【手続補正書】
【提出日】平成18年1月27日(2006.1.27)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  改変タンパク質アレルゲンを作製する方法であって、以下の工程：
（ａ）タンパク質アレルゲン中の１つ以上のＩｇＥエピトープを同定する工程；
（ｂ）少なくとも１つの改変タンパク質アレルゲンを調製する工程であって、該少なくとも１つの改変タンパク質アレルゲンのアミノ酸配列は、少なくとも１つのＩｇＥエピトープ中で少なくとも１つのアミノ酸が改変されていることを除いて、非改変タンパク質アレルゲンのアミノ酸配列と実質的に同一である、工程；
（ｃ）該非改変タンパク質アレルゲンに対してアレルギー性である患者のプールされた集団由来の血清または抗体を使用して、該少なくとも１つの改変タンパク質アレルゲンに対するＩｇＥ結合についてスクリーニングする工程；
（ｄ）該非改変タンパク質アレルゲンに対してアレルギー性である少なくとも１つの個体から培養されたＴ細胞を使用して、該少なくとも１つの改変タンパク質アレルゲンによるＴ細胞の活性化についてスクリーニングする工程；および
（ｅ）改変タンパク質アレルゲンを選択する工程であって、該改変タンパク質アレルゲンは、該非改変タンパク質アレルゲンと比較してＩｇＥに対する結合を減少させ、そして該非改変タンパク質アレルゲンと実質的に同じ方法でＴ細胞を活性化させる、工程、
を包含する、方法。
【請求項２】  前記非改変タンパク質アレルゲンに対してアレルギー性である少なくとも１つの個体由来の血清または抗体を使用して、ＩｇＧに対する前記少なくとも１つの改変タンパク質アレルゲンの結合についてスクリーニングする工程、および該非改変タンパク質アレルゲンと実質的に同じ方法でＩｇＧに結合する改変タンパク質アレルゲンを選択する工程をさらに包含する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】  前記選択された改変タンパク質アレルゲンが、１つ以上のＩｇＥエピトープの中心で変異される、請求項１に記載の方法。
【請求項４】  前記選択された改変タンパク質アレルゲンが、置換によって変異される、請求項１に記載の方法。
【請求項５】  前記選択された改変タンパクス質アレルゲンが、１つ以上のＩｇＥエピトープの中心の疎水性アミノ酸を、中性アミノ酸または親水性アミノ酸と置換することによって変異される、請求項４に記載の方法。
【請求項６】  前記選択された改変タンパク質アレルゲンが、次いで、ＩＬ−１２、ＩＬ−１６、ＩＬ−１８、ＩＦＮγおよび免疫刺激オリゴデオキシヌクレオチド配列からなる群から選択されるアジュバントを用いて処方され、該配列は、活発な活性化を引き起こし、かつＴｈ１型反応に対する免疫応答をゆがめる非メチル化ＣｐＧ部分を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項７】  前記Ｔ細胞の活性化についてスクリーニングする工程において、前記少なくとも１つの改変タンパク質アレルゲンが、Ｔ細胞ヘルパー１応答の開始についてスクリーニングされる、請求項１に記載の方法。
【請求項８】  前記選択された改変タンパク質アレルゲンが、植物、動物、細菌、酵母、真菌、および昆虫細胞からなる群から選択される組換え宿主において作製される、請求項１に記載の方法。
【請求項９】  前記選択された改変タンパク質アレルゲンが、部位特異的変異を使用して細胞中に作製される、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】  前記非改変タンパク質アレルゲンが、Ａｒａ  ｈ  １、Ａｒａ  ｈ  ２およびＡｒａ  ｈ  ３からなる群から選択されるピーナッツアレルゲンである、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】  前記非改変タンパク質アレルゲンが、マメ、乳、穀物、卵、魚、甲殻類、軟体動物、昆虫、カビ、塵、草、木、海草、哺乳動物、鳥類、および天然のラテックスからなる群から選択される供給源から得られるタンパク質である、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】  前記調製する工程が、前記非改変タンパク質アレルゲンの全てのＩｇＥエピトープ中の少なくとも１つのアミノ酸変異を有する改変タンパク質アレルゲンを調製することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】  前記調製する工程が、少なくとも１つの改変タンパク質アレルゲンを調製することを含み、該少なくとも１つの改変タンパク質アレルゲンのアミノ酸配列は、少なくとも１つの直鎖状ＩｇＥエピトープにおいて少なくとも１つのアミノ酸が改変されていることを除いて、前記非改変タンパク質アレルゲンのアミノ酸配列と実質的に同一である、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】  改変タンパク質アレルゲンであって、該改変タンパク質アレルゲンのアミノ酸配列は、１つ以上のＩｇＥエピトープにおいて少なくとも１つのアミノ酸が改変されており、該改変タンパク質アレルゲンに結合するプールされた血清ＩｇＥが、該非改変タンパク質アレルゲンに結合するプールされた血清ＩｇＥと比較して減少していることをのぞいて、該非改変タンパク質アレルゲンのアミノ酸配列と実質的に同一であり、ここで、該改変タンパク質アレルゲンは、該非改変タンパク質アレルゲンと実質的に同じ方法でＴ細胞を活性化する、改変タンパク質アレルゲン。
