(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
液体クロマトグラフィーのキャリブレータ及び／又はコントロールの濃縮物として使用可能なヘモグロビン標準試料溶液を作製するための材料の組み合わせであって、
前記材料としてヘモグロビン標準試料と緩衝液とを含み、
前記ヘモグロビン標準試料が凍結乾燥血液であり、
前記緩衝液がｐＨ５．０〜８．０であり緩衝剤を５０〜３０００ｍＭの濃度で含有する緩衝液である、材料の組み合わせ。
【請求項２】
液体クロマトグラフィーのキャリブレータ及び／又はコントロールの濃縮物として使用可能なヘモグロビン標準試料溶液を作製するための材料の組み合わせであって、
前記材料としてヘモグロビン標準試料と緩衝剤とを含み、
前記ヘモグロビン標準試料が凍結乾燥血液であり、
前記緩衝剤がｐＨ５．０〜８．０の間で緩衝能を有する緩衝剤であって、５０〜３０００ｍＭの濃度の緩衝液を作製するための緩衝剤である、材料の組み合わせ。
【請求項３】
さらに、非イオン性界面活性剤を含む請求項１又は２記載の材料の組み合わせ。
【請求項４】
液体クロマトグラフィー法を用いてヘモグロビン類を測定する方法であって、
請求項１から３のいずれか一項に記載の材料の組み合わせを用いて作製したヘモグロビン標準試料溶液を使用して較正、又は、コントロール試料の測定を行う工程を含む測定方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の属する技術分野】
本発明は、ヘモグロビン類の測定に用いられるヘモグロビン溶液に関する。
【従来の技術】
ヘモグロビンＡ１ｃ（以下ＨｂＡ１ｃと略す）は、血液中の糖が赤血球に入った後に、ヘモグロビンと化学的結合することにより生成され、過去１〜２カ月間の血液中の平均的な血糖値（血液中のグルコース濃度）を反映している。従って、ＨｂＡ１ｃは、糖尿病のスクリーニング検査や糖尿病患者の血糖管理状態を把握するなどの糖尿病診断の指標として広く用いられている。
【０００１】
上記ＨｂＡ１ｃの測定は、免疫法や高速液体クロマトグラフィー法が広く知られており、測定に際して行われる校正にはキャリブレータが、検体測定の精度管理にはコントロールが用いられている。前記キャリブレータ並びにコントロール液は、ＨｂＡ１ｃ値が既知のものが使用される。
【０００２】
キャリブレータは、カラム交換時や測定装置のメンテナンスの際に、測定システムを校正するために用いられている。
前記コントロール液は、日常の検体検査における測定システムの精度管理に用いられている。具体的にはＨｂＡ１ｃ値が既知のコントロール液を、一定数の検体毎に測定し、その測定結果を管理図等にプロットすることにより、精度管理を行う事が可能となる。
【０００３】
通常、キャリブレータ及びコントロール液は、ヒト赤血球を凍結乾燥処理して製造されており、以下のように調製される。
バイアル中の凍結乾燥血液を復元するために、バイアルに精製水を添加する。十分に溶解させるため、５〜３０分間程度静置する。専用の希釈液を用いて定められた希釈を行うことにより、ＨｂＡ1ｃ値の既知なヘモグロビン溶液を得ることができる。なお、溶解後に保存する必要がある場合には、精製水で溶解した状態で冷蔵保存される。
キャリブレータは多くの場合、２点校正を行うために正常域及び高値域におけるＨｂＡ1ｃ値が既知である２種類の凍結乾燥血液が用いられる。バイアル中の各凍結乾燥血液を専用の溶解液で溶解した後、一定の希釈率に希釈されて測定に用いられる。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
キャリブレータ及びコントロール液は、溶液として調製した後、ＨｂＡ1ｃ値が経時的に小さくなる現象が認められる。これは、キャリブレータ及びコントロール液を冷蔵保存すると、ＨｂＡ1ｃ値が経時的に小さくなる現象が抑制されることから、前記現象はキャリブレータ及びコントロール液中のＨｂＡ1ｃが温度の影響を受けて、何らかの変性きたし、結果としてＨｂＡ1ｃの測定値が誤差を受けていると推定される。
【０００５】
