(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（ＩＶ−Ｐ）
0004138883.tif 000009
（ここで、Ａは還元により除去しうるヒドロキシ保護基である）
の１−クロロ−７−（被保護ヒドロキシ）−４−ニトロアクリジン−９（１０Ｈ）−オンを、式
ＮＨ2−（ＣＨ2）nＮＲ1Ｒ2
（ここで、Ｒ1及びＲ2は炭素数１〜４のアルキル基、ｎは２〜５である）
のω−（ジアルキルアミノ）アルキルアミンと反応させて式（ＩＩＩ−Ｐ）
0004138883.tif 000010
（ここで、Ａ、ｎ、Ｒ1及びＲ2は上記に規定されたとおりである）
の７−（被保護ヒドロキシ）−４−ニトロ−１−［〔ω−（ジアルキルアミノ）アルキル〕アミノ］アクリジン−９（１０Ｈ）−オンを生成させ、式（ＩＩＩ−Ｐ）の化合物を、水素あるいはギ酸塩イオンで、パラジウム触媒及びギ酸の存在下に１５〜５０℃の温度で還元し、残留パラジウムを除去し、残存する反応混合物を加熱して対応する式（Ｉ）の化合物へ環化させることからなる、式（Ｉ）
0004138883.tif 000011
（ここで、ｎ、Ｒ1及びＲ2は上記に規定されたとおりである）
の化合物の製造方法。
【請求項２】
還元を水素ガスを用いて１５〜３０℃で行う請求項１による方法。
【請求項３】
還元をギ酸アンモニウムを用いて３０〜５０℃の温度で行う請求項１による方法。
【請求項４】
環化を強酸の存在下で行う、請求項１、２又は３による方法。
【請求項５】
環化を溶媒中で８０℃ないし溶媒の環流温度で行う、請求項１ないし４のいずれか１項による方法。
【請求項６】
式（ＩＶ−Ｐ）の化合物が、被保護ヒドロキシ基がベンジルオキシ基であるものである、請求項１ないし５のいずれか１項による方法。
【請求項７】
式（Ｉ）の化合物が酸付加塩として得られるかあるいは遊離塩基から酸付加塩へ変換され、この酸付加塩がエタノール−水混合物から結晶化される、請求項１−６のいずれか１項による方法。
【請求項８】
アミンが、Ｒ1及びＲ2が共にメチル又はエチルであるものである、請求項１−７のいずれか１項による方法。
【請求項９】
ｎが２で、Ｒ1及びＲ2が共にエチルである、請求項８による方法。
【請求項１０】
式（ＩＩ−Ｆｏｒ）
0004138883.tif 000012
（ここで、Ｒ1及びＲ2は炭素数１〜４のアルキル基、ｎは２〜５である）
の化合物。
【請求項１１】
Ｒ1及びＲ2がエチル基で、ｎが２である、請求項１０による化合物。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は一般式（Ｉ）
0004138883.tif 000002
（ここで、Ｒ1及びＲ2は同一であってもよいし、また異なっていてもよい炭素数１〜４のアルキル基を示す）の５-［〔ω-（ジアルキルアミノ）アルキル〕アミノ］-８-ヒドロキシイミダゾ〔４，５，１-ｄｅ〕アクリジン-６-オンの製造法に関する。
この化合物は抗腫瘍活性、特に白血病、黒色腫（メラノーマ）又は結腸腺ガンに対する抗腫瘍活性を示し、さらに詳しくは、「マゼルスカ（Ｚ．Ｍａｚｅｒｓｋａ）ら，抗ガン薬デザイン（Ａｎｔｉ-Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ）１１，７３−８８（１９９６）」に述べられている。
さらに、本発明は本発明方法における中間体として有用であり、また抗腫瘍活性を有する、新規な１-［〔ω-（ジアルキルアミノ）アルキル〕アミノ］-４-置換-７-ヒドロキシアクリジン-９（１０Ｈ）-オンに関する。
