【誤訳訂正書】
【提出日】平成18年8月22日(2006.8.22)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０００１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、ある化合物に関連する。特に、本発明は、１１β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ（１１β−ＨＳＤ）を阻害し得る化合物を提供する。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１３】
１１β−ＨＳＤ１型は、特定の組織が、コルチゾンをコルチゾールに変換して、局所的な糖質コルチコイド活性を増加させ、適合応答を増強することを可能にし、糖質コルチコイドの活性の失敗を生じ得る２型活性を相殺する［１０］。ストレス応答の増強は、脳において特に重要であり、高レベルの１１β−ＨＳＤ１型が、海馬周辺で見られ、さらに、この酵素の役割を解明する。１１β−ＨＳＤ１型はまた、肝細胞成熟において重要な役割を果たすようである［８］。１１β−ＨＳＤ１型酵素の別の新生の役割は、多くの非ステロイド性カルボニル化合物の解毒プロセスにあり、多くの毒性化合物のカルボニル基の還元は、溶解性を高め、従って、その外分泌を増加させるための一般的な方法である。１１β−ＨＳＤ１型酵素は、最近、肺組織において活性であることが示されている［１１］。１型の活性は、生後までは見られず、従って、妊娠の間に喫煙する母親がその子供に対して、子供がこの化合物を代謝的に解毒し得るようになる前に、タバコの有害な作用を与える。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２８】
【化２４】
2006514614.tif 000001
を有する化合物を提供し、ここで、
Ｒ１およびＲ２のうちの１つは、以下の式：
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４０】
代替的な観点から、本発明は、肝臓インシュリン抵抗性、脂肪組織のインシュリン抵抗性、筋肉のインシュリン抵抗性、糖質コルチコイドにより増強された神経毒に起因するニューロンの喪失または機能不全ならびに上記の状態の任意の組合せからなる群から選択される状態に罹患しているヒトもしくは動物被験体の処置方法を提供し、この方法は、上記患者に本発明に記載される化合物の薬学的に活性な量を含む医薬を投与する工程を包含する。
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００６１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００６１】
【化３６】
2006514614.tif 000002
で置換された環を形成し、ここで、Ｒ３は、Ｈまたは置換基である。
【誤訳訂正６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００９２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００９２】
好ましくは、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５の各々は、独立して、Ｈ、ハロゲン、アルキル（例えば、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、フェニル、Ｏ−アルキル、Ｏ−フェニル、ニトリル、ハロアルキル（例えば、ＣＦ３、ＣＣｌ３およびＣＢｒ３）、カルボキシアルキル、−ＣＯ２Ｈ、ＣＯ２アルキルおよびＮＨ−アセチル基から選択される。
【誤訳訂正７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００９５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００９５】
（置換基）
本発明の化合物は、本明細書中に示される環系以外の置換基を有し得る。さらに、本明細書中の環系は、一般式として与えられ、このように解釈されるべきである。所定の環メンバー上に具体的に示される置換基が存在しない場合、環メンバーは、任意の置換基で置換されていてもよく、Ｈはほんの一例である。環系は、１以上の程度の不飽和を含み得、例えば、いくつかの局面において、環系の１つ以上の環は芳香族である。環系は、炭素環式であり得るか、または、１つ以上のヘテロ原子を含み得る。
【誤訳訂正８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１１５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１１５】
代表的なヒドロカルビル基は、炭化水素基である。ここで、用語「炭化水素」とは、基が直鎖状、分枝もしくは環状であり得るアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、またはアリール基のうちのいずれか１つを意味する。用語「炭化水素」はまた、必要に応じて置換されているこれらの基を含む。炭化水素が置換基を有する分枝構造である場合、置換は、炭化水素骨格上または分枝鎖上のいずれかであり得る；あるいは、置換は、炭化水素骨格および分枝鎖上にあり得る。
【誤訳訂正９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１２１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１２１】
本発明のいくつかの局面において、１つ以上のヒドロカルビル基は、独立して、アルケン基から選択される。代表的なアルケン基としては、Ｃ１〜Ｃ１０アルケン基、Ｃ１−Ｃ６アルケン基、Ｃ１−Ｃ３アルケン基（例えば、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６またはＣ７アルケン基）を含む。好ましい局面において、アルケン基は、１、２または３のＣ＝Ｃ結合を含む。好ましい局面において、アルケン基は、１つのＣ＝Ｃ結合を含む。いくつかの好ましい局面において、少なくとも１つのＣ＝Ｃ結合または１つのみのＣ＝Ｃ結合は、アルケン鎖のＣ末端にあり、すなわち、結合は、環系に対して鎖の遠位端にある。
