(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ
【化１】
0004101905.tif 000012
〔式中、
Ｒ1は、(Ｃ1〜Ｃ8)−アルキル（１個、２個以上またはすべての水素は、弗素によって置換されている）であり、
Ｒ2は、弗素、塩素、臭素、水素、−Ｏ−(Ｃ1〜Ｃ8)−アルキル、(Ｃ1〜Ｃ8)−アルキル（アルキル基において、１個、２個以上またはすべての水素は弗素によって置換されていてもよい）であり、
Ｒ3は、弗素、塩素、臭素、水素、−Ｏ−(Ｃ1〜Ｃ8)−アルキル、(Ｃ1〜Ｃ8)−アルキル（アルキル基において、１個、２個以上またはすべての水素は弗素によって置換されていてもよい）であり、
Ｒ4は、ＣＦ3である〕の第三級４−アミノ−２−ウレイドピリミジン−５−カルボキサミドおよびその生理学的に許容し得る酸付加塩。
【請求項２】
Ｒ1が、(Ｃ1〜Ｃ4)−アルキル（１個、２個以上またはすべての水素は弗素によって置換されている）であり、
Ｒ2が、弗素、塩素、水素、−Ｏ−(Ｃ1〜Ｃ4)−アルキル、(Ｃ1〜Ｃ4)−アルキル（アルキル基において、すべての水素は弗素によって置換されていてもよい）であり、
Ｒ3が、弗素、塩素、臭素、水素、−Ｏ−(Ｃ1〜Ｃ4)−アルキル、(Ｃ1〜Ｃ4)−アルキル（アルキル基において、１個、２個以上またはすべての水素は弗素によって置換されていてもよい）であり、
Ｒ4が、ＣＦ3である請求項１記載の式Ｉの化合物またはその生理学的に許容し得る酸付加塩。
【請求項３】
Ｒ1がトリフルオロメチル、２,２,２−トリフルオロエチル、２,２,３,３,３−ペンタフルオロプロピル、２,２,３,３,４,４,４−ヘプタフルオロブチルであり、
Ｒ2が、弗素、塩素、水素、−ＣＦ3、−ＯＣＦ3であり、
Ｒ3が、弗素、塩素、水素、−ＣＦ3、−ＯＣＦ3であり、
Ｒ4が、ＣＦ3である請求項１または２記載の式Ｉの化合物またはその生理学的に許容し得る酸付加塩。
【請求項４】
反応スキーム
【化２】
0004101905.tif 000013
によって、適当な溶剤中において０℃〜２００℃の温度で、式IIの化合物を式III（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4は請求項１に記載の式Ｉに示した意義を有する）の化合物と反応させて式Ｉの化合物を得、場合によっては、得られた式Ｉの化合物を生理学的に許容し得る塩に変換するかまたは得られた塩を生理学的に許容し得る塩に変換することからなる請求項１〜３の何れか一項に記載の式Ｉの化合物の製法。
【請求項５】
反応スキーム
【化３】
0004101905.tif 000014
によって、式IV（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4は、請求項１に記載の式Ｉに示した意義を有する）の化合物を環化して式Ｉの化合物を得ることからなる請求項１〜３の何れか一項に記載の式Ｉの化合物の製法。
【請求項６】
反応スキーム
【化４】
0004101905.tif 000015
によって、
ａ）  適当な溶剤中において０℃〜１５０℃の温度で、４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジンカルボン酸エチルを、２,２−ジエトキシ−１−メチルピロリジンと反応させて４−（１−メチルピロリジン−２−イリデンアミノ）−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）−ピリミジン−５−カルボン酸エチルを得、
ｂ）  得られた４−（１−メチルピロリジン−２−イリデンアミノ）−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−カルボン酸エチルを、適当な溶剤中において０℃〜１５０℃の温度で、ＮａｌおよびＴＭＳＣｌと反応させて、４−（１−メチルピロリジン−２−イリデンアミノ）−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−カルボン酸を得、
ｃ）  得られた４−（１−メチルピロリジン−２−イリデンアミノ）−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）−ピリミジン−５−カルボン酸を、適当な溶剤中でＴＯＴＵおよび補助塩基の存在下において０℃〜１５０℃の温度で、式Ｖ（式中Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4は、請求項１に記載の式Ｉに示した意義を有する）の化合物と反応させ、そして
ｄ）  得られた式VI（式中Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4は、上述の意義を有する）の化合物を、アンモニア水溶液の補助塩基の存在下において適当な溶剤中で０℃〜１５０℃の温度でエチレンジアミンと反応させて式Ｉの化合物を得ることからなる請求項１〜３の何れか一項に記載の式Ｉの化合物の製法。
【請求項７】
請求項１〜３の何れか一項に記載の１種または２種以上の化合物を含有する医薬。
【請求項８】
請求項１〜３の何れか一項に記載の化合物を含有する脂質代謝疾患の治療用医薬。
【請求項９】
請求項１〜３の何れか一項に記載の化合物を含有する高脂血症の治療用医薬。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、４−アミノ−２−ウレイドピリミジン−５−カルボン酸の第三級アミドおよびその酸付加塩に関するものである。特に、本発明は、置換された４−アミノ−２−（イイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−Ｎ−（フルオロアルキル）−Ｎ−（置換された）フェニルカルボキサミドおよびその酸付加塩に関するものである。
脂肪症および脂質代謝の疾患の治療に４−アミノ−２−ウレイドピリミジン−５−Ｎ−（アルキル−Ｎ−フェニル）カルボキサミドを使用することは、すでに記載された〔欧州特許０ ５５７ ８７９参照〕。
しかしながら、薬剤として提案されたＮ−フェニルアミドおよび実際にアルキル−置換された第三級アミドの代謝における安定性は、完全に満足されるものではない。代謝における高い安定性は、代謝産物による可能な副作用を除去するために重要である。
【０００２】
本発明は、代謝における高い安定性、および、脂質代謝の疾患において治療的に利用できる作用、特に抗高脂血作用を有する入手可能な化合物を製造する目的に基づいている。
驚くべきことに、アミド窒素原子がジ置換された、すなわち、置換されたフェニル基のほかに他の基、実際にはフルオロアルキル基を有してい第三級４−アミノ−２−ウレイド−ピリミジン−５−（Ｎ−フェニル）カルボキサミドは、良好な脂質−低下作用を有しそして代謝的脱アルキル化に関する代謝において増加された安定性を有するということが見出された。
【０００３】
本発明は、式Ｉ
【化５】
0004101905.tif 000002
〔式中、
Ｒ1は、(Ｃ1〜Ｃ8)−アルキル（１個または２個以上の水素は、弗素によって置換されている）であり、
Ｒ2は、弗素、塩素、臭素、水素、−Ｏ−(Ｃ1〜Ｃ8)−アルキル、(Ｃ1〜Ｃ8)−アルキル（アルキル基において、１個または２個以上の水素は弗素によって置換されていてもよい）であり、
Ｒ3は、弗素、塩素、臭素、水素、−Ｏ−(Ｃ1〜Ｃ8)−アルキル、(Ｃ1〜Ｃ8)−アルキル（アルキル基において、１個または２個以上の水素は弗素によって置換されていてもよい）であり、
Ｒ4は、ＣＦ3、ＯＣＦ3である〕の第三級４−アミノ−２−ウレイドピリミジン−５−カルボキサミドおよびその生理学的に許容し得る酸付加塩に関するものである。
【０００４】
式Ｉの好ましい化合物は、１個または２個以上の基が次の意義を有する、すなわち、
Ｒ1が、(Ｃ1〜Ｃ4)−アルキル（１個または２個以上の水素は弗素によって置換されている）であり、
Ｒ2が、弗素、塩素、水素、−Ｏ−(Ｃ1〜Ｃ4)−アルキル、(Ｃ1〜Ｃ4)−アルキル（アルキル基において、すべての水素は弗素によって置換されていてもよい）であり、
Ｒ3が、弗素、塩素、臭素、水素、−Ｏ−(Ｃ1〜Ｃ4)−アルキル、(Ｃ1〜Ｃ4)−アルキル（アルキル基において、１個または２個以上の水素は弗素によって置換されていてもよい）であり、
Ｒ4が、ＣＦ3、ＯＣＦ3である化合物およびその生理学的に許容し得る酸付加塩である。
【０００５】
