【手続補正書】
【提出日】平成17年11月9日(2005.11.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉで表されるプロテアーゼ阻害剤（蛋白質分解酵素阻害薬）：
【化１】
2005514377.tif 000001
但し、ＡはＮ及びＣα炭素原子を含む３〜８員複素環を表し；
Ｗは標的プロテアーゼの活性サイト残基(residue)と反応して共有結合付加物を形成する官能基を表し；
Ｒ1は水素、Ｃ−末端が結合されたアミノ酸若しくはペプチド又はそのアナログ、又はアミノ保護基を表し；
Ｒ2は存在しないか、環Ａに対する１個以上の置換基を表し、そのそれぞれは独立してハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、カルボニル、チオカルボニル、アミノ、アシルアミノ、アミド、シアノ、ニトロ、アジド、スルフェート、スルホネート、スルホンアミド、−（ＣＨ2）m−Ｒ6、−（ＣＨ2）m−ＯＨ、−（ＣＨ2）m−Ｏ−低級アルキル、−（ＣＨ2）m−Ｏ−低級アルケニル、−（ＣＨ2）n−Ｏ−（ＣＨ2）m−Ｒ6、−（ＣＨ2）m−ＳＨ、−（ＣＨ2）m−Ｓ−低級アルキル、−（ＣＨ2）m−Ｓ−低級アルケニル、−（ＣＨ2）n−Ｓ−（ＣＨ2）m−Ｒ6でもよく、
Ｒ3aは水素又は結合している窒素原子の電子対を共役(conjugate)しない置換基を表し；
Ｒ3bは存在しないか、結合している窒素原子の電子対を共役しない、低級アルキル等の置換基を表し；
Ｒ4a及びＲ4bはそれぞれ独立して、水素、低級アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、複素環アルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシル、カルボキシル、カルボキシアミド、カルボニル、又はシアノ基を表し（但しＲ4a及びＲ4bの両方が水素であるかいずれも水素でない）；
Ｒ4cはハロゲン、アミン、アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、複素環アルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシル、カルボキシル、カルボキシアミド、カルボニル、又はシアノを表し；
Ｒ6はそれぞれの存在について独立して、アリール、アラルキル、シクロアルキル、シクロアルケニル又は複素環成分を表し；
ｚは０又は１〜３の整数であり；ｍは０又は１〜８の整数であり；ｎは１〜８の整数である。
【請求項２】
式ＩＩＩで表されるプロテアーゼ阻害剤：
【化２】
2005514377.tif 000002
但し、Ｒは水素、ハロゲン、又は分岐状若しくは非分岐状Ｃ１〜Ｃ６アルキルを表し；
Ｗは標的プロテアーゼの活性サイト残基と反応して共有結合付加物を形成する官能基を表し；
Ｒ1は水素、Ｃ−末端が結合されたアミノ酸若しくはペプチド又はそのアナログ、又はアミノ保護基を表し；
Ｒ3aは水素、又は結合している窒素原子の電子対を共役しない、低級アルキル等の置換基を表し；
Ｒ3bは存在しないか、結合している窒素原子の電子対を共役しない、低級アルキル等の置換基を表し；
Ｒ4a及びＲ4bはそれぞれ独立して、水素、低級アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、複素環アルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシル、カルボキシル、カルボキシアミド、カルボニル、又はシアノ基を表し（但しＲ4a及びＲ4bの両方が水素であるかいずれも水素でない）；
Ｒ4cはハロゲン、アミン、アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、複素環アルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシル、カルボキシル、カルボキシアミド、カルボニル、又はシアノを表し；
ｚは０又は１〜３の整数である。
【請求項３】
