(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式で示される化合物：
0004125785.tif 000012
［式中、ＸはＣＨまたはＮであり；
Ｗ1はＨまたはＯＨであり；
Ｗ2はＨ、ＦまたはＮＯ2であり；
Ｗ3はＨ、ＦまたはＮＯ2であり；
Ｒ**8はＨ、ＣＨ3またはＣ2Ｈ5であり；
ＸがＣＨである場合はＷ1、Ｗ2およびＷ3のすべてがＨであることはなく、Ｗ2およびＷ3の少なくとも一方はＦおよびＮＯ2から成る群から選択する。］。
【請求項２】
ＸがＮである請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｗ2がＦであり、Ｗ3がＨである請求項２記載の化合物。
【請求項４】
エチル２−フルオロ−４−［（２’，６’−ジ−ｔ−ブチルピリダ−４’−イル）カルバモイル］ベンゾエート；または
２−フルオロ−４−［（２’，６’−ジ−ｔ−ブチルピリダ−４’−イル）カルバモイル］安息香酸
である請求項３記載の化合物。
【請求項５】
Ｗ2がＦであり、Ｗ3がＦである請求項２記載の化合物。
【請求項６】
メチル２，６−ジフルオロ−４−［（２’，６’−ジ−ｔ−ブチルピリダ−４’−イル）カルバモイル］ベンゾエート；または
２，６−ジフルオロ−４−［（２’，６’−ジ−ｔ−ブチルピリダ−４’−イル）カルバモイル］安息香酸
である請求項５記載の化合物。
【請求項７】
Ｗ2がＮＯ2である請求項２記載の化合物。
【請求項８】
メチル２−ニトロ−４−［（２’，６’−ジ−ｔ−ブチルピリダ−４’−イル）カルバモイル］ベンゾエート；または
２−ニトロ−４−［（２’，６’−ジ−ｔ−ブチルピリダ−４’−イル）カルバモイル］安息香酸
である請求項７記載の化合物。
【請求項９】
Ｗ1、Ｗ2およびＷ3がいずれも水素である請求項２記載の化合物。
【請求項１０】
エチル４−［（２’，６’−ジ−ｔ−ブチルピリダ−４’−イル）カルバモイル］ベンゾエート；または
４−［（２’，６’−ジ−ｔ−ブチルピリダ−４’−イル）カルバモイル］安息香酸
である請求項９記載の化合物。
【請求項１１】
ＸがＣＨである請求項１記載の化合物。
【請求項１２】
Ｗ2がＦであり、Ｗ3がＨである請求項１１記載の化合物。
【請求項１３】
エチル２−フルオロ−４−［（３’，５’−ジ−ｔ−ブチルフェニル）カルバモイル］ベンゾエート；または
２−フルオロ−４−［（３’，５’−ジ−ｔ−ブチルフェニル）カルバモイル］安息香酸
である請求項１２記載の化合物。
【請求項１４】
Ｗ2がＦであり、Ｗ3がＦである請求項１１記載の化合物。
【請求項１５】
メチル２，６−ジフルオロ−４−［（３’，５’−ジ−ｔ−ブチルフェニル）カルバモイル］ベンゾエート；または
２，６−ジフルオロ−４−［（３’，５’−ジ−ｔ−ブチルフェニル）カルバモイル］安息香酸
である請求項１４記載の化合物。
【請求項１６】
Ｗ1がＯＨである請求項１１記載の化合物。
【請求項１７】
エチル２−フルオロ−４−［（２’−ヒドロキシ−３’，５’−ジ−ｔ−ブチルフェニル）カルバモイル］ベンゾエート；または
２−フルオロ−４−［（２’−ヒドロキシ−３’，５’−ジ−ｔ−ブチルフェニル）カルバモイル］安息香酸
である請求項１６記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
発明の背景
１．発明の分野
本発明は、レチノイド様生物学的活性を有する新規化合物に関する。本発明は、とりわけ、アリールまたはヘテロアリールアミンと、アリールまたはヘテロアリールカルボン酸との間に形成したアミドに関する（芳香族または複素環部分の１個は、電子求引基を有する）。本発明の化合物は、レチノイド様生物学的活性を有する。
２．従来技術
レチノイド様活性を有する化合物は当分野でよく知られており、米国および他の多くの特許、並びに科学文献に記載されている。当分野では一般に、レチノイド様活性は、ヒトを包含する哺乳動物を処置するため、多くの疾病および病態の徴候および症状を治療または軽減するために有用であることが知られ、認識されている。換言すれば、レチノイド様化合物を活性成分として含有する薬剤組成物は、細胞増殖および分化の調整剤として、特に、皮膚関連疾患、例えば化学性角化症、ヒ素角化症、炎症性および非炎症性アクネ、乾癬、魚鱗癬および他の角化および皮膚の過剰増殖性疾患、湿疹、アトピー性皮膚炎、ダリエー病、扁平苔癬の処置剤として、グルココルチコイド傷害（ステロイド萎縮）の予防および治療剤として、局所用殺菌剤として、皮膚の抗色素沈着剤として、並びに皮膚の老化および光傷害の処置および回復剤として有用であることが、当分野で一般に認識されている。レチノイド化合物はまた、癌および前癌状態、例えば前悪性および悪性過剰増殖性疾患、例えば乳、皮膚、前立腺、頸、子宮、結腸、膀胱、食道、胃、肺、喉頭、口腔、血液およびリンパ系の癌、化生、異形成、新形成、粘膜の白斑および乳頭腫の予防および治療、並びにカポジ肉腫の処置にも有用である。更に、レチノイド化合物は、眼疾患、例えば増殖性硝子体網膜症（ＰＶＲ）、網膜剥離、ドライアイおよび他の角膜異常（ただし、それらに限定されない）の処置剤として、並びに種々の心臓血管疾患、例えば脂質代謝に関連する疾患（例えば脂血症）（ただし、これに限定されない）の治療および予防、血管形成後再狭窄の予防、および循環組織プラスミノーゲン活性剤（ＴＰＡ）レベル向上剤としても使用し得る。レチノイド化合物の他の用途は、次のものを包含する：ヒト乳頭腫ウイルス（ＨＰＶ）に関連する症状および疾患（イボおよび性器イボを包含する）、種々の炎症性疾患、例えば肺線維症、回腸炎、大腸炎およびクローン（Krohn）病、神経変性疾患、例えばアルツハイマー病、パーキンソン病および発作、下垂体機能異常（成長ホルモン分泌低下を包含する）の予防および治療、アポトーシスの調節（アポトーシス誘導、およびＴ細胞活性化アポトーシス抑制を包含する）、毛髪成長の回復（本発明化合物と、Minoxidil（商標）のような他の剤との組み合わせ処置を包含する）、免疫系に関連する疾患の処置（本発明化合物の、免疫抑制剤および免疫刺激剤としての使用を包含する）、臓器移植拒絶の処置、並びに創傷治癒の促進［ケローシス（chelosis）の調節を包含する］。
米国特許番号４，７２３，０２８（Shoudo）、公開された欧州特許出願番号０  １７０  １０５（Shudo）、ドイツ国特許出願ＤＥ  ３５２４１９９  Ａ１（Shudo）、ＰＣＴ  ＷＯ９１／１６０５１（Spadaら）、ＰＣＴ  ＷＯ８５／０４６５２（Polus）、J.Med.Chem.１９８８  ３１，２１８２−２１９２（Kagechikaら）には、レチノイド様または関連の生物学的活性を有する、アリールおよびヘテロアリールまたはジアリール置換オレフィンまたはアミドが記載されている。
米国特許番号４，９９２，４６８、５，０１３，７４４、５，０６８，２５２、５，１７５，１８５、５，２０２，４７１、５，２６４，４５６、５，３２４，８４０、５，３２６，８９８、５，３４９，１０５、５，３９１，７５３、５，４１４，００７、５，４３４，１７３（本出願の譲受人に譲渡されている）並びにその中に引用された特許および文献には、フェニルとヘテロアリール、またはフェニルと第２のフェニル基が、オレフィンまたはアセチレン結合を介して結合した構造を有する、レチノイド様生物学的活性を有する化合物が記載されている。更に、本出願の譲受人に譲渡されたいくつかの同時係属出願および最近発行された特許も、レチノイド様活性を有する化合物に関する。
哺乳動物（および他の生物）において二つの主要なタイプのレチノイド受容体が存在することが、現在当分野で一般に認められている。この主要な二つの受容体タイプまたはファミリーはそれぞれ、ＲＡＲおよびＲＸＲと称される。各タイプにサブタイプが存在する：ＲＡＲファミリーにおけるサブタイプはＲＡＲα、ＲＡＲβおよびＲＡＲγと称され、ＲＸＲファミリーにおけるサブタイプはＲＸＲα、ＲＸＲβおよびＲＸＲγと称される。また、この二つの主要レチノイド受容体タイプおよび複数のサブタイプの分布が、哺乳動物の組織および器官によって一様でないことも、当分野で確立されている。従って、レチノイド受容体に結合し得る化合物において、主要タイプまたはファミリーの１種に対する特異性または選択性、および受容体ファミリーの１種もしくはそれ以上のサブタイプに対する特異性または選択性が、望ましい薬理学的性質であると考えられる。
