【手続補正書】
【提出日】平成18年9月28日(2006.9.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも3つの細胞型の細胞混合物から第1の細胞型が濃縮された集団を生成する方法であって、
（a）少なくとも第1、第2、および第3の細胞型を含む細胞混合物を提供する段階と；
（b）該第2の細胞型と比較して該第1の細胞型が濃縮された第1の細胞集団を生成するために、該第1の細胞型の通過を選択的に可能にする第1の微小流路（microfluidic channel）と該混合物を接触させる段階；ならびに
（c）該第2および第3の細胞型と比較して該第1の細胞型が濃縮された第2の細胞集団を生成するために、該第1の細胞型の通過を選択的に可能にする第2の微小流路と該第1細胞集団を接触させ、それにより第1の細胞型が濃縮された集団を生成する段階
を含む方法。
【請求項２】
段階（b）が、第2の細胞型と比較して第1の細胞型の相対的集団を少なくとも100倍、1000倍、10,000倍、100,000倍、または1,000,000倍増加させる、請求項1記載の方法。
【請求項３】
段階（c）が、第3の細胞型と比較して第1の細胞型の相対的集団を少なくとも100倍、1000倍、10,000倍、100,000倍、または1,000,000倍増加させる、請求項1記載の方法。
【請求項４】
第2の細胞集団をアレイ化する段階（d）をさらに含む、請求項1記載の方法。
【請求項５】
第1の細胞型が胎児赤血球であり、第2の細胞型が母体赤血球であり、かつ第3の細胞型が母体白血球である、請求項1記載の方法。
【請求項６】
試料から一つまたは複数の所望の細胞を分離するためのマイクロ流体システムであって、
（a）（i）少なくとも2つの流入流路；
（ii）反応チャンバー；および
（iii）流出流路を含み、
該流入流路が該反応チャンバーを通して該流出流路へ接続されている、溶解デバイス；
（b）微小流路内に配置された障害物を含む細胞結合デバイスであって、該障害物が第2の細胞型と比較して第1の細胞型へ優先的に結合する、細胞結合デバイス；ならびに
（c）個別の細胞を封じ込めるための場所の二次元アレイを含むアレイ化デバイス
を含むシステム。
【請求項７】
試料から一つまたは複数の所望の細胞を分離するためのマイクロ流体システムであって、
（a）（i）少なくとも2つの流入流路；
（ii）反応チャンバー；および
（iii）流出流路を含み、
該流入流路が該反応チャンバーを通して該流出流路へ接続されている、溶解デバイス；ならびに
（b）微小流路内に配置された障害物を含む細胞結合デバイスであって、該障害物が第2の細胞型と比較して第1の細胞型へ優先的に結合する、細胞結合デバイス
を含むシステム。
【請求項８】
試料から所望の細胞を分離するためのマイクロ流体システムであって、
（a）（i）少なくとも2つの流入流路；
（ii）反応チャンバー；および
（iii）流出流路を含み、
該流入流路が該反応チャンバーを通して該流出流路へ接続されている、溶解デバイス；ならびに
（b）個別の細胞を封じ込めるための場所の二次元アレイを含むアレイ化デバイス
を含むシステム。
【請求項９】
試料から一つまたは複数の所望の細胞を分離するためのマイクロ流体システムであって、
（a）微小流路内に配置された障害物を含む細胞結合デバイスであって、該障害物が第2の細胞型と比較して第1の細胞型へ優先的に結合する、細胞結合デバイス；および
（b）個別の細胞を封じ込めるための場所の二次元アレイを含むアレイ化デバイス
を含むシステム。
【請求項１０】
障害物が、抗CD71抗体、抗CD36抗体、抗GPA抗体、もしくは抗CD45抗体、またはそれらの組み合わせでコーティングされている、請求項6、7、および9のいずれか一項記載のマイクロ流体システム。
【請求項１１】
細胞結合デバイスが、第4の細胞型と比較して第3の細胞型へ優先的に結合する障害物をさらに含む、請求項6、7、および9のいずれか一項記載のマイクロ流体システム。
