(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
次式Ｉ：
【化１】
0004201360.tif 000003
（式中、Ｒ１がＨもしくはＣＨ２ＯＳＯ３−であり、Ｒ２が（１−６Ｃ）アルキルであり、Ｒ３がＳＯ３−であり、Ｒ４がＯＳＯ３−であり、ｎが０もしくは１であり、且つ、ｐが１もしくは２である）を有する炭水化物誘導体、又は、その医薬上許容可能な塩。
【請求項２】
Ｒ２がメチルである請求項１に記載の炭水化物誘導体。
【請求項３】
ｎが１であり且つｐが１である請求項１又は２に記載の炭水化物誘導体。
【請求項４】
Ｒ１がＣＨ２ＯＳＯ３−である請求項１から３のいずれか一項に記載の炭水化物誘導体。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、抗血栓活性を有する炭水化物誘導体、この炭水化物誘導体を含む医薬組成物、及び医薬の製造のためのこの炭水化物誘導体の使用に係わる。
【０００２】
【従来の技術】
例えばＥＰ８４，９９９に開示されている硫酸化グリコサミノグリカン誘導体のような抗血栓活性を有する炭水化物誘導体は公知である。改善された薬理学的特性を有する他の硫酸化グリコサミノグリカン関連炭水化物誘導体が、ＥＰ  ５２９，７１５に開示されている。これらの炭水化物誘導体は、グリコサミノグリカンの特徴的な官能基（遊離ヒドロキシル基、Ｎ−硫酸基、及び、Ｎ−アセチル基）を持たない。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、抗血栓活性を有する新規な炭水化物誘導体を提供することにある。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
本発明の炭水化物誘導体は次式Ｉを有する。
【０００５】
【化２】
0004201360.tif 000002
【０００６】
前式中で、Ｒ1 がＨもしくはＣＨ2 ＯＳＯ3 - であり、
Ｒ2 とＲ3 が独立にＨ、（１−６Ｃ）アルキルもしくはＳＯ3 - であり、
Ｒ4 がＯＳＯ3 - もしくはＮＨＳＯ3 - であり、
ｎが０もしくは１であり、且つ、
ｐが１もしくは２である。
【０００７】
本発明の炭水化物誘導体又はその医薬上許容可能な塩が、非還元末端の４位にグリセロール様もしくはグリコール様基を持たないサッカリドの抗Ｘａ活性よりも著しく高い抗Ｘａ活性を有することが現在発見されている。
【０００８】
第Ｘａ因子は、血液凝固カスケードにおいて重要な役割を演じる。この因子は、凝固カスケードの最終段階を調節するトロンビンの形成を触媒する。トロンビンの最も重要な機能は、フィブリノーゲンを切断してフィブリンモノマーが生じ、これらのフィブリンモノマーは架橋によって不溶性ゲル（即ち、フィブリンクロット）を形成する。
【０００９】
本発明の化合物は、トロンビン仲介疾病とトロンビン関連疾病を治療及び予防する上で有効である。こうした疾病には、凝固カスケードが活性化される様々な血栓症状態と前血栓症状態が含まれ、例えば、深静脈血栓症、肺塞栓症、血栓静脈炎、血栓症又は塞栓症に起因する動脈閉塞、血管形成術又は血栓融解の間又はその後の動脈再閉塞、動脈損傷又は浸潤性心臓病処置後の再発狭窄症、術後静脈血栓症又は塞栓症、急性又は慢性アテローム性動脈硬化症、発作、心筋梗塞、癌及び転移、並びに、神経変性疾病等である。本発明の炭水化物誘導体は、平滑筋細胞増殖の阻害剤としても使用可能であり、更に、脈管形成、癌、及び、レトロウイルス（例えば、ＨＩＶ）感染症の治療にも使用可能である。
【００１０】
更に、本発明の化合物は、透析と手術時に必要であるような体外血液循環における抗凝固物質又は抗凝固コーティングとしても使用可能である。
【００１１】
本発明の化合物はインビトロ又はエキソビボ抗凝固物質としても使用可能である。
【００１２】
【発明の実施の形態】
本発明による好ましい炭水化物誘導体は、式Ｉ中のＲ2 が（１−６Ｃ）アルキルであり、Ｒ3 がＳＯ3 - であり、Ｒ4 がＯＳＯ3 - であり、且つ、Ｒ1 、ｎ、ｐが上記定義の通りである炭水化物誘導体又はその医薬上許容可能な塩である。
【００１３】
より好ましい炭水化物誘導体は、式Ｉ中のＲ1 がメチルである化合物である。特に好ましい炭水化物誘導体は、式Ｉ中のｎが１であり且つｐが１である化合物である。最も好ましいものは、式Ｉ中のＲ1 がＣＨ2 ＯＳＯ3 - である化合物である。
【００１４】
