【手続補正書】
【提出日】平成18年7月31日(2006.7.31)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＣＡ  ＩＸポリペプチドの炭酸脱水酵素活性を阻害可能な薬剤を同定する方法であって、該薬剤は、アンタゴニスト抗ＣＡ  ＩＸ抗体、該アンタゴニスト抗ＣＡ  ＩＸ抗体の抗原結合フラグメント、ペプチド、ペプトイド、および有機低分子からなる群から選択され、該方法は、以下：
ａ）炭酸脱水酵素活性を検出するために適切な条件下で、試験されるべき薬剤を該ＣＡ
ＩＸポリペプチドを発現する細胞と合わせる工程；および
ｂ）該薬剤の、該炭酸脱水酵素活性を阻害する能力を評価する工程であって、これにより、該炭酸脱水酵素活性の該薬剤による阻害が、該薬剤がインヒビターであることを表す、工程、
を、包含する、方法。
【請求項２】
前記薬剤が、アンタゴニスト抗ＣＡ  ＩＸ抗体またはその抗原結合フラグメントである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
請求項２に記載の方法であって、前記抗ＣＡ  ＩＸ抗体またはその前記抗原結合フラグメントが、前記ＣＡ  ＩＸポリペプチドの阻害性エピトープと特異的に反応して抗体抗原複合体を形成し、これにより、該複合体の形成が、該ＣＡ  ＩＸポリペプチドの炭酸脱水酵素活性の阻害をもたらす、方法。
【請求項４】
請求項３に記載の方法であって、前記阻害性エピトープが、前記ＣＡ  ＩＸポリペプチドの炭酸脱水酵素ドメインの連続するアミノ酸残基を含む阻害性エピトープ、該炭酸脱水酵素ドメインの不連続なアミノ酸残基を含む阻害性エピトープ、ならびに該炭酸脱水酵素ドメインの連続するアミノ酸残基および不連続なアミノ酸残基の両方を含む阻害性エピトープからなる群から選択される、方法。
【請求項５】
前記哺乳動物が、ヒトであり、前記ＣＡ  ＩＸポリペプチドが、配列番号２のヒトＣＡ  ＩＸであり、前記炭酸脱水酵素ドメインが、配列番号２のアミノ酸残基１３５〜４１４によって表される、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記阻害性エピトープが、配列番号２の残基２２６、２２８および２５１からなる群から選択される、少なくとも１つのアミノ酸残基を含む、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記阻害性エピトープが、配列番号２の残基２２０〜２６０からなる群から選択される、少なくとも５つの連続するアミノ酸残基を含む、請求項５に記載の方法。
【請求項８】
前記阻害性エピトープが、配列番号２の残基２２６、２２８および２５１からなる群から選択される、少なくとも１つのアミノ酸残基を含む、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記抗ＣＡ  ＩＸ抗体が、ヒト抗ＣＡ  ＩＸモノクローナル抗体またはその抗原結合フラグメントである、請求項３に記載の方法。
【請求項１０】
前記抗ＣＡ  ＩＸ抗体が、ヒト化抗ＣＡ  ＩＸモノクローナル抗体またはその抗原結合フラグメントである、請求項３に記載の方法。
【請求項１１】
前記抗ＣＡ  ＩＸ抗体が、またはその抗原結合フラグメントが、それらに結合する、細胞毒素、治療剤、または放射活性金属イオンをさらに含む、請求項３に記載の方法。
【請求項１２】
前記抗原結合フラグメントが、Ｆａｂフラグメント、Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、Ｆｖフラグメント、単鎖Ｆｖフラグメントからなる群から選択される、請求項３に記載の方法。
【請求項１３】
哺乳動物において、新生物細胞の増殖を阻害するための組成物であって、該新生物細胞は、ＣＡ  ＩＸタンパク質の発現によって特徴付けられ、該組成物は、治療的有効用量の、該ＣＡ  ＩＸタンパク質の炭酸脱水酵素活性を阻害する薬剤を含み、ここで、該薬剤は、請求項１に記載の方法によって同定される、組成物。
【請求項１４】
