(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
酸化チタンと黄色酸化鉄および／または赤色酸化鉄とを含む軟カプセル剤皮に、１α−ヒドロキシビタミンＤ３、２４−ヒドロキシビタミンＤ３、２５−ヒドロキシビタミンＤ３、１α，２４−ジヒドロキシビタミンＤ３、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３、１α，２４，２５−トリヒドロキシビタミンＤ３、２２−オキサ−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３、２β−（３−ヒドロキシプロピルオキシ）−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３の中から選ばれる活性型ビタミンＤ３類の油性溶液が被包されてなる軟カプセル剤。
【請求項２】
酸化チタンとカラメルとを含む軟カプセル剤皮に、１α−ヒドロキシビタミンＤ３、２４−ヒドロキシビタミンＤ３、２５−ヒドロキシビタミンＤ３、１α，２４−ジヒドロキシビタミンＤ３、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３、１α，２４，２５−トリヒドロキシビタミンＤ３、２２−オキサ−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３、２β−（３−ヒドロキシプロピルオキシ）−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３の中から選ばれる活性型ビタミンＤ３類の油性溶液が被包されてなる軟カプセル剤。
【請求項３】
油性溶液基剤が中鎖脂肪酸トリグリセリド、プロピレングリコール脂肪酸ジエステル、トリアセチン、ポリエチレングリコール、植物油の中から選ばれた少なくとも一種であることを特徴とする請求項１または２に記載の軟カプセル剤。
【請求項４】
油性溶液基剤が中鎖脂肪酸トリグリセリドからなることを特徴とする請求項３記載の軟カプセル剤。
【請求項５】
活性型ビタミンＤ３類が１α−ヒドロキシビタミンＤ３である請求項１〜４のいずれか１項記載の軟カプセル剤。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は活性型ビタミンＤ３類の軟カプセル剤に関する。
背景技術
１α−ヒドロキシコレカルシフェロール（１α−ヒドロキシビタミンＤ３）、１α，２５−ジヒドロキシコレカルシフェロール（１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３）などの活性型ビタミンＤ３類は、小腸におけるカルシウムの吸収促進作用、骨における骨代謝の調節作用、副甲状腺における副甲状腺ホルモン産生の調節、腫瘍細胞における分化誘導作用、免疫抑制作用などを有している。したがってカルシウム吸収が低下している腎不全、骨代謝の異常により起こる骨粗鬆症、副甲状腺機能亢進症、悪性腫瘍、自己免疫疾患などに有効とされている。
しかし、これらの化合物はいずれも、光、熱に対して不安定であるため、医薬として利用するためには、光、熱に対する安定性を確保することが重要である。
また、活性型ビタミンＤ３類を活性成分とする製剤は、疾病や症状に応じて各種用量が用いられるため、活性成分の含量が異なる製剤が利用される。この場合、医療過誤を防ぐためにも、各製剤において活性成分の含量が識別しやすいことが重要である。
さらに、活性型ビタミンＤ３類は数十μｇ以下という極めて少ない使用量で効果を発揮するため、製剤化に際しては含量の均一性を確保することが重要である。
