【手続補正書】
【提出日】平成18年7月14日(2006.7.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ
【化１】
2005535676.tif 000001
で示される４−（４−メチルピペラジン−１−イルメチル）−Ｎ−［４−メチル−３−（４−ピリジン−３−イル）ピリミジン−２−イルアミノ）フェニル］−ベンズアミドまたは医薬上許容されるその塩を活性成分とする、腫瘍の放射免疫療法の効果の増強剤。
【請求項２】
放射免疫コンジュゲート剤と同時的、個別的または逐次的に使用することを特徴とする、請求項１記載の増強剤（ここで、両活性成分は、互いに独立して遊離の形態または医薬上許容される塩の形態で存在する。）。
【請求項３】
腫瘍を患い、そして放射免疫療法を将来受けるか、現在受けているか、または過去に受けたヒトに使用することを特徴とする、請求項１または２記載の増強剤。
【請求項４】
１日に１０〜１０００ｍｇの用量を成人に投与することを特徴とする、請求項１〜３のいずれか１項に記載の増強剤。
【請求項５】
式Ｉの４−（４−メチルピペラジン−１−イルメチル）−Ｎ−［４−メチル−３−（４−ピリジン−３−イル）ピリミジン−２−イルアミノ）フェニル］−ベンズアミドが医薬上許容される酸付加塩である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の増強剤。
【請求項６】
酸付加塩がモノメタンスルホン酸塩である、請求項５に記載の増強剤。
【請求項７】
放射免疫コンジュゲート剤が１３１Ｉ−８１Ｃ６、１３１Ｉ−ＭＮ、１３１Ｉ−１４、１３１Ｉ−Ｆ６、１３１Ｉ−Ａ５Ｂ７、１３１Ｉ−ＨＭＦＧ１、１３１Ｉ−ＢｒＥ３、１３１Ｉ−ＣＣ４９、１３１Ｉ−Ｂ７２.３、９０Ｙ−８１Ｃ６、９０Ｙ−ＭＮ、９０Ｙ−１４、９０Ｙ−Ｆ６、９０Ｙ−Ａ５Ｂ７、９０Ｙ−ＨＭＦＧ１、９０Ｙ−ＢｒＥ３、９０Ｙ−ＣＣ４９および９０Ｙ−Ｂ７２.３を含む群から選択される、請求項２〜６のいずれか１項に記載の増強剤。
【請求項８】
放射免疫コンジュゲート剤が１３１Ｉ−ＣＣ４９および１３１Ｉ−Ｂ７２.３からなる群から選択される、請求項７に記載の増強剤。
【請求項９】
式Ｉの４−（４−メチルピペラジン−１−イルメチル）−Ｎ−［４−メチル−３−（４−ピリジン−３−イル）ピリミジン−２−イルアミノ）フェニル］−ベンズアミドが放射免疫療法の１２日前から放射免疫療法の１２日後までの期間内に投与されることを特徴とする、請求項１〜８のいずれか１項に記載の増強剤。
【請求項１０】
膵臓腫瘍、肺癌、乳癌、類表皮カルシノーマ、腎細胞カルシノーマ、神経内分泌腫瘍、婦人科系の癌、泌尿器科系の癌、消化管癌、結腸直腸腺癌または結腸癌、膵臓腺癌；グリア芽腫、頭部および／または頚部癌、中枢神経系の癌、骨腫瘍、固形小児腫瘍、造血器悪性疾患、ＡＩＤＳ−関連癌、軟組織肉腫、および皮膚癌から選択される腫瘍において放射免疫療法の効果を増強するための、請求項１〜９のいずれか１項に記載の増強剤。
【請求項１１】
（ａ）Ｎ−｛５−［４−（４−メチル−ピペラジノ−メチル）−ベンゾイルアミド］−２−メチルフェニル｝−４−（３−ピリジル）−２−ピリミジン−アミンおよび（ｂ）少なくとも１種の放射免疫コンジュゲート剤（ここで、両活性成分は、互いに独立して遊離の形態または医薬上許容される塩の形態で存在する。）ならびに所望により少なくとも１つの医薬上許容される担体を含んでなる、腫瘍処置用組合せ剤。
【請求項１２】
（ａ）腫瘍関連抗原に特異的に結合する放射免疫コンジュゲート剤、および
（ｂ）式Ｉの４−（４−メチルピペラジン−１−イルメチル）−Ｎ−［４−メチル−３−（４−ピリジン−３−イル）ピリミジン−２−イルアミノ）フェニル］−ベンズアミドまたは医薬上許容されるその塩を含んでなる、
放射免疫療法のためのキット。
【請求項１３】
腫瘍の放射免疫療法の効果を増強する医薬組成物の製造のための、式Ｉ
