(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
茶（Ｔｈｅａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  Ｌ．）抽出物を有効成分として含有する、α−ＭＳＨに起因するＭＭＰ−１産生を抑制するＭＭＰ−１産生抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、茶（Ｔｈｅａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  Ｌ．）抽出物由来のα−ＭＳＨ阻害剤及びこのα−ＭＳＨ阻害剤を含有する美白剤、老化防止剤、ＭＭＰ−１産生抑制剤並びにこれらを含有する皮膚外用剤に関する。更に詳細には、茶抽出物に由来するα−ＭＳＨ阻害剤を含有することにより、α−ＭＳＨに起因するメラニン生成を抑制して皮膚の色素沈着を予防及び改善する美白剤、α−ＭＳＨに起因するＭＭＰ−１産生を抑制するＭＭＰ−１産生抑制剤、α−ＭＳＨに起因するＭＭＰ−１産生を抑制して皮膚の皺を予防及び改善する老化防止剤、及びこれらを安定に含有する皮膚外用剤に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
従来より、メラノサイト刺激ホルモン（α−Ｍｅｌａｎｏｃｙｔｅ  Ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ  Ｈｏｒｍｏｎｅ：α−ＭＳＨ）は皮膚細胞中のメラノサイトに働きかけ、メラニン生成を促進させる働きがあることが知られている。特定の植物抽出物や化合物の働きによって、α−ＭＳＨを阻害する試みや、それらのα−ＭＳＨ阻害剤を皮膚外用剤に配合する試みが行われてきた（特開２００１−１６３７２８号、特開２００１−２２０３４７号等）。しかしながら、これらの発明はα−ＭＳＨの作用を阻害することによって、色素沈着を改善、もしくは炎症及び／又は免疫関与の色素異常症を改善することのみを主たる目的としているものであった。近年、メラニン生成を促進する働きのみに着目されていたα−ＭＳＨが皮膚真皮中の線維芽細胞に働きかけ、真皮コラーゲンを分解し、皺を形成する原因成分であるマトリックスメタロプロテアーゼ−１（Ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ−１：ＭＭＰ−１）を産生する働きがあることが示唆されている（Ｋｉｓｓ．Ｍ．，ｅｔ  ａｌ：Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．Ｈｏｐｐｅ−Ｓｅｙｌｅｒ  ３７６，４２５−４３０（１９９５））。
しかしながら、α−ＭＳＨを阻害すると、α−ＭＳＨに起因するメラニン生成を抑制して美白効果が得られると同時に、α−ＭＳＨに起因するＭＭＰ−１産生を抑制して老化防止効果が得られるということを実証した薬効剤の開発はこれまで行われてこなかった。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、α−ＭＳＨ阻害剤を提供することにより、α−ＭＳＨに起因するメラニン生成を抑制する美白剤、α−ＭＳＨに起因するＭＭＰ−１の産生を抑制するＭＭＰ−１産生抑制剤、ＭＭＰ−１の産生を抑制して皺形成等を予防及び改善する老化防止剤を提供することにある。また、これらのα−ＭＳＨ阻害剤、美白剤、老化防止剤、ＭＭＰ−１産生抑制剤を安定に配合した皮膚外用剤を提供することにある。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記課題について鋭意検討を行った結果、ツバキ科の植物である茶（Ｔｈｅａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  Ｌ．）の抽出物に優れたα−ＭＳＨ阻害作用及びα−ＭＳＨに基づくメラニン生成抑制作用並びにＭＭＰ−１産生抑制作用があることを見出し、本発明を完成した。
茶抽出物は、美白作用（特開平６１−０５０９０９号等）、抗酸化作用（特開平０９−０９５４１４号等）や抗老化作用（特開平１１−２４６３８８号等）等を有することは知られているが、茶抽出物にはα−ＭＳＨ阻害作用があること、その結果、ＭＭＰ−１産生抑制作用も有しており、美白作用と老化防止作用の両立が可能であることについては本発明者らが初めて見出した。
【０００５】
上記の作用は、茶抽出物の美白作用及び／又は老化防止作用の新しいメカニズムとして見出されたものであり、茶抽出物を美白剤あるいは老化防止剤として含有することにより、美白効果並びに老化防止効果に優れた皮膚外用剤を提供することができる。
また、他の薬効剤、例えば、美白剤、抗酸化剤、抗炎症剤、細胞賦活剤、保湿剤、紫外線防止剤等と組合わせて用いることにより、美白効果並びに老化防止効果を更に高めることができる。