従来、活性型ビタミンＤ３類の製剤としては、活性型ビタミンＤ３類の油性溶液が、０．０１重量％水溶液で波長３１０ｍμにおける光透過率が１０％以下であり、かつ可視部領域に吸収をもつ紫外線吸収剤を剤皮の１．０重量％以下で含有する剤皮で被覆されてなる活性型ビタミンＤ３類の軟カプセル剤（特開昭５４−８４０２３号公報）が知られている。この他、光不安定な化合物を安定化する軟カプセル剤として、ゼラチン剤皮に特定波長の光を吸収する染料及び不透明化剤を均一に分散せしめた軟カプセル剤（特開昭４８−２８６２１号公報）、軟カプセル剤皮に食用黄色５号を均一に分散せしめ、この軟カプセル中の光不安定な化合物を安定ならしめた軟カプセル剤（特開昭５５−２２６４５号公報）、剤皮中に食用黄色４号等の食用タール系色素を分散せしめて軟カプセル化する方法（特開昭５８−１３５１１号公報）等が報告されている。しかしながら、これらの開示技術で用いられる可視部に吸収を持つ紫外線吸収剤あるいは染料は、タール系合成色素や合成着色料であり、最近の学術の進歩によりこれらの安全性が疑問視されている。さらに、各国ごとに使用できる色素の種類が異なっており、国際的に供給する上でも問題がある。
一方、タール系合成色素あるいは合成着色料を用いない活性型ビタミンＤ３類を安定化する方法としては、剤皮中に、カカオ色素、アピゲニン、カルミン酸、カルミン酸レーキ、ラツカイン酸、シコニン等の天然色素を含有せしめて軟カプセル化する方法（特開昭６２−５３９２３号公報）が知られている。しかしながら、これらの天然色素は原料ロットによって色調にばらつきがあり、またこれらの天然色素自体の安定性に問題があるため、恒常的に均一な色調を保つことが難しい。
また、無機の化合物を用いて活性型ビタミンＤ３類を安定化する方法としては、剤皮中に酸化チタンの少なくとも８５％以上が粒子径０．１μｍ以下の微粒子酸化チタンを含有せしめた軟カプセル剤（特開昭６３−１６６８２４号公報）が知られている。しかし、酸化チタンの色調は白色であるので、活性成分の含量の識別性が不十分であり、識別性をよくするためにはさらに何らかの着色剤を用いる必要がある。
上記のタール系色素、合成着色料、天然色素以外の着色料としては、酸化鉄、カラメルなどが知られている。酸化鉄を用いた軟カプセル剤としては、黄色酸化鉄、赤色酸化鉄を含有する剤皮で被覆されてなる活性型ビタミンＤ３類の軟カプセル剤が特開昭５４−８４０２３号公報に記載されているが、熱に対する安定性が十分でないと報告されている。これに対し、軟カプセル剤皮中で活性成分がベンガラ（三二酸化鉄）と直接接触することによる活性成分の不安定化を防止した方法として、マイクロカプセル中にベンガラを内包してなるマイクロカプセル化ベンガラを剤皮中に分散させ、ベンガラとカプセル内の薬剤との直接接触を防止した、遮光性カプセル製剤（特開平１−１５７９１１号公報）が報告されているが、ベンガラを内包したマイクロカプセルの調製など操作が煩雑であり、実用生産に用いるには適当とは言えない。この他、カラメルを用いて着色したゼラチン皮膜（特開昭５５−１２７４４８号公報）が知られているが、活性型ビタミンＤ３類の光安定性あるいは熱安定性に及ぼす作用については知られていない。
発明の開示
本発明は、人体に対して安全性の高い物質を用いて、活性型ビタミンＤ３類の光安定性および熱安定性を確保し、活性物質含量の違いが識別しやすく、実用生産に適した活性型ビタミンＤ３類の軟カプセル剤を提供するものである。
本発明者らは、鋭意研究を行った結果、白色顔料と黄色酸化鉄および／または赤色酸化鉄、あるいは白色顔料とカラメルを剤皮に含有させることにより、活性型ビタミンＤ３類の光安定性および熱安定性に優れ、識別性がよく、実用生産に適した方法で製造することができる活性型ビタミンＤ３類の軟カプセル剤が得られることを見出し、本発明を完成させるに至った。
