【手続補正書】
【提出日】平成18年6月29日(2006.6.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）グルコサミン−６−燐酸アセチルトランスフェラーゼ活性を増加する少なくとも一つの遺伝子修飾を含む微生物を発酵培地中で培養する工程；および
ｂ）グルコサミン−６−燐酸、グルコサミン、グルコサミン−１−燐酸、Ｎ−アセチルグルコサミン−１−燐酸、Ｎ−アセチルグルコサミン−６−燐酸、およびＮ−アセチルグルコサミンでなる群より選ばれる、該培養工程から製造された生成物を採集する工程
を包含する、発酵によるグルコサミンまたはＮ−アセチルグルコサミンの製造方法。
【請求項２】
ａ）内因性グルコサミン−６−燐酸アセチルトランスフェラーゼとグルコサミン−６−燐酸シンターゼ活性を増加する少なくとも１種の遺伝子修飾とを有する微生物を発酵培地中で培養する工程；および
ｂ）グルコサミン−６−燐酸、グルコサミン、グルコサミン−１−燐酸、Ｎ−アセチルグルコサミン−１−燐酸、Ｎ−アセチルグルコサミン−６−燐酸およびＮ−アセチルグルコサミンからなる群から選ばれる、培養工程から生産された生成物を採集する工程、
を包含する、発酵によるグルコサミンまたはＮ−アセチルグルコサミンの製造方法。
【請求項３】
ａ）グルコサミン−６−燐酸デアミナーゼ活性を増加する少なくとも一つの遺伝子修飾を含む微生物を、発酵培地中で培養する工程；ならびに
ｂ）グルコサミン−６−燐酸、グルコサミン、グルコサミン−１−燐酸、Ｎ−アセチルグルコサミン−１−燐酸、Ｎ−アセチルグルコサミン−６−燐酸およびＮ−アセチルグルコサミンでなる群より選ばれた、培養工程で製造された生成物を採集する工程、
を包含する、発酵によるグルコサミンまたはＮ−アセチルグルコサミンの製造方法。
【請求項４】
ａ）グルコサミン−６−燐酸デアミナーゼ活性を減少する少なくとも一つの遺伝子修飾、およびグルコサミン−１−燐酸Ｎ−アセチルトランスフェラーゼ活性を増加する少なくとも一つの遺伝子修飾を有する微生物を発酵培地中で培養する工程；および
ｂ）グルコサミン−６−燐酸、グルコサミン、グルコサミン−１−燐酸、Ｎ−アセチルグルコサミン−１−燐酸、Ｎ−アセチルグルコサミン−６−燐酸およびＮ−アセチルグルコサミンでなる群より選ばれた、培養工程から生成された生成物を採集する工程
を包含する、発酵によるグルコサミンまたはＮ−アセチルグルコサミンの製造方法。
【請求項５】
グルコサミン−６−燐酸デアミナーゼの活性を減少する遺伝子修飾が、微生物中でグルコサミン−６−燐酸デアミナーゼをコードする内因性遺伝子の部分的または完全な欠失または不活性化を含む請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記微生物によるグルコサミン−６−燐酸デアミナーゼの過剰発現；グルコサミン−６−燐酸デアミナーゼの酵素活性の増加；グルコサミン−６−燐酸デアミナーゼの逆反応の増加によるグルコサミン−６−燐酸生成の増加；グルコサミン−６−燐酸デアミナーゼの正反応の減少によるフラクトース−６−燐酸生成の減少；グルコサミン−６−燐酸デアミナーゼのフラクトース−６−燐酸に対する親和性の増加；グルコサミン−６−燐酸デアミナーゼのグルコサミン−６−燐酸に対する親和性の減少；およびグルコサミン−６−燐酸デアミナーゼのグルコサミン−６−燐酸生成物阻害の減少でなる群より選ばれた結果を、前記遺伝子修飾が提供する、請求項３に記載の方法。
【請求項７】
グルコサミン−６−燐酸デアミナーゼをコードする核酸配列を含む組み換え核酸分子で、微生物が形質転換される、請求項３に記載の方法。
【請求項８】
グルコサミン−６−燐酸デアミナーゼの酵素活性を増加する少なくとも一つの遺伝子修飾を、グルコサミン−６−燐酸デアミナーゼをコードする核酸配列が有する、請求項３に記載の方法。
【請求項９】
配列番号４２のアミノ酸配列と少なくとも約３５％同一であるアミノ酸配列を、グルコサミン−６−燐酸デアミナーゼが有し、ここでグルコサミン−６−燐酸デアミナーゼが酵素活性を有する、請求項３に記載の方法。
