(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
血清総コレステロールレベルもしくは血清ＬＤＬコレステロールレベルを低下させるために、または血清ＨＤＬコレステロールレベルを上昇させるために用いるための医薬の製造におけるＺ−２−［４−（４−クロロ−１，２−ジフェニル−ブテ−１−エニル）フェノキシ］エタノールの使用。
【請求項２】
有効量のＺ−２−［４−（４−クロロ−１，２−ジフェニル−ブテ−１−エニル）フェノキシ］エタノールを含有する、血清総コレステロールレベルもしくは血清ＬＤＬコレステロールレベルを低下させるためにまたは血清ＨＤＬコレステロールレベルを上昇させために用いるための医薬組成物。
【請求項３】
薬学的に許容しうる担体をさらに含有する請求の範囲第２項記載の医薬組成物。
【請求項４】
アテローム性動脈硬化症の予防または治療のための医薬の製造におけるＺ−２−［４−（４−クロロ−１，２−ジフェニル−ブテ−１−エニル）フェノキシ］エタノールの使用。
【発明の詳細な説明】
本発明は、血清総コレステロールもしくは血清ＬＤＬコレステロールを低下させるための、または血清ＨＤＬコレステロールを増加させるためのＺ-2-［4-（4-クロロ-1,2-ジフェニル−ブテ-1-エニル（but-1-enyl））フェノキシ］エタノールの使用に関する。
低比重リポ蛋白（ＬＤＬ）と関係する血清コレステロールレベルの上昇は、アテローム性動脈硬化症（atherosclerosis）の発生および進行の重大な要因であることが証明されている。また、血清ＨＤＬコレステロールが低いことはアテローム性動脈硬化症の別の危険因子である。そこで、高コレステロール血症の患者または高コレステロール血症になる危険性がある患者において、ＨＤＬコレステロールレベルを上昇させる効果を合わせもつ、血清総コレステロールレベルもしくは血清ＬＤＬコレステロールレベルを下げる方法を提供することが望ましい。
（デアミノヒドロキシ）トレミフェン（（deaminohydroxy）toremifene）としても知られており、式：
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で示される化学構造を有するＺ-2-［4-（4-クロロ-1,2-ジフェニル−ブテ-1-エニル）フェノキシ］エタノールは、既知の抗エストロゲン薬であるトレミフェンの代謝物である。トレミフェンは現在、エストロゲン受容体陽性乳癌の治療に臨床で用いられている。
Ｚ-2-［4-（4-クロロ-1,2-ジフェニル−ブテ-1-エニル）フェノキシ］エタノールはすでに以前に記載されており、たとえばエイチ・シピレ
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らによる「ラットにおけるトレミフェンの代謝（Metabolism of toremifene in the rat）」、J. Steroid Biochem.,36,3,211-215（1990）、エル・カンガス（Kangas,L.）による「トレミフェン代謝物の生化学的および薬理学的作用（Biochemical and pharmacological effects of toremifene metabolites）」、Cancer Chemother. Pharmacol.,（1990）,27,8-12、エム・アンティラ（Anttila,M.）らによる「トレミフェンの薬物動態学（Pharmacokinetics of toremifene）」、J. Steroid Biochem.,36,3,249-252（1990）、エヌ・シンベルグ（Simberg,N.）らによる「ラット子宮におけるトレミフェンおよびその代謝物のインビトロおよびインビボでの結合（In vitro and in vivo binding of toremifene and its metabolites in rat uterus）」、J. Steroid Biochem.,36,3,197-202（1990）、ジェイ・ビショップ（Bishop,J.）