【化２】
2005535676.tif 000002
で示される４−（４−メチルピペラジン−１−イルメチル）−Ｎ−［４−メチル−３−（４−ピリジン−３−イル）ピリミジン−２−イルアミノ）フェニル］−ベンズアミドまたは医薬上許容されるその塩の使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００３】
治療的適用のために使用される放射性核種の理想的な特性としては、組織内の路長（χ９０）が腫瘍内で最適の局所限定的エネルギー沈積および離れた器官に最小の用量をもたらすような、放射線放出の種類およびエネルギーレベルが挙げられる。慣用的な放射免疫療法（ＲＩＴ）は、放射性同位体および投与スケジュールにかかわらず、固形腫瘍において成功しない。１つの容易に同定可能な原因は、腫瘍における放射免疫コンジュゲートの不十分な取り込みである。抗原の状態と独立して、注射された用量の０.０１％という少量の腫瘍取り込みが、臨床試験においてよく観察され、このことは圧倒的多数の放射免疫コンジュゲートが腫瘍部位に浸透できないことを示唆している。たいていの固形腫瘍に沈積した総放射線量は治療に不十分であるが、循環している放射性同位体は正常組織を照射する。固形腫瘍の処置におけるＲＩＴの失敗は、腫瘍の生理機能に部分的に関係する。全身的に投与されたモノクローナル抗体（ｍＡｂ）は腫瘍の周辺および血管周囲領域に集積する傾向がある。すべてのクローン原性腫瘍細胞に到達するために、ｍＡｂは腫瘍内皮、その下にある基底膜、腫瘍基質（tumor stroma）および実質を横切らなければならない。結果的に、腫瘍の血管は大分子が異常に漏れやすいけれども、腫瘍塊へのｍＡｂの浸透は不十分である。通常、放射標識されたｍＡｂの取り込みは腫瘍の周囲の毛細血管に沿って観察されるが、腫瘍の核は標識されないままである。いくつかの相互に関係のある原因がこれらの問題の中心で同定され、そして腫瘍に対する放射線量を改善し、かつ、正常組織に対する用量を制限するために多くの戦略が研究されてきた。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００６】
今回、驚くべきことに、化合物Ｉまたは医薬上許容されるその塩が放射免疫療法処置期間中、期間前および／または期間後に投与された場合、固形腫瘍は放射免疫療法による処置が成功し得ることが証明された。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００７】
したがって、本発明は、腫瘍の放射免疫療法の効果を増強する薬剤の製造のための、式Ｉ
【化１】
2005535676.tif 000003
で示される４−（４−メチルピペラジン−１−イルメチル）−Ｎ−［４−メチル−３−（４−ピリジン−３−イル）ピリミジン−２−イルアミノ）フェニル］−ベンズアミドまたは医薬上許容されるその塩の使用に関する。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１２】
本発明は、とりわけ特に、膵臓腫瘍；メラノーマ；肺癌、たとえば小細胞肺癌；乳癌；類表皮カルシノーマ；腎細胞カルシノーマ；神経内分泌腫瘍；婦人科系の癌、たとえば子宮頸癌、子宮癌、卵巣癌、前立腺癌または膀胱癌；消化管癌、たとえば胃癌、結腸直腸腺癌または結腸癌；膵臓癌（膵臓腺癌）；グリア芽腫；頭部および／または頚部癌；軟組織肉腫、および皮膚癌（メラノーマおよびカポジ肉腫を含む）のような固形腫瘍において放射免疫療法の効果を増強する医薬の製造のための、化合物Ｉまたは医薬上許容されるその塩、たとえば化合物Ｉメシル酸塩の使用に関する。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１３】
