【手続補正書】
【提出日】平成18年10月5日(2006.10.5)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  式Ｉ：
【化１】
2002527073.tif 000001
（式中、
Ｒは、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルケニル、またはＣ１〜Ｃ８アルキニルであり、
Ｘは、Ｈ、またはＦであり、
Ｙは、ＣＨ２、Ｏ、Ｓ、Ｓｅ、またはＮＨである）のキラル非ラセミエステルを、加水分解酵素を用いて製造するための方法であって、
前記加水分解酵素が、リパーゼではなく、
前記方法が、
（ａ）式Ｉのエステルのエナンチオマー混合物を約１と約２５％の間の濃度（重量／非均一系の体積）で有機溶媒系に分散させて、有機成分を製造する段階、
（ｂ）水性溶媒系を提供して、水性成分を製造する段階、
（ｃ）前記加水分解酵素を、前記有機成分、前記水性成分のいずれかまたは両方に分散させる段階、および
（ｄ）前記有機成分と前記水性成分を接触させて非均一系を形成する段階であって、ここで前記加水分解酵素がエナンチオ選択的に一方のエナンチオマーを加水分解し、これによって、式Ｉのキラル非ラセミエステルと式ＩＩ：
【化２】
2002527073.tif 000002
（式中、
Ｘは、Ｈ、またはＦであり、
Ｙは、ＣＨ２、Ｏ、Ｓ、Ｓｅ、またはＮＨである）の非ラセミアルコールとを製造する段階を含んでなる方法。
【請求項２】  式Ｉのエステルが２−ブチリルオキシメチル−５−（５−フルオロシトシン−１−イル）−１，３−オキサチオランである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】  式Ｉのエステルが２−ブチリルオキシメチル−５−（５−フルオロシトシン−１−イル）−１，３−オキサチオランであり、
（ａ）前記有機成分が約５と約９０％の間の前記非均一系を含み、
（ｂ）前記非均一系が約１と約２０％の間の界面活性剤を含んでなり、
（ｃ）前記界面活性剤濃度が前記非均一系の体積を基準として計算される、請求項１に記載の方法。
【請求項４】  前記加水分解酵素がブタ肝臓エステラーゼおよびサブチリシンから成る群から選択される、請求項１、２または３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】  前記加水分解酵素が架橋酵素結晶である、請求項４に記載の方法。
【請求項６】  前記架橋酵素結晶がグルタルアルデヒドで架橋されている、請求項５に記載の方法。
【請求項７】  前記加水分解酵素が固定化酵素である、請求項４に記載の方法。
【請求項８】  前記加水分解酵素が可溶性酵素である、請求項４に記載の方法。
【請求項９】  前記加水分解酵素がブタ肝臓エステラーゼである、請求項４に記載の方法。
【請求項１０】  前記キラル非ラセミエステルが前記有機成分から分離される、請求項１、２または３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】  前記キラル非ラセミアルコールが前記水性成分から分離される、請求項１、２または３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】  前記エナンチオマー混合物が約５％から約１５％の間の濃度に前記有機成分に分散される、請求項１、２または３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】  前記エナンチオマー混合物が約１％から約５％の間の濃度に前記有機成分に分散される、請求項１、２または３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】  前記エナンチオマー混合物が約１０％から約２０％の間の濃度に前記有機成分に分散される、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】  前記有機成分が約５０％以下の水に混和性の有機溶媒を含んでなる、請求項１、２または３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】  前記有機成分がＣ４〜Ｃ８アルコール、ニトロメタン、ジクロロメタン、トルエン、メチルイソブチルケトン、酢酸ｔ−ブチルおよびアルカンから成る群から選択される一つ以上の溶媒を含んでなる、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】  前記有機成分がｎ−アミルアルコールおよび３−メチル−３−ペンタノールの一方または両方を含んでなる、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】  前記界面活性剤がカチオン界面活性剤、アニオン界面活性剤および非イオン性界面活性剤から成る群から選択される、請求項３に記載の方法。
【請求項１９】  前記界面活性剤がグルコード−オキシコール酸、オクチルβ−グルコピラノシド、ジオクチルスルホスクシナート、デオキシコール酸、およびエトキシル酸アルコールから成る群から選択される、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】  前記界面活性剤がジオクチルスルホスクシナートである、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】  前記界面活性剤が前記有機成分に添加される、請求項３に記載の方法。
【請求項２２】  前記界面活性剤が前記水性成分に添加される、請求項３に記載の方法。
【請求項２３】  前記界面活性剤が前記非均一系に添加される、請求項３に記載の方法。