らによる「進行した乳癌を患った閉経患者における高用量トレミフェンの第Ｉ相臨床研究および薬物動態学研究（Phase I clinical and pharmacokinetics study of high dose toremifene in postmenopausal patient with advanced breast cancer）」、Cancer Chemother. Pharmacol.,30,174-178（1992）および本出願人の国際特許出願第ＰＣＴ／ＦＩ９５／００４７５号明細書に記載されている。この化合物はＴＧＦ−βの放出を生じるのに活性であるが、重要なホルモン活性は全くないということが示された。
今、Ｚ-2-［4-（4-クロロ-1,2-ジフェニル−ブテ-1-エニル）フェノキシ］エタノールが血清総コレステロールおよび血清ＬＤＬコレステロールの低下ならびに血清ＨＤＬコレステロールの増加に活性であることが見出された。この化合物はホルモンの関連する重大な副作用がないので、アテローム性動脈硬化症の治療または予防はもちろん、血清総コレステロールもしくは血清ＬＤＬコレステロールの低下または血清ＨＤＬコレステロールの増加にとりわけ好適である。
本発明は、血清総コレステロールレベルもしくは血清ＬＤＬコレステロールレベルを低下させる方法または血清ＨＤＬコレステロールレベルを上昇させる方法であって、前記低下または上昇治療が必要な患者に有効量のＺ-2-［4-（4-クロロ-1,2-ジフェニル−ブテ-1-エニル）フェノキシ］エタノールを投与することからなる方法を提供する。
本発明はまた、アテローム性動脈硬化症を予防または治療する方法であって、前記治療が必要な患者に有効量のＺ-2-［4-（4-クロロ-1,2-ジフェニル−ブテ-1-エニル）フェノキシ］エタノールを投与することからなる方法を提供する。
本発明はまた、血清総コレステロールレベルもしくは血清ＬＤＬコレステロールレベルを低下させるために、または血清ＨＤＬコレステロールレベルを上昇させるために用いるための医薬の製造におけるＺ-2-［4-（4-クロロ-1,2-ジフェニル−ブテ-1-エニル）フェノキシ］エタノールの使用を提供する。
本発明はまた、有効量のＺ-2-［4-（4-クロロ-1,2-ジフェニル−ブテ-1-エニル）フェノキシ］エタノールからなる、血清総コレステロールレベルもしくは血清ＬＤＬコレステロールレベルを低下させるためにまたは血清ＨＤＬコレステロールレベルを上昇させるために用いるための医薬組成物を提供する。
本発明はまた、アテローム性動脈硬化症の予防または治療のための医薬の製造におけるＺ-2-［4-（4-クロロ-1,2-ジフェニル−ブテ-1-エニル）フェノキシ］エタノールの使用を提供する。
本発明の化合物は、カプセル剤、錠剤、顆粒剤、散剤、坐剤、注射剤、パッチ剤、懸濁剤およびシロップ剤などの通常の剤型を用いて、経口的、非経口的もしくは経皮的な方法（way）を含む種々の方法で投与することができる。「有効量」という語は、血清総コレステロールレベルもしくは血清ＬＤＬコレステロールレベルを低下または血清ＨＤＬコレステロールレベルを上昇させることのできる、本発明の化合物の量を意味する。本発明の化合物は、本発明の方法にしたがい、患者の必要度に応じて、月１回、週１回または毎日または１日に数回投与してもよい。典型的な１日あたりの経口投与量は、活性化合物が約0.5mg〜約1000mg、好ましくは約10mg〜約800mgの範囲内である。しかしながら、この投与量は、投与方法はもちろん、患者の年令、体重および状態に応じて適宜変更してもよい。本発明の化合物は単独で投与してもよいし、ほかの活性な化合物とともに投与してもよい。
本発明の組成物は、当該技術分野において通常用いられる方法により製造することができる。前記組成物には、活性化合物のほかに、担体、結合剤、賦形剤、滑沢剤、懸濁剤および希釈剤などの、当該技術分野において通常用いられる薬学的に許容しうる添加剤を含有していてもよい。本発明の組成物における活性化合物の量は、経口投与および非経口投与のための単位投与量で所望の治療効果を得るのに充分な量とし、たとえば約0.5mg〜約1000mg、好ましくは約10mg〜約800mgである。
