【誤訳訂正書】
【提出日】平成18年10月26日(2006.10.26)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】請求項１４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【請求項１４】
信号強度が前記第１セットと前記第２セットとの間で異なる前記スペクトル線を検出することが、部分的線形適合アルゴリズム(Partial-Linear-Fit algorithm)の使用を含む、請求項１３に記載の方法。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２３】
好ましくは、本発明に従う差プロファイルは、その対応する信号強度が、健康な個体の対応するスペクトルに比べて患者のスペクトルにおいて特定の係数で増加される又は減少されるところのスペクトル線位置を含む。この係数は、信号強度の増加のために(正の)閾値(又は基準値)を及び減少のために対応する(負の)閾値を適用するために使用されうる。その対応する信号強度が対応する閾値の上又は下であるところのスペクトル線位置は、差プロファイルに含まれる。データが特異的な及び「有意な」疾病に関連付けられた変化に結びつけられるように、その信号強度が健康な状況に又は病気の状況に関連されることができないところの内因的及び外因的代謝物質(以下を参照)がそのような差プロファイルから除去された。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２６】
閾値のレベルのための選択はまた、差プロファイルが決定される哺乳動物の個々の特性になかんずく依存するだろう。そのような特性は、性別、年齢、生命の段階（受精／未受精）、食事、有りうる薬物投与、遺伝的背景、及びヒトにおいてタバコ及び／又はアルコール消費を含む。人々の均質なグループの使用が、本明細書の下記に記載された本発明に従う方法において好ましく、均質なグループは、できるだけ多くの同等の特性を有する個体のグループとして定義され、唯一の差が、疾病の存在又は不存在である。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２７】
好ましくは、哺乳動物の体液中の代謝物質の正規化されたスペクトルは、個体の均質なグループから来る一組のデータを含む。それは、男性個体における疾病の検出のために本発明に従う差プロファイルが、好ましくは専ら男性の個体の対応する信号強度を有するＮＭＲスペクトル線位置を含むことを意味する。それ故に、疾病のための差プロファイルは、それが得られた個体の特性に依存して異なりうる。
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３０】
差プロファイルがそれから構築されるスペクトル線位置の数は、上記された閾値の定義によって主に決定される。正規化されたスペクトル中のノイズのピッチについての値が考慮されうるこの閾値は、疾病が診断されている個体と健康な個体との間のスペクトル線の高さにおける差がどの値から「有意である」かを示す。高さにおける差は、プラス(強度の増加)又はマイナス(強度の減少)のいずれかでありうる。
【誤訳訂正６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３６】
ＮＭＲスペクトル分析を実行するために、体液のサンプルが非常に適切に凍結乾燥されることができ、次いで、該凍結乾燥物は、適切なバッファー、例えばD20に基づいて調製されるリン酸ナトリウムバッファー中でもどされる。そのようなバッファーのための適切な酸含量は、pH 4〜10、好ましくはpH 4〜8の範囲であり、及びより好ましくはそのようなバッファーはおよそ6のpHを有する。好ましくは、相互に比較されるだろう種々のサンプルは等しいpHのバッファー中にもどされる。等しいpHのバッファーにおける体液のサンプルの凍結乾燥された成分のもどしは、種々のサンプル間のpHにおける差によって生ずるスペクトル差を最小にするために役立つ。該もどされたサンプルにさらに、内部標準、例えばTMSP(トリメチルシリル-[2,2,3,3,-2H4]-1-プロピオン酸ナトリウム)又はテトラメチルシラン等が添加されうる。その後、ＮＭＲスペクトルが、これらのサンプルから記録されることができ、ＮＭＲ装置が1H ＮＭＲ分析のためにセットされる。好ましくは、サンプルのＮＭＲスペクトルは三回記録される。一般に、製造者によって推奨されるような既定の設定が、この目的のために使用されうる。測定結果は、内部標準に相対的に化学シフトで示され、及び「ppm」(parts per million)で表される。
【誤訳訂正７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４０】
いくつかの記録されたＮＭＲスペクトルの正規化は、複数の個体から得られた一組の値の信頼度に寄与する。さらに、正規化は、一組の以前に記録されたスペクトルと、別々に記録されたスペクトルとの比較を可能にする。
【誤訳訂正８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４５】
