【手続補正書】
【提出日】平成18年7月12日(2006.7.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
１個または複数の脂質部分にコンジュゲートされたポリペプチドを含むリポペプチドであって、
（ｉ）前記ポリペプチドが、
（ａ）Ｔヘルパー細胞（Ｔｈ）エピトープのアミノ酸配列およびＢ細胞エピトープのアミノ酸配列（前記各アミノ酸配列は異なる）、ならびに
（ｂ）内部リジンまたは内部リジン類似体のε−アミノ基または末端側鎖基を介して前記脂質部分の各々が共有結合するための１個または複数の内部リジン残基または内部リジン類似体残基、
を含むアミノ酸配列を含み、
（ｉｉ）前記１個または複数の脂質部分の各々が、前記１個もしくは複数の内部リジン残基のε−アミノ基、または前記１個もしくは複数の内部リジン類似体残基の末端側鎖基に共有結合している、
上記リポペプチド。
【請求項２】
前記脂質が前記リジン残基のε−アミノ基に結合している、請求項１に記載のリポペプチド。
【請求項３】
脂質部分が結合している前記内部リジン残基が、前記Ｔｈエピトープと前記Ｂ細胞エピトープの間に位置する、請求項１または２に記載のリポペプチド。
【請求項４】
脂質部分が結合している前記内部リジン残基が、前記Ｔｈエピトープ内に位置する、請求項１または２に記載のリポペプチド。
【請求項５】
２個の脂質部分を含む、請求項１または２に記載のリポペプチド。
【請求項６】
脂質部分が結合している内部リジン残基が、前記Ｔｈエピトープと前記Ｂ細胞エピトープの間に位置し、脂質部分が結合している内部リジン残基が前記Ｔｈエピトープ内に位置する、請求項５に記載のリポペプチド。
【請求項７】
前記脂質部分が一般式（ＶＩＩ）：
【化１】
2006513140.tif 000001
（式中、
（ｉ）Ｘは、硫黄、酸素、ジスルフィド（−Ｓ−Ｓ−）、メチレン（−ＣＨ２−）およびアミノ（−ＮＨ−）からなる群から選択され、
（ｉｉ）ｍは、１または２の整数であり、
（ｉｉｉ）ｎは、０〜５の整数であり、
（ｉｖ）Ｒ１は、水素、カルボニル（−ＣＯ−）およびＲ’−ＣＯ−（式中、Ｒ’は、７〜２５個の炭素原子を有するアルキル、７〜２５個の炭素原子を有するアルケニル、および７〜２５個の炭素原子を有するアルキニルからなる群から選択され、前記アルキル基、アルケニル基またはアルキニル基は、場合によっては、ヒドロキシル基、アミノ基、オキソ基、アシル基またはシクロアルキル基で置換されていてもよい）からなる群から選択され、
（ｖ）Ｒ２は、Ｒ’−ＣＯ−Ｏ−、Ｒ’−Ｏ−、Ｒ’−Ｏ−ＣＯ−、Ｒ’−ＮＨ−ＣＯ−およびＲ’−ＣＯ−ＮＨ−（式中、Ｒ’は、７〜２５個の炭素原子を有するアルキル、７〜２５個の炭素原子を有するアルケニル、および７〜２５個の炭素原子を有するアルキニルからなる群から選択され、前記アルキル基、アルケニル基またはアルキニル基は、場合によっては、ヒドロキシル基、アミノ基、オキソ基、アシル基またはシクロアルキル基で置換されていてもよい）からなる群から選択され、
（ｖｉ）Ｒ３は、Ｒ’−ＣＯ−Ｏ−、Ｒ’−Ｏ−、Ｒ’−Ｏ−ＣＯ−、Ｒ’−ＮＨ−ＣＯ−およびＲ’−ＣＯ−ＮＨ−（式中、Ｒ’は、７〜２５個の炭素原子を有するアルキル、７〜２５個の炭素原子を有するアルケニル、および７〜２５個の炭素原子を有するアルキニルからなる群から選択され、前記アルキル基、アルケニル基またはアルキニル基は、場合によっては、ヒドロキシル基、アミノ基、オキソ基、アシル基またはシクロアルキル基で置換されていてもよい）からなる群から選択され、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の各々は同じでも異なっていてもよい。）
の構造を有する、請求項１から６のいずれか一項に記載のリポペプチド。
【請求項８】
