【手続補正書】
【提出日】平成17年10月27日(2005.10.27)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも６つの異なる連結された免疫原性ペプチドを含む、ハイブリッドポリペプチドであって、各免疫原性ペプチドは、Ａ群連鎖球菌Ｍタンパク質のアミノ末端部分のうちの少なくとも３０アミノ酸を含み、ここで、該少なくとも６つの免疫原性ポリペプチドは、少なくともＭ５タンパク質、Ｍ６タンパク質、Ｍ１４タンパク質、Ｍ１９タンパク質、Ｍ２４タンパク質、およびＭ２９タンパク質に由来し、該ポリペプチドは、カルボキシ末端ペプチドとして繰り返されるアミノ末端ペプチドを有する、ポリペプチド。
【請求項２】
前記ポリペプチドの前記アミノ末端免疫原性ペプチドがＭ２４である、請求項１に記載のハイブリッドポリペプチド。
【請求項３】
前記ポリペプチドが組み換えポリペプチドであり、前記免疫原性ペプチドが直列に連結されており、ここで、該ポリペプチドは、Ｍ２４−Ｍ５−Ｍ６−Ｍ１９−Ｍ２９−Ｍ１４−Ｍ２４連結免疫原性ペプチドの構造を有する、請求項２に記載のハイブリッドポリペプチド。
【請求項４】
少なくとも７つの異なる連結された免疫原性ペプチドを含む、ハイブリッドポリペプチドであって、各免疫原性ペプチドは、Ａ群連鎖球菌Ｍタンパク質のアミノ末端部分のうちの少なくとも３５アミノ酸を含み、ここで、該少なくとも７つの免疫原性ポリペプチドは、少なくともＭ２タンパク質、Ｍ１１タンパク質、Ｍ２２タンパク質、Ｍ３３タンパク質、Ｍ４３タンパク質、Ｍ５９タンパク質、およびＭ９４タンパク質に由来し、該ポリペプチドは、カルボキシ末端ペプチドとして繰り返されるアミノ末端ペプチドを有する、ポリペプチド。
【請求項５】
前記ポリペプチドの前記アミノ末端免疫原性ペプチドがＭ２である、請求項４に記載のハイブリッドポリペプチド。
【請求項６】
前記ポリペプチドが組み換えポリペプチドであり、前記免疫原性ペプチドが直列に連結されており、ここで、該ポリペプチドは、Ｍ２−Ｍ４３−Ｍ９４−Ｍ２２−Ｍ１１−Ｍ５９−Ｍ３３−Ｍ２連結免疫原性ペプチドの構造を有する、請求項５に記載のハイブリッドポリペプチド。
【請求項７】
少なくとも７つの異なる連結された免疫原性ペプチドを含む、ハイブリッドポリペプチドであって、各ペプチドは、異なる連鎖球菌Ｍタンパク質のアミノ末端部分のうちの少なくとも４０アミノ酸を含み、ここで、該少なくとも７つの免疫原性ペプチドは、少なくともＭ７５タンパク質、Ｍ７６タンパク質、Ｍ７７タンパク質、Ｍ８９タンパク質、Ｍ９２タンパク質、Ｍ１０１タンパク質、およびＭ１１４タンパク質に由来し、該ポリペプチドは、カルボキシ末端ペプチドとして繰り返されるアミノ末端ペプチドを有する、ポリペプチド。
【請求項８】
前記ポリペプチドの前記アミノ末端免疫原性ペプチドがＭ８９である、請求項７に記載のハイブリッドポリペプチド。
【請求項９】
前記ポリペプチドが組み換えポリペプチドであり、前記免疫原性ペプチドが直列に連結されており、ここで、該ポリペプチドは、Ｍ８９−Ｍ１０１−Ｍ７７−Ｍ１１４−Ｍ７５−Ｍ７６−Ｍ９２−Ｍ８９連結免疫原性ペプチドの構造を有する、請求項８に記載のハイブリッドポリペプチド。
【請求項１０】
少なくとも７つの異なる直列に連結された免疫原性ペプチドを含む、ハイブリッドポリペプチドであって、各免疫原性ペプチドは、異なるＡ群連鎖球菌タンパク質のアミノ末端部分のうちの少なくとも５０アミノ酸を含み、ここで、該少なくとも７つの免疫原性ペプチドの１つは、Ａ群連鎖球菌のＳｐａタンパク質に由来し、ここで、該少なくとも７つの異なる免疫原性ペプチドのうちの６つは、Ｍ１．０タンパク質、Ｍ１．２タンパク質、Ｍ３タンパク質、Ｍ１２タンパク質、Ｍ１８タンパク質、およびＭ２８タンパク質に由来し、該ポリペプチドは、カルボキシ末端ペプチドとして繰り返されるアミノ末端ペプチドを有する、ポリペプチド。
【請求項１１】
前記ポリペプチドの前記アミノ末端免疫原性ペプチドがＭ１．０である、請求項１０に記載のハイブリッドポリペプチド。
【請求項１２】
前記ポリペプチドが組み換えポリペプチドであり、前記免疫原性ペプチドが直列に連結されており、ここで、該ポリペプチドは、Ｍ１．０−Ｍ１２−Ｓｐａ−Ｍ２８−Ｍ３−Ｍ１．２−Ｍ１８−Ｍ１．０連結免疫原性ペプチドの構造を有する、請求項１１に記載のハイブリッドポリペプチド。
【請求項１３】