上記された部分的線形適合アルゴリズムは、主成分判別分析(PCDA)部分を含む。ここで、変数の数は、主成分分析(PCA)によって最初に減少される。第１の主成分(PC)上でのサンプルの投影(いわゆるスコア)は、線形判別分析のための開始点として使用される。サンプルのスコアがスコア・プロット中にプロットされ、そこでは同様のサンプルがクラスタに分かれる傾向があり及び相違するサンプルが、互いにより大きな距離で離されるだろう(図1を参照)。判別式軸とオリジナルの変数(ＮＭＲ信号)との関係は、ローディングプロットにおいて視覚化される。ここで、オリジナルの変数の位置が、判別式軸に平行な変数ベクトルの長さが、その軸へのその変数のローディングに比例するように示される。
【誤訳訂正９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４６】
データを視覚化する他の可能性は、ローディングベクトルのグラフ的回転によって、スコア・プロット中のクラスタ（例えば、図１の変形性関節症クラスタ）の位置に関連する因子スペクトル（なかんずく図２を参照）によってである。他のカテゴリーに相対的に1つのカテゴリーの最大の分離の方向に作られたこれら因子スペクトルすなわち代謝的フィンガープリントが、カテゴリー間の分離の原因である代謝物質の型における洞察を提供する。
【誤訳訂正１０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４９】
本発明では、プロトン核磁気共鳴法の分析的方法論が代謝物質に関する数字データを得るために使用される故に、得られた値は装置の設定及び測定が行なわれる条件に依存する。また、絶対値は、測定において使用される基準(例えば、内部標準)に依存する。従って、差プロファイル（その例が表１に示される）が種々の測定モーメント間で及び種々の測定条件間で異なりうる値を含む。この理由のために、表１に示されるような値は絶対値でない。従って、変形性関節症のための差プロファイルにおけるスペクトル線位置及び可能なスペクトル線強度の両方の個々の値の意味が、互いに関連してそれらの比率及び位置において及びそれ故にこれらの値のパターンにおいて実質的に存在する。
【誤訳訂正１１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５４】
当該哺乳動物の健康な個体の体液中の代謝物質のスペクトルによって本発明に従う差プロファイルと比較する前に、疾病が疑われるこの哺乳動物の個体の体液中の代謝物質のＮＭＲスペクトルを正規化することが可能であるが、必ずしも必要でない。従って、特徴的な差プロファイルが、疾病が疑われる個体から記録されたスペクトル中に実際に含まれることが比較ステップから明らかである場合、疾病の存在が決定される。
【誤訳訂正１２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５５】
疾病がスコア・プロット、例えば図１のスコア・プロット等において疑われる個体から記録されたスペクトルのデータをプロットすること、及び該データが「病気」スペクトルのクラスタ内にあるかどうかを決定することがまた可能である。該疾病が疑われる個体のこれらデータが「病気」と指定されたクラスタ内にない場合、該疾病は、それが「病気」基準グループ内で生じる場合に、少なくとも疾病の段階でなく、該個体中に存在しない。本発明では、そのような診断学的方法ステップが、ＮＭＲスペクトルを差プロファイルと比較するためのステップ内に含まれることが理解される。
【誤訳訂正１３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００６３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００６３】
特定の特徴的な代謝物質の1H化学シフトは例えば以下である（値±0.05ppm）：N-アセチルアスパルテートは、2.05 ppmでシングレット（帰属CH3）として及び2.91及び1.95ppmでマルチプレット（帰属CH2）として現れ；イノシトールは、3.25 ppmでダブレット（帰属H1/H3）として及び4.10 ppmでトリプレット（帰属H2）として；コリンは、3.19 ppmでマルチプレット（帰属NCH2）として及び3.94 ppmでマルチプレット（帰属OCH2）として現れ；ネオプテリンは、4.34及び4.44 ppmでマルチプレット（帰属CH2）として並びに4.60及び4.70ppmでマルチプレット（帰属CH）として並びに5.20 ppmでシングレット（帰属OCH2）として現れ、及びタウリンは、3.26 ppm（帰属CH2SO3）及び3.31 ppm（帰属NCH2）でトリプレットとして現れる。そのような代謝物質は、患者における疾病を検出するための本発明に従うバイオマーカーとして非常に適切に使用されることができ、そこではバイオマーカーの濃度における増加は例えば、これら代謝物質がそれから生じる基本物質の(増加した)分解又は転化を示す。
