(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（Ｉ）で示されるアミノアルコール誘導体またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含む医薬。
［化１］
Ｒ2−ＣＨ2−Ｃ*Ｈ（ＮＨＰ1）−Ｃ*Ｈ（ＯＲ3）−Ｒ1 ・・・・・・（Ｉ）
（式中、*は不斉炭素を表し、Ｒ1はフェニル基を表し、Ｒ2はヒドロキシル、メチル若しくはヒドロキシメチル基で置換されていてもよいピロリジノ、ピペリジノまたはピペラジノ基、或いはモルホリノ基を表し、Ｒ3は水素原子を表し、Ｐ1は炭素数４〜１６のアルキル基、炭素数６〜１８のアラルキルオキシカルボニル基、炭素数４〜１６のアルコキシカルボニル基、または炭素数４〜１６のアルケニルオキシカルボニル基を表す。）
【請求項２】
一般式（Ｉ）において、Ｒ1がフェニル基であり、Ｒ2がピロリジノ、ヒドロキシピロリジノ、ピペリジノ、ヒドロキシピペリジノまたはモルホリノ基であり、Ｒ3が水素原子であり、Ｐ1は炭素数４〜１６のアルキル基、炭素数６〜１８のアラルキルオキシカルボニル基、炭素数４〜１６のアルコキシカルボニル基、または炭素数４〜１６のアルケニルオキシカルボニル基である請求項１に記載の医薬。
【請求項３】
下記一般式（Ｉ）で示されるアミノアルコール誘導体またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含む異常増殖性疾患治療薬。
［化２］
Ｒ2−ＣＨ2−Ｃ*Ｈ（ＮＨＰ1）−Ｃ*Ｈ（ＯＲ3）−Ｒ1 ・・・・・・・ （Ｉ）
（式中、*は不斉炭素を表し、Ｒ1はフェニル基を表し、Ｒ2はヒドロキシル、メチル若しくはヒドロキシメチル基で置換されていてもよいピロリジノ、ピペリジノまたはピペラジノ基、或いはモルホリノ基を表し、Ｒ3は水素原子を表し、Ｐ1は炭素数４〜１６のアルキル基、炭素数６〜１８のアラルキルオキシカルボニル基、炭素数４〜１６のアルコキシカルボニル基、または炭素数４〜１６のアルケニルオキシカルボニル基を表す。）
【請求項４】
一般式（Ｉ）において、Ｒ1がフェニル基であり、Ｒ2がピロリジノ、ヒドロキシピロリジノ、ピペリジノ、ヒドロキシピペリジノまたはモルホリノ基であり、Ｒ3が水素原子であり、Ｐ1は炭素数４〜１６のアルキル基、炭素数６〜１８のアラルキルオキシカルボニル基、炭素数４〜１６のアルコキシカルボニル基、または炭素数４〜１６のアルケニルオキシカルボニル基である請求項３に記載の異常増殖性疾患治療薬。
【請求項５】
一般式（Ｉ）において、Ｒ1がフェニル基であり、Ｒ2がピロリジノ基であり、Ｒ3が水素原子であり、Ｐ1がベンジルオキシカルボニル基である請求項３記載の異常増殖性疾患治療薬。
【請求項６】
一般式（Ｉ）において、その立体配置が（１Ｒ，２Ｒ）であることを特徴とする請求項３から５いずれか１項に記載の異常増殖性疾患治療薬。
【請求項７】
異常増殖性疾患が癌である請求項３から６いずれか１項に記載の治療薬。
【請求項８】
（１Ｒ，２Ｒ）−２−ヘキサノイルアミノ−３−ピロリジノ−１−フェニル−１−プロパノールまたはその薬学的に許容される塩。
【請求項９】
（１Ｒ，２Ｒ，２’Ｒ）−２−（２’−ヒドロキシオクタノイルアミノ）−３−ピロリジノ−１−フェニル−１−プロパノールまたはその薬学的に許容される塩。
【請求項１０】
請求項８に記載の（１Ｒ，２Ｒ）−２−ヘキサノイルアミノ−３−ピロリジノ−１−フェニル−１−プロパノールまたはその薬学的に許容される塩を有効成分として含む医薬。
【請求項１１】
請求項９に記載の（１Ｒ，２Ｒ，２’Ｒ）−２−（２’−ヒドロキシオクタノイルアミノ）−３−ピロリジノ−１−フェニル−１−プロパノールまたはその薬学的に許容される塩を有効成分として含む医薬。
【請求項１２】
請求項８に記載の（１Ｒ，２Ｒ）−２−ヘキサノイルアミノ−３−ピロリジノ−１−フェニル−１−プロパノールまたはその薬学的に許容される塩を有効成分として含む異常増殖性疾患治療薬。
【請求項１３】
請求項９に記載の（１Ｒ，２Ｒ，２’Ｒ）−２−（２’−ヒドロキシオクタノイルアミノ）−３−ピロリジノ−１−フェニル−１−プロパノールまたはその薬学的に許容される塩を有効成分として含む異常増殖性疾患治療薬。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、アミノアルコール誘導体またはその薬学的に許容される塩を含む医薬及び異常増殖性疾患治療薬に関する。詳細には本発明は、グルコスフィンゴ糖脂質（以下「糖脂質」ということもある）生合成制御作用を有する上記誘導体を含む医薬、特に、未分化な状態で異常増殖する細胞の分化を誘導し、一定の寿命を持つ終末分化細胞に分化させて、異常増殖状態からの離脱をはかることを目的とする異常増殖性疾患治療薬、さらには癌治療薬に関する。
【０００２】
【従来の技術】
グルコスフィンゴ糖脂質は、哺乳動物細胞の細胞表面膜構成成分として存在しており、生理活性物質のレセプター機能、細胞間相互認識機能、又は細胞間相互作用等を介しての発生、増殖、分化、癌化及び免疫反応等の細胞機能と密接に関係していることが知られている。
現在、糖脂質の機能を探る手法として最も多く使われているものは、実験系に外から糖脂質を添加するというタイプのものであるが、その場合内因性糖脂質との関連が問題となる。つまり、細胞膜に存在する内因性糖脂質が種々の細胞表面受容体等と既に複合体を形成している中に、さらに糖脂質を添加して導きだされる結果は、内因性糖脂質の真の細胞生理学的意義を常に反映しているとは限らないと考えられる。従って、糖脂質の細胞生理学上に於ける本来の役割を知るためには、内因性糖脂質の生合成を特異的に阻害する方法が必要であった。
【０００３】
本発明者等は先に、セラミドのアナログである２−アシルアミノプロパノール誘導体を種々合成しそれらの糖脂質生合成阻害活性を検討することによって、１−フェニル−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−プロパノール（ＰＤＭＰ）の立体異性体の中でＤ−、またはＤＬ−トレオ体がグルコシルセラミド生合成酵素を特異的に阻害し、グルコシルセラミドを出発物質とする全ての糖脂質の細胞内含量を著しく減少させることを証明した（Ａｄｖ．Ｌｉｐｉｄ  Ｒｅｓ．，２６，１８３−２１３，１９９３）。また、ＰＤＭＰあるいはその類縁体を癌治療薬として用いることは、特開平１ー２５４６２３に開示されている。更に、ＰＤＭＰはグルコシルセラミド合成阻害により、グルコシルセラミドの生合成前駆体であるセラミドの細胞内含量を増加させる効果を有するが、近年セラミド分子は、分化、アポトーシスや細胞増殖の抑制に関与している細胞内シグナル伝達系における重要な細胞内情報伝達分子としての証拠が数多く報告されてきている（Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  Ｔｏｄａｙ，１６，２９４−２９５，１９９５）。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
本発明者らは、種々のＰＤＭＰ中間体及び類縁体を合成し、それらの糖脂質生合成に及ぼす作用を確認したところ、従来活性が確認されていたＰＤＭＰ類縁体に比し、本発明のアミノアルコール誘導体が、優れた活性を示すことを見いだし本発明に到達した。本発明は、アミノアルコール誘導体またはその薬学的に許容される塩を含む医薬、特に、細胞が未分化の状態で異常増殖を呈する病態においては、その細胞中に特定の糖脂質分子が正常細胞に比べて異常に発現しているが、このような糖脂質の発現を抑制することで細胞を異常増殖状態から離脱させ、正常な状態に分化させて細胞の異常増殖に基づく疾患を処置する医薬、さらには癌治療薬を提供することを目的とする。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
即ち、本発明の要旨は、一般式（Ｉ）
［化３］
Ｒ2−ＣＨ2−Ｃ*Ｈ（ＮＨＰ1）−Ｃ*Ｈ（ＯＲ3）−Ｒ1 ・・・・・・・ （Ｉ）
（式中、*は不斉炭素を表し、Ｒ1はフェニル基を表し、Ｒ2はヒドロキシル、メチル若しくはヒドロキシメチル基で置換されていてもよいピロリジノ、ピペリジノまたはピペラジノ基、或いはモルホリノ基を表し、Ｒ3は水素原子を表し、Ｐ1は炭素数４〜１６のアルキル基、炭素数６〜１８のアラルキルオキシカルボニル基、炭素数４〜１６のアルコキシカルボニル基、または炭素数４〜１６のアルケニルオキシカルボニル基を表す。）
で示されるアミノアルコール誘導体またはその薬学的に許容される塩を含む医薬に存するものである。
【０００６】
また、本発明の他の要旨は、一般式（Ｉ）
［化４］
Ｒ2−ＣＨ2−Ｃ*Ｈ（ＮＨＰ1）−Ｃ*Ｈ（ＯＲ3）−Ｒ1 ・・・・・・ （Ｉ）
（式中、*は不斉炭素を表し、Ｒ1はフェニル基を表し、Ｒ2はヒドロキシル、メチル若しくはヒドロキシメチル基で置換されていてもよいピロリジノ、ピペリジノまたはピペラジノ基、或いはモルホリノ基を表し、Ｒ3は水素原子を表し、Ｐ1は炭素数４〜１６のアルキル基、炭素数６〜１８のアラルキルオキシカルボニル基、炭素数４〜１６のアルコキシカルボニル基、または炭素数４〜１６のアルケニルオキシカルボニル基を表す。）で示されるアミノアルコール誘導体を含む異常増殖性疾患治療薬に存するものである。
