【手続補正書】
【提出日】平成17年9月29日(2005.9.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６または配列番号７に記載されるアミノ酸配列を有する精製されたポリペプチド。
【請求項２】  配列番号１に記載されるアミノ酸配列を有する請求項１に記載の精製されたポリペプチド。
【請求項３】  配列番号２に記載されるアミノ酸配列を有する請求項１に記載の精製されたポリペプチド。
【請求項４】  配列番号３に記載されるアミノ酸配列を有する請求項１に記載の精製されたポリペプチド。
【請求項５】  配列番号４に記載されるアミノ酸配列を有する請求項１に記載の精製されたポリペプチド。
【請求項６】  配列番号５に記載されるアミノ酸配列を有する請求項１に記載の精製されたポリペプチド。
【請求項７】  配列番号６に記載されるアミノ酸配列を有する請求項１に記載の精製されたポリペプチド。
【請求項８】  配列番号７に記載されるアミノ酸配列を有する請求項１に記載の精製されたポリペプチド。
【請求項９】  前記ポリペプチドが完全にＬ−アミノ酸から成る、請求項１〜８の何れか一項に記載の精製されたポリペプチド。
【請求項１０】  前記ポリペプチドが完全にＤ−アミノ酸から成る、請求項１〜８の何れか一項に記載の精製されたポリペプチド。
【請求項１１】  請求項１〜１０の何れか一項に記載の精製されたポリペプチド及び担体を含む組成物。
【請求項１２】  請求項１〜１０の何れか一項に記載の精製されたポリペプチドの混合物及び担体から実質的に成る組成物。
【請求項１３】  請求項１〜１０の何れか一項に記載の精製されたポリペプチド、又は、該精製されたポリペプチドの混合物、又は請求項１１又は１２に記載の組成物から実質的に成る、哺乳類の自己免疫疾患の治療又は阻害のために用いられる医薬製剤。
【請求項１４】  前記自己免疫疾患が、Ｂ細胞により媒介される自己免疫疾患、Ｔ細胞により媒介される自己免疫疾患、脱髄疾患、炎症性疾患、慢性関節リウマチ、変形性関節症、多発性硬化症、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性卵巣炎、自己免疫性甲状腺炎、自己免疫性ブドウ膜網膜炎、クローン病、慢性免疫性血小板減少性紫斑病、大腸炎、接触感受性疾患、真性糖尿病、グレーブス病、ギラン・バレー症候群、橋本病、突発性粘液水腫、重症筋無力症、乾癬、尋常性天疱瘡、慢性関節リウマチ、または全身性紅斑性狼瘡である、請求項１３に記載の医薬製剤。
【請求項１５】  前記自己免疫疾患は、Ｂ細胞により媒介される自己免疫疾患である、請求項１４に記載の医薬製剤。
【請求項１６】  前記自己免疫疾患は、Ｔ細胞により媒介される自己免疫疾患である、請求項１４に記載の医薬製剤。
【請求項１７】  前記自己免疫疾患は、脱髄疾患である、請求項１４に記載の医薬製剤。
【請求項１８】  前記自己免疫疾患は、多発性硬化症である、請求項１４に記載の医薬製剤。
【請求項１９】  前記自己免疫疾患は、炎症性疾患である、請求項１４に記載の医薬製剤。
【請求項２０】  前記自己免疫疾患は、慢性関節リウマチ又は変形性関節症である、請求項１４に記載の医薬製剤。
【請求項２１】  請求項１〜１０の何れか一項に記載の精製されたポリペプチド、又は、該精製されたポリペプチドの混合物、又は請求項１１又は１２に記載の組成物から実質的に成る、哺乳類の移植片対宿主病（GVHD）、宿主対移植片病（HVGD）、又は遅延型の過敏症（DTH）の治療又は予防のために用いられる医薬製剤。
【請求項２２】  前記精製されたポリペプチドは、配列番号２に記載されるアミノ酸配列を有する連続したアミノ酸を含む、請求項１３〜２１の何れか一項に記載の医薬製剤
【請求項２３】  前記精製されたポリペプチドは、配列番号７に記載されるアミノ酸配列を有する連続したアミノ酸を含む、請求項１３〜２１の何れか一項に記載の医薬製剤。
