【手続補正書】
【提出日】平成18年7月19日(2006.7.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
羊膜から単離された胎盤幹細胞を含む組成物であって、ｃ−ｋｉｔ、Ｔｈｙ−１、Ｏｃｔ−４，ＳＯＸ２、ＳＳＥＡ−１、ＳＳＥＡ−３、ＳＳＥＡ−４、ＴＲＡ１−６０、及びＴＲＡ１−８１から成る群から選定される少なくとも１つのマーカーを発現する細胞の富化された、前記組成物。
【請求項２】
羊膜上皮細胞から単離され、且つｃ−ｋｉｔ、Ｔｈｙ−１、Ｏｃｔ−４，ＳＯＸ２、ＳＳＥＡ−１、ＳＳＥＡ−３、ＳＳＥＡ−４、ＴＲＡ１−６０、及びＴＲＡ１−８１から成る群から選定される少なくとも１つのマーカーを発現する細胞の富化された、胎盤幹細胞を含む組成物。
【請求項３】
羊膜間葉から単離され、且つＯｃｔ−４又はＳＯＸ２を発現する細胞の富化された、胎盤幹細胞を含む組成物。
【請求項４】
１つ以上のサイトケラチンを発現する細胞の富化された、請求項１〜３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５】
前記細胞が、ＡＥ１、ＡＥ３、サイトケラチン８、サイトケラチン１８、及びサイトケラチン１９から成る群から選定される１つ以上のサイトケラチンを発現する、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
前記細胞が、ＣＤ３４発現について陰性である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項７】
前記幹細胞が、治療用タンパク質を発現するために操作される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項８】
肝疾患、血管疾患、神経組織疾患又は膵疾患を有す対象を治療するための有効量で、請求項１〜７のいずれか１項に記載の組成物を含む、医薬組成物。
【請求項９】
ｃ−ｋｉｔ、Ｔｈｙ−１、Ｏｃｔ−４，ＳＯＸ２、ＳＳＥＡ−１、ＳＳＥＡ−３、ＳＳＥＡ−４、ＴＲＡ１−６０、及びＴＲＡ１−８１から成る群から選定される少なくとも１つのマーカーを発現する羊膜から単離された細胞を選定するステップを含んで成る、請求項１に記載の富化された組成物を作製する方法。
【請求項１０】
前記羊膜から単離された細胞が、羊膜上皮から単離される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記羊膜から単離された細胞が、羊膜間葉から単離され、且つＯｃｔ−４及びＳＯＸ２から成る群から選定される少なくとも１つのマーカーを発現するために選定される、請求項９に記載の方法。
【請求項１２】
前記選定が、ｃ−ｋｉｔ、Ｔｈｙ−１、Ｏｃｔ−４，ＳＯＸ２、ＳＳＥＡ−１、ＳＳＥＡ−３、ＳＳＥＡ−４、ＴＲＡ１−６０、及びＴＲＡ１−８１から成る群から選定される少なくとも１つのマーカーに対する抗体を使用する、請求項９に記載の方法。
【請求項１３】
請求項１〜７のいずれか１項に記載の幹細胞を、ＥＧＦ、ＴＧＦ−α、もしくはデキサメタゾン、又はそれらの組合せを適切な量で含む培地中で、該幹細胞が肝細胞へ分化するために十分な時間培養することを含んで成る肝細胞を作製する方法。
【請求項１４】
アルブミン、ＣＹＰ３Ａ４、Ａ１ＡＴ、ＨＦＮ１、ＨＦＮ４及びＣ／ＥＢＰ−αから成る群から選択される少なくとも１つのマーカーを発現する、請求項１３に記載の方法によって得られる肝細胞。
【請求項１５】
請求項１３に記載の方法によって得られる肝細胞を、肝疾患を有する対象を治療するための有効量で含む医薬組成物。
【請求項１６】
検査薬が肝細胞に対して毒性であるか否かを決定する方法であって、該細胞に対する毒性効果を検出するのに十分な時間、請求項１３に記載の方法によって得られた肝細胞を該検査薬と接触させ、そして該肝細胞に対する毒性効果を決定することを含んで成る方法。
【請求項１７】
検査薬の代謝産物を決定する方法であって、該検査薬が代謝されるのに十分な時間、請求項１３に記載の方法により得られた肝細胞を該検査薬と接触させ、そして代謝産物の存在を検出することを含んで成る方法。
