【手続補正書】
【提出日】平成17年12月20日(2005.12.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】    莢膜多糖をさらに含む組成物から、核酸および／またはタンパク質を分離して精製莢膜多糖を得る方法であって、該組成物を塩基試薬と接触させ、そして、核酸および／またはタンパク質を塩基処理することによって生じる不純物から、莢膜多糖を分離することを含む、前記方法。
【請求項２】    莢膜多糖上に存在するＮ−アセチル基の一部を、抽出中に加水分解し、そしてその後、再度アシル化し、再度Ｎ−アシル化された莢膜多糖が天然莢膜多糖と交差反応性になるようにする、請求項１の方法。
【請求項３】    請求項１の、莢膜多糖をさらに含む組成物から核酸および／またはタンパク質を分離する方法であって、さらに：
（ａ）所望により、クロマトグラフィーにより、核酸および／またはタンパク質から莢膜多糖を分離し；
（ｂ）段階（ａ）由来の莢膜多糖をアシル化剤と反応させ；
（ｃ）段階（ｂ）由来の莢膜多糖をクロマトグラフィーにより精製する
段階を含む、前記方法。
【請求項４】    塩基性条件のｐＨが約９および１４の間である、請求項３の方法。
【請求項５】    塩基性条件のｐＨが約１２である、請求項４の方法。
【請求項６】    莢膜多糖が連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ）属のいかなる細菌由来であってもよい、請求項３の方法。
【請求項７】    莢膜多糖がＢ群連鎖球菌由来である、請求項３の方法。
【請求項８】    莢膜多糖がＢ群連鎖球菌Ｉａ、Ｉｂ、ＩＩ、ＩＩＩ、Ｖ、ＶＩおよびＶＩＩＩ型由来である、請求項３の方法。
【請求項９】    塩基試薬が有機塩基を含む、請求項３の方法。
【請求項１０】    塩基試薬が無機塩基を含む、請求項３の方法。
【請求項１１】    塩基試薬がＮａＯＨ、ＫＯＨまたはＬｉＯＨを含む、請求項３の方法。
【請求項１２】    クロマトグラフィーにより分離する段階が、疎水性相互作用クロマトグラフィーである、請求項３の方法。
【請求項１３】    アシル化剤が無水酢酸、塩化アセチル、酢酸ペンタフルオロフェニル、または酢酸４−ニトロフェニルである、請求項３の方法。
【請求項１４】    クロマトグラフィーにより莢膜多糖を精製する段階が、ゲル浸透クロマトグラフィーである、請求項３の方法。
【請求項１５】    塩基試薬が無機塩基を含み、クロマトグラフィーにより分離する段階が疎水性クロマトグラフィーであり、アシル化試薬が無水酢酸、塩化アセチル、酢酸ペンタフルオロフェニルまたは酢酸４−ニトロフェニルであり、そしてクロマトグラフィーにより莢膜多糖を精製する段階がゲル浸透クロマトグラフィーである、請求項３の方法。
【請求項１６】    塩基試薬がＮａＯＨを含み、クロマトグラフィーにより分離する段階が疎水性相互作用クロマトグラフィーであり、アシル化試薬が無水酢酸であり、そしてクロマトグラフィーにより莢膜多糖を回収する段階がゲル濾過クロマトグラフィーである、請求項３の方法。
【請求項１７】    莢膜多糖がナイセリア（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ）属のいかなる細菌由来であってもよい、請求項３の方法。
【請求項１８】    莢膜多糖が髄膜炎菌（Ｎ．  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）Ｃ型由来である、請求項３の方法。
【請求項１９】    精製莢膜多糖が、重量約１％未満の核酸および約１μｇ／ｍｌ未満のタンパク質を含む、請求項１の方法。
【請求項２０】    Ｂ群連鎖球菌莢膜多糖および核酸および／またはタンパク質を含む組成物を、塩基試薬で処理し、そして精製莢膜多糖を分離することを含む方法により産生されるＢ群連鎖球菌莢膜多糖であって：
