【手続補正書】
【提出日】平成18年11月1日(2006.11.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１６６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１６６】
組み込まれた接着ペプチドを含む共役付加によって作製されたゲルとの、細胞の相互作用
共役付加ゲルはPEG-2500-3A、GCYKNRDCG及びペンダント型で挿入されたRGD含有ペプチド（GCGYGRGDSPG）で作製された。ゲルは、GCYKNRDCG中の0.1 gのPEG-2500-3A/ml及びスルフヒドリル基当たり1.1当量のアクリレートで作製された。ゲルは36時間以上、1％の抗生物質と抗真菌剤を含むダルベッコ改変イーグル培地（幾つかは血清なしの条件下でまた幾つかは10％ウシ胎仔血清を含む）で膨潤された。RGDペプチドがPEG-2500-3Aの12個のアクリレート当たり一つ組み込まれた時、（血清を含まない条件下での膨潤と血清を含む培地中での膨潤のいずれの場合も）ヒト包皮線維芽細胞（継代後8代目;トリプシン/EDTA継代）はゲルに接着した。播種から6時間後、（いずれの培地条件においても）細胞はゲルの表面に均一に分布し、播種された細胞の約50％が広がった。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１８７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１８７】
光重合化によってゲルが形成される共役付加によって挿入されたペプチドを含むPEGゲルと細胞の相互作用
PEGゲルはペプチドGCGYGRGDSPGを用いて、上述のように調製された。大部分の細胞はGRGDSPG配列を認識する受容体をもっており、細胞は、ペプチドを含む固定化されたRGDを示している表面と相互作用すると考えられる。共役付加によって組み込まれたペプチドを含むPEGゲルと細胞との細胞相互作用を試験するためにゲルが形成され、ヒト臍静脈内皮細胞はゲルに播種された。表面で細胞がペプチドと相互作用していることを示す、表面上の細胞の形の変化が観察された。形の変化は広がりと呼ばれ、表面での球状から平面状及び多面体状の細胞の形の変化のことを指す。ペプチドのないPEGゲル上では細胞の広がりが起こらず、また、GCGYGRGDSPGペプチドの特異性は、同じアミノ酸残基を含むが異なった配列であり、生物学的な活性を持たないGCGYGRDGSPG（配列番号:68）ペプチドを含むゲルとの比較によって確認された。細胞がゲル上に1 mm2当たり400細胞の割合で播種され、面積当たりの広がった細胞の数を数回にわたって計測した（図6参照）。実験は、通常の細胞培養培地を用いて行われた。共役付加反応を用いてゲル中に組み込まれたペプチドGCGYGRGDSPGを含むゲルの上だけで、細胞は広がることができた。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１９１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１９１】
実施例10：共役付加によって組み込まれたペプチドを用いた細胞及び組織に対する標的化PEGトリアクリレート微粒子
実施例7で示されたように微粒子はPEGトリアクリレート及びペプチドGCYdKNdRDCG（配列番号:66）との共役付加架橋によって形成されるが、GCGYGRGDSPG 1に対してGCYdKNdRDCG 8の割合で、付加的にペプチドGCGYGRGDSPGも反応混合物に含まれる。生物活性なペプチドが、生物活性なペプチドを含まない微粒子と比較して、細胞の表面に微粒子を局在化させる能力を試験される。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２２５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２２５】
本明細書内の全ての出版物及び特許は、それぞれ個々の出版物または特許が特異的かつ独立して参照として組み入れられることが示されるのと同程度に、本明細書において参照として組み入れられる。
【図面の簡単な説明】
【図１】  システインに隣接するアミノ酸残基の変更が、アクリル酸エステル（PEG-アクリル酸エステル）への共役付加速度に及ぼす影響に関するグラフである。
【図２】  PEGジアクリル酸エステル上のアクリル酸エステルへのチオール（システイン上の）付加の反応速度を調べるためのモデルとして用いた共役付加反応の概略図である。
【図３】  チオール（システイン上の）とPEGジアクリル酸エステルとの間の付加反応に対するpHの影響を示したグラフである。
【図４】  さまざまな量のPEGDAが、試薬1モル当たりの吸光度である平均吸光係数（すなわち、吸光度をPEGDA濃度とシステイン濃度の合計で割ったもの；この合計は2.5×10３Mに保たれる）に及ぼす影響に関するグラフである。
【図５】  共役不飽和物の部位の近傍にある基の立体的影響が、チオール（システイン上の）とアクリル酸エステル、クロトン酸エステルまたはジメチルアクリル酸エステルとの反応およびそれによって官能性を付与されたPEGに及ぼす影響を示したグラフである。
【図６】  RGDペプチド配列を本発明のヒドロゲルに組み込むことが、細胞の接着および伸展に及ぼす影響を示したグラフである。
【図７】  ヒドロゲル包埋コラーゲン(ヘリスタット（Helistat))スポンジからのミオグロビンの放出を示したグラフである。第14日に材料にプラスミンを添加しており、これによってプラスミン感受性ヒドロゲルからのミオグロビンの放出量が増したことに注目されたい。
【図８】  水系で調製した75％固体ゲルの歪み-応力曲線である。ゲルはペンタエリトリトールテトラキス（3-メルカプトプロピオン酸）およびPEGジアクリル酸エステル570を用いてリン酸緩衝生理食塩水、pH 9.0中に75％固体として調製した。圧縮荷重を加えた場合、ゲルは約37％の変形および2MPaの極限強さを示した。
【図９】  PEGジアクリル酸エステル570と入れ換えに種々の量のペンタエリトリトールトリアクリル酸エステルを加えた水系で調製した75％固体ゲルの歪み-応力曲線である。ゲルはペンタエリトリトールテトラキス（3-メルカプトプロピオン酸）およびPEGジアクリル酸エステル570およびペンタエリトリトールトリアクリル酸エステルを用いてリン酸緩衝生理食塩水、pH 9.0中にて75％固体として調製した。このゲルにより、疎水性トリアクリル酸エステルの含有量によってゲルの剛性が操作されることが示された。
【図１０】  ゲルへの無機粒子または界面活性剤の添加がゲルの極限強さに及ぼす影響を示したグラフである。水系で75％固体（75％固体ゲル）として調製したゲルを、BaSO4 10％を添加した場合、または界面活性剤ソルビタンモノオレイン酸エステル(エマルジョン(Emulsion))1％を添加した場合と比べた。あらかじめ反応させた前駆物質から得られたゲルと、ペンタエリトリトールテトラキス（3-メルカプトプロピオン酸）およびPEGジアクリル酸エステル570前駆物質（あらかじめ反応させた前駆物質）によって得られたゲルとの比較も行った。
【図１１】  ゲルへの無機粒子または界面活性剤の添加がゲルの剛性に及ぼす影響を示したグラフである。水系で75％固体（75％固体ゲル）として調製したゲルを、BaSO4 10％を添加した場合、または界面活性剤ソルビタンモノオレイン酸エステル（Emulsion）1％を添加した場合と比べた。あらかじめ反応させた前駆物質から得られたゲルと、ペンタエリトリトールテトラキス（3-メルカプトプロピオン酸）およびPEGジアクリル酸エステル570前駆物質（あらかじめ反応させた前駆物質）によって得られたゲルとの比較も行った。
