(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
モニリエラ・ポリニス（Moniliella pollinis）ＭＣＩ３５５４（FERM BP-6170）に変異処理を行った微生物を液体培地で培養し、培養物より微生物凝集塊を除去した後、培養物中に残存する微生物から好気的培養中に実質的な泡を形成しない微生物を採取することを特徴とする、好気的培養中に実質的な泡を形成しないエリスリトール産生微生物の製造方法。
【請求項２】
変異処理を行った微生物を液体培地で培養し、培養物より微生物凝集塊を除去する行程を繰り返し行う請求項１に記載の方法。
【請求項３】
請求項１または２に記載の方法により得られる、好気的培養中に実質的な泡を形成しないエリスリトール産生微生物。
【請求項４】
請求項１に記載の方法により得られる、モニリエラ・ポリニス（Moniliella pollinis）ＭＣＩ３５５４の変異株ＭＣＩ３５５５（FERM BP-6171）である、好気的培養中に実質的な泡を形成しないエリスリトール産生微生物。
【請求項５】
請求項３または４に記載のエリスリトール産生微生物又はその変異株を、培地で培養し、培養物よりエリスリトールを採取することを特徴とするエリスリトールの製造方法。
【請求項６】
モニリエラ・ポリニス（Moniliella pollinis）ＭＣＩ３５５４（FERM BP-6170）の変異株であって、エリスリトール産生能を有し、好気的培養中に実質的な泡を形成しないエリスリトール産生微生物。
【請求項７】
モニリエラ・ポリニス（Moniliella pollinis）ＭＣＩ３５５４の変異株ＭＣＩ３５５５（FERM BP-6171）である、好気的培養中に実質的な泡を形成しないエリスリトール産生微生物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明はエリスリトール産生微生物の製造方法、該方法により得られる微生物、及び該微生物を用いるエリスリトールの製造方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
エリスリトールの製造方法としては、トリゴノプシス属（Trigonopsis）、キャンジダ属（Candida）の酵母をグリセロールを炭素源とする培地に培養して製造する方法（特公昭４７−４１５４９号公報）、キャンジダ属（Candida）、トルロプシス属（Torulopsis）、ハンゼヌラ属（Hansenula）の酵母を炭化水素等を炭素源とする培地で培養して製造する方法（特公昭５１−２１０７２号公報）等が知られている。しかしながら、これらの方法は、炭素源として使用される原料が実際の工業的生産において適当でないため、未だ工業化されていない。
【０００３】
オーレオバシディウム属の微生物（Aureobasidium sp. SN-G42（FERM P-8940）等）をグルコースなどの糖質を炭素源とする培地に培養して製造する方法（米国特許第４９３９０９１号及び第５０３６０１１号公報等）も知られている。
【０００４】
また、モニリエラ・トメントサ・バール・ポリニス（Moniliella tomentosa var. pollinis）をグルコースなどの糖質を炭素源とする培地に培養して製造する方法（特開昭６０−１１０２９５号公報等）も知られている。この方法は安価で安全な原料であるグルコースを使用し、かつ生産性も高いという点で優れているが、培養中の発泡が著しく、通常使用されている消泡剤では役にたたないため、高価なキサダンガムなどを多量に添加する必要があり工業的においては必ずしも有利な方法とはいえない。
【０００５】
また、エリスリトールを高生産するモニリエラ属、トリコスポラノイデス属に属する菌株も培養中に発泡が激しく、通常使用されている消泡剤では役にたたないことが分かった。微生物による発酵生産においては発泡を抑えることは、吹きこぼれによる生産性の低下、発酵槽内の雑菌汚染の確率の増大、吹きこぼれた培養液による生産設備の汚染等を阻止するということであり、実生産においては発泡を抑えることは必要不可欠なことである。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、安価で安全な原料である発酵性糖質から高い生産性を示すモニリエラ属とその近縁に属するトリコスポラノイデス（Trichosporonoides）属の欠点である好気的な培養中に起こる激しい発泡を解決し、安価で効率的なエリスリトールの製造方法の提供を目的としてなされたものである。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記目的を達成すべく、先ずエリスリトール産生能を有する微生物の改良について鋭意検討を行った。その結果、エリスリトールを産生する能力を有する酵母状糸状菌の培養物より菌体凝集塊を除いた後、培養物中に残存する菌体を採取すれば、好気的培養中に実質的な泡を形成しないエリスリトール産生微生物が効率的に得られることを見出した。更に本発明者らは、これらエリスリトール産生微生物は、水と水不溶性溶媒で分配した時に水層に２０％以上残る物性を有しており、該微生物を用いれば、培養中の激しい発泡の問題が解決できることを見出した。本発明はこれらの知見に基づいて成し遂げられたものである。
【０００８】
すなわち本発明により、(1)エリスリトール産生能を有する微生物を液体培地で培養し、培養物より微生物凝集塊を除去した後、培養物中に残存する微生物から好気的培養中に実質的な泡を形成しない微生物を採取することを特徴とする、好気的培養中に実質的な泡を形成しないエリスリトール産生微生物の製造方法が提供される。
【０００９】
この発明の好ましい態様によれば、(2)微生物を液体培地で培養し、培養物より微生物凝集塊を除去する行程を繰り返し行う上記(1)に記載の方法、(3)変異処理を行った微生物を液体培地で培養する上記(1)又は(2)に記載の方法が提供される。
【００１０】
この発明の更に好ましい態様によれば、(4)液体培地で培養する微生物が、酵母状糸状菌である上記(1)乃至(3)のいずれかに記載の方法、(5)酵母状糸状菌が、モニリエラ（Moniliella）属に属する微生物である上記(4)に記載の方法、(6)モニリエラ（Moniliella）属に属する微生物が、モニリエラ・ポリニス（Moniliella pollinis）及びモニリエラ・スアヴェオレンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolens var. nigra）よりなる群から選ばれる微生物である上記(5)に記載の方法、(7)モニリエラ（Moniliella）属に属する微生物が、モニリエラ・ポリニス（Moniliella pollinis）ＣＢＳ４６１．６７、モニリエラ・ポリニス（Moniliella pollinis）ＭＣＩ３５５４、モニリエラ・スアヴェオレンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolens var. nigra）ＣＢＳ２２３．３２、モニリエラ・スアヴェオレンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolens var. nigra）ＣＢＳ３８２．３６及びモニリエラ・スアヴェオレンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolens var. nigra）ＣＢＳ２２３．７９よりなる群から選ばれる微生物である上記(5)に記載の方法が提供される。
【００１１】
また、(8)酵母状糸状菌が、トリコスポロノイデス（Trichosporonoides）属に属する微生物である上記(4)に記載の方法、(9)トリコスポロノイデス（Trichosporonoides）属に属する微生物が、トリコスポロノイデス・オエドセファリス（Trichosporonoides oedocephalis）、トリコスポロノイデス・メガチリエンシス（Trichosporonoides megachillensis）、トリコスポロノイデス・マディダ（Trichosporonoides madida）、トリコスポロノイデス・ニグレッセンス（Trichosporonoides nigrescens）及びトリコスポロノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spathulata）よりなる群から選ばれる微生物である上記(8)に記載の方法、(10)トリコスポロノイデス（Trichosporonoides）属に属する微生物が、トリコスポラノイデス・オエドファリス（Trichosporonoides oedocephalis）ＣＢＳ６４９．６６、トリコスポラノイデス・オエドファリス（Trichosporonoides oedocephalis）ＣＢＳ５６８．８５、トリコスポラノイデス・メガチリエンシス（Trichosporonoides megachillensis）ＣＢＳ５６７．８５、トリコスポロノイデス・メガチリエンシス（Trichosporonoides megachillensis）ＡＴＣＣ７６７１８、トリコスポロノイデス・マディダ（Trichosporonoides madida）ＣＢＳ２４０．７９、トリコスポラノイデス・ニグレッセンス（Trichosporonoides nigrescens）ＣＢＳ２６８．８１、トリコスポラノイデス・ニグレッセンス（Trichosporonoides nigrescens）ＣＢＳ２６９．８１、トリコスポロノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spathulata）ＣＢＳ２４１．７９、トリコスポロノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spathulata）ＣＢＳ２４２．７９Ａ及びトリコスポロノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spathulata）ＣＢＳ２４２．７９Ｂよりなる群から選ばれる上記(8)に記載の方法が提供される。
