【手続補正書】
【提出日】平成18年5月23日(2006.5.23)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  炎症性自己免疫疾患または状態の処置または予防のための医薬の製造における、非免疫抑制性、シクロフィリン結合サイクロスポリンの使用。
【請求項２】  患者に有効量の非免疫抑制性、シクロフィリン結合サイクロスポリンを投与することを含む、炎症性自己免疫状態または疾患の、このような疾患または状態に罹患しているまたは危険のある患者の処置または予防のための方法。
【請求項３】  非免疫抑制性、シクロフィリン結合サイクロスポリンが式Ａ
【化１】
2002516873.tif 000001
[式中、Ｂは式Ｂ
【化２】
2002516873.tif 000002
〔式中、ａは２位のαAbu残基への結合を意味する；
ｂは４位におけるＣ残基への結合を意味する；
Alkは２から６個の炭素原子を含む直鎖または分枝鎖アルキレンまたは３から６個の炭素原子を含むシクロアルキレン、および
Ｒは
カルボキシまたはアルキルオキシカルボニル残基；
基−ＮＲ１Ｒ２
(式中、Ｒ１およびＲ２は同じまたは異なって水素、アルキル、Ｃ２−４アルケニル、Ｃ３−６シクロアルキル、フェニル(所望によりハロゲン、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アミノ、アルキルアミノまたはジアルキルアミノで置換されていてもよい)またはベンジルまたは、５または６個の環原子および１から３個のヘテロ原子を含む飽和または不飽和へテロ環式基、またはＲ１およびＲ２は、それらが結合している窒素原子と共に４から６個の環原子を含み、所望により窒素、酸素または硫黄からなる群から選択される更なるヘテロ原子を含んでいてもよく、所望によりアルキル、フェニルまたはベンジルで置換されていてもよい飽和または不飽和ヘテロ環を意味する)；
式
【化３】
2002516873.tif 000003
(式中、Ｒ１およびＲ２は上記で定義の意味、Ｒ３は水素またはアルキル基を意味し、ｎは２から４の整数を意味する)
および、式中、アルキルは、１から４個の炭素原子を含む直鎖または分枝鎖アルキルを意味する。
の基〕
のアミノ酸残基である；
ＣはMeLeuまたは４−ヒドロキシ−MeLeuである]
の化合物およびその薬学的に許容される塩である、請求項１記載の使用または請求項２記載の方法。
【請求項４】  非免疫抑制性、シクロフィリン結合サイクロスポリンが、式Ｉ：
【化４】
2002516873.tif 000004
〔式中、ＷはMeBmt、ジヒドロ−MeBmtまたは８'−ヒドロキシ−MeBmt；
ＸはαAbu、Val、Thr、NvaまたはＯ−メチルスレオニン(MeOThr)；
ＲはSarまたは(Ｄ)−MeAla；
ＹはMeLeu、γ−ヒドロキシ−MeLeu、MeIle、MeVal、MeThr、MeAla、MeTyr、MeTyr(O-PO(OH)２)、MeaIleまたはMeaThrまたはPro；
ＺはVal、Leu、N-Alk-ValまたはN-Alk-Leu
(式中、AlkはMeまたは、所望によりフェニル、または６環員を含むＮ、ＳまたはＯヘテロアリール、または所望によりハロゲンで置換されていてもよいフェニルで置換されていてもよいビニルで置換されているMeである) および、
ＱはMeLeu、γ−ヒドロキシ−MeLeuまたはMeAlaである〕
の化合物である、請求項１記載の使用または請求項２記載の方法。
【請求項５】  非免疫抑制性、シクロフィリン結合サイクロスポリンが
ａ)[ジヒドロ−MeBmt]１−[γ−ヒドロキシ−MeLeu]４−シクロスポリン、
ｂ)[MeVal]４−シクロスポリン、
ｃ)[MeIle]４−シクロスポリン、
ｄ)[MeThr]４−シクロスポリン、
ｅ)[γ−ヒドロキシ−MeLeu]４−シクロスポリン、
ｆ)[Nva]２−[γ−ヒドロキシ−MeLeu]４−シクロスポリン、
ｇ)[γ−ヒドロキシ−MeLeu]４−[γ−ヒドロキシ−MeLeu]６−シクロスポリン、
ｈ)[MeVal]５−シクロスポリン、
ｉ)[MeOThr]２−[(D)MeAla]３−[MeVal]５−シクロスポリン、または
ｊ)[８'−ヒドロキシ−MeBmt]１−シクロスポリン、
ｍ)[Ｎ−ベンジル−Val]５−シクロスポリン、
ｎ)[Ｎ−５−フルオロ−ベンジル−Val]５−シクロスポリン、
ｏ)[Ｎ−アリル−Val]５−シクロスポリン、
ｐ)[Ｎ−３−フェニル−アリル−Val]５−シクロスポリン、
ｑ)[Pro]４−シクロスポリン、または
