【手続補正書】
【提出日】平成17年10月26日(2005.10.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＧＰＲ４３の機能を調節する物質を同定する方法であって：
（ａ）短鎖脂肪酸とＧＰＲ４３ポリペプチドの結合を許容する条件下で候補調節因子の存在および不存在下でＧＰＲ４３ポリペプチドを短鎖脂肪酸と接触させる工程；および
（ｂ）ＧＰＲ４３ポリペプチドと短鎖脂肪酸の結合を測定する工程であって、候補調節因子存在下の結合が、候補調節因子不存在下の結合と比較して減少すれば、該候補調節因子がＧＰＲ４３の機能を調節する物質として同定される工程；
を含む方法。
【請求項２】
試料中で、ＧＰＲ４３の機能を調節する物質の存在を検出する方法であって：
（ａ）短鎖脂肪酸とＧＰＲ４３ポリペプチドの結合を許容する条件下で試料の存在および不存在下でＧＰＲ４３ポリペプチドを短鎖脂肪酸と接触させる工程；および
（ｂ）ＧＰＲ４３ポリペプチドと短鎖脂肪酸の結合を測定する工程であって、試料存在下の結合が、試料不存在下の結合と比較して減少すれば、該試料中にＧＰＲ４３の機能を調節する物質が存在することが示される工程；
含む方法。
【請求項３】
ＧＰＲ４３の機能を調節する物質を同定する方法であって：
（ａ）候補調節因子の存在および不存在下でＧＰＲ４３ポリペプチドを短鎖脂肪酸と接触させる工程；および
（ｂ）ＧＰＲ４３ポリペプチドのシグナル伝達活性を測定する工程であって、候補調節因子存在下の活性が、候補調節因子不存在下の活性と比較して変化すれば、該候補調節因子がＧＰＲ４３の機能を調節する物質として同定される工程；
を含む方法。
【請求項４】
ＧＰＲ４３の機能を調節する物質を同定する方法であって：
（ａ）ＧＰＲ４３ポリペプチドを候補調節因子と接触させる工程；
（ｂ）候補調節因子存在下でＧＰＲ４３ポリペプチドのシグナル伝達活性を測定する工程；および
（ｃ）候補調節因子存在下で測定される活性を、ＧＰＲ４３ポリペプチドがＥＣ５０の濃度の短鎖脂肪酸と接触している試料中で測定される活性と比較する工程であって、候補調節因子存在下で測定される活性量が、ＥＣ５０の濃度で存在する短鎖脂肪酸によって誘導される量の少なくとも２０％であれば、該候補調節因子がＧＰＲ４３の機能を調節する物質として同定される工程；
を含む方法。
【請求項５】
試料中で、ＧＰＲ４３の機能を調節する物質の存在を検出する方法であって：
（ａ）試料の存在および不存在下でＧＰＲ４３ポリペプチドを短鎖脂肪酸と接触させる工程；
（ｂ）ＧＰＲ４３ポリペプチドのシグナル伝達活性を測定する工程；および
（ｃ）試料不存在下でＧＰＲ４３および短鎖脂肪酸を含有する反応において測定される活性量を、ＧＰＲ４３、短鎖脂肪酸および試料を含有する反応において測定される活性量と比較する工程であって、試料存在下の活性が、試料不存在下の活性と比較して変化すれば、該試料中にＧＰＲ４３の機能を調節する物質が存在することが示される工程；
を含む方法。
【請求項６】
試料中で、ＧＰＲ４３の機能を調節する物質の存在を検出する方法であって：
（ａ）ＧＰＲ４３ポリペプチドを試料と接触させる工程；
（ｂ）試料存在下でＧＰＲ４３ポリペプチドのシグナル伝達活性を測定する工程；および
（ｃ）試料存在下で測定される活性を、ＧＰＲ４３ポリペプチドがＥＣ５０の濃度で存在する短鎖脂肪酸と接触している反応中で測定される活性と比較する工程であって、試料存在下で測定される活性量が、ＥＣ５０の濃度で存在する短鎖脂肪酸によって誘導される量の少なくとも２０％であれば、ＧＰＲ４３の機能を調節する物質が検出される工程；
を含む方法。
【請求項７】
短鎖脂肪酸が検出可能に標識されている、請求項１から６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
