【手続補正書】
【提出日】平成18年7月24日(2006.7.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式IIA又はIIB
【化１】
2006503011.tif 000001
｛式中、
Rは水素又はアルキルを示し、
R５はフェニルを示し、このフェニルは場合によりハロゲン, CF3,NO2,CN又はSO2NR51R52
（式中、R51及びR52は相互に独立して水素又はアルキルを示すか又は
R51及びR52はこれらが結合するN-原子と一緒になってピペリジニル-又はモルホリニル-環を形成する。）によって置換され、
そして
R8 は水素又はアルキルを示す。｝ 
で表わされるインドール-2,3-ジオン-3-オキシム誘導体のキラル (±) 異性体の製造方法において, この方法が次の工程：
(i)  式9-1
【化２】
2006503011.tif 000002
（式中、R５及びR8は上記に定義された通りである。）
で表わされる8-アミノ-1,2,3,4-テトラヒドロ-イソキノリン誘導体を抱水クロラール及びヒドロキシアミン塩酸塩と反応させて、N-(1,2,3,4-テトラヒドロ-イソキノリン-8-イル)-2-ヒドロキシイミノ-アセトアミド誘導体を生じさせ (工程 9); 
(ii)  硫酸を、工程 (i)で得られたN-(1,2,3,4-テトラヒドロ-イソキノリン-8-イル)-2-ヒドロキシイミノ-アセトアミド誘導体に添加し (工程 10); ついで
(iii)  工程(ii)で得られた2,3-ジオキソ-2,3,6,7,8,9-ヘキサヒドロ-1H-ピロロ[3,2-h]イソキノリン 誘導体をキラル (エナンチオ純粋な(R)又は(S) ) α-N,N-ジBoc-アミノキシ-γ-ブチロラクトンと反応させて、 所望のキラル最終生成物, すなわち上記に定義された通りの式IIA又はIIBで表わされる、エナンチオ純粋な(R)- 又は(S)-2-[2-オキソ-1,2,6,7,8,9-ヘキサヒドロ-ピロロ[3,2-h]イソキノリン-3-イリデンアミノオキシ]-4-ヒドロキシ-酪酸) (化合物 A又はB) (工程 11)を得;
ついで所望の最終生成物を回収する
ことを含む、上記製造方法。
【請求項２】
この方法がさらに次の工程： 
(a) エナンチオ純粋な(S) 又は(R) α-ヒドロキシ-γ-ブチロラクトンをN,N-ジBoc-ヒドロキシルアミンと反応させて、エナンチオ純粋な (S) 又は (R) α-N,N-ジBoc-アミノキシ-γ-ブチロラクトンを生じさせ (工程 8a);
ついで請求項1に記載された工程 (i) 〜(iii)を行うことを含む、請求項1記載の方法。
【請求項３】
この方法がさらに次の工程： 
(b) N,N-ジBoc-O-ベンジルヒドロキシアミンを水素添加して、N,N-ジBoc-ヒドロキシルアミンを生じさせ (工程 7);
ついで 請求項2記載の工程 (a)及び請求項1記載の工程 (i) 〜(iii)を行うことを含む、 
請求項2記載の方法。
【請求項４】
この方法がさらに次の工程： 
(c) Boc2Oを用いてO-ベンジルヒドロキシアミンをN,N-ジBoc-O-ベンジルヒドロキシアミンに変換させ (工程 6);
ついで請求項3記載の工程 (b) , 請求項2記載の工程(a)及び 請求項1記載の工程 (i)〜(iii) を行うことを含む、請求項3記載の方法。
【請求項５】
この方法がさらに次の工程： 
(d)エナンチオ純粋な (S) 又は (R) α-ヒドロキシ-γ-ブチロラクトンをトシルクロライドと反応させて、エナンチオ純粋な (S) 又は (R) α-トシルオキシ-γ-ブチロラクトンを生じさせ(工程 5);
ついで 請求項4記載の工程 (c), 請求項3記載の工程 (b), 請求項2記載の工程 (a)及び 請求項1記載の工程 (i)〜(iii)を行うことを含む、請求項1記載の方法。
【請求項６】
式 IIIA又はIIIB
【化３】
2006503011.tif 000003
｛式中、
Rは水素又はアルキルを示し、;
R53はSO2NR51R52
（式中、R51及びR52は相互に独立して水素又はアルキルを示し、 
R51及びR52はこれらが結合するN-原子と一緒になってピペリジニル-又はモルホリニル-環を形成する。）
を示し、そして
