(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
0004150430.tif 000009
｛式中、
Ｒ1は、式：
0004150430.tif 000010
［式中、Ｒ2は、−ＣＨ2−Ｒ3を表し；そして
式中、Ｒ3は、
Ｃ1−Ｃ11のアルキル、
Ｃ1−Ｃ11−Ｒ4のアルキル、
Ｒ4−（Ｏ(0または1)−Ｒ4）0または1
（式中、Ｒ4は各々独立して、フェニルまたは１つもしくは２つの置換基で置換されているフェニルであり、この置換基は各々独立して、ハロ、Ｃ1−Ｃ4の低級アルキル、Ｃ1−Ｃ4の低級アルコキシ、またはＣ1−Ｃ4の低級アルキルチオである。）を表す。］
のエピバンコサミニル基を表す。｝
の化合物、またはその医薬的に許容され得る塩。
【請求項２】
−ＣＨ2−Ｒ3がp−（p−クロロフェニル）ベンジルである、請求項１の化合物。
【請求項３】
医薬的に許容され得る希釈剤または担体と組み合わせて、請求項１の化合物を含んでなる医薬品製剤。
【請求項４】
宿主における細菌感染を処置するのに用いる医薬であって、請求項３の製剤の有効量を含んでなる医薬。
【請求項５】
宿主における細菌感染を処置するのに用いる医薬であって、細菌感染がバンコマイシン耐性エンテロコッカスに起因し、該医薬は請求項３の製剤の有効量を含んでなる医薬。
【請求項６】
請求項１に記載の化合物の製造方法であって、無極性溶媒中、式：
0004150430.tif 000011
［式中、Ｒ2は、請求項１−２に定義した通りであり：そしてＲ5は、
Ｃ1−Ｃ11のアルキル、
フェニル、
ナフチル、または
１つもしくは２つの置換基で置換されているフェニル
を表し、この置換基は各々独立して、ハロ、Ｃ1−Ｃ4の低級アルキル、Ｃ1−Ｃ4の低級アルコキシ、ベンジルオキシ、ニトロ、または
0004150430.tif 000012
（式中、Ｒ6は各々独立して、Ｃ1−Ｃ4の低級アルキルである。）である。］
の化合物を有機酸で処理することを含んでなる方法。
【請求項７】
製造した化合物の医薬的に許容され得る塩を更に形成することを含んでなる請求項６に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
本発明は、グリコペプチドに関し、特にグリコペプチドＡ８２８４６Ｂの誘導体に関する。これらの誘導体では、ロイシルが除去されて、Ａ８２８４６Ｂの「ヘキサペプチド」およびそのＮDISACC変化体（variations）を作り出している。これらのヘキサペプチドは、抗菌物質として有用であり、さらなる抗菌化合物を製造する出発物質としてもまた有用である。
発明の詳細な説明
本発明は、式：
0004150430.tif 000002
｛式中、
Ｒ1は、水素、または式：
0004150430.tif 000003
［式中、Ｒ2は、水素または−ＣＨ2−Ｒ3を表し；そしてＲ3は、
Ｃ1−Ｃ11のアルキル、
Ｃ1−Ｃ11−Ｒ4のアルキル、または
Ｒ4−(Ｏ（0または1)−Ｒ4）0または1
（式中、Ｒ4は各々独立して、フェニルまたは１つもしくは２つの置換基で置換されているフェニルであり、この置換基は各々独立して、ハロ、Ｃ1−Ｃ4の低級アルキル、Ｃ1−Ｃ4の低級アルコキシ、またはＣ1−Ｃ4の低級アルキルチオである。）を表す。］
のエピバンコサミニル基を表す。｝
の化合物、およびその医薬的に許容され得る塩に関する。
本発明の化合物は、式：
0004150430.tif 000004
［式中、Ｒ2は、上に定義した通りである。］
の親グリコペプチドのエドマン分解により製造する。そのエドマン分解は、ペプチドまたはタンパク質のＮ末端残基の切断のための２段階法である。本発明では、まず最初に、上の親グリコペプチドを式ＳＣＮ−Ｒ5のイソチオシアネートと反応させて、式：
0004150430.tif 000005
の中間体ＮLEU−（チオカルバモイル）Ａ８２８４６Ｂ化合物を得る。
先の式において、Ｒ5は、
Ｃ1−Ｃ10のアルキル、
フェニル、
ナフチル、または
１つもしくは２つの置換基で置換されているフェニル
を表し、この置換基は各々独立して、ハロ、Ｃ1−Ｃ4の低級アルキル、Ｃ1−Ｃ4の低級アルコキシ、ベンジルオキシ、ニトロ、または
0004150430.tif 000006
［式中、Ｒ6は各々独立して、Ｃ1−Ｃ4の低級アルキルである。］
