【手続補正書】
【提出日】平成18年5月10日(2006.5.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
治療を必要とする患者の癌を治療するための医薬の製造におけるEphA2抗体の使用であって、前記EphA2抗体が、EphA2アゴニスト抗体、EphA2癌細胞表現型阻害抗体、露出EphA2エピトープ抗体、または3×10-3s-1未満のKoffでEphA2と結合する抗体である、上記使用。
【請求項２】
前記EphA2抗体の投与が、未治療癌細胞におけるEphA2リン酸化のレベルに比して癌細胞におけるEphA2リン酸化を増大させる、請求項1に記載の使用。
【請求項３】
前記EphA2抗体の投与が、未治療癌細胞におけるEphA2発現のレベルに比して癌細胞におけるEphA2発現を低減させる、請求項1に記載の使用。
【請求項４】
前記EphA2抗体が、軟寒天中でのコロニー形成あるいは三次元基底膜または細胞外マトリックス調製物中での管状ネットワーク形成を阻害する、請求項1に記載の使用。
【請求項５】
前記EphA2抗体が、現状の軟寒天中でのコロニー形成または基底膜もしくは細胞外マトリックス調製物中での管状ネットワーク形成を低減させる、請求項1に記載の使用。
【請求項６】
前記低減が、アポトーシスまたはネクローシスによって起こる、請求項5に記載の使用。
【請求項７】
前記EphA2抗体が、細胞-細胞接触していない細胞で発現した場合にEphA2と結合する、請求項1に記載の使用。
【請求項８】
前記EphA2抗体が、そのリガンドと安定に相互作用することができないEphA2と結合する、請求項1に記載の使用。
【請求項９】
前記EphA2抗体が、そのリガンドと結合していないEphA2と結合する、請求項1に記載の使用。
【請求項１０】
前記EphA2抗体が、3×10-3s-1未満のKoffでEphA2と結合する、請求項1に記載の使用。
【請求項１１】
前記癌が上皮細胞起源である、請求項1に記載の使用。
【請求項１２】
前記癌が、前記癌細胞の組織型を有する非癌細胞に比してEphA2を過剰発現する細胞を含む、請求項1に記載の使用。
【請求項１３】
前記癌が、皮膚、肺、大腸、乳房、前立腺、膀胱または膵臓の癌であり、あるいは腎細胞癌または黒色腫である、請求項1に記載の使用。
【請求項１４】
前記癌が転移癌である、請求項1に記載の使用。
【請求項１５】
前記EphA2抗体がモノクローナル抗体である、請求項1に記載の使用。
【請求項１６】
前記EphA2抗体が、Eph099B-102.147、Eph099B-208.261、Eph099B-210.248、またはEph099B-233.152である、請求項1に記載の使用。
【請求項１７】
前記EphA2抗体が、Eph099B-102.147、Eph099B-208.261、Eph099B-210.248、またはEph099B-233.152とEphA2結合について競合する、請求項1に記載の使用。
【請求項１８】
前記EphA2抗体がヒト化されている、請求項1に記載の使用。
【請求項１９】
前記EphA2抗体が、ヒト化したEph099B-102.147、Eph099B-208.261、Eph099B-210.248、またはEph099B-233.152である、請求項1に記載の使用。
【請求項２０】
前記EphA2抗体がヒト抗体である、請求項1に記載の使用。
【請求項２１】
該医薬が、EphA2抗体ではない抗癌治療と併用して投与される、請求項1に記載の使用。
【請求項２２】
前記追加の癌治療が、化学療法、生物学的療法、免疫療法、放射線療法、ホルモン療法、および手術からなる群から選択される、請求項21に記載の使用。
【請求項２３】
前記生物学的療法が、細胞-フィブロネクチン結合またはフィブロネクチン発現を低減させる薬剤を投与することを含む、請求項22に記載の使用。
【請求項２４】
アゴニスト抗体、EphA2癌細胞表現型阻害抗体、露出EphA2エピトープ抗体、または3×10-3s-1未満のKoffでEphA2と結合する抗体である治療有効量のEphA2抗体;および製薬上許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項２５】
前記EphA2抗体が、Eph099B-102.147、Eph099B-208.261、Eph099B-210.248、またはEph099B-233.152である、請求項24の医薬組成物。
【請求項２６】
前記EphA2抗体がEphA2との結合について、Eph099B-102.147、Eph099B-208.261、Eph099B-210.248、またはEph099B-233.152と競合する、請求項24の医薬組成物。
