【手続補正書】
【提出日】平成18年8月14日(2006.8.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）（ｉ）ナトリウム排泄増加性分子ＮＰＲ−Ａ結合部位、および
（ｉｉ）少なくとも１個の修飾部分結合部位
を含有する生物学的に活性なナトリウム排泄増加性化合物；および
（ｂ）上記修飾部分結合部位に結合されている少なくとも１個の修飾部分；
を含有するナトリウム排泄増加性化合物結合体であって、このナトリウム排泄増加性化合物結合体は、対応する未結合ナトリウム排泄増加性化合物に対する酵素による分解に比較して増大した耐性、増大した循環半減期、増加した生体利用性、および延長された効果持続性からなる群から選択される１種または２種以上の利点を示す、上記ナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項２】
対応する未結合ナトリウム排泄増加性化合物に比較し、治療的に格別の割合でｃＧＭＰ刺激活性を保有することをさらに特徴とする、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項３】
対応する未結合ナトリウム排泄増加性化合物のｃＧＭＰ刺激活性の少なくとも３０％を保有することをさらに特徴とする、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項４】
対応する未結合ナトリウム排泄増加性化合物のｃＧＭＰ刺激活性の少なくとも５０％を保有することをさらに特徴とする、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項５】
対応する未結合ナトリウム排泄増加性化合物のｃＧＭＰ刺激活性の少なくとも７０％を保有することをさらに特徴とする、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項６】
対応する未結合ナトリウム排泄増加性化合物のｃＧＭＰ刺激活性の少なくとも９０％を保有することをさらに特徴とする、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項７】
対応する未結合ナトリウム排泄増加性化合物よりもさらに親水性であることをさらに特徴とする、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項８】
対応する未結合ナトリウム排泄増加性化合物よりもさらに両親媒性であることをさらに特徴とする、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項９】
対応する未結合ナトリウム排泄増加性化合物よりもさらに親油性であることをさらに特徴とする、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項１０】
修飾部分がアルキル基からなるものではない、請求項９に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項１１】
対応する未結合ナトリウム排泄増加性化合物よりも大きいプロテアーゼ分解耐性であることをさらに特徴とする、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項１２】
ナトリウム排泄増加性化合物が下記配列を含有する、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体：
Ａ1ＰＸ1ＭＶＱＧＳＧＣＦＧＲＸ2ＭＤＲＩＳＳＳＳＧＬＧＣＸ3ＶＬＲ（配列番号：１１６）
（ここで、
Ａ1は、ナトリウム排泄増加性ペプチドに天然で存在するアミノ酸または一連のアミノ酸であり、
Ｘ1、Ｘ2およびＸ3は、Ｌｙｓ、ＡｒｇおよびＧｌｙからなる群から独立して選択され、およびＸ1、Ｘ2およびＸ3の少なくとも１個はＬｙｓである）。
【請求項１３】
ナトリウム排泄増加性化合物が、脳ナトリウム排泄増加性ペプチド、動脈ナトリウム排泄増加性ペプチド、Ｃ−型ナトリウム排泄増加性ペプチドまたはデンドロアスピス（dendroaspis）ナトリウム排泄増加性ペプチドのペプチドまたは生物学的に活性なペプチドセグメントを含有する、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項１４】
ナトリウム排泄増加性化合物が、
（ａ）アミノ酸配列：
Ｘ1−Ｃ1ＦＧＲＸ2ＭＤＲＩＳＳＳＳＧＬＧＣ2−Ｘ3（配列番号：１１７）
（ここで、
Ｘ1は、存在していてもよく、また存在する場合、１〜１０個のアミノ酸を有するアミノ酸配列であり、
Ｘ2は、Ｇｌｙ、ＡｒｇまたはＬｙｓであり、および
Ｘ3は、存在していてもよく、また存在する場合、１〜１０個のアミノ酸を有するアミノ酸配列である）、
（ｂ）ループを形成するためのＣ1−Ｃ2間のジスルフィド結合、
を含有する、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項１５】
Ｘ1がＡｒｇまたはＧｌｙである、請求項１４に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項１６】
Ｘ1が下記群から選択される、請求項１４に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体：
（ａ）Ｌｙｓ；
（ｂ）Ｇｌｙ；
（ｃ）Ａｒｇ；
（ｄ）ＳＧ−、ＧＳＧ−、ＱＧＳＧ−（配列番号：１１８）、ＶＱＧＳＧ−（配列番号：１１９）、ＭＶＱＧＳＧ−（配列番号：１２０）、ＰＫＭＶＱＧＳＧ−（配列番号：１２１）、およびＳＰＫＭＶＱＧＳＧ−（配列番号：１２２）；
（ｅ）ＬｙｓのＧｌｙへの置換およびＬｙｓのＡｒｇへの置換からなる群から選択される置換を含有する（ｄ）のｈＢＮＰセグメント；
（ｆ）ＧｌｙのＬｙｓへの置換およびＡｒｇのＬｙｓへの置換からなる群から選択される置換を含有する（ｄ）のｈＢＮＰセグメント；
（ｇ）挿入Ｌｙｓを含有する（ｄ）のｈＢＮＰセグメント；
（ｈ）ナトリウム排泄増加性ペプチドのＮ−末端テイルのＣ−末端セグメントおよびＮ−末端テイル；
（ｉ）ＬｙｓのＧｌｙへの置換およびＬｙｓのＡｒｇへの置換からなる群から選択される置換を含有する（ｈ）のＣ−末端セグメントおよびＮ−末端テイル；
（ｊ）ＬｙｓのＧｌｙへの置換およびＬｙｓのＡｒｇへの置換からなる群から選択される置換を含有する（ｈ）のＣ−末端セグメントおよびＮ−末端テイル；
（ｋ）挿入Ｌｙｓを含有する（ｈ）のＣ−末端セグメントおよびＮ−末端テイル。
【請求項１７】
Ｘ3が下記群から選択される、請求項１４に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体：
（ａ）Ｌｙｓ；
（ｂ）Ｇｌｙ；
（ｃ）Ａｒｇ；
（ｄ）ｈＢＮＰセグメント  ＫＶ、ＫＶＬ、ＫＶＬＲ（配列番号：１０７）、ＫＶＬＲＲ（配列番号：１０６）、およびＫＶＬＲＲＨ（配列番号：１０５）；および
（ｅ）ＬｙｓのＧｌｙへの置換およびＬｙｓのＡｒｇへの置換からなる群から選択される置換を含有する（ｄ）のｈＢＮＰセグメント；
（ｆ）ＧｌｙのＬｙｓへの置換およびＡｒｇのＬｙｓへの置換からなる群から選択される置換を含有する（ｄ）のｈＢＮＰセグメント；
（ｇ）挿入Ｌｙｓを含有する（ｄ）のｈＢＮＰセグメント；
（ｈ）ナトリウム排泄増加性ペプチドのＮ−末端セグメントおよびＣ−末端テイル；
（ｉ）ＬｙｓのＧｌｙへの置換およびＬｙｓのＡｒｇへの置換からなる群から選択される置換を含有する（ｈ）のＣ−末端テイルのＮ−末端セグメントおよびＣ−末端テイル；
（ｊ）ＬｙｓのＧｌｙへの置換およびＬｙｓのＡｒｇへの置換からなる群から選択される置換を包含する（ｈ）のＣ−末端テイルのＮ−末端セグメントおよびＣ−末端テイル；
（ｋ）挿入Ｌｙｓを含有する（ｈ）のＣ−末端テイルのＮ−末端セグメントおよびＣ−末端テイル。
【請求項１８】
ナトリウム排泄増加性化合物が、
（ａ）ＳＰＫＭＶＱＧＳＧＣＦＧＲＫＭＤＲＩＳＳＳＳＧＬＧＣＫＶＬ（配列番号：１２３）；
（ｂ）ＳＰＫＭＶＱＧＳＧＣＦＧＲＫＭＤＲＩＳＳＳＳＧＬＧＣ（配列番号：１２４）；および
（ｃ）ＬｙｓのＧｌｙへの置換およびＬｙｓのＡｒｇへの置換からなる群から選択される置換を含有するセグメント（ａ）または（ｂ）；
からなる群から選択される配列を含有する、請求項１４に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項１９】
Ｘ1がｈＢＮＰのＮ−末端から１〜９個のアミノ酸残基配列を含有する、請求項１４に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項２０】
Ｘ1が、ＳＰＸ3ＭＶＱＧＳＧ（配列番号：１２５）を含有し、およびＸ2が修飾部分結合部位を有する、請求項１４に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項２１】
Ｘ3が、ｈＢＮＰのＣ−末端から１〜６個のアミノ酸残基配列を含有する、請求項１４に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項２２】
Ｘ3が、ＫＶＬＲＲＨ（配列番号：１０５）、ＫＶＬＲＲ（配列番号：１０６）、ＫＶＬＲ（配列番号：１０７）、ＫＶＬ、ＫＶまたはＫを含有する、請求項１４に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項２３】
ナトリウム排泄増加性化合物が、Ｌｙｓ３Ａｒｇ、Ｌｙｓ１４Ａｒｇ、Ａｒｇ３０Ｌｙｓ、Ｌｙｓ２７ＡｒｇおよびＡｒｇ３１Ｌｙｓからなる群から選択される１種または２種以上の変異を有する天然ｈＢＮＰ配列（配列番号：７３）を含有する、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項２４】
ナトリウム排泄増加性化合物が１個または２個以上の挿入または欠失を有する天然ｈＢＮＰ配列（配列番号：７３）を含有する、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項２５】
ナトリウム排泄増加性化合物が天然ｈＢＮＰアミノ酸配列（配列番号：７３）およびＮ−末端またはＣ−末端Ｌｙｓを含有する、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項２６】
（ａ）ナトリウム排泄増加性化合物をコードする２種または３種以上のアミノ酸配列を含有するマルチペプチドを含有し；
（ｂ）任意に、各セットまたは隣接ナトリウム排泄増加性化合物をコードする配列間にスペーサー配列を含有し；
（ｃ）任意に、マルチペプチドのどちらかの末端または両末端にエクステンションを有し、このエクステンションは１個または２個以上のアミノ酸を含有する；
ことをさらに特徴とする、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項２７】
ナトリウム排泄増加性ペプチド単位がそれぞれ、ｈＢＮＰ（配列番号：７３）またはその生物学的に活性な類縁体、セグメントまたはセグメント類縁体を包含する、請求項２６に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項２８】
ナトリウム排泄増加性化合物が天然ＢＮＰからなる、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項２９】
ナトリウム排泄増加性化合物が天然ｈＢＮＰからなる、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項３０】
ナトリウム排泄増加性化合物が天然ＡＮＰからなる、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項３１】
ナトリウム排泄増加性化合物がイヌＢＮＰからなる、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項３２】
ナトリウム排泄増加性化合物がウロジラチン（urodilatin）からなる、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項３３】
ナトリウム排泄増加性化合物がＤＮＰからなる、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項３４】
ナトリウム排泄増加性化合物が下記アミノ酸配列を含有する、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体：
Ｘ1ＭＶＱＧＳＧＣＦＧＲＸ2ＭＤＲＩＳＳＳＳＧＬＧＣＸ3（配列番号：１２６）
（ここで、Ｘ1、Ｘ2およびＸ3はそれぞれ、Ｌｙｓ、ＧｌｙおよびＡｒｇからなる群から独立して選択され、ただしＸ1、Ｘ2およびＸ3の少なくとも１個はＡｒｇまたはＧｌｙである）。
【請求項３５】
配列が、
（ａ）ＳＰＫ、ＰＫおよびＫからなる群から選択されるエクステンション、Ｘ1へのＮ−末端、；および／または
（ｂ）−ＶＬＲＲＨ（配列番号：１９）、−ＶＬＲＲ（配列番号：２０）、−ＶＬＲ、−ＶＬおよび−Ｖからなる群から選択されるエクステンション、Ｘ3へのＣ−末端；
を含有する、請求項３４に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項３６】
Ｘ1がＬｙｓであり、Ｘ2がＡｒｇであり、およびＸ3がＡｒｇである、請求項３４に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項３７】
ナトリウム排泄増加性化合物が下記アミノ酸配列を含有する、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体：