背景技術
一般式（Ｉ）のイミダゾアクリジノンの製造方法は、ＰＣＴ出願ＷＯ−Ａ−９２／１５５８３及び「コロディ（Ｗ．Ｃｈｏｌｏｄｙ）ら．，ジャーナル  メディカル  ケミストリー（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．）３５，３７８〜３８２（１９９２）」に知られ、一般式（ＩＩ）のアミンの環化に依る。アミン（ＩＩ）は、前記特許出願に記載され、かつ反応式１に示されるように、多段工程法により得られる。
0004138883.tif 000003
（Ａは還元により除去しうるヒドロキシ保護基、Ｒ1及びＲ2はＣ1〜4のアルキル基、ｎは２〜５である）
式ＩＩの化合物である７-ヒドロキシ-４-アミノ-１-［〔ω-（ジアルキルアミノ）アルキル〕アミノ］アクリジン-９（１０Ｈ）-オンは不安定であるのが問題であった。これについては特に「コロディ（Ｗ．Ｃｈｏｌｏｄｙ）ら．，ジャーナル  メディカル  ケミストリー（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．）３５，３７８〜３８２（１９９２）」の３７９ページ右欄を参照されたい。この問題は還元及び環化を“１槽反応（ｏｎｅ  ｐｏｔ  ｒｅａｃｔｉｏｎ）”における単一工程として行い、式ＩＩＩのニトロ化合物をラネーニッケル及びギ酸と加熱することによって克服される。この反応はイミダゾ〔４，５，１-ｄｅ〕［１，４］-ジアゼピノ［５，６，７-ｍｎ］アクリジンを合成することに関連して行われる。これについては「コロディ（Ｗ．Ｃｈｏｌｏｄｙ）ら．，ジャーナル  ヘテロサイクリック  ケミストリー（Ｊ．Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ．Ｃｈｅｍ．），２９，１７４９〜１７５２（１９９２）」を参照されたい。この操作は不安定なアミン（ＩＩ）の単離を必要としない。しかし、不運にも他の問題が生じた。式Ｉ（ここでＲ1及びＲ2はエチル基、ｎは２である）の５-［〔２-（ジエチルアミノ）エチル〕アミノ］-８-ヒドロキシイミダゾ〔４，５，１-ｄｅ〕アクリジン-６-オンとして好適なニッケルイオンのないものについては、化合物及びニッケルイオンの両方とも酸性溶液には可溶であるが、アルカリを加えると沈でんするので精製が困難である。これは、式Ｉの化合物すべてに大なり小なり生じることが推測され、特に医薬用に向けられたときに重大な問題である。
ニッケルイオンの汚染を回避するために、ラネーニッケル及びギ酸からなる還元−環化用混合物がギ酸及びパラジウムに取って代わられると、式（Ｉ）の生成化合物は反応中ゆっくりと分解される。
発明の開示
最後に挙げた問題は、還元を、ギ酸中室温又はそれよりも少し高い温度でパラジウム触媒及び（ａ）水素ガスのような水素供給体又は（ｂ）ギ酸塩イオンの存在下に行い、パラジウム触媒を実質的にすべて除去し、実質的にパラジウムのない溶液を加熱して環化を行うならば解決されることが今や見出された。さらに、この方法は予期しない付加的利益をもたらす。すなわち、ヒドロキシル基を脱保護し、４-クロロ化合物をアミンと反応させる操作の順序を逆にし、脱保護を還元及び環化と同様の単一工程反応で行うことができる。この手段によって３つの反応を単一工程で行え、このようにして全工程数を４から２に減少させることができる。
還元反応は中間体としてＮ-ホルミル化合物を生成する。次いで、このＮ-ホルミル化合物を環化する。全反応式を反応式２として以下に示す。