【０００７】
【発明の実施の形態】
以下、本発明を詳細に説明する。
本発明は、グルコスフィンゴ糖脂質生合成制御物質であるアミノアルコール誘導体またはその薬学的に許容される塩を有効成分とする医薬、さらには糖脂質生合成阻害作用を示すアミノアルコール誘導体またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含む異常増殖性疾患、特に癌治療薬に関する。ここで、「グルコスフィンゴ糖脂質」とはグルコシルセラミドとそれを出発物質として生合成されるスフィンゴ糖脂質を意味する。
本発明において、低級とは炭素数が１〜６であることを意味する。
【０００８】
本発明の医薬及び異常増殖性疾患治療薬の有効成分として用いられるアミノアルコール誘導体は、前記一般式（Ｉ）で示される化合物である。一般式（Ｉ）において、Ｒ1はアリール基を表すが、好ましくは低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシル、ヒドロキシ低級アルキルおよびニトロから選択される同一または異なる１〜３個の置換基で置換されていてもよいフェニル基であり、さらに好ましくはフェニル基である。Ｒ2は、環状アミノ基であり、好ましくはヒドロキシル、低級アルキル若しくはヒドロキシ低級アルキル基を有していてもよいピロリジノ、ピペリジノ又はピペラジノ基、或いはモルホリノ基であり、例えばピロリジノ、ヒドロキシピロリジノ、ヒドロキシメチルピロリジノ、ピペリジノ、ヒドロキシピペリジノ、ピペラジノ、Ｎ−メチルピペラジノまたはモルホリノ基が挙げられ、より好ましくはピロリジノ、ヒドロキシピロリジノ、ピペリジノ、ヒドロキシピペリジノまたはモルホリノ基等の環状アミノ基が挙げられ、最も好ましいのはピロリジノ基である。
【０００９】
Ｒ3は、水素またはアシル基であり、好ましくは水素、アセチル基、サクシニル基、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノアセチル基またはメトキシアセチル基などの置換基を有し得る低級アシル基であり、より好ましくは水素である。Ｐ1はアルキル基、アラルキルオキシカルボニル基、アルコキシカルボニル基、アルケニルオキシカルボニル基、ヒドロキシアルキルカルボニル基または炭素数４〜８のアルキルカルボニル基を表し、好ましくは炭素数４〜１６のアルキル基、炭素数６〜１８のアラルキルオキシカルボニル基、炭素数４〜１６のアルコキシカルボニル基、炭素数４〜１６のアルケニルオキシカルボニル基、炭素数４〜１６のヒドロキシアルキルカルボニル基または炭素数４〜８のアルキルカルボニル基であり、より好ましくはベンジルオキシカルボニル基、炭素数６〜８のヒドロキシアルキルカルボニル基または炭素数６〜８のアルキルカルボニル基である。
【００１０】
本発明の一般式（Ｉ）で示されるアミノアルコール誘導体を有効成分として含む医薬及び異常増殖性疾患治療薬は、一般式（Ｉ）において、Ｒ1が低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシル、ヒドロキシ低級アルキルおよびニトロから選択される同一または異なる１〜３個の置換基で置換されていてもよいフェニル基であり、Ｒ2がピロリジノ、ヒドロキシピロリジノ、ピペリジノ、ヒドロキシピペリジノまたはモルホリノ基であり、Ｒ3が水素または低級アシル基であるアミノアルコール誘導体またはその薬学的に許容される塩を含むものである。
さらに、異常増殖性疾患治療薬は一般式（Ｉ）において、Ｒ1がフェニル基であり、Ｒ2がピロリジノ基であり、Ｒ3が水素であり、Ｐ1がベンジルオキシカルボニル基、炭素数６〜８のヒドロキシアルキルカルボニル基または炭素数６〜８のアルキルカルボニル基であり、特にその立体配置が（１Ｒ，２Ｒ）であるアミノアルコール誘導体またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含むものでる。
【００１１】
本発明のアミノアルコール誘導体化合物中、一般式（Ｉ）においてその立体配置が（１Ｒ，２Ｒ）である化合物は、糖脂質生合成阻害活性が高く、さらに一般式（Ｉ）においてＲ1がフェニル基であり、Ｒ2がピロリジノ基であり、Ｒ3が水素であり、Ｐ1がベンジルオキシカルボニル基であり、その立体配置が（１Ｒ，２Ｒ）である化合物は、現在糖脂質生合成阻害活性が認められているＰＤＭＰ及びその類縁体に比し、その活性が著しく高く、細胞毒性が低いことが確認された。
【００１２】
本発明のアミノアルコール誘導体は、下記の合成経路１〜３に示される方法によって合成することができる。
［合成経路１］
化合物ａで示される光学活性なＮ−保護−２−アミノアルカンジオールをピリジン等の溶媒中、またはジクロルメタン等の無水溶媒中ピリジンの存在下、氷冷から室温下にて、例えば塩化メタンスルフォニルで処理し、ジオールの１級水酸基だけに脱離基（Ｙ）を導入（例えばメタンスルホニル化（メシル化））して化合物ｂを合成する。式中Ｙは、脱離基を表し、具体的にはメタンスルホニル（メシル）、トリハロゲノメタンスルホニル、例えばトリフルオロメタンスルホニル、ｐ−トルエンスルホニル、ベンゼンスルホニル、ｐ−ブロモベンゼンスルホニル基等を表す。この生成物（化合物ｂ）を単離後、場合によっては単離せずにそのまま出発物質としてエチルアルコール又はＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等の有機溶媒中、式Ｒ2Ｈで示されるアミンで処理することにより一般式（Ｉ）−１に示される化合物に導くことができる。このアミンはＲ2Ｈで示され、式中Ｒ2は環状アミノ基を表す。さらに必要に応じ、得られた式（Ｉ）−１の化合物のヒドロキシル基を自体公知の方法でアシル化（エステル化）し、一般式（Ｉ）−２（但し、Ｒ3はアシル基）に示される化合物に導くことができる。
上記エステル化反応は、通常約０〜５０℃、好ましくは室温下（５〜３５℃（ＪＩＳ  Ｋ００５０））、数時間〜数日間、好ましくは１１時間〜１８時間行われるが、反応条件は当業者であれば予備実験によって適宜に設定することができる。
【００１３】
［合成経路２］  一般式（Ｉ）においてＰ1がアルコキシカルボニル基、アルケニルオキシカルボニル基、ヒドロキシアルキルカルボニル基、アルキルカルボニル基である一般式（Ｉ）−３の化合物（以下の説明において、この場合のＰ1をＲ4ＣＯとする）は、一般式（Ｉ）−１に示される化合物を出発物質として合成経路２に従って合成することができる。つまり、一般式（Ｉ）−１の化合物のアミノ保護基（Ｐ1）、例えばベンジルオキシカルボニル基等のアラルキルオキシカルボニル基を、接触還元、酸処理、塩基処理等の常法の脱保護方法により除去し、化合物ｃへと導く。
次いで生成したアミノ基を式Ｒ4ＣＯＯＨで示されるカルボン酸またはその反応性誘導体、例えば該カルボン酸の酸ハロゲン化物、酸無水物等によりアシル化（アミド化）することで、目的とする一般式（Ｉ）−３で示されるアミノアルコール誘導体へと導くことができる。この式中、Ｒ4ＣＯ−は炭素数４〜１６のアルコキシカルボニル基、炭素数４〜１６のアルケニルオキシカルボニル基、炭素数４〜１６のヒドロキシアルキルカルボニル基または炭素数４〜８のアルキルカルボニル基を表す。具体的には、導入するアシル基（Ｒ4ＣＯ−）の炭素数が６のアルキルカルボニル基の場合、上記アシル化剤としてヘキサノイルクロリドまたは無水ヘキサン酸が用いられる。
【００１４】
また、化合物ｃをカルボン酸（Ｒ4ＣＯＯＨ）およびアミド結合反応に通常使用される縮合剤と反応させて、目的とするアミノアルコール誘導体へと導くこともできる。具体的に上記カルボン酸としてはヘキサン酸、２−ヒドロキシオクタン酸等の脂肪酸又はヒドロキシ置換脂肪酸が用いられ、上記の縮合剤としてはジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、水溶性カルボジイミド等公知のものが用いられる。水溶性カルボジイミドは、具体的には１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）が例示される。
さらに必要に応じ、式（Ｉ）−３の化合物のヒドロキシル基を、合成経路１と同様に自体公知の方法でアシル化し、一般式（Ｉ）−４（但し、Ｒ3はアシル基）に示される化合物に導くことができる。
【００１５】
［合成経路３］
また、一般式（Ｉ）においてＰ1がアルキル基である一般式（Ｉ）−５の化合物（以下の説明において、この場合のＰ1をＲ5ＣＨ2（通常は炭素数４〜１６）とする）は、合成経路３によって合成することができる。つまり、化合物ｄで示される化合物（式中、Ｒ5ＣＯは炭素数４〜１６のアルキルカルボニル基を表す）を水素化リチウムアルミニウム等の還元剤で処理することにより、目的とする一般式（Ｉ）−５で示されるアミノアルコール誘導体へと導くことができる。
さらに必要に応じ、式（Ｉ）−５の化合物の３位ヒドロキシル基を、合成経路１と同様に自体公知の方法でアシル化（エステル化）し、一般式（Ｉ）−６（但し、Ｒ3はアシル基）に示される化合物に導くことができる。
【００１６】
（単離、精製）
