【誤訳訂正書】
【提出日】平成18年8月14日(2006.8.14)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
フローサイトメトリー方法であって、
ａ．哺乳類種の雄の精細胞を得るステップと、
ｂ．射出ポイントで液体流に前記精細胞を射出するステップと、
ｃ．前記液体流中の複数の液滴を形成するステップと、
ｄ．前記複数の液滴部分に前記精細胞の各々の１つを同伴させるステップと、
ｅ．前記複数の液滴の前記部分における精細胞を分析するステップと、
ｆ．前記精細胞間を識別し、少なくとも１つの精細胞特性に基づいた２つの集団を生成するステップと、
ｇ．前記液体流における前記精細胞の前記射出ポイントを調整し、前記精細胞の少なくとも２つの集団の分解能を向上させるステップとを包含する方法。
【請求項２】
前記哺乳類種の前記雄が、ウシ種の哺乳類、ウマ種の哺乳類、羊種の哺乳類、犬種の哺乳類、ネコ種の哺乳類、ブタ種の哺乳類、海洋種の哺乳類、シカ種の哺乳類からなる群から選択される請求項１に記載のフローサイトメトリー方法。
【請求項３】
前記液体流がシース液体を有する請求項１に記載のフローサイトメトリー方法。
【請求項４】
前記シース液体が、クエン酸緩衝液、リン酸緩衝液、ＨＥＰＥＳ緩衝液を含むシース液体からなる群から選択されるシース液体を含む請求項３に記載のフローサイトメトリー方法。
【請求項５】
哺乳類種の雄の精細胞を得る前記ステップは、第１の哺乳類種の精細胞を得るステップと、第２の哺乳類種の精細胞を得るステップとを有し、前記精細胞の前記少なくとも２つの集団の分解能を向上させるために、前記液体流中の前記精細胞の前記射出ポイントを調整する前記ステップは、前記少なくとも２つの集団の分解能を増加させるために、前記液体流内の第１の位置で前記第１の哺乳類種の前記精細胞の第１の射出ポイントを確立するステップと、前記少なくとも２つの集団の分解能を増加させるために、前記液体流内の第２の位置で前記第２の哺乳類種の前記精細胞の第２の射出ポイントを確立するステップとを包含する請求項１に記載のフローサイトメトリー方法。
【請求項６】
前記精細胞の少なくとも２つの集団の分解能を向上させるために、前記液体流中の前記精細胞の前記射出ポイントを調整する前記ステップは、粒子インジェクターが前記液体流へ前記精細胞を導入する位置を調整するステップを包含する請求項１に記載のフローサイトメトリー方法。
【請求項７】
粒子インジェクターが前記液体流へ前記精細胞を導入する位置を調整するステップは、前記粒子インジェクターとノズル本体との間にスライド調整可能な結合を提供するステップを包含する請求項１に記載のフローサイトメトリー方法。
【請求項８】
粒子インジェクターが前記液体流へ前記精細胞を導入する位置を調整するステップは、前記粒子インジェクターと前記ノズル本体との間のらせん状のねじ山の対になったペアを操作するステップを包含する請求項１に記載のフローサイトメトリー方法。
【請求項９】
前記精細胞の前記少なくとも２つの集団の分解能を向上させるために、前記液体流中の前記精細胞の前記射出ポイントを調整する前記ステップは、前記液体流中への前記精細胞の前記射出ポイントと前記液体流が流れる前記ノズル開口部との間の距離を変化させるために、前記粒子インジェクターを第２の粒子インジェクターと交換するステップを包含する請求項１に記載のフローサイトメトリー方法。
【請求項１０】
前記精細胞の前記少なくとも２つの集団の分解能を向上させるために、前記液体流中の前記精細胞の前記射出ポイントを調整する前記ステップは、前記液体流の中への前記精細胞の前記射出ポイントと前記液体流が流れるノズル開口部との間の距離を調整するステップを包含する請求項１に記載のフローサイトメトリー方法。
【請求項１１】
前記液体流は液体流特性を有し、前記精細胞の前記少なくとも２つの集団の分解能を向上させるために、前記液体流中の前記精細胞の前記射出ポイントを調整する前記ステップは、前記液体流特性に基づいて前記精細胞の前記射出ポイントを調整するステップを包含する請求項１に記載のフローサイトメトリー方法。