Ｘが硫黄であり、ｍとｎがともに１であり、Ｒ１が水素およびＲ’−ＣＯ−（式中Ｒ’は７〜２５個の炭素原子を有するアルキル基である）からなる群から選択され、Ｒ２およびＲ３がＲ’−ＣＯ−Ｏ−、Ｒ’−Ｏ−、Ｒ’−Ｏ−ＣＯ−、Ｒ’−ＮＨ−ＣＯ−およびＲ’−ＣＯ−ＮＨ−（式中、Ｒ’は７〜２５個の炭素原子を有するアルキル基である）からなる群から選択される、請求項７に記載のリポペプチド。
【請求項９】
Ｒ’が、パルミトイル、ミリストイル、ステアロイル、ラウロイル、オクタノイルおよびデカノイルからなる群から選択される、請求項８に記載のリポペプチド。
【請求項１０】
前記脂質が、Ｐａｍ２Ｃｙｓ、Ｐａｍ３Ｃｙｓ、Ｓｔｅ２Ｃｙｓ、Ｌａｕ２ＣｙｓおよびＯｃｔ２Ｃｙｓからなる群から選択されるリポアミノ酸部分内に含まれる、請求項７から９のいずれか一項に記載のリポペプチド。
【請求項１１】
前記リポアミノ酸部分が、Ｐａｍ２Ｃｙｓ、Ｓｔｅ２Ｃｙｓ、Ｌａｕ２ＣｙｓおよびＯｃｔ２Ｃｙｓからなる群から選択される、請求項１０に記載のリポペプチド。
【請求項１２】
前記リポアミノ酸部分が、式（ＩＩ）：
【化２】
2006513140.tif 000002
の構造を有する、請求項１０に記載のリポペプチド。
【請求項１３】
前記脂質部分が、以下の一般式（ＶＩＩＩ）：
【化３】
2006513140.tif 000003
（式中、
（ｉ）Ｒ４は、（ｉ）約７〜約２５個の炭素原子からなるα−アシル脂肪酸残基、（ｉｉ）α−アルキル−β−ヒドロキシ脂肪酸残基、（ｉｉｉ）α−アルキル−β−ヒドロキシ脂肪酸残基のβ−ヒドロキシエステル、および（ｉｖ）リポアミノ酸残基、からなる群から選択され、
（ｉｉ）Ｒ５は、水素、またはアミノ酸残基の側鎖である。）
を有する、請求項１から６のいずれか一項に記載のリポペプチド。
【請求項１４】
前記脂質部分が前記ペプチド部分からスペーサーによって分離されている、請求項１から１３のいずれか一項に記載のリポペプチド。
【請求項１５】
前記スペーサーが、アルギニン、セリンまたは６−アミノヘキサン酸を含む、請求項１４に記載のリポペプチド。
【請求項１６】
前記スペーサーがセリンホモ二量体またはアルギニンホモ二量体からなる、請求項１４または１５に記載のリポペプチド。
【請求項１７】
前記内部リジンまたは内部リジン類似体が、免疫原性の低い合成アミノ酸配列内に入れ子状に置かれている、請求項１から１６のいずれか一項に記載のリポペプチド。
【請求項１８】
前記Ｔヘルパーエピトープが、インフルエンザウイルス赤血球凝集素のＴヘルパーエピトープ、またはイヌジステンパーウイルスＦ（ＣＤＶ−Ｆ）タンパク質のＴヘルパーエピトープである、請求項１から１７のいずれか一項に記載のリポペプチド。
【請求項１９】
前記インフルエンザウイルス赤血球凝集素のＴヘルパーエピトープが、配列番号１または配列番号１８で示されるアミノ酸配列を含む、請求項１８に記載のリポペプチド。
【請求項２０】
前記ＣＤＶ−Ｆタンパク質のＴヘルパーエピトープが、配列番号２４で示されるアミノ酸配列を含む、請求項１８に記載のリポペプチド。
【請求項２１】
前記Ｂ細胞エピトープが、ウイルスの免疫原性タンパク質、リポタンパク質または糖タンパク質に由来する、請求項１から２０のいずれか一項に記載のリポペプチド。
【請求項２２】
前記Ｂ細胞エピトープが、原核生物の免疫原性タンパク質、リポタンパク質または糖タンパク質に由来する、請求項１から２０のいずれか一項に記載のリポペプチド。
【請求項２３】
前記Ｂ細胞エピトープが、Ａ群ストレプトコッカスのＭタンパク質に由来する、請求項２２に記載のリポペプチド。
【請求項２４】
前記Ｂ細胞エピトープが、配列番号１０１で示されるアミノ酸配列を含む、請求項２３に記載のリポペプチド
【請求項２５】
前記Ｂ細胞エピトープが、真核生物の免疫原性タンパク質、リポタンパク質または糖タンパク質に由来する、請求項１から２０のいずれか一項に記載のリポペプチド。