式ＩＶで表されるプロテアーゼ阻害剤：
【化３】
2005514377.tif 000003
但し、ＡはＮ及びＣα炭素原子を含む３〜８員複素環を表し；
ＢはＣ３〜Ｃ８員環、又はＣ７〜Ｃ１４員の縮合された二環式若しくは三環式系を表し；
Ｗは標的プロテアーゼの活性サイト残基と反応して共有結合付加物を形成する官能基を表し；
Ｒ1は水素、Ｃ−末端が結合されたアミノ酸若しくはペプチド又はそのアナログ、又はアミノ保護基を表し；
Ｒ2は存在しないか、環Ａに対する１個以上の置換基を表し、そのそれぞれは独立してハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、カルボニル、チオカルボニル、アミノ、アシルアミノ、アミド、シアノ、ニトロ、アジド、スルフェート、スルホネート、スルホンアミド、−（ＣＨ2）m−Ｒ6、−（ＣＨ2）m−ＯＨ、−（ＣＨ2）m−Ｏ−低級アルキル、−（ＣＨ2）m−Ｏ−低級アルケニル、−（ＣＨ2）n−Ｏ−（ＣＨ2）m−Ｒ6、−（ＣＨ2）m−ＳＨ、−（ＣＨ2）m−Ｓ−低級アルキル、−（ＣＨ2）m−Ｓ−低級アルケニル、−（ＣＨ2）n−Ｓ−（ＣＨ2）m−Ｒ6でもよく；
Ｒ3bは存在しないか、結合している窒素原子の電子対を共役しない、低級アルキル等の置換基を表し；
Ｒ6はそれぞれの存在について独立して、アリール、アラルキル、シクロアルキル、シクロアルケニル又は複素環成分を表し；
ｍは０又は１〜８の整数であり；ｎは１〜８の整数である。
【請求項４】
式ＶＩで表されるプロテアーゼ阻害剤：
【化４】
2005514377.tif 000004
但し、ＢはＣ３〜Ｃ８員環、又はＣ７〜Ｃ１４員の縮合された二環式若しくは三環式系を表し；
Ｗは標的プロテアーゼの活性サイト残基と反応して共有結合付加物を形成する官能基を表し；
Ｒは水素、ハロゲン、又は分岐状若しくは非分岐状Ｃ１〜Ｃ６アルキルを表し；
Ｒ1は水素、Ｃ−末端が結合されたアミノ酸若しくはペプチド又はそのアナログ、又はアミノ保護基を表し；
Ｒ3bは存在しないか、結合している窒素原子の電子対を共役しない、低級アルキル等の置換基を表す。
【請求項５】
Ｗは−ＣＮ、−ＣＨ＝ＮＲ5、及び下式で表される群から選ばれた一種を表す請求項１〜４のプロテアーゼ阻害剤；
【化５】
2005514377.tif 000005
但し、Ｙ1及びＹ2はそれぞれ独立して、−ＯＨ、又は水酸基へ加水分解されることが可能な基であり、Ｙ1及びＹ2は環構造中に５〜８原子を有する１の環を介して結合されている環状誘導体を含む基を表し；
Ｒ5は、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、−Ｃ（Ｘ1）（Ｘ2）Ｘ3、−（ＣＨ2）m−Ｒ6、−（ＣＨ2）n−ＯＨ、−（ＣＨ2）n−Ｏ−アルキル、−（ＣＨ2）n−Ｏ−アルケニル、−（ＣＨ2）n−Ｏ−アルキニル、−（ＣＨ2）n−Ｏ−（ＣＨ2）m−Ｒ6、−（ＣＨ2）n−ＳＨ、−（ＣＨ2）n−Ｓ−アルキル、−（ＣＨ2）n−Ｓ−アルケニル、−（ＣＨ2）n−Ｓ−アルキニル、−（ＣＨ2）n−Ｓ−（ＣＨ2）m−Ｒ6、−Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）ＮＨ2、−Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ7を表し；
Ｒ6はそれぞれの存在について独立して、アリール、アラルキル、シクロアルキル、シクロアルケニル又は複素環成分を表し；
Ｒ7はそれぞれの存在について独立して、水素、又はアルキル、アルケニル、アリール、アラルキル、シクロアルキル、シクロアルケニル若しくは複素環成分を表し；
Ｒ50はＯ又はＳを表し；
Ｒ51はＮ3、ＳＨ2、ＮＨ2、ＮＯ2又は−ＯＲ7を表し；
Ｒ52は水素、低級アルキル、アミン、−ＯＲ7、又は医薬的に許容できる塩を表すか、Ｒ51及びＲ52が、それらが結合しているリン原子と共に環構造中に５〜８員環を有する複素環を形成してもよく；
Ｘ1はハロゲンを表し；
Ｘ2及びＸ3はそれぞれ水素又はハロゲンを表し；
ｍは０又は１〜８の整数であり；
ｎは１〜８の整数である。