【請求項１２】
前記液体流は液体流特性を変化させ、前記精細胞の前記少なくとも２つの集団の分解能を向上させるために、前記液体流中の前記精細胞の前記射出ポイントを調整する前記ステップは、前記変化した液体流特性に基づいて前記精細胞の前記射出ポイントを調整するステップを包含する請求項１に記載のフローサイトメトリー方法。
【請求項１３】
精細胞の第１の集団および精細胞の第２の集団へ、前記精細胞を分離するステップをさらに包含する請求項１に記載のフローサイトメトリー方法。
【請求項１４】
少なくとも１つの精細胞特性に基づいて２つの集団を生成するために前記精細胞間を識別する前記ステップは、性別特性に基づいて前記精細胞間を識別するステップを備え、精細胞の前記第１の集団はＸ染色体を有し、精細胞の前記第２の集団はＹ染色体を有する請求項１に記載のフローサイトメトリー方法。
【請求項１５】
フローサイトメーターであって、
ａ．液体流と、
ｂ．前記液体流が流れるノズル本体と、
ｃ．前記液体流が前記ノズルを出るノズル開口部と、
ｄ．粒子ソースと、
ｅ．前記液体流中の位置で少なくとも１つの粒子を同伴させる前記粒子ソースに流体結合した粒子インジェクターと、
ｆ．前記ノズル開口部と、前記粒子インジェクターが前記少なくとも１つの粒子を同伴させる前記液体流中の前記位置との間の距離を変化させる選択的可変調整素子と、
を備えるフローサイトメーター。
【請求項１６】
前記粒子は細胞を含む請求項１５に記載のフローサイトメーター。
【請求項１７】
前記粒子は精細胞を含む請求項１５に記載のフローサイトメーター。
【請求項１８】
前記精細胞は、ウシ種の哺乳類、ウマ種の哺乳類、羊種の哺乳類、犬種の哺乳類、ネコ種の哺乳類、ブタ種の哺乳類、海洋種の哺乳類、シカ種の哺乳類からなる群から選択される哺乳類種の雄から得られる請求項１５に記載のフローサイトメーター。
【請求項１９】
前記ノズル開口部と、前記粒子インジェクターが前記少なくとも１つの粒子を同伴させる前記液体流中の前記位置との間の距離を変化させる前記選択的可変調整素子は、前記粒子インジェクターと前記ノズルとの間のスライド調整可能な係合を備える請求項１５に記載のフローサイトメーター。
【請求項２０】
前記ノズル開口部と、前記粒子インジェクターが前記少なくとも１つの粒子を同伴させる前記液体流中の前記位置との間の距離を変化させる前記選択的可変調整素子は、前記粒子インジェクターと前記ノズルとの間で係合するらせん状のねじ山の対になったペアを備える請求項１５に記載のフローサイトメーター。
【請求項２１】
前記ノズル開口部と、前記粒子インジェクターが前記少なくとも１つの粒子を同伴させる前記液体流中の前記位置との間の距離を変化させる前記選択的可変調整素子は、前記液体流中の第２の位置で前記少なくとも１つの粒子を同伴させる第２の粒子インジェクターと前記粒子インジェクターとを交換するステップを備える請求項１５に記載のフローサイトメーター。
【請求項２２】
フローサイトメーターであって、
ａ．液体流と、
ｂ．前記液体流が流れるノズル本体と、
ｃ．前記液体流が前記ノズルを出るノズル開口部と、
ｄ．粒子ソースと、
ｅ．前記液体流中の選択的可変位置で少なくとも１つの粒子を同伴させる前記粒子ソースに流体結合した粒子インジェクターと、
を備えるフローサイトメーター。
【請求項２３】
フローサイトメーターであって、
ａ．液体流と、
ｂ．前記液体流が流れるノズル本体と、
ｃ．前記液体流が前記ノズルを出るノズル開口部と、
ｄ．粒子ソースと、
ｅ．前記液体流中の位置で前記粒子ソースから少なくとも１つの粒子を同伴させる前記粒子ソースに流体結合した調整可能な粒子インジェクターと、を備え、前記粒子インジェクターの調整により、前記ノズル開口部と前記粒子インジェクターが前記少なくとも１つの粒子を同伴させる前記液体流中の前記位置との間の距離を変化させる、フローサイトメーター。
【請求項２４】
フローサイトメーターであって、
ａ．液体流と、
ｂ．前記液体流が流れるノズル本体と、
ｃ．前記液体流が前記ノズルを出るノズル開口部と、
ｄ．粒子ソースと、
ｅ．前記ノズル本体に前記粒子ソースを流体結合する導管と、