ＣＦＧＲＸ1ＭＤＲＩＳＳＳＳＧＬＧＣＸ2（配列番号：２１）
（ここで、Ｘ1およびＸ2は、修飾部分にカプリングされている修飾部分結合部位を含有する）。
【請求項３８】
Ｘ1が修飾部分にカプリングされているＬｙｓを含有する、請求項３７に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項３９】
Ｘ2が修飾部分にカプリングされているＬｙｓを含有する、請求項３７に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項４０】
修飾部分結合部位が、天然または非天然アミノ酸側鎖、ナトリウム排泄増加性化合物のＮ−末端およびナトリウム排泄増加性化合物のＣ−末端からなる群から選択される部分を包含する、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項４１】
修飾部分結合部位が、Ｌｙｓ側鎖である、請求項４０に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項４２】
請求項３７に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体が１個のみの修飾部分を含有する、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項４３】
（ａ）ナトリウム排泄増加性化合物がｈＢＮＰのＬｙｓ3〜Ｃｙｓ26セグメントおよびこのセグメントのＣｙｓ10をＣｙｓ26にカプリングするジスルフィド結合を含有し（配列番号：１２７）；
（ｂ）一個の修飾部分がＬｙｓ3の部位でナトリウム排泄増加性化合物にカプリングされている；
請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項４４】
ナトリウム排泄増加性化合物が、ｈＢＮＰのＣｙｓ10〜Ｃｙｓ2８（配列番号：１２８）セグメントおよびＣｙｓ10〜Ｃｙｓ26をカプリングするジスルフィド結合を含有し、当該ナトリウム排泄増加性化合物結合体は当該セグメントのＬｙｓ14に、そこにカプリングされている一個の修飾部分を有する、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項４５】
ナトリウム排泄増加性化合物がｈＢＮＰのＣｙｓ10〜Ｌｙｓ27セグメント（配列番号：１２９）を含有し、当該ナトリウム排泄増加性化合物は当該セグメントのＬｙｓ27において、そこにカプリングされている１個の修飾部分を有するモノ−結合体である、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項４６】
ナトリウム排泄増加性化合物がｈＢＮＰのＣｙｓ10〜Ｈｉｓ32セグメント（配列番号：１３０）および当該セグメントのＣｙｓ10〜Ｃｙｓ26をカプリングするジスルフィド結合を含有し、当該ナトリウム排泄増加性化合物は当該セグメントのＬｙｓ27において、そこにカプリングされている１個の修飾部分を有するモノ−結合体である、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項４７】
ナトリウム排泄増加性化合物がｈＢＮＰのＣｙｓ10〜Ｃｙｓ26セグメント（配列番号：１２８）および当該セグメントのＣｙｓ10〜Ｃｙｓ26をカプリングするジスルフィド結合を含有し、当該ナトリウム排泄増加性化合物は当該化合物のＮ−末端において、そこにカプリングされている１個の修飾部分を有するモノ−結合体である、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項４８】
（ａ）ナトリウム排泄増加性化合物がｈＢＮＰアミノ酸配列からなり；および
（ｂ）ナトリウム排泄増加性化合物結合体が、
（ｉ）ｈＢＮＰアミノ酸配列のＬｙｓ3においてナトリウム排泄増加性ペプチドにカプリングされている修飾部分；および
（ｉｉ）ｈＢＮＰアミノ酸配列のＬｙｓ14においてナトリウム排泄増加性ペプチドにカプリングされている修飾部分；
を含有するジ−結合体である；
請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項４９】
（ａ）ナトリウム排泄増加性化合物がｈＢＮＰであり；および
（ｂ）ナトリウム排泄増加性化合物結合体が、
（ｉ）ｈＢＮＰアミノ酸配列のＬｙｓ3においてナトリウム排泄増加性ペプチドにカプリングされている修飾部分；および
（ｉｉ）ｈＢＮＰアミノ酸配列のＬｙｓ27においてナトリウム排泄増加性ペプチドにカプリングされている修飾部分；
を含有するジ−結合体である；
請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項５０】
ナトリウム排泄増加性化合物配列がＮ−末端テイルを含有し、および修飾部分が当該Ｎ−末端テイルに位置しているアミノ酸にカプリングされている、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項５１】
Ｎ−末端テイルがナトリウム排泄増加性ペプチドのＮ−末端テイルの天然配列またはナトリウム排泄増加性ペプチドのＮ−末端テイルのＣ−末端セグメントからなる、請求項５０に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項５２】
修飾部分が下記式を有する、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体：
2006515579.tif 000001
（式中、
各Ｃは、独立して選択され、ｍ個の炭素を有するアルキル基であり、ｍは１〜２０であり；および
各ＰＡＧは、独立して選択され、ｎ個の付属単位を有するポリアルキレングリコール基であり、ｎは２〜２５であり；
各Ｘは、独立して選択され、結合性基である）。
【請求項５３】
ｍが１〜１８である、請求項５２に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項５４】
ｍが１〜１６である、請求項５２に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項５５】
ｎが２〜２０である、請求項５２に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項５６】
ｎが２〜１５である、請求項５２に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項５７】
ｎが２〜１０である、請求項５２に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項５８】
各Ｘが−Ｃ−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）−、および−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−からなる群から独立して選択される、請求項５２に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項５９】
修飾部分がナトリウム排泄増加性化合物を対応する未結合ナトリウム排泄増加性化合物よりもさらに親油性にする、請求項５２に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項６０】
修飾部分がナトリウム排泄増加性化合物を対応する未結合ナトリウム排泄増加性化合物よりもさらに親水性にする、請求項５２に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項６１】
修飾部分がナトリウム排泄増加性化合物を対応する未結合ナトリウム排泄増加性化合物よりもさらに両親媒性にする、請求項５２に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項６２】
修飾部分が下記式を有する、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体：
2006515579.tif 000002
（式中、
ＰＡＧは、ｎ個の付属単位を有するポリアルキレングリコール基であり、ｎは２〜２５であり；
Ｘは、ＯまたはＮであり；および
各ｏは、独立して選択され、１〜１５である）。
【請求項６３】
ｎが２〜２０である、請求項６２に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項６４】
ｎが２〜１５である、請求項６２に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項６５】
ｎが２〜１０である、請求項６２に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項６６】
各ｏが独立して選択され、１〜１３である、請求項６２に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項６７】
各ｏが独立して選択され、１〜９である、請求項６２に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項６８】
各ｏが独立して選択され、１〜６である、請求項６２に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項６９】
各Ｘが−Ｏ−である、請求項６２に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項７０】
修飾部分がナトリウム排泄増加性化合物を対応する未結合ナトリウム排泄増加性化合物よりもさらに親油性にする、請求項６２に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項７１】
修飾部分がナトリウム排泄増加性化合物を対応する未結合ナトリウム排泄増加性化合物よりもさらに親水性にする、請求項６２に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項７２】
修飾部分がナトリウム排泄増加性化合物を対応する未結合ナトリウム排泄増加性化合物よりもさらに両親媒性にする、請求項６２に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項７３】
修飾部分が下記式を有する、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体：
2006515579.tif 000003
（式中、
各Ｃは、独立して選択され、ｍ個の炭素を有するアルキル基であり、ｍは１〜２０であり；および
各ＰＡＧは、独立して選択され、ｎ個の付属単位を有するポリアルキレングリコール基であり、ｎは２〜２５であり；
各Ｘは、独立して選択され、結合性基であり；
ｏは、１〜１５である）。
【請求項７４】
ｍが１〜１８である、請求項７３に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項７５】
ｍが１〜１６である、請求項７３に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項７６】
ｎが２〜２０である、請求項７３に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項７７】
ｎが２〜１５である、請求項７３に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項７８】
ｎが２〜１０である、請求項７３に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項７９】
ｏが１〜１３である、請求項７３に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項８０】
ｏが１〜９である、請求項７３に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項８１】
ｏが１〜６である、請求項７３に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項８２】
各Ｘが−Ｃ−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）−、および−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−からなる群から独立して選択される、請求項７３に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項８３】
修飾部分がナトリウム排泄増加性化合物を対応する未結合ナトリウム排泄増加性化合物よりもさらに親油性にする、請求項７３に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項８４】
修飾部分がナトリウム排泄増加性化合物を対応する未結合ナトリウム排泄増加性化合物よりもさらに親水性にする、請求項７３に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項８５】
修飾部分がナトリウム排泄増加性化合物を対応する未結合ナトリウム排泄増加性化合物よりもさらに両親媒性にする、請求項７３に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項８６】