特に高速液体クロマトグラフィー法(以下ＨＰＬＣ法と記す。)による測定において顕著に認められるため、ＨｂＡ1ｃの３次元構造が変化している可能性がある。
ただし、検体中に存在するＨｂＡ1ｃ値は経時的な変化が認められず、キャリブレータ及びコントロール液に限ってＨｂＡ1ｃ値は経時的な変化が認めらることから、一度乾燥されたＨｂＡ1ｃが、温度による影響を受けることにより、３次元構造が経時的に変化していると推測される。しかし、本発明者らが調べる限り原因は未だ解明されていない。
【０００６】
多くの場合、測定が行われる場所の室温は約２３〜２５℃に設定されているのが一般的であるため、キャリブレータ及びコントロール液を低温で管理することは難しい。
特にキャリブレータは、ＨｂＡ１ｃ値が変化すると測定システムの正しい校正が行われなくなってしまうため、検体を測定したときの値は、間違った値として測定者に知らせることになる。
【０００７】
例えばＨｂＡ１ｃ値が４．８％及び１０．８％として値の既知なキャリブレータを溶解後、室温状態で放置されて０．２％及び０．４％低下した状態で測定システムが校正されてしまうと、実際の検体を測定した場合に、ＨｂＡ１ｃ値の結果は、真の測定結果よりも０．２％ないし０．４％高い値で得られることになる。キャリブレータの変性は測定システム上、測定結果として確認することは不可能である。何故なら測定を行う前に劣化したキャリブレータ溶液に基づいて装置が校正されてしまうためである。
上述した理由により、キャリブレータは校正を行う際に用時調製され、保存されて使用することはできなかった。
【０００８】
一方、コントロール液はサンプルカップに分注され、測定装置のラックに設置される。最近の測定システムでは、一度にセットできる検体数は最大で１００〜２００検体であるため、後方にセットされたコントロール液では、１検体の測定時間が例えば１．５分である場合、数時間も室温に置かれることになる。そのため、コントロール液のＨｂＡ１ｃ値が経時的な変化を受けてしまうことになる。
【０００９】
ＨｂＡ１ｃ値をＨＰＬＣ法によって高精度に測定するためには、測定システムを正確に校正することが必要であり、日常の精度管理も高精度に維持されていることが望ましい。そのため、キャリブレータやコントロール液中のＨｂＡ1ｃが変性されない対策が必要である。
【００１０】
ヘモグロビンの変性を防止する方法としては、特開平７−２２９９０２、特開平８−２６２０２０、特開平９−６１４３１、特開平９−１１９９３１、特開平９−２２４９４２、特開平１０−１３２８２４、特開平１１−１１８８０６、特開平１１−２１８５３３、特開２０００−２０６１１７、特開２０００−２５６３３９、特開２０００−２５８４２０があげられる。
前記従来技術は、ヘモグロビンに特定物質を共存させることにより、ヘモグロビンの変性を防止するための技術として認められる。
【００１１】
しかし、前記従来技術として挙げられたものは、糞便中に存在するヘモグロビンを安定化させる方法であるため、糞便中に存在するヘモグロビンは抗体によって検出する方法であれば、ヘモグロビンの抗体認識部位である２〜３のアミノ酸が変性されなければ良く、それ以外の他の部分が変性されても測定に何ら影響を及ぼさない。
一方本発明のＨｂＡ1ｃを測定する場合においては、物質の分離分析によって測定を行うため、ＨｂＡ1ｃ分子の１ヶ所にのみ変性が起こるだけで、３次元構造が変化を受け、通常の分離が行われずに測定値が誤差を受けてしまう。つまり、ＨＰＬＣ法による測定の場合は、ＨｂＡ1ｃの変性により溶出するリテンションタイムが変化するため、結果として測定値が誤差を含んでしまう。この現象はＨＰＬＣにおいてのみ認められ、高精度測定を行う場合の解決しなければならない問題点であった。
【００１２】
本発明の目的は、ＨＰＬＣによるＨｂＡ1ｃの測定において、室温状態でＨｂの経時的な変性を防ぐヘモグロビン溶液、又はその製造方法を提供することである。
【００１３】
【課題を解決するための手段】
本発明は、キャリブレータ又はコントロール液として用いられるヘモグロビン溶液の変性防止を目的として行われる。