短鎖脂肪酸が、放射性同位体、フルオロフォア、蛍光消光剤、酵素、およびアフィニティータグからなる群から選択される部分で検出可能に標識されている、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
接触がＧＰＲ４３ポリペプチド発現細胞内またはその表面で行われる、請求項１から８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
接触が合成リポソーム内またはその表面で行われる、請求項１から８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
接触がＧＰＲ４３ポリペプチドを含有するウイルス誘導性出芽膜内またはその表面で行われる、請求項１から８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
接触がＧＰＲ４３ポリペプチド発現細胞由来の膜画分を用いて行われる、請求項１から１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
測定が、標識置換、表面プラスモン共鳴、蛍光共鳴エネルギー転移、蛍光消光、および蛍光偏光からなる群から選択される方法を用いて行われる、請求項１、２および７から１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
物質が、ペプチド、ポリペプチド、抗体またはその抗原結合断片、脂質、炭水化物、核酸、および有機小分子からなる群から選択される、請求項１から１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
ＧＰＲ４３ポリペプチドのシグナル伝達活性を測定する工程がセカンドメッセンジャーのレベル変化を検出することを含む、請求項３から１２および１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
シグナル伝達活性を測定する工程が、グアニンヌクレオチド結合または交換、アデニル酸シクラーゼ活性、ｃＡＭＰ、プロテインキナーゼＣ活性、ホスファチジルイノシトール分解、ジアシルグリセロール、イノシトール三リン酸、細胞内カルシウム、アラキノイド酸、ＭＡＰキナーゼ活性、チロシンキナーゼ活性、またはレポーター遺伝子発現の測定を含む、請求項３から１２および１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
シグナル伝達活性の測定がエクオリンに基づくアッセイの使用を含む、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
細胞内のＧＰＲ４３ポリペプチドの活性を調節する方法であって：
ＧＰＲ４３ポリペプチドの活性を調節する物質を細胞に供給する工程であって、ＧＰＲ４３の活性が調節される工程；
を含む方法。
【請求項１９】
ＧＰＲ４３シグナル伝達の調節不全を特徴とする疾患または障害を診断する方法であって：
（ａ）組織試料から核酸を単離する工程；
（ｂ）核酸を鋳型として用いてＧＰＲ４３ポリヌクレオチドを増幅する工程；および
（ｃ）工程（ｂ）で生産される増幅ＧＰＲ４３ポリヌクレオチドの量を標準と比較する工程であって、標準と比較して増幅ＧＰＲ４３ポリヌクレオチドの量に差異があれば、ＧＰＲ４３の調節不全を特徴とする疾患または障害が診断される工程；
を含む方法。
【請求項２０】
ＧＰＲ４３シグナル伝達の調節不全を特徴とする疾患または障害を診断する方法であって：
（ａ）組織試料から核酸を単離する工程；
（ｂ）核酸を鋳型として用いてＧＰＲ４３ポリヌクレオチドを増幅する工程；および
（ｃ）工程（ｂ）で生産される増幅ＧＰＲ４３ポリヌクレオチドの配列を標準と比較する工程であって、標準と比較して配列に差異があれば、ＧＰＲ４３の調節不全を特徴とする疾患または障害が診断される工程；