本発明は、レチノイド様生物学的活性を有する化合物、とりわけ１種またはそれ以上のＲＡＲレチノイド受容体サブタイプに結合する化合物を提供する。
発明の概要
本発明は、式１で示される化合物に関する：
0004125785.tif 000002
［式中、ＸはＣＨまたはＮであり；
Ｒ1はそれぞれ、Ｈまたは炭素数１〜６のアルキルであり；
ｍは０〜５の整数であり；
ｐは０〜２の整数であり；
ｒは０〜２の整数であり；
Ｌは−（Ｃ＝Ｚ）−ＮＨ−、または−ＮＨ−（Ｃ＝Ｚ）−であり（ここで、ＺはＯまたはＳ）；
Ｙはフェニルもしくはナフチル基であるか、またはピリジル、チエニル、フリル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、チアゾリル、オキサゾリル、イミダゾリルおよびピラゾリルから成る群から選択するヘテロアリールであり、該フェニル、ナフチルおよびヘテロアリール基は場合により、１個または２個のＲ1置換基を有し；
ＷはＦ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｉ、Ｃ1-6アルキル、フルオロ置換Ｃ1-6アルキル、ＮＯ2、Ｎ3、ＯＨ、ＯＣＨ2ＯＣＨ3、ＯＣ1-10アルキル、テトラゾール、ＣＮ、ＳＯ2Ｃ1-6アルキル、ＳＯ2Ｃ1-6アルキル、ＳＯ2Ｃ1-6−フルオロ置換アルキル、ＳＯ−Ｃ1-6アルキル、ＣＯ−Ｃ1-6アルキル、ＣＯＯＲ8、フェニル、フェニルもしくは置換フェニル以外の基Ｗで置換されたフェニル自体から成る群から選択する置換基であり、ＸがＣＨでｒが０である場合は、ｐは０でなく、少なくとも１個の基Ｗはアルキルでなく；
Ａは、（ＣＨ2）q（ここで、ｑは０〜５）、炭素数３〜６の低級分枝鎖アルキル、炭素数３〜６のシクロアルキル、炭素数２〜６／二重結合数１または２のアルケニル、炭素数２〜６／三重結合数１または２のアルキニルであり；
ＢはＣＯＯＨもしくは薬学的に許容し得るその塩、ＣＯＯＲ8、ＣＯＮＲ9Ｒ10、−ＣＨ2ＯＨ、ＣＨ2ＯＲ11、ＣＨ2ＯＣＯＲ11、ＣＨＯ、ＣＨ（ＯＲ12）2、ＣＨＯＲ13Ｏ、−ＣＯＲ7、ＣＲ7（ＯＲ12）2、ＣＲ7ＯＲ13Ｏである（ここで、Ｒ7は炭素数１〜５のアルキル、シクロアルキルまたはアルケニル基であり、Ｒ8は炭素数１〜１０のアルキル、トリメチルシリルアルキル（アルキル基の炭素数１〜１０）、炭素数５〜１０のシクロアルキル、フェニルまたは低級アルキルフェニルであり、Ｒ9およびＲ10はそれぞれ水素、炭素数１〜１０のアルキル、炭素数５〜１０のシクロアルキル、フェニルまたは低級アルキルフェニルであり、Ｒ11は低級アルキル、フェニルまたは低級アルキルフェニルであり、Ｒ12は低級アルキルであり、Ｒ13は炭素数２〜５の２価アルキル基である）。］。
第２の態様において、本発明は、式１で示される化合物を、皮膚関連疾患、例えば化学性角化症、ヒ素角化症、炎症性および非炎症性アクネ、乾癬、魚鱗癬および他の角化および皮膚の過剰増殖性疾患、湿疹、アトピー性皮膚炎、ダリエー病、扁平苔癬の処置剤として、グルココルチコイド傷害（ステロイド萎縮）の予防および治療剤として、局所用殺菌剤として、皮膚の抗色素沈着剤として、並びに皮膚の老化および光傷害の処置および回復剤として使用することに関する（それらに限定されない）。本発明の化合物はまた、癌および前癌状態、例えば前悪性および悪性過剰増殖性疾患、例えば乳、皮膚、前立腺、頸、子宮、結腸、膀胱、食道、胃、肺、喉頭、口腔、血液およびリンパ系の癌、化生、異形成、新形成、粘膜の白斑および乳頭腫の予防および治療、並びにカポジ肉腫の処置にも有用である。更に、本発明の化合物は、眼疾患、例えば増殖性硝子体網膜症（ＰＶＲ）、網膜剥離、ドライアイおよび他の角膜異常（ただし、それらに限定されない）の処置剤として、並びに種々の心臓血管疾患、例えば脂質代謝に関連する疾患（例えば脂血症）（ただし、これに限定されない）の治療および予防、血管形成後再狭窄の予防、および循環組織プラスミノーゲン活性剤（ＴＰＡ）レベル向上剤としても使用し得る。本発明化合物の他の用途は、次のものを包含する：ヒト乳頭腫ウイルス（ＨＰＶ）に関連する症状および疾患（イボおよび性器イボを包含する）、種々の炎症性疾患、例えば肺線維症、回腸炎、大腸炎およびクローン病、神経変性疾患、例えばアルツハイマー病、パーキンソン病および発作、下垂体機能異常（成長ホルモン分泌低下を包含する）の予防および治療、アポトーシスの調節（アポトーシス誘導、およびＴ細胞活性化アポトーシス抑制を包含する）、毛髪成長の回復（本発明化合物と、Minoxidil（商標）のような他の剤との組み合わせ処置を包含する）、免疫系に関連する疾患の処置（本発明化合物の、免疫抑制剤および免疫刺激剤としての使用を包含する）、臓器移植拒絶の処置、並びに創傷治癒の促進（ケローシスの調節を包含する）。
本発明は、式１で示される化合物を、薬学的に許容し得る賦形剤と共に含有する薬剤製剤にも関する。
他の態様においては、本発明は、式１で示される化合物の製法に関する。該方法においては、酸受容体または水受容体の存在下に、式２で示される化合物と式３で示される化合物とを反応させる。このような式中、Ｘ1はＯＨ、ハロゲンまたは−ＣＯＸ1をアミド形成に反応性とする他の基であり、他の記号は式１に関する定義と同意義である。本発明による別の方法においては、式２ａで示される化合物と式３ａで示される化合物とを反応させる（記号は前記と同意義）。
0004125785.tif 000003
更に本発明は、式１で示される化合物に対して行う反応であって、基Ｂを変化して、やはり式１で示される反応生成物を得る反応にも関する。
一般的な態様
定義
アルキルとは、直鎖アルキル、分枝鎖アルキルおよびシクロアルキルとして知られる全ての基を包含する。アルケニルとは、１個またはそれ以上の不飽和部分を有する直鎖アルケニル、分枝鎖アルケニルおよびシクロアルケニル基を包含する。同様に、アルキニルとは、１個またはそれ以上の三重結合を有する直鎖アルキニルおよび分枝鎖アルキニル基を包含する。
低級アルキルは、上記の広範なアルキル基のうち、直鎖低級アルキルの場合は炭素数１〜６のものを意味し、低級の分枝鎖およびシクロアルキル基の場合は炭素数３〜６のものを意味する。同様に、低級アルケニルは、直鎖低級アルケニルの場合は炭素数２〜６のもの、分枝鎖およびシクロ低級アルケニル基の場合は炭素数３〜６のものと定義する。低級アルキニルも同様に、直鎖低級アルキニルの場合は炭素数２〜６のもの、分枝鎖低級アルキニル基の場合は炭素数４〜６のものと定義する。
本発明において「エステル」とは、有機化学における古典的なエステルの定義に含まれるすべての化合物を包含する。エステルは、有機および無機エステルを包含する。Ｂ（式１の）が−ＣＯＯＨの場合、エステルとは、この基をアルコールまたはチオアルコール、好ましくは炭素数１〜６の脂肪族アルコールで処理して得られる生成物を包含する。Ｂが−ＣＨ2ＯＨである化合物からエステルを誘導する場合は、エステルとは、エステルを形成し得る有機酸（リン含有酸およびイオウ含有酸を包含する）から誘導する化合物、または式：−ＣＨ2ＯＣＯＲ11［Ｒ11は置換または不置換の脂肪族、芳香族、複素環または脂肪族芳香族基（好ましくは、脂肪族部分の炭素数１〜６）である。］で示される化合物を包含する。
本発明において特記しない限り、好ましいエステルは、炭素数１０もしくはそれ以下の飽和脂肪族アルコールもしくは酸、または炭素数５〜１０の環式もしくは飽和脂肪族環式アルコールもしくは酸から誘導したものである。特に好ましい脂肪族エステルは、低級アルキル酸またはアルコールから誘導したものである。フェニルまたは低級アルキルフェニルエステルも好ましい。
アミドとは、有機化学における古典的なアミドの意義を有する。アミドには、不置換アミド並びに脂肪族および芳香族モノ−およびジ置換アミドが含まれる。本発明において特記しない限り、好ましいアミドは、炭素数１０もしくはそれ以下の飽和脂肪族基、または炭素数５〜１０の環式もしくは飽和脂肪族−環式基から誘導するモノ−およびジ置換アミドである。特に好ましいアミドは、置換および不置換低級アルキルアミンから誘導したものである。置換および不置換フェニルまたは低級アルキルフェニルアミンから誘導したモノ−およびジ置換アミドも好ましい。不置換アミドも好ましい。
アセタールおよびケタールは、式：−ＣＫ［Ｋは（−ＯＲ）2で、Ｒは低級アルキルであるか、Ｋは−ＯＲ7Ｏ−であり、Ｒ7は炭素数２〜５の直鎖または分枝状低級アルキルである。］で示される基を有する。
