【手続補正書】
【提出日】平成18年8月8日(2006.8.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）アミノ酸配列のＳＥＱＩＤ番号：２、４、または６をコード化する単離核酸分子、
（ｂ）以下のハイブリッド形成条件で（ａ）とハイブリッド形成する核酸分子：０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、６５℃および２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳとそれに続く０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳでの洗浄、および
（ｃ）（ａ）または（ｂ）に相補的である核酸分子
よりなる群から選択される、α（１，６）−結合したグルコースオリゴ糖を加水分解するポリペプチドをコード化することを特徴とする単離核酸分子。
【請求項２】
請求項１に記載の単離核酸分子によってコード化されることを特徴とするポリペプチド。
【請求項３】
（ａ）α（１，６）−結合したグルコースオリゴ糖を加水分解するポリペプチドに作動可能に連結されたシグナルペプチドから構成されるキメラタンパクをコード化する単離核酸分子、
（ｂ）以下のハイブリッド形成条件下で（ａ）とハイブリッド形成する核酸分子：０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、６５℃、および２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳとそれに続く０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳでの洗浄、および
（ｃ）（ａ）または（ｂ）に相補的な核酸分子
よりなる群から選択される、α（１，６）−結合したグルコースオリゴ糖を加水分解するポリペプチドをコード化することを特徴とする単離核酸分子。
【請求項４】
請求項３に記載の核酸分子によってコード化されることを特徴とするポリペプチド。
【請求項５】
適切な制御配列に作動可能に連結された、請求項１または請求項３に記載の単離核酸分子を含むことを特徴とするキメラ遺伝子。
【請求項６】
請求項５に記載のキメラ遺伝子を含むことを特徴とするベクター。
【請求項７】
請求項５に記載のキメラ遺伝子を含むことを特徴とする形質転換された宿主細胞。
【請求項８】
（ａ）適切な条件下で限界デキストリン存在下において、
（ｉ）α（１，６）−結合したグルコースオリゴ糖を加水分解するポリペプチドに作動可能に連結されたシグナルペプチドから構成されるキメラタンパクをコード化する単離核酸分子、
（ｉｉ）以下のハイブリッド形成条件下で（ｉ）とハイブリッド形成する核酸分子：０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、６５℃、および２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳとそれに続く０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳでの洗浄、または
（ｉｉｉ）（ｉ）または（ｉｉ）に相補的な核酸分子、および
（ｉｖ）単糖類を標的分子に転換するための少なくとも１つのキメラ遺伝子
を含む形質転換された宿主細胞を接触させ、これにより標的分子を製造する工程と、
（ｂ）（ａ）で製造された標的分子を任意選択的に回収する工程と
を含むことを特徴とする組換え宿主細胞中における標的分子の製造方法。
【請求項９】
（ａ）適切な条件下で限界デキストリン存在下において、
（ｉ）α（１，６）−結合したグルコースオリゴ糖を加水分解するポリペプチドに作動可能に連結されたシグナルペプチドから構成されるキメラタンパクをコード化する単離核酸分子、
（ｉｉ）以下のハイブリッド形成条件下で（ｉ）とハイブリッド形成する核酸分子：０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、６５℃、および２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳとそれに続く０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳでの洗浄、または
（ｉｉｉ）（ｉ）または（ｉｉ）と相補的な核酸分子、および
（ｉｖ）単糖類をグリセロールに転換するための少なくとも１つのキメラ遺伝子
を含む形質転換された宿主細胞を接触させ、これによりグリセロールを製造する工程と、
（ｂ）（ａ）で製造されたグリセロールを任意選択的に回収する工程と
を含むことを特徴とする組換え宿主細胞中におけるグリセロールの製造方法。
【請求項１０】
（ａ）適切な条件下で限界デキストリン存在下において、
（ｉ）α（１，６）−結合したグルコースオリゴ糖を加水分解するポリペプチドに作動可能に連結されたシグナルペプチドから構成されるキメラタンパクをコード化する単離核酸分子、