を含む方法。
【請求項２１】
標準が配列番号１である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
ＧＰＲ４３の調節不全を特徴とする疾患の存在を検出する方法であって：
（ａ）組織試料をＧＰＲ４３に特異的な抗体と接触させる工程；
（ｂ）組織試料に対する抗体の結合を検出する工程；および
（ｃ）工程（ｂ）で検出される結合を標準と比較する工程であって、標準と比較して結合に差異があれば、ＧＰＲ４３の調節不全を特徴とする疾患の存在が示される工程；
を含む方法。
【請求項２３】
ＧＰＲ４３の調節不全を特徴とする疾患の存在を検出する方法であって：
（ａ）ＰＭＮ細胞の膜に存在するＧＰＲ４３ポリペプチドを短鎖脂肪酸と接触させる工程；
（ｂ）ＧＰＲ４３ポリペプチドと短鎖脂肪酸の結合を測定する工程；および
（ｃ）工程（ｂ）で検出される結合を標準と比較する工程であって、標準と比較して結合に差異があれば、ＧＰＲ４３の調節不全を特徴とする疾患の存在が示される工程；
を含む方法。
【請求項２４】
ＧＰＲ４３の調節不全を特徴とする疾患の存在を検出する方法であって：
（ａ）ＰＭＮ細胞の膜に存在するＧＰＲ４３ポリペプチドを短鎖脂肪酸と接触させる工程；
（ｂ）ＧＰＲ４３ポリペプチドのシグナル伝達活性を測定する工程；および
（ｃ）工程（ｂ）で検出されるシグナル伝達活性を標準と比較する工程であって、標準と比較して結合に差異があれば、ＧＰＲ４３の調節不全を特徴とする疾患の存在が示される工程；
を含む方法。
【請求項２５】
単一のＧＰＲ４３ポリペプチドおよび単一の短鎖脂肪酸またはその塩を含む組成物。
【請求項２６】
単一のＧＰＲ４３ポリペプチドおよび単一の短鎖脂肪酸またはその塩を含むキット。
【請求項２７】
単一の短鎖脂肪酸またはその塩および、ＧＰＲ４３ポリペプチドを含む細胞膜画分を含むキット。
【請求項２８】
ＧＰＲ４３の活性を調節する物質をスクリーニングするためのキットであって、ＧＰＲ４３ポリペプチドをコードする単一のポリヌクレオチドおよび単一の短鎖脂肪酸塩を含むキット。
【請求項２９】
ＧＰＲ４３の活性を調節する物質をスクリーニングするためのキットであって、単一の短鎖脂肪酸塩および、ＧＰＲ４３ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドで形質転換された細胞を含むキット。
【請求項３０】
ＧＰＲ４３シグナル伝達の調節不全を特徴とする疾患または障害を診断するためのキットであって、ＧＰＲ４３ポリペプチドをコードする単一のポリヌクレオチド、標準およびそれらのためのパッケージ材料を含むキット。
【請求項３１】
標準がＧＰＲ４３の調節不全を特徴とする疾患または障害を有しない個体から採取される臨床試料を含む、請求項３０に記載のキット。
【請求項３２】
ＧＰＲ４３シグナル伝達の調節不全を特徴とする疾患または障害を診断するためのキットであって、ＧＰＲ４３ポリペプチドを含む細胞膜画分、標準およびそれらのためのパッケージ材料を含むキット。
【請求項３３】
標準がその疾患または障害を患わない個体由来の試料を含む、請求項３２に記載のキット。
【請求項３４】
ＧＰＲ４３シグナル伝達の調節不全を特徴とする疾患または障害を診断するためのキットであって、ＧＰＲ４３ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドで形質転換された細胞、標準およびそれらのためのパッケージ材料を含むキット。
【請求項３５】
単一の短鎖脂肪酸塩をさらに含む、請求項３０〜３４のいずれか１項に記載のキット。
【請求項３６】
短鎖脂肪酸またはその塩が線状もしくは分岐状である、請求項２６〜２９および３５のいずれか１項に記載のキット。
【請求項３７】
短鎖脂肪酸の１つまたはそれ以上の炭素が非炭素含有置換基で置換されている、請求項２６〜２９および３５のいずれか１項に記載のキット。
