(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ
0004171069.tif 000061
［式中、（ａ）Ｒ1が−Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ（ＣＨ3）2）ＮＨ2または−Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ3）ＮＨ2であり、Ｒ2が−Ｃ（Ｏ）Ｃ3〜Ｃ21の飽和_アルキルカルボニルであるか；または
（ｂ）Ｒ1が−Ｃ（Ｏ）Ｃ3〜Ｃ21の飽和_アルキルカルボニルであり、Ｒ2が−Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ（ＣＨ3）2）ＮＨ2または−Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ3）ＮＨ2であり；
Ｒ3はＯＨまたはＨであり、Ｒ3＝Ｏである場合に互変異体を含む_］
の化合物および薬理学的に許容しうるその塩。
【請求項２】
Ｒ1が−Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ（ＣＨ3）2）ＮＨ2または−Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ3）ＮＨ2であり、Ｒ2が−Ｃ（Ｏ）Ｃ3〜Ｃ21の飽和_アルキルカルボニルであ_る、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
−Ｃ（_Ｏ）Ｃ3〜Ｃ21の飽和アルキルカルボニルが−Ｃ（Ｏ）Ｃ9〜Ｃ17の飽和アルキルカルボニルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ3がヒドロキシである請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
（Ｒ）−９−［２−（ステアロイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−（ミリストイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−（ブチリルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−（デカノイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−（ドコサノイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）−２−（ステアロイルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−（デカノイルオキシメチル）−４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）ブチル］グアニン、
Ｒ）−９−［４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）−２−（ミリストイルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−（ドデカノイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−パルミトイルオキシメチル−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［２−ステアロイルオキシメチル−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］プリン、
（Ｒ）−９−［２−（Ｌ−バリルオキシメチル）−４−（ステアロイルオキシ）ブチル］グアニン、
または薬理学的に許容しうるその塩
よりなる群れから選ばれる、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
（Ｒ）−９−［２−（ステアロイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン。
【請求項７】
（Ｒ）−９−［２−（ステアロイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニンまたは薬理学的に許容しうるその塩。
【請求項８】
薬理学的に許容しうる担体または希釈剤とともに請求項１に記載の化合物を含んでなる医薬組成物。
【請求項９】
薬理学的に許容しうる担体または希釈剤とともに請求項５に記載の化合物を含んでなる医薬組成物。
【請求項１０】
薬理学的に許容しうる担体または希釈剤とともに請求項６に記載の化合物を含んでなる医薬組成物。
【請求項１１】
請求項１に記載の化合物の有効量を含む、ウイルス感染の治療または予防用剤。
【請求項１２】
水痘帯状ヘルペスウイルス、単純ヘルペスウイルス１型および２型、エプスタイン−バーウイルスまたはヘルペス６型（ＨＨＶ−６）および８型（ＨＨＶ−８）を含むヘルペス感染の治療または予防のためのものである請求項１１に記載のウイルス感染の治療または予防用剤。
【請求項１３】
ＳＩＶ、ＨＩＶ−１およびＨＩＶ−２を含むレトロウイルス感染の治療または予防のためのものである請求項１１に記載のウイルス感染の治療または予防用剤。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は、抗ウイルス剤の分野に関し、とりわけヘルペスおよびレトロウイルス感染に対して有用な非環状ヌクレオシドの誘導体に関する。本発明は、新規化合物、これら化合物を含有する医薬組成物、それを用いたウイルス感染の治療および予防方法、その製造法および新規な中間体を提供する。
発明の背景
多くの非環状ヌクレオシドの実際的な有用性は、それらの薬動力学が比較的穏やかであるために限られている。非環状ヌクレオシドの一般的なバイオアベイラビリティーを改善する努力のなかで多くのプロドラッグアプローチが探求されている。これらアプローチの一つは、非環状側鎖上の１またはそれ以上のヒドロキシ基のエステル誘導体、とりわけ脂肪族エステルを調製することを含む。
ヨーロッパ特許ＥＰ１６５２８９号には、Ｈ２Ｇとしても知られている有望な抗ヘルペス剤である９−［４−ヒドロキシ−（２−ヒドロキシメチル）ブチル］グアニンが記載されている。ヨーロッパ特許ＥＰ１８６６４０号は、６−デオキシＨ２Ｇを開示している。ヨーロッパ特許ＥＰ３４３１３３号は、これら化合物、とりわけそのＲ−（−）エナンシオマーがＨＩＶなどのレトロウイルス感染に対しても活性であることを開示している。Ｈ２Ｇの様々な誘導体、たとえば非環状側鎖上のヒドロキシ基のリン酸エステル、脂肪族エステル（たとえば、ジアセテートおよびジプロピオネート）およびエーテルがＥＰ３４３１３３号に開示されている。この特許はまた、典型的に６−ハロゲン化されたプリン残基のＮ−９位への非環状側鎖の縮合、または別法として、ピリミジンもしくはフラザノ−［３，４−ｄ］ピリミジン残基のイミダゾール環閉環（closure）またはイミダゾール残基のピリミジン環閉環（それぞれ、前駆体ピリミジンまたはイミダゾール残基上にはすでに非環状側鎖が存在している）を含む、これら誘導体の調製法をも開示している。これら各方法の最も広い記載において、非環状側鎖は前以て誘導体化されているが、個々の例はまた無水酢酸および無水プロピオン酸およびＤＭＦを用いたＨ２Ｇの１工程ジアシル化をも示している。
ハーンデン（Ｈarnden）ら（Ｊ．Ｍed．Ｃhem．３２、１７３８（１９８９））は、ペンシクロビルとしても知られる非環状ヌクレオシドである９−［４−ヒドロキシ−（３−ヒドロキシメチル）ブチル］グアニンの幾つかの短鎖脂肪族エステルおよびその６−デオキシ類似体を探索した。市場に出回っている抗ウイルス剤であるファンシクロビルは、６−デオキシペンシクロビルのジアセチル誘導体である。
ベンジャミン（Ｂenjamin）ら（Ｐharm．Ｒes．４、Ｎo．２、１２０（１９８７））は、ガンシクロビルとしても知られる９−［（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポキシ）メチル］グアニンの短鎖脂肪族エステルを開示している。ジプロピオネートエステルは好ましいエステルであると開示されている。
レーク−バカール（Ｌake−Ｂakaar）らはＡntimicrob．Ａgents Ｃhemother．３３、Ｎo．１、１１０−１１２（１９８９）において、Ｈ２Ｇのジアセテートおよびジプロピオネート誘導体および６−デオキシＨ２Ｇのモノアセテートおよびジアセテート誘導体を開示している。Ｈ２Ｇのジアセテートおよびジプロピオネート誘導体は、Ｈ２Ｇに比べてバイオアベイラビリティーの穏やかな改善しかもたらさないことが報告されている。
国際特許出願ＷＯ９４／２４１３４号（１９９４年１０月２７日公開）は、ジ−ピバロイルエステル、ジ−バレロイルエステル、モノ−バレロイルエステル、モノ−オレオイルエステルおよびモノ−ステアロイルエステルを含む、ガンシクロビルの６−デオキシＮ−７類似体の脂肪族エステルプロドラッグを開示している。
国際特許出願ＷＯ９３／０７１６３号（１９９３年４月１５日公開）および国際特許出願ＷＯ９４／２２８８７号（１９９４年１０月１３日公開）は、ともにモノ−不飽和Ｃ１８またはＣ２０脂肪酸に由来するヌクレオシド類似体のモノ−エステル誘導体を開示している。米国特許第５，２１６，１４２号（１９９３年６月１日発行）もまたヌクレオシド類似体の長鎖脂肪酸モノ−エステル誘導体を開示している。
非環状ヌクレオシドのプロドラッグを提供する第二のアプローチは、非環状側鎖上の１またはそれ以上のヒドロキシ基のアミノ酸エステルの調製を含む。ヨーロッパ特許ＥＰ９９４９３号は一般にアシクロビルのアミノ酸エステルを開示しており、ヨーロッパ特許出願ＥＰ３０８０６５号（１９８９年３月２２日公開）はアシクロビルのバリンおよびイソロイシンエステルを開示している。
ヨーロッパ特許出願ＥＰ３７５３２９号（１９９０年６月２７日公開）は、ジ−バリンエステル誘導体、ジ−イソロイシンエステル誘導体、ジ−グリシンエステル誘導体およびジ−アラニンエステル誘導体を含む、ガンシクロビルのアミノ酸エステル誘導体を開示している。国際特許出願ＷＯ９５／０９８５５号（１９９５年４月１３日公開）は、モノ−バリンエステル誘導体およびジ−バリンエステル誘導体を含む、ペンシクロビルのアミノ酸エステル誘導体を開示している。
ＤＥ１９５２６１６３号（１９９６年２月１日公開）および米国特許第５，５４３，４１４号（１９９６年８月６日発行）は、ガンシクロビルのアキラルなアミノ酸エステルを開示している。
ヨーロッパ特許出願ＥＰ６９４５４７号（１９９６年１月３１日公開）は、ガンシクロビルのモノ−Ｌ−バリンエステル、およびジ−バリル−ガンシクロビルからのその調製を開示している。
ヨーロッパ特許出願ＥＰ６５４４７３号（１９９５年５月２４日公開）は、９−［１’，２’−ビスヒドロキシメチル）−シクロプロパン−１’−イル］メチルグアニンの種々のビスアミノ酸エステル誘導体を開示している。
国際特許出願ＷＯ９５／２２３３０号（１９９５年８月２４日公開）は、非環状ヌクレオシド９−［３，３−ジヒドロキシメチル−４−ヒドロキシ−ブト−１−イル］グアニンの脂肪族エステル、アミノ酸エステルおよび混合アセテート／バリネートエステルを開示している。この文献は、トリバリンエステル誘導体のバリンエステルの一つをアセテートエステルで置き換えたときにバイオアベイラビリティーが低下することを開示している。
発明の簡単な説明
本発明者らは、アミノ酸エステルと脂肪酸エステルとの特定の組み合わせを有するＨ２Ｇのジエステル誘導体が親化合物（Ｈ２Ｇ）と比べて経口バイオアベイラビリティーを有意に改善しうることを見出した。それゆえ、本発明の第一の側面に従い、式Ｉ：
0004171069.tif 000002
［式中、（ａ）Ｒ1が−Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ（ＣＨ3）2）ＮＨ2または−Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ3）ＮＨ2であり、Ｒ2が−Ｃ（Ｏ）Ｃ3〜Ｃ21の飽和もしくはモノ不飽和の任意に置換されたアルキルであるか；または
（ｂ）Ｒ1が−Ｃ（Ｏ）Ｃ3〜Ｃ21の飽和もしくはモノ不飽和の任意に置換されたアルキルであり、Ｒ2が−Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ（ＣＨ3）2）ＮＨ2または−Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ3）ＮＨ2であり；
Ｒ3はＯＨまたはＨである］
の新規な化合物および薬理学的に許容しうるその塩が提供される。
本発明の混合脂肪酸およびアミノ酸エステルの経口バイオアベイラビリティーに及ぼす有利な効果は、対応する脂肪酸エステルの経口バイオアベイラビリティーと比較して特に予期しないものである。ラットからのＨ２Ｇの尿回収アッセイ（表１Ａ）または血漿薬物アッセイ（表１Ｂ）を用いた結果に基づき、Ｈ２Ｇのモノ脂肪酸エステルおよびジ−脂肪酸エステルのいずれも親化合物のＨ２Ｇに比べて経口バイオアベイラビリティーに改善はみられない。実際、ジ−ステアレート誘導体は親化合物に比べて有意に低いバイオアベイラビリティーとなり、ステアレートエステルがＨ２Ｇの経口バイオアベイラビリティーを改善するうえで有害であることが示された。ある種の他の非環状ヌクレオシド類似体において一方または両方のヒドロキシルを対応バリンまたはジ−バリンエステルに変換するとバイオアベイラビリティーが改善されることが報告されている。Ｈ２Ｇを対応モノ−もしくはジ−バリルエステル誘導体に変換しても、親化合物に比べて同様のバイオアベイラビリティーの改善が得られた。Ｈ２Ｇの脂肪酸誘導体がバイオアベイラビリティーを改善するうえで有害であることが示されていることから、それぞれ尿回収アッセイおよび血漿薬物アッセイに基づいてＨ２Ｇの混合アミノ酸／脂肪酸ジエステル誘導体がＨ２Ｇのバリンジエステル誘導体に比べて改善されたまたは匹敵する経口バイオアベイラビリティーを付与することは予期しないことであった。
0004171069.tif 000003
0004171069.tif 000004
本発明はまた、薬理学的に許容しうる担体または希釈剤とともに式Ｉの化合物および薬理学的に許容しうるその塩を含む医薬組成物をも提供する。本発明のさらなる側面は、式Ｉの化合物および薬理学的に許容しうるその塩の治療への使用およびこれら化合物および塩のヒトまたは動物でのウイルス感染の治療および予防のための薬剤の調製における使用を含む。
本発明の化合物は、とりわけ水痘帯状ヘルペスウイルス、単純ヘルペスウイルス１型および２型、エプスタイン−バーウイルス、ヘルペス６型（ＨＨＶ−６）および８型（ＨＨＶ−８）によって引き起こされるものなどのヘルペス感染に対する強力な抗ウイルス剤である。本発明の化合物は、疱疹後の神経痛を含む年寄りにおける帯状疱疹や若年におけるニワトリ水痘などの水痘帯状ヘルペスウイルス感染に対して特に有用であり、該疾患の持続および重篤度を数日間低減することができる。本発明の化合物を用いて治療に供しうるエプスタイン−バーウイルス感染には、以前は治療することができなかったが青年において何ヵ月もの学校不能（scholastic incapacity）を引き起こす感染性単球増殖症／腺熱が含まれる。
本発明の化合物はまた、ある種のレトロウイルス感染、とりわけＳＩＶ、ＨＩＶ−１およびＨＩＶ−２に対して、およびトランス作用性（transactivating）ウイルスが示されている感染に対しても活性である。
従って、本発明のさらなる側面は、ヒトまたは動物に有効量の式Ｉの化合物または薬理学的に許容しうるその塩を投与することからなる、ヒトまたは動物におけるウイルス感染の予防または治療法を提供する。
たとえば側鎖がインビボで開裂される場合に本発明の化合物の塩基部分が天然グアニンとなるように、Ｒ3はヒドロキシまたはその互変体＝Ｏであるのが有利である。別の態様として、Ｒ3は水素であってよく、それゆえ一般に一層可溶性の６−デオキシ誘導体（インビボでたとえばキサンチンオキシダーゼによりグアニンに酸化されうる）を定めてよい。
式Ｉの化合物は２Ｒ異性体と２Ｓ異性体との混合物であるラセミ体の形態で存在していてよい。しかしながら、好ましくは式Ｉの化合物は少なくとも７０％、好ましくは９０％のＲ体、たとえば９５％以上のＲ体を有する。最も好ましくは、式Ｉの化合物はエナンシオマーとして純粋なＲ体である。
