【手続補正書】
【提出日】平成17年11月17日(2005.11.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
幹細胞が濃縮されている集団を調製する方法であって、第一の細胞集団から幹細胞が濃縮されている前記集団を分離することを含んでなり、幹細胞が濃縮されている前記集団が、前記の第一の細胞集団より、少なくとも約１００倍高い濃度のＰ１Ｈ１２＋幹細胞を含んでなる、前記方法。
【請求項２】
幹細胞が濃縮されている前記集団が、前記の第一の細胞集団より、少なくとも約１，０００倍高い濃度のＰ１Ｈ１２＋幹細胞を含んでなる、請求項１の方法。
【請求項３】
幹細胞が濃縮されている前記集団が、前記の第一の細胞集団より、約１，０００倍〜約４，０００倍高い濃度のＰ１Ｈ１２＋幹細胞を含んでなる、請求項１の方法。
【請求項４】
幹細胞が濃縮されている前記集団が、さらに、ＣＤ１４８、ＡＣ１３３、ＣＤ４５およびＣＤ３４からなる群より選択される１以上のマーカーを、前記の第一の細胞集団より高い濃度で含んでなる、請求項１の方法。
【請求項５】
前記分離工程が、前記の第一の細胞集団を、Ｐ１Ｈ１２＋に特異的に結合する分子と接触させ、そして前記分子に結合する、濃縮されている前記細胞集団を選択することを含んでなる、請求項１の方法。
【請求項６】
前記分子が抗体である、請求項５の方法。
【請求項７】
前記抗体がモノクローナル抗体である、請求項６の方法。
【請求項８】
前記分子が抗体由来である、請求項６の方法。
【請求項９】
前記分子がペプチド−Ｆｃ融合分子である、請求項６の方法。
【請求項１０】
前記分離工程が、前記の第一の細胞集団を、ＣＤ１４８、ＡＣ１３３、ＣＤ４５およびＣＤ３４からなる群より選択される分子に特異的に結合する分子と接触させ、そして濃縮されている前記細胞集団に関して、前記分子に結合する細胞を選択することをさらに含んでなる、請求項１の方法。
【請求項１１】
前記分離工程が、濃縮されている前記細胞集団を、ＣＤ１４８、ＡＣ１３３、ＣＤ４５およびＣＤ３４からなる群より選択されるマーカーに特異的に結合する分子と接触させ、そして前記分子に結合しない細胞を、濃縮されている前記細胞集団から取り除くことをさらに含んでなる、請求項１の方法。
【請求項１２】
前記分離工程が、前記の第一の細胞集団を、ＣＤ１４４、ＣＤ２０２ｂ、ＶＥＧＦＲ２からなる群より選択される分子に特異的に結合する分子と接触させ、そして濃縮されている前記細胞集団に関して、前記分子に結合しない細胞を選択することをさらに含んでなる、請求項１の方法。
【請求項１３】
前記分離工程が、濃縮されている前記細胞集団を、ＣＤ１４４、ＣＤ２０２ｂ、ＶＥＧＦＲ２からなる群より選択される分子に特異的に結合する分子と接触させ、そして前記分子に結合する細胞を、濃縮されている前記細胞集団から取り除くことをさらに含んでなる、請求項１の方法。
【請求項１４】
幹細胞が濃縮されている前記集団が、前記の第一の細胞集団より、Ｐ１Ｈ１２＋、ＣＤ１４８＋、ＡＣ１３３＋、ＣＤ１４４−、ＣＤ２０２ｂ−またはＶＥＧＦＲ２−である幹細胞を、少なくとも約１００倍高い濃度で含んでなる、請求項１の方法。
【請求項１５】
幹細胞が濃縮されている前記集団が、前記の第一の細胞集団より、Ｐ１Ｈ１２＋、ＣＤ１４８＋、ＡＣ１３３＋、ＣＤ１４４−、ＣＤ２０２ｂ−またはＶＥＧＦＲ２−である幹細胞を、少なくとも約１，０００倍高い濃度で含んでなる、請求項１４の方法。
【請求項１６】
幹細胞が濃縮されている前記集団が、前記の第一の細胞集団より、Ｐ１Ｈ１２＋、ＣＤ１４８＋、ＡＣ１３３＋、ＣＤ１４４−、ＣＤ２０２ｂ−またはＶＥＧＦＲ２−である幹細胞を、約１，０００倍〜約４，０００倍高い濃度で含んでなる、請求項１５の方法。
【請求項１７】
