【手続補正書】
【提出日】平成18年3月16日(2006.3.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１４】
Ａ２ＡＡＲアゴニストの抗炎症作用は、髄膜炎、腹膜炎、および関節炎の実験的モデルにおいて、生体内で証明された。細菌性敗血症の可能性のある致命的な症候群は、救急治療室でますます共通する問題である。現在、アメリカ合衆国で１１番目の主な死亡原因である、敗血症および敗血性ショックは、頻度が増加しつつある。現時点での推定は、年間、約９００，０００のケースの新たな敗血症（約６０％がグラム陰性）が、推定粗死亡率３５％を伴いアメリカ合衆国で生じることを示す。さらに、最近の臨床試験で判断された死亡率は約２５％であるが、約１０％の患者が基礎疾病で死亡する。ショックは、年間、約２００，０００ケースで、起因性死亡率４６％（死亡者数９２，０００）を伴い発症する。敗血症は、年間で医療費の推定５０〜１００億ドルを占める。非冠疾患集中治療室の入院患者の間で、敗血症は最も一般的な死亡原因であることは、すでに十分に理解されている。敗血症症候群は、主に重要な社会的健康問題である。Ａ２ＡＡＲアゴニストは、罹患率および死亡率を低減させるための新規かつ固有の補助的治療法としての用途を有すると期待される。該処置は、全身性炭疽、野兎病、大腸菌感染症、およびペストの結末を改善するだろと信じられている。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１２】
具体的には、本発明は、哺乳類（例えば、ヒト）での細菌、真菌、またはウイルス感染症により引き起こされる炎症、および該感染症の処置、例えば、細菌またはウイルス細胞の死により引き起こされる炎症を処置するための医薬を製造するための、式（Ｉ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩の使用も提供する。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２１】
錠剤、トローチ剤、ピル剤、およびカプセル剤などは、次の；トラガカントゴム、アカシア、コーンスターチ、またはゼラチンの様な結合剤；第二リン酸カルシウムの様な賦形剤；コーンスターチ、ポテトスターチ、アルギン酸などの様な崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムの様な滑沢剤；およびスクロース、フルクトース、ラクトース、またはアスパルテームの様な甘味剤、またはウインターグリーン油、またはペパーミント、サクランボ香味剤の様な香味剤を含有する。単位投薬量剤形がカプセル剤である場合、それは、上記種類の原料に加えて、植物油またはポリエチレングリコールの様な液体担体を含有する。様々な他の原料は、被覆剤として、その他、固体単位投薬量剤形の物理的形態を変更するために存在する。例えば、錠剤、ピル剤、またはカプセル剤は、ゼラチン、蝋、セラック、または糖などで被覆される。シロップ剤またはエレキシル剤は、活性化合物、甘味剤としてスクロースまたはフルクトース、保存剤としてメチルおよびプロピルパラベン、着色剤、およびチェリーまたはオレンジ香味剤の様な香味剤を含有する。もちろん、任意の単位投薬量剤形を製剤するのに用いられる任意の原料は、医薬的に許容され、かつ利用される量で十分に非毒性でなければならない。さらに、活性化合物は、持続性放出製剤および装置に取り込まれ得る。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１４０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１４０】
本発明の実施に有用な化合物の合成
全ての融点を、Thomas Hooverキャピラリー融点測定装置で測定した（未補正）。プロトンについての核磁気共鳴スペクトル（１Ｈ  ＮＭＲ）を、３００ＭＨｚのＧＥ分光光度計で記録した。化学的シフト値を、テトラメチルシランと比較してｐｐｍ（１００万分の１）で表す。データ記録については、ｓ＝シングレット、ｄ＝ダブレット、ｔ＝トリプレット、ｑ＝カルテット、そしてｍ＝マルチプレットとする。質量分析を、FinniganＬｃＱクラシックで測定した。高分解能質量分析（ＨＲＭＳ）データは、質量分析ナブラスカセンターによりもたらされた。分析的ＨＰＬＣを、室温で操作する、WatersシンメトリーＣ８（２．１×１５０ｍｍ）を有するWaters２６９０セパレーションモジュールで処理した。化合物を、２００μｌ／分で、０．