【請求項１８】
血管内皮細胞を作製する方法であって、請求項１〜７のいずれか１項に記載の幹細胞を、基質を覆ったマトリゲル上で、該幹細胞が血管内皮細胞へ分化するために十分な時間培養することを含んで成る方法。
【請求項１９】
請求項１８に記載の方法によって得られる血管上皮細胞を、血管性疾患を有する対象を治療するための有効量で含む医薬組成物。
【請求項２０】
検査薬が血管内皮細胞に対して毒性であるか否かを決定する方法であって、該細胞に対する毒性効果を検出するのに十分な時間、請求項１８に記載の方法によって得られた血管内皮細胞を該検査薬と接触させ、そして該血管内皮細胞に対する毒性効果を決定することを含んで成る方法。
【請求項２１】
検査薬の代謝産物を決定する方法であって、該検査薬が代謝されるのに十分な時間、請求項１８に記載の方法により得られた血管内皮細胞を該検査薬と接触させ、そして代謝産物の存在を検出することを含んで成る方法。
【請求項２２】
膵細胞を作製する方法であって、請求項１〜７のいずれか１項に記載の幹細胞を、基質を覆ったマトリゲル上で、デキサメタゾン及びＩＴＳを適切な量で含む培地中で、該幹細胞が膵細胞へ分化するために十分な時間培養することを含んで成る方法。
【請求項２３】
前記細胞が、Ｐａｘ６、Ｐｄｘ１及びインスリンから成る群から選定される少なくとも１つのマーカーを発現する、請求項２２に記載の方法によって得られる膵細胞。
【請求項２４】
請求項２２に記載の方法によって得られる膵細胞を、膵疾患を有する対象を治療するための有効量で含む医薬組成物。
【請求項２５】
検査薬が膵細胞に対して毒性であるか否かを決定する方法であって、該細胞に対する毒性効果を検出するのに十分な時間、請求項２２に記載の方法によって得られた膵細胞を該検査薬と接触させ、そして該膵細胞に対する毒性効果を決定することを含んで成る方法。
【請求項２６】
検査薬の代謝産物を決定する方法であって、該検査薬が代謝されるのに十分な時間、請求項２２に記載の方法により得られた膵細胞を該検査薬と接触させ、そして代謝産物の存在を検出することを含んで成る方法。
【請求項２７】
神経組織細胞を作製する方法であって、請求項１〜７のいずれか１項に記載の幹細胞を、基質を覆ったマトリゲル上で、ＦＧＦ−４を適切な量で含む培地中で、該幹細胞が神経組織細胞へ分化するために十分な時間培養することを含んで成る方法。
【請求項２８】
前記細胞が、ＧＦＡＰ、ＦＬＴ１、ＣＮＰ、及びβチューブリンIII から成る群から選定される少なくとも１つのマーカーを発現する、請求項２７に記載の方法によって得られる神経組織細胞。
【請求項２９】
請求項２７に記載の方法によって得られる神経組織細胞を、神経疾患を有する対象を治療するための有効量で含む医薬組成物。
【請求項３０】
検査薬が神経組織細胞に対して毒性であるか否かを決定する方法であって、該細胞に対する毒性効果を検出するのに十分な時間、請求項２７に記載の方法によって得られた神経組織細胞を該検査薬と接触させ、そして該神経組織細胞に対する毒性効果を決定することを含んで成る方法。
【請求項３１】
検査薬の代謝産物を決定する方法であって、該検査薬が代謝されるのに十分な時間、請求項２７に記載の方法により得られた神経組織細胞を該検査薬と接触させ、そして代謝産物の存在を検出することを含んで成る方法。
【請求項３２】
動物臓器をヒト化する方法であって、請求項１〜７のいずれか１項に記載の胎盤幹細胞組成物を動物臓器に移植し、該幹細胞が動物臓器を再生及び再増殖させてヒト化臓器を生産する方法。
【請求項３３】
前記動物臓器が、移植前に未変性(native)細胞が涸渇している、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記臓器が、肝臓、膵臓、及び脳から成る群から選定される、請求項３２に記載の方法。
【請求項３５】
前記臓器が肝臓であり、そして前記胎盤幹細胞が脾臓に投与されることによって移植される、請求項３２に記載の方法。
【請求項３６】
請求項３２に記載の方法によって得られたヒト化臓器。