【手続補正書】
【提出日】平成17年9月12日(2005.9.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞を光ディスク上で計数する方法であって、
光ディスク上に、血球または血球の断片を含むサンプルをアプライし、
前記光ディスクを、前記細胞を捕捉するための捕捉剤を含む捕捉ゾーン内で前記血球または血球の断片が捕捉されるようにスピンし、
前記細胞の調査データを前記捕捉ゾーンから取得し、
前記調査データ内で評価矩形を画定し、
前記評価矩形内の前記調査データを増強し、そして
前記評価矩形内の細胞を計数するステップ、
を含む方法。
【請求項２】
前記画定するステップは、前記評価矩形のカスタムサイズを選択するステップをさらに含む請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記画定するステップは複数の評価矩形を選択するステップをさらに含む請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記調査データ領域を増強する前記ステップが、
前記調査データに対してバックグラウンド照度均一化を実行し、
前記調査データに対して規格化を実行し、そして
前記調査データをフィルタリングするステップ、
をさらに含む請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記バックグラウンド照度均一化を実行するステップが、
近傍矩形のサイズを選択し、
前記調査データ内の点を選び、
水平走査を実行し、それによって、前記点を中心とする前記近傍矩形内に配置されたすべての隣接点に対する第１スライド平均を計算し、
垂直走査を実行し、それによって、前記点を中心とする前記近傍矩形内に配置されたす
べての隣接点に対する第２スライド平均を計算し、
前記第１スライド平均および第２スライド平均を組み合わせ、それによって、全平均を生成し、
前記全平均と前記点のもとの値との差を求めて該差をバックグラウンド値に加算することにより計算される結果値に、前記点のもとの値を再割当て、そして
前記調査データ内のすべての点について、前記水平走査を実行するステップ、前記垂直走査を実行するステップ、２つの前記平均を組み合わせるステップおよび前記もとの値を再割当てするステップを繰り返すステップ、
をさらに含む請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記バックグラウンド照度均一化を実行するステップは、
前記調査データに対してフーリエ変換を実行し、それによって、周波数領域関数を生成し、
前記周波数領域関数から低波長関数を除去し、
前記周波数領域関数から長波長関数を除去し、そして
前記周波数領域関数に対して逆変換を実行するステップであって、それによって、前記調査データの修正バージョンを求める、逆変換を実行するステップ、
をさらに含む請求項４に記載の方法。
【請求項７】
前記規格化を実行するステップは、
前記調査データ内のすべての点の値の平均および標準偏差を計算し、
前記平均および前記標準偏差を用いて前記調査データ内のすべての点の前記値を規格化し、そして
必要であればいくつかの点の前記値を切り捨てるステップ、
をさらに含む請求項４に記載の方法。
【請求項８】
前記フィルタリングするステップは、
近傍矩形のサイズを選択し、
前記調査データ内の点を選び、
前記点を中心とする前記近傍矩形内に配置されたすべての十分に異なる点を見つけ、
前記十分に異なる点の数が所定のフィルタリング基準より大きい場合に前記点の値を再割当て、そして
前記調査データ内のすべての点について、前記すべての十分に異なる点を見つけるステップおよび前記値を再割当てするステップを繰り返すステップ、
をさらに含む請求項４に記載の方法。
【請求項９】
前記フィルタリングステップの後に前記調査データから細胞計数を妨害しうるコンポーネントを除去し、そして
前記バックグラウンド照明を実行するステップ、前記規格化を実行するステップおよび前記フィルタリングするステップを繰り返すステップ、
をさらに含む請求項４に記載の方法。
【請求項１０】
前記不要なコンポーネントを除去するステップは、
しきい値を選択し、
前記しきい値を用いて前記調査データに対して２値化を実行し、
前記調査データに対して規格化を実行し、
連結コンポーネントを同定し、
前記連結コンポーネントを抽出し、
サイズしきい値を選択し、そして
前記サイズしきい値を満たさないコンポーネントを除去するステップ、
