【手続補正書】
【提出日】平成18年1月19日(2006.1.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
種特異的細菌胞子を検出および定量するためのラテラルフローイムノアッセイ法であって、
テルビウムイオンを含むマトリックスを供給し、
細菌胞子からＤＰＡを放出させ、
テルビウムイオンとＤＰＡを溶液中で結合させ、
結合したテルビウムイオンとＤＰＡを励起し、結合したテルビウムイオンとＤＰＡに特徴的なルミネッセンスを生じさせて、細菌胞子を検出し、
ここで前記励起工程は、結合したテルビウムイオンとＤＰＡに、紫外線を放射することを含んでなる
ことを含んでなる、方法。
【請求項２】
細菌胞子からＤＰＡを放出する工程が、胞子をマイクロ波処理することを含んでなる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
細菌胞子からＤＰＡを放出する工程が、Ｌ−アラニンを用いて胞子を発芽させることを含んでなる、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
細菌胞子からＤＰＡを放出する工程が、微小球を用いて胞子を超音波処理することを含んでなる、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
細菌胞子からＤＰＡを放出する工程が、胞子をオートクレーブ処理することを含んでなる、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
細菌胞子を検出および定量するためのラテラルフローイムノアッセイ法であって、
第一の試験ストリップを用意し、
未知細菌胞子の試料を試験ストリップに加え、
未知細菌胞子の試料を第一の試験ストリップ上の試料領域に引き、
第一の試験ストリップの試料領域に種特異的抗体を供給して未知細菌胞子の試料に選択的に結合させ、ここで種特異的抗体は未知細菌胞子とマッチするときには試料と結合するものであり、
結合した試料中の細菌胞子からＤＰＡを放出させ、
テルビウムイオンをＤＰＡと結合させ、
結合したテルビウムイオンとＤＰＡを励起し、結合したテルビウムイオンとＤＰＡに特徴的なルミネッセンスを生じさせて、試料の細菌胞子を検出し、
ここで励起して試料中の細菌胞子を検出する工程は、試料中の結合したテルビウムイオンとＤＰＡに、紫外線を放射することを含んでなる
ことを含んでなる、方法。
【請求項７】
既知濃度の既知の細菌胞子の標準品を第二の試験ストリップに加え、
既知の細菌胞子の標準品を第二の試験ストリップ上の試料領域に引き、
第二の試験ストリップの試料領域に種特異的抗体を供給して既知の細菌胞子の標準品に選択的に結合させ、ここで種特異的抗体は既知の細菌胞子とマッチするときには標準品と結合するものであり、
結合した標準品中の細菌胞子からＤＰＡを放出させ、
テルビウムイオンをＤＰＡと結合させ、
結合したテルビウムイオンとＤＰＡを励起し、結合したテルビウムイオンとＤＰＡに特徴的なルミネッセンスを生じさせて、標準品の細菌胞子を検出し、
ここで励起して標準品中の細菌胞子を検出する工程は、標準品中の結合したテルビウムイオンに、紫外線を放射することを含んでなり、
試料からの励起ルミネッセンスの強度を標準品と比較して、試料中の胞子濃度を定量する
ことをさらに含んでなる、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
可視指示薬によってそれぞれ第一および第二の試験ストリップの試料領域での試料および標準品の到着を確認することをさらに含んでなる、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
試料および標準品中の細菌胞子からＤＰＡを放出する工程が、胞子をマイクロ波処理することを含んでなる、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
