【手続補正書】
【提出日】平成17年6月17日(2005.6.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
１種または２種以上の生体分子を検出する方法であって、
１種または２種以上の試薬が固定化される第１支持体を供給するステップと、
１種または２種以上のリガンドが固定化される第２支持体を供給するステップと、
第１支持体に固定化された試薬を第２支持体に固定化されたリガンドと接触させることによって、１種または２種以上の試薬が１種または２種以上のリガンドに結合するステップと、
第１支持体を第２支持体から分離するステップと、
前記第２支持体における１種または２種以上の試薬を検出するステップと、
を含むことを特徴とする方法。
【請求項２】
前記試薬は、前記接触ステップにおいて前記試薬を固定化するとともに、前記分離ステップにおいて前記結合された試薬を前記第１支持体から解離可能にするに足る強度で前記第１支持体に固定化されることを特徴とする請求項１記載の方法。
【請求項３】
前記試薬は、１種または２種以上の抗体もしくは１種または２種以上のＤＮＡプローブを含むことを特徴とする請求項１記載の方法。
【請求項４】
前記リガンドは、前記第２支持体に固定化される前に相互に分離されることを特徴とする請求項１記載の方法。
【請求項５】
前記リガンドは、
少なくとも部分的に分子量に基づくゲル電気泳動を用いて、または、
少なくとも部分的に等電点に基づくゲル電気泳動を用いて、または、
少なくとも部分的に１つもしくは２つ以上の分子量および等電点、または分子量および等電点の両方に基づくゲル電気泳動を用いて、または、
免疫学的に、または、
１種または２種以上の抗体アレイを用いて、
相互に分離されることを特徴とする請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
前記試薬は、抗体、組換えタンパク質、ＤＮＡ、ＲＮＡ、オリゴヌクレオチド、炭水化物および小さい化学物質からなる群から選択されることを特徴とする請求項１〜５のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
１種または２種以上の前記試薬は、前記第１支持体において１つまたは２つ以上の所定位置で固定化されることを特徴とする請求項１記載の方法。
【請求項８】
前記試薬は、前記第１支持体における所定位置でそれぞれ固定化されることを特徴とする請求項１記載の方法。
【請求項９】
前記試薬は、抗体であることを特徴とする請求項８記載の方法。
【請求項１０】
１種または２種以上の前記抗体は、１種または２種以上の翻訳後修飾されたタンパク質に特異的であることを特徴とする請求項９記載の方法。
【請求項１１】
１種または２種以上の前記抗体は、１種または２種以上のリン酸化タンパク質に特異的であることを特徴とする請求項１０記載の方法。
【請求項１２】
１種または２種以上の試薬が固定化される前記第１支持体を供給する前記ステップが、１種または２種以上の中間物を前記第１支持体に施すステップであって、１種または２種以上の前記中間物はプロテインＡ、プロテインＧおよびこれらの突然変異体からなる群から選択される種種ステップと、１種または２種以上の前記試薬が１種または２種以上の前記中間物と相互作用するように、１種または２種以上の前記試薬を前記第１支持体に施すステップとを含むことを特徴とする請求項１記載の方法。
【請求項１３】
細胞中の１種または２種以上の生体分子を検出する方法であって、
（ａ）抗体が固定化される位置によって抗体が同定され得るように、前記第１支持体において所定位置で供給される１種または２種以上の抗体を、第１支持体に固定化するステップと、
（ｂ）第２支持体に前記細胞を配置するステップと、
（ｃ）前記抗体を前記細胞中の対応するいずれの抗原にも結合可能にするために、前記第１支持体における前記抗体を前記第２支持体における前記細胞と接触させるステップと、
（ｄ）前記第１支持体を前記第２支持体から分離した後、１種または２種以上の前記結合抗体が、対応する生体分子との結合を維持するステップと、
（ｅ）前記第２支持体における前記細胞中の前記生体分子に結合した前記抗体を検出するステップと、
を含むことを特徴とする方法。
【請求項１４】
前記細胞は、前記第２支持体に固定されることを特徴とする請求項１３記載の方法。
【請求項１５】
前記細胞は、１または２以上の組織切片であることを特徴とする請求項１３記載の方法。
【請求項１６】
１種または２種種以上の前記抗体は、１種または２種以上の翻訳後修飾されたタンパク質に特異的であることを特徴とする請求項１３記載の方法。
【請求項１７】
１種または２種以上の前記抗体は、１種または２種以上のリン酸化タンパク質に特異的であることを特徴とする請求項１３記載の方法。
【請求項１８】
異なる５〜１００，０００種の試薬が、前記第１支持体において１または２以上の所定位置でそれぞれ固定化され、
異なる２００〜１０，０００種の試薬が、前記第１支持体において１または２以上の所定位置でそれぞれ固定化され、
異なる５０〜１，０００種の試薬が、前記第１支持体において１または２以上の所定位置でそれぞれ固定化され、
