【手続補正書】
【提出日】平成17年7月5日(2005.7.5)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒドロキシル含有化合物を、ホスフィチル化剤と：
（１）以下の式Ｉ：
【化１】
2005518451.tif 000001
［式中、Ｒ、Ｒ１、及びＲ２は、独立にＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ１−Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ１０アリール、Ｃ１−Ｃ１０アラルキル、Ｃ１−Ｃ１０ヘテロアルキル、又はＣ１−Ｃ１０ヘテロアリールである］
のアミン塩基から誘導される酸−塩基複合体；
（２）以下の式ＩＩ：
【化２】
2005518451.tif 000002
［式中、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、及びＲ７は、独立に水素、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ１−Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ１０アリール、Ｃ１−Ｃ１０アラルキル、Ｃ１−Ｃ１０ヘテロアルキル、又はＣ１−Ｃ１０ヘテロアリールであり、そして前記Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、及びＲ７の少なくとも一つは水素ではない］
のアミン塩基から誘導された酸−塩基複合体；
（３）ジアザビシクロアミン塩基から誘導された酸−塩基複合体；
（４）双性イオンアミン性複合体；及び
（５）二つ又はそれより多いこれらの組合せ；
からなる群から選択されるホスフィチル化活性化剤の存在下で反応させて、ホスフィチル化化合物を製造するための工程を含んでなる、ホスフィチル化化合物を製造する方法。
【請求項２】
前記ホスフィチル化活性化剤が、式Ｉのアミン塩基から誘導された酸−塩基複合体である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記式Ｉのアミン塩基が、ジイソプロピルエチルアミン、トリプロピルアミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、ジエチルメチルアミン、ＮＭＭ、ＴＭＥＤＡ、トリベンジルアミン、及び二つ又はそれより多いこれらの組合せからなる群から選択される、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記式Ｉのアミン塩基が、ジイソプロピルエチルアミンである、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記ホスフィチル化活性化剤が、更にトリフルオロ酢酸、ジクロロ酢酸、メタンスルホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、４−ピリジニウムエチレンスルホン酸、無水塩酸、無水臭化水素、無水ヨウ化水素、及びＨＢＦ４からなる群から選択される酸から誘導される、請求項２に記載の方法。
【請求項６】
前記酸−塩基複合体が、更にトリフルオロ酢酸から誘導される、請求項４に記載の方法。
【請求項７】
前記ホスフィチル化活性化剤が、式ＩＩのアミン塩基から誘導された酸−塩基複合体である、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記式ＩＩのアミン塩基が、ジメチルアニリン、ＤＭＡＰ、４−ジメチルアミノピリジウム、メチルピリジン、２−ピコリン、３−ピコリン、ジメチルピリジン、２，６−ルチジン、トリメチルピリジン、２，４，６−コリジン、ｓｙｎ−コリジン、テトラメチルピリジン、ペンタメチルピリジン、及び二つ又はそれより多いこれらの組合せからなる群から選択される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記式ＩＩのアミン塩基が、２−ピコリン又はｓｙｎ−コリジンである、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記ホスフィチル化活性化剤が、更にトリフルオロ酢酸、ジクロロ酢酸、メタンスルホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、４−ピリジニウムエチレンスルホン酸、無水塩酸、無水臭化水素、無水ヨウ化水素、及びＨＢＦ４からなる群から選択される酸から誘導される、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
前記酸−塩基複合体が、更にトリフルオロ酢酸から誘導される、請求項９に記載の方法。
【請求項１２】
前記ホスフィチル化活性化剤が、ＤＢＵ、ＤＢＮ、１，１，３，３−テトラメチルグアニジン及びこれらの組合せからなる群から選択されるジアザビシクロアミン塩基から誘導される酸−塩基複合体である、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記ホスフィチル化活性化剤が、双姓イオン性アミン複合体である、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記双性イオン性アミン複合体が、ピリジンエタンスルホン酸を含んでなる、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記ヒドロキシル含有化合物が、ヌクレオシド又はそれから誘導されたオリゴマーである、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
前記ヌクレオシドが、５’−Ｏ−保護ヌクレオシドである、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記ホスフィチル化剤が、ビス−ジイソプロピルアミノ−２−シアノエトキシホスフィン；ジアルコキシ（ジアルキルアミノ）ホスフィン；アルコキシ−アルキル（ジアルキルアミノ）ホスフィン、ビス（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−２−メチルトリフルオロアセチルアミノエトキシホスフィン；ビス（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−２−ジフェニル−メチルシリルエトキシホスフィン；（アリルオキシ）ビス（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）−ホスフィン；２−シアノエチル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトライソプロピルホスホロジアミダイト；メトキシ−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトライソプロピルホスホロジアミダイト；メチル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトライソプロピルホスホロジアミダイト；及び二つ又はそれより多いこれらの混合物からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