上記各合成経路によって得られた本発明化合物の単離・精製は反応後、酢酸エチル、クロロホルム等による溶媒抽出、各種クロマトグラフィー（吸着クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー等）、結晶化の自体既知の精製手段を適宜に組み合わせて行うことができる。
【００１７】
合成経路１
【化５】
0004176170.tif 000002
【００１８】
合成経路２
【化６】
0004176170.tif 000003
【００１９】
合成経路３
【化７】
0004176170.tif 000004
【００２０】
上記合成経路１の出発物質であるＮ−保護−２−アミノアルカンジオール類の合成法としては、Ｎ−保護−α−アミノケトン類を還元する方法（J.Org.Chem.,54,1866(1989)）、Ｎ−（ジフェニルメチレン）アミノ酸エステルを水素化ジイソブチルアルミニウム、続いてグリニャール試薬で処理する方法 （J.Org.Chem.,57,5469(1992)）、Ｎ−保護−アミノアルデヒドやＮ−保護−アミノ酸の酸塩化物に有機金属試薬を反応させる方法（J. Am. Chem. Soc., 95, 4098(1973)）、２−オキサゾリジノンとアルデヒドの不斉アルドール反応（J. Am. Chem. Soc., 108, 6757(1986)）（エバンス法）、キラルなイミダゾリジノンおよびオキサゾリジノンとアルデヒドの不斉アルドール反応（Helv. Chem. Acta, 70, 237(1987)）等が知られている。
一方、上記Ｎ−保護−α−アミノケトン類の合成法としては、Ｎ−保護−α−アミノ酸を出発原料としてアミノ酸のカルボキシル基を酸塩化物に変換後、ベンゼンとフリーデル−クラフツ反応させる方法（J.Am.Chem.Soc.,103,6157(1981)）、該アミノ酸のカルボキシル基をアルキルリチウム試薬で処理してリチウム塩とした後、グリニャール試薬と反応させる方法等が知られている（J.Org.Chem.,54,1866(1989)）。
【００２１】
一般式（Ｉ）で示される化合物の薬学的に許容される塩としては、塩酸、リン酸、硫酸、硝酸等の無機酸塩、ギ酸、酢酸、クエン酸、乳酸、リンゴ酸、シュウ酸、マレイン酸、フマル酸、コハク酸、トリフルオロ酢酸、メタンスルホン酸（メシル酸）、Ｐ−トルエンスルホン酸等の有機酸の塩をあげることができる。このような塩の製造は自体既知の方法によって行うことができ、例えば一般式（Ｉ）で示される化合物（遊離型）をアルコール等の適宜な溶媒に溶解し、通常等モル程度の上記の酸を添加して反応させ、所望により溶媒を溜去すればよい。
本発明化合物は遊離型である場合よりも、塩酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、コハク酸塩等の塩型である場合の方が、水又は生理食塩水に対する溶解性が向上する。
【００２２】
〔作用〕
一般式（Ｉ）で示される本発明のアミノアルコール誘導体またはその薬学的に許容される塩（以下「本発明化合物」ということもある。）は、糖脂質の生合成を制御する作用を有し、該作用に基づく医薬としての有用性を有している。
一般式（Ｉ）で示される化合物は分子中に少なくとも２箇所に不斉炭素を有し、その立体配置（Ｌ−トレオ、Ｌ−エリトロ、Ｄ−トレオ、Ｄ−エリトロ）による各異性体は、それぞれ上記生合成制御作用が異なる。特に、本発明化合物のうち、糖脂質生合成阻害作用を有する化合物は、未分化な状態で異常増殖する細胞の分化を誘導する作用又は異常増殖細胞を正常化する作用を有し、異常増殖性疾患治療薬、特に癌治療薬として有用である。このような用途に好ましい本発明化合物は、その立体配置がＤ−トレオ又はＬ−トレオ体であり、Ｄ−トレオ体が特に好ましい。
なお、一般式（Ｉ）の化合物の立体配置、（１Ｓ、２Ｓ）、（１Ｒ、２Ｓ）、（１Ｓ、２Ｒ）又は（１Ｒ、２Ｒ）は、それぞれＬ−トレオ体、Ｌ−エリトロ体、Ｄ−エリトロ体又はＤ−トレオ体に相当する。
【００２３】
本発明化合物は未分化で異常増殖する細胞の分化を誘導する作用を有するので、本発明の治療薬は、ヒトを含む哺乳動物の異常増殖性疾患、すなわち細胞が未分化な状態で異常増殖を呈することに基づく各種疾患の処置、すなわちこのような疾患の治療、軽減（症状の改善）、維持（悪化防止）または予防を目的とする医薬品として使用される。このような疾患としては、良性腫瘍（子宮筋腫など）；固形癌（食堂癌、大腸癌、肺癌、胃癌、膵臓癌、肝癌等の扁平上皮癌や腺癌など、または脳腫瘍）、神経膠腫、白血病、悪性リンパ腫等の悪性腫瘍もしくは癌（癌腫、肉腫）；腎炎（糸球体腎炎など）、ヒト自己免疫性リンパ球増殖性症候群、リンパ球増殖性疾患、血管免疫芽細胞性リンパ節症、免疫芽細胞性リンパ節症、全身性エリテマトーデス、炎症性腸疾患（クローン病、潰瘍性大腸炎等）、進行性全身性硬化症、多発性筋炎（皮膚筋炎）、シェーグレン症候群、骨髄異形成症候群、強皮症、リウマチ、乾癬、創傷の過形成（肉芽等）などの異常増殖性疾患が例示されるが、本発明の治療薬は、好ましくは悪性腫瘍、特に固形癌の治療に有効である。
【００２４】
〔製剤化〕
本発明化合物を、担体、賦形剤、その他の添加物と共に、経口又は非経口的に投与する製剤とすることができる。
経口製剤としては、散剤、顆粒剤、カプセル剤、錠剤等の固形製剤；シロップ剤、エリキシル剤、乳剤等の液状製剤を挙げることができる。散剤は、例えば乳糖、デンプン、結晶セルロース、乳酸カルシウム、リン酸水素カルシウム、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム、無水ケイ酸等の賦形剤と混合して得ることができる。顆粒剤は、上記賦形剤のほか、必要に応じて、例えば白糖、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン等の結合剤や、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム等の崩壊剤を更に加え、湿式又は乾式で造粒して得ることができる。錠剤は、上記散剤又は顆粒剤をそのまま、又はステアリン酸マグネシウム、タルク等の滑沢剤を加えて打錠して得ることができる。また、上記錠剤又は顆粒剤は、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、メタクリル酸メチルコポリマー、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースサクシネート等の腸溶性基剤で被覆し、あるいはエチルセルロース、カルナウバロウ、硬化油、白色セラック等で被覆し、これらを腸溶性又は持続性製剤にすることができる。カプセル剤のうち硬カプセル剤は、上記散剤又は顆粒剤を硬カプセルに充填して得ることができ、また軟カプセル剤は、本発明化合物を、グリセリン、ポリエチレングリコール、ゴマ油、オリーブ油等に溶解し、これをゼラチン膜で被覆して得ることができる。
【００２５】
シロップ剤は、白糖、ソルビトール、グリセリン等の甘味剤と本発明化合物とを、水に溶解して得ることができる。また、甘味剤及び水のほかに、精油、エタノール等を加えてエリキシル剤とするか、あるいはアラビヤゴム、トラガント、ポリソルベート類（ポリソルベート２０、ポリソルベート６０、ポリソルベート８０（トウィーン８０）等）、カルボキシメチルセルロースナトリウム等を加えて乳剤又は懸濁剤にすることもできる。またこれらの液状製剤には必要に応じ、矯味剤、着色剤、保存剤等を加えることができる。
【００２６】
非経口製剤としては、注射剤、直腸投与剤、ペッサリー、皮膚外用剤、吸入剤、エアゾール剤、点眼剤等を挙げることができる。注射剤は、本発明化合物に、必要に応じてポリソルベート類等の非イオン界面活性剤；塩酸、水酸化ナトリウム、乳酸、乳酸ナトリウム、リン酸一水素ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム等のpH調整剤；塩化ナトリウム、ブドウ糖等の等張化剤；アミノ酸類等の安定化剤；及び注射用蒸留水又は生理食塩水を加え、滅菌濾過した後、アンプルに充填して得ることができる。また更にマンニトール、デキストラン、ゼラチン等を加えて真空凍結乾燥し、用時溶解型の注射剤とすることができる。その他、粉末充填型の注射剤とすることもできる。また本発明化合物に、レシチン、ポリソルベート類、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、マクロゴール等の乳化剤を加えた後、水中で乳化させた注射用乳剤にすることもできる。
【００２７】
また、注射剤としては、溶解性、目標臓器への移行速度の改善が可能なリポソーム製剤やリピッドマイクロスフェア等が挙げられる。リポソーム製剤は公知のリポソーム調製法（C.G. Knight, Liposomes: From Physical Structure to Therapeutic Applications, pp. 51-82, Elsevier, Amsterdam (1981); Proc. Natl. Acad. Sci., U.S.A., Vol.75, 4194(1978)）に従って調製することができる。
【００２８】