（ｉｉ）以下のハイブリッド形成条件下で（ｉ）とハイブリッド形成する核酸分子：０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＥＳ、６５℃および２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳとそれに続く０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳでの洗浄、または
（ｉｉｉ）（ｉ）または（ｉｉ）に相補的な核酸分子、
（ｉｖ）単糖類を１，３−プロパンジオールに転換するための少なくとも１つのキメラ遺伝子
を含む形質転換された宿主細胞を接触させ、これにより、１，３−プロパンジオールを製造する工程と、
（ｂ）（ａ）で製造された１，３−プロパンジオールを任意選択的に回収する工程と
を含むことを特徴とする組換え宿主細胞中における１，３−プロパンジオールの製造方法。
【請求項１１】
（ａ）適切な条件下で限界デキストリン存在下において、
（ｉ）α（１，６）−結合したグルコースオリゴ糖を加水分解するポリペプチドに連結されたシグナルペプチドで構成されるキメラタンパクをコード化する単離核酸分子、
（ｉｉ）以下のハイブリッド形成条件下で（ｉ）とハイブリッド形成する核酸分子：０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、６５℃および２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳとそれに続く０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳでの洗浄、および
（ｉｉｉ）（ｉ）または（ｉｉ）に相補的な核酸分子
を含む形質転換された宿主細胞を接触させる工程と、
（ｂ）（ａ）で製造された細胞塊を任意選択的に回収する工程と
を含むことを特徴とする組換え宿主細胞中の細胞塊の製造方法。
【請求項１２】
（ａ）適切な条件下で限界デキストリン存在下において、
（ｉ）ＳＥＱＩＤ番号：２、６、１７、および３１よりなる群から選択されるアミノ酸配列をコード化する単離核酸分子、
（ｉｉ）以下のハイブリッド形成条件下で（ｉ）とハイブリッド形成する核酸分子：０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、６５℃および２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳとそれに続く０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳでの洗浄、または
（ｉｉｉ）（ｉ）または（ｉｉ）に相補的な核酸分子、および
（ｉｖ）単糖類を標的分子に転換するための少なくとも１つのキメラ遺伝子
を含む形質転換された宿主細胞を接触させ、これにより、前記標的分子を製造する工程と、
（ｂ）（ａ）で製造された標的分子を任意選択的に回収する工程と
を含むことを特徴とする組換え宿主細胞中における標的分子の製造方法。
【請求項１３】
（ａ）適切な条件下で限界デキストリン存在下において、
（ｉ）ＳＥＱＩＤ番号２、６、１７、および３１よりなる群から選択されるアミノ酸配列をコード化する単離核酸分子、
（ｉｉ）以下のハイブリッド形成条件下で（ｉ）とハイブリッド形成する核酸分子：０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、６５℃および２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳとそれに続く０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳでの洗浄、または
（ｉｉｉ）（ｉ）または（ｉｉ）に相補的な核酸分子、および
（ｉｖ）単糖類を１，３−プロパンジオールに転換するための少なくとも１つのキメラ遺伝子
を含む形質転換された宿主細胞を接触させ、これにより、１，３−プロパンジオールを製造する工程と、
（ｂ）任意選択的に（ａ）で製造された１，３−プロパンジオールを回収する工程と
を含むことを特徴とする組換え宿主細胞中における１，３−プロパンジオールの製造方法。
【請求項１４】
（ａ）適切な条件下で限界デキストリン存在下において、
（ｉ）ＳＥＱＮＯ：２、６、１７、および３１よりなる群から選択されるアミノ酸配列をコード化する単離核酸分子、
（ｉｉ）以下のハイブリッド形成条件下で、（ｉ）とハイブリッド形成する核酸分子：０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、６５℃および２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳとそれに続く０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳでの洗浄、または
（ｉｉｉ）（ｉ）または（ｉｉ）に相補的な核酸分子、および
（ｉｖ）単糖類をグリセロールに転換するための少なくとも１つのキメラ遺伝子
を含む形質転換された宿主細胞を接触させる、これにより、グリセロールを製造する工程と、