【誤訳訂正１０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１２６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１２６】
ここで、用語「酸素炭化水素」とは、基が直鎖、分枝鎖もしくは環状であり得るアルコキシ基、オキシアルケニル基、オキシアルキニル基、またはオキシアリール基のいずれか１つを意味する。用語「酸素炭化水素」はまた、必要に応じて置換されているこれらの基を含む。酸素炭化水素が、置換基を有する分枝構造である場合、置換は、炭化水素骨格上または分枝鎖上のいずれかであり得る；あるいは、置換は、炭化水素骨格上および分枝鎖上であり得る。
【誤訳訂正１１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１２７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１２７】
代表的には、オキシヒドロカルビル基は、式Ｃ１〜６Ｏ（例えば、Ｃ１〜３Ｏ）のものである。
【誤訳訂正１２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１３３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１３３】
レポーター分子の例としては、（β−ガラクトシダーゼ、インベルターゼ、緑色蛍光タンパク質、ルシフェラーゼ、クロラムフェニコール、アセチルトランスフェラーゼ、（−グルクロニダーゼ、エキソ−グルカナーゼおよびグルコアミラーゼが挙げられるが、これらに限定されない。あるいは、放射標識されるかまたは蛍光タグ標識されたヌクレオチドは、新生転写物に取り込まれ得、これは、次いで、オリゴヌクレオチドプローブに結合する場合に、同定される。
【誤訳訂正１３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１７９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１７９】
異なる送達系に依存した異なる組成物／処方物の要求が存在し得る。例として、本発明の薬学的組成物は、処方されて、ミニポンプを用いてかまたは粘膜経路 によって（例えば、吸入のための経鼻スプレーもしくはエーロゾルまたは摂取可能溶液として）送達され得るか、または組成物が送達（例えば、静脈内経路によるか、筋内経路によるか、または皮下経路による）のために注射可能な形態で処方される非経口送達される。あるいは、処方物は両方の経路によって送達されるように設計され得る。
【誤訳訂正１４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１８４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１８４】
さらに、または代替的に、本発明の化合物は、生物学的応答の修飾因子と組合わせて使用され得る。
【誤訳訂正１５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１８８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１８８】
さらなる例として、本発明の薬剤は、一日あたり１〜４回、好ましくは１日あたり１回または２回のレジメンに従って投与され得る。任意の特定の患者に対する特定の用量レベルおよび投薬頻度は、変動し得、そして種々の因子（使用される特定の化合物の活性、この化合物の代謝安定性および作用の長さ、年齢、体重、全身の健康、性別、食事、投与形式および時間、排出速度、薬物の組み合わせ、特定の状態の重篤度、および宿主が受ける治療を含む）に依存する。
【誤訳訂正１６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１９１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１９１】
従って、薬学的投与に関して、本発明の化合物は、従来の薬学的処方技術ならびに薬学的キャリア、アジュバント、賦形剤、希釈剤などを用いて任意の適切な様式で、通常非経口投与のために、処方され得る。おおよその有効用量の割合は、１〜１０００ｍｇ／日、例えば、１０〜９００ｍｇ／日またはさらに１００〜８００ｍｇ／日の範囲であり得、問題の化合物の個々の活性に依存し、そしてこれは、平均体重（７０Ｋｇ）の患者に対してである。好ましくそしてより活性である化合物に関する、より有用な投薬量の割合は、２００〜８００ｍｇ／日、より好ましくは２００〜５００ｍｇ／日、最も好ましくは２００〜２５０ｍｇ／日の範囲である。これらは、単一投薬レジメンで提供され得、分割された投薬レジメンおよび／または複数の投薬レジメンが、数日間にわたって続く。経口投与に関して、これらは、単一用量あたり１００〜５００ｍｇの化合物を含む錠剤、カプセル、溶液または懸濁液で処方され得る。あるいは、および好ましくは、この化合物は、適切な非経口的に投与可能なキャリア中に、非経口投与のために処方され、そして２００〜８００ｍｇ、好ましくは２００〜５００ｍｇ、より好ましくは２００〜２５０ｍｇの範囲の単一日投薬量の割合を提供する。しかし、このような有効日用量は、活性成分の本来の活性、患者の体重に依存して変動し、このような変動は、当該分野および医師の判断の範囲内である。
【誤訳訂正１７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２２１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２２１】
例えば、本発明の化合物または組成物は、ＷＯ−Ａ−９９／５２８９０に列挙される障害の処置において有用であり得る（すなわち）：
