【手続補正書】
【提出日】平成17年1月7日(2005.1.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
核酸分子または該核酸分子を発現する組換えベクターを含んでなる細胞であって、該核酸分子が、
a) 10〜600ヌクレオチド長であり、細胞内で発現された標的プレmRNAに該核酸分子の結合をターゲットする1以上の標的結合ドメイン；
b) 分岐点、ピリミジントラクトおよび3’スプライス受容部位を含む3’スプライス領域； 
c) 3’スプライス領域を標的結合ドメインから分離するスペーサー領域；および
d) 標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列；
を含んでなり、該核酸分子は細胞内の核スプライシング成分により認識されるものである、上記細胞。
【請求項２】
核酸分子または該核酸分子を発現する組換えベクターを含んでなる細胞であって、該核酸分子が、
a) 10〜600ヌクレオチド長であり、細胞内で発現された標的プレmRNAに該核酸分子の結合をターゲットする1以上の標的結合ドメイン；
b) 5’スプライス部位；
c) 5’スプライス部位を標的結合ドメインから分離するスペーサー領域；および
d) 標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列；
を含んでなり、該核酸分子は細胞内の核スプライシング成分により認識されるものである、上記細胞。
【請求項３】
前記核酸分子が5’供与部位をさらに含んでなる、請求項１に記載の細胞。
【請求項４】
前記核酸分子が3’スプライス領域の1以上の側に結合する1以上の相補配列を含むセーフティーヌクレオチド配列をさらに含んでなる、請求項１に記載の細胞。
【請求項５】
前記核酸分子が5’スプライス領域の1以上の側に結合する1以上の相補配列を含むセーフティーヌクレオチド配列をさらに含んでなる、請求項２に記載の細胞。
【請求項６】
前記核酸分子が翻訳可能なタンパク質産物をコードする配列をさらに含んでなる、請求項１に記載の細胞。
【請求項７】
前記核酸分子が翻訳停止コドンを含むヌクレオチド配列をさらに含んでなる、請求項１または３に記載の細胞。
【請求項８】
細胞内でキメラRNA分子を生成する方法であって、細胞内で発現された標的プレmRNAと、核スプライシング成分により認識される核酸分子とを、該核酸分子の一部が標的プレmRNAの一部にトランススプライシングされて細胞内でキメラRNAを形成する条件下で接触させることを含んでなり、該核酸分子が、
a) 10〜600ヌクレオチド長であり、細胞内で発現された標的プレmRNAに該核酸分子の結合をターゲットする1以上の標的結合ドメイン；
b) 分岐点、ピリミジントラクトおよび3’スプライス受容部位を含む3’スプライス領域； 
c) 3’スプライス領域を標的結合ドメインから分離するスペーサー領域；および
d) 標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列；
を含んでなる、上記方法。
【請求項９】
細胞内でキメラRNA分子を生成する方法であって、細胞内で発現された標的プレmRNAと、核スプライシング成分により認識される核酸分子とを接触させることを含んでなり、該核酸分子が、
a) 10〜600ヌクレオチド長であり、細胞内で発現された標的プレmRNAに該核酸分子の結合をターゲットする1以上の標的結合ドメイン；
b) 5’スプライス部位；
c) 5’スプライス部位を標的結合ドメインから分離するスペーサー領域；および
d) 標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列；
を含んでなり、該核酸分子は細胞内の核スプライシング成分により認識されるものである、上記方法。
【請求項１０】
前記核酸分子が5’供与部位をさらに含んでなる、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
前記キメラRNA分子が翻訳可能なタンパク質をコードする配列を含んでなる、請求項８に記載の方法。
【請求項１２】
前記キメラRNA分子が毒素をコードする配列を含んでなる、請求項８に記載の方法。
【請求項１３】
