(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
化合物２−（２−アミノ−１，６−ジヒドロ−６−オキソ−プリン−９−イル）−メトキシ−３−ヒドロキシ−１−プロピル−Ｌ−バリナート又はその薬学的に許容できる塩又はそのジアステレオマーの製造方法であって、
（ａ）場合により保護される２−（２−アミノ−１，６−ジヒドロ−６−オキソ−プリン−９−イル）−メトキシ−１，３−プロパンジイル−ビス−Ｌ−バリナート又はその塩を、非極性非プロトン溶媒中で、Ｃ1-6のアルキルアミン、ベンジルアミン又はベンジルメチルアミンで部分的に加水分解して、場合により保護される化合物２−（２−アミノ−１，６−ジヒドロ−６−オキソ−プリン−９−イル）−メトキシ−３−ヒドロキシ−１−プロピル−Ｌ−バリナート又はその薬学的に許容される塩を得ること；
（ｂ）場合により、式：
0004091115.tif 000010
（式中、Ｐ1は、水素又はアミノ−保護基であり、Ｐ2は、アミノ−保護基である）
を有する化合物からアミノ保護基を除去して、化合物２−（２−アミノ−１，６−ジヒドロ−６−オキソ−プリン−９−イル）−メトキシ−３−ヒドロキシ−１−プロピル−Ｌ−バリナート又はその薬学的に許容される塩を得ること；
（ｃ）場合により、化合物２−（２−アミノ−１，６−ジヒドロ−６−オキソ−プリン−９−イル）−メトキシ−３−ヒドロキシ−１−プロピル−Ｌ−バリナートをその薬学的に許容される塩に転化すること；
（ｄ）場合により、化合物２−（２−アミノ−１，６−ジヒドロ−６−オキソ−プリン−９−イル）−メトキシ−３−ヒドロキシ−１−プロピル−Ｌ−バリナートの酸付加塩を非塩型に転化すること；又は、
（ｅ）場合により、２−（２−アミノ−１，６−ジヒドロ−６−オキソ−プリン−９−イル）−メトキシ−３−ヒドロキシ−１−プロピル−Ｌ−バリナートをその（Ｒ）及び（Ｓ）ジアステレオ異性体に分割すること、
を含む方法。
【請求項２】
該Ｃ1-6のアルキルアミンが、ｎ−プロピルアミンである請求項１記載の方法。
【請求項３】
該非極性非プロトン溶媒が、ヘキサンである請求項１記載の方法。
【発明の詳細な説明】
発明の背景
発明の分野
本発明は、ガンシクロビルのプロドラッグ製剤及びその薬学的に許容される塩の製造方法に関する。さらに詳しくは、本発明は、２−（２−アミノ−１，６−ジヒドロ−６−オキソ−プリン−９−イル）−メトキシ−１，３−プロパン−ジオールから誘導されたＬ−モノバリンエステル及びその薬学的に許容される塩に関する。
背景情報
イギリス特許第１５２３８６５号明細書は、９−位に非環式鎖を有する抗ウイルス性のプリン誘導体を記載している。これらの誘導体の中で、ＩＮＮ命名法でアシクロビルと呼ばれる２−（２−アミノ−１，６−ジヒドロ−６−オキソ−プリン−９−イル）−メトキシ−エタノールは、単純ヘルペスのようなヘルペスウイルスに対して強い活性を有することが見出された。
米国特許第４，３５５，０３２号明細書は、ＩＮＮ命名法でガンシクロビルと呼ばれる化合物、９−〔（２−ヒドロキシ−１−ヒドロキシメチル−エトキシ）−メチル〕−グアニン又は２−（２−アミノ−１，６−ジヒドロ−６−オキソ−プリン−９−イル）−メトキシ−１，３−プロパン−ジオール又は９−〔（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポキシ）−メチル〕−グアニン（ＤＨＰＧ）を開示している。ガンシクロビルは、ヘルペス科のウイルス、例えば単純ヘルペス及びサイトメガロウイルスに対し大変有効である。
ヨーロッパ特許出願公開第３７５３２９号明細書は、以下の式：
0004091115.tif 000002
（式中、Ｒ及びＲ1は、それぞれ水素原子及びアミノアシル残基から選ばれるが、ただし、Ｒ及びＲ1の少なくとも一つは、アミノ酸アシル残基を表わし、Ｂは、式：
0004091115.tif 000003
〔式中、Ｒ2は、Ｃ1-6の直鎖、Ｃ3-6の分岐鎖もしくはＣ3-6の環状アルコキシ基、又はヒドロキシ又はアミノ基又は水素原子を表わす）の基を表す〕
を有するプロドラッグ化合物及びそれらの生理学的に許容される塩を開示している。これらのプロドラッグ化合物は、経口経路に投与するときに有利な生物学的利用能を有し、体内で高い親化合物の濃度が得られると記載されている。
ヨーロッパ特許出願公開第３７５３２９号明細書の実施例３（ｂ）は、白色泡状体としての、ガンシクロビルのビス（Ｌ−イソロイシナート）エステルの製造を開示している。実施例４（ｂ）は、白色固体としての、ガンシクロビルのビス（グリシナート）エステルの製造を開示している。実施例５（ｂ）は、固体としての、ガンシクロビルのビス（Ｌ−バリナート）エステルの製造を開示している。実施例６（ｂ）は、９０％のビスエステル及び１０％のモノエステルを含むシロップとしての、ガンシクロビルのビス（Ｌ−アラニナート）エステルの製造を開示している。ビス−エステルは、ガンシクロビルを、場合により保護されたアミノ酸又はその機能的同等物と反応させることにより製造される。その反応は、従来の方法で、例えばピリジン、ジメチルホルムアミドなどのような溶媒中、１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミドのようなカップリング剤の存在下で、場合により４−ジメチルアミノピリジンのような触媒能を有する塩基の存在下で行われる。記載されたビスエステルは、経口投与用薬剤の製造のために処理が困難な非結晶性物質である。
