【手続補正書】
【提出日】平成19年12月12日(2007.12.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  水丁香（Ludwigia octovalvis）、魚針草（Anisomeles indica）、半枝蓮（Scutellaria rivularis）、半辺蓮（Lobelia chinensis）、虱母草（Urena lobata）、菟絲子（Cuscuta australis）、馬蹄金（Dichondra micrantha ）、苦職（Physalis angulata）、白花菜（Cleome gynandra）、山芥菜（Rorippa indica）、遍地錦（Hydrocotyle formosana）、傷寒草（Vernonia cinerae ）、金鈕扣（Spilanthes acmella）、美人蕉（Canna indica）、馬鞍藤（Ipomoea pes-caprae ）、化石樹（Clerodendrum calamitosum）、錦地羅（Drosera burmanni）、金線蓮（Anoectochilus formosanus）、南嶺蕘花（Wikstroemia indica）、白葉刺根（Elaeagnus oldhamii）、玉葉金花（Mussaenda parviflora）、台湾馬兜鈴（Aristolochia mollis）、臭茉莉（Clerodendrum philippinum）、白龍船花（Clerodendrum paniculataum var. albifloraum）、木苧麻（Boehmeria densiflora）、鴉臼（Sapium sebiferum）、三葉葡萄（Tetrastigma dentatum）、小葉葡萄（Vitis thunbergii）、菊花木（Bauhinia championi）、金石榴（Bredia oldhami）、哈在花（Staurogyne concinnula ）、石上柏（Selaginella doederleinii）、胡枝子（Lespedeza cuneata）、細葉水丁香（Ludwigia hyssopifolia）、千金藤（Stephania japonica）、烏蕨（Sphenomeris chusana）、鉄線蕨（Adiantum flabellulatum）、山香（Hyptis suaveolens）、鶏眼草（Kummerowia striata ）、海州常山（Clerodendrum trichotomum）、黄荊（Vitex negundo）、咸豊草（Bidens pilosa var. minor）、鼠麹草（Gnaphalium affine）、紫背草（Emilia sonchifolia）、含羞草（Mimosa pudica）、乳仔草（Euphorbia hirta）、車前草（Plantago formosana ）、釘地蜈蚣（Torenia concolor var. formosona ）、大甲草（Euphorbia formosana ）、戟葉紫花地丁（Viola phillippica）、台湾何首烏（Polygonum multiflorum var.hypoleucum ）、牛乳榕（Ficus erecta var.beecheyana ）、蓖葉燈籠草（Kalanchoe spathulata）、扛香藤（Mallotus repandus）、台湾鈎藤（Uncaria hirsuta）、羅氏塩膚木（Rhus semialata var.roxburghiana）、金剣草（Rubia lanceolata）、紅花鼠尾草（Salvia coccinea）、兔仔菜（Ixeris chinensis）、刀傷草（Ixeris laevigata var. oldhami）、苦藍盤（Clerodendrum inerme）、頭花香苦草（Hyptis rhomboides）、杜虹花（Callicarpa formosana）、野菰（Aeginetia indica）、三葉五加（Acanthopanax trifoliatus）より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物を配合したことを特徴とする皮膚老化防止剤。
【請求項２】  請求項１記載の抽出物のうち、老化防止効果がメラニン生成抑制効果である、魚針草（Anisomeles indica）、虱母草（Urena lobata ）、菟絲子（Cuscuta australis）、馬蹄金（Dichondra micrantha）、苦職（Physalis angulata）、白花菜（Cleome gynandra）、山芥菜（Rorippa indica）、遍地錦（Hydrocotyle formosana）、金鈕扣（Spilanthes acmella）、美人蕉（Canna indica）、金線蓮（Anoectochilus formosanus）、南嶺蕘花（Wikstroemia indica）、台湾馬兜鈴（Aristolochia mollis）、菊花木（Bauhinia championi ）、石上柏（Selaginella doederleinii）、胡枝子（Lespedeza cuneata）、細葉水丁香（Ludwigia hyssopifolia）、咸豊草（Bidens pilosa var.minor）、紫背草（Emilia sonchifolia）、車前草（Plantago formosana ）、釘地蜈蚣（Torenia concolor var.formosona）、戟葉紫花地丁（Viola phillippica）、牛乳榕（Ficus erecta var.beecheyana）、蓖葉燈籠草（Kalanchoe spathulata）、金剣草（Rubia lanceolata）、紅花鼠尾草（Salvia coccinea）より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物を配合したことを特徴とする老化防止剤。
