(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
0004066272.tif 000039
［式中、
Ｒは水素、ハロゲン、低級アルコキシ、ジアルキルアミノ、アルキル、所望により置換されていてもよい１−アルキニル、又は置換されたアルキル；
Ｒ1は水素、所望により置換されていてもよいアルキル、所望により置換されていてもよいアルケニル、所望により置換されていてもよいアリール、所望により置換されていてもよいアラルキル、所望により置換されていてもよいアルキニル、所望により置換されていてもよいアラルキニル、アルコキシアルキル、アミノアルキル、シアノ、シアノアルキル、チオシアノアルキル、アジドアルキル、置換されたアラルキニル、アリールアルキル、アリールアルケニル、所望により置換されていてもよいアラルキルアルキニル、アルカノイルオキシアルキニル、所望により置換されていてもよいヘテロアリールオキシアルキニル、オキサアルキニル又はそのケタール、シアノアルキニル、所望により置換されていてもよいヘテロアリールアルキニル、ヒドロキシアルキニル、アルコキシアルキニル、アミノアルキニル、アシルアミノアルキニル、メルカプトアルキニル、ヒドロキシアルキニル二酸ヘミ−エステル又はその塩、又はアルキニルオキシアルキニル；
Ｒ2は水素、ヒドロキシ、アルコキシ、アルカノイルオキシ、カルバルコキシル、ケト基又はアミノ基；
Ｒ3は所望により置換されていてもよいヘテロアリールアセチル基；
Ｒ4は水素又はメチル；
Ｒ5は水素；
Ｒ6は水素、アルカノイル、アミノカルボニル又はアルコキシカルボニル；
Ｒ7は水素、ハロゲン、ヒドロキシ、アルコキシ、アルカノイルオキシ又はカルバルコキシル；
Ｒ8は水素又はハロゲン；
Ｒ9は水素、ハロゲン、アルキル、アルコキシ、アリールアルコキシ又はアミノ；そして
Ｒ10は水素、ハロゲン、アルキル、ハロアルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アルカノイルオキシ、カルバルコキシル、シアノ、チオシアノ又はメルカプトを表す。
ここで用いた用語は以下のごとく定義される。
「アルキル」という語句は直鎖、分枝鎖、及び環状の飽和脂肪族基を意味し、それらは全て、所望により置換されていてもよく、
「アルケニル」という語句は、少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を含む直鎖、分枝鎖、及び環状の不飽和基を意味し、それらは全て所望により置換されていてもよく、
「アルキニル」という語句は、少なくとも１個の炭素−炭素三重結合を含む直鎖及び分枝鎖の不飽和炭化水素基を意味し、それらは所望により置換されていてもよく、
「アルコキシ」という語句はエーテル−ＯＲ（ここにＲはアルキル）を意味し、
「アリールオキシ」という語句はエーテル−ＯＲ（ここにＲはアリール）を意味し、
「アリール」という語句は、共役したパイ電子系を有する少なくとも１個の環を有する芳香族基を意味し、炭素環アリール及びビアリールが含まれ、いずれも所望により置換されていてもよく、
「炭素環アリール」という語句は芳香環上の環原子が炭素原子である芳香環基を意味し、
「アラルキル」または「アリールアルキル」という語句はアリール基で置換されたアルキル基を意味し、所望により置換されていてもよく、
「アルカノイルオキシ」という語句は、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）Ｒ（Ｒはアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、又はアラルキル）を意味し、
「カルバルコキシル」という語句は、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ（Ｒはアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、又はアラルキル）を意味し、
「カルボキサミド」という語句は、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＲ1（Ｒ及びＲ1は独立して水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、又はアラルキルから選択される）を意味し、
「ジアルキルアミノ」という語句は、−ＮＲＲ”（Ｒ及びＲ”は独立して低級アルキル基を表すか、一緒になって、モルホリノ基の残余部分を形成する）を意味し、
「アミノ」という語句は、ＮＲＲ’（Ｒ及びＲ’は独立して水素、低級アルキルであるか、一緒になって５又は６員環を形成する）を意味し、
「所望により置換されていてもよい」基又は「置換された」基という語句は、低級アルキル（非環式もしくは環式）、アリール（炭素系アリールもしくはヘテロアリール）、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、ハロ、ハロアルキル、アミノ、メルカプト、アルキルチオ、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、ニトロ、アルカノイル、アルカノイルオキシ、アルカノイルオキシアルカノイル、アルコキシカルボキシ、カルバルコキシ［−ＣＯＯＲ（Ｒは低級アルキル）］、カルボキサミド［−ＣＯＮＲＲ’（Ｒ及びＲ’は独立して低級アルキル）］、ホルミル、カルボキシル、ヒドロキシ、シアノ、アジド、ケト及びその環状ケタール、アルカノイルアミド、ヘテロアリールオキシ、ヘテロカルボサイクリックオキシ、及びヘミスクシネートエステル塩類から独立して選択される、１−３、４又は５個の置換基で置換された基を意味し、
「低級」という語句は、有機基又は化合物に関して、炭素原子数が１から１０個（１０を含む）までの直鎖、分枝鎖又は環状であることを意味し、
「ヘテロアリール」という語句は１、２、３又は４個のＯ、Ｎ又はＳ原子を含有し、１又はそれ以上の環に非局在する６、１０又は１４個のπ電子を有する炭素含有５−１４員の環状不飽和基を意味する。］
で示される化合物又はその生理学的に許容される３−エステル。
【請求項２】
Ｒ3が所望により置換されていてもよいイミダゾリルアセチル基である、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ1がアルコキシアルキル基である、請求項１又は２記載の化合物。
【請求項４】
３α−ヒドロキシ−２１−（１’−イミダゾリル）−５β−プレグナン−２０−オン、
３α−ヒドロキシ−３β−（４−ヒドロキシブチン−１−イル）−２１−（１−イミダゾリル）−５β−プレグナン−２０−オン、
３α−ヒドロキシ−３β−（４−ヒドロキシブチン−１−イル）−２１−（１−イミダゾリル）−５β−１９−ノルプレグナン−２０−オン、
３α−ヒドロキシ−２１−［１Ｈ−（４−メチル−５−カルボキシル）イミダゾール−１−イル］−５β−プレグナン−２０−オン  エチルエステル、
３α−ヒドロキシ−２１−（１’−イミダゾリル）−５α−プレグナン−２０−オン、
３β−エチニル−３α−ヒドロキシ−２１−（１’−イミダゾリル）−５β−プレグナン−２０−オン、
３α−ヒドロキシ−２１−（１’−イミダゾリル）−３β−メチル−５α−プレグナン−２０−オン、
３α−ヒドロキシ−２１−［１Ｈ−（２−メチル）イミダゾール−１−イル）−５β−プレグナン−２０−オン、
３α−ヒドロキシ−３β−トリフルオロメチル−２１−（１−イミダゾリル）−５β−プレグナン−２０−オン、
３α−ヒドロキシ−２１−［１Ｈ−（２’−ホルミル）イミダゾール−１−イル）］−５β−プレグナン−２０−オン又は
３α−ヒドロキシ−３β−トリフルオロメチル−２１−（１−イミダゾリル）−５β−１９−ノル−プレグナン−２０−オンである請求項２記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ3が所望により置換されていてもよいピラゾリルアセチル基である請求項１記載の化合物。
【請求項６】
３α−ヒドロキシ−２１−（ピラゾール−１−イル）−５β−プレグナン−２０−オン、
３α−ヒドロキシ−２１−（ピラゾール−１−イル）−５α−プレグナン−２０−オン、
３α−ヒドロキシ−２１−（１Ｈ−３，５−ジメチルピラゾリル）−５β−プレグナン−２０−オン、
３α−ヒドロキシ−２１−（１’−ピラゾリル）−３β−メチル−５α−プレグナン−２０−オン、
３α−ヒドロキシ−２１−（ピラゾール−１−イル）−３β−トリフルオロメチル−５β−プレグナン−２０−オン又は
３α−ヒドロキシ−２１−（ピラゾール−１−イル）−３β−トリフルオロメチル−５β−１９−ノル−プレグナン−２０−オンである請求項５記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ3が所望により置換されていてもよいトリアゾリルアセチル基である請求項１記載の化合物。
【請求項８】
３α−ヒドロキシ−３β−メチル−２１−（１’，２’，４’−トリアゾリル）−５α−プレグナン−２０−オン、
３α−ヒドロキシ−３β−（４−ヒドロキシブチン−１−イル）−２１−（１，２，３−トリアゾール−２−イル）−５β−１９−ノルプレグナン−２０−オン、
３α−ヒドロキシ−２１−（２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２−イル）−５β−プレグナン−２０−オン、
３α−ヒドロキシ−３β−メチル−２１−（２’Ｈ−１’，２’，３’−トリアゾール−２’−イル）−５α−プレグナン−２０−オン、
３β−エチニル−３α−ヒドロキシ−２１−１’，２’，４’−トリアゾリル）−５β−プレグナン−２０−オン、
３α−ヒドロキシ−３β−メチル−２１−（１’，２’，３’−トリアゾール−１’−イル）−５α−プレグナン−２０−オン、
３α−ヒドロキシ−２１−（１’，２’，４’−トリアゾール−１−イル）−５β−プレグナン−２０−オン、
３α−ヒドロキシ−３β−（４−ヒドロキシブチン−１−イル）−２１−（１，２，４−トリアゾール−１−イル）−５β−プレグナン−２０−オン、
３α−ヒドロキシ−３β−（４−ヒドロキシブチン−１−イル）−２１−（１，２，３−トリアゾール−１−イル）−５β−プレグナン−２０−オン、
３α−ヒドロキシ−３β−（４−ヒドロキシブチン−１−イル）−２１−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−５β−１９−ノルプレグナン−２０−オン、
３α−ヒドロキシ−３β−トリフルオロメチル−２１−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−５β−１９−ノルプレグナン−２０−オン又は
３α−ヒドロキシ−３β−トリフルオロメチル−２１−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−５β−１９−プレグナン−２０−オンである請求項７記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ3が所望により置換されていてもよいテトラゾリルアセチル基である請求項１記載の化合物。
【請求項１０】
３α−ヒドロキシ−２１−（２’Ｈ−１，２，３，４−テトラゾール−２’−イル）−５β−プレグナン−２０−オン、
３α−ヒドロキシ−２１−（１’Ｈ−１，２，３，４−テトラゾール−１’−イル）−５β−プレグナン−２０−オン又は
３α−ヒドロキシ−３β−（４−ヒドロキシブチン−１−イル）−２１−（テトラゾール−１−イル）−５β−プレグナン−２０−オンである請求項９記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ3が所望により置換されていてもよいベンズイミダゾリルアセチル基である請求項１記載の化合物。
【請求項１２】
３α−ヒドロキシ−２１−（１’−ベンズイミダゾリル）−５β−プレグナン−２０−オン、
２１−（１’−ベンズイミダゾリル）−３α−ヒドロキシ−３β−メチル−５α−プレグナン−２０−オン又は
２１−（１’−ベンズイミダゾリル）−３α−ヒドロキシ−３β−メチル−５α−プレグナン−２０−オンである請求項１１記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ3が所望により置換されていてもよいプリニルアセチル基である請求項１記載の化合物。
【請求項１４】
３α−ヒドロキシ−２１−（９’Ｈ−プリン−９’−イル）−５β−プレグナン−２０−オン又は
３α−ヒドロキシ−２１−（７’Ｈ−プリン−７’−イル）−５β−プレグナン−２０−オンである請求項１３記載の化合物。
【請求項１５】
Ｒがモルホリノ基でありＲ3が所望により置換されていてもよいトリアゾリルアセチル基である請求項１記載の化合物。
【請求項１６】
３α−ヒドロキシ−２β−モルホリニル−２１−（１，２，４−トリアゾリル）−５α−プレグナン−２０−オンである請求項１５記載の化合物。
【請求項１７】
Ｒ3が所望により置換されていてもよいウラシルアセチル基である請求項１記載の化合物。
【請求項１８】
３α−ヒドロキシ−２１−（１’−ウラシル）−１５α−プレグナン−２０−オンである請求項１７記載の化合物。
【請求項１９】
Ｒが所望により置換されていてもよい１−アルキニル基である請求項１記載の化合物。
【請求項２０】
動物対象におけるストレス又は不安を治療又は予防するための医薬組成物であって、請求項１−１９のいずれかに記載の化合物と製剤的に許容されるキャリアまたは希釈剤とを含有する医薬組成物。
【請求項２１】
動物対象における発作行動（恐慌行動）を緩和又は予防するための医薬組成物であって、請求項１−１９のいずれかに記載の化合物と製剤的に許容されるキャリアまたは希釈剤とを含有する医薬組成物。
【請求項２２】
動物対象における不眠症を緩和又は予防するための医薬組成物であって、請求項１−１９のいずれかに記載の化合物と製剤的に許容されるキャリアまたは希釈剤とを含有する医薬組成物。
【請求項２３】
動物対象における月経前症候群（ＰＭＳ）又は出産後の抑うつ（ＰＮＤ）を緩和又は予防するための医薬組成物であって、請求項１−１９のいずれかに記載の化合物と製剤的に許容されるキャリアまたは希釈剤とを含有する医薬組成物。
【請求項２４】
動物対象における情緒障害を緩和又は予防するための医薬組成物であって、請求項１−１９のいずれかに記載の化合物と製剤的に許容されるキャリアまたは希釈剤とを含有する医薬組成物。
【請求項２５】
該情緒障害がうつ病である請求項２４に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
動物対象に麻酔を誘導するための医薬組成物であって、請求項１−１９のいずれかに記載の化合物と製剤的に許容されるキャリアまたは希釈剤とを含有する医薬組成物。
【請求項２７】
該化合物が、酢酸、プロピオン酸マレイン酸、フマル酸、アスコルビン酸、ピメリン酸、コハク酸、グルタル酸、ビスメチレンサリチル酸、メタンスルホン酸、エタン−ジ−スルホン酸、オキザル酸、酒石酸、サリチル酸、クエン酸、グルコン酸、イタコン酸、グリコール酸、ｐ−アミノ安息香酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、γ−アミノ−酪酸、α−（２−ヒドロキシエチルアミノ）プロピオン酸、グリシン及び他のα−アミノ酸、リン酸、硫酸、グルクロン酸、及び１-メチル-１，４-ジヒドロニコチン酸からなる群から選択される酸の製剤的に許容されるエステル又はジエスチルである請求項２０−２６のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項２８】
該薬剤が静脈投与の場合、投与単位あたり約１mgから約１００mg、非−静脈投与の場合、投与単位あたり約１００mgから５００mgで、該化合物が存在している、請求項２０−２６のいずれかに記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
関連出願の相互参照
本願は、米国出願第０８／１９６，９１９号（１９９４年２月１４日出願）の、米国一部継続出願第０８／３４６，９２７号（１９９４年１１月２３日）の米国一部継続出願であり、本願はこれら各々の全内容を参照して組み込んでいる。
発明の背景
本発明はγ−アミノ酪酸Ａ（ＧＡＢＡA）受容体−クロリド・イオノフォア複合体（ＧＲＣ）を介する動物（及びヒト）の脳の興奮性を調節するための、方法、組成物、及び化合物に関する。
脳の興奮性は昏睡状態から痙攣までに及ぶ連続的な動物の覚醒レベルとして定義され、さまざまな神経伝達物質によって調節される。一般に神経伝達物質は、ニューロン膜を横切るイオンの伝導性（コンダクタンス）の調節に関与している。安静時では、ニューロン膜は約−８０mVの電位差（膜ボルテージ）を有し、細胞内側は細胞外側に対して負である。この電位差（ボルト）はニューロン半透膜を横切るイオン（Ｋ+、Ｎａ+、Ｃｌ-、有機性アニオン）の平衡の結果である。神経伝達物質はシナプス前小胞に貯蔵され、ニューロン性活動電位の影響下に放出される。シナプス間隙へ放出されると、アセチルコリンのような興奮性の化学伝達物質は膜の脱分極（−８０mVから−５０mVへの電位変化）を起す。この効果は、アセチルコリンにより刺激を受けてＮａ+イオンの膜透過性を増大するシナプス後のニコチン性受容体により仲介される。低下した膜電位はシナプス後の活動電位の形でニューロンの興奮性を刺激する。
ＧＲＣの場合、脳の興奮性に対する効果は神経伝達物質であるＧＡＢＡによって仲介される。脳内ニューロンの４０％までがＧＡＢＡを神経伝達物質として利用しているので、ＧＡＢＡは脳全体の興奮性に対して著しい影響をもつ。ＧＡＢＡはニューロン膜を横切るクロリドイオンの伝導性を調節することによって、個々のニューロンの興奮性を調節する。ＧＡＢＡはＧＲＣ上にある認識部位と相互作用し、クロリドイオンの、ＧＲＣから細胞内への電気化学的勾配下流への流れを促進する。このアニオンの細胞内レベルの増加は膜貫通（トランスメンブラン）電位の過分極をもたらし、興奮性入力に対するニューロンの感受性を低下する（即ち、ニューロンの興奮性低下）。換言すれば、ニューロン内のクロリドイオン濃度が高ければ高いほど、脳の興奮性（覚醒水準）は低下する。
ＧＲＣは、不安、発作行動、及び鎮静の仲介に関与することがよく知られている。従ってＧＡＢＡ及びＧＡＢＡ様の作用をする薬物、もしくはＧＡＢＡの効果を増強する薬物［例えば治療的に有用なバルビツレート類、及び「Valium」のようなベンゾジアゼピン類（ＢＺ）］は、ＧＲＣ上の特異的な調節部位と相互作用することによってその治療上有用な効果を発揮する。
また一連のステロイド代謝産物はＧＲＣと相互作用することにより脳の興奮性を変化させることが観察された［マジェフスカ、Ｍ．Ｄ．ら、「Steroid hormone metabolites are barbiturate-like modulators of the GABA receptor」、サイエンス、２３２巻、１００４〜１００７頁（１９８６年）、ハリソン、Ｎ．Ｌ．ら、「Structure-activity relationships for steroid interaction with the gamma-aminobutyric acid-A receptor complex」、ジャーナル・オブ・ファーマコロジー・アンド・エキスペリメンタル・セラピューティックス、２４１巻、３４６〜３５３頁（１９８７年）］。本発明以前は、作用の効力及び部位に関する理解が不完全なために、当該技術分野の研究者はこれらのステロイド代謝産物の治療的な有用性を認めていなかった。本出願人の発明は、一部、ある種のステロイド化合物の効力及び部位に関して理解がより進んだ結果得られた知識を製薬に適用することに関する。
卵巣ホルモンであるプロゲステロンおびその代謝産物は脳の興奮性に対して著しい効果を有することが証明された［バックストローム、Ｔ．ら、「Ovarian steroid hormones：effects on mood，behavior and brain excitability」、アクタ・オブステトリカ・エ・ギネコロジカ・スカンジナビカ、増刊、１３０巻、１９〜２４頁（１９８５年）、プファフ、Ｄ．Ｗ．及びマッキウエン、Ｂ．Ｓ．、「Actions of estrogens and progrestins on nerve cells」、サイエンス、２１９巻、８０８〜８１４頁（１９８３年）、ジアメックら、「Structure activity relationships of some steroidal hypnotic agents」、ジャーナル・オブ・メジシナル・ケミストリー、１１巻、１１７頁（１９６８年）、ランバート、Ｊ．ら、「Actions of synthetic and endogenous steroids on the GABAA receptor」、トレンズ・イン・ファーマコロジー、８巻、２２４〜２２７頁（１９８７年）］。プロゲステロン及びその代謝産物のレベルは月経周期の時期にともなって変化する。プロゲステロン類及びその代謝産物は月経開始前に減少することはよく証明されている。月経開始に先立って毎月繰り返されるある種の身体的症状もよく証明されている。月経前症候群（ＰＭＳ）に伴って起るこれらの症状はストレス、不安、及び偏頭痛等である［ダルトン、Ｋ．、「プレメンストルアル・シンドローム・アンド・プロジェステロン・セラピー」、第２版（シカゴ）、シカゴ・イヤーブック（１９８４年）］。ＰＭＳの患者は、月経前に現れ月経後になくなる症状を毎月繰り返す。
これと類似の形で、プロゲステロンの低下は女性てんかん患者における発作回数の増加と時期的に相関する（即ち月経てんかん）［レイドロー、Ｊ．、「Catamenial epilepsy」、ランセット、１２３５〜１２３７頁（１９５６年）］。プロゲステロン代謝産物の減少との一層直接的な相関関係が観察された［ロシツェフスカら、「Ovarian homones，anticonvulsant drugs and seizures during the menstrual cycle in women with epilepsy」、ジャーナル・オブ・ニューロロジー・ニューロサージャリー・アンド・サイキアトリー、４９巻、４７〜５１頁（１９８６年）］。また原発全汎小発作てんかん患者で、発作の時間的発生頻度は月経前症候群の症状の発生頻度と相関した［バックストローム、Ｔ．ら、「Ensocrinological aspects of cyclical mood changes during the menstrual cycle or the premenstrual syndrome」、ジャーナル・オブ・サイコソマティック・オブステトリックス・アンド・ジャイネコロジー、２巻、８〜２０頁（１９８３年）］。ステロイドであるデスオキシコルチコステロンは月経周期と相関したてんかん発作をもつ患者を処置するのに有効であることが判明した［エアド、Ｒ．Ｂ．及びゴーダン、Ｇ．、「Anticonvulsive properties of deoxycorticosterone」、ジャーナル・オブ・ジ・アメリカン・メジカル・ソサエティー、１４５巻、７１５〜７１９頁（１９５１年）］。
また低いプロゲステロン濃度と関連する症候群は出産後の抑うつ（ＰＮＤ）である。出産直後のプロゲステロン濃度の減少は劇的にＰＮＤの発症をもたらす。ＰＮＤの症状は軽度の抑うつから入院加療を必要とする精神病に至る範囲にわたる。ＰＮＤは重篤な不安・過敏を伴う。ＰＮＤに伴う抑うつは、古典的な抗うつ剤による処置にあまり反応せず、ＰＮＤを経験した婦人にはＰＭＳの発生頻度の増加が示される［ダルトン、Ｋ．（１９８４年）、前掲］。
以上を総括すると、これらの知見は、プロゲステロン及びデオキシコルチコステロンの非常に重要な役割、さらに詳しくは、それらの代謝産物が、月経てんかん、ＰＭＳ、及びＰＮＤに伴う発作行動又は症状の増大として現れる脳の興奮性のホメオスタティックな調節において重要な役割を示唆している。プロゲステロンの濃度低下とＰＭＳ、ＰＮＤ、及び月経てんかんに随伴する症状との相関関係［バックストロームら（１９８３年）、前掲、ダルトン、Ｋ．（１９８４年）、前掲］は、これらの疾患の処置におけるプロゲステロンの使用を促進した［マトソンら、「Medroxyprogesterone therapy of catamenial epilepsy」、アドバンシズ・イン・エピレプトロジー：第ＸＶ回エピレプシー・インターナショナル・シンポジウム、レーブン・プレス社（ニューヨーク）、２７９〜２８２頁（１９８４年）、及びダルトン、Ｋ.（１９８４年）前掲］。然しながらプロゲステロンは上記の症候群の処置に必ずしも常に有効とは限らない。例えばＰＭＳの処置ではプロゲステロンに関する用量−反応関係は存在しない［マドックスら、「A double-blind placebo-controlled trial of progresterone vaginal suppositories in the treatment of premenstrual syndrome」、オブステトリックス・アンド・ジャイネコロジー、１５４巻、５７３〜５８１頁（１９８６年）、デナースタインら、ブリティッシュ・メジカル・ジャーナル、２９０巻、１６〜１７頁（１９８６年）］。
本明細書で上記及び以下に挙げた出版物及び文献類は、参考文献として本明細書に包含させた。
発明の要約
本発明は脳の興奮性を調節するための方法、組成物、及び化合物に関する。より詳細には本発明は、ＧＲ複合体上に新たに同定した部位で作用し、ＧＲ−活性物質に感受性のストレス、不安、不眠、情緒障害（抑うつのような）、及び発作行動を緩和するよう、脳の興奮性を調節する３α−ヒドロキシル化ステロイド誘導体の使用に関連する。そのような処置に有効な組成物及び化合物は、本発明の範囲に包含される。
本発明に使用され、本発明の一部を構成する化合物は、ＧＡＢＡA受容体複合体に関連（associate）したクロリドイオン・チャンネルを調節する能力を通して作用する、中枢神経系の興奮性の調節物質である。出願人らの実験から、本発明に使用され、本発明を構成する化合物は、ＢＺ類のような既知の抗不安剤の作用に類似した抗痙攣・抗不安作用を有するが、ＧＲ複合体上の異なった部位で作用することが明らかにされた。
生殖に関連する過程（発情周期及び妊娠）とプロゲステロンの内因性代謝産物との関係は十分に確立されている［マーカー、Ｒ．Ｅ．、カム、Ｏ．、マックグルー、Ｒ．Ｖ．、「Isolation of epipregnanol-3-one-20 from human pregnancy urine」、ジャーナル・オブ・ジ・アメリカン・ケミカル・ソサエティー、５９巻、６１６〜６１８頁（１９３７年）］。然しながら本発明以前には、プロゲステロン代謝産物及びその誘導体の使用を通して脳の興奮性を調節することにより、障害を治療する方法は認識されていなかった。従って本発明は、本発明の化合物を使用して脳の興奮性を調節することにより、障害を治療する方法、組成物、及びそのための化合物を目的とする。本発明で処置し得る代表的な障害は、ＧＲ−活性物質に反応し得るてんかん、不安、月経前症候群（ＰＭＳ）、出産後の抑うつ（ＰＮＤ）、情緒障害（抑うつのような）、及び不眠である。本発明化合物はまた、麻酔を誘発するためにも使用しうる。
【図面の簡単な説明】
当業者であれば添付図面を参照することによって、本発明を一層よく理解し、その利点を評価し得よう。
図１Ａ及び１Ｂは［35Ｓ］t-ブチルビシクロホスホロチオナート（［35S］TBPS）のラット脳細胞膜への結合％を種々の濃度の（＋）ビククリン中のアルファキサロン（アルファキサロンとも呼ぶ）及びＧＡＢＡの対数濃度に対してプロットしたグラフである。
図２は２μＭ ＴＢＰＳ（■）、１μＭ ３α５αＰ（□）、１００μＭペントバルビタールＮａ（●）及び１μＭ ３α５αＰ＋１００μＭペントバルビタールＮａ（Ｏ）を添加することで開始した、ラット皮質Ｐ2ホモジネートからの２ｎＭ［35Ｓ］ＴＢＰＳの解離の経時変化を示す。
図３はラット海馬ホモジネート中での、［3Ｈ］−フルニトラゼパム結合への３α−ＯＨ−５α−プレグナン−２０−オン（３α−５α−Ｐ）調節に対するペントバルビタール１回投与の効果を示したグラフである。
図４はラット大脳皮質ホモジネート中の［35Ｓ］ＴＢＰＳ結合阻害に対する３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン、３α，２１−ジヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン（５α−ＴＨＤＯＣ）及びＲ５０２０（プロメゲステロン）の効果を示すグラフである。
図５は１５の異なる３α−ヒドロキシル化ステロイドのＴＢＰＳ結合と電気生理学的な活性との関係を示すグラフである。
