【手続補正書】
【提出日】平成17年8月29日(2005.8.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞表面部分を連結させることによって、Ｔ細胞集団を活性化および増大する方法であって、以下：
ａ．細胞集団を提供する工程であって、ここで該細胞集団の少なくとも一部がＴ細胞を含む、工程；
ｂ．該細胞集団を１つの表面と接触させる工程であって、ここで該表面には、該Ｔ細胞の少なくとも一部の細胞表面部分を連結させかつ該Ｔ細胞を刺激する１つ以上の因子が結合しており、そしてここで該Ｔ細胞は、約０．２×１０６細胞／ｍｌ〜約５×１０６細胞／ｍｌの濃度で播種され、約２週間未満の間に、約６×１０６細胞／ｍｌと約５０×１０６細胞／ｍｌとの間の濃度まで増大する、工程
を包含する、方法。
【請求項２】
前記Ｔ細胞が、約０．２×１０６細胞／ｍｌの濃度で播種され、約１２日目までに約３０×１０６細胞／ｍｌの濃度に達する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記Ｔ細胞が、前記Ｔ細胞が、約０．２×１０６細胞／ｍｌの濃度で播種され、約７日目までに約３０×１０６細胞／ｍｌの濃度に達する、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記Ｔ細胞が、約０．２×１０６細胞／ｍｌの濃度で播種され、約９日目までに約３０×１０６細胞／ｍｌの濃度に達する、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記Ｔ細胞が、約５×１０６細胞／ｍｌの濃度で播種され、約１２日目までに約７０×１０６細胞／ｍｌの濃度に達する、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記Ｔ細胞が、約５×１０６細胞／ｍｌの濃度で播種され、約７日目までに約７０×１０６細胞／ｍｌの濃度に達する、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記Ｔ細胞が、約５×１０６細胞／ｍｌの濃度で播種され、約９日目までに約７０×１０６細胞／ｍｌの濃度に達する、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記Ｔ細胞が、約５×１０６細胞／ｍｌの濃度で播種され、約１２日目までに約４０×１０６細胞／ｍｌの濃度に達する、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記Ｔ細胞が、約５×１０６細胞／ｍｌの濃度で播種され、約７日目までに約４０×１０６細胞／ｍｌの濃度に達する、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記Ｔ細胞が、約５×１０６細胞／ｍｌの濃度で播種され、約９日目までに約４０×１０６細胞／ｍｌの濃度に達する、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記Ｔ細胞が、約０．２×１０６細胞／ｍｌの濃度で播種され、約１２日目までに約４０×１０６細胞／ｍｌの濃度に達する、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記Ｔ細胞が、約０．２×１０６細胞／ｍｌの濃度で播種され、約７日目までに約４０×１０６細胞／ｍｌの濃度に達する、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記Ｔ細胞が、約０．２×１０６細胞／ｍｌの濃度で播種され、約９日目までに約４０×１０６細胞／ｍｌの濃度に達する、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記Ｔ細胞集団が、約０．１リットル容積〜約２００リットル容積を有する培養容器中に播種される、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
前記培養容器が、少なくとも１つの入口フィルターおよび１つの出口フィルターを備える、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記増大が、閉鎖系において行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
前記閉鎖系が、少なくとも１つの入口フィルターと、１つの出口フィルターと、サンプリングポートとを備えた容器を含む、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
培養培地が、前記閉鎖系を通して灌流される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