さらなる態様において、本発明は、同時的、個別的または逐次的使用のための、（ａ）Ｎ−｛５−［４−（４−メチル−ピペラジノ−メチル）−ベンゾイルアミド］−２−メチルフェニル｝−４−（３−ピリジル）−２−ピリミジン−アミンまたは医薬上許容されるその塩、たとえばメシル酸塩および（ｂ）放射免疫コンジュゲート剤（ここで、活性成分は、互いに独立して遊離の形態または医薬上許容される塩の形態で存在する。）から選択される少なくとも１つの化合物および所望により少なくとも１つの医薬上許容される担体を含んでなる、組合せ剤、たとえば組合せ調製物（combined preparation）または医薬組成物に関する。かかる組合せ剤を、以下、本明細書において「本発明の組合せ剤」と称する。本発明の組合せ剤は、腫瘍増殖を有意に阻止する。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１４】
別の実施態様において、本発明は、温血動物、とりわけヒト、腫瘍を有するヒトの処置方法であって、当該動物に、（ａ）Ｎ−｛５−［４−（４−メチル−ピペラジノ−メチル）−ベンゾイルアミド］−２−メチルフェニル｝−４−（３−ピリジル）−２−ピリミジン−アミンまたは医薬上許容されるその塩、たとえば化合物Ｉメシル酸塩および（ｂ）放射免疫コンジュゲート剤（ここで、活性成分は、互いに独立して遊離の形態または医薬上許容される塩の形態で存在する。）から選択される少なくとも１つの化合物および所望により少なくとも１つの医薬上許容される担体を含んでなる、組合せ剤、たとえば組合せ調製物または医薬組成物を投与することを含んでなる方法を提供する。好ましくは、活性成分は、腫瘍に対して共同で治療上有効な量で存在する。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２０】
本明細書において使用する放射免疫コンジュゲートとしては、癌標的細胞または組織に特異的であり、かつ、放射性核種に結合したモノクローナル抗体が挙げられるが、これに限定されるわけではない。放射性核種には、ベータ放射体、たとえばヨウ素−１３１（１３１Ｉ）、９０イットリウム（９０Ｙ）またはアルファ放射体、たとえば２３１ビスマス、２１１アスタチンが含まれる。本発明のモノクローナル抗体は、種々の標的、たとえばテネイシン（多くの腫瘍において過剰発現する細胞外マトリックスタンパク質）、ＣＥＡ（癌胎児性抗原）、ＴＡＧ７２（癌胎児性抗原腫瘍関連糖タンパク質−７２）およびＭＵＣ１（異常グリコシル化上皮性ムチン）エピトープから選択され得る。好ましくは、抗−テネイシン抗体は８１Ｃ６（Reardon et al., J. Clin. Oncol. (2002) 20: 1389: 97）であり、抗−ＣＥＡ抗体はＭＮ−１４、Ｆ６およびＡ５Ｂ７（Behr et al., Cancer (2002) 94: 1373-81; Goldenberg J. Nucl. Med. (2002) 43: 693-713）を含む群から選択され、抗−ＭＵＣ１抗体はＨＭＦＧ１およびＢｒＥ３（Goldenberg J. Nucl. Med. (2002) 43: 693-713; Epenetos et al., J. Gynecol. Cancer. (2000) 10: 44-46）を含む群から選択される。抗−ＴＡＧ７２抗体は、ＣＣ４９およびＢ７２.３を含む群から選択される。本発明の放射免疫コンジュゲートは、８１Ｃ６−、ＭＮ−、１４−、Ｆ６−、Ａ５Ｂ７−、ＨＭＦＧ１−、ＢｒＥ３−、ＣＣ４９−およびＢ７２.３−核種、たとえば１３１Ｉ−８１Ｃ６、１３１Ｉ−ＭＮ、１３１Ｉ−１４、１３１Ｉ−Ｆ６、１３１Ｉ−Ａ５Ｂ７、１３１Ｉ−ＨＭＦＧ１、１３１Ｉ−ＢｒＥ３、１３１Ｉ−ＣＣ４９、１３１Ｉ−Ｂ７２.３、９０Ｙ−８１Ｃ６、９０Ｙ−ＭＮ、９０Ｙ−１４、９０Ｙ−Ｆ６、９０Ｙ−Ａ５Ｂ７、９０Ｙ−ＨＭＦＧ１、９０Ｙ−ＢｒＥ３、９０Ｙ−ＣＣ４９、９０Ｙ−Ｂ７２.３を含む群から選択される。