【請求項１０】
グルコサミン−６−燐酸デアミナーゼが配列番号４２のアミノ酸配列を有する、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
グルコサミン−６−燐酸Ｎ−アセチルトランスフェラーゼ活性を増加する遺伝子修飾を、微生物がさらに含む、請求項３に記載の方法。
【請求項１２】
前記グルコサミン−６−燐酸アセチルトランスフェラーゼ活性を増加する前記遺伝子修飾が、グルコサミン−６−燐酸アセチルトランスフェラーゼの酵素活性の増加；微生物によるグルコサミン−６−燐酸アセチルトランスフェラーゼの過剰発現；グルコサミン−６−燐酸アセチルトランスフェラーゼのＮ−アセチルグルコサミン−６−燐酸生成物阻害の減少；およびグルコサミン−６−燐酸アセチルトランスフェラーゼのグルコサミン−６−燐酸に対する親和性の増加でなる群から選ばれる結果を提供する、請求項１または１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記グルコサミン−６−燐酸アセチルトランスフェラーゼをコードする核酸配列を含む少なくとも一つの組み換え核酸分子で、前記微生物が形質転換される、請求項１または１１に記載の方法。
【請求項１４】
グルコサミン−６−燐酸アセチルトランスフェラーゼをコードする前記核酸配列が、該グルコサミン−６−燐酸アセチルトランスフェラーゼの酵素活性を増加する少なくとも一つの遺伝子修飾を有する、請求項１または１１に記載の方法。
【請求項１５】
前記グルコサミン−６−燐酸アセチルトランスフェラーゼが、配列番号３０、配列番号３２および配列番号３４からなる群より選ばれるアミノ酸配列と少なくとも約３５％同一であるアミノ酸配列を有し、該グルコサミン−６−燐酸アセチルトランスフェラーゼが酵素活性を有する、請求項１または１１に記載の方法。
【請求項１６】
前記グルコサミン−６−燐酸アセチルトランスフェラーゼが配列番号３０、配列番号３２および配列番号３４でなる群より選ばれるアミノ酸配列を有する、請求項１または１１に記載の方法。
【請求項１７】
前記組み換え核酸分子の発現が誘導可能である、請求項１３に記載の方法。
【請求項１８】
前記組み換え核酸分子の発現がラクトースで誘導可能である、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記微生物がラクトースによる転写誘導の阻害を減少する遺伝子修飾をさらに含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記遺伝子修飾がＬａｃＩレプレッサータンパク質をコードする遺伝子の部分的または完全な欠失または不活性化を含む、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記微生物が、グルコサミン−６−燐酸シンターゼ活性を増加する少なくとも一つの遺伝子修飾をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２２】
グルコサミン−６−燐酸シンターゼ活性を増加する少なくとも一つの遺伝子修飾を、微生物がさらに含む、請求項４に記載の方法。
【請求項２３】
前記微生物がグルコサミン−６−燐酸シンターゼをコードする核酸配列を含む少なくとも一つの組み換え核酸分子で形質転換される、請求項２、２１または２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