【請求項３】  請求項１記載の抽出物のうち、老化防止効果がエラスターゼ阻害効果である、南嶺蕘花（Wikstroemia indica）、木苧麻（Boehmeria densiflora）、三葉葡萄（Tetrastigma dentatum）、小葉葡萄（Vitis thunbergii）、菊花木（Bauhinia championi）、金石榴（Bredia oldhami）、胡枝子（Lespedeza cuneata）、細葉水丁香（Ludwigia hyssopifolia）、鉄線蕨（Adiantum flabellulatum）、含羞草（Mimosa pudica ）、釘地蜈蚣（Torenia concolor  var. formosona）、台湾何首烏（Polygonum multiflorum var. hypoleucum）、台湾鈎藤（Uncaria hirsuta）、羅氏塩膚木（Rhus semialata var. roxburghiana）より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物を配合したことを特徴とする老化防止剤。
【請求項４】  請求項１記載の抽出物のうち、老化防止効果がヒアルロニダーゼ阻害効果である、小葉葡萄（Vitis thunbergii）、菊花木（Bauhinia championi）より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物を配合したことを特徴とする老化防止剤。
【請求項５】  請求項１記載の抽出物のうち、老化防止効果が活性酸素除去効果である、水丁香（Ludwigia octovalvis）、魚針草（Anisomeles indica ）、半枝蓮（Scutellaria rivularis）、半辺蓮（Lobelia chinensis）、菟絲子（Cuscuta australis）、苦職（Physalis angulata）、白花菜（Cleome gynandra）、傷寒草（Vernonia cinerae）、美人蕉（Canna indica）、馬鞍藤（Ipomoea pes-caprae）、化石樹（Clerodendrum calamitosum）、錦地羅（Drosera burmanni）、南嶺蕘花（Wikstroemia indica）、白葉刺根（Elaeagnus oldhamii）、玉葉金花（Mussaenda parviflora）、臭茉莉（Clerodendrum philippinum）、白龍船花（Clerodendrum paniculataum var.albifloraum）、木苧麻（Boehmeria densiflora）、鴉臼（Sapium sebiferum）、三葉葡萄（Tetrastigma dentatum）、小葉葡萄（Vitis thunbergii）、菊花木（Bauhinia championi）、金石榴（Bredia oldhami）、哈在花（Staurogyne concinnula）、胡枝子（Lespedeza cuneata）、細葉水丁香（Ludwigia hyssopifolia）、千金藤（Stephania japonica）、鉄線蕨（Adiantum flabellulatum ）、山香（Hyptis suaveolens）、海州常山（Clerodendrum trichotomum）、黄荊（Vitex negundo）、鼠麹草（Gnaphalium affine）、含羞草（Mimosa pudica ）、乳仔草（Euphorbia hirta）、釘地蜈蚣（Torenia concolor var.formosona ）、大甲草（Euphorbia formosana）、台湾何首烏（Polygonum multiflorum var. hypoleucum）、扛香藤（Mallotus repandus）、台湾鈎藤（Uncaria hirsuta）、羅氏塩膚木（Rhus semialata var. roxburghiana）、車前草（Plantago formosana）、金剣草（Rubia lanceolata）、兔仔菜（Ixeris chinensis）、刀傷草（Ixeris laevigata var. oldhami）、苦藍盤（Clerodendrum inerme）、頭花香苦草（Hyptis rhomboides）、杜虹花（Callicarpa formosana）、野菰（Aeginetia indica）、三葉五加（Acanthopanax trifoliatus）より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物を配合したことを特徴とする老化防止剤。
【請求項６】  請求項１記載の抽出物のうち、老化防止効果が抗酸化効果である、水丁香（Ludwigia octovalvis）、魚針草（Anisomeles indica ）、半枝蓮（Scutellaria rivularis）、傷寒草（Vernonia cinerae）、馬鞍藤（Ipomoea pes-caprae ）、錦地羅（Drosera burmanni）、南嶺蕘花（Wikstroemia indica）、白葉刺根（Elaeagnus oldhamii）、玉葉金花（Mussaenda parviflora）、木苧麻（Boehmeria densiflora）、鴉臼（Sapium sebiferum）、三葉葡萄（Tetrastigma dentatum）、小葉葡萄（Vitis thunbergii）、菊花木（Bauhinia championi）、金石榴（Bredia oldhami）、哈在花（Staurogyne concinnula）、胡枝子（Lespedeza cuneatant