薬学的に許容し得る塩は、そのような塩を形成し得る官能基（例えば酸官能基）を有するいずれの本発明化合物に対しても形成し得る。薬学的に許容し得る塩は、親化合物の活性を保持しており、被投与体および環境に対して有害または不都合な作用を及ぼさない塩である。薬学的に許容し得る塩は、有機または無機塩基から誘導し得る。このような塩は、一価または多価イオンから生成し得る。特に好ましいものは、ナトリウム、カリウム、カルシウムおよびマグネシウムのような無機イオンである。有機塩は、例えばモノ−、ジ−およびトリ−アルキルアミンまたはエタノールアミンのようなアミンから得られ、特にアンモニウム塩である。カフェイン、トロメタミンなどの分子から塩を生成することもできる。酸付加塩を形成し得るほど充分に塩基性の窒素が存在する場合は、いずれの無機もしくは有機酸またはアルキル化剤（例えばヨウ化メチル）と酸付加塩を形成してもよい。塩酸、硫酸またはリン酸のような無機酸との塩が好ましい。多くの単純な有機酸、例えば一塩基性、二塩基性または三塩基性酸のいずれかを使用することもできる。
本発明化合物のいくつかは、トランスおよびシス（ＥおよびＺ）異性体を有し得る。更に、本発明化合物は１個またはそれ以上のキラル中心を有し得、それ故、エナンチオマーおよびジアステレオマーの形態で存在し得る。本発明の範囲は、そのような個々の異性体、並びにシスおよびトランス異性体混合物、ジアステレオマー混合物、およびエナンチオマー（光学異性体）のラセミ混合物のすべてを包含することを意図する。
式１の基Ｘに関しては、ＸがＣＨである化合物もＮである化合物も同様に好ましい。ＸがＣＨである場合は、ベンゼン環が、基Ｌ（１位）と、基Ｗおよび／またはＲ1（３および５位）で１，３，５置換されていることが好ましい。ＸがＮである場合は、ピリジン環が、基Ｌ（４位）と、基Ｗおよび／またはＲ1（２および６位）で２，４，６置換されていることが好ましい。
式１の基Ｌは、好ましくは−（Ｃ＝Ｚ）−ＮＨ−で、Ｚは好ましくはＯである。換言すれば、本発明によると、基Ｙに−ＮＨ部分が結合したカルバモイルまたはアミド化合物が好ましい。
式１の基Ｗについて述べると、この基は通例、電子求引基である。本発明化合物中においてＷは、フェニルまたはピリジル環上に存在し（式１において、置換基「（Ｗ）p」として示す）、および／またはアリールもしくはヘテロアリール基Ｙの置換基として存在する。好ましくは、基Ｗは基Ｙに存在するか、または基Ｙと上記フェニルもしくはピリジル環との両方に存在する。アリールまたはヘテロアリール部分Ｙにおいては、基Ｗは基Ａ−Ｂに隣接する位置に存在することが好ましい；好ましくは、基Ａ−Ｂがフェニル環上で基Ｌ（アミドまたはカルバモイル）に対してパラ位に存在し、すなわち基Ｗは好ましくは基Ｌ（アミドまたはカルバモイル）に対してメタ位に存在する。好ましい基ＷはＦ、ＮＯ2、Ｂｒ、Ｉ、ＣＦ3、Ｎ3、およびＯＨである。あるいは、フェニルまたはピリジル環上のＷ（式１において、置換基「（Ｗ）p」として示す）は、アルキル基、好ましくは分枝鎖アルキル（例えばｔ−ブチル）であり、ｐは好ましくは２である。更に、基Ｙ上に１個または２個のフルオロ置換基が存在することが特に好ましい。基Ｙがフェニルの場合、フルオロ置換基は好ましくは基Ａ−Ｂに対してオルトおよびオルト’位に存在する。
式１中のＹに関しては、Ｙがフェニル、ピリジル、２−チアゾリル、チエニルまたはフリルである本発明化合物が好ましく、Ｙがフェニルである化合物がより好ましい。Ｙ（フェニル）およびＹ（ピリジル）基上の置換に関しては、基Ｌおよび基Ａ−Ｂによって、フェニル基が１，４（パラ）置換されている化合物、およびピリジン環が２，５置換されている化合物が好ましい。（「ピリジン」命名法の２，５位置換は、「ニコチン酸」命名法の６位置換に対応する。）好ましい本発明化合物においては、基Ｙ上に置換基Ｒ1（Ｈ以外の）が存在しない。
基Ｒ1が存在する場合、この基は好ましくはＨまたはＣＨ3である。
好ましい化合物の基Ａ−Ｂは、（ＣＨ2）n−ＣＯＯＨまたは（ＣＨ2）n−ＣＯＯＲ8（ｎおよびＲ8は前記と同意義）である。ｎが０で、Ｒ8が低級アルキルであるか、またはｎが０で、ＢがＣＯＯＨもしくは薬学的に許容し得るその塩であれば、より好ましい。
本発明化合物の最も好ましいものを、式４に関して表１に示す。
0004125785.tif 000004
投与様式
本発明の化合物は、症状、器官特異的処置の必要性、投与量などを考慮して、全身的に、または局所的に投与し得る。
皮膚病の処置においては、通例、薬剤を局所的に投与することが好ましいが、重篤な嚢胞性アクネまたは乾癬の処置のような場合には、経口投与を行ってもよい。局所投与用の通常の剤形、例えば溶液、懸濁液、ゲル、軟膏などのいずれを使用してもよい。このような局所投与用製剤の調製は、薬剤の分野における文献、例えば、Remington’s Pharmaceutical Science、第１７版（Mack Publishing Company、イーストン、ペンシルベニア）に詳細に説明されている。本発明の化合物を局所投与するには、粉末またはスプレー（とりわけエアロゾル形のもの）として投与することもできる。本発明の薬剤を全身的に投与する場合には、経口投与に適した、散剤、丸薬、錠剤など、またはシロップ剤もしくはエリクシル剤の形態に調製することができる。静脈内または腹腔内投与を行うには、化合物を、注射によって投与し得る溶液または懸濁液に調製し得る。坐剤の形、または皮下徐放性製剤もしくは筋肉内注射剤の形に調製することが有用である場合もある。
皮膚乾燥を処置し；遮光し；他の手段により皮膚病を処置し；感染を防止し、刺激や炎症を緩和する、などの副次的な目的で、前記のような局所投与用製剤に他の薬物を加えることができる。
本発明の化合物１種またはそれ以上の処置有効量を投与することによって、レチノイン酸様化合物によって処置できることがわかっている皮膚病または他の症状を処置することができる。処置濃度は、特定の症状を軽減するか、または病状の進行を遅延させる濃度であり得る。場合によっては、本発明の化合物は、特定の症状の発現を防止するために予防的に使用し得る可能性もある。
有効な治療または予防濃度は症状によって様々であり、処置しようとする症状の重さ、および処置に対する患者の感受性によっても異なり得る。従って、一つの濃度が必ずしも有効なのではなく、処置する疾病に応じて濃度を変化することが必要であり得る。そのような濃度は、ルーチン試験によって決定し得る。例えばアクネまたは同様の皮膚病の処置においては、０．０１〜１．０mg／mlの濃度の製剤が適用に有効であると考えられる。全身的に投与する場合は、０．０１〜５mg／kg体重／日の量が、多くの場合有効であり得る。
レチノイド様生物学的活性アッセイ
本発明化合物のレチノイド様活性は、該化合物のレチノイド受容体結合力を測定するアッセイにおいて確認することができる。本特許出願において前記のように、哺乳動物（および他の生物）には二つの主要なタイプのレチノイン酸受容体（ＲＡＲおよびＲＸＲ）がある。各タイプにはサブタイプ（ＲＡＲα、ＲＡＲβ、ＲＡＲγ、ＲＸＲα、ＲＸＲβおよびＲＸＲγ）があり、その分布は哺乳動物の組織および器官によって一様ではない。哺乳動物の組織または器官によりサブタイプの分布が異なる故に、一つのレチノイド受容体ファミリーの中で、一つまたは二つのレチノイド受容体サブタイプにのみ選択的に結合するということが、有益な薬理学的性質をもたらし得る。上記理由の故に、レチノイド受容体のいずれかまたは全ての結合、並びにある受容体ファミリーにおける特異的もしくは選択的結合、または受容体サブタイプのいずれかにおける選択的もしくは特異的活性は、いずれも望ましい薬理学的性質であると考えられる。
上記従来知見に照らして、ＲＡＲα、ＲＡＲβ、ＲＡＲγ、ＲＸＲα、ＲＸＲβおよびＲＸＲγ受容体サブタイプにおける化合物の作動剤様活性を試験するためのアッセイ方法が開発されている。例えば、キメラ受容体トランス活性化アッセイは、ＲＡＲα、ＲＡＲβ、ＲＡＲγおよびＲＸＲα受容体サブタイプにおける作動剤様活性を試験するもので、Feigner P.L.およびHolm M.（１９８９）Focus、１１  ２の研究に基づくものであるが、これは米国特許第５４５５２６５号に詳細に記載されている。該特許明細書を引用により本発明の一部とする。
ホロ受容体トランス活性化アッセイおよびリガンド結合アッセイは、それぞれ複数のレチノイド受容体サブタイプへの本発明化合物の結合能を調べるものであるが、１９９３年６月２４日公開のＰＣＴ出願ＷＯ９３／１１７５５（特に第３０〜３３頁および第３７〜４１頁）に記載されている。該明細書も引用により本発明の一部とする。リガンド結合アッセイの説明は、次にも行う。
