(57)【要約】【課題】被処理液から効率よく単球を分離・回収することができる単球分離用フィルターを提供すること。【解決手段】本発明の単球分離用フィルターは、単球を含有する被処理液から、前記単球を分離する単球分離用フィルターであって、前記被処理液と接触する部位の少なくとも一部が、所定の物質による刺激により膨張または収縮する刺激応答性ゲルを含む材料で構成されていることを特徴とする。前記刺激応答性ゲルは、糖類またはオキソ酸類と接触することにより膨張するものであるのが好ましい。単球分離用フィルターは、少なくとも表面の一部が前記刺激応答性ゲルを含む材料で構成された繊維を含むものであるのが好ましい。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
単球を含有する被処理液から、前記単球を分離する単球分離用フィルターであって、
前記被処理液と接触する部位が、所定の物質による刺激により膨張または収縮する刺激応答性ゲルを含む材料で構成され、前記刺激応答性ゲルはフェニルボロン酸構造を有するポリマーを含んでいることを特徴とする単球分離用フィルター。
【請求項２】
前記刺激応答性ゲルは、糖類またはオキソ酸類による刺激により膨張するものである請求項１に記載の単球分離用フィルター。
【請求項３】
前記単球分離用フィルターは、表面が前記刺激応答性ゲルで構成された繊維を含むものである請求項１または２に記載の単球分離用フィルター。
【請求項４】
前記単球分離用フィルターは、前記繊維を含む不織布を備えるものである請求項３に記載の単球分離用フィルター。
【請求項５】
前記ポリマーは、構成成分として、フェニルボロン酸構造を有するモノマーを含むものである請求項１ないし４のいずれか１項に記載の単球分離用フィルター。
【請求項６】
前記ポリマーは、構成成分として、３−アクリルアミドフェニルボロン酸を含むものである請求項５に記載の単球分離用フィルター。
【請求項７】
前記ポリマーは、構成成分として、前記フェニルボロン酸構造を有するモノマーに加えて、水溶性モノマーを含むものである請求項５または６に記載の単球分離用フィルター。
【請求項８】
前記ポリマーは、前記水溶性モノマーとして、Ｎ−ヒドロキシエチルアクリルアミドを含むものである請求項７に記載の単球分離用フィルター。
【請求項９】
前記ポリマー中における前記フェニルボロン酸構造を有するモノマーの含有率が、２０質量％以上４５質量％以下である請求項５ないし８のいずれか１項に記載の単球分離用フィルター。
【請求項１０】
単球分離用フィルターは、前記刺激応答性ゲル中に、平均粒径が１０ｎｍ以上１０００ｎｍ以下の微粒子が分散してなる部位を有するものである請求項１ないし９のいずれか１項に記載の単球分離用フィルター。
【請求項１１】
請求項１ないし１０のいずれか１項に記載の単球分離用フィルターに、単球を含有する被処理液を接触させる工程と、
前記被処理液を接触させた前記単球分離用フィルターに、前記刺激応答性ゲルを膨張または収縮させる所定の物質を接触させる工程とを有することを特徴とする単球分離方法。
【請求項１２】
請求項１ないし１０のいずれか１項に記載の単球分離用フィルターを備えることを特徴とする単球分離器具。
【請求項１３】
単球分離用フィルターの単球を含む被処理液と接触する部位を含む領域を構成する材料であって、
フェニルボロン酸構造を有するポリマーを含み、所定の物質による刺激により膨張または収縮する刺激応答性ゲルを含むことを特徴とするゲル材料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、単球分離用フィルター、単球分離方法、単球分離器具およびゲル材料に関する。
【背景技術】
【０００２】
種々の目的で、血液や組織液等、種々の細胞が混在した細胞懸濁液から目的細胞を分離することが行われている。
【０００３】
特に、近年、細胞機能の研究や、細胞の分離、培養技術の進歩によって、種々の疾患に対して細胞を移植する治療法が広がりを見せており、このような治療法に際して、単球の分離が行われている。
【０００４】
このような単球の分離には、比重遠心法が行われてきたが、比重遠心法では、一般的な培養用の理化学用具を用いられるため、分離操作中に何回も分離用遠沈管に移し替える作業が必要で、操作が煩雑であるという問題があった。また、遠心操作を繰り返すため、細胞へのダメージが大きいという問題もある。
【０００５】
このような問題を解決する目的で、各種の単球捕捉フィルターが提案されている（例えば、特許文献１参照）。
【０００６】
しかしながら、従来の単球捕捉フィルターでは、捕捉された単球を単球捕捉フィルターから効率よく分離し、効率よく分離することが困難であった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２００３−２７４９２３号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明の目的は、被処理液から効率よく単球を分離・回収することができる単球分離用フィルター、単球分離方法、単球分離器具を提供すること、また、被処理液から効率よく単球を分離・回収することができる単球分離用フィルターに好適に適用することができるゲル材料を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明の単球分離用フィルターは、単球を含有する被処理液から、前記単球を分離する単球分離用フィルターであって、
前記被処理液と接触する部位が、所定の物質による刺激により膨張または収縮する刺激応答性ゲルを含む材料で構成され、前記刺激応答性ゲルはフェニルボロン酸構造を有するポリマーを含んでいることを特徴とする。
【００１０】
これにより、被処理液から効率よく単球を分離・回収することができる単球分離用フィルターを提供することができる。
【００１１】
本発明の単球分離用フィルターでは、前記刺激応答性ゲルは、糖類またはオキソ酸類による刺激により膨張するものであることが好ましい。
【００１２】