【誤訳訂正１４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００７０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００７０】
本発明はさらに、哺乳動物における疾病の検出(すなわち、診断及び／又は予後)のための方法であって、体液、好ましくは尿中の本発明に従うバイオマーカーを測定することを含む方法に関する。そのような測定は好ましくは、健康な個体の体液中で見つけられ且つ定量的変化が個々の疾病のための差プロファイルにおけるそのバイオマーカーの回帰に対応するところのそのバイオマーカーの通常の値に相対的なバイオマーカーの発生における定量的変化（疾病が疑われている哺乳動物の個体の体液中での）の検出を含む。
【誤訳訂正１５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００８７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００８７】
代謝的及び生理学的測定と組み合わせて本発明を使用することによって、例えば、早期の段階で変形性関節症を診断し且つ定量化することが今可能である。変形性関節症のこの分析、病原論の知識及び治療の効率性が、本発明の使用を通じて非常に改善しうる。本発明に従うバイオマーカー、例えばラクテート、マレエート、β−アラニン、ヒポキサンチン、3,4-ジヒドロキシマンデレート、3−ヒドロキシ桂皮酸、アラニン、アスパラギン又はＮ−アセチルアスパルテートの単独又は組み合わせから成る群から選択されるバイオマーカーを使用することによって（表３を参照）、早期の段階で変形性関節症を検出し且つ患者の処置を改善することがいま可能になる。
【誤訳訂正１６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００８８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００８８】
原則として、本発明は、魚、トリを含む動物に適用されることができ、及び好ましくは一般に哺乳動物に適用され、特に、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ネズミ、イヌ、げっ歯動物、サル及び特に霊長類に適用される。好ましくは、本発明は、モルモット、イヌ又はヒトに適用される。
【誤訳訂正１７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００９０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００９０】
サンプルの予備的処理
ＮＭＲスペクトル分析の前に、1 mlの尿サンプルが凍結乾燥され、そして内部標準としてトリメチルシリル-[2,2,3,3,2H4]-1-プロピオン酸ナトリウム(TMSP) 1 mMを有する1 mlのリン酸ナトリウムバッファー(pH 6.0、D20に基づく)中にもどされた。
【誤訳訂正１８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００９１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００９１】
ＮＭＲ測定
ＮＭＲスペクトルは、プロトンＮＭＲセットアップを備えたバリアン(Varian) UNITY 400 MHzスペクトル計で、293 Kの作業温度で、完全に自動化された様式で三回記録された。自由誘導減衰(FID)は、8,000 Hzのスペクトルバンド幅を有する64 Kデータポイントとして集められた;45度のパルスが4.10秒の測定時及び2秒の緩和遅延で使用された。スペクトルが、128 FIDの蓄積によって決定された。残余の水の信号は、水ピークが測定パルスの前に一定の頻度で2秒間照射されたプリサチュレーションによって除去された。
【誤訳訂正１９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００９４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００９４】
変形性関節症代謝物質の代謝的フィンガープリント又は差プロファイルの決定
400MHzのＮＭＲスペクトル計によって、健康な個体の及び変形性関節症が診断された個体の尿サンプルが試験された。スペクトルが処理され、そしてライン・リストが内部標準への参照後に標準のバリアン・ソフトウェアによって編集された。ＮＭＲデータ換算ファイルが、Winlin VI. 10内にインポートされた。種々のＮＭＲスペクトルにおける比較可能な信号の小さな変化が、国際公開第02/13228号に記載されたような部分的線形適合アルゴリズムを使用することによって調節され、そして該線が解像度の損失無しにフィットされた。データのスケールは自動的に調節され、そして単位強度へと「正規化」された。内因的及び外因的代謝物質が、ＮＭＲスペクトルから除去され、それは特定の及び「有意的な」変形性関節症に関連した変化へのデータの変換をもたらした。この目的のために、それによってスペクトル線位置の80〜90％が除去されたところの閾値が使用された。