【手続補正書】
【提出日】平成17年6月15日(2005.6.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
多糖類のオートクレーブ処理の方法であって該方法は：
多糖類を約６ないし８のｐＨの水性溶液に溶解し、均質な溶液が得られるまで混合する、
得られた均質溶液を少なくとも１つの容器に、該溶液を含む容器の厚さが１５ｍｍより小さいような量で、入れる、
オートクレーブ内に該均質溶液を含む容器を配置する、
少なくとも１つの容器中にセンサーを配置する、および
該均質溶液を含む容器をオートクレーブ処理する
ことを含み、ここで該オートクレーブ処理が前決定温度に該均質な溶液を加熱することを含み、その後冷却をＦ０＞８であるとき開始し、かつここで、該均質溶液が前決定時間に渡り前決定温度以上のままであることを特徴とする方法。
【請求項２】
Ｆ０値がオートクレーブ処理方法中に、最大約１０ないし１２に達する、請求項１の方法。
【請求項３】
均質な溶液を含む容器の厚さが１０ｍｍより小さい、請求項１の方法。
【請求項４】
均質な溶液を含む容器の厚さが７ｍｍより小さい、請求項３の方法。
【請求項５】
容器がプラスチックバッグである請求項１の方法。
【請求項６】
前決定温度が１２１ないし１３０℃の範囲にある、請求項１の方法。
【請求項７】
均質な溶液が約３ないし７分以内に前決定温度に加熱される、請求項６の方法。
【請求項８】
均質な溶液が３ないし６分間前決定温度のままである、請求項７の方法。
【請求項９】
均質な溶液が約５ないし１２分間で約６５ないし９０℃の温度に冷却される、請求項８の方法。
【請求項１０】
オートクレーブ処理方法が約１１ないし２５分間後に完了する請求項９の方法。
【請求項１１】
該多糖類がグルコースアミノグリカンを含む、請求項１の方法。
【請求項１２】
グルコースアミノグリカンは、硫酸ヘパリン、コンドエチン硫酸、またはそれらの塩または誘導体を含む請求項１１の方法。
【請求項１３】
該多糖類がカルボキシメチルセルロース、キサンタン、ガムアラビカム、デンプン、またはそれらの塩または誘導体を含む、請求項１の方法。
【請求項１４】
該多糖類がヒアルロン酸またはそれらの塩または誘導体を含む請求項１の方法。
【請求項１５】
該ヒアルロン酸がヒアルロン酸ナトリウムである請求項１４の方法。
【請求項１６】
ヒアルロン酸ナトリウムが
０．０４５ないし０．０５５ＭのＡｒｇ、ＨＣｌ
０．０４５ないし０．０５５ＭのＧｌｙ、
０．０４５ないし０．０５５ＭのＬｙｓ、ＨＣｌ
０．０１ないし０．１８ＭのＮａＣｌ、
０．０３５ないし０．０４５ＭのＣａＣｌ２２Ｈ２Ｏ
を含むバッファーに溶解され、かつ該ヒアルロン酸塩／エステルが最大約２３ｍｇ／ｍｌの量で溶解される、請求項１５の方法。
【請求項１７】
ヒアルロン酸塩／エステルが１０−２３ｍｇ／ｍｌの量で溶解される、請求項１６の方法。
【請求項１８】
逆圧がバッグの膨張を防ぐため使用される、請求項５の方法。
【請求項１９】
逆圧が窒素ガスの手段によって実施される請求項１８の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００８】
本発明の従う方法でオートクレーブ処理された、多糖類の粘性は幾分減少するが、許容レベルである。粘性の減少は小さく、粘性はなお十分である。したがって、該方法は分子量に対してあまり影響しないので、殺菌された溶液は、その目的のために使用できる。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１１】
オートクレーブの任意の種類を、溶液を前決定温度まで加熱し、その後Ｆ０＞８のとき冷却を開始する限り、使用しうる。開始する冷却は、オートクレーブの冷却であり、そして同じ時間に溶液は冷却される。しかし、溶液はオートクレーブよりもゆっくり冷却され、それは発明に従う方法からの温度を示す図４に見ることができる。Ｆ０値は、方法中に最大約１０−１２に達し、方法は有利に短い時間で完了する。それによって多糖類の分解は減少する。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１３】
Ｆ０の概念は、１９７６年に「Proposed Rules for LVP」でＦＤＡによって導入されたとき医薬殺菌で使用され始めた。殺菌の致死効果は、t121.11°について121.11℃の一定温度で実施される仮説殺菌にそれを関連させることによって計算される（121.11℃は250°Fに正確に対応する；簡単のため、われわれはＦ０を、温度１２１．０°に対応するかのように取り扱い続けるものとする）。こうして計算された時間がＦ０である。この計算は、２，３の追加的複雑化を伴って、たとえ殺菌温度がTで一定に維持しないが時間ｔ中その値周辺で変動しても、当然に実行できる。数学的見地では、Ｆ０は、以下のように表現する：
