(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
オリーブ葉の水又はエタノール溶液抽出物を、カラムクロマト法により、架橋ポリスチレン樹脂又はオクタデシルシリル化シリカゲル充填剤に吸着させ、エタノール濃度３０〜６０ｖｏｌ％を用いて溶出させた分画物を必須成分とすることを特徴とする皮膚外用剤組成物。
【請求項２】
架橋ポリスチレン樹脂が、ダイヤイオンＨＰ−２０（登録商標）である請求項１記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項３】
皮膚外用剤組成物が活性酸素消去作用を有する化粧料である請求項１、又は請求項２記載の皮膚外用剤組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、オリーブ葉の抽出物のカラムクロマト処理分画物を配合することにより、紫外線や代謝により皮膚内に生じる活性酸素を消去して、活性酸素に起因する皮膚の老化を防止する皮膚外用剤組成物に関する。
【０００２】
【従来の技術】
皮膚は、体内から起因する酸素ストレスだけでなく、空気と接していることや紫外線の照射を受けることから、最も活性酸素にさらされている器官である。皮膚表面では、活性酸素が皮脂を酸化し、皮膚表面状態の悪化の原因となっている。また、真皮中では、構成成分であるコラーゲンやエラスチンが、架橋することにより弾力低下の原因となり、ヒアルロン酸は低分子化することにより、保湿能の低下を引き起こすと言われている。このような真皮成分の変化が、シワの原因として提唱されている。また、活性酸素は、シミの生成にも深く関与していると考えられ、よって様々な皮膚の老化の主原因と推定されている。このようなことから、活性酸素から皮膚を守る化粧料が開発されてきた。それらの中で、天然物中から多くの活性酸素抑制物質が確認されてきた。ゴマ油中のセサミノール、セサモール、米胚芽中のトコフェノール、オリザノール、コーヒー豆中のカフェー酸、ローズマリー中のカルノソール、ローズマリー酸、ターメリック中のクルクミン等、他に多くの植物抽出液に活性酸素抑制作用が確認され、化粧料等に配合されてきた。
【０００３】
一方、本発明に係わるオリーブ葉は、Ｏｌｉｖｅ  Ｌｅａｆ  ＥｘｔｒａｃｔとしてＣＴＦＡ（第８改定）に記載されており、化粧品添加剤として広く使用されている。しかしながら、これら抽出液は、エタノール、多価アルコール又はこれらと水の混液で抽出されたものであり、高い活性酸素消去作用を求めることはできない。
『また、オリーブ葉エキスに抗酸化作用があることやオリーブ葉の成分であるＯｌｅｕｒｏｐｅｉｎ、その加水分解物であるＨｙｄｒｏｘｙｔｙｒｏｓｏｌに同様の抗酸化作用があることが知られており（Phytochemistry,Vol.31,No.4,pp.1173-1178,1992) 、Ｈｙｄｒｏｘｙｔｙｒｏｓｏｌの合成法も確立されている（Phytochemistry、同) 。』
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
これまで有効とされた天然物中の単離成分は高価であったり、皮膚刺激性が強いといった欠点があり、化粧料に配合するにあたり、価格、刺激及び効果の点から問題を有する。他方、これまでの活性酸素抑制作用を有する植物抽出物は、効果が弱く、十分な効果を求めるためには、多量を化粧料に配合することが必要であり、化粧料の製品に色、匂いの面で好ましいものを得ることができなかった。
【０００５】
従って、本発明の目的は、価格、刺激及び効果の面から化粧料添加剤として優れた活性酸素抑制作用を有する植物抽出物を配合し、活性酸素に起因する皮膚の老化を防止する皮膚外用剤組成物を提供することにある。
【０００６】
このような実情において、本発明者らは、広く天然界に存在する植物の抽出物について鋭意検討を行った結果、オリーブ葉の抽出物分画物が高い活性酸素抑制作用があることを見出し本発明を完成するに至った。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
すなわち、本発明は、オリーブ葉抽出物のカラムクロマト処理分画物を含有することを特徴とする活性酸素消去作用を有する皮膚外用剤組成物を提供するものである。
