(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式Ｉで表わされ、光学活性のアミノ酸が存在する場合には、そのＤ型およびＬ型の両方を包含するビオチン化合物またはその塩：
【化１】
0004127325.tif 000154
式中、
Ｑは、存在していないか、あるいは−ＮＨ−（ＣＨ2）n−ＣＯ−であり、
Ｒ1は、シクロ−（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｚ）であり、ここでＺは側鎖でＱに結合しているか、またはＱが存在していない場合には、ビオチンに結合しており、
Ｚは、Ｍ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｍ、Ｄ−Ｔｒｐ−Ｍ、Ｄ−Ｔｙｒ−Ｍ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｔｒｐ−Ｄ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｏｒｎ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄａｂ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄａｐ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｏｒｎ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｄａｂ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｄａｐ、Ｄ−Ｐｈｅ−４−アミノメチル−Ｐｈｅ、Ｄ−Ｐｈｅ−４−アミノメチル−Ｄ−Ｐｈｅ、Ｄ−Ｔｒｐ−４−アミノメチル−Ｐｈｅ、Ｄ−Ｔｒｐ−４−アミノメチル−Ｄ−Ｐｈｅ  Ｄ−Ｔｙｒ−４−アミノメチル−Ｐｈｅ、Ｄ−Ｔｙｒ−４−アミノメチル−Ｄ−Ｐｈｅ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ａｓｐ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｓｐ、Ｄ−Ｔｒｐ−Ａｓｐ、Ｄ−Ｔｒｐ−Ｄ−Ａｓｐ、Ｄ−Ｔｙｒ−Ａｓｐ、Ｄ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｓｐ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｃｙｓ、Ｄ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓ、Ｄ−Ｔｒｐ−Ｄ−Ｃｙｓ、Ｄ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ、Ｄ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｃｙｓ、Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｙｓ、Ｔｒｐ−Ｄ−Ｌｙｓ、Ｔｙｒ−Ｄ−Ｌｙｓ、Ｐｈｅ−Ｏｒｎ、Ｐｈｅ−Ｄａｂ、Ｐｈｅ−Ｄａｐ、Ｔｒｐ−Ｏｒｎ、Ｔｒｐ−Ｄａｂ、Ｔｒｐ−Ｄａｐ、Ｔｙｒ−Ｏｒｎ、Ｔｙｒ−Ｄａｂ、Ｔｙｒ−Ｄａｐ、Ｐｈｅ−４−アミノメチル−Ｄ−Ｐｈｅ、Ｔｒｐ−４−アミノメチル−Ｄ−Ｐｈｅ、Ｔｙｒ−４−アミノメチル−Ｄ−Ｐｈｅ、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｓｐ、Ｔｒｐ−Ｄ−Ａｓｐ、Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｓｐ、Ｐｈｅ−Ｄ−Ｃｙｓ、Ｔｒｐ−Ｄ−Ｃｙｓ、Ｔｙｒ−Ｄ−Ｃｙｓ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｍ−Ｇｌｙ、Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ、Ｄ−Ｔｒｐ−Ｍ−Ｇｌｙ、Ｄ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ、Ｄ−Ｔｙｒ−Ｍ−Ｇｌｙ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｔｒｐ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｔｙｒ−Ａｌａ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ、またはＭ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒであり、ここでＭは、Ｄａｐ、Ｓｅｒ、Ｃｙｓ、Ａｓｐ、Ｄ−Ａｓｐ、Ｄａｂ、ホモセリン、ホモシステイン、Ｇｌｕ、Ｄ−Ｇｌｕ、Ｔｈｒ、Ｏｒｎ、Ｌｙｓ、Ｄ−Ｌｙｓ、４−アミノメチル−Ｐｈｅまたは４−アミノメチル−Ｄ−Ｐｈｅである。
【請求項２】
Ｚが、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｔｒｐ−Ｄ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｏｒｎ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄａｂ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄａｐ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｏｒｎ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｄａｂ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｄａｐ、Ｄ−Ｐｈｅ−４−アミノメチル−Ｐｈｅ、Ｄ−Ｐｈｅ−４−アミノメチル−Ｄ−Ｐｈｅ、Ｄ−Ｔｒｐ−４−アミノメチル−Ｐｈｅ、Ｄ−Ｔｒｐ−４−アミノメチル−Ｄ−Ｐｈｅ  Ｄ−Ｔｙｒ−４−アミノメチル−Ｐｈｅ、Ｄ−Ｔｙｒ−４−アミノメチル−Ｄ−Ｐｈｅ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ａｓｐ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｓｐ、Ｄ−Ｔｒｐ−Ａｓｐ、Ｄ−Ｔｒｐ−Ｄ−Ａｓｐ、Ｄ−Ｔｙｒ−Ａｓｐ、Ｄ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｓｐ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｃｙｓ、Ｄ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓ、Ｄ−Ｔｒｐ−Ｄ−Ｃｙｓ、Ｄ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ、Ｄ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｃｙｓ、Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｙｓ、Ｔｒｐ−Ｄ−Ｌｙｓ、Ｔｙｒ−Ｄ−Ｌｙｓ、Ｐｈｅ−Ｏｒｎ、Ｐｈｅ−Ｄａｂ、Ｐｈｅ−Ｄａｐ、Ｔｒｐ−Ｏｒｎ、Ｔｒｐ−Ｄａｂ、Ｔｒｐ−Ｄａｐ、Ｔｙｒ−Ｏｒｎ、Ｔｙｒ−Ｄａｂ、Ｔｙｒ−Ｄａｐ、Ｐｈｅ−４−アミノメチル−Ｄ−Ｐｈｅ、Ｔｒｐ−４−アミノメチル−Ｄ−Ｐｈｅ、Ｔｙｒ−４−アミノメチル−Ｄ−Ｐｈｅ、Ｐｈｅ−Ｄ−Ａｓｐ、Ｔｒｐ−Ｄ−Ａｓｐ、Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｓｐ、Ｐｈｅ−Ｄ−Ｃｙｓ、Ｔｒｐ−Ｄ−Ｃｙｓ、Ｔｙｒ−Ｄ−Ｃｙｓ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ、Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ、Ｄ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｔｒｐ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｔｙｒ−Ａｌａ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ、またはＤ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓである、請求項１に記載のビオチン化合物またはその塩。
【請求項３】
請求項１に記載の下記式Ｉで表わされるビオチン化合物またはこの化合物の生理学的に許容される塩：
【化２】
0004127325.tif 000155
ａ）式中、
Ｑは存在しておらず、そして
Ｒ1は、シクロ−（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ）である；
ｂ）式中、
Ｑは−ＮＨ−（ＣＨ2）5−ＣＯであり、そして
Ｒ1は、シクロ−（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ）である；
ｃ）式中、
Ｑは−ＮＨ−（ＣＨ2）5−ＣＯであり、そして
Ｒ1は、シクロ−（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙである；
ｄ）式中、
Ｑは−ＮＨ−（ＣＨ2）5−ＣＯであり、そして
Ｒ1は、シクロ−（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｌｙｓである；
ｅ）式中、
Ｑは−ＮＨ−（ＣＨ2）5−ＣＯであり、そして
Ｒ1は、シクロ−（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ）である；
ｆ）式中、
Ｑは−ＮＨ−（ＣＨ2）5−ＣＯであり、そして
Ｒ1は、シクロ−（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ）である。
【請求項４】
請求項１に記載の式Ｉで表わされる化合物またはその塩の製造方法であって、
（ａ）式ＩＩ：
Ｈ−Ｑ−Ｒ1                   ＩＩ
