【手続補正書】
【提出日】平成17年10月13日(2005.10.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】発明の名称
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の名称】組織工学におけるマトリックスのための螺旋状に構築された絹フィブロイン繊維束
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
エクスビボで既定のタイプの靱帯または腱を産生するために用いられるワイヤ-ロープ形状を有する絹繊維骨格のマトリックス。
【請求項２】
絹繊維骨格のマトリックスが、カイコの絹、クモの絹、遺伝子操作細胞、トランスジェニック植物およびトランスジェニック動物からの絹、培養細胞からの絹、天然の絹、天然の絹遺伝子のクローニングした全配列または部分配列からの絹、ならびに絹または絹様配列をコードする合成遺伝子からの絹からなる群より選択される絹フィブロインから構成される、請求項1記載のマトリックス。
【請求項３】
絹繊維骨格のマトリックスがカイコガの繊維から得られるフィブロインを含む、請求項2記載のマトリックス。
【請求項４】
マトリックスが絹とコラーゲン繊維とを含む、請求項1記載のマトリックス。
【請求項５】
マトリックスが、絹および絹フィブロイン繊維と、一つまたは複数の絹の泡沫、被膜、メッシュ、またはスポンジとの複合体を含む、請求項1記載のマトリックス。
【請求項６】
マトリックスが、絹と、コラーゲン、ポリ乳酸またはそのコポリマー、ポリグリコール酸またはそのコポリマー、ポリ無水物、エラスチン、グリコサミノグリカン、および多糖類からなる群より選択される一つまたは複数の分解性のポリマーとの複合体を含む、請求項1記載のマトリックス。
【請求項７】
マトリックスが、絹と、ポリエチレン、ポリスチレン、ポリメチルメタクリレート、ポリエチレンオキシド、およびポリウレタンからなる群より選択される一つまたは複数の非分解性ポリマーとの複合体を含む、請求項1記載のマトリックス。
【請求項８】
マトリックス上に播種される多能性細胞または線維芽細胞をさらに含む、請求項1記載のマトリックス。
【請求項９】
多能性細胞または線維芽細胞が自己由来である、請求項8記載のマトリックス。
【請求項１０】
多能性細胞または線維芽細胞が同種異系である、請求項9記載のマトリックス。
【請求項１１】
多能性細胞が、骨髄間質細胞および成人細胞または胚幹細胞からなる群より選択される、請求項9記載のマトリックス。
【請求項１２】
線維芽細胞が成熟ヒトACL線維芽細胞である、請求項9記載のマトリックス。
【請求項１３】
多能性細胞または線維芽細胞が、マトリックス上で増殖および分化して、既定の靱帯または腱を形成する、請求項9記載のマトリックス。
【請求項１４】
マトリックス上での多能性細胞または線維芽細胞の増殖および分化を増強する表面改変物質をさらに含む、請求項9記載のマトリックス。
【請求項１５】
産生される靱帯または腱が、前十字靱帯、後十字靱帯、回旋腱板腱、肘の内側側副靱帯、手の屈筋腱、顎関節の靱帯および腱、ならびに果外側靱帯からなる群より選択される、請求項1記載のマトリックス。
【請求項１６】
産生される靱帯が前十字靱帯である、請求項15記載のマトリックス。
【請求項１７】
マトリックス上に播種した多能性細胞または線維芽細胞を含む、エクスビボで既定の靱帯または腱を産生するために用いられるワイヤ-ロープ形状を有する絹繊維骨格のマトリックス。
【請求項１８】
絹繊維骨格のマトリックスが、カイコの絹、クモの絹、遺伝子操作細胞、トランスジェニック植物およびトランスジェニック動物からの絹、培養細胞からの絹、天然の絹、天然の絹遺伝子のクローニングした全配列または部分配列からの絹、ならびに絹または絹様配列をコードする合成遺伝子からの絹からなる群より選択される絹フィブロインから構成される、請求項17記載のマトリックス。
【請求項１９】
絹繊維骨格のマトリックスがカイコガのカイコ繊維から得られるフィブロインを含む、請求項18記載のマトリックス。
【請求項２０】
マトリックスが絹とコラーゲン繊維との複合体を含む、請求項17記載のマトリックス。
【請求項２１】
マトリックスが、絹および絹フィブロイン繊維と、一つまたは複数の絹の泡沫、被膜、メッシュ、またはスポンジとの複合体を含む、請求項17記載のマトリックス。
【請求項２２】
マトリックスが、絹と、コラーゲン、ポリ乳酸またはそのコポリマー、ポリグリコール酸またはそのコポリマー、ポリ無水物、エラスチン、グリコサミノグリカン、および多糖類からなる群より選択される一つまたは複数の分解性のポリマーとの複合体を含む、請求項17記載のマトリックス。
【請求項２３】