【００１２】
本発明の別の態様（第２の態様）により、(11)エリスリトール産生能を有する微生物であって、水と水不溶性溶媒で分配した時に水層に２０％以上残る物性を有する微生物及び／又は疎水度が８０以下である微生物を採取し、該微生物から更に好気的培養中に実質的な泡を形成しない微生物を採取することを特徴とするエリスリトール産生微生物の製造方法が提供される。
【００１３】
この発明の好ましい態様によれば、(12)エリスリトール産生能を有する微生物を液体培地で培養し、培養物より微生物凝集塊を除去する行程を組み合わせて行う上記(11)に記載の方法、(13)微生物を液体培地で培養し、培養物より微生物凝集塊を除去する行程を繰り返し行う上記(12)に記載の方法、(14)変異処理を行った微生物を液体培地で培養する上記(12)又は(13)に記載の方法が提供される。
【００１４】
この発明の更に好ましい態様によれば、(15)液体培地で培養する微生物が、酵母状糸状菌である上記(11)乃至(14)のいずれかに記載の方法、(16)酵母状糸状菌が、モニリエラ（Moniliella）属に属する微生物である上記(15)に記載の方法、(17)モニリエラ（Moniliella）属に属する微生物が、モニリエラ・ポリニス（Moniliella pollinis）及びモニリエラ・スアヴェオレンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolens var. nigra）よりなる群から選ばれる微生物である上記(16)に記載の方法、(18)モニリエラ（Moniliella）属に属する微生物が、モニリエラ・ポリニス（Moniliella pollinis）ＣＢＳ４６１．６７、モニリエラ・ポリニス（Moniliella pollinis）ＭＣＩ３５５４、モニリエラ・スアヴェオレンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolens var. nigra）ＣＢＳ２２３．３２、モニリエラ・スアヴェオレンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolens var. nigra）ＣＢＳ３８２．３６及びモニリエラ・スアヴェオレンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolens var. nigra）ＣＢＳ２２３．７９よりなる群から選ばれる微生物である上記(16)に記載の方法が提供される。
【００１５】
また、(19)酵母状糸状菌が、トリコスポロノイデス（Trichosporonoides）属に属する微生物である上記(15)に記載の方法、(20)トリコスポロノイデス（Trichosporonoides）属に属する微生物が、トリコスポロノイデス・オエドセファリス（Trichosporonoides oedocephalis）、トリコスポロノイデス・メガチリエンシス（Trichosporonoides megachillensis）、トリコスポロノイデス・マディダ（Trichosporonoides madida）、トリコスポロノイデス・ニグレッセンス（Trichosporonoides nigrescens）及びトリコスポロノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spathulata）よりなる群から選ばれる微生物である上記(19)に記載の方法、(21)トリコスポロノイデス（Trichosporonoides）属に属する微生物が、トリコスポラノイデス・オエドファリス（Trichosporonoides oedocephalis）ＣＢＳ６４９．６６、トリコスポラノイデス・オエドファリス（Trichosporonoides oedocephalis）ＣＢＳ５６８．８５、トリコスポラノイデス・メガチリエンシス（Trichosporonoides megachillensis）ＣＢＳ５６７．８５、トリコスポロノイデス・メガチリエンシス（Trichosporonoides megachillensis）ＡＴＣＣ７６７１８、トリコスポロノイデス・マディダ（Trichosporonoides madida）ＣＢＳ２４０．７９、トリコスポラノイデス・ニグレッセンス（Trichosporonoides nigrescens）ＣＢＳ２６８．８１、トリコスポラノイデス・ニグレッセンス（Trichosporonoides nigrescens）ＣＢＳ２６９．８１、トリコスポロノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spathulata）ＣＢＳ２４１．７９、トリコスポロノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spathulata）ＣＢＳ２４２．７９Ａ及びトリコスポロノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spathulata）ＣＢＳ２４２．７９Ｂよりなる群から選ばれる上記(19)に記載の方法が提供される。
【００１６】
本発明の別の態様（第３の態様）により、(22)上記(1)乃至(10)のいずれかに記載の方法により得られる、好気的培養中に実質的な泡を形成しないエリスリトール産生微生物が提供される。
【００１７】
この発明の好ましい態様によれば、(23)上記(7)に記載の方法により得られる、モニリエラ・ポリニス（Moniliella pollinis）ＣＢＳ４６１．６７の変異株ＭＣＩ３３７１（FERM BP-6173）、モニリエラ・ポリニス（Moniliella pollinis）ＭＣＩ３５５４の変異株ＭＣＩ３５５５（FERM BP-6171）、モニリエラ・スアヴェオレンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolens var. nigra）ＣＢＳ２２３．３２の変異株ＭＣＩ３５９８、モニリエラ・スアヴェオレンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolens var. nigra）ＣＢＳ３８２．３６の変異株ＭＣＩ３５９９及びモニリエラ・スアヴェオレンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolens var. nigra）ＣＢＳ２２３．７９の変異株ＭＣＩ３６００よりなる群から選ばれる、好気的培養中に実質的な泡を形成しないエリスリトール産生微生物が提供される。
【００１８】
また、(24)上記(10)に記載の方法により得られる、トリコスポラノイデス・オエドファリス（Trichosporonoides oedocephalis）ＣＢＳ６４９．６６の変異株ＭＣＩ３４３９（FERM BP-6308）、トリコスポラノイデス・オエドファリス（Trichosporonoides oedocephalis）ＣＢＳ５６８．８５の変異株ＭＣＩ３４４０（FERM BP-6175）、トリコスポラノイデス・メガチリエンシス（Trichosporonoides megachillensis）ＣＢＳ５６７．８５の変異株ＭＣＩ３３６９（FERM BP-6172）、トリコスポロノイデス・メガチリエンシス（Trichosporonoides megachillensis）ＡＴＣＣ７６７１８の変異株ＭＣＩ３６０４、トリコスポロノイデス・マディダ（Trichosporonoides madida）ＣＢＳ２４０．７９の変異株ＭＣＩ３４４１（FERM BP-6309）、トリコスポラノイデス・ニグレッセンスＣＢＳ２６８．８１の変異株ＭＣＩ３４３７（FERM BP-6174）、トリコスポラノイデス・ニグレッセンス（Trichosporonoides nigrescens）ＣＢＳ２６９．８１の変異株ＭＣＩ３４３８（FERM BP-6307）、トリコスポロノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spathulata）ＣＢＳ２４１．７９の変異株ＭＣＩ３６０１、トリコスポロノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spathulata）ＣＢＳ２４２．７９Ａの変異株ＭＣＩ３６０２及びトリコスポロノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spathulata）ＣＢＳ２４２．７９Ｂの変異株ＭＣＩ３６０３よりなる群から選ばれる、好気的培養中に実質的な泡を形成しないエリスリトール産生微生物が提供される。
【００１９】
本発明の別の態様（第４の態様）により、(25)上記(11)乃至(21)のいずれかに記載の方法により得られる好気的培養中に実質的な泡を形成しないエリスリトール産生微生物が提供される。
【００２０】
本発明の別の態様（第５の態様）により、(26)上記(22)乃至(26)のいずれかに記載のエリスリトール産生微生物又はその変異株を、培地で培養し、培養物よりエリスリトールを採取することを特徴とするエリスリトールの製造方法が提供される。
【００２１】
本発明の別の態様（第６の態様）により、(27)モリニエラ（Moniliella）属に属するエリスリトール産生能を有する微生物であって、好気的培養中に実質的な泡を形成しないエリスリトール産生微生物が提供される。
【００２２】
本発明の別の態様（第７の態様）により、(28)モリニエラ（Moniliella）属に属するエリスリトール産生能を有する微生物であって、水と水不溶性溶媒で分配した時に水層に２０％以上残る物性及び／又は疎水度が８０以下である物性を有し、好気的培養中に実質的な泡を形成しないエリスリトール産生微生物が提供される。