【請求項２７】
前記EphA2抗体がモノクローナル抗体である、請求項24の医薬組成物。
【請求項２８】
前記EphA2抗体がヒト化されている、請求項24の医薬組成物。
【請求項２９】
前記EphA2抗体がヒト抗体である、請求項24の医薬組成物。
【請求項３０】
前記EphA2抗体が、ヒト化したEph099B-102.147、Eph099B-208.261、Eph099B-210.248、またはEph099B-233.152である、請求項24の医薬組成物。
【請求項３１】
EphA2抗体ではない抗癌剤を含む、請求項24の医薬組成物。
【請求項３２】
前記抗癌剤が、化学療法薬、放射線療法薬、ホルモン治療薬、生物学的治療薬、または免疫治療薬である、請求項31に記載の医薬組成物。
【請求項３３】
その結合がEphA2の少なくとも1種の活性に作用する、EphA2と特異的に結合する単離抗体。
【請求項３４】
前記EphA2の活性がEphA2リン酸化またはEphA2分解である、請求項33に記載の単離抗体。
【請求項３５】
その結合が癌細胞表現型を阻害する、EphA2と特異的に結合する単離抗体。
【請求項３６】
前記結合が、癌細胞の軟寒天中でのコロニー形成または三次元基底膜もしくは細胞外マトリックス調製物中での管状ネットワーク形成を阻害する、請求項35に記載の単離抗体。
【請求項３７】
前記結合が、癌細胞の軟寒天中でのコロニー形成または三次元基底膜もしくは細胞外マトリックス調製物中での管状ネットワーク形成を低減させる、請求項35に記載の単離抗体。
【請求項３８】
前記低減が、癌細胞のネクローシスまたはアポトーシスによって引き起こされる、請求項37に記載の単離抗体。
【請求項３９】
その結合が、EphA2が細胞-細胞接触していないかまたはエフリンA1リガンドと結合していない場合にのみ起こる、EphA2と特異的に結合する単離抗体。
【請求項４０】
その結合が3×10-3s-1未満のKoffを有する、EphA2と特異的に結合する単離抗体。
【請求項４１】
Koff速度が10-1s-1未満である、請求項40に記載の単離抗体。
【請求項４２】
モノクローナル抗体である、請求項33、35、39、または40のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項４３】
前記抗体がヒト化されている、請求項33、35、39、または40のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項４４】
前記抗体がヒト抗体である、請求項33、35、39、または40のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項４５】
前記抗体が誘導体である、請求項33、35、39、または40のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項４６】
誘導体ではない抗体と比較した場合にin vivo半減期が増大している、請求項45に記載の単離抗体。
【請求項４７】
Eph099B-102.147、Eph099B-208.261、Eph099B210.248、またはEph099B-233.152である抗体。
【請求項４８】
請求項33、35、39、40、または47のいずれか一項に記載の抗体を産生する細胞系。
【請求項４９】
受託番号PTA-4572、PTA-4573、またはPTA-4574を有するアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクションに寄託されているハイブリドーマによって産生される抗体。
【請求項５０】
受託番号PTA-4572、PTA-4573、またはPTA-4574を有するアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクションに寄託されているハイブリドーマ。
【請求項５１】
配列番号1のアミノ酸配列を含む可変軽鎖および配列番号5のアミノ酸配列を含む可変重鎖を含むEphA2抗体。
【請求項５２】
配列番号17のアミノ酸配列を含む可変軽鎖および配列番号21のアミノ酸配列を含む可変重鎖を含む抗体。
【請求項５３】
EphA2と免疫特異的に結合する、配列番号2のアミノ酸配列を含むVL CDR1;配列番号3のアミノ酸配列を含むVL CDR2;配列番号4のアミノ酸配列を含むVL CDR3;配列番号6のアミノ酸配列を含むVH CDR1;配列番号7のアミノ酸配列を含むVH CDR2;および配列番号8のアミノ酸配列を含むVH CDR3を含むEphA2抗体。
