【手続補正書】
【提出日】平成18年3月14日(2006.3.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
幹細胞を目的組織の細胞にインビボで分化させる方法であって、
（ａ）ドナー組織に由来する、エクスビボ拡大培養された幹細胞の集団を得ること、および
（ｂ）前記幹細胞を目的組織に投与して、目的組織を特徴づける１つ以上の細胞タイプへの幹細胞の分化を誘導するようにすること
を含む方法。
【請求項２】
前記ドナー組織は、目的組織の表現型特徴および機能的特徴と同一の表現型特徴および機能的特徴を有する請求項１記載の方法。
【請求項３】
前記ドナー組織は、目的組織の表現型特徴および機能的特徴とは異なる表現型特徴および機能的特徴を有する請求項１記載の方法。
【請求項４】
前記ドナー組織に由来する前記幹細胞は、胚性幹細胞ならびに新生児幹細胞および／または成体幹細胞からなる群から選択される請求項１記載の方法。
【請求項５】
前記胚性幹細胞は胚性幹細胞および胚生殖細胞からなる群から選択される請求項４記載の方法。
【請求項６】
前記新生児幹細胞および／または成体幹細胞は、造血幹細胞および非造血幹細胞からなる群から選択される請求項４記載の方法。
【請求項７】
前記造血幹細胞は、骨髄細胞、新生児臍帯血細胞および末梢血細胞からなる群から選択される請求項６記載の方法。
【請求項８】
前記ドナー組織に由来する前記造血幹細胞がＣＤ３４＋豊富化細胞である請求項７記載の方法。
【請求項９】
前記ドナー組織に由来する前記造血幹細胞がＡＣ１３３＋豊富化細胞である請求項７記載の方法。
【請求項１０】
前記エクスビボ拡大培養された幹細胞は、ＣＤ３８、ＣＤ３、ＣＤ６１、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１４、ＣＤ１５および／またはＣＤ４の細胞表面抗原のダウンレギュレーションされた発現によって特徴づけられる請求項８記載の方法。
【請求項１１】
前記非造血幹細胞は、ニューロン幹細胞、ニューロン始原細胞、稀突起神経膠細胞始原細胞、間葉性幹細胞、肝細胞幹細胞、肝臓幹細胞、表皮幹細胞、心臓幹細胞からなる群から選択される請求項６記載の方法。
【請求項１２】
ドナー組織に由来する前記幹細胞が細胞系譜的に拘束された細胞と混合される請求項１記載の方法。
【請求項１３】
ドナー組織に由来する前記幹細胞が、前記目的組織を有する対象に関して同一遺伝子型、同種および／または異種であるドナーから得られる請求項１記載の方法。
【請求項１４】
前記目的組織が、内胚葉細胞、外胚葉細胞および／または中胚葉細胞を含む請求項１記載の方法。
【請求項１５】
内胚葉細胞を含む前記目的組織は、咽頭、食道、胃、腸、肝臓、膵臓、気管および肺からなる群から選択される請求項１４記載の方法。
【請求項１６】
外胚葉細胞を含む前記目的組織は、脳、副腎、網膜および表皮からなる群から選択される請求項１４記載の方法。
【請求項１７】
中胚葉細胞を含む前記目的組織は、結合組織、間葉、骨、軟骨、筋肉、繊維組織、真皮、心臓、骨髄、および泌尿生殖系の細管からなる群から選択される請求項１４記載の方法。
【請求項１８】
ドナー組織に由来する前記幹細胞が、内胚葉起源、外胚葉起源および／または中胚葉起源である請求項１記載の方法。
【請求項１９】
前記エクスビボ拡大培養された幹細胞の前記集団を得ることが、細胞増殖を誘導しかつ細胞分化を抑制するために好適な条件のもとで幹細胞を培養することによって行われる請求項１記載の方法。
【請求項２０】
前記細胞増殖を誘導しかつ前記細胞分化を抑制するために好適な前記条件が、前記幹細胞におけるＣＤ３８の発現および／または活性を低下させるために選択される請求項１９記載の方法。
【請求項２１】
前記条件が栄養分およびサイトカインを含む請求項１９記載の方法。
【請求項２２】
前記サイトカインが初期作用サイトカインである請求項２１記載の方法。
【請求項２３】
