【手続補正書】
【提出日】平成17年9月26日(2005.9.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  高められた生成物特異性のCGTアーゼ変異体であって、次の位置に対応するアミノ酸残基（CGTアーゼ番号付け）：
(i) 位置  47: 47C; 47D; 47E; 47F; 47G; 47I; 47K; 47N; 47P; 47R; 47S; 47T;47V; 47W; もしくは 47Y;
(ii) 位置  145: 145D; 145H; 145I; 145N; 145Q; もしくは145V;
(iii) 位置  146: 146H; 146K; 146L; 146T; 146V; もしくは146Y;
(iv) 位置  147: 147C; 147D; 147E; 147N; もしくは147Q;
(v) 位置  196: 196C; 196E; 196F; 196G; 196H; 196I; 196K; 196L; 196M; 196P; 196Q; 196R; 196T; 196V; 196W; もしくは 196Y 、及び/又は
(vi) 位置  371: 371C; 371E; 371F; 371H; 371I; 371K; 371L; 371M;371Q; 371R; 371T; 371V; もしくは 371W 、
中の１又は複数の残基が、置換及び/又は挿入により導入されているCGTアーゼ変異体。
【請求項２】  次の位置に対応するアミノ酸残基（CGTアーゼ番号付け）：
(i) 位置  47: 47F; 47K; 47R; 47W; もしくは 47Y;
(ii) 位置  145: 145D; 145H; 145N; もしくは 145Q;
(iii) 位置  146: 146H; 146K; 146L; 146T; 146V; もしくは146Y;
(iv) 位置  147: 147C; 147D; 147E; 147N; もしくは147Q;
(v) 位置  196: 196C; 196E; 196F; 196G; 196H; 196I; 196K; 196L; 196M; 196P;196Q; 196R; 196T; 196V; 196W;もしくは196Y 、及び/又は
(vi) 位置  371: 371C; 371H; 371K; 371R; もしくは 371T 、
中の１又は複数の残基が、置換及び/又は挿入により導入されている、α−シクロデキストリンの生成に関して高められた生成物特異性を示す請求項１記載のCGTアーゼ変異体。
【請求項３】  次の位置に対応するアミノ酸残基（ CGTアーゼ番号付け）：
(i) 位置  47: 47C; 47D; 47E; 47F; 47G; 47I 47N; 47P; 47S; 47T; 47V; 47W; もしくは 47Y;
(ii) 位置  145: 145D; 145I; 145N; もしくは 145V;
(iii) 位置  147:147E;
(iv) 位置  196: 196C; 196E; 196F; 196G; 196H; 196I; 196K; 196L; 196M; 196P; 196Q; 196R; 196T; 196V; 196W; もしくは 196Y 、及び/又は
(v) 位置  371: 371C; 371E; 371F; 371H; 371I; 371K; 371L; 371M; 371Q; 371R; 371T; 371V; もしくは 371W 、
中の１又は複数の残基が、置換及び/又は挿入により導入されている、β−シクロデキストリンの生成に関して高められた生成物特異性を示す請求項１記載のCGTアーゼ変異体。
【請求項４】  次の位置に対応するアミノ酸残基（CGTアーゼ番号付け）：
(i) 位置  47: 47C; 47D; 47E; 47F; 47G; 47I; 47N; 47P; 47S; 47T; 47V; 47W; もしくは 47Y;
(ii) 位置  145: 145D; 145I; 145N; もしくは 145V;
(iii) 位置  147: 147E;
(iv) 位置  196: 196C; 196E; 196F; 196G; 196H; 196I; 196K; 196L; 196M; 196P; 196Q; 196R; 196T; 196V; 196W; もしくは 196Y 、及び/又は
(v) 位置  371: 371C; 371E; 371F; 371H; 371K; 371M; 371Q; 371R; 371T; もしくは 371W 、
中の１又は複数の残基が、置換及び/ 又は挿入により導入されている、γ−シクロデキストリンの生成に関して高められた生成物特異性を示す請求項１記載のCGTアーゼ変異体。
【請求項５】  バチルス（Bacillus）の株、ブレビバクテリウム（Brevibacterium）の株、クロストリジウム（Clostridium）の株、コリネバクテリウム（Corynebacterium）の株、クレブシエラ（Klebsiella）の株、ミクロコーカス（Micrococcus）の株、サーモアナエロビウム（Thermoanaerobium）の株、サーモアナエロバクテリウム（Thermoanaerobacterium）の株、サーモアナエロバクター（Thermoanaerobacter）の株、又はサーモアクチノミセス（Thermoactinomyces）の株に由来する請求項１〜４のいずれか１項記載のCGTアーゼ変異体。
【請求項６】  バチルス・オートリチカス（Bacillus autolyticus）の株、バチルス・セレウス（Bacillus cereus）の株、バチルス・サーキュランス（Bacillus circulans）の株、バチルス・サーキュランス  var. アルカロフィラス（Bacillus  circulans var. alkalophilus）の株、バチルス・コアギュランス（Bacillus  coagulans ）の株、バチルス・フィルマス（Bacillus  firmus ）の株、バチルス・ハロフィラス（Bacillus halophilus）の株、バチルス・マセランス（Bacillus macerans）の株、バチルス・メガテリウム（Bacillus megaterium）の株、バチルス・オーベンシス（Bacillus ohbensis）の株、バチルス・ステアロサーモフィラス（Bacillus  stearothermophilus）の株又はバチルス・スブチリス（Bacillus  subtilis）の株に由来する請求項５記載のCGTアーゼ変異体。