【０００８】
本願発明は、下記の請求項１〜請求項３により構成されている。
請求項１：オリーブ葉の水又はエタノール溶液抽出物を、カラムクロマト法により、架橋ポリスチレン樹脂又はオクタデシルシリル化シリカゲル充填剤に吸着させ、エタノール濃度３０〜６０ｖｏｌ％を用いて溶出させた分画物を必須成分とすることを特徴とする皮膚外用剤組成物。
請求項２：架橋ポリスチレン樹脂が、ダイヤイオンＨＰ−２０（登録商標）である請求項１記載の皮膚外用剤組成物。
請求項３：皮膚外用剤組成物が活性酸素消去作用を有する化粧料である請求項１、又は請求項２記載の皮膚外用剤組成物。
【０００９】
以下、この発明の皮膚外用剤組成物について詳述する。
本発明においては、オリーブ  Ｏｌｅａ  ｅｕｒｏｐａｅａ  Ｌ．（モクセイ科）の葉の抽出物のカラムクロマト処理分画物を必須成分として用いる。
【００１０】
本発明で用いるオリーブ葉は、地中海沿岸地方、北アフリカ原産のオリーブで、現在地中海沿岸地方をはじめ世界各地の比較的気温の高い土地で栽培されている。オリーブ葉は、長楕円形か皮針形の革質で先端は鋭く尖っている。
『オリーブ葉の成分としては、セコイリドイド配糖体のoleuropein、demethyloleuropein、oleoside、ligstroside 、カフェー酸エステルのverbascoside、フラボノイド配糖体のrutine、luteolin glycosides 、apigenin glycosides 、トリテルペンのoleanolic acid、betulinic acid、トリテルペノールのsitsterol 、α-amyrin 、β-amyrin 、uvaol 、erythrodiol 、クロロフィル等があげられる。これら成分の中で活性酸素消去作用を有する成分は、セコイリドイド配糖体、カフェー酸エステル及びフラボノイド配糖体である。』
【００１１】
本発明の必須成分であるオリーブ葉抽出物のカラムクロマト分画物を調製する際には、オリーブ葉は、必要に応じ、生又は乾燥したものをそのまま又は粉砕したものを使用し、有機栽培で生育された葉も同様に使用することができる。抽出物の調製方法は特に限定されないが、例えば、種々の適当な溶媒を用い、室温又は加温下において抽出する方法があげられる。
【００１２】
具体的に抽出溶媒としては、水、メタノール、エタノール等の低級一価アルコール、これらの一種又は二種以上の混合溶媒を用いることができる。これらの中で、特に水又は２０〜６０％エタノール溶液をもちいることが好ましい。エタノール濃度が高すぎるとトリテルペンやクロロフィル等の成分が多量に抽出され、後処理（濃縮等）が困難となる。
【００１３】
抽出物をカラム充填用試料として調製する方法は、濃縮によりアルコールを留去し、３〜５０倍の濃縮液とする。濃縮により、トリテルペンが析出してくるが、ろ過により取り除いてもさしつかえない。濃縮液を０〜１０％のエタノール溶液として充填用試料とすることもできる。
【００１４】
カラムクロマトの方法としては、オープンカラムを使用することもできるが、加圧液体クロマトグラフィーを利用した方が、工業的には望ましい。具体的には、低圧、中圧、フラッシュクロマトグラフィーを利用することができる。
【００１５】
カラムクロマトに使用する充填剤は、逆相系の結合型シリカゲルや高分子系充填剤を使用することができる。具体的には、ＯＤＳ型、ＤＭＳ（ジメチルジクロロシラン）型等の結合型リシカゲル、スチレン−ジビニルベンゼン系、メタアクリル酸エステル系などの高分子系充填剤をあげることができるが、これらに限定されるものではない。充填剤の粒子径としては、２０〜２００μｍのものを使用することができる。
【００１６】
溶出に使用する溶媒としては、水、メタノール、エタノール、アセトン、ｎ−プロパノール、エチルエーテル、酢酸エチル、これらの一種又は二種以上の混合溶媒を用いることができる。特に水〜２０％エタノールで充填した試料を洗浄した後、３０〜６０％のエタノール溶液で溶出することが望ましい。
【００１７】