「（１−６Ｃ）アルキル」は、メチル、エチル、イソプロピル、第三ブチル、イソペンチル、ヘキシル等のような、１個から６個の炭素原子を有する直鎖又は分枝鎖アルキル基を意味する。好ましいアルキル基は、メチル、エチル、（イソ）プロピル、ｎ−ブチル、及び第三ブチルのような、（１−４Ｃ）アルキル基である。最も好ましいアルキル基はメチルである。
【００１５】
荷電部分を補償する対イオンは、水素、又は、より好ましくはアルカリ金属もしくはアルカリ土類金属（例えば、ナトリウム、カルシウム、もしくはマグネシウム）イオンのような医薬上許容可能な対イオンである。
【００１６】
本発明の炭水化物誘導体は、Ｗｅｓｔｅｒｄｕｉｎ  Ｐ．，Ｂｉｏｏｒｇ．ａｎｄ  Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２，１２６７−１２８０，１９９４に記述されている方法によって製造することが可能な保護基を有する四糖の非還元末端の４−ヒドロキシ基に、別の保護基を有するグリセロール様又はグリコール様部分を結合させることによって製造することができる。この後で、保護基を除去した後に、その化合物を硫酸化すると、式Ｉの炭水化物誘導体が得られる。
【００１７】
静脈性血栓症の治療のためには、又は、平滑筋細胞増殖の阻害のためには、本発明の化合物を、ヒトに関しては好ましくは体重１ｋｇ当たり０．００１ｍｇから１０ｍｇの一日量で、経腸投与又は非経口投与し得る。本発明の化合物が経口的、口腔的、又は、舌下的に活性である場合には、例えば、標準的な参考文献である、Ｇｅｎｎａｒｏ他，Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（１８版．Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９０，特にＰａｒｔ  ８：Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｉｒ  Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｅを参照されたい）に記載されているような医薬上適切な添加剤と本発明の化合物を混合して、ピルや錠剤のような固体単位剤形に圧縮してもよいし、又は、カプセルもしくは坐薬の剤形に処理することも可能である。更に、医薬上適切な液体によって、本発明の化合物を、溶液、懸濁液、乳濁液の形態の注射製剤として、又は、例えば点鼻スプレーのようなスプレーとして使用することが可能である。
【００１８】
例えば錠剤のような単位剤形を製造するために、例えば充填剤、着色剤、ポリマー結合剤等のような慣用の添加剤を使用する。一般的に、本発明の活性化合物の機能を妨げない医薬上許容可能なあらゆる添加剤を使用することが可能である。
【００１９】
組成物を投与する際に使用することが可能である適切な担体には、適切な量で使用される、ラクトース、デンプン、セルロース誘導体等、及び、これらの混合物が含まれる。
【００２０】
【実施例】
本発明を、下記の実施例によって更に詳細に説明する。
【００２１】
下記の実施例では、添付図面のフローシート１とフローシート２を参照する。中間体と最終生成物を、フローシート１とフローシート２とに示す対応する番号によって表す。
【００２２】
実施例１
化合物７と化合物８の製造
化合物２の製造
窒素雰囲気下において、エチレングリコールジメチルエーテル（２５ｍＬ）中に２−ベンジルオキシエタノール１（２．８４ｍＬ）とクロロメチルメチルスルフィド（１．５９ｍＬ）とを含む冷却した（０℃）溶液に、鉱油中６０％分散液の形態の水素化ナトリウム（１．２ｇ）を加え、その混合物を室温で２４時間撹拌した。反応混合物にメタノールを加え、撹拌を１５分間続けた。混合物を酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈した後で、水性炭酸水素ナトリウムと水とで連続的に洗浄し、有機層を硫酸マグネシウム上で脱水し、真空中で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製し、化合物２を２．５ｇ得た。
【００２３】
化合物３の製造
化合物３の合成は、Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ａｎｄ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｖｏｌ．２，ｎｏ．１１，ｐｐ．１２６７−１２８０，１９９４（Ｐ．Ｗｅｓｔｅｒｄｕｉｎ他）に記載されている。
【００２４】
化合物４の製造