【請求項７】  クレブシエラ・プネウモニア (Klebsiella pneumonia）の株、サーモアナエロバクター・エタノリカス（Thermoanaerobacter ethanolicus ）の株、サーモアナエロバクター・フィニイ（Thermoanaerobacter finnii）の株、クロストリジウム・サーモアミロリチカム（Clostridium thermoamylolyticum）の株、クロストリジウム・サーモサッカロリチカム（Clostridium thermosaccharolyticum）の株、又はサーモアナエロバクテリウム・サーモスルフリゲネス（Thermoanaerobacterium thrmosulfurigenes）の株に由来する請求項５記載のCGTアーゼ変異体。
【請求項８】  次のアミノ酸残基（CGTアーゼ番号付け）：
(i) 47K/145E/146V/147N;
(ii) 47K/145E/146E/147N;
(iii) 47K/145D/146R/147D;
(iv) 47K/145D/146E/147D;
(v) 47K/145E/146V/147N/196H;
(vi) 47K/145E/146E/147N/196H;
(vii) 47K/145E/146V/147N/196H/371R;
(viii) 47K/145E/146E/147N/196H/371R;
(ix) 47K/145D/146R/147D/196H;
(x) 47K/145D/146E/147D/196H;
(xi) 47K/145D/146R/147D/196H/371R;
(xii) 47K/145D/146R/147D/196H/371R;
(xiii) 47K/196H;
(xiv) 47R/196H;
(xv) 145E/146V/147N;
(xvi) 145E/146E/147N;
(xvii) 145D/146R/147D;
(xviii) 145D/146E/147D;
(xix) 47K/371R 、及び/又は
(xx) 47R/371R 、
の１又は複数の残基を含んで成る請求項１〜７のいずれか１項記載のCGTアーゼ変異体。
【請求項９】  バチルス・サーキュランスの株に由来し、そして次のアミノ酸残基（CGTアーゼ番号付け）：
(i) R47K/S145E/S146V/D147N;
(ii) R47K/S145E/S146E/D147N;
(iii) R47K/S145D/S146R;
(iv) R47K/S145D/S146E;
(v) R47K/S145E/S146V/D147N/D196H;
(vi) R47K/S145E/S146E/D147N/D196H;
(vii) R47K/S145E/S146V/D147N/D196H/D371R;
(viii) R47K/S145E/S146E/D147N/D196H/D371R;
(ix) R47K/S145D/S146R/D196H;
(x) R47K/S145D/S146E/D196H;
(xi) R47K/S145D/S146R/D196H/D371R;
(xii) R47K/S145D/S146R/D196H/D371R;
(xiii) R47K/D196H;
(xiv) S145E/S146V/D147N;
(xv) S145E/S146E/D147N;
(xvi) S145D/S146R;
(xvii) S145D/S146E;
(xviii) R47K/D371R 、
の１又は複数の残基を含んで成る請求項８記載のCGTアーゼ変異体。
【請求項１０】  サーモアナエロバクター sp. の株に由来し、そして次のアミノ酸残基（CGTアーゼ番号付け）：
(i) S145E/E146V/T147N;
(ii) SI45E/T147N;
(iii) S145D/E146R/T147D;
(iv) S145D/T147D;
(v) S145E/E146V/T147N/D196H;
(vi) S145E/T147N/D196H;
(vii) S145E/E146V/T147N/D196H/D371R;
(viii) S145E/T147N/D196H/D371R;
(ix) S145D/E146R/T147D/D196H;
(x) S145D/T147D/D196H;
(xi) S145D/E146R/T147D/D196H/D371R;
(xii) S145D/E146R/T147D/D196H/D371R;
(xiii) S145E/E146V/T147N;
(xiv) S145E/T147N;
(xv) S145D/E146R/T147D;
(xvi) S145D/T147D;
(xvii) K47R/D371R; 及び/又は
(xviii) K47R/D196H 、
の１又は複数の残基を含んで成る請求項８記載のCGTアーゼ変異体。
【請求項１１】  シクロデキストリン工程の最終シクロデキストリン生成物中のα−シクロデキストリン含有率を高めるための請求項１〜１０のいずれか１項記載のCGTアーゼ変異体の使用。
【請求項１２】  シクロデキストリン工程の最終シクロデキストリン生成物中のβ−シクロデキストリン含有率を高めるための請求項１〜１０のいずれか１項記載のCGTアーゼ変異体の使用。
【請求項１３】  シクロデキストリン工程の最終シクロデキストリン生成物中のγ−シクロデキストリン含有率を高めるための請求項１〜１０のいずれか１項記載のCGTアーゼ変異体の使用。
【請求項１４】  請求項１〜１０のいずれか１項の変異体中の位置に対応する１又は複数のアミノ酸残基が、置換及び/又は挿入により導入されている、α−シクロデキストリンの生成に関して生成物特異性を高めるための方法。
【請求項１５】  請求項１〜１０のいずれか１項の変異体中の位置に対応する１又は複数のアミノ酸残基が、置換及び/又は挿入により導入されている、β−シクロデキストリンの生成に関して生成物特異性を高めるための方法。
【請求項１６】  請求項１〜１０のいずれか１項の変異体中の位置に対応する１又は複数のアミノ酸残基が、置換及び/又は挿入により導入されている、γ−シクロデキストリンの生成に関して生成物特異性を高めるための方法。