溶出液の回収は、小さなフラクションに分けて回収することもできるし、大きなフラクションとして回収することもできる。回収した溶出液は、そのまま分画液とすることもできるし、濃縮液として濃度を高めることもできる。また、スプレードライや凍結乾燥などの操作によりエキス粉末とすることもできる。必要に応じては、さらにカラムクロマトグラフィーを繰り返したり、向流クロマトグラフィーにより分画を精製することもできる。これら分画物は、分画液、分画粉末、分画ペーストに調製し、更に適宜製剤化して用いることもできる。
【００１８】
本発明に係る皮膚外用剤組成物の必須成分である、オリーブ葉の抽出物カラムクロマト分画物の含有量は、乾燥固形分に換算して好ましくは０．００００１〜５．０重量％（以下、単に「％」で示す）、特に０．００１〜０．５％がより好ましい。分画液を使用する場合は、溶質である乾燥固形分の含有量が上記範囲内であれば、その抽出液濃度等は何ら限定されるものではない。
【００１９】
本発明の皮膚外用剤組成物は、上記必須成分の他、アスコルビン酸、α−トコフェノール、ローズマリーエキス・セージエキス・チョウジエキス等をはじめとする植物エキスなどの抗酸化剤を併用することにより活性酸素消去作用を高めることができる。
【００２０】
また、本発明の皮膚外用剤組成物には、化粧料成分として一般に使用されている界面活性剤、油脂類、多価アルコール、低級アルコール、増粘剤、紫外線吸収剤・散乱剤、防腐剤、酸化防止剤、キレート剤、ｐＨ調整剤、香料、色素等を適宜配合することができる。これらの添加成分の具体例を示すと次のとおりである。界面活性剤としては、高級脂肪酸石けん、アルキル硫酸エステル塩、ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸塩、アシルＮ−メチルタウリン塩、アルキルエーテルリン酸エステル塩、Ｎ−アシルアミノ酸塩等のアニオン界面活性剤、塩化アルキルトリメチルアンモニウム、塩化ジアルキルジメチルアンモニウム、塩化ベンザルコニウム、アミノアルコール脂肪酸有機シリコーン樹脂等のカチオン界面活性剤、アルキルジメチルアミノ酢酸ベタイン、アルキルアミドジメチルアミノ酢酸ベタイン、２−アルキル−Ｎ−カルボキシ−Ｎ−ヒドロキシイミダゾリニウムベタイン等の両性界面活性剤、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレン分枝アルキルエーテル、ソルビタンエステル、ポリオキシエチレンソルビタンエステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレングリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンコレステロールエステル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油脂肪酸エステル、グリセリンアルキルエーテル、ポリオキシエチレングリセリンアルキルエーテル、ポリグリセリン脂肪酸エステル等の非イオン性界面活性剤、レシチン、ラノリン、コレステロール、サポニン等の天然界面活性剤等。油脂類としては、オリーブ油、ツバキ油、マカデミアンナッツ油、ヒマシ油、ゴマ油、サフラワー油、ピーナツ油、ピスタチオ油等の植物油、ミンク油、卵黄油等の動物油、ホホバ油、カルナウバロエ、キャンデリラロウ、ミツロウ、ラノリン等のロウ類、流動パラフィン、パラフィン、ワセリン、セレシン、マイクロクリスタリンワックス、スクワラン等の炭化水素、ラウリン酸、ミリスチン酸、ステアリン酸、イソステアリン酸等の高級脂肪酸類、セチルアルコール、ステアリルアルコール、イソステアリルアルコール、２−オクチルドデカノール、ホホバアルコール等の高級アルコール類、ミリスチン酸イソプロピル、ミリスチン酸２−オクチルドデシル、２−エチルヘキサン酸セチル、リンゴ酸ジイソステアリル等のエステル類、メチルポリシロキサン、メチルフェニルポリシロキサン等のシリコーン油等。多価アルコールとしては、エチレングリコール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、グリセリン、ポリグリセリン、グルコース、マルチトース、フルクトース、キシリトース、ソルビトール、マルトトリオース、エリスリトール等。増粘剤としては、アルギン酸ナトリウム、キサンタンガム、マルメロ種子抽出物、グアーガム、ローカストビーンガム、ヒアルロン酸ナトリウム、コラーゲン、カゼイン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシビニルポリマー等。
