【手続補正書】
【提出日】平成18年1月19日(2006.1.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
線維化疾患を処置するための医薬であって、該医薬が、細胞外基質の形成に関わる遺伝
子の発現をＲＮＡ干渉によって阻害するのに好適な２本鎖リボ核酸（ｄｓＲＮＡ）を含み
、該医薬が、前記ｄｓＲＮＡおよび生理学的に許容される溶媒のみからなる製剤である、
前記医薬。
【請求項２】
遺伝子が、ＣＴＧＦ、ＴＧＦ−β、Ｉ型もしくはＩＩ型ＴＧＦ−β受容体、ｓｍａｄ−
２、ｓｍａｄ−３、またはｓｍａｄ−４、ＳＡＲＡ、ＰＤＧＦ、オンコスタチン−Ｍ、コ
ラーゲン原線維の形成に関わる遺伝子、プロコラーゲン、プロリル−４−ヒドロキシラー
ゼ、リシル−ヒドロキシラーゼ、リシル−オキシダーゼ、Ｎ−プロペプチダーゼ、または
Ｃ−プロペプチダーゼをコードする遺伝子である、請求項１に記載の医薬。
【請求項３】
プロコラーゲンが、α１（Ｉ）型、α２（Ｉ）型、α１（ＩＩ）型、α１（ＩＩＩ）型
、α１（Ｖ）型、α２（Ｖ）型、α３（Ｖ）型、α１（ＶＩ）型、α２（ＶＩ）型、α３
（ＶＩ）型、α１（ＸＩ）型、α２（ＸＩ）型、またはα３（ＸＩ）型である、請求項２
に記載の医薬。
【請求項４】
線維化疾患が、肝線維症、腎臓もしくは肺の線維症、または治癒に必要な瘢痕形成を上
回る瘢痕組織の形成である、請求項１〜３のいずれかに記載の医薬。
【請求項５】
ｄｓＲＮＡの鎖Ｓ１が、遺伝子と少なくとも断片的に相補的な領域を有する、請求項１
〜４のいずれかに記載の医薬。
【請求項６】
遺伝子と少なくとも断片的に相補的な領域が、２５個未満の連続したヌクレオチドから
なる、請求項５に記載の医薬。
【請求項７】
相補的な領域が、１９〜２４個のヌクレオチドを有する、請求項１〜６のいずれかに記
載の医薬。
【請求項８】
鎖Ｓ１が、３０個未満のヌクレオチドを有する、請求項１〜７のいずれかに記載の医薬
。
【請求項９】
ｄｓＲＮＡの少なくとも１つの末端が、１〜４個のヌクレオチドからなる１本鎖のオー
バーハングを有する、請求項１〜８のいずれかに記載の医薬。
【請求項１０】
１本鎖のオーバーハングが、鎖Ｓ１の３’末端に位置する、請求項９に記載の医薬。
【請求項１１】
ｄｓＲＮＡが、１つの末端のみに１本鎖のオーバーハングを有する、請求項１〜１０の
いずれかに記載の医薬。
【請求項１２】
ｄｓＲＮＡが、鎖Ｓ１に加えて鎖Ｓ２を有する、請求項１〜１１のいずれかに記載の医
薬。
【請求項１３】
鎖Ｓ１が２３ヌクレオチド長であり、鎖Ｓ２が２１ヌクレオチド長であり、かつ、鎖Ｓ
１の３’末端が２個のヌクレオチドで構成された１本鎖のオーバーハングを有するが、鎖
Ｓ１の５’末端に位置するｄｓＲＮＡの末端は平滑である、請求項１２に記載の医薬。
【請求項１４】
鎖Ｓ１が、遺伝子の一次ＲＮＡ転写物またはプロセシングされたＲＮＡ転写物と相補的
である、請求項１〜１３のいずれかに記載の医薬。
【請求項１５】
ｄｓＲＮＡが、添付の配列表に示すとおりの、配列番号３の配列を有する鎖Ｓ２と配列
番号４の配列を有する鎖Ｓ１、または、配列番号５の配列を有する鎖Ｓ２と配列番号６の
配列を有する鎖Ｓ１とからなる、請求項１〜１４のいずれかに記載の医薬。
【請求項１６】
医薬が、吸入、注入または注射に好適な製剤である、請求項１〜１５のいずれかに記載
の医薬。
【請求項１７】
医薬が、１日体重１ｋｇあたり５ｍｇの最大用量を達成するのが可能な量でｄｓＲＮＡ
を含む少なくとも１用量単位で存在する、請求項１〜１６のいずれかに記載の医薬。
【請求項１８】
線維化疾患の処置用の医薬を製造するための２本鎖リボ核酸（ｄｓＲＮＡ）の使用であ
