【手続補正書】
【提出日】平成17年4月4日(2005.4.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号１の配列；配列番号１の配列においてＴがＵでもあり得る配列；および配列番号１の配列に相補的な核酸配列；よりなる群から選択されるポリデオキシリボヌクレオチドまたはポリリボヌクレオチドであることを特徴とする単離ポリヌクレオチド。
【請求項２】
配列番号１の配列；配列番号１の配列においてＴがＵでもあり得る配列；および配列番号１の配列に相補的な核酸配列；よりなる群から選択されるポリヌクレオチドを含み、かつ該ポリヌクレオチドが該ポリヌクレオチドの転写を誘導する制御配列に作動可能に結合していることを特徴とする発現ベクター。
【請求項３】
細菌または酵母発現ベクターであることを特徴とする請求項２記載の発現ベクター。
【請求項４】
両生類、昆虫または哺乳類発現ベクターであることを特徴とする請求項２記載の発現ベクター。
【請求項５】
請求項２、３または４記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
【請求項６】
配列番号１の配列、配列番号１の配列においてＴがＵでもあり得る配列、および配列番号１の配列に相補的な核酸配列よりなる群から選択されるポリヌクレオチドを含み、かつ該ポリヌクレオチドが該ポリヌクレオチドの転写を誘導する制御配列に作動可能に結合している発現ベクターで、宿主細胞を形質転換し；
前記ポリヌクレオチドを宿主細胞で発現させ；さらに
Ｉｎｄｙポリペプチドを回収する；各工程を含むことを特徴とする、Ｉｎｄｙポリペプチドを作成する方法。
【請求項７】
配列番号２のアミノ酸配列から成るポリペプチド；または配列番号２のアミノ酸配列において１または数個のアミノ酸が欠失、置換または付加されたアミノ酸配列から成り、カルボン酸塩の細胞トランスポーターとして機能する能力を有するポリペプチド；をコードする単離ポリヌクレオチド。
【請求項８】
配列番号２の配列に対して８５％以上の全体の同一性を有するポリペプチドをコードすることを特徴とする請求項７記載の単離ポリヌクレオチド。
【請求項９】
前記ポリペプチドがカルボン酸塩のトランスポーターであることを特徴とする請求項８記載の単離ポリヌクレオチド。
【請求項１０】
前記カルボン酸塩が、コハク酸塩、α−ケトグルタル酸塩、フマル酸塩、またはクエン酸塩のうちの１以上であることを特徴とする請求項９記載のポリヌクレオチド。
【請求項１１】
配列番号２に示すアミノ酸配列から成るポリペプチド；または配列番号２のアミノ酸配列において１または数個のアミノ酸が欠失、置換または付加されたアミノ酸配列から成り、カルボン酸塩の細胞トランスポーターとして機能する能力を有するポリペプチド；に結合するポリクロナールまたはモノクロナール抗体。
【請求項１２】
配列番号２の配列から成るポリペプチドに対する抗体であることを特徴とする請求項１１記載の抗体。
【請求項１３】
配列番号２の配列のアミノ酸１８１−１９７またはアミノ酸２８１−２９８に結合することを特徴とする請求項１２記載の抗体。
【請求項１４】
配列番号２の配列に対して８５％以上の全体の同一性を有するポリペプチドに対する試験物質の阻害活性を評価する方法であって：
前記ポリペプチドを試験物質と接触させ；さらに
前記試験物質の存在下または不在下で前記ポリペプチドによって輸送されたカルボン酸塩の量を検出する；各工程を含み、
試験物質の不在下での輸送と比較して試験物質の存在下で輸送が阻害される場合に、該試験物質が細胞トランスポーター阻害剤であることが示唆されることを特徴とする方法。
【請求項１５】
前記ポリペプチドが配列番号２の配列を含むことを特徴とする請求項１４記載の方法。
【請求項１６】
前記ポリペプチドが、Ｉｎｄｙ ｍＲＮＡを含むツメガエル卵母細胞において発現されていることを特徴とする請求項１４記載の方法。
【請求項１７】
細胞または抽出物中における配列番号２の配列に対して８５％以上の全体の同一性を有するポリペプチドの濃度を減らす方法であって、
細胞または抽出物を、カルボン酸塩の細胞トランスポーターを発現させる第２核酸分子の発現を阻害するのに有効な量の、該第２核酸分子の少なくとも部分に実質的に相補的である第１核酸分子と接触させる工程を含むことを特徴とする方法。
【請求項１８】
前記ポリペプチドが配列番号２の配列を含むことを特徴とする請求項１７記載の方法。
【請求項１９】
