【手続補正書】
【提出日】平成18年9月11日(2006.9.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【書類名】      明細書
【発明の名称】  Ｆｃ受容体調節剤を含有する医薬組成物およびそれを調製する方法
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）下記式の芳香族化合物：
【化１】
2002524504.tif 000001
下記式のヘテロ芳香族化合物：
【化２】
2002524504.tif 000002
下記式の環状化合物：
【化３】
2002524504.tif 000003
下記式の二環式化合物：
【化４】
2002524504.tif 000004
および
下記式のアミノ酸誘導体：
【化５】
2002524504.tif 000005
またはこれらの塩からなる群から選択される化合物［上記式中、
Ｗ1およびＷ2はそれぞれ独立に、ＣＯ2Ｒ15、Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨＯＨ、ＳＯ3Ｒ15、Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ2、ＯＰＯ（ＯＲ15）2、Ｃ（＝Ｏ）ＣＦ3またはＰＯ（Ｏ
Ｒ15）2であり；
Ａｒ1、Ａｒ2、Ａｒ4およびＡｒ5はそれぞれ独立に、Ｃ6〜Ｃ20アリールまた
はＣ1〜Ｃ20ヘテロアリールであり；
Ａｒ3はＣ1〜Ｃ20ヘテロアリールであり；
Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3、Ｘ4、Ｘ5、Ｘ6、Ｘ7およびＸ8はそれぞれ独立に、メチレン、Ｏ、ＳまたはＮＲ16であり；
Ｒ1およびＲ2はそれぞれ独立に、結合、Ｃ1〜Ｃ6アルキレンまたはハロゲン化Ｃ1〜Ｃ6アルキレンであり；
Ｒ3およびＲ4はそれぞれ独立に、ハロゲン、−Ｚ1またはＣ1〜Ｃ6アルキルで
あり；
Ｘ9、Ｙ1およびＺ1はそれぞれ独立に、ＯＲ17、ＳＲ17またはＮＲ17Ｒ18であ
り；
Ｒ5およびＲ6はそれぞれ独立に、アミノ酸側鎖残基または式−Ｒ19−Ｗ3の部
分であり；
Ｒ8、Ｒ9およびＲ11はそれぞれ独立にアミノ酸側鎖残基であり、ただしＲ11はＨおよびＣＨ3ではなく；
Ｒ7は、ＯＲ20、ＮＲ21Ｒ22または約１〜約１０個のアミノ酸であり；
Ｒ10はＣ1〜Ｃ6アルキレンであり；
Ｒ12はＣ1〜Ｃ6アルキルまたはＣ6〜Ｃ20アラルキルであり；
Ｗ3はＣ（＝Ｏ）Ｘ10であり；
Ｘ10は、ＯＲ23またはＮＲ24Ｒ25であり；
Ｒ13、Ｒ15、Ｒ17、Ｒ18、Ｒ20、Ｒ21、Ｒ23およびＲ24はそれぞれ独立に、水素またはＣ1〜Ｃ6アルキルであり；
各Ｒ16は独立にＨ、Ｃ6〜Ｃ20アリールまたはアミド保護基であり；
Ｒ19はＣ1〜Ｃ6アルキレンであり；
Ｒ22およびＲ25はそれぞれ独立に、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルまたはアミド保護基であり；
Ｒ14はＨ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルまたはアミン保護基であり；
Ｌは原子１〜約２０個を有する連結基であり；
ｍおよびｎはそれぞれ独立に０〜２の整数である。］、および
（ｂ）医薬的に許容される担体
を含む医薬組成物。
【請求項２】  患者における免疫グロブリンのＦｃ受容体結合を阻害する医薬組成物を調製する方法において、置換もしくは未置換安息香酸類；ヌクレオシド類およびそれらの類似体；葉酸およびそれの誘導体；
下記式の芳香族化合物：
【化６】
2002524504.tif 000006
下記式のヘテロ芳香族化合物：
【化７】
2002524504.tif 000007
下記式の環状化合物：
【化８】
2002524504.tif 000008
下記式の二環式化合物：
【化９】
2002524504.tif 000009
および
下記式のアミノ酸誘導体：
【化１０】
2002524504.tif 000010
［上記式中、
Ｗ1およびＷ2はそれぞれ独立に、ＣＯ2Ｒ15、Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨＯＨ、ＳＯ3Ｒ15、Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ2、ＯＰＯ（ＯＲ15）2、Ｃ（＝Ｏ）ＣＦ3またはＰＯ（Ｏ
Ｒ15）2であり；
Ａｒ1、Ａｒ2、Ａｒ4およびＡｒ5はそれぞれ独立に、Ｃ6〜Ｃ20アリールまた
はＣ1〜Ｃ20ヘテロアリールであり；
Ａｒ3はＣ1〜Ｃ20ヘテロアリールであり；
Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3、Ｘ4、Ｘ5、Ｘ6、Ｘ7およびＸ8はそれぞれ独立に、メチレン、Ｏ、ＳまたはＮＲ16であり；
Ｒ1およびＲ2はそれぞれ独立に、結合、Ｃ1〜Ｃ6アルキレンまたはハロゲン化Ｃ1〜Ｃ6アルキレンであり；
Ｒ3およびＲ4はそれぞれ独立に、ハロゲン、−Ｚ1またはＣ1〜Ｃ6アルキルで
あり；
Ｘ9、Ｙ1およびＺ1はそれぞれ独立に、ＯＲ17、ＳＲ17またはＮＲ17Ｒ18であ
り；
Ｒ5およびＲ6はそれぞれ独立に、アミノ酸側鎖残基または式−Ｒ19−Ｗ3の部
分であり；
Ｒ8、Ｒ9およびＲ11はそれぞれ独立にアミノ酸側鎖残基であり、ただしＲ11はＨおよびＣＨ3ではなく；
Ｒ7は、ＯＲ20、ＮＲ21Ｒ22または約１〜約１０個のアミノ酸であり；
Ｒ10はＣ1〜Ｃ6アルキレンであり；
Ｒ12はＣ1〜Ｃ6アルキルまたはＣ6〜Ｃ20アラルキルであり；
Ｗ3はＣ（＝Ｏ）Ｘ10であり；
Ｘ10は、ＯＲ23またはＮＲ24Ｒ25であり；
Ｒ13、Ｒ15、Ｒ17、Ｒ18、Ｒ20、Ｒ21、Ｒ23およびＲ24はそれぞれ独立に、水素またはＣ1〜Ｃ6アルキルであり；
各Ｒ16は独立にＨ、Ｃ6〜Ｃ20アリールまたはアミド保護基であり；
Ｒ19はＣ1〜Ｃ6アルキレンであり；
Ｒ22およびＲ25はそれぞれ独立に、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルまたはアミド保護基であり；
Ｒ14はＨ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルまたはアミン保護基であり；
Ｌは原子１〜約２０個を有する連結基であり；
ｍおよびｎはそれぞれ独立に０〜２の整数である。］
またはこれらの塩からなる群から選択される医薬的に有効量の化合物を活性化合物として前記医薬組成物に配合する段階を有することを特徴とする前記医薬組成物を調製する方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（技術分野）
本発明は、免疫グロブリンのＦｃ受容体への結合を調節する化合物およびそれの使用に関する。
【０００２】
（背景技術）
Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）は、免疫グロブリン（Ｉｇ）のＦｃ部分に特異性を有する関連性の大きい受容体のファミリーである。これらの受容体は、正常な免疫および感染に対する抵抗性において主要な役割を果たし、体液性免疫系に細胞エフェクターを提供する。受容体は各免疫グロブリン類について決定されており、それらが結合するＩｇの種類によって決まっている（すなわち、Ｆｃガンマ受容体（ＦｃｇＲ）はガンマ免疫グロブリン（ＩｇＧ）に結合し、Ｆｃイプシロン受容体（ＦｃｇＲ）はイプシロン免疫グロブリン（ＩｇＥ）に結合し、Ｆｃアルファ受容体（ＦｃａＲ）はアルファ免疫グロブリン（ＩｇＡ）に結合する。ＦｃｇＲ受容体の中では３種類のサブファミリーが決定されており、それはＩｇＧに対して高アフィニティーの受容体であるＦｃｇＲＩ、免疫複合体の凝集物に強く結合するＩｇＧに対する低アフィニティー受容体であるＦｃｇＲＩＩ、および免疫複合体に結合する低アフィニティー受容体であるＦｃｇＲＩＩＩである。これらの受容体は構造的に非常に関連が深いが、異なった機能を行う。免疫複合体との相互作用およびその疾患との関連から、ＦｃｇＲＩＩの構造と機能が興味を持たれている。
【０００３】
ＦｃｇＲはほとんどの造血細胞で発現され、ＩｇＧの結合を介して免疫系のホメオスタシスおよび感染に対する宿主保護において重要な役割を果たす。ＦｃｇＩＩは、実質的にＩｇＧ免疫複合体のみに結合し、例えば単核球、大食球、好中球、好酸球、血小板およびＢリンパ球などの各種細胞種で発現されるＩｇＧに対する低アフィニティー受容体である。ＦｃｇＲＩＩは、抗体依存性の細胞介在細胞毒性、免疫複合体のクリアランス、免疫介在物質の放出および抗体産生の調節などの各種免疫および炎症応答に関与する。ＩｇＧのＦｃｇＲへの結合は、ＦｃｇＲによる調節が関与する疾患徴候を生じる場合がある。例えば、自己免疫疾患血小板減少性紫斑病には、血小板のＦｃｇＲ依存性ＩｇＧ免疫複合体活性化またはＦｃｇＲ＋食細胞によるそれらの破壊によって生じる組織（血小板）損傷が関与する。さらにはＩＩ型およびＩＩＩ型過敏反応など各種炎症疾患に、ＩｇＧ免疫複合体が関与していることが知られている（例：慢性関節リウマチ、全身性紅斑性狼瘡）。ＩＩ型およびＩＩＩ型過敏反応には、補体介在機序または食細胞エフェクター機序のいずれかを活性化させて組織損傷を生じ得るＩｇＧが介在する。
【０００４】
ＦｃＲは各種生理機序に関与することから、免疫グロブリンのＦｃＲへの結合に影響を与える化合物が必要とされている。さらには、そのような化合物を用いて各種病気を治療することも必要とされている。
【０００５】
（発明の概要）
【０００６】
本発明は、
（ａ）下記式の芳香族化合物：
【化１１】
2002524504.tif 000011
下記式のヘテロ芳香族化合物：
【化１２】
2002524504.tif 000012
下記式の環状化合物：
【化１３】
2002524504.tif 000013
下記式の二環式化合物：
【化１４】
2002524504.tif 000014
および
下記式のアミノ酸誘導体：
【化１５】
2002524504.tif 000015
またはこれらの塩からなる群から選択される化合物［上記式中、
Ｗ1およびＷ2はそれぞれ独立に、ＣＯ2Ｒ15、Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨＯＨ、ＳＯ3Ｒ15、Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ2、ＯＰＯ（ＯＲ15）2、Ｃ（＝Ｏ）ＣＦ3またはＰＯ（Ｏ
Ｒ15）2であり；
Ａｒ1、Ａｒ2、Ａｒ4およびＡｒ5はそれぞれ独立に、Ｃ6〜Ｃ20アリールまた
はＣ1〜Ｃ20ヘテロアリールであり；
Ａｒ3はＣ1〜Ｃ20ヘテロアリールであり；
Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3、Ｘ4、Ｘ5、Ｘ6、Ｘ7およびＸ8はそれぞれ独立に、メチレン、Ｏ、ＳまたはＮＲ16であり；
Ｒ1およびＲ2はそれぞれ独立に、結合、Ｃ1〜Ｃ6アルキレンまたはハロゲン化Ｃ1〜Ｃ6アルキレンであり；
Ｒ3およびＲ4はそれぞれ独立に、ハロゲン、−Ｚ1またはＣ1〜Ｃ6アルキルで
あり；
Ｘ9、Ｙ1およびＺ1はそれぞれ独立に、ＯＲ17、ＳＲ17またはＮＲ17Ｒ18であ
り；
Ｒ5およびＲ6はそれぞれ独立に、アミノ酸側鎖残基または式−Ｒ19−Ｗ3の部
分であり；
Ｒ8、Ｒ9およびＲ11はそれぞれ独立にアミノ酸側鎖残基であり、ただしＲ11はＨおよびＣＨ3ではなく；
Ｒ7は、ＯＲ20、ＮＲ21Ｒ22または約１〜約１０個のアミノ酸であり；
Ｒ10はＣ1〜Ｃ6アルキレンであり；
Ｒ12はＣ1〜Ｃ6アルキルまたはＣ6〜Ｃ20アラルキルであり；
Ｗ3はＣ（＝Ｏ）Ｘ10であり；
Ｘ10は、ＯＲ23またはＮＲ24Ｒ25であり；  Ｒ13、Ｒ15、Ｒ17、Ｒ18、Ｒ20、Ｒ21、Ｒ23およびＲ24はそれぞれ独立に、水素またはＣ1〜Ｃ6アルキルであり；
各Ｒ16は独立にＨ、Ｃ6〜Ｃ20アリールまたはアミド保護基であり；
Ｒ19はＣ1〜Ｃ6アルキレンであり；
Ｒ22およびＲ25はそれぞれ独立に、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルまたはアミド保護基であり；
Ｒ14はＨ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルまたはアミン保護基であり；
Ｌは原子１〜約２０個を有する連結基であり；
ｍおよびｎはそれぞれ独立に０〜２の整数である。］、および
（ｂ）医薬的に許容される担体
を含む医薬組成物を提供する。
本発明はさらに、置換もしくは未置換安息香酸類；ヌクレオシド類およびそれらの類似体；葉酸およびそれの誘導体；約２〜約１０個のアミノ酸残基を有するペプチド類またはそれの誘導体、好ましくはトリペプチド類もしくはヘキサペプチド類；原子約８個〜約１８個を有する環部分を含む大環状化合物、好ましくは環状ペプチド類またはそれの誘導体；ならびに上記式の化合物からなる群から選択される化合物を使用して、患者におけるＦｃ受容体への免疫グロブリン類の結合を調節、例えば阻害または促進する方法を提供するものでもある。本発明の特定の実施態様では、上記で確認した化合物によるＦｃ受容体の調節を用いて、抗体と内在性もしくは外因性抗原との接触によって抗体凝集物が形成されたり免疫複合体が生じる疾患を治療する。さらに、上記で確認した化合物によるＦｃ受容体の調節を用いて、ＩｇＧ介在組織損傷を低減し、ＩｇＥ介在応答を低減し、ないしは患者における炎症を低減することもできる。
【０００７】
（発明を実施するための最良の形態）
本発明は、Ｆｃ受容体と免疫グロブリンとの間の相互作用を調節することができる各種化合物を抵抗する。いずれかの理論に拘束されるものではないが、特に有用な化合物はＦｃ受容体（例：ＦｃｇＲＩＩ）の領域Ｃ（図１参照）を標的とすると考えられている。そこで、これらの化合物は２個のＦｃｇＩＩ蛋白間の二量化界面を妨害することで、そのＦｃＲ蛋白の一方または両方を介した細胞信号伝達に影響を与えると考えられている。具体的には、ＦｃｇＲＩＩのペプチド残基１１７〜１３１および１５０〜１６４がＦｃｇＩＩａ二量体の界面領域を構成すると考えられており、それらの領域を模倣またはそれら領域に結合することができる化合物は良好な結合調節剤であると考えられている。例えば、天然ヘキサペプチドＰｈｅ１２１〜Ｓｅｒ１２６またはそれより短い部分は、強い水素結合相互作用のある領域に広がっていることから、２個のＦｃｇＲＩＩａ分子間の二量化の好適な調節剤である。そのような蛋白部分は、発明の名称「Ｆｃ受容体の三次元構造およびモデルならびにそれの使用（3 Dimensi onal Structure and Models of Fc Receptors and Uses Thereof ）」という１９９９年２月５日出願の米国特許出願０９／２４５７６４号（これは引用によってその全内容が本明細書に含まれる）における配列番号３の一部として開示されている。
【０００８】
本発明の化合物は、無作為スクリーニングならびにＦｃ受容体調節のための合理的な薬剤設計によって得られたものである。ＦｃｇＲはほとんどの造血細胞で発現され、ＩｇＧの結合を介して免疫系のホメオスタシスおよび感染に対する宿主保護において重要な役割を果たす。ＦｃｇＩＩは、実質的にＩｇＧ免疫複合体のみに結合し、例えば単核球、大食球、好中球、好酸球、血小板およびＢリンパ球などの各種細胞種で発現されるＩｇＧに対する低アフィニティー受容体である。ＦｃｇＲＩＩは、抗体依存性の細胞介在細胞毒性、免疫複合体のクリアランス、免疫介在物質の放出および抗体産生の調節などの各種免疫および炎症応答に関与する。
【０００９】
ＩｇＧのＦｃｇＲへの結合は、ＦｃｇＲによる調節が関与する疾患徴候を生じる場合がある。例えば、自己免疫疾患血小板減少性紫斑病には、血小板のＦｃｇＲ依存性ＩｇＧ免疫複合体活性化またはＦｃｇＲ＋食細胞によるそれらの破壊によって生じる組織（血小板）損傷が関与する。さらにはＩＩ型およびＩＩＩ型過敏反応など各種炎症疾患に、ＩｇＧ免疫複合体が関与していることが知られている（例：慢性関節リウマチ、全身性紅斑性狼瘡）。ＩＩ型およびＩＩＩ型過敏反応には、補体介在機序または食細胞エフェクター機序のいずれかを活性化させて組織損傷を生じ得るＩｇＧが介在する。
【００１０】
ＦｃｇＲＩＩａまたは実際にはあらゆるＦｃＲの３次元構造についての知見が得られれば、疾患管理のための治療薬および診断試薬の処方が容易になる可能性がある。例えば、ＦｃｇＲＩＩａの結合領域の構造がわかることで、ＦｃｇＲＩＩａへの免疫グロブリンの結合を調節することができる化合物を設計することができる。ＦｃｇＲＩＩａ、ＲｃｅＲＩおよびＦｃｇＲＩＩＩｂなどの多くのＦｃ受容体の構造が、１９９８年２月６日出願の米国特許仮出願６０／０７３９７２号（引用によってその全内容が本明細書に含まれるものとする）および発明の名称「Ｆｃ受容体の三次元構造およびモデルならびにそれの使用」という１９９９年２月５日出願の前述の米国特許出願０９／２４５７６４号に開示されている。
【００１１】
ＦｃｇＲＩＩａは蛋白二量体であり、Ｃ２対称軸を有する。Ｘ線結晶構造に基づいたＦｃｇＲＩＩａの結合領域の模式的構造を図１に示してある。いずれかの理論に拘束されるものではないが、部位ＡおよびＡ′がＦｃ−抗体界面領域であると考えられており、従って部位ＡまたはＡ′に結合するかまたはそれに衝突する化合物は、ＩｇＧへのこの受容体の正常な結合を妨害する可能性がある。さらに、部位Ｂ、Ｃおよび／またはＤに結合する化合物は、その化合物が受容体構造を変化させて抗体結合を不安定化させたり受容体の二量化を促進する場合にはそれぞれ、抗体結合を妨害したり促進したりし得る。