前記グルコサミン−６−燐酸シンターゼが、配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１４、配列番号１６、配列番号１８および配列番号２０でなる群より選ばれるアミノ酸配列に対し、少なくとも約３５％同一であるアミノ酸配列を含み、該グルコサミン−６−燐酸シンターゼが酵素活性を有する、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記グルコサミン−６−燐酸シンターゼが、配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１４、配列番号１６、配列番号１８および配列番号２０でなる群より選ばれるアミノ酸配列を含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項２６】
野生型グルコサミン−６−燐酸シンターゼと比較して前記グルコサミン−６−燐酸シンターゼの生成物阻害を減少する修飾を、該グルコサミン−６−燐酸シンターゼが有する、請求項２３に記載の方法。
【請求項２７】
前記グルコサミン−６−燐酸シンターゼが、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、および配列番号１４でなる群より選ばれるアミノ酸配列を含む、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記微生物が、グルコサミン−６−燐酸デアミナーゼ活性を減少する少なくとも一つの遺伝子修飾をさらに含む、請求項１、２または２１に記載の方法。
【請求項２９】
グルコサミン−６−燐酸デアミナーゼ活性を減少する前記遺伝子修飾が、前記微生物中でグルコサミン−６−燐酸デアミナーゼをコードする内因性遺伝子の部分的または完全な欠失または不活性化を含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
グルコサミン−１−燐酸Ｎ−アセチルトランスフェラーゼ活性を増加する少なくとも１つの遺伝子修飾を微生物がさらに含む、請求項３に記載の方法。
【請求項３１】
グルコサミン−１−燐酸Ｎ−アセチルトランスフェラーゼの酵素活性の増加；Ｎ−アセチルグルコサミン−１−燐酸ウリジルトランスフェラーゼ酵素活性の減少；グルコサミン−１−燐酸Ｎ−アセチルトランスフェラーゼ活性を有する酵素の微生物による過剰発現；グルコサミン−１−燐酸に対するグルコサミン−１−燐酸Ｎ−アセチルトランスフェラーゼの親和性の増加；Ｎ−アセチルグルコサミン−１−燐酸に対するグルコサミン−１−燐酸Ｎ−アセチルトランスフェラーゼ／Ｎ−アセチルグルコサミン−１−燐酸ウリジルトランスフェラーゼの親和性の減少；およびグルコサミン−１−燐酸Ｎ−アセチルトランスフェラーゼのＮ−アセチルグルコサミン−１−燐酸生成物阻害の減少でなる群より選ばれる結果を、グルコサミン−１−燐酸Ｎ−アセチルトランスフェラーゼ活性を増加する遺伝子修飾が提供する、請求項４または請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
微生物が二元活性グルコサミン−１−燐酸Ｎ−アセチルトランスフェラーゼ／Ｎ−アセチルグルコサミン−１−燐酸ウリジルトランスフェラーゼを含み、グルコサミン−１−燐酸Ｎ−アセチルトランスフェラーゼ活性が増加する、請求項４または請求項３０に記載の方法。
【請求項３３】
グルコサミン−１−燐酸Ｎ−アセチルトランスフェラーゼ／Ｎ−アセチルグルコサミン−１−燐酸ウリジルトランスフェラーゼをコードする核酸配列、またはグルコサミン−１−燐酸Ｎ−アセチルトランスフェラーゼをコードする核酸配列を含む組み換え核酸分子で、微生物が形質転換される、請求項４または請求項３０に記載の方法。
【請求項３４】
グルコサミン−１−燐酸Ｎ−アセチルトランスフェラーゼ／Ｎ−アセチルグルコサミン−１−燐酸ウリジルトランスフェラーゼ、またはグルコサミン−１−燐酸Ｎ−アセチルトランスフェラーゼをコードする核酸配列が、それぞれグルコサミン−１−燐酸Ｎ−アセチルトランスフェラーゼ／Ｎ−アセチルグルコサミン−１−燐酸ウリジルトランスフェラーゼまたはグルコサミン−１−燐酸Ｎ−アセチルトランスフェラーゼの活性を増加する少なくとも一つの遺伝子修飾を有する、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