【請求項２６】
前記真核生物が寄生生物である、請求項２５に記載のリポペプチド。
【請求項２７】
前記真核生物が哺乳動物である、請求項２５に記載のリポペプチド。
【請求項２８】
前記Ｂ細胞エピトープが、哺乳動物のペプチドホルモンに由来する、請求項２７に記載のリポペプチド。
【請求項２９】
前記ペプチドホルモンが、消化ホルモンまたは生殖ペプチドホルモンである、請求項２８に記載のリポペプチド。
【請求項３０】
前記消化ホルモンが、ガストリンまたはペンタガストリンである、請求項２９に記載のリポペプチド。
【請求項３１】
配列番号１０２または配列番号１１３で示されるアミノ酸配列を含む、請求項３０に記載のリポペプチド。
【請求項３２】
前記生殖ホルモンが、黄体形成ホルモン−放出ホルモン（ＬＨＲＨ）またはその断片である、請求項２９に記載のリポペプチド。
【請求項３３】
配列番号２または配列番号３または配列番号４で示されるアミノ酸配列を含む、請求項２６に記載のリポペプチド。
【請求項３４】
前記ポリペプチドが、
（ｘｖ）ＧＡＬＮＮＲＦＱＩＫＧＶＥＬＫＳＥＨＷＳＹＧＬＲＰＧ（配列番号５）；
（ｘｖｉ）ＧＡＬＮＮＲＦＱＩＫＧＶＥＬＫＳＫＥＨＷＳＹＧＬＲＰＧ（配列番号７）；
（ｘｖｉｉ）ＫＬＩＰＮＡＳＬＩＥＮＣＴＫＡＥＬＫＨＷＳＹＧＬＲＰＧ（配列番号９）；
（ｘｖｉｉｉ）ＫＬＩＰＮＡＳＬＩＥＮＣＴＫＡＥＬＫＧＬＲＰＧ（配列番号１３）；
（ｘｉｘ）ＫＬＩＰＮＡＳＬＩＥＮＣＴＫＡＥＬＨＷＳＹＧＬＲＰＧ（配列番号１０３）；
（ｘｘ）ＫＬＩＰＮＡＳＬＩＥＮＣＴＫＡＥＬＧＬＲＰＧ（配列番号１０４）；
（ｘｘｉ）ＫＬＩＰＮＡＳＬＩＥＮＣＴＫＡＥＬＫＱＡＥＤＫＶＫＡＳＲＥＡＫＫＱＶＥＫＡＬＥＱＬＥＤＫＶＫ（配列番号１０５）；
（ｘｘｉｉ）ＫＬＩＰＮＡＳＬＩＥＮＣＴＫＡＥＬＫＫＱＡＥＤＫＶＫＡＳＲＥＡＫＫＱＶＥＫＡＬＥＱＬＥＤＫＶＫ（配列番号１０６）；
（ｘｘｉｉｉ）ＧＡＬＮＮＲＦＱＩＫＧＶＥＬＫＳＫＱＡＥＤＫＶＫＡＳＲＥＡＫＫＱＶＥＫＡＬＥＱＬＥＤＫＶＫ（配列番号１０７）；
（ｘｘｉｖ）ＧＡＬＮＮＲＦＱＩＫＧＶＥＬＫＳＫＫＱＡＥＤＫＶＫＡＳＲＥＡＫＫＱＶＥＫＡＬＥＱＬＥＤＫＶＫ（配列番号１０８）；
（ｘｘｖ）ＫＬＩＰＮＡＳＬＩＥＮＣＴＫＡＥＬＧＷＭＤＦ（配列番号１０９）；
（ｘｘｖｉ）ＫＬＩＰＮＡＳＬＩＥＮＣＴＫＡＥＬＫＧＷＭＤＦ（配列番号１１０）；
（ｘｘｖｉｉ）ＧＡＬＮＮＲＦＱＩＫＧＶＥＬＫＳＧＷＭＤＦ（配列番号１１１）；および
（ｘｘｖｉｉｉ）ＧＡＬＮＮＲＦＱＩＫＧＶＥＬＫＳＫＧＷＭＤＦ（配列番号１１２）。
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むポリペプチド、
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１から３３のいずれか一項に記載のリポペプチド。
【請求項３５】
未成熟樹状細胞（ＤＣ）上でのＭＨＣクラスＩＩ分子の表面発現をアップレギュレート可能である、請求項１から３４のいずれか一項に記載のリポペプチド。
【請求項３６】
前記ＤＣがＤ１細胞である、請求項３５に記載のリポペプチド。
【請求項３７】
１個または複数の脂質部分にコンジュゲートされたポリペプチドを含むリポペプチドであって、
（ｉ）前記ポリペプチドが、
（ａ）Ｔヘルパー細胞（Ｔｈ）エピトープのアミノ酸配列およびＢ細胞エピトープのアミノ酸配列（前記各アミノ酸配列は異なる）、ならびに
（ｂ）１個または複数の内部リジン残基のε−アミノ基を介して前記脂質部分の各々が共有結合するための１個または複数の内部リジン残基、
を含むアミノ酸配列を含み、
（ｉｉ）前記１個または複数の脂質部分の各々が、前記１個または複数の内部リジン残基のε−アミノ基に共有結合しており、
（ｉｉｉ）前記リポペプチドが一般式（ＶＩ）：
【化４】
