【手続補正書】
【提出日】平成17年9月29日(2005.9.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
特定の細胞タイプ、特定の組織又は誘発性プロモーターの制御下に置かれる形質導入遺伝子を含むことを特徴とするレンチウイルス性ベクター。
【請求項２】
特定の細胞タイプが、成熟した血液細胞、好中球、単球、顆粒球、ニューロン、肺細胞、筋肉細胞、肝細胞、膵臓細胞、内皮細胞、心臓細胞、皮膚細胞、骨髄間質細胞、及び眼球細胞の群から選択されることを特徴とする請求項１記載のベクター。
【請求項３】
形質導入遺伝子の転写が単球及び／又は顆粒球に対して概して特定的であることを特徴とする請求項２記載のベクター。
【請求項４】
さらに、発現カセットの上流に配置される中央ポリプリン・トラクト（cPPT）を含み、好ましくは前記cPPTが配列識別番号１のヌクレオチド配列を含み、より好ましくはさらに前記cPPTの上流及び／又は下流に配置された複数の独特なクローニング・サイトを含んでいることを特徴とする請求項１記載のベクター。
【請求項５】
さらに、自己不活性化ベクター（SIN）と定義され、好ましくはLTR領域が3' LTRのU3領域の欠失によって転写的にほぼ不活性化されており、より好ましくは欠失がU3-R領域境界に対して位置-418から位置-18のヌクレオチドの欠失であることを特徴とする請求項１記載のベクター。
【請求項６】
プロモータが、gp91-フォックス・プロモータ、gp47-フォックス・プロモータ、CD11bプロモータ、β-グロビン・プロモータ、MHCクラスIIプロモータ、クロッティング・ファクターIXプロモータ、インシュリン・プロモータ、PDXIプロモータ、CD4プロモータ、そしてCD2 プロモータであることを特徴とする請求項１記載のベクター。
【請求項７】
さらに、少なくとも１つのエンハンサ配列を含んでおり、好ましくは、エンハンサ配列が配列識別番号２、配列識別番号３、配列識別番号４、配列識別番号５、配列識別番号６、及び配列識別番号７の群から選択されることを特徴とする請求項１記載のベクター。
【請求項８】
さらに、cPPTを含んでいて、好ましくは、少なくとも１つのエンハンサ配列がcPPTの上流及び／又は下流に配置されていることを特徴とする請求項１記載のベクター。
【請求項９】
プロモータが、約10から約200の範囲、好ましくは約40から約200の範囲、より好ましくは約150から約200の範囲の信号対ノイズ比で形質導入遺伝子の発現を促進することができることを特徴とする請求項１記載のベクター。
【請求項１０】
プロモータが、転写アクチベータに反応して形質導入遺伝子の発現を促進することができ、前記転写アクチベータが好ましくはINF-ガンマであることを特徴とする請求項１記載のベクター。
【請求項１１】
形質導入遺伝子が、gp91-フォックス、gp47-フォックス、エリスロポエチン（赤血球生成促進因子）、インターロイキン、コロニー刺激性因子、インテグリンαIIbβ、多剤耐性遺伝子、アンチウイルス遺伝子、血液凝固因子VIIIをコードする遺伝子、血液凝固因子IXをコードする遺伝子、T細胞抗原レセプタ、B細胞抗原レセプタ、単鎖抗体（ScFv）、TNF、ガンマインターフェロン、CTLA4 、B7、メラナ、MAGE、マーカー遺伝子、発光酵素あるいはGFPであることを特徴とする請求項１記載のベクター。
【請求項１２】
さらに、形質導入遺伝子の発現を促進するように配置された転写後規制配列を含んでおり、好ましくは、イントロンがベクター・ゲノム・トランスクリプト又は転写後規制要素とは反対の向きに配置されているか、好ましくは、ウッドチャック肝炎ウイルス転写後規制要素（WPRE）又はB型肝炎ウイルス転写後規制要素(HPRE)であることを特徴とする請求項１記載のベクター。
【請求項１３】
(a) ヒト細胞内の形質導入遺伝子の検出可能な転写を促進する活性を有するプロモータの制御下に置かれる形質導入遺伝子を含む発現カセットと、そして
(b) 上記発現カセットの上流に配置される中央ポリプリン・トラクト（cPPT）と
を含有している遺伝子組み換え体レンチウイルス性ベクター。
【請求項１４】
ベクターが細胞の約20％から約80％に形質導入することができる請求項１３記載のベクター。