【請求項２４】  前記精製されたポリペプチドは、Ｌ−アミノ酸から成る、請求項１３〜２１の何れか一項に記載の医薬製剤。
【請求項２５】  グラチラマーアセテートの分子量を測定する方法であって、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６又は配列番号７のアミノ酸配列を有する精製されたポリペプチドを用いて、分子量測定に用いられるクロマトグラフィー装置をキャリブレートすること、及び、分子量測定に用いられる該キャリブレートされたクロマトグラフィー装置を用いて、グラチラマーアセテートの分子量を測定することを含むことを特徴とする方法。
【請求項２６】  それぞれがアラニン、グルタミン酸、チロシン及びリジンから実質的に成るポリペプチドの混合物を含む、医薬製剤を得るための方法において、該混合物が4,000〜13,000ダルトンの平均分子量を有し、また該混合物中において、アラニンのモル分率が0.427であり、グルタミン酸のモル分率が0.141であり、リジンのモル分率が0.337であり、チロシンのモル分率が0.093であり、
該方法は、医薬製剤に包含するために、該混合物が4000〜13,000ダルトンの平均分子量を有しているかどうかを測定するためにゲル透過クロマトグラフィーカラムを用いて、それぞれアラニン、グルタミン酸、チロシン及びリジンから実質的に成るポリペプチドの水溶性混合物のバッチの分子量分布を測定することを含み、
その改良点が、カラム上の保持時間と分子量との関係を確立するために、それぞれがアラニン、グルタミン酸、チロシン及びリジンから実質的に成り、所定のアミノ酸配列を有するポリペプチドである複数の分子量マーカーを、該カラムクロマトグラフィーに供することによって、該ゲル透過クロマトグラフィーカラムによって得られた分子量をキャリブレートすることを含むことを特徴とする方法。
【請求項２７】  それぞれが、アラニン、グルタミン酸、チロシン及びリジンから実質的に成るポリペプチドの混合物を含む医薬製剤を得る方法であって、該混合物が4000〜13,000ダルトンの平均分子量を有し、また該混合物中において、アラニンのモル分率が0.427であり、グルタミン酸のモル分率が0.141であり、リジンのモル分率が0.337であり、チロシンのモル分率が0.093であり、
それぞれがアラニン、グルタミン酸、チロシン及びリジンから実質的に成るポリペプチドの混合物のバッチを得ること；
分子量キャリブレートされたゲル透過クロマトグラフィーカラムを用いて、前記バッチ中のポリペプチドの混合物の平均分子量を測定すること；及び、
該混合物が4000〜13,000ダルトンの平均分子量を有すると測定された場合に、前記医薬製剤中に該混合物を包含すること；を含み、
ここにおいて、前記ゲル透過クロマトグラフィーカラムは、該カラムにおける保持時間と分子量との関係を確立するために、複数の分子量マーカーを該カラムクロマトグラフィーに供することによってキャリブレートされ、ここで、該各マーカーは、アラニン、グルタミン酸、チロシン及びリジンから実質的に成るポリペプチドであり、且つ、所定のアミノ配列を有することを特徴とする方法。
【請求項２８】  それぞれが、アラニン、グルタミン酸、チロシン及びリジンから実質的に成るポリペプチドの水溶性混合物の平均分子量を測定する方法であって、該混合物中において、アラニンのモル分率が0.427であり、グルタミン酸のモル分率が0.141であり、リジンのモル分率が0.337であり、チロシンのモル分率が0.093であり、
該混合物の平均分子量を測定するために、該混合物を、分子量キャリブレートされたゲル透過クロマトグラフィーカラムクロマトグラフィーに供することを含み、ここにおいて、該ゲル透過クロマトグラフィーカラムは、該カラムにおける保持時間と分子量との関係を確立するために、複数の分子量マーカーを該カラムクロマトグラフィーに供することによってキャリブレートされ、ここで、該各マーカーは、アラニン、グルタミン酸、チロシン及びリジンから実質的に成るポリペプチドであり、且つ、所定のアミノ酸配列を有することを特徴とする方法。
