(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
テトラヒドロピペリンと、ジプロピオン酸ベータメタゾン、フォルスコリン、及びアルベンダゾールからなる群より選択される薬物とを含む、対象における前記薬物の局所投与経路による生体利用能向上用組成物。
【請求項２】
テトラヒドロピペリンと、フォルスコリンである栄養素とを含む、対象における前記栄養素の局所投与経路による生体利用能向上用組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本出願は、２０００年５月１９日に出願された米国仮出願第６０／２０５，２４５号、および２００１年３月２３日に出願された第６０／２７７，９７９号の特典を請求する。
【０００２】
【発明の分野】
本発明は、テトラヒドロピペリンおよびその類似体または誘導体、例えばメチルテトラヒドロピペリンなどのアルキルテトラヒドロピペリン類、ジメチルテトラヒドロピペリンなどのジアルキルテトラヒドロピペリン類、アルコキシ化テトラヒドロピペリン、１−［（５，３−ベンゾジオキシル−５−イル）−１−ヒドロキシ−２，４−ペンタジエニル］−ピペリン、１−［（５，３−ベンゾジオキシル−５−イル）−１−メトキシ−２，４−ペンタジエニル］−ピペリン、１−［（５，３−ベンゾジオキシル−５−イル）−１−オキソ−４−ハロ−２−ペンテニル］−ピペリン、１−［（５，３−ベンゾジオキシル−５−イル）−１−オキソ−２−ハロ−４−ペンテニル］−ピペリン、ジヒドロピペリン、アルキルジヒドロピペリン類、ジアルキルジヒドロピペリン類、およびアルコキシ化ジヒドロピペリンなどの、ヒトおよび動物における、栄養素および／または薬物の生体利用能および／または吸収に対する効果に関する。
【０００３】
【発明の背景】
ピペリン、すなわちコショウ科の植物に天然に存在するアルカロイドは、栄養素１−３や薬物４−７の吸収および／または生体利用能を高めることが判明している。関連の従来技術の参考文献（Ａｔａｌ，Ｃ．Ｋ．他、Ｉｎｄｉａｎ  Ｊ  Ｅｘｐ  Ｂｉｏｌ；１５（Ｄｅｃ．１９７７）：１２３０−１２３２）では、ピペリンの合成誘導体は、幼虫駆除（イエバエの幼虫を殺す）活性において、ピレトリンと併用した場合に相乗作用を示すことが示されている。ピレトリンは、昆虫忌避剤（ｂｕｇ−ｒｅｐｅｌｌａｎｔ）として使用される、植物から誘導される化合物である。Ａｔａｌ，Ｃ．Ｋ．他によって試験された様々な化合物は、テトラヒドロピペリン酸のピペリジンアミドであった。全体として、テトラヒドロピペリン酸の２４個のアミドと、７個のエステルが調製されている。伝統的なインド−チベット医学では、Ｃｕｒｃｕｍａｌｏｎｇａ（Ｌｉｎｎ．Ｖｅｒｎ．：ウコン）、Ｂｏｓｗｅｌｌｉａ  ｓｅｒｒａｔａ（Ｒｏｘｂ．Ｖｅｒｎ．：乳香）、および密接に関連しているＣｏｍｍｉｐｈｏｒａ  ｍｕｋｕｌ（Ｈｏｏｋ，Ｖｅｒｎ．：グーグルゴム（ｇｕｍ−ｇｕｇｇｕｌ））が、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）として、また、抗新生物治療において伝統的に用いられてきた。
【０００４】
ウコン中に天然に存在する黄色色素であるクルクミン、デメトキシクルクミン、およびビスデメトキシクルクミン（クルクミノイドとも呼ばれるジフェルロイルメタン（ｄｉｆｅｒｕｌｏｙｌｍｅｔｈａｎｅ）誘導体）は、実験モデルにおいて、イニシエーションおよびプロモーション中の消化管腫瘍形成を抑制する。予想される機構は、一酸化窒素シンターゼ（ｉＮＯＳ）、シクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）、および炎症誘発性のプロスタグランジン産生の抑制に関与する可能性がある。クルクミノイドの局所適用は、表皮中のＤＮＡのベンゾ［ａ］ピレン（Ｂ［ａ］Ｐ）付加体の、Ｂ［ａ］Ｐが介在する形成を抑制する。これはまた、１２−Ｏ−テトラデカノイルホルボール−１３−アセテート（ＴＰＡ）が引き起こす増加、すなわち皮膚の炎症、表皮のＤＮＡ合成、オルニチンデカルボキシラーゼ（ＯＤＣ）のｍＲＮＡレベル、ＯＤＣ活性、過形成、ｃ−Ｆｏｓおよびｃ−Ｊｕｎタンパク質形成、過酸化水素、ならびに酸化型のＤＮＡ塩基である５−ヒドロキシメチル−２’−デオキシウリジン（ＨｍｄＵ）の増加を減少させる。
【０００５】
乳香のゴムから誘導された４種の主なトリテルペンボズウェル酸（ｂｏｓｗｅｌｌｉｃ  ａｃｉｄ）は、ヒト白血病ＨＬ−６０細胞において、ＩＣ５０値が０．６から７．１μＭの範囲であるような量で、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで、ＤＮＡ、ＲＮＡ、およびタンパク質合成を抑制した（１９９９年４月３０日に出願されたＵＳＳＮ  ０９／３０２，５１０（その開示を参照として本明細書に組み込む）を参照のこと）。
【０００６】
グーグルゴムから単離されたフェルラ酸（ｆｅｒｕｌａｔｅ）誘導体は、ＭＣＦ−７（胸の）およびＰＣ−３（前立腺の）腫瘍細胞に対する著しい細胞毒性活性を示した。両細胞におけるＩＣ５０は両方とも、１４．３ｍｃｇ／ｍｌ（２５μｍ）であった。このフェルラ酸誘導体は、形質移入された細胞株（Ｐ３８８／ＭＤＲ）と親細胞株両方における細胞生存率を、ＩＣ５０＜２５μｍに低下させた。この発見は、この化合物が、Ｐ−糖タンパク質が介在する薬物抵抗性を克服できる可能性があることを示唆している（２０００年５月１９日に出願されたＵＳＳＮ６０／２０５，４６６（その開示を参照として本明細書に組み込む）を参照のこと）。
【０００７】
上で述べた抗癌治療薬は、消化管吸収が良くない、かつ／または（これらの化合物の）組織利用能が不十分であるために、効力が限られている。本発明は、天然のアルカロイドであるピペリンから開発された化合物に関する。天然のアルカロイドであるピペリンは、動物およびヒトでの経口投与における、薬物および栄養素の消化管吸収を高める潜在能力について以前から調べられてきた。十分に試験されてきた化合物には、バシシン（ｖａｓｉｃｉｎｅ）、ピラジナミド、リファンピシン、イソニアジド、プロプラノロール、テオフィリン、フェニトインなどの薬物、および脂溶性のβ−カロチン、水溶性のビタミンＢ６、ビタミンＣ、補酵素Ｑ１０、Ｌ−セレノメチオニンの形の無機質セレンなどの栄養素が含まれる。