式中、ＱおよびＲ1は請求項１に記載の意味を有する、
で表わされる化合物を、アシル化反応において、式ＩＩＩ：
【化３】
0004127325.tif 000156
式中、Ｌは、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉまたは遊離のあるいは反応的に官能性に修飾されているＯＨ基である、
で表わされる化合物と反応させる、あるいは
（ｂ）式ＩＶ：
Ｈ−Ｒ1                      ＩＶ
式中、Ｒ1は請求項１に記載の意味を有する、
で表される化合物を、アシル化反応において、式Ｖ：
【化４】
0004127325.tif 000157
式中、Ｑは請求項１に記載の意味を有し、そして
Ｌは、Ｈ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉまたは遊離のあるいは反応的に官能性に修飾されているＯＨ基である、
で表わされる化合物と反応させる、あるいは
（ｃ）これらの化合物を、それらの官能性誘導体の１種から加溶媒分解剤または水素添加分解剤で処理することによって遊離させる、および／または
式Ｉで表わされる塩基化合物または酸化合物を、酸または塩基で処理することによって、その塩の１種に変換する、
ことを特徴とする製造方法。
【請求項５】
請求項１に記載の式Ｉで表わされる化合物の、アフィニティクロマトグラフィによるインテグリン類の精製への使用。
【請求項６】
請求項１に記載の式Ｉで表わされる化合物の、ＥＬＩＳＡ式分析法およびＦＡＣＳ分析法における抗−ビオチン抗体反応用診断マーカーとしての使用。
【請求項７】
リガンド−レセプター相互反応の強度測定のための強制フィールド顕微鏡分析法における請求項１に記載の式Ｉで表わされる化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、新規なビオチン化合物およびそれらの塩、これらの化合物の製造方法、これらの化合物を含有する医薬製剤、ならびにその医薬を製造する方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
ビオチニル化ペプチドの類似化合物は、例えばWO 9415956（ビオチニル化内皮レセプター拮抗体）に、WO 9413313（ビオチニル化ＬＨＲＨ拮抗体）に、またはWO 9418325（ビオチニル化壊死因子）に記載されている。
精製可能性を改良する目的で、樹脂上における固相合成中にペプチドをビオチニル化(biotinylation)することは、T.J.LoblらによりAnal.Biochem.170,502(1988)に記載されている。環状および線状のペプチドである類似化合物は、DE 43 10 643、DE 43 36 758、EP 0 406 428およびWO 89/05150に記載されている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の課題は、有用な性質を有する新規化合物、特に医薬の製造に使用することができる新規化合物を提供することにある。
また本発明の課題は、インテグリン抑制薬として作用し、病的脈管形成性障害、血栓症、心筋梗塞、冠状部心疾患(coronary heart diseases)、動脈硬化症、腫瘍、骨粗鬆症、炎症および感染症を制御するために使用することができる医薬を提供することにある。
本発明の課題はまた、急性腎不全および傷癒合の処置に使用することができる医薬を提供することにある。
さらにまた本発明の課題は、防腐薬として作用する医薬を提供することにある。  さらにまた本発明の課題は、血管系における血栓のインビボ検出および位置決定に診断助剤として使用することができる診断剤を提供することにある。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
本発明による下記式Ｉで表わされ、光学活性のアミノ酸およびアミノ酸誘導体が存在する場合には、そのＤ型およびＬ型の両方を包含する新規ビオチン化合物およびそれらの生理学的に許容される塩が上記課題を解消することが見出された：
【化７】
0004127325.tif 000002
【０００５】
式中、
Ｑは存在していないか、あるいは−ＮＨ−（ＣＨ2）n−ＣＯ−または−ＮＨ−（ＣＨ2）n−ＮＨ−であり、
Ｒ1は、Ｘ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｙ、Ａ−Ｃｙｓ（Ｒ2）−Ｂ−Ｕまたはシクロ−（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｚ）であり、ここでＺは側鎖でＱに結合しているか、またはＱが存在していない場合には、Ｚはビオチンに結合しており、ＸおよびＹは、それぞれ相互に独立して、アミノ酸残基またはジ−、トリ−、テトラ−またはペンタ−ペプチド残基であり、ここで上記アミノ酸は、それぞれ相互に独立して、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ａｒｇ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、４−Ｈａｌ−Ｐｈｅ、Ｈｉｓ、ｈｏｍｏ−Ｐｈｅ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｎｌｅ、Ｐｈｅ、Ｐｈｇ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、ＴｙｒまたはＶａｌからなる群から選択され、そして上記アミノ酸はまた、誘導体化されていてもよく、
【０００６】
Ａは、存在していないか、またはＡｓｐであるか、あるいはまたＡは、下記の群から選択されるペプチド断片であり：
【化８】
0004127325.tif 000003
0004127325.tif 000004
【０００７】
Ｂは、存在していないか、またはＯＨ、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｏｒｎ、Ｐｈｅ、４−Ｈａｌ−Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｖａｌまたは上記アミノ酸残基のＮ−メチル化誘導体であるか、あるいはまたＢは、下記の群から選択されるペプチド断片であり：
【化９】
0004127325.tif 000005
ただしＲ1がＡ−Ｃｙｓ（Ｒ2）−Ｂ−Ｕである場合には、基ＡまたはＢの一方のみが存在していないことができ、
【０００８】
Ｒ2はＨであるか、またはＣ原子１〜６個を有するアルキル、Ｔｒｔ、ＤｐｍまたはＢｚｌであり、
ＵはＯＨ、ＯＲ9、ＮＨ2、ＮＨＲ9またはＮ（Ｒ9）2であり、
Ｚは、それぞれ相互に独立して、アミノ酸残基またはジ−、トリ−、テトラ−またはペンタ−ペプチド残基であり、ここでアミノ酸は、それぞれ相互に独立して、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ａｒｇ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、ＶａｌまたはＭからなる群から選択され、そして上記アミノ酸はまた、誘導体化されていてもよく、およびまた上記アミノ酸残基は、Ｍが常時、存在しているものとして、α−アミノ基およびα−カルボキシル基を介してペプチド様相で一緒に結合していてもよく、
【０００９】
Ｍは、ＮＨ（Ｒ8）−ＣＨ（Ｒ3）−ＣＯＯＨであり、
Ｒ3は、−Ｒ5−Ｒ4、−Ｒ6−Ｒ4、Ｒ7−Ｒ4であり、
Ｒ4は、ＯＨ、ＮＨ2、ＳＨまたはＣＯＯＨであり、
Ｒ5は、Ｃ原子１〜６個を有するアルキレンであり、
Ｒ6は、Ｃ原子７〜１４個を有するアルキレンフェニルであり、
Ｒ7は、Ｃ原子８〜１５個を有するアルキレンフェニルアルキレンであり、
Ｒ8は、Ｈであるか、またはＣ原子１〜６個を有するアルキルまたはＣ原子７〜１２個を有するアルキレンフェニルであり、
Ｒ9は、Ｃ原子１〜６個を有するアルキルであり、
Ｈａｌは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩであり、そして
ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０である。
【００１０】
本発明による式Ｉで表わされる化合物およびそれらの塩は、良好な寛容性を有するとともに、非常に価値ある薬理学的性質を有することが見出された。
特に、これらの化合物はインテグリン抑制体として作用する。これらの化合物は特に、αV、β3またはβ5インテグリンレセプターとリガンドとの相互反応を抑制し、例えばβ3インテグリンレセプターに対するフィブリノーゲンの結合を抑制する。これらの化合物は、インテグリンαVβ3、αVβ5、αIIbβ3およびαVβ1、αVβ6およびαVβ8の場合に特別の活性を示す。この効果は、例えばJ.W.Smith等によりJ.Biol.Chem.265,12267〜12271(1990)に記載の方法によって検出することができる。
脈管系インテグリンと細胞外マトリックスタンパク質との間の相互反応に対する脈管形成開始の依存性は、P.C.Brooks、R.A.ClarkおよびD.A.ChereshによるScience,264,569〜571(1994)に記載されている。
【００１１】
この相互反応の抑制可能性および従って環状ペプチドによる脈管形成性血管細胞のアポプトシス(apoptosis)［プログラムされた細胞死(programmed cell death)］の抑制可能性は、P.C.Brooks、A.M.Montgomery、M.Rosenfeld、R.A.Reisfeld、T.-Hu、G.KlierおよびD.A.ChereshによるCell,79,1157〜1164(1994)に記載されている。
インテグリンレセプターとリガンドとの相互反応、例えばフィブリノーゲンレセプター（糖タンパク質ＩＩｂ／ＩＩＩａ）に対するフィブリノーゲンの相互反応を阻止する式Ｉで表わされる化合物は、ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ拮抗薬として、転移による腫瘍細胞の拡散を防止する。この作用は、下記の観察によって証明される：
局所腫瘍から血管系への腫瘍細胞の転移は、腫瘍細胞と血小板との相互反応による微小集合体［微小血栓（microthrombi）］の形成により生じる。腫瘍細胞は、この微小集合体内での防護によって遮蔽され、免疫系細胞によって認識されない。
