(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記（１）〜（４）の工程を少なくとも含む、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の溶出試験方法：
（１）シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤をヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステルに懸濁して、懸濁液を調製する工程；
（２）上記（１）で得られた懸濁液とシス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金１ｍｇに対して１０ｍＬ〜１０００ｍＬに相当する塩酸水溶液を混合させて、試験液を調製する工程；
（３）上記（２）で得られた試験液を回転振盪または回転撹拌し、経時的に回転振盪または回転攪拌を止めてサンプリングする工程；および
（４）上記（３）でサンプリングした液を定量分析する工程。
【請求項２】
上記（３）の工程が、試験液を経時的に遠心分離し、上澄み液からサンプリングするものである、請求項１に記載の溶出試験方法。
【請求項３】
上記（４）の工程における定量分析が、原子吸光分析装置または誘導結合プラズマ質量分析装置を用いて行われる、請求項１または２に記載の溶出試験方法。
【請求項４】
上記（２）の工程における塩酸水溶液が、０．５規定の塩酸水溶液である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の溶出試験方法。
【請求項５】
上記（３）の工程における回転振盪または回転攪拌が、２５℃、１５ｒｐｍで行われる、請求項１〜４のいずれか一項に記載の溶出試験方法。
【請求項６】
上記（１）の工程における懸濁が、懸濁濃度２０ｍｇ／ｍＬで行われる、請求項１〜５のいずれか一項に記載の溶出試験方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、医薬品の品質にかかわる分析方法に関する。詳しくは、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）（Ｒ1は炭素数６〜２２のアルカノイルオキシ基を表す。）の溶出試験法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
白金錯体であるシス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）（Ｒ1は炭素数６〜２２のアルカノイルオキシ基を表す。）のヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステル懸濁剤は、肝臓ガン、悪性リンパ腫、非小細胞肺ガン、小細胞肺ガン、表在性膀胱ガンに対し、従来の薬剤より優れた効果を示す薬剤として知られている。中でも下記式で表される構造を有するシス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）白金（ＩＩ）のヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステル懸濁剤は、特に優れた効果を有することが知られている。
【０００３】
【化１】
0004141149.tif 000002
【０００４】
シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）は、通常、凍結乾燥製剤の形態にて供され、該凍結乾燥製剤をヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステルに懸濁して懸濁剤とし、患者に投与される。この懸濁剤において、上記効果を有効に発揮させるためには、有効成分のシス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）および／またはヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステルの品質の恒常性を保つことが必須となる。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
通常、製剤の品質の恒常性は、製剤からの有効成分の放出挙動を観測する溶出試験を行うことで確認される。しかし、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）のヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステル懸濁剤は、この溶出試験に通常用いられる溶媒（水、燐酸緩衝液、生理食塩水、血清等）に対しての溶出が遅く、また自身の溶解度が低いことから、品質を確認するための試験系の確立が困難であり、また確立したとしても長期間の試験を行う必要があるという問題があった。
【０００６】
本発明は、上記課題を解決するためになされたものであって、その目的とするところは、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）、特にはそのヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステル懸濁剤、を臨床で安全に応用するために、その品質を確認するための効率的な溶出試験法を提供することである。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意検討を行った結果、無機酸の水溶液を用いて、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）またはそのヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステル懸濁液を溶出させることで、有効成分が分析に適した時間内に溶出することを見出し、更なる検討を加え、本発明を完成させるに至った。
【０００８】
すなわち本発明は、以下を特徴とするものである。
〔１〕下記（１）〜（４）の工程を少なくとも含む、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）（式中、Ｒ1は炭素数６〜２２のアルカノイルオキシ基を表す。）の溶出試験方法：
（１）シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）を懸濁用液に懸濁する工程；
（２）上記（１）で得られた懸濁液を無機酸の水溶液と混合させて、試験液を調製する工程；
（３）上記（２）で得られた試験液を経時的にサンプリングする工程；および
（４）上記（３）でサンプリングした液を定量分析する工程。
〔２〕Ｒ1がテトラデカノイルオキシ基である、上記〔１〕に記載の溶出試験方法。
〔３〕無機酸の濃度が０．１規定〜１０規定の範囲である、上記〔１〕または〔２〕に記載の溶出試験方法。
〔４〕無機酸が、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸またはホウ酸である、上記〔１〕〜〔３〕のいずれかに記載の溶出試験方法。
〔５〕無機酸が塩酸である、上記〔４〕に記載の溶出試験方法。
〔６〕塩酸の濃度が０．１規定〜６規定の範囲である、上記〔５〕に記載の溶出試験方法。
〔７〕懸濁用液が、ハロゲン原子で置換されてもよい不飽和脂肪酸エステル、ハロゲン原子で置換されてもよい飽和脂肪酸エステル、炭化水素、不飽和脂肪酸トリグリセリドまたは飽和脂肪酸トリグリセリドである、上記〔１〕〜〔６〕のいずれかに記載の溶出試験方法。
〔８〕懸濁用液が、ヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステル、ミリスチン酸イソプロピル、リノール酸エチル、流動パラフィンまたは中鎖脂肪酸トリグリセリドである、上記〔７〕に記載の溶出試験方法。
〔９〕懸濁用液がヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステルである、上記〔８〕に記載の溶出試験方法。
〔１０〕上記（４）において、原子吸光分析装置、高速液体クロマトグラフ、誘導結合プラズマ質量分析装置または誘導結合プラズマ発光分析装置を用いて定量分析するものである、上記〔１〕〜〔９〕のいずれかに記載の溶出試験方法。
〔１１〕上記（３）の工程が、試験液を回転振盪し、経時的に回転振盪を止めてサンプリングするものである、上記〔１〕〜〔１０〕のいずれかに記載の溶出試験方法。
〔１２〕回転振盪における回転数が５ｒｐｍ〜４０ｒｐｍである、上記〔１１〕に記載の溶出試験方法。