図６はラット皮質ホモジネート中の［35Ｓ］ＴＢＰＳ結合阻害に対する３α−ＯＨ−５α−プレグナン−２０−オン、５α−プレグナン−３α，２０α−ジオール及び５β−プレグナン−３α，２０β−ジオールの効果を示すグラフである。
図７はヒト組換えＧＡＢＡ受容体サブユニットα１β１γ２Ｌを注射したアフリカツメガエルの接合子嚢におけるＧＡＢＡ−惹起電流に対する３α−ＯＨ−５α−プレグナン−２０−オン、５α−プレグナン−３α，２０α−ジオール及び５β−プレグナン−３α，２０β−ジオールの効果を示すグラフである。
図８は３α−ＯＨ−５α−プレグナン−２０−オン及び３α−ＯＨ−５β−プレグナン−２０−オンの注射から１０分以内に起こった明から暗への移動の数を示す線グラフである。
図９Ａ及び９Ｂは高められたプラス型迷路テストにおける３α−ＯＨ−５α−プレグナン−２０−オン及び３α−ＯＨ−５β−プレグナン−２０−オンの５分間試験期間中の、（Ａ）解放岐路への侵入及び（Ｂ）解放岐路内経過時間を示す２つの線グラフである。
図１０はGeller Seifter試験における３α−ＯＨ−５α−プレグナン−２０−オン及び３α−ＯＨ−５β−プレグナン−２０−オンに関するベースラインからの罰せられたラットの応答の変化を示す線グラフである。
図１１は３α−ＯＨ−５α−プレグナン−２０−オンの数個のプロドラッグの抗−metrazol（メトラゾール）活性の経時変化を示す。
好ましい態様の詳細な説明
本発明に含まれ、そして使用される化合物は、３−ヒドロキシル化−プレグナン及び３α−ヒドロキシル化−アンドロスタンの様々な誘導体、及びそのエステル、エーテル、スルホン酸塩、硫酸塩、ホスホン酸塩、リン酸塩、オキシム、チオ硫酸塩、ヘテロ環及びヘテロアリール誘導体、及びプロドラッグと称される誘導体等である。「プロドラッグ」と表わされるものは、既知の直接作用する薬物の誘導体であって、もとの薬物と比べて高められた薬物デリバリー特性及び治療価値を有し、酵素的又は化学的処理によって活性な薬物に変換される誘導体を指す［ノタリ、Ｒ．Ｅ．、「Theory and Practice of Prodrug Kinetics」、メソッズ・イン・エンジモロジー、１１２巻、３０９〜３２３頁（１９８５年）；ボーダー、Ｎ．、「Novel Approaches in Prodrug Design」、ドラッグズ・オブ・ザ・フューチャー、６巻（３）、１６５〜１８２頁（１９８１年）；バンドガード、Ｈ．、「Design of Prodrugs:Bioreversible Derivatives for Various Functional Groups and Chemical Entities」、デザイン・オブ・プロドラッグズ（Ｈ．バンドガード編）、エルセビル社（ニューヨーク）（１９８５年）参照］。本発明の一部を構成する合成誘導体のあるものは、上記の特徴に加えて固有の活性を有しているので、真のプロドラッグでないかもしれないことは注意すべきである。ただし本発明の目的から、それらをプロドラッグとよぶ。
本発明者らの研究［ギー、Ｋ．Ｗ．ら、「ＧＡＢＡ-dependent modulation of the Cl ionophore by steroids in rat brain」、ヨーロピアン・ジャーナル・オブ・ファーマコロジー、１３６巻、４１９〜４２３頁（１９８７年）］は、本発明に使用した３−ヒドロキシル化ステロイド類が、ＧＲ複合体の調節物質として他の研究者［マジェフスカ、Ｍ．Ｄ．ら（１９８６年）（前掲）、及びハリソンＮ．Ｌ．ら（１９８７年）（前掲）］の報告よりはるかに高い効果を有することを証明した。マジェフスカら及びハリソンらは３−ヒドロキシル化−５−還元−ステロイド類がはるかに低水準の効果しか持たないと報告した。本発明者らのインビトロ及びインビボ実験データは、これらのステロイド類はその高い能力により、ＧＲ複合体を介する脳の興奮性の調節に治療上有用であり得ることを示している。本発明で有用な最も強力なステロイド類は、プロゲステロン及びデオキシコルチコステロンの主たる代謝産物の誘導体を含む。これらのステロイド類は、ＧＲ-活性薬に反応し得るストレス、不安、不眠、情緒障害（抑うつのような）、及び発作異常における脳の興奮性の調節に、治療上好ましい態様で特異的に使用できる。さらに本発明者らは、これらのステロイド類が、従来、ストレス、不安、睡眠、情緒障害、及び発作障害に対して治療上有利な効果が惹起されるとされてきた既知の相互作用部位（即ち、バルビツレート、ＢＺ、及びＧＡＢＡ）［ギー、Ｋ．Ｗ．及びヤマムラ、Ｈ．Ｉ．、「Benzodiazepines and Barbiturates：Drugs for the treatment of Anxiety，Insomnia and Seizure Disorders」、イン・セントラル・ナーバス・システム・ディスオーダーズ、１２３〜１４７頁（Ｄ．Ｃ．ホーベル編、１９８５年）、ロイド、Ｋ．Ｇ．及びモーセリ、Ｐ．Ｌ．、「Psychopharmacology of GABAergic Drugs」、サイコファーマコロジー：ザ・サード・ジェネレーション・オブ・プログレス、１８３〜１９５頁、Ｈ．Ｙ．メルツァー編）、レーブン、プレス社（ニューヨーク）（１９８７年）］と異なる、ＧＲ複合体上の独自な部位で相互作用することを証明した。これらの化合物は、持効性、効力及び経口活性（他の投与形態と併せて）の点で好ましいものである。
本発明のステロイド誘導体は、下記の式（Ｉ）：
0004066272.tif 000002
（式中、Ｒ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9及びＲ10は本明細書で以下に定義される通りであり、点線は単結合又は二重結合である）
で示される構造式の１つを有する。式Ｉの構造にはアンドロスタン類、プログナン類（Ｒ4＝メチル）、１９−ノル−アンドロスタン類、及びノルプレグナン類（Ｒ4＝Ｈ）が含まれる。
本発明はまた、式Ｉで示される化合物の製剤的に許容されるエステル及び酸付加塩等の塩をも包含する。プロドラッグが薬物型に変換されるように、エステルは切り離されるであろうという事実から、３αヒドロキシは、製剤的に許容されるエステルとしてマスクされていてもよいと考えられる。本明細書中、これらを開裂可能なエステルと称する。
定義
本発明に従い、本明細書で用いられる次の語句を明白に特記しないかぎり、以下のごとく定義する。
「アルキル」という語句は直鎖、分枝鎖、及び環状の飽和脂肪族基を意味し、それらは全て、所望により置換されていてもよい。適当なアルキル基には所望により置換されていてもよいメチル、エチル等が含まれる。
「アルケニル」という語句は、少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を含む直鎖、分枝鎖、及び環状の不飽和基を意味し、それらは全て所望により置換されていてもよい。
「アルキニル」という語句は、少なくとも１個の炭素−炭素三重結合を含む直鎖及び分枝鎖の不飽和炭化水素基を意味し、それらは所望により置換されていてもよい。適当なアルキニル基には、プロピニル、ペンチニル等が含まれ、それらはシアノ、アセトキシ、ハロ、ヒドロキシ又はケトによって置換されていてもよい。好ましいアルキニル基は炭素原子５−１８個を有する。より好ましいアルキニル基は炭素原子５−１２個を有する。最も好ましいアルキニル基は炭素原子５−７個を有する。
「アルコキシ」という語句はエーテル−ＯＲ（ここにＲはアルキル）を意味する。
「アリールオキシ」という語句はエーテル−ＯＲ（ここにＲはアリール）を意味する。
「アリール」という語句は、共役したパイ電子系を有する少なくとも１個の環を有する芳香族基を意味し、炭素環アリール及びビアリールが含まれ、いずれも所望により置換されていてもよい。
「炭素環アリール」という語句は芳香環上の環原子が炭素原子である芳香環基を指す。炭素環アリールには所望により置換されていてもよいフェニル及びナフチル基が含まれる。置換フェニルは好ましくは１−３、４又は５個の置換基を有し、低級アルキル、アミノ、アミド、シアノ、カルボン酸エステル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、ハロゲン、低級アシル、及びニトロ等の置換基が好都合である。
「アラルキル」という語句はアリール基で置換されたアルキル基を意味する。適当なアラルキル基はベンジル等を含み、所望により置換されていてもよい。
「アルカノイルオキシ」という語句は、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）Ｒ（Ｒはアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、又はアラルキル）を意味する。
「カルバルコキシル」という語句は、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ（Ｒはアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、又はアラルキル）を意味する。
「カルボキサミド」という語句は、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＲ1（Ｒ及びＲ1は独立して水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、又はアラルキルから選択される）を意味する。
「ジアルキルアミノ」という語句は、−ＮＲＲ”（Ｒ及びＲ”は独立して低級アルキル基を表すか、一緒になって、モルホリノ基の残余部分を形成する）を意味する。適当なジアルキルアミノ基はジメチルアミノ、ジエチルアミノ、及びモルホリノを含む。
「アシル」という語句は、アルカイノル基−Ｃ（Ｏ）Ｒ（Ｒはアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、又はアラルキル）を意味する。
「アミノ」という語句は、ＮＲＲ’（Ｒ及びＲ’は独立して水素、低級アルキルであるか、一緒になって５又は６員環（例えばピロリジン又はピペリジン環）を形成する）を意味する。
「所望により置換されていてもよい」又は「置換された」という語句は、低級アルキル（非環式及び環式）、アリール（炭素系アリール及びヘテロアリール）、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、ハロ、ハロアルキル（トリハロアルキル（例えばトリフルオロメチルを含む））、アミノ、メルカプト、アルキルチオ、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、ニトロ、アルカノイル、アルカノイルオキシ、アルカノイルオキシアルカノイル、アルコキシカルボキシ、カルバルコキシ［−ＣＯＯＲ（Ｒは低級アルキル）］、カルボキサミド［−ＣＯＮＲＲ’（Ｒ及びＲ’は独立して低級アルキル）］、ホルミル、カルボキシル、ヒドロキシ、シアノ、アジド、ケト及びその環状ケタール、アルカノイルアミド、ヘテロアリールオキシ、ヘテロカルボサイクリックオキシ、及びヘミスクシネートエステル塩類から独立して選択される、１−３、４又は５個の置換基により置換された基を意味する。
「低級」という語句は、本明細書中、有機基又は化合物に関し、炭素原子数が１から１０個（１０を含む）まで、好ましくは１から６個まで（６を含む）、より好都合には１から４個までと定義する。そのような基は直鎖、分枝鎖又は環状であってよい。
「ヘテロ環」という語句は１、２又は３個のＯ、Ｎ又はＳヘテロ原子を含有する４、５、６又は７員環の炭素含有基であって、例えばチアゾリジン、テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン、ピロリジン、ピペリジン、キヌクリジン（quinuclidine）、ジチアン、テトラヒドロピラン、ε−カプロラクトン、ε−カプロラクタム、ω−チオカプロラクタム及びモルホリン等が含まれる。
「ヘテロアリール」という語句は１、２、３又は４個のＯ、Ｎ又はＳ原子を含有し、１又はそれ以上の環に非局在する６、１０又は１４個のπ電子を有する炭素含有５−１４員の環状不飽和基を指し例えばピリジン、オキサゾール、インドール、プリン、ピリミジン、イミダゾール、ベンズイミダゾール、インダゾール、２Ｈ−１，２，４−トリアゾール、１，２，３−トリアゾール、２Ｈ−１，２，３，４−テトラゾール、１Ｈ−１，２，３，４−テトラゾール、ベンゾトリアゾール、１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン、チアゾール、イソキサゾール、ピラゾール、キノリン、シトシン、チミン、ウラシル、アデニン、グアニン、ピラジン、ピコリン酸、ピコリン、フロ酸、フルフラル、フリルアルコール、カルバゾール、９Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］インドール、イソキノリン、ピロール、チオフェン、フラン、９（１０Ｈ）−アクリドン、フェノキサジン、及びフェノチアジンが含まれ、これら各々は上記のごとく、所望により置換されていてもよい。
「二酸」という語句は２つのカルボキシ基で置換されたＣ1-5アルキレン基を指し、例えばマロン酸、クエン酸、グルタル酸、アジピン酸、ピメリン酸、及びスベリン酸が含まれる。二酸のヘミエステル塩には、そのナトリウム、リチウム、カリウム、マグネシウム、及びカルシウム塩が含まれる。
「β−アセチル−チオスルフェート塩」という語句は、そのナトリウム、リチウム、カリウム、マグネシウム及びカルシウム塩を含む意図である。
「製剤的に許容されるエステル又は塩」という語句は、本発明の化合物と有機又は無機酸又は塩基との組合わせから導かれる式Ｉのエステル又は塩を指す。
本発明に従って、ケタールとしては低級アルカノールのジエーテル（例えば、ジメチル及びジエチルケタール）、並びにＣ2-3アルカンジオールのジエーテルを含む環状ケタール（例えばエチレンケタール及びプロピレンケタール）を挙げることができる。
式Ｉの化合物に用いることができる置換基の例は、以下の通りである。
Ｒは水素、ハロゲン、所望により置換されていてもよい１−アルキニル、低級アルコキシ、アルキル、ジアルキルアミノ、又は置換されたアルキル；
Ｒ1は置換されたアラルキニル、アリールアルキル、アリールアルケニル、アリール、所望により置換されていてもよいアラルキルアルキニル、アルカノイルオキシアルキニル、所望により置換されていてもよいヘテロアリールオキシアルキニル、オキサアルキニル又はそのケタール、シアノアルキニル、所望により置換されていてもよいヘテロアリールアルキニル、ヒドロキシアルキニル、アルコキシアルキニル、アミノアルキニル、アシルアミノアルキニル、メルカプトアルキニル、ヒドロキシアルキニル二酸ヘミ−エステル又はその塩、又はアルキニルオキシアルキニル；
Ｒ2は水素、ヒドロキシ、アルコキシ、アルカノイルオキシ、カルバルコキシル、ケト基又はアミノ基；
Ｒ3はアセチル基、アセチル基のケタール；アルコキシアセチル基、アルキルチオアセチル基、アルキルスルフィニルアセチル基、アルキルスルホニルアセチル基、アミノアセチル基、トリフルオロアセチル基；ヒドロキシアセチル基；アルコキシアルキルアセチル基（例えばメトキシメチルアセチル基又はエトキシメチル−２’−メチレンアセチル基）；ヒドロキシアルキル基（例えばヒドロキシメチル基、１’−ヒドロキシエチル基、１’−ヒドロキシプロピル基、又は２’−ヒドロキシ−２’−プロピル基）；ヒドロキシアセチル二酸ヘミ−エステル塩（例えばスクシニルオキシアセチル基）；アルカノイルオキシアセチル基（例えばアセトキシアセチル基））；又はスルホキシアセチル基；アルキルアセチル基（例えばメチルアセチル基）；ハロアセチル基；エチニル基；所望により置換されていてもよいヘテロアリールアセチル基；所望により置換されていてもよいヘテロアラルキルアセチル基、これはまた所望によりアルキレンがヒドロキシ、アルコキシ、アルカノイルオキシ又はカルバルコキシル基により置換されていてもよい；所望により置換されていてもよいヘテロ環−アセチル基；アセチルチオスルフェート塩；シアノ基；アルキルメチレン基（Ｒ7と一緒になって）；又はアルコキシメチレン基（Ｒ7と一緒になって）；
Ｒ4は水素又はメチル、
Ｒ5は水素；
Ｒ6は水素、アルカノイル、アミノカルボニル又はアルコキシカルボニル；
Ｒ7は水素、ハロゲン、ヒドロキシ、アルコキシ、アルカノイルオキシ、カルバルコキシル、メチレン基（Ｒ3と一緒になって）、又はアルコキシメチレン基（Ｒ3と一緒になって）；
Ｒ8は水素又はハロゲン；
Ｒ9は水素、ハロゲン、アルキル、アルコキシ、アリールアルコキシ又はアミノ；そして
Ｒ10は水素、ハロゲン、アルキル、ハロアルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アルカノイルオキシ、カルバルコキシル、シアノ、チオシアノ又はメルカプトである。
但し、Ｒ3が所望により置換されていてもよいヘテロアリールアセチル基又はアセチルチオスルフェート塩又はＲが所望により置換されていてもよい１−アルキニル基である場合、Ｒ1はさらに水素、アルキル、アルケニル、アリール、アラルキル、アルキニル、所望により置換されていてもよいアラルキニル、アルコキシアルキル、アミノアルキル、シアノ、シアノアルキル、チオシアノアルキル、又はアジドアルキルである。
好ましい式Ｉの化合物群はＲが水素又は低級アルコキシである化合物である。Ｒ、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9及びＲ10が水素である化合物がより好ましい。
他の好ましい化合物群は、式ＩにおいてＲ1が置換されたアラルキニル、例えばＲ1が４−置換フェニルアルキニル（例えば、４−アセチルフェニルエチニル、４−メトキシフェニルエチニル、４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノフェニルエチニル、４−シアノフェニルエチニル、４−カルボキシフェニルエチニル エチルエステル、４−Ｎ，Ｎ−ジアルキルアミドフェニルエチニル）、又はＲ1がオキソアルキニル、ヒドロキシアルキニル、アセトキシアルキニル、シアノアルキニル、又はアルコキシアルキニルである化合物である。
また、その他の好ましい化合物群はＲ3がアセチル、ヘテロアリールアセチル、ヘテロ環−アセチル、ヒドロキシアルキル、ヒドロキシアセチル、及びそれらの生理学的に許容される酸とのエステルである。さらに好ましくは、Ｒ3はアセチル、β−スクシニルオキシアセチル、アルコキシアセチル、アセチルチオ硫酸塩、ピラゾリルアセチル、又はイミダゾリルアセチルである。
さらに他の好ましい化合物群は、
Ｒが水素、フルオロ、クロロ又は低級アルコキシ；
Ｒ1が置換されたアリールエチニル；
Ｒ2が水素、ケト基又はジメチルアミノ基；
Ｒ3がβ−アセチル基、β−アセチル基のジメチルケタール、トリフルオロアセチル基、β−（ヒドロキシアセチル）基、β−メトキシメチルアセチル基、β−（エトキシ）メチル−２’−メチレンアセチル基、β−（１’−ヒドロキシエチル）基、β−（１’−ヒドロキシプロピル）基、β−（２’−ヒドロキシ−２’−プロピル）基、β−スクシニルオキシアセチル基、β−ヒドロキシアセチルコハク酸ナトリウム基、β−アセトキシアセチル基、β−スルホキシアセチル基、β−メチルアセチル基、β−クロロアセチル基、又はβ−エチニル基；
Ｒ4が水素又はメチル；
Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9及びＲ10が水素；
点線が全て単結合；そして
Ｒ7が水素、又はＲ3がβ−ヒドロキシアセチルのときＲ7が水素又はヒドロキシである化合物である。
さらに好ましい化合物は、３、２０及び／又は２１位のヒドロキシル基のエステルである式Ｉの化合物である。好ましいエステルはそれらの対応する以下に例示する酸及び二酸から得られるエステルである；酢酸、プロピオン酸、マレイン酸、フマル酸、アスコルビン酸、ピメリン酸、コハク酸、グルタル酸、ビスメチレンサリチル酸、メタンスルホン酸、エタン−ジ−スルホン酸、オキザル酸、酒石酸、サリチル酸、クエン酸、グルコン酸、イタコン酸、グリコール酸、ｐ−アミノ安息香酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、ガンマ−アミノ−酪酸、α−（２−ヒドロキシエチルアミノ）プロピオン酸、グリシン及び他のα−アミノ酸、リン酸、硫酸、グルクロン酸、及び１−メチル-１，４-ジヒドロニコチン酸。
好ましい化合物は以下の化合物である：３α−ヒドロキシ−３β−フェニルエチニル−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−フェニルエチニル−５α−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−（３’，４’−ジメトキシフェニル）エチニル−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−（４’−メチルフェニル）エチニル−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−（２’−メトキシフェニル）エチニル−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−（４’−カルボキシフェニル）エチニル−５β−プレグナン−２０−オン エチルエステル、３α−ヒドロキシ−３β−（４’−アセトキシアセチルフェニル）エチニル−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−アセチルフェニル）エチニル−３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−アセチルフェニル）エチニル−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−ジメチルアミノフェニル）エチニル−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−ビフェニル）エチニル−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−（４’−ニトロフェニル）エチニル−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−（４’−メトキシフェニル）エチニル−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−トリフルオロメチルフェニル）エチニル−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−クロロフェニル）エチニル−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−シアノフェニル）エチニル−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−［４’−（Ｒ／Ｓ）−ヒドロキシペンチニル］−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−フェニル−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−ベンジル−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−（２’−フェニルエチル）−５β−プレダナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−［２−（３’，４’−ジメトキシフェニル）エチル］−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−［６’−オキソ−１’−ヘプチニル］−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−［７’−オキソ−１’−オクチニル］−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−［４’−オキソ−１’−ペンチニル］−５β−プレグナン−２０−オン、３β−［５’−（Ｒ／Ｓ）−ヒドロキシヘキシニル］−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−ヒドロキシブチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−ヒドロキシブチニル）−３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−２１−（１’−イミダゾリル）−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−メチル−２１−（１’，２’，４’−トリアゾリル）−５α−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−アセトキシフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−アセチルフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−１９−ノル−５β−プレグナン−２０���オン、３β−（４’−カルボキシフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−１９−ノル−５β−プレグナン−２０−オン エチルエステル、３β−（４’−カルボキシフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン エチルエステル、３β−［４’−（Ｎ，Ｎ−ジエチルカルボキサミド）フェニル］エチニル−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−［５−オキソ−１−ヘキシニル］−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−［５’−オキソ−１’−ヘキシニル］−５β−プレグナン−２０−オン サイクリック５’−（１，２−エタンジイル  アセタール）、３β−（５−シアノ−１−ペンチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−（２−ピリジル）エチニル−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（６−ヒドロキシ−１−ヘキシニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（６’−ヒドロキシ−１’−ヘキシニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン ６’−ヘミスクシナート ナトリウム塩、３β−（５’−ヒドロキシ−１’−ペンチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（５’−ヒドロキシ−１’−ペンチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン ５’−ヘミスクシナート ナトリウム塩、３β−（４’−ヒドロキシ−１’−ブチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン ４’−ヘミスクシナート ナトリウム塩、３β−（４’−シアノ−１’−ブチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（５’−アセトキシ−１’−ペンチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−アセトキシ−１’−ブチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−アセトキシ−１’−ブチニル）−３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン、３β−（６’−アセトキシ−１’−ヘキシニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−［３−（２’−プロピニルオキシ）−１−プロピニル］−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−（３−メトキシ−１−プロピニル）−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−（３−メトキシ−１−プロピニル）−５α−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−［３−（４’−ピリジニルオキシ）−１−プロピニル］−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−［３−（１’Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１’−イル）−１−プロピニル］−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−［３−（２’Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２’−イル）−１−プロピニル］−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−（２’−チエニル）エチニル−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−（３’−フェニル−１’−プロピニル）−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−（３’−フェニルプロピニル）−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−［３−（１’Ｈ−ピラゾール−１’−イル）−１−プロピニル］−５β−プレグナン−２０��オン、３β−（３’−アセチルフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（３’−アセトキシ−３’−プロピニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−（４−ヒドロキシブチン−１−イル）−２１−（１−イミダゾリル）−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−（４−ヒドロキシブチン−１−イル）−２１−（１−イミダゾリル）−５β−１９−ノル−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−（４−ヒドロキシブチン−１−イル）−２１−（１，２，３−トリアゾール−２−イル）−５β−１９−ノルプレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−２１−（１−イミダゾリル）−５α−プレグナン−２０−オン、Ｓ−（３α−ヒドロキシ−３β−メチル−５α−プレグナン−２０−オン−２１−イル）チオ硫酸ナトリウム、Ｓ−（３α−ヒドロキシ−３β−メトキシメチル−５α−プレグナン−２０−オン−２１−イル）チオ硫酸ナトリウム、Ｓ−（３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン−２１−イル）チオ硫酸ナトリウム、Ｓ−（３α−ヒドロキシ−３β−トリフルオロメチル−５β−プレグナン−２０−オン−２１−イル）チオ硫酸ナトリウム、Ｓ−（３α−ヒドロキシ−３β−（４’−ヒドロキシブチニル）−５β−プレグナン−２０−オン−２１−イル）チオ硫酸ナトリウム、Ｓ−（３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン−２１−イル）チオ硫酸ナトリウム、及び３β−（４’−アセチルフェニルエチニル）−３α，２１−ジヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−アセチルフェニルエチニル）−３α，２１−ジヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−アセチルフェニルエチニル）−３α，２１−ジヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン ２１−ヘミスクシナート ナトリウム塩、及び３β−（４’−アセチルフェニルエチニル）−３α，２１−ジヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン ２１−ヘミスクシナート ナトリウム塩。