【請求項６】
Ｒ4a、Ｒ4b及びＲ4cはそれぞれ独立して小さな疎水性基を表す請求項１又は２のプロテアーゼ阻害剤。
【請求項７】
Ｒ4a、Ｒ4b及びＲ4cは独立して、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル及び低級アルキニルの群から選ばれる請求項６のプロテアーゼ阻害剤。
【請求項８】
Ｒ4a及びＲ4bはそれぞれ水素を表し、Ｒ4cは小さな疎水性基を表す請求項１又は２のプロテアーゼ阻害剤。
【請求項９】
Ｒ4a及びＲ4bはそれぞれ水素を表し、Ｒ4cはシクロアルキル、複素環アルキル、アリール及びヘテロアリールの群から選ばれた一種を表す請求項１、２及び５いずれか１項のプロテアーゼ阻害剤。
【請求項１０】
Ｒ4cはＣ３〜Ｃ８シクロアルキルを表す請求項９のプロテアーゼ阻害剤。
【請求項１１】
Ｒ2は存在しないか−ＯＨを表す請求項１、３及び９いずれか１項のプロテアーゼ阻害剤。
【請求項１２】
Ｒ3aは水素を表し、Ｒ3bは存在しない請求項１〜６、９又は１１のプロテアーゼ阻害剤。
【請求項１３】
Ｗは下式で表される請求項１〜１２いずれか１項のプロテアーゼ阻害剤：
【化６】
2005514377.tif 000006
但し、Ｙ1及びＹ2はそれぞれ独立して、−ＯＨ、又は水酸基へ加水分解されることが可能な基であり、Ｙ1及びＹ2は環構造中に５〜８原子を有する１の環を介して結合されている環状誘導体を含む基を表し；
Ｒ5は、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、−Ｃ（Ｘ1）（Ｘ2）Ｘ3、−（ＣＨ2）m−Ｒ6、−（ＣＨ2）n−ＯＨ、−（ＣＨ2）n−Ｏ−アルキル、−（ＣＨ2）n−Ｏ−アルケニル、−（ＣＨ2）n−Ｏ−アルキニル、−（ＣＨ2）n−Ｏ−（ＣＨ2）m−Ｒ6、−（ＣＨ2）n−ＳＨ、−（ＣＨ2）n−Ｓ−アルキル、−（ＣＨ2）n−Ｓ−アルケニル、−（ＣＨ2）n−Ｓ−アルキニル、−（ＣＨ2）n−Ｓ−（ＣＨ2）m−Ｒ6、−Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）ＮＨ2、−Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ7を表し；
Ｒ6はそれぞれの存在について独立して、アリール、アラルキル、シクロアルキル、シクロアルケニル又は複素環成分を表し；
Ｒ7はそれぞれの存在について独立して、水素、又はアルキル、アルケニル、アリール、アラルキル、シクロアルキル、シクロアルケニル若しくは複素環成分を表し；
Ｘ1はハロゲンを表し；
Ｘ2及びＸ3はそれぞれ水素又はハロゲンを表し；
ｍは０又は１〜８の整数であり；ｎは１〜８の整数である。
【請求項１４】
Ｒ5は水素又は−Ｃ（Ｘ1）（Ｘ2）Ｘ3である（但し、Ｘ1はフッ素であり、Ｘ2及びＸ3がハロゲンの場合はやはりフッ素である。）請求項１３のプロテアーゼ阻害剤。
【請求項１５】
Ｒ1は、プロテアーゼの基質であるアミノ酸残基又はペプチジル成分である請求項１〜１２いずれか１項のプロテアーゼ阻害剤。
【請求項１６】
５０ｎｍ以下のＫｉでＤＰＩＶ（ジペプチジルペプチダーゼＩＶ）を阻害するプロテアーゼ阻害剤である請求項１〜１５いずれか１項のプロテアーゼ阻害剤。
【請求項１７】
経口的に作用する請求項１〜１６いずれか１項のプロテアーゼ阻害剤。
【請求項１８】
医薬的に許容できるキャリア、及び請求項１〜１７いずれか１項記載のプロテアーゼ阻害剤又は医薬的に許容できる塩若しくはそのプロドラッグを含有する医薬組成物。
【請求項１９】
in vivoでのｐｏｓｔ−プロリン開裂酵素を阻害するための治療薬の製造における請求項１〜１７いずれか１項のプロテアーゼ阻害剤の使用。
【請求項２０】
阻害剤がグルカゴン類似ペプチド、ＮＰＹ、ＰＰＹ、セクレチン、ＧＬＰ−１、ＧＬＰ−２、及びＧＩＰの群から選ばれるペプチドホルモンの血漿中濃度を増加させる請求項１９の使用。
【請求項２１】
グルコース代謝調節用治療薬の製造における請求項１〜１７いずれか１項のプロテアーゼ阻害剤の使用。
【請求項２２】
