【手続補正書】
【提出日】平成18年3月2日(2006.3.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０５８５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０５８５】
【図１Ａ】（パネルＡおよびＢ）は結合ペプチド／ニュートラアビジン−ＨＲＰ複合体の飽和結合曲線を示すグラフである。図１Ａは配列番号２６４および配列番号２９４の飽和結合曲線を示す。図１Ｂは配列番号２７７および配列番号３５６の飽和結合曲線を示す。すべてのペプチドはＣ末端ビオチンおよびＪＪスペーサーを有している。
【図１Ｂ】（パネルＡおよびＢ）は結合ペプチド／ニュートラアビジン−ＨＲＰ複合体の飽和結合曲線を示すグラフである。図１Ａは配列番号２６４および配列番号２９４の飽和結合曲線を示す。図１Ｂは配列番号２７７および配列番号３５６の飽和結合曲線を示す。すべてのペプチドはＣ末端ビオチンおよびＪＪスペーサーを有している。
【図２】ＫＤＲトランスフェクト２９３Ｈ細胞およびＭｏｃｋトランスフェクト２９３Ｈ細胞への、単一濃度（５．５５ｎＭ）のペプチド／ニュートラアビジン−ＨＲＰ複合体：対照（スペーサーによりビオチン化、ならびに配列番号２６４、２９４、２７７および３５６）の結合を示すグラフである。すべてのペプチドはＣ末端ビオチンおよびＪＪスペーサーを有している。
【図３】実施例５で試験したスペーサー（ジ（８−アミノ−３，６−ジオキサオクタン酸）「ＪＪ」）およびビオチンの両方を持つペプチド構造および持たない構造：（（ａ）ＪＪスペーサーを持つビオチン化配列番号２６４；（ｂ）Ｎ末端ビオチンを持つ配列番号２６４；（ｃ）ＪＪスペーサーを持つビオチン化配列番号２９４；（ｄ）ビオチン化配列番号２９４）を示す。
【図４】ＫＤＲトランスフェクト２９３Ｈ細胞およびＭｏｃｋトランスフェクト２９３Ｈ細胞への、単一濃度（２．７８ｎＭ）のペプチド／ニュートラアビジンＨＲＰ複合体の結合を示す棒グラフである；ペプチドは（ａ）対照（スペーサーを持つ）；（ｂ）対照；（ｃ）ＪＪスペーサーを持つビオチン化配列番号２６４；（ｄ）Ｎ末端ビオチンを持つ配列番号２６４；および（ｅ）ＪＪスペーサーを持つビオチン化配列番号２９４；およびビオチン化配列番号２９４を含む。
【図５】４０％ラット血清存在下および非存在下でのペプチド／ニュートラアビジンＨＲＰ複合体の特異的結合（ＫＤＲトランスフェクト細胞への結合からＭｏｃｋトランスフェクト細胞への結合を引く）を示す棒グラフである。（ａ）配列番号２９４；（ｂ）配列番号２６４；（ｃ）配列番号２７７；（ｄ）配列番号３５６。ペプチド／アビジンＨＲＰ溶液の濃度は（ａ）および（ｂ）は６．６６ｎＭ、（ｃ）３．３３ｎＭ、および（ｄ）２．２２ｎＭであった。すべてのペプチドはＣ末端ビオチンおよびＪＪスペーサーを有している。