【図１２】  フュームドシリカ（14nm）を加えた水系で調製したゲルの歪み-応力曲線である。ゲルはペンタエリトリトールテトラキス（3-メルカプトプロピオン酸）およびPEGジアクリル酸エステル570を用い、フュームドシリカ粒子（14nm）で補強した上でリン酸緩衝生理食塩水、pH 9.0中にて調製した。
【図１３】  N-メチルピロリドン/PEG 400共溶媒中で調製した10％固体ゲルの歪み-応力曲線である。ゲルはペンタエリトリトールテトラキス（3-メルカプトプロピオン酸）およびPEGジアクリル酸エステル570を用い、10％固体としてN-メチルピロリドン/PEG 400中にて調製した。
【図１４】  ペンタエリトリトールテトラキス（3-メルカプトプロピオン酸）およびPEGジアクリル酸エステル570の弾性率および複素弾性率（G'およびG''）を示している。pH 9.0のリン酸緩衝生理食塩水は加えずに、ペンタエリトリトールテトラキス（3-メルカプトプロピオン酸）およびPEGジアクリル酸エステル570を1 SHに対して1 C=Cの比で混合した。この混合物をボルテックスした後に、弾性率および複素弾性率をレオロジーにより時間的に決定した。
【図１５】  pH 9.0のリン酸緩衝生理食塩水で活性したペンタエリトリトールテトラキス（3-メルカプトプロピオン酸）およびPEGジアクリル酸エステル570の37℃での弾性率および複素弾性率（G'およびG''）を示している。ペンタエリトリトールテトラキス（3-メルカプトプロピオン酸）およびPEGジアクリル酸エステル570を1 SHに対して1 C=Cの比で混合し、pH 9.0のリン酸緩衝生理食塩水を加えた。混合物をボルテックスした後に弾性率（◆）および複素弾性率（■）をレオロジーにより時間的に決定した。
【配列表】
SEQUENCE LISTING
<110> Eidgenossische Technische Hochschule Zurich
Universitat Zurich
<120> BIOMATERIALS FORMED BY NUCLEOPHILIC ADDITION REACTION TO CONJUGATED
UNSATURATED GROUPS
<130> CE-A0130
<140> PCT/US00/02608      
<141> 2000-02-01  
<150> 60/118,093          
<151> 1999-02-01  
<160> 74
<170> FastSEQ for Windows Version 4.0
<210> 1
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<221> VARIANT        
<222> (1)...(10)
<223> Xaa=any amino acid except Cys
<400> 1
Tyr Cys Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Cys Tyr
1               5                  10  
<210> 2
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<221> VARIANT        
<222> (1)...(8)
<223> Xaa=any amino acid except Cys
<400> 2
Cys Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Cys
1               5              
<210> 3
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<221> VARIANT        
<222> (1)...(6)
<223> Xaa=any amino acid except Cys
<400> 3
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
1               5      
<210> 4
<211> 13
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<221> VARIANT        
<222> (1)...(13)
<223> Xaa=any amino acid except Cys
<400> 4
Cys Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Cys Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Cys
1               5                  10              
<210> 5
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<221> VARIANT        
<222> (1)...(7)
<223> Xaa=any amino acid except Cys
<400> 5
Cys Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Cys
1               5          
<210> 6
<211> 13
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<221> VARIANT        
<222> (2)...(6)
<223> Xaa=any amino acid except Cys or Tyr
<221> VARIANT        
<222> (8)...(12)
<223> Xaa=any amino acid except Cys or Tyr
<221> MOD_RES        
<222> 1
<223> Xaa=acetylated Tyrosine
<400> 6
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Tyr Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Tyr
1               5                  10              
<210> 7
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<221> VARIANT        
<222> (1)...(5)
<223> Xaa=any amino acid except Cys or Tyr
<400> 7
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
1               5  
<210> 8
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 8
Gly Pro Arg Val Val Glu
1               5      
<210> 9
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 9
Asn Asn Arg Asp Asn Thr
1               5      
<210> 10
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 10
Tyr Asn Arg Val Ser Glu
1               5      
<210> 11
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 11
Gln Met Arg Met Glu Leu
1               5      
<210> 12
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 12
