(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の式を有する化合物又はその薬学的に受容可能な塩若しくは溶媒和物：
【化１】
0004101054.tif 000045
式中、
Ｒ0は独立して、ハロ、C1〜6アルキル、C2〜6アルケニル、アリール、ヘテロアリール、C3〜8シクロアルキル、C3〜8ヘテロシクロアルキル、C1〜3アルキレンアリール、C1〜3アルキレンヘテロアリール、Het、C（＝O）Ra、OC（＝O）ORa、C1〜4アルキレンNRaRb、C1〜4アルキレンHet、C1〜4アルキレンC（＝O）ORa、C（＝O）NRaSO2Rb、C（＝O）C1〜4アルキレンHet、C（＝O）NRaRb、C（＝O）NRaC1〜4アルキレンORb、C（＝O）NRaC1〜4アルキレンHet、ORa、OC1〜4アルキレンC（＝O）ORa、OC1〜4アルキレンNRaRb、OC1〜4アルキレンHet、OC1〜4アルキレンORa、OC1〜4アルキレンNRaC（＝O）ORb、NRaRb、NRaC1〜4アルキレンNRaRb、NRaC（＝O）Rb、NRaC（＝O）NRaRb、N(SO2C1〜4アルキル）2、NRa(SO2C1〜4アルキル）、ニトロ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、シアノ、SO2NRaRb、SO2Ra、SORa、SRa、及び、OSO2CF3からなる群から選択され；
Ｒ1は、水素、C1〜6アルキル、C2〜6アルケニル、C2〜6アルキニル、ハロＣ1〜6アルキル、C3〜8シクロアルキル、C3〜8シクロアルキルC1〜3アルキル、アリールC1〜3アルキル及びヘテロアリールC1〜3アルキルからなる群から選択され；
Ｒ2は、ベンゼン、チオフェン、フラン、及び、ピリジンからなる群より選択される任意に置換された単環式芳香族環、並びに、任意に置換された二環式環
【化２】
0004101054.tif 000046
からなる群より選択され、ここで、融合環Ａは、飽和であるか、又は、部分的若しくは完全に不飽和である５又は６員環であり、かつ、炭素原子、並びに、任意に、酸素、イオウ、及び、窒素から選択される１つ若しくは２つのヘテロ原子を含み、
R3は、水素又はC1〜6アルキルからなるか、
或いは、R1及びＲ3は一緒になって、５員環又は６員環の３員又は４員のアルキル鎖成分又はアルケニル鎖成分を表し；
融合環Bは、部分的若しくは完全に不飽和である５、又は、６員環であり、かつ、炭素原子、並びに、任意に、酸素、イオウ、及び、窒素から選択される１〜３のヘテロ原子を含み；
Raは、水素、C1〜10アルキル、C2〜10アルケニル、C2〜10アルキニル、アリール、ヘテロアリール、アリールC1〜3アルキル、C1〜3アルキレンアリール、C（＝O）ORb、C（＝O）N(Rb)2、C1〜4アルキレンN(Rb)2、CF3、OCF3、ORb、OC（＝O）Rb、OC1〜4アルキレンC（＝O）ORb、C1〜4アルキレンOC1〜4アルキレンC（＝O）ORb、C（＝O）NRbSO2Rb、C（＝O）C1〜4アルキレンHet、C2〜6アルキレンN(Rb)2、C（＝O）NRbC1〜4アルキレンORb、C（＝O）NRbC1〜4アルキレンHet、OC2〜4アルキレンN(Rb)2、OC1〜4アルキレンCH(ORb)CH2N(Rb)2、OC2〜4アルキレンORb、OC2〜4アルキレンNRbC（＝O）ORb、N(Rb)2、NRbC1〜4アルキレンN(Rb)2、NRbC（＝O）Rb、NRbC（＝O）N(Rb)2、N(SO2C1〜4アルキル）2、NRb(SO2C1〜4アルキル）、SO2N(Rb)2、OSO2トリフルオロメチル、C（＝O）Rb、C1〜3アルキレンORb、CN、及び、C1〜6アルキレンC（＝O）ORbからなる群から選択され；
Rbは、水素、C1〜6アルキル、アリール、アリールC1〜3アルキル、C1〜3アルキレンアリール、ヘテロアリール、ヘテロアリールC1〜3アルキル、及び、C1〜3アルキレンヘテロアリールからなる群から選択され；
qは、０、１、２、３又は４である。
【請求項２】
下記の式：
【化３】
0004101054.tif 000047
によって表される、請求項１に記載の化合物又はその薬学的に受容可能な塩若しくは溶媒和物。
【請求項３】
ｑが、０である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ0が、Ｃ1〜6アルキル、アリール、Ｃ1〜3アルキレンアリール、Ｃ1〜3アルキレンヘテロアリール、Ｈｅｔ、ＯＲa、Ｃ1〜4アルキレンＮＲaＲb、Ｃ（＝Ｏ）Ｒa、ＮＲaＲb、Ｃ3〜8シクロアルキル、及び、Ｃ（＝Ｏ）ＮＲaＲbからなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ1が、水素、Ｃ1〜6アルキル、ハロＣ1〜6アルキル、Ｃ3〜8シクロアルキル、Ｃ3〜8シクロアルキレンＣ1〜3アルキル、アリールＣ2〜3アルキル、及び、ヘテロアリールＣ1〜3アルキルからなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ2が、ナフタレン、インデン、ベンゾキサゾール、ベンゾチアゾール、ベンズイソキサゾール、ベンズイミダゾール、キノリン、インドール、ベンゾチオフェン、及び、ベンゾフランからなる群より選択される任意に置換された二環式環である、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ2が、
【化４】
0004101054.tif 000048
（ここで、ｑは、整数１又は２であり、かつ、Ｇは独立に、Ｃ（Ｒa）2、Ｏ、Ｓ、又は、ＮＲaである）
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ2が、任意に置換されている
【化５】
0004101054.tif 000049
からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
環Ｂが、シクロペンテニル、シクロヘキシニル、フェニル、フラニル、チエニル、２Ｈ−ピローリル、ピローリル、２−ピローリニル、３−ピローリニル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、２−イミダゾリニル、ピラゾリル、２−ピラゾリニル、イソキサゾリル、イソチアジゾリル、１，２，３−オキサジアゾリル、１，２，３−トリアゾリル、１，３，４−チアジゾリル、３Ｈ−ピローリル、１，２−ジチオリル、１，３−ジチオリル、３Ｈ−１，２−オキサチオリル、１，２，４−オキサジアゾリル、１，２，５−オキサジアゾリル、１，３，４−オキサジアゾリル、１，２，３，４−オキサトリアゾリル、１，２，３，５−オキサトリアゾリル、３Ｈ−１，２，３−ジオキサゾリル、１，２，４−ジオキサゾーレ、１，３，２−ジオキサゾーレ、１，３，４−ジオキサゾリル、５Ｈ−１，２，５−オキサチアゾリル、１，３−オキサチオリル、２Ｈ−ピラニル、４Ｈ−ピラニル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、１，３，５−トリアジニル、２−ピローニル、４−ピロニル、１，２−ジオキニル、１，３−ジオキシニル、１，２，４−トリアジニル、１，２，３−トリアジニル、４Ｈ−１，３−オキサジニル、２Ｈ−１，３−オキサジニル、６Ｈ−１，３−オキサジニル、６Ｈ−１，２−オキサジニル、２Ｈ−１，２−オキサジニル、４Ｈ−１，４−オキサジニル、１，２，５−オキサチアジニル、１，４−オキサジニル、ｏ−イソキサジニル、ｐ−イソキサジニル、１，２，５−オキサチアジニル、１，２，６−オキサチアジニル、１，４，２−オキサジアジニル、及び、１，３，５，２−オキサジアジニルからなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
環Ｂが、非置換又は置換である、フェニル、イミダゾリル、ピローリル、チエニル、フラニル、チアゾリル、オキサゾリル、ピリミジニル、トリアジニル、及び、イミダゾリニルからなる群より選択される、請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
【化６】
0004101054.tif 000050
【化７】
0004101054.tif 000051
【化８】
0004101054.tif 000052
【化９】
0004101054.tif 000053
からなる群より選択される、化合物又はその薬学的に受容可能な塩若しくは溶媒和物。
【請求項１２】
下記の式を有する化合物又はその薬学的に受容可能な塩若しくは溶媒和物を薬学的に受容可能な希釈剤またはキャリアと一緒に含む薬学的組成物。
【化１０】
0004101054.tif 000054
式中、
Ｒ0は独立して、ハロ、C1〜6アルキル、C2〜6アルケニル、アリール、ヘテロアリール、C3〜8シクロアルキル、C3〜8ヘテロシクロアルキル、C1〜3アルキレンアリール、C1〜3アルキレンヘテロアリール、Het、C（＝O）Ra、OC（＝O）ORa、C1〜4アルキレンNRaRb、C1〜4アルキレンHet、C1〜4アルキレンC（＝O）ORa、C（＝O）NRaSO2Rb、C（＝O）C1〜4アルキレンHet、C（＝O）NRaRb、C（＝O）NRaC1〜4アルキレンORb、C（＝O）NRaC1〜4アルキレンHet、ORa、OC1〜4アルキレンC（＝O）ORa、OC1〜4アルキレンNRaRb、OC1〜4アルキレンHet、OC1〜4アルキレンORa、OC1〜4アルキレンNRaC（＝O）ORb、NRaRb、NRaC1〜4アルキレンNRaRb、NRaC（＝O）Rb、NRaC（＝O）NRaRb、N(SO2C1〜4アルキル）2、NRa(SO2C1〜4アルキル）、ニトロ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、シアノ、SO2NRaRb、SO2Ra、SORa、SRa、及び、OSO2CF3からなる群から選択され；