R8は水素又はアルキルを示す。｝
で表わされるインドール-2,3-ジオン-3-オキシム誘導体のキラル (±) 異性体の、請求項1-5のいずれか1つに記載の製造方法。
【請求項７】
式 IIIA又はIIIB
｛式中、 
Rは水素又はC1-3-アルキルを示し、
R53はSO2NR51R52
（式中、R51及びR52は相互に独立して水素又はC1-3-アルキルを示すか又は 
R51及びR52はこれらが結合するN-原子と一緒になってピペリジニル-又はモルホリニル-環を形成する。）
を示し、そして
R8は水素又はC1-6 -アルキルを示す。｝
で表わされるインドール-2,3-ジオン-3-オキシム誘導体のキラル (±) 異性体の、請求項6記載の製造方法。
【請求項８】
工程 (i) の8-アミノ-1,2,3,4-テトラヒドロ-イソキノリン誘導体が、（N-[5-(4-ジメチルスファモイル-フェニル)-2-メチル-1,2,3,4-テトラヒドロ-イソキノリン-8-イル]-2-ヒドロキシイミノ-アセトアミドを得るために）4-(8-アミノ-2-メチル-1,2,3,4-テトラヒドロ-イソキノリン-5-イル)-N,N-ジメチル-ベンゼンスルホンアミド、すなわち化合物9-1の化合物（式中、R5は4-N,N-ジメチルスルファモイル-フェニルを示し、R8はメチルを示す。）であり、そして
工程 (iii)の2,3-ジオキソ-2,3,6,7,8,9-ヘキサヒドロ-1H-ピロロ[3,2-h]イソキノリン誘導体が、N,N-ジメチル-4-(8-メチル-2,3-ジオキソ-2,3,6,7,8,9-ヘキサヒドロ-1H-ピロロ[3,2-h]イソキノリン-5-イル)-ベンゼンスルホンアミド、すなわち式IIA又はIIBで表わされる化合物（式中、Rは水素を示し、R5はSO2NR51R52によって置換されたフェニルを示し、R51及び R52の双方はメチルを示し、R8はメチルを示す。）であって;
これらが、エナンチオ純粋な(R)- 又は(S)-2-[5-(4-ジメチルスファモイル-フェニル)-8-メチル-2-オキソ-1,2,6,7,8,9-ヘキサヒドロ-ピロロ[3,2-h]イソキノリン-3-イリデンアミノオキシ]-4-ヒドロキシ-酪酸を最終生成物(すなわち化合物IV A 又はIV B) として生じさせる、請求項1-7のいずれか1つに記載の方法。
【請求項９】
請求項1-8のいずれか１つに記載の方法において、 この方法が次の工程： 
(i) α-ヒドロキシ-γ-ブチロラクトンのラセミ混合物をアセチル化して、ラセミ性α-アセトキシ-γ-ブチロラクトンを得 (工程 1); 
(ii)工程 (i)で得られたラセミ性α-アセトキシ-γ-ブチロラクトンを酵素脱アセチル化して、エナンチオ純粋な (S) 又は (R) α-アセトキシ-γ-ブチロラクトン (工程 2)を得; ついで
(iii)工程(ii)で得られたエナンチオ純粋な (S) 又は (R) α-アセトキシ-γ-ブチロラクトンを、酸性イオン交換体を用いて加水分解させ (工程 3);
ついで所望の最終生成物を回収する
ことを含む、上記製造方法。
【請求項１０】
この方法がさらに工程： 
(iv) 工程(iii)のエナンチオ-不純な残留物, すなわちエナンチオ-不純なα-ヒドロキシ-γ-ブチロラクトン及びα-アセトキシ-γ-ブチロラクトンを、酸又は塩基を用いてラセミ化させ; 
ついでラセミ混合物を工程 (i)で再使用する
ことを含む、請求項9記載の方法。
【請求項１１】
工程 (ii)の酵素脱アセチル化が、脂肪分解酵素を用いて行われる、請求項9記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００５】
特許文献2には、酵素によるエステル交換反応を用いて光学的に活性なヒドロキシラクトン類を製造する方法が記載されている。しかし, インドール-2,3-ジオン-3-オキシム誘導体の対掌体の製造方法は開示されていない。
特許文献3には、4-置換された-2-ヒドロキシブタノエート類及びその製造方法が記載されている。しかし, インドール-2,3-ジオン-3-オキシム誘導体の対掌体の製造方法は開示されていない。
【特許文献1】国際特許出願（WO）第98/14447号明細書(NeuroSearch)
【特許文献2】欧州特許第439779号明細書(Chisso Corp.)