【００２１】
紫外線吸収剤としては、２−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾフェノン、２−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾフェノン−５−スルホン酸等のベンゾフェノン誘導体、パラアミノ安息香酸、パラジメチルアミノ安息香酸オクチル等のパラアミノ安息香酸誘導体、パラメトキシ桂皮酸オクチル、ジパラメトキシ桂皮酸モノ−２−エチルヘキサン酸グリセリル等のメトキシ桂皮酸誘導体、サリチル酸ホモメンチル等のサリチル酸誘導体等。防腐剤としては、安息香酸塩、サリチル酸塩、ソルビン酸塩、デヒドロ酢酸塩、パラオキシ安息香酸エステル、塩化ベンザルコニウム、ヒノキチオール、レゾルシン、エタノール等。酸化防止剤としては、トコフェノール、アスコルビン酸、ブチルヒドロキシアニソール、ジブチルヒドロキシトルエン、没食子酸エステル類等。キレート剤としては、エチレンジアミン四酢酸ナトリウム、ポリリン酸ナトリム、クエン酸等。
【００２２】
さらに、抗菌、細胞賦活、保湿、皮脂分泌抑制、消炎、血行促進、収斂、抗酸化、美白等の生理活性作用を有する植物抽出物及びこれらの抽出分画、精製物とを併用することもできる。
【００２３】
また、本発明の皮膚外用剤組成物は、一般皮膚化粧料に限定されるものではなく、医薬部外品、薬用化粧料等を包含するものである。本発明の皮膚外用剤組成物の剤形は、可溶系、乳化系、粉末分散系等何れでもよく、用途も、化粧水、乳液、クリーム、パック等の基礎化粧料、ファンデーション等のメークアップ化粧料やアイライナー、入浴剤等を問わない。
【００２４】
かくして得られる本発明のオリーブ葉抽出物のカラムクロマト分画物を必須成分として含有する皮膚外用組成物は、活性酸素消去作用に優れ、皮膚機能を亢進し、肌の皺を防止し、きめ細やかなしっかりとした肌にする効果が高く、老化防用化粧料として有用である。
【００２５】
【実施例】
次に実施例を挙げて説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【００２６】
（オリーブ葉抽出物のカラムクロマト分画物の製造例１）乾燥したオリーブの葉２５０ｇに５０ｖｏｌ％エタノール溶液５ｋｇを加え、６０℃にて８時間攪拌抽出を行い、冷後、ろ過し、抽出物約４５００ｇを得る。抽出物を減圧下、４０℃以下にて約５００ｇまで濃縮する。濃縮液に適量のエタノール及び精製水を加え１０％エタノール溶液１０００ｇとし、カラム充填用試料とする。径６０ｍｍ、長さ１０００ｍｍのガラスカラムに高分子吸着体（ダイヤイオンＨＰ−２０（登録商標）、三菱化成株式会社製）２Ｌを充填し、１０％エタノール溶液に置換したカラムに充填用試料を約２気圧で充填した後、５Ｌの１０％エタノール溶液にて洗浄する。更に２０％エタノール溶液３Ｌにて洗浄した後、５０％エタノール５Ｌで溶出し、溶出液を回収する。回収した溶出液を減圧下１５０ｇまで濃縮する。濃縮液に３５０ｇの１，３−ブチレングリコールを加え、乾燥固形分約１％のオリーブ葉抽出物のカラムクロマト分画物Ａを得る。
【００２７】
（オリーブ葉抽出物のカラムクロマト分画物の製造例２）乾燥したオリーブの葉２５０ｇに３０ｖｏｌ％エタノール溶液５ｋｇを加え、６０℃にて８時間攪拌抽出を行い、冷後、ろ過し、抽出物約４５００ｇを得る。抽出物を減圧下、４０℃以下にて約５００ｇまで濃縮する。濃縮液に適量のエタノール及び精製水を加え１０％エタノール溶液１０００ｇとし、カラム充填用試料とする。径６０ｍｍ、長さ１０００ｍｍのガラスカラムにカラムクロマト用オクタドシルシリル化シリカゲルを充填し、１０％エタノール溶液に置換したカラムに充填用試料を約２気圧で充填した後、５Ｌの１０％エタノール溶液にて洗浄した後、６０％エタノール５Ｌで溶出し、溶出液を回収する。回収した溶出液を凍結乾燥し、オリーブ葉抽出物のカラムクロマト分画物Ｂを得る。