５％  酢酸を含有する、アセトニトリル：水（７０：３０）で溶出し、Waters４８６調節可能検出器を用いて、２１４ｎｍでＵＶ検出した。製造的ＨＰＬＣを、室温で操作する、シム−パックＶＰ−ＯＤＳ  Ｃ１８（２０×１００ｍｍ）カラムを有する島津製作所のディスカバリーＨＰＬＣ上で行った。化合物を、３０ｍｌ／分で、水（０．１％  ＴＦＡ含有）からメタノールへの勾配２０〜８０％により１５分かけて溶出し、ＳＰＤ１０Ａ  ＶＰ調節可能検出器を用いて、２１４ｎｍでＵＶ検出した。ここで存在する最終化合物全てを、ＨＰＬＣにより、９８％以上純粋であると決定した。フラッシュクロマトグラフィーを、Silicyle６０Ａゲル（２３０〜４００メッシュ）上、または再利用可能なクロマトグラフィーカラムおよびシステム（RT Scientific, Manchester NHより）を用いて行った。分析的薄層クロマトグラフィーを、MerckのKieselgel６０  Ｆ２５４アルミニウムシートで行った。製造的薄層クロマトグラフィーを、シリカゲルを有する１０００ミクロンのAnaltech  Uniplateを用いて、行った。特に記載されない限り、全反応を、窒素雰囲気下、火炎乾燥ガラス器具中で行った。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１４３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１４３】
一般的方法３：修飾ピペラジン（piperadine）／ピペラジンの製造
【化３２】
2006515829.tif 000001
適当なＢｏｃ保護ピペラジン／ピペラジン（piperadine）約１００ｍｇに、精製ＴＦＡ２〜４ｍｌを添加する。該溶液を６時間攪拌する。ＴＦＡを減圧下で除去し、黄色油を得る。該油を、ジクロロメタン約１０ｍｌにとり、これに１０倍量過剰のＴＥＡ、および適当な塩化アシル３当量を添加する。該黄色溶液を室温で約１２時間攪拌し、その後、溶媒を除去し、生成物を、１．１×３０ｃｍ、１４ｇのカラム（Robert Thompson Scientificより）を用いて、５％〜３０％勾配の酢酸エチル／ヘキサンで精製する。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１５８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１５８】
製造例１４：メチル４−プロパ−２−イニルシクロヘキサンカルボキシレート（８９）
【化４７】
2006515829.tif 000002
ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ（７：３）（１０ｍｌ）中の８８（２４０ｍｇ、１．４５ｍｍｏｌ）溶液に、ＴＭＳジアゾメタン（ヘキサン中２．０Ｍ）（０．９ｍｌ、１．８ｍｍｏｌ）を０．２ｍｌ等量ずつ、黄色が残るまで添加した。反応物を室温でさらに０．２５時間攪拌した。攪拌後、溶液が無色となるまで、氷酢酸を滴下した。該反応物を真空下で濃縮し、油を得た。これを、エーテル：石油エーテル（１：９）を用いて、シリカゲルでのクロマトグラフィーにより精製し、透明な油として８９（２１０ｍｇ、８０％）を得た。
1H NMR (CDCl3) δ 3.60 (s, 3H), 2.25-2.13 (m, 1 H), 2.08-1.94 (m, 3 H), 1.95-1.90 (m, 2 H), 1.49-1.31 (m, 3 H), 1.10-0.93 (m, 2 H)；
13C NMR (CDCl3) δ 176.7, 83.3, 69.8, 51.9, 43.4, 36.7, 31.9, 29.2, 26.3；
APCI m/z (相対強度) 181 (MH+, 100).
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１５９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１５９】
製造例１５：トランス［４−（１−プロパルギル）シクロヘキシルメチル］メチルカーボネート（９０）
【化４８】
2006515829.tif 000003
収量：３４５ｍｇ（８１％）
1H NMR (CDCl3) δ 0.98-1.07, 1.40-1.52, 1.57-1.70, 1.78-1.93 (4 x m, 10H,シクロヘキシル), 1.96 (t, 1H, アセチレン), 2.10 (dd, 2H, -C6H10CH2CCH), 3.78 (s, 3H, -OCH3), 3.96 (d, -C6H10CH2O-).