d.Cours.）G.Don）、細葉水丁香（Ludwigia hyssopifolia）、烏蕨（Sphenomeris chusana）、鉄線蕨（Adiantum flabellulatum）、山香（Hyptis suaveolens ）、鶏眼草（Kummerowia striata）、海州常山（Clerodendrum trichotomum）、黄荊（Vitex negundo）、乳仔草（Euphorbia hirta）、釘地蜈蚣（Torenia concolor var.formosona）、大甲草（Euphorbia formosana）、台湾何首烏（Polygonum multiflorum var.hypoleucum）、牛乳榕（Ficus erecta var.beecheyana）、扛香藤Mallotus repandus）、台湾鈎藤（Uncaria hirsuta）、羅氏塩膚木（Rhus semialata Murp roxburghiana）より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物を配合したことを特徴とする老化防止剤。
【請求項７】  請求項１〜６の何れかに記載の皮膚老化防止剤の１種又は２種以上を配合することを特徴とする皮膚外用剤。
【請求項８】  皮膚外用剤が化粧料であることを特徴とする請求項７記載の皮膚外用剤。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２０】
【課題を解決するための手段】
請求項１に記載された発明に係る皮膚老化防止剤は、水丁香（Ludwigia octovalvis）、魚針草（Anisomeles indica）、半枝蓮（Scutellaria rivularis）、半辺蓮（Lobelia chinensis）、虱母草（Urena lobata）、菟絲子（Cuscuta australis）、馬蹄金（Dichondra micrantha ）、苦職（Physalis angulata）、白花菜（Cleome gynandra）、山芥菜（Rorippa indica）、遍地錦（Hydrocotyle formosana）、傷寒草（Vernonia cinerae ）、金鈕扣（Spilanthes acmella）、美人蕉（Canna indica）、馬鞍藤（Ipomoea pes-caprae ）、化石樹（Clerodendrum calamitosum）、錦地羅（Drosera burmanni）、金線蓮（Anoectochilus formosanus）、南嶺蕘花（Wikstroemia indica）、白葉刺根（Elaeagnus oldhamii）、玉葉金花（Mussaenda parviflora）、台湾馬兜鈴（Aristolochia mollis）、臭茉莉（Clerodendrum philippinum）、白龍船花（Clerodendrum paniculataum var. albifloraum）、木苧麻（Boehmeria densiflora）、鴉臼（Sapium sebiferum）、三葉葡萄（Tetrastigma dentatum）、小葉葡萄（Vitis thunbergii）、菊花木（Bauhinia championi）、金石榴（Bredia oldhami）、哈在花（Staurogyne concinnula ）、石上柏（Selaginella doederleinii）、胡枝子（Lespedeza cuneata）、細葉水丁香（Ludwigia hyssopifolia）、千金藤（Stephania japonica）、烏蕨（Sphenomeris chusana）、鉄線蕨（Adiantum flabellulatum）、山香（Hyptis suaveolens）、鶏眼草（Kummerowia striata ）、海州常山（Clerodendrum trichotomum）、黄荊（Vitex negundo）、咸豊草（Bidens pilosa var. minor）、鼠麹草（Gnaphalium affine）、紫背草（Emilia sonchifolia）、含羞草（Mimosa pudica）、乳仔草（Euphorbia hirta）、車前草（Plantago formosana ）、釘地蜈蚣（Torenia concolor var. formosona ）、大甲草（Euphorbia formosana ）、戟葉紫花地丁（Viola phillippica）、台湾何首烏（Polygonum multiflorum var.hypoleucum ）、牛乳榕（Ficus erecta var.beecheyana ）、蓖葉燈籠草（Kalanchoe spathulata）、扛香藤（Mallotus repandus）、台湾鈎藤（Uncaria hirsuta）、羅氏塩膚木（Rhus semialata var.roxburghiana）、金剣草（Rubia lanceolata）、紅花鼠尾草（Salvia coccinea）、兔仔菜（Ixeris chinensis）、刀傷草（Ixeris laevigata var. oldhami）、苦藍盤（Clerodendrum inerme）、頭花香苦草（Hyptis rhomboides）、杜虹花（Callicarpa formosana）、野菰（Aeginetia indica）、三葉五加（Acanthopanax trifoliatus）より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物を配合したものである。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２１】
