【手続補正書】
【提出日】平成17年4月4日(2005.4.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
インターフェロンガンマ（IFNG）活性を示し、配列番号：１に示されるアミノ酸配列を有するIFNGポリペプチド変異体、またはIFNG活性を示すその断片。
【請求項２】
配列番号：１に示されるアミノ酸配列を有する請求項1記載の変異体。
【請求項３】
1から15のアミノ酸残基がC-末で切断されている、配列番号：１に示されるアミノ酸配列の断片である請求項1記載の変異体。
【請求項４】
配列番号：２、配列番号：３、配列番号：４、配列番号：５、配列番号：６、配列番号：７、配列番号：８、配列番号：９、配列番号：１０、配列番号：１１、配列番号：１２、配列番号：１３、配列番号：１４、配列番号１５および配列番号:16からなる群より選択されるアミノ酸配列を有する断片である、請求項２記載の変異体。
【請求項５】
グリコシル化されている請求項１から４までのいずれか記載の変異体。
【請求項６】
さらなる修飾を少なくとも一つ含み、かつIFNG活性を示す、請求項１から５までのいずれか記載の変異体。
【請求項７】
配列番号：１に示されるアミノ酸配列に対して1から10の修飾を含む、請求項６記載の変異体。
【請求項８】
配列番号：２、配列番号：３、配列番号：４、配列番号：５、配列番号：６、配列番号：７、配列番号：８、配列番号：９、配列番号：１０、配列番号：１１、配列番号：１２、配列番号：１３、配列番号：１４、配列番号１５および配列番号:16からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して1から10の修飾を含む、請求項６記載の変異体。
【請求項９】
修飾が置換である請求項７または８記載の変異体。
【請求項１０】
非ポリペプチド部分に対する連結基を含むアミノ酸残基が少なくとも一つ導入され、および/または少なくとも一つ除去されている、請求項６から９までのいずれか記載の変異体。
【請求項１１】
グリコシル化部位が少なくとも一つ導入されている請求項１０記載の変異体。
【請求項１２】
グリコシル化部位がN-グリコシル化部位である請求項１１記載の変異体。
【請求項１３】
（本明細書の実施例１において規定される）側鎖の少なくとも25％が表面に露出しているアミノ酸残基を含む位置にN-グリコシル化部位が導入されている、請求項１２記載の変異体。
【請求項１４】
（本明細書の実施例１において規定される）側鎖の少なくとも50％が表面に露出しているアミノ酸残基を含む位置にN-グリコシル化部位が導入されている、請求項１３記載の変異体。
【請求項１５】
N-グリコシル化部位が置換により導入されている請求項１３または１４記載の変異体。
【請求項１６】
K12S、K12T、G18S、G18T、E38N、E38N+S40T、K61S、K61T、N85S、N85T、K94N、Q106SおよびQ106Tから成る群より置換が選択される、請求項１５記載の変異体。
【請求項１７】
K12T、G18T、E38N+S40T、K61T、N85T、K94NおよびQ106Tから成る群より置換が選択される、請求項１６記載の変異体。
【請求項１８】
置換がE38N+S40Tである請求項１７記載の変異体。
【請求項１９】
システイン残基が少なくとも一つ導入されている請求項１０記載の変異体。
【請求項２０】
（本明細書の実施例１において規定される）側鎖の少なくとも25％が表面に露出しているアミノ酸残基を含む位置にシステイン残基が導入されている、請求項１９記載の変異体。
【請求項２１】
（本明細書の実施例１において規定される）側鎖の少なくとも50％が表面に露出しているアミノ酸残基を含む位置にシステイン残基が導入されている、請求項２０記載の変異体。
【請求項２２】
システイン残基が置換により導入されている請求項２０または２１記載の変異体。
【請求項２３】
N10C、N16C、E38C、N59C、N83C、K94C、N104CおよびA124Cから成る群より置換が選択される、請求項２２記載の変異体。
【請求項２４】
システイン残基が非ポリペプチド部分に共有結合している請求項１９から２３までのいずれか記載の変異体。