好ましくは、放射免疫コンジュゲートは、ヨウ素−１３１（１３１Ｉ）標識モノクローナル抗体ＣＣ４９（１３１Ｉ−ＣＣ４９）（Murray JL et al. Cancer (1994) 73: 1057-66）、９０Ｙ−標識Ｂ７２.３（９０イットリウム）、１３１Ｉ−Ｂ７２.３（Thor A et al. J Natl. Cancer Inst. (1986) 76: 995-1006）であり、最も好ましくは１３１Ｉ−ＣＣ４９、１３１Ｉ−Ｂ７２.３である。放射免疫コンジュゲートは、トシツモマブ（Tositumomab）（１３１Ｉ−標識形態）放射標識抗−ＣＤ２０モノクローナル抗体（ＣＡＳ登録番号：２０８９２１−０２−２および１９２３９１−４８−３；米国特許第５５９５７２１号）、リツキシマブ（９０Ｙ−標識形態）（ＣＡＳ登録番号：１７４７２２−３１−７；米国特許第５７６３１３７号）、イブリツモマブ・チウキセタン（Ibritumomab Tiuxetan）（イットリウム−９０（９０Ｙ）−標識形態；ゼバリン（Zevalin）（登録商標））（ＣＡＳ登録番号：２０６１８１−６３−７；米国特許第５７３６１３７号）、ゲムツズマブオゾガマイシン（Gemtuzumab Ozogamicin）（放射標識形態）（ＣＡＳ登録番号：２２０５７８−５９−６；米国特許第５７７３００１号）、アレムツズマブ（Alemtuzumab）すなわちキャムパス（Campath）−１Ｈ（放射標識形態）（米国特許第５８４６５３４号）、１３１Ｉ−標識抗−ＣＤ４５抗体および１３１Ｉ−標識抗−ＣＤ３３抗体（たとえばＨｕＭ−１９５）（Eric L. Sievers; Cancer Chemotherapy and Pharmacology, Abstract (2000) 47: S18-S22）を含む群から選択され得る。放射免疫コンジュゲートの治療用量は当分野において周知である。９０Ｙ−ゼバリンの治療用量は、約０.４ｍＣｉ／ｋｇ（１５ＭＢｑ／ｋｇ）〜最大３２ｍＣｉ（１.２ＧＢｑ）である。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２１】
「固形腫瘍または腫瘍」なる語は、神経膠腫、膵臓腫瘍；肺癌、たとえば小細胞肺癌；乳癌；類表皮カルシノーマ；神経内分泌；婦人科系および泌尿器科系の癌、たとえば子宮頸、子宮、卵巣、前立腺、腎細胞カルシノーマ、精巣性胚細胞腫瘍または癌；膵臓癌（膵臓腺癌）；グリア芽腫、頭部および／または頚部癌；ＣＮＳ（中枢神経系）癌；骨腫瘍；固形小児腫瘍；造血器悪性疾患；ＡＩＤＳ−関連癌；軟組織肉腫；および皮膚癌（メラノーマおよびカポジ肉腫を含む）のような腫瘍および／または転移（位置はどこでもよい）を意味する。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２８】
確立された試験モデルにより、化合物Ｉまたは医薬上許容されるその塩が、腫瘍の放射免疫療法の効果の増強をもたらすことが示され得る。さらに、化合物Ｉまたは医薬上許容されるその塩は、放射免疫療法の異なる態様において、たとえばより少ない副作用、たとえば正常器官に対するより少ない放射線毒性において有利な効果をもたらす。化合物Ｉまたは医薬上許容されるその塩は、予期せぬ相乗効果により放射免疫療法の抗腫瘍効果を改善する予期せぬ相乗効果を示す。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３３】
高速液体クロマトグラフィー：放射標識された抗体の完全性を、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を用いて調べる。分析を、０.５ｍｌ／分の流速にて１００ｍＭ ＫＣｌ含有６７ｍＭリン酸ナトリウム、ｐＨ ６.８で平衡化した、Ｓｐｈｅｒｏｇｅｌ−ＴＳＫ Ｇ３０００ＳＷ（０.７５×３０ｃｍ）カラムと並行して、Ｓｐｈｅｒｏｇｅｌ−ＴＳＫ Ｇ２０００ＳＷカラム（０.７５×３０ｃｍ）を用いて行う。デュアル検出システムが存在する：２８０ｎｍにてＵＶ吸収および放射活性。０.５分間隔でフラクションを回収し、そして放射線量（radioactive content）をガンマシンチレーションカウンターで測定する。５％未満の凝集物を有する放射標識調製物をさらなる試験に使用する。