【請求項２９】  それぞれがアラニン、グルタミン酸、チロシン及びリジンから実質的に成るポリペプチドの水溶性混合物が、4000〜13,000ダルトンの平均分子量を有するかどうかを測定する方法であって、該混合物中において、アラニンのモル分率が0.427であり、グルタミン酸のモル分率が0.141であり、リジンのモル分率が0.337であり、チロシンのモル分率が0.093であり、該方法は、該混合物の平均分子量を測定するために、キャリブレートされたゲル透過クロマトグラフィーカラムに該混合物を供することを含み、ここにおいて、該ゲル透過クロマトグラフィーカラムは、該カラムにおける保持時間と分子量との関係を確立するために、複数の分子量マーカーを該カラムクロマトグラフィーに供することによってキャリブレートされ、ここで、該各マーカーは、アラニン、グルタミン酸、チロシン及びリジンから実質的に成るポリペプチドであり、且つ、所定のアミノ酸配列を有することを特徴とする方法。
【請求項３０】  それぞれが、アラニン、グルタミン酸、チロシン及びリジンから実質的に成るポリペプチドの混合物を含む医薬製剤を得る方法において、該混合物は2000〜40,000ダルトンの平均分子量を有し、該混合物中において、アラニンのモル分率が0.38〜0.5であり、グルタミン酸のモル分率が0.13〜0.15であり、チロシンのモル分率が0.08〜0.10であり、リジンのモル分率が0.3〜0.4であり、ここにおいて、該方法は、前記医薬製剤に包含されるための該混合物が2000〜40,000ダルトンの平均分子量を有するかどうかを測定するために、ゲル透過クロマトグラフィーカラムを用いて、それぞれがアラニン、グルタミン酸、チロシン及びリジンから実質的に成るポリペプチドの混合物のバッチの分子量分布を測定することを含み、その改良点は、
該カラムにおける保持時間と分子量との関係を確立するために、それぞれがアラニン、グルタミン酸、チロシン及びリジンから実質的に成り、且つ、所定のアミノ酸配列を有するポリペプチドである複数の分子量マーカーを、該カラムクロマトグラフィーに供することによって、ゲル透過クロマトグラフィーカラムを用いて得られた分子量をキャリブレートすることを特徴とする方法。
【請求項３１】  それぞれがアラニン、グルタミン酸、チロシン及びリジンから実質的に成るポリペプチドの混合物を含む医薬製剤を得る方法であって、該混合物は2000〜40,000ダルトンの平均分子量を有し、該混合物中において、アラニンのモル分率が0.38〜0.5であり、グルタミン酸のモル分率が0.13〜0.15であり、チロシンのモル分率が0.08〜0.10であり、リジンのモル分率が0.3〜0.4であり、
該方法は、それぞれが、アラニン、グルタミン酸、チロシン及びリジンから実質的に成るポリペプチドの混合物のバッチを得ること；
該バッチ中のポリペプチドの混合物の平均分子量を、分子量キャリブレートされたゲル透過クロマトグラフィーカラムを用いて測定すること；及び、
該混合物が2000〜40,000ダルトンの平均分子量を有すると測定された場合、該混合物を前記医薬製剤に包含することを含み、
ここにおいて、該ゲル透過クロマトグラフィーカラムは、該カラムにおける保持時間と分子量との関係を確立するために、複数の分子量マーカーを該カラムクロマトグラフィーに供することによってキャリブレートされ、ここで、該各マーカーは、アラニン、グルタミン酸、チロシン及びリジンから実質的に成るポリペプチドであり、且つ、所定のアミノ配列を有することを特徴とする方法。
【請求項３２】  それぞれがアラニン、グルタミン酸、チロシン及びリジンから実質的に成るポリペプチドの混合物の平均分子量を測定する方法であって、該混合物中において、アラニンのモル分率が0.38〜0.5であり、グルタミン酸のモル分率が0.13〜0.15であり、チロシンのモル分率が0.08〜0.10であり、リジンのモル分率が0.3〜0.4であり、