【００２３】
本発明の別の態様（第８の態様）により、(29)モニリエラ・ポリニス（Moniliella pollinis）及びモニリエラ・スアヴェオレンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolens var. nigra）よりなる群から選ばれる微生物の変異株であって、エリスリトール産生能を有し、好気的培養中に実質的な泡を形成しないエリスリトール産生微生物が提供される。
【００２４】
本発明の別の態様（第９の態様）により、(30)モニリエラ・ポリニス（Moniliella pollinis）ＣＢＳ４６１．６７、モニリエラ・ポリニス（Moniliella pollinis）ＭＣＩ３５５４、モニリエラ・スアヴェオレンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolens var. nigra）ＣＢＳ２２３．３２、モニリエラ・スアヴェオレンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolens var. nigra）ＣＢＳ３８２．３６及びモニリエラ・スアヴェオレンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolens var. nigra）ＣＢＳ２２３．７９よりなる群から選ばれる微生物の変異株であって、エリスリトール産生能を有し、好気的培養中に実質的な泡を形成しないエリスリトール産生微生物が提供される。
【００２５】
本発明の別の態様（第１０の態様）により、(31)モニリエラ・ポリニス（Moniliella pollinis）ＣＢＳ４６１．６７の変異株ＭＣＩ３３７１（FERM BP-6173）、モニリエラ・ポリニス（Moniliella pollinis）ＭＣＩ３５５４の変異株ＭＣＩ３５５５（FERM BP-6171）、モニリエラ・スアヴェオレンス・バール・ニグラＣＢＳ２２３．３２の変異株ＭＣＩ３５９８、モニリエラ・スアヴェオレンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolens var. nigra）ＣＢＳ３８２．３６の変異株ＭＣＩ３５９９及びモニリエラ・スアヴェオレンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolens var. nigra）ＣＢＳ２２３．７９の変異株ＭＣＩ３６００よりなる群から選ばれる、エリスリトール産生能を有し、好気的培養中に実質的な泡を形成しないエリスリトール産生微生物が提供される。
【００２６】
本発明の別の態様（第１１の態様）により、(32)トリコスポロノイデス（Trichosporonoides）属に属するエリスリトール産生能を有する微生物であって、好気的培養中に実質的な泡を形成しないエリスリトール産生微生物が提供される。
【００２７】
本発明の別の態様（第１２の態様）により、(33)トリコスポロノイデス（Trichosporonoides）属に属するエリスリトール産生能を有する微生物であって、水と水不溶性溶媒で分配した時に水層に２０％以上残る物性及び／又は疎水度が８０以下である物性を有し、好気的培養中に実質的な泡を形成しないエリスリトール産生微生物が提供される。
【００２８】
本発明の別の態様（第１３の態様）により、(34)トリコスポロノイデス・オエドセファリス（Trichosporonoides oedocephalis）、トリコスポロノイデス・メガチリエンシス（Trichosporonoides megachillensis）、トリコスポロノイデス・マディダ（Trichosporonoides madida）、トリコスポロノイデス・ニグレッセンス（Trichosporonoides nigrescens）及びトリコスポロノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spathulata）よりなる群から選ばれる微生物の変異株であって、エリスリトール産生能を有し、好気的培養中に実質的な泡を形成しないエリスリトール産生微生物が提供される。
【００２９】
本発明の別の態様（第１４の態様）により、(35)トリコスポラノイデス・オエドファリス（Trichosporonoides oedocephalis）ＣＢＳ６４９．６６、トリコスポラノイデス・オエドファリス（Trichosporonoides oedocephalis）ＣＢＳ５６８．８５、トリコスポラノイデス・メガチリエンシス（Trichosporonoides megachillensis）ＣＢＳ５６７．８５、トリコスポロノイデス・メガチリエンシス（Trichosporonoides megachillensis）ＡＴＣＣ７６７１８、トリコスポロノイデス・マディダ（Trichosporonoides madida）ＣＢＳ２４０．７９、トリコスポラノイデス・ニグレッセンス（Trichosporonoides nigrescens）ＣＢＳ２６８．８１、トリコスポラノイデス・ニグレッセンス（Trichosporonoides nigrescens）ＣＢＳ２６９．８１、トリコスポロノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spathulata）ＣＢＳ２４１．７９、トリコスポロノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spathulata）ＣＢＳ２４２．７９Ａ及びトリコスポロノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spathulata）ＣＢＳ２４２．７９Ｂよりなる群から選ばれる微生物の変異株であって、エリスリトール産生能を有し、好気的培養中に実質的な泡を形成しないエリスリトール産生微生物が提供される。
【００３０】
本発明の別の態様（第１５の態様）により(36)トリコスポラノイデス・オエドファリス（Trichosporonoides oedocephalis）ＣＢＳ６４９．６６の変異株ＭＣＩ３４３９（FERM BP-6308）、トリコスポラノイデス・オエドファリス（Trichosporonoides oedocephalis）ＣＢＳ５６８．８５の変異株ＭＣＩ３４４０（FERM BP-6175）、トリコスポラノイデス・メガチリエンシス（Trichosporonoides megachillensis）ＣＢＳ５６７．８５の変異株ＭＣＩ３３６９（FERM BP-6172）、トリコスポロノイデス・メガチリエンシス（Trichosporonoides megachillensis）ＡＴＣＣ７６７１８の変異株ＭＣＩ３６０４、トリコスポロノイデス・マディダ（Trichosporonoides madida）ＣＢＳ２４０．７９の変異株ＭＣＩ３４４１（FERM BP-6309）、トリコスポラノイデス・ニグレッセンスＣＢＳ２６８．８１の変異株ＭＣＩ３４３７（FERM BP-6174）、トリコスポラノイデス・ニグレッセンス（Trichosporonoides nigrescens）ＣＢＳ２６９．８１の変異株ＭＣＩ３４３８（FERM BP-6307）、トリコスポロノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spathulata）ＣＢＳ２４１．７９の変異株ＭＣＩ３６０１、トリコスポロノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spathulata）ＣＢＳ２４２．７９Ａの変異株ＭＣＩ３６０２及びトリコスポロノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spathulata）ＣＢＳ２４２．７９Ｂの変異株ＭＣＩ３６０３よりなる群から選ばれる、エリスリトール産生能を有し、好気的培養中に実質的な泡を形成しないエリスリトール産生微生物が提供される。
【００３１】
【発明の実施の形態】
以下、本発明について更に詳細に説明する。
本明細書において、「実質的な泡」とは、微生物の培養の際に用いられる市販されている消泡剤では消泡できない高密度で安定的な泡を意味する。また、「好気的培養中に実質的な泡を形成しない微生物」とは、通気、撹拌、振盪等を伴う好気的培養中に微生物に起因する発泡を起こさず、培地成分等に起因する発泡が通常の消泡剤の添加で抑制可能な微生物を意味する。
【００３２】
本発明のエリスリトール産生微生物の製造方法において、親株として用いる「エリスリトール産生能を有する微生物」としては、主炭素源として用いるグルコース、フルクトース等の発酵性糖質からエリスリトールを産生する能力を有する微生物であれば如何なるものであっても良いが、通常、酵母状糸状菌が用いられ、具体的にはモニリエラ（Moniliella）属に属する微生物及びトリコスポロノイデス（Trichosporonoides）属に属する微生物が好ましい微生物として挙げられる。
【００３３】
モニリエラ属に属する微生物としては、例えば、モニリエラ・ポリニス（Moniliella pollinis）、モニリエラ・スアヴェオレンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolens var. nigra）等を挙げることができる。
【００３４】