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３５】
結合した放射活性を、プレートから個々のウェルを切り、そしてａ−シンチレーションカウンターにおける放射活性を測定することにより検出する。ビーズ結合アッセイにおいて、ＢＳＭまたはＴＡＧ−７２を固相マトリックス（Ｒｅａｃｔｉ−Ｇｅｌ ＨＷ−６５Ｆ）と結合させ、そして０.０２％アジ化ナトリウムを有する１％ＢＳＡで貯蔵する。被覆ビーズを５００×ｇにて５分間遠心分離し、１％ＢＳＡ、ＰＢＳ中０.１％ Ｔｗｅｅｎ ２０で洗浄し、そして０.５ｍｌの結合バッファー（ＰＢＳ中１％ＢＳＡ）で再懸濁する。放射標識した試料を各チューブに添加し、そして完全な懸濁を確実にするため、それぞれ１０分間ボルテックスする。室温にて１時間インキュベーションした後、未結合の放射標識タンパク質を、遠心分離および洗浄を繰り返すこと（３回）により除去し、そしてペレットをガンマシンチレーションカウンター中で計数する。免疫反応性ＭＡｂのパーセントを、（結合した平均ｃｐｍ  −  バックグラウンド）と（添加した平均ｃｐｍ  −  バックグラウンド）の比として計算する。マトリックスに結合したＢＳＭに対する放射性ヨウ素化されたＢ７２.３およびＣＣ４９の結合は、一般に９０％より大きい。適当ならば、有意に低い免疫反応性を有する放射標識ＭＡｂを再試験し、そして放射標識を繰り返す。
【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４５】
化合物Ｉメシル酸塩での放射免疫療法の可能性：
化合物Ｉメシル酸塩−増強癌放射免疫療法治験を、化合物Ｉメシル酸塩がＲＩＴを改善するインビボメカニズムを決定し、そして投薬スケジュールを決定するためにマウスにおいて行う。集められたデータの概要を表１に示す。腫瘍をＳＱに移植し（５×１０６ ＬＳ１７４Ｔ細胞／マウス）、そして１０日間成長させる。マウスを４つの群に無作為化する：（１）無処置（ＮＴ）；（２）１３１Ｉ−Ｂ７２.３のみ；（３）化合物Ｉメシル酸塩のみおよび（４）１３１Ｉ−Ｂ７２.３＋化合物Ｉメシル酸塩。腫瘍サイズを３日ごとに測定し、そして腫瘍容積を算出する。データを、第３日目（この日は、化合物Ｉメシル酸塩の最初の用量が投与される日である。）の腫瘍サイズに対する腫瘍増殖としてプロットする。１３１Ｉ−Ｂ７２.３投与の日に、平均腫瘍サイズは２７０ｍｍ３である。０.２５ｍＣｉの１３１Ｉ−Ｂ７２.３投与の１週間後に、化合物Ｉメシル酸塩−ＲＩＴの組合せで処置されたマウスの腫瘍容積は、対照、すなわち未処置腫瘍の容積より５０％小さい。これと同一の時間に、ＲＩＴのみの処置は、約１０％の容積の減少をもたらした。化合物Ｉメシル酸塩単独での処置は効果がなかった。４倍時間（quadrupling time）（Ｔｑ）の変化を、対照について第１０日目に計算し（３,０００ｍｍ２を超える過剰腫瘍負荷による終了日）、そして残りのマウスについて１３１ＩＢ７２.３の後の第２８日目に計算する（表１）。
【手続補正１４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４９】
腫瘍増殖の有意な阻止が明らかとなる。両方のモデルにおいて、化合物Ｉメシル酸塩と組み合わせた０.２５ｍＣｉの１３１Ｉ−ＣＣ４９の単回ボーラス投与に対する腫瘍応答は、１３１Ｉ−ＣＣ４９が単独で使用される場合の約２倍よりも多い用量で得られる応答と同等である。
総合すれば、これらの結果は、化合物Ｉまたは医薬上許容されるその塩、たとえば化合物Ｉメシル酸塩が、放射免疫療法処置の効果を改善するという予期せぬ可能性を有することが示される。