【０００８】
【発明の概要】
本発明は、その栄養素／薬物の生体利用能を高める特性について以前に試験されていない、テトラヒドロピペリンすなわちＴＨＰの形の修飾アルカロイドピペリン、ならびにその類似体および誘導体に関する。初期の研究に基づくと、本発明は、クルクミノイドおよび他の吸収の弱い抗癌剤の、皮膚および消化管を通した吸収を高める特性をもつ。
【０００９】
本発明は、栄養素または薬物の生体利用能、ならびに栄養素および／または薬物の吸収を高めるものとしての、テトラヒドロピペリンおよびその類似体または誘導体、例えば、メチルテトラヒドロピペリンまたはエチルテトラヒドロピペリンなどのアルキルテトラヒドロピペリン類、ジメチルテトラヒドロピペリンまたはジエチルテトラヒドロピペリンなどのジアルキルテトラヒドロピペリン類、メトキシテトラヒドロピペリンなどのアルコキシ化テトラヒドロピペリン、１−［（５，３−ベンゾジオキシル−５−イル）−１−ヒドロキシ−２，４−ペンタジエニル］−ピペリンなどのヒドロキシル化テトラヒドロピペリン、１−［（５，３−ベンゾジオキシル−５−イル）−１−メトキシ−２，４−ペンタジエニル］−ピペリン、１−［（５，３−ベンゾジオキシル−５−イル）−１−オキソ−４−ハロ−２−ペンテニル］−ピペリンや１−［（５，３−ベンゾジオキシル−５−イル）−１−オキソ−２−ハロ−４−ペンテニル］−ピペリン、ジヒドロピペリンなどのハロゲン化テトラヒドロピペリン、メチルジヒドロピペリンまたはエチルジヒドロピペリンなどのアルキルジヒドロピペリン類、ジメチルジヒドロピペリンまたはジエチルジヒドロピペリンなどのジアルキルジヒドロピペリン類、メトキシジヒドロピペリンなどのアルコキシ化ジヒドロピペリン、およびハロゲン化ジヒドロピペリンなどに関する。本発明はまた、テトラヒドロピペリンあるいはその類似体または誘導体と共に、栄養素および／または薬物を含有する組成物を提供する。
【００１０】
本発明の対象であるテトラヒドロピペリンは、ピペリンと同様、ブラックペッパー中に天然に存在する（ブラックペッパーオレオレジン中に約０．７％）。本発明では、テトラヒドロピペリンを、ブラックペッパーオレオレジンからあらかじめ抽出したピペリンから合成する。本発明は、生体システムにおける吸収および／または生体利用能を向上することがある種の適用において試験された。引用した実験は、栄養素／薬物の吸収および／または生体利用能についての、発明のはるかに広範な適用の一部を例示する。本発明者らは、テトラヒドロピペリンおよびその類似体または誘導体など、ピペリンのある種の合成誘導体が、栄養素および／または薬物の生体利用能および／または吸収に影響を与えることを初めて実証する。
【００１１】
対象に、対象が薬物または栄養素を摂取すると同時に、あるいは摂取の直前または直後に、栄養素または薬物の生体利用能を高めるのに有効な量のテトラヒドロピペリンあるいはその類似体または誘導体、例えばメチルテトラヒドロピペリン、エチルテトラヒドロピペリン、プロピルテトラヒドロピペリンなどのアルキルテトラヒドロピペリン、ジメチルテトラヒドロピペリンまたはジエチルテトラヒドロピペリンなどのジアルキルテトラヒドロピペリン、メトキシテトラヒドロピペリンまたはエトキシテトラヒドロピペリンなどのアルコキシ化テトラヒドロピペリン、１−［（５，３−ベンゾジオキシル−５−イル）−１−ヒドロキシ−２，４−ペンタジエニル］−ピペリン、１−［（５，３−ベンゾジオキシル−５−イル）−１−メトキシ−２，４−ペンタジエニル］−ピペリン、１−［（５，３−ベンゾジオキシル−５−イル）−１−オキソ−４−ハロ−２−ペンテニル］−ピペリンや１−［（５，３−ベンゾジオキシル−５−イル）−１−オキソ−２−ハロ−４−ペンテニル］−ピペリンなどのハロゲン化テトラヒドロピペリン、ジヒドロピペリン、メチルジヒドロピペリンまたはエチルジヒドロピペリンまたはプロピルジヒドロピペリンなどのアルキルジヒドロピペリン、ジメチルジヒドロピペリンまたはジエチルジヒドロピペリンなどのジアルキルジヒドロピペリン、メトキシジヒドロピペリンまたはエトキシジヒドロピペリンなどのアルコキシ化ジヒドロピペリン、あるいは１−［（５，３−ベンゾジオキシル−５−イル）−１−オキソ−２−クロロ−４−ペンテニル］−ピペリンや１−［（５，３−ベンゾジオキシル−５−イル）−１−オキソ−４−クロロ−２−ペンテニル］−ピペリンなどのハロゲン化ジヒドロピペリンなどを投与することを含み、こうした向上を必要とする動物またはヒトの対象において栄養素または薬物の生体利用能を高める方法は、本発明の範囲内である。
【００１２】
対象に、対象が薬物または栄養素を摂取すると同時に、あるいは摂取の直前または直後に、吸収を高めるのに有効な量のテトラヒドロピペリンあるいはその類似体、例えばメチルテトラヒドロピペリン、エチルテトラヒドロピペリン、プロピルテトラヒドロピペリンなどのアルキルテトラヒドロピペリン、例えばジメチルテトラヒドロピペリンまたはジエチルテトラヒドロピペリンなどのジアルキルテトラヒドロピペリン、例えばメトキシテトラヒドロピペリンまたはエトキシテトラヒドロピペリンなどのアルコキシ化テトラヒドロピペリン、ヒドロキシル化テトラヒドロピペリン、１−［（５，３−ベンゾジオキシル−５−イル）−１−ヒドロキシ−２，４−ペンタジエニル］−ピペリン、例えば１−［（５，３−ベンゾジオキシル−５−イル）−１−メトキシ−２，４−ペンタジエニル］−ピペリンや１−［（５，３−ベンゾジオキシル−５−イル）−l−オキソ−４−ハロ−２−ペンテニル］−ピペリンなどのハロゲン化テトラヒドロピペリン、１−［（５，３−ベンゾジオキシル−５−イル）−l−オキソ−２−ハロ−４−ペンテニル］−ピペリン、ジヒドロピペリン、例えばメチルジヒドロピペリンまたはエチルジヒドロピペリンまたはプロピルジヒドロピペリンなどのアルキルジヒドロピペリン、例えばジメチルジヒドロピペリンまたはジエチルジヒドロピペリンなどのジアルキルジヒドロピペリン、例えばメトキシジヒドロピペリンまたはエトキシジヒドロピペリンなどのアルコキシ化ジヒドロピペリン、ヒドロキシル化ジヒドロピペリン、あるいは例えば１−［（５，３−ベンゾジオキシル−５−イル）−１−オキソ−２−クロロ−４−ペンテニル］−ピペリンまたは１−［（５，３−ベンゾジオキシル−５−イル）−１−オキソ−４−クロロ−２−ペンテニル］−ピペリンなどのハロゲン化ジヒドロピペリンなどを投与することを含み、こうした向上を必要とする動物またはヒトの対象において栄養素および／または薬物の吸収を高める方法も、本発明の範囲内である。