これらの中で好ましい菌株としては、モニリエラ・ポリニス（Moniliella pollinis）ＣＢＳ４６１．６７、モニリエラ・ポリニス（Moniliella pollinis）ＭＣＩ３５５４（FERM BP-6170）、モニリエラ・スアヴェオレンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolens var. nigra）ＣＢＳ２２３．３２、モニリエラ・スアヴェオレンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolens var. nigra）ＣＢＳ３８２．３６、モニリエラ・スアヴェオレンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolens var. nigra）ＣＢＳ２２３．７９、等を挙げることができる。
【００３５】
トリコスポロノイデス属に属する微生物としては、例えば、トリコスポロノイデス・オエドセファリス（Trichosporonoides oedocephalis）、トリコスポロノイデス・メガチリエンシス（Trichosporonoides megachillensis）、トリコスポロノイデス・マディダ（Trichosporonoides madida）、トリコスポロノイデス・ニグレッセンス（Trichosporonoides nigrescens）、トリコスポロノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spathulata）等を挙げることができる。
【００３６】
これらの中で好ましい菌株としては、例えば、トリコスポラノイデス・オエドファリス（Trichosporonoides oedocephalis）ＣＢＳ６４９．６６、トリコスポラノイデス・オエドファリス（Trichosporonoides oedocephalis）ＣＢＳ５６８．８５、トリコスポラノイデス・メガチリエンシス（Trichosporonoides megachillensis）ＣＢＳ５６７．８５、トリコスポロノイデス・メガチリエンシス（Trichosporonoides megachillensis）ＡＴＣＣ７６７１８、トリコスポロノイデス・マディダ（Trichosporonoides madida）、ＣＢＳ２４０．７９、トリコスポラノイデス・ニグレッセンス（Trichosporonoides nigrescens）ＣＢＳ２６８．８１、トリコスポラノイデス・ニグレッセンス（Trichosporonoides nigrescens）ＣＢＳ２６９．８１、トリコスポロノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spathulata）ＣＢＳ２４１．７９、トリコスポロノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spathulata）ＣＢＳ２４２．７９Ａ、トリコスポロノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spathulata）ＣＢＳ２４２．７９Ｂ等を挙げることができる。
【００３７】
これらの菌株は、いずれも国際寄託機関であるオランダ国のCentraal Bureau voor Schimmelcultures（ＣＢＳ）、アメリカ合衆国のAmerican Type Culture Collection（ＡＴＣＣ）に国際寄託されている菌株であり、当業者に容易に入手可能なものである。また、モニリエラ・ポリニス（Moniliella pollinis）ＭＣＩ３５５４（FERM BP-6170）は、１９９７年１１月１９日より、日本国の工業技術院生命工学工業技術研究所（日本国茨城県つくば市東１丁目１番３号、郵便番号305）に、FERM BP-6170の受託番号でブタペスト条約に基づき国際寄託されている。
【００３８】
本発明のエリスリトール産生微生物の製造方法において、上記微生物は液体培地で培養され、培養物より微生物凝集塊を除去した後、培養物中に残存する微生物から好気的培養中に実質的な泡を形成しない微生物が採取される。
【００３９】
培養は、後述する本発明の微生物によるエリスリトールの製造方法で用いる培地と同様の組成を有する液体培地を用い、好ましくは、通気、撹拌、振盪等の好気的条件で行われる。培地のｐＨは、通常ｐＨ３〜７、好ましくはｐＨ３〜４．５、培養温度は２５℃〜３７℃、好ましくは２７℃〜３５℃の範囲内が適当である。培養時間は、通常は１〜７日間、好ましくは２〜５日間が適当である。
【００４０】
培養物からの微生物凝集塊の除去は、マイクロマニュピレーター等を用いて凝集していない菌体を分離する方法、ペーパーフィルター等により凝集塊を濾過する方法、菌体懸濁液に通気し菌体凝集塊を泡として除去する方法等により行うことができる。
【００４１】
上記微生物の培養及び微生物凝集塊除去の行程は、一回でも良いが、この行程を繰り返し行うのが好ましい。この行程を繰り返すことにより、好気的培養中に実質的な泡を形成しない微生物を効率よく採取することができる。繰り返しの回数は、好ましくは５〜１５回が適当である。
【００４２】
また、エリスリトール産生能を有する微生物を変異処理し、該微生物を用いて、上記培養及び凝集塊除去の行程を行えば、更に効率的に好気的培養中に実質的な泡を形成しない微生物を採取することができる。変異処理の方法としては、それ自体既知の通常用いられる、紫外線照射、Ｘ線照射、放射線照射、Ｎ−メチル−Ｎ’−ニトロ−ニトロソグアニジン（ＮＴＧ）等の変異誘起剤処理、遺伝子組換え、細胞融合等の人為的変異処理等を挙げることが出来る。
【００４３】
上記した微生物生物凝集塊を除去した培養物中に残存する微生物から好気的培養中に実質的な泡を形成しない微生物を採取するには、例えば、凝集塊を除去した培養物を液体培地と同様の組成の寒天培地に接種し、コロニーを分離する。次に、分離したコロニーを、それぞれバッフル付き三角フラスコを用いて液体培地で好気的に培養し、泡の形成が少ない株を選抜すれば良い。
【００４４】
上記のようにして得られる好気的培養中に実質的な泡を形成しない微生物をさらに変異処理し、再度、培養及び微生物凝集塊除去の行程および／またはコロニーの分離、選抜工程を行ってもよい。
【００４５】
かくして得られる本発明の微生物としては、前記した微生物を親株として、上記の方法により得られる好気的培養中に実質的な泡の形成がなく、エリスリトール産生能を有するものであれば如何なる微生物でも本発の範囲に含まれる。具体的には、酵母状糸状菌、例えば、モニリエラ（Moniliella）属に属する微生物又はトリコスポロノイデス（Trichosporonoides）属に属する微生物で上記特徴を有するものが挙げられる。更に具体的には、次の菌株を特に好ましいものとして挙げることができる。
【００４６】
(1)モニリエラ・ポリニス（Moniliella pollinis）ＣＢＳ４６１．６７の変異株ＭＣＩ３３７１（FERM BP-6173）
(2)モニリエラ・ポリニス（Moniliella pollinis）ＭＣＩ３５５４の変異株ＭＣＩ３５５５（FERM BP-6171）
(3)モニリエラ・スアヴェオレンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolens var. nigra）ＣＢＳ２２３．３２の変異株ＭＣＩ３５９８
(4)モニリエラ・スアヴェオレンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolens var. nigra）ＣＢＳ３８２．３６の変異株ＭＣＩ３５９９
(5)モニリエラ・スアヴェオレンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolens var. nigra）ＣＢＳ２２３．７９の変異株ＭＣＩ３６００
(6)トリコスポラノイデス・オエドファリス（Trichosporonoides oedocephalis）ＣＢＳ６４９．６６の変異株ＭＣＩ３４９９（FERM BP-6308）
(7)トリコスポラノイデス・オエドファリス（Trichosporonoides oedocephalis）ＣＢＳ５６８．８５の変異株ＭＣＩ３４４０（FERM BP-6175）
(8)トリコスポラノイデス・メガチリエンシス（Trichosporonoides megachillensis）ＣＢＳ５６７．８５の変異株ＭＣＩ３３６９（FERM BP-6172）
(9)トリコスポロノイデス・メガチリエンシス（Trichosporonoides megachillensis）ＡＴＣＣ７６７１８の変異株ＭＣＩ３６０４
(10)トリコスポロノイデス・マディダ（Trichosporonoides madida）ＣＢＳ２４０．７９の変異株ＭＣＩ３４４１（FERM BP-6309）
(11)トリコスポラノイデス・ニグレッセンスＣＢＳ２６８．８１の変異株ＭＣＩ３４３７（FERM BP-6174）
(12)トリコスポラノイデス・ニグレッセンス（Trichosporonoides nigrescens）ＣＢＳ２６９．８１の変異株ＭＣＩ３４３８（FERM BP-6307）
(13)トリコスポロノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spathulata）ＣＢＳ２４１．７９の変異株ＭＣＩ３６０１
(14)トリコスポロノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spathulata）ＣＢＳ２４２．７９の変異株ＭＣＩ３６０２
(15)トリコスポロノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spathulata）ＣＢＳ２４２．７９Ｂの変異株ＭＣＩ３６０３
【００４７】