前記ＣＡ  ＩＸタンパク質の炭酸脱水酵素活性を阻害する前記薬剤が、組換えＣＨＯ細胞または組換え骨髄腫細胞によって産生される抗体である、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
前記骨髄腫細胞が、Ｓｐ２骨髄腫細胞またはＮＳ０骨髄腫細胞である、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】
機能的炭酸脱水酵素ドメインを有する、ＣＡ  ＩＸポリペプチドの炭酸脱水酵素活性を阻害する薬剤を同定する方法であって、該方法は、以下：
ａ）炭酸脱水酵素活性を検出するために適切な条件下で、試験されるべき薬剤を該ＣＡ
ＩＸポリペプチドを発現する細胞と結合させる工程；および
ｂ）該薬剤の、該炭酸脱水酵素活性を阻害する能力を評価する工程であって、これにより、該炭酸脱水酵素活性の該薬剤による阻害が、該薬剤がインヒビターであることを表す、工程、
を、包含する、方法。
【請求項１７】
請求項１６に記載の方法であって、前記ＣＡ  ＩＸポリペプチドは、以下：
ａ）配列番号２に示されるアミノ酸配列を有するヒトＣＡ  ＩＸ；
ｂ）配列番号２の残基１３５〜４１４に示されるポリペプチド；
ｃ）炭酸脱水酵素活性を有するポリペプチドであって、該ポリペプチドはヒトＣＡ  ＩＸのフラグメントを含み、該フラグメントは機能的炭酸脱水酵素ドメインを含み、ここで、該炭酸脱水酵素ドメインは、配列番号２の残基１３５〜４１４と少なくとも７０％の配列同一性を共有する、ポリペプチド；ならびに
ｄ）配列番号２のヒトＣＡ  ＩＸのポリペプチド改変体であって、該ポリペプチド改変体は、配列番号２と少なくとも７０％の配列同一性を共有し、該ポリペプチド改変体は、機能的炭酸脱水酵素ドメインを有し、ここで、該炭酸脱水酵素ドメインは、配列番号２の残基１３５〜４１４と少なくとも７０％の配列同一性を共有する、ポリペプチド改変体、からなる群から選択される、方法。
【請求項１８】
前記フラグメントが、配列番号２の残基１３５〜４１４と少なくとも８０％の配列同一性を共有する機能的炭酸脱水酵素ドメインを含む、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記フラグメントが、配列番号２の残基１３５〜４１４と少なくとも９０％の配列同一性を共有する機能的炭酸脱水酵素ドメインを含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記フラグメントが、配列番号２の残基１３５〜４１４と少なくとも９５％の配列同一性を共有する機能的炭酸脱水酵素ドメインを含む、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記ポリペプチド改変体が、配列番号２と少なくとも８０％の配列同一性を共有し、ここで、前記炭酸脱水酵素ドメインが、配列番号２の残基１３５〜４１４と少なくとも８０％の配列同一性を共有する、請求項１７に記載の方法。
【請求項２２】
前記ポリペプチド改変体が、配列番号２と少なくとも９０％の配列同一性を共有し、ここで、前記炭酸脱水酵素ドメインが、配列番号２の残基１３５〜４１４と少なくとも９０％の配列同一性を共有する、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記ポリペプチド改変体が、配列番号２と少なくとも９５％の配列同一性を共有し、ここで、前記炭酸脱水酵素ドメインが、配列番号２の残基１３５〜４１４と少なくとも９５％の配列同一性を共有する、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記細胞が、ＣＯＳ、チャイニーズハムスター卵巣、ＮＩＨ−３Ｔ３、２９３、およびこれらの誘導体からなる群から選択される宿主細胞である、請求項１６に記載の方法。
【請求項２５】
前記細胞が、前記ＣＡ  ＩＸを天然に発現する細胞株または組織の細胞である、請求項１６に記載の方法。
【請求項２６】
前記薬剤の炭酸脱水酵素活性を阻害する前記能力が、軟寒天アッセイを使用して検出される、請求項１６に記載の方法。
【請求項２７】