マトリックスが、絹と、ポリエチレン、ポリスチレン、ポリメチルメタクリレート、ポリエチレンオキシド、およびポリウレタンからなる群より選択される一つまたは複数の非分解性ポリマーとの複合体を含む、請求項17記載のマトリックス。
【請求項２４】
多能性細胞または線維芽細胞が自己由来である、請求項17記載のマトリックス。
【請求項２５】
多能性細胞または線維芽細胞が同種異系である、請求項17記載のマトリックス。
【請求項２６】
多能性細胞が、骨髄間質細胞および成人細胞または胚幹細胞からなる群より選択される、請求項17記載のマトリックス。
【請求項２７】
線維芽細胞が成熟ヒトACL線維芽細胞である、請求項17記載のマトリックス。
【請求項２８】
多能性細胞または線維芽細胞が、マトリックス上で増殖および分化して、既定の靱帯または腱を形成する、請求項17記載のマトリックス。
【請求項２９】
マトリックス上での多能性細胞または線維芽細胞の増殖および分化を増強する表面改変物質をさらに含む、請求項17記載のマトリックス。
【請求項３０】
多能性細胞または線維芽細胞を播種したマトリックスがインビトロでバイオリアクターにおいて培養される、請求項17記載のマトリックス。
【請求項３１】
産生される靱帯または腱が、前十字靱帯、後十字靱帯、回旋腱板腱、肘の内側側副靱帯、手の屈筋腱、顎関節の靱帯および腱、ならびに果外側靱帯からなる群より選択される、請求項15記載のマトリックス。
【請求項３２】
産生される靱帯が前十字靱帯である、請求項31記載のマトリックス。
【請求項３３】
マトリックス上に播種して、バイオリアクター内で静的な環境でインビトロで培養される多能性細胞または線維芽細胞を含む、エクスビボで既定のタイプの靱帯または腱を産生するために用いられるワイヤ-ロープ形状を有する絹繊維骨格のマトリックス。
【請求項３４】
バイオリアクターが、細胞の増殖および再生にとって適当な条件を提供する、請求項33記載のマトリックス。
【請求項３５】
絹繊維骨格のマトリックスが、カイコの絹、クモの絹、遺伝子操作細胞、トランスジェニック植物およびトランスジェニック動物からの絹、培養細胞からの絹、天然の絹、天然の絹遺伝子のクローニングした全配列または部分配列からの絹、ならびに絹または絹様配列をコードする合成遺伝子からの絹からなる群より選択される絹フィブロインから構成される、請求項33記載のマトリックス。
【請求項３６】
絹繊維骨格のマトリックスがカイコガのカイコ繊維から得られるフィブロインを含む、請求項35記載のマトリックス。
【請求項３７】
マトリックスが絹とコラーゲン繊維との複合体を含む、請求項33記載のマトリックス。
【請求項３８】
マトリックスが、絹および絹フィブロイン繊維と、一つまたは複数の絹の泡沫、被膜、メッシュ、またはスポンジとの複合体を含む、請求項33記載のマトリックス。
【請求項３９】
マトリックスが、絹と、コラーゲン、ポリ乳酸またはそのコポリマー、ポリグリコール酸またはそのコポリマー、ポリ無水物、エラスチン、グリコサミノグリカン、および多糖類からなる群より選択される一つまたは複数の分解性のポリマーとの複合体を含む、請求項33記載のマトリックス。
【請求項４０】
マトリックスが、絹と、ポリエチレン、ポリスチレン、ポリメチルメタクリレート、ポリエチレンオキシド、およびポリウレタンからなる群より選択される一つまたは複数の非分解性ポリマーとの複合体を含む、請求項33記載のマトリックス。
【請求項４１】
多能性細胞または線維芽細胞が自己由来である、請求項33記載のマトリックス。
【請求項４２】
多能性細胞または線維芽細胞が同種異系である、請求項33記載のマトリックス。
【請求項４３】
多能性細胞が、骨髄間質細胞および成人細胞または胚幹細胞からなる群より選択される、請求項33記載のマトリックス。
【請求項４４】
多能性細胞が成熟ヒトACL線維芽細胞である、請求項33記載のマトリックス。
【請求項４５】
多能性細胞または線維芽細胞が、マトリックス上で増殖および分化して、既定の靱帯または腱を形成する、請求項33記載のマトリックス。
【請求項４６】
マトリックス上での多能性細胞または線維芽細胞の増殖および分化を増強する表面改変物質をさらに含む、請求項33記載のマトリックス。
【請求項４７】
産生される靱帯または腱が、前十字靱帯、後十字靱帯、回旋腱板腱、肘の内側側副靱帯、手の屈筋腱、顎関節の靱帯および腱、ならびに果外側靱帯からなる群より選択される、請求項33記載のマトリックス。
【請求項４８】
産生される靱帯が前十字靱帯である、請求項47記載のマトリックス。
【請求項４９】
マトリックス上に播種され、バイオリアクター内でインビトロで培養される多能性細胞または線維芽細胞を含む、エクスビボで既定の靱帯または組織を産生するために用いられるワイヤ-ロープ形状を有する絹繊維骨格のマトリックス。
【請求項５０】
バイオリアクターが、細胞の増殖および再生にとって適当な条件を提供する、請求項49記載のマトリックス。
【請求項５１】