【００１３】
この特許出願では、用語「栄養素」には、アミノ酸（ロイシン、イソロイシン、バリン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン、スレオニン、メチオニン、リジンなど、非必須アミノ酸と必須アミノ酸の両方）、炭水化物（グルコース、フルクトース、ラクトースなど）、ビタミン（ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ナイアシンアミド、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、葉酸、ビタミンＣなどの水溶性ビタミンと、ビタミンＡ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＫなどの脂溶性ビタミンの両方）、無機質（カルシウム、マグネシウム、亜鉛、銅、セレン、鉄、バナジウム、クロム、ヨウ素、カリウム、マンガンなど）、ハーブ抽出物（クルクミン、クルクミノイド、ボズウェル酸、アシュワガンダ、イチョウ（Ｇｉｎｋｇｏ  ｂｉｌｏｂａ）、カプサイシン、アコニチン、セントジョーンズワートなど）、酸化防止剤（ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、α−カロチン、トランス型β−カロチン、βクリプトキサンチン、リコピン、ルテイン／ゼアキサンチン、松樹皮のバイオフラボノイド複合体、ゲルマニウム、セレン、亜鉛など）が含まれる。
【００１４】
この特許出願では、用語「薬物」には、抗癌剤（メトトレキセート、メルカプトプリン、フルオロウラシル、フロクスウリジン、ロムスチン、ブスルファン、シスプラチン、ブレオマイシン、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、パクリタキセル、タモキシフェンなど）、抗ウイルス薬（アマンタジン、リマンタジン、リバビリン、および例えばジドブジン、ジダノシン、ジデオキシシトシン、ジドキシイノシン、スタブジン、ラミブジンなどの抗ＨＩＶ薬、およびプロテアーゼ阻害剤など）、抗菌薬（ペニシリンやセファロスポリンなど）、抗真菌薬（アンホテリシンＢなど）、抗パーキンソン症薬（Ｌ−ドーパなど）、抗てんかん薬、鎮痛薬（例えばモルヒネ、メサドン、コデイン、ヒドロコドン、メペリジンなどのオピオイド鎮痛薬、例えばジクロフェナクジエチルアンモニウム（ジクロフェナクジエチルアンモニウム）などの非ステロイド性抗炎症鎮痛薬など）、抗不整脈薬（キノジン、リドカイン、フレカイニド、例えばプロプラノロールやソタロールなどのβ−アドレナリン遮断薬、アミオダロン、例えばベラパミルやジルチアゼムなどのカルシウムチャネル遮断薬など）、抗狭心症薬（例えばアミオジピン、ベプリジル、ニフェジピン、ジピリダモール）、抗高脂血症薬（例えばゲムフィブロジル、プロブコール， ロバスタチン、シンバスタチン、プラバスタチン）、抗高血圧薬（例えば、例えばチアジド系利尿剤などの利尿剤、フロセミド、トルセミド（ｔｏｒｓｅｍｉｄｅ）、トリアムテレン、アミロライド、クロニジン、例えばアセブトロール、アテノロール、ベタキソロール、ビソプロロール、メトプロロールなどのβ−アドレナリン遮断薬、例えばプラゾシンやテラゾシンなどのα−アドレナリン遮断薬、ヒドララジン、ミノキシジル、例えばカプトプリル、ベンザゼプリル、エナラプリルなどのアンジオテンシン変換酵素阻害薬、ジアゾキシド、およびニトログリセリンなど）、コルチコステロイド（ベータメタゾン、デキサメタゾン、フルニソリド、トリアムシノロンなど）、クロモリンナトリウム（ｃｒｏｍｏｌｙｎ  ｓｏｄｉｕｍ）、ネドクロミル、アルブテロール、ビトルテロールが含まれる。
【００１５】
本特許出願では、用語「アルキル」には、Ｃ１〜Ｃ６、好ましくはＣ１〜Ｃ３、より好ましくはＣ１の、任意選択で置換された、直鎖または分枝の脂肪族炭化水素基が含まれる。任意選択の置換基は、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、スルフィドリル、アミノおよび／またはニトロ基であり得る。
【００１６】
用語「ハロ」は、フルオロ、クロロ、ブロモ、またはヨードを意味する。「ハロ」はクロロまたはブロモであることが好ましい。
【００１７】
用語「吸収」には、非経口、（経口投与後などの）消化管内、舌下、局所（経皮経路、眼の経路、あるいは座薬を介するものなど）、および／または吸入による投与を介する吸収が含まれる。用語「生体利用能」は、非経口投与、消化管内、舌下、局所（経皮経路、眼の経路、あるいは座薬を介するものなど）、および／または吸入経路によって栄養素または薬物を摂取した対象の体内で利用可能な栄養素または薬物の量を意味する。
【００１８】
本発明はまた、薬剤として許容される担体または賦形剤と混合した、テトラヒドロピペリン、アルキル化テトラヒドロピペリンまたはジヒドロピペリンなどのテトラヒドロピペリンの類似体または誘導体、あるいはテトラヒドロピペリンまたはテトラヒドロピペリンの類似体もしくは誘導体の薬剤として許容される塩を含む組成物または調合物も含む。これらの組成物または調合物は任意選択で、さらに栄養素または薬物を含んでもよい。
【００１９】