基Ｒ1／Ｒ2のアミノ酸はＬ−アミノ酸に由来するものであるのが好ましい。基Ｒ1／Ｒ2の脂肪酸は、合計で偶数個の炭素原子を有するものが好ましく、特にデカノイル（Ｃ10）、ラウリル（Ｃ12）、ミリストイル（Ｃ14）、パルミトイル（Ｃ16）、ステアロイル（Ｃ18）またはエイコサノイル（Ｃ20）であるのが好ましい。他の有用な基Ｒ1／Ｒ2としては、ブチリル、ヘキサノイル、オクタノイルまたはベヘノイル（Ｃ22）が挙げられる。さらに有用な基Ｒ1／Ｒ2としては、ミリストール酸（myristoleic）、ミリステレイド酸（myristelaidic）、パルミトレイン酸、パルミテレイド酸（palmitelaidic）、ｎ６−オクタデセン酸、オレイン酸、エライジン酸、ガンド酸（gandoic）、エルカ酸またはブラシジン酸に由来するものが挙げられる。モノ不飽和脂肪酸エステルは、一般に、その長さに依存して好ましくはω−６、ω−９またはω−１１位にトランスの立体配置の二重結合を有する。基Ｒ1／Ｒ2は、Ｃ9〜Ｃ17不飽和、またはｎ：９モノ不飽和アルキルを含む脂肪酸に由来するのが好ましい。
飽和または不飽和脂肪酸またはＲ1／Ｒ2は、ヒドロキシ、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシＣ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ1〜Ｃ6アルカノイル、アミノ、ハロ、シアノ、アジド、オキソ、メルカプトおよびニトロなどよりなる群から独立に選ばれた５つまでの同じかまたは異なる置換基で任意に置換されていてよい。
式Ｉの最も好ましい化合物は、Ｒ1が−Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ（ＣＨ3）2）ＮＨ2または−Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ3）ＮＨ2であり、Ｒ2が−Ｃ（Ｏ）Ｃ9〜Ｃ17の飽和アルキルであるものである。
本明細書において「低級アルキル」とは１〜７の炭素原子を含む直鎖または分岐鎖アルキルラジカルをいい、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、イソ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、１−メチルブチル、２，２−ジメチルブチル、２−メチルペンチル、２，２−ジメチルプロピル、ｎ−ヘキシルなどを含むがこれらに限られるものではない。
本明細書において「Ｎ−保護基」または「Ｎ−保護」とは、合成手順のあいだの所望でない反応からアミノ酸またはペプチドのＮ−末端を保護することまたはアミノ基を保護することをいう。よく用いられるＮ−保護基はグリーン（Ｇreene）の「Ｐrotective Ｇroups in Ｏrganic Ｓynthesis」（ジョン・ウイリー・アンド・サンズ、ニューヨーク、１９８１）（参照のため本明細書中に引用する）に記載されている。Ｎ−保護基としては、たとえばホルミル、アセチル、プロピオニル、ピバロイル、ｔ−ブチルアセチル、２−クロロアセチル、２−ブロモアセチル、トリフルオロアセチル、トリクロロアセチル、フタリル、ｏ−ニトロフェノキシアセチル、α−クロロブチリル、ベンゾイル、４−クロロベンゾイル、４−ブロモベンゾイル、４−ニトロベンゾイルなどのアセチル基；ベンゼンスルホニル、ｐ−トルエンスルホニルなどのスルホニル基、ベンジルオキシカルボニル、ｐ−クロロベンジルオキシカルボニル、ｐ−メトキシベンジルオキシカルボニル、ｐ−ニトロベンジルオキシカルボニル、２−ニトロベンジルオキシカルボニル、ｐ−ブロモベンジルオキシカルボニル、３，４−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、４−メトキシベンジルオモシカルボニル、２−ニトロ−４，５−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、３，４，５−トリメトキシベンジルオキシカルボニル、１−（ｐ−ビフェニリル）−１−メチルエトキシカルボニル、α，α−ジメチル−３，５−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、ベンズヒドリルオキシカルボニル、ｔ−ブトキシカルボニル、ジイソプロピルメトキシカルボニル、イソプロピルオキシカルボニル、エトキシカルボニル、メトキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル、フェノキシカルボニル、４−ニトロフェノキシカルボニル、フルオレニル−９−メトキシカルボニル、シクロペンチルオキシカルボニル、アダマンチルオキシカルボニル、シクロヘキシルオキシカルボニル、フェニルチオカルボニルなどのカルバメート形成基；ベンジル、トリフェニルメチル、ベンジルオキシメチルなどのアルキル基；およびトリメチルシリルなどのシリル基が挙げられる。好ましいＮ−保護基としては、ホルミル、アセチル、ベンゾイル、ピバロイル、ｔ−ブチルアセチル、フェニルスルホニル、ベンジル、ｔ−ブトキシカルボニル（ＢＯＣ）およびベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）などが挙げられる。
本明細書において「活性エステル誘導体」とは、酸クロライドなどの酸ハライドをいい、ギ酸および酢酸に由来する無水物、イソブチルオキシカルボニルクロライドなどのアルコキシカルボニルハライドからの無水物、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド由来のエステル、Ｎ−ヒドロキシフタルイミド由来のエステル、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール由来のエステル、Ｎ−ヒドロキシ−５−ノルボルネン−２，３−ジカルボキサミド由来のエステル、２，４，５−トリクロロフェニル由来のエステルなどが挙げられるがこれらに限られるものではない。
式Ｉの好ましい化合物として、以下のものが挙げられる：
（Ｒ）−９−［２−（ブチリルオキシメチル）−４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−（４−アセチルブチリルオキシメチル）−４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−（ヘキサノイルオキシメチル）−４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）−２−（オクタノイルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）−２−（デカノイルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）−２−（ドデカノイルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）−２−（テトラデカノイルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）−２−（ヘキサデカノイルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）−２−（オクタデカノイルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−（エイコサノイルオキシメチル）−４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−（ドコサノイルオキシメチル）−４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）−２−（（９−テトラデセノイル）オキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−（（９−ヘキサデセノイル）オキシメチル）−４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）−２−（（６−オクタデセノイル）オキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）−２−（（９−オクタデセノイル）オキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−（（１１−エイコサノイル）オキシメチル）−４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−（（１３−ドコセノイル）オキシメチル）−４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［２−（ブチリルオキシメチル）−４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［２−（４−アセチルブチリルオキシメチル）−４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［２−（ヘキサノイルオキシメチル）−４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）−２−（オクタノイルオキシメチル）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）−２−（デカノイルオキシメチル）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）−２−（ドデカノイルオキシメチル）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）−２−（テトラデカノイルオキシメチル）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）−２−（ヘキサデカノイルオキシメチル）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）−２−（オクタデカノイルオキシメチル）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）−２−（エイコサノイルオキシメチル）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［２−（エイコサノイルオキシメチル）−４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［２−（ドコサノイルオキシメチル）−４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）−２−（（９−テトラデセノイル）オキシメチル）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［２−（（９−ヘキサデセノイル）オキシメチル）−４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）−２−（（６−オクタデセノイル）オキシメチル）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）−２−（（９−オクタデセノイル）オキシメチル）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［２−（（１１−エイコサノイル）オキシメチル）−４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）ブチル］プリン、または
（Ｒ）−２−アミノ−９−［２−（（１３−ドコセノイル）オキシメチル）−４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）ブチル］プリン、
および薬理学的に許容しうるその塩。
さらに好ましい化合物として、以下のものが挙げられる：
（Ｒ）−９−［２−（ブチリルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−（４−アセチルブチリルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−（ヘキサノイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−（オクタノイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）−ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−（デカノイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−（ドデカノイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−（テトラデカノイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−ヘキサデカノイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−（オクタデカノイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−（エイコサノイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−（エイコサノイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−（ドコサノイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−（（９−テトラデセノイル）オキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−（（９−ヘキサデセノイル）オキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−（（６−オクタデセノイル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−（（９−オクタデセノイル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−（（１１−エイコサノイル）オキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−（（１３−ドコセノイル）オキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［２−（ブチリルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［２−（４−アセチルブチリルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［２−（ヘキサノイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［２−（オクタノイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［２−（デカノイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［２−（ドデカノイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［２−（テトラデカノイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［２−（ヘキサデカノイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［２−（オクタデカノイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［２−（エイコサノイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［２−（ドコサノイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［２−（（９−テトラデセノイル）オキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［２−（（９−ヘキサデセノイル）オキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［２−（（６−オクタデセノイル）オキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［２−（（９−オクタデセノイル）オキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［２−（（１１−エイコセノイル）オキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］プリン、または
（Ｒ）−２−アミノ−９−［２−（（１３−ドコセノイル）オキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］プリン、
および薬理学的に許容しうるその塩。