これにより、刺激応答性ゲルの体積変化率、親水性・疎水性の状態の変化の程度をより大きいものとすることができ、刺激応答性ゲルに付着した単球の回収をより効率よく行うことができる。また、これらの物質は、各種細胞に対し、ダメージを与えにくく、単球を含む被処理液の処理を好適に行うことができる。また、これらの物質は、比較的低い濃度で、刺激応答性ゲルの体積変化率、親水性・疎水性の状態の変化の程度を十分に大きいものとすることができるため、特定成分の除去の処理を省略または簡略化したりすることができる。
【００１３】
本発明の単球分離用フィルターは、表面が前記刺激応答性ゲルで構成された繊維を含むものであることが好ましい。
【００１４】
これにより、単球をより効率よく分離、回収することができる。また、回収時に単球以外の不要な成分が不本意に混入することをより効果的に抑制することができる。また、単球分離用フィルターを備えた単球分離器具の生産性をより優れたものとすることができる。
【００１５】
本発明の単球分離用フィルターは、前記繊維を含む不織布を備えるものであることが好ましい。
【００１６】
これにより、単球の分離・回収の効率をより優れたものとすることができる。また、単球分離用フィルターの取扱いが容易となり、単球分離用フィルターを備えた単球分離器具の生産性をより優れたものとすることができる。
【００１７】
本発明の単球分離用フィルターでは、前記ポリマーは、構成成分として、フェニルボロン酸構造を有するモノマーを含むものであることが好ましい。
【００１８】
これにより、前記ポリマーが有するフェニルボロン酸構造の割合等の調整を容易に行うことができる。また、前記ポリマーの剛性をより容易に行うことができる。また、前記ポリマーの化学的安定性をより優れたものとすることができ、前記ポリマーの不本意な劣化、変性等をより効果的に抑制することができる。
【００１９】
本発明の単球分離用フィルターでは、前記ポリマーは、構成成分として、３−アクリルアミドフェニルボロン酸を含むものであることが好ましい。
【００２０】
これにより、所定の物質による刺激に対する疎水性−親水性の変化の大きさ、刺激応答性ゲルの体積の変化率をより大きいものとすることができ、単球の分離・回収の効率をより優れたものとすることができる。
【００２１】
本発明の単球分離用フィルターでは、前記ポリマーは、構成成分として、前記フェニルボロン酸構造を有するモノマーに加えて、水溶性モノマーを含むものであることが好ましい。
【００２２】
これにより、所定の物質による刺激に対する疎水性−親水性の変化の大きさ、刺激応答性ゲルの体積の変化率をより大きいものとすることができ、単球の分離・回収の効率をより優れたものとすることができる。
【００２３】
本発明の単球分離用フィルターでは、前記ポリマーは、前記水溶性モノマーとして、Ｎ−ヒドロキシエチルアクリルアミドを含むものであることが好ましい。
【００２４】
これにより、刺激応答性ゲルの水の保持力を特に優れたものとすることができ、刺激応答性ゲルの機能をより安定的に発揮することができる。また、刺激応答性ゲルの耐久性、信頼性を特に優れたものとすることができる。
【００２５】
本発明の単球分離用フィルターでは、前記ポリマー中における前記フェニルボロン酸構造を有するモノマーの含有率が、２０質量％以上４５質量％以下であることが好ましい。
【００２６】
これにより、刺激応答性ゲルの柔軟性をより適切なものとすることができ、所定の物質（特定成分）に対する感度を特に優れたものとすることができる。
【００２７】
本発明の単球分離用フィルターは、前記刺激応答性ゲル中に、平均粒径が１０ｎｍ以上１０００ｎｍ以下の微粒子が分散してなる部位を有するものであることが好ましい。
【００２８】
これにより、ブラッグ反射による構造色を視認することができる。特に、刺激応答性ゲルの膨張または収縮に伴い、隣り合う当該粒子の距離が変化し、ブラッグ反射による構造色も変化するため、光学的（視覚的）に刺激応答性ゲルの状態（膨張収縮状態、親水性疎水性の状態）を確認することができる。その結果、刺激応答性ゲルから単球が剥離した状態であるか否かを容易に確認することができる。
【００２９】
本発明の単球分離方法は、本発明の単球分離用フィルターに、単球を含有する被処理液を接触させる工程と、
前記被処理液を接触させた前記単球分離用フィルターに、前記刺激応答性ゲルを膨張または収縮させる所定の物質を接触させる工程とを有することを特徴とする。
【００３０】
これにより、被処理液から効率よく単球を分離・回収することができる単球分離方法を提供することができる。
【００３１】
本発明の単球分離器具は、本発明の単球分離用フィルターを備えることを特徴とする。
これにより、被処理液から効率よく単球を分離・回収することができる単球分離器具を提供することができる。
【００３２】
本発明のゲル材料は、単球分離用フィルターの単球を含む被処理液と接触する部位を含む領域を構成する材料であって、
フェニルボロン酸構造を有するポリマーを含み、所定の物質による刺激により膨張または収縮する刺激応答性ゲルを含むことを特徴とする。
【００３３】
これにより、被処理液から効率よく単球を分離・回収することができる単球分離用フィルターに好適に適用することができるゲル材料を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００３４】
【図１】単球分離用フィルターを備える単球分離器具の好適な実施形態を説明するための模式的な平面図である。
【図２】図１に示す単球分離器具の模式的な断面図である。
【図３】単球分離方法の好適な実施形態を示すフローチャートである。
【発明を実施するための形態】
【００３５】
以下、添付する図面を参照しつつ、好適な実施形態について詳細な説明をする。
《単球分離用フィルター、単球分離器具》
以下、単球分離用フィルター、単球分離器具について説明する。
【００３６】
図１は、単球分離用フィルターを備える単球分離器具の好適な実施形態を説明するための模式的な平面図、図２は、図１に示す単球分離器具の模式的な断面図である。
【００３７】
図示のように、単球分離器具（単球分離装置）１０は、単球分離用フィルター１と、単球分離用フィルター１を収容するハウジング２とを有している。
【００３８】