【請求項１２】
アレイ化デバイスが個別の細胞の選択的放出のためのアクチュエーターをさらに含む、請求項6、8、および9のいずれか一項記載のマイクロ流体システム。
【請求項１３】
反応チャンバーが蛇行状流路を含む、請求項6から8のいずれか一項記載のマイクロ流体システム。
【請求項１４】
溶解デバイスが希釈チャンバーおよび第3の流入流路をさらに含み、反応チャンバーが該希釈チャンバーを通じて流出流路へ接続されており、該第3の流入口が該反応チャンバーと該希釈チャンバーとの間に配置されている、請求項6から8のいずれか一項記載のマイクロ流体システム。
【請求項１５】
希釈チャンバーが蛇行状流路を含む、請求項14記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項１６】
試料から一つまたは複数の第2の細胞型を分離するための方法であって、
（a）一つまたは複数の微小流路内に（i）少なくとも第1および第2の細胞型を含む試料、および（ii）第1の細胞型を優先的に溶解させる溶液を導入して、第2の細胞型と比較して第1の細胞型のより高度な溶解を引き起こす段階；
（b）段階（a）の生成物を微小流路内に配置された障害物を含むマイクロ流体デバイスと接触させる段階であって、該障害物が該第2の細胞型へ優先的に結合する段階と；
（c）該障害物へ結合した細胞を収集し、それにより該第2の細胞型が濃縮された細胞集団を生成する段階；
（d）該第2の細胞型が濃縮された該細胞集団をアレイ化する段階；
（e）該第2の細胞型が濃縮された該集団中で一つまたは複数の該第2の細胞型を同定する段階；ならびに
（f）該一つまたは複数の第2の細胞型を収集し、それにより該試料から該一つまたは複数の第2の細胞型を分離する段階
を含む方法。
【請求項１７】
試料から一つまたは複数の第2の細胞型を分離するための方法であって、
（a）一つまたは複数の微小流路内に（i）少なくとも第1、第2、および第3の細胞型を含む試料、および（ii）第1の細胞型を優先的に溶解させる溶液を導入して、第2の細胞型と比較して第1の細胞型のより高度な溶解を引き起こす段階；
（b）段階（a）の生成物を微小流路内に配置された障害物を含むマイクロ流体デバイスと接触させる段階であって、該障害物が該第2の細胞型と比較して該第3の細胞型へ優先的に結合する段階；
（c）該障害物へ結合していない細胞を収集し、それにより該第2の細胞型が濃縮された細胞集団を生成する段階；
（d）該第2の細胞型が濃縮された該細胞集団をアレイ化する段階；
（e）該第2の細胞型が濃縮された該細胞集団中で一つまたは複数の該第2の細胞型を同定する段階；ならびに
（f）該一つまたは複数の第2の細胞型を収集し、それにより該試料から該一つまたは複数の第2の細胞型を分離する段階
を含む方法。
【請求項１８】
第2の細胞型が濃縮された細胞集団を生成するための方法であって、
（a）一つまたは複数の微小流路内に（i）少なくとも第1および第2の細胞型を含む試料、および（ii）第1の細胞型を優先的に溶解させる溶液を導入して、第2の細胞型と比較して第1の細胞型のより高度な溶解を引き起こす段階；
（b）段階（a）の生成物を微小流路内に配置された障害物を含むマイクロ流体デバイスと接触させる段階であって、該障害物が該第2の細胞型へ優先的に結合する段階；ならびに
（c）該障害物へ結合した細胞を収集し、それにより該第2の細胞型が濃縮された細胞集団を生成する段階
を含む方法。
【請求項１９】
第2の細胞型が濃縮された細胞集団を生成するための方法であって、
（a）一つまたは複数の微小流路内に（i）少なくとも第1、第2、および第3の細胞型を含む試料、および（ii）第1の細胞型を優先的に溶解させる溶液を導入して、第2の細胞型と比較して第1の細胞型のより高度な溶解を引き起こす段階；