【特許文献3】欧州特許第467132号明細書(Chisso Corp.)
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００７】
したがって, その第一の局面で, 本発明は、キラルインドール-2,3-ジオン-3-オキシム誘導体(化合物A又はB)のエナンチオ純粋な調製物を得る方法において, この方法が次の連続工程：
(i)   8-アミノ-1,2,3,4-テトラヒドロ-イソキノリン (化合物 9) 誘導体を抱水クロラール及びヒドロキシアミン塩酸塩と反応させて、N-(1,2,3,4-テトラヒドロ-イソキノリン-8-イル)-2-ヒドロキシイミノ-アセトアミド (化合物 10) 誘導体を生じさせ (工程 9); 
(ii)  硫酸を、工程 (i)で得られたN-(1,2,3,4-テトラヒドロ-イソキノリン-8-イル)-2-ヒドロキシイミノ-アセトアミド (化合物 10) 誘導体に添加し (工程 10);             ついで
(iii)  工程 (ii)で得られた2,3-ジオキソ-2,3,6,7,8,9-ヘキサヒドロ-1H-ピロロ[3,2-h]イソキノリン (化合物 11) 誘導体をキラル (エナンチオ純粋な(R)又は(S) ) α-N,N-ジBoc-アミノキシ-γ-ブチロラクトンと反応させて、 所望のキラル最終生成物, すなわちエナンチオ純粋な(R)- 又は(S)-2-[2-オキソ-1,2,6,7,8,9-ヘキサヒドロ-ピロロ[3,2-h]イソキノリン-3-イリデンアミノオキシ]-4-ヒドロキシ-酪酸) (化合物 A又はB) (工程 11)を得;
ついで所望の最終生成物を回収する
ことを含む、上記製造方法を提供する。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１０】
発明の詳細な説明
インドール-2,3-ジオン-3-オキシム誘導体
本発明は、インドール-2,3-ジオン-3-オキシム誘導体の対掌体の製造方法を提供する。本発明の方法により得られるインドール-2,3-ジオン-3-オキシム誘導体は、特に 一般式 IA 又は IB
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１２】
より好ましい実施態様において、本発明の方法により得られるインドール-2,3-ジオン-3-オキシム誘導体は、式IIA又はIIB
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１３】
【化２】
2006503011.tif 000004
｛式中、
R は水素 又は アルキルを示し、
R5 はフェニルを示し、このフェニルは場合によりハロゲン, CF3, NO2, CN 又は SO2NR51R52（式中、R51 及び R52, 相互に独立して水素又はアルキルを示するか又は
R51 及び R52 はこれらが結合するN-原子と一緒になってピペリジニル-又はモルホリニル-環を形成する。）によって置換され、
そして
R8 は水素又はアルキルを示す。｝ 
によって特徴づけることができる。
さらにより好ましい実施態様において、本発明の方法により得られるインドール-2,3-ジオン-3-オキシム誘導体は、式IIIA又はIIIB
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１５】
さらにより好ましい実施態様において、本発明の方法により得られるインドール-2,3-ジオン-3-オキシム誘導体は、一般式 IIIA又はIIIB
｛式中、 
R は水素又はC1-3-アルキルを示し、
R53 はSO2NR51R52; 
（式中、R51 及び R52, 相互に独立して水素又はC1-3-アルキルを示すか又は 
R51 及び R52 はこれらが結合するN-原子と一緒になってピペリジニル-又はモルホリニル-環を形成する。）
を示し、そして
R8 は水素又はC1-6-アルキルを示す。｝