試料および標準品中の細菌胞子からＤＰＡを放出する工程が、Ｌ−アラニンを用いて胞子を発芽させることを含んでなる、請求項７に記載の方法。
【請求項１１】
試料および標準品中の細菌胞子からＤＰＡを放出する工程が、微小球を用いて胞子を超音波処理することを含んでなる、請求項７に記載の方法。
【請求項１２】
試料および標準品中の細菌胞子からＤＰＡを放出する工程が、胞子をオートクレーブ処理することを含んでなる、請求項７に記載の方法。
【請求項１３】
細菌胞子の生／死のアッセイ法であって、
生きたおよび死んだ細菌胞子の試料に、テルビウムイオンを供給し、
発芽によって、生細菌胞子から、ＤＰＡを放出させ、
テルビウムイオンを生細菌胞子から放出されたＤＰＡと結合させ、
結合したテルビウムイオンと生細菌胞子から放出されたＤＰＡを励起して、結合したテルビウムイオンとＤＰＡに特徴的な第一のルミネッセンスを生じさせ、生細菌胞子を検出し、
オートクレーブ処理、超音波処理またはマイクロ波処理によって、死細菌胞子からＤＰＡを放出させ、
テルビウムイオンを死細菌胞子から放出されたＤＰＡと結合させ、
結合したテルビウムイオンと死細菌胞子から放出されたＤＰＡを励起して、結合したテルビウムイオンとＤＰＡに特徴的な第二のルミネッセンスを生じさせ、死細菌胞子を検出し、
ここで励起工程は、結合したテルビウムイオンとＤＰＡに、紫外線を放射することを含んでなり、
各ルミネッセンスの強度から、生細菌胞子から放出されたＤＰＡ対死細菌胞子から放出されたＤＰＡの比を生成して、生きている細菌胞子の割合を得る
ことを含んでなる、方法。
【請求項１４】
細菌胞子のライフタイム・ゲート（lifetime-gated）測定を行って有機発色団から蛍光バックグラウンドを除去する方法であって、
テルビウムイオンを含む溶液に、細菌胞子内容物を有する細菌胞子の試料を供給し、
細菌胞子内容物を長寿命ルモフォア（lumophore）で標識し、
細菌胞子からＤＰＡを放出させ、
テルビウムイオンを放出されたＤＰＡと溶液中で結合させ、
結合したテルビウムイオンと放出されたＤＰＡを第一の期間励起し、
ルミネッセンスを検出する前に、第二の期間待機し、
第二の期間の後に、第三の期間の間、結合したテルビウムイオンと放出されたＤＰＡに特徴的なルミネッセンスを検出して、細菌胞子を検出する
ことを含んでなる、方法。
【請求項１５】
励起の第一の期間がナノ秒のオーダーであり、第二の期間がマイクロ秒のオーダーであり、かつ、第三の期間がミリ秒のオーダーである、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
励起の第一の期間が１〜１０ナノ秒のオーダーであり、第二の期間が数十マイクロ秒のオーダーであり、かつ、第三の期間が１〜１０ミリ秒のオーダーである、請求項１７に記載の方法。
【請求項１７】
励起の第一の期間がナノ秒のオーダーであり、第二の期間が０．１〜１０ミリ秒のオーダーであり、かつ、第三の期間が数百マイクロ秒のオーダーである、請求項１４に記載の方法。
【請求項１８】
空気中の細菌胞子の無人監視方法であって、
空気中に運ばれている細菌胞子の空気試料を収集し、
収集した細菌胞子をテルビウムイオンに関連づけ、
細菌胞子からＤＰＡを放出させ、
テルビウムイオンをＤＰＡと結合させ、
結合したテルビウムイオンとＤＰＡを励起して、結合したテルビウムイオンとＤＰＡに特徴的なルミネッセンスを生じさせ、ここで励起工程は、結合したテルビウムイオンとＤＰＡに、紫外線を放射することを含んでなり、
ルミネッセンスを検出して細菌胞子の存在を測定する
ことを含んでなる、方法。
【請求項１９】
空気中で運ばれる細菌胞子を収集する工程が、エアゾールサンプラーまたはインパクターを用いて細菌胞子を捕捉することを含んでなる、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
ルミネッセンスを検出して細菌胞子の存在を測定する工程が、分光計または蛍光計を用いてルミネッセンスを監視することを含んでなる、請求項１８に記載の方法。
