【手続補正書】
【提出日】平成18年7月12日(2006.7.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
１個または複数の脂質部分にコンジュゲートされたポリペプチドを含むリポペプチドであって、
（ｉ）前記ポリペプチドが、
（ａ）Ｔヘルパー細胞（Ｔｈ）エピトープのアミノ酸配列および細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ）エピトープのアミノ酸配列（前記各アミノ酸配列は異なる）、ならびに
（ｂ）内部リジンまたは内部リジン類似体のε−アミノ基または末端側鎖基を介して前記脂質部分の各々が共有結合するための１個または複数の内部リジン残基または内部リジン類似体残基、
を含むアミノ酸配列を含み、
（ｉｉ）前記１個または複数の脂質部分の各々が、前記１個もしくは複数の内部リジン残基のε−アミノ基、または前記１個もしくは複数の内部リジン類似体残基の末端側鎖基に共有結合している、
上記リポペプチド。
【請求項２】
前記脂質がリジン残基のε−アミノ基に結合している、請求項１に記載のリポペプチド。
【請求項３】
脂質部分が結合している前記内部リジン残基が、前記Ｔｈエピトープと前記ＣＴＬエピトープの間に位置する、請求項１または２に記載のリポペプチド。
【請求項４】
脂質部分が結合している前記内部リジン残基が、前記Ｔｈエピトープ内に位置する、請求項１または２に記載のリポペプチド。
【請求項５】
前記脂質部分が一般式（ＶＩＩ）：
【化１】
2006513979.tif 000001
（式中、
（ｉ）Ｘは、硫黄、酸素、ジスルフィド（−Ｓ−Ｓ−）、メチレン（−ＣＨ２−）およびアミノ（−ＮＨ−）からなる群から選択され、
（ｉｉ）ｍは、１または２の整数であり、
（ｉｉｉ）ｎは、０〜５の整数であり、
（ｉｖ）Ｒ１は、水素、カルボニル（−ＣＯ−）およびＲ’−ＣＯ−（式中、Ｒ’は、７〜２５個の炭素原子を有するアルキル、７〜２５個の炭素原子を有するアルケニル、および７〜２５個の炭素原子を有するアルキニルからなる群から選択され、前記アルキル基、アルケニル基またはアルキニル基は、場合によっては、ヒドロキシル基、アミノ基、オキソ基、アシル基またはシクロアルキル基で置換されていてもよい）からなる群から選択され、
（ｖ）Ｒ２は、Ｒ’−ＣＯ−Ｏ−、Ｒ’−Ｏ−、Ｒ’−Ｏ−ＣＯ−、Ｒ’−ＮＨ−ＣＯ−およびＲ’−ＣＯ−ＮＨ−（式中、Ｒ’は、７〜２５個の炭素原子を有するアルキル、７〜２５個の炭素原子を有するアルケニル、および７〜２５個の炭素原子を有するアルキニルからなる群から選択され、前記アルキル基、アルケニル基またはアルキニル基は、場合によっては、ヒドロキシル基、アミノ基、オキソ基、アシル基またはシクロアルキル基で置換されていてもよい）からなる群から選択され、
（ｖｉ）Ｒ３は、Ｒ’−ＣＯ−Ｏ−、Ｒ’−Ｏ−、Ｒ’−Ｏ−ＣＯ−、Ｒ’−ＮＨ−ＣＯ−およびＲ’−ＣＯ−ＮＨ−（式中、Ｒ’は、７〜２５個の炭素原子を有するアルキル、７〜２５個の炭素原子を有するアルケニル、および７〜２５個の炭素原子を有するアルキニルからなる群から選択され、前記アルキル基、アルケニル基またはアルキニル基は、場合によっては、ヒドロキシル基、アミノ基、オキソ基、アシル基またはシクロアルキル基で置換されていてもよい）からなる群から選択され、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の各々は同じでも異なっていてもよい。）
の構造を有する、請求項１から４のいずれか一項に記載のリポペプチド。
【請求項６】
Ｘが硫黄であり、ｍとｎがともに１であり、Ｒ１が水素およびＲ’−ＣＯ−（式中Ｒ’は７〜２５個の炭素原子を有するアルキル基である）からなる群から選択され、Ｒ２およびＲ３がＲ’−ＣＯ−Ｏ−、Ｒ’−Ｏ−、Ｒ’−Ｏ−ＣＯ−、Ｒ’−ＮＨ−ＣＯ−およびＲ’−ＣＯ−ＮＨ−（式中、Ｒ’は７〜２５個の炭素原子を有するアルキル基である）からなる群から選択される、請求項５に記載のリポペプチド。
【請求項７】
Ｒ’が、パルミトイル、ミリストイル、ステアロイル、ラウロイル、オクタノイル、デカノイルおよびコレステロールからなる群から選択される、請求項６に記載のリポペプチド。
【請求項８】
前記脂質が、Ｐａｍ１Ｃｙｓ、Ｐａｍ２Ｃｙｓ、Ｐａｍ３Ｃｙｓ、Ｃｈｏｌ２Ｌｙｓ、Ｓｔｅ２Ｃｙｓ、Ｌａｕ２ＣｙｓおよびＯｃｔ２Ｃｙｓからなる群から選択されるリポアミノ酸部分内に含まれる、請求項５から７のいずれか一項に記載のリポペプチド。