前記灌流が、約４日目に、約０．５ｍｌ／分〜約３．０ｍｌ／分の速度で開始される、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記灌流が、約６日目に、約０．５ｍｌ／分〜約３．０ｍｌ／分の速度で開始される、請求項１８に記載の方法。
【請求項２１】
前記灌流が、約８日目に、約０．５ｍｌ／分〜約３．０ｍｌ／分の速度で開始される、請求項１８に記載の方法。
【請求項２２】
前記培地が、ＲＰＭＩ  １６４０、ＡＩＭ−Ｖ、ＤＭＥＭ、ＭＥＭ、α−ＭＥＭ、Ｆ−１２、Ｘ−Ｖｉｖｏ１５およびＸ−Ｖｉｖｏ２０からなる群より選択される、請求項１８に記載の方法。
【請求項２３】
前記培養培地が、サイトカインまたはビタミンを含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２４】
前記サイトカインが、ＩＬ−２、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−４、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＴＧＦβ、およびＴＮＦ−αからなる群より選択される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記培養培地が、界面活性剤を含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２６】
前記培養培地が、抗体を含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２７】
前記培養培地が、プラスマネートを含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２８】
前記培養培地が、還元剤を含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２９】
前記還元剤が、Ｎ−アセチル−システインを含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記還元剤が、２−メルカプトエタノールを含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３１】
前記閉鎖系が、振盪可能なプラットフォーム上に配置されたバイオリアクター培養容器を備える、請求項１６に記載の方法。
【請求項３２】
前記振盪プラットフォームの速度および角度が可変性である、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記プラットフォームの振盪が、約３日目に、約５〜１０回の振盪／分で開始される、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記プラットフォームの振盪が、約３日目に、約１１〜１５回の振盪／分で開始される、請求項３２に記載の方法。
【請求項３５】
前記プラットフォームがさらに、可変性の加熱要素を備える、請求項３２に記載の方法。
【請求項３６】
前記プラットフォームがさらに、磁石を備える、請求項３２に記載の方法。
【請求項３７】
前記閉鎖系がさらに、ガスマニホルドを備える、請求項３２に記載の方法。
【請求項３８】
前記閉鎖系がさらに、該閉鎖系へのおよび該閉鎖系からの無菌輸送のためのシリンジポンプおよび制御器を備える、請求項３２に記載の方法。
【請求項３９】
請求項１に記載の方法であって、前記表面には、Ｔ細胞の第１のＴ細胞表面部分を連結する第１因子が結合しており、そして同じ表面または第２の表面には、該Ｔ細胞の第２の部分を連結する第２因子が結合しており、ここで該第１因子および第２因子による該連結が、該Ｔ細胞の増殖を誘導する、方法。
【請求項４０】
同じ表面または第３の表面には、前記Ｔ細胞の第３の部分を連結する第３因子が結合しており、ここで前記第１因子、前記第２因子および該第３因子による該連結が、該Ｔ細胞の増殖を誘導する、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
少なくとも１つの因子が、抗体または抗体フラグメントである、請求項３９に記載の方法。
【請求項４２】
前記第１因子が、抗体またはそのフラグメントであり、そして前記第２因子が、抗体またはそのフラグメントである、請求項３９に記載の方法。
【請求項４３】
前記第１因子および前記第２因子が、異なる抗体である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４４】
前記第１因子が、抗ＣＤ３抗体、抗ＣＤ２抗体、または、抗ＣＤ３抗体もしくは抗ＣＤ２抗体の抗体フラグメントである、請求項３９に記載の方法。
【請求項４５】
前記第２因子が、抗ＣＤ２８抗体またはその抗体フラグメントである、請求項３９に記載の方法。
【請求項４６】
前記第１因子が、抗ＣＤ３抗体であり、そして該第２因子が、抗ＣＤ２８抗体である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４７】