すなわち、本発明は、白色顔料と黄色酸化鉄および／または赤色酸化鉄とを含む軟カプセル剤皮に、活性型ビタミンＤ３類の油性溶液が被包されてなる軟カプセル剤を提供するものである。
また、本発明は、白色顔料とカラメルとを含む軟カプセル剤皮に、活性型ビタミンＤ３類の油性溶液が被包されてなる軟カプセル剤を提供するものである。
発明を実施するための好ましい形態
なお、本出願が主張する優先権の基礎となる出願である特願平１１−２４４８２８号の開示は全て引用により本明細書の中に取り込まれる。
本発明において用いられる活性型ビタミンＤ３類としては、例えば、１α−ヒドロキシビタミンＤ３、２４−ヒドロキシビタミンＤ３、２５−ヒドロキシビタミンＤ３、１α，２４−ジヒドロキシビタミンＤ３、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３、１α，２４，２５−トリヒドロキシビタミンＤ３、２２−オキサ−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３、２β−（３−ヒドロキシプロピルオキシ）−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３などが挙げられるが、特に１α−ヒドロキシビタミンＤ３、２β−（３−ヒドロキシプロピルオキシ）−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３が好適に用いられる。
本発明において用いられる白色顔料としては、例えば、酸化チタン、炭酸カルシウム、アルミナなどがあげられ、酸化チタン、炭酸カルシウムが好ましく、さらに酸化チタンが好ましい。
本発明において用いられる酸化チタンとしては、例えばアナターゼ型、ルチル型などの二酸化チタン（ＴｉＯ２）があげられ、いずれも市販品を好適に用いることができるが、アナターゼ型が好ましい。ここで、酸化チタンの粒子径には特に制限はなく、一般には平均粒子径が０．２〜０．５μｍのものを用いるが、さらに粒子径が小さいものでも同様に使用することができる。また、特開平１１−２２２４４２号公報に記載されているような耐変色性を向上させる処理を施した酸化チタンを用いてもよい。用いる酸化チタンの含量は、乾燥後の含量として９８．５重量％以上であることが好ましい。
白色顔料の使用量は、剤皮構成成分の全量に対して、０．１重量％以上が好ましく、特に０．５重量％以上が好ましい。また、剤皮構成成分の全量に対して、１．５重量％以下が好ましく、特に１．０重量％以下が好ましい。
ここで、本発明において用いられる剤皮構成成分の全量とは、剤皮の原料から水を除いたものをいう。
本発明において用いられる黄色酸化鉄はＦｅ２Ｏ３（Ｈ２Ｏ）（ｙｅｌｌｏｗ  ｉｒｏｎ  ｏｘｉｄｅ）であり、黄色三二酸化鉄ともよばれる。黄色酸化鉄としては、市販品を好適に用いることができるが、強熱物中の三二酸化鉄の含量が９８．０重量％以上であることが好ましい。
本発明において用いられる赤色酸化鉄はＦｅ２Ｏ３（ｒｅｄ  ｉｒｏｎ  ｏｘｉｄｅ）であり、三二酸化鉄あるいはベンガラともよばれる。市販品を好適に用いることができるが、強熱物中の三二酸化鉄の含量が９８．０重量％以上であることが好ましい。
