濾過し、真空下に濃縮し、残留物を得る。残留物をバルブ対バルブ（bulb-to-bulb）蒸留により蒸留し、標題化合物を得る。沸点；180〜190℃、30mmHg。
元素分析値（C16H19NO4として）：
計算値：C 66.43；H 6.62；N 4.84
測定値：C 66.34；H 6.57；N 4.82
３．２．１（３−フェニル−５−オキソピロリジン−３−イル）酢酸エチルエステルの合成
実施例２．２．２の方法により、３−シアノ−３−フェニルペンタンジ酸ジエチルエステルを用いて製造し、標題化合物を得る。Rf＝0.60（シリカゲル、６％メタノール／ジクロロメタン）
３．２．２（３−フェニル−５−オキソピロリジン−３−イル）酢酸エチルエステルの合成
３−シアノ−３−フェニルペンタン二酸ジエチルエステル（93ｇ，321ミリモル）およびエタノール（400ml）を２ガロンの圧力反応容器中合わせる。ラネーニッケル（280g）を添加する。50℃に加熱し、200psiの水素を充填する。15分後、反応器を換気し、濃アンモニア水溶液（120ml）を添加する。反応器に水素200psiを充填する。７時間後、反応器を換気し、18時間放置する。セライトパッドで濾過し、固体をエタノールで洗浄する。濾液を真空下に蒸発させ、残留物を得る。残留物と１／５ジエチルエーテル／ヘキサン（500ml）を合わせ、−20℃に冷却する。18時間後、傾瀉し、１／５ジエチルエーテル／ヘキサン（500ml）を添加し、−20℃に冷却して固体とする。固体を濾取し１／５ジエチルエーテル／ヘキサン（500ml）で磨砕する。固体を濾取し、乾燥して標題化合物を得る。
元素分析値（C14H17NO3として）：
計算値：C 68.00；H 6.93；N 5.66
測定値：C 67.63；H 6.99；N 5.81
３．２．３（３−フェニル−５−オキソピロリジン−３−イル）酢酸エチルエステルの合成
３−シアノ−３−フェニルペンタン二酸ジエチルエステル（396.6ｇ，1.37モル）およびエタノール（４Ｌ）および濃アンモニア水（530ml）を２ガロンのオートクレーブ中で合わせる。ラネーニッケル（410ｇ）を添加する。24℃に加熱し、水素205psiを充填する。26時間後、反応器を換気し、窒素パージする。反応混合物をセライトパッドで濾過し、固体をエタノール（1.5Ｌ）で洗浄する。濾液を真空下に蒸発させ、標題化合物を得る。
３．２．４（３−フェニル−５−オキソピロリジン−３−イル）酢酸エチルエステルの合成
３−シアノ−３−フェニルペンタン二酸ジエチルエステル（243ｇ，0.84モル）およびエタノール（2.5Ｌ）、濃アンモニア水（325ml）およびラネーニッケル（250g，水で３回予備洗浄）を２ガロンのオートクレーブ中で合わせる。200psiの水素を充填する。50℃に加熱する。24時間後、反応器を換気し、窒素パージする。反応混合物をセライトパッドで濾過し、固体をエタノール（１Ｌ）で洗浄する。濾液を真空下に蒸発させ、標題化合物を得る。
３．３．１  ３−フェニル−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンの合成
実施例１．３の方法により、（３−フェニル−５−オキソピロリジン−３−イル）酢酸エチルエステル（8.7ｇ，35ミリモル）を用いて製造し、ジクロロメタン／ジエチルエーテルから再結晶させ、標題化合物を得る。融点：115.0〜117.0℃；Rf＝0.03（シリカゲル、６％メタノール／ジクロロメタン）。
元素分析値（C12H17NOとして）：
計算値：C 75.36；H 8.96；N 7.32
測定値：C 75.78；H 8.96；N 7.45
３．３．２  ３−フェニル−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンの合成
（３−フェニル−５−オキソピロリジン−３−イル）酢酸エチルエステル（301ｇ，1.25モル）およびテトラヒドロフラン（3.5Ｌ）を合わせる。約５℃に冷却する。テトラヒドロフラン中リチウムアルミニウムハイドライドの溶液（3.9Ｌ，１Ｍ，3.9モル）を約45分間かけて少しづつゆっくり添加する。添加終了後、60℃に加熱する。18時間後、氷浴中で冷却する。反応混合物の温度が20℃を超えないような速度で水／テトラヒドロフラン１／１（1.95Ｌ）を滴加する。反応混合物をテトラヒドロフラン（2.25Ｌ）希釈し、攪拌する。1.5時間後、反応混合物を濾過する。固体を時エチルエーテル（３Ｌ）に懸濁し濾過する。濾液を合わせ、真空下に濃縮し、残留物を得る。残留物とジクロロメタン（４Ｌ）を合わせ、水（１Ｌ）で3回抽出する。有機層をMgSO4で乾燥し、濾過し、真空下に濃縮し、固体を得る。固体をジエチルエーテル（0.3L）で磨砕し、濾取し、ジエチルエーテルで洗浄し、乾燥し、標題化合物を得る。Rf＝0.12（シリカゲル、ジクロロメタン／メタノール／濃アンモニア水、９／１／0.1）。
３．３．３  ３−フェニル−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンの合成
（３−フェニル−５−オキソピロリジン−３−イル）酢酸エチルエステル（171ｇ，0.69モル）とテトラヒドロフラン（２Ｌ）を合わせる。約５℃に冷却する。テトラヒドロフラン中リチウムアルミニウムハイドライドの溶液（2.24Ｌ，１ｍ，１ｍ，2.24モル）を約15分間かけてゆっくり添加する。添加終了後約60℃に加熱する。18時間後、氷浴中で冷却する。酒石酸カリウムナトリウムの飽和水溶液（208ml）を添加することによりゆっくりクエンチングする。クエンチング終了後、Na2SO4（100ｇ）およびセライト（150ｇ）を添加し、攪拌する。３時間後反応混合物をテトラヒドロフラン（２Ｌ）で希釈し、濾過する。固体をジエチルエール（２Ｌ）中に懸濁し、濾過する。濾液を合わせ、真空下に濃縮し、標題化合物を得る。融点；106〜110℃。Rf＝0.12（シリカゲル、ジクロロメタン／メタノール／濃アンモニア水  ９／１／0.1）。
３．３．４（−）−３−フェニル−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩の分割
（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸（1.10ｇ，2.62ミリモル）を水／メタノール（13.6mL／13.6mL）で合わせる。12Ｍ塩酸溶液（0.217mL，2.63ミリモル）を添加する。メタノール（13.6mL）中の３−フェニル−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（1.0ｇ，5.23ミリモル）の熱溶液を添加する。還流下に加熱する。30分後、ゆっくり周囲温度に冷却し、固体とする。固体を濾取し、固体を２回メタノール／水から、１回メタノール／２−ブタノンから、１回エタノールから再結晶させ、（−）−３−フェニル−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸を得る。アセトン／水中の炭酸ナトリウムおよび3,4,5−トリメトキシベンゾイルクロリドを用いて分析用試料を3,4,5−トリメトキシベンズアミドに変換後、CHIRALPAK AD（10μm×4.6cm×250cm）を用い、ペンタン／エタノール／メタノール／トリエチルアミン（80／15／5／0.1）を溶離剤とし、流量1.5ml／分としたHPLCによる分析で、（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩の（−）−異性体から製造した3,4,5−トリメトキシベンズアミドについて、98％のエナンチオマー余剰（98％ee）、保持時間22.30分が示される。
３．３．５（＋）−３−フェニル−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩と（−）−３−フェニル−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩の分割
エタノール（100mL）中の３−フェニル−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（5.0ｇ，20.2ミリモル）の熱溶液をエタノール（200ml）中の少量のアセトンを含む（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸（16.46ｇ，20.0ミリモル）の還流溶液に添加する。添加終了後、周囲温度にゆっくり冷却し、固体を得る。固体を濾取し、エタノールから三回固体を再結晶させ、（−）−３−フェニル−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩を得る。融点：176.0〜179.0℃。
元素分析値（C12H17NO・C20H18O10として）：
計算値：C 63.05；H 5.79；N 2.30
測定値：C 62.72；H 5.80；N 2.33
試料を3,4,5−トリメトキシベンズアミドに変換後、実施例３．３．４の方法によるHPLC分析で、（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩の（−）−異性体から製造した3,4,5−トリメトキシベンズアミドについて、99.9％のエナンチオマー余剰（99.9％ee）、保持時間22.30分が示される。
放置により上記母液から固体が得られる。固体を濾取し、２回エタノールから再結晶させ、（＋）−３−フェニル−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩を得る。融点；175.0〜176.0℃。
元素分析値（C12H17NO・C20H18O10・0.8C3H6Oとして）：
計算値：C 62.98；H 6.11；N 2.13
測定値：C 62.86；H 5.94；N 2.33
試料を3,4,5−トリメトキシベンズアミドに変換後、実施例３．３．４の方法によるHPLC分析で、（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩の（＋）−異性体から製造した3,4,5−トリメトキシベンズアミドについて、99.9％のエナンチオマー余剰（99.9％ee）、保持時間10.26分が示される。
３．３．６（＋）−３−フェニル−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩と（−）−３−フェニル−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩の分割