修飾部分が直鎖状または分枝鎖状ポリアルキレングリコール基を含有する、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項８７】
修飾部分がアルキル基にカプリングした糖基を含有する、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項８８】
修飾部分が糖基をさらに含有する、請求項８７に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項８９】
ポリアルキレングリコール基がポリエチレングリコール基を包含する、請求項８６に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項９０】
ポリアルキレングリコール基が２〜２５個のポリアルキレングリコール付属単位を有する、請求項８６に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項９１】
ポリアルキレングリコール基が２〜２０個のポリアルキレングリコール付属単位を有する、請求項８６に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項９２】
ポリアルキレングリコール基が２〜１５個のポリアルキレングリコール付属単位を有する、請求項８６に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項９３】
ポリアルキレングリコール基が２〜１０個のポリアルキレングリコール付属単位を有する、請求項８６に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項９４】
修飾部分が直鎖状または分枝鎖状アルキル基をさらに含有する、請求項８６に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項９５】
修飾部分が糖基をさらに含有する、請求項９４に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項９６】
アルキル基が炭素１〜２０個を有する、請求項９４に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項９７】
アルキル基が炭素１〜１８個を有する、請求項９４に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項９８】
アルキル基が炭素１〜１６個を有する、請求項９４に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項９９】
アルキル基が、−Ｃ−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）−、および−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−からなる群から選択されるリンカーによってポリアルキレングリコール基から分離されている、請求項９４に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項１００】
修飾部分がナトリウム排泄増加性化合物を対応する未結合ナトリウム排泄増加性化合物よりもさらに親油性にする、請求項９４に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項１０１】
修飾部分がポリアルキレングリコール基をアルキル基にカプリングする結合を含有し、この結合はインビボで加水分解性である、請求項９４に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項１０２】
修飾部分がナトリウム排泄増加性化合物にカプリングされている直鎖状または分枝鎖状ポリアルキレングリコール部分およびナトリウム排泄増加性化合物に対して遠位にある部位でポリアルキレングリコール部分にカプリングされている直鎖状または分枝鎖状アルキル基を含有する、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項１０３】
修飾部分がナトリウム排泄増加性化合物にカプリングされている直鎖状または分枝鎖状アルキル部分およびナトリウム排泄増加性化合物に対して遠位にある部位でアルキル部分にカプリングされている直鎖状または分枝鎖状ポリアルキレングリコール基を含有する、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項１０４】
修飾部分が表１のオリゴマー部分からなる群から選択される、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項１０５】
修飾部分がインビボで加水分解可能である結合によってナトリウム排泄増加性化合物にカプリングされている、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項１０６】
修飾部分が血液流中で加水分解可能である結合によってナトリウム排泄増加性化合物にカプリングされている、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項１０７】
修飾部分がインビボで非加水分解性である結合によってナトリウム排泄増加性化合物にカプリングされている、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項１０８】
修飾部分が血液流中で非加水分解性である結合によってナトリウム排泄増加性化合物にカプリングされている、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項１０９】
修飾部分がエステル、カーボネート、カルバメート、アミド、エーテルおよびアミンからなる群から選択される結合によってナトリウム排泄増加性化合物にカプリングされている、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項１１０】
修飾部分がインビボで加水分解可能であり、ペジル化（pegylated）ナトリウム排泄増加性化合物を生成する、請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項１１１】
修飾部分がインビボで加水分解可能であり、１〜６個のＰＥＧ単位を有する１種または２種以上のＰＥＧ部分を含有するペジル化ナトリウム排泄増加性化合物を生成する、請求項１１０に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項１１２】
請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体を含有する医薬製剤。
【請求項１１３】
腸内、非経口、経口、皮下、舌下、口腔、鼻、静脈内および筋肉内からなる群から選択される供給経路用に処方されている、請求項１１２に記載の医薬製剤。
【請求項１１４】
過剰レベルの細胞外液体を特徴とする状態の処置方法であって、その必要性を有する対象に医薬上で許容される量の請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体を投与することを包含する、上記方法。
【請求項１１５】
状態が充血性心不全を包含する、請求項１１４に記載の方法。
【請求項１１６】
状態が慢性充血性心不全を包含する、請求項１１４に記載の方法。
【請求項１１７】
状態が急性充血性心不全を包含する、請求項１１４に記載の方法。
【請求項１１８】
ナトリウム排泄増加性化合物結合体が自己投与される、請求項１１４に記載の方法。
【請求項１１９】
ナトリウム排泄増加性化合物結合体が経口投与される、請求項１１４に記載の方法。
【請求項１２０】
ナトリウム排泄増加性化合物結合体が、腸内、非経口、経口、皮下、舌下、口腔、鼻、静脈内および筋肉内からなる群から選択される投与経路を経て投与される、請求項１１４に記載の方法。
【請求項１２１】
状態が高血圧である、請求項１１４に記載の方法。
【請求項１２２】
請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体の製造方法であって、
（ａ）２個または３個以上のナトリウム排泄増加性化合物単位を含有するナトリウム排泄増加性ペプチドマルチペプチドを結合させ；
（ｂ）このナトリウム排泄増加性ペプチドマルチペプチドを分解させ、ナトリウム排泄増加性化合物結合体を生成し；
（ｃ）この分解されたナトリウム排泄増加性化合物結合体を酸化し、ナトリウム排泄増加性化合物結合体中に１個または２個以上のジスルフィド結合を形成させる；
ことを包含する、上記製造方法。
【請求項１２３】
ナトリウム排泄増加性化合物が、ｈＢＮＰのＣｙｓ10〜Ｃｙｓ26（配列番号：１２８）を含有し、および工程１２２（ｃ）がＣｙｓ10とＣｙｓ26との間にジスルフィド結合を生成する、請求項１２２に記載の方法。
【請求項１２４】
請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体の製造方法であって、
（ａ）２個または３個以上のナトリウム排泄増加性化合物単位を含有するマルチペプチドナトリウム排泄増加性化合物を製造し；
（ｂ）このナトリウム排泄増加性ペプチドマルチペプチドを分解させ、ナトリウム排泄増加性ペプチド化合物を生成し；
（ｃ）このナトリウム排泄増加性化合物を結合させ、ナトリウム排泄増加性化合物結合体を生成し；
（ｄ）このナトリウム排泄増加性化合物結合体を酸化し、ナトリウム排泄増加性化合物結合体中に１個または２個以上のジスルフィド結合を形成させる；
ことを包含する、上記製造方法。
【請求項１２５】
ナトリウム排泄増加性化合物が、ｈＢＮＰのＣｙｓ10〜Ｃｙｓ26（配列番号：１２８）を含有し、および工程１２２（ｃ）がＣｙｓ10とＣｙｓ26との間にジスルフィド結合を生成する、請求項１２４に記載の方法。
【請求項１２６】
請求項１に記載のナトリウム排泄増加性化合物結合体の製造方法であって、
（ａ）２個または３個以上のナトリウム排泄増加性化合物単位を含有するマルチペプチドナトリウム排泄増加性化合物を製造し；
（ｂ）このナトリウム排泄増加性ペプチドマルチペプチドを分解させ、ナトリウム排泄増加性化合物を生成し；
（ｃ）この分解されたナトリウム排泄増加性化合物を酸化し、ナトリウム排泄増加性化合物中に１個または２個以上のジスルフィド結合を形成し；次いで
（ｄ）このナトリウム排泄増加性化合物を結合させる；
ことを包含する、上記製造方法。
【請求項１２７】
修飾されたプロ−ポリナトリウム排泄増加性ペプチド結合体であって、
（ａ）修飾部分結合部位およびＮＰＲ−Ａ結合部位を有する少なくとも１個のナトリウム排泄増加性ペプチド単位；
（ｂ）少なくとも１個のナトリウム排泄増加性ペプチド単位の修飾部分結合部位に結合されている少なくとも１個の修飾部分；
（ｃ）リーダー配列；および
（ｄ）リーダー配列を第一のナトリウム排泄増加性ペプチド結合体にカプリングする酵素により分解可能なスペーサー；
を含有する、上記修飾されたプロ−ポリナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項１２８】
少なくとも１個の修飾部分結合部位、ＮＰＲ−Ａ結合領域および天然ナトリウム排泄増加性ペプチドアミノ酸配列に比較し、そこに置換されている少なくとも１個のＬｙｓ残基を含有するナトリウム排泄増加性ペプチド類縁体であって、上記置換Ｌｙｓ残基がアミノ酸修飾部分結合部位ではない、ナトリウム排泄増加性ペプチド類縁体。
【請求項１２９】
１個または２個以上の置換Ｌｙｓ残基がＬｙｓ３Ｇｌｙ、Ｌｙｓ３Ａｒｇ、Ｌｙｓ１４Ｇｌｙ、Ｌｙｓ１４Ａｒｇ、Ｌｙｓ２７Ｇｌｙ、またはＬｙｓ２７Ａｒｇからなる群から選択される置換を包含する、請求項１２８に記載のナトリウム排泄増加性ペプチド類縁体。
【請求項１３０】
構造：
ＳＰＫＭＶＱＧＳＧＣＦＧＲＸ1ＭＤＲＩＳＳＳＳＧＬＧＣＸ2ＶＬＲＲＨ（配列番号：１３１）
（ここで、Ｘ1はＬｙｓであり、およびＸ2はＬｙｓ以外であるか、またはＸ1はＬｙｓであり、およびＸ2はＬｙｓ以外であるであるか、またはＸ1およびＸ2はＬｙｓ以外である）
を含有する、請求項１２８に記載のナトリウム排泄増加性ペプチド類縁体。
【請求項１３１】
Ｘ1がＬｙｓであり、およびＸ2がＡｒｇまたはＧｌｙであるか、またはＸ1がＬｙｓであり、およびＸ2がＡｒｇまたはＧｌｙであるか、またはＸ1およびＸ2が独立して選択され、ＡｒｇまたはＧｌｙである、請求項１３０に記載のナトリウム排泄増加性ペプチド類縁体。
【請求項１３２】
構造：
ＣＦＧＲＸ1ＭＤＲＩＳＳＳＳＧＸ2ＧＣ（配列番号：１３２）
（ここで、Ｘ1は結合部位を含有していないアミノ酸であり、およびＸ2は修飾部分結合部位を含有するアミノ酸である）
を含有する、ナトリウム排泄増加性ペプチド類縁体。
【請求項１３３】
Ｘ1がＡｒｇであり、およびＸ2がＬｙｓである、請求項１３２に記載のナトリウム排泄増加性ペプチド類縁体。
【請求項１３４】
構造：
Ｘ1−ＣＦＧＲＸ3ＭＤＲＩＳＳＳＳＧＬＧＣ−Ｘ2（配列番号：１１７）
（ここで、Ｘ1は１〜１０個のアミノ酸を有するアミノ酸配列であり、Ｘ2は１〜１０個のアミノ酸を有するアミノ酸配列であり、およびＸ3はＬｙｓ以外である）
を有するナトリウム排泄増加性ペプチド類縁体。
【請求項１３５】
Ｘ３がＡｒｇまたはＧｌｙである、請求項１３４に記載のナトリウム排泄増加性ペプチド類縁体。
【請求項１３６】
Ｘ1がＳＰＹ1ＭＶＱＧＳＧ（配列番号：１３３）であり、ここでＹ1は修飾部分結合部位を含有する、請求項１３４に記載のナトリウム排泄増加性ペプチド類縁体。
【請求項１３７】
