(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
蛋白質又は蛋白質加水分解物をアシル化剤によってアシル化した後の任意の段階で、アシル化ペプチド類を含有する反応混合物にプロピレングリコールを添加し、その後、減圧脱気することを特徴とする下記の一般式（１）
【化１】
0004090541.tif 000007
（式中、Ｒ1は炭化水素基を表わし、Ｒ2はアミノ酸側鎖を表わし、Ｍは水素原子、金属原子又はアンモニウムを表わし、ｎは１以上の数を表わす。）で表わされるアシル化ペプチド類の製造方法（但し、蛋白質又は蛋白質加水分解物をアシル化剤によってアシル化する際に、溶媒として２−プロパノールを使用することを除く。）。
【請求項２】
アシル化に使用するアシル化剤が脂肪酸ハライドである請求項１記載の製造方法。
【請求項３】
アシル化剤によるアシル化が終了した後の任意の段階で、系内を酸性化して水洗することを特徴とする請求項１又は２記載の製造方法。
【請求項４】
プロピレングリコールの添加量が、系内に残存する反応混合物に対して５〜２００重量％である請求項１乃至３の何れか１項記載の製造方法。
【請求項５】
請求項１乃至４の何れか１項記載の製造方法により製造された洗浄剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明はアシル化ペプチド類の製造方法に関する。さらに詳しくは、従来の方法に比べて副生成物や臭気成分が混入しにくく、トイレタリー製品等に配合される界面活性剤として好適なアシル化ペプチド類の製造方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
アシル化ペプチド類は古くから知られているアニオン性界面活性剤である。アシル化ペプチドは動植物由来の蛋白質を原料としていることから安全性が高く、皮膚刺激性が少ないので、シャンプー、ヘアコンディショナー等のトイレタリー製品や化粧品等に使用されている。特に、近年の自然指向・天然物指向から需要が高まっているといわれている。
【０００３】
アシル化ペプチドの製造方法は古くから検討されている。一般に、アシル化ペプチドの製造は、
１）原料蛋白質を加水分解する工程；
２）加水分解させたペプチドをアシル化する工程；
３）アシル化したペプチドを精製し、中和する工程；
を経て製造される。
【０００４】
しかし、アシル化ペプチド類は蛋白質という天然の素材を直接原料としているので、製造上様々な問題点を有している。例えば、蛋白質中の窒素成分は臭気の原因となるので、これらの臭気成分は最終製品からは完全に除去されていなければならない。又、アシル化剤として好まれて使用される脂肪酸ハライドは反応性が高いため、溶媒中にアルコール等が存在するとそれと反応して副生成物を生成する原因となる。又、未反応のまま存在すると、後の中和工程で中和剤と反応して石鹸等を生成する。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
このような不純物などを除去するためには、従来から減圧脱気やろ過、水洗、溶媒洗浄、酸性化した後に水洗する等の他の工業製品においても使用される精製工程が採用されていたが、原料に蛋白質を使用するアシル化ペプチド類の精製方法としては十分な方法とは言えなかった。
アシル化ペプチド類は主に人体に直接触れるトイレタリー製品に配合されるので、副生成物の生成や臭気成分の混入は極力避けねば製品としての価値がなくなってしまう。従って、本発明の目的は、従来の方法に比べて副生成物や臭気成分が混入しにくく、トイレタリー製品等に配合される界面活性剤として好適なアシル化ペプチド類の製造方法を提供することにある。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
即ち本発明は、蛋白質又は蛋白質加水分解物をアシル化剤によってアシル化した後の任意の段階で、アシル化ペプチド類を含有する反応混合物にプロピレングリコールを添加し、その後、減圧脱気することを特徴とする下記の一般式（１）
【０００７】
【化２】
0004090541.tif 000002
【０００８】