上記菌株の中で、(1)ＭＣＩ３３７１株（FERM BP-6173）、(2)ＭＣＩ３５５５株（FERM BP-6171）、(6)ＭＣＩ３４３９株（FERM BP-6308）、(7)ＭＣＩ３４４０株（FERM BP-6175）、(8)ＭＣＩ３３６９株（FERM BP-6172）、(10)ＭＣＩ３４４１株（FERM BP-6309）、(11)ＭＣＩ３４３７株（FERM BP-6174）、(12)ＭＣＩ３４３８株（FERM BP-6307）は、日本国の工業技術院生命工学工業技術研究所（日本国茨城県つくば市東１丁目１番３号、郵便番号305）に、カッコ内の受託番号（「FERM BP-」が冠せられている）で各々ブタペスト条約に基づき国際寄託されている。ＭＣＩ３３７１株（FERM BP-6173）及びＭＣＩ３３６９株（FERM BP-6172）は１９９６年１１月２８日に、各々FERM P-15967及びFERM P-15969の受託番号で寄託され、１９９７年１１月１９日にブタペスト条約に基づく国際寄託に移管されている。ＭＣＩ３４４０株（FERM BP-6175）及びＭＣＩ３４３７株（FERM BP-6174）は１９９７年３月２８日に、各々FERM P-16167およびFERM P-16164の受託番号で寄託され、１９９７年１１月１９日にブタペスト条約に基づく国際寄託に移管されている。ＭＣＩ３５５５株（FERM BP-6171）は、１９９７年１１月１９日より国際寄託されている。ＭＣＩ３４３９株（FERM BP-6308）、ＭＣＩ３４４１株（FERM BP-6309）およびＭＣＩ３４３８株（FERM BP-6307）は１９９７年３月２８日に、各々FERM P-16166、FERM P-16168およびFERM P-16165の受託番号で寄託され、１９９８年３月２６日にブタペスト条約に基づく国際寄託に移管されている。
【００４８】
上記した本発明により提供されるエリスリトール産生微生物は、好ましくは水と水不溶性溶媒で分配した時に水層に２０％以上残る物性を有する微生物及び／又は疎水度が８０以下である微生物である。
【００４９】
かくして本発明の別の態様により、エリスリトール産生能を有する微生物であって、水と水不溶性溶媒で分配した時に水層に２０％以上残る物性を有する微生物及び／又は疎水度が８０以下である微生物を採取し、該微生物から更に好気的培養中に実質的な泡を形成しない微生物を採取することを特徴とするエリスリトール産生微生物の製造方法が提供される。上記微生物の疎水度は通常８０以下であるが、好ましくは７０以下である。
【００５０】
後記実施例４〜１８及び比較例１〜１５に示すように、好気的培養中に実質的な泡を形成しない微生物は、その疎水度がいずれも８０以下であり、好気的培養中に実質的な泡を形成しないことと疎水度とは関連性があると考えられる。したがって、好気的培養中に実質的な泡を形成しない微生物の選択と、疎水度が８０以下である微生物の選択は、いずれか一方を行ってもよいし、両方行ってもよい。また、両方の選択を行う場合は、どちらを先に行ってもよい。
【００５１】
本発明の方法においては、エリスリトール産生能を有する微生物を、例えば、前記した寒天培地に接種後、培養してコロニーを分離し、各コロニーから得られる微生物の一部を物性の測定に供すればよい。
【００５２】
この発明で用いる水不溶性溶媒としては、例えばトルエン、ベンゼン、酢酸エチル、クロロホルム、シクロヘキサン、ヘキサノール、オクタノール、プロパノールが挙げられ、好ましくはトルエン、ベンゼン、オクタノールが挙げられ、特に好ましくはトルエンが挙げられる。
【００５３】
水と水不溶性溶媒での微生物の分配は、それ自体既知の通常用いられる方法により、例えば、微生物の水懸濁液を調製し、それに適量の上記水不溶性溶媒を加えて攪拌し、水層及び／又は溶媒層の微生物量を測定することにより算出できる。
【００５４】
微生物の疎水度は、下記式：
疎水度＝１００×（１−Ｒ／Ｉ）
（式中、Ｒは水不溶性溶媒処理後の水層の吸光度を表し、Ｉは水不溶性溶媒処理前の吸光度を表す。）で定義される値である。
【００５５】
上記式における水層の吸光度は、微生物の水懸濁液を調製して吸光度（例えば660nmで）を分光光度計により測定し、該懸濁液に水不溶性溶媒を加えて攪拌し、水層と水不溶性溶媒層とを分離させた後水層の吸光度を同じ波長で測定することにより求められる。微生物の水懸濁液は、吸光度が測定できる微生物量が存在すれば特に制限されないが、通常、吸光度０．１〜１．０、好ましくは０．３〜０．６に調製するのが適当である。加える水不溶性溶媒の量は特に制限されないが、微生物の水懸濁液と等量加えるのが好ましい。微生物懸濁液と水不溶性溶媒との攪拌は、試験管ミキサー等を用いて行えば良い。また、微生物は、水懸濁液を調製する前に、必要に応じて洗浄操作を行うのが好ましい。また、好気的培養中に実質的な泡を形成しない微生物の採取は、前記した方法で行えば良い。尚、本発明において、吸光度は、濁度で置き換えることができる。
【００５６】
上記物性値による微生物の選別は、前記したエリスリトール産生能を有する微生物を液体培地で培養し、培養物より微生物凝集塊を除去する行程を組み合わせて行うこともできる。即ち、該行程を、上記物性値による微生物の選別の前又は後に組み合わせて行えば良い。また、液体培地での微生物の培養は、前記の通り変異処理を行った後に行うこともできる。
【００５７】
かくして本発明の方法により、前記したエリスリトール産生能を有し、好気的培養中に実質的な泡を形成しないエリスリトール産生微生物が提供される。
【００５８】
次に、本発明により提供されるエリスリトール産生微生物の帰属を明確にするために、本発明者らにより行われた微生物の同定結果（菌学的性質）を示す。
【００５９】
ＭＣＩ３３６９株（FERM BP-6172）の同定
ＭＣＩ３３６９株は、ＰＤＡ（potato dextrose agar）上、２４℃培養ではじめ白色、後にオリーブがかった灰色、２週間以上の古い培養ではオリーブ褐色に変色する。菌の生育は速く、酵母様の出芽により増殖する。酵母様の細胞は、はじめ無色、後にはオリーブがかった褐色を呈する。栄養菌糸はよく発達し、隔壁を有し分枝する、幅２〜３．８μｍ、はじめ無色、後に若干厚膜化し褐色に変色する。気中菌糸の発達は旺盛で、気中菌糸の側面より出芽型分生子を形成する。栄養菌糸、気中菌糸は断片状に切れて分節型の分生子となる。分節型分生子は円筒形〜樽形（３．６〜２５μｍ×２．２〜４．３μｍ）、はじめ無色で、後に淡褐色になる。出芽型分生子は単一または３〜４個の連鎖となる。分生子は細長い楕円形、大きさは３．４〜７．５μｍ×１．９〜４．１μｍ（平均６．５±１．２μｍ×３．８±０．６μｍ）、はじめ無色、後にオリーブがかった褐色を呈する。
【００６０】
本菌株（ＭＣＩ３３６９）の形態学的性状は、親株であるトリコスポロノイデス・メガチリエンシス（Trichosporonoides megachiliensis）ＣＢＳ５６７．８５の基準株の特徴によく一致した。従って、本菌株はトリコスポロノイデス・メガチリエンシス（Trichosporonoides megachiliensis）と同定した。
【００６１】
ＭＣＩ３３７１株（FERM BP-6173）の同定
ＭＣＩ３３７１株は、ＰＤＡ（potato dextrose agar）上、２４℃培養で始め白色〜黄味白色、培養一週間後にはにぶい黄色となり、さらに古い培養では黒褐色に変色する。菌の生育は速く、酵母様の出芽により増殖する。出芽細胞は、はじめ薄膜でオリーブがかった褐色を呈し、後に厚膜化して着色する。酵母様の出芽と同時に栄養菌糸が伸長する。栄養菌糸は隔壁を有し、分枝する。幅２〜４．５μｍ、はじめ無色、後に褐色になる。菌糸は断片状に切れて分節型の分生子となるか、または菌糸の側面あるいは先端部より出芽型の分生子を形成する。分節型分生子は円筒形〜樽形（６〜３５μｍ×２．５〜５．０μｍ）、はじめ無色で、後に褐色になる。出芽型分生子は単一または２〜３個の連鎖となって形成される、卵形〜楕円形、あるいは亜球形で、大きさは４．７〜９．４μｍ×３．１〜５．６μｍ（平均６．８±１．３μｍ×４．５±０．６μｍ）、はじめ無色で、後にオリーブがかった褐色となる。
【００６２】
本菌株（ＭＣＩ３３７１）は、分節型分生子と出芽型分生子の二形性を有する、２）出芽型分生子は求頂的に形成され同調的に形成されない等の特徴を有する。これらの特徴に基づいてDe Hoog & Hermanides-Nijhof（1977）のモノグラフに従って属の検索を行ったところ、本菌株はモニリエラ（Moniliella）属に帰属することが判明した。De Hoog（1979）の“The Black yeasts, II：Moniliella and Allied Genera”Studies in Mycology No.19,1〜90によれば、モニリエラ（Moniliella）属にはモニリエラ・スアベオレンス・バー・スアベオレンス（Moniliella suaveolens var. suaveolens）、モニリエラ・スアベオレンス・バー・ニゲル（Moniliella suaveolens var. niger）、モニリエラ・アセトアブテンス（Moniliella acetoabutens）及びモニリエラ・ポリニス（Moniliella pollinis）の３種２変種が知られている。これらの種や変種は主として出芽型分生子あるいは分節型分生子の形態学的特徴によって区別されている。本菌株の形態学的性状を精査した結果、本菌はモニリエラ・ポリニス（Moniliella pollinis）の記載によく合致した。従って本菌株はモニリエラ・ポリニス（Moniliella pollinis）と同定した。
【００６３】
ＭＣＩ３４３７株（FERM BP-6174）の同定
ＭＣＩ３４３７株は、トリコスポロノイデス・ニグレッセンス（Trichosporonoides nigrescens）ＣＢＳ２６８．８１に由来する変異株で、ＬＣＡ（三浦培地）上、２４℃培養で初め白色〜黄味白色、培養１週間後に黄褐色、２週間以上の古い培養では暗い黄茶色に変色する。菌の生育は中程度であり、酵母様の出芽により増殖する。出芽細胞は、初め薄膜でオリーブがかった褐色を呈し、後に厚膜化して、黒褐色に着色し、多極出芽により増殖する。１回から３〜４回出芽して増殖する。酵母様の出芽と同時に基底菌糸が伸長する。基底菌糸は、隔壁を有し、分枝し、幅は２〜４．５μｍ、初め無色で、後に褐色になる。菌糸は断片状に切れて分節型の分生子になるか、あるいは菌糸の側面あるいは先端部より出芽型の分生子を形成する。分節型分生子は円筒形〜樽型、長さは変化に富む、幅は２．５〜５．０μｍ、初め無色で、後に褐色になる。出芽型分生子は、基底菌糸の側面及び先端に形成し、単一あるいは２、３の連鎖となって形成され、亜球形〜楕円形（４．３〜９．２ｘ３．８〜６．５μｍ）、褐色で、厚膜化するが、３７℃では生育しない。