【図６】４５０ｎｍの吸光度としてプロットしたｍｏｃｋトランスフェクト細胞およびＫＤＲトランスフェクト細胞へのポリペプチド／アビジン−ＨＲＰ溶液（配列番号２９４および／または配列番号２６４）の結合を示す棒グラフである。それぞれの四量体複合体を形成するために使用される対照およびＫＤＲ結合ペプチドの割合はそれぞれの試験多量体の下の説明に示す。
【図７】４５０ｎｍでの吸光度としてプロットした、ＫＤＲトランスフェクト細胞へのＪＪスペーサー／アビジン−ＨＲＰ複合体を持つビオチン化配列番号２６４の特異的結合（ｍｏｃｋトランスフェクト細胞へのバックグラウンド結合を引く）を示す棒グラフである。下の説明に示すように、アッセイ系に複合体を形成していないペプチドの濃度（Ｘ軸に示す）を増やしながら添加した。遊離配列番号２６４だけがＫＤＲトランスフェクト細胞への配列番号２６４複合体の結合を減少させることが可能であった。
【図８】実施例６で試験した結合ポリペプチド配列：配列番号２９４および３６８〜３７２の構造を示す。
【図９】ＫＤＲトランスフェクト細胞およびＭｏｃｋトランスフェクト細胞への蛍光ビーズの結合を示す棒グラフである。表示されたビオチン化リガンドが結合したニュートラアビジン被覆ビーズによるＫＤＲ発現２９３Ｈ細胞および非発現２９３Ｈ細胞への結合を試験した。
【図１０】ＫＤＲ発現２９３Ｈ形質移入体への、２種の濃度（３０μＭおよび０．３μＭ）の結合ポリペプチド（ａ）アセチル化配列番号２９４（改変したＣ末端「Ｐ６」、ＧＤＳＲＶＣＷＥＤＳＷＧＧＥＶＣＦＲＹＤＰ；配列番号３７４を持たない）；（ｂ）配列番号２６３（改変したＣ末端「Ｐ４」、ＡＧＤＳＷＣＳＴＥＹＴＹＣＥＭＩＧＴ；配列番号３７５を持たない）；（ｃ）ＪＪスペーサーを持つビオチン化配列番号２６４；および（ｄ）配列番号２７７（ＪＪスペーサーでビオチン化）による１２５Ｉ−標識ＶＥＧＦ結合の阻害割合（％）を示す棒グラフである。
【図１１】活性化（リン酸化）ＫＤＲは非刺激（−Ｖ）ＨＵＶＥＣ由来の免疫沈降物には検出されず、ＶＥＧＦ−刺激（＋Ｖ）ＨＵＶＥＣ由来の免疫沈降物には豊富にあることを示すフィルム上の化学ルミネセンス検出を示す（上部パネル）。抗ＫＤＲによるブロットの再検索は、全ＫＤＲに相当する量が両免疫沈降物に存在することを示した（下部パネル）。
【図１２】ＶＥＧＦ−介在リン酸化を部分的に阻害する抗ＫＤＲ抗体（１μｇ／ｍＬ）の能力を示す、フィルム上における化学ルミネセンス検出を示す。
【図１３】ＶＥＧＦ−介在ＫＤＲリン酸化を阻害するＫＤＲ結合ポリペプチド配列番号３０６（１０μＭ）の能力を示す、フィルム上における化学ルミネセンス検出を示す。
【図１４】ＫＤＲトランスフェクト２９３Ｈ細胞へのＴｃ−標識ポリペプチド（配列番号３３９）の結合を示す棒グラフである。
