【手続補正書】
【提出日】平成17年4月28日(2005.4.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の類似性を有するアミノ酸配列、あるいはそのＣＤ４４ＨまたはＣＤ４４Ｒ２アイソフォームの配列を有し、かつモノクローナル抗体ＨＥＣＡ−４５２の結合特性を有する抗体に結合することを特徴とする、実質的に精製されたグリコシル化ＣＤ４４ポリペプチド。
【請求項２】  前記グリコシル化ポリペプチドから炭化水素部位を除去するのに十分な条件下において該グリコシル化ポリペプチドをＮ−グリコシダーゼＦに接触させることにより、前記抗体に対する該グリコシル化ポリペプチドの結合が低下することを特徴とする請求項１記載のグリコシル化ポリペプチド。
【請求項３】  前記グリコシル化ポリペプチドからシアル酸部位を除去するのに十分な条件下において該グリコシル化ポリペプチドをシアリダーゼに接触させることにより、前記抗体に対する該グリコシル化ポリペプチドの結合が低下することを特徴とする請求項１記載のグリコシル化ポリペプチド。
【請求項４】  前記グリコシル化ポリペプチドからフコース部位を除去するのに十分な条件下において該グリコシル化ポリペプチドをフコシダーゼに接触させることにより、前記抗体に対する該グリコシル化ポリペプチドの結合が低下することを特徴とする請求項１記載のグリコシル化ポリペプチド。
【請求項５】  前記グリコシル化ポリペプチドがＥ−セレクチンリガンドであって、Ｅ−セレクチンリガンドの活性が、該グリコシル化ポリペプチド上のＮ−結合炭化水素部位によって媒介されていることを特徴とする請求項１記載のグリコシル化ポリペプチド。
【請求項６】  前記グリコシル化ポリペプチドがＬ−セレクチンリガンドであって、Ｌ−セレクチンリガンドの活性が、該グリコシル化ポリペプチド上のＮ−結合炭化水素部位によって媒介されていることを特徴とする請求項１記載のグリコシル化ポリペプチド。
【請求項７】  配列番号１のアミノ酸配列を有し、かつモノクローナル抗体ＨＥＣＡ−４５２の結合特性を有する抗体に結合することを特徴とする、実質的に精製されたグリコシル化ポリペプチド。
【請求項８】  幹細胞を特定する方法であって、
（ａ）被験細胞集団を、請求項１記載のグリコシル化ポリペプチドに特異的に結合する１種またはそれ以上の物質に、該被験細胞集団中に幹細胞が存在する場合に該物質と幹細胞とがコンプレックスを形成するのに十分な条件下において接触させ；さらに、
（ｂ）前記コンプレックスを検出し、それによって幹細胞を特定する；各工程を含む方法。  
【請求項９】  前記１種またはそれ以上の物質が抗ＣＤ４４抗体であることを特徴とする請求項８記載の方法。  
【請求項１０】  前記１種またはそれ以上の物質が、モノクローナル抗体ＨＥＣＡ−４５２の結合特性を有する抗体であることを特徴とする請求項８記載の方法。  
【請求項１１】  前記被験細胞が血液細胞または骨髄細胞であることを特徴とする請求項８記載の方法。
【請求項１２】  細胞集団から幹細胞を単離する方法であって、
（ａ）被験細胞集団を、請求項１記載のグリコシル化ポリペプチドに特異的に結合する１種またはそれ以上の物質に、該被験細胞集団中に幹細胞が存在する場合に該物質と幹細胞とがコンプレックスを形成するのに十分な条件下において接触させ；
（ｂ）前記コンプレックスを検出し；
（ｃ）前記細胞集団から前記コンプレックスを除去し、それによって細胞集団から幹細胞を単離する；各工程を含む方法。
【請求項１３】  細胞集団から幹細胞を単離する方法であって、
（ａ）固相上に固定化したＥ−セレクチンポリペプチドまたはＬ−セレクチンポリペプチドを提供し；
（ｂ）前記固相を、細胞懸濁物を含む液体サンプルに、該固相と液体サンプルとの間の相対的移動が固相表面においてずれ応力を生じさせるように接触させ；さらに、
（ｃ）前記固相に接着した細胞を回収し、それによって幹細胞を単離する；各工程を含む方法。  
