【手続補正書】
【提出日】平成17年10月5日(2005.10.5)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  （ａ）第１蛍光試薬で標識された核内受容体またはそのリガンド結合ドメイン、
（ｂ）第２蛍光試薬で標識されたＣＢＰ、ｐ３００もしくは他の核内受容体コアクチベーターまたはその結合部分、および
（ｃ）該核内受容体のアゴニストであると疑われる物質
を、該物質が該核内受容体のアゴニストである場合に該核内受容体またはそのリガンド結合ドメインとＣＢＰ、ｐ３００もしくは他の核内受容体コアクチベーターまたはその結合部分との結合が生じる条件下で供給し、
（ｄ）該第１蛍光試薬と該第２蛍光試薬との間の蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）を測定することを含んでなる、核内受容体のアゴニストの同定方法であって、該物質が該核内受容体のアゴニストであることがＦＲＥＴの発生により示されることを特徴とする方法。
【請求項２】  該核内受容体またはそのリガンド結合ドメインが、ステロイド受容体、甲状腺ホルモン受容体、レチノイン酸受容体、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体、レチノイドＸ受容体、グルココルチコイド受容体、ビタミンＤ受容体、ＬＸＲおよびＦＸＲよりなる群から選ばれる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】  該核内受容体またはそのリガンド結合ドメインが、完全長核内受容体、核内受容体のリガンド結合ドメイン、および核内受容体のＡＦ−２部位よりなる群から選ばれる、請求項１に記載の方法。
【請求項４】  該核内受容体またはそのリガンド結合ドメインが核内受容体のＡＦ−２部位を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項５】  該核内受容体またはそのリガンド結合ドメインが、完全長ＰＰＡＲ、ＰＰＡＲのリガンド結合ドメイン、ヒトＰＰＡＲγ１のアミノ酸残基１７６〜４７８よりなる群から選ばれる、請求項１に記載の方法。
【請求項６】  該核内受容体またはそのリガンド結合ドメインが、ＰＰＡＲα、ＰＰＡＲγ１、ＰＰＡＲγ２およびＰＰＡＲδよりなる群から選ばれる、請求項１に記載の方法。
【請求項７】  該核内受容体またはそのリガンド結合ドメインが、ヒトＲＡＲαのアミノ酸１４３〜４６２、ラットＴ３Ｒα１のアミノ酸１２２〜４１０、マウスＲＸＲγのアミノ酸２２７〜４６３およびヒトＥＲのアミノ酸２５１〜５９５よりなる群から選ばれるリガンド結合ドメインを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項８】  ＣＢＰ、ｐ３００もしくは他の核内受容体コアクチベーターまたはその結合部分が、完全長ヒトＣＢＰ、完全長マウスＣＢＰ、ヒトＣＢＰのアミノ酸残基１〜１１３、およびヒトＣＢＰのアミノ酸残基１〜４５３よりなる群から選ばれる、請求項１に記載の方法。
【請求項９】  該第１蛍光試薬が、ＸＬ６６５およびユウロピウムクリプテート（Ｅｕ３＋Ｋ）よりなる群から選ばれる、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】  該第２蛍光試薬が、ＸＬ６６５およびユウロピウムクリプテート（Ｅｕ３＋Ｋ）よりなる群から選ばれる、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】  （ａ）第１蛍光試薬で標識された核内受容体またはそのリガンド結合ドメイン、
（ｂ）核内受容体コアクチベーターの結合部分（該結合部分はアミノ酸配列ＬＸＸＬＬを含有し、該結合部分は第２蛍光試薬で標識されている）、および
（ｃ）該核内受容体のアゴニストであると疑われる物質
を、該物質が該核内受容体のアゴニストである場合に該核内受容体またはそのリガンド結合ドメインと該核内受容体コアクチベーターの結合部分との結合が生じる条件下で供給し、
（ｄ）該第１蛍光試薬と該第２蛍光試薬との間の蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）を測定することを含んでなる、核内受容体のアゴニストの同定方法であって、該物質が該核内受容体のアゴニストであることがＦＲＥＴの発生により示されることを特徴とする方法。
【請求項１２】  該核内受容体コアクチベーターの結合部分が、ヒトＲＩＰ−１４０、ヒトＳＲＣ−１、マウスＴＩＦ−２、ヒトまたはマウスＣＢＰ、ヒトまたはマウスｐ３００、マウスＴＩＦ−１およびヒトＴＲＩＰタンパク質よりなる群から選ばれる、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】  （ａ）第１蛍光試薬で標識された核内受容体またはそのリガンド結合ドメイン、
（ｂ）アミノ酸配列ＬＸＸＬＬを含有し第２蛍光試薬で標識されているポリペプチド、および
