(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式
【化１】
0004157175.tif 000010
式中、Ｒ１はアミノ保護基を表わす、
で示される化合物を式
【化２】
0004157175.tif 000011
式中、Ｒ２は低級アルキル基を表わす、
で示される化合物と反応させることを特徴とする式
【化３】
0004157175.tif 000012
式中、Ｒ１は前記の意味を有する、
の化合物の製造方法。
【請求項２】
式
【化４】
0004157175.tif 000013
式中、Ｒ１はアミノ保護基を表わし、Ｒ２は低級アルキル基を表わす、
で示される化合物。
【請求項３】
Ｒ１がｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基を表わし、且つＲ２がメチル基を表わす請求項２記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、抗腫瘍作用を有するドラスタチン１０及びその誘導体を合成するための原料の１つである２′−ピロリジンプロパン酸誘導体の新規な製造方法及びその製造方法において有用な中間体化合物に関する。
【０００２】
【従来の技術】
ドラスタチン１０は、１９８７年にペチット等によりインド洋産のタツナミガイから抽出された下記構造式をもつペンタペプチドであり、非常に強い抗腫瘍作用を有する化合物として知られている（特開平２−１６７２７８号公報参照）。
【０００３】
【化６】
0004157175.tif 000002
【０００４】
また、本発明者等は、先に、いくつかの新規なドラスタチン１０誘導体を創製し提案した（国際公開ＷＯ９３／０３０５４号パンフレット、国際公開ＷＯ９５／０９８６４号パンフレット、国際公開ＷＯ９６／３３２１２号パンフレット等参照）。
【０００５】
これらのドラスタチン１０及びその誘導体の合成における重要な合成原料の１つは、下記式
【０００６】
【化７】
0004157175.tif 000003
【０００７】
式中、Ｒ1はアミノ保護基を表わし、Ｒ3は水素原子、低級アルキル基又
はアラルキル基を表わし、Ｒ4は水素原子又はメチル基を表わす、
で示される２′−ピロリジンプロパン酸誘導体であり、その合成法としては従来からいくつかの方法が提案されているが、従来提案された合成法は、例えば、立体選択的反応でないため上記式（Ｖ）で示される立体配置をもつ化合物の収率が非常に低い（J. Org. Chem., 59, 6287-6295, 1994）とか、工業的に適さない反応試薬を用いて反応を行う必要がある（Tetrahedron Lett., 32(21), 2395-2398, 1991；Tetrahedron, 49(9), 1913-1924, 1993）等の問題がある。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、前記式（Ｖ）においてＲ3及びＲ4が共に水素原子を表わす場合の式（Ｖ）の化合物、すなわち、下記式
【０００９】
【化８】
0004157175.tif 000004
【００１０】
式中、Ｒ1は前記の意味を有する、
で示される２′−ピロリジンプロパン酸誘導体の工業的に有利な製造方法を提供することにある。
【００１１】
本発明の別の目的は、上記式（Ｉ）の２′−ピロリジンプロパン酸誘導体の製造において有用な新規中間体を提供することにある。
【００１２】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、前記式（Ｉ）の２′−ピロリジンプロパン酸誘導体の製造方法について種々研究を重ねた結果、今回、Ｎ−保護−２−プロリナールを出発原料としてわずか２工程で、しかも工業的に有利な反応試薬及び反応条件を用いて、且つ優れた収率及び立体選択性をもって式（Ｉ）の２′−ピロリジンプロパン酸誘導体を製造することができる方法を見い出した。
【００１３】
【発明の実施の形態】
しかして、本発明によれば、式
【００１４】
【化９】
0004157175.tif 000005
【００１５】
式中、Ｒ2は低級アルキル基を表わし、Ｒ1は前記の意味を有する、
で示される化合物を過ヨウ素酸で処理することを特徴とする
【００１６】
【化１０】
0004157175.tif 000006
【００１７】
式中、Ｒ1は前記の意味を有する、
で示される２′−ピロリジンプロパン酸誘導体の製造方法が提供される。
【００１８】
また、本発明によれば、式
【００１９】
【化１１】
0004157175.tif 000007
【００２０】
式中、Ｒ1は前記の意味を有する、
で示される化合物を式
【００２１】
【化１２】
0004157175.tif 000008
【００２２】
式中、Ｒ2は前記の意味を有する、
で示される化合物と反応させることを特徴とする前記式（ＩＩ）の化合物の製造方法が提供される。
【００２３】
更に、本発明によれば、本発明の方法において有利な中間体となる前記式（ＩＩ）の化合物が提供される。
【００２４】
