【手続補正書】
【提出日】平成17年11月25日(2005.11.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
所定の均一な粒度分布を持つ多小胞リポソーム粒子組成物の調製方法であって、
a)第一水相と、少なくとも１種の両親媒性脂質および少なくとも１種の中性脂質を含んでなる揮発性水不混和性溶媒相とを混合することにより第一エマルジョンを得ること、
b)前記第一エマルジョンと、第二水相とを混合し、乳化して、連続水相を含んでなる第二エマルジョンを得ること、
c)揮発性水不混和性溶媒を第二エマルジョンからスパージして、多小胞リポソーム粒子の組成物を形成すること、ここでスパージは異なるガス流量を有する少なくとも２つのステップを含む、および
d)クロスフロー濾過によって多小胞リポソーム粒子組成物を濾過すること
を含んでなる、上記調製方法。
【請求項２】
所定の均一な粒度分布を持つ多小胞リポソーム粒子組成物の調製方法であって、
a)第一水相と、少なくとも１種の両親媒性脂質および少なくとも１種の中性脂質を含んでなる、体積分率約0.33〜約1.6の揮発性水不混和性溶媒相とを混合することにより第一エマルジョンを得ること、
b)前記第一エマルジョンと、体積分率約0.01〜約0.5の第二水相とを混合し、乳化することにより、連続水相を含んでなる第二エマルジョンを得ること、
c)揮発性水不混和性溶媒を第二エマルジョンからスパージして、多小胞リポソーム粒子の組成物を形成すること、および
d)クロスフロー濾過によって多小胞リポソーム粒子組成物を濾過すること
を含んでなる、上記調製方法。
【請求項３】
所定の均一な粒度分布を持つ多小胞リポソーム粒子組成物の調製方法であって、
a)第一水相と、少なくとも１種の両親媒性脂質および少なくとも１種の中性脂質を含んでなる揮発性水不混和性溶媒相とを、少なくとも１つの羽根車を用いて約2,000〜約16,000rpmの速度で混合することにより第一エマルジョンを得ること、
b)前記第一エマルジョンと、第二水相とを混合し、乳化することにより、連続水相を含んでなる第二エマルジョンを得ること、
c)揮発性水不混和性溶媒を第二エマルジョンから除去して、多小胞リポソーム粒子の組成物を形成すること、および
d)クロスフロー濾過によって多小胞リポソーム粒子組成物を濾過すること
を含んでなる、上記調製方法。
【請求項４】
所定の均一な粒度分布を持つ多小胞リポソーム粒子組成物の調製方法であって、
a)第一水相と、少なくとも１種の両親媒性脂質および少なくとも１種の中性脂質を含んでなる揮発性水不混和性溶媒相とを混合することにより第一エマルジョンを得ること、
b)前記第一エマルジョンと第二水相とを静的ミキサーに約100cm/分〜約500cm/分の線速度で通すことにより、連続水相を含んでなる第二エマルジョンを得ること、
c)揮発性水不混和性溶媒を第二エマルジョンから除去して、多小胞リポソーム粒子組成物を形成すること、および
d)クロスフロー濾過によって多小胞リポソーム粒子組成物を濾過すること
を含んでなる、上記調製方法。
【請求項５】
所定の均一な粒度分布を持つ多小胞リポソーム粒子組成物の調製方法であって、
a)第一水相と、少なくとも１種の両親媒性脂質および少なくとも１種の中性脂質を含んでなる、体積分率約0.33〜約1.6の揮発性水不混和性溶媒相とを混合することにより第一エマルジョンを得ること、
b)前記第一エマルジョンと、第二水相とを混合し、乳化して、連続水相を含んでなる体積分率約0.01〜約0.5の第二エマルジョンを得ること、
c)揮発性水不混和性溶媒を第二エマルジョンからスパージして、多小胞リポソーム粒子の組成物を形成すること、ここでスパージは異なるガス流量を有する少なくとも２つのステップを含む、および
d)クロスフロー濾過によって多小胞リポソーム粒子組成物を濾過すること
を含んでなる、上記調製方法。
【請求項６】
所定の均一な粒度分布を持つ多小胞リポソーム粒子組成物の調製方法であって、
a)第一水相と、少なくとも１種の両親媒性脂質および少なくとも１種の中性脂質を含んでなる揮発性水不混和性溶媒相とを、少なくとも１つの羽根車を用いて約2,000〜約16,000rpmの速度で混合することにより第一エマルジョンを得ること、
b)前記第一エマルジョンと、第二水相とを混合し、乳化して、連続水相を含んでなる第二エマルジョンを得ること、
c)揮発性水不混和性溶媒を第二エマルジョンからスパージして、多小胞リポソーム粒子の組成物を形成すること、ここでスパージは異なるガス流量を有する少なくとも２つのステップを含む、および
d)クロスフロー濾過によって多小胞リポソーム粒子組成物を濾過すること
を含んでなる、上記調製方法。
【請求項７】
所定の均一な粒度分布を持つ多小胞リポソーム粒子組成物の調製方法であって、
a)第一水相と、少なくとも１種の両親媒性脂質および少なくとも１種の中性脂質を含んでなる揮発性水不混和性溶媒相とを混合することにより第一エマルジョンを得ること、
b)前記第一エマルジョンと第二水相とを静的ミキサーに約100cm/分〜約500cm/分の線速度で通すことにより、連続水相を含んでなる第二エマルジョンを得ること、