ＩＩ型糖尿病、インシュリン耐性、グルコース不耐性、高血糖症、低血糖症、過インシュリン症、肥満症、高脂質血症、又は高リポ蛋白血症の患者のグルコース代謝調節用請求項２１の使用。
【請求項２３】
酵素を請求項１〜１７いずれか１項記載のプロテアーゼ阻害剤と接触させることを含むｐｏｓｔ−プロリン開裂酵素の蛋白分解活性の阻害方法。
【請求項２４】
請求項１〜１７いずれか１項記載のプロテアーゼ阻害剤の製剤；医薬的に許容できるキャリア；並びに、in vivoでのｐｏｓｔ−プロリン開裂酵素阻害用製剤の使用方法を文章で記載し及び／又は図示して示す使用説明書：を含む包装医薬製品。
【請求項２５】
請求項１〜１７いずれか１項記載のプロテアーゼ阻害剤の製剤；医薬的に許容できるキャリア；並びにグルコース代謝調節用製剤の使用方法を文章で記載し及び／又は図示して示す使用説明書：を含む包装医薬製品。
【請求項２６】
プロテアーゼ阻害剤が、インシュリン及び／又はインシュリン分泌活性化剤(Insulinotropic agent)と共に配合され、又は共に包装されている請求項２５の包装医薬製品。
【請求項２７】
プロテアーゼ阻害剤が、Ｍ１受容体拮抗薬（レセプタアンタゴニスト）、プロラクチン阻害剤、β−細胞のＡＴＰ−依存性カリウムチャネルに作用する薬剤、メトホルミン、及び／又はグルコシダーゼ阻害剤、と共に配合され、又は共に包装されている請求項２５の包装医薬製品。
【請求項２８】
ｚが０である、請求項１、２、又は６〜８いずれか１項のプロテアーゼ阻害剤。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２３】
ＩＩ．定義
ここで使用される「高親和性」は、１μＭ以下の解離定数ＫDを有する分子間同士の強い結合親和性をいう。好ましくは、ＫDは１００ｎＭ未満、１０ｎＭ未満、１ｎＭ未満、１００ｐＭ未満、更に好ましくは１０ｐＭ以下である。好ましくは、２つの分子は共役結合されていてもよい（ＫDは実質的に０である。）。
「ｂｏｒｏ−Ａｌａ」は、カルボキシル基（ＣＯＯＨ）がボロニル基（Ｂ（ＯＨ）2）で置換されているアラニンのアナログを言う。同様に、「ｂｏｒｏ−Ｐｒｏ」は、カルボキシル基（ＣＯＯＨ）がボロニル基（Ｂ（ＯＨ）2）で置換されているプロリンのアナログを言う。一般的に、「ｂｏｒｏ−Ｘａａ」（但し、Ｘａａはアミノ酸残基である。）は、カルボキシル基（ＣＯＯＨ）がボロニル基（Ｂ（ＯＨ）2）で置換されているアミノ酸のアナログを言う。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３１】
アルケニルは、特定数の炭素原子、又は炭素数の限定が特記されない場合２６までの炭素原子を有し；基中に１以上の二重結合を有する、分岐状又は非分岐状の不飽和炭素鎖基を言う。６〜２６炭素原子を有するアルケニルとして、ヘキセニル、ヘプテニル、オクテニル、ノネニル、デセニル、ウンデセニル、ドデニル、トリデセニル、テトラデセニル、ペンタデセニル、ヘキサデセニル、ヘプタデセニル、オクタデセニル、ノナデセニル、エイコセニル、ヘネイコセニル、ドコセニル、トリコセニル及びテトラコセニル（これらの種々の異性体等）が挙げられる。但し、不飽和結合は、基中のどこに位置しても良く、二重結合に関する配置で（Ｚ）又は（Ｅ）構造のいずれでも良い（Ｅ、Ｚ表示法による）。
アルキニルは、基中に１以上の三重結合を有するアルケニル基中のヒドロカルビル基を言う。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３５】