【請求項１５】
ベクターが細胞の約60％から約80％に形質導入することができる請求項１３記載のベクター。
【請求項１６】
さらに、cPPTの上流又は下流に配置された複数の独特なクローニング・サイトを含んでいることを特徴とする請求項１３記載のベクター。
【請求項１７】
さらに、自己不活性化ベクター（SIN）と定義されることを特徴とする請求項１３記載のベクター。
【請求項１８】
LTR領域が、3' LTRのU3領域の欠失によって転写的にほぼ不活性化されていることを特徴とする請求項１３記載のベクター。
【請求項１９】
プロモータが、gp91-フォックス・プロモータ、gp47-フォックス・プロモータ、CD11bプロモータ、EF1-αプロモータ、PGKプロモータ、β-グロビン・プロモータ、MHCクラスIIプロモータ、クロッティング・ファクターIXプロモータ、インシュリン・プロモータ、PDXIプロモータ、CD4プロモータ、そしてCD2 プロモータであることを特徴とする請求項１３記載のベクター。
【請求項２０】
さらに、少なくとも１つのエンハンサ配列を含んでいることを特徴とする請求項１３記載のベクター。
【請求項２１】
プロモータが、特定の細胞タイプで形質導入遺伝子の発現を促進することができることを特徴とする請求項１３記載のベクター。
【請求項２２】
特定の細胞タイプが、成熟した血液細胞、好中球、単球、顆粒球、ニューロン、肺細胞、筋肉細胞、肝細胞、膵臓細胞、内皮細胞、心臓細胞、皮膚細胞、骨髄間質細胞、及び眼球細胞の群から選択されることを特徴とする請求項２１記載のベクター。
【請求項２３】
形質導入遺伝子が、gp91-フォックス、gp47-フォックス、エリスロポエチン（赤血球生成促進因子）、インターロイキン、コロニー刺激性因子、インテグリンαIIbβ、多薬剤耐性遺伝子、アンチウイルス遺伝子、血液凝固因子VIIIをコードする遺伝子、血液凝固因子IXをコードする遺伝子、T細胞抗原レセプタ、B細胞抗原レセプタ、単鎖抗体（ScFv）、TNF、ガンマインターフェロン、CTLA4 、B7、メラナ、MAGE、マーカー遺伝子、発光酵素あるいはGFPであることを特徴とする請求項１３記載のベクター。
【請求項２４】
さらに、形質導入遺伝子の発現を促進するように配置された転写後規制配列を含んでいることを特徴とする請求項１３記載のベクター。
【請求項２５】
転写後規制配列が、発現カセット又は転写後規制要素内に配置されたイントロンであることを特徴とする請求項２４記載のベクター。
【請求項２６】
転写後規制要素が、ウッドチャック肝炎ウイルス転写後規制要素（WPRE）又はB型肝炎ウイルス転写後規制要素(HPRE)であることを特徴とする請求項２５記載のベクター。
【請求項２７】
請求項１〜２６記載のいずれか１つのベクターで形質導入されたホスト細胞であって、ホスト細胞が造血血球前駆体細胞であることを特徴とするホスト細胞。
【請求項２８】
造血血球前駆体細胞がヒト造血血球前駆体細胞であることを特徴とする請求項２７記載のホスト細胞。
【請求項２９】
造血血球前駆体細胞がCD34+細胞であることを特徴とする請求項２７記載のホスト細胞。
【請求項３０】
ベクターによってヒト細胞群内のヒト造血血球前駆体細胞の形質導入を起こさせる条件下で、造血幹細胞を含むヒト細胞群を請求項１〜２６記載のいずれか１つのベクターと接触させるステップを含むヒト造血幹細胞を形質導入するためのインビトロでの方法。
【請求項３１】
ヒト造血幹細胞群がCD34+細胞を含んでいることを特徴とする請求項３０記載の方法。
【請求項３２】
細胞群が幹細胞の多分化能をほとんど失わずに細胞増殖を刺激するように処理されることを特徴とする請求項３０記載の方法。
【請求項３３】
プロモータを誘発するアクチベータの使用を通じて形質導入遺伝子の発現が達成される請求項３０記載の方法。
【請求項３４】
ヒト固体又は動物個体に注入するための薬剤の調製への請求項２７記載の細胞の使用又は請求項３０〜３３記載のいずれか１つの方法で形質導入されたヒト造血幹細胞の使用。
【請求項３５】
薬剤がさらにアクチベーターを含有し、該アクチベーターはプロモーターを誘発し、好ましくはアクチベーターが形質導入細胞から別々に投与されることを特徴とする請求項３４記載の使用。