【手続補正書】
【提出日】平成17年9月28日(2005.9.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  ＴＳＨ−Ｒ自己抗体またはＴＳＨの検定方法であって、
（ａ）ＴＳＨの存在下または非存在下で試験試料をレポーターカセットに安定して感染したヒトＴＳＨ−Ｒを発現するクローンからの細胞と接触させ、前記レポーターカセットが、
（ｉ）対応する基質たとえば蛋白質に接触したとき測定可能な応答を生じうる反応物たとえば酵素と、
（ｉｉ）サイクリックＡＭＰ（ｃＡＭＰ）応答要素（ＣＲＥｓ）を含むプロモーターと、
の両方のｃＤＮＡを有し、その際、反応物の濃度が誘導内生ｃＡＭＰ濃度によって変動するステップを含むことを特徴とする検定方法。
【請求項２】  該プロモーターがＣＲＥ共通配列ＴＧＡＣＧＴＣＡを含むプロモーター配列または合成オリゴヌクレオチドを含むことを特徴とする請求項１に記載の検定方法。
【請求項３】  さらに、
（ｂ）前記のように接触させられる細胞に、対応する基質を加えるステップを含むことを特徴とする請求項１又は２に記載の検定方法。
【請求項４】  さらに、
（ｃ）基質にさらされる細胞における応答を測定するステップ、そして
（ｄ）試験ステップ（ｃ）からの応答とステップ（ａ）から（ｃ）が実施された標準または正常試料からの応答とを比較するステップを含むことを特徴とする請求項３に記載の検定方法。
【請求項５】  プロモーターが縦列ｃＡＭＰ応答要素を含む糖蛋白ホルモンアルファサブユニットに対するものであることを特徴とする請求項１から４の中のいずれか１つに記載の検定方法。
【請求項６】  プロモーターがＣＡＴ酵素を駆動するカセットを含むことを特徴とする請求項１から４のいずれか１つに記載の検定方法。
【請求項７】  測定可能な応答が色変化、蛍光発光変化または光放射であることを特徴とする請求項１から６の中のいずれか１つに記載の検定方法。
【請求項８】  反応物がクロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ（ＣＡＴ）、ホタルルシフェラーゼ、レニラルシフェラーゼ、β−ガラクトシダーゼ、アルカリホスファターゼ、ホースラディッシュペルオキシダーゼおよび緑色蛍光蛋白から選択されることを特徴とする請求項７に記載の検定方法。
【請求項９】  ステップ（ａ）においてｃＡＭＰ応答要素を含むプロモーターによって駆動されるルシフェラーゼｃＤＮＡを使用し、ステップ（ｂ）においてルシフェリンを使用し、またステップ（ｃ）においてルシフェリン雰囲気中の細胞溶解物からの光出力を測定することを含むことを特徴とする請求項４に記載の検定方法。
【請求項１０】  レポーターカセットがα−ルシフェラーゼを含むことを特徴とする請求項１から９の中のいずれか１つに記載の検定方法。
【請求項１１】  ステップ（ａ）において使用する為のクローンが、ＣＨＯ細胞、又は、真核発現ベクター内のｈＴＳＨ−Ｒのコーディング領域を含むｃＤＮＡと、プロモーター及び反応物の両方を有するレポーターカセットを含むｃＤＮＡと、を有する真核細胞株のどれか、の安定した同時感染により得ることが可能であることを特徴とする請求項１から１０までの中のいずれか１つに記載の検定方法。
【請求項１２】 使用されるすべての反応物が一つ以上のステップで一緒にされ、かつ／またはステップ（ａ）〜（ｄ）の二つ以上が実質的に同時に実施されることを特徴とする請求項１から１１の中のいずれか１つに記載の検定方法。
【請求項１３】 手操作の、部分自動化の、または完全自動化の手段により実施されることを特徴とする請求項１から１２の中のいずれか１つに記載の検定方法。
