【手続補正書】
【提出日】平成16年11月29日(2004.11.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
微生物感染を予防または治療する薬剤の調製における、ペプチドの抗菌活性に関連した疎水性閾値を有するコア配列を含む、非両親媒性ペプチドの使用。
【請求項２】
疎水性の値が高速液体クロマトグラフィー（HPLC）におけるコア配列のアミノ酸の保持時間に基づく、請求項1記載の使用。
【請求項３】
疎水性の値がコア配列における各アミノ酸の疎水性の値の算術平均を含む、請求項1記載の使用。
【請求項４】
アミノ酸の疎水性の値が表1に示される、請求項3記載の使用。
【請求項５】
ペプチドが微生物の膜に挿入し得るように疎水性の値が選択される、請求項1〜4のいずれか一項記載の使用。
【請求項６】
疎水性の値が少なくとも0.3、および好ましくは少なくとも0.4である、請求項3〜5のいずれか一項記載の使用。
【請求項７】
コア配列が疎水性アミノ酸Hyの配列であり、この疎水性配列の任意の位置に1つまたは複数のアミノ酸Xが挿入されている、請求項1〜6のいずれか一項記載の使用。
【請求項８】
Hyがアラニン、ロイシン、バリン、イソロイシン、もしくはフェニルアラニン、またはこれらの任意の組み合わせである、請求項7記載の使用。
【請求項９】
コア配列が約19〜約24個のアミノ酸の配列であり、各アミノ酸がアラニン、ロイシン、バリン、イソロイシン、フェニルアラニン、トリプトファン、メチオニン、チロシン、およびシステインからなる群より独立して選択される、請求項1〜8のいずれか一項記載の使用。
【請求項１０】
コア配列が1つのトリプトファン残基を含む、請求項7〜9のいずれか一項記載の使用。
【請求項１１】
コア配列が式
2004534084.tif 000001
を有する配列である、請求項7記載の使用。
【請求項１２】
コア配列が式
2004534084.tif 000002
（式中、Wはペプチドの蛍光検出を可能にする残基である）
を有する配列である、請求項7記載の使用。
【請求項１３】
Xが、アラニンを上回るまたはアラニンを等しい疎水性の値の任意の疎水性アミノ酸である、請求項7〜12のいずれか一項記載の使用。
【請求項１４】
Xが、コア配列の平均の疎水性の値を少なくとも0.3、および好ましくは少なくとも約0.4に維持する任意のアミノ酸である、請求項7〜12のいずれか一項記載の使用。
【請求項１５】
Xがアラニン、トリプトファン、メチオニン、システイン、ロイシン、バリン、イソロイシン、またはフェニルアラニンからなる群より選択される、請求項7〜12のいずれか一項記載の使用。
【請求項１６】
アミノ酸Xの疎水性の値(H)を以下の等式を用いて決定する、請求項14または15記載の使用：
H = (10 × ΔtRX-Lys / ΔtRPhe-Lys) - 5.00
（式中、ΔtRX-LysはXを含むペプチドの保持時間(Rx)とXをリジンで置換したペプチドの保持時間との間の分単位での保持時間の相違であり、かつΔtRPhe-LysはXをフェニルアラニンで置換したペプチドとXをリジンで置換したペプチドとの間の分単位での保持時間の相違である）
【請求項１７】
ペプチドがコア配列の一方の末端に少なくとも1個の塩基性アミノ酸残基を含む、請求項1〜16のいずれか一項記載の使用。
【請求項１８】
ペプチドがコア配列の各末端に少なくとも1個の塩基性アミノ酸残基を含む、請求項1〜16のいずれか一項記載の使用。
【請求項１９】
少なくとも1個の塩基性アミノ酸残基がリジンである、請求項17または18記載の使用。
【請求項２０】
ペプチドが式Bn1-Z-Bn2
（式中、Bは塩基性アミノ酸残基であり、n1およびn2は1〜6であり、Zは少なくとも0.3、好ましくは少なくとも0.4の平均の疎水性の値を有する配列である）