【０００６】
【発明の実施の形態】
本発明に用いられる茶（Ｔｈｅａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  Ｌ．）はツバキ科に属する植物である。茶は、緑茶に代表される不醗酵茶、烏龍茶に代表される半醗酵茶、及び紅茶に代表される醗酵茶に大別される。本発明で用いられる茶抽出物は、緑茶、烏龍茶、紅茶等、いずれの加工法によって調製された茶を用いることができ、さらにこれらの茶を加工して作る加工茶（例えば、緑茶を蒸して得られる玉露茶や番茶、また後醗酵茶である黒茶など）からの抽出物を用いることも可能である。
【０００７】
また、本発明で用いられる茶抽出物は、上記のように加工された茶のみならず、生の茶の葉や、茶の葉以外の部位である、根、茎、実等を用いることも可能である。これらの抽出物の抽出法は特に限定されるものではないが、乾燥、細切等、適宜処理を施した後、低温もしくは室温〜加温下で溶媒により抽出する方法を挙げることができる。得られた抽出液は濾過またはイオン交換樹脂を用い、吸着、脱色、精製して溶液状、ペースト状、ゲル状、粉末状とすることもできる。
【０００８】
抽出溶媒としては、例えば水、低級１価アルコール（メチルアルコール、エチルアルコール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール等）、液状多価アルコール（グリセリン、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール等）、低級アルキルエステル（酢酸エチル等）、炭化水素（ベンゼン、ヘキサン、ペンタン等）、ケトン類（アセトン、メチルエチルケトン等）、エーテル類（ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジプロピルエーテル等）、アセトニトリル等が挙げられ、一種又は二種以上を用いることができる。
【０００９】
好ましい抽出方法の例としては、含水濃度０〜１００ｖｏｌ％のエチルアルコール又は１，３−ブチレングリコールを用い、室温で、又は加温して１〜５日間抽出を行った後ろ過し、得られたろ液を更に１週間程放置して熟成させ、再びろ過を行う方法が挙げられる。
【００１０】
本発明の茶抽出物の皮膚外用剤への含有量は、乾燥固形分として好ましくは０．０００１〜１０質量％（以下単に「％」で示す）であり、より好ましくは０．００５〜５％であり、更に好ましくは０．００１〜２％である。この範囲内であれば、該抽出物をより安定に配合することができ、かつ高い効果を発揮することができる。また、抽出物を抽出液として使用する場合は、溶質である乾燥固形分の含有量が上記範囲内であれば、その抽出液濃度は何ら限定されるものではない。
【００１１】
本発明の茶抽出物は、通常の皮膚外用剤に使用される種々の形態の基剤に配合し、製剤化することにより皮膚外用剤を得ることができる。茶抽出物を有効成分とした皮膚外用剤は単独でもα−ＭＳＨを阻害し、ＭＭＰ−１産生を抑制する作用を有するが、他の薬効成分、例えば、美白剤（ビタミンＣ及びその誘導体、カンゾウ抽出物、ソウハクヒ抽出物、ヨクイニン抽出物、インチンコウ抽出物等）、抗酸化剤（ビタミンＥ及びその誘導体、ルチン、ユキノシタ抽出物、ヤシャジツ抽出物等）、抗炎症剤（グリチルリチン酸及びその誘導体、グリチルレチン酸及びその誘導体、ビタミンＢ類及びその誘導体等）、細胞賦活剤（ビタミンＡ及びその誘導体、酵母抽出物、アスパラガス抽出物、ブナの芽抽出物、アルファヒドロキシ酸等）、保湿剤（多価アルコール、ムコ多糖及びその誘導体、リン脂質及びその誘導体、フキタンポポ抽出物、アケビ抽出物等）、紫外線防止剤（パラメトキシケイ皮酸―２−エチルヘキシル、オキシベンゾン及びその誘導体、酸化チタン、微粒子酸化チタン等）等と組合わせて用いることにより、それらの作用をより高めることができる。
【００１２】
本発明の皮膚外用剤は、その形態は特には限定されず、例えば、乳液、クリーム、化粧水、パック、洗浄料、ファンデーション、軟膏、エアゾール、ハップ剤、リニメント剤等、いずれの形態の化粧料であっても、外用医薬品等であっても良い。
【００１３】
また、本発明の皮膚外用剤には、前記の成分に重複しない範囲で、化粧料や医薬部外品、外用医薬品等に通常使用される任意の成分、すなわち、水、アルコール、油剤、界面活性剤、増粘剤、各種粉体、キレート剤、ｐＨ調整剤、血行促進剤、抗菌・殺菌剤、各種動植物・微生物抽出物、香料等を適宜用いることができる。
【００１４】
【実施例】
次に参考例、試験例及び実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれらに何ら制約されるものではない。