該混合物の平均分子量を測定するために、該混合物を、分子量キャリブレートされたゲル透過クロマトグラフィーカラムでのクロマトグラフィーに供することを含み、ここにおいて、該ゲル透過クロマトグラフィーカラムは、該カラムにおける保持時間と分子量との関係を確立するために、複数の分子量マーカーを該カラムクロマトグラフィーに供することによってキャリブレートされ、ここで、該各マーカーは、アラニン、グルタミン酸、チロシン及びリジンから実質的に成るポリペプチドであり、且つ、所定のアミノ酸配列を有することを特徴とする方法。
【請求項３３】  それぞれがアラニン、グルタミン酸、チロシン及びリジンから実質的に成るポリペプチドの混合物が、2000〜40,000ダルトンの平均分子量を有するかどうかを測定する方法であって、該混合物中において、アラニンのモル分率が0.38〜0.5であり、グルタミン酸のモル分率が0.13〜0.15であり、チロシンのモル分率が0.08〜0.10であり、リジンのモル分率が0.3〜0.4であり、
該方法は、該混合物の平均分子量を測定するために、該混合物をキャリブレートされたゲル透過クロマトグラフィーカラムに供することを含み、ここにおいて、該ゲル透過クロマトグラフィーカラムは、該カラムにおける保持時間と分子量との関係を確立するために、複数の分子量マーカーを該カラムクロマトグラフィーに供することによってキャリブレートされ、ここで、該各マーカーは、アラニン、グルタミン酸、チロシンから実質的に成るポリペプチドであり、且つ、所定のアミノ酸配列を有することを特徴とする方法。
【請求項３４】  請求項２６、２７、３０、又は３１に記載の方法であって、前記ポリペプチドの混合物の凍結乾燥の工程をさらに含む方法。
【請求項３５】  請求項２６〜３４の何れか一項に記載の方法であって、前記ゲル透過クロマトグラフィーカラムが、2×106ダルトンの排除限界、1000〜3×105ダルトンの最適分離範囲、及び20〜40μｍのビーズ直径を有する、架橋結合されたアガロースを基礎とする媒体を含むことを特徴とする方法。
【請求項３６】  前記ゲル透過クロマトグラフィーカラムは、スペロース１２（Superose12）であることを特徴とする請求項３５の方法。
【請求項３７】  請求項２６〜３４の何れか一項に記載の方法であって、前記分子量マーカーにおいて、アラニンのモル分率が0.38〜0.5であり、グルタミン酸のモル分率が0.13〜0.15であり、チロシンのモル分率が0.08〜0.10であり、リジンのモル分率が0.3〜0.4であることを特徴とする方法。
【請求項３８】  請求項３７に記載の方法であって、前記分子量マーカーにおいて、アラニンのモル分率が0.422〜0.444であり、グルタミン酸のモル分率が0.133〜0.143であり、チロシンのモル分率が0.086〜0.093であり、リジンのモル分率が0.333〜0.349であることを特徴とする方法。
【請求項３９】  請求項２６〜３４の何れか一項に記載の方法であって、前記分子量マーカーの一つが、
【化１】
2002525378.tif 000001
（ここにおいて、Ａはアラニンを表し、Ｋはリジンを表し、Ｙはチロシンを表し、Ｅはグルタミン酸を表す）
から成る群から選択されることを特徴とする方法。
【請求項４０】  請求項２６〜３４の何れか一項に記載の方法であって、前記複数の分子量マーカーが、
【化２】
2002525378.tif 000002
（ここにおいて、Ａはアラニンを表し、Ｋはリジンを表し、Ｙはチロシンを表し、Ｅはグルタミン酸を表す）
であることを特徴とする方法。
【請求項４１】  請求項３０〜３４の何れか一項に記載の方法であって、前記混合物中において、アラニンのモル分率が0.427であり、グルタミン酸のモル分率が0.141であり、リジンのモル分率が0.337であり、チロシンのモル分率が0.093であることを特徴とする方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００８】