３−フェニル−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（99.2ｇ，659ミリモル）とエタノール（2.5Ｌ）を合わせる。還流下に加熱する。エタノール（5.07Ｌ）中の（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸（212ｇ，507ミリモル）の還流溶液を添加する。添加終了後、攪拌しながらゆっくり冷却して周囲温度とし、油状物とする。還流下エタノール（595mL）中に油状物を溶解し、エタノール（1.1Ｌ）中の（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸（49.2ｇ）の還流溶液を添加する。攪拌しながら周囲温度に冷却し、固体とする。固体を濾取し、エタノール（3.2Ｌ）から再結晶させ、第２の固体を得る。第2の固体を濾取し、エタノール（2.6Ｌ）から再結晶させ、結晶種として（−）−３−フェニル−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩を添加し、（−）−３−フェニル−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩（121ｇ）を得る。
３．３．７（＋）−３−フェニル−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩と（−）−３−フェニル−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩の分割
３−フェニル−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（101ｇ，530ミリモル）とエタノール（1.92Ｌ）を合わせる。還流下に加熱する。エタノール（3.9Ｌ）中の（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸（107ｇ，410ミリモル）の還流溶液を添加する。還流を継続する。10分後、ゆっくり周囲温度に戻し、結晶種を添加する。18時間後、形成した固体を濾取し、エタノール（200mL）で洗浄する。２回エタノールから再結晶し、（−）−３−フェニル−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩を得る。融点；179〜180℃。
0004195512.tif 000019
３．３．８（＋）−３−フェニル−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン塩酸塩の合成
（−）−３−フェニル−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩（30.9ｇ，50.7ミリモル）および重炭酸ナトリウム（11.6ｇ，53.2ミリモル）をテトラヒドロフラン／水（200ml，5／1）中で化合させる。氷浴中で冷却し、ジ−ｔ−ブチルジカーボネート（8.52ｇ，101ミリモル）を添加する。18時間後、真空下に蒸発させ、テトラヒドロフランの大部分を除去する。酢酸エチルで希釈し、水、塩化アンモニウム飽和水溶液、重炭酸ナトリウム飽和水溶液、次いで塩水で抽出する。有機層をMgSO4で乾燥し、濾過し、真空下に蒸発させ、残留物を得る。50％酢酸エチル／ヘキサンを溶離剤とするシリカゲル上のクロマトグラフィーに付し、（−）−３−フェニル−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩から調製した１−ｔ−ブトキシカルボニル−３−フェニル−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンを得る。Rf＝0.25（シリカゲル、50％酢酸エチル／ヘキサン）。
１−ｔ−ブトキシカルボニル−３−フェニル−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（13.0ｇ，44.6ミリモル）とジオキサン中の塩酸の溶液（22.3ml，４Ｍ，89.2ミリモル）を合わせる。50℃に加熱する。１時間後、冷却し、ジエチルエーテルを添加して固体を形成する。固体を濾取し、乾燥後、標題化合物を得る。融点；161〜163℃。
0004195512.tif 000020
元素分析値（C12H17NO・HClとして）：
計算値：C 63.29；H 7.97；N 6.15
測定値：C 63.21；H 7.86；N 6.05
３．４．１  １−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾル−１−イル）ベンゾイル）−３−フェニル−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンの合成
（−）−３−フェニル−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩（3.49ｇ，6.48ミリモル）およびアセトン（20ml）、水（６ml）および炭酸カリウム（2.70g，19.5ミリモル）を合わせる。氷浴中０℃に冷却する。30分後、アセトン（20mL）中の２−メトキシ−５−（1H−テトラゾル−１−イル）ベンゾイルクロリド（7.4ミリモル）の溶液を滴加する。周囲温度に加温する。18時間後、反応混合物を酢酸エチルと重炭酸ナトリウム飽和水溶液との間で分配する。有機層を分離し、塩水で抽出する。有機層をNa2SO4で乾燥し、濾過し、真空下に蒸発させ、標題化合物を得る。
３．４．２  １−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−フェニル−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンの合成
（−）−３−フェニル−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩（56.0ｇ，92.1ミリモル）、炭酸ナトリウム（19.5ｇ，184ミリモル）を酢酸エチル（２Ｌ）および水（２Ｌ）中で合わせる。氷浴中で約０℃に冷却する。30分後、２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイルクロリド（92.1ミリモル）をゆっくり少しずつ添加する。添加終了後、周囲温度に加温する。１時間後、反応混合物を酢酸エチルで希釈し、水、１Ｍ塩酸水溶液、次いで塩水で記する。有機層をNa2SO4で乾燥し、濾過し、真空下に蒸発させ、標題化合物を得る。Rf＝0.48（９／１ジクロロメタン／メタノール）。
３．５  １−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−フェニル−３−（２−メタンスルホニルオキシエチル）ピロリジンの合成
実施例２．５．２の方法により、１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾ−ル−１−イル）ベンゾイル）−３−フェニル−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（（−）−３−フェニル−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩より製造）を用いて製造し、標題化合物を得る。
３．６  １−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−フェニルピロリジンの合成
実施例１．６の方法により、１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−フェニル−３−（２−メタンスルホニルオキシエチル）ピロリジン（（−）−３−フェニル−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩より製造）および４−フェニルピペリジン−４−カルボン酸アミド塩酸塩を用いて製造し、標題化合物を得る。
実施例４
（Ｓ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジンの合成
0004195512.tif 000021
４．１（Ｒ）−（＋）−３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（S,S）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩の分割
（S,S）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸（14.77ｇ，35ミリモル）、水（200ml）およびメタノール（200ml）を合わせる。還流下に加熱する。メタノール（135ml）中の３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（18.36ｇ，70ミリモル）の溶液を滴加する。1.5時間後、水（135mL）を添加し、ゆっくり周囲温度に冷却して固体とする。形成した固体を濾過し、水で洗浄して標題化合物を得る。融点；201〜202℃（分解）。実施例３．３．４に記載のとおりのHPLCにより99.9％のエナンチオマー余剰（99.9％ee）が示される。
0004195512.tif 000022
４．２（Ｒ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンの合成
実施例２．４．３の法方により、（Ｒ）−３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩を用いて調製し、標題化合物を得る。
４．３（Ｒ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−メタンスルホニルオキシエチル）ピロリジンの合成
実施例２．５．２の（Ｓ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンの方法を用いて製造し、標題化合物を得る。
４．４（Ｓ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジンの合成
（Ｒ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−メタンスルホニルオキシエチル）ピロリジン（９ミリモル）、４−フェニルピペリジン−４−カルボン酸アミド塩酸塩（８ミリモル）、および、N,N−ジイソプロピルエチルアミン（4.6ｇ，36ミリモル）をアセトニトリル（100ml）中で化合させる。還流下に加熱する。19時間後、反応混合物を冷却し、真空下に蒸発させ、残留物を得る。残留物とジクロロメタンを合わせ、重炭酸ナトリウム飽和水溶液、次いで塩水で抽出する。有機層をMgSO4で乾燥し、濾過し、真空下に蒸発させ、標題化合物を得る。
