【手続補正書】
【提出日】平成17年7月19日(2005.7.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
活性化プロテインＣ（ＡＰＣ）による治療を必要とする動物を治療する方法であって、該動物に
有効量の銅キレート剤、および
有効量の
（ａ）ＡＰＣ、
（ｂ）プロテインＣ、該動物におけるプロテインＣの合成を増加させる物質、もしくはこれら両方、
（ｃ）プロテインＣの活性化剤、または
（ｄ）（ａ）、（ｂ）および（ｃ）のうち１つもしくは複数の組合せ
のうちの１つを投与することからなる方法。
【請求項２】
前記キレート剤がヒトアルブミンまたはＮ末端銅結合性配列Ａｓｐ  Ａｌａ  Ｈｉｓを含むその断片である請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記キレート剤が下式を有するペプチドまたはその生理学的に許容できる塩である請求項１に記載の方法。
Ｐ1−Ｐ2
［式中、
Ｐ1は、
Ｘａａ1  Ｘａａ2  Ｈｉｓまたは
Ｘａａ1  Ｘａａ2  Ｈｉｓ  Ｘａａ3であり、
Ｐ2は（Ｘａａ4）nであり、
Ｘａａ1はグリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、トレオニン、アスパラギン酸、イソアスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、イソグルタミン酸、グルタミン、リシン、ヒドロキシリシン、ヒスチジン、アルギニン、オルニチン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、システイン、メチオニンまたはα−ヒドロキシメチルセリンであり、
Ｘａａ2はグリシン、アラニン、β−アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、トレオニン、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、グルタミン、リシン、ヒドロキシリシン、ヒスチジン、アルギニン、オルニチン、フェニルアラニン、チロシ
ン、トリプトファン、システイン、メチオニンまたはα−ヒドロキシメチルセリンであり、
Ｘａａ3はグリシン、アラニン、バリン、リシン、アルギニン、オルニチン、アスパラギン酸、グルタミン酸、アスパラギン、グルタミンまたはトリプトファンであり、
Ｘａａ4は任意のアミノ酸であり、
ｎは０〜１００である］
【請求項４】
Ｘａａ1がアスパラギン酸、グルタミン酸、アルギニン、トレオニンまたはα−ヒドロキシメチルセリンである請求項３に記載の方法。
【請求項５】
Ｘａａ2がグリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、トレオニン、セリン、アスパラギン、メチオニン、ヒスチジンまたはα−ヒドロキシメチルセリンである請求項３に記載の方法。
【請求項６】
Ｘａａ3がリシンである請求項３に記載の方法。
【請求項７】
Ｘａａ1がアスパラギン酸、グルタミン酸、アルギニン、トレオニンまたはα−ヒドロキシメチルセリンであり、Ｘａａ２がグリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、トレオニン、セリン、アスパラギン、メチオニン、ヒスチジンまたはα−ヒドロキシメチルセリンであり、Ｘａａ３がリシンである請求項３に記載の方法。
【請求項８】
Ｘａａ1がアスパラギン酸またはグルタミン酸であり、Ｘａａ2がアラニン、グリシン、バリン、トレオニン、セリン、ロイシンまたはα−ヒドロキシメチルセリンである請求項７に記載の方法。
【請求項９】
Ｘａａ2がアラニン、トレオニン、ロイシンまたはα−ヒドロキシメチルセリンである請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
Ｘａａ1がアスパラギン酸であり、Ｘａａ2がアラニンである請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
ｎが０〜１０である請求項３に記載の方法。
【請求項１２】
ｎが０〜５である請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
ｎが０である請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
