【手続補正書】
【提出日】平成17年9月6日(2005.9.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  髄膜組織の成長を促進させるために髄膜組織の成長マトリックスを調製するための方法であって、前記方法は、
活性ウイルス及びプリオンを実質的に含まない生理的適合性コラーゲンを調製し；
前記コラーゲンを含有する一定量の液状媒体を準備し、そして
前記液状媒体を除去して前記髄膜組織の成長マトリックスを与えることを含む方法。
【請求項２】  前記マトリックスが、成長する髄膜組織を前記マトリックスに浸潤させるのに足る大きさと量の孔を有する平面物体である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】  前記孔の平均直径が、約５０〜約１５０μｍである、請求項２に記載の方法。
【請求項４】  前記マトリックス表面に隣接した前記孔が直径範囲約３０μｍ〜約１５０μｍの最外部の孔であり、前記孔の残りが直径範囲約５０μｍ〜約３００μｍの最内部の孔である、請求項２に記載の方法。
【請求項５】  前記最外部の孔が直径約７０μｍで、前記最内部の孔が直径約１５０μｍである、請求項４に記載の方法。
【請求項６】  前記マトリックスがスポンジである、請求項１〜５のいずれかに記載の方法。
【請求項７】  前記マトリックスがフィルムである、請求項１〜６のいずれかに記載のの方法。
【請求項８】  前記マトリックスが不織布又はフェルトである、請求項１〜７のいずれかに記載の方法。
【請求項９】  前記コラーゲンが非抗原性である、請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
【請求項１０】  前記マトリックスが縫合可能である、請求項１〜９のいずれかに記載の方法。
【請求項１１】  前記コラーゲンが、前記コラーゲン含有材料をｐＨ約１３〜約１４にアルカリ化し、混入糖タンパク及び脂質を実質的に除去することを含む方法によって得られる、請求項１〜１０のいずれかに記載の方法。
【請求項１２】  前記コラーゲンが、
天然Ｉ型コラーゲン源から外来物質を清掃し；
前記清掃コラーゲン含有材料を洗浄し；
前記洗浄コラーゲン含有材料を粉砕し；
前記粉砕コラーゲン含有材料を、タンパク分解酵素で消化して、エラスチン及び抗原活性の原因となり得る非コラーゲン性不純物を実質的に除去し、前記コラーゲンを膨潤させ；
前記タンパク分解酵素を不活化し；
前記酵素的に消化されたコラーゲン含有材料を洗浄して、過剰の酵素と非コラーゲンタンパク質不純物を実質的に除去し；
前記コラーゲン含有材料を、約２５℃〜約３０℃の温度で約３５〜約４８時間、ｐＨ約１３〜約１４にアルカリ化して混入糖タンパク及び脂質を実質的に除去し；
前記アルカリ化コラーゲン含有材料を酸で中和し；
前記中和コラーゲン含有材料を洗浄し；
前記洗浄及び中和コラーゲン含有材料を、ｐＨ約２〜約３に酸性化して前記材料をさらに膨潤させ（前記酸性化には、コラーゲンの実質的架橋を生じさせる酸を使用しない）；
前記酸性化コラーゲン含有材料を均質化し；
前記均質化コラーゲン含有材料をろ過して、非膨潤、非コラーゲン材料からコラーゲン線維を分離し；そして
前記ろ過コラーゲン線維を前記マトリックスに使用するために回収する；
ことを含む方法によって得られる、請求項１〜１１のいずれかに記載の方法。
【請求項１３】  前記酸性化ステップが乳酸水溶液を用いて前記ｐＨを調整し、前記方法は、さらに：
前記ろ過コラーゲン線維の水性分散物を形成し；
水酸化アンモニウムの添加により前記水性分散物からコラーゲン線維を析出させ；そして
前記析出コラーゲン線維の分散物をキャスティングして前記マトリックスを形成する；
ことを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】  前記タンパク分解酵素がフィシン又はペプシンである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】  前記消化のステップが、前記コラーゲン含有材料１５０部当たり約１部のタンパク分解酵素を加え、前記コラーゲン含有材料のｐＨを約６．０〜約６．３に調整し、前記コラーゲン含有材料を約３６．５℃〜約３７．５℃の温度で約１〜約２時間消化することを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１６】  前記タンパク分解酵素がフィシンである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１７】  前記酵素が、前記酵素的に消化されたコラーゲン含有材料に酸化剤を加えることによって不活化される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１８】  前記酸化剤が亜塩素酸ナトリウムである、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】  前記方法が、さらに、前記洗浄及び酵素不活化コラーゲン含有材料を、希過酸化水素水でさらに洗浄することを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項２０】  前記アルカリ化が、約５％の水酸化ナトリウム及び約２０％の硫酸ナトリウムの水溶液を使用する、請求項１２に記載の方法。
【請求項２１】  前記酸性化ステップが、酢酸、塩酸又は乳酸を用いて前記ｐＨを調整する、請求項１２に記載の方法。
【請求項２２】  前記コラーゲンがウシを供給源として誘導される、請求項１〜２１のいずれかに記載の方法。
【請求項２３】  前記コラーゲンがウシの真皮又は腱から誘導される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】  前記コラーゲンを、フィルム、スポンジ、不織布及びフェルトからなる群から選択される少なくとも二つの異なる部材に形成し；そして
前記少なくとも二つの異なる部材を一緒に結合して前記髄膜組織成長マトリックスを提供することをさらに含む、請求項１〜２３のいずれかに記載の方法。
【請求項２５】  請求項１の記載にしたがって調製された髄膜組織成長マトリックスであって、当該マトリックスが、活性ウイルス及びプリオンを実質的に含まない生理的適合性コラーゲンを含む、髄膜組織成長マトリックス。