イギリス特許出願第８８２９５７１号は、ヨーロッパ特許出願公開第３７５３２９号明細書及び米国特許第５，０４３，３３９号明細書の優先権特許出願であり、式：
0004091115.tif 000004
（式中、Ｒは、ヒドロキシ又はアミノ基又は水素原子を表わす）の化合物のアミノ酸エステル及びその生理学的に許容される塩を開示している。
好ましいアミノ酸の例は、例えば、グリシン、アラニン、バリン及びイソロイシンのような６個までの炭素原子を含む脂肪族酸を含む。アミノ酸エステルは、モノエステルもジエステルも含む。このジエステルの製造法は、ヨーロッパ特許出願公開第３７５３２９号明細書中の製造法と同一である；しかしながら、この特許出願並びにヨーロッパ特許出願公開第３７５３２９号明細書及び米国特許第５，０４３，３３９号明細書は、モノエステルの製造、又はそれらの有用性を示唆するいかなるデータも開示していない。
Leon Collaらの、J. Med. Chem.（1983）26, 602-604は、アシクロビルのいくつかの水溶性エステル誘導体及びそれらの塩を、アシクロビルのプロドラッグとして開示している。著者らは、アシクロビルが、水へのその限られた溶解性のために目薬又は筋肉注射剤として投与できないことを述べ、したがって、親化合物よりもさらに水溶性であるアシクロビル誘導体を合成している。著者らは、グリシルエステルの塩酸塩、アラニルエステルの塩酸塩、β−アラニルエステルの塩酸塩、コハク酸エステルのナトリウム塩、及びアジド酢酸エステルを開示している。アラニルエステルは、アシクロビルを対応するＮ−カルボキシ−保護アミノ酸とピリジン中で、１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド及び触媒量のｐ−トルエンスルホン酸の存在下で反応させ、そして続いて接触還元によりα−及びβ−アラニルエステルを塩酸塩として得る方法を含む、従来のエステル化法で製造された。
L.M. Beauchampらの、Antiviral Chemistry & Chemotherapy（1992）, 3(3), 157-154は、抗ヘルペス剤アシクロビルの１８個のアミノ酸エステル及びアシクロビルのプロドラッグとしてのそれらの有用性を開示し、ラットでアシクロビルの尿中回収量を測定することにより評価した。１０個のプロドラッグ、例えばグリシル、Ｄ，Ｌ−アラニル、Ｌ−アラニル、Ｌ−２−アミノブチレート、Ｄ，Ｌ−バリル、Ｌ−バリル、Ｄ，Ｌ−イソロイシル、Ｌ−イソロイシル、Ｌ−メチオニル、及びＬ−プロリルエステルは、尿中にアシクロビル自体よりも多量の親薬剤を生じた。著者らによれば、アシクロビルのＬ−バリルエステルは、研究されたエステルの中で最も優秀なプロドラッグであった。これらのエステルは、Collaらによって使用された方法と同様の方法で製造された。
ヨーロッパ特許出願公開第３０８０６５号明細書は、アシクロビルのバリン及びイソロイシンエステル、好ましいものとして、他のエステル及びアシクロビルと比較した場合、経口投与後に腸管からの吸収作用がかなり増加することを示すので、そのＬ型を開示している。アミノ酸エステルは、アシクロビルをＮ−カルボキシ−保護アミノ酸又は酸ハロゲン化物又はアミノ酸の酸無水物と、ピリジン又はジメチルホルムアミドのような溶媒中で、場合により触媒性塩基の存在下で反応させることを含む、従来のエステル化法で製造される。
ＰＣＴ特許出願公開ＷＯ  ９４／２９３１１号明細書は、アシクロビル又はガンシクロビルを含む、ヌクレオシド類似体のアミノ酸エステルの製造方法を開示している。この方法は、エステル化可能なヒドロキシ基をその線状又は環式エーテル部分中に有するヌクレオシド類似体を、式：
0004091115.tif 000005
（式中、Ｒ1は、水素、Ｃ1-4のアルキルもしくはアルケニル基又は他のアミノ酸側鎖を表してもよく、Ｒ2は、水素又は基ＣＯＯＲ3を表してもよいが、ここでＲ3は、ベンジル、ｔ−ブチル、フルオレニルメエチル、又は場合によりハロ置換された線状又は分岐状のＣ1-8のアルキル基である）の２−オキサ−４−アザ−シクロアルカン−１，３−ジオンと反応させることを含む。好ましいＲ1基は、それぞれ、アシクロビル又はガンシクロビルのグリシン、アラニン、バリン及びイソロイシンエステルを生じる、水素、メチル、イソプロピル及びイソブチルを含む。ＰＣＴ特許出願公開ＷＯ９４／２９３１１号明細書の実施例１〜３は、従来の方法によるバリン−置換２−オキサ−４−アザ−シクロアルカン−１，３−ジオン（Ｚ−バリン−Ｎ−カルボキシ無水物）によるアシクロビルの縮合のみを開示している。そのＰＣＴ出願のアミノ酸エステルは、アシクロビルエステル及びガンシクロビルエステルの両方を含むが、その出願は、ガンシクロビルエステル、ましてガンシクロビルのモノ−エステルの製造方法を開示していない。
２−（２−アミノ−１，６−ジヒドロ−６−オキソ−プリン−９−イル）−メトキシ−１，３−プロパン−ジオールから誘導されたＬ−モノバリンエステル及びその薬学的に許容される塩は、強い抗ウイルス剤であり、かつヨーロッパ特許出願公開第６９４５４７号明細書に記載されている。これらの化合物は、改良された経口吸収作用及び低毒性を有することが見出されている。この特許出願は、ここで記載した方法とは異なった、これらエステルのあるいくつかの製造方法をも開示している。