a) 10〜600ヌクレオチド長であり、細胞内で発現された標的プレmRNAに核酸分子の結合をターゲットする1以上の標的結合ドメイン；
b) 分岐点、ピリミジントラクトおよび3’スプライス受容部位を含む3’スプライス領域； 
c) 3’スプライス領域を標的結合ドメインから分離するスペーサー領域；
d) 3’スプライス領域の片側または両側に結合する1以上の相補配列を含むセーフティー配列；および
e) 標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列；
を含んでなり、細胞内で核スプライシング成分により認識される、核酸分子。
【請求項１４】
a) 10〜600ヌクレオチド長であり、細胞内で発現された標的プレmRNAに核酸分子の結合をターゲットする1以上の標的結合ドメイン；
b) 5’スプライス部位；
c) 5’スプライス領域を標的結合ドメインから分離するスペーサー領域；
d) 5’スプライス領域の片側または両側に結合する1以上の相補配列を含むセーフティー配列；および
e) 標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列；
を含んでなり、細胞内で核スプライシング成分により認識される、核酸分子。
【請求項１５】
前記核酸分子が5’供与部位をさらに含んでなる、請求項１３に記載の核酸分子。
【請求項１６】
前記核酸分子が翻訳可能なタンパク質産物をコードする配列をさらに含んでなる、請求項１３または１４に記載の核酸分子。
【請求項１７】
前記翻訳可能なタンパク質産物が毒素である、請求項１３または１４に記載の核酸分子。
【請求項１８】
核酸分子を発現する発現ベクターであって、該核酸分子が、
a) 10〜600ヌクレオチド長であり、細胞内で発現された標的プレmRNAに該核酸分子の結合をターゲットする1以上の標的結合ドメイン；
b) 分岐点、ピリミジントラクトおよび3’スプライス受容部位を含む3’スプライス領域； 
c) 3’スプライス領域を標的結合ドメインから分離するスペーサー領域；および
d) 標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列；
を含んでなり、該核酸分子は細胞内の核スプライシング成分により認識されるものである、上記発現ベクター。
【請求項１９】
核酸分子を発現する真核生物発現ベクターであって、該核酸分子が、
a) 10〜600ヌクレオチド長であり、細胞内で発現された標的プレmRNAに該核酸分子の結合をターゲットする1以上の標的結合ドメイン；
b) 5’スプライス部位；
c) 5’スプライス領域を標的結合ドメインから分離するスペーサー領域；および
d) 標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列；
を含んでなり、該核酸分子は細胞内の核スプライシング成分により認識されるものである、上記真核生物発現ベクター。
【請求項２０】
前記核酸分子が5’供与部位をさらに含んでなる、請求項１８に記載のベクター。
【請求項２１】
前記スプライス部位の片側または両側に結合する1以上の相補配列を含むセーフティー配列をさらに含んでなる、請求項１８または１９に記載の発現ベクター。
【請求項２２】
核酸分子を含んでなる細胞であって、該核酸分子が、
a) 分岐点、ピリミジントラクトおよび3’スプライス受容部位を含む3’スプライス領域；および
b) 標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列；
を含んでなり、該核酸分子は細胞内の核スプライシング成分により認識されるものである、上記細胞。
【請求項２３】
核酸分子を含んでなる細胞であって、該核酸分子が、
a) 5’スプライス部位；
b) 5’スプライス部位を標的結合ドメインから分離するスペーサー領域；および
c) 標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列；
を含んでなり、該核酸分子が細胞内の核スプライシング成分により認識されるものである、上記細胞。
【請求項２４】
前記核酸分子が5’供与部位をさらに含んでなる、請求項２２に記載の細胞。
【請求項２５】