〔１３〕上記（３）の工程が、試験液を５００ｒｐｍ〜１０００ｒｐｍで遠心分離し、上澄み液からサンプリングするものである、上記〔１〕〜〔１２〕のいずれかに記載の溶出試験方法。
〔１４〕サンプリングの間隔が１時間〜２４時間である、上記〔１〕〜〔１３〕のいずれかに記載の溶出試験方法。
【０００９】
〔１５〕下記（１）〜（４）の工程を少なくとも含む、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）（式中、Ｒ1は炭素数６〜２２のアルカノイルオキシ基を表す。）の溶出試験方法：
（１）シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）を懸濁用液に懸濁する工程；
（２）上記（１）で得られた懸濁液の一部をサンプリングし、それをシス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）１ｍｇに対して１０ｍＬ〜１０００ｍＬに相当する無機酸の水溶液と混合させて試験液を調製する工程；
（３）上記（２）で得られた試験液を振盪または撹拌し、経時的に振盪または攪拌を止めてサンプリングする工程；および
（４）上記（３）でサンプリングした液を定量分析する工程。
〔１６〕上記（３）の工程が、試験液を遠心分離し、上澄み液からサンプリングするものである、上記〔１５〕に記載の溶出試験方法。
〔１７〕Ｒ1がテトラデカノイルオキシ基である、上記〔１５〕または〔１６〕に記載の溶出試験方法。
〔１８〕無機酸の濃度が０．１規定〜１０規定の範囲である、上記〔１５〕〜〔１７〕のいずれかに記載の溶出試験方法。
〔１９〕無機酸が、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸またはホウ酸である、上記〔１５〕〜〔１８〕のいずれかに記載の溶出試験方法。
〔２０〕無機酸が塩酸である、上記〔１９〕に記載の溶出試験方法。
〔２１〕塩酸の濃度が０．１規定〜６規定の範囲である、上記〔２０〕に載の溶出試験方法。
〔２２〕懸濁用液がハロゲン原子で置換されてもよい不飽和脂肪酸エステル、ハロゲン原子で置換されてもよい飽和脂肪酸エステル、炭化水素、不飽和脂肪酸トリグリセリドまたは飽和脂肪酸トリグリセリドである、上記〔１５〕〜〔２１〕のいずれかに記載の溶出試験方法。
〔２３〕懸濁用液が、ヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステル、ミリスチン酸イソプロピル、リノール酸エチル、流動パラフィンまたは中鎖脂肪酸トリグリセリドである、上記〔２２〕に記載の溶出試験方法。
〔２４〕懸濁液がヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステルである、上記〔２３〕に記載の溶出試験方法。
〔２５〕上記（４）において、原子吸光分析装置、高速液体クロマトグラフ、誘導結合プラズマ質量分析装置または誘導結合プラズマ発光分析装置を用いて定量分析するものである、上記〔１５〕〜〔２４〕のいずれかに記載の溶出試験方法。
〔２６〕上記（３）の工程が、試験液を回転振盪し、経時的に回転振盪を止めてサンプリングするものである、上記〔１５〕〜〔２５〕のいずれかに記載の溶出試験方法。
〔２７〕回転振盪における回転数が５ｒｐｍ〜４０ｒｐｍである、上記〔２６〕に記載の溶出試験方法。
〔２８〕上記（３）の工程が、試験液を５００ｒｐｍ〜１０００ｒｐｍで遠心分離し、上澄み液からサンプリングするものである、上記〔１５〕〜〔２７〕のいずれかに記載の溶出試験方法。
〔２９〕サンプリングの間隔が１時間〜２４時間である、上記〔１５〕〜〔２８〕のいずれかに記載の溶出試験方法。
【００１０】
〔３０〕下記（１）〜（４）の工程を少なくとも含む、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）（式中、Ｒ1は炭素数６〜２２のアルカノイルオキシ基を表す。）の溶出試験方法：
（１）シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）をヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステルに懸濁する工程；
（２）上記（１）で得られた懸濁液から５０μＬ〜５００μＬをサンプリングし、これに０．５規定の塩酸水を１０ｍＬ〜５０ｍＬ加えて試験液を調製する工程；
（３）上記（２）で得られた試験液を回転振盪し、経時的に回転振盪を止めて試験液を遠心分離し、上澄み液からサンプリングする工程；および
（４）上記（３）でサンプリングした液を原子吸光分析装置を用いて定量分析する工程。
【００１１】
〔３１〕下記（１）〜（４）の工程を少なくとも含む、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）（式中、Ｒ1は炭素数６〜２２のアルカノイルオキシ基を表す。）の溶出試験方法：
（１）シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）をヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステルに懸濁する工程；
（２）上記（１）で得られた懸濁液から５０μＬ〜５００μＬをサンプリングし、それに０．５規定の塩酸水を１０ｍＬ〜５０ｍＬ加えて試験液を調製する工程；
（３）上記（２）で得られた試験液を回転振盪し、経時的に回転振盪を止めて試験液を遠心分離し、上澄み液からサンプリングする工程；および
（４）上記（３）でサンプリングした液を高速液体クロマトグラフを用いて定量分析する工程。
【００１２】
〔３２〕下記（１）〜（４）の工程を少なくとも含む、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の溶出試験方法：
（１）シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）をヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステルに懸濁する工程；
（２）上記（１）で得られた懸濁液から５０μＬ〜５００μＬをサンプリングし、それに０．５規定の塩酸水を１０ｍＬ〜５０ｍＬ加えて試験液を調製する工程；
（３）上記（２）で得られた試験液を回転振盪し、経時的に回転振盪を止めて試験液を遠心分離し、上澄み液からサンプリングする工程；および
（４）上記（３）でサンプリングした液を原子吸光分析装置を用いて定量分析する工程。
【００１３】
〔３３〕下記（１）〜（４）の工程を少なくとも含む、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の溶出試験方法：
（１）シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）をヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステルに懸濁する工程；
（２）上記（１）で得られた懸濁液から５０μＬ〜５００μＬをサンプリングし、それに０．５規定の塩酸水を１０ｍＬ〜５０ｍＬ加えて試験液を調製する工程；
（３）上記（２）で得られた試験液を回転振盪し、経時的に回転振盪を止めて試験液を遠心分離し、上澄み液からサンプリングする工程；および
（４）上記（３）でサンプリングした液を高速液体クロマトグラフを用いて定量分析する工程。
【００１４】
〔３４〕下記（１）〜（４）の工程を少なくとも含む、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の溶出試験方法：
（１）シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）をヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステルに懸濁する工程；
（２）上記（１）で得られた懸濁液から５０μＬ〜５００μＬをサンプリングし、それに０．５規定の塩酸水を１０ｍＬ〜５０ｍＬ加えて試験液を調製する工程；
（３）上記（２）で得られた試験液を２０℃〜４０℃で回転振盪し、経時的に回転振盪を止めて試験液を遠心分離し、上澄み液からサンプリングする工程；および
（４）上記（３）でサンプリングした液を原子吸光分析装置を用いて定量分析する工程。
【００１５】
〔３５〕下記（１）〜（４）の工程を少なくとも含む、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の溶出試験方法：