【００１２】
図２には部位Ｂすなわち溝の模式的側面図を示してあり、調節剤設計で対象とする蛋白残基を有する一方の面のみを示してある。溝の壁にはフェニルアラニンのベンゼン環があり、疎水性相互作用、特にｐ−ｐ相互作用の標的となり得る。溝の「床部」にはＰｈｅ１２１、Ｔｈｒ１５２、Ｌｅｕ１５９およびＳｅｒ１６１があり、Ａｓｎ１５４、Ｌｙｓ１１７（骨格カルボニル）およびＴｈｒ１１９もある。これらの蛋白は、調節剤またはリガンドと強力な水素結合および／またはファン・デル・ワールス相互作用を行うことができるポケットを形成するよう配置されていると考えられている。
【００１３】
以上詳細に説明した溝の特徴によって、下記に描いた化合物が設計および合成された。
【００１４】
【化１６】
2002524504.tif 000016
上記の図において「核」は芳香環などの親油性基であり、「連結基」は原子数１〜約２０、好ましくは１〜約１０、さらに好ましくは２〜約８の連結部分を表す。連結基に直接連結された酸基およびポケット基は適宜存在している。溝の蓋部分にあるＬｙｓ１１７およびＨｉｓ１３１などの塩基性基と好適に相互作用するため、酸基（「酸」）は「核」および／または「連結基」から分岐していることができる。「ポケット」とは、溝の床部にあるポケットを満たしている分子部分を表す。別形態として調節剤は、受容体のポケットのみに結合またはそれを占有することができる。それらの原理は、特定の調節剤が上記で示した設計にどのように関係するかを示している図３ならびにこの調節剤とＦｃｇＲＩＩａ蛋白との間の相互作用点を示している図４に具体的に例示してある。
【００１５】
図３には「ポケット」残基を含む例示化合物を示してあり、この図において化合物の連結基部分にはシトシン様環部分が存在する。他の好適なポケット結合剤には核酸ならびに以下に示すようなヒドラジド類およびアミドウレア類またはそれらの誘導体などの関連する構造などがある。
【００１６】
【化１７】
2002524504.tif 000017
好ましくはこれらのポケット残基は、核酸、ヒドラジド類、アミドウレア類またはそれらの誘導体の二量体のような化合物の二量体からなる。
【００１７】
上記の特徴を有する本発明の化合物には、
下記式の芳香族化合物：
【化１８】
2002524504.tif 000018
下記式のヘテロ芳香族化合物：
【化１９】
2002524504.tif 000019
下記式の環状化合物：
【化２０】
2002524504.tif 000020
下記式の二環式化合物：
【化２１】
2002524504.tif 000021
および
下記式のアミノ酸誘導体：
【化２２】
2002524504.tif 000022
またはこれらの塩などがある。上記式中、Ｗ1およびＷ2はそれぞれ独立に、ＣＯ2Ｒ15、Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨＯＨ、ＳＯ3Ｒ15、Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ2、ＯＰＯ（ＯＲ15）2、Ｃ（＝Ｏ）ＣＦ3またはＰＯ（ＯＲ15）2であり；Ａｒ1、Ａｒ2、Ａｒ4およびＡｒ5はそれぞれ独立に、Ｃ6〜Ｃ20アリールまたはＣ1〜Ｃ20ヘテロアリールであり；Ａｒ3はＣ1〜Ｃ20ヘテロアリールであり；Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3、Ｘ4、Ｘ5、Ｘ6、Ｘ7およびＸ8はそれぞれ独立に、メチレン、Ｏ、ＳまたはＮＲ16であり；Ｒ1およびＲ2はそれぞれ独立に、結合、Ｃ1〜Ｃ6アルキレンまたはハロゲン化Ｃ1〜Ｃ6アルキレンであり；Ｒ3およびＲ4はそれぞれ独立に、ハロゲン、−Ｚ1またはＣ1〜Ｃ6アルキルであり；Ｘ9、Ｙ1およびＺ1はそれぞれ独立に、ＯＲ17、ＳＲ17またはＮＲ17Ｒ18であり；Ｒ5およびＲ6はそれぞれ独立に、アミノ酸側鎖残基または式−Ｒ19−Ｗ3の部分であり；Ｒ8、Ｒ9およびＲ11はそれぞれ独立にアミノ酸側鎖残基であり、ただしＲ11はＨおよびＣＨ3ではなく；Ｒ7は、ＯＲ20、ＮＲ21Ｒ22または約１〜約１０個のアミノ酸であり；Ｒ10はＣ1〜Ｃ6アルキレンであり；Ｒ12はＣ1〜Ｃ6アルキルまたはＣ6〜Ｃ20アラルキルであり；Ｗ3はＣ（＝Ｏ）Ｘ10であり；Ｘ10は、ＯＲ23またはＮＲ24Ｒ25であり；Ｒ13、Ｒ15、Ｒ17、Ｒ18、Ｒ20、Ｒ21、Ｒ23およびＲ24はそれぞれ独立に、水素またはＣ1〜Ｃ6アルキルであり；各Ｒ16は独立にＨ、Ｃ6〜Ｃ20アリールまたはアミド保護基であり；Ｒ19はＣ1〜Ｃ6アルキレンであり；Ｒ22およびＲ25はそれぞれ独立に、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルまたはアミド保護基であり；Ｒ14はＨ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルまたはアミン保護基であり；Ｌは原子１〜約２０個を有する連結基であり；ｍおよびｎはそれぞれ独立に０〜２の整数である。
本発明による「アルキル」基は、直鎖または分岐基であることができる脂肪族炭化水素である。アルキル基は、ハロゲン、アルケニル、アルキニル、アリール、水酸基、アミノ、チオ、アルコキシ、カルボキシ、オキソまたはシクロアルキルなどの１以上の置換基で置換されていても良い。場合によりアルキル基に沿って１以上の酸素、硫黄あるいは置換もしくは未置換窒素原子が挿入されていても良い。アルキル基の例としては、メチル、エチル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、クロロメチル、トリクロロメチル、メトキシエチル、アミノメチルおよびペンタフルオロエチルなどがある。
【００１８】
「アリール」基は単環式もしくは二環式の炭素環もしくは複素環である芳香環部分である。アリール基は、ハロゲン、アルケニル、アルキル、アルキニル、水酸基、アミノ、チオ、アルコキシまたはシクロアルキルなどの１以上の置換基で置換されていても良い。
【００１９】
「モノ−アリールまたはヘテロアリール」とは、単環式の炭素環または複素環芳香環を指す。モノ−アリールまたはヘテロアリール環の例としては、ピロール、チオフェン、フラン、イミタ゛ソ゛ール、ピラゾール、１，２，４−トリアゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、チアゾール、イソチアゾール、オキサゾール、イソオキサゾール、ｓ−トリアジンおよびベンゼンなどがある。好ましい基はフェニルである。
【００２０】
「ジ−アリールまたはヘテロアリール」とは、２個の融合した炭素環および／またはヘテロ環の芳香環から構成される二環系を意味する。ジ−アリールまたはヘテロアリール環の例としては、インデン、イソインデン、ベンゾフラン、ジヒドロベンゾフラン、インドール、１Ｈ−インダゾール、インドリン、アズレン、テトラヒドロアズレン、ベンゾピラゾール、ベンゾオキサゾール、ベンゾイミダゾール、ベンゾチアゾール、１，３−ベンゾジオキソール、１，４−ベンゾジオキサン、プリン、ナフタレン、テトラリン、クマリン、クロモン、クロメン、１，２−ジヒドロベンゾチオピラン、テトラヒドロベンゾチオピラン、キノリン、イソキノリン、キナゾリン、ピリド［３，４−ｂ］−ピリジンおよび１，４−ベンイソオキサジン（benisoxazine）などがある。
【００２１】
「アラルキル」とは、アリール基で置換されたアルキル基を指す。好適なアラルキル基にはベンジル、２−フェニルエチルおよびピコリルなどがあるが、これらに限定されるものではない。アリール基は他の好適な官能基によって置換されていても良い。アラルキル基には複素芳香環および炭素芳香環部分を有するものが含まれる。
【００２２】
「連結基」（Ｌ1）とは、指定された数の原子でＡｒ1をＡｒ2に連結する原子
鎖を指す。連結基に関連する数は、Ａｒ1とＡｒ2を直接連結する原子数のみを指すものである。Ｌ1部分は、例えばトリフルオロアセチル、イミド、ウレア、アミジン、アミドキシムまたはそれらの誘導体など、受容体の溝にあるアミノ酸残基との水素結合および／またはファン・デル・ワールス相互作用に関与することができる基を有することができる。
【００２３】
「アミノ酸側鎖残基」とは、天然アミノ酸および市販アミノ酸のａ−アミノ酸のａ−炭素にあるアミノ酸側鎖を指す。代表的なアミノ酸側鎖残基には、水素（グリシン）、メチル（アラニン）、−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＮＨ（Ｃ＝ＮＨ）ＮＨ2（アルギニン）、−ＣＨ2Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ2（アスパラギン）、−ＣＨ2ＣＯ2Ｈ（アスパラギン酸）、−ＣＨ2ＳＨ（システイン）、−ＣＨ2ＣＨ2Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ2（グルタミン）、−ＣＨ2ＣＨ2ＣＯ2Ｈ（グルタミン酸）、−ＣＨ2−（４−イミダゾール）（ヒスチジン）、−ＣＨ（Ｅｔ）ＣＨ3（イソロイシン）、−ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）（ロイシン）、−（ＣＨ2）4ＮＨ2（リジン）、−（ＣＨ2）2ＳＣＨ3（メチオニン）、−ＣＨ2Ｐｈ（フェニルアラニン）、−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−（プロリン）、−ＣＨ2ＯＨ（セリン）、−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ3（トレオニン）、−ＣＨ2−（３−インドール）（トリプトファン）、−ＣＨ2−（４−ヒドロキシフェニル）（チロシン）および−ＣＨ（ＣＨ3）2（バリン）などがある。
【００２４】
Ｗ1およびＷ2の相当する酸基のｐＫａは約９未満、より好ましくは約７未満、最も好ましくは約５未満である。「Ｗ1およびＷ2の相当する酸基」とは、Ｗ1およびＷ2の親酸基を指し、例えばＷ1およびＷ2がエステルである場合、相当する酸はカルボン酸を指し。Ｗ1およびＷ2がリン酸アルキルである場合、相当する酸はリン酸を指す。Ｗ1およびＷ2のｐＫａがＷ1およびＷ2そのものだけでなく、Ｗ1およびＷ2基付近および／またはＷ1およびＷ2が結合しているモノもしくはジアリールもしくはヘテロアリール基に存在する置換基の種類によっても決まることは明らかであろう。そこで例えば、ニトロ、ニトロソ、カルボニル、シアノおよびハロゲン基などの１以上の電子吸引基が存在すると、相当するＷ1およびＷ2酸基のｐＫａは低下する。ｐＫａは−ｌｏｇ（Ｋａ）として定義され、Ｋａは解離定数である。所定の媒体中での酸または塩基の強さは、それの解離定数値によって示される。例えば、強塩基は強プロトン受容体（または電子対供与体）であり、高いｐＫａ値を有する。ｐＫａ値は溶媒および温度などの各種要素によって決まる。例えば、水（Ｈ2Ｏ）（Ｈ3Ｏ+の形の水の共役酸ではない）は水中２５ＥＣで１５．７、０ＥＣで１６．７および６０ＥＣで１４．７のｐＫａを有する。さらにそれのｐＫａは２５ＥＣのジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中では２７．５である。本願におけるｐＫａは、別段の断りがない限り約１５．７の水ｐＫａ値に対するｐＫａ値を指す。
【００２５】
本明細書に記載の式に関して、
好ましくはＷ1およびＷ2は独立に、ＣＯ2Ｒ5、Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨＯＨ、ＯＰＯ（ＯＲ5）2、Ｃ（＝Ｏ）ＣＦ3またはＰＯ（ＯＲ5）2である。
【００２６】
好ましくはＲ1およびＲ2は独立に、結合、Ｃ1〜Ｃ6アルキレンまたはフッ素化Ｃ1〜Ｃ6アルキレンである。より好ましくはＲ1およびＲ2は独立に、結合、メチレンまたはジフルオロメチレンである。
【００２７】
好ましくはＡｒ1、Ａｒ2およびＡｒ5は独立に、モノアリールまたはヘテロアリールである。より好ましくはＡｒ1、Ａｒ2およびＡｒ5はフェニルである。
【００２８】
好ましくはＡｒ3は２−ピリドニルであり、より好ましくはＡｒ3は４−Ａｒ4−（２−ピリドニル）である。すなわち２−ピリドン部分の４位がＡｒ4部分に結合している。
【００２９】
好ましくはＡｒ4はＣ1〜Ｃ20ヘテロアリールである。より好ましくはＡｒ4はピリジルである。最も好ましくはＡｒ4は４−ピリジルである。すなわちピリジン部分の４位がＡｒ3部分に結合している。
【００３０】
好ましくはＹ1はＮＲ17Ｒ18である。より好ましくはＹ1はＮＨ2である。
好ましくは各Ｒ15は独立に水素、メチルまたはエチルである。
【００３１】
好ましくはＬ1はＣ1〜Ｃ6アルキレン；ａ，ｂ−不飽和カルボニル部分を有するＣ1〜Ｃ6アルケニレン（例：−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（＝Ｏ）−）；あるいは式−Ｒ33−Ｘ14−、−Ｒ34−Ｘ15−Ｒ35−または−Ｘ16−Ｒ36−Ａｒ6−Ａｒ7−Ｒ37−Ｘ17−の部分である。Ｒ33、Ｒ34、Ｒ35、Ｒ36およびＲ37はそれぞれ独立にＣ1〜Ｃ6アルキレン（置換アルキレンを含む）、好ましくはメチレンである。Ｘ14、Ｘ15、Ｘ16およびＸ17はそれぞれ独立に、Ｏ、ＳまたはＮＲ38であり、好ましくはＯまたはＮＲ38である。Ａｒ6およびＡｒ7はそれぞれ独立に、Ｃ6〜Ｃ20アリールまたはＣ1〜Ｃ20ヘテロアリールであり、好ましくは２−ピリドンである。さらにＲ38はＨ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルまたはアミン保護基であり、好ましくは−ＣＨ2ＣＯ2Ｈである。より好ましくはＬ1はスルホンアミド（−ＳＯ2ＮＨ−）、エチレン（−ＣＨ2ＣＨ2−）、−ＣＨ2Ｏ−、−ＣＨ＝ＣＨＣ（＝Ｏ）−、−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ（ＯＨ）−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ（ＯＨ）−、−ＣＨ2Ｎ（Ｒ38）ＣＨ2−、下記式の部分：
【化２３】
2002524504.tif 000023
または下記式の部分：
【化２４】
2002524504.tif 000024
である。式中、Ｒ27およびＲ28はそれぞれ独立に、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アラルキルまたは保護基である。好ましくはＲ27およびＲ28は独立にＨまたは４−メトキシベンジルである。
好ましくはｍおよびｎは０である。
別形態として、Ｒ1とＷ1および／またはＲ2とＷ2がともに、それぞれ−（ＣＨ2）aＣＨ（ＮＨＲ29）ＣＯ2Ｒ39および−（ＣＨ2）bＣＨ（ＮＨＲ30）ＣＯ2Ｒ40を形成しており、これらにおいてａおよびｂは独立に０〜２の整数であり、Ｒ29およびＲ30は独立にＨまたはアミン保護基であり、Ｒ39およびＲ40は独立にＨまたはＣ1〜Ｃ6アルキルである。好ましくはａおよびｂは１である、好ましくはＲ29およびＲ30は独立にＨ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルまたはアミン保護基である。
【００３２】
好ましくはＲ5はアスパラギン側鎖残基である。
好ましくはＲ6はグルタミン側鎖残基である。
好ましくはＲ7は約１〜約１０アミノ酸またはそれの誘導体、より好ましくは約１〜約５アミノ酸またはそれの誘導体、さらに好ましくは約２以上のアミノ酸残基またはそれの誘導体、最も好ましくは−ｌｙｓ−ｓｅｒ−ＣＯＮＨＣＨ3部分、すなわち式−ＮＨＣＨ［（ＣＨ2）4ＮＨ2］ＣＯＮＨＣＨ（ＣＨ2ＯＨ）ＣＯＮＨＣＨ3の部分である。
【００３３】
好ましくはＸ1、Ｘ2、Ｘ3、Ｘ4、Ｘ5、Ｘ6、Ｘ7およびＸ8は独立に、ＯまたはＮＲ16である。より好ましくはＸ1、Ｘ2、Ｘ3、Ｘ4、Ｘ5、Ｘ6、Ｘ7およびＸ8はＮＲ16である。
【００３４】
好ましくはＸ9は、ＯＲ17またはＮＲ17Ｒ18であり、最も好ましくはＮＨ2である。
好ましくはＲ8はグリシン側鎖基（すなわち、Ｈ）である。
好ましくはＲ9はチロシン側鎖残基（すなわち、４−ヒドロキシベンジル）である。
【００３５】
好ましくはＲ10はプロピレンである。
好ましくはＲ11はリジン側鎖残基、すなわち式−（ＣＨ2）4ＮＨ2の部分である。
好ましくはＲ12はＣ6〜Ｃ20アラルキルであり、より好ましくは２−フェニルエチルである。
【００３６】
好ましくはＲ13はＨである。
好ましくはＲ14はＨまたはアミン保護基であり、より好ましくはアミン保護基であり、最も好ましくはアセチル基、すなわち式−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ3の部分である。
【００３７】  好ましくは各Ｒ16は独立にＨまたはＣ6〜Ｃ20アリールである。より好ましくは各Ｒ16は独立にＨまたはフェニルである。
本発明の特定の１実施態様では、前述の芳香族化合物は下記式のものである。
【００３８】
【化２５】
2002524504.tif 000025
より好ましくはその芳香族化合物は下記式のものである。
【００３９】
【化２６】
2002524504.tif 000026
本発明の別の特定の実施態様では、前述の芳香族化合物は下記式のものである。