【請求項２６】  平面形を有する、請求項２５に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項２７】  有効量の髄膜組織成長因子をさらに含む、請求項２５又は２６に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項２８】  前記マトリックスが、成長する髄膜組織を前記マトリックスに浸潤させるのに足る大きさと量の孔を有する、請求項２５〜２７のいずれかに記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項２９】  前記孔の平均直径が、約５０〜約１５０μｍである、請求項２８に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項３０】  前記マトリックスがスポンジ、フィルム、不織布又はフェルトである、請求項２５〜２９のいずれかに記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項３１】  請求項２４に記載にしたがって調製された髄膜組織成長マトリックスであって、当該マトリックスが生理的適合性コラーゲンを含み、当該コラーゲンが、活性ウイルス及びプリオンを実質的に含まないで、しかもフィルム、スポンジ、不織布及びフェルトからなる群から選択される少なくとも二つの異なる部材に形成され、当該少なくとも二つの異なる部材が互いに結合されている、髄膜組織成長マトリックス。
【請求項３２】  前記少なくとも二つの異なる部材がフィルム及びスポンジである、請求項３１に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項３３】  前記少なくとも二つの異なる部材がスポンジ及び二枚のフィルムであり、前記スポンジが前記二枚のフィルムの間にラミネートされている請求項３１に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項３４】  有効量の髄膜組織成長因子をさらに含む、請求項３１〜３３のいずれかに記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項３５】  前記少なくとも二つの異なる部材のうちの少なくとも一つの多孔性部材が成長する髄膜組織をその中で浸潤させるのに足る大きさと量の孔を有し、前記少なくとも二つの異なる部材のうちの少なくとも一つの縫合可能な部材が、縫合を保持するのに足る耐久性のある、請求項３１〜３４のいずれかに記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項３６】  前記多孔性部材の表面に隣接した前記孔が直径範囲約３０μｍ〜約１５０μｍの最外部の孔で、前記孔の残りが直径範囲約５０μｍ〜約３００μｍの最内部の孔である、請求項３５に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項３７】  前記最外部の孔が直径約７０μｍで、前記最内部の孔が直径約１５０μｍである、請求項３６に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項３８】  前記髄膜組織成長因子が、ＲＧＤ含有ペプチド、デコリン、ラミニン、メロシン、コンドロイチン硫酸、デルマチン硫酸、ヘパラン硫酸、ケラチン硫酸、塩基性線維芽細胞成長因子(bFGF)、フィブロネクチン及びその他のインテグリンリガンド、エンタクチン及びテネイシンからなる群から選ばれる、請求項２７〜３０及び３４〜３７のいずれかに記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項３９】  前記マトリックスが平面である、請求項３１〜３８のいずれかに記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項４０】  前記処理コラーゲンが、
天然Ｉ型コラーゲン源から外来物質を清掃し；
前記清掃コラーゲン含有材料を洗浄し；
前記洗浄コラーゲン含有材料を粉砕し；
前記粉砕コラーゲン含有材料を、タンパク分解酵素で消化して、エラスチン及び抗原活性の原因となり得る非コラーゲン性不純物を実質的に除去し、前記コラーゲンを膨潤させ；
前記タンパク分解酵素を不活化し；
前記酵素的に消化されたコラーゲン含有材料を洗浄して、過剰の酵素と非コラーゲンタンパク質不純物を実質的に除去し；
前記コラーゲン含有材料を、約２５℃〜約３０℃の温度で約３５〜約４８時間、ｐＨ約１３〜約１４にアルカリ化して混入糖タンパク及び脂質を実質的に除去し；
前記アルカリ化コラーゲン含有材料を酸で中和し；
前記中和コラーゲン含有材料を洗浄し；
前記洗浄及び中和コラーゲン含有材料を、ｐＨ約２〜約３に酸性化して前記材料をさらに膨潤させ（前記酸性化には、コラーゲンの実質的架橋を生じさせる酸を使用しない）；
前記酸性化コラーゲン含有材料を均質化し；
前記均質化コラーゲン含有材料をろ過して、非膨潤、非コラーゲン材料からコラーゲン線維を分離し；そして
前記ろ過コラーゲン線維を前記マトリックスに使用するために回収する；
ことを含む方法によって得られる、請求項２５〜３９のいずれかに記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項４１】  前記酸性化ステップが乳酸水溶液を用いて前記ｐＨを調整し、前記方法は、さらに：
前記ろ過コラーゲン線維の水性分散物を形成し；
水酸化アンモニウムの添加により前記水性分散物からコラーゲン線維を析出させ；そして
前記析出コラーゲン線維の分散物をキャスティングして前記マトリックスを形成する；
ことを含む、請求項４０に記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項４２】  前記マトリックスが架橋している、請求項２５〜４１のいずれかに記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項４３】  前記コラーゲンがウシを供給源として誘導される、請求項２５〜４２のいずれかに記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項４４】  前記コラーゲンがウシの真皮又は腱から誘導される、請求項２５〜４３のいずれかに記載の髄膜組織成長マトリックス。
【請求項４５】  前記コラーゲンが、ヒトでないトランスジェニック動物によって発現されたヒトコラーゲンである、請求項２５〜４２のいずれかに記載の髄膜組織成長マトリックス。