【手続補正書】
【提出日】平成18年3月7日(2006.3.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
心機能不全に対する処置を必要とする被験体において機能不全性心臓を処置するための薬学的組成物であって、該組成物は、以下：
該被験体の心臓に骨格筋芽細胞を含み、ここで、骨格筋芽細胞または該骨格筋芽細胞を生じる細胞の少なくとも一部が、送達後に該心臓において生存し、そして該心臓において骨格筋芽細胞の生存または分化に特徴的なマーカーを発現する、薬学的組成物。
【請求項２】
前記薬学的組成物が、線維芽細胞をさらに含む、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項３】
前記マーカーが、骨格筋芽細胞、骨格筋管、骨格筋原線維または骨格筋管融合に特徴的である、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項４】
前記マーカーが、骨格筋特異的なミオシン重鎖である、請求項３に記載の薬学的組成物。
【請求項５】
前記マーカーが、デスミンである、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項６】
前記マーカーが、骨格筋芽細胞または心臓細胞由来の骨格筋芽細胞から誘導される細胞を識別する、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項７】
前記マーカーが、筋管由来の骨格筋芽細胞または筋原線維由来の骨格筋芽細胞を識別する、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項８】
前記マーカーが、ｍｙｏＤ、ミオゲニン、ｍｙｆ−５およびＮＣＡＭからなる群から選択される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記被験体がヒトである、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項１０】
前記被験体が、虚血性心疾患を患う、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項１１】
前記被験体の心臓が、ウイルス感染によって引き起こされた損傷を被っている、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項１２】
前記被験体の心臓が、外因性化合物によって引き起こされた損傷を被っている、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項１３】
前記被験体の心臓が、免疫系活性によって媒介された損傷を被っている、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項１４】
前記被験体が、うっ血性心不全を患う、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項１５】
前記被験体の心臓が、前記組成物送達の少なくとも１時間前に損傷を被っている、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項１６】
前記被験体の心臓が、前記組成物送達の少なくとも２４時間前に損傷を被っている、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項１７】
前記被験体の心臓が、前記組成物送達の少なくとも１ヶ月前に損傷を受けている、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項１８】
前記損傷が、虚血性の損傷である、請求項１５、請求項１６または請求項１７のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項１９】
前記被験体の心臓が、前記組成物送達の少なくとも６ヶ月前に損傷を被っている、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項２０】
前記被験体の心臓が、前記組成物送達の少なくとも１年前に損傷を被っている、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項２１】
前記損傷が、虚血性の損傷である、請求項１９または請求項２０に記載の薬学的組成物。
【請求項２２】
心筋瘢痕組織へ送達するために処方される、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項２３】
心筋瘢痕組織および瘢痕の証拠を示さない隣接心筋組織へ送達するために処方される、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項２４】
前記心臓の脂肪に富んだ領域へ送達するために処方される、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項２５】
少なくとも１×１０６の骨格筋芽細胞を送達するために処方される、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項２６】
約１０６と約１０７との間の骨格筋芽細胞を送達するために処方される、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項２７】
約１０７と約１０８との間の骨格筋芽細胞を送達するために処方される、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項２８】
約１０８と約１０９との間の骨格筋芽細胞を送達するために処方される、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項２９】
約１０９と約１０１０との間の骨格筋芽細胞を送達するために処方される、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項３０】
約３００×１０６の骨格筋芽細胞を送達するために処方される、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項３１】
前記骨格筋芽細胞が、約８×１０７細胞／ｍｌの濃度で送達するために処方される、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項３２】
前記骨格筋芽細胞が、１６×１０７細胞／ｍｌまでの濃度で送達するために処方される、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項３３】
前記組成物が、線維芽細胞をさらに含み、そして、少なくとも１×１０６、約１０６と約１０７との間、約１０７と約１０８との間、約１０８と約１０９との間または約１０９と約１０１０との間の細胞が送達するために処方される、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項３４】
前記組成物が、線維芽細胞をさらに含み、そして、前記骨格筋芽細胞および該線維芽細胞が、約８×１０７細胞／ｍｌの全濃度で送達するために処方される、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項３５】
前記組成物が、線維芽細胞をさらに含み、そして、前記骨格筋芽細胞および該線維芽細胞が、１６×１０７細胞／ｍｌまでの全濃度で送達するために処方される、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項３６】
心内膜または心外膜に送達するために処方される、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項３７】
動脈内に送達するために処方される、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項３８】
静脈内に送達するために処方される、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項３９】
静脈系へ挿入されるカテーテルを通して前記心臓に送達するために処方される、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項４０】