式Ｉの他の好ましい化合物として、以下のものが挙げられる：
（Ｒ）−９−［４−（ブチリルオキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−（４−アセチルブチリルオキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−（ヘキサノイルオキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−（オクタノイルオキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）−ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−（デカノイルオキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−（ドデカノイルオキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−（テトラデカノイルオキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−（ヘキサデカノイルオキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−（オクタデカノイルオキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−（エイコサノイルオキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−（ドコサノイルオキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−（（９−テトラデセノイル）オキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−（（９−ヘキサデセノイル）オキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−（（６−オクタデセノイル）オキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−（（９−オクタデセノイル）オキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−（（１１−エイコセノイル）オキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−（（１３−ドコセノイル）オキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［４−（ブチリルオキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［４−（４−アセチルブチリルオキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［４−（ヘキサノイルオキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［４−（オクタノイルオキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［４−（デカノイルオキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［４−（ドデカノイルオキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［４−（テトラデカノイルオキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［４−（ヘキサデカノイルオキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［４−（オクタデカノイルオキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［４−（エイコサノイルオキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［４−（ドコサノイルオキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［４−（（９−テトラデセノイル）オキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［４−（（９−ヘキサデセノイル）オキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［４−（（６−オクタデセノイル）オキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［４−（（９−オクタデセノイル）オキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［４−（（１１−エイコサノイル）オキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］プリン、または
（Ｒ）−２−アミノ−９−［４−（（１３−ドコセノイル）オキシメチル）−２−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］プリン、
および薬理学的に許容しうるその塩。
式Ｉの化合物は塩を形成し、これは本発明の他の側面を形成する。式Ｉの化合物の適当な薬理学的に許容しうる塩としては、有機酸の塩、とりわけカルボン酸の塩が挙げられ、酢酸、トリフルオロ酢酸、乳酸、グルコン酸、クエン酸、酒石酸、マレイン酸、リンゴ酸、パントテン酸、イセチオン酸、アジピン酸、アルギン酸、アスパラギン酸、安息香酸、酪酸、ジグルコン酸、シクロペンタン酸、グルコヘプタン酸、グリセロリン酸、蓚酸、ヘプタン酸、ヘキサン酸、フマール酸、ニコチン酸、パルミチン酸（palmoate）、ペクチン酸、３−フェニルプロピオン酸、ピクリン酸、ピバル酸、プロピオン酸、酒石酸、ラクトビオン酸、ピボル酸（pivolate）、ショウノウ酸、ウンデカン酸およびコハク酸の塩を含むがこれらに限られるものではない、有機スルホン酸の塩、たとえばメタンスルホン酸、エタンスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ショウノウスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−クロロベンゼンスルホン酸およびｐ−トルエンスルホン酸の塩；および無機酸の塩、たとえば塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、重硫酸、ヘミ硫酸（hemisulfate）、チオシアン酸、過硫酸、リン酸およびスルホン酸の塩が挙げられる。塩酸塩が便利である。
式Ｉの化合物は水和物として単離できる。本発明の化合物は結晶形、好ましくは均一な結晶形にて単離でき、それゆえ本発明の他の側面は＞７０％、好ましくは＞９０％均一な結晶物質、たとえば＞９５％均一な結晶物質を含む実質的に純粋な結晶形にて式Ｉの化合物を提供する。
本発明の化合物は経口投与するのに特に適しているが、直腸経由、膣経由、鼻経由、局所的、経皮または非経口的に、たとえば筋肉内、静脈内または硬膜外で投与することもできる。本発明の化合物はたとえばカプセル中にて単独で投与することもできるが、一般に薬理学的に許容しうる担体または希釈剤とともに投与されるであろう。本発明は医薬組成物の調製法にも関し、式Ｉの化合物または薬理学的に許容しうるその塩を薬理学的に許容しうる担体または希釈剤と混合することからなる。
経口剤型は、通常の担体または結合剤、たとえばステアリン酸マグネシウム、粉乳（chalk）、デンプン、乳糖、ろう、ガムまたはゼラチンを用い、カプセル剤や錠剤などの単位投与剤型として調製する。リポソームまたは合成もしくは天然のポリマー、たとえばＨＰＭＣやＰＶＰなどを用い、除放製剤とすることができる。別法として、製剤はまた点鼻または点眼剤、シロップ剤、ゲル剤またはクリーム剤として提供され、任意に香料および／または保存剤および／または乳化剤とともに水、食塩水、エタノール、植物油またはグリセリンなどの通常のビヒクル中の液剤、懸濁剤、エマルジョン、水中油または油中水製剤を含む。
本発明の化合物は、一般に、０．１〜２００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲、有利には０．５〜１００ｍｇ／ｋｇ／日、さらに好ましくは１０〜５０ｍｇ／ｋｇ／日、たとえば１０〜２５ｍｇ／ｋｇ／日の範囲にて毎日の投与量として投与できる。通常の成人に対する典型的な投与割合は、ヘルペス感染の場合、約５０〜５００ｍｇ、たとえば３００ｍｇを１日当たり１回または２回であり、ＨＩＶ感染の場合は該量の２〜１０倍である。
抗ウイルス療法において慎重であるように、本発明の化合物は他の抗ウイルス剤、たとえばヘルペス適応症の場合、アシクロビル、バルシクロビル、ペンシクロビル、ファンシクロビル、ガンシクロビルおよびそのプロドラッグ、シドホビル、ホスカーネットなど、およびレトロウイルス適応症の場合、ＡＺＴ、ｄｄＩ、ｄｄＣ、ｄ４Ｔ、３ＴＣ、ホスカーネット、リトナビル、インジナビル、サキナビル、デラビリジン、ベルテックスＶＸ４７８、アグロンＡＧ１３４３などとともに投与できる。
本発明の化合物は新たに、すなわちＨ２Ｇ親化合物のエステル化によって調製でき、該Ｈ２Ｇ親化合物はヨーロッパ特許出願ＥＰ３４３１３３号（参照のため本明細書中に引用する）に開示された合成法により調製される。
Ｈ２Ｇの調製のための典型的な反応式を次頁に示す：
0004171069.tif 000005
工程１の縮合反応は、一般にＮａＯＨやＮａ2ＣＯ3などの塩基触媒を用い、ＤＭＦなどの溶媒中で行う。工程２は還元過程を含み、これはＬｉＢＨ4／テトラヒドロフランを用い、ｔ−ＢｕＯＨなどの溶媒中で行うことができる。工程３における塩素のアミノ基による置換は、アンモニア圧のもとで行うことができる。工程４ではアデノシンデアミナーゼ（固相支持体上に都合よく固定化することができる）を用いる。反応混合物を冷却すると未反応の異性体前駆体が溶液中に止まり、それによって純度を高めることができる。
Ｒ3が水素である本発明の化合物の出発物質は、ヨーロッパ特許ＥＰ１８６６４０号（その内容を参照のため本明細書中に引用する）に示された方法により調製できる。これら出発物質は、プリンの２−アミノ基を任意に上記通常のＮ−保護基、とりわけＢＯＣ（ｔ−ＢｕＯ−ＣＯ−）、Ｚ（ＢｎＯ−ＣＯ−）またはＰｈ3Ｃ−で保護した後、下記Ｈ２Ｇについて記載するようにアシル化することができる。
本発明の化合物は下記反応式ＡおよびＢに記載するようにＨ２Ｇから調製できる。
Ａ．直接アシル化
0004171069.tif 000006
反応式ＡはＲ1がアミノ酸に由来しＲ2が脂肪酸に由来する化合物の調製を示すが、逆の反応式はＲ1が脂肪酸に由来しＲ2がアミノ酸に由来する化合物に適用できる。上記反応式Ａに明確に示した変量において、Ｇはグアニンまたは６−デオキシグアニンであり、ＰＧは任意のＮ−保護基または水素であり、Ｒ1＊はバリンまたはイソロイシン側鎖であり、Ｒ2＊は脂肪酸側鎖である。Ｈ２Ｇは上記において出発物質として示してあるが、このものはもちろんＲ3またはプリンの２位にて通常のＮ−保護基で任意に保護されていてよい（示していない）。Ｈ２Ｇ（誘導体）は第一の工程において活性化Ｒ1α−アミノ酸誘導体（以下にさらに記載する）とジメチルホルムアミドやピリジンなどの溶媒中で反応してモノアシル化生成物を得る。このＲ1α−アミノ酸はＮ−ＢＯＣまたはＮ−ＣＢｚなどで適切にＮ−保護してよい。この第一のアシル化は、制御された条件下、Ｈ２Ｇの側鎖上の側鎖４−ヒドロキシ基で優先的に起こるようにすることができる。これら制御された条件は、たとえばとりわけアシル化剤の試薬濃度や添加速度を操作することにより、温度を下げることにより、または溶媒を選択することにより達成できる。反応はＴＬＣにより追跡し、制御条件をモニターすることができる。
精製後、第一のエステル化工程と同様の手順を用い、Ｒ1モノアシル化化合物を側鎖２−ＣＨ2ＯＨ基上で適当な活性化脂肪酸誘導体でさらにアシル化してジアシル化生成物を得る。ついで、このジエステル生成物を、たとえばトリフルオロ酢酸、ＨＣｌ（水性）／ジオキサンを用いる通常の脱保護処理または触媒の存在下での水素化に供して式Ｉの所望の化合物を得る。この化合物は脱保護条件に依存して塩の形態であってよい。
種々のアシル化に用いる活性化Ｒ1／Ｒ2酸誘導体としては、たとえば、酸ハライド、酸無水物、活性化酸エステル、またはカップリング剤、たとえばジシクロヘキシルカルボジイミドの存在下の酸が挙げられ、この場合、それぞれにおける「酸」は対応するＲ1／Ｒ2アミノ酸またはＲ1／Ｒ2脂肪酸を表す。代表的な活性化酸誘導体としては、酸クロライド、ギ酸および酢酸由来の混合無水物、イソブチルオキシカルボニルクロライドなどのアルコキシカルボニルハライド由来の無水物、Ｎ−ヒドロキシスクシンアミド由来のエステル、Ｎ−ヒドロキシフタルイミド由来のエステル、Ｎ−ヒドロキシ−５−ノルボルネン−２，３−ジカルボキサミド由来のエステル、２，４，５−トリクロロフェノール由来のエステルなどが挙げられる。
Ｂ．側鎖４−ヒドロキシ基の保護を経由するアシル化：
0004171069.tif 000007
（式中、Ｇ、ＰＧ、Ｒ1＊およびＲ2＊は反応式Ａと同じ）
反応式ＢはＲ1がアミノ酸に由来しＲ2が脂肪酸に由来する化合物の調製を示すべく例示したが、逆の反応式はＲ1が脂肪酸に由来しＲ2がアミノ酸に由来する化合物に適用できるであろう。この反応式は嵩ばった保護基によるＨ２Ｇ側鎖４−ヒドロキシ基の位置選択的な保護に依存している。上記反応式Ｂにおいて、このことはｔ−ブチルジフェニルシリルとして示したが、トリチル、９−（９−フェニル）キサンテニル、１，１−ビス（４−メチルフェニル）−１’−ピレニルメチルもまた適している。得られる生成物を上記反応式Ａに記載したのと同様の試薬および手順を用いて側鎖２−ヒドロキシメチル基にてアシル化するが、この場合、活性化酸誘導体はＲ2脂肪酸、たとえばミリスチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、エライジン酸クロライドなどである。かくしてモノアシル化した化合物を適当な脱保護処理に供して側鎖４−ヒドロキシ保護基を除去するが、このことは位置選択的保護基に依存したＨＦ／ピリジンなどの試薬、上記反応条件の操作、すなわち試薬濃度、添加速度、温度および溶媒を用いて高度に選択的な仕方で行うことができる。ついで、遊離になった側鎖４−ヒドロキシ基を上記反応式Ａに記載したのと同様にして活性化α−アミノ酸でアシル化する。
本明細書におけるたとえば反応式Ａ、Ｂ、ＣまたはＤにおいてＲ1／Ｒ2のアミノ酸エステルを導入するための他の方法としては、国際特許出願第ＷＯ９４／２９３１１号に記載の２−オキサ−４−アザ−シクロアルカン−１，３−ジオン法が挙げられる。
本明細書におけるたとえば反応式Ａ、Ｂ、ＣまたはＤにおいてＲ1／Ｒ2の脂肪酸エステルを導入するための他の方法としては、ＳＰ４３５固定化カンジダ・アンタークチクス（Ｃandida antarcticus）（ノボ・ノルディスク）、ブタ膵リパーゼまたはカンジダ・ルゴサ（Ｃandida rugosa）リパーゼなどのリパーゼを用いたプレパラティブ・バイオトランスフォーメーションズ（Ｐreparative Ｂiotransformations）１．１１．８（ロバーツ（Ｓ．Ｍ．Ｒoberts）編、ウイリー・アンド・サンズ、ニューヨーク、１９９５）に記載の酵素的経路によるものが挙げられる。酵素的なアシル化は、他のアシル基またはプリンの２−アミン上でのＮ−保護および脱保護工程を避けることが望ましい場合に特に都合がよい。
式ＩにおいてＲ3が水素である化合物を得る他の経路は、式Ｉの対応グアニン化合物（Ｒ1／Ｒ2のアミノ酸エステル残基はＢＯＣなどの通常のＮ−保護基で任意に保護してある）をハロなどの活性化剤で６−活性化することである。ついで、かくして活性化された６−プリンをたとえばパラジウム触媒でプリンに還元し、脱保護して所望の６−デオキシＨ２Ｇジ−エステルとする。
かくして本発明の他の側面は、
（ａ）式ＩにおいてＲ1およびＲ2がそれぞれ水素である化合物のプリン２位および／または６位を任意にＮ−保護し、
（ｂ）（i）任意にＮ−保護したバリンまたはイソロイシン基、
（ii）任意に置換した飽和またはモノ不飽和のＣ3〜Ｃ21ＣＯＯＨ誘導体、または
（iii）位置選択的な保護基
のいずれかで式Ｉの化合物を側鎖４−ヒドロキシ基にて位置選択的にアシル化し、
（ｃ）（i）任意にＮ−保護したバリンまたはイソロイシン誘導体、または
（ii）任意に置換した飽和またはモノ不飽和のＣ3〜Ｃ21ＣＯＯＨ誘導体
で側鎖２−ヒドロキシメチル基をアシル化し、
（ｄ）Ｒ1に位置選択的な保護基が存在する場合には、これを
