(57)【要約】【課題】  本発明の目的は、薬物の抗炎症作用および抗酸化作用の効果を判定する簡便な方法を提供するものである。【解決手段】  本発明は、測定試料中のＨＤＬリポ蛋白中αトコフェロール、ＬＤＬリポ蛋白中αトコフェロール、ＨＤＬリポ蛋白中γトコフェロール又はＨＤＬリポ蛋白中γ／αトコフェロール比率による薬物の抗酸化効果の評価方法に関する。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
測定試料中のＨＤＬリポ蛋白中αトコフェロール、ＬＤＬリポ蛋白中αトコフェロール、ＨＤＬリポ蛋白中γトコフェロール又はＨＤＬリポ蛋白中γ／αトコフェロール比率による薬物の抗酸化効果の評価方法。
【請求項２】
薬物が血圧降下剤、脂質降下剤又は抗血小板剤であることを特徴とする請求項１に記載の評価方法。
【請求項３】
健常者のＨＤＬリポ蛋白中αトコフェロール、ＬＤＬリポ蛋白中αトコフェロール、ＨＤＬリポ蛋白中γトコフェロール又はＨＤＬリポ蛋白中γ／αトコフェロール比率の測定値の９５％信頼区間の上限値と比較して薬物を投与した測定試料中の同測定項目が高値を示した場合に薬物の抗酸化効果が認められたとする請求項１に記載の評価方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、血液中のリポ蛋白中のトコフェロール量を用いた薬物の抗酸化効果を評価する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
血管内皮細胞の炎症が生じると、活性酸素と呼ばれる物質が産生される。活性酸素は、タンパク質や遺伝子に損傷を与えたり、酵素活性を低下させるため、動脈硬化や臓器の機能低下の原因となる。
【０００３】
抗炎症作用や抗酸化作用を有する薬物が投与されると、これらの活性酸素が減少させることができ、動脈硬化や臓器の機能低下を防止できる。これらのことから、抗炎症作用や抗酸化作用を有する薬物の効果を評価することは重要である。
【０００４】
血液中のビタミンＥ（主成分：αトコフェロール、γトコフェロール）は、おもにリポ蛋白中に含まれており、抗酸化作用を測定するために、血液中のαトコフェロール、γトコフェロールの測定が実施されている（例えば、特許文献１参照）。しかしながら、リポ蛋白（主にＨＤＬとＬＤＬがあげられる）は種類によりその働きが大きく異なる。血液中の総αトコフェロール、又は総γトコフェロールを測定するだけでは、十分な薬物の抗酸化効果を評価することができなかった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２０１３−８３４７９号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の目的は、薬物の抗炎症作用および抗酸化作用の効果を判定する簡便な方法を提供するものである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、鋭意検討を行った結果、血液中のリポ蛋白中のトコフェロール量により、薬物の抗酸化効果を評価できることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００８】
以下、本発明について詳細に説明する。
【０００９】
本発明は、測定試料中のＨＤＬリポ蛋白中αトコフェロール、ＬＤＬリポ蛋白中αトコフェロール、ＨＤＬリポ蛋白中γトコフェロール又はＨＤＬリポ蛋白中γ／αトコフェロール比率による薬物の抗酸化効果の評価方法に関するものである。
【００１０】
本発明において、ＬＤＬリポ蛋白中αトコフェロール、ＨＤＬリポ蛋白中αトコフェロール、ＬＤＬリポ蛋白中γトコフェロール、ＨＤＬリポ蛋白中γトコフェロールの測定は、例えば特許文献１に記載の方法を用いることが可能である。
【００１１】
ビタミンＥ類であるαトコフェロール、γトコフェロールは血中の活性酸素により分解を受けるので、抗酸化作用がある一定以上有する薬物が存在すれば、健常者の値に比べて高い値を示すようになるため、リポ蛋白中のトコフェロール量を測定することで、薬物の抗酸化効果を評価することが可能となる。また、γトコフェロールは、αトコフェロールに比べて、活性酸素による分解を受けやすいことが知られており、γ／αトコフェロール比率は、薬物の抗酸化効果を評価する上でより有効な基準となる。
【００１２】
本発明における薬物としては、例えば、血圧降下剤、脂質降下剤、抗血小板剤が挙げられる。
【００１３】