さらに（あるいは）本発明の化合物または組成物は、ＷＯ−Ａ−９８／０５６３５に列挙される障害の処置において有用であり得る。参照を容易にするために、そのリストの一部をここに挙げる：糖尿病（ＩＩ型糖尿病を含む）、肥満、癌、炎症または炎症性疾患、皮膚科障害、熱、心血管効果、出血、凝固および急性期反応、悪液質、拒食症、急性感染、ＨＩＶ感染、ショック状態、宿主対移植片反応、自己免疫疾患、再還流傷害、髄膜炎、片頭痛、およびアスピリン依存性抗血栓症；腫瘍増殖、侵入および伝播、新脈管形成、転移、悪性、腹水および悪性胸水；脳虚血、虚血性心疾患、変形性関節症、慢性関節リウマチ、骨粗しょう症、喘息、多発性硬化症、神経変性、アルツハイマー病、アテローム性動脈硬化症、発作、血管炎、クローン病および潰瘍性大腸炎；歯周炎、歯肉炎；乾癬、アトピー性皮膚炎、慢性潰瘍、表皮水疱症；角膜潰瘍、網膜症および外科創傷治癒；鼻炎、アレルギー性結膜炎、湿疹、アナフィラキシー；再狭窄、うっ血性心不全、子宮内膜症、アテローム性動脈硬化症または内膜硬化症。
【誤訳訂正１８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２３５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２３５】
（ラット肝臓およびラット腎臓のμｌあたりのタンパク質量）
ラット肝臓およびラット腎臓におけるタンパク質量を決定する必要があった。実験をＢｒａｄｆｏｒｄ法に従って行なった［１４］。以下の方法を用いた：第１に、ＢＳＡ（タンパク質）溶液を調製した（１ｍｇ／ｍｌ）。１０〜１００μｇのタンパク質を含むタンパク質溶液を、チューブ内にピペッティングし、蒸留水を用いて容量を調節した。次いで、５ｍｌのタンパク質試薬をチューブに添加し、激しく混合した。吸光度を、試薬ブランクに対して、３ｍｌのキュベットにて、５９５ｎｍにて１５分後および１時間前に測定した。タンパク質の重量を、対応する吸光度に対してプロットし、ラット肝臓およびラット腎臓の細胞質におけるタンパク質濃度を決定するために使用される標準曲線を得た。
【誤訳訂正１９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２４０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２４０】
（アッセイ手順−１１β−ＨＳＤインヒビター）
これらのアッセイにおいて、還元型（１型）および酸化型（２型）の方向の両方で異なるインヒビターの１１β−ＨＳＤ活性に対する影響を評価した。還元型方向において、Ｅは、基質であり、Ｆは生成物であり、酸化型の場合には、逆である。ここで記載される方法は、酸化型の方向についてのものである。
【誤訳訂正２０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２４１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２４１】
基質溶液は、ＰＢＳ−スクロース中の５０，０００ｃｐｍ／ｍｌの３Ｈ−Ｆおよび０．５μＭのＦを含んだ。１ｍｌの基質溶液を各チューブに添加し、インヒビターをまた、「コントロール」および「ブランク」のチューブを除いて、１０μＭの濃度にて、各チューブに添加した。１５０μＬを、ブランクを除く全てのチューブに添加し、これが、同時に形成された３Ｈ−Ｆの量について補正を行なった。チューブを機械的に振盪する水浴中、３７℃にて６０分間インキュベートした。腎臓、肝臓のホモジネートの量および用いたインキュベーション時間を、酵素依存性アッセイおよび時間依存性アッセイから得たものであった。インキュベーションの後、５０００ｃｐｍ／５０μＬの１４Ｃ−Ｅおよび５０μｇ／５０μＬの未標識Ｅを含有する５０μＬの回収物を添加して、次の工程において生じるロスを補正した（ＴＬＣプレート上のスポットを可視化するため）。次いで、水性混合物を、４ｍｌのエーテル（２×３０秒サイクル、激しい混合）で抽出した。水相を凍結した後、エーテル（上側）層を、小さなチューブにデカントし、４５℃にて、完全に乾燥するまで蒸発させた。次いで、残留物を、６滴のエーテルに再溶解させ、ＴＬＣプレートに移した。ＴＬＣプレートをクロロホルム：メタノール（９：１  ｖ／ｖ）溶媒系で展開させ、溶媒の先端が約１８ｃｍ移動するまで、約９０分間ＴＬＣプレートを展開させた。生成物Ｅの位置を、ＵＶ光下で可視化し、ＴＬＣプレートから切り出し、シンチレーションバイアルに入れた。放射活性を０．５ｍｌメタノールを用いて５分間にわたって溶離した。０．５ｍｌのＰＢＳ−スクロースおよび１０ｍｌのＥｃｏｓｃｉｎｔを次いで添加し、激しく混合し、その後、シンチレーションカウンター内でカウントした。サンプルをカウントする前に、２つの全活性バイアルを調製した。これらは、０．５ｍｌの基質溶液、５０μＬの回収物、０．５ｍｌのメタノールおよび１０ｍｌのＥｃｓｃｉｎｔを含んだ。これらの２つの全活性バイアルが、最初に添加された１４Ｃ−Ｅおよび３Ｈ−Ｆの量を決定して、計算を行なうために必要とされた。
【誤訳訂正２１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２５５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２５５】
酵素アッセイを、各実験について指定された１８１μＭ  ＮＡＤＰＨ、１ｍＭ  グルコース−６−リン酸およびコルチゾン濃度の存在下で行なった：
酵素アッセイ緩衝液：
１ｍＭ  ＥＤＴＡを含有する３０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ，ｐＨ  ７．２
抗体結合緩衝液：
０．１Ｍ  ＮａＣｌおよび０．１％ゼラチンを含有する５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ，ｐＨ  ８。
【誤訳訂正２２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２５７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２５７】