をさらに含む請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記規格化を実行するステップは、複数の侵食および膨張を実行するステップをさらに含む請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記連結コンポーネントを抽出するステップは、
前記調査データのすべての黒点に初期コンポーネント番号を割り当て、
開始点を選び、
走査方向を設定し、
前記調査データのすべての点を走査し、それによって、隣接する黒点のコンポーネント番号に一致するように前記黒点のそれぞれのコンポーネント番号を再割当てし、
所定ルールのセットに従って前記走査方向を変更し、そして
連結黒点の前記コンポーネント番号が同一になるように前記走査するステップおよび前記変更するステップを繰り返すステップ、
をさらに含む請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
前記評価矩形内の細胞を計数する前記ステップは、
前記調査データに対して畳込みを実行し、
前記調査データの複数の局所最大値を探索し、
前記複数の局所最大値から冗長な局所最大値を除去し、
冗長な局所最大値を除去した後、前記複数の局所最大値の残りの最大を細胞の輝中心であると宣言し、そして
前記細胞の輝中心を認識することにより細胞を計数するステップ、
をさらに含む請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記畳込みを実行するステップは円形近傍を定義する指標関数を使用し、該円形近傍は細胞の予想サイズの限界を定める請求項１３に記載の細胞を計数する方法。
【請求項１５】
前記畳込みを実行するステップはガウス指標関数を使用する請求項１３に記載の方法。
【請求項１６】
前記冗長な局所最大値を除去するステップは、
距離しきい値を選択し、そして
前記距離しきい値を使用するステップであって、それによって、局所最大値が冗長であるかどうかを判断するステップ、
をさらに含む請求項１３に記載の方法。
【請求項１７】
統計分析を実行するステップをさらに含み、該ステップは、
計数された細胞に基づいて細胞の分布を取得し、そして
細胞が凝集しているか、または視認性が低い領域内の細胞数を推定するステップ、
を含む請求項１３に記載の方法。
【請求項１８】
高分解能で前記調査データを再サンプリングし、そして
前記畳込みを実行し、前記複数の局所最大値を探索し、前記冗長な局所最大値を除去し、前記複数の局所最大値の残りの最大を細胞の輝中心であると宣言し、そして前記細胞の輝中心を認識することにより細胞を計数するステップを繰り返すステップ、
をさらに含む請求項１３に記載の方法。
【請求項１９】
輝中心により計数された前記細胞を前記調査データから除去し、
暗縁を認識することにより細胞を計数し、
前記輝中心を認識することにより細胞を計数するステップからの合計を、前記暗縁を認
識することにより計数するステップからの合計に加算するステップ、
をさらに含む請求項１３に記載の方法。
【請求項２０】
前記暗縁を認識することにより細胞を計数するステップは、
前記調査データに対して反転を実行し、
複数の畳込みを実行し、
前記複数の畳込みからの結果の和をとり、
局所最大値を見つけ、
最大を細胞の中心であると宣言し、そして
前記細胞の中心を計数するステップ、
をさらに含む請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記複数の畳込みを実行するステップはシフトした円環なしで畳込みを実行する請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記畳込みを実行するステップはガウス指標関数を使用する請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
前記畳込みを実行するステップは平滑化関数を使用する請求項２０に記載の方法。
【請求項２４】
前記評価矩形において示される細胞を計数するステップは、
前記調査データに対して反転を実行し、
複数の畳込みを実行し、
前記複数の畳込みからの結果の和をとり、
局所最大値を見つけ、
最大を細胞の中心であると宣言し、そして
前記細胞の中心を計数するステップ、
をさらに含む請求項１に記載の方法。
【請求項２５】
前記複数の畳込みを実行するステップはシフトした円環なしで畳込みを実行する請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記増強するステップは、
前記調査データに対して規格化を実行し、