（i）任意にＮ−保護したバリンまたはイソロイシン基、または
（ii）任意に置換した飽和またはモノ不飽和のＣ3〜Ｃ21ＣＯＯＨ誘導体
で置換し、ついで
（ｅ）得られた化合物を必要なら脱保護する
ことからなる、式Ｉの化合物の製造方法を提供する。
上記反応式ＡおよびＢではアミノ酸エステルおよび脂肪酸エステルを段階的に加える選択的なアシル化を採用している。式Ｉの化合物の別の製造方法は、両方のアシル基が同じであるジアシル化Ｈ２Ｇ誘導体を出発物質とし、これらアシル基の一方を選択的に除去してモノアシル中間体を得、ついで第二の異なるアシル基を上記反応式ＡおよびＢと同様にしてアシル化するものである。
従って、本発明の他の側面は、上記式Ｉの化合物の製造方法を提供するものであり、該方法は、
（Ａ）式ＩにおいてＲ1およびＲ2がともにバリルまたはイソロイシルエステル（任意にＮ−保護されている）であるかまたはＲ1およびＲ2がともに−Ｃ（＝Ｏ）Ｃ3〜Ｃ21飽和またはモノ不飽和の任意に置換されたアルキルであるジアシル化合物をモノ脱アシル化し、ついで
（Ｂ）かくして遊離になった側鎖４−ヒドロキシまたは側鎖２−ヒドロキシメチル基を対応のバリル、イソロイシルまたは−Ｃ（＝Ｏ）Ｃ3〜Ｃ21飽和またはモノ不飽和の任意に置換されたアルキルでアシル化し、ついで
（Ｃ）必要なら脱保護する
ことからなる。
この別法は、ジアシル化Ｈ２Ｇ誘導体の調製が容易である点および精製工程が殆どまたは全く必要でない点で有利である。ジアシル化Ｈ２Ｇ誘導体のアシル基の一方のみの選択的な除去は、反応条件、とりわけ温度、反応物の添加速度および塩基の選択を操作することにより達成できる。
それゆえ、この別法の合成経路に利用できる化合物は、式：
0004171069.tif 000008
（式中、Ｒ1およびＲ2はバリルまたはイソロイシル（任意にＮ−保護されている）または−Ｃ（＝Ｏ）Ｃ3〜Ｃ21飽和またはモノ不飽和の任意に置換されたアルキル；Ｒ3はＯＨまたはＨ）
を有するものである。
この別法において合成を容易にするため、Ｒ1およびＲ2はともに最初から同じであるのが好ましく、同じアミノ酸エステルであるのが最も好ましい。かかるジ−アミノ酸エステルは、その調製において一般にＮ−保護され、この条件にて選択的な脱アシル化工程に直接用いることができる。別のやり方として、そのようなＮ−保護ジ−アミノアシル化Ｈ２Ｇ誘導体は、下記に記載するように、脱保護し、必要に応じて再保護することができる。それゆえ、保護されていないジ−アミノアシルＨ２Ｇ誘導体は下記化合物の一つを含む：
（Ｒ）−９−［２−（Ｌ−イソロイシルオキシメチル）−４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−（Ｌ−バリルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）−２−（Ｌ−イソロイシルオキシメチル）ブチル］プリン、および
（Ｒ）−２−アミノ−９−［４−（Ｌ−バリルオキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］プリン。
これら保護されていないＨ２Ｇジアシル化誘導体はアシル基の一方の（典型的には側鎖４−位アシル）選択的な脱アシル化に直接供することができ、ついで遊離した４−ヒドロキシを上記と同様にして酵素的にアシル化する。別のやり方として、保護されていないＨ２Ｇジアシル化誘導体を再保護し、ついで選択的な脱アシル化に供し、ついで今度は反応式ＡおよびＢに記載したような脂肪酸エステルによる通常のアシル化を行うことができる。都合のよいことには、かかる再保護工程はその後のアシル化に適した性質を有する異なるＮ−保護基を用いて行う。たとえば、ジ−アミノ酸Ｈ２Ｇ誘導体を調製する場合には、保護基の脂肪親和性の性質がアシル化生成物の分離を助けるのでＦｍｏｃなどの脂肪親和性のＮ−保護基を用いるのが都合がよい。一方、Ｆｍｏｃの脂肪親和性の性質は脂肪酸でアシル化を行う際には有用性はほとんどなく、それゆえＢＯＣなどの別のＮ−保護基を用いてジアシル化Ｈ２Ｇを再保護するのが都合がよい。
式Ｉの化合物の製造を上記本発明の第一の側面の方法における工程（ｂ）（i）、（ii）または（iii）の新規なモノアシル化中間体から開始できることもまた明らかであろう。それゆえ、これら化合物は、式：
0004171069.tif 000009
（式中、Ｒ1およびＲ2の一方は
（i）−Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ（ＣＨ3）2）ＮＨ2または−Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ3）ＮＨ2、
（ii）−Ｃ（＝Ｏ）Ｃ3〜Ｃ21飽和またはモノ不飽和の任意に置換されたアルキル、または
（iii）位置選択的な保護基；
Ｒ1およびＲ2の他方は水素；
Ｒ3はＯＨまたはＨ）
で示されるものである。
それゆえ、有用な化合物としては以下のものが挙げられる：
（Ｒ）−９−［２−ヒドロキシメチル−４−（ｔ−ブチルジフェニルシリル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−ヒドロキシメチル−４−（トリチルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−ヒドロキシメチル−４−（９−（９−フェニル）キサンテニルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−ヒドロキシメチル−４−（１，１−ビス（４−メチルフェニル）−１’−ピレニルメチルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−ヒドロキシメチル−４−（デカノイルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−ヒドロキシメチル）−４−（ドデカノイルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−ヒドロキシメチル−４−（テトラデカノイルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−ヒドロキシメチル）−４−（ヘキサデカノイルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−ヒドロキシメチル−４−（オクタデカノイルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−ヒドロキシメチル）−４−（エイコサノイルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−ヒドロキシメチル−４−（ドコサノイルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−ヒドロキシ−２−（デカノイルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−ヒドロキシ−２−（ドデカノイルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−ヒドロキシ−２−（テトラデカノイルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−ヒドロキシ−２−（ヘキサデカノイルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−ヒドロキシ−２−（オクタデカノイルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−ヒドロキシ−２−（エイコサノイルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−ヒドロキシ−２−（ドコサノイルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−ヒドロキシメチル−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−ヒドロキシメチル）−４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−ヒドロキシ−２−（Ｌ−イソロイシルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［４−ヒドロキシ−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［２−ヒドロキシメチル−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［２−ヒドロキシメチル）−４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）ブチル］プリン、
（Ｒ）−２−アミノ−９−［４−ヒドロキシ−２−（Ｌ−イソロイシルオキシメチル）ブチル］プリンおよび
（Ｒ）−２−アミノ−９−［４−ヒドロキシ−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］プリン。
上記本発明の第一の側面の方法の工程（ｃ）における位置選択的に保護した側鎖４−ヒドロキシ中間体もまた新規な化合物である。
それゆえ、有用な化合物としては以下のものが挙げられる：
（Ｒ）−９−［２−デカノイルオキシメチル−４−（ｔ−ブチルジフェニルシリル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−ドデカノイルオキシメチル−４−（ｔ−ブチルジフェニルシリル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−テトラデカノイルオキシメチル−４−（ｔ−ブチルジフェニルシリル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−ヘキサデカノイルオキシメチル−４−（ｔ−ブチルジフェニルシリル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−オクタデカノイルオキシメチル−４−（ｔ−ブチルジフェニルシリル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−エイコサノイルオキシメチル−４−（ｔ−ブチルジフェニルシリル）ブチル］グアニン、
（Ｒ）−９−［２−ドコサノイルオキシメチル−４−（ｔ−ブチルジフェニルシリル）ブチル］グアニン。
式ＩにおいてＲ3が−ＯＨである本発明の化合物の他の製造方法を反応式Ｃに示す。
0004171069.tif 000010
反応式Ｃを参照すると、マロン酸エステル１（Ｒ4およびＲ5は低級アルキルまたはベンジルなど）を約−４０℃〜約１９０℃の温度にて不活性溶媒（たとえば、ＤＭＦまたはＴＨＦまたはジオキサンまたはジオキソランまたはＮ−メチルピロリドンなど）中の約０．５〜約２．０モル当量の塩基（たとえば、カリウムｔ−ブトキシドまたはナトリウムエトキシドまたはＮａＨまたはＫＨなど）の存在下、約０．５〜約２．０モル当量のアセタール２（Ｒ6およびＲ7は低級アルキルまたはベンジルなどであるかまたはＲ6とＲ7とは一緒になって−ＣＨ2ＣＨ2−または−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−または−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−、Ｘ1は脱離基（たとえば、Ｃｌ、ＢｒまたはＩ、またはメタンスルホネート、トリフラート、ｐ−トルエンスルホネート、ベンゼンスルホネートなどのスルホネート））との反応によりアルキル化してアルキル化マロン酸エステル３を得る。
３を約−２０℃〜約１００℃の温度、不活性溶媒（たとえば、ＴＨＦまたはメチルｔ−ブチルエーテルまたはｔ−ＢｕＯＨなど）中にて約０．５〜約４．０モル当量のエステル→アルコール還元剤（たとえば、ＬｉＢＨ4またはＣａ（ＢＨ4）2またはＮａＢＨ4またはＬｉＡｌＨ4など）で還元するとジオール４を得る。リパーゼ（たとえば、リパーゼＰＳ−３０またはリパーゼＰＰＬまたはリパーゼＣＣＬなど）またはホスホリパーゼ（たとえば、ホスホリパーゼＤなど）の存在下での約１．０〜約２０．０モル当量のビニルエステル５（Ｒ8はＣ3−Ｃ21飽和またはモノ不飽和の任意に置換されたアルキル）との反応による４の酵素的エステル化によりエステル６の所望の立体異性体を得る。この反応は溶媒の不在下でも不活性な溶媒（たとえば、メチルｔ−ブチルエーテルまたはトルエンまたはヘキサンなど）の存在下でも行うことができる。この反応は約−２０℃〜約８０℃の温度にて行う。
６を約−２５℃〜約１００℃の温度にて不活性溶媒（たとえば、メチレンクロライドまたはトルエンまたは酢酸エチルなど）中でハロゲン化剤（たとえば、ＮＢＳ／Ｐ（Ｐｈ）3またはＮＣＳ／Ｐ（Ｐｈ）3またはＰＯＣｌ3またはＮＣＳ／Ｐ（Ｐｈ）3／ＮａＩなど、アセトン中）と反応させるかまたは不活性溶媒（たとえば、メチレンクロライドまたはトルエンまたは酢酸エチルなど）中、約１．０〜約４．０モル当量の塩基（たとえば、トリエチルアミンまたは炭酸カリウムまたはピリジンまたはジメチルアミノピリジンまたはエチルジイソプロピルアミンなど）の存在下で約０．８〜約２．０モル当量のスルホニルハライド（たとえば、ベンゼンスルホニルクロライド、トルエンスルホニルクロライドまたはメタンスルホニルクロライドなど）と反応させることにより、６のアルコール置換基を脱離基（たとえば、ハロゲンまたはスルホネート）に変換してエステル７（Ｘ2はハロゲンまたはスルホネート脱離基）を得る。
７を約−２５℃〜約１４０℃にて不活性溶媒（たとえば、ＤＭＦまたはＴＨＦまたはアセトニトリルまたはＮ−メチルピロリドンまたはエタノールなど）中、約１．０〜約６．０モル当量の塩基（たとえば、炭酸カリウムまたはＮａＨまたはＫＨまたはＮａＯＨまたはＫＯＨまたはリチウムジイソプロピルアミドなど）の存在下で約０．９〜約２．０モル当量の２−アミノ−４−クロロプリン８と反応させて置換プリン９を得る。
別のやり方として、アルコール６を２−アミノ−４−クロロプリン８とミツノブカップリングして（たとえば、Ｐ（Ｐｈ）3／ジエチルアジドカルボキシレート）９を得る。
９を約−２５℃〜約１５０℃の温度にて不活性溶媒（たとえば、ＴＨＦまたはＤＭＦなど）中、約１．０〜約６．０モル当量の塩基（たとえば、カリウムｔ−ブトキシドまたは炭酸カリウムまたはＮａＨまたはＫＨまたはリチウムジイソプロピルアミドなど）の存在下で約２．０〜約２０モル当量のアルコールＲ9ＯＨ（Ｒ9はベンジルなどのアルコール保護基）と反応させてアルコール１０を得る。
１０のアルコール保護基Ｒ9を除去して（たとえば、Ｐｄ/ＣまたはＰｄ（ＯＨ）2などの水素化触媒の存在下、エタノールやベンジルアルコールやメタノールやＴＨＦなどの不活性溶媒中での接触水素化により）置換グアニン１１を得る。
１１を約−２５℃〜約１００℃の温度にて（ａ）不活性溶媒（たとえば、ＴＨＦまたはＤＭＦなど）中、約０．８〜約２．０モル当量のＲ10ＣＯＯＨおよびカップリング試薬（たとえば、ＤＣＣ／ＤＭＡＰなど）と反応させるか、または（ｂ）不活性溶媒（たとえば、メチレンクロライドまたはＴＨＦまたはピリジンまたはアセトニトリルまたはＤＭＦなど）中、約０〜約３．０モル当量の塩基（たとえば、ピリジンまたはトリエチルアミンまたはエチルジイソプロピルアミンまたはＤＢＵまたは炭酸カリウムなど）の存在下で約０．８〜約２．０モル当量のＲ10ＣＯＯＨの活性化誘導体（たとえば、酸クロライドまたはＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステルまたはＲ10Ｃ（Ｏ）ＯＣ（Ｏ）Ｒ10など）と反応させることによりエステル化してエステル１２を得る。
１２をまず不活性溶媒（たとえば、ＴＨＦ／Ｈ2Ｏまたはメチレンクロライド／Ｈ2Ｏまたは酢酸エチル／Ｈ2Ｏまたはエタノール／Ｈ2Ｏまたはメタノール／Ｈ2Ｏなど）中、約０．１〜約１０．０モル当量の酸（たとえば、トリフルオロメタンスルホン酸またはＨＣｌまたは酢酸または硫酸など）と反応させることにより１２のアセタール置換基を脱保護し、得られるアルデヒドを還元する。得られた粗製の反応混合物に、約０．１〜約１０．０モル当量の塩基（たとえば、重炭酸ナトリウムまたは炭酸カリウムまたはトリエチルアミンまたはピリジンまたはＫＯＨなど）、さらなる不活性溶媒（たとえば、ＴＨＦおよびまたはメチレンクロライドまたは酢酸エチルまたはメチルｔ−ブチルエーテルまたはイソプロパノールなど）および約０．３〜約５．０モル当量のアルデヒド還元剤（たとえば、水素化ホウ素ナトリウムまたはＲａＮｉ／Ｈ2など）を約−２５℃〜約１００℃の温度にて加えてアルコール１３を得る。
１３を約２５℃〜約１００℃の温度にて不活性溶媒（たとえば、ＴＨＦまたはジオキサンまたはジオキソランまたはＤＭＦまたはメチレンクロライドなど）中、約０．８〜約３．０モル当量のＮ−保護アミノ酸Ｐ1ＮＨＣＨ（Ｒ11）ＣＯＯＨまたはその活性化誘導体（Ｐ1はＮ−保護基、Ｒ11はイソプロピルまたはイソブチル）と反応させてアルコール１４を得る。１４をＮ−脱保護して式ＩにおいてＲ3が−ＯＨである本発明の化合物を得る。