結合アッセイ
結合アッセイは全て、同じ様式で行った。６タイプの受容体はいずれも、Baculovirusにおいて発現した発現受容体タイプ（ＲＡＲα、β、ΓおよびＲＸＲα、β、Γ）から誘導した。いずれの化合物も、原液を１０mMエタノール溶液として調製し、ＤＭＳＯ：エタノール（１：１）で連続希釈した。アッセイ緩衝液は、６受容体アッセイのいずれにおいても、次の成分から成っていた：８％グリセロール、１２０mM  KCl、８mMトリス、５mM  ＣＨＡＰＳ、４mM  ＤＴＴおよび０．２４mM  ＰＭＳＦ、pH７．４＠室温。
受容体結合アッセイは全て、同一方法で行った。最終アッセイ体積は２５０μlで、試験する受容体に応じた抽出物タンパク質１０〜４００μgと共に、５nM［3Ｈ］オールトランスレチノイン酸または１０nM［3Ｈ］９−シス−レチノイン酸および種々の濃度の競合リガンド（濃度範囲０〜１０-5Ｍ）を含有していた。アッセイは、９６ウェルミニチューブ系用に構成した。平衡に達するまで４℃でインキュベートした。適当な非ラベルレチノイン酸異性体１０００nMの存在下の結合として、非特異的結合を定義した。インキュベート時間終了後、適当な洗浄緩衝液中の６．２５％ヒドロキシアパタイト５０μlを加えた。この洗浄緩衝液は、１００mM  KCl、１０mMトリスおよび５mM  ＣＨＡＰＳ（ＲＸＲα、β、Γ）または０．５％トリトンＸ−１００（ＲＡＲα、β、Γ）から成っていた。混合物を撹拌し、４℃で１０分間インキュベートし、遠心し、上清を除去した。適当な洗浄緩衝液で、ヒドロキシアパタイトを更に３回洗った。受容体−リガンド複合体は、ヒドロキシアパタイトに吸着された。ヒドロキシアパタイトペレットの液体シンチレーションカウンティングによって、受容体−リガンド複合体量を測定した。
非特異的結合を補正後、ＩＣ50値を求めた。ＩＣ50値は、特異的結合を５０％低下するのに必要な競合リガンドの濃度と定義する。データのログロジットプロットのグラフからＩＣ50値を求めた。Cheng−Prussofの式を、ＩＣ50値、ラベルリガンド濃度およびラベルリガンドのKdに適用することによって、Kd値を求めた。リガンド結合アッセイの結果をKd値で表す。（Chengら、Biochemical Pharmacology、第２２巻、第３０９９〜３１０８頁参照。これを特に引用により本発明の一部とする。）
本発明の例示化合物によるリガンド結合アッセイの結果を表２に示す。
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表２に示す試験結果から明らかなように、表２中の例示本発明化合物は、ＲＡＲα受容体に特異的または選択的に結合する。
癌細胞系アッセイ
材料と方法
ホルモン
オールトランス-レチノイン酸（t-RA）（Sigma Chemicals Co.（ミズーリ州セントルイス）製）は−70℃で保存した。それを各実験に先立って100%エタノール中に１mMの濃度で溶解し、使用直前に培地で希釈した。いずれの実験も照明を抑えて行なった。実験プレートと同じ濃度のエタノールを用いて対照をアッセイした。この濃度はどちらのアッセイにも影響を与えなかった。
細胞と細胞培養
細胞系RPMI 8226、ME-180およびAML-193はいずれもアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（ATCC,メリーランド州ロックビル）から入手した。RPMI 8226は多発性骨髄腫患者の末梢血から得られたヒト造血細胞系である。この細胞は他のヒトリンパ球細胞系のリンパ芽球様細胞と似ており、免疫グロブリンのα型軽鎖を分泌する。RPMI-8226細胞は、10%ウシ胎児血清、グルタミンおよび抗生物質を添加したRPMI培地（Gibco製）中で増殖する。この細胞は、空気中5%CO2の加湿雰囲気下に37℃で増殖する懸濁培養物として維持した。週に2回、この細胞を1×105/mlの濃度に希釈した。
ME-180は頚部に由来するヒト類表皮癌細胞系である。この腫瘍は侵襲性の高い偏平上皮癌で、不規則な細胞クラスターを持ち、あまり角質化しない。ME-180細胞は、10%ウシ胎児血清、グルタミンおよび抗生物質を添加したマッコイ（McCoy）5a培地（Gibco製）中で増殖・維持した。この細胞は、空気中5%CO2の加湿雰囲気下に37℃で増殖する単層培養物として維持した。週に2回、この細胞を1×105/mlの濃度に希釈した。
AML-193はM5急性単球白血病に分類される芽球から樹立された。この細胞系を樹立するには増殖因子である顆粒球コロニー刺激因子（GM-CSF）が必要だった。また化学的に特定された培地におけるその継続的増殖にも増殖因子類が必要である。AML-193細胞は、10%ウシ胎児血清、グルタミンおよび抗生物質と5μg/mlインスリン（Sigma Chemical Co.製）および2ng/ml rh GM-CSF（R and D Systems製）を添加したアイスコーヴ（Iscove）改良ダルベッコ培地で増殖・維持した。週に2回、この細胞を3×105/mlの濃度に希釈した。
3H-チミジンの取り込み
放射能標識チミジンの取り込みの測定に使用した方法は、Shrivastavらが記述した方法を改良したものである。RPMI-8226細胞を、96ウェル丸底マイクロタイタープレート（Costar製）に1000細胞/ウェルの密度で接種した。適当なウェルに、150μl/ウェルの最終体積で所定の最終濃度になるようレチノイド被検化合物を加えた。そのプレートを空気中5%CO2の加湿雰囲気下に37℃で96時間インキュベートした。次に、培地25μl中の[5’-3H]-チミジン（英国Amersham製,比活性43Ci/mmol）1μCiを各ウェルに加え、細胞をさらに6時間インキュベートした。さらにその培養物を後述のように処理した。
トリプシン処理によって収集したME-180細胞を96ウェル平底マイクロタイタープレート（Costar製）に2000細胞/ウェルの密度で接種した。その培養物の処理は、次に挙げる点以外は、RPMI 8226について上述したのと同様に行なった。チミジンと共にインキュベートした後、上清を注意深く除去し、リン酸緩衝食塩水中の0.5mMチミジン溶液で細胞を洗浄した。ME180細胞を50μlの2.5%トリプシンで短時間処理することにより、細胞をプレートから剥がした。
AML-193細胞は、96ウェル丸底マイクロタイタープレート（Costar製）に1000細胞/ウェルの密度で接種した。適当なウェルに、150μl/ウェルの最終体積で所定の最終濃度になるようレチノイド被検化合物を加えた。そのプレートを空気中5%CO2の加湿雰囲気下に、37℃で96時間インキュベートした。次に、培地25μl中の[5’-3H]-チミジン（英国Amersham製,比活性43Ci/mmol）1μCiを各ウェルに加え、その細胞をさらに6時間インキュベートした。
次に、いずれの細胞系も次のように処理した：SKATRONマルチウェル細胞収集器（Skatron Instruments（ヴァージニア州スターリング）製）を用いて、細胞DNAを10%トリクロロ酢酸でガラス繊維フィルターマット上に沈澱させた。DNA中に取り込まれた放射能活性を、細胞増殖の直接的指標として、液体シンチレーション計数によって測定した。数値は、3ウェルずつ測定した取り込まれたチミジンの1分あたりの平均崩壊数±SEMを表わす。
上記のインビトロ細胞系において、本発明の例示化合物2は、10-11〜10-6モル濃度の被検化合物濃度範囲で、腫瘍細胞系の増殖（放射能標識チミジンの取り込みによって測定したもの）を有意に減少させた。
具体的態様
本発明の化合物は本明細書に例示する化学合成経路で製造できる。本明細書に記載する条件が、式1で表されるどの化合物にも一般化できる具体的態様であることは、合成化学者には容易に理解されるだろう。
一般に、本発明化合物の製造法は、式2の化合物と式3の化合物の反応または式2aの化合物と式3aの化合物の反応によるアミドの生成を伴う（これらの式については本特許出願の概要の項に定義する）。したがって上述のように、式2の化合物は、置換フェニル骨格（式1でXがCH）または置換ピリジル骨格（式1でXがN）に結合したカルボン酸またはその「活性型」である。