（ｂ）（ａ）で製造されたグリセロールを任意選択的に回収する工程と
を含むことを特徴とする組換え宿主細胞中におけるグリセロールの製造方法。
【請求項１５】
（ａ）適切な条件下で限界デキストリン存在下において、
（ｉ）ＳＥＱＩＤ番号：２、６、１７、および３１よりなる群から選択されるアミノ酸配列をコード化する単離核酸分子、
（ｉｉ）以下のハイブリッド形成条件下で（ｉ）とハイブリッド形成する核酸分子：０．１×ＳＳＣ，０．１％ＳＤＳ、６５℃および２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳとそれに続く０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳでの洗浄、または
（ｉｉｉ）（ｉ）または（ｉｉ）に相補的な核酸分子
を含む形質転換された宿主細胞を接触させ、これにより、細胞塊を製造する工程と、
（ｂ）（ａ）で製造された細胞塊を任意選択的に回収する工程と
を含むことを特徴とする組換え宿主細胞中における細胞塊の製造方法。
【請求項１６】
（ａ）適切な生育条件下で、
（ｉ）ＳＥＱＩＤ番号：２、６、１７、および３１よりなる群から選択される酵素をコード化する核酸分子、
（ｉｉ）以下のハイブリッド形成条件下で（ｉ）とハイブリッド形成する核酸分子：０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ，６５℃および２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳとそれに続く０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳでの洗浄、または
（ｉｉｉ）（ｉ）または（ｉｉ）に相補的な核酸分子
を含む形質転換された宿主細胞を、有効量の限界デキストリン基材と接触させる工程と、
（ｂ）任意選択的に工程（ａ）の生成物を回収する工程と
を含むことを特徴とする限界デキストリンを分解する方法。
【請求項１７】
ＳＥＱＩＤ番号：１７で示される配列を有するポリペプチドと比較した場合に、アライメントのＢＬＡＳＴＰ法に基づいて少なくとも６９％の同一性を有するアミノ酸配列を有するポリペプチドであり、該ポリペブチドがα（１，６）−結合したグルコースオリゴ糖を加水分解する活性を有することを特徴とするポリペプチド。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１９７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１９７】
【表１】
2006504412.tif 000001
本出願は、特許請求の範囲に記載の発明を含め、以下の発明を包含する。
（１）  （ａ）アミノ酸配列のＳＥＱＩＤ番号：２、４、または６をコード化する単離核酸分子、
（ｂ）以下のハイブリッド形成条件で（ａ）とハイブリッド形成する核酸分子：０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、６５℃および２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳとそれに続く０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳでの洗浄、および
（ｃ）（ａ）または（ｂ）に相補的である核酸分子
よりなる群から選択される、α（１，６）−結合したグルコースオリゴ糖を加水分解するポリペプチドをコード化することを特徴とする単離核酸分子。
（２）  ＳＥＱＩＤ番号：１、３、および５からなる核酸分子の群から選択されることを特徴とする（１）に記載の単離核酸分子。
（３）  （１）に記載の単離核酸分子によってコード化されることを特徴とするポリペプチド。
（４）  ＳＥＱＩＤ番号：２、４、および６よりなる群から選択されことを特徴とする（３）に記載のポリペプチド
（５）  （ａ）α（１，６）−結合したグルコースオリゴ糖を加水分解するポリペプチドに作動可能に連結されたシグナルペプチドから構成されるキメラタンパクをコード化する単離核酸分子、
（ｂ）以下のハイブリッド形成条件下で（ａ）とハイブリッド形成する核酸分子：０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、６５℃、および２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳとそれに続く０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳでの洗浄、および
（ｃ）（ａ）または（ｂ）に相補的な核酸分子
よりなる群から選択される、α（１，６）−結合したグルコースオリゴ糖を加水分解するポリペプチドをコード化することを特徴とする単離核酸分子。
（６）  前記シグナルペプチドがＳＥＱＩＤ番号：２４またはＳＥＱＩＤ番号：２５であることを特徴とする（５）に記載の単離核酸分子。
（７）  前記α（１，６）−結合したグルコースオリゴ糖を加水分解するポリペプチドが、ＳＥＱＩＤ番号：２、４、６、１７、または３１であることを特徴とする（５）に記載の単離核酸分子。