基質の調製：
必要とされるアッセイ濃度（１７５μＭ）の６００倍でエタノール中のコルチゾン溶液を調製する。アッセイ緩衝液中に５０分の１で希釈する。
ＮＡＤＰＨを、アッセイ緩衝液中１．８ｍｇ／ｍｌの溶液として調製する。
Ｇ−６−Ｐを、アッセイ緩衝液中３．６５ｍｇ／ｍｌの溶液として調製する。
これらの３つの溶液を１：１：１で混合して、各サンプルへの２５μｌの添加に十分な量の溶液を作製する。２５μｌあたり０．５μＣｉに滴定したコルチゾンを添加し、溶液を十分に混合する。
【誤訳訂正２３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２６１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２６１】
（ラジオイムノアッセイ）
１１β−ＨＳＤ１酵素アッセイを、各実験について所定のｕ底ポリプロピレン９６ウェルプレートまたは１．５ｍｌ  Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆチューブ中にて、上記の標準的な操作手順に従って行なった。酵素反応を停止した後、他に示されない限り、緩衝液３中で調製した１００μｌの抗体を、試験サンプルに添加し、１００μｌの緩衝液３をＮＳＢサンプルに添加した。サンプルを３７℃にて１時間インキュベートし、氷上で１５分間冷やした。緩衝液３中で所定の濃度に調製したデキストランでコーティングしたチャコール（５０μｌ／サンプル）を加え、サンプルを混合し（チューブについてはボルテックスし、９６ウェルプレートについては８チャネルピペットで５回吸引した）、さらに１０分間冷ました。サンプルを４℃にて２０００×ｇで１５分間遠心分離し、炭を沈殿させた。上清のアリコート（１００μｌ）をＯｐｔｉｐｌａｔｅに移し、１５０〜２００μｌのＭｉｃｒｏｓｃｉｎｔ  ４０中でＴｏｐｃｏｕｎｔ上でカウントした。いくつかの実験において、上清のアリコートをシンチレーションバイアルに移し、５ｍｌ  Ｕｌｔｉｍａ  Ｇｏｌｄシンチラント中、Ｔｉｃａｒｂ  ＬＳＣ上でカウントした。
【誤訳訂正２４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２６５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２６５】
文献は、いくつかの水溶液からのコルチゾールの抽出法を詳述する［１６，１７］。使用方法を選択するために、［１４Ｃ］−標識したコルチゾールをＮＥＮから入手した。ストックを、５０μｌ中の４０００  ＤＰＭを含むリン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）中で、冷やしたコルチゾール（１μｇ）をキャリアとして添加して調製した。最終エタノール濃度は０．４％であった。この溶液のアリコートをガラス管（１００μｌ）に添加し、以下の抽出を行なった：１．  １ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２、ボルテックスし、相分離濾紙（Ｗｈａｔｍａｎ，ＩＰＳ）を通過させる、２．１ｍｌの酢酸エチル、ボルテックスし、相分離濾紙を通す、３．  １ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２および２００μｌの０．０５％  ＣａＣｌ２、ボルテックスし、遠心分離（５００ｇで５分間）し、そして、上側の水相を除去する、４．  １ｍｌの酢酸エチルおよび２００μｌの０．０５％  ＣａＣｌ２、ボルテックスし、遠心分離（５００ｇで５分間）し、そして、上側の有機層を回収する。有機相を乾燥させ、残留物を１００μｌのＩＭＳ中に取った。このアリコートをＴＬＣプレート上にスポットし、前としてプレートを展開させた。ローダミンＢで可視化した後、スポットをシンチレーションバイアルにスクレープし、５ｍｌのＵｌｔｔｉｍａゴールドシンチラント中、液体シンチレーションカウンター（Ｐａｃｋａｒｄ  ＴｒｉＣａｒｂ）でカウントした。抽出効率を算出し、図４に示す。
【誤訳訂正２５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２６７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２６７】
（ヒトおよびラットの肝臓ミクロソームの１１β−ＨＳＤ１活性）
ラットおよびヒト肝臓ミクロソームにおける１１β−ＨＳＤ１活性を評価して、酵素活性の測定に必要とされる最小限のミクロソームタンパク質濃度を決定した。実験を、Ｂｒａｄｆｏｒｄ法に従って行った［１４］。これらのアッセイを、緩衝液２中で実施し、用いたコルチゾンの濃度は、インキュベーションあたり、０．５μＣｉの［３Ｈ］−コルチゾンを含有する２μＭであった。ミクロソームを、インキュベーションあたり、１００μｌの最終インキュベーション容量にて、ガラス管内で５０μｇ〜４００μｇの範囲の濃度にて試験した。サンプルを１時間３７℃の振盪水浴中にてインキュベートし、１ｍｌの酢酸エチルを添加してアッセイを停止した。回収物を回収するために、５０μｌの［１４Ｃ］−コルチゾールをサンプルに添加し、その後、２００μｌの０．０５％  ＣａＣｌ２を添加した。サンプルを激しく混合し、上記のように遠心分離した。上側の有機相を除去し、乾燥させ、残留物を１００μｌのメタノールに溶解し、そして５０μｌのアリコートをＴＬＣプレート上にスポットさせた。これを、上記のように展開させた。サンプルを二重標識プログラムを用いてＴｒｉＣａｒｂ液体シンチレーションカウンター上でカウントした。回収効率を、５０μｌの［１４Ｃ］−コルチゾール溶液中に得たＤＰＭから決定し、これを、サンプルを用いてカウントした。結果を図５に示す。
【誤訳訂正２６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２６８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２６８】
