(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
皮部・肉部にアントシアニン色素を含む普通栽培種又は異種栽培種、或いはそれらを基に交配育種し、色素濃度，耐病性，収量性等の実用形質改良を進めた品種からｐＨ３．０以下の酸あるいは酸性アルコールを抽出溶媒として用い、１０℃以下で抽出した馬鈴薯アントシアニン色素混合物を有効成分とすることを特徴とするインフルエンザウイルスの増殖抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、馬鈴薯アントシアニン色素混合物を有効成分とするインフルエンザウイルスの増殖抑制剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
馬鈴薯はナス科の多年草であり、南米の標高３，０００〜４，０００ｍの中央アンデス高地が原産とされる。その栽培の起源は古く、原産地のアンデスでは、黄金で栄えたインカ文明より１，０００年以上も前のティワナコ文明期の土器にも馬鈴薯のモチーフが見られる。ヨーロッパにもたらされた当初は花を観賞用として栽培されていたが、冷涼な気候でも丈夫に育ち、地中に産することから救荒作物などとして用いられ、１８世紀後半には麦，イネ，大豆と並ぶ主要作物となった。
世界に広く栽培されている馬鈴薯はS. tuberosum ssp. tuberosum L.で、染色体数が２ｎ＝４８の４倍体種である。しかし、原産地のアンデス高原では２倍体から５倍体の様々な種が栽培されている。これらは１，７００種以上にもおよび、サツマイモのような形状や複雑にねじれたようなものなど様々なものがある。また、これらの中には表皮の色が赤や紫、黒などの鮮やかな色を持ち、肉色が赤〜紫色や濃黄色に着色した品種が存在している。これらは、普通栽培種の祖先や同一起源の近縁種で、４倍体のS. tuberosum ssp. andigena L.や２倍体のS. phureja Juz. et Buk.などがあり、カロテンやアントシアニンのような機能性色素を含有しているものがある。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
本発明者らは、これらの馬鈴薯の皮部・肉部から抽出したアントシアニン色素にインフルエンザＡおよびインフルエンザＢウイルスの増殖を抑える作用を見出して本発明に至った。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
本発明は、皮部・肉部にアントシアニン色素を含む普通栽培種又は異種栽培種、或いはそれらを基に交配育種し、色素濃度，耐病性，収量性等の実用形質改良を進めた品種からｐＨ３．０以下の酸あるいは酸性アルコールを抽出溶媒として用い、１０℃以下で抽出した馬鈴薯アントシアニン色素混合物を有効成分とすることを特徴とするインフルエンザウイルスの増殖抑制剤を提案するものである。
【０００５】
【発明の実施の形態】
▲１▼色素処理法
通常の紫サツマイモや赤キャベツのような原料からアントシアニン色素を抽出するには０．５％硫酸を用いて常温で抽出している。この条件下でも、紫サツマイモや赤キャベツではさほど抽出される色素に影響はない。
しかし、馬鈴薯塊茎にはポリフェノールを褐変させるポリフェノールオキシダーゼ（チロシナーゼ）の様な酸化酵素が存在し、その酵素活性が非常に強く、アントシアニン色素が容易に変色分解する。また、馬鈴薯由来のアントシアニン色素は、紫サツマイモや赤キャベツのアントシアニン色素に比較して希薄条件下での安定性に難がある。
したがって、本発明における馬鈴薯由来のアントシアニン色素を馬鈴薯塊茎から抽出するには、従来のような抽出方法では色素の構造変化を生ずることなく安定に効率よく色素を取得することは困難である。
【０００６】
有色馬鈴薯塊茎からアントシアニン色素を抽出するには、酸あるいは酸性アルコールを抽出溶媒として用いる。前述の酸化酵素の活性を止める条件としては、ｐＨ３．０以下の酸性にする，１０℃以下（出来れば４℃以下）にする，５０％以上のアルコールで抽出する，などの抽出条件が挙げられる。酸については乳酸，酢酸，クエン酸などを使用できるが、より抽出効率や色素安定性がいいものとしてはギ酸，トリフルオロ酢酸がある。酸の濃度は１〜５％程度である。また、抽出液に１％以上の食塩（出来れば５％程度）を入れることも良い。
【０００７】
以下に、本発明に用いられるアントシアニン色素の抽出に好ましい一例を挙げる。
まず、有色馬鈴薯塊茎を、スライサー等を用いて２ｍｍ厚にスライスし、スライスが直接、４倍量程度の抽出液に投入されるようにして、塊茎スライスの変色を防ぐようにする。
その際、抽出液には１％食塩を含む３％ギ酸溶液を用いる。また、抽出温度、抽出液温とも酸化酵素の働かない、４℃で行う。
【０００８】
次に、色素抽出液を濾過あるいは遠心分離等の固−液分離法により固形物を除去して馬鈴薯アントシアニン色素抽出液を得る。この段階でも抗ウイルス活性を示すが（表１：表１では１％乳酸のみでの抽出液）、さらに本抽出液のアントシアニン色素などのフラボノイド系色素成分を、合成吸着樹脂、例えばAmberlite ＸＡＤ-7（オルガノ社製）の様なメタアクリル酸エステル系樹脂やＨＰ−２０（三菱化成社製）の様なスチレン−ジビニルベンゼン系樹脂に吸着させ、色素成分をエタノールにて溶出させる。この色素成分の溶出に使用する溶媒としてはメタノールやイソプロパンノールなどのアルコール類やアセトニトリル等の有機溶媒、さらに、それらの水との混合溶媒（重量％で５０％以上が好ましい）を用いることが出来る。
