【手続補正書】
【提出日】平成18年5月12日(2006.5.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
a) GPVIの細胞外ドメインおよびコラーゲンとの結合について機能的なその変異体から選択されるGPVI部分;および、
b)免疫グロブリンのFcドメインおよびその機能保存変異体から選択されるFc部分、
を含み、該GPVI部分とFc部分とがアミノ酸配列 Gly-Gly-Argを特徴とするリンカーを介して融合している融合タンパク質。
【請求項２】
そのFcドメインがIgG Fcドメインである請求項1の融合タンパク質。
【請求項３】
GPVIの細胞外ドメインがヒト由来である請求項1または請求項2の融合タンパク質。
【請求項４】
Fcドメインがヒト由来である請求項1〜3のいずれかの融合タンパク質。
【請求項５】
Fcドメインの機能保存部分がコラーゲンとの結合について機能的な形態にて融合タンパク質を細胞から分泌させることについて機能的である請求項1〜4のいずれかの融合タンパク質。
【請求項６】
配列番号１のアミノ酸配列を特徴とする請求項1の融合タンパク質。
【化１】
2006512894.tif 000001
（配列番号１）
【請求項７】
１または数個のアミノ酸においてグリコシル化されている請求項1〜6のいずれかの融合タンパク質。
【請求項８】
ホモ二量体融合タンパク質である請求項1〜7のいずれかの融合タンパク質。
【請求項９】
２つの単量体が共有結合している請求項8の融合タンパク質。
【請求項１０】
蛍光標識されている請求項8または請求項9の融合タンパク質。
【請求項１１】
以下の群から選択される配列を含む核酸配列:
a)配列番号２の核酸または遺伝コードの縮重によって同じポリペプチドをコードするその変異体;
【化２】
2006512894.tif 000002
（配列番号２）
b)配列番号２によってコードされるポリペプチドと少なくとも 70%の配列相同性を有するポリペプチドをコードする核酸配列であり、そのN-末端からそのC-末端の順に、GPVIの細胞外ドメインまたはコラーゲンとの結合について機能的であるその変異体、アミノ酸配列 Gly-Gly-Argを有するリンカー、およびFcドメインまたはコラーゲンとの結合について機能的な形態にて細胞から該核酸によってコードされるタンパク質を分泌させる能力について機能的なその機能保存変異体、を含むポリペプチドをコードする核酸配列;および、
c)5’→3’方向において、GPVIの細胞外ドメインまたはコラーゲンとの結合について機能的なその変異体を含む少なくとも 100 アミノ酸をコードする第一のセグメント、アミノ酸配列 Gly-Gly-Argをコードする第二のセグメント、および、コラーゲンとの結合について機能的な形態にて細胞から該核酸によってコードされるタンパク質を分泌させる能力についてFcドメインと同様に機能的な少なくとも 200 アミノ酸をコードする第三のセグメントを有する少なくとも300アミノ酸のポリペプチドをコードする核酸。
【請求項１２】
配列番号２の配列を特徴とする請求項11の核酸。
【請求項１３】
配列番号２の塩基1〜807に対応する位置の塩基がGPVIの細胞外ドメインをコードする請求項11のbまたはcの核酸。
【請求項１４】
配列番号２の塩基817〜1515に対応する位置の塩基がIgG 免疫グロブリンのFcドメインをコードする請求項11のbまたはcの核酸。
【請求項１５】
請求項11〜14のいずれかの核酸にコードされるタンパク質。
【請求項１６】
請求項11〜14のいずれかの核酸によってコードされる２本のポリペプチド鎖を含み、各鎖が鎖間ジスルフィド結合によって他方の鎖のヒンジ領域に連結しているヒンジ領域を有する、アテローム性動脈硬化症の治療または予防のための抗アテローム硬化性医薬組成物。
【請求項１７】
請求項11〜14のいずれかの核酸を含むベクター。
【請求項１８】