【請求項１５】  少なくとも１つのアミノ酸が、前記非改変タンパク質アレルゲンの全てのＩｇＥエピトープにおいて改変されている、請求項１４に記載の改変タンパク質アレルゲン。
【請求項１６】  少なくとも１つの改変アミノ酸が、前記非改変タンパク質アレルゲンの１つ以上のＩｇＥエピトープの中心に位置する、請求項１４に記載の改変タンパク質アレルゲン。
【請求項１７】  前記非改変タンパク質アレルゲンの１つ以上のＩｇＥエピトープ中の少なくとも１つのアミノ酸が、置換によって改変されている、請求項１４に記載の改変タンパク質アレルゲン。
【請求項１８】  前記非改変タンパク質アレルゲンの１つ以上のＩｇＥエピトープ中の少なくとも１つの疎水性アミノ酸が、中性アミノ酸または親水性アミノ酸によって置換されている、請求項１７に記載の改変タンパク質アレルゲン。
【請求項１９】  前記改変タンパク質アレルゲンが、前記非改変タンパク質アレルゲンに対してアレルギー性である少なくとも１つの個体から培養されたＴ細胞を活性化する能力を保持する、請求項１４に記載の改変タンパク質アレルゲン。
【請求項２０】  前記改変タンパク質アレルゲンが、ＩｇＧに結合する能力を保持する、請求項１４に記載の改変タンパク質アレルゲン。
【請求項２１】  前記改変タンパク質アレルゲンが、Ｔｈ１型反応を開始する能力を保持する、請求項１４に記載の改変タンパク質アレルゲン。
【請求項２２】  請求項１４に記載の改変タンパク質アレルゲンと、ＩＬ−１２、ＩＬ−１６、ＩＬ−１８、ＩＦＮγおよび免疫刺激オリゴデオキシヌクレオチド配列からなる群から選択されるアジュバントとを含有する組成物であって、該配列は、活発な活性化を引き起こし、かつＴｈ１型反応に対する免疫応答をゆがめる非メチル化ＣｐＧ部分を含む、組成物。
【請求項２３】  前記改変タンパク質アレルゲンが、トランスジェニック植物またはトランスジェニック動物において作製される、請求項１４に記載の改変タンパク質アレルゲン。
【請求項２４】  植物および動物からなる群から選択される組換え宿主において発現される、請求項１４に記載の改変タンパク質アレルゲン。
【請求項２５】  細菌、酵母、真菌、および昆虫細胞からなる群から選択される組換え宿主において発現される、請求項１４に記載の改変タンパク質アレルゲン。
【請求項２６】  前記非改変タンパク質アレルゲンが、Ａｒａ  ｈ  １、Ａｒａ  ｈ  ２およびＡｒａ  ｈ  ３からなる群から選択されるピーナッツアレルゲンである、請求項１４に記載の改変タンパク質アレルゲン。
【請求項２７】  前記非改変タンパク質アレルゲンが、マメ、乳、穀物、卵、魚、甲殻類、軟体動物、昆虫、カビ、塵、草、木、海草、哺乳動物、および天然のラテックスからなる群から選択される供給源から得られる、請求項１４に記載の改変タンパク質アレルゲン。
【請求項２８】  前記改変タンパク質アレルゲンが、少なくとも１つの直鎖状ＩｇＥエピトープ中で少なくとも１つのアミノ酸が改変されていることを除いて、非改変タンパク質アレルゲンのアミノ酸配列と実質的に同一であるアミノ酸配列を有する、請求項１４〜２７のいずれか１項に記載の改変タンパク質アレルゲン。
【請求項２９】  以下のプロセスによって作製される、改変タンパク質アレルゲン：
（ａ）タンパク質アレルゲンにおいて１つ以上のＩｇＥエピトープを同定する工程；
（ｂ）少なくとも１つの改変タンパク質アレルゲンを調製する工程であって、該少なくとも１つの改変タンパク質アレルゲンのアミノ酸配列は、少なくとも１つのＩｇＥエピトープ中で少なくとも１つのアミノ酸が改変されていることを除いて、非改変タンパク質アレルゲンのアミノ酸配列と実質的に同一である、工程；
（ｃ）該非改変タンパク質アレルゲンに対してアレルギー性である患者のプールされた集団由来の血清または抗体を使用して、該少なくとも１つの改変タンパク質アレルゲンに対するＩｇＥ結合についてスクリーニングする工程；
（ｄ）該非改変タンパク質アレルゲンに対してアレルギー性である少なくとも１つの個体から培養されたＴ細胞を使用して、該少なくとも１つの改変タンパク質アレルゲンによるＴ細胞の活性化についてスクリーニングする工程；および
（ｅ）改変タンパク質アレルゲンを選択する工程であって、該改変タンパク質アレルゲンは、該非改変タンパク質アレルゲンと比較してＩｇＥに対する結合を減少させ、そして該非改変タンパク質アレルゲンと実質的に同じ方法でＴ細胞を活性化させる、工程。
【請求項３０】 請求項１４〜２８のいずれか１項によって規定される改変タンパク質アレルゲンをコードする、ヌクレオチド分子。
【請求項３１】  組換え宿主における発現のためのベクター中の、請求項３０に記載のヌクレオチド分子。
【請求項３２】  タンパク質アレルゲンに対する臨床的応答を減少させるために個体を処置するための医薬の製造における、請求項１４〜２８のいずれか１項によって規定される改変タンパク質アレルゲンの使用であって、ここで、該医薬は、該タンパク質アレルゲンに対するアレルギー性反応を減少させるために十分な量および十分な時間投与されるように処方される、使用。