（１）シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）をヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステルに懸濁する工程；
（２）上記（１）で得られた懸濁液から５０μＬ〜５００μＬをサンプリングし、それに０．５規定の塩酸水を１０ｍＬ〜５０ｍＬ加えて試験液を調製する工程；
（３）上記（２）で得られた試験液を２０℃〜４０℃で回転振盪し、経時的に回転振盪を止めて試験液を遠心分離し、上澄み液からサンプリングする工程；および
（４）上記（３）でサンプリングした液を高速液体クロマトグラフを用いて定量分析する工程。
【００１６】
〔３６〕下記（１）〜（４）の工程を少なくとも含む、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の溶出試験方法：
（１）シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）をヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステルに懸濁する工程；
（２）上記（１）で得られた懸濁液から５０μＬ〜５００μＬをサンプリングし、それに０．５規定の塩酸水を１０ｍＬ〜５０ｍＬ加えて試験液を調製する工程；
（３）上記（２）で得られた試験液を２０℃〜４０℃、１５ｒｐｍ〜２５ｒｐｍで回転振盪し、経時的に回転振盪を止めて試験液を遠心分離し、上澄み液からサンプリングする工程；および
（４）上記（３）でサンプリングした液を原子吸光分析装置を用いて定量分析する工程。
【００１７】
〔３７〕下記（１）〜（４）の工程を少なくとも含む、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の溶出試験方法：
（１）シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）をヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステルに懸濁する工程；
（２）上記（１）で得られた懸濁液から５０μＬ〜５００μＬをサンプリングし、それに０．５規定の塩酸水を１０ｍＬ〜５０ｍＬ加えて試験液を調製する工程；
（３）上記（２）で得られた試験液を２０℃〜４０℃、１５ｒｐｍ〜２５ｒｐｍで回転振盪し、経時的に回転振盪を止めて試験液を遠心分離し、上澄み液からサンプリングする工程；および
（４）上記（３）でサンプリングした液を高速液体クロマトグラフを用いて定量分析する工程。
【００１８】
〔３８〕下記（１）〜（４）の工程を少なくとも含む、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の溶出試験方法：
（１）シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）をヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステルに懸濁する工程；
（２）上記（１）で得られた懸濁液から５０μＬ〜５００μＬをサンプリングし、それに０．５規定の塩酸水を１０ｍＬ〜５０ｍＬ加えて試験液を調製する工程；
（３）上記（２）で得られた試験液を２０℃〜４０℃、１５ｒｐｍ〜２５ｒｐｍで回転振盪し、経時的に回転振盪を止めて試験液を５００ｒｐｍ〜２０００ｒｐｍで１分間〜５分間遠心分離し、上澄み液からサンプリングする工程；および
（４）上記（３）でサンプリングした液を原子吸光分析装置を用いて定量分析する工程。
【００１９】
〔３９〕下記（１）〜（４）の工程を少なくとも含む、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の溶出試験方法：
（１）シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）をヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステルに懸濁する工程；
（２）上記（１）で得られた懸濁液から５０μＬ〜５００μＬをサンプリングし、それに０．５規定の塩酸水を１０ｍＬ〜５０ｍＬ加えて試験液を調製する工程；
（３）上記（２）で得られた試験液を２０℃〜４０℃、１５ｒｐｍ〜２５ｒｐｍで回転振盪し、経時的に回転振盪を止めて試験液を５００ｒｐｍ〜２０００ｒｐｍで１分間〜５分間遠心分離し、上澄み液からサンプリングする工程；および
（４）上記（３）でサンプリングした液を高速液体クロマトグラフを用いて定量分析する工程。
【００２０】
〔４０〕下記（１）〜（４）の工程を少なくとも含む、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の溶出試験方法：
（１）シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤２０ｍｇをヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステル１ｍＬに懸濁する工程；
（２）上記（１）で得られた懸濁液から５０μＬ〜５００μＬをサンプリングし、それに０．５規定の塩酸水を１０ｍＬ〜５０ｍＬ加えて試験液を調製する工程；
（３）上記（２）で得られた試験液を２０℃〜４０℃、１５ｒｐｍ〜２５ｒｐｍで回転振盪し、経時的に回転振盪を止めて試験液を５００ｒｐｍ〜２０００ｒｐｍで１分間〜５分間遠心分離し、上澄み液からサンプリングする工程；および
（４）上記（３）でサンプリングした液を原子吸光分析装置を用いて定量分析する工程。
【００２１】
〔４１〕下記（１）〜（４）の工程を少なくとも含む、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の溶出試験方法：
（１）シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤２０ｍｇをヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステル１ｍＬに懸濁する工程；
（２）上記（１）で得られた懸濁液から５０μＬ〜５００μＬをサンプリングし、それに０．５規定の塩酸水を１０ｍＬ〜５０ｍＬ加えて試験液を調製する工程；
（３）上記（２）で得られた試験液を２０℃〜４０℃、１５ｒｐｍ〜２５ｒｐｍで回転振盪し、経時的に回転振盪を止めて試験液を５００ｒｐｍ〜２０００ｒｐｍで１分間〜５分間遠心分離し、上澄み液からサンプリングする工程；および
（４）上記（３）でサンプリングした液を高速液体クロマトグラフを用いて定量分析する工程。
【００２２】
〔４２〕下記（１）〜（４）の工程を少なくとも含む、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の溶出試験方法：
（１）シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤７０ｍｇをヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステル３．５ｍＬに懸濁する工程；
（２）上記（１）で得られた懸濁液から５０μＬ〜５００μＬをサンプリングし、それに０．５規定の塩酸水を１０ｍＬ〜５０ｍＬ加えて試験液を調製する工程；
（３）上記（２）で得られた試験液を２０℃〜４０℃、１５ｒｐｍ〜２５ｒｐｍで回転振盪し、経時的に回転振盪を止めて試験液を５００ｒｐｍ〜２０００ｒｐｍで１分間〜５分間遠心分離し、上澄み液からサンプリングする工程；および
（４）上記（３）でサンプリングした液を原子吸光分析装置を用いて定量分析する工程。
【００２３】
〔４３〕下記（１）〜（４）の工程を少なくとも含む、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の溶出試験方法：
（１）シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤７０ｍｇをヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステル３．５ｍＬに懸濁する工程；
（２）上記（１）で得られた懸濁液から５０μＬ〜５００μＬをサンプリングし、それに０．５規定の塩酸水を１０ｍＬ〜５０ｍＬ加えて試験液を調製する工程；
（３）上記（２）で得られた試験液を２０℃〜４０℃、１５ｒｐｍ〜２５ｒｐｍで回転振盪し、経時的に回転振盪を止めて試験液を５００ｒｐｍ〜２０００ｒｐｍで１分間〜５分間遠心分離し、上澄み液からサンプリングする工程；および