c)揮発性水不混和性溶媒を第二エマルジョンからスパージして、多小胞リポソーム粒子の組成物を形成すること、ここでスパージは異なるガス流量を有する少なくとも２つのステップを含む、および
d)クロスフロー濾過によって多小胞リポソーム粒子組成物を濾過すること
を含んでなる、上記調製方法。
【請求項８】
所定の均一な粒度分布を持つ多小胞リポソーム粒子組成物の調製方法であって、
a)第一水相と、少なくとも１種の両親媒性脂質および少なくとも１種の中性脂質を含んでなる、体積分率約0.33〜約1.6の揮発性水不混和性溶媒相とを、少なくとも１つの羽根車を用いて約2,000〜約16,000rpmの速度で混合することにより第一エマルジョンを得ること、
b)前記第一エマルジョンと、第二水相とを、静的ミキサーに約100cm/分〜約500cm/分の線速度で通すことにより混合し、乳化して、連続水相を含んでなる体積分率約0.01〜約0.5の第二エマルジョンを得ること、
c)揮発性水不混和性溶媒を第二エマルジョンからスパージして、多小胞リポソーム粒子の組成物を形成すること、および
d)クロスフロー濾過によって多小胞リポソーム粒子組成物を濾過して濃度を調節すること
を含んでなる、上記調製方法。
【請求項９】
所定の均一な粒度分布を持つ多小胞リポソーム粒子組成物の調製方法であって、
a)第一水相と、少なくとも１種の両親媒性脂質および少なくとも１種の中性脂質を含んでなる、体積分率約0.33〜約1.6の揮発性水不混和性溶媒相とを、少なくとも１つの羽根車を用いて約2,000〜約16,000rpmの速度で混合することにより第一エマルジョンを得ること、
b)前記第一エマルジョンと、第二水相とを、静的ミキサーに約100cm/分〜約500cm/分の線速度で通すことにより混合し、乳化して、連続水相を含んでなる体積分率約0.01〜約0.5の第二エマルジョンを得ること、
c)揮発性水不混和性溶媒を第二エマルジョンからスパージして、多小胞リポソーム粒子の組成物を形成すること、ここでスパージは異なるガス流量を有する少なくとも２つのステップを含む、および
d)クロスフロー濾過によって多小胞リポソーム粒子組成物を濾過して濃度を調節すること
を含んでなる、上記調製方法。
【請求項１０】
第一のスパージステップの不活性ガス流量が第二のスパージステップのガス流量より小さい、請求項１、５、６、７または９に記載の方法。
【請求項１１】
第一のスパージステップのガス流量が約500Lpm以下である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
第一のスパージステップのガス流量が約375Lpm以下である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
第一のスパージステップの継続時間が約3〜約30分である、請求項１１または１２に記載の方法。
【請求項１４】
第一のスパージステップの継続時間が約17分である、請求項１１または１２に記載の方法。
【請求項１５】
第二のスパージステップのガス流量が少なくとも約700Lpmである、請求項１、５、６、７または９に記載の方法。
【請求項１６】
第二のスパージステップのガス流量が少なくとも約1000Lpmである、請求項１、５、６、７または９に記載の方法。
【請求項１７】
第二のスパージステップの継続時間が約2〜約10分である、請求項１５または１６に記載の方法。
【請求項１８】
第二のスパージステップの継続時間が約5分である、請求項１５または１６に記載の方法。
【請求項１９】
第三のスパージステップのガス流量が約400Lpm以下である、請求項１、５、６、７または９に記載の方法。
【請求項２０】
第三のスパージステップのガス流量が約250Lpm以下である、請求項１、５、６、７または９に記載の方法。
【請求項２１】
第三のスパージステップの継続時間が約2〜約90分である、請求項１９または２０に記載の方法。
【請求項２２】
第三のスパージステップの継続時間が約28分である、請求項１９または２０に記載の方法。
【請求項２３】
第一水相の揮発性水不混和性溶媒相に対する体積比が約0.33〜約1.6である、請求項２、５、８または９に記載の方法。
【請求項２４】
第一エマルジョンの第二水相に対する体積比が約0.01〜約0.5である、請求項２、５、８または９に記載の方法。
【請求項２５】
第一エマルジョンの混合を約5〜約100分間行う、請求項３、６、８または９に記載の方法。
【請求項２６】
混合を約15℃〜約40℃の温度で行う、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
第二エマルジョンの混合を、少なくとも１つの羽根車を用いて約2,000rpm以下の速度で行う、請求項１、２、３、５または６に記載の方法。
【請求項２８】
第二エマルジョンの混合を約1〜約10分間行う、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
混合を約20℃〜約50℃の温度で行う、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