実施例５
（Ｒ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジンの合成
0004195512.tif 000023
５．１（Ｓ）−１−（ｔ−ブトキシカルボニル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンの合成
（Ｓ）−３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（R,R）−ジ−ｐ−アニソイル酒石酸塩（40ｇ，59,0ミリモル）、N,N−ジイソプロピルエチルアミン（20.6mL）およびジクロロメタン（400ml）を化合させる。ジクロロメタン（100mL）中のジ−ｔ−ブチルジカーボネート（14.2ｇ）の溶液を滴加する。18時間後、反応混合物を重炭酸ナトリウム飽和水溶液、ついで３回水で抽出する。有機層をMgSO4で乾燥し、濾過し、真空下に蒸発させ、残留物を得る。残留物を、順次35％酢酸エチル／ヘキサン次いで50％酢酸エチル／ヘキサンを溶離剤とするシリカゲル上のクロマトグラフィーに付し、標題化合物を得る。Rf＝0.16（シリカゲル、35％酢酸エチル／ヘキサン）。
５．２（Ｓ）−１−（ｔ−ブトキシカルボニル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−メタンスルホニルオキシエチル）ピロリジンの合成
（Ｓ）−１−（ｔ−ブトキシカルボニル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（17ｇ，47.0ミリモル）、N,N−ジイソプロピルエチルアミン（20ml）およびジクロロメタン（300ml）を化合させる。反応混合物を氷浴中で冷却する。メタンスルホニルクロリド（4.8ml）を滴加する。30分後、更にメタンスルホニルクロリド（0.9mL）を添加する。２時間後、反応混合物を重炭酸ナトリウム飽和水溶液、ついで３回水で抽出する。有機層をMgSO4で乾燥し、濾過し、真空下に蒸発させ、残留物を得る。残留物を順次20％酢酸エチル／ヘキサン、35％酢酸エチル／ヘキサン、50％酢酸エチル／ヘキサン、次いで酢酸エチルを溶離剤とするシリカゲル上のクロマトグラフィーに付し、標題化合物を得る。Rf＝0.24（シリカゲル、35％酢酸エチル／ヘキサン）。
５．３（Ｓ）−１−（ｔ−ブトキシカルボニル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジンの合成
（Ｓ）−１−（ｔ−ブトキシカルボニル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−メタンスルホニルオキシエチル）ピロリジン（17.9ｇ，40.9ミリモル）、４−フェニルピペリジン−４−カルボン酸アミド塩酸塩（11ｇ，45.7ミリモル）、炭酸カリウム（18ｇ，130ミリモル）およびテトラヒドロフラン／水（120mL／40mL）を化合させる。還流下に加熱する。90時間後、反応混合物を周囲温度に冷却し、層を分離させる。水層をジクロロメタンで抽出する。有機層を合わせ、MgSO4で乾燥し、濾過し、真空下に蒸発させ、残留物を得る。残留物を順次、20％酢酸エチル／ヘキサン、３％メタノール／ジクロロメタン次いで６％メタノール／ジクロロメタンを溶離剤とするシリカゲル上のクロマトグラフィーに付し、標題化合物を得る。Rf＝0.40（シリカゲル、６％メタノール／ジクロロメタン）。
５．４．１（Ｓ）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン塩酸塩の合成
（Ｓ）−１−（ｔ−ブトキシカルボニル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン（1.15ｇ）とジクロロメタン（25ml）を合わせる。氷浴中で冷却する。攪拌しながら、塩酸（気体、約3.6ｇ）を添加する。１時間後、真空下に蒸発させ、残留物を得る。ジクロロメタンを添加し、真空下に蒸発させ、乾燥し、標題化合物を得る。
５．４．２（Ｓ）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン塩酸塩の合成
（Ｓ）−１−（ｔ−ブトキシカルボニル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン（15.0ｇ，27.5ミリモル）とジクロロメタン（200ml）を合わせる。アイスバス中で冷却する。ジオキサン中の塩酸の溶液（30mL，４Ｍ，120ミリモル）を添加する。３時間後、メタノール（100ml）を添加し、約45℃に加熱する。12時間後、真空下に蒸発させ、標題化合物を得る。
５．５（Ｒ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジンの合成
（Ｓ）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン塩酸塩（1.03ｇ，1.99ミリモル）、N,N−ジイソプロピルエチルアミン（1.1mL，6.3ミリモル）をジクロロメタン（50ｍ）中で化合させる。１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（0.3g，2.22ミリモル）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（0.43ｇ，2.22ミリモル）および２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）安息香酸（0.52ｇ，2.35ミリモル）を添加する。18時間後、反応混合物をジクロロメタンで希釈し、２回水で抽出する。有機層をMgSO4で乾燥し、濾過し、真空下に蒸発させ、残留物を得る。残留物を順次３％メタノール／ジクロロメタン、５％メタノール／ジクロロメタン、次いで10％メタノール／ジクロロメタンを溶離剤とするシリカゲル上のクロマトグラフィーに付し、標題化合物を得る。Rf＝0.17（シリカゲル、６％メタノール／ジクロロメタン）。
５．６（Ｒ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン塩酸塩の合成
（Ｒ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン（0.77ｇ，1.19ミリモル）およびジクロロメタン（20mL）を合わせる。氷浴中で冷却する。ジオキサン中の塩酸の溶液（0.72ml，４Ｍ，2.88ミリモル）を添加し、固体を得る。３時間後、固体を集め、くり返してエタノールと合わせ、真空下に蒸発させ、標題化合物を得る。
製造例４
２−メトキシ−５−（4H−トリアゾル−４−イル）安息香酸
J. Chem. Soc.（c）, 1664（1967）の方法に従い、メチル２−メトキシ−５−アミノベンゾエート（2.0ｇ，11ミリモル）、N,N−ジメチルホルムアミドアジン（1.56ｇ，11ミリモル）、ｐ−トルエンスルホン酸（190mg）をトルエン（25ml）中で化合させる。反応容器に対し、容器のヘッドスペースがアルゴンでパージされ希塩酸水溶液を通して流出物を回収するように気体導入口をつける。還流下に加熱する。20時間後、反応混合物を真空下に濃縮し、残留物を得る。残留物をジクロロメタンと重炭酸ナトリウム飽和水溶液との間で分配する。水層を２回ジクロロメタンで抽出する。有機層を合わせ、MgSO4で乾燥し、濾過し、真空下に蒸発させ、残留物を得る。残留物を順次70％酢酸エチル／ジクロロメタン次いで５％メタノール／ジクロメタンを溶離剤とするシリカゲル上のクロマトグラフィーに付し、残留物を得る。残留物を酢酸エチル／ヘキサンから再結晶させ、メチル２−メトキシ−５−（4H−トリアゾル−４−イル）ベンゾエートを得る。融点；191〜195.5℃。
あるいは、J. Med. Chem. 21, 1100（1978）の方法にしたがって、メチル２−メトキシ−５−アミノベンゾエート（1.8ｇ，10ミリモル）、ジホルミルヒドラジン（0.97ｇ，11ミリモル）および五酸化リン（1.84ｇ，13ミリモル）を合わせる。160℃に加熱する。1.5時間後、反応混合物を冷却し、重炭酸ナトリウム飽和水溶液を添加する。３回ジクロロメタンで抽出する。合わせた有機層をMgSO4で乾燥し、濾過し、真空下に蒸発させ、残留物を得る。残留物を順次、40％酢酸エチル／ジクロメタン次いで５％メタノール／ジクロロメタンを溶離剤とするシリカゲル上のクロマトグラフィーに付し、メチル２−メトキシ−５−（4H−トリアゾール−４−イル）ベンゾエートを得る。融点；179〜182℃。
メチル２−メトキシ−５−（4H−トリアゾール−４−イル）ベンゾエート（56ミリモル）およびメタノール（200ml）および水（50ml）を合わせる。１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（62.5ml，62.5ミリモル）を添加する。還流下に加熱する。８時間後、真空下に濃縮し、溶媒の大部分を除去する。１Ｍ塩酸水溶液を用いてpHを約１〜２に調節し、ジクロロメタンで抽出する。有機層をMgSO4で乾燥し、濾過し、真空下に蒸発させ、標題化合物を得る。
実施例６
（Ｒ）−１−（２−メトキシ−５−（4H−トリアゾール−４−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン
0004195512.tif 000024
６．１（Ｒ）−１−（２−メトキシ−５−（4H−トリアゾール−４−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジンエチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジンの合成
実施例５．５の方法により、（S）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロフェニル）ピロリジン塩酸塩および２−メトキシ−５−（4H−トリアゾル−４−イル）安息香酸を用いて製造し、標題化合物を得る。
６．２（Ｒ）−１−（２−メトキシ−５−（4H−トリアゾール−４−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン塩酸塩の合成