0004138883.tif 000004
（Ａはヒドロキシ保護基、Ｒ1及びＲ2はＣ1〜4アルキル基、ｎは２〜５である）
従って、本発明は式（Ｉ）
0004138883.tif 000005
（ここで、Ｒ1及びＲ2は炭素数１〜４のアルキル基、ｎは２〜５である）
の化合物の製造方法を提供するものであって、この製法は、式（ＩＶ−Ｐ）
0004138883.tif 000006
（ここで、Ａは還元により除去しうるヒドロキシ保護基である）
の１-クロロ-７-（被保護ヒドロキシ）-４-ニトロアクリジン-９（１０Ｈ）-オンを、式
ＮＨ2−（ＣＨ2）nＮＲ1Ｒ2
（ここで、ｎ、Ｒ1及びＲ2は上記に規定されたとおりである）
のω-（ジアルキルアミノ）アルキルアミンと反応させて式（ＩＩＩ−Ｐ）
0004138883.tif 000007
（ここで、Ａ、ｎ、Ｒ1及びＲ2は上記に規定されたとおりである）
の７-（被保護ヒドロキシ）-４-ニトロ-１-［〔ω-（ジアルキルアミノ）アルキル〕アミノ］アクリジン-９（１０Ｈ）-オンを生成させ、式（ＩＩＩ−Ｐ）の化合物を水素ガス又はギ酸塩アニオンのようなギ酸よりも強力な還元剤でパラジウム触媒及びギ酸の存在下に１５〜５０℃の温度で還元し、残さのパラジウムを実質的にすべて除去し、残留する反応混合物を代表的には５０℃以上の温度で加熱して対応する式（Ｉ）の化合物へ環化させることからなる。
式（Ｉ）の化合物は、付加塩として生成されているなら、遊離塩基へ変換してもよいし、その逆にしてもよい。これらの目的のためにはいかなる既知の操作を用いてもよい。
さらに、本発明は反応式２自体に示される式（ＩＩ−Ｆｏｒ）のＮ-ホルミル化合物を包含し、その製造はパラジウムが実質的にすべて除去された上記ろ液から単離することによる。そして、その、式Ｉの相当する化合物への変換は加熱して環化させることからなる。
発明を実施するための最良の形態
本発明方法は出発物質としてヒドロキシ基が保護されている式（ＩＶ−Ｐ）の４-ニトロ-１-クロロ化合物を必要とする。これらの化合物ＩＶ−Ｐは以下の反応式３で示される予備的工程により製造される。
0004138883.tif 000008
（Ａは上記に規定されたとおりのヒドロキシ保護基である）
ヒドロキシ保護基，Ａは、反応式３において−ＯＨが安息香酸誘導体のカルボン酸基と反応するのを防止し、還元により除去されるものであればいかなるものであってもよく、好ましくはベンジル（ＰｈＣＨ2−）である。このように用いうる保護基の別のものはアリル、４-（ジメチルアミノカルボニル）ベンジル又はアリールベンジルカーボネートを包含する。
反応式３に従う製法例は、リファランスで開示されている欧州特許ＥＰ−Ｂ−０１４５２２６（ワーナーランバート社）の実施例２に見出される。
今度は反応式２に示される発明の方法に転じると、アミン化工程は、リファランスで開示されている、ＰＣＴ出願ＷＯ−Ａ−９２／１５５８３又は欧州特許ＥＰ−Ｂ−０１４５２２６に記載された方法のどれかで行われる。アミン化は好ましくはジメチルホルムアミドなどの不活性溶媒中適度の高温例えば４０〜８０℃で加熱することによる。
式（Ｉ）の化合物の好ましい種類は、ｎが２又は３であるもの、またＲ1及びＲ2が同じもの、特に両方ともメチル又は両方ともエチルであるものであり、同様の採択（別個に又は一緒に）はアミン反応成分にも当てはまる。