2006513140.tif 000004
（式中、
エピトープは、ＴヘルパーエピトープまたはＢ細胞エピトープであり、
Ａは、存在しても存在しなくてもよく、約１〜約６アミノ酸長のアミノ酸スペーサーからなり、
ｎは、１、２、３または４の整数であり、
Ｘは、ＮＨ、ＯおよびＳからなる群から選択される末端側鎖基であり、
Ｙは、存在しても存在しなくてもよく、約１〜約６アミノ酸長の、アルギニン、セリンまたは６−アミノヘキサン酸を含むスペーサーからなり、
Ｚは、Ｐａｍ２Ｃｙｓ、Ｐａｍ３Ｃｙｓ、Ｓｔｅ２Ｃｙｓ、Ｌａｕ２ＣｙｓおよびＯｃｔ２Ｃｙｓからなる群から選択されるリポアミノ酸部分である。）
を有する、上記リポペプチド。
【請求項３８】
Ａが存在しない、請求項３７に記載のリポペプチド。
【請求項３９】
前記Ｂ細胞エピトープが、配列番号２または配列番号３または配列番号４で示されるアミノ酸配列を含む、請求項３８に記載のリポペプチド。
【請求項４０】
（ｉ）前記Ｂ細胞エピトープが配列番号１０１で示されるアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）Ｙが存在し、かつセリンホモ二量体からなり、（ｉｉｉ）ＺがＰａｍ２Ｃｙｓからなる、請求項３８に記載のリポペプチド。
【請求項４１】
前記Ｔヘルパーエピトープが配列番号２４で示されるアミノ酸配列を含み、前記脂質部分が配列番号２４内のリジン残基のε−アミノ基を介して前記ポリペプチドに結合している、請求項４０に記載のリポペプチド。
【請求項４２】
前記脂質部分が、配列番号２４のＬｙｓ−１４を介して前記ポリペプチドに結合している、請求項４０に記載のリポペプチド。
【請求項４３】
（ｉ）前記Ｂ細胞エピトープが配列番号１０２で示されるアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）Ｙが存在し、かつセリンホモ二量体からなり、（ｉｉｉ）ＺがＰａｍ２Ｃｙｓからなる、請求項３８に記載のリポペプチド。
【請求項４４】
未成熟樹状細胞（ＤＣ）上のＭＨＣクラスＩＩ分子の表面発現をアップレギュレート可能である、請求項３７から４３のいずれか一項に記載のリポペプチド。
【請求項４５】
前記ＤＣがＤ１細胞である、請求項４４に記載のリポペプチド。
【請求項４６】
（ｉ）以下の（ａ）および（ｂ）：
（ａ）Ｔヘルパー細胞（Ｔｈ）エピトープのアミノ酸配列およびＢ細胞エピトープのアミノ酸配列（前記各アミノ酸配列は異なる）、
（ｂ）１個または複数の内部リジン残基または内部リジン類似体残基、
を含むアミノ酸配列を含むポリペプチドを製造するステップ、ならびに
（ｉｉ）前記１個または複数の脂質部分の各々を直接的または間接的に、前記１個もしくは複数の内部リジン残基のε−アミノ基、または前記１個もしくは複数の内部リジン類似体残基の末端側鎖基に共有結合させて、前記内部リジン残基のεアミノ基に結合した前記脂質部分を含む、または前記内部リジン類似体残基の末端側鎖基に結合した前記脂質部分を含むリポペプチドを製造するステップ、
を含む、リポペプチドを製造する方法。
【請求項４７】
スペーサーを前記リポアミノ酸のアミノ酸部分に付加するステップをさらに含む、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
前記ポリペプチドが、単一の内部リジンまたはリジン類似体残基とブロッキングされたＮ末端とを含むアミノ酸配列を有する、請求項４６または４７に記載の方法。
【請求項４９】
請求項１から４５のいずれか一項に記載のリポペプチドを含む、被験体中の抗原性Ｂ細胞エピトープに対する抗体の産生を誘発する組成物であって、前記抗原性Ｂ細胞エピトープに対する抗体の産生を誘発するのに十分な上記組成物。
【請求項５０】
高力価抗体の産生を誘発するステップを含む、請求項４９に記載の組成物。
【請求項５１】
