【手続補正書】
【提出日】平成18年7月27日(2006.7.27)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ミクロソームのプロスタグランジンＥ合成酵素（ｍＰＧＥＳ）および造血系プロスタグランジンＤ合成酵素（ｈＰＧＤＳ）からなるグループから選ばれるプロスタグランジン合成酵素が基質と反応しプロスタグランジン生成物を産生する活性を、化合物または薬剤が低下させるかどうかを測定するための方法であって、
（ａ）該プロスタグランジン合成酵素と、基質、コファクターおよび化合物または薬剤とを混合し；
（ｂ）工程（ａ）の混合物と、該基質がプロスタグランジン生成物に自然変換することを防止する薬剤を含有する停止溶液とをインキュベートし；
（ｃ）工程（ｂ）の混合物と、蛍光標識したプロスタグランジン生成物および該プロスタグランジン生成物を免疫原とした抗体を含有する検出試薬とをインキュベートし；
（ｄ）工程（ｃ）の混合物および対照用混合物を、蛍光標識が励起できる波長を有する平面偏光で照射し、ついで工程（ｃ）の混合物および対照用混合物の蛍光偏光を測定し；そして
（ｅ）工程（ｄ）の測定値を比較する、
工程を含み、
ここで、工程（ｃ）の混合物の蛍光偏光測定値が対照用混合物の蛍光偏光測定値より大きいという知見が、該化合物または薬剤が該プロスタグランジン合成酵素活性を低下させていることを示す、
上記方法。
【請求項２】
プロスタグランジン合成酵素が、ミクロソームのプロスタグランジンＥ合成酵素（ｍＰＧＥＳ）、基質がプロスタグランジンＨ2（ＰＧＨ2）、コファクターがグルタチオン（ＧＳＨ）、そしてプロスタグランジン生成物がプロスタグランジンＥ2（ＰＧＥ2）である請求項１の方法。
【請求項３】
ミクロソームのプロスタグランジンＥ合成酵素が、配列番号２のアミノ酸配列を含んでいるヒトｍＰＧＥＳである、請求項２の方法。
【請求項４】
プロスタグランジン合成酵素が、造血系プロスタグランジンＤ合成酵素（ｈＰＧＤＳ）、基質がプロスタグランジンＨ2（ＰＧＨ2）、コファクターがグルタチオン（ＧＳＨ）、そしてプロスタグランジン生成物がプロスタグランジンＤ2（ＰＧＤ2）である請求項１の方法。
【請求項５】
造血系プロスタグランジンＤ合成酵素が、ヒト造血系プロスタグランジンＤ合成酵素であり、そして配列番号４のアミノ酸配列を含んでいる、請求項４の方法。
【請求項６】
停止溶液の薬剤がＦｅＣｌ2である、請求項１の方法。
【請求項７】
蛍光標識がフルオレセイン、フィコエリトリン（ＰＥ）、テキサスレッド（ＴＲ）、ローダミン、遊離のランタニド系列塩、キレート化ランタニド系列塩、ＢＯＤＩＰＹ、ＡＬＥＸＡまたはＣｙＤｙｅを含む、請求項１の方法。
【請求項８】
蛍光標識がテキサスレッド（ＴＲ）である、請求項７の方法。
【請求項９】
停止溶液の薬剤がＦｅＣｌ2である、請求項２の方法。
【請求項１０】
インキュベートする工程（ｂ）の持続時間が少なくとも３０秒間であり、そして、インキュベートする工程（ｃ）の持続時間が少なくとも３分間である、請求項９の方法。
【請求項１１】
蛍光標識がフルオレセイン、フィコエリトリン（ＰＥ）、テキサスレッド（ＴＲ）、ローダミン、遊離のランタニド系列塩、キレート化ランタニド系列塩、ＢＯＤＩＰＹ、ＡＬＥＸＡまたはＣｙＤｙｅを含む、請求項１０の方法。
【請求項１２】
蛍光標識がテキサスレッド（ＴＲ）であり、そして、平面偏光励起光の波長が、５８０±２０ｎｍである、請求項１１の方法。
【請求項１３】
停止溶液の薬剤がＦｅＣｌ2である、請求項４の方法。
【請求項１４】
蛍光標識がフルオレセイン、フィコエリトリン（ＰＥ）、テキサスレッド（ＴＲ）、ローダミン、遊離のランタニド系列塩、キレート化ランタニド系列塩、ＢＯＤＩＰＹ、ＡＬＥＸＡまたはＣｙＤｙｅを含む、請求項１３の方法。
【請求項１５】
蛍光標識がテキサスレッド（ＴＲ）であり、そして、平面偏光励起光の波長が５８０±２０ｎｍである、請求項１４の方法。
【請求項１６】
造血系プロスタグランジンＤ合成酵素（ｈＰＧＤＳ）およびミクロソームのプロスタグランジンＥ合成酵素（ｍＰＧＥＳ）からなるグループから選ばれるプロスタグランジン合成酵素が基質と反応しプロスタグランジン生成物を産生する活性を、化合物または薬剤が低下させるかどうかを測定するための方法であって、
（ａ）該プロスタグランジン合成酵素と、基質、コファクターおよび化合物または薬剤とを混合し；
（ｂ）工程（ａ）の混合物と、未反応基質がプロスタグランジン生成物に自然変換することを防止する薬剤を含有する停止溶液とをインキュベートし；
（ｃ）工程（ｂ）の混合物と、テキサスレッドで標識したプロスタグランジン生成物および該プロスタグランジン生成物を免疫原とした抗体を含有する検出試薬とをインキュベートし；