本発明において、剤皮構成成分に白色顔料と黄色酸化鉄および／または赤色酸化鉄とを含む場合には、剤皮に添加する白色顔料、黄色酸化鉄および／または赤色酸化鉄の添加量は、剤皮の遮光性、耐熱性、所望の色調に応じて調節するが、白色顔料、黄色酸化鉄および赤色酸化鉄の合計は、剤皮構成成分の全量に対して０．１１重量％以上であることが好ましく、０．５１重量％以上であることがさらに好ましい。また、剤皮構成成分の全量に対して、１．５１重量％以下であることが好ましく、１．１重量％以下であることがさらに好ましい。また、剤皮に添加する黄色酸化鉄と赤色酸化鉄の合計は、０．０１重量％以上であればよく、また、１．０重量％以下であることが好ましい。ここで、黄色酸化鉄と赤色酸化鉄のうち、いずれか一種を用いてもよいし、二種を共に用いてもよい。
また、色調を調節するために、カラメルなどの色素を更に加えることもできる。
本発明において用いられるカラメルとは、たとえば、ブドウ糖、白糖、転化糖、水飴、デンプン加水分解物、糖蜜などの食用炭水化物を熱処理したものである。ここで、カラメルの分子量には特に制限はないが、たとえば、特開昭５５−１２７４４８号公報に記載されているような特定の分子量以下の成分を除いたカラメルを用いてもよい。
本発明において、剤皮にカラメルを含む場合には、剤皮に添加するカラメルの添加量は、剤皮の所望の色調および強度に応じて調節するが、剤皮構成成分の全量に対して０．０５〜１．５重量％が好ましい。剤皮にカラメルを含む場合には、剤皮にさらに白色顔料を加えることが好ましく、剤皮に添加する白色顔料とカラメルの合計は、剤皮の所望の色調および強度に応じて調節するが、剤皮構成成分の全量に対して０．１５重量％以上であることが好ましく、また１．５５重量％以下であることが好ましい。また、剤皮構成成分に白色顔料とカラメルを含む場合には、剤皮構成成分として、さらに黄色酸化鉄および／または赤色酸化鉄を含んでもよく、この場合、剤皮構成成分の全量に対する白色顔料とカラメルと黄色酸化鉄と赤色酸化鉄の合計が１．５６重量％以下であることが好ましい。
軟カプセル剤皮のその他の構成成分としては、白色顔料と黄色酸化鉄および／または赤色酸化鉄、あるいは、白色顔料およびカラメル等と共に軟カプセル剤皮を構成できるものであればよく、各種ゼラチン、各種可塑剤などがあげられ、これに各種添加剤を加えてもよい。各種ゼラチンには、例えば、牛、豚などの動物由来のゼラチンなどを用いることができる。ここでいう各種ゼラチンとは、アルカリ処理ゼラチン、酸処理ゼラチン、化学修飾ゼラチンなどが含まれ、各種ゼラチン単独あるいは混合物として用いることができる。
アルカリ処理ゼラチンとはゼラチンの原料であるコラーゲン、オセインなどを石灰液などのアルカリ性物質にて加水分解し抽出したゼラチンであり、酸処理ゼラチンはコラーゲン、オセインなどを希塩酸、希硫酸などの酸性物質にて加水分解したゼラチンである。化学修飾ゼラチンとしてはゼラチンのアミノ酸とコハク酸、フタル酸、酢酸などの物質とを反応させて製造したものが一般的であるが、これに限定されるものではない。また、化学修飾ゼラチンに用いるゼラチンはアルカリ処理ゼラチンでも酸処理ゼラチンであってもよい。
各種可塑剤としてはグリセリン、ソルビトール、マルトース、グルコース、マルチトース、ショ糖、キシリトール、マンニトール、エリトリトール、ポリエチレングリコール類（分子量４００〜８０００）などがあげられる。
各種添加剤としては、パラオキシ安息香酸エチル、パラオキシ安息香酸プロピル、ソルビン酸カリウムなどがあげられる。
剤皮の厚さは、軟カプセル剤が十分な強度を保持し、かつ軟カプセル剤を投与した際、適当な時期に崩壊し活性型ビタミンＤ３類を放出できる厚さであればよいが、２００μｍ〜６００μｍが好ましい。
