【手続補正書】
【提出日】平成17年6月1日(2005.6.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗体であって、第1VEGF受容体に対して特異的な第1抗原結合部位と、第2VEGF受容体に対して特異的な第2抗原結合部位とを有することを特徴とする、抗体。
【請求項２】
該第1及び第2のVEGF受容体が哺乳動物受容体である、請求項１に記載の抗体。
【請求項３】
該第1及び第2のVEGF受容体がヒト受容体である、請求項１に記載の抗体。
【請求項４】
該第1及び第2のVEGF受容体が、KDR、Flt-1及びFlt-4から成る群から選択される、請求項３に記載の抗体。
【請求項５】
該第1VEGF受容体がKDRであり、該第2VEGF受容体がFlt-1である、請求項３に記載の抗体。
【請求項６】
該第1VEGF受容体がKDRであり、該第1抗原結合部位の相補性決定領域（CRD）のアミノ酸配列が：
CDRH1におけるSEQ ID NO:1；
CDRH2におけるSEQ ID NO:2；
CDRH3におけるSEQ ID NO:3；
CDRL1におけるSEQ ID NO:4；
CDRL2におけるSEQ ID NO:5；及び
CDRL3におけるSEQ ID NO:6
を含む、請求項３に記載の抗体。
【請求項７】
該第1VEGF受容体がKDRであり、該第1抗原結合部位の可変ドメインのアミノ酸配列が：
重鎖可変ドメイン(VH)に対応するSEQ ID NO:7；及び
軽鎖可変ドメイン(VL)に対応するSEQ ID NO:8
を含む、請求項３に記載の抗体。
【請求項８】
該第1VEGF受容体がKDRであり、該第1抗原結合部位の相補性決定領域（CRD）のヌクレオチド配列が：
CDRH1に対応するSEQ ID NO:9；
CDRH2に対応するSEQ ID NO:10；
CDRH3に対応するSEQ ID NO:11；
CDRL1に対応するSEQ ID NO:12；
CDRL2に対応するSEQ ID NO:13；及び
CDRL3に対応するSEQ ID NO:14
を含む、請求項３に記載の抗体。
【請求項９】
該第1VEGF受容体がKDRであり、該第1抗原結合部位の可変ドメインのヌクレオチド配列が：
重鎖可変ドメイン(VH)に対応するSEQ ID NO:15；及び
軽鎖可変ドメイン(VL)に対応するSEQ ID NO:16
を含む、請求項３に記載の抗体。
【請求項１０】
該第1VEGF受容体がKDRであり、該第1抗原結合部位の相補性決定領域（CRD）のアミノ酸配列が：
CDRH1に対応するSEQ ID NO:1；
CDRH2に対応するSEQ ID NO:21；
CDRH3に対応するSEQ ID NO:3；
CDRL1に対応するSEQ ID NO:4；
CDRL2に対応するSEQ ID NO:5；及び
CDRL3に対応するSEQ ID NO:6
を含む、請求項３に記載の抗体。
【請求項１１】
該第1VEGF受容体がKDRであり、該第1抗原結合部位の可変ドメインのアミノ酸配列が：
重鎖可変ドメイン(VH)に対応するSEQ ID NO:22；及び
軽鎖可変ドメイン(VL)に対応するSEQ ID NO:23
を含む、請求項３に記載の抗体。
【請求項１２】
該第1VEGF受容体がKDRであり、該第1抗原結合部位の相補性決定領域（CRD）のヌクレオチド配列が：
CDRH1に対応するSEQ ID NO:9；
CDRH2に対応するSEQ ID NO:24；
CDRH3に対応するSEQ ID NO:11；
CDRL1に対応するSEQ ID NO:12；
CDRL2に対応するSEQ ID NO:13；及び
CDRL3に対応するSEQ ID NO:14
を含む、請求項３に記載の抗体。
【請求項１３】
該第1VEGF受容体がKDRであり、該第1抗原結合部位の可変ドメインのヌクレオチド配列が：
重鎖可変ドメイン(VH)に対応するSEQ ID NO:25；及び
軽鎖可変ドメイン(VL)に対応するSEQ ID NO:26
を含む、請求項３に記載の抗体。
【請求項１４】
