【手続補正書】
【提出日】平成18年9月14日(2006.9.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
１つ以上の抗原結合性抗体フラグメントに化学架橋体を介して架橋した抗体を含む二重特異性分子であって、該抗体がC3b様受容体に結合し、該１つ以上の抗原結合性抗体フラグメントのそれぞれが抗原分子に結合する、前記二重特異性分子。
【請求項２】
前記１つ以上の抗原結合性抗体フラグメントがFcドメインを含まない、請求項１に記載の二重特異性分子。
【請求項３】
前記１つ以上の抗原結合性抗体フラグメントが、免疫グロブリン分子のFab、Fab'、(Fab')2およびFvフラグメントからなる群より選択される抗原結合性抗体フラグメントを含む、請求項１に記載の二重特異性分子。
【請求項４】
前記１つ以上の抗原結合性抗体フラグメントが、一本鎖Fvフラグメント、または免疫グロブリン分子の定常ドメインと融合した一本鎖Fvフラグメントを含む、請求項１に記載の二重特異性分子。
【請求項５】
前記抗原結合性抗体フラグメントの少なくとも１つが、該Fab、Fab'、(Fab')2またはFvフラグメントに融合したリンカーペプチドをさらに含む融合タンパク質であり、該リンカーペプチドが前記化学架橋体と共有結合している、請求項３に記載の二重特異性分子。
【請求項６】
前記１つ以上の抗原結合性抗体フラグメントの少なくとも１つが、C3b様受容体に結合する前記抗体と所定の部位で架橋されている、請求項１〜５のいずれか一項に記載の二重特異性分子。
【請求項７】
前記所定の部位が、前記抗原結合性抗体フラグメント中のシステイン残基である、請求項６に記載の二重特異性分子。
【請求項８】
前記所定の部位が、前記少なくとも１つの抗原結合性抗体フラグメントのＣ末端である、請求項７に記載の二重特異性分子。
【請求項９】
C3b様受容体に結合する前記抗体がモノクローナル抗体である、請求項１に記載の二重特異性分子。
【請求項１０】
前記モノクローナル抗体がマウスモノクローナル抗体である、請求項９に記載の二重特異性分子。
【請求項１１】
前記マウスモノクローナル抗体が7G9である、請求項１０に記載の二重特異性分子。
【請求項１２】
前記モノクローナル抗体がヒト化モノクローナル抗体である、請求項９に記載の二重特異性分子。
【請求項１３】
前記モノクローナル抗体がヒトモノクローナル抗体である、請求項９に記載の二重特異性分子。
【請求項１４】
前記１つ以上の抗原結合性抗体フラグメントが、バシラス・アンスラシス(Bacillus anthracis)(炭疽菌)の防御抗原(PA)タンパク質に結合する、請求項９に記載の二重特異性分子。
【請求項１５】
前記１つ以上の抗原結合性抗体フラグメントがマウスモノクローナル抗体14B7のFabフラグメントである、請求項１４に記載の二重特異性分子。
【請求項１６】
前記１つ以上の抗原結合性抗体フラグメントがマウスモノクローナル抗体14B7に由来する一本鎖抗体フラグメントである、請求項１４に記載の二重特異性分子。
【請求項１７】
前記二重特異性分子が、前記抗原分子と、前記抗原結合性抗体フラグメントが由来する抗体の活性の少なくとも５％の活性で結合する、請求項１〜５、１５および１６のいずれか一項に記載の二重特異性分子。
【請求項１８】
前記二重特異性分子が、前記抗原分子と、前記抗原結合性抗体フラグメントが由来する抗体の活性の少なくとも15％の活性で結合する、請求項１７に記載の二重特異性分子。
【請求項１９】
前記二重特異性分子が、前記抗原分子と、前記抗原結合性抗体フラグメントが由来する抗体の活性の少なくとも25％の活性で結合する、請求項１８に記載の二重特異性分子。
【請求項２０】
前記二重特異性分子が、前記抗原分子と、前記抗原結合性抗体フラグメントが由来する抗体の活性の少なくとも50％の活性で結合する、請求項１９に記載の二重特異性分子。
【請求項２１】
前記二重特異性分子が、前記抗原分子と、前記抗原結合性抗体フラグメントが由来する抗体の活性の少なくとも90％の活性で結合する、請求項２０に記載の二重特異性分子。
【請求項２２】
前記二重特異性分子が、前記抗原分子と、前記抗原結合性抗体フラグメントが由来する抗体の活性の少なくとも99％の活性で結合する、請求項２１に記載の二重特異性分子。
【請求項２３】
前記二重特異性分子が、前記抗原分子と、前記C3b様受容体に結合する抗体と架橋していない前記抗原結合性抗体フラグメントの活性の少なくとも５％の活性で結合する、請求項１〜５、１５および１６のいずれか一項に記載の二重特異性分子。
【請求項２４】
前記二重特異性分子が、前記抗原分子と、前記C3b様受容体に結合する抗体と架橋していない前記抗原結合性抗体フラグメントの活性の少なくとも15％の活性で結合する、請求項２３に記載の二重特異性分子。
【請求項２５】