（b）段階（a）の生成物を微小流路内に配置された障害物を含むマイクロ流体デバイスと接触させる段階であって、該障害物が該第2の細胞型と比較して該第3の細胞型へ優先的に結合する段階；ならびに
（c）該障害物へ結合していない細胞を収集し、それにより該第2の細胞型が濃縮された細胞集団を生成する段階
を含む方法。
【請求項２０】
試料から一つまたは複数の第2の細胞型を分離するための方法であって、
（a）一つまたは複数の微小流路内に（i）少なくとも第1および第2の細胞型を含む試料、および（ii）第1の細胞型を優先的に溶解させる溶液を導入して、第2の細胞型と比較して第1の細胞型のより高度な溶解を引き起こす段階；
（b）段階（a）の生成物をアレイ化する段階；
（c）該一つまたは複数の第2の細胞型を同定する段階；ならびに
（d）該一つまたは複数の第2の細胞型を収集し、それにより該試料から該一つまたは複数の第2の細胞型を分離する段階
を含む方法。
【請求項２１】
試料から一つまたは複数の第2の細胞型を分離するための方法であって、
（a）少なくとも第1および第2の細胞型を含む試料を微小流路内に配置された障害物を含むマイクロ流体デバイスと接触させる段階であって、該障害物が該第2の細胞型と比較して該第1の細胞型へ優先的に結合する段階；
（b）該障害物へ結合していない細胞を収集し、それにより枯渇した細胞集団を生成する段階；
（c）該枯渇した細胞集団をアレイ化する段階；
（d）該枯渇した集団中で該一つまたは複数の第2の細胞型を同定する段階；および
（e）該一つまたは複数の該第2の細胞型を収集し、それにより該試料から該一つまたは複数の第2の細胞型を分離する段階
を含む方法。
【請求項２２】
試料から一つまたは複数の第2の細胞型を分離するための方法であって、
（a）少なくとも第1および第2の細胞型を含む試料を微小流路内に配置された障害物を含むマイクロ流体デバイスと接触させる段階であって、該障害物が該第1の細胞型と比較して該第2の細胞型へ優先的に結合する段階；
（b）該障害物へ結合した細胞を収集し、それにより枯渇した細胞集団を生成する段階；
（c）該枯渇した細胞集団をアレイ化する段階；
（d）該枯渇した集団中で該一つまたは複数の第2の細胞型を同定する段階；および
（e）該一つまたは複数の第2の細胞型を収集し、それにより該試料から該一つまたは複数の該第2の細胞型を分離する段階
を含む方法。
【請求項２３】
第2の細胞型が胎児赤血球である、請求項16から22のいずれか一項記載の方法。
【請求項２４】
段階（a）中の溶液がNaHCO3およびアセタゾールアミド（acetazolamide）を含む、請求項16から20のいずれか一項記載の方法。
【請求項２５】
段階（a）の後に、一つまたは複数の微小流路内で段階（a）の生成物を希釈剤で希釈する段階をさらに含む、請求項16から20のいずれか一項記載の方法。
【請求項２６】
障害物の各々が結合成分でコーティングされている、請求項16から19、21、および22のいずれか一項記載の方法。
【請求項２７】
結合成分が、抗CD71抗体、抗CD36抗体、抗GPA抗体、もしくは抗CD45抗体、またはそれらの組み合わせを含む、請求項16記載の方法。
【請求項２８】
試料中の一つまたは複数の第2の細胞型の少なくとも75％、80％、90％、95％、98％、または99％がアレイ化デバイス内でアレイ化される、請求項16、17、および20から22のいずれか一項記載の方法。
【請求項２９】
試料中の第2の細胞型の少なくとも75％、80％、90％、95％、98％、または99％が収集される、請求項18から19のいずれか一項記載の方法。
【請求項３０】
第2の細胞型が濃縮された細胞集団を生成するための方法であって、
（a）少なくとも第1および第2の細胞型を含む試料を提供する段階；
（b）一つまたは複数の微小流路内に（i）該試料、および（ii）第1の細胞型を優先的に溶解させる溶解バッファーを導入して、第2の細胞型と比較して第1の細胞型のより高度な溶解を引き起こし、該濃縮された集団を生成する段階
を含む方法。