Ｒ1は、水素、C1〜6アルキル、C2〜6アルケニル、C2〜6アルキニル、ハロＣ1〜6アルキル、C3〜8シクロアルキル、C3〜8シクロアルキルC1〜3アルキル、アリールC1〜3アルキル及びヘテロアリールC1〜3アルキルからなる群から選択され；
Ｒ2は、
【化１１】
0004101054.tif 000055
（ここで、ｑは、整数１又は２であり、かつ、Ｇは独立に、Ｃ（Ｒa）2、Ｏ、Ｓ、又は、ＮＲaである）
であり、
R3は、水素又はC1〜6アルキルからなるか、
或いは、R1及びＲ3は一緒になって、５員環又は６員環の３員又は４員のアルキル鎖成分又はアルケニル鎖成分を表し；
融合環Bは、非置換又は置換である、フェニル、イミダゾリル、ピローリル、チエニル、フラニル、チアゾリル、及び、オキサゾリルからなる群より選択され；
Raは、水素、C1〜10アルキル、C2〜10アルケニル、C2〜10アルキニル、アリール、ヘテロアリール、アリールC1〜3アルキル、C1〜3アルキレンアリール、C（＝O）ORb、C（＝O）N(Rb)2、C1〜4アルキレンN(Rb)2、CF3、OCF3、ORb、OC（＝O）Rb、OC1〜4アルキレンC（＝O）ORb、C1〜4アルキレンOC1〜4アルキレンC（＝O）ORb、C（＝O）NRbSO2Rb、C（＝O）C1〜4アルキレンHet、C2〜6アルキレンN(Rb)2、C（＝O）NRbC1〜4アルキレンORb、C（＝O）NRbC1〜4アルキレンHet、OC2〜4アルキレンN(Rb)2、OC1〜4アルキレンCH(ORb)CH2N(Rb)2、OC2〜4アルキレンORb、OC2〜4アルキレンNRbC（＝O）ORb、N(Rb)2、NRbC1〜4アルキレンN(Rb)2、NRbC（＝O）Rb、NRbC（＝O）N(Rb)2、N(SO2C1〜4アルキル）2、NRb(SO2C1〜4アルキル）、SO2N(Rb)2、OSO2トリフルオロメチル、C（＝O）Rb、C1〜3アルキレンORb、CN、及び、C1〜6アルキレンC（＝O）ORbからなる群から選択され；
Rbは、水素、C1〜6アルキル、アリール、アリールC1〜3アルキル、C1〜3アルキレンアリール、ヘテロアリール、ヘテロアリールC1〜3アルキル、及び、C1〜3アルキレンヘテロアリールからなる群から選択され；
qは、０、１、２、３又は４である。
【請求項１３】
ｃＧＭＰに特異的なＰＤＥの阻害が治療的に有益である状態について雄性動物または雌性動物を処置するための請求項１２記載の薬学的組成物。
【請求項１４】
状態が男性の勃起機能不全である、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
処置が経口処置である、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】
状態が女性の性的興奮障害である、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１７】
処置が経口処置である、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１８】
状態が、安定型狭心症、不安定型狭心症、異型狭心症、高血圧、肺高血圧症、慢性閉塞性肺疾患、悪性高血圧症、クロム親和性細胞腫、急性呼吸窮迫症候群、鬱血性心不全、急性腎不全、慢性腎不全、アテローム性動脈硬化症、血管能力が低下した状態、末梢血管疾患、血管障害、血小板血症、炎症性疾患、心筋梗塞、発作、気管支炎、慢性喘息、アレルギー性喘息、アレルギー性鼻炎、緑内障、消化性潰瘍、消化管運動障害、経皮経管冠動脈形成術後、頸動脈血管形成術、バイパス手術後グラフト狭窄症、骨粗鬆症、早産、良性前立腺肥大および過敏性腸症候群からなる群から選択される、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１９】
ヒトまたは非ヒト動物の身体において、ｃＧＭＰに特異的なＰＤＥの阻害が治療的に有益である状態を処置するための請求項１２記載の薬学的組成物。
【請求項２０】
雄の勃起機能不全または雌の性的興奮障害を治療的または予防的に処置するための請求項１２記載の薬学的組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（発明の分野および背景）
本発明は、一連の化合物、そのような化合物の調製方法、そのような化合物を含有する薬学的組成物、および治療剤としてのその使用に関する。詳細には、本発明は、環状グアノシン3’，5’一リン酸に特異的なホスホジエステラーゼ（cGMP特異的PDE）（特にPDE5）の強力な選択的阻害剤である化合物で、心臓血管障害および勃起機能不全の処置を含む、そのような阻害が有益と考えられる様々な治療領域において有用である化合物に関する。
【０００２】
（発明の詳細な説明）
本発明は、下記の式（Ｉ）の化合物並びにその薬学的に受容可能な塩及び溶媒和物に関する：
【０００３】
【化１０】
0004101054.tif 000002
式中、
Ｒ0は独立して、ハロ、C1〜6アルキル、C2〜6アルケニル、アリール、ヘテロアリール、C3〜8シクロアルキル、C3〜8ヘテロシクロアルキル、C1〜3アルキレンアリール、C1〜3アルキレンヘテロアリール、Het、C（＝O）Ra、OC（＝O）ORa、C1〜4アルキレンNRaRb、C1〜4アルキレンHet、C1〜4アルキレンC（＝O）ORa、C（＝O）NRaSO2Rb、C（＝O）C1〜4アルキレンHet、C（＝O）NRaRb、C（＝O）NRaC1〜4アルキレンORb、C（＝O）NRaC1〜4アルキレンHet、ORa、OC1〜4アルキレンC（＝O）ORa、OC1〜4アルキレンNRaRb、OC1〜4アルキレンHet、OC1〜4アルキレンORa、OC1〜4アルキレンNRaC（＝O）ORb、NRaRb、NRaC1〜4アルキレンNRaRb、NRaC（＝O）Rb、NRaC（＝O）NRaRb、N(SO2C1〜4アルキル）2、NRa(SO2C1〜4アルキル）、ニトロ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、シアノ、SO2NRaRb、SO2Ra、SORa、SRa、及び、OSO2CF3からなる群から選択され；
Ｒ1は、水素、C1〜6アルキル、C2〜6アルケニル、C2〜6アルキニル、ハロＣ1〜6アルキル、C3〜8シクロアルキル、C3〜8シクロアルキルC1〜3アルキル、アリールC1〜3アルキル及びヘテロアリールC1〜3アルキルからなる群から選択され；
Ｒ2は、ベンゼン、チオフェン、フラン、及び、ピリジンからなる群より選択される任意に置換された単環式芳香族環、並びに、任意に置換された二環式環
【０００４】
【化１１】
0004101054.tif 000003
からなる群より選択され、ここで、融合環Ａは、飽和であるか、又は、部分的若しくは完全に不飽和である５又は６員環であり、かつ、炭素原子、並びに、任意に、酸素、イオウ、及び、窒素から選択される１つ若しくは２つのヘテロ原子を含み、
R3は、水素又はC1〜6アルキルからなるか、
或いは、R1及びＲ3は一緒になって、５員環又は６員環の３員又は４員のアルキル鎖成分又はアルケニル鎖成分を表し；
融合環Bは、飽和であるか、又は、部分的若しくは完全に不飽和である５、６、又は、７員環であり、かつ、炭素原子、並びに、任意に、酸素、イオウ、及び、窒素から選択される１〜３のヘテロ原子を含み；
Raは、水素、C1〜10アルキル、C2〜10アルケニル、C2〜10アルキニル、アリール、ヘテロアリール、アリールC1〜3アルキル、C1〜3アルキレンアリール、C（＝O）ORb、C（＝O）N(Rb)2、C1〜4アルキレンN(Rb)2、CF3、OCF3、ORb、OC（＝O）Rb、OC1〜4アルキレンC（＝O）ORb、C1〜4アルキレンOC1〜4アルキレンC（＝O）ORb、C（＝O）NRbSO2Rb、C（＝O）C1〜4アルキレンHet、C2〜6アルキレンN(Rb)2、C（＝O）NRbC1〜4アルキレンORb、C（＝O）NRbC1〜4アルキレンHet、OC2〜4アルキレンN(Rb)2、OC1〜4アルキレンCH(ORb)CH2N(Rb)2、OC2〜4アルキレンORb、OC2〜4アルキレンNRbC（＝O）ORb、N(Rb)2、NRbC1〜4アルキレンN(Rb)2、NRbC（＝O）Rb、NRbC（＝O）N(Rb)2、N(SO2C1〜4アルキル）2、NRb(SO2C1〜4アルキル）、SO2N(Rb)2、OSO2トリフルオロメチル、C（＝O）Rb、C1〜3アルキレンORb、CN、及び、C1〜6アルキレンC（＝O）ORbからなる群から選択され；
Rbは、水素、C1〜6アルキル、アリール、アリールC1〜3アルキル、C1〜3アルキレンアリール、ヘテロアリール、ヘテロアリールC1〜3アルキル、及び、C1〜3アルキレンヘテロアリールからなる群から選択され；
qは、０、１、２、３又は４である。
【０００５】
本明細書中で使用される用語「アルキル」には、先に示された数の炭素原子を含有する直鎖状および分枝状の炭化水素基が含まれ、典型的には、メチル基、エチル基、ならびに直鎖および分枝状のプロピル基およびブチル基が含まれる。炭化水素基は16個までの炭素原子を含有することができる。用語「アルキル」には、「架橋アルキル」、すなわち、C6〜C16のビシクロ炭化水素基または多環式炭化水素基が含まれ、例えば、ノルボルニル、アダマンチル、ビシクロ［2．2．2］オクチル、ビシクロ［2．2．1］ヘプチル、ビシクロ［3．2．1］オクチルまたはデカヒドロナフチルが含まれる。用語「シクロアルキル」は、環状のC3〜C8炭化水素基として定義され、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロヘキシルおよびシクロペンチルである。
【０００６】