である。
この反応は、便利には、ピリジンを含む水中、僅かに過剰のイソチオシアネート反応物を使用して、２５℃〜３０℃の温度で行う。ＮLEU−（チオカルバモイル）Ａ８２８４６Ｂ中間体は、従来の方法で分離することができ、またはエドマン分解の第２段階において反応溶媒を除去した後に使用することができる。
第２段階では、ジクロロメタンのような無極性溶媒中、そのＮLEU−（チオカルバモイル）Ａ８２８４６Ｂを有機酸、好ましくはトリフルオロ酢酸と反応させる。その反応は、０℃から３５℃までの温度で進行するが、０℃から２５℃までの温度で行うのが好ましい。その反応は、一般に、数時間で完了する。その結果得られたヘキサペプチド生成物を分離して、所望ならば、従来の方法で精製する。塩を使用することが所望される場合、その生成物を標準的な方法で反応させる。
エドマン分解のこの第２段階は、幾つかの場合、二糖類のエピバンコサミンの喪失を引き起こし得る。より長い反応時間を使用して、本発明のＮDISACC−デスエピバンコサミニル（Ｒ1＝水素）化合物を製造することができる。
次の実施例は、本発明の化合物の製造を説明する。
ＮDISACC−（p−（p−クロロフェニル）ベンジル）−ＮLEU−（フェニルチオカルバモイル）Ａ８２８４６Ｂの製造
ＮDISACC−（p−（p−クロロフェニル）ベンジル）Ａ８２８４６Ｂ 三塩酸塩（１００．０mg、０．０５２６mmol）をＨ2Ｏ−ピリジン（１：１ ｖ／ｖ）１０mlに溶解して、イソチオシアン酸フェニル（０．０１０ml、０．０８３mmol）で処理した。その結果得られた混合物を室温で１時間攪拌し、この時点で、ＨＰＬＣ分析は、出発物質の完全な消費を示した。その反応混合物を減圧下に濃縮し、粗製の生成物を分取用ＨＰＬＣにより精製して、ＮDISACC−（p−（p−クロロフェニル）ベンジル）−ＮLEU−（フェニルチオカルバモイル）Ａ８２８４６Ｂ ７６．６mg（収率７６％）を得た。
Ｃ93Ｈ102Ｃl3Ｎ11Ｏ26Ｓに関するＦＡＢ−ＭＳ：
計算値：１９２５．５。
実測値：１９２８．５（Ｍ＋３）。
単離されたチオ尿素からの実施例６の化合物の製造
精製されたＮDISACC−（p−（p−クロロフェニル）ベンジル）−ＮLEU−（フェニルチオカルバモイル）Ａ８２８４６Ｂ（６３．３mg、０．０３２７mmol）の試料をＣＨ2Ｃl2 １０mlに縣濁させ、０℃まで冷却した後、トリフルオロ酢酸（０．１０ml）で処理した。１時間後、その反応混合物を室温まで温めて、さらに２時間攪拌した。溶媒を減圧下に除去し、粗製の生成物を分取用ＨＰＬＣにより精製して、ＮDISACC−（p−（p−クロロフェニル）ベンジル）デスロイシル−Ａ８２８４６Ｂ ２５．３mg（収率４６％）を白色の粉末として得た。
Ｃ79Ｈ84Ｃl3Ｎ9Ｏ25に関するＦＡＢ−ＭＳ：
計算値：１６６３．５。
実測値：１６６６．４（Ｍ＋３）。
チオ尿素中間体の単離を伴わない親抗生物質からの実施例４の化合物の製造
ＮDISACC−（p−フェニルベンジル）Ａ８２８４６Ｂ（４１．０mg、０．０２３３mmol）をＨ2Ｏ−ピリジン（１：１ ｖ／ｖ）４mlに溶解して、イソチオシアン酸フェニル（０．００４０ml、０．０３３mmol）で処理した。その結果得られた混合物を室温で３時間攪拌し、この時点で、ＨＰＬＣ分析は、出発物質の完全な消費を示した。その反応混合物を減圧下に濃縮して、粗製のチオ尿素中間体を白色の固体として得た。次いで、そのチオ尿素誘導体をＣＨ2Ｃl2 １０mlに縣濁させ、０℃まで冷却した後、トリフルオロ酢酸（０．２５ml）で処理した。３０分後、その反応混合物を室温まで温めて、さらに１時間攪拌した。溶媒を減圧下に除去し、粗製の生成物を分取用ＨＰＬＣにより精製して、ＮDISACC−（p−フェニルベンジル）デスロイシル−Ａ８２８４６Ｂ １４．０mg（収率３７％）を白色の粉末として得た。
Ｃ79Ｈ85Ｃl2Ｎ9Ｏ25に関するＦＡＢ−ＭＳ：
計算値：１６２９．５。
実測値：１６３２．５（Ｍ＋３）。
これらの実施例で報告したＨＰＬＣ法は、次の通りであった。
分析用：Ｗaters Ｃ18 μＢondapakまたはＮovapak Ｃ18カラム（３．９×３００mm）および２８０nmでのＵＶ検出を使用して、反応を分析用ＨＰＬＣによりモニターした。溶出は、３０分にわたり、５％ＣＨ3ＣＮ−９５％緩衝液〜８０％ＣＨ3ＣＮ−２０％緩衝液のリニアグラジエントで成し遂げた。使用した緩衝液は、Ｈ3ＰＯ4でpＨ３に調節した、水中の０．５％トリエチルアミンであった。