請求項２に記載された発明に係る皮膚老化防止剤は、請求項１記載の抽出物のうち、老化防止効果がメラニン生成抑制効果である、魚針草（Anisomeles indica）、虱母草（Urena lobata ）、菟絲子（Cuscuta australis）、馬蹄金（Dichondra micrantha）、苦職（Physalis angulata）、白花菜（Cleome gynandra）、山芥菜（Rorippa indica）、遍地錦（Hydrocotyle formosana）、金鈕扣（Spilanthes acmella）、美人蕉（Canna indica）、金線蓮（Anoectochilus formosanus）、南嶺蕘花（Wikstroemia indica）、台湾馬兜鈴（Aristolochia mollis）、菊花木（Bauhinia championi ）、石上柏（Selaginella doederleinii）、胡枝子（Lespedeza cuneata）、細葉水丁香（Ludwigia hyssopifolia）、咸豊草（Bidens pilosa var.minor）、紫背草（Emilia sonchifolia）、車前草（Plantago formosana ）、釘地蜈蚣（Torenia concolor var.formosona）、戟葉紫花地丁（Viola phillippica）、牛乳榕（Ficus erecta var.beecheyana）、蓖葉燈籠草（Kalanchoe spathulata）、金剣草（Rubia lanceolata）、紅花鼠尾草（Salvia coccinea）より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物を配合したものである。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２２】
請求項３に記載された発明に係る皮膚老化防止剤は、請求項１記載の抽出物のうち、老化防止効果がエラスターゼ阻害効果である、南嶺蕘花（Wikstroemia indica）、木苧麻（Boehmeria densiflora）、三葉葡萄（Tetrastigma dentatum）、小葉葡萄（Vitis thunbergii）、菊花木（Bauhinia championi）、金石榴（Bredia oldhami）、胡枝子（Lespedeza cuneata）、細葉水丁香（Ludwigia hyssopifolia）、鉄線蕨（Adiantum flabellulatum）、含羞草（Mimosa pudica ）、釘地蜈蚣（Torenia concolor  var. formosona）、台湾何首烏（Polygonum multiflorum var. hypoleucum）、台湾鈎藤（Uncaria hirsuta）、羅氏塩膚木（Rhus semialata var. roxburghiana）より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物を配合したものである。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２３】
請求項４に記載された発明に係る皮膚老化防止剤は、請求項１記載の抽出物のうち、老化防止効果がヒアルロニダーゼ阻害効果である、小葉葡萄（Vitis thunbergii）、菊花木（Bauhinia championi）より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物を配合したものである。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２４】
請求項５に記載された発明に係る皮膚老化防止剤は、請求項１記載の抽出物のうち、老化防止効果が活性酸素除去効果である、水丁香（Ludwigia octovalvis）、魚針草（Anisomeles indica ）、半枝蓮（Scutellaria rivularis）、半辺蓮（Lobelia chinensis）、菟絲子（Cuscuta australis）、苦職（Physalis angulata）、白花菜（Cleome gynandra）、傷寒草（Vernonia cinerae）、美人蕉（Canna indica）、馬鞍藤（Ipomoea pes-caprae）、化石樹（Clerodendrum calamitosum）、錦地羅（Drosera burmanni）、南嶺蕘花（Wikstroemia indica）、白葉刺根（Elaeagnus oldhamii）、玉葉金花（Mussaenda parviflora）、臭茉莉（Clerodendrum philippinum）、白龍船花（Clerodendrum paniculataum var.albifloraum）、木苧麻（Boehmeria densiflora）、鴉臼（Sapium sebiferum）、三葉葡萄（Tetrastigma dentatum）、小葉葡萄（Vitis thunbergii）、菊花木（Bauhinia championi）、金石榴（Bredia oldhami）、哈在花（Staurogyne concinnula）、胡枝子（Lespedeza cuneata）、細葉水丁香（Ludwigia hyssopifolia）、千金藤（Stephania japonica）、鉄線蕨（Adiantum flabellulatum ）、山香（Hyptis suaveolens）、海州常山（Clerodendrum trichotomum）、黄荊（Vitex negundo）、鼠麹草（Gnaphalium affine）、含羞草（Mimosa pudica ）、乳仔草（Euphorbia hirta）、釘地蜈蚣（Torenia concolor var.formosona ）、大甲草（Euphorbia formosana）、台湾何首烏（Polygonum