【図１５】３種の異なる濃度（１０μＭ、０．３μＭ、および０．０３μＭ）のペプチドＰ１２−ＸＢ（配列番号２７７）Ｄ２、Ｄ１、Ｄ３、およびＰ１３−Ｄ（ＡＱＤＷＹＹＤＥＩＬＳＭＡＤＱＬＲＨＡＦＬＳＧＧ；配列番号３７６）による、ＫＤＲトランスフェクト２９３Ｈ細胞への１２５Ｉ−標識ＶＥＧＦ結合の阻害割合（％）を示す棒グラフである。結果は、トリプリケートで行われた１回の実験±Ｓ．Ｄ．に由来する。
【図１６】ＨＵＶＥＣ中のＫＤＲのＶＥＧＦ誘発リン酸化を１０ｎＭで完全に阻害し、そして１ｎＭで大部分のリン酸化を阻害するＤ１の能力を示す写真である。全ＫＤＲ（下部パネル）に対するブロットの再検索は、試験化合物の効果が少ない試料負荷によるものではないことを示した。Ｄ１に含まれる２種の結合配列からなるホモ二量体は１００ｎＭまでリン酸化を阻害しなかった。
【図１７】ＶＥＧＦにより誘発される内皮細胞の遊走／浸潤をＤ１が強力に阻害することを示すグラフである。蛍光色素で遊走細胞を染色後、該遊走細胞を蛍光測定により定量した。
【図１８】４０％マウス血清の非存在下および存在下におけるｍｏｃｋ形質移入２９３Ｈ細胞およびＫＤＲ形質移入２９３Ｈ細胞への１２５Ｉ−標識Ｄ５の結合を示すグラフである。
【図１９】４０％マウス血清の非存在下および存在下におけるＫＤＲトランスフェクト２９３Ｈ細胞への１２５Ｉ−標識Ｄ５の特異的結合（ＫＤＲ−ＭＯＣＫ）を示すグラフである。
【図２０】パーセントで表した注射量／ｍＬ対時間としての血漿クリアランスのグラフである。
【図２１】Ｓｕｐｅｒｄｅｘペプチドカラム由来の血漿のＳＥ−ＨＰＬＣ特性を示す。パネルは上から、注入された試料、０分、３０分、および９０分。それぞれのパネルの挿入物はＨＰＬＣ解析の測定時間、動物数、および注射容積を示す。
【図２２】ＨＵＶＥＣ増殖アッセイにおけるＫＤＲペプチドの試験の結果を示すグラフである。Ａ：Ｄ６；Ｂ：配列番号２７７；Ｃ：配列番号３７７（ＡＥＧＴＧＤＬＨＣＹＦＰＷＶＣＳＬＤＰＧＰＥＧＧＧＫ陰性対照）；Ｆ：配列番号３７７；陰性対照。
【図２３Ａ】マウスＫＤＲ−Ｆｃに結合するＤ１（図３６を参照されたい）の速度論解析を示す。すべてのセンソグラムは２価分析物モデルに適合する。
【図２３Ｂ】マウスＫＤＲ−Ｆｃに結合するＤ１（図３６を参照されたい）の速度論解析を示す。すべてのセンソグラムは２価分析物モデルに適合する。
【図２４Ａ】配列番号２６４および配列番号２９４のヘテロ二量体、Ｄ７の速度論解析を示す。すべてのセンソグラムは、２価分析物モデルに適合する。
【図２４Ｂ】配列番号２６４および配列番号２９４のヘテロ二量体、Ｄ７の速度論解析を示す。すべてのセンソグラムは、２価分析物モデルに適合する。
【図２５Ａ】マウスＫＤＲ−Ｆｃに結合した蛍光標識配列番号２７７の速度論解析を示す。すべてのセンソグラムは、１：１ラングミュアモデルに適合する。