本発明は、ガンシクロビルをＬ−バリン誘導体でエステル化してジ−バリンガンシクロビル中間体を提供する改良された方法に関する。バリン基の一つを低級アルキルアミン、ベンジルアミン又はベンジルメチルアミンで除去することは、式Ｉのモノ−バリンエステル化合物を提供する。
発明の要約
第一の観点において、本発明は、式Ｉ
0004091115.tif 000006
の化合物及びその薬学的に許容される塩の製造方法を提供するが、この化合物を、以下、２−（２−アミノ−１，６−ジヒドロ−６−オキソ−プリン−９−イル）−メトキシ−３−ヒドロキシ−１−プロピル−Ｌ−バリナート又はモノ−Ｌ−バリンガンシクロビルと呼ぶ。
この方法は、Ｌ−バリン誘導体によるガンシクロビルのジエステル化、続いてバリン基の一つを低級アルキルアミン、ベンジルアミン又はベンジルメチルアミンで除去すること、そしていかなる保護基をも除去して式Ｉのプロドラッグを得ることを含む。場合により、その方法は、また、式Ｉのプロドラッグの塩の生成、式Ｉのプロドラッグの酸付加塩の非塩形態への転化、式Ｉの結晶状のプロドラッグの光学分割又は式Ｉのプロドラッグの製造をも含むことができる。その方法の詳細は、以下に述べる。
発明の詳細な説明
定義
特に断らないかぎりは、詳細な説明及び請求項で使用する以下の用語は、以下に与えられた意味を有する。
「アルキル」は、１乃至指定された炭素原子数を有する線状又は分岐状の飽和炭化水素ラジカルを意味する。例えばＣ1-7のアルキルは、少なくとも１個、しかしながら、７個を超えない炭素原子を有するアルキル、例えばメチル、エチル、イソプロピル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘプチルなどである。
「低級アルキル」は、１乃至６個の炭素原子のアルキルを意味する。
「アリール」は、一つの水素原子を除去することによって芳香族炭化水素から誘導された有機ラジカルを意味する。好ましいアリールラジカルは、一つの環（例えば、フェニル）又は二つの縮合環（例えば、ナフチル）を有する芳香族炭素環式ラジカルである。
「アラルキル」は、水素原子が上記定義のアリール基で置き換わったアルキル基である。
「アシル」は、有機酸から水酸基を除去することにより誘導された有機ラジカルである；例えばＣＨ3ＣＯ−すなわちアセチルは、ＣＨ3ＣＯＯＨのアシルラジカルである。そのようなアシル基の他の例は、プロピオニル、又はベンゾイルなどである。「アシル」なる用語は、有機ラジカルＲＣＯ−（ここで、Ｒは上記定義のようなアルキル基である）である「アルカノイル」なる用語を含む。
「低級アルコキシ」、「（低級アルキル）アミノ」、「ジ（低級アルキル）アミノ」、「（低級アルカノイル）アミノ」、及び同様の用語は、アルコキシ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルカノイルアミノなどを意味し、ここで、各アルキルラジカルは、上記した「低級アルキル」である。
「ハロゲン」又は「ハロ」は、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素を意味する。
「低級アルキルアミン」は、線状又は分岐状有機ラジカルＲ1Ｎ（Ｒ2）2を意味し、ここでＲ1は、低級アルキル、Ｒ2は、水素又は低級アルキルを表わし、低級アルキルは、上記で定義したとおりである。
化合物の「誘導体」は、元の化合物から単純な化学操作によって得ることができる化合物を意味する。
化合物の「活性化誘導体」は、所望の化学反応において該化合物を活性化する、元の化合物の反応性の形態を意味するが、ここで、元の化合物は、わずかに反応性があるか又は反応性はない。活性化は、元の化合物の自由エネルギー量よりも大きな自由エネルギー量を有する誘導体、又は分子内での化学的部分を形成して、別の試薬とより反応しやすい活性化型を与えることにより達成される。本発明においては、カルボキシ基の活性化は特に重要であり、対応する活性化剤又はカルボキシ基を活性化させる基部分は、以下でさらに詳しく述べる。活性化されたＬ−バリン誘導体の例は、式II：
0004091115.tif 000007
（式中、Ｐ2は、アミノ−保護基であり、Ａは、カルボキシ−活性基、例えばハロ、低級アシルオキシ基、カルボジイミド基、例えば１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド（ＥＤＡＣ）、イソブチラート基などである）の化合物である。
該アミノ酸（特にＬ−バリン）をエステル化しやすくさせる、アミノ酸の活性化した形態であるアミノ酸無水物は、本発明で特に重要なものである。アミノ酸無水物は、上記式IIの化合物に含まれる。ＰＣＴ特許出願公開ＷＯ  ９４／２９３１１号明細書に記載されたＬ−バリンの環状アミノ酸無水物、例えば式IIａ：
0004091115.tif 000008
（式中、Ｐ2は、アミノ保護基である）
の２−オキサ−４−アザ−５−イソプロピル−シクロアルカン−１，３−ジオンは、本発明に特に有用である。環状アミノ酸無水物の他の例は、以下にさらに詳しく記載された保護されたアミノ酸Ｎ−カルボキシ無水物（ＮＣＡｓ）である。