（４）上記（３）でサンプリングした液を高速液体クロマトグラフを用いて定量分析する工程。：
等に関する。
【００２４】
【発明の実施の形態】
本発明の溶出試験方法は、以下の（１）〜（４）の工程を基本的に含む。
（１）シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）を懸濁用液に懸濁する工程
本発明におけるシス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）は、Ｒ1における炭素数が６〜２２のアルカノイルオキシ基であるものが用いられる。炭素数６〜２２のアルカノイルオキシ基としては、例えば、ヘキサノイルオキシ、ヘプタノイルオキシ、オクタノイルオキシ、ノナノイルオキシ、デカノイルオキシ、ウンデカノイルオキシ、ドデカノイルオキシ、トリデカノイルオキシ、テトラデカノイルオキシ、ペンタデカノイルオキシ、ヘキサデカノイルオキシ、ヘプタデカノイルオキシ、オクタデカノイルオキシ、ノナデカノイルオキシ、アイコサノイルオキシ、ヘンエイコサノイルオキシ、ドコサノイルオキシ等が例示される。好ましいアルカノイルオキシ基としては、炭素数１０〜１６のアルカノイルオキシ基が挙げられ、具体的には例えば、デカノイルオキシ、ウンデカノイルオキシ、ドデカノイルオキシ、トリデカノイルオキシ、テトラデカノイルオキシ、ペンタデカノイルオキシ、ヘキサデカノイルオキシ、等が挙げられる。更に好ましいアルカノイルオキシ基としては、炭素数１３〜１５のアルカノイルオキシ基が挙げられ、具体的には例えば、トリデカノイルオキシ、テトラデカノイルオキシ、ペンタデカノイルオキシ、等が挙げられる。特に好ましいアルカノイルオキシ基としては、テトラデカノイルオキシ等が挙げられる。
【００２５】
本発明に使用されるシス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）は、無水物でも水和物でもよい。また当該シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）は、注射剤として用いられるので、一度溶液状態にして滅菌濾過して、凍結乾燥したものが好ましい。具体的には、２−メチル−２−プロパノールに溶解し、除菌濾過して、凍結乾燥してなる凍結乾燥製剤の態様が挙げられる。
【００２６】
本発明において使用される懸濁用液としては、上記のシス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）を懸濁し得る液状の油であれば特に制限はないが、２５℃で液状であり沸点が８０℃以上の脂肪酸エステル、炭化水素が好ましい。たとえば、ハロゲン原子で置換されてもよい不飽和脂肪酸エステル、ハロゲン原子で置換されてもよい飽和脂肪酸エステル、炭化水素、不飽和脂肪酸トリグリセリドまたは飽和脂肪酸トリグリセリドが例示される。
上記ハロゲン原子で置換されてもよい不飽和または飽和脂肪酸エステルにおけるハロゲン原子としては、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子が挙げられる。このような不飽和または飽和脂肪酸エステルとしては、脂肪酸エチルエステル、脂肪酸イソプロピルエステルが挙げられ、具体的には、ヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステル（リピオドール）、ケシ油脂肪酸エチルエステル、オレイン酸エチルエステル、リノール酸エチルエステル、ミリスチン酸エチルエステル、オレイン酸イソプロピルエステル、リノール酸イソプロピルエステル、ミリスチン酸イソプロピルエステルが例示される。
上記炭化水素としては、具体的には、流動パラフィン、流動イソパラフィン、スクワランなどが挙げられる。
上記不飽和または飽和脂肪酸トリグリセリドとしては、具体的には、トリオレイングリセリド、トリリノレイングリセリドなどの不飽和脂肪酸トリグリセリドや、中鎖脂肪酸トリグリセリドであるトリカプリル酸グリセリル、トリカプリン酸グリセリル、トリ（カプリル・カプリン酸）グリセリルとそれらの混合物、さらには植物油であるサフラワー油、大豆油、アルモンド油、ゴマ油、綿実油、アボガド油、オリーブ油、ツバキ油、パーシック油、ヒマシ油などが挙げられる。上記中でも、懸濁用液の安定性の観点からは、ハロゲン原子で置換されてもよい不飽和または飽和脂肪酸エステル、炭化水素が好ましく、特には、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）が実際に投与される形態にて品質を確認することができる観点から、ヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステルを懸濁用液として使用するのが好ましい。
【００２７】
懸濁する温度としては、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）が懸濁用液に懸濁され得る温度であれば、特に制限されないが、たとえば５℃〜３０℃の範囲から選択される。
【００２８】
懸濁用液の量についても、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）が懸濁され得る量であれば、特に制限はないが、該シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）１ｍｇに対し、０．０２５ｍＬ〜５ｍＬの範囲から選ばれるのが好ましく、０．０５ｍＬ〜５ｍＬの範囲から選択されるのがより好ましい。該シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）１ｍｇに対し、懸濁用液が０．０２５ｍＬ未満であると、均一な懸濁液を調製することが困難となる虞があるためであり、また懸濁用液が５ｍＬを超えると、臨床用懸濁液と近い状態でなくなる虞があるためである。
具体的には、該シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）がたとえばシス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）である場合、当該シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）１ｍｇに対し、例えば、０．０５ｍＬ〜５ｍＬの範囲の量のヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステルで懸濁させるのが好ましい。
【００２９】
懸濁は、通常の方法で行えばよい。
具体的には、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ'）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）に懸濁用液を加え、直ちに（たとえば、１分間以内に）振り混ぜ、液中に明らかな塊がなくなるまで、例えば、手でよく振り混ぜて懸濁する（懸濁後の液を「懸濁液」と呼ぶ。）。懸濁液は使用するまで室温で保存し、速やかに（調製後１時間以内に）下記（２）の工程に供するのが好ましい。
【００３０】
（２）上記（１）の工程で得られた懸濁液と無機酸とを混合して、試験液を調製する工程
続く（２）の工程においては、上記（１）の工程で調製した懸濁液を、無機酸の水溶液と混合させ、試験液を調製する。当該無機酸の水溶液は溶出液として使用されるものであって、この無機酸の水溶液と上記懸濁液との混合によって、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ'）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）の溶出が開始される。
【００３１】
本発明において使用される無機酸としては、特には制限はないが、たとえば、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、ホウ酸が例示され、中でも塩酸が好ましい。
【００３２】
無機酸の濃度は、使用する無機酸の種類に応じて適宜選択すればよいが、０．１規定〜１０規定の範囲から選択されるのが好ましい。無機酸の濃度が０．１規定未満であると、溶出速度が遅くなり過ぎる虞があるためであり、また無機酸の濃度が１０規定を超えると、溶出速度が速くなり過ぎる虞があるためである。
具体的には、たとえば無機酸が塩酸である場合、当該塩酸の濃度は、好ましくは０．１規定〜６規定の範囲から、より好ましくは０．３規定〜１規定の範囲から選ばれる。中でも、０．５規定の塩酸を使用するのが、特に好ましい。
【００３３】
