【手続補正書】
【提出日】平成18年2月20日(2006.2.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式(I): 
(I) 両性物質 - Y - スペーサー - 両親媒性物質
を有する脂質の等電点が4.5〜8.5である両性脂質であって、
(a)両性物質が、pKa値が4〜8のカチオン電荷の少なくとも一部及び/又はpKa値が3〜7のアニオン電荷の少なくとも一部及び任意により追加の電荷担体を有し、
aa)前記カチオン電荷の一部はイミダゾール、モルホリン、ピペラジン、プリン、ピリジン及び/又はピリミジン又はその誘導体を含む群より選ばれ、
bb)前記アニオン電荷の一部は、脂肪族鎖に結合した、酢酸、ブロモ酢酸、クロロ酢酸、アセト酢酸、プロピオン酸、アクリル酸、酪酸、クロトン酸、又はカルボン酸を含むカルボキシル基; モノエステル化又はアミノ化又は脂肪族鎖に結合したジカルボン酸を含むカルボキシル基; モノエステル化又はアミノ化又は脂肪族鎖に結合したオリゴカルボン酸を含むカルボキシル基である、
(b)スペーサーがエチレン系不飽和結合0、1又は2個と、ヒドロキシル基0〜4個を含む直鎖、分枝鎖又は環状構造をもつC原子8個までを有する低級アルキル残基であり、
(c)Yが-(C=O)-O-; -(C=O)-NH-; -NH-(C=O)-O-; -O-; -NH-; -CH=N-; -O-(O=C)-; -S-; -(O=C)-; -NH-(O=C)-; -O-(O=C)-NH-, -N=CH- 及び/又は -S-S-を含み、
(d)両親媒性物質が下記一般式(II)又は(III)又は(IV):
【化１】
2005517739.tif 000001
（式中、R1及びR2は独立してエチレン系不飽和結合0、1又は2個を有するC8-C30アルキル鎖又はアシル鎖であり、
Xは-O-(C=O); -NH-(C=O)-; -S-(C=O)-; -O-; -NH-; -S-; -N=CH-; -(O=C)-O-; -S-(O=C)-; -NH-(O=C)-; -N=CH-及び/又は-S-S-を含む群より選ばれる。）; 又は
【化２】
2005517739.tif 000002
（式中、R1及びR2は独立してエチレン系不飽和結合0、1又は2個を有するC8-C30アシル鎖であり、
Xは-O-である。); 又は
【化３】
2005517739.tif 000003
（式中、R1及びR2は独立してエチレン系不飽和結合0、1又は2個を有するC8-C30アルキル鎖であり、
Xは存在しないか又は-(C=O)-O-; -(C=O)-NH-; -(C=O)-S-; -NH-; -CH=N-; 及び/又は-S-(O=C)-からなる群より選ばれる。）
を有する構造であり、
(e)両親媒性物質がC8-C30直鎖アルコールでエステル化したアスパラギン酸、グルタミン酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アコニチン酸、シトラコン酸及び/又はマレイン酸のような1,4-又は1,5-ジカルボン酸であり、及び/又は
(f)両親媒性物質がC8-C30直鎖脂肪酸でアミノ化した3-アミノアラニン、ジアミノ酪酸、オルニチン又はリシンの1,4-又は1,5-ジアミンである
ことを特徴とする、前記脂質。
【請求項２】
ジカルボン酸がシュウ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、グルタル酸、アジピン酸、カプリル酸、ピメリン酸、スベリン酸、シクロヘキサンジカルボン酸及び/又はシクロペンタンジカルボン酸を含む群より選ばれ、及び/又はオリゴカルボン酸がクエン酸、イソクエン酸及び/又はエチレンジアミン四酢酸を含む群より選ばれることを特徴とする、請求項1記載の脂質。
【請求項３】
両性脂質の等電点が5〜7であることを特徴とする、請求項1又は2記載の脂質。
【請求項４】
両性物質におけるカチオン電荷とアニオン電荷の部分のpKa値が最大で2 pH単位離れていることを特徴とする、請求項1又は2に記載の脂質。 