ラットおよびヒトのミクロソームにおける１１β−ＨＳＤ１活性は類似しており、ラットおよびヒトのミクロソームについて、それぞれ、０．７ｐｍｏｌ／ｍｇ／分および０．５ｐｍｏｌ／ｍｇ／分であった。ヒトミクロソームにおける活性は、ミクロソームタンパク質濃度とは無関係であるようで、このことは、抽出されたタンパク質濃度範囲が高すぎることを示唆し得る。
【誤訳訂正２７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２７１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２７１】
活性に対する基質濃度の影響を試験した。［３Ｈ］−コルチゾン濃度を０．５μＣｉ／サンプルに一定に保ち、未標識のコルチゾンを、４４ｎＭから２μＭまで変化させた。アッセイを、３７℃にて、サンプルあたり１０μｇのミクロソームタンパク質、３０分のインキュベーション時間で実施した。結果を図８に示す。これらのデータの二重逆数プロット（Ｌｉｎｅｗｅａｖｅｒ−Ｂｕｒｋｅ）は、６６０ｎＭのコルチゾンについての見かけのＫｍを与える、図９。
【誤訳訂正２８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２７３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２７３】
グリシレチン酸およびカルベノキソロンは、それぞれ、４０ｎＭおよび１１９ｎＭのＩＣ５０値を生じる。ＳＰＡ形式および組換え１１β−ＨＳＤを用いてＢａｒｆらによって、カルベノキソロンについて報告されたＩＣ５０は、３３０ｎＭであり［１５］、およそ３倍強力でない。この２つのアッセイ系における能力の差は、おそらく、異なるアッセイ条件（ｔｌｃ終点と比較したＳＰＡ、また、酵素供給源：組換え酵素に対して天然の肝臓酵素）によるものである。
【誤訳訂正２９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２８１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２８１】
このアッセイは、予測されていた通りに、標準曲線（３１３ｐｇ／ｍｌ〜１０，０００ｐｇ／ｍｌ）においてコルチゾールを検出したが、酵素アッセイサンプルから得られたシグナルは、ミクロソームタンパク質濃度の増加と共に減少し、このことは、ミクロソームタンパク質がイムノアッセイに影響し得ることを示唆する、図１２（Ａ）。外因性コルチゾンの添加が、酵素アッセイサンプルにおいて検出されたコルチゾールのレベルに影響を有さず、これは、抗体が、コルチゾンと交差反応しないことを示唆する、図１２（Ｂ）。酵素アッセイ緩衝液中に界面活性剤を含めても、影響はほとんどなかった、図１２（Ｃ）。
【誤訳訂正３０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２８２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２８２】
１１β−ＨＳＤ１活性を検出するためのイムノアッセイ系を用いることが実行可能であるかを決定するために、このアッセイ条件を変更した；サンプルあたり２４μｇのミクロソームタンパク質および緩衝液２中、２μＭのコルチゾン基質。酵素活性をまた、サンプル内に存在する場合、ステロイド置換試薬（コルチゾール結合タンパク質からコルチゾールを放出するキット成分）の添加後にサンプル中で測定した。アッセイは、標準曲線（３１３ｐｇ／ｍｌ〜１０，０００ｐｇ／ｍｌ）内のコルチゾールを検出した。図１３は、異なる群について得られた、４０６ｎｍにおける吸光度を示す。
【誤訳訂正３１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２８３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２８３】
コルチゾール標準の最低濃度および最高濃度は、図１３において、３１３ｐｇ／ｍｌおよび１０，０００ｐｇ／ｍｌであると示され、ＮＳＢ吸光度は、このアッセイにおいて得られるダイナミックレンジを示す。
【誤訳訂正３２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２８４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２８４】
ミクロソームタンパク質と共にインキュベートしたサンプルから取った反応混合物の存在下で得られた吸光度（「酵素」）は、ミクロソームタンパク質を含まない反応混合物の存在下で得られた吸光度（「酵素なし」）よりも低く、コルチゾールのレベルの増加を示す。
【誤訳訂正３３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２９２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２９２】
０．６７μｇ／ウェル〜６．７μｇ／ウェルの濃度における抗体力価を試験した。１１β−ＨＳＤ１アッセイを、２０μｇ／ウェルのヒトミクロソームタンパク質を用いて実施し、最適なシグナルバックグラウンド比を生じた。各抗体濃度を、「酵素なし」ブランク（ミクロソームから構成される緩衝液）、「ＧＡブランク」（ミクロソームの前に１０μｌの停止溶液を添加した）およびコントロール群に対して試験した。結果を図１６および１７に示す。
【誤訳訂正３４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２９４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２９４】
ＲＩＡ検出を用いて、ヒト肝臓ミクロソームタンパク質濃度との酵素活性の直線性を試験する。１１β−ＨＳＤ１アッセイを、ミクロソームタンパク質濃度を１μｇ／ウェルから４０μｇ／ウェルに変化させて実施した。１１β−ＨＳＤ１活性は、２０μｇ／ウェルまではタンパク質と直線性であり（図１８）、従来の酵素アッセイで得られた結果（図７）
を確認した。
【誤訳訂正３５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２９７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２９７】