標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列がヌクレオチド配列タグを含んでなる、請求項２２または２３に記載の細胞。
【請求項２６】
核酸分子を発現する組換えベクターを含んでなる細胞であって、該核酸分子が、
a) 分岐点、ピリミジントラクトおよび3’スプライス受容部位を含む3’スプライス領域；および
b) 標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列；
を含んでなり、該核酸分子は細胞内で核スプライシング成分により認識されるものである、上記細胞。
【請求項２７】
核酸分子を発現する組換えベクターを含んでなる細胞であって、該核酸分子が、
a) 5’スプライス部位；および
b) 標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列；
を含んでなり、該核酸分子は細胞内で核スプライシング成分により認識されるものである、上記細胞。
【請求項２８】
前記核酸分子が5’供与部位をさらに含んでなる、請求項２６に記載の細胞。
【請求項２９】
細胞内でキメラRNA分子を作製する方法であって、細胞内で発現された標的プレmRNAと、核スプライシング成分により認識される核酸分子とを、該核酸分子の一部が細胞内で標的プレmRNAの一部にトランススプライシングされてキメラRNAを形成する条件下で接触させることを含んでなり、該核酸分子が、
a) 分岐点、ピリミジントラクトおよび3’スプライス受容部位を含む3’スプライス領域；および
b) 標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列；
を含むものである、上記方法。
【請求項３０】
細胞内でキメラRNA分子を作製する方法であって、細胞内で発現された標的プレmRNAと、核スプライシング成分により認識される核酸分子とを、接触させることを含んでなり、該核酸分子が、
a) 5’スプライス部位；および
b) 標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列；
を含んでなり、該核酸分子は細胞内で核スプライシング成分により認識されるものである、上記方法。
【請求項３１】
前記核酸分子が5’供与部位をさらに含んでなる、請求項２９に記載の方法。
【請求項３２】
前記キメラRNA分子がヌクレオチド配列タグをさらに含んでなる、請求項２９に記載の方法。
【請求項３３】
核酸分子を発現する真核生物発現ベクターであって、該核酸分子が、
a) 分岐点、ピリミジントラクトおよび3’スプライス受容部位を含む3’スプライス領域；および
b) 標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列；
を含んでなり、該核酸分子は細胞内で核スプライシング成分により認識されるものである、上記発現ベクター。
【請求項３４】
核酸分子を発現する真核生物発現ベクターであって、該核酸分子が、
a) 5’スプライス部位；および
b) 標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列；
を含んでなり、該核酸分子は細胞内で核スプライシング成分により認識されるものである、上記発現ベクター。
【請求項３５】
前記核酸分子が5’供与部位をさらに含んでなる、請求項３３に記載のベクター。
【請求項３６】
核酸分子を発現する組換え発現ベクターを含んでなる発現ライブラリーであって、該核酸分子が、
a) 分岐点、ピリミジントラクトおよび3’スプライス受容部位を含む3’スプライス領域；および
b) 標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列;
を含んでなり、該核酸分子は細胞内で核スプライシング成分により認識されるものである、上記発現ライブラリー。
【請求項３７】
核酸分子を発現する組換え発現ベクターを含んでなる発現ライブラリーであって、該核酸分子が、
a) 5’スプライス部位；および
b) 標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列;
を含んでなり、該核酸分子は細胞内で核スプライシング成分により認識されるものである、上記発現ライブラリー。