ｆ．前記液体流中の位置で少なくとも１つの粒子を同伴させる前記導管に結合された粒子インジェクターと、
ｇ．前記ノズル開口部と前記粒子インジェクターが前記少なくとも１つの粒子を同伴させる前記液体流中の前記位置との間の距離を変化させる選択的可変調整素子と、
を備えるフローサイトメーター。
【請求項２５】
フローサイトメーターであって、
ａ．ノズル開口部を有するノズルと、
ｂ．前記ノズル内に調節により位置決めされた粒子インジェクターと、を備え、これにより、前記粒子インジェクターの位置的調整は、前記粒子インジェクターの射出ポイントと前記ノズル開口部との間の距離を変化させる、フローサイトメーター。
【請求項２６】
フローサイトメトリー方法であって、
ａ．ノズル内に液体流を生成するステップと、
ｂ．ノズル開口部から前記液体流を放出するステップと、
ｃ．前記ノズル開口部から離れた前記液体流中の粒子射出ポイントを確立するステップと、
ｄ．前記射出ポイントで前記液体流中に細胞を同伴させるステップと、
ｅ．前記ノズル内で粒子インジェクターの位置を調整するステップと、
ｆ．少なくとも１つの細胞特性に基づいて前記細胞を分析するステップと、
ｇ．前記ノズル内で粒子インジェクターの位置を調整するステップとを包含する方法。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０００７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０００７】
粒子または細胞特性に基づく分離および単離を達成するために、放射光はセンサー（１１）に受光され、液滴（９）内に含まれる粒子または細胞（１６）特性に基づいて、各液滴（９）により差動的に帯電する液滴荷電装置に接続されたあるタイプの分離識別システム（１３）に取り込まれる。このように、分離識別システム（１３）は、液滴（１９）が適切な粒子または細胞（１６）を含むかどうかに基づいて静電偏向プレート（１４）が液滴（９）を偏向するように作用する。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４０】
再び主に図３を参照すると、本発明は、細胞ソース導管（２８）内に対称な速度の細胞ソース液体流（２７）をさらに備えることができる。対称な速度の細胞ソース液体流は、細胞ソース導管（２８）の内表面の近傍、またはその内表面における速度の減少と関連した予測される対称性を含むことができるが、細胞ソース液体流（２７）の垂直断面全体にわたって速度の非対称性を防止するか減少させることが可能な細胞ソース液体流（２７）の垂直断面の全体にわたって実質的に対称性を示す速度を有する細胞ソース液体流（２７）を提供する。細胞ソース液体流（２７）の速度においてこの対称性を確立するために、本発明のある実施形態では、実質的に直線的な細胞ソース導管（２８）を利用することができる。直線的な細胞ソース導管（２８）は、細胞ソース液体流（２７）に対して、実質的にあらゆる湾曲、屈曲、または回転を持たない直線的な流路、あるいは従来技術よりもより直線的な流路を与え、この湾曲、屈曲、または回転は、細胞ソース液体流（２７）による通過の際に、細胞ソース液体流（２７）の一部に速度を減少させること、またはこの液体流部分の一部に速度を増加させることを求め得る。このため、図１に示すように従来技術と比較すると、対称な速度の細胞ソース液体流（２７）により、従来タイプの細胞ソース液体流（２９）による以下に述べる問題点を解決する手段が提供される。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４６】
射出ポイント（３０）の調整を可能とする粒子インジェクター（３１）の選択可能な変数の調整は、種々の方法で達成することができる。第１の方法は、図３ｂに示すように、粒子インジェクター（３１）とノズル本体（２５）との間で噛み合わさる１組の対となったらせん状のねじ山（３６）により、粒子インジェクター（３１）の回転調整を行うことが可能であり、射出ポイント（３０）の位置を変化させることができる。第２の方法は、図３ｃに示すように、スライド可能な係合（３７）が提供されることにより、粒子インジェクター（３１）とノズル本体（２５）との間で調整可能な係合が得られる。第３の方法は、図３、４ｄおよび８に示すように、複数の相互交換可能な粒子インジェクター（３１）は、ノズル本体（２５）に合わせたキー止め金具（３８）により確定された交互長を有することができる。