（式中、Ｒ1は炭化水素基を表わし、Ｒ2はアミノ酸側鎖を表わし、Ｍは水素原子、金属原子又はアンモニウムを表わし、ｎは１以上の数を表わす。）で表わされるアシル化ペプチド類の製造方法（但し、蛋白質又は蛋白質加水分解物をアシル化剤によってアシル化する際に、溶媒として２−プロパノールを使用することを除く。）である。
【０００９】
【発明の実施の形態】
本発明の製造方法の原料である蛋白質としては例えば、まゆ、まゆ屑、生糸、生糸屑等に由来するシルク、骨、軟骨、腱、筋膜、皮膚、魚鱗等に由来するコラーゲン、コラーゲンから誘導されるゼラチン、獣毛、毛髪、羽毛、爪、角、蹄、鱗等に由来するケラチン、絹フィブロイン、牛乳、やぎ乳、人乳等に由来するカゼイン、アルブミン、グロブリン、植物性蛋白等が挙げられる。植物性蛋白としては、米、コメヌカ、小麦、はと麦、ライ麦、大麦、燕麦、トウモロコシ、大豆、アーモンド、ナッツ、ごま、落花生、そば、わかめ、あまのり、いわのり、かわのり、まつも等が挙げられる。又、これらの動物性蛋白又は植物性蛋白の部分加水分解物であってもよい。
【００１０】
上記の蛋白質は、通常加水分解処理されたものがアシル化ペプチド類の原料として使用される。蛋白質を加水分解処理する場合は、酸を使用する方法、アルカリを使用する方法及び酵素を使用する方法が好ましい。
酸を使用する方法においては、酸及び水の存在下、常圧下又は加圧下、４０〜１２０℃程度で２〜２４時間程度処理すれば蛋白質加水分解物が得られる。酸としては例えば、塩酸、硫酸、リン酸、硝酸、臭化水素酸、ギ酸、酢酸等を使用することができる。
アルカリを使用する方法においては、アルカリ及び水の存在下、常圧で室温〜１００℃程度で３０分〜２４時間程度処理すれば蛋白質加水分解物が得られる。アルカリとしては例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム、水酸化バリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、トリエチルアミン、ピリジン等を使用することができ、特に水酸化ナトリウム又は水酸化カリウムが好ましい。
酵素を使用する方法においては、酵素及び水の存在下、常圧で室温〜４５℃程度で３〜２４時間程度処理すれば得ることができる。酵素としては例えば、ペプシン、プロクターゼ、パパイン、ブロメライン、サーモライシン、トリプシン、プロナーゼ、キモトリプシン、スブリチン、スタフイロコカスプロテアーゼなどを使用することができる。又、酵素を使用して蛋白質を加水分解する場合は、系内を酵素の最適ｐＨに調整することが好ましい。ｐＨを調整するためには酢酸／酢酸ナトリウム緩衝液、リン酸緩衝液などの緩衝液や、酸又はアルカリ等によって調整することが好ましい。
【００１１】
上記加水分解処理を行うと、原料として使用した蛋白質は低分子量のポリペプチドに分解される。該ポリペプチドの分子量は、上記加水分解処理の反応条件、例えば酸、酵素又はアルカリの量、水の量、処理時間、処理温度等を制御することにより制御することが可能である。本発明の製造方法によって得られたアシル化ペプチド類を界面活性剤として使用する場合は、ポリペプチドの平均分子量を１５０〜２，０００に調整することが好ましい。尚、ポリペプチドの重合度ｎは１（完全に加水分解した場合）以上である。
【００１２】
一般式（１）において、Ｒ2はアミノ酸側鎖である。アミノ酸としては例えばグリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、スレオニン、システイン、シスチン、メチオニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン、グルタミン酸、リシン、アルギニン、フェニルアラニン、チロシン、ヒスチジン、トリプトファン、プロリン、ヒドロキシプロリン等が挙げられる。
【００１３】