別のやり方として、化合物１３をＰ1ＮＨＣＨ（Ｒ11）ＣＯＯＨ由来の対称無水物（すなわち、Ｐ1ＮＨＣＨ（Ｒ11）Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ（Ｏ）ＣＨ（Ｒ11）ＮＨＰ1）と反応させてＲ3が−ＯＨである１を得ることができる。
Ｒ3が−ＯＨである化合物の他の製造方法を反応式Ｄに示す。
0004171069.tif 000011
マロン酸エステル１（Ｒ4およびＲ5は低級アルキルまたはベンジルなど）を約−４０℃〜約１９０℃の温度にて不活性溶媒（たとえば、ＤＭＦまたはＴＨＦまたはジオキサンまたはジオキソランまたはＮ−メチルピロリドンなど）中、約０．５〜約２．０モル当量の塩基（たとえば、カリウムｔ−ブトキシドまたはナトリウムエトキシドまたはＮａＨまたはＫＨなど）の存在下、約０．５〜約２．０モル当量のエーテル１５（Ｘ1は脱離基（たとえば、Ｃｌ、ＢｒまたはＩ、またはメタンスルホネート、トリフラート、ｐ−トルエンスルホネート、ベンゼンスルホネートなどのスルホネート）、Ｒ12は−ＣＨ（Ｐｈ）2、−Ｃ（Ｐｈ）3または−Ｓｉ（ｔ−Ｂｕ）（Ｍｅ）2など）との反応によりアルキル化してアルキル化マロン酸エステル１６を得る。
１６を約−２０℃〜約１００℃の温度、不活性溶媒（たとえば、ＴＨＦまたはメチルｔ−ブチルエーテルまたはエタノールまたはｔ−ブタノールなど）中にて約０．５〜約４．０モル当量のエステル→アルコール還元剤（たとえば、ＬｉＢＨ4またはＣａ（ＢＨ4）2またはＮａＢＨ4またはＬｉＡｌＨ4など）で還元するとジオール１７を得る。リパーゼ（たとえば、リパーゼＰＳ−３０またはリパーゼＰＰＬまたはリパーゼＣＣＬなど）またはホスホリパーゼ（たとえば、ホスホリパーゼＤなど）の存在下での約１．０〜約２０．０モル当量のビニルエステル５（Ｒ8はＣ3−Ｃ21飽和またはモノ不飽和の任意に置換されたアルキル）との反応による１７の酵素的エステル化によりエステル１８の所望の立体異性体を得る。この反応は溶媒の不在下でも不活性な溶媒（たとえば、メチルｔ−ブチルエーテルまたはトルエンまたはヘキサンなど）の存在下でも行うことができる。この反応は約−２０℃〜約８０℃の温度にて行う。
１８を約−２５℃〜約１００℃の温度にて不活性溶媒（たとえば、メチレンクロライドまたはトルエンまたは酢酸エチルなど）中でハロゲン化剤（たとえば、ＮＢＳ／Ｐ（Ｐｈ）3またはＮＣＳ／Ｐ（Ｐｈ）3またはＰＯＣｌ3またはＮＣＳ／Ｐ（Ｐｈ）3／ＮａＩなど、アセトン中）と反応させるかまたは不活性溶媒（たとえば、メチレンクロライドまたはトルエンまたは酢酸エチルまたはピリジンまたはメチルｔ−ブチルエーテルなど）の存在下、約１．０〜約４．０モル当量の塩基（たとえば、トリエチルアミンまたは炭酸カリウムまたはピリジンまたはジメチルアミノピリジンまたはエチルジイソプロピルアミンなど）の存在下で約０．８〜約２．０モル当量のスルホニルハライド（たとえば、ベンゼンスルホニルクロライド、トルエンスルホニルクロライドまたはメタンスルホニルクロライドなど）と反応させることにより、１８のアルコール置換基を脱離基（たとえば、ハロゲンまたはスルホネート）に変換してエステル１９（Ｘ2はハロゲンまたはスルホネート脱離基）を得る。
１９を約−２５℃〜約１４０℃の温度にて不活性溶媒（たとえば、ＤＭＦまたはＴＨＦまたはアセトニトリルまたはＮ−メチルピロリドンまたはエタノールなど）中、約１．０〜約６．０モル当量の塩基（たとえば、炭酸カリウムまたはＮａＨまたはＫＨまたはＮａＯＨまたはＫＯＨまたはリチウムジイソプロピルアミドなど）の存在下で約０．９〜約２．０モル当量の２−アミノ−４−クロロプリン８と反応させて置換プリン２０を得る。
別のやり方として、アルコール１８を２−アミノ−４−クロロプリン８とミツノブカップリングして（たとえば、Ｐ（Ｐｈ）3／ジエチルアジドカルボキシレート）２０を得る。
２０を約−２５℃〜約１５０℃の温度にて不活性溶媒（たとえば、ＴＨＦまたはＤＭＦなど）中、約１．０〜約６．０モル当量の塩基（たとえば、カリウムｔ−ブトキシドまたは炭酸カリウムまたはＮａＨまたはＫＨまたはリチウムジイソプロピルアミドなど）の存在下で約２．０〜約２０．０モル当量のアルコールＲ9ＯＨ（Ｒ9はベンジルなどのアルコール保護基）と反応させてアルコール２１を得る。
２１のアルコール保護基Ｒ9を除去して（たとえば、Ｐｄ/ＣまたはＰｄ（ＯＨ）2などの水素化触媒の存在下、エタノールやベンジルアルコールやメタノールやＴＨＦなどの不活性溶媒中での接触水素化により）置換グアニン２２を得る。
２３を（ａ）還元剤（たとえば、ＨＣＯ2ＨおよびＰｄ／Ｃなど）と反応させるか（Ｒ12が−ＣＨ（Ｐｈ）2または−Ｃ（Ｐｈ）3の場合）、または（ｂ）脱シリル化剤（たとえば、Ｂｕ4ＮＦなど）と反応させる（Ｒ12が−Ｓｉ（ｔ−Ｂｕ）（Ｍｅ）2の場合）ことにより２３のエーテル置換基を脱保護して１３を得る。
アルコール１３は反応式Ｃに示したように１に変換できる。
さらに他のやり方は、アルコール４または１７をビニルエステルＣＨ2＝ＣＨ−ＯＣ（Ｏ）Ｒ10（すなわち、反応式ＣおよびＤにおいてＲ8＝Ｒ10）で酵素的にエステル化して６または１８中に最終生成物Ｉの所望のカルボン酸エステルを直接導入することを含む。このことにより、９〜１２または２０〜２３に含まれるエステル加水分解および再エステル化をなしですませることができる。
反応式ＣおよびＤの手順は、非環状側鎖の各ヒドロキシル基が異なるヒドロキシ保護基または前駆体基の使用により識別されるという事実により特徴付けられる。このことにより、アミノ酸基かまたは脂肪酸基のいずれかによる各ヒドロキシ基の選択的なアシル化が可能となる。
反応式ＣおよびＤはＲ1がアミノ酸由来でありＲ2が脂肪酸由来である本発明の化合物の態様を参照して説明および記載してある。しかしながら、それぞれの反対の反応式がＲ1が脂肪酸由来でありＲ2がアミノ酸由来である化合物に適用しうることが明らかであろう。
発明の詳細な記載
ここで、本発明は下記の限定されない実施例、比較例および添付の図面を参照して例示による説明されるであろう。添付の図面において：
図１は、生物学的実施例３でさらに説明するように、本発明の化合物またはＨ２Ｇの他のプロドラッグ誘導体を投与したカニクイザルでの血漿Ｈ２Ｇレベルを時間の関数として表したものである；
図２は、生物学的実施例４でさらに説明するように、種々の投与量の本発明の化合物または従来技術の抗ウイルス剤を投与した単純ヘルペス感染マウスでの生存率を時間の関数として表したものである。
実施例１
（Ｒ）−９−［２−（ステアロイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン
本実施例は、製造反応式Ａの適用を説明するものである。
（ａ）（Ｒ）−９−［４−（Ｎ−tert−ブトキシカルボニル−Ｌ−バリルオキシ）−２−（ヒドロキシメチル）ブチル］グアニン
Ｎ−ｔ−ＢＯＣ−Ｌ−バリン（５．５８ｇ、２５．７ミリモル）、ＤＭＡＰ（０．３１４ｇ、２．５７ミリモル）およびＤＣＣ（６．５２ｇ、３１．６ミリモル）を加える前に、Ｈ２Ｇ（５ｇ、１９．７ミリモル）をＤＭＦ（３００ｍｌ）中に加熱下で溶解し、室温に冷却した。この混合物を室温にて２４時間撹拌し、ついで濾過した。生成物をシリカゲル上のクロマトグラフィーにかけ、ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨで溶出して所望の中間体生成物２．４ｇを得た。
0004171069.tif 000012
（ｂ）（Ｒ）−９−［４−（Ｎ−tert−ブトキシカルボニル−Ｌ−バリルオキシ）−２−（ステアロイルオキシメチル）ブチル］グアニン
工程（ａ）の生成物（１８５ｍｇ、０．４１ミリモル）をピリジン（５ｍｌ）に溶解し、溶液を氷浴中で冷却し、ステアロイルクロライド（１７９μｌ、０．５３１ミリモル）を加えた。溶液を氷浴中にて２時間保持し、ついで室温にて１時間保持した。ついで、これを蒸発させ、シリカゲル上のクロマトグラフィーにかけた。ジクロロメタン／メタノールで溶出して所望の中間体生成物１４３ｍｇを得た。
（ｃ）（Ｒ）−９−［２−（ステアロイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン
工程（ｂ）の生成物（１３８ｍｇ、０．１９２ミリモル）を氷浴中で冷却し、トリフルオロ酢酸（５ｍｌ）を加えた。溶液を氷浴中で４５分間保持し、ついで蒸発させて油状物を得た。水（０．５〜１ｍｌ）を加え、２度蒸発させた。残渣をもう１度水（５ｍｌ）に溶解し、濾過し、凍結乾燥して所望の生成物１４８ｍｇをビストリフルオロ酢酸塩として得た。
0004171069.tif 000013
実施例２
（Ｒ）−９−［２−（ミリストイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン
工程（ｂ）においてステアロイルクロライドの代わりにミリストイルクロライドを用い、実施例１と同様にして標記化合物をビストリフルオロ酢酸塩として得た。
0004171069.tif 000014
実施例３
（Ｒ）−９−［２−（オレオイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン
工程（ｂ）においてステアロイルクロライドの代わりにオレオイルクロライドを用い、実施例１と同様にして標記化合物をビストリフルオロ酢酸塩として得た。
0004171069.tif 000015
実施例４
（Ｒ）−９−［２−（ブチリルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン
（ａ）（Ｒ）−９−［４−（Ｎ−tert−ブトキシカルボニル−Ｌ−バリルオキシ）−２−（ブチリルオキシメチル）ブチル］グアニン
ＤＣＣ（１１０ｍｇ、０．５３ミリモル）をジクロロメタン（１０ｍｌ）に溶解し、酪酸（８２ｍｇ、０．９３ミリモル）を加えた。室温で４時間後、混合物を濾過し、濾液を蒸発させた。残渣をピリジン（５ｍｌ）に溶解し、（Ｒ）−９−［４−（Ｎ−tert−ブトキシカルボニル−Ｌ−バリルオキシ）−２−ヒドロキシメチル］ブチル］グアニン（２００ｍｇ、０．４４ミリモル）（実施例１、工程（ａ））を加えた。混合物を室温にて１２０時間撹拌した。ＴＬＣにより反応は不完全であったので上記手順を用いてさらに無水物を調製した。この無水物を加え、混合物をさらに２０時間撹拌した。反応混合物を蒸発させ、まずシリカゲル上、ついで酸化アルミニウム上のクロマトグラフィーにかけ、両方の場合にジクロロメタン／メタノールで溶出して中間体生成物７９ｍｇを得た。
（ｂ）（Ｒ）−９−［２−（ブチリルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン
工程（ａ）の中間体生成物を実施例１工程（ｃ）と同様にして脱保護して所望の生成物８４ｍｇをビストリフルオロ酢酸塩として得た。
0004171069.tif 000016
実施例５
（Ｒ）−９−［２−（デカノイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン
工程（ｂ）においてステアロイルクロライドの代わりにデカノイルクロライドを用い、実施例１と同様にして標記化合物をビストリフルオロ酢酸塩として得た。
0004171069.tif 000017
実施例６
（Ｒ）−９−［２−（ドコサノイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン
工程（ｂ）においてステアリルクロライドと溶媒としてのＤＭＦとジクロロメタンとの混合物との代わりに実施例１工程（ａ）のＤＭＡＰ／ＤＣＣ条件をドコサン酸とともに用い、実施例１と同様にして標記化合物をビストリフルオロ酢酸塩として得た。
0004171069.tif 000018
実施例７
（Ｒ）−９−［４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）−２−（ステアロイルオキシメチル）ブチル］グアニン
本実施例は、製造反応式Ｂの適用を説明するものである。
（ａ）（Ｒ）−９−［２−ヒドロキシメチル４−（ｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）ブチル］グアニン
Ｈ２Ｇ（２ｇ、８ミリモル）を乾燥ＤＭＦとともに２回共蒸発させ、ついで乾燥ＤＭＦ（１２０ｍｌ）およびピリジン（１ｍｌ）中に懸濁した。懸濁液にジクロロメタン（２０ｍｌ）中のｔ−ブチルジフェニルクロロシラン（２．１ｍｌ、８．２ミリモル）を０℃にて３０分間かけて滴下した。滴下完了時点で反応混合物は透明な溶液となった。反応を０℃で２時間続け、ついで４℃で一夜保持した。反応液にメタノール（５ｍｌ）を加えた。室温で２０分後、反応混合物を小容量まで蒸発させ、炭酸水素ナトリウム水溶液に注ぎ、ジクロロメタンで２回抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空蒸発させた。生成物を、ＭｅＯＨ濃度を段階的に大きくするメタノール／ジクロロメタン系を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより単離した。生成物をＣＨ2Ｃｌ2中の７％ＭｅＯＨで溶出して１．８９ｇを得た。
（ｂ）（Ｒ）−９−［２−（ステアロイルオキシメチル）−４−（ｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）ブチル］グアニン
（Ｒ）−９−［２−ヒドロキシメチル４−（ｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）ブチル］グアニン（２．３１ｇ、５ミリモル）を乾燥ピリジンとともに２回共蒸発させ、ピリジン（２０ｍｌ）中に溶解した。溶液にジクロロメタン（２ｍｌ）中のステアロイルクロライド（１．８６ｍｌ、５．５ミリモル、テクニカルグレード）を−５℃にてゆっくりと滴下した。反応液を同温度にて１時間、ついで５℃で２時間保持した。反応をＴＬＣによりモニターした。反応が未完了であったため、−５℃にてステアロイルクロライド（０．２９ｍｌ）をさらに加えた。５℃にて３０分後、メタノール（３ｍｌ）を加え、反応混合物を２０分間撹拌した。ついで、これを炭酸水素ナトリウム水溶液中に注ぎ、ジクロロメタンで抽出した。有機相を乾燥させ、生成物を、ＭｅＯＨを段階的に大きくするシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、ＣＨ2Ｃｌ2中の３．５％ＭｅＯＨで溶出した（収量２．７ｇ）。
（ｃ）（Ｒ）−９−［（４−ヒドロキシ−２−（ステアロイルオキシメチル）ブチル］グアニン
（Ｒ）−９−［２−（ステアロイルオキシメチル）−４−（ｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）ブチル］グアニン（２．７ｇ、３．５６ミリモル）を乾燥ＴＨＦ（３０ｍｌ）に溶解し、溶液にフッ化水素−ピリジン（１．５ｍｌ）を加えた。反応を４℃で一夜保持し、ＴＬＣによりモニターした。反応は約８０％変換に達した。さらにＨＦ−ピリジン（０．７５ｍｌ）を加えた。４時間後、ＴＬＣは出発物質が消失したことを示した。温度を上げることなく反応混合物を真空濃縮し、さらにピリジン（５ｍｌ）を加え、再び蒸発させた。生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより単離した（収量１．２６ｇ）。
（ｄ）（Ｒ）−９−［４−（Ｎ−ＢＯＣ−Ｌ−イソロイシルオキシ）−２−（ステアロイルオキシメチル）ブチル］グアニン
（Ｒ）−９−［４−ヒドロキシ−２−（ステアロイルオキシメチル）ブチル］グアニン（１３５ｍｇ、０．２６ミリモル）およびＮ−ＢＯＣ−Ｌ−イソロイシン（１８０ｍｇ、０．７８ミリモル）を乾燥ＤＭＦとともに２回共蒸発させ、同溶媒（３．５ｍｌ）中に溶解した。溶液に１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（１６０ｍｇ、０．７８ミリモル）および４−ジメチルアミノピリジン（４．８ｍｇ、０．０３９ミリモル）を加えた。１８時間反応させた後、反応混合物をセライト濾過し、通常通り処理した。生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより単離し、ＣＨ2Ｃｌ2中の５％ＭｅＯＨで溶出した（収量１６０ｍｇ）。
（ｅ）（Ｒ）−９−［４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）−２−（ステアロイルオキシメチル）ブチル］グアニン
工程（ｄ）の（Ｒ）−９−［４−（Ｎ−ＢＯＣ−Ｌ−イソロイシルオキシ）−２−（ステアロイルオキシメチル）ブチル］グアニン（１５０ｍｇ、０．２０５ミリモル）を０℃にてトリフルオロ酢酸（３ｍｌ）で２０分間処理した。溶液を真空蒸発させた。残渣をトルエンとともに２回共蒸発させ、真空下に数時間保持した。残渣をＭｅＯＨ（２ｍｌ）中に溶解し、蒸発させてトリフルオロ酢酸塩をガラス状の生成物として得た（収量１９１ｍｇ）。