単球分離用フィルター１は、単球を含有する被処理液から単球を分離するもののであって、被処理液と接触する部位の少なくとも一部が、フェニルボロン酸構造を有するポリマーを含み、所定の物質による刺激により膨張または収縮する刺激応答性ゲルを含む材料で構成されている。なお、刺激とは種々の化学反応および物理的な作用などを指す。
【００３９】
フェニルボロン酸構造を有するポリマーを含む刺激応答性ゲルは、前記所定の物質を含まない状態（または、前記所定の物質の含有率が十分に低い状態）では、表面の疎水性が高い状態となり、単球を選択的に適度な結合力で結合させることができる一方で、前記所定の物質を所定の濃度以上で含む状態では、表面の親水性が高い状態となるとともに膨張または収縮し、結合していた単球を効率よく放出することができる。したがって、被処理液中に含まれる単球を効率よく分離、回収することができる。特に、回収された単球に、被処理液中に含まれる他の成分（例えば、リンパ球、顆粒球、赤血球、血小板等）が混入することを効果的に抑制しつつ、高い回収率で単球を回収することができる。しかも、分離、回収の処理時における単球へのダメージを効率よく抑制することができる。
【００４０】
なお、単球とは、単核白血球に加え、単核白血球から分化した細胞（例えば、マクロファージ（大食細胞）、樹状細胞、破骨細胞等）を含む概念である。
【００４１】
また、被処理液としては、単球を含む液体であればいかなるものであってもよく、例えば、末梢血、臍帯血等の血液、骨髄液、間質液、リンパ（リンパ液）等の体液や、これらに所定の処理（例えば、比重遠心分離等）を施した液体、培養処理後の培養細胞を含む培養液等が挙げられる。
【００４２】
単球分離用フィルター１の形状は、特に限定されず、例えば、シート状、粒子状、ブロック状（特に、多孔質のブロック状）、繊維状等、いかなる形状であってもよい。
【００４３】
本実施形態では、単球分離用フィルター１は、少なくとも表面の一部が刺激応答性ゲルを含む材料で構成された繊維を含むものである。
【００４４】
これにより、単球分離用フィルター１の表面積（被処理液と接触可能な部位の面積）をより大きいものとすることができ、単球をより効率よく分離、回収することができる。また、回収時に単球以外の不要な成分が不本意に混入することをより効果的に抑制することができる。また、刺激応答性ゲルを含む材料で構成された繊維は、一般に、形状の調整を好適に行うことができるため、例えば、単球分離器具１０の組み立て時において、ハウジング２内への単球分離用フィルター１の収納を効率よく行うことができ、単球分離器具１０の生産性をより優れたものとすることができる。また、ハウジング２内において、単球分離用フィルター１を緻密に充填することができるため、被処理液からの単球の分離の効率をより優れたものとすることができる。
【００４５】
単球分離用フィルター１が、少なくとも表面の一部が刺激応答性ゲルを含む材料で構成された繊維を含むものである場合、当該繊維は、中空糸、中実糸のいずれであってもよい。
【００４６】
また、単球分離用フィルター１が、少なくとも表面の一部が刺激応答性ゲルを含む材料で構成された繊維を含むものである場合、当該繊維は、織布、不織布のように所定の形状（例えば、シート状等）に成形されたものであってもよい。
【００４７】
本実施形態では、単球分離用フィルター１は、前記繊維を含む不織布を備えるものである。
【００４８】
これにより、単球の分離・回収の効率をより優れたものとすることができる。また、単球分離用フィルター１の取扱いが容易となり、単球分離器具１０の生産性をより優れたものとすることができる。
【００４９】
本実施形態のように、単球分離用フィルター１がシート状の部材（例えば、不織布）を備えるものである場合、単球分離用フィルター１は、当該シートを複数枚備えるものであってもよい。
これにより、単球の分離・回収の効率をより優れたものとすることができる。
【００５０】
単球分離用フィルター１が複数枚のシート状の部材を備えるものである場合、単球分離用フィルター１は、これらの複数枚のシート状の部材を重ね合わせた積層体を備えるものであるのが好ましい。
これにより、単球の分離・回収の効率をより優れたものとすることができる。
【００５１】
単球分離用フィルター１は、被処理液と接触する部位の少なくとも一部が、フェニルボロン酸構造を有するポリマーを含み、所定の物質による刺激により膨張または収縮する刺激応答性ゲルを含む材料で構成されたものであればよく、例えば、その全体が刺激応答性ゲルを含む材料で構成されたものであってもよいし、基材と刺激応答性ゲルを含む材料で構成された表面層とを有するものであってもよい。より具体的には、例えば、単球分離用フィルター１が不織布状のものである場合、例えば、セルロース等で構成された繊維を有する基材としての不織布と、前記繊維の表面に設けられ、刺激応答性ゲルを含む材料で構成された表面層とを有するものであってもよい。
【００５２】
単球分離用フィルター１が基材と刺激応答性ゲルを含む材料で構成された表面層とを有するものである場合、表面層の形成に先立ち、基材に対して、表面処理を施してもよい。
【００５３】
これにより、基材と表面層との密着性を優れたものとし、単球分離用フィルター１、単球分離器具１０の耐久性をより優れたものとすることができる。
【００５４】
基材に対する表面処理としては、例えば、酸素プラズマ法、ＵＶ照射法、電子線照射法、放射線（Ｘ線、ガンマ線）照射法、ＳｉＯｘ膜形成法、シランカップリング剤塗布法、架橋剤塗布法（例えばグルタルアルデヒド等）等が挙げられる。
【００５５】
単球分離用フィルター１の収縮状態での体積は、０．５ｃｍ３以上２００ｃｍ３以下であるのが好ましく、１ｃｍ３以上１５０ｃｍ３以下であるのがより好ましい。
【００５６】
これにより単球分離器具１０の小型化を図りつつ、単球をより効率よく分離・回収することができる。
【００５７】
単球分離用フィルター１を構成する刺激応答性ゲルは、所定の物質（特定成分）による刺激により膨張または収縮するものである。
【００５８】
刺激応答性ゲルが反応する所定の物質は、刺激応答性ゲルの構成材料等により異なるが、例えば、フルクトース、マンニトール等の糖類；乳酸等のオキソ酸類；ジオール類；各種タンパク質；各種ホルモン類；各種イオン物質；各種金属；尿酸；尿素等が挙げられる。