Ｉａ型ＣＰＳが：  およそ０．０１０−０．００５の範囲のＫａｖ
およそ３１８−３１１の範囲のＭｗ（ｋｇ／ｍｏｌ）
およそ１．３５−１．３１の範囲のＭｗ／Ｍｎを有し
Ｉｂ型ＣＰＳが：  およそ０．１９１−０．１５０の範囲のＫａｖ
およそ２１８−１７０の範囲のＭｗ（ｋｇ／ｍｏｌ）
およそ１．６１−１．２０の範囲のＭｗ／Ｍｎを有し
ＩＩ型ＣＰＳが：  およそ０．１５２−０．１１５の範囲のＫａｖ
およそ２８９−２４６の範囲のＭｗ（ｋｇ／ｍｏｌ）
およそ１．４６のＭｗ／Ｍｎを有し
ＩＩＩ型ＣＰＳが：およそ０．３４３−０．２６８の範囲のＫａｖ
およそ１０８−１０４の範囲のＭｗ（ｋｇ／ｍｏｌ）
およそ１．２４−１．２２の範囲のＭｗ／Ｍｎを有し
Ｖ型ＣＰＳが：    およそ０．２５７−０．１５６の範囲のＫａｖ
およそ１７９−９２の範囲のＭｗ（ｋｇ／ｍｏｌ）
およそ１．２８−１．１５の範囲のＭｗ／Ｍｎを有する
前記莢膜多糖。
【請求項２１】    莢膜多糖を、グラム陰性およびグラム陽性細菌の他の細胞構成成分から抽出する方法であって、細菌細胞、ホモジナイズした細菌細胞、馴化培地（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄ  ｍｅｄｉｕｍ）、細菌培養上清、またはこれらの混合物を、塩基性条件下で塩基試薬と接触させ、そして他の細胞構成成分を前記塩基試薬と接触させることにより生じる不純物から、莢膜多糖を分離して精製莢膜多糖を得ることを含む、前記方法。
【請求項２２】    塩基性条件が約ｐＨ  ９およびｐＨ  １４の間である、請求項１８の方法。
【請求項２３】    塩基性条件が約ｐＨ  １２である、請求項１９の方法。
【請求項２４】    該方法が、細菌細胞を塩基試薬と接触させることを含む、請求項２０の方法。
【請求項２５】    精製莢膜多糖が、重量約１％未満の核酸および約１μｇ／ｍｌ未満のタンパク質を含む、請求項２５の方法。
【請求項２６】    分離段階がクロマトグラフィー分離である、請求項２５の方法。
【請求項２７】    莢膜多糖がナイセリア属のいかなる細菌由来であってもよい、請求項２５の方法。
【請求項２８】    莢膜多糖が髄膜炎菌Ｃ型由来である、請求項２５の方法。
【請求項２９】    莢膜多糖が連鎖球菌属のいかなる細菌由来であってもよい、請求項２５の方法。
【請求項３０】    莢膜多糖がＢ群連鎖球菌由来である、請求項２５の方法。
【請求項３１】    該細菌がＢ群連鎖球菌Ｉａ、Ｉｂ、ＩＩ、ＩＩＩ、Ｖ、ＶＩまたはＶＩＩＩである、請求項２５の方法。
【請求項３２】    Ｃ群髄膜炎菌（ｍｅｎｉｎｇｏｃｏｃｃｕｓ）多糖結合体ワクチンを産生する方法であって、（ａ）Ｃ群髄膜炎菌莢膜多糖を含む、Ｃ群髄膜炎菌細菌細胞、ホモジナイズした細菌細胞、馴化培地、細菌培養上清、またはそれらの混合物を、Ｃ群髄膜炎菌多糖のＮ−アセチル基の少なくとも１つを加水分解するのに十分に塩基性である塩基性条件下で、塩基試薬と接触させ、（ｂ）莢膜多糖を段階（ａ）の産物から分離し、そして該多糖をポリペプチドと結合させることを含む、前記方法。
【請求項３３】    結合が還元性アミノ化により達成される、請求項３２の方法。
【請求項３４】    さらに、脱Ｎ−アセチル化多糖を、アシル化剤で処理し、そして該Ｎ−アシル化多糖を酸化剤で処理し、隣接（ｖｉｃｉｎａｌ）ジオールを酸化的に切断し、アルデヒド基を産生する段階を含む、請求項３３の方法。
【請求項３５】    さらに、脱Ｎ−アセチル化多糖を単離し、そして再アシル化産物を単離することを含む、請求項３４の方法。
【請求項３６】    塩基試薬が水酸化ナトリウム、水酸化カリウムおよび水酸化リチウムからなる群より選択され、そしてアシル化剤が無水酢酸および塩化アセチルからなる群より選択される、請求項３４の方法。