【手続補正書】
【提出日】平成17年7月4日(2005.7.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
表面にヒドロキシ官能基またはハイドライド官能性を含む固形支持体の機能化方法であって、以下の工程：
ａ) 次の式（I）：
Ａ−Ｘ−ＣＯＯＲ  （Ｉ）
［式中、
−  Ａは、式（Ｉ）の２官能性分子の、支持体のヒドロキシまたはハイドライド官能基への共有結合を許容する基を表し、
−  Ｒは、カルボン酸官能基を保護する基を表し、
−  Ｘは、任意にＮ、ＯまたはＳから選ばれる一つ以上のヘテロ原子で中断されていてもよい、飽和または不飽和の、直鎖状または分枝鎖状のＣ2〜Ｃ18炭化水素をベースとする鎖を表す]
の保護されたカルボン酸官能基を含む少なくとも一つの２官能性分子の共有結合によるグラフティング(シリル化またはヒドロシリル化)
ｂ）グラフティング工程ａ）の間に脱保護されなかったカルボン酸官能基の脱保護
を含み、工程a)が式（I）（ここで、Ａは単官能基である）の化合物を用いて５０〜２００℃の温度で行われること、および該方法が式（I）の上記分子と反応しなかった支持体の残留するヒドロキシまたはハイドライド官能基の不動態化の工程ｃ）も含むことを特徴とする、固形支持体の機能化方法。
【請求項２】
固形支持体がプラスチック材料、金属酸化物、シリカおよびその誘導体、ならびに半導体から選ばれることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項３】
単官能基Ａが、ジアルキル(ジアルキルアミノ)シラン、ジアルキルハロシラン、ジフェニル（ジアルキルアミノ）シラン、ジフェニルハロシラン、[（モノアルキル）、（モノフェニル）、(ジアルキルアミノ)]シラン、[(モノアルキル)、（モノフェニル）、(ハロ)]シラン、アルケン、アルキンの群および有機金属化合物から選ばれる、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
保護基Ｒが、Ｃ1−Ｃ4アルキル基または環状基であることを特徴とする請求項１〜３のいずれか一つに記載の方法。
【請求項５】
固形支持体の表面が表面でヒドロキシ官能性を示すこと、および式（Ｉ）の分子が次の式（Ｉａ）：
【化１】
2004534959.tif 000001
(式中、
−  Ａ1およびＡ2は  同一または異なって、Ｃ1−Ｃ4アルキルまたはフェニル基を表し、
−  Ａ3はＣ1−Ｃ4アルコキシ基、（Ｃ1−Ｃ4）ジアルキルアミノ基、または塩素のようなハロゲン原子を表し、
−  ＲはＣ1−Ｃ4アルキル基および環状基から選ばれる保護基を表し、
−  ｎは２〜１８の整数である）
の有機シリコン化合物から選ばれることを特徴とする、請求項１〜４のいずれか一つに記載の方法。
【請求項６】
式（Ｉａ）の化合物が、
−  Ａ1およびＡ2は同一であって、メチル基を表し、
−  Ａ3はジメチルアミノ基または塩素原子を表し、
−  ｎ=10であり、
−  Ｒはtert-ブチル基を表す）
のものから選ばれることを特徴とする請求項５に記載の方法。
【請求項７】
固形支持体の表面がその表面でハイドライド官能性を示すこと、および式（Ｉ）の分子がアルケン、アルキン、アルデヒド、過酸化水素またはその他の有機金属化合物から選ばれることを特徴とする、請求項１〜４のいずれか一つに記載の方法。
【請求項８】
式（Ｉ）の化合物が、ウンデシレン酸のメチルまたはtert-ブチルエステルから選ばれ
ることを特徴とする請求項７に記載の方法。
【請求項９】
工程a)が、以下の工程：
ｉ)固形支持体からの夾雑物の除去、およびその表面のヒドロキシ化、
ii)上で定義された一般式（Ia）の有機シリコン化合物の、無極性の炭化水素ベースの溶媒、極性溶媒およびそれらの混合物から選ばれる溶媒への、不活性雰囲気下での導入、
iii)工程ii)で調製される溶液への浸漬による、工程i)で得られる支持体のシラン化、および
iv)不活性雰囲気下、５０〜２００℃までの温度、好ましくは１４０℃で２〜７２時間の溶媒の蒸発後、工程iii)で得られるシラン化された支持体の再硬化、
v)工程iv)で得られる変性支持体の洗浄および乾燥
を含む、有機相でのシラン化工程であることを特徴とする、請求項１〜６のいずれか一つに記載の方法。
【請求項１０】
固形支持体が、ガラスまたはシリカ製の支持体であり、工程a)が以下の工程：
i) 固形支持体からの夾雑物の除去およびその表面の水和、