式Ｉの特に好ましい化合物は、１個または２個以上の基が次の意義を有する、すなわち
Ｒ1が、トリフルオロメチル、２,２,２−トリフルオロエチル、２,２,３,３,３−ペンタフルオロプロピル、２,２,３,３,４,４,４−ヘプタフルオロブチルであり、
Ｒ2が、弗素、塩素、水素、−ＣＦ3、−ＯＣＦ3であり、
Ｒ3が、弗素、塩素、水素、−ＣＦ3、−ＯＣＦ3であり、
Ｒ4が、ＣＦ3である化合物および生理学的に許容し得る酸付加塩である。
【０００６】
生理学的に許容し得る酸付加塩は、“Deutsches Arzneibuch"〔ドイツ薬局〕（9th Edition 1986, Official Issue, Deutscher Apotheker-Verlay Stuttgart)１９頁における定義による水に容易に可溶性、可溶性または難溶性である化合物を意味するものとして理解される。化合物の塩酸塩および硫酸塩が好ましい。さらに、本発明は、式Ｉの４−アミノ−２−ウレイドピリミジン−５−カルボキサミドを製造する３通りの方法に関するものである。
【０００７】
方法Ａ
【化６】
0004101905.tif 000003
式Ｉの化合物を製造する方法Ａは、補助塩基（例えばＮＥｔ3）を添加しまたは添加することなく、適当な溶剤（例えばＤＭＥ）中において０℃〜２００℃の温度で、式IIの化合物を式III（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4は、式Ｉに示した意義を有す）の化合物と反応させて、式Ｉの化合物を得、場合によっては、得られた式Ｉの化合物を生理学的に許容し得る塩に変換するかまたは、場合によっては得られた塩を生理学的に許容し得る塩に変換することからなる。
【０００８】
方法Ｂ
【化７】
0004101905.tif 000004
式Ｉの化合物を製造する方法Ｂは、式IV（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4は、式Ｉに示した意義を有す）の化合物を環化して式Ｉの化合物を得ることからなる。型IVの化合物の製造そしてまた型Ｉの化合物を提供する環化は、欧州特許５５７ ８７９に記載されている。
【０００９】
方法Ｃ
【化８】
0004101905.tif 000005
【００１０】
式Ｉの化合物を製造する方法Ｃは、次の工程からなる。
ａ）  適当な溶剤、例えばエタノール中において０℃〜１５０℃の温度で、４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−カルボン酸エチルを２,２−ジエトキシ−１−メチルピロリジンと反応させて、４−（１−メチルピロリジン−２−イリデンアミノ）−２−（４,４−ジメチル−イミダゾリジン−２−オン−１−イル）−ピリミジン−５−カルボン酸エチルを得る。
【００１１】
ｂ）  適当な溶剤、例えばアセトニトリル中において０℃〜１５０℃の温度で、最初の工程で得られた４−（１−メチルピロリジン−２−イリデンアミノ）−２−（４,４−ジメチル−イミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−カルボン酸エチルをＮａｌおよびＴＭＳＣｌと反応させて、４−（１−メチルピロリジン−２−イリデンアミノ）−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−カルボン酸を得る。
【００１２】
ｃ）  第２の工程で得られた４−（１−メチルピロリジン−２−イリデンアミノ）−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−カルボン酸を、式Ｖ（式中Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4は、式Ｉに示した意義を有す）の化合物と反応させる。これは、ＴＯＴＵおよび補助塩基、例えばトリエチルアミンの存在下において適当な溶剤、例えばＣＭＦ中において、０℃〜１５０℃の温度で実施される。工程ｃ）において、式VIの化合物が得られる。
【００１３】
ｄ）  補助塩基、例えばアンモニア水溶液の存在下において適当な溶剤、例えばイソプロパノール中で０℃〜１５０℃の温度で、第３の工程で得られた式VI（式中、式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4は、式Ｉに示した意義を有す）の化合物をエチレンジアミンと反応させて式Ｉの化合物を得る。
【００１４】
４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−カルボン酸〔この酸クロライドは方法Ａの出発物質を形成するまたはこのエステルは方法Ｃの出発物質を形成する〕は、次のようにして製造される。
【化９】
0004101905.tif 000006
【００１５】
第１の工程においては、例えばＫＯＨのような塩基の存在下において適当な溶剤、例えばイソプロパノール中で０℃〜１５０℃の温度で、１−アミジノ−４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン臭化水素酸塩および２−シアノ−３−アルコキシアクリル酸アルキルを反応させて３−（１−アミジノ−４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン）−２−シアノアクリル酸アルキルを得る。
第２の工程においては、トリフルオロ酢酸または酢酸の存在下において適当な溶剤、例えばトルエン中で０℃〜１５０℃の温度で３−（１−アミジノ−４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン）−２−シアノアクリル酸アルキルを環化して４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−カルボン酸アルキルを得る。
第３の工程においては、４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−カルボン酸アルキルを、既知の方法によって加水分解して、４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−カルボン酸を得る。
【００１６】
本発明は、また、非毒性の不活性の医薬的に適当な賦形剤のほかに本発明による１種または２種以上の活性化合物を含有するまたは本発明による１種または２種以上の活性化合物からなる医薬製剤およびこれらの医薬製剤を製造する方法に関するものである。
非毒性の不活性の医薬的に適当な賦形剤は、医薬的に許容し得る固体、半固体または液状の希釈剤、充填剤および何れかの型の補助剤を意味するものとして理解されるべきでありそしてこれらの賦形剤は、活性化合物と混合した後に、適当な投与形態にする。
【００１７】
本発明による化合物の適当な投与形態は、例えば錠剤、被覆された錠剤、カプセル、ピル、水性の溶液、懸濁液およびエマルジョン、適当である場合は滅菌された注射溶液、非水性のエマルジョン、懸濁液および溶液、スプレーそしてまた、活性化合物の持続性の製剤形態である。
治療的に活性な化合物は、上述した医薬製剤において、好都合には全混合物の約０.１〜９９.０重量％、好ましくは０.５〜７０.０重量％の濃度で存在させなければならない。
【００１８】
スプレーの形態の溶液およびエーロゾルの投与濃度は、一般に０.１〜２０重量％、好ましくは０.５〜５重量％である。
上述した医薬製剤は、また、本発明による活性化合物に加えて他の医薬的に活性な化合物を含有することができる。
上述した医薬製剤は、既知方法による慣用のやり方で、例えば活性化合物を賦形剤と混合することによって製造される。
【００１９】
活性化合物または医薬製剤は、経口的に、非経口的に、腹腔内的におよび／または直腸的に投与することができる。