ｒ)[γ−ヒドロキシ−MeLeu]９−シクロスポリン
からなる群から選択される、請求項１記載の使用または請求項２記載の方法。
【請求項６】  非免疫抑制性、シクロフィリン結合サイクロスポリンが[MeIle]４−シクロスポリンまたは[γ−ヒドロキシ−MeLeu]４−シクロスポリンである、請求項１記載の使用または請求項２記載の方法。
【請求項７】  患者に有効量の非免疫抑制性、シクロフィリン結合サイクロスポリンおよびサングリフェーリンを含む組合わせを投与することを含む、炎症性自己免疫状態および疾患の、このような疾患または状態に罹患しているまたは危険のある患者の処置または予防のための方法。
【請求項８】  非免疫抑制性、シクロフィリン結合サイクロスポリンおよびサングリフェーリンを含む、例えば、炎症性自己免疫疾患または状態の処置または予防のための医薬組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００７】
上記ＭＬＲで非免疫抑制性と判断された化合物が、しばしば、IL-2 Reporter Gene Assayで不活性であり、したがって、IL-2 Reporter Gene Assayを、本発明で使用するための非免疫抑制性、シクロフィリン結合サイクロスポリン化合物の選択、例えば、一次スクリーニングに使用し得る。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００９】
活性化合物は、特に、自己免疫疾患および炎症状態、特に、関節炎(たとえば、関節リウマチ、慢性進行性関節炎および変形性関節炎)およびリウマチ疾患のような、病因が自己免疫要素を含む炎症性状態の処置、予防、または軽減に有用である。活性化合物を用い得る具体的自己免疫疾患は、自己免疫血液学的疾患(例えば、溶血性貧血、無形成性貧血、真正赤血球性貧血および特発性血小板減少症)、全身性エリテマートーデス、ポリコンドリティス、スクレロドーマ、ヴェグナー肉芽腫症、皮膚筋炎、慢性活動性肝炎、重症筋無力症、乾癬、スティーブン−ジョンソン症候群、特発性スプルー、自己免疫性炎症性大腸疾患(例えば、潰瘍性大腸炎およびクローン病を含む)、膵臓炎、内分泌性眼科疾患、グレーヴズ病、サルコイドーシス、多発性硬化症、原発性胆汁性肝硬変、糖尿病、例えば、若年性糖尿病(Ｉ型糖尿病)、ブドウ膜網膜炎(uveoretinitis)(ベーチェット病)、ブドウ膜炎(前部および後部)、乾性角結膜炎およびを春季角結膜炎、間質性肺繊維症、乾癬性関節炎および糸球体腎炎(ネフローゼ症候群ありおよびなし、例えば、特発性ネフローゼ症候群または最小変化ネフローゼを含む)、喘息および自己免疫要素を含む他の炎症性気道疾患、甲状腺炎(橋本Ghoto病)、脳脊髄炎、中枢神経系の炎症性状態および類似の自己免疫疾患を含む。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１２】
フロインドアジュバント誘発関節炎
ＯＦＡおよびウィスタ−ラット(雄または雌、体重１５０ｇ)に、尾の付け根または後足に、０.６mgの凍結乾燥加熱殺菌Mycobacterium smegmatisを含む０.１mlのミネラル油をi.c.注射する。関節炎の発症のモデルにおいて、処置をアジュバント注射直後に開始する(日１−１８)；確立した関節炎モデルにおいて、処理を、２次炎症が十分に発症した１４日目に開始する(日１４−２０)。実験の最後に、関節の腫脹をマイクロキャリパーの手段で測定する。開発中のまたは確立したテストモデルにおいて、疾患進行の予防または阻害は薬学的有用性の指標である。
参考文献：Winter & Nuss, Arthritis and Rheumatism 9 (1966) 394; Billingham & Davies, Handbook of Experimental Pharmacology (Vane & Ferreira Eds, Springer Verlag, Berlin) 50/II, (1979) 108-144]
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１５】
活性化合物の他のグループは、４位のMeLeu基が異なるＮ−メチル化アミノ酸、例えば、γ−ヒドロキシ−MeLeu、MeIle、MeVal、MeThr、MeAla、MeTyrまたはMeTyr(O-PO(OH)2)またはProで置換されているサイクロスポリン類である。MeIleおよびMeThrに加えて、アロ形のMeaIleおよびMeaThrも使用し得る。アロ形において、β位の立体化学は、天然アミノ酸ものと逆の配置になっており、正常形およびアロ形はジアステレオ異性体の対を成す。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】