【請求項３１】
段階（b）の後に、希釈した試料を生成するために、一つまたは複数の微小流路内で濃縮された集団を希釈剤で希釈する段階（c）をさらに含む、請求項30記載の方法。
【請求項３２】
段階（c）の後に、希釈した試料を収集する段階（d）をさらに含む、請求項31記載の方法。
【請求項３３】
試料が2つまたはそれ以上の微小流路内に導入される、請求項30記載の方法。
【請求項３４】
第1の細胞型が母体赤血球であり、第2の細胞型が胎児赤血球である、請求項30記載の方法。
【請求項３５】
溶解バッファーがNaHCO3およびアセタゾールアミドを含む、請求項34記載の方法。
【請求項３６】
溶解バッファーが少なくとも30秒間試料と接触させられる、請求項34記載の方法。
【請求項３７】
第2の細胞型の少なくとも98％が溶解されない、請求項30記載の方法。
【請求項３８】
（a）（i）少なくとも3つの流入流路；
（ii）蛇行状流路を含む反応チャンバー；
（iii）蛇行状流路を含む希釈チャンバー；および
（iv）流出流路
を含むマイクロ流体デバイス；ならびに
（b）他の細胞型より1つの細胞型を優先的に溶解させる溶解バッファー
を含むキット。
【請求項３９】
（c）希釈剤をさらに含む、請求項38記載のキット。
【請求項４０】
溶解バッファーがNaHCO3およびアセタゾールアミドを含む、請求項38記載のキット。
【請求項４１】
流入流路および流出流路が10から500μmの直径寸法を有する、請求項38記載のキット。
【請求項４２】
（ii）および（iii）の蛇行状流路が各々少なくとも10μLの容積を有する、請求項41記載のキット。
【請求項４３】
（ii）および（iii）の蛇行状流路が各々少なくとも20μLの容積を有する、請求項42記載のキット。
【請求項４４】
第2の細胞型について枯渇した、または濃縮された細胞集団を生成する方法であって、
（a）少なくとも第1および第2の細胞型を含む試料を、該第2の細胞型と比較して該第1の細胞型へ優先的に結合する障害物を含むマイクロ流体デバイスと接触させる段階；
（b）該障害物へ結合した細胞または該障害物へ結合していない細胞を収集し、それにより枯渇した、または濃縮された細胞集団を生成する段階
を含む方法。
【請求項４５】
障害物が第1の細胞型の表面へ結合する結合成分でコーティングされている、請求項44記載の方法。
【請求項４６】
第1の細胞型が胎児赤血球である、請求項44記載の方法。
【請求項４７】
第2の細胞型が胎児赤血球である、請求項44記載の方法。
【請求項４８】
試料内の第1の細胞型の少なくとも60％が障害物へ結合する、請求項44記載の方法。
【請求項４９】
試料内の第2の細胞型の少なくとも70％が障害物へ結合しない、請求項44記載の方法。
【請求項５０】
障害物が二次元アレイで規則化されている、請求項44記載の方法。
【請求項５１】
その各々が胎児細胞特異的、上皮細胞特異的、腫瘍細胞特異的、幹細胞特異的、細菌特異的、原虫特異的、または真菌特異的な抗体を含み、微小流路内に配置された障害物を含む、第2の細胞型について濃縮された、または枯渇した細胞集団を生成するためのマイクロ流体デバイスであって、第1および第2の細胞型を含む試料を該デバイスに導入した場合に、該第1または第2の細胞型が該障害物に優先的に結合する、マイクロ流体デバイス。
【請求項５２】
障害物が二次元アレイで規則化されている、請求項51記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項５３】
障害物の各々の高さが50から500μmである、請求項51記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項５４】
障害物の各々が、高さに直交する5から500μmの範囲内の寸法を有する、請求項51のマイクロ流体デバイス。
【請求項５５】