例えば脂血低下剤として利用することのできる本発明の化合物およびその塩は、賦形剤と一緒に有効な量の活性物質を含有し、経口的および非経口的投与に適した医薬製剤を製造するために使用することができる。好ましくは、希釈剤または賦形剤、例えばラクトース、デキストロース、庶糖、マンニトール、ソルビトール、セルロース、種々な型の澱粉および／またはグリセロールおよび滑沢剤、例えばシリカ、タルク、ステアリン酸またはその塩、例えばステアリン酸マグネシウムおよびステアリン酸カルシウム、および／またはポリエチレングリコールと一緒に活性化合物を含有する錠剤またはカプセル（ゼラチンカプセル）が使用される。錠剤はまた、結合剤、例えば炭酸マグネシウム、珪酸アルミニウムマグネシウム、澱粉、ゼラチン、トラガカントゴム、メチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロースおよび／またはポリビニルピロリドン、および適当である場合は、着色剤、風味料および甘味剤を含有することもできる。注射用溶液は、好ましくは、等張性の水性の溶液または懸濁液であってそしてこれらは滅菌することができそして補助剤、例えば防腐剤、安定剤、湿展剤および／または乳化剤、可溶化剤、滲透圧を調節する塩および／または緩衝物質を含有することができる。必要に応じて他の薬理学的に活性な物質を含有することのできる本発明による医薬製剤は、例えば、普通の混合、顆粒形成およびパン−コーティング法によって製造され、活性化合物０.１％〜好ましくは８０％、好ましくは約５％〜６５％を含有する。
【００２０】
経口的投与は、医薬的に慣用の製剤で、例えば錠剤、被覆された錠剤またはカプセルの形態で行われそしてこれらの製剤は、一日の投与につき、慣用の賦形剤および／または構成成分との混合物として活性化合物５〜１０００mg、好ましくは２０〜２００mgを含有する。５〜２００mgの個々の投与量を好ましくは一日に１〜３回投与することができる。
【００２１】
しかしながら、処置される患者の性質および体重、疾患の性質および程度、製剤および薬剤の投与の型および投与が行われる時間または間隔によって、上述した投与量から逸脱することが必要であり得る。すなわち、ある場合においては、活性化合物の上述した量以下の量で十分であるが、他の場合においては、活性化合物の上述した量以上でなければならない。それぞれの場合において必要な活性化合物の最適の投与量および投与の型の決定は、専門的知識に基づき当業者によって容易に実施されることができる。
【００２２】
代謝において化合物が安定しているので、式Ｉの化合物およびその生理学的に許容し得る塩は、脂質代謝の疾患、特に高脂血症を治療するための理想的な薬剤である。ＬＤＬ受容体に影響を与えることによって、化合物は特に血漿レベルを有効に低下させるのに特に適している。次の結果は、記載した化合物の薬理学的活性を確証する。
【００２３】
１ａ．至る所においてモデルとして認められているヒトの肝細胞腫細胞系Ｈｅｐ Ｇ２において、ＬＤＬ受容体ｍＲＮＡレベルは、式Ｉの化合物によって増加される（表Ｉ）。
１ｂ．ラットの肝臓においてさえも、数時間以内にＬＤＬ受容体ｍＲＮＡレベルは、式Ｉの化合物によって増加される（表II)。
刺激は、比較対照の１７０〜３５０％の範囲にある（比較対照＝１００％)。ｍＲＮＡの調製は、Chomczynski P. およびSacchi N. の方法〔Anal. Biochem. 162, 156〜159(1987)〕によって実施された。器官（例えば肝臓）において、冷凍貯蔵した組織を、あらかじめ乳鉢中でドライアイス上で均質化しそしてｍＲＮＡを標準方法〔Sambrook, J. Fritsch E. F. およびManiatis T., Molecular Cloning, second Edition, Cold Spring Harbor(1989)参照〕によってOligo dTによりさらに強化した。この文献での方法のコレクションにおいては、本文で使用されるすべての他の関連した分子生物学的標準方法もまた説明されている。このようにして得られた溶解したｍＲＮＡ５〜２０μｍを標準方法によって変性し１％の水平アガロースゲル上で分離した。ｍＲＮＡを毛細管ブロットによってHybond Ｎ膜（Amersham)に移す。使用した特異的なハイブリダイゼーションプローブは、部分的ＬＤＬ受容体ｃＤＮＡクローンおよび内部標準のβ−アクチン遺伝子を含有するプラスミドである。両方のプラスミドは、５×１０9 cpm／μｇの比活性までAmershamのランダムプライマーキット(random primer kit)によって標識した。プレハイブリダイゼーション、ハイブリダイゼーションおよびフィルターの洗浄は、標準方法によって実施した。それから、フィルムを、強化スクリーンの存在下において−７０℃で１４日までCronex４フィルム（Dupont）上で露出しそしてハイブリダイゼーションシグナルを、商業的レーザーデンシトメーターを使用して、フィルム−黒色化強度によって定量した。それから、ＬＤＬ受容体バンドおよびアクチンバンドの強度の指数を内部標準として測定して収量変動を補正した。
【００２４】
表Ｉは、１６時間の培養後の全血清中の式Ｉの選択した化合物（化合物の最終濃度１０-6Ｍ）によるＨｅｐ Ｇ２細胞におけるＬＤＬ受容体ｍＲＮＡ発現の刺激を示す。Ｈｅｐ Ｇ２細胞は、ＲＰＭＩ １６４０標準培地中のウシ胎仔血清(最終濃度１０％）を使用して培養した。使用した誘導比較対照は、血清を含有していないＲＰＭＩ培地である。それから、全体のｍＲＮＡを調製しそして関連したＬＤＬ受容体ｍＲＮＡおよびβ−アクチンｍＲＮＡレベルを、ノーザンブロット技術により測定した。比較対照（物質を添加しない）のＬＤＬ受容体ｍＲＮＡシグナルおよびβ−アクチンｍＲＮＡシグナルの指数を１００％としてセットしそして化合物の影響下で達成されるそれ以上のＬＤＬ受容体ｍＲＮＡレベルの刺激を、比較対照の％で表示した。
【００２５】
【表１】
0004101905.tif 000007
【００２６】
表IIは、式Ｉの選択した化合物の投与（３０mg／kgの投与量）後６時間のラット肝臓におけるＬＤＬ受容体ｍＲＮＡの刺激を示す。肝臓組織は、取出しそして液体窒素中でショック−凍結した。
それから、ｍＲＮＡを単離し相対的ＬＤＬ受容体ｍＲＮＡレベルを、ノーザンブロット技術により測定した。
未処理の比較対照動物のｍＲＮＡレベルを１００％としてセットしそして比較対照のＬＤＬ受容体ｍＲＮＡの刺激(％)を計算した。
【００２７】
【表２】
0004101905.tif 000008
【００２８】
代謝における安定性についての実験
Ｒ1＝アルキルである式Ｉの化合物が、代謝において、Ｒ1＝Ｈである式Ｉの化合物（以下化合物Ａと称す）に分解されることは知られている。以下の実験は、４−アミノ−２−（４,４−ジメチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル）ピリミジン−５−Ｎ−（エチル）−Ｎ−（３−トリフルオロメチル−フェニル）カルボキサミド塩酸塩（ＥＰ ０ ５５７ ８７９の実施例２の化合物−以下化合物Ｂと称す）と比較した、本発明による式Ｉの化合物の脱アルキル化傾向を試験するために使用した。
【００２９】
１.１  ヒトの肝細胞
ヒトの肝細胞は、University of Pittsburgh, Pathology Divisionによって調製された。肝臓の灌流後、インスリン（７Ｍ）、デキサメタゾン（７Ｍ）、ペンストレップおよびフンガゾン（Gibco）を添加したウィリアムスＥ培地を使用して、細胞懸濁液が調製された。この懸濁液は、フラスコ中において塗抹（streaked out）そして培地に１０％の牛血清が補給された。この培地を血清を含有していないウィリアムスＥと交換した後、フラスコを室温で処置し、処置後、培地を再び交換した。トリパンブルー（Trypan Blue）を使用した生存能力試験に対して、細胞は＞９５％の生存能力を示した。肝臓灌流から培養の開始までの時間は、約４８時間であった。培養液は、培地２５ml中に約１２×１０6の肝細胞を含有している。
【００３０】
１.２  ９０００ｇの肝臓フラクションの調製
１.２.１．ヒト
−７８℃で貯蔵されたヒトの肝臓の片の冷凍された試料を、４℃の温度の１.１％濃度の塩化カリウム溶液に導入することによって解凍した。このような冷凍／解凍循環は、代謝的に関連した酵素に不利な影響を与えない〔P. J. Meier, H. K. Mueller, B. Dick, U. A. Meyer；Gastroenterology 85, 682(1983)〕。解凍後、肝臓の片を標準方法によって調製した〔A. Y. H. Lu, W. Levin；Biochem. Biophys. Res. Comm. 46, 1339〜1344(1972), P. G. Gervasi等；Xenobiotica 12/8, 517(1982)〕。調製の間中、温度を０℃と４℃との間に保持した。個々の酵素の差を除去するために、１０人のヒトの肝臓の９０００ｇのフラクションを混合した。
【００３１】
１.２.２．９０００ｇの肝臓フラクションの蛋白含有量