請求項1〜7のいずれかの融合タンパク質または請求項8または9のホモ二量体融合タンパク質を発現する細胞。
【請求項１９】
請求項8または請求項9のホモ二量体融合タンパク質を含む医薬組成物。
【請求項２０】
GPVIの細胞外ドメインまたはコラーゲンとの結合について機能的であるその変異体;および免疫グロブリンのFcドメインまたはその機能保存部分を含み、該細胞外ドメインまたはその変異体および該Fcドメインまたはその機能保存部分がアミノ酸配列 Gly-Gly-Argを特徴とするリンカーを介して融合しているホモ二量体融合タンパク質であるイムノアドヘシンを含む医薬組成物。
【請求項２１】
イムノアドヘシンが配列番号１のポリペプチドのホモ二量体である請求項20の医薬組成物。
【請求項２２】
静脈内用調製物である請求項20または請求項21の医薬組成物。
【請求項２３】
請求項8または請求項9のホモ二量体融合タンパク質またはホモ二量体形態の場合の請求項15のタンパク質を含む、患者におけるアテローム性動脈硬化症の治療または予防のための医薬組成物。
【請求項２４】
アテローム進行の予防のための請求項23の医薬組成物。
【請求項２５】
請求項8または請求項9のホモ二量体融合タンパク質またはホモ二量体形態の場合の請求項15のタンパク質を含む、患者における動脈内血栓症の予防のための医薬組成物。
【請求項２６】
患者が急性冠症候群または頸動脈症候群に罹患しており、かつ、活動性動脈内病変を有する、請求項25の医薬組成物。
【請求項２７】
糖尿病のアテローム硬化性合併症の治療のための、請求項 23〜26のいずれかの医薬組成物。
【請求項２８】
請求項8または請求項9のホモ二量体融合タンパク質、またはホモ二量体形態の場合の請求項15のタンパク質を含む、心筋梗塞および/または脳卒中の治療または予防のための医薬組成物。
【請求項２９】
経口、皮下、腹腔内または静脈内投与用の請求項23〜28のいずれかの医薬組成物。
【請求項３０】
融合タンパク質0.5〜6.0 mg/kgを送達するための剤形である請求項23〜29のいずれかの医薬組成物。
【請求項３１】
GPVIとコラーゲンとの結合の阻害剤をインビトロでスクリーニングするための請求項8または請求項9のホモ二量体融合タンパク質またはホモ二量体形態の場合の請求項15のタンパク質の使用。
【請求項３２】
ホモ二量体融合タンパク質が蛍光標識されている請求項31の使用。
【請求項３３】
以下の工程を含む糖タンパク質 VIのコラーゲンへの結合の阻害剤をインビトロでスクリーニングする方法:
(i)コラーゲンを露出する表面を提供する工程;
(ii)該表面の一部分と、請求項8または請求項9の融合タンパク質またはホモ二量体形態の場合の請求項15のタンパク質とを、該融合タンパク質の該表面への結合を可能とするあらかじめ決められた条件下で接触させる工程;
(iii)該表面の別の部分と、該融合タンパク質とを、工程(ii)の条件下で被験化合物の存在下で接触させる工程;
(iv)該被験化合物の非存在下および存在下での該表面に結合した該融合タンパク質の量を測定する工程;
(v)被験化合物の非存在下と比較して該被験化合物の存在下において該表面への該融合タンパク質の結合が少なければ該被験化合物を阻害剤として同定する工程;および、
(vi)所望により血小板凝集および/または血小板活性化に対する該阻害剤の機能的効果を測定する工程。
【請求項３４】
請求項8または請求項9のホモ二量体融合タンパク質またはホモ二量体形態の場合の請求項15のタンパク質の、GPVIに媒介される血小板の活動性血管内病変への付着の阻害剤をインビトロでスクリーニングするための使用。
【請求項３５】
請求項8または請求項9のホモ二量体融合タンパク質またはホモ二量体形態の場合の請求項15のタンパク質を免疫原として使用することを含む非ヒト哺乳類からのモノクローナル抗体の産生方法。
【請求項３６】
静脈内血栓の形成の予防または病的アテローム硬化性病変の発症または進行の制御のための請求項35のモノクローナル抗体を含む医薬組成物。