【手続補正書】
【提出日】平成17年5月17日(2005.5.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
骨格筋のジヒドロピリジン受容体ポリペプチドのフラグメントを含む組成物であって、該ペプチドは、配列番号１〜１０のいずれか一つに示されるペプチド及びＲＫＲＲＫモチーフの少なくとも５個の連続アミノ酸残基を含むペプチド、又はその機能性誘導体、相同体もしくは類似体である、前記組成物。
【請求項２】
フラグメントが、ペプチド配列：
Ｔｈｒ  Ｓｅｒ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｌｙｓ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｇｌｕ  Ｇｌｕ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ａｒｇ  Ｓｅｒ  Ｌｙｓ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｘａａ  （配列番号１）及びＲＫＲＲＫモチーフ、
の少なくとも５個の連続アミノ酸残基を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
ペプチド配列が以下のペプチド配列：
（ｉ）  Ｔｈｒ  Ｓｅｒ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ｍｅｔ  Ｓｅｒ  Ｌｙｓ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  （配列番号３）
（ｉｉ）  Ｔｈｒ  Ｓｅｒ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ｍｅｔ  Ｓｅｒ  Ａｒｇ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  （配列番号４）
（ｉｉｉ）  Ｔｈｒ  Ｓｅｒ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ｍｅｔ  Ｓｅｒ  Ａｒｇ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  （配列番号２）
（ｉｖ）  Ｔｈｒ  Ｓｅｒ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ｍｅｔ  Ａｌａ  Ａｒｇ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  （配列番号８）
（ｖ）  Ｔｈｒ  Ｓｅｒ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ｍｅｔ  Ｓｅｒ  Ｘａａ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  （配列番号９）
（ｖｉ）  Ｔｈｒ  Ｓｅｒ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ｍｅｔ  Ａｌａ  Ｘａａ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  （配列番号１０）
のいずれか一つ、又はその機能性誘導体、相同体もしくは類似体に相当する、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
ペプチドが、少なくとも１０個の連続アミノ酸残基を含む、請求項１ないし３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５】
フラグメントが塩基性荷電フラグメントである、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
さらに製薬上許容しうるアジュバント、溶媒、賦形剤又は担体を含む、請求項１ないし５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項７】
心リアノジン受容体カルシウムチャンネルの活性を調節するための組成物であって、心リアノジンチャンネルを、前記リアノジンチャンネルの活性を調節するに足る量の組成物と接触させる、請求項１ないし６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項８】
心リアノジンカルシウムチャンネルのペプチド又は非ペプチドモジュレーターを同定するための組成物であって：
（ｉ）ある量の組成物を、機能性心リアノジンカルシウムチェンネルの存在下、カルシウムチャンネルの活性が調節されるのに適当な条件下でインキュベートして該チャンネルの活性を測定し；
（ｉｉ）候補のペプチド又は非ペプチド化合物を、前記機能性心リアノジンカルシウムチャンネルの存在下、カルシウムチャンネルの活性が前記組成物によって調節されるのに適当な条件下でインキュベートして該チャンネルの活性を測定し；そして、
（ｉｉｉ）（ｉ）及び（ｉｉ）における活性を比較する；
請求項１ないし６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項９】
調節がアップレギュレーションである、請求項７又は８に記載の組成物。
【請求項１０】
フラグメントが、約１ｎＭ〜約１０μＭの範囲の濃度で適用される、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
調節がダウンレギュレーションである、請求項７又は８に記載の組成物。