すなわち、リポソーム膜を形成する両親媒性物質としては、天然リン脂質（卵黄レシチン、大豆レシチン、スフィンゴミエリン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルイノシトール、ジホスファチジルグリセロール、ホスファチジルエタノールアミン、カルジオリピン等）、合成リン脂質（ジステアロイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン等）等のリン脂質が使用される。また、膜の安定性、流動性、薬剤の膜透過性を改善するために、コレステロール類（コレステロール、エルゴステロール、フィトステロール、シトステロール、スチグマステロール等）、リポソームに負電荷を付与することが知られている物質（ホスファチジン酸、ジセチルホスフェート等）、正電荷を付与することが知られている物質（ステアリルアミン、ステアリルアミンアセテート等）、酸化防止剤（トコフェロール等）、油性物質（大豆油、綿実油、ゴマ油、肝油等）等、公知の種々の添加剤を使用してもよい。
【００２９】
リポソームの製造は、例えば、以下の方法で行うことができる。上記両親媒性物質及び添加剤と、本発明化合物を、有機溶媒（クロロホルム、ジクロロメタン、エタノール、メタノール、ヘキサン等の単独又は混合溶媒）にそれぞれ溶解し、両溶液を混合し、フラスコ等の容器中において不活性ガス（窒素ガス、アルゴンガス等）の存在下で有機溶媒を除去し、器壁に薄膜を付着させる。次いで、この薄膜を適当な水性媒体（生理食塩水、緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等）に加え、撹拌機で撹拌する。小粒径のリポソームを得るためには、超音波乳化機、加圧型乳化機、フレンチプレス細胞破砕機等を用いて更に分散させる。このようにリポソーム化に必要な両親媒性物質等と本発明化合物が水性媒体に分散した液をメンブランフィルター処理することによってリポソーム化が進行し、粒径分布が制御されたナノスフェア−リポソーム（脂質超微粒子；粒径２５〜５０nm程度）を得ることができる。また、リポソームを限外濾過、遠心分離、ゲル濾過等の分画処理に付し、担持されなかった薬剤を除去してもよい。
【００３０】
また、膜形成物質として、上記両媒性物質、添加剤の他に、β−オクチルグルコシド、Ｌ−チロシン−７−アミド−４−メチルクマリン、フェニルアミノマンノシド又はスルファチドを添加することによって得られる、グルコース残基、チロシン残基、マンノース残基又はスルファチドを膜上に有するリポソームに本発明の一般式（Ｉ）のアミノアルコール誘導体を担持させることもできる（方法自体は、特開平４−６９３３２号参照）。
【００３１】
リピッドマイクロスフェアは、本発明化合物を大豆油、ゴマ油等に溶解し、天然リン脂質、グリセリン、水等を加え撹拌機で撹拌し、更に超音波乳化機、加圧型乳化機、フレンチプレス細胞破砕機等を用いて分散させることにより得られる。
【００３２】
直腸投与剤は、本発明化合物に、カカオ脂肪酸のモノ、ジ又はトリグリセリド、ポリエチレングリコール等の坐剤用基剤を加えた後、加温して溶融し、これを型に流し込んで冷却するか、あるいは本発明化合物を、ポリエチレングリコール、大豆油等に溶解した後、ゼラチン膜で被覆して得ることができる。
皮膚外用剤は、本発明化合物に、白色ワセリン、ミツロウ、流動パラフィン、ポリエチレングリコール等を加え、必要に応じ加温し、混練して得ることができる。
テープ剤は、本発明化合物に、ロジン、アクリル酸アルキルエステル重合体等の粘着剤を混練し、これを不織布等に展延して得ることができる。
吸入剤は、例えば薬学的に許容される不活性ガス等の噴射剤に、本発明化合物を溶解又は分散し、これを耐圧容器に充填して得ることができる。
【００３３】
〔投与方法〕
本発明化合物を有効成分として含む医薬の投与方法は、特に限定されないが、特に異常増殖性疾患の治療に使用する場合、筋肉内注射、静脈内注射、皮下注射又は腹腔内注射等の注射、経直腸投与、経肺投与などが好ましい。異常増殖性疾患の治療法としては、疾患部位に直接投与する方法（局注等）があげられる。
投与量は、患者の年令、健康状態、体重等に応じ適宜決定するが、一般には、０．２５〜２００mg/kg 、好ましくは０．５〜１００mg/kg を一日１回あるいはそれ以上に分けて投与する。
〔毒性〕
本発明医薬の有効成分である一般式（Ｉ）で示されるアミノアルコール誘導体は、薬理活性を示す投与量において、ほとんどもしくは全く細胞毒性を示さない。
【００３４】
【実施例】
次に本発明を実施例により更に詳細に説明するが、本発明はその要旨を越えない限り以下の実施例に限定されるものではない。
本発明化合物およびその合成中間体の製造法を調製例として示す。
以下の実施例においてＭｅＯＨ、ＡｃＯＥｔ、ＡｃＯＨ、ＤＭＦはそれぞれ、メタノール、酢酸エチル、酢酸、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを示す。
【００３５】
調製例１  （１Ｓ，２Ｓ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１−フェニル−１，３−プロパンジオール−３−メタンスルホニルエステルの合成
（１Ｓ，２Ｓ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１−フェニル−１，３−プロパンジオール（２１．２ｇ，７０．３ｍｍｏｌ）をピリジン（３５０ｍｌ）に溶かし、氷溶上でメタンスルホニルクロリド（５．６ｍｌ，７２．３ｍｍｏｌ）を５分間かけて滴下した。氷浴上で３０分間攪拌した後、室温で一晩攪拌した。反応が終了していることをＴＬＣ（クロロホルム：メタノール＝２０：１）で確認した後、溶媒を留去し、酢酸エチル（５００ｍｌ）を加え、１Ｎ−ＨＣｌ（２５０ｍｌ×３）、飽和食塩水（２５０ｍｌ）で洗浄後、硫酸ナトリウム上で乾燥し、溶媒を留去した。析出した結晶を酢酸エチル：ヘキサン＝１：１で洗浄し、白色結晶の標記物質（２５．３ｇ，収率９５．０％）を得た。
TLC Rf 0.55(CHCl3:MeOH=20:1)、 0.83(AcOEt), 0.62(Hexane:AcOEt=1:2)
1H-NMR(CDCl3)δ : 7.35-7.26(10H,m,aromatic), 5.30(1H,d,J=7.81Hz,NH), 5.02(2H,s,CH2-O-CO), 4.99(1H,d,J=3.91Hz,CH-OH), 4.43-4.39,4.22-4.12(3H,m,N-CH-CH2), 2.98(3H,s,SO3CH3)
なお、（１Ｓ、２Ｓ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１−フェニル−１，３−プロパンジオールの代わりに、（１Ｒ、２Ｒ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１−フェニル−１，３−プロパンジオールを用いることにより、（１Ｒ，２Ｒ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１−フェニル−１，３−プロパンジオール−３−メタンスルホニルエステルを合成することができた。
【００３６】
調製例２  （１Ｒ，２Ｒ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロパノールの合成
（１Ｒ，２Ｒ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１−フェニル−１，３−プロパンジオール−３−メタンスルホニルエステル（１．２１ｇ，３．１９ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（６ｍｌ）に溶かし、室温下、モルホリン（１．１１ｇ，１２．８ｍｍｏｌ）を加え、４０℃で２４時間攪拌した。反応がほぼ終了していることをＴＬＣ（クロロホルム：メタノール＝２０：１，ヘキサン：酢酸エチル＝１：２，酢酸エチル）で確認した後、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（７０ｍｌ）、酢酸エチル（１００ｍｌ）を加え、有機層を水、飽和食塩水で順次洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥、ろ過した。溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：２）で精製し、無色油状の標記物質（５０７．５ｍｇ，収率４３．０％）を得た。
TLC Rf 0.32(CHCl3:MeOH=20:1)、 0.12(Hexane:AcOEt=1:2)
1H-NMR(CDCl3)δ : 7.38-7.26(10H,m,aromatic), 5.04(2H,s,CH2O-CO), 5.00(1H,d,J=3.41Hz,H-1), 4.11(1H,m,H-2), 3.72(4H,m,(CH2)2O), 2.68-2.47(6H,m,(CH2)3N)
【００３７】
調製例３  （１Ｒ，２Ｒ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−ピロリジノ−１−フェニル−１−プロパノールの合成