マトリックスが、バイオリアクターによって提供される一つまたは複数の機械的シグナルを受ける、請求項50記載のマトリックス。
【請求項５２】
機械的シグナルに、周期的な並進的ひずみおよび回転的ひずみを適用することが含まれる、請求項51記載のマトリックス。
【請求項５３】
機械的シグナルの大きさ、持続および組み合わせが、インビボで天然の靱帯または腱が経験するものに近づくように培養期間において変化する、請求項52記載のマトリックス。
【請求項５４】
機械的シグナルが、インビボで天然の靱帯または腱が経験する機械的刺激を模倣する、請求項51記載のマトリックス。
【請求項５５】
絹繊維骨格のマトリックスが、カイコの絹、クモの絹、遺伝子操作細胞、トランスジェニック植物およびトランスジェニック動物からの絹、培養細胞からの絹、天然の絹、天然の絹遺伝子のクローニングした全配列または部分配列からの絹、ならびに絹または絹様配列をコードする合成遺伝子からの絹からなる群より選択される絹フィブロインから構成される、請求項49記載のマトリックス。
【請求項５６】
絹繊維骨格のマトリックスがカイコガのカイコ繊維から得られるフィブロインを含む、請求項55記載のマトリックス。
【請求項５７】
マトリックスが絹とコラーゲン繊維との複合体を含む、請求項49記載のマトリックス。
【請求項５８】
マトリックスが、絹および絹フィブロイン繊維と、一つまたは複数の絹の泡沫、被膜、メッシュ、またはスポンジとの複合体を含む、請求項49記載のマトリックス。
【請求項５９】
マトリックスが、絹と、コラーゲン、ポリ乳酸またはそのコポリマー、ポリグリコール酸またはそのコポリマー、ポリ無水物、エラスチン、グリコサミノグリカン、および多糖類からなる群より選択される一つまたは複数の分解性のポリマーとの複合体を含む、請求項49記載のマトリックス。
【請求項６０】
マトリックスが、絹と、ポリエチレン、ポリスチレン、ポリメチルメタクリレート、ポリエチレンオキシド、およびポリウレタンからなる群より選択される一つまたは複数の非分解性ポリマーとの複合体を含む、請求項49記載のマトリックス。
【請求項６１】
多能性細胞または線維芽細胞が自己由来である、請求項49記載のマトリックス。
【請求項６２】
多能性細胞または線維芽細胞が同種異系である、請求項49記載のマトリックス。
【請求項６３】
多能性細胞が、骨髄間質細胞および成人細胞または胚幹細胞からなる群より選択される、請求項49記載のマトリックス。
【請求項６４】
多能性細胞が成熟ヒトACL線維芽細胞である、請求項49記載のマトリックス。
【請求項６５】
多能性細胞または線維芽細胞が、マトリックス上で増殖および分化して、既定の靱帯または腱を形成する、請求項49記載のマトリックス。
【請求項６６】
マトリックス上での多能性細胞または線維芽細胞の増殖および分化を増強する表面改変物質をさらに含む、請求項49記載のマトリックス。
【請求項６７】
産生される靱帯または腱が、前十字靱帯、後十字靱帯、回旋腱板腱、肘の内側側副靱帯、手の屈筋腱、顎関節の靱帯および腱、ならびに果外側靱帯からなる群より選択される、請求項49記載のマトリックス。
【請求項６８】
産生される靱帯が前十字靱帯である、請求項67記載のマトリックス。
【請求項６９】
マトリックスに被験者からの自己由来細胞を播種して、被験者からの動的な機械的シグナルを曝露する、特定の靱帯または腱を必要とする被験者にインビボで移植するための既定の靱帯または組織を産生するために用いられるワイヤ-ロープ形状を有する絹繊維骨格のマトリックス。
【請求項７０】
絹繊維骨格のマトリックスが、カイコの絹、クモの絹、遺伝子操作細胞、トランスジェニック植物およびトランスジェニック動物からの絹、培養細胞からの絹、天然の絹、天然の絹遺伝子のクローニングした全配列または部分配列からの絹、ならびに絹または絹様配列をコードする合成遺伝子からの絹からなる群より選択される絹フィブロインから構成される、請求項69記載のマトリックス。
【請求項７１】
絹繊維骨格のマトリックスがカイコガのカイコ繊維から得られるフィブロインを含む、請求項70記載のマトリックス。
【請求項７２】
マトリックスが絹とコラーゲン繊維との複合体を含む、請求項69記載のマトリックス。
【請求項７３】
マトリックスが、絹および絹フィブロイン繊維と、一つまたは複数の絹の泡沫、被膜、メッシュ、またはスポンジとの複合体を含む、請求項69記載のマトリックス。
【請求項７４】
マトリックスが、絹と、コラーゲン、ポリ乳酸またはそのコポリマー、ポリグリコール酸またはそのコポリマー、ポリ無水物、エラスチン、グリコサミノグリカン、および多糖類からなる群より選択される一つまたは複数の分解性のポリマーとの複合体を含む、請求項69記載のマトリックス。
【請求項７５】
マトリックスが、絹と、ポリエチレン、ポリスチレン、ポリメチルメタクリレート、ポリエチレンオキシド、およびポリウレタンからなる群より選択される一つまたは複数の非分解性ポリマーとの複合体を含む、請求項69記載のマトリックス。