【図２５Ｂ】マウスＫＤＲ−Ｆｃに結合した蛍光標識配列番号２７７の速度論解析を示す。すべてのセンソグラムは、１：１ラングミュアモデルに適合する。
【図２６】パネル１、２および３に示す、α、β、γもしくはδジペプチド、または回転模倣物（たとえばα、β、γ、またはδ模倣物）の例を示す。
【図２７】オキシムリンカーを示す。アミノアルコール官能基を含む（４）、およびアルコキシアミノ官能基を含む（５）アミノ酸はペプチド鎖に取り込まれるが、必ずしもペプチド鎖の末端ではない。
【図２８】ペンダントブロモアセトアミド官能基を有するシステインの環化の例を示す。
【図２９】システイン部分とペプチドアルデヒドの分子内反応を介したチアゾリジン結合による環状ペプチドの形成を示す図式である。
【図３０】ＬｙｓおよびＡｓｐの準直交（ｑｕａｓｉｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ）脱保護、その後の樹脂上環化および樹脂からの開裂によるジスルフィド結合のラクタム代替物を示す図式である。
【図３１】アリルを基礎にした保護基を使用したＬｙｓおよびＡｓｐの準直交脱保護、その後の樹脂上環化および樹脂からの開裂によるジスルフィド結合のラクタム代替物を示す図式である。
【図３２】Ｇｒｕｂｂｓオレフィンメタセシス環化を示す図式である。
【図３３】リン脂質構造を示す。
【図３４】図３４Ａ〜Ｆは、キレート剤の好ましい構造を示す。
【図３５】キレート剤の構造を示す。
【図３６】二量体１（Ｄ１；Ａｃ−ＡＧＰＴＷＣＥＤＤＷＹＹＣＷＬＦＧＴＧＧＧＫ（配列番号２７７）［（ビオチン−ＪＪＫ−（Ｏ＝）Ｃ（ＣＨ２）３Ｃ（＝Ｏ）−ＪＪ−ＮＨ（ＣＨ２）４−（Ｓ）−ＣＨ（（Ａｃ−ＶＣＷＥＤＳＷＧＧＥＶＣＦＲＹＤＰＧＧＧ（配列番号３７０））−ＮＨ）ＣＯＮＨ２）−ＮＨ２］を示す。
【図３７】二量体２（Ｄ２；Ａｃ−ＡＧＰＴＷＣＥＤＤＷＹＹＣＷＬＦＧＴＧＧＧＫ（配列番号２７７）［（ビオチン−ＪＪＫ−（Ｏ＝）Ｃ（ＣＨ２）３Ｃ（＝Ｏ）−ＪＪ−ＮＨ（ＣＨ２）４−（Ｓ）−ＣＨ（（Ａｃ−ＡＧＰＴＷＣＥＤＤＷＹＹＣＷＬＦＧＴＪ（配列番号３３８））−ＮＨ）ＣＯＮＨ２）−ＮＨ２］を示す。
【図３８】二量体３（Ｄ３；Ａｃ−ＶＣＷＥＤＳＷＧＧＥＶＣＦＲＹＤＰＧＧＧＫ（配列番号３３７）［（ビオチン−ＪＪＫ−（Ｏ＝）Ｃ（ＣＨ２）３Ｃ（＝Ｏ）−ＪＪ−ＮＨ（ＣＨ２）４−（Ｓ）−ＣＨ（（Ａｃ−ＶＣＷＥＤＳＷＧＧＥＶＣＦＲＹＤＰＧＧＧ（配列番号３７０））−ＮＨ）ＣＯＮＨ２）−ＮＨ２］を示す。
【図３９】二量体４（Ｄ４；Ａｃ−ＡＧＰＴＷＣＥＤＤＷＹＹＣＷＬＦＧＴＪＫ（配列番号３３８）［ＤＯＴＡ−ＪＪＫ−（Ｏ＝）Ｃ（ＣＨ２）３Ｃ（＝Ｏ）−ＪＪ−ＮＨ（ＣＨ２）４−（Ｓ）−ＣＨ（（Ａｃ−ＶＣＷＥＤＳＷＧＧＥＶＣＦＲＹＤＰＧＧＧ（配列番号３７０））−ＮＨ）ＣＯＮＨ２］−ＮＨ２）を示す。