障害物の各々が他の障害物から少なくとも10から1000μm離れて配置されている、請求項51記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項５６】
抗体が、抗CD71抗体、抗CD36抗体、抗GPA抗体、もしくは抗CD45抗体、またはそれらの組み合わせである、請求項51記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項５７】
（a）微小流路内に配置された障害物の、流体流路を規定する第1の領域であって、該第1の領域内の該障害物が第2の細胞型と比較して第1の細胞型へ優先的に結合する、第1の領域；および
（b）該微小流路内に配置された障害物の第2の領域であって、該第2の領域内の該障害物が第4の細胞型と比較して第3の細胞型へ優先的に結合する、第2の領域
を含む（ただし、該第1および第3の細胞型が同一ではない）、第2の細胞型について濃縮された、または枯渇した細胞集団を生成するためのマイクロ流体デバイス。
【請求項５８】
第2の細胞型および第4の細胞型が同一である、請求項57記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項５９】
第2の細胞型および第3の細胞型が同一である、請求項58記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項６０】
第1の領域および第2の領域が、微小流路内で流体の流れに対して直列に配列されている、請求項57記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項６１】
第1の領域および第2の領域が微小流路内で流体の流れに対して並列に配列されている、請求項57記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項６２】
第1の領域内の障害物が第2の領域内の該障害物間に散在している、請求項61記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項６３】
（a）微小流路内に配置された障害物の、流体流路を規定する第1の領域であって、該第1の領域内の該障害物が、第2の細胞型と比較して第1の細胞型へ優先的に結合し、該障害物が少なくとも2つの実質的に平行な行で、かつ少なくとも2つの実質的に平行な列で配列されている、第1の領域；および
（b）該微小流路内に配置された障害物の第2の領域であって、該第2の領域内の該障害物が、第4の細胞型と比較して第3の細胞型へ優先的に結合し、該障害物が少なくとも2つの実質的に平行な行で、かつ少なくとも2つの実質的に平行な列で配列されている第2の領域を含む、マイクロ流体デバイスであって、第1および第2の領域が微小流路内で相互に隣接して配置されており、かつ第2の領域内の行が第1の領域内の行に対して第1の領域内の行間の距離より短い距離に配置されている、第2の領域
を含む、第2の細胞型において濃縮された、または枯渇した細胞集団の生成のためのマイクロ流体デバイス。
【請求項６４】
第1の領域内の障害物が、抗CD71抗体、抗CD36抗体、抗GPA抗体、もしくは抗CD45抗体、またはそれらの組み合わせでコーティングされている、請求項63記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項６５】
第2の領域内の障害物が、抗CD71抗体、抗CD36抗体、抗GPA抗体、もしくは抗CD45抗体、またはそれらの組み合わせでコーティングされている、請求項63記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項６６】
第1の領域内の列間の距離に対する第1の領域内の行間の距離の比率が約√3である、請求項63記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項６７】