本明細書において「低級」なる語は、この語が付された基又は化合物の炭素原子数が６個以下、好ましくは４個以下であることを意味する。
【００２５】
しかして、「低級アルキル基」は、直鎖状又は分枝鎖状であることができ、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｓｅｃ−ペンチル、１−エチルプロピル基等が挙げられる。
【００２６】
一方、記号Ｒ1によって表わされる「アミノ保護基」には、酸もしくは塩基による処理又は水素化分解により容易に離脱しうる通常のアミノ基の保護基が包含され、例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル基等を挙げることができる。また、「アラルキル基」は、アリール部分が置換されていてもよいフエニル、ナフチル等であるアリール低級アルキル基を意味し、例えば、ベンジル、ｐ−ニトロベンジル、ｐ−メトキシベンジル基等が挙げられる。
【００２７】
本発明において、特に好ましい前記式（ＩＩ）の化合物は、Ｒ1がｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基を表わし、且つＲ2がメチル基を表わす場合の前記式（ＩＩ）の化合物である。
【００２８】
本発明に従えば、前記式（Ｉ）の化合物は、前記式（ＩＩ）の化合物を過ヨウ素酸で処理することにより製造することができる。
【００２９】
過ヨウ素酸による処理は、通常、不活性溶媒、例えば、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等のエーテル類等の中で行うことができる。反応温度は、一般に、−２０℃乃至５０℃程度、好ましくは氷冷下乃至室温程度の温度が適している。
【００３０】
上記反応において、式（ＩＩ）の化合物に対する過ヨウ素酸の使用量は、特に制限されるものではないが、通常、式（ＩＩ）の化合物１モル当たり少なくとも１モル、好ましくは１．１〜５モル程度、より好ましくは１．５〜２モル程度の割合で使用するのが有利である。かくして、前記式（Ｉ）の２′−ピロリジンプロパン酸誘導体が高収率で生成する。
【００３１】
得られる前記式（Ｉ）の２′−ピロリジンプロパン酸誘導体は、例えば、抽出、濾過、蒸留、再結晶、カラムクロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィー等の方法により、反応混合物から分離、精製することができる。
【００３２】
なお、上記反応において出発原料として使用される前記式（ＩＩ）の化合物は、従来の文献に未載の新規な化合物であり、本発明の方法を行う際の重要な中間体となる。
【００３３】
本発明の方法の出発原料である前記式（ＩＩ）の化合物は、例えば、前記式（ＩＩＩ）の化合物と前記式（ＩＶ）の化合物とを反応させることにより製造することができる。
【００３４】
該反応は、通常、不活性溶媒、例えばテトラヒドロフラン等のエーテル類の中で、塩基、例えばリチウムジイソプロピルアミド等の存在下に行うことができる。反応温度は、一般に、約−１００℃乃至約０℃、好ましくは約−７５℃乃至約−６５℃の温度が適している。
【００３５】
上記反応において、式（ＩＶ）の化合物は、一般に、式（ＩＩＩ）の化合物１モル当たり少なくとも１モル、好ましくは１．０５〜１．５モル程度の割合で使用するのが有利であり、また、上記塩基は、一般に、式（ＩＶ）の化合物１モル当たり少なくとも１モル、好ましくは１．０５〜１．５モル程度の割合で使用するのが好適である。かくして、前記式（ＩＩ）の化合物が好収率で得られる。
【００３６】
以上に述べた本発明の方法により製造される前記式（Ｉ）の２′−ピロリジンプロパン酸誘導体は、既知の方法に従い、カルボキシル基をベンジル基等で保護した後ヒドロキシル基をメチル化し、しかる後カルボキシル保護基を離脱させることにより、強力な抗腫瘍作用を有するドラスタチン１０及びその誘導体の合成における重要な合成原料の１つである［２Ｒ，３Ｒ，２′Ｓ］−Ｎ−保護−３−メトキシ−２−メチル−２′−ピロリジンプロパン酸（前記式（Ｖ）においてＲ3が水素原子を表わし、且つＲ4がメチル基を表わす場合の化合物）に換えることができる。なお、この反応の詳細については後記参考例を参照されたい。
【００３７】
【実施例】
以下、実施例及び参考例により本発明をさらに具体的に説明する。
【００３８】
なお、実施例及び参考例において用いる化合物番号に対応する化合物の構造については、以下のフローシート１を参照されたい。ここでＢｏｃはｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基、Ｍｅはメチル基、Ｂｚｌはベンジル基を表す。
【００３９】
【化１３】
0004157175.tif 000009
【００４０】
実施例１