ii) 無水メタノールのような無水アルコール中での支持体の洗浄、
iii) アルゴン下で予め脱酸化したアルケンに支持体を接触させる、
iv) ９０〜２００℃の温度で２〜２４時間触媒を添加することによる支持体のヒドロシリル化
を含むヒドロシリル化工程であることを特徴とする、請求項１〜４、７または８のいずれか一つに記載の方法。
【請求項１１】
支持体を次の式（II）：
(C1−C4 アルキル)3-Si-Y (II)
(ここで、Yはヨウ素、臭素または塩素のようなハロゲン原子を表す)
のシランと反応させてシリルエステルを形成することにより脱保護工程b）を行うことを特徴とする、請求項１〜１０のいずれか一つに記載の方法。
【請求項１２】
シリルエステルの形成が、
-  室温でまたは約６０℃に加熱して、無水の有機溶媒中での支持体とヨードトリアルキルシランとの反応によるか、
-  あるいは室温または約４０℃で、無水アセトンまたはアセトニトリル中、ヨウ化ナトリウムの存在下での、支持体とクロロトリメチルシランとの反応により、
得られることを特徴とする請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
工程ｃ）が工程ｂ）により同時に行われることを特徴とする、請求項１１または１２に記載の方法。
【請求項１４】
工程ｂ）が熱的脱保護工程であることを特徴とする、請求項１〜１０のいずれか一つに記載の方法。
【請求項１５】
熱的脱保護工程が、工程a)の最後に単に温度を上げることにより、工程a)と同時に行われることを特徴とする、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
請求項１〜１５のいずれか一つに従って得られる機能化された固形支持体。
【請求項１７】
アミノまたはヒドロキシ官能基を有する対象となる生物学的分子を共有結合により固定化するための、請求項１６に記載の少なくとも一つの機能化された固形支持体の使用。
【請求項１８】
生物学的分子が、核酸、ポリペプチド、脂質、炭水化物およびホルモンから選ばれることを特徴とする、請求項１７に記載の使用。
【請求項１９】
次の工程：
a)請求項１〜１５のいずれか一つに定義される方法による、エステルの形態にある末端カルボン酸官能基を含む機能化された固形支持体の製造、
b) 末端カルボン酸官能基の脱保護および活性化、
c）工程a)またはｂ）で得られる変性固形支持体を、末端の一つにアミン官能基、またはヒドロキシ官能基、または一級アミン官能基で官能化されたスペーサアームを有する固定化される生物学的分子の、一つ以上の溶媒中の一つ以上の局部的に適用される溶液と接触させること、
d) カルボン酸官能基のレベルで生物学的分子の共有結合を生じさせるための溶媒の蒸発、
e) 生物学的分子と反応しなかった活性カルボン酸官能基の気相中または溶液中でのアミンによる不活性化、および
f) 上記の生物学的分子が固定化されている固形支持体の洗浄
を含むことを特徴とする、機能化された固形支持体上の生物学的分子の固定化方法。
【請求項２０】
工程e)で用いられるアミンがメチルアミンおよびジメチルアミンから選ばれることを特徴とする請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
工程e)が同じ支持体の所定の領域においてのみ行われ、不活性化されてはならないこれらの領域が予め保護されていることを特徴とする、請求項１９または２０に記載の方法。
【請求項２２】
請求項１９〜２１のいずれか一つに定義される固定化方法により得られる固形支持体。
【請求項２３】
固定化される生物学的分子が核酸またはポリペプチドであり、それが核酸チップまたはポリペプチドチップを構成することを特徴とする、請求項２２に記載の固形支持体。
【請求項２４】
−固形支持体上での合成、
−分子の分離および精製、
−特に固定化された生物学的分子が酵素その他であるときの、分子生物学において、
−バイオセンサーとして
のための、請求項２２または２３に記載の固形支持体の使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４７】
本発明による方法の第１の変法によれば、好ましくは支持体を、次の式（II）：
(C1−C4 アルキル)3-Si-Y（II）
（ここで、Yはヨウ素、臭素または塩素のようなハロゲン原子を表す）のシランと反応させることにより水中で容易に加水分解されるシリルエステルを形成することからなる方法による、緩和な条件下で脱保護工程b)を行うことができる。