(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
アミノ酸組成中に塩基性アミノ酸を15重量％以上含有する、乳由来の塩基性タンパク質画分を有効成分とする脂質代謝改善剤。
【請求項２】
乳由来の塩基性タンパク質画分が、乳または乳由来の原料を陽イオン交換樹脂に接触させて塩基性タンパク質を吸着させ、この樹脂に吸着した画分を塩濃度0.1M〜1.0Mの溶出液で溶出して得られる画分である請求項１記載の脂質代謝改善剤。
【請求項３】
請求項１又は２に記載の乳由来の塩基性タンパク質画分をタンパク質分解酵素で分解して得られる塩基性ペプチド画分を有効成分とする脂質代謝改善剤。
【請求項４】
タンパク質分解酵素が、ペプシン、トリプシン、キモトリプシン及びパンクレアチンよりなる群から選択される少なくとも１種のタンパク質分解酵素である請求項３記載の脂質代謝改善剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、脂質代謝改善剤及び脂質代謝改善飲食品に関する。本発明の脂質代謝改善剤及び脂質代謝改善飲食品は、これを摂取することにより脂質代謝を改善することができるので、脂肪肝、高脂血症、動脈硬化症、肥満症などの疾患の治療及び予防に有用である。
【０００２】
【従来の技術】
脂質代謝は、食物由来のトリグリセリドを主体とする脂肪を生体内で異化（分解）、同化（蓄積）する過程を指し、広義には脂質のエネルギー化反応、脂肪酸の生合成、アシルグリセロールの生合成、リン脂質の代謝、コレステロールの代謝などを含むものである（「栄養学のための生化学」、三崎旭著、朝倉書店(1993)、第123-134頁）。
【０００３】
近年、心臓血管系の疾患による死亡率が急増しており、その発症の危険率と血中コレステロール濃度の相関が指摘されている。このような中、日常的な投与が可能である食品素材により、血中コレステロール濃度を下げようという試みがなされてきた。例えば、大豆タンパク質（Atherosclerosis, 72 ,115(1988)）、乳清タンパク質（Agric．Biol．Chem.，55，813(1991)、特開平5-176713号公報）、大豆タンパク質加水分解物（J．Nutr.，120 ，977(1990)）、卵黄リン脂質（Agric．Biol．Chem.，53，2469(1989)）などが挙げられる。また、ラクトアルブミン、コラーゲン、大豆タンパク質または小麦グルテンと大豆レシチンを組み合わせる方法（Nutr．Rep．Int.,28，621(1983)）や、大豆レシチンを含む組織状の大豆タンパク質を用いる方法（Ann．Nutr．Metab., 29, 348(1985)）などが提案されている。
しかし、これらには、比較的多量の投与を必要とするという問題、風味上の問題、飲料にした場合に保存中に沈殿するなどの保存安定性の問題があった。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
本発明者らは、これらの問題点を鑑み、広く食品素材に含まれている脂質代謝改善作用を示す物質について、鋭意、探索を進めていたところ、乳由来の塩基性タンパク質画分あるいはその塩基性タンパク質画分をペプシンやパンクレアチンなどのタンパク質分解酵素で分解して得られる塩基性ペプチド画分が、経口投与により脂質代謝を改善することができることを見出した。そして、この塩基性タンパク質画分や塩基性ペプチド画分を脂質代謝改善剤や脂質代謝改善飲食品の有効成分として利用できることを見出し、本発明を完成するに至った。したがって、本発明は、この脂質代謝改善作用を有する乳由来の塩基性タンパク質画分あるいは塩基性ペプチド画分を有効成分とする脂質代謝改善剤を提供することを課題とする。また、本発明は、これらの画分を配合した脂質代謝改善飲食品を提供することを課題とする。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明の脂質代謝改善剤の特徴は、乳由来の塩基性タンパク質画分あるいはその塩基性タンパク質画分をタンパク質分解酵素で分解して得られる塩基性ペプチド画分を有効成分とすることにある。この乳由来の塩基性タンパク質画分は、牛乳、人乳、山羊乳、羊乳など哺乳類の乳から得られるものであり、また、この塩基性ペプチド画分は、乳由来の塩基性タンパク質画分にタンパク質分解酵素を作用させて得ることができるものである。
【０００６】
この乳由来の塩基性タンパク質画分は、後述する試験例１〜４に示したように次の性質を有している。
1) ソジウムドデシルサルフェート−ポリアクリルアミドゲル電気泳動(SDS-PAGE)によると分子量 3,000〜80,000の範囲の数種のタンパク質よりなる。