0004171069.tif 000019
実施例８
（Ｒ）−９−［２−（デカノイルオキシメチル）−４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）ブチル］グアニン
工程（ｂ）においてステアロイルクロライドの代わりにデカノイルクロライドを用い、実施例７と同様にして標記化合物をビストリフルオロ酢酸塩として得た。
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実施例９
（Ｒ）−９−［４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）−２−（ミリストイルオキシメチル）ブチル］グアニン
工程（ａ）においてＮ−ＢＯＣ−バリンの代わりにＮ−ＢＯＣ−Ｌ−イソロイシンを用い、工程（ｂ）においてステアリルクロライドの代わりにミリストイルクロライドを用い、実施例１と同様にして標記化合物をビストリフルオロアセチル塩として得た。
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実施例１０
（Ｒ）−９−［２−（４−アセチルブチリルオキシメチル−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン
工程（ｂ）においてＮ−ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−バリンの代わりに実施例１工程（ａ）のＤＣＣ／ＤＭＡＰ条件を４−アセチル酪酸とともに用い、実施例１と同様にして標記化合物をビストリフルオロ酢酸塩として得た。
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実施例１１
（Ｒ）−９−［２−（ドデカノイルオキシメチル−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン
工程（ｂ）においてステアロイルクロライドの代わりにドデカノイルクロライドを用い、実施例１と同様にして標記化合物をビストリフルオロ酢酸塩として得た。
実施例１２
（Ｒ）−９−［２−パルミトイルオキシメチル−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン
工程（ｂ）においてステアロイルクロライドの代わりにパルミトイルクロライドを用い、実施例１と同様にして標記化合物をビストリフルオロ酢酸塩として得た。
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実施例１３
（Ｒ）−２−アミノ−９−［２−ステアロイルオキシメチル−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］プリン
本実施例は、基Ｒ1の脱酸素化を示すものである。
（ａ）（Ｒ）−２−アミノ−９−（２−ステアロイルオキシメチル−４−（Ｎ−tert−ブトキシカルボニル−Ｌ−バリルオキシ）ブチル）−６−クロロプリン：
実施例１工程（ｂ）の（Ｒ）−９−（２−ステアロイルオキシメチル−４−（Ｎ−tert−ブトキシカルボニル−Ｌ−バリルオキシ）ブチル）グアニン（６４６ｍｇ、０．９ミリモルのアセトニトリル中の溶液にテトラメチルアンモニウムクロライド（４２７ｍｇ、２．７ミリモル）、Ｎ，Ｎ−ジエチルアニリン（０．７１６ｍｌ、４．５ミリモル）およびオキシ塩化リン（０．４１７ｍｌ、４．５ミリモル）を加えた。反応を還流下で保持し、進行をＴＬＣによりモニターした。３時間後、反応混合物を真空蒸発させ、残渣をジクロロメタンに溶解し、ついで冷炭酸水素ナトリウム水溶液に注いだ。有機相を蒸発させ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製した。収量：２５１ｍｇ。
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（ｂ）（Ｒ）−２−アミノ−９−（２−ステアロイルオキシメチル−４−（Ｎ−tert−ブトキシカルボニル−Ｌ−バリルオキシ）ブチル）プリン：
メタノール／酢酸エチル（６ｍｌ、３：１Ｖ／Ｖ）中の（Ｒ）−２−アミノ−９−（２−ステアロイルオキシメチル−４−（Ｎ−tert−ブトキシカルボニル−Ｌ−バリルオキシ）ブチル）−６−クロロプリン（２４０ｍｇ、０．３３ミリモル）の溶液にギ酸アンモニウム（１０５ｍｇ、１．６５ミリモル）および１０％パラジウム／炭素（１５ｍｇ）を加えた。反応を還流下で１時間保持し、ギ酸アンモニウム（７０ｍｇ）を再度加えた。さらに１時間後にＴＬＣが反応の完了を示したので、混合物をセライト濾過し、エタノールで充分に洗浄した。濾液を蒸発させ、シリカゲルカラムで精製した。収量：１９３ｍｇ。
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（ｃ）（Ｒ）−２−アミノ−９−（２−ステアロイルオキシメチル−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル）プリン：
（Ｒ）−２−アミノ−９−（２−ステアロイルオキシメチル−４−（Ｎ−tert−ブトキシカルボニル−Ｌ−バリルオキシ）ブチル）プリン（１８０ｍｇ、０．２６ミリモル）を０℃にてトリフルオロ酢酸（５ｍｌ）で４０分間処理した。これを、ついで真空蒸発させ、トルエンおよびメタノールで順番に共蒸発させた。残渣を一夜凍結乾燥して所望の生成物１９５ｍｇを得た。
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実施例１４
（Ｒ）−９−［４−ヒドロキシ−２−（ステアロイルオキシメチル）ブチル］グアニンの他の製造法
（ａ）４，４−ジエトキシ−２−エトキシカルボニル酪酸エチルの製造
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カリウムtert−ブトキシド（１４１．８ｇ、１．１１当量）を乾燥ＤＭＦ（１Ｌ）中に溶解した。マロン酸ジエチル（２６６ｍＬ、１．５４当量）を５分間かけて加えた。ブロモアセトアルデヒドジエチルアセタール（１７２ｍＬ、１．１４モル）を５分間かけて加えた。混合物を１２０℃（内部温度）に加熱し、１２０℃にて５時間撹拌した。混合物を静置して室温に冷却し、水（５Ｌ）に注ぎ、メチルtert−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ、３×６００ｍＬ）で抽出した。有機溶液をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、濃縮し、蒸留して（０．５ｍｍ、９５−１４０℃）所望のジエステル（２４４ｇ、７８％）を無色油状物として得た。
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（ｂ）４，４−ジエトキシ−２−（ヒドロキシメチル）−ブタノールの製造
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ＬｉＢＨ4（購入した溶液、ＴＨＦ中に２Ｍ、２２．５ｍＬ）と実施例１４工程（ａ）の生成物（１５ｍＬのＴＨＦ中に５ｇ、１８．１ミリモル）とを混合し、６０℃に温め、６０℃で４時間撹拌した。反応混合物を静置して室温に冷却し、反応容器を冷水浴中に置いた。ついで、トリエタノールアミン（５．９７ｍＬ、１当量）を、反応混合物の温度が２０〜２５℃の間に保持されるような速度で加えた。食塩水（１７．５ｍＬ）を気体発生を制御しうる速度で加え、混合物を室温で４５分間撹拌した。層を分離し、有機層を食塩水（２×１５ｍＬ）で洗浄した。コンバインした食塩水洗浄液をＭＴＢＥ（メチルtert−ブチルエーテル、３×２０ｍＬ）で抽出した。コンバインした有機抽出物を蒸発させ、残渣をＭＴＢＥ（５０ｍＬ）中に溶解し、食塩水（２５ｍＬ）で洗浄した。食塩水層をＭＴＢＥ（３×２５ｍＬ）で逆抽出した。コンバインした有機抽出物をＮａ2ＳＯ4で乾燥させ、濾過し、濃縮して所望のジオール（３．３６ｇ、１５．５ミリモル、９７％）を無色油状物として得た。
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（ｃ）（２Ｒ）−２−アセトキシメチル−４，４−ジエトキシ−ブタノールの製造
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１０ｍｌ容の１首丸底フラスコ中に実施例１４工程（ｂ）の生成物（３．８４ｇ、２０ミリモル）を入れ、ついで酢酸ビニル（２．６ｇ、３０ミリモル）および最後にリパーゼＰＳ３０（６９ｍＬ、アマノ（Ａmano）、ロンバード、イリノイから購入）を加えた。混合物を周囲温度で１６時間撹拌した。反応の進行をＴＬＣ（２／１ヘキサン−ＥｔＯＡｃ；Ｃｅ（ＳＯ4）3で染色し、ホットプレート上で黒焦げにした（charred）；ジオールのｒ．ｆ．は０．１、モノアセテートは０．３、ビスアセテートは０．７５である）により厳密にモニターした。反応混合物をＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、５ミクロンフィルターで濾過した。フィルターをＣＨ2Ｃｌ2でさらに洗浄した。ついで、濾液を真空濃縮して所望の生成物を得た。
（ｄ）（２Ｓ）−２−アセトキシメチル−４，４−ジエトキシブチルトルエンスルホネートの製造
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マグネチックスターバーおよび隔壁を備えた１００ｍｌ容の１首丸底フラスコ中にＮ2下にて実施例１４工程（ｃ）の粗製の生成物（４．６２ｇ、１９ミリモル）、乾燥ＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）およびＥｔ3Ｎ（５．６２ｍＬ、４０ミリモル）を加えた。この溶液にトシルクロライド（４．７６ｇ、２５ミリモル）を加えた。得られた混合物を周囲温度で４時間撹拌した。Ｈ2Ｏ（０．２７ｇ、１５ミリモル）を加え、４時間激しく撹拌した。反応混合物を８０ｍＬのＥｔＯＡｃおよび５０ｍＬのＨ2Ｏで希釈し、水性層を分離した。有機層に７５ｍＬの５％ＫＨ2ＰＯ4水溶液を加えた。層を混合および分離後、水性層を除いた。有機層を５０ｍＬの飽和ＮａＨＣＯ3溶液で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮して所望の生成物を７．４０ｇの一定重量とした。
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（ｅ）
0004171069.tif 000034
の製造
５０ｍＬ容の１首丸底フラスコ中に実施例１４工程（ｄ）の生成物（３．８８ｇ、１０ミリモル）、無水ＤＭＦ（２０ｍＬ）、２−アミノ−４−クロロ−プリン（２．１２５ｇ、１２．５ミリモル）およびＫ2ＣＯ3（４．８３ｇ）を加えた。得られた懸濁液をＮ2ブランケット（blanket）下で４０℃にて２０時間撹拌した。混合物をロータリーエバポレーター上で濃縮して大部分のＤＭＦを除いた。残渣をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）およびＨ2Ｏ（５０ｍＬ）で希釈した。反応混合物を分別漏斗に移し、振盪し、水性層を分離した。水性層をＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）で抽出した。有機層をコンバインし、５％ＫＨ2ＰＯ4（７５ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、Ｈ2Ｏ（７５ｍＬ）、食塩水（７５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮して粗製の生成物３．９５ｇを得た。粗製の生成物を４０ｍＬのメチル−ｔ−ブチルエーテルでスラリー化した。この混合物を４℃で一夜撹拌し、混合物を濾過した。濾液を濃縮して３．３５ｇの生成物を油状物（ＨＰＬＣ分析に基づいて所望の生成物２．６ｇを含有）として得た。
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（ｆ）
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の製造
５００ｍＬ容の１首丸底フラスコ中にベンジルアルコール（１３６ｍＬ）を加え、０℃に冷却し、ついでＫＯ−ｔ−Ｂｕ（３６ｇ、３２１ミリモル）を少しずつ加えた。温度を４０℃まで温め、混合物を２０分間撹拌した。この混合物に、２５ｍＬの無水ＴＨＦおよびベンジルアルコール（３０ｍＬ）中に溶解した実施例１４工程（ｅ）の粗製生成物（２４．７ｇ、６４．２ミリモル）を０℃にて加えた。温度を２時間かけてゆっくりと８℃に温めた。反応混合物を５００ｍＬの氷に注ぎ、５００ｍＬのＭＴＢＥで抽出した。有機層を２５０ｍＬの食塩水で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮して１９３ｇの所望の生成物のベンジルアルコール溶液を得た。ＨＰＬＣ分析は、この溶液が２５．９６ｇの所望の生成物を含有することを示した。
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（ｇ）
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の製造
１００ｍＬ容の１首丸底フラスコ中に、無水ＥｔＯＨ（２０ｍＬ）中に溶解した実施例１４工程（ｆ）の粗製の生成物（１．３０ｇ、３．１３ミリモルの実施例１４工程（ｆ）の生成物を含有するベンジルアルコール溶液を９．６５ｇ）を加えた。これに５ｍＬの無水ＥｔＯＨ中でスラリー化した０．４５ｇの１０％Ｐｄ／Ｃを加えた。反応フラスコを排気し、Ｈ2のバルーンでＨ2を３回加えた。反応フラスコを１気圧Ｈ2で与圧し、反応混合物を一夜撹拌した。反応混合物をケイソウ土のパッドで濾過してＰｄ／Ｃを除いた。揮発成分を真空下で除いた。残渣を２５ｍＬの酢酸イソプロピルと混合し、ついで真空濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）で希釈し、所望の生成物でシーディングし（seeded）、加熱還流し、ついでＣＨ3ＣＮ（２ｍＬ）およびＭＴＢＥ（３５ｍｌ）を加えた。混合物を３０分間撹拌した。沈殿を濾過し、所望の生成物を６００ｍｇの一定重量まで乾燥させた。
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（ｈ）
0004171069.tif 000040
の製造
２５ｍＬ容の１首丸底フラスコ中に、実施例１４工程（ｇ）の生成物（０．６５０ｇ、２．０ミリモル）、ピリジン（４ｍＬ）およびＣＨ2Ｃｌ2（２ｍＬ）、ＤＭＡＰ（１０ｍｇ）を加えた。混合物を−５℃に冷却し、ＣＨ2Ｃｌ2（０．５ｍＬ）中に溶解したステアロイルクロライド（７９０ｍｇ、２．６ミリモル）を５分間かけて加えた。得られた混合物を−５℃で１６時間撹拌した。無水ＥｔＯＨ（０．１３８ｇ、３．０ミリモル）を加え、混合物をさらに１時間撹拌した。反応混合物を真空濃縮した。残渣にトルエン（３０ｍＬ）を加え、ついで混合物を真空濃縮した。再びトルエン（３０ｍＬ）を残渣に加え、ついで混合物を真空濃縮した。残渣に１％ＫＨ2ＰＯ4（２５ｍＬ）を加え、この混合物をＣＨ2Ｃｌ2（６０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮して１．６５ｇの一定重量とした。粗製の生成物を４０ｇのＳｉＯ2上のクロマトグラフィーにかけ、９５／５ ＣＨ2Ｃｌ2−ＥｔＯＨで溶出して所望の生成物３６７ｍｇを得た。
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（ｉ）
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の製造
２５ｍＬ容の１首丸底フラスコ中に、ＴＨＦ（１．７ｍＬ）に溶解した実施例１４工程（ｈ）の生成物（０．２３４ｇ、０．３９４ミリモル）を加えた。この溶液にＨ2Ｏ（１８０ｍｇ）中のトリフルオロメタンスルホン酸（０．１０８ｇ）を加えた。混合物を室温で一夜撹拌した。反応混合物に飽和ＮａＨＣＯ3溶液（１０ｍＬ）、ＴＨＦ（５ｍＬ）、ＣＨ2Ｃｌ2（２ｍＬ）およびＮａＢＨ4（０．１０ｇ）を加えた。この混合物を３０分間撹拌した。反応混合物にＫＨ2ＰＯ4の５％溶液（３０ｍＬ）を加えた。この混合物を２×１５ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2で抽出した。有機層をコンバインし、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮して２０７ｍｇの一定重量とした。この物質をＥｔＯＡｃ（８ｍＬ）およびＣＨ3ＣＮ（０．５ｍＬ）から再結晶して所望の生成物１７３ｍｇを得た。