【００４０】
【化２７】
2002524504.tif 000027
本発明の特定の１実施態様では、前述のヘテロ芳香族化合物は下記式のものである。
【００４１】
【化２８】
2002524504.tif 000028
より好ましくはそのヘテロ芳香族化合物は下記式のものである。
【００４２】
【化２９】
2002524504.tif 000029
本発明の別の特定の実施態様では、前述の環状化合物は下記式のものである。
【００４３】
【化３０】
2002524504.tif 000030
本発明のさらに別の特定の実施態様では、前述の二環式化合物は下記式のものである。
【００４４】
【化３１】
2002524504.tif 000031
本発明のさらに別の特定の実施態様では、前述アミノ酸誘導体は下記式のものまたはそれの塩である。
【００４５】
【化３２】
2002524504.tif 000032
好ましくは前述アミノ酸誘導体は下記式のものまたはそれの塩である。
【００４６】
【化３３】
2002524504.tif 000033
本発明のＦｃ受容体調節化合物は、ヌクレオシドまたはそれの誘導体を含むこともできる。好ましくは本発明のヌクレオシドは下記式の構造を有する。
【００４７】
【化３４】
2002524504.tif 000034
式中、ＱはＯまたはメチレンである。好ましくはＱはＯである。Ｘ11はＯＲ31またはＯＰＯ（ＯＲ31）2である。好ましくはＸ11はＯＨまたはＯＰＯ3Ｈ2である、Ｘ12およびＸ13はそれぞれ独立にＨまたはＯＲ15である。好ましくはＸ12およびＸ13はそれぞれ独立にＨまたはＯＨである。Ｒ31およびＲ32はそれぞれ独立にＨまたはＣ1〜Ｃ6アルキルである。
【００４８】
本発明のＦｃ受容体調節化合物はさらに葉酸またはそれの誘導体を含むことができる。
本発明のＦｃ受容体調節化合物はまた、Ｆｃ受容体と免疫グロブリンとの間の相互作用を調節することができるペプチドを含むこともできる。いずれかの理論に拘束されるものではないが、特に有用なペプチドはＦｃ受容体（例：ＦｃｇＲＩＩ）の領域Ｃ（図１参照）を標的とすると考えられている。そこで、これらのペプチドは２個のＦｃｇＩＩ蛋白間の二量化界面を妨害することで、そのＦｃＲ蛋白の一方または両方を介した細胞信号伝達に影響を与えると考えられている。具体的には、ペプチド残基１１７〜１３１および１５０〜１６４がＦｃｇＩＩａ二量体の界面領域を構成すると考えられており、それらの配列またはそれの類似配列からの蛋白は結合阻害剤である。例えば、天然ヘキサペプチドＰｈｅ１２１〜Ｓｅｒ１２６またはそれより短い部分は、強い水素結合相互作用のある領域に広がっていることから、２個のＦｃｇＲＩＩａ分子間の二量化の好適な調節剤である。そのような蛋白部分は、発明の名称「Ｆｃ受容体の三次元構造およびモデルならびにそれの使用」という１９９９年２月５日出願の前述の米国特許出願０９／２４５７６４号における配列番号３の一部として開示されている。そうして本発明者らは、配列ＧＫＳ（ｇｌｙ−ｌｙｓ−ｓｅｒ）のトリペプチドもしくはそれの誘導体ならびに配列ＦＱＮＧＫＳ（ｐｈｅ−ｇｌｎ−ａｓｎ−ｇｌｙ−ｌｙｓ−ｓｅｒ）のヘキサペプチドもしくはそれの誘導体がＦｃｇＲＩＩのＩｇＧへの結合を調節することを発見した。実施例２４ならびに図１０および１１を参照する。
【００４９】
本発明者らはさらに、立体配座的に制限された大環状化合物がＦｃＲ蛋白活性を調節することも見出した。本明細書で使用する場合に「大環状化合物」とは、原子約８〜約１８個からなる環部分を含む化合物を指す。好ましくは本発明の大環状化合物の環構造は原子数約１０〜約１６、より好ましくは約１２〜約１４、最も好ましくは約１３〜約１４を有する。特に有用な本発明の大環状化合物は、環状ペプチドまたはそれの誘導体である。下記式の構造を有するそのような環状ペプチドについては上述している。
【００５０】
【化３５】
2002524504.tif 000035
突然変異発生試験によって、ＦｃＲのＦＧループの頂部がＩｇ結合において重要であることが明らかになっている。ＦＧペプチド鎖は、ＦＧループにおけるアミノ酸側鎖を所定の突出させている延長ｂ−シートを有する。そのようなＦｃ蛋白の配向については、発明の名称「Ｆｃ受容体の三次元構造およびモデルならびにそれの使用」という１９９９年２月５日出願の前述の米国特許出願０９／２４５７６４号に記載されている。ｂ−ターン類似物として作用して受容体におけるものと同じようにＦＧループの頂部でその側鎖を与えることができる分子も、ＦｃＲ受容体活性の調節において有効であることが認められている。そこで本発明の別の実施態様では、本発明のＦｃ受容体調節化合物に下記式の化合物も含まれる。
【００５１】
【化３６】
2002524504.tif 000036
式中、大環状部分は上記のものと同じ原子数を有する。そのようなｂ−ターン類似物のある特定の実施態様は、下記式の構造を有する上記の化合物である。
【００５２】
【化３７】
2002524504.tif 000037
本発明の化合物は、容易に入手可能な原料から合成することができる。本発明の化合物上の各種置換基は、原料化合物に存在していてもよく、中間体のいずれかに付加しても良く、あるいは公知の置換または変換反応法によって最終生成物形成後に付加しても良い。置換基自体が反応性である場合には、その置換基自体を当業界で公知の方法に従って保護することができる。各種保護基が当業界では知られており、使用が可能である。多くの可能な基の例としては、グリーンの著作に記載されている（"Protective Groups in Organic Synthesis", T. W. Green, John Wiley and Sons, 1981；引用によって本明細書に全内容が含まれるものとする）。例えば、ニトロ化によってニトロ基を付加することができ、そのニトロ基は還元によってアミノ基などの他の基に変換することができ、アミノ基のジアゾ化およびジアゾ基のハロゲンによる置き換えによってハロゲンに変換することができる。アシル基はフリーデル−クラフツアシル化によって付加することができる。アシル基は、ウォルフ−キシュナー還元およびクレメンソン還元などの各種方法によって相当するアルキル基に変換することができる。アミノ基をアルキル化することでモノおよびジアルキルアミノ基を形成することができ、メルカプト基および水酸基をアルキル化することで相当するエーテルを形成することができる。１級アルコールを当業界で公知の酸化剤によって酸化することでカルボン酸またはアルデヒドを形成することができ、２級アルコールを酸化してケトンを形成することができる、そうして置換反応または変換反応を用いて、原料、中間体または単離生成物を含めた最終生成物の分子全体に各種置換基を提供することができる。
【００５３】
本発明の化合物は必ず存在するある種の置換基を有することができることから、各置換基の導入は当然のことながら、関与する具体的な置換基ならびにその形成に必要な化学によって決まる。従って、ある置換基が第２の置換基形成時の化学反応によってどのように影響を受けると考えられるかを検討するには、当業者が熟知している技術が関与してくると考えられる。それもまた、関与する環によって決まるものであると考えられる。
【００５４】
理解しておくべき点として、本発明の範囲は存在し得る各種異性体だけでなく、形成され得る異性体の各種混合物も含むものである。
本発明の化合物が１以上のキラル中心を有する場合、その化合物をエナンチオ選択的に合成することができるか、あるいはエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーの混合物を製造および分離することができる。本発明の化合物、それらの原料および／または中間体の分割は、文献記載の（例えば、４巻の概論であるOptical Resolution Procedure for Chemical Compounds: Optical Resolution Information Center, Manhattan College, Riverdale, N.Y.およびEnantiomers, Racemates and Resolutions, Jean Jacques, Andre Co llet and Samuel H. Wilen; John Wiley & Sons, Inc, New York, 1981；これらは引用によってその全内容が本明細書に含まれるものとする）公知の手順によって行うことができる。基本的には化合物の分割は、エナンチオマー的に純粋な部分の化学的または酵素的な結合によって分別結晶、蒸留またはクロマトグラフィーによって分離可能な形のものを生じさせることによるジアステレオマーの物性差に基づいたものである。
【００５５】
本発明の化合物がオレフィン部分を有し、そのようなオレフィン部分がシス体またはトランス体であることができる場合、支配的な生成物としてシスオレフィンまたはトランスオレフィンを選択的に生じるようその化合物を合成することができる。別法として、オレフィン部分を有する化合物をシスオレフィンとトランスオレフィンの混合物として製造し、例えばチャンらの報告（W. K. Chan, et al., J. Am. Chem. Soc., 1974, 96, 3642 ；引用によって全体が本明細書に含まれるものとする）に記載のようなクロマトグラフィーによって分離することができる。
【００５６】
本発明の化合物は、塩基性アミノ官能基が存在する場合には酸と塩を形成し、カルボン酸またはホスホン酸などの酸官能基が存在する場合には塩基と塩を形成する。そのような塩はいずれも新規生成物の単離および／または精製において有用である。特に有用なものは、酸および塩基の両方との医薬的に許容される塩である。好適な酸には例えば、医薬的に許容される塩酸、シュウ酸、硫酸、硝酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、酢酸、マレイン酸、酒石酸などがある。医薬用の塩基性塩にはＮａ塩、Ｋ塩、Ｃａ塩およびＭｇ塩などがある。
【００５７】
合理的な薬剤設計に加えてないしはそれに代えて、各種化合物の試験を行ってそれのＦｃ受容体調節活性を求めるスクリーニング法により、他のＦｃ受容体調節剤を確認することができる。このようにして、各種Ｆｃ受容体調節剤が確認されている。そうして本発明の化合物には、置換および未置換の安息香酸類、特に４−メチル安息香酸および３−メチル安息香酸；ヌクレオシド類およびそれの類似体；ならびに葉酸およびそれの誘導体などがある。
【００５８】
本発明の化合物はＦｃ受容体調節剤である。例えばその化合物は免疫グロブリンのＦｃ受容体結合を調節する。好ましくは本発明の化合物は、ＦｃａＲ、ＦｃｇＲ、ＦｃｇＲおよびそれらの混合物からなる群から、より好ましくはＦｃｇＲＩ、ＦｃｇＲＩＩ、ＦｃｇＲＩＩＩおよびそれらの混合物からなる群から、さらに好ましくはＦｃｇＲＩＩａ、ＦｃｇＲＩＩｂ、ＦｃｇＲＩＩｃおよびそれらの混合物からなる群から、最も好ましくはＦｃｇＲＩＩａ受容体から選択される。本発明の化合物は、抗体凝集物が生じる疾患ならびに抗体の内在性もしくは外因性抗原との接触によって免疫複合体が生じる疾患の治療または診断などの各種用途で用いることができる。本発明の化合物によって利用可能な治療および診断の例としては、免疫複合体疾患；慢性関節リウマチ、全身性紅斑性狼瘡、免疫性血小板減少症、好中球減少症、溶血性貧血などの（これらに限定されるものではないが）自己免疫疾患；結節性多発動脈炎、全身性血管炎などの（これらに限定されるものではないが）血管炎；異種移植片拒絶反応；ならびにデング熱ウイルス−デング出血性熱およびはしかウイルス感染などのフラビウイルス感染（これに限定されるものではないが）のようなウィルスのＦｃＲ取り込みが感染を促進する感染性疾患などがある。さらに本発明の化合物を用いて、ＩｇＧ介在組織損傷を低減し、炎症を低減することもできる。
【００５９】
本発明の化合物はさらに、ＦｃＲ機能を促進することで白血球機能を促進することもできる。その機能には、抗体依存細胞介在細胞毒性、食菌作用、炎症サイトカイン類の放出などがある。ＦｃＲ機能亢進の治療および診断の例としては、正常な抗体が産生されて病原体を除去する感染ならびに癌および感染などの治療で天然もしくは組換え抗体を用いることができるＦｃＲ機能を必要とする疾患などがある。例えば、抗体を本発明の化合物と併用投与することで、抗体治療の効果を高めることができる。
【００６０】
本発明の化合物は患者に投与して所望の生理的効果を得ることができる。好ましくは患者は動物であり、より好ましくは哺乳動物であり、最も好ましくはヒトである。当該化合物は、選択される投与経路に適合させた各種形態で、すなわち経口または非経口で投与することができる。この点に関しての非経口投与には、静脈投与；筋肉投与；皮下投与；眼内投与；滑液包内投与；経皮、点眼、舌下および口腔などの経上皮投与；点眼、皮膚、眼球、直腸ならびに吸入剤およびエアロゾルによる経鼻吸入などの局所投与；腹腔内投与；ならびに経直腸全身投与などがある。
【００６１】
活性化合物は、例えば不活性希釈剤もしくは同化可能な食用担体とともに経口投与することができるか、あるいはそれを硬もしくは軟殻ゼラチンカプセルに封入することができるか、あるいは打錠することができるか、あるいはそれを食事の食物に直接混合することができる。経口治療投与の場合、活性化合物を賦形剤と混合して、消化可能な錠剤、口腔錠剤、トローチ、カプセル、エリキシル剤、懸濁液、シロップ、ウェハーなどの形で使用することができる。そのような組成物および製剤は０．１％以上の活性化合物を含むことができる。組成物および製剤のパーセントは当然のことながら変動し得るものであり、簡便には単位重量の約１〜約１０％とすることができる。そのような治療上有用な組成物中の活性化合物の量は、好適な用量が得られるようなものとする。本発明による好ましい組成物または製剤は、経口単位製剤が活性化合物を約１〜約１０００ｍｇ含むように製造する。
【００６２】
錠剤、トローチ、丸薬、カプセルなどは、トラガカントガム、アカシア、コーンスターチまたはゼラチンなどの結合剤；リン酸二カルシウムなどの賦形剤；コーンスターチ、ジャガイモデンプン、海藻酸などの崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤；ショ糖、乳糖またはサッカリンなどの甘味剤を含むこともでき、あるいはペパーミント、冬緑油またはチェリー香味などの香味剤を加えることができる。単位製剤がカプセルである場合、それには上記の種類の材料以外に液体担体を含有させることができる。各種の他薬剤をコーティング剤として、あるいは他の形で単位製剤の物理的形状を変える目的で存在させることができる。例えば錠剤、丸薬またはカプセルをシェラック、糖またはその両方でコーティングすることができる。シロップまたはエリキシル剤は活性化合物、甘味剤としてのショ糖、保存剤としてのメチルおよびプロピルパラベン、染料ならびにチェリーフレーバーまたはオレンジフレーバーなどの香味剤を含むことができる。当然のことながら、単位製剤の製造で使用される材料は医薬的に純粋であって、使用される量では実質的に無毒でなければならない。さらに活性化合物を、徐放製剤に組み入れることができる。
【００６３】
活性化合物は非経口的に投与することもできる。遊離塩基または薬理的に許容される塩としての活性化合物の溶液を、ヒドロキシプロピルセルロースなどの界面活性剤と適切に混合した水で調製することができる。分散液をグリセリン、液体ポリエチレングリコールおよびそれらの混合液ならびにオイル中で調製することもできる。通常の保存および使用条件下では、これらの製剤には保存剤を含有させて、微生物成長を防止する。
【００６４】
注射に好適な医薬製剤には、無菌の水系液剤もしくは分散液ならびに無菌注射液剤または分散液の即時調剤用の無菌粉剤などがある。いずれの場合も製剤は無菌でなければならないとともに、容易に注射可能となる程度に流動性でなければならない。それは製造および保存条件下で安定なものとすることができ、細菌および真菌などの微生物の汚染作用に対して保存されなければならない。担体は、例えば水、エタノール、多価アルコール（例：グリセリン、プロピレングリコールおよび液体ポリエチレングリコールなど）、それらの好適な混合物ならびに植物油を含む分散媒体の溶媒であることができる。適切な流動性は例えば、レシチンなどのコーティング剤を用いることで、分散液の場合には必要な粒径を維持することで、さらには界面活性剤を用いることで維持することができる。微生物作用の防止は、例えばパラベン類、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、チメロサールなどの各種抗菌剤および抗真菌剤によって行うことができる。多くの場合、糖類または塩化ナトリウムなどの等張剤を含有させることが好ましい。モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンなどの吸収遅延剤によって注射組成物の吸収を遅延させることができる。
【００６５】
無菌注射液剤は、適切な溶媒中の必要な量での活性化合物を上記で列記した各種他成分と混合し、次に濾過滅菌することで調製される。概して分散液は、塩基性の分散媒体および上記で挙げたものからの必要な他の成分を含む無菌媒体に各種滅菌有効成分を入れることで調製される。無菌注射液剤を調製するための無菌粉剤の場合、好ましい製造方法は真空乾燥および凍結乾燥法であり、それによって有効成分と前もって無菌的に濾過した溶液からの別の所望の成分の粉末を得る。