【数１】
2004530513.tif 000001
ここでデルタｔ＝Tの測定間の時間間隔
T=時間ｔの殺菌産物の温度
Z=10に等しいと仮定される、温度係数。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】
容器１は、好ましい実施態様ではプラスチックバッグ１であり、空間中に３方向に伸長する。プラスチックバッグは本質的に幅ｗ、長さｌ、および厚さｔを有する。この文脈では、厚さｔは最も小さい値を有する。ゆえに、もしプラスチックバッグ１が支持体上で平らに横たわるならば（前記図１から見られる）、厚さｔは、支持体に対して垂直の伸長である。しかし、最も重要なのは、厚さｔが１５ｍｍより小さい値を有することである。バッグ１は可撓性であり、厚さｔは溶液がその内に充填されるとき、より高くなり、バッグ１の厚さｔは最大１５ｍｍになる。プラスチックバッグ１は好ましい容器１であるが、他の容器はまた可能である。それらはまた、本質的に幅ｗ、長さｌおよび厚さｔを有し得、ここで厚さｔは最小値を有する。容器の他の形態たとえば不規則形態はもちろん可能である。しかし容器の厚さｔがあり、それは容器１の空間中の伸張の最小値を有し、この厚さｔは、１５ｍｍよりも小さい。容器は可撓性または剛直である。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２０】
多糖類は例えば、グルコースアミノグリカンであり得、それらはヘパリン硫酸、コンドロイチン硫酸またはそれらの塩またはそれらの誘導体であり得る。
多糖類はまた、ヒアルロン酸、カルボキシメチルセルロース、キサンタン、アラビアゴム、デンプンまたはそれらの塩またはそれらの誘導体であり得る。発明にしたがって、多糖類の塩または誘導体をいつも使用し得、またたとえ明示的に述べられないにしても、意味する。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２４】
米国特許5,631,011で記載された、前記組成物でヒアルロン酸を使用するについての有利性は、ヒアルロン酸が組織処置組成物での粘性特性を改善する点である。例えば、水様流動性を有する粘着性成分は、にかわを取り扱うときの困難性につながる。溶液では、ヒアルロン酸は非常に延長されたランダムコイルのコンホメーションをとり、それは低濃度ですでに可撓性分子ネットワーク内にもつれ、それはヒアルロン酸塩／エステル興味深いレオロージー的特性を与える。さらに、ヒアルロン酸はまた、治療的および薬学的効果を有する。ヒアルロン酸を処置組成物で使用するとき、粘性は改善し、良好レベルに適応する。なお、より大体積の殺菌されたヒアルロン酸の必要性があり、その問題は本発明によって解決される。ヒアルロン酸が米国特許5631011で使用されるとき、Ｈｅａｌｏｎ（登録商標）が使用され、それは唯一の商業利用可能ヒアルロン酸であった。Ｈｅａｌｏｎ（登録商標）のための容器は非常に小さく約１ｍｌである。なおも、好適なタンパク質、例えばトロンビンとヒアルロン酸を混合するための興味があり、より大量の処理は、ヒアルロン酸をオートクレーブ処理し次いでトロンビンと混合するときになされうる。混合されたトロンビン及びヒアルロン酸は次いで更なる工程において、好適なサイズのより小さい容器に分配される。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２５】
ヒアルロン酸を好ましくは、タンパク質と混合する。特に好ましいタンパク質はトロンビンである。トロンビンはアルカリまたは酸性環境に感受性であり、したがってトロンビンに適合するオートクレーブ処理のためのバッファーのｐＨは約６ないし８である。補助塩の低含量がまた必要であり、塩化カルシウムをこの目的のために使用し得る。オートクレーブ処理前にヒアルロン酸を溶解するバッファーが、こうしてトロンビンに適合する。この環境はヒアルロン酸のため最適ではなく、それはヒアルロン酸の小分解につながる。しかし、分解はヒアルロン酸の使用のため許容可能である。オートクレーブ処理はまた、ヒアルロン酸を分解し、この分解はまた許容可能である。本発明に従うオートクレーブ処理は、これらの量で可能な最初のものである。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２８】