また、本発明において、健常者のＨＤＬリポ蛋白中αトコフェロール、ＬＤＬリポ蛋白中αトコフェロール、ＨＤＬリポ蛋白中γトコフェロール又はＨＤＬリポ蛋白中γ／αトコフェロール比率の測定値の９５％信頼区間の上限値と比較して薬物を投与した測定試料中の同測定項目が高値を示した場合に薬物の抗酸化効果が認められたと判定することも可能である。
【発明の効果】
【００１４】
本発明は、血液中のリポ蛋白中のトコフェロール数値により、薬物の抗酸化効果を簡便に評価することを可能とした。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】脂質異常症患者と健常者のＨＤＬリポ蛋白中のαトコフェロールを示したものである。
【図２】脂質異常症患者と健常者のＬＤＬリポ蛋白中のαトコフェロールを示したものである。
【図３】脂質異常症患者と健常者のＨＤＬリポ蛋白中のγトコフェロールを示したものである。
【図４】脂質異常症患者と健常者のＬＤＬリポ蛋白中のγトコフェロールを示したものである。
【図５】脂質異常症患者と健常者のＨＤＬリポ蛋白中のγ／αトコフェロールのモル比率を示したものである。
【図６】脂質異常症患者と健常者のＬＤＬリポ蛋白中のγ／αトコフェロールのモル比率を示したものである。
【実施例】
【００１６】
脂質異常症患者１５０名、健常者３８名の血清試料について、ＬＤＬリポ蛋白中αトコフェロール、ＨＤＬリポ蛋白中αトコフェロール、ＬＤＬリポ蛋白中γトコフェロール、ＨＤＬリポ蛋白中γトコフェロールを測定した。これらの測定方法は特許文献１の方法を用いた。
【００１７】
別途、積水メディカルの直接法の試薬でＨＤＬコレステロール、ＬＤＬコレステロールを測定した。ＨＤＬコレステロールの値から、ＨＤＬコレステロール当りのＨＤＬリポ蛋白中αトコフェロール、ＨＤＬリポ蛋白中γトコフェロールを算出した。また、ＬＤＬコレステロールの値から、ＬＤＬコレステロール当りのＬＤＬリポ蛋白中αトコフェロール、ＬＤＬリポ蛋白中γトコフェロールを算出した。
【００１８】
脂質異常症患者と健常者のＨＤＬリポ蛋白中αトコフェロールを比べると、有意差を持って、健常者が高値を示していることが表１から分かる。しかしながら、図１を見ると、脂質異常症患者において、健常者の９５％信頼区間の上限値６．９３ｍｍｏｌ／ｍｏｌ−ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌに比べて、高値を示す検体が存在している。これは、投与されている薬物の抗酸化作用を示していることを意味する。また、健常者の９５％信頼区間の下限値３．９７ｍｍｏｌ／ｍｏｌ−ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌに比べて、低値を示す検体も存在している。これは、病態の重篤化により投与した薬物の抗酸化作用が不十分であることが推測される。
【００１９】
【表１】
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脂質異常症患者と健常者のＬＤＬリポ蛋白中αトコフェロールを比べると、有意差はないことが表２から分かる。図２を見ると、脂質異常症患者において、健常者の９５％信頼区間の上限値４．９４ｍｍｏｌ／ｍｏｌ−ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌに比べて、高値を示す検体が存在している。また、健常者の９５％信頼区間の下限値２．４３ｍｍｏｌ／ｍｏｌ−ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌに比べて、低値を示す検体も存在している。これは、病態の重篤化により投与した薬物の抗酸化作用が不十分であることが推測される。
【００２０】
【表２】
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脂質異常症患者と健常者のＨＤＬリポ蛋白中γトコフェロールを比べると、有意差はないことが表３から分かる。図３を見ると、脂質異常症患者において、健常者の９５％信頼区間の上限値０．９２３ｍｍｏｌ／ｍｏｌ−ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌに比べて、高値を示す検体が存在している。また、健常者の９５％信頼区間の下限値０．３６２ｍｍｏｌ／ｍｏｌ−ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌに比べて、低値を示す検体も存在している。これは、病態の重篤化により投与した薬物の抗酸化作用が不十分であることが推測される。
