【手続補正書】
【提出日】平成17年10月12日(2005.10.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  哺乳動物において新たな血管を形成するのに十分な血管新生調整剤の有効量を哺乳動物へ投与することを含む、哺乳動物における新たな血管の形成を誘導する方法。
【請求項２】  血管新生調整剤がGM-CSF、M-CSF、b-FGF、SCF、SDF-1、G-CSF、HGF、アンジオポエチン-1、アンジオポエチン-2、FTL-3リガンド、またはこれらの有効な断片である、請求項1記載の方法。
【請求項３】  血管新生調整剤がGM-CSFであり、哺乳動物へのGM-CSFの投与量が哺乳動物において内皮前駆細胞（EPC）の頻度を増加させるのに十分である、請求項2記載の方法。
【請求項４】  標準的EPC単離アッセイ法で測定してEPC頻度の増加が少なくとも約20％である、請求項3記載の方法。
【請求項５】  哺乳動物に投与する血管新生調整剤の量が哺乳動物においてEPCの分化を増加させるに十分である、請求項1記載の方法。
【請求項６】  標準的EPC培養アッセイ法で測定してEPC分化の増加が少なくとも約20％である、請求項5記載の方法。
【請求項７】  哺乳動物への血管新生調整剤の投与量が哺乳動物において血管長を増加させるのに十分である、請求項1記載の方法。
【請求項８】  標準的血管長アッセイ法で測定して血管長の増加が少なくとも約5％である、請求項7記載の方法。
【請求項９】  哺乳動物に投与する血管新生調整剤の量がさらに、哺乳動物において血管径を増加させるのに十分である、請求項7記載の方法。
【請求項１０】  標準的血管径アッセイ法で測定して血管径の増加が少なくとも約5％である、請求項9記載の方法。
【請求項１１】  哺乳動物に投与する血管新生調整剤の量が組織虚血後にEPC分化を増加させるのに十分である、請求項1記載の方法。
【請求項１２】  標準的後肢虚血アッセイ法で測定してEPC分化の増加が少なくとも約20％である、請求項11記載の方法。
【請求項１３】  標準的角膜ミクロポケットアッセイ法で測定して、血管新生調整剤の投与量が新生血管形成を少なくとも約5%を増加させるのに十分である、請求項1記載の方法。
【請求項１４】  血管新生調整剤の投与量が病巣へのEPC骨髄由来EPCの取り込みを増加させるのに十分である、請求項1記載の方法。
【請求項１５】  標準的齧歯類骨髄（BM）移植モデルで測定して、EPC骨髄由来EPCの病巣への取り込みの増加が少なくとも約20%である、請求項14記載の方法。
【請求項１６】  哺乳動物が虚血組織を有する、有する疑いのある、または将来的に有すると考えられる、請求項1記載の方法。
【請求項１７】  虚血組織が虚血性脈管疾患と関係する、請求項16記載の方法。
【請求項１８】  虚血組織が四肢、移植片、または器官からの組織を含む、請求項16記載の方法。
【請求項１９】  前記組織が循環系または中枢神経系と関係する、請求項16記載の方法。
【請求項２０】  前記組織が心臓または脳組織である、請求項16記載の方法。
【請求項２１】  血管新生調整剤が少なくとも一つの脈管由来タンパク質と共投与される、請求項1記載の方法。
【請求項２２】  脈管由来タンパク質が内皮細胞分裂誘発物質である、請求項21記載の方法。
【請求項２３】  脈管由来タンパク質が、酸性繊維芽細胞増殖因子（aFGF）、塩基性繊維芽細胞増殖因子（bFGF）、血管内皮増殖因子（VEGF-1）、表皮増殖因子（EGF）、トランスフォーミング増殖因子α及びβ（TGF-α及びTGF-β）、血小板由来内皮増殖因子（PD-ECGF）、血小板由来増殖因子（PDGF）、腫瘍壊死因子α（TNF-α）、肝細胞増殖因子（HGF）、インスリン様増殖因子（IGF）、エリスロポエチン、コロニー刺激因子（CSF）、マクロファージ-CSF（M-CSF）、アンジオポエチン-1（Ang1）もしくはNOシンターゼ（NOS）、またはそれらの断片である、請求項21記載の方法。
【請求項２４】  タンパク質がVEGF-B、VEGF-C、VEGF-2、VEGF-3、またはそれらの有効な断片である、請求項23記載の方法。
【請求項２５】  顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（GM-CSF）の有効量を哺乳動物へ投与する段階、及び血管損傷を促進する状態に該哺乳動物を暴露する段階を含み、GM-CSFの量が哺乳動物において重度の血管損傷を予防または軽減するのに十分である、哺乳動物において重度の血管損傷を予防または軽減する方法。