【００６４】
本菌株（ＭＣＩ３４３７）は、１）分節型分生子と出芽型分生子の二形性を有する、２）出芽型分生子は求頂的に形成され、同調的な形成をしない等の特徴を有する。これらの特徴に基づいて、Trichosporonoides nigrescensの親株と対比すると共に、G. S. de Hoog（1979）のモノグラフ及びA. D. Hocking & J. I. Pitt（1981）の原記載に従って属及び種の検索を行ったところ、本生産菌の性状はTrichosporonoides nigrescensの親株によく合致した。従って本菌株はT. nigrescensと同定した。
【００６５】
ＭＣＩ３４３８株（FERM BP-6307）の同定
ＭＣＩ３４３８株は、トリコスポロノイデス・ニグレッセンス（Trichosporonoides nigrescens）ＣＢＳ２６９．８１に由来する変異株で、ＬＣＡ（三浦培地）上、２４℃培養で初め白色〜黄味白色、培養１週間後に黄褐色となり、２週間以上の古い培養では暗い黄茶色に変色する。菌の生育は中程度で、酵母様の出芽により増殖する。出芽細胞は、初め薄膜でオリーブがかった褐色を呈し、後に厚膜化して、黒褐色に着色し、多極出芽する。１回から３〜４回出芽して増殖する。酵母様の出芽と同時に基底菌糸が伸長する。基底菌糸は、隔壁を有し、分枝し、幅は２〜４．５μｍ、初め無色で、後に褐色になる。菌糸は断片状に切れて分節型の分生子になる、あるいは菌糸の側面あるいは先端部より出芽型の分生子を形成する。分節型分生子は円筒形〜樽型、長さは変化に富む、幅は２．５〜５．０μｍ、初め無色で、後に褐色になる。出芽型分生子は、基底菌糸の側面及び先端に形成し、単一あるいは２、３の連鎖となって形成され、亜球形〜楕円形（３．４〜９．８ｘ３．８〜６．３μｍ）、初め無色で、後に褐色となり、厚膜化するが、３７℃では生育しない。
【００６６】
本菌株（ＭＣＩ３４３８）は、１）分節型分生子と出芽型分生子の二形性を有する、２）出芽型分生子は求頂的に形成され、同調的な形成をしない等の特徴を有する。これらの特徴に基づいて、Trichosporonoides nigrescensの親株と対比すると共に、G. S. de Hoog（1979）Pitt（1981）の原記載に従って属及び種の検索を行ったところ、本生産菌の性状はTrichosporonoides nigrescensの親株によく合致した。従って本菌株はT. nigrescensと同定した。
【００６７】
ＭＣＩ３４３９株（FERM BP-6308）の同定
ＭＣＩ３４３９株は、トリコスポロノイデス・オエドセファリス（Trichosporonoides oedocephalis）ＣＢＳ６４９．６６に由来する変異株で、ＬＣＡ（三浦培地）上、２４℃培養で初め白色〜黄味白色、培養１週間後に茶色、２週間以上の古い培養では暗い黄茶色に変色する。菌の生育は速い、酵母様の出芽により増殖する。出芽細胞は無色で、多極出芽より増殖する。１回から３〜４回出芽して増殖する。酵母様の出芽と同時に基底菌糸及び気中菌糸が伸長する。基底菌糸と気中菌糸は隔壁を有し、分枝し、幅は２〜４．５μｍ、無色である。菌糸は、断片状に切れて分節型の分生子になるか、あるいは菌糸の側面あるいは先端部より出芽型の分生子を形成する。また基底菌糸より分生子柄が発達し、先端が膨潤して頂嚢となる。頂嚢は直径８．８〜１２．５μｍ、頂嚢より同調的に出芽型分生子が形成される。分節型分生子は円筒形〜樽型、長さは変化に富み、幅は２．８〜５．０μｍ、初め無色。出芽型分生子は、基底菌糸の側面及び先端に形成され、単一あるいは２、３の連鎖となって形成され、楕円形（４．４〜６．３ｘ２．２〜３．８μｍ）で、無色である。頂嚢に形成される分生子は、亜球形〜球形（４．０〜６．３μｍ）で、赤褐色であり、３７℃で生育する。
【００６８】
本菌株（ＭＣＩ３４３９）は、１）分節型分生子と出芽型分生子の二形性を有する、２）出芽型分生子は基底菌糸及び気中菌糸上に求頂的に生じる、あるいは頂嚢から同調的に生じる等の特徴を有する。これらの特徴に基づいて、Trichosporonoides oedocephalisの親株と対比すると共に、G. S. de Hoog（1979）のモノグラフ及びR. H. Haskins &J. F. T. Spencer（1966）の原記載に従って属及び種の検索を行ったところ、本生産菌の性状はTrichosporonoides oedocephalisの親株によく合致した。従って本菌株はT. oedocephalisと同定した。
【００６９】
ＭＣＩ３４４０株（FERM BP-6175）の同定
ＭＣＩ３４４０株は、トリコスポロノイデス・オエドセファリス（Trichosporonoides oedocephalis）ＣＢＳ５６８．８５に由来する変異株で、ＬＣＡ（三浦培地）上、２４℃培養で初め白色〜黄味白色、培養１週間後に茶色、２週間以上の古い培養では暗い黄茶色に変色する。菌の生育は速く、酵母様の出芽により増殖する。出芽細胞は無色で、多極出芽により増殖する。１回から３〜４回出芽して増殖する。酵母様の出芽と同時に基底菌糸及び気中菌糸が伸長する。基底菌糸と気中菌糸は隔壁を有し、分枝し、幅は２〜4.5μm、無色である。菌糸は、断片状に切れて分節型の分生子になるか、あるいは菌糸の側面あるいは先端部より出芽型の分生子を形成する。ＬＣＡ（三浦培地）及びＰＤＡ（potato dextrose agar）上で頂嚢は形成されない。分節型分生子は、円筒形〜樽型、長さは変化に富み、幅は２．８〜５．０μｍ、無色である。出芽型分生子は、基底菌糸の側面及び先端に形成する、単一あるいは２、３の連鎖となって形成される、楕円形（４．７〜８．１ｘ２．５〜３．４μｍ）で、無色であり、３７℃で生育する。
【００７０】
本菌株（ＭＣＩ３４４０）は、１）分節型分生子と出芽型分生子の二形性を有する、２）出芽型分生子は基底菌糸及び気中菌糸上に求頂的に生じる等の特徴を有する。Oedocephalis-typeの頂嚢を形成しない性状を有す。Haskins & Spencer（1966）の原記載によれば、Trichosporonoides oedocephalisは主として頂嚢を持つことによって、他の種（T. spathulata、T. nigrescens、T. madida及びT. megachiliensis）から識別されている。本変異株は、この点がT. oedocephalisと異なっている。しかし、T. oedocephalisの親株と対比すると共に、G. S. de Hoog（1979）のモノグラフ及びR. H. Haskins &J. F. T. Spencer（1966）の原記載に従って属及び種の検索を行ったところ、Oedocephalis-typeの頂嚢を欠損している以外の形態学的性状はT. oedocephalisの親株によく合致した。従って本菌株は暫定的にT. oedocephalisと同定した。
【００７１】
ＭＣＩ３４４１株（FERM BP-6309）の同定
ＭＣＩ３４４１株は、トリコスポロノイデス・マディダ（Trichosporonoides madida）ＣＢＳ２４０．７９に由来する変異株で、ＬＣＡ（三浦培地）上、２４℃培養で初め白色〜黄味白色、培養２週間以上の古い培養では茶色に変色する。菌の生育は中程度、酵母様の出芽により増殖する。出芽細胞は無色で、多極出芽により増殖する。１回から３〜４回出芽して増殖する。酵母様の出芽と同時に基底菌糸が伸長し、菌糸の発達は貧弱である。基底菌糸は、隔壁を有し、分枝し、幅は２〜３．５μｍで、無色である。菌糸は断片状に切れて分節型の分生子になるか、あるいは菌糸の側面あるいは先端部より出芽型の分生子を形成する。分節型分生子は円筒形〜樽型、長さは変化に富み、幅は２．５〜４０μｍ、無色である。出芽型分生子は基底菌糸の側面及び先端に形成する、単一あるいは２、３の連鎖となって形成され、亜球形〜楕円形（３．１〜７．８ｘ２．８〜４．４μｍ）、無色であり、３７℃で生育する。
【００７２】
本菌株（ＭＣＩ３４４１）は、１）分節型分生子と出芽型分生子の二形性を有する、２）出芽型分生子は求頂的に形成され、同調的な形成をしない等の特徴を有する。これらの特徴に基づいて、Trichosporonoides madidaの親株と対比すると共に、G. S. de Hoog（1979）のモノグラフに従って属及び種の検索を行ったところ、本菌株の性状はTrichosporonoides madidaの親株によく合致した。従って本菌株はT. madidaと同定した。
【００７３】
ＭＣＩ３５５４株（FERM BP-6170）の同定
本菌株は、本発明者らにより土壌中の枯茎から分離された微生物であり、本発明のＭＣＩ３５５５株（FERM BP-6171）の親株である。
【００７４】
１）形態学的特徴：
コロニーはＰＤＡ（potato dextrose agar）上、２４℃培養で初め白色〜黄味白色、培養１週間後に黄褐色、２週間以上の古い培養では暗い黄茶色に変色する。菌の生育は中程度、酵母様の出芽により増殖する。出芽細胞は、初め無色、後にやや厚膜化して、淡褐色を呈し、楕円形、卵形あるいは亜球形（３．８〜６．３×３．０〜５．０μｍ）である。１回から３〜４回出芽して増殖し、多極出芽する。酵母様の出芽と同時に基底菌糸と気中菌糸が伸長する。基底菌糸および気中菌糸は、幅２．２〜３．５μｍ、隔壁を有し、分枝し、初め無色で、後に褐色になる。菌糸は、断片状に切れて分節型の分生子になり、菌糸の側面あるいは先端部より出芽型の分生子を形成する。分節型分生子は円筒形〜樽型、長さは変化に富み（９．４〜１８．８μｍ×３．１〜４．１μｍ）、初め無色で、後に褐色になる。出芽型分生子は、基底菌糸の側面および先端に、単一あるいは２、３個の連鎖となって形成され、亜球形〜楕円形（５．９〜１０．９×３．８〜５．９μｍ）で、初め無色、後に褐色となり、やや厚膜化する。
