【誤訳訂正書】
【提出日】平成17年7月12日(2005.7.12)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物の腫瘍細胞、好ましくはヒト腫瘍細胞で発現されたＶＥＧＦ−１レセプター（ＶＥＧＦＲ−１）のアンタゴニスト。
【請求項２】
下記：
・小分子、
・ＶＥＧＦＲ−１、好ましくは細胞外ＶＥＧＦＲ−１ドメインに結合する、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体および完全ヒト抗体、好ましくは中和抗体、
・好ましくはＦａｂフラグメントまたはＦ（ａｂ’）２フラグメントの一方または両方を含む、抗体の機能的断片および機能的等価物、
・抗腫瘍剤または検出可能なシグナル生成剤に化学的に又は生合成により結合された抗体、
・標的またはレポーター部分が結合された抗体、
・好ましくはＶＥＧＦＲ−１活性化を阻止する、タンパク質、ペプチド、核酸分子（アンチセンスオリゴヌクレオチドを含む）のような生物学的アンタゴニスト、
・免疫系に対して抗体を自己のように認識させるように、表面で曝された残基を置換することによって免疫原性を少なくした抗体、
から成る群より選択される、請求項１に記載のＶＥＧＦＲ−１のアンタゴニスト。
【請求項３】
ＶＥＧＦＲ−１の活性を阻止する低分子である、請求項１または２に記載のＶＥＧＦＲ−１のアンタゴニスト。
【請求項４】
受託番号ＡＴＣＣ  ＰＴＡ−３３４４としてＡＴＣＣに寄託されたハイブリドーマ細胞系により産生されたヒトモノクローナル抗体Ｍａｂ６．１２である、請求項１または２に記載のＶＥＧＦＲ−１のアンタゴニスト。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれかに記載のＶＥＧＦＲ−１のアンタゴニストと、内皮細胞で発現されたＶＥＧＦレセプター（ＶＥＧＦＲ）または腫瘍血管系、好ましくはヒト内皮細胞で発現された他の増殖因子レセプターに対する第２アンタゴニストとの組合せ。
【請求項６】
前記第２アンタゴニストが、ＶＥＧＦＲ−２、ＶＥＧＦＲ−３、ニューロピリンおよびＦＬＫ−１のようなそれらの非ヒト相同体より選択されるＶＥＧＦＲに対するものである、請求項５に記載の組合せ。
【請求項７】
前記第２アンタゴニストが、下記：
・小分子、
・ＶＥＧＦＲ−２、ＶＥＧＦＲ−３、ニューロピリンまたはそれらの非ヒト相同体、好ましくはそれらの細胞外ドメインに結合する、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体および完全ヒト抗体、好ましくは中和抗体、
・好ましくはＦａｂフラグメントまたはＦ（ａｂ’）２フラグメントの一方または両方を含む、抗体の機能的断片および機能的等価物、
・抗腫瘍剤または検出可能なシグナル生成剤に化学的に又は生合成により結合された抗体、
・標的またはレポーター部分が結合された抗体、
・好ましくはＶＥＧＦＲ−２、ＶＥＧＦＲ−３、ニューロピリンまたはそれらの非ヒト相同体の活性化を阻止する、タンパク質、ペプチド、核酸分子（アンチセンスオリゴヌクレオチドを含む）のような生物学的アンタゴニスト、
から成る群より選択される、請求項５または６に記載の組合せ。
【請求項８】
前記第２アンタゴニストが、ＶＥＧＦＲ−２、ＶＥＧＦＲ−３、ニューロピリンまたはそれらの非ヒト相同体の活性を阻止する小分子である、請求項５〜７のいずれか一項に記載の組合せ。
【請求項９】
前記第２アンタゴニストが血管新生化を阻害する、請求項５〜８のいずれか一項に記載の組合せ。
【請求項１０】
前記第２アンタゴニストがＶＥＧＦＲ−２に対するものである、請求項５〜９のいずれか一項に記載の組合せ。
【請求項１１】
前記第２アンタゴニストがＤＣ１０１、好ましくは受託番号ＡＴＣＣ  ＨＢ  １１５３４としてＡＴＣＣに寄託されたハイブリドーマ細胞系により産生されたＤＣ１０１である、請求項５〜７，９および１０のいずれか一項に記載の組合せ。
【請求項１２】
前記ＶＥＧＦＲ−１のアンタゴニストが抗体ＭＦ−１である、請求項５〜７および９のいずれか一項に記載の組合せ。
【請求項１３】
・請求項１〜４のいずれか一項に記載のアンタゴニストと、
・請求項５〜１２のいずれか一項に記載の組合せと、
抗腫瘍剤または放射性同位体との組合せ。
【請求項１４】
前記抗腫瘍剤が、アントラサイクリン、メトトレキサート、ビンデシン、ネオカルチノスタチン、シス−プラチン、クロラムブシル、シトシンアラビノシド、イリノテカン、５−フルオロウリジン、メルファラン、リシン、カリケアマイシン、タクソール、ゲムシチビン、フルオロウラシル、パクリタキセル、ドセタキセル、ロイコボリンおよびノベルビンからなる群より選択される化学療法剤である、請求項１３に記載の組合せ。
【請求項１５】
有効成分として請求項１〜４のいずれか一項に記載のアンタゴニストまたは請求項５〜１４のいずれか一項に記載のアンタゴニストの組合せと、医薬として許容される担体とを含んで成る医薬組成物。
【請求項１６】
経口、静脈内、腹膜内、脳脊髄内、皮下、くも膜下、筋肉内、吸入または局所投与のために製剤化された、請求項１５に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