配列番号５６のアミノ酸配列と少なくとも３５％同一であるアミノ酸配列を、グルコサミン−１−燐酸Ｎ−アセチルトランスフェラーゼ／Ｎ−アセチルグルコサミン−１−燐酸ウリジルトランスフェラーゼが有し、グルコサミン−１−燐酸Ｎ−アセチルトランスフェラーゼ／Ｎ−アセチルグルコサミン−１−燐酸ウリジルトランスフェラーゼがグルコサミン−１−燐酸Ｎ−アセチルトランスフェラーゼ酵素活性を有する、請求項３３に記載の方法。
【請求項３６】
グルコサミン−１−燐酸Ｎ−アセチルトランスフェラーゼ／Ｎ−アセチルグルコサミン−１−燐酸ウリジルトランスフェラーゼが、配列番号５６のアミノ酸配列を有する、請求項３３に記載の方法。
【請求項３７】
グルコサミン−１−燐酸Ｎ−アセチルトランスフェラーゼ活性を有し、Ｎ−アセチルグルコサミン−１−燐酸ウリジルトランスフェラーゼ活性が減少されたか、またはその活性を持たない短縮型グルコサミン−１−燐酸Ｎ−アセチルトランスフェラーゼ／Ｎ−アセチルグルコサミン−１−燐酸ウリジルトランスフェラーゼを核酸配列がコードする、請求項３３に記載の方法。
【請求項３８】
短縮型グルコサミン−１−燐酸Ｎ−アセチルトランスフェラーゼ／Ｎ−アセチルグルコサミン−１−燐酸ウリジルトランスフェラーゼが配列番号５８のアミノ酸配列と少なくとも約３５％同一であるアミノ酸配列を有し、短縮型グルコサミン−１−燐酸Ｎ−アセチルトランスフェラーゼ／Ｎ−アセチルグルコサミン−１−燐酸ウリジルトランスフェラーゼがグルコサミン−１−燐酸Ｎ−アセチルトランスフェラーゼ酵素活性を有する、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
短縮型グルコサミン−１−燐酸Ｎ−アセチルトランスフェラーゼ／Ｎ−アセチルグルコサミン−１−燐酸ウリジルトランスフェラーゼが、配列番号５８のアミノ酸配列を有する、請求項３７に記載の方法。
【請求項４０】
グルコサミン−６−燐酸シンターゼ活性を減少する遺伝子修飾を、微生物がさらに含む、請求項３、１１または３０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４１】
グルコサミン−６−燐酸シンターゼ活性を減少する遺伝子修飾が、微生物中でグルコサミン−６−燐酸シンターゼをコードする内因性遺伝子の部分的または完全な欠失または不活性化である、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
前記発酵培地中で炭素源を約０．５％〜約５％の濃度に保つ工程を前記培養工程が含む、請求項１、２、３または４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４３】
前記培養工程が酵母抽出物を含む発酵培地中で行われる、請求項１、２、３または４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４４】
グルコース、フラクトース、ペントース糖、ラクトースおよびグルコン酸でなる群から選ばれる炭素源を含む発酵培地中で前記培養工程が行われる、請求項１、２、３または４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４５】
前記ペントース糖がリボース、キシロースおよびアラビノースでなる群より選ばれる、請求項１、２、３または４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４６】
前記培養工程がグルコースおよびリボースを含む発酵培地、ならびにグルコースおよびグルコン酸を含む発酵培地でなる群より選ばれる発酵培地中で行われる、請求項１、２、３または４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４７】
前記培養工程が約２５℃〜約４５℃の温度で行われる、請求項１、２、３または４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４８】