【００５９】
特に、刺激応答性ゲルは、糖類またはオキソ酸類と接触することにより膨張するものであるのが好ましく、フルクトース、マンニトール、乳酸のうち少なくとも１種と接触することにより膨張するものであるのがより好ましい。
【００６０】
これにより、刺激応答性ゲルの体積変化率、親水性・疎水性の状態の変化の程度をより大きいものとすることができ、刺激応答性ゲルに付着した単球の回収をより効率よく行うことができる。また、これらの物質は、各種細胞に対し、ダメージを与えにくい。したがって、単球を含む被処理液の処理を好適に行うことができる。また、これらの物質は、比較的低い濃度で、刺激応答性ゲルの体積変化率、親水性・疎水性の状態の変化の程度を十分に大きいものとすることができるため、特定成分の除去の処理を省略または簡略化したりすることができる。
【００６１】
単球分離用フィルター１に付着した単球を分離する際に用いる所定の物質（特定成分）は、いかなる形態で単球分離用フィルター１（刺激応答性ゲル）と接触するものであってもよいが、液体状態で接触するのが好ましい。
【００６２】
これにより、単球分離用フィルター１（刺激応答性ゲル）と所定の物質（特定成分）とを効率よく接触させることができ、単球の回収効率をより優れたものとすることができる。
【００６３】
単球分離用フィルター１に付着した単球を分離する際に用いる液体は、所定の物質（特定成分）を含む水溶液であるのが好ましい。
【００６４】
これにより、回収の処理時における単球へのダメージをより効率よく抑制することができる。
【００６５】
単球分離用フィルター１に付着した単球を分離する際に用いる液体中に含まれる所定の物質（特定成分）の含有率は、特に限定されないが、０．０１質量％以上３．０質量％以下であるのが好ましく、０．０２質量％以上２．０質量％以下であるのがより好ましい。
【００６６】
これにより、回収の処理時における単球へのダメージをより効率よく抑制することができる。また、後処理としての特定成分の除去の処理を省略または簡略化したりすることができる。
【００６７】
単球分離用フィルター１を構成する刺激応答性ゲル（ゲル材料）については、後に詳述する。
【００６８】
ハウジング２は、単球分離用フィルター１を収容する機能を有するものである。
ハウジング２は、いかなる材料で構成されたものであってもよいが、少なくとも単球分離用フィルター１が設けられた部位が光透過性を有する材料で構成されたものであるのが好ましい。
【００６９】
これにより、ハウジング２内（単球分離用フィルター１が収容された部位）の様子を外部から好適に観察することができる。
【００７０】
また、ハウジング２の構成材料は、単球分離器具１０の生産性、取扱いの容易性等の観点から、プラスチック材料で構成されたものであるのが好ましい。
【００７１】
ハウジング２を構成するプラスチック材料としては、例えば、軟質ポリ塩化ビニル、ポリオレフィン、エチレン−酢酸ビニル共重合体等が挙げられる。
【００７２】
ハウジング２には、ハウジング２内の空間（単球分離用フィルター１が収容された空間）に被処理液を導入するための流入口３と、ハウジング２内に配された単球分離用フィルター１を通過した被処理液を外部に排出する流出口４とが設けられている。
【００７３】
流入口３および流出口４は、チューブ形状をなすものである。
流入口３および流出口４は、いかなる材料で構成されたものであってもよいが、高周波融着や熱シールによりハウジング２を製造する場合には、ハウジング２と同一の材料か、融点が近い材料で構成されたものであるのが好ましい。
【００７４】
刺激応答性ゲルが収縮した状態におけるハウジング２内の空間（ゲル収容可能空間中）での単球分離用フィルター１の充填率は、７０体積％以上９５体積％以下であるのが好ましく、７５体積％以上９０体積％以下であるのがより好ましい。
これにより、被処理液の処理量、処理速度をより優れたものとすることができる。
【００７５】
《ゲル材料》
以下、単球分離用フィルター１を構成するゲル材料（刺激応答性ゲルを含む材料）について、詳細に説明する。
【００７６】
単球分離用フィルター１を構成するゲル材料は、単球分離用フィルターの単球を含む被処理液と接触する部位の少なくとも一部を含む領域を構成する材料であって、フェニルボロン酸構造を有するポリマーを含み、所定の物質による刺激により膨張または収縮する刺激応答性ゲルを含むものである。
【００７７】
これにより、被処理液から効率よく単球を分離・回収することができる。特に、回収された単球に、被処理液中に含まれる他の成分（例えば、リンパ球、顆粒球、赤血球、血小板等）が混入することを効果的に抑制しつつ、高い回収率で単球を回収することができる。
【００７８】
＜刺激応答性ゲル＞
刺激応答性ゲルは、フェニルボロン酸構造を有するポリマー（高分子材料）を含み、所定の物質による刺激により膨張または収縮するものであればよいが、通常、前記ポリマーとともに、水を含むものである。
【００７９】
（高分子材料（ポリマー））
刺激応答性ゲルは、少なくとも、フェニルボロン酸構造を有するポリマー（第１のポリマー）を含むものである。
【００８０】
フェニルボロン酸構造は、例えば、ポリマー（第１のポリマー）の構成成分としての重合性化合物（モノマー等）を重合させた後に導入されたものであってもよいが、ポリマー（第１のポリマー）の構成成分としての重合性化合物が有するものであるのが好ましい。言い換えると、ポリマー（第１のポリマー）は、構成成分として、フェニルボロン酸構造を有するモノマーを含むものであるのが好ましい。
【００８１】
これにより、ポリマー（第１のポリマー）が有するフェニルボロン酸構造の割合等の調整を容易に行うことができる。また、ポリマー（第１のポリマー）の剛性をより容易に行うことができる。また、ポリマー（第１のポリマー）の化学的安定性をより優れたものとすることができ、ポリマー（第１のポリマー）の不本意な劣化、変性等をより効果的に抑制することができる。
【００８２】