【請求項５】
両性物質のカチオン電荷の部分がイミダゾール、ピペラジン、モルホリンを含み、アニオン電荷部分がカルボキシル基を含んでいることを特徴とする、請求項1〜4のいずれか1項に記載の脂質。
【請求項６】
両性物質がヒスチジン、アルギニン、リシン、グルタミン酸及び/又はアスパラギン酸からなる群より選ばれる2〜6個のアミノ酸を有するぺプチドであり、ここで、
i)HisとAsp/Gluの% は66%を超えない、
ii)Arg/Lysの% は50% より少なく、Asp/Gluの% は50% より多い、又は
HisとArg/Lysの% は33% 以下であり、Asp/Gluの% はArg/Lysの% より多い
ことを特徴とする、請求項1〜5のいずれか1項に記載の脂質。
【請求項７】
両親媒性物質がジアシルグリセロール、ジアルキルグリセロール、ホスホグリセロール、アシル化又はアルキル化3-アミノ-1,2-プロパンジオール及び/又はN,N-ジアルキルアミンからなる群より選ばれることを特徴とする、請求項1〜6のいずれか1項に記載の脂質。
【請求項８】
スペーサーが糖又はモノマー単位20個までのポリエチレングリコールであることを特徴とする、請求項1〜7のいずれか1項に記載の脂質。
【請求項９】
両性脂質であって、脂質が下記構造
【化４】
2005517739.tif 000004
（式中、長鎖両親媒性物質は独立してラウロイル、ミリストイル、パルミトイル、ステアロイル、オレオイル又はリノレオイルの残基を含んでいる。）
を有する、前記脂質。
【請求項１０】
両性脂質であって、脂質が下記構造
【化５】
2005517739.tif 000005
（式中、長鎖両親媒性物質は独立して
a)ラウロイル、ミリストイル、パルミトイル、ステアロイル、オレオイル又はリノレオイルの残基、又は
b)ラウリル、ミリスチル、パルミチル、ステアリル、オレイル又はリノレイルの残基を含んでいる。）
を有する、前記脂質。
【請求項１１】
両性脂質であって、脂質が下記構造
【化６】
2005517739.tif 000006
（式中、長鎖両親媒性物質は独立して 
a)ラウロイル、ミリストイル、パルミトイル、ステアロイル、オレオイル又はリノレオイルの残基、又は
b)ラウリル、ミリスチル、パルミチル、ステアリル、オレイル又はリノレイルの残基を含んでいる。）
を有する、前記脂質。
【請求項１２】
両性脂質であって、脂質が下記構造
【化７】
2005517739.tif 000007
（式中、長鎖両親媒性物質は独立してラウリル、ミリスチル、パルミチル、ステアリル、オレイル又はリノレイルの残基を含んでいる。）
を有する、前記脂質。
【請求項１３】
両性脂質であって、脂質が下記構造
【化８】
2005517739.tif 000008
（式中、長鎖両親媒性物質は独立してラウロイル、ミリストイル、パルミトイル、ステアロイル、オレオイル又はリノレオイルの残基を含んでいる。）
を有する、前記脂質。
【請求項１４】
請求項1〜13のいずれか1項に記載の両性脂質を含むリポソーム。
【請求項１５】
リポソームが最高で50モル% の両性脂質、好ましくは2〜50モル%、更に好ましくは10〜40モル% を含むことを特徴とする、請求項1〜14のいずれか1項に記載のリポソーム。
【請求項１６】
リポソームがホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ジアシルグリセロール、テトラエーテル脂質及び/又はPEG脂質を含むことを特徴とする、請求項14又は15記載のリポソーム。
【請求項１７】
リポソームの平均サイズが50〜1000 nm、好ましくは50〜300 nm、更に好ましくは60〜130 nmであることを特徴とする、請求項14〜16のいずれか1項に記載のリポソーム。
【請求項１８】
リポソームが活性物質を含んでいることを特徴とする、請求項14〜17のいずれか1項に記載のリポソーム。
【請求項１９】