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１６０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１６０】
製造例１６：トランス［４−（１−プロパルギル）シクロヘキシルメチル］ｉｓｏ−ブチルカーボネート（９１）
【化４９】
2006515829.tif 000004
収量：４３３ｍｇ（８３％）
1H NMR (CDCl3) δ 0.95 (d, 4H, -OCH2CH(CH3)2), 0.98-1.09, 1.40-1.51, 1.57-1.70, 1.78-1.93 (4 x m, 10H,シクロヘキシル), 1.94-2.04 (m, 1H, -OCH2CH(CH3)2), 1.96 (t, 1H, アセチレン), 2.10 (dd, 2H, -C6H10CH2CCH), 3.91, 3.95 (2 x d, 4H, -OCH2CH(CH3)2, -C6H10CH2O- ).
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１６１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１６１】
製造例１７：トランス［４−（１−プロパルギル）シクロヘキシルメチル］ベンジルカーボネート（９２）
【化５０】
2006515829.tif 000005
収量：３４０ｍｇ（６９％）
1H NMR (CDCl3) δ 0.97-1.08, 1.40-1.49, 1.55-1.69, 1.77-1.93 (4 x m, 10H,シクロヘキシル), 1.96 (t, 1H, アセチレン), 2.10 (dd, 2H, -C6H10CH2CCH), 3.98 (d, -C6H10CH2O-), 5.15 (s, 2H, -OCH2Ph), 7.33-7.40 (m, 5H, Ar).
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１６７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１６７】
製造例２３：４−プロパ−２−イニル−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（ＪＲ３２７５）
【化５６】
2006515829.tif 000006
アセトニトリル６０ｍｌ中のｔｅｒｔ−ブチル−１−ピペラジン−カルボキシレート１０．０ｇ（５４．８ｍｍｏｌ）溶液に、臭化プロパルギル５．２０ｍｌ（６０．４ｍｍｏｌ）および無水炭酸カリウム３７．９ｇ（２７４ｍｍｏｌ）を添加する。室温で３６時間攪拌後、さらに、臭化プロパルギル１．５ｍｌを添加した。残渣を蒸発させ、乾燥させた。ジクロロメタン５０ｍｌ、および水５０ｍｌを添加した。反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２（４×４０ｍｌ）で抽出し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、そして蒸発させ、褐色油を得た。該油をジクロロメタンに溶解し、ヘキサン／酢酸エチル勾配を用いて、ＲＴ  Scientificシステムにより精製し、黄色油５．５ｇ（４６％）を得た。これはおいておくと、最終的に結晶となった。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１７６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１７６】
製造例３２：ピペリジン−１，４−ジカルボン酸モノ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化６５】
2006515829.tif 000007
水１５０ｍｌ中のピペリジン−４−カルボン酸（１０ｇ、７７．５ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（２１．４ｇ、１５５ｍｍｏｌ）溶液を調製した。ＴＨＦ４０ｍｌ中のジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（１６．９ｇ、７７．５ｍｍｏｌ）溶液を、滴下漏斗により０℃で滴下した。反応物を３０分かけて徐々に室温まで温め、さらに４時間攪拌した。ＴＨＦを減圧下で除去し、水相をエーテル５０ｍｌで抽出した。次に、水相を１０％  ＨＣｌでｐＨ２に調整し、ＥｔＯＡｃ（４×５０ｍｌ）で抽出した。合併した有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮し、白色固体としてＪＲ３１８３  １７．２ｇ（９７％）を得た。r.f.＝０．２（バニリンで染色した、３５％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）
1H NMR (CDCl3) δ 11.83 (s, 1 H), 3.98 (d, J = 11.8 Hz, 2 H), 2.83 (t, J = 11.8, 2 H), 2.46 (m, 1 H), 1.88 (d, J = 12.9hz, 2 H), 1.2 (m, 2 H), 1.42 (s, 9 H).
13C NMR (CDCl3) δ 180.0, 154.8, 79.8, 42.9, 40.8, 28.3, 27.7.
APCI m/z (相対強度) M- 228.2 (100).