酵素アッセイおよびＲＩＡステージの両方が、同じ緩衝液中で行なわれ、両方の相が、酵素アッセイ緩衝液（緩衝液２）中または緩衝液３（ＲＩＡ緩衝液）中のいずれかで行なわれるように、プロトコールを単純化する。用いたミクロソームタンパク質濃度は、１０μｇ／ウェルであり、コルチゾン濃度は、１７５ｎＭであった。酵素アッセイおよびＲＩＡの両方を緩衝液３中で実施すると、データがわずかに改善するようである、図２０。
【誤訳訂正３６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２９９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２９９】
１０μｇ／ウェルのミクロソームタンパク質および１７５ｎＭの基質を用いると、反応は、３０分までの時点では直線性である。これらの結果は、１７５ｎＭの基質濃度が、低すぎることを示す。従来の１１β−ＨＳＤ１アッセイにおいて観察された見かけのＫｍは、６６０ｎＭであった（図８および９）が、これらのアッセイは、終点での測定値であり、従って、最初の速度が、３０分間のインキュベーション時間で、低基質群において測定されたかどうかは定かではない。しかし、ヒト肝臓ミクロソーム１１β−ＨＳＤ１アッセイにおけるコルチゾンについて公開されているＫｍ値は、μｍｏｌ濃度の範囲内である［１８，１９］。１７５ｎＭの基質は、見かけのＫｍより十分に低いが、以下の２つの理由から、濃度を有意に増加する可能性はない：
（ｉ）化合物がコルチゾンと競合する場合、測定される阻害は、基質が参考文献１において用いられた濃度を上回って増える場合に落ちる
（ｉｉ）基質濃度を増加することが、標識の特異的活性を減少し、アッセイの感度を低下させる。このことは、より高い濃度の［３Ｈ］−コルチゾンを添加することによって克服され得るが、このプロトコールは０．５μＣｉ／ウェルを用い、より高いレベルの放射活性が用いられる場合に、コストの影響が存在する。
【誤訳訂正３７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０３０１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０３０１】
図２３中に示されるこれらのデータのＬｉｎｅｗｅａｖｅｒ−Ｂｕｒｋｅプロットから決定した見かけのＫｍ（７００ｎＭ）は、ｔｌｃ形式の１１β−ＨＳＤ１アッセイ（図９、見かけのＫｍ  約６６０ｎＭ）において決定したものと非常に類似する。これらのデータは、１０μｇのミクロソームタンパク質では、酵素が、３０分のインキュベーションの時間にわたって、１７５ｎＭのコルチゾンにおいても飽和していないことを示唆する。
【誤訳訂正３８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０３０７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０３０７】
グリシレチン酸は、４１ｎＭのＩＣ５０で酵素の濃度関連阻害を生じ、良好なフィット値（ｒ２＝０．９６２）およびヒルスロープ（Ｈｉｌｌｓｌｏｐｅ）を有する。これは、ｔｌｃ形式アッセイを用いて生じた４０ｎＭの値に類似する（図１０を参照のこと）。３０ｎＭのＩＣ５０値は、基質としてデヒドロ−デキサメタゾンを用いて、ヒト肝臓ミクロソームにおける１１β−ＨＳＤ１のグリシレチン酸阻害について報告されている［１９］。しかし、これらの値は、Ｂａｒｆらにより報告された値よりも低い［１５］。
【誤訳訂正３９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０３５０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０３５０】
【化７３】
2006514614.tif 000003
ＤＧＳ０３１３０Ｂ（ＳＴＸ７０１）
淡黄色結晶ＤＧＳ０３１３０Ａ（４５ｍｇ；１４％）。ｍｐ１６９  Ｃ；ＴＬＣ  Ｒｆ：０．４２  ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＡｃ（４：１）；
【誤訳訂正４０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０３７５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０３７５】
【化９２】
2006514614.tif 000004
（２−［６−（３−クロロ−２−メチルベンゼンスルホニルアミノ）−ベンゾチアゾール−２−イルスルファニル］−Ｎ，Ｎ−ジエチルアセトアミド（ＳＴＸ７５５，ＸＤＳ０１１４５）および２−［６−（３−クロロ−２−メチルベンゼンスルホニルアミノ）−ベンゾチアゾール−２−イル］−Ｎ，Ｎ−ジエチルアセトアミド（ＳＴＸ７６３，ＸＤＳ０１１４５Ｂ））
ＤＭＣ（５ｍｌ）中のＡｌＣｌ３（５０ｍｇ）の懸濁液に、ジエチルアミン（０．４ｍｌ）を添加した。溶液を窒素下、室温にて１０分間撹拌した。［６−（３−クロロ−２−メチルベンゼンスルホニルアミノ）−ベンゾチアゾール−２−イルスルファニル］−酢酸エチルエステル（ＳＴＸ７５２，１００ｍｇ）を添加し、混合物を室温にて３０分間撹拌し続けた。反応を水でクエンチし、ＤＣＭと５％  ＮａＨＣＯ３との間で分配した。有機層を水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空下でエバポレートして、黄色の残留物を生じ、これを、溶離溶媒として２０〜３０％  酢酸エチル−ＤＣＭを用いるフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。ＳＴＸ７５５（５０ｍｇ，４７％）を白色固体として得た。ＴＬＣ  Ｒｆ  ０．６０の単一スポット（２５％  ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ）；ＨＰＬＣ純度  ８９％（ｔＲ  １０％  水−メタノール中２．７分）；