【請求項１２】
フラグメントが、約１０μＭを上回る濃度で適用される、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
心リアノジンカルシウムチャンネルの候補アゴニスト又はアンタゴニストを同定するための、請求項１ないし６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１４】
心リアノジンチャンネルが開口しているか又は高いチャンネル開口確率を有しているかどうかを決定するための組成物であって、心リアノジンチャンネルを、ある量の組成物に、リアノジンへの結合が起こるに足る時間及び条件下で接触させ、前記ペプチドのリアノジンへの結合を測定することを含み、前記ペプチドのリアノジンへの結合は高いチャンネル開口確率を示し、ペプチドのチャンネルポアへの非特異的なペプチドの結合は低いチャンネル開口確率を示す、請求項１ないし６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１５】
患者における心機能不全を治療するための組成物であって、有効量の組成物を、増強された心収縮が起こるに足る時間及び条件下で投与し、それによって前記心機能不全を矯正する、請求項１ないし６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１６】
心機能不全が、心筋収縮不全、虚血性心疾患、敗血症のような全身性炎症状態、心肥大（カルシウム過負荷）、催不整脈性右室異形成２型（ＡＲＶＤ２）、及び薬物（例えばコカイン）性心筋症のような心筋症、心筋梗塞、律動異常、鬱血性心不全、又は心臓発作である、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
心リアノジンカルシウムチャンネルの活性を調節し、それによってカルシウムシグナリングの欠陥を調節するための、請求項１ないし６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１８】
カルシウムシグナリングの欠陥が、慢性心肥大、拡張型心筋症又は心不全を誘発する、請求項１７に記載の組成物。
【請求項１９】
収縮力を増強し、さらに収縮期に細胞内カルシウム濃度（すなわち［Ｃａ2+］i）を増加させ、さらに拡張期に［Ｃａ2+］iを減少させることができる用量として投与されるのに適した組成物である、請求項１７又は１８に記載の組成物。
【請求項２０】
ペプチド又はその相同体、類似体、もしくは誘導体が、収縮期の［Ｃａ2+］iに比べて収縮期の［Ｃａ2+］iに少なくとも約３％又は５％の増加を誘導する、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２１】
ペプチド又はその相同体、類似体、もしくは誘導体が、拡張期の［Ｃａ2+］iに比べて拡張期の［Ｃａ2+］iに少なくとも約３％又は５％の減少を誘導する、請求項２０に記載の組成物。
【請求項２２】
それぞれ収縮期の［Ｃａ2+］i又は拡張期の［Ｃａ2+］iに比べて、少なくとも約１０％又は１５％、前記収縮期の［Ｃａ2+］iが増加し、又は拡張期の［Ｃａ2+］iが減少する、請求項２０又は２１に記載の組成物。
【請求項２３】
投与されたペプチドが、心収縮の効率に改善をもたらす、請求項１７〜２２のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２４】
心収縮が、投与後０．５〜１．０時間以内にプレロード・リクルータブル・ストローク・ワークの少なくとも約５％又は１０％の増加を誘導することによって増強される、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２５】
心収縮が、約１５％、２０％、３０％、４０％、５０％、５５％、６０％又は７０％増強される、請求項２４に記載の組成物。
【請求項２６】
非ヒト動物において心リアノジン受容体カルシウムチャンネルの活性を調節する方法であって、心リアノジンチャンネルを、前記リアノジンチャンネルの活性を調節するに足る量の、ＲＫＲＲＫモチーフを含んでなる骨格筋のジヒドロピリジン受容体ポリペプチドのフラグメント又はその機能性誘導体、相同体もしくは類似体と接触させることを含む方法。
【請求項２７】
前記心リアノジンカルシウムチャンネルの活性を測定する追加のステップを含む、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
非ヒト動物において、心リアノジンカルシウムチャンネルのペプチド又は非ペプチドモジュレーターを同定する方法であって、
（ｉ）心リアノジンチャンネルの活性を調節する量の、ＲＫＲＲＫモチーフを含んでなる骨格筋のジヒドロピリジン受容体ポリペプチドのフラグメント又はその機能性相同体、類似体もしくは誘導体を、機能性心リアノジンカルシウムチェンネルの存在下、カルシウムチャンネルの活性が調節されるのに適当な条件下でインキュベートして該チャンネルの活性を測定し；
（ｉｉ）候補のペプチド又は非ペプチド化合物を、前記機能性心リアノジンカルシウムチャンネルの存在下、カルシウムチャンネルの活性が前記ジヒドロピリジン受容体ポリペプチドのフラグメント又はその相同体、類似体もしくは誘導体によって調節されるのに適当な条件下でインキュベートして該チャンネルの活性を測定し；そして、
（ｉｉｉ）（ｉ）及び（ｉｉ）における活性を比較する；
ことを含む方法。
【請求項２９】
調節がアップレギュレーションである、請求項２６又は２８に記載の方法。
【請求項３０】
