【手続補正書】
【提出日】平成18年10月25日(2006.10.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  （１）（ａ）Ｔ細胞マイトジェン、（ｂ）インターロイキン−２および（ｃ）インターロイキン−４を含む第１の培地中で、出発試料中の細胞を培養すること、および
（２）（ｉ）インターロイキン−２および（ｉｉ）インターロイキン−４を含む第２の培地中で、上記（１）で得られた細胞を培養することによって、ＴｃＲγδ＋Ｔ細胞を増殖させること
を特徴とする出発試料中のＴｃＲγδ＋Ｔ細胞を増殖させる方法。
【請求項２】  （１）ＸＬＣＭを含む第１の培地中で、出発試料中の細胞を培養すること、および
（２）（ｉ）インターロイキン−２および（ｉｉ）インターロイキン−４を含む第２の培地中で、上記（１）で得られた細胞を培養することによって、ＴｃＲγδ＋Ｔ細胞を増殖させること
を特徴とする出発試料中のＴｃＲγδ＋Ｔ細胞を増殖させる方法。
【請求項３】  第１および第２の培地が血清または血漿を含有する請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】  ステップ（１）の前に、出発試料中の細胞をＴ細胞について富化する請求項１から３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】  ステップ（１）の前に、出発試料中の細胞をＣＤ４＋細胞について富化する請求項１から４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】  ステップ（１）の前に、出発試料中の細胞からＣＤ１４＋、ＣＤ１６＋、ＣＤ１９＋、ＣＤ５６＋およびグリコホリンＡ＋細胞を除去する請求項１から５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】  ステップ（１）の前に、出発試料中の細胞からＴｃＲαβ＋  Ｔ細胞を除去する請求項１から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】ステップ（１）の前に、出発試料中の細胞から非ＴｃＲγδＴ細胞を除去する請求項１から７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】  出発試料が末梢血、骨髄、リンパ組織、上皮、胸腺、肝臓、ひ臓、癌組織、感染組織、リンパ節組織またはそれらの分画物から選択される請求項１から８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】  出発試料がヒト末梢血またはその分画物である請求項９に記載の方法。
【請求項１１】  出発試料が低密度単核細胞である請求項１から１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】  第１の培地中にＴ細胞マイトジェンが約０．０１から約１００μｇ／ｍｌの量で存在し、ＩＬ−２が約０．１から約１０００ｎｇ／ｍｌの量で存在し、ＩＬ−４が約０．１から約１０００ｎｇ／ｍｌの量で存在する請求項１または３から１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】  第１の培地中にＴ細胞マイトジェンが約０．１から約５０μｇ／ｍｌの量で存在し、ＩＬ−２が約１から約１００ｎｇ／ｍｌの量で存在し、ＩＬ−４が約１から約１００ｎｇ／ｍｌの量で存在する請求項１または３から１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】  第１の培地中にＴ細胞マイトジェンが約０．５から約１０μｇ／ｍｌの量で存在し、ＩＬ−２が約２から約５０ｎｇ／ｍｌの量で存在し、ＩＬ−４が約２から約５０ｎｇ／ｍｌの量で存在する請求項１または３から１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】  第１の培地がＴ細胞マイトジェンを１μｇ／ｍｌ、ＩＬ−２を１０ｎｇ／ｍｌおよびＩＬ−４を１０ｎｇ／ｍｌ含む請求項１または３から１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】  Ｔ細胞マイトジェンがコンカナバリンＡである請求項１または３から１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】  血清または血漿が約１から約２５体積％の量で存在する請求項３に記載の方法。
【請求項１８】  血清または血漿が約２から約２０体積％の量で存在する請求項３に記載の方法。
【請求項１９】  血清または血漿が約２．５から約１０体積％の量で存在する請求項３に記載の方法。
【請求項２０】  血清または血漿が約５体積％の量で存在する請求項３に記載の方法。