還元は水素ガスを用いて行われる。この反応は最適には１５〜３０℃をさす室温で行われ、５０℃までの高温特に４０℃までの高温では、発明の利点は、なくならないが、減少する。どちらの場合にも還元は水素の代わりにギ酸塩例えばギ酸アンモニウムを用い、温度を３０〜５０℃に上げることによって行われる。あるいは、ギ酸、好ましくは水中８０〜９８％ｗ／ｖのものが用いられる。ギ酸は好ましくは９０〜９７％濃度のものである。パラジウム触媒はこの反応で通常の量で存在する。該触媒は還元が完了したと判断されたのち、触媒量や撹拌速度に依るが、通常室温で５〜３０時間の範囲内、典型的には２０時間で、また少し高温では相応してより短時間で反応系から除去される。該触媒は通常ろ過により除去される。次いで、パラジウムの実質的にない、生成反応混合物は、好ましくは５０℃以上の温度、好ましくは８０℃〜還流温度に加熱されて環化される。追加の溶媒は必要ではなく、ギ酸がこの目的に資する。
環化反応は、好ましくは強酸（この用語は弱酸と考えられているギ酸を含む）、最も好ましくは塩酸又はメタンスルホン酸などの医薬的に許容しうる塩を形成する強酸の存在下に行われる。硫酸は好ましさに劣る。塩酸の使用は反応時間を４８時間から１０時間に短縮させることが見出された。
式（Ｉ）の化合物は、好ましい方法で又は遊離塩基を酸性化することで酸付加塩として得られ、結晶化により精製される。好適化合物（ｎ＝２、Ｒ1＝Ｒ2＝Ｃ2Ｈ5）は水又はエタノール−水から結晶化される。それは加熱した５０％ｖ／ｖ水性エタノールに溶解され、追加のエタノールは別に加えられ、溶液を結晶化させるのが都合がよい。
新規方法は別個の工程での７-ヒドロキシ基の脱保護を回避させ、このようにして多分突然変異誘発性のヒドロキシ中間体を用いる操作を回避させる。新規中間体（ＩＩＩ−Ｐ）はクロロ誘導体（ＩＶ−Ｐ）から非常に高収率で製造され、容易に精製される。この方法は、遊離の、非常に不安定なアミン（ＩＩ）を含む操作を回避させ、塩としてさえもアミンの単離を含まない。それはラネーニッケル由来の金属イオンによる潜在的な医療用生成物の汚染の問題を回避させる。
別に、実質的にパラジウムのない反応混合物は４０℃以下の温度でＮ-ホルミル化合物（ＩＩ−Ｆｏｒ）を生成させるように処理される。次いで、この化合物は結晶化され、溶媒中加熱することによって環化されて相当する化合物Ｉを与える。化合物ＩＩ−Ｆｏｒは抗腫瘍効果、特に抗白血病効果を示し、かくして化合物Ｉの製造における中間体はもちろんそれ自身で有用である。
実施例
本発明は、次の制限されない実施例を参照することによる例証のために詳述される。さらなる発明の具体化はこれらの観点で当業者に案出されるであろう。
実施例１
１．  １-［〔２-（ジエチルアミノ）エチル〕アミノ］-７-ベンジルオキシ-４-ニトロアクリジン-９（１０Ｈ）-オン（ＩＩＩ-Ｐ）の製造
７-ベンジルオキシ-１-クロロ-４-ニトロアクリジン-９（１０Ｈ）-オン（ＩＶ-Ｐ）（９．５２ｇ、２５ｍｍｏｌ）、２-ジエチルアミノエチルアミン（４．３ｍｌ、３０ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（３．５ｍｌ、２５ｍｍｏｌ）の混合物をジメチルホルムアミド又はジメチルスルホキシド（１５０ｍｌ）中かきまぜながら６０℃で１時間加熱した。次いで、水（５００ｍｌ）及び炭酸ナトリウムの濃厚溶液（４０ｍｌ）を加えたのち、沈でんをろ過し、水洗し、乾燥して粗生成物１０．８ｇ（９４％）を得た。ジメチルホルムアミド（１００ｍｌ）から結晶化させて分析的に純粋な生成物を収量１０ｇ（８７％）で得た。
２．  ５-［〔２-（ジエチルアミノ）エチル〕アミノ］-ヒドロキシ-イミダゾ〔４，５，１-ｄｅ〕アクリジン-６-オン二塩酸塩（Ｉ）の製造