前記二重特異性分子が、前記抗原分子と、前記C3b様受容体に結合する抗体と架橋していない前記抗原結合性抗体フラグメントの活性の少なくとも25％の活性で結合する、請求項２４に記載の二重特異性分子。
【請求項２６】
前記二重特異性分子が、前記抗原分子と、前記C3b様受容体に結合する抗体と架橋していない前記抗原結合性抗体フラグメントの活性の少なくとも50％の活性で結合する、請求項２５に記載の二重特異性分子。
【請求項２７】
前記二重特異性分子が、前記抗原分子と、前記C3b様受容体に結合する抗体と架橋していない前記抗原結合性抗体フラグメントの活性の少なくとも90％の活性で結合する、請求項２６に記載の二重特異性分子。
【請求項２８】
前記二重特異性分子が、前記抗原分子と、前記C3b様受容体に結合する抗体と架橋していない前記抗原結合性抗体フラグメントの活性の少なくとも99％の活性で結合する、請求項２６に記載の二重特異性分子。
【請求項２９】
(ａ)システイン残基を含む抗原結合性抗体フラグメントを、該抗原結合性抗体フラグメント中の該システイン残基が遊離チオールとして維持されるように、宿主細胞により作製し；
(ｂ)該遊離チオールを有する該抗原結合フラグメントを回収し；そして
(ｃ)該遊離チオールを有する該抗原結合性抗体フラグメントと、C3b様受容体に結合する誘導体化抗体とを、該誘導体化抗体が該抗原結合性抗体フラグメントと該遊離チオールにおいて架橋されるような適切な条件下で接触させ；
それにより二重特異性分子を生成すること、を含む二重特異性分子の製造方法。
【請求項３０】
前記抗原結合性抗体フラグメントが前記宿主細胞により分泌される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
C3b様受容体に結合する前記誘導体化抗体がマレイミドで誘導体化されている、請求項２９に記載の方法。
【請求項３２】
前記マレイミドがスルホスクシンイミジル4-(N-マレイミドメチル)シクロヘキサン-1-カルボキシレートである、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記マレイミドがNHS-ポリエチレングリコール-マレイミドである、請求項３１に記載の方法。
【請求項３４】
C3b様受容体に結合する抗体を、抗原分子に結合する抗原結合性抗体フラグメントと架橋することを含む、二重特異性分子の製造方法。
【請求項３５】
(ａ)チオール誘導体化抗原結合性抗体フラグメントを、該抗原結合性抗体フラグメントが遊離チオールを含むように作製し；
(ｂ)C3b様受容体に結合するマレイミド誘導体化抗体を、該抗体がマレイミドを含むように作製し；そして
(ｃ)遊離チオールを含む該抗原結合性抗体フラグメントと、マレイミドを含む該抗体とを、該抗体と該抗原結合性抗体フラグメントとが該マレイミドおよび該遊離チオールを介して架橋されるような条件下で接触させ；
それにより二重特異性分子を生成すること、を含む二重特異性分子の製造方法。
【請求項３６】
前記抗原結合性抗体フラグメントが、N-スクシンイミジル-S-アセチル-チオアセテート(SATA)で誘導体化される、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
前記抗原結合性抗体フラグメントが、抗原結合性抗体フラグメント：SATAで約1：3〜約1：6のモル比で誘導体化される、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
C3b様受容体に結合する前記抗体が、スルホスクシンイミジル4-(N-マレイミドメチル)シクロヘキサン-1-カルボキシレートで誘導体化される、請求項３５に記載の方法。
【請求項３９】
C3b様受容体に結合する前記抗体が、NHS-ポリエチレングリコール-マレイミドで誘導体化される、請求項３５に記載の方法。
【請求項４０】
前記ステップ(ｃ)が、前記チオール誘導体化抗原結合性抗体フラグメントと、C3b様受容体に結合する前記マレイミド誘導体化抗体とを、約1:1のモル比で混合することを含む方法により行われる、請求項３５〜３９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４１】
前記ステップ(ｃ)が、前記チオール誘導体化抗原結合性抗体フラグメントと、C3b様受容体に結合する前記マレイミド誘導体化抗体とを、約2:1のモル比で混合することを含む方法により行われる、請求項３５〜３９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４２】
請求項３４〜３９のいずれか一項に記載の方法により製造される生成物。
【請求項４３】