【請求項２１】  第２の培地中にＩＬ−２が約０．１から約１０００ｎｇ／ｍｌの量で存在し、ＩＬ−４が約０．１から約１０００ｎｇ／ｍｌの量で存在する請求項１から２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】  第２の培地中にＩＬ−２が約１から約１００ｎｇ／ｍｌの量で存在し、ＩＬ−４が約１から約１００ｎｇ／ｍｌの量で存在する請求項１から２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】  第２の培地中にＩＬ−２が約２から約５０ｎｇ／ｍｌの量で存在し、ＩＬ−４が約２から約５０ｎｇ／ｍｌの量で存在する請求項１から２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】  第２の培地がＩＬ−２を１０ｎｇ／ｍｌおよびＩＬ−４を１０ｎｇ／ｍｌ含む請求項１から２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】  ＸＬＣＭが約１から約２５％の量で存在する請求項２に記載の方法。
【請求項２６】  ＸＬＣＭが約２から約２０％の量で存在する請求項２に記載の方法。
【請求項２７】  ＸＬＣＭが約２．５から約１０％の量で存在する請求項２に記載の方法。
【請求項２８】  ＸＬＣＭが約５％の量で存在する請求項２に記載の方法。
【請求項２９】  慢性骨髄性白血病患者から採取した試料からＴｃＲγδＴ＋細胞を得る方法であって、
（１）試料から低密度単核細胞（ＬＤＭＮＣ）を得ることと、
（２）ステップ（１）で得られた細胞からＣＤ３３＋細胞を除去することと、
（３）（ａ）Ｔ細胞マイトジェン、（ｂ）インターロイキン−２および（ｃ）インターロイキン−４を含む第１の培地中で、ステップ（２）で得られた細胞を培養することと、
（４）（ｉ）インターロイキン−２および（ｉｉ）インターロイキン−４を含む第２の培地中で、ステップ（３）で得られた細胞を培養することにより、ＴｃＲγδＴ＋細胞を増殖させること
を含む方法。
【請求項３０】  ステップ（２）がその細胞から更にＣＤ１４＋、ＣＤ１６＋、ＣＤ１９＋、ＣＤ５６＋およびグリコホスホリンＡ＋の各細胞を除去することを含む請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】  ステップ（２）がその細胞から更にＴｃＲαβ＋Ｔ細胞を除去することを含む請求項２９に記載の方法。
【請求項３２】  請求項１から２８のいずれか一項に記載の方法に従って調製された、ＴｃＲγδ＋Ｔ細胞が富化された細胞調製品。
【請求項３３】  全細胞の７０％を超える細胞がＴｃＲγδＴ＋細胞である請求項３２に記載の細胞調製品。
【請求項３４】  全細胞の８０％を超える細胞がＴｃＲγδ＋Ｔ細胞である請求項３２または３３に記載の細胞調製品。
【請求項３５】  全細胞の９０％を超える細胞がＴｃＲγδ＋Ｔ細胞である請求項３２、３３または３４に記載の細胞調製品。
【請求項３６】  Ｖδ１＋  ＴｃＲγδ＋Ｔ細胞およびＶδ２＋ＴｃＲγδ＋Ｔ細胞を含む請求項３２から３５のいずれか一項に記載の細胞調製品。
【請求項３７】  調製品中の全ＴｃＲγδ＋Ｔ細胞の約５０〜９０％がＶδ１＋  ＴｃＲγδ＋Ｔ細胞で約１０〜５０％がＶδ２＋ＴｃＲγδ＋Ｔ細胞である請求項３６に記載の細胞調製品。
【請求項３８】  調製品中の全ＴｃＲγδ＋Ｔ細胞の約７０％がＶδ１＋  ＴｃＲγδ＋Ｔ細胞で約３０％がＶδ２＋  ＴｃＲγδ＋Ｔ細胞である請求項３６に記載の細胞調製品。
【請求項３９】  免疫反応を調節する医薬品を調製するための、請求項３２から３８のいずれか一項に記載の細胞調製品の使用。
【請求項４０】  感染症を治療する医薬品を調製するための、請求項３２から３８のいずれか一項に記載の細胞調製品の使用。
【請求項４１】  癌を治療する医薬品を調製するための、請求項３２から３８のいずれか一項に記載の細胞調製品の使用。
【請求項４２】  慢性骨髄性白血病を治療する医薬品を調製するための、請求項３２から３８のいずれか一項に記載の細胞調製品の使用。
【請求項４３】  ワクチンを調製するための、請求項３２から３８のいずれか一項に記載の細胞調製品の使用。
【請求項４４】  請求項１から２８のいずれか一項に記載の方法に従って得られたＴｃＲγδ＋Ｔ細胞の有効量を、それを必要とする動物に投与することを含む免疫反応を調節する方法。
【請求項４５】  請求項１から２８のいずれか一項に記載の方法に従って得られたＴｃＲγδ＋Ｔ細胞の有効量を、それを必要とする動物に投与することを含む感染症を治療する方法。
【請求項４６】  請求項１から２８のいずれか一項に記載の方法に従って得られたＴｃＲγδ＋Ｔ細胞の有効量を、それを必要とする動物に投与することを含む癌を治療する方法。
【請求項４７】  請求項１から２８のいずれか一項に記載の方法に従って得られたＴｃＲγδ＋Ｔ細胞の有効量を、それを必要とする動物に投与することを含む慢性骨髄性白血病を治療する方法。