【００１５】
参考例１；  茶抽出物の調製；
茶（Ｔｈｅａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  Ｌ．）の新鮮葉を乾燥し、天日乾燥して得られた茶葉を原料とした緑茶１００ｇに５０ｖｏｌ％エタノール１Ｌを加えて３０℃で緩やかにかき混ぜながら抽出を行った後ろ過して緑茶抽出物（乾燥固形分０．８％）を得た。同様に、烏龍茶と紅茶の葉各１００ｇについても同様の抽出を行って、烏龍茶抽出物（乾燥固形分１．０％）および紅茶抽出物（乾燥固形分１．１％）を得た。
【００１６】
試験例１；  培養細胞によるメラニン生成抑制試験
培養細胞にマウス由来のＢメラノーマを使用し、細胞培養によるメラニン生成抑制試験を行った。１００ｍｍのシャーレに１０％ＦＢＳ含有ＭＥＭ培地を加えて、細胞を播種し、３７℃、二酸化炭素濃度５ｖｏｌ％中にて培養した。翌日、α−ＭＳＨ（１×１０−８ｍｏｌ／Ｌ）及び参考例１で調製した各茶抽出物を各々表１に示した濃度に調整して添加し、混和した。培養５日目に培地を交換し、再度、同一の各検体調整液を添加した。翌日、細胞を回収し、一定の細胞数にそろえた後に細胞のメラニン量の定量を行った。α―ＭＳＨと各茶抽出物を添加しないものをコントロールとして用い、コントロールのメラニン生成量を１００としてそれぞれのメラニン生成量を示した。結果を表１に合わせて示した。
【００１７】
（結果）
【表１】
0004116287.tif 000002
【００１８】
表1の結果から明らかなように、α―ＭＳＨによって亢進されるメラニン生成量を各茶抽出物が抑制していることがわかった。従って、本発明の茶抽出物は、これを皮膚に適用することにより、優れたα―ＭＳＨ阻害作用を発揮してα―ＭＳＨによって引き起こされるメラニン生成を抑制するため、日焼けによる皮膚の黒化、シミ、ソバカス等を効果的に防止し、美白効果を得ることができる。
【００１９】
試験例２；  細胞培養によるＭＭＰ−１産生抑制効果試験
培養細胞にヒト新生児由来線維芽細胞（ＮＢ１ＲＧＢ）を用いてＭＭＰ−１の産生量を指標に検討を行った。６穴のマルチウエルプレートに１０％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭ培地を加えて、細胞を播種し、３７℃、二酸化炭素濃度５ｖｏｌ％中にて３日間培養した。これにα−ＭＳＨ（１×１０−５ｍｏｌ／Ｌ）及び参考例１で調製した各茶抽出物を各々表２に示した濃度に調整して加え３０分間インキュベートした。その後培地を無血清培地に交換し、一定時間培養し、培養上清を回収した。回収した培養上清はアマシャム  ファルマシア  バイオテク株式会社製のＭＭＰ−１活性測定システム（コードＲＰＮ２６２９）を用いて測定した。α―ＭＳＨ、茶抽出物を添加しないものをコントロールとして用い、コントロールのＭＭＰ−１産生量を１００としてそれぞれのＭＭＰ−１産生量を示した。結果を表２に合わせて示した。
【００２０】
（結果）
【表２】
0004116287.tif 000003
【００２１】
表２の結果から明らかな如く、α−ＭＳＨによって亢進されるＭＭＰ−1の産生量を茶抽出物が抑制することによって、ＭＭＰ−1の産生を抑制することが明らかとなった。従って、本発明の茶抽出物は、これを皮膚に適用することにより、極めて優れたα−ＭＳＨ抑制作用を発揮し、α−ＭＳＨによって引き起こされるＭＭＰ−１産生を抑制することで、皮膚の皺を予防及び改善することができる。
【００２２】
以下に、本発明の皮膚外用剤の形態例を示した。これらの皮膚外用剤は、本発明の茶抽出物由来のα―ＭＳＨ阻害剤、ＭＭＰ―１産生抑制剤による美白効果、老化防止効果を発揮することができる。
【００２３】
0004116287.tif 000004
【００２４】
（製法）
Ａ．成分（１）〜（６）を混合し、加熱して７０℃に保つ。
Ｂ．（７）〜（１１）を混合した後、Ａに加え乳化後、冷却してクリームを得た。
【００２５】
実施例２  化粧水
（成分）                                                    （％）
（１）グリセリン                                          １０．０
（２）１，３−ブチレングリコール                            ６．０
（３）烏龍茶抽出物＊１                                      １．０
（４）アスパラガス抽出物＊２                                ０．５
（５）クエン酸                                              ０．１
（６）クエン酸ナトリウム                                    ０．３