【請求項３８】
前記核酸分子が5’供与部位をさらに含んでなる、請求項３６に記載の発現ライブラリー。
【請求項３９】
標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列がヌクレオチド配列タグを含んでなる、請求項３６または３７に記載の発現ライブラリー。
【請求項４０】
プレmRNA分子におけるエキソン-イントロン境界をマッピングする方法であって、
(i) 核酸分子と標的プレmRNA分子とを、該核酸分子の一部が標的プレmRNAの一部にトランススプライシングされてキメラmRNAを形成する条件下で接触させ；
(ii) 該キメラmRNA分子を増幅し；
(iii) 増幅した分子を選択的に精製し；さらに
(iv) 増幅した分子のヌクレオチド配列を決定し、それによりイントロン-エキソン境界を同定する;
ことを含んでなる、上記方法。
【請求項４１】
a) 標的プレmRNAにプレトランススプライシング分子の結合をターゲットする2以上の標的結合ドメイン；
b) 分岐点、ピリミジントラクトおよび3’スプライス受容部位を含む3’スプライス領域ならびに5’スプライス供与部位；
c) 3’スプライス領域および5’スプライス供与部位を標的結合ドメインから分離するスペーサー領域；および
d) 標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列；
を含んでなり、細胞内で核スプライシング成分により認識される、核酸分子。
【請求項４２】
前記スペーサー領域が3’スプライス領域および5’スプライス供与部位を標的結合ドメインから離す、請求項４１に記載の核酸分子。
【請求項４３】
翻訳可能なタンパク質産物をコードする配列をさらに含んでなる、請求項４１に記載の核酸分子。
【請求項４４】
翻訳可能なタンパク質産物が毒素である、請求項４３に記載の核酸分子。
【請求項４５】
翻訳停止コドンを含む配列をさらに含んでなる、請求項４１に記載の核酸分子。
【請求項４６】
標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列が嚢胞性繊維症膜貫通コンダクタンス調節タンパク質をコードするヌクレオチド配列を含んでなる、請求項４１に記載の分子。
【請求項４７】
嚢胞性繊維症膜貫通コンダクタンス調節タンパク質をコードするヌクレオチド配列が嚢胞性繊維症膜貫通調節タンパク質コンダクタンス遺伝子のエキソン10を含んでなる、請求項４６に記載の分子。
【請求項４８】
ヌクレオチド配列を発現する組換え発現ベクターであって、該ヌクレオチド配列が、
a) 標的プレmRNAにプレトランススプライシング分子の結合をターゲットする2以上の標的結合ドメイン；
b) 分岐点、ピリミジントラクトおよび3’スプライス受容部位を含む3’スプライス領域ならびに5’スプライス供与部位；
c) 3’スプライス領域および5’スプライス供与部位を標的結合ドメインから離すスペーサー領域；および
d) 標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列；
を含んでなり、該核酸分子は細胞内で核スプライシング成分により認識されるものである、上記組換え発現ベクター。
【請求項４９】
プレトランススプライシング分子分岐点、ピリミジントラクト、3’スプライス部位または5’スプライス部位の1以上の側に結合する1以上の相補配列を含むセーフティーヌクレオチド配列をさらに含んでなる、請求項４１または４８に記載の分子。
【請求項５０】
核酸分子または該核酸分子を発現する組換え発現ベクターを含んでなる細胞であって、該核酸分子が、
a) 標的プレmRNAにプレトランススプライシング分子の結合をターゲットする2以上の標的結合ドメイン；
b) 分岐点、ピリミジントラクトおよび3’スプライス受容部位を含む3’スプライス領域ならびに5’スプライス供与部位；
c) 3’スプライス領域および5’スプライス供与部位を標的結合ドメインから離すスペーサー領域；および
d) 標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列；
を含んでなり、該核酸分子は細胞内で核スプライシング成分により認識されるものである、上記細胞。
【請求項５１】