ポリマー（第１のポリマー）を構成する、フェニルボロン酸構造を有するモノマーとしては、例えば、３−（メタ）アクリルアミドフェニルボロン酸、ビニルフェニルボロン酸、（メタ）アクリロイロキシフェニルボロン酸、（メタ）アクリロイルアミノベンゼンボロン酸、（メタ）アクリロイルアミノベンゼンボロン酸、４−ビニルベンゼンボロン酸等が挙げられ、これらから選択される１種または２種以上を組み合わせて用いることができるが、ポリマー（第１のポリマー）は、３−アクリルアミドフェニルボロン酸を構成成分として含むものであるのが好ましい。
【００８３】
これにより、所定の物質による刺激に対する疎水性−親水性の変化の大きさ、刺激応答性ゲルの体積の変化率をより大きいものとすることができ、単球の分離・回収の効率をより優れたものとすることができる。
【００８４】
前記ポリマー（第１のポリマー）は、フェニルボロン酸構造を有するモノマーに加え、フェニルボロン酸構造を有さないモノマーを含むものであってもよい。
これにより、前記ポリマー（第１のポリマー）が有するフェニルボロン酸構造の割合等を好適なものに調整することができる。
【００８５】
フェニルボロン酸構造を有さないモノマーとしては、例えば、（メタ）アクリルアミド、Ｎ−メチル（メタ）アクリルアミド、Ｎ−エチル（メタ）アクリルアミド、Ｎ−イソプロピル（メタ）アクリルアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチル（メタ）アクリルアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノプロピル（メタ）アクリルアミド、エチレンビス（メタ）アクリルアミド、Ｎ−ヒドロキシエチル（メタ）アクリルアミド、Ｎ−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］（メタ）アクリルアミド、ジアセトン（メタ）アクリルアミド、Ｎ−ｔ−ブチル（メタ）アクリルアミド、Ｎ，Ｎ−ジエチル（メタ）アクリルアミド、Ｎ−（ブトキシメチル）（メタ）アクリルアミド、Ｎ−（イソブトキシメチル）（メタ）アクリルアミド、Ｎ−フェニル（メタ）アクリルアミド、Ｎ−ヒドロキシメチル（メタ）アクリルアミド、Ｎ−ヒドロキシプロピル（メタ）アクリルアミド、Ｎ−ヒドロキシブチル（メタ）アクリルアミド、Ｎ−ヒドロキシペンチル（メタ）アクリルアミド、２，３−ジヒドロキシプロピル（メタ）アクリルアミド、ジヒドロキシブチル（メタ）アクリルアミド、ジヒドロキシペンチル（メタ）アクリルアミド、トリス（ヒドロキシメチル）メチル（メタ）アクリルアミド、２−（メタ）アクリルアミド−２−メチルスルホン酸、（メタ）アクリルアミドグリコール酸、イソブトキシメチル（メタ）アクリルアミド、（メタ）アクリルアミドエタンカルボン酸、（メタ）アクリルアミドプロパンカルボン酸、（メタ）アクリルアミドブタンカルボン酸、（メタ）アクリルアミドペンタンカルボン酸、（メタ）アクリルアミドヘキサンカルボン酸、（メタ）アクリルアミドヘプタンカルボン酸、（メタ）アクリルアミドオクタンカルボン酸、（メタ）アクリルアミドエトキシエタノール、２−ヒドロキシ（メタ）アクリレート、２−ヒドロキシエチル（メタ）アクリレート、Ｎ−ビニルラクトン、（メタ）アクリル酸モノグリセロール、メチルビニルエーテル、無水マレイン酸グリセロールモノ（メタ）アクリレート、２−ヒドロキシ−１−アクリロキシ−３−メタ（アクリロキシ）プロパン、２−ヒドロキシ−１，３−ジメタ（アクリロキシ）プロパン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノプロピル（メタ）アクリルアミド各種四級塩、（メタ）アクリロイルモルホリン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノエチル（メタ）アクリレート各種四級塩、（メタ）アクリル酸、各種アルキル（メタ）アクリレート、１，４−シクロヘキサンジメタノールモノ（メタ）アクリレート、（３−（メタ）アクリルアミドプロピル）トリメチルアンモニウムクロリド、トリメチル−２−（メタ）アクロイルオキシエチルアンモニウムクロリド、りん酸２−（（メタ）アクリロイルオキシ）エチル２−（トリメチルアンモニオ）エチル、（メタ）アクリル酸３−スルホプロピルカリウム、２−（メタ）アクリルアミド−２−メチルプロパンスルホン酸、（メタ）アクリル酸２−（２−エトキシエトキシ）エチル、（メタ）アクリル酸グリシジル、Ｎ，Ｎ’−（１，２−ジヒドロキシエチレン）ビス（メタ）アクリルアミド、ジ（エチレングリコール）ジビニルエーテル、トリ（エチレングリコール）ジビニルエーテル、ポリ（エチレングリコール）ジビニルエーテル、トリメチロールプロパンエトキシラートトリ（メタ）アクリラート、トリメチロールプロパンプロポキシラートトリ（メタ）アクリラート、Ｎ−［トリス（３−（メタ）アクリルアミドプロポキシメチル）メチル］（メタ）アクリルアミド、ビニルスルホン酸、酢酸ビニル、カルボン酸ビニル（Ｃ３〜Ｃ１０）、Ｎ−ビニルピロリドン、アクリロニトリル、スチレン、ポリエチレングリコールジ（メタ）アクリレート、１，６−ヘキサンジオールジ（メタ）アクリレート、ネオペンチルグリコールジ（メタ）アクリレート、トリプロピレングリコールジ（メタ）アクリレート、ポリプロピレングリコールジ（メタ）アクリレート、２，２−ビス〔４−（（メタ）アクリロキシジエトキシ）フェニル〕プロパン、２，２−ビス〔４−（（メタ）アクリロキシポリエトキシ）フェニル〕プロパン、２，２−ビス〔４−（（メタ）アクリロキシポリプロポキシ）フェニル〕プロパン、エチレングリコールジ（メタ）アクリレート、ジエチレングリコールジ（メタ）アクリレート、トリエチレングリコールジ（メタ）アクリレート、１，３−ブチレングリコールジ（メタ）アクリレート、２，２−ビス〔４−（（メタ）アクリロキシエトキシ）フェニル〕プロパン、２，２−ビス〔４−（（メタ）アクリロキシエトキシジエトキシ）フェニル〕プロパン、２，２−ビス〔４−（（メタ）アクリロキシエトキシポリエトキシ）フェニル〕プロパン、トリメチロールプロパントリ（メタ）アクリレート、テトラメチロールメタントリ（メタ）アクリレート、テトラメチロールメタンテトラ（メタ）アクリレート、ジペンタエリスリトールヘキサ（メタ）アクリレート、Ｎ，Ｎ’−メチレンビス（メタ）アクリルアミド、ジエチレングリコールジアリルエーテル、ジビニルベンゼン、４−（メタ）アクリルアミドベンゾ−１８−クラウン−６−エーテル、アクリロイルアミノベンゾクラウンエーテル、（メタ）アクリロイルアミノベンゾクラウンエーテル、４−ビニルベンゾクラウンエーテル等が挙げられ、これらから選択される１種または２種以上を組み合わせて用いることができる。