さらに好ましい神経活性ステロイドには以下の化合物が含まれる：３β−（４’−アセチルフェニル）エチニル−３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−カルボキシフェニル）エチニル−３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン エチルエステル、３β−（４’−アセチルフェニル）エチニル−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−カルボキシフェニル）エチニル−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン エチルエステル、３β−（４’−アセチルフェニル）エチニル−３α−ヒドロキシ−５β−１９−ノルプレグナン−２０−オン、３β−（４’−カルボキシフェニル）エチニル−３α−ヒドロキシ−５β−１９−ノルプレグナン−２０−オン エチルエステル、３β−（４’−ジメチルアミノフェニル）エチニル−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−ビフェニル）エチニル−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−（４’−メトキシフェニル）エチニル−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−トリフルオロメチルフェニル）エチニル−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−クロロフェニル）エチニル−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−［４’（Ｒ／Ｓ）−ヒドロキシペンチニル］−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−ヒドロキシブチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン；３β−（４’−ヒドロキシブチニル）−３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−［３−（２’Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２’−イル）−１−プロピニル］−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−２１−（１−イミダゾリル）−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−アセチルフェニルエチニル）−３α，２１−ジヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−アセチルフェニルエチニル）−３α，２１−ジヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−アセチルフェニルエチニル）−３α，２１−ジヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン ２１−ヘミスクシナート ナトリウム塩、及び３β−（４’−アセチルフェニルエチニル）−３α，２１−ジヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン ２１−ヘミスクシナート ナトリウム塩。
特に好ましい神経活性ステロイドには以下の化合物が含まれる：３β−（４’−アセチルフェニル）エチニル−３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−アセチルフェニル）エチニル−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−カルボキシフェニル）エチニル−３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン エチルエステル、３β−（４’−カルボキシフェニル）エチニル−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン エチルエステル、３β−（４’−ジメチルアミノフェニル）エチニル−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−ビフェニル）エチニル−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−ヒドロキシブチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−ヒドロキシブチニル）−３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−［３−（２’Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２’−イル）−１−プロピニル］−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−２１−（１−イミダゾリル）−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−アセチルフェニルエチニル）−３α，２１−ジヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−アセチルフェニルエチニル）−３α，２１−ジヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−アセチルフェニルエチニル）−３α，２１−ジヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン ２１−ヘミスクシナート ナトリウム塩、及び３β−（４’−アセチルフェニルエチニル）−３α，２１−ジヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン ２１−ヘミスクシナート ナトリウム塩及び３β−［４’（Ｒ／Ｓ）−ヒドロキシペンチニル］−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン。
合成法
本発明の化合物は、例えば、”Steroid Reactions”Djerassi，Holden-Day，Inc．San Franciscoにより１９６３年に出版；又は”Organic Reactions in Steroid Chemistry”，Fried and Edwards，Van Nostrand-Reinhold Co．，New Yorkにより１９７２年に出版に記載の従来技術を用い、任意の好都合な方法によって調製することができる。
一般的方法
２０−ヒドロキシプレグナンは２０−ケトプレグナンの通常の還元剤での還元によって製造した。
２１−ヘミサクシネートはプレグナン−２０−オン誘導体から、まず分子状臭素でブロム化して対応する２１−ブロモプレグナンを得て製造した。次に、このブロモ化合物を、たとえばコハク酸のような種々の二酸でアミンの存在下に反応させて２１−ヒドロキシエステルを得た。得られた二酸からのエステルを次に通常の方法によってナトリウム塩に変換した。
この型の２１−オキシ化化合物は、プレグナン−２０−オンを四酢酸鉛で酸化して２１−アセトキシ誘導体を得、このアセテートの加水分解で２１−アルコールを得、例えばヒドロキシル基の水素を置換できる酸無水物または酸塩化物または他の試薬、たとえば塩化メタンスルホニルのような、適当なカルボン酸誘導体でアシル化するものである一連の反応によっても製造しうる。
プレグナン−１７−エンは１７−ケトステロイドの、たとえばｎ−プロピルトリフェニルホスホニウムブロミドの、たとえばカリウムｔ−ブトキシドのような強塩基での処理で誘導されるイリドのようなウィティヒ試薬、での反応によっても形成しうる。
実施例１
３α−ヒドロキシ−３β−（２’−フェニルエチル）−５β−プレグナン−２０−オン
３α−ヒドロキシ−３β−フェニルエチニル−５β−プレグナン−２０−オン（４４ｍｇ）をＥｔＯＡｃ（１２ｍＬ）に溶解し、Ｐｄ／Ｃ（５％、１２ｍｇ）を添加し、混合物を４００Ｋｐａ圧で一夜室温で水素化した。触媒の濾過に続く溶媒の蒸発によって粗製生成物を得、これをシリカゲル上でクロマトグラフィーして精製して純粋な標記化合物（３３ｍｇ）を単離した。ｍｐ．１５３〜１５４℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（ヘキサン：アセトン７：３）＝０．４。
実施例２
３α−（３’，４’−ジメトキシフェニルエチニル）−３β−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オンおよび３β−（３’，４’−ジメトキシフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン
２、２−ジブロモ−１−（３’，４’−ジメトキシフェニル）エテン（トリフェニルホスフィン存在下における３，４−ジメトキシベンズアルデヒドの四臭化炭素でのウィティヒ反応によって製造）（９６６ｍｇ、３ミリモル）を乾燥ＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液をＮ2下に−７８℃でｎ−ＢｕＬｉ（ＴＨＦ中２．５Ｍ、６ミリモル、２．４ｍＬ）で処理した。混合物をこの温度で２時間撹拌し、５β−プレグナン−３，２０−ジオン環状２０−（１，２−エタンジイルアセタール）（７２０ｍｇ、２ミリモル）の乾燥ＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を３０分間に渡って滴加した。得られる混合物を−７８℃で２時間撹拌後、冷浴を除き、撹拌をさらに室温で１時間継続した。これを次に−１０℃において２Ｎ−ＨＣｌ溶液（１ｍＬ）でクエンチした。溶媒を除き、次に残渣をアセトン（２５ｍＬ）中に溶解した。２Ｎ−ＨＣｌ（１０ｍＬ）を添加後、溶液を室温で２時間撹拌した。飽和のＮａＨＣＯ3溶液を添加して酸を中和した。溶媒を除き、残渣をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水、希ＮａＨＣＯ3溶液、水および食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4上で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物（１．２ｇ）を得た。この粗製生成物を次にＣＨ2Ｃｌ2少量中に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。トルエン：アセトン混合物（９６：４）で溶離するとフェニルアセチレン化合物を得たがこれは確認しなかった。同一溶媒でさらに溶離すると３α−（３’，４’−ジメトキシフェニルエチニル）−３β−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン（１２０ｍｇ）を第一分画として、次に３β−（３’，４’−ジメトキシフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン（４３０ｍｇ、ｍｐ．８２〜８８℃）を第二分画として得た。
類似方法を使用して、３β−（４’−メトキシフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−クロロフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（２’−メトキシフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−ビフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−ジメチルアミノフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、および３β−（４’−シアノフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オンを製造した。
実施例３
３β−（３’，４’−ジメトキシフェニルエチル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン
Ｐｄ／Ｃ（５％、２８ｍｇ）およびＥｔＯＡｃ（１２ｍＬ）との混合物を水素下に１０分間撹拌することによって水素で予め飽和した。次に３β−（３’，４’−ジメトキシフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン（１８５ｍｇ）のＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）溶液を添加し、混合物を３００Ｋｐａ圧において室温で一夜水素化した。触媒の濾過に続く溶媒の蒸発は粗製生成物を与え、これをシリカゲル上のクロマトグラフィー（ヘキサン：アセトン４：１）によって精製し、純粋な標記化合物（１３５ｍｇ）を単離した。ＴＬＣ：Ｒｆ（ヘキサン：アセトン４：１）＝０．１４。
実施例４
３β−（４’−ニトロフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン
２，２−ジブロモ−１−（４−ニトロフェニル）エテン（トリフェニルホスフィンの存在下４−ニトロベンズアルデヒドと四塩化炭素とのウィティヒ反応によって製造）（２９６ｍｇ、１ミリモル）の乾燥ＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液を−９５℃においてＮ2下にｎ−ＢｕＬｉ（ＴＨＦ中２．５Ｍ、２ミリモル、０．８ｍＬ）で処理した。混合物を−８０から−１００℃で０．５時間撹拌し、次に５β−プレグナン−３，２０−ジオン環状２０−（１，２−エタンジイルアセタール）（１２０ｍｇ、０．５ミリモル）の乾燥ＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を１０分間にわたって滴加した。得られた混合物を−８０℃で１時間および次に０℃で１時間撹拌した後、ＮＨ4Ｃｌ溶液（３ｍＬ）でクエンチした。溶媒を除き、残渣をアセトン（２５ｍＬ）中に溶解した。２Ｎ−ＨＣｌ（１０ｍＬ）を添加後、溶液を室温で１時間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ3溶液を添加して酸を中和した。溶媒を除き、残渣をＣＨ2Ｃｌ2で抽出した。有機層を水および食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4上で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物（４００ｍｇ）を得た。この粗製生成物を次に少量のＣＨ2Ｃｌ2に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。トルエン：アセトン混合物（９６：４）による溶離は標記化合物を褐色固体（７０ｍｇ）として与えた。ＴＬＣ：Ｒｆ（トルエン：アセトン９５：５）＝０．１８。
実施例５
３β−ヒドロキシ−３α−フェニル−５β−プレグナン−２０−オンおよび３α−ヒドロキシ−３β−フェニル−５β−プレグナン−２０−オン
５β−プレグナン−３，２０−ジオン環状２０−（１，２−エタンジイルアセタール）（７２０ｍｇ、２ミリモル）の乾燥ＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液を−７０℃においてフェニルマグネシウムブロミド（ＴＨＦ中３Ｍ、６ミリモル、２ｍＬ）で処理した。混合物をこの温度で３時間および次に室温で２時間撹拌後、これを２Ｎ−ＨＣｌ（１ｍＬ）でクエンチした。溶媒を除き、残渣をアセトン（２０ｍＬ）中に溶解した。１Ｎ−ＨＣｌ（５ｍＬ）を添加したのち、溶液を室温で１５時間撹拌した。溶媒を除き、残渣をＣＨ2Ｃｌ2で抽出した。有機層を水、希ＮａＨＣＯ3溶液、水および食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4上で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物（１．３ｇ）を得た。この粗製の生成物を次に少量のＣＨ2Ｃｌ2中に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。トルエン：アセトン混合物（９５：５）での溶離は３α−フェニル−３β−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン（４２０ｍｇ）を第一分画として与えた。さらなる同一溶媒混合物での溶離は３β−フェニル−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン（１８５ｍｇ）を与えた。ｍｐ．１８２〜１８４℃。
実施例６
３β−ヒドロキシ−３α−ベンジル−５β−プレグナン−２０−オンおよび３α−ヒドロキシ−３β−ベンジル−５β−プレグナン−２０−オン
ベンジルマグネシウムブロミド（ＴＨＦ中２Ｍ、２ミリモル、１ｍＬ）の溶液をＴＨＦ（１５ｍＬ）で希釈し、−６０℃において５β−プレグナン−３，２０−ジオン環状２０−（１，２−エタンジイルアセタール）（３６０ｍｇ、１ミリモル）の乾燥ＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液を滴加した。混合物をこの温度で１時間、次に室温で１５時間撹拌後、これを２Ｎ−ＨＣｌ（１ｍＬ）でクエンチした。溶媒を除き、残渣をアセトン（２０ｍＬ）中に溶解した。１Ｎ−ＨＣｌ（５ｍＬ）を添加後、溶液を室温で３０分間撹拌した。これを２Ｎ−ＮａＯＨで中和した。沈殿した固体を濾取し、水洗し、乾燥して３β−ヒドロキシ−３α−ベンジル−５β−プレグナン−２０−オン（２３８ｍｇ）を得た。濾液をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水、希ＮａＨＣＯ3溶液、水および食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物（１６０ｍｇ）を得た。この粗製生成物を次にＣＨ2Ｃｌ2少量中に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。トルエン：アセトン混合物（９５：５）での溶離は３β−ヒドロキシ−３α−ベンジル−５β−プレグナン−２０−オン（４０ｍｇ）を第一分画として与えた。同一溶媒混合物でのさらなる溶離は３α−ヒドロキシ−３β−ベンジル−５−β−プレグナン−２０−オン（３０ｍｇ）を与え、これはヘキサン：ＣＨ2Ｃｌ2（４：１）から無水柱状晶（１５ｍｇ）として結晶化した。ｍｐ．１３３〜１４１℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（トルエン：アセトン９：１）＝０．５。
実施例７
３β−［３’（Ｒ／Ｓ）−ヒドロキシブチニル］−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン
３（Ｒ／Ｓ）−ヒドロキシブチン（０．４７０ｍＬ、６ミリモル）の乾燥ＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液を−７０℃でｎ−ＢｕＬｉ（ＴＨＦ中２．５Ｍ、１２ミリモル、４．８ｍＬ）で処理した。この混合物をこの温度で０．５時間撹拌後、５β−プレグナン−３、２０−ジオン環状２０−（１，２−エタンジイルアセタール）（１．０８ｇ、３ミリモル）の乾燥ＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液を添加し、混合物を−７８℃で１時間撹拌した。冷浴を除き、混合物を室温でさらに１．５時間撹拌した。これを次にＮＨ4Ｃｌ溶液（３ｍＬ）でクエンチした。溶媒を除き、残渣をアセトン（１０ｍＬ）中に溶解した。２Ｎ−ＨＣｌ（５ｍＬ）を添加後、溶液を室温で１時間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ3溶液を添加して酸を中和した。溶媒を除き、残渣をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水、希ＮａＨＣＯ3溶液、水および食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4上で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物（１．４ｇ）を得た。この粗製生成物を次にＣＨ2Ｃｌ2少量中に溶解し、シリカゲルのカラムに注入した。トルエン：アセトン混合物（８５：１５）での溶離は３β−［３’（ＲＳ）−ヒドロキシブチニル］−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン（１４５ｍｇ）を無色固体として与えた。ＴＬＣ：Ｒｆ（トルエン：アセトン４：１）＝０．２４。
類似の方法を使用して３β−［４’（ＲＳ）−ヒドロキシペンチニル］−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オンを製造した。
実施例８
３β−（４’−アセチルフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン
４−ヨードアセトフェノン（９５ｍｇ、０．３９ミリモル）、３β−エチニル−３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン（１０６ｍｇ、０．３ミリモル）の脱ガス乾燥ピロリジン（３ｍＬ）溶液をアルゴン下に室温で撹拌した。ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）二塩化物（５ｍｇ）およびＣｕＩ（５ｍｇ）を添加し、混合物を室温で１５時間撹拌した。ＴＬＣは出発物質の１００％変換を示し、そこで、混合物をＮＨ4Ｃｌ溶液（１５ｍＬ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水、希ＮａＨＣＯ3溶液、水および食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4上で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物（１５０ｍｇ）を得た。この粗製生成物を次にＣＨ2Ｃｌ2少量中に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。ヘキサン：アセトン混合物（４：１）で溶離して３β−（４’−アセチルフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン（３５ｍｇ）を無色固体として得た。ＴＬＣ：Ｒｆ（ヘキサン：アセトン７：３）＝０．４。
類似の方法を使用して、３α−ヒドロキシ−３β−（４’−トリフルオロメチルフェニルエチニル）−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−アセチルフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−（４’−メチルフェニルエチニル）−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−（４’−アセトキシアセチルフェニルエチニル）−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（３’−ヒドロキシフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（２’，４’−ジフルオロフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（ペンタフルオロフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、および３α−ヒドロキシ−３β−（４’−カルボキシフェニルエチニル）−５β−プレグナン−２０−オン−エチルエステルを製造した。
実施例９