【００１２】
この微小集合体は、血管壁に付着することができるようになり、この付着が腫瘍細胞の組織への浸透をさらに助長する。微小血栓の形成は、活性化された血小板におけるフィブリノーゲンレセプターへのフィブリノーゲン結合によって媒介されるから、ＧＰＩＩａ／ＩＩＩｂ拮抗体は有効な転移抑制薬と見做すことができる。
従って、式Ｉで表わされる化合物は、ヒトおよび動物の医療において、医薬活性物質として使用することができ、特に血栓症、心筋梗塞、動脈硬化症、炎症、卒中、狭心症、腫瘍症、骨溶解性疾患（例えば骨粗鬆症）、病的脈管形成性疾患（例えば炎症）、眼疾患、糖尿病性網膜炎、黄斑変性症、近視、眼ヒストプラスマ症、リウマチ性関節炎、骨関節炎、ルベオーシス型緑内障、潰瘍性大腸炎、クローン病、アテローム硬化症、乾癬症および脈管形成後の再発性狭窄症、ウイルス感染、細菌感染、カビ感染の予防および（または）処置に、およびまた急性腎不全の処置および癒合プロセスを支持する傷癒合に、医薬活性物質として使用することができる。
【００１３】
式Ｉで表わされる化合物は、生体組織、移植物、カテーテルまたは心臓ペースメーカーが挿入される手術における抗菌活性物質として使用することができる。この場合に、これらの化合物は防腐薬として作用する。この抗微生物活性の効能は、P.Valentin-Weigund等によりInfection and Immunity,2851〜2855(1988)に記載された方法によって証明することができる。
式Ｉで表わされる化合物は、フィブリノーゲン結合の抑制体であり、従って血小板におけるフィブリノーゲンレセプターのリガンドの抑制体であることから、これらの化合物は血管系における血栓のインビボ検出および位置決定に、診断助剤として使用することができる。これは、そのビオチニル基が紫外線検出可能な基であることによる。
【００１４】
式Ｉで表わされる化合物はまた、フィブリノーゲン結合抑制体として、フィブリノーゲンレセプターの細胞内シグナルメカニズムまたは活性化の種々の段階における血小板代謝の究明に有効な手段として使用することもできる。この「ビオチン標識」の検出可能単位は、そのレセプターに結合した後の上記メカニズムの究明を可能にする。
【００１５】
本明細書全体をとおして使用されているアミノ酸残基の略語は、下記アミノ酸の基を表わすものとする：
Ａｂｕ              ４−アミノ酪酸
Ａｈａ              ６−アミノヘキサン酸、６−アミノカプロン酸
Ａｌａ              アラニン
Ａｓｎ              アスパラギン
Ａｓｐ              アスパラギン酸
Ａｒｇ              アルギニン
Ｃｙｓ              システイン
Ｄａｂ              ２，４−ジアミノ酪酸
Ｄａｐ              ２，３−ジアミノプロピオン酸
Ｇｌｎ              グルタミン
Ｇｌｐ              ピログルタミン酸
【００１６】
Ｇｌｕ              グルタミン酸
Ｇｌｙ              グリシン
Ｈｉｓ              ヒスチジン
ｈｏｍｏ−Ｐｈｅ    ホモ−フェニルアラニン
Ｉｌｅ              イソロイシン
Ｌｅｕ              ロイシン
Ｌｙｓ              リジン
Ｍｅｔｈ            メチオニン
Ｎｌｅ              ノルロイシン
Ｏｒｎ              オルニチン
Ｐｈｅ              フェニルアラニン
Ｐｈｇ              フェニルグリシン
４−Ｈａｌ−Ｐｈｅ  ４−ハロ−フェニルアラニン
【００１７】
Ｐｒｏ              プロリン
Ｓｅｒ              セリン
Ｔｈｒ              スレオニン
Ｔｒｐ              トリプトファン
Ｔｙｒ              チロシン
Ｖａｌ              バリン
および
Ｂｉｔ
【化１０】
0004127325.tif 000006
【００１８】
さらにまた、下記の意味を有する略語を使用する：
ＢＯＣ              ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル
ＣＢＺ              ベンジルオキシカルボニル
ＤＣＣＩ            ジシクロヘキシルカルボジイミド
ＤＭＦ              ジメチルホルムアミド
Ｅｔ                エチル
Ｆｍｏｃ            ９−フルオレニルメトキシカルボニル
ＨＯＢｔ            １−ヒドロキシベンゾトリアゾール
Ｍｅ                メチル
ＭＢＨＡ            ４−メチルベンズヒドリルアミン
Ｍｔｒ              ４−メトキシ−２，３，６−トリメチルフェニルスルホニル
ＯＢｕｔ            ｔｅｒｔ−ブチルエステル
ＯＭｅ              メチルエステル
ＯＥｔ              エチルエステル
ＰＯＡ              フェノキシアセチル
ＴＦＡ              トリフルオロ酢酸
Ｔｒｔ              トリチル（トリフェニルメチル）
【００１９】
上記アミノ酸が数種のエナンチオマー形態で存在できる場合に、本明細書の全体をとおして、これらの全部の形態およびその混合物（例えば、ＤＬ形）がまた、例えば式Ｉで表わされる化合物の構成物質として包含される。さらにまた、これらのアミノ酸はそれ自体公知の適当な保護基を有することができ、これらもまた例えば式Ｉで表わされる化合物の構成物質として包含される。
本発明による化合物はまた、いわゆるプロドラッグ、すなわち例えばアルキル基またはアシル基、糖あるいはオリゴペプチドにより修飾されており、体内で急速に分解して、本発明による活性化合物を生成する式Ｉで表わされる化合物を包含する。
【００２０】
本発明はまた、請求項１に記載の式Ｉで表わされる化合物およびその塩の製造方法に関し、この方法は、
（ａ）式ＩＩ：
Ｈ−Ｑ−Ｒ1                   ＩＩ
式中、ＱおよびＲ1は請求項１に記載の意味を有する、
で表わされる化合物を、アシル化反応において、式ＩＩＩ：
【化１１】
0004127325.tif 000007
式中、Ｌは、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉまたは遊離のあるいは反応的に官能性に修飾されているＯＨ基である、
で表わされる化合物と反応させる、あるいは
【００２１】
（ｂ）式ＩＶ：
Ｈ−Ｒ1                       ＩＶ
式中、Ｒ1は請求項１に記載の意味を有する、
で表わされる化合物を、アシル化反応において、式Ｖ：
【化１２】
0004127325.tif 000008
式中、Ｑは請求項１に記載の意味を有し、そして
Ｌは、Ｈ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉまたは遊離のあるいは反応的に官能性に修飾されているＯＨ基である、
で表わされる化合物と反応させる、あるいは
【００２２】
（ｃ）これらの化合物を、それらの官能性誘導体の１種から加溶媒分解剤または水素添加分解剤で処理することによって遊離させる、および（または）
式Ｉで表わされる塩基化合物または酸化合物を、酸または塩基で処理することによって、その塩の１種に変換する、
ことを特徴とする方法である。
【００２３】
本明細書の全体をとおして、基Ｑ、Ｒ1およびＬは、別段の記載がないかぎり、式Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩについて示されている意味を有する。
前記各式において、アルキルは好ましくは、メチル、エチル、イソプロピルまたはｔｅｒｔ−ブチルである。
アルキレンは好ましくは、メチレン、エチレン、プロピレン、ブチレン、ペンチレンまたはヘキシレンである。
アルキレンフェニルは好ましくは、ベンジルまたはフェネチルである。
アルキレンフェニルアルキレンは好ましくは、４−メチレンベンジルまたは４−エチレンベンジルである。
【００２４】
基−Ｒ6−Ｒ4は好ましくは、２−、３−または４−ヒドロキシベンジル、２−、３−または４−アミノベンジル、２−、３−または４−メルカプトベンジル、２−、３−または４−カルボキシベンジルであり、さらにまた好ましくは、２−、３−または４−ヒドロキシフェネチル、２−、３−または４−アミノフェネチル、２−、３−または４−メルカプトフェネチルあるいは２−、３−または４−カルボキシフェネチルである。
Ｑは好ましくは、６−アミノヘキサン酸（６−アミノカプロン酸）であるか、あるいは存在していない。
Ｍは好ましくは、Ｄａｐ、Ｓｅｒ、Ｃｙｓ、Ａｓｐ、Ｄ−Ａｓｐ、Ｄａｂ、ホモセリン、ホモシステイン、Ｇｌｕ、Ｄ−Ｇｌｕ、Ｔｈｒ、Ｏｒｎ、Ｌｙｓ、Ｄ−Ｌｙｓ、４−アミノメチル−Ｐｈｅまたは４−アミノメチル−Ｄ−Ｐｈｅである。
【００２５】
Ｘは好ましくは、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ａｒｇ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、ＴｙｒまたはＶａｌであり、さらにまたＸは好ましくは、下記の基である：
【化１３】
0004127325.tif 000009
【００２６】
さらにまたＸは好ましくは、下記の基である：
【化１４】
0004127325.tif 000010
【００２７】
Ｙは好ましくは、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ａｒｇ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、ＴｙｒまたはＶａｌであり、さらにまたＹは好ましくは、下記の基である：
【化１５】
0004127325.tif 000011
0004127325.tif 000012
【００２８】
さらにまた、Ｙはまた、下記の基であることができる：
【化１６】
0004127325.tif 000013
【００２９】