【請求項１４】  請求項１２または１３記載の方法に従って単離された細胞を含有する、哺乳類において造血性疾患を治療するための医薬組成物。
【請求項１５】  請求項１２または１３記載の方法に従って単離された細胞を含有する、哺乳類において癌を治療するための医薬組成物。
【請求項１６】  Ｅ−セレクチンおよび／またはＬ−セレクチンに対する細胞の親和性を高める方法であって、
（ａ）細胞を提供し；さらに、
（ｂ）前記細胞を、該細胞上の請求項１記載のグリコシル化ポリペプチドの細胞表面発現または活性を高める１種またはそれ以上の物質に接触させ、それによってＥ−セレクチンおよび／またはＬ−セレクチンに対する細胞の親和性を高める；各工程を含む方法。
【請求項１７】  前記細胞が幹細胞であることを特徴とする請求項１６記載の方法。
【請求項１８】  前記１種またはそれ以上の物質が、ＣＤ４４ポリペプチドをコードする核酸であることを特徴とする請求項１６記載の方法。
【請求項１９】  前記１種またはそれ以上の物質が、グリコシルトランスフェラーゼまたはグリコシダーゼポリペプチドをコードする核酸であることを特徴とする請求項１６記載の方法。
【請求項２０】  少なくとも１種またはそれ以上の前記物質が、グリコシルトランスフェラーゼをコードする核酸であることを特徴とする請求項１６記載の方法。
【請求項２１】  幹細胞の移植能を高める方法であって：
（ａ）幹細胞を提供し；さらに、
（ｂ）前記幹細胞を、該幹細胞における請求項１記載のグリコシル化ポリペプチドの細胞表面発現または活性を高める１種またはそれ以上の物質に接触させ、それによって幹細胞の移植能を高める；各工程を含む方法。
【請求項２２】  前記１種またはそれ以上の物質が、ＣＤ４４ポリペプチドをコードする核酸であることを特徴とする請求項２１記載の方法。
【請求項２３】  前記１種またはそれ以上の物質が、グリコシルトランスフェラーゼまたはグリコシダーゼポリペプチドをコードする核酸であることを特徴とする請求項２１記載の方法。
【請求項２４】  少なくとも１種またはそれ以上の前記物質が、グリコシルトランスフェラーゼをコードする核酸であることを特徴とする請求項２１記載の方法。
【請求項２５】  細胞集団の移植能を高める方法であって、
（ａ）固相上に固定化したＬ−セレクチンポリペプチドを提供し；
（ｂ）前記固相を、前記細胞集団を含む液体サンプルに、固相と液体サンプルとの間の相対的移動が固相表面においてずれ応力を生じさせるように接触させ；さらに、
（ｃ）前記固相に接着した細胞を回収し、それによって細胞集団の移植能を高める；各工程を含む方法。
【請求項２６】  細胞集団の移植能を高める方法であって、
（ａ）固相上に固定化したＥ−セレクチンポリペプチドを提供し；
（ｂ）前記固相を、前記細胞集団を含む液体サンプルに、固相と液体サンプルとの間の相対的移動が固相表面においてずれ応力を生じさせるように接触させ；さらに、
（ｃ）前記固相に接着した細胞を回収し、それによって細胞集団の移植能を高める；各工程を含む方法。
【請求項２７】  対象内で１またはそれ以上の幹細胞における請求項１記載のグリコシル化ポリペプチドの細胞表面発現を増加させる物質を含有することを特徴とする、対象において移植幹細胞のレベルを高めるための医薬組成物。
【請求項２８】  請求項２１、２５または２６記載の方法に従って単離された細胞を含有することを特徴とする、対象において移植幹細胞のレベルを高めるための医薬組成物。
【請求項２９】  前記対象がヒトであることを特徴とする請求項２７または２８記載の医薬組成物。
【請求項３０】  前記対象が、造血性疾患を患っているかまたは発症の危険性を有することを特徴とする請求項２７または２８記載の医薬組成物。
【請求項３１】  前記対象が、癌を患っているかまたは発症の危険性を有することを特徴とする請求項２７または２８記載の医薬組成物