【請求項２４】  前記界面活性剤が前記加水分解酵素と配合される、請求項３に記載の方法。
【請求項２５】  前記水性溶媒系が水と、緩衝塩、アルカリ化剤、抗菌保存薬、安定剤、濾過助剤、補酵素、分散を促進する添加剤、および酵素の機能を促進する添加剤から成る群から選択される添加剤とを含んでなる、請求項１、２または３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】  前記水性溶媒系が約７より大きいｐＨのリン酸緩衝液で緩衝された水を含んでなる、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】  前記水性溶媒系が２−アミノ−２−（ヒドロキシメチル）−１，３−プロパンジオールで緩衝された水を含んでなる、請求項２５に記載の方法。
【請求項２８】  前記エナンチオマー混合物の一方のエナンチオマー形を対応するアルコールへエナンチオ選択的に転化させることができる条件が約５℃と約４５℃の間の温度を含んでなる、請求項１、２または３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２９】  （ａ）加水分解酵素、
（ｂ）式Ｉ：
【化３】
2002527073.tif 000003
（式中、
Ｒは、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルケニル、またはＣ１〜Ｃ８アルキニルであり、
Ｘは、Ｈ、またはＦであり、
Ｙは、ＣＨ２、Ｏ、Ｓ、Ｓｅ、またはＮＨである）の疎水性エステルのエナンチオマー混合物、
（ｃ）有機成分、および
（ｄ）水性成分を含んでなる非均一系であって、
エナンチオマー混合物が有機成分に分散され、前記非均一系が水性成分から有機成分を分離することができる膜を含まず、ならびに前記加水分解酵素がリパーゼではない、加水分解酵素を用いてキラル非ラセミ疎水性エステルを製造するための非均一系。
【請求項３０】  前記加水分解酵素がブタ肝臓エステラーゼおよびサブチリシンから成る群から選択される、請求項２９に記載の非均一系。
【請求項３１】  前記加水分解酵素が架橋酵素結晶である、請求項２９に記載の非均一系。
【請求項３２】  前記架橋酵素結晶がグルタルアルデヒドで架橋されている、請求項３１に記載の非均一系。
【請求項３３】  前記加水分解酵素が固定化酵素である、請求項２９に記載の非均一系。
【請求項３４】  前記加水分解酵素が可溶性酵素である、請求項２９に記載の非均一系。
【請求項３５】  前記加水分解酵素がブタ肝臓エステラーゼである、請求項３０に記載の非均一系。
【請求項３６】  前記エナンチオマー混合物が２−ブチリルオキシメチル−５−（５−フルオロシトシン−１−イル）−１，３−オキサチオランを含んでなる、請求項２９に記載の非均一系。
【請求項３７】  前記エナンチオマー混合物が約５％から約１５％の間の濃度に前記有機成分に分散される、請求項２９に記載の非均一系。
【請求項３８】  前記エナンチオマー混合物が約１０％から約２０％の間の濃度に前記有機成分に分散される、請求項２９に記載の非均一系。
【請求項３９】  前記エナンチオマー混合物が約１％から約５％の間の濃度に前記有機成分に分散される、請求項２９に記載の非均一系。
【請求項４０】  前記有機成分が約５０％以下の水に混和性の有機溶媒を含んでなる、請求項２９に記載の非均一系。
【請求項４１】  前記約５０％以下の水に混和性の有機溶媒が、Ｃ４〜Ｃ８アルコール、ニトロメタン、ジクロロメタン、トルエン、メチルイソブチルケトン、酢酸ｔ−ブチルおよびアルカンから成る群から選択される一つ以上の溶媒を含んでなる、請求項４０に記載の非均一系。
【請求項４２】  前記有機成分がｎ−アミルアルコールおよび３−メチル−３−ペンタノールの一方または両方を含んでなる、請求項４１に記載の非均一系。
【請求項４３】  界面活性剤をさらに含んでなる、請求項２９に記載の非均一系。
【請求項４４】  前記界面活性剤がカチオン界面活性剤、アニオン界面活性剤、および非イオン性界面活性剤から成る群から選択される、請求項４３に記載の非均一系。
【請求項４５】  前記界面活性剤がグルコード−オキシコール酸、オクチルβ−グルコピラノシド、ジオクチルスルホスクシナート、デオキシコール酸、およびエトキシル酸アルコールから成る群から選択される、請求項４４に記載の非均一系。
【請求項４６】  前記界面活性剤がジオクチルスルホスクシナートである、請求項４５に記載の非均一系。
【請求項４７】  前記有機成分が前記界面活性剤を含んでなる、請求項４３に記載の非均一系。
【請求項４８】  前記水性成分が前記界面活性剤を含んでなる、請求項４３に記載の非均一系。
【請求項４９】  前記界面活性剤が前記加水分解酵素と配合される、請求項４８に記載の非均一系。
【請求項５０】  前記水性成分が水と、緩衝塩、アルカリ化剤、抗菌保存薬、安定剤、濾過助剤、補酵素、分散を促進する添加剤、および酵素の機能を促進する添加剤から成る群から選択される添加剤とを含んでなる、請求項２９に記載の非均一系。
【請求項５１】  前記水性成分が約７より大きいｐＨのリン酸緩衝液で緩衝された水を含んでなる、請求項２９に記載の非均一系。
【請求項５２】  前記水性成分が約７より大きいｐＨの２−アミノ−２−（ヒドロキシメチル）−１，３−プロパンジオールで緩衝された水を含んでなる、請求項２９に記載の非均一系。
【請求項５３】  前記有機成分と前記水性成分を接触させ、前記接触が前記エナンチオマー混合物の一方のエナンチオマー形の対応するアルコールへのエナンチオ選択性転化をもたらし、および前記接触が約５℃と約４５℃の間の温度で行われる、請求項５２に記載の非均一系。
【請求項５４】  前記有機成分がＣ４〜Ｃ８アルコールから成る群から選択される一つ以上の溶媒を含んでなる、請求項１６に記載の方法。