Ｘ、ＹおよびＺにかかわる意味において前記されているアミノ酸およびアミノ酸残基はまた、誘導体化されていてもよく、Ｎ−メチル、Ｎ−エチル、Ｎ−プロピル、Ｎ−ベンジルまたは
【化１７】
0004127325.tif 000014
さらにまた、ＡｓｐおよびＧｌｕの誘導体、特に側鎖カルボキシル基のメチル、エチル、プロピル、ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ネオペンチルまたはベンジルエステルは好ましく、さらにまたその−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ2基に置換基としてアセチル、ベンゾイル、メトキシカルボニルまたはエトキシカルボニル基を有していてもよいＡｒｇの誘導体が好ましい。
さらにまた、ＸおよびＹにかかわる意味において前記されているアミノ酸およびアミノ酸残基はまた、それ自体公知の適当な保護基を備えていてもよい。
【００３０】
Ｚは好ましくは、Ｍであり、さらにまた好ましくは、下記の基である：
【化１８】
0004127325.tif 000015
【００３１】
式Ｉで表わされる化合物は、１個または２個以上のキラル中心を有することができ、従って種々の立体異性体の形態で存在することができる。式Ｉはこれら全部の形態を包含する。
従って、本発明は特に、式Ｉにおいて、その分子中に存在する前記基の少なくとも１個が上記の好適な意味の１つを有する化合物に関する。これらの化合物の数種の好適群は、下記付属式Ｉａ〜Ｉｆで表わすことができる。これらの式Ｉａ〜Ｉｆは、式Ｉに対応し、下記に定義されていない基は式Ｉの場合について上記した意味を有する：
Ｉａにおいて、Ｑは存在しておらず、そしてＲ1はＸ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｙである；
Ｉｂにおいて、Ｑは−ＮＨ−（ＣＨ2）5−ＣＯ−であり、そしてＲ1はＸ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｙである；
【００３２】
Ｉｃにおいて、Ｑは−ＮＨ−（ＣＨ2）5−ＣＯ−であり、そしてＲ1はシクロ−（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｚ）である；
Ｉｄにおいて、Ｑは−ＮＨ−（ＣＨ2）5−ＣＯ−であり、そしてＲ1はシクロ−（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｍ）である；
Ｉｅにおいて、Ｑは−ＮＨ−（ＣＨ2）5−ＣＯ−であり、そしてＲ1はＡ−Ｃｙｓ（Ｒ2）−Ｂである；そして
Ｉｆにおいて、Ｑは−ＮＨ−（ＣＨ2）n−ＣＯ−であり、Ｒ1はＸ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｙであり、そしてｎは１、２、３、４、５または６である。
【００３３】
式Ｉで表わされる化合物およびまたこれらの化合物を製造するための出発物質はまた、刊行物（例えば、Houben−WeylによるMethoden der Organischen Chemie［有機化学の方法］、Georg−Thieme出版社、Stuttgart ）に記載の方法などのそれ自体公知の方法により、詳細には当該反応に適する、公知の反応条件の下に製造される。さらにまた、それ自体公知であるが、ここでは詳細に説明されていない変法を使用することもできる。
所望により、出発物質はまた、これらを反応混合物から分離することなく、直ちにさらに式Ｉで表わされる化合物に変換するような方法で、その場で生成させることもできる。
【００３４】
式Ｉで表わされる化合物は好ましくは、式ＩＩで表わされる化合物と式ＩＩＩで表わされる化合物との反応により得ることができる。
式ＩＩで表わされる化合物および式ＩＩＩで表わされる化合物は、一般に公知である。これらの化合物が未知である場合には、これらはそれ自体公知の方法によって製造することができる。
式ＩＩＩで表わされる化合物中に存在する基−ＣＯ−Ｌは、予備活性化されているカルボン酸、好ましくはカルボニルハライド、対称または混合無水物または活性エステルである。典型的アシル化反応でカルボキシル基を活性化させる、この種の基は、刊行物（例えば、Houben−WeylによるMethoden der Organischen Chemie、Georg −Thieme出版社、Stuttgart ）に記載されている。活性化エステルは、例えばＨＯＢｔまたはＮ−ヒドロキシスクシンイミドの添加によって、その場で生成させると好ましい。Ｌは好ましくは、Ｈ、Ｃｌ、Ｂｒまたは−ＯＮ−スクシンイミドである。
【００３５】
この反応は一般に、酸結合剤、好ましくはトリエチルアミン、ジメチルアニリン、ピリジンまたはキノリンなどの有機塩基、あるいは過剰量の式ＩＩＩで表わされるカルボキシル成分の存在下に、不活性溶媒中で行う。アルカリ金属またはアルカリ土類金属の水酸化物、炭酸塩または重炭酸塩、あるいはまたアルカリ金属またはアルカリ土類金属の、好ましくはカリウム、ナトリウム、カルシウムまたはセシウムの弱酸の別種の塩を添加すると有利であることがある。この反応時間は使用される条件に依存し、数分〜１４日間であり、この反応温度は、約−３０゜〜１４０゜、通常−１０゜〜９０゜、特に約０゜〜約７０゜である。
【００３６】
適当な不活性溶媒の例には、ヘキサン、石油エーテル、ベンゼン、トルエンまたはキシレンなどの炭化水素類；トリクロロエチレン、１，２−ジクロロエタン、四塩化炭素、クロロホルムまたはジクロロメタンなどの塩素化炭化水素類；メタノール、エタノール、イソプロパノール、ｎ−プロパノール、ｎ−ブタノールまたはｔｅｒｔ−ブタノールなどのアルコール類；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）またはジオキサンなどのエーテル類；エチレングリコールモノメチルエーテルまたはエチレングリコールモノエチルエーテル（メチルグリコールまたはエチルグリコール）あるいはエチレングリコールジメチルエーテル（ジグリム）などのグリコールエーテル類；アセトンまたはブタノンなどのケトン類；アセトアミド、ジメチルアセトアミドまたはジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）などのアミド類；アセトニトリルなどのニトリル類；ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）などのスルホキシド類；二硫化炭素；ギ酸または酢酸などのカルボン酸類；ニトロメタンまたはニトロベンゼンなどのニトロ化合物；酢酸エチルなどのエステル類；水；あるいは前記溶媒の混合物がある。
【００３７】
式Ｉで表わされる化合物はまた、式ＩＶで表わされる化合物と式Ｖで表わされる化合物との反応によって得ることもできる。式ＩＶおよび式Ｖで表わされる出発化合物は一般に公知である。これらの化合物が未知である場合には、これらはそれ自体公知の方法によって製造することができる。
式Ｖで表わされる化合物中に存在する基−ＣＯ−Ｌは、予備活性化されたカルボン酸、好ましくはカルボニルハライド、対称または混合無水物または活性エステルである。典型的アシル化反応でカルボキシル基を活性化させる、この種の基は、刊行物（例えば、Houben−WeylによるMethoden der Organischen Chemie、Georg −Thieme出版社、Stuttgart ）に記載されている。Ｌは好ましくは、Ｃｌ、Ｂｒまたは−ＯＮ−スクシンイミドである。
【００３８】
式ＩＶで表わされる化合物と式Ｖで表わされる化合物との反応は、反応時間、温度および溶媒に関して、式ＩＩで表わされる化合物と式ＩＩＩで表わされる化合物との反応について記載した条件と同一の条件の下に行う。
式Ｉにおいて、Ｒ1がＸ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−ＹまたはＡ−Ｃｙｓ（Ｒ2）−Ｂである線状開環鎖状化合物はさらにまた、固相合成の最終段階において、最終反応成分として、直鎖状Ｎ−末端保護アミノ酸と同一のサイクルでビオチンとカプリングさせ、次いでこのビオチン−ペプチドを標準条件下に樹脂から分離することによって得ることができる。
この固相合成、分離および精製は、A.JonczykおよびJ.MeienhoferによりPeptides,Proc.8th,Am.Pept.Symp.,V.HrubyおよびD.H.Rich編集、Pierce Comp.III,73〜77頁(1983)に記載のとおりにして、あるいはAngew.Chem.,104,375〜391(1992)に記載の技術と同様の方法で行う。
【００３９】
式ＩＩおよび式ＩＶで表わされる線状開環鎖状化合物はさらにまた、例えば前記の標準的学術書および特許出願書に記載の慣用のアミノ酸およびペプチド合成方法によって、およびまた例えばMerrifieldの固相合成法［B.F.GysinおよびR.B.MerrifieldによるJ.Am.Chem.Soc.,94,3102以降(1972)］によって、製造することもできる。
式ＩＩおよび式ＩＶにおいて、Ｒ1がシクロ−（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｚ）である環状化合物は、例えばDE 43 10 643またはHouben-Weylによる前記刊行物、１５／ＩＩ巻、１〜８０６頁（１９７４）に記載のとおりにして、対応する線状化合物を環化させることによって製造することができる。
【００４０】
式Ｉで表わされる化合物はさらにまた、これらの化合物を加溶媒分解、特に加水分解により、または水素添加分解により、それらの官能性誘導体から遊離させることによって得ることもできる。
加溶媒分解あるいは水素添加分解に好適な出発物質は、１個または２個以上の遊離のアミノ基および（または）ヒドロキシル基の代わりに、対応する保護アミノ基および（または）ヒドロキシル基を含有する化合物、好ましくはＮ原子に結合しているＨ原子の代わりにアミノ保護基を有する化合物、例えばＮＨ2基の代わりにＮＨＲ´基（式中Ｒ´はアミノ保護基、例えばＢＯＣまたはＣＢＺである）を有する以外は式Ｉに対応する化合物である。
もう１種の好適な出発物質は、そのヒドロキシル基のＨ原子の代わりにヒドロキシル保護基を有する化合物、例えばヒドロキシフェニル基の代わりにＲ´´Ｏ−フェニル基（式中Ｒ´´はヒドロキシル保護基である）を有する以外は式Ｉに対応する化合物である。
