【手続補正書】
【提出日】平成17年11月29日(2005.11.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
目的のヌクレオチド配列を脊椎動物のゲノムに組み込む方法であって、
ａ）原形質膜を有する単離された初期段階胚を提供する工程；および
ｂ）該原形質膜を、目的のヌクレオチド配列を含む少なくとも第１のレンチウイルスベクターを含む組成物と接触させる工程、
を包含する、方法。
【請求項２】
請求項１に記載の方法であって、ここで、
ａ）前記単離された初期段階胚がさらに透明帯を含み、該透明帯および前記原形質膜が卵黄周囲腔を規定し；そして
ｂ）前記原形質膜との接触工程が、前記組成物の該卵黄周囲腔への導入工程を包含する、方法。
【請求項３】
請求項１に記載の方法であって、ここで、前記初期段階胚が受精卵母細胞である、方法。
【請求項４】
請求項１に記載の方法であって、ここで、前記初期段階胚が、２細胞期胚、４細胞期胚、８細胞期胚、および桑実胚からなる群から選択される、方法。
【請求項５】
請求項２に記載の方法であって、ここで、第１のレンチウイルスベクターを含む組成物が、微量注入によって卵黄周囲腔に導入される、方法。
【請求項６】
請求項３に記載の方法であって、ここで、前記目的の第１ヌクレオチド配列が受精卵母細胞のゲノムに組み込まれる、方法。
【請求項７】
請求項１に記載の方法であって、ここで、前記目的の第１のヌクレオチド配列がポリペプチドをコードする、方法。
【請求項８】
請求項１に記載の方法であって、ここで、第１のレンチウイルスベクターが、ヒト免疫不全ウイルスおよびサル免疫不全ウイルスからなる群から選択されるウイルスに由来する、方法。
【請求項９】
請求項１に記載の方法であって、ここで、第１のレンチウイルスベクターがｔｒａｎｓ−ウイルスベクターである、方法。
【請求項１０】
請求項９に記載の方法であって、ここで、前記ｔｒａｎｓ−ウイルスベクターが、ｔｒａｎｓ−レンチウイルスベクターまたはｔｒａｎｓ−レトロウイルスベクターである、方法。
【請求項１１】
請求項１に記載の方法であって、ここで、脊椎動物がマウス、ウサギ、ヒツジ、ウシ、鳥類、およびラットからなる群から選択される、方法。
【請求項１２】
請求項１に記載の方法であって、ここで、前記組成物がさらに、目的の第２のヌクレオチド配列を含む第２のレンチウイルスベクターを含む、方法。
【請求項１３】
請求項１２に記載の方法であって、ここで、第１および第２のレンチウイルスベクタ−が、ヒト免疫不全ウイルスおよびサル免疫不全ウイルスからなる群から選択されるウイルスに由来される、方法。
【請求項１４】
請求項１２に記載の方法であって、ここで、第１および第２のレンチウイルスベクターがｔｒａｎｓ−ウイルスベクターである、方法。
【請求項１５】
請求項１４に記載の方法であって、ここで、前記ｔｒａｎｓ−ウイルスベクターがｔｒａｎｓ−レンチウイルスベクターまたはｔｒａｎｓ−レトロウイルスベクターである、方法。
【請求項１６】
請求項１に記載の方法であって、ここで、前記方法がさらに、移植前の胚の形成を可能にする条件下で初期段階胚を培養する工程を包含する、方法。
【請求項１７】
請求項１６に記載の方法であって、さらに、前記移植前の胚をレシピエント脊椎動物へ移入し、そして前記移植前の胚を少なくとも１頭の脊椎動物に発生させる工程を包含する、方法。
【請求項１８】
請求項１６に記載の方法であって、ここで、
ａ）前記初期段階胚がさらに透明帯を含み、該透明帯および前記原形質膜が卵黄周囲腔を規定し；そして
ｂ）前記原形質膜との接触工程が、目的の第１のヌクレオチド配列を含む少なくとも前記第１のレンチウイルスベクターを含む組成物を、該卵黄周囲腔へ導入する工程を包含する、
方法。
【請求項１９】
請求項１６に記載の方法であって、ここで、前記初期段階胚が受精卵母細胞である、方法。
【請求項２０】
請求項１６に記載の方法であって、ここで、前記初期段階胚が２細胞胚、４細胞胚、８細胞胚、または桑実胚である、方法。
【請求項２１】
請求項１８に記載の方法であって、さらに前記移植前の胚をレシピエント脊椎動物へ移入し、そして前記移植前の胚を少なくとも１つの遺伝的に改変された脊椎動物に発生させる工程を包含する、方法。
【請求項２２】
請求項１８に記載の方法であって、ここで、第１のレンチウイルスベクターを含む組成物が、微量注入を介して卵黄周囲腔に導入される、方法。