本発明の別の態様は、テトラヒドロピペリン、テトラヒドロピペリンの類似体、テトラヒドロピペリンの誘導体、ならびにテトラヒドロピペリンならびにテトラヒドロピペリンの類似体および誘導体の薬剤として許容される塩である。テトラヒドロピペリンの「類似体」は、テトラヒドロピペリンに類似した構造の化合物であるので、この「類似体」は、栄養素および／または薬物の生体利用能の向上において、および／または栄養素および／または薬物の吸収の向上において、テトラヒドロピペリンと類似の生物学的効果をもつ。テトラヒドロピペリンの誘導体は、例えば、置換基または官能基の付加によって、あるいは官能基の除去によって、テトラヒドロピペリンから誘導された化合物である。テトラヒドロピペリンの類似体および誘導体の例は、上で開示している。
【００２０】
テトラヒドロピペリンおよびテトラヒドロピペリンの類似体または誘導体、例えばジヒドロピペリンは、本発明の方法において、栄養素および／または薬物の生体利用能または吸収が向上される必要がある動物またはヒトの対象に、対象の体重１ｋｇあたり１日につき約０．００００５から５０ｍｇ、体重１ｋｇあたり１日につき約０．００００５から０．９９ｍｇ、あるいは体重１ｋｇあたり１日につき１から５０ｍｇの用量で投与することができる。用量は、１日につき０．００００５から０．５ｍｇ／ｋｇであることが好ましい。用量は、１日につき０．００００５から０．１５ｍｇ／ｋｇであることがより好ましい。用量は、１日につき０．０００５から０．０１５ｍｇ／ｋｇであることがいっそう好ましい。
【００２１】
テトラヒドロピペリンおよびジヒドロピペリンは、当技術分野で知られた還元手順を用いてピペリンを還元することによって調製できる。例えば、テトラヒドロピペリンは、触媒としてＰｄ／Ｃを使用する水素化を用いてピペリンを還元することによって調製される。ジヒドロピペリンは、クロロトリス（トリフェニルホスフィン）ロジウムによって触媒されるピペリンの水素化、あるいは触媒としてＰｄ／Ｃを使用するピペリンの水素化によって、ピペリンからのテトラヒドロピペリンの調製よりも低い温度または圧力で生成することができる。テトラヒドロピペリンの誘導体または類似体の調製は、当技術分野で知られた合成手順を使用して実施することができる。例えば、テトラヒドロピペリンまたはジヒドロピペリンのオキソ基の、ヒドロキシ基への転換は、水素およびＲｈ触媒またはＢｕ３ＳｎＨ−Ｐｄ（ＰＰｈ３）４を用いたカルボニル基の還元によって実施することができる。テトラヒドロピペリンまたはジヒドロピペリンのハロゲン誘導体は、その化合物のＣ＝Ｃ結合へのＨＦ、ＨＣＩ、ＨＢｒ、またはＨＩの付加によって調製することができる。出発材料であるピペリンは、当技術分野で知られた方法によって、合成方法を介して、あるいはブラックペッパーまたはナガコショウ（Ｐｉｐｅｒ  ｌｏｎｇｕｍ）の抽出を介して調製することができる。
【００２２】
本発明の別の態様では、該化合物にとって好ましい局所用の用量範囲である０．０１％および０．１重量％のレベルでＴＨＰ（純度９８％）を含有する局所組成物により、局所への刺激症状が生じるかどうか決定するため試験を行った。５０人の健康なボランティアに対して、ワセリンの賦形剤に入れたＴＨＰを使用する皮膚パッチテストを４８時間行い、４８時間後と７２時間後に結果を読み取った。被験者を臨床評価した時点では、どちらの用量も皮膚刺激を引き起こしていなかった。刺激スコアは、監督医、すなわち皮膚科開業医によって、０であると報告された。これらの結果は、ＴＨＰは、局所送達のために有効であるとみなされている用量範囲では、皮膚への刺激原として作用しないことを示唆する。親化合物を用いた以前の経験に基づくと、ＴＨＰは、健康な成人のボランティアでは、経口で５０ｍｇまでの用量レベルでは胃粘膜を刺激しないはずである。
【００２３】
ＴＨＰの、薬物を強める潜在能力を、２種の吸収の弱い薬物、すなわちステロイド性抗炎症薬であるジプロピオン酸ベータメタゾンすなわちＢＭＤＰ、および、抗酸化性のフェノール類であるテトラヒドロクルクミノイド（ＴＨＣ）を用いる実験で評価した。
【００２４】
ＢＭＤＰを使用する実験では、皮膚調製物を、「供与区画」と「受容区画」の２区画に分けたフランツ拡散セル中に置いた。供与区画に、薬物（１００μｇ／ｍｌ）を、（活性試料として）０．１％のＴＨＰと共に、（対照試料として）ＴＨＰなしで塗布した。続いて、受容区画中の流体の吸収を、５、１０、１５、２０、３０、４５、および６０分という時間間隔で、ＢＭＤＰおよびＴＨＰの存在について測定した。活性試料では、最初の１０分以内にＢＭＤＰの１００％が拡散した。対照試料では、４５分後にＢＭＤＰの２９％が拡散し、６０分後でもわずか５４％だけが拡散した。
【００２５】
局所的に塗布されたＴＨＣのフリーラジカル捕捉特性に対する、ＴＨＰの生物学的増強能を評価した。このｉｎ  ｖｉｔｒｏのＤＰＰＨラジカル捕捉方法では、１，１ジフェニル−２−ピクリルヒドラジルラジカルすなわちＤＰＰＨを結合して不活化する酸化防止剤の能力を測定した。ＤＰＰＨは、非常に安定なフリーラジカルの例と考えられている。対照試料には０．０１％のＴＨＣを含めたのに対し、活性試料には、０．０１％のＴＨＣと、濃度０．１％〜０．０００１％の範囲のＴＨＰを含めた。さらに、様々な濃度のＴＨＰを単独で含む対照も、ＤＰＰＨとの結合について試験した。
【００２６】
ＴＨＰは、単独では有意な抗酸化性を示さないが、ＴＨＣと一緒に使用すると、ＴＨＣの抗酸化性を、ＴＨＣを単独で使用した場合に比べて３０％まで高めることが示された。最大希釈度の０．０００１％でもなお、ＴＨＰはＴＨＣの生理活性を若干増強する有益な活性を示した。
【００２７】
したがって、本発明は、クルクミノイドおよびそのＴＨＣ誘導体の局所および全身の吸収を高め、続いて、クルクミノイドの知られている抗癌特性を促進する。本発明の好ましい方法は、フェノール類を全身に増加させるので、前立腺癌の治療に使用される。
【００２８】
さらに、ＴＨＰは、その親化合物であるピペリンが、神経終末からのＰ物質などの神経伝達物質を放出することが知られているので、理論的には、単独で抗癌作用を発揮する可能性がある。上で考察したように、癌の部位から神経伝達物質を防ぐことは、アンドロゲン受容体の刺激を、最終的には癌細胞の増殖を妨げる可能性がある。
【００２９】
本発明の組成物は、患者、好ましくはヒトに、非経口投与によって、より好ましくは経口的にあるいは局所的に投与することができる。
【００３０】
単位用量の薬剤組成物中の、経口投与に適したＴＨＰの量は、一般に、体重１ｋｇあたり０．０００４〜０．８５ｍｇの範囲であり、非経口投与では単位用量につき、体重１ｋｇあたり０．００００４〜０．０８５ｍｇの範囲であり、局所投与では、ＴＨＰの量は、局所用組成物の総重量に対して０．００００１重量％〜１０重量％、好ましくは０．００１重量％から５重量％の範囲である。
【００３１】
したがって、本発明の一態様は、抗癌剤と一緒に投与される組成物中のテトラヒドロピペリンの使用に関する。テトラヒドロピペリンと組み合わせて投与される化合物として、クルクミノイド、ボズウェル酸、ならびに前立腺癌に対する生体活性を有し、吸収が弱い他の植物性または合成の化合物を挙げることができる。患者に投与される抗癌化合物の量は、これらの活性な化合物の既知の制癌有効量に応じて変わってくるが、これらの化合物の吸収が高められることにより、抗癌作用を保ちつつ投与される化合物の量は、しばしば少なくなる。
【００３２】
通常、ＴＨＰと、吸収の弱い抗癌化合物または他の薬物との重量比は、１：０１〜１０の範囲となるが、この範囲外の量も、本発明で使用が企図される少なくとも数種の抗癌化合物または他の薬物に有効であると考えられている。
【００３３】
【発明の実施の形態】
本発明を、以下の実施例を用いて例示するが、これは例示のためだけのものであり、本発明の範囲を限定するものと解釈するべきではない。
【００３４】
実施例１
テトラヒドロピペリンの効果を、ステロイド性抗炎症薬であるジプロピオン酸ベータメタゾン（ＢＭＤＰ）の経皮吸収に対して評価した。
【００３５】
材料および方法：
この実験では、フランツ拡散セルを利用した。これは、皮膚を通過する薬物および栄養素の吸収を評価するために、マウスの腹部皮膚の移植片から作製したｉｎ  ｖｉｔｒｏの装置である。フランツ拡散セルは、供与区画と受容区画を含む。試験薬物であるＢＭＤＰをテトラヒドロピペリンと共に、あるいはＢＭＤＰをテトラヒドロピペリンなし（対照）で、皮膚の片側（供与区画）に塗布した。皮膚の受容側へのこの薬物の移動は、あらかじめ決めた時間間隔で、ＵＶ法によって推定した。
【００３６】
装置：
フランツ拡散セル（組み立てられたもの）；受容区画の容積−３６ｍｌ；備え付けられる皮膚の面積−１０．１８ｃｍ２；ＵＶ／ＶＩＳ分光光度計（ＪａｓｃｏＶ−５３０）、ＦＴ／ＩＲ分光光度計（Ｊａｓｃｏ  ５３００）。
【００３７】
化学薬品
ジプロピオン酸ベータメタゾン（Ｎｕｃｒｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｌｔｄ．）；塩化ナトリウム；Ｔｗｅｅｎ  ２０；プロピレングリコール；化学薬品はすべて、分析グレード（ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  ｇｒａｄｅ）のものであった。
１．標準ＢＭＤＰ溶液（１００μｇ／ｍｌ）：
１００ｍｌのメスフラスコに、ＢＭＤＰ  １０ｍｇを入れ、Ｔｗｅｅｎを加えた生理食塩水５０ｍｌに溶解し、同溶液でメスアップした。
２．テトラヒドロピペリン溶液（１％ｗ／ｖ）：
２５ｍｌのメスフラスコ中で、テトラヒドロピペリン０．２５ｇをプロピレングリコール（ＰＧ）でメスアップした。
【００３８】
皮膚の調製：
雌雄両方のアルビノマウスの腹部の皮膚を使用した。使用したマウスは、生後７〜８週のものであった。これらのマウスを、テールプラッキング（ｔａｉｌ  ｐｌｕｃｋｉｎｇ）法によって屠殺した。マウスの腹部の皮膚を剪毛して切除し、付着している脂肪組織を取り除いた。皮膚を含水させるために生理食塩水（０．９％ｗ／ｖ）中に１時間保管した。
【００３９】
実験の設計：
フランツ拡散セルに、剪毛した面を供与区画に向けて、含水した皮膚を置いた。受容流体（Ｔｗｅｅｎ  ２０を加えた生理食塩水）は、３７±０．５℃に保ち、２００ｒｐｍで連続的に攪拌した。行った実験を、以下で述べる。
ａ．対照：
プロピレングリコール０．５ｍｌを、備え付けられた皮膚に塗布して、１時間維持した。受容流体を取り除いて新しい受容流体で置き換えた。ＢＭＤＰ溶液（５０μｇ）を塗布し、サンプリングを３時間実施した。試料体積は、毎回２ｍｌであり、これは新しい受容流体で置き換えた。各試料の吸光度は、ＵＶ分光光度計で、波長２５６ｎｍで測定した。
ｂ．試験：
テトラヒドロピペリン溶液０．５ｍｌを、備え付けられた皮膚に塗布して、１時間維持した。受容流体を取り除いて新しい受容流体で置き換えた。ＢＭＤＰ溶液（５０μｇ）０．５ｍｌを塗布し、サンプリングを３時間実施した。試料体積は毎回２ｍｌであり、これは受容流体で置き換えた。各試料の吸光度は、ＵＶ分光光度計で、波長２５６ｎｍで測定した。
【００４０】
Ｔｗｅｅｎ  ２０を加えた生理食塩水中で作成された場合、ＢＭＤＰ溶液のＵＶ吸収スペクトルは、２３８ｎｍでの吸収を示した。次の理由から、分析用の波長として、２５６ｎｍを選んだ。
１．テトラヒドロピペリンは、２２８ｎｍと２７５ｎｍで吸収を示す。
２．テトラヒドロピペリンの吸光度は２５６ｎｍで最小であるが、この波長はＢＭＤＰにとっては好都合である。λ２５６での吸収値の差が、最大である。
３．試験溶液中に存在するＢＭＤＰの状態をシミュレートするため、受容流体を使用して検量線を作成した。
【００４１】
【表１】
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【００４２】
吸光度が加算的な特性をもつことを考慮し、Ｊａｓｃｏによって提供されるソフトウェアＶ５００の曲線減法能（ｃｕｒｖｅ  ｓｕｂｔｒａｃｔｉｏｎ  ｆａｃｉｌｉｔｙ）を利用することによって、この浸透試験におけるＢＭＤＰの濃度を決定した。ＢＭＤＰとテトラヒドロピペリンのスペクトルから、テトラヒドロピペリンの曲線スペクトルを減算することによって、ＢＭＤＰのスペクトルの２５６ｎｍの吸光度を得た。対照および試験用における、拡散した薬物の割合を、表２に示す。