Gly Phe Arg His Arg His
1               5      
<210> 13
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 13
Gly Tyr Arg Ala Arg Pro
1               5      
<210> 14
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 14
Tyr Gln Lys Asn Asn Lys
1               5      
<210> 15
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 15
Leu Ile Lys Met Lys Pro
1               5      
<210> 16
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 16
Asn Phe Lys Ser Gln Leu
1               5      
<210> 17
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 17
Glu Trp Lys Ala Leu Thr
1               5      
<210> 18
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 18
Ser Tyr Lys Met Ala Asp
1               5      
<210> 19
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 19
Thr Gln Lys Lys Val Glu
1               5      
<210> 20
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 20
Arg Gln Lys Gln Val Lys
1               5      
<210> 21
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 21
Gln Val Lys Asp Asn Glu
1               5      
<210> 22
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 22
Leu Ile Lys Ala Ile Gln
1               5      
<210> 23
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 23
Thr Leu Lys Ser Arg Lys
1               5      
<210> 24
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 24
Ser Arg Lys Met Leu Glu
1               5      
<210> 25
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens, Bos taurus and Gallus
gallus
<400> 25
Pro Gln Gly Ile Ala Gly
1               5      
<210> 26
<211> 6
<212> PRT
<213> Bos taurus
<400> 26
Pro Gln Gly Leu Leu Gly
1               5      
<210> 27
<211> 6
<212> PRT
<213> Gallus gallus
<400> 27
Pro Gln Gly Ile Leu Gly
1               5      
<210> 28
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Gallus gallus and Homo sapiens
<400> 28
Pro Gln Gly Leu Ala Gly
1               5      
<210> 29
<211> 6
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 29
Pro Leu Gly Ile Ala Gly
1               5      
<210> 30
<211> 6
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 30
Pro Leu Gly Leu Trp Ala
1               5      
<210> 31
<211> 6
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 31
Pro Leu Gly Leu Ala Gly
1               5      
<210> 32
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 32
Gly Pro Gln Gly Ile Ala Gly Gln
1               5              
<210> 33
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 33
Gly Pro Val Gly Ile Ala Gly Gln
1               5              
<210> 34
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 34
Gly Pro Gln Gly Val Ala Gly Gln
1               5              
<210> 35
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 35
Gly Pro Gln Gly Arg Ala Gly Gln
1               5              
<210> 36
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 36
Gly Pro Gln Gly Ile Ala Ser Gln
1               5              
<210> 37
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 37
Gly Pro Gln Gly Ile Phe Gly Gln
1               5              
<210> 38
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 38
Gly Pro Gln Gly Ile Trp Gly Gln
1               5              
<210> 39
<211> 4
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 39
Arg Gly Asp Ser
1              
<210> 40
<211> 4
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 40
Arg Glu Asp Val
1              
<210> 41
<211> 4
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 41