「保護基」は、（ａ）反応性基を、望ましくない化学反応に関与することから保護し；そして（ｂ）反応性基の保護がもはや必要なくなった後に容易に除去できる化学基を意味する。例えばベンジル基は、第１級ヒドロキシル官能基のための保護基である。
「アミノ−保護基」は、さもなければ特定の化学反応により変性されるであろう反応性アミノ基を保護する保護基である。その定義は、ホルミル基又は２〜４個の炭素原子を有する低級アルカノイル基、特にアセチル又はプロピオニル基、トリチル又は置換トリチル基、例えばモノメトキシトリチル基、４，４′−ジメトキシトリチルすなわち４，４′−ジメトキシトリフェニルメチル基のようなジメトキシトリチル基、トリフルオロアセチル基、及びＮ−（９−フルオレニルメトキシカルボニル）すなわち「ＦＭＯＣ」基、アリルオキシカルボニル基又は（Ｃ6−Ｃ12）アリール低級アルキルカーボネート（例えば、ベンジルクロロカーボネートから誘導されたＮ−ベンジルオキシカルボニル基）のようなハロカーボネートから誘導されるか、あるいはビフェニルアルキルハロカーボネート、又は第３級アルキルハロカーボネート（例えば第３級ブチルハロカーボネート、特に第３級ブチルクロロ−カーボネート）、又はジ（低級）アルキルジカーボネート、特にジ（ｔ−ブチル）−ジカーボネートから誘導される他の保護基、フタリル基及びトリフェニルメチルクロリドのようなトリフェニルメチルハライド、及びトリフルオロ酢酸無水物を含む。
「脱離基」は、化学反応で別の基により置換される置換されやすい基を意味する。脱離基の例は、ハロゲン、場合により置換されたベンジルオキシ基、イソプロピルオキシ基、メシルオキシ基、トシルオキシ基又はアシルオキシ基である。
式Ｉの化合物の製造に使用されるすべての活性化剤及び保護剤は、以下の条件を満たさなければならない；（１）それらの導入は、定量的に、かつＬ−バリン成分のラセミ化なしで進めなければならない；（２）所望の反応の間、存在する保護基は、使用される反応条件に対して安定であるべきである；（３）該基は、エステル結合が安定でありかつエステルのＬ−バリン成分のラセミ化が起こらない条件で容易に除去されなければならない。
本発明の方法は、式Ｉのプロドラッグの光学分割をも含むことができる。これら化合物の立体化学及び光学分割に関する用語は、ヨーロッパ特許出願公開第６９４５４７号明細書に記載されている。
「場合による」又は「場合により」は、記載された事柄（event）又は情況（circumstance）が起こるか又は起こらないかもしれないこと及びその記述が該事柄（event）又は情況（circumstance）が起こった例及び起こらなかった例を含むことを意味する。例えば「場合により置換されたフェニル」は、フェニルが置換されているか又は非置換であること及びその記述が非置換フェニル及びその中に置換基があるフェニルをも含むことを意味する；「場合により、次に遊離塩基を酸付加塩に転化する」は、該転化が、記載されたその方法が本発明の範囲内にあるように行われるか又は行われないことを意味し、かつ本発明は、遊離塩基を酸付加塩に転化する方法及び遊離塩基を転化しない方法を含む。
「薬学的に許容される」は、一般に安全かつ非毒性である薬学組成物を製造するのに有用であることを意味し、かつ家畜への使用並びに人間への薬剤使用に許容できることを含む。
「薬学的に許容される塩」は、所望の薬理活性を有し、かつ生物学的にもそうでなくても有害でない塩を意味する。そのような塩は、例えば塩化水素酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの無機酸；例えば酢酸、プロピオン酸、ヘキサン酸、ヘプタン酸、シクロペンタン−プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、乳酸、マロン酸、コハク酸、リンゴ酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、ｏ−（４−ヒドロキシ−ベンゾイル）−安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、１，２−エタン−ジスルホン酸、２−ヒドロキシエタン−スルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−クロロベンゼンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ショウノウスルホン酸、４−メチル−ビシクロ〔２，２，２〕オクト−２−エン−１−カルボン酸、グルコ−ヘプトン酸、４，４′−メチレンビス（３−ヒドロキシ−２−ナフトエ）酸、３−フェニルプロピオン酸、トリメチル−酢酸、第３級ブチル酢酸、ラウリル硫酸、グルコン酸、グルタミン酸、ヒドロキシ−ナフトエ酸、サリチル酸、ステアリン酸、ムコン酸などの有機酸で形成された酸付加塩を含む。好ましい薬学的に許容される塩は、塩化水素酸、硫酸、リン酸、酢酸又はメタンスルホン酸、エタンスルホン酸、１，２−エタンジスルホン酸、２−ヒドロキシエタン−スルホン酸、ベンゼン−スルホン酸、ｐ−クロロベンゼン−スルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、及びショウノウスルホン酸で形成された塩である。
合成反応パラメーター
