(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
原料乳を陽イオン交換樹脂に接触させ、樹脂に吸着した画分を塩濃度0.1M〜1.0Mの溶出液で溶出させることにより得られる、ラクトフェリン及びラクトパーオキシダーゼを主成分とし、ソジウムドデシルサルフェート−ポリアクリルアミドゲル（SDS-PAGE）電気泳動による分子量分布が 3,000〜80,000ダルトン、等電点が ７．５〜１１の範囲であり、かつ、タンパク質のアミノ酸組成中、塩基性タンパク質を１５重量％以上を含む、歯槽骨の減少を抑制する歯周病予防及び改善剤。
【請求項２】
請求項１記載の歯周病予防及び改善剤を含有することを特徴とする歯周病予防及び改善のための飲食品。
【請求項３】
請求項１記載の歯周病予防及び改善剤を含有することを特徴とする歯周病予防及び改善のための医薬。
【請求項４】
歯磨き剤又はうがい剤であることを特徴とする請求項３記載の医薬。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、乳由来の塩基性タンパク質を有効成分とする歯周病予防及び改善剤に関する。また本発明は、乳由来の塩基性タンパク質を有効成分とする歯周病予防及び改善剤の飲食品及び医薬への利用に関する。
【０００２】
【従来の技術】
近年、歯周病が大きな社会問題となっている。歯周病は虫歯とは異なり、歯の根本が弱り、虫歯以外の歯も使えなくなる病気である。また、多くの人が歯周病の兆候を示していることが言われており、この意味において、歯周病は虫歯よりも怖い病気であると言える。
従来、歯周病に対しては、歯垢を除去することや、抗菌剤を含有するうがい剤（マウスウォッシュ）等を用いてうがいをすること等、原因菌の繁殖を防止する観点からの予防が行われているが、これらの方法は過度に進行した症状に対しては効果が小さいと考えられる。すなわち、歯周病末期では、歯槽骨の減少がみられ、また、一旦失われた歯槽骨は再生されにくい。このようにして歯周病に起因して歯を失うと、食物が食べにくくなるのは勿論にして、痛みを伴うこと等から生活に支障をきたすため、早急の有効な予防・治療手段が求められている。しかしながら、現在のところ歯槽骨の減少を抑制する効果を持つ歯周病予防及び改善剤はない。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、乳由来の塩基性タンパク質を有効成分とする歯周病予防及び改善剤を提供することを課題とする。また本発明は、乳由来の塩基性タンパク質を有効成分とする歯周病予防及び改善剤を配合した医薬及び飲食品を提供することを課題とする。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、乳中に微量に含まれる塩基性タンパク質が、歯周病の予防及び改善に顕著な効果を示すことを見出し、本発明を完成するに至った。
原料としては、牛乳、山羊乳、羊乳等の乳を用いることができ、これらの乳をそのままの新鮮乳として、あるいは、これらの乳を粉乳、脱脂乳、還元乳、ホエー等の乳調製品としたものを用いることができる。
本発明で使用する塩基性タンパク質は、上記の原料乳を陽イオン交換樹脂に接触させ、次いで、樹脂に吸着した画分を塩濃度0.1M〜1.0Mの溶出液で溶出させることにより得ることができる。なお、得られた塩基性タンパク質は、必要に応じて適宜、脱塩、濃縮等を行い用いることができる。
このようにして得られた塩基性タンパク質は、ソジウムドデシルサルフェート−ポリアクリルアミドゲル（SDS-PAGE）電気泳動による分子量分布が 3,000〜80,000ダルトン、等電点が 7.5〜11の乳由来の塩基性タンパク質画分であって、その主な成分はラクトフェリンとラクトパーオキシダーゼであり、タンパク質のアミノ酸組成中、塩基性アミノ酸を15重量％以上含有している。
【０００５】
また、本発明の歯周病予防及び改善剤は、上記の塩基性タンパク質を有効成分とするものであり、例えば歯磨き剤、うがい剤、飴、ガム、トローチ等の形態で飲食品及び医薬に配合して用いることができる。投与の形態及び投与量としては、成人一人１日当たり 1〜50 mg 程度を数回に分けて歯の表面に接触させることが望ましい。
なお、本発明の塩基性タンパク質は、元来乳の成分であって安全なものと考えられ、実際、ラットによる毒性試験の結果、急性毒性は認められなかった。
以下、本発明を実施例及び試験例を挙げて説明する。
【０００６】
【製造例】
乳由来の塩基性タンパク質の調製；
陽イオン交換樹脂（スルホン化キトパール、富士紡績社製) 100gを充填したカラムを脱イオン水で十分洗浄した後、未殺菌脱脂乳 10 l を流速10ml/minで通液し、脱イオン水で十分洗浄した後、 0.1 M塩化ナトリウムを含む 0.05Mリン酸緩衝液(pH7)  2 lを通液した。次いで、0.1 M 塩化ナトリウムを含む 0.05Mリン酸緩衝液(pH7) と1.0M塩化ナトリウムを含む 0.05Mリン酸緩衝液(pH7) を用いて0.1Mから1.0Mまでのグラジエント溶出を行い、樹脂に吸着している塩基性タンパク質を溶出させ回収した。この溶出液を逆浸透膜により脱塩し、濃縮した後、凍結乾燥して粉末状の塩基性タンパク質を得た。以上の操作を８回繰り返し、塩基性タンパク質 821g を得た。
【０００７】
【試験例１】
歯槽骨減少量の評価；