前記調査データに対してフィルタリングを実行し、
しきい値数を選択し、
前記調査データが前記しきい値数より大きい値だけ所定バックグラウンド値と異なっているかどうかを判断することにより前記調査データに対して２値化を実行し、
前記調査データに対して規格化を実行し、そして
前記調査データ内の１ピクセル幅境界を抽出し、
前記１ピクセル幅境界により画定される領域を調査データで塗りつぶし、
前記塗りつぶされた領域に畳込みを適用するステップ、
をさらに含む請求項１に記載の方法。
【請求項２７】
前記調査データの画像表現をコンピュータモニタに表示するステップをさらに含む請求項１に記載の方法。
【請求項２８】
前記表示するステップは、
前記調査データに対して高速フーリエ変換を実行し、それによって、周波数領域内の調査データを生成し、
前記周波数領域内のスペクトルの一部を除去し、そして
前記周波数領域内の残りの前記調査データに対して逆変換を実行するステップであって、それによって、表示のために前記調査データを増強するステップ、
をさらに含む請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
調査データを取得するステップは、
１種または数種の捕捉剤を有する１つまたは複数の捕捉ゾーンを含む前記光ディスクの表面上に血液サンプルを用意し、
前記光ディスクを光リーダに装填し、
前記光ディスクを回転させ、
電磁放射の入射ビームを前記捕捉ゾーンの１つに光源から当て、
前記入射ビームが前記捕捉ゾーンで前記ディスクと相互作用した後に形成される電磁放射の結果ビームを検出器で検出し、
検出されたビームをアナログ出力信号に変換し、そして
前記アナログ出力信号を、前記捕捉ゾーンに捕捉された細胞を含むデジタルデータに変換するステップ、
を含む請求項１に記載の方法。
【請求項３０】
前記アナログ出力を前記デジタルデータに変換する前記ステップは、
一定間隔で前記アナログ信号の振幅をサンプリングし、
前記サンプリング振幅を一次元配列に記録し、
前記サンプリングするステップおよび前記記録するステップを用いて複数の一次元配列を作成し、そして
前記複数の一次元配列を組み合わせるステップであって、それによって、前記サンプルのデジタルデータを含む２次元配列を作成するステップ、
をさらに含む請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記光ディスクは、前記捕捉に当てられる光が前記検出器へ反射されるように反射層を備えて構成される請求項２９に記載の方法。
【請求項３２】
前記検出器は下部検出器である請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記光ディスクは、前記捕捉ゾーンに当てられる光が前記光ディスクを透過するように構成され、前記ディスクは前記光源と前記検出器の間にある請求項２９に記載の方法。
【請求項３４】
前記１つまたは複数の捕捉ゾーンは、前記光ディスク内の１つまたは複数のチャンバー内に配置される請求項２９に記載の方法。
【請求項３５】
前記光ディスクは、前記捕捉ゾーンに対応する複数のウィンドウを備える請求項２９に記載の方法。
【請求項３６】
前記評価矩形を選択するステップは、
前記調査データ内で前記複数のウィンドウの１つを見つけ、そして
前記ウィンドウ内で標準サイズの評価矩形をクロッピングするステップ、
をさらに含む請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
前記複数のウィンドウの１つを見つける前記ステップは、
前記調査データに対して圧縮を実行し、
前記調査データに対してしきい値評価を実行し、
前記調査データに対して２値化を実行し、
前記調査データに対して規格化を実行し、
連結コンポーネントを同定し、
前記調査データから連結コンポーネントを抽出し、そして
前記連結コンポーネントからウィンドウに対応するコンポーネントを見つけるステップ、
をさらに含む請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記連結コンポーネントを抽出するステップは、
前記調査データのすべての黒点に初期コンポーネント番号を割り当て、
開始点を選び、
走査方向を設定し、
前記調査データのすべての点を走査し、それによって、隣接する黒点のコンポーネント番号に一致するように前記黒点のそれぞれのコンポーネント番号を再割当てし、
所定ルールのセットに従って前記走査方向を変更し、そして
連結黒点の前記コンポーネント番号が同一になるように前記走査するステップおよび前記変更するステップを繰り返すステップ、