【００２１】
【表３】
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脂質異常症患者と健常者のＬＤＬリポ蛋白中γトコフェロールを比べると、有意差を持って、健常者が高値を示していることが表４から分かる。図４を見ると、脂質異常症患者において、健常者の９５％信頼区間の上限値１．５８７ｍｍｏｌ／ｍｏｌ−ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌに比べて、高値を示す検体が存在しない。健常者の９５％信頼区間の下限値０．４６３ｍｍｏｌ／ｍｏｌ−ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌに比べて、低値を示す検体が多く存在している。これは、病態の重篤化により投与した薬物の抗酸化作用が不十分であることが推測される。
【００２２】
【表４】
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脂質異常症患者と健常者のＨＤＬリポ蛋白中γ／αトコフェロール比率を比べると、有意差はないことが表５から分かる。図５を見ると、脂質異常症患者において、健常者の９５％信頼区間の上限値０．１７７に比べて、高値を示す検体が存在している。また、健常者の９５％信頼区間の下限値０．０６７に比べて、低値を示す検体も存在している。これは、病態の重篤化により投与した薬物の抗酸化作用が不十分であることが推測される。
【００２３】
【表５】
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脂質異常症患者と健常者のＬＤＬリポ蛋白中γ／αトコフェロール比率を比べると、有意差を持って、健常者が高値を示していることが表６から分かる。図６を見ると、脂質異常症患者において、健常者の９５％信頼区間の上限値０．４８１に比べて、高値を示す検体が存在しない。健常者の９５％信頼区間の下限値０．１３３に比べて、低値を示す検体が多く存在している。これは、病態の重篤化により投与した薬物の抗酸化作用が不十分であることが推測される。
【００２４】
【表６】
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次に、上述したいづれかの項目において、健常者の９５％信頼区間の上限値に比べ高値を示した２５検体について、投与薬物を確認した。
【００２５】
１番の検体では抗血小板剤、また、抗炎症効果を持つバイアスピリンが投与されており、ＬＤＬリポ蛋白中αトコフェロールについて健常者の９５％信頼区間の上限値に比べ高値を示していた。これは、バイアスピリンの抗炎症効果が抗酸化効果として表れていることを示している。
【００２６】
２番の検体では血圧降下剤セララ（抗アルドステロン性利尿薬）が投与されており、ＨＤＬリポ蛋白中αトコフェロールについて健常者の９５％信頼区間の上限値に比べ高値を示していた。これは、血圧降下剤セララの血圧降下の作用により、抗炎症効果・抗酸化効果が表れたか、もしくは、血圧降下剤セララに抗炎症効果・抗酸化効果を有することによる。血圧が降下すると血管内皮細胞の炎症を抑えることができる。
【００２７】
３番の検体では脂質改善薬メバロチン（スタチン）が投与されており、ＬＤＬリポ蛋白中αトコフェロールについて健常者の９５％信頼区間の上限値に比べ高値を示していた。これは、脂質改善薬メバロチンの抗炎症効果が抗酸化効果として表れていることを示している。
【００２８】
４番の検体では脂質改善薬クレストール（スタチン）が投与されており、ＬＤＬリポ蛋白中αトコフェロールについて健常者の９５％信頼区間の上限値に比べ高値を示していた。これは、脂質改善薬クレストールの抗炎症効果が抗酸化効果として表れていることを示している。
【００２９】
５番の検体では脂質改善薬メバロチン（スタチン）が投与されており、ＨＤＬリポ蛋白中γ／αトコフェロール比率について健常者の９５％信頼区間の上限値に比べ高値を示していた。これは、脂質改善薬メバロチンの抗炎症効果が抗酸化効果として表れていることを示している。３番と４番と異なる項目が高値を示しているのは、脂質代謝の状態や病態により抗酸化効果がどの項目に現れるか異なることによる。
【００３０】