【０００９】
続いて吸着樹脂により処理した色素成分液を凍結乾燥あるいは４０℃以下の温度で減圧乾燥して粗アントシアニン色素粉末を得る。この段階での抗ウイルス活性は、抽出液に比較してかなり向上が見られる（表２）が、さらにアントシアニン色素の純度を上げることで高い抗ウイルス活性を示す。
【００１０】
得られた粗アントシアニン色素粉末を少量の９９．９％エタノールに溶解し、これに過剰のジエチルエーテルを添加してアントシアニン色素を強制的に沈殿させる。生じた沈殿を４０℃以下の減圧乾燥あるいは凍結乾燥を行い、精製アントシアニン色素粉末を得ることが出来る。この最終段階での抗ウイルス活性は表３に示す通りである。
【００１１】
【表１】
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【表２】
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【表３】
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【００１２】
▲２▼馬鈴薯アントシアニン色素の主要な構造
アントシアニン色素含有馬鈴薯には肉部の色調で赤系と紫系がある。現在最も多く栽培中の品種，紫馬鈴薯「インカパープル」中に含まれているアントシアニン色素は、図１に示す高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）分析より明らかなように約７種類ほどある。そのうち４種類ほどが有機酸によってアシル化している。主要色素は3-Ｏ-［6-Ｏ-（4-Ｏ-p-coumaroyl-α-Ｌ-rhamnopyranosyl）-β-Ｄ-glucopyranosyl］-5-Ｏ-β-Ｄ-glucopyranosyl-petunidin（ペタニン）である。
【化１】
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【００１３】
また、赤馬鈴薯「インカレッド」中に含まれるアントシアニン色素は、図２に示す高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）分析より明らかなように約８種類であり、そのうちの４〜６種類ほどが有機酸によってアシル化している。主要色素は3-Ｏ-［6-Ｏ-（4-Ｏ-ｐ-coumaroyl-α-Ｌ-rhamnopyranosyl）-β-Ｄ-glucopyranosyl］-5-Ｏ-β-Ｄ-glucopyranosyl-pelargonidin（ペラニン）である。
【化２】
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【００１４】
以上のように精製した色素においてかなりの抗ウイルス活性が見られる。
しかしながら、赤馬鈴薯アントシアニン色素の９０％以上を占める主成分であるペラニン（pelargonidin 3-ｐ -coumaroyrutinose,5-diglucose）に類似した構造であるpelargonidin 3-ｐ-coumaroyglucose、5-glucose（Ｐg 3-pＣ・glc、5-glc）やpelargonidin 3-ｐ-coumaroyglucose、5-malonylglucose（Ｐg 3-pＣ・glc、5-Ｍa・glc）ではペラニンに比較して抗ウイルス活性が弱く（表４）、抗インフルエンザウイルス活性は馬鈴薯アントシアニン色素の構造に起因していると考えられる。
【００１５】
【表４】
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【００１６】
馬鈴薯アントシアニン色素がインフルエンザウイルスを抑制する効果を示す理由については不明であるが、ウイルスの酵素を阻害することやウイルスのタンパク質を凝集させるなどの理由が推定される。生体内での反応は未知であるが、アントシアニン色素は安全性が高いため、現有の風邪薬への利用や、家庭用、業務用集塵フィルター、ウイルス防御用マスク等への応用などの、インフルエンザウイルス防御を目的とした分野に利用できる可能性が高い。
【００１７】
【発明の効果】
以上説明したように本発明の抗インフルエンザ活性を有する材料は、馬鈴薯アントシアニン色素からなり、その原材料である馬鈴薯は入手が容易であり、しかも安価であって、さらにはその抽出、精製も特殊な設備を必要とすることなく比較的容易に行うことができるので、極めて実用的価値が高いものである。そして、アントシアニン色素は安全性が高いため、現有の風邪薬への利用や、家庭用、業務用集塵フィルター、ウイルス防御用マスク等への応用などの、インフルエンザウイルス防御を目的とした分野に利用できる可能性が高い。
【図面の簡単な説明】
【図１】紫馬鈴薯由来のアントシアニン色素の高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）分析である。
【図２】赤馬鈴薯由来のアントシアニン色素の高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）分析である。
【図１】
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【図２】
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