って、該ｄｓＲＮＡが、細胞外基質の形成に関わる遺伝子の発現をＲＮＡ干渉によって阻
害するのに好適であり、該ｄｓＲＮＡが、該ｄｓＲＮＡおよび生理学的に許容される溶媒
のみからなる製剤に含まれている、前記使用。
【請求項１９】
遺伝子が、ＣＴＧＦ、ＴＧＦ−β、Ｉ型もしくはＩＩ型ＴＧＦ−β受容体、ｓｍａｄ−
２、ｓｍａｄ−３、またはｓｍａｄ−４、ＳＡＲＡ、ＰＤＧＦ、オンコスタチン−Ｍ、コ
ラーゲン原線維の形成に関わる遺伝子、プロコラーゲン、プロリル−４−ヒドロキシラー
ゼ、リシル−ヒドロキシラーゼ、リシル−オキシダーゼ、Ｎ−プロペプチダーゼ、または
Ｃ−プロペプチダーゼをコードする遺伝子である、請求項１８に記載の使用。
【請求項２０】
プロコラーゲンが、α１（Ｉ）型、α２（Ｉ）型、α１（ＩＩ）型、α１（ＩＩＩ）型
、α１（Ｖ）型、α２（Ｖ）型、α３（Ｖ）型、α１（ＶＩ）型、α２（ＶＩ）型、α３
（ＶＩ）型、α１（ＸＩ）型、α２（ＸＩ）型、またはα３（ＸＩ）型である、請求項１
９に記載の使用。
【請求項２１】
線維化疾患が、肝線維症、腎臓もしくは肺の線維症、または治癒に必要な瘢痕形成を上
回る瘢痕組織の形成である、請求項１８〜２０のいずれかに記載の使用。
【請求項２２】
ｄｓＲＮＡの鎖Ｓ１が、遺伝子と少なくとも断片的に相補的な領域を有する、請求項１
８〜２１のいずれかに記載の使用。
【請求項２３】
遺伝子と少なくとも断片的に相補的な領域が、２５個未満の連続したヌクレオチドからな
る、請求項２２に記載の使用。
【請求項２４】
相補的な領域が、１９〜２４個のヌクレオチドを有する、請求項１８〜２３のいずれか
に記載の使用。
【請求項２５】
鎖Ｓ１が、３０個未満のヌクレオチドを有する、請求項１８〜２４のいずれかに記載の
使用。
【請求項２６】
ｄｓＲＮＡの少なくとも１つの末端が、１〜４個のヌクレオチドからなる１本鎖のオー
バーハングを有する、請求項１８〜２５のいずれかに記載の使用。
【請求項２７】
１本鎖のオーバーハングが、鎖Ｓ１の３’末端に位置する、請求項２６に記載の使用。
【請求項２８】
ｄｓＲＮＡが、１つの末端のみに１本鎖のオーバーハングを有する、請求項１８〜２７
のいずれかに記載の使用。
【請求項２９】
ｄｓＲＮＡが、鎖Ｓ１に加えて鎖Ｓ２を有する、請求項１８〜２８のいずれかに記載の
使用。
【請求項３０】
鎖Ｓ１が２３ヌクレオチド長であり、鎖Ｓ２が２１ヌクレオチド長であり、かつ、鎖Ｓ
１の３’末端が２個のヌクレオチドで構成された１本鎖のオーバーハングを有するが、鎖
Ｓ１の５’末端に位置するｄｓＲＮＡの末端は平滑である、請求項２９に記載の使用。
【請求項３１】
鎖Ｓ１が、遺伝子の一次ＲＮＡ転写物またはプロセシングされたＲＮＡ転写物と相補的
である、請求項１８〜３０のいずれかに記載の使用。
【請求項３２】
ｄｓＲＮＡが、添付の配列表に示すとおりの、配列番号３の配列を有する鎖Ｓ２と配列
番号４の配列を有する鎖Ｓ１、または、配列番号５の配列を有する鎖Ｓ２と配列番号６の
配列を有する鎖Ｓ１とからなる、請求項１８〜３１のいずれかに記載の使用。
【請求項３３】
ｄｓＲＮＡが、吸入、注入または注射に好適な製剤中に存在する、請求項１８〜３２の
いずれかに記載の使用。
【請求項３４】
ｄｓＲＮＡが、吸入、注入または注射によって投与される、請求項１８〜３３のいずれ
かに記載の使用。
【請求項３５】
ｄｓＲＮＡが、１日体重１ｋｇあたり５ｍｇの最大用量で用いられる、請求項１８〜３
４のいずれかに記載の使用。
【請求項３６】
線維化疾患における細胞外基質形成に関わる遺伝子の発現を、ＲＮＡ干渉によって阻害
するのに好適である、２本鎖リボ核酸（ｄｓＲＮＡ）であって、該ｄｓＲＮＡが、該ｄｓ
ＲＮＡおよび生理学的に許容される溶媒のみからなる製剤に含まれている、前記ｄｓＲＮ