2) 95重量％以上がタンパク質であって、その他少量の脂肪、灰分を含む。
3) タンパク質は主としてラクトフェリン及びラクトパーオキシダーゼよりなる。
4) タンパク質のアミノ酸組成は、リジン、ヒスチジン、アルギニン等の塩基性アミノ酸を15重量％以上含有する。
このような塩基性タンパク質画分は、例えば、脱脂乳や乳清などの乳原料を陽イオン交換樹脂と接触させて塩基性タンパク質を吸着させ、この樹脂に吸着した塩基性タンパク質画分を0.1M〜1.0Mの塩濃度の溶出液で溶出し、この溶出画分を回収し、逆浸透(RO)膜や電気透析(ED)法などにより脱塩及び濃縮し、必要に応じて乾燥することにより得ることができる。
【０００７】
また、乳由来の塩基性タンパク質画分を得る方法としては、乳または乳由来の原料を陽イオン交換体に接触させて塩基性タンパク質を吸着させた後、この陽イオン交換体に吸着した塩基性タンパク質画分を、pH５を越え、イオン強度 0.5を越える溶出液で溶出して得る方法（特開平5-202098号公報）、アルギン酸ゲルを用いて得る方法（特開昭 61-246198号公報）、無機の多孔性粒子を用いて乳清から得る方法（特開平 1-86839号公報）、硫酸化エステル化合物を用いて乳から得る方法（特開昭 63-255300号公報）などが知られており、本発明では、このような方法で得られた塩基性タンパク質画分を用いることができる。
【０００８】
また、乳由来の塩基性ペプチド画分は、塩基性タンパク質画分と同様のアミノ酸組成を有しており、例えば、上記の方法で得られた乳由来の塩基性タンパク質画分にペプシン、トリプシン、キモトリプシンなどのタンパク質分解酵素を作用させ、さらに必要に応じ、パンクレアチンなどのタンパク質分解酵素を作用させることにより、平均分子量 4,000以下のペプチド組成物として得ることができる。
【０００９】
本発明の脂質代謝改善剤を投与するに際しては、有効成分の乳由来の塩基性タンパク質画分あるいは塩基性ペプチド画分をそのままの状態で用いることもできるが、常法に従い、粉末剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、ドリンク剤などに製剤化して用いることもできる。さらには、これらの塩基性タンパク質画分や塩基性ペプチド画分をそのままあるいは製剤化した後、これを栄養剤や飲食品などに配合して、脂質代謝改善を図ることも可能である。また、大豆タンパク質、乳清タンパク質、大豆レシチン、ジアシルグリセロール、大豆イソフラボンなど従来から脂質代謝改善作用をもつと考えられている成分とともに、塩基性タンパク質画分や塩基性ペプチド画分を配合すれば、一層の脂質代謝改善作用が期待できる。なお、乳由来の塩基性タンパク質画分あるいは塩基性ペプチド画分は、比較的熱に対して安定なので、乳由来の塩基性タンパク質画分あるいは塩基性ペプチド画分を含む原料を通常行われるような条件で加熱殺菌することも可能である。
【００１０】
本発明の脂質代謝改善剤の投与量は、年齢、治療効果及び病態などにより異なるが、ラットを用いた動物実験の結果によると、脂質代謝改善作用を示すためには塩基性タンパク質画分あるいは塩基性ペプチド画分を、ラット体重1kg換算で20mg以上投与する必要があることが判った。このことから、外挿法（続医薬品の開発、vol.8,7-18(1993)）にしたがうと、ヒトでの有効投与量は、成人一人当たり一日20mg以上となるので、この必要量を確保できるよう飲食品に配合したり、医薬として投与すれば良い。
次に、実施例及び試験例を示して本発明を詳細に説明する。
【００１１】
【実施例１】
陽イオン交換樹脂のスルホン化キトパール（富士紡績社製）400gを充填したカラム（直径５cm×高さ30cm）を脱イオン水で十分洗浄した後、このカラムに脱脂乳40 l (pH 6.7)を流速25ml/分で通液した。通液後、このカラムを脱イオン水で十分洗浄し、 0.98M塩化ナトリウムを含む 0.02M炭酸緩衝液(pH 7.0)で樹脂に吸着した塩基性タンパク質画分を溶出した。そして、この溶出液を逆浸透(RO)膜により脱塩して、濃縮した後、凍結乾燥して塩基性タンパク質画分粉末 21gを得た。
【００１２】
【試験例１】
実施例１で得られた塩基性タンパク質画分について、ソジウムドデシルサルフェート−ポリアクリルアミドゲル電気泳動(SDS-PAGE)により測定したところ、分子量は 3,000〜80,000の範囲に分布していた。
【００１３】
【試験例２】
実施例１で得られた塩基性タンパク質画分について、成分組成を分析した。その結果を表１に示す。この表に示すとおり、この画分のほとんどはタンパク質である。
【表１】
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【００１４】