【請求項３２】  前記癌が血液癌であることを特徴とする請求項３１記載の医薬組成物。
【請求項３３】  請求項２７記載の医薬組成物であって、前記対象からイクス・ビボ（ｅｘ  ｖｉｖｏ）で調製した幹細胞を、該幹細胞を前記対象内に再導入する前に、幹細胞の細胞表面における請求項１記載のグリコシル化ポリペプチドの発現を高めるのに十分な条件下において前記物質に接触させることを特徴とする医薬組成物。
【請求項３４】  対象内で請求項１記載のグリコシル化ポリペプチドの細胞表面発現を低下させる物質を含有することを特徴とする、対象において造血性疾患を治療するための医薬組成物。      
【請求項３５】  以下の方法によって単離された血液細胞を含有することを特徴とする、対象において造血性疾患を治療するための医薬組成物：
（ａ）対象から採取した血液を提供し；
（ｂ）前記血液を、請求項１記載のグリコシル化ポリペプチドに特異的に結合する１種またはそれ以上の物質に、該細胞集団中に血液細胞が存在する場合に該物質と血液細胞とがコンプレックスを形成するのに十分な条件下において接触させ；  
（ｃ）前記コンプレックスを検出し；
（ｄ）前記血液から前記コンプレックスを除去し、それによって該血液から血液細胞を単離する。
【請求項３６】  以下の方法によって単離された血液細胞を含有することを特徴とする、対象において造血性疾患を治療するための医薬組成物：
（ａ）対象から採取した血液、および固相上に固定化されたＥ−セレクチンポリペプチドを提供し；
（ｂ）固相と血液との間の相対的移動が固相表面においてずれ応力を生じさせるように、前記血液を前記固相に接触させ；さらに
（ｃ）前記固相に接着した血液細胞を回収し、それによって血液細胞を単離する。
【請求項３７】  以下の方法によって単離された血液細胞を含有することを特徴とする、対象において造血性疾患を治療するための医薬組成物：
（ａ）対象から採取した血液、および固相上に固定化したＬ−セレクチンポリペプチドを提供し；
（ｂ）固相と血液との間の相対的移動が固相表面においてずれ応力を生じさせるように、前記血液を前記固相に接触させ；
（ｃ）前記固相に接着した血液細胞を回収し、それによって血液細胞を単離する。
【請求項３８】  請求項１記載のグリコシル化ポリペプチドまたはそのフラグメントを含有することを特徴とする、対象において炎症性疾患を治療するための医薬組成物。
【請求項３９】  請求項１２または１３記載の方法に従って単離された細胞を含有することを特徴とする、哺乳類において幹細胞を用いた治療が可能な疾患を治療するための医薬組成物。
【請求項４０】  前記疾患が、心筋梗塞、パーキンソン病、糖尿病、先天性筋ジストロフィー、卒中、遺伝性／先天性疾患および肝障害より成る群から選択されることを特徴とする請求項３９記載の医薬組成物。
【請求項４１】  対象の造血性疾患に対する感受性を特定する方法であって、
（ａ）前記対象から採取した細胞集団を、請求項１記載のグリコシル化ポリペプチドに特異的に結合する１種またはそれ以上の物質に、該細胞集団中に細胞が存在する場合に該物質と細胞とがコンプレックスを形成するのに十分な条件下において接触させ；さらに、  
（ｂ）前記コンプレックスを検出する；各工程を含み、該コンプレックスの存在が、前記対象が造血性疾患に罹患しているかまたは感受性を有することを示唆することを特徴とする方法。
【請求項４２】  請求項１記載のグリコシル化ポリペプチドに特異的に結合する物質を含有することを特徴とする、対象において造血性疾患を治療するための医薬組成物。
【請求項４３】  請求項１記載のグリコシル化ポリペプチドに特異的に結合する化合物を含む第一ドメインと毒素を含む第二ドメインとが共有結合によって連結している物質を含有することを特徴とする、造血性疾患を治療するための医薬組成物。
【請求項４４】  前記第一ドメインが、ＨＣＥＬＬ抗体またはそれらのフラグメントであることを特徴とする請求項４３記載の医薬組成物。