前記培養工程が約ｐＨ４〜約ｐＨ７．５のｐＨで行われる、請求項１、２、３または４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４９】
前記微生物がバクテリア、菌類および酵母でなる群より選ばれる、請求項１、２、３または４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５０】
前記微生物がＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ、ＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓおよびＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓでなる群から選ばれた属由来のバクテリアである、請求項１、２、３または４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５１】
微生物がＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ、Ｃａｎｄｉｄａ、Ｈａｎｓｅｎｕｌａ、Ｐｉｃｈｉａ、Ｋｌｕｖｅｒｏｍｙｃｅｓ、およびＰｈａｆｆｉａでなる群から選ばれた属由来の酵母である、請求項１、２、３または４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５２】
前記微生物がＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ、Ａｂｓｉｄｉａ、Ｒｈｉｚｏｐｕｓ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ、ＮｅｕｒｏｓｐｏｒａおよびＴｒｉｃｈｏｄｅｒｍａでなる群から選ばれた属由来の真菌類である、請求項１、２、３または４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５３】
前記微生物中でホスフォグルコイソメラーゼ活性を増加する遺伝子修飾を、該微生物がさらに含む、請求項１、２、３または４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５４】
前記微生物が配列番号１０５を含む前記ホスフォグルコイソメラーゼをコードする核酸配列を含む組み換え核酸分子で形質転換される、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
前記微生物中でホスフォフラクトキナーゼの部分的または完全な欠失または不活性化を該微生物がさらに含む、請求項１、２、３または４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５６】
前記微生物がグルタミンシンテターゼ活性を増加する遺伝子修飾をさらに含む、請求項１、２、３または４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５７】
配列番号８９を含むグルタミンシンテターゼをコードする核酸配列を含む組み換え核酸分子で前記微生物が形質転換されている、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
グルコース−６−燐酸デヒドロゲナーゼ活性を増加する遺伝子修飾を、前記微生物がさらに含む、請求項１、２、３または４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５９】
配列番号９５を含むグルコース−６−燐酸デヒドロゲナーゼをコードする核酸配列を含む組み換え核酸分子で、前記微生物が形質転換されている、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