【誤訳訂正４１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０３８４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０３８４】
【化１００】
2006514614.tif 000005
３−クロロ−Ｎ−メチル−Ｎ−（３−メチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−ベンゾチアゾール−６−イル）−２−メチルベンゼンスルホンアミド（ＳＴＸ８３１，ＸＤＳ０１１６３）
アセトン（３ｍＬ）中のＳＴＸ７５３（６６ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）の溶液に、炭酸カリウム（６６ｍｇ）を添加し、その後、ヨウ化メチル（６６ｍｇ）を添加した。混合物を室温にて２時間撹拌し、ＤＣＭ中に抽出し、ブラインで洗浄した。硫酸ナトリウムで乾燥させた後、溶媒を真空下で除去して、油状の残留物を得、これを、フラッシュクロマトグラフィーにより精製した。オフホワイトの固体（５９ｍｇ、８０％）を得た。ＴＬＣ  Ｒｆ  ０．３７の単一スポット（１００％  ＤＣＭ）；ＨＰＬＣ純度  ９９％（ｔＲ  １０％  水−メタノール中２．０分）；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，
【誤訳訂正４２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０４０１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０４０１】
【化１１３】
2006514614.tif 000006
３−クロロ−Ｎ−（２，６−ジメチル−ベンゾチアゾール−７−イル）−２−メチル−ベンゼンスルホンアミド（ＳＴＸ１０２１，ＸＤＳ０２０６９）
オフホワイトの結晶固体。ＴＬＣ  Ｒｆ  ０．４９の単一スポット（１０％  ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ）；ＨＰＬＣ純度  ９８％（ｔＲ  ２０％  水−メタノール中２．０分）；
【誤訳訂正４３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０４０２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０４０２】
【化１１４】
2006514614.tif 000007
３−クロロ−Ｎ−（２，５−ジメチル−ベンゾチアゾール−４−イル）−２−メチル−ベンゼンスルホンアミド（ＳＴＸ９９６，ＸＤＳ０２０４７）
白色結晶固体。ＴＬＣ  Ｒｆ  ０．７６の単一スポット（１０％  ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ）；ＨＰＬＣ純度＞９９％（ｔＲ  １０％  水−メタノール中２．９分）；
【誤訳訂正４４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０４０３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０４０３】
【化１１５】
2006514614.tif 000008
Ｎ−（２，５−ジメチルベンゾチアゾール−６−イル）−Ｎ（−３−クロロ−２−メチルフェニルスルホニル）−３−クロロ−２−メチルベンゼンスルホンアミド（ＳＴＸ９９７，ＸＤＳ０２０４８Ａ）
オフホワイトのシロップ。ＴＬＣ  Ｒｆ  ０．７８の単一スポット（１０％  ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ）；ＨＰＬＣ純度  ８５％（ｔＲ  １０％  水−メタノール中４．２分）；
【誤訳訂正４５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０４２７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０４２７】
【化１３６】
2006514614.tif 000009
（５−（３−クロロ−２−メチル−ベンゼンスルホンアミノ）−１Ｈ−インドール−３−カルボン酸メチルエステル，ＳＴＸ１０５０（ＫＲＢ０１１３２）の合成）
【誤訳訂正４６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０４４４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０４４４】
【化１５１】
2006514614.tif 000010
（Ｎ−ベンズイミダゾールアリールスルホンアミド誘導体の合成のための一般法）
ＤＣＭ中のアリールスルホニルクロリド（１．１当量）の溶液に、ピリジン（２．２当量）および触媒量のＤＭＡＰを添加し、その後、対応するアミン（１当量）を添加した。反応混合物を窒素下、室温にて、４〜１６時間撹拌し、ＴＬＣが反応の完了を示した後、次いで、酢酸エチルと５％炭酸水素ナトリウムとの間で分配した。有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮して、固体または粘性シロップとして粗生成物を生じた。次いで、化合物をフラッシュクロマトグラフィー（メタノール−ＤＣＭ勾配溶出）により精製して、結晶固体として所望のアリールスルホンアミドを生じた。収率は、５０〜８０％の範囲である。
【誤訳訂正４７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０４４５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０４４５】
３−クロロ−Ｎ−（１，２−ジメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−６−イル）−２−メチルベンゼンスルホンアミド（ＳＴＸ９７５，ＸＤＳ０２００１）