９０００ｇのフラクションのチトクロームＰ ４５０の含量を、以下の通り測定した〔T. Omura, R. Sato；J. Biol. Chem. 239, 2370(1964)〕。
0004101905.tif 000009
＊  １０人のヒトからの肝臓試料の混合物
【００３２】
１.３  培養方法
１.３.１．肝細胞および９０００ｇのフラクション
試験物質を、約１０mg／mlの濃度においてＤＭＳＯに溶解した。この溶液のアリコートを、滅菌条件下で、肝細胞培養液または９０００ｇのフラクションに加えた。培養は、５％のＣＯ2および＞９０％の大気湿度を有する大気中で３７℃で実施した。培養時間は、９０００ｇのフラクションに対しては３時間そして肝細胞に対しては４８時間であった。ＮＡＤＰＨおよびＭｇ2+を、補助因子として９０００ｇのフラクションに加えた〔P. G. Gervasi等；Xenobiotica 12/8, 517(1982)〕。すべての試料を、培養後すぐに冷凍し分析まで−２０℃以下で貯蔵した。
【００３３】
１.３.２．比較対照およびブランク培養
試験物質は、培地中における物質の安定性を証明するために、９０００ｇのフラクションおよび肝細胞の培地に対する緩衝系（buffer system）中で適当な濃度でインキュベートした。
それぞれの種類およびそれぞれの時間に対して、肝細胞および９０００ｇのフラクションを使用した培養を、すべて、試験物質の添加なしに実施した。得られた試料は、クロマトグラフィー分析における比較対照として使用した。
【００３４】
１.４．Ａの測定
試験管内培養混合物中のＡを定量的に測定するために、それぞれの混合物０.２５μｌを、それぞれの場合において牛血清０.７５μｌで希釈した。これらの試料を血清中におけるＢ遊離塩基および代謝産物Ａ遊離塩基を測定するために、次の試験によって分析した。
内部標準の調製された溶液（メタノール１ml当りＲ1＝ＣＨ3、Ｒ2、Ｒ3＝ＨおよびＲ4＝ＣＦ3である式Ｉの化合物１０μg）５０μｌ、酢酸ナトリウム緩衝液（０.４Ｍ、pH５.５）０.１mlおよびエチルエーテル５mlを、血清０.１mlに加えた。混合物を、２０分振盪した。遠心分離後に、有機相４mlを、移し、ｎ−ヘキサン３mlを加え混合物を１％（v/v）濃度の水性トリフルオロ酢酸０.５mlで抽出した。上部有機層を吸引分離し捨てた。有機溶剤の残りを除去するために、水性残留物を４０℃で３０分蒸発した。残った水性相１００μｌを、ＨＰＬＣ装置に注入した。ＨＰＬＣ分析は、水８００ｇ、アセトニトリル２７０ｇおよびトリフルオロ酢酸１mlの移動相を使用してＣ １８ ＲＰカラム（TosoHaas Semi-Micro TSK gel ODS 80 TS)上で実施した。流速は、０.２ml／分であった。分析物の定量的測定は、γ＝２４０nmにおけるＵＶ検出器を用いてピークの高さを測定することによって実施した。検量範囲は、希釈しない試験管内試料１ml当り２００〜０.２μｇに相当する５０〜０.０５μg／mlである。検出限界は、希釈しない試験管内試料１ml当り０.２μgに相当する０.０５μg／mlである。
【００３５】
さらに、未調製試料（unprepared samples)を、以下のＨＰＬＣ系を使用して放射線−検出器およびＵＶ検出器を用いて分析した。
カラム：Nucleosil １００または１２０ C １８.５μm、 ２５０×４〔内径〕mm(CTI GmbH, Idstein, Germany)
溶離剤Ａ：水中の０.１重量％の酢酸アンモニウム
溶離剤Ｂ：１：４（v/v）の溶離剤Ａ／アセトニトリル
【表３】
0004101905.tif 000010
検出：放射線検出器Ramona ９２（Raytest, Straubenhardt, Germany）２５４ nmにおけるＵＶ；検出器モデル２０４（Linear Instruments, Reno, Nevada, USA)
【００３６】
【表４】
0004101905.tif 000011
表１から、本発明による式Ｉの化合物は、比較化合物Ｂより大きい安定性を有しているということを推測することができる。
以下の実施例は、本発明を実施例に記載された生成物および実施化に限定することなく、本発明をより詳細に説明するために示すものである。
【００３７】
【実施例】
実施例１（方法Ａ）
４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−Ｎ−（２,２,２−トリフルオロエチル）−Ｎ−〔（３−トリフルオロメチル）フェニル〕カルボキサミド塩酸塩
第１工程：４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−Ｎ−（２,２,２−トリフルオロエチル）−Ｎ−〔（３−トリフルオロメチル）フェニル〕カルボキサミドの製造
４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）−５−ピリミジン−カルボン酸９.６６ｇ（０.０３８モル）を、乾燥したＤＭＥ１００mlに懸濁し、それから塩化チオニル１１.５ml（１６１ミリモル）を、室温で撹拌しながら滴加しそして次に混合物を５時間（８５℃〜９０℃）還流する。過剰の塩化チオニルを除去するために、ＤＭＥ ５０mlを留去する。それぞれの場合（全体で３×反復）において、新鮮な無水のＤＭＥ ５０mlを加えそしてＤＭＥ ５０mlが再び留去する。その後、もう一度ＤＭＥ ５０mlを加える。それから、Ｎ−（２,２,２−トリフルオロエチル）−３−トリフルオロメチルアニリン１１.２ｇ（０.０４６モル）およびトリエチルアミン５.７５ｇ（０.０４６モル）の混合物を、４０℃で撹拌しながら、酸クロライド懸濁液に滴加する。僅かな加温が起こる。混合物を、６０〜７０℃で５分撹拌し、それから、さらにトリエチルアミン２.３mlを滴加しそして混合物を８０℃で３０分撹拌し、そしてそれから、室温で一夜放置する。この後にＨ2Ｏ １５０mlを滴加し（僅かに加温）そしてＤＭＥを回転蒸発器上で除去する。酸性の水性相を、酢酸エチルで一度抽出し、２Ｎ ＮａＯＨ水溶液を使用してpH８〜９に調節しそして酢酸エチルで３回以上抽出する。合した抽出液を、ＭｇＳＯ4を使用して乾燥し、濾過しそして濃縮する。粗製生成物４ｇがフォーム状の固体の形態で得られた。シリカゲルおよび溶離剤として酢酸エチル／メタノール（１０：１）を使用したカラムクロマトグラフィーによって、精製を実施した。精製された生成物２.５ｇ（使用したカルボン酸を基にして、理論値の１３.８％）が、白色の結晶として単離された。融点：２４８℃。
MS：m/e 477.2(M+＋1)；200 MHz 1H-NMR(DMSO-d6, ppm)：1.2(s, 6H), 3.55(s, 2H), 4.75(q, 2H), 7.0(brs, 2H), 7.28(s, 1H), 7.54-7.64(m, 3H), 7.75-7.82(m, 2H)
【００３８】
第２工程：４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−Ｎ−（２,２,２−トリフルオロエチル）−Ｎ−〔（３−トリフルオロメチル）フェニル〕カルボキサミド塩酸塩の製造
４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−Ｎ−（２,２,２−トリフルオロエチル）−Ｎ−〔（３−トリフルオロメチル）フェニル〕−カルボキサミド２.５ｇ（０.００５モル）を、アセトン６０mlに懸濁する。０℃の飽和のエーテル性ＨＣｌ溶液１mlを、湿気を排除して氷浴中で撹拌しながら滴加する。さらに、混合物を冷却浴中で２時間以上撹拌しそして室温で一夜放置する。それから、エーテル２００mlを加え、結晶化がはじまった後に混合物を０℃に冷却しそして結晶を吸引濾去する。収量：白色の結晶２.５ｇ（理論値の９３％）。融点：＞３００℃。
200 MHz 1H-NMR(DMSO-d6, ppm)：1.25(s, 6H), 3.6(s, 2H), 4.75(t, 2H), 7.58-7.72(m, 3H), 7.95(s, 1H), 8.04(s, 1H), 8.62(s, 1H), 9.0(brs, 1H), 11.8-13.4(brs, 1H)
【００３９】
実施例２（方法Ｂ）
４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−Ｎ−（２,２,３,３,４,４,４−ヘプタフルオロブチル）−Ｎ−〔（３−トリフルオロメチル）フェニル〕カルボキサミド塩酸塩
第１工程：塩化シアノアセチルの製造