【請求項１４】 請求項１から１３の中のいずれか１つに記載の検定を実施するためのキット。
【請求項１５】 （ａ）対応する基質たとえば蛋白質に接触したとき測定可能な応答を生じうる反応物たとえば酵素と、サイクリックＡＭＰ（ｃＡＭＰ）応答要素（ＣＲＥｓ）を含むプロモーターと、の両方のｃＤＮＡを有し、その際、反応物の濃度が誘導内生ｃＡＭＰ濃度によって変動するレポーターカセットに安定して感染したヒトＴＳＨ−Ｒを発現するクローンからの細胞；
（ｂ）検定のための標準又は正常試料；
（ｃ）細胞を培養および／または再構成する培地；及び
（ｄ）検定を実施するための説明、
を含むことを特徴とする請求項１４記載のキット。
【請求項１６】  プロモーターがＣＲＥ共通配列ＴＧＡＣＧＴＣＡを含むプロモーター配列または合成オリゴヌクレオチドを含むことを特徴とする請求項１５に記載のキット。
【請求項１７】  さらに、
（ｅ）細胞溶解のための緩衝剤；および／または、
（ｆ）レポーターカセットのための緩衝剤、好ましくはルシフェラーゼ緩衝剤；および／または、
（ｇ）緩衝剤中の対応する基質好ましくはルシフェリン；
および、随意に照度計を含むことを特徴とする請求項１５又は１６に記載のキット。
【請求項１８】  レポーターカセットがプラスミドｐＡ３ｌｕｃを含み、該プラスミドが該プラスミドに導入された糖蛋白ホルモンαサブユニットプロモーターを含むことを特徴とする請求項１４から１７の中のいずれか１つに記載のキット。
【請求項１９】  ＣＲＥ含有配列が市販のルシフェラーゼレポーター系たとえばｐＧＥＭ−ｌｕｃ内にサブクローン化されていることを特徴とする請求項１４から１８の中のいずれか１つに記載のキット。
【請求項２０】  レポーターカセットが複数のプラスミドを含むことを特徴とする請求項１４から１８のいずれか１つに記載のキット。
【請求項２１】  ヒトＴＳＨ−Ｒが真核発現ベクター内にサブクローン化されていることを特徴とする請求項１４から１８の中のいずれか１つに記載のキット。
【請求項２２】  前記真核発現ベクターがｐＳＶＬであることを特徴とする請求項２１に記載のキット。
【請求項２３】  ＴＳＨ−Ｒが、同じプラスミド内に抗生物質耐性遺伝子を含む二重ベクター内にサブクローン化されていることを特徴とする請求項２１に記載のキット。
【請求項２４】  二重ベクターがｐｃＤＮＡＩＩＩを含むことを特徴とする請求項２３に記載のキット。
【請求項２５】  要素（ａ）のための細胞がここで明記するクローンＪＰ０９からのものであり、該クローンが細胞あたり１０5の程度のＴＳＨ−Ｒに安定に感染していることを特徴とする請求項１４から２４の中のいずれか１つに記載のキット。
【請求項２６】  前記細胞がα−ルシフェラーゼｃＤＮＡとピューロマイシン耐性コード化プラスミドとの両方に同時感染していることを特徴とする請求項２５に記載のキット。
【請求項２７】  前記細胞が凍結乾燥（フリーズドライ）され、凍結されあるいはゲルに含まれ、そして個別容器で提供されることを特徴とする請求項１４から２６の中のいずれか１つに記載のキット。
【請求項２８】  前記細胞が、さらに、使用中にウェル内で接種された細胞の数を補正する方法による検定を提供するために同時感染させられていることを特徴とする請求項１４から２６の中のいずれか１つに記載のキット。
【請求項２９】  前記細胞が、さらに、レニラルシフェラーゼプラスミドにより同時感染させられていることを特徴とする請求項２８に記載のキット。
【請求項３０】  自己免疫甲状腺疾患、非自己免疫甲状腺疾患、甲状腺に起因しない自己免疫および多内分泌腺疾患から選択される病気または疾患に関して使用されることを特徴とする請求項１から２９のいずれか１つに記載の検定方法またはキット。