複数種の異なる二重特異性分子を含み、その複数種の二重特異性分子の各々が、抗原分子に結合する１つ以上の抗原結合性抗体フラグメントに化学架橋体を介して架橋された、C3b様受容体に結合する抗体を含む、二重特異性分子のポリクローナル集団。
【請求項４４】
前記１つ以上の抗原結合性抗体フラグメントがFcドメインを含まない、請求項４３に記載の二重特異性分子のポリクローナル集団。
【請求項４５】
前記１つ以上の抗原結合性抗体フラグメントが、免疫グロブリン分子のFab、Fab'、(Fab')2およびFvフラグメントからなる群より選択される抗原結合性抗体フラグメントを含む、請求項４３に記載の二重特異性分子のポリクローナル集団。
【請求項４６】
前記１つ以上の抗原結合性抗体フラグメントが、一本鎖Fvフラグメント、または免疫グロブリン分子の定常ドメインと融合した一本鎖Fvフラグメントを含む、請求項４３に記載の二重特異性分子のポリクローナル集団。
【請求項４７】
前記抗原結合性抗体フラグメントの少なくとも１つが、前記Fab、Fab'、(Fab')2またはFvフラグメントに融合したリンカーペプチドをさらに含む融合タンパク質であり、該リンカーペプチドが前記化学架橋体と共有結合している、請求項４５に記載の二重特異性分子のポリクローナル集団。
【請求項４８】
前記抗原分子が、哺乳動物の血液循環から除去されることが望ましい分子である、請求項１〜５および９〜１６のいずれか一項に記載の二重特異性分子。
【請求項４９】
前記哺乳動物がヒトであり、前記抗体はCR1に結合する、請求項４８に記載の二重特異性分子。
【請求項５０】
前記抗原分子が病原体の抗原であり、前記抗体はCR1に結合する、請求項１〜５および９〜１６のいずれか一項に記載の二重特異性分子。
【請求項５１】
前記病原体が細菌である、請求項５０に記載の二重特異性分子。
【請求項５２】
前記病原体がウイルスである、請求項５０に記載の二重特異性分子。
【請求項５３】
前記抗原分子が毒素である、請求項１〜５および９〜１６のいずれか一項に記載の二重特異性分子。
【請求項５４】
請求項１〜５、９〜２８および４８〜５３のいずれか一項に記載の二重特異性分子の治療的有効量、ならびに製薬上許容される担体を含む、哺乳動物の血液循環中の抗原分子の存在に関連した望ましくない病的状態を有する哺乳動物を治療するための医薬組成物。
【請求項５５】
前記抗体が前記哺乳動物の血液細胞上のC3b様受容体に結合する、請求項５４に記載の医薬組成物。
【請求項５６】
(ａ)マレイミド誘導体化抗原結合性抗体フラグメントを、該抗原結合性抗体フラグメントがマレイミドを含むように作製し；
(ｂ)C3b様受容体に結合するチオール誘導体化抗体を、該抗体が遊離チオールを含むように作製し；そして
(ｃ)マレイミドを含む該抗原結合性抗体フラグメントを、遊離チオールを含む該抗体と、該抗体と該抗原結合性抗体フラグメントとが該マレイミドおよび該遊離チオールを介して架橋されるような条件下で接触させ；
それにより二重特異性分子を生成すること、を含む二重特異性分子の製造方法。
【請求項５７】
前記抗原結合性抗体フラグメントがスルホスクシンイミジル4-(N-マレイミドメチル)シクロヘキサン-1-カルボキシレート(sSMCC)で誘導体化される、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
前記抗原結合性抗体フラグメントが、抗原結合性抗体フラグメント：sSMCCで約1：5のモル比で誘導体化される、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
C3b様受容体に結合する前記抗体が、N-スクシンイミジル-S-アセチル-チオアセテート(SATA)で誘導体化される、請求項５６に記載の方法。
【請求項６０】
C3b様受容体に結合する前記抗体が、N-スクシンイミジル-S-アセチル-チオアセテート(SATA)で約1：12の抗体：SATAのモル比で誘導体化される、請求項５８に記載の方法。
【請求項６１】
前記ステップ(ｃ)が、前記マレイミド誘導体化抗原結合性抗体フラグメントと、C3b様受容体に結合する前記チオール誘導体化抗体とを、マレイミド誘導体化抗原結合性抗体フラグメント：チオール誘導体化抗体で約3.75:1のモル比で混合することを含む方法により行われる、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
請求項５６〜６１のいずれか一項の方法により製造される、二重特異性分子。
【請求項６３】
前記抗原結合性抗体フラグメントが14B7scAbであり、C3b様受容体に結合する前記抗体がマウスモノクローナル抗体7G9であり、かつ、7G9に架橋された２つの14B7scAbを有する、請求項６２に記載の二重特異性分子。
【請求項６４】
請求項６２に記載の二重特異性分子を治療的または予防的に十分な量で含む、動物における炭疽菌感染を治療または予防するための医薬組成物。