【００４１】
出発物質の分子中には、同一または相違する数個の保護されているアミノ基および（または）ヒドロキシル基が存在することがある。存在する保護基が相互に相違している場合には、これらの基は、かなりの場合に、選択的に分離することができる。
「アミノ保護基」の用語は周知であり、アミノ基を化学反応から保護（ブロック）するのに適し、かつまた所望の化学反応が分子中の別の部位で行われた後に、容易に分離することができる基に関する用語である。この種の代表的基には、特に未置換の、または置換基を有する、アシル基、アリール基、アラルコキシメチル基あるいはアラルキル基がある。これらのアミノ保護基は、所望の反応（または一連の反応）の後に分離されるから、それらの性質および大きさに別段の制限はない。しかしながら、Ｃ原子１〜２０個、特に１〜８個を有する基が好ましい。本発明の方法に係わり、「アシル基」の用語は、最も広い意味で解釈されるべきである。「アシル基」の用語には、脂肪族、芳香族脂肪族、芳香族またはヘテロ環状のカルボン酸またはスルホン酸から誘導されるアシル基が包含され、およびまた特に、アルコキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、およびまた特にアラルコキシカルボニル基が包含される。
【００４２】
この種のアシル基の例には、アルカノイル、例えばアセチル、プロピオニル、ブチリル；アラルカノイル、例えばフェニルアセチル；アロイル、例えばベンゾイルまたはトルイル；アリールオキシアルカノイル、例えばＰＯＡ；アルコキシカルボニル、例えばメトキシカルボニル、エトキシカルボニル、２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル、ＢＯＣ、２−ヨウドエトキシカルボニル；アラルキルオキシカルボニル、例えばＣＢＺ（「カルボベンゾキシ」）、４−メトキシベンジルオキシカルボニル、ＦＭＯＣ；アリールスルホニル、例えばＭｔｒがある。好適アミノ保護基は、ＢＯＣおよびＭｔｒであり、およびまたＣＢＺ、Ｆｍｏｃ、ベンジルおよびアセチルも好適である。
【００４３】
「ヒドロキシル保護基」の用語は同様に、周知の用語であり、ヒドロキシル基を化学反応から保護するのに適し、かつまた所望の化学反応が分子中の別の部位で行われた後に、容易に分離することができる基に関する用語である。この種の代表的基には、前記の未置換の、または置換基を有する、アリール基、アラルキル基またはアシル基があり、およびまたアルキル基がある。このヒドロキシル保護基は、所望の反応または一連の反応が行われた後に再び分離されるから、これらのヒドロキシル保護基の性質および大きさに制限はない；Ｃ原子１〜２０個、特に１〜１０個を有する基が好ましい。ヒドロキシル保護基の例には、ベンジル、ｐ−ニトロベンゾイル、ｐ−トルエンスルホニル、ｔｅｒｔ−ブチルおよびアセチルが包含され、ベンジルおよびｔｅｒｔ−ブチルは特に好ましい。アスパラギン酸及びグルタミン酸におけるＣＯＯＨ基は、それらのｔｅｒｔ−ブチルエステルの形態（例えば、Ａｓｐ（ＯＢｕｔ））で保護すると好ましい。
【００４４】
使用されている保護基に依存して、式Ｉで表わされる化合物は、それらの官能性誘導体から、例えば強酸を使用することにより、好ましくはＴＦＡまたは過塩素酸を使用することにより、あるいはまたその他の強無機酸、例えば塩酸または硫酸、あるいはまた強有機カルボン酸、例えばトリクロロ酢酸、あるいはスルホン酸、例えばベンゼンスルホン酸またはｐ−トルエンスルホン酸を使用して、遊離させることができる。追加の不活性溶媒を存在させて行うこともできるが、これは常時必須ではない。
【００４５】
適当であり、好ましい不活性溶媒は、有機溶媒、例えば酢酸などのカルボン酸類、テトラヒドロフランまたはジオキサンなどのエーテル類、ＤＭＦなどのアミド類、ジクロロメタンなどのハロゲン化炭化水素類であり、およびまたメタノール、エタノールまたはイソプロパノールなどのアルコール類および水である。前記溶媒の混合物もまた適当である。ＴＦＡは、別種の溶媒を添加することなく、過剰量で好ましく使用され、また過塩素酸は、９：１の割合の酢酸と７０％過塩素酸との混合物の形態で使用すると好ましい。この分離に適する反応温度は、好ましくは約０°〜約５０゜、好ましくは１５〜３０゜（室温）である。
【００４６】
ＢＯＣ基、ＯＢｕｔ基およびＭｔｒ基は、好ましくは例えばジクロロメタン中のＴＦＡを用いて、あるいはジオキサン中の約３〜５Ｎ  ＨＣｌを用いて、１５〜３０゜において、分離することができ、またＦＭＯＣ基はジメチルアミン、ジエチルアミンあるいはピペリジンのＤＭＦ中ほぼ５〜５０％溶液を用いて、１５〜３０゜において分離することができる。
トリチル基は、アミノ酸類、ヒスチジン、アスパラギン、グルタミンおよびシステインの保護に使用される。この分離は、所望の最終生成物に応じて、ＴＦＡ／１０％チオフェノールにより行い、この場合には、前記アミノ酸の全部のトリチル基が分離され、およびまたＴＦＡ／アニソールまたはＴＦＡ／チオアニソールが使用される場合には、Ｈｉｓ、ＡｓｎおよびＧｌｎ上のトリチル基のみが分離され、他方Ｃｙｓ側鎖基上のトリチル基は残留する。
【００４７】
水素添加分解により分離することができる保護基（例えば、ＣＢＺまたはベンジル）は、例えば触媒（例えばパラジウム、有利にはカーボンなどの支持体上のパラジウムなどの貴金属触媒）の存在下に、水素で処理することによって分離することができる。この場合に適当な溶媒は、前記した溶媒であり、特別の例としては、メタノールまたはエタノールなどのアルコール類、あるいはＤＭＦなどのアミド類がある。一般に、この水素添加分解は、約０〜１００゜の温度および約１〜２００バールの圧力において、好ましくは２０〜３０゜および１〜１０バールにおいて行われる。ＣＢＺ基の水素添加分解は、例えばメタノール中で、５〜１０％Ｐｄ−Ｃ上において、あるいはメタノール／ＤＭＦ中でＰｄ−Ｃ上においてギ酸アンモニウム（水素の代わりに）を用いて２０〜３０゜で良好に達成される。
【００４８】
式Ｉで表わされる塩基化合物はまた、酸を用いて、例えばエタノールなどの不活性溶媒中で当量の塩基化合物と酸とを反応させ、次いで蒸発させることによって、対応する酸付加塩に変換することができる。この反応に特に適する酸は、生理学的に許容される塩を生成させる酸である。従って、無機酸、例えば硫酸、硝酸、ヒドロハロ酸、例えば塩酸または臭化水素酸、リン酸、例えばオルトリン酸、スルファミン酸、およびまた有機酸、特に脂肪族、脂環族、芳香族脂肪族、芳香族またはヘテロ環状の一塩基性または多塩基性カルボン酸、スルホン酸あるいは硫酸、例えばギ酸、酢酸、プロピオン酸、ピバリン酸、ジエチル酢酸、マロン酸、コハク酸、ピメリン酸、フマール酸、マレイン酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、クエン酸、グルコン酸、アスコルビン酸、ニコチン酸、イソニコチン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ナフタレンモノスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸およびラウリル硫酸を使用することができる。
【００４９】
生理学的に許容されない酸との塩、例えばピクリン酸塩は、式Ｉで表わされる化合物の分離および（または）精製に使用することができる。
他方、式Ｉで表わされる酸化合物は、塩基との反応によって、その生理学的に許容される金属塩あるいはアンモニウム塩の１種に変換することができる。この態様に特に適する塩は、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウムおよびアンモニウム塩であり、およびまた置換アンモニウム塩、例えばジメチル−、ジエチル−またはジイソプロピルアンモニウム塩、モノエタノール−、ジエタノール−またはジイソプロピルアンモニウム塩、シクロヘキシル、ジシクロヘキシルアンモニウム塩、ジベンジルエチレンジアンモニウム塩であり、さらにまた例えばアルギニンまたはリジンとの塩である。
【００５０】
本発明はさらにまた、式Ｉで表わされる化合物および（または）それらの生理学的に許容される塩の、特に非化学的手段による医薬製剤の製造における使用に関する。この目的には、これらの化合物は、少なくとも１種の固体、液体および（または）半液体のビヒクルまたは助剤物質とともに、所望により１種または２種以上の別の活性物質と組み合わせて、適当な剤型にすることができる。
本発明はさらにまた、少なくとも１種の式Ｉで表わされる化合物および（または）その生理学的に許容される塩の１種を含有する医薬製剤に関する。
これらの製剤は、ヒトまたは動物医療における医薬として使用することができる。
【００５１】
適当なビヒクルは、経腸（例えば経口）、非経口または局所投与に、あるいはまた吸入スプレイの形態での投与に適しており、かつまた本発明の新規化合物と反応しない、有機物質または無機物質、例えば水、植物油、ベンジルアルコール、アルキレングリコール、ポリエチレングリコール、グリセロールトリアセテート、ゼラチン、炭水化物（例えば乳糖またはデンプン）、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ペトロラタムがある。錠剤、丸剤、被覆錠剤、カプセル剤、粉末、顆粒、シロップ、溶液または滴剤は、特に経口投与に使用され、座薬は直腸投与に使用され、溶液、好ましくは油性または水性溶液およびまた懸濁液、エマルジョンまたはインプラントは非経口投与に使用され、そして軟膏、クリームまたは粉末は局所投与に使用される。本発明の新規化合物はまた、凍結乾燥させることができ、得られる凍結乾燥物は、例えば注射製剤の製造に使用することができる。
【００５２】
上記製剤は、殺菌することができ、そして（または）助剤物質、例えば滑剤、保存剤、安定剤および（または）湿潤剤、乳化剤、浸透圧に影響する塩類、緩衝物質、着色剤、風味付与剤および（または）数種の別の活性物質、例えば１種または２種以上のビタミン類を含有することができる。
吸入スプレイとしての投与に使用することができる噴霧液は、推進性気体または推進性気体混合物（例えば、ＣＯ2またはクロロフルオロ炭素）中に溶解または懸濁されている活性物質からなる。この場合に、活性物質は、微粉砕した形態で使用すると好ましく、１種または２種以上の追加の生理学的に寛容性の溶剤、例えばエタノールを存在させることができる。この吸入溶液は、慣用の吸入器を用いて投与することができる。