当該（２）の工程において、懸濁液と無機酸の水溶液との混合のさせ方に特に制限はなく、懸濁液に無機酸の水溶液を添加してもよく、無機酸の水溶液に懸濁液を添加してもよい。また、上記（１）の工程で調製した懸濁液を全て（２）の工程に用いる必要は勿論なく、懸濁液の一部分のみをサンプリングし、これを無機酸の水溶液に加える、あるいはこれに無機酸の水溶液を加えてもよい。
【００３４】
懸濁液から一部分のみをサンプリングする場合のサンプリング量は、溶出に用いる無機酸の水溶液の量および、溶出したシス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ'）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）またはその無機酸との反応物の溶解度に応じて、適宜選択すればよく、特に制限はない。具体的には、０．５規定の塩酸水を１０ｍＬ〜５０ｍＬ用いる場合、上記懸濁液から５０μＬ〜５００μＬをサンプリングする。
また懸濁液からサンプリングした液に混合する無機酸の水溶液の量は、無機酸の種類、濃度に応じて適宜選択すればよいが、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ'）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）１ｍｇに対して１０ｍＬ〜１０００ｍＬであるのが好ましい。無機酸の水溶液の量がシス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ'）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）１ｍｇに対して１０ｍＬ未満であると、溶出したシス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）またはその溶出物が水溶液中で飽和となり溶出を妨げてしまう虞があるためであり、また１０００ｍＬを超えると、溶出物濃度が低いため、分析が困難となる虞があるためである。
【００３５】
（３）上記（２）で得られた試験液を経時的にサンプリングする工程
続いて、上記（２）の工程で調製した試験液をサンプリングする。当該サンプリングは、経時的に行う。サンプリングの間隔は、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ'）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）の溶出の速度にもよるが、たとえば、１時間〜２４時間の範囲から選択すればよい。サンプリングの開始は、上記混合の直後からであってもよいし、当該直後から３０分〜２４時間後であってもよい。これにより、懸濁液と無機酸の水溶液との混合により開始されるシス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ'）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）の溶出を、経時的な分析に供することができる。
【００３６】
この（３）の工程におけるサンプリングは、試験液を攪拌または振盪し、経時的に攪拌または振盪を止めて試験液をサンプリングするように行うのが好ましい。試験液を攪拌または振盪し、経時的に攪拌または振盪を止めてサンプリングすることで、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ'）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）が試験液全体にわたり均一に溶出し、正確な定量分析が可能となるというような利点があるからである。当該攪拌または振盪は、たとえば、回転振盪法、パドル法、フロースルーセル法、あるいはフランズセル法に使用される従来公知の装置を用いて行えばよい。
【００３７】
中でも試験液を回転攪拌し、経時的に回転攪拌を止めて試験液をサンプリングするのが、特に好ましい。回転振盪における回転数に、特に制限はないが、５ｒｐｍ〜４０ｒｐｍの範囲から選択されるのが好ましく、１５ｒｐｍ〜２５ｒｐｍの範囲から選択されるのがより好ましい。該回転数が５ｒｐｍ未満であると、溶出速度のばらつきが大きいため再現性が悪く、また溶出速度が遅くなってしまう虞があるからであり、また該回転数が４０ｒｐｍを超えると、サンプリングした液がエマルション化して、遠心分離によっても分離しにくくなり、溶出液のみのサンプリングが困難となってしまう虞があるからである。
【００３８】
経時的なサンプリングを行うに際しての試験液（すなわち、溶出試験中の試験液）を保持する温度としては、特に制限されないが、５℃〜６０℃の範囲から選択されるのが好ましく、２０℃〜４０℃の範囲から選択されるのがより好ましい。このような試験液の温度保持は、少なくとも（３）の工程を、当該温度保持可能な環境中または恒温器内で行えばよい。試験液の保持温度が５℃未満であると、溶出速度が遅くなり過ぎてしまう虞があるためであり、また６０℃を超えると、溶出速度が速くなり過ぎて試験の再現性が悪くなるという虞があるためである。また保持温度が５℃未満あるいは６０℃を超えると、（３）の工程を当該温度で実施することが困難であるため、（３）の工程におけるサンプリング中に試験液の温度が大きく変化し溶出速度に影響するというような虞もある。
【００３９】
当該（３）の工程におけるサンプリングは、懸濁液と無機酸水溶液とを分離させるため、試験液の上澄み液を採取するのが好ましい。より好ましくは、経時的に上記攪拌または振盪を止めて試験液を遠心分離し（一定時間経過ごとに試験液を取り出して遠心分離し）、当該遠心分離後の上澄み液をサンプリング液とする。遠心分離の条件に特に制限はないが、確実に上記分離を行うことができることから、回転数が５００ｒｐｍ〜２０００ｒｐｍ、時間が１分間〜５分間であるのが好ましい。
上述した（３）の工程は、具体的には、上記（２）の工程で得られた試験液を２５℃、１５ｒｐｍで回転振盪し、試験液を１０００ｒｐｍで２分間遠心分離し、得られた上澄み液からサンプリングする場合が例示される。
【００４０】
（４）上記（３）の工程でサンプリングした液（以下、「サンプリング液」という）を定量分析する工程
（４）の工程で用いる分析装置としては、従来公知の定量分析を行う装置であれば特に制限なく用いることができ、具体的には、原子吸光分析装置、液体クロマトグラフ、誘導結合プラズマ質量分析計、誘導結合プラズマ発光分析装置などが例示される。中でも、全白金溶出物が定量可能であるという観点からは、原子吸光分析装置または誘導結合プラズマ発光分析装置を用いて白金を定量するのが好ましい。ただし、無機酸中の白金溶出物を同定すれば、その化合物を高速液体クロマトグラフを用いて定量してもよい。
【００４１】
上述した（１）〜（４）の工程を含む本発明の溶出試験方法によって、従来、試験に適した時間での溶出が困難であったシス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）、およびそのヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステルとの懸濁剤について、好適な溶出試験を確立することができる。このような本発明の溶出試験方法は、当該シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）、そのヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステルとの懸濁剤の品質を効率的に確認することが可能となり、これらの臨床での安全な応用の実現という観点より、非常に有用である。
【００４２】
なお本発明の注射用凍結乾燥製剤の投与量は、一般に成人に対して、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）として、１ｍｇ／日〜５００ｍｇ／日である。投与方法としては、例えば局所動注が挙げられ、特に肝動注が好ましい。
本発明の注射用凍結乾燥製剤は、ヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステル等に懸濁した状態で投与することができる。この場合、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）］白金（ＩＩ）は、２０ｍｇ／ｍＬの濃度で投与される。
【００４３】
【実施例】
次に実験例を挙げて本発明を詳しく説明するが、本発明の範囲がこれらに限定されるものではない。
実験例１