実施例５．６の方法により（Ｒ）−１−（２−メトキシ−５−（4H−トリアゾール４−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジンエチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジンを用いて製造し標題化合物を得る。
製造例５
２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−５−イル）安息香酸
メチル２−メトキシ−５−ホルミルベンゾエート（5.0ｇ，25.9ミリモル）、塩酸ヒドロキシルアミン（8.55ｇ，133ミリモル）および酢酸ナトリウム（10.25ｇ，125ミリモル）をエタノール／水（200ml，１／１）中で化合させる。50℃に加熱する。１時間後、反応混合物を氷上に注ぎ込み、固体とする。固体を濾取し、メチル２−メトキシ−５−ホルミルベンゾエートオキシムを得る。Rf＝0.76（シリカゲル、９／１ジクロロメタン／メタノール）。
メチル２−メトキシ−５−ホルミルベンゾエートオキシム（3.5ｇ，16.7ミリモル）をジクロロメタン（75ml）と合わせ、氷浴中で冷却する。チオニルクロリド（2.0ml，27.2ミリモル）を滴加する。20分後、反応混合物をジクロロメタンで希釈し、重炭酸ナトリウム飽和水溶液、次いで塩水で抽出する。有機層をMgSO4で乾燥し、濾過し、真空下に濃縮し、残留物を得る。残留物を１／１酢酸エチル／ヘキサンを溶離剤とするシリカゲル上のクロマトグラフィーに付し、メチル２−メトキシ−５−シアノベンゾエートを得る。
メチル２−メトキシ−５−シアノベンゾエート（0.67ミリモル）、アジ化ナトリウム（0.13ｇ，2.04ミリモル）、および塩酸トリエチルアンモニウム（0.14ｇ，1.03ミリモル）をＮ−メチルピロリドン（６ml）中で化合させる。150℃に加熱する。４時間後、周囲温度に冷却し、反応混合物を水と酢酸エチルとの間で分配する。層を分離させ、水層を３回酢酸エチルで抽出する。水層のpHを１Ｍ塩酸水溶液で約１とする。水層を再度、３回酢酸エチルで、そして２回ジクロロメタンで抽出する。水層を塩化ナトリウムで飽和させ、再度、４回ジクロロメタンで抽出する。有機層を合わせ、MgSO4で乾燥し、濾過し、真空下に蒸発させ、メチル２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−５−イル）ベンゾエートを得る。
メチル２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−５−イル）ベンゾエート（１ミリモル）および水素化リチウム（1.1ミリモル）を１／１テトラヒドロフラン／水（５ml）中で化合させる。24時間後、反応混合物を0.5m塩酸水溶液とジクロロメタンで希釈する。層を分離させ、水層を３回ジクロロメタンで抽出する。有機層を合わせ、MgSO4で乾燥し、濾過し、真空下に蒸発させ、標題化合物を得る。
実施例７
（Ｒ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−５−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン
0004195512.tif 000025
７．１（Ｒ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−５−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジンの合成
実施例５．５の方法により、（S）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン塩酸塩および２−メトキシ−５−（1H−テトラゾル−５−イル）安息香酸を用いて製造し、標題化合物を得る。
製造例６
４−（ピリド−３−イル）ピペリジン−４−カルボン酸アミド塩酸塩
N,N−ビス−（２−クロロエチル）ベンジルアミン塩酸塩（72.0ｇ，269ミリモル）およびピリド−３−イルアセトニトリル（31.8ｇ，269ミリモル）およびヘキサデシルトリブチルホスホニウムブロミド（６ｇ）を水酸化ナトリウム水溶液（50重量％、400ml）中で化合させる。蒸気浴上で加熱し、激しく攪拌する。1.5時間後反応混合物を周囲温度に冷却する。反応混合物を３回ジクロロメタンで抽出する。有機層を合わせ、２回10％塩酸水溶液で抽出する。有機層を合わせ、水酸化ナトリウム水溶液（50重量％）で塩基性とする。塩基性化した水溶液を３回ジエチルエーテルで抽出する。合わせたエーテル層をMgSO4で乾燥し、濾過し、濾液を得る。濾液を塩化水素ガスでパージし、固体とする。固体を濾取し、65℃で真空下乾燥し、１−ベンジル−４−（ピリド−３−イル）−４−シアノピペリジン塩酸塩を得る。
１−ベンジル−４−（ピリド−３−イル）−４−シアノピペリジン塩酸塩（7.0ｇ，20ミリモル）、水酸化ナトリウム水溶液（７ml，50重量％）およびエタノール（130Ｌ）を化合させる。約50℃に加熱する。加熱を止め、反応混合物の温度が60℃を超えないような速度で過酸化水素の溶液（23ml，水中30重量％）を添加する。過酸化水素の添加終了後、反応混合物の温度を50℃に保持する。４時間後、真空下に濃縮し、固体を得る。固体を濾取し、水で洗浄し、風乾し、１−ベンジル−４−（ピリド−３−イルＮ−オキシド）−ピペリジン−４−カルボン酸アミドＮ−オキシドを得る。Rf＝0.29（シリカゲル、９／１メタノール／ジクロロメタン）。
あるいは、１−ベンジル−４−（ピリド−３−イル）−４−シアノピペリジン塩酸塩（20.0ｇ）、水酸化ナトリウム水溶液（20ml，50重量％）およびメタノール（380ml）を化合させる。反応混合物の温度が60℃を超えないような速度で過酸化水素の溶液（60ml，水中30重量％）を添加する。過酸化水素の添加終了後、約50℃に加熱する。２時間後、真空下に濃縮し、固体を得る。固体を濾取し、水で洗浄し、１−ベンジル−４−（ピリド−３−イルＮ−オキシド）−ピペリジン−４−カルボン酸アミドＮ−オキシドを得る。
１−ベンジル−４−（ピリド−３−イルＮ−オキシド）−ピペリジン−４−カルボン酸アミドＮ−オキシド（3.1ｇ、10.5ミリモル）、５％Pd／Ｃ（２ｇ）およびメタノール（200ml）を加圧容器中合わせる。水素55psiで水素添加する。71時間後、触媒を濾去し、メタノールで洗浄し、濾液を真空下に蒸発させ、４−（ピリド−３−イル）−ピペリジン−４−カルボン酸アミドを得る。
４−（ピリド−３−イル）−ピペリジン−４−カルボン酸アミド（3.0ｇ，14.6ミリモル）、メタノール（30ml）および水（10ml）を合わせる。氷浴中で冷却し、ヨウ化水素酸の水溶液（4.2ml，57％，31.2ミリモル）を添加する。30分後、濾過し、濾液を真空下に蒸発させ、残留存物を得る。残留物をメタノールで磨砕し、固体を得る。固体を集め、真空下５６℃で乾燥し、標題化合物を得る。
実施例８
（Ｒ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−５−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−（ピリド−３−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン
0004195512.tif 000026
８．１．１（Ｒ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−５−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−（ピリド−３−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジンの合成
（Ｓ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−５−イル）ベンゾイル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−メタンスルホニルオキシエチル）ピロリジン（1.3ミリモル）、N,N−ジイソプロピルエチルアミン（１ml，5.74ミリモル）および４−（ピリド−３−イル）ピペリジン−４−カルボン酸アミド塩酸塩（0.75ｇ，1.62ミリモル）をアセトニトリル（25ml）中で化合させる。還流下に加熱する。18時間後、メタノール（15ml）を添加し、還流を継続する。18時間後、反応混合物を周囲温度に戻し、ジクロロメタンで希釈し、２回水で抽出する。有機層をMgSO4で乾燥し、濾過し、真空下に濃縮し、残留物を得る。残留物を順次、酢酸エチル、３％メタノール／酢酸エチル、６％メタノール／酢酸エチル、次いで10％メタノール／酢酸エチルを溶離剤とするシリカゲル上のクロマトグラフィーに付し、標題化合物を得る。
８．１．２（Ｒ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−５−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−（ピリド−３−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジンの合成
（Ｓ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−５−イル）ベンゾイル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）−３−（２−メタンスルホニルオキシエチル）ピロリジン（1.6ミリモル）、炭酸カリウム（1.1ｇ、8.0ミリモル）、および４−（ピリド−３−イル）ピペリジン−４−カルボン酸アミド（0.50ｇ，2.44ミリモル）をテトラヒドロフラン／水（９ml／３ml）中で化合させる。還流下に加熱する。100時間後、反応混合物を周囲温度に戻し、ジクロロメタンで希釈する。濾過し、濾液を２回水で抽出する。有機層をMgSO4で乾燥し、濾過し、真空下に濃縮し、残留物を得る。残留物を順次、酢酸エチル、３％メタノール／酢酸エチル、６％メタノール／酢酸エチル、次いで10％メタノール／酢酸エチルを溶離剤とするシリカゲル上のクロマトグラフィーに付し、標題化合物を得る。
８．２（Ｒ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−５−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−（ピリド−３−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン塩酸塩の合成