【請求項７６】
自己由来細胞が多能性細胞または線維芽細胞である、請求項69記載のマトリックス。
【請求項７７】
線維芽細胞が成熟ヒト前十字靱帯線維芽細胞である、請求項76記載のマトリックス。
【請求項７８】
多能性細胞または線維芽細胞が、マトリックス上で増殖および分化して、所望の靱帯または腱を形成する、請求項76記載のマトリックス。
【請求項７９】
産生される靱帯または腱が、前十字靱帯、後十字靱帯、回旋腱板腱、肘の内側側副靱帯、手の屈筋腱、ならびに果外側靱帯からなる群より選択される、請求項78記載のマトリックス。
【請求項８０】
産生される靱帯が前十字靱帯である、請求項79記載のマトリックス。
【請求項８１】
以下の段階を含む、エクスビボで既定のタイプの靱帯または腱を産生する方法：
（a）マトリックス形成の前後いずれかに、マトリックス内に細胞を均一に固定するために、円柱形の絹繊維骨格マトリックスの内部またはその上に多能性細胞または線維芽細胞を播種する段階；
（b）播種したマトリックスの反対の端部に第一および第二のアンカーを結合させる段階；ならびに
（c）細胞の増殖および再生に適した条件下で段階（b）のアンカーを結合させたマトリックスにおいて細胞を培養する段階。
【請求項８２】
マトリックスが、ワイヤ-ロープ形状を有する繊維を含む、請求項81記載の方法。
【請求項８３】
絹繊維骨格のマトリックスが、カイコの絹、クモの絹、遺伝子操作細胞、トランスジェニック植物およびトランスジェニック動物からの絹、培養細胞からの絹、天然の絹、天然の絹遺伝子のクローニングした全配列または部分配列からの絹、ならびに絹または絹様配列をコードする合成遺伝子からの絹からなる群より選択される絹フィブロインから構成される、請求項81記載の方法。
【請求項８４】
絹繊維骨格のマトリックスがカイコガのカイコ繊維から得られるフィブロインを含む、請求項83記載の方法。
【請求項８５】
マトリックスが絹とコラーゲン繊維との複合体を含む、請求項81記載の方法。
【請求項８６】
マトリックスが、絹および絹フィブロイン繊維と、一つまたは複数の絹の泡沫、被膜、メッシュ、またはスポンジとの複合体を含む、請求項81記載の方法。
【請求項８７】
マトリックスが、絹と、コラーゲン、ポリ乳酸またはそのコポリマー、ポリグリコール酸またはそのコポリマー、ポリ無水物、エラスチン、グリコサミノグリカン、および多糖類からなる群より選択される一つまたは複数の分解性のポリマーとの複合体を含む、請求項81記載の方法。
【請求項８８】
マトリックスが、絹と、ポリエチレン、ポリスチレン、ポリメチルメタクリレート、ポリエチレンオキシド、およびポリウレタンからなる群より選択される一つまたは複数の非分解性ポリマーとの複合体を含む、請求項81記載の方法。
【請求項８９】
多能性細胞または線維芽細胞が自己由来である、請求項81記載の方法。
【請求項９０】
多能性細胞または線維芽細胞が同種異系である、請求項81記載の方法。
【請求項９１】
多能性細胞が、骨髄間質細胞および成人細胞または胚幹細胞からなる群より選択される、請求項81記載の方法。
【請求項９２】
線維芽細胞が成熟ヒトACL線維芽細胞である、請求項81記載の方法。
【請求項９３】
多能性細胞または線維芽細胞が、マトリックス上で増殖および分化して、前十字靱帯を形成する、請求項81記載の方法。
【請求項９４】
マトリックス上での多能性細胞または線維芽細胞の増殖および分化を増強する表面改変物質をさらに含む、請求項81記載の方法。
【請求項９５】
アンカーが、ヒドロキシアパタイト、脱塩骨、チタン、ステンレススチール、高密度ポリエチレン、ダクロンおよびテフロンからなる群より選択される材料を含む、請求項81記載の方法。
【請求項９６】
段階（c）が、第一および第二のアンカーの一つまたは双方の運動による一つまたは複数の機械的な力をマトリックスが受ける段階をさらに含む、請求項81記載の方法。
【請求項９７】
力が第二のアンカーに関して第一のアンカーに対して独立しているが、同時に適用される、機械的な力に、周期的な並進的ひずみおよび回転的ひずみを適用することが含まれる、請求項96記載の方法。
【請求項９８】
機械的な力の大きさ、持続、および組み合わせが、インビボで天然の靱帯または腱が経験するものに近づくように培養期間において変化する、請求項96記載の方法。
【請求項９９】
段階（b）において第一のアンカーと第二のアンカーとに結合した播種されたマトリックスが、インビボで既定の靱帯または腱が経験する化学刺激を模倣する条件下でさらに培養される、請求項96記載の方法。
【請求項１００】
マトリックスが、バイオリアクターにおいて培養されて機械的な力を受ける、請求項96記載の方法。
【請求項１０１】
螺旋状に構築される線維を有する既定の靱帯または腱を産生するように経時的に適用される機械的な力の組み合わせであり、屈曲および伸長の組み合わせをシミュレートする機械的な力の組み合わせが適用される、請求項96記載の方法。