前記初期作用サイトカインは、幹細胞因子、ＦＬＴ３リガンド、インターロイキン−１、インターロイキン−２、インターロイキン−３、インターロイキン−６、インターロイキン−１０、インターロイキン−１２、腫瘍壊死因子−αおよびトロンボポエチンからなる群から選択される請求項２２記載の方法。
【請求項２４】
前記サイトカインが後期作用サイトカインである請求項２１記載の方法。
【請求項２５】
前記後期作用サイトカインは、顆粒球コロニー刺激因子、顆粒球／マクロファージコロニー刺激因子、エリスロポエチン、ＦＧＦ、ＥＧＦ、ＮＧＦ、ＶＥＧＦ、ＬＩＦ、肝細胞増殖因子およびマクロファージコロニー刺激因子からなる群から選択される請求項２４記載の方法。
【請求項２６】
細胞に遷移金属キレーターまたは遷移金属キレートを与えることが前記条件に含まれる請求項１９記載の方法。
【請求項２７】
前記遷移金属キレーターまたは遷移金属キレートは、ポリアミンキレート化剤、エチレンジアミン、ジエチレントリアミン、トリエチレンテトラミン、トリエチレンジアミン、テトラエチレンペンタミン、アミノエチルエタノールアミン、アミノエチルピペラジン、ペンタエチレンヘキサミン、トリエチレンテトラミン塩酸塩、テトラエチレンペンタミン塩酸塩、ペンタエチレンヘキサミン塩酸塩、テトラエチルペンタミン、カプトプリル、ペニシラミン、Ｎ，Ｎ’−ビス（３−アミノプロピル）−１，３−プロパンジアミン、Ｎ，Ｎ，ビス（２−アミノエチル）−１，３−プロパンジアミン、１，７−ジオキサ−４，１０−ジアザシクロドデカン、１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン−５，７−ジオン、１，４，７−トリアザシクロノナン三塩酸塩、１−オキサ−４，７，１０−トリアザシクロドデカン、１，４，８，１２−テトラアザシクロペンタデカン、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカンからなる群から選択される請求項２６記載の方法。
【請求項２８】
前記細胞増殖を誘導しかつ前記細胞分化を抑制するために好適な前記条件が、ＰＩ３−キナーゼの活性阻害剤または発現阻害剤と細胞を培養することを含む請求項１９記載の方法。
【請求項２９】
前記ＰＩ３−キナーゼの発現阻害剤がポリヌクレオチドである請求項２８記載の方法。
【請求項３０】
前記ポリヌクレオチドがＰＩ３−キナーゼ細胞内抗体をコードする請求項２９記載の方法。
【請求項３１】
前記ポリヌクレオチドがＰＩ３−キナーゼ抗体をコードする請求項２９記載の方法。
【請求項３２】
前記ポリヌクレオチドが、ＰＩ３−キナーゼの細胞内のｍＲＮＡ分解または遺伝子分解を生じさせる小さい干渉性ポリヌクレオチド分子である請求項２９記載の方法。
【請求項３３】
前記小さい干渉性ポリヌクレオチド分子は、ＲＮＡｉ分子、アンチセンス分子、リボザイム分子およびＤＮＡザイム分子からなる群から選択される請求項３２記載の方法。
【請求項３４】
前記ポリヌクレオチドが優性ネガティブなＰＩ３−キナーゼ構築物を含有するＤＮＡベクターである請求項２９記載の方法。
【請求項３５】
前記ＰＩ３−キナーゼの活性阻害剤は、ウォルトマンニンおよびＬＹ２９４００２からなる群から選択される請求項２８記載の方法。
【請求項３６】
前記細胞増殖を誘導しかつ前記細胞分化を抑制するために好適な前記条件が、レチノイドに応答する前記幹細胞の能力を低下できるように選択される請求項１９記載の方法。
【請求項３７】
前記レチノイドに応答する前記幹細胞の前記能力を低下させることが可逆的な様式で行われる請求項３６記載の方法。
【請求項３８】
レチノイドに応答する前記幹細胞の前記能力の低下が可能な選択された前記条件は、１つ以上のレチノイン酸受容体アンタゴニスト、１つ以上のレチノイドＸ受容体アンタゴニストおよび／または１つ以上のビタミンＤ受容体アンタゴニストの有効量の存在を含む請求項３６記載の方法。
【請求項３９】