【試験例３】
実施例１で得られた塩基性タンパク質画分について、6N塩酸で 110℃、24時間加水分解した後、アミノ酸分析装置（L-8500型、日立製作所製） でそのアミノ酸組成を分析した。その結果を表２に示す。この塩基性タンパク質画分には、アミノ酸組成中15重量％以上の塩基性アミノ酸が含まれている。
【表２】
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【００１５】
【実施例２】
陽イオン交換樹脂のＳＰトヨパール（東ソー社製）30kgを充填したカラム (直径 100cm×高さ10cm)を脱イオン水で十分洗浄した後、このカラムに121℃で30秒間加熱殺菌したチーズホエー3t(pH 6.2)を流速10 l/分で通液した。通液後、このカラムを脱イオン水で十分洗浄し、0.9M塩化ナトリウムを含む0.1Mクエン酸緩衝液(pH 5.7)で樹脂に吸着した塩基性タンパク質画分を溶出した。そして、この溶出液を電気透析(ED)法により脱塩し、濃縮した後、凍結乾燥して塩基性タンパク質画分粉末183gを得た。
【００１６】
【実施例３】
実施例１で得られた塩基性タンパク質画分粉末 50gを蒸留水10 l に溶解した後、１重量％パンクレアチン（シグマ社製）溶液 50mlを添加し、37℃で２時間反応させた。反応後、80℃で10分間加熱処理して酵素を失活させた後、濃縮し凍結乾燥して塩基性ペプチド画分粉末48.3g を得た。
【００１７】
【試験例４】
実施例１で得られた塩基性タンパク質画分粉末及び実施例３で得られた塩基性ペプチド画分粉末について、4週齢のWistar系雄ラットを用いた動物実験により脂質代謝改善作用を調べた。生理食塩水投与群（Ａ群）、塩基性タンパク質画分粉末をラット体重1kg換算で20mg投与する群（Ｂ群）、塩基性タンパク質画分粉末をラット体重1kg換算で200mg投与する群（Ｃ群）、塩基性ペプチド画分粉末をラット体重1kg換算で20mg投与する群（Ｄ群）、塩基性ペプチド画分粉末をラット体重1kg換算で200mg投与する群（Ｅ群）の5試験群（ｎ＝８）に分け、それぞれを毎日1回ゾンデで投与して10週間飼育した。なお、飼育期間中は、1重量％のコレステロール及び0.25重量％のコール酸ナトリウムを含む飼料を摂取させた。
10週間飼育後に血清中の総コレステロール、高密度リポタンパク質コレステロール、低密度及び超低密度リポタンパク質コレステロール、及び中性脂肪を測定した。その結果を表３に示す。
【表３】
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【００１８】
これによると、総コレステロールは、対照群であるＡ群に比べ、試験群であるＢ群、Ｃ群、Ｄ群及びＥ群すべてにおいて有意に低い値を示した。内訳を見てみると、悪玉コレステロールとされる低密度及び超低密度リポタンパク質コレステロールは、Ａ群に比べ、Ｂ群、Ｃ群、Ｄ群及びＥ群で有意に低い値を示しているのに対して、善玉コレステロールとされる高密度リポタンパク質コレステロールは、各群間に有意な差は認められなかった。また、中性脂肪はＡ群に比べ、Ｃ群とＥ群で有意に低い値を示した。
【００１９】
このことから、塩基性タンパク質画分及び塩基性ペプチド画分には血清中のコレステロール、特に悪玉コレステロールとされる低密度及び超低密度リポタンパク質コレステロールを低下させる作用や中性脂肪を低下させる作用があり、脂質代謝を改善することが明らかとなった。
また、この脂質代謝改善作用は塩基性タンパク質画分または塩基性ペプチド画分をラット体重1kg換算で最低20mg投与した場合に認められることが明らかとなった。
【００２０】
【実施例４】
表４に示す組成の脂質代謝改善飲料を製造した。製造した飲料の風味は良好で、常温1年間保存によっても風味が劣化することはなく、沈殿等の問題もなかった。
【表４】
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【００２１】
【実施例５】
表５に示す組成のドウを作成し、成形した後、焙焼して脂質代謝改善ビスケットを製造した。
【表５】
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【００２２】
【実施例６】
表６に示す組成の脂質代謝改善錠剤を製造した。
【表６】
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【００２３】
【発明の効果】
本発明の脂質代謝改善剤や脂質代謝改善飲食品は、これを摂取することにより脂質代謝を改善することができるので、脂肪肝、高脂血症、動脈硬化症、肥満症などの疾患の治療及び予防に有用である。