【請求項９】
前記リポアミノ酸部分がＰａｍ２Ｃｙｓである、請求項８に記載のリポペプチド。
【請求項１０】
前記脂質部分が、以下の一般式（ＶＩＩＩ）：
【化２】
2006513979.tif 000002
（式中、
（ｉ）Ｒ４は、（ｉ）約７〜約２５個の炭素原子からなるα−アシル脂肪酸残基、（ｉｉ）α−アルキル−β−ヒドロキシ脂肪酸残基、（ｉｉｉ）α−アルキル−β−ヒドロキシ脂肪酸残基のβ−ヒドロキシエステル、および（ｉｖ）リポアミノ酸残基、からなる群から選択され、
（ｉｉ）Ｒ５は、水素、またはアミノ酸残基の側鎖である。）
を有する、請求項１から４のいずれか一項に記載のリポペプチド。
【請求項１１】
前記脂質部分が前記ペプチド部分からスペーサーによって分離されている、請求項１から１０のいずれか一項に記載のリポペプチド。
【請求項１２】
前記スペーサーが、アルギニン、セリンまたは６−アミノヘキサン酸を含む、請求項１１に記載のリポペプチド。
【請求項１３】
前記スペーサーがセリンホモ二量体からなる、請求項１１または１２に記載のリポペプチド。
【請求項１４】
前記内部リジンまたは内部リジン類似体が、免疫原性の低い合成アミノ酸配列内に入れ子状に置かれている、請求項１から１３のいずれか一項に記載のリポペプチド。
【請求項１５】
前記Ｔヘルパーエピトープが、インフルエンザウイルス赤血球凝集素のＴヘルパーエピトープ、またはイヌジステンパーウイルスＦ（ＣＤＶ−Ｆ）タンパク質のＴヘルパーエピトープである、請求項１から１４のいずれか一項に記載のリポペプチド。
【請求項１６】
前記インフルエンザウイルス赤血球凝集素のＴヘルパーエピトープが、配列番号１で示されるアミノ酸配列を含む、請求項１５に記載のリポペプチド。
【請求項１７】
前記ＣＤＶ−Ｆタンパク質のＴヘルパーエピトープが、配列番号２０で示されるアミノ酸配列を含む、請求項１５に記載のリポペプチド。
【請求項１８】
前記ＣＴＬエピトープが、ウイルスの免疫原性タンパク質、リポタンパク質または糖タンパク質に由来する、請求項１から１７のいずれか一項に記載のリポペプチド。
【請求項１９】
ウイルスがインフルエンザウイルスである、請求項１８に記載のリポペプチド。
【請求項２０】
前記ＣＴＬエピトープが、配列番号２で示されるアミノ酸配列を含む、請求項１９に記載のリポペプチド。
【請求項２１】
ウイルスがＣ型肝炎ウイルスである、請求項１８に記載のリポペプチド。
【請求項２２】
前記ＣＴＬエピトープが、配列番号１７６で示されるアミノ酸配列を含む、請求項２１に記載のリポペプチド。
【請求項２３】
前記ＣＴＬエピトープが、原核生物の免疫原性タンパク質、リポタンパク質または糖タンパク質に由来する、請求項１から１７のいずれか一項に記載のリポペプチド。
【請求項２４】
前記ＣＴＬエピトープが、リステリア・モノサイトゲネスに由来する、請求項２３に記載のリポペプチド。
【請求項２５】
前記ＣＴＬエピトープが、配列番号１７２で示されるアミノ酸配列を含む、請求項２４に記載のリポペプチド。
【請求項２６】
前記ＣＴＬエピトープが、真核生物の免疫原性タンパク質、リポタンパク質または糖タンパク質に由来する、請求項１から１７のいずれか一項に記載のリポペプチド。
【請求項２７】
前記真核生物が寄生生物である、請求項２６に記載のリポペプチド。
【請求項２８】
前記真核生物が哺乳動物である、請求項２６に記載のリポペプチド。
【請求項２９】
前記ＣＴＬエピトープが、哺乳動物または腫瘍細胞のオボアルブミンタンパク質に由来する、請求項２８に記載のリポペプチド。
【請求項３０】
前記ＣＴＬエピトープが、配列番号１７３で示されるアミノ酸配列を含む、請求項２９に記載のリポペプチド。
【請求項３１】
前記ポリペプチドが、配列番号３、配列番号４、配列番号１７４、配列番号１７５、および配列番号１７７からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１から３０のいずれか一項に記載のリポペプチド。
【請求項３２】
未成熟樹状細胞（ＤＣ）上でのＭＨＣクラスＩＩ分子の表面発現をアップレギュレート可能である、請求項１から３１のいずれか一項に記載のリポペプチド。
【請求項３３】
前記ＤＣがＤ１細胞である、請求項３２に記載のリポペプチド。
【請求項３４】
１個または複数の脂質部分にコンジュゲートされたポリペプチドを含むリポペプチドであって、
（ｉ）前記ポリペプチドが、