第2の領域内の列間の距離に対する第2の領域内の行間の距離の比率が約√3である、請求項63記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項６８】
障害物が胎児細胞特異的抗体を含む、請求項51記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項６９】
障害物が上皮細胞特異的抗体を含む、請求項51記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項７０】
（a）試料を、第2の型の細胞と比較して第1の型の細胞に優先的に結合する結合成分を含む障害物を含むデバイスと接触させる段階；および
（b）該障害物に結合した細胞を放出させることにより、該細胞を該試料から分離する段階
を含む、試料から第2の型の1つまたは複数の細胞を分離する方法。
【請求項７１】
段階（b）における分離が、剪断力の適用または結合した細胞の溶解を含む、請求項70記載の方法。
【請求項７２】
段階（b）の後に細胞をアレイ化する段階をさらに含む、請求項70記載の方法。
【請求項７３】
段階（b）の後に細胞の細胞内容（cellular contents）を分析する段階をさらに含む、請求項70記載の方法。
【請求項７４】
分析がFISHを含む、請求項73記載の方法。
【請求項７５】
分析が核酸分析を含む、請求項73記載の方法。
【請求項７６】
第1の型が、胎児細胞、上皮細胞、腫瘍細胞、幹細胞、細菌、原虫、または真菌を含む、請求項70記載の方法。
【請求項７７】
段階（b）の後に第1の型の1つまたは複数の細胞を同定する、請求項70記載の方法。
【請求項７８】
結合成分が抗体を含む、請求項70記載の方法。
【請求項７９】
抗体が、胎児細胞特異的、上皮細胞特異的、腫瘍細胞特異的、幹細胞特異的、細菌特異的、原虫特異的、または真菌特異的な抗体である、請求項78記載の方法。
【請求項８０】
第2の型が白血球または赤血球を含む、請求項70記載の方法。
【請求項８１】
（a）試料を、第1の型の細胞と比較して第2の型の細胞に優先的に結合する結合成分を含む障害物を含むデバイスと接触させる段階；および
（b）胎児細胞、上皮細胞、腫瘍細胞、幹細胞、細菌、原虫、および真菌からなる群より選択される、第2の型の細胞を同定するために、該障害物に結合した細胞を染色する段階
を含む、試料において第2の型の1つまたは複数の細胞を同定する方法。
【請求項８２】
段階（b）の間、または段階（b）の後に、細胞の細胞内容を分析する段階をさらに含む、請求項81記載の方法。
【請求項８３】
分析が核酸分析を含む、請求項82記載の方法。
【請求項８４】
分析がFISHを含む、請求項81記載の方法。
【請求項８５】
第2の型が胎児細胞、上皮細胞、または腫瘍細胞を含む、請求項81記載の方法。
【請求項８６】
段階（b）の間、または段階（b）の後に、第2の型の1つまたは複数の細胞を同定する、請求項81記載の方法。
【請求項８７】
結合成分が抗体を含む、請求項81記載の方法。
【請求項８８】
抗体が、胎児細胞特異的、上皮細胞特異的、腫瘍細胞特異的、幹細胞特異的、細菌特異的、原虫特異的、または真菌特異的な抗体である、請求項87記載の方法。
【請求項８９】
第1の型が白血球または赤血球を含む、請求項81記載の方法。
【請求項９０】
（i）請求項51記載のデバイス、および（ii）障害物に結合した第1または第2の型の細胞を溶解することができる溶解試薬、を含むキット。
【請求項９１】
（i）請求項51記載のデバイス、および（ii）障害物に結合した第1または第2の型の細胞に対する染料、を含むキット。
【請求項９２】
（i）請求項51記載のデバイス、および（ii）障害物に結合した第1または第2の型の細胞の核酸分析のための試薬、を含むキット。
【請求項９３】
（a）基質を提供する段階；
（b）複数の障害物または該基質を作製する段階；