１つ以上のレチノイン酸受容体アンタゴニスト、１つ以上のレチノイドＸ受容体アンタゴニストおよび／または１つ以上のビタミンＤ受容体アンタゴニストの前記有効量の前記存在は、前記幹細胞の全エクスビボ培養期間の０．１％〜５０％の期間に行われる請求項３８記載の方法。
【請求項４０】
前記１つ以上のレチノイン酸受容体アンタゴニストは、ＡＧＮ１９４３１０；ＡＧＮ１９３１０９；３−（４−メトキシ−フェニルスルファニル）−３−メチル酪酸；６−メトキシ−２，２−ジメチルチオクロマン−４−オン、２，２−ジメチル−４−オキソ−チオクロマン−６−イルトリフルオロメタンスルホネート；４−（（２，２−ジメチル−４−オキソ−チオクロマン−６−イル）エチニル）安息香酸エチル；４−（（２，２−ジメチル  １−４−トリフルオロメタンスルホニルオキシ−（２Ｈ）−チオクロメン−６−イル）エチニル）安息香酸エチル（４１）；チオクロメン−６−イル］エチニル］ベンゾエート（イル）；（ｐ−［（Ｅ）−２−［３’４’−ジヒドロ−４，４’−ジメチル−７’−（ヘプチルオキシ）−２’Ｈ−１−ベンゾチオピラン−６’イル］プロペニル］安息香酸１’１’−ジオキシド；２Ｅ，４Ｅ，６Ｅ−［７−（３，５−ジ−ｔ−ブチル−４−ｎ−ブトキシフェニル）−３−メチル］−オクタ２，４，６−トリエン酸；２Ｅ，４Ｅ，６Ｅ−［７−（３，５−ジ−ｔ−ブチル−４−ｎ−プロポキシフェニル）−３−メチル］−オクタ２，４，６−トリエン酸；２Ｅ，４Ｅ，６Ｅ−［７−（３，５−ジ−ｔ−ブチル−４−ｎ−ペントキシフェニル）−３−メチル］−オクタ２，４，６−トリエン酸；２Ｅ，４Ｅ，６Ｅ−［７−（３，５−ジ−ｔ−ブチル−４−ｎ−ヘキソキシフェニル）−３−メチル］−オクタ２，４，６−トリエン酸；２Ｅ，４Ｅ，６Ｅ−［７−（３，５−ジ−ｔ−ブチル−４−ｎ−ヘプトキシフェニル）−３−メチル］−オクタ２，４，６−トリエン酸；２Ｅ，４Ｅ，６Ｅ−［７−（３，５−ジ−ｔ−ブチル−４−ｎ−オクトキシフェニル）−３−メチル］−オクタ２，４，６−トリエン酸；（２Ｅ，４Ｅ，６Ｅ）−７−［３−ｔ−ブチル−５−（１−フェニルビニル）−フェニル］−３−メチル−オクタ２，４，６−トリエン酸；２Ｅ，４Ｅ，６Ｅ−［７−（３，５−ジ−ｔ−ブチル−４｛［４，５−３Ｈ２］−ｎ−ペントキシ｝フェニル）−３−メチル］−オクタ２，４，６−トリエン酸；（２Ｅ，４Ｅ）−（１ＲＳ，２ＲＳ）−５−［２−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ．ブチル−２−エトキシフェニル）シクロプロピル］−３−メチル−ペンタ−２，４−ジエン酸エチルエステル：（２Ｅ，４Ｅ）−（１ＲＳ，２ＲＳ）−５−［２−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ．ブチル−２−エトキシフェニル）シクロプロピル］−３−メチル−ペンタ−２，４−ジエン酸；（２Ｅ，４Ｅ）−（１ＲＳ，２ＲＳ）−５−［２−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ．ブチル−２−ブトキシフェニル）シクロプロピル］−３−メチル−ペンタ−２，４−ジエン酸；（２Ｅ，４Ｅ，６Ｚ）−７−［３，５−ジ−ｔｅｒｔ．ブチル−２−エトキシフェニル］−３−メチル−２，４，６−オクタトリエン酸；（２Ｅ，４Ｅ，６Ｚ）−７−［３，５−ジ−ｔｅｒｔ．ブチル−２−ブチルオキシフェニル］−３−メチル−２，４，６−オクタトリエン酸；４−（５，６，７，８−テトラヒドロ−５，５，８，８−テトラメチル−２−ナフタレンカルボキサミド）安息香酸；（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−（５，５，８，８−テトラメチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−イル���シクロプロピル］ペンタ−２，４−ジエン酸；ｐ−［（Ｅ）−２−［３’，４’−ジヒドロ−４’，４’−ジメチル−７’−（ヘプチルオキシ）−２’Ｈ−１−ベンゾチオピラン−６’−イル］プロペニル］安息香酸；１’，１’−ジオキシド，４−（７，７，１０，１０−テトラメチル−１−ピリジン−３−イルメチル−４，５，７，８，９，１０−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ナフト［２，３−ｇ］インドール−３−イル）安息香酸；（２Ｅ，４Ｅ，６Ｚ）−７−［３，５−ジ−ｔｅｒｔ．