請求項１６に記載の方法に従って同定されているＣＡ  ＩＸポリペプチドの炭酸脱水酵素活性のインヒビターであって、ここで、該インヒビターが、ペプチド、ペプトイド、および有機低分子からなる群から選択される、インヒビター。
【請求項２８】
哺乳動物において新生物細胞の増殖を阻害するための組成物であって、該新生物細胞は、ＣＡ  ＩＸタンパク質の発現によって特徴付けられ、該組成物は、治療的有効用量の、該ＣＡ  ＩＸタンパク質の炭酸脱水酵素活性を阻害する薬剤を含み、ここで、該薬剤は、請求項１６に記載の方法によって同定される、組成物。
【請求項２９】
ＣＡ  ＩＸポリペプチドの炭酸脱水酵素活性を阻害可能な薬剤を含有する組成物であって、該薬剤は、アンタゴニスト抗ＣＡ  ＩＸ抗体、該アンタゴニスト抗ＣＡ  ＩＸ抗体の抗原結合フラグメント、ペプチド、ペプトイド、および有機低分子からなる群から選択され、ここで、該薬剤は、該炭酸脱水酵素活性を検出するために適切な条件下で、試験されるべき薬剤を、該ＣＡ  ＩＸポリペプチドを発現する細胞と合わせる工程；および、該薬剤の、該炭酸脱水酵素活性を阻害する能力を評価する工程であって、これにより、該薬剤による該炭酸脱水酵素活性の阻害が、該薬剤がインヒビターであることを表す工程、によって同定される、組成物。
【請求項３０】
前記組成物が、薬学的組成物である、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３１】
薬学的に受容可能なキャリアをさらに含有する、請求項３０に記載の組成物。
【請求項３２】
哺乳動物において、新生物細胞の増殖を阻害するための組成物であって、該新生物細胞は、ＣＡ  ＩＸタンパク質の発現によって特徴付けられ、該組成物は、治療的有効量の請求項２９の組成物である、組成物。
【請求項３３】
本質的に配列番号２のアミノ酸残基１３５〜４１４からなる、ポリペプチド。
【請求項３４】
ＣＡ  ＩＸタンパク質の発現によって特徴付けられる新生物を有する被験体を処置するための組成物であって、該組成物は、治療的有効量の薬学的薬剤を含み、ここで、該薬学的薬剤は、該ＣＡ  ＩＸタンパク質の炭酸脱水酵素活性を阻害する薬剤を含み、ここで、該薬剤は、請求項１に記載の方法によって同定される、組成物。
【請求項３５】
前記薬剤が、モノクローナル抗体である、請求項３４に記載の組成物。
【請求項３６】
機能的炭酸脱水酵素ドメインを含むヒトＣＡ  ＩＸまたはその生物学的に活性な改変体の炭酸脱水酵素活性を阻害するモノクローナル抗体であって、該機能的炭酸脱水酵素ドメインは、配列番号２の残基２２９〜２５６に相同である残基の領域を含み、ここで、該抗体は、該ヒトＣＡ  ＩＸの阻害性エピトープまたは該その生物学的に活性な改変体の該阻害性エピトープと特異的に反応して抗体抗原複合体を形成し、ここで、該複合体の形成は、該炭酸脱水酵素活性の阻害をもたらし、ここで、該ヒトＣＡ  ＩＸの該阻害性エピトープは、配列番号２の残基２２９〜２５６の少なくとも１つを含み、ここで、該その生物学的に活性な改変体の該阻害性エピトープは、配列番号２の残基２２９〜２５６と相同な領域の少なくとも１つの残基を含む、モノクローナル抗体。
【請求項３７】
請求項３６に記載のモノクローナル抗体であって、前記ヒトＣＡ  ＩＸの前記阻害性エピトープが、配列番号２の残基２２９〜２５６の少なくとも２つを含むが、配列番号２の残基２２９〜２５６の２８未満しか含まない、モノクローナル抗体。
【請求項３８】
請求項３６に記載の抗体および薬学的に受容可能なキャリアを含有する、薬学的組成物。
【請求項３９】
ＣＡ  ＩＸポリペプチドの炭酸脱水酵素活性を阻害する能力について、抗体をアッセイする方法であって、該方法は、以下：
ａ）炭酸脱水酵素活性を検出するために適切な条件下で、試験されるべき抗体を該ＣＡ
ＩＸポリペプチドを発現する細胞と合わせる工程；および
ｂ）該抗体の、該炭酸脱水酵素活性を阻害する能力を評価する工程であって、これにより、該炭酸脱水酵素活性の該抗体による阻害が、該抗体がインヒビターであることを表す、工程、
を、包含する、方法。
【請求項４０】
前記抗体が、既存の抗体である、請求項３９に記載の方法。