そうでないと断らない限りは、ここに記載した反応は、大気圧下で５℃から１７０℃（好ましくは１０℃から５０℃；最も好ましくは「室温」又は「雰囲気温度」、例えば２０℃から３０℃）の温度範囲内で起こる。しかしながら、化学反応で使用される温度範囲は、これら温度範囲より上下の温度であろういくつかの反応が存在することは明らかである。さらに、断らない限りは、反応時間及び条件は、おおよそのものであるが、例えば、ほぼ大気圧で、約５℃から約１００℃（好ましくは約１０℃から約５０℃；最も好ましくは約２０℃）の温度範囲内で、約１から約１００時間（好ましくは約５から６０時間）の間に起こる。例中で与えられたパラメーターは、おおよそではなく特定されている。
ここで記載した化合物及び中間体の単離及び精製は、所望ならば、適切な分離及び精製方法、例えばろ過、抽出、結晶化、カラムクロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィー、厚層クロマトグラフィー、又はこれら方法の組み合わせにより達成できる。適切な分離及び単離方法の具体例は、下記の例を参照することで示される。しかしながら、他の同等な分離ないし単離方法も、もちろん使用できる。
目下の好ましい態様
本発明の最も広い定義は、発明の要約中に、式Ｉの化合物及びその薬学的に許容される塩の製造方法として示されているが、（Ｒ，Ｓ）混合物及びある特定の塩が好ましい。
以下の酸は、式Ｉの化合物と薬学的に許容される塩を形成するために好ましい：塩化水素酸、硫酸、リン酸、酢酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、１，２−エタンジスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−クロロベンゼンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸及びショウノウスルホン酸である。最も好ましいものは、塩化水素酸、硫酸又はリン酸のような強無機酸である。
最も好ましい化合物は、２−（２−アミノ−１，６−ジヒドロ−６−オキソ−プリン−９−イル）−メトキシ−３−ヒドロキシ−１−プロピル  Ｌ−バリナートの塩化水素塩及び酢酸塩である。これら化合物は、結晶性物質として製造でき、それゆえ安定した経口製剤に容易に製造できる。
ここに記載したいかなる方法においても、式Ｉ、II、III、又はIVについては、Ｐ1、Ｐ2及びＡが、発明の要約中で述べられた最も広い定義中で定義された式のことであり、これらの方法は、目下の好ましい態様に適用できる。
合成方法の詳細
本発明の方法は、以下に示す反応シーケンス中に描かれている。
0004091115.tif 000009
ここで、Ｐ1は、水素又はアミノ保護基、Ｐ2は、アミノ保護基である。２−（２−アミノ−１，６−ジヒドロ−６−オキソ−プリン−９−イル）−メトキシ−１，３−プロパンジオール（ガンシクロビル）は、式II又は式IIａのＬ−バリン誘導体でエステル化してガンシクロビルのジ−バリンエステル（式III）を形成する。一つのバリン基を低級アルキルアミン、ベンジルアミン又はベンジルメチルアミンで除去したのち、保護基を除去すると、式Ｉの化合物が得られる。
式Ｉの化合物は、場合によりその薬学的に許容される塩に転化できる。その方法は、式Ｉのプロドラッグの酸付加塩の非塩型への転化、式Ｉの化合物の光学分割又は式Ｉの結晶状の化合物の製造も含むことができる。
式Ｉの化合物を生産する方法は、グアニン塩基の２−位におけるアミノ基の保護を含むか又は含まない（その方法が、保護されたアミノ基なしで行われる場合については、工程ＩからIIIの以下の詳細な記載を参照）。出発物質ガンシクロビルが、保護されたアミノ基を有する場合については、その保護基は、当業界においてよく知られた従来の方法で除去される。例えば、アミノ−保護基が、低級アルカノイル基ならば、塩基性条件（ｐＨ８〜１１）が保護基を除去するのに使用される。例えば、２−Ｎ−アセチル−ガンシクロビルは、アセチル基が完全に除去されるまでアルカリ剤、例えば水酸化アンモニウム、炭酸ナトリウム又は炭酸カリウム、水酸化ナトリウム又は水酸化カリウムで処理される。一般に、この反応は、低級アルカノールのような適切な溶媒の存在下で行われる。好ましくは出発物質をメタノールに溶解し、化学量論的に過剰量の水酸化アンモニウムを加える。反応温度は、０から５０℃、好ましくは室温に保持される。反応が終了後（ＴＬＣで決定できる）、他の溶媒、例えば、従来の分離法を使用してろ別及び単離できる脱アセチル化生成物の沈殿を導くエチルエーテルを加え、脱−保護生成物の単離を容易にする。
出発物質
式Ｉの化合物を製造するために使用されるすべての出発物質は、ガンシクロビル及び保護剤及びカルボキシル基−活性化剤のような、既知のものである。