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５２】
主に図４を再び参照すると、本発明ではノズル（２５）内に面積の減少した液体流（２６）を備えることができる。本発明のいくつかの実施形態において（図４ａおよび４ｂに示す）、ノズル（２）内の従来の液体流の断面積は、実施例の図４ｃおよび４ｄ）に示すように実質的に減少している。図４ａおよび４ｂに示すように基準とする従来技術（Ｃｙｔｏｍａｔｉｏｎ  ＳＸ  ＭｏＦｌｏ（登録商標）ノズル）と比較した場合、本発明のいくつかの実施形態における液体流（２６）断面積の減少は、従来の液体流断面積（３３）の４分の１と６分の１との間、またはそれ未満にある。さらに、図４ｃおよび４ｄの両方に示すように、本発明のいくつかの実施形態では従来ノズル（２）の長さを実質的に短くでき、より短い液体流流路を提供できる。特に、ウシ精子のフロー分離に関して、フロー流断面積は、図４ｃに示す従来技術のおよそ５分の１に減少した。
【誤訳訂正６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５５】
図５、６および７から分かるように、比較データは、毎秒約２５，０００イベント、毎秒約５０，０００から６０，０００イベント、または毎秒約１００，０００から１１０，０００イベントの３つの異なるイベント速度で、従来のフローサイトメーター技術（図５ａ、６ａおよび７ａ）および本高分解能フローサイトメーター発明（図５ｂ、６ｂおよび７ｂ）を使用して得た。蛍光色素で染色された精子が検出可能な蛍光を発すると、イベントがカウントされる。一般により大きなイベント速度は、検出された蛍光の大きさの相違に基づいて精細胞を識別することがより困難となる可能性がある。全てのイベント速度に関して、本明細書で述べたような高分解能フローサイトメーター発明を使用すると、非常に広い範囲でＸ染色体を運ぶ、およびＹ染色体を運ぶウシ核の混合集団が識別された。
【誤訳訂正７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００６１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００６１】
さらに、分析すべき粒子、細胞、あるいは精細胞の種類に依存するが、増加した分解能により、毎秒２０，０００から１００，０００イベントの間の非常に高いイベント速度を達成することができる。その結果、各々の秒毎により多数の精子が分離され、ソートされ、収集され、回収される。フローサイトメーターまたは細胞ソーターのコストが分離された粒子を生成するための総コストの大部分を占めるので、このアプローチにより単位時間当たりより多くの生成物が生産され、単位当たりの生産コストを減少させる。
【誤訳訂正８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００６２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００６２】
ノズルアセンブリ発明をより低圧の液体流で操作し、収集された精細胞を分離し、あるいはソートされた場合、毎秒１０００ソートよりも大きいソート速度でも、運動性、生存度、および受精能（精細胞受精能特性）を向上させることができ、精細胞のある種において、実質的に精液中で新たに収集された精細胞と同じ精細胞受精能特性を有することができる。
【誤訳訂正９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００６３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００６３】