によって特徴付けられる。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】
最も好ましい実施態様において、本発明の方法により得られるインドール-2,3-ジオン-3-オキシム誘導体は、化合物 IVA 又はIVB
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１８】
好ましい実施態様において、本発明の方法は、連続工程：
(i)   8-アミノ-1,2,3,4-テトラヒドロ-イソキノリン (化合物 9) 誘導体を抱水クロラール及びヒドロキシアミン塩酸塩と反応させて、N-(1,2,3,4-テトラヒドロ-イソキノリン-8-イル)-2-ヒドロキシイミノ-アセトアミド (化合物 10) 誘導体を生じさせ (工程 9); 
(ii)  硫酸を、工程 (i)で得られたN-(1,2,3,4-テトラヒドロ-イソキノリン-8-イル)-2-ヒドロキシイミノ-アセトアミド (化合物 10) 誘導体に添加し (工程 10);             ついで
(iii)  工程 (ii)で得られた2,3-ジオキソ-2,3,6,7,8,9-ヘキサヒドロ-1H-ピロロ[3,2-h]イソキノリン (化合物 11) 誘導体をキラル (エナンチオ純粋な(R)又は(S) ) α-N,N-ジBoc-アミノキシ-γ-ブチロラクトンと反応させて、 所望のキラル最終生成物, すなわちエナンチオ純粋な(R)- 又は(S)-2-[2-オキソ-1,2,6,7,8,9-ヘキサヒドロ-ピロロ[3,2-h]イソキノリン-3-イリデンアミノオキシ]-4-ヒドロキシ-酪酸) (化合物 A又はB) (工程 11)を得;
ついで所望の最終生成物を回収する
ことを含む。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１９】
好ましい実施態様において、この方法はさらに次の工程： 
(a) エナンチオ純粋な(S) 又は(R) a-ヒドロキシ-g-ブチロラクトンをN,N-ジBoc-ヒドロキシルアミンと反応させて、エナンチオ純粋な (S) 又は (R) α-N,N-ジBoc-アミノキシ-γ-ブチロラクトンを生じさせ (工程 8a);
ついで上記工程 (i) 〜(iii)を行うことを含む。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２０】
別の好ましい実施態様において、この方法はさらに次の工程： 
(b) N,N-ジBoc-O-ベンジルヒドロキシアミンを水素添加して、N,N-ジBoc-ヒドロキシルアミンを生じさせ (工程 7);
ついで上記工程 (a)及び上記工程 (i) 〜(iii)を行うことを含む。 
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２１】
第三の好ましい実施態様において、この方法はさらに次の工程： 
(c) Boc2Oを用いてO-ベンジルヒドロキシアミンをN,N-ジBoc-O-ベンジルヒドロキシアミンに変換させ (工程 6);
ついで上記工程 (b) , 上記工程(a)及び上記の工程 (i)〜(iii) を行うことを含む。
第四の実施態様において、この方法はさらに次の工程： 
(d)エナンチオ純粋な (S) 又は (R) α-ヒドロキシ-γ-ブチロラクトンをトシルクロライドと反応させて、エナンチオ純粋な (S) 又は (R)α-トシルオキシ-γ-ブチロラクトンを生じさせ(工程 5);
ついで 上記工程 (c), 上記工程 (b), 上記工程 (a)及び上記工程 (i)〜(iii)を行うことを含む。
【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２２】
最も好ましい実施態様において、
工程 (i) の8-アミノ-1,2,3,4-テトラヒドロ-イソキノリン (化合物 9) 誘導体が、4-(8-アミノ-2-メチル-1,2,3,4-テトラヒドロ-イソキノリン-5-イル)-N,N-ジメチル-ベンゼンスルホンアミド (N-[5-(4-ジメチルスファモイル-フェニル)-2-メチル-1,2,3,4-テトラヒドロ-イソキノリン-8-イル]-2-ヒドロキシイミノ-アセトアミドを得るために)であり、そして