工程Ｉ（エステル化工程）を実施する前に、Ｌ−バリン誘導体のアミノ基を保護して望ましくないアミド形成によるエステル化の妨害を避けなければならない。本発明で有用な種々のアミノ−保護されたＬ−バリン誘導体は、例えばＮ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−バリン、ＢＯＣ−Ｌ−バリン及びＦＭＯＣ−Ｌ−バリン、Ｎ−ホルミル−Ｌ−バリン及びＮ−ベンジルオキシカルボニル−Ｎ−カルボキシ−Ｌ−バリン無水物は、すべて商業的に入手可能（SNPE Inc., Princeton, NJ, Aldrich Chemical Co., Milwaukee, WI及びSigma Chemical Co., St. Louis, MO）であるか、又は、例えば、Ｎ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−バリンのように、文献中に記載されている。環状アミノ−保護されたＬ−バリン誘導体は、上記したような文献中にも記載されている。ベンジルオキシカルボニル−バリン−置換２−オキサ−４−アザ−シクロアルカン−１，３−ジオン（Ｚ−バリン−Ｎ−カルボキシ−無水物、又はＺ−バリン−ＮＣＡ）は、本発明で特に重要であり、商業的にも入手できる（SNPE Inc., Princeton NJ）。あるいは、保護工程は、従来の方法で行われる。
本発明の化合物の製造のための好ましいガンシクロビル出発物質は、米国特許第４，３５５，０３２号明細書に記載された保護されていないガンシクロビル（２−（２−アミノ−１，６−ジヒドロ−６−オキソ−プリン−９−イル）メトキシ−１，３−プロパンジオール）である。他のガンシクロビル出発物質、例えば２−（２−アシル−アミノ−１，６−ジヒドロ−６−オキソ−プリン−９−イル）メトキシ−１，３−プロパンジオールは、２−アミノ基において保護されている。
Ｌ−バリンの活性誘導体の製造
工程Ｉ（エステル化工程）を実施する前に、Ｌ−バリンは、活性化もされなければならない。保護アミノ酸の少なくとも１当量及び適切なカップリング剤又は脱水剤の１当量、例えば１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド又は塩基性基を有するそのようなジイミドの塩を、最初から使用するべきである。Ｎ，Ｎ′−カルボニルジイミダゾールのような他のカルボジイミドを使用することもできる。さらなる有用な脱水剤は、無水トリフルオロ酢酸、混合無水物、酸塩化物、１−ベンゾ−トリアゾリルオキシ−トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート、ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリスピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール、１−ヒドロキシ−４−アザベンゾトリアゾール、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール、Ｎ−エチル−Ｎ′−（３−（ジメチルアミノ）−プロピル）カルボジイミド塩酸塩、３−ヒドロキシ−３，４−ジヒドロ−４−オキソ−１，２，３−ベンゾトリアジン、Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート、Ｏ−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−ビス（テトラメチレン）ウロニウムヘキサフルオロホスフェート又はＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−ビス（テトラメチレン）ウロニウムヘキサフルオロホスフェートである。L.A.Carpinoによるこれらカップリング剤の記載は、J. Am. Chem. Soc. 1993, 115, p.4397-4398に見出すことができる。
アミノ酸の活性化した形態であるウレタンで保護されたアミノ酸のＮ−カルボキシ無水物（ＵＮＣＡ’ｓ）は、この目的にも有効であり、これらは、William, D. Fullerらの、J. Am. Chem. Soc. 1990, 112, 7414-7416に記載されているが、これは参考文献として本明細書に組み込まれる。他の保護されたアミノ酸のＮ−カルボキシ無水物は、前に論じたＰＣＴ特許出願公開ＷＯ９４／２９３１１号明細書に記載されている。要約すれば、保護されたアミノ酸の無水物又は他の活性化誘導体を緩やかな条件下で生成するすべての他の試薬は、カップリング剤として使用できる。
そのアミノ−保護されたアミノ酸は、ハロゲン化低級アルカン、好ましくはジクロロメタンのような不活性溶媒中に、不活性雰囲気下で、例えば窒素雰囲気下で溶解され、そのカップリング剤（好ましくは１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド）が加えられる。その反応混合物は、０から５０℃、好ましくはほぼ室温で攪拌される。その反応混合物は、ろ過され、反応生成物（保護されたアミノ酸の無水物）は、単離される。得られた生成物は、乾燥ジメチルホルムアミドのような乾燥不活性溶媒中に溶解され、窒素下に置かれる。
モノ−Ｌ−バリンガンシクロビルの製造
工程Ｉ：
場合により、保護された２−アミノ基を有するガンシクロビルは、式IIのＬ−バリン誘導体でエステル化され、ガンシクロビルのジ−バリンエステルを中間体（式III）として得る。適切なアミノ保護基は、２〜４個の炭素原子を有する低級アルカノイル基、特にアセチル基又はプロピオニル基である。他の適切なアミノ−保護基は、トリチル基又は置換されたトリチル基、例えばモノメトキシトリチル基及び４，４′−ジメトキシトリチル基である。