（１）  液体クロマトグラフィーのキャリブレータ及び／又はコントロールの濃縮物として使用可能なヘモグロビン標準試料溶液を作製するための材料の組み合わせであって、前記材料としてヘモグロビン標準試料と緩衝液とを含み、前記ヘモグロビン標準試料が凍結乾燥血液であり、前記緩衝液がｐＨ５．０〜８．０であり緩衝剤を５０〜３０００ｍＭの濃度で含有する緩衝液である、材料の組み合わせ。
（２）  液体クロマトグラフィーのキャリブレータ及び／又はコントロールの濃縮物として使用可能なヘモグロビン標準試料溶液を作製するための材料の組み合わせであって、前記材料としてヘモグロビン標準試料と緩衝剤とを含み、前記ヘモグロビン標準試料が凍結乾燥血液であり、前記緩衝剤がｐＨ５．０〜８．０の間で緩衝能を有する緩衝剤であって、５０〜３０００ｍＭの濃度の緩衝液を作製するための緩衝剤である、材料の組み合わせ。
（３）  更に非イオン性界面活性剤を含む前記（１）又は（２）の材料の組み合わせ。
（４）  液体クロマトグラフィー法を用いてヘモグロビン類を測定する方法であって、前記（１）から（３）のいずれかの材料の組み合わせから作製したヘモグロビン標準試料溶液を使用して較正、又は、コントロール試料の測定を行う工程を含む測定方法。
【００１４】
以下、本発明の詳細な説明において述べるコントロール液及びキャリブレータを、「ヘモグロビン溶液」と称する。つまり、本発明が施された「ヘモグロビン溶液」をコントロール液及びキャリブレータとして使用するという意味と同じである。
【００１５】
本発明に係るヘモグロビン溶液に用いられる緩衝剤としては、ｐＨ５．０〜８．０で緩衝能を有し、これを通常の緩衝剤としては用いられない濃度領域、つまり５０〜３０００ｍＭという高濃度域で使用するものである。このような緩衝剤は、無機酸、有機酸、もしくはこれらの塩または有機物が挙げられる。
【００１６】
上記無機酸としては、例えば、リン酸、ホウ酸などが挙げられる。
上記有機酸及び有機物としては、例えば、カルボン酸、ジカルボン酸、カルボン酸誘導体、ヒドロキシカルボン酸、アミノ酸などが挙げられる。
上記カルボン酸としては、例えば、酢酸、プロピオン酸などが挙げられる。上記ジカルボン酸としては、例えば、マロン酸、コハク酸、グルタル酸、アジピン酸、マレイン酸、フマル酸、フタル酸などが挙げられる。上記カルボン酸誘導体としては、例えば、β，β−ジメチルグルタル酸、バルビツール酸などが挙げられる。上記ヒドロキシカルボン酸としては、例えば、クエン酸、酒石酸、乳酸などが挙げられる。上記アミノ酸としては、例えば、アスパラギン酸、ヒスチジンなどが挙げられる。上記無機酸または有機酸の塩としては、従来公知のものが用いられ、例えばナトリウム塩やカリウム塩などが挙げられる。
【００１７】
また、２−（Ｎ−モリホリノ）エタンスルホン酸（ＭＥＳ）、Ｎ−２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ’−エタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）、ビス（２−ヒドロキシエチル）イミノトリス−（ヒドロキシメチル）メタン（Ｂｉｓｔｒｉｓ）、Ｔｒｉｓ、ＡＤＡ、ＰＩＰＥＳ、Ｂｉｓｔｒｉｓｐｒｏｐａｎｅ、ＡＣＥＡ、ＭＯＰＳ、ＢＥＳ、ＴＥＳ、ＨＥＰＰＳ、Ｔｒｉｃｉｎｅ、Ｂｉｃｉｎｅ、グリシルグリシン、ＴＡＰＳ、ＣＡＰＳ等の一般にグッド（Ｇｏｏｄ）の緩衝液といわれているものも使用できる。
【００１８】
ヘモグロビン溶液中における緩衝剤の濃度は、水に溶解された状態で緩衝作用が認められる濃度範囲であればよく、本発明では、５０ｍＭ〜３０００ｍＭであり、好ましくは１００〜２０００ｍＭ、より好ましくは２００〜１０００ｍＭである。実際の使用に際しては、前記緩衝剤を含む溶液を用いて、直接乾燥血液に添加しても良いし、従来通り精製水で乾燥血液を溶解した後、前記緩衝剤を含む溶液を希釈液として用いても良い。また、生体から採取された生の血液から調整する場合も含まれる。