前記核酸分子のスペーサー領域が3’スプライス領域および5’スプライス供与部位を標的結合ドメインから離す、請求項５０に記載の細胞。
【請求項５２】
前記核酸分子が翻訳可能なタンパク質産物をコードする配列をさらに含んでなる、請求項５０に記載の細胞。
【請求項５３】
翻訳可能なタンパク質が毒素である、請求項５２に記載の細胞。
【請求項５４】
前記核酸分子が翻訳停止コドンを含むヌクレオチド配列をさらに含んでなる、請求項５０に記載の細胞。
【請求項５５】
標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列が嚢胞性繊維症膜貫通コンダクタンス調節タンパク質をコードするヌクレオチド配列を含んでなる、請求項５０に記載の細胞。
【請求項５６】
嚢胞性繊維症膜貫通コンダクタンス調節タンパク質をコードするヌクレオチド配列が嚢胞性繊維症膜貫通コンダクタンス調節タンパク質遺伝子のエキソン10を含んでなる、請求項５５に記載の細胞。
【請求項５７】
プレトランススプライシング分子分岐点、ピリミジントラクト、3’スプライス部位または5’スプライス部位の1以上の側に結合する1以上の相補配列を含むセーフティーヌクレオチド配列をさらに含んでなる、請求項４１または４８に記載の核酸分子を含む細胞。
【請求項５８】
プレトランススプライシング分子と標的プレmRNAとを、二重トランススプライシング反応によりプレトランススプライシング分子の一部が標的プレmRNAの一部にトランススプライシングされてキメラmRNAを形成する条件下で接触させることを含んでなる、キメラmRNA分子の作製方法。
【請求項５９】
プレトランススプライシング分子が嚢胞性繊維症膜貫通コンダクタンス調節タンパク質をコードするヌクレオチド配列を含んでなる、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
プレトランススプライシング分子が嚢胞性繊維症膜貫通コンダクタンス調節タンパク質遺伝子のエキソン10を含んでなる、請求項５８に記載の方法。
【請求項６１】
キメラmRNA分子を含む宿主細胞を提供する方法であって、
プレトランススプライシング分子を、標的プレmRNAを発現する宿主細胞に導入することを含んでなり、その際、二重トランススプライシング反応により、プレトランススプライシング分子の一部が標的プレmRNAの一部にトランススプライシングされてキメラmRNAを形成する条件下で、プレトランススプライシング分子が標的プレmRNAと結合する、上記方法。
【請求項６２】
前記宿主細胞がヒト細胞である、請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】
プレトランススプライシング分子が、宿主細胞において欠陥があるかまたは欠失しているタンパク質をコードするヌクレオチド配列を含んでなる、請求項６１に記載の方法。
【請求項６４】
プレトランススプライシング分子が嚢胞性繊維症膜貫通調節タンパク質の断片をコードするヌクレオチド配列を含んでなる、請求項６１に記載の方法。
【請求項６５】
請求項１に記載の核酸分子と製薬上許容される担体を含んでなる、医薬組成物。
【請求項６６】
a) 標的プレmRNAにプレトランススプライシング分子の結合をターゲットする1以上の標的結合ドメイン；
b) 5’スプライス供与部位；
c) 5’スプライス供与部位を標的結合ドメインから離すスペーサー領域；および
d) 標的プレmRNAにトランススプライシングされる遺伝子の5’末端を含むヌクレオチド配列;
を含んでなり、細胞内で核スプライシング成分により認識される、核酸分子。
【請求項６７】
標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列が翻訳可能なタンパク質産物をコードする、請求項６６に記載の核酸分子。
【請求項６８】
翻訳可能なタンパク質産物が毒素である、請求項６７に記載の核酸分子。
【請求項６９】
標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列が翻訳停止コドンを含んでなる、請求項６６に記載の核酸分子。
【請求項７０】
標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列が嚢胞性繊維症膜貫通コンダクタンス調節タンパク質をコードするヌクレオチド配列を含んでなる、請求項６６に記載の核酸分子。