【００７５】
２）生理学的特徴：
生育温度：９℃〜３７℃（ＰＤＡ上、１０日間培養）
最適生育温度：２７℃〜３０℃
生育ｐＨ：４〜９（ＬＣＡ液体培地上、１０日間培養）
最適生育ｐＨ：５〜６
炭素源の利用（下記表１に示す。）
糖からの発酵性（下記表２に示す。）
窒素源の利用（下記表３に示す。）
【００７６】
３）分類学的考察
本菌株（ＭＣＩ３５５４）は、１）酵母様の出芽型細胞を有する、２）分節型分生子と出芽型分生子の二形性を有する、３）出芽型分生子は求頂的に形成され、同調的に形成されない等の特徴を有する。これらの特徴に基づいて、G. S. de Hoog（1979）,”The Black Yeasts, II: Moniliella and Allied Genera, Studies in Mycology No.19, p1-36”のモノグラフの検索表およびG. S. de Hoog & E. Gueho（1984）, Deoxyribonucleic acid base composition and taxonomy of Moniliella and allied genera, Antonie van Leeuwenhook, 135-141のMoniliella属に属する種の記載に従って、属及び種の検索をしたところ、本生産菌の性状はMoniliella pollinisの記載によく合致した。さらにMoniliella pollinisのタイプstrain（CBS 461.67）の性状と対比したところ、本生産菌の性状はタイプstrainの性状にもよく合致した。従って本菌株はMoniliella pollinisと同定した。
【００７７】
ＭＣＩ３５５５株（FERM BP-6171）の同定
１）形態学的特徴：
本菌株（ＭＣＩ３５５５）は、モニリエラ・ポリニス（Moniliella pollinis）ＭＣＩ３５５４に由来する変異株で、コロニーはＰＤＡ（potato dextrose agar）上、２４℃培養で初め白色〜黄味白色、培養１週間後に黄褐色、２週間以上の古い培養では暗い黄茶色に変色する。菌の生育は中程度、酵母様の出芽により増殖する。出芽細胞は初め、無色、後にやや厚膜化して、淡褐色を呈する、楕円形、卵形あるいは亜球形（４．０〜７．８×３．５〜６．２μｍ）である。１回から３〜４回出芽して増殖し、多極出芽する。酵母様の出芽と同時に基底菌糸と気中菌糸が伸長する。基底菌糸及び気中菌糸は幅１．３〜４．１μｍ、隔壁を有し、分枝する、初め無色、後に褐色になる。菌糸は、断片状に切れて分節型の分生子になり、菌糸の側面あるいは先端部より出芽型の分生子を形成する。分節型分生子は円筒形〜樽型、長さは変化に富み（１３．４〜３２．８μｍ×２．５〜４．１μｍ）、初め無色、後に褐色になる。出芽型分生子は基底菌糸の側面および先端に、単一あるいは２、３個の連鎖となって形成され、亜球形〜楕円形（５．０〜９．４×４．４〜６．３μｍ）で、初め無色、後に褐色となり、やや厚膜化する。
【００７８】
２）生理学的特徴：
生育温度：９℃〜３７℃（ＰＤＡ上、１０日間培養）
最適生育温度：２７℃〜３０℃
生育ｐＨ：４〜９（ＬＣＡ液体培地上、１０日間培養）
最適生育ｐＨ：５〜６
炭素源の利用（下記表１に示す。）
糖からの発酵性（下記表２に示す。）
窒素源の利用（下記表３に示す。）
【００７９】
３）分類学的考察
本菌株（ＭＣＩ３５５５）は、１）酵母状の出芽型細胞を有する、２）分節型分生子と出芽型分生子の二形成を有する、３）出芽型分生子は求頂的に形成され、同調的に形成されない等の特徴を有する。これらの特徴に基づいて、G. S. de Hoog（1979）,”The Black Yeasts, II: Moniliella and Allied Genera, Studies in Mycology No.19, p1-36”のモノグラフの検索表及びG. S. de Hoog & E. Gueho（1984）, Deoxyribonucleic acid base composition and taxonomy of Moniliella and allied genera, Antonie van Leeuwenhook, 135-141のMoniliella属に属する種の記載に従って、属および種の検索をしたところ、本生産菌の性状はMoniliella pollinisの記載によく合致した。さらにMoniliella pollinisのタイプstrain（CBS 461.67）の性状と対比したところ、本生産菌の性状はタイプstrainの性状にもよく合致した。従って本菌株はMoniliella pollinisと同定した。
【００８０】
【表１−１】
0004033914.tif 000002
【００８１】
【表１−２】
0004033914.tif 000003
【００８２】
【表２】
0004033914.tif 000004
【００８３】
【表３】
0004033914.tif 000005
【００８４】
かくして得られるエリスリトール産生微生物を用いて、本発明の別の態様であるエリスリトールの製造方法が提供される。
【００８５】
この発明においては、上記エリスリトール産生微生物又はその変異株を、発酵性糖質を主炭素源とする培地で培養し、培養物よりエリスリトールが採取される。
【００８６】
エリスリトール産生微生物としては、前記したものが用いられ、この発明で用いる好ましい微生物としては、同じく前記した好ましい菌株が挙げられる。これらの菌株は、さらにエリスリトールの生産能等の諸性質を改良した変異株であっても良い。これらの変異株は、それ自体既知の通常用いられる手段により育種することができる。
【００８７】
本発明に用いる培地は、炭素源、窒素源、必要に応じて無機塩、発育素等を水に溶解させた液体培地である。
【００８８】
上記微生物の培養に使用される主炭素源としては、グルコース、フルクトース、グリセロール等の発酵性糖質が利用される。これらの主炭素源は、単独でも組み合わせても使用できる。使用濃度は特に限定されないが、エリスリトールの生産を阻害しない範囲で可能な限り高くするほうが有利である。好ましい濃度は２０％〜６０％（Ｗ／Ｖ）の範囲である。また、培養中に主炭素源を分割添加してもよい。これらの主炭素源から、本発明で用いる微生物によりエリスリトールが産生される。
【００８９】
微生物の培養に使用される窒素源としてはアンモニア塩、尿素、ペプトン、微生物エキス、コーンステープリカー等の各種の有機、無機の窒素化合物が用いられる。無機塩としては各種リン酸塩、硫酸塩、マグネシウム、カリウム、マンガン、鉄、亜鉛等の金属塩が用いられる。また、発育素としてビタミン、ヌクレオチド、アミノ酸等の微生物の生育を促進する因子を必要に応じて添加することができる。また、本発明で用いる微生物は、培養中に実質的な泡を形成しないが、培養中の培地成分による発泡を抑える為に市販の消泡剤を適量添加しておくことが好ましい。
【００９０】
培養に際しては、斜面培養から菌体を直接主培地に接種しても構わないが、液体培地で１日〜４日の培養で得られる前培養物を主培地に接種するのが好ましい。
【００９１】
培養初期のｐＨは、通常ｐＨ３〜７、好ましくはｐＨ３〜４．５である。培養温度は２５℃〜３７℃、好ましくは２７℃〜３５℃の範囲内が適当である。また、培養は通気、撹拌、振盪等の好気的条件で行うのが好ましい。培養時間は、主炭素源が消費されるまで行うのが好ましく、通常は３日〜８日間行われる。かくして産生される培養液中のエリスリトール生成量は、ガスクロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー等のそれ自体既知の通常用いられる方法で測定できる。上記の培養条件は、使用する微生物によって異なることが予想されるが、使用する微生物について条件を段階的に変化させて予備実験を行うことにより、好ましい条件を見出すことができる。
【００９２】
培養液中に蓄積したエリスリトールは、常法に従って、培養物より分離・精製される。具体的には、遠心分離、濾過等により固形物を除去した後、活性炭、イオン交換樹脂により脱色、脱塩し、その溶液から結晶化することによりエリスリトールを分離・精製することができる。
【００９３】
【実施例】
以下に実施例により本発明を更に具体的に述べるが、本発明は以下に記載する実施例に限定されるものではない。
【００９４】
実施例１
モニリエラ・ポリニス（Moniliella pollinis）ＣＢＳ４６１．６７を、酵母エキス１．５％、グルコース３０％の培地で培養し、菌体を集め、生理食塩水にて２度洗浄し、ついでＮＴＧ１ｍｇ／ｍｌを含む生理食塩水にて３０℃にて６０分間変異処理を行った。その後菌体を集め、培地に懸濁し、３０℃にて振盪培養して変異を安定化させた。ついでその一部を培地に接種し２日間培養した後、菌体凝集塊を除き、残った菌体懸濁液を濃縮後培地に接種した。この操作を７回繰り返した後、この菌体を同一組成の寒天培地に広げコロニーを形成させた。各コロニーから得られた菌体をバッフル付き三角フラスコで振盪培養し、その中から泡のでない菌株を選択し、ＭＣＩ３３７１株（FERM BP-6173）を得た。
【００９５】
同様にして、モニリエラ・スアヴェオェンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolens var. nigra）ＣＢＳ２２３．７９からＭＣＩ３６００株、トリコスポラノイデス・オエドファリス（Trichosporonoides oedocephalis）ＣＢＳ５６８．８５からＭＣＩ３４４０株（FERM BP-6175）を得た。
【００９６】
実施例２