ブチル−２−メトキシフェニル］−３−メチル−２，４，６−オクタトリエン酸；（２Ｅ，４Ｅ，６Ｚ）−７−［３，５−ジ−ｔｅｒｔ．ブチル−２−エトキシフェニル］−３−メチル−２，４，６−オクタトリエン酸；（２Ｅ，４Ｅ，６Ｚ）−７−［３，５−ジ−ｔｅｒｔ．ブチル−２−ヘキシルオキシフェニル］−３−メチル−２，４，６−オクタトリエン酸；（２Ｅ，４Ｅ，６Ｚ）−７−［３，５−ジ−ｔｅｒｔ．ブチル−２−オクチルオキシフェニル］−３−メチル−２，４，６−オクタトリエン酸；および（２Ｅ，４Ｅ）−（１ＲＳ，２ＲＳ）−５−［２−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ．ブチル−２−ブトキシフェニル）シクロプロピル］−３−メチル−ペンタ−２，４−ジエン酸、（２Ｅ，４Ｅ，６Ｚ）−７−（３−ｎ−プロポキシ−５，６，７，８−テトラヒドロ−５，５，８，８−テトラメチルナフタレン−２−イル）−３−メチルオクタ−２，４，６−トリエン酸、および４−（５Ｈ−２，３（２，５−ジメチル−２，５−ヘキサノ）−５−ｎ−プロピルジベンゾ［ｂ，ｅ］［１，４］ジアゼピン−１１−イル）安息香酸、４−（５Ｈ−２，３−（２，５−ジメチル−２，５−ヘキサノ）−５−メチル−８−ニトロジベンゾ［ｂ，ｅ］［１，４］ジアゼピン−１１−イル）安息香酸、４−｛［４−（４−エチルフェニル）２，２−ジメチル−（２Ｈ）−チオクロメン−６−イル］エチニル｝安息香酸、４−［４−２メチル−１，２−ジカルバ−クロソ（ｃｌｏｓｏ）−ドデカボラン−１−イル−フェニルカルバモイル］安息香酸、４−［４，５，７，８，９，１０−ヘキサヒドロ−７，７，１０，１０−テトラメチル−１−（３−ピリジルメチル）アントラ［１，２−ｂ］ピロール−３−イル］安息香酸、（３−ピリジルメチル）−）５−チアアントラ［２，１−ｂ］ピロール−３−イル）安息香酸、および（３−ピリジルメチル）アントラ［２ｍ１−ｄ］ピラゾール−３−イル）安息香酸からなる群から選択される請求項３８記載の方法。
【請求項４１】
前記１つ以上のレチノイドＸ受容体アンタゴニストは、ＬＧＮ１００５７２、ＬＧＮ１００５７４、１−（３−ヒドロキシ−５，６，７，８−テトラヒドロ−５，５，８，８−テトラメチルナフタレン−２−イル）エタノン、１−（３−プロポキシ−５，６，７，８−テトラヒドロ−５，５，８，８−テトラメチルナフタレン−２−イル）エタノン、３−（３−プロポキシ−５，６，７，８−テトラヒドロ−５，５，８，８−テトラメチルナフタレン−２−イル）ブタ−２−エンニトリル、３−（３−プロポキシ−５，６，７，８−テトラヒドロ−５，５，８，８−テトラメチルナフタレン−２−イル）ブタ−２−エナール、（２Ｅ，４Ｅ，６Ｅ）−７−３［−プロポキシ−５，６，７，８−テトラヒドロ−５，５，８，８−テトラメチル−２−ナフタレン−２−イル］−３−メチルオクタ−２，４，６−トリエン酸、４−［３，５，５，８，８−ペンタメチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−２−ナフチル］カルボニル］安息香酸、４−［１−（３，５，５，８，８−ペンタメチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−２−ナフチル）エテニル］安息香酸、４−［１（３，５，５，８，８−ペンタメチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