（１）シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤２０ｍｇに対してヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステル１ｍＬを加えて直ちに振り混ぜ、均一に懸濁した。
（２）以下の試験液１〜３を、それぞれ３試験分調製した。この際、実際に添加した懸濁液の重量を測定し、以下の数式にしたがって主薬仕込み量を求めた。
主薬仕込み量［ｍｇ］＝懸濁濃度［ｍｇ／ｍＬ］×懸濁液の重量［ｇ］／懸濁液の比重［ｇ／ｍＬ］
（懸濁濃度＝２０ｍｇ／ｍＬ、懸濁液の比重＝１．３０１ｇ／ｍＬ）
・５０ｍＬねじ口試験管中で、上記懸濁液１００μＬに対し１規定の塩酸水５０ｍＬを混合させたもの（試験液１）
・１５ｍＬねじ口試験管中で、上記懸濁液１００μＬに対し生理食塩水１０ｍＬを混合させたもの（試験液２）
・１５ｍＬねじ口試験管中で、上記懸濁液５００μＬに対しラット血清（１％ポリソルベート８０を含有）１０ｍＬを混合させたもの（試験液３）
（３）試験液１〜３を、３７℃に保持した恒温器内で回転振盪器を用いて、回転数５ｒｐｍで回転振盪した。
試験液１（塩酸水）については、１、２、３、６日後に遠心分離（１０００ｒｐｍ、２分）後、上澄み液（溶出試験液層）を５００μＬ採取した。
試験液２（生理食塩水）については、４、８週間後に遠心分離（１０００ｒｐｍ、１０分）後、上澄み液（溶出試験液層）を８ｍＬ採取し、新しい生理食塩水を８ｍＬ補充した。
試験液３（血清）については、１、２、３週間後に遠心分離（１０００ｒｐｍ、１０分）後、上澄み液（溶出試験液層）を１ｍＬ採取し、これをさらに遠心分離（１２０００ｒｐｍ、６０分）して、上清液を採取した。
（４）原子吸光光度法にてサンプリング液中の白金量を測定した。
試験液１（塩酸水）については、白金標準液（１規定の塩酸中に白金１０００ｐｐｍ）を１規定の塩酸で希釈し、０．０２ｐｐｍ標準液、０．１ｐｐｍ標準液、０．２ｐｐｍ標準液をそれぞれ調製した。試験液１からのサンプリング液（３試験分）は、１規定の塩酸で適当濃度まで希釈した。各サンプリング液について原子吸光光度計を用いて電熱加熱法で白金量を測定し、３点検量線法により得られた白金濃度から、仕込み量に対する累積溶出率（％）を求めた。
試験液２（生理食塩水）については、白金標準液（１０００ｐｐｍ）を生理食塩水で０．１ｐｐｍ、０．５ｐｐｍ、１ｐｐｍに希釈し、それぞれ前処理液（１２５ｍｇ／ｍＬ硝酸アンモニウム、０.２５％  Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００溶液）で２倍に希釈して、０．０５ｐｐｍ標準液、０．２５ｐｐｍ標準液、０．５ｐｐｍ標準液とした。試験液２からのサンプリング液（３試験分）は、生理食塩水で適当濃度まで希釈後、前処理液で２倍希釈した。各サンプリング液について原子吸光光度計を用いて電熱加熱法で白金量を測定し、３点検量線法により得られた白金濃度から、仕込み量に対する累積溶出率（％）を求めた。
試験液３（ラット血清）については、白金標準液（１０００ｐｐｍ）を蒸留水で０．０８ｐｐｍ、０．４ｐｐｍ、０．８ｐｐｍに希釈し、それぞれ１％ラット血清含有の前処理液（１２５ｍｇ／ｍＬ硝酸アンモニウム、０.２５％  Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００溶液）で２倍に希釈して、０．０４ｐｐｍ標準液、０．２ｐｐｍ標準液、０．４ｐｐｍ標準液とした。試験液３からのサンプリング液（３試験分）は、水で１００倍希釈後、１％ラット血清で適当濃度まで希釈後、１％ラット血清含有の前処理液で２倍希釈した。各サンプリング液について原子吸光光度計を用いて電熱加熱法で白金量を測定し、３点検量線法により得られた白金濃度から、仕込み量に対する累積溶出率（％）を求めた。
なお原子吸光光度法は、下記の条件で行った。
・測定機：原子吸光光度計（ＡＡ−６７００、島津製作所製）
・測定方式：電熱加熱法
・光源ランプ：ホロカソードランプ
・測定元素：Ｐｔ
・分光器分析線波長：２６５．９ｎｍ
・フローガス：アルゴンガス（１．００ｍＬ／分）
・温度／時間／加熱モード：
乾燥（１００℃／２０秒／Ｒａｍｐ、１００℃／５秒／Ｓｔｅｐ、１６０℃／１０秒／Ｒａｍｐ、３００℃／２０秒／Ｒａｍｐ）
灰化（１２００℃／１０秒／Ｒａｍｐ、１２００℃／２５秒／Ｓｔｅｐ）
原子化（２６００℃／３秒／Ｓｔｅｐ）
クリーニング（２７００℃／２秒／Ｓｔｅｐ）
・注入量：１０μＬ
・キュベット：パイロ化グラファイトチューブ
【００４４】
図１は、上記実験例１における３種類の試験液１〜３の場合のシス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤の溶出挙動を示すグラフである。図１のグラフにおいて、縦軸は累積溶出率（％）、横軸は期間（週間）を示す。なおグラフに示す累積溶出率は、各試験液１〜３の３試験分の平均溶出率である。
【００４５】
実験例２
ヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステル、ケシ油脂肪酸エチルエステル、リノール酸エチル、ミリスチン酸イソプロピル、流動パラフィン、中鎖脂肪酸トリグリセリドをそれぞれ懸濁用液として用いて、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）を懸濁させた場合の各懸濁液の懸濁性について評価を行った。各懸濁用液は、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤２０ｍｇに対し、１ｍＬ混合させた。
結果を表１に示す。
【００４６】
【表１】
0004141149.tif 000003
【００４７】
表１に示すように、上述した全ての懸濁用液を用いた場合においても凍結乾燥製剤が均一に分散し、良好な懸濁性を示した。
【００４８】
実験例３
シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤２０ｍｇに対し、０．２５ｍＬ、０．５ｍＬ、１ｍＬ、１０ｍＬ、１００ｍＬの液量にてヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステルを添加した各場合について、懸濁液の調製の難易を評価した。
結果を表２に示す。
【００４９】
【表２】
0004141149.tif 000004
【００５０】
表２に示すように、液量が０．５ｍＬ〜１００ｍＬの場合においては容易に懸濁できたが、液量が０．２５ｍＬのときは、上記凍結乾燥製剤に対する懸濁用液の量が少ないため、懸濁が困難であった。この結果より、凍結乾燥製剤２０ｍｇに対する懸濁用液の量は０．５ｍＬ〜１００ｍＬの範囲から選択するのが好適であることが判る。
【００５１】
実験例４
ヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステル（ＬＰＤ）、ヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステルとリノール酸エチルの混液（１：１）、ヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステルとミリスチン酸イソプロピルの混液（１：１）をそれぞれ懸濁用液として使用した各場合について、下記（１）〜（４）の手順にて溶出試験を行った。
（１）シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤２０ｍｇに対して懸濁用液を１ｍＬ添加し、直ちに振り混ぜ、均一に懸濁した。
（２）それぞれ１５ｍＬねじ口試験管中で、各懸濁液３００μＬに対し１規定の塩酸１０ｍＬを混合し、試験液４〜６を１試験分ずつ調製した。
・懸濁用液としてＬＰＤを用いたもの（試験液４）
・懸濁用液としてＬＰＤとリノール酸エチルの混液（１：１）を用いたもの（試験液５）
・懸濁用液としてＬＰＤとミリスチン酸イソプロピルの混液（１：１）を用いたもの（試験液６）
（３）試験液４〜６を、３７℃に保持した恒温器内で回転振盪器を用いて回転数５ｒｐｍで回転振盪し、試験液の調製後より３、６、９、１２、１５、２０、２４、３０、４８、５３、７２、９６、１６８時間後に、溶出試験液層（上層）を２００μＬサンプリングした。
（４）原子吸光光度法にて１２、２４、１６８時間後のサンプリング液中の白金量を測定した。
白金標準液（１規定の塩酸中に白金１０００ｐｐｍ）を１規定の塩酸で０．０５ｐｐｍ、０．１ｐｐｍ、０．２ｐｐｍに希釈し、標準液とした。試験液４〜６からの各サンプリング液は、１規定の塩酸で適当濃度まで希釈した。これらについて、原子吸光光度計を用いて電熱加熱法で白金量を測定し、３点検量線法により得られた白金濃度から溶出率（％）を求めた。
