【手続補正書】
【提出日】平成18年8月22日(2006.8.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ウイルスゲノム核酸を含んでなる核酸構築物であって、前記ウイルスゲノム核酸は少なくとも２つの内在性遺伝子発現制御ユニットを含んでなり、このユニットはそれぞれ１つの内在性プロモーターを含んでなり、ここでユニットの内在性プロモーターはウイルスゲノム核酸の起源であるウイルスのウイルスライフサイクルにおいて同時期に活性であり、そしてコード配列に機能しうるように連結されているが、ここにおいて：
(a)  構築物中のウイルスゲノム核酸の５’および３’末端間に相当するウイルスゲノム領域中に存在するウイルス配列の１０％より多く９５％までが構築物から欠失しており、；さらに
(b)  ウイルスゲノム核酸の長さは、1から50 kbである、
前記核酸構築物。
【請求項２】
構築物が
（ｉ）プラスミドまたはコスミドであり；および／または
（ｉｉ）ウイルスの複製開始点およびパッケージングシグナルを欠いている、
請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項３】
ウイルスゲノム配列の20%より多くそして85％までが欠失している、請求項１または２に記載の核酸構築物。
【請求項４】
ウイルスゲノム配列の30%より多くそして75％までが欠失している、請求項１〜３のいずれか一つに記載の核酸構築物。
【請求項５】
内在性遺伝子発現制御ユニットはそれらユニットの天然型のコード配列に機能しうるように連結されている、請求項１〜４のいずれか一つに記載の核酸構築物。
【請求項６】
内在性遺伝子発現制御ユニットのプロモーターの上流および／または下流の500bpより大きい配列は、ウイルスゲノムの内在性配列と同一または少なくとも80％相同である、請求項１〜５のいずれか一つに記載の核酸構築物。
【請求項７】
２以上の内在性遺伝子発現制御ユニットが、ウイルスゲノム核酸が由来するウイルスゲノム中の連続した遺伝子に由来する、請求項１〜６のいずれか一つに記載の核酸構築物。
【請求項８】
３以上の内在性遺伝子発現制御ユニットが、ウイルスゲノム核酸が由来するウイルスゲノム中の連続した遺伝子に由来する、請求項１〜７のいずれか一つに記載の核酸構築物。
【請求項９】
少なくとも２つの内在性プロモーターがゲノム核酸の起源であるウイルスのウイルスライフサイクルにおいて同時期にスイッチオンとなる、請求項１〜８のいずれか一つに記載の核酸構築物。
【請求項１０】
少なくとも２つの内在性遺伝子発現制御ユニットがいずれも最初期ウイルス遺伝子に由来する、またはいずれも初期ウイルス遺伝子に由来する、請求項１〜９のいずれか一つに記載の核酸構築物。
【請求項１１】
少なくとも２つの内在性遺伝子発現制御ユニットが異なっている、請求項１〜１０のいずれか一つに記載の核酸構築物。
【請求項１２】
ウイルスゲノム核酸がヘルペスウイルスに由来する、請求項１〜１１のいずれか一つに記載の核酸構築物。
【請求項１３】
ヘルペスウイルスが、単純ヘルペスウイルス（HSV）、サイトメガロウイルス（CMV）およびエプスタイン-バールウイルス（EBV）からなる一群から選択される、請求項１２に記載の核酸構築物。
【請求項１４】
HSVがHSV-1およびHSV-2からなる一群から選択される、請求項１３に記載の核酸構築物。
【請求項１５】
ウイルスゲノム核酸が単純ヘルペスウイルスに由来し、少なくとも２つの内在性遺伝子発現制御ユニットがそれぞれ、ICP0, ICP4, ICP22およびICP27遺伝子プロモーターからなる一群から選択される内在性プロモーターを含んでなる、請求項１４に記載の核酸構築物。
【請求項１６】
ウイルスゲノム核酸がHSV-2に由来し、ウイルス配列が下記の技法：
(a)  部分的EcoRI消化および再連結；
(b)  Bst11071および ScaI消化および再連結；
(c)  Nsi消化および再連結；
(d)  BstXI酵素による部分消化後、再連結してICP27とICP0間の配列を除去する；