−２−ナフチル）シクロプロピル］安息香酸、４−［１−（３，５，５，８，８−ペンタメチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−２−ナフチル）エテニル］ベンゼンテトラゾール、２−［１−（５，５，８，８−テトラメチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−２−ナフチル）エテニル］ピリジン−５−カルボン酸、２−［１−（３，５，５，８，８−ペンタメチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−２−ナフチル）エチル］ピリジン−５−カルボン酸、２−［１−（３，５，５，８，８−ペンタメチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−２−ナフチル）エテニル］ピリジン−５−カルボン酸エチル、５−［１−３，５，５，８，８−ペンタメチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−２−ナフチル］エテニル］ピリジン−２−カルボン酸、２−［１−（３，５，５，８，８−ペンタメチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−２−ナフチル）シクロプロピル］ピリジン−５−カルボン酸、２−［１−（３，５，５，８，８−ペンタメチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−２−ナフチル）シクロプロピル］ピリジン−５−カルボン酸メチル、４−［１−（３，５，５，８，８−ペンタメチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−２−ナフチル）エテニル］−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）ベンズアミド、２−［１−（３，５，５，８，８−ペンタメチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−２−ナフチル）エテニル］ピリジン−５−カルボン酸、２−［１−（３，５，５，８，８−ペンタメチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−２−ナフチル）シクロプロピル］ピリジン−５−カルボン酸、４−［（３，５，５，８，８−ペンタメチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−２−ナフチル）カルボニル］安息香酸ブチルオキシム、４−［（３，５，５，８，８−ペンタメチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−２−ナフチル）カルボニル］安息香酸プロピルオキシム、４−［（３，５，５，８，８−ペンタメチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−２−ナフチル）カルボニル］安息香酸シアノイミン、４−［（３，５，５，８，８−ペンタメチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−２−ナフチル）カルボニル］安息香酸アリルオキシム、４−［（３，５，５，８，８−ペンタメチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−２−ナフチル）カルボニル］安息香酸４−（３−メチルブタ−２−エン酸）オキシム、および４−［（３，５，５，８，８−ペンタメチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−２−ナフチル）カルボニル］安息香酸１−アミノエチルオキシム、（２Ｅ，４Ｅ，６Ｚ）−７−（３−ｎ−プロポキシ−５，６，７，８−テトラヒドロ−５，５，８，８−テトラメチルナフタレン−２−イル）−３−メチルオクタ−２，４，６−トリエン酸、４−（５Ｈ−２，３（２，５−ジメチル−２，５−ヘキサノ）−５−ｎ−プロピルジベンゾ［ｂ，ｅ］［１，４］ジアゼピン−１１−イル）安息香酸、および４−（５Ｈ−２，３−（２，５−ジメチル−２，５−ヘキサノ）−５メチル−８−ニトロジベンゾ［ｂ，ｅ］［１，４］ジアゼピン−１１−イル）安息香酸からなる群から選択される請求項３８記載の方法。