なお原子吸光光度法の条件は、上述した実験例１と同様にして行った。
【００５２】
図２は、上記実験例４における３種類の試験液４〜６の場合のシス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤の溶出挙動を示すグラフである。図２のグラフにおいて、縦軸は溶出率（％）、横軸は期間（時間）を示す。
【００５３】
実験例５
（１）シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤２０ｍｇ、およびその一水和物結晶２０ｍｇを、それぞれヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステル１ｍＬに加えて直ちに振り混ぜ、均一に懸濁した。
シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（ドコサノイルオキシ）］白金（ＩＩ）２３ｍｇに対してヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステル１ｍＬを加え直ちに振り混ぜ、均一に懸濁した。
（２）それぞれ１５ｍＬねじ口試験管中で、懸濁液３００μＬに対し１規定の塩酸１０ｍＬを混合させ、試験液７〜９を調製した。
・シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤（主薬凍結乾燥製剤）を懸濁させた懸濁液を用いたもの（試験液７）
・シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）・一水和物結晶（主薬・一水和物結晶）を懸濁させた懸濁液を用いたもの（試験液８）
・シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（ドコサノイルオキシ）］白金（ＩＩ）（化合物２）を懸濁させた懸濁液を用いたもの（試験液９）
（３）試験液７〜９を、３７℃に保持した恒温器内で回転振盪器を用いて、回転数５ｒｐｍで回転振盪し、試験液の調製後より３、６、９、１２、１５、２０、２４、３０、４８、５３、７２、９６、１６８時間後に溶出試験液層（上層）を２００μＬサンプリングした。
（４）原子吸光光度法にて１２、２４、１６８時間後のサンプリング液中の白金量を測定した。
白金標準液（１規定の塩酸中に白金１０００ｐｐｍ）を１規定の塩酸で０．０５ｐｐｍ、０．１ｐｐｍ、０．２ｐｐｍに希釈し標準液とした。試験液７〜９からの各サンプリング液は、１規定の塩酸で適当濃度まで希釈した。これらについて、原子吸光光度計を用いて電熱加熱法で白金量を測定し、３点検量線法により得られた白金濃度から溶出率（％）を求めた。
図３は、上記実験例５における３種類の試験液７〜９の場合の、上記主薬凍結乾燥製剤、主薬・一水和物結晶および化合物２それぞれの溶出挙動を示すグラフである。図３のグラフにおいて、縦軸は溶出率（％）、横軸は期間（時間）を示す。
【００５４】
実験例６
無機酸として塩酸水を用いた場合、試験液中においてシス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）（分子量：７６４）は、反応して、ジクロロ（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）白金（ＩＩ）（以下、「ＤＰＣ」と略す。分子量：３８１）となる。適切な試験液の量を決めるために、３７℃におけるＤＰＣの各濃度（０規定、０．０１規定、０．１規定、０．５規定、１規定、２規定、３規定、６規定）における塩酸への溶解度を求めた。
結果を表３に示す。
【００５５】
【表３】
0004141149.tif 000005
【００５６】
たとえば、３７℃におけるＤＰＣの１規定塩酸に対する溶解度は、３３５ｎｍｏｌ／ｍＬであった。
これらの結果から、塩酸を用いた場合の試験液量は、被験物質１μｍｏｌに対して、３ｍＬ以上が望ましいと考えられた。また被験物質に主薬を用いた場合、１ｍｇに対して４ｍＬ以上が望ましいと考えられた。
【００５７】
実験例７
（１）シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤２０ｍｇに対してヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステル（ＬＰＤ）１ｍＬを加え、直ちに振り混ぜ、均一に懸濁した。
（２）５０ｍＬねじ口試験管中で、該懸濁液１００μＬに対し１規定の塩酸５０ｍＬを加えて混合し、試験液を２５試験分調製した。
（３）試験液を、３７℃に保持した恒温器内で回転振盪器を用いて、回転数５ｒｐｍで回転振盪し、４、２４、９６、１６８、２４０時間後には３試験分ずつ、４８、７２時間後には５試験分ずつ、合計２５試験分を各時間に取り出した。各溶出試験液層（上層）からを、下記の（４−１）、（４−２）の２種の定量分析用に、それぞれ１ｍＬずつサンプリングした。
【００５８】
（４−１）原子吸光光度法にてサンプリング液中の白金量を測定した。
白金標準液（１規定の塩酸中に白金１０００ｐｐｍ）を蒸留水で２倍希釈し、これを０．５規定の塩酸で希釈して０．０２ｐｐｍ標準液、０．１ｐｐｍ標準液、０．２ｐｐｍ標準液とした。試験液７〜９からの各サンプリング液（３試験分または５試験分）は、蒸留水で２倍希釈し、これらを０．５規定の塩酸で適当濃度まで希釈した。これらについて、原子吸光光度計を用いて電熱加熱法で白金量を測定し、３点検量線法により得られた白金濃度から溶出率（％）を求めた。
なお原子吸光光度法の条件は、上述した実験例１と同様にして行った。
【００５９】
（４−２）高速液体クロマトグラフ（ＨＰＬＣ）にてサンプリング液中の白金量を測定した。測定は、下記の手順にて行った。
▲１▼標準液（ＳＴＤ溶液）の調製
ＤＰＣ約１０ｍｇを２５０ｍＬ容のメスフラスコに精密に量りとり、ｍｉｌｌｉＱ水を加え、１分程度超音波を照射し完全に溶解後、定容とする。これを５ｍＬ正確に１００ｍＬ容メスフラスコにとり、塩酸をサンプルの塩酸濃度と同一となるように適量加え、ｍｉｌｌｉＱ水で定容としＳＴＤ溶液とした。
［約０．００２ｍｇ／ｍＬ（ＤＰＣ）  ｉｎ  ０．０５Ｎ  ＨＣｌ］（ＤＰＣの保持時間：７．１分付近）
▲２▼サンプル溶液の調製
水相サンプリング液をマイクロピペットにて正確に１００μＬとり、正確に量りとったｍｉｌｌｉＱ水９００μＬと混合して、ＨＰＬＣ用サンプル溶液とした。
▲３▼ＨＰＬＣの測定条件
・カラム：ＳＵＭＩＰＡＸ  ＯＤＳ  Ａ−２１２
・検出器：ＵＶ（２１０ｎｍ）
・流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ
・注入量：４０μＬ
・カラム温度：３０℃
・サンプルクーラー：室温
・シリンジ洗浄液：水・アセトニトリル（１：１）
・移動相：Ａ液−水、Ｂ液−アセトニトリル
表４に示すようにＡ液とＢ液とのグラジエント条件（％）を変化させて、溶出の時間（分）を測定した。
【００６０】
【表４】
0004141149.tif 000006
【００６１】
図４は、上記実験例７における原子吸光光度法、高速液体クロマトグラフそれぞれにて定量分析した、［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤の溶出挙動を示すグラフである。図４のグラフにおいて、縦軸は溶出率（％）、横軸は期間（時間）を示す。
図４に示すように、両方法による差はなかった。シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）は、溶出液に溶出後、反応してＤＰＣとなっていた。
【００６２】
実験例８
無機酸として塩酸、懸濁用液としてヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステルを用いた、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤の溶出試験について、下記の表５に示すＡ〜Ｐの条件にて試験を行い、再現性、試験期間、サンプリング時間の適切性（実験者の作業性）、製剤の識別性の観点から試験条件の最適化を検討した。
【００６３】
【表５】
0004141149.tif 000007
【００６４】
表５中、Ａ〜Ｐの各アルファベットは各試験条件を示し、×は未実施の条件を示す。なおＡ〜Ｐ以外の試験条件は、懸濁濃度が２０ｍｇ／ｍＬ、懸濁液１００μＬに対し塩酸を５０ｍＬ混合という条件とした。
また溶出試験における定量分析は上述した実験例１と同様の条件にて、原子吸光光度法を用いて行った。ただし、標準液は、測定サンプルと同じ塩酸濃度となるように、蒸留水あるいは塩酸の水溶液を用いて希釈した。