【請求項１０２】
産生される靱帯または腱が、前十字靱帯、後十字靱帯、回旋腱板腱、肘の内側側副靱帯、手の屈筋腱、顎関節の靱帯および腱、ならびに果外側靱帯からなる群より選択される、請求項81記載の方法。
【請求項１０３】
産生される靱帯または腱が前十字靱帯である、請求項102記載の方法。
【請求項１０４】
機械的な力が、インビボで前十字靱帯が経験する機械的な刺激を模倣する、請求項96記載の方法。
【請求項１０５】
以下の段階を含む、エクスビボで既定のタイプの靱帯または腱を産生する方法：
（a）マトリックス形成の前後いずれかに、マトリックス内に細胞を均一に固定するために、円柱形の絹繊維骨格マトリックスの内部またはその上に多能性細胞または線維芽細胞を播種する段階；
（b）播種したマトリックスの反対の端部に第一および第二のアンカーを結合させる段階；ならびに
（c）第一および第二のアンカーの一つまたは双方の運動による一つまたは複数の機械的な力をマトリックスに与えながら、細胞の増殖および再生に適した条件下で段階（b）のアンカーを結合させたマトリックスにおいて細胞を培養する段階。
【請求項１０６】
マトリックスが、ワイヤ-ロープ形状を有する繊維を含む、請求項105記載の方法。
【請求項１０７】
絹繊維骨格のマトリックスが、カイコの絹、クモの絹、遺伝子操作細胞、トランスジェニック植物およびトランスジェニック動物からの絹、培養細胞からの絹、天然の絹、天然の絹遺伝子のクローニングした全配列または部分配列からの絹、ならびに絹または絹様配列をコードする合成遺伝子からの絹からなる群より選択される絹フィブロインから構成される、請求項105記載の方法。
【請求項１０８】
絹繊維骨格のマトリックスがカイコガのカイコ繊維から得られるフィブロインを含む、請求項107記載の方法。
【請求項１０９】
マトリックスが絹とコラーゲン繊維との複合体を含む、請求項105記載の方法。
【請求項１１０】
マトリックスが、絹および絹フィブロイン繊維と、一つまたは複数の絹の泡沫、被膜、メッシュ、またはスポンジとの複合体を含む、請求項105記載の方法。
【請求項１１１】
マトリックスが、絹と、コラーゲン、ポリ乳酸またはそのコポリマー、ポリグリコール酸またはそのコポリマー、ポリ無水物、エラスチン、グリコサミノグリカン、および多糖類からなる群より選択される一つまたは複数の分解性のポリマーとの複合体を含む、請求項105記載の方法。
【請求項１１２】
マトリックスが、絹と、ポリエチレン、ポリスチレン、ポリメチルメタクリレート、ポリエチレンオキシド、およびポリウレタンからなる群より選択される一つまたは複数の非分解性ポリマーとの複合体を含む、請求項105記載の方法。
【請求項１１３】
多能性細胞または線維芽細胞が自己由来である、請求項105記載の方法。
【請求項１１４】
多能性細胞または線維芽細胞が同種異系である、請求項105記載の方法。
【請求項１１５】
多能性細胞が、骨髄間質細胞および成人細胞または胚幹細胞からなる群より選択される、請求項105記載の方法。
【請求項１１６】
多能性細胞が成熟ヒトACL線維芽細胞である、請求項105記載の方法。
【請求項１１７】
多能性細胞または線維芽細胞が、マトリックス上で増殖および分化して、既定の靱帯または腱を形成する、請求項105記載の方法。
【請求項１１８】
マトリックス上での多能性細胞または線維芽細胞の増殖および分化を増強する表面改変物質をさらに含む、請求項105記載の方法。
【請求項１１９】
アンカーが、ヒドロキシアパタイト、脱塩骨、チタン、ステンレススチール、高密度ポリエチレン、ダクロンおよびテフロンからなる群より選択される材料を含む、請求項105記載の方法。
【請求項１２０】
第二のアンカーに関して第一のアンカーに対して独立しているが、同時に適用される機械的な力に、周期的な並進的ひずみおよび回転的ひずみを適用することが含まれる、請求項105記載の方法。
【請求項１２１】
機械的な力の大きさ、持続、および組み合わせが、インビボで天然の靱帯または腱が経験するものに近づくように培養期間において変化する、請求項105記載の方法。
【請求項１２２】
段階（b）において第一のアンカーと第二のアンカーとに結合した播種されたマトリックスが、インビボで既定の靱帯または腱が経験する化学刺激を模倣する条件下でさらに培養される、請求項105記載の方法。
【請求項１２３】
マトリックスが、バイオリアクターにおいて培養されて機械的な力を受ける、請求項105記載の方法。
【請求項１２４】
螺旋状に構築される繊維を有する既定の靱帯または腱を産生するように経時的に適用される機械的な力の組み合わせであり、屈曲および伸長の組み合わせをシミュレートする機械的な力の組み合わせが適用される、請求項105記載の方法。
【請求項１２５】