白色顔料、黄色酸化鉄、赤色酸化鉄は剤皮中に均一に分散させることが好ましい。分散させる方法としては、例えば白色顔料と黄色酸化鉄および／または赤色酸化鉄との混合懸濁液、または、白色顔料とカラメルとの混合液をゼラチン溶液に加える方法や、白色顔料をゼラチン溶液に加えて分散させた後、黄色酸化鉄および／または赤色酸化鉄、または、カラメルを加える方法などがあげられる。ここで、添加順序に特に制限はない。これら白色顔料、黄色酸化鉄、赤色酸化鉄およびカラメルをゼラチン溶液に均一に分散させるには、通常使用される攪拌、分散方法および装置を用いることができる。
油性溶液基剤としては、軟カプセル剤を製造可能で、活性型ビタミンＤ３類の安定性を損わないものであればよく、例えば脂肪酸のグリセリド類、プロピレングリコール脂肪酸ジエステル、トリアセチン、ポリエチレングリコール、植物油などがあげられ、脂肪酸のグリセリド類が好ましく、中鎖脂肪酸トリグリセリドが特に好ましい。これらの油性基剤は一種あるいは二種以上を混合して用いてもよい。ここで中鎖脂肪酸トリグリセリドとは、脂肪酸の炭素鎖長が８〜１０である脂肪酸トリグリセリドを主成分とするものをいう。植物油としてはオリーブ油、大豆油、ナタネ油、ヒマシ油などがあげられ、これらの一種あるいは二種以上を混合して用いてもよい。
本発明の軟カプセル剤は、上記の活性型ビタミンＤ３類の油性溶液を、例えばロータリー法、滴下法などの連続式軟カプセル製造装置を用いて、上記の軟カプセル剤皮中に被包することにより製造することができる。
実施例
以下の実施例により本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこの実施例によりなんら制限されるものではない。
（実施例１）
１α−ヒドロキシビタミンＤ３を無水エタノールに溶解し１．４４ｍｇ／ｍｌの濃度の溶液を得、これに中鎖脂肪酸トリグリセリド（日清製油）を加えて４．８μｇ／ｍｌの濃度の１α−ヒドロキシビタミンＤ３油性溶液を得た。また、ゼラチン（新田ゼラチン）３８重量部、グリセリン（鹿島ケミカル）１１重量部、ソルビン酸カリウム０．１５重量部、精製水５０重量部に、下記の表１に示す量の酸化チタン（Ａ−１００、石原産業）、黄色酸化鉄（癸巳化成株式会社）および赤色酸化鉄（癸巳化成株式会社）を加えたゼラチン溶液を調製した。上記の酸化チタン、黄色酸化鉄および／または赤色酸化鉄を加えたゼラチン溶液で、連続式軟カプセル製造機（スフェレックス、フロイント産業）を用いて、上記１α−ヒドロキシビタミンＤ３油性溶液に剤皮を施し、タンブラー型乾燥機を用いて乾燥し、軟カプセル剤を調製した。
得られた軟カプセル剤は、１カプセルあたりの平均重量１０１ｍｇ、内溶液量は平均６１ｍｇであった。これらのカプセルの色調および他の実施例で得られたカプセルとの識別性を官能試験（目視検査）にて評価したところ良好であった。
（比較例１）
ゼラチン溶液が酸化チタン、黄色酸化鉄、赤色酸化鉄のいずれも含まないこと以外は、上記の実施例１と同様にして、軟カプセル剤を調製した。
得られた軟カプセル剤は、１カプセルあたりの平均重量１００ｍｇ、内溶液量は平均６０ｍｇであった。
（比較例２）
ゼラチン溶液に酸化チタン、黄色酸化鉄および赤色酸化鉄を加える代わりに、下記表１に示す量の酸化チタンを加えたこと以外は、実施例１と同様にして軟カプセル剤を製造した。
得られた軟カプセル剤は、１カプセルあたりの平均重量１０１ｍｇ、内溶液量は平均６３ｍｇであった。
（実施例２）
ゼラチン溶液に酸化チタン、黄色酸化鉄および赤色酸化鉄を加える代わりに、下記表１に示す量の酸化チタンと黄色酸化鉄を加えたこと以外は、実施例１と同様にして軟カプセル剤を製造した。
得られた軟カプセル剤は、１カプセルあたりの平均重量１０６ｍｇ、内溶液量は平均６４ｍｇであった。これらのカプセルの色調および識別性を実施例１と同様に評価したところ、良好であった。