をさらに含む請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記光ディスクの表面は前記捕捉ゾーンの位置をマーキングするダークスポットを含む請求項２９に記載の方法。
【請求項４０】
前記評価矩形を画定するステップは、
前記調査データ内で前記ダークスポットの１つを見つけ、そして
前記ダークスポットから所定距離シフトすることにより求められる点を中心とする標準サイズの評価矩形を作成するステップ、
をさらに含む請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
前記ダークスポットの１つを見つける前記ステップは、
前記調査データに対して圧縮を実行し、
前記調査データに対してしきい値評価を実行し、
前記調査データに対して２値化を実行し、
前記調査データに対して規格化を実行し、
前記調査データから連結コンポーネントを抽出し、そして
前記連結コンポーネントからダークスポットに対応するコンポーネントを見つけるステップ、
をさらに含む請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
前記連結コンポーネントを抽出するステップは、
前記調査データのすべての黒点に初期コンポーネント番号を割り当て、
開始点を選び、
走査方向を設定し、
前記調査データのすべての点を走査し、それによって、隣接する黒点のコンポーネント番号に一致するように前記黒点のそれぞれのコンポーネント番号を再割当てし、
所定ルールのセットに従って前記走査方向を変更し、そして
連結黒点の前記コンポーネント番号が同一になるように前記走査するステップおよび前記変更するステップを繰り返すステップ、
をさらに含む請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記ダークスポットの１つを見つける前記ステップは、位置情報を読み出すステップをさらに含む請求項４０に記載の方法。
【請求項４４】
前記光ディスクは、前記捕捉ゾーンを位置特定するためのコンピュータ可読位置情報を含む請求項２９に記載の方法。
【請求項４５】
コンピュータモニタ上に前記ウィンドウの画像を表示するステップをさらに含む請求項３５に記載の方法。
【請求項４６】
前記ウィンドウの前記画像を表示する前記ステップは、
前記画像が歪んでいるかどうかを判断し、
歪みの方向を求め、そして
前記画像の歪みを補正するステップ、
をさらに含む請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
細胞の前記サンプルの調査データを取得する前記ステップは、アーカイブからサンプルの事前に格納されている調査データを取り出すことを含む請求項１に記載の方法。
【請求項４８】
前記アーカイブは、患者の特徴に従って前記格納されている調査データを登録する請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
前記サンプルの事前に格納されている調査データを取り出すステップは、患者の前記特徴から選択される複数の基準に適合するサンプルを選択するステップをさらに含み、それによって、母集団健康動向研究が行われる請求項４８に記載の細胞を計数する方法。
【請求項５０】
前記細胞を計数するステップからの結果を出力するステップをさらに含む請求項１に記載の方法。
【請求項５１】
前記細胞は白血球である請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
前記結果はＣＤ４＋細胞およびＣＤ８＋細胞の計数、ならびにＣＤ４＋細胞数のＣＤ８＋細胞数に対する比を含む請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
前記結果は、ＣＤ３＋細胞およびＣＤ４５＋細胞の計数をさらに含む請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
前記細胞を計数するステップは、
泡トラックについて細胞の分布を分析し、
最小のしきい値に満たない局所細胞密度を有する領域を無視し、そして
細胞数を再計算するステップ、
をさらに含む請求項１に記載の方法。
【請求項５５】
細胞を光ディスク上で計数する方法であって、
フローチャネルにある光ディスクの捕捉ゾーンから、細胞を含む調査データを取得し、
前記調査データ内で評価矩形を画定し、
前記評価矩形内の前記調査データを増強し、そして
前記評価矩形内の細胞を計数するステップ、
を含む方法。