【手続補正書】
【提出日】平成18年5月2日(2006.5.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】生物学的活性物質の細胞への運搬に適した複合体であって、
（ｉ）一般式（ＩＩ）又は（Ｉ）の脂質：
【化１】
2005530771.tif 000001
（式中、
Ｘ１及びＸ２は同一又は異なり、−Ｏ−ＣＨ２−、及び−ＯＣ（Ｏ）−から選択され；
Ｒ１及びＲ２は同一又は異なり、直鎖又は分岐、飽和又は不飽和Ｃ７〜Ｃ２４炭化水素基であり、それは非置換、又は水酸基、ハロゲン及びＯＲ’（ここで、Ｒ’はＣ１〜Ｃ６炭化水素基である）から選択される一つ又はそれ以上の置換基によって置換されており；
Ｒ５は−Ｎ＋（Ｒ３）２−Ｒ６（ここで、各Ｒ３は同一又は異なり、直鎖又は分岐、飽和又は不飽和Ｃ１〜Ｃ１０炭化水素基であり、それは非置換、又は水酸基、ハロゲン、ＯＲ’、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ−、−ＣＮ、−ＮＲ’Ｒ’’及び−Ｃ（Ｏ）Ｒ’’（ここで、Ｒ’及びＲ’’は同一又は異なり、Ｃ１〜Ｃ６炭化水素基である）から選択される一つ又はそれ以上の置換基によって置換されており、Ｒ６は、
（ａ）−［−Ａ−Ｙ−］ｎ−Ｒ４
（式中、
各Ｙは同一又は異なり、−Ｎ＋（Ｒ４）２−（ここで、各Ｒ４は同一又は異なり、直鎖又は分岐、飽和又は不飽和Ｃ１〜Ｃ１０炭化水素基であり、それは非置換、又は水酸基、ハロゲン、ＯＲ’、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ−、−ＣＮ、−ＮＲ’Ｒ’’及び−Ｃ（Ｏ）Ｒ’’（ここで、Ｒ’及びＲ’’は同一又は異なり、Ｃ１〜Ｃ６炭化水素基である）から選択される一つ又はそれ以上の置換基によって置換されている）、
各Ａは同一又は異なり、Ｃ１〜Ｃ２０アルキレン基であり、それは非置換、又は水酸基、ハロゲン、ＯＲ’、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ−、−ＣＮ、−ＮＲ’Ｒ’’及び−Ｃ（Ｏ）Ｒ’’（ここで、Ｒ’及びＲ’’は同一又は異なり、Ｃ１〜Ｃ６炭化水素基である）から選択される一つ又はそれ以上の置換基によって置換されており；及び、ｎは１から１０である。）：又は、
（ｂ）
−［−Ｂ−Ｏ−］ｍ−Ｑ
（式中、各Ｂは同一又は異なり、Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン基であり、それは非置換、又は水酸基、ハロゲン、ＯＲ’、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ−、−ＣＮ、−ＮＲ’Ｒ’’及び−Ｃ（Ｏ）Ｒ’’（ここで、Ｒ’及びＲ’’は同一又は異なり、Ｃ１〜Ｃ６炭化水素基である）から選択される一つ又はそれ以上の置換基によって置換されており；
ｍは１から１０であり；及び
Ｑは−Ｎ＋（Ｒ３）３、ＯＨ、ＯＲ’、ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、及びハロゲン（ここで、Ｒ３及びＲ’は上記で定義した通り）から選択される。））、
【化２】
2005530771.tif 000002
（式中、
Ｘ１及びＸ２は同一又は異なり、上記で定義したとおりであり；
Ｒ１及びＲ２は同一又は異なり、上記で定義したとおりであり；
各Ｒ３及び各Ｒ４は同一又は異なり、上記で定義したとおりである。）、
（ｉｉ）生物学的活性物質、及び
（ｉｉｉ）インテグリン結合ペプチド
を含む該複合体。
【請求項２】Ｒ１及びＲ２は同一又は異なり、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、又はレノレン酸の残基である、請求項１記載の複合体。
【請求項３】各Ｒ３及び各Ｒ４は同一又は異なり、直鎖又は分岐、飽和又は不飽和Ｃ１〜Ｃ４炭化水素基であり、それは非置換、又は水酸基又はＯＲ’（ここで、Ｒ’はＣ１〜Ｃ６アルキル基である）から選択される一つ又は二つの置換基によって置換されており、及び／又は；