(e)  BspHI酵素による完全消化後、BsiWI酵素で部分消化し、さらに再連結してICP22に隣接する配列を除去する；
(f)  SrfI 酵素による消化後、再連結して、ICP4とICP0間の配列を除去する；および
(g)   BstXI酵素による完全消化後、再連結してICP27とICP0間の配列を除去する、
のうち1以上の技法によって構築物から除去された、請求項１４または１５に記載の核酸構築物。
【請求項１７】
ウイルスゲノム核酸がHSV-1に由来し、ウイルス配列が構築物から除去されてICP0, ICP4, ICP22およびICP27コード配列と無関係なHSV-1配列のほぼすべてを取り除いた、請求項１４または15に記載の核酸構築物。
【請求項１８】
構築物が天然型のコード配列に機能しうるように連結されているICP0, ICP4, ICP22およびICP27プロモーターを含む、請求項１４〜１７のいずれか一つに記載の核酸構築物。
【請求項１９】
内在性遺伝子発現制御ユニットに機能しうるように連結されている２以上のコード配列が抗原をコードする、請求項１〜１８のいずれか一つに記載の核酸構築物。
【請求項２０】
欠失領域が隣接する２つの内在性遺伝子発現制御ユニットおよびそれらのコード配列の間の介在配列の一部またはすべてを含んでなる、請求項１〜１９のいずれか一つに記載の核酸構築物。
【請求項２１】
欠失領域が、ウイルスライフサイクルにおいて同時期に活性である少なくとも２つの内在性遺伝子発現制御ユニット領域以外のウイルスゲノム領域に存在する１以上の遺伝子に相当する、請求項１〜２０のいずれか一つに記載の核酸構築物。
【請求項２２】
被験体において免疫応答を誘導するために、被験体に直接投与するための核酸構築物を作製する方法であって、
(a)  ベクターの骨格構造にウイルスゲノム核酸を挿入すること、前記ウイルスゲノム核酸は、少なくとも2つの遺伝子発現制御ユニットを含んでなり、このユニットはさらに哺乳動物細胞において発現可能なそれぞれ1つの内在性プロモーターを含んでなり、ここでユニットの内在性プロモーターはウイルスゲノム核酸の起源であるウイルスのウイルスライフサイクルにおいて同時期に活性となる；および、
(b)  ウイルスゲノム核酸をベクターの骨格構造に挿入する前、挿入する時、もしくは挿入後のいずれかの時に、少なくとも2つの内在性遺伝子発現制御ユニットは別にして、構築物のウイルスゲノム核酸の5’から3’末端までの間に相当するウイルスゲノムの領域に存在するウイルスの配列の一部または全部を、ウイルスゲノム核酸から欠失させること、
を含んでなり、
ここにおいて、ベクター骨格に挿入されるウイルスゲノム核酸の長さは、1から50 kbである、
前記方法。
【請求項２３】
欠失が請求項１〜２０のいずれか一つにおいて定義され、および／または得られるベクターが請求項１〜２０のいずれか一つにおいて定義される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
粒子を介したデリバリー装置からの送達に適した、コーティングされた粒子であって、その粒子は請求項１〜２１のいずれか一つに記載された核酸構築物あるいは請求項２２または２３に記載の方法で作成された核酸構築物でコーティングされた担体粒子を含んでなる、前記のコーティングされた粒子。
【請求項２５】
請求項２４に記載のコーティングされた粒子を含んでなる、粒子を介したデリバリー装置のための投与容器。
【請求項２６】
請求項２４に記載のコーティングされた粒子を充填した、粒子を介したデリバリー装置。
【請求項２７】
請求項１〜２１のいずれか一つに記載の核酸構築物および製薬上許容し得る添加剤または賦形剤を含むワクチン。
【請求項２８】
関心のあるポリペプチドの哺乳動物細胞での発現を得るためのイン・ビトロ法であって、請求項１〜２１のいずれか一つに記載された核酸構築物または請求項２２または２３に記載の方法によって作成された核酸構築物を該細胞中に移行させることを含んでなる方法。
【請求項２９】
請求項１〜２１のいずれか一つに記載された核酸構築物、請求項２２または２３に記載の方法によって作成された核酸構築物または請求項２４に記載のコーティングされた粒子を含む核酸免疫化剤。