産生される靱帯または腱が、前十字靱帯、後十字靱帯、回旋腱板腱、肘の内側側副靱帯、手の屈筋腱、顎関節の靱帯および腱、ならびに果外側靱帯からなる群より選択される、請求項105記載の方法。
【請求項１２６】
産生される靱帯が前十字靱帯である、請求項125記載の方法。
【請求項１２７】
機械的な力が、インビボで既定の靱帯または腱が経験する機械的な刺激を模倣する、請求項105記載の方法。
【請求項１２８】
ワイヤ-ロープ形状を有し、エクスビボで既定の靱帯または腱を産生するようにマトリックス上で増殖および分化する多能性細胞または線維芽細胞を播種した絹繊維骨格のマトリックスを含む生物工学による組織。
【請求項１２９】
絹繊維骨格のマトリックスが、カイコの絹、クモの絹、遺伝子操作細胞、トランスジェニック植物およびトランスジェニック動物からの絹、培養細胞からの絹、天然の絹、天然の絹遺伝子のクローニングした全配列または部分配列からの絹、ならびに絹または絹様配列をコードする合成遺伝子からの絹からなる群より選択される絹フィブロインから構成される、請求項128記載の生物工学による組織。
【請求項１３０】
マトリックスが絹とコラーゲン繊維との複合体を含む、請求項128記載の生物工学による組織。
【請求項１３１】
マトリックスが、絹と、コラーゲン、ポリ乳酸またはそのコポリマー、ポリグリコール酸またはそのコポリマー、ポリ無水物、エラスチン、グリコサミノグリカン、および多糖類からなる群より選択される一つまたは複数の分解性のポリマーとの複合体を含む、請求項128記載の生物工学による組織。
【請求項１３２】
マトリックスが、絹と、ポリエチレン、ポリスチレン、ポリメチルメタクリレート、ポリエチレンオキシド、およびポリウレタンからなる群より選択される一つまたは複数の非分解性ポリマーとの複合体を含む、請求項128記載の生物工学による組織。
【請求項１３３】
多能性細胞または線維芽細胞が自己由来または同種異系である、請求項128記載の生物工学による組織。
【請求項１３４】
マトリックス上で多能性細胞または線維芽細胞の増殖および分化を増強する表面改変物質をさらに含む、請求項128記載の生物工学による組織。
【請求項１３５】
自己由来または同種異系細胞が、それを必要とするレシピエントに移植するために分化して靱帯または腱を形成する同種異系移植片または自家移植片を形成する、請求項128記載の生物工学による組織。
【請求項１３６】
産生される靱帯または腱が、ACL、後十字靱帯、回旋腱板腱、肘の内側側副靱帯、手の屈筋腱、顎関節の靱帯および腱、ならびに果外側靱帯からなる群より選択される、請求項128記載の生物工学による組織。
【請求項１３７】
産生される靱帯または腱が前十字靱帯である、請求項136記載の生物工学による組織。
【請求項１３８】
以下の段階を含む方法によって産生される生物工学による組織：
（a）マトリックス形成の前後いずれかに、マトリックス内に細胞を均一に固定するために、円柱形の絹繊維骨格マトリックスの内部またはその上に多能性細胞または線維芽細胞を播種する段階；
（b）マトリックスの反対の端部に第一および第二のアンカーを結合させる段階；ならびに
（c）細胞の増殖および再生に適した条件下で段階（b）のアンカーを結合させたマトリックスにおいて細胞を培養する段階。
【請求項１３９】
マトリックスが、ワイヤ-ロープ形状を有する線維を含む、請求項138記載の生物工学による組織。
【請求項１４０】
絹繊維骨格のマトリックスが、カイコの絹、クモの絹、遺伝子操作細胞、トランスジェニック植物およびトランスジェニック動物からの絹、培養細胞からの絹、天然の絹、天然の絹遺伝子のクローニングした全配列または部分配列からの絹、ならびに絹または絹様配列をコードする合成遺伝子からの絹からなる群より選択される絹フィブロインから構成される、請求項138記載の生物工学による組織。
【請求項１４１】
マトリックスが絹とコラーゲン繊維との複合体を含む、請求項138記載の生物工学による組織。
【請求項１４２】
マトリックスが、絹と、コラーゲン、ポリ乳酸またはそのコポリマー、ポリグリコール酸またはそのコポリマー、ポリ無水物、エラスチン、グリコサミノグリカン、および多糖類からなる群より選択される一つまたは複数の分解性のポリマーとの複合体を含む、請求項138記載の生物工学による組織。
【請求項１４３】
マトリックスが、絹と、ポリエチレン、ポリスチレン、ポリメチルメタクリレート、ポリエチレンオキシド、およびポリウレタンからなる群より選択される一つまたは複数の非分解性ポリマーとの複合体を含む、請求項138記載の生物工学による組織。
【請求項１４４】
多能性細胞または線維芽細胞が自己由来または同種異系である、請求項138記載の生物工学による組織。
【請求項１４５】
多能性細胞または線維芽細胞がマトリックス上で増殖および分化して組織を形成する、請求項138記載の生物工学による組織。
【請求項１４６】
