(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
アリスロバクター（Arthrobacter） sp. CR-TP0321と命名されFERM P-17280として寄託された微生物、又はアリスロバクター sp. CR-TP0611と命名されFERM P-17281として寄託された微生物。
【請求項２】
テレフタル酸含有廃液に請求項１記載の微生物を接触させることを特徴とするテレフタル酸含有廃液処理方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、テレフタル酸含有廃液の処理、特に高濃度のテレフタル酸含有廃液の処理に有用な、テレフタル酸分解微生物及びこれを用いたテレフタル酸含有廃液処理方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
ポリエステル繊維やポリエステルフィルムの加工、製造工程などから排出される廃液にはテレフタル酸が多く含まれる。このような廃液を処理する方法としては、活性汚泥を用いる方法が一般的であるが、テレフタル酸は比較的難分解であるため、活性汚泥処理に供するには廃液の希釈操作や大きな活性汚泥槽を用いるなどの対応が必要である。他の廃液処理法として湿式酸化処理法（特開平7-204666号公報）、オゾン処理法（特開平6-26979号公報）などの報告があるが、活性汚泥処理に比べてコスト的に有利とはいえない。
【０００３】
一方、テレフタル酸を分解する微生物については、バチルス属の微生物が0.2％のテレフタル酸を24時間で分解したという報告（FEMS マイクロバイオロジーレターズ，30巻，p.217-220，1985年）や0.6％のテレフタル酸を60時間で97％以上分解するシュードモナス属の微生物に関する報告（特開平10-42864号公報）があるが、２％を超えるような高濃度のテレフタル酸を分解したという報告はない。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
発明者らは、種々のテレフタル酸分解菌について検討した結果、これら従来のテレフタル酸分解菌は、たとえ0.5％程度のテレフタル酸含有廃液に対しては分解能力を示しても、２％を超えるような高濃度のテレフタル酸含有廃液の場合には、極端に分解活性が失われることが判明した。
【０００５】
そこで、本発明は、高濃度にテレフタル酸を含有する廃液に適用した場合であっても高いテレフタル酸分解活性を保ち、効率良く廃液を処理できる微生物を提供することを目的とする。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、かかる課題を解決するため鋭意研究を重ねた結果、驚くべきことに、２％はおろか、４％を超えるような高濃度のテレフタル酸に対しても極めて高い分解活性を保つアリスロバクター（Arthrobacter）属微生物を単離することに成功し、本発明を完成した。
【０００７】
すなわち本発明は、アリスロバクター（Arthrobacter） sp. CR-TP0321と命名されFERM P-17280として寄託された微生物、又はアリスロバクター sp. CR-TP0611と命名されFERM P-17281として寄託された微生物、及びテレフタル酸含有廃液に当該微生物を接触させることを特徴とするテレフタル酸含有廃液処理方法を提供するものである。
【０００８】
【発明の実施の形態】
本明細書において、微生物のテレフタル酸分解活性は、後記表１に示す組成の培地にテレフタル酸を添加した培地中（pHは7.0とし、培養中のpH調整は行っていない）で、微生物を30℃で一定時間回転振とう培養（120rpm）した場合の培養前後におけるテレフタル酸量から算出した。
【０００９】
本発明の微生物は、本発明者らが土壌中から単離したアリスロバクター sp. CR-TP0321と命名されFERM P-17280として寄託された微生物、及びアリスロバクター sp. CR-TP0611と命名されFERM P-17281として寄託された微生物である。
これらは、以下のような菌学的性質を示す。
【００１０】
《アリスロバクター sp. CR-TP0321及びCR-TP0611の菌学的性質》
（相違点についてはかっこ内にCR-TP0611を示す）
【００１１】
ａ．形態的特徴
・細胞の大きさ形              0.5×0.5〜1.0μｍ  球状桿菌
・胞子の有無                  なし
・運動性                      −
【００１２】
ｂ．寒天培地における生育状況
・表１の培地において円形のコロニー、光沢があり、乳白色
【００１３】
【表１】
0004146961.tif 000002
【００１４】
0004146961.tif 000003
【００１５】
ｄ．化学分類学的性質
・リボソ−マルDNAの配列は、CR-TP0321は配列番号１、CR-TP0611は配列番号２に示すとおりである。
【００１６】
ｅ．その他の特性
・3,4-ジヒドロキシ安息香酸酸化酵素    オルソ開裂，メタ開裂
【００１７】
これら菌学的性質をバージェイズマニュアル−オブ−システマティックバクテリオロジー（vol.1，1984年）及びInternational Journal of Systematic Bacteriology 1995, p837-839の報文などと照らし合わせた結果、これらはアリスロバクター属に属する微生物であると同定されたが、同属に属する公知の菌株に該当しないことから、これを新菌株と同定し、アリスロバクター sp. CR-TP0321と命名しFERM P-17280として、及びアリスロバクター sp. CR-TP0611と命名しFERM P-17281として、工業技術院生命工学工業技術研究所に寄託した。