該第1VEGF受容体がKDRであり、該第1抗原結合部位がCDRL1、CDRL2、CDRL3、CDRH1、CDRH2及びCDRH3におけるアミノ酸配列セットを含み、該セットが、SEQ ID NO:53,54,55,65,66及び67のセット、SEQ ID NO:56,57,58,65,66及び67のセット、SEQ ID NO:59,60,61,65,66及び67のセット、並びにSEQ ID NO:62,63,64,68,69及び70のセットから成る群から選択される、請求項３に記載の抗体。
【請求項１５】
該第1VEGF受容体がKDRであり、該第1結合部位が、VHドメインとVLドメインとの対を含み、該ドメイン対が、SEQ ID NO:72及び74、SEQ ID NO:76及び78、SEQ ID NO:76及び81、並びにSEQ ID NO:83及び85から成る群から選択される、請求項３に記載の抗体。
【請求項１６】
該第1VEGF受容体がKDRであり、該第1抗原結合部位が、それぞれSEQ ID NO:65,66,及び67によって与えられたアミノ酸配列CDRH1、CDRH2及びCDRH3のセット、並びに、SEQ ID NO:106,107及び108のセットと、SEQ ID NO:109,110及び111のセットと、SEQ ID NO:112,113及び114のセットと、SEQ ID NO:115,116及び117のセットと、SEQ ID NO:118,119及び120のセットと、SEQ ID NO:121,122及び123のセットと、SEQ ID NO:124,125及び126のセットと、SEQ ID NO:127,128及び129のセットと、SEQ ID NO:130,131及び132のセットと、SEQ ID NO:133,134及び135のセットとから成る群から選択されたCDRL1、CDRL2、CDRL3におけるアミノ酸配列セットを含む、請求項３に記載の抗体。
【請求項１７】
該第1VEGF受容体がKDRであり、該第1結合ドメインのVHドメインがSEQ ID NO:76を含み、該第1結合ドメインのVLドメインが、SEQ ID NO:87、SEQ ID NO:89、SEQ ID NO:91、SEQ ID NO:93、SEQ ID NO:95、SEQ ID NO:97、SEQ ID NO:99、SEQ ID NO:101、SEQ ID NO:103及びSEQ ID NO:105から成る群から選択された配列を含む、請求項３に記載の抗体。
【請求項１８】
該第2VEGF受容体がFlt-1であり、該第2抗原結合部位がMab 6.12(ATCC No. PTA-3344)の重鎖及び軽鎖可変ドメインを含む、請求項６から１７までのいずれか１項に記載の抗体。
【請求項１９】
該第1VEGF受容体がFlt-1であり、該第1抗原結合部位の相補性決定領域(CDR)のアミノ酸配列が：
CDRH1におけるSEQ ID NO:35；
CDRH2におけるSEQ ID NO:36；
CDRH3におけるSEQ ID NO:37；
CDRL1におけるSEQ ID NO:38；
CDRL2におけるSEQ ID NO:39；及び
CDRL3におけるSEQ ID NO:40
を含む、請求項３に記載の抗体。
【請求項２０】
該第1VEGF受容体がFlt-1であり、該第1抗原結合部位の可変ドメインのアミノ酸配列が：
重鎖可変ドメイン(VH)に対応するSEQ ID NO:41；及び
軽鎖可変ドメイン(VL)に対応するSEQ ID NO:42
を含む、請求項３に記載の抗体。
【請求項２１】
該第1VEGF受容体がFlt-1であり、該第1抗原結合部位の相補性決定領域（CRD）のヌクレオチド配列が：
CDRH1に対応するSEQ ID NO:43；
CDRH2に対応するSEQ ID NO:44；
CDRH3に対応するSEQ ID NO:45；
CDRL1に対応するSEQ ID NO:46；
CDRL2に対応するSEQ ID NO:47；及び
CDRL3に対応するSEQ ID NO:48
を含む、請求項３に記載の抗体。
【請求項２２】
該第1VEGF受容体がFlt-1であり、該第1抗原結合部位の可変領域のヌクレオチド配列が：
重鎖可変ドメイン(VH)に対応するSEQ ID NO:49；及び
軽鎖可変ドメイン(VL)に対応するSEQ ID NO:50
を含む、請求項３に記載の抗体。
【請求項２３】
該第1VEGF受容体がFlt-1であり、該第1抗原結合部位がMab 6.12(ATCC No. PTA-3344)の重鎖及び軽鎖可変ドメインを含む、請求項３に記載の抗体。