【００６６】
本発明の治療用化合物は、単独であるいは上記のような医薬的に許容される担体と組み合わせて哺乳動物に投与することができ、その割合は化合物の溶解度および化学的性質、選択される投与経路ならびに標準的な製薬上の実務によって決まる。
【００６７】
予防もしくは治療に最も好適な本発明の治療剤の用量は医師が決定するものであり、それは投与形態および選択される特定の化合物によって変動し、さらには治療を受ける特定の患者によって変動する。医師は通常は最初は低い用量で治療を開始し、その状況下での至適効果が得られるまで少量ずつ増量することを望むものである。治療用量は通常は、約０．１〜約１０００ｍｇ／日、好ましくは約１０〜約１００ｍｇ／日であるか、あるいは約０．１〜約５０ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは約０．１〜約２０ｍｇ／ｋｇ／日であり、いくつかの異なる用量単位で投与することができる。経口投与に、約２倍〜約４倍のレベルの相対的に高い用量が必要な場合がある。
【００６８】
本発明のさらに別の目的、長所および新規な特徴は、以下の実施例の試験に基づいて当業者にはさらに明らかになろう。ただし、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
【００６９】
実験
本明細書では、以下の略称および用語を用いる。
ｒｔ：室温
Ｅｔ2Ｏ：ジエチルエーテル（すなわちエーテルまたはエチルエーテル）
ＭＳ（ＡＰＣＩ）：大気圧化学イオン化
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル
ＴＭＳＣｌ：トリメチルシリルクロライド
ＣＨ3ＣＮ：アセトニトリル
ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド。
【００７０】
実験１
本実験は１，２−ビス（ｍ−カルボキシフェニル）エタンの合成を示す。
【００７１】
【化３８】
2002524504.tif 000038
段階１：以下のようにして、リンゼイらの方法によって（Lindsay et al., JACS, 1961, 83, 943 ）１，２−ビス（ｍ−ブロモフェニル）エタンを製造した。３−ブロモベンジルブロマイド（１．０ｇ、４．０ｍｍｏｌ）のＥｔ2Ｏ（１０ｍＬ）溶液に室温でマグネシウム（０．０５ｇ、２．０ｍｍｏｌ）を加えた。室温で２０分後、全てのマグネシウムが溶け、無水塩化第二鉄（５ｍｇ）を加えた。反応液を１時間加熱還流し、冷却し、１Ｍ  Ｈ2ＳＯ4水溶液で約ｐＨ１の酸性とし、Ｅｔ2Ｏで抽出した（５０ｍＬで３回）。合わせた有機抽出液を水（５０ｍＬ）で洗浄し、脱水し（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、減圧下に濃縮して黄色固体を得た。石油エーテルからの再結晶によって１，２−ビス（ｍ−ブロモフェニル）エタンを無色固体として得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ３３８（５０％）、３４０（１００）、３４２（５０）。1Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）：ｄ２．８５、ｓ、２Ｈ；７．０２〜７．２５、ｍ、２Ｈ；７．３０〜７．３９、ｍ、２Ｈ。
【００７２】
段階２：１，２−ビス（ｍ−ブロモフェニル）エタン（３０５ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に−７８℃でｔｅｒｔ−ブチルリチウム（１．７Ｍペンタン溶液２．１ｍＬ、３．６０ｍｍｏｌ）を滴下した。この温度で２０分後、ＣＯ2を反応混合物に吹き込んだ。その間に冷却浴を外し、反応混合物は室温となった。反応混合物を水（５０ｍＬ）とＥｔ2Ｏ（５０ｍＬ）との間で分配し、水相を分液し、内部温度を２５℃以下に維持しながら濃ＨＣｌ水溶液で約ｐＨ１の酸性とした。水相をＥｔＯＡｃで抽出し（５０ｍＬで３回）、合わせた有機抽出液を脱水し（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、減圧下に濃縮して１，２−ビス（ｍ−カルボキシフェニル）エタンを白色固体として得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ２６９（Ｍ＋１、１００％）。13Ｃ  ＮＭＲ（５０ＭＨｚ、ｄ6−ＤＭＳＯ）：ｄ３８．４、１２８．８、１３０．３、１３１．１、１３２．５、１３４．８、１４３．５、１６９．２。融点はリンゼイら（JACS, 1961, 83, 943 ）が報告している値と一致していた。
【００７３】
実験２
本実験は、３−［（ｍ−カルボキシフェニル）メトキシ］安息香酸の合成を示すものである。
【００７４】
【化３９】
2002524504.tif 000039
段階１：３−ブロモフェノール（１３．８ｇ、８０ｍｍｏｌ）、３−ブロモベンジルブロマイド（１０ｇ、４０ｍｍｏｌ）、Ｋ2ＣＯ3（１６．６ｇ、１２０ｍｍｏｌ）およびＮａＩ（３００ｍｇ、２ｍｍｏｌ）のアセトン（１００ｍＬ）中混合物を１２時間加熱還流した。反応混合物を冷却して室温とし、減圧下に濃縮し、Ｅｔ2Ｏ（３００ｍＬ）と水（３００ｍＬ）との間で分配した。有機相をＮａＯＨ水溶液（１Ｍ、３００ｍＬ）で洗浄し、脱水し（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、減圧下に濃縮して３−［（ｍ−ブロモフェニル）メトキシ］ブロモベンゼンを透明油状物として得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ３３９（Ｍ+−３、５０％）、３４１（Ｍ+−１、１００％）、３４３（Ｍ+＋３、５０％）。13Ｃ  ＮＭＲ（５０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）：ｄ６８．９、１１３．４、１１７．９、１２２．５、１２２．６、１２４．１２５．６、１２９．９、１３０．０、１３０．４、１３０．９、１３８．４、１５８．９。
【００７５】
段階２：３−［（ｍ−ブロモフェニル）メトキシ］ブロモベンゼンおよび実施例１段階２に記載の方法を用いて、段階２で３−［（ｍ−カルボキシフェニル）メトキシ］安息香酸を白色固体として得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ２７１（Ｍ+−１、１００％）。13Ｃ  ＮＭＲ（５０ＭＨｚ、ｄ6−ＤＭＳＯ）：ｄ６８．３、１１４．５、１１９．３、１２１．５、１２７．８、１２８．３、１２９．３、１３０．５、１３１．５、１３１．８、１３７．０、１５７．７、１６６．６、１６６．７。
【００７６】
実験３
本実験は１，２−ビス（３−ホスホノ−フェニル）エタンの合成を示すものである。
【００７７】
【化４０】
2002524504.tif 000040
段階１：１，２−ビス（３−ブロモフェニル）エタン（実施例１段階１の方法を用いて得たもの）（４４０ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ）、亜リン酸ジエチル（０．４６ｍＬ、３．５９ｍＬ）およびトリエチルアミン（０．５ｍＬ、３．５９ｍｍｏｌ）をトルエンに溶かし、脱気した。Ｐｄ（ＰＰｈ3）4（１８５ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）を一気に加え、反応液を９０℃で１６時間加熱した。反応液を冷却して室温とし、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ2、５０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル、次に１００％ＥｔＯＡｃ、次に１００％ＥｔＯＨ）によって精製して、１，２−ビス［３−（ジエトキシホスホノ）フェニル］−エタンを白色固体として得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ４５５（Ｍ+＋１、１００％）。31Ｐ  ＮＭＲ（８１ＭＨｚ、プロトンデカップリング、ＣＤＣｌ3）：ｄ＋１９．５。
【００７８】
段階２：上記エステル（５８６ｍｇ、１．３０ｍｍｏｌ）のＣＨ2Ｃｌ2（１０ｍＬ）溶液に室温でトリメチルシリルブロマイド（１．０３ｍＬ、７．８ｍｍｏｌ）を滴下した。反応液を室温で１６時間撹拌し、減圧下に濃縮した。ＭｅＯＨ（５ｍＬ）を加え、溶液を減圧下に濃縮した。この手順をさらに２回繰り返して、１，２−ビス（３−ホスホノフェニル）エタンを白色固体として得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ３４１（Ｍ+−１、１００％）。31Ｐ  ＮＭＲ（８１ＭＨｚ、プロトンデカップリング、ＣＤＣｌ3）：ｄ＋１４．６。
【００７９】
実験４
本実験は３，３′−ジカルボキシ−カルコンの合成を示すものである。
【００８０】
【化４１】
2002524504.tif 000041
段階１：３−シアノベンズアルデヒド（３．０ｇ、２３．０ｍｍｏｌ）および３−シアノアセトフェノン（３．３４ｇ、２３．０ｍｍｏｌ）の氷酢酸（５ｍＬ）および濃Ｈ2ＳＯ4（３．６６ｍＬ、６９ｍｍｏｌ）溶液を室温で７２時間撹拌した。水（２００ｍＬ）を加え、反応液を濾過した。沈殿を水で洗浄し（２００ｍＬで２回）、減圧乾燥して、３，３′−ジシアノカルコンをオフホワイト固体として得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ２５８（Ｍ+−１、１００％）。13Ｃ  ＮＭＲ（５０ＭＨｚ、ｄ6−ＤＭＳＯ）：ｄ１１１．７、１１７．８、１１８．０、１２３．０、１２９．７、１３１．６、１３２．１、１３２．４、１３３．３、１３３．５、１３５．３、１３６．１、１３７．４、１４２．１、１８７．３。
【００８１】
段階２：段階１からの３，３′−ジシアノカルコン（２．０ｇ、７．７５ｍｍｏｌ）の氷酢酸（３０ｍＬ）溶液を濃Ｈ2ＳＯ4（１０ｍＬ）および水（１０ｍＬ）の混合液で処理した。反応混合物を１３０℃で１２時間加熱し、冷却して室温とし、濾過した。沈殿を水で洗浄し（１００ｍＬで３回）、減圧乾燥して、３，３′−ジカルボキシカルコンを黄色固体として得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ２９５（Ｍ+−１、１００％）。13Ｃ  ＮＭＲ（５０ＭＨｚ、ｄ6−ＤＭＳＯ）：ｄ１２２．５、１２８．６、１２８．７、１２９．２、１３０．８、１３１．０、１３１．２、１３２．４、１３２．５、１３３．１、１３４．５、１３７．２、１４３．１、１６６．３、１６６．５、１８８．２。
【００８２】
実験５
本実験は１，３−ビス（ｍ−カルボキシ−フェニル）−１−プロパノールの合成を示す。
【００８３】
【化４２】
2002524504.tif 000042
３，３′−ジカルボキシカルコン（実施例４、段階２）（４３０ｍｇ、１．４５ｍｍｏｌ）のＮａＯＨ水溶液（１Ｍ、２．９０ｍｍｏｌ）含有エタノール（１０ｍＬ）溶液をウィルキンソン触媒存在下に約０．３１ＭＰａ（４５ｐｓｉ）で水素化した。反応混合物を濾過し、減圧下に濃縮した。残留物をメタノール（１０ｍＬ）に溶かし、室温にてＮａＢＨ4（２２０ｍｇ、５．８ｍｍｏｌ）で処理した。反応混合物を室温で１６時間撹拌し、飽和ＮＨ4Ｃｌ水溶液を注意深く加えることで反応停止し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）とＨＣｌ水溶液（１Ｍ、５０ｍＬ）との間で分配した。有機抽出液を脱水し（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、減圧下に濃縮して１，３−ビス（ｍ−カルボキシフェニル）−１−プロパノールを粘稠油状物として得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ２９９（Ｍ+−１、１００％）。1Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）：ｄ１．９５〜２．１０、ｍ、２Ｈ；２．６８〜２．８３、ｍ、２Ｈ；４．６２〜４．７８、ｍ、１Ｈ；７．０３〜７．６０、ｍ、４Ｈ；７．７５〜８．０３、ｍ、４Ｈ。
【００８４】
実験６
本実験はトランス−３，３′−ビス−カルボキシスチルベンの合成を示す。
【００８５】
【化４３】
2002524504.tif 000043
段階１：３−ブロモ安息香酸メチル（２１．５ｇ、１００ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）2（２２４ｍｇ、１ｍｍｏｌ）、トリ−ｏ−トリルホスフィン（６０８ｍｇ、２ｍｍｏｌ）およびトリブチルアミン（２６．２ｍＬ、１１０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１００ｍＬ）溶液をアルゴンで脱気し、溶液にエチレン気流を吹き込みながら１３０℃で６時間加熱した。反応混合物を室温まで冷却し、濾過した。沈殿を冷Ｅｔ2Ｏで洗浄し（５０ｍＬで２回）、減圧乾燥して、トランス−３，３′−ビス−カルボキシスチルベンジメチルエーテルをオフホワイト固体として得た。13Ｃ  ＮＭＲ（５０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）：ｄ５２．２、１２７．５、１２８．８、１３０．６、１３０．９、１３７．２、１６６．９。
【００８６】
段階２：上記ジエステル（５００ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を室温でＬｉＯＨ水溶液（１Ｍ、１０ｍＬ）で処理した。室温で１６時間撹拌した後、反応混合物をＥｔ2Ｏ（５０ｍＬ）と水（５０ｍＬ）との間で分配した。水相を分液し、有機相を水（２５ｍＬ）で抽出した。合わせた水系抽出液を、内部温度を１０℃以下に維持しながら濃ＨＣｌ水溶液で酸性とした。水相をＣＨ2Ｃｌ2で抽出し（５０ｍＬで３回）、合わせた有機抽出液を脱水し（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、減圧下に濃縮してトランス−３，３′−ビスカルボキシスチルベンを白色固体として得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ２６７（Ｍ+−１、１００％）。1Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ｄ6−ＤＭＳＯ）：ｄ７．２８〜７．５６、ｍ、２Ｈ；７．７８〜７．９０、ｍ、２Ｈ；８．２０、ｓ、１Ｈ。
【００８７】
実験７
本実験は、（Ｓ，Ｓ）−１，２−ビス−（３−カルボキシフェニル）エタン−１，２−ジオールの合成を示すものである。  
【００８８】
【化４４】
2002524504.tif 000044
段階１：トランス−３，３′−ビスカルボキシスチルベンジメチルエステル（実施例６段階１）（５．０ｇ、１６．９ｍｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン−Ｎ−オキサイド（２．２ｇ、１８．６ｍｍｏｌ）のアセトン（５０ｍＬ）および水（２０ｍＬ）溶液を室温でＯｓＯ4（４．３ｍＬ、３９．４ｍＭ、０．１７ｍｍｏｌ）で室温にて処理した。反応混合物を室温で１６時間撹拌し、メタ重亜硫酸ナトリウム（３．０ｇ）を加えることで反応停止し、２Ｍ硫酸水溶液によってｐＨを約ｐＨ７に調節した。アセトンを減圧下に除去し、残った溶液を約ｐＨ２の酸性とし、ＮａＣｌで飽和させ、ＥｔＯＡｃで抽出した（１００ｍＬで３回）。合わせた有機抽出液を脱水し（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、減圧下に濃縮して（Ｒ，Ｒ）−１，２−ビス−［３−（カルボメトキシ）−フェニル］エタン−１，２−ジオールを白色固体として得た。1Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）：ｄ３．２、ｂｓ、１Ｈ；３．８２、ｓ、３Ｈ；４．７７、ｓ、１Ｈ；７．２０〜７．３１、ｍ、２Ｈ；７．８０〜７．８９、ｍ、２Ｈ。
【００８９】
段階２：上記のジエステル（５００ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）を実施例６段階２に記載の手順を用いて加水分解して、（Ｓ，Ｓ）−１，２−ビス−（３−カルボキシフェニル）エタン−１，２−ジオールを白色固体として得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ３０１（Ｍ+−１、１００％）。1Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ｄ6−ＤＭＳＯ）：ｄ３．４０、ｂｓ、１Ｈ；４．７６、ｓ、１Ｈ；５．５６、ｂｓ、１Ｈ；７．２０〜７．２９、ｍ、２Ｈ；７．８０〜７．９１、ｍ、２Ｈ。
【００９０】
実験８
本実験は３，３′−ビス−（カルボキシ−メチル）スチルベンの合成を示す。
【００９１】
【化４５】
2002524504.tif 000045
段階１：３−ブロモフェニル酢酸メチル（８．０ｇ、３４．９ｍｍｏｌ）を、実施例６段階１に記載の手順を用いてエチレンと反応させた。粗反応生成物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ2、５％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル）によって精製して、３，３′−ビス−［（カルボ−メトキシ）メチル］スチルベンおよび３−（エテニル）フェニル酢酸メチルを白色固体混合物として得た。