活性化合物の更なるグループは、５位のValがＮ−アルキル−、好ましくはＮ−メチル−、アミノ酸で置換されているものである。好ましくは、Ｎ−アルキル化されているアミノ酸はValまたはLeuである。好ましくは、[Val]５のイミノ基の水素は非分枝鎖Ｃ１−６アルキル基、好ましくはメチル、エチル、またはｎ−プロピル、特にメチルで置換されている。後者の活性化合物の好ましいグループは全て新規である。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１８】
本発明で使用する活性化合物の特定のクラスは、式Ａ
【化５】
2002516873.tif 000005
[式中、Ｂは式Ｂ
【化６】
2002516873.tif 000006
〔式中、ａは２位のαAbu残基への結合を意味する；
ｂは４位におけるＣ残基への結合を意味する；
Alkは２から６個の炭素原子を含む直鎖または分枝鎖アルキレンまたは３から６個の炭素原子を含むシクロアルキレン、および
Ｒは
カルボキシまたはアルキルオキシカルボニル残基；
基−ＮＲ１Ｒ２
(式中、Ｒ１およびＲ２は同じまたは異なって水素、アルキル、Ｃ２−４アルケニル、Ｃ３−６シクロアルキル、フェニル(所望によりハロゲン、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アミノ、アルキルアミノまたはジアルキルアミノで置換されていてもよい)またはベンジルまたは、５または６個の環原子および１から３個のヘテロ原子を含む飽和または不飽和へテロ環式基、またはＲ１およびＲ２は、それらが結合している窒素原子と共に４から６個の環原子を含み、所望により窒素、酸素または硫黄からなる群から選択される更なるヘテロ原子を含んでいてもよく、所望によりアルキル、フェニルまたはベンジルで置換されていてもよい飽和または不飽和ヘテロ環を意味する)；
式
【化７】
2002516873.tif 000007
(式中、Ｒ１およびＲ２は上記で定義の意味、Ｒ３は水素またはアルキル基を意味し、ｎは２から４の整数を意味する)
および、式中、アルキルは、１から４個の炭素原子を含む直鎖または分枝鎖アルキルを意味する。
の基〕
のアミノ酸残基である；
ＣはMeLeuまたは４−ヒドロキシ−MeLeuである]
のシクロスポリン誘導体およびその薬学的に許容される塩である。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２０】
活性化合物の特に好ましいグループは、式Ｉ：
【化９】
2002516873.tif 000008
〔式中、ＷはMeBmt、ジヒドロ−MeBmtまたは８'−ヒドロキシ−MeBmt；
ＸはαAbu、Val、Thr、NvaまたはＯ−メチルスレオニン(MeOThr)；
ＲはSarまたは(Ｄ)−MeAla；
ＹはMeLeu、γ−ヒドロキシ−MeLeu、MeIle、MeVal、MeThr、MeAla、MeTyr、MeTyr(O-PO(OH)２)、MeaIleまたはMeaThrまたはPro；
ＺはVal、Leu、N-Alk-ValまたはN-Alk-Leu
(式中、AlkはMeまたは、所望によりフェニル、または６環員を含むＮ、ＳまたはＯヘテロアリール、または所望によりハロゲンで置換されていてもよいフェニルで置換されていてもよいビニルで置換されているMeである) および、
ＱはMeLeu、γ−ヒドロキシ−MeLeuまたはMeAlaである〕
の化合物およびその薬学的に許容される塩から成る。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２１】
基Ｗ、Ｘ、Ｙ、ＺおよびＱは、独立して以下の好ましい意味を有する：
Ｗは好ましくはＷ'であり、Ｗ'はMeBmtまたはジヒドロ−MeBmtである；
Ｘは好ましくはＸ'であり、Ｘ'はαAbuまたはNvaであり、より好ましくはＸ"であり、Ｘ"はαAbuである；
Ｙは好ましくはＹ'であり、Ｙ'はγ−ヒドロキシ−MeLeu、MeVal、MeThr、MeAlaまたはMeTyr(O-PO(OH)２)である；
Ｚは好ましくはＺ'であり、Ｚ'はValまたはMeValである；そして
Ｑは好ましくはＱ'であり、Ｑ'はMeLeuである。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２６】
