【手続補正書】
【提出日】平成17年8月11日(2005.8.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞死を調節する方法であり、以下の段階を含む方法：
a. i. ミトコンドリアを有する標的細胞
ii. オリゴマイシン感受性付与タンパク質に結合する物質
を提供する段階；および
b. 該物質がオリゴマイシン感受性付与タンパク質に結合して該細胞内のスーパーオキシドレベルを増加または細胞ATPレベルを変化させるような条件下で、該細胞を該物質に曝露する段階。
【請求項２】
標的細胞がインビトロ細胞である、請求項1記載の方法。
【請求項３】
標的細胞がインビボ細胞である、請求項1記載の方法。
【請求項４】
標的細胞がエクスビボ細胞である、請求項1記載の方法。
【請求項５】
標的細胞が癌細胞である、請求項1記載の方法。
【請求項６】
標的細胞が、B細胞、T細胞、および顆粒球からなる群より選択される、請求項1記載の方法。
【請求項７】
物質がベンゾジアゼピンまたはベンゾジオン誘導体を含む、請求項1記載の方法。
【請求項８】
物質がBZ-432を含む、請求項1記載の方法。
【請求項９】
曝露段階が、標的細胞の細胞死の増加をもたらす、請求項1記載の方法。
【請求項１０】
細胞における増殖を阻害する方法であり、以下の段階を含む方法：
a. i. ミトコンドリアを有する標的の増殖細胞
ii. ミトコンドリアATP合成酵素複合体に結合する物質
を提供する段階；および
b. 該物質がミトコンドリアATP合成酵素複合体に結合して該細胞内のスーパーオキシドレベルを増加または細胞ATPレベルを変化するような条件下で、該細胞を該物質へ曝露する段階。
【請求項１１】
物質がオリゴマイシン感受性付与タンパク質へ結合する、請求項10記載の方法。
【請求項１２】
標的細胞がインビトロ細胞である、請求項10記載の方法。
【請求項１３】
標的細胞がインビボ細胞である、請求項10記載の方法。
【請求項１４】
標的細胞がエクスビボ細胞である、請求項10記載の方法。
【請求項１５】
標的細胞が癌細胞である、請求項10記載の方法。
【請求項１６】
標的細胞が、B細胞、T細胞、および顆粒球からなる群より選択される、請求項10記載の方法。
【請求項１７】
標的細胞が増殖細胞である、請求項10記載の方法。
【請求項１８】
物質がベンゾジアゼピンまたはベンゾジオン誘導体を含む、請求項10記載の方法。
【請求項１９】
物質がBZ-432を含む、請求項10記載の方法。
【請求項２０】
a. 物質に曝露された対象の細胞内のスーパーオキシドを増加または細胞ATPレベルを変化させるのに十分な用量の、オリゴマイシン感受性付与タンパク質に結合する物質；および
b. 細胞死の開始により改善される状態を治療するための該物質の使用に関する説明書
を備える、薬学的組成物。
【請求項２１】
物質がベンゾジアゼピンまたはベンゾジオン誘導体を含む、請求項20記載の組成物。
【請求項２２】
物質がBZ-432を含む、請求項20記載の組成物。
【請求項２３】
状態が癌である、請求項20記載の組成物。
【請求項２４】
状態が、増殖性疾患および自己免疫疾患からなる群より選択される、請求項20記載の組成物。
【請求項２５】
状態が、移植片対宿主病および移植拒絶反応からなる群より選択される、請求項20記載の組成物。
【請求項２６】
a. 物質に曝露された対象の細胞内のスーパーオキシドを増加または細胞ATPレベルを変化させるのに十分な用量の、ミトコンドリアATP合成酵素複合体に結合する物質；および
b. 自己免疫疾患、増殖性疾患、または癌を治療するための該物質の使用に関する説明書