【請求項４２】
前記１つ以上のビタミンＤ受容体アンタゴニストは、１α，２５−（ＯＨ）−Ｄ３−２６，２３−ラクトン；１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ（３）；その２５−カルボン酸エステルＺＫ１５９２２２；（２３Ｓ）−２５−デヒドロ−１α−ＯＨ−Ｄ（３）；（２３Ｒ）−２５−デヒドロ−１α−ＯＨ−Ｄ（３）；１β，２５（ＯＨ）２Ｄ３；１β，２５（ＯＨ）２−３−ｅｐｉ−Ｄ３；（２３Ｓ）２５−デヒドロ−１α（ＯＨ）Ｄ３−２６，２３−ラクトン；（２３Ｒ）２５−デヒドロ−１α（ＯＨ）Ｄ３−２６，２３−ラクトン、および（５Ｚ，７Ｅ，２２Ｅ−（１Ｓ，７Ｅ，２２Ｅ−（１Ｓ，３Ｒ，２４Ｒ）−１，３，２４−トリヒドロキシ−２６，２７−シクロ−９，１０−セココレスタ−５，７，１０（１９），２２−テトラエン−２５−カルボン酸）ブチルからなる群から選択される請求項３８記載の方法。
【請求項４３】
レチノイドに応答する前記幹細胞の前記能力の低下が可能な選択された前記条件は、レチノイン酸受容体、レチノイドＸ受容体および／またはビタミンＤ受容体をダウンレギュレーションするポリヌクレオチドを含む請求項３６記載の方法。
【請求項４４】
前記ポリヌクレオチドが、抗レチノイン酸受容体細胞内抗体、抗レチノイドＸ受容体細胞内抗体および／または抗ビタミンＤ受容体細胞内抗体をコードする請求項４３記載の方法。
【請求項４５】
前記ポリヌクレオチドが、抗レチノイン酸受容体抗体、抗レチノイドＸ受容体抗体および／または抗ビタミンＤ受容体抗体をコードする請求項４３記載の方法。
【請求項４６】
前記ポリヌクレオチドが、レチノイン酸受容体、レチノイドＸ受容体またはビタミンＤ受容体の細胞内のｍＲＮＡ分解または遺伝子分解を生じさせる小さい干渉性ポリヌクレオチド分子である請求項４３記載の方法。
【請求項４７】
前記小さい干渉性ポリヌクレオチド分子は、ＲＮＡｉ分子、アンチセンス分子、リボザイム分子およびＤＮＡザイム分子からなる群から選択される請求項４６記載の方法。
【請求項４８】
レチノイドに応答する前記幹細胞の前記能力の低下が可能な選択された前記条件は、１つ以上のＰＩ３−キナーゼの発現阻害剤または活性阻害剤の有効量を含む請求項３６記載の方法。
【請求項４９】
前記細胞増殖を誘導しかつ前記細胞分化を抑制するために好適な前記条件が、ビタミンＤに応答する前記幹細胞の能力を低下させることができるように選択される請求項１９記載の方法。
【請求項５０】
前記ビタミンＤに応答する前記幹細胞の前記能力を低下させることが可逆的な様式で行われる請求項４９記載の方法。
【請求項５１】
ビタミンＤに応答する前記幹細胞の前記能力の低下が可能な選択された前記条件は、１つ以上のレチノイン酸受容体アンタゴニスト、１つ以上のレチノイドＸ受容体アンタゴニストおよび／または１つ以上のビタミンＤ受容体アンタゴニストの有効量の存在を含む請求項４９記載の方法。
【請求項５２】
１つ以上のレチノイン酸受容体アンタゴニスト、１つ以上のレチノイドＸ受容体アンタゴニストおよび／または１つ以上のビタミンＤ受容体アンタゴニストの前記有効量の前記存在は、前記幹細胞の全エクスビボ培養期間の０．１％〜５０％の期間に行われる請求項５１記載の方法。
【請求項５３】
ビタミンＤに応答する前記幹細胞の前記能力の低下が可能な選択された前記条件は、レチノイン酸受容体、レチノイドＸ受容体および／またはビタミンＤ受容体をダウンレギュレーションするポリヌクレオチドを含む請求項４９記載の方法。