ジクロロメタン（１．５ｍＬ）中に化合物３（１２５ｍｇ）と化合物２（６４ｍｇ）と粉末分子ふるい（４オングストローム）とを含む混合物を窒素雰囲気下で１５分間撹拌した。溶液を冷却し（５℃）、１，２−ジクロロエタン−ジオキサン（１／１，ｖ／ｖ）１．５ｍＬ中にＮ−ヨードスクシンイミド（６８ｍｇ）とトリフルオロメタンスルホン酸（２．７μＬ）とを含む製造したばかりの溶液を注入した。１０分後に、赤色の反応混合物を濾過し、ジクロロメタンで希釈し、水性チオ硫酸ナトリウムと水性炭酸水素ナトリウムとで連続的に洗浄した。有機層を硫酸マグネシウム上で脱水し、真空中で濃縮した。ジクロロメタン−メタノール（２／１，ｖ／ｖ）中に懸濁させたＳｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０でのサイズ排除クロマトグラフィーによって残渣を精製し、化合物４を１０８ｍｇ得た。
【００２５】
化合物５の製造
テトラヒドロフラン（７．３ｍＬ）中に化合物４（１０５ｍｇ）を含む冷却した（−５℃）溶液に、過酸化水素の３０％水溶液（３．８ｍＬ）を加え、１０分間撹拌した後に、水酸化リチウム溶液（１．２５Ｍ、１．７ｍＬ）を加えた。混合物を−５℃で２時間撹拌した後で、温度を０℃に上昇させた。２０時間撹拌した後に、温度を２０℃に上昇させ、撹拌を２４時間続けた。反応混合物を０℃に冷却した後に、メタノール（７．０ｍＬ）と水性水酸化ナトリウム（４Ｍ、２．０ｍＬ）とを加えた。１時間撹拌した後に、温度を再び２０℃に上昇させ、撹拌を更に２０時間続けた。混合物を冷却し（０℃）、塩酸（２Ｎ）でｐＨ３に酸性化し、ジクロロメタンで抽出した。有機層を水性亜硫酸ナトリウム（５％）で洗浄し、硫酸マグネシウム上で脱水し、真空中で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物５を８０ｍｇ得た。
【００２６】
化合物６の製造
水（７ｍＬ）と２−メチル−２−プロパノール（７ｍＬ）との混合物中に化合物５（８０ｍｇ）を含む溶液に、炭素担持パラジウム（１０％）８０ｍｇを加えた。反応混合物を水素雰囲気下に１６時間置いた。触媒を濾過によって除去し、２−メチル−２−プロパノール／水混合物で洗浄した。濾液と洗液を真空中で濃縮して凍結乾燥し、化合物６を３８ｍｇ得た。
【００２７】
化合物７及び化合物８の製造
水（０．８ｍＬ）中に化合物６（３８ｍｇ）を含む溶液をＤｏｗｅｘ  ５０ＷＸ８Ｈ+ カラム上で水で溶出させ、プールしたフラクションを蒸発乾固させた。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドと共に蒸発させた後に、残渣をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２．５ｍＬ）中に溶解し、窒素雰囲気下に置き、トリエチルアミン／三酸化硫黄複合体（２８７ｍｇ）を加えた。混合物を５０℃で一晩撹拌し、０℃に冷却し、炭酸水素ナトリウム水溶液（５３３ｍｇ）を加えた。混合物を２０℃で１時間撹拌し、少量に濃縮し、水：アセトニトリル  ９：１（ｖ／ｖ）中に懸濁させたＳｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ−２５カラム上で脱塩した。粗生成物をＤｏｗｅｘ  ５０ＷＸ８Ｎａ+ カラムで溶出させ、アニオン交換カラムクロマトグラフィー（ＨＰＬＣ、Ｍｏｎｏ−Ｑ  ５／５、塩化ナトリウム勾配）で精製し、化合物７｛［α］D 20＝＋３１．１（ｃ＝１；水）｝１２ｍｇと化合物８｛［α］D 20＝３４．８（ｃ＝０．９３；水）｝１８ｍｇとを得た。
【００２８】
実施例２
化合物１６の製造
化合物１０の製造
無水ジオキサン（２６ｍＬ）中に塩化ベンゾイル（２６．３ｍＬ）を含む溶液を、グリセロール（１０ｇ）とピリジン（１０９ｍＬ）との冷却した（−２０℃）混合物に、１時間かけて滴加した。得られた混合物を０℃で１６時間撹拌し、その後で水を加えた。１５分間撹拌した後に、混合物を１／５の体積に濃縮し、ジクロロメタンで希釈し、水、水性炭酸水素ナトリウム、水で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウム上で脱水し、真空中で濃縮した。得られた油をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製し、化合物１０を２１ｇ得た。
【００２９】
化合物１１の製造