脂質1 mgに対して少なくとも50μg、好ましくは90μgを超える、更に好ましくは150μgを超える活性物質がリポソームの内部に入り込んでいることを特徴とする、請求項18記載のリポソーム。
【請求項２０】
請求項14〜19のいずれか１項に記載のリポソームを活性物質で充填する方法であって、
活性物質を封入するための結合pH値と非結合活性物質を除去するための第二pH値が用いられることを特徴とする、前記方法。
【請求項２１】
請求項14〜19のいずれか1項に記載のリポソームを活性物質で充填する方法であって、該リポソームを特定のpH値で透過性にし、その後密封されることを特徴とする、前記方法。
【請求項２２】
ナノカプセルを製造するための請求項14〜19のいずれか1項に記載のリポソームの使用。
【請求項２３】
診断において用いられる放出システムを製造するための請求項14〜19のいずれか1項に記載のリポソームの使用。
【請求項２４】
活性物質を輸送及び放出するための請求項14〜19のいずれか1項に記載のリポソームの使用。
【請求項２５】
生体内トランスフェクションシステムであって、
遺伝物質で充填した請求項14〜19のいずれか1項に記載のリポソームを含んでいることを特徴とする、前記システム。
【請求項２６】
生体内トランスフェクションシステムであって、
遺伝物質で重点したリポソームを含み、前記リポソームが下記式
(I) 両性物質 - Y - スペーサー - 両親媒性物質
［式中、(a)両性物質は、pKa値が4〜8のカチオン電荷の少なくとも一部及び/又はpKa値が3〜7のアニオン電荷の少なくとも一部及び任意により追加の電荷担体を有し、
aa)前記カチオン電荷の一部はイミダゾール、モルホリン、ピペラジン、プリン、ピリジン及び/又はピリミジン又はその誘導体を含む群より選ばれ、
bb)前記アニオン電荷の一部は、脂肪族鎖に結合した、酢酸、ブロモ酢酸、クロロ酢酸、アセト酢酸、プロピオン酸、アクリル酸、酪酸、クロトン酸、又はカルボン酸を含むカルボキシル基; モノエステル化又はアミノ化又は脂肪族鎖に結合した、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、グルタル酸、アジピン酸、カプリル酸、ピメリン酸、スベリン酸、シクロヘキサンジカルボン酸又はシクロペンタンジカルボン酸のようなジカルボン酸を含むカルボキシル基; モノエステル化又はアミノ化又は脂肪族鎖に結合した、クエン酸、イソクエン酸又はエチレンジアミン四酢酸のようなオリゴカルボン酸を含むカルボキシル基である、
(b)スペーサーはエチレン系不飽和結合0、1又は2個と、ヒドロキシル基0〜4個を含む直鎖、分枝鎖又は環状構造をもつC原子8個までを有する低級アルキル残基であり、
(c)Yは-(C=O)-O-; -(C=O)-NH-; -NH-(C=O)-O-; -O-; -NH-; -CH=N-; -O-(O=C)-; -S-; -(O=C)-; -NH-(O=C)-; -O-(O=C)-NH-, -N=CH-及び/又は-S-S-を含み、
(d)両親媒性物質は下記一般式(V) 
【化９】
2005517739.tif 000009
（式中、R1及びR2は独立してエチレン系不飽和結合0、1又は2個を有するC8-C30アルキルであり、
Xは-O-; -NH-; -S-の群より選ばれる。）
を有する構造である。］
を有する両性脂質を含んでいることを特徴とする、前記システム。
【請求項２７】
両親媒性物質が下記式(VI):
【化１０】
2005517739.tif 000010
（式中、Rはエチレン系不飽和結合0、1又は2個を有するC8-C30アルキルであり、
Xは-O-; -NH-; -S-の群より選ばれる。）
を有する構造であることを特徴とする、請求項26記載の生体内トランスフェクションシステム。
【請求項２８】
生体内、試験管内及び/又は生体外で細胞をトランスフェクトするベクターとしての請求項25〜27のいずれか１項に記載の生体内トランスフェクションシステムの使用。