【請求項７１】
嚢胞性繊維症膜貫通コンダクタンス調節タンパク質をコードするヌクレオチド配列が嚢胞性繊維症膜貫通調節タンパク質遺伝子のエキソン1〜10を含んでなる、請求項７０に記載の核酸分子。
【請求項７２】
核酸分子を発現する組換え発現ベクターであって、該核酸分子が、
a) 標的プレmRNAにプレトランススプライシング分子の結合をターゲットする1以上の標的結合ドメイン；
b) 5’スプライス供与部位；
c) 5’スプライス供与部位を標的結合ドメインから離すスペーサー領域；および
d) 標的プレmRNAにトランススプライシングされる遺伝子の5’末端を含むヌクレオチド配列；
を含んでなり、該核酸分子は細胞内で核スプライシング成分により認識されるものである、上記発現ベクター。
【請求項７３】
プレトランススプライシング分子分岐点、ピリミジントラクト、または3’スプライス部位の1以上の側に結合する1以上の相補配列を含むセーフティーヌクレオチド配列をさらに含んでなる、請求項６６または６９に記載の分子。
【請求項７４】
プレトランススプライシング分子分岐点、ピリミジントラクト、または3’スプライス部位の1以上の側に結合する1以上の相補配列を含むセーフティーヌクレオチド配列をさらに含んでなる、請求項７２に記載の組換え発現ベクター。
【請求項７５】
核酸分子または該核酸分子を発現する組換え発現ベクターを含んでなる細胞であって、該核酸分子が、
a) 標的プレmRNAにプレトランススプライシング分子の結合をターゲットする1以上の標的結合ドメイン；
b) 5’スプライス供与部位；
c) 5’スプライス供与部位を標的結合ドメインから離すスペーサー領域；および
d) 標的プレmRNAにトランススプライシングされる遺伝子の5’末端を含むヌクレオチド配列；
を含んでなり、該核酸分子は細胞内で核スプライシング成分により認識されるものである、上記細胞。
【請求項７６】
前記核酸分子が翻訳可能なタンパク質産物をコードする配列をさらに含んでなる、請求項７５に記載の細胞。
【請求項７７】
前記核酸分子が翻訳停止コドンを含むヌクレオチド配列をさらに含んでなる、請求項７５に記載の細胞。
【請求項７８】
標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列が嚢胞性繊維症膜貫通調節タンパク質をコードするヌクレオチド配列を含んでなる、請求項７５に記載の細胞。
【請求項７９】
嚢胞性繊維症膜貫通調節タンパク質をコードするヌクレオチド配列が嚢胞性繊維症膜貫通調節タンパク質遺伝子のエキソン1〜10を含んでなる、請求項７８に記載の細胞。
【請求項８０】
前記翻訳可能なタンパク質が毒素である、請求項７６に記載の細胞。
【請求項８１】
プレトランススプライシング分子分岐点、ピリミジントラクト、または5’スプライス部位の1以上の側に結合する1以上の相補配列を含むセーフティーヌクレオチド配列をさらに含んでなる、請求項６６または７３に記載の核酸分子を含む細胞。
【請求項８２】
プレトランススプライシング分子分岐点、ピリミジントラクト、または5’スプライス部位の1以上の側に結合する1以上の相補配列を含むセーフティーヌクレオチド配列をさらに含んでなる、請求項７２に記載の組換え発現ベクターを含む細胞。
【請求項８３】
キメラmRNA分子を作製する方法であって、プレトランススプライシング分子と標的プレmRNAとを、トランススプライシング反応により、プレトランススプライシング分子の一部が標的プレmRNAの5’末端にトランススプライシングされてキメラmRNAを形成する条件下で接触させることを含んでなる、上記方法。
【請求項８４】
プレトランススプライシング分子が嚢胞性繊維症膜貫通コンダクタンス調節タンパク質をコードするヌクレオチド配列を含んでなる、請求項８３に記載の方法。
【請求項８５】
プレトランススプライシング分子が嚢胞性繊維症膜貫通コンダクタンス調節タンパク質遺伝子のエキソン1〜10を含んでなる、請求項８３に記載の方法。
【請求項８６】
キメラmRNA分子を含む宿主細胞を提供する方法であって、