マトリックス上での多能性細胞または線維芽細胞の増殖および分化を増強する表面改変物質をさらに含む、請求項138記載の生物工学による組織。
【請求項１４７】
段階（c）が、第一および第二のアンカーの一つまたは双方の動作による一つまたは複数の機械的な力をマトリックスが受ける段階をさらに含む、請求項138記載の生物工学による組織。
【請求項１４８】
第二のアンカーに関して第一のアンカーに対して独立しているが、同時に適用される機械的な力に、周期的な並進的ひずみおよび回転的ひずみを適用することが含まれる、請求項147記載の生物工学による組織。
【請求項１４９】
機械的な力の大きさ、持続、および組み合わせが、インビボで天然の組織が経験するものに近づくように培養期間において変化する、請求項147記載の生物工学による組織。
【請求項１５０】
機械的な力が、インビボで天然の組織が経験する機械的刺激を模倣する、請求項147記載の生物工学による組織。
【請求項１５１】
段階（b）において第一のアンカーと第二のアンカーとに結合した播種されたマトリックスが、インビボで天然の組織が経験する化学刺激を模倣する条件下でさらに培養される、請求項147記載の生物工学による組織。
【請求項１５２】
マトリックスが、バイオリアクターにおいて培養されて機械的な力を受ける、請求項147記載の生物工学による組織。
【請求項１５３】
螺旋状に構築される繊維を有する組織を産生するように経時的に適用される機械的な力の組み合わせであり、屈曲および伸長の組み合わせをシミュレートする機械的な力の組み合わせが適用される、請求項147記載の生物工学による組織。
【請求項１５４】
多能性細胞または線維芽細胞がマトリックス上で増殖および分化して、所望の靱帯または腱を形成する、請求項138記載の生物工学による組織。
【請求項１５５】
靱帯または腱が、前十字靱帯、後十字靱帯、回旋腱板腱、肘の内側側副靱帯、手の屈筋腱、顎関節の靱帯および腱、ならびに果外側靱帯からなる群より選択される、請求項154記載の生物工学による組織。
【請求項１５６】
産生される靱帯が前十字靱帯である、請求項155記載の生物工学による組織。
【請求項１５７】
以下の段階を含む方法によって産生される生物工学による組織：
（a）マトリックス形成の前後いずれかに、マトリックス内に細胞を均一に固定するために、円柱形の絹繊維骨格マトリックスの内部またはその上に多能性細胞を播種する段階；
（b）マトリックスの反対の端部に第一および第二のアンカーを結合させる段階；ならびに
（c）第一および第二のアンカーの一つまたは双方の運動による一つまたは複数の機械的な力をマトリックスに与えながら、細胞の増殖および再生に適した条件下で段階（b）の結合したマトリックスにおいて細胞を培養する段階。
【請求項１５８】
マトリックスが、ワイヤ-ロープ形状を有する繊維を含む、請求項157記載の生物工学による組織。
【請求項１５９】
絹繊維骨格のマトリックスが、カイコの絹、クモの絹、遺伝子操作細胞、トランスジェニック植物およびトランスジェニック動物からの絹、培養細胞からの絹、天然の絹、天然の絹遺伝子のクローニングした全配列または部分配列からの絹、ならびに絹または絹様配列をコードする合成遺伝子からの絹からなる群より選択される絹フィブロインから構成される、請求項157記載の生物工学による組織。
【請求項１６０】
マトリックスが絹とコラーゲン繊維との複合体を含む、請求項157記載の生物工学による組織。
【請求項１６１】
マトリックスが、絹と、コラーゲン、ポリ乳酸またはそのコポリマー、ポリグリコール酸またはそのコポリマー、ポリ無水物、エラスチン、グリコサミノグリカン、および多糖類からなる群より選択される一つまたは複数の分解性のポリマーとの複合体を含む、請求項157記載の生物工学による組織。
【請求項１６２】
マトリックスが、絹と、ポリエチレン、ポリスチレン、ポリメチルメタクリレート、ポリエチレンオキシド、およびポリウレタンからなる群より選択される一つまたは複数の非分解性ポリマーとの複合体を含む、請求項157記載の生物工学による組織。
【請求項１６３】
多能性細胞または線維芽細胞が自己由来または同種異系である、請求項157記載の生物工学による組織。
【請求項１６４】
多能性細胞または線維芽細胞が、マトリックス上で増殖および分化して、所望の靱帯または腱を形成する、請求項157記載の生物工学による組織。
【請求項１６５】
マトリックス上での多能性細胞または線維芽細胞の増殖および分化を増強する表面改変物質をさらに含む、請求項157記載の生物工学による組織。
【請求項１６６】
第二のアンカーに関して第一のアンカーに対して独立しているが、同時に適用される機械的な力に、周期的な並進的ひずみおよび回転的ひずみを適用することが含まれる、請求項157記載の生物工学による組織。
【請求項１６７】
機械的な力の大きさ、持続、および組み合わせが、インビボで天然の組織が経験するものに近づくように培養期間において変化する、請求項157記載の生物工学による組織。