multiflorum var. hypoleucum）、扛香藤（Mallotus repandus）、台湾鈎藤（Uncaria hirsuta）、羅氏塩膚木（Rhus semialata var. roxburghiana）、車前草（Plantago formosana）、金剣草（Rubia lanceolata）、兔仔菜（Ixeris chinensis）、刀傷草（Ixeris laevigata var. oldhami）、苦藍盤（Clerodendrum inerme）、頭花香苦草（Hyptis rhomboides）、杜虹花（Callicarpa formosana）、野菰（Aeginetia indica）、三葉五加（Acanthopanax trifoliatus）より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物を配合したものである。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２５】
請求項６に記載された発明に係る皮膚老化防止剤は、請求項１記載の抽出物のうち、老化防止効果が抗酸化効果である、水丁香（Ludwigia octovalvis）、魚針草（Anisomeles indica ）、半枝蓮（Scutellaria rivularis）、傷寒草（Vernonia cinerae）、馬鞍藤（Ipomoea pes-caprae ）、錦地羅（Drosera burmanni）、南嶺蕘花（Wikstroemia indica）、白葉刺根（Elaeagnus oldhamii）、玉葉金花（Mussaenda parviflora）、木苧麻（Boehmeria densiflora）、鴉臼（Sapium sebiferum）、三葉葡萄（Tetrastigma dentatum）、小葉葡萄（Vitis thunbergii）、菊花木（Bauhinia championi）、金石榴（Bredia oldhami）、哈在花（Staurogyne concinnula）、胡枝子（Lespedeza cuneatant d.Cours.）G.Don）、細葉水丁香（Ludwigia hyssopifolia）、烏蕨（Sphenomeris chusana）、鉄線蕨（Adiantum flabellulatum）、山香（Hyptis suaveolens ）、鶏眼草（Kummerowia striata）、海州常山（Clerodendrum trichotomum）、黄荊（Vitex negundo）、乳仔草（Euphorbia hirta）、釘地蜈蚣（Torenia concolor var.formosona）、大甲草（Euphorbia formosana）、台湾何首烏（Polygonum multiflorum var.hypoleucum）、牛乳榕（Ficus erecta var.beecheyana）、扛香藤Mallotus repandus）、台湾鈎藤（Uncaria hirsuta）、羅氏塩膚木（Rhus semialata Murp roxburghiana）より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物を配合したものである。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３１】
【表１】
2002179581.tif 000001
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３２】
【表２】
2002179581.tif 000002
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３３】
【表３】
2002179581.tif 000003
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５２】
【表４】
2002179581.tif 000004
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５３】
【表５】
2002179581.tif 000005
【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５４】
【表６】
2002179581.tif 000006
【手続補正１４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５５】
実験例２  メラニン生成抑制および細胞毒性試験
大日本製薬（株）より購入したＢ１６マウスメラノーマ細胞（Ｂ１６−Ｆ１細胞、ATCC No. CRL-6323）を用いて96 well plate法で測定した。本細胞（１×10４）を各wellに播種し、10％ＦＣＳ、１％抗生物質溶液含有D-MEMで24時間培養後（37℃、５％ＣＯ２）、培地を被検物質とテオフィリン（0.5mM）とを添加したD-MEMに交換し、さらに３日間培養した。なお、被検物質の溶媒（エタノール）は、終濃度が１％となるように培地に添加した。メラニン生成抑制活性は、遠心分離で得られた培養上清に等量のHEPES buffer（pH 6.8）/エタノール（9:1）を加え、マイクロプレートリーダーEL-340（BIO-TEK  INSTRUMENT）にて475nm−660nmの吸光度を測定し、細胞外メラニン量を評価した。結果を次の表７に示す。
【手続補正１５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５６】
【表７】
2002179581.tif 000007
【手続補正１６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５７】