（実施例３）
ゼラチン溶液に酸化チタン、黄色酸化鉄、赤色酸化鉄を加える代わりに、下記表１に示す量の酸化チタンと黄色酸化鉄を加えたこと以外は、実施例１と同様にして軟カプセル剤を製造した。
得られた軟カプセル剤は、１カプセルあたりの平均重量１００ｍｇ、内溶液量は平均６０ｍｇであった。これらのカプセルの色調および識別性を実施例１と同様に評価したところ、良好であった。
（実施例４）
ゼラチン溶液に酸化チタン、黄色酸化鉄、赤色酸化鉄を加える代わりに、下記表１に示す量の酸化チタンとカラメルを加えたこと以外は、実施例１と同様にして軟カプセル剤を製造した。
得られた軟カプセル剤は、１カプセルあたりの平均重量１０３ｍｇ、内溶液量は平均６３ｍｇであった。これらのカプセルの色調および識別性を実施例１と同様に評価したところ、良好であった。
（実施例５）
ゼラチン溶液に酸化チタン、黄色酸化鉄、赤色酸化鉄を加える代わりに、下記表１に示す量の酸化チタンとカラメルを加えたこと以外は、実施例１と同様にして軟カプセル剤を製造した。
得られた軟カプセル剤は、１カプセルあたりの平均重量１００ｍｇ、内溶液量は平均６１ｍｇであった。これらのカプセルの色調および識別性を実施例１と同様に評価したところ、良好であった。
0004070459.tif 000002
上述の表１においては、各数値は、剤皮の原料（水を除く）全量に対する各成分の添加量（重量％）を示す。−はその成分を添加しないことを示す。
（実施例６）
２β−（３−ヒドロキシプロピルオキシ）−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３を無水エタノールに溶解し０．４８８ｍｇ／ｍｌの濃度の溶液を得、これに中鎖脂肪酸トリグリセリド（日清製油）を加えて８．０μｇ／ｍｌの濃度の２β−（３−ヒドロキシプロピルオキシ）−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３油性溶液を得た。また、ゼラチン（新田ゼラチン）３８重量部、グリセリン（鹿島ケミカル）１１重量部、精製水５０重量部に、下記表２に示す量の酸化チタン（Ａ−１００、石原産業）および赤色酸化鉄（癸巳化成株式会社）を加えたゼラチン溶液を調製した。連続式軟カプセル製造機を用いて、上記２β−（３−ヒドロキシプロピルオキシ）−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３油性溶液に、上記の酸化チタンおよび赤色酸化鉄を加えたゼラチン溶液で剤皮を施し、軟カプセル剤を製造した。
得られた軟カプセル剤は、１カプセルあたりの平均重量１００ｍｇ、内溶液量は平均６０ｍｇであった。これらのカプセルの色調および識別性を実施例１と同様に評価したところ、良好であった。
（比較例３）
ゼラチン溶液が酸化チタン、赤色酸化鉄のいずれも含まないこと以外は、上記の実施例６と同様にして、軟カプセル剤を調製した。
得られた軟カプセル剤は、１カプセルあたりの平均重量１００ｍｇ、内溶液量は平均６０ｍｇであった。
（比較例４）
ゼラチン３５重量部、グリセリン１２重量部、精製水５３重量部に、下記表２に示す量の酸化チタンを含むゼラチン溶液を使用する以外は、実施例６と同様にして、軟カプセル剤を製造した。
得られた軟カプセル剤は、１カプセルあたりの平均重量１７０ｍｇ、内溶液量は平均１００ｍｇであった。
0004070459.tif 000003
上述の表２においては、各数値は、剤皮の原料（水を除く）全量に対する各成分の添加量（重量％）を示す。−はその成分を添加しないことを示す。
（試験例１）光加速試験１