前記抗原性Ｂ細胞エピトープが病原体に由来し、前記病原体に対する中和抗体を産生させるステップを含む、請求項４９または５０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５２】
前記抗原性Ｂ細胞エピトープに対するモノクローナル抗体を産生させるステップをさらに含む、請求項４９から５１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５３】
請求項１から２０、２５、２７から２９、３２、３４から３９、４４および４５のいずれか１項に記載のリポペプチドを含む、被験体において不妊を誘導する組成物であって、該組成物が、前記抗原性Ｂ細胞エピトープに対する液性免疫応答を誘発するのに十分な上記組成物。
【請求項５４】
前記被験体における卵形成、精子形成、受精、着床または胚発生を阻止するのに十分な前記Ｂ細胞エピトープに対する二次免疫応答を発生させる、請求項５３に記載の組成物。
【請求項５５】
抗体レベルが、免疫された雌性被験体の少なくとも単一生殖サイクルの間持続される、請求項５３または５４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５６】
請求項１から２０、２５、２７から２９、３２、３４から３９、４４および４５のいずれか一項に記載のリポペプチドを含む避妊薬であって、前記Ｂ細胞エピトープが生殖ホルモンまたはホルモン受容体に由来するものである、上記避妊薬。
【請求項５７】
請求項１から２０、２２から２４、３４から４２、４４及び４５のいずれか１項に記載のリポペプチドを含む、被験体中のＡ群ストレプトコッカス抗原に対する免疫応答を誘発する組成物であって、前記抗原性Ｂ細胞エピトープに対する液性免疫応答を誘発するのに十分な上記組成物。
【請求項５８】
Ａ群ストレプトコッカスによる感染の蔓延を防止し、かつ／またはそれに続くＡ群ストレプトコッカスへの暴露後の被験体の罹患率もしくは死亡率を低下させるのに十分な、前記Ｂ細胞エピトープに対する二次免疫応答を発生させる、請求項５７に記載の組成物。
【請求項５９】
請求項１から２０、２２から２４、３４から４２、４４および４５のいずれか一項に記載のリポペプチドを含むワクチンであって、前記Ｂ細胞エピトープがＡ群ストレプトコッカスのＭタンパク質に由来するものである、上記ワクチン。
【請求項６０】
請求項１から２０、２５、２７から３１、３４から３９及び４３から４５のいずれか１項に記載のポリペプチドを含む、被験体中のガストリンペプチドに対する免疫応答を誘発する組成物であって、前記抗原性Ｂ細胞エピトープに対する液性免疫応答を誘発するのに十分な上記組成物。
【請求項６１】
それを必要とする動物において胃酸分泌を阻害または遮断するのに十分な前記Ｂ細胞エピトープに対する二次免疫応答を発生させる、請求項６０に記載の組成物。
【請求項６２】
前記動物が、高ガストリン血症、ゾリンジャーエリソン症候群、胃潰瘍、十二指腸潰瘍およびガストリノーマからなる群から選択される症状に罹患している、請求項６１に記載の組成物。
【請求項６３】
請求項１から２０、２５、２７から３１、３４から３７および４３から４５のいずれか一項に記載のリポペプチドを含むワクチンであって、前記Ｂ細胞エピトープがガストリンポリペプチドに由来するものである、上記ワクチン。
【請求項６４】
前記抗体が、ＩｇＭ、ＩｇＡおよびＩｇＧからなる群から選択される免疫グロブリンを含む、請求項４９から５２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６５】
前記ＩｇＧが、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２a、ＩｇＧ２bおよびＩｇＧ３からなる群から選択される、請求項６４に記載の組成物。