のアミノ酸配列である、請求項1〜19のいずれか一項記載の使用。
【請求項２１】
Bが独立してリジンまたはアルギニンであり、かつZが約19〜約24個のアミノ酸の配列であり、各アミノ酸がアラニン、ロイシン、バリン、イソロイシン、フェニルアラニン、トリプトファン、メチオニン、チロシン、およびシステインからなる群より独立して選択される、請求項20記載の使用。
【請求項２２】
ペプチドが式
2004534084.tif 000003
（式中、X残基は任意のアミノ酸である）
を有する、請求項21記載の使用。
【請求項２３】
1つのX残基がWで置換される、請求項22記載の使用。
【請求項２４】
ペプチドが酸型またはアミド型である、請求項1〜23のいずれか一項記載の使用。
【請求項２５】
ペプチドが以下のうちの1つを含む、請求項1〜7のいずれか一項記載の使用：
2004534084.tif 000004
（式中、j)〜m)およびo)〜s)において、Xはアラニンを上回るまたはアラニンと等しい疎水性の値の任意の疎水性アミノ酸である。
【請求項２６】
ペプチドの少なくとも1つのアミノ酸がD-アミノ酸である、請求項1〜25のいずれか一項記載の使用。
【請求項２７】
ペプチドが真核細胞に対する有意な溶血活性を有さない、請求項1〜26のいずれか一項記載の使用。
【請求項２８】
抗菌活性をペプチド抗菌活性アッセイ法における64μM未満の最小発育阻止濃度(MIC)として定義する、請求項1〜27のいずれか一項記載の使用。
【請求項２９】
微生物感染が真菌または酵母感染である、請求項1〜28のいずれか一項記載の使用。
【請求項３０】
微生物感染が細菌感染である、請求項1〜28のいずれか一項記載の使用。
【請求項３１】
細菌感染がグラム陽性菌感染である、請求項30記載の使用。
【請求項３２】
細菌感染がグラム陰性菌感染である、請求項30記載の使用。
【請求項３３】
細菌感染が、大腸菌、枯草菌、緑膿菌、セパシア菌、表皮ブドウ球菌、黄色ブドウ球菌、C.クセロシス、およびE.フェカリスからなる群より選択される細菌による感染である、請求項32記載の使用。
【請求項３４】
経口的、局所的、静脈内、皮下、経鼻的、および吸入からなる群より選択される投与経路によってペプチドを投与する、請求項1〜33のいずれか一項記載の使用。
【請求項３５】
以下のアミノ酸配列のうちの1つを含むペプチド：
2004534084.tif 000005
（式中、b)、d)、e)、およびg)〜m)において、Xはアラニンを上回るまたはアラニンと等しい疎水性の値の任意の疎水性アミノ酸であり、かつペプチドは抗菌活性を有する）
【請求項３６】
抗菌活性を、ペプチド抗菌活性アッセイ法における64μM未満の最小発育阻止濃度(MIC)として定義する、請求項35記載のペプチド。
【請求項３７】
ペプチドがグラム陽性菌感染に対する抗菌活性を有する、請求項35記載のペプチド。
【請求項３８】
ペプチドがグラム陰性菌感染に対する抗菌活性を有する、請求項35記載のペプチド。
【請求項３９】
ペプチドの抗菌活性に関連した疎水性閾値を有するコア配列および薬学的に許容される担体を含む非両親媒性ペプチドを含む、薬学的組成物。
【請求項４０】
請求項35〜38のいずれか一項記載のペプチドを含む、請求項39記載の薬学的組成物。
【請求項４１】
(a) コアペプチド配列を有する非両親媒性ペプチドを提供する段階；および
(b) コア配列の平均の疎水性の値を決定する段階
を含む、抗菌活性を有する可能性のあるペプチドを選択する方法であって、少なくとも0.3の平均の疎水性の値が抗菌活性を有するペプチドを示す方法。
【請求項４２】
抗菌活性が細菌に対するものであり、かつこの活性を64μM未満の細菌に対する最小発育阻止濃度(MIC)と定義する、請求項41記載の方法。