Ｘ1が、
（ａ）ナトリウム排泄増加性ペプチドのＮ−末端テイルおよびＮ−末端テイルのＣ−末端セグメント；
（ｂ）ＬｙｓのＧｌｙへの置換およびＬｙｓのＡｒｇへの置換からなる群から選択される置換を包含する（ａ）のＣ−末端セグメントおよびＮ−末端テイル；
（ｃ）ＧｌｙのＬｙｓへの置換およびＡｒｇのＬｙｓへの置換からなる群から選択される置換を包含する（ａ）のＣ−末端セグメントおよびＮ−末端テイル；
（ｄ）挿入Ｌｙｓを含有する（ａ）のＣ−末端セグメントおよびＮ−末端テイル；
からなる群から選択される、請求項１３４に記載のナトリウム排泄増加性ペプチド類縁体。
【請求項１３８】
Ｘ2がＹ2ＶＬＲＲＨ（配列番号：１３４）であり、ここでＹ2はＬｙｓ以外である、請求項１３４に記載のナトリウム排泄増加性ペプチド類縁体。
【請求項１３９】
Ｙ2がＡｒｇである、請求項１３８に記載のナトリウム排泄増加性ペプチド類縁体。
【請求項１４０】
Ｘ2が、
（ａ）ナトリウム排泄増加性ペプチドのＣ−末端テイルのＮ−末端セグメントおよびＣ−末端テイル；
（ｂ）ＬｙｓのＧｌｙへの置換およびＬｙｓのＡｒｇへの置換からなる群から選択される置換を包含する１３７（ａ）のＣ−末端テイルのＮ−末端セグメントおよびＣ−末端テイル；
（ｃ）ＧｌｙのＬｙｓへの置換およびＡｒｇのＬｙｓへの置換からなる群から選択される置換を包含する１３７（ａ）のＣ−末端テイルのＮ−末端セグメントおよびＣ−末端テイル；
（ｄ）挿入Ｌｙｓを含有する１３７（ａ）のＣ−末端テイルのＮ−末端セグメントおよびＣ−末端テイル；
からなる群から選択される、請求項１３４に記載のナトリウム排泄増加性ペプチド類縁体。
【請求項１４１】
構造：
Ｘ1−ＣＦＧＲＸ3ＭＤＲＩＧＬＧＣ−Ｘ2（配列番号：１３５）
（ここで、Ｘ1は１〜９個のアミノ酸を有するペプチドであり、Ｘ2は１〜６個のアミノ酸を有するペプチドであり、およびＸ3はＬｙｓ以外である）
を有するナトリウム排泄増加性ペプチド類縁体。
【請求項１４２】
Ｘ3がＡｒｇまたはＧｌｙである、請求項１４０に記載のナトリウム排泄増加性ペプチド類縁体。
【請求項１４３】
Ｘ1がＳＰＹ1ＭＶＱＧＳＧ（配列番号：１３３）であり、ここでＹ1は修飾部分結合部位を含有する、請求項１４２に記載のナトリウム排泄増加性ペプチド類縁体。
【請求項１４４】
Ｘ2がＹ2ＶＬＲＲＨ（配列番号：１３４）であり、ここでＹ2はＬｙｓ以外である、請求項１４２に記載のナトリウム排泄増加性ペプチド類縁体。
【請求項１４５】
Ｙ2がＡｒｇである、請求項１４４に記載のナトリウム排泄増加性ペプチド類縁体。
【請求項１４６】
Ｘ3がＡｒｇであり、Ｘ1が配列ＳＰＫＭＶＱＧＳＧ（配列番号：１２２）であり、およびＸ2が配列ＲＶＬである、請求項１４４に記載のナトリウム排泄増加性ペプチド類縁体。
【請求項１４７】
構造：
Ｘ1−ＣＦＧＲＸ3ＭＤＲＩＸ4ＧＬＧＣ−Ｘ2（配列番号：１３６）
（ここで、
（ａ）Ｘ1は１〜１０個のアミノ酸を有するアミノ酸配列であり、
（ｂ）Ｘ2は１〜１０個のアミノ酸を有するアミノ酸配列であり、
（ｃ）Ｘ4は１〜４個のアミノ酸を有するアミノ酸配列であり、および
（ｄ）Ｘ3はＬｙｓ以外である）
を有するナトリウム排泄増加性ペプチド類縁体。
【請求項１４８】
Ｘ1も、またＸ2もどちらもナトリウム排泄増加性ペプチドに天然に存在する配列ではない、請求項１４７に記載のナトリウム排泄増加性ペプチド類縁体。
【請求項１４９】
Ｘ3がＡｒｇまたはＧｌｙである、請求項１４７に記載のナトリウム排泄増加性ペプチド。
【請求項１５０】
Ｘ1がＳＰＹ1ＭＶＱＧＳＧ（配列番号：１３３）であり、ここでＹ1は修飾部分結合部位を含有する、請求項１４７に記載のナトリウム排泄増加性ペプチド。
【請求項１５１】
Ｘ2がＹ2ＶＬＲＲＨ（配列番号：１３４）であり、ここでＹ2はＬｙｓ以外である、請求項１４７に記載のナトリウム排泄増加性ペプチド類縁体。
【請求項１５２】
Ｙ2がＡｒｇである、請求項１５１に記載のナトリウム排泄増加性ペプチド類縁体。
【請求項１５３】
Ｌｙｓ１４ＡｒｇまたはＬｙｓ１４Ｇｌｙの置換を含有するｈＢＮＰ類縁体。
【請求項１５４】
Ｌｙｓ２７ＡｒｇまたはＬｙｓ２７Ｇｌｙの置換を含有するｈＢＮＰ類縁体
【請求項１５５】
Ｌｙｓ３ＡｒｇまたはＬｙｓ３Ｇｌｙの置換を含有するｈＢＮＰ類縁体。
【請求項１５６】
（ａ）（ｉ）ナトリウム排泄増加性分子ＮＰＲ−Ａ結合部位；および
（ｉｉ）少なくとも１個の修飾部分結合部位；
を含有するナトリウム排泄増加性化合物；および
（ｂ）上記修飾部分結合部位に結合した少なくとも１個の修飾部分；
を含有するナトリウム排泄増加性化合物結合体であって、
このナトリウム排泄増加性化合物は、対応する未結合ナトリウム排泄増加性化合物に比較して、治療的に有意の割合のｃＧＭＰ刺激活性を保有する、上記ナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項１５７】
（ａ）（ｉ）ナトリウム排泄増加性分子ＮＰＲ−Ａ結合部位；および
（ｉｉ）少なくとも１個の修飾部分結合部位；
を含有するナトリウム排泄増加性化合物；および
（ｂ）上記修飾部分結合部位に結合した少なくとも１個の修飾部分；
を含有するナトリウム排泄増加性化合物結合体であって、
このナトリウム排泄増加性化合物結合体は、対応する未結合ナトリウム排泄増加性化合物のｃＧＭＰ刺激活性の少なくとも５０％を保有する、上記ナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項１５８】
（ａ）（ｉ）ナトリウム排泄増加性分子ＮＰＲ−Ａ結合部位；および
（ｉｉ）少なくとも１個の修飾部分結合部位；
を含有するナトリウム排泄増加性化合物；および
（ｂ）上記修飾部分結合部位に結合した少なくとも１個の修飾部分；
を含有するナトリウム排泄増加性化合物結合体であって、
このナトリウム排泄増加性化合物結合体は、対応する未結合ナトリウム排泄増加性化合物に比較して、さらに親水性である、上記ナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項１５９】
（ａ）（ｉ）ナトリウム排泄増加性分子ＮＰＲ−Ａ結合部位；および
（ｉｉ）少なくとも１個の修飾部分結合部位；
を含有するナトリウム排泄増加性化合物；および
（ｂ）上記修飾部分結合部位に結合した少なくとも１個の修飾部分；
を含有するナトリウム排泄増加性化合物結合体であって、
このナトリウム排泄増加性化合物結合体は、対応する未結合ナトリウム排泄増加性化合物に比較して、さらに両親媒性である、上記ナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項１６０】
（ａ）（ｉ）ナトリウム排泄増加性分子ＮＰＲ−Ａ結合部位；および
（ｉｉ）少なくとも１個の修飾部分結合部位；
を含有するナトリウム排泄増加性化合物；および
（ｂ）上記修飾部分結合部位に結合した少なくとも１個の修飾部分；
を含有するナトリウム排泄増加性化合物結合体であって、
このナトリウム排泄増加性化合物結合体は、対応する未結合ナトリウム排泄増加性化合物に比較して、さらに親油性であり、ここで少なくとも１個の修飾部分はアルキル部分からなるものではない、上記ナトリウム排泄増加性化合物結合体。
【請求項１６１】
下記式を有する化合物：
2006515579.tif 000004
式中、
各Ｃは独立して選択され、ｍ個の炭素を有するアルキル基であり、ｍは１〜２０であり；および
各ＰＡＧは独立して選択され、ｎ個の付属単位を有するポリアルキレングリコール基であり、ｎは２〜２５であり；
各Ｘは独立して選択され、結合性部分である。
【請求項１６２】
下記式を有する化合物：
2006515579.tif 000005
式中、
各Ｃは独立して選択され、ｍ個の炭素を有するアルキル基であり、ｍは１〜２０であり；および
各ＰＡＧは独立して選択され、ｎ個の付属単位を有するポリアルキレングリコール基であり、ｎは２〜２５であり；
各Ｘは独立して選択され、結合性部分である。
【請求項１６３】
下記式を有する化合物：
2006515579.tif 000006
式中、
ＰＡＧはｎ個の付属単位を有するポリアルキレングリコール基であり、ｎは２〜２５であり；および
各ＸはＯまたはＮであり；および
各ｏは独立して選択され、１〜１５である。
【請求項１６４】
下記式を有する化合物：
2006515579.tif 000007
式中、
ＰＡＧはｎ個の付属単位を有するポリアルキレングリコール基であり、ｎは２〜２５であり；
各ＸはＯまたはＮであり；および
各ｏは独立して選択され、１〜１５である。
【請求項１６５】
下記式を有する化合物：
2006515579.tif 000008
式中、
各Ｃは独立して選択され、ｍ個の炭素を有するアルキル基であり、ｍは１〜２０であり；および
各ＰＡＧは独立して選択され、ｎ個の付属単位を有するポリアルキレングリコール基であり、ｎは２〜２５であり；
各Ｘは独立して選択され、結合性部分であり；
ｏは１〜１５である。
【請求項１６６】
下記式を有する化合物：
2006515579.tif 000009
式中、
各Ｃは独立して選択され、ｍ個の炭素を有するアルキル基であり、ｍは１〜２０であり；および
各ＰＡＧは独立して選択され、ｎ個の付属単位を有するポリアルキレングリコール基であり、ｎは２〜２５であり；
各Ｘは独立して選択され、結合性部分であり；
ｏは１〜１５である。
【請求項１６７】
式：
2006515579.tif 000010
（式中、
各Ｃは独立して選択され、ｍ個の炭素を有するアルキル基であり、ｍは１〜２０であり；
各ＰＡＧは独立して選択され、ｎ個の付属単位を有するポリアルキレングリコール基であり、ｎは２〜２５であり；
各Ｘは独立して選択され、結合性部分である）
で表わされる化合物の製造方法であって、
（ａ）式：
Ｃm−Ｘ−ＰＡＧn−ＯＨ
で表わされる化合物を、式：
2006515579.tif 000011
（式中、Ｘ2はハライドである）
で表わされる化合物と反応させ、ここで反応は塩基および溶媒の存在下に行い、
2006515579.tif 000012
を生成し、次いで
（ｂ）（ａ）の生成物を、ルイス酸および溶媒の存在下に、式：
Ｃm−Ｘ−ＰＡＧn−ＯＨ
で表わされる化合物と反応させ、
2006515579.tif 000013
を生成させることを包含する、上記製造方法。
【請求項１６８】
塩基がＮａＨであり、および溶媒がテトラヒドロフランである、請求項１６７に記載の方法。
【請求項１６９】
ルイス酸がＢＦ3ＯＥｔ2である、請求項１６７に記載の方法。
【請求項１７０】
式：
2006515579.tif 000014
（式中、
各Ｃは独立して選択され、ｍ個の炭素を有するアルキル基であり、ｍは１〜２０であり；および
各ＰＡＧは独立して選択され、ｎ個の付属単位を有するポリアルキレングリコール基であり、ｎは２〜２５であり；
各Ｘは独立して選択され、結合性部分である）
で表わされる化合物の製造方法であって、
請求項０の生成物をパラニトロクロロホーメートまたはジスクイミジル（disuccimidyl）カーボネートと反応させることを包含する、上記製造方法。
【請求項１７１】
式：
2006515579.tif 000015
（式中、
ＰＡＧはｎ個の付属単位を有するポリアルキレングリコール基であり、ｎは２〜２５であり；
ＸはＯまたはＮであり；および
各ｏは独立して選択され、１〜１５である）
で表わされる化合物の製造方法であって、
式：
2006515579.tif 000016
（式中、ｏは上記定義のとおりである）
で表わされる化合物を、溶媒中で、式：
ＯＨ−ＰＡＧn−Ｘ
（式中、Ｘは−ＮＨまたは−ＯＨである）
で表わされる化合物と反応させ、式：
2006515579.tif 000017
で表わされる化合物を生成させることを包含する、上記製造方法。
【請求項１７２】
式：
2006515579.tif 000018
（式中、
ＰＡＧはｎ個の付属単位を有するポリアルキレングリコール基であり、ｎは２〜２５であり；
ＸはＯまたはＮであり；および
各ｏは独立して選択され、１〜１５である）
で表わされる化合物の製造方法であって、
請求項１７０の生成物を、ジスクシンイミジルカーボネート、パラニトロクロロホーメート、ホスゲンおよびＮ−ヒドロキシスクシンイミドからなる群から選択される活性化剤を用いて活性化することを包含する、上記製造方法。
【請求項１７３】
式：
2006515579.tif 000019
（式中、
各Ｃは独立して選択され、ｍ個の炭素を有するアルキル基であり、ｍは１〜２０であり；および
各ＰＡＧは独立して選択され、ｎ個の付属単位を有するポリアルキレングリコール基であり、ｎは２〜２５であり；
各Ｘは独立して選択され、結合性部分であり；
ｏは１〜１５である）
で表わされる化合物の製造方法であって、
請求項０の生成物を、溶媒中で塩基の存在下に、式：
2006515579.tif 000020
で表わされる化合物と反応させることを包含する、上記製造方法。
【請求項１７４】
塩基がＫ2ＣＯ3であり、および溶媒が水性および／または有機溶媒である、請求項１７３に記載の方法。
【請求項１７５】
式：
2006515579.tif 000021
（式中、
各Ｃは独立して選択され、ｍ個の炭素を有するアルキル基であり、ｍは１〜２０であり；および
各ＰＡＧは独立して選択され、ｎ個の付属単位を有するポリアルキレングリコール基であり、ｎは２〜２５であり；
各Ｘは独立して選択され、結合性部分であり；
ｏは１〜１５である）
で表わされる化合物の製造方法であって、
請求項１の方法に従い生成された化合物を、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドと反応させることを包含する、上記製造方法。