【００９２】
３，３′−ビス−［（カルボ−メトキシ）メチル］スチルベン：1Ｈ  ＮＭＲ
（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）：ｄ３．６５、ｓ、２Ｈ；３．７０、ｓ、３Ｈ；７．１、ｓ、１Ｈ；７．１５〜７．５０、ｍ、４Ｈ。13Ｃ  ＮＭＲ（５０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）：４１．２、５２．１、１２５．３、１２７．４、１２８．６、１２８．７、１２８．９、１３４．４、１３７．６、１７１．９。
【００９３】
３−（エテニル）フェニル酢酸メチル：1Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）：ｄ３．６３、ｓ、２Ｈ；３．６８、ｓ、３Ｈ；５．８、ｄ、Ｊ＝１０．９Ｈｚ、１Ｈ；５．７８、ｄ、Ｊ＝１８．８Ｈｚ、１Ｈ；６．７２、ｄ、Ｊ＝１０．９，１８．８Ｈｚ、１Ｈ；７．１８〜７．４１、ｍ、４Ｈ。
【００９４】
段階２：３，３′−ビス−［（カルボメトキシ）メチル］スチルベンを実施例６段階２に記載の手順を用いて加水分解して、３，３′−ビス−（カルボキシ−メチル）スチルベンを白色固体として得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ２９５（Ｍ+−１、１００％）。1Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ｄ6−ＤＭＳＯ）：ｄ３．６０、ｓ、２Ｈ；７．００〜７．６２、ｍ、５Ｈ。
【００９５】
実験９
本実験は、１，２−ビス−［ｍ−（カルボキシメチル）フェニル］エタンの合成を示す。
【００９６】
【化４６】
2002524504.tif 000046
段階１：３，３′−ビス−［（カルボメトキシ）メチル］スチルベン（実施例８段階１）（５００ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）およびパラジウム炭素（１０％、２００ｍｇ）のメタノール（２０ｍＬ）中混合物を水素雰囲気下に室温で１６時間水素化した。反応液を濾過し、減圧下に濃縮して１，２−ビス−［ｍ−（カルボメトキシメチル）フェニル］エタンを無色油状物として得た。1Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）：ｄ２．９１、ｓ、２Ｈ；３．６３、ｓ、２Ｈ；３．７２、ｓ、３Ｈ；７．０８〜７．３１、ｍ、４Ｈ。
【００９７】
段階２：上記のエステルを実施例６段階２に記載の手順を用いて加水分解して、１，２−ビス−［ｍ−（カルボキシメチル）フェニル］エタンを白色固体として得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ２９７（Ｍ+−１、１００％）。1Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ｄ6−ＤＭＳＯ）：ｄ２．８２、ｓ、２Ｈ；３．５６、ｓ、２Ｈ；７．０６〜７．２７、ｍ、４Ｈ；１２．２５、ｂｓ、１Ｈ。
【００９８】
実験１０
本実験は１−［ｍ−（カルボキシメチル）フェニル］−２−［ｍ−（カルボキシフェニル）］エタンの合成を示す。
【００９９】
【化４７】
2002524504.tif 000047
段階１：３−（エテニル）フェニル酢酸メチル（実施例８段階１）（１．１ｇ、６．２５ｍｍｏｌ）、３−ブロモ安息香酸メチル（９６０ｍｇ、４．４６ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム（２０ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン塩酸塩（２４９ｍｇ、１．７８ｍｍｏｌ）および酢酸ナトリウム（７３１ｍｇ、８．９２ｍｍｏｌ）をＮ−メチルピロリジノンに溶かし、アルゴンで脱気し、１３０℃で５時間加熱した。反応液を冷却して室温とし、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、有機相を水（１００ｍＬ）、ＨＣｌ水溶液（１Ｍ、１００ｍＬ）および飽和ＮａＨＣＯ3（１００ｍＬ）で洗浄した。有機抽出液を脱水し（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、減圧下に濃縮してトランス−１−［ｍ−（３−カルボメトキシメチル）−フェニル］−２−［３−（カルボメトキシ−フェニル）］エタンを無色油状物として得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ３０９（Ｍ+−１、１００％）。1Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）：ｄ３．６４、ｓ、２Ｈ；３．６８、ｓ、３Ｈ；７．１６〜７．５６、６Ｈ；７．６３〜７．７１、ｍ、１Ｈ；７．９０〜７．９８、ｍ、１Ｈ；８．２０、ｍ、１Ｈ。
【０１００】
段階２：上記化合物を実施例９段階１に記載の方法に従って水素化して、１−［ｍ−（カルボメトキシメチル）−フェニル］−２−［ｍ−（カルボメトキシフェニル）］エタンを無色油状物として得た。1Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）：ｄ２．８７、ｍ、４Ｈ；３．５６、ｓ、２Ｈ；３．６０、ｓ、３Ｈ；３．８４、ｓ、３Ｈ；６．９５〜７．３６、６Ｈ；７．７７〜７．９０、ｍ、２Ｈ。
【０１０１】
段階３：段階２のエステルを実施例６段階２に記載の手順を用いて加水分解して、１−［ｍ−（カルボキシメチル）フェニル］−２−［ｍ−（カルボキシフェニル）］エタンを白色固体として得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ２８３（Ｍ+−１、１００％）。1Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ｄ6−ＤＭＳＯ）：ｄ２．９２、ｍ、４Ｈ；３．５５、ｓ、２Ｈ；７．０２〜７．３５、ｍ、４Ｈ；７．３６〜７．６０、ｍ、２Ｈ；７．７１〜７．９３、ｍ、２Ｈ。13Ｃ  ＮＭＲ（５０ＭＨｚ、ｄ6−ＤＭＳＯ）：ｄ３８．６、３８．７、４０．９、１２８．５、１２８．８、１３０．０、１３０．３、１３１．０、１３１．２、１３２．６、１３４．８、１３６．７、１４３．１、１４３．８、１６９．２、１７４．５。
【０１０２】
実験１１
本実験はＮ，Ｎ−ビス（ｍ−カルボキシベンジル）グリシンの合成を示す。
【０１０３】
【化４８】
2002524504.tif 000048
段階１：グリシンメチルエステル塩酸塩（０．６３ｇ、５．０ｍｍｏｌ）、ＮａＨＣＯ3（１．４ｇ、１７．０ｍｍｏｌ）およびＮａＩ（０．３７ｇ、２．４ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（５ｍＬ）およびＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液にｍ−シアノベンジルブロマイド（２．３５ｇ、１２．０ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた。反応液を２時間加熱還流し、冷却して室温とし、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）および水（４０ｍＬ）で希釈した。有機相を水（４０ｍＬで３回）、飽和ＮａＣｌ水溶液（４０ｍＬ）で洗浄し、脱水し（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、減圧下に濃縮してＮ，Ｎ−ビス（ｍ−シアノベンジル）グリシンメチルエステルを以降の反応に十分な純度の無色油状物として得た。希酸水溶液への抽出と、塩基性化および有機溶媒への抽出によって、さらに精製することができる。1Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）：ｄ３．３９、ｓ、２Ｈ；３．７１、ｓ、３Ｈ；３．８６、ｓ、４Ｈ；７．３９〜７．７３、ｍ、１０Ｈ。
【０１０４】
段階２：上記ニトリル（１．５ｇ、５．０２ｍｍｏｌ）を実施例４段階２に記載の方法に従って加水分解して、Ｎ，Ｎ−ビス（ｍ−カルボキシベンジル）グリシン（硫酸塩）をオフホワイト固体として得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ３４２（Ｍ+−１、１００％）。13Ｃ  ＮＭＲ（５０ＭＨｚ、ｄ6−ＭｅＯＨ）：ｄ５３．８、５９．０、１３０．２、１３１．５、１３２．７、１３２．８、１３４．２、１３６．１、１６９．１、１７０．７。
【０１０５】
実験１２
本実験は（３Ｒ，４Ｒ）−１，３−ビス−（ｐ−メトキシベンジル）−４，５−ビス（ｍ−ホスホノフェニル）−イミダゾリド−２−オンの合成を示す。
【０１０６】
【化４９】
2002524504.tif 000049
段階１：無水ＭｇＳＯ4の入ったｐ−メトキシベンジルアミン（７．４２ｇ、
５４ｍｍｏｌ）のＣＨ2Ｃｌ2（１００ｍＬ）溶液を０℃にてｍ−ブロモベンズアルデヒド（１０．０ｇ、５４ｍｍｏｌ）で処理した。反応液を室温で１６時間撹拌し、濾過し、減圧下に濃縮してｍ−ブロモベンズアルデヒドのＮ−ｐ−メトキシベンジルイミンを無色油状物として得た。1Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）：ｄ３．８２、ｓ、３Ｈ；４．７８、ｓ、２Ｈ；６．９２、ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、２Ｈ；７．１６、ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、２Ｈ；７．５２〜７．６０、ｍ、１Ｈ；７．６２〜７．７２、ｍ、１Ｈ；７．９８、ｍ、１Ｈ；８．２９、ｍ、１Ｈ。
【０１０７】
段階２：ＣＨ3ＣＮ（５ｍＬ）中の亜鉛（１．３１ｇ、２０．０ｍｍｏｌ）に１，２−ジブロモエタン（０．５ｍＬ）を加え、混合物を１分間加熱還流した。反応液を冷却して室温としてから、ＴＭＳＣｌ（１ｍＬ）を加え、反応液を室温で１時間撹拌した。上記イミン（６．０８ｇ、２０ｍｍｏｌ）のＣＨ3ＣＮ（２０ｍＬ）溶液を一気に加え、ＴＭＳＣｌ（３．８ｍＬ）を３０分間かけて加えた。反応液を３５〜４０℃で４時間撹拌した。ＮＨ4ＯＨ（６ｍＬ）および飽和ＮＨ4Ｃｌ水溶液（１４ｍＬ）によって反応停止し、濾過した。水相を分液し、水相をＥｔ2Ｏ（５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出液を脱水し（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、減圧下に濃縮して、橙赤色油状物を得た。カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ2、２５％Ｅｔ2Ｏ／石油エーテル）によって、（１Ｒ，２Ｒ）−Ｎ，Ｎ′−（ｐ−メトキシベンジル）−１，２−（ｍ−ブロモフェニル）エタン−１，２−ジアミンを無色油状物として得た。13Ｃ  ＮＭＲ（５０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）：ｄ５０．５、５５．３、６７．４、１１３．８、１２２．４、１２６．７、１２９．２、１２９．６、１３０．３、１３０．７、１３２．１、１４３．４、１５８．７。
【０１０８】
段階３：上記ジアミン（２６０ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）のＣＨ3ＣＮ（１０ｍＬ）溶液にＮ，Ｎ′−ジスクシニミジルカーボネート（１６０ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を２時間加熱還流した。追加のＮ，Ｎ′−ジスクシニミジルカーボネート（１６０ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）を加え、反応液をさらに２時間加熱還流した。反応液を濃縮し、ＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）とＨＣｌ水溶液（１Ｍ、４０ｍＬ）との間で分配した。有機相を飽和ＮａＨＣＯ3水溶液（４０ｍＬ）、飽和ＮａＣｌ（４０ｍＬ）で洗浄し、脱水し（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、減圧下に濃縮して橙赤色油状物を得た。カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ2、２５％Ｅｔ2Ｏ／石油エーテル、次にＥｔＯＡｃ）によって、（３Ｒ，４Ｒ）−１，３−ビス−（ｐ−メトキシベンジル）−４，５−ビス（ｍ−ブロモフェニル）−イミダゾリド−２−オンを白色固体として得た。13Ｃ  ＮＭＲ（５０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）：ｄ４５．３、５５．２、６５．０、１１１．４、１２３．１、１２５．９、１２８．１、１２９．８、１３０．２、１３０．５、１３１．７、１４０．７、１５９．１、１５９．９。
【０１０９】
段階４：上記ウレア（２００ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）を実施例３段階１に記載の条件下に亜リン酸ジエチルで処理して、（３Ｒ，４Ｒ）−１，３−ビス−（ｐ−メトキシベンジル）−４，５−ビス（ｍ−ホスホノフェニル）−イミダゾリド−２−オンを無色油状物として得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ７５０（Ｍ+＋１、１００％）。31Ｐ  ＮＭＲ（８１ＭＨｚ、プロトンデカップリング、ＣＤＣｌ3）：ｄ＋１１．５。
【０１１０】
実験１３
本実験は６−アミノ−４−（４′−ピリジル）−２−（１Ｈ）−ピリドンの合成を示す。
【０１１１】
【化５０】
2002524504.tif 000050
段階１：文献（JOC, 1997, 62, 2774 ）記載の方法に従って４，４′−ビピリジンとＮａＮＨ2を反応させることで、報告されている２，２′−ジアミノ−４，４−ビピリジンに加えて以前には未報告の２−アミノ−４，４′−ビピリジンが得られた。13Ｃ  ＮＭＲ（５０ＭＨｚ、ｄ6−ＤＭＳＯ）：ｄ１０５．０、１０９．５、１２０．９、１４５．４、１４８．９、１５０．３、１６０．５。
【０１１２】
段階２：上記アミノ−ピリジン（１．５ｇ、１０．５ｍｍｏｌ）を無水酢酸（２０ｍＬ）に溶かし、６０℃で３時間加熱した。反応液を冷却して室温とし、濾過した。固体をＥｔ2Ｏで洗浄し（５０ｍＬで２回）、減圧乾燥して、２−（アセチルアミノ）−４−（４′−ピリジル）−ピリジンを明褐色固体として得た。1Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ｄ6−ＤＭＳＯ）：ｄ２．１２、ｓ、３Ｈ；７．４０〜７．５８、ｍ、１Ｈ；７．６０〜７．８３、ｍ、２Ｈ；８．３０〜８．５８、ｍ、２Ｈ；８．６２〜８．８８、ｍ、２Ｈ。
【０１１３】
段階３：上記ピリジン（０．９ｇ、４．２ｍｍｏｌ）をＣＨ2Ｃｌ2（５０ｍＬ）に溶かし、ｍ−クロロ過安息香酸（４．８６ｇ、６０重量％）で処理し、反応液を１６時間加熱還流した。反応液を冷却して室温とし、濾過し、沈殿をＥｔ2Ｏで洗浄した（５０ｍＬで２回）。沈殿を無水酢酸（２５ｍＬ）に加え、４時間加熱還流し、冷却して室温とし、沈殿を回収した。沈殿をメタノール（５ｍＬ）に加え、Ｎａ2ＣＯ3（５０ｍｇ）で処理し、５時間加熱還流した。反応液を冷却して室温とし、濾過し、濾液を減圧下に濃縮した。Ｅｔ2Ｏでの磨砕によって、６−アミノ−４−（４′−ピリジル）−２−（１Ｈ）−ピリドンを黄色固体として得た。ＭＳ（ＣＩ）ｍ／ｚ１８８（Ｍ+＋１、１００％）。1Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ｄ4−ＭｅＯＨ）：ｄ５．８３、ｄ、Ｊ＝１Ｈｚ、１Ｈ；５．９０、ｄ、Ｊ＝１Ｈｚ、１Ｈ；７．６７、ｄ、Ｊ＝７Ｈｚ、２Ｈ；８．１６、ｄ、Ｊ＝７Ｈｚ、２Ｈ。
【０１１４】
実験１４
本実験は本発明の化合物の一部についてのＦｃ受容体調節活性を示すものである。
図５Ａおよび５Ｂに示した小さい化合物の存在下での組換え可溶性ＦｃｇＲＩＩａとヒト免疫グロブリンとの間の相互作用について、Ｈｅｐｅｓ緩衝生理食塩水［ＨＢＳ：１０ｍＭＨｅｐｅｓ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、３．４ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．００５％サーファクタント（Surfactant）Ｐ２０（Pharmacia ）］中２２℃でバイアコア（BIAcore ）２０００バイオセンサー（Pharmacia Biotech, Uppsala, Sweden）を用いて調べた。モノマーのヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ３およびＩｇＥ（５０ｍｇ／ｍＬ）（非特異的結合対照）をアミンカップリングプロトコール（BIAcore, Uppsala, Sweden）を用いて、ＣＭ−５センサーチップ（BIAcore, Uppsala, Sweden）のカルボキシメチル化デキストラン表面に共有結合的にカップリングした。別のチャネルをそのカップリングプロトコールを用いて化学的に処理した。組換え可溶性ＦｃｇＲＩＩａは、５０％結合能力と等価である１２５ｍｇ／ｍＬの濃度として用いた。組換え可溶性ＦｃｇＲＩＩａを各化合物とともに室温で３０分間前インキュベートしてから、１０ｍＬ／分で１分間にわたりセンサーチップ表面に注入し、次に３分間の解離期を設けた。全ての表面を５０ｍＭジエチルアミン（約ｐＨ１１．５）、１Ｍ  ＮａＣｌで再生し、各化合物間で分析を行った。各相互作用についての最大応答を測定した。ＩｇＧ１およびＩｇＧ３への結合から非特異的結合応答（ＩｇＥチャネル）を引いた。化合物と受容体の間の緩衝液組成の差について測定値を補正した。