【請求項２６】  血管損傷を促進する状態が侵襲性操作または虚血である、請求項25記載の方法。
【請求項２７】  侵襲性操作が手術である、請求項26記載の方法。
【請求項２８】  虚血が、感染、外傷、移植片拒絶、脳血管虚血、腎臓虚血、肺虚血、四肢虚血、虚血性心筋症または心筋虚血のうちの少なくとも一つに関係する、請求項26記載の方法。
【請求項２９】  血管損傷を促進する状態へ哺乳動物を暴露する少なくとも約12時間前に、GM-CSFを哺乳動物へ投与する、請求項25記載の方法。
【請求項３０】  血管損傷を促進する状態へ哺乳動物を暴露する約1日から10日前の間にGM-CSFを哺乳動物へ投与する、請求項29記載の方法。
【請求項３１】  血管損傷を促進する状態への暴露後、GM-CSFを哺乳動物へ投与することをさらに含む、請求項29記載の方法。
【請求項３２】  下記の段階を含む、治療が必要な哺乳動物において虚血組織を治療する方法：
a) 哺乳動物から内皮前駆細胞（EPC）を単離する段階、
b) 単離したEPCを、EPCの増殖を誘導するのに十分な量の脈管由来タンパク質と接触させる段階、及び
c) 虚血組織を治療するのに十分な量の増殖したEPCを哺乳動物へ投与する段階。
【請求項３３】  EPCが次のマーカー、CD34+、flk-1+、またはtie-2+の少なくとも一つを有する、請求項32記載の方法。
【請求項３４】  虚血組織が損傷血管を有する、請求項32記載の方法。
【請求項３５】  血管が侵襲性操作により損傷を受ける、請求項34記載の方法。
【請求項３６】  侵襲性操作がバルーン血管形成、またはステントもしくはカテーテルの配置である、請求項35記載の方法。
【請求項３７】  ステントが血管内ステントである、請求項36記載の方法。
【請求項３８】  少なくとも一つの脈管由来タンパク質の共投与をさらに含む、請求項32記載の方法。
【請求項３９】  脈管由来タンパク質が内皮細胞分裂誘発物質または内皮細胞分裂誘発物質をコードする核酸である、請求項38記載の方法。
【請求項４０】  脈管由来タンパク質が、酸性繊維芽細胞増殖因子（aFGF）、塩基性繊維芽細胞増殖因子（bFGF）、血管内皮増殖因子（VEGF-1）、表皮増殖因子（EGF）、トランスフォーミング増殖因子α及びβ（TGF-α及びTGF-β）、血小板由来内皮増殖因子（PD-ECGF）、血小板由来増殖因子（PDGF）、腫瘍壊死因子α（TNF-α）、肝細胞増殖因子（HGF）、インスリン様増殖因子（IGF）、エリスロポエチン、コロニー刺激因子（CSF）、マクロファージ-CSF（M-CSF）、アンジオポエチン-1（Ang1）もしくはNOシンターゼ（NOS）、またはそれらの断片である、請求項39記載の方法。
【請求項４１】  タンパク質がVEGF-B、VEGF-C、VEGF-2、VEGF-3、またはそれらの有効な断片である、請求項40記載の方法。
【請求項４２】  内皮前駆細胞（EPC）の検出可能な標識を施された集団と哺乳動物を接触させる段階、及び哺乳動物の組織損傷部位でまたはその近傍で該標識細胞を検出する段階を含む、哺乳動物において組織損傷の存在を検出する方法。
【請求項４３】  組織損傷が虚血または虚血性脈管疾患である、請求項42記載の方法。
【請求項４４】  単離された内皮前駆細胞（EPC）を含み、哺乳動物に生理学的に許容されるよう調剤される、哺乳動物において新生血管形成を誘導するための薬学的製品。
【請求項４５】  滅菌されており、少なくとも一つの脈管由来タンパク質または該タンパク質をコードする核酸をさらに含む、請求項44記載の薬学的製品。
【請求項４６】  単離されたEPC及び選択的に脈管由来タンパク質または該タンパク質をコ−ドする核酸の少なくとも一つを有し、選択的に、薬学的に許容される担体溶液、核酸または分裂誘発物質、EPCの運搬手段、及びキット使用のための説明書をさらに含む、単離された内皮前駆細胞（EPC）の全身性導入のためのキット。
【請求項４７】  EPCの運搬手段がステント、カテーテル、またはシリンジである、請求項46記載のキット。
【請求項４８】  哺乳動物での内皮前駆細胞（EPC）可動化を促進するのに十分な、少なくとも一つの造血因子の有効量を投与する段階を含む、哺乳動物においてEPC可動化を増強する方法。
【請求項４９】  顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（GM-CSF）、少なくとも一つの脈管由来タンパク質、またはそれらの有効な断片のうちの一つまたは複数の有効量を哺乳動物へ共投与することをさらに含む、請求項48記載の方法。