【図４０】二量体５（Ｄ５；Ａｃ−ＶＣＷＥＤＳＷＧＧＥＶＣＦＲＹＤＰＧＧＧＫ（配列番号３３７）（ＪＪ−Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）３Ｃ（＝Ｏ）−Ｋ−ＮＨ（ＣＨ２）４−（Ｓ）−ＣＨ（（Ａｃ−ＡＧＰＴＷＣＥＤＤＷＹＹＣＷＬＦＧＴＧＧＧ（配列番号３７８））−ＮＨ）ＣＯＮＨ２）−ＮＨ２）を示す。
【図４１】二量体８（Ｄ８；Ａｃ−ＡＱＤＷＹＹＤＥＩＬＳＭＡＤＱＬＲＨＡＦＬＳＧＧＧＧＧＫ（配列番号３５６）｛Ａｃ−ＡＱＤＷＹＹＤＥＩＬＳＭＡＤＱＬＲＨＡＦＬＳＧＧＧＧＧＫ（配列番号３５６）（Ｊ−Ｇｌｕｔ−）−ＮＨ２｝Ｋ（ビオチン−ＪＪ）−ＮＨ２）を示す。
【図４２】二量体９（Ｄ９；Ａｃ−ＡＱＤＷＹＹＤＥＩＬＳＭＡＤＱＬＲＨＡＦＬＳＧＧＧＧＧＫ（配列番号３５６）｛［Ａｃ−ＧＤＳＲＶＣＷＥＤＳＷＧＧＥＶＣＦＲＹＤＰＧＧＧＫ（配列番号２９４）（ＪＪ−Ｇｌｕｔ−）］−ＮＨ２｝Ｋ−ＮＨ２）を示す。
【図４３】二量体１０（Ｄ１０；Ａｃ−ＡＧＰＴＷＣＥＤＤＷＹＹＣＷＬＦＧＴＧＧＧＫ（配列番号２７７）｛［Ａｃ−ＧＤＳＲＶＣＷＥＤＳＷＧＧＥＶＣＦＲＹＤＰＧＧＧＫ（配列番号２９４）（ＪＪ−Ｇｌｕｔ−ＮＨ（ＣＨ２）４−（Ｓ）−ＣＨ（ＰｎＡＯ６−Ｇｌｕｔ−ＮＨ）（Ｃ＝Ｏ−））−ＮＨ２］−ＮＨ２｝を示す。
【図４４】二量体１１（Ｄ１１；Ａｃ−ＡＧＰＴＷＣＥＤＤＷＹＹＣＷＬＦＧＴＧＧＧＫ（配列番号２７７）｛Ａｃ−ＶＣＷＥＤＳＷＥＤＳＷＧＧＥＶＣＦＲＹＤＰＧＧＧＫ（配列番号４７５）［ＪＪ−Ｇｌｕｔ−ＮＨ（ＣＨ２）４−（Ｓ）−ＣＨ（ＤＯＴＡ−ＪＪ−ＮＨ−）（Ｃ＝Ｏ）−］−ＮＨ２｝−ＮＨ２）を示す。
【図４５】二量体１２（Ｄ１２；Ａｃ−ＡＧＰＴＷＣＥＤＤＹＣＷＬＦＧＴＧＧＧＫ（配列番号４７６）｛［ＰｎＡＯ６−Ｇｌｕｔ−Ｋ（Ａｃ−ＶＣＷＥＤＳＷＧＧＥＶＣＦＲＹＤＰＧＧＧＫ（配列番号３３７）（−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）２ＯＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）−）−ＮＨ２）］−ＮＨ２｝を示す。
【図４６】二量体１３（Ｄ１３；Ａｃ−ＡＧＰＴＷＣＥＤＤＷＹＹＣＷＬＦＧＴＧＧＧＫ（配列番号２７７）｛Ａｃ−ＶＣＷＥＤＳＷＧＧＥＶＣＦＲＹＤＰＧＧＧＫ（配列番号３３７）［ＪＪ−Ｇｌｕｔ−Ｋ（ＢＯＡ）］−ＮＨ２｝−ＮＨ２）を示す。
【図４７】二量体１４（Ｄ１４；Ａｃ−ＡＱＤＷＹＹＤＥＩＬＳＭＡＤＱＬＲＨＡＦＬＳＧＧＧＧＧＫ（配列番号３５６）｛ＰｎＡＯ６−Ｇｌｕｔ−Ｋ［Ａｃ−ＧＳＤＲＶＣＷＥＤＳＷＧＧＥＶＣＦＲＹＤＰＧＧＧＫ（配列番号４７７）  （ＪＪ−Ｇｌｕｔ）−ＮＨ２］｝−ＮＨ２）を示す。