【００５３】
式Ｉで表わされる化合物およびそれらの生理学的に許容される塩は、インテグリン抑制薬として、病気の制御に使用することができ、特に病的脈管形成性障害、血栓症、心筋梗塞、冠状部心疾患、動脈硬化症、腫瘍、骨粗鬆症、炎症および感染症の制御に使用することができる。
この目的には、本発明による物質は一般に、市販されている別の公知ペプチド化合物と同様に、しかし特にUS-A-4 472 305に記載の化合物と同様に、投与することができ、好ましくは投与単位あたりで約０．０５〜５００ｍｇ、特に０．０５〜１００ｍｇの用量で投与することができる。一日薬用量は、好ましくは約０．０１〜２ｍｇ／体重ｋｇである。しかしながら、各患者に対する特定の薬用量は、広く種々の因子、例えば使用される特定の化合物の活性、年齢、体重、一般健康状態、性別、食事、投与の時期および経路、排泄速度、医薬物質の組み合わせおよび治療しようとする特定の疾患の重篤度に依存する。経口投与が好ましい。
【００５４】
式Ｉで表わされる新規化合物はまた、分析生物学および分子生物学の分野で使用することができる。これは、ビオチニル基の糖タンパク質アビジンと複合体を形成する能力の利用を包含する。
このビオチン−アビジン複合体の使用は、E.A.BayerおよびM.WilchekによるMethods of Biochemical Analysis,26,1〜45(1980)（文献：１）に記載されている。
式Ｉで表わされる新規化合物は、アフィニテイクロマトグラフイ用のカラムの調製におけるインテグリンリガンドとして使用することができ、これにより純粋なインテグリンを製造することができる。このアビジン−誘導体化支持材料、例えばセファロースと式Ｉで表わされる新規化合物との複合体は、例えば上記参考文献：１に記載の方法のようなそれ自体公知の方法によって生成させることができる。
【００５５】
この理由で、この方法のこれ以上の詳細は現時点で示さず、対応する刊行物、例えば文献：１を引用する。
適当なポリマー支持材料は、ペプチド化学で公知であって、好ましくは疎水性物性を有するポリマー固相であり、この例には架橋多糖類、例えばセルロース、セファロースまたはセファデックス（Sephadex；登録商品名）、アクリルアミド類、ポリエチレングリコールを基材とするポリマーまたはテンタキュラーポリマー（tentacular polymers；登録商品名）などがある。
式Ｉで表わされる新規化合物はまた、ＥＬＩＳＡ式検定法およびＦＡＣＳ［蛍光活性化セルソーター（Fluorescence Activated Cell Sorter）］分析法における抗ビオチン抗体反応用の診断マーカーとして使用することもできる。
【００５６】
このビオチン検出における抗ビオチン抗体の使用は、M.BergerによるBiochemistry,14,2338〜2342(1975)に記載されている。酵素免疫検定法（ＥＬＩＳＡ）におけるビオチンで誘導体化されている免疫グロブリンＩｇＧの使用は、U.Holmkov-Nielsen等によりJournal of Chromatography,297,225〜233(1984)に記載されている。
J.GaoおよびS.J.Shattilは、インテグリンαIIb βIII活性化を抑制する物質を検出するＥＬＩＳＡ試験を、J.Immunol.Methods,181,55〜64(1995)に開示している。この場合に、その検出にビオチニル化フィブリノーゲンが使用されている。
【００５７】
臨床細胞検査におけるフローサイトメトリイ(flow cytometry)は、G.SchmitzおよびG.RotheによりDG Klinische Chemie Mitteilungen,24(1993),No.1,1〜14頁に記載されている。
式Ｉで表わされる化合物はさらにまた、リガンド−レセプター相互反応の強度の測定に、強制フィールド顕微鏡分析法(force field microscopy)［原子力顕微鏡分析法(atomic force microscopy AFM)］で使用することができる。
リガンドは好ましくは、アビジンと式Ｉで表わされる新規化合物との複合体を意味する。
レセプターは好ましくは、インテグリンレセプターを意味する。
E.-L.Florin等は、アビジン官能性化強制フィールド顕微鏡とビオチニル化アガロースとの間の接着力の測定を、Science,264,415〜417(1994)に開示している。
本明細書全体をとおして、温度は全部、「℃」で示されている。
【００５８】
【実施例】
以下の例において、「慣用の仕上げ処理」の用語は、下記の意味を有するものとする：
必要に応じて、水を添加し、最終生成物の構造に依存して必要に応じて、この混合物のｐＨを２〜１０に調整し、酢酸エチルまたはジクロロメタンによる抽出を行い、この有機相を分離採取し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、次いで蒸発させ、次いでシリカゲル上でのクロマトグラフイおよび（または）結晶化による精製を行う。
Ｒｆ値はシリカゲル上での数値である；移動相：酢酸エチル／メタノール９：１。
【００５９】
ＲＴ＝下記システムのＨＰＬＣにおける保有時間（分）：
［Ａ］
カラム：    ヌクレオシル（Nucleosil）７Ｃ１８  ２５０×４ｍｍ
溶出剤Ａ：  水中０．１％ＴＦＡ
溶出剤Ｂ：  アセトニトリル中０．１％ＴＦＡ
流動速度：  １ｍｌ／分
勾配：      ２０〜５０％Ｂ／３０分
［Ｂ］
リクロソルブ（Lichrosorb）（登録商品名）RP Select B（７μｍ）２５０×４ｍｍカラムにおいて、１ｍｌ／分の速度で、０．３％ＴＦＡを用いる勾配０〜８０％の水中  ２−プロパノールにより５０分間。
【００６０】
0004127325.tif 000016
ＤＭＰＰ樹脂は、４−（２´，４´−ジメトキシフェニルヒドロキシメチル）フェノキシ樹脂を表わし、この樹脂は側鎖保護ペプチドの合成を可能にするスーパー酸−不安定樹脂（super acid−labile resin）である。
【００６１】
例１
Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（ＢＯＣ）−ＯＨ  ０．６ｇをジクロロメタン１００ｍｌに溶解し、ＤＭＰＰ樹脂１．２当量、ＨＯＢｔ１．４当量およびＤＣＣＩ  １．４当量を添加し、この混合物を室温で１２時間撹拌する。溶媒を分離すると、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（ＢＯＣ）−ＤＭＰＰ樹脂が得られる。ペプチド合成装置において、Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨとＨ−Ｌｙｓ（ＢＯＣ）−ＤＭＰＰ樹脂［これは、ピペリジン／ＤＭＦ（２０％）を用いてＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（ＢＯＣ）−ＤＭＰＰ樹脂から遊離される］とを、３倍過剰量の保護プロリンを使用することによって縮合させる。このカプリングはＤＣＣＩ／ＨＯＢｔ中で室温において行う。Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ（ＢＯＣ）−ＤＭＰＰ樹脂が得られる。
【００６２】
同様にして、引続いてＦｍｏｃ保護基の分離およびＦｍｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｕｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨおよびＢｉｔ−ＯＨとの順次カプリングを、各カプリングについて、下記反復反応条件を使用して行う：
ピペリジン／ＤＭＦ（２０％）によるα−アミノ基の分離
ジメチルアセトアミドによる洗浄
Ｆｍｏｃ−アミノ酸またはＢｉｔ−ＯＨとの反応。
これにより、Ｂｉｔ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｇｌｙ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）−Ｓｅｒ（Ｂｕｔ）−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ（ＢＯＣ）−ＤＭＰＰ樹脂が得られる。
【００６３】
この樹脂をＣＦ3ＳＯ3Ｈ／ＣＨ2Ｃｌ2／Ｈ2Ｏにより洗浄し、Ｂｉｔ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｇｌｙ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）−Ｓｅｒ（Ｂｕｔ）−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ（ＢＯＣ）−ＯＨを得る。
保護基をジオキサン中で２Ｎ  ＨＣｌにより分離させ、溶媒を除去し、この残留物をＴＦＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中に取り入れ、次いでＥｔ2Ｏにより沈殿させ、次いで引続いてＲＰ−ＨＰＬＣによる精製を行う。
Ｂｉｔ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−ＯＨ×２ＴＦＡが得られる；ＲＴ［Ｂ］＝１２．１４；ＦＡＢ：１０５６。
【００６４】
例２
例１と同様にして、ＤＭＰＰ樹脂に、
【化１９】
0004127325.tif 000017
を順次カプリングさせる。これにより、
【化２０】
0004127325.tif 000018
が得られる。
【００６５】
この樹脂からの分離、保護基の分離および精製の後に、
【化２１】
0004127325.tif 000019
が得られる；ＲＴ［Ｂ］＝２７．６；ＦＡＢ：１２７３。
【００６６】
同様に、ＤＭＰＰ樹脂との縮合により下記の化合物が得られる：
【化２２】
0004127325.tif 000020
を縮合させることにより、
【化２３】
0004127325.tif 000021
を得る；
【００６７】
【化２４】
0004127325.tif 000022
を縮合させることにより、
【化２５】
0004127325.tif 000023
を得る；
【００６８】
【化２６】
0004127325.tif 000024