【００４３】
【表２】
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【００４４】
上の表から、対照において、最初の３０分は、拡散した薬物の量が検出できないことが認められる。しかし、テトラヒドロピペリンが存在する場合、薬物はすべて、１０分以内に拡散してしまった。これは、テトラヒドロピペリンが存在すると、ＢＭＤＰの浸透が向上することを実証している。
【００４５】
実施例２
フォルスコリン、すなわち（喘息における気管支拡張に使用する、血小板凝集を予防する、また抗高血圧薬、抗緑内障薬、抗炎症薬としてなど）様々な治療効果をもつジテルペノイド化合物の、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ浸透試験を実施した。この試験のために、６７ｍｌおよび６９ｍｌの容積の組み立てられたフランツ拡散セルを使用した。浸透試験のために、新たに切除したラット腹部の皮膚を使用した。
【００４６】
装置
組み立てられたフランツ拡散セル
受容区画の容積：６７ｍｌおよび６９ｍｌ
【００４７】
材料および方法
この試験で使用する溶液
ａ）フォルスコリンのメタノール溶液（２．５％）
ｂ）テトラヒドロピペリンを、フォルスコリンのメタノール溶液（２．５％）に溶かしたもの（０．０５％）
ｃ）テトラヒドロピペリンを、フォルスコリンのメタノール溶液（２．５％）に溶かしたもの（０．１％）
【００４８】
手順
皮膚の外層が供与区画に面するように、新たに切除したラット腹部の細胞を、フランツ拡散セルに置いた。受容流体は恒温磁気攪拌器を使用して３５℃に保った。
【００４９】
この試験は、受容区画中の媒質を、リン酸緩衝液の代わりにメタノールで置き換えることによって行った。この浸透試験では、受容区画中でも供与区画中でも、媒質としてメタノールを使用した。
【００５０】
試験
供与区画中に、フォルスコリン５０ｍｇとテトラヒドロピペリン（フォルスコリン濃度の５％）とを含有するメタノール２ｍｌを入れた。メタノール６９ｍｌからなる受容区画を、３５℃に保った。浸透試験は、１時間実施した。１５、３０、および６０分という間隔で試料を抜き取り、存在するフォルスコリンの量をＨＰＬＣで分析した。
【００５１】
対照
供与区画中に、フォルスコリン５０ｍｇを含有するメタノール２ｍｌを入れた。メタノール６５ｍｌからなる受容区画を、３５℃に保った。浸透試験は、１時間実施した。１５、３０、および６０分という間隔で試料を抜き取り、存在するフォルスコリンの量をＨＰＬＣで分析した
【００５２】
結果
図１は、テトラヒドロピペリン（フォルスコリンの濃度の５％）がある場合と無い場合の、フォルスコリンの経皮的浸透を示す。表３は、テトラヒドロピペリンがある場合と無い場合の、フォルスコリンの放出の比較データを示す。
【００５３】
【表３】
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【００５４】
結論：表３及び図１に示すように、テトラヒドロピペリンの濃度がフォルスコリン濃度の５％であるとき、フォルスコリンの浸透は増加した。しかし、テトラヒドロピペリンの濃度がフォルスコリン濃度の２％である場合は、浸透の増加は認められなかった。
【００５５】
実施例３
テトラヒドロピペリンをハスモンヨトウ（ｔｏｂａｃｃｏ  ｃｕｔ  ｗｏｒｍ）、Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ  ｌｉｔｕｒａ  Ｆ．に対して試験し、フェンバレレートすなわち合成ピレスロイドと共に使用した場合の、その致死率（ｋｉｌｌ  ｒａｔｅ）を増大させる可能性を決定した。
【００５６】
この実験は、テトラヒドロピペリンがフェンバレレートの浸透を高める能力を実証する。この浸透の増加のために、致死率は、対照の致死率に比べてはるかに高い。この実施例の詳細を、以下の段落に示す。
【００５７】
方法論
ａ．試験溶液の調製−試験生成物０．５ｇをエタノール１ｍｌに溶解し、標準のメスフラスコ中で、適当な乳化剤を用いて１００ｍｌに調製した。この溶液は、５０００ｐｐｍのａ．ｉ．（０．５％）を含有する。さらに、連続希釈を行って、０．２５、０．１２５、および０．０６２５％の試験生成物を得た。これらの試験溶液それぞれに、フェンバレレートを加え、最終体積で、２５０ｐｐｍのフェンバレレートａ．ｉ．を得た。０．５％のテトラヒドロピペリンと比較するために、エタノール１．０％溶液および２５０ｐｐｍａ．ｉ．のフェンバレレートを使用した。
ｂ．バイオアッセイ−この実験では、実験室で飼育したハスモンヨトウ、Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ  ｌｉｔｕｒａの生後７日の幼虫を使用した。一連の予備試験の後、この実験について、テトラヒドロピペリンの濃度は、０．５、０．２５、０．１２５、および０．０６２５％と選択された。新鮮なヒマシの葉を、上の濃度の試験化合物および標準化合物およびブランク溶液に３０秒浸した。適当に乾燥させた後、処理した葉をプラスチック製容器に移した。各容器に５匹の幼虫を放した。これを４回繰り返し、各濃度について２０匹の幼虫がいるようにした。対照群の幼虫には、水に浸した葉を与えた。観察結果を、曝露の４８時間後の幼虫の死亡率について記録した。
【００５８】
【表４】
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【００５９】
死亡率は、試験化合物テトラヒドロピペリンの量に依存することが認められる。０．０６２５％では、試験化合物は、２５０ｐｐｍ  ａ．ｉ．のフェンバレレートの活性を高めなかった。０．１２５％では、活性がわずかに向上し、試験昆虫は６５％死亡した。２５０ｐｐｍ  ａ．ｉ．のフェンバレレート単独の標準処理において死亡率が５５％であるのに対し、２５０  ｐｐｍ．ａ．ｉ．のフェンバレレートを用いた０．２５および０．５％の濃度レベルでは、得られた死亡率はそれぞれ８５％および１００％であった。最大希釈である０．５％の試験化合物テトラヒドロピペリン単独では、標的昆虫に対する活性はまったく示さなかった。