この場合、「活性型」カルボン酸という用語は、式3の1級アミンと反応させた時にアミドを形成しうるようなカルボン酸の誘導体をいうと解釈すべきである。「逆アミド」の場合、活性型カルボン酸とは、式2aの1級アミンと反応させたときにアミドを形成しうる誘導体（式3a）である。一般にこの用語は、アミンとのアミド結合の形成に当技術分野で通常使用される公知のカルボン酸誘導体を意味する。この目的に適した形態または誘導体の例は酸塩化物、酸臭化物、およびカルボン酸のエステル（特に、エステルのアルコール部分が良好な脱離基を形成する活性エステル）である。現在のところ式2（または式3a）に従う試薬として最も好ましいものは、酸塩化物（X1がCl）である。式2（または式3a）の酸塩化物は、対応するエステル（X1が例えばエチル）を加水分解し塩化チオニル（SOCl2）で処理することにより、従来法で製造できる。カルボン酸がエステルではなくカルボン酸そのものとして市販されている場合、あるいは公知の合成法で製造できる場合は、そのカルボン酸を塩化チオニルで直接処理することによって式2（または式3a）の酸塩化物を製造することもできる。通例、式2（または式3a）の酸塩化物を塩化メチレンのような不活性溶媒中、ピリジンなどの酸受容体の存在下に、式3のアミン（または式2aのアミン）と反応させる。
触媒（4-ジメチルアミノピリジン）と脱水剤（例えばジシクロヘキシルカルボジイミド（DCC）や、より好ましくは1-（3-ジメチルアミノプロピル）-3-エチルカルボジイミド塩酸塩（EDC）など）の存在下にアミンと反応させる場合は、式2（または式3a）に従うカルボン酸そのものもアミド形成に適している。
一般に式2のカルボン酸または対応するエステルは、化学文献または特許文献に記述されている方法で製造され、必要であればその文献製造法を、それ自体は当技術分野で知られている化学反応または化学工程で改良してもよい。本発明のいくつかの好ましい化合物の製造に使用される式2に従う一試薬2,6-ジ-tert-ブチルイソニコチン酸（化合物C）の製造例を、反応式1に示す。すなわち、2,6-ジ-tert-ブチル-4-メチルピリジン（Aldrich Chemical Co.から市販されている）をN-ブロモスクシンイミドおよび過酸化ベンゾイルと反応させて、4-ブロモメチル-2,6-ジ-tert-ブチルピリジン（化合物A）を得る。化合物Aを塩基（水酸化ナトリウム）と反応させて対応するヒドロキシメチル化合物（化合物B）を得た後、それをジョーンズ酸化反応で酸化することにより、2,6-ジ-tert-ブチルイソニコチン酸（化合物C）を得る。
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本発明のカルバモイル（またはアミド）化合物を製造するための試薬として役立つ化合物のもう1つの例を反応式1に示す。2,4-ジ-tert-ブチルフェノール（Aldrich製）を氷酢酸中で臭素化することにより、2-ブロモ-4,6-ジ-tert-ブチルフェノール（化合物D）を得た後、それを塩化メトキシメチル（MOMCl）と反応させて、O-メトキシメチル-2-ブロモ-4,6-ジ-tert-ブチルフェノール（化合物E）を得る。化合物Eをt-ブチルリチウムで処理した後、二酸化炭素で処理すると、O-メトキシメチル-3,5-ジ-tert-ブチルサリチル酸（化合物F）が得られる。化合物Fは、この化合物のヒドロキシル官能基がメトキシメチル（MOM）基で保護されているという点だけが式2に広く包含される化合物と異なる試薬である。しかし、例えば反応式5に例示するように、このメトキシメチル保護基はカルバモイル（アミド）結合の形成後に除去される。芳香族ブロモ化合物（例えば化合物D）をt-ブチルリチウムと反応させた後、二酸化炭素と反応させる方法は、本願に記載の式2および式3aに従ういくつかの芳香族カルボン酸を製造する方法として好ましい。
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反応式2は、上述の式3に対応する試薬として役立つ芳香族アミノカルボン酸またはエステルの製造例である。すなわち反応式2によれば、3-ニトロ-6-メチル-フルオロベンゼン（Aldrich製）を酸化反応に付し、得られたカルボン酸を酸塩化物に変換した後、エチルエステルに変換し、次にそのニトロ基を還元することにより、2-フルオロ-4-アミノ安息香酸エチル（化合物G）を得る。もう1つの例として、2,4,6-トリフルオロ安息香酸（Aldrich製）を酸塩化物経由でそのメチルエステルに変換し、その4-フッ素原子をアジ化ナトリウムとの反応によって置換することにより、アジド化合物中間体（化合物H）を得る。化合物Hを水素添加によって還元すると、2,6-ジフルオロ-4-アミノ安息香酸メチル（化合物I）が得られる。さらにもう1つの例として、2-ニトロ-4-アミノ安息香酸（Research Plus Inc.製）を、対応する酸塩化物経由でそのメチルエステル（化合物K）に変換する。
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反応式3は、式2aの1級アミンが公表された文献法で得られない場合に、式2の酸塩化物（X1=Cl）または他の形態の活性化酸から式2aの1級アミン化合物を合成する例である。すなわち、実質上クルチウス転位の方法に従って、式2の酸塩化物をアセトン中でアジ化ナトリウムと反応させることにより、式5のアジド化合物を得る。式5のアジドをt-ブタノールのような高沸点極性溶媒中で加熱して式6のイソシアネート中間体とし、それを加水分解することにより式2aの化合物を得る。
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反応式4は、市販されていないまたは公表された文献法で製造できない式3aの化合物の製造例を示している。すなわち、まず、例えば2,5-ジフルオロ-4-ブロモ安息香酸（Sugawaraら,工業化学雑誌1970,73,972-979（これは参考文献として本明細書の一部を構成する）の文献法で得ることができる）をエチルアルコールと酸で処理することによってエステル化して対応するエステルを得た後、それをブチルリチウムと反応させ、続いて二酸化炭素と反応させることにより、2,5-ジフルオロテレフタル酸のモノエステル（化合物L）を得る。同様の反応を2,3,5,6-ジフルオロ-4-ブロモ安息香酸（Reumanら,J.Med.Chem.1995,38,2531-2540（これは参考文献として本明細書の一部を構成する）の文献法で得ることができる）に対して行なうと、2,3,5,6-テトラフルオロテレフタル酸のモノエステル（化合物M）が得られる。一般に、ここに例示した一連の反応は、当業者に容易にわかるような変更を施すことにより、既知の文献法では製造できない式3aのいずれの化合物の合成にも利用できる。
本発明化合物の製造に適した方法、本発明の範囲に包含される式1の化合物をさらに別の本発明化合物に変換するのに適した方法、また式2、式3、式2aおよび式3aの試薬を製造するのに適した方法は他にも数多くあり、それらは本明細書に照らせば、当業者にはすぐわかるだろう。この点に関して、式1の化合物を別の同族体および/または誘導体に変換する場合、および式2と式3（同じく式2aと式3a）の試薬を製造する場合に適用できる一般的合成法を以下に記す。
カルボン酸は通例、塩化水素または塩化チオニルのような酸触媒の存在下に、適当なアルコール溶液中で酸を還流することによってエステル化する。また、ジシクロヘキシルカルボジイミドおよびジメチルアミノピリジンの存在下に、カルボン酸を適当なアルコールと縮合させてもよい。エステルは、常套の方法で回収および精製する。アセタールおよびケタールは、March、”Advanced Organic Chemistry”、第２版、McGraw-Hill Book Company、第８１０頁に記載の方法により容易に得られる。アルコール、アルデヒドおよびケトンは、例えばMcOmie、Plenum Publishing Press、１９７３およびProtecting Groups、Greene編、John Wiley ＆ Sons、１９８１に記載されているような既知の方法で、それぞれエーテルおよびエステル、アセタールまたはケタールを形成することによって保護し得る。