（１Ｒ，２Ｒ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１−フェニル−１，３−プロパンジオール−３−メタンスルホニルエステル（１．５２ｇ，４．０１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（８ｍｌ）に溶かし、ピロリジン（１．１４ｇ，１６．０３ｍｍｏｌ）を加え、４０〜５０℃で１８時間攪拌した後、酢酸エチル（１００ｍｌ）を加え、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（７０ｍｌ）、水（７０ｍｌ）、飽和食塩水（７０ｍｌ）で順次洗浄後、硫酸ナトリウム上で乾燥し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝２０：１）で精製し、無色油状の標記物質（１．２１ｇ，収率８５．５％）を得た。
TLC Rf 0.20(CHCl3:MeOH=20:1), 0.20(AcOEt)
1H-NMR(CDCl3)δ : 7.39-7.24(10H,m,aromatic), 5.06-5.02(2H,m,CH2-O-CO), 4.99(1H,d,J=3.91Hz,H-1), 4.07(1H,m,H-2), 2.9-2.6(6H,m,(CH2)3N), 1.83-1.74(4H,m,H-3',H-4')
13C-NMR(CDCl3)δ : 156.0，140.8，136.5，128.4，128.2，128.0，127.8，127.4，126.1，75.7，66.6，58.1，55.2，53.4，23.6
【００３８】
また、本化合物の塩酸塩は下記の方法で調製した。
（１Ｒ，２Ｒ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−ピロリジノ−１−フェニル−１−プロパノール（９５．１ｍｇ、０．２６９ｍｍｏｌ）をエタノール（３ｍｌ）に溶かし、室温下、２Ｎ−塩酸（１６１．２μｌ、０．３２２ｍｍｏｌ）を加え、１０分間撹拌した後、溶媒を減圧留去した。この後エタノール（３ｍｌ）を加え、減圧留去する操作を３回繰り返し、室温下１６時間減圧乾燥し、淡黄色油状の（１Ｒ，２Ｒ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−ピロリジノ−１−フェニル−１−プロパノール塩酸塩１０５．５ｍｇ（収率１００％）を得た。
【００３９】
調製例４  （１Ｒ，２Ｒ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−ピペリジノ−１−フェニル−１−プロパノールの合成
（１Ｒ，２Ｒ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１−フェニル−１，３−プロパンジオール−３−メタンスルホニルエステル（１．２１ｇ，３．１９ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（６ｍｌ）に溶かし、ピペリジン（１．０９ｇ，１２．８ｍｍｏｌ）を加え、４０〜５０℃で２４時間攪拌した。反応がほぼ終了していることをＴＬＣ（酢酸エチル、クロロホルム：メタノール＝２０：１）で確認した後、酢酸エチル（１００ｍｌ）を加え、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（７０ｍｌ）、水（７０ｍｌ）、飽和食塩水（７０ｍｌ）で順次洗浄後、硫酸ナトリウム上で乾燥し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル）で精製し、無色油状の標記物質（７９５．４ｍｇ，収率６８．０％）を得た。
TLC Rf 0.20(CHCl3:MeOH=20:1), 0.17(AcOEt)
1H-NMR(CDCl3)δ : 7.36-7.25(10H,m,aromatic), 5.04(2H,s,CH2-O-CO), 5.01(1H,d,J=3.42Hz,H-1), 4.94(1H,d,J=7.33Hz,NH), 4.15(1H,m,H-2), 2.64-2.45(6H,m,(CH2)3N), 1.68-1.54(4H,m,H-3',H-5'), 1.5-1.4(2H,m,H-4')
13C-NMR(CDCl3)δ : 155.9，140.8，136.4，128.5，128.3，128.1，127.9，127.4，126.3，75.7，66.7，60.5，55.8，51.7，26.1，23.9
【００４０】
調製例５  （１Ｓ，２Ｓ）−２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロパノールの合成
調製例１の方法に従い（１Ｓ，２Ｓ）−２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノ−１−フェニル−１，３−プロパンジオールをメシル化した後、調製例２の方法に従ってモルホリン置換反応を行った結果、無色油状の標記物質を収率６３％で得た。
TLC Rf 0.36(CHCl3:MeOH=20:1)
1H-NMR(CDCl3)δ : 7.38-7.26(5H,m,aromatic), 4.98(1H,d,J=3.91Hz,H-1), 4.05(1H,m,H-2), 3.74(4H,m,(CH2)2O), 2.64-2.59(5H,m,H-2',H-6',H-3A), 2.46(1H,dd,J=4.89,13.19Hz,H-3B), 1.38(9H,s,(CH3)3)
【００４１】
調製例６  （１Ｓ，２Ｓ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−（Ｎ−メチルピペラジノ）−１−フェニル−１−プロパノールの合成
（１Ｓ，２Ｓ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１−フェニル−１，３−プロパンジオール−３−メタンスルホニルエステル（１．８１ｇ，４．７８ｍｍｏｌ）をエタノール（４０ｍｌ）に溶かし、ヨウ化ナトリウム（７１２．８ｍｇ，４．７５ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルピペラジン（１．９２ｇ，１９．２ｍｍｏｌ）を加え、５０℃で５日間攪拌した。反応状況をＴＬＣ（クロロホルム：メタノール＝９：１）で確認した後、溶媒を留去し、水（５０ｍｌ）、酢酸エチル（１００ｍｌ）を加え、有機層を水、飽和食塩水で順次洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥、ろ過した。溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝２０：１）で精製し、無色油状の標記物質（２４２．２ｍｇ，収率１３．２％）を得た。
TLC Rf 0.38(CHCl3:MeOH=9:1)
1H-NMR(CDCl3)δ : 7.36-7.26(10H,m,aromatic), 5.04(2H,s,CH2-O-CO), 5.00(1H,d,J=3.41Hz,H-1), 4.97(1H,d,NH), 4.12(1H,m,H-2), 2.70-2.49(10H,m,(CH2)3N,(CH2)2N), 2.28(3H,s,CH3-N)
13C-NMR(CDCl3)δ : 156.0，140.7，136.4，128.5，128.3，128.1，127.9，127.5，126.2，75.3，66.8，59.6，55.1，54.1，52.1，45.9
【００４２】
調製例７  （１Ｓ，２Ｓ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−（（２Ｓ）−２−ヒドロキシメチルピロリジノ）−１−フェニル−１−プロパノールの合成
（２Ｓ）−２−ヒドロキシメチルピロリジン（３２３．３ｍｇ，３．２０ｍｍｏｌ）をエタノール（１２ｍｌ）に溶かし、（１Ｓ，２Ｓ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１−フェニル−１，３−プロパンジオール−３−ｐ−ブロモベンゼンスルホニルエステル（７８２ｍｇ，１．５０ｍｍｏｌ）の塩化メチレン溶液（３ｍｌ）に滴下した。４５℃で２日間攪拌し、反応状況をＴＬＣ（クロロホルム：メタノール＝９：１、酢酸エチル：２−プロパノール＝２：１）で確認した後、溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：２−プロパノール＝７：３）で精製し、無色油状の標記物質（７９．５ｍｇ，収率１３．８％）を得た。
TLC Rf 0.25(CHCl3:MeOH=9:1), 0.39(AcOEt:(CH3)2CHOH=2:1)
1H-NMR(CDCl3)δ : 7.51-7.23(10H,m,aromatic), 5.32(1H,br,NH), 4.99(3H,m,H-1,CH2-O-CO), 3.93(1H,m,H-2), 3.67,3.66,3.64,3.63(1H,dd,CH2(A)-OH), 3.51(1H,dd,J=4.40,11.23Hz,CH2(B)-OH), 3.28-3.23(1H,m,H-5'A), 3.08(1H,dd,J=5.86,13.19Hz,H-3A), 2.81(1H,dd,J=2.93,13.18Hz,H-3B), 2.71(1H,m,H-2'), 2.34-2.28(1H,m,H-5'B), 1.90-1.59(4H,m,H-3',H-4')