前記薬学的組成物が、少なくとも３０％の骨格筋芽細胞を含む、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項４１】
前記薬学的組成物が、約３０％と約５０％との間の骨格筋芽細胞を含む、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項４２】
前記薬学的組成物が、約５０％と約６０％との間の骨格筋芽細胞を含む、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項４３】
前記薬学的組成物が、約６０％と約７５％との間の骨格筋芽細胞を含む、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項４４】
前記薬学的組成物が、約７５％と約９０％との間の骨格筋芽細胞を含む、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項４５】
前記薬学的組成物が、約９０％と約９５％との間の骨格筋芽細胞を含む、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項４６】
前記薬学的組成物が、約９５％と約９９％との間の骨格筋芽細胞を含む、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項４７】
前記薬学的組成物が、少なくとも９９％の骨格筋芽細胞を含む、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項４８】
前記薬学的組成物が、線維芽細胞をさらに含む、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項４９】
前記薬学的組成物が、少なくとも５％の線維芽細胞、少なくとも１０％の線維芽細胞、少なくとも２５％の線維芽細胞、少なくとも５０％の線維芽細胞または少なくとも７０％の線維芽細胞を含む、請求項４８に記載の薬学的組成物。
【請求項５０】
前記薬学的組成物が、約１％未満の筋管を含む、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項５１】
前記薬学的組成物が、約０．５％未満の筋管を含む、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項５２】
前記薬学的組成物が、本質的に筋管を含まない、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項５３】
前記薬学的組成物が、約１％未満の内皮細胞を含む、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項５４】
前記薬学的組成物が、約０．５％未満の内皮細胞を含む、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項５５】
前記薬学的組成物が、本質的に内皮細胞を含まない、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項５６】
前記骨格筋芽細胞が、自己性である、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項５７】
前記骨格筋芽細胞、または該筋芽細胞を生じる細胞が、少なくとも３０日間生存する、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項５８】
前記骨格筋芽細胞、または該筋芽細胞を生じる細胞が、少なくとも６０日間生存する、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項５９】
前記骨格筋芽細胞、または該骨格筋芽細胞を生じる細胞が、少なくとも９０日間生存する、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項６０】
前記骨格筋芽細胞、または該骨格筋芽細胞を生じる細胞が、少なくとも１年間生存する、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項６１】
小血管形成が、生存する前記骨格筋芽細胞もしくは該骨格筋芽細胞を生じる細胞でか、またはその付近で生じる、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項６２】
小血管形成が、内皮細胞マーカーの発現によって証明される、請求項６１に記載の薬学的組成物。
【請求項６３】
前記薬学的組成物は、前記被験体が左心室補助装置を受ける手順と合わせて送達される、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項６４】
前記薬学的組成物は、前記被験体が冠状動脈バイパス移植片を受ける手順と合わせて送達するために処方される、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項６５】
前記薬学的組成物は、前記被験体が弁置換術を受ける手順と合わせて送達するために処方される、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項６６】
被験体の心臓への移植のための組成物を調製する方法であって、該方法は、以下：
被験体に由来する筋組織のサンプルから細胞集団を単離する工程であって、ここで、該細胞集団は、骨格筋芽細胞を含む、工程；
培養物中で該集団を増殖させる工程；ならびに
送達後に該被験体の心臓において、生存する能力または生存する細胞を生じる能力によって特徴付けられ、そして該心臓において該骨格筋芽細胞の生存または分化に特徴的なマーカーを発現する骨格筋芽細胞を含む移植可能な組成物を産生するために、該増殖させる工程から生じる集団を調製する工程、
を包含する、方法。
【請求項６７】
前記調製する工程において調製された前記集団が、線維芽細胞をさらに含む、請求項６６に記載の方法。
【請求項６８】
前記細胞が、前記増殖させる工程の間、コンフルエント未満の状態で維持される、請求項６６に記載の方法。
【請求項６９】
前記細胞が、前記増殖させる工程の間、約７５％未満のコンフルエンスで維持される、請求項６８に記載の方法。
【請求項７０】
前記単離する工程が、少なくとも二つのプロテアーゼを含む消化混合物において、前記サンプルを消化する工程を包含する、請求項６６に記載の方法。
【請求項７１】
前記消化混合物が、ＥＤＴＡを含む、請求項７０に記載の方法。
【請求項７２】
前記プロテアーゼが、カルボキシペプチダーゼ、カスパーゼ、キモトリプシン、コラゲナーゼ、エラスターゼ、エンドプロテイナーゼ、ロイシンアミノペプチダーゼ、パパイン、プロナーゼおよびトリプシンからなる群から選択される、請求項７０に記載の方法。
【請求項７３】
前記増殖させる工程が、約５０回未満の倍加回数の間、培養物中に前記細胞集団を維持する工程を包含する、請求項６６に記載の方法。
【請求項７４】
前記増殖させる工程が、約５回と約１５回との間の倍加回数の間、培養物中に前記細胞集団を維持する工程を包含する、請求項６６に記載の方法。
【請求項７５】
前記調製する工程が、線維芽細胞を含む細胞集団と、骨格筋芽細胞を含む細胞集団と合わせる工程を包含する、請求項６６に記載の方法。
【請求項７６】
骨格線維芽細胞を含む前記細胞集団が、培養物中で、前記サンプルから単離された細胞集団を増殖させることによって得られる、請求項７５に記載の方法。
【請求項７７】
前記調製する工程が、前記細胞を分別する工程を包含する、請求項６６または請求項７５に記載の方法。
【請求項７８】
前記単離する工程または前記調製する工程の一つまたは両方が、フローサイトメトリーまたは蛍光活性化細胞分別を実施する工程を包含する、請求項７７に記載の方法。
【請求項７９】
前記被験体がヒトである、請求項６６に記載の方法。
【請求項８０】
骨格筋芽細胞を含む移植可能な組成物であって、該組成物は、被験体の心臓へ送達される場合、送達後に該心臓において生存し、そして該骨格筋芽細胞の生存または分化に特徴的なマーカーを発現する能力によって特徴付けられる、組成物。
【請求項８１】
前記組成物が、線維芽細胞をさらに含む、請求項８０に記載の移植可能な組成物。
【請求項８２】
前記マーカーが、骨格筋芽細胞、骨格筋管、骨格筋管融合または骨格筋原線維に特徴的である、請求項８０に記載の移植可能な組成物。
【請求項８３】
請求項６６に記載の方法に従って調製された、移植可能な組成物。