【手続補正書】
【提出日】平成18年9月22日(2006.9.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
重篤患者を処置または治療するための、マンナン結合レクチン（ＭＢＬ）を含有する医薬組成物。
【請求項２】
瀕死の重篤患者を処置または治療するための、マンナン結合レクチン（ＭＢＬ）を含有する医薬組成物。
【請求項３】
集中治療処置室（ＩＣＵ）内での生存率を増加させるための、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項４】
重篤患者が、集中治療室内に滞在する時間を軽減させるための、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項５】
重篤患者が、手術を受けた後の患者である、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項６】
重篤患者が、外傷患者である、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項７】
ＭＢＬポリペプチドモノマーが哺乳類動物のＭＢＬポリペプチドモノマーである、請求項１〜６のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項８】
哺乳類動物のＭＢＬポリペプチドモノマーが、ヒトＭＢＬポリペプチドモノマーである、請求項１〜６のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項９】
ＭＢＬが、少なくとも１つのマンナン結合レクチン（ＭＢＬ）ポリペプチドモノマー、または少なくとも１つのマンナン結合レクチン（ＭＢＬ）ポリペプチドモノマーを含んでいる少なくとも１つのマンナン結合レクチン（ＭＢＬ）ポリペプチドオリゴマーを含む、請求項１〜６いずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１０】
ＭＢＬが、少なくとも１つのマンナン結合レクチン（ＭＢＬ）ポリペプチドモノマーを含んでいる少なくとも１つのマンナン結合レクチン（ＭＢＬ）ポリペプチドオリゴマーを含む、請求項１〜６のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１１】
オリゴマーがトリマー、テトラマー、ペンタマーおよび／またはヘキサマーからなるオリゴマーの群から選択される、請求項９または１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
重篤患者の血液ＭＢＬレベルが２５０ng／ml以上に維持されるような方法で用いられる、請求項１〜１１のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１３】
重篤患者の血液ＭＢＬレベルが５００ng／ml以上に維持されるような方法で用いられる、請求項１〜１１のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１４】
重篤患者の血液ＭＢＬレベルが１０００ng／ml以上に維持されるような方法で用いられる、請求項１〜１１のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１５】
重篤患者の血液ＭＢＬレベルが１０００ng／ml〜２０００ng／mlに維持されるような方法で用いられる、請求項１〜１１のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１６】
ＩＣＵで行われる別の処置前に個体に投与される、請求項１〜１５のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１７】
別の処置と同時に、連続的にまたは別々に個体に投与される、請求項１〜１５のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１８】
医薬が、別の処置の前、間および後に個体に投与される、請求項１〜１５のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１９】
予め決められた最低ＭＢＬポリペプチド血清レベル以下のＭＢＬポリペプチド血清レベルを有する重病患者におけるＭＢＬポリペプチド血清レベルのブースターである、請求項１〜１８のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項２０】
個体の集中治療処置中の致命的な予後を予防するための、請求項１〜１９のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項２１】
重篤患者の死亡を防止するためのＭＢＬポリペプチド組成物の投与の要否を判定する方法であって、
ｉ）該患者から採取された血清中のＭＢＬポリペプチドのレベルを決定すること、
ｉｉ）該レベルに基づき集中治療の合併症の発生の確率を推定すること、
ｉｉｉ）ＭＢＬポリペプチド組成物の投与の要否を判定すること、を含む方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００５】