前記ホスフィチル化剤が、２−シアノエチル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトライソプロピルホスホロジアミダイト及びメトキシ−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトライソプロピルホスホロジアミダイトからなる群から選択される、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記ホスフィチル化剤が、２−シアノエチル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトライソプロピルホスホロジアミダイトである、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
更に沈殿溶媒中でホスフィチル化化合物を沈殿させる工程を含んでなる、請求項１に記載の方法。
【請求項２１】
前記沈殿工程が、ホスフィチル化化合物及び溶媒を含んでなる化合物の溶液を用意し、そして前記化合物の溶液を沈殿溶媒と接触させて、ホスフィチル化化合物を沈殿させることを含んでなる、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記沈殿溶媒が、石油エーテルを含んでなる請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
５’−Ｏ−保護−ヌクレオシドを、ホスフィチル化剤と、トリフルオロ酢酸−ジイソプロピルエチルアミン複合体の存在下で反応させて、３’−Ｏ−ホスホロアミダイトを形成させる工程を含んでなる、ホスフィチル化化合物を製造する方法。
【請求項２４】
前記ホスフィチル化剤が、２−シアノエチル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトライソプロピルホスホロジアミダイトである、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記５’−Ｏ−保護−ヌクレオシドが、Ｎ６−ベンゾイル−５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−デオキシアデノシン、Ｎ４−ベンゾイル−５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−デオキシシチジン、Ｎ２−イソブチロイル−５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−デオキシグアノシン、及び５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−チミジンからなる群から選択される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記３’−Ｏ−ホスホロアミダイトが、５’−Ｏ−ジメトキシトリチル−２’−デオキシアデノシン（Ｎ６−ベンゾイル）−３’−Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ−Ｏ−（２−シアノエチル）ホスホロアミダイト、５’−Ｏ−ジメトキシトリチル−２’−（Ｎ４−ベンゾイル）−３’−Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ−Ｏ−（２−シアノエチル）ホスホロアミダイト、５’−Ｏ−ジメトキシトリチル−２’−デオキシグアノシン（Ｎ２−イソブチロイル）−３’−Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ−Ｏ−（２−シアノエチル）ホスホロアミダイト、及び５’−Ｏ−ジメトキシトリチル−チミジン−３’−Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ−Ｏ−（２−シアノエチル）ホスホロアミダイトからなる群から選択される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２７】
前記３’−Ｏ−ホスホロアミダイトが、前記３’−Ｏ−ホスホロアミダイトの沈殿溶媒中の沈殿によって精製される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２８】
請求項２３に記載の方法によって製造されたホスフィチル化化合物。
【請求項２９】
５’−Ｏ−保護−ヌクレオシドから誘導されたオリゴマーを、３’−Ｏ−ホスホロアミダイトと、トリフルオロ酢酸−ジイソプロピルエチルアミン複合体の存在下で反応させて、ホスフィチル化オリゴマー化合物を形成させる工程を含んでなる、ホスフィチル化化合物を製造する方法。
【請求項３０】
前記反応が、自動化ＤＮＡ合成装置中で行われる、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
請求項２９に記載の方法によって製造されたホスフィチル化オリゴマー化合物。
【請求項３２】
ホスフィチル化化合物及び溶媒を含んでなる化合物の溶液を用意し、そして前記化合物の溶液を沈殿溶媒と接触させて、精製されたホスフィチル化化合物を沈殿させる工程を含んでなる、ホスフィチル化化合物を精製する方法。
【請求項３３】
前記沈殿溶媒が、石油エーテルを含んでなる、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記接触工程が、約５℃ないし約２５℃の温度で行われる、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記接触工程が、ステンレス鋼の容器中で行われる、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記反応工程が、更に、酢酸メチル、酢酸エチル、酢酸ｎ−プロピル、酢酸イソプロピル、酢酸ｎ−ブチル、酢酸イソブチル、テトラヒドロフラン、及び二つ又はそれより多いこれらの組合せからなる群から選択される溶媒の存在中で行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項３７】
前記溶媒が、酢酸メチル、酢酸イソプロピル、テトラヒドロフラン、及び二つ又はそれより多いこれらの組合せからなる群から選択される、請求項３６に記載の方法。