３α−ヒドロキシ−２１−（１’−イミダゾリル）−５β−プレグナン−２０−オンα−ヒドロキシ−２１−ブロモ−５β−プレグナン−２０−オン：３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン（５．１５ｇ、１６．５ミリモル）のメタノール（１００ｍＬ）溶液を入れたフラスコに臭素（１．１ｍＬ）のメタノール（３０ｍＬ）溶液を臭素の褐色を維持する速度でこの色が持続するまで滴加した。水（２００ｍＬ）を添加し、混合物をＣＨ2Ｃｌ2（３×１００ｍＬ）で抽出した。抽出物を集め、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥した。溶媒の除去は泡状白色固体として生成物（６．６３ｇ）を与えた。他の２１−ブロモ−プレグナン−２０−オン（３β−エチニル−３α−ヒドロキシ−２１−ブロモ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−メチル−３α−ヒドロキシ−２１−ブロモ−５α−プレグナン−２０−オンおよび３α−ヒドロキシ−３β−トリフルオロメチル−１２−ブロモ−５β−１９−ノルプレグナン−２０−オン）は同一方法を使用して合成した。
３α−ヒドロキシ−２１−（１’−イミダゾリル）−５β−プレグナン−２０−オン：３α−ヒドロキシ−２１−ブロモ−５β−プレグナン−２０−オン（０．８６ｇ）およびイミダゾール（０．３７ｇ）の混合物をＣＨ3ＣＮ（１２ｍＬ）中でＡｒ下に１時間加熱還流し、２５℃まで冷却した。次にこれをＮＨ4Ｃｌ溶液（１００ｍＬ、飽和水溶液）を入れた分液漏斗に注入し、生成物をＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）で抽出した。有機層を集め、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥し、真空下に溶媒を去った。純生成物（０．５９ｇ、４２％）をフラッシュカラムクロマトグラフィーによって単離した。
３α−ヒドロキシ−２１−（１’−ベンズイミダゾリル）−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−２１−［１Ｈ−（４−メチル−５−カルベトキシ）イミダゾール−１−イル］−５β−プレグナン−２０−オン・エチルエステル、３α−ヒドロキシ−２１−（１’−イミダゾリル）−５α−プレグナン−２０−オン、３β−エチニル−３α−ヒドロキシ−２１−（１’−イミダゾリル）−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−２１−（１Ｈ−３，５−ジメチルピラゾリル）−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−２１−（１’−イミダゾリル）−３β−メチル−５α−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−２１−（１’−ピラゾリル）−５α−プレグナン−２０−オン、３β−エチニル−３α−ヒドロキシ−２１−（１’−ピラゾリル）−５β−プレグナン−２０−オン、２１−（１’−ベンズイミダゾリル）−３α−ヒドロキシ−３β−メチル−５α−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−２１−（１’−ピラゾリル）−３β−メチル−５α−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−２１−（ピラゾール−１−イル）−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−２１−［１Ｈ−（２−メチル）イミダゾール−１−イル）−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−２１−［１Ｈ−（２’−ホルミル）イミダゾール−１−イル］−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−２１−（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）−３β−トリフルオロメチル−５β−１９−ノルプレグナン−２０−オン、および３α−ヒドロキシ−２１−（ピラゾール−１−イル）−３β−トリフルオロメチル−５β−１９−ノルプレグナン−２０−オン化合物を実施例９に従って合成した。
実施例１０
３α−ヒドロキシ−３β−メチル−２１−（１’，２’，４’−トリアゾリル）−５α−プレグナン−２０−オン
１，２，４−トリアゾール（１４６ｍｇ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液にＡｒ中でＮａＨ（５６ｍｇ）を添加し、得られた混合物を２５℃で２０分間撹拌した。次に３β−メチル−３α−ヒドロキシ−２１−ブロモ−５α−プレグナン−２０−オン（３００ｍｇ）のＴＨＦ溶液を添加し、このようにして得られた混合物を５時間撹拌した。これを次に水（４０ｍＬ）を入れた分液漏斗に注入し、生成物をＣＨ2Ｃｌ2（３×５０ｍＬ）で抽出した。有機層を集め、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥し、溶媒を真空下に除去した。純粋な生成物（１８７ｍｇ、６４％）はフラッシュカラムクロマトグラフィーによって単離した。
３α−ヒドロキシ−２１−（２’Ｈ−１，２，３，４−テトラゾール−２’−イル）−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−２１−（２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２−イル）−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−２１−（９’Ｈ−プリン−９’−イル）−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３−メチル−２１−（２’Ｈ−１’，２’，３’−トリアゾール−２’−イル）−５α−プレグナン−２０−オン、３β−エチニル−３α−ヒドロキシ−２１−（１’，２’，４’−トリアゾリル）−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−３β−メチル−２１−（１’，２’，３’−トリアゾール−１’−イル）−５α−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−２１−（１’，２’，４’−トリアゾール−１−イル）−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−２１−（１’Ｈ−１，２，３，４−テトラゾール−１’−イル）−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−２１−［１Ｈ−（４−ニトロ）イミダゾール−１−イル］−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−２１−（７’Ｈ−プリン−７’−イル）−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−２１−［１Ｈ−（４’，５’−ジシアノ）イミダゾール−１−イル）］−５β−プレグナン−２０−オン、３α−ヒドロキシ−２１−（１’−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−３β−トリフルオロメチル−５β−１９−ノルプレグナン−２０−オン、および３α−ヒドロキシ−２１−［１Ｈ−（４’，５’−ジクロロ）イミダゾール−１−イル）］−５β−プレグナン−２０−オンを実施例１０に示した操作に従って合成した。
実施例１１
３β−（４’−アセトキシフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン
ａ．３β−（４’−ヒドロキシフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン
２、２−ジブロモ−１−（４−ヒドロキシフェニル）エテン（トリフェニルホスフィン存在下、４−ヒドロキシベンズアルデヒドの四臭化炭素でのウィティヒ反応により製造）（１．２５ｍｇ、４．５ミリモル）の乾燥ＴＨＦ（２５ｍＬ）溶液をＮ2下に−７０℃でｎ−ＢｕＬｉ（ＴＨＦ中２．５Ｍ、１３．５ミリモル、５．４ｍＬ）で処理した。混合物を温度−７０℃で０．５時間撹拌し、５β−プレグナン−３，２０−ジオン環状２０−（１，２−エタンジイルアセタール）（８１０ｍｇ、２．２５ミリモル）の乾燥ＴＨＦ（２５ｍＬ）溶液を１０分間にわたって滴加した。得られた混合物を−７８℃で３０分間撹拌後、冷浴を除き、撹拌をさらに室温で１時間継続した。これを次に−１０℃で飽和ＮＨ4Ｃｌ溶液（４ｍＬ）でクエンチした。溶媒を除き、次に残渣をアセトン（２５ｍＬ）中に溶解した。２Ｎ−ＨＣｌ（６ｍＬ）を添加後、溶液を室温で１５分間撹拌した。飽和のＮａＨＣＯ3溶液を添加して酸を中和した。減圧下に溶媒を除き、粗製生成物（１．３ｇ）をそのまま次の段階のために使用した。
ｂ．３β−（４’−アセトキシフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン
前段からの粗製生成物をＣＨ2Ｃｌ2（５ｍＬ）およびピリジン（３ｍＬ）に溶解した。得られた溶液を塩化アセチル（３ｍＬ）とピリジン（３ｍＬ）との氷冷混合物に添加した。この混合物を０℃で３０分間撹拌し、氷（５０ｇ）中に注入した。２Ｎ−ＨＣｌ（１０ｍＬ）を添加し、混合物をさらにＣＨ2Ｃｌ2で希釈した。有機層を分離し、水、食塩水で洗浄し、無水ＭｇＳＯ4上で乾燥した。溶媒の除去は粗製固体（２ｇ）を与え、これをシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーによって精製した。トルエン：アセトン混合物（９５：５）での溶離で３α−（４’−アセトキシフェニルエチニル）−３β−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン（１５０ｍｇ）を得た。同一溶媒でさらに溶離すると３β−（４’−アセトキシフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン（５３０ｍｇ）を得た。ｍｐ．１７１〜１７６℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（ヘキサン：アセトン７：３）＝０．４１。
実施例１２
３β−（４’−アセチルフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−１９−ノル−５β−プレグナン−２０−オン
４−ヨードアセトフェノン（６０ｍｇ、０．２４ミリモル）および３β−エチニル−３α−ヒドロキシ−１９−ノル−５β−プレグナン−２０−オン（８０ｍｇ、０．２４ミリモル）の脱ガスした乾燥トリエチルアミン（０．５ｍＬ）溶液をアルゴン下に２３℃で撹拌した。ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）二塩化物（５ｍｇ）およびＣｕＩ（５ｍｇ）を添加し、混合物をこの温度で４５分間撹拌した。ＣＨ2Ｃｌ2（４ｍＬ）を添加し、混合物を２３℃で３時間撹拌した。ＴＬＣは出発物質の１００％変換を示し、そこで、溶媒を除き、残渣をシリカゲル上のクロマトグラフィーによって精製した。ヘキサン：アセトン（４：１）で溶離して３β−（４’−アセチルフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−１９−ノル−５β−プレグナン−２０−オン（３０ｍｇ）を無色固体として得た。ｍｐ．６５〜６７℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（ヘキサン：アセトン４：１）＝０．１２。
実施例１３
３β−（４’−カルボキシフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−１９−ノル−５β−プレグナン−２０−オン・エチルエステル
４−ヨード安息香酸エチル（７０ｍｇ、０．２４ミリモル）および３β−エチニル−３α−ヒドロキシ−１９−ノル−５β−プレグナン−２０−オン（８０ｍｇ、０．２４ミリモル）の脱ガス乾燥トリエチルアミン（１ｍＬ）溶液をアルゴン下に２３℃で撹拌した。ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）二塩化物（５ｍｇ）およびＣｕＩ（５ｍｇ）を添加し、混合物をこの温度で１時間撹拌した。ＣＨ2Ｃｌ2（４ｍＬ）を添加、混合物を２３℃で３時間撹拌した。ＴＬＣは出発物質の１００％変換を示し、そこで、溶媒を除き、残渣をシリカゲル上のクロマトグラフィーによって精製した。ヘキサン：アセトン（４：１）で溶離して３β−（４’−カルボキシフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−１９−ノル−５β−プレグナン−２０−オン・エチルエステル（２２ｍｇ）を無色固体として得た。ｍｐ．１６４〜１６６℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（ヘキサン：アセトン４：１）＝０．２７。
実施例１４
３β−（４’−カルボキシフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン・エチルエステル
４−ヨード安息香酸エチル（８３ｍｇ、０．３ミリモル）および３β−エチニル−３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン（１０３ｍｇ、０．３ミリモル）の脱ガス乾燥トリエチルアミン（１ｍＬ）溶液をアルゴン下に２３℃で撹拌した。ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）二塩化物（５ｍｇ）およびＣｕＩ（５ｍｇ）を添加して、混合物をこの温度で１時間撹拌した。ＣＨ2Ｃｌ2（４ｍＬ）を添加し、混合物を２３℃で１．５時間撹拌した。ＴＬＣは出発物質の１００％変換を示し、そこで溶媒を除き、残渣をシリカゲル上のクロマトグラフィーによって精製した。ヘキサン：アセトン（４：１）で溶離して３β−（４’−カルボキシフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン・エチルエステル（１０ｍｇ）を無色固体として得た。ｍｐ．１９０〜１９２℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（ヘキサン：アセトン４：１）＝０．２７。
実施例１５
３β−［４’−（Ｎ，Ｎ−ジエチルカルボキサミド）フェニル］エチニル−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン
４−（Ｎ，Ｎ−ジエチルカルボキサミド）ヨードベンゼン（９１ｍｇ、０．３ミリモル）と３β−エチニル−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン（１０３ｍｇ、０．３ミリモル）との脱ガス乾燥トリエチルアミン（１ｍＬ）溶液をアルゴン下に２３℃で撹拌した。ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）二塩化物（５ｍｇ）およびＣｕＩ（５ｍｇ）を添加して、混合物をこの温度で１時間撹拌した。ＣＨ2Ｃｌ2（４ｍＬ）を添加し、混合物を２３℃で０．５時間撹拌した。ＴＬＣは出発物質の１００％変換を示し、そこで、溶媒を除き、残渣をシリカゲル上のクロマトグラフィーによって精製した。ヘキサン：アセトン（３：１）で溶離して３β−［４’−（Ｎ、Ｎ−ジエチルカルボキサミド）フェニル］エチニル−３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン・エチルエステル（１８ｍｇ）を無色固体として得た。ＴＬＣ：Ｒｆ（ヘキサン：アセトン３：１）＝０．２２。
実施例１６
３α−ヒドロキシ−３β−［５−オキソ−１−ヘキシニル］−５β−プレグナン−２０−オン環状（１，２−エタンジイルアセタール）
１−ヘキシン−５−オン環状（１，２−エタンジイルアセタール）（４９３ｍｇ、３．５２ミリモル）の乾燥ＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液を−６０℃でｎ−ＢｕＬｉ（ＴＨＦ中２．５Ｍ、３ミリモル、１．２ｍＬ）で処理した。混合物を−７８℃で０．５時間撹拌の後、５β−プレグナン−３，２０−ジオン環状２０−（１，２−エタンジイルアセタール）（３６０ｍｇ、１ミリモル）のＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液を添加し、混合物を−７８℃で１時間撹拌した。冷浴を除き、混合物をＮＨ4Ｃｌ溶液（３ｍＬ）でクエンチした。溶媒を除き、次に、残渣をアセトン（４０ｍＬ）中に溶解した。１Ｎ−ＨＣｌ（４ｍＬ）を添加後、溶液を室温で１５分間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ3溶液を添加して酸を中和した。溶媒を除き、残渣をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水、希ＮａＨＣＯ3溶液、水および食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4上で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物（７００ｍｇ）を得た。この粗製生成物を次にＣＨ2Ｃｌ2少量中に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。トルエン：アセトン混合物（９３：７）で溶離して３α−ヒドロキシ−３β−［５−オキソ−１−ヘキシニル］−５β−プレグナン−２０−オン環状（１，２−エタンジイルアセタール）（２１０ｍｇ）を無色固体として得た。ｍｐ．１３０〜１３３℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（トルエン：アセトン９：１）＝０．３３。
実施例１７
３α−ヒドロキシ−３β−［５−オキソ−１−ヘキシニル］−５β−プレグナン−２０−オン
３α−ヒドロキシ−３β−［５−オキソ−１−ヘキシニル］−５β−プレグナン−２０−オン環状（１，２−エタンジイルアセタール）（９５ｍｇ）をアセトン（５ｍＬ）に溶解した。２Ｎ−ＨＣｌ（１ｍＬ）の添加後、溶液を室温で３時間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ3溶液を添加して酸を中和した。溶媒を除き、残渣をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水、水および食塩水で洗浄した。無水のＭｇＳＯ4上で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製標記生成物（１００ｍｇ）を得、これを次に収量６３ｍｇで無色柱状晶としてヘキサン−アセトンから結晶化させた。ｍｐ．１０４〜１０６℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（ヘキサン：アセトン７：３）＝０．２７。
１−ヘプチン−６−オン環状６−（１，２−エタンジイルアセタール）を使用して３α−ヒドロキシ−３β−［６−オキソ−１−ヘプチニル］−５β−プレグナン−２０−オンを類似の方法を使用して製造した。
実施例１８
３β−（５−シアノ−１−ペンチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン
５−シアノペンチン（０．８４ｍＬ、８ミリモル）の乾燥ＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液を−７０℃でｎ−ＢｕＬｉ（ＴＨＦ中２．５Ｍ、７．８ミリモル、３．２ｍＬ）で処理した。混合物を−７５℃で０．５時間撹拌後、５β−プレグナン−３，２０−ジオン環状２０−（１，２−エタンジイルアセタール）（７２０ｍｇ、２ミリモル）のＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液を添加し、混合物を−７８℃で０．５時間撹拌した。冷浴を除き、混合物をＮＨ4Ｃｌ溶液（３ｍＬ）でクエンチした。溶媒を除き、次に残渣をアセトン（４０ｍＬ）中に溶解した。１Ｎ−ＨＣｌ（４ｍＬ）を添加後、溶液を室温で１５分間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ3溶液を添加して酸を中和した。溶媒を除き、残渣をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水および食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4上で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物（１．５５ｇ）を得た。この粗製生成物を次にＣＨ2Ｃｌ2少量に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。トルエン：アセトン混合物（９５：５）で溶離して３α−（５−シアノ−１−ペンチニル）−３β−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン（１７０ｍｇ）を第一分画として得た。さらに同一溶媒混合物で溶離して３β−（５−シアノ−１−ペンチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン（４８０ｍｇ）を無色固体として得た。ｍｐ．１３４〜１３６℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（トルエン：アセトン７：３）＝０．３。
類似の方法を使用して、３β−（４−シアノ−１−ブチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オンを製造した。
実施例１９
３α−ヒドロキシ−３β−（２−ピリジル）エチニル−５β−プレグナン−２０−オン
２−エチニルピリジン（２７０ｍｇ、２．６ミリモル）の乾燥ＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液を−６０℃でｎ−ＢｕＬｉ（ＴＨＦ中２．５Ｍ、２．５ミリモル、１ｍＬ）で処理した。混合物を−７８℃で０．５時間撹拌した後、５β−プレグナン−３，２０−ジオン環状２０−（１，２−エタンジイルアセタール）（１７０ｍｇ、０．４７ミリモル）のＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液を添加し、混合物を−７８℃で１時間撹拌した。冷浴を除き、混合物をＮＨ4Ｃｌ溶液（３ｍＬ）でクエンチした。溶媒を除き、次に残渣をアセトン（２５ｍＬ）中に溶解した。２Ｎ−ＨＣｌ（２ｍＬ）を添加後、溶液を室温で１５分間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ3溶液を添加して酸を中和した。溶媒を除き、残渣をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水および食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4上で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物（３６０ｍｇ）を得た。この粗製生成物を次にＣＨ2Ｃｌ2少量中に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。トルエン：アセトン混合物（９５：５）で溶離して第一分画として未反応エチニルピリジンを得た。同一溶媒混合物でさらに溶離して３β−（２−ピリジル）エチニル−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン（１０７ｍｇ）を無色固体として得た。ｍｐ．１９２〜１９５℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（トルエン：アセトン８７：１３）＝０．２１。
実施例２０
３β−（６−ヒドロキシ−１−ヘキシニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン
５−ヘキシン−１−オール（１．３５ｍＬ、１２ミリモル）の乾燥ＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液を−６５℃でｎ−ＢｕＬｉ（９．６ｍＬ、ＴＨＦ中２．５Ｍ、２４ミリモル）で処理した。混合物を−７８℃で０．５時間撹拌した後、５β−プレグナン−３，２０−ジオン環状２０−（１，２−エタンジイルアセタール）（１．０８ｇ、３ミリモル）のＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液を添加し、混合物を−７８℃で１時間撹拌した。冷浴を除き、撹拌を室温で４５分間継続した。混合物を次にＮＨ4Ｃｌ溶液（５ｍＬ）でクエンチした。溶媒を除き、残渣をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水、希ＮａＨＣＯ3溶液、水および食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物（１．９０ｇ）を得た。次にこの粗製生成物をＥｔＯＡｃから結晶化させて純生成物を無色柱状晶（８９０ｍｇ）として得た。これを次にアセトン（１２０ｍＬ）中に溶解した。２Ｎ−ＨＣｌ（３ｍＬ）を添加後、溶液を室温で１５分間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ3溶液を添加して酸を中和した。溶媒を除き、残渣をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水および食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4上で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物を得た。この粗製生成物を次にＣＨ2Ｃｌ2少量中に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。トルエン：アセトン混合物（９５：５）で溶離して第一分画として未反応ヘキシノールを得た。同一溶媒混合物でさらに溶離して３α−（６−ヒドロキシ−１−ヘキシニル）−３β−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン（６０ｍｇ）、および次に３β−（６−ヒドロキシ−１−ヘキシニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン（６２０ｍｇ）を無色固体として得た。ｍｐ．１３２〜１３４℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（ヘキサン：アセトン７：３）＝０．２３。
実施例２１
３β−（６’−ヒドロキシ−１’−ヘキシニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン・６’−ヘミサクシネート・ナトリウム塩
ａ．３β−（６’−ヒドロキシ−１’−ヘキシニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン・６’−ヘミサクシネート
３β−（６’−ヒドロキシ−１’−ヘキシニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン（６００ｍｇ、１．４５ミリモル）のピリジン（５ｍＬ）溶液をコハク酸無水物（６００ｍｇ、６ミリモル）および４−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）アミノピリジン（２０ｍｇ）で処理した。この混合物を７０〜７５℃に１．２５時間加熱した。薄層クロマトグラフィーは１００％変換を示した。これを室温まで冷却し、氷−２Ｎ−ＨＣｌ中に注入した。有機物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を０．２Ｎ−ＨＣｌ、水および食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4上で乾燥した後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物を得た。この粗製生成物を次にＣＨ2Ｃｌ2少量に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。ヘキサン：アセトン（７：３）混合物で溶離して３β−（６’−ヒドロキシ−１’−ヘキシニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン・６’−ヘミサクシネート（７００ｍｇ）を得た。ＴＬＣ：Ｒｆ（ヘキサン：アセトン：ＡｃＯＨ７０：３０：０．５）＝０．２１。