（Ｒ）−１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−５−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−（ピリド−３−イル）−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン（0.3ｇ）とジクロロメタン（50ml）を合わせる。氷浴中で冷却する。塩酸（気体、約6.0ｇ）を添加する。１時間後、メタノール（約20ml）を添加し、真空下に蒸発させ、56℃で真空下乾燥し、標題化合物を得る。
実施例９
１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジメチルフェニル）ピロリジン
0004195512.tif 000027
９．１．１  ３−シアノ−３−（3,4−ジメチルフェニル）ペンタン二酸ジエチルエステルの合成
3,4−ジメチルフェニルアセトニトリル（50.0ミリモル）とテトラヒドロフラン（140ml）を合わせる。約５℃に冷却する。ナトリウムビス（トリメチルシリル）アミドの溶液（800ml，テトラヒドロフラン中１Ｍ，800ミリモル）を滴加する。添加終了後、反応混合物を周囲温度に戻し、１時間攪拌する。反応混合物の温度が20℃を超えないような速度で、上記溶液をカニューレでテトラヒドロフラン（500ml）中のエチルブロモアセテート（84.5ml、762ミリモル）の冷（−８℃）溶液に移す。攪拌しながら周囲温度に戻す。18時間後、ジエチルエーテル（1.5Ｌ）で希釈し、塩化アンモニウム飽和水溶液、水、次いで、塩化ナトリウム飽和水溶液で抽出する。有機層をMgSO4で乾燥し、濾過し、真空下に濃縮し、標題化合物を得る。
９．１．２  ３−シアノ−３−（3,4−ジメチルフェニル）ペンタン二酸ジエチルエステルの合成
ナトリウムビス（トリメチルシリル）アミド（723ml，テトラヒドロフラン中１Ｍ、723ミリモル）を氷浴中０℃に冷却する。約1.5時間かけてテトラヒドロフラン（130ml）中の3,4−ジメチルフェニルアセトニトリル（50ミリモル）の溶液を添加する。添加終了後、反応混合物を周囲温度に戻し攪拌放置する。２時間後、テトラヒドロフラン（250ml）中のエチルブロモアセテート（126ｇ，757ミリモル）の冷（−50℃）溶液にカニューレで上記溶液を移す。移し終わった後、反応混合物を周囲温度に戻す。18時間後、ジエチルエーテル（500ml）で希釈し、水、１Ｍ塩酸溶液、重炭酸ナトリウム飽和水溶液、次いで塩水で抽出する。有機層をMgSO4で乾燥し、濾過し、真空下に濃縮し、標題化合物を得る。残留物をジエチルエーテルから再結晶させ、標題化合物を得る。
９．２．１（３−（3,4−ジメチルフェニル）−５−オキソピロリジン−３−イル）酢酸エチルエステルの合成
実施例２．２．２の方法により、３−シアノ−３−（3,4−ジメチルフェニル）ペンタンジ酸ジエチルエステルを用いて製造し、標題化合物を得る。
９．２．２（３−（3,4−ジメチルフェニル）−５−オキソピロリジン−３−イル）酢酸エチルエステルの合成
３−シアノ−３−（3,4−ジメチルフェニル）ペンタンジ酸ジエチルエステル（56ｇ，177ミリモル）とエタノール（500ml）をParr容器中で合わせる。ラニーニッケル（50ｇ）および濃アンモニア水（85ml）を添加する。50℃、100psiで48時間水素添加する。セライトパッドで濾過し、固体をエタノールで洗浄する。濾液を真空下に蒸発させ、残留物を得る。残留物を６％メタノール／ジクロロメタンを溶離剤とするシリカゲル上のクロマトグラフィーに付し、標題化合物を得る。
９．３（３−（3,4−ジメチルフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンの合成
実施例２．３．１の方法により、（３−（3,4−ジメチルフェニル）−５−オキソピロリジン−３−イル）酢酸エチルエステルを用いて製造し、ジクロロメタン／ジエチルエーテルから再結晶させて、標題化合物を得る。Rf＝0.35（シリカゲル、85／10／５ジクロロメタン／メタノール／酢酸）。
９．４  １−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾル−１−イル）ベンゾイル）−（３−（3,4−ジメチルフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンの合成
（３−（3,4−ジメチルフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン（20ミリモル）および重炭酸ナトリウム（8.4ｇ）をアセトン（50ml）／水（50ml）中で合わせる。アセトン（50ml）中の２−メトキシ−５−（1H−テトラゾル−１−イル）ベンゾイルクロリド（20ミリモル）の溶液を添加する。３時間後、反応混合物を３回酢酸エチルで抽出する。有機層をMgSO4で乾燥し、濾過し、真空下に濃縮し、標題化合物を得る。
９．５  １−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾル−１−イル）ベンゾイル）−（３−（3,4−ジメチルフェニル）−３−（２−メタンスルホニルオキシエチル）ピロリジンの合成
実施例２．５．２の方法により、１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−（３−（3,4−ジメチルフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジンを用いて製造し、標題化合物を得る。
９．６  １−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジメチルフェニル）ピロリジンの合成
実施例１．６の方法により１−（２−メトキシ−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−（３−（3,4−ジメチルフェニル）−３−（２−メタンスルホニルオキシエチル）ピロリジンと４−フェニルピペリジン−４−カルボン酸アミド塩酸塩を用いて製造し、標題化合物を得る。
製造例７
３−（1H−テトラゾール−１−イル）安息香酸
エチル３−アミノベンゾエートを用いて調製例１の方法によりエチル３−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾエートを製造し、エチル３−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾエートを得る。Rf＝0.51（シリカゲル、１／１酢酸エチル／ヘキサン）。
エチル３−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾエート（4.93ｇ，22.6ミリモル）およびテトラヒドロフラン／水（100ml／25ml）を合わせる。水素化リチウム（1.9ｇ、45.2ミリモル）を添加し、還流下に加熱する。２時間後、周囲温度に冷却し、反応混合物を５回１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液で抽出する。水層を合わせ、酢酸エチルで抽出する。水層を1M塩酸水溶液（pH約１）で酸性化し、固体とする。固体を濾取し、標題化合物を得る。
実施例１０
（Ｒ）−１−（３−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン
0004195512.tif 000028
10．１（Ｒ）−１−（３−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジンの合成
実施例５．５の方法により（Ｓ）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン塩酸塩および３−（1H−テトラゾール−１−イル）安息香酸を用いて製造し、標題化合物を得る。
製造例８
２−メチル−５−（1H−テトラゾール−１−イル）安息香酸
２−メチル−５−ニトロ安息香酸（4.98ｇ，27.5ミリモル）、炭酸カリウム（1.93ｇ，14.0ミリモル）およびヨウ化メチル（7.80ｇ，55.0ミリモル）をアセトン（100ml）中で合わせる。還流下に加熱する。４時間後、反応混合物を冷却し、水で希釈し、５回酢酸エチルで抽出する。有機層を合わせ、重炭酸ナトリウム飽和水溶液、次いで塩水で抽出する。有機層をMgSO4で乾燥し、濾過し、真空下に蒸発させ、メチル２−メチル−５−ニトロベンゾエートを得る。Rf＝0.61（シリカゲル、酢酸エチル／ヘキサン１／１）。
メチル２−メチル−５−ニトロベンゾエート（5.32ｇ，27.2ミリモル）とメタノール（100ml）を合わせる。５％Pd／Ｃ（0.27ｇ）を添加する。50psiで加圧装置内で水素添加する。18時間後、セライトで濾過して触媒を除去し、濾液を真空下に蒸発させ、メチル２−メチル−５−アミノ安息香酸を得る。Rf＝0.34（シリカゲル、酢酸エチル／ヘキサン１／４）。
メチル２−メチル−５−アミノベンゾエート（4.5ｇ，27.2ミリモル）とトリエチルオルトホルメート（16.2ｇ，109ミリモル）を氷酢酸（25ml）中で合わせる。12時間後、アジ化ナトリウム（7.08ｇ，109ミリモル）を少しずつ添加する。70℃に加熱する。２時間後、反応混合物を周囲温度に冷却し、水（250ml）で希釈する。固体を濾取し、水で洗浄し、乾燥し、メチル２−メチル−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾエートを得る。Rf=0.13（シリカゲル、酢酸エチル／ヘキサン１／４）。
メチル２−メチル−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾエート（5.2ｇ，23.9ミリモル）と水素化リチウム水和物（2.0ｇ，47.7ミリモル）をテトラヒドロフラン／水（50ml／50ml）中で合わせる。還流下に加熱する。２時間後、ジエチルエーテルで希釈し、層を分離させる。水層を３回ジエチルエーテルで抽出する。合わせたジエチルエーテル層を１Ｍ水酸化ナトリウム溶液（20ml）で３回抽出する。水層を合わせ、１Ｍ塩酸水溶液（pH約１）で酸性化し、固体とする。固体を濾取し、水から再結晶させ、標題化合物を得る。
実施例１１
（Ｒ）−１−（２−メチル−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン
0004195512.tif 000029
11．１（Ｒ）−１−（２−メチル−５−（1H−テトラゾール−１−イル）ベンゾイル）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル．）ピロリジンの合成