を縮合させることにより、
【化２７】
0004127325.tif 000025
を得る；
【００６９】
【化２８】
0004127325.tif 000026
を縮合させることにより、
【化２９】
0004127325.tif 000027
を得る；
【００７０】
【化３０】
0004127325.tif 000028
を縮合させることにより、
【化３１】
0004127325.tif 000029
を得る；
【００７１】
【化３２】
0004127325.tif 000030
を縮合させることにより、
【化３３】
0004127325.tif 000031
を得る；
【００７２】
【化３４】
0004127325.tif 000032
を縮合させることにより、
【化３５】
0004127325.tif 000033
を得る；
【００７３】
【化３６】
0004127325.tif 000034
を縮合させることにより、
【化３７】
0004127325.tif 000035
を得る；
【００７４】
【化３８】
0004127325.tif 000036
を縮合させることにより、
【化３９】
0004127325.tif 000037
を得る；
【００７５】
【化４０】
0004127325.tif 000038
を縮合させることにより、
【化４１】
0004127325.tif 000039
を得る；
【００７６】
【化４２】
0004127325.tif 000040
を縮合させることにより、
ａ）保護基をＴＦＡおよび１０％チオフェノールを用いて分離した場合には、
【化４３】
0004127325.tif 000041
が得られ；
ｂ）保護基をＴＦＡおよび１０％チオアニソールを用いて分離した場合には、
【化４４】
0004127325.tif 000042
が得られる；
【００７７】
【化４５】
0004127325.tif 000043
を縮合させることにより、
ａ）保護基をＴＦＡおよび１０％チオフェノールを用いて分離した場合には、
【化４６】
0004127325.tif 000044
が得られ；
ｂ）保護基をＴＦＡおよび１０％チオアニソールを用いて分離した場合には、
【化４７】
0004127325.tif 000045
が得られる；
【００７８】
【化４８】
0004127325.tif 000046
を縮合させることにより、
ａ）保護基をＴＦＡおよび１０％チオフェノールを用いて分離した場合には、
【化４９】
0004127325.tif 000047
が得られ；
ｂ）保護基をＴＦＡおよび１０％チオアニソールを用いて分離した場合には、
【化５０】
0004127325.tif 000048
が得られる；
【００７９】
【化５１】
0004127325.tif 000049
を縮合させることにより、
ａ）保護基をＴＦＡおよび１０％チオフェノールを用いて分離した場合には、
【化５２】
0004127325.tif 000050
が得られ；
ｂ）保護基をＴＦＡおよび１０％チオアニソールを用いて分離した場合には、
【化５３】
0004127325.tif 000051
が得られる；
【００８０】
【化５４】
0004127325.tif 000052
を縮合させることにより、
ａ）保護基をＴＦＡおよび１０％チオフェノールを用いて分離した場合には、
【化５５】
0004127325.tif 000053
が得られ；
ｂ）保護基をＴＦＡおよび１０％チオアニソールを用いて分離した場合には、
【化５６】
0004127325.tif 000054
が得られる；
【００８１】
【化５７】
0004127325.tif 000055
を縮合させることにより、
【化５８】
0004127325.tif 000056
を得る；
【００８２】
【化５９】
0004127325.tif 000057
を縮合させることにより、
【化６０】
0004127325.tif 000058
を得る；
【００８３】
【化６１】
0004127325.tif 000059
0004127325.tif 000060
を縮合させることにより、
【化６２】
0004127325.tif 000061
を得る；
【００８４】
【化６３】
0004127325.tif 000062
を縮合させることにより、
【化６４】
0004127325.tif 000063
を得る；
【００８５】
【化６５】
0004127325.tif 000064
を縮合させることにより、
【化６６】
0004127325.tif 000065
を得る；
【００８６】
【化６７】
0004127325.tif 000066
を縮合させることにより、
【化６８】
0004127325.tif 000067
を得る；
【００８７】
【化６９】
0004127325.tif 000068
を縮合させることにより、
【化７０】
0004127325.tif 000069
を得る；
【００８８】
【化７１】
0004127325.tif 000070
を縮合させることにより、
【化７２】
0004127325.tif 000071
を得る；
【００８９】
【化７３】
0004127325.tif 000072
を縮合させることにより、
【化７４】
0004127325.tif 000073
を得る；
【００９０】
【化７５】
0004127325.tif 000074
を縮合させることにより、
【化７６】
0004127325.tif 000075
を得る；
【００９１】
【化７７】
0004127325.tif 000076
を縮合させることにより、
【化７８】
0004127325.tif 000077
を得る；
【００９２】
【化７９】
0004127325.tif 000078
を縮合させることにより、
【化８０】
0004127325.tif 000079
を得る；
【００９３】
例３
安価な化合物である、（＋）−ビオチニル−Ｎ−スクシンイミジルエステル１．７ｇおよびトリエチルアミン０．５ｇを、ジクロロメタン１００ｍｌ中のシクロ−（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ）３．０５ｇ［この化合物は、Ｈ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｇｌｙ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ（ＢＯＣ）−ＯＨをシクロ−（Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｇｌｙ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ（ＢＯＣ））に環化させ、次いで保護基を分離することによって得られる］の溶液中に添加する。この混合物を室温で５時間撹拌し、慣用の仕上げ処理に付し、
【化８１】
0004127325.tif 000080
【００９４】
例４
例３と同様にして、シクロ−（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ）３．０５ｇおよびＮ−スクシンイミジル  （＋）−ビオチニル−６−アミノカプロエート（「化合物Ａ」）２．３ｇ［この化合物は、安価で入手することができる］およびトリエチルアミン０．５ｇから、
【化８２】
0004127325.tif 000081
【００９５】
同様にして、「化合物Ａ」および下記の環状化合物：
【化８３】
0004127325.tif 000082
0004127325.tif 000083
【００９６】
から、下記の化合物を得る：
【化８４】
0004127325.tif 000084
0004127325.tif 000085
【００９７】
例５
５％ＮａＨＣＯ3水溶液４０ｍｌおよびＴＨＦ４０ｍｌ中のシクロ−（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ）３．０５ｇの溶液に、ＢＯＣ−ＡｈａＮ−スクシンイミジルエステル６ｇを添加する。４時間撹拌し、次いで慣用の仕上げ処理に付し、
シクロ−（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ（ＢＯＣ−Ａｈａ））を得る；ＲＴ［Ｃ］：２７．７；ＦＡＢ：８１７。
ＢＯＣ基をＨＣｌ／ジオキサン中で分離し、次いで慣用の仕上げ処理に付し、
【化８５】
0004127325.tif 000086
例１と同様にして、（＋）−ビオチニル−Ｎ−スクシンイミジルエステルとの引続く反応によって、
【化８６】
0004127325.tif 000087
【００９８】
例６
例４と同様にして、シクロ−（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ）［この化合物は、Ｈ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｇｌｙ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ（ＢＯＣ）−Ｇｌｙ−ＯＨをシクロ−（Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｇｌｙ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ（ＢＯＣ）−Ｇｌｙ）に環化させ、次いで保護基を分離することによって得られる］およびＮ−スクシンイミジル（＋）−ビオチニル−６−アミノカプロエートから、
【化８７】
0004127325.tif 000088
【００９９】
同様にして、シクロ−（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ）［この化合物は、Ｈ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｇｌｙ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ（ＢＯＣ）−ＯＨをシクロ−（Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｇｌｙ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ（ＢＯＣ））に環化させ、次いで保護基を分離することによって得られる］およびＮ−スクシンイミジル（＋）−ビオチニル−６−アミノカプロエートから、