（８）  前記シグナルペプチドがＳＥＱＩＤ番号：２４またはＳＥＱＩＤ番号：２５であり、前記α（１，６）−結合したグルコースオリゴ糖を加水分解するポリペプチドがＳＥＱＩＤ番号：２、４、６、１７、または３１であることを特徴とする（５）に記載の単離核酸分子。
（９）  前記シグナルペプチドがＳＥＱＩＤ番号：２６またはＳＥＱＩＤ番号：２７で示されるシグナル配列によってコード化されることを特徴とする（５）に記載の単離核酸分子。
（１０）  前記α（１，６）−結合したグルコースオリゴ糖を加水分解するポリペプチドをコード化し、単離核酸分子がＳＥＱＩＤ番号：１、ＳＥＱＩＤ番号：５、ＳＥＱＩＤ番号：１６、またはＳＥＱＩＤ番号：３０で示される配列を有することを特徴とする（５）に記載の単離核酸分子。
（１１）  ＳＥＱＩＤ番号：３、ＳＥＱＩＤ番号：２８、ＳＥＱＩＤ番号：３２、ＳＥＱＩＤ番号：３４、ＳＥＱＩＤ番号：３６、ＳＥＱＩＤ番号：３８、ＳＥＱＩＤ番号：４０、またはＳＥＱＩＤ番号：４２よりなる群から選択されることを特徴とする（５）に記載の単離核酸分子。
（１２）  （５）に記載の核酸分子によってコード化されることを特徴とするポリペプチド。
（１３）  （９）、（１０）、または（１１）に記載の単離核酸分子によってコード化されることを特徴とするポリペプチド。
（１４）  ＳＥＱＩＤ番号：４、ＳＥＱＩＤ番号：２９、ＳＥＱＩＤ番号：３３、ＳＥＱＩＤ番号：３５、ＳＥＱＩＤ番号：３７、ＳＥＱＩＤ番号：３９、ＳＥＱＩＤ番号：４１、およびＳＥＱＩＤ番号４３よりなる群から選択されることを特徴とする（１３）に記載のポリペプチド。
（１５）  適切な制御配列に作動可能に連結された、（１）または（５）に記載の単離核酸分子を含むことを特徴とするキメラ遺伝子。
（１６）  前記適切な制御配列が、ＣＹＣ１、ＨＩＳ３、ＧＡＬ１、ＧＡＬ１０、ＡＤＨ１、ＰＧＫ、ＰＨＯ５、ＧＡＰＤＨ、ＡＤＣ１、ＴＲＰ１、ＵＲＡ３、ＬＥＵ２、ＥＮＯ、ＴＰＩ、ＡＯＸ１、ｌａｃ、ａｒａ、ｔｅｔ、ｔｒｐ、ＩＰＬ、ＩＰＲ、Ｔ７、ｔａｃ、ｔｒｃ、ａｐｒ、ｎｐｒ、ｎｏｓ、およびＧＩを含む群から選択されることを特徴とする（１５）に記載のキメラ遺伝子。
（１７）  （１５）に記載のキメラ遺伝子を含むことを特徴とするベクター。
（１８）  （１５）に記載のキメラ遺伝子を含むことを特徴とする形質転換された宿主細胞。
（１９）  前記キメラ遺伝子が染色体に組み込まれるか、またはプラスミドにより運搬されることを特徴とする（１８）に記載の形質転換された宿主細胞。
（２０）  宿主細胞が細菌、酵母菌、および糸状菌よりなる群から選択されることを特徴とする（１８）に記載の形質転換された宿主細胞。
（２１）  前記形質転換された宿主細胞がアスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）、トリコデルマ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）、サッカロミセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）、ピチア（Ｐｉｃｈｉａ）、カンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）、ハンゼヌラ（Ｈａｎｓｅｎｕｌａ）、ロドコッカス（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）、アシネトバクター（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ）、アルスロバクター（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ）、ブレビバクテリウム（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、アシドボラック（Ａｃｉｄｏｖｏｒａｘ）、バシラス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、ストレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）、エシェリキア（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ）、サルモネラ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、またはコリネバクテリウム（Ｃｏｒｎｙｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属から選択されることを特徴とする（２０）に記載の形質転換された宿主細胞。
（２２）  前記形質転換された宿主細胞が大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）であることを特徴とする（２０）に記載の形質転換された宿主細胞。
（２３）  （ａ）適切な条件下で限界デキストリン存在下において、
（ｉ）α（１，６）−結合したグルコースオリゴ糖を加水分解するポリペプチドに作動可能に連結されたシグナルペプチドから構成されるキメラタンパクをコード化する単離核酸分子、