Ａが（ＣＨ2）q（ｑが１〜５）である化合物を合成するためには、Ｂが酸または他の官能基である式１の化合物を、よく知られたアルント−アイシュテルト同族体化法、または他の同族体法を用いる同族体化に付す。同様の同族体化（および、他の本発明に記載の合成変換のいくつか）は、式３または３ａの試薬に対して行うこともできる。Ａが二重結合を１個またはそれ以上有するアルケニル基である本発明化合物は、例えば必要数の二重結合を式３の試薬に含ませることによって合成することができる。通例、Ａが不飽和炭素鎖であるそのような化合物は、有機合成化学者によく知られた合成法によって、例えばヴィッティッヒ反応などの反応によって、またはα−ハロ−カルボン酸、エステルもしくはカルボキシアルデヒドからハロゲンを脱離して二重結合を導入することによって得ることができる。Ａが三重（アセチレン）結合を有する本発明化合物は、対応するアリールまたはヘテロアリールアルデヒド中間体を用いて合成し得る。そのような中間体は、当分野でよく知られた方法、例えば対応するメチルケトンと強塩基（例えばリチウムジイソプロピルアミド）との反応によって得ることができる。
式１の化合物から誘導する酸および塩は、対応するエステルから容易に得られる。アルカリ金属塩基で塩基性ケン化することにより、酸が得られる。例えば、好ましくは不活性ガス雰囲気中、室温で、約３モル過剰の塩基（例えば水酸化カリウムまたはリチウム）と共に、式１のエステルをアルカノールのような極性溶媒に溶解し得る。この溶液を１５〜２０時間撹拌し、冷却し、酸性化し、常套の方法で加水分解物を回収する。
アミド（式１において、ＢがＣＯＮＲ9Ｒ10）は、対応するエステルまたはカルボン酸から、当業者既知の適当ないずれのアミド化方法で生成してもよい。このような化合物を調製する一方法においては、酸を酸クロリドに変換し、次いで水酸化アンモニウムまたは適当なアミンで処理する。
アルコールは、対応する酸を塩化チオニルまたは他の手段によって酸クロリドに変換し（J.March、”Advanced Organic Chemistry”、第２版、McGraw-Hill Book Company）、次いで酸クロリドを水素化ホウ素ナトリウムで還元する（March、前掲書、第１１２４頁）ことによって得られる。また、低温において、エステルを水素化リチウムアルミニウムで還元してもよい。これらのアルコールを、ウィリアムソン反応条件下に適当なハロゲン化アルキルでアルキル化することによって、対応するエーテルが得られる（March、前掲書、第３５７頁）。これらのアルコールを、酸触媒またはジシクロヘキシルカルボジイミドおよびジメチルアミノピリジンの存在下に適当な酸と反応させることによって、エステルに変換し得る。
アルデヒドは、穏やかな酸化剤、例えば塩化メチレン中のピリジニウムジクロメート（Corey,E.J.、Schmidt,G.、Tet.Lett.、３９９、１９７９）または塩化メチレン中のジメチルスルホキシド／塩化オキサリル（Omura,K.、Swern,D.、Tetrahedron、１９７８、３４、１６５１）を用いて、対応する第一級アルコールから調製することができる。
ケトンは、適当なアルデヒドを、アルキルグリニヤール試薬または同様の試薬で処理し、次いで酸化することによって調製し得る。
アセタールまたはケタールは、March、前掲書、第８１０頁に記載の方法により、対応するアルデヒドまたはケトンから得られる。
ＢがＨである式１の化合物は、対応するハロゲン化芳香族化合物（ハロゲンは好ましくはＩである）から合成できる。
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反応式5は、式2の試薬と式3の試薬の反応による本発明のカルバモイル（アミド）化合物の製造例を示している。すなわち、2,6-ジ-tert-ブチルイソニコチン酸（化合物C）を塩化チオニル（SOCl2）と反応させて酸塩化物中間体にし、それを酸受容体（ピリジン）の存在下に2-フルオロ-4-アミノ安息香酸エチル（化合物G）と反応させて、2-フルオロ-4-[（2’,6’-ジ-tert-ブチルピリダ-4’-イル）カルバモイル]安息香酸エチル（化合物1）を得る。もう1つの例として、3,5-ジ-tert-ブチル安息香酸（Kagechikaら,J.Med.Chem.1988,31,2182（これは参考文献として本明細書の一部を構成する）の文献法で得ることができる）を塩化チオニルと反応させた後、2-フルオロ-4-アミノ安息香酸エチル（化合物G）と反応させて、2-フルオロ-4-[（3’,5’-ジ-tert-ブチルフェニル）カルバモイル]安息香酸エチル（化合物5）を得る。さらなる例として、O-メトキシメチル-3,5-ジ-tert-ブチルサリチル酸（化合物F）を4-ジメチルアミノピリジン（DMAP）触媒および1-（3-ジメチルアミノプロピル）-3-エチルカルボジイミド塩酸塩（EDC）の存在下に2-フルオロ-4-アミノ安息香酸エチル（化合物G）と反応させて、2-フルオロ-4-[（2’-メトキシメチル-3’,5’-ジ-tert-ブチルフェニル）カルバモイル]安息香酸エチル（化合物N）を得る。そのメトキシメチル保護基を、三フッ化ホウ素エーテル和物およびチオフェノールで処理することにより化合物Nから除去すると、2-フルオロ-4-[（2’-ヒドロキシ-3’,5’-ジ-tert-ブチルフェニル）カルバモイル]安息香酸エチル（化合物7）が得られる。
反応式5に示すもう1つの例では、2,6-ジ-tert-ブチルイソニコチン酸（化合物C）を塩化チオニル（SOCl2）と反応させ、得られた酸塩化物中間体を2,6-ジフルオロ-4-アミノ安息香酸メチル（化合物I）と反応させ、次にそのエステル基を鹸化することにより、2,6-ジフルオロ-4-[（2’,6’-ジ-tert-ブチルピリダ-4’-イル）カルバモイル]安息香酸（化合物10）を得る。3,5-ジ-tert-ブチル安息香酸をこれと同じ一連の反応に付すと、2,6-ジフルオロ-4-[（3’,5’-ジ-tert-ブチルフェニル）カルバモイル]安息香酸（化合物12）が得られる。
反応式5に示すもう1つの例として、2,6-ジ-tert-ブチルイソニコチン酸（化合物C）を塩化チオニル（SOCl2）と反応させた後、2-ニトロ-4-アミノ安息香酸メチル（化合物K）と反応させ、そのエステル官能基を鹸化することにより、2-ニトロ-4-[（2’,6’-ジ-tert-ブチルピリダ-4’-イル）カルバモイル]安息香酸（化合物14）を得る。
実施例
4-ブロモメチル-2,6-ジ-t-ブチルピリジン（化合物A）
乾燥CCl4 25mlと混合した2,6-ジ-t-ブチル-4-メチルピリジン（Aldrich製,2.0g,9.73mmol）に、過酸化ベンゾイル（24mg,0.097mmol）とNBS（1.9g,10.7mmol）を加えた。その反応混合物を16時間還流した。室温に冷却した後、溶媒を減圧下に除去し、残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル，ヘキサン）で精製することにより、油状物（1.957g）を得た。この油状物は82%の所望の生成物を含有し、18%は出発物質だった。1H NMRδ7.09（s,2H）,4.39（s,2H）,1.35（s,18H）。
4-ヒドロキシメチル-2,6-ジ-t-ブチルピリジン（化合物B）
12%NaOH水溶液20mlと1,4-ジオキサン10ml中の4-ブロモメチル-2,6-ジ-t-ブチルピリジン（化合物A,1.743g,純度82%）の不均一溶液を12時間還流した。その溶液は、室温に冷却すると自発的に二層に分離した。その上層を分離し、酢酸エチルを加えた。次に、この有機層を食塩水と水で洗浄し、MgSO4で乾燥した。所望の生成物をカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル/ヘキサン1/9）で精製することにより、白色固体を得た。1H NMRδ7.09（s,2H）,4.67（d,J=4.4Hz,2H）,2.3（b,1H）,1.36（s,18H）。
2,6-ジ-t-ブチルイソニコチン酸（化合物C）
アセトン5mlに溶解した4-ヒドロキシメチル-2,6-ジ-t-ブチルピリジン（化合物B、302mg,1.37mmol）に、その溶液が淡黄色から橙色に変わるまでジョーンズ試薬を滴下した（55滴のジョーンズ試薬を要した）。5分後、その反応混合物に2mlのイソプロパノールを加えると、Cr3+塩の緑色の沈澱が生じた。その沈澱を濾過によって除去し、溶液を酢酸エチルで希釈した後、食塩水と水で洗浄し、MgSO4で乾燥した。濾過後、溶媒を除去して所望の生成物を白色固体（227mg）として得た。1H NMRδ7.71（s,2H）,1.34（s,18H）。