【化８８】
0004127325.tif 000089
同様にして、シクロ−（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｎ−Ｍｅ−Ｌｙｓ）およびＮ−スクシンイミジル（＋）−ビオチニル−６−アミノカプロエートから、
【化８９】
0004127325.tif 000090
【０１００】
例７
例１と同様にして、ＨＯＢｔ  １．４当量およびＤＣＣＩ  １．４当量の添加の下に、ＭＢＨＡ樹脂に、
【化９０】
0004127325.tif 000091
を順次カプリングさせて、
【化９１】
0004127325.tif 000092
を得る。
この樹脂からＴＦＡにより分離し、ピペリジン／ＤＭＦにより保護基を分離し、次いで精製して、
【化９２】
0004127325.tif 000093
を得る。
【０１０１】
同様に、ＭＢＨＡ樹脂との縮合により下記の化合物が得られる：
【化９３】
0004127325.tif 000094
を縮合させることにより、
【化９４】
0004127325.tif 000095
を得る；
【０１０２】
【化９５】
0004127325.tif 000096
を縮合させることにより、
【化９６】
0004127325.tif 000097
を得る；
【０１０３】
【化９７】
0004127325.tif 000098
を縮合させることにより、
【化９８】
0004127325.tif 000099
を得る；
【０１０４】
【化９９】
0004127325.tif 000100
を縮合させることにより、
【化１００】
0004127325.tif 000101
を得る；
【０１０５】
【化１０１】
0004127325.tif 000102
を縮合させることにより、
【化１０２】
0004127325.tif 000103
を得る；
【０１０６】
【化１０３】
0004127325.tif 000104
を縮合させることにより、
【化１０４】
0004127325.tif 000105
を得る；
【０１０７】
【化１０５】
0004127325.tif 000106
を縮合させることにより、
【化１０６】
0004127325.tif 000107
を得る；
【０１０８】
【化１０７】
0004127325.tif 000108
を縮合させることにより、
【化１０８】
0004127325.tif 000109
を得る；
【０１０９】
【化１０９】
0004127325.tif 000110
を縮合させることにより、
【化１１０】
0004127325.tif 000111
を得る；
【０１１０】
【化１１１】
0004127325.tif 000112
を縮合させることにより、
【化１１２】
0004127325.tif 000113
を得る；
【０１１１】
【化１１３】
0004127325.tif 000114
を縮合させることにより、
ａ）保護基をＴＦＡおよび１０％チオフェノールを用いて分離した場合には、
【化１１４】
0004127325.tif 000115
が得られ；
ｂ）保護基をＴＦＡおよび１０％チオアニソールを用いて分離した場合には、
【化１１５】
0004127325.tif 000116
が得られる；
【０１１２】
【化１１６】
0004127325.tif 000117
を縮合させることにより、
ａ）保護基をＴＦＡおよび１０％チオフェノールを用いて分離した場合には、
【化１１７】
0004127325.tif 000118
が得られ；
ｂ）保護基をＴＦＡおよび１０％チオアニソールを用いて分離した場合には、
【化１１８】
0004127325.tif 000119
が得られる；
【０１１３】
【化１１９】
0004127325.tif 000120
を縮合させることにより、
ａ）保護基をＴＦＡおよび１０％チオフェノールを用いて分離した場合には、
【化１２０】
0004127325.tif 000121
が得られ；
ｂ）保護基をＴＦＡおよび１０％チオアニソールを用いて分離した場合には、
【化１２１】
0004127325.tif 000122
が得られる；
【０１１４】
【化１２２】
0004127325.tif 000123
を縮合させることにより、
ａ）保護基をＴＦＡおよび１０％チオフェノールを用いて分離した場合には、
【化１２３】
0004127325.tif 000124
が得られ；
ｂ）保護基をＴＦＡおよび１０％チオアニソールを用いて分離した場合には、
【化１２４】
0004127325.tif 000125
が得られる；
【０１１５】
【化１２５】
0004127325.tif 000126
を縮合させることにより、
ａ）保護基をＴＦＡおよび１０％チオフェノールを用いて分離した場合には、
【化１２６】
0004127325.tif 000127
が得られ；
ｂ）保護基をＴＦＡおよび１０％チオアニソールを用いて分離した場合には、
【化１２７】
0004127325.tif 000128
が得られる；
【０１１６】
【化１２８】
0004127325.tif 000129
を縮合させることにより、
【化１２９】
0004127325.tif 000130
を得る；
【０１１７】
【化１３０】
0004127325.tif 000131
を縮合させることにより、
【化１３１】
0004127325.tif 000132
を得る；
【０１１８】
【化１３２】
0004127325.tif 000133
を縮合させることにより、
【化１３３】
0004127325.tif 000134
を得る；
【０１１９】
【化１３４】
0004127325.tif 000135
を縮合させることにより、
【化１３５】
0004127325.tif 000136
を得る；
【０１２０】
【化１３６】
0004127325.tif 000137
を縮合させることにより、
【化１３７】
0004127325.tif 000138
を得る；
【０１２１】
【化１３８】
0004127325.tif 000139
を縮合させることにより、
【化１３９】
0004127325.tif 000140
を得る；
【０１２２】
【化１４０】
0004127325.tif 000141
を縮合させることにより、
【化１４１】
0004127325.tif 000142
を得る；
【０１２３】
【化１４２】
0004127325.tif 000143
を縮合させることにより、
【化１４３】
0004127325.tif 000144
を得る；
【０１２４】
【化１４４】
0004127325.tif 000145
を縮合させることにより、
【化１４５】
0004127325.tif 000146
を得る；
【０１２５】
【化１４６】
0004127325.tif 000147
を縮合させることにより、
【化１４７】
0004127325.tif 000148
を得る；
【０１２６】
【化１４８】
0004127325.tif 000149
を縮合させることにより、
【化１４９】
0004127325.tif 000150
を得る；
【０１２７】
【化１５０】
0004127325.tif 000151
を縮合させることにより、
【化１５１】
0004127325.tif 000152
を得る。
【０１２８】
例８
インテグリンを精製するためのアフィニティクロマトグラフイに適する物質の製造：
参考文献１の１４頁に記載のとおりにして、セファロースの活性化を行う。次いでこの活性化したセファロース１０ｇに、０．１Ｍ重炭酸ナトリウム２０ｍｌ中のアビジン２０ｍｇを添加する。この懸濁液を４゜で１２時間撹拌し、次いで洗浄する。この物質を次いで、数個のナトリウムアジド結晶とともに水中に懸濁する。酢酸ナトリウム緩衝液中にペプチド１．１当量を溶解し、この溶液に上記アビジン−セファロース懸濁液を添加し、次いで４゜で１０時間撹拌することによって、本発明によるビオチニル化化合物、例えば
【化１５２】
0004127325.tif 000153
とのアビジン複合体が形成される。過剰のペプチドを洗浄により除去する。
【０１２９】
以下の例は、医薬製剤に関するものである。
例Ａ：バイアル
二重蒸留水３リットル中の式Ｉで表わされる活性物質１００ｇおよびリン酸水素二ナトリウム５ｇの溶液のｐＨを、２Ｎ塩酸によりｐＨ６．５に調整し、殺菌濾過し、バイアルに充填し、次いで無菌条件下に凍結乾燥させ、次いでシールする。各バイアルは活性物質５ｍｇを含有する。
例Ｂ：座薬
式Ｉで表わされる活性物質２０ｇ、大豆レシチン１００ｇおよびカカオ脂１４００ｇの混合物を溶融し、型中に注入し、次いで冷却させる。各座薬は活性物質２０ｍｇを含有する。
【０１３０】
例Ｃ：溶液
二重蒸留水９４０ｍｌ中で、式Ｉで表わされる活性物質１ｇ、ＮａＨ2ＰＯ4・２Ｈ2Ｏ  ９．３８ｇ、Ｎａ2ＨＰＯ4・１２Ｈ2Ｏ  ２８．４８ｇおよびベンザルコニウムクロライド０．１ｇの溶液を調製する。そのｐＨを６．８に調整し、全量を１リットルにし、次いでこの溶液を照射により殺菌する。この溶液は、点眼剤の形態で使用することができる。
例Ｄ：軟膏
式Ｉで表わされる活性物質５００ｍｇを、無菌条件下に、ペトロラタム９９．５ｇと混合する。
例Ｅ：錠剤
式Ｉで表わされる活性物質１ｋｇ、乳糖４ｋｇ、ジャガイモデンプン１．２ｋｇ、タルク０．２ｋｇおよびステアリン酸マグネシウム０．１ｋｇの混合物を、慣用の方法で圧縮して、各錠剤が活性物質１０ｍｇを含有する錠剤を得る。
【０１３１】
例Ｆ：被覆錠剤
例Ｅと同様に、錠剤を圧縮成形し、次いで慣用の方法で、ショ糖、ジャガイモデンプン、タルク、トラガカントゴムおよび着色剤からなる被膜により被覆する。例Ｇ：カプセル剤
硬質ゼラチンカプセルに、式Ｉで表わされる活性物質２ｋｇを慣用の方法で充填し、各カプセルが活性物質２０ｍｇを含有するカプセル剤を得る。
例Ｈ：アンプル
二重蒸留水６０リットル中の式Ｉで表わされる活性物質１ｋｇの溶液を、殺菌濾過し、アンプルに充填し、無菌条件下に凍結乾燥させ、次いでシールする。各アンプルは活性物質１０ｍｇを含有する。
【０１３２】
例Ｉ：吸入スプレイ
式Ｉで表わされる活性物質１４ｇを、等張ＮａＣｌ溶液１０リットルに溶解し、この溶液を使用して、ポンプ機能を備えた市販のスプレイ容器に充填する。この溶液は、口または鼻に噴霧することができる。１回の噴射（約０．１ｍｌ）は、約０．１４ｍｇの用量に相当する。