【請求項５４】
前記細胞増殖を誘導しかつ前記細胞分化を抑制するために好適な前記条件が、レチノイン酸受容体を伴うシグナル伝達経路に応答する前記幹細胞の能力を低下させることができるように選択される請求項１９記載の方法。
【請求項５５】
レチノイン酸受容体を伴うシグナル伝達経路に応答する前記幹細胞の前記能力を低下させることが可逆的な様式で行われる請求項５４記載の方法。
【請求項５６】
前記細胞増殖を誘導しかつ前記細胞分化を抑制するために好適な前記条件が、レチノイドＸ受容体を伴うシグナル伝達経路に応答する前記幹細胞の能力を低下させることができるように選択される請求項１９記載の方法。
【請求項５７】
レチノイドＸ受容体を伴う前記シグナル伝達経路に応答する前記幹細胞の前記能力を低下させることが可逆的な様式で行われる請求項５６記載の方法。
【請求項５８】
前記細胞増殖を誘導しかつ前記細胞分化を抑制するために好適な前記条件が、ビタミンＤ受容体を伴うシグナル伝達経路に応答する前記幹細胞の能力を低下させることができるように選択される請求項１９記載の方法。
【請求項５９】
ビタミンＤ受容体を伴うシグナル伝達経路に応答する前記幹細胞の前記能力を低下させることが可逆的な様式で行われる請求項５８記載の方法。
【請求項６０】
細胞または組織の置換を必要とする障害に罹患している個体を治療する方法であって、
（ａ）単離された幹細胞を、細胞増殖を誘導しかつ細胞分化を抑制するために好適な選択された培養条件に供し、それにより、拡大培養された幹細胞の集団を得ること；および
（ｂ）前記拡大培養された幹細胞の集団を、障害に関連する個体の組織に導入し、それにより、前記組織を特徴づける細胞への前記拡大培養された幹細胞集団の細胞分化を誘導し、それにより細胞または組織の置換を必要とする障害に罹患している個体を治療すること
を含む方法。
【請求項６１】
前記細胞増殖を誘導しかつ前記細胞分化を抑制するために好適な前記条件が、細胞に遷移金属キレーターまたは遷移金属キレートを与えることを含む請求項６０記載の方法。
【請求項６２】
前記遷移金属キレーターまたは遷移金属キレートは、ポリアミンキレート化剤、エチレンジアミン、ジエチレントリアミン、トリエチレンテトラミン、トリエチレンジアミン、テトラエチレンペンタミン、アミノエチルエタノールアミン、アミノエチルピペラジン、ペンタエチレンヘキサミン、トリエチレンテトラミン塩酸塩、テトラエチレンペンタミン塩酸塩、ペンタエチレンヘキサミン塩酸塩、テトラエチルペンタミン、カプトプリル、ペニシラミン、Ｎ，Ｎ’−ビス（３−アミノプロピル）−１，３−プロパンジアミン、Ｎ，Ｎ，ビス（２−アミノエチル）−１，３−プロパンジアミン、１，７−ジオキサ−４，１０−ジアザシクロドデカン、１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン−５，７−ジオン、１，４，７−トリアザシクロノナン三塩酸塩、１−オキサ−４，７，１０−トリアザシクロドデカン、１，４，８，１２−テトラアザシクロペンタデカン、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカンからなる群から選択される請求項６１記載の方法。
【請求項６３】
前記単離された幹細胞が造血幹細胞である請求項６０記載の方法。
【請求項６４】
前記造血幹細胞は、骨髄細胞、新生児臍帯血細胞および末梢血細胞からなる群から選択される請求項６３記載の方法。
【請求項６５】
前記造血幹細胞がＣＤ３４＋豊富化細胞である請求項６３記載の方法。
【請求項６６】
前記造血幹細胞がＡＣ１３３＋豊富化細胞である請求項６３記載の方法。
【請求項６７】
前記拡大培養された幹細胞集団は、ＣＤ３８、ＣＤ３、ＣＤ６１、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ１４、ＣＤ１５および／またはＣＤ４の細胞表面抗原のダウンレギュレーションされた発現によって特徴づけられる請求項６０記載の方法。