13C-NMR(CDCl3)δ : 156.5，141.0，136.5，128.4，128.3，128.0，127.8，127.5，125.8，75.4，66.6，66.4，63.7，58.0，56.2，55.4，27.0，23.8
【００４３】
調製例８  （１Ｓ，２Ｓ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−（３−ヒドロキシピロリジノ）−１−フェニル−１−プロパノールの合成
（１Ｓ，２Ｓ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１−フェニル−１，３−プロパンジオール−３−メタンスルホニルエステル（２．６０ｇ，６．８６ｍｍｏｌ）をエタノール（２０ｍｌ）に溶かし、３−ヒドロキシピロリジン（１．１９ｇ，１３．６８ｍｍｏｌ）を加え、４５℃で５日間攪拌した。反応状況をＴＬＣ（クロロホルム：メタノール＝９：１）で確認した後、溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロルホルム：メタノール＝９：１、酢酸エチル：メタノール＝９：１）で精製し、無色油状の標記物質（５２７．１ｍｇ，収率２０．８％）を得た。
TLC Rf 0.25(CHCl3:MeOH=9:1), 0.35(AcOEt:MeOH=4:1)
1H-NMR(CDCl3)δ : 7.41-7.24(10H,m,aromatic), 5.26(0.7H,d,J=7.82Hz,NH,片方のジアステレオマー由来), 5.20(0.3H,d,NH,もう片方のジアステレオマー由来), 5.00(3H,s,H-1,CH2-O-CO), 4.34(0.7H,m,H-3',片方のジアステレオマー由来), 4.28(0.3H,m,H-3',もう片方のジアステレオマー由来), 4.02(1H,m,H-2), 3.04-2.99, 2.89-2.42(6H,m,(CH2)3N), 2.20-2.07(1H,m,H-4'A), 1.80-1.68(1H,m,H-4'B)
13C-NMR(CDCl3)δ : 156.5，141.2，141.1，136.7，128.8，128.6，128.3，128.2，127.8，126.4，75.4，75.2，71.3，67.0，64.0，58.0，54.2，54.1，53.8，34.9
【００４４】
調製例９  （１Ｓ，２Ｓ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−ピロリジノ−１−フェニル−１−プロパノールの合成
（１Ｓ，２Ｓ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１−フェニル−１，３−プロパンジオール−３−メタンスルホニルエステル（１．２１ｇ，３．１９ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（６ｍｌ）に溶かし、ピロリジン（０．９１ｇ，１２．８ｍｍｏｌ）を加え、４０℃で２４時間攪拌した後、酢酸エチル（１００ｍｌ）を加え、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（７０ｍｌ）、水（７０ｍｌ）、飽和食塩水（７０ｍｌ）で順次洗浄後、硫酸ナトリウム上で乾燥し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝２０：１）で精製し、無色油状の標記物質（９８３．１ｍｇ，収率８７．０％）を得た。
TLC Rf 0.20(CHCl3:MeOH=20:1), 0.20(AcOEt)
1H-NMR(CDCl3)δ : 7.39-7.24(10H,m,aromatic), 5.06-5.02(2H,m,CH2-O-CO), 4.99(1H,d,J=3.91Hz,H-1), 4.07(1H,m,H-2), 2.9-2.6(6H,m,(CH2)3N), 1.83-1.74(4H,m,H-3',H-4')
13C-NMR(CDCl3)δ : 156.0，140.8，136.5，128.4，128.2，128.0，127.8，127.4，126.1，75.7，66.6，58.1，55.2，53.4，23.6
【００４５】
調製例１０  （１Ｓ，２Ｓ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−（３−ヒドロキシメチルピペリジノ）−１−フェニル−１−プロパノールの合成
（１Ｓ，２Ｓ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１−フェニル−１，３−プロパンジオール−３−メタンスルホニルエステル（２．４３ｇ，６．４１ｍｍｏｌ）をエタノール（２０ｍｌ）に溶かし、３−ヒドロキシメチルピペリジン（１．４７ｇ，１２．７８ｍｍｏｌ）を加え、４５℃で５日間攪拌した。反応状況をＴＬＣ（クロロホルム：メタノール＝９：１）で確認した後、溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロルホルム：メタノール＝２０：１、酢酸エチル：メタノール＝２０：１）で精製し、無色油状の標記物質（２９３．３ｍｇ，１１．５％）を得た。
TLC Rf 0.42(CHCl3:MeOH=9:1), 0.16(AcOEt:MeOH=20:1)
1H-NMR(CDCl3)δ : 7.35-7.26(10H,m,aromatic), 5.03(2H,s,CH2-O-CO), 4.994(0.5H,d,J=7.81Hz,H-1,片方のジアステレオマー由来), 4.986(0.5H,d,J=8.30Hz,H-1,もう片方のジアステレオマー由来), 4.15-4.09(1H,m,H-2), 3.56-3.45(2H,m,CH2-OH), 3.00-2.91, 2.75, 2.25-2.00(4H,m,H-2',H-6'), 2.65-2.59(1H,m,H-3A), 2.49-2.45(1H,m,H-3B), 1.82(1H,m,H-3'), 1.75-1.65, 1.63-1.53, 1.09-1.04(4H,m,H-4',H-5')
13C-NMR(CDCl3)δ : 156.2，156.1，140.7，136.4，128.5，128.3，128.1，127.9，127.5，126.2，75.4，75.3，66.7，65.7，65.6，60.4，60.3，60.2，58.2，57.5，55.7，55.1，52.0，38.8，38.7，26.6，24.7，14.2
【００４６】
調製例１１  （１Ｓ，２Ｓ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−（４−ヒドロキシピペリジノ）−１−フェニル−１−プロパノールの合成
（１Ｓ，２Ｓ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１−フェニル−１，３−プロパンジオール−３−メタンスルホニルエステル（２７３．６ｍｇ，０．７２２ｍｍｏｌ）をエタノール（３ｍｌ）に溶かし、ヨウ化ナトリウム（１１９．２ｍｇ，０．７９５ｍｍｏｌ）、４−ヒドロキシピペリジン（１７１．５ｍｇ，１．７０ｍｍｏｌ）を加え、室温で４日間攪拌した。反応状況をＴＬＣ（クロロホルム：メタノール＝９：１）で確認した後、４−ヒドロキシピペリジン（１５７．０ｍｇ，１．５５ｍｍｏｌ）を追加し、４５℃でさらに２日間攪拌した。溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝２０：１）で精製し、無色油状の標記物質（１１２．６ｍｇ，収率４０．６％）を得た。
TLC Rf 0.24(CHCl3:MeOH=9:1)
1H-NMR(CDCl3)δ : 7.36-7.25(10H,m,aromatic), 5.03(3H,m,CH2-O-CO,NH), 5.00(1H,d,J=2.93Hz,H-1), 4.11(1H,m,H-2), 3.71(1H,m,H-4'), 2.91, 2.82，2.64，2.48，2.32(6H,m,(CH2)3N), 1.89(2H,m,H-3'A,H-5'A), 1.64-1.56(2H,m,H-3'B,H-5'B)
13C-NMR(CDCl3)δ : 156.1，140.7，136.4，128.5，128.3，128.1，127.9，127.5，126.2，75.4，66.9，66.8，66.7，59.5，52.2，51.9，34.4
【００４７】
調製例１２  （１Ｒ，２Ｒ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−（４−ヒドロキシピペリジノ）−１−フェニル−１−プロパノールの合成