【００８６】
上記のモノマーのうち、アクリルアミド系、メタアクリルアミド系、アクリル酸系、メタアクリル酸系が好ましく、親水性がより高いアクリルアミド系、メタアクリルアミド系がより好ましい。
【００８７】
特に、前記ポリマー（第１のポリマー）は、フェニルボロン酸構造を有するモノマー以外のモノマーとして、水溶性モノマーを含むのが好ましい。
【００８８】
これにより、所定の物質による刺激に対する疎水性−親水性の変化の大きさ、刺激応答性ゲルの体積の変化率をより大きいものとすることができ、単球の分離・回収の効率をより優れたものとすることができる。
【００８９】
なお、水溶性モノマーは、２５℃の水：１００ｇに対する溶解度が、５ｇ以上のものであるのが好ましく、１０ｇ以上のものであるのがより好ましい。
これにより、前述したような効果がより顕著に発揮される。
【００９０】
水溶性モノマーとしては、水酸基（ＯＨ基）、ケトン基、カルボン酸基、イオン性基のうち少なくとも１種を有するものが好ましく、水酸基（ＯＨ基）、イオン性基のうち少なくとも１種を有するものがより好ましく、水酸基（ＯＨ基）を有するものがさらに好ましい。
これにより、刺激応答性ゲルの水の保持力をより優れたものとすることができる。
【００９１】
特に、水溶性モノマーが水酸基（ＯＨ基）を有するものであると、刺激応答性ゲルは、フェニルボロン酸構造とＯＨ基とが結合した第１の状態と、フェニルボロン酸構造とＯＨ基との結合が解除された第２の状態とを取り得る。
【００９２】
このような状態の変化は、周囲の環境の変化（所定の物質（特定成分）の有無や、所定の物質（特定成分）の濃度等の変化）によって起こるものである。特に、上記のような状態の変化は、特定成分の濃度が比較的低い領域で、起こるものである。したがって、刺激応答性ゲルの特定成分に対する反応性（感受性）をより高いものとし、特定成分による刺激（特に水酸基（ＯＨ基）との反応）による、刺激応答性ゲルの体積変化、親水性・疎水性の状態変化を、より少量の特定成分の添加により、生じさせることができる。
【００９３】
このため、刺激応答性ゲルに結合した単球を、より少量の特定成分の添加により、刺激応答性ゲルから剥離することができる。その結果、刺激応答性ゲルから単球を剥離する際に特定成分を比較的多量に用いる必要がなく、添加される特定成分により、単球等がダメージを受けることをより効果的に抑制することができる。また、添加された特定成分の濃度を十分に低いものとすることができるため、後処理としての特定成分の除去を容易に行うことができたり、特定成分の除去の処理を省略または簡略化したりすることができる。
【００９４】
前記ポリマー（第１のポリマー）を構成する、ＯＨ基を有するモノマーとしては、例えば、Ｎ−ヒドロキシエチル（メタ）アクリルアミド、Ｎ−ヒドロキシメチル（メタ）アクリルアミド、Ｎ−ヒドロキシプロピル（メタ）アクリルアミド、Ｎ−ヒドロキシブチル（メタ）アクリルアミド、Ｎ−ヒドロキシペンチル（メタ）アクリルアミド、２，３−ジヒドロキシプロピル（メタ）アクリルアミド、ジヒドロキシブチル（メタ）アクリルアミド、ジヒドロキシペンチル（メタ）アクリルアミド、トリス（ヒドロキシメチル）メチル（メタ）アクリルアミド、２−ヒドロキシ（メタ）アクリレート、２−ヒドロキシエチル（メタ）アクリレート、２−ヒドロキシ−１−アクリロキシ−３−メタ（アクリロキシ）プロパン、２−ヒドロキシ−１，３−ジメタ（アクリロキシ）プロパン、Ｎ，Ｎ’−（１，２−ジヒドロキシエチレン）ビス（メタ）アクリルアミド、（メタ）アクリルアミドエトキシエタノール、１，４−シクロヘキサンジメタノールモノ（メタ）アクリレート等が挙げられ、これらから選択される１種または２種以上を組み合わせて用いることができるが、前記ポリマー（第１のポリマー）は、Ｎ−ヒドロキシエチルアクリルアミドを構成成分として含むものであるのが好ましい。
【００９５】
これにより、刺激応答性ゲルの水の保持力を特に優れたものとすることができ、前述したような刺激応答性ゲルの機能をより安定的に発揮することができる。また、刺激応答性ゲルが前記ポリマー（第１のポリマー）に加え、後に詳述する第２のポリマーを含むものである場合に、第１のポリマーと第２のポリマーとの親和性をより好適なものとすることができ、刺激応答性ゲル（ゲル材料）中における不本意な相分離等の問題をより長期間にわたって抑制することができ、刺激応答性ゲルの耐久性、信頼性を特に優れたものとすることができる。
【００９６】
なお、上記の説明では、ポリマーを構成するモノマーがＯＨ基を有するものである場合について中心的に説明したが、前記ポリマーがＯＨ基を有していれば、前述したような効果が得られ、例えば、ＯＨ基は、ポリマーの構成成分としての重合性化合物（モノマー等）を重合させた後に導入されたものであってもよい。
【００９７】
また、前記ポリマー（第１のポリマー）は、Ｎ−イソプロピルアクリルアミド（ＮＩＰＡＡｍ）、エチレンビスアクリルアミドのうち少なくとも一方を含むものであるのが好ましい。
【００９８】
前記ポリマー（第１のポリマー）中におけるフェニルボロン酸構造を有さないモノマーの含有率は、４０ｍｏｌ％以上８０ｍｏｌ％以下であるのが好ましく、５０ｍｏｌ％以上７５ｍｏｌ％以下であるのがより好ましい。
【００９９】
前記ポリマー（第１のポリマー）中における前記フェニルボロン酸構造を有するモノマーの含有率は、２０質量％以上４５質量％以下であるのが好ましく、２５質量％以上４３質量％以下であるのがより好ましい。
【０１００】
これにより、刺激応答性ゲルの柔軟性をより適切なものとすることができ、所定の物質（特定成分）に対する感度を特に優れたものとすることができる。
【０１０１】