ｂ．３β−（６’−ヒドロキシ−１’−ヘキシニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン・６’−ヘミサクシネート・ナトリウム塩
前記ヘミサクシネート（４００ｍｇ）、ＮａＨＣＯ3（６８ｍｇ）、水（８ｍＬ）およびＣＨ2Ｃｌ2（１ｍＬ）の混合物を室温で１５分間撹拌した。溶媒を除き、残渣を凍結乾燥してナトリウム塩を無色固体（４００ｍｇ）として得た。
実施例２２
３β−（５’−ヒドロキシ−１’−ペンチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン
４−ペンチン−１−オール（１．１ｍＬ、１２ミリモル）の乾燥ＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液を−６５℃でｎ−ＢｕＬｉ（９．９ｍＬ、ＴＨＦ中２．５Ｍ、２４．５ミリモル）で処理した。混合物を−７８℃で０．５時間撹拌後、５β−プレグナン−３，２０−ジオン環状２０−（１，２−エタンジイルアセタール）（１．０８ｇ、３ミリモル）のＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液を添加し、混合物を−７８℃で１時間撹拌した。冷浴を除き、撹拌を室温で４５分間継続した。混合物を次にＮＨ4Ｃｌ溶液（５ｍＬ）でクエンチした。溶媒を除き、次に残渣をアセトン（３０ｍＬ）に溶解した。２Ｎ−ＨＣｌ（７ｍＬ）を添加後、溶液を室温で１５分間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ3溶液を添加して酸を中和した。溶媒を除き、残渣をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水と食塩水とで洗浄した。無水ＭｇＳＯ4で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物を得た。この粗製生成物を次にＣＨ2Ｃｌ2少量中に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。トルエン：アセトン：ＥｔＯＡｃ混合物（７０：１５：１５）で溶離して第一分画として未反応ペンテノールを得た。同一溶媒混合物でさらに溶離して３α−（５’−ヒドロキシ−１’−ペンチニル）−３β−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン（１００ｍｇ）、および次に３β−（５’−ヒドロキシ−１’−ペンチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン（６５０ｍｇ）を無色固体として得た。ｍｐ．１６０〜１６３℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（トルエン：アセトン：ＥｔＯＡｃ７０：１５：１５）＝０．２８。
類似方法を使用して３β−（４’−ヒドロキシ−１’−ブチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−ヒドロキシ−１’−ブチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−１９−ノルプレグナン−２０−オン、３β−（４’−ヒドロキシ−１’−ブチニル）−３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン、３β−［４’（Ｒ／Ｓ）−ヒドロキシ−１’−ペンチニル］−３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン、３β−［３’（Ｒ／Ｓ）−ヒドロキシ−１’−ブチニル］−３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン、および３β−（３’−ヒドロキシ−１’−プロピニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オンを製造した。
実施例２３
３β−（５’−ヒドロキシ−１’−ペンチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン・５’−ヘミサクシネート・ナトリウム塩
ａ．３β−（５’−ヒドロキシ−１’−ペンチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン・５’−ヘミサクシネート
３β−（６’−ヒドロキシ−１’−ヘキシニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン（３５０ｍｇ、０．８７ミリモル）のピリジン（３ｍＬ）溶液をコハク酸無水物（３８０ｍｇ、３．８ミリモル）および４−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）アミノピリジン（２０ｍｇ）で処理した。この混合物を６５〜７０℃に１時間加熱した。ＴＬＣは１００％の変換を示した。これを室温まで冷却し、氷−２Ｎ−ＨＣｌ中に注入した。有機物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を０．２Ｎ−ＨＣｌ、水および食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4上で乾燥した後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物（９００ｍｇ）を得た。この粗製生成物を次にＣＨ2Ｃｌ2少量に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。ヘキサン：アセトン（７：３）混合物で溶離して３β−（５’−ヒドロキシ−１’−ペンチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン・５’−ヘミサクシネート（３５０ｍｇ）を得た。ＴＬＣ：Ｒｆ（ヘキサン：アセトン：ＡｃＯＨ７０：３０：０．５）＝０．２５。
ｂ．３β−（５’−ヒドロキシ−１’−ペンチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン・５’−ヘミサクシネート・ナトリウム塩
前記ヘミサクシネート（３４５ｍｇ）、ＮａＨＣＯ3（６０ｍｇ）、水（５ｍＬ）、ＴＨＦ（２ｍＬ）およびＣＨ2Ｃｌ2（１ｍＬ）の混合物を室温で１時間撹拌した。溶媒を除き、残渣を凍結乾燥して無色固体（３４０ｍｇ）としてナトリウム塩を得た。
類似方法を使用して３β−（４’−ヒドロキシ−１’−ブチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン、３β−（４’−ヒドロキシ−１’−ブチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−１９−ノルプレグナン−２０−オン、３β−（４’−ヒドロキシ−１’−ブチニル）−３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン、３β−［４’（Ｒ／Ｓ）−ヒドロキシ−１’−ペンチニル］−３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン、３β−［３’（Ｒ／Ｓ）−ヒドロキシ−１’−ブチニル］−３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン、および３β−（３’−ヒドロキシ−１’−プロピニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オンからヘミサクシネートのナトリウム塩を製造した。
実施例２４
３β−（５’−アセトキシ−１’−ペンチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン
ピリジン（２８０ｍｇ）のＣＨ2Ｃｌ2（２ｍＬ）溶液を塩化アセチル（２８０ｍｇ）で０〜５℃において処理した。３β−（５’−ヒドロキシ−１’−ペンチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン（１３０ｍｇ）のＣＨ2Ｃｌ2（３ｍＬ）溶液を添加した。撹拌を０℃で２０分間継続した。ＴＬＣは１００％の変換を示し、そこで混合物を氷−２Ｎ−ＨＣｌ（２０ｇ、２ｍＬ）中に注入した。有機物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を０．２Ｎ−ＨＣｌ、水および食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4上で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物を得た。次に、この粗製生成物をＣＨ2Ｃｌ2少量に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。トルエン：アセトン（９：１）混合物で溶離して３β−（５’−アセトキシ−１’−ペンチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン（１００ｍｇ）を得た。ｍｐ．８４〜８７℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（ヘキサン：アセトン７０：３０）＝０．３８。
実施例２５
３β−（４’−アセトキシ−１’−ブチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン
ピリジン（２８０ｍｇ）のＣＨ2Ｃｌ2（２ｍＬ）溶液を１０℃で塩化アセチル（２８０ｍｇ）と処理した。３β−（４’−ヒドロキシ−１’−ブチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン（１１０ｍｇ）のＣＨ2Ｃｌ2（３ｍＬ）溶液を添加した。撹拌を１０℃で３０分間継続した。ＴＬＣは１００％の変換を示し、そこで、混合物を氷−２Ｎ−ＨＣｌ（２０ｇ、３ｍＬ）中に注入した。有機物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を０．２Ｎ−ＨＣｌ、水および食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4上で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物を得た。この粗製生成物を次にＣＨ2Ｃｌ2少量に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。ヘキサン：アセトン（４：１）混合物で溶離して３β−（４’−アセトキシ−１’−ブチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン（９２ｍｇ）を得た。ｍｐ．１７０〜１７３℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（ヘキサン：アセトン７０：３０）＝０．３。
実施例２６
３β−（６’−アセトキシ−１’−ヘキシニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン
ピリジン（２ｍＬ）のＣＨ2Ｃｌ2（１０ｍＬ）溶液を塩化アセチル（２ｍＬ）で０℃において処理した。３β−（６’−ヒドロキシ−１’−ヘキシニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン２０−オン（４００ｍｇ、０．９６ミリモル）のＣＨ2Ｃｌ2（５ｍＬ）溶液を添加した。撹拌を０℃で２０分間継続した。ＴＬＣは１００％の変換を示し、そこで混合物を氷−２Ｎ−ＨＣｌ（５０ｇ、１１ｍＬ）中に注入した。有機物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を０．２Ｎ−ＨＣｌ、水および食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4上で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物（５００ｍｇ）を得た。この粗製生成物を次にＣＨ2Ｃｌ2少量に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。トルエン：アセトン（９５：５）混合物で溶離して３β−（６’−アセトキシ−１’−ヘキシニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン２０−オン（１３０ｍｇ）を得た。ｍｐ．８５〜８７℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（トルエン：アセトン９３：７）＝０．２。
実施例２７
３α−ヒドロキシ−３β−［３−（２’−プロピニルオキシ）−１’−プロピニル］−５β−プレグナン−２０−オン
プロパルギルエーテル（０．３ｍＬ、３ミリモル）の乾燥ＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を−７０℃においてｎ−ＢｕＬｉ（ＴＨＦ中２．４Ｍ、３ミリモル、１．２５ｍＬ）で処理した。混合物を−７５℃で０．５時間撹拌後、５β−プレグナン−３，２０−ジオン環状２０−（１，２−エタンジイルアセタール）（３６０ｍｇ、１ミリモル）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を添加し、混合物を−７８℃で１時間撹拌した。冷浴を除き、混合物をＮＨ4Ｃｌ溶液（５ｍＬ）でクエンチした。溶媒を除き、次に残渣をアセトン（４０ｍＬ）に溶解した。１Ｎ−ＨＣｌ（４ｍＬ）を添加後、溶液を室温で１５分間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ3溶液を添加して酸を中和した。溶媒を除き、残渣をＥｔＯＡｃで抽出した。有機物を水および食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4上で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物を得た。この粗製生成物を次にＣＨ2Ｃｌ2少量中に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。トルエン：アセトン混合物（９５：５）で溶離して第一分画として３β−ヒドロキシ−３α−［３−（２’−プロピニルオキシ）−１−プロピニル］−５β−プレグナン−２０−オン（３１ｍｇ）を得た。同一溶媒混合物でさらに溶離して３α−ヒドロキシ−３β−［３−（２’−プロピニルオキシ）−１−プロピニル］−５β−プレグナン−２０−オン（２２５ｍｇ）を無色固体として得た。ｍｐ．１０３〜１０６℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（トルエン：アセトン９５：５）＝０．３９。
実施例２８
３α−ヒドロキシ−３β−（３−メトキシ−１−プロピニル）−５β−プレグナン−２０−オン
メチルプロパルギルエーテル（０．２５ｍＬ、３ミリモル）の乾燥ＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を−７０℃でｎ−ＢｕＬｉ（ＴＨＦ中２．４Ｍ、２．９ミリモル、１．２０ｍＬ）で処理した。混合物を−７５℃で０．５時間撹拌後、５β−プレグナン−３，２０−ジオン環状２０−（１，２−エタンジイルアセタール）（１８５ｍｇ、０．５ミリモル）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を添加し、混合物を−７８℃で２０分間撹拌した。冷浴を除き、混合物をＮＨ4Ｃｌ溶液（２ｍＬ）でクエンチした。溶媒を除き、次に残渣をアセトン（２５ｍＬ）に溶解した。２Ｎ−ＨＣｌ（２ｍＬ）を添加後、溶液を室温で１５分間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ3溶液を添加して酸を中和した。溶媒を除き、残渣をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水および食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4上で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物（２５０ｍｇ）を得た。次にこの粗製生成物をＣＨ2Ｃｌ2少量に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。トルエン：アセトン混合物（９３：７）で溶離して第一分画として３β−ヒドロキシ−３α−（３−メトキシ−１−プロピニル）−５β−プレグナン−２０−オン（１９ｍｇ）を得た。同一溶媒混合物でさらに溶離して３α−ヒドロキシ−３β−（３−メトキシ−１−プロピニル）−５β−プレグナン−２０−オン（１１５ｍｇ）を無色固体として得た。ｍｐ．１５５〜１５９℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（ヘキサン：アセトン７：３）＝０．２５。
実施例２９
３α−ヒドロキシ−３β−［３−（４’−ピリジニルオキシ）−１−プロピニル］−５β−プレグナン−２０−オン
プロパルギル・４−ピリジル・エーテル（Ｔｈｕｍｍｅｌなど、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、１９７８年、４３巻、４８８２頁に従って製造）（１７３ｍｇ、１．３ミリモル）の乾燥ＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液を−７０℃においてｎ−ＢｕＬｉ（ＴＨＦ中２．５Ｍ、１．３ミリモル、０．５２ｍＬ）で処理した。混合物を、−７５℃で０．５時間撹拌後、５β−プレグナン−３，２０−ジオン環状２０−（１，２−エタンジイルアセタール）（１８０ｍｇ、０．５ミリモル）のＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液を添加し、混合物を−７８℃で２０分間撹拌した。冷浴を除き、撹拌を室温で１時間継続した。混合物をＮＨ4Ｃｌ溶液（２ｍＬ）でクエンチした。溶媒を除き、次に残渣をアセトン（２５ｍＬ）に溶解した。２Ｎ−ＨＣｌ（２ｍＬ）を添加後、溶液を室温で２０分間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ3溶液を添加して酸を中和した。溶媒を除き、残渣をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水および食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4上で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物（２５０ｍｇ）を得た。次にこの粗製生成物をＣＨ2Ｃｌ2少量中に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。ＣＨ2Ｃｌ2：アセトン混合物（９０：１０）で溶離して３α−ヒドロキシ−３β−［３−（４’−ピリジニルオキシ）−１−プロピニル］−５β−プレグナン−２０−オン（１４５ｍｇ）を無色固体として得た。ｍｐ．８４〜９０℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（ＣＨ2Ｃｌ2：アセトン８５：１５）＝０．１７。
実施例３０
３α−ヒドロキシ−３β−［３−（１’Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１’−イル）−１−プロピニル］−５β−プレグナン−２０−オン
１−（２−プロピニル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール（トリアゾールと臭化プロパルギルとの反応で製造）（７７ｍｇ、０．７２ミリモル）の乾燥ＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を−７０℃においてｎ−ＢｕＬｉ（ＴＨＦ中２．５Ｍ、０．７２ミリモル、０．２８ｍＬ）で処理した。混合物を、−７５℃で０．５時間撹拌後、５β−プレグナン−３，２０−ジオン環状２０−（１，２−エタンジイルアセタール）（１３０ｍｇ、０．３６ミリモル）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を添加し、混合物を−７８℃で１時間撹拌した。冷浴を除き、混合物をＮＨ4Ｃｌ溶液（１ｍＬ）でクエンチした。溶媒を除き、次に残渣をアセトン（２５ｍＬ）に溶解した。２Ｎ−ＨＣｌ（２ｍＬ）を添加後、溶液を室温で３０分間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ3溶液を添加して酸を中和した。溶媒を除き、残渣をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水および食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4上で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物を得た。この粗製生成物を次にＣＨ2Ｃｌ2少量に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。トルエン：アセトン混合物（８５：１５）で溶離して３α−ヒドロキシ−３β−［３−（１’Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１’−イル）−１−プロピニル］−５β−プレグナン−２０−オン（５６ｍｇ）を無色固体として得た。ｍｐ．１４２〜１４４℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（ヘキサン：アセトン７：３）＝０．３３。
実施例３１
３α−ヒドロキシ−３β−［３−（２’Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２’−イル）−１−プロピニル］−５β−プレグナン−２０−オン
トリアゾールと臭化プロパルギルとの反応で製造した２−（２−プロピニル）−２Ｈ−１，２，３−トリアゾール（３５ｍｇ、０．３３ミリモル）の乾燥ＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を−７０℃においてｎ−ＢｕＬｉ（ＴＨＦ中２．５Ｍ、０．３３ミリモル、０．１５ｍＬ）で処理した。混合物を−７５℃で０．５時間撹拌後、５β−プレグナン−３，２０−ジオンの環状２０−（１，２−エタンジイルアセタール）（６０ｍｇ、０．１６ミリモル）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を添加し、混合物を−７８℃で１時間撹拌した。冷浴を除き、混合物をＮＨ4Ｃｌ溶液（１ｍＬ）でクエンチした。溶媒を除き、次に残渣をアセトン（２５ｍＬ）に溶解した。２Ｎ−ＨＣｌ（２ｍＬ）を添加後、溶液を室温で３０分間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ3溶液を添加して酸を中和した。溶媒を除き、残渣をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水および食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4上で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物を得た。この粗製生成物を次にＣＨ2Ｃｌ2少量に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。トルエン：アセトン混合物（８５：１５）で溶離して第一分画としてプレグナン−３，２０−ジオン（２０ｍｇ）を得た。同一溶媒でさらに溶離して３α−ヒドロキシ−３β−［３−（２’Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２’−イル）−１−プロピニル］−５β−プレグナン−２０−オン（２０ｍｇ）を無色固体として得た。ｍｐ．１３９〜１４０℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（ヘキサン：アセトン４：１）＝０．１７。
実施例３２
３α−ヒドロキシ−３β−（２’−チエニル）エチニル−５β−プレグナン−２０−オン
４−ヨードチオフェン（６３ｍｇ、０．３ミリモル）、３β−エチニル−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン（１０３ｍｇ、０．３ミリモル）の脱ガス乾燥トリエチルアミン（１ｍＬ）溶液をアルゴン下２３℃で撹拌した。ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）二塩化物（５ｍｇ）およびＣｕＩ（５ｍｇ）を添加し、混合物をこの温度で４５分間撹拌した。ＣＨ2Ｃｌ2（５ｍＬ）を添加して、混合物を２３℃で１時間撹拌した。ＴＬＣは出発物質の１００％変換を示した。そこで、溶媒を除き、残渣をシリカゲル上のクロマトグラフィーによって精製した。ヘキサン：アセトン（４：１）で溶離して３α−ヒドロキシ−３β−（２’−チエニル）エチニル−５β−プレグナン−２０−オン（５０ｍｇ）を無色の固体として得た。ｍｐ．２０５〜２０６℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（ヘキサン：アセトン４：１）＝０．３５。
類似の方法を使用して３α−ヒドロキシ−３β−（５’−アセチル−２’−チエニル）エチニル−５β−プレグナン−２０−オンを製造した。ｍｐ．２２６〜２２８℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（ヘキサン：アセトン４：１）＝０．１４。
実施例３３
３α−ヒドロキシ−３β−（３’−フェニル−１’−プロピニル）−５β−プレグナン−２０−オン
３−フェニル−１−プロピン（０．２５ｍＬ、２ミリモル）の乾燥ＴＨＦ（１７ｍＬ）溶液を−７０℃においてｎ−ＢｕＬｉ（ＴＨＦ中２．５Ｍ、２ミリモル、０．８ｍＬ）で処理した。混合物を−７５℃で１０分間撹拌後、５β−プレグナン−３，２０−ジオン環状２０−（１，２−エタンジイルアセタール）（２０６ｍｇ、０．６ミリモル）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を添加し、混合物を−７８℃で２０分間撹拌した。冷浴を除き、混合物をＮＨ4Ｃｌ溶液（５ｍＬ）でクエンチした。溶媒を除き、次に残渣をアセトン（１５ｍＬ）に溶解した。２Ｎ−ＨＣｌ（４ｍＬ）を添加後、溶液を室温で２０分間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ3溶液を添加して酸を中和した。溶媒を除き、残渣をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水と食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4上で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物（４６０ｍｇ）を得た。この粗製生成物を次にＣＨ2Ｃｌ2少量中に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。トルエン：アセトン混合物（８５：１５）で溶離して第一分画として未反応フェニルプロピンを得た。同一溶媒でさらに溶離して３α−ヒドロキシ−３β−（３’−フェニル−１’−プロピニル）−５β−プレグナン−２０−オン（１７５ｍｇ）を無色固体として得た。ｍｐ．１２４〜１３２℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（ヘキサン：アセトン７：３）＝０．４６。
実施例３４
３α−ヒドロキシ−３β−（３’−フェニルプロピル）−５β−プレグナン−２０−オン
前記フェニルプロピニル誘導体（５０ｍｇ）のＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）溶液をＰｄ／Ｃ（１０ｍｇ、５％）上、２気圧のＨ2で４５分間水素化した。混合物を次にセライト床少量を通して濾過、濃縮して標記化合物を無色固体（４０ｍｇ）として得た。ｍｐ．４１〜４６℃、Ｒｆ（ヘキサン：アセトン７：３）＝０．４８。
実施例３５