上記緩衝剤の濃度が５０ｍＭよりも低い場合には、乾燥ヘモグロビンを溶解する際に温度の影響を受け易くなり、ヘモグロビン類の安定性が悪くなる。また、緩衝剤の濃度が３０００ｍＭよりも高くなると、安定型Ａ１ｃ分離パターンが悪化する。
【００１９】
本発明におけるヘモグロビン溶液のｐＨは５．０〜８．０であり、好ましくは６．０〜７．８であり、より好ましくは６．５〜７．５である。ｐＨが５．０より低い場合、及び８．０より高い場合には、ヘモグロビン類の変性が起こり易くなり、安定なヘモグロビン標準試料溶液を得ることができなくなる。
【００２０】
本発明において、好ましくは添加される上記非イオン性界面活性剤とは特に限定されるわけではないが、例えば、ポリオキシエチレン類（以下、ポリオキシエチレンをＰＯＥ、エチレンオキシド付加モル数を（ｎ）で表わす。）、ＰＯＥ（７）デシルエーテル、ＰＯＥ（ｎ）ドデシルエーテル、ＰＯＥ（１０）トリデシルエーテル、ＰＯＥ（１１）テトラデシルエーテル、ＰＯＥ（ｎ）セチルエーテル、ＰＯＥ（ｎ）ステアリルエーテル、ＰＯＥ（ｎ）オレイルエーテル、ＰＯＥ（１７）セチル−ステアリルエーテル、ＰＯＥ（ｎ）オクチルフェニルエーテル、ＰＯＥ（ｎ）ノニルフェニルエーテル、モノラウリン酸ソルビタン、モノパルミチン酸ソルビタン、モノステアリン酸ソルビタン、モノオレイン酸ソルビタン、ＰＯＥ（ｎ）モノラウリン酸ソルビタン、ＰＯＥ（ｎ）モノパルミチン酸ソルビタン、ＰＯＥ（ｎ）モノステアリン酸ソルビタン、ＰＯＥ（ｎ）モノオレイン酸ソルビタン、ＰＯＥ（９）ラウリルエーテル等が挙げられる。また、オキシエチレン−オキシプロピレンブロック共重合体等の高分子化合物も用いることができる。
上記界面活性剤は、１種のみが用いられてもよく、２種以上併用されて用いられてもよい。また、１種あるいは２種以上の界面活性剤の含有量は、好ましくは０．０１〜１０重量％である。
【００２１】
本発明において好ましくは含有される上記保存剤とは、アミン系化合物、アルコール化合物、アルデヒド系化合物、カルボン酸系化合物、フェノール系化合物、アミド系化合物、有機ハロゲン系化合物、イソチアゾロン系化合物、有機金属化合物、ＥＤＴＡ類及びホウ酸からなる群から選択された少なくとも１種の保存剤である。これらの具体例は特に限定されず、例えば以下に示すものが挙げられる。
【００２２】
アミン系化合物としては、例えば、２−（４−チアゾリル）ベンツイミダゾール等のイミダゾール系化合物、２，３，５，６−テトラクロロメチルスルホニルピリジン、（２−ピリジルチオ−１−オキシド）ナトリウム等のピリジン系化合物、トリアルキルトリアミン等が挙げられる。
アルコール系化合物としては、、例えば、メタノール、エタノール、ｎ−プロピルアルコール、イソプロパノール、２−フェノキシエタノール、２−フェノキシプロパノール、２−フェニルエタノール等が挙げられる。
アルデヒド系化合物としては、例えば、ホルムアルデヒド、グルタルアルデヒド等が挙げられる。
【００２３】
カルボン酸系化合物としては、例えば、安息香酸、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、プロピオン酸、プロピオン酸カリウム、プロピオン酸ナトリウム、プロピオン酸カルシウム、サリチル酸、サリチル酸ナトリウム、デヒドロ酢酸ナトリウム、１０−ウンデシレン酸、ウンデシレン酸亜鉛、マグネシウム２水素ビスモノペルオキシフタラート等が挙げられる。
フェノール系化合物としては、例えば、チモール、イソプロピルメチルフェノール、オルトフェニルフェノール、オルトフェニルフェノールナトリウム、ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチル、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチル、ｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピル、ｐ−ヒドロキシ安息香酸ブチル、ｍ−クレゾール、ｐ−クロロフェノール等が挙げられる。
【００２４】
アミド系化合物としては、例えば、２−クロロアセタミド等が挙げられる。