【請求項２５】
非ポリペプチド部分がポリマー分子である請求項２４記載の変異体。
【請求項２６】
ポリマー分子が直鎖または分岐ポリエチレングリコールである請求項２５記載の変異体。
【請求項２７】
N-グリコシル化部位が少なくとも一つ導入され、かつシステイン残基が少なくとも一つ導入されている、請求項１０記載の変異体。
【請求項２８】
請求項１３から１８までのいずれかにて規定される位置にN-グリコシル化部位が導入され、かつ請求項２０から２３までのいずれかにて規定される位置にシステイン残基が導入される、請求項２７記載の変異体。
【請求項２９】
K12T+N16C、K12T+E38C、K12T+N59C、K12T+N83C、K12T+K94C、K12T+N104C、K12T+A124C、G18T+N10C、G18T+E38C、G18T+N59C、G18T+N83C、G18T+K94C、G18T+N104C、G18T+A124C、G18N+S20T+N10C、G18N+S20T+N16C、G18N+S20T+E38C、G18N+S20T+N59C、G18N+S20T+N83C、G18N+S20T+K94C、G18N+S20T+N104C、G18N+S20T+A124C、E38N+S40T+N10C、E38N+S40T+N16C、E38N+S40T+N59C、E38N+S40T+N83C、E38N+S40T+K94C、E38N+S40T+N104C、E38N+S40T+A124C、K61T+N10C、K61T+N16C、K61T+E38C、K61T+N83C、K61T+K94C、K61T+N104C、K61T+A124C、N85T+N10C、N85T+N16C、N85T+E38C、N85T+N59C、N85T+K94C、N85T+N104C、N85T+A124C、K94N+N10C、K94N+N16C、K94N+E38C、K94N+N59C、K94N+N83C、K94N+N104C、K94N+A124C、Q106T+N10C、Q106T+N16C、Q106T+E38C、Q106T+N59C、Q106T+N83C、Q106T+K94CおよびQ106T+A124Cから成る群より選択される置換を含む、請求項２８記載の変異体。
【請求項３０】
E38N+S40T+N10C、E38N+S40T+N16C、E38N+S40T+N59C、E38N+S40T+N83C、E38N+S40T+K94C、E38N+S40T+N104CおよびE38N+S40T+A124Cから成る群より選択される置換を含む、請求項２９記載の変異体。
【請求項３１】
システイン残基が非ポリペプチド部分に共有結合している請求項２７から３０までのいずれか記載の変異体。
【請求項３２】
非ポリペプチド部分が請求項２５から２６までのいずれかにて規定されている、請求項３１記載の変異体。
【請求項３３】
G26F、G26N、G26Y、G26Q、G26V、G26A、G26M、G26I、G26K、G26R、G26T、G26H、G26CおよびG26Sから成る群より選択される置換を含む、請求項６から３２までのいずれか記載の変異体。
【請求項３４】
G26A、G26M、G26I、G26K、G26R、G26T、G26H、G26CおよびG26Sから成る群より選択される置換を含む、請求項３３記載の変異体。
【請求項３５】
置換G26AまたはG26Sを含む、請求項３４記載の変異体。
【請求項３６】
置換G26Aを含む請求項３５記載の変異体。
【請求項３７】
N-グリコシル化部位が少なくとも一つ除去され、かつシステイン残基が少なくとも一つ導入されている、請求項１０記載の変異体。
【請求項３８】
N-グリコシル化部位が少なくとも一つ除去され、除去されたN-グリコシル化部位に占められていた位置とは異なる位置にN-グリコシル化部位が少なくとも一つ導入され、かつシステイン残基が少なくとも一つ導入されている、請求項３７記載の変異体。
【請求項３９】
システイン残基が非ポリペプチド部分に共有結合している、請求項３７または３８記載の変異体。
【請求項４０】
非ポリペプチド部分が請求項２５から２６までのいずれかにて規定されている、請求項３９記載の変異体。
【請求項４１】
請求項１から４０までのいずれか記載のポリペプチド変異体をコードしているヌクレオチド配列。