【００６０】
結論
ハスモンヨトウ；Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ  ｌｉｔｕｒａは、様々な作物に対する有害虫となりつつある。多くの殺虫剤は、この害虫を標的にするが、この害虫は、これらの殺虫剤のうちのいくつかに耐性がある。耐性の機構は様々であるが、クチクラ浸透が困難であることが、生理学的耐性を与える原因となる要因の１つである可能性がある。
【００６１】
フェンバレレートは、テトラヒドロピペリンによってもたらされる）そのクチクラ浸透の向上のために、より効果的であった。
【００６２】
Ａｔａｌ他８によって報告されるような、ピレトリンと共に使用するテトラヒドロピペリンの「相乗効果」は、この出願で実証されるように、ここでは、テトラヒドロピペリンにより皮膚の浸透が向上することによる、イエバエの幼虫の体内におけるピレトリンの浸透の向上に基づいて説明できる。
【００６３】
実施例４
テトラヒドロピペリンが、腸内寄生虫に対するアルベンダゾールなどの駆虫薬の、皮膚への浸透性をどのように向上するのか知るための実験を行った。ただし、この実験に対する予備試験として、ミミズに対する試験を行った。
【００６４】
材料および方法：
ミミズは、Ａｌ  Ａｍｅｅｎ  Ｃｏｌｌｅｇｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｂａｎｇａｌｏｒｅから入手した。Ａｌｂｅｎｄａｚｏｌｅ（Ｚｅｎｔｅｌ）は、Ｓｍｉｔｈ  Ｋｌｉｎｅ  Ｂｅｅｃｈａｍ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｂａｎｇａｌｏｒｅから入手した。試験水溶液は、０．２５％ｗ／ｖカルボキシメチルセルロースナトリウム中に懸濁させた０．１％および０．２％ｗ／ｖのテトラヒドロピペリン（Ｔｅｔｒａｐｅｒｉｎｅ（商標）、Ｓａｂｉｎｓａ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，ＵＳＡが商標をもつ生成物）を含有していた。
【００６５】
実験の手順：
１．アルベンダゾールの効果：長さおよび重量がほぼ同じミミズを、各６匹の３つのグループに分けた。このミミズを、ペトリ皿中で、０．１％および０．２％テトラヒドロピペリンと０．２％アルベンダゾールに、あるいは０．１％および０．２％テトラヒドロピペリン単独に曝露した。麻痺の開始時間を記録し、ミミズの死亡も観察して上と同様に記録した。結果を表５および図２に示す。
【００６６】
結果および考察：
０．１％のアルベンダゾールは、２時間後にようやく駆虫活性を発揮することが判明した。したがって、より高濃度のアルベンダゾールを使用した。
【００６７】
アルベンダゾールは０．２％では、駆虫活性は２時間以内であることが認められた。したがって、この濃度を標準として選択した。０．１％テトラヒドロピペリンと０．２％アルベンダゾールを用いた場合、独立「ｔ」検定を使用して標準濃度と比較したとき、麻痺および死亡への時間の変化は認められなかった。
【００６８】
０．２％アルベンダゾールは、０．２％テトラヒドロペリンと一緒に投与された場合、麻痺および死亡に要する時間の減少を示した。つまり、ＴＨＰの濃度が増大すると、駆虫薬の皮膚浸透性が向上した。
【００６９】
【表５】
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【００７０】
結論：表５及び図２に示すように、これらの観察結果は、テトラヒドラピペリンが存在すると、アルベンダゾールの駆虫活性が高められることを実証している。したがって、テトラヒドラピペリンは、アルベンダゾールの低有効量を可能にする、皮膚への浸透増強剤として使用することができる。以下の試験は、テトラヒドロピペリンの低い皮膚刺激能を確立する。
【００７１】
実施例５
皮膚刺激能の決定−動物試験
この試験は、ニュージーランドホワイトウサギに対する一次的な皮膚刺激能を、Ｇａｉｔｏｎｄｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ，ＣＩＢ，Ｎｅｗ  Ｄｅｌｈｉ，Ｉｎｄｉａによって提供された指針に従って決定するために設計した。
【００７２】
試験動物：雌雄の健常な成体ニュージーランド白ウサギ、各群は雌雄それぞれ３匹のランダムに選択したウサギがらなる。
【００７３】
材料および方法：試験物質０．５ｍｌを、各試験動物の除毛した無処置および擦過した皮膚の部位に塗布した。擦過が角質層には達するが真皮には達しないように注意した。テープを使用し、ガーゼのパッチで各処置部位を覆って保護した。パッチと、吸収されなかった試験物質を、２４時間後に取り除いた。塗布された各部位を注意深く観察し、２４時間と７２時間の時点で、その反応をドレイズ法に従って評価した。
【００７４】
結果：
試験動物すべてについて、無処置の皮膚と擦過した皮膚の両方で、紅斑も浮腫も観察されなかった。
【００７５】
結論：
一次的な皮膚刺激スコアは０である。テトラヒドロピペリンは、ウサギの皮膚に対する刺激をまったく引き起こさなかった。
【００７６】
実施例６
皮膚刺激能の決定−ヒトにおけるパッチテスト
４８時間の反復傷害パッチテストを使用して、試験化合物の皮膚刺激能を評価した。
【００７７】
対象
年齢１８歳〜８７歳の５０人の男性または女性の対象が、この試験に参加した。５人の男性と４１人の女性の対象が、この試験を完全に終えた。これらの対象は、健康状態が良好であり、この試験を開始する３０日前から薬物を使用していなかった。
【００７８】
材料および方法
この試験材料は、ワセリンで０．１％ｗ／ｗに希釈し、閉塞的に塗布した。この試験材料０．２ｇすなわち０．２ｃｃを背中の上部の皮膚に塗布した。周囲の皮膚をＭａｓｔｉｔｏｌ（商標）などの粘着増強剤で整えた後、固定するために、３Ｍ  Ｍｉｃｒｏｐｏｒｅ（商標）またはＫｅｎｄａｌｌ  Ｔｅｎｄｅｒｓｋｉｎ（商標）などの紙テープを使用した。対象には、４８時間の観察期間の間、水または直射日光への曝露を避けるように指示した。曝露期間の最後に、試験の施設でテープをはがし、試験主任の監督下で、訓練された職員によって評価を行った。
