【手続補正書】
【提出日】平成18年5月10日(2006.5.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００２】
（背景技術）
閉経後の女性の骨喪失を防止するためにホルモン代替療法を利用することは十分に前例のある方法である。通常のプロトコルは、エストロン、エストリオール、エチニルエストラジオールまたは天然源より単離した抱合エストロゲン（すなわち、Wyeth-Ayerstから由来のプレマリン（Premarin）（登録商標）抱合エストロゲン）配合の処方を用いてエストロゲンを補足する必要がある。ある患者においては、拮抗剤のないエストロゲン（エストロゲンをプロゲスチンと組み合わせて服用しない）の増殖作用が子宮組織において起こるため、その療法に対して禁忌を示す。この増殖は子宮内膜症および／または子宮内膜癌の危険性が増大することと関連している。拮抗剤のないエストロゲンの胸部組織に対する作用は、それほど明らかではないが、ある程度は関係している。骨の倹約効果を維持する一方で子宮および胸部における増殖作用を最小限にすることのできるエストロゲンに対する要求があるのは明らかである。特定の非ステロイド系抗エストロゲンが卵巣を切除したラット実験ならびにヒト臨床実験にて骨重量を維持することが明らかにされた。例えば、タモキシフェン（Tamoxifen）（デラウェア州、ウィルミントン、ゼネカ・ファーマシューティカルズ（Zeneca Pharmaceuticals）により、ノバデックス（Novadex）の商品名で市販されている、クエン酸タモキシフェン）は乳癌の治療に有用な緩和剤であり、ヒトの骨に対してエストロゲンアゴニスト様効果を発揮することが証明されている。しかしながら、このタモキシフェンはまた子宮において部分アゴニストであり、このことが懸念の原因である。ラロキシフェン（Raloxifene）、すなわち、ベンゾチオフェン抗エストロゲンが、骨を倹約する能力を維持しながら、卵巣を切除したラットにてタモキシフェンよりも少ない程度で子宮増殖を刺激することが明らかにされた。組織選択的エストロゲンについての適当な報文が、「Tissue-Selective Actions of Estrogen Analogs」、Bone Vol.１７、No.４、１９９５年１０月、１８１Ｓ−１９０Ｓに示されている。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００４】
米国特許第４８９４３７３号（Young）は、閉経となる徴候を治療し、骨粗鬆症を治療また予防するのに、エストロゲンの不在下で、クロミフェンおよびその異性体、クエン酸および誘導体を含む、抗エストロゲンの使用を教示する。米国特許第５５５２４０１号（Cullinanら）は、閉経後症候群、および子宮平滑筋腫に付随する種々の医学的適応症、子宮内膜症および動脈平滑筋増殖の治療に有用であるベンゾチオフェン化合物を記載し、その化合物はエストロゲンまたはプロゲスチンを含有していてもよい医薬処方に用いられる。米国特許第５６４６１３７号および第５５９１７５３号（共に、Blackらに付与）は、メドロキシプルゲステロン、ノルエチンドロンまたはノルエチノドレルあるいはその医薬上許容される塩から選択されるプロゲスチンと組み合わせた、ラロキセフィン型アリールベンゾチオフェン化合物の製剤を用いる骨粗鬆症の治療法を開示する。米国特許第５５５０１０７号（Labrie）は、抗エストロゲンを、アンドロゲン、プロゲスチン、性ステロイド形成、特に１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼおよびアロマターゼ活性の少なくとも１つの阻害剤、プロラクチン分泌の少なくとも１つの阻害剤、成長ホルモン分泌の１つの阻害剤、およびＡＣＴＨ分泌の１つの阻害剤からなる群より選択される少なくとも１つの化合物と組み合わせて、乳癌または子宮内膜癌を治療することからなる発明をクレームしている。米国特許第５６７２６０９号（Bryantら）は閉経後症候群を治療するのに有用なピリジン化合物、およびエストロゲンまたはプロゲスチンを含有する製剤を開示する。米国特許第５５３４５２７号（Blackら）は骨喪失の阻害におけるアロイルベンゾチオフェンおよびエストロゲンの使用を教示する。
図ＩおよびＩＩに示される、インデノインドールおよびベンゾカルバゾールは、本発明に記載されているような、インドールの窒素が側鎖を有するように記載された型の化合物を報告していない。Ger.Offen.、ＤＥ３８２１１４８Ａ１８９１２２８およびＷＯ９６／０３３７５には、本発明の基礎となる側鎖を有しない、または請求しない、インデノインドールおよびベンゾカルバゾールが記載されている。さらに、エストロゲン／抗エストロゲン活性を有するベンゾカルバゾールについての、Segallら、Eur.J.Med.Chem.、３０＃２ １６５−１６９（１９９５）を参照のこと。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２３】