【請求項６８】
前記単離された幹細胞が細胞系譜的に拘束された細胞と混合される請求項６０記載の方法。
【請求項６９】
前記単離された幹細胞が、前記障害に関連する前記個体の前記組織に関して同一遺伝子型、同種および／または異種であるドナーから得られる請求項６０記載の方法。
【請求項７０】
障害に関連する前記個体の前記組織が、内胚葉細胞、外胚葉細胞および／または中胚葉細胞を含む請求項６０記載の方法。
【請求項７１】
内胚葉細胞を含む前記組織は、咽頭、食道、胃、腸、肝臓、膵臓、気管および肺からなる群から選択される請求項７０記載の方法。
【請求項７２】
外胚葉細胞を含む前記目的組織は、脳、副腎、網膜および表皮からなる群から選択される請求項７０記載の方法。
【請求項７３】
中胚葉細胞を含む前記目的組織は、結合組織、間葉、骨、軟骨、筋肉、繊維組織、真皮、心臓、骨髄、および泌尿生殖系の細管からなる群から選択される請求項７０記載の方法。
【請求項７４】
前記障害は、神経学的障害、筋肉障害、心臓血管障害、血液学的障害、皮膚障害、肝臓障害および膵臓障害からなる群から選択される請求項７０記載の方法。
【請求項７５】
成体幹細胞を事前に決定されたタイプの細胞に組織内で分化させる方法であって、
（ａ）ドナー組織から得られた成体幹細胞を、細胞増殖を誘導しかつ細胞分化を抑制するために好適に選択された条件のもとで培養し、それにより、拡大培養された幹細胞の集団を得ること；および
（ｂ）前記拡大培養された成体幹細胞の集団を、事前に決定されたタイプの目的組織に導入し、それにより、前記拡大培養された幹細胞の集団を前記目的組織を特徴づける細胞へ分化させること
を含む方法。
【請求項７６】
前記ドナー組織は、前記目的組織の表現型特徴および機能的特徴と同一の表現型特徴および機能的特徴を有する請求項７５記載の方法。
【請求項７７】
前記ドナー組織は、前記目的組織の表現型特徴および機能的特徴とは異なる表現型特徴および機能的特徴を有する請求項７５記載の方法。
【請求項７８】
前記ドナー組織から得られた成体幹細胞が、前記目的組織を特徴づける前記細胞に関して同一遺伝子型、同種および／または異種である請求項７５記載の方法。
【請求項７９】
骨髄に由来する幹細胞を事前に決定されたタイプの細胞に組織内で分化させる方法であって、
（ａ）ドナー組織から得られた骨髄細胞を、細胞増殖を誘導しかつ細胞分化を抑制するために好適に選択された条件のもとで培養し、それにより、拡大培養された幹細胞の集団を得ること；および
（ｂ）前記拡大培養された骨髄に由来する幹細胞の集団を、事前に決定されたタイプの目的組織に導入し、それにより、前記拡大培養された幹細胞の集団を前記目的組織を特徴づける細胞へ分化させること
を含む方法。
【請求項８０】
前記骨髄に由来する幹細胞が細胞系譜的に拘束された細胞と混合される請求項７９記載の方法。
【請求項８１】
前記骨髄に由来する幹細胞が、前記障害に関連する前記目的組織に関して同一遺伝子型、同種および／または異種であるドナーから得られる請求項７９記載の方法。
【請求項８２】
障害に関連する前記目的組織が、内胚葉細胞、外胚葉細胞および／または中胚葉細胞を含む請求項７９記載の方法。
【請求項８３】
内胚葉細胞を含む前記組織は、咽頭、食道、胃、腸、肝臓、膵臓、気管および肺からなる群から選択される請求項８２記載の方法。
【請求項８４】
外胚葉細胞を含む前記目的組織は、脳、副腎、網膜および表皮からなる群から選択される請求項８２記載の方法。
【請求項８５】
中胚葉細胞を含む前記目的組織は、結合組織、間葉、骨、軟骨、筋肉、繊維組織、真皮、心臓、骨髄、および泌尿生殖系の細管からなる群から選択される請求項８２記載の方法。
【請求項８６】
目的組織が心臓組織である請求項８０記載の方法。
【請求項８７】
心臓組織が心筋梗塞後のものである請求項８６記載の方法。