【手続補正書】
【提出日】平成17年12月14日(2005.12.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  アミノ酸ストリングを有するアミノ酸配列を含むセルロース分解活性を有する酵素であって、該アミノ酸ストリングが、
(a) Asn-Asn-(Leu/Phe/Lys/Ile)-Trp-Gly
(b) Glu-(Leu/Phe/Ile)-Met-Ile-Trp
(c) Gly-Thr-Glu-Pro-Phe-Thr  (d)(Ser/Tyr/Cys/Trp/Thr/Asn/Lys/Arg)-(Val/Pro)-(Lys/Ala)-(Ser/Ala)-(Tyr/Phe)
(e) Lys-Asn-Phe-Phe-Asn-Tyr
からなる群より選択されることを特徴とする酵素、または該酵素の誘導体。
【請求項２】  前記セルラーゼが菌類、細菌または放線菌類に由来することを特徴とする請求項１記載の酵素。
【請求項３】  前記酵素がエンドグルカナーゼであることを特徴とする請求項１記載の酵素。
【請求項４】  前記菌類が糸状菌類であることを特徴とする請求項２記載の酵素。
【請求項５】  前記糸状菌類がユーアスコミセテス属(Euascomycetes)に属することを特徴とする請求項４記載の酵素。
【請求項６】  前記ユーアスコミセテス属がプレクトミセテ属(Plectomycete)に属することを特徴とする請求項５記載の酵素。
【請求項７】  前記ユーアスコミセテス属が、ジアポルタレス属(Diaporthales)、ハロスファエリアレス属(Halosphaeriales)、ミクロアスカレス属(Microascales)、オフィオストマタレス属(Ophiostomatales)、フィラコラレス属(Phyllachorales)、ソーダリアレス属(Sordariales)またはキシラリアレス属(Xylariales)に属することを特徴とする請求項５記載の酵素。
【請求項８】  前記ユーアスコミセテス属が、クラビシピタセアエ属(Clavicipitaceae)、メラノスポラセアエ属(Melanosporaceae)、ネクトリアセアエ属(Nectriaceae)、ニエスリアセアエ属(Niessliaceae)またはミトスポリックハイポクレアレス属(Mitosporic Hypocreales)を含むハイポクレアレス属(Hypocreales)に属することを特徴とする請求項５記載の酵素。
【請求項９】  前記ユーアスコミセテス属が、トリコデルマ属を含まないハイポクレアセアエ属(Hypocreaceae)に属することを特徴とする請求項５記載の酵素。
【請求項１０】  前記ユーアスコミセテス属が、グリオクラジウム属spp.、フザリウム属spp.、アクレモニウム属spp.、ミセリオフトラ属spp.、ベルティセリウム属spp.、ミロセシウム属spp.、またはペニシリウム属spp.であることを特徴とする請求項５記載の酵素。
【請求項１１】  前記ユーアスコミセテス属が、アスペルギルスアエネアス、アスペルギルスアンソデスミス、アスペルギルスアウレオフルゲン、アスペルギルスアウレオラタス、アスペルギルスアベナセウス、アスペルギルスアワモリイ、アスペルギルスビスポラス、アスペルギルスブランネオユニセリアタス、アスペルギルスカンペストリス、アスペルギルスカエシアラス、アスペルギルスカンジダス、アスペルギルスカルボナリウス、アスペルギルスカルネウス、アスペルギルスセルビナス、アスペルギルスクラバトフラバス、アスペルギルスクラバトアニカス、アスペルギルスクラバタス、アスペルギルスコニカス、アスペルギルスコンジャンクタス、アスペルギルスクルストサス、アスペルギルスデフレクタス、アスペルギルスジモルフィカス、アスペルギルスエバルネオクレメウス、アスペルギルスエジプチアカス、アスペルギルスエリプチカス、アスペルギルスエロンガタス、アスペルギルスフィキューム、アスペルギルスフラスケントラーゲリ、黄色アスペルギルス、アスペルギルスフミガタス、アスペルギルスギガンテウス、アスペルギルスグラウカス、アスペルギルスゴラクフプレンシス、アスペルギルスグラシリス、アスペルギルスイイズケ、アスペルギルスイタコニカス、アスペルギルスジャポニカス、アスペルギルスカンバレンシス、アスペルギルスカナガワエンシス、アスペルギルスラノサス、アスペルギルスレポリス、アスペルギルスロンギベシカ、アスペルギルスメリナス、アスペルギルスマルチカラー、黒色アスペルギルス、アスペルギルスノミウス、アスペルギルスヌタンス、アスペルギルスオクラセウス、アスペルギルスオリザエ、アスペルギルスパリダス、アスペルギルスパナメンシス、アスペルギルスパラシチカス、アスペルギルスパルバラス、アスペルギルスペニシリオイド、アスペルギルスフィアリセプチカス、アスペルギルスフォエニシス、アスペルギルスプロリフェラン、アスペルギルスパルビナス、アスペルギルスプニセウス、アスペルギルスラペリ、アスペルギルスレカルバタス、アスペルギルスレストリクタス、アスペルギルスシロウサミ、アスペルギルスソジャエ、アスペルギルススパルサス、アスペルギルススボリバセウス、アスペルギルスサブセシリス、アスペルギルスタマリイ、アスペルギルステルレウス、アスペルギルステルリコラ、アスペルギルストミイ、アスペルギルスツビンゲンシス、アスペルギルスアンガイス、アスペルギルスユニラテラリス、アスペルギルスウスタス、アスペルギルスベルシカラー、アスペルギルスウェンチイ、アスペルギルスキセロフィラス、アスペルギルスゾナタス、アスペルギルスsp.を含むアスペルギルス属であることを特徴とする請求項５記載の酵素。
【請求項１２】  前記酵素が、EGIIIと３０％より大きいアミノ酸配列同一性を有することを特徴とする請求項１記載の酵素。
【請求項１３】  前記酵素が、前記EGIIIと６０％より大きいアミノ酸配列同一性を有することを特徴とする請求項１２記載の酵素。
【請求項１４】  請求項１記載の酵素をコードするDNA。
【請求項１５】  請求項１４のDNAを有するベクター。
【請求項１６】  請求項１５のベクターで形質転換される宿主細胞。
【請求項１７】  セルラーゼを産生する方法であって、
(a)セルラーゼの産生に適当な条件下で適当な培養培地中で請求項１６記載の宿主細胞を培養し、
(b)前記産生されたセルラーゼを回収し、必要に応じて
(c)精製されたセルラーゼ産物を提供するために前記セルラーゼを精製する、
各工程を含むことを特徴とする方法。
【請求項１８】  EGIII様セルラーゼをコードする遺伝子を得る方法であって、
(a)    関心のある有機体からゲノムDNAを調製し、
(b)  (a) Asn-Asn-(Leu/Phe/Lys/Ile)-Trp-Gly
(b) Glu-(Leu/Phe/Ile)-Met-Ile-Trp
(c) Gly-Thr-Glu-Pro-Phe-Thr
(d)(Ser/Tyr/Cys/Trp/Thr/Asn/Lys/Arg)-(Val/Pro)-(Lys/Ala)-            (Ser/Ala)-(Tyr/Phe)
(e) Lys-Asn-Phe-Phe-Asn-Tyr
の１つ以上からなる群より選択されるアミノ酸ストリングをコードするDNAプライマーを調製し、
(c)前記DNAプライマーに対応する前記ゲノムDNA中の遺伝子断片の全てまたは一部の同定に適当な条件下で、工程(a)からの前記ゲノムDNAおよび工程(b)からの前記DNAプライマーを混合し、
(d)前記ゲノムDNAからの前記断片に対応する前記遺伝子の前記全てまたは一部を単離する、
各工程を含むことを特徴とする方法。
【請求項１９】  前記工程(c)がさらに、前記DNAプライマーの標識および前記標識されたDNAプライマーと前記ゲノムDNAとの間のハイブリッド形成およびEGIII様セルラーゼの全てまたは一部をコードする前記ハイブリッド形成されたゲノムDNAの検出を含むことを特徴とする請求項１８記載の方法。
【請求項２０】  前記工程(c)がさらに、前記DNAプライマーと前記ゲノムDNAとの間のPCR反応の開始およびEGIII様セルラーゼをコードする遺伝子の全てまたは一部を含む生じた増幅DNA断片の同定を含むことを特徴とする請求項１８記載の方法。
【請求項２１】  前記ゲノムDNAが、細菌、菌類または放線菌から得られることを特徴とする請求項１８記載の方法。
【請求項２２】  請求項１８により単離される遺伝子を含むベクター。
【請求項２３】  請求項２２のベクターにより形質転換される宿主細胞。
【請求項２４】  請求項１８により得られる遺伝子によりコードされるEGIII様セルラーゼ。
【請求項２５】  請求項２４によるEGIII様セルラーゼのセルロース含有テキスタイルの処理における使用方法。
【請求項２６】  請求項２４によるEGIII様セルラーゼの食物添加物としての使用方法。
【請求項２７】  請求項２４によるEGIII様セルラーゼの木材パルプの処理における使用方法。
【請求項２８】  請求項２４によるEGIII様セルラーゼのバイオマスのグルコースへの低減における使用方法。
【請求項２９】  請求項２４によるEGIII様セルラーゼのストーンウォッシュまたはインジゴで染められたデニムにおける使用方法。
【請求項３０】  請求項２４によるEGIII様セルラーゼを含む洗濯洗剤。