前記第１核酸分子が、アンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイム、三重螺旋形成分子、二本鎖干渉ＲＮＡ、またはそれらの少なくとも１つを含む混合物であることを特徴とする請求項１７記載の方法。
【請求項２０】
前記第１核酸分子が、薬剤的に許容される担体または希釈剤をさらに含むことを特徴とする請求項１７記載の方法。
【請求項２１】
カルボン酸塩の細胞トランスポーター活性を阻害するのに有効な量のカルボン酸塩の細胞トランスポーター活性のアンタゴニストを含有することを特徴とする、生物をカロリー制限するための組成物。
【請求項２２】
カルボン酸塩の細胞トランスポーター活性を阻害するのに有効な量のカルボン酸塩の細胞トランスポーター活性のアンタゴニストを含有することを特徴とする、生物において寿命を延ばすための組成物。
【請求項２３】
前記カルボン酸塩が、ジカルボン酸、トリカルボン酸、またはそれらの混合物であることを特徴とする請求項２１または２２記載の組成物。
【請求項２４】
前記カルボン酸塩が、コハク酸塩、α−ケトグルタル酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩、またはそれらの混合物であることを特徴とする請求項２３記載の組成物。
【請求項２５】
前記トランスポーターが、カチオン依存性トランスポーターであることを特徴とする請求項２４記載の組成物。
【請求項２６】
前記アンタゴニストが、Ｉｎｄｙ遺伝子配列の少なくとも部分、アンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイム、三重螺旋形成分子、二本鎖干渉ＲＮＡ、抗Ｉｎｄｙ抗体、またはそれらの少なくとも１つを含む混合物であることを特徴とする請求項２１または２２記載の組成物。
【請求項２７】
物の体重を増加させるのに有効な量の配列番号１の配列またはその活性断片を含むベクターを含有することを特徴とする、生物を処置するための組成物。
【請求項２８】
機能的ｍＮＡＤＣ−１タンパク質の発現を妨げるｍＮＡＤＣ−１遺伝子における破壊を含むゲノムを有しており、カロリー制限、体重減少、または寿命延長の表現型を有することを特徴とするトランスジェニックマウス。
【請求項２９】
配列番号２の配列を有する実質的に純水なポリペプチド。
【請求項３０】
配列番号１の配列；配列番号１の配列においてＴがＵでもあり得る配列；および配列番号１の配列に相補的な核酸配列；よりなる群から選択されるポリヌクレオチドによってコードされる実質的に純水なポリペプチド。
【請求項３１】
配列番号３、４、５および６の配列、ならびにそれら配列に対して９５％以上の同一性を有する配列より成る群から選択される配列を含むトランスポーターポリペプチドを提供する；
前記トランスポーターポリペプチドを試験物質と接触させる；
前記試験物質の前記トランスポーターポリペプチドとの相互作用を評価する；
前記試験物質を細胞と接触させる；および
前記細胞の老化現象または老化速度を評価する；各工程を含む、試験物質のトランスポーターポリペプチドとの相互作用を評価する方法。
【請求項３２】
前記試験物質の前記トランスポーターポリペプチドとの相互作用を評価する工程が、トランスポーターポリペプチドのトランスポーター活性を評価することを含む、請求項３１記載の方法。
【請求項３３】
前記試験物質の前記トランスポーターポリペプチドとの相互作用を評価する工程が、前記試験物質の存在下および不在下でのトランスポーター活性を評価することを含み、該試験物質の不在下でのトランスポーター活性に対して該試験物質の存在下でのトランスポーター活性が変化している場合に、該試験物質がトランスポーターポリペプチドのモジュレーターであることが示唆されることを特徴とする請求項３１記載の方法。
【請求項３４】
前記トランスポーターポリペプチドが配列番号３の配列を含むことを特徴とする請求項３１記載の方法。
【請求項３５】
前記トランスポーターポリペプチドが配列番号４の配列を含むことを特徴とする請求項３１記載の方法。
【請求項３６】
前記トランスポーターポリペプチドが配列番号５の配列を含むことを特徴とする請求項３１記載の方法。
【請求項３７】
前記トランスポーターポリペプチドが配列番号６の配列を含むことを特徴とする請求項３１記載の方法。
【請求項３８】
化合物ライブラリーをスクリーニングするのに用いられることを特徴とする請求項３１記載の方法。