「複素環」又は「複素環基」は、通常環構造が１〜４ヘテロ原子を有する３〜１０員環構造、好ましくは３〜７員環をいう。複素環は又、多環式でもよい。複素環基として、例えば、チオフェン、チアントレン、フラン、ピラン、イソベンゾフラン、クロメン、キサンテン、フェノキサチイン、ピロール、イミダゾール、ピラゾール、イソチアゾール、イソオキサゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、インドリジン、イソインドール、インドール、インダゾール、プリン、キノリジン、イソキノリン、キノリン、フタラジン、ナフチリジン、キノキサリン、キナゾリン、シンノリン、プテリジン、カルバゾール、カルボリン、フェナントリジン、アクリジン、ピリミジン、フェナントロリン、フェナジン、フェナルサジン、フェノチアジン、フラザン、フェノキサジン、ピロリジン、オキソラン、チオレン、オキサゾール、ピペリジン、ピペラジン、モルフォリン、ラクトン、ラクタム、例えばアゼチジノン及びピロリジノン、スルタム、スルトン等が挙げられる。複素環は１以上の位置で；例えば、ハロゲン、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヒドロキシル、アミノ、ニトロ、スルフヒドリル、イミノ、アミド、ホスフェート、ホスホネート、ホスフィネート、カルボニル、カルボキシル、シリル、スルファモイル、スルフィニル、エーテル、アルキルチオ、スルホニル、ケトン、アルデヒド、エステル、複素環、芳香族又はヘテロ芳香族成分、−ＣＦ3、−ＣＮ等の；上記置換基で置換されてもよい。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５８】
更に好ましい本発明の上記阻害剤構造では、Ｗは下式で表される：
【化７】
2005514377.tif 000007
更に好ましい本発明の上記阻害剤構造では、Ｒ5は水素又は−Ｃ（Ｘ1）（Ｘ2）Ｘ3である（但し、Ｘ1はフッ素であり、Ｘ2及びＸ3がハロゲンの場合はやはりフッ素である。）。
更に好ましい本発明の上記阻害剤構造では、Ｒ1はＲ1及びそれに結合しているアミン成分間を開裂するプロテアーゼ用の基質であるペプチジル成分である。又、Ｒ1は好ましくはアミノ保護基でもよい。
好ましくは、Ａは４〜８員環、更に好ましくは５、６又は７員環である。Ａは、アザリジン、チアゾール、ピロール、ジアゾール（イミダゾール及びピラゾリジン等）、ピリジン、オキサゾール、イソザゾール、イソチアゾール、アゼピン、ジアゼピン、オキサジアゾール、オキサトリアゾール、ジオキサゾール、オキサチアゾール、ピリミジン、ピリダジン、ピランジン、トリアジン、オキサジン、イソオキサジン及びオキサチアジン、又はそれらの還元体（それらのジヒドロ及びテトラヒドロ体等）、例えばピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、チアゾリジン、及びイミダゾリン等、の群からなる基から選ばれた環でもよい。更に好ましくは、Ａはチアゾール、ピロール、若しくはピリジン、又はそれらの還元体である。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６０】
Ｂは例えば３〜８員環、好ましくは５、６又は７員環である。Ｂはアザリジン、チアゾール、ピロール、ジアゾール（イミダゾール及びピラゾリジン等）、ピリジン、オキサゾール、イソザゾール、イソチアゾール、アゼピン、ジアゼピン、オキサジアゾール、オキサトリアゾール、ジオキサゾール、オキサチアゾール、ピリミジン、ピリダジン、ピランジン、トリアジン、オキサジン、イソオキサジン、及びオキサチアジン、又はそれらの還元体（それらのジヒドロ及びテトラヒドロ体等）、例えば、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、チアゾリジン、及びイミダゾリン等の群から選ばれた環でも良い。
Ｂは、例えば、インドール、インドレニン、イソベンザゾール、ピリンジン、ピラノピロール、イソインダゾール、インドキサジン、ベンズオキサゾール、アントラニル、キノリン、イソキノリン、シンノリン、キナゾリン、ナフチリジン、ピリドピリジン、ベンズオキサジン、ベンズイソオキサジン、カルバゾール、アクリジン、プリン、又はそれらの還元体（それらのジヒドロ−及びテトラヒドロ−体等）等の二環式又は三環式である。更に好ましくは、Ｂはテトラヒドロイソキノリン又はテトラヒドロカルボリン（β又はγ−カルボリン等）である。