シアノ酢酸３０.６ｇ（１.３７５モル）を１リットルの四頚フラスコ中の無水のエーテル４２０mlに溶解しそしてＰＣｌ5の全量７５ｇ（０.３６モル）を、氷浴中で冷却しながら、小量ずつ加える。混合物を、ＰＣｌ5が完全に溶解するまで、室温で３時間撹拌しそして真空中で濃縮し、そして残留物を、トルエンと一緒に２回真空中で蒸発して形成したＰＯＣｌ3を除去する。残留する赤色の油を、直接次の反応に使用した（Org. Synth. (1973), Coll. Vol. V. 171-173頁による製造）。
第２工程：Ｎ−（２,２,３,３,４,４,４−ヘプタフルオロブチル）−Ｎ−〔（３−トリフルオロメチル）フェニル〕シアノアセトアミドの製造
上記反応で得られた塩化シアノアセチルを、無水のＣＨ2Ｃｌ2 ３００mlに溶解しそして１リットルの四頚フラスコに導入する。無水のＣＨ2Ｃｌ2 １５０mlに溶解したＮ−（２,２,３,３,４,４,４−ヘプタフルオロブチル）−３−トリフルオロメチルアニリン５８ｇ（０.１７モル）およびトリエチルアミン２３.５ml（０.１７モル）を滴加する。反応混合物は沸騰する。それを４０℃で１時間以上撹拌しそしてそれから処理する。ＣＨ2Ｃｌ2 １５０mlおよびＨ2Ｏ ３００mlを加えそして相を分離する。ＣＨ2Ｃｌ2相を水で洗浄（５×）しそしてＨ2Ｏ相をＣＨ2Ｃｌ2で抽出（１×）する。合したＣＨ2Ｃｌ2相をＭｇＳＯ4を使用して乾燥し、濾過しそして真空中で濃縮する。褐色の油状残留物７０ｇが残る。精製のために、シリカゲル５００ｇおよび溶離剤としてｎ−ヘプタン／酢酸エチル（１：１）を使用したフラッシュカラムクロマトグラフィーを実施する。このクロマトグラフィー処理によって、暗黄色のフォーム状物質としてＮ−（２,２,３,３,４,４,４−ヘプタフルオロブチル）−Ｎ−〔（３−トリフルオロメチル）フェニル〕シアノアセトアミド４８.６ｇ（理論値の〜７１％）を得た。
MS：m/e 411.1(M+＋1)；200 MHz 1H-NMR(DMSO-d6, ppm)：3.44(s, 2H), 4.68(t, 2H), 7.65-7.95(m, 4H)
【００４０】
第３工程：エトキシメチレン−Ｎ−（２,２,３,３,４,４,４−ヘプタフルオロブチル）−Ｎ−〔（３−トリフルオロメチル）フェニル〕シアノアセトアミドの製造
Ｎ−（２,２,３,３,４,４,４−ヘプタフルオロブチル）−Ｎ−〔（３−トリフルオロメチル）フェニル〕シアノアセトアミド４８.５ｇ（０.１１８モル）、オルトギ酸トリエチル３９.５ml（０.２３７モル）および無水酢酸４４.９ml（０.４７５モル）を、ガラススリーブを有する機械的撹拌機およびカラムヘッドを具備した２５０mlの四頚フラスコ中で、室温で一緒に混合しそして混合物を、油浴中で徐々に加熱する。反応は、１４５℃の浴温ではじまる。１〜２時間の経過中に約６０mlが留去される。この時間の後に、反応は終了する（ＴＬＣ検査）。すべての揮発性成分を、１mmHgの圧力および１４０℃の浴温で、真空中で留去する。残った残留物を、酢酸エチルで処理し、混合物を回転蒸発器上で濃縮しそして残留物をトルエンと一緒に１回蒸発する。残留した赤色〜褐色の油（５６ｇ、理論値の約１００％）を、さらに精製することなしに、次の工程に使用した。
MS：m/e 467.1(M+＋1)；200 MHz 1H-NMR(DMSO-d6, ppm)：1.22(t, 3H), 4.38(q, 2H), 4.78(t, 2H), 7.65-7.9(m, 4H), 8.36(s, 1H)
第４工程：４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−Ｎ−（２,２,３,３,４,４,４−ヘプタフルオロブチル）−Ｎ−〔（３−トリフルオロメチル）フェニル〕カルボキサミドの製造
撹拌および湿気を排除しながら、１−アミジノ−４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン２２.５ｇ（０.１８７モル）を、無水のＤＭＥ ３００ml中の懸濁液として導入する。無水のＤＭＥ ３００ml中のエトキシメチレン−Ｎ−（２,２,３,３,４,４,４−ヘプタフルオロブチル）−Ｎ−〔（３−トリフルオロメチル）フェニル〕シアノアセトアミド５６ｇ（０.１１９モル）を０℃で徐々に滴加する。添加後、混合物を、室温で２時間撹拌する。この時間の後に、反応を終了する（ＴＬＣ検査）。氷酢酸１２５mlを、撹拌しながらこの溶液に滴加しそしてそれを、５０℃の温度で２時間撹拌する。室温で一夜放置した後、ピリミジン誘導体への環化を終了する。処理のために、副生成物として形成された沈殿した５−シアノ−４−ピリミドン誘導体を濾去する。濾液を濃縮し、氷酢酸をトルエンと一緒に蒸発しそして半固体の残留物を酢酸エチルにとる。さらに、形成された５−シアノ−４−ピリミドン誘導体の沈殿した量を、再び濾過により除去する。それから、酢酸エチル相を２Ｎ ＮａＯＨ水溶液で２×および飽和塩化ナトリウム溶液で２×洗浄し、ＭｇＳＯ4を使用して乾燥し、濾過しそして回転蒸発器上で濃縮し、その後、残留物として、粗製生成物５１ｇが暗色の油として得られる。シリカゲルおよび溶離剤としての酢酸エチルを使用したカラムクロマトグラフィーによって、精製を実施する。溶剤を蒸発した後、黄色の結晶として、４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−Ｎ−（２,２,３,３,４,４,４−ヘプタフルオロブチル）−Ｎ−〔（３−トリフルオロメチル）フェニル〕カルボキサミド１２.５６ｇ（理論値の１８％）を得た。融点：１８５℃。
MS：m/e 577.2(M+＋1)；200 MHz 1H-NMR(DMSO-d6, ppm)：1.2(s, 6H), 3.55(s, 2H), 4.8(t, 2H), 7.0(brs，2H), 7.28(s, 1H), 7.54-7.64(m, 3H), 7.78-7.80(m, 2H)
【００４１】
第５工程：４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル)ピリミジン−５−Ｎ−(２,２,３,３,４,４,４−ヘプタフルオロブチル）−Ｎ−〔（３−トリフルオロメチル）フェニル〕カルボキサミド塩酸塩の製造
４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−Ｎ−（２,２,３,３,４,４,４−ヘプタフルオロブチル）−Ｎ−〔（３−トリフルオロメチル）フェニル〕カルボキサミド１２.５ｇ（０.０２３モル）を、アセトン２００mlに溶解する。０℃の飽和のエーテル性ＨＣｌ溶液６mlを、氷浴中で撹拌しながら滴加する。混合物を、湿気を排除しながら冷却浴中で２時間以上撹拌しそして室温で一夜放置する。その後、エーテル５００mlを加え、混合物を結晶化の開始後、０℃に冷却しそして結晶を吸引濾去する。収量：僅かに帯黄色の結晶１０ｇ（理論値の７１％）。融点：２７８℃（分解）。
200 MHz 1H-NMR(DMSO-d6, ppm)：1.25(s, 6H), 3.60(s, 2H), 4.80(t, 2H), 7.58-7.75(m, 3H), 7.95(s, 1H), 8.04(s, 1H), 8.64(s, 1H), 9.02(brs, 1H), 11.60-13.20(brs, 1H)
【００４２】
実施例３
４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）−ピリミジン−５−Ｎ−(２,２,３,３,３−ヘプタフルオロプロピル）−Ｎ−〔（３−トリフルオロメチル）フェニル〕カルボキサミド塩酸塩
この化合物は、実施例１の方法Ａと同様にして製造される。収率１０％。融点：＞３００℃。
MS：m/e 527.3(M+＋1)；200 MHz 1H-NMR(DMSO-d6, ppm)：1.30(s, 6H), 3.60(s, 2H), 4.80(t, 2H), 7.60-7.80(m, 3H), 7.95(s, 1H), 8.05(s, 1H), 8.60(s, 1H), 8.70(brs, 1H), 9.10(brs, 1H)
【００４３】
実施例４
４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）−ピリミジン−５−Ｎ−(２,２,３,３,４,４,４−ヘプタフルオロブチル）−Ｎ−〔（３−トリフルオロメチル）フェニル〕カルボキサミド塩酸塩
この化合物は、実施例１の方法Ａと同様にして製造される。収率１２％。融点：２７８℃。