【００２８】
（試験例１）活性酸素消去作用ＳＯＤ様活性作用の測定
オリーブ葉抽出物のカラムクロマト分画物Ａ及びＢについてＳＯＤ様活性を測定した。ＳＯＤ様活性は、ＮＢＴ法（ＸＯＤ系と組み合わせたＢｅａｕｃｈａｍｐｓらの方法：Anal.Biochem.,４４巻、２７６〜２８７頁、１９７１）に従った。その結果を表１に示す。
【００２９】
【表１】
0004136203.tif 000002
【００３０】
（試験例２）既存オリーブ葉抽出物との比較試験
既存オリーブ葉抽出物は、乾燥したオリーブの葉５００ｇに７０ｖｏｌ％１，３−ブチレングリコール溶液５ｋｇを加え、６０℃にて８時間攪拌抽出を行い、冷後、ろ過して得られる約４０００ｇを比較対照とした。前項と同様にＳＯＤ様活性を測定したところ、１０倍希釈にて５１．３％とカラムクロマト分画物Ａの１／１０の活性であった。
【００３１】
（試験例３）パネルテスト
２０〜３９歳（平均年齢２４．５歳）の女性５０名を対象として、下記の本発明皮膚外用組成物、前項の既存オリーブ葉抽出物配合外用組成物、対照皮膚外用組成物を、１日２回（朝、夕）連続３ケ月間顔面に塗布、使用せしめた結果の官能評価を表２に示す。官能評価は、潤い、きめ、皺、しみ・そばかすの４項目とした。また、試験に用いたオリーブ葉抽出物カラムクロマト分画物は、製造例１に示した分画液を使用した。また、対照は、７０％１，３−ブチレングリコール溶液を用いた。
【００３２】
パネルテストに使用した皮膚外用組成物
オリーブ葉抽出物カラムクロマト分画物Ａ              ５．０％
（又は既存オリーブ葉抽出物）
（対照は７０％１，３−ブチレングリコール溶液）
グリセリン                                          ５．０％
エタノール                                          ５．０％
パラオキシ安息香酸エステル                          ０．２％
精製水                                            ８４．８％
【００３３】
表２より明らかなように、本発明の皮膚外用組成物は高い有効性を示し、その効果は本発明のオリーブ葉抽出物カラムクロマト分画物に由来するものであることが明らかとなった。
【００３４】
【表２】
0004136203.tif 000003
【００３５】
（試験例３）急性毒性試験
絶食させた雌雄各５匹のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄｒａｗｌｅｙ  ＣＤ系ラット、体重は雄２０５〜２２２ｇ、雌２１５〜２２１ｇで、８〜１２週齢を用いた。試験試料は、製造例１に示した分画液を使用した。各ラットに投与時の絶食後の体重に基づいて２０００ｍｇ／ｋｇ一回強制経口投与した。投与後３０分、１時間及び４時間、以後は１日１回、１４日間ラットの死亡あるいは明らかな毒性徴候を観察した。体重は０日目の投与前、７日及び１４日目に固体別に記録した。また、試験終了時にラットは頸部脱臼により屠殺し、肉眼的病理検査を行った。試験結果として、死亡あるいは毒性の一般症状は認められなかった。また、固体別体重は、試験期間を通じて、全てのラットに予想された体重増加を示した。剖検時に異常は認められなかった。これらにより、Ｓｐｒａｇｕｅ−ＤｒａｗｌｅｙＣＤ系ラットにおける急性経口５０％致死率（ＬＤ50）は、２０００ｍｇ／ｋｇ体重より大きいことが確認された。これにより、オリーブ葉抽出物カラムクロマト分画物は、安全性に優れていることが明白である。
【００３６】
（試験例４）皮膚安全性試験
製造例１に示した分画液を試験溶液として用いた。皮膚一次刺激性試験は、ニュージーランドホワイト種ウサギ３匹を用いて行った結果、皮膚一次刺激指数は０．０であった。連続皮膚刺激性試験は、雌雄各３匹の白色Ｄｕｎｋｉｎ  Ｈａｒｔｌｅｙ系モルモットを用いて、１４日間連続反復投与した結果、最大週別平均刺激指数は０．０となり無刺激と判定された。眼刺激性試験は、ニュージーランドホワイト種ウサギ３匹の眼について行い、最大群平均評点は０．０で非刺激性と判定された。皮膚感作性試験は、白色モルモットを使用したＡｄｊｕｖａｎｔ／Ｐａｔｃｈ法にて、試験動物、対照動物各１０匹によって行い、発現率０／１０で感作性の無いものであることが確認された。光毒性及び光感作性試験は、Ｄｕｎｋｉｎ  Ｈａｒｔｌｅｙ系モルモット雌各５匹を使用して行なったところ、光毒性及び光感作性の徴候を引き起こさなかった。これらの皮膚安全性の結果から、オリーブ葉抽出物カラムクロマト分画物は、皮膚安全性のうえで、非常に安全性の高いものであることが明白である。