用語「アルケニル」および用語「アルキニル」は、それぞれ炭素−炭素の二重結合又は炭素−炭素の三重結合を有することを除いて、「アルキル」と同様に定義される。「シクロアルケニル」は、炭素−炭素の二重結合が環に存在することを除いて、シクロアルキルと同様に定義される。
【０００７】
用語「アルキレン」は、置換基を有するアルキル基を示す。例えば、用語「C1〜3アルキレンアリール」は、1個〜3個の炭素原子を含有し、かつ1個のアリール基で置換されたアルキル基を示す。本明細書中で使用される用語「アルケニレン」は同様に定義され、示された数の炭素原子と1つの炭素−炭素の二重結合とを含有し、そしてエチエニレンのような直鎖状および分枝状のアルケニレン基を含む。
【０００８】
用語「ハロ」または用語「ハロゲン」は、フッ素、臭素、塩素およびヨウ素を含むことが本明細書中では定義される。
【０００９】
用語「ハロアルキル」は、独立して、フルオロ、クロロ、ブロモ、及び、ヨードから選択される1つ以上のハロ置換基で置換されたアルキル基として本明細書中では定義される。同様に、「ハロシクロアルキル」は、1つ以上のハロ置換基を有するシクロアルキル基として定義される。
【００１０】
用語「アリール」は単独または組合せで、本明細書中では、単環または多環の芳香族基（好ましくは単環または二環の芳香族基、例えば、フェニルまたはナフチル）として定義される。もし他で表されるならば、「アリール」基は、非置換であり得るか、または例えば、1つ以上（特に1つ〜3つ）のハロ、アルキル、ヒドロキシアルキル、アルコキシ、アルコキシアルキル、ハロアルキル、ニトロ、アミノ、アルキルアミノ、アシルアミノ、アルキルチオ、アルキルスルフィニルおよびアルキルスルホニルで置換され得る。例示的なアリール基には、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、2−クロロフェニル、3−クロロフェニル、4−クロロフェニル、2−メチルフェニル、4−メトキシフェニル、3−トリフルオロメチルフェニル、4−ニトロフェニルなどが含まれる。用語「アリールC1〜3アルキル」および用語「ヘテロアリールC1〜3アルキル」は、C1〜3アルキル置換基を有するアリール基またはヘテロアリール基として定義される。
【００１１】
用語「ヘテロアリール」は、本明細書中では、1つまたは2つの芳香族環を含有し、かつ少なくとも1個の窒素原子または酸素原子またはイオウ原子を芳香族環に含有する単環系または二環系で、非置換であり得るか、あるいは例えば、ハロ、アルキル、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、アルコキシ、アルコキシアルキル、ハロアルキル、ニトロ、アミノ、アルキルアミノ、アシルアミノ、アルキルチオ、アルキルスルフィニルおよびアルキルスルホニルのような置換基の1つ以上（特に1つ〜3つ）により置換され得る単環系または二環系として定義される。ヘテロアリール基の例には、チエニル、フリル、ピリジル、オキサゾリル、キノリル、イソキノリル、インドリル、トリアゾリル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、イミダゾリル、ベンゾチアゾリル、ピラジニル、ピリミジニル、チアゾリルおよびチアジアゾリルが含まれる。
【００１２】
用語「Het」は、酸素、窒素、及び、イオウからなる群から選択される１つ以上のヘテロ原子を含んでいる単環系、二環系、及び、三環系として定義される。「Het」基は、さらに、環に結合されたオキソ基（＝O）を含むことができる。「Het」基は、特に限定されず、1,3−ジオキソラン、2−ピラゾリン、ピラゾリジン、ピローリジン、ピペラジン、ピローリン、2H−ピラン、4H−ピラン、モルフォリン、チオフォリン、ピペリジン、1,4−ジチアン、及び、1,4−ジオキサンである。
【００１３】
用語「ヒドロキシ」は−OHとして定義される。
【００１４】
用語「アルコキシ」は、Rがアルキルである−ORとして定義される。
【００１５】
用語「アルコキシアルキル」は、1つの水素原子がアルコキシ基によって置換されているアルキル基として定義される。用語「（アルキルチオ）アルキル」は、酸素原子ではなくイオウ原子が存在することを除いて、アルコキシアルキルと同様に定義される。
【００１６】
用語「ヒドロキシアルキル」は、ヒドロキシ基がアルキル基に付属しているとして定義される。
【００１７】
用語「アミノ」は−NH2として定義され、用語「アルキルアミノ」は、少なくとも1つのRがアルキルであり、もう1つのRがアルキルまたは水素である−NR2として定義される。
【００１８】
用語「アシルアミノ」は、RがアルキルまたはアリールであるRC（＝O）Nとして定義される。
【００１９】
用語「アルキルチオ」は、Rがアルキルである−SRとして定義される。
【００２０】
用語「アルキルスルフィニル」は、ＲがアルキルであるR−SO2として定義される。
【００２１】
用語「アルキルスルホニル」は、RがアルキルであるR−SO3として定義される。
【００２２】
用語「ニトロ」は−NO2として定義される。
【００２３】
用語「トリフルオロメチル」は−CF3として定義される。
【００２４】
用語「トリフルオロメトキシ」は−OCF3として定義される。
【００２５】
用語「シアノ」は−CNとして定義される。
【００２６】
R0置換基は、環Ｂの炭素原子又はヘテロ原子に位置付けられ。好ましい実施形態において、qは、0であり、又は、R0が、C1〜6アルキル、アリール、C1〜3アルキレンアリール、C1〜3アルキレンヘテロアリール、Het、ORa、C（＝O）ORa、C1〜4アルキレンNRaRb、C（＝O）Ra、NRaRb、C3〜8シクロアルキル、及び、C（＝O）NRaRbからなる群から選択される。
【００２７】
他の好ましい実施形態において、R1が、水素、C1〜6アルキル、ハロC1〜6アルキル、C3〜8シクロアルキル、C3〜8シクロアルキレンC1〜3アルキル、アリールC2〜3アルキル、及び、ヘテロアリールC1〜3アルキルからなる群から選択される。
【００２８】
式（Ｉ）の化合物のより好ましい群において、R2は、
【００２９】
【化１２】
0004101054.tif 000004
によって表される。
【００３０】
ここで、二環式環は、例えば、ナフタレン若しくはインデン、又は、複素環、例えば、ベンゾキサゾール、ベンゾチアゾール、ベンズイソキサゾール、ベンズイミダゾール、キノリン、インドール、ベンゾチオフェン、若しくは、ベンゾフラン、又は、
【００３１】
【化１３】
0004101054.tif 000005
を表すことができる。
【００３２】
ここで、qは、整数１又は２であり、かつ、Gは独立に、C(Ra)2、O、S、又は、NRaである。二環式環は、R1置換基が典型的にフェニル環炭素原子によって残りの分子に結合することからなる。
【００３３】
式（Ｉ）の化合物のより好ましい群において、R2は、任意に置換された二環式環
【００３４】
【化１４】
0004101054.tif 000006
によって表される。
【００３５】
ここで、qは、整数１又は２であり、かつ、Gは独立に、CH2、又は、Oである。
【００３６】
特に好ましいR2置換基には、
【００３７】
【化１５】
0004101054.tif 000007
が含まれる。
【００３８】
ここで、この特定の化合物群において、二環式環への置換基には、特に限定されず、ハロゲン（例えば、塩素）、C1〜3アルキル（例えば、メチル、エチル、又は、i−プロピル）、ORa（例えば、メトキシ、エトキシ、又は、ヒドロキシ）、CO2Ra、ハロメチル、又は、ハロメトキシ（例えば、トリフルオロメチル、又は、トリフルオロメトキシ）、シアノ、ニトロ、及び、NRaRbが含まれる。
【００３９】
環Ｂの例は、下記を含むが、下記に限定されず、それらの残基を含むことができる。
【００４０】
【化１６】
0004101054.tif 000008
【００４１】
【化１７】
0004101054.tif 000009
【００４２】
【化１８】
0004101054.tif 000010
【００４３】
【化１９】
0004101054.tif 000011
【００４４】
【化２０】
0004101054.tif 000012
【００４５】
【化２１】
0004101054.tif 000013
【００４６】
【化２２】
0004101054.tif 000014
【００４７】
【化２３】
0004101054.tif 000015
R0置換基が、環Ｂの炭素又は窒素原子に結合されることがある。
【００４８】
式（Ｉ）の一般的な範囲に含まれる化合物の特に好ましいサブクラスが、下記の式（ＩＩ）：
【００４９】
【化２４】
0004101054.tif 000016
の化合物によって表される。
【００５０】
式（Ｉ）の化合物は1つ以上の非対称中心を含むことができ、従って立体異性体として存在し得る。本発明には、式（Ｉ）の化合物の両方の混合物および別々の個々の立体異性体が含まれる。式（Ｉ）の化合物にはまた互変異性形態が存在し得るので、本発明には、その両方の混合物および別々の個々の互変異性体が含まれる。
【００５１】
式（Ｉ）の化合物の薬学的に受容可能な塩には、薬学的に受容可能な酸と形成される酸付加塩を挙げることができる。好適な塩の例には、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、水素リン酸塩、酢酸塩、安息香酸塩、コハク酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、乳酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、グルコン酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩およびp−トルエンスルホン酸塩の塩が含まれるが、これらに限定されない。式（Ｉ）の化合物はまた、塩基との薬学的に受容可能な金属塩（具体的には、アルカリ金属塩およびアルカリ土類金属塩）をもたらし得る。例には、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩およびカルシウム塩が含まれる。