MS：m/e 577.2(M+＋1)；200 MHz 1H-NMR(DMSO-d6, ppm)：1.25(s, 6H), 3.60(s, 2H), 4.80(t, 2H), 7.58-7.75(m, 3H), 7.95(s, 1H), 8.04(s, 1H), 8.64(s, 1H), 9.02(brs, 1H), 11.60-13.20(brs, 1H)
【００４４】
実施例５
４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−Ｎ−(２,２,２−トリフルオロエチル）−Ｎ−〔（３−トリフルオロメトキシ）フェニル〕カルボキサミド
この化合物は、実施例１の方法Ａと同様にして製造される。収率１％。融点：１１５℃。
MS：m/e 493.1(M+＋1)；200 MHz 1H-NMR(DMSO-d6, ppm)：1.20(s, 6H), 3.55(s, 2H), 4.70(t, 2H), 7.00(brs, 2H), 7.20-7.40(m, 4H), 7.40-7.50(m, 1H), 7.80(s, 1H)
【００４５】
実施例６
４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−Ｎ−(２,２,２−トリフルオロエチル）−Ｎ−〔（４−フルオロ−３−トリフルオロメチル）フェニル〕カルボキサミド
この化合物は、実施例１の方法Ａと同様にして製造される。収率１％。融点：９０℃。
MS：m/e 495.2(M+＋1)；200 MHz 1H-NMR(DMSO-d6, ppm)：1.30(s, 6H), 3.60(s, 2H), 4.70(t, 2H), 7.00(brs, 2H), 7.30(s, 1H), 7.40-7.70(m, 2H), 7.90(m, 1H)
【００４６】
実施例７
４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−Ｎ−(２,２,３,３,３−ペンタフルオロプロピル）−Ｎ−〔（３−トリフルオロメトキシ）フェニル〕カルボキサミド塩酸塩
この化合物は、実施例２の方法Ｂと同様にして製造される。収率１１％。融点：２８７℃。
MS：m/e 543.1(M+＋1)；200 MHz 1H-NMR(DMSO, ppm)：1.25(s, 6H), 3.60(s, 2H), 4.80(t, 2H), 7.35(m, 1H), 7.50-7.60(m, 3H), 8.00(s, 1H), 8.50-9.20(brs, 2H), 8.60(s, 1H)
【００４７】
実施例８
４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−Ｎ−〔（４−クロロ−３−トリフルオロメチル）フェニル〕−Ｎ−（２,２,２−トリフルオロエチル）カルボキサミド塩酸塩
この化合物は、実施例１の方法Ａと同様にして製造される。収率１２％。融点：２６８〜２７０℃。
MS：m/e 511.5(M+＋1)；200 MHz 1H-NMR(DMSO-d6, ppm)：1.20(s, 6H), 3.55(s, 2H), 4.75(q, 2H), 7.05(brs, 2H), 7.30(s, 1H), 7.55(dd, 1H), 7.70(d, 1H), 7.90(s, 1H), 7.95(d, 1H)
【００４８】
実施例９
４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−Ｎ−〔（４−クロロ−３−トリフルオロメチル）フェニル〕−Ｎ−（２,２,３,３,３−ペンタフルオロプロピル）カルボキサミド
この化合物は、実施例２の方法Ｂと同様にして製造される。収率１２％。融点：２３２〜２３４℃。
MS：m/e 561.8(M+＋1)；200 MHz 1H-NMR(DMSO-d6, ppm)：1.20(s, 6H), 3.55(s, 2H), 4.80(t, 2H), 7.00(brs, 2H), 7.30(s, 1H), 7.55(dd, 1H), 7.70(d, 1H), 7.90(s, 1H), 7.95(d, 1H)
【００４９】
実施例１０
４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−Ｎ−〔（４−クロロ−３−トリフルオロメチル）フェニル〕−Ｎ−（２,２,３,３,４,４,４−ヘプタフルオロブチル）カルボキサミド
この化合物は、実施例２の方法Ｂと同様にして製造される。収率１０％。融点：２２８〜２３０℃。
MS：m/e 611.6(M+＋1)；200 MHz 1H-NMR(DMSO-d6, ppm)：1.20(s, 6H), 3.55(s, 2H), 4.80(t, 2H), 7.05(brs, 2H), 7.30(s, 1H), 7.55(dd, 1H), 7.70(d, 1H), 7.90(s, 1H), 7.95(d, 1H)
【００５０】
実施例１１
４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−Ｎ−〔（６−クロロ−３−トリフルオロメチル）フェニル〕−Ｎ−（２,２,３,３,３−ペンタフルオロプロピル）カルボキサミド塩酸塩
この化合物は、実施例１の方法Ａと同様にして製造される。収率２９％。融点：１５２℃。
MS：m/e 561.5(M+＋1)；200 MHz 1H-NMR(DMSO-d6, ppm)：1.20(s, 6H), 3.55(s, 2H), 4.75(t, 2H), 7.10(brs, 2H), 7.35(s, 1H), 7.70(s, 2H), 7.75(s, 1H), 8.30(s, 1H)
【００５１】
実施例１２
４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−〔Ｎ−（３−トリフルオロメチルフェニル）−Ｎ−（２−フルオロエチル〕カルボキサミド
この化合物は、実施例１の方法Ａと同様にして製造される。収率５１％。融点：２１０℃。
MS：m/e 441(M+＋1)；200 MHz 1H-NMR(DMSO, ppm)：1.30(s, 6H), 3.75(s, 2H), 4.15(dt, 2H), 4.70(dt, 2H), 6.40(brs, 2H), 7.20-7.30(m, 2H), 7.35-7.55(m, 3H), 7.75(s, 1H)
【００５２】
実施例１３
４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−〔Ｎ−（２,２,２−トリフルオロエチル）−Ｎ−（３−トリフルオロメチル−６−クロロフェニル）〕カルボキサミド
この化合物は、実施例２の方法Ｂと同様にして製造される。収率２１％。融点：２２２℃。
MS：m/e 511(M+＋1)；200 MHz 1H-NMR(DMSO-d6, ppm)：1.22(s, 6H), 3.60(s, 2H), 4.46および4.70(2×brs, 2H), 7.82(m, 2H), 7.94(s, 1H), 8.23(s, 1H), 8.63(s, 1H), 8.70(brs, 2H)
【００５３】
実施例１４
４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−〔Ｎ−（３−トリフルオロメチル−６−クロロフェニル）−Ｎ−（２,２,３,３,４,４,４−ヘプタフルオロブチル）〕カルボキサミド
この化合物は、実施例２の方法Ｂと同様にして製造される。収率９％。融点：２０３℃。
MS：m/e 611.6(M+＋1)；200 MHz 1H-NMR(DMSO-d6, ppm)：1.20(s, 6H), 3.55(s, 2H), 4.78(t, 2H), 7.08(brs, 2H), 7.33(s, 1H), 7.73(s, 2H), 7.78(s, 1H), 8.34(s, 1H)
【００５４】
実施例１５
４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）−５−〔Ｎ−（３−トリフルオロメチルフェニル）−Ｎ−（２,２,３,３,４,４,５,５,５−ノナフルオロペンチル）〕カルボキサミド
この化合物は、実施例２の方法Ｂと同様にして製造される。収率１５％。融点：１７４〜１７６℃。
MS：m/e 627(M+＋1)；200 MHz 1H-NMR(DMSO-d6, ppm)：1.20(s, 6H), 3.55(s, 2H), 4.82(t, 2H), 7.03(brs, 2H), 7.28(s, 1H), 7.55-7.70(m, 3H), 7.80(s, 2H)
【００５５】