【０１１５】
表面プラズモン共鳴の感受性を用いて、化合物存在下での可溶性ＦｃｇＲＩＩａとＩｇＧ１（図６および８）およびＩｇＧ３（図７および９）との相互作用を測定した。化合物ＢＲＩ６７２８、ＢＲＩ６７３４、ＢＲＩ６８１３、ＢＲＩ６８００、ＢＲＩ６８０１、ＢＲＩ６８０２、ＢＲＩ６８０３、ＢＲＩ６８１４、ＢＲＩ６８１７、ＢＲＩ６８２２、ＢＲＩ６８２３およびＢＲＩ６８２４がいずれも可溶性ＦｃｇＲＩＩａのＩｇＧ１との相互作用を阻害した（図６および８）。５ｍｇ／ｍＬの濃度では、化合物ＢＲＩ６７９８、ＢＲＩ６７９９、ＢＲＩ６８１５およびＢＲＩ６８２５が可溶性ＦｃｇＲＩＩａのＩｇＧ１との相互作用を促進した（図６および８）。化合物ＢＲＩ６７２８、ＢＲＩ６７３４、ＢＲＩ６８１３、ＢＲＩ６８００、ＢＲＩ６８０１、ＢＲＩ６８０２、ＢＲＩ６８０３、ＢＲＩ６８１４、ＢＲＩ６８１６、ＢＲＩ６８１７、ＢＲＩ６８２２、ＢＲＩ６８２３およびＢＲＩ６８２４が可溶性ＦｃｇＲＩＩａのＩｇＧ３との相互作用を阻害した（図７および９）。約５ｍｇ／ｍＬおよび１０ｍｇ／ｍＬの濃度で、化合物ＢＲＩ６７２７、ＢＲＩ６７９８、ＢＲＩ６８１５およびＢＲＩ６８２５が可溶性ＦｃｇＲＩＩａのＩｇＧ３との相互作用を促進した。
【０１１６】
実験１５
本実験はＮ−（３′−カルボキシフェニル）−２−（カルボキシベンゼン）スルホンアミドの合成を示す。
【０１１７】
【化５１】
2002524504.tif 000051
段階１：３−アミノ安息香酸エチル（１．４４ｇ、８．７３ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１．２１ｍＬ、８．７３ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（１０ｍＬ）溶液に０℃で、２−（クロロスルホニル）安息香酸メチル（２．２５ｇ、８．７３ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（２０ｍＬ）溶液を滴下した。反応液を昇温させて室温とし、終夜撹拌した。反応混合物を水（２０ｍＬ）、ＨＣｌ水溶液（１Ｍ、２０ｍＬ）およびＮａＯＨ水溶液（１Ｍ、２０ｍＬ）で洗浄し、脱水し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、減圧下に濃縮して、橙赤色油状物を得た。エチルエーテル
での磨砕によって、Ｎ−（３′−カルボエトキシフェニル）−２−（カルボメトキシ）ベンゼンスルホンアミドを白色固体として得た。1Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）：ｄ１．３１、ｔ、Ｊ＝６．０Ｈｚ、２Ｈ；４．００，ｓ、３Ｈ；４．２９、ｑ、Ｊ＝６．０Ｈｚ、２Ｈ；７．２３〜７．６１、ｍ、５Ｈ；７．６６〜７．９２、ｍ、３Ｈ；８．２６、ｂｒｓ、１Ｈ。
【０１１８】
段階２：上記ジエステル（１．０ｇ、２．７５ｍｍｏｌ）を実施例６段階２に記載の手順を用いて加水分解して、Ｎ−（３′−カルボキシフェニル）−２−（カルボキシベンゼン）スルホンアミドを白色固体として得た。ＭＳ（ＣＩ）ｍ／ｚ３２０（Ｍ+−１、１００％）。13Ｃ  ＮＭＲ（５０ＭＨｚ、ｄ6−ＤＭＳＯ）：ｄ１６８．０、１６６．３、１３７．８、１３５．８、１３３．４、１３２．６、１３１．３、１３０．１、１２９．０、１２８．８、１２８．０、１２４．５、１２３．８および１２０．５。
【０１１９】
実験１６
本実験はトランス−３，３′−ビス−（Ｎ−ヒドロキシアミジノ）スチルベンの合成を示す。
【０１２０】
【化５２】
2002524504.tif 000052
段階１：トランス−３，３′−ジシアノスチルベンを実施例６段階１の方法を用いて３−ブロモベンゾニトリルから製造した。ＭＳ（ＣＩ）ｍ／ｚ２３０（Ｍ+、１００％）。
【０１２１】
段階２：トランス−３，３′−ジシアノスチルベン（１．５ｇ、６．５２ｍｍｏｌ）、ヒドロキシルアミン塩酸塩（３．２６ｇ、５０ｍｍｏｌ）およびＮａ2ＣＯ3（３．０４ｇ、３０ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（４０ｍＬ）および水（１５ｍＬ）溶液を３時間加熱還流した。反応液を冷却して室温とし、エタノールを減圧下に除去した。残った溶液をＥｔＯＡｃで抽出し（５０ｍＬで２回）、合わせた有機抽出液をＨＣｌ水溶液で洗浄した（１Ｍ、２０ｍＬで２回）。合わせた水系抽出液を塩基性とし、ＥｔＯＡｃで抽出した（５０ｍＬで３回）。合わせた有機抽出液を脱水し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、減圧下に濃縮して無色固体を得た。ＭＳ（ＣＩ）ｍ／ｚ２９７（Ｍ+＋１、１００％）。13Ｃ  ＮＭＲ（５０ＭＨｚ、ｄ6−ＤＭＳＯ）：ｄ１２３．３、１２４．８、１２７．１、１２８．６、１３３．８、１３６．８および１５０．７。
【０１２２】
実験１７
本実験は（ｄ，ｌ）−およびメソ−２−アセチルアミノ−３−（３−｛２−［３−（２−アセチルアミノ−２−カルボキシエチル）フェニル］エチル｝−フェニル）プロピオン酸の合成を示す。
【０１２３】
【化５３】
2002524504.tif 000053
段階１：３−ブロモベンズアルデヒド（２３．７ｇ、１２８．２ｍｍｏｌ）、Ｎ−アセチルグリシン（１０．０ｇ、８５．５ｍｍｏｌ）および酢酸ナトリウム（５．２６ｇ、６４．１ｍｍｏｌ）の無水酢酸（６０ｍＬ）溶液を１時間加熱還流した。得られた懸濁液を濾過し、固体を水で洗浄した（５０ｍＬで２回）。残った固体を塩化エチレン（１００ｍＬ）に溶かし、脱水し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、減圧下に濃縮して黄色固体を得た。固体を脱水ＭｅＯＨ（２００ｍＬ）に懸濁させ、９時間加熱還流した。反応混合物を減圧下に濃縮して黄色固体を得た。ＥｔＯＡｃおよび石油エーテルからの再結晶によって、ｍ−ブロモ−ａ−アセトアミドケイ皮酸メチルを黄色固体として得た。ＭＳ（ＣＩ）ｍ／ｚ２９８（Ｍ+＋１（Ｂｒ＝７９）、１００％）、３００（Ｍ+＋１（Ｂｒ＝８１）、１００％）。13Ｃ  ＮＭＲ（５０ＭＨｚ、ｄ6−ＤＭＳＯ）：ｄ２３．３、５２．８、１２２．５、１２５．０、１２８．０６、１３０．０、１３０．２、１３２．２、１３２．３、１３５．９、１６５．４および１６８．８。
【０１２４】
段階２：実施例６段階１の方法を用いて上記の化合物から２−アセチルアミノ−３−（３−｛２−［３−トランス−２−アセチルアミノ−２−カルボメトキシエテニル）フェニル］エテニル｝フェニル）プロプ−２−エン酸トランス−メチルを製造した。ＭＳ（ＣＩ）ｍ／ｚ４６１（Ｍ+−１、１００％）。
【０１２５】
段階３：段階２からの化合物（３８０ｍｇ、０．８２ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（３００ｍｇ、１０％）のＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中混合物を室温で１６時間水素雰囲気下に撹拌した。反応液を濾過し、減圧下に濃縮して（ｄ，ｌ）−およびメソ−２−アセチルアミノ−３−（３−｛２−［３−（２−アセチルアミノ−２−カルボメトキシ−エチル）−フェニル］−エチル｝−フェニル）プロピオン酸メチルを透明粘稠油状物として得た。それをそれ以上精製せずに使用した。
【０１２６】
段階４：段階３からの化合物（２８０ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）を実施例６段階２に記載の手順を用いて加水分解して、（ｄ，ｌ）−およびメソ−２−アセチルアミノ−３−（３−｛２−［３−（２−アセチルアミノ−２−カルボキシエチル）フェニル］エチル｝−フェニル）プロピオン酸を透明粘稠油状物として得た。ＭＳ（ＣＩ）ｍ／ｚ４４０（Ｍ+−１、１００％）。
【０１２７】
実験１８
本実験は（３Ｒ，４Ｒ）−４，５−ビス（ｍ−カルボキシフェニル）イミダゾリド−２−オンの合成を示す。
【０１２８】
【化５４】
2002524504.tif 000054
段階１：（Ｒ，Ｒ）−１，２−ビス−［３−（カルボメトキシ）フェニル］エタン−１，２−ジオール（実施例７段階１）（１．５ｇ、４．５４ｍｍｏｌ）のピリジン（１０ｍＬ）溶液に０℃でメタンスルホニルクロライド（１．０１ｍＬ、１３．１ｍｍｏｌ）を滴下した。反応液を昇温させて室温とし、終夜撹拌した。反応液を水（３０ｍＬ）および塩化メチレン３０ｍＬで希釈し、水相を塩化メチレン１０ｍＬで２回抽出した。合わせた有機抽出液を１Ｍ  ＨＣｌ水溶液２０ｍＬで２回、重炭酸ナトリウム水溶液２０ｍＬで洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、減圧下に濃縮して（Ｒ，Ｒ）−１，２−ビス−［３−（カルボメトキシ）フェニル］エタン−１，２−ジオールのジ−メタンスルホン酸エステルを黄色粘稠油状物として得た。
【０１２９】
段階２：上記メシレート（５０５ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）およびＮａＮ3（１
５０ｍｇ、２．３１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（６ｍＬ）溶液を９０℃で１７時間加熱した。反応混合物を冷却して室温とし、ジエチルエーテル５０ｍＬで希釈し、水５０ｍＬで３回洗浄した。有機相をＭｇＳＯ4で脱水し、濾過し、減圧下に濃縮して（Ｒ，Ｒ）−１，２−ビス−［３−（カルボメトキシ）フェニル］−１，２−ジアゾエタンを黄色粘稠油状物として得た。1Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）：ｄ３．９３、ｓ、３Ｈ；４．７３、ｓ、１Ｈ；７．１７〜７．３９、ｍ、２Ｈ；７．７８〜８．０１、ｍ、２Ｈ。
【０１３０】
段階３：上記ジアジド（６１１ｍｇ、１．６１ｍｍｏｌ）およびＰｄ／炭素（１０％、５０ｍｇ）のメタノール中混合物を濃ＨＣｌ水溶液（３．８６ｍＬ、３．８６ｍｍｏｌ）で処理した。反応液を水素雰囲気下に置き、室温で３０時間撹拌した。反応液をセライト濾過し、濃縮して（Ｒ，Ｒ）−１，２−ビス−［３−（カルボメトキシ）フェニル］−１，２−ジアミノ−エタンの塩酸塩を得た。ＭＳ（ＣＩ）ｍ／ｚ３２９（遊離アミノについてのＭ+＋１、７０％）、３１２（１００％）。
【０１３１】
段階４：上記ジアミン（遊離塩基型（２８０ｍｇ、０ｐ８５ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（５ｍＬ）溶液をＤＭＡＰ（１０４ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）およびジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（２０４ｍｇ、０．９４ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１ｍＬ）溶液で室温にて処理した。反応液を室温で２５分間撹拌し、エーテル５０ｍＬと１Ｍ  ＨＣｌ５０ｍＬとの間で分配した。有機相を分液し、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下に濃縮した。カラムクロマトグラフィーによって、（３Ｒ，４Ｒ）−４，５−ビス−（ｍ−カルボメトキシフェニル）イミダゾリド−２−オンを白色固体として得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ３５５（Ｍ+＋１、１００％）。1Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ｄ6−ＤＭＳＯ）：ｄ３．８６、ｓ、６Ｈ；４．５７、ｓ、２Ｈ；７．１６、ｂｒｓ、２Ｈ；７．４６〜７．６１、ｍ、４Ｈ；７．８８〜８．００、ｍ、４Ｈ。
【０１３２】
段階５：上記ジエステル（６８ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）を実施例６段階２に記載の手順を用いて加水分解して、（３Ｒ，４Ｒ）−４，５−ビス（ｍ−カルボキシフェニル）イミダゾリド−２−オンを白色固体として得た。ＭＳ（電子噴射）ｍ／ｚ３２７（Ｍ+＋１、１００％）。13Ｃ  ＮＭＲ（５０ＭＨｚ、ｄ6−ＤＭＳＯ）：ｄ６４．３、１２７．４、１２９．１、１２９．３、１３１．１、１３１．４、１４２．１、１６２．５、１６７．３。
【０１３３】
実験１９
本実験は３−（［３′−（１″−オキソ−２″，２″，２″−トリフルオロエチル）フェノキシ］メチル）フェニルトリフルオロメチルケトンの合成を示す。
【０１３４】
【化５５】
2002524504.tif 000055
３−［（ｍ−ブロモフェニル）メトキシ］ブロモ−ベンゼン（実施例２段階１）（２３３ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６ｍＬ）溶液に−７８℃でｔｅｒｔ−ブチルリチウム（１．６ｍＬ、１．７Ｍペンタン溶液、２．７２ｍｍｏｌ）を滴下した。この温度で２０分後、得られた溶液をトリフルオロ酢酸エチル（０．３５ｍＬ、２．９４ｍＬ）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液に−７８℃で滴下した。反応混合物を１６時間撹拌し、その間に反応混合物は室温に達した。反応混合物を１Ｍ  ＨＣｌ２０ｍＬとエーテル５０ｍＬとの間で分配した。有機相を分液し、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下に濃縮して３−（［３′−（１″−オキソ−２″，２″，２″−トリフルオロエチル）フェノキシ］メチル）フェニルトリフルオロメチルケトンを無色油状物として得た。ＭＳ（ＣＩ）ｍ／ｚ３７７（Ｍ+＋１、１００％）。19Ｆ  ＮＭＲ（１８８ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）：ｄ−７１．７６および−７１．９０。
【０１３５】
実験２０  本実験はＡｃ−Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−ＮＨ2の合成を示す。
【０１３６】
【化５６】
2002524504.tif 000056
固相ペプチド合成法を用いて、上記ペプチドを組み立てた。Ｎ−アシル化および樹脂からの開裂によって、標題化合物を白色固体として得た。ＨＰＬＣおよびＭＳ分析によって、本材料の純度確認および同定を行った。
【０１３７】
実験２１
本実験はシクロ−［Ｎ−フェニルグリシン−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−（Ｄ）−Ａｓｐ］−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−ＮＨ2の合成を示す。
【０１３８】
【化５７】
2002524504.tif 000057
段階１：Ｎ−［（４Ｓ）−３−ベンジルオキシカルボニル−５−オキソ−オキサゾリジン−４−イル−アセチルクロライド（３．００ｇ、１０ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（２０ｍＬ）溶液をｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−フェニルグリシネート（２．３ｍｇ、１１ｍｍｏｌ）のピリジン（１０ｍＬ）溶液に０℃で滴下した。反応液を昇温させて室温とし、終夜撹拌した。反応液をＨ2Ｏ（１００ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）で希釈した。有機相を分液し、クエン酸（１０％、１００ｍＬで２回）およびブライン（１００ｍＬ）の順で洗浄し、脱水し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、減圧下に濃縮して黄色粘稠油状物を得た。カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ2、２０％から５０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル）によって、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（４Ｓ）−３−ベンジルオキシカルボニル−５−オキソ−オキサゾリジン−４−イル−アセチル］−Ｎ−フェニルグリシネートを白色泡状物として得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ４６７（Ｍ+−１、１００％）。