【請求項１７６】
構造：
ＳＰＸ1ＭＭＨＸ2ＳＧＣＦＧＲＲＬＤＲＩＧＳＬＳＧＬＧＣＮＶＬＲＸ3Ｙ（配列番号：１３７）
（ここで、Ｘ1はＬｙｓ、ＡｒｇまたはＨｉｓであり、Ｘ2はＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓであり、およびＸ3はＡｒｇまたはＨｉｓである）
を含有するナトリウム排泄増加性ペプチド類縁体。
【請求項１７７】
Ｓ残基で結合している修飾部分を含有する、請求項１７６に記載のナトリウム排泄増加性ペプチド類縁体。
【請求項１７８】
構造：
ＳＰＺ1ＭＶＱＧＡＧ−ＣＦＧＲＺ2ＭＤＲＩＳＳＳＳＸ1Ｘ2Ｘ3Ｃ（配列番号：１１３）
（ここで、Ｚ1はＡｒｇであるか、またはＬｙｓ以外のアミノ酸であり、およびＺ2はＡｒｇであるか、またはＬｙｓ以外のアミノ酸であり、Ｘ1はＧｌｙ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、Ｉｌｅまたはその同類置換であり、Ｘ2はＬｅｕ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅまたはその同類置換であり、およびＸ3はＧｌｙおよびＡｒｇであるか、またはその同類置換である）
を含有するナトリウム排泄増加性ペプチド類縁体。
【請求項１７９】
Ｚ1がＬｙｓであり、およびＺ2がＬｙｓ以外である、請求項１７８に記載のナトリウム排泄増加性ペプチド類縁体。
【請求項１８０】
構造：
ＫＣＦＫＧＫＮＤＲＸ1ＫＸ2ＱＳＧＬＸ3Ｃ−ＮＳＦＫＹ（配列番号：１１４）
（ここで、Ｘ1はＴ、ａ、Ｒ、Ｈ、Ｐ、Ｔ、Ｅであり；Ｘ2はＫ、Ｎ−メチル、Ａｒｇ、Ｓ、Ｄ、Ｐであり；Ｘ3はＡｒｇ、Ｋ、Ｙ、Ｆ、Ｓ、Ｐ、Ｏｒｎ、Ｈａｒ、ｐ−アミジノフェニルＡｌａ、Ｉ、であるか、ＧｌｙまたはＴｒｙ以外の陽電荷を有するいずれか別のアミノ酸である）
を含有するナトリウム排泄増加性ペプチド類縁体。
【請求項１８１】
１個または２個以上のＬｙｓ残基がそこに結合している修飾部分を含有するナトリウム排泄増加性ペプチド結合体を包含することをさらに特徴とする、請求項１７８または１８０に記載のナトリウム排泄増加性ペプチド。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４７】
ナトリウム排泄増加性ペプチドは、例えば下記配列によって定義することができる：
ＣＦＧＲＸＭＤＲＩＳＳＳＳＧＬＧＣ（配列番号：１）
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４９】
ＣＦＧＲＸ1ＭＤＲＩＸ2ＧＬＧＣ（配列番号：２）
（ここで、Ｘ1はリジンであり、Ｘ2は１〜４個のアミノ酸である）。Ｘ2は、Ｓ、ＳＳ、ＳＳＳ、ＳＳＳＳ（配列番号：３）、Ｋ、ＫＳ、ＫＳＳ（またはＫＳＳＳ（配列番号：４）であることができる。ＫがＸ2として、またはＸ2の配列の一部として含有されている場合、修飾部分結合部位である。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５０】
ナトリウム排泄増加性化合物は、例えば下記構造を有する：
Ｘ1−ＣＦＧＲＸ3ＭＤＲＩＳＳＳＳＧＬＧＣ−Ｘ2（配列番号：５）
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５１】
（ここで、Ｘ1およびＸ2の少なくとも一方が存在する場合、Ｘ1は１〜１０個のアミノ酸を有するペプチドであり、Ｘ2は１〜６個のアミノ酸を有するペプチドであり、およびＸ3はリジン以外、例えばアルギニンである）。一例として、Ｘ1はｈＢＮＰのＮ−末端から１〜１０個のアミノ酸残基配列の全部またはＣ−末端断片を含有することができる。一態様において、Ｘ1はＳＰＺ1ＭＶＱＧＳＧ−（配列番号：６）、ＳＰＺ1ＭＶＱＧ（配列番号：７）、ＳＰＺ1ＭＶＱ（配列番号：８）、ＳＰＺ1ＭＶ（配列番号：９）、ＳＰＺ1Ｍ（配列番号：１０）、ＳＰＺ1、ＰＺ1ＭＶＱＧＳＧ（配列番号：１１）、Ｚ1ＭＶＱＧＳＧ（配列番号：１２）を包含し、ここでＺ1はリジンまたはアルギニンである。Ｚ1がリジンである場合、修飾部分結合部位が提供される。別の態様において、Ｘ2はｈＢＮＰのＣ−末端から１〜６個のアミノ酸残基配列の全部またはＮ−末端断片を含有することができる。一態様において、Ｘ2は配列Ｚ2ＶＬＲＲＨ（配列番号：１３）、Ｚ2ＶＬＲＲ（配列番号：１４）、Ｚ2ＶＬＲ（配列番号：１５）、Ｚ2ＶＬ、Ｋ、Ｒ、ＲＶＬＲＲ（配列番号：１６）、ＲＶＬＲ（配列番号：１７）、ＲＶＬ、ＲＶ、またはＲであり、ここでＺ2はリジンまたはアルギニンであることができる。Ｚ2がリジンである場合、修飾部分結合部位が提供される。Ｚ1がリジンである場合、Ｚ2はリジン以外であることができ、またＺ2がリジンである場合、Ｚ1はリジン以外であることができる。別様に、Ｘ1およびＸ2はいずれかのナトリウム排泄増加性ペプチドから得られるいずれかのＮ−末端およびＣ−末端テイルアミノ酸配列であることができる。或る態様において、Ｎ−末端および／またはＣ−末端テイル配列が存在し、また詳細には、ｈＢＮＰのＮ−末端およびＣ−末端テイル配列またはそのいずれかの断片ではない。未結合ナトリウム排泄増加性化合物がまた、本発明の態様であることは明白である。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５２】
一態様において、ナトリウム排泄増加性化合物類縁体は下記アミノ酸配列を含有する：
Ｘ1ＭＶＱＧＳＧＣ1ＦＧＲＸ2ＭＤＲＩＳＳＳＳＧＬＧＣ2Ｘ3（配列番号：１８）
（ここで、Ｘ1、Ｘ2およびＸ3はそれぞれ、ＬｙｓおよびＬｙｓ以外のアミノ酸からなる群から独立して選択され、およびＸ1、Ｘ2およびＸ3の少なくとも１個はＬｙｓであり、およびＸ1、Ｘ2およびＸ3の少なくとも１個はＬｙｓ以外のアミノ酸である；および
Ｃ1およびＣ2はシステインであり、ジスルフィド結合によってカプリングさせることができる）。未結合ペプチド類縁体はまた、本発明の態様であることは明白である。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５３】
一態様において、Ｘ1、Ｘ2およびＸ3の少なくとも１個はＡｒｇである。もう一つの態様において、Ｘ1はＬｙｓであり、Ｘ2はＡｒｇであり、およびＸ3はＡｒｇである。この態様はまた、ここに記載のアミノ酸配列、Ｘ1に対するＮ−末端、および／またはＸ3に対するＣ−末端を包含することができる。一例として、存在する場合、Ｎ−末端テイル配列は、Ｓ−またはＳＰ−であることができ、および存在する場合、Ｃ−末端テイルは、−ＶＬＲＲＨ（配列番号：１９）、−ＶＬＲＲ（配列番号：２０）、−ＶＬＲ、−ＶＬ、または−Ｖであることができる。或る態様において、Ｎ−末端および／またはＣ−末端テイル配列が存在し、詳細には、これはｈＢＮＰまたはその断片のＮ−末端およびＣ−末端テイルではない。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５４】
もう一つの態様において、ナトリウム排泄増加性ペプチド類縁体は下記アミノ酸配列を含有する：
ＣＦＧＲＸ1ＭＤＲＩＳＳＳＳＧＬＧＣＸ2（配列番号：２１）
（ここで、Ｘ1およびＸ2の少なくとも一方は、修飾部分にカプリングされている修飾部分結合部位を含有するアミノ酸であり、他方はいずれか別のアミノ酸または未結合Ｌｙｓである）。一態様において、Ｘ1はその側鎖で修飾部分にカプリングされているＬｙｓであり、およびＸ2は別種のアミノ酸、例えばＧｌｙまたはＡｒｇである。別様に、Ｘ2はその側鎖で修飾部分にカプリングされているＬｙｓであり、およびＸ1は別種のアミノ酸、例えばＧｌｙ、Ａｒｇまたはリジン以外のアミノ酸である。別の態様において、Ｘ1はその側鎖で修飾部分にカプリングされているＬｙｓであり、およびＸ2は未結合Ｌｙｓである。別様に、Ｘ2はその側鎖で修飾部分にカプリングされているＬｙｓであり、およびＸ1は未結合Ｌｙｓである。未結合ペプチドがまた、本発明の態様であることは明白である。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６１】
上記類縁体に加えて、本発明で使用するのに適する広く種々の類縁体が当技術で開示されている。例えば、１９９２年５月１９日付けで発行された米国特許５，１１４，９２３（この特許の全記載を引用してここに組入れる）は、式Ｒ1−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｍｅｔ−Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｒ2（配列番号：２２）で表わされるナトリウム排泄増加性活性を有するペプチドを開示している。この式において、Ｒ1は、（Ｈ）；Ｇｌｙ−；Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−；Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−；Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（配列番号：２３）；Ｖａｌ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（配列番号：２４）；Ｍｅｔ−Ｖａｌ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（配列番号：２５）；Ｌｙｓ−Ｍｅｔ−Ｖａｌ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（配列番号：２６）；Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｍｅｔ−Ｖａｌ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（配列番号：２７）；Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｍｅｔ−Ｖａｌ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（配列番号：２８）；およびＲ3−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｍｅｔ−Ｖａｌ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（配列番号：２９）から選択され、この式において、Ｒ3はヒトタンパク質にかかわる位置１−９９の１０２アミノ酸配列またはそのＣ−末端タンパク質であり、およびＲ2は、（Ｈ）；ＮＨ2、ＮＨＲ′であるか、または修飾部分′および修飾部分″は独立し、低級アルキル（１−４Ｃ）であり、またはＲ2はＬｙｓ；Ｌｙｓ−Ｖａｌ；Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ；Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（配列番号：３０）；Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｒｇ（配列番号：３１）；Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ（配列番号：３２）；またはそのアミド（ＮＨ2、ＮＨＲ′またはＮＲ′修飾部分）である。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６２】
１９９０年２月２日付けで発行された米国特許４，９０４，７６３（この特許の全記載を引用してここに組入れる）はまた、本発明で使用するのに適するナトリウム排泄増加性活性ペプチド類縁体、例えばＸ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｍｅｔ−Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−ＯＨ（配列番号：３３）（ここで、ＸはＨ、Ｈ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−またはＨ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｍｅｔ−Ｖａｌ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ（配列番号：３４）である）を開示している。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６３】
１９９０年２月２７日付けで発行された米国特許４，９０４，７６３（この特許の全記載を引用してここに組入れる）はまた、本発明で使用するのに適する別のナトリウム排泄増加性活性ペプチド類縁体を開示しており、この化合物はＸ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｙ（配列番号：３５）（ここで、２システインはジスルフィド結合により架橋されている）を包含する。この式において、ＸはＨまたはＨ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−を意味し、およびＹは−Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＯＨ（配列番号：３６）、−Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−ＯＨ（配列番号：３７）、−Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＯＨ（配列番号：３８）、−Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−ＯＨ（配列番号：３９）、−Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−ＯＨ、−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＯＨ（配列番号：４０）、またはその塩を表わす。もう一種の使用するのに適する類縁体は、１９８９年１２月１４日付けで発行されたＰＣＴ出願公開Ｎｏ．ＷＯ８９１２０６９に開示されている。