（７）精製水                                                残量
（８）ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（６０Ｅ．Ｏ．）        ０．５
（９）エチルアルコール                                      ８．０
（１０）防腐剤                                              適量
（１１）香料                                                適量
＊１  参考例１で製造したもの
＊２  丸善製薬社製
【００２６】
（製法）
Ａ．成分（１）〜（６）を混合溶解する。
Ｂ．成分（７）〜（１１）を混合溶解する。
Ｃ．ＡとＢを混合して均一にし、化粧水を得た。
【００２７】
0004116287.tif 000005
【００２８】
（製法）
Ａ．成分（１３）〜（１７）を加熱混合し、７０℃に保つ。
Ｂ．成分（１）〜（１２）を加熱混合し、７０℃に保つ。
Ｃ．ＡにＢを加えて混合し、均一に乳化する。
Ｄ．Ｃを冷却後（１８）〜（２２）を加え、均一に混合して乳液を得た。
【００２９】
実施例４．  パック
（成分）                                                    （％）
（１）ポリビニルアルコール                                １５．０
（２）無水ケイ酸                                            ０．５
（３）ポリエチレングリコール                                ０．５
（４）ポリオキシプロピレンメチルグルコシド                  ５．０
（５）グリセリン                                            ５．０
（６）精製水                                                残量
（７）エチルアルコール                                    ２０．０
（８）防腐剤                                                適量
（９）緑茶抽出物＊１                                        ０．１
（１０）ヨクイニン抽出物＊２                                ０．１
（１１）香料                                                適量
＊１  参考例１で製造したもの
＊２  丸善製薬社製
【００３０】
（製法）
Ａ．成分（１）〜（６）を混合し、７０℃に加熱し、撹拌する。
Ｂ．成分（７）及び（８）を混合する。
Ｃ．上記Ｂを先のＡに加え、混合した後、冷却して（９）〜（１１）を均一に分散してパックを得た。
【００３１】
実施例５．  リキッドファンデーション：
（成分）                                                    （％）
（１）液状ラノリン                                          ２．０
（２）流動パラフィン                                        ５．０
（３）ステアリン酸                                          ２．０
（４）セタノール                                            １．０
（５）自己乳化型モノステアリン酸グリセリル                  １．０
（６）パラメトキシケイ皮酸−２−エチルヘキシル              ８．０
（７）防腐剤                                                適量
（８）グリセリン                                            ５．０
（９）トリエタノールアミン                                  １．０
（１０）カルボキシメチルセルロース                          ０．２
（１１）ベントナイト                                        ０．５
（１２）精製水                                              残量