【請求項１６８】
機械的な力が、インビボで天然の組織が経験する機械刺激を模倣する、請求項157記載の生物工学による組織。
【請求項１６９】
段階（b）における第一のアンカーと第二のアンカーとに結合した播種されたマトリックスが、インビボで天然の組織が経験する化学刺激を模倣する条件下でさらに培養される、請求項157記載の生物工学による組織。
【請求項１７０】
マトリックスが、バイオリアクターにおいて培養されて機械的な力を受ける、請求項157記載の生物工学による組織。
【請求項１７１】
螺旋状に構築される繊維を有する組織を産生するように経時的に適用される機械的な力の組み合わせであり、屈曲および伸長の組み合わせをシミュレートする機械的な力の組み合わせが適用される、請求項157記載の生物工学による組織。
【請求項１７２】
靱帯または腱が、前十字靱帯、後十字靱帯、回旋腱板腱、肘の内側側副靱帯、手の屈筋腱、顎関節の靱帯および腱、ならびに果外側靱帯からなる群より選択される、請求項164記載の生物工学による靱帯。
【請求項１７３】
産生される靱帯が前十字靱帯である、請求項172記載の生物工学による靱帯。
【請求項１７４】
ワイヤ-ロープ形状を有し、マトリックス上で増殖および分化してエクスビボで前十字靱帯を産生する骨髄間質細胞を播種した絹繊維骨格のマトリックス。
【請求項１７５】
セリシン抽出カイコフィブロイン繊維を含む絹繊維骨格のマトリックス組成物であって、該繊維が生体適合性であり、かつ繊維束に螺旋状に構築され、ここで該マトリックスは該フィブロイン周辺細胞の内殖を支持し、かつ生体分解性である、絹繊維骨格のマトリックス組成物。
【請求項１７６】
絹繊維骨格のマトリックスがカイコガから得られるフィブロイン繊維を含む、請求項175記載のマトリックス組成物。
【請求項１７７】
マトリックスがセリシン抽出フィブロイン繊維とコラーゲン繊維との複合体を含む、請求項175記載のマトリックス組成物。
【請求項１７８】
マトリックスが、セリシン抽出フィブロイン繊維と、一つまたは複数の絹の泡沫、被膜、メッシュ、もしくはスポンジとの複合体を含む、請求項175記載のマトリックス組成物。
【請求項１７９】
マトリックスが、セリシン抽出フィブロイン繊維と、コラーゲン、ポリ乳酸またはそのコポリマー、ポリグリコール酸またはそのコポリマー、ポリ無水物、エラスチン、グリコサミノグリカン、および多糖類からなる群より選択される一つまたは複数の分解性のポリマーとの複合体を含む、請求項175記載のマトリックス組成物。
【請求項１８０】
マトリックス上に播種される多能性細胞または線維芽細胞をさらに含む、請求項175記載のマトリックス組成物。
【請求項１８１】
多能性細胞または線維芽細胞が自己由来である、請求項180記載のマトリックス組成物。
【請求項１８２】
多能性細胞または線維芽細胞が同種異系である、請求項181記載のマトリックス組成物。
【請求項１８３】
多能性細胞が、骨髄間質細胞および成人細胞または胚幹細胞からなる群より選択される、請求項181記載のマトリックス組成物。
【請求項１８４】
線維芽細胞が成熟ヒトACL線維芽細胞である、請求項181記載のマトリックス組成物。
【請求項１８５】
多能性細胞または線維芽細胞が、マトリックス上で増殖および分化して、既定の靱帯または腱を形成する、請求項181記載のマトリックス組成物。
【請求項１８６】
マトリックス上での多能性細胞または線維芽細胞の増殖および分化を増強する表面改変物質をさらに含む、請求項181記載のマトリックス組成物。
【請求項１８７】
産生される靱帯または腱の形状を含むマトリックスが、前十字靱帯、後十字靱帯、回旋腱板腱、肘の内側側副靱帯、手の屈筋腱、顎関節の靱帯および腱、ならびに果外側靱帯からなる群より選択される、請求項175記載のマトリックス組成物。
【請求項１８８】
靱帯が前十字靱帯である、請求項187記載のマトリックス組成物。
【請求項１８９】
螺旋状に構築される線維が円柱形状を含む、請求項175記載のマトリックス組成物。
【請求項１９０】
表面改変がアルギニン−グリシン−アスパルテートペプチドを含む、請求項186記載のマトリックス組成物。
【請求項１９１】
マトリックスが2000Nより強い最終引張力および100〜600N/mmの間の線形硬直を含む、請求項175記載のマトリックス組成物。
【請求項１９２】
セリシン抽出生体分解性カイコフィブロイン繊維の螺旋状に構築される線維束、およびこれらに結合した骨髄間質細胞を含む絹繊維骨格のマトリックス組成物。
【請求項１９３】
実質的にセリシン抽出カイコフィブロイン繊維を含む組成物であって、該繊維が生体分解性であり、かつ繊維束に螺旋状に構築され、かつ2000Nより強い最終引張力および100〜600N/mmの間の線形硬直を含むマトリックスに構築され、ここでセリシンは該繊維から完全に除去される、組成物。