【手続補正書】
【提出日】平成18年10月2日(2006.10.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−保護プロシアニジン（４，８）−ダイマーを調製する方法であって、酸性粘土の存在下、５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−保護−エピカテキンまたは−カテキンのモノマーに５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−保護−４−アルコキシ−エピカテキンまたは−カテキンのモノマーをカップリングさせる工程を含むことを特徴とする方法。
【請求項２】
前記プロシアニジンダイマーは、エピカテキン−（４β，８）−エピカテキン、エピカテキン−（４β，８）−カテキン、カテキン−（４α，８）−カテキン、カテキン−（４β，８）−カテキン、カテキン−（４α，８）−エピカテキン、およびカテキン−（４β，８）−エピカテキンより成る群から選択されることを特徴とする請求項１記載の方法。
【請求項３】
５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−保護プロシアニジン（４，８）−オリゴマーを調製する方法であって、酸性粘土の存在下、５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−保護−エピカテキンもしくは−カテキンの（４，８）−ダイマーまたはより高次のオリゴマーに５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−保護−４−アルコキシ−エピカテキンもしくは−カテキンのモノマーをカップリングさせる工程を含むことを特徴とする調製法。
【請求項４】
保護基は、保護されているモノマー、ダイマーまたはオリゴマーのＡ環を不活化しない基であり、４−アルコキシ基は、末端水酸基を有するＣ2−Ｃ6アルコキシ基であり、また、酸性粘土はモンモリロン石粘土であることを特徴とする請求項１または２記載の方法。
【請求項５】
前記保護基はベンジル基であり、末端水酸基を有する前記Ｃ2−Ｃ6アルコキシ基は２−ヒドロキシエトキシ基であり、前記モンモリロン石粘土はベントナイト粘土であることを特徴とする請求項４記載の方法。
【請求項６】
前記モノマーは、５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルエピカテキンおよび５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−４−（２−ヒドロキシエトキシ）エピカテキンであり、前記混合物は、５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルエピカテキン−（４β，８）−ダイマーおよび５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルエピカテキン−（４β，８）2−トリマーを含むことを特徴とする請求項１記載の方法。
【請求項７】
前記ダイマーは５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルエピカテキン−（４β，８）−ダイマーであり、前記モノマーは５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−４−（２−ヒドロキシエトキシ）エピカテキンであり、さらに、前記混合物は５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルエピカテキン−（４β，８）2−トリマーおよび−（４β，８）3−テトラマーを含むことを特徴とする請求項３記載の方法。
【請求項８】
保護されたモノマー、および保護されたダイマーもしくはより高次のオリゴマーをカラムクロマトグラフィーによって分離し、さらに、ダイマーまたはオリゴマー上の保護基を水素で置換する工程をさらに含むことを特徴とする請求項１または３記載の方法。
【請求項９】
銀テトラフルオロボレートまたは酸性粘土の存在下、テトラ−Ｏ−保護またはペンタ−Ｏ−保護−（４β，８）−プロシアニジンの混合物を調製する方法であって、テトラ−Ｏ−保護−エピカテキンもしくは−カテキンのモノマー、ならびにペンタ−Ｏ−保護−エピカテキンもしくは−カテキンのモノマーより成る群から選択される保護モノマーに、４−チオ−テトラ−Ｏ−保護−エピカテキンもしくは−カテキンのモノマー、ならびに４−チオ−ペンタ−Ｏ−保護−エピカテキンもしくは−カテキンのモノマーより成る群から選択されるＣ−４チオ活性化保護モノマーを反応させることを含むことを特徴とする方法。
【請求項１０】
テトラ−Ｏ−保護−エピカテキンのモノマーは、５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルエピカテキンもしくは−カテキンであり；ペンタ−Ｏ−保護−エピカテキンもしくは−カテキンのモノマーは、３−Ｏ−アセチル−５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−エピカテキンであり；４−チオ−テトラ−Ｏ−保護−エピカテキンまたは−カテキンのモノマーは、４−ベンジルチオ−または４−２−（ベンゾチアゾリル）チオ−エピカテキンもしくは−カテキンであり；４−チオ−ペンタ−Ｏ−保護−エピカテキンもしくは−カテキンのモノマーは、３−Ｏ−アセチル−４−ベンジルチオ−エピカテキンもしくは−カテキンまたは３−Ｏ−アセチル−４−［（２−ベンゾチアゾリル）チオ］−５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−エピカテキンもしくは−カテキンであることを特徴とする請求項９記載の方法。