有機ハロゲン系化合物としては、例えば、２，４，５，６−テトラクロロイソフタロニトリル、Ｎ−（フルオロジクロロメチルチオ）−フタルイミド、Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ’(フルオロジクロロメチルチオ）−Ｎ’−フェニルスルファミド等が挙げられる。
イソチアゾロン系化合物としては、例えば、１，２−ベンゾチアゾリン−３−オン等が挙げられる。
有機金属化合物としては、例えば、１０，１０−オキシビスフェノキシアルシン等が挙げられる。
ＥＤＴＡ類としては、ＥＤＴＡ、ＥＤＴＡ類のナトリウム塩、ＥＤＴＡのカリウム塩なとが挙げられる。
上記保存剤の含有量は、特に限定されないが、通常、ヘモグロビン溶液中、０．０１〜１０重量％、好ましくは０．０００５〜５重量％とされる。
上記保存剤は、１種のみを用いられてもよく、２種以上併用されてもよい。また、２種以上併用される場合においても、含有量の合計が上記の範囲であることが好ましい。
【００２５】
上記保存剤の含有が０．００１重量％に満たない場合には、十分な抗菌性が得られず、ヘモグロビン類の安定性に悪影響が出る場合がある。また、含有量が１０重量％を超えると、保存剤の溶解性が悪くなったり、ヘモグロビン類の測定系に悪影響が出て、ＨｂＡ１ｃ値を正確に測定できないことがある。
上記保存剤は、ヘモグロビン溶液に十分に溶解することが好ましく、単独で溶解性が悪い保存剤を用いる場合には、ヘモグロビン類の測定系に悪影響が出ない量まで含有量を低めるか、あるいは複数の保存剤を組み合わせて用いるなどの方法を採用することが望ましい。
【００２６】
また、溶解性を高めるために、メタノール、エタノール、アセトニトリル、アセトンなどの水溶性有機溶剤が混合されて用いられてもよい。この場合、これらの有機溶媒の濃度は、ヘモグロビンの安定性及びヘモグロビン類の測定系に悪影響を与えない程度の濃度に調製されることが好ましい。
【００２７】
【発明の実施の形態】
以下、実施例及び比較例を挙げ、本発明をより詳細に説明する。本発明は、以下の実施例に限定されるものではない。
【００２８】
（用意した材料）
（１）キャリブレータ
キャリブレータとして、アークレイ社製、商品名ＡＤＡＭＳ  Ａ１ｃキャリブレータ（低値４．８％及び高値１０．８％の２種）を用意した。
（２）コントロール液
国際試薬社製、ロットナンバー１２７６  正常域５．０％〜５．６％及び高値域１０．２％〜１１．２％の２種のコントロール液を用意した。
（３）キャリブレータ用希釈液
アークレイ社製、品番：ＡＤＡＭＳ  Ａ１ｃキャリブレータ専用希釈液
（４）精製水
大塚製薬社製、注射用精製水
（５）測定システム
アークレイ株式会社社製、自動グリコヘモグロビン測定装置「ＡＤＡＭＳ  Ａ１ｃＨＡ−８１６０」
【００２９】
（６）実施例で用いたヘモグロビン溶液
以下のＭ液及びＤ液の２種類を用意した。
界面活性剤として、１．０重量％ポリオキシエチレン（９）ラウリルエーテル（ニッコーケミカルズ社製、品番：ニッコールＢＬ―９ＥＸ）、保存剤としてソルビン酸カリウム０．１重量％を含有する４５０ｍＭのＰＩＰＥＳ溶液（ｐＨ７．２）をＭ液とした。
界面活性剤として、０．５重量％ポリエチレングリコールモノ−４−オクチルフェニールエーテル（東京化成社製、品番：トリトンＸ−１００）、保存剤として、プロピオン酸ナトリウム０．０５重量％を含有する５ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ＝７．２）をＤ液とした。
（校正）
上記キャリブレータ用希釈液を４℃に冷却し、この希釈液で上記キャリブレータを希釈し、低値及び高値ともｎ＝３の平均値で校正をおこなった。
【００３０】
（実施例１）
上記コントロール液２種を、それぞれ、冷蔵（４℃）に維持されたＭ液０．２ｍＬに溶解し、ヘモグロビン溶液を得た。このヘモグロビン溶液を、４℃に３０分間静置した後、上記キャリブレータ用希釈液２００ｍＬで希釈し、コントロール液を調製した後、上記測定システムを用いてＨｂＡ１ｃ値を測定した。ＨｂＡ１ｃ値（ｎ＝３での平均値）を下記の表２に示す。