混合型エストロゲンアゴニスト／アンタゴニストは、骨粗鬆症、前立腺肥大症、男性型禿頭症、卵巣癌、不妊症、乳癌、子宮内膜癌、心血管疾患、避妊、アルツハイマー病、認識減退および他のＣＮＳ障害を含む、エストロゲン過剰または欠乏から由来する多くの疾患、ならびにとりわけ、黒色腫、前立腺癌、結腸の癌、ＣＮＳ癌および子宮癌を含むある種の癌、の治療または予防に有用である。加えて、これらの化合物は、閉経後の女性のホルモン代替療法に、あるいはエストロゲン補足が効果的である他のエストロゲン欠乏の病態に用いることができる。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２７】
本発明の式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物は、コレステロールを下げ、骨喪失を妨げるなどの、エストロゲンアゴニストのように、あるいはエストロゲンアンタゴニストのように、作動する能力を有する組織選択的化合物である。したがって、１またはそれ以上のエストロゲンを含む本発明の処方中のこれらの化合物は、骨粗鬆症、前立腺肥大症、乳癌、子宮内過形成、子宮内癌、子宮内膜症、嚢胞性腺過形成、子宮過形成、子宮頚管過形成、良性前立腺過形成、心血管疾患、避妊、アルツハイマー病および黒色腫を含む、多くの疾患の治療に有用である。本発明のかかる処方はまた、性質上、内分泌疾患として類別される疾患を含め、過剰なグルココルチコイドから由来の疾患を含め、二次性骨粗鬆症から由来の骨喪失、上皮小体亢進症、甲状腺亢進症、性腺機能低下症、高プロリン血症および真性糖尿病を治療するのに用いることができる。骨喪失はまた、薬物誘発の、例えば、ヘパリン治療、アルコール使用、またはタバコ、バルビツレートもしくはコルチコステロイドの使用から由来するものであってもよい。薬物誘発の骨喪失はまた、ゴナドトロピン放出ホルモン（ＧｎＲＨまたはＬＨＲＨ）または合成ＧｎＲＨアンタゴニストまたはアゴニスト、例えば、商品名：ＬＵＰＲＯＮ（登録商標）の下でＴＡＰファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド（TAP Pharmaceuticals Inc.）より市販されている注射可能な酢酸ルイプロリド（leuprolide acetate）または商品名：Ｚｏｌａｄｅｘ（登録商標）の下でゼネカ・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド（Zeneca Pharmaceuticals Inc.）より市販されている酢酸ゴセレリンインプラントを用いる治療からも由来しうる。かかる骨喪失はまた、個々の、慢性腎障害、吸収不良症候群、肝疾患、慢性閉塞性肺疾患、慢性関節リウマチまたはサルコイドーシスの流動的でないことからも由来しうる。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２９】
エストラゲン代替療法（ＥＲＴ）はこれらの変化のいくつかを正常にし、特に心血管系に関連するもの（ＬＤＬの低下、ＨＤＬの上昇、心臓発作および卒中の危険性の減少）、骨格に関連するもの（骨重量の維持、骨折の危険の減少）および中枢神経系に関連するもの（顔面潮紅の頻度および重度の減少）を正常とする。生殖器が応答する一方で、すべてがすべて陽性というわけではない。陽性面では、膣乾燥が緩和される。しかしながら、陰性の子宮応答として、月経のような出血を伴う、肥大および増殖が挙げられる。肺もまた影響を受け、外部からのエストロゲン療法が乳癌の危険性の増加と相関関係にあるというデータもある。
近年、子宮を去勢していない女性に、エストロゲン単独では処方しないが、エストロゲンとプロゲスチンとを組み合わせて処方して子宮刺激を減少させている。子宮内膜癌の危険性はホルモン処理をしないレベルにまで減少するが、別のプロゲスチンの副作用のため、女性のホルモン代替療法に対する了承は減少している。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６４】
生物学的データ
インビトロのエストロゲン受容体結合アッセイ
受容体の調製
エストロゲン受容体を過剰に発現するＣＨＯ細胞を、ＤＭＥＭ＋１０％デキストランを被覆し、仔ウシ血清を除いたチャコールを入れた１５０ｍｍ2皿にて増殖させた。プレートをＰＢＳで２回、１０ｍＭトリス塩酸（ｐＨ７.４）、１ｍＭ ＥＤＴＡで１回洗浄した。表面を擦り落とすことで細胞を収穫し、ついでその細胞懸濁液を氷上に置いた。手で支える電動式組織粉砕機で、１０秒間２回粉砕して細胞を破壊した。粗調製物を１２０００ｇで２０分間遠心分離に付し、つづいて１０００００ｇで６０分間遠心させ、リボソーム不含サイトゾルを得た。そのサイトゾルを凍結させ、−８０℃で貯蔵した。サイトゾルの蛋白濃度を標準対照蛋白を用いるＢＣＡアッセイを用いて評価した。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６８】
２Ｘ ＶＩＴ ＥＲＥ感染アッセイ
細胞の維持および処置
ヒトエストロゲン受容体と安定してトランスフェクトさせたチャイニーズハムスター卵巣細胞（ＣＨＯ）を、ＤＭＥＭ＋１０％仔ウシ血清（ＦＢＳ）中に維持した。処理する４８時間前に、成長培地をフェノールレッドを欠くＤＭＥＭ＋１０％デキストランで被覆し、ＦＢＳを除いたチャコール（処理培地）と置換した。細胞を１ウェルに付き２００μＬの培地を含有する９６−ウェルプレートに５０００細胞／ウェルの密度でプレートした。