【００７９】
パッチをはがした後すぐに、反応を紅斑または浮腫の出現に基づいてスコアし、はがしてから２４時間後に再びスコアした。対象には、最終の読み取り後に遅延して生じたいかなる反応も報告するように指示した。
【００８０】
結果：
試験材料に皮膚を４８時間曝露した後のいずれの対象においても紅斑または浮腫反応は観察されなかった。
【００８１】
結論：
５０人の対象に試験した４８時間の閉塞的パッチのもとで、記述した通りに試験した場合の試験材料は、（接触による）一次刺激を引き起こさないと思われる。したがって、テトラヒドロピペリンは皮膚への刺激の潜在的可能性が低い。
【００８２】
実施例７
テトラヒドロピペリンを調製するプロセス
テトラヒドロピペリン（ＴＨＰ）の化学的性質：
化学薬品名：１−［５−（１，３−ベンゾジオキソール−５イル）−１−オキソ−ペンタノイル］−ピペリジン
分子式：Ｃ１７Ｈ２３ＮＯ３
分子量：２８９．３６
組成比率：Ｃ−７０．５６％、Ｈ−８．０１％、Ｎ−４．８４％、Ｏ−１６．５９％
以下に示されるそれらの構造を見ることによって、ピペリンとＴＨＰの構造の類似性が分かり、それを理解することができるであろう：
【００８３】
【化１】
0004098985.tif 000007
【００８４】
【化２】
0004098985.tif 000008
【００８５】
プロセス：
ピペリンを、メタノール、エタノール、イソプロパノールなどのプロトン性溶媒に溶解した。好ましい溶媒はメタノールである。Ｐｔ、ＰｔＯ２、または炭素担持Ｐｄ（５％または１０％）などの貴金属触媒を使用することができる。５％活性をもつ炭素担持Ｐｄである好ましいものを、触媒として加え、３０ｐｓｉから８０ｐｓｉまでの範囲の圧力で、２〜６時間、２５から６０℃で水素化を実施した。反応完了後、触媒を濾過し、濾液を減圧下、３０から４０℃で濃縮した。残ったオイルを室温まで冷却し、テトラヒドロピペリンの結晶でシーディングさせ、結晶化が完了までの間、終夜放置した。その後、それを濾過し、乾燥させて乾燥した場所に保管した。
【００８６】
プロセスの例：ピペリン１００グラムをメタノール７００ｍｌに溶解した。この混合物に、触媒として５％Ｐｄ／Ｃ５グラムを加え、４０Ｐｓｉで２時間、４０から５０℃で水素化を行った。反応完了後、触媒を濾過し、濾液を減圧下、４０℃で濃縮した。残ったオイルを室温まで冷却し、テトラヒドロピペリンの種結晶を入れ、反応完了のために終夜放置した。
【００８７】
ＴＨＰの仕様：
説明：オフホワイト、特徴のあるにおいをもつ低温で融解する固体
溶解性：クロロホルム、メタノールに溶解し、水には溶解しない
融点：４１℃〜４２℃
ＨＰＬＣによる分析：  分  ９９．５％
クロマトグラフィによる不純物：０． ５％未満
【００８８】
【参考文献】
1. Majeed et al., (1996) Use of piperine to increase the bioavailability of nutritional compounds. United States Patent No. 5,536,506.
2. Majeed et al., Use of piperine as a bioavailability enhancer. (1998) United States Patent No 5,744,161.
3. Majeed et al., (1999) Bioperine applications for nutraceutical bioavailability United States Patent No. 5,972,382.
4. Zutshi, U. et al., (1984). Influence of piperine on rifampicin blood levels inpatients with pulmonary tuberculosis. J. Assoc. Physicians of India. 33; 223-224.
5. Zutshi, U. et al. (1989). A process for preparation of pharmaceutical combination with enhanced activity for treatment of tuberculosis and leprosy Indian Patent No.1232/DEU89.
6. Bano, G. et al. (1991). The effect of piperine on the bioavailability and pharmacokinetics of propranolol and theophylline in healthy volunteers. European J. Clin. Pharm. 41; 615-618.
7. Bano, G. et al. (1987). The effect of piperine on the pharmacokinetics of phenytoin in healthy volunteers. Planta Medica. 53; 568-570.
8. Atal C. K. et al. (1977). Indian J. Exp. Bil, 15; 1230-1232.
【図面の簡単な説明】
【図１】テトラヒドロピペリン（フォルスコリンの濃度の５％）がある場合と無い場合のフォルスコリンの経皮的浸透を示すグラフ。
【図２】  麻痺の開始時間とミミズの死亡を観察して得られたグラフ。
【図３】  ジプロピオン酸ベータメタゾンとテトラヒドロピペリンを重ね合わせたＵＶおよび可視スペクトルを示す図。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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