実施例１６（方法Ｃ）
４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−〔Ｎ−（３−トリフルオロメチルフェニル）−Ｎ−（２,２,２−トリフルオロエチル）〕カルボキサミド
第１工程：４−（１−メチルピロリジン−２−イリデンアミノ）−２−（４,４−ジメチル−２−イミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−カルボン酸エチルの合成
４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）−ピリミジン−５−カルボン酸エチル１ｇ＝３.５８ミリモルを、エタノール２０mlに溶解しそして溶液を２,２−ジエトキシ−１−メチルピロリジン１０mlで処理しそして室温で１時間撹拌する。その後、溶剤および過剰のＮＭＰジエチルアセタールを回転蒸発器上で留去しそして残留物をジエチルエーテルと一緒に撹拌しそして吸引濾去する。残留物を熱ＥｔＯＨに溶解しそして溶液を活性炭と一緒に煮沸し、濾過しそして濃縮する。４−（１−メチルピロリジン−２−イリデンアミノ）−２−（４,４−ジメチル−２−オキソ−１−イミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−カルボン酸エチル１.２ｇが得られた。収率８６.９％。融点１６９℃。
MS：m/e 361.2(M+＋1)；1H-NMR(200 MHz，DMSO-d6, ppm), d〔ppm〕：8.55(s, 1H), 7.35(s, 1H), 4.2(q, 2H), 3.73(s, 2H), 3.48(t, 2H), 3.03(t, 2H), 3.0(s, 3H), 1.98(p. 2H), 1.28(t(いんぺい)＋s, 9H)
【００５６】
第２工程：４−（１−メチルピロリジン−２−イリデンアミノ）−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−カルボン酸の合成
４−（１−メチルピロリジン−２−イリデンアミノ）−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−カルボン酸エステル４ｇ＝１１.１ミリモルを、乾燥Ｎａｌ ５.０ｇ＝３３.３ミリモルと一緒に乾燥ＣＨ3ＣＮ １００mlに溶解（アルゴン）する。溶液を、加熱還流しそしてＴＭＳＣｌ ４.２５ml＝３.６４ｇ＝３３.３ミリモルを、徐々に滴加する。反応混合物を、還流下で５５時間煮沸する。その後、さらにＮａｌおよびＴＭＳＣｌの相当する量を加えそして混合物をさらに１５時間加熱する。冷却した反応混合物を吸引濾過しそして固体をＣＨ3ＣＮで洗浄する。残留物を水中で撹拌し、再び吸引濾去し、小量のエタノールおよびジエチルエーテルで洗浄しそして真空中で乾燥する。無色の粉末２.５２ｇが得られた。収率６８.３％。ＭＳ：m/e ３３３.１（Ｍ+＋１）。融点：２９８℃（分解）。
1H-NMR 200 MHz, DMSO-d6, ppm), d〔ppm〕：14.4(s, ブロード, 1H), 8.88(s, 1H), 8.15(s, 1H), 3.83(t＋s, 4H), 3.6(t, 2H), 3.23(s, 3H), 2.18(p, 2H), 1.33(s, 6H)
【００５７】
２.２．４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル)ピリミジン−５−カルボン酸１ｇ＝３.９８ミリモルを、乾燥ピリジン２０mlおよびＮＭＰジエチルアセタール１０mlの混合物に懸濁しそして混合物を室温で４８〜７２時間撹拌する。すぐに赤色〜褐色の溶液が得られる。この溶液をジクロロメタン約５０mlでうすめ、水約５０mlで処理しそしてそれから撹拌しながら氷酢酸で処理する。この方法において、帯黄色の沈殿が有機相と水性相との間の中間層において析出する。この沈殿を、吸引濾去し、水でそれからエタノールで洗浄しそして乾燥する。無水の粉末０.３５ｇが得られた。収率２６.５％。融点：２９５℃（分解）から。
【００５８】
２.３．４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル)ピリミジン−５−カルボン酸５ｇ＝１９.９ミリモルを、撹拌しながら、乾燥ジクロロメタン５０mlに懸濁する。ＮＭＰジエチルアセタール(２)１０mlを加え（反応混合物の僅かな加温）そして懸濁液を、室温で２４〜４８時間撹拌する。帯黄色の懸濁液を、吸引濾去しそして残留物をジクロロメタンで洗浄する。無色の粉末２.０７ｇが得られた。収率：３１.３％。融点：２９５℃(分解)から。
1H-NMR (200 MHz, DMSO-d6, ppm), d〔ppm〕：14.4(s, ブロード, 1H), 8.88(s, 1H), 8.15(s, 1H), 3.83(t＋s, 4H), 3.6(t, 2H), 3.23(s, 3H), 2.18(p, 2H), 1.33(s, 6H)
【００５９】
第３工程：４−（１−メチルピロリジン−２−イリデンアミノ）−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−Ｎ−（２,２,２−トリフルオロエチル）−Ｎ−〔（３−トリフルオロメチル）フェニル〕カルボキサミドの合成
４−（１−メチルピロリジン−２−イリデンアミノ）−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−カルボン酸１ｇ＝３ミリモルおよびＮ−（２,２,２−トリフルオロエチル）−３−トリフルオロメチルアニリン０.７３ｇ＝３ミリモルを、０℃の乾燥ＤＭＦ ２０ml中に懸濁しそして撹拌しながら、ＴＯＴＵ（Ｏ−｛〔シアノ（エトキシカルボニル）メチリデン〕アミノ｝−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート）０.９９ｇ＝３ミリモルおよびＮＥｔ3 ０.４１６ml＝３ミリモルで処理する。混合物を０℃で１０′撹拌しそして室温に加温し、１時間後にさらにＮＥｔ3 ０.４１６ml（＝３ミリモル）を加えそしてそれから反応混合物を１００℃の浴温で一夜撹拌する。反応溶液を、濃縮しそして残留物をジエチルエーテルと一緒に撹拌しそして吸引濾去する。残留物を飽和炭酸ナトリウム溶液と一緒に撹拌しそして水性相を、酢酸エチルで数回抽出する。酢酸エチル相を濃縮しそして残留物を、9／1の酢酸エチル／メタノールを使用してシリカゲル上でクロマトグラフィー処理して、油としてアニリド０.４７ｇを得た。収率２８.４％。
MS：m/e 558(M+＋1)；1H-NMR (200 MHz, DMSO-d6), d〔ppm〕：8.22(s, 1H), 7.66(s, 1H), 7.59-7.45(m, 3H), 4.8(q, 2H), 3.58(s, 2H), 3.42(t, 2H), 3.0(s, 3H), 2.2(t, 2H), 1.91(p, 2H), 1.22(s, 6H)
【００６０】
第４工程：４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−〔Ｎ−（３−トリフルオロメチルフェニル）−Ｎ−（２,２,２−トリフルオロエチル）〕カルボキサミドの合成
４−（１−メチルピロリジン−２−イリデンアミノ）−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−Ｎ−〔（２,２,２−トリフルオロエチル）〕−Ｎ−（３−トリフルオロメチルフェニル）カルボキサミド８４mg＝０.１５ミリモルを、イソプロパノール５mlおよび濃アンモニア水溶液３mlの混合物に懸濁しそして混合物を、エチレンジアミン３滴で処理しそして還流下で２４〜４８時間煮沸する。反応溶液を濃縮しそして9／1のＥＡ／ＭｅＯＨの混合物を使用してシリカゲル上でクロマトグラフィー処理する。無色の油が得られる。これを、ジエチルエーテルの添加によって、氷浴中で結晶化する。４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−〔Ｎ−（３−トリフルオロメチルフェニル）−Ｎ−（２,２,２−トリフルオロエチル）〕カルボキサミド０.３ｇが無色の結晶として得られた。収率４４.７％。融点：２４８℃。
1H-NMR(DMSO-d6, ppm)：1.2(s, 6H), 3.55(s, 2H), 4.75(q, 2H), 7.0(s, ブロード, 2H), 7.28(s, 1H), 7.64-7.54(m, 3H), 7.82-7.75(m, 2H)