（c）胎児細胞特異的、上皮細胞特異的、腫瘍細胞特異的、幹細胞特異的、細菌特異的、原虫特異的、または真菌特異的な抗体を、該複数の障害物に添付する段階；および
（d）流路を生成するために、該複数の障害物を封入する段階
を含む、第2の型の細胞について濃縮された、または枯渇した細胞集団を生成するためのデバイスを製造する方法。
【請求項９４】
基質が、シリコンベースの基質、金属ベースの基質、シリコンオンインシュレーター（silicon-on insulator）ベースの基質、ガラスベースの基質、またはポリマーベースの基質より選択される、請求項93記載の方法。
【請求項９５】
作製段階が、リソグラフィ（lithography）、微細加工（micromachining）、鋳造（casting）、成形（molding）、型押し（embossing）、ウェットケミカルエッチング（wet chemical etch）、ドライケミカルエッチング（dry chemical etch）、ミリング（milling）、ダイヤモンドカッティング（diamond cutting）、電鋳（electroforming）、LIGA、またはそれらの任意の組み合わせを含む、請求項93記載の方法。
【請求項９６】
障害物のパターンが2次元アレイである、請求項93記載の方法。
【請求項９７】
2次元アレイパターンが複数の行を含み、ここで全ての後ろの行が前の行に対してシフトしている、請求項96記載の方法。
【請求項９８】
抗体が、抗CD71抗体、抗CD36抗体、抗GPA抗体、および抗CD45抗体からなる群より選択される、請求項93記載の方法。
【請求項９９】
胎児細胞または非胎児細胞に選択的に結合する1つまたは複数の結合成分ならびに1つまたは複数のヒドロゲルポリマーを含む、胎児細胞濃縮デバイス。
【請求項１００】
胎児赤血球または非胎児細胞に選択的に結合する結合成分を含むヒドロゲルポリマーを含むマトリックスを通じて試料を流し、これにより、該非胎児細胞のサブセットから該胎児細胞を分離する段階
を含む、胎児細胞および非胎児細胞を含む試料から胎児細胞を分離するための方法。
【請求項１０１】
腫瘍細胞または非腫瘍細胞に選択的に結合する1つまたは複数の結合成分ならびに1つまたは複数のヒドロゲルポリマーを含む、腫瘍細胞濃縮デバイス。
【請求項１０２】
腫瘍細胞または非腫瘍細胞に選択的に結合する結合成分を含むヒドロゲルポリマーを含むマトリックスを通じて試料を流し、これにより、該非腫瘍細胞のサブセットから該腫瘍細胞を分離する段階
を含む、腫瘍細胞および非腫瘍細胞を含む試料から腫瘍細胞を分離するための方法。
【請求項１０３】
1つまたは複数のサイズベースの分離領域であって、各々のサイズベースの分離領域は、流体試料の第1の分析対象を第1の方向へ、かつ該流体試料の第2の分析対象を第2の方向へ方向付ける複数の障害物を含み、該第1の分析対象および第2の分析対象は異なるサイズを有する、分離領域；および
該第1の分析対象、第2の分析対象、または第3の分析対象のいずれかを選択的に捕捉する、1つまたは複数の捕捉領域
を含む、システム。
【請求項１０４】
1つまたは複数のサイズベースの分離領域、および1つまたは複数の捕捉領域に試料を適用する段階であって、各々のサイズベースの分離領域は、第1の分析対象を第1の方向へ、かつ第2の分析対象を第2の方向へ方向付ける複数の障害物を含み、かつ各々の捕捉領域は該第1、第2、または第3の分析対象を選択的に捕捉する、段階
を含む、流体試料における異なるサイズの第2の分析対象から第1の分析対象をサイズベースで分離するための方法。
【請求項１０５】
2列の障害物を含む路と連絡する第1の流入口を含む、血液試料から第1の細胞型が濃縮された細胞集団を生成するためのデバイスであって、該2列の障害物は、第1の細胞型を第1の流出口へ向かう第1の方向へ、かつ第2の細胞型を第2の流出口へ向かう第2の方向へ方向付ける、デバイス。
【請求項１０６】