【請求項５４】
EphA2と免疫特異的に結合する、配列番号18のアミノ酸配列を含むVL CDR1;配列番号19のアミノ酸配列を含むVL CDR2;配列番号20のアミノ酸配列を含むVL CDR3;配列番号22のアミノ酸配列を含むVH CDR1;配列番号23のアミノ酸配列を含むVH CDR2;および配列番号24のアミノ酸配列を含むVH CDR3を含むEphA2抗体。
【請求項５５】
1種または複数のCDRにある1、2、3、4、または5つの変異を有し、EphA2と免疫特異的に結合する、請求項53または54に記載のEphA2抗体。
【請求項５６】
ヒト重鎖フレームワーク領域およびヒト軽鎖フレームワーク領域を含む請求項53または54に記載のEphA2抗体。
【請求項５７】
前記フレームワーク領域にある1、2、3、4、または5つの変異を有し、EphA2と免疫特異的に結合する、請求項56に記載のEphA2抗体。
【請求項５８】
定常領域を含む請求項53または54に記載のEphA2抗体。
【請求項５９】
定常領域を含む請求項56に記載のEphA2抗体。
【請求項６０】
前記定常領域がヒトのものである、請求項58に記載のEphA2抗体。
【請求項６１】
前記定常領域がヒトのものである、請求項59に記載のEphA2抗体。
【請求項６２】
請求項53または54に記載のEphA2抗体の軽鎖可変ドメインまたは重鎖可変ドメインをコードするヌクレオチド配列を含む単離核酸。
【請求項６３】
請求項62の核酸を含むベクター。
【請求項６４】
請求項63のベクターを含む宿主細胞。
【請求項６５】
EphA2アゴニスト抗体を同定する方法であって、
a)EphA2を発現する細胞と、EphA2と特異的に結合する抗体とを、抗体-エピトープ結合に適した条件下で接触させ;および
b)前記細胞中のEphA2のホスホチロシン含有量を決定する
ことを含み、
前記抗体と接触していないEphA2発現細胞に対する前記細胞中のEphA2のホスホチロシン含有量の増大の検出により、前記抗体がEphA2アゴニスト抗体であることを示す方法。
【請求項６６】
EphA2アゴニスト抗体を同定する方法であって、
a)EphA2を発現する細胞と、EphA2と特異的に結合する抗体とを、抗体-エピトープ結合に適した条件下で接触させ;および
b)前記細胞中のEphA2タンパク質の発現レベルを決定する
ことを含み、
前記抗体と接触していないEphA2発現細胞に対する前記細胞中のEphA2タンパク質の発現レベルの低下の検出により、前記抗体がEphA2アゴニスト抗体であることを示す方法。
【請求項６７】
癌細胞表現型を阻害するEphA2抗体を同定する方法であって、
a)軟寒天または三次元基底膜もしくは細胞外マトリックス調製物中で培養したEphA2を発現する細胞と、EphA2と特異的に結合する抗体とを、抗体-エピトープ結合に適した条件下で接触させ;および
b)前記細胞の軟寒天でのコロニー形成または前記三次元基底膜もしくは細胞外マトリックス調製物中での管状ネットワーク形成の能力を決定する
ことを含み、
前記抗体と接触していないEphA2発現細胞に対する前記細胞のコロニー形成または管状ネットワーク形成能力の低減の検出により、前記抗体が癌細胞表現型を阻害するEphA2抗体であることを示す方法。
【請求項６８】
癌細胞表現型を有する癌細胞を死滅させるEphA2抗体を同定する方法であって、
a)軟寒天中でコロニーを形成するかまたは三次元基底膜もしくは細胞外マトリックス調製物中で管状ネットワークを形成したEphA2を発現する癌細胞と、EphA2と特異的に結合する抗体とを、抗体-エピトープ結合に適した条件下で接触させること;および
b)前記コロニーまたは管状ネットワークの低減を決定すること
を含み、
前記抗体と接触していないEphA2発現細胞のコロニーまたは管状ネットワークに対する前記コロニーまたは管状ネットワークの低減の検出により、前記抗体が癌細胞表現型を有する癌細胞を死滅させるEphA2抗体であることを示す方法。
【請求項６９】
癌細胞上に露出したEphA2エピトープと優先的に結合するEphA2抗体を同定する方法であって、
a)第1のグループの細胞が非癌細胞であり第2のグループの細胞が癌細胞である、EphA2を発現する2つのグループの細胞で接触を行うこと;および
b)前記抗体のEphA2との結合能力を決定すること
を含み、
前記第2群の細胞で抗体結合が検出され、前記第1群の細胞では検出されないことにより、前記抗体が、癌細胞上で露出したEphA2エピトープと優先的に結合するEphA2抗体であることが示される方法。
【請求項７０】
前記決定に免疫蛍光顕微鏡検査法またはフロー・サイトメトリーを使用する、請求項69に記載の方法。