実施例５．５の方法により、（Ｓ）−３−（２−（４−フェニル−４−カルボキサミドピペリジン−１−イル）エチル）−３−（3,4−ジクロロフェニル）ピロリジン塩酸塩と２−メチル−５−（1H−テトラゾール−１−イル）安息香酸を用いて製造し、標題化合物を得る。
タキキニンは共通のＣ−末端配列，Phe−Xaa−Gly−Leu−Met−NH2を共有しているニューロペプチドの１つのクラスである。タキキニンは末梢神経と中枢神経系に広範に分布し、そこで少なくとも３種の受容体と結合する。ＮＫ1、ＮＫ2およびＮＫ3受容体はそれぞれサブスタンスＰ、ニューロキニンＡ（NKA）およびニューロキニンＢ（NKB）の優先的結合親和性により定義される。
タキキニン拮抗剤の用途は種々のタキキニン媒介疾患および症状の治療であり、例えば膀胱炎；気管支収縮；過敏性反応；疼痛治療；末梢神経症；ヘルペス後の神経痛；有害免疫反応；呼吸器疾患、例えば喘息、気管支炎、咳、鼻炎およびアレルギー症状など；眼科疾患、例えば結膜炎および春季結膜炎；皮膚疾患、例えば接触性皮膚炎、アトピー性皮膚炎および蕁麻疹；炎症性疾患、例えば関節リューマチおよび骨関節炎など；胃腸症状、例えばクローン病、嘔吐および潰瘍性大腸炎；血管拡張による症状、例えばアンギナおよび偏頭痛；および中枢神経系の疾患と症状、例えば不安、抑鬱、精神病、分裂症、痴呆などが対象となる。
タキキニン媒介の疾患および症状はタキキニンが全体的または部分的に臨床上の徴候に関与する疾患や症状を指すものとする。更に、タキキニンの関与は必ずしも特定のタキキニン媒介の疾患や症状の原因である必要はない。タキキニン拮抗剤は上記したタキキニン媒介の疾患および症状の抑制やその治療緩解において有用である。
本発明は式（１）の新規で有用なタキキニン拮抗剤およびその立体異性体および製薬上許容しうる塩を提供する。特に本発明はＮＫ1およびＮＫ2受容体拮抗剤である式（１）の化合物を提供する。
別の実施態様において、本発明は式（１）の化合物の治療有効量をタキキニン媒介の疾患や症状の治療の必要な患者に投与することからなる、上記患者における上記疾患や症状の治療方法を提供する。本明細書に記載する治療対象となる種々の疾患や症状は当業者にはよく知られたものである。また当業者は、関連する疾患や症状に対しても、式（１）の化合物の治療有効量で疾患や症状を現在有する患者を治療することにより、または疾患や症状を有する患者を予防的に治療することができる。
本明細書では、「患者」という用語は特定のタキキニン媒介の疾患や症状を有する哺乳類のような温血動物を指す。モルモット、イヌ、ネコ、ラット、マウス、ウマ、ウシ、ヒツジおよびヒトがこの用語の範囲に含まれる動物の例である。ある患者は、その患者がタキキニン媒介の疾患や症状の１種または２種以上に罹患している場合に、上記疾患や症状の治療の必要な患者とされる。
タキキニン媒介の疾患や症状の治療の必要な患者の識別は、当業者の知るとおりである。専門医は臨床試験、身体検査および病歴／家族暦に基づいて、上記治療の必要な患者を容易に識別できる。
本明細書では式（１）の化合物の「治療有効量」とは、タキキニン媒介の疾患や症状を抑制するのに有効な量を指す。「抑制」とは上記した疾患や症状の進行の遅延、中断、阻止または停止が起こるような全ての過程を指し、必ずしも疾患や症状の完全な消失を指すものではなく、タキキニン媒介の疾患や症状の予防的治療も包含するものとする。
治療有効量は従来の方法を用いることにより、または、同様の状況下で得られた結果を観察することにより、当業者である担当の診断医により容易に決定できる。治療有効量、即ち用量を決定する際には、担当診断医が多くの要因を考慮することが必要であり、例えば、動物種、その体格、年齢、全身の健康状態、関与する特定の疾患、疾患の関与の程度と重篤度、個体別の応答、投与する特定の化合物、投与方法、投与する製剤の生体利用性、選択された用法、併用薬剤の使用、および他の関連状況を考慮する。
式（１）の化合物の治療有効量は約0.1ミリグラム／kg体重／日（mg／kg／日）〜約100mg／kg／日の範囲で変わるものと予測される。好ましい量は当業者が決定できる。
上記したタキキニン媒介の疾患や症状を有する患者を治療する際には、式（１）の化合物を、経口、吸入、非経腸および局所の投与経路を含む、化合物が有効量で生体利用される任意の形態および様式で投与できる。例えば、式（１）の化合物を経口で、エアロゾルまたは乾燥粉末の吸入により、また、皮下、筋肉内、静脈内、鼻内、直腸内、経皮、局所投与などにより投与できる。呼吸系の疾患および症状、例えば、喘息、気管支炎および咳の治療のためには、経口または吸入投与が一般的に好ましい。製剤調製の当業者は選択された化合物の特定の性質、治療対象である疾患または症状、疾患または症状の段階、および他の関連状況に応じて適切な投与の形態および様式を容易に選択できる（Remington’s Pharmaceutical Sciences, 18th Edition, MackPublishing Co.（1990））。
本発明の化合物は単独でまたは、製薬上許容しうる担体または賦形剤と組み合わせた医薬組成物の形態で投与でき、その比率や性質は選択されたか化合物の溶解度や化学特性、選択された投与経路、および標準的な薬剤上の慣行により決定できる。本発明の化合物はそれ自体有効であるが、安定性、結晶化上の都合、溶解度の向上などを目的として、酸付加塩や塩基付加塩のような製薬上許容しうるその塩の形態に製剤して投与してもよい。
別の実施態様において、本発明は、製薬上許容しうる担体または賦形剤の１種または２種以上と混合して、または他の方法で組み合わせて、式（１）の化合物の治療有効量を含有する医薬組成物を提供する。
医薬組成物は製薬技術分野でよく知られた方法で調製する。担体または賦形剤は、活性成分のための溶媒または媒体として作用する固体、半固体、または液体であってよい。適当な担体または賦形剤は当該技術分野でよく知られている。医薬組成物は経口、吸入、非経腸、または局所用途に適合させてよく、患者に対し、錠剤、カプセル、エアゾル、吸入剤、座薬、溶液、懸濁液などの形態で投与してよい。
本発明の化合物は例えば不活性の希釈剤とともに、または可食担体とともに経口投与してよい。ゼラチンカプセルに封入してもよく、圧縮して錠剤としてもよい。経口治療投与の目的のためには、式（１）の化合物を賦形剤とともに配合し、錠剤、トローチ、カプセル、エリキシル、懸濁液、シロップ、ウエハース、チューインガムなどの形態で使用してよい。これらの製剤は式（１）の化合物、即ち活性成分を少なくとも４％含有するが、特定の形態に応じて変化してよく、好都合には、単位の４％〜約70重量％であってよい。組成物中に存在する活性成分の量は、投与に適する単位剤形が得られるようなものとする。
錠剤、丸薬、カプセル、トローチなどはまた１種以上の以下に示す補助剤、即ち、微結晶セルロース、トラガカントガムまたはゼラチンのようなバインダー；澱粉または乳糖のような賦形剤、アルギン酸、プリモゲル、コーンスターチなどのような崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムまたはステロテックスのような潤滑剤；コロイド状二酸化ケイ素のような滑剤；およびスクロースまたはサッカリンのような甘味剤を含有してよく、またペパーミント、メチルサリシレートまたはオレンジフレーバーのような着香剤も添加してよい。投与単位形態がカプセルである場合は、上記した物質のほかに、ポリエチレングリコールまたは脂肪油のような液体担体も含有してよい。他の投与単位形態は例えばコーティングのような投与単位の物理的形態を変える他の種々の物質を含有してよい。即ち、錠剤または丸薬は砂糖、シェラックまたは他の腸溶性コーティング剤でコーティングしてよい。シロップは本発明の化合物のほかに、甘味剤としてのスクロースおよび特定の保存料、染料および着色料およびフレーバーを含有してよい。これらの種々の組成物を調製する際に使用する物質は製薬上純粋であり、使用量において非毒性でなければならない。
非経口治療投与の目的のためには、本発明の化合物は溶液または懸濁液に配合してよい。これらの製剤は本発明の化合物少なくとも0.1％を含有しなければならないが、0.1％〜約50重量％の範囲で変化してよい。このような組成物中に存在する活性成分の量は、適当な用量が得られるようなものとする。好ましい組成物および製剤は当業者が決定できる。
溶液および懸濁液はまた１種以上の以下の補助剤、即ち、注射用水、生理食塩水、脂肪油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたは他の合成溶媒のような滅菌希釈剤；ベンジルアルコールまたはメチルパラベンのような抗菌剤；アスコルビン酸または重亜硫酸ナトリウムのような抗酸化剤；エチレンジアミン四酢酸のようなキレート化剤；酢酸塩、クエン酸塩またはリン酸塩のような緩衝剤および塩化ナトリウムやデキストロースのような浸透圧調節剤を含有してよい。非経口製剤はアンプル、使い捨てシリンジまたはガラス製またはプラスチック製の複合用量バイアルに充填できる。
本発明の化合物はまたエアゾルまたは乾燥粉末として吸入により投与してもよい。送達は液化または圧縮ガスにより行ってよく、または、本発明の化合物またはその製剤を分与できる適当なポンプ系により行ってよい。式（１）の化合物の吸入による投与のための製剤は、一相、二相、または三相の系であってよい。種々の系が式（１）の化合物のエアゾルによる投与に使用できる。乾燥粉末製剤は、式（１）の化合物をペレット化またはミリングして適当な粒径とするか、または、ペレット化された、またはミリングされた式（１）の化合物を乳糖などのような適当な担体物質と混合することにより調製する。吸入による送達は、必要な容器、作動手段、弁、補助容器などを含む。吸入による投与のための好ましいエアゾルおよび乾燥粉末の製剤は当業者が決定できる。
本発明の化合物はまた局所投与してよく、その場合、担体は、適宜、溶液、軟膏またはゲル基剤からなっていてよい。基剤は例えば１種以上の以下の物質、即ち、ワセリン、ラノリン、ポリエチレングリコール、ミツロウ、鉱物油、希釈剤、例えば水およびアルコール、および乳化剤および安定化剤を含有してよい。局所製剤は式（１）の化合物または製薬上許容しうるその塩を約0.1〜約10％w／v（重量／単位容量）の濃度で含有してよい。
本発明のタキキニン受容体拮抗剤は以下の方法により評価できる。
実施例Ａ
推定拮抗剤によるNK1およびNK2受容体へのヨウ素化タキキニンの結合の拮抗作用