Ｐ2が金属結合性配列を含む請求項３に記載の方法。
【請求項１５】
Ｐ2が以下の配列のうち１つを含む請求項１４に記載の方法。
（Ｘａａ4）m  Ｘａａ3  Ｈｉｓ  Ｘａａ2  Ｘａａ5、
（Ｘａａ4）m  Ｈｉｓ  Ｘａａ2  Ｘａａ5、
（Ｘａａ4）m  Ｘａａ5  Ｘａａ2  Ｈｉｓ  Ｘａａ3または
（Ｘａａ4）m  Ｘａａ5  Ｘａａ2  Ｈｉｓ
［式中、Ｘａａ5は遊離の側鎖−ＮＨ2を有するアミノ酸であり、ｍは０〜５である］
【請求項１６】
Ｘａａ5がＯｒｎまたはＬｙｓである請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
Ｐ2が以下の配列のうち１つを含む請求項１４に記載の方法。
［（Ｘａａ4）mＸａａ5Ｘａａ2ＨｉｓＸａａ3］r、
［（Ｘａａ4）mＸａａ5Ｘａａ2Ｈｉｓ］r、
［（Ｘａａ4）mＸａａ5Ｘａａ2ＨｉｓＸａａ3（Ｘａａ4）mＸａａ5Ｘａａ2Ｈｉｓ］rまたは
［（Ｘａａ4）mＸａａ5Ｘａａ2Ｈｉｓ（Ｘａａ4）mＸａａ5Ｘａａ2ＨｉｓＸａａ3］r［式中、Ｘａａ5は遊離の側鎖−ＮＨ2を有するアミノ酸であり、ｍは０〜５であり、ｒは２〜１００である］
【請求項１８】
Ｐ2がＣｕ（Ｉ）に結合する配列を含む請求項１４に記載の方法。
【請求項１９】
Ｐ2が以下の配列
Ｍｅｔ  Ｘａａ4  Ｍｅｔ、
Ｍｅｔ  Ｘａａ4  Ｘａａ4  Ｍｅｔ、
Ｃｙｓ  Ｃｙｓ、
Ｃｙｓ  Ｘａａ4  Ｃｙｓ、
Ｃｙｓ  Ｘａａ4  Ｘａａ4  Ｃｙｓ、
Ｍｅｔ  Ｘａａ4  Ｃｙｓ  Ｘａａ4  Ｘａａ4  Ｃｙｓ、
Ｇｌｙ  Ｍｅｔ  Ｘａａ4  Ｃｙｓ  Ｘａａ4  Ｘａａ4  Ｃｙｓ［配列番号３］、
Ｇｌｙ  Ｍｅｔ  Ｔｈｒ  Ｃｙｓ  Ｘａａ4  Ｘａａ4  Ｃｙｓ［配列番号４］、
Ｇｌｙ  Ｍｅｔ  Ｔｈｒ  Ｃｙｓ  Ａｌａ  Ａｓｎ  Ｃｙｓ［配列番号５］または
γ−Ｇｌｕ  Ｃｙｓ  Ｇｌｙ
のうち１つを含む請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
Ｐ2がＧｌｙ  Ｍｅｔ  Ｔｈｒ  Ｃｙｓ  Ａｌａ  Ａｓｎ  Ｃｙｓ［配列番号５］である請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
Ｐ2が、該ペプチドの細胞膜への浸透、標的組織への到達またはこれら両方の能力を増大させる配列からなる請求項３に記載の方法。
【請求項２２】
Ｐ2が疎水性またはアルギニンオリゴマーである請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
β−アラニン（存在する場合）以外のＰ1のアミノ酸のうち少なくとも１つがＤ−アミノ酸である請求項３に記載の方法。
【請求項２４】
Ｐ2のアミノ酸のうち少なくとも５０％がＤ−アミノ酸である請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
Ｐ1の少なくとも１つのアミノ酸、Ｐ2の少なくとも１つのアミノ酸、またはＰ1の少なくとも１つのアミノ酸およびＰ2の少なくとも１つのアミノ酸が、（ａ）銅イオンに結合するＰ1の能力を変化させることなく、該ペプチドの親油性を増加させる置換基、（ｂ）銅イオンに結合するＰ1の能力を変化させることなく、タンパク質分解酵素から該ペプチドを保護する置換基、または（ｃ）銅イオンに結合するＰ1の能力を変化させない非ペプチド金属結合性官能基である置換基、で置換されている請求項３に記載の方法。
【請求項２６】
ｎが０であり、Ｐ1が以下の式のうち１つを有する請求項２５に記載の方法。
【化１】
2004535461.tif 000001
【化２】
2004535461.tif 000002
［式中、
Ｒ1はアルキル、アリールまたはヘテロアリールであり、
Ｒ2は−ＮＨ2、−ＮＨＲ1、Ｎ（Ｒ1）2、−ＯＲ1またはＲ1であり、
Ｒ3はＨ、非ペプチド金属結合性官能基であるか、または２つのＲ3基が一緒に非ペプチド金属結合性官能基を形成している］
【請求項２７】
前記キレート剤が次式を有するペプチド２量体である請求項１に記載の方法。
Ｐ3−Ｌ−Ｐ3
［式中、
各Ｐ3は同じであるか、または異なっていてよく、銅に結合することができるペプチドであり、
Ｌは２つのＰ3ペプチドにそれらのＣ末端アミノ酸を介して結合している化学基である］