Ａ。
【請求項３７】
遺伝子が、ＣＴＧＦ、ＴＧＦ−β、Ｉ型もしくはＩＩ型ＴＧＦ−β受容体、ｓｍａｄ−
２、ｓｍａｄ−３、またはｓｍａｄ−４、ＳＡＲＡ、ＰＤＧＦ、オンコスタチン−Ｍ、コ
ラーゲン原線維の形成に関わる遺伝子、プロコラーゲン、プロリル−４−ヒドロキシラー
ゼ、リシル−ヒドロキシラーゼ、リシル−オキシダーゼ、Ｎ−プロペプチダーゼ、または
Ｃ−プロペプチダーゼをコードする遺伝子である、請求項３６に記載のｄｓＲＮＡ。
【請求項３８】
プロコラーゲンが、α１（Ｉ）型、α２（Ｉ）型、α１（ＩＩ）型、α１（ＩＩＩ）型
、α１（Ｖ）型、α２（Ｖ）型、α３（Ｖ）型、α１（ＶＩ）型、α２（ＶＩ）型、α３
（ＶＩ）型、α１（ＸＩ）型、α２（ＸＩ）型、またはα３（ＸＩ）型である、請求項３
７に記載のｄｓＲＮＡ。
【請求項３９】
線維化疾患が、肝線維症、腎臓もしくは肺の線維症、または不所望な瘢痕形成である、
請求項３６〜３８のいずれかに記載のｄｓＲＮＡ。
【請求項４０】
ｄｓＲＮＡの鎖Ｓ１が、遺伝子と少なくとも断片的に相補的な領域を有する、請求項３
６〜３９のいずれかに記載のｄｓＲＮＡ。
【請求項４１】
遺伝子と少なくとも断片的に相補的な領域が、２５個未満の連続したヌクレオチドから
なる、請求項４０に記載のｄｓＲＮＡ。
【請求項４２】
相補的な領域が、１９〜２４個のヌクレオチドを有する、請求項３６〜４１のいずれか
に記載のｄｓＲＮＡ。
【請求項４３】
鎖Ｓ１が、３０個未満のヌクレオチドを有する、請求項３６〜４２のいずれかに記載の
ｄｓＲＮＡ。
【請求項４４】
ｄｓＲＮＡの少なくとも１つの末端が、１〜４個のヌクレオチドからなる１本鎖のオー
バーハングを有する、請求項３６〜４３のいずれかに記載のｄｓＲＮＡ。
【請求項４５】
１本鎖のオーバーハングが、鎖Ｓ１の３’末端に位置する、請求項４４に記載のｄｓＲ
ＮＡ。
【請求項４６】
ｄｓＲＮＡが、１つの末端のみに１本鎖のオーバーハングを有する、請求項３６〜４５
のいずれかに記載のｄｓＲＮＡ。
【請求項４７】
ｄｓＲＮＡが、鎖Ｓ１に加えて鎖Ｓ２を有する、請求項３６〜４６のいずれかに記載の
ｄｓＲＮＡ。
【請求項４８】
鎖Ｓ１が２３ヌクレオチド長であり、鎖Ｓ２が２１ヌクレオチド長であり、かつ、鎖Ｓ
１の３’末端が２個のヌクレオチドで構成された１本鎖のオーバーハングを有するが、鎖
Ｓ１の５’末端に位置するｄｓＲＮＡの末端は平滑である、請求項４７に記載のｄｓＲＮ
Ａ。
【請求項４９】
鎖Ｓ１が、遺伝子の一次ＲＮＡ転写物またはプロセシングされたＲＮＡ転写物と相補的
である、請求項３６〜４８のいずれかに記載のｄｓＲＮＡ。
【請求項５０】
ｄｓＲＮＡが、添付の配列表に示すとおりの、配列番号３の配列を有する鎖Ｓ２と配列
番号４の配列を有する鎖Ｓ１、または、配列番号５の配列を有する鎖Ｓ２と配列番号６の
配列を有する鎖Ｓ１とからなる、請求項３６〜４９のいずれかに記載のｄｓＲＮＡ。
【請求項５１】
ｄｓＲＮＡが、吸入、注入または注射に好適な製剤中に存在する、請求項３６〜５０の
いずれかに記載のｄｓＲＮＡ。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３７】
図２は、トランスフェクションに用いたＣＴＧ１＋２  ｄｓＲＮＡ濃度に依存した、Ｃ
ＴＧＦ遺伝子の相対転写物レベルを示す。ここでも、用いたｄｓＲＮＡの効果は濃度に依
存する。１００ｎｍｏｌ／ｌのＣＴＧ１＋２  ｄｓＲＮＡによって転写物レベルは１０％
に減少する一方、ｄｓＲＮＡ５０ｎｍｏｌ／ｌでは、非特異的ＨＣＶ  ｓ５／ａｓ５  ｄ
ｓＲＮＡで処理した細胞の転写物レベルの３２％に減少した。ここでも、β２−ミクログ
ロブリンの発現には変化がみられない。