プレトランススプライシング分子を、標的プレmRNAを発現する宿主細胞に導入することを含んでなり、その際、トランススプライシング反応により、プレトランススプライシング分子の一部が標的プレmRNAの5’部分にトランススプライシングされてキメラmRNAを形成する条件下で、プレトランススプライシング分子が標的プレmRNAと結合する、上記方法。
【請求項８７】
前記宿主細胞がヒト細胞である、請求項８６に記載の方法。
【請求項８８】
プレトランススプライシング分子が、宿主細胞において欠陥があるかまたは欠失しているタンパク質をコードするヌクレオチド配列を含んでなる、請求項８６に記載の方法。
【請求項８９】
プレトランススプライシング分子が嚢胞性繊維症膜貫通コンダクタンス調節タンパク質の断片をコードするヌクレオチド配列を含んでなる、請求項８８に記載の方法。
【請求項９０】
請求項１８に記載の核酸分子および製薬上許容される担体を含んでなる、医薬組成物。
【請求項９１】
CFTR PTM24である、核酸分子。
【請求項９２】
核酸分子または該核酸分子を発現する組換えベクターを含んでなる植物細胞であって、該核酸分子が、
a) 細胞内で発現された標的プレmRNAに該核酸分子の結合をターゲットする1以上の標的結合ドメイン；
b) 3’スプライス受容部位を含む3’スプライス領域；
c) 3’スプライス領域を標的結合ドメインから離すスペーサー領域；および
d) 標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列；
を含んでなり、該核酸分子は細胞内で核スプライシング成分により認識されるものである、上記植物細胞。
【請求項９３】
核酸分子または該核酸分子を発現する組換えベクターを含んでなる植物細胞であって、該核酸分子が、
a) 植物細胞内で発現された標的プレmRNAに該核酸分子の結合をターゲットする1以上の標的結合ドメイン；
b) 5’スプライス部位；
c) 5’スプライス部位を標的結合ドメインから離すスペーサー領域；および
d) 標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列；
を含んでなり、該核酸分子は細胞内で核スプライシング成分により認識されるものである、上記植物細胞。
【請求項９４】
前記核酸分子が5’供与部位をさらに含んでなる、請求項９２に記載の植物細胞。
【請求項９５】
前記核酸分子がUAに富む配列をさらに含んでなる、請求項９２に記載の植物細胞。
【請求項９６】
前記核酸分子が3’スプライス領域の1以上の側にまたはそれに隣接して結合する1以上の相補配列を含むセーフティーヌクレオチド配列をさらに含んでなる、請求項９２に記載の植物細胞。
【請求項９７】
前記核酸分子が5’スプライス領域の1以上の側にまたはそれに隣接して結合する1以上の相補配列を含むセーフティー配列をさらに含んでなる、請求項９３に記載の植物細胞。
【請求項９８】
前記核酸分子が翻訳可能なタンパク質産物をコードする配列をさらに含んでなる、請求項９２に記載の植物細胞。
【請求項９９】
前記核酸分子が翻訳停止コドンを含むヌクレオチド配列をさらに含んでなる、請求項９２に記載の植物細胞。
【請求項１００】
植物細胞においてキメラRNA分子を作製する方法であって、
細胞内で発現された標的プレmRNAと、核スプライシング成分により認識される核酸分子とを、該核酸分子の一部が標的プレmRNAの一部にトランススプライシングされて細胞内でキメラRNAを形成する条件下で接触させることを含んでなり、該核酸分子が、
a) 植物細胞内で発現された標的プレmRNAに該核酸分子の結合をターゲットする1以上の標的結合ドメイン；
b) 3’スプライス受容部位を含む3’スプライス領域；
c) 3’スプライス領域を標的結合ドメインから離すスペーサー領域；および
d) 標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列；
を含んでなる、上記方法。
【請求項１０１】
植物細胞においてキメラRNA分子を作製する方法であって、
細胞内で発現された標的プレmRNAと、核スプライシング成分により認識される核酸分子とを、接触させることを含んでなり、該核酸分子が、
a) 植物細胞内で発現された標的プレmRNAに該核酸分子の結合をターゲットする1以上の標的結合ドメイン；
b) 5’スプライス部位；
c) 5’スプライス部位を標的結合ドメインから離すスペーサー領域；および