第1の複数のギャップを含む路と連絡する第1の流入口を含む、母体血液試料から胎児赤血球が濃縮された細胞集団を生成するためのデバイスであって、該第1の複数のギャップは、1つまたは複数の胎児赤血球を第1の流出口へ向かう第1の方向へ、かつ1つまたは複数の母体赤血球を第2の流出口へ向かう第2の方向へ方向付ける、デバイス。
【請求項１０７】
第1の複数のギャップを含む路と連絡する第1の流入口を含む、血液試料から上皮細胞が濃縮された細胞集団を生成するためのデバイスであって、該第1の複数のギャップは、1つまたは複数の上皮細胞を第1の流出口へ向かう第1の方向へ、かつ1つまたは複数の非上皮細胞を第2の流出口へ向かう第2の方向へ方向付ける、デバイス。
【請求項１０８】
複数の障害物を含む路と連絡する第1の流入口を有するデバイスに血液試料を適用する段階であって、該血液試料が該路を通じて流れる場合に、該複数の障害物は該第1の細胞型を第1の流出口へ向かう第1の方向へ、かつ該血液試料における第2の細胞型を第2の流出口へ向かう第2の方向へ方向付け、これにより該第1の細胞型が濃縮された細胞集団を生成する、段階
を含む、血液試料から第1の細胞型が濃縮された細胞集団を生成するための方法。
【請求項１０９】
複数の障害物を含む路と連絡する第1の流入口を有するデバイスに母体血液試料を適用する段階であって、該母体血液試料が該路を通じて流れる場合に、該複数の障害物は胎児赤血球を第1の流出口へ向かう第1の方向へ、かつ該母体血液試料における1つまたは複数の非胎児赤血球を第2の流出口へ向かう第2の方向へ方向付け、これにより胎児赤血球が濃縮された細胞集団を生成する、段階
を含む、母体血液試料から胎児赤血球が濃縮された細胞集団を生成するための方法。
【請求項１１０】
複数の障害物を含む路と連絡する第1の流入口を有するデバイスに血液試料を適用する段階であって、該血液試料が該路を通じて流れる場合に、該複数の障害物は該上皮細胞を第1の流出口へ向かう第1の方向へ、かつ該血液試料における1つまたは複数の非上皮細胞を第2の流出口へ向かう第2の方向へ方向付け、これにより上皮細胞が濃縮された細胞集団を生成する、段階
を含む、血液試料から上皮細胞が濃縮された細胞集団を生成するための方法。
【請求項１１１】
複数の障害物を含む路と連絡する第1の流入口を有するデバイスに血液試料を適用する段階であって、該血液試料が該路を通じて流れる場合に、該複数の障害物は該腫瘍細胞を第1の流出口へ向かう第1の方向へ、かつ該血液試料における1つまたは複数の非腫瘍細胞を第2の流出口へ向かう第2の方向へ方向付け、これにより腫瘍細胞が濃縮された細胞集団を生成する、段階
を含む、血液試料から腫瘍細胞が濃縮された細胞集団を生成するための方法。
【請求項１１２】
試料において50×10-3細胞/μlまでの濃度を有する第1の細胞型を、サイズ、形状、または変形能に基づいて、少なくとも100,000倍に選択的に濃縮するために配置される第1のアレイの障害物を含む、デバイス。
【請求項１１３】
母体血液試料からの1つまたは複数の非胎児細胞を枯渇させ、かつ該母体血液試料に存在する少なくとも90％の胎児細胞を回収する第1のアレイの障害物を含む、デバイス。
【請求項１１４】
血液試料からの1つまたは複数の非腫瘍細胞を枯渇させ、かつ該血液試料における少なくとも90％の腫瘍細胞を保持する第1のアレイの障害物を含む、デバイス。
【請求項１１５】
第1の細胞型について少なくとも100,000倍に濃縮された細胞集団を生成するための第1のアレイの障害物を含むデバイスに、試料を適用する段階 
を含む、試料において50×10-3細胞/μlまでの濃度で存在する第1の細胞型について濃縮された細胞集団を生成するための方法。
【請求項１１６】
基質を提供する段階；および
サイズ、形状、または変形能に基づいて細胞を通過させる障害物のパターンを、該基質上に作製する段階
を含む、セルソーティングのためのデバイスを製造するための方法であって、基質が、ソートされた細胞を収集するための少なくとも2つの流出口を含む、方法。