【請求項２８】
各Ｐ3が２〜１０アミノ酸を含む請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
少なくとも１つのＰ3がＰ1であり、Ｐ1が
Ｘａａ1  Ｘａａ2  Ｈｉｓまたは
Ｘａａ1  Ｘａａ2  Ｈｉｓ  Ｘａａ3であって、
Ｘａａ1はグリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、トレオニン、アスパラギン酸、イソアスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、イソグルタミン酸、グルタミン、リシン、ヒドロキシリシン、ヒスチジン、アルギニン、オルニチン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、システイン、メチオニンまたはα−ヒドロキシメチルセリンであり、
Ｘａａ2はグリシン、アラニン、β−アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、トレオニン、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、グルタミン、リシン、ヒドロキシリシン、ヒスチジン、アルギニン、オルニチン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、システイン、メチオニンまたはα−ヒドロキシメチルセリンであり、
Ｘａａ3はグリシン、アラニン、バリン、リシン、アルギニン、オルニチン、アスパラギン酸、グルタミン酸、アスパラギン、グルタミンまたはトリプトファンである請求項２７に記載の方法。
【請求項３０】
両方のＰ3ペプチドがＰ1である請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
Ｐ3の少なくとも１つのアミノ酸が、（ａ）銅イオンに結合するＰ3の能力を変化させることなく、該ペプチドの親油性を増加させる置換基、（ｂ）銅イオンに結合するＰ3の能力を変化させることなく、タンパク質分解酵素から該ペプチドを保護する置換基、または（ｃ）銅イオンに結合する該ペプチドの能力を変化させない非ペプチド金属結合性官能基である置換基、で置換されている請求項２７に記載の方法。
【請求項３２】
前記銅キレート剤は非ペプチド金属結合性官能基を結合したペプチドであり、該ペプチドが銅結合性部位を含み、かつ／または該非ペプチド官能基が銅に結合する請求項１に記載の方法。
【請求項３３】
該動物が後天性凝固性亢進状態または後天性プロテインＣ欠乏症に罹患しているためＡＰＣを必要としている請求項１に記載の方法。
【請求項３４】
該動物が敗血症に罹患しているためＡＰＣを必要としている請求項１に記載の方法。
【請求項３５】
該動物が血管内凝固を伴う疾患または状態に罹患しているためＡＰＣを必要としている請求項１に記載の方法。
【請求項３６】
活性化プロテインＣ（ＡＰＣ）による治療を必要とする動物を治療する方法であって、
有効量の銅キレート剤を以下の
（ａ）ＡＰＣ、
（ｂ）プロテインＣ、該動物におけるプロテインＣの合成を増加させる物質、もしくはこれら両方、
（ｃ）プロテインＣの活性化剤、または
（ｄ）（ａ）、（ｂ）および（ｃ）のうち１つもしくは複数の組合せ
のうちの１つを含む組成物と接触させて、該組成物中に存在する全ての銅に結合させるようにするステップと、
有効量のＡＰＣ、プロテインＣ、プロテインＣの合成を増加させる物質、プロテインＣの活性化剤、もしくはそれらのうち１つまたは複数の組合せをＡＰＣによる治療を必要とする動物に投与するステップと
からなる方法。
【請求項３７】
前記銅キレート剤がヒトアルブミンまたはＮ末端銅結合性配列Ａｓｐ  Ａｌａ  Ｈｉｓを含むその断片である請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記銅キレート剤が次式を有するペプチドまたはその生理学的に許容できる塩である請求項３６に記載の方法。
Ｐ1−Ｐ2
［式中、
Ｐ1は、
Ｘａａ1  Ｘａａ2  Ｈｉｓまたは
Ｘａａ1  Ｘａａ2  Ｈｉｓ  Ｘａａ3であり、
Ｐ2は（Ｘａａ4）nであり、
