【手続補正書】
【提出日】平成18年6月15日(2006.6.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  ヘテロマーカリウムチャネルのαサブユニットを含むポリペプチドモノマーをコードする、単離された核酸であって、該ポリペプチドモノマーは、以下：
（ｉ）少なくとも１つのさらなるＫｖαサブユニットとともに、電位ゲート制御の特徴を有するヘテロマーカリウムチャネルを形成する能力を有し；
（ｉｉ）Ｋｖ６．２サブユニット会合領域に対して約７０％を超えるアミノ酸配列同一性を有するモノマーサブユニット会合領域を有し；そして
（ｉｉｉ）配列番号１または配列番号１７に対して生成されたポリクローナル抗体に特異的に結合する、
単離された核酸。
【請求項２】  前記核酸がヒトＫｖ６．２をコードする、請求項１に記載の単離された核酸。
【請求項３】  前記核酸がマウスＫｖ６．２をコードする、請求項１に記載の単離された核酸。
【請求項４】  前記核酸が、配列番号１または配列番号１７をコードする、請求項１に記載の単離された核酸。
【請求項５】  前記核酸が、配列番号２または配列番号１８のヌクレオチド配列を有する、請求項１に記載の単離された核酸。
【請求項６】  前記核酸が、以下：
【化１】
2002519060.tif 000001
からなる群より選択されるプライマーセットと同じ配列に対して、ストリンジェントなハイブリゼーション条件下で選択的にハイブリダイズするプライマーによって増幅される、請求項１に記載の単離された核酸。
【請求項７】  前記核酸が、約５３ｋＤａと約６５ｋＤａとの間の分子量を有するポリペプチドモノマーをコードする、請求項１に記載の単離された核酸。
【請求項８】  ヘテロマーカリウムチャネルのαサブユニットを含むポリペプチドモノマーをコードする、単離された核酸であって、該ポリペプチドモノマーは、以下：
（ｉ）少なくとも１つのさらなるＫｖαサブユニットとともに、電位ゲート制御の特徴を有するヘテロマーカリウムチャネルを形成する能力を有し；
（ｉｉ）Ｋｖ６．２  Ｓ４−Ｓ６領域に対して約８５％を超えるアミノ酸配列同一性を有するＳ４−Ｓ６領域を有し；そして
（ｉｉｉ）配列番号１または配列番号１７に対して生成されたポリクローナル抗体に特異的に結合する、
単離された核酸。
【請求項９】  配列番号２または配列番号１８に対してストリンジェントな条件下で特異的にハイブリダイズするポリペプチドモノマーをコードする、単離された核酸。
【請求項１０】  前記核酸が、配列番号２または配列番号１８のヌクレオチド配列に対して、中程度のストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で、選択的にハイブリダイズする、請求項１または８に記載の単離された核酸。
【請求項１１】  ヘテロマーカリウムチャネルのαサブユニットを含む、単離されたポリペプチドモノマーであって、該ポリペプチドモノマーは、以下：
（ｉ）少なくとも１つのさらなるＫｖαサブユニットとともに、電位ゲート制御の特徴を有するヘテロマーカリウムチャネルを形成する能力を有し；
（ｉｉ）Ｋｖ６．２  サブユニット会合領域に対して７０％を超えるアミノ酸配列同一性を有するモノマーサブユニット会合領域を有し；そして
（ｉｖ）配列番号１または配列番号１７に対して生成されたポリクローナル抗体に特異的に結合する、
単離されたポリペプチドモノマー。
【請求項１２】  前記ポリペプチドモノマーがヒトＫｖ６．２のアミノ酸配列を有する、請求項１１に記載の単離されたポリペプチドモノマー。
【請求項１３】  前記ポリペプチドモノマーがマウスＫｖ６．２のアミノ酸配列を有する、請求項１１に記載の単離されたポリペプチドモノマー。
【請求項１４】  前記ポリペプチドモノマーが配列番号１または配列番号１７のアミノ酸配列を有する、請求項１１に記載の単離されたポリペプチドモノマー。
【請求項１５】  ヘテロマーカリウムチャネルのαサブユニットを含む、単離されたポリペプチドモノマーであって、該ポリペプチドモノマーは、以下：
（ｉ）少なくとも１つのさらなるＫｖαサブユニットとともに、電位ゲート制御の特徴を有するヘテロマーカリウムチャネルを形成する能力を有し；
（ｉｉ）Ｋｖ６．２  Ｓ４−Ｓ６領域に対して８５％を超えるアミノ酸配列同一性を有するＳ４−Ｓ６領域を有し；そして
（ｉｉｉ）配列番号１または配列番号１７に対して生成されたポリクローナル抗体に特異的に結合する、
単離されたポリペプチドモノマー。
【請求項１６】  請求項１１または請求項１５に記載のポリペプチドモノマーに選択的に結合する、抗体。
【請求項１７】  前記ポリペプチドモノマーが、配列番号１または配列番号１７のアミノ酸配列を有する、請求項１６に記載の抗体。
【請求項１８】  請求項１に記載の核酸を含む、発現ベクター。
【請求項１９】  請求項１８に記載のベクターを用いてトランスフェクトされた、宿主細胞。
【請求項２０】  ヘテロマー電位ゲート制御カリウムチャネルを通じたイオンフラックスを増加もしくは減少させる化合物を同定するための方法であって、該方法は、以下の工程：
（ｉ）該化合物を、真核生物宿主細胞または細胞膜に接触させる工程であって、該宿主細胞もしくは細胞膜において、ヘテロマーカリウムチャネルのαサブユニットを含むポリペプチモノマーが発現されており、ここで、該ポリペプチドモノマーは、以下：
（ａ）少なくとも１つのさらなるＫｖαサブユニットとともに、電位ゲート制御の特徴を有するヘテロマーカリウムチャネルを形成する能力を有し；