トリコスポラノイデス・メガチリエンシス（Trichosporonoides megachillensis）ＣＢＳ５６７．８５を、酵母エキス１．５％、グルコース３０％の培地で培養し、菌を集め生理食塩水にて２度洗浄し、ついで紫外線照射にて６０分間変異処理を行った。その後菌体を集め、同一培地に懸濁し、３０℃で振盪培養して変異を安定化させた。ついでその一部を同一培地に接種し２日間培養した後、菌体凝集塊を除き、残った菌体懸濁液を濃縮後培地に接種した。この操作を３回繰り返した後、この菌体を同一組成の寒天培地に広げコロニーを形成させた。各コロニーから得られた菌体をバッフル付き三角フラスコで振盪培養し、その中から泡のでない菌株を選択しＭＣＩ３３６９株（FERM BP-6172）を得た。
【００９７】
同様にして、トリコスポラノイデス・メガチリエンシス（Trichosporonoides megachillensis）ＡＴＣＣ７６７１８、トリコスポラノイデス・オエドファリス（Trichosporonoides oedocephalis）ＣＢＳ６４９．６６、トリコスポラノイデス・ニグレッセンス（Trichosporonoides nigrescens）ＣＢＳ２６８．８１、トリコスポラノイデス・ニグレッセンス（Trichosporonoides nigrescens）ＣＢＳ２６９．８１、トリコスポラノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spathulata）ＣＢＳ２４１．７９、トリコスポラノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spathulata）ＣＢＳ２４２．７９Ａ、トリコスポラノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spathulata）ＣＢＳ２４１．７９Ｂ、モニリエラ・スアヴェオェンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolens var. nigra）ＣＢＳ２２３．３２、モニリエラ・スアヴェオェンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolens var. nigra）ＣＢＳ３８２．３６、モニリエラ・ポリニス（Moniliella pollinis）ＭＣＩ３５５４（FERM BP-6170）から、それぞれＭＣＩ３６０４株、ＭＣＩ３４３９株（FERM BP-6308）、ＭＣＩ３４３７株（FERM BP-6174）、ＭＣＩ３４３８株（FERM BP-6307）、ＭＣＩ３６０１株、ＭＣＩ３６０２株、ＭＣＩ３６０３株、ＭＣＩ３５９８株、ＭＣＩ３５９９株、ＭＣＩ３５５５株（FERM BP-6171）を得た。
【００９８】
実施例３
トリコスポラノイデス・マディダ（Trichosporonoides madida）ＣＢＳ２４０．７９を、酵母エキス１．５％、グルコース３０％の培地で培養し、菌体凝集塊を除き、残った菌体懸濁液を濃縮後同一培地に接種し再培養した。この操作を５回繰り返した後、この菌体を同一組成の寒天培地に広げコロニーを形成させた。各コロニーから得られた菌体をバッフル付き三角フラスコで振か盪培養し、その中から泡のでない菌株を選択し、ＭＣＩ３４４１株（FERM BP-6309）を得た。
【００９９】
実施例４〜１８
グルコース３０％（Ｗ／Ｖ）及び酵母エキス１％を含む培地５ｍｌを、綿栓した直径２１ｍｍの試験管に入れ１２０℃で２０分間滅菌した。この培地にＭＣＩ３４３７株（FERM BP-6174）、ＭＣＩ３４３８株（FERM BP-6307）、ＭＣＩ３４３９株（FERM BP-6308）、ＭＣＩ３４４０株（FERM BP-6175）、ＭＣＩ３３６９株（FERM BP-6179）、ＭＣＩ３４４１株（FERM BP-6309）、ＭＣＩ３３７１株（FERM BP-6173）、ＭＣＩ３５５５株（FERM BP-6171）、ＭＣＩ３５９８株、ＭＣＩ３５９９株、ＭＣＩ３６００株、ＭＣＩ３６０１株、ＭＣＩ３６０２株、ＭＣＩ３６０３株、ＭＣＩ３６０４株をそれぞれ植菌し、３０℃で３日間振盪培養した。その培養液１ｍｌを同一培地２０ｍｌを含む２００ｍｌのバッフル付き三角スラスコに植菌し、３０℃で４日間振盪培養した。培養終了後、培養液中のエリスリトールの濃度を高速液体クロマトグラフィーで測定した。
【０１００】
また、試験管で培養した菌体を用いて、菌体の疎水度をIimuraら（Y. Iimura, S. Hara and K. Otsuka, Agric. Biol. Chem., 44(6),1215-1222, 1980）の方法に従って測定した。すなわち、菌体を蒸留水で２回洗浄後、吸光度（A660）が０．６となるように菌体を水で懸濁し、等量のトルエンを加えて撹拌し、３０分静置後、水層の吸光度（A660）を測定し、下記の計算式から菌体の疎水度（ＨＤ値）を算出した。
【０１０１】
ＨＤ値＝１００×（１−Ｒ／Ｉ）
Ｉ：トルエン処理前の吸光度（A660値）
Ｒ：トルエン処理後の水層の吸光度（A660値）
【０１０２】
その結果、各菌株においては培養中に実質的な発泡が認められなかった。また、各菌株におけるエリスリトールの生産量と疎水度は表４に示す通りであった。
【０１０３】
【表４】
0004033914.tif 000006
【０１０４】
比較例１〜１５
それぞれ実施例４〜１８と同様の方法で、変異株を得る前の親株をそのまま用いてエリスリトールを生産した。その結果、各菌株とも培養中は激しく発泡した。また、エリスリトールの生産量と疎水度は表５に示す通りであった。
【０１０５】
【表５】
0004033914.tif 000007
【０１０６】
実施例１９
グルコース３０％（Ｗ／Ｖ）、酵母エキス（アサヒビール社製）１％を含む液体培地１００ｍｌを綿栓した５００ｍｌの三角フラスコに入れ、１２０℃、２０分間滅菌したものに、常法により斜面培養したＭＣＩ３３６９株（FERM BP-6172）を１白金耳植菌し、３５℃で３日間振盪培養した。グルコース４０％（Ｗ／Ｖ）、酵母エキス（アサヒビール社製）１．５％、消泡剤ＣＡ３３０（日本油脂製）５００ｐｐｍ含む液体培地３Ｌを入れた５リットル容発酵槽に、上記培養物を１００ｍｌ植菌し、温度３５℃、通気量０．５ｖｖｍ、回転数７００ｒｐｍの条件で４日間培養した。培養液中のエリスリトール濃度を高速液体クロマトグラフィーで測定した結果、１８０．９ｇ／Ｌのエリスリトールが蓄積していた。また、培養中には発泡は認められなかった。
【０１０７】
実施例２０
グルコース３０％（Ｗ／Ｖ）、酵母エキス（アサヒビール社製）１％を含む液体培地１００ｍｌを綿栓した５００ｍｌの三角フラスコに入れ、１２０℃、２０分間滅菌したものに、常法により斜面培養したＭＣＩ３３７１株（FERM BP-6173）を１白金耳植菌し、３５℃で３日間振盪培養した。グルコース４０％（Ｗ／Ｖ）、酵母エキス（アサヒビール社製）１．５％、消泡剤ＣＡ３３０（日本油脂製）５００ｐｐｍ含む液体培地３Ｌを入れた５リットル容発酵槽に、上記培養物を１００ｍｌ植菌し、温度３５℃、通気量０．５ｖｖｍ、回転数７００ｒｐｍの条件で４日間培養した。培養液中のエリスリトール濃度を高速液体クロマトグラフィーで測定した結果、１７５．１ｇ／Ｌのエリスリトールが蓄積していた。また、培養中には発泡は認められなかった。
【０１０８】
実施例２１
グルコース３０％（Ｗ／Ｖ）、酵母エキス（アサヒビール社製）１％を含む液体培地１００ｍｌを綿栓した５００ｍｌの三角フラスコに入れ、１２０℃、２０分間滅菌したものに、常法により斜面培養したＭＣＩ３４４０株（FERM BP-6175）を１白金耳植菌し、３５℃で３日間振盪培養した。グルコース４０％（Ｗ／Ｖ）、酵母エキス（アサヒビール社製）１．５％、消泡剤ＣＡ３３０（日本油脂製）５００ｐｐｍ含む液体培地３Ｌを入れた５リットル容発酵槽に、上記培養物を１００ｍｌ植菌し、温度３５℃、通気量０．５ｖｖｍ、回転数７００ｒｐｍの条件で４日間培養した。培養液中のエリスリトール濃度を高速液体クロマトグラフィーで測定した結果、１４０．１ｇ／Ｌのエリスリトールが蓄積していた。また、培養中に発泡は認められなかった。
【０１０９】
実施例２２
グルコース３０％（Ｗ／Ｖ）、酵母エキス（アサヒビール社製）１％を含む液体培地１００ｍｌを綿栓した５００ｍｌの三角フラスコに入れ、１２０℃、２０分間滅菌したものに、常法により斜面培養したＭＣＩ３４３７株（FERM BP-6174）を１白金耳植菌し、３５℃で３日間振盪培養した。グルコース４０％（Ｗ／Ｖ）、酵母エキス（アサヒビール社製）１．５％、消泡剤ＣＡ３３０（日本油脂製）５００ｐｐｍ含む液体培地３Ｌを入れた５リットル容発酵槽に、上記培養物を１００ｍｌ植菌し、温度３５℃、通気量０．５ｖｖｍ、回転数７００ｒｐｍの条件で４日間培養した。培養液中のエリスリトール濃度を高速液体クロマトグラフィーで測定した結果、１５２．１ｇ／Ｌのエリスリトールが蓄積していた。また、培養中に発泡は認められなかった。
【０１１０】
比較例１６
グルコース３０％（Ｗ／Ｖ）、酵母エキス（アサヒビール社製）１％を含む液体培地１００ｍｌを綿栓した５００ｍｌの三角フラスコに入れ、１２０℃、２０分間滅菌したものに、常法により斜面培養したＣＢＳ４６１．６７株を１白金耳植菌し、３５℃で３日間振盪培養した。グルコース４０％（Ｗ／Ｖ）、酵母エキス（アサヒビール社製）１．５％、消泡剤ＣＡ３３０（日本油脂製）５００ｐｐｍ含む液体培地３Ｌを入れた５リットル容発酵槽に、上記培養物を１００ｍｌ植菌し、温度３５℃、通気量０．５ｖｖｍ、回転数７００ｒｐｍの条件で培養した。培養開始後２日目に激しい発泡が見られ、消泡剤の添加では発泡を抑えきることができなかった。
【０１１１】
【産業上の利用の可能性】
本発明の製造方法により、好気的培養中に実質的な泡を形成しないエリスリトール産生微生物が効率的に製造できる。また、本発明により、エリスリトール製造時の激しい発泡が解決され、グルコース等の安価で且つ容易に供給しうる原料から、高収率で安価にエリスリトールを製造することができる。