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６４】
本発明で使用するのに適するもう一種のナトリウム排泄増加性活性ペプチド類縁体の追加の一組は、２００３年６月１２日付けで発行された米国特許公開Ｎｏ．２００３０１０９４３０（この特許の全記載を引用してここに組入れる）に開示されている。この刊行物は、式：Ｒ1−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇ／Ｌｙｓ−Ｌｅｕ／Ｍｅｔ−Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｍｅｔ−Ｇｌｙ／Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ／Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｒ2（配列番号：４１）で表わされるナトリウム排泄増加性活性を有するペプチドを開示している。この式において、Ｒ1は（Ｈ）、Ｇｌｙ−、Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−、Ａｓｐ／Ｌｙｓ／Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−、Ａｒｇ／Ｈｉｓ／Ｇｌｎ−Ａｓｐ／Ｌｙｓ／Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（配列番号：４２）、Ｍｅｔ／Ｖａｌ−Ａｒｇ／Ｈｉｓ／Ｇｌｎ−Ａｓｐ／Ｌｙｓ／Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（配列番号：４３）、Ｔｈｒ／Ｍｅｔ−Ｍｅｔ／Ｖａｌ−Ａｒｇ／Ｈｉｓ／Ｇｌｎ−Ａｓｐ／Ｌｙｓ／Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（配列番号：４４）、Ｌｙｓ−Ｔｈｒ／Ｍｅｔ−Ｍｅｔ／Ｖａｌ−Ａｒｇ／Ｈｉｓ／Ｇｌｎ−Ａｓｐ／Ｌｙｓ／Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（配列番号：４５）、Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ／Ｍｅｔ−Ｍｅｔ／Ｖａｌ−Ａｒｇ／Ｈｉｓ／Ｇｌｎ−Ａｓｐ／Ｌｙｓ／Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（配列番号：４６）、Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ／Ｍｅｔ−Ｍｅｔ／Ｖａｌ−Ａｒｇ／Ｈｉｓ／Ｇｌｎ−Ａｓｐ／Ｌｙｓ／Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（配列番号：４７）、またはブタ、イヌまたはヒトＢＮＰの天然上流配列の１０−１０９アミノ酸配列、もしくはその組み合わせからなる群から選択され；Ｒ2は（ＯＨ）、ＮＨ2またはＮＲ′Ｒ″（ここで、Ｒ′およびＲ″は独立して低級アルキル（この場合、１−４Ｃ）であるか、またはＡｓｎ／Ｌｙｓ、Ａｓｎ／Ｌｙｓ−Ｖａｌ、Ａｓｎ／Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ、Ａｓｎ／Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（配列番号：４８）、Ａｓｎ／Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｒｇ／Ｌｙｓ（配列番号：４９）、Ａｓｎ／Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｒｇ／Ｌｙｓ−Ｔｙｒ／Ｈｉｓ（配列番号：５０）またはそのアミド（ＮＨ2またはＮＲ′Ｒ″）であり、ただし式がＲ1−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｃｙｓ−Ｒ2（配列番号：５１）であり、およびＲ1がＡｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙである場合、Ｒ2はＡｓｎ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ（配列番号：５２）ではない。
【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６６】
本発明で使用するのに適する別種のナトリウム排泄増加性活性ペプチド類縁体は、２００２年７月４日付けで発行された米国特許公開Ｎｏ．２００２００８６８４３（この特許の全記載を引用してここに組入れる）に開示されている。この刊行物は、生理学的活性ポリペプチド、Ｘ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｍｅｔ−Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−ＯＨ（配列番号：５３）［ここで、２システインは架橋されている］を開示している。この式において、ＸはＨ、Ｈ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−またはＨ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｍｅｔ−Ｖａｌ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（配列番号：５４）である。
【手続補正１４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７５】
リーダーは、例えば１個のアミノ酸、アミノ酸配列、ペプチド（例えば、リーダーペプチドまたはシグナルペプチド）、またはタンパク質であることができ、またリーダーはＮ−末端を結合からブロックし、当該マルチペプチド（例えば、酵素カクテル；Ｖ８プロテアーゼ（エンドプロテイナーゼ（Ｇｌｕ−Ｃ）およびエンドプロテイナーゼ（Ａｓｐ−Ｎ））により分解可能な（Ｈｉｓ）６−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−（配列番号：５５）の精製を補助し；溶解性を改良し、および／または細胞からの排出を補助する（例えば、Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ（配列番号：５６））；またリーダーは好ましくは、酵素分解または化学的分解によってマルチペプチドから分離することができる。
【手続補正１５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７６】
エクステンションは、例えば１個のアミノ酸、アミノ酸配列、ペプチド（例えば、リーダーペプチドまたはシグナルペプチド）、またはタンパク質であることができ；またエクステンションはＣ−末端を結合からブロックし、当該マルチペプチド（例えば、（Ｈｉｓ）６−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ（配列番号：５５））の精製を補助し；溶解性を改良し、および／または細胞からの排出を補助する（例えば、酵素カクテル；Ｖ８プロテアーゼ（エンドプロテイナーゼ（Ｇｌｕ−Ｃ）およびエンドプロテイナーゼ（Ａｓｐ−Ｎ））により切断されるＡｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ（配列番号：５６））；またエクステンシヨンは好ましくは、酵素分解または化学的分解によってマルチペプチドから分離することができる。
【手続補正１６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７９】
一態様において、スペーサーは、Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（配列番号：５７）であり、リーダーは、Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ（配列番号：５８）であり、およびエクステンションは、（Ｈｉｓ）6−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ（配列番号：５９）である。この態様において、ＮＰはトリプシンおよびカルボキシペプチダーゼＢ酵素カクテルを用い放出させることができる。
【手続補正１７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８０】
一態様において、スペーサーは、Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（配列番号：６０）であり、リーダーは、Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ（配列番号：５８）であり、およびエクステンションは、（Ｈｉｓ）6−ＡＡＡ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ（配列番号：６１）である（ここで、ＡＡＡはアミノ酸残基３−４０個、好ましくは３−１５個の長さを有するアミノ酸配列である）。この態様において、ＮＰはトリプシンおよびカルボキシペプチダーゼＢ酵素カクテルを用い放出させることができる。
【手続補正１８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８１】
もう一つの態様において、スペーサーは、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（配列番号：６２）であり、リーダーは、Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（配列番号：６３）であり、およびエクステンションは、（Ｈｉｓ）6−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（配列番号：６４）である。この態様において、ＮＰはトロンビンおよびカルボキシペプチダーゼＢ酵素カクテルを用い放出させることができる。
【手続補正１９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８２】
もう一つの態様において、スペーサーは、Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（配列番号：６５）であり、リーダーは、Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（配列番号：６３）であり、およびエクステンションは、（Ｈｉｓ）6−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（配列番号：６４）である。この態様において、ＮＰはトロンビンおよびカルボキシペプチダーゼＡ酵素カクテルを用い放出させることができる。
【手続補正２０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８３】
もう一つの態様において、スペーサーは、Ｍｅｔ−Ｍｅｔであり、およびエクステンションは、（Ｈｉｓ）6−ＡＡＡ−Ｍｅｔ−Ｍｅｔ（配列番号：６６）である（ここで、ＡＡＡはアミノ酸残基３−４０個の長さを有するアミノ酸配列である）。この態様において、ＮＰはＣＮＢｒを用い放出させることができる。
【手続補正２１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８４】
もう一つの態様において、スペーサーは、Ａｓｐ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ（配列番号：６７）であり、リーダーは、Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ（配列番号：５５）であり、およびエクステンションは、（Ｈｉｓ）6−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ（配列番号：６８）である。この態様において、ＮＰはＶ８プロテアーゼ（エンドプロテイナーゼＧｌｕ−Ｃ）およびエンドプロテイナーゼＡｓｐ−Ｎカクテルを用い放出させることができる。
【手続補正２２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８５】
もう一つの態様において、スペーサーは、Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ（配列番号：６９）であり、リーダーは、Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ（配列番号：５５）であり、およびエクステンションは、（Ｈｉｓ）6−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ（配列番号：６８）である。この態様において、ＮＰはＶ８プロテアーゼ（エンドプロテイナーゼＧｌｕ−Ｃ）を用い放出させることができ、これにより新規ＮＰ類縁体であるＮＰ−Ｇｌｕが得られる。