【００３７】
（試験例５）パッチテスト
２０歳〜５１歳（平均年齢２５．２歳）までの男性３０名、女性３０名からなる健常人６０名のボランティアを用いた。被験物質は、先の製造例１の分画液及びパネルテストで使用した皮膚外用組成物を用い、対照として７０％１，３−ブチレングリコール溶液及び生理食塩水を使用した。試験は、２４時間閉塞塗布試験を行った。人体貼付試験用フィンチャンバー（直径１１ｍｍ、大正製薬）を使用し、被験物質をそれぞれ０．１ｍＬ塗布した後、直ちに被験者の背部に貼付し、２４時間放置した。そして２４時間後にフィンチャンバーを除去して、３０分後及び翌日（４８時間後）に判定基準に従って皮膚反応を観察した。
【００３８】
判定基準は、本邦パッチテスト研究会の判定基準に従った。
無反応                          ・・・・・  （−）
僅かな紅斑                      ・・・・・  （±）
明らかな紅斑                    ・・・・・  （＋）
紅斑＋腫脹                      ・・・・・  （＋＋）
紅斑＋腫脹＋丘疹または小水泡    ・・・・・  （＋＋＋）
大水泡                          ・・・・・  （＋＋＋＋）
【００３９】
試験結果を表３に示す。陽性反応（＋以上）を示した例は認められなかった。なお、僅かな紅斑（±）を生じた例は各検体群において、７０％１，３−ブチレングリコール溶液や生理食塩水使用例とほぼ同程度の頻度であった。従って、皮膚刺激性は低いものと考えられ、皮膚外用剤に配合するにあたってその安全性の面で問題のないものであることが明らかとなった。
【００４０】
【表３】
0004136203.tif 000004
▲１▼：生理食塩水
▲２▼：７０％１，３−ブチレングリコール溶液
▲３▼：製造例１の分画液
▲４▼：パネルテスト使用皮膚外用組成物
【００４１】
（実施例１）クリーム
下記の成分（１）〜（１０）、これとは別に下記成分（１１）〜（１４）を７５℃に加温溶解しそれぞれＡ液及びＢ液とする。Ａ液にＢ液を加えて乳化し、攪拌しながら５０℃まで冷却し、成分（１５）を加え、クリームを調製した。
0004136203.tif 000005
【００４２】
（実施例２）化粧水
下記成分（５）〜（８）を混合溶解させてＡ液とし、これとは別に下記成分（１）〜（４）及び（９）を混合溶解させて（Ｂ）液とし、Ａ液とＢ液を均一に混合し、化粧水を得た。
0004136203.tif 000006
【００４３】
（実施例３）乳液
下記成分（１）〜（１０）、これとは別に下記成分（１１）〜（１４）及び（１６）を７５℃で加熱溶解させてそれぞれＡ液及びＢ液とし、Ａ液にＢ液を加えて乳化し、攪拌しながら５０℃まで冷却し、成分（１５）を加え、乳液を調製した。
0004136203.tif 000007
【００４４】
（実施例４）クレンジングジェル
下記成分（１）〜（３）、これとは別に下記成分（４）〜（６）及び（８）を７０℃に加熱溶解させてそれぞれＡ液及びＢ液とし、Ａ液にＢ液を加えて均一になるまで攪拌する。攪拌しながら、５０℃まで冷却し、成分（７）を加えてクレンジングジェルを調製した。
0004136203.tif 000008
【００４５】
以上のクリーム、化粧水、乳液、クレンジングジェルは、いずれも試験例３に示したパネルテストと同様の効果を有していた。
【００４６】
【発明の効果】
以上詳述したように、本発明の必須成分であるオリーブ葉抽出物カラムクロマト処理分画物は、優れた活性酸素抑制作用を有し、安全性に優れ、これを含有する皮膚外用組成物は、肌の老化の原因となる活性酸素の生成を抑制し、また、安全性にも優れたものである。