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実施例１５
（Ｒ）−９−［４−（Ｎ−tert−ブチルオキシカルボニル−Ｌ−バリルオキシ）−２−（ステアロイルオキシメチル）ブチル］グアニンの他の製造法
（Ｒ）−９−［２−（ステアロイルオキシメチル）−４−（ｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）ブチル］グアニン（４５ｇ）およびＴＨＦ（９５０ｍｌ）を２Ｌ容フラスコ中でコンバインした。ついで、Ｂｏｃ−Ｌ−バリン（３．２２ｇ、０．２５当量）を加え、ついでテトラブチルアンモニウムフルオライド（ＴＨＦ中に１Ｍ、８９．０５ｍＬ）を１０分間かけて加えた。透明な反応混合物を室温で２時間５０分間撹拌し、反応の進行をＴＬＣ（９０／１０ ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ）によりモニターした。
反応混合物にＢｏｃ−Ｌ−バリン（３５．４３ｇ、２．７５当量）、ＤＣＣ（３６．６７ｇ、２．７５当量）およびＴＨＦ（２５ｍｌ）中のジメチルアミノピリジン（１．１ｇ、０．１５当量）を加えた。反応混合物を室温で２４時間撹拌した。ＤＣＣを濾去し、ＣＨ2Ｃｌ2で洗浄した。濾液を濃縮し、残渣を２リットルのＣＨ2Ｃｌ2中に取り、２Ｌの１／２飽和重炭酸ナトリウム溶液および食塩水溶液で洗浄した。乾燥および蒸発させると約１００ｇの粗製の生成物が得られた。この物質を３％ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2〜５％ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2を用いたシリカクロマトグラフィー（シリカを６０００ｍｌ）により精製して所望の生成物３８．２２ｍｇを得た。
実施例１６
（Ｒ）−９−［２−（ステアロイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニンの他の製造法
（ａ）（Ｒ）−９−［２−ヒドロキシメチル）−４−（ｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）ブチル］グアニン
Ｈ２Ｇ（４５０．０ｇ、１．７８モル）およびＮ，Ｎジメチルホルムアミド（６．４ｋｇ）をブッチ（Ｂucchi）エバポレーターに入れ、混合物を温めて固体を溶解した。溶液を９０℃未満で真空下にて濃縮乾固した。得られた粉末を、スターラー、添加漏斗および温度プローブを備えた２２リットル容フラスコに移した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１．７ｋｇ）を加え、ついでピリジン（３．５３ｋｇ）を加えた。得られた懸濁液を窒素下で−１０℃に冷却し、ｔ−ブチルクロロジフェニルシラン（６８４ｇ、２．４９モル）を滴下しながら−５±５℃で撹拌した。得られた混合物を反応が完了するまで（ＴＬＣ（１０：１ メチレンクロライド／メタノール）およびＨＰＬＣ（４．６×２５０ｍｍゾルバックス（Ｚorbax）ＲｘＣ８（５ミクロン）；１．５ｍｌ／分の６０：４０ アセトニトリル−ＮＨ4ＯＡＣ水溶液（０．０５Ｍ）；２５４ｎｍでＵＶ検出）によりモニター）−５±５℃で撹拌した。水（１６ｋｇ）を加え、混合物を３０分間撹拌して生成物を沈殿させ、ついで混合物を０℃で３０分間冷却した。固体を濾過により単離し、生成物のケーキを冷水で洗浄し、空気で吸引乾燥して粗製の生成物をオフホワイトの固体として得た。粗製の固体をピリジン（３ｋｇ）中に取り、真空下、６０℃で濃縮して水を除去した。乾燥固体残渣をメタノール（１０ｋｇ）で６０℃にて１〜２時間スラリー化し、熱い間に濾過した。濾液を真空濃縮し、固体残渣を酢酸イソプロピル（７ｋｇ）とともに３０分間還流した。混合物を２０℃に冷却し、濾過した。濾過ケーキを５０℃で真空乾燥して標記化合物を白色固体（５５５ｇ）として得た。
（ｂ）（Ｒ）−９−［２−（ステアロイルオキシメチル）−４−（ｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）ブチル］グアニン
実施例１６工程（ａ）の生成物（５５５ｇ、１．１１３モル）を５０リットル容ブッチエバポレーターに入れた。ピリジン（２．７ｋｇ）を滴下して固体を溶解し、混合物を真空下、６０℃で蒸発乾固した。残渣を新鮮なピリジン（２．７ｋｇ）中に取り、スターラー、添加漏斗および温度プローブを備えた２２リットル容のフラスコに移した。溶液を窒素下で−５℃に冷却した。メチレンクロライド（１．５ｋｇ）中のステアロイルクロライド（４４０ｇ、１．４５モル）の溶液を温度が０℃以下になるように加えた。４−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）ピリジン（１５ｇ、０．１２モル）を加え、変換が完了するまで（ＴＬＣ（１０：１ メチレンクロライド／メタノール）およびＨＰＬＣ（４．６×２５０ｍｍゾルバックスＲｘＣ８（５ミクロン）；１．５ｍｌ／分の６０：４０ アセトニトリル−ＮＨ4ＯＡＣ水溶液（０．０５Ｍ）；２５４ｎｍでＵＶ検出）によりモニター）混合物を−５〜０℃で２〜４時間撹拌した。反応の終了時点でアセトニトリル（８．７ｋｇ）を加え、混合物を１５分間以上撹拌して生成物を沈殿させた。スラリーを０℃にて２時間冷却し、固体を濾過により単離し、濾過ケーキをアセトニトリル（２ｋｇ）で洗浄した。所望の生成物を白色固体（７７５ｇ）として得た。
（ｃ）（Ｒ）−９−［４−ヒドロキシ−２−（ステアロイルオキシメチル）ブチル］グアニン
テトラヒドロフラン（１０ｋｇ）中の実施例１６工程（ｂ）の生成物（７６５ｇ、０．２９モル）の溶液をリアクター中で調製した。テトラヒドロフラン中のテトラ（ｎ−ブチル）アンモニウムフルオライドの溶液（１Ｍ溶液を１．７ｋｇ、１．７モル）を加え、得られた透明な溶液を２０±５℃で４時間撹拌した。水（３２ｋｇ）を加え、得られたスラリーを１時間撹拌し、ついで０℃に３０分間冷却した。沈殿を濾過により単離し、濾過ケーキを水（１０ｋｇ）およびアセトニトリル（５ｋｇ）で順番に洗浄した。真空下、２５℃で乾燥した後、７０２ｇの粗製の生成物を得た。粗製の生成物を還流ＴＨＦ（４．２ｋｇ）および水（１６０ｇ）中に溶解し、ついで４０℃に冷却し、メチレンクロライド（１４．５ｋｇ）で処理した。混合物を２５±５℃に１時間冷却し、ついで５±５℃に１時間冷却して沈殿を完了した。わずかにオフホワイトの粉末を濾過により単離し、真空下、４０℃で乾燥させて所望の生成物（４１６ｇ）を得た。
（ｄ）（Ｒ）−９−［４−（Ｎ−Ｃｂｚ−Ｌ−バリルオキシ）−２−（ステアロイルオキシメチル）ブチル］グアニン
ＴＨＦ（７５０ｍｌ）中のＮ−Ｃｂｚ−Ｌ−バリン（１６９ｇ、０．６７モル）の溶液を、メカニカルスターラー、温度計および添加漏斗を備えた２リットル容フラスコ中に調製した。ＴＨＦ（２５０ｍｌ）中のジシクロヘキシルカルボジイミド（６９．３ｇ、０．３４モル）の溶液を５分間かけて加え、得られたスラリーを２０±５℃で２時間撹拌した。スラリーを濾過し、濾過ケーキをＴＨＦ（３００ｍｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液をスターラーおよび温度計を備えた３リットル容フラスコに入れた。実施例１６工程（ｃ）の生成物（１１６ｇ、０．２２モル）を固体として加え、ＴＨＦ（２５０ｍｌ）で濯いだ。４−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）ピリジン（２．７３ｇ、０．０２２モル）を加え、白色スラリーを２０±５℃で撹拌した。１５分以内に固体はすべて溶解し、反応は１時間以内に完了した（ＨＰＬＣにより決定：４．６×２５０ｍｍゾルバックスＲｘＣ８カラム；１ｍｌ／分の８５：１５ アセトニトリル−０．２％ＨＣｌＯ4水溶液；２５４ｎｍでＵＶ検出；出発物質は４．１分で溶出し、生成物は５．９分で溶出）。水（５ｍｌ）を加えて反応を停止させ、溶液を真空濃縮して薄黄色の半固体を得た。これをメタノール（１．５リットル）中に取り、３０分間加熱還流した。溶液を２５℃に冷却し、沈殿を濾過により除去した。濾液を真空濃縮して粘性の薄黄色の油状物を得た。アセトニトリル（１Ｌ）を加え、得られた白色懸濁液を２０±５℃で９０分間撹拌した。粗製の固体生成物を濾過により単離し、アセトニトリル（２×１００ｍｌ）で洗浄し、一夜空気乾燥して所望の生成物をワックス状の粘着性固体（１２２ｇ）として得た。これをさらに酢酸エチル（５００ｍｌ）から結晶化し、３０℃で真空乾燥することによって精製して所望の生成物を白色のワックス状固体（１０４ｇ）として得た。
（ｅ）（Ｒ）−９−［４−（Ｌ−バリルオキシ）−２−（ステアロイルオキシメチル）ブチル］グアニン
温（４０℃）エタノール（２．３Ｌ）中の実施例１６工程（ｄ）の生成物（７７ｇ）の溶液を、５％Ｐｄ−Ｃ（１５．４ｇ）とともに水素化リアクターに入れた。混合物を４０ｐｓｉの水素圧下、４０℃で４時間激しく撹拌し、排気し、さらに４〜１０時間水素化した。触媒を濾去し、濾液を真空濃縮して白色固体を得た。これをエタノール（３８５ｍｌ）とともに２５℃で１時間撹拌し、ついで０℃に冷却し、濾過した。濾過ケーキを空気乾燥し、ついで３５℃で真空下で乾燥して標記化合物を白色粉末（４６ｇ）として得た。
実施例１７
（Ｒ）−９−［２−（Ｌ−バリルオキシ）−４−（ステアロイルオキシメチル）ブチル］グアニン
（ａ）（Ｒ）−９−［２−ヒドロキシメチル−４−（ステアロイルオキシ）ブチル］グアニン
Ｈ２Ｇ（５０６ｍｇ；２．０ミリモル）を乾燥Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４０ｍｌ）中にピリジン（４００ｍｇ；５．０６ミリモル）および４−ジメチルアミノピリジン（６０ｍｇ；０．４９ミリモル）とともに溶解した。ステアロイルクロライド（１５００ｍｇ；４．９５ミリモル）を加え、混合物を室温に一夜保った。溶媒のほとんどを真空蒸発させ、残渣を７０ｍｌの酢酸エチルおよび７０ｍｌの水とともに撹拌し、固体を濾去し、酢酸エチルおよび水で洗浄し、乾燥して６８０ｍｇの粗製生成物を得た。シリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール １５：１）により純粋な標記化合物を白色固体として得た。
0004171069.tif 000044
（ｂ）（Ｒ）−９−［２−（Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−バリルオキシメチル）−４−（ステアロイルオキシ）ブチル］グアニン
ジクロロメタン（２０ｍｌ）中のＮ−Ｂｏｃ−Ｌ−バリン（５２８ｍｇ；２．１ミリモル）およびＮ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（２５０ｍｇ；１．２１ミリモル）の混合物を室温で一夜撹拌し、ジシクロヘキシル尿素を濾去し、少量のジクロロメタンで抽出し、濾液を真空蒸発させて小容量とした。（Ｒ）−９−［２−ヒドロキシメチル−４−（ステアロイルオキシ）ブチル］グアニン（３４０ｍｇ；０．６５４ミリモル）、４−ジメチルアミノピリジン（２５ｍｇ；０．２０５ミリモル）および乾燥Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１５ｍｌ）を加え、混合物をＮ2下、５０℃で４時間撹拌した。溶媒を真空蒸発させて小容量とした。シリカゲル、ついで酸化アルミニウム上のカラムクロマトグラフィー（溶出液として酢酸エチル：メタノール：水 １５：２：１）により１８５ｍｇ（３９％）の純粋な標記化合物を白色固体として得た。
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（ｃ）（Ｒ）−９−［２−（Ｌ−バリルオキシメチル）−４−（ステアロイルオキシ）ブチル］グアニン
（Ｒ）−９−［２−（Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−バリルオキシメチル）−４−（ステアロイルオキシ）ブチル］グアニン（１８０ｍｇ；０．２５ミリモル）に冷トリフルオロ酢酸（２．０ｇ）を加え、溶液を室温で１時間保持し、蒸発して小容量とし、白色の無定形粉末が得られるまでジオキサンで繰り返し凍結乾燥させた。トリフルオロ酢酸塩として得られた標記化合物の収量は定量的なものであった。
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実施例１８
（Ｒ）−９−［２−ヒドロキシメチル−４−（ステアロイルオキシ）ブチル］グアニンの他の製造法
Ｈ２Ｇ（７．６０ｇ、３０ミリモル）を乾燥ＤＭＦ（２００ｍｌ）中で加熱溶解した。溶液を濾過して固体不純物を除去し、２０℃に冷却し（Ｈ２Ｇは結晶化する）、ピリジン（９．０ｇ、１１４ミリモル）、４−ジメチルアミノピリジン（０．４６ｇ、３．７５ミリモル）を添加しついでステアロイルクロライド（２０．０ｇ、６６ミリモル）をゆっくりと加える間、この温度で撹拌した。撹拌を室温で一夜続けた。ついで、溶媒のほとんどを真空留去し、残渣を２００ｍｌの酢酸エチルおよび２００ｍｌの水とともに撹拌し、固体を濾去し、酢酸エチルおよび水で洗浄し、乾燥させて粗製の生成物を得た。再結晶の代わりとして、粗製の生成物を１００ｍｌの酢酸エチル：メタノール：水（１５：２：１）とともにほぼ沸騰するまでしばらく加熱し、懸濁液を３０℃にゆっくりと冷却し、濾過して溶液中の２”異性体（２”異性体はより低い温度で結晶化する）のほとんどを得た。抽出手順をもう１回繰り返して真空乾燥した後に、ほとんど異性体を含まない生成物６．５７ｇ（４２％）を得た。
実施例１９
結晶性（Ｒ）−９−［２−ステアロイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニンの製造
実施例１６工程（ｃ）の生成物（２０．０７ｇ、３２．５ミリモル）を無水エタノール（４００ｍｌ）中に加熱溶解し、濾過し、エタノール（１１７．５ｍｌ）でさらに希釈した。この溶液に水（ＨＰＬＣグレード、１０３．５ｍｌ）を加え、混合物を３５〜４０℃に冷却した。混合物を冷却した後、水（ＨＰＬＣグレード、９３１．５ｍｌ）を充分に撹拌しながら一定速度で１６時間かけて加えた。すべての水を加えた後、撹拌を室温で４時間続けた。得られた沈殿を紙で濾過し、室温で真空下にて乾燥させて標記化合物を白色の自由流動性の（free flowing）結晶性粉末（１９．４３ｇ、９７％）として得た（融点１６９〜１７０℃）。
実施例２０
９−Ｒ−（４−ヒドロキシ−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル）グアニン
（ａ）ＤＭＦ（３０ｍｌ）中の９−Ｒ−（４−（tert−ブチルジフェニルシリルオキシ）−２−（ヒドロキシメチル）ブチル）グアニン（６９５ｍｇ、１．５ミリモル）の溶液に、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−バリン（４８８ｍｇ、２．２５ミリモル）、４−ジメチルアミノピリジン（３０ｍｇ、０．２５ミリモル）およびＤＣＣ（５５６ｍｇ、２．７ミリモル）を加えた。１６時間後、反応液にＮ−Ｂｏｃ−Ｌ−バリン（２４４ｍｇ）およびＤＣＣ（２７８ｍｇ）を再度加え、さらに５時間保持した。反応混合物をセライト濾過し、炭酸水素ナトリウム水溶液中に注ぎ、ついでジクロロメタンで抽出した。有機相を蒸発させ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して９５０ｍｇのＮ−保護モノアミノアシル誘導体を得た。
（ｂ）上記中間体（５２０ｍｇ、０．７８ミリモル）をＴＨＦ（１５ｍｌ）中に溶解した。溶液にピリジン中のフッ化水素（７０％／３０％、０．３４ｍｌ）を加えた。２日後、溶液を蒸発させ、トルエンと共蒸発させた。シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して３１１ｍｇの保護モノアミノアシル化合物を得た。
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（ｃ）工程（ｂ）の生成物（９５ｍｇ、０．２１ミリモル）をトリフルオロ酢酸（４ｍｌ）とジクロロメタン（６ｍｌ）との混合物で１時間処理した。溶液を蒸発させ、凍結乾燥して１２５ｍｇの脱保護モノアミノアシル生成物を得た。
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実施例２１
（Ｒ）−９−（２−ヒドロキシメチル−４−（Ｌ−イソロイシルオキシ）ブチル）グアニン