【０１３９】
段階２：ＮａＯＨ水溶液（３ｍＬ、１Ｍ、３ｍｍｏｌ）を上記ジペプチド（５７０ｍｇ、１．２２ｍｍｏｌ）のメタノール（２０ｍＬ）溶液に０℃で滴下した。反応液を昇温させて室温とし、ＴＬＣでモニタリングした。反応液を濃縮し、Ｅｔ2Ｏ（３０ｍＬ）とクエン酸（１０％、３０ｍＬ）との間で０℃で分配した。水相をＥｔ2Ｏで抽出し（３０ｍＬで３回）、合わせた有機抽出液を脱水し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、減圧下に濃縮して白色固体を得た。カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ2、２％から５％ＭｅＯＨ／塩化メチレン）によって、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−アスパルチル］−ｂ−Ｎ−フェニルグリシネートを白色固体として得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ４５６（Ｍ+＋１、９０％）。
【０１４０】
段階３：パラジウム炭素（１０％、５００ｍｇ）を含む上記化合物（１．３５ｇ、２．９６ｍｏｌ）のＭｅＯＨ（４０ｍＬ）溶液を水素雰囲気下に置き、室温で１６時間撹拌した。反応液を濾過し、減圧下に濃縮してｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−アスパルチル］−ｂ−Ｎ−フェニルグリシネートをオフホワイト固体として得た。
【０１４１】
段階４：上記化合物（８９０ｍｇ、２．７６ｍｍｏｌ）、Ｆｍｏｃ−Ｏ−Ｓｕ、すなわちＮ−（９−フルオレニルメトキシカルボニルオキシ）コハク酸イミド（９３２ｍｇ、２．７６ｍｍｏｌ）、Ｎａ2ＣＯ3（８８０ｍｇ、８．２９ｍｍｏｌ）のジオキサン（１５ｍＬ）およびＨ2Ｏ（１５ｍＬ）中混合物を室温で１６時間撹拌した。反応液をＥｔ2Ｏ（１００ｍＬ）およびＨ2Ｏ（１００ｍＬ）で希釈した。有機層を分液し、Ｎａ2ＣＯ3水溶液で抽出した（５％、１００ｍＬで３回）。合わせた水系抽出液を１０％クエン酸で酸性とし、ＥｔＯＡｃで抽出した（１００ｍＬで３回）。有機抽出液を合わせ、脱水し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、減圧下に濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−Ｆｍｏｃ−アスパルチル］−ｂ−Ｎ−フェニルグリシネートを白色固体として得た。13Ｃ  ＮＭＲ（５０ＭＨｚ、ｄ6−ＤＭＳＯ）：ｄ２８．０、３６．７、４７．０、５０．４、５２．４、６７．０、６７．３、８２．３、１１９．９、１２５．２、１２５．３、１２７．１、１２７．７、１２７．８、１２８．８、１３０．１、１４１．２、１４２．８、１４３．７、１４３．９、１５６．１、１６７．６、１７１．６、１７４．５。
【０１４２】
段階５：上記Ｆｍｏｃ保護ジペプチドを用いた固相アミノ酸合成とそれに続く樹脂上での環化および開裂によって、シクロ−［Ｎ−フェニルグリシン−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−（Ｄ）−Ａｓｐ］−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−ＮＨ2を得た。
【０１４３】
実験２２
本実験は２−（２′−フェニルエチル）−ａ−Ｎ−アセチル−リジンアミドおよびそれの塩酸塩の合成を示す。
【０１４４】
【化５８】
2002524504.tif 000058
段階１：金属ナトリウム（１３８ｍｇ、５．９８ｍｍｏｌ）の脱水エタノール（１６ｍＬ）中混合物にブタン酸２−シアノ−４−（フェネチル）エチル（１．０ｇ、４．６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で３０分間撹拌した。４−ブロモ−ブト−１−エン（０．６ｍＬ、６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１６時間加熱還流した。得られた懸濁液を冷却して室温とし、減圧下に濃縮し、エーテル（１００ｍＬ）およびＮＨ4Ｃｌ（飽和水溶液１００ｍＬ）で希釈した。水層を分液し、エーテルで抽出した（５０ｍＬで３回）。有機層を合わせ、脱水し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮して明褐色油状物を得た。カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ2、２０％エーテル／石油エーテル）によって、２−シアノ−２−（２′−フェネチル）−ヘキス−５−エン酸エチルを透明無色油状物として得た。1Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）：ｄ１．３５（ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、３Ｈ）、１．８２〜２．４５（ｍ、６Ｈ）、２．６５（ｔｄ、Ｊ＝１２．４Ｈｚおよび７．０Ｈｚ、１Ｈ）、２．９０（ｔｄ、Ｊ＝１２．４Ｈｚおよび７．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．２４（ｑ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、２Ｈ）、５．００〜５．１３（ｍ、２Ｈ）、５．６７〜５．７６（ｍ、１Ｈ）、７．１５〜７．３５（ｍ、５Ｈ）。
【０１４５】
段階２：上記オレフィン（０．７２ｇ、２．６５ｍｍｏｌ）、ＬｉＯＨ（１０．６ｍＬ、１．０Ｍ、１０．６ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ（５０ｍＬ）の混合物を室温で１８時間撹拌した。反応混合物をエーテル（１００ｍＬ）および水（１００ｍＬ）で希釈し、分液を行った。水層を２Ｍ  ＨＣｌ水溶液で約ｐＨ２の酸性とし、エーテル（１００ｍＬ）の入った分液漏斗に移し入れた。分液した水層をエーテルで抽出した（５０ｍＬで３回）。有機部分を合わせ、脱水し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、減圧下に濃縮して、２−シアノ−２−（２′−フェネチル）−５−ヘキセン酸を粘稠無色油状物として得た。この取得物をそれ以上精製せずに次の反応に用いた。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ２４４（Ｍ+＋１、５５％）、２４２（Ｍ+−１、６３％）。
【０１４６】
段階３：上記酸（２．６ｇ、１０．７ｍｍｏｌ）のトルエン（３５ｍＬ）溶液にジフェニルホスホリルアジド（２．７５ｍＬ、１２．８ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１．７５ｍＬ、１２．６ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を１００℃で１時間加熱し、その後ｔｅｒｔ−ブタノール（３５ｍＬ）を加えた。混合物をさらに２時間１００℃で加熱し、冷却して室温とし、減圧下に濃縮した。得られた黄色油状物をエーテル（３００ｍＬ）および水（３００ｍＬ）で希釈した。有機層を分液し、クエン酸（５％水溶液１００ｍＬ）、ＮａＨＣＯ3（５％水溶液１００ｍＬ）およびブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、脱水し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮して、黄色油状物を得た。カラムクロマトグラフィー（シリカ、２％酢酸エチル／クロロホルム溶離）によって２−（Ｎ−ｂｏｃ−アミノ）−２−（２+−フェネチル）−５−ヘキセノニトリルを無色油状物として得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ３１６（Ｍ+＋１、５％）、３１３（Ｍ+−１、２％）。13Ｃ  ＮＭＲ（５０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）：ｄ２８．４、３０．５、３６．３、３８．９、５４．９、１１６．３、１１９．７、１２６．６、１２８．４、１２８．８、１３６．３、１４０．１、１５３．５。
【０１４７】
段階４：ＮａＯＨ（９．２ｍＬ、１．０Ｍ）およびＨ2Ｏ2（３０％（体積基準）水溶液３８ｍＬ）を上記ニトリル化合物（５２３ｍｇ、１．９３ｍｍｏｌ）のエタノール（２０ｍＬ）溶液に０℃で加えた。反応混合物を０℃で３０分間撹拌し、室温で１８時間撹拌した。エタノールを減圧下に除去し、残留物をエーテル（１００ｍＬ）およびブライン（１００ｍＬ）で希釈した。水層を分液し、エーテルで抽出した（２０ｍＬで４回）。有機層を合わせ、脱水し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮して、２−（Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ）−２−（２′−フェネチル）−５−ヘキセンアミドを無色粘着性泡状物として得た。この取得物をそれ以上精製せずに次の反応に用いた。Ｒf０．３（３０％酢酸エチル／ガソリン溶離）。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ３３３（Ｍ+＋１、５％）、２３３（１００％）。
【０１４８】
段階５：上記アミド（４８０ｍｇ、１．４４ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（５ｍＬ）溶液にトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加え、混合物を室温で３５分間撹拌した。反応混合物を濃縮して、２−アミノ−２−（２′−フェネチル）−５−ヘキセンアミドを赤褐色油状物として得た。この取得物をそれ以上精製せずに次の反応に用いた。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ２３３（Ｍ+＋１、１００％）。
【０１４９】
段階６：上記アミン（３３５ｍｇ、１．４４ｍｍｏｌ）のピリジン（２．５ｍＬ）溶液に無水酢酸（２．５ｍＬ）を加え、室温で２１時間撹拌した。得られた赤褐色反応混合物を減圧下に濃縮した。カラムクロマトグラフィー（シリカ、８０％酢酸エチル／ガソリン溶離、Ｒf０．３６）によって、（Ｎ−アセチル−アミノ）−２−（２′−フェネチル）−５−ヘキセンアミドを淡黄色泡状物として得た。13Ｃ  ＮＭＲ（５０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）：ｄ２４．２、２８．３、３０．４、３５．２、３７．８、６４．０、１１５．２、１２６．１、１２８．４、１２８．５、１３７．４、１４１．１、１６９．４、１７５．３。
【０１５０】
段階７：上記オレフィン（１３０ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）の脱水ＴＨＦ（２ｍＬ）溶液に９−ＢＢＮ（４．６ｍＬ、０．５Ｍ  ＴＨＦ溶液、２．３０ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を室温で１８時間撹拌した。混合物を冷却して０℃とし、水（０．５ｍＬ）、ＮａＯＡｃ（５．０Ｍ水溶液５ｍＬ）およびＨ2Ｏ2（５ｍＬ）をこの順序で加えた。得られた混合物を室温で２時間撹拌し、酢酸エチル（３０ｍＬ）およびブライン（３０ｍＬ）で希釈した。水層を分液し、酢酸エチルで抽出した（１０ｍＬで３回）。有機部分を合わせ、脱水し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、減圧下に濃縮して黄色油状物を得た。カラムクロマトグラフィー（シリカ、５％ＭｅＯＨ／酢酸エチル溶離、Ｒf０．４）によって、２−（Ｎ−アセチル−アミノ）−２−（２′−フェネチル）−６−ヒドロキシ−ヘキサンアミドを無色粘着性泡状物として得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ２９３（Ｍ+＋１、３５％）、２９１（Ｍ+−１、３５％）。
【０１５１】
段階８：上記アルコール（８８ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（２ｍＬ）溶液に０℃でトリエチルアミン（０．１ｍＬ、０．７２ｍｍｏｌ）およびメタンスルホニルクロライド（０．０５ｍＬ、０．６５ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で１９時間撹拌し、酢酸エチル（３０ｍＬ）およびブライン（３０ｍＬ）で希釈した。水層を分液し、酢酸エチルで抽出した（１０ｍＬで３回）。有機層を合わせ、脱水し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、減圧下に濃縮して２−（Ｎ−アセチル−アミノ）−２−（２′−フェネチル）−６−メタンスルホニルオキシ−ヘキサンアミドを黄褐色残留物として得た。この粗生成物をそれ以上精製せずに次の反応で用いた。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ３７１（Ｍ+＋１、４５％）、３６９（Ｍ+−１、５％）。
【０１５２】
段階９：上記メシレート（１１０ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）およびアジ化ナトリウム（５４ｍｇ、０．８３ｍｍｏｌ）の脱水ＤＭＦ（２ｍＬ）溶液を６０℃〜６５℃で１９．５時間加熱した。橙赤色懸濁液を冷却して室温とし、濃縮し、酢酸エチル（３０ｍＬ）およびブライン（３０ｍＬ）で希釈した。水層を分液し、酢酸エチルで抽出した（１０ｍＬで４回）。有機部分を合わせ、脱水し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮して、２−（Ｎ−アセチル−アミノ）−２−（２′−フェネチル）−６−アジド−ヘキサンアミドを黄褐色油状物として得た。その取得物をそれ以上精製せずに次の反応で用いた。1Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）：ｄ１．２０〜１．７８（ｍ、６Ｈ）、１．９２（ｓ、３Ｈ）、２．２０〜３．０２（ｍ、１Ｈ）、３．１２〜３．３０（ｍ、２Ｈ）、５．５７（ｓ、１Ｈ）、５．９０（ｓ、１Ｈ）、６．７２（ｓ、１Ｈ）、７．０４〜７．３０（ｍ、５Ｈ）。
【０１５３】
段階１０：上記アジド（９５ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（１８．４ｍｇ）のメタノール（２ｍＬ）懸濁液を室温および大気圧で２１時間水素化した。黒色懸濁液をシリカ−セライトの小さい層で濾過し、その層はメタノール（約３０ｍＬ）で数回流した、濾液を濃縮することで、明黄褐色油状物を得た。カラムクロマトグラフィー（シリカ、１０％トリエチルアミン／メタノール溶離、Ｒf０．２２）によって、２−（２′−フェニルエチル）−ａ−Ｎ−アセチル−リジンアミドを透明無色油状物として得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ２９２（Ｍ+＋１、１００％）、２９０（Ｍ+−１、３０％）。1Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ｄ6−ＭｅＯＤ）：ｄ１．１０〜１．６０（ｍ、４Ｈ）、１．７３〜１．９０（ｍ、１Ｈ）、１．９５（ｓ、３Ｈ）、１．９５〜２．３５（ｍ、２Ｈ）、２．４０〜２．８０（ｍ、５Ｈ）、７．１０〜７．３５（ｍ、５Ｈ）。
【０１５４】  得られたアミン少量について、そのアミンに０．５Ｍ  ＨＣｌ水溶液を加え、混合物を減圧下に濃縮することで、相当する塩酸塩に変換した。
実験２３
本実験は４，４′−ビス（３−［（ｍ−カルボキシフェノキシ）メチル］−２−ピリドン）の合成を示す。
【０１５５】
【化５９】
2002524504.tif 000059
段階１：３−ホルミル−４−ヨード−２−メトキシピリジン（ファンらの方法（Fang et al., J. Org. Chem., 1994, 59, 6142）（９８ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）のメタノール（４ｍＬ）溶液に−５℃で固体ＮａＢＨ4（２８ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）を１回で加えた。激しい発泡が認められ、黄色反応液が無色になった。水（２ｍＬ）を加えることで反応を直ちに停止し、メタノールを減圧下に除去した。得られた残留物を酢酸エチル（２０ｍＬ）および水（２０ｍＬ）で希釈した。水層を分液し、酢酸エチルで抽出した（１０ｍＬで３回）。有機部分を合わせ、脱水し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮して、３−（ヒドロキシメチル）−４−ヨード−２−メトキシピリジンを無色結晶固体として得た。この取得物をそれ以上精製せずに次の反応で用いた。Ｒf０．４（３０％酢酸エチル／ガソリン溶離）。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ２６６（Ｍ+＋１、１００％）。1Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）：ｄ３．９８（ｓ、３Ｈ）、４．８０（ｓ、２Ｈ）、７．３４（ｄ、Ｊ＝４．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．７０（ｄ、Ｊ＝４．０Ｈｚ、１Ｈ）。