３α−ヒドロキシ−３β−［３−（１’Ｈ−ピラゾール−１’−イル）−１−プロピニル］−５β−プレグナン−２０−オン
１−（２−プロピニル）−１Ｈ−ピラゾール（ピラゾールと臭化プロパルギルとの反応で製造）（１６０ｍｇ、１．５ミリモル）の乾燥ＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液を−７０℃においてｎ−ＢｕＬｉ（ＴＨＦ中２．５Ｍ、１．５ミリモル、０．６ｍＬ）で処理した。混合物を−７５℃で０．５時間撹拌後、５β−プレグナン−３，２０−ジオン環状２０−（１，２−エタンジイルアセタール）（１８０ｍｇ、０．５ミリモル）のＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液を添加し、混合物を−７８℃で１時間撹拌した。冷浴を除き、混合物をＮＨ4Ｃｌ溶液（１ｍＬ）でクエンチした。溶媒を除き、次に残渣をアセトン（２５ｍＬ）中に溶解した。２Ｎ−ＨＣｌ（２ｍＬ）を添加後、溶液を室温で３０分間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ3溶液を添加して酸を中和した。溶媒を除き、残渣をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水および食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4上で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物を得た。粗製生成物を次にＣＨ2Ｃｌ2少量中に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。トルエン：アセトン混合物（９：１）で溶離して３α−ヒドロキシ−３β−［３−（１’Ｈ−ピラゾール−１’−イル）−１−プロピニル］−５β−プレグナン−２０−オン（８０ｍｇ）を無色固体として得た。ｍｐ．１１３〜１１５℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（トルエン：アセトン９：１）＝０．１９。
実施例３６
３β−（３’−アセチルフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン
３−ヨードアセトフェノン（７４ｍｇ、０．３ミリモル）、３β−エチニル−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン（１０３ｍｇ、０．３ミリモル）の脱ガス乾燥トリエチルアミン（１ｍＬ）溶液をアルゴン下に２３℃で撹拌した。ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）二塩化物（５ｍｇ）およびＣｕＩ（５ｍｇ）を添加し、混合物をこの温度で４５分間撹拌した。これにＣＨ2Ｃｌ2（５ｍＬ）を添加して、混合物を２３℃で１時間撹拌した。ＴＬＣは出発物質の１００％変換を示し、そこで溶媒を除き、残渣をシリカゲル上のクロマトグラフィーによって精製した。ヘキサン：アセトン（８５：１５）で溶離して３β−（３’−アセチルフェニルエチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン（３０ｍｇ）を無色固体として得た。ｍｐ．℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（ヘキサン：アセトン４：１）＝０。
実施例３７
３β−（３’−アセトキシ−３’−プロピニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン
０〜５℃においてピリジン（２８０ｍｇ）のＣＨ2Ｃｌ2（２ｍＬ）溶液を塩化アセチル（２８０ｍｇ）で処理した。３β−（３’−ヒドロキシ−１’−プロピニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン（１３０ｍｇ）のＣＨ2Ｃｌ2（３ｍＬ）溶液を添加した。撹拌を０℃で３０分間継続した。ＴＬＣは１００％変換を示した。そこで混合物を氷−２Ｎ−ＨＣｌ（２０ｇ、３ｍＬ）中に注入した。有機物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を０．２Ｎ−ＨＣｌ、水および食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4上で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物（１５０ｍｇ）を得た。この粗製生成物をＣＨ2Ｃｌ2少量中に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。トルエン：アセトン混合物（４：１）で溶離して３β−（３’−アセトキシ−１’−プロピニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン（１１０ｍｇ）を得た。ｍｐ．１３２〜１５０℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（ヘキサン：アセトン７０：３０）＝０．３７。
実施例３８
３α−ヒドロキシ−３β−（４−ヒドロキシブチン−１−イル）−２１−（１−イミダゾリル）−５β−プレグナン−２０−オン
ａ．２１−ブロモ−３α−ヒドロキシ−３β−（４−ヒドロキシブチン−１−イル）−５β−プレグナン−２０−オン
３α−ヒドロキシ−３β−（４−ヒドロキシブチン−１−イル）−５β−プレグナン−２０−オン（３８６ｍｇ、１ミリモル）のＭｅＯＨ（２０ｍＬ）溶液を塩化アセチル２滴、続いて臭素（１．２ミリモル）で処理した。混合物を室温で２．５時間撹拌し、氷水中に注入した。分離した固体を濾取し、水洗し、乾燥した（４１０ｍｇ）。半乾燥固体を次にＥｔＯＡｃに溶解し、無水ＭｇＳＯ4上で乾燥した。濾過および溶媒の除去で粗製ブロモ誘導体を得、これをそのまま次段に使用した。
ｂ．３α−ヒドロキシ−３β−（４−ヒドロキシブチン−１−イル）−２１−（１−イミダゾリル）−５β−プレグナン−２０−オン
ＮａＨ（１３８ｍｇ、９５％、５．４６ミリモル）のＴＨＦ（１０ｍＬ）懸濁液を室温においてイミダゾール（３４５ｍｇ、５．１ミリモル）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液で処理した。この混合物を３０分間撹拌後、粗製ブロモ誘導体（９５ｍｇ、０．２ミリモル）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を添加した。撹拌を室温で１時間継続した。飽和ＮＨ4Ｃｌ溶液を添加し、溶媒を除いた。残渣をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水および食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4上で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物（１００ｍｇ）を得た。この粗製生成物を次にＣＨ2Ｃｌ2少量に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。ＣＨ2Ｃｌ2：ＭｅＯＨ：ＮＥｔ3（９５：４．５：０．５）混合物による溶離で３α−ヒドロキシ−３β−（４−ヒドロキシブチン−１−イル）−２１−（１−イミダゾリル）−５β−プレグナン−２０−オン（４０ｍｇ）を無色固体として得た。ｍｐ．１１７〜１１９℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（ＣＨ2Ｃｌ2：ＭｅＯＨ：ＮＥｔ3９５：４．５：０．５）＝０．２１。
同様にして３α−ヒドロキシ−３β−（４−ヒドロキシブチン−１−イル）−２１−（１，２，４−トリアゾール−１−イル）−５β−プレグナン−２０−オン、ｍｐ．２０８〜２１０℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（ＣＨ2Ｃｌ2：ＭｅＯＨ：ＮＥｔ3９５：４．５：０．５）＝０．２４；３α−ヒドロキシ−３β−（４−ヒドロキシブチン−１−イル）−２１−（テトラゾール−１−イル）−５β−プレグナン−２０−オン、ｍｐ．１１０〜１１２℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（ＣＨ2Ｃｌ2：ＭｅＯＨ：ＮＥｔ3９６：３．５：０．５）＝０．１１；および３α−ヒドロキシ−３β−（４−ヒドロキシブチン−１−イル）−２１−（１，２，３−トリアゾール−１−イル）−５β−プレグナン−２０−オン、ｍｐ．１０１〜１０４℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（ＣＨ2Ｃｌ2：ＭｅＯＨ：ＮＥｔ3９５：４．５：０．５）＝０．２を製造した。
実施例３９
３α−ヒドロキシ−３β−（４−ヒドロキシブチン−１−イル）−２１−（１−イミダゾリル）−５β−１９−ノルプレグナン−２０−オン
ａ．２１−ブロモ−３α−ヒドロキシ−３β−（４−ヒドロキシブチン−１−イル）−５β−１９−ノルプレグナン−２０−オン
３α−ヒドロキシ−３β−（４−ヒドロキシブチン−１−イル）−５β−１９−ノルプレグナン−２０−オン（７１０ｍｇ、１．９ミリモル）のＭｅＯＨ（６０ｍＬ）溶液を３３℃に加熱し、塩化アセチル２滴、続いて臭素（２．２８ミリモル、０．１１６ｍＬ）で処理した。混合物を室温で１．５時間撹拌し、氷水中に注入した。分離した固体を濾取し、水洗し、乾燥した。この半乾燥固体を次にＥｔＯＡｃに溶解し、無水ＭｇＳＯ4上で乾燥した。濾過と溶媒の除去で粗製ブロモ誘導体（８７０ｍｇ）を得、これをそのまま次段に使用した。
ｂ．３α−ヒドロキシ−３β−（４−ヒドロキシブチン−１−イル）−２１−（１−イミダゾリル）−５β−１９−ノルプレグナン−２０−オン
ＮａＨ（１３８ｍｇ、９５％、５．４６ミリモル）のＴＨＦ（１０ｍＬ）懸濁液を室温においてイミダゾール（３４５ｍｇ、５．１ミリモル）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液で処理した。この混合物を３０分間撹拌後、粗製ブロモ誘導体（９０ｍｇ、０．２ミリモル）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を添加した。撹拌を室温で１時間継続した。飽和ＮＨ4Ｃｌ溶液を添加し、溶媒を除いた。残渣をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水および食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4上で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物（１００ｍｇ）を得た。この粗製生成物を次にＣＨ2Ｃｌ2少量に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。ＣＨ2Ｃｌ2：ＭｅＯＨ：ＮＥｔ3（９５：４．５：０．５）混合物で溶離して３α−ヒドロキシ−３β−（４−ヒドロキシブチン−１−イル）−２１−（１−イミダゾリル）−５β−１９−ノルプレグナン−２０−オン（２５ｍｇ）を無色固体として得た。ｍｐ．１１８〜１２７℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（ＣＨ2Ｃｌ2：ＭｅＯＨ：ＮＥｔ3９５：４．５：０．５）＝０．２８。
実施例４０
３α−ヒドロキシ−３β−（４−ヒドロキシブチン−１−イル）−２１−（１，２，３−トリアゾール−２−イル）−５β−１９−ノルプレグナン−２０−オンおよび３α−ヒドロキシ−３β−（４−ヒドロキシブチン−１−イル）−２１−（１，２，３−トリアゾール−１−イル）−５β−１９−ノルプレグナン−２０−オン
ＮａＨ（１１ｍｇ、９５％、０．４４ミリモル）のＴＨＦ（１０ｍＬ）懸濁液を室温において１，２，３−トリアゾール（３０ｍｇ、０．４４ミリモル）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液で処理した。この混合物を３０分間撹拌後、粗製の２１−ブロモ−３α−ヒドロキシ−３β−（４−ヒドロキシブチン−１−イル）−５β−プレグナン−２０−オン（１００ｍｇ、０．２２ミリモル）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を添加した。撹拌は室温で１時間継続した。飽和ＮＨ4Ｃｌ溶液を添加し、溶媒を除いた。残渣をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水および食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4上で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物（１００ｍｇ）を得た。この粗製生成物を次にＣＨ2Ｃｌ2少量に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。ＣＨ2Ｃｌ2：アセトン（４：１）混合物によって溶離して３α−ヒドロキシ−３β−（４−ヒドロキシブチン−１−イル）−２１−（２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２−イル）−５β−１９−ノルプレグナン−２０−オン（１５ｍｇ）を第一分画として得た。ｍｐ．１５８〜１６０℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（ＣＨ2Ｃｌ2：アセトン４：１）＝０．３６。同一の溶媒混合物でさらに溶離して、３α−ヒドロキシ−３β−（４−ヒドロキシブチン−１−イル）−２１−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−５β−１９−ノルプレグナン−２０−オン（１５ｍｇ）を得た。ｍｐ．１８８〜１９０℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（ＣＨ2Ｃｌ2：アセトン４：１）＝０．２。
実施例４１
３α−ヒドロキシ−２β−モルホリニル−２１−［１’−（１’，２’，４’−トリアゾリル）−５α−プレグナン−２０−オン
１，２，４−トリアゾール（１０８ｍｇ、１．５７ミリモル）の乾燥ＴＨＦ（２．５ｍＬ）溶液に水素化ナトリウム（３６ｍｇ、１．５０ミリモル）を添加した。この混合物をアルゴン下に２５℃で０．５時間撹拌した。次に３α−ヒドロキシ−２β−モルホリニル−２１−ブロモ−５α−プレグナン−２０−オン（１３０ｍｇ、０．２７ミリモル）を添加し、混合物をさらにアルゴン下に２５℃で２．５時間撹拌した。反応混合物に水（２０ｍＬ）を徐々に添加した。生成物を酢酸エチル（３×２５ｍＬ）で抽出した。抽出物を集め、食塩水（２０ｍＬ）および水（３×２０ｍＬ）で洗浄した。得られた有機溶液を硫酸ナトリウム上で乾燥し、溶媒を真空下に除去して粗製生成物（１３０ｍｇ）を得た。純粋な生成物（９０ｍｇ、７１％）はフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル３０ｇおよびＣＨ2Ｃｌ2：ＭｅＯＨ：ＥｔＮ3＝９５：４．５：０．５混合溶媒３００ｍＬ、Ｒｆ＝０．１４）によって得られた。
実施例４２
３α−ヒドロキシ−２１−（１’−ウラシル）−５α−プレグナン−２０−オン
ウラシル（１１２ｍｇ、１ミリモル）およびＫ2ＣＯ3（１３８ｍｇ、１ミリモル）のＤＭＦ（１．５ｍＬ）懸濁液に３α−ヒドロキシ−２１−ブロモ−５α−プレグナン−２０−オン（４００ｍｇ、１ミリモル）を添加し、得られた混合物を２５℃で６５時間撹拌した。これを次に水（６０ｍＬ）および酢酸エチル（１００ｍＬ）の入った分液漏斗中に注入した。振盪後、水層を除去し、有機層中の白色固体を濾取して生成物（８７ｍｇ、２０％）として得た。ｍｐ．２６２〜２６５℃（分解）。
実施例４３
Ｓ−（３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン−２１−イル）チオ硫酸ナトリウム
２１−ブロモ−３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン（５００ｍｇ、１．２６ミリモル）のエタノール５０ｍＬ溶液にチオ硫酸ナトリウム（１９９ｍｇ、１．２６ミリモル）の水（１０ｍＬ）溶液を滴加した。ＴＬＣ（１：１アセトン／ジクロロメタン）が出発ブロミドの完全な消費を示すまで反応物を室温で撹拌した。反応物の真空濃縮で臭化ナトリウムを含む所期のチオ硫酸塩を得た。フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、１：１から３：１アセトン／ジクロロメタンまでの勾配で溶離）は４３０ｍｇ（７５％）の標記化合物を白色固体として与えた。
同様に、Ｓ−（３α−ヒドロキシ−３β−メチル−５α−プレグナン−２０−オン−２１−イル）チオ硫酸ナトリウムは前記フラッシュクロマトグラフィーにより精製し、Ｓ−（３α−ヒドロキシ−３β−メトキシメチル−５α−プレグナン−２０−オン−２１−イル）チオ硫酸ナトリウムは５０：１メタノール／水からの再結晶により精製し、Ｓ−（３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン−２１−イル）チオ硫酸ナトリウムはシリカゲルおよび３：１アセトン／エタノールでのフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、Ｓ−［３α−ヒドロキシ−３β−（４’−ヒドロキシブチニル）−５β−プレグナン−２０−オン−２１−イル］チオ硫酸ナトリウムは熱アセトンでのかきまぜによって精製し、またＳ−（３α−ヒドロキシ−３β−トリフルオロメチル−５β−１９−ノルプレグナン−２０−オン−２１−イル）チオ硫酸ナトリウムは熱アセトン／クロロホルムでのかきまぜによって精製して、製造した。
実施例４４
３α−ヒドロキシ−３β−（Ｅ）−（２−フェニルエテニル）−５α−プレグナン−２０−オン
ベンジルフェニルスルホキシド
ベンジルフェニルスルフィド（Ａｌｄｒｉｃｈ社、１．６８ｇ、５．３３ミリモル）のＣＨ2Ｃｌ2２５ｍＬ溶液に−７８℃においてｍ−クロロ過安息香酸（Ａｌｄｒｉｃｈ社、５０〜６０％、７６０ｍｇ、６０％として２．６４ミリモル）のＣＨ2Ｃｌ2１０ｍＬ溶液を徐々に添加した。室温まで温めて一夜撹拌後、溶液を飽和ＮａＨＣＯ3溶液２０ｍＬに添加した。水層を分離し、ＣＨ2Ｃｌ2（２×１０ｍＬ）で抽出した。有機層を集め、次に乾燥（ＭｇＳＯ4）し、濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、１０％アセトン／ヘキサンおよび１５％アセトン／ヘキサン）に付してスルホキシド（６３２ｍｇ、５５％）を白色固体として得た。ｍｐ．１２３〜１２６℃。
２０，２０−エチレンジオキシ−３α−ヒドロキシ−３β−［［２−（フェニルスルフィニル）−２−フェニル］エチル］−５α−プレグナン
ジイソプロピルアミン（Ａｌｄｒｉｃｈ社、ＣａＨ2から新たに蒸留、０．５ｍＬ、３６１ｍｇ、３．５７ミリモル）の乾燥ＴＨＦ２ｍＬ溶液を−１０℃に冷却し、ｎ−ＢｕＬｉの１．６Ｍ−ヘキサン溶液（Ａｌｄｒｉｃｈ社、１．０ｍＬ、１．６ミリモル）を注射筒から滴加した。１０分後、反応物を−７５℃に冷却し、ベンジルフェニルスルホキシド（３４７ｍｇ、１．６０ミリモル）の乾燥ＴＨＦ５ｍＬ溶液を注射筒から３０分間にわたって滴加した。得られた濃黄色溶液に固体の２０，２０−エチレンジオキシ−３（Ｒ）−５α−プレグナン−３−スピロ−２’−オキシラン２９７ｍｇ（０．７９ミリモル）を添加した。反応物を室温まで温め、次に５０℃に加温した。５時間後、反応物を室温まで冷却し、氷冷水３０ｍＬに添加した。得られた混合物をＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。ＥｔＯＡｃ層を集め、飽和ＮａＣｌで逆抽出し、乾燥（Ｎａ2ＳＯ4）し、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、１００％ＣＨ2Ｃｌ2から２０％アセトン／ＣＨ2Ｃｌ2までの勾配）によって精製してスルホキシド（４０５ｍｇ、８６％）をジアステレオマー２種の混合物（1Ｈ−ＮＭＲ中のベンジルプロトン２本に基づいて）として得た。
３α−ヒドロキシ−３β−［［２−（フェニルスルフィニル）−２−フェニル］エチル］−５α−プレグナン−２０−オン
２０，２０−エチレンジオキシ−３α−ヒドロキシ−３β−［［２−（フェニルスルフィニル）−２−フェニル］エチル］−５α−プレグナン（１．３０ｇ、２．２１ミリモル）のＴＨＦ１５ｍＬ溶液を氷／水浴中で冷却し、１Ｎ−ＨＣｌ水溶液（３ｍＬ）、続いてアセトン２ｍＬを添加した。室温で７０分間撹拌後、反応物を０℃まで再冷却し、飽和ＮａＨＣＯ3溶液６ｍＬを含有するＥｔＯＡｃ／水混合物に添加した。水層をＥｔＯＡｃで２回抽出し、有機層を集め、飽和ＮａＣｌ溶液で抽出し、乾燥（Ｎａ2ＳＯ4）し、濃縮した。残渣は精製することなしに次段に進めた。
３α−ヒドロキシ−３β−（Ｅ）−（２−フェニルエテニル）−５α−プレグナン−２０−オン
２，４，６−コリジン０．９５ｍＬを含む３α−ヒドロキシ−３β−［［２−（フェニルスルフィニル）−２−フェニル］エチル］−５α−プレグナン−２０−オン（９６３ｍｇ、１．７６ミリモル）のｐ−シメン６ｍＬ懸濁液を１３５℃に１時間加熱した。一夜０℃に放置後、生成物が沈殿し、濾過で単離した。粗製生成物を冷ｐ−シメン（３×５ｍＬ）およびヘキサン（合計１２０ｍＬ）で洗浄して標記化合物４４５ｍｇを白色固体として得た。ｍｐ．２０９〜２１３℃。
実施例４５
３α−ヒドロキシ−２β−トリメチルシリルエチニル−５α−プレグナン−２０−オン
トリメチルシリルアセチレン（０．５ｍＬ、０．３４７ｇ、３．５４ミリモル）の乾燥ＴＨＦ４ｍＬ溶液を−７８℃に冷却し、２．５Ｍ−ｎ−ＢｕＬｉのヘキサン溶液で処理した。ニートのＢＦ3−Ｅｔ2Ｏ（０．３ｍＬ、０．３４６ｇ、２．４４ミリモル）を注射筒により添加した。−７８℃で５分間撹拌後、２０，２０−エチレンジオキシ−５α−プレグナン−２α，３α−エポキシド（５５７ｍｇ、１．５４ミリモル）の乾燥ＴＨＦ３ｍＬ溶液を１２分にわたって添加した。さらに２．５時間後、反応物を飽和ＮＨ4Ｃｌ溶液に添加した。得られた混合物をＥｔＯＡｃ（３×２５ｍＬ）で抽出した。有機層を集め、食塩水溶液で洗浄し、乾燥（Ｎａ2ＳＯ4）し、減圧濃縮した。粗製反応混合物をアセトン１０ｍＬに溶解し、氷／水浴中で冷却し、１Ｎ−ＨＣｌ溶液（１ｍＬ）で処理した。室温で１時間後、反応物を飽和ＮａＨＣＯ3溶液１ｍＬを含有するエーテル／水混合物中に添加した。水層をエーテルで２回洗浄し、エーテル層を集めて飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、乾燥（Ｎａ2ＳＯ4）、濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、１２．５％アセトン／ヘキサン）で標記化合物２４９ｍｇを白色固体として得た。ｍｐ．１６４〜１６７℃。
前記操作は３α−ヒドロキシ−２β−（３’−メトキシ−１’−プロピニル）−５α−プレグナン−２０−オンの製造のためにも使用した。
トリメチルシリル化合物のＫ2ＣＯ3／ＭｅＯＨでの加水分解は３α−ヒドロキシ−２β−エチニル−５α−プレグナン−２０−オンを白色固体として与えた。ｍｐ．１７９〜１８９℃（分解）。
実施例４６
３α，２１−ジヒドロキシ−３β−エチニル−５β−プレグナン−２０−オン
ａ．２１−ブロモ−３β−エチニル−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン
３β−エチニル−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン（３ｇ、８．７７ミリモル）のＭｅＯＨ（１１０ｍＬ）溶液をＨＢｒ（４８％）２滴、続いて臭素（０．５ｍＬ、１０．８ミリモル）で処理した。混合物を室温で１時間処理し、氷水中に注入した。分離した固体を濾取し、水洗し、乾燥（３．２ｇ）した。この半乾燥固体を次にＥｔＯＡｃ中に溶解し、無水ＭｇＳＯ4上で乾燥した。濾過と溶媒除去とで粗製ブロモ誘導体を得た。粗製生成物を次にＣＨ2Ｃｌ2少量中に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。ヘキサン：ＥｔＯＡｃ混合物（４：１）で溶離して２１−ブロモ−３β−エチニル−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン（３．２ｇ）を得た。
ｂ．３α，２１−ジヒドロキシ−３β−エチニル−５β−プレグナン−２０−オン
前記ブロモ誘導体（３．２ｇ）のアセトン（１００ｍＬ）溶液をトリフルオロ酢酸（５．８ｍＬ、７６ミリモル）とトリエチルアミン（８．５ｍＬ）とで処理した。この混合物を３０分間還流し、次にトリフルオロ酢酸ナトリウム塩（１０ｇ）を少量づつ１０時間にわたって添加した。室温に冷却後、飽和ＮａＨＣＯ3溶液を添加した。溶媒を除き、残渣をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水および食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4上で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物を得た。この粗製生成物を次にＣＨ2Ｃｌ2少量中に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。ヘキサン：ＥｔＯＡｃ混合物（３：２）による溶離で３α，２１−ジヒドロキシ−３β−エチニル−５β−プレグナン−２０−オン（１．６ｇ）を得た。ｍｐ．１５６〜１５７℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（ヘキサン：アセトン３：１）＝０．２。
実施例４７
３β−（４’−アセチルフェニルエチニル）−３α，２１−ジヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン
４−ヨードアセトフェノン（１．２２ｇ、４．４４ミリモル）、３α，２１−ジヒドロキシ−３β−エチニル−５β−プレグナン−２０−オン（１．５９ｇ、４．４４ミリモル）の脱ガス乾燥トリエチルアミン（７ｍＬ）溶液をアルゴン下に２３℃で撹拌した。ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム塩化物（１５ｍｇ）およびＣｕＩ（５ｍｇ）を添加して、この混合物をこの温度で４５分間撹拌した。ＣＨ2Ｃｌ2（３０ｍＬ）を添加し、混合物を２３℃で１．５時間撹拌した。ＴＬＣは出発物質の１００％変換を示し、そこで溶媒を除き、残渣をシリカゲル上のクロマトグラフィーによって精製した。ヘキサン：アセトン（４：１）で溶離して３β−（４’−アセチルフェニルエチニル）−３α，２１−ジヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン（１．３ｇ）を無色固体として得た。ｍｐ．１８１〜１８３℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（ヘキサン：アセトン３：２）＝０．１４。
実施例４８
３β−（４’−アセチルフェニルエチニル）−３α，２１−ジヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン・２１−ヘミサクシネート・ナトリウム塩
ａ．３β−（４’−アセチルフェニルエチニル）−３α，２１−ジヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン・２１−ヘミサクシネート
３β−（４’−アセチルフェニルエチニル）−３α，２１−ジヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン（１．３ｇ、６．７６ミリモル）のピリジン（８ｍＬ）溶液をコハク酸無水物（６８０ｍｇ、２．５ミリモル）および４−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）アミノピリジン（２５ｍｇ）で処理した。混合物を７０〜７５℃に２．５時間加熱した。ＴＬＣは１００％の変換を示した。ピリジンを除き、残渣をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を０．１Ｎ−ＨＣｌ、水および食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4上で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物を得た。この粗製生成物を次にＣＨ2Ｃｌ2少量中に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。ヘキサン：アセトン混合物（７：３）で溶離して３β−（４’−アセチルフェニルエチニル）−３α，２１−ジヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン・２１−ヘミサクシネート（１．４ｇ）を得た。