６番の検体では抗血小板剤、また、抗炎症効果を持つバイアスピリンが投与されており、ＨＤＬリポ蛋白中αトコフェロール、ＬＤＬリポ蛋白中αトコフェロールについて健常者の９５％信頼区間の上限値に比べ高値を示していた。これは、バイアスピリンの抗炎症効果が抗酸化効果として表れていることを示している。１番と異なる項目が高値を示しているのは、脂質代謝の状態や病態により抗酸化効果がどの項目に現れるか異なることによる。
【００３１】
７番の検体では脂質改善薬リポバス（スタチン）が投与されており、ＨＤＬリポ蛋白中γトコフェロール、ＨＤＬリポ蛋白中γ／αトコフェロール比率について健常者の９５％信頼区間の上限値に比べ高値を示していた。これは、脂質改善薬リポバスの抗炎症効果が抗酸化効果として表れていることを示している。３〜５番と異なる項目が高値を示しているのは、脂質代謝の状態や病態により抗酸化効果がどの項目に現れるか異なることによる。
【００３２】
８番の検体では甲状腺機能を抑える薬剤であるプロパジールが投与されており、ＬＤＬリポ蛋白中αトコフェロールについて健常者の９５％信頼区間の上限値に比べ高値を示していた。これは、プロパジールは血圧降下作用を持つため、その血圧降下により抗炎症効果が抗酸化効果として表れていることを示している。血圧が降下すると血管内皮細胞の炎症を抑えることができる。
【００３３】
９番の検体では脂質改善薬プラバスタチン（スタチン）が投与されており、ＨＤＬリポ蛋白中γトコフェロールについて健常者の９５％信頼区間の上限値に比べ高値を示していた。これは、脂質改善薬プラバスタチンの抗炎症効果が抗酸化効果として表れていることを示している。他のスタチン投与により高値を示した項目が異なるのは、脂質代謝の状態や病態により抗酸化効果がどの項目に現れるか異なることによる。
【００３４】
１０番の検体では甲状腺機能を抑える薬剤であるメルカゾールが投与されており、ＨＤＬリポ蛋白中αトコフェロール、ＨＤＬリポ蛋白中γトコフェロールについて健常者の９５％信頼区間の上限値に比べ高値を示していた。これは、メルカゾールは血圧降下作用を持つため、その血圧降下により抗炎症効果が抗酸化効果として表れていることを示している。血圧が降下すると血管内皮細胞の炎症を抑えることができる。８番と異なる項目が高値を示しているのは、脂質代謝の状態や病態により抗酸化効果がどの項目に現れるか異なることによる。
【００３５】
１１番の検体では脂質改善薬ベサトール（フィブラート）が投与されており、ＨＤＬリポ蛋白中γトコフェロール、ＨＤＬリポ蛋白中γ／αトコフェロール比率について健常者の９５％信頼区間の上限値に比べ高値を示していた。これは、脂質改善薬ベサトールの抗炎症効果が抗酸化効果として表れていることを示している。
【００３６】
１２番の検体では血圧降下剤ニューロタン（アンジオテンシン受容体拮抗薬）が投与されており、ＬＤＬリポ蛋白中αトコフェロールについて健常者の９５％信頼区間の上限値に比べ高値を示していた。これは、血圧降下剤ニューロタンの抗炎症効果が抗酸化効果として表れていることを示している。
【００３７】
１３番の検体では脂質改善薬メバロチン（スタチン）が投与されており、ＨＤＬリポ蛋白中αトコフェロール、ＬＤＬリポ蛋白中αトコフェロールについて健常者の９５％信頼区間の上限値に比べ高値を示していた。これは、脂質改善薬メバロチンの抗炎症効果が抗酸化効果として表れていることを示している。他のスタチン投与により高値を示した項目が異なるのは、脂質代謝の状態や病態により抗酸化効果がどの項目に現れるか異なることによる。
【００３８】
１４番の検体では血圧降下剤レニベース（アンジオテンシン変換酵素阻害剤）が投与されており、ＨＤＬリポ蛋白中αトコフェロールについて健常者の９５％信頼区間の上限値に比べ高値を示していた。これは、血圧降下剤レニベースの抗炎症効果が抗酸化効果として表れていることを示している。
【００３９】
１５番の検体では血圧降下剤オルメテック（アンジオテンシン受容体拮抗薬）が投与されており、ＨＤＬリポ蛋白中γトコフェロール、ＨＤＬリポ蛋白中γ／αトコフェロール比率について健常者の９５％信頼区間の上限値に比べ高値を示していた。これは、血圧降下剤オルメテックの抗炎症効果が抗酸化効果として表れていることを示している。１２番と異なる項目が高値を示しているのは、脂質代謝の状態や病態により抗酸化効果がどの項目に現れるか異なることによる。
【００４０】
１６番の検体では脂質改善薬クレストール（スタチン）が投与されており、ＨＤＬリポ蛋白中γトコフェロール、ＨＤＬリポ蛋白中γ／αトコフェロール比率について健常者の９５％信頼区間の上限値に比べ高値を示していた。これは、脂質改善薬クレストールの抗炎症効果が抗酸化効果として表れていることを示している。他のスタチン投与により高値を示した項目が異なるのは、脂質代謝の状態や病態により抗酸化効果がどの項目に現れるか異なることによる。