【請求項２１】
空気中で運ばれる細菌胞子を収集する工程が、空気を連続採取することを含んでなり、かつ、ルミネッセンスを検出して細菌胞子の存在を測定する工程が、ルミネッセンスを連続観察することを含んでなる、請求項１８に記載の方法。
【請求項２２】
細菌胞子からＤＰＡを放出する工程が、細菌胞子を超音波処理して溶液を加熱することを含んでなり、かつ、テルビウムイオンをＤＰＡと溶液中で結合させる工程が、加熱した溶液を冷却して結合したＴｂ−ＤＰＡ錯体の割合を増加させることを含んでなる、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
空気試料中の細菌胞子の無人監視装置であって、
空気中の細菌胞子を捕捉する空気サンプラーであって、且つテルビウムイオンが入っている収集容器を有する、空気サンプラーと、
溶液中で細菌胞子からＤＰＡを放出させてＤＰＡをテルビウムイオンと結合させ、Ｔｂ−ＤＰＡ錯体を形成する手段と、
Ｔｂ−ＤＰＡ錯体を励起してルミネッセンスを生じさせる、エネルギー供給源と、
ルミネッセンスを測定する、電気光学回路と
を含んでなる、装置。
【請求項２４】
細菌胞子を検出および定量するためのラテラルフローイムノアッセイ装置であって、
ストリップを横切るテルビウムイオンを含む溶液の横方向毛管流を供給するための材料の第一の試験ストリップと、
未知細菌胞子の試料を受け取る第一の試験ストリップ上の入力領域と、
入力領域から横方向にずらされており且つ入力領域との間を毛管流によって連通した第一の試験ストリップの試料領域であって、未知細菌胞子とマッチするときには未知細菌胞子の試料に選択的に結合する種特異的抗体を供給する、第一のストリップの試料領域、
第一の試験ストリップの試料領域中に細菌胞子からＤＰＡを放出させて、テルビウムイオンをＤＰＡと溶液中で結合させる手段と、
第一の試験ストリップの試料領域で結合したテルビウムイオンとＤＰＡを励起して、結合したテルビウムイオンとＤＰＡに特徴的なルミネッセンスを生じさせる、エネルギー供給源であって、紫外線を含んでなる、エネルギー供給源と、
第一の試験ストリップの試料領域で細菌胞子の存在を同定しまたはその濃度を測定するためのルミネッセンス検出器と
を含んでなる、装置。
【請求項２５】
第一の試験ストリップ上の試料領域中の細菌胞子からＤＰＡを放出させる手段が、マイクロ波加熱装置、溶液にＬ−アラニンを添加する手段、胞子を微小球を用いて超音波処理する手段、またはオートクレーブを含んでなる、請求項２４に記載の装置。
【請求項２６】
細菌胞子の存在が空気試料中に検出されるか、またはその濃度が所定の大きさに達するときに警告シグナルを生成することをさらに含んでなる、請求項１８に記載の方法。
【請求項２７】
電気光学回路に連結され、所定の閾値を上回る細菌胞子濃度を検出する警告回路をさらに含んでなる、請求項２３に記載の装置。
【請求項２８】
第二の試験ストリップと、
既知濃度の既知の細菌胞子の標準品を受け取る、第二の試験ストリップ上の入力領域と、
第二の試験ストリップの入力領域から横方向に移動し且つその間の毛管流によって連通した第二の試験ストリップの試料領域であって、既知の細菌胞子とマッチするときには既知の細菌胞子の標準品に選択的に結合する種特異的抗体を供給する、第二の試験ストリップの試料領域と、
第二の試験ストリップの試料領域における細菌胞子からＤＰＡを放出した後、テルビウムイオンをＤＰＡと結合させる手段と、
第二の試験ストリップの試料領域で結合したテルビウムイオンとＤＰＡを励起して、結合したテルビウムイオンとＤＰＡに特徴的なルミネッセンスを生じさせる、エネルギー供給源と、
第二の試験ストリップの試料領域で細菌胞子の存在を同定するか、またはその濃度を測定するための、ルミネッセンス検出器と、
試料からの励起ルミネッセンスの強度を標準品と比較して、試料中の胞子濃度を定量する手段と
をさらに含んでなる、請求項２４に記載の装置。