【図４８】二量体１５（Ｄ１５；Ａｃ−ＡＧＰＴＷＣＥＤＤＷＹＹＣＷＬＦＧＴＧＧＧＫ（配列番号２７７）｛［［Ａｃ−ＧＤＳＲＶＣＷＥＤＳＷＧＧＥＶＣＦＲＹＤＰＧＧＧＫＪＪ（配列番号２９４）−Ｇｌｕｔ］−ＮＨ２］−Ｋ（ＰｎＡＯ６−Ｇｌｕｔ）｝−ＮＨ２）を示す。
【図４９】二量体１６（Ｄ１６；Ａｃ−ＡＧＰＴＷＣＥＤＤＷＹＹＣＷＬＦＧＴＧＧＧＧＫ（配列番号２７７）｛ＰｎＡＯ６−Ｇｌｕｔ−Ｋ［Ａｃ−ＧＤＳＲＶＣＷＥＤＳＷＧＧＥＶＣＦＲＹＤＰＧＧＧＫ（配列番号２９４）［−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）３Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）２（ＣＨ２）３ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）−］−ＮＨ２］｝−ＮＨ２）を示す。
【図５０】二量体１７（Ｄ１７；Ａｃ−ＡＱＤＷＹＹＤＥＩＬＪＧＲＧＧＲＧＧＲＧＧＫ（配列番号４７８）｛Ｋ［Ａｃ−ＶＣＷＥＤＳＷＧＧＥＶＣＦＲＹＤＰＧＧＧＫ（配列番号２９４）（ＪＪ−Ｇｌｕｔ）−ＮＨ２］｝−ＮＨ２）を示す。
【図５１】二量体１８（Ｄ１８；Ａｃ−ＡＰＧＴＷＣＤＹＤＷＥＹＣＷＬＧＴＦＧＧＧ（配列番号４７９）｛ＰｎＡＯ６−Ｇｌｕｔ−Ｋ［Ａｃ−ＧＶＤＦＲＣＥＷＳＤＷＧＥＶＧＣＲＳＰＤＹＧＧＧＫ（配列番号４８９）（ＪＪ−Ｇｌｕｔ）−ＮＨ２］｝−ＮＨ２）を示す。
【図５２】二量体１９（Ｄ１９；Ａｃ−ＡＧＰＴＷＣＥＤＤＷＹＹＣＷＬＦＧＴＧＧＧＫ（配列番号２９４）｛ビオチン−Ｋ［Ａｃ−ＶＣＷＥＤＳＷＧＧＥＶＣＦＲＹＤＰＧＧＧＫ（ＪＪ−Ｇｌｕｔ）−ＮＨ２］｝−ＮＨ２）を示す。
【図５３】二量体２０（Ｄ２０；（−ＪＪＡＧＰＴＷＣＥＤＤＷＹＹＣＷＬＦＧＴＧＧＧＧＫ（配列番号４８０）−ＮＨ２）−Ｇｌｕｔ−ＶＣＷＥＤＳＷＧＧＥＶＣＦＲＹＤＰＧＧＧ（配列番号３７０）−ＮＨ２）を示す。
【図５４】二量体２１（Ｄ２１；［−ＪＪＡＧＰＴＷＣＥＤＤＷＹＹＣＷＬＦＧＴＧＧＧＧＫ（配列番号４８０）（ＰｎＡＯ６−Ｇｌｕｔ）−ＮＨ２］−Ｇｌｕｔ−ＶＣＷＥＤＳＷＧＧＥＶＣＦＲＹＤＰＧＧＧ（配列番号３７０）−ＮＨ２）を示す。
【図５５】二量体２２（Ｄ２２；Ａｃ−ＧＤＳＲＶＣＷＥＤＳＷＧＧＥＶＣＦＲＹＤＰＧＧＧＫ（配列番号２９４）｛ＪＪ−Ｇｌｕｔ−ＪＪ−ＡＧＰＴＷＣＥＤＤＷＹＹＣＷＬＦＴＧＧＧＫ（配列番号４８１）−ＮＨ２｝−ＮＨ２）を示す。
【図５６】二量体２３（Ｄ２３；Ａｃ−ＡＧＰＴＷＣＥＤＤＷＹＹＣＷＬＦＧＴＧＧＧＫ（配列番号２７７）｛Ａｃ−ＶＣＷＥＤＳＷＧＧＥＶＣＦＲＹＤＰＧＧＧＫ（配列番号３３７）［ＪＪ−Ｇｌｕｔ−Ｋ（ＳＡＴＡ）］−ＮＨ２｝−ＮＨ２を示す。また、Ｄ２３はＳＡＴＡ（Ｓ−アセチルチオアセチル）基で官能化されている。