【００５２】
本発明の化合物は、cGMPに特異的なPDE5の強力な選択的阻害剤である。従って、式（Ｉ）の化合物は、治療における使用が注目され、具体的には、PDE5の選択的な阻害が有益であると考えられる様々な状態を処置するための使用が注目される。
【００５３】
ホスホジエステラーゼ（PDE）は、環状アデノシン一リン酸（cAMP）および環状グアノシン一リン酸（cGMP）などの環状ヌクレオチドの加水分解を触媒する。PDEは、少なくとも7つのイソ酵素ファミリーに分類されており、多くの組織に存在している（J.A.Beavo、Physiol.Rev.、75、725頁（1995））。
【００５４】
PDE5の阻害は、特に注目される標的である。PDE5の強力な選択的阻害剤は、血管拡張効果、弛緩効果および利尿効果をもたらし、これらはすべて、様々な疾患状態の処置において有益である。この領域での研究により、cGMPの基本構造に基づく数種類の阻害剤がもたらされている（E.Sybertz他、Expert.Opin.Ther.Pat.、7、631頁（1997））。
【００５５】
従って、PDE5阻害剤の生化学的効果、生理学的効果および臨床的効果により、その有用性が、平滑筋機能、腎臓機能、止血機能、炎症機能および／または内分泌機能の調節が望ましい様々な疾患状態において示唆されている。従って、式（Ｉ）の化合物は、安定型および不安定型および異型（プリンズメタル型）の狭心症、高血圧、肺高血圧症、鬱血性心不全、急性呼吸窮迫症候群、急性腎不全および慢性腎不全、アテローム性動脈硬化症、血管能力が低下した状態（例えば、経皮経管冠動脈形成術後もしくは頸動脈血管形成術またはバイパス手術後グラフト狭窄症）、末梢血管疾患、血管障害（レイノ病など）、血小板血症、炎症性疾患、発作、気管支炎、慢性喘息、アレルギー性喘息、アレルギー性鼻炎、緑内障、骨粗鬆症、早産、良性前立腺肥大、消化性潰瘍、男性の勃起機能不全、女性の性的興奮障害、ならびに消化管運動障害を特徴とする疾患（例えば、過敏性腸症候群）を含む多数の障害を処置することにおいて有用である。
【００５６】
特に重要な使用には、インポテンスの1つの形態で、一般的な医学的問題である男性の勃起機能不全の処置がある。インポテンスは、男性において性交力がないとして定義することができ、陰茎勃起または射精またはその両方を達成できないことを伴い得る。勃起機能不全の発生率は年齢とともに増大し、40歳を越える男性の約50％がある程度の勃起機能不全に罹っている。
【００５７】
さらに、さらなる重要な使用には、女性の性的興奮障害の処置がある。女性の性的興奮障害は、性的興奮の十分な潤滑／膨張応答を達成すること、または性行為が完了するまでそのような応答を維持することが頻発してできないこととして定義される。性的興奮応答は、骨盤の血管充血、膣潤滑、ならびに外性器の拡張および膨張からなる。
【００５８】
従って、式（Ｉ）の化合物は、男性の勃起機能不全および女性の性的興奮障害を処置することにおいて有用であることが考えられる。従って、本発明は、雄性動物（ヒトを含む）における勃起機能不全および雌性動物（ヒトを含む）における性的興奮障害を治療的または予防的に処置する医薬品を製造するための、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に受容可能な塩、またはそれらのいずれかを含有する薬学的組成物の使用に関する。
【００５９】
用語「処置」には、処置されている状態または症状の進行または重篤度を防止するか、低下させるか、停止させるか、または逆転させることが含まれる。そのため、用語「処置」には、適する場合には医学的な治療的投与および／または予防的投与の両方が含まれる。
【００６０】
「式（Ｉ）の化合物」またはその生理学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物は、正味の化合物として、またはそれらのいずれかを含有する薬学的組成物として投与され得ることもまた理解される。
【００６１】
本発明の化合物は、男性の勃起機能不全および女性の性的刺激障害などのヒトにおける性的機能不全を処置するためであることが主に考えられるが、本発明の化合物はまた、他の様々な疾患状態を処置するためにも使用することができる。
【００６２】
従って、本発明のさらなる局面は、安定型および不安定型および異型（プリンズメタル型）の狭心症、高血圧、肺高血圧症、慢性閉塞性肺疾患、鬱血性心不全、急性呼吸窮迫症候群、急性腎不全および慢性腎不全、アテローム性動脈硬化症、血管能力が低下した状態（例えば、PTCA後またはバイパス手術後グラフト狭窄症）、末梢血管疾患、血管障害（レイノ病など）、血小板血症、炎症性疾患、心筋梗塞の予防、発作の予防、発作、気管支炎、慢性喘息、アレルギー性喘息、アレルギー性鼻炎、緑内障、骨粗鬆症、早産、良性前立腺肥大、男性および女性の勃起機能不全、あるいは消化管運動障害を特徴とする疾患（例えば、IBS）を処置する際に使用される式（Ｉ）の化合物を提供することである。
【００６３】
本発明の別の局面により、上記に記された状態および障害を処置する医薬品を製造するための式（Ｉ）の化合物の使用が提供される。
【００６４】
さらなる局面において、本発明は、ヒトまたは非ヒト動物の身体における上記に記された状態および障害を処置する方法を提供する。この方法は、治療効果的な量の式（Ｉ）の化合物を前記身体に投与することを含む。
【００６５】
本発明の化合物は任意の好適な経路によって投与することができ、例えば、経口投与、口内投与、吸入投与、舌下投与、直腸投与、膣内投与、経尿道投与、鼻腔投与、局所投与、皮膚を介した（すなわち、経皮的）投与、または非経口投与（静脈内投与、筋肉内投与、皮下投与および冠状動脈内投与を含む）によって投与することができる。非経口投与は、ニードルおよびシリンジを使用して、またはPOWDERJECT（商標）のような高圧技術を使用して達成することができる。
【００６６】
本発明の化合物の経口投与は好ましい経路である。経口投与は最も便利な投与であり、これにより、他の投与経路に付随する様々な不都合が避けられる。嚥下障害の患者または経口投与後の薬物吸収が損なわれている患者については、薬物を非経口的に投与することができ、例えば、舌下投与または口内投与することができる。
【００６７】
本発明における使用に好適な化合物および薬学的組成物には、有効成分が、その意図された目的を達成するために効果的な量で投与されるそのようなものが含まれる。より詳細には、「治療効果的な量」は、処置されている患者の発症を防止するために効果的な量、または処置されている患者の既に存在する症状を緩和するために効果的な量を意味する。効果的な量の決定は、特に、本明細書中に示される詳細な開示を考慮して、十分に当業者の能力の範囲内である。
【００６８】
「治療効果的な用量」は、所望する効果の達成をもたらす化合物のそのような量を示す。そのような化合物の毒性および治療効力は、例えば、LD50（集団の50％致死量）およびED50（集団の50％において治療効果的な用量）を決定するための細胞培養または実験動物における標準的な薬学的手法によって決定することができる。毒性効果と治療効果との用量比は、LD50とED50との比として表される治療指数である。大きい治療指数を示す化合物が好ましい。そのようなデータから得られるデータは、ヒトにおいて使用される投薬量範囲を明確化するときに使用することができる。そのような化合物の投薬量は、好ましくは、毒性を多少なりとも伴わない、ED50を含む循環濃度の範囲内にある。投薬量は、用いられる投薬形態および利用される投与経路に依存して、この範囲内で変化させることができる。
【００６９】
正確な配合、投与経路および投薬量は、患者の状態を考慮して、個々の医師によって選ぶことができる。投薬量および投薬間隔は、治療効果を維持するために十分である活性成分の血漿中レベルをもたらすために、個々に調節することができる。
【００７０】
組成物の投与量は、処置されている患者、患者の体重、苦痛の重篤度、投与様式および処方医師の判断に依存する。
【００７１】
詳細には、上記に示された状態および障害の治療的または予防的な処置においてヒトに投与される場合、式（Ｉ）の化合物の経口投薬量は、一般に、平均的な成人患者（70kg）については1日に約0.5mg〜約1000mgである。従って、典型的な成人患者の場合、個々の錠剤またはカプセルは、1日あたり1回または数回、単回用量物または多回用量物で投与するために、0.2mg〜500mgの活性な化合物を好適な薬学的に受容可能なビヒクルまたはキャリアに含有する。静脈内投与または口内投与または舌下投与に対する投薬量は、典型的には、必要に応じて、単回用量あたり0.1mg〜500mgである。実際には、医師により、個々の患者に対して最も好適な実際の投薬法が決定されるが、投薬量は、特定の患者の年齢、体重および応答によって変化する。上記の投薬量は平均的な場合の例示であるが、個々の場合には、それよりも大きい投薬量またはそれよりも少ない投薬量が効果を有する場合があり、そのようなことは本発明の範囲内である。
【００７２】
ヒトに使用される場合、式（Ｉ）の化合物は単独で投与することができるが、一般には、意図された投与経路および標準的な製薬操作に関して選択された薬学的キャリアと混合されて投与される。本発明に従って使用される薬学的組成物は、従って、薬学的に使用され得る調製物に式（Ｉ）の化合物を加工することを容易にする賦形剤および補助剤を含む1つ以上の生理学的に受容可能なキャリアを使用して従来の様式で配合することができる。
【００７３】