（１）窒素気流下にジイソプロピルアミンを無水テトラヒドロフラン（300ml）に溶かした後、内温−１０℃で１．６Ｍのｎ−ブチルリチウム／ヘキサン溶液（261ml, 418mmol, 1.1当量）を３０分で滴下し、さらに１０分間攪拌する。次に−７０℃に冷却して化合物２（78.7g, 418mmol, 1.1当量）を２０分間で滴下し、さらに１時間攪拌する。これに化合物１（75.7g, 380mmol, 1.0当量）の無水テトラヒドロフラン溶液（50ml）を２０分間で滴下し、さらに−７０℃で４５分間攪拌する。反応混合物に飽和塩化アンモニウム水溶液（500ml）を加えた後、室温にもどしてエーテル（500mlx2）で抽出する。合わせた有機層を水（500ml）、１０％亜硫酸水素ナトリウム水溶液（500mlx3）、飽和食塩水（500ml）で順次洗浄する。無水硫酸マグネシウムと共に１時間攪拌しながら乾燥後、吸引濾過して減圧下溶媒を留去後、残渣を真空ポンプで乾燥すると、結晶が析出する。この結晶を濾取し、ヘキサンで洗い一番晶を得る。さらに母液の溶媒を減圧下留去後、残渣を真空ポンプで乾燥して析出した二番晶を得る。一番晶と二番晶を合わせて白色結晶の化合物３（75.2g, 51%）を得た。
【００４１】
融点： 78-83℃
[α]D20： -42.7゜(c 1.00, MeOH)
EI-MS  m/z： 314
1H-NMR (CDCl3, δ)： 0.18 (9H, s), 1.18-1.26 (3H, d, J=6.8 Hz), 1.34 (3H, s), 1.37 (3H, s), 1.48 (9H, s), 1.75-2.00 (4H, m), 3.22-3.54 (4H, m), 3.81-3.84 (2H, m)
（２）過ヨウ素酸（49.8g, 218mmol, 1.3当量）をテトラヒドロフラン（500ml）に溶かした後、外温０〜５℃で化合物３（63.2g, 163mmol, 1.0当量）を加え１５分攪拌し、さらに室温で１．５時間攪拌する。反応混合物を０〜５℃の亜硫酸水素ナトリウム（207g, 1.989mol, 12当量）水溶液（350ml）中に吸引濾過し、エーテルで洗い込んだ後２０分間攪拌する。これをエーテル（300mlx2）で抽出した後、合わせた有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液(300mlx4)で逆抽出する。合わせた水層に氷を加え、飽和硫酸水素カリウム水溶液でｐＨ２とした後、エーテル（300mlx4）で抽出する。合わせた有機層を飽和食塩水（400ml）で洗い、無水硫酸マグネシウムで１時間乾燥する。吸引濾過して減圧下溶媒を留去後、残渣を真空ポンプで乾燥して、白色アモルファスの化合物４（40.3g, 91%）を得た。
【００４２】
[α]D25： -55.3゜(c 1.01, MeOH)
参考例１
（１）上記実施例１で得られた化合物４（39.6g, 145mmol）を９５％ 水性アセトン溶液（450ml）に溶かし、これに炭酸カリウム（20.0g, 145mmol, 1.0当量）そしてベンジルブロミド（22.4ml, 189mmol, 1.3当量）の９５％水性アセトン溶液（150ml）を順次加え、室温で２０時間攪拌する。反応混合物のアセトンを減圧留去後、酢酸エチル（800ml）を加え抽出し、水（300ml）、飽和食塩水（300ml）で洗い、無水硫酸ナトリウムで２時間乾燥する。吸引濾過して減圧下溶媒を留去後、残渣をシリカゲルカラムで２回精製して、無色油状物の化合物５（48.6g, 92%）を得た。
【００４３】
[α]D29： -26.7゜(c 1.01, MeOH)
EI-MS  m/z： 345
1H-NMR (CDCl3, δ)： 1.26-1.34 (3H, d, J=7.0 Hz), 1.45 (9H, s), 1.6 (1H, s), 1.71-1.93 (4H, m),2.55-2.69 (1H, m),3.24-3.44 (2H, m), 3.98-4.08 (2H, m), 5.13 (2H, s), 7.35 (5H, s)
（２）化合物５（42.3g, 118mmol）を乾燥ジメチルホルムアミド（300ml）に溶かし、窒素ガス置換後、氷冷下でヨウ化メチル（36.8ml, 590mmol, 5.0当量）そして水素化ナトリウム（油性, 9.4g, 236mmol, 2.0当量）を加え、氷冷下で４５分間攪拌する。反応混合物に氷を加えた後、５％硫酸水素カリウム水溶液を加えｐＨ３とする。ヨウ化メチル及びジメチルホルムアミドを各々減圧留去後、酢酸エチル（1.6l）を加え５％硫酸水素カリウム水溶液（800ml）、５％チオ硫酸ナトリウム−飽和食塩水（800ml）、飽和食塩水（800ml）で順次洗い、無水硫酸ナトリウムで２時間乾燥する。吸引濾過して減圧下溶媒を留去後、残渣をシリカゲルカラムで精製して、無色油状物の化合物６（39.6g, 89%）を得た。
【００４４】
[α]D26： -23.8゜(c 1.01, MeOH)
EI-MS  m/z： 345
1H-NMR (CDCl3, δ)： 1.22-1.29 (3H, d, J=6.8 Hz), 1.46 (9H, s), 1.80-1.89 (4H, m), 2.47-2.64 (1H, m),3.19-3.58 (2H, m), 3.39 (3H, s), 3.61-3.88 (2H, m), 5.11-5.14 (2H, dd), 7.34 (5H, s)