【手続補正書】
【提出日】平成18年3月2日(2006.3.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  植物の代謝を操作するための方法であって、該方法は、該植物において少なくとも１つの導入遺伝子を発現する工程を包含し、従って少なくとも１つの導入遺伝子を発現する該植物は、該植物の細胞質ゾルまたはプラスチドにおいて、アシル−ＣｏＡチオエステルをＲ−３−ヒドロキシアシル−ＣｏＡに変換し得る植物であって、
ここで該少なくとも１つの導入遺伝子は、アシルＣｏＡチオエステルをトランス−２−エノイル−ＣｏＡに変換し得る酵素、トランス−２−エノイル−ＣｏＡをＲ−３−ヒドロキシアシル−ＣｏＡに水和し得る酵素、トランス−２−エノイル−ＣｏＡをＳ−３−ヒドロキシアシル−ＣｏＡに水和し得る酵素、Ｓ−３−ヒドロキシアシル−ＣｏＡをＲ−３−ヒドロキシアシル−ＣｏＡにエピマー化し得る酵素、３−ヒドロキシアシル−ＣｏＡを酸化してβ−ケトアシルＣｏＡを形成し得る酵素ならびに／またはＳ特異的ヒドラターゼ活性、Ｓ特異的デヒドロゲナーゼ活性、β−ケトチオラーゼ活性、エピメラーゼ活性およびΔ３−シス−Δ２−トランス−エノイルＣｏＡイソメラーゼ活性をコードする多酵素複合体をコードする導入遺伝子からなる群より選択される、方法。
【請求項２】  前記少なくとも１つの導入遺伝子が、細菌、酵母、真菌、植物または哺乳動物の遺伝子である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】  前記少なくとも１つの導入遺伝子が、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ、ＡｌｃａｌｉｇｅｎｅｓおよびＣｏｒｙｎｅｆｏｒｍからなる群から選択される細菌由来の遺伝子である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】  前記少なくとも１つの導入遺伝子が、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｐｕｔｉｄａ  ｆａｏＡＢであり、該導入遺伝子は、好ましくは配列番号７のヌクレオチド配列を有する、請求項３に記載の方法。
【請求項５】  ポリヒドロキシアルカノエートシンターゼ、アセトアセチル−ＣｏＡレダクターゼ、β−ケトアシル−ＣｏＡチオラーゼ、エノイル−ＣｏＡヒドラターゼおよびＣｏＡの存在下においてβ−ケトアシル−ＣｏＡのチオ開裂を触媒してアセチルＣｏＡおよび２個の炭素単位だけ短い飽和アシル−ＣｏＡチオエステルを生じ得る酵素からなる群から選択される酵素をコードする、細菌、真菌、酵母、植物、または動物起源の遺伝子を発現する工程をさらに含み、ここで、これらの遺伝子によってコードされる該酵素が、前記植物の細胞質ゾルまたはプラスチドに対して指向される、請求項１に記載の方法。
【請求項６】  植物細胞の代謝を操作する方法において使用するためのＤＮＡ構築物であって、
（ａ）植物において機能的なプロモーター領域；
（ｂ）請求項１によって規定される少なくとも１つの導入遺伝子をコードする構造的ＤＮＡ配列；および
（ｃ）植物において天然に発現される遺伝子の３’非翻訳領域であって、該非翻訳領域が、ｍＲＮＡのポリアデニル化についてのシグナル配列をコードする、３’非翻訳領域、を同調して含む、ＤＮＡ構築物。
【請求項７】  前記プロモーターが、種子特異的プロモーターである、請求項６に記載のＤＮＡ構築物。