前記免疫原性ポリペプチドが、制限酵素認識部位である核酸配列によりコードされる少なくとも２つのアミノ酸によって連結されている、請求項３、６、９、および１２のいずれか１項に記載のハイブリッドポリペプチド。
【請求項１４】
前記認識部位が、ＢａｍＨＩ、ＣｌａＩ、ＥｃｏＲＩ、ＨｉｎｄＩＩＩ、ＫｐｎＩ、ＮｃｏＩ、ＮｈｅＩ、ＰｍｌＩ、ＰｓｔＩ、ＳａｌＩ、およびＸｈｏＩから選択される、請求項１３に記載のハイブリッドポリペプチド。
【請求項１５】
前記ポリペプチドが、被験体において、組織交差反応性抗体ではない少なくとも１つのオプソニン抗体を誘発し得る、請求項１〜１４のいずれか１項に記載のハイブリッドポリペプチド。
【請求項１６】
前記被験体がヒトまたは動物である、請求項１５に記載のハイブリッドポリペプチド。
【請求項１７】
カルボキシ末端タグをさらに含む、請求項１〜１４のいずれか１項に記載のハイブリッドポリペプチド。
【請求項１８】
前記カルボキシ末端タグが、アルカリホスファターゼ、β−ガラクトシダーゼ、６ヒスチジン、エピトープタグＤＹＫＤＤＤＤＫ（配列番号１８）、エピトープタグＤＬＹＤＤＤＤＫ（配列番号１９）、およびＧＳＴから選択される、請求項１７に記載のハイブリッドポリペプチド。
【請求項１９】
前記カルボキシ末端タグが６ヒスチジンである、請求項１８に記載のハイブリッドポリペプチド。
【請求項２０】
少なくとも１つのさらなるカルボキシ末端アミノ酸をさらに含む、請求項１〜１４および１９のいずれか１項に記載のハイブリッドポリペプチド。
【請求項２１】
前記さらなるカルボキシ末端アミノ酸が、Ｄ−アミノ酸であるか、または該さらなるカルボキシ末端が、システインである、請求項２０に記載のハイブリッドポリペプチド。
【請求項２２】
配列番号２、４、６、または８に示されるアミノ酸配列を含む、ハイブリッドポリペプチド。
【請求項２３】
ハイブリッドポリペプチドであって、該ハイブリッドポリペプチドは、（ａ）配列番号２，４，６、または８に示されるアミノ酸配列に対して少なくとも９７％同一なアミノ酸配列；（ｂ）配列番号２，４，６、または８に示されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一なアミノ酸配列；（ｃ）配列番号２，４，６、または８のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％同一なアミノ酸配列；あるいは（ｄ）高ストリジェンシー条件下において、配列番号１、３、５、または７に示されるヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドにハイブリダイズするポリヌクレオチドによってコードされるアミノ酸配列を含み、
ここで、該ハイブリッドポリペプチドは、被験体において、組織交差反応性抗体ではない少なくとも１つのオプソニン抗体を誘発し得る、ポリペプチド。
【請求項２４】
ポリヌクレオチドであって、該ポリヌクレオチドは、（ａ）請求項１〜１４および２２のいずれか１項に記載のハイブリッドポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含むか、あるいは（ｂ）高ストリジェンシー条件下において、配列番号１，３、５、または７に示されるヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドにハイブリダイズする能力を有する、ポリヌクレオチド。
【請求項２５】
請求項２４に記載のポリヌクレオチドに作動可能に連結された発現制御配列を含む、核酸発現構築物。
【請求項２６】
前記発現制御配列が、誘導性プロモーターを含む、請求項２５に記載の構築物。
【請求項２７】
前記誘導性プロモーターが、ｌａｃプロモーター、ｔａｃプロモーター、ｔｒｃプロモーター、ａｒａプロモーター、ｔｒｐプロモーター、λファージプロモーター、Ｔ７ファージプロモーター、およびＴ５ファージプロモーターから選択される、請求項２６に記載の構築物。
【請求項２８】
前記誘導性プロモーターが、Ｔ５ファージプロモーターである、請求項２６に記載の構築物。
【請求項２９】
前記構築物が、プラスミド、ファージミド、シャトルベクター、コスミド、およびウイルスから選択される核酸発現ベクターを含む、請求項２５に記載の構築物。
【請求項３０】
請求項２５に記載の構築物であって、前記構築物が核酸発現ベクターを含み、該ベクターはプラスミドである構築物。
【請求項３１】
前記プラスミドが、ｐＴ５（配列番号１７）である、請求項３０に記載の構築物。
【請求項３２】