（ａ）Ｔヘルパー細胞（Ｔｈ）エピトープのアミノ酸配列およびＣＴＬエピトープのアミノ酸配列（前記各アミノ酸配列は異なる）、ならびに
（ｂ）１個または複数の内部リジンまたはリジン類似体残基のε−アミノ基を介して前記脂質部分の各々が共有結合するための１個または複数の内部リジンまたはリジン類似体残基、
を含むアミノ酸配列を含み、
（ｉｉ）前記１個または複数の脂質部分の各々が、前記１個または複数の内部リジン残基のε−アミノ基に共有結合しており、
（ｉｉｉ）前記リポペプチドが一般式（ＶＩ）：
【化３】
2006513979.tif 000003
（式中、
エピトープは、ＴヘルパーエピトープまたはＣＴＬエピトープであり、
Ａは、存在しても存在しなくてもよく、約１〜約６アミノ酸長のアミノ酸スペーサーからなり、
ｎは、１、２、３または４の整数であり、
Ｘは、ＮＨ、ＯおよびＳからなる群から選択される末端側鎖基であり、
Ｙは、存在しても存在しなくてもよく、約１〜約６アミノ酸長のアミノ酸スペーサーからなり、
Ｚは、脂質部分である。）
を有する、上記リポペプチド。
【請求項３５】
Ａが存在しない、請求項３４に記載のリポペプチド。
【請求項３６】
Ｙが存在し、かつセリンホモ二量体からなる、請求項３４または３５に記載のリポペプチド。
【請求項３７】
Ｚが、Ｐａｍ１Ｃｙｓ、Ｐａｍ２Ｃｙｓ、Ｐａｍ３Ｃｙｓ、Ｃｈｏｌ２Ｌｙｓ、Ｓｔｅ２Ｃｙｓ、Ｌａｕ２ＣｙｓおよびＯｃｔ２Ｃｙｓからなる群から選択される、請求項３４から３６のいずれか一項に記載のリポペプチド。
【請求項３８】
未成熟樹状細胞（ＤＣ）上のＭＨＣクラスＩＩ分子の表面発現をアップレギュレート可能である、請求項３４から３７のいずれか一項に記載のリポペプチド。
【請求項３９】
前記ＤＣがＤ１細胞である、請求項３８に記載のリポペプチド。
【請求項４０】
（ｉ）以下の（ａ）および（ｂ）：
（ａ）Ｔヘルパー細胞（Ｔｈ）エピトープのアミノ酸配列およびＣＴＬエピトープのアミノ酸配列（前記各アミノ酸配列は異なる）、
（ｂ）１個または複数の内部リジン残基または内部リジン類似体残基、
を含むアミノ酸配列を含むポリペプチドを製造するステップ、ならびに
（ｉｉ）前記１個または複数の脂質部分の各々を直接的または間接的に、前記１個もしくは複数の内部リジン残基のε−アミノ基、または前記１個もしくは複数の内部リジン類似体残基の末端側鎖基に共有結合させて、前記内部リジン残基のεアミノ基に結合した前記脂質部分を含む、または前記内部リジン類似体残基の末端側鎖基に結合した前記脂質部分を含むリポペプチドを製造するステップ、
を含む、リポペプチドを製造する方法。
【請求項４１】
スペーサーを前記リポアミノ酸のアミノ酸部分に付加するステップをさらに含む、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
前記ポリペプチドが、単一の内部リジンまたはリジン類似体残基とブロッキングされたＮ末端とを含むアミノ酸配列を有する、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項４３】
リポペプチド中のＣＴＬエピトープに対する細胞傷害性Ｔ細胞応答を誘発するのに十分な請求項１から３９のいずれか一項に記載のリポペプチドを含み、被験体において免疫応答を誘発する組成物。
【請求項４４】
請求項１から２０および３１から３９のいずれか一項に記載のリポペプチドを含むインフルエンザウイルスに対するワクチンであって、前記ＣＴＬエピトープがインフルエンザウイルスタンパク質に由来するものである、上記ワクチン。
【請求項４５】
請求項１から１８、２１、２２および３１から３９のいずれか一項に記載のリポペプチドを含むＣ型肝炎ウイルスに対するワクチンであって、前記ＣＴＬエピトープがＣ型肝炎ウイルスタンパク質に由来するものである、上記ワクチン。
【請求項４６】
請求項１から１７、２３から２５および３１から３９のいずれか一項に記載のリポペプチドを含むリステリア・モノサイトゲネスに対するワクチンであって、前記ＣＴＬエピトープがリステリア・モノサイトゲネスタンパク質に由来するものである、上記ワクチン。
【請求項４７】
請求項１から１７および２６から３９のいずれか一項に記載のリポペプチドを含む、癌に対する予防または治療用ワクチンであって、前記ＣＴＬエピトープが腫瘍特異的ＣＴＬエピトープである、上記ワクチン。
【請求項４８】
前記ＣＴＬエピトープに対する免疫学的記憶を発生させる、請求項４４から４７のいずれか１項に記載のワクチン。