これらの薬学的組成物は、従来の様式で、例えば、従来的な混合プロセス、溶解プロセス、造粒プロセス、糖衣錠作製プロセス、研和化プロセス、乳化プロセス、カプセル化プロセス、包括化プロセスまたは凍結乾燥プロセスによって製造することができる。適正な配合は、選ばれた投与経路に依存している。治療効果的な量の本発明の化合物が経口投与される場合、組成物は、典型的には、錠剤、カプセル、粉末剤、溶液剤またはエリキシル剤の形態である。錠剤形態で投与される場合、組成物は、ゼラチンまたはアジュバントなどの固体のキャリアをさらに含有することができる。錠剤、カプセルおよび粉末剤は、約5％〜約95％の本発明の化合物を含有し、好ましくは約25％〜約90％の本発明の化合物を含有する。液体形態で投与される場合、水、鉱油、または動物起源もしくは植物起源のオイルなどの液体のキャリアを加えることができる。組成物の液体形態はさらに、生理学的な生理的食塩水溶液、デキストロースもしくは他の糖の溶液、またはグリコールを含有することができる。液体形態で投与される場合、組成物は約0.5重量％〜約90重量％の本発明の化合物を含有し、好ましくは約1重量％〜約50重量％の本発明の化合物を含有する。
【００７４】
治療効果的な量の本発明の化合物が、静脈内注射、経皮注射または皮下注射によって投与される場合、組成物は、パイロジェンを含まない非経口的に受容可能な水溶液の形態である。そのような非経口的に受容可能な溶液剤の調製は、pH、等張性、安定性などを適正に考慮して、当業者の範囲内である。静脈内注射、経皮注射または皮下注射のための好ましい組成物は、典型的には、本発明の化合物に加えて、等張性のビヒクルを含有する。
【００７５】
経口投与される場合、化合物は、式（Ｉ）の化合物をこの分野で十分に知られている薬学的に受容可能なキャリアと組み合わせることによって容易に配合することができる。そのようなキャリアは、処置される患者によって経口摂取される錠剤、ピル、糖衣錠、カプセル、液剤、ゲル剤、シロップ剤、スラリー剤、懸濁剤などとして本発明の化合物が配合されることを可能にする。経口使用される薬学的調製物は、式（Ｉ）の化合物を固体の賦形剤とともに加え、必要な場合には得られた混合物を粉砕し、そして錠剤または糖衣錠コアを得るために、所望する場合には好適な補助剤を加えた後、顆粒の混合物を加工することによって得ることができる。好適な賦形剤には、例えば、充填剤およびセルロース調製物が含まれる。所望する場合には、崩壊剤を加えることができる。
【００７６】
吸入により投与される場合、本発明の化合物は、好適な噴射剤の使用によって、加圧パックまたはネブライザーから得られるエアロゾルスプレー物の形態で都合よく送達される。加圧されたエアロゾルの場合、投薬量単位は、計量された量を送達するためのバルブを提供することによって決定することができる。吸入器または吹き入れ器において使用される、化合物と好適な粉末基剤（ラクトースまたはデンプンなど）との粉末混合物を含有するカプセルおよびカートリッジ（例えば、ゼラチン）を配合することができる。
【００７７】
化合物は、注射による非経口投与のために、例えば、ボーラス注射または連続注入による非経口投与のために配合することができる。注射用配合物は、保存剤が添加された、例えば、アンプルまたは多回用量容器におけるユニット投薬形態物で提供され得る。組成物は、懸濁物、溶液、または油性もしくは水性のビヒクルにおけるエマルションのような形態を取ることができ、そして懸濁剤、安定化剤および／または分散剤などの配合剤を含有することができる。
【００７８】
非経口投与される薬学的配合物は、水溶性形態にある活性な化合物の水溶液を含む。さらに、活性な化合物の懸濁物を、適する油性の注射用懸濁物として調製することができる。好適な親油性の溶媒またはビヒクルには、脂肪オイルまた合成脂肪酸エステルが含まれる。水性の注射用懸濁物は、懸濁物の粘度を増大させる物質を含有することができる。場合により、懸濁剤はまた、好適な安定化剤、または化合物の安定性を増大させ、かつ高濃度の溶液剤の調製を可能にする薬剤を含有することができる。あるいは、本発明の組成物は、使用前に、好適なビヒクルで、例えば、滅菌されたパイロジェン非含有水で構成される粉末形態にすることができる。
【００７９】
本発明の化合物はまた、例えば、従来の坐薬基剤を含有する、坐薬または停留浣腸剤などの直腸用組成物で配合することができる。前に記載された配合物に加えて、化合物はまた、デポ剤調製物として配合することができる。長く作用するそのような配合物は、埋め込み（例えば、皮下または筋肉内）によって、または筋肉内注射によって投与することができる。従って、例えば、化合物は、好適なポリマー物質もしくは疎水性物質（例えば、受容可能なオイルにおけるエマルションとして）またはイオン交換樹脂と一緒に配合することができ、あるいはやや溶けにくい誘導体として、例えば、やや溶けにくい塩として配合することができる。
【００８０】
本発明の化合物の多くは、薬学的に適合し得る対イオンとの塩として提供され得る。そのような薬学的に受容可能な塩基付加塩は、遊離酸の生物学的な有効性および性質を保持し、好適な無機塩基または有機塩基との反応によって得られるそのような塩である。
【００８１】
特に、式（Ｉ）の化合物は、デンプンまたはラクトースなどの賦形剤を含有する錠剤の形態で、または単独もしくは賦形剤との混合物のいずれかでのカプセルもしくは卵型剤型で、あるいは矯味矯臭剤または着色剤を含有するエリキシル剤または懸濁剤の形態で、経口投与、口内投与または舌下投与することができる。そのような液体の調製物は、懸濁剤などの薬学的に受容可能な添加剤を用いて調製することができる。化合物はまた非経口的に注射することができ、例えば、静脈内投与、筋肉内投与、皮下投与または冠状動脈内投与することができる。非経口投与される場合、化合物は、溶液を血液と等張性にするために他の物質（例えば、塩または単糖（マンニトールまたはグルコースなど））を含有し得る滅菌された水溶液の形態で最もよく使用される。
【００８２】
獣医学的に使用される場合、式（Ｉ）の化合物またはその非毒性の塩は、通常の獣医学的実施に従って好適に許容され得る配合物として投与される。獣医は、特定の動物について最適である投薬法および投与経路を容易に決定することができる。
【００８３】
従って、本発明は、さらなる局面において、式（Ｉ）の化合物を、それに対する薬学的に受容可能な希釈剤またはキャリアと一緒に含む薬学的組成物を提供する。さらに、本発明により、式（Ｉ）の化合物を含む薬学的組成物を調製する方法が提供される。この方法は、式（Ｉ）の化合物を、それに対する薬学的に受容可能な希釈剤またはキャリアと一緒に混合することを含む。
【００８４】
具体的な実施形態において、本発明には、雄性動物（ヒトを含む）における勃起機能不全または雌性動物（ヒトを含む）における性的刺激障害を治療的または予防的に処置するための薬学的組成物が含まれる。この組成物は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に受容可能な塩を薬学的に受容可能な希釈剤またはキャリアと一緒に含む。
【００８５】
式（Ｉ）の化合物は、この分野で知られている任意の好適な方法によって、または本発明の一部を形成する下記のプロセスによって調製することができる。下記の方法において、R0、R1、R2およびR3は、上記の構造式（Ｉ）において定義されている通りである。一般的に、構造式（Ｉ）は、下記の反応スキームによって調整される。
【００８６】
特に、構造式（Ｉ）の化合物は、適切に置換された2−アリールエチルアミン又は2−ヘテロアリールエチルアミンを使用して、下記の方法を使用して調整される。方法A−Cは構造式（Ｉ）のジケトピペラジン−テトラヒドロイソキノリン及びジケトピペラジン−テトラヒドロイミダゾピリジンへの合成経路の例である。しかしながら、付加的な合成経路が、テトラヒドロイソキノリンの合成である。例えば、M.D. Rozwadowska, Heterocycles, 39, 903 (1994)、M. Shamma, Isoquinoline Alkaloinds, Chemistry and Pharmacology, Academis Press : New York (1972)、及び、T. Kametani, The Chemistry of the Iso-quinoline Alkaloids, Elsevier, Amsterdam (1969)参照。
【００８７】
一般的方法Ａ
【００８８】
【化２５】
0004101054.tif 000017
一般構造式（ＩＩＩ）の化合物が、例えば、ピクテット−スペングラー（Pictet-Spengler）反応によって調整されることができる。W. Whaley他、 Org. React, 6, 151−206 (1951)、S. M. Hutchins 他、 Tetrahedon Lett., 37, 4865 (1996)、R.D. Cox 他、 Chem. Rev., 95, 1787 (1995)、及び、A. Yokoyama他、 J. Org. Chem., 64, 611 (1999)参照。置換されたアリールエチルアミン又はヘテロアリールエチルアミンエステルは、アルデヒドと反応され、構造式（ＩＩＩ）の化合物を提供する。得られる第二アミン（ＩＩＩ）は、その後、適切なアシル化の条件でアミノ酸又は酸ハロゲン化物のどちらか一方で処理され、アミドエステルを形成する。構造式（Ｉ）の化合物を形成する環化は、エステルで分子内アミン攻撃によって達成される。構造式（Ｉ）は、第一アミンと反応する遊離基（例えば、化合物（ＩＶ））を有する適切な側鎖から導かれる。
【００８９】
一般的方法Ｂ
【００９０】
【化２６】
0004101054.tif 000018