（ｄ）工程（ｃ）の混合物および対照用混合物を、５８０±２０ｎｍの波長の平面偏光で照射し、ついで工程（ｃ）の混合物および対照用混合物の蛍光偏光を６２０±２０ｎｍで測定し；そして
（ｅ）工程（ｄ）の測定値を比較する、
工程を含み、
ここで、工程（ｃ）の混合物の蛍光偏光測定の値が対照用混合物の蛍光偏光測定値より大きいという知見が、該化合物または薬剤が該プロスタグランジン合成酵素活性を低下させていることを示す、
上記方法。
【請求項１７】
プロスタグランジン合成酵素が、配列番号２のアミノ酸配列を含むヒトのミクロソームのプロスタグランジンＥ合成酵素（ｍＰＧＥＳ）、基質がプロスタグランジンＨ2（ＰＧＨ2）、コファクターがグルタチオン、プロスタグランジン生成物がプロスタグランジンＥ2（ＰＧＥ2）である、請求項１６の方法。
【請求項１８】
停止溶液の薬剤がＦｅＣｌ2である、請求項１７の方法。
【請求項１９】
テキサスレッドで標識されたプロスタグランジン生成物が、該プロスタグランジン生成物および該テキサスレッドが結合しているリンカー分子を含む、請求項１８の方法。
【請求項２０】
リンカー分子が、アミノ酪酸、アミノカプロン酸、７−アミノヘプタン酸、８−アミノカプリル酸、Ｆｍｏｃ−アミノカプロン酸、１個またはそれ以上のβ−アラニン、イソチオシアネート基、 スクシンイミジルエステル、スルホナルハライドまたはカルボジイミドからなるグループから選ばれる、請求項１９の方法。
【請求項２１】
リンカー分子がカルボジイミドである、請求項２０の方法。
【請求項２２】
プロスタグランジン合成酵素が、配列番号４のアミノ酸配列を含むヒト造血系プロスタグランジンＤ合成酵素（ｈＰＧＤＳ）、基質がプロスタグランジンＨ2（ＰＧＨ2）、コファクターがグルタチオン、プロスタグランジン生成物がプロスタグランジンＤ2（ＰＧＤ2）である、請求項１６の方法。
【請求項２３】
停止溶液の薬剤がＦｅＣｌ2である、請求項２２の方法。
【請求項２４】
テキサスレッドで標識されたプロスタグランジン生成物が、該プロスタグランジン生成物および該テキサスレッドが結合しているリンカー分子を含む、請求項２３の方法。
【請求項２５】
リンカー分子が、アミノ酪酸、アミノカプロン酸、７−アミノヘプタン酸、８−アミノカプリル酸、Ｆｍｏｃ−アミノカプロン酸、１個またはそれ以上のβ−アラニン、イソチオシアネート基、 スクシンイミジルエステル、スルホナルハライドまたはカルボジイミドからなるグループから選ばれる、請求項２４の方法。
【請求項２６】
リンカー分子がカルボジイミドである、請求項２５の方法。
【請求項２７】
配列番号２のアミノ酸配列を含むヒトのミクロソームのプロスタグランジンＥ合成酵素（ｍＰＧＥＳ）がその基質であるプロスタグランジンＨ2（ＰＧＨ2）と反応しプロスタグランジンＥ2（ＰＧＥ2）を産生する活性を、化合物または薬剤が低下させるかどうかを測定するための方法であって、
（ａ）ｍＰＧＥＳと、ＰＧＨ2、グルタチオンおよび化合物または薬剤とを混合し；
（ｂ）工程（ａ）の混合物と、ＦｅＣｌ2を含有する停止溶液とをインキュベートし；
（ｃ）工程（ｂ）の混合物と、テキサスレッドで標識したＰＧＥ2およびＰＧＥ2を免疫原とした抗体を含有する検出試薬とをインキュベートし；
（ｄ）工程（ｃ）の混合物および対照用混合物を、５８０±２０ｎｍの波長の平面偏光で照射し、ついで工程（ｃ）の混合物および対照用混合物の蛍光偏光を測定し；そして
（ｅ）工程（ｄ）の測定値を比較する、
工程を含み、
ここで、工程（ｃ）の混合物の蛍光偏光測定の値が、対照用混合物の蛍光偏光測定値より大きいという知見が、該化合物または薬剤がｍＰＧＥＳ活性を低下させていることを示す、
上記方法。
【請求項２８】
配列番号４のアミノ酸配列を含むヒト造血系プロスタグランジンＤ合成酵素（ｈＰＧＤＳ）がその基質であるプロスタグランジンＨ2（ＰＧＨ2）と反応しプロスタグランジンＤ2（ＰＧＤ2）を産生する活性を、化合物または薬剤が低下させるかどうかを測定するための方法であって、
（ａ）ｈＰＧＤＳと、ＰＧＨ2、グルタチオンおよび化合物または薬剤とを混合し；
（ｂ）工程（ａ）の混合物と、ＦｅＣｌ2を含有する停止溶液とをインキュベートし；
（ｃ）工程（ｂ）の混合物と、テキサスレッドで標識したＰＧＤ2およびＰＧＤ2を免疫原とした抗体を含有する検出試薬とをインキュベートし；
（ｄ）工程（ｃ）の混合物および対照用混合物を、５８０±２０ｎｍの波長の平面偏光で照射し、ついで工程（ｃ）の混合物および対照用混合物の蛍光偏光を測定し；そして
（ｅ）工程（ｄ）の測定値を比較する、
工程を含み、
ここで、工程（ｃ）の混合物の蛍光偏光測定の値が、対照用混合物の蛍光偏光測定値より大きいという知見が、該化合物または薬剤がｈＰＧＤＳ活性を低下させていることを示す、
上記方法。