６週齢のゴールデンハムスター54匹を１週間予備飼育した後、エーテル麻酔下でM1の歯頸部に滅菌した手術用縫合絹糸No4 を５重に巻き付け、Keyes らの飼料(D#2000: Keyes, P.H. and Jordan: Archs. Oral. Biol. 9: 377-400,1964)で飼育することにより歯周病を発病させた。次いで、ゴ−ルデンハムスタ−を対照群、塩基性タンパク質0.5 mg/ml 群及び 5 mg/ml群の３群（各１８匹ずつ）に分け、一日２回、各濃度の塩基性タンパク質水溶液で口腔内を約10分間絶えず浸す処置を毎日継続して行った。この処置の開始から３日後、７日後及び１４日後に、各群につき６匹を選び、2.5%グルタルアルデヒド溶液(pH7.4) を用いて約20分間固定灌流した後、下顎骨両側を摘出し、次の方法で歯槽骨減少量を評価した。すなわち、摘出された下顎骨両側を2.5%グルタルアルデヒド溶液で固定した後、軟Ｘ線撮影して、写真を画像解析装置(PIAS LA-555) を用いて解析し、M1付近のエナメルセメント境と歯槽骨頂間の面積を計測することによって、歯槽骨減少量を評価した。
結果を表１に示す。塩基性タンパク質0.5 mg/ml 群及び5 mg/ml 群を作用させた群のゴ−ルデンハムスターは、対照群に比べて、明らかに歯槽骨減少量が有意に低く、かつこの効果は濃度依存的であった。このことから、乳由来の塩基性タンパク質は、歯槽骨の減少を抑制し、歯周病予防及び改善に効果的であることがわかる。
【０００８】
【表１】
0004082782.tif 000002
**  対照群に対して有意差あり (P<0.01)
【０００９】
【実施例１】
（歯周病予防及び改善用歯磨き剤の製造）
表２に示す配合で各成分を混合し、クリームを製造して容器に充填し、歯周病予防及び改善用歯磨き剤を製造した。
【００１０】
【表２】
───────────────────────────────
グリセリン                          70.0（重量％）
二酸化ケイ素                        20.0
キサンタンガム                       1.0
ミントフレーバー                     1.0
二酸化チタン                         0.7
フッ化ナトリウム                     0.3
蒸留水                               6.5
乳塩基性タンパク質                   0.5
───────────────────────────────
【００１１】
【実施例２】
（歯周病予防及び改善用うがい剤の製造）
表３に示す配合で各成分を混合し、歯周病予防及び改善用うがい剤を製造した。
【００１２】
【表３】
───────────────────────────────
エタノール                           8.0（重量％）
香料                                 0.9
ソルビトール                         5.0
プロピレングリコール                 5.0
乳塩基性タンパク質                   0.1
蒸留水                              81.0
───────────────────────────────
【００１３】
【実施例３】
（歯周病予防及び改善用ガムの製造）
表４に示す配合に従い、ガムベースを溶解し、各成分を混合撹拌後、成形して歯周病予防及び改善用ガムを製造した。
【００１４】
【表４】
───────────────────────────────
ガムベース                          20.0（重量％）
コーンシロップ                       9.0
デキストロース１水和物              10.0
ラクトース                           5.0
グリセリン                           5.0
糖                                  50.0
乳塩基性タンパク質                   1.0
───────────────────────────────
【００１５】
【実施例４】
（歯周病予防及び改善用飴の製造）
砂糖と水飴を表５に示す配合で混合撹拌し、150 ℃まで煮詰め、115 ℃まで冷却した後、乳塩基性タンパク質を0.1 重量％となるように添加して撹拌し、冷却盤上で冷却し、成形して歯周病予防及び改善用飴を製造した。
【００１６】
【表５】
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砂糖                                69.9（重量％）
水飴                                30.0
乳塩基性タンパク質                   0.1
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【００１７】
【発明の効果】
本発明の乳由来の塩基性タンパク質を有効成分とする歯周病予防及び改善剤は、歯周病の末期症状である歯槽骨の減少を抑えることができ、歯周病の予防及び改善に大きく寄与する。
また、本発明の歯周病予防及び改善剤は、例えば歯磨き剤、うがい剤、飴、ガム、トローチ等の形態で飲食品及び医薬に配合することによって効率的に歯の表面に接触させることができるので、大きな予防及び改善効果が得られる。