【０１５６】
段階２：上記アルコール（３７３ｍｇ、１．４１ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．９５ｍＬ、６．８ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（９．４ｍＬ）溶液に０℃でメタンスルホニルクロライド（０．５ｍＬ、６．４ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた混合物を室温で１５時間撹拌し、酢酸エチル（１５０ｍＬ）およびブライン（１５０ｍＬ）で希釈した。水層を分液し、酢酸エチルで抽出した（５０ｍＬで３回）。有機部分を合わせ、脱水し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、減圧下に濃縮して、３−（クロロメチル）−４−ヨード−２−メトキシピリジンを明黄褐色結晶固体として得た。この取得物をそれ以上精製せずに次の反応で用いた。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ２８４（Ｍ+＋１、１００％）。1Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）：ｄ３．９５（ｓ、３Ｈ）、４．６５（ｓ、２Ｈ）、７．２８（ｄ、Ｊ＝４．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．６５（ｄ、Ｊ＝４．０Ｈｚ、１Ｈ）。
【０１５７】
段階３：上記クロライド（３９９ｍｇ、１．４１ｍｍｏｌ）の脱水ＤＭＦ（７ｍＬ）溶液に３−ヒドロキシ安息香酸メチルのナトリウム塩（３７２ｍｇ、２．１４ｍｍｏｌ）を１回で加えた。橙赤色反応混合物を室温で１８時間撹拌し、酢酸エチルで抽出した（３０ｍＬで３回）。有機層を合わせ、脱水し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮して褐色油状物を得た。この油状物のカラムクロマトグラフィー（シリカ、３０％エーテル／ガソリン溶離、Ｒf０．３５）によって、４−ヨード−２−メトキシ−３−｛［ｍ−カルボメトキシ）フェノキシ］メチル｝−ピリジンを無色油状物として得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ４００（Ｍ+＋１、４０％）。1Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）：ｄ３．９２（ｓ、３Ｈ）、３．９６（ｓ、３Ｈ）、５．２０（ｓ、２Ｈ）、７．１５〜７．４２（ｍ、３Ｈ）、７．６２〜７．８０（ｍ、３Ｈ）。
【０１５８】
段階４：上記ヨウ化物（０．５ｇ、１．２５ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ3）4（１４１ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）、Ｋ2ＣＯ3（５１８ｍｇ、３．７６ｍｍｏｌ）、ジボロンピナコールエステル（１５９ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（７．６ｍＬ）懸濁液を、遮光しながら８０℃で１６時間加熱した。暗褐色反応混合物を室温まで冷却し、酢酸エチル（１５０ｍＬ）および水（１５０ｍＬ）で希釈した。水層を分液し、酢酸エチルで抽出した（２５ｍＬで３回）。有機層を合わせ、脱水し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、減圧下に濃縮して褐色油状物を得た。カラムクロマトグラフィー（シリカ、５０％酢酸エチル／ガソリン溶離、Ｒf０．５７）によって、４，４′−ビス−２−メトキシ−３−｛［ｍ−カルボメトキシ）フェノキシ］メチル｝−ピリジンを泡状物として得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ５４５（Ｍ+＋１、１００％）。
【０１５９】
段階５：上記二量体ジエステル（２７７ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）のＬｉＯＨ（１０ｍＬ、１．０Ｍ）およびＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を室温で１８時間撹拌した。粗反応混合物をエーテル（７５ｍＬ）で希釈し、分液を行った。水層を２．０Ｍ  ＨＣｌ水溶液でｐＨ２の酸性とし、酢酸エチルで抽出した（５０ｍＬで４回）。有機部分を合わせ、脱水し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮して、４，４′−ビス−２−メトキシ−３−｛［ｍ−カルボキシ）フェノキシ］メチル｝−ピリジンを無色固体として得た。この取得物をそれ以上精製せずに次の段階で用いた。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ５１７（Ｍ+＋１、１００％）、５１５（Ｍ+−１、１００％）。
【０１６０】
段階６：上記メトキシ−ピリジンの加水分解によって、４，４′−ビス−｛３−［（ｍ−カルボキシフェノキシ）メチル］−２−ピリドン｝を得た。
実験２４
本実験はトリペプチドおよびヘキサペプチドＦｃ受容体調節活性を示すものである。
【０１６１】
ペプチドの製造
固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）を用いて、配列ＧＫＳのアセチル化トリペプチドならびに配列ＦＱＮＧＫＳのヘキサペプチドを製造した（例えば、Merrifield, J. Am. Chem. Soc., 1963, 85, 2419 およびMerrifield et al., Anal. Chem., 1966, 38, 1905参照）。ペプチドは４３２Ａシナジーペプチド合成装置で合成した。ペプチドの構築はＦｍｏｃ化学に基づいたものであり（Carpino e t al., J. Org. Chem., 1972, 37, 3404 ）、アミド化Ｃ末端樹脂を原料として用いた。ペプチドの構築が終了したら、活性エステルを発生させてペプチドと反応させ、アセチル化Ｎ末端を形成した。
【０１６２】
標準的なＴＦＡ開裂法（Ｆｍｏｃ適合性）を行い、生成物を逆相高速液体クロマトグラフィー（ＲＰ−ＨＰＬＣ）を用いて精製した（例えばMant, C. T. and Hodges, R. S. eds, 1991, "High-Perfomance Liquid Chromatogr aphy of Peptides and Proteins: Separation, Analysis and Confirmation," CRC Press, Boca Raton, Florida参照）。２種類の移動相は０．１％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）／９９％Ｈ2Ｏと０ｐ１％ＴＦＡ／６０％ＣＨ3ＣＮ／３９．９％Ｈ2Ｏであった。固定相は分取用Ｃ８ブラウンリー（Brownlee）カラムであった。最終生成物について質量分析を行い、同定を行うとともにいずれのペプチドも９５％を超える純度のものであることを確認した。
【０１６３】
ヘキサペプチドまたはトリペプチド存在下でのＦｃｇＲＩＩａ結合の分析
バキュロウィルス由来ＦｃｇＲＩＩａとペプチド（トリペプチド：ＧＫＳ、ヘキサペプチド：ＦＱＮＧＫＳ）との間の相互作用の分析を、Ｈｅｐｅｓ緩衝生理食塩水［ＨＢＳ：１０ｍＭＨｅｐｅｓ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、３．４ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．００５％サーファクタントＰ２０（Pharmacia ）］中ＥＣ２２でバイアコア（BIAcore ）２０００バイオセンサー（Pharmacia Biotech, Uppsala,  Sweden）を用いて調べた。モノマーのヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ３およびＩｇＥ（５０ｍｇ／ｍＬ）をアミンカップリングプロトコール（BIAcore, Uppsala, Sweden）を用いて、ＣＭ−５センサーチップ（BIAcore, Uppsala, Sweden）のカルボキシメチル化デキストラン表面に共有結合的にカップリングした。Ｉｇが結合していないチャネルをそのカップリングプロトコールを用いて化学的に処理した。一定濃度（５０ｍｇ／ｍＬ、５０％結合濃度）のＦｃｇＲＩＩａを広範囲の濃度のペプチド（図１０および１１参照）と２２ＥＣで１時間にわたって混合してから、混合物を２０ｍＬ／分で１分間にわたりセンサーチップ表面に注入し、次に３分間の解離期を設けた。濃度依存性測定終了後、全ての表面を５０ｍＭジエチルアミン（約ｐＨ１１．５）、１Ｍ  ＮａＣｌで再生した。各濃度のペプチドについて測定した総応答を求め、ペプチド濃度に対してプロットした。ＩｇＧ１またはＩｇＧ３への結合から非特異的結合応答（ＩｇＥチャネル）を引いた。
【０１６４】
結果
表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）の感受性を用いて、ヘキサペプチド（ＦＱＮＧＫＳ）またはトリペプチド（ＧＫＳ）存在下での可溶性ＦｃｇＲＩＩａのＩｇＧ１およびＩｇＧ３への結合を調べた。ヘキサペプチド存在下では、可溶性ＦｃｇＲＩＩａの固定化ＩｇＧ１への結合は４倍促進され、ＩｇＧ３との相互作用については１．６倍促進された（図１０）。しかしながらトリペプチド存在下での可溶性ＦｃｇＲＩＩａとＩｇＧ１またはＩｇＧ３との相互作用は、同様のペプチド濃度範囲（０〜４ｍｇ／ｍＬ、図１１）にわたって阻害された。
【０１６５】
実験２５
本実験は本発明の化合物の一部の血小板凝集阻害活性を示すものである。この方法では、血小板とＨＡＧＧの混合物への化合物の添加を行う。いずれかの理論に拘束されるものではないが、この手順によって、化合物が血小板凝集物形成を阻害する能力ならびに化合物添加に先だって形成されている血小板凝集物を分解する能力を示すものと考えられている。
【０１６６】
血小板は１種類のガンマ受容体ＦｃｇＲＩＩａを発現する。ＦｃｇＲＩＩａの架橋後に血小板は、各種生化学的変性および細胞変性を受けて、最終的に凝集する。化合物が血小板活性化を阻害する能力を、特異的に血小板凝集を測定するアッセイを用いて測定した。
【０１６７】
材料および方法
血小板を次のように単離した。クエン酸を加えた採取瓶に新鮮な全血３０ｍＬを採取し、１０００ｒｐｍで１０分間遠心した。血小板豊富な血漿を分離し、４本の管中で５分間にわたって２０００ｒｐｍで遠心した。上清を除去し、血小板を管当たりタイロード緩衝液（１３７ｍＭ  ＮａＣｌ、２．７ｍＭ  ＫＣｌ、０．３６ｍＭ  ＮａＨ2ＰＯ4、０．１％ブドウ糖、３０ｍＭクエン酸ナトリウム、１．０ｍＭ  ＭｇＣｌ2・６Ｈ2Ｏ、ｐＨ６．５）２ｍＬに緩やかに再懸濁し、２０００ｒｐｍで５分間遠心した。上清を再度除去し、血小板を管当たりＨｅｐｅｓ含有タイロード緩衝液（１３７ｍＭ  ＮａＣｌ、２．７ｍＭ  ＫＣｌ、０．３６ｍＭ  ＮａＨ2ＰＯ4、０．１％ブドウ糖、５ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ、２ｍＭ  ＣａＣｌ2、１．０ｍＭ  ＭｇＣｌ2・６Ｈ2Ｏ、ｐＨ７．３５）０．５ｍＬに再懸濁した。血小板カウントを血液分析装置（Coulter ）を用いて測定し、Ｈｅｐｅｓ含有タイロード緩衝液を用いて濃度を血小板約１００×１０5個／ｍＬに調節した。
【０１６８】
各凝集実験において、Ｆｃ受容体作働薬、熱凝集ガンマグロブリン（「ＨＡＧＧ」、２００ｍｇ／ｍＬ）またはコラーゲン（２ｍｇ／ｍＬ）の５０ｍＬ混合物をリン酸緩衝生理食塩水（「ＰＢＳ」：３．５ｍＭ  ＮａＨ2ＰＯ4、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ）５０ｍＬまたはＢＲＩ化合物（ＰＢＳ中５ｍｇ／ｍＬ）とともに室温で６０分間インキュベートした。次に、２槽血小板凝集計を用いて３７℃で以下に記載のようにアッセイを行った。ガラス製キュベットをホルダーに入れ、３７℃まで予備加熱し、血小板懸濁液４００ｍＬを加えた。基底線が安定した後、ＨＡＧＧ：ＰＢＳ、ＨＡＧＧ：ＢＲＩ化合物またはコラーゲン：ＰＢＳ、コラーゲン：ＢＲＩ化合物１００ｍＬを血小板懸濁液に加えた。血小板のその後の凝集を１５分間にわたってあるいは凝集が完了するまでモニタリングした。凝集曲線の勾配を測定することで、凝集速度を求めた。
【０１６９】
結果
化合物（ＢＲＩ６８５５、ＢＲＩ６８０３、ＢＲＩ６８１３、ＢＲＩ６８６４、ＢＲＩ６８５６、ＢＲＩ６８６８、ＢＲＩ７００２）がＨＡＧＧ誘発ＦｃｇＲＩＩａ依存性凝集を阻害する能力を調べた。化合物ＢＲＩ６８５５、ＢＲＩ６８０３、ＢＲＩ６８１３、ＢＲＩ６８６４およびＢＲＩ６８５６存在下では、経時的な（ｘ）光透過増加比（ｙ）として測定される血小板凝集率（例えば図１２および１３参照）は、ＦｃｇＲＩＩａ作働薬、熱凝集ガンマグロブリン（１００％）を用いた場合に得られた率と比較して低くなった（表１参照）。化合物ＢＲＩ６８６８およびＢＲＩ７００２は血小板活性化率を有意に阻害するようには思われなかった（表１）。化合物ＢＲＩ６８５５およびＢＲＩ６８０３は血小板凝集を誘発したが、コラーゲン誘発血小板凝集の有意な阻害は行わなかった。これは、ＢＲＩ６８５５およびＢＲＩ６８０３の活性がＨＡＧＧに対して特異的であることを示している。
【０１７０】
【表１】
2002524504.tif 000060
１００％はＨＡＧＧを用いて血小板凝集について得られる曲線の値である。
留意すべき点として、いずれの実験においても化合物の効果はＨＡＧＧ誘発凝集と同時に比較した。
【０１７１】
ＮＴ＝試験を行わなかった。
実験２６
本実験は、本発明の化合物の一部の血小板凝集阻害活性を示すものである。この方法では、血小板および化合物の混合物にＨＡＧＧを加える。いずれかの理論に拘束されるものではないが、実験２５とは異なり、この方法は化合物が血小板凝集物形成を阻害する能力のみを示すと考えられている。
【０１７２】
材料および方法
実験２５の実験手順を用いて、血小板を単離し、血小板カウントを求めた。
実験２５とは異なり、ＰＢＳまたはＢＲＩ化合物５０ｍＬを血小板懸濁液に加えることで血小板凝集を行った。約１分後、作働薬（ＨＡＧＧ、コラーゲンまたはＡＤＰ）を血小板懸濁液に加えた。その後の血小板凝集を１０〜１５分間または凝集が完了するまでモニタリングした。凝集曲線の勾配を測定することで凝集率を求めた。
【０１７３】
結果
化合物ＢＲＩ６７２８がＨＡＧＧ誘発ＦｃｇＲＩＩａ依存性凝集を阻害する能力を調べた。力価測定量の化合物ＢＲＩ６７２８存在下では、経時的な（ｘ）光透過増加比（ｙ）として測定される血小板凝集率（例えば図４参照）は、ＦｃｇＲＩＩａ作働薬、熱凝集ガンマグロブリン（１００％）を用いた場合に得られた率と比較して低くなった（図１４参照）。他の化合物を用いた血小板凝集の結果を表２に示してある。
【０１７４】
【表２】
2002524504.tif 000061
１００％はＰＢＳを用いて血小板凝集量である。
ＮＴ＝試験を行わなかった。
当業者であれば、本発明の好ましい実施態様に対して多くの変更および修正を行うことができ、そのような変更および修正は本発明の精神を逸脱しない限りにおいて行うことができることは明らかであろう。従って、添付の特許請求の範囲は、本発明の精神および範囲に含まれるそのような均等な変更全てを含むものである。
【図面の簡単な説明】
【図１】ＦｃｇＲＩＩａ受容体上の結合部位の模式図。
【図２】対象とする蛋白残基のある一方の面を示した、溝の模式的側面図。
【図３】特定のリガンドを本発明の化合物の設計に関連づける方法を示す図。
【図４】ＦｃｇＩＩａ受容体結合部位におけるアミノ酸と特定の調節剤との間の各種水素結合を示す図。
【図５Ａ】図６〜９に示したＦｃ受容体調節活性に相当するものを含むＦｃ受容体調節化合物の一部を示す図。
【図５Ｂ】図６〜９に示したＦｃ受容体調節活性に相当するものを含むＦｃ受容体調節化合物の一部を示す図。
【図６】図５Ａおよび５Ｂにおける化合物の一部によるヒトＩｇＧ１へのＦｃｇＲＩＩａ結合の調節活性を示す図。
【図７】図５Ａおよび５Ｂにおける化合物の一部によるヒトＩｇＧ３へのＦｃｇＲＩＩａ結合の調節活性を示す図。
【図８】図５Ａおよび５Ｂにおける化合物の一部によるヒトＩｇＧ１へのＦｃｇＲＩＩａ結合の調節活性を示す図。
【図９】図５Ａおよび５Ｂにおける化合物の一部によるヒトＩｇＧ３へのＦｃｇＲＩＩａ結合の調節活性を示す図。
【図１０】ヘキサペプチド存在下でのＩｇＧ１およびＩｇＧ３へのｓＦｃｇＲＩＩ結合の促進を示す図。
【図１１】トリペプチド存在下でのＩｇＧ１およびＩｇＧ３へのｓＦｃｇＲＩＩ結合の阻害を示す図。
【図１２】作働薬のみ存在下での経時的光透過増加をプロットしたグラフ。
【図１３】作働薬およびＢＲＩ６８５５化合物存在下での経時的光透過増加をプロットしたグラフ。
【図１４】ＢＲＩ６７２８化合物の各種濃度での血小板凝集％をプロットしたグラフ。