ｎが１及び２から選択され；及び／又は、
ｍが１、２及び３から選択され；及び／又は、
Ａが非置換のＣ３、Ｃ４又はＣ５アルキレン基であり；及び／又は、
Ｂが非置換のＣ２、Ｃ３又はＣ４アルキレン基であり；及び／又は、
ＱがＮ＋（Ｒ３）３又はＯＨである、
請求項１又は２記載の複合体。
【請求項４】生物学的活性物質が核酸、ペプチド又は小分子である、上記請求項のいずれか一項に記載の複合体。
【請求項５】核酸がＤＮＡ又はＲＮＡである、請求項４記載の複合体。
【請求項６】インテグリン結合ペプチドが天然インテグリンリガンドのインテグリン結合ドメインの全部又は一部を含む、上記請求項のいずれか一項に記載の複合体。
【請求項７】ポリカチオン性成分を含み、及び／又は中性脂肪を含む、上記請求項のいずれか一項に記載の複合体。
【請求項８】（ｉ）請求項１記載の式（Ｉ）又は（ＩＩ）の脂質、（ｉｉ）生物学的活性物質、及び（ｉｉｉ）インテグリン結合ペプチドを予混合することから成る、請求項１記載の複合体の調製方法。
【請求項９】（ｉ）請求項１〜３の何れか一項記載の式（Ｉ）又は（ＩＩ）の脂質； 
（ｉｉ）インテグリン結合ペプチド；及び、 
（ｉｉｉ）（ａ）ポリカチオン性成分、及び／又は、（ｂ）中性脂肪、
を含む混合物。
【請求項１０】インテグリン結合ペプチドが請求項６記載で定義されたものである、請求項９記載の混合物。
【請求項１１】請求項９又は１０記載の混合物を生物学的活性物質と予混合することから成る、請求項１ないし７の何れか一項に記載の複合体の調製方法。
【請求項１２】インビトロ、又はエキソビボで細胞を請求項１ないし７の何れか一項に記載の複合体と接触させることから成る、細胞に生物学的活性物質をトランスフェクションさせる方法。
【請求項１３】請求項４又は５記載の複合体を、該複合体の核酸成分を発現させる条件下で請求項１２記載の方法を用いて細胞にトランスフェクションすることから成る、細胞内での核酸の発現方法。
【請求項１４】（ａ）請求項４又は５記載の複合体を、該複合体の核酸成分にコードされるポリペプチドを発現させる条件下で請求項１２記載の方法を用いて細胞にトランスフェクションし、；及び
（ｂ）発現したポリペプチドを回収することから成る、
ポリペプチドの調製方法。
【請求項１５】請求項１ないし７の何れか一項に記載の複合体、及び薬学的に許容し得るキャリア、希釈材、又は賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項１６】遺伝的欠陥又は修飾に基因するか又は関連する状態の治療又は予防；又は、アンチセンス核酸又はｉＲＮＡに基因する状態の治療又は予防；又は、ヒト又は動物へのワクチン接種のための薬剤。
【請求項１７】請求項１ないし３の何れか一項に記載の式（ＩＩ）又は（Ｉ）の脂質。
【請求項１８】１，４−ジ（トリメチルアンモニウム）−２，３−ジオレオイルオキシーブタン；ジイオダイド；
［２，３ジ−（オレイルオキシ）−プロピル］−（３−トリメチルーアンモニウムープロピル）−ジメチルーアンモニウム；ジブロマイド；
［２，３−ジ−（オレイルオキシ）−プロピル］−［２−（２−トリメチル−アンモニウム−エトキシ）−エチル］−ジメチル−アンモニウム；ジブロマイド；及び
［２，３−ジ−（オレイルオキシ）−プロピル］−｛２−［２−（２−ヒドロキシ−エトキシ）ーエトキシ］−エチル｝−ジメチル−アンモニウム；ジブロマイド、
から選択される請求項１７記載の脂質。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８１】
本発明の複合体のトランスフェクション効率は高いので、所望の蛋白質を産生することができる宿主細胞（所謂、「細胞工場」）の生産に特に適している。即ち、本発明の複合体での使用に適した核酸は、例えば、酵素のような産業上又は科学上有用な、例えば、薬剤又はワクチンとして治療上又は予防上使用することが出来る蛋白質のような医薬上有用な、例えば、ＥＬＩＳＡで使用する抗原のような診断上有用な、商業上有用な蛋白質をコードすることが出来る。