請求項２５〜３１のいずれか１項に記載の構築物を含む、宿主細胞。
【請求項３３】
前記宿主細胞が、細菌、酵母細胞、線虫類細胞、昆虫細胞、および哺乳動物細胞から選択される、請求項３２に記載の宿主細胞。
【請求項３４】
前記宿主細胞が細菌であり、そして該細菌がＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉである、請求項３３に記載の宿主細胞。
【請求項３５】
ハイブリッドポリペプチドを生成する方法であって、請求項３２〜３４のいずれか１項に記載の宿主細胞を、該ポリペプチドの発現に十分な時間、該発現のために条件下で培養する工程を包含する、方法。
【請求項３６】
薬学的に受容可能なキャリア、ならびに請求項１〜１４、および請求項２２〜２３のいずれか１項に記載のハイブリッドポリペプチドを含む、薬学的組成物。
【請求項３７】
薬学的に受容可能なキャリア、および（ａ）請求項１、４、７、および１０に記載のハイブリッドポリペプチドのうちの少なくとも２つの混合物；または（ｂ）請求項３、６、９、および１２に記載のハイブリッドポリペプチドのうちの少なくとも２つの混合物を含む、薬学的組成物。
【請求項３８】
請求項３７に記載の薬学的組成物であって、ここで、前記の少なくとも２つのハイブリッドポリペプチドの混合物は、請求項１０に記載のハイブリッドポリペプチドを、請求項１、４、および７のいずれか１項に記載のハイブリッドポリペプチドのうちの少なくとも１つとともに含む、薬学的組成物。
【請求項３９】
前記少なくとも２つのハイブリッドポリペプチドの混合物は、請求項１２に記載のハイブリッドポリペプチドを請求項３、６、および９のいずれか１項に記載のハイブリッドポリペプチドのうちの少なくとも１つとともに含む、請求項３７に記載の薬学的組成物。
【請求項４０】
薬学的に受容可能なキャリア、ならびに請求項１、４、７、および１０に記載のハイブリッドポリペプチドのうちの少なくとも３つの混合物；または（ｂ）請求項３、６、９、および１２に記載のハイブリッドポリペプチドのうちの少なくとも３つの混合物を含む、薬学的組成物。
【請求項４１】
薬学的に受容可能なキャリアと、ならびに請求項１、４、７、および１０に記載のハイブリッドポリペプチドの混合物；または（ｂ）請求項３、６、９、および１２に記載のハイブリッドポリペプチドの混合物を含む、薬学的組成物。
【請求項４２】
薬学的に受容可能なキャリアと、ハイブリッドポリペプチドとの混合物を含む薬学的組成物であって、該混合物は、配列番号２に示されるアミノ酸配列を含むハイブリッドポリペプチド；配列番号４に示されるアミノ酸配列を含むハイブリッドポリペプチド；配列番号６に示されるアミノ酸配列を含むハイブリッドポリペプチド；および配列番号８に示されるアミノ酸配列を含むハイブリッドポリペプチドを含む、薬学的組成物。
【請求項４３】
前記混合物中の前記ハイブリッドポリペプチドが等モル量で混合されている、請求項４１または４２のどちらかに記載の薬学的組成物。
【請求項４４】
アジュバントをさらに含む、請求項３６〜４３のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項４５】
前記アジュバントが、ミョウバンまたはフロイントアジュバントである、請求項４４に記載の薬学的組成物。
【請求項４６】
アジュバントをさらに含み、該アジュバントがミョウバンである、請求項４４に記載の薬学的組成物。
【請求項４７】
微生物感染を予防する際に使用するための、請求項３６〜４６のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項４８】
前記微生物感染がＡ群連鎖球菌感染である、請求項４７に記載の薬学的組成物。
【請求項４９】
請求項１、４、７、および１０のいずれか１項に記載の１以上のハイブリッドポリペプチドに特異的に結合する、複数の単離された抗体。
【請求項５０】
前記複数の単離された抗体のうちの少なくとも１つの抗体が、前記ハイブリッドポリペプチドにおいて提示されないＭタンパク質抗原に特異的である、請求項４９に記載の複数の単離された抗体。
【請求項５１】
ハイブリッドポリペプチドにおいて提示されないＭタンパク質抗原がＭ４である、請求項５０に記載の複数の単離された抗体。
【請求項５２】
微生物感染を予防するための医薬を製造するための、請求項４９〜５１のいずれか１項に記載の複数の単離された抗体の使用であって、ここで微生物感染がＡ群連鎖球菌感染である、使用。