当業者は、以下のとおりin vitroでＮＫ1受容体とＮＫ2受容体の親和性を測定できる。タキキニン拮抗剤のＮＫ1受容体親和性はモルモット肺（Keystone Biologicals, Cleveland, OH）において評価し、ＮＫ2受容体に対する親和性はHSKR−１細胞（ヒト空腸NK2受容体を発現するマウス3Ｔ3線維芽細胞）において評価する。組織または細胞を15倍量の50mM Tris−HCl緩衝液（pH7.4，４℃）中Polytronでホモゲナイズし、遠心分離する。ペレットをTris-HCl緩衝液に再懸濁し、遠心分離し、ペレットを２回再懸濁により洗浄する。最終ペレットを組織では40mg／ml、細胞では20mg／mlの濃度でインキュベーション緩衝液中に再懸濁し、少なくとも15分間室温に維持した後に使用する。受容体の結合を開始するために、250μlの膜調製物を二連で以下の放射リガンド、即ち125Ｉ−Bolton Hunter Lys−３標識サブスタンスＰおよび125ヨードヒスチジル−１−ニューロキニンＡに添加し、最終容量500μlの緩衝液の組成は50mM Tris−HCl（室温でpH7.4）、0.1％ウシ血清アルブミン、２mM塩化マンガン、40μg／mlバシトラシン、40μg／mlロイペプチンおよびキモスタチン、10μMチオルファンおよび種々の用量の推定タキキニン拮抗剤とする。インキュベーションは室温で90分（NK1受容体アッセイ）または２時間（NK2受容体アッセイ）行い、結合を停止させるために50mM Tris−HCl緩衝液（pH7.4，４℃）を添加し、0.1％ポリエチレンイミン（NK1受容体アッセイ）または0.5％ウシ血清アルブミン（NK2受容体アッセイ）に予め浸積しておいたGB／Ｆフィルターを通して真空下濾過する。フィルター結合放射能をガンマカウンターで計数する。非特異的結合は１μMのサブスタンスＰまたはニューロキニンＡの存在下の結合として定義する。特異的結合は総結合から非特異的結合を差し引くことにより計算する。ヨウ素化ＳＰまたはＮＫＡ結合の被験化合物または標準物質による競合はこの最大結合のパーセントとして表示する。IC50値（受容体結合を50％抑制するために必要な濃度）は、反復曲線当てはめプログラム（GraphPAD Inplot, San Diego, CA）を用いた非一次回帰により被験化合物各々について求める。
実施例Ｂ
推定拮抗剤によるin vitroのタキキニン誘発ホスファチジルイノシトール（PI）ターンオーバーの拮抗作用
当業者は以下のとおりＮＫ1受容体とＮＫ2受容体の拮抗作用の効力を測定することができる。タキキニン媒介ホスファチジルイノシトール（PI，イノシトールホスフェート）蓄積をそれぞれＮＫ1またはＮＫ2の受容体の存在下および不存在下、UC１１またはSKLKB82 ＃３細胞において測定する。組織を95％酸素−５％二酸化炭素通気下37℃のKrebs-Henseleit緩衝液中でインキュベートする。次に組織を穏やかに通気しながら60分間37℃で100μCiのミオー［２-3Ｈ（N）］イノシトールを含有する新しい緩衝液でインキュベートする。10mM塩化リチウムを含有する室温の緩衝液５ml中で２回洗浄した後、組織を30分間室温でインキュベートし、その間15分に緩衝液を交換する。緩衝液を除き、被験化合物を含むKrebs-Henseleit緩衝液（40μg／mlバシトラシン、４μg／mlロイペプチンおよびキモスタチンの各々、0.1％ウシ血清アルブミンおよび10mMのチオルファンおよび10mMの塩化リチウムを含有）を添加する。15分後、ＳＰをUC11細胞、または、ＮＫＡをSKLKB82 ＃３細胞に種々の濃度で添加し、反応を開始する。室温で60分間インキュベートした後、反応を停止するために、930μlのクロロホルム：メタノール（１：２v／v）を各試験管に添加し、その後、クロロホルム310μlおよび二重蒸留水310μlを添加する。試料を攪拌し、遠心分離し、水層（上層）0.9mlを取り出し、二重蒸留水２mlを添加する。混合物を攪拌し、50％ Bio−Rad AG 1-X8（ホルメート型、100〜200メッシュ）交換カラム（Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA）上に適用する。カラムを順次、１）二重蒸留水10ml、２）５mM四ホウ酸二ナトリウム／60mMギ酸ナトリウム５mlおよび３）１Ｍギ酸アンモニウム／0.1mMギ酸5mlで洗浄する。３回目の溶離液を回収し、１mlをシンチレーション液７ml中で計数する。有機層（下層）のうち50μlを採取し、シンチレーションバイアル中で乾燥し、シンチレーション液７ml中で計数する。
水相アリコート中のＤＰＭ（総イノシトールホスフェート）の有機相アリコート50μl中のＤＰＭ（総取り込み［3H］イノシトール）に対する比率を各試料につき計算する。データはバックグラウンドに対するアゴニスト誘発［3H］−インシトールホスフェート蓄積のパーセントとして表示する。被験化合物および／または標準物質の存在下の比を対照試料（促進アゴニスト不存在下）の比と比較する。
用量応答のグラフを作成し、被験化合物がタキキニン誘発ホスファチジルイノシトールターンオーバーを抑制する能力をコンピュータープログラム支援の下に求める。データはバックグラウンドに対する総イノシトールホスフェート蓄積の刺激のパーセントとして表し、タキキニンにより誘発された最大応答に対して規格化する。用量応答曲線を用いてシールド分析を行い、競合拮抗剤の濃度を示す値を求め、アゴニストの用量で予測される値の1／2までアゴニストの用量の作用を低減する拮抗剤のモル濃度のマイナス対数値であるpＡ２として表示する。シールド分析で得られた直線の傾きが１と有意差が無い場合、化合物は競合拮抗剤として作用している。
実施例Ｃ
in vivo NK1拮抗作用の評価
当業者はモルモット気管においてサブスタンスＰ誘発血漿蛋白溢出を抑制する化合物の能力を測定することにより本発明の化合物がin vivoでのＮＫ1受容体拮抗剤であることを測定できる。毛細管後方小静脈を通るサブスタンスＰ誘発蛋白漏出はモルモット気管におけるエバンズブルー染料の蓄積を測定することにより評価する。動物をペントバルビタール麻酔し、次いでエバンズブルー染料（20mg／kg，i.v.，0.9％塩化ナトリウム溶液中に調製）を注射する。染料投与１分後、拮抗剤を投与（i.v.）し、その後、サブスタンスＰ（1.0ナノモル／kg，i.v.）を投与し、更に５分後、0.9％塩化ナトリウム溶液50mlの経心灌流により循環系から過剰の染料を除去する。気管および主要気管支を除去し、乾燥染色し、計量する。
染料の定量は50℃24時間ホルムアミドで組織を抽出した後分光光度計により（620nm）行なう。値をバックグラウンド（染料のみ、アゴニスト不存在）から差し引く。ＥＤ50（サブスタンスＰ誘発血漿蛋白溢出を50％抑制する化合物の用量）を直線回帰分析により計算する。
実施例Ｄ
in vivo NK2拮抗作用の評価
当業者は、モルモットにおいて選択的ＮＫ2受容体アゴニストである［β−Ala8］NKA４−10により誘発された気管支収縮を抑制する化合物の能力を評価することにより、本発明の化合物がin vivoでのＮＫ2受容体拮抗剤であることを測定できる。動物をウレタン麻酔し、次に頸静脈、頚動脈および気管に挿管する。頚動脈のカニューレをt Statham圧力変換器に接続して血圧を測定し、頸静脈に設置したカテーテルを用いて被験化合物を投与する。気管のカニューレはＴ−連結器に挿入する。Ｔ−連結器の一方のアーム部は呼吸ポンプに連結し、もう一方は別の圧力変換器に接続する。呼吸ポンプを64拍／分に設定し、供給空気量は水10cmの吸入圧力となるようにする。安定な呼吸と血圧が得られるまで約15分間動物を馴化させる。推定タキキニン拮抗剤または溶媒を静脈内投与し、管を水で洗浄する。次に１〜30ナノモル／kg，i.v.の範囲の用量のＮＫ2受容体選択的拮抗剤［β−Ala8］NKA４−10につき用量応答曲線を作成する。気管支収縮はアゴニストに応答して起こる肺吸入圧力の用量依存性増加から推定する。被験化合物の拮抗作用はアゴニストの用量応答曲線の右側シフトおよび［β−Ala8］NKA４−10に応答して生じた最大吸入圧力の抑制から推定する。
実施例Ｅ
in vivo NK1およびNK2拮抗作用の評価
当業者は気道感覚神経からＳＰおよびＮＫＡの双方を放出することが知られているカプサイシン誘発呼吸作用を抑制する化合物の能力を評価することにより、本発明の化合物がin vivoでのＮＫ2受容体拮抗剤であることを測定できる。意識のあるモルモットにおけるカプサイシン誘発呼吸作用の拮抗作用は以下の通り調べる。In vivoの実験はDunkin Hartley雄モルモット（250〜350ｇ）を用いて行う。意識呼吸パターンの変化を４匹において同時に、Validyne DP 45-16差圧変換器を介して対照箱に各々連結された四つの小型のプレクシガラス箱よりなる全身プレチスモグラフの変法を用いて同時にモニタリングする。四つの箱には給気管（エアゾルの供給にも用いる）および排気管を取り付ける。給気および排気管は同じ長さの狭い内孔を有するものであり、共通の供給チャンバーより出て共通の換気チャンバーに出る。このシステムを用いて給気と大気圧の変動が同期し、差圧変換器による実質信号から排除されていることを確認する。アナログ圧力信号をデータトランスレーションDT2821 A to Dボードを介してデジタル化する。データを100試料／秒／動物の速度で収集する。圧力変化の各サイクルを以下のパラメーター、即ち、最小圧力と最大圧力との間で求めた上昇および下行の傾き、上昇の下行の傾きに対する比、および初期平衡圧力とピーク時サイクル圧力との間の変化の程度を用いて分析する。上記値（および動物の観察）に基づき、System V UNIXオペレーションシステムを動かすPCAT 286を用いて、圧力サイクルを、正常呼吸、強制呼気（腹部の上昇により観察）、特異な呼吸状態（SRE；通常は、咳、一過性であることが特徴の少ないくしゃみや息切れ、ノイズと区別できる極めて大きい圧力の増加）および運動／ノイズに分類する。呼吸困難は、動物における呼吸困難への観察可能な移行を伴うプレチスモグラフの圧力の有意な持続性の増加と定義される。
種々の気管支収縮剤に対する気道の応答性を調べる典型的な実験の過程において、エアゾルをDeVilbiss Ultraneb 99超音波噴霧器を用いて19分（0.33ml／分）供給し、その間動物をモニタリングする。噴霧前に、休息時呼吸を１分間採取してベースライン圧力を求める。予備実験では種々の濃度のカプサイシンを評価して、呼吸困難を示す動物の数を最大にするが、応答の重症度は最小限にするような0.001％の濃度を選択しておく。仮想タキキニン拮抗剤はエアゾルの曝露の開始前20分に投与（i.v.）するか、あるいは、エアゾルの曝露開始の1時間前に経口投与する。