これらの方法は、EP0484281Bの実施例１から１０に一般的におよびより具体的に記載される。この一般的記載およびこれらの実施例の教示は、本発明に引用して包含させる。EP0484281Bの実施例１１は、シクロスポリンに対する代表的活性化合物の免疫抑制およびシクロフィリン結合活性の測定を記載し、この実施例の教示もまた本発明の記載に包含させる。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３１】
活性化合物は、炎症性自己免疫疾患の処置および予防に、単独でまたは他の治療剤、例えば、抗炎症性化合物および／または免疫抑制化合物と組合わせて使用し得る。特に好ましい態様において、活性化合物は、カルシニューリン活性を阻害しない免疫抑制性、シクロフィリン結合化合物の最近同定されたクラスであるサングリフェーリンと組合わせて使用する。サングリフェーリン、および、これらの調製の方法は、ＷＯ９７０２２８５およびＷＯ９８０７７４３に記載されている。活性化合物と組合わせた使用に特に好ましいサングリフェーリンは、サングリフェーリンAからL、特にサングリフェーリンA、B、CおよびDである。
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３６】
活性化合物を他の化合物、例えば、サングリフェーリンと共に投与する場合、活性剤と他の化合物の適当な比率の類似の製剤を使用し得る。このように、例えば、活性化合物とサングリフェーリンは、好ましくは、投与量当たり約１０から約１００mg／kgの活性化合物で、約５：１から約５０：１(活性化合物po：サングリフェーリン sc)の範囲の重量比で使用する。
【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３８】
生物学的活性アッセイ
Ａ．ラットにおける実験的自己免疫脳脊髄炎(ＥＡＥ)
本発明の代表的活性化合物である[MeIle]４−シクロスポリンを、３０mg／kgの投与量で上記のような急性ＥＡＥアッセイで試験し、この疾患の発症を有意に阻害することが判明する。得られる結果を図１に記載し、これは免疫化後９から１８日のコントロール動物および活性化合物処理動物の疾病の重症度を示すグラフである。コントロール動物は１１日目に０.５を超える得点を有し、１５および１６日目に得点は２.０に近づく；一方、[MeIle]４−Cs処理動物は１２日目まで測定可能な得点はなく、１５日から１７日目に約０.５の最大得点となり、その後減少する。
【手続補正１４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３９】
Ｂ．ラットにおける実験的自己免疫ブドウ膜網膜炎(ＥＡＵ)
ｉ)[MeIle]４−シクロスポリンおよびサングリフェーリン Aを、それ自体およびサングリフェーリン Aとの組合わせで、また上記の様にＥＡＵアッセイで試験する。得られる結果は下記表Ｉに示す。
【表１】
2002516873.tif 000009
【手続補正１５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４１】
[MeIle]４−シクロスポリンおよびサングリフェーリン Aをまたそれ自体および組合わせで、上記のような発症した関節炎アッセイで試験する。得られる結果は図２に示し、これは３０mg／kg  p.o.の[MeIle]４−シクロスポリン、１mg／kg  s.c.のサングリフェーリン A、または３０mg／kg  p.o.の[MeIle]４−シクロスポリンと１mg／kg  s.c.のサングリフェーリン Aの組合わせで処置した５匹の動物のグループで得られた腫脹の阻害の平均のグラフである。
【手続補正１６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４２】
Ｃ．コラーゲン誘発関節炎
非免疫抑制性サイクロスポリンである[MeIle]４−シクロスポリン(NIM 811とも呼ぶ)を、ラットコラーゲン誘発関節炎モデルにおける治療的プロトコールにおいて調査する。ラットを、尾の付け根の回りに皮内投与したタイプIIコラーゲンで免疫化する。１０−１２日後、関節炎の発症が起こり、紅斑および関節の腫脹により類型化する。動物の１日２回の[MeIle]４−シクロスポリン(エタノール１０％／コーン油媒体中、２つの異なる量)のp.o.による処置を腫脹の発症の直後に開始し、１０日まで続ける。コントロール関節炎動物および登録商標COX阻害剤で処理するラットを実験に包含させる。後足の腫脹を定期的に評価する。実験の最後に、動物を殺し、関節を組織学的パラメーターの評価のために調製する。