Ｌ−バリン誘導体の適切なアミノ−保護基は、Ｎ−ベンジルオキシカルボニル基、フタリル基、第３級ブチルオキシカルボニル基及びＮ−（９−フルオレニルメトキシカルボニル）すなわち「ＦＭＯＣ」基である。
ガンシクロビルのジ−バリンエステルは、例えばヨーロッパ特許第３７５３２９号明細書に記載されたような通常の方法で製造できる。
ジ−バリンエステルを製造するための通常の方法の他の例は、以下のとおりである。ガンシクロビルの懸濁液は、ほぼ当量のＬ−バリン誘導体、好ましくはＮα−Ｂｏｃ−バリン−ＮＣＡ、及びトリエチルアミン（ＴＥＡ）のような有機塩基を含む溶液と、１０℃〜５０℃、好ましくは雰囲気温度で、１０〜９０時間、好ましくはほぼ２４時間反応させる。その反応混合物は、希釈され、ろ過され、洗浄され、真空下で乾燥される。
工程II：
ガンシクロビルのジ−バリンエステルのモノ−（Ｌ−バリナート）−ガンシクロビルへの転化は、低級アルキルアミン、ベンジルアミン又はベンジルメチルアミンと共に、好ましくはｎ−プロピルアミンと共に、ヘキサンのような非極性非プロトン性溶媒中において、Ｌ−バリンエステル部分の一つを部分的に加水分解することにより行われる。これによりアミノアシル残基の一つの開裂が生じる。
例えば、ガンシクロビルのジ−バリンエステルは、非極性の非プロトン性溶媒、好ましくはヘキサン中において、ｎ−プロピルアミンで処理され、１０℃〜５０℃で、好ましくは雰囲気温度で、１時間〜１０日間、好ましくは１〜７日間攪拌される。この反応混合物は、真空下で蒸発され、ＨＰＬＣで分析される。
工程III：
工程IIの生成物のアミノ保護基は、脱−保護反応により、好ましくは酸性の媒質又は溶媒中で、最も好ましくは水素化分解で除去される。酸性条件下の脱−保護は、それが脱−保護反応で遊離したアミノ基がプロトン化することを保証するので好適である。すなわち、式Ｉの塩基が脱−保護反応で形成された遊離アミノ基は、存在する酸の少なくとも化学量論量により捕捉される。酸付加塩として式Ｉの化合物の単離は、式Ｉの化合物の所望の立体配置を保護するであろう。したがって、脱−保護工程を示す、下記のこれらの例は、付随する塩形成工程をも示している。
その脱−保護反応は、不活性溶媒、好ましくは酸性溶媒中において、水素化分解触媒、例えば白金、又は炭素上の水酸化パラジウム、炭素上のパラジウムを使用して、１〜２０００psi（０．０７〜１４０気圧）、好ましくは５０〜２００psi（３．５〜１４気圧）、最も好ましくは５〜２０psi（０．３５〜１．４気圧）の上昇した水素圧で、前工程の生成物を溶解して行われる。その反応の完了は、通常のＴＬＣ分析を使用して監視できる。必要ならば、さらに水素化触媒を加えて、その水素化分解は、転化が完了するまで続けられる。触媒は、除去され、洗浄される。ろ過工程からのろ液及び洗浄液を一緒にし、これを濃縮及び凍結乾燥し、ガンシクロビルＬ−バリンエステルを単離する。その生成物の精製及び結晶状のエステルの単離は、再結晶化又は液体クロマトグラフィーのような他の精製技術によって行われる。
存在するならば、グアニン基の２−アミノ基のどのような保護基も上記したような通常の方法で除去できる。
もし第３級ブチルオキシカルボニル基が、アミノ−保護基として使用されるならば、その除去は、ＨＣｌのような酸及び溶媒としてのイソプロパノールで、又はトリフルオロ酢酸だけで行われる。
あるいは、エステル化工程が、トリチル又は置換されたトリチル−保護されたガンシクロビル誘導体で行われるならば、そのような保護基は、水性アルカン酸又はトリフルオロ酢酸又は塩化水素酸で、例えば酢酸水溶液で、−２０℃〜１００℃の温度での処理により除去できる。
塩の製造
当業者は、式Ｉの化合物が、酸付加塩として又は対応する遊離塩基として製造できることを理解するであろう。酸付加塩として製造されるならば、その化合物は、水酸化アンモニウム溶液、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムなどのような適切な塩基で処理することにより遊離塩基に転化できる。しかしながら、式Ｉの遊離塩基は、特徴づけることが酸付加塩よりも困難であることを指摘することは重要である。遊離塩基を酸付加塩に転化するときに、その化合物を、（前に記述した）適切な有機酸又は無機酸と反応させる。これらの反応は、（酸付加塩を製造する場合には）少なくとも化学量論量の適切な酸であるいは（式Ｉの遊離化合物を遊離させる場合には）塩基で処理することにより行われる。本発明の塩−形成工程において、典型的には遊離塩基は、水又は低級アルカノール（好ましくはイソプロパノール）及びその混合物のような極性溶媒中に溶解され、酸は、水中又は低級アルカノール中に必要量加えられる。その反応温度は、通常、約０℃〜５０℃、好ましくはほぼ室温に保持する。その対応する塩は、自然に沈殿するか、あるいはより小さな極性の溶媒の添加、蒸発又は真空による溶媒の除去、又は溶液の冷却によって溶液から取り出すことができる。
立体異性体の単離及び結晶状の２−（２−アミノ−１，６−ジヒドロ−６−オキソ−プリン−９−イル）メトキシ−３−ヒドロキシ−１−プロピル−Ｌ−バリナートの製造
式（Ｉ）から、本発明の化合物は、Ｌ−バリン中の非対称炭素原子のほかに、一つの非対称炭素原子（キラル中心）をプロパニル鎖中に有することは明らかである。したがって、二つのジアステレオマー型、Cahnらの規則によって決定されるような、（Ｒ）−及び（Ｓ）−型が存在する。そのジアステレオマーの分離のための適切な方法は、ヨーロッパ特許出願公開第６９４５４７号明細書に記載されている。