工程 (iii)の2,3-ジオキソ-2,3,6,7,8,9-ヘキサヒドロ-1H-ピロロ[3,2-h]イソキノリン (化合物 11) 誘導体が、N,N-ジメチル-4-(8-メチル-2,3-ジオキソ-2,3,6,7,8,9-ヘキサヒドロ-1H-ピロロ[3,2-h]イソキノリン-5-イル)-ベンゼンスルホンアミドであって;
これらが、エナンチオ純粋な(R)- 又は(S)-2-[5-(4-ジメチルスファモイル-フェニル)-8-メチル-2-オキソ-1,2,6,7,8,9-ヘキサヒドロ-ピロロ[3,2-h]イソキノリン-3-イリデンアミノオキシ]-4-ヒドロキシ-酪酸を最終生成物(化合物 A 又は B) として生じさせる。
【手続補正１４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２６】
より好ましい実施態様において、工程 (ii)の酵素脱アセチル化を脂肪分解酵素を用いて実施する。最も好ましい実施態様において、脂肪分解酵素はリパーゼ PS (Amano Pharmaceutical Co.から入手される)である。
【実施例】
【手続補正１５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２７】
本発明を次の例によって詳述するが、これらが請求項に記載される本発明の範囲に何らの限定を与えることを意図するものではない。
先ず、 2-[5-(4-ジメチルスファモイル-フェニル)-8-メチル-2-オキソ-1,2,6,7,8,9-ヘキサヒドロ-ピロロ[3,2-h]イソキノリン-3-イリデンアミノオキシ]-4-ヒドロキシ-酪酸（以下、化合物 IVA 及び IVBと略称する。）の光学異性体への合成経路を略述する。
【手続補正１６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３３】
【化１０】
2006503011.tif 000005
CH2Cl2(325 mL)中にラセミ性 α-ヒドロキシ-γ-ブチロラクトン (25 g; 0.25 mol), DMAP (1.5 g), アセチルクロライド (25.5 ml; 0.37 mol) を有する混合物に固形K2CO3(50 g)を少しづつ分けて添加する(僅かに発熱性)。 反応混合物を室温で一晩攪拌し, ろ過し、蒸発乾固する。カラムクロマトグラフィー (石油エーテル 80-100:EtOAc =2:1) によって26.4 g (75%)の ラセミ性 α-アセトキシ-γ-ブチロラクトンを生じさせる。
【手続補正１７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３６】
【化１２】
2006503011.tif 000006
H2O (50 mL)中にエナンチオ純粋な (S)-α-アセトキシ-γ-ブチロラクトン (5 g, 34.7 mmol) 及び Amberlite IRA120 (酸形) を有する懸濁液を、還流加熱し、反応の進行をGCMSで監視する。2 時間後, GCMSは完全な変換を示す。反応混合物をろ過して、蒸発乾固する。減圧蒸留0.3-0.4 ミリバール (沸点85-92℃) はエナンチオ純粋な (S)-α-ヒドロキシ-γ-ブチロラクトン (2.6 g, 76% 収率)を生じさせる。 [α]D25= -66.1°。
【手続補正１８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３７】
粗生成物をさらに水溶液からCH2Cl2を用いて抽出して単離し、あるいは純粋な生成物をカラムクロマトグラフィーによって単離することができる。しかしAmberlite IRA-120をH2SO4で置き換えることができるが、全体としてより低い収量である。.