d) 標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列；
を含んでなり、該核酸分子は細胞内で核スプライシング成分により認識されるものである、上記方法。
【請求項１０２】
前記核酸分子が5’供与部位をさらに含んでなる、請求項１００に記載の方法。
【請求項１０３】
前記核酸分子がUAに富む配列をさらに含んでなる、請求項１００に記載の方法。
【請求項１０４】
前記キメラRNA分子が翻訳可能なタンパク質をコードする配列を含んでなる、請求項１００に記載の方法。
【請求項１０５】
前記キメラRNA分子が毒素をコードする配列を含んでなる、請求項１００に記載の方法。
【請求項１０６】
a) 植物細胞内で発現された標的プレmRNAに核酸分子の結合をターゲットする1以上の標的結合ドメイン；
b) 3’スプライス受容部位を含む3’スプライス領域；
c) 3’スプライス領域を標的結合ドメインから離すスペーサー領域；
d) 3’スプライス部位の片側もしくは両側にまたはそれに隣接して結合する1以上の相補配列を含むセーフティー配列；および
e) 標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列；
を含んでなり、細胞内で核スプライシング成分により認識される、核酸分子。
【請求項１０７】
a) 植物細胞内で発現された標的プレmRNAに核酸分子の結合をターゲットする1以上の標的結合ドメイン；
b) 5’スプライス部位；
c) 5’スプライス部位を標的結合ドメインから離すスペーサー領域；
d) 5’スプライス部位の片側もしくは両側にまたはそれに隣接して結合する1以上の相補配列を含むセーフティー配列；および
e) 標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列；
を含んでなり、細胞内で核スプライシング成分により認識される、核酸分子。
【請求項１０８】
5’供与部位をさらに含んでなる、請求項１０６に記載の核酸分子。
【請求項１０９】
3’スプライス部位の片側もしくは両側で、またはそれに隣接して結合する1以上の相補配列を含むセーフティー配列をさらに含んでなる、請求項１０６に記載の核酸分子。
【請求項１１０】
UAに富む配列をさらに含んでなる、請求項１０６または１０７に記載の核酸分子。
【請求項１１１】
核酸分子を発現する真核生物発現ベクターであって、該核酸分子が、
a) 植物細胞内で発現された標的プレmRNAに該核酸分子の結合をターゲットする1以上の標的結合ドメイン；
b) 3’スプライス受容部位を含む3’スプライス領域；
c) 3’スプライス領域を標的結合ドメインから離すスペーサー領域；および
d) 標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列；
を含んでなり、該核酸分子は細胞内で核スプライシング成分により認識されるものである、上記真核生物発現ベクター。
【請求項１１２】
核酸分子を発現する真核生物発現ベクターであって、該核酸分子が、
a) 植物細胞内で発現された標的プレmRNAに該核酸分子の結合をターゲットする1以上の標的結合ドメイン；
b) 5’スプライス部位；
c) 5’スプライス部位を標的結合ドメインから離すスペーサー領域；および
d) 標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列；
を含んでなり、該核酸分子は細胞内で核スプライシング成分により認識されるものである、上記真核生物発現ベクター。
【請求項１１３】
前記核酸分子が5’供与部位をさらに含んでなる、請求項１１１に記載のベクター。
【請求項１１４】
前記核酸分子がUAに富む配列をさらに含んでなる、請求項１１１または１１２に記載のベクター。
【請求項１１５】
a) 細胞内で発現された標的プレmRNAに核酸分子の結合をターゲットし、ランダムなヌクレオチド配列を含んでなる、1以上の標的結合ドメイン；
b) 5’スプライス部位；
c) 5’スプライス部位を標的結合ドメインから離すスペーサー領域；および
d) 標的プレmRNAにトランススプライシングされるヌクレオチド配列；
を含んでなり、細胞内で核スプライシング成分により認識される、核酸分子。