Ｘａａ1はグリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、トレオニン、アスパラギン酸、イソアスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、イソグルタミン酸、グルタミン、リシン、ヒドロキシリシン、ヒスチジン、アルギニン、オルニチン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、システイン、メチオニンまたはα−ヒドロキシメチルセリンであり、
Ｘａａ2はグリシン、アラニン、β−アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、トレオニン、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、グルタミン、リシン、ヒドロキシリシン、ヒスチジン、アルギニン、オルニチン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、システイン、メチオニンまたはα−ヒドロキシメチルセリンであり、
Ｘａａ3はグリシン、アラニン、バリン、リシン、アルギニン、オルニチン、アスパラギン酸、グルタミン酸、アスパラギン、グルタミンまたはトリプトファンであり、
Ｘａａ4は任意のアミノ酸であり、
ｎは０〜１００である］
【請求項３９】
Ｐ1の少なくとも１つのアミノ酸が、（ａ）銅イオンに結合するＰ1の能力を変化させることなく、ペプチドの親油性を増加させる置換基、（ｂ）銅イオンに結合するＰ1の能力を変化させることなく、タンパク質分解酵素からペプチドを保護する置換基、または（ｃ）銅イオンに結合するＰ1の能力を変化させない非ペプチド金属結合性官能基である置換基、で置換されている請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記銅キレート剤が次式を有するペプチド２量体である請求項３６に記載の方法。
Ｐ3−Ｌ−Ｐ3
［式中、
各Ｐ3は同じであるか、または異なっていてよく、銅に結合することができるペプチドであり、
Ｌは２つのＰ3ペプチドにそれらのＣ末端アミノ酸を介して結合している化学基である］
【請求項４１】
少なくとも１つのＰ3がＰ1であり、Ｐ1が
Ｘａａ1  Ｘａａ2  Ｈｉｓまたは
Ｘａａ1  Ｘａａ2  Ｈｉｓ  Ｘａａ3であって、
Ｘａａ1はグリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、トレオニン、アスパラギン酸、イソアスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、イソグルタミン酸、グルタミン、リシン、ヒドロキシリシン、ヒスチジン、アルギニン、オルニチン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、システイン、メチオニンまたはα−ヒドロキシメチルセリンであり、
Ｘａａ2はグリシン、アラニン、β−アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、トレオニン、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、グルタミン、リシン、ヒドロキシリシン、ヒスチジン、アルギニン、オルニチン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、システイン、メチオニンまたはα−ヒドロキシメチルセリンであり、
Ｘａａ3はグリシン、アラニン、バリン、リシン、アルギニン、オルニチン、アスパラギン酸、グルタミン酸、アスパラギン、グルタミンまたはトリプトファンである、
請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
Ｐ3の少なくとも１つのアミノ酸が、（ａ）銅イオンに結合するＰ3の能力を変化させることなく、ペプチドの親油性を増加させる置換基、（ｂ）銅イオンに結合するＰ3の能力を変化させることなく、タンパク質分解酵素からペプチドを保護する置換基、または（ｃ）銅イオンに結合するＰ3の能力を変化させない非ペプチド金属結合性官能基である置換基、で置換されている請求項４０に記載の方法。
【請求項４３】
前記銅キレート剤は非ペプチド金属結合性官能基を結合したペプチドであり、該ペプチドが銅結合性部位を含み、かつ／または該非ペプチド官能基が銅に結合する請求項３６に記載の方法。