上述の実施例１〜５および比較例１、２において製造した軟カプセル剤を、３５００ルックスの蛍光灯下に１７１時間放置した後（積算照度６０万ルックス・時）、高速液体クロマトグラフィーを用いて、下記の測定条件により、１α−ヒドロキシビタミンＤ３の残存率を求めた。また、目視により光照射後の軟カプセル剤の色調を光照射を行わない軟カプセル剤と比較し、色調の安定性を評価した。
残存率の測定条件
装置：島津製作所製高速液体クロマトグラフィー（オートインジェクタ−ＳＩＬ−１０Ａ、送液ユニット  ＬＣ−１０ＡＤ、システムコントローラー  ＳＣＬ−１０Ａ、検出器  ＳＰＤ−１０Ａ、カラムオーブン  ＣＴＯ−１０Ａ／１０ＡＣ、クロマトパック  Ｃ−Ｒ７Ａｐｕｌｓ）
カラム：Ｗａｔｅｒｓ製ＳｙｍｍｅｔｒｙＣ１８  ３．５ｕｍ  ４．６×１５０ｍｍ
試料量：２００μＬ（試料濃度  約１２５ｎｇ／ｍｌ）
カラム温度：２５℃
移動相：アセトニトリル：水：テトラヒドロフラン：酢酸＝１３５０：４００：２５０：１（Ｖ／Ｖ）
流速：１ｍｌ／ｍｉｎ
検出器：ＵＶ検出器  ２６５ｎｍ
測定結果を表３に示した。この結果より、本発明の軟カプセル剤は、優れた光安定性があることが認められた。また、本発明の軟カプセル剤は、光照射による色調の安定性に優れていることが確認された。
0004070459.tif 000004
（試験例２）光加速試験２
上述の実施例６および比較例３、４において製造した軟カプセル剤を、３０００ルックスの蛍光灯下に２００時間放置した後（積算照度６０万ルックス・時）、高速液体クロマトグラフィーを用いて、下記の測定条件により、２β−（３−ヒドロキシプロピルオキシ）−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３の残存率を求めた。また、目視により光照射後の軟カプセル剤の色調を光照射を行わない軟カプセル剤と比較し、色調の安定性を評価した。
残存率の測定条件
装置：島津製作所製高速液体クロマトグラフィー（オートインジェクタ−ＳＩＬ−１０Ａ、送液ユニット  ＬＣ−１０ＡＤ、システムコントローラー  ＳＣＬ−１０Ａ、検出器  ＳＰＤ−１０Ａ、カラムオーブン  ＣＴＯ−１０ＡＣ）
解析装置：Ｗａｔｅｒｓ  ミレニアム３２
カラム：ＹＭＣ  Ａ−００４  ＳＩＬ  ５ｕｍ  ４．６×３００ｍｍ
試料量：５０μＬ  試料濃度  約５μｇ／ｍｌ）
カラム温度：２５℃
移動相：ジクロロメタン：メタノール：酢酸：水＝１０００：１５：１３：３．５（Ｖ／Ｖ）
流速：１．８ｍｌ／ｍｉｎ
検出器：ＵＶ検出器  ２６５ｎｍ
測定結果を表４に示した。この結果より、本発明の軟カプセル剤は、優れた光安定性があることが認められた。また、本発明の軟カプセル剤は、光照射による色調の安定性に優れていることが確認された。
0004070459.tif 000005
（試験例３）熱加速試験
実施例１〜５および比較例１、２において製造した軟カプセル剤を５０℃で１ヶ月間保存した後、高速液体クロマトグラフィーを用いて上述の試験例１と同様の測定条件で１α−ヒドロキシビタミンＤ３の残存率を求めた。測定結果を表５に示した。この結果より、本発明の軟カプセル剤は十分な熱安定性があることが認められた。
0004070459.tif 000006
産業上の利用の可能性
本発明の軟カプセル剤は、（ｉ）光安定性および熱安定性に優れている、（ｉｉ）色調を調節できるため識別性がよい、（ｉｉｉ）使用する白色顔料、黄色酸化鉄、赤色酸化鉄、カラメルは人体に対する安全性が広く認められており、安全性に優れている、（ｉｖ）色調の安定性に優れている（ｖ）実用生産に適している、などの優れた効果を有し、活性型ビタミンＤ３類の軟カプセル剤として有用である。