工程 4 
工程 3からのα-ヒドロキシ-γ-ブチロラクトン 及び α-アセトキシ-γ-ブチロラクトンのエナンチオ-不純な残留物を、酸又は塩基を用いてラセミ化して循環させ, ついで工程 1 〜3に再使用することができる。 
工程 5
【手続補正１９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３８】
【化１３】
2006503011.tif 000007
乾燥CH2Cl2(50 mL) 中に(R)-α-ヒドロキシ-γ-ブチロラクトン (3.5 g, 34.3 mmol), トシルクロライド (10.0 g, 52.6 mmol)及び K2CO3(2.23 g, 16.2 mmol) を有する懸濁液を室温で一晩攪拌する。反応混合物をろ過し, ろ液を1M リン酸緩衝液 pH = 7 (2x 50 mL), 3 M NaCl(水溶液) (1x 50 mL)で洗浄し, Na2SO4で乾燥させ、ろ過し、蒸発乾固して、粗生成物を生じさせる。粗生成物をPE40/60 (50 mL) で粉砕し、30分間攪拌する。 生じた沈殿をろ過によって単離し、PE40/60 を用いて洗浄し、痕跡量のトシルクロライドを除き, 7.7 g (87%) のエナンチオ純粋な(R)-α-トシルオキシ-γ-ブチロラクトンを生じさせる。 [α]36525= -9.9°。
【手続補正２０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４１】
反応混合物に、アセトニトリル (150 mL)中に Boc2O (6.7 g, 310 mmol) を有する溶液及びアセトニトリル (30 mL)中にDMAP (2 g, 16.4 mmol)を有する溶液を添加する。 反応混合物をついでTLC (EtOAc:PE60/80 = 1:5) が中間体N-Boc-O-ベンジルヒドロキシアミンの完全な変換を示すまで、40℃で攪拌する(約2時間)。反応混合物を蒸発乾固し、EtOAc (200 mL)に再溶解させる。有機相を1M リン酸緩衝液 pH = 7 (100 mL) 及び NaCl (水溶液, 飽和) (50 mL)の混合物で洗浄する。有機相をNa2SO4を用いて乾燥させ、ろ過し、蒸発乾固して、油状物を生じさせ、これを粉砕しながら  PE40/60 (20 mL)によって沈殿させる。沈殿をろ過によって単離し、56 g (92%)のN,N-ジBoc-O-ベンジルヒドロキシアミンを白色固体として生じさせる。
工程 7
【手続補正２１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４３】
油状物をEtOAc (25 mL)に溶解させ、1M NaOH (3x 25 mL)で抽出する。一緒にされた水相を、直ちに1M リン酸緩衝液 pH = 7中に注ぎ、EtOAc (3x 75 mL)で抽出する。一緒にされた有機フラクションをNa2SO4を用いて乾燥させ、ろ過し、蒸発乾固する。単離された白色固体を空気乾燥させて、8.8 g (81%)の純粋なN,N-ジBoc-ヒドロキシルアミンを生じさせる。
工程 8a
【手続補正２２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４４】
【化１６】
2006503011.tif 000008
N2 下で乾燥 THF (50 mL) 中にN,N-ジBoc-ヒドロキシルアミン (8.5 g, 36 mmol)を有する溶液にPh3P (11 g, 42 mmol)を添加し、0℃に冷却する。乾燥 THF (10 mL)中に(S)-α-ヒドロキシ-γ-ブチロラクトン (3.6 g, 35 mmol)を有する溶液を添加し、ついで 30分間 DEAD (6.8 ml, 42 mmol)を添加する。暗色反応混合物を、TLC(EtOAc:PE60/80 = 1:2, KMnO4 スプレー) が(S)-α-ヒドロキシ-γ-ブチロラクトンの完全な変換を示すまで、0℃で攪拌する(約 2 時間)。 
【手続補正２３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４５】
反応混合物を蒸発乾固し、Et2O (50 mL)に溶解させ、PE40/60 (100 mL)の添加によって粉砕する。 反応混合物 をろ過し, 沈殿を徹底的にEt2O:PE40/60 = 1:1 (100 mL)を用いて洗浄する。一緒にされた有機ろ液を蒸発乾固して、16 g の褐色油状物を生じさせる。油状物をカラムクロマトグラフィー (1000 mL SiO2, 直径7 cm, 溶離剤: EtOAc:PE60/80 = 1:2)分離する。 純粋なフラクションを一緒にし, 蒸発乾固し、PE40/60 (15 mL)を用いて洗浄して、 8.5 g (77%) のエナンチオ純粋な (R)-α-N,N-ジBoc-アミノキシ-γ-ブチロラクトンを生じさせる。 