【請求項１１】
保護モノマーは３，５，７，３’，４’−ペンタ−Ｏ−ベンジル−エピカテキンであり、活性化保護モノマーは３−Ｏ−アセチル−４−（２−ベンゾチアゾリル）チオ−３，５，７，３’，４’−ペンタ−Ｏ−ベンジル−エピカテキンであることを特徴とする請求項９の方法。
【請求項１２】
逆相高圧液体クロマトグラフィーによって保護オリゴマーを単離し、さらに、アセチルおよび／またはベンジル保護基を除去する工程をさらに含むことを特徴とする請求項９記載の方法。
【請求項１３】
４−［（２−ベンゾチアゾリル）チオ］−５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルエピカテキンまたは４−［（２−ベンゾチアゾリル）チオ］−５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルカテキン。
【請求項１４】
請求項１３の化合物を調製する方法であって、５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−４−（２−ヒドロキシエトキシ）エピカテキンまたは５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−４−（２−ヒドロキシエトキシ）カテキンに、２−メルカプトベンゾチアゾールとトリメチルアルミニウムとから生成した有機アルミニウムチオレートを反応させることを含むことを特徴とする方法。
【請求項１５】
３−Ｏ−アセチル−４−［（２−ベンゾチアゾリル）チオ］−５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルエピカテキンまたは３−Ｏ−アセチル−４−［（２−ベンゾチアゾリル）チオ］−５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルカテキン。
【請求項１６】
請求項１５の化合物を調製する方法であって、５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−４−（２−ヒドロキシエトキシ）エピカテキンまたは５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−４−（２−ヒドロキシエトキシ）カテキンに、２−メルカプトベンゾチアゾールとトリメチルアルミニウムとから生成した有機アルミニウムチオレートを反応させることを含むことを特徴とする方法。
【請求項１７】
プロシアニジン（４，８）ダイマージガレートを調製する方法であって、
（ａ）酸性粘土の存在下、５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−保護−エピカテキンもしくは−カテキンのモノマーに、活性化した５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−保護−４−アルコキシ−エピカテキンもしくは−カテキンのモノマーをカップリングさせ；
（ｂ）カラムクロマトグラフィーにより、その他の保護（４，８）プロシアニジンオリゴマーから、保護された（４，８）プロシアニジンダイマーを分離し；さらに、
（ｃ）ヒドロキシ保護没食子酸または活性化没食子酸を用い、保護された（４，８）プロシアニジンダイマーをエステル化する；
工程を含むことを特徴とする調製法。
【請求項１８】
前記保護されたモノマーは５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−エピカテキンまたは−カテキンであり；前記活性化モノマーは５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−４−（２−ヒドロキシエトキシ）−エピカテキンまたは−カテキンであり；前記酸性粘土はモンモリロン石粘土であり；前記ヒドロキシ保護活性化没食子酸はトリ−Ｏ−ガロイルクロリドであることを特徴とする請求項１７記載の方法。
【請求項１９】
前記プロシアニジンダイマージガレートは、エピカテキン−（４β，８）−エピカテキンジガレート、エピカテキン−（４β，８）−カテキンジガレート、カテキン−（４α，８）−エピカテキンジガレートおよびカテキン−（４β，８）−エピカテキンジガレートより成る群から選択されることを特徴とする請求項１７記載の方法。
【請求項２０】
Ｃ−４−アルコキシ−５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−８−ブロモ−エピカテキンまたは−カテキンを調製する方法であって、５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−エピカテキンまたは−カテキンのＣ−４位にアルコキシ基を導入することによってＣ−４位を活性化し、さらに、Ｃ−８位にブロモ基を導入することによってＣ−８位をブロックする工程を含むことを特徴とする調製法。
【請求項２１】
４−アルコキシ基は２−ヒドロキシエトキシ基であり、活性化工程はブロック工程より先に行い、さらに、ブロック工程は、塩化メチレン中、−40℃においてＮ−ブロモスクシンイミドを用いて行うことを特徴とする請求項２０記載の方法。
【請求項２２】
４−アルコキシ基は２−ヒドロキシエトキシ基であり、ブロック工程は活性化工程より先に行い、さらに、ブロック工程は、塩化メチレン中、−40℃においてＮ−ブロモスクシンイミドを用いて行うことを特徴とする請求項２０記載の方法。
【請求項２３】
細胞周期をG0/G1期に停滞させて癌細胞の増殖を阻害することによって哺乳類の乳癌を治療するための組成物であって、エピカテキン−（４β，８）4−ペンタマーを含有することを特徴とする組成物。