少なくとも１つの混合ステップを、動的ミキサーおよび静的ミキサーからなる群から選択されるミキサー中で行う、請求項１、２、３、５または６に記載の方法。
【請求項３１】
静的ミキサーがKenics(商標名)またはKoch(商標名)からなる群から選択される、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
第一エマルジョンおよび第二水相を、静的ミキサーに約100cm/分〜約500cm/分の線速度で通す、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
少なくとも１種の両親媒性脂質が、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、スフィンゴミエリン、リゾホスファチジルコリン、リゾホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジン酸、カルジオリピン、アシルトリメチルアンモニウムプロパン、ジアシルジメチルアンモニウムプロパン、ステアリルアミン、およびエチルホスファチジルコリンからなる群から選択される、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３４】
少なくとも１種の中性脂質が、グリセロールエステル、グリコールエステル、トコフェロールエステル、ステロールエステル、アルカンおよびスクアレンからなる群から選択される、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３５】
第二水相が少なくとも１種の糖を更に含んでなる、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３６】
第二水相が少なくとも１種のアミノ酸を更に含んでなる、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３７】
濾過が、
a)2〜６倍の濃度増大をもたらす、多小胞リポソーム粒子組成物の第一濃縮、および
b)多小胞リポソーム粒子組成物のpHを約５〜約８にするバッファー交換
を含んでなる、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３８】
第二濃縮ステップを更に含んでなる、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
濾過を中空繊維フィルターにより行う、請求項３７に記載の方法。
【請求項４０】
濾過を約0.1psi〜約7psiの膜間差圧で行う、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
濾過がバックパルス容積および保持物背圧によるバックパルシングを更に含んでなる、請求項３９に記載の方法。
【請求項４２】
バックパルシングが周期的である、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
バックパルシングが約0.5分〜約10分毎に起こる、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
バックパルシングが約1分〜約5分毎に起こる、請求項４２に記載の方法。
【請求項４５】
バックパルス容積が初期濾過容積の約0.01％〜約5％である、請求項４１に記載の方法。
【請求項４６】
バックパルシング容積が初期濾過容積の約0.1％〜約1.0％である、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
濾過を約10psi以下の保持物背圧で行う、請求項４１に記載の方法。
【請求項４８】
多小胞リポソーム粒子組成物の濃度調節を更に含んでなる、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４９】
濃度調節を二次濾過により行う、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
濃度調節を、多小胞リポソーム粒子組成物をデカントすることにより行う、請求項４８に記載の方法。
【請求項５１】
第一水相が生理活性物質を含んでなり、かつ多小胞リポソーム粒子組成物が封入された生理活性物質を含んでなる、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５２】
生理活性物質が、抗アンギーナ薬、抗不整脈薬、喘息鎮静薬、抗生物質、抗糖尿病薬、抗真菌薬、抗ヒスタミン薬、抗高血圧薬、抗寄生虫薬、抗新生物薬、抗腫瘍薬、抗ウイルス薬、強心配糖体、ホルモン、免疫調節剤、モノクロナール抗体、神経伝達物質、核酸、タンパク質、放射線造影剤、放射性核種、鎮静薬、鎮痛薬、ステロイド、トランキライザー、ワクチン、昇圧薬、麻酔薬、ペプチド、プロドラッグおよびこれらの製薬上許容される塩からなる群から選択される、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