(R)-異性体: [α]D25 = +62.5°; [α]36525= +210°。 
(R)-異性体を同様に製造する: [α]D25= -62.8°; [α]36525= -211°。
工程8b 
【手続補正２４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４６】
【化１７】
2006503011.tif 000009
N2下で 0℃で乾燥 CH2Cl2中に60% NaH (350 mg, 8.8 mmol)を有する懸濁液に、CH2Cl2(5 mL)中にBocNHOH を有する溶液を添加する。反応混合物を0°Cで 30分間攪拌する。その際CH2Cl2(5 mL)中に(R)-α-トシルオキシ-γ-ブチロラクトン (2 g, 7.8 mmol) を有する溶液を添加した後に行う。反応混合物を室温に加温させ、攪拌しながら一晩放置する。反応混合物を1M リン酸緩衝液 pH = 6.3 (20 mL)を用いて急冷し、有機相を分離する。水相をCH2Cl2(2x 20 mL)で抽出し、一緒にされた有機相をNaCl (水溶液, 飽和) (15 mL)で抽出する。有機フラクションをNa2SO4を用いて乾燥させ、 ろ過し、蒸発乾固して、カラムクロマトグラフィー (150 gのSiO2, 溶離剤: EtOAc:PE60/80 = 1:2) 分離して、1.5 g (89%) の (S)-α-N-Boc-アミノキシ-γ-ブチロラクトンを生じさせる。 [α]D25= -42°; [α]36525= -127°。
同様な方法で、約10% の(S)-異性体を有する(R)-異性体を製造する: [α]36525= +70°。
工程9-10
【手続補正２５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４８】
【化１９】
2006503011.tif 000010
抱水クロラール (71.6 g, 0.434 mol), ヒドロキシアミン塩酸塩 (60.3 g, 0.868 mol) 及び Na2SO4 (243.3 g, 1.65 mol) を、80℃に予備加熱されたH2O (1.8 L)を有する反応容器に順に添加する。澄明な溶液が得られた時に, アニリン(4-(8-アミノ-2-メチル-1,2,3,4-テトラヒドロ-イソキノリン-5-イル)-N,N-ジメチル-ベンゼンスルホンアミド; 99.0 g, 0.217 mol) を添加する。反応を45分間攪拌し、その際TLCはアニリンの全消費を示す。 セライト(39 g)を添加し、反応混合物を40℃に冷却し、1時間攪拌する。反応混合物をろ過し、沈殿を冷H2O (500 mL)で洗浄する。単離された固形物 (セライト（celite）上のイソニトロソアセトアニリド)を、加熱灯下で乾燥させ、132 gの化合物を生じさせ、これをさらに精製することなく使用する。
【手続補正２６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５１】
粗生成物 (38.1 g, 76.7 mmol) をH2O (800 mL)に懸濁させ、pH を4 M NaOH (約 80 mL) を用いて13に調整し、紫色溶液を生じさせ、これを20分間攪拌する。ついで黄-橙色溶液をTHF (300 mL)に添加し、pH をAcOHを用いて8.5に調整する。この溶液をEtOAc (4x 400 mL)を用いて洗浄し、ついで濃H2SO4(90 mL)を添加し、75°Cに加熱する。水溶液を室温に徐々に冷却させ、ついで0°Cに冷却させる。生じた沈殿をろ過し, ついでH2O (2x 100 mL)及び96% EtOH (2x 100 mL)で洗浄して、 31.3 g (そのアニリンから約53%収率に相当) の純粋なイサチン誘導体を硫酸塩として生じさせる。
工程11
【手続補正２７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５３】
反応混合物を室温で一晩放置し、40℃に加温して、pHを1M NaOH (水溶液) (約150 mL)を用いて10 に調整する。さらに、1M NaOH (水溶液) (約180 mL 全体で)を反応の間添加して、pHを10で保つ。4時間40℃で攪拌した後, 反応混合物はほとんど澄明な溶液になる。HPLCは全ての生成物が中間体ラクトン形で消費されることを示し、pHを2M H2SO4(水溶液)を用いて8.5に調整する。 