二者択一的に、化合物（Ｉ）は、ペプチドカップリング条件下で始めにアリールエチルアミン又はヘテロアリールエチルアミンとアミノ酸とが反応することによって調整され、アミド（Ｖ）を形成することができる。ジケトピペラジン（ＶＩ）を形成する環化は、エステルで分子内アミン攻撃によって達成される。得られるピペラジン（ＶＩ）は、改変されたピクテット−スペングラー（Pictet−Spengler）条件下でアルデヒドとの縮合反応が行われ、構造式（Ｉ）の化合物を提供する。改変されたピクテット−スペングラー（Pictet−Spengler）反応は、T.A. Miller 他、 Bioorg. Med. Chem. Lett., 8, 1065 (1998)、A. Previero 他、 Canadian J. of Chemistry, 46, 3404 (1968)、及び、P. Ducrot 他、 Tet. Lett., 40, 9037 (1999)参照。
【００９１】
一般的方法Ｃ
【００９２】
【化２７】
0004101054.tif 000019
【００９３】
【化２８】
0004101054.tif 000020
テトラヒドロイソキノリン骨格も、アシル化されたβ−アリールエチルアミンの脱水環化を含むビスチャー−ナピエラルスキ（Bischler-Napieralski）反応を使用して形成される。P2O5又はPOCl3は最も典型的な環化剤である。W.M. Whaley 他、 Org. React, VI, 74-150 (1951)、W.D.F. Meutermans 他、 Tetrahedron Lett., 36, 7709 (1995)、A. Ishida 他、 Chem. Pharm. Bull., 34, 1995 (1986)、及び、A.K. Saxena 他、 Indian J. Chem., 13 , 230 (1975)参照。例えば、NaBH4と得られるイミン（ＶＩＩＩ）の還元は、1,2,3,4−テトラ−ヒドロ−β−カルボリン（ＩＸ）を提供する。
【００９４】
始めにアミンがアシル化され、その後、例えば、ラウェッソン剤と、チオアミドに変換されるので、改変された方法Ｃはラセミ化を避ける。アルキルハロゲン化物又はアシルハロゲン化物とチオアミドの処理は、イミニウムハロゲン化物（ＩＸ）を提供する。還元温度でNaBH4と粗中間体（ＸＩＩ）の反応は、立体選択的にテトラヒドロイソキノリン（ＩＸ）を提供する。
【００９５】
【化２９】
0004101054.tif 000021
【００９６】
【化３０】
0004101054.tif 000022
構造式（Ｉ）の化合物の合成では、当業者に十分に知られているクロロギ酸ベンジルおよびクロロギ酸トリクロロエチルのような保護化合物および保護基を使用することができる。そのような保護基は、例えば、T.W.Greene他、“Protective Groups in Organic Synthesis（第3版）”（John Wiley and Sons, Inc.、NY、NY（1999））に開示される。これらの保護基は、当業者に広く知られている塩基、酸、又は、水素条件下で反応の最終段階で除去される。適切な出発原料、マニュピーレション、及び、化学機能の保護の使用によって、特にここに記載されない構造式（Ｉ）の化合物の合成は、上記スキームと類似方法で達成される。
【００９７】
式（Ｉ）の化合物は式（Ｉ）の他の化合物に変換することができる。従って、例えば、化合物が置換芳香族環を含有するとき、式（Ｉ）の別の好適に置換された化合物を調製することが可能である。適切な相互変換の例には、（例えば、BBr3、SnCl2またはパラジウム触媒（パラジウム担持カーボンなど）などの好適な薬剤を使用する）好適な手段によってORbをヒドロキシにすること、または標準的なアシル化条件もしくはスルホニル化条件を使用してアミノをアルキルアミノなどの置換アミノにすることが含まれるが、これらに限定されない。
【００９８】
式（Ｉ）の化合物は、個々の立体異性体として、又は、ラセミ混合物として、上記の方法によって調製することができる。本発明の化合物の個々の立体異性体は、ラセミ混合物をその構成する立体異性体に分離するためにこの分野で知られている方法を使用する分割によって、例えば、キラルなカラム（Hypersilナフチルウレアなど）でのHPLCを使用する分割によって、または立体異性体の塩の分離を使用する分割によってラセミ体から調製することができる。本発明の化合物は、適切な溶媒から結晶化することによって、または適切な溶媒を蒸発させることによって、溶媒分子との会合状態で単離することができる。
【００９９】
塩基性中心を含む式（Ｉ）の化合物の薬学的に受容可能な酸付加塩を従来の様式で調製することができる。例えば、遊離塩基の溶液を、好適な酸を直接または好適な溶液のいずれかで用いて処理することができ、そして得られる塩を、ろ過によって、または反応溶媒を減圧下で蒸発させることによって単離することができる。薬学的に受容可能な塩基付加塩は、式（Ｉ）の化合物の溶液を好適な塩基で処理することによって類似する様式で得ることができる。両タイプの塩は、イオン交換樹脂技術を使用して形成または相互変換させることができる。従って、本発明のさらなる局面により、式（Ｉ）の化合物または塩もしくは溶媒和物（例えば、水和物）を調製するための方法が提供され、（ｉ）塩形態又は（ｉｉ）溶媒和物（例えば、水和物）形態によって続けられる。
【０１００】
下記の略号が、以降、添付された実施例において使用される：rt（室温）、min（分）、h（時間）、g（グラム）、mmol（ミリモル）、m.p.（融点）、eq（当量）、L（リットル）、mL（ミリリットル）、μL（マイクロリットル）、Et2O（ジエチルエーテル）、CH2Cl2（ジクロロメタン）、MeOH（メタノール）、Et3N（トリエチルアミン）、EtOAc（酢酸エチル）、AcOH（酢酸）、HCl（塩酸）、MeNH2（メチルアミン）、TFA（トリフルオロ酢酸）、IPA（イソプロピルアルコール）、aq（水溶液）、NaCl（塩化ナトリウム）、Na2SO4（硫酸ナトリウム）、NaHCO3（重炭酸ナトリウム）、及び、THF（テトラヒドロフラン）。
【０１０１】
実施例１の調製
（＋−, cis）−4−ベンゾ[1,3]ジオキソール−5−イル−7−メチル−3,4,6,7,8a,9−ヘキサヒドロ−1,3,4a,7−テトラアザ−シクロペンタ[b]ナフタレン−5,8−ジオン 塩酸化物
【０１０２】
【化３１】
0004101054.tif 000023
実施例１は下記の反応スキームによってD−ヒスチジン一塩酸化物から調整された。さらに、S.M. Hutchins他、Tet. Letters, 37, 4865−4868 (1996)参照。
【０１０３】
【化３２】
0004101054.tif 000024
【０１０４】
【化３３】
0004101054.tif 000025
D−ヒスチジンメチルエステル一塩酸化物（中間体１）の調整
窒素雰囲気下で０℃で無水MeOH（150mL）中でチオニル塩化物（29.37g、18.0mL、246.9mmol）は、D−ヒスチジン一塩酸化物一水和物（10.35g、49.37mmol）の懸濁液に滴下で加えられた。得られた混合物は、ゆっくり室温に暖められ、その後、２４時間攪拌された。その後、溶媒は減圧下で除去され、白色固体を生成した。残留物は、Et2Oで懸濁され、ろ過で収集された。1H NMRによって得られた固体の分析は、出発原料と中間体１との混合物であることを示した。チオニル塩化物処理は、上記のように３回繰り返し出発原料の含有量が１０％未満である白色固体（11.74g、100％）を産出した。：1H−NMR(300MHz、CDCl3)：δ9.07（d、J＝1.2Hz、1H）、8.7−9.1（bs、1H）、7.52（s、1H）、4.47（t、J＝7.1Hz、1H）、3.73（s、3H）、3.32−3.29（m、2H）。
【０１０５】
（＋／−）−cis−β−カルボリン（中間体２）の調整
ピリジン（70mL）中で中間体１（3.24g、14.59mmol）及びピペロナール（2.63g、17.51mmol）の懸濁液は、１００℃に暖められ、その後、窒素雰囲気下で４時間攪拌された。得られたオレンジ溶液は、室温に冷却され、真空で濃縮された。粗生成物は、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル、0−20％  MeOH／CH2Cl2)によって精製され、オレンジの固体１．７２ｇ（39.2%）を産出した。：TLC Rf（10% MeOH／CH2Cl2)＝0.39；1H−NMR(300MHz、CDCl3)：δ8.99（s、1H）、7.07（s、1H）、7.03（s、2H）、6.09（s、2H）、5.71（s、1H）、4.70−4.65（m、1H）、3.80（s、3H）、3.36−3.25（m、2H）；MS （API） m／z 302（M＋H）。
transカルボリンも、カラムから溶出されたが、純粋なものではなかった。：TLC Rf（10% MeOH／CH2Cl2)＝0.34。
【０１０６】
（＋／−）−cis−2−クロロアセチル−β−カルボリン（中間体３）の調整
窒素雰囲気下で０℃でTHF（40mL）及び水(5mL)中でクロロアセチル塩化物（0.6mL、7.4mmol）は、中間体２（1.72g、5.7mmol）及びEt3N（1.6mL、11.4mmol）の混合物に滴下で加えられた。得られた混合物は、室温に暖められ、その後、約１時間攪拌された。反応は、１N HCl（2mL）で冷却され、その後、真空で濃縮された。粗生成物は、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル、5−10％  MeOH／CH2Cl2)によって精製され、明るい黄色固体０．４９ｇ（22.8%）を産出した。：TLC Rf（3％  EtOAc／CH2Cl2)＝0.43：MS （API） m／z 378（M＋H）。
【０１０７】
実施例１の調整