【図５７】二量体２４（Ｄ２４；Ａｃ−ＡＧＰＴＷＣＥＤＤＷＹＹＣＷＬＦＧＴＧＧＧＫ（配列番号２７７）｛ＳＡＴＡ−ＪＪＫ［Ａｃ−ＶＣＷＥＤＳＷＧＧＥＶＣＦＲＹＤＰＧＧＧＫ（配列番号３３７）（ＪＪ−Ｇｌｕｔ）−ＮＨ２］｝−ＮＨ２）を示す。
【図５８】二量体２５（Ｄ２５；Ａｃ−ＡＧＰＴＷＣＥＤＤＷＹＹＣＷＬＦＧＴＧＧＧＫ（配列番号２７７）｛Ａｃ−ＧＤＳＲＶＣＷＥＤＳＷＧＧＥＶＣＦＲＹＤＰＧＧＧＫ（配列番号２９４）［ＪＪ−Ｇｌｕｔ−ＮＨ（ＣＨ２）４−（Ｓ）−ＣＨ（ＮＨ２）Ｃ（＝Ｏ）−］−ＮＨ２｝−ＮＨ２）を示す。
【図５９】二量体２６（Ｄ２６；ＡＧＰＴＷＣＥＤＤＷＹＹＣＷＬＦＧＴＧＧＧＧＫ（配列番号２７７）｛（−Ｇｌｕｔ−ＪＪ−ＶＣＷＥＤＳＷＧＧＥＶＣＦＲＹＤＰＧＧＧ（配列番号３７０）−ＮＨ２）−Ｋ｝−ＮＨ２）を示す。
【図６０】二量体２７（Ｄ２７；Ａｃ−ＡＧＰＴＷＣＥＤＤＷＹＹＣＷＬＦＧＴＧＧＧＧＫ（配列番号２７７）｛Ａｃ−ＶＣＷＥＤＳＷＧＧＥＶＣＦＲＹＤＰＧＧＧＫ（配列番号３３７）［Ｓ（ＧａｌＮＡｃ（Ａｃ）３−α−Ｄ）−Ｇ−Ｓ（ＧａｌＮＡｃ（Ａｃ）３−α−Ｄ）−Ｇｌｕｔ−Ｓ（ＧａｌＮＡｃ（Ａｃ）３−α−Ｄ）−Ｇ−Ｓ（ＧａｌＮＡｃ（Ａｃ）３−α−Ｄ）−ＮＨ（ＣＨ２）４−（Ｓ）−ＣＨ（ビオチン−ＪＪＮＨ−）Ｃ（＝Ｏ）−］−ＮＨ２｝−ＮＨ２）を示す。
【図６１】本発明の二量体結合ペプチドを示す。
【図６２】本発明の二量体結合ペプチドを示す。
【図６３】本発明の二量体結合ペプチドを示す。
【図６４】本発明の二量体結合ペプチドを示す。
【図６５】Ｄ６濃度の関数としての腫瘍増殖阻害を示す。
【図６６】グリコシル化し、改変したスペーサーを持つＤ２６（■）が細胞遊走アッセイにおいてＶＥＧＦの作用を阻害し、それらの化学的改変を欠如するＤ２４（◆）より強力にＶＥＧＦ−刺激細胞遊走を阻害できることを示す。
【図６７】培養したＨＵＶＥＣによる細胞遊走アッセイにおいて、ＶＥＧＦの生物学的作用を阻害するＤ６の効力を付加物Ａが促進することを示す。◆：示した濃度でのＤ６単独。■：示した濃度でのＤ６＋１００ｎＭ  付加物Ａ（一定）。
【図６８】スキーム１（ペプチド２の合成）を示す図式である。
【図６９】スキーム２（ペプチド４の合成）を示す図式である。
【図７０】スキーム３（Ｄ２６の合成）を示す図式である。
【図７１】配列番号５０４（■）およびＤ１（◆）によるＫＤＲトランスフェクト細胞への特異的１２５Ｉ−ＶＥＧＦ結合の％阻害±ｓ．ｄ．を示す。
【図７２】配列番号５０４（◆）およびＤ１（■）の示した濃度の存在下でのＨＵＶＥＣ細胞の％最大ＶＥＧＦ−刺激細胞遊走±ｓ．ｄ．を示す。
【図７３】１２５Ｉ−ストレプトアビジンと対照ペプチドおよび試験ペプチド（配列番号３２１、３２０および３２３）の複合体のｍｏｃｋトランスフェクト細胞およびＫＤＲトランスフェクト細胞への全結合（ＶＥＧＦ存在下）をグラフで示す。配列番号３２１を含む複合体だけが特異的結合（ＫＤＲ−ｍｏｃｋ）を示した。