【請求項２４】
第1VEGF受容体の細胞外ドメイン及び第2VEGF受容体の細胞外ドメインに特異的に結合する抗体であって、該第1又は第2VEGF受容体に対する抗体の結合が、前記VEGF受容体の活性化を中和することを特徴とする、抗体。
【請求項２５】
VEGFの結合をブロックする、請求項２４に記載の抗体。
【請求項２６】
受容体ホモ二量化をブロックする、請求項２４に記載の抗体。
【請求項２７】
受容体ヘテロ二量化をブロックする、請求項２４に記載の抗体。
【請求項２８】
該第1及び第2VEGF受容体が、KDR、Flt-1及びFlt-4から成る群から選択される、請求項２４に記載の抗体。
【請求項２９】
該第1VEGR受容体がKDRであり、該第2VEGR受容体がFlt-1である、請求項２４に記載の抗体。
【請求項３０】
抗体であって、第1VEGF受容体の細胞外ドメイン及び第2VEGF受容体の細胞外ドメインに特異的に結合し、腫瘍成長を抑制することを特徴とする、抗体。
【請求項３１】
該第1及び第2VEGF受容体が、KDR、Flt-1及びFlt-4から成る群から選択される、請求項２９に記載の抗体。
【請求項３２】
該第1VEGR受容体がKDRであり、該第2VEGR受容体がFlt-1である、請求項２９に記載の抗体。
【請求項３３】
抗体であって、第1VEGF受容体の細胞外ドメイン及び第2VEGF受容体の細胞外ドメインに特異的に結合し、血管形成を阻害することを特徴とする抗体。
【請求項３４】
該第1及び第2VEGF受容体が、KDR、Flt-1及びFlt-4から成る群から選択される、請求項３２に記載の抗体。
【請求項３５】
該第1VEGR受容体がKDRであり、該第2VEGR受容体がFlt-1である、請求項３２に記載の抗体。
【請求項３６】
第1VEGF受容体の細胞外ドメインに特異的に結合する、第1免疫グロブリン重鎖可変ドメインと第1免疫グロブリン軽鎖可変ドメインとを含む第1抗原結合部位、並びに、第2VEGF受容体の細胞外ドメインに特異的に結合する、第2免疫グロブリン重鎖可変ドメインと第2免疫グロブリン軽鎖可変ドメインとを含む第2抗原結合部位を有する抗体の形成方法であって、
a)  宿主細胞中に
該第2免疫グロブリン軽鎖可変ドメインのN末端に該第1免疫グロブリン重鎖可変ドメインが配置された第1ポリペプチドをコードする組換えDNA構築体と、
該第1免疫グロブリン軽鎖可変ドメインのN末端に該第2免疫グロブリン重鎖可変ドメインが配置された第2ポリペプチドをコードする組換えDNA構築体とを、
該ポリペプチドの発現と該抗体の形成とを可能にするのに十分な時間及び方法で、
同時発現させ；そして
ｂ）  該抗体を回収する
ことを特徴とする、抗体の形成方法。
【請求項３７】
該構築体が同一DNA発現ベクター上にある、請求項３５に記載の方法。
【請求項３８】
該構築体が異なるDNA発現ベクター上にある、請求項３５に記載の方法。
【請求項３９】
該宿主細胞が細菌細胞、酵母細胞又は哺乳動物細胞である、請求項３５に記載の方法。
【請求項４０】
該抗体が該宿主細胞から分泌される、請求項３５に記載の方法。
【請求項４１】
細胞内の第1VEGF受容体及び第2VEGF受容体の活性化を中和する方法であって、該受容体の活性化を中和するのに十分な量の、該第1VEGF受容体に対して特異的な第1抗原結合部位と、該第2VEGF受容体に対して特異的な第2抗原結合部位とを有する抗体で、細胞を処理することを含む、細胞内の第1VEGF受容体及び第2VEGF受容体の活性化を中和する方法。
【請求項４２】
腫瘍成長を抑制する必要のある哺乳動物における腫瘍成長の抑制方法であって、腫瘍成長を抑制するのに有効な量の、第1VEGF受容体に対して特異的な第1抗原結合部位と、第2VEGF受容体に対して特異的な第2抗原結合部位とを有する抗体で、該哺乳動物を治療することを特徴とする、腫瘍成長の低減方法。
【請求項４３】
血管形成を阻害する必要のある哺乳動物における血管形成阻害方法であって、血管形成を阻害するのに有効な量の、第1VEGF受容体に対して特異的な第1抗原結合部位と、第2VEGF受容体に対して特異的な第2抗原結合部位とを有する二価抗体で、該哺乳動物を治療することを特徴とする、血管形成阻害方法。