Arg Gly Asp Val
1              
<210> 42
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 42
Leu Arg Gly Asp Asn
1               5  
<210> 43
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 43
Ile Lys Val Ala Val
1               5  
<210> 44
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 44
Tyr Ile Gly Ser Arg
1               5  
<210> 45
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 45
Pro Asp Ser Gly Arg
1               5  
<210> 46
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 46
Arg Asn Ile Ala Glu Ile Ile Lys Asp Ala
1               5                  10  
<210> 47
<211> 4
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 47
Arg Gly Asp Thr
1              
<210> 48
<211> 4
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 48
Asp Gly Glu Ala
1              
<210> 49
<211> 4
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<221> VARIANT        
<222> (1)...(4)
<223> Xaa=any amino acid
<400> 49
Val Thr Xaa Gly
1              
<210> 50
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<221> VARIANT        
<222> 1,4,6
<223> Xaa=Met, Leu, Ala, Ile, Val, Phe, or Pro
<221> VARIANT        
<222> 2,3,5
<223> Xaa=Arg or Lys
<400> 50
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
1               5      
<210> 51
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 51
Pro Arg Arg Ala Arg Val
1               5      
<210> 52
<211> 19
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 52
Tyr Glu Lys Pro Gly Ser Pro Pro Arg Glu Val Val Pro Arg Pro Arg
1               5                  10                  15      
Pro Gly Val
<210> 53
<211> 28
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 53
Arg Pro Ser Leu Ala Lys Lys Gln Arg Phe Arg His Arg Asn Arg Lys
1               5                  10                  15      
Gly Tyr Arg Ser Gln Arg Gly His Ser Arg Gly Arg
20                  25              
<210> 54
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 54
Arg Ile Gln Asn Leu Leu Lys Ile Thr Asn Leu Arg Ile Lys Phe Val
1               5                  10                  15      
Lys
<210> 55
<211> 14
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<221> MOD_RES        
<222> 2
<223> Xaa=bAla
<400> 55
Lys Xaa Phe Ala Lys Leu Ala Ala Arg Leu Tyr Arg Lys Ala
1               5                  10                  
<210> 56
<211> 14
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 56
Lys His Lys Gly Arg Asp Val Ile Leu Lys Lys Asp Val Arg
1               5                  10                  
<210> 57
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 57
Tyr Lys Lys Ile Ile Lys Lys Leu
1               5              
<210> 58
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 58
Gly Cys Tyr Lys Asn Arg Asp Cys Gly
1               5                  
<210> 59
<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 59
Gly Cys Asp Asp Gly Pro Gln Gly Ile Trp Gly Gln Asp Asp Cys Gly
1               5                  10                  15      
<210> 60
<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 60
Gly Cys Arg Asp Gly Pro Gln Gly Ile Trp Gly Gln Asp Arg Cys Gly
1               5                  10                  15      
<210> 61
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 61
Gly Cys Gly Tyr Gly Arg Gly Asp Ser Pro Gly
1               5                  10      
<210> 62
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<221> MOD_RES        
<222> (1)...(10)
<223> Xaa at position 1 is acetylated Gly.  Xaa at
position 10 is amidated proline.