【請求項８】  前記種子特異的プロモーターが、ナピンプロモーター、ファゼオリンプロモーター、オレオシンプロモーター、２Ｓアルブミンプロモーター、ゼインプロモーター、β−コングリシニンプロモーター、アシルキャリアタンパク質プロモーター、および脂肪酸デサチュラーゼプロモーターからなる群から選択される、請求項７に記載のＤＮＡ構築物。
【請求項９】  前記プロモーターが、構成的プロモーターである、請求項６に記載のＤＮＡ構築物。
【請求項１０】  前記プロモーターが、ＣａＭＶ  ３５Ｓプロモーター、増強されたＣａＭＶ  ３５Ｓプロモーターおよびユビキチンプロモーターからなる群から選択される、請求項６に記載のＤＮＡ構築物。
【請求項１１】  トランスジェニック植物において、ポリヒドロキシアルカノエートの生物学的生成を増強するための方法であって、該方法は、該植物において少なくとも１つの導入遺伝子を発現する工程であって、従って少なくとも１つの導入遺伝子を発現する該植物は、該植物の細胞質ゾルまたはプラスチドにおいて、アシル−ＣｏＡチオエステルをＲ−３−ヒドロキシアシル−ＣｏＡに変換し得る植物である工程を包含し、
ここで該少なくとも１つの導入遺伝子は、アシルＣｏＡチオエステルをトランス−２−エノイル−ＣｏＡに変換し得る酵素、トランス−２−エノイル−ＣｏＡをＲ−３−ヒドロキシアシル−ＣｏＡに水和し得る酵素、トランス−２−エノイル−ＣｏＡをＳ−３−ヒドロキシアシル−ＣｏＡに水和し得る酵素、Ｓ−３−ヒドロキシアシル−ＣｏＡをＲ−３−ヒドロキシアシル−ＣｏＡにエピマー化し得る酵素、３−ヒドロキシアシル−ＣｏＡを酸化してβ−ケトアシルＣｏＡを形成し得る酵素および／またはＳ特異的ヒドラターゼ活性、Ｓ特異的デヒドロゲナーゼ活性、β−ケトチオラーゼ活性、エピメラーゼ活性およびΔ３−シス−Δ２−トランス−エノイルＣｏＡイソメラーゼ活性をコードする多酵素複合体をコードする導入遺伝子からなる群より選択される、方法。
【請求項１２】  前記トランスジェニック植物が、Ｂｒａｓｓｉｃａ、トウモロコシ、ダイズ、綿実、ヒマワリ、ヤシ、ココヤシ、ベニバナ、ラッカセイ、カラシ、アマ、タバコ、およびアルファルファからなる群から選択される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】  アシル−ＣｏＡチオエステルをＲ−３−ヒドロキシアシル−ＣｏＡに変換し得るトランスジェニック植物またはその一部であって、該植物は、
該植物の細胞質ゾルまたはプラスチドにおいて少なくとも１つの脂肪酸β−酸化酵素をコードする少なくとも１つの異種の遺伝子を含み、
ここで該少なくとも１つの導入遺伝子は、アシルＣｏＡチオエステルをトランス−２−エノイル−ＣｏＡに変換し得る酵素、トランス−２−エノイル−ＣｏＡをＲ−３−ヒドロキシアシル−ＣｏＡに水和し得る酵素、トランス−２−エノイル−ＣｏＡをＳ−３−ヒドロキシアシル−ＣｏＡに水和し得る酵素、Ｓ−３−ヒドロキシアシル−ＣｏＡをＲ−３−ヒドロキシアシル−ＣｏＡにエピマー化し得る酵素、３−ヒドロキシアシル−ＣｏＡを酸化してβ−ケトアシルＣｏＡを形成し得る酵素および／またはＳ特異的ヒドラターゼ活性、Ｓ特異的デヒドロゲナーゼ活性、β−ケトチオラーゼ活性、エピメラーゼ活性およびΔ３−シス−Δ２−トランス−エノイルＣｏＡイソメラーゼ活性をコードする多酵素複合体をコードする導入遺伝子からなる群より選択される、トランスジェニック植物またはその一部。
【請求項１４】  前記少なくとも１つの導入遺伝子が、細菌、酵母、真菌、植物、または哺乳動物の遺伝子である、請求項１３に記載の植物またはその一部。
【請求項１５】  前記少なくとも１つの導入遺伝子が、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ、Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ、およびＣｏｒｙｎｅｆｏｒｍからなる群から選択される細菌由来の遺伝子である、請求項１４に記載の植物またはその一部。