アセトニトリル：ジクロロメタン（１：１、ｖ／ｖ、８ｍＬ）中に化合物１０（６００ｍｇ）を含む溶液に、硫化メチル（１．４５ｍＬ）を加えた。反応混合物を０℃に冷却し、アセトニトリル：ジクロロメタン（１：１、ｖ／ｖ、１０ｍＬ）中に無水過酸化ベンゾイル（３．６３ｇ）を含む混合物を滴加した。２０℃で１６時間撹拌した後に、その混合物をジクロロメタンで希釈し、水性炭酸水素ナトリウムと水で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウム上で脱水し、真空中で濃縮した。シリカゲルカラムクロマトグラフィーによる精製の後で、化合物１１を４００ｍｇ単離した。
【００３０】
化合物１２の製造
Ｐ．Ｗｅｓｔｅｒｄｕｉｎ他，Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ａｎｄ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １９９４，ｖｏｌ  ２，ｎｏ．１１，ｐｐ．１２６７−１２８０に説明されている手順と同様の手順で、化合物１２を製造した。化合物１２を得る反応中、メチル基の代わりにベンジル基でウロン酸を保護した。
【００３１】
化合物１３の製造
化合物４の場合に説明した手順と同様の手順で、化合物１１を化合物１２にカップリング合させることによって化合物１３を製造した。
【００３２】
化合物１４の製造
水（２ｍＬ）とＰｄ／Ｃ（４００ｍｇ）との中に炭酸水素ナトリウム（１４２ｍｇ）を含む懸濁液を、２−メチル−２−プロパノール（６０ｍＬ）中に化合物１３（４８０ｍｇ）を含む溶液に加えた。混合物を水素雰囲気中に１６時間置いた。触媒を濾過によって除去し、２−メチル−２−プロパノール／水混合物で洗浄した。合わせた濾液と洗液を真空中で濃縮し、化合物１４を３１５ｍｇ得、更に精製することなしに次に使用した。
【００３３】
化合物１５の製造
化合物１４（３１５ｍｇ）を０．３５Ｎ水性水酸化ナトリウム（１０ｍＬ）中に溶解した。反応混合物を一晩撹拌し、その後でｐＨを１Ｎ塩酸で８．５に調整した。混合物を、水：アセトニトリル：トリエチルアミン  ９０：１０：０．１（ｖ／ｖ／ｖ）混合物中に懸濁させたＳｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ−２５カラムを用いて脱塩した。適切なフラクションをプールし、真空中で濃縮した。化合物１４に関して説明した通りに生成物に対して再び水素化分解を行った。後処理し、濾液と洗液を濃縮した後に、混合物を、水：アセトニトリル：トリエチルアミン  ９０：１０：０．１（ｖ／ｖ／ｖ）混合物中に懸濁させたＳｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ−２５カラムを用いて脱塩した。適切なフラクションをプールし、真空中で濃縮し、Ｄｏｗｅｘ  ５０ＷＸ８Ｎａ+ カラム上で水で溶出させ、最後に凍結乾燥させ、化合物１５を１６５ｍｇ得た。
【００３４】
化合物１６の製造
化合物１５（１６５ｍｇ）の溶液をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドと共に蒸発させ、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１１．０ｍＬ）中に溶解した。トリエチルアミン／三酸化硫黄複合体（１．３１ｇ）を反応混合物に加えた。５０℃で１６時間撹拌した後に、混合物を冷却し（０℃）、水性炭酸水素ナトリウム（２．４３ｇ）を加え、撹拌を２０℃で１時間続け、その後で溶液を真空中で濃縮した。残渣を水：アセトニトリル  ９：１（ｖ／ｖ）中に懸濁させたＳｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ−２５カラムを用いて脱塩し、適切なフラクションをプールし、真空中で濃縮した。Ｄｏｗｅｘ  ５０ＷＸ８Ｎａ+ カラムで溶出させた後に、塩化ナトリウム勾配を使用してＱ−Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ  Ｈｉｇｈ  Ｌｏａｄカラムで生成物を精製し、化合物１６｛［α］D 20＝＋２４．０（ｃ＝０．７７，Ｈ2 Ｏ）｝１６０ｍｇを得た。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の炭水化物誘導体の製造工程を示すフローシートである。
【図２】本発明の炭水化物誘導体の製造工程を示すフローシートである。
【図１】
0004201360.tif 000004
【図２】
0004201360.tif 000005