以下の実施例により本発明の化合物の合成を説明する。
実施例
実施例１
Ｚ-2-［4-（4-クロロ-1,2-ジフェニル−ブテ-1-エニル）フェノキシ］エタノール
（ｉ）Ｚ-4-［4-（2-ベンジロキシエトキシ）-フェニル］-3,4-ジフェニル−ブテ-3-エン-1-オール
反応容器に、トルエン（790ml）、４８％水酸化ナトリウム水溶液（790ml）、臭化テトラブチルアンモニウム（2.12g、6.6mmol）および米国特許第4996225号明細書記載の方法により製造したＺ-4-（4-ヒドロキシ-1,2-ジフェニル−ブテ-1-エニル）-フェノール（50g、0.16mol）を入れた。この混合物を３０分間還流した。この反応混合物に、ベンジル-（2-ブロモエチル）エーテル（ディ・グロベルニー（Grobelny D.）ら、Tetrahedron Letters,28,2639-42,1979）（41.7g、0.19mol）を加え、２時間還流を続けた。ついで混合物を室温に冷却し、層を分離して水相をトルエンで洗浄した。トルエン相を合わせて水洗し、乾燥、蒸発乾固させた。残渣はさらに精製せずに次の行程で用いた。
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（ii）Ｚ-1-［4-（2-ベンジロキシエトキシ）-フェニル］-4-クロロ-1,2-ジフェニル−ブテ-1-エン
前の工程でえられたＺ-4-［4-（2-ベンジロキシエトキシ）-フェニル］-3,4-ジフェニル−ブテ-3-エン-1-オールをアセトニトリル（400ml）に溶解した。トリフェニルホスフィン（103.5g、0.4mol）およびテトラクロロメタン（120g、0.79mol）を加え、混合物を２時間還流した。ついで、混合物を減圧下蒸発乾固させた。残渣をメタノール（160ml）および水（40ml）に溶解し、沸点にて石油エーテルを用いて３回（3×200ml）抽出した。石油エーテル層を合わせて減圧下蒸発乾固させた。残渣をエタノール（700ml）から２回結晶化した。収量３６ｇ。
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（iii）Ｚ-2-［4-（4-クロロ-1,2-ジフェニル−ブテ-1-エニル）フェノキシ］エタノール
酢酸エチル（350ml）とエタノール（350ml）との混合物にＺ-1-［4-（2-ベンジロキシエトキシ）-フェニル］-4-クロロ-1,2-ジフェニル−ブテ-1-エン（36g、0.08mol）を溶解した。パラジウム−炭素（５％、0.28g）を加え、出発化合物が残らなくなる（薄層クロマトグラフィー）までこの溶液を水素ガスでフラッシュ（flush）した。パラジウム−炭素はシリカ質土（siliceous earth）で濾過して除去し、濾液は蒸発させた。残渣をエタノール（155ml）と水（65ml）との混合物から結晶化した。収量20ｇ。
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Ｚ-2-［4-（4-クロロ-1,2-ジフェニル−ブテ-1-エニル）フェノキシ］エタノールの血清コレステロールレベル低下作用を以下の実験によって証明する。
実験例
ラットにおけるインビボ研究
この研究ではスプラク−ダウレー（Spraque-Dawley）系成体の雌ラットを用いた。本発明の化合物を溶媒（vehicle）（148mM NaCl、2.9％マグロコール（Magrocol）3000、0.19％トゥイーン（Tween）20）に、種々の濃度（0.5〜10mg/ml）で溶解した。動物にこの溶液（１ml/kg）を毎日１回経口ガバージュ（oral gavage）で２８日間投与した。対照群の動物には溶媒のみを与えた。本発明の化合物の最終的な１日用量は０、0.5、１、５または10mg/kgであった。処置期間の終了時に、麻酔した動物から心臓穿刺により血液サンプルを採集した。分離した血清サンプルはガスクロマトグラフィーにより、コレステロール、コレステロール前駆体分子および選択されたフィトステロールについて分析した（ティー・ミエッティネン（Miettinen T.）、J. Lipid.Res.29,43-51,1988）。