【手続補正２３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８６】
もう一つの態様において、スペーサーは、Ｇｌｕ−Ｇｌｕであり、リーダーは、Ｃ−末端に存在するＧｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ（配列番号：７０）であり、およびエクステンションは、Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ（Ｈｉｓ）6−Ｇｌｕ（配列番号：７１）である。この場合、そのＣ−末端は、エンテロキナーゼにより分解させることができる融合相手、適当な融合タンパク質に結合されている。この態様において、ＮＰはＶ８プロテアーゼ（エンドプロテイナーゼＧｌｕ−Ｃ）を用い放出させることができ、これにより新規ＮＰ類縁体であるＮＰ−Ｇｌｕが得られる。
【手続補正２４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８７】
もう一つの態様において、スペーサーは、Ｇｌｕ−Ｇｌｕであり、リーダーは、Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ（配列番号：５６）であり、およびエクステンションは、（Ｈｉｓ）6−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ（配列番号：６８）である。この場合、そのＮ−末端は、エンテロキナーゼにより分解させることができる融合相手、適当な融合タンパク質に結合されている。この態様において、ＮＰはＶ８プロテアーゼ（エンドプロテイナーゼＧｌｕ−Ｃ）を用い放出させることができ、これにより新規ＮＰ類縁体であるＮＰ−Ｇｌｕが得られる。
【手続補正２５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８８】
もう一つの態様において、スペーサーは、Ｇｌｕ−Ｇｌｕであり、リーダーは、Ｃ−末端に存在するＧｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ（配列番号：７０）であり、およびエクステンションは、Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−（Ｈｉｓ）6−Ｇｌｕ（配列番号：７１）である。この場合、そのＣ−末端は、融合相手、適当な融合タンパク質に結合されている。この態様において、ＮＰはＶ８プロテアーゼ（エンドプロテイナーゼＧｌｕ−Ｃ）を用い放出させることができ、これにより新規ＮＰ類縁体であるＮＰ−Ｇｌｕが得られる。
【手続補正２６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８９】
もう一つの態様において、スペーサーは、Ｇｌｕ−Ｇｌｕであり、リーダーは、Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ（配列番号：５６）であり、およびエクステンションは、Ｇｌｕ−（Ｈｉｓ）6−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ（配列番号：７２）である。この場合、そのＮ−末端は、融合相手、適当な融合タンパク質に結合されている。この態様において、ＮＰはＶ８プロテアーゼ（エンドプロテイナーゼＧｌｕ−Ｃ）を用い放出させることができ、これにより新規ＮＰ類縁体であるＮＰ−Ｇｌｕが得られる。
【手続補正２７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２６３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２６３】
天然ＢＮＰを、天然の野生型ｈＢＮＰペプチドの活性測定値を得るために分析試験した。使用された天然ｈＢＮＰペプチドは、１−３２アミノ酸配列を有していた：ＳＰＫＭＶＱＧＳＧＣＦＧＲＫＭＤＲＩＳＳＳＳＧＬＧＣＫＶＬＲＲＨ（配列番号：７３）。この配列において、Ｃ10とＣ26とはジスルフィド結合により結合し、結合を形成している。２９種の構築物の構造および結果を表１に示す。ＢＮＰ結合体はＥＣ５０およびＥｍａｘについて評価し、これらの数値を天然ペプチドについて同一実験条件下に得た数値と比較した。オリゴマー部分を有していない天然ＢＮＰ（１−３２ａａ）に対する比較として、これらのデータを表１に示す。これらの結果は、クラス１修飾部分Ｌｙｓ３を含有するモノ結合体ＢＮＰ（ＢＮＰ−００２）およびＬｙｓ１４またはＬｙｓ２７にクラス２修飾部分を有するモノ結合体ＢＮＰが好適であることを指摘している。
【手続補正２８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２６９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２６９】
１．  ウロジラチン（Ｎ−末端に４つ目の追加の残基を有するｈＢＮＰ）
ＴＡＰＲＳＬＲＲＳＳＣＦＧＧＲＭＤＲＩＧＡＱＳＧＬＧＣＮＳＦＸ1Ｙ（配列番号：７４）
アミノ酸Ｔは修飾部分結合部位を表わす。上記配列において、Ｘ1はリジンであるか、またはアルギニン以外のアミノ酸である。Ｘ1がリジンである場合、第二の修飾部分結合部位が付与される。
【手続補正２９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２７０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２７０】
２．  イヌナトリウム排泄増加性ペプチド（イヌＮＰ）
イヌＢＮＰはしばしば、結合体の製造において天然の利点を提供する。そのループ領域には、結合部位は存在しない。結合部位はＮ−およびＣ−末端テイルに存在する。これらの特徴は活性を実質的に失うことなく結合を可能にする。これはまた、生成物のより少ない分布を導き、より高い収率およびより容易な精製をもたらす。
ＳＰＸ1ＭＭＨＸ2ＧＧＣＦＧＲＲＬＤＲＩＧＳＬＳＧＬＧＣＮＶＬＲＸ3Ｙ（配列番号：７５）
Ｘ1、Ｘ2およびＸ3のアミノ酸部位は修飾部分結合部位を提供する。この中性ペプチドにおいて、ペプチドの３個の部位全部を修飾部分との結合に利用することができる。そのループ領域はアミノ酸１０（Ｃ）〜アミノ酸２６（Ｃ）に特定される。位置３、１４または２７に存在するアミノ酸のいずれか２個または３個はＬｙｓ以外、例えばＡｒｇにより置換することができる。
【手続補正３０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２７１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２７１】
３．  デンドロアスピスナトリウム排泄増加性ペプチド（ＤＮＰ）
ＥＶＸ1ＹＤＰＣＦＧＨＸ2ＩＤＲＩＮＨＶＳＮＬＧＣＰＳＬＲＤＰＲＰＮＡＰＳＴＳＡ（配列番号：７６）
Ｘ1およびＸ2のアミノ酸部位は修飾部分結合部位である。この例において、Ｘ1およびＸ2は両方ともに、アミノ酸Ｌｙｓである。或る態様において、Ｘ1はＡｒｇであり、およびＸ2はＡｒｇである。そのＮ−末端はまた、結合部位である。好ましくは、Ｘ1がリジンである場合、Ｘ2はアルギニン（またはリジン以外）である。場合により、このペプチドはＮ−末端に追加の結合部位を有する。
【手続補正３１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２７２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２７２】
４．  Ｃ−タイプナトリウム排泄増加性ペプチド（ＣＮＰ）
ＧＬＳＫ1ＧＣＦＧＬＫ2ＬＤＲＩＧＳＭＳＧＬＧＣ（配列番号：７７）
Ｋ1およびＫ2のアミノ酸部位は修飾部分結合部位である。この例において、Ｋ1およびＫ2は両方ともに、アミノ酸Ｌｙｓである。しかしながら、このペプチドの類縁体は、ペプチドのこれらの位置のどちらか、または両方に追加の結合部位を含有することができる。場合により、このペプチドはＮ−末端に追加の結合部位を有することができる。
【手続補正３２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２７３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２７３】
５．  ＡＮＰ（ヒト）（ラット）（ブタ）
ＳＬＲＲＳＳＣＦＧＧＲＸＤＲＩＧＡＱＳＧＬＧＣＮＳＦＲＹ（配列番号：７８）
この例において、ＸはＭｅｔ（Ｍ）またはＩｌｅ（Ｌ）であり、この場合、修飾部分結合部位はＮ−末端に存在し、またはＲをＫにより置き換え、修飾部分部位を付与することができる。
【手続補正３３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２９４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２９４】
１．  ｈＢＮＰ−ループ領域単独の類縁体
ＣＦＧＲＸＭＤＲＩＳＳＳＳＧＬＧＣ−（配列番号：７９）
ここで、ＸはＬｙｓ以外のアミノ酸であるか、またはＸはＡｒｇまたはＧｌｙである。
【手続補正３４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２９５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２９５】
２．  ｈＢＮＰ−３ＡｒｇまたはＬｙｓ以外のアミノ酸の類縁体
−ＳＰＲＭＶＱＧＳＧ−ＣＦＧＲＫＭＤＲＩＳＳＳＳＧＬＧＣ−Ｘ2−（配列番号：８０）
ここで、Ｘ2は１〜１０長さのアミノ酸、好ましくは１〜６長さのアミノ酸である。或る態様において、Ｘ2は、ＫＶＬＲＲＨ（配列番号：３２）、ＫＶＬＲＲ（配列番号：３１）、ＫＶＬＲ（配列番号：３０）、ＫＶＬ、ＫＶ、Ｋ、ＲＶＬＲＲＨ（配列番号：８１）、ＲＶＬＲＲ（配列番号：１６）、ＲＶＬＲ（配列番号：１７）、ＲＶＬ、ＲＶまたはＲである。
【手続補正３５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２９６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２９６】
３．  ｈＢＮＰ−３変異部位類縁体：３Ａｒｇ、１４Ａｒｇ、２７Ａｒｇ
ＳＰＸ1ＭＶＱＧＳＧ−ＣＦＧＲＸ2ＭＤＲＩＳＳＳＳＧＬＧＣ−Ｘ3ＶＬＲＲＨ（配列番号：８２）
ここで、Ｘ1はＬｙｓであるか、またはＬｙｓ以外のアミノ酸であり、Ｘ2はＬｙｓ以外のアミノ酸であり、およびＸ3はＬｙｓであるか、またはＬｙｓ以外のアミノ酸である。或る態様において、Ｘ1、Ｘ2およびＸ3は独立して、ＡｒｇまたはＧｌｙである。別の態様において、Ｘ1はＬｙｓであり、Ｘ2およびＸ3は独立して、ＡｒｇまたはＧｌｙである。好適態様において、Ｘ1、Ｘ2およびＸ3の少なくとも一つはＬｙｓである。
【手続補正３６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２９７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２９７】
４．  ｈＢＮＰ−１４および２７Ａｒｇおよび末端修飾部位、Ｘ1の類縁体
Ｘ1ＳＰＫＭＶＱＧＳＧ−ＣＦＧＲＸ2ＭＤＲＩＳＳＳＳＧＬＧＣ−Ｘ3ＶＬＲＲＨ−（配列番号：８３）
ここで、Ｘ1はＣ−末端修飾部位（Ｓｅｒ）であり、およびＸ2およびＸ3はＬｙｓ以外のアミノ酸である。或る態様において、Ｘ2およびＸ3は独立して、ＡｒｇまたはＧｌｙである。別の態様において、Ｘ2はＡｒｇであり、およびＸ3はＬｙｓである。
【手続補正３７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２９８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２９８】
５．  ｈＢＮＰ−１４Ａｒｇの類縁体
（全部が、そのテイルの一方または両方がループまで短縮されている）
Ｘ1−ＣＦＧＲＲＭＤＲＩＳＳＳＳＧＬＧＣ−Ｘ2（配列番号：８４）
ここで、Ｘ1は１〜１０長さのアミノ酸、好ましくは１〜９長さのアミノ酸であり、およびＸ2は１〜１０長さのアミノ酸、好ましくは１〜６長さのアミノ酸でる。Ｘ1は、ＳＰＫＭＶＱＧＳＧＣ（配列番号：８５）、ＰＫＭＶＱＧＳＧＣ（配列番号：８６）、ＫＭＶＱＧＳＧＣ（配列番号：８７）、ＭＶＱＧＳＧＣ（配列番号：８８）、ＶＱＧＳＧＣ（配列番号：８９）、ＱＧＳＧＣ（配列番号：９０）、ＧＳＧＣ（配列番号：９１）、ＳＧＣ、ＧＣ、Ｃ、ＳＰＫ、ＳＰＫＭ（配列番号：９２）、ＳＰＫＭＶ（配列番号：９３）、ＳＰＫＭＶＱ（配列番号：９４）、ＫＭＶＱ（配列番号：９５）、ＫＭＶ、ＫＭＶＱＧ（配列番号：９６）、ＫＭＶＱＧＳ（配列番号：９７）、ＫＭＶＱＧＳＧ（配列番号：９８）またはＫＭＶＱＧＳＧＣ（配列番号：９９）を包含することができる。Ｘ2はＫＶＬＲＲＨ（配列番号：１００）、ＫＶＬＲＲ（配列番号：１０１）、ＫＶＬＲ（配列番号：１０２）、ＫＶＬ、ＫＶ、Ｋ、ＲＶＬＲＲＨ（配列番号：１０３）、ＲＶＬＲＲ（配列番号：１０４）、ＲＶＬＲ（配列番号：１０５）、ＲＶＬ、ＲＶまたはＲを包含することができる。