（ｂ）Ｋｖ６．２サブユニット会合領域に対して７０％を超えるアミノ酸配列同一性を有するモノマーサブユニット会合領域を有し；そして
（ｃ）配列番号１または配列番号１７に対して生成されたポリクローナル抗体に特異的に結合する、工程；ならびに
（ｉｉ）カリウムチャネルを発現する、該細胞または細胞膜に対する該化合物の機能的効果を決定する工程、
を包含する、方法。
【請求項２１】  前記イオンフラックスの増加または減少が、電流または電位の変化を測定することによって決定される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】  前記カリウムチャネルモノマーポリペプチドが組換え体である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】  前記カリウムチャネルモノマーポリペプチドが、ヒトＫｖ６．２である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２４】  前記カリウムチャネルモノマーポリペプチドが、マウスＫｖ６．２である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２５】  前記カリウムチャネルモノマーポリペプチドが、配列番号１または配列番号１７のアミノ酸配列を有する、請求項２０に記載の方法。
【請求項２６】  ヘテロマー電位ゲート制御カリウムチャネルを通じたイオンフラックスを増加もしくは減少させる化合物を同定するための方法であって、該方法は、以下の工程：
（ｉ）該化合物を、真核生物宿主細胞または細胞膜に接触させる工程であって、該宿主細胞もしくは細胞膜において、ヘテロマーカリウムチャネルのαサブユニットを含むポリペプチモノマーが発現されており、ここで、該ポリペプチドモノマーは、以下：
（ａ）少なくとも１つのさらなるＫｖαサブユニットとともに、電位ゲート制御の特徴を有するヘテロマーカリウムチャネルを形成する能力を有し；
（ｂ）Ｋｖ６．２  Ｓ４−Ｓ６領域に対して８５％を超えるアミノ酸配列同一性を有するＳ４−Ｓ６領域を有し；そして
（ｃ）配列番号１または配列番号１７に対して生成されたポリクローナル抗体に特異的に結合する、工程；ならびに
（ｉｉ）該カリウムチャネルを発現する、該細胞または細胞膜に対する該化合物の機能的効果を決定する工程、
を包含する、方法。
【請求項２７】  Ｋｖ６．２の存在を哺乳動物組織において検出する方法であって、該方法は、以下の工程：
（ｉ）哺乳動物から単離された生物学的サンプルを、Ｋｖ６．２と選択的に会合するＫｖ６．２特異的試薬と接触させる工程；および
（ｉｉ）該サンプルと選択的に会合したＫｖ６．２特異的試薬のレベルを検出する工程、
を包含する、方法。
【請求項２８】  前記Ｋｖ６．２特異的試薬が、Ｋｖ６．２特異的抗体、Ｋｖ６．２特異的オリゴヌクレオチドプライマー、およびＫｖ６．２核酸プローブからなる群より選択される、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】  前記サンプルがヒト由来である、請求項２７に記載の方法。
【請求項３０】  コンピュータシステムにおいて、ヒトＫｖ６．２遺伝子の変異についてスクリーニングする方法であって、該方法は、以下の工程：
（ｉ）該コンピュータに、配列番号２のヌクレオチド配列、配列番号１８のヌクレオチド配列、およびそれらの保存的改変版を有する電位ゲート制御カリウムチャネルポリペプチドモノマーをコードする第一の核酸配列を入力する工程；
（ｉｉ）該第一の核酸配列と、該第一の核酸配列と実質的な同一性を有する第二の核酸配列とを比較する工程；および
（ｉｉｉ）該第一の核酸配列と該第二の核酸配列との間のヌクレオチドの相違を同定する工程、
を包含する、方法。
【請求項３１】  前記第二の核酸配列が、疾患状態に関連する、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】  コンピュータシステムにおいて、Ｋｖ６．２ポリペプチドモノマーの三次元構造を同定するための方法であって、該方法は、以下の工程：
（ｉ）該コンピュータシステムに、カリウムチャネルポリペプチドモノマーの少なくとも２５アミノ酸のアミノ酸配列または該ポリペプチドモノマーをコードする遺伝子の少なくとも７５ヌクレオチドを入力する工程であって、該ポリペプチドモノマーは、配列番号１、配列番号１７のアミノ酸配列またはそれらの保存的改変版を有する、工程；ならびに
（ｉｉ）該アミノ酸配列によってコードされるポリペプチドモノマーの三次元構造を生成する工程、
を包含する、方法。
【請求項３３】  前記アミノ酸配列が一次構造であり、ここで、前記生成工程が、以下の工程：
（ｉ）該一次構造から決定されるエネルギー項を用いて、該一次構造から二次構造を形成する工程；および
（ｉｉ）該二次構造から決定されるエネルギー項を用いて、該二次構造から三次構造を形成する工程、
を包含する、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】  前記生成工程が、前記三次構造によって決定される非等方性項を用いて、該三次構造から四次構造を形成する工程をさらに包含する、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】  リガンドに結合する、Ｋｖ６．２カリウムチャネルタンパク質の三次元構造の領域を同定する工程、および該領域を用いて該カリウムチャネルタンパク質に結合するリガンドを同定する工程、
をさらに包含する、請求項３１に記載の方法。