【００１８】
本発明の微生物を用いてテレフタル酸含有廃液を処理するには、廃液に当該微生物を接触させればよい。
【００１９】
処理対象とする廃液中のテレフタル酸濃度は特に限定されず、本発明においては、従来のテレフタル酸分解能を有する微生物では分解活性が極端に低下する、２重量％以上の高濃度でも処理可能である。
【００２０】
また当該廃液中には、テレフタル酸以外に、エチレングリコール等の有機物、水酸化ナトリウム等の無機物が含まれていても本発明の微生物の活性に悪影響を及ぼすものではない。また当該廃液中には、必要に応じて、アンモニア、硫安、塩安、リン安、硝酸ナトリウム、硝酸アンモニウム、硝酸カリウム、肉エキス、酵母エキス、ペプトン等の窒素源、更にはマグネシウム塩、カリウム塩、リン酸塩、鉄塩その他の金属塩などから選ばれた化合物を添加することができる。
【００２１】
テレフタル酸含有廃液に接触させるべき本発明微生物の量としては、乾燥菌体量で0.01〜20g/L、更に0.05〜10g/L、特に0.1〜５g/Lの範囲が好ましい。なお、テレフタル酸を資化することで菌量が増大するため、培養の進行と共に菌体濃度は変動し得る。また本発明微生物は懸濁状態で用いても、又は包括固定担体、活性炭等に固定して用いてもよい。
【００２２】
廃液処理の温度及び時間は廃液中のテレフタル酸濃度、添加微生物によって適宜調整できるが、処理温度としては、10〜40℃、特に20〜35℃が好ましく、また処理時間としては、10〜100時間、特に20〜60時間が好ましい。
【００２３】
【実施例】
以下、実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００２４】
実施例１
(1)  21mm径試験管に50mMのテレフタル酸を添加した表１の組成の培地を10ml調製し、土壌サンプルを0.5gずつ入れ、30℃で３日間培養した。次いで、これを約５分間静置し、わずかに濁った上清0.1mlを上記と同じ組成の新しい試験管に植え継ぎ、30℃で３日間培養した。この操作を１〜２回繰り返し、最後の上清を滅菌した蒸留水で適当に希釈し、50mMのテレフタル酸を添加した表１の組成の寒天培地に展開し、30℃で３日間培養し、コロニーを形成させた。
上記コロニーを上記と同様の新しい寒天培地に爪楊枝を用いて接種して、生育してくる菌株を得た。この菌株を、再び50mMのテレフタル酸を添加した表１と同様の組成の新しい培地10mlに植菌して、30℃で３日間培養した。培養液を滅菌した蒸留水に適当に希釈し、LB寒天培地に展開し、30℃で１日間培養し、コロニーを形成させた。生じたコロニーを、50mMのテレフタル酸を含む寒天培地に爪楊枝を用いて接種して、旺盛に生育してくる菌株を得た。
【００２５】
(2A)  (1)で得られた菌株の中から明らかに形態の異なる２種の菌株を任意に選択した〔CR−TP021及びCR−TP191〕。これらを50mM（0.83重量％）のテレフタル酸を含む表１の培地10mlを調製した21mm径の試験管に１白金耳接種し、30℃で24時間振とう培養した。
【００２６】
(2B)  一方、(1)で得られた数種類の菌株から300mMのテレフタル酸を含有する表１の寒天培地で生育可能な菌株２株を得た〔CR-TP0321及びCR-TP0611〕。これらの菌株の菌学的性質は、前記のとおりであった。これらを50mM（0.83重量％）のテレフタル酸を含む表１の培地10mlを調製した21mm径の試験管に１白金耳接種し、30℃で24時間振とう培養した。
【００２７】
(3)  (2A)及び(2B)で得た培養液の各１mlを、50、100、150、200、250mM（0.83，1.66，2.49，3.32，4.15重量％）のテレフタル酸を含む表１の組成の培地50mlを調製した300ml容のバッフル付き三角フラスコに接種した。
30℃で回転振とう培養（120rpm）し、40時間後（0.83，1.66，2.49，3.32重量％）又は50時間後（4.15重量％）の菌体量（乾燥重量）及びテレフタル酸量を測定した。この結果を表２に示す。
【００２８】
【表２】
0004146961.tif 000004
【００２９】
表２から明らかなように、CR−TP021及びCR−TP192は、0.83％のテレフタル酸を40時間以内に60％以上分解することができるにもかかわらず、テレフタル酸の濃度が上昇するとテレフタル酸の分解活性は急激に低下した。
これに対しCR-TP0321及びCR-TP0611は、３重量％を超える濃度のテレフタル酸を40時間以内に80％以上分解することができ、更には４重量％を超える濃度のテレフタル酸を50時間以内に80％以上分解することができるものであった。
【００３０】
【発明の効果】
本発明のアリスロバクター属微生物を用いれば、高濃度のテレフタル酸を含む廃液処理を効率良く行うことができる。
【００３１】
【配列表】
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【００３２】
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【００３３】
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