図５〜図２０は、それぞれ試験条件Ａ〜Ｐで溶出試験を行った場合の、主薬凍結乾燥製剤および／または主薬・一水和物結晶の溶出挙動を示すグラフである。図５〜図２０に示す各グラフは、いずれも縦軸は累積溶出率（％）を示し、横軸は期間（時間）を示す。
【００６５】
【発明の効果】
上述したように本発明によれば、シス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（Ｒ1）白金（ＩＩ）、特にはそのヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステル懸濁剤、を臨床で安全に応用するために、その品質を確認するための効率的な溶出試験法を提供することができた。
【図面の簡単な説明】
【図１】実験例１における３種類の試験液１〜３を用いた場合のシス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤の溶出挙動を示すグラフであり、縦軸は累積溶出率（％）、横軸は期間（週間）を示す。
【図２】実験例４における３種類の試験液４〜６の場合のシス［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤の溶出挙動を示すグラフであり、縦軸は溶出率（％）、横軸は期間（時間）を示す。
【図３】実験例５における３種類の試験液７〜９の場合の、主薬凍結乾燥製剤、主薬・一水和物結晶および化合物２それぞれの溶出挙動を示すグラフであり、縦軸は溶出率（％）、横軸は期間（時間）を示す。
【図４】実験例７における原子吸光光度法、高速液体クロマトグラフそれぞれにて定量分析した、［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤の溶出挙動を示すグラフであり、縦軸は溶出率（％）、横軸は期間（時間）を示す。
【図５】表５における条件Ａ（３７℃、静置、１．０規定の塩酸水を使用）にて溶出試験を行った場合の、［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤の溶出挙動を示すグラフであり、縦軸は累積溶出率（％）、横軸は期間（時間）を示す。
【図６】表５における条件Ｂ（３７℃、５ｒｐｍ、０．５規定の塩酸水を使用）にて溶出試験を行った場合の、［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤の溶出挙動を示すグラフであり、縦軸は累積溶出率（％）、横軸は期間（時間）を示す。
【図７】表５における条件Ｃ（３７℃、５ｒｐｍ、１．０規定の塩酸水を使用）にて溶出試験を行った場合の、［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤、およびその一水和物結晶の溶出挙動を示すグラフであり、縦軸は累積溶出率（％）、横軸は期間（時間）を示す。
【図８】表５における条件Ｄ（３７℃、１０ｒｐｍ、０．３規定の塩酸水を使用）にて溶出試験を行った場合の、［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤の溶出挙動を示すグラフであり、縦軸は累積溶出率（％）、横軸は期間（時間）を示す。
【図９】表５における条件Ｅ（３７℃、１５ｒｐｍ、０．３規定の塩酸水を使用）にて溶出試験を行った場合の、［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤、およびその一水和物結晶の溶出挙動を示すグラフであり、縦軸は累積溶出率（％）、横軸は期間（時間）を示す。
【図１０】表５における条件Ｆ（３７℃、１５ｒｐｍ、０．５規定の塩酸水を使用）にて溶出試験を行った場合の、［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤の溶出挙動を示すグラフであり、縦軸は累積溶出率（％）、横軸は期間（時間）を示す。
【図１１】表５における条件Ｇ（３７℃、２５ｒｐｍ、０．１規定の塩酸水を使用）にて溶出試験を行った場合の、［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤の溶出挙動を示すグラフであり、縦軸は累積溶出率（％）、横軸は期間（時間）を示す。
【図１２】表５における条件Ｈ（３７℃、２５ｒｐｍ、０．２規定の塩酸水を使用）にて溶出試験を行った場合の、［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤の溶出挙動を示すグラフであり、縦軸は累積溶出率（％）、横軸は期間（時間）を示す。
【図１３】表５における条件Ｉ（３７℃、２５ｒｐｍ、０．３規定の塩酸水を使用）にて溶出試験を行った場合の、［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤の溶出挙動を示すグラフであり、縦軸は累積溶出率（％）、横軸は期間（時間）を示す。
【図１４】表５における条件Ｊ（３７℃、２５ｒｐｍ、０．５規定の塩酸水を使用）にて溶出試験を行った場合の、［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤の溶出挙動を示すグラフであり、縦軸は累積溶出率（％）、横軸は期間（時間）を示す。
【図１５】表５における条件Ｋ（３７℃、４０ｒｐｍ、０．５規定の塩酸水を使用）にて溶出試験を行った場合の、［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤の溶出挙動を示すグラフであり、縦軸は累積溶出率（％）、横軸は期間（時間）を示す。
【図１６】表５における条件Ｌ（３７℃、４０ｒｐｍ、１．０規定の塩酸水を使用）にて溶出試験を行った場合の、［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤の溶出挙動を示すグラフであり、縦軸は累積溶出率（％）、横軸は期間（時間）を示す。
【図１７】表５における条件Ｍ（２５℃、１５ｒｐｍ、０．５規定の塩酸水を使用）にて溶出試験を行った場合の、［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤、およびその一水和物結晶の溶出挙動を示すグラフであり、縦軸は累積溶出率（％）、横軸は期間（時間）を示す。
【図１８】表５における条件Ｎ（２５℃、１５ｒｐｍ、１．０規定の塩酸水を使用）にて溶出試験を行った場合の、［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤の溶出挙動を示すグラフであり、縦軸は累積溶出率（％）、横軸は期間（時間）を示す。
【図１９】表５における条件Ｏ（２５℃、４０ｒｐｍ、０．５規定の塩酸水を使用）にて溶出試験を行った場合の、［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤の溶出挙動を示すグラフであり、縦軸は累積溶出率（％）、横軸は期間（時間）を示す。
【図２０】表５における条件Ｐ（２５℃、４０ｒｐｍ、１．０規定の塩酸水を使用）にて溶出試験を行った場合の、［（（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’）ビス（テトラデカノイルオキシ）］白金（ＩＩ）の凍結乾燥製剤の溶出挙動を示すグラフであり、縦軸は累積溶出率（％）、横軸は期間（時間）を示す。
【図１】
0004141149.tif 000008
【図２】
0004141149.tif 000009
【図３】
0004141149.tif 000010
【図４】
0004141149.tif 000011
【図５】
0004141149.tif 000012
【図６】
0004141149.tif 000013
【図７】
0004141149.tif 000014
【図８】
0004141149.tif 000015
【図９】
0004141149.tif 000016
【図１０】
0004141149.tif 000017
【図１１】
0004141149.tif 000018
【図１２】
0004141149.tif 000019
【図１３】
0004141149.tif 000020
【図１４】
0004141149.tif 000021
【図１５】
0004141149.tif 000022
【図１６】
0004141149.tif 000023
【図１７】
0004141149.tif 000024
【図１８】
0004141149.tif 000025
【図１９】
0004141149.tif 000026
【図２０】
0004141149.tif 000027