【手続補正２８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５４】
反応混合物を蒸発乾固し、固体40.3 gを生じさせる。 単離された固体をi-PrOH/H2O (85/15) (1600 mL)の混合物中で還流して、暖かいうちにろ過する(無機塩が除去される)。ろ液を0℃に徐々に冷却させ, 一晩放置する。生じた沈殿をろ過によって単離して、23.9 g の黄色〜橙色結晶を生じさせる。結晶(20 g) をH2O (80 mL)に溶解させ、 EtOAc (250 mL)を用いて 11/2 時間激しく攪拌する ( Z-異性体 及びイサチンオキシムの残部を除去する)。有機相を廃棄し、水相を蒸発乾固する。単離された固形物を、THF (400 mL)に懸濁させ、ろ過する。 
【手続補正２９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５５】
沈殿をH2O (160 mL)に溶解させ、2M H2SO4(水溶液)を用いてpHを5.2に徐々に調整する。混合物を11/2 時間室温で攪拌し、ろ過する。単離された固体を冷H2O (2x 25 mL)を用いて洗浄し、空気乾燥させてA 又は B (すなわち(R)- 又は (S)-2-[5-(4-ジメチルスファモイル-フェニル)-8-メチル-2-オキソ-1,2,6,7,8,9-ヘキサヒドロ-ピロロ[3,2-h]イソキノリン-3-イリデンアミノオキシ]-4-ヒドロキシ-酪酸) を黄色非晶質固体として生じさせる：15.8 g (56%)。 反応は立体化学の保持と共に起こる。すなわち変換は全く観察されない。
工程12
【手続補正３０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５７】
反応混合物を冷却し、ろ過し、ついで沈殿を96% EtOHで洗浄する。沈殿 をH2O (100 ml)に懸濁させ、75-80oCに加温し、pHを4 M NaOH (水溶液)を用いて8.5 に調整する。水溶液を室温に冷却し、ろ過する。沈殿をH2Oで洗浄し、ついで無水EtOH (100 ml)に懸濁させ、還流させる。溶液を室温に冷却し、ろ過する。 
【手続補正３１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５９】
【化２２】
2006503011.tif 000011
N2 下で0℃で乾燥DMF (2 ml)中に60% NaH (50 mg, 1.25 mmol)を有する懸濁液を、乾燥DMF (8 ml)中にイサチンオキシム, 8-メチル-5-(4-(N,N-ジメチルスルファモイル)-フェニル)-6,7,8,9-テトラヒドロ-1H-ピロロ-[3,2-h]-イソキノリン-2,3-ジオン-3-オキシム (500 mg, 1.25 mmol)を有する溶液に徐々に添加する。乾燥DMF (2 ml) 中に(R)-α-トシルオキシ-γ-ブチロラクトン (340 mg, 1.33 mmol) を有する溶液を添加した後、反応混合物を30分間0℃で攪拌する。反応を室温で攪拌しながら一晩放置し、その際HPLCはイサチンオキシムの完全な消費を示す。
【手続補正３２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６０】
反応混合物を蒸発乾固し、ついでH2O (20 ml) 及びジオキサン (5 ml)を添加する。反応混合物を、1M NaOHの使用によってpH = 10に調整する。別のNaOHを添加して、pHを10で保つ。反応混合物を室温で攪拌しながら一晩放置し、40-45℃に1時間加熱する。その際HPLCは中間体ラクトンの完全な変換を示す。反応混合物をpH = 8.5 に調整し、蒸発乾固する(広範な発泡)。 
【手続補正３３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６２】
母液は主にトシル酸ナトリウムからなる。粗化合物 (300 mg) をH2O (10 ml)に溶解させ、pHを1M HClを用いて5.7に, あるいは2M H2SO4(水溶液)を用いて5.2 に調整する。油状物を分離し、H2O をデカンテーションで除く。生成物を、粉砕しながらEtOHによって沈殿させる。生成物をろ過によって単離し、160 mg (28%)のIVA 又は IVB (すなわち(R)- 又は (S)-2-[5-(4-ジメチルスファモイル-フェニル)-8-メチル-2-オキソ-1,2,6,7,8,9-ヘキサヒドロ-ピロロ[3,2-h]イソキノリン-3-イリデンアミノオキシ]-4-ヒドロキシ-酪酸)を生じさせる。