<400> 62
Xaa Cys Gly Tyr Gly Arg Gly Asp Ser Xaa
1               5                  10  
<210> 63
<211> 13
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 63
Gly Asp Gly Ser Gly Tyr Gly Arg Gly Asp Ser Pro Gly
1               5                  10              
<210> 64
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 64
Gly Cys Gly Tyr Gly Arg Gly Asp Ser
1               5                  
<210> 65
<211> 14
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 65
Gly Lys Lys Lys Lys Gly Cys Tyr Lys Asn Arg Asp Cys Gly
1               5                  10                  
<210> 66
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<221> VARIANT        
<222> (1)...(9)
<223> Xaa at position 4 is D-Lys.  Xaa at position 6 is
D-Arg.
<400> 66
Gly Cys Tyr Xaa Asn Xaa Asp Cys Gly
1               5                  
<210> 67
<211> 13
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 67
Gly Cys Cys Gly His His His His His Gly Cys Cys Gly
1               5                  10              
<210> 68
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 68
Gly Cys Gly Tyr Gly Arg Asp Gly Ser Pro Gly
1               5                  10      
<210> 69
<211> 156
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 69
Met Gly Ser Ser His His His His His His Ser Ser Gly Leu Val Pro
1               5                  10                  15      
Arg Gly Ser His Met Lys Asp Pro Lys Arg Leu Tyr Arg Ser Arg Lys
20                  25                  30          
Leu Pro Val Glu Leu Glu Ser Ser Ser His Pro Ile Phe His Arg Gly
35                  40                  45              
Glu Phe Ser Val Cys Asp Ser Val Ser Val Trp Val Gly Asp Lys Thr
50                  55                  60                  
Thr Ala Thr Asp Ile Lys Gly Lys Glu Val Met Val Leu Gly Glu Val
65                  70                  75                  80  
Asn Ile Asn Asn Ser Val Phe Lys Gln Tyr Phe Phe Glu Thr Lys Cys
85                  90                  95      
Arg Asp Pro Asn Pro Val Asp Ser Gly Cys Arg Gly Ile Asp Ser Lys
100                 105                 110         
His Trp Asn Ser Tyr Cys Thr Thr Thr His Thr Phe Val Lys Ala Leu
115                 120                 125             
Thr Met Asp Gly Lys Gln Ala Ala Trp Arg Phe Ile Arg Ile Asp Thr
130                 135                 140                 
Ala Cys Val Cys Val Leu Ser Arg Lys Ala Val Arg
145                 150                 155     
<210> 70
<211> 432
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<400> 70
gaattcccat ggcatatgaa agacccgaaa cgtctgtacc gttctcgtaa actgcccgtg 60
gaactcgaga gctcttccca cccgattttc catcgtggcg agttctccgt gtgtgactct 120
gtctctgtat gggtaggcga taaaaccact gccactgata tcaaaggcaa agaggtgatg 180
gtgctgggag aagtaaacat taacaactct gtattcaaac agtacttctt cgaaactaag 240
tgccgtgacc cgaacccggt agactctggg tgtcgcggca tcgattctaa acactggaac 300
tcttactgca ccactactca cactttcgtt aaagcgttga ctatggatgg taaacaggct 360
gcctggcgtt tcatccgtat cgatactgca tgcgtgtgtg tactgtcccg taaagctgtt 420
cgttaaggat cc                                                     432
<210> 71
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<221> MOD_RES        
<222> 5
<223> Xaa=bAla
<400> 71
Gly Cys Gly Lys Xaa Phe Ala Lys Leu Ala Ala Arg Leu Tyr Arg Lys
1               5                  10                  15      
Ala
<210> 72
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Based on Homo sapiens
<221> VARIANT        
<222> (1)...(5)
<223> Xaa at position 1 is any amino acid containing or
modified with a thiol group.  Xaa at positions 2,
3, and 4 is any amino acid.  Xaa at position 5 is
any amino acid modified with a drug.
<400> 72
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
1               5  
<210> 73
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> based on Homo sapiens
<400> 73
Gly Lys Lys Lys Lys
1               5  
<210> 74
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> based on Homo sapiens
<400> 74
Gly Arg Gly Asp Ser Pro Gly
1               5