ｂ．３β−（４’−アセチルフェニルエチニル）−３α，２１−ジヒドロキシ−５β−プレグナン−２０−オン・２１−ヘミサクシネートナトリウム塩
前記ヘミサクシネート（１．５ｇ、２．６ミリモル）、ＮａＨＣＯ3（２２０ｍｇ、２．６ミリモル）、水（１０ｍＬ）およびＣＨ2Ｃｌ2（１６ｍＬ）の混合物を室温で１時間撹拌した。溶媒を除き、残渣を凍結乾燥してナトリウム塩を無色固体（１．４ｇ）として得た。
実施例４９
３α，２１−ジヒドロキシ−３β−エチニル−５α−プレグナン−２０−オンａ．２１−ブロモ−３β−エチニル−３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン
３β−エチニル−３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン（２．３ｇ、６．７２ミリモル）のＭｅＯＨ（８０ｍＬ）溶液をＨＢｒ（４８％）２滴、続いて臭素（０．４ｍＬ、７．７３ミリモル）で処理した。混合物を室温で１時間撹拌し、氷水中に注入した。分離した固体を濾過して集め、水洗し、乾燥した（２．５ｇ）。この半乾燥固体を次にＥｔＯＡｃに溶解し、無水ＭｇＳＯ4上で乾燥した。濾過と溶媒除去で粗製ブロモ誘導体を得た。この粗製生成物を次に少量のＣＨ2Ｃｌ2中に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。ヘキサン：ＥｔＯＡｃ混合物（８５：１５）による溶離で２１−ブロモ−３β−エチニル−３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン（２．１ｇ）を得た。
ｂ．３α，２１−ジヒドロキシ−３β−エチニル−５α−プレグナン−２０−オン
前記ブロモ誘導体（２．１ｇ、５ミリモル）のアセトン（４０ｍＬ）溶液をトリフルオロ酢酸（３．８ｍＬ、５０ミリモル）およびトリエチルアミン（５．５ｍＬ）で処理した。混合物を３０分間還流し、次にトリフルオロ酢酸ナトリウム塩（１０ｇ）を少量づつ１０時間にわたって添加した。室温まで冷却後、飽和のＮａＨＣＯ3溶液を添加した。溶媒を除き、残渣をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水および食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4上で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物（１．６ｇ）を得た。この粗製生成物を次にＣＨ2Ｃｌ2少量中に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（７：３）混合物で溶離して３α，２１−ジヒドロキシ−３β−エチニル−５α−プレグナン−２０−オン（１．５ｇ）を得た。ｍｐ．２１４〜２１８℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（ヘキサン：アセトン７：３）＝０．３３。
実施例５０
３β−（４’−アセチルフェニルエチニル）−３α，２１−ジヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン
４−ヨードアセトフェノン（９６２ｍｇ、４ミリモル）、３α，２１−ジヒドロキシ−３β−エチニル−５α−プレグナン−２０−オン（１．２ｇ、４ミリモル）の脱ガス乾燥トリエチルアミン（７ｍＬ）溶液をアルゴン下に２３℃で撹拌した。ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウムクロリド（１５ｍｇ）およびＣｕＩ（５ｍｇ）を添加し、混合物をこの温度で４５分間撹拌した。ＣＨ2Ｃｌ2（２５ｍＬ）を添加して混合物を２３℃で１．５時間撹拌した。ＴＬＣは出発物質の１００％変換を示し、そこで溶媒を除き、残渣をシリカゲル上のクロマトグラフィーで精製した。ヘキサン：アセトン（７：３）で溶離して３β−（４’−アセチルフェニルエチニル）−３α，２１−ジヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン（７５０ｍｇ）を無色固体として得た。ｍｐ．２２２〜２２５℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（ヘキサン：アセトン４：１）＝０．１３。
実施例５１
３β−（４’−アセチルフェニルエチニル）−３α，２１−ジヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン・２１−ヘミサクシネート・ナトリウム塩
ａ．３β−（４’−アセチルフェニルエチニル）−３α，２１−ジヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン・２１−ヘミサクシネート
３β−（４’−アセチルフェニルエチニル）−３α，２１−ジヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン（２７６ｍｇ、１．４ミリモル）のピリジン（４ｍＬ）溶液をコハク酸無水物（６８０ｍｇ、２．７ミリモル）および４−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）アミノピリジン（２０ｍｇ）で処理した。混合物を７０〜７５℃で２．５時間加熱した。ＴＬＣは１００％の変換を示した。真空下にピリジンを除き、残渣をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を０．１Ｎ−ＨＣｌ、水および食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4上で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物を得た。この粗製生成物を次にＣＨ2Ｃｌ2少量中に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。ヘキサン：アセトン混合物（７．：３）で溶離して３β−（４’−アセチルフェニルエチニル）−３α，２１−ジヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン・２１−ヘミサクシネート（４００ｍｇ）を得た。
ｂ．３β−（４’−アセチルフェニルエチニル）−３α，２１−ジヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン・２１−ヘミサクシネート・ナトリウム塩
前記ヘミサクシネート（４００ｍｇ、０．７ミリモル）、ＮａＨＣＯ3（６０ｍｇ、０．７ミリモル）、水（３ｍＬ）およびＣＨ2Ｃｌ2（５ｍＬ）の混合物を室温で１時間撹拌した。溶媒を除き、残渣を凍結乾燥してナトリウム塩を無色固体（３９０ｍｇ）として得た。
実施例５２
３α−ヒドロキシ−３β−（３−ピリジル）エチニル−５β−プレグナン−２０−オン
３−ブロモピリジン（７０ｍｇ、０．４４ミリモル）および３β−エチニル−３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン（１５０ｍｇ、０．４４ミリモル）の脱ガス乾燥トリエチルアミン（１ｍＬ）溶液をアルゴン下に２３℃で撹拌した。ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム塩化物（１０ｍｇ）およびＣｕＩ（５ｍｇ）を添加し、混合物をこの温度で４５分間撹拌した。ＣＨ2Ｃｌ2（４ｍＬ）を添加して混合物を２３℃で１．５時間撹拌した。ＴＬＣは出発物質の１００％変換を示し、そこで溶媒を除き、残渣をシリカゲル上のクロマトグラフィーで精製した。ヘキサン：アセトン（３：１）で溶離して３α−ヒドロキシ−３β−（３−ピリジル）エチニル−５β−プレグナン−２０−オンを無色固体（３０ｍｇ）として得た。ｍｐ．２３０〜２３５℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（ヘキサン：アセトン７：３）＝０．２４。
実施例５３
２１−ブロモ−３α−ヒドロキシ−３β−（３−ヒドロキシプロピン−１−イル）−５β−プレグナン−２０−オン
３α−ヒドロキシ−３β−（３−ヒドロキシプロピン−１−イル）−５β−プレグナン−２０−オン（４８３ｍｇ、１．３ミリモル）のＭｅＯＨ（２０ｍＬ）溶液を３３℃に加熱し、ＨＢｒ（４８％）２滴、続いて臭素（１．４３ミリモル、０．７３ｍＬ）で処理した。混合物を３７℃で１時間撹拌し、氷水中に注入した。分離した固体を濾取し、水洗し、乾燥した。この半乾燥固体を次にＥｔＯＡｃ中に溶解し、無水ＭｇＳＯ4上で乾燥した。濾過と溶媒の除去とで粗製の２１−ブロモ−３α−ヒドロキシ−３β−（３−ヒドロキシプロピン−１−イル）−５β−プレグナン−２０−オン（３２２ｍｇ）を得た。
実施例５４
３α−ヒドロキシ−３β−（３−ヒドロキシプロピン−１−イル）−２１−（１，２，３−トリアゾール−２−イル）−５β−プレグナン−２０−オンおよび３α−ヒドロキシ−３β−（３−ヒドロキシプロピン−１−イル）−２１−（１，２，３−トリアゾール−１−イル）−５β−プレグナン−２０−オン
ＮａＨ（３０ｍｇ、９５％、１．２ミリモル）のＴＨＦ（１０ｍＬ）懸濁液を室温において１，２，３−トリアゾール（６９ｍｇ、１ミリモル）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液で処理した。この混合物を３０分間撹拌後、実施例５３の粗製ブロモ誘導体（１６２ｍｇ、０．３７ミリモル）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を添加した。撹拌を室温で１．５時間継続した。飽和ＮＨ4Ｃｌ溶液を添加し、溶媒を除いた。残渣をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水および食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4上で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物（２５０ｍｇ）を得た。この粗製生成物を次にＣＨ2Ｃｌ2少量に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。ＣＨ2Ｃｌ2：アセトン（６：４）混合物によって溶離して３α−ヒドロキシ−３β−（３−ヒドロキシプロピン−１−イル）−２１−（２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２−イル）−５β−プレグナン−２０−オン（４０ｍｇ）を第一分画として得た。ｍｐ．１８８〜１９１℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（ＣＨ2Ｃｌ2：アセトン６：４）＝０．５６。同一の溶媒混合物でさらに溶離して３α−ヒドロキシ−３β−（３−ヒドロキシプロピン−１−イル）−２１−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−５β−プレグナン−２０−オン（４０ｍｇ）を得た。ｍｐ．１３５〜１４０℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（ＣＨ2Ｃｌ2：アセトン６：４）＝０．３４。
実施例５５
３β−（４’−ヒドロキシ−１’−ブチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−１１，２０−ジオン
３−ブチン−１−オール（０．４ｍＬ、５．２ミリモル）の乾燥ＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液を−６５℃においてｎ−ＢｕＬｉ（４ｍＬ、ＴＨＦ中２．５Ｍ、１０ミリモル）で処理した。この混合物を−７８℃で０．５時間撹拌後、５β−プレグナン−３，１１，２０−トリオン環状２０−（１，２−エタンジイルアセタール）（８００ｍｇ、２．１４ミリモル）のＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液を添加し、混合物を−７８℃で１時間撹拌した。冷浴を除去し、撹拌を室温で４５分間継続した。次に混合物をＮＨ4Ｃｌ溶液（５ｍＬ）でクエンチした。溶媒を除き、残渣をアセトン（３０ｍＬ）に溶解した。２Ｎ−ＨＣｌ溶液（７ｍＬ）を添加後、溶液を室温で１５分間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ3溶液を添加して酸を中和した。溶媒を除去し、残渣をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水および食塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4上で乾燥後、溶液を濾過し、蒸発して粗製生成物を得た。粗製生成物を次にＣＨ2Ｃｌ2少量中に溶解し、シリカゲルのカラム上に注入した。トルエン：アセトン混合物（３：１）で溶離して未反応ブチノールを第一分画として得た。同一溶媒混合物でさらに溶離して３α−（４’−ヒドロキシ−１’−ブチニル）−３β−ヒドロキシ−５β−プレグナン−１１，２０−ジオン（１００ｍｇ）を得、次に３β−（４’−ヒドロキシ−１’−ブチニル）−３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−１１，２０−ジオン（４００ｍｇ）を無色固体として得た。ｍｐ．１５８〜１６２℃、ＴＬＣ：Ｒｆ（トルエン：アセトン３：１）＝０．１６。
当業者にとっては、前記化合物はジアステレオマー混合物としても存在しうること、およびそれが個々のジアステレオマーに分割しうることも明白となろう。ジアステレオマーの分割はガスまたは液体クロマトグラフィーによって、または天然起源のものからの単離によって容易に達成される。ここに特に指摘がない限り、本発明の化合物についての本明細書および請求項は分離されたものであるかまたはその混合物であるかに拘らず前記の通り異性体全てを包含することを意図して記載されている。
異性体が分離されている時には、所期の薬理学的活性はしばしばジアステレオマーの一つで卓越している。ここに記載するように、これら化合物は高度な立体特異性を表示する。殊に、ＧＡＢＡ受容体複合体に対する親和性の高い化合物は３β-置換-３α-ヒドロキシプレグナンのステロイド骨格を持つものである。
無毒性で医薬的に許容しうる天然および合成の直接的および「プロドラッグ」的な型のプロゲステロン、デオキシコーチコステロンおよびアンドロスタン代謝物である本発明の化合物および本発明で使用される化合物は、脳内でＧＡＢＡA受容体複合体においてこれまで未知の作用を持つ。本発明はこのこれまで未知の機序および作用の発見にも利用される。
本発明の医薬的組成物は、本発明の活性化合物またはその混合物を非毒性な医薬的担体とともに認められた操作法に従って動物またはヒトである対象において所期の薬動力学的活性を得るために充分な非毒性量において通常の単位用量型に製造される。好ましくは、この組成物は単位用量当り、活性成分約１ｍｇから約５００ｍｇまでから選択された活性だが毒性のない量で活性成分を含有する。この量は所期の生物活性および患者の症状に依存する。本発明の組成物および方法の望ましい目的はストレス、不安症、ＰＭＳ、ＰＮＤおよび、たとえばてんかんに起因するような発作の処置において不安症発作、筋肉硬直および中枢神経系不全患者に普遍的な抑欝を改善または予防することである。この組成物および方法の望ましい他の目的は、不眠症処置および催眠作用発現である。この化合物と方法の望ましいもう一つの目的は殊に静脈注射による麻酔導入である。
ここに採用する医薬的担体は、例えば固体、液体または時間放出（たとえば、Remington's・Pharmaceutical・Sciences、１４版、１９７０年参照）のいずれかでありうる。代表的な固体担体は乳糖、白土、ショ糖、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アラビアゴム、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、微結晶セルロース、ポリマーハイドロゲル、その他である。典型的な液体担体はプロピレングリコール、グリコフロール、シクロデキストリンの水溶液、シロップ、ピーナッツ油およびオリーブ油その他の乳液である。同様に、担体または希釈剤は、たとえば一ステアリン酸グリセリン又は二ステアリン酸グリセリン単独またはワックスと、マイクロカプセル、マイクロスフェア、リポソームおよび／またはハイドロゲルのような、当業者によく公知の時間−遅延剤をいずれも含みうる。
様々な医薬的製剤型を採用できる。そこで、固体担体を使用する時には、製剤は単なる粉砕微粉剤、油剤、錠剤、硬ゼラチンまたは腸溶カプセル内で、微粉型または顆粒型カプセル剤、またはトローチ剤またはロゼンジ剤型であることができる。本発明の化合物および本発明で使用する化合物はまた直腸投与のために坐剤の型においても使用しうる。化合物を、たとえば室温では固体であるが直腸温度で液体であるカカオ脂およびポリエチレングリコールまたは他の適当な非刺激性物質のような物質と混合する。液体担体を使用する時は、製剤は、たとえばアンプル剤、または水性または非水性懸濁剤のような液体型であることができる。液体用量型には医薬的に許容される保存剤その他も必要である。これに加えて、ここに開示するデータに基づいて必要となるべき用量の低さのために、非経口投与、経鼻投与、舌下および口内投与、および時間放出皮膚パッチも局所投与のために適当な医薬的剤型である。
本発明に従う不安解消、抗痙攣、気分転換（抗抑欝のような）または催眠作用発揮方法はこのような活性を必要とする対象に通常は医薬的担体とともに前記のような組成物に製剤化された、かかる活性を発揮するに充分な非毒性量の本発明の化合物を投与することからなる。
月経期間内に、分泌される代謝物は約４倍も変動する（Rosciszewskaなど）。それ故、症状を調節するための療法は患者のプロゲステロン代謝物濃度を正常な月経前状態での濃度よりさらに高濃度に維持することである。活性および主代謝産物の血漿中濃度は月経前および月経後の期間に監視する。本発明化合物の投与すべき単一または混合物としての量は正常な対象の月経前期間のプロゲステロン代謝物と同等かまたはさらに高いＧＡＢＡA受容体活性を示す水準に達するように算出される。
投与経路は活性化合物を刺激すべきＧＡＢＡA受容体に効果的に輸送する経路のいずれでもありうる。投与は非経口、経口、経直腸、膣内、皮内、筋肉内、舌下または経鼻的に行いうるが、経口、筋肉内および皮膚経路が好適である。例えば、一用量の皮膚パッチが活性成分を１週間までの期間にわたって患者に供給しうる。しかしながら、てんかん重積状態については非経口経路が好適である。
ＧＲ部位における力価および効力
試験管内および生体内実験データはプロゲステロン／デオキシコーチコステロンとその誘導体の天然起源の代謝物は高度な親和性をもってＧＲ複合体の新規で特異的な認識部位に相互作用して、ＧＡＢＡに感受性なニューロンの膜を横断する塩素イオンの通過を促進する（Geeなど、1987年、Harrisonなど、1987年）ことを示す。
当業者には［35Ｓ］ｔ−ブチルビシクロホスホロチオネート（［35Ｓ］ＴＢＰＳ）結合の調節は、ストレス、不安、および発作性疾患の処置に潜在的に治療効果が期待されるＧＲ複合体において作用する薬剤の力価と効力発揮の手段であることが公知である（Squires,R.F．など、「［35Ｓ］ｔ−ブチルビシクロホスホロチオネートはガンマアミノ酪酸−Ａに共役する脳−特異的部位およびイオン認識部位に高親和性で結合する」、Mol．Pharmacol．、２３巻：３２６頁、１９８３年；Lawrence，L．J．など、「ベンゾジアゼピンの抗痙攣作用：塩素イオノフォアのガンマアミノ酪酸依存性調節」、Biochem．Biophys．Res．Comm．、123巻：1130〜1137頁、1984年；Woodなど、「ベンゾジアゼピン受容体の作動剤、拮抗剤、逆作動剤および作動剤／拮抗剤の試験管内特徴付け」、Pharmacol.Exp.Ther.、231巻：572〜576頁、１９８４年）。今回本発明の化合物によって影響を受ける［35Ｓ］ＴＢＰＳの調節の性格を決定する数種の実験を行った。これら化合物はバルビツール酸、ベンゾジアゼピンまたはその他公知の部位とは重複しないＧＲ複合体の新規な部位と相互作用することが発見された。さらにその上、これら化合物はＧＲ複合体においてその活性に対して厳密な構造的必要条件を伴って高度な力価および効力を持つ。本発明において有用な好適な化合物は下記［35Ｓ］ＴＢＰＳ結合検定法で２μＭまたはそれ以下のＩＣ50を持つ。
この検定を行う操作は（１）Geeなど、１９８７年および（２）Gee,K.W.、L.J.LawrenceおよびH.I.Yamamura、「ベンゾジアゼピン受容体リガンドによる塩素イオノフォアの調節：ガンマアミノ酪酸の影響およびリガンド効率」、Molecular・Pharmacology、３０巻、２１８頁、１９８６年に詳記されている。これら操作は次のようにして実施される：
雄性Sprague-Dawleyラットから屠殺直後に脳を取出し、氷上で大脳皮質を切離した。Ｐ2ホモゲネートを報告（Ｇｅｅなど、１９８６年）のようにして調製した。略述すれば、皮質を０．３２Ｍ−ショ糖中で穏やかに均質化し、続いて１０００×ｇで１０分間遠心分離した。上清液を集め、９０００×ｇで２０分間遠心分離した。得られたＰ2ペレットを５０ｍＭ−燐酸Ｎａ／Ｋ緩衝液（ｐＨ７．４）および２００ｍＭ−ＮａＣｌ中に１０％（原湿重量／容積）懸濁液として懸濁し、ホモジェネートとした。
Ｐ2ホモジェネート１００マイクロリットル（ｍＬ）量（０．５ｍｇ蛋白質）を２ナノモル（ｎＭ）［35Ｓ］ＴＢＰＳ（７０〜１１０キューリー／ミリモル；New・England・Nuclear社、ボストン、ＭＡ）を検査さるべき天然起源ステロイドまたはその合成的誘導体の存在または不在下にインキュベーションした。被検化合物はジメチルスルホキシド（Baker・Chem.社、Phillipsbury、NJ）に溶解し、５μＬ量をインキュベーション混合物に添加した。インキュベーション混合物を緩衝液で最終容積１ｍＬとした。非特異的結合は２ｍＭ−ＴＢＰＳ存在下の結合として定義した。ＧＡＢＡ（Sigma・Chem．社、セントルイス、ＭＯ）の効果および特異性は全ての検定をＧＡＢＡプラス（＋）ビククリン（Sigma・Chem．社）の存在下に行って評価した。２５℃で９０分間維持（定常状態条件）したインキュベーションはグラスフィルター濾板
0004066272.tif 000003
を通す急速濾過によって終了させた。濾板に結合した放射能は液体シンチレーションスペクトル技術で定量した。動力学的なデータおよび化合物／［35Ｓ］ＴＢＰＳ用量−作用曲線は電算機反復操作を使用する非線形回帰によって分析し、速度定数およびＩＣ50（基本的［35Ｓ］ＴＢＰＳ結合の半最大阻害値に当たる阻害が起きる化合物濃度）を得た。
この検定について得られる実験データはＧｅｅなど、１９８７年にも記述してある。この参考文献に討議されているデータは図１Ａおよび１Ｂ中のプロットとして示した。これらプロットはラット大脳皮質への２ｎＭ−［35Ｓ］ＴＢＰＳ結合のプレグナンステロイド、アルファキサロン（１Ａ）およびＧＡＢＡ（１Ｂ）調節に関する（＋）ビククリンの効果を示す。これらの図において（○）はビククリン不含の対照を示し、（●）は０．５μＭ−ビククリンを示し、（□）は１．０μＭ−ビククリンを示し、（■）は２．０μＭ−ビククリンを示し、（△）は３．０μＭ−ビククリンを示す。この実験では［35Ｓ］ＴＢＰＳの結合を阻害するアルファキサロンまたはＧＡＢＡの性能に対する（＋）ビククリンの効果を測定した。ビククリンはＧＡＢＡの競合的拮抗剤で、用量−作用曲線における古典的な並行シフトが図１Ｂに見られる。これとは対照的に、この研究によって確認されたステロイド結合部位は図１ＡにおけるＧＡＢＡ／ビククリン部位からは区別される。［35Ｓ］ＴＢＰＳ結合の阻害がアルファキサロンに起因する時にはビククリンが誘発する用量−作用曲線のシフトは平行ではない。これはＧＡＢＡ部位とステロイド部位とが重複していないことを示す。
実験の第二はステロイド、バルビツール酸およびベンゾジアゼピンはＧＡＢＡ受容体上の結合部位を共有しないことを証明するために行った。図２は２μＭ−ＴＢＰＳ（■）、１μＭ−３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン（□）、１００μＭ−ペントバルビタールＮａ（●）および１μＭ−３α−ＯＨ−５α−プレグナン−２０−オン＋１００μＭ−ペントバルビタールＮａ（○）の添加が誘発するラット皮質Ｐ2ホモジェネートからの［35Ｓ］ＴＢＰＳの解離の経時変化を示す。この検定は前記略述に従って実行した。これら動力学的データは飽和濃度の３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オンによって誘発される［35Ｓ］ＴＢＰＳ結合の解離が１００μＭ−ペントバルビタールＮａによって増強されることを示す。この効果は３α−ＯＨ−５α−プレグナン−２０−オン（ステロイド）およびペントバルビタール（バルビツール酸）とが独立の部位に結合することの証拠である。
実験の第三で３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オンとペントバルビタールＮａとの間の（Ｈ3）フルニトラゼパム（ＦＬＵ）結合の増強における相互作用を検討した。これら実験はさらにステロイドはベンゾジアゼピンおよびバルビツール酸とは共通の作用部位を共有しないとの主張を支持する。この一連の実験ではペントバルビタールＮａの最大刺激濃度の存在または不在下における（Ｈ3）ＦＬＵ結合に関する３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オンの種々の濃度の効果。（3Ｈ）ＦＬＵ結合を強化するペントバルビタールＮａの効力は３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オンの効力より大きいのでもし両者が同じ部位上で競合的に作用するなら、３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オンは究極的にペントバルビタールＮａの効果に拮抗する筈である。これは観察されたもの（図３）とは異なっていた。そこでこれらデータはさらに本発明の化合物および本発明で使用する化合物を含むある種のステロイドはＧＲ複合体上のバルビツール酸またはＢＺ制御部位とは異なる新規な部位に相互作用するとの結論をさらに支持する。作用部位が独立であるために、これらのステロイド化合物はバルビツール酸およびＢＺのものとは異なる治療的側面を持つと思われる。
種々の化合物をスクリーニングしてそれらの［35Ｓ］ＴＢＰＳ結合の調節剤としての能力を試験管内で測定した。これら検定は前記で検討した操作法に従って実行した。これら検定に基いて、ＧＲ複合体における特異的相互作用についての構造−作用の必要条件を樹立し、その力価および効力の順序を決定した。図４は実験上の例として３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン（３α，５α−Ｐ）、３α，２１−ジヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン（５α−ＴＨＤＯＣ）およびＲ５０２０（プロモジェステロン）の［35Ｓ］ＴＢＰＳ阻害曲線を示し、一方、表１はこの出願が請求するものを含む多数の化合物のＩＣ50および最大阻害を提供する。ＩＣ50は対照での［35Ｓ］ＴＢＰＳ結合の５０％を阻害するための化合物の濃度として定義される。これは化合物の試験管内力価の指標である。最大阻害はその化合物の試験管内効力の指標である。
0004066272.tif 000004
0004066272.tif 000005
0004066272.tif 000006
0004066272.tif 000007
0004066272.tif 000008
0004066272.tif 000009
0004066272.tif 000010
0004066272.tif 000011
0004066272.tif 000012