を備える、薬学的組成物。
【請求項２７】
物質がベンゾジアゼピンまたはベンゾジオン誘導体を含む、請求項26記載の組成物。
【請求項２８】
物質がBZ-432を含む、請求項26記載の組成物。
【請求項２９】
増殖性疾患、自己免疫疾患、または癌を治療するのに有用な物質を同定する方法であり、以下の段階を含む方法：
a. i. ミトコンドリアATP合成酵素複合体、
ii. ベンゾジアゼピンまたはベンゾジオン誘導体、および
iii. 候補物質
を提供する段階；
b. ミトコンドリアATP合成酵素複合体を、ベンゾジアゼピンまたはベンゾジオン誘導体および候補物質へ曝露する段階；ならびに
c. ベンゾジアゼピンまたはベンゾジオン誘導体および候補物質の、ミトコンドリアATP合成酵素複合体への結合を比較する段階。
【請求項３０】
比較段階が、ミトコンドリアATP合成酵素複合体を含有する細胞における細胞死、成長速度、または細胞数を観察する段階を含む、請求項29記載の方法。
【請求項３１】
比較段階が、ミトコンドリアATP合成酵素複合体を含有する細胞におけるスーパーオキシドレベルを測定する段階を含む、請求項29記載の方法。
【請求項３２】
比較段階が、ベンゾジアゼピンまたはベンゾジオン誘導体および候補物質の、ミトコンドリアATP合成酵素複合体に対する結合親和性を測定する段階を含む、請求項29記載の方法。
【請求項３３】
比較段階が、候補物質のオリゴマイシン感受性付与タンパク質への結合を検出する段階を含む、請求項29記載の方法。
【請求項３４】
薬学的物質を同定する方法であり、以下の段階を含む方法：
a. スーパーオキシドフリーラジカルを生成するか、細胞死を開始するか、または細胞増殖を変化させるように、ミトコンドリアATP合成酵素複合体に結合する物質を提供する段階；
b. 該物質を化学的に修飾して、候補薬学的物質のライブラリーを作成する段階；および
c. 該物質と比較した、スーパーオキシドフリーラジカルを生成する能力、細胞死を開始する能力、または細胞増殖を変化させる能力の増大に基づいて、候補物質ライブラリーの1つまたは複数の個別のメンバーを選択する段階。
【請求項３５】
組織または動物における毒性に関してライブラリーの1つまたは複数の個別のメンバーを試験する段階を更に含む、請求項34記載の方法。
【請求項３６】
ライブラリーの1つまたは複数の個別のメンバーを、市販品としての承認のために政府機関へ提出する段階を更に含む、請求項34記載の方法。
【請求項３７】
選択的に細胞死を誘導する物質または活性化細胞の成長もしくは増殖を阻害する物質をスクリーニングする方法であり、以下の段階を含む方法：
a. i. 少なくとも1種の未活性化細胞を含む第一の細胞試料
ii. 少なくとも1種の未活性化細胞を含む第二の細胞試料
iii. 少なくとも1種の未活性化細胞を含む第三の細胞試料
iv. 有効量の活性化物質
v. 有効量の候補物質
vi. 有効な比および量の活性化物質および候補物質
を提供する段階；
b. 第一の細胞試料を、該有効量の活性化物質と接触させる段階；
c. 第二の細胞試料を、該有効量の候補物質と接触させる段階；
d. 第三の細胞試料を、該有効な比および量の活性化物質および候補物質と接触させる段階；
e. 第三の細胞試料中の細胞死のレベルまたは細胞数を、第一の細胞試料中および第二の細胞試料中の細胞死のレベルまたは細胞数と比較する段階；ならびに
f. 第三の細胞試料中の細胞死または成長阻害の量を、第一の細胞試料中および第二の細胞試料中の細胞死または成長阻害のレベルと比較する段階。
【請求項３８】