【請求項３８】
短鎖脂肪酸塩が、酪酸ナトリウム、プロピオン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、吉草酸ナトリウムおよびギ酸ナトリウムからなる群から選択される、請求項２６〜２９および３５のいずれか１項に記載のキット。
【請求項３９】
標準がその疾患または障害を患わない個体由来の試料を含む、請求項３４〜３８のいずれか１項に記載のキット。
【請求項４０】
哺乳類のＰＭＮ走化性を調節する方法であって、ＧＰＲ４３を保持しているＰＭＮ細胞を、ＰＭＮ走化性を調節するのに十分なＧＰＲ４３シグナル伝達活性の調節因子と接触させることを含む方法。
【請求項４１】
ＰＭＮ細胞をＧＰＲ４３シグナル伝達活性の阻害剤と接触させることによってＰＭＮ走化性を減少させる、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
ＰＭＮ細胞をＧＰＲ４３シグナル伝達活性の作用薬と接触させることによってＰＭＮ走化性を増大させる、請求項４０に記載の方法。
【請求項４３】
ＰＭＮ細胞をＧＰＲ４３シグナル伝達活性の拮抗薬と接触させることによってＰＭＮ走化性を減少させる、請求項４０に記載の方法。
【請求項４４】
ＰＭＮ走化性を調節する物質を同定する方法であって：
（ａ）候補物質の存在および不存在下でＧＰＲ４３ポリペプチドを短鎖脂肪酸と接触させる工程；および
（ｂ）ＧＰＲ４３ポリペプチドのシグナル伝達活性を測定する工程であって、候補物質存在下のＧＰＲ４３のシグナル伝達活性が、候補物質不存在下のシグナル伝達活性と比較して増大または減少すれば、該候補物質がＰＭＮ走化性を調節する物質として同定される工程；
を含む方法。
【請求項４５】
ＰＭＮ走化性を調節する物質を同定する方法であって：
（ａ）短鎖脂肪酸とＧＰＲ４３ポリペプチドの結合を許容する条件下で候補物質の存在および不存在下でＧＰＲ４３ポリペプチドを短鎖脂肪酸と接触させる工程；および
（ｂ）ＧＰＲ４３ポリペプチドと短鎖脂肪酸の結合を測定する工程であって、候補物質存在下の結合が、候補物質不存在下の結合と比較して増大または減少すれば、該候補物質がＰＭＮ走化性を調節する物質として同定される工程；
を含む方法。
【請求項４６】
試料中で、ＰＭＮ走化性を調節する物質の存在を検出する方法であって：
（ａ）試料の存在および不存在下でＧＰＲ４３ポリペプチドを短鎖脂肪酸と接触させる工程；および
（ｂ）ＧＰＲ４３ポリペプチドのシグナル伝達活性を測定する工程であって、試料存在下のＧＰＲ４３のシグナル伝達活性が、試料不存在下のシグナル伝達活性と比較して増大または減少すれば、この候補物質がＰＭＮ走化性を調節する物質として同定される工程；
を含む方法。
【請求項４７】
試料中で、ＰＭＮ走化性を調節する物質の存在を検出する方法であって：
（ａ）短鎖脂肪酸とＧＰＲ４３ポリペプチドの結合を許容する条件下で試料の存在および不存在下でＧＰＲ４３ポリペプチドを短鎖脂肪酸と接触させる工程；および
（ｂ）ＧＰＲ４３ポリペプチドと短鎖脂肪酸の結合を測定する工程であって、試料存在下の結合が、試料不存在下の結合と比較して増大または減少すれば、この候補物質がＰＭＮ走化性を調節する物質として同定される工程；
を含む方法。
【請求項４８】
ＰＭＮ走化性関連疾患処置用の物質を同定する方法であって：
（ａ）候補物質の存在および不存在下でＧＰＲ４３ポリペプチドを短鎖脂肪酸と接触させる工程；および
（ｂ）ＧＰＲ４３ポリペプチドのシグナル伝達活性を測定する工程であって、候補物質存在下のＧＰＲ４３のシグナル伝達活性が、候補物質不存在下のシグナル伝達活性と比較して増大または減少すれば、該候補物質がＰＭＮ走化性関連疾患処置用の物質として同定される工程；
を含む方法。
【請求項４９】
ＰＭＮ走化性関連疾患処置用の物質を同定する方法であって：