（１３）酸化チタン                                          ６．０
（１４）微粒子酸化チタン                                    ２．０
（１５）微粒子酸化亜鉛                                      ５．０
（１６）マイカ                                              ２．０
（１７）タルク                                              ４．０
（１８）着色顔料                                            ４．０
（１９）烏龍茶抽出物＊１                                    ２．０
（２０）マンニトール＊２                                    ０．５
（２１）ニコチン酸アミド＊３                                ０．５
（２２）香料                                                適量
＊１  参考例１で製造したもの
＊２  シグマ社製
＊３  シグマ社製
【００３２】
（製法）
Ａ．成分（１）〜（７）を混合溶解する。
Ｂ．Ａに成分（１３）〜（１８）を加え、均一に混合し、７０℃に保つ。
Ｃ．成分（８）〜（１２）を均一に溶解し、７０℃に保つ。
Ｄ．ＣにＢを添加して、均一に乳化する。
Ｅ．Ｄを冷却後、成分（１９）〜（２２）を添加してリキッドファンデーションを得た。
【００３３】
実施例６．  日やけ止め乳液
（成分）                                                    （％）
（１）ポリオキシアルキレン変性オルガノポリシロキサン        １．０
（２）ジメチルポリシロキサン                                ５．０
（３）オクタメチルシクロテトラシロキサン                  ２０．０
（４）イソノナン酸イソトリデシル                            ５．０
（５）パラメトキシケイ皮酸−２−エチルヘキシル              ５．０
（６）防腐剤                                                適量
（７）香料                                                  適量
（８）微粒子酸化チタン                                    １０．０
（９）粒子酸化亜鉛                                        １０．０
（１０）酸化ジルコニウム                                    ５．０
（１１）ポリスチレン末                                      ３．０
（１２）トリメチルシロキシケイ酸                            ０．５
（１３）ジプロピレングリコール                              ３．０
（１４）エチルアルコール                                  １０．０
（１５）精製水                                              残量
（１６）食塩                                                ０．２
（１７）烏龍茶抽出物＊１                                    ２．０
（１８）ブナの芽抽出物＊２                                  ３．０
＊１  参考例１で製造したもの
＊２  ガテフォセ社製
【００３４】
(製法)
Ａ．成分（１）〜（１２）を混合分散する。
Ｂ．成分（１３）〜（１６）を混合分散する。
Ｃ．ＡにＢを添加して、均一に乳化する。
Ｄ．Ｃに成分（１７）、（１８）を添加して日やけ止め乳液を得た。
【００３５】
【発明の効果】
本発明の茶抽出物由来のα−ＭＳＨ阻害剤は、α−ＭＳＨに起因するメラニン生成を抑制し、日焼けなどによる皮膚の黒化、シミ、ソバカスの予防改善のための美白剤として有効なものである。かつ、α−ＭＳＨに起因するＭＭＰ−１産生を抑制するＭＭＰ−１産生抑制剤として作用するので、加齢や紫外線によるしわやたるみ等の予防、改善のための老化防止剤としても有効なものである。従って、このものを含有する本発明の皮膚外用剤は、美白及び／又は老化防止を目的とする化粧品や外用医薬品等として有利に利用することができる。