１-［〔２-（ジエチルアミノ）エチル〕アミノ］-７-ベンジルオキシ-４-ニトロアクリジン-９（１０Ｈ）-オン（ＩＩＩ-Ｐ）（９．２ｇ、２０ｍｍｏｌ）及び９６％ギ酸（１００ｍｌ）中の１０％パラジウム担持木炭（１ｇ）の混合物を、水素ガス中室温で２４時間泡立たせることによって水素化した。次いで、触媒をろ別し、ろ液を９０℃で４８時間加熱した。（あるいは、濃塩酸（５ｍｌ）を加え、反応時間を１０〜１５時間に減少させた。）溶媒を真空下蒸発させ、残さを濃塩酸とメタノールの加熱した５０／５０溶液１５０ｍｌで処理し、冷却し、ろ過して粗生成物（７ｇ、７９％）を得た。粗生成物を木炭（１．５ｇ）と５０％エタノール（３０ｍｌ）中５分間還流させた。加熱した溶液をろ過し、９５％エタノール（１００ｍｌ）を加え、溶液を２０時間結晶化のため放置した。生成物をろ過し、エタノールで洗浄して黄色結晶の生成物（６．４ｇ、７２％）を得た。
実施例２
１．  ５-［〔２-（ジエチルアミノ）エチル〕アミノ］-８-ヒドロキシ-イミダゾ〔４，５，１-ｄｅ〕アクリジン-６-オン二塩酸塩（Ｉ）の製造
１-［〔２-（ジエチルアミノ）エチル〕アミノ］-７-ベンジルオキシ-４-ニトロアクリジン-９（１０Ｈ）-オン（ＩＩＩ-Ｐ）（２．３ｇ、５ｍｍｏｌ）、ギ酸アンモニウム（２．５ｇ）及び９６％ギ酸（２５ｍｌ）中の１０％パラジウム担持木炭（０．２５ｇ）の混合物を４０℃で、ＴＬＣにより判断されるような反応の完了まで、典型的には２０時間かきまぜた。次いで、触媒をろ別し、ろ液を９０℃で４８時間加熱した。（あるいは、濃塩酸（１ｍｌ）を加え、反応時間を１０〜１５時間に減少させた。）溶媒を真空下蒸発させ、残さを濃塩酸とメタノールの加熱した５０／５０溶液１５０ｍｌで処理し、冷却し、る過して粗生成物（７．１ｇ、７７％）を得た。粗生成物は実施例１に上記したように精製される。
２．  １-［〔２-（ジエチルアミノ）エチル〕アミノ］-７-ヒドロキシ-４-（Ｎ-ホルミルアミノ）アクリジン-９（１０Ｈ）-オン（ＩＩ）の製造
触媒をろ別するまでこの実施例の部分１を繰り返した。次いで、ろ液から溶媒を４０℃以下の温度で真空下に蒸発させた。残さをメタノールに溶解し、生成物をジエチルエーテルで沈でんさせた。精製操作を３回繰り返して黄色の吸湿性固体を得た。この固体を水に溶解し、重炭酸ナトリウムでアルカリ性として黄色沈でん物を得た。沈でん物をＤＭＦ−メタノールから結晶化させて標題化合物（５４０ｍｇ、２７％）を得た。
生成物をＣ，Ｈ，Ｎ元素分析、５００ＭＨＺ  1Ｈ  ＮＭＲ、ホモＣＯＳＹ（ｈｏｍｏＣＯＳＹ）及び13Ｃ  ＮＭＲにより分析した。データは提案した構造を確証し、化合物が、少なくともＤＭＳＯ溶液中、Ｎ-ホルミル基の配向の異なる２個の異性体の１：２混合物として存在することを示した。
３．  式（ＩＩ−Ｆｏｒ）の化合物の抗腫瘍特性
式（ＩＩ−Ｆｏｒ）のＮ-ホルミル化合物がＰ３８８リンパ性白血病細胞で腹腔内注射され、１〜５日間腹腔内注射処理されたハツカネズミにおける抗腫瘍活性に関しスクリーニングされた（試験のさらに詳細についてはＷＯ−Ａ−９２／１５５８３参照）。結果は次のとおりであった。
投与量（ｍｇ／ｋｇ）  ％Ｔ／Ｃ＊
１２．５              １１０
２５                  １３０
５０                  １４０
１００                １４０
２００                  ２０
＊は、パーセントとして示された、対照ハツカネズミに対する処理されたハツカネズミの平均生存期間の比を示す。