（ａ）短鎖脂肪酸とＧＰＲ４３ポリペプチドの結合を許容する条件下で候補物質の存在および不存在下でＧＰＲ４３ポリペプチドを短鎖脂肪酸と接触させる工程；および
（ｂ）ＧＰＲ４３ポリペプチドと短鎖脂肪酸の結合を測定する工程であって、候補物質存在下の結合が、候補物質不存在下の結合と比較して増大または減少すれば、該候補物質がＰＭＮ走化性関連疾患処置用に同定される工程；
を含む方法。
【請求項５０】
ＧＰＲ４３受容体がＰＭＮ細胞の細胞膜に存在する、請求項４４〜４９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５１】
短鎖脂肪酸が検出可能に標識されている、請求項４４〜５０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５２】
短鎖脂肪酸が、放射性同位体、フルオロフォア、蛍光消光剤、酵素、およびアフィニティータグからなる群から選択される部分で検出可能に標識されている、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
請求項１から１７のいずれか１項に記載の方法によって、同定されるか、あるいは試料中で検出される、ＧＰＲ４３活性を調節する物質。
【請求項５４】
請求項４４〜５２のいずれか１項に記載の方法によって、同定されるか、あるいは試料中で検出される、ＰＭＮ走化性を調節する物質。
【請求項５５】
ＧＰＲ４３活性を調節するための、請求項５３に記載の物質の使用。
【請求項５６】
ＰＭＮ走化性を調節するための、請求項５４に記載の物質の使用。
【請求項５７】
ＧＰＲ４３関連疾患処置用の医薬品を製造するための、またはＧＰＲ４３活性調節用のキットを製造するための、請求項５３に記載の物質の使用。
【請求項５８】
ＰＭＮ走化性関連疾患処置用の医薬品を製造するための、またはＰＭＮ走化性調節用のキットを製造するための、請求項５４に記載の物質の使用。
【請求項５９】
適当な製薬的担体または希釈剤および必要量の請求項５３または５４に記載の物質を含む医薬組成物。
【請求項６０】
ベシクルまたは、投与対象の患者の免疫応答を調節可能なアジュバントをさらに含む、請求項５９に記載の医薬組成物。
【請求項６１】
ＧＰＲ４３関連疾患処置用の医薬品を製造するための、またはＧＰＣＲ４３調節用のキットを製造するための、請求項５９または６０に記載の医薬組成物の使用。
【請求項６２】
ＰＭＮ走化性関連疾患処置用の医薬品を製造するための、またはＰＭＮ走化性調節用のキットを製造するための、請求項５９または６０に記載の医薬組成物の使用。
【請求項６３】
インビボおよび／またはインビトロのＧＰＲ４３活性もしくはＰＭＮ走化性を調節するための短鎖脂肪酸の使用。
【請求項６４】
ＧＰＲ４３をコードするポリヌクレオチドの部分欠失または全欠失を含む非ヒト哺乳類を検証する際の短鎖脂肪酸の使用。
【請求項６５】
ＧＰＲ４３をコードするポリヌクレオチドを過剰発現している非ヒト哺乳類を検証する際の短鎖脂肪酸の使用。
【請求項６６】
短鎖脂肪酸またはその塩が線状または分岐状である、請求項１〜１７、２３、２４および４４〜５２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６７】
短鎖脂肪酸またはその塩の１つまたはそれ以上の非カルボニル炭素が非炭素含有置換基で置換されている、請求項１〜１７、２３、２４および４４〜５２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６８】
短鎖脂肪酸塩が、酪酸ナトリウム、プロピオン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、吉草酸ナトリウムおよびギ酸ナトリウムからなる群から選択される、請求項１〜１７、２３、２４および４４〜５２のいずれか１項に記載の方法。