又、上記加水分解処理した場合には、アンモニアや低級アミン等の不純物が生成する場合があるが、これらはアシル化剤と反応して副生成物を生成する原因となったり、臭気成分となったりするので、アスピレーターや真空ポンプ等により反応系を減圧して除去することが好ましい。減圧度は通常１００ｍｍＨｇ以下、好ましくは５０ｍｍＨｇ以下、より好ましくは２０ｍｍＨｇ以下である。減圧除去する際の温度は特に限定されないが、通常加水分解処理時の温度の上下２０℃程度である。減圧除去の時間は特に限定されないが、好ましくは１０分〜８時間、より好ましくは１０分〜６時間、更に好ましくは１０分〜３時間程度である。
【００１４】
アシル化剤としては、例えばカルボン酸、カルボン酸ハライド、カルボン酸メチルエステル、カルボン酸エチルエステル等を使用することができるが、反応性が高いカルボン酸又はカルボン酸ハライドを使用することが好ましい。カルボン酸又はそのハライドとしては例えばぎ酸、酢酸、プロピオン酸、酪酸、吉草酸、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、エルカ酸、リノール酸、リノレン酸又はこれらのクロリド等が挙げられる。通常原料とされるのは、炭素数８〜２２程度の単一又は混合脂肪酸又はそのクロリドである。通常は、天然油脂から得られる脂肪酸又はこれらを塩素化した脂肪酸クロリドを使用する。天然油脂としては例えば、アマニ油、オリーブ油、カカオ脂、ゴマ油、コメヌカ油、サフラワー油、大豆油、ツバキ油、コーン油、ナタネ油、パーム油、パーム核油、ひまし油、ひまわり油、綿実油、ヤシ油等の植物性油脂、牛脂、豚脂、乳脂、魚油、鯨油等の動物性油脂が挙げられる。尚、このアシル化反応に使用されたカルボン酸又はそのハライドにより、生成するアシル化ペプチドのＲ1が決定される。
【００１５】
アシル化反応を行う際の温度は特に限定されないが、あまりに低温で行うと反応速度が遅いため効率的ではなく、あまりに高温で行うと原料の蛋白質の劣化や変性が起こり、又ペプチドやアミノ酸の分解を引き起こすので、０〜１００℃で行うことが好ましく、１０〜９０℃で行うことがより好ましく、２０〜８０℃で行うことが最も好ましい。アシル化反応を行う時間は特に限定されないが、好ましくは１０分〜１２時間、より好ましくは２０分〜８時間、更に好ましくは３０分〜６時間程度である。又、アシル化反応にカルボン酸クロリドを使用する場合は、反応促進のためにアルカリによって反応系内のｐＨをアルカリ性に調整して反応系に添加することが好ましい。
【００１６】
記蛋白質又は蛋白質加水分解物をアシル化する際の溶媒としては例えばメタノール、エタノール、１−プロパノール、ブタノール、エチレングリコール、ジエチレングリコール、ジプロピレングリコール、メトキシエタノール、エトキシエタノール、ブトキシエタノール、アセトン、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトン、ジメチルエーテル、ジエチルエーテル、エチルメチルエーテル、水等が挙げられる。
【００１７】
本発明の製造方法においては、アシル化反応終了後の任意の段階で、主生成物であるアシル化ペプチド類の他、溶媒、副反応物、不純物、未反応の原料及び残存する触媒等を含有する反応混合物にプロピレングリコールを添加し、その後に減圧脱気する操作を行う。この操作により、副反応物、溶媒及び未反応の原料等に由来する臭気成分や不純物を除去することができる。この処理に使用するプロピレングリコールの量は特に限定されないが、好ましくは、アシル化ペプチド類を含有する上記反応混合物に対して５〜２００重量％程度であり、より好ましくは１０〜１００重量％程度である。減圧脱気を行う場合は、アスピレーターや真空ポンプ等により反応系を減圧すればよく、減圧度は通常１００ｍｍＨｇ以下、好ましくは５０ｍｍＨｇ以下、より好ましくは２０ｍｍＨｇ以下である。減圧脱気する際の温度は特に限定されないが、通常１０〜８０℃程度である。減圧脱気の時間は特に限定されないが、好ましくは１０分〜８時間、より好ましくは１０分〜６時間、更に好ましくは１０分〜３時間程度である。
【００１８】
以上の反応により一般式（１）で表わされるアシル化ペプチド類を得ることができるが、アシル化反応終了後の任意の段階で、塩酸、硫酸、硝酸等の酸でｐＨを酸性に調整し、水洗すると、容易に副反応物、不純物、未反応の原料及び残存する触媒等を除去することができる。水洗に使用する水の量は特に限定されないが、好ましくは、アシル化ペプチド類、溶媒、アシル化剤等の系内に残存する反応混合物に対して５〜２００重量％程度であり、より好ましくは１０〜１００重量％程度である。このように酸性下で水洗処理を行った場合は一般式（１）におけるＭが水素原子であるアシル化ペプチド類が得られる。