（ｃ）該核内受容体のアゴニストであると疑われる物質
を、該物質が該核内受容体のアゴニストである場合に該核内受容体またはそのリガンド結合ドメインと該ポリペプチドとの結合が生じる条件下で供給し、
（ｄ）該第１蛍光試薬と該第２蛍光試薬との間の蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）を測定することを含んでなる、核内受容体のアゴニストの同定方法であって、該物質が該核内受容体のアゴニストであることがＦＲＥＴの発生により示されることを特徴とする方法。
【請求項１４】  （ａ）第１蛍光試薬で標識された核内受容体またはそのリガンド結合ドメイン、
（ｂ）第２蛍光試薬で標識されたＣＢＰ、ｐ３００もしくは他の核内受容体コアクチベーターまたはその結合部分、
（ｃ）該核内受容体のアゴニスト、および
（ｄ）該核内受容体のアンタゴニストであると疑われる物質
を、該物質の不存在下で該核内受容体またはそのリガンド結合ドメインとＣＢＰ、ｐ３００もしくは他の核内受容体コアクチベーターまたはその結合部分との結合が生じる条件下で供給し、
（ｅ）該物質が存在する場合の該第１蛍光試薬と該第２蛍光試薬との間の蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）を測定し、該物質が存在しない場合の該第１蛍光試薬と該第２蛍光試薬との間のＦＲＥＴを測定することを含んでなる、核内受容体のアンタゴニストの同定方法であって、該物質が該核内受容体のアンタゴニストであることが、該物質が存在する場合のＦＲＥＴの減少により示されることを特徴とする方法。
【請求項１５】  該核内受容体またはそのリガンド結合ドメインが、ステロイド受容体、甲状腺ホルモン受容体、レチノイン酸受容体、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体、レチノイドＸ受容体、グルココルチコイド受容体、ビタミンＤ受容体、ＬＸＲおよびＦＸＲよりなる群から選ばれる、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】  該核内受容体またはそのリガンド結合ドメインが、完全長核内受容体、核内受容体のリガンド結合ドメイン、および核内受容体のＡＦ−２部位よりなる群から選ばれる、請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】  該核内受容体またはそのリガンド結合ドメインが核内受容体のＡＦ−２部位を含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１８】  該核内受容体またはそのリガンド結合ドメインが、完全長ＰＰＡＲ、ＰＰＡＲのリガンド結合ドメイン、ヒトＰＰＡＲγ１のアミノ酸残基１７６〜４７８よりなる群から選ばれる、請求項１４に記載の方法。
【請求項１９】  該核内受容体またはそのリガンド結合ドメインが、ＰＰＡＲα、ＰＰＡＲγ１、ＰＰＡＲγ２およびＰＰＡＲδよりなる群から選ばれる、請求項１４に記載の方法。
【請求項２０】  該核内受容体またはそのリガンド結合ドメインが、ヒトＲＡＲαのアミノ酸１４３〜４６２、ラットＴ３Ｒα１のアミノ酸１２２〜４１０、マウスＲＸＲγのアミノ酸２２７〜４６３およびヒトＥＲのアミノ酸２５１〜５９５よりなる群から選ばれるリガンド結合ドメインを含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項２１】  ＣＢＰ、ｐ３００もしくは他の核内受容体コアクチベーターまたはその結合部分が、完全長ＣＢＰ、ヒトＣＢＰのアミノ酸残基１〜１１３、およびヒトＣＢＰのアミノ酸残基１〜４５３よりなる群から選ばれる、請求項１４に記載の方法。
【請求項２２】  該第１蛍光試薬が、ＸＬ６６５およびユウロピウムクリプテート（Ｅｕ３＋Ｋ）よりなる群から選ばれる、請求項１４に記載の方法。
【請求項２３】  該第２蛍光試薬が、ＸＬ６６５およびユウロピウムクリプテート（Ｅｕ３＋Ｋ）よりなる群から選ばれる、請求項１４に記載の方法。
【請求項２４】  蛍光試薬で標識された核内受容体またはそのリガンド結合ドメイン。
【請求項２５】  該核内受容体またはそのリガンド結合ドメインが、ＰＰＡＲα、ＰＰＡＲγ１、ＰＰＡＲγ２、ＰＰＡＲδおよびＰＰＡＲα、ＰＰＡＲγ１、ＰＰＡＲγ２またはＰＰＡＲδのリガンド結合ドメインならびにヒトＰＰＡＲγ１のアミノ酸残基１７６〜４７８よりなる群から選ばれ、該蛍光試薬が、ＸＬ６６５およびユウロピウムクリプテート（Ｅｕ３＋Ｋ）よりなる群から選ばれる、請求項２４に記載の核内受容体またはそのリガンド結合ドメイン。
【請求項２６】  蛍光試薬で標識されたＣＢＰ、ｐ３００もしくは他の核内受容体コアクチベーターまたはその結合部分。
【請求項２７】  該蛍光試薬が、ＸＬ６６５およびユウロピウムクリプテート（Ｅｕ３＋Ｋ）よりなる群から選ばれる、請求項２６に記載のＣＢＰ、ｐ３００もしくは他の核内受容体コアクチベーターまたはその結合部分。