【手続補正３８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２９９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２９９】
６．  ｈＢＮＰ１−２９−３ＡｒｇまたはＬｙｓ以外のアミノ酸の類縁体
ＳＰＸ1ＭＶＱＧＳＧ−ＣＦＧＲＫＭＤＲＩＳＳＳＳＧＬＧＣ−ＫＶＬ（配列番号：１０６）
ここで、Ｘ1はＡｒｇであるか、またはＬｙｓ以外のもう一種のアミノ酸である。
【手続補正３９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３００
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３００】
７．  ｈＢＮＰ１−２６−３ＡｒｇまたはＬｙｓ以外のアミノ酸の類縁体
ＳＰＸ1ＭＶＱＧＳＧ−ＣＦＧＲＫＭＤＲＩＳＳＳＳＧＬＧＣ（配列番号：１０７）
ここで、Ｘ1はＡｒｇまたはＧｌｙであるか、またはＬｙｓ以外のもう一種のアミノ酸である。
【手続補正４０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３０１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３０１】
８．  ｈＢＮＰ短縮Ｃ−末端テイルＬｙｓ１４Ａｒｇ、２７Ａｒｇ、またはＬｙｓ以外のアミノ酸の類縁体
Ｘ1−ＣＦＧＲＭＤＲＩＳＳＳＳＧＬＧＣ−ＲＶＬＲＲＨ（配列番号：１０８）
ここで、Ｘ1は１〜１０長さのアミノ酸、好ましくは１〜９長さのアミノ酸である。Ｘ1は、ＳＰＫＭＶＱＧＳＧＣ（配列番号：８５）、ＰＫＭＶＱＧＳＧＣ（配列番号：８６）、ＫＭＶＱＧＳＧＣ（配列番号：８７）、ＭＶＱＧＳＧＣ（配列番号：８８）、ＶＱＧＳＧＣ（配列番号：８９）、ＱＧＳＧＣ（配列番号：９０）、ＧＳＧＣ（配列番号：９１）、ＳＧＣ、ＧＣまたはＣを包含することができる。
【手続補正４１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３０２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３０２】
９．  ｈＢＮＰ−Ｌｙｓ１４ＡｒｇまたはＬｙｓ以外のアミノ酸の類縁体
−ＣＦＧＲＸ1ＭＤＲＩＸ2ＧＬＧＣ−（配列番号：１０９）
ここで、Ｘ1はＡｒｇであるか、またはＬｙｓ以外のアミノ酸であり、およびＸ2は１〜４アミノ酸である。或る態様において、Ｘ2は、ＳＳＳＳ（配列番号：３）、ＳＳＳ、ＳＳ、Ｓ、ＫＳＳＳ（配列番号：４）、ＫＳＳまたはＫＳである。
【手続補正４２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３０３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３０３】
１０．  ｈＢＮＰ−Ｌｙｓ３０Ａｒｇまたは同様の電荷を有する別の同等のアミノ酸の類縁体
ＳＰＫＭＶＱＧＳＧＣＦＧＲＫＭＤＲＩＳＳＳＳＧＬＧＣＸ1ＲＨ（配列番号：１１０）
ここで、Ｘ1はＡｒｇであるか、またはＬｙｓ以外のアミノ酸である。
【手続補正４３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３０４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３０４】
１１．  ｈＢＮＰ−２７ＡｒｇまたはＬｙｓ以外のアミノ酸の類縁体
ＳＰＫＭＶＱＧＳＧＣＦＧＲＫＭＤＲＩＳＳＳＳＧＬＧＣＸ1ＶＬＲＲＨ（配列番号：（配列番号：１１１））
ここで、Ｘ1はＬｙｓであるか、またはＡｒｇ以外のアミノ酸である。
【手続補正４４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３０５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３０５】
１２．  ｈＢＮＰの延長形態
−ＳＰＫＭＶＱＧＳＧ−ＣＦＧＲＫＭＤＲＩＳＳＳＳＧＬＧＣ−ＫＶＬＲＲＨ−Ｘ2（配列番号：１１２）
ここで、Ｘ2は、Ｌｙｓ、ＣｙｓまたはＬｙｓ＋Ｘａａnであり、ここでｎは１〜１００、１〜５０または１〜１０であり、およびＸａａは、独立して選択されるいずれかのアミノ酸または一群のアミノ酸であるか、または未知のアミノ酸である。
【手続補正４５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３０６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３０６】
１３．  欠失変異ｈＢＮＰ類縁体
−ＣＦＧＲＸ1ＭＤＲＩＸ2ＧＬＧＣ−（配列番号：１０９）
ここで、Ｘ1はＡｒｇであるか、またはＬｙｓ以外のアミノ酸であり、およびＸ2は１〜４アミノ酸、例えばＳＳＳＳ（配列番号：３）、ＳＳＳ、ＳＳ、Ｓ、ＫＳＳＳ（配列番号：４）、ＫＳＳまたはＫＳである。
【手続補正４６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３０７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３０７】
１４．  ｈＢＮＰ類縁体−レセプター特異性
ＳＰＺ1ＭＶＱＧＳＧ−ＣＦＧＲＺ2ＭＤＲＩＳＳＳＳＸ1Ｘ2Ｘ3Ｃ（配列番号：１１３）
ここで、Ｚ1はアルギニンであるか、またはリジン以外のアミノ酸であり、およびＺ2はアルギニンであるか、またはリジン以外のアミノ酸であり、Ｘ1はＧｌｙ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、Ｉｌｅまたはその同類置換基であり、Ｘ2はＧｌｙ、Ａｒｇまたはその同類置換基であり、およびＸ3はＧｌｙ、Ａｒｇまたはその同類置換基である。この類縁体の別の態様において、Ｚ1はリジンであり、およびＺ2はアルキルニンであるか、またはＬｙｓ以外のアミノ酸である。
【手続補正４７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３０８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３０８】
１５．  ＡＮＰ類縁体
ＫＣＦＫＧＫＮＤＲＸ1ＫＸ2ＱＳＧＬＸ3Ｃ−ＮＳＦＫＹ（配列番号：１１４）
ここで、Ｘ1はＴ、ａ、Ｒ、Ｈ、Ｐ、Ｅであり；Ｘ2はＫ、Ｎ−メチル、Ａｒｇ、Ｓ、ＤまたはＰであり；Ｘ3はＡｒｇ、Ｋ、Ｙ、Ｆ、Ｓ、Ｐ、Ｏｒｍ、Ｈａｒ、Ｈａｒ、ｐ−アミジノフェニルＡｌａ、Ｉ、Ｇｌｙ以外の陽電荷を有するいずれか別のアミノ酸、またはＴｒｙである。
【手続補正４８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３１４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３１４】
ｎは、例えば１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０であることができ；ＮＰはナトリウム排泄増加性ペプチドまたはナトリウム排泄増加性ペプチド類縁体であり；
スペーサーは、例えばＮＰ中に存在しない酵素分解部位であることができる（例えば、Ａｓｐ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ（配列番号：６７））；
【手続補正４９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３１５】
リーダーは、例えば１個のアミノ酸、アミノ酸配列、ペプチド（例えば、リーダーペプチドまたはシグナルペプチド）、またはタンパク質であることができ、またリーダーは結合からＮ−末端をブロックし、マルチペプチドの精製を補助し（例えば、酵素カクテル：Ｖ８プロテアーゼ（エンドプロテアーゼＧｌｕ−Ｃ）により分解可能な（Ｈｉｓ）６−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−（配列番号：５５））、溶解を改善し、および／または細胞からの排出を補助する（例えば、Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ（配列番号：５６））ように選択される；リーダーは好ましくは、酵素分解または化学分解によってマルチペプチドから分離することができるものである。
【手続補正５０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３１６】
エクステンションは、例えば１個のアミノ酸、アミノ酸配列、ペプチド（例えば、リーダーペプチドまたはシグナルペプチド）、またはタンパク質であることができ、またエクステンションは結合からＣ−末端をブロックし、マルチペプチドの精製を補助し（例えば、（Ｈｉｓ）６−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−（配列番号：５５））、溶解を改善し、および／または細胞からの排出を補助する（例えば、酵素カクテル：Ｖ８プロテアーゼ（エンドプロテイナーゼＧｌｕ−Ｃ）およびエンドプロテイナーゼ（Ａｓｐ−Ｎ）により分解可能なＡｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ（配列番号：５６））ように選択される；エクステンションは好ましくは、酵素分解または化学分解によってマルチペプチドから分離することができるものである。
【手続補正５１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３１７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３１７】
もう一つの例において、酵素分解部位、好ましくはＮＰに存在しない酵素分解部位（例えば、Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ（配列番号：６９））である。この構築物中のリーダーはまた、細胞にＢＮＰを排出させるシグナルペプチド、例えばＡｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ（配列番号：５６）であることができる。マルチペプチドの精製を補助するものと考えられる構築に使用することができる「エクステンション」（例えば、（Ｈｉｓ）６−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ（配列番号：５５））をまた、含有することができる。ペプチド結合体の分解に使用することができる酵素は、Ｖ８プロテアーゼ（エンドプロテイナーゼＧｌｕ−Ｃ）である。生成する生成物はＮＰ−Ｇｌｕである。
【手続補正５２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３２２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３２２】
９．２８  プロ−マルチペプチドの製造
トリプシンおよびカルボキシペプチダーゼ−Ｂ分解スペーサーおよびＨｉｓタッグ付きリーダーペプチドを備えたプロ−ペンタペプチドＢＮＰ−１の構築
完全長さのプロ−ペンタペプチドＢＮＰ−１のコード配列は、次式に従い得ることができる：
リーダー−ＮＰ−［スペーサー−ＮＰ］n
ここで、スペーサーは、Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（配列番号：５７）であり；
リーダーは、Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ（配列番号：５８）であり；
エクステンションは、（Ｈｉｓ）6−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ（配列番号：５９）であり；
ＮＰは、ｈＢＮＰである。
この態様において、ＮＰはトリプシンおよびカルボキシペプチダーゼＢ酵素カクテルを用いて放出させることができる。
【手続補正５３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３２３】
（ａ）プラスミド構築
標準的分子生物学的技術を使用し、プロ−ペンタペプチドＢＮＰ−１のアミノ酸配列［（Ｈｉｓ）6−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ａｒｇ．］−ＢＮＰ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−ＢＮＰ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−ＢＮＰ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−ＢＮＰ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−ＢＮＰ（配列番号：１１５）］発現用プラスミドを構築する。このプラスミドは使用されるホスト細胞（例えば、Ｅ−コリ）用に最適化されたコドン(Codon)である。このマルチペプチド配列をコードするＤＮＡ断片を、ホストリーダー配列から出発して合成的に組立て、次いでその分解部位をＢＮＰ配列のＨｉｓタグの３′／５′の順序で付加する。この配列のｃＤＮＡをポリアクリルアミドゲルから標準的技術により精製する。このプラスミド構造は制限酵素分析により確認する。
【手続補正５４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】追加
【補正の内容】
【配列表】
2006515579000001.app