【請求項４２】
請求項４１記載のヌクレオチド配列を含む発現ベクター。
【請求項４３】
請求項４１記載のヌクレオチド配列または請求項４２記載の発現ベクターを含む、グリコシル化可能宿主細胞。
【請求項４４】
CHO細胞またはBHK細胞である、請求項４３記載の宿主細胞。
【請求項４５】
請求項１から４０までのいずれか記載のIFNGポリペプチド変異体を少なくとも70％含むIFNGポリペプチド変異体の集合体、またはそのようなIFNGポリペプチド変異体の集合体を含む組成物。
【請求項４６】
請求項１から４０までのいずれか記載のポリペプチド変異体、および製薬的に許容される希釈剤、担体またはアジュバントを含む医薬組成物。
【請求項４７】
医薬として使用される請求項１から４０までのいずれか記載のポリペプチド変異体または請求項４６記載の医薬組成物。
【請求項４８】
間質性肺疾患を処置する医薬を製造するための、請求項１から４０までのいずれか記載のポリペプチド変異体または請求項４６記載の組成物の使用。
【請求項４９】
間質性肺疾患が特発性肺繊維症である、請求項４８記載の使用。
【請求項５０】
アミノ酸配列：N-X-S（式中、Xはプロリン以外のアミノ酸残基である）であるインビボN-グリコシル化部位を少なくとも一つ含む親IFNGポリペプチドのインビボN-グリコシル化の程度を増大させる方法であって、そのN-X-Sアミノ酸配列中のセリン残基をスレオニン残基と置換してIFNG変異体を得ることを含む方法。
【請求項５１】
親IFNGポリペプチドが配列番号：１７に示されるアミノ酸配列を有する、請求項５０記載の方法。
【請求項５２】
親IFNGポリペプチドが、1から15アミノ酸残基がC-末で切断されている配列番号：１７に示されるアミノ酸配列の断片である、請求項５０記載の方法。
【請求項５３】
該断片が、配列番号：１９、配列番号：２０、配列番号：２１、配列番号：２２、配列番号：２３、配列番号：２４、配列番号：２５、配列番号：２６、配列番号：２７、配列番号：２８、配列番号：２９、配列番号：３０、配列番号：３１、配列番号：３２および配列番号：３３から成る群より選択されるアミノ酸配列を有する、請求項５２記載の方法。
【請求項５４】
(a) 請求項１から４０までのいずれか記載のIFNGポリペプチド変異体をコードするヌクレオチド配列を含むグリコシル化可能宿主細胞を、ポリペプチド変異体の発現を誘導する条件下で培養し、
(b)任意に、該ポリペプチド変異体を非ポリペプチド部分と結合が起こるよう誘導する条件下にインビトロで反応させ、そして
(c)該ポリペプチド変異体を回収する、
ことを含む、請求項１から４０までのいずれか記載のIFNGポリペプチド変異体を産生する方法。
【請求項５５】
(a) 請求項１から４０までのいずれか記載のIFNGポリペプチド変異体をコードするヌクレオチド配列を含むグリコシル化可能宿主細胞を、ポリペプチド変異体の発現を誘導する条件下で培養し、
(b)該ポリペプチド変異体を非ポリペプチド部分と結合が起こるよう誘導する条件下にインビトロで反応させ、そして
(c)該ポリペプチド変異体を回収する、
ことを含む、請求項５４記載の方法。
【請求項５６】
該変異体が請求項１９から４０までのいずれか記載のものである、請求項５５記載の方法。
【請求項５７】
(a) 請求項１から４０までのいずれか記載のIFNGポリペプチド変異体をコードするヌクレオチド配列を含むグリコシル化可能宿主細胞を、ポリペプチド変異体の発現を誘導する条件下で培養し、そして
(b)該ポリペプチド変異体を回収する、
ことを含む、請求項５４記載の方法。
【請求項５８】
該ポリペプチド変異体が、配列番号：１、配列番号：２、配列番号：３、配列番号：４、配列番号：５、配列番号：６、配列番号：７、配列番号：８、配列番号：９、配列番号：１０、配列番号：１１、配列番号：１２、配列番号：１３、配列番号：１４、配列番号１５および配列番号:16から成る群より選択されるアミノ酸配列を有する請求項５４記載の方法。
【請求項５９】
該変異体がさらなる修飾を少なくとも一つ含む、請求項５７記載の方法。
【請求項６０】
該変異体が請求項１１から１８まで、または３３から３６までのいずれか記載のものである、請求項５８記載の方法。