生理活性物質が、シタラビン、インスリン、パクリタキセル、5-フルオロウラシル、フロクスウリジン、モルヒネ、ヒドロモルヒネ、デキサメタゾン、メトトレキセート、ブレオマイシン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、IgF-1、ブピバカインおよびアミカシンからなる群から選択される、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
生理活性物質の封入効率が少なくとも約67.8%である、請求項５１に記載の方法。
【請求項５５】
一次濾過前の平均粒子サイズが、一次濾過後の平均粒子サイズの約１ミクロンの範囲内である、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５６】
請求項１〜５５のいずれか１項に記載の方法により製造された生成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８９】
透過物を使用するバックパルスについての製造セットアップの例を図４に示す。一次濾過プロセス中に、一定重量を維持するための手段２、例えば、スケールまたはロードセルの上に配置された保持物容器１中の懸濁液はクロスフローモジュール３を通って再循環される。これらのモジュールは、製造業者が膜の逆加圧の可能性を推奨する場合には任意の形態のものであり得る。再循環は蠕動ポンプ型または回転ローブポンプ等の容積式ポンプ型の保持物ポンプ４を使用して得られる。所望により保持物弁６を調節することにより背圧が保持物戻りライン５で生じる。この操作中の膜間圧力は、圧力Ｐを有する保持物入口７、保持物戻りライン５および透過物ライン８における圧力の読み取り値(P)20、21、22に基いてモニターし得る。バッファー交換溶液は蠕動型またはその他の型のポンプ10を使用して保持容器９から供給される。順方向で透過物を用いる通常の操作中、透過物流量は、流量計11によりモニターされ、調節弁12、例えば、ニードル弁または流れを調節するためのその他の等価な手段を使用して調節される。透過物は、計量装置14、例えば、スケールまたはその他の等価な装置を使用して重量をモニターして廃棄容器13中に回収され得る。逆方向の透過物によるバックパルス中、透過物流は透過物弁15で遮断される。透過物側の不活性ガス弁16が開けられて保持物圧力(P)20、21より大きい圧力でインライン透過物リザーバ17を加圧する。これが透過物を逆方向に流れるように強制する。バックパルス中の流量は不活性ガスリザーバ19から供給された不活性ガスライン18の圧力Ｐにより調節し得る。予め決めた時間の後に、または予め決めた容積のバックパルス溶液が導入されるまで、通常の濾過プロセスが再開される。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９０】
バックパルスのための生理食塩液またはその他の水溶液を使用するためのセットアップは透過物によるバックパルスに使用されたセットアップと同様である（図５）。実際の一次濾過のためのセットアップは図４（項目1-15）と同じである。しかしながら、そのセットアップはバックパルス溶液をクロスフローモジュールに導入する方法において異なる。バックパルス溶液は、不活性ガス供給19からの正圧(P)23下にある容器17Aに貯蔵される。透過物以外の水溶液を使用するバックパルス中、透過物弁15が遮断され、バックパルス弁16Aが開けられる。これがバックパルス溶液を逆方向に流れさせる。予め決めた時間の後、または予め決めた容積のバックパルス溶液が導入されるまで、通常の一次濾過プロセスが再開される。
【手続補正４】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】全図
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図１】
2001522870.tif 000001
【図２】
2001522870.tif 000002
【図３】
2001522870.tif 000003
【図４】
2001522870.tif 000004
【図５】
2001522870.tif 000005
【図６】
2001522870.tif 000006
【図７】
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【図８】
2001522870.tif 000008
【図９】
2001522870.tif 000009
【図１０】
2001522870.tif 000010
【図１１】
2001522870.tif 000011
【図１２】
2001522870.tif 000012
【図１３】
2001522870.tif 000013
【図１４】
2001522870.tif 000014
【図１５】
2001522870.tif 000015
【図１６】
2001522870.tif 000016
【図１７】
2001522870.tif 000017
【図１８】
2001522870.tif 000018
【図１９】
2001522870.tif 000019
【図２０】
2001522870.tif 000020
【図２１】
2001522870.tif 000021
【図２２】
2001522870.tif 000022