（ｉｉ）以下のハイブリッド形成条件下で（ｉ）とハイブリッド形成する核酸分子：０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、６５℃、および２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳとそれに続く０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳでの洗浄、または
（ｉｉｉ）（ｉ）または（ｉｉ）に相補的な核酸分子、および
（ｉｖ）単糖類を標的分子に転換するための少なくとも１つのキメラ遺伝子
を含む形質転換された宿主細胞を接触させ、これにより標的分子を製造する工程と、
（ｂ）（ａ）で製造された標的分子を任意選択的に回収する工程と
を含むことを特徴とする組換え宿主細胞中における標的分子の製造方法。
（２４）  （ａ）適切な条件下で限界デキストリン存在下において、
（ｉ）α（１，６）−結合したグルコースオリゴ糖を加水分解するポリペプチドに作動可能に連結されたシグナルペプチドから構成されるキメラタンパクをコード化する単離核酸分子、
（ｉｉ）以下のハイブリッド形成条件下で（ｉ）とハイブリッド形成する核酸分子：０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、６５℃、および２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳとそれに続く０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳでの洗浄、または
（ｉｉｉ）（ｉ）または（ｉｉ）と相補的な核酸分子、および
（ｉｖ）単糖類をグリセロールに転換するための少なくとも１つのキメラ遺伝子
を含む形質転換された宿主細胞を接触させ、これによりグリセロールを製造する工程と、
（ｂ）（ａ）で製造されたグリセロールを任意選択的に回収する工程と
を含むことを特徴とする組換え宿主細胞中におけるグリセロールの製造方法。
（２５）  （ａ）適切な条件下で限界デキストリン存在下において、
（ｉ）α（１，６）−結合したグルコースオリゴ糖を加水分解するポリペプチドに作動可能に連結されたシグナルペプチドから構成されるキメラタンパクをコード化する単離核酸分子、
（ｉｉ）以下のハイブリッド形成条件下で（ｉ）とハイブリッド形成する核酸分子：０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＥＳ、６５℃および２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳとそれに続く０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳでの洗浄、または
（ｉｉｉ）（ｉ）または（ｉｉ）に相補的な核酸分子、
（ｉｖ）単糖類を１，３−プロパンジオールに転換するための少なくとも１つのキメラ遺伝子
を含む形質転換された宿主細胞を接触させ、これにより、１，３−プロパンジオールを製造する工程と、
（ｂ）（ａ）で製造された１，３−プロパンジオールを任意選択的に回収する工程と
を含むことを特徴とする組換え宿主細胞中における１，３−プロパンジオールの製造方法。
（２６）  （ａ）適切な条件下で限界デキストリン存在下において、
（ｉ）α（１，６）−結合したグルコースオリゴ糖を加水分解するポリペプチドに連結されたシグナルペプチドで構成されるキメラタンパクをコード化する単離核酸分子、
（ｉｉ）以下のハイブリッド形成条件下で（ｉ）とハイブリッド形成する核酸分子：０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、６５℃および２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳとそれに続く０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳでの洗浄、および
（ｉｉｉ）（ｉ）または（ｉｉ）に相補的な核酸分子
を含む形質転換された宿主細胞を接触させる工程と、
（ｂ）（ａ）で製造された細胞塊を任意選択的に回収する工程と
を含むことを特徴とする組換え宿主細胞中の細胞塊の製造方法。
（２７）  前記シグナルペプチドがＳＥＱＩＤ番号：２４またはＳＥＱＩＤ番号：２５を含むことを特徴とする（２３）、（２４）、（２５）、または（２６）に記載の方法。
（２８）  （ａ）適切な条件下で限界デキストリン存在下において、
（ｉ）ＳＥＱＩＤ番号：２、６、１７、および３１よりなる群から選択されるアミノ酸配列をコード化する単離核酸分子、
（ｉｉ）以下のハイブリッド形成条件下で（ｉ）とハイブリッド形成する核酸分子：０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、６５℃および２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳとそれに続く０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳでの洗浄、または