【００１９】
又、得られたアシル化ペプチド類又は上記酸性下水洗処理を行ったアシル化ペプチド類をアルカリ又はアミン等で処理してアシル化ペプチド類を塩の形態とすることもできる。この場合は使用したアルカリ又はアミンによりＭが決定される。アルカリとしては前述のものが、アミンとしては例えばアンモニア、メチルアミン、ジメチルアミン、エチルアミン、ジエチルアミン、（イソ）プロピルアミン、ジ（イソ）プロピルアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、２−アミノ−２−メチル−１，３−プロパンジオール、アミノエチルエタノールアミン、Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラキス（２−ヒドロキシプロピル）エチレンジアミン等が挙げられる。
【００２０】
本発明の製造方法により製造されたアシル化ペプチド類は、アニオン性界面活性剤として使用することができ、主に洗浄剤に配合して使用することができる。洗浄剤としては例えばヘアーシャンプー、ヘアーリンス、ヘアーコンディショナー、ヘアートリートメント、ボディシャンプー、台所用洗剤、食器用洗浄剤、衣服用洗剤等が挙げられる。その他、パーマネントウェーブ剤、ヘアークリーム、ヘアーフォーム、ヘアーブリーチ、ヘアーローション、ヘアーリキッド、ヘアートニック、化粧水、シェービングクリーム、アフターシェービングローション、プレシェービングローション、フェイスローション、モイスチャークリーム、クレンジングクリーム、コールドクリーム等の化粧品に配合して使用することができる。
【００２３】
【実施例】
以下、実施例により本発明を更に具体的に説明する。尚、以下の実施例中、特に記載が無い限り部又は％は重量基準である。
（実施例１）
減圧可能な反応装置に食用ゼラチン１００部、水酸化ナトリウム２０部及び水５０部を仕込み、５０〜６０℃で６時間攪拌混合して加水分解処理を行い、固形分５５％、平均分子量約２５０のポリペプチドを得た。次いでこのポリペプチド１００部に対してエタノール３０部を加え、水酸化ナトリウムでｐＨ１０に調整しつつラウリン酸クロリド４０部を５０℃で滴下した。滴下終了後４０〜５０℃で１時間熟成した。その後、塩酸を加え、系のｐＨを２にした後水洗した。油層を分離し、油層１００部に対して３０部のプロピレングリコールを加え、２０ｍｍＨｇで２時間減圧脱気を行った。その後水酸化ナトリウムで中和して、固形分４１％、外観は透明であるコラーゲン加水分解ペプチドラウリン酸縮合物ナトリウム塩を得た。
【００２４】
（実施例２）
減圧可能な反応装置に食用ゼラチン１００部、水酸化ナトリウム２０部及び水５０部を仕込み、５０〜６０℃で６時間攪拌混合して加水分解処理を行い、固形分５５％、平均分子量約２５０のポリペプチドを得た。次いでこのポリペプチド１００部に対してプロピレングリコール３０部を加え、水酸化ナトリウムでｐＨ１０に調整しつつラウリン酸クロリド４０部を５０℃で滴下した。滴下終了後４０〜５０℃で１時間熟成した。その後、塩酸を加え、系のｐＨを２にした後水洗した。油層を分離し、油層１００部に対して３０部のプロピレングリコールを加え、２０ｍｍＨｇで２時間減圧脱気を行った。その後水酸化ナトリウムで中和して、固形分４１％、外観は透明であるコラーゲン加水分解ペプチドラウリン酸縮合物ナトリウム塩を得た。
【００２９】
（比較例１）
４つ口フラスコに食用ゼラチン１００部、水酸化ナトリウム２０部及び水５０部を仕込み、５０〜６０℃で６時間攪拌混合して加水分解処理を行い、固形分５５％、平均分子量約２５０のポリペプチドを得た。次いでこのポリペプチド１００部に対してプロピレングリコール３０部を加え、水酸化ナトリウムでｐＨ１０に調整しつつラウリン酸クロリド４０部を５０℃で滴下した。滴下終了後４０〜５０℃で１時間熟成した。その後、水酸化ナトリウムで中和して、固形分４０％、外観は透明であるコラーゲン加水分解ペプチドラウリン酸縮合物ナトリウム塩を得た。