ヒアルロン酸塩／エステルを、バッファーに溶解し均質溶液が得られるまで混合する。これは約2日間かかりうる。溶液をプラスチックバッグ1に充填し、それをオートクレーブにおき、センサーをバッグの少なくとも1つに置く。以下の実施例で使用されるバッグは、１７０ｍｍの幅ｗ、１７０ｍｍの長さｌ、７ｍｍの厚さｔを有した。他の長さｌおよび幅ｗは可能であるが厚さはいつも１５ｍｍ以下である。オートクレーブ処理は、溶液を前決定温度まで最初に加熱することによって実施される。この温度は約１２１℃ないし１３０℃であり、溶液を約３ないし７分以内にこの温度に加熱する。オートクレーブの任意の型を使用し得、それはＦ０値を計算することのできるオートクレーブプログラムを有し、冷却をＦ０＞８のとき開始する。冷却はオートクレーブ冷却を意味する。図４では、オートクレーブの冷却はＦ０が約８のときに開始することが見られうる。溶液はまた同じ時間に冷却開始することがまた見られうる。溶液を加熱したら、それは前決定時間、約３ないし６分間に渡り前決定温度を維持する。バッグの膨張を防ぐため、逆圧を使用し得る。該逆圧は窒素ガスの手段によって実施しうる。加熱及び冷却サイクルはできるだけ短いべきであり、分解を回避する。Ｆ０値は最大、オートクレーブ工程中約１０ないし１２に達する。溶液を約６５ないし９０℃の温度に約５ないし１２分間にわたり冷却する。この冷却がオートクレーブの冷却とほぼ同時に開始することが図４に見られうる。全工程は約１１ないし２５分後に完了し、それは有利には短時間である。なおより好ましい間隔は１１ないし２０分である。時間限定は殺菌がもはや得られないときであり、これは微生物学的に確認すべきである。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３４】
特に定義しない場合、すべての技術的および特異的用語は、本発明の属する分野の当業者によって一般に理解されるのと同じ意味を有する。好適な方法及び材料は、いかに記載し、けれどもここに記載のものと類似または均等な方法及び材料をまた本発明の実務または試験で使用し得る。すべての刊行物、特許出願、特許および他のここに言及の引用は、引用によりその全体をここに含める。定職の場合は、定義を含む本明細書が制御する。加えて材料、方法及び例は例示のみであり、限定を意図しない。以下に本発明を添付実施例で説明し、それは発明の例示を意図し、保護範囲を限定しない。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３７】
６００ｍｌの溶液を作成し、均質溶液が得られるまで転倒撹拌した。これは室温で約２日間かかった。２つのプラスチックバッグを２５０ｍｌの溶液で充填し、その結果内容物を含むバッグの厚さは約７ｍｍであった。幅ｗは１７０ｍｍであり、長さｌは１７０ｍｍであった。バッグの名目値は、１ｌであった。センサーAをバッグのひとつに置き、オートクレーブ処理を開始した。逆圧を使用するファンオートクレーブ処理プログラムでオートクレーブ処理を実施し、冷却をＦ０>8のとき開始した。図４のカーブは、オートクレーブチャンバー中の温度、センサーAからのバッグ中の温度、および分における時間に対してプロットした計算されるＦ０を示す。チャンバーの加熱及び冷却についてのカーブはオートクレーブに依存する。安全の理由から、オートクレーブはバッグが８０℃に冷却されるまで閉じる。さもなくばバッグを、容器の温度が１００℃以下であったときに除去した。
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３９】
実施例２
この例は、本発明にしたがってオートクレーブされたヒアルロン酸塩／エステルの粘性を示し、Ｈｅａｌｏｎ（登録商標）の粘性は比較として示す。
ヒアルロン酸塩／エステルのオートクレーブ処理の２回の稼動を、異なる時間で行った。１８ｍｇ／ｍｌのヒアルロン酸塩／エステルを、以下のものを含む溶液に溶解した：
０．０５ＭのＡｒｇ、ＨＣｌ
０．０５ＭのＧｌｙ
０．０５ＭのＬｙｓ、ＨＣｌ
０．１６ＭのＮａＣｌ
０．０４ＭのＣａＣｌ２・２Ｈ２Ｏ
【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４２】
Ｈｅａｌｏｎ（登録商標）は医薬応用のための良好な粘性を有する。本発明にしたがってオートクレーブしたヒアルロン酸塩／エステルはＨｅａｌｏｎ（登録商標）と同じレベルの粘性を有し、それは許容可能レベルである。こうして、発明に従うオートクレーブ処理は、粘性およびヒアルロン酸塩／エステルにあまり影響しない。
【手続補正１４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４３】
大量オートクレーブ処理がヒアルロン酸塩／エステルについてなすために可能であり、粘性および分子量は許容可能レベルに減少することが２つの実施例によって示された。これは新規であり、というのは、ヒアルロン酸の高分解のため、ヒアルロン酸の大量オートクレーブは可能でなかったからである。本発明に従う新規方法は、今や可能であり、オートクレーブされたヒアルロン酸は広範囲の応用を有する。