（実施例２）
Ｍ液の温度を２５℃とし、２５℃でコントロール液を溶解し、３０分間静置した後、キャリブレータ用希釈液で希釈したことを除いては、実施例１と同様にして、ＨｂＡ１ｃ値を測定した。結果を下記の表２に示す。
【００３１】
（実施例３）
Ｍ液の温度を３５℃とし、３５℃でコントロール液を溶解し、３０分静置した後、キャリブレータ用希釈液で希釈したことを除いては、実施例１と同様にして、ＨｂＡ１ｃ値を測定した。結果を下記の表２に示す。
（比較例１〜３）
下記の表１に示すように、Ｍ液に変えて精製水を用いたことを除いては、実施例１〜３と同様にして比較例１〜３の各ヘモグロビン標準試料溶液を得、かつＨｂＡ１ｃ値を測定した。結果を下記の表２に示す。
【表１】
0004061365.tif 000002
【表２】
0004061365.tif 000003
（参考例４〜６）
上記実施例１〜３の途中で得た各ヘモグロビン溶液を、キャリブレータ用希釈液ではなく、Ｄ液２００ｍＬで希釈したことを除いては、実施例１〜３と同様にして、参考例４〜６のヘモグロビン標準試料溶液を得、実施例１と同様にしてＨｂＡ１ｃ値を測定した。上記参考例４〜６で得たヘモグロビン標準試料溶液と、比較例１で得たヘモグロビン標準試料溶液について、希釈直後のＨｂＡ１ｃ値と、２５℃に５時間及び１６時間保存した後のＨｂＡ１ｃ値を測定した。結果を下記の表３に示す。
【表３】
0004061365.tif 000004
【００３２】
（参考例７）
上記キャリブレータを、３５℃の温度に維持されたＤ液６ｍＬに溶解してヘモグロビン標準試料溶液を得、３５℃の温度で３０分間静置した後に、ＨｂＡ１ｃ値（ｎ＝３での平均値）を測定した。ＨｂＡ１ｃ測定値と、校正により得られた表示値との差異を下記の表５に示す。
（比較例４〜６）
下記の表４に示すように、Ｄ液に変えてキャリブレータ用希釈液を用い、溶解温度及び３０分間の静置温度を、それぞれ、冷蔵（４℃）、２５℃及び３５℃としたことを除いては、参考例７と同様にして比較例４〜６のヘモグロビン標準試料溶液を得、参考例７と同様にして評価した。結果を下記の表５に示す。
【００３３】
【表４】
0004061365.tif 000005
【表５】
0004061365.tif 000006
【００３４】
【発明の効果】
本発明に係るヘモグロビン溶液では、ｐＨ５．０〜８．０で緩衝能を有する緩衝剤が５０〜３０００ｍＭの濃度で含有されているため、ヘモグロビンの劣化が少ないヘモグロビン溶液を調製することができ、ヘモグロビン測定システムの精度管理を確実に行うことができるとともに、キャリブレータの保存が可能となったことにより、そのコストを低減することができ、キャリブレータやコントロールの取扱性を高めることができた。
同様に、ｐＨ５．０〜８．０で緩衝能を有する緩衝剤と、上記特定の保存剤とを含むため、従来より安定なヘモグロビン溶液を容易に提供することができ、ヘモグロビン測定システムの精度管理が容易となり、そのコストを低減することができ、さらにキャリブレータ及びコントロールの取扱性を高めることができる。本発明に係るヘモグロビン標準試料溶液は、本発明に係るヘモグロビン溶液は、保存に際してのヘモグロビンの変性が行い難く、従って、ヘモグロビン測定システムの精度管理を確実に行うことができ、かつそのコストを低減することができ、キャリブレータやコントロールの取扱性を高めることができる。
【００３５】
本発明に係るヘモグロビン溶液の調製方法では、本発明に係るヘモグロビン溶液により乾燥血液を溶解してヘモグロビン溶液を得た後、前記ヘモグロビン溶液を希釈することにより希釈されたヘモグロビン溶液を調製することができるため、本発明に従って、測定システムの精度管理コストを低減することができ、かつキャリブレータやコントロールの取扱性を高めることができる。
本発明に係るヘモグロビン類の測定方法では、上記のように本発明に従って得られる安定なヘモグロビン標準試料溶液を用いてＨＰＬＣにより行われるため、ヘモグロビン測定システムの精度管理コストの低減及びヘモグロビン測定精度を高めることができる。