フラグメントが約１ｎＭ〜約１０μＭの範囲の濃度で適用される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
調節がダウンレギュレーションである、請求項２６又は２８に記載の方法。
【請求項３２】
フラグメントが約１０μＭを上回る濃度で適用される、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
フラグメントが、ペプチド配列：
Ｔｈｒ  Ｓｅｒ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｌｙｓ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｇｌｕ  Ｇｌｕ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ａｒｇ  Ｓｅｒ  Ｌｙｓ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｘａａ  （配列番号１）及びＲＫＲＲＫモチーフ、
の少なくとも５個の連続アミノ酸残基を含む、請求項２６ないし３２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３４】
ペプチド配列が以下のペプチド配列：
（ｉ）  Ｔｈｒ  Ｓｅｒ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ｍｅｔ  Ｓｅｒ  Ｌｙｓ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  （配列番号３）
（ｉｉ）  Ｔｈｒ  Ｓｅｒ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ｍｅｔ  Ｓｅｒ  Ａｒｇ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  （配列番号４）
（ｉｉｉ）  Ｔｈｒ  Ｓｅｒ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ｍｅｔ  Ｓｅｒ  Ａｒｇ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  （配列番号２）
（ｉｖ）  Ｔｈｒ  Ｓｅｒ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ｍｅｔ  Ａｌａ  Ａｒｇ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  （配列番号８）
（ｖ）  Ｔｈｒ  Ｓｅｒ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ｍｅｔ  Ｓｅｒ  Ｘａａ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  （配列番号９）
（ｖｉ）  Ｔｈｒ  Ｓｅｒ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ｍｅｔ  Ａｌａ  Ｘａａ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  （配列番号１０）
のいずれか一つ、又はその機能性誘導体、相同体もしくは類似体に相当する、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
ペプチドが、少なくとも１０個の連続アミノ酸残基を含む、請求項２６ないし３４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３６】
フラグメントが塩基性荷電フラグメントである、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
（ｉ）非ヒト動物において、心リアノジンカルシウムチャンネルの候補アゴニスト又はアンタゴニストを同定し；
（ｉｉ）実際に心リアノジンチャンネルを活性化又は阻害する（ｉ）の化合物を決定し；
（ｉｉｉ）（ｉｉ）のどの化合物がＲＫＲＲＫモチーフを含んでなる配列番号１〜１０のいずれか一つより前記心リアノジンカルシウムチャンネルに対して高い結合親和性を有しているかを決定し；そして、
（ｉｖ）場合により、（ｉｉｉ）の化合物と前記心リアノジンカルシウムチャンネル間の相互作用部位を決定する；
ことを含むプロセス。
【請求項３８】
非ヒト動物において、心リアノジンチャンネルが開口しているか又は高いチャンネル開口確率を有しているかどうかを決定する方法であって、前記方法は、心リアノジンチャンネルを、ある量の、ＲＫＲＲＫモチーフを含んでなる骨格筋のジヒドロピリジン受容体ポリペプチドのフラグメントに、リアノジンへの結合が起こるに足る時間及び条件下で接触させ、前記ペプチドのリアノジンへの結合を測定することを含み、前記ペプチドのリアノジンへの結合は高いチャンネル開口確率を示し、ペプチドのチャンネルポアへの非特異的なペプチドの結合は低いチャンネル開口確率を示す方法。
【請求項３９】
非ヒト動物患者における心機能不全の治療法であって、有効量の、ＲＫＲＲＫモチーフを含んでなる骨格筋のジヒドロピリジン受容体ポリペプチドのフラグメントを、増強された心収縮が起こるに足る時間及び条件下で投与し、それによって前記心機能不全を矯正することを含む方法。
【請求項４０】
心機能不全が、心筋収縮不全、虚血性心疾患、敗血症のような全身性炎症状態、心肥大（カルシウム過負荷）、催不整脈性右室異形成２型（ＡＲＶＤ２）、及び薬物（例えばコカイン）性心筋症のような心筋症、心筋梗塞、律動異常、鬱血性心不全、又は心臓発作である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