グラチラマーアセテート（共重合体１；Cop 1；本明細書では以下GLAT共重合体）はアラニン、グルタミン酸、リジンおよびチロシンのそれぞれモル比約4.6：1.5：3.6：1.0からなるポリペプチドの混合物であり、これは４種類のアミノ酸を化学的に重合することにより合成し、平均分子量約4,000から約13,000ダルトンまでの範囲の生成物としたものである。相当するモル分率はおよそアラニン0.427、グルタミン酸0.141、リジン0.337およびチロシン0.093であり、約+/-10%で変化してもよい。関連の共重合体としては、上記４種類のアミノ酸のうち３種類からなるポリペプチド（従って「三元共重合体」）の混合物がある。共重合体１および三元共重合体は哺乳類免疫系の本質的不均一性およびヒト集団に近づき、自己免疫疾患およびその他の免疫症状の治療に有効である。好ましい平均分子量範囲および三元共重合体の製造方法は、出典開示によりそのまま本明細書の一部とされる米国特許第5,800,808号に記載されている。本発明の共重合体１は、当該分野で既知の方法、例えば米国特許第3,849,550号に記載されている方法によって調製可能であり、ここにおいて、該チロシンのＮ−カルボキシ無水物、アラニン、γ−ベンジルグルタミン酸及びＥ−Ｎ−トリフルオロ−アセチルリジンは、開始剤としてのジエチルアミンとともに無水ジオキサン中で、環境温度で重合される。グルタミン酸のγ−カルボキシル基の非ブロック化は、氷酢酸中で臭化水素によって行われ、続いて、１Ｍのピペリジンによって、リジン残基からトリフルオロアセチル基が除去される。本明細書において、「環境温度」及び「室温」という語は、約２０℃〜約２６℃の温度範囲を意味するように理解されるべきである。要求される分子量プロフィールを有する共重合体１は、いずれも、それ自体公知の方法によって得ることができる。そのような方法は、高分子量種を含む共重合体１のクロマトグラフィー、望ましくない種がない画分の収集、又は、部分的な酸又は酵素的加水分解によって高分子量種を除去し、続いて透析又は限外濾過によって精製することを含む。所望の分子量プロフィールを有する共重合体１を得るためのさらなる方法は、アミノ酸がなお保護されている所望の種を調製し、次いで、保護を除去して正確な種を直接得ることによるものである。本発明の組成は、当該分野で既知の従来方法により処方されることができる。好ましくは、該組成は、凍結乾燥され、皮下注射に適した水溶液に処方される。或いは、共重合体１は、ペプチド薬剤の経口、経鼻、頬側、又は直腸製剤を調製するための当該分野で既知の任意の形態に処方されてもよい。また、その他の３種類、４種類、５種類またはそれ以上のアミノ酸の組合せからなるその他の共重合体も本発明によって意図されるものである。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００９】
医薬製剤において用いられる共重合体１または三元共重合体調製物を保証するには、その調製物中のポリペプチドの分子量分布を正確に測定する必要がある。１つの分子量測定法として、Superose12カラム（2×106ダルトンの排除限界、1000〜3×105ダルトンの最適分離範囲、及び20〜40μｍのビーズ直径を有する、架橋結合されたアガロースを基礎とする媒体）クロマトグラフィーがある。グラチラマーアセテートの分子量測定に関するカラムのキャリブレーション係数は間接的に測定した分子量を有するグラチラマーアセテートバッチを用いて測定されてきた。間接的測定には、粘度測定法および速度沈降超遠心分離法が含まれている。さらに最近では、その分子量が多角レーザー光散乱(MALLS)によって測定されたグラチラマーアセテートマーカーのバッチが製造されている。