前記抗ＣＤ３抗体と抗ＣＤ２８抗体とが、約１：１〜約１：１００の比率で存在する、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
前記第１因子が、抗ＣＤ３抗体であり、そして前記第２因子が、ＣＤ２８に対するリガンドである、請求項３９に記載の方法。
【請求項４９】
前記リガンドが、ＣＤ２８に対する天然のリガンドである、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
前記天然のリガンドが、Ｂ７である、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
少なくとも１つの因子が、抗体または抗体フラグメントである、請求項４０に記載の方法。
【請求項５２】
前記第１因子が、抗体またはそのフラグメントであり、そして前記第２因子が、抗体またはそのフラグメントである、請求項４０に記載の方法。
【請求項５３】
前記第１因子および第２因子が、異なる抗体である、請求項４０に記載の方法。
【請求項５４】
前記第１因子が、抗ＣＤ３抗体、抗ＣＤ２抗体、または、抗ＣＤ３抗体もしくは抗ＣＤ２抗体の抗体フラグメントである、請求項４０に記載の方法。
【請求項５５】
前記第２因子が、抗ＣＤ２８抗体またはその抗体フラグメントである、請求項４０に記載の方法。
【請求項５６】
前記第１因子が、抗ＣＤ３抗体であり、そして前記第２因子が、ＣＤ２８抗体である、請求項４０に記載の方法。
【請求項５７】
第３因子が、抗体または抗体フラグメントである、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
前記第３因子が、抗４−１ＢＢ抗体またはその抗体フラグメントである、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
請求項１に記載の方法に従って生成された、Ｔ細胞集団。
【請求項６０】
装置であって、以下：
ａ．少なくとも１つの出口フィルターと１つの入口フィルターとを備える閉鎖された培養容器を備え；
ｂ．該閉鎖された培養容器は、内部に、約６×１０６細胞／ｍｌ〜約９０×１０６細胞／ｍｌの密度で、増大されたＴ細胞を含む一定容量の培養培地を有する、
装置。
【請求項６１】
前記増大されたＴ細胞が、１０×１０６細胞／ｍｌの密度である、請求項６０に記載の装置。
【請求項６２】
前記増大されたＴ細胞が、２０×１０６細胞／ｍｌの密度である、請求項６０に記載の装置。
【請求項６３】
前記増大されたＴ細胞が、３０×１０６細胞／ｍｌの密度である、請求項６０に記載の装置。
【請求項６４】
前記増大されたＴ細胞が、４０×１０６細胞／ｍｌの密度である、請求項６０に記載の装置。
【請求項６５】
前記増大されたＴ細胞が、５０×１０６細胞／ｍｌの密度である、請求項６０に記載の装置。
【請求項６６】
請求項６０に記載の装置であって、前記培地がさらに１つの表面を含み、ここで該表面には、Ｔ細胞の第１の細胞表面部分を連結する第１因子が結合しており、そして同じ表面または第２の表面には、該Ｔ細胞の第２の部分を連結する第２因子が結合している、装置。
【請求項６７】
単一の個体に由来する計１００×１０９個の活性化および増大されたＴ細胞を含む、組成物。
【請求項６８】
細胞表面部分を連結させることによって、Ｔ細胞集団を増大させる方法であって、該方法は、以下：
ａ．細胞集団を提供する工程であって、ここで該細胞集団の少なくとも一部はＴ細胞を含む、工程；
ｂ．該細胞集団を１つの表面と接触させる工程であって、ここで該表面には、Ｔ細胞の第１の細胞表面部分を連結する第１因子が結合しており、そして同じ表面または第２の表面には、該Ｔ細胞の第２の部分を連結する第２因子が結合しており、ここで該第１因子および該第２因子による該連結は、該Ｔ細胞の増殖を誘導する、工程；
ｃ．約０日間と約５日間との間の期間にわたって該表面と接触させた後で、該細胞集団を、約０．２×１０６細胞／ｍｌと約５．０×１０６細胞／ｍｌとの間の濃度で、少なくとも１つの入口フィルターと１つの出口フィルターとを備えたディスポーザブルバイオリアクターバッグを備える閉鎖系に播種する工程；
ｄ．該閉鎖系を通して、約１ｍｌ／分で培地を灌流する工程；
ｅ．該バイオリアクターバッグを、振盪プラットフォームにおいて、約５〜１５回の振盪／分で振盪する工程、
を包含し；
そしてここで、該Ｔ細胞は、約２週間未満で、約６×１０６細胞／ｍｌと約９０×１０６細胞／ｍｌとの間の濃度まで増大する、方法。
【請求項６９】
Ｔ細胞集団であって、該Ｔ細胞は増殖性であり、そしてここで該集団は、約６×１０６細胞／ｍｌと約９０×１０６細胞／ｍｌとの間の濃度である、Ｔ細胞集団。
【請求項７０】
請求項６９に記載のＴ細胞集団であって、該Ｔ細胞集団は、培養２週間未満の間に、約１００×１０９個と約５００×１０９個との間の細胞総数に達する、Ｔ細胞集団。