2-ブロモ-4,6-ジ-t-ブチルフェノール（化合物D）
HOAc 2mlに溶解した2,4-ジ-t-ブチルフェノール（Aldrich製,2.0g,9.7mmol）に、Br2（0.5ml,9.7mmol）を加えた。その反応混合物を室温で12時間攪拌した。溶媒を減圧下に除去し、残渣をカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル/ヘキサン1/20）で精製することにより、所望の生成物（2.54g）を白色固体として得た。1H NMRδ7.33（d,J=2.3Hz,1H）,7.24（d,J=2.3Hz,1H）,1.41（s,9H）,1.29（s,9H）。
O-メトキシメチル-2-ブロモ-4,6-ジ-t-ブチルフェノール（化合物E）
0℃の乾燥CH2Cl2 20mlに溶解した2-ブロモ-4,6-ジ-t-ブチルフェノール（化合物D、2.54g,8.88mmol）と触媒量のBu4NIに、ジイソプロピルエチルアミン（9.51ml,53mmol）を加え、次に塩化メトキシメチル（2.02ml,26.6mmol）を加えた。その反応混合物を45℃に12時間加熱した。次に、その反応混合物を10%クエン酸で洗浄した後、NaHCO3（飽和）と食塩水で洗浄し、MgSO4で乾燥した。濾過し、溶媒を減圧下で除去した後、残渣をカラムクロマトグラフィー（純粋なヘキサン）で精製することにより、標題の化合物（2.79g）を無色の油状物として得た。1H NMRδ7.40（d,J=2.24Hz,1H）,7.30（d,J=2.4Hz,1H）,5.22（s,2H）,3.70（s,3H）,1.43（s,9H）,1.29（s,9H）。
O-メトキシメチル-3’,5’-ジ-t-ブチルサリチル酸（化合物F）
アルゴン下−78℃の乾燥THF 30mlに溶解したO-メトキシメチル-2-ブロモ-4,6-ジ-t-ブチルフェノール（化合物E,2.79g,8.5mmol）に、11mlのt-BuLi（1.7Mヘキサン溶液,18.7mmol）を加えた。その混合物を−78℃で1時間攪拌した。次に、その溶液に、CO2（気体）を−78℃で1時間吹き込んだ。CO2流を除いた後、その反応混合物を−78℃でさらに1時間攪拌した。次に、10%のHClを加え、その混合物を室温に温め、酢酸エチルで抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。濃縮後、残渣をカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル/ヘキサン1/1）で精製することにより、標題の化合物を白色固体（492mg）として得た。1H NMRδ7.75（d,J=2.81Hz,1H）,7.60（d,J=2.8Hz,1H）,5.07（s,2H）,3.62（s,3H）,1.33（s,9H）,1.26（s,9H）。
4-アミノ-2-フルオロ安息香酸エチル（化合物G）
HOAc 13.7ml中の2-フルオロ4-ニトロトルエン（1.0g,6.4mmol,Aldrich製）とNa2Cr2O7（2.74g,8.4mmol）の混合物に、H2SO4 6.83mlをゆっくり加えた。その混合物を90℃まで1時間ゆっくりと加熱することにより、緑色を帯びた不均一溶液を得た。その混合物を室温に冷却し、酢酸エチルで希釈した。その溶液のpHをNaOH水溶液で4に調節した。酢酸エチルをさらに用いて、その混合物を抽出した。合わせた有機層をNaHCO3（飽和）で洗浄した後、食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。濾過後、その溶液を蒸発乾固し、次にそれを6mlのSOCl2に溶解し、80℃で1時間加熱した。過剰のSOCl2を減圧下に除去し、残渣をCH2Cl2 5ml、EtOH 2mlおよびピリジン2mlに溶解した。その混合物を室温で2時間攪拌し、蒸発乾固した。その残渣を酢酸エチル/ヘキサン（1/9）でカラムクロマトグラフィーすることにより、2-フルオロ-4-ニトロ安息香酸エチルを白色固体として得た。次に、その固体を10mlの酢酸エチルに溶解し、Pd/C（50mg）を加えた。水素添加により、2-フルオロ-4-ニトロ安息香酸エチルを標題の化合物に変換した。1H NMRδ7.77（t,J=8.4Hz,1H）,6.41（dd,J1=8.6,J2=2.2Hz,1H）,6.33（dd,J1=13.0,J2=2.2Hz,1H）,4.33（q,J=7.1Hz,2H）,4.3（b,2H）,1.37（t,J=7.1Hz,3H）。
4-アミノ-2,6-ジフルオロ安息香酸メチル（化合物I）
SOCl2 0.5mlに溶解したトリフルオロ安息香酸（150mg,0.86mmol,Aldrich製）を還流下に2時間加熱した。その反応混合物を室温に冷却し、過剰のSOCl2を減圧下に除去した。残渣をピリジン1mlとメタノール0.2mlに溶解した。室温で30分間攪拌した後、溶媒を除去し、残渣をカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル/ヘキサン1/10）で精製することにより、トリフルオロ酢酸メチルを無色の油状物として得た。次に、その油状物を1mlのCH3CNに溶解し、水0.5mlに溶解したNaN3（100mg,1.54mmol）を加えた。その反応混合物を2日間還流した。濾過によって塩を除去し、残った溶液を油状物に濃縮した。次に、その油状物をメタノール1mlに溶解し、触媒量のPd/C（10%,w/w）を加えた。その反応混合物を12時間水素添加した。触媒を除去し、その溶液を油状物に濃縮した。カラムクロマトグラフィー（酢酸エチル/ヘキサン1/3）により、標題の化合物を無色の結晶として得た。1H NMRδ6.17（d,J=10.44Hz,2H）,4.2（b,2H）,3.87（s,3H）。
2-ニトロ-4-アミノ安息香酸メチル（化合物K）
2-ニトロ-4-アミノ安息香酸（261mg,1.43mmol）を1mlのSOCl2に溶解した。その溶液を1時間還流した。過剰のSOCl2を減圧下に除去し、その残渣にCH2Cl2 5ml、MeOH 1mlおよびTEA（0.24ml,1.7mmol）を加えた。その反応混合物を室温で2時間攪拌した。過剰のMeOHとTEAを除去し、その残渣をカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル/ヘキサン1/3）で精製することにより、標題の化合物を黄色固体（316mg）として得た。1H NMRδ7.69（d,J=8.5Hz,1H）,6.85（d,J=2.2Hz,1H）,6.67（dd,J=8.3;2.1Hz,1H）,4.31（b,2H）,3.94（s,3H）。
2-フルオロ-4-[（2’,6’-ジ-t-ブチルピリダ-4’-イル）カルバモイル]安息香酸エチル（化合物1）
SOCl2 2mlに溶解した2,6-ジ-t-ブチルイソニコチン酸（化合物C、47.3mg,0.20mmol）を還流下に2時間加熱した。過剰のSOCl2を減圧下に除去し、その残渣を2mlの乾燥CH2Cl2に溶解し、2-フルオロ-4-アミノ安息香酸エチル（化合物G,40.2mg,0.22mmol）とピリジン（0.0835ml,0.69mmol）を加えた。その反応混合物を室温で12時間攪拌した。溶媒を除去し、残渣をカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル/ヘキサン1/9）で精製することにより、標題の化合物（71.2mg）を白色結晶として得た。1H NMRδ8.56（b,1H）,7.91（t,J=8.36Hz,1H）,7.53（dd,J=12.82,2.0Hz,1H）,7.39（dd,J=8.7,2.0Hz,1H）,4.33（q,J=7.1Hz,2H）,1.37（t,J=7.1Hz,3H）,1.35（s,18H）。
4-[（2’,6’-ジ-t-ブチルピリダ-4’-イル）カルバモイル]安息香酸エチル（化合物3）
2-フルオロ-4-[（2’,6’-ジ-t-ブチルピリダ-4’-イル）カルバモイル]安息香酸エチル（化合物1）の合成法と同じ方法で、ただし2,6-ジ-t-ブチルイソニコチン酸（化合物C,101mg,0.43mmol）と4-アミノ安息香酸エチル（78mg,0.47mmol）を使用することにより、標題の化合物を白色固体（135mg）として得た。1H NMRδ8.43（b,1H）,8.02（d,J=8.7Hz,2H）,7.75（d,J=8.7Hz,2H）,7.48（s,2H）,4.33（q,J=7.1Hz,2H）,1.38（t,J=7.1Hz,3H）,1.35（s,18H）。