これに対し、前記ポリマー（第１のポリマー）中におけるフェニルボロン酸構造を有するモノマーの含有率が前記下限値未満であったり、前記上限値を超えたりすると、刺激応答性ゲルの柔軟性や、所定の物質（特定成分）に対する感度が低下し、単球の剥離に要する所定の物質（特定成分）の使用量を多くしなければならなくなる場合がある。
【０１０２】
ポリマーは、通常、重合性化合物（モノマー等）に加えて、重合開始剤を反応させることにより得られる。
【０１０３】
重合開始剤としては、例えば、その重合様式によって、適宜選択することができるが、具体的には、過酸化ベンゾイル、過酸化ラウロイル、過酸化水素、過硫酸塩、例えば過硫酸カリウム、過硫酸ナトリウム、過硫酸アンモニウム等、アゾ系開始剤（例えば２，２’−アゾビス（２−アミジノプロパン）二塩酸塩、アゾビスジメチルバレロニトリル、２，２’−アゾビス（２−アミノプロパン）二塩酸塩、２，２’−アゾビス〔２−（５−メチル−２−イミダゾリン−２−イル）プロパン〕二塩酸塩、２，２′−アゾビスイソブチルアミド二水和物、２，２’−アゾビス［Ｎ−（２−カルボキシエチル）−２−メチルプロピオンアミジン］ｎ−ハイドレート、２，２’−アゾビス［２−メチル−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）プロピオンアミド］、２，２’−アゾビス（Ｎ，Ｎ’−ジメチレンイソブチルアミジン）二塩酸塩、２，２’−アゾビス｛２−メチル−Ｎ−〔１，１，−ビス（ヒドロキシメチル）−２−ヒドロキシエチル〕プロピオンアミド｝、２，２’−アゾビス〔２−（２−イミダゾリン−２−イル）プロパン〕二塩酸塩、４，４’−アゾビス（４−シアノ吉草酸）、２，２’−アゾビスイソブチロニトリル、２，２’−アゾビス（２，４’−ジメチルバレロニトリル）等）、ベンゾフェノン、２，２−ジメトキシ−１，２−ジフェニルエタン−１−オン、１−ヒドロキシシクロヘキシルフェニルケトン、２−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニルプロパン−１−オン、２，４，６−トリメチルベンゾイルジフェニルホスフィンオキサイド、１−［４−（２−ヒドロキシエトキシ）−フェニル］−２−ヒドロキシ−２−メチル−１−プロパン−１−オン、２，４−ジエチルチオキサントン、イソプロピルチオキサントン、１−クロロ−４−プロポキシチオキサントン、２−（３−ジメチルアミノ−２−ヒドロキシプロポキシ）−３，４−ジメチル−９Ｈ−チオキサントン−９−オンメソクロライド、２−メチル−１［４−（メチルチオ）フェニル］−２−モルホリノプロパン−１、２−ベンジル−２−ジメチルアミノ−１−（４−モルホリノフェニル）−ブタノン−１、ビス（シクロペンタジエニル）−ビス（２，６−ジフルオロ−３−（ピル−１−イル）チタニウム、ジイソプロピルオキシジカーボネート、１，３−ジ（ｔ−ブチルペルオキシカルボニル）ベンゼン、３，３’，４，４’−テトラ−（ｔ−ブチルペルオキシカルボニル）ベンゾフェノン、ｔ−ブチルペルオキシ−２−エチルヘキサノエート、ｔ−ブチルペルオキシビバレート、ｔ−ブチルペルオキシジイソブチレート等のパーオキシエステル等が挙げられる。また、過酸化水素あるいは過硫酸塩は、例えば、亜硫酸塩、Ｌ−アスコルビン酸等の還元性物質やアミン塩等を組み合わせてレドックス系の開始剤としても使用することができる。
【０１０４】
前記ポリマー（第１のポリマー）は、構成成分として、架橋剤成分を含むものであってもよい。
【０１０５】
これにより、前記ポリマー（第１のポリマー）は、架橋構造を有し、三次元的な網目構造を有するものとなる。その結果、刺激応答性ゲルの水（溶剤）の保持力を特に優れたものとすることができ、長期間にわたって安定的に好適なゲル状態を保持することができる。すなわち、刺激応答性ゲルの耐久性が優れたものとなる。
【０１０６】
架橋剤としては、重合性官能基を２個以上有する化合物を用いることができ、具体的には、エチレングリコール、プロピレングリコール、トリメチロールプロパン、グリセリン、ポリオキシエチレングリコール、ポリオキシプロピレングリコール、ポリグリセリン、Ｎ，Ｎ’−メチレンビスアクリルアミド、Ｎ，Ｎ−メチレン−ビス−Ｎ−ビニルアセトアミド、Ｎ，Ｎ−ブチレン−ビス−Ｎ−ビニルアセトアミド、トリレンジイソシアネート、ヘキサメチレンジイソシアネート、アリル化デンプン、アリル化セルロース、ジアリルフタレート、テトラアリロキシエタン、ペンタエリストールトリアリルエーテル、トリメチロールプロパントリアリルエーテル、ジエチレングリコールジアリルエーテル、トリアリルトリメリテート等が挙げられ、これらから選択される１種または２種以上を組み合わせて用いることができる。
【０１０７】
前記ポリマー（第１のポリマー）中における架橋剤成分の含有率は、０．５ｍｏｌ％以上１０．０ｍｏｌ％以下であるのが好ましく、０．８ｍｏｌ％以上８．０ｍｏｌ％以下であるのがより好ましく、１．１ｍｏｌ％以上７．０ｍｏｌ％以下であるのがさらに好ましい。
【０１０８】
これにより、前記ポリマー（第１のポリマー）の架橋度をより好適な範囲にすることができ、前述したような効果をより顕著に発揮しつつ、前記ポリマー（第１のポリマー）の柔軟性をより適切なものとすることができる。
【０１０９】
刺激応答性ゲルは、異なる複数種の高分子材料を含むものであってもよい。
例えば、刺激応答性ゲルは、高分子材料として、前述したようなフェニルボロン酸構造を有する第１のポリマーに加えて、ＯＨ基（炭素原子に結合する水酸基）を有する第２のポリマーを含むものであってもよい。
【０１１０】
これにより、前述したような刺激応答性ゲルを構成する樹脂材料がフェニルボロン酸構造とＯＨ基とを有することによる効果がより効果的に発揮されるとともに、刺激応答性ゲルの強度をより優れたものとすることができ、ゲル材料、単球分離用フィルター１、単球分離器具１０の耐久性をより優れたものとすることができる。
【０１１１】