４５分間、窒素雰囲気下で４５℃でTHF（20mL）中で粗中間体３（0.49g、1.29mmol）及び水中で４０％MeNH2（1.10mL、6.48mmol）の混合物は、暖められた。反応は不完全であった。水(2mL)が加えられ、透明な２層の混合物を与えた。さらに２０分後、得られた溶液は室温に冷却され、濃縮されたHCl（4mL）で冷却され、そして、THFを除去するために濃縮された。得られたスラリーはろ過され、また、固体は水及びアセトンで洗浄された。真空で４５℃で乾燥した後、生成物は白色固体（0.16g、36%）として得られた。：mp 227〜230℃；TLC Rf（10% MeOH／CH2Cl2)＝0.20；1H−NMR（300MHz、DMSO−d6）：δ14.7（bs、2H）、8.94（s、1H）、6.80−6.91（m、3H）、6.00（s、1H）、5.96（s、2H）、4.35（dd、J＝4.3Hz、J＝11.2Hz、1H）、4.13（d、J＝17.1Hz、1H）、3.97（d、J＝17.6Hz、1H）、3.60（bs、1H）、3.41（dd、J＝4.6Hz、J＝16.4Hz、1H）、3.17−3.27（m、1H）、2.90（s、3H）；MS （API） m／z 341（M＋H）；［α］D25℃＝回転が観測されなかった（c＝0.25、DMSO）。元素分析：計算値（C17H17N4O4・HCl・0.4 H2O）：C、53.17；H、4.67；N、14.59。実測値：C、53.26；H、4.54；N、14.52。生成物の相対立体化学は、NOE差実験（DMSO−d6）によって、cis異性体であることが確認された。：4.35ppmのC12aプロトンから6.00ppmのC4プロトンへの正のNOE増強。
【０１０８】
実施例２の調整
【０１０９】
【化３４】
0004101054.tif 000026
実施例２の化合物は、実施例１と同様な方法で調整されることができる。
【０１１０】
実施例３の調整
【０１１１】
【化３５】
0004101054.tif 000027
実施例３の化合物は、下記の合成シーケンスによって調整されることができる。
【０１１２】
【化３６】
0004101054.tif 000028
【０１１３】
【化３７】
0004101054.tif 000029
実施例４及び５の調整
実施例４及び５は、実施例３の合成シーケンスによって調整されることができる。
【０１１４】
【化３８】
0004101054.tif 000030
実施例６の調整
【０１１５】
【化３９】
0004101054.tif 000031
実施例６は、下記の合成シーケンスによって調整されることができる。
【０１１６】
【化４０】
0004101054.tif 000032
【０１１７】
【化４１】
0004101054.tif 000033
実施例７の調整
実施例７は、実施例６の合成シーケンスによって調整されることができる。
【０１１８】
【化４２】
0004101054.tif 000034
実施例８の調整
【０１１９】
【化４３】
0004101054.tif 000035
実施例８の化合物は、下記の合成シーケンスによって調整されることができる。
【０１２０】
【化４４】
0004101054.tif 000036
【０１２１】
【化４５】
0004101054.tif 000037
実施例９の調整
実施例９は、実施例８の合成シーケンスによって調整されることができる。
【０１２２】
【化４６】
0004101054.tif 000038
実施例１０の調整
（6R，11aS）−6−ベンゾ［1,3］ジオキソール−5−イル−8,9−ジメトオキシ−2−メチル−2,3,11,11a−テトラヒドロ−6H−ピラジノ−［1,2−b］イソキノリン−1,4−ジオン
【０１２３】
【化４７】
0004101054.tif 000039
実施例１０に類似するテトラヒドロイソキノリンは、下記の合成スキームに記載されるように3−(3,4−ジメトキシフェニル)−L−アラニン１から調整された。A.K. Saxena他、Indian J. Chem., 13, 230−237 (1975)参照。
【０１２４】
【化４８】
0004101054.tif 000040
【０１２５】
【化４９】
0004101054.tif 000041
【０１２６】
【化５０】
0004101054.tif 000042
（S）−2−アミノ−3−（3,4−ジメトキシフェニル）プロピオン酸メチルエステル（中間体４）の調製
窒素雰囲気下で０℃でMeOH水溶液（50mL）中でチオニル塩化物（3.2g、2.0mL、26.8mmol）は、3−（3,4−ジメトキシフェニル）−L−アラニン１（2.0g、8.9mmol）の懸濁液に滴下で加えられた。混合物は、ゆっくり室温に暖められ、その後、７２時間攪拌された。溶媒は減圧下で除去され、固体を生成した。粗生成物は、CH2Cl2で取り上げられ、その後、飽和NaHCO3及び飽和NaClで洗浄された。有機層は、無水Na2SO4で乾燥され、ろ過され、濃縮され、明るい茶色オイル（1.97g、93%）を産出した。
【０１２７】
2−［（1−ベンゾ[1,3］ジオキソール−5−イル−メタノイル）アミノ]−3−(3,4−ジメトキシフェニル)−プロピオン酸メチルエステル（中間体５）の調整
窒素雰囲気下で０℃でCH2Cl2（40mL）中でピペロニロイル塩化物（1.90g、2.14mmol）は、粗中間体４（1.90g、7.94mmol）及びEt2O（2.5mL、18.3mmol）の混合物に滴下で加えられた。得られた混合物は、０℃で４時間攪拌され、その後、室温で暖められた。反応は、CH2Cl2（50mL）で溶出され、0.2M  HCl（2×40mL）、飽和NaHCO3（40mL）、及び、飽和NaCl（40mL）で洗浄された。溶液は、無水Na2SO4で乾燥され、ろ過され、真空で濃縮され、白色固体を提供した。固体はろ過で収集され、20%  EtOAc／ヘキサンで洗浄され、中間体５  ３．６９ｇ（100%）を産出した。：TLC Rf（5% MeOH／CH2Cl2)＝0.57；1H−NMR（300MHz、CDCl3）：δ8.62（d、J＝7.7Hz、1H）、7.42（dd、J＝1.7Hz、J＝8.13Hz、1H）、7.36（d、J＝1.6Hz、1H）、6.98（d、J＝8.2Hz、1H）、6.91（d、J＝1.7Hz、1H）、6.77−6.85（m、2H）、6.09（s、2H）、4.58（m、1H）、3.69（s、6H）、3.64（s、3H）、2.95−3.10（m、2H）。
【０１２８】
1−ベンゾ[1,3］ジオキソール−5−イル−6,7−ジメトキシ−3,4,4a,8a−テトラヒドロイソキノリン−3−カルボン酸メチルエステル（中間体６）の調整
１．５時間、窒素雰囲気下で１２０℃で中間体５（3.074g、7.94mmol）及びPOCl3（15mL）の混合物が加熱された。混合物は、室温で冷却され、その後、氷水（100mL）に注がれ、EtOAc（2×200mL）で抽出された。化合された有機層は、無水Na2SO4で乾燥され、ろ過され、黄褐色泡に濃縮された。粗生成物は、5%  MeOH／CH2Cl2中で1% Et3Nを使用してシリカゲルでカラムクロマトグラフィーで精製され、ベージュの泡として中間体６（1.60g、55%）を提供した。：TLC Rf（5% MeOH／CH2Cl2)＝0.55；1H−NMR（300MHz、CDCl3）：δ7.17（d、J＝1.6Hz、1H）、7.11（dd、J＝8.0Hz、J＝1.6Hz、1H）、6.85（m、2H）、6.79（s、1H）、6.01（d、J＝1.1Hz、2H）、4.30（dd、J＝12.3Hz、J＝6.3Hz、1H）、3.95（s、3H）、3.81（s、3H）、3.77（s、3H）、2.91−3.08（m、2H）；MS （API） m／z 370（M＋H）。
【０１２９】
1−ベンゾ[1,3］ジオキソール−5−イル−6,7−ジメトキシ−1,2,3,4,4a,8a−ヘキサヒドロイソキノリン−3−カルボン酸メチルエステル（中間体７）の調整
MeOH（60mL）中で中間体６（1.5g、4.06mmol）の溶液は０℃に冷却され、窒素雰囲気下で攪拌された。ナトリウム水素化臭素化物（154mg）は添加され、得られる混合物は２時間で攪拌された。反応混合物は、その後、白色固体が沈殿しながら、真空で濃縮された。固体はMeOH（20mL）で粉砕され、ろ過によって収集され、乾燥され、中間体７  ０．８２ｇ（54%）を与えた。：TLC Rf（90：10：1 CH2Cl2／EtOAc／MeOH)＝0.33；1H−NMR（300MHz、CDCl3）：δ6.84（dd、J＝7.8Hz、J＝1.6Hz、1H）、6.76−6.79（m、2H）、6.62（s、1H）、6.21（s、1H）、5.95（dd、J＝3.4Hz、J＝1.1Hz、2H）、5.02（bs、1H）、3.82−3.86（m、1H）、3.86（s、3H）、3.78（s、3H）、3.64（s、3H）、3.01−3.14（m、2H）、2.41（bs、NH）；MS （API） m／z 372（M＋H）。
【０１３０】
1−ベンゾ[1,3］ジオキソール−5−イル−2−（2−クロロエタノイル）−6,7−ジメトキシ−1,2,3,4,4a,8a−ヘキサヒドロイソキノリン−3−カルボン酸メチルエステル（中間体８）の調整
窒素雰囲気下で０℃でCH2Cl2（15mL）中でクロロアセチル塩化物（0.23mL、2.88mmol）は、中間体７（0.82g、2.21mmol）及びEt3N(0.71mL、5.09mmol）の混合物に滴下で加えられた。得られた混合物は、室温で暖められ、０．５時間攪拌されれた。反応は、1M  HCl（2mL）で冷却され、CH2Cl2（50mL）及び水（10mL）で溶出された。層は分離され、有機は、飽和NaClで洗浄され、無水Na2SO4で乾燥された。ろ過及び真空での濃縮は、中間体８（1.5g）を与え、さらに精製せずに使用された。：TLC Rf（10% EtOAc／CH2Cl2)＝0.55；MS （API） m／z 448（M＋H）、472(M＋Na)。
【０１３１】
実施例１０の調整