【００３０】
（比較例２）
４つ口フラスコに食用ゼラチン１００部、水酸化ナトリウム１４部及び水４６部を仕込み、５０〜６０℃で６時間攪拌混合して加水分解処理を行い、固形分５２％、平均分子量約３００のポリペプチドを得た。次いでこのポリペプチド１００部に対してプロピレングリコール３０部を加え、水酸化ナトリウムでｐＨ１０に調整しつつラウリン酸クロリド３３部を５０℃で滴下した。滴下終了後４０〜５０℃で１時間熟成した。その後、水酸化ナトリウムで中和して、固形分４１％、外観は透明であるコラーゲン加水分解ペプチドラウリン酸縮合物ナトリウム塩を得た。
【００３１】
（比較例３）
４つ口フラスコに食用ゼラチン１００部、水酸化ナトリウム２０部及び水５０部を仕込み、５０〜６０℃で６時間攪拌混合して加水分解処理を行い、固形分５５％、平均分子量約２５０のポリペプチドを得た。次いでこのポリペプチド１００部に対して２−プロパノール３０部を加え、水酸化ナトリウムでｐＨ１０に調整しつつラウリン酸クロリド４０部を５０℃で滴下した。滴下終了後４０〜５０℃で１時間熟成した。その後、水酸化ナトリウムで中和して、固形分４０％、外観は透明であるコラーゲン加水分解ペプチドラウリン酸縮合物ナトリウム塩を得た。
【００３２】
（比較例４）
４つ口フラスコに食用ゼラチン１００部、水酸化ナトリウム２０部及び水５０部を仕込み、５０〜６０℃で６時間攪拌混合して加水分解処理を行い、固形分５２％、平均分子量約３００のポリペプチドを得た。次いでこのポリペプチド１００部に対してエタノール３０部を加え、水酸化ナトリウムでｐＨ１０に調整しつつラウリン酸クロリド４０部を５０℃で滴下した。滴下終了後４０〜５０℃で１時間熟成した。その後、水酸化ナトリウムで中和して、固形分４０％、外観は透明であるコラーゲン加水分解ペプチドラウリン酸縮合物ナトリウム塩を得た。
【００３３】
（評価１）
上記実施例及び比較例で得られたアシル化ペプチド類の純度及び不純物を、ＧＰＣ（カラム：ｓｈｏｄｅｘ．Ａｓｈａｈｉｐａｋ−３１０、溶剤：水／アセトニトリル＝１／１）にて分析した。又、電位差滴定装置（平沼製作所ＣＯＭ−９００型。比較電極にＭＳ−２３１（銀滴定用）、銀電極にＡＧ−３１１（銀滴定用）を使用。）により塩素イオンを測定することで、副生した塩化ナトリウムを測定した。尚、単位は％である。
【００３４】
【表１】
0004090541.tif 000003
【００３５】
（評価２）
上記実施例及び比較例で得られたアシル化ペプチド類の水溶性を目視にて観察し、白濁を生じるまでの時間を測定した。尚、濃度は純分としてアシル化ペプチド類０．２５％、人工硬水は炭酸カルシウム濃度１００ｐｐｍ及び３００ｐｐｍを用いた。
【００３６】
【表２】
0004090541.tif 000004
【００３７】
（評価３）
上記実施例及び比較例で得られたアシル化ペプチド類の臭いをパネラー５名で官能評価した。尚、純分としてアシル化ペプチド類１０％を含む４０℃の水溶液を調整し、市販のアシル化ペプチド類を対照品として以下の基準に従って評価した。
【００３８】
＜評価基準＞
○：市販品と比較して臭いが弱い。
△：市販品と同等の臭い。
×：市販品と比較して臭いが強い。
【００３９】
【表３】
0004090541.tif 000005
【００４０】
（評価４）
上記実施例及び比較例で得られたアシル化ペプチド類の泡立ちをロスマイルス法により測定した。測定条件は、アシル化ペプチド類の濃度は純分として０．２５％、水温４０℃で５分後の泡の高さを測定した。又、水はイオン交換水及び人工硬水炭酸カルシウム濃度１００ｐｐｍ及び３００ｐｐｍを用いた。尚、単位はｍｍである。
【００４１】
【表４】
0004090541.tif 000006
【００４２】
【発明の効果】
本発明の効果はアシル化ペプチドの新規な製造方法を提供したことにある。本発明によれば、従来の方法に比べて副生成物や臭気成分が混入しにくく純度の高いアシル化ペプチドが得られるために、これを界面活性剤として使用した場合に、従来のアシル化ペプチド類より良好な性能を示すアシル化ペプチド類を得ることができる。