（ａ）ＤＭＦ（２５０ｍｌ）中の（Ｒ）−９−（２−ヒドロキシメチル−４−ヒドロキシブチル）グアニン（２．５３ｇ、１０ミリモル）の溶液に、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−イソロイシン（２．７７ｇ、１２ミリモル）、４−ジメチルアミノピリジン（６１ｍｇ、０．６ミリモル）およびＤＣＣ（３．７ｇ、１８ミリモル）を加えた。０℃で１６時間反応後、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−イソロイシン（１．３ｇ）およびＤＣＣ（１．８ｇ）を再度加え、反応液を室温で一夜保持した。反応混合物をセライト濾過し、濾液を蒸発させ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して１．２５ｇのＮ−保護モノアミノアシル中間体を得た。
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（ｂ）工程（ａ）の中間体（１００ｍｇ、０．２１ミリモル）をトリフルオロ酢酸（３ｍｌ）で０℃にて３０分間処理した。溶液を蒸発させ、凍結乾燥して標記脱保護モノアミノアシル生成物を定量的収量で得た。
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実施例２２
（Ｒ）−９−［２−ヒドロキシメチル−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン
実施例１工程（ａ）の生成物を実施例１工程（ｃ）と同様にしてトリフルオロ酢酸で脱保護した。
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実施例２３
（Ｒ）−９−［２−（Ｌ−バリルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン
（ａ）（Ｒ）−９−［４−（Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−バリルオキシ）−２−（Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］グアニン
それぞれ２．７当量、０．２８当量および３．２当量のＮ−Ｂｏｃ−バリン、ＤＭＡＰおよびＤＣＣを用いて実施例１工程（ａ）に記載の技術を行い、標記化合物を得た。
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（ｂ）（Ｒ）−９−［４−（Ｌ−バリルオキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル］グアニン
実施例２３工程（ａ）の中間体を実施例１工程（ｃ）と同様にして脱保護することにより標記化合物をトリフルオロ酢酸塩として得た。
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実施例２４
（Ｒ）−９−［４−ヒドロキシ−２−（ステアロイルオキシメチル）ブチル］グアニン
実施例７の工程（ａ）〜（ｃ）に従って標記化合物を調製する。
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実施例２５
（Ｒ）−９−［２−ヒドロキシメチル−４−（ステアロイルオキシ）ブチル］グアニン
実施例１７工程（ａ）の手順により標記化合物を調製する。
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実施例２６
（Ｒ）−９−［２−ステアロイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニンの他の製造法
（ａ）（Ｒ）−９−［４−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−バリルオキシ）２−（ヒドロキシメチル）ブチル］グアニン
乾燥Ｈ２Ｇ（２５２ｍｇ、１ミリモル）、４−ジメチルアミノピリジン（１２２ｍｇ、１ミリモル）およびＮ−Ｃｂｚ−Ｌ−バリンｐ−ニトロフェニルエステル（４０８ｍｇ、１．１ミリモル）を乾燥ジメチルホルムアミド（１６ｍｌ）中に溶解した。２３℃で３０時間撹拌した後、有機溶媒を除去し、残渣を注意深くクロマトグラフィー（シリカ、２％〜７％メタノール／メチレンクロライド）にかけて所望の生成物を白色固体（１５１ｍｇ、３１％）として得た。
（ｂ）（Ｒ）−９−［４−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−バリルオキシ）２−（ステアロイルオキシメチル）ブチル］グアニン
乾燥メチレンクロライド（２ｍｌ）中のステアロイルクロライド（３９４ｍｇ、１．３ミリモル）の溶液を、乾燥ピリジン（５ｍｌ）中の工程（ａ）の生成物（２４３ｍｇ、１ミリモル）および４−ジメチルアミノピリジン（２０ｍｇ）の溶液に、窒素下、−５℃にてゆっくりと滴下した。この温度で反応混合物を１２時間撹拌した。メタノール（５ｍｌ）を加え、反応液を１時間撹拌した。溶媒を除去した後、残渣をアセトニトリルでトリチュレートし、クロマトグラフィー（シリカ、０〜５％メタノール／メチレンクロライド）にかけて所望の生成物（５４２ｍｇ、７２％）を得た。
（ｃ）（Ｒ）−９−［２−ステアロイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン
工程（ｂ）の生成物（４９０ｍｇ、１ミリモル）をメタノール（３０ｍｌ）中に溶解し、５％Ｐｄ／Ｃ（１００ｍｇ）を加えた。水素を充填したバルーンを反応容器の上部に置いた。２３℃で６時間後、ＴＬＣは出発物質の不在を示した。反応混合物を０．４５ミクロンのナイロン膜で濾過して触媒を除去し、溶媒を除いて所望の生成物を白色固体（３５０ｍｇ、９９％）として得た。このものは実施例１６で得たものと同一であった（スペクトルおよび分析データ）。
実施例２７
（Ｒ）−９−（４−ヒドロキシ−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル）グアニンの他の製造法
実施例２３工程（ｂ）の（Ｒ）−９−（４−（Ｌ−バリルオキシ）−２−（Ｌ−バリルオキシメチル）ブチル）グアニン（１００ｍｇ、０．１２６ミリモル）を０．１Ｎ ＮａＯＨ水溶液（６．３ｍｌ、０．６３ミリモル）中に室温にて溶解した。定期的にアリコートを取り、０．５Ｎトリフルオロ酢酸で中和した。アリコートを蒸発させ、ＨＰＬＣにより分析して反応の進行をモニターした。４時間後、溶液に０．５Ｎトリフルオロ酢酸溶液（１．２６ｍｌ、０．６３ミリモル）を加え、反応混合物を蒸発させた。所望の生成物をＨＰＬＣ（ＹＭＣ、５０×４．６ｍｍ、勾配０．１％ＴＦＡ＋０〜５０％０．１％ＴＦＡ（アセトニトリル中）、２０分間、２５４ｎｍにてＵＶ検出）により精製した（収率：１３．６％）。
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実施例２８
（Ｒ）−９−（２−ヒドロキシメチル−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル）グアニンの他の製造法
実施例２７の反応溶液をＨＰＬＣ分離して標記化合物を２９．２％の収率で得た。
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実施例２９
（Ｒ）−９−［２−ステアロイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン一塩酸塩
実施例１６工程（ｄ）の生成物（３６０ｍｇ、０．４７９ミリモル）をメタノール（１０ｍｌ）と酢酸エチル（１０ｍｌ）との混合物中に溶解した。溶液に１０％Ｐｄ／Ｃ（１００ｍｇ）および１Ｎ ＨＣｌ（５２０μｌ）を加えた。反応混合物を１気圧Ｈ2、室温にて２時間撹拌した。反応混合物を濾過し、濾液から溶媒を蒸発させて所望の生成物を結晶性固体（３００ｍｇ）として得た。
製剤実施例Ａ
錠剤の調合
下記成分を０．１５ｍｍふるいでスクリーニングし、乾燥混合する。
１０ｇ  （Ｒ）−９−［２−（ステアロイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン
４０ｇ  乳糖
４９ｇ  結晶セルロース
１ｇ  ステアリン酸マグネシウム
打錠機を用いて混合物を圧錠し、２５０ｍｇの活性成分を含有する錠剤とする。
製剤実施例Ｂ
腸溶錠剤
製剤実施例Ａの錠剤に、下記成分を含有する溶液をタブレットコーター（tabletcoater）中でスプレーコーティングする。
１２０ｇ  エチルセルロース
３０ｇ  プロピレングリコール
１０ｇ  ソルビタンモノオレエート
１０００ｍｌまで  蒸留水
製剤実施例Ｃ
除放製剤
５０ｇ  （Ｒ）−９−［２−（ステアロイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン
１２ｇ  ヒドロキシプロピルメチルセルロース（メトセルＫ１５）
４．５ｇ  乳糖
を乾燥混合し、ポビドンの水性ペーストで顆粒化する。ステアリン酸マグネシウム（０．５ｇ）を加え、混合物を打錠機で圧錠して５００ｍｇの活性成分を含有する１３ｍｍ直径の錠剤とする。
製剤実施例Ｄ
ソフトカプセル
２５０ｇ  （Ｒ）−９−［２−（ステアロイルオキシメチル）−４−（Ｌ−バリルオキシ）ブチル］グアニン
１００ｇ  レシチン
１００ｇ  ラッカセイ油
本発明の化合物をレシチンおよびラッカセイ油中に分散させ、ソフトゼラチンカプセル中に充填する。
生物学的実施例１
ラットにおけるバイオアベイラビリティー試験
本発明の化合物のバイオアベイラビリティーをラットモデルにおいて親化合物であるＨ２Ｇおよび他のＨ２Ｇ誘導体と比較した。本発明の化合物および比較化合物を複数の（multiples of）３匹の個々に体重を計った動物に経口（カテーテルにより胃中へ）で投与して、被験化合物成分の溶解度に依存して水性（実施例４、５、比較例１〜３、５、８）ビヒクル、落花生油（比較例４、９、１０）ビヒクルまたはプロピレングリコール（実施例１〜３、６〜１２、１７、比較例６、７）ビヒクル中に溶解したプロドラッグ０．１ミリモル／ｋｇを与えた。投与後５時間〜投与後約１７時間、動物を絶食し、メタボリックケージ中に維持した。投与後２４時間の間、採尿し、分析のときまで凍結させた。尿中のＨ２Ｇをステーレ
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およびエーベルグ
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Ａntimicrob Ａgents Ｃhemother．３６Ｎｏ２、３３９〜３４２（１９９２）のＨＰＬＣ／ＵＶアッセイを以下のように改変して用いて分析した：解凍後の試料を蒸留水Ｈ2Ｏ中で１：１００に希釈し、３０００ｒｐｍで１０分間遠心分離してアミコンフィルターで濾過する。２つの３０μｌ試料をＨＰＬＣカラム（ゾルバックスＳＢ−Ｃ１８；７５×４．６ｍｍ；３．５ミクロン；移動相０．０５Ｍ ＮＨ4ＰＯ4、３〜４％メタノール、ｐＨ３．３〜３．５；０．５ｍｌ／分；２５４ｍｍ、ＭｅＯＨ４％でｐＨ３．３３のときのＨ２Ｇの保持時間、〜１２．５分）上でクロマトグラフィーにかける。バイオアベイラビリティーは、少なくとも３匹の動物で平均した各動物から回収したＨ２Ｇ測定値として計算し、それぞれリンゲル緩衝液ビヒクル中の０．１ミリモル／ｋｇＨ２Ｇで頸静脈内注射した４匹の個々に体重を測定したラットの一群から回収した平均２４時間尿Ｈ２Ｇのパーセントとして表し、上記のようにして分析した。
比較例１（Ｈ２Ｇ）は実施例１〜１２の製造に用いたのと同じバッチからのものであった。比較例２（モノＶａｌ−Ｈ２Ｇ）および比較例３（ジＶａｌ−Ｈ２Ｇ）の調製は実施例２０および実施例２３に示してある。比較例４（ジステアロイルＨ２Ｇ）は、実施例１の工程（ｂ）に匹敵するエステル化条件での非保護Ｈ２Ｇのジエステル化により調製した。比較例５および８（Ｖａｌ／ＡｃＨ２Ｇ）は、無水酢酸および関連モノバリンＨ２Ｇを用いて実施例４と同様にして調製した。比較例６（Ａｌａ／ステアロイルＨ２Ｇ）は、工程４においてＮ−ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−アラニンを用いて実施例６と同様にして調製した。比較例７（Ｇｌｙ／デカノイル）は、Ｎ−ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−グリシンで調製した工程（ａ）中間体を用いて実施例５と同様にして調製した。比較例９および１０の調製は、それぞれ実施例２４および２５に示す。その結果を次頁の表２に示す。
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本発明の化合物と比較例の化合物とのバイオアベイラビリティーの比較は、Ｒ1／Ｒ2での脂肪酸とＲ1／Ｒ2でのアミノ酸との特別の組み合わせが対応するジアミノ酸エステルまたはジ脂肪酸エステルに比べて有意に大きなバイオアベイラビリティーをもたらすことを示している。たとえば、このモデルにおいて、実施例１の化合物は比較例３の対応ジバリンエステルに比べて５５％良好なバイオアベイラビリティーを示す。実施例４の化合物は対応ジバリンエステルに比べて２５％良好なバイオアベイラビリティーを示す。
さらに、たとえば比較例５、６および７の結果から、本発明の特定の脂肪酸のみが特定のアミノ酸との組み合わせで薬動力学パラメータにおけるこれら劇的で予測できない増大をもたらすことも明らかである。
生物学的実施例２
ラットにおける血漿濃度
血漿濃度アッセイを雄のスプラーグドーリー由来ラットで行った。投与に先立ち、動物を一夜絶食させたが水分は自由にとらせた。評価すべき各化合物をプロピレングリコール中で１０ｍｇＨ２Ｇ／ｍｌに対応する濃度にて溶液／懸濁液として調製し、室温にて８時間振盪した。ラット群（各群少なくとも４匹のラット）に各化合物の１０ｍｇ／ｋｇ（１ｍｌ／ｋｇ）経口投与量を与えた；この投与量を胃管栄養法（gavage）により投与した。投与後の選択した時点（投与後０．２５時間、０．５時間、１時間、１．５時間、２時間、４時間、６時間、９時間、１２時間、１５時間および２４時間）でヘパリン処理血液試料（０．４ｍｌ／試料）を各動物の尾静脈から得た。血液試料を直ちに氷浴中で冷却した。採取から２時間以内に血漿を遠心分離により赤血球から分離し、分析のときまで凍結させた。目的成分を血漿タンパク質からアセトニトリル沈殿を用いて分離した。凍結乾燥および再構成後、蛍光検出を用いる逆相ＨＰＬＣにより血漿濃度を測定した。Ｈ２Ｇおよび他の被験化合物の経口取り込みを、経口投与から得られる曲線下Ｈ２Ｇ面積を別の群のラットに投与したＨ２Ｇの１０ｍｇ／ｋｇ静脈内投与から得られるものと比較することによって決定した。その結果を上記表１Ｂに示す。
生物学的実施例３
サルにおけるバイオアベイラビリティー
実施例１および比較例３の化合物（上記生物学的実施例１を参照）をカニクイザルに胃管栄養法により経口で投与した。これら溶液は、以下のものを含んでいた：
実施例１  ６．０ｍｌのプロピレングリコール中に１５０ｍｇを溶解、２５ｍｇ／ｋｇまたは０．０２９５ミリモル／ｋｇに対応。
比較例３  ７．０ｍｌの水中に１６４ｍｇを溶解、２３．４ｍｇ／ｋｇまたは０．０２９５ミリモル／ｋｇに対応。
血液試料を３０分、１時間、２時間、３時間、４時間、６時間、１０時間および２４時間で採取した。血漿を２５００ｒｐｍで遠心分離により分離し、分析までに凍結乾燥する前に５４℃で２０分間不活化した。血漿Ｈ２Ｇレベルを上記実施例３０のＨＰＬＣ／ＵＶアッセイによりモニターした。
図１は血漿Ｈ２Ｇ回収を時間の関数として示す。単一の動物試験から統計的に有意な結論を引き出すことはできないが、本発明の化合物を与えた動物は他のＨ２Ｇプロドラッグを与えた動物に比べて若干より速やかで若干より大きなＨ２Ｇへの暴露を経験したように思われる。
生物学的実施例４
抗ウイルス活性
単純ヘルペスウイルス−１（ＨＳＶ−１）感染マウスは、インビボでの抗ウイルス剤の効能を決定するための動物モデルとして用いることができる。ＬＤ50の１０００倍のＨＳＶ−１を腹腔内接種したマウスに、現在市場に出回っている抗ヘルペス剤であるアシクロビルを含む製剤（滅菌水ビヒクル中の２％プロピレングリコール中に２１および８３ｍｇ／ｋｇ、毎日３回、経口）かまたは実施例２９の化合物（滅菌水ビヒクル中の２％プロピレングリコール中に２１および８３ｍｇ／ｋｇ、毎日３回、経口）のいずれかを接種５時間後から開始して５日間連続で投与した。動物の存命を毎日評価した。その結果を図２に示すが、図２は生存率を時間に対して作図したものである。図の説明において、本発明の化合物は実施例２９と、アシクロビルはＡＣＶと表示してある。生存したＨＳＶ−１感染マウスのパーセントは、本発明の化合物を所定量投与した場合に等価量のアシクロビルを投与した場合に比べて有意に大きくなった。
【図１】
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【図２】
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