結果を表１に示す。被験化合物により血清総コレステロールレベルが最高用量レベルで３４％低下した。相対的なフィトステロール含量も最高用量レベルでわずかに減少した（たとえばβ−シトステロールレベルは２０％低下、表１）。相対的なラトステロール含量が約５０％増加した以外は、血清スクワレンまたは前駆体ステロール含量には有意な変化はなかった（表１）。
３カ月間のラットの研究でえられた予備データは、Ｚ-2-［4-（4-クロロ-1,2-ジフェニル−ブテ-1-エニル）フェノキシ］エタノールが強力な血清コレステロール低下薬であるという考えを支持している。すなわち、0.5mg/kgまたは２mg/kgの１日用量で血清総コレステロールレベルがそれぞれ１５〜２５％または３０〜４０％低下した。
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コレステロール生合成の研究
コレステロール生合成に対する作用についても、コレステロール前駆体として14Ｃ−アセテートを用いたＨｅｐ  Ｇ２細胞培養物においてインビトロで研究した。被験化合物を培地に0.001〜５μmolの濃度で添加した。２時間後、培養を停止し、新たに合成されたコレステロールを薄層クロマトグラフィーで定量した。
用いたインビトロ細胞培養系において、被験化合物はコレステロール生合成を直接的には阻害しなかった。
第Ｉ相臨床研究
二重盲検第Ｉ相臨床研究において、被験化合物を健康な閉経女性に経口で１日１回、１２週間投与し、続く２週間を回復期間とした（それぞれの用量レベルに患者１０人）。用いた用量は25、50、100および200mgであり、血清脂質の値は２週間おきに分析した。血清総コレステロール含量および血清ＨＤＬコレステロール含量は、酵素学的ＰＡＰ法により測定し、ＰＥＧ沈降したのちＨＤＬコレステロールを測定した。ＬＤＬコレステロール値は計算により求めた。
第Ｉ相臨床研究では、用量レベル200mgで血清総コレステロールレベルが２週間日から先は有意に（ｐ＜0.02）低下しており、最大低下は基線より約１２％であった。血清ＬＤＬレベルの低下はさらに顕著であった（ｐ＜0.003）。すなわち、血清ＬＤＬレベルの低下は基線より最大２２％であった（用量レベル200mg）。被験化合物はＨＤＬコレステロールレベルを上昇させる傾向もあり、200mgの用量レベルでの上昇が有意であった（基線を超えて１０％上昇、ｐ＜0.04）。血清ＨＤＬ／ＬＤＬコレステロール比は増加する傾向にあり、この増加は200mgの用量レベルできわめて有意であった（ｐ＜0.0001）。回復期間のあいだに脂質の値は基線レベルに戻った。プラシーボ群では有意な変化はみられなかった。
ディスカッション
被験化合物により血清コレステロール含量が減少するメカニズムは、コレステロール生合成の直接的な阻害、血清リポ蛋白代謝に対する作用もしくは消化管からのコレステロール吸収に対する作用のいずれか、またはこれらメカニズムがいくつか組み合わさったものであろう。本データによれば生合成の直接的な阻害はありそうもない。生合成の直接的な阻害は、前駆体ステロール類の蓄積が試験した用量において最小であったので、合成経路のスクワレン工程後（post-squalene stage）では強くない。β−シトステロールレベルが低下したことからコレステロール吸収がわずかに改善されることが指摘されるかもしれない。
ヒトでのデータから、Ｚ-2-［4-（4-クロロ-1,2-ジフェニル−ブテ-1-エニル）フェノキシ］エタノールが臨床での使用において有益な脂質に対する効果を有すること、すなわち、コレステロールレベル、とりわけ有害なＬＤＬコレステロールレベルが顕著に低下することが示唆される。さらに、保護的なＨＤＬコレステロールレベルが上昇することも注目される。つまりは、被験化合物は臨床での使用においてアテローム性動脈硬化症の進行過程を阻害または遅延するようである。本化合物の作用の正確なメカニズムはさらなる実験により解明されるだろう。