白色結晶固体。Ｍｐ２６５−２６６  Ｃ；ＴＬＣ  Ｒｆ  ０．４３の単一スポット（５％  メタノール／ＤＣＭ）；ＨＰＬＣ純度＞９９％（ｔＲ  １０％  水−メタノール中２．分）；
【誤訳訂正４８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０４４６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０４４６】
【化１５２】
2006514614.tif 000011
３−クロロ−Ｎ−（１，２−ジメチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−イル）−２−メチルベンゼンスルホンアミド（ＳＴＸ９７６，ＸＤＳ０２００３）
白色結晶固体。Ｍｐ  ２８３−２８３℃。ＴＬＣ  Ｒｆ  ０．３８の単一スポット（５％  メタノール／ＤＣＭ）；ＨＰＬＣ純度＞９９％（ｔＲ  １０％  水−メタノール中２．０分）；
【誤訳訂正４９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０４６６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０４６６】
【化１７２】
2006514614.tif 000012
Ｎ−（２−メチル−１−フェニル−１Ｈ−ベンズイミダゾール−５−イル）−アセトアミド：
Ｎ’−フェニル−ベンゼン−１，２，４−トリアミン（８００ｍｇ，４ｍｍｏｌ）を、酢酸（１０ｍＭＬ）中に溶解させ、無水酢酸（１．０ｍＬ）をこの溶液に添加した。混合物を８０℃にて６時間撹拌し、室温まで冷却して、５％炭酸ナトリウムで中和し、次いで、酢酸エチルで抽出した。有機相をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して残留物を生じ、これをエタノールから結晶化した。褐色の結晶固体（０．８５ｇ，８０％）を得た。Ｍｐ  ２３１〜２３２℃；ＴＬＣ  Ｒｆ  ０．３９の単一スポット（１０％  メタノール／ＤＣＭ）；
【誤訳訂正５０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０４８８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０４８８】
本発明は、例としてのみ添付の図面を参照することによって、さらに詳細に記載される。
【図１】図１は、ラット肝臓およびラット腎臓の１μＬあたりのタンパク質量を示すグラフ１である。
【図２】図２は、ラット肝臓における、１１β−ＨＳＤ１型活性の、酵素濃度および時間依存性の経過（ＥからＦ）を示すグラフ２である。
【図３】図３は、ラット腎臓における、１１β−ＨＳＤ２型活性の、酵素濃度および時間依存性の経過（ＦからＥ）を示すグラフ３である。
【図４】図４は、４つの抽出方法により得られる抽出効率を示すグラフである。
【図５】図５は、ラットおよびヒトの肝臓ミクロソームにおける１１β−ＨＳＤ１活性の比較を示すグラフである。
【図６】図６は、ヒトミクロソーム１１β−ＨＳＤ１活性に対する、インキュベーション時間の効果を示す一連のグラフである。
【図７】図７は、ヒトミクロソーム１１β−ＨＳＤ１活性に対する、ミクロソームタンパク質濃度の効果を示す一連のグラフである。
【図８】図８は、ヒト肝臓ミクロソーム１１β  ＨＳＤ１についての基質（コルチゾン）飽和曲線を示すグラフである。
【図９】図９は、ヒト肝臓ミクロソーム１１β  ＨＳＤ１についての基質飽和データのＬｉｎｅｗｅａｖｅｒ−Ｂｕｒｋｅプロットである。
【図１０】図１０は、グリシレチン酸についてのＩＣ５０決定を示すグラフである。
【図１１】図１１は、カルベノキソロンについてのＩＣ５０決定を示すグラフである。
【図１２Ａ】図１２Ａは、イムノアッセイにより測定した１１β−ＨＳＤ１活性を示すグラフである。図１２Ａは、タンパク質の効果を示す。
【図１２Ｂ】図１２Ｂは、イムノアッセイにより測定した１１β−ＨＳＤ１活性を示すグラフである。図１２Ｂは、コルチゾンの効果を示す。
【図１２Ｃ】図１２Ｃは、イムノアッセイにより測定した１１β−ＨＳＤ１活性を示すグラフである。図１２Ｃは、Ｔｗｅｅｎ−８０の効果を示す。
【図１３】図１３は、Ａｓｓａｙ  Ｄｅｓｉｇｎｓ  Ｃｏｒｔｉｓｏｌイムノアッセイの評価を示すグラフである。
【図１４】図１４は、Ａｓｓａｙ  Ｄｅｓｉｇｎｓイムノアッセイにより検出した１１β−ＨＳＤ１活性の測定に対する、ミクロソームタンパク質増加の効果を示すグラフである。
【図１５】図１５は、Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈ抗コルチゾール抗体を用いるＲＩＡによる１１β  ＨＳＤ１活性の検出を示すグラフである。
【図１６】図１６は、信号対雑音比に対するＩｍｍｕｎｏｔｅｃｈ抗体濃度の低減効果を示すグラフである（ＧＡブランク群と比較したミクロソーム群）。
【図１７】図１７は、ＲＩＡによる、１１β  ＨＳＤ１活性の検出についてのＩｍｍｕｎｏｔｅｃｈ抗体飽和曲線を示すグラフである。
【図１８】図１８は、ＲＩＡによる、ヒト肝臓ミクロソーム１１β  ＨＳＤ１活性の直線性を示すグラフである。
【図１９】図１９は、ＲＩＡによる、ヒト肝臓ミクロソーム１１β  ＨＳＤ１活性の検出に対する、Ｔｗｅｅｎ  ８０の効果を示すグラフである。
【図２０】図２０は、ＲＩＡによる、ヒト肝臓ミクロソーム１１β  ＨＳＤ１活性の検出に対する緩衝液系の効果を示すグラフである。
【図２１】図２１は、ＲＩＡにより検出されたヒト肝臓ミクロソーム１１β ＨＳＤ１活性のインキュベーション時間との直線性を示すグラフである。
【図２２】図２２は、ＲＩＡにより検出されたヒト肝臓ミクロソーム１１β−ＨＳＤ１活性についての基質飽和曲線を示すグラフである。
【図２３】図２３は、ＲＩＡにより検出されたヒト肝臓ミクロソーム１１β−ＨＳＤ１活性についての基質飽和データのＬｉｎｅｗｅａｖｅｒ−Ｂｕｒｋｅプロットである。
【図２４】図２４は、ヒト肝臓ミクロソーム１１β−ＨＳＤ１活性のＤＭＳＯ耐性を示すグラフである。
【図２５】図２５は、グリシレチン酸によるヒト肝臓ミクロソーム１１β−ＨＳＤ１活性の阻害についてのＩＣ５０曲線である。