幹細胞が濃縮されている前記集団が、さらに、ＣＤ３４＋またはＣＤ４５＋である幹細胞に関しても濃縮されている、請求項１４の方法。
【請求項１８】
幹細胞が濃縮されている前記集団が、さらに、ＣＤ３４−およびＣＤ４５＋である幹細胞に関しても濃縮されている、請求項１４の方法。
【請求項１９】
幹細胞が濃縮されている前記集団が、さらに、ＣＤ３４＋およびＣＤ４５＋である幹細胞に関しても濃縮されている、請求項１４の方法。
【請求項２０】
前記分子が検出可能実体に結合している、請求項５の方法。
【請求項２１】
前記検出可能実体が、蛍光実体、比色実体、または磁気実体である、請求項２０の方法。
【請求項２２】
前記分子が固体支持体に結合している、請求項５の方法。
【請求項２３】
前記固体支持体がプラスチック表面、ガラス表面、アガロース、アクリルアミド、レクチンまたは磁気粒子である、請求項２２の方法。
【請求項２４】
幹細胞が濃縮されている前記集団を培養して、Ｐ１Ｈ１２＋、ＣＤ１４４＋、ＡＣ１３３−、ＣＤ２０２＋、ＣＤ４５−、ＶＥＧＦＲ２＋であり、ＨＵＶＥＣおよびＭＶＥＣよりも高い増殖能を有し、そしてヴァイベル・パラーデ体を含有する子孫細胞を生じさせる工程をさらに含んでなる、請求項１の方法。
【請求項２５】
前記の第一の細胞集団が哺乳動物由来である、請求項１の方法。
【請求項２６】
前記哺乳動物が霊長類である、請求項２５の方法。
【請求項２７】
前記霊長類がヒトである、請求項２６の方法。
【請求項２８】
前記の第一の細胞集団が末梢血由来である、請求項１の方法。
【請求項２９】
前記の第一の細胞集団が骨髄由来である、請求項１の方法。
【請求項３０】
前記の第一の細胞集団が胎児肝組織由来である、請求項１の方法。
【請求項３１】
請求項１の方法によって調製した、幹細胞が濃縮されている集団。
【請求項３２】
前記幹細胞が、ＣＤ１４８、ＡＣ１３３、ＣＤ４５およびＣＤ３４からなる群より選択されるマーカーの１またはそれより多くに関して陽性である、請求項３１の、幹細胞が濃縮されている集団。
【請求項３３】
Ｐ１Ｈ１２＋、ＣＤ１４８＋、ＡＣ１３３＋、ＣＤ１４４−、ＣＤ２０２ｂ−およびＶＥＧＦＲ２−である幹細胞に関して濃縮されている、請求項３１の、幹細胞が濃縮されている集団。
【請求項３４】
さらに、ＣＤ３４＋またはＣＤ４５＋である幹細胞に関しても濃縮されている、請求項３１の、幹細胞が濃縮されている集団。
【請求項３５】
さらに、ＣＤ３４＋およびＣＤ４５＋である幹細胞に関しても濃縮されている、請求項３１の、幹細胞が濃縮されている集団。
【請求項３６】
さらに、ＣＤ３４−およびＣＤ４５＋である幹細胞に関しても濃縮されている、請求項３１の、幹細胞が濃縮されている集団。
【請求項３７】
前記幹細胞が、ヴァイベル・パラーデ体を含有する、請求項３１の、幹細胞が濃縮されている集団。
【請求項３８】
前記幹細胞が内皮前駆細胞である、請求項３１の、幹細胞が濃縮されている集団。
【請求項３９】
前記の第一の細胞集団が哺乳動物由来である、請求項３１の、幹細胞が濃縮されている集団。
【請求項４０】
前記哺乳動物が霊長類である、請求項３９の、幹細胞が濃縮されている集団。
【請求項４１】
前記霊長類がヒトである、請求項４０の、幹細胞が濃縮されている集団。
【請求項４２】
前記の第一の細胞集団が末梢血由来である、請求項３１の、幹細胞が濃縮されている集団。
【請求項４３】
前記の第一の細胞集団が骨髄由来である、請求項３１の、幹細胞が濃縮されている集団。
【請求項４４】
前記の第一の細胞集団が胎児肝組織由来である、請求項３１の、幹細胞が濃縮されている集団。
【請求項４５】