【請求項７１】
治療を必要とする患者の癌を治療するための医薬の製造におけるEphA2アンチセンス核酸分子の使用。
【請求項７２】
前記アンチセンス分子が配列番号49、またはその断片を含む、請求項71に記載の使用。
【請求項７３】
治療を必要とする患者の第1の治療に完全または部分的に不応性の癌を治療するための医薬の製造におけるEphA2抗体の使用であって、該医薬が第2の治療としての投与のためのものであり、前記EphA2抗体が、EphA2アゴニスト抗体、EphA2癌細胞表現型阻害抗体、露出EphA2エピトープ抗体、または3×10-3s-1未満のKoffでEphA2と結合する抗体である、上記使用。
【請求項７４】
前記第1の治療が、化学療法、ホルモン療法、生物学的療法、または放射線療法である、請求項73に記載の使用。
【請求項７５】
前記ホルモン療法がタモキシフェン投与を含む、請求項74に記載の使用。
【請求項７６】
前記第2の治療が、化学療法、ホルモン療法、生物学的療法、または放射線療法の付与を含む、請求項73に記載の使用。
【請求項７７】
前記第1の治療を前記第2の治療と同時に付与する、請求項73に記載の使用。
【請求項７８】
治療を必要とする患者の非癌過剰増殖性細胞疾患または障害を治療するための医薬の製造におけるEphA2抗体の使用であって、前記EphA2抗体が、EphA2アゴニスト抗体、EphA2癌細胞表現型阻害抗体、露出EphA2エピトープ抗体、または3×10-3s-1未満のKoffでEphA2と結合する抗体である、上記使用。
【請求項７９】
前記EphA2抗体の投与が、未治療非癌過剰増殖性細胞におけるEphA2リン酸化のレベルに比して非癌過剰増殖性細胞におけるEphA2リン酸化を増大させる、請求項78に記載の使用。
【請求項８０】
前記EphA2抗体の投与が、未治療非癌過剰増殖性細胞におけるEphA2発現のレベルに比して非癌過剰増殖性細胞におけるEphA2発現を低減させる、請求項78に記載の使用。
【請求項８１】
前記非癌過剰増殖性細胞が上皮細胞である、請求項78に記載の使用。
【請求項８２】
前記患者が、同じ組織型を有する非癌非過剰増殖性細胞に比してEphA2を過剰発現する非癌過剰増殖性細胞を有する、請求項78に記載の使用。
【請求項８３】
前記非癌過剰増殖性細胞疾患または障害が、喘息、乾癬、炎症性腸疾患、平滑筋再狭窄、内皮再狭窄、クローン病、または慢性閉塞性肺疾患である、請求項78に記載の使用。
【請求項８４】
前記EphA2抗体がモノクローナル抗体である、請求項78に記載の使用。
【請求項８５】
前記EphA2抗体が、Eph099B-102.147、Eph099B-208.261、Eph099B-210.248、またはEph099B-233.152である、請求項78に記載の使用。
【請求項８６】
前記EphA2抗体が、Eph099B-102.147、Eph099B-208.261、Eph099B-210.248、またはEph099B-233.152とEphA2結合について競合する、請求項78に記載の使用。
【請求項８７】
前記EphA2抗体がヒト化されている、請求項78に記載の使用。
【請求項８８】
前記EphA2抗体が、Eph099B-102.147、Eph099B-208.261、Eph099B-210.248、またはEph099B-233.152である、請求項78に記載の使用。
【請求項８９】
前記EphA2抗体がヒト抗体である、請求項78に記載の使用。
【請求項９０】
癌にかかっていることが分かっている、または疑わしい患者の癌のための療法の有効性を診断、予知またはモニターする方法であって、
a)前記患者の細胞と、EphA2アゴニスト抗体、EphA2癌細胞表現型阻害抗体、露出EphA2エピトープ抗体、または3×10-3s-1未満のKoffでEphA2と結合する抗体であるEphA2抗体とを、抗体-EphA2結合に適した条件下で接触させ;また
b)前記細胞とのEphA2抗体結合を測定する
ことを含み、
対照よりも高いEphA2抗体結合レベルの検出により、患者が癌にかかっていることを示す方法。
【請求項９１】
前記細胞が、全血、喀痰、尿、血清または腫瘍細胞組織の細針吸引液由来である、請求項90に記載の方法。
【請求項９２】
前記細胞が、前記患者由来の凍結もしくは固定組織または細胞である、請求項90に記載の方法。
【請求項９３】
前記検出が、前記患者における前記EphA2抗体結合の画像化を含む、請求項90に記載の方法。
【請求項９４】
前記患者が転移癌を有する、請求項90に記載の方法。
【請求項９５】
前記EphA2抗体が露出EphA2エピトープ抗体である、請求項90に記載の方法。