本発明は、重篤患者におけるＭＢＬレベルを、通常レベル、好ましくは２５０μg/1血清以上のレベル、より好ましくは、５００μg/ｌの血清以上のレベルまで、より好ましくは１０００ng/ml以上のレベルに、そして最も好ましくは１０００ng/ml〜２０００ng/mlのレベルに回復することが、集中治療室(ＩＣＵ)内の重篤患者の生存などの予後を改善するために使用され得ることを示す。しかし、本発明に従って、肝細胞を刺激して、ＭＢＬを合成および／または放出し、その結果循環するＭＢＬレベルを増加させる活性なＭＢＬ誘導体または生物学的に活性な物質群の化合物を使用して、同様の結果を得ることができるということは当業者には明からであろう。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１２】
ＭＢＬペプチドフラグメントの発現は、標準的方法によってなされ得る。例えば、ＭＢＬをコードするＤＮＡ、好ましくはｃＤＮＡの所望の領域は、上記クローンの１つから単離され、いくつかの標準的発現ベクターのいずれか１つに挿入される。発現のための好ましい領域は、海洋性 urchin A. crassispina の体腔液 (Giga et al. , J. Biol. Chem. 13: 6197,1987); チキン軟骨・コア・プロテオグリカンタンパク質(Shigaku et al. , Proc. Natl. Acad. Sci. USA 83: 5081,1986)およびＩｇＥ Ｆｃ 受容体(Ikuta et al. , Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84: 819,1987)から単離された糖鎖結合レクチンをコードしている領域である。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２０】
天然のヒトＭＢＬタンパク質におけるサブユニットの実際の数は議論のまとである。超遠心分離の使用によって、Lipscombeらは、２５％のヒト血清ＭＢＬが２-３個のトリマーと６個のトリマーのサイズを達成する非常に小さなフラクションから作られることを示唆するデータを得た(Lipscombe, R. J. , et al. (1995) Immunology 85: 660-667)。相対的定量化は、化学ルミネセンスによって現像されるWestern blotの濃度計測によって実施された。イオン交換クロマトグラフィーからの画分のＳＤＳ−ＰＡＧＥ分析により、共有結合したＭＢＬサブユニット鎖の優勢種がテトラマーからなるが、一方でペンタマーまたはヘキサマー複合体のみが補体を活性化したことがわかった(Lu, J., et al. (1990) J. Immunol. 144: 2287-2294. )。これに対して、ゲル浸透クロマトグラフィー分析法(ＧＰＣ)は、ＭＢＬがＣｌ複合体とサイズで比較し得ることを示唆する。ＧＰＣは、ＭＢＬ分子の形成中にタンパク質同士の弱い相互作用の重要性についての試験を可能にし、また標準的なＭＢＬアッセイ技術と組合せて、ＧＰＣ画分中のＭＢＬ含量の公平な決定を可能とする条件下で実施され得る。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３５】
本明細書中「菌血症」なる用語は、特に、血液培養によって検出される血液処置中の細菌の存在を意味する。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６５】
ＭＢＬ源をクロマトグラフィーに適用後、好ましくは、ＭＢＬを溶出せずに汚染タンパク質の除去または量を低減することになる組成、ｐＨおよびイオン強度を含む変性させない緩衝液を用いてカラムが洗浄される。このような緩衝液は、カルシウム・イオンを添加したＴＢＳ（１０ｍＭのトリス緩衝液、１４５ｍｌのＮａＣｌ、ｐＨ７.４）でありうる。ＭＢＬの溶出は、ＭＢＬの効率的な溶出が可能な選択的脱着剤、例えばＥＤＴＡを加えたＴＢＳを用いて行われ、ＭＢＬオリゴマーが捕集される。このような精製方法は国際特許出願（ＷＯ００７０４３およびＷＯ９９３７６７）に記載されている。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１０４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１０４】
統計的分析
ＩＣＵに入院期間中のＭＢＬ濃度の変化がフリードマン試験によって解析された。両側確率値とのスピアマン順位相関は変数間の関連性の強度を評価するのに使われた。基準ＭＢＬレベルの結果因子（死亡率、急性腎不全、菌血症、抗生剤治療の長期必要性、多発性神経障害）に対する影響は、多変量ロジスティック回帰分析によって評価された。加えて多変量ロジスティック回帰分析を用いて、時間に伴うＭＢＬの変化が臨床的結果因子を説明するかどうかを評価した。データは特に断らない限り四分位範囲を伴う中央値として現わされ、統計的有意性はＰ＜０.０５とみなされた。すべての統計計算はマッキントッシュ用Statview ５.０.１（SAS Institute Inc., North Carolina, USA）にて行われた。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１２】
本発明において、以前に免疫抑制状態でなかった２４３人のＩＣＵ治療患者の動向分析から明らかとなったことは、免疫応答性のある重篤患者でＭＢＬレベルが低いことと関連した脆弱性のために、ＩＣＵ中のＭＢＬレベルは非生存者よりも生存者の方がほぼ３倍高かったことである。ＭＢＬの低レベルとＩＣＵ治療患者の予後との関係は、以前にPeterslund ら（Lancet, 2001 Aug 25; 358(9282): 637-8）が示唆したように、重篤なＭＢＬ欠乏に限られたばかりでなく、機能的ＭＢＬ欠乏の切捨てレベルとして＜５００ｎｇ／ｍｌを用いたときでさえ明らかであった。