d. 第三の細胞試料中の細胞死または成長阻害のレベルが、第一の細胞試料中および第二の細胞試料中の細胞死を上回る場合に、第三の試料に接触した候補物質を選択する段階を更に含む、請求項37記載の方法。
【請求項３９】
第一、第二、および第三の試料が、B細胞、T細胞、顆粒球、または癌細胞を含有する、請求項37記載の方法。
【請求項４０】
接触がインビトロにおいて起こる、請求項37記載の方法。
【請求項４１】
接触がインビボにおいて起こる、請求項37記載の方法。
【請求項４２】
活性化物質が、T細胞リガンド、BAFFリガンド、TNF、Fasリガンド(FasL)、Toll受容体、APRIL受容体、CD40リガンド、サイトカイン、ケモカイン、ホルモン、ステロイド、B細胞リガンド、γ線照射、UV照射、細胞ストレスを増大させる物質もしくは条件、ならびに細胞表面受容体を特異的に認識および結合する抗体からなる群より選択される、請求項37記載の方法。
【請求項４３】
抗体が、抗CD4、抗CD8、抗CD20、抗BAFF、抗TNF、抗CD40、抗CD3、抗CD28、抗B220、抗Toll受容体、抗APRIL受容体、抗B細胞受容体、および抗T細胞受容体からなる群より選択される、請求項42記載の方法。
【請求項４４】
ミトコンドリア透過性遷移の前に、活性化された標的細胞を、該活性化された標的細胞におけるスーパーオキシド形成を阻害する有効量の物質と接触することにより、活性化された標的細胞における誘導された細胞死を阻害する方法。
【請求項４５】
活性化された標的細胞がインビトロで存在する、請求項44記載の方法。
【請求項４６】
活性化された標的細胞がインビボで存在する、請求項44記載の方法。
【請求項４７】
物質がミトコンドリアATP合成酵素に結合する、請求項44記載の方法。
【請求項４８】
物質がオリゴマイシン感受性付与タンパク質に結合する、請求項44記載の方法。
【請求項４９】
物質がベンゾジアゼピンまたはベンゾジオン誘導体を含む、請求項44記載の方法。
【請求項５０】
選択的に細胞死を誘導する物質または活性化細胞の成長もしくは増殖を阻害する物質をスクリーニングする方法であり、以下の段階を含む方法：
a. i. 少なくとも1種の未活性化細胞を含む第一の細胞試料
ii. 少なくとも1種の未活性化細胞を含む第二の細胞試料
iii. 候補物質
を提供する段階；
b. 第一の細胞試料を、候補物質と接触させる段階；ならびに
c. 第一および第二の細胞中の、細胞内スーパーオキシド濃度を比較する段階。
【請求項５１】
d. 第一の細胞試料中の細胞内スーパーオキシド濃度が、第二の細胞試料中を上回る場合に、第一の細胞試料に接触した候補物質を選択する段階を更に含む、請求項50記載の方法。
【請求項５２】
e. i. 処理された未活性化細胞においてスーパーオキシドレベルを増加させることが公知である物質
ii. 少なくとも1種の未活性化細胞を含む第三の細胞試料
iii. 少なくとも1種の未活性化細胞を含む第四の細胞試料
を提供する段階；
f. 第三の細胞試料を、該スーパーオキシドレベルを増加させることが公知である物質で処理する段階；
g. 第四の細胞試料を、該スーパーオキシドレベルを増加させることが公知である物質および選択された候補物質で処理する段階；ならびに
h. 処理した第四の細胞試料中のスーパーオキシドレベルが、処理した第三の細胞試料と比べて高いかどうかを判定することにより、該スーパーオキシドレベルを増加させることが公知である物質と共に、候補物質がスーパーオキシドレベルを相乗的に増大させるかどうかを同定する段階
を更に含む、請求項51記載の方法。
【請求項５３】
スーパーオキシドレベルを増加させることが公知である物質、および、請求項52記載の同定された候補物質を含有する、薬学的カクテル。