異なる５〜５００種の試薬が、前記第１支持体において１または２以上の所定位置でそれぞれ固定化され、
異なる２〜５０種の試薬が、前記第１支持体において１または２以上の所定位置でそれぞれ固定化される
ことを特徴とする請求項１〜１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
前記第１支持体は、ニトロセルロース、ナイロン、ポリビニリデンジフルオライド、ガラス、合成樹脂、およびこれらの誘導体からなる群から選択された材料を含むことを特徴とする請求項１３記載の方法。
【請求項２０】
前記第１支持体は、アレイを含むことを特徴とする請求項１３記載の方法。
【請求項２１】
前記アレイは、複数の全体的または部分的な毛細管を含むことを特徴とする請求項２０記載の方法。
【請求項２２】
前記抗体を固定化する前記ステップは、１種または２種以上の中間物を前記第１支持体に施すステップと、１種または２種以上の前記抗体が１種または２種以上の前記中間物と相互作用するように１種または２種以上の前記抗体を前記第１支持体に施すステップとを含むことを特徴とする請求項１３記載の方法。
【請求項２３】
１種または２種以上の前記中間物は、プロテインＡ、プロテインＧおよびこれらの突然変異体からなる群から選択されることを特徴とする請求項２２記載の方法。
【請求項２４】
前記検出ステップは、１種または２種以上の前記抗体が一方または両方の支持体に存在するか否かを検出するステップと、前記分離ステップ後、前記抗体の１つまたは２つ以上の位置を同定するステップと、前記抗体の１つまたは２つ以上の数量を決定するステップと、抗体の１つまたは２つ以上のタイプを同定するステップとからなる群から選択する１つまたは２つ以上の検出ステップを含むことを特徴とする請求項１３記載の方法。
【請求項２５】
１種または２種以上の生体分子を検出する方法であって、
（ａ）第１支持体に１種または２種以上の試薬を固定化するステップと、
（ｂ）１種または２種以上の前記試薬と相互作用するように構成される１種または２種以上のリガンドを第２支持体に固定化するステップと、
（ｃ）前記試薬の１種または２種以上を１種または２種以上の前記リガンドと結合可能にするために前記試薬を前記リガンドに接触させるステップと、
（ｄ）前記試薬の１種または２種以上を１種または２種以上の前記リガンドと架橋するステップと、
（ｅ）１種または２種以上の前記リガンドと結合される１種または２種以上の前記試薬を前記第１支持体から解離可能にするために、前記第１支持体を前記第２支持体から分離するステップと、
（ｆ）前記試薬またはリガンドの１種または２種以上を検出するステップと、
を含む方法。
【請求項２６】
１種または２種以上の前記リガンドおよび試薬は、少なくとも部分的に１種または２種以上のアルデヒドを用いて架橋されることを特徴とする請求項２５記載の方法。
【請求項２７】
１種または２種以上の前記アルデヒドは、ホルムアルデヒドおよびグルタルデヒドからなる群から選択されることを特徴とする請求項２６記載の方法。
【請求項２８】
前記第１支持体は、ニトロセルロース、ナイロン、ポリビニリデンジフルオライド、ガラスまたは合成樹脂と、これらの誘導体とからなる群から選択された材料を含むことを特徴とする請求項１〜２７のいずれかに記載の方法。
【請求項２９】
前記第１支持体は、ナイロンおよびナイロンの誘導体からなる群から選択される材料を含むことを特徴とする請求項１６記載の方法。
【請求項３０】
前記試薬は、円形状、細長い形状および多角形状からなる群から選択された１つまたは２つ以上の形状で前記第１支持体に固定化されることを特徴とする請求項１〜２９のいずれかに記載の方法。
【請求項３１】
１種または２種以上の生体分子の検出に用いるアレイであって、
１種または２種以上の試薬を固定化するように構成される第１支持体であって、１種または２種以上のリガンドが固定化される第２支持体と接触して配置されるように構成される第１支持体を含み、
１種または２種以上の前記試薬は、１種または２種以上の前記リガンドと結合し、次いで前記第１支持体から解離し、前記第２支持体において前記リガンドとの結合を維持することが可能にされることを特徴とするアレイ。
【請求項３２】
前記第１支持体は、ナイロン、ニトロセルロース、ポリビニリデンジフルオライド、ガラス、合成樹脂およびこれらの誘導体からなる群から選択された１種または２種以上の材料を含むことを特徴とする請求項３１記載のアレイ。
【請求項３３】
前記第１支持体は１つまたは２つ以上の毛細管の全部または一部を含むことを特徴とする請求項３１記載のアレイ。
【請求項３４】
１種または２種以上の前記試薬は、円形状、細長い形状、および多角形状からなる群から選択された１つまたは２つ以上の形状で固定化されることを特徴とする請求項３１記載のアレイ。
【請求項３５】
１種または２種以上の前記試薬は、抗体を含むことを特徴とする請求項３１記載のアレイ。
【請求項３６】
１種または２種以上の前記試薬は、ＤＮＡプローブを含むことを特徴とする請求項３１記載のアレイ。
【請求項３７】
１種または２種以上の前記試薬は、抗体、組換えタンパク質、ＤＮＡ、ＲＮＡ，オリゴヌクレオチド、炭水化物および小さい化学物質からなる群から選択されることを特徴とする請求項３１記載のアレイ。