式（Ｉ）の化合物は、また非結晶状の形態よりも多くのよく知られた利点を有する結晶状の形態に製造される。本発明の化合物を結晶状の形態に製造する適切な方法は、ヨーロッパ特許出願公開第６９４５４７号明細書にも記載されている。
以下の製造例及び例は、当業者が本発明をさらに明瞭に理解でき、かつ実施できるように与えられている。それらは、本発明の範囲を限定すると考えるべきではなく、単にそれらの例及び典型例としてだけ考えるべきである。
実施例１
２−（２−アミノ−１，６−ジヒドロ−６−オキソ−プリン−９−イル）−メトキシ−１，３−プロパンジイル−ビス−〔Ｎ−（ブチルオキシカルボニル）−Ｌ−バリナート〕及び２−（２−アミノ−１，６−ジヒドロ−６−オキソ−プリン−９−イル）−メトキシ−１，３−プロパンジイル−ビス−〔Ｎ−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｌ−バリナート〕の製造
１Ａ．Ｏ，Ｏ，ビスＮα−Boc−バリン−ガンシクロビルの製造
ジメチルホルムアミド（２５ml）中のガンシクロビル（４mg）の懸濁液に、トリエチルアミン（２．３２ml）及びＮα−Boc−バリン−ＮＣＡ（１１mg）を加え、室温で終夜攪拌した。反応混合物を水で希釈し、ろ過し、水洗し、終夜乾燥した。固体を酢酸エチルに溶解し、重炭酸ナトリウム溶液（５％）で洗浄し、水洗し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、ろ過し、蒸発させた。残渣をアセトンに溶解し、過剰の石油エーテルの添加によって沈澱させ、固体をろ取し、減圧下で終夜乾燥して、生成物１０mgを得た。
１Ｂ．Ｏ，Ｏ，ビスＮα−Ｚ−Boc−バリン−ガンシクロビルの製造
ジメチルホルムアミド（３０ml）中のガンシクロビル（５mg）の懸濁液に、トリエチルアミン（２．５ml）及びＮα−Ｚ−バリン−ＮＣＡ（７．５mg）を加え、半時間後にもう一つの部分（７．５mg）を加えた。最初の添加から３時間後に、水を加え、反応混合物を酢酸エチルで抽出した。有機相を、硫酸水素ナトリウム溶液（５％）、水、重炭酸ナトリウム溶液（５％）、水、及び食塩水で逐次洗浄し、次いで硫酸ナトリウム上で乾燥し、ろ過し、蒸発させた。残渣をトルエンに溶解し、ヘキサンの添加によって沈澱させた。固体をろ取し、ヘキサンで洗浄し、減圧下で乾燥して、生成物１５mgを得た。
実施例２
２−（２−アミノ−１，６−ジヒドロ−６−オキソ−プリン−９−イル）−メトキシ−３−ヒドロキシ−１−プロピル−Ｎ−（ブチルオキシカルボニル）−Ｌ−バリナート及び２−（２−アミノ−１，６−ジヒドロ−６−オキソ−プリン−９−イル）−メトキシ−３−ヒドロキシ−１−プロピル−Ｎ−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｌ−バリナートの製造
２Ａ．Ｏ−（Ｎα−Boc−バリン）−ガンシクロビルの製造
ヘキサン（１０ml）及びｎ−プロピルアミン（１ml）中のＯ，Ｏ，ビスＮα−Boc−バリンガンシクロビル（５０mg）を、室温で７日間攪拌した。反応混合物を減圧下で蒸発させ、生成物を、ＨＰＬＣで分析したところ、ガンシクロビル１１％、Ｏ−（Ｎα−Boc−バリン）−ガンシクロビル７４％、及びビス−バリンガンシクロビル１５％の混合物であった。
２Ｂ．Ｏ−（Ｎα−Ｚ−バリン）−ガンシクロビルの製造
ｎ−プロピルアミン（１０ml）及びヘキサン（２０ml）中のＯ，Ｏ，ビスＮα−Ｚ−バリンガンシクロビル（２mg）を、室温で攪拌し；７時間後、ヘキサン５mlを加え、反応混合物をさらに２４時間攪拌し、蒸発させた。ＨＰＬＣは、ガンシクロビル３１％、Ｏ−（Ｎα−Ｚ−バリン）−ガンシクロビル５７．５％、及びビス−バリンガンシクロビル１１．５％の混合物を示した。
実施例３
２−（２−アミノ−１，６−ジヒドロ−６−オキソ−プリン−９−イル）メトキシ−３−ヒドロキシ−１−プロピル−Ｌ−バリナートの製造
ＣＨ3ＯＨ（２３リットル）中のＰｄ（ＯＨ）2／Ｃ（６７０ｇ）の激しく攪拌した懸濁液を、Ｈ2ガス（７psi〔０．４９気圧〕）で１２時間処理した。この懸濁液に、濃ＨＣｌ（１．６４ｋｇ）を含有するＣＨ3ＯＨ（３４リットル）中のＯ−（Ｎα−Ｚ−バリン）−ガンシクロビル（６．７kg、１３．７モル）の溶液を加えた。Ｈ2雰囲気を７psi（０．４９気圧）に保ち、２０分の間隔で置き換えた。２．７５時間後に、Ｈ2雰囲気を窒素と置き換えた。Solka Flocを通したろ過によって、触媒を除去した。ろ液を約１３リットルまで減圧下で濃縮し、その時点でＨ2Ｏ（４リットル）を加えた。ろ液の体積を再び約１３リットルまで減少させた。混合物の温度を約３８℃に調整し、イソプロピルアルコール（２４リットル）を徐々に加えた。結晶化が生じた後に、混合物を、２時間にわたって２１℃に冷却した。追加のイソプロピルアルコール（２４リットル）を加え、混合物を５℃で１６時間攪拌した。次いで、固体をろ過によって捕集した。ろ過ケークを冷イソプロピルアルコール（１９リットル）で洗浄し、窒素気流下で３日間乾燥した。固体を真空オーブン（５５℃、窒素気流、２５インチの真空）に入れた。２４時間後に、イソプロピルアルコールは、０．４％であると判明した。固体の重量：４．３５kg。純度：（ＨＰＬＣ）９８．６％；ＭＳ：３５５（ＭＨ）+。