0004066272.tif 000013
0004066272.tif 000014
図４および表１から明らかなように、３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン、３α，２１−ジヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オンおよび本発明の化合物および本発明で使用する化合物では［35Ｓ］ＴＢＰＳ結合の最大阻害の５０％を達成するに必要な濃度であるＩＣ50は低いが、一方では、性ステロイド（Ｒ５０２０、エストラジオールおよびプロゲステロン）、糖質コルチコイド（コルチコステロン）およびコレステロールは高いＩＣ50を持ち、実質的に無効である。そこで、ホルモン性ステロイドおよびコレステロールそれら自体はここに記載する徴候のためには医療的価値を持たないと予測される。この一群の独特なステロイドをホルモン性ステロイドから識別するため、ここで、これらを神経刺激ステロイド（又は神経活性ステロイド；neuroactive steroids）と命名する。しかしながら、たとえばプロゲステロンのような性ステロイドは体内で３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オンに類似のステロイドに代謝されることができる。そこで、プロゲステロンをプロドラッグであるとも理解できる。このＴＢＰＳデータは参考のために引用するPurdy,R.H.など、「ラット大脳皮質シナプトニューロソーム中でＧＡＢＡ受容体を介する塩素イオン取込みを増強する３α−ヒドロキシステロイドの合成、代謝および薬理学的活性」、J.Med.Chem.、３３巻：１５７２〜１５８１頁（１９９０年）が記載した、種々の３α−ヒドロキシル化ステロイドの36Ｃｌイオン取込み増強のデータと相関し、また、これらのデータは図５に示すようにヒトＧＡＢＡ受容体を注射した卵母細胞中でＧＡＢＡ誘発電流を増強するステロイドの作用を測定して得られた電気生理学的データとも相関する。これはＴＢＰＳ検定がＣｌ-チャネル作用をアロステリックに調節するステロイドの性能の近似的測定法の一つであることを示す。
効果が限定的な化合物
望ましい治療活性は最小な副作用とともに患者に提供すべきであるから、この発明の注目すべき側面は５α−プレグナン−３α，２０α−ジオール、５β−プレグナン−３α，２０β−ジオール基を持つ化合物またはそれら化合物の誘導体およびプロドラッグにおける活性が部分的な作動薬の発見を含む。これに加え、これら二群以外の神経刺激性ステロイドのサブセットもＴＢＰＳ検定では部分的効力を示す（表１）。不安または痙攣の症状改善を求める患者には催眠は望ましくない。不眠の改善を求める患者には麻酔は望ましくない。活性が部分的な作動薬として記載した化合物および作用は望ましくない効果が最低で所望の効果を示すことが期待される。
作動薬効果が限定的なことを示すため、非常な高濃度でさえ［35Ｓ］ＴＢＰＳ結合の調節が部分的な５α−プレグナン−３α，２０α−ジオールおよび５β−プレグナン−３α，２０α−ジオールの性能を図示する（図６）。
これに加え、ヒトＧＡＢＡA受容体遺伝子を注射したツメガエル卵母細胞においてＧＡＢＡを介するＣl-電流増強を強化する性能が部分的なこれら化合物を３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン（図７）のそれと比較した。
ツメガエル発現系を神経刺激ステロイドの限定的な効力を試験するために使用する時には次の操作を行った。Xenopus・laevisの卵母細胞（段階ＶＩ）にコラゲネース消化（Ｃａ2+塩不含Barthの食塩水中、コラゲネース'A'２ｍｇ／ｍＬ、３時間＠１８〜２３℃）法を用いて「脱小胞化」を行い、これにヒトＧＡＢＡA受容体サブユニット複合体α１β１およびγ１のｃＲＮＡ転写物を注射した。主なＧＡＢＡA受容体複合体はαβγサブユニットから構成されている。注射した卵母細胞を個々に９６穴プレートのウェル（ペニシリン５０ＩＵ／ｍＬ、ストレプトマイシン５０ｍｇ／ｍＬおよびゲントマイシン１００ｍｇ／ｍＬを添加した正常Barth溶液ウェル当り２００μＬ）中に、１９〜２０℃に９日間まで維持した。双電極ボルテージクランプモード中Axoclamp・2A（Axon・Instruments社）ボルテージクランプ増幅器を使用して、ホールド電圧−６０ｍＶでクランプしたツメガエル卵母細胞電位から、作動剤誘発電流を記録した。電圧感知および電流を導通する微電極には３Ｍ−ＫＣｌを満たし、細胞外標準食塩水中で測定した抵抗は１〜３Ｍオームであった。卵母細胞はカエルリンゲル（１２０ｍＭ−ＮａＣｌ、２ｍＭ−ＫＣｌ、１．０ｍＭ−ＣａＣｌ2、５ｍＭ−ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４）を毎分５〜７ｍＬの速度で室温（１７〜２１℃）で継続的に潅流した。
薬剤は全て潅流システムから供給した。ステロイド（１０-2Ｍ）はＤＭＳＯまたはエタノール中で濃厚貯蔵液として調製し、リンゲル液で適当な濃度に希釈した。最終ＤＭＳＯおよびエタノール濃度はＧＡＢＡ誘発電位反応に影響を持たない濃度０．２％ｖ／ｖであった。他の薬剤の貯蔵液はリンゲル液中で作成した。膜電流反応は１００Ｈｚで低パスフィルターし、磁気テープ上にＦＭ型レコーダー（Racal・Store・4DS）を用いて記録し、次に分析した。
本発明の化合物および本発明で使用する化合物は前段に記載し、表示したものと類似して効力が部分的であった。
プロゲステロンに優る利点
プロゲステロンの低水準とＰＭＳ、ＰＮＤおよび月経性てんかんとの間の相関（Backstromなど、１９８３年；Dalton,K.、１９８４年）からその処置にプロゲステロンを使用するに至った（Mattsonなど、１９８４年；Dalton、１９８４年）。しかしながら、プロゲステロンは前記症候の処置には満足な効果はない。例えば、ＰＭＳの処置ではプロゲステロンには用量−作用関係が存在しない（Maddocksなど、１９８７年）。これらの結果は表１に示すように、プロゲステロンのある種の代謝物と比較してプロゲステロンはＧＲ複合体での力価が非常に低いことを示した試験管内研究の結果を参照して考慮すれば、予想できる。
プロゲステロンの有用な効果は多分、プロゲステロンから活性プロゲステロン代謝物への様々な変換に関連する。前記症候群の処置に特定のプロゲステロン代謝物を使用することは代謝物およびその誘導体の力価と効力の高さを考えれば、明らかにプロゲステロンの使用に優っている（Geeなど、1987年及び表１参照）。
ホルモン性副作用の不在
プロゲステロンおよび他のホルモン性ステロイド受容体に対する親和性がないため、神経刺激ステロイドがホルモン性副作用を持たないことが証明されている（表２〜５）。提示したデータはＧｅｅなど、１９８８年に記載された操作に従って、［3Ｈ］Ｒ５０２０のラット子宮プロゲステロン受容体への結合にプロゲステロン代謝物およびその誘導体およびプロゲスチンＲ５０２０が与える効果を測定するために行った検定によって得られた。
3Ｈ−プロゲステロン（０．１５ｎＭ）をラット子宮サイトソルと被検化合物の存在下にインキュベーションした。特異的結合をインキュベーション後に測定し、その化合物不含の対照インキュベーションと比較した。データは結合阻止百分率として表示した。もし、それら化合物が高度な親和性でプロゲステロン受容体に結合すれば、その検査濃度で結合の１００％阻止が予期される。
それらの潜在的エストロゲン、鉱質コルチコイドおよび糖質コルチコイド活性を検査して代表的神経刺激ステロイドの種々のホルモン活性をさらに研究した。これらの活性は各ホルモン受容体へのステロイドホルモンの結合を阻止するこれら化合物の性能を観察することによって分析した。結果を表３〜５に示す。これらは各化合物１０-6Ｍにおける種々のステロイドホルモン受容体への3Ｈ−リガンド結合阻止百分率として表示した。対照値は被検化合物不在下における結合により表示した。
表３では、ラット屠殺３日前に腎臓摘出した。鉱質コルチコイド受容体分離のため、Ｇｅｅなど、１９８８年に記載のように脳サイトソル分画を調製した。各薬剤を、ＩＩ型（糖質コルチコイド）受容体への3Ｈ−アルドステロンの結合を阻害する選択的ＩＩ型アゴニストＲＵ２８３６２（０．５μＭ）の存在下に、３ｎＭ−3Ｈ−アルドステロン（鉱質コルチコイド受容体に対する特異的リガンド）とインキュベーションした。
0004066272.tif 000015
0004066272.tif 000016
表４について、脳サイトソル分画は表３でのようにして調製して、各化合物を３ｎＭ−3Ｈ−デキサメタゾン（糖質コルチコイド受容体に対する特異的リガンド）とともにインキュベーションした。
0004066272.tif 000017
表５は以前に報告（Ｇｅｅなど、１９８８年）されたようにして調製したウシ子宮サイトソルへの3Ｈ−エストラジオール（エストロゲン受容体に対する特異的リガンド）結合の阻止を表示する。各化合物の存在下に3Ｈ−エストラジオール（０．１５ｎＭ）をサイトソルとインキュベーションした。
0004066272.tif 000018
これら実験の結果は神経刺激ステロイドは前記ステロイド受容体のいずれに対しても強い親和性を持たないことを明らかに証明する。そこで、これらステロイド受容体結合に起因するホルモン性副作用を持たないと予想される。
抗痙攣作用
マウスのメトラゾール誘発痙攣を予防する本発明の化合物および本発明で使用する化合物の性能を評価することによって神経刺激ステロイドとＧＡＢＡ受容体との生理学的関連を決定するための実験も行った。メトラゾールを注射する１０分前にマウスに本発明の被検化合物を種々の用量で注射した。各マウスを３０分間観察してメトラゾールによって誘発される間代性痙攣（前肢間代性痙攣活性の存在）の発現までの時間を測定した。対照マウスでは、メトラゾール（８５ｍｇ／ｋｇ）は９５％のマウスに痙攣を誘発した。マウスを痙攣から保護する、本発明の化合物および本発明で使用する化合物数種の性能を表６に示す。
0004066272.tif 000019
0004066272.tif 000020
0004066272.tif 000021
0004066272.tif 000022
0004066272.tif 000023
0004066272.tif 000024
0004066272.tif 000025
0004066272.tif 000026
他の化学的痙攣剤に対して動物を保護する神経刺激ステロイドの性能をさらに３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン、３α，２１−ジヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オンおよび３α−ヒドロキシ−３β−メチル−５α−プレグナン−２０−オンについて証明した。抗痙攣試験は前記のものと同様である。化学的痙攣剤は次の通り：メトラゾール（８５ｍｇ／ｋｇ）、（＋）ビククリン（２．７ｍｇ／ｋｇ）、ピクロトキシン（３．１５ｍｇ／ｋｇ）およびストリキニン（１．２５ｍｇ／ｋｇ）または基剤（０．９％食塩水）。痙攣剤または基剤の注射直後からマウスを３０分から４５分間観察した。強直または間代性痙攣のあった動物数を記録した。最大電気ショック試験では６０Ｈｚで５０ｍＡの電流を２００ミリ秒間角膜電極から与え強直発作を誘発させた。この強直発作を止める化合物の性能を終点として定義した。一般的なＣＮＳ抑圧性能は化合物の注射１０分後に３回試験の間に１回でも回転棒（毎分６回転）に１分間留まったマウスの数を測定する回転棒試験で測定した。ＥＤ50（半−最大効果の起きる用量）を各スクリーニングについて測定し、下記の表７に示した。この結果は神経刺激ステロイドは、他の臨床的に使用されている抗痙攣剤と比較して、ＢＺクロナゼパムのものと類似のプロファイルを持ち高度に有効であった。これらの観察は試験管内でＧＲ複合体との親和性の高い相互作用に対応し、これら化合物が脳興奮調節剤として治療上有用であることを証明する。
0004066272.tif 000027
0004066272.tif 000028
抗不安効果
次の実験はプロゲステロン代謝物である３α−ＯＨ−５α−プレグナン−２０−オンおよび３α−ＯＨ−５β−プレグナン−２０−オンが抗不安剤化合物の行動学的効果を測定するヒト不安症の動物モデル４種で有効な抗不安剤であることを証明する。これら化合物２種は本発明を例示目的で記載するものであると理解すべきである。これらの測定でのその合成的誘導体のデータも表８〜１０に提示する。抗不安剤化合物の行動学的効果を測定するために使用した動物モデル４種は：１）明暗室移動試験、２）高低差プラス型迷路、３）Geller-Seifter葛藤試験および４）Vogel試験である。
ａ）明暗室移動試験
明暗室移動試験（CrawleyとGoodwin、「ベンゾジアゼピンの抗不安効果に対する単純な動物行動モデルに関する予報」、Pharmacol.Biochem.Behav．、１３巻：６７〜７０頁（１９８０年））は齧歯類は天然では新しい環境を探索する傾向があるが、しかし開放された照明の明るい場所を齧歯類は嫌忌し、探索的行動を阻害する（Christmas・and・Maxwell、「マウスおよびラットにおける進取的および探索的行動についてのベンゾジアゼピンその他薬剤の効果の比較」、Neuropharmacol．、９巻：１７〜２９頁（１９７０年）、File、「クロロジアゼポキシド様薬剤の抗不安作用の検出法としての社会的相互作用の使用」、J.Neurosci.Meth.、２巻：２１９〜２３８頁（１９８０年））との観察に基づく。ジアゼパム、クロナゼパムおよびペントバルビタールを含む臨床的に確立されている種々の抗不安剤は明箱と暗箱との間の移動回数が増加することが示されているが、一方、非抗不安剤はこの行動的効果を示さなかった（Crawleyなど、「不安のマウス探索モデルに対してベンゾジアゼピン拮抗剤には本質的な拮抗作用はない」、Neuropharmcol．、２３巻：５３１〜５３７頁（１９８４年））。
体重１５〜２０ｇの雄性Ｎ．Ｉ．Ｈ．スイスウエブスターマウス（Harlan社、ハーラン、インディアナポリス、ＩＮ）を鋸屑床のポリエチレンケージにケージ当り４匹づつ入れた。コロニー室の環境（２２℃）は１２時間の明暗サイクル（０６００〜１８００）で制御した。食餌と水は試験の間を除いて自由摂取とした。試験は０７００〜１５００時に行い、群を時間の日効果を相殺した。各マウスには薬剤または基剤を１回だけ投与した。
使用した方法は以前記載された方法（Wielandなど、「プロゲステロン代謝物５α−プレグナン−３α−オール−２０−オンの抗不安作用」、Br.Res.、５６５巻：２６３〜２６８頁（１９９１年））を修正したものである。機器は２室の自動化試験装置（モデルＲＸＹＺＣＭ１６、Omnitech電機社、コロンバス、ＯＨ）を含んでいた。開放室は閉鎖室と７．５×７．５ｃｍの通路で結合してあった。開放室は２００Ｗの白熱電球で明るく照明した。実験室は暗黒を維持した。どちらかの部屋の赤外線遮断をDigiscan分析機（Omnitech電機社）を通してコンピュータに連結して自動的に記録し、Integrated・Lab動物監視システム（Omnitech電機）を用いてデータを分析した。N.I.H．スイス−ウエブスターマウスに基剤または被検薬を腹腔内（ＩＰ）に投与し、１０分後に照明室の中央部に置いた。試験時間の１０分間における明室と暗室との間の移動数、照明室中での全活動および照明室内での経過時間を観測した。
図８は明暗室移動試験による３α−ＯＨ−５α−プレグナン−２０−オンおよび３α−ＯＨ−５β−プレグナン−２０−オンの効果を示す。両化合物とも暗箱と明箱との間の移動数に関して明瞭な用量−作用曲線を形成した。事後の比較では３α−ＯＨ−５α−プレグナン−２０−オンおよび３α−ＯＨ−５β−プレグナン−２０−オンの用量に対する移動数は試験した用量では対照よりも明瞭に増加することを示した（Dunnettのｔ−検定）。
これに加えて３α−ＯＨ−５α−プレグナン−２０−オンおよび３α−ＯＨ−５β−プレグナン−２０−オンは双方とも対照群と比べて１０および２０ｍｇ／ｋｇで活動を有意（ｐ＜０．０１）に増加した（Dunnettのｔ−検定）。試験した用量ではいずれも二化合物の間に有意差はなかった。
ｂ）高低差プラス型迷路
高低差プラス型迷路の理論的基礎は明暗室移動試験のものと類似している。以前の報告（Pellowなど、「ラットにおける不安の測定用の高度差プラス型迷路における開放：閉鎖岐路進入のバリデーション」、J.Neruosci.Meth.、14巻：１４９〜１６７頁（１９８５年））通り、高低差プラス型迷路装置は開放空間に対するマウスの自然的な忌避を利用するように設計されている。装置は開放岐路２本と閉鎖岐路２本から構成される。高低差プラス型迷路試験では開放岐路への進入数と開放岐路での滞在時間とが、双方とも開放岐路および閉鎖岐路中での進入数および滞在時間に対する百分率として表現され、不安の測定２種ができる。
体重１５〜２０ｇの雄性N.I.H．スイスウエブスターマウス（Harlan社、インディアナポリス、ＩＮ）を鋸屑床のポリエチレンケージにケージ当り４匹づつ入れた。コロニー室の環境（２２℃）は１２時間の明暗サイクル（０６００〜１８００）で制御した。食餌と水は試験の間を除いて自由摂取とした。試験は０７００〜１５００時に行い、群への日の時間効果を相殺した。各マウスには薬剤または基剤を１回だけ投与した。
使用した方法は以前に記載された方法（Lister、「マウスの不安を測定するプラス型迷路の使用」、Psycopharmacol.、９２巻：１８０〜１８５頁（１９８７年））である。機器は床から５０ｃｍの高さの閉鎖岐路２本と直角な開放岐路２本を含んでいた。各岐路は長さ５０ｃｍで閉鎖岐路の壁の高さは４０ｃｍであった。この迷路は完全に黒色のプレクシガラスからできていた。各開放岐路の上には２００Ｗの白熱電球を設置して開放岐路と閉鎖岐路との間に明確な対比を形成した。
注射の１０分後、N.I.H.スイスウエブスターマウスを開放岐路に向けてプラス型迷路の中央部に置いた。試験時間５分間に、開放岐路および閉鎖岐路への進入数および開放岐路および閉鎖岐路での滞在時間を測定した。測定する従属変数について全四肢とも一岐路内にあるものとした。それ故、迷路の中央部で経過した時間は計数しなかったので、開放岐路および閉鎖岐路内で経過した時間の和は必ずしも５分間に等しくない。高低差プラス型迷路試験における３α−ＯＨ−５α−プレグナン−２０−オンおよび３α−ＯＨ−５β−プレグナン−２０−オンの効果を図９Ａに示す。両化合物は全用量にわたって開放岐路への進入率の増加を示した。３α−ＯＨ−５α−プレグナン−２０−オンは２０ｍｇ／ｋｇで有意（ｐ≦０．０５）な進入増加を示し、一方、３α−ＯＨ−５β−プレグナン−２０−オンは５ｍｇ／ｋｇ（ｐ≦０．０５）、７．５ｍｇ／ｋｇ（ｐ≦０．０１）および１０ｍｇ／ｋｇ（ｐ≦０．０１）で有意な進入増加を示した。
これに加え、３α−ＯＨ−５α−プレグナン−２０−オンおよび３α−ＯＨ−５β−プレグナン−２０−オンは開放岐路内経過時間の用量依存性増加をもたらした（図９Ｂ）。３α−ＯＨ−５α−プレグナン−２０−オンは１０ｍｇ／ｋｇ（ｐ≦０．０１）で開放岐路内経過時間の有意な増加を示し、３α−ＯＨ−５β−プレグナン−２０−オンは７．５ｍｇ／ｋｇ（ｐ≦０．０１）および１０ｍｇ／ｋｇ（ｐ≦０．０１）で開放岐路内経過時間の有意な増加を示した。
表８は前記と同一条件下に高低差プラス型迷路を用いた本発明の化合物および本発明で使用する化合物の抗不安作用の要約を示す。
0004066272.tif 000029
0004066272.tif 000030
0004066272.tif 000031
0004066272.tif 000032
0004066272.tif 000033
0004066272.tif 000034
Ｃ）Ｇｅｌｌｅｒ−Ｓｅｉｆｅｒ葛藤試験
ヒト不安症のこの動物モデルは薬剤の抗不安性を確認するためラットにおける条件付けられた葛藤の状態を利用する。ラットは陽性の強化についてレバーを押すように２種類の計画で条件付けた（GellerとSeifter、「ラットにおける実験的に誘発した葛藤に対するメプロバメート、バルビツレート、ｄ−アンフェタミンおよびプロマジンの効果」、Psychopharmacologia、１巻：４８２〜４９２頁（１９６０年））。最初は、様々な比率の計画での罰のないレバー押しを含む。第二の時期は棒押しが陽性強化と罰をもたらす固定した比率の計画である。罰期は動物に葛藤状態を起こす。非罰期に薬剤が持つ抑制効果の反応を観察できる。抗不安反応は、非罰期反応への影響なしに罰期の反応を増加するものである。
葛藤試験には体重２５０〜３００ｇの雄性アルビノSprague-Dawleyラット（Charles・River・Labs社、ウイルミントン、ＭＡ）を使用し、Purina・Lab.Chow食餌ペレットの食餌制限と水の自由摂取をさせて体重を若成体水準の８５％に維持した。各ラットを個々に０７００〜１９００に照明する１２時間明暗サイクル下に飼育した。
３α−ＯＨ−５α−プレグナン−２０−オンおよび３α−ＯＨ−５β−プレグナン−２０−オンの抗不安（罰−解除）および反応抑制効果をラットでGellerとSeifter（１９６０年）の葛藤試験によって測定した。この６３分の試験で、空腹のラットは甘味付けたミルクの報酬を求めてレバー押し反応を行った。強化計画は１５分間隔で入れ代わる罰期および非罰期からなる。ラットは壁の一つに取付けたレバー、０．１ｍＬのミルク報酬（Eagleコンデンスミルク１部、水２部）を出す小さな柄杓および足−衝撃罰を加える金属格子床を持つ実験装置（Coulbourn装置）内で訓練した。ＳＫＥＤ（State・Systems社）を作動するＤＥＣ・ＰＤＰ１１／７３ミニコンピュータをプログラムおよび記録に使用した。
ラットは最初に連続的強化計画に反応することを学習させて、急速に３０秒、１分および２分の可変間隔（ＶＩ）計画に進行させた。連続的強化計画の下ではラットはミルクの報酬を各レバー押しごとに得た。段階ＶＩ計画では、ミルクの報酬は稀に、時には平均２分間に１回の可変的間隔で与えた。３分間の「葛藤」期間を４回非罰期のＶＩベースライン上に導入し、第一はＶＩ行動３分間後に、また、他にはＶＩ反応の１２分期の間に変化させた。光と音響の提示で信号を与える葛藤期間に連続的強化計画を再度行い、各レバー押しにミルク報酬と短時間の足衝撃罰（０．２５ミリ秒）を与えた。衝撃強度は最初は０．２ｍＡとし、毎日０．０２ｍＡづつ増加して徐々にレバー押しを葛藤期間につき反応５回またはそれ以下にした。この訓練には４〜６週間を要し、その後、安定な低率の反応が葛藤期間に観察され、非罰期には安定な高率の反応が観察された。罰期反応の薬剤誘発による増加を抗不安活性の指標として、一方、非罰期反応率の減少を抑制または催眠の反応の指標として把握した。
３α−ＯＨ−５α−プレグナン−２０−オンおよび３α−ＯＨ−５β−プレグナン−２０−オンの葛藤試験による効果を図１０に示した。両化合物は罰期反応の率を大きく増加し、両者とも抗不安症薬剤として活性があろうことが示唆された。皮下注射では３α−ＯＨ−５β−プレグナン−２０−オンの極大効果は２ｍｇ／ｋｇで、３α−ＯＨ−５α−プレグナン−２０−オンでは４．４ｍｇ／ｋｇで観察された（統計的分析および各用量の試験数が少ないため、各化合物での試験は全て集計して関連測定に対するｔ−検定を使用して基剤対照との比較した。３α−ＯＨ−５α−プレグナン−２０−オンはｐ＜０．０２、３α−ＯＨ−５β−プレグナン−２０−オンはｐ＜０．００８であった）。
表９は前記実験条件下にＧｅｌｌｅｒ−Ｓｅｉｆｔｅｒ試験を使用する本発明の化合物および本発明で使用する化合物の抗不安作用の要約を示す。
0004066272.tif 000035
ｄ）Ｖｏｇｅｌ試験
Ｖｏｇｅｌ試験は高度に欲求のある行動と忌避との間の葛藤の発展に基づく。この試験のための強い欲求は渇きである。動物を１２〜１６時間絶水して水飲みの欲求を与える。訓練期間に動物を試験環境に暴露して摂水口に習熟させて新たな環境に対する恐怖を削減する。訓練後に、動物を２時間摂水させる。この時間に動物は絶水時間の代償に正常な量の水と餌とを摂取する。しかしながら、この計画でもまだ試験期間の間に摂水への強い欲求が起きる。
１２時間から１６時間絶水後、動物を試験ケージに入れ、５分間自由摂水させる。この期間を用いて動物にその環境および摂水口に馴化させる。訓練期間後、動物を元のケージ内で２時間水および餌を摂取させる。食餌は全期間自由に摂取させる。２４時間後、薬剤を動物に脳室内投与する。
動物に注射してから指定の遅れの後に、動物を１０分間試験ケージに入れる。動物が舐める度にコンピュータが計数し、各１２回舐めた後に穏やかな電気刺激を舌および／または足に与える。電気刺激は０．６ｍＡ電流の１００ミリ秒間からなる。この操作は動物に葛藤状態を作成するが、これは臨床的に使用されている抗不安剤（たとえばValium）により減少する。用量作用曲線については別群の動物を被検薬剤の用量を変えて注射し、所定の時間に試験する。
これら測定の代表的化合物のデータを表１０に要約する。
0004066272.tif 000036
プロドラッグ
基本化合物である３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オンと３α，２１−ジヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オンおよびその誘導体のプロドラッグの抗痙攣および抗不安作用を前記と同一の操作を使用して評価した。３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オンの数種のプロドラッグによるメトラゾール誘発発作からの保護百分率を化合物投与後の時間に対してプロットした（図１１および表１１）。
基本化合物、３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オンおよび３α，２１−ジヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オンの３αおよび２１−ヒドロキシル基における種々のエステルはその生物学的活性を維持し、ものによってはそのような修飾は該化合物が提供する保護時間を増加した。そこで、本発明の化合物を修飾すれば一定時間わたって様々な程度に保護する抗痙攣および抗不安作用を提供することができる。
0004066272.tif 000037
ベンゾジアゼピンとは対照的に神経刺激ステロイドは麻酔も誘発できる。麻酔を誘発する性能は、ベンゾジアゼピンにはない性質であるが、ＧＡＢＡ不在下に塩素イオンチャネルを開口する能力に起因すると考えられる。それ故、神経ステロイドはＧＡＢＡ不在下にその受容体において、またＧＡＢＡ存在下においては「間接的に」にも作用できる。この「間接的な」作用は受容体の「調節」（Lambertなど、「ＧＡＢＡA受容体における合成および内因性ステロイドの作用」、Trends・Pharmacology・Science、８巻：２２４〜２２７頁（１９８７年））と呼ばれる。
本発明の化合物および本発明で使用する化合物は高濃度で麻酔の処方のためにも使用できる。しかしながら、麻酔を誘発するための好適な投与経路は静脈注射（ｉｖ）である。動物では薬剤の麻酔的性質は起立反射喪失を起こす薬剤の性能によって測定する。起立反射の喪失は仰向けにした時に３０秒以内に動物が自分で起立しなくなることと定義される。薬剤はマウスの側尾静脈にｉｖ注射で投与する。投与後、マウスを仰向けにおいて起立反射喪失について観察する。例示的結果を表１２に示す。
0004066272.tif 000038
本発明の化合物および本発明で使用する化合物の前記と同様な修飾を持つプロドラッグは３α−５−還元−プレグナン類のプロドラッグとして活性を持つと予測される。
好適な態様を記載し、例示しておいたので、本発明の範囲から離れることなく種々の置換および修飾をそれらに加えうる。それ故、本発明は例示として記載したものであり、限定的に記載したものではないことは理解されるはずである。
【図１Ａ】
0004066272.tif 000040
【図１Ｂ】
0004066272.tif 000041
【図２】
0004066272.tif 000042
【図３】
0004066272.tif 000043
【図４】
0004066272.tif 000044
【図５】
0004066272.tif 000045
【図６】
0004066272.tif 000046
【図７】
0004066272.tif 000047
【図８】
0004066272.tif 000048
【図９Ａ】
0004066272.tif 000049
【図９Ｂ】
0004066272.tif 000050
【図１０】
0004066272.tif 000051
【図１１】
0004066272.tif 000052