ノズル本体アセンブリにより達成することができる増加した分解能のために、従来のノズル技術で達成されたソート速度よりも大きなソート速度でも、ソートされた粒子の純度が増加する場合がある。
【誤訳訂正１０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００６７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００６７】
本ノズルアセンブリ発明により、オペレータは分離分解能の損失を観察し、さらにそれを直ちに修正することが可能となる。従来のノズルアセンブリを使用しても部分的な閉塞で機器が故障することはないが、閉塞が形成されるにつれて、長時間、数日、あるいは数週間にもわたり機器の分解能が徐々に失われる状態が生じ、また不十分に分解するノズルが操作される全ての時間において、装置は一般に純度のより低い生成物を産し、あるいは特により低いソート速度で稼働する必要があると考えられ、製造すべき生成物量が減少する結果を招く（より低い生産性）。実際、熟練した技術者がノズルを変更するか清掃にした場合にのみ、より低い生産性にオペレータが気づく場合があり、一時的な改善が見られる。
【誤訳訂正１１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００６８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００６８】
射出筒の交換の容易さは、射出筒を１回のみの使い捨てで使用するか、あるいはごく限定された期間で使用する部品とすることができる。ヒト胎性細胞、またはヒト精細胞、またはヒトの骨髄細胞などのソート材料などのフローサイトメーターのある使用において、試料間の相互汚染の排除を確実とするために複雑で長いＣＩＰ（適所で清潔）プロトコルが必要であるが、ＣＩＰ処置を試料と接触する全ての部品を交換する手順に置き換えると簡便で好都合であり、このため試料射出筒の交換が必要である。
【誤訳訂正１２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００８０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００８０】
【図１】図１は、従来のフローサイトメーター技術の概要を示す。
【図２】図２は、従来のフローサイトメーター技術の概要を示す。
【図３】図３は、分解能増強フローサイトメーター発明に関する特別の実施態様を示す。
【図４】図４は、従来のフローサイトメーターノズルアセンブリ（図４ａ）および従来のフローサイトメーターのインジェクター部（図４ｂ）と、対応する分解能増強フローサイトメーターノズルアセンブリ発明（図４ｃ）および分解能増強フローサイトメーター発明の分解能増強インジェクター部分（図４ｄ）との比較を提供する。
【図５】図５は、それぞれ毎秒２５，０００イベントで、従来のフローサイトメーター技術（図５ａ）を使用したウシ精核試料の分解能と、分解能増強フローサイトメーター発明（図５ｂ）を使用した同じウシ精核試料の分解能との比較を提供する。
【図６】図６は、従来のフローサイトメーター技術（図６ａ）を使用し、毎秒５０，０００イベントで実施したウシ精核試料の分解能と、分解能増強フローサイトメーター発明（図６ｂ）を使用し、毎秒６０，０００イベントで実施した同じウシ精核試料の分解能との比較を提供する。
【図７】図７は、従来のフローサイトメーター技術（図７ａ）を使用し、毎秒１００，０００イベントで実施したウシ精核試料の分解能と、分解能増強フローサイトメーター発明（図７ｂ）を使用し、毎秒１１０，０００イベントで実施した同じウシ精核試料の分解能との比較を提供する。
【図８】図８は、本粒子インジェクター発明の特定の実施態様を示す。
【図９】図９は、ノズルボディー内側発明の特定の実施態様を示す。
【図１０】図１０は、ノズルボディー外側発明の特定の実施態様を示す。
【図１１】図１１は、図１０中に示される外部ノズル発明の特定の実施態様の断面Ｂ−Ｂを提供する。