その結果、表７から明らかなように、試験濃度0.001%での抑制率が20%以上の値を示した生薬抽出物が２６品目見出され、とりわけ、苦職、蓖葉燈籠草、南嶺蕘花、釘地蜈蚣、魚針草、菊花木、台湾馬兜鈴、咸豊草、山芥菜、馬蹄金、牛乳榕、石上柏、紅花鼠尾草、戟葉紫花地丁の14品目はＩＣ５０値（コントロールの細胞メラニン量を半分にする被験物質濃度）が、いづれも10μg/ml以下であり、陽性対照物質として設置したアルブチンやコウジ酸よりも強い作用が認められた（表７）。これら活性を示した生薬抽出物は細胞への毒性も低く、試験濃度0.001%での細胞毒性は認められなかった。
【手続補正１７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５９】
【表８】
2002179581.tif 000008
【手続補正１８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６０】
表８に示す通り、0.025%濃度で20%以上の阻害活性が認められた生薬は14品目見出され、とりわけ、羅氏塩膚木、小葉葡萄、菊花木、三葉葡萄は、陽性対照物質であるＥＬＨＩＢＩＮ（大豆抽出物、ペンタファーム社製）よりもＩＣ５０値が低く、強いエラスターゼ阻害作用が認められた。
【手続補正１９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６２】
【表９】
2002179581.tif 000009
【手続補正２０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６３】
その結果、0.02％濃度で検討し、小葉葡萄、菊花木の２品目でいずれも４０％以上の高い阻害活性が認められ、とりわけ、小葉葡萄は、陽性対照物質であるグリチルリチンよりもＩＣ５０値が低く、強い阻害活性が認められた。
【手続補正２１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６５】
【表１０】
2002179581.tif 000010
【手続補正２２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６７】
結果を表１０に示す。
Ｏ２−消去率（％）＝（Ａ−Ｂ）／ Ａ ×100
Ａ：コントロールの吸光度    Ｂ：試料添加のときの吸光度
ＩＣ５０値はＯ２−消去率が50％を示した時の検体濃度で表した。
【手続補正２３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６８】
その結果、0.025%濃度で30%以上のSOD様活性が認められた生薬は57品目見出され、とりわけ、羅氏塩膚木は、陽性対照物質であるアセンヤクよりもＩＣ５０値が低く、強いSOD様活性が認められた。
【手続補正２４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７１】
【表１１】
2002179581.tif 000011
【手続補正２５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７２】
その結果、0.002%濃度で30%以上のDPPHラジカル捕捉作用が認められた生薬は32品目見出され、とりわけ、菊花木は、陽性対照物質であるアスコルビン酸よりもＩＣ５０値が低く、強いDPPHラジカル捕捉作用が認められた。  
【手続補正２６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７３】
まとめ  複数の作用を合わせ持つ生薬抽出物
上記のメラニン生成抑制、エラスターゼ阻害活性、ヒアルロニダーゼ阻害活性、SOD様作用、DPPHラジカル捕捉作用をすべて併せ持つ生薬抽出物としては、菊花木が該当した。メラニン生成抑制、エラスターゼ阻害活性、SOD様作用、DPPHラジカル捕捉作用を併せ持つ生薬抽出物としては、南嶺蕘花、胡枝子、細葉水丁香、釘地蜈蚣が該当した。メラニン生成抑制、ヒアルロニダーゼ阻害活性、SOD様作用、DPPHラジカル捕捉作用を併せ持つ生薬抽出物としては、小葉葡萄が該当した。このように、単独の生薬で美白−抗炎症−抗酸化、美白―抗酸化、美白−抗炎症、抗酸化−抗炎症の各作用を併せ持つものが多く認められた。
【手続補正２７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７６】
実施例１  化粧水   
表１２に示す組成の化粧水を、生薬抽出物の菊花木、羅氏塩膚木、小葉葡萄、および南嶺蕘花の抽出物を用いて製造した。
【手続補正２８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７７】
【表１２】
2002179581.tif 000012
【手続補正２９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７８】
実施例 ２  乳液
表１３に示す組成の乳液を生薬抽出物の菊花木、羅氏塩膚木、小葉葡萄、および南嶺蕘花の抽出物を用いて製造した。
【手続補正３０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７９】
【表１３】
2002179581.tif 000013
【手続補正３１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８０】
実施例３  クリーム   
表１４に示す組成のクリームを生薬抽出物の菊花木、羅氏塩膚木、小葉葡萄、および南嶺蕘花の抽出物を用いて製造した。
【手続補正３２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８２】
【表１４】
2002179581.tif 000014