（ｉｉｉ）（ｉ）または（ｉｉ）に相補的な核酸分子、および
（ｉｖ）単糖類を標的分子に転換するための少なくとも１つのキメラ遺伝子
を含む形質転換された宿主細胞を接触させ、これにより、前記標的分子を製造する工程と、
（ｂ）（ａ）で製造された標的分子を任意選択的に回収する工程と
を含むことを特徴とする組換え宿主細胞中における標的分子の製造方法。
（２９）  （ａ）適切な条件下で限界デキストリン存在下において、
（ｉ）ＳＥＱＩＤ番号２、６、１７、および３１よりなる群から選択されるアミノ酸配列をコード化する単離核酸分子、
（ｉｉ）以下のハイブリッド形成条件下で（ｉ）とハイブリッド形成する核酸分子：０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、６５℃および２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳとそれに続く０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳでの洗浄、または
（ｉｉｉ）（ｉ）または（ｉｉ）に相補的な核酸分子、および
（ｉｖ）単糖類を１，３−プロパンジオールに転換するための少なくとも１つのキメラ遺伝子
を含む形質転換された宿主細胞を接触させ、これにより、１，３−プロパンジオールを製造する工程と、
（ｂ）任意選択的に（ａ）で製造された１，３−プロパンジオールを回収する工程と
を含むことを特徴とする組換え宿主細胞中における１，３−プロパンジオールの製造方法。
（３０）  （ａ）適切な条件下で限界デキストリン存在下において、
（ｉ）ＳＥＱＮＯ：２、６、１７、および３１よりなる群から選択されるアミノ酸配列をコード化する単離核酸分子、
（ｉｉ）以下のハイブリッド形成条件下で、（ｉ）とハイブリッド形成する核酸分子：０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、６５℃および２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳとそれに続く０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳでの洗浄、または
（ｉｉｉ）（ｉ）または（ｉｉ）に相補的な核酸分子、および
（ｉｖ）単糖類をグリセロールに転換するための少なくとも１つのキメラ遺伝子
を含む形質転換された宿主細胞を接触させる、これにより、グリセロールを製造する工程と、
（ｂ）（ａ）で製造されたグリセロールを任意選択的に回収する工程と
を含むことを特徴とする組換え宿主細胞中におけるグリセロールの製造方法。
（３１）  （ａ）適切な条件下で限界デキストリン存在下において、
（ｉ）ＳＥＱＩＤ番号：２、６、１７、および３１よりなる群から選択されるアミノ酸配列をコード化する単離核酸分子、
（ｉｉ）以下のハイブリッド形成条件下で（ｉ）とハイブリッド形成する核酸分子：０．１×ＳＳＣ，０．１％ＳＤＳ、６５℃および２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳとそれに続く０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳでの洗浄、または
（ｉｉｉ）（ｉ）または（ｉｉ）に相補的な核酸分子
を含む形質転換された宿主細胞を接触させ、これにより、細胞塊を製造する工程と、
（ｂ）（ａ）で製造された細胞塊を任意選択的に回収する工程と
を含むことを特徴とする組換え宿主細胞中における細胞塊の製造方法。
（３２）  前記シグナルペプチドがＳＥＱＩＤ番号：２４またはＳＥＱＩＤ番号：２５であることを特徴とする（２８）、（２９）、（３０）、または（３１）に記載の方法。
（３３）  （ａ）適切な生育条件下で、
（ｉ）ＳＥＱＩＤ番号：２、６、１７、および３１よりなる群から選択される酵素をコード化する核酸分子、
（ｉｉ）以下のハイブリッド形成条件下で（ｉ）とハイブリッド形成する核酸分子：０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ，６５℃および２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳとそれに続く０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳでの洗浄、または
（ｉｉｉ）（ｉ）または（ｉｉ）に相補的な核酸分子
を含む形質転換された宿主細胞を、有効量の限界デキストリン基材と接触させる工程と、
（ｂ）任意選択的に工程（ａ）の生成物を回収する工程と
を含むことを特徴とする限界デキストリンを分解する方法。
（３４）  ＳＥＱＩＤ番号：１７で示される配列を有するポリペプチドと比較した場合に、アライメントのＢＬＡＳＴＰ法に基づいて少なくとも６９％の同一性を有するアミノ酸配列を有するポリペプチドであり、該ポリペブチドがα（１，６）−結合したグルコースオリゴ糖を加水分解する活性を有することを特徴とするポリペプチド。