前記微生物中でグリコーゲン合成に関与する酵素をコードする遺伝子の部分的または完全な欠失または不活性化を、該微生物がさらに含み、前記遺伝子修飾が該微生物のガラクトース代謝能を阻害しない、請求項１、２、３または４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６１】
グルコサミン−６−燐酸アセチルトランスフェラーゼ活性を増加する少なくとも一つの遺伝子修飾を含む、遺伝子修飾微生物。
【請求項６２】
グルコサミン−６−燐酸シンターゼ活性を増加する少なくとも一つの遺伝子修飾を、微
生物がさらに含む、請求項６１に記載の遺伝子修飾微生物。
【請求項６３】
グルコサミン−６−燐酸デアミナーゼ活性を減少する少なくとも一つの遺伝子修飾を、微生物がさらに含む、請求項６１に記載の遺伝子修飾微生物。
【請求項６４】
グルコサミン−６−燐酸デアミナーゼ活性を増加する少なくとも一つの遺伝子修飾を含む、遺伝子修飾微生物。
【請求項６５】
グルコサミン−６−燐酸シンターゼ活性を減少する遺伝子修飾を、微生物がさらに含む、請求項６４に記載の遺伝子修飾微生物。
【請求項６６】
グルコサミン−６−燐酸Ｎ−アセチルトランスフェラーゼ活性を増加する遺伝子修飾を、微生物がさらに含む、請求項６４に記載の遺伝子修飾微生物。
【請求項６７】
グルコサミン−６−燐酸シンターゼ活性を減少する遺伝子修飾を、微生物がさらに含む、請求項６６に記載の遺伝子修飾微生物。
【請求項６８】
グルコサミン−１−燐酸Ｎ−アセチルトランスフェラーゼ活性を増加する遺伝子修飾を、微生物がさらに含む、請求項６４または請求項６５に記載の遺伝子修飾微生物。
【請求項６９】
グルコサミン−６−燐酸デアミナーゼ活性を減少する少なくとも一つの遺伝子修飾と、グルコサミン−１−燐酸Ｎ−アセチルトランスフェラーゼ活性を増加する少なくとも一つの遺伝子修飾とを含む、遺伝子修飾微生物。
【請求項７０】
グルコサミン−６−燐酸シンターゼ活性を増加する少なくとも一つの遺伝子修飾を、微生物がさらに含む、請求項６９に記載の遺伝子修飾微生物。
【請求項７１】
前記採集工程が、細胞内グルコサミン−６−燐酸、グルコサミン−１−燐酸、Ｎ−アセチルグルコサミン−６−燐酸、Ｎ−アセチルグルコサミン−１−燐酸、Ｎ−アセチルグルコサミンおよびグルコサミンでなる群から選ばれる細胞内生成物を前記微生物から回収する工程、またはグルコサミンおよびＮ−アセチルグルコサミンでなる群より選ばれる細胞外生成物を前記発酵培地から回収する工程を包含する、請求項１、２、３または４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７２】
ａ）グルコサミンおよびＮ−アセチルグルコサミンでなる群より選ばれた生成物を前記発酵培地から精製する工程；
ｂ）グルコサミン−６−燐酸、グルコサミン−１−燐酸、Ｎ−アセチルグルコサミン−６−燐酸およびＮ−アセチルグルコサミン−１−燐酸でなる群より選ばれた生成物を前記微生物から回収する工程；
ｃ）グルコサミン−６−燐酸およびグルコサミン−１−燐酸でなる群より選ばれた生成物を脱燐酸し、グルコサミンを製造する工程；
ｄ）  Ｎ−アセチルグルコサミン−６−燐酸およびＮ−アセチルグルコサミン−１−燐酸でなる群より選ばれた生成物を脱燐酸し、Ｎ−アセチルグルコサミンを製造する工程；ならびに
ｅ）Ｎ−アセチルグルコサミン、Ｎ−アセチルグルコサミン−６−燐酸およびＮ−アセチルグルコサミン−１−燐酸でなる群より選ばれた生成物を処理し、グルコサミン、グルコサミン−６−燐酸およびグルコサミン−１−燐酸でなる群より選ばれたグルコサミン製品を製造する工程、
でなる群から選ばれた工程をさらに包含する、請求項１、２、３または４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７３】
Ｎ−アセチルグルコサミン、Ｎ−アセチルグルコサミン−６−燐酸およびＮ−アセチルグルコサミン−１−燐酸でなる群より選ばれた前記生成物を、酸および加熱条件下または酵素的脱アセチル化で加水分解する工程を工程（ｅ）が含む、請求項７２に記載の方法。
【請求項７４】