１．５時間、窒素雰囲気下で４５℃でTHF（15mL）中で粗中間体８（0.99g、2.21mmol）及び水中で４０％MeNH2（1.8mL、22.2mmol）の混合物は、暖められた。反応は、濃縮されたHClでpHが酸性になるまで冷却された。混合物は、THFを除去するために濃縮された。得られたスラリーは、３：１ 水：MeOH（30mL）を加えられた。固体はろ過により収集され、水及びEt3O（2×10mL）で洗浄され、乾燥され、白色固体として実施例１０（0.74g、82%）を得た。：mp 235〜236℃；TLC Rf（10% EtOAc／CH2Cl2)＝0.14；1H−NMR（300MHz、DMSO−d6）：δ7.21（s、1H）、6.99（s、1H）、6.74−6.77（m、2H）、6.54（dd、J＝1.2Hz、J＝7.4Hz、1H）、6.29（s、1H）、5.94（d、J＝6.3Hz、2H）、4.17−4.28（m、2H）、3.93（d、J＝16.5Hz、1H）、3.76（s、3H）、3.74（s、3H）、3.17（dd、J＝3.2Hz、J＝3.9Hz、1H）、2.95（s、3H）、2.72（dd、J＝2.7Hz、J＝12.9Hz、1H）；MS （API） m／z 411（M＋H）、433（M＋Na）；［α］D25℃＝回転が観測されなかった（c＝0.43、DMSO）。元素分析：計算値（C22H22N2O6・0.15 H2O）：C、63.96；H、5.44；N、6.78。実測値：C、63.88；H、5.45；N、6.84。
生成物の相対立体化学は、NOE差実験（DMSO−d6）によって、trans異性体であることが確認された。：3.93ppmのC6プロトンから6.29ppmのC11プロトンへの正のNOE増強無し。
【０１３２】
実施例１１の調整
実施例１１の化合物は、実施例１０の合成シーケンスによって調整された。
【０１３３】
【化５１】
0004101054.tif 000043
本発明の化合物は経口投与用の錠剤に配合することができる。例えば、式（Ｉ）の化合物は、国際特許出願公開WO96／38131（これは参考として本明細書中に組み込まれる）に示される共沈殿法によってポリマーキャリアとの分散物にすることができる。共沈殿させた分散物は、賦形剤と混合され、その後、錠剤に圧縮成形することができ、錠剤は場合によりフィルムコーティングされる。
【０１３４】
構造式（Ｉ）の化合物をPDE5の阻害能力について試験した。化合物がPDE5活性を阻害する能力は、化合物のIC50値（すなわち、酵素活性の50％を阻害するために必要とされる阻害剤の濃度）に関連する。構造式（Ｉ）の化合物のIC50値は、組換えヒトPDE5を使用して測定された。
【０１３５】
本発明の化合物は、典型的には、組換えヒトPDE5に対して約50μM未満のIC50値を示し、好ましくは約25μＭ未満のIC50値を示し、より好ましくは約15μM未満のIC50値を示す。本発明の化合物は、典型的には、組換えヒトPDE5に対して約1μM未満のIC50値を示し、多くの場合、約0.05μM未満のIC50値を示す。本発明の完全な利点を達成するために、本発明のPDE5阻害剤は約0.1nM〜約15μMのIC50を有する。
【０１３６】
組換えヒトPDEの産生およびIC50の測定は、この分野で十分に知られている方法によって達成することができる。例示的な方法を下記に記載する。
【０１３７】
ヒトPDEの発現
Saccharomyces cerevisiae（酵母）における発現
ヒトのPDE1B、PDE2、PDE4A、PDE4B、PDE4C、PDE4D、PDE5およびPDE7の組換え産生を、米国特許第5，702，936号（これは参考として本明細書中に組み込まれる）の実施例7に記載される組換え産生と同様に行ったが、本実施例では、用いられた酵母形質転換ベクターは、Price他、Methods In Enzymology、185、308頁〜318頁（1990）に記載される基本的なADH2プラスミドに由来するベクターであり、酵母のADH2プロモーター配列およびターミネーター配列を含み、そしてSaccharomyces cerevisiae宿主がプロテアーゼ欠損BJ2−54株（これは1998年8月31日にAmerican Type Culture Collection（Manassas、Virginia）にアクセション番号ATCC74465で寄託された）であった。形質転換された宿主細胞を、微量金属およびビタミンを含む2XSC−leu培地（pH6.2）において増殖させた。24時間後、YEP培地含有グリセロールを2XYET／3％グリセロールの最終濃度に加えた。約24時間後に細胞を集め、洗浄して、−70℃で保存した。
【０１３８】
ヒトホスホジエステラーゼ調製物
ホスホジエステラーゼ活性の測定
調製物のホスホジエステラーゼ活性は下記のように測定された。活性炭分離技術を利用するPDEアッセイを、本質的には、Loughney他（1996）に記載されるように行った。このアッセイでは、PDE活性により、［32P］cAMPまたは［32P］cGMPが、存在するPDE活性の量に比例して、対応する［32P］5’−AMPまたは［32P］5’−GMPに変換される。［32P］5’−AMPまたは［32P］5’−GMPは、その後、ヘビ毒の5’−ヌクレオチダーゼの作用によって遊離の［32P］リン酸および非標識のアデノシンまたはグアノシンに定量的に変換された。従って、放出された［32P］リン酸の量は酵素活性に比例している。このアッセイは、40mMのTrisHCl（pH8.0）、1μMのＺnSO4、5mMのMgCl2および0.1mg／mLのウシ血清アルブミン（BSA）（いずれも最終濃度）を含有する100μLの反応混合物において30℃で行われた。PDE酵素は、基質の総加水分解が30％未満である量で存在した（直線的なアッセイ条件）。アッセイは、基質（1mMの［32P］cAMPまたはcGMP）の添加によって開始され、混合物を12分間インキュベーションした。その後、75μgのガラガラヘビ（Crotalus atrox）毒液を加え、インキュベーションを3分間続けた（合計で15分間）。反応を、200μLの活性炭（0.1MのNaH2PO4（pH4）における25mg／mLの懸濁物）の添加によって停止させた。遠心分離（750Xg、3分間）により活性炭を沈降させた後、上清のサンプルを採取して、シンチレーションカウンターで放射能測定を行い、PDE活性を計算した。
【０１３９】
S.cerevisiaeからのPDE5の精製
細胞ペレット（29g）を、等容量の溶解緩衝液（25mMのTrisHCl（pH8）、5mMのMgCl2、0.25mMのDTT、1mMのベンズアミジンおよび10μMのZnSO4）とともに氷上で解凍した。細胞を、窒素を20,000psiで使用するMicrofluidizer（登録商標）（Microfluidics Corp.）で溶解した。溶解液を遠心分離して、0.45μmのディスポーザブルフィルターに通してろ過した。ろ液を、Q SEPHAROSE（登録商標）Fast−Flow（Pharmacia）の150mLのカラムに負荷した。カラムを1.5容量の緩衝液Ａ（20mMのビス−トリスプロパン（pH6.8）、1mMのMgCl2、0.25mMのDTT、10μMのZnSO4）で洗浄して、125mMのNaClを含む緩衝液Aのステップグラジエントで溶出し、続いて、緩衝液Aにおける125mM〜1000mMのNaClの直線グラジエントで溶出した。直線グラジエントから得られる活性な画分を、緩衝液Ｂ（20mMのビス−トリスプロパン（pH6.8）、1mMのMgCl2、0.25mMのDTT、10μMのZnSO4および250mMのKCl）における180mLのヒドロキシアパタイトカラムに負荷した。負荷後、カラムを2容量の緩衝液Ｂで洗浄し、そして緩衝液Ｂにおける0mM〜125mMのリン酸カリウムの直線グラジエントで溶出した。活性な画分をまとめて、60％硫酸アンモニウムで沈殿させ、そして緩衝液Ｃ（20mMのビス−トリスプロパン（pH6.8）、125mMのNaCl、0.5mMのDTTおよび10μMのZnSO4）に再懸濁した。まとめたものをSEPHACRYL（登録商標）S−300HRの140mLのカラムに負荷し、緩衝液Ｃで溶出した。活性な画分を50％グリセロールに希釈し、−20℃で保存した。
【０１４０】
得られた調製物はSDS−PAGEにより約80％の純度であった。これらの調製物は約3μmolのcGMP加水分解／分／ミリグラムタンパク質の比活性を有した。
【０１４１】
cGMP−PDEに対する阻害作用
本発明の化合物のｃＧＭＰ−ＰＤＥ活性を、Wells他、Biochim.Biophys.Acta、384、430（1975）から改変した1段階アッセイを使用して測定した。反応媒体には、50mMのTris−HCl（pH7.5）、5mMの酢酸マグネシウム、250μg／mlの5’−ヌクレオチダーゼ、1mMのEGTA、および0.15μMの8−［H3］−cGMPが含まれた。別途示されない限り、使用された酵素はヒト組換えPDE5（ICOS Corp.、Bothell、Washington）であった。
【０１４２】
本発明の化合物は、アッセイにおいて2％で最終的に存在するDMSOに溶解された。インキュベーション時間は30分であり、その間、基質の総変換は30％を越えなかった。
【０１４３】
調べられた化合物に対するIC50値を、10nM〜10μMの範囲の濃度を典型的には使用する濃度−応答曲線から求めた。標準的な方法論を使用する他のPDE酵素に対する試験は、本発明の化合物がcGMPに特異的なPDE酵素に対して選択的であることを示した。
【０１４４】
生物学的データ
本発明による化合物は、典型的には、1000nM未満のIC50値を示すことが見出された。本発明の代表的な化合物に対するインビトロ試験データを下記の表に示す：
【０１４５】
【表１】
0004101054.tif 000044
自明なことではあるが、本明細書中前記に示される本発明の多くの改変および変化を、本発明の精神および範囲から逸脱することなく行うことができる。従って、添付された請求項により示されるような限定のみが課せられるだけである。