【図７４】ペプチド（配列番号３２１）−１２５Ｉ−ストレプトアビジン複合体の各種濃度（０〜１３．３３ｎＭ）での、ＫＤＲトランスフェクト細胞へのペプチド−１２５Ｉ−ストレプトアビジン複合体の特異的結合（ＶＥＧＦ非存在下および存在下）を示すグラフである。
【図７５】ホモ二量体Ｄ８（■）はヘテロ二量体Ｄ１７（◆）とは異なり、実施例２８で行われた細胞遊走アッセイにおいてＶＥＧＦの作用を阻害しないことを示す。
【図７６】環状ラクタムペプチドの合成を示す図式である（見本手順）。
【図７７】異なるスペーサー長とビオチンを持つ配列番号４８２誘導体の結合を示すグラフである。誘導体は配列番号４８２標的配列とビオチン間において、それぞれＪスペーサーを０、１および２有する。
【図７８】実施例３２に記載のＫＤＲトランスフェクト２９３Ｈ細胞へのＴｃ−標識Ｄ１０の結合を示す。パネルＢは実施例３２に記載のＫＤＲトランスフェクト２９３Ｈ細胞へのＴｃ−標識Ｄ１８の結合の欠如を表す。Ｍｏｃｋ＝ｍｏｃｋトランスフェクト。Ｔｒａｎｓ＝ＫＤＲトランスフェクト。ＭＳ＝マウス血清
【図７９Ａ】図７９Ａ〜Ｇは、本発明の結合ペプチドの誘導体を示す。
【図７９Ｂ】図７９Ａ〜Ｇは、本発明の結合ペプチドの誘導体を示す。
【図７９Ｃ】図７９Ａ〜Ｇは、本発明の結合ペプチドの誘導体を示す。
【図７９Ｄ】図７９Ａ〜Ｇは、本発明の結合ペプチドの誘導体を示す。
【図７９Ｅ】図７９Ａ〜Ｇは、本発明の結合ペプチドの誘導体を示す。
【図７９Ｆ】図７９Ａ〜Ｇは、本発明の結合ペプチドの誘導体を示す。
【図７９Ｇ】図７９Ａ〜Ｇは、本発明の結合ペプチドの誘導体を示す。
【図８０】ＰＣ３腫瘍を移植されたヌードマウスで行われたＤ１３による放射線治療研究の結果を要約する。実施例３４に記載のように、描かれたそれぞれの線は、１組の非処置マウスにおける平均の腫瘍増殖を表す太い点線以外は、処置されたマウスにおける個々の腫瘍増殖の時間経過を示す。
【図８３】本発明のＫＤＲペプチドに結合したマイクロバブルの懸濁液注射後３０分までのマトリゲルまたは腫瘍におけるバブル造影剤の取込および滞留を示す。対照的に、同じバブルは、マトリゲルまたは腫瘍部位の外側に位置するＡＯＩでは一過性（わずか１０分）の可視化／バブル造影剤だけを示した。
【図８４】本発明のＫＤＲペプチドに結合したマイクロバブルの懸濁液注射後３０分までのマトリゲルまたは腫瘍におけるバブル造影剤の取込および滞留を示す。対照的に、同じバブルは、マトリゲルまたは腫瘍部位の外側に位置するＡＯＩでは一過性（わずか１０分）の可視化／バブル造影剤だけを示した。
【図８５】１０％ヒト血清アルブミン存在下でのＫＤＲトランスフェクト細胞またはｍｏｃｋトランスフェクト細胞に結合したペプチド結合超音波造影剤の代表例を示す。（拡大：１００×）