また、刺激応答性ゲルは、前述した第１のポリマーがＯＨ基を有さないものであっても、ＯＨ基を有する第２のポリマーを含むことにより、フェニルボロン酸構造とＯＨ基とが結合した第１の状態と、フェニルボロン酸構造とＯＨ基との結合が解除された第２の状態とを好適に取り得、刺激応答性ゲルの体積変化、親水性・疎水性の状態変化を、より少量の特定成分の添加により、生じさせることができる。このため、刺激応答性ゲルに結合した単球を、より少量の特定成分の添加により、刺激応答性ゲルから剥離することができる。また、刺激応答性ゲルの水の保持力を特に優れたものとすることができ、長期間にわたって安定的に好適なゲル状態を保持することができる。また、第１のポリマーがＯＨ基を有するものであり、さらに第２のポリマーを含む場合には、前述したような効果がより顕著に発揮される。
【０１１２】
以下、刺激応答性ゲルが、樹脂材料として、フェニルボロン酸構造を有するポリマー（第１のポリマー）に加え、ＯＨ基（炭素原子に結合する水酸基）を有し、フェニルボロン酸構造を有さない第２のポリマーを含むものである場合について中心的に説明する。
【０１１３】
（第２のポリマー）
第２のポリマーは、ＯＨ基（水酸基）を有するものである。
【０１１４】
ＯＨ基は、ポリマーの構成成分としての重合性化合物（モノマー等）を重合させた後に導入されたものであってもよいが、ポリマーの構成成分としての重合性化合物が有するものであるのが好ましい。
【０１１５】
これにより、第２のポリマーが有するＯＨ基の割合等の調整を容易に行うことができる。
【０１１６】
第２のポリマーを構成する、ＯＨ基を有するモノマーとしては、例えば、Ｎ−ヒドロキシエチル（メタ）アクリルアミド、Ｎ−ヒドロキシメチル（メタ）アクリルアミド、Ｎ−ヒドロキシプロピル（メタ）アクリルアミド、Ｎ−ヒドロキシブチル（メタ）アクリルアミド、Ｎ−ヒドロキシペンチル（メタ）アクリルアミド、２，３−ジヒドロキシプロピル（メタ）アクリルアミド、ジヒドロキシブチル（メタ）アクリルアミド、ジヒドロキシペンチル（メタ）アクリルアミド、トリス（ヒドロキシメチル）メチル（メタ）アクリルアミド、２−ヒドロキシ（メタ）アクリレート、２−ヒドロキシエチル（メタ）アクリレート、２−ヒドロキシ−１−アクリロキシ−３−メタ（アクリロキシ）プロパン、２−ヒドロキシ−１，３−ジメタ（アクリロキシ）プロパン、Ｎ，Ｎ’−（１，２−ジヒドロキシエチレン）ビス（メタ）アクリルアミド、（メタ）アクリルアミドエトキシエタノール、１，４−シクロヘキサンジメタノールモノ（メタ）アクリレート等が挙げられ、これらから選択される１種または２種以上を組み合わせて用いることができるが、第２のポリマーは、Ｎ−ヒドロキシエチルアクリルアミドを構成成分として含むものであるのが好ましい。
【０１１７】
これにより、刺激応答性ゲルは、フェニルボロン酸構造とＯＨ基とが結合した第１の状態と、フェニルボロン酸構造とＯＨ基との結合が解除された第２の状態とをより好適に取り得、刺激応答性ゲルの体積変化、親水性・疎水性の状態変化を、より少量の特定成分の添加により、生じさせることができる。このため、刺激応答性ゲルに結合した単球を、より少量の特定成分の添加により、刺激応答性ゲルから剥離することができる。また、刺激応答性ゲルの水の保持力を特に優れたものとすることができ、長期間にわたって安定的に好適なゲル状態を保持することができる。
【０１１８】
また、第２のポリマーは、その構成成分として、ＯＨ基を有さないモノマーを含むものであってもよい。これにより、第２のポリマーが有するＯＨ基の割合等を好適なものに調整することができる。
【０１１９】
第２のポリマーを構成する、ＯＨ基を有さないモノマーとしては、例えば、（メタ）アクリルアミド、Ｎ−メチル（メタ）アクリルアミド、Ｎ−エチル（メタ）アクリルアミド、Ｎ−イソプロピル（メタ）アクリルアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチル（メタ）アクリルアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノプロピル（メタ）アクリルアミド、エチレンビス（メタ）アクリルアミド、Ｎ−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］（メタ）アクリルアミド、ジアセトン（メタ）アクリルアミド、Ｎ−ｔ−ブチル（メタ）アクリルアミド、Ｎ，Ｎ−ジエチル（メタ）アクリルアミド、Ｎ−（ブトキシメチル）（メタ）アクリルアミド、Ｎ−（イソブトキシメチル）（メタ）アクリルアミド、Ｎ−フェニル（メタ）アクリルアミド、２−（メタ）アクリルアミド−２−メチルスルホン酸、（メタ）アクリルアミドグリコール酸、イソブトキシメチル（メタ）アクリルアミド、（メタ）アクリルアミドエタンカルボン酸、（メタ）アクリルアミドプロパンカルボン酸、（メタ）アクリルアミドブタンカルボン酸、（メタ）アクリルアミドペンタンカルボン酸、（メタ）アクリルアミドヘキサンカルボン酸、（メタ）アクリルアミドヘプタンカルボン酸、（メタ）アクリルアミドオクタンカルボン酸、（メタ）アクリルアミドエトキシエタノール、Ｎ−ビニルラクトン、（メタ）アクリル酸モノグリセロール、メチルビニルエーテル、無水マレイン酸グリセロールモノ（メタ）アクリレート、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノプロピル（メタ）アクリルアミド各種四級塩、（メタ）アクリロイルモルホリン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノエチル（メタ）アクリレート各種四級塩、（メタ）アクリル酸、各種アルキル（メタ）アクリレート、１，４−シクロヘキサンジメタノールモノ（メタ）アクリレート、（３−（メタ）アクリルアミドプロピル）トリメチルアンモニウムクロリド、トリメチル−２−（メタ）アクロイルオキシエチルアンモニウムクロリド、りん酸２−（（メタ）アクリロイルオキシ）エチル２−（トリメチルアンモニオ）エチル、（メタ）アクリル酸３−スルホプロピルカリウム、２−（メタ）アクリルアミド−２−メチルプロパンスルホン酸、（メタ）アクリル酸２−（２−エトキシエトキシ）エチル、（メタ）アクリル酸グリシジル、ジ（エチレングリコール）ジビニルエーテル、トリ（エチレングリコール）ジビニルエーテル、ポリ（エチレングリコール）ジビニルエーテル