【００４１】
１７番の検体ではユベラ（ビタミンＥ：αトコフェロール）が投与されており、ＨＤＬリポ蛋白中αトコフェロール、ＬＤＬリポ蛋白中αトコフェロールが高値を示している。
【００４２】
１８番の検体では血圧降下剤レニベース（アンジオテンシン変換酵素阻害剤）が投与されており、ＨＤＬリポ蛋白中γトコフェロール、ＨＤＬリポ蛋白中γ／αトコフェロール比率について健常者の９５％信頼区間の上限値に比べ高値を示していた。これは、血圧降下剤レニベースの抗炎症効果が抗酸化効果として表れていることを示している。１４番と異なる項目が高値を示しているのは、脂質代謝の状態や病態により抗酸化効果がどの項目に現れるか異なることによる。
【００４３】
１９番の検体では抗血小板剤、また、抗炎症効果を持つバイアスピリンが投与されており、ＬＤＬリポ蛋白中αトコフェロールについて健常者の９５％信頼区間の上限値に比べ高値を示していた。これは、バイアスピリンの抗炎症効果が抗酸化効果として表れていることを示している。６番と異なる項目が高値を示しているのは、脂質代謝の状態や病態により抗酸化効果がどの項目に現れるか異なることによる。
【００４４】
２０番の検体では抗血小板剤、また、抗炎症効果を持つバイアスピリンが投与されており、ＨＤＬリポ蛋白中αトコフェロールについて健常者の９５％信頼区間の上限値に比べ高値を示していた。これは、バイアスピリンの抗炎症効果が抗酸化効果として表れていることを示している。他のバイアスピリン投与により高値を示した項目が異なるのは、脂質代謝の状態や病態により抗酸化効果がどの項目に現れるか異なることによる。
【００４５】
２１番の検体では抗血小板剤、また、抗炎症効果を持つバイアスピリンが投与されており、ＨＤＬリポ蛋白中γトコフェロール、ＨＤＬリポ蛋白中γ／αトコフェロール比率について健常者の９５％信頼区間の上限値に比べ高値を示していた。これは、バイアスピリンの抗炎症効果が抗酸化効果として表れていることを示している。他のバイアスピリン投与により高値を示した項目が異なるのは、脂質代謝の状態や病態により抗酸化効果がどの項目に現れるか異なることによる。
【００４６】
２２番の検体では血圧降下剤アムロジン（カルシウム拮抗薬）、脂質改善薬メバロチン（スタチン）が投与されており、ＬＤＬリポ蛋白中αトコフェロールについて健常者の９５％信頼区間の上限値に比べ高値を示していた。これは、血圧降下剤アムロジン、脂質改善薬メバロチンの抗炎症効果が抗酸化効果として表れていることを示している。
【００４７】
２３番の検体では血圧降下剤アムロジン（カルシウム拮抗薬）が投与されており、ＨＤＬリポ蛋白中γトコフェロール、ＨＤＬリポ蛋白中γ／αトコフェロール比率について健常者の９５％信頼区間の上限値に比べ高値を示していた。これは、血圧降下剤アムロジンの抗炎症効果が抗酸化効果として表れていることを示している。
【００４８】
２４番の検体では血圧降下剤メインテート（βブロッカー）が投与されており、ＨＤＬリポ蛋白中γ／αトコフェロール比率について健常者の９５％信頼区間の上限値に比べ高値を示していた。これは、血圧降下剤メインテートの抗炎症効果が抗酸化効果として表れていることを示している。
【００４９】
２５番の検体では血圧降下剤ロンゲス（アンジオテンシン変換酵素阻害剤）が投与されており、ＨＤＬリポ蛋白中γトコフェロール、ＨＤＬリポ蛋白中γ／αトコフェロール比率について健常者の９５％信頼区間の上限値に比べ高値を示していた。これは、血圧降下剤ロンゲスの抗炎症効果が抗酸化効果として表れていることを示している。１４番と異なる項目が高値を示しているのは、脂質代謝の状態や病態により抗酸化効果がどの項目に現れるか異なることによる。
【００５０】
以上のように、血圧降下剤、脂質降下剤、抗血小板剤、また、血圧降下の作用を持つ甲状腺機能を抑制する薬剤において、血液中のＨＤＬリポ蛋白中αトコフェロール、又は、ＬＤＬリポ蛋白中αトコフェロール、又は、ＨＤＬリポ蛋白中γトコフェロール、又は、ＨＤＬリポ蛋白中γ／αトコフェロール比率について、健常者の９５％信頼区間の上限値に比べ高値を示しており、そのことは投与した薬剤の抗酸化効果として表れていることを示していた。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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