請求項３１の、幹細胞が濃縮されている前記集団由来の、子孫細胞集団であって、Ｐ１Ｈ１２＋、ＣＤ１４４＋、ＡＣ１３３−、ＣＤ２０２＋、ＣＤ４５−、ＶＥＧＦＲ２＋であり、ＨＵＶＥＣおよびＭＶＥＣよりも高い増殖能を有し、そしてヴァイベル・パラーデ体を含有する、前記子孫細胞集団。
【請求項４６】
Ｐ１Ｈ１２＋およびＡＣ１３３＋であり、そして自己再生（ｓｅｌｆ−ｒｅｎｅｗ）可能であり、そして内皮細胞に分化する、単離幹細胞。
【請求項４７】
さらに、ＣＤ１４８＋、ＣＤ１４４−、ＶＥＧＦＲ２−およびＣＤ２０２ｂ−である、請求項４６の単離幹細胞。
【請求項４８】
さらに、ＣＤ３４＋またはＣＤ４５＋である、請求項４６の単離幹細胞。
【請求項４９】
さらに、ＣＤ３４＋およびＣＤ４５＋である、請求項４６の単離幹細胞。
【請求項５０】
さらに、ＣＤ３４−およびＣＤ４５＋である、請求項４６の単離幹細胞。
【請求項５１】
哺乳動物由来である、請求項４６の単離幹細胞。
【請求項５２】
前記哺乳動物が霊長類である、請求項４６の単離幹細胞。
【請求項５３】
前記霊長類がヒトである、請求項４６の単離幹細胞。
【請求項５４】
末梢血由来である、請求項４６の単離幹細胞。
【請求項５５】
骨髄由来である、請求項４６の単離幹細胞。
【請求項５６】
胎児肝組織由来である、請求項４６の単離幹細胞。
【請求項５７】
１５％血清を含んでなる完全培地中で、少なくとも１４日間培養可能である、請求項４６の単離幹細胞。
【請求項５８】
異種ポリヌクレオチド配列をさらに含んでなる、請求項４６の単離幹細胞。
【請求項５９】
請求項４６の前記単離幹細胞またはその子孫細胞を含んでなる細胞株。
【請求項６０】
請求項３８の前記幹細胞と実質的に均質の集団を含んでなる、幹細胞培養物。
【請求項６１】
請求項４６の前記単離幹細胞および薬学的に許容しうるキャリアーを含んでなる組成物。
【請求項６２】
前記の薬学的に許容しうるキャリアーが、生理食塩水、ゲル、ヒドロゲル、スポンジ、およびマトリックスからなる群より選択される、請求項６１の組成物。
【請求項６３】
１５％血清を含む完全培地中で、約６日間〜約３週間、請求項３８の前記単離幹細胞を培養することによって得られる単離子孫細胞であって、Ｐ１Ｈ１２＋、ＣＤ１４４＋、ＡＣ１３３−、ＣＤ２０２＋、ＣＤ４５−、ＶＥＧＦＲ２＋であり、ＨＵＶＥＣおよびＭＶＥＣよりも高い増殖能を有し、そしてヴァイベル・パラーデ体を含有することで特徴付けられる、前記単離子孫細胞。
【請求項６４】
請求項６３の前記単離子孫細胞と実質的に均質の集団を含んでなる、子孫細胞培養物。
【請求項６５】
請求項６３の前記単離子孫細胞および薬学的に許容しうるキャリアーを含んでなる組成物。
【請求項６６】
薬学的に許容しうるキャリアーが、生理食塩水、ゲル、ヒドロゲル、スポンジ、およびマトリックスからなる群より選択される、請求項６５の組成物。
【請求項６７】
請求項４６の前記単離幹細胞を含んでなる、組織工学構築物。
【請求項６８】
請求項４６の前記単離幹細胞の子孫を含んでなる、組織工学構築物。
【請求項６９】
請求項４６の前記単離幹細胞およびその子孫細胞を含んでなる、組織工学構築物。
【請求項７０】
請求項４６の前記単離幹細胞の分化を誘導する剤を同定する方法であって、前記単離幹細胞を試験剤と接触させ、そして前記単離幹細胞中の変化を検出することを含んでなり、前記変化が、前記剤が前記単離幹細胞の分化を誘導することの指標となる、前記方法。
【請求項７１】
内皮細胞を含んでなる組織工学構築物を生成する方法であって、請求項４６の前記単離幹細胞を組織工学構築物中で培養することを含んでなる、前記方法。
【請求項７２】
血管疾患または血管障害を治療するための医薬組成物であって、請求項４６の前記単離幹細胞を含んでなる、前記医薬組成物。
【請求項７３】
血管疾患または血管障害を治療するための医薬組成物であって、請求項６３の前記単離子孫細胞を含んでなる、前記医薬組成物。