【請求項２３】
請求項１９に記載の方法であって、ここで、前記目的の第１のヌクレオチド配列が受精卵母細胞のゲノムに組み込まれる、方法。
【請求項２４】
請求項１６に記載の方法であって、ここで、前記組成物がさらに、目的の第２のヌクレオチド配列を含む第２のレンチウイルスベクターを含む、方法。
【請求項２５】
請求項２４に記載の方法であって、さらに前記移植前の胚をレシピエント脊椎動物へ移入し、そして前記移植前の胚を少なくとも１つの遺伝的に改変された脊椎動物に発生させる工程を包含する、方法。
【請求項２６】
単離された初期段階胚および目的のヌクレオチド配列を含む、有効濃度の少なくとも第１のレンチウイルスベクターを含む組成物であり、ここで、該初期段階胚が非ヒト脊椎動物である、組成物。
【請求項２７】
請求項２６に記載の組成物であって、ここで、前記初期段階胚が受精卵母細胞である、組成物。
【請求項２８】
請求項２６に記載の組成物であって、ここで、前記初期段階胚が２細胞胚、４細胞胚、８細胞胚、または桑実胚である、組成物。
【請求項２９】
請求項２６に記載の組成物であって、ここで、
ａ）前記単離された初期段階胚がさらに透明帯を含み、該透明帯および前記原形質膜が卵黄周囲腔を規定し；そして
ｂ）前記レンチウイルスベクターが卵黄周囲腔にある、
組成物。
【請求項３０】
請求項２９に記載の組成物であって、ここで、前記目的の第１のヌクレオチド配列がポリペプチドをコードする、組成物。
【請求項３１】
請求項２６に記載の組成物であって、ここで、前記レンチウイルスベクターがヒト免疫不全ウイルスおよびサル免疫不全ウイルスからなる群から選択されるウイルスに由来する、組成物。
【請求項３２】
請求項２６に記載の組成物であって、ここで、前記レンチウイルスベクターがｔｒａｎｓ−ウイルスベクターである、組成物。
【請求項３３】
請求項３２に記載の組成物であって、ここで、前記ｔｒａｎｓ−ウイルスベクターが、ｔｒａｎｓ−レンチウイルスベクターまたはｔｒａｎｓ−レトロウイルスベクターである、組成物。
【請求項３４】
請求項２６に記載の組成物であって、ここで、非ヒト脊椎動物が、マウス、ウサギ、ヒツジ、ウシ、鳥類、およびラットからなる群から選択される、組成物。
【請求項３５】
請求項２６に記載の組成物であって、さらに目的の第２のヌクレオチド配列を含む、有効濃度の第２のレンチウイルスベクターを含む、組成物。
【請求項３６】
目的のヌクレオチド配列を脊椎動物のゲノムに組み込む方法であって；
ａ）原形質膜を有する単離された卵母細胞を提供する工程；および
ｂ）該原形質膜を、目的のヌクレオチド配列を含む少なくとも第１のレンチウイルスベクターを含む組成物と接触させる工程
を含む、方法。
【請求項３７】
請求項３６に記載の方法であって、ここで、
ａ）前記単離された卵母細胞がさらに透明帯を含み、該透明帯および前記原形質膜が卵黄周囲腔を規定し；そして
ｂ）前記原形質膜との接触工程が、さらに前記組成物を該卵黄周囲腔へ導入する工程を包含する、
方法。
【請求項３８】
単離された卵母細胞および目的のヌクレオチド配列を含む、有効濃度の少なくとも第１のレンチウイルスベクターを含む組成物であって、ここで、前記卵母細胞が脊椎動物からである、組成物。
【請求項３９】
請求項３８に記載の組成物であって、
ａ）前記単離された卵母細胞がさらに透明帯を含み、該透明帯および前記原形質膜が卵黄周囲腔を規定し；そして
ｂ）前記レンチウイルスベクターが卵黄周囲腔にある、
組成物。
【請求項４０】
目的のヌクレオチド配列を脊椎動物のゲノムに組み込む方法であって、
ａ）原形質膜を有する単離された胞胚を提供する工程；および
ｂ）該原形質膜と、目的のヌクレオチド配列を含む少なくとも第１のレンチウイルスベクターを含む組成物を接触させる工程
を包含する、方法。
【請求項４１】
請求項４０に記載の方法であって、ここで、前記レンチウイルスベクターが、ヒト免疫不全ウイルスおよびサル免疫不全ウイルスからなる群から選択されるウイルスに由来する、方法。
【請求項４２】
請求項４０に記載の方法であって、ここで、レンチウイルスベクターがｔｒａｎｓ−ウイルスベクターである、方法。
【請求項４３】
単離された胞胚および目的のヌクレオチド配列を含む、有効濃度の少なくとも第１のレンチウイルスベクターを含む組成物であって、ここで、該胞胚が非ヒト脊椎動物からである、組成物。
【請求項４４】
実質的に実施例に記載されたような、方法。