【手続補正書】
【提出日】平成18年11月2日(2006.11.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
【化１】
2002529075.tif 000001
のヌクレオチド配列（配列番号１）を含むアカゲザルのメラノコルチン５受容体タンパク質をコードする精製された核酸分子。
【請求項２】  アカゲザルのメラノコルチン５受容体タンパク質をコードする精製されたＤＮＡ分子であって、配列番号２において３文字表記で示されているように、
【化２】
2002529075.tif 000002
2002529075.tif 000003
のアミノ酸配列から実質的になるタンパク質をコードするＤＮＡ分子。
【請求項３】  組換え宿主細胞においてアカゲザルのＭＣ−５Ｒタンパク質を発現させるための発現ベクターであって、請求項２に記載されるアミノ酸配列をコードするＤＮＡ分子を含む発現ベクター。
【請求項４】  真核生物の発現ベクターである、請求項３に記載の発現ベクター。
【請求項５】  原核生物の発現ベクターである、請求項３に記載の発現ベクター。
【請求項６】  組換えアカゲザルＭＣ−５Ｒタンパク質を発現する宿主細胞であって、請求項３に記載される発現ベクターを含む宿主細胞。
【請求項７】  組換えアカゲザルＭＣ−５Ｒタンパク質を発現する宿主細胞であって、請求項４に記載される発現ベクターを含む宿主細胞。
【請求項８】  組換えアカゲザルＭＣ−５Ｒタンパク質を発現する宿主細胞であって、請求項５に記載される発現ベクターを含む宿主細胞。
【請求項９】  前記アカゲザルＭＣ−５Ｒタンパク質が前記発現ベクターから過剰発現される、請求項６に記載の宿主細胞。
【請求項１０】  前記アカゲザルＭＣ−５Ｒタンパク質が前記発現ベクターから過剰発現される、請求項７に記載の宿主細胞。
【請求項１１】  前記アカゲザルＭＣ−５Ｒタンパク質が前記発現ベクターから過剰発現される、請求項８に記載の宿主細胞。
【請求項１２】  組換えアカゲザルＭＣ−５Ｒタンパク質を含み、請求項９に記載される宿主細胞から得られる細胞膜画分。
【請求項１３】  組換えアカゲザルＭＣ−５Ｒタンパク質を含み、請求項１０に記載される宿主細胞から得られる細胞膜画分。
【請求項１４】  組換えアカゲザルＭＣ−５Ｒタンパク質を含み、請求項１１に記載される宿主細胞から得られる細胞膜画分。
【請求項１５】
【化３】
2002529075.tif 000004
のヌクレオチド配列（配列番号１）からなる精製されたＤＮＡ分子。
【請求項１６】  配列番号２において３文字表記で示されているように、
【化４】
2002529075.tif 000005
2002529075.tif 000006
のアミノ酸配列からなるアカゲザルのメラノコルチン５受容体タンパク質をコードする精製された核酸分子。
【請求項１７】  配列番号１のヌクレオチド９４〜ヌクレオチド１０６８のヌクレオチド配列からなる、請求項１５に記載の精製されたＤＮＡ分子。
【請求項１８】  組換え宿主細胞においてアカゲザルのＭＣ−５Ｒタンパク質を発現させるための発現ベクターであって、請求項１７に記載されるＤＮＡ分子を含む発現ベクター。
【請求項１９】  真核生物の発現ベクターである、請求項１８に記載の発現ベクター。
【請求項２０】  原核生物の発現ベクターである、請求項１８に記載の発現ベクター。
【請求項２１】  組換えアカゲザルＭＣ−５Ｒタンパク質を発現する宿主細胞であって、請求項１９に記載される発現ベクターを含む宿主細胞。
【請求項２２】  組換えアカゲザルＭＣ−５Ｒタンパク質を発現する宿主細胞であって、請求項２０に記載される発現ベクターを含む宿主細胞。
【請求項２３】  組換えアカゲザルＭＣ−５Ｒタンパク質を発現する宿主細胞であって、請求項２１に記載される発現ベクターを含む宿主細胞。
【請求項２４】  組換えアカゲザルＭＣ−５Ｒタンパク質を含み、請求項２２に記載される宿主細胞から得られる細胞膜画分。