【請求項３１】  妊婦、甲状腺機能正常眼疾の人ならびにアミオダロンおよび／またはリチウム塩を投与されている人から選択される患者の選別に使用されることを特徴とする請求項１から３０の中のいずれか１つに記載の検定方法またはキット。
【請求項３２】  ＴＳＡｂまたはＴＢＡｂを測定すること、または、置換されもしくは他の修飾がなされて標識を含む一つまたはそれ以上のアミノ酸を有することなどによって配列の一部が変更されたＴＳＨ−Ｒに対する自己抗体を測定すること、を特徴とする請求項１から３１の中のいずれか１つに記載の検定方法またはキット。
【請求項３３】  （ｉ）対応する基質たとえば蛋白質に接触したとき測定可能な応答を生じうる反応物たとえば酵素と、
（ｉｉ）ｃＡＭＰ応答要素（ＣＲＥｓ）を含むプロモーターと、
の両方のｃＤＮＡを有するレポーターカセットの使用であって、その際、反応物の濃度が誘導内生ｃＡＭＰ濃度によって変動し、検定方法またはキットの作成に使用され、上記検定方法またはキットが請求項１から３２の中のいずれか１つに規定されている検定方法またはキットであることを特徴とするレポーターカセットの使用。
【請求項３４】  プロモーターがＣＲＥ共通配列ＴＧＡＣＧＴＣＡを含むプロモーター配列または合成オリゴヌクレオチドを含むことを特徴とする請求項３３に記載の使用。
【請求項３５】  反応物酵素がルシフェラーゼであり、および／または基質がルシフェリンであることを特徴とする請求項３３または３４に記載の使用。
【請求項３６】  レポーターカセットに安定して感染しているヒトＴＳＨ−Ｒを発現するクローンであって、該レポーターカセットが、
（ｉ）対応する基質たとえば蛋白質に接触したとき測定可能な応答を生じうる反応物たとえば酵素と、
（ｉｉ）ｃＡＭＰ応答要素（ＣＲＥｓ）を含むプロモーターと、
の両方のｃＤＮＡを有し、その際、反応物の濃度が誘導内生ｃＡＭＰ濃度によって変動することを特徴とするクローン。
【請求項３７】  プロモーターがＣＲＥ共通配列ＴＧＡＣＧＴＣＡを含むプロモーター配列または合成オリゴヌクレオチドを含むことを特徴とする請求項３６に記載のクローン。
【請求項３８】  反応物酵素がルシフェラーゼであり、および／または基質がルシフェリンであることを特徴とする請求項３６または３７に記載のクローン。
【請求項３９】  請求項３６から３８の中のいずれか１つに記載のクローンによって生成されることを特徴とする細胞。
【請求項４０】  レポーターカセットに安定して感染しているヒトＴＳＨ−Ｒを発現するｃＤＮＡまたはｍＲＮＡであって、該レポーターカセットが、
（ｉ）対応する基質たとえば蛋白質に接触したとき測定可能な応答を生じうる反応物たとえば酵素と、
（ｉｉ）ｃＡＭＰ応答要素（ＣＲＥｓ）を含むプロモーターと、
の両方のｃＤＮＡを有し、その際、反応物の濃度が誘導内生ｃＡＭＰ濃度によって変動することを特徴とするｃＤＮＡまたはｍＲＮＡ。
【請求項４１】  プロモーターがＣＲＥ共通配列ＴＧＡＣＧＴＣＡを含むプロモーター配列または合成オリゴヌクレオチドを含むことを特徴とする請求項４０に記載のｃＤＮＡまたはｍＲＮＡ。
【請求項４２】  反応物酵素がルシフェラーゼであり、および／または基質がルシフェリンであることを特徴とする請求項４０または４１に記載のｃＤＮＡまたはｍＲＮＡ。
【請求項４３】  対応する基質たとえば蛋白質に接触したとき測定可能な応答を生じうる反応物たとえば酵素と、ＣＲＥを含むプロモーターと、の両方のｃＤＮＡを含むレポーターカセットに安定して感染していることを特徴とするヒトＴＳＨ−Ｒ。