注射可能または不溶解性の液剤の形態で存在する、請求項１５または１６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
哺乳動物、特にヒトの乳癌、卵巣癌、脳腫瘍、腎臓癌、膀胱癌、腺癌、悪性グリオームおよび白血病の治療用の医薬品の製造のための、請求項１〜４のいずれか一項に記載のアンタゴニストまたは請求項５〜１４のいずれか一項に記載の組合せの使用。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３７】
ヒトを含む哺乳動物に対する投与方法としては、限定されることなく、経口、静脈、腹膜内、脳脊髄内、皮下、くも膜下、筋肉内、吸入、または局所投与が挙げられる。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４６】
ＲＮＡ抽出、ｃＤＮＡ合成およびＲＴ−ＰＣＲ
製造業者の指示に従い、トリゾール(Gibco BRL, Rockville, MD, USA）を用いて、全ＲＮＡを分離した。次に、製造業者のプロトコル（Amersham Pharmacia Biotech, Piscataway, New Jersy, USA）に従い、スーパースクリプトII逆転写酵素を用いて、第１鎖（first-strand）ｃＤＮＡを合成した。アドバンテージ２ポリメラーゼ・ミックス（Advantage 2 polymerase mix）（Clontech Laboratories Inc., Palo Alto, California, USA）を用いて、ＰＣＲを行った。増幅条件は次の通りである：９４℃で５分間、９４℃で１分間、６３℃で４５秒間、７２℃で２分間および７２℃で７分間を３５サイクル。ＰＣＲに用いたプライマーは次の通りである：ＶＥＧＦＲ−１（順方向：ＡＴＴＴＧＴＧＡＴＴＴＴＧＧＣＣＴＴＧＣ配列番号：１；逆方向：ＣＡＧＧＣＴＣＡＴＧＡＡＣＴＴＧＡＡＡＧＣ配列番号：２）；ヒトＶＥＧＦＲ−２（順方向：ＧＴＧＡＣＣＡＡＣＡＴＧＧＡＧＴＣＧＴＧ配列番号：３；逆方向：ＣＣＡＧＡＧＡＴＴＣＣＡＴＧＣＣＡＣＴＴ配列番号：４）；ＶＥＧＦ（順方向：ＣＧＡＡＧＴＧＧＴＧＡＡＧＴＴＣＡＴＧＧＡＴＧ配列番号：５；逆方向：ＴＴＣＴＧＴＡＴＣＡＧＴＣＴＴＴＣＣＴＧＧＴＧＡＧ配列番号：６）；ＰｌＧＦ（順方向：ＣＧＣＴＧＧＡＧＡＧＧＣＴＧＧＴＧＧ配列番号：７；逆方向：ＧＡＡＣＧＧＡＴＣＴＴＴＡＧＧＡＧＣＴＧ配列番号：８）およびβ−アクチン（順方向：ＴＣＡＴＧＴＴＴＧＡＧＡＣＣＴＴＣＡＡ配列番号：９；逆方向：ＧＴＣＴＴＴＧＣＧＧＡＴＧＴＣＣＡＣＧ配列番号：１０）。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５０】
ＶＥＧＦＲ−１リン酸化アッセイ
レセプターリン酸化アッセイのために、ＤＵ４４７５細胞を１２穴プレート内に播種して（５×１０5 細胞／穴）ＲＰＭＩ無血清培地中で１８時間保った。培地を取り換えた後に、その細胞を、３７℃で、ＶＥＧＦ（５０ｎｇ／ｍｌ）、ＰｌＧＦ（１００ｎｇ／ｍｌ）により１０分間処理するか、又はヒトＶＥＧＦＲ−１およびヒトＶＥＧＦＲ−２に対するｍＡｂ（それぞれクローン６．１２およびＩＭＣ−１Ｃ１１）で１時間、そしてＰｌＧＦで１０分間、同時インキュベートした。刺激の後に、冷ＲＩＰＡ緩衝液（５０ｍＭ Ｔｒｉｓ、５ｍＭ ＥＤＴＡ、１％ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１１４、０．４％カコジル酸ナトリウムおよび１５０ｍＭ ＮａＣｌ）中で、プロテアーゼインヒビター（１ｍｇ／ｍＬアプロチニン、１０ｍｇ／ｍＬロイペプチン、１ｍＭグリセロリン酸、１ｍＭオルトバナジン酸ナトリウムおよび １ｍＭ ＰＭＳＦ）の存在下、４℃で３０分間、細胞を溶解させることによって全タンパク質抽出物を得た。タンパク質抽出物からの上清を、抗ホスホチロシン抗体（ＰＹ２０）およびプロテインＧアガロースビーズ（Santa Cruz Biotechnology Inc., Santa Cruz, California, USA）の存在下、４℃で終夜、免疫沈降して、リン酸化されたタンパク質を沈殿させた。この免疫沈降物を添加液に再懸濁させ、そして還元性条件下（β−メルカプトエタノールの存在下）、７．５％ポリアクリルアミドゲルを用いたＳＤＳ−ＰＡＧＥによって分画した。次に、タンパク質をニトロセルロース膜上にエレクトロブロットした。ブロットを１％ＢＳＡ／ＰＢＳ − １％ ＴＷＥＥＮ-２０中で室温において１時間ブロックし、次に第１抗体および第２抗体とともにインキュベートした。マウスモノクローナル抗体である抗ＶＥＧＦＲ−１（R&D Systems Inc., Minneapolis, Minnesota, USA)を１μｇ／ｍＬの濃度で使用し、第２の抗マウスＩｇＧ−ＨＲＰ（Santa Cruz Biotechnology Inc., Santa Cruz, California, USA）を１：６０００で使用した。ＥＣＬ化学ルミネッセンス検出システムおよびＥＣＬフィルム(Amersham Pharmacia Biotech, Piscataway, New Jersey, USA）を用いて、該ニトロセルロースブロット上のタンパク質の検出を行った。