分取用：Ｗaters Ｃ18 Ｎova−Ｐakカラム（４０×３００mm）および２８０nmでのＵＶ検出を使用して、粗製の反応混合物を分取用ＨＰＬＣにより精製した。溶出は、３０分にわたり、５％ＣＨ3ＣＮ−９５％緩衝液〜８０％ＣＨ3ＣＮ−２０％緩衝液のリニアグラジエントで成し遂げた。使用した緩衝液は、Ｈ3ＰＯ4でpＨ３に調節した、水中の０．５％トリエチルアミンであった。その後、所望の画分をＷaters Ｃ18 Ｓep−Ｐak（３５cc）で脱塩した後、凍結乾燥させた。
化合物を次のように脱塩した。Ｗaters Ｓep−Ｐakカートリッジをメタノール（カラム体積２−３）で予め湿らせておいた後、水（カラム体積２−３）で調整した。最少量の水に溶解した試料をＳep−Ｐakカラムに充填した後、これを水（カラム体積２−３）で洗浄して、所望ではない塩を除去した。次いで、生成物を適当な溶媒系、典型的には、１：１ ＣＨ3ＣＮ／Ｈ2Ｏ、ＣＨ3ＣＮ、および／またはメタノールで溶出した。有機溶媒成分を減圧下に除去し、その結果得られた水溶液を凍結乾燥させて、最終生成物を得た。
本発明の代表的な化合物を次の表に挙げる。
0004150430.tif 000007
本発明の化合物は、細菌感染の処置に有用である。従って、別の態様において、本発明は、宿主動物、典型的には、温血動物における細菌感染を抑制する方法に関し、この方法は、その宿主動物に本発明の化合物の有効な抗菌量を投与することを含んでなる。この態様では、その化合物を使用して、様々な細菌、とりわけグラム陽性菌による感染を抑制して処置することができる。好ましい態様では、その化合物を使用して、実在する抗菌物質に耐性のある細菌による感染を抑制して処置する。例えば、ある細菌は、メチシリンに耐性であるが、他の細菌は、バンコマイシンおよび／またはテイコプラニンに耐性である。本発明の化合物は、そのような耐性菌種による感染を抑制して処置する技術を提供する。
本発明のこの態様を行う際には、経口経路並びに静脈内および筋肉内といったような非経口経路を含め、いずれかの従来技術により、本発明の化合物を投与することができる。使用すべき化合物の量は重要ではなく、使用する個々の化合物、投与経路、感染の重篤度、服用間隔、および当業者に知られている他の要因により変わるであろう。一般に、約０．５から約１００mg／kgまでの用量が有効であろう；そして多くの状況では、約０．５から約５０mg／kgまでのより少ない用量が有効であろう。本発明の化合物を単回用量で投与することができるが、抗菌療法の既知の方法では、本発明の化合物を、典型的には、約数日または約数週間といったようなある期間にわたり繰り返し投与して、細菌感染の抑制を確実なものとする。
既知の抗菌療法によってもまた、本発明の化合物を、典型的には、必要な用量の便利な送達のために製剤化する。従って、別の態様において、本発明は、医薬的に許容され得る担体と組み合わせて、本発明の化合物を含んでなる医薬品製剤に関する。そのような担体は、経口経路および非経口経路の両方の送達に関してよく知られている。一般に、ある製剤は、本発明の化合物を約０．１から約９０重量％まで、しばしば、約１．０〜約３％の濃度で含んでなるであろう。
本発明の化合物の抗菌効力を表により説明する。標準的なブロスミクロ希釈アッセイを使用して、最小阻止濃度（ＭＩＣ）を測定した。
0004150430.tif 000008
本発明の化合物はまた、他の抗菌化合物に対する出発物質として使用することもできる。特に、本発明のヘキサペプチドを反応させて、遊離の「Ｎ1」アミンにアルキル基を導入することができる。そのヘキサペプチドをアルデヒドと反応させて、シッフ塩基を形成した後、これを還元して、Ｎ1−アルキルヘキサペプチドを得ることにより、アルキル化を達成する。反応は両方とも、ＤＭＦのような極性溶媒中、０−１００℃、好ましくは６０−７０℃の温度で行う。好ましい還元剤は、シアノホウ水素化ナトリウムである。一態様では、その還元剤をヘキサペプチドおよびアルデヒドと同時に加える。その結果得られたＮ1−アルキル化ヘキサペプチドは、抗菌物質として有用であって、本発明の化合物に関して上に記載したように使用することができる。