フラグメントが、ペプチド配列：
Ｔｈｒ  Ｓｅｒ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｌｙｓ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｇｌｕ  Ｇｌｕ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ａｒｇ  Ｓｅｒ  Ｌｙｓ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｘａａ  （配列番号１）及びＲＫＲＲＫモチーフ、
の少なくとも５個の連続アミノ酸残基を含む、請求項３９又は４０に記載の方法。
【請求項４２】
前記ペプチド配列が以下のペプチド配列：
（ｉ）  Ｔｈｒ  Ｓｅｒ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ｍｅｔ  Ｓｅｒ  Ｌｙｓ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  （配列番号３）
（ｉｉ）  Ｔｈｒ  Ｓｅｒ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ｍｅｔ  Ｓｅｒ  Ａｒｇ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  （配列番号４）
（ｉｉｉ）  Ｔｈｒ  Ｓｅｒ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ｍｅｔ  Ｓｅｒ  Ａｒｇ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  （配列番号２）
（ｉｖ）  Ｔｈｒ  Ｓｅｒ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ｍｅｔ  Ａｌａ  Ａｒｇ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  （配列番号８）
（ｖ）  Ｔｈｒ  Ｓｅｒ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ｍｅｔ  Ｓｅｒ  Ｘａａ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  （配列番号９）
（ｖｉ）  Ｔｈｒ  Ｓｅｒ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ｍｅｔ  Ａｌａ  Ｘａａ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  （配列番号１０）
のいずれか一つ、又はその機能性誘導体、相同体もしくは類似体に相当する、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
ペプチドが、少なくとも１０個の連続アミノ酸残基を含む、請求項３９ないし４２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４４】
フラグメントが塩基性荷電フラグメントである、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
非ヒト動物において心リアノジンカルシウムチャンネルの活性を調節し、それによってカルシウムシグナリングの欠陥を調節するための、配列番号１〜１０いずれか一つ及びＲＫＲＲＫモチーフに示したペプチドの少なくとも５個の連続アミノ酸残基を含む骨格筋のジヒドロピリジン受容体ペプチドのフラグメント、又はその機能的相同体、類似体、もしくは誘導体の使用。
【請求項４６】
ペプチドが、少なくとも１０個の連続アミノ酸残基を含む、請求項４５に記載の使用。
【請求項４７】
カルシウムシグナリングの欠陥が、慢性心肥大、拡張型心筋症又は心不全を誘発する、請求項４５又は４６に記載の使用。
【請求項４８】
ペプチド又はその相同体、類似体、もしくは誘導体が、収縮力を増強し、さらに収縮期に細胞内カルシウム濃度（すなわち［Ｃａ2+］i）を増加させ、さらに拡張期に［Ｃａ2+］iを減少させることができる用量として投与される、請求項４５又は４６に記載の使用。
【請求項４９】
ペプチド又はその相同体、類似体、もしくは誘導体が、収縮期の［Ｃａ2+］iに比べて収縮期の［Ｃａ2+］iに少なくとも約３％又は５％の増加を誘導する、請求項４８に記載の使用。
【請求項５０】
ペプチド又はその相同体、類似体、もしくは誘導体が、拡張期の［Ｃａ2+］iに比べて拡張期の［Ｃａ2+］iに少なくとも約３％又は５％の減少を誘導する、請求項４８に記載の使用。
【請求項５１】
それぞれ収縮期の［Ｃａ2+］i又は拡張期の［Ｃａ2+］iに比べて、少なくとも約１０％又は１５％、前記収縮期の［Ｃａ2+］iが増加し、又は拡張期の［Ｃａ2+］iが減少する、請求項４９又は５０に記載の使用。
【請求項５２】
投与されたペプチドが、心収縮の効率に改善をもたらす、請求項４５ないし４９のいずれか１項に記載の使用。
【請求項５３】
心収縮が、投与後０．５〜１．０時間以内にプレロード・リクルータブル・ストローク・ワークの少なくとも約５％又は１０％の増加を誘導することによって増強される、請求項５２に記載の使用。
【請求項５４】
心収縮が、約１５％、２０％、３０％、４０％、５０％、５５％、６０％又は７０％増強される、請求項５３に記載の使用。