（１Ｒ，２Ｒ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１−フェニル−１，３−プロパンジオール−３−メタンスルホニルエステル（２９５．６ｍｇ，０．７８０ｍｍｏｌ）をエタノール（３ｍｌ）に溶かし、４−ヒドロキシピペリジン（３１５．１ｍｇ，３．１２ｍｍｏｌ）を加え、４５℃で２日間攪拌した。反応状況をＴＬＣ（クロロホルム：メタノール＝９：１）で確認した後、溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝２０：１）で精製し、無色油状の標記物質（１７９．７ｍｇ，収率６０．０％）を得た。
TLC Rf 0.24(CHCl3:MeOH=9:1)
1H-NMR(CDCl3)δ : 7.36-7.25(10H,m,aromatic), 5.03(3H,m,CH2-O-CO,NH), 5.00(1H,d,J=2.93Hz,H-1), 4.11(1H,m,H-2), 3.71(1H,m,H-4'), 2.91, 2.82，2.64，2.48，2.32(6H,m,(CH2)3N), 1.89(2H,m,H-3'A,H-5'A), 1.64-1.56(2H,m,H-3'B,H-5'B)
13C-NMR(CDCl3)δ : 156.1，140.7，136.4，128.5，128.3，128.1，127.9，127.5，126.2，75.4，66.9，66.8，66.7，59.5，52.2，51.9，34.4
【００４８】
調製例１３  （１Ｒ，２Ｒ）−２−アミノ−３−ピロリジノ−１−フェニル−１−プロパノールの合成
（１Ｒ，２Ｒ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−ピロリジノ−１−フェニル−１−プロパノール（３９４．２ｍｇ，１．１１ｍｍｏｌ）をメタノール（１０ｍｌ）に溶かし、１０％パラジウム炭素（１２４．８ｍｇ，１０．６ｍｏｌ％）を加え、水素雰囲気下、室温で30分間撹拌した。TLC（クロロホルム：メタノール＝７：３および酢酸エチル：メタノール＝２：１）で反応が終了していることを確認した後、パラジウム炭素をろ過除去した。ろ液を濃縮し、無色油状の標記物質（２５０．２ｍｇ）を得た。
【００４９】
調製例１４  （１Ｒ，２Ｒ）−２−オクチルオキシカルボニルアミノ−３−ピロリジノ−１−フェニル−１−プロパノールの合成
（１Ｒ，２Ｒ）−２−アミノ−３−ピロリジノ−１−フェニル−１−プロパノール（２５０．２ｍｇ，１．１１ｍｍｏｌ）をメタノール（５ｍｌ）に溶かし、室温下、トリエチルアミン（０．１８６ｍｌ，１．３３７ｍｍｏｌ）を加えた後、氷浴上にてクロロぎ酸ｎ−オクチルエステル（０．２４０ｍｌ，１．２２６ｍｍｏｌ）を加え、室温下攪拌した。９０分後、トリエチルアミン（０．１８６ｍｌ，１．３３７ｍｍｏｌ）、クロロぎ酸ｎ−オクチルエステル（０．２４０ｍｌ，１．２２６ｍｍｏｌ）追加し、室温下攪拌した。２０時間後、溶媒を減圧留去し、酢酸エチル（１００ｍｌ）を加え、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水、飽和食塩水それぞれ７０ｍｌで順次洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥後、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し（溶出溶媒；クロロホルム：メタノール＝２０：１）、無色油状の標記物質（９９．５ｍｇ、収率２３．８％）を得た。
TLC Rf 0.28(AcOEt:MeOH=4:1)、0.30(CHCl3:MeOH=9:1)
1H-NMR(CDCl3)δ:7.36-7.24(5H,m,aromatic)，5.05(1H,d,J=2.93Hz,H-1)，4.9(1H,d,NH)，4.04(1H,m,H-2)，3.96(2H,m,COOCH2)，2.91-2.68(6H,m,CH2N(CH2)2)，
1.80(4H,m,H-3',H-4')，1.52(2H,m,COOCH2CH2)，1.26(10H,m,(CH2)5CH3)，0.88(3H,t,CH2CH3)
13C-NMR(CDCl3)δ : 156.4，140.9，128.2，127.3，126.1，75.6，65.1，58.1，55.2，53.3，31.7，29.1，28.9，25.7，23.6，22.6，14.0
【００５０】
調製例１５  （１Ｒ，２Ｒ）−２−デシルアミノ−３−ピロリジノ−１−フェニル−１−プロパノールの合成
（１Ｒ，２Ｒ）−２−デカノイルアミノ−３−ピロリジノ−１−フェニル−１−プロパノール（１８１．８ｍｇ，０．４８６ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（５ｍｌ）に溶かし、室温下、水素化リチウムアルミニウム（１５３．０ｍｇ，４．０３２ｍｍｏｌ）を加え、３５〜４０℃で２．５時間還流後、氷浴上にて１Ｎ−塩酸（１５ｍｌ）を加え、３０分間攪拌した後、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（７０ｍｌ）、クロロホルム（１００ｍｌ）を加え、有機層を水、飽和食塩水それぞれ７０ｍｌで順次洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥後、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し（溶出溶媒；クロロホルム：メタノール＝２０：１、酢酸エチル：メタノール＝２：１）、無色油状の標記物質（１２１．２ｍｇ、収率６９．３％）を得た。
TLC Rf 0.39(CHCl3:MeOH=9:1)、0.19(AcOEt:MeOH=2:1)
1H-NMR(CDCl3)δ:7.37-7.22(5H,m,aromatic)，4.68(1H,d,J=3.90Hz,H-1)，2.99(1H,m,H-2)，2.63-2.42(8H,m,CH2N(CH2)2,NHCH2)，1.77(4H,m,H-3',H-4')，1.41-1.24（16H,m,(CH2)8CH3），0.88(3H,t,CH3)
13C-NMR(CDCl3)δ : 143.1，128.1，127.0，126.2，73.9，61.2，57.6，54.5，48.5，31.9，30.2，29.7，29.6，29.4，29.3，27.1，23.6，22.7，14.1
【００５１】
調製例１６  （１Ｒ，２Ｒ）−２−ヘキサノイルアミノ−３−ピロリジノ−１−フェニル−１−プロパノールの合成
（１Ｒ，２Ｒ）−２−アミノ−３−ピロリジノ−１−フェニル−１−プロパノール（１６０．０ｍｇ，０．７２７ｍｍｏｌ）をメタノール（４ｍｌ）に溶かし、室温下、トリエチルアミン（０．１２１ｍｌ，０．８７３ｍｍｏｌ）を加えた後、氷浴上にてｎ−ヘキサノイルクロリド（０．１０２ｍｌ，０．７２７ｍｍｏｌ）を加え、室温下攪拌した。２時間後、トリエチルアミン（０．１２１ｍｌ，０．８７３ｍｍｏｌ）、ｎ−ヘキサノイルクロリド（０．０５ｍｌ，０．３５８ｍｍｏｌ）を追加し、室温下攪拌した。９０分後後、メタノール（５ｍｌ）を加え、溶媒を減圧留去し、酢酸エチル（４０ｍｌ）を加え、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水、飽和食塩水それぞれ２５ｍｌで順次洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥後、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し（溶出溶媒；酢酸エチル：メタノール＝２：１）、無色油状の標記物質（２１．７ｍｇ、収率９．４％）を得た。
TLC Rf 0.12(CHCl3:MeOH=9:1)、0.23(AcOEt:MeOH=2:1)
1H-NMR(CDCl3)δ:7.36-7.23(5H,m,aromatic)，5.86(1H,d,J=7.33Hz,NH),5.04(1H,d,J=2.93Hz,H-1)，4.27-4.22(1H,m,H-2)，2.85-2.83(2H,m)，2.71-2.63(4H,m),2.09-2.04(2H,m,COCH2)，1.79(4H,m),1.52-1.44(2H,m,COCH2CH2),1.29-1.20(2H,m),1.17-1.11(2H,m),0.84(3H,t,CH3)
13C-NMR(CDCl3)δ : 173.4, 141.1, 128.2, 127.4, 125.9, 75.8, 58.1, 55.3, 52.4, 36.7, 31.2, 25.3, 23.7, 22.3, 13.8
【００５２】
調製例１７  （１Ｒ，２Ｒ，２’Ｓ）−２−（２’−ヒドロキシオクタノイルアミノ）−３−ピロリジノ−１−フェニル−１−プロパノールおよび（１Ｒ，２Ｒ，２’Ｒ）−２−（２’−ヒドロキシオクタノイルアミノ）−３−ピロリジノ−１−フェニル−１−プロパノールの合成