Ｎ−アセチルグルコサミンの固体を発酵ブロスから沈殿または結晶化させて、前記発酵法で製造されたＮ−アセチルグルコサミンが回収される、請求項１、２、３または４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７５】
ａ）発酵プロセスの生成物である可溶化Ｎ−アセチルグルコサミンを含む発酵ブロスを得る工程；および
ｂ）発酵ブロスからＮ−アセチルグルコサミンを含む固体を回収する工程、
を包含する、Ｎ−アセチルグルコサミンの製造方法。
【請求項７６】
発酵ブロスから細胞物質を除去する工程をさらに包含する、請求項７５に記載の方法。
【請求項７７】
発酵ブロスを脱色する工程をさらに包含する、請求項７５に記載の方法。
【請求項７８】
発酵ブロスをイオン交換樹脂と接触させる工程をさらに包含する、請求項７５に記載の方法。
【請求項７９】
発酵ブロスからＮ−アセチルグルコサミンを含む固体を結晶化する工程、または発酵ブロスからＮ−アセチルグルコサミンを含む固体を沈殿させる工程を、回収工程が包含する、請求項７５に記載の方法。
【請求項８０】
可溶化Ｎ−アセチルグルコサミンを含む発酵ブロスを濃縮する工程を、回収工程が包含する、請求項７５に記載の方法。
【請求項８１】
濃縮工程が大気圧以下で行われる、請求項８０に記載の方法。
【請求項８２】
濃縮工程が約４０℃〜約７５℃の間の温度で行われる、請求項８０に記載の方法。
【請求項８３】
発酵ブロス中の固形分が少なくとも約３０％固形になる様に濃縮工程が行われる、請求項８０に記載の方法。
【請求項８４】
濃縮工程の後に発酵ブロスを冷却する工程をさらに包含する、請求項８０に記載の方法。
【請求項８５】
発酵ブロスが、約−５℃〜約４５℃の間に冷却される、請求項８４に記載の方法。
【請求項８６】
発酵ブロスにＮ−アセチルグルコサミン結晶を接種する工程をさらに包含する、請求項８５に記載の方法。
【請求項８７】
回収工程がＮ−アセチルグルコサミンを水混和性溶剤と接触させる工程を包含する、請求項７５に記載の方法。
【請求項８８】
回収されたＮ−アセチルグルコサミンを含む固体を乾燥する工程をさらに包含する、請求項７５に記載の方法。
【請求項８９】
Ｎ−アセチルグルコサミンを含む乾燥固体を水混和性溶剤で洗浄する工程をさらに包含する、請求項８８に記載の方法。
【請求項９０】
回収されたＮ−アセチルグルコサミンを含む固体を溶解してＮ−アセチルグルコサミン溶液を形成する工程と、この溶液からＮ−アセチルグルコサミンを含む固体を回収する工程とをさらに包含する、請求項７５に記載の方法。
【請求項９１】
発酵ブロスを濾過してバクテリア内毒素を除去する工程をさらに包含する、請求項７５に記載の方法。
【請求項９２】
ａ）Ｎ−アセチルグルコサミン、Ｎ−アセチルグルコサミン−６−燐酸およびＮ−アセチルグルコサミン−１−燐酸でなる群から選ばれたＮ−アセチルグルコサミン源を得る工程；および
ｂ）工程ａ）のＮ−アセチルグルコサミン源を処理して、Ｎ−アセチルグルコサミン源からグルコサミン、グルコサミン−６−燐酸およびグルコサミン−１−燐酸でなる群から選ばれるグルコサミン製品を製造する工程、
を包含する、Ｎ−アセチルグルコサミン源からのグルコサミンの製造方法。
【請求項９３】
Ｎ−アセチルグルコサミン源が、その源中の乾燥固体の比率として少なくとも約４０％のＮ−アセチルグルコサミンであり、発酵プロセスで製造された、請求項９２に記載の方法。
【請求項９４】
Ｎ−アセチルグルコサミン源が発酵プロセスで製造されたＮ−アセチルグルコサミンである、請求項９２に記載の方法。
【請求項９５】
Ｎ−アセチルグルコサミン源が、水性で低沸点の一級または二級アルコール中に懸濁される、請求項９１に記載の方法。
【請求項９６】
処理工程ｂ）が酸および加熱条件下にＮ−アセチルグルコサミン源を加水分解する工程を包含する、請求項９０に記載の方法。
【請求項９７】
加水分解工程が約６０℃〜約１００℃の温度で行われる、請求項９６に記載の方法。
【請求項９８】