Ｂは、非置換又は、１以上の−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ2、ハロゲン又は低級アルキルで置換されていてもよい。更に好ましくは、Ｂは非置換である。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６１】
Ｂは、例えば３〜８員環、好ましくは５、６又は７員環でもよい。Ｂは、アザリジン、チアゾール、ピロール、ジアゾール（イミダゾール及びピラゾリジン等）、ピリジン、オキサゾール、イソザゾール、イソチアゾール、アゼピン、ジアゼピン、オキサジアゾール、オキサトリアゾール、ジオキサゾール、オキサチアゾール、ピリミジン、ピリダジン、ピランジン、トリアジン、オキサジン、イソオキサジン、及びオキサチアジン、又はそれらの還元体（それらのジヒドロ及びテトラヒドロ体等）、例えばピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、チアゾリジン、及びイミダゾリン等の群から選ばれた環でも良い。
Ｂは、例えばインドール、インドレニン、イソベンザゾール、ピリンジン、ピラノピロール、イソインダゾール、インドキサジン、ベンズオキサゾール、アントラニル、キノリン、イソキノリン、シンノリン、キナゾリン、ナフチリジン、ピリドピリジン、ベンズオキサジン、ベンズイソオキサジン、カルバゾール、アクリジン、若しくはプリン、又はそれらの還元体（それらのジヒドロ及びテトラヒドロ体等）等の二環式又は三環式でもよい。更に好ましくは、Ｂはテトラヒドロイソキノリン又はテトラヒドロカルボリン（β又はγ−カルボリン等）である。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７０】
一般に、増加した小腸内重量及びその結果の増加した小腸粘膜機能のいずれかの効果が必要な患者は本発明の方法による治療の対象である。本発明で治療できる特定の症状として、種々のスプルー症候群、即ち；小麦のα−グリアジン中毒により生じ、腸の絨毛（ｖｉｌｌａｅ）の非常な損失に特徴を有するセリアックスプルー；感染により生じ、絨毛の部分的平坦化に特徴を有する熱帯性スプルー；普通の種々の免疫不全又は低ガンマグロブリン血症患者に通常見られ、絨毛高さの非常な減少に特徴を有する低ガンマグロブリン血症スプルー；が挙げられる。治療の有効性は、絨毛形態を検査する腸の生検により、栄養物吸収の生化学的評価により、患者の体重増加により、又はこれらの状態に関する症状改善により観察できる。本発明の方法で治療出来る、又は本発明の方法が予防的に使用できる他の症状として、放射線腸炎、伝染性又は感染後腸炎、局部性腸炎（クローン病）、毒性又は他の化学療法用薬剤による小腸内損傷、並びに短腸症候群の患者が挙げられる。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１０１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１０１】
実施例３：ｐＨ８での阻害剤の不活性化
実験は、シクロヘキシルグリシン−ｂＡｌａはＨｉｓ−ｂＡｌａ、Ａｌａ−ｂＡｌａ、及びＰｈｇ−ｂＡｌａと比較して、非常なｐＨ−時間依存性阻害を示さないことを示した。この実験では阻害剤の貯蔵溶液（Ｈｉｓ−ｂＡｌａ、Ａｌａ−ｂＡｌａ、Ｐｈｇ−ｂＡｌａ及びシクロヘキシルグリシン−ｂＡｌａ）をｐＨ１〜２に調整した。これら貯蔵溶液をｐＨ８で下記のようにプレインキュベートした：最初に、緩衝液（０．１Ｍ、ＨＥＰＥＳ、ｐＨ８、０．１４Ｍ  ＮａＣｌ）中への１：１０希釈を行った；次に、希釈後ｐＨを測定し、別の阻害剤のために７．５〜８に調整した；最後に、このｐＨでインキュベーションを０、６０、１２０、１８０分間行った。下記インキュベーション、１：１０阻害剤の緩衝液溶液への希釈及び阻害剤の酵素（ＤＰＰＩＶ）緩衝溶液への１：１０希釈が順々に行われた。阻害剤は、緩慢な結合のため酵素と共に１０分間プレインキュベートし、基質（Ｈ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−パラニトロアナリド）を濃度約＝ＫＭ（１７μＭ）で添加した。４１０ｎｍでの吸収を全ての阻害剤に対して３０分後に記録した。図３〜６参照。