【請求項２５】  組換えアカゲザルＭＣ−５Ｒタンパク質を含み、請求項２３に記載される宿主細胞から得られる細胞膜画分。
【請求項２６】  組換え宿主細胞においてカゲザルのＭＣ−５Ｒタンパク質を発現させる方法であって、
（ａ）請求項３に記載される発現ベクターを好適な宿主細胞にトランスフェクションすること；および
（ｂ）前記発現ベクターからのアカゲザルのＭＣ−５Ｒタンパク質の発現を可能にする条件下で工程（ａ）の宿主細胞を培養すること
を含む方法。
【請求項２７】  配列番号２において３文字表記で示されているアミノ酸配列を含む
【化５】
2002529075.tif 000007
のアミノ酸配列を含むアカゲザルの精製されたメラノコルチン５受容体タンパク質。
【請求項２８】  配列番号２に示されているアミノ酸配列からなるアカゲザルの精製されたメラノコルチン５受容体タンパク質。
【請求項２９】  物質がｒｈＭＣ−５Ｒに結合し得るかどうかを明らかにする方法であって、
（ａ）細胞内におけるｒｈＭＣ−５Ｒの発現を導く発現ベクターで細胞をトランスフェクションすることによって試験細胞を提供すること；
（ｂ）前記試験細胞を前記物質に曝すこと；
（ｃ）ｒｈＭＣ−５Ｒに対する前記物質の結合量を測定すること；
（ｄ）前記試験細胞におけるｒｈＭＣ−５Ｒに対する前記物質の結合量を、ｒｈＭＣ−５Ｒでトランスフェクションされていないコントロール細胞に対する前記物質の結合量と比較すること
を含む方法。
【請求項３０】  物質がｒｈＭＣ−５Ｒを活性化し得るかどうかを明らかにする方法であって、
（ａ）細胞内におけるｒｈＭＣ−５Ｒの発現を導く発現ベクターで細胞をトランスフェクションすることによって試験細胞を提供すること；
（ｂ）前記試験細胞を前記物質に曝すこと；
（ｃ）蓄積した細胞内ｃＡＭＰの量を測定すること；
（ｄ）前記物質に応答した前記試験細胞におけるｃＡＭＰの量を、前記物質に曝されていない試験細胞におけるｃＡＭＰの量と比較すること
を含む方法。
【請求項３１】  ＭＣ−５Ｒ受容体活性を調節する物質を同定する方法であって、
（ａ）配列番号２に示されるアミノ酸配列を含むＭＣ−５Ｒ受容体タンパク質の存在下および非存在下で試験物質と一緒にすること；および
（ｂ）ＭＣ−５Ｒ受容体タンパク質の存在下および非存在下における前記試験物質の作用を測定して比較すること
を含む方法。
【請求項３２】  物質がＭＣ−５Ｒの潜在的なアゴニストまたはアンタゴニストであるかどうかを明らかにする方法であって、
（ａ）細胞内におけるＭＣ−５Ｒの発現を導く請求項３に記載される発現ベクターで細胞をトランスフェクションまたは形質転換して、試験細胞を得ること；
（ｂ）ＭＣ−５Ｒを発現させるために十分な時間にわたって前記試験細胞を生育させること；
（ｃ）前記物質の存在下および非存在下でＭＣ−５Ｒの標識リガンドに前記細胞を曝すこと；
（ｄ）ＭＣ−５Ｒに対する前記標識リガンドの結合を測定すること
を含む方法であって、この場合、前記標識リガンドの結合量が、前記物質の存在下において、前記物質の非存在下のときよりも少ない場合、前記物質は、ＭＣ−５Ｒの潜在的なアゴニストまたはアンタゴニストである、方法。
【請求項３３】  物質がＭＣ−５Ｒに結合し得るかどうかを明らかにする方法であって、
（ａ）細胞内におけるＭＣ−５Ｒの発現を導く請求項３に記載される発現ベクターで細胞をトランスフェクションまたは形質転換して、試験細胞を得ること；
（ｂ）前記試験細胞を前記物質に曝すこと；
（ｃ）ＭＣ−５Ｒに対する前記物質の結合量を測定すること；
（ｄ）前記試験細胞におけるＭＣ−５Ｒに対する前記物質の結合量を、ＭＣ−５Ｒでトランスフェクションされていないコントロール細胞に対する前記物質の結合量と比較すること
を含む方法であって、この場合、前記物質の結合量が、コントロール細胞と比較して前記試験細胞において大きい場合、前記物質はＭＣ−５Ｒに結合し得る、方法。