2-フルオロ-4-[（3’,5’-ジ-t-ブチルフェニル）カルバモイル]安息香酸エチル（化合物5）
2-フルオロ-4-[（2’,6’-ジ-t-ブチルピリダ-4’-イル）カルバモイル]安息香酸エチル（化合物1）の合成法と同じ方法で、ただし3,5-ジ-t-ブチル安息香酸（60mg,0.26mmol,文献法で得ることができる,Kagechikaら,J.Med.Chem.1988 31,2182-2192を参照のこと）と2-フルオロ-4-アミノ安息香酸エチル（化合物G,51.5mg,0.28mmol）を使用することにより、標題の化合物を白色固体（66mg）として得た。1H NMRδ8.21（b,1H）,7.93（t,J=8.3Hz,1H）,7.79（dd,J=12.8,2.0Hz,1H）,7.67（d,J=1.8Hz,2H）,7.65（t,J=1.7Hz,1H）,7.35（dd,J=8.7,2.1Hz,1H）,4.36（q,J=7.2Hz,2H）,1.39（t,J=7.2Hz,3H）,1.36（s,18H）。
2-フルオロ-4-[（2’-メトキシメチル-3’,5’-ジ-t-ブチルフェニル）カルバモイル]安息香酸エチル（化合物N）
乾燥CH2Cl2 5ml中のO-メトキシメチル-3’,5’-ジ-t-ブチルサリチル酸（化合物F,150mg,0.51mmol）、4-ジメチルアミノピリジン（142mg,0.61mmol）および2-フルオロ-4-アミノ安息香酸エチル（化合物G,102mg,0.56mmol）の混合物に、1-（3-ジメチルアミノプロピル）-3-エチルカルボジイミド塩酸塩（117mg,0.61mmol）を加えた。その反応混合物を室温で12時間攪拌した。溶媒を減圧下に留去し、その残渣を酢酸エチルに溶解した後、食塩水と水で洗浄し、MgSO4で乾燥した。濾過した後、溶媒を除去し、その残渣をカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル/ヘキサン1/3）で精製することにより、標題の化合物（58mg）を得た。1H NMRδ8.97（b,1H）,7.94（t,J=8.37Hz,1H）,7.78（d,J=2.7Hz,1H）,7.61（d,J=13.0Hz,1H）,7.56（d,J=2.6Hz,1H）,7.35（d,J=8.7Hz,1H）,5.00（s,2H）,3.53（s,3H）,4.38（q,J=7.1Hz,2H）,1.47（s,9H）,1.39（t,J=7.2Hz,3H）,1.33（s,9H）。
2-フルオロ-4-[（2’-ヒドロキシ-3’,5’-ジ-t-ブチルフェニル）カルバモイル]安息香酸エチル（化合物7）
THF 1mlに溶解した2-フルオロ-4-[（2’-メトキシメチル-3’,5’-ジ-t-ブチルフェニル）カルバモイル]安息香酸エチル（化合物N,34mg,0.07mmol）に、10滴のHOAcを加えた。その反応混合物を12時間加熱還流した。溶媒を除去し、酢酸エチルを加えた。その溶液をNaHCO3（飽和）、食塩水、水で洗浄し、MgSO4で乾燥した。溶媒を減圧下に除去して油状物を得た。その油状物を大気に12時間さらしたところ、その間に結晶が生成した。その結晶を集め、ヘキサンで数回洗浄することにより、標題の化合物を白色固体（13.5mg）として得た。1H NMRδ10.73（s,1H）,7.98（d,J=2.56Hz,1H）,7.88（b,1H）,7.75（t,J=8.26Hz,1H）,7.60（d,J=2.44Hz,1H）,7.32（dd,J=12.3,2.0Hz,1H）,7.02（dd,J=8.6,2.0Hz,1H）,4.35（q,J=7.2Hz,2H）,1.39（s,9H）,1.37（t,J=7.2Hz,3H）,1.5（s,9H）。
2,6-ジフルオロ-4-[（2’,6’-ジ-t-ブチルピリダ-4’-イル）カルバモイル]安息香酸（化合物10）
2,6-ジ-t-ブチルイソニコチン酸（化合物C,20mg,0.085mmol）に1mlのSOCl2を加えた。その混合物を還流下に2時間加熱した。室温に冷却した後、過剰のSOCl2を除去し、その残渣を2mlのCH2Cl2に溶解した。その溶液に、2,6-ジフルオロ-4-アミノ安息香酸メチル（化合物I,16mg,0.085mmol）とトリエチルアミン（0.015ml,0.1mmol）を加えた。その反応混合物を2時間室温に保った後、蒸発乾固した。その残渣をカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル/ヘキサン1/10）で精製することにより、標題の化合物のメチルエステルを得た。それを一般的方法（下記参照）で鹸化することにより、標題の化合物を無色の固体として得た。1H NMRδ7.44（s,2H）,7.40（d,J=11.8Hz,2H）,1.37（s,18H）。
2,6-ジフルオロ-4-[（3’,5’-ジ-t-ブチルフェニル）カルバモイル]安息香酸（化合物12）
2,6-ジフルオロ-4-[（2’,6’-ジ-t-ブチルピリダ-4’-イル）カルバモイル]安息香酸（化合物10）の製造法と同じ方法で、ただし3,5-ジ-t-ブチル安息香酸（37mg,0.16mmol）と2,6-ジフルオロ-4-アミノ安息香酸メチル（化合物I,29mg,0.16mmol）を使用することにより、標題の化合物を無色の結晶として得た。1H NMRδ7.92（b,1H）,7.60（m,3H）,7.42（d,J=10.0Hz,2H）,1.38（s,18H）。
2-ニトロ-4-[（2’,6’-ジ-t-ブチルピリダ-4’-イル）カルバモイル]安息香酸（化合物14）
2,6-ジフルオロ-4-[（2’,6’-ジ-t-ブチルピリダ-4’-イル）カルバモイル]安息香酸（化合物10）の製造法と同じ方法で、ただし2,6-ジ-t-ブチルイソニコチン酸（40mg,0.17mmol）と2-ニトロ-4-アミノ安息香酸メチル（化合物K,33mg,0.17mmol）を使用することにより、標題の化合物を淡黄色油状物として得た。1H NMRδ（アセトン-d6）10.25（b,1H）,8.32（s,1H）,7.97（d,J=8.1Hz,1H）,7.93（b,1H）,7.70（s,2H）,1.36（s,18H）。
対応するメチルまたはエチルエステルの加水分解による安息香酸誘導体の一般的合成法
EtOH 20mlに溶解したエステル（3.0mmol）に、1N NaOH水溶液5mlを加えた。その反応混合物を室温で終夜攪拌し、10%HClでpH=5に中和した。アルコールを留去し、水層を酢酸エチル（3×10ml）で抽出した。その酢酸エチル層をさらにNaHCO3（飽和）と食塩水で洗浄し、MgSO4で乾燥した。濃縮後、所望のカルボン酸を得た。これは酢酸エチルまたはアセトニトリル中で再結晶することができた。
2-フルオロ-4-[（2’,6’-ジ-t-ブチルピリダ-4’-イル）カルバモイル]安息香酸（化合物2）
1H NMRδ（CD3OD）7.92（t,J=8.36Hz,1H）,7.82（dd,J=12.82,2.0Hz,1H）,7.63（s,2H）,7.55（dd,J=8.7,2.1Hz,1H）,1.39（s,18H）。
4-[（2’,6’-ジ-t-ブチルピリダ-4’-イル）カルバモイル]安息香酸（化合物4）
1H NMRδ（CD3OD）8.02（d,J=8.85Hz,2H）,7.85（d,J=8.85Hz,2H）,7.63（s,2H）,1.40（s,18H）。
2-フルオロ-4-[（3’,5’-ジ-t-ブチル）フェニルカルバモイル]安息香酸（化合物6）
1H NMRδ（CD3OD）7.92（t,J=8.3Hz,1H）,7.80（dd,J=12.8,2.0Hz,1H）,7.79（d,J=1.8Hz,2H）,7.69（t,J=1.7Hz,1H）,7.57（dd,J=8.7,2.1Hz,1H）,1.37（s,18H）。
2-フルオロ-4-[（2’-ヒドロキシ-3’,5’-ジ-t-ブチル）フェニルカルバモイル]安息香酸（化合物8）
1H NMRδ（アセトン-d6）12.3（b,1H）,10.07（b,1H）,7.98（t,J=8.48,1H）,7.80（m,2H）,7.58（d,J=2.3Hz,1H）,7.56（dd,J=8.8,2.0Hz,1H）,1.44（s,9H）,1.31（s,9H）。