【００６１】
実施例１７
４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）−５−ピリミジン−５−〔Ｎ−（３−トリフルオロメチル−４−フルオロフェニル）−Ｎ−（２,２,３,３,４,４,４−ヘプタフルオロブチル）〕カルボキサミド
この化合物は、実施例１の方法Ａと同様にして製造される。収率５％。融点１２８℃（分解）。
MS m/e＝595.3(M+＋1)；200 MHz, 1H-NMR(DMSO-d6, ppm)：1.20(s, 6H), 3.60(s, 2H), 4.78(t, 2H), 7.0(brs, 2H), 7.20(s, 1H), 7.42-7.95(m, 3H)
【００６２】
実施例１８
４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−〔Ｎ−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチルフェニル）−Ｎ−（２,２,２−トリフルオロエチル）〕カルボキサミド塩酸塩
この化合物は、実施例２と同様にして製造される。収率１５％。融点：２９５℃（分解）。
MS m/e＝495.1(M+＋1)；200 MHz, 1H-NMR(DMSO-d6, ppm)：1.30(s, 6H), 3.60(s, 2H), 4.60-4.90(brs, 2H), 7.55(m, 1H), 7.85(m, 1H), 7.95(s, 1H), 8.25(m, 1H), 8.60(brs, 1H), 8.65(s, 1H), 9.15(brs, 1H)
【００６３】
実施例１９
４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−〔Ｎ−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチルフェニル）−Ｎ−（２,２,３,３,３−ペンタフルオロプロピル）〕カルボキサミド
この化合物は、実施例２と同様にして製造される。収率１０％。融点：２４０℃（分解）。
MS m/e＝545.2(M+＋1)；200 MHz, 1H-NMR(DMSO-d6, ppm)：1.30(s, 6H), 3.60(s, 2H), 4.80(t, 2H), 7.00(brs, 2H), 7.35(s, 1H), 7.45(m, 1H), 7.75(m, 1H), 7.80(s, 1H), 8.25(m, 1H)
【００６４】
実施例２０
４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−（Ｎ−ペンタフルオロプロピル−Ｎ−３−トリフルオロメチル−４−フルオロカルボキシアニリド）
この化合物は、実施例２の方法Ｂと同様にして製造される。収率５％。融点：２０８℃。
MS m/e 545(M+＋1)；200 MHz, 1H-NMR(DMSO-d6, ppm)：7.95-7.85(s, 2H), 7.70-7.45(m, 2H), 7.3(s, 1H), 7.0(s, 2H), 4.78(t, 2H), 3.58(s, 2H), 4.78(t, 2H), 3.58(s, 2H), 1.20(s, 6H)
【００６５】
実施例２１
４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−（Ｎ−ヘプタフルオロプロピル−Ｎ−３−トリフルオロメチル−６−フルオロカルボキシアニリド）
この化合物は、実施例２の方法Ｂと同様にして製造される。収率４％。融点：２００℃。
MS m/e 595(M+＋1)；200 MHz, 1H-NMR(DMSO-d6, ppm)：8.25(d, 1H), 7.82(s, 1H), 7.82-7.70(m, 1H), 7.45(t, 2H), 7.32(s, 1H), 7.05(s, 2H), 4.8(t, 2H), 3.58(s, 2H), 1.20(s, 6H)
【００６６】
実施例２２
４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−２−イル）ピリミジン−５−Ｎ−〔（３−トリフルオロメチルフェニル）−Ｎ−（２−フルオロエチル）〕カルボキサミド
第１工程：３−（１−アミジノ−４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）−２−シアノアクリル酸エチルの製造
水酸化カリウム２.１１ｇ（３７ミリモル）を、７０℃に加温しながら、イソプロパノール３０mlに溶解する。室温に冷却した後、１−アミジノ−４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン８.９ｇ（３７ミリモル）を加えそして混合物を１時間以上撹拌する。イソプロパノール８mlに溶解した２−アミノ−３−エトキシ−アクリル酸エチル６.３４ｇ（３７ミリモル）を加える。白色の懸濁液は、この経過中にしばらくの間より高度に液体となり、それから生成物が沈殿しはじめる。混合物を、１０℃で１時間以上撹拌し、沈殿を吸引濾去しそしてこのようにして得られた生成物を、イソプロパノール、水、イソプロパノールおよびＭＴＢエーテルで洗浄することによって精製する。それから、それを、真空中４０℃で、一定の重量になるまで乾燥する。収量８.９ｇ（理論値の８６％）。
MS m/e 280.3(M+＋1)；200 MHz, 1H-NMR(DMSO-d6, ppm)：1.25(t, 3H), 1.30(s, 6H), 3.70(s, 2H), 4.15(q, 2H), 8.25(s, 1H), 8.60(s, 1H), 8.75(brs, 2H)
【００６７】
第２工程：４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−カルボン酸エチルの製造
第１工程により製造された３−（１−アミジノ−４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）−２−シアノアクリル酸エステル７.１ｇ（２５ミリモル）を、トルエン３０mlに懸濁する。この懸濁液を、トリフルオロ酢酸２.９ｇで処理しそして９５℃に加温する。環化終了後、混合物を室温に冷却しそしてＭＴＢエーテル３０mlで処理する。このようにして得られた粗製生成物を、シリカゲル上のカラムクロマトグラフィーによって精製する。収量５.０５ｇ（理論値の７２％）。
MS m/e 280.2(M+＋1)；200 MHz, 1H-NMR(DMSO-d6, ppm)：1.25(s, 6H), 1.30(t, 3H), 3.70(s, 2H), 4.15(q, 2H), 7.40(s, 1H), 7.55(brs, 1H), 7.75(brs, 1H), 8.60(s, 1H)
【００６８】
第３工程：４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−カルボン酸の製造
第２工程によって製造された４−アミノ−２−（４,４−ジメチルイミダゾリジン−２−オン−１−イル）ピリミジン−５−カルボン酸エチル５.５ｇ（１９.７ミリモル）を、水５５ml中の水酸化ナトリウム０.８ｇの溶液に加える。この懸濁液を７０℃に加温しそしてこの温度で出発物質が消失（ＨＰＬＣ検査）するまで撹拌する。それを、５０℃に冷却しそして３７％ＨＣｌ約２mlで処理する。この経過中に、白色の沈殿が沈降する。混合物を氷浴中で冷却しそしてそれから、沈殿を吸引濾去する。濾過残留物を氷水で洗浄しそして真空中で乾燥してきれいな生成物を得た。収量３.３０ｇ（理論値の６６％）。
MS m/e 280.2(M+＋1)；200 MHz, 1H-NMR(DMSO-d6, ppm)：1.25(s, 6H), 1.30(t, 3H), 3.70(s, 2H), 4.15(q, 2H), 7.40(s, 1H), 7.55(brs, 1H), 7.75(brs, 1H), 8.60(s, 1H)
【００６９】
発明の詳細な説明において使用された略号は、次の意義を有す。
ＤＭＥ      ジメトキシエタン
ＮＥｔ3     トリエチルアミン
ＴＭＳＣｌ  トリメチルクロロシラン
ＬＤＬ      低密度リポタンパク質
ＮＭＰ      Ｎ−メチルピロリドン
ＤＭＦ      ジメチルホルムアミド
ＴＯＴＵ    Ｏ−〔（シアノ（エトキシカルボニル）メチリデン）アミノ−１,１,３,３−テトラメチル〕ウロニウムテトラフルオロボレート