【請求項３４】  物質がＭＣ−５Ｒに結合し得るかどうかを明らかにする方法であって、
（ａ）細胞内におけるＭＣ−５Ｒの発現を導く請求項３に記載される発現ベクターで細胞をトランスフェクションまたは形質転換して、試験細胞を得ること；
（ｂ）前記試験細胞からＭＣ−５Ｒを含む膜を調製して、リガンドが前記膜内のＭＣ−５Ｒに結合するような条件下で前記膜をＭＣ−５Ｒのリガンドに曝すこと；
（ｃ）工程（ｂ）に引き続き、あるいは工程（ｂ）と同時に、前記試験細胞から得られた膜を物質に曝すこと；
（ｄ）前記物質の存在下および非存在下において前記膜内のＭＣ−５Ｒに対する前記リガンドの結合量を測定すること；
（ｅ）前記物質の存在下および非存在下において前記膜内のＭＣ−５Ｒに対する前記リガンドの結合量を比較すること
を含む方法であって、この場合、前記物質の存在下における前記膜内のＭＣ−５Ｒに対する前記リガンドの結合量の減少は、前記物質がＭＣ−５Ｒに結合し得ることを示す、方法。
【請求項３５】  物質がＭＣ−５Ｒに結合し得るかどうかを明らかにする方法であって、
（ａ）細胞内におけるＭＣ−５Ｒの発現を導く請求項３に記載される発現ベクターで細胞をトランスフェクションまたは形質転換して、試験細胞を得ること；
（ｂ）前記試験細胞からＭＣ−５Ｒを含む膜を調製して、前記試験細胞から得られた膜を前記物質に曝すこと；
（ｃ）前記試験細胞から得られた膜内のＭＣ−５Ｒに対する前記物質の結合量を測定すること；
（ｄ）前記試験細胞から得られた膜内のＭＣ−５Ｒに対する前記物質の結合量を、ＭＣ−５Ｒでトランスフェクションされていないコントロール細胞から得られた膜に対する前記物質の結合量と比較すること
を含む方法であって、この場合、前記試験細胞から得られた膜内のＭＣ−５Ｒに対する前記物質の結合量が、前記コントロール細胞から得られた膜に対する前記物質の結合量よりも大きい場合、前記物質はＭＣ−５Ｒに結合し得る、方法。
【請求項３６】  ＭＣ−５Ｒのアゴニストを同定する方法であって、
（ａ）ＭＣ−５Ｒの発現を導く請求項３に記載される第１の発現ベクターおよびプロミスカスＧタンパク質の発現を導く第２の発現ベクターで細胞をトランスフェクションまたは形質転換して、試験細胞を得ること；
（ｂ）前記試験細胞を、ＭＣ−５Ｒのアゴニストと考えられる物質に曝すこと；
（ｃ）細胞内のイノシトールリン酸のレベルを測定すること
を含む方法であって、この場合、アゴニストと考えられる前記物質の非存在下における細胞内のイノシトールリン酸レベルと比較して、細胞内のイノシトールリン酸レベルの増大は、前記物質がＭＣ−５Ｒのアゴニストであることを示す、方法。
【請求項３７】  ＭＣ−５Ｒのアンタゴニストを同定する方法であって、
（ａ）ＭＣ−５Ｒの発現を導く請求項３に記載される第１の発現ベクターおよびプロミスカスＧタンパク質の発現を導く第２の発現ベクターで細胞をトランスフェクションまたは形質転換して、試験細胞を得ること；
（ｂ）前記試験細胞を、ＭＣ−５Ｒのアンタゴニストである物質に曝すこと；
（ｃ）工程（ｂ）に引き続き、あるいは工程（ｂ）と同時に、前記試験細胞を、ＭＣ−５Ｒのアンタゴニストと考えられる物質に曝すこと；
（ｄ）細胞内のイノシトールリン酸のレベルを測定すること
を含む方法であって、この場合、アンタゴニストと考えられる前記物質の非存在下における細胞内のイノシトールリン酸レベルと比較して、アンタゴニストと考えられる前記物質の存在下における細胞内のイノシトールリン酸レベルの低下は、前記物質がＭＣ−５Ｒのアンタゴニストであることを示す、方法。
【請求項３８】  工程（ａ）における前記第１および第２の発現ベクターが、ＭＣ−５Ｒタンパク質のＣ末端においてプロミスカスＧタンパク質に融合したキメラＭＣ−５Ｒタンパク質を発現する単一の発現ベクターに置換されている、請求項３７に記載されるＭＣ−５Ｒのアンタゴニストを同定する方法。
【請求項３９】  配列番号２に示されるアミノ酸配列を含むＭＣ−５Ｒ受容体タンパク質に特異的に結合する抗体。