本発明の代表的な化合物のタキキニン受容体結合（IC50値）を表１に示す。特にＮＫ1およびＮＫ2受容体結合値は本発明の実施例Ａの方法で測定した。これらの値はいくつかの実験の平均を示す。表１では化合物ＡおよびＢはそれぞれ本発明の実施例5.6および8.2の化合物であり、化合物Ｃは、PCT WO 94／26735の実施例20A．１に記載の化合物である（＋）−１−（２−（３−（3,4−ジクロロフェニル）−１−（3,4,5−トリメトキシベンゾイル）ピロリジン−３-イル）エチル）−４−フェニルピペリジン−４−カルボン酸アミド塩酸塩である。
0004195512.tif 000030
実施例Ｆ
ヒトおよびモルモットの肝における代謝の検討
当業者は肝抽出物においてin vitroでの被験化合物の消失速度を測定することにより本発明の化合物の代謝安定性を測定できる。代謝安定性は、本試験の初期直線期の間に被験化合物が消失する速度を測定することにより解かる代謝速度と逆の相関を有する。
本方法はモルモットまたはヒト肝のいずれかより得られるＳ９またはＳ10肝上澄みのいずれかを用いて行う。モルモット肝Ｓ９はVitro Technologies, Baltimore, Mdより購入でき、ヒト肝S9はIIAM,Eaton Paより購入できる。モルモットとヒトのＳ10上澄みはともに以下の通り調製する。即ち、計量した肝（新鮮肝または使用時まで−80℃保存のもの）と1.15％塩化カリウム水溶液（10〜15ml）を合わせ、スイスKinematicsのPCU Poltronまたは同等のものを用いてホモゲナイズする。ホモジネートを、肝mg当たり溶液３ml（合計）を使用できるのに十分な1.15％塩化カリウム水溶液と合わせ、混合する。上記ホモジネートは使用前は常時氷上に保存し、長期の保存は−80℃で行う。
ホモジネート20mlを12500rpm（10,000×Ｇ）で３℃で遠心分離する。20分後、白色の脂質蛋白膜がある場合はこれを除去し、上澄みを新しい遠沈管に移す。上澄みを20分間3℃で12500（10000×Ｇ）で遠心分離した後、新しい保存容器に移し、Ｓ10上澄みを得る。Ｓ10上澄みを氷上または長期保存の場合は−80℃で保存する。
各被験化合物の保存溶液は、16mlのインキュベーション混合物にスパイクした場合に被験化合物の初期濃度が10μmとなるようにメタノール中で調製する。この方法によれば最終インキュベーション混合物のメタノール含有量は１％を超えない。
インキュベーション混合物の調製は、インキュベーションビーカー中、Ｓ９またはＳ10上澄み（４ml）；1.1mM NADP、6.4nMグルコース−６−ホスフェートおよび1.3mM硫酸マグネシウムを含有する水溶液（４ml）；およびグルコース−６−ホスフェートの水溶液（４単位／２ml）（0.32ml）；および0.1Ｍリン酸一水素二カリウム水溶液（7.58ml）を合わせることにより行う。37℃の振とう水浴上に置いたインキュベーション混合物に被験化合物の保存溶液0.1mlを添加することにより被験化合物をインキュベートする。
この試験における被験化合物の消失速度を測定するために、１、３、５、10、15、30および60分にインキュベーションビーカーから三連のアリコート（0.5ml）をサンプリングする。全てのアリコートをヘキサン／ドライアイススラリー中で凍結し、酵素を即座に不活性化する。試験時まで−70℃で保存する。各試料中の被験化合物の濃度は、調製後、被験化合物の標準濃度と比較しながらHPLCにより測定するが、このような調製と測定は当業者の知るとおりである。消失速度は被験化合物の濃度の経時変化をグラフ化することにより本試験の初期直線期の傾きから求めることができる。
化合物ＡおよびＢ、即ちそれぞれ本発明の実施例5.6および8.2の化合物、および化合物Ｃ、即ちPCT WO 94／26735の実施例20Ａ．１に記載の化合物である（＋）−１−（２−（３-（3,4−ジクロロフェニル）−１−（3,4,5−トリメトキシベンゾイル）ピロリジン−３−イル）エチル）−４−フェニルピペリジン−４−カルボン酸アミド塩酸塩の代謝安定性は実施例Ｆの方法により測定した。これらの試験によれば、本発明の化合物は肝酸化酵素により実質的に代謝されないことがわかる。
化合物Ａの検量線用標準溶液は、メタノール（10ml）中に化合物Ａ（遊離塩基）10mgを溶解し、１mg／mlの保存溶液とすることにより調製した。アセトニトリルを用いて保存溶液１mlを希釈して10mlすることにより100μg／mlのスパイキング標準溶液を調製し、100μg／ml溶液をアセトニトリルで連続希釈することにより、50、25、10、５、2.5および1.0μg／mlの濃度のスパイク標準溶液を得る。各スパイキング標準溶液20μlを対照Ｓ９上澄み0.2mlに添加することにより、10,000；5,000；2,500；1,000；500；250；および100ng／mlの濃度の検量線用標準溶液を二連で調製する。ブランクおよび試料には各々アセトニトリル20μlを添加する。化合物Ａの試験で得られた検量線用標準物質およびアリコートは以下の通り調製した。即ち、紫色のスルホン酸固相抽出カートリッジ（Varian Inc., Harbor City, Ca）にメタノール（１ml）および0.5％モノクロロ酢酸水溶液（１ml）を負荷する。検量線用標準溶液またはインキュベーションから採取したアリコート0.2mlを５％アセトニトリル水溶液（0.5ml）で希釈し、負荷したカートリッジに添加する。試料をカートリッジを通して真空吸引し、モノクロロ酢酸の0.5％水溶液（１ml）、アセトニトリル50％水溶液（50mM水酸化カリウム）（１ml）で洗浄する。60％メタノール、38％水、１％酢酸、１％トリエチルアミン（0.4ml）を用いてHPLCバイアルに溶出させる。TSK Super ODSカラム（２ミクロン，５cm×4.6mm）（Tosohaas Inc. Montgomeryville, Pa）、カラム温度60℃、インジェクション容量0.15ml、検出波長210nmおよび溶離剤60％（10％アセトニトリル、90％水（25mMリン酸二水素カリウム，pH3））および40％（60％アセトニトリル、40％水（25mMリン酸二水素カリウム、pH３））、流量1.25ml／分の条件でHPLC分析を行う。
化合物Ｂの検量線用標準溶液は以下の通り作成する。即ち、化合物Ｂ l.1mgとアセトニトリル（９ml）を10mlのメスフラスコ中で合わせる。約５分間音波処理して溶解させる。希釈して10mlとし、混合して110μg／mlのスパイキング標準溶液とする。保存溶液２mlを等量のアセトニトリルで希釈し、55μg／mlのスパイキング標準溶液とする。同様に希釈して25、12.5、6.25、3.125、1.56および0.78μg／mlのスパイキング溶液を調製する。各スパイキング標準溶液50μlを対照Ｓ９上澄み0.5mlに添加することにより、10、５、2.5、1.25、0.625、0.313、0.156、0.078μg／mlの濃度の検量線用標準溶液を調製する。検量線用標準溶液と化合物Ｂのアッセイのアリコートを調製し、以下の通り評価した。即ち、20％トリクロロ酢酸のアセトニトリル溶液（0.1ml）をインキュベーションから採取したアリコート0.5ml（試料または対照）に添加する。各スパイキング標準溶液50μlまたはアセトニトリル（50μl）を試料またはブランクに添加し、30秒間攪拌混合した後、５〜６分間12000rpmで遠心分離する。上澄み300μlをHPLCバイアルに移し、Rainin Microsorbカラム（３ミクロン、100mm×4.6mm）（Rainin, Inc., Woborn, Mass）、カラム温度60℃、インジェクション容量0.15ml、検出波長216nM、溶離剤88％（20％アセトニトリル，79.15％水，0.6％酢酸，0.25％トリエチルアミン）および12％（80％アセトニトリル，19.5％水、0.6％酢酸、0.25％トリエチルアミン）、流量1.0ml／分の条件でHPLC分析する。
化合物Ｃの検量線用標準溶液は以下の通り作成する。即ち、化合物Ｃ（遊離塩基）1.0mgをアセトニトリル（10ml）に溶解し、100μg／mlの保存溶液を調製する。100μg／mlの溶液をアセトニトリルで連続希釈してスパイキング標準溶液50、25、10、５、2.5および1.0μg／mlを調製する。各スパイキング標準溶液20μLを対照Ｓ９上澄み0.2mlに添加することにより、10,000；5,000；2,500；1,000；500；250および100ng／mlの濃度を有する検量線用標準溶液を二連で調製する。ブランクと試料にはアセトニトリル20μlを添加する。検量線用標準溶液と化合物Ｃのアッセイのアリコートを調製し、以下の通り評価した。即ち、紫色のスルホン酸固相抽出カートリッジ（Varian Inc., Harbor City, Ca）にメタノール（１ml）および0.5％モノクロロ酢酸水溶液（１ml）を負荷する。検量線用標準溶液またはインキュベーションから採取したアリコート0.5mlを５％アセトニトリル水溶液（0.5ml）で希釈し、負荷したカートリッジに添加する。試料をカートリッジを通して真空吸引し、モノクロロ酢酸の0.5％水溶液（１ml）、アセトニトリル50％水溶液（１ml）で洗浄する。60％メタノール、38％水、１％酢酸、１％トリエチルアミン（0.4ml）を用いてHPLCバイアルに溶出させる。TSK Super ODSカラム（２ミクロン，５cm×4.6mm）（Tosohaas Inc. Montgomeryville, Pa）、カラム温度60℃、インジェクション容量0.2ml、検出波長210nmおよび溶離剤60％（10％アセトニトリル、90％水（25mMリン酸二水素カリウム，pH３））および40％（60％アセトニトリル、40％水（25mMリン酸二水素カリウム、pH３））、流量1.25ml／分の条件でHPLC分析を行う。
本発明の化合物の代謝安定性は、本発明の代表的化合物に関するモルモットＳ９肝上澄みおよびヒトＳ９肝上澄みにおける代謝速度試験結果により示される。結果は表２および３にそれぞれ示す。表２では化合物ＡおよびＢはそれぞれ本発明の実施例5.6および8.2の化合物であり、化合物Ｃは、PCT WO 94／26735の実施例20Ａ．１に記載の化合物である（＋）−１−（２−（３−（3,4−ジクロロフェニル）−１−（3,4,5−トリメトキシベンゾイル）ピロリジン−３−イル）エチル）−４−フェニルピペリジン−４−カルボン酸アミド塩酸塩である。本発明の化合物は、以下に示す表２からわかる通り、特にPCT／WO 94／26735の化合物と比較して、初期の直線期に殆ど一定の濃度であることから示されるように、代謝が実質的に無いという明らかな差を有する。
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