【請求項１６】  前記少なくとも１つの導入遺伝子が、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｐｕｔｉｄａ  ｆａｏＡＢであり、該導入遺伝子は、好ましくは配列番号７のヌクレオチド配列を有する、請求項１５に記載の植物またはその一部。
【請求項１７】  ポリヒドロキシアルカノエートシンターゼ、アセトアセチル−ＣｏＡ  レダクターゼ、β−ケトアシル−ＣｏＡ  チオラーゼ、およびエノイル−ＣｏＡ  ヒドラターゼおよびＣｏＡの存在下においてβ−ケトアシル−ＣｏＡのチオ開裂を触媒してアセチルＣｏＡおよび２個の炭素単位だけ短い飽和アシル−ＣｏＡチオエステルを生じ得る酵素からなる群から選択される酵素をコードする遺伝子をさらに含む、請求項１３に記載の植物またはその一部。
【請求項１８】  前記植物が、Ｂｒａｓｓｉｃａ、トウモロコシ、ダイズ、綿実、ヒマワリ、ヤシ、ココヤシ、ベニバナ、ラッカセイ、カラシ、アマ、タバコ、およびアルファルファからなる群から選択される、請求項１３に記載の植物またはその一部。
【請求項１９】  （ａ）植物において機能的なプロモーター領域；
（ｂ）請求項１３において規定される少なくとも１つの導入遺伝子をコードする構造的ＤＮＡ配列；および
（ｃ）植物において天然に発現される遺伝子の３’非翻訳領域であって、ここで該非翻訳領域が、ｍＲＮＡのポリアデニル化についてのシグナル配列をコードする、３’非翻訳領域、
を同調して含むＤＮＡ構築物を含む、請求項１３に記載の植物またはその一部。
【請求項２０】  前記プロモーターが種子特異的プロモーターである、請求項１９に記載の植物またはその一部。
【請求項２１】  前記種子特異的プロモーターが、ナピンプロモーター、ファゼオリンプロモーター、オレオシンプロモーター、２Ｓアルブミンプロモーター、ゼインプロモーター、β−コングリシニンプロモーター、アシルキャリアタンパク質プロモーター、および脂肪酸デサチュラーゼプロモーターからなる群から選択される、請求項２０に記載の植物またはその一部。
【請求項２２】  前記プロモーターが、構成的プロモーターである、請求項１９に記載の植物またはその一部。
【請求項２３】  前記プロモーターが、ＣａＭＶ  ３５Ｓプロモーター、増強されたＣａＭＶ  ３５Ｓプロモーターおよびユビキチンプロモーターからなる群から選択される、請求項２０に記載の植物またはその一部。
【請求項２４】  植物における種子生産を、予防または抑制する方法であって、該方法は、該植物の細胞質ゾルまたはプラスチドにおいて少なくとも１つの脂肪酸β−酸化酵素をコードする少なくとも１つの異種の遺伝子を発現する工程を包含する方法であって、
ここで該少なくとも１つの導入遺伝子は、アシルＣｏＡチオエステルをトランス−２−エノイル−ＣｏＡに変換し得る酵素、トランス−２−エノイル−ＣｏＡをＲ−３−ヒドロキシアシル−ＣｏＡに水和し得る酵素、トランス−２−エノイル−ＣｏＡをＳ−３−ヒドロキシアシル−ＣｏＡに水和し得る酵素、Ｓ−３−ヒドロキシアシル−ＣｏＡをＲ−３−ヒドロキシアシル−ＣｏＡにエピマー化し得る酵素、３−ヒドロキシアシル−ＣｏＡを酸化してβ−ケトアシルＣｏＡを形成し得る酵素および／またはＳ特異的ヒドラターゼ活性、Ｓ特異的デヒドロゲナーゼ活性、β−ケトチオラーゼ活性、エピメラーゼ活性およびΔ３−シス−Δ２−トランス−エノイルＣｏＡイソメラーゼ活性をコードする多酵素複合体からなる群より選択される酵素をコードする、方法。