加水分解工程が約１０重量％〜約４０重量％の濃度の塩酸溶液を用いて行われる、請求項９６に記載の方法。
【請求項９９】
ａ）Ｎ−アセチルグルコサミン源を加熱条件下で塩酸溶液または循環加水分解母液とＮ−アセチルグルコサミン源を組み合わせて加水分解し、グルコサミン塩酸塩を含む溶液を製造する工程；
ｂ）工程ａ）の溶液を冷却してグルコサミン塩酸塩を沈殿させる工程；および
ｃ）工程ｂ）から沈殿したグルコサミン塩酸塩を含む固体を取り出す工程、
を包含する、請求項９６に記載の方法。
【請求項１００】
Ｎ−アセチルグルコサミン源を塩酸塩溶液または循環加水分解母液と連続的にブレンドし、Ｎ−アセチルグルコサミン源を溶解溶液として維持し、次いで加熱条件下に無水塩酸を工程ａ）の溶液に加えて加水分解を開始し、Ｎ−アセチルグルコサミンをグルコサミン塩酸塩に変換することで加水分解工程ａ）が行われる、請求項９９に記載の方法。
【請求項１０１】
加水分解母液が工程ｃ）で沈殿したグルコサミン塩酸塩を回収した後に残る加水分解溶液であり、加水分解工程が行われる前、工程中、または工程後に一級または二級アルコールが加水分解溶液に添加される、請求項９９に記載の方法。
【請求項１０２】
回収工程が：
ｉ）沈殿したグルコサミン塩酸塩を含む固体を採集する工程；
ｉｉ）グルコサミン塩酸塩を含む固体を水混和性溶剤で洗浄する工程；および
ｉｉｉ）グルコサミン塩酸塩を含む固体を乾燥する工程、
を包含する、請求項９９に記載の方法。
【請求項１０３】
回収工程が：
ｉ）沈殿したグルコサミン塩酸塩を含む固体を採集する工程；
ｉｉ）工程（ｉ）からの固体を水に溶解して溶液とする工程；
ｉｉｉ）工程（ｉｉ）の溶液のｐＨを約２．５〜４の間に調整する工程；
ｉｖ）工程（ｉｉｉ）の溶液を活性炭と接触させ、グルコサミン塩酸塩を含む固体を脱色する工程；
ｖ）工程（ｉｖ）の溶液から活性炭を除去する工程；および
ｖｉ）グルコサミン塩酸塩を工程（ｖ）の溶液から結晶化する工程、
を包含する、請求項９９に記載の方法。
【請求項１０４】
結晶化工程が約７０℃以下の温度でグルコサミン塩酸塩を濃縮する工程を包含する、請求項１０３に記載の方法。
【請求項１０５】
次の回収プロセスの結晶化工程（ｖｉ）〜（ｉ）後に残留する溶液を循環する工程をさらに包含する、請求項１０３に記載の方法。
【請求項１０６】
結晶化工程（ｖｉ）から次の結晶化工程後に残留する溶液を循環する工程をさらに包含する、請求項１０３に記載の方法。
【請求項１０７】
工程（ｖｉ）からの結晶化グルコサミン塩酸塩を水混和性溶剤で洗浄する工程をさらに包含する、請求項１０３に記載の方法。
【請求項１０８】
洗浄後の結晶化グルコサミン塩酸塩を約７０℃以下の温度で約６時間以下乾燥する工程をさらに包含する、請求項１０７に記載の方法。
【請求項１０９】
Ｎ−アセチルグルコサミン源が、水性で低沸点の一級または二級アルコール中に懸濁され、その方法が、加水分解後、または再使用のために加水分解溶液を循環する前にアルコールで生成した酢酸エステルを除去する工程（ａ）と（ｂ）との間に追加工程を包含する、請求項９９に記載の方法。
【請求項１１０】
蒸留、フラッシングおよび濃縮でなる群から選ばれたプロセスで、大気圧以下で酢酸エステルが除去される、請求項１０９に記載の方法。
【請求項１１１】
工程（ｃ）で回収されたグルコサミン塩酸塩を水混和性溶剤で洗浄する工程を包含する、請求項９９に記載の方法。
【請求項１１２】
処理工程（ｂ）がＮ−アセチルグルコサミン源を脱アセチル化酵素と接触させ、グルコサミン製品を製造する工程を包含する、請求項９２に記載の方法。
【請求項１１３】
結晶化または沈殿によりグルコサミン製品を回収する工程をさらに包含する、請求項１１２に記載の方法。
【請求項１１４】
アルコールの存在下、Ｎ−アセチルグルコサミン源を脱アセチル化酵素と接触させ、アルコールをエステル化する工程を、接触工程が包含する、請求項１１２に記載の方法。
【請求項１１５】
塩をグルコサミン製品と混合し、その混合物をイオン交換媒体と接触させる工程をさらに包含する、請求項１１２に記載の方法。