（１Ｒ，２Ｒ）−２−アミノ−３−ピロリジノ−１−フェニル−１−プロパノール（１７９．０ｍｇ，０．８１４ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（６ｍｌ）に溶かし、室温下、２−ヒドロキシオクタン酸（１６６．３ｍｇ，１．０８３ｍｍｏｌ）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（１９８．２ｍｇ，１．７２２ｍｍｏｌ）を加え２０分間撹拌した後、氷浴上で１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（１７１．１ｍｇ，０．８９３ｍｍｏｌ）を加え、室温下一夜攪拌した。ＴＬＣ（クロロホルム：メタノール＝７：３）で反応がほとんど終了していることを確認した後、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（２０ｍｌ）を加え、クロロホルムで抽出（３０ｍｌｘ３）した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥後、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し（溶出溶媒；クロロホルム：メタノール＝２０：１、酢酸エチル：メタノール＝２：１）、無色油状の標記物質（（１Ｒ，２Ｒ，２’Ｓ）体を６．９ｍｇ、（１Ｒ，２Ｒ，２’Ｒ）体を８．８ｍｇ）を得た。
（１Ｒ，２Ｒ，２’Ｓ）−２−（２’−ヒドロキシオクタノイルアミノ）−３−ピロリジノ−１−フェニル−１−プロパノール
TLC Rf 0.22(CHCl3:MeOH=9:1)、0.32(AcOEt:MeOH=2:1)
1H-NMR(CDCl3)δ:7.34-7.23(5H,m,aromatic)，6.72(1H,d,NH),5.08(1H,d,J=2.92Hz,H-1)，4.24(1H,m,H-2)，3.95(1H,m,H-2'), 2.98-2.85(2H,m)，2.73-2.65(4H,m), 1.80(4H,m),1.64(1H,m,H-3'A),1.42(1H,m,H-3'B),1.28-1.21(8H,m,(CH2)4CH3),0.87(3H,t,CH3)
13C-NMR(CDCl3)δ : 174.1, 141.0, 128.3, 127.4, 125.8, 75.6, 71.9, 58.2, 55.4, 52.5, 34.8, 31.6, 29.0, 24.7, 23.7, 22.6, 14.0
【００５３】
調製例１８  （１Ｒ，２Ｒ，２’Ｒ）−２−（２’−ヒドロキシオクタノイルアミノ）−３−ピロリジノ−１−フェニル−１−プロパノールの合成
調製例１７の方法に従い、２−ヒドロキシオクタン酸の代わりに、（２Ｒ）−２−ヒドロキシオクタン酸を用い、標記化合物を合成すると同時に、調製例１７で合成、分離した化合物を同定した。
（１Ｒ，２Ｒ，２’Ｒ）−２−（２’−ヒドロキシオクタノイルアミノ）−３−ピロリジノ−１−フェニル−１−プロパノール
TLC Rf 0.32(CHCl3:MeOH=4:1)、0.20(AcOEt:MeOH=2:1)
1H-NMR(CDCl3)δ:7.33-7.23(5H,m,aromatic)，6.97(1H,d,NH),5.02(1H,d,J=3.41Hz,H-1)，4.35(1H,m,H-2)，4.03(1H,m,H-2'), 3.09-3.04(1H,m),2.87-2.78(5H,m)，1.85(4H,brs),1.58(1H,m,H-3'A),1.44(1H,m,H-3'B),1.27-1.21(8H,m,(CH2)4CH3),0.87(3H,t,CH3)
13C-NMR(CDCl3)δ : 174.4, 140.6, 128.3, 127.6, 125.9, 75.1, 72.3, 57.9, 55.2, 51.7, 34.4, 31.6, 29.0, 24.6, 23.5, 22.6, 14.0
【００５４】
調製例１９  （１Ｒ，２Ｒ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−ピロリジノ−１−フェニル−１−プロピル  アセテートの合成
（１Ｒ，２Ｒ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１−フェニル−３−ピロリジノ−１−プロパノール２８４．２ｍｇ（０．８０３ｍｍｏｌ）をピリジン５ｍｌに溶かし、氷浴上にて、無水酢酸１５１．４μｌ（１．６１ｍｍｏｌ）を加え、室温下撹拌し、１６時間後、無水酢酸３８．０μｌ（０．４０３ｍｍｏｌ）を追加した。反応終了後、１Ｎ  塩酸３０ｍｌを加え、２０分間撹拌した後、酢酸エチル５０ｍｌで抽出し、有機層を水、飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水、飽和食塩水それぞれ３０ｍｌで順次洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥後、ろ過し、溶媒を減圧留去した。また、合わせた洗液をクロロホルム７０ｍｌで３回抽出し、有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥後、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物を合わせてシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝２０：１、酢酸エチル：メタノール＝２０：１）で精製し、無色油状の標記物質２３０．９ｍｇ（収率７２．６％）を得た。
TLC Rf. 0.24（CHCl3：MeOH＝20:1）、0.31（AcOEt：MeOH＝9:1)
1H-NMR(CDCl3):7.34-7.25(10H,m,aromatic)，5.95(1H,d,J=4.88Hz,H-1)，5.10-4.94(2H,m,COOCH2)，4.17(1H,m,H-2)，2.51(6H,m,CH2N(CH2)2),2.03(3H,s,COCH3),1.73(4H,m,H-3',H-4')
13C-NMR(CDCl3): 169.7, 156.1，137.7, 136.6，128.6, 128.3，128.2, 128.0，127.9, 126.6，75.3，66.5，56.5，54.5，54.3，23.5，20.8
【００５５】
実施例１
本発明化合物とＤ−トレオ−ＰＤＭＰのグルコシルセラミド合成酵素に対する阻害効果及び細胞毒性を比較検討した。
〔方法及び結果〕
グルコシルセラミド合成酵素に対する阻害活性は、マウス肝臓のミクロゾーム画分を酵素源とし、井ノ口とRadinによって報告された方法（J. Lipid Res. vol.28, 565-571, 1987）によって測定し、各化合物のグルコシルセラミド合成酵素に対する５０％酵素活性阻害濃度（ＩＣ50）として求めた。また、各化合物の培養ヒト胎児繊維芽細胞に対する細胞毒性を２４時間培養後、ＭＴＴ法（Pauwels et al, J. Virol. Methods, Vol. 20, pp.309-321,(1988)）により、５０％の細胞が死滅する濃度（ＣＤ50）として求めた。さらに、細胞毒性を示す濃度が高く、グルコシルセラミド合成酵素を阻害する濃度が低ければ、その化合物の安全性が高いと言えることから、ＣＤ50／ＩＣ50値を算出した。これらの結果を表１に示した。その結果、本発明の化合物は、Ｄ−トレオ−ＰＤＭＰに比較して、グルコシルセラミド合成酵素に対する阻害活性が著しく高く、さらに細胞毒性は調べた濃度範囲では全く認められなかった。ＣＤ50／ＩＣ50値においてもＤ−トレオ−ＰＤＭＰは５であるのに対し、本発明の化合物はいずれも高く、安全性においても優れていることが判明した。
【００５６】
【表１】
0004176170.tif 000005
【００５７】
実施例２
調製例３の本発明化合物のヒト食道癌に対する治療効果を検討した。
〔方法及び結果〕
ヒト食道癌より樹立された細胞株ＫＥＳ−３を１ｘ１０7個をヌードマウスの側背部皮下に移入し、１〜２週間後の腫瘍形成時に調製例３の化合物の塩酸塩の生理食塩水溶液（７．７８ｍｇ／ｍｌ）１０μｌを１日１回、７日間連続局注し、病理組織学的変化を検討した。比較対照としては、溶媒の生理食塩水を同量局注した。その結果を光学顕微鏡写真１及び２（倍率２４０）により示す。
ＫＥＳ−３の上記投与実験の移植組織像（ヘマトキシエオジン染色）を比較してみると、生理食塩水対照群の組織像（写真１）と比べて調製例３の本発明化合物投与群は全般的に核の空ほう化や凝縮、および細胞膨化を呈しており、明らかな変性が顕著に認められた（写真２）。
【００５８】
【発明の効果】
本発明によれば一般式（Ｉ）で示されるアミノアルコール誘導体またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含む医薬、特に悪性腫瘍のように未分化な状態で異常な細胞増殖を呈することに基づく疾患の治療に有効な医薬、さらには固形癌治療薬として有望な医薬を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】ＫＥＳ−３をヌードマウスに移植後、生理食塩水を局注した場合の病理組織学的な変化を表す光学顕微鏡写真１である。
【図２】ＫＥＳ−３をヌードマウスに移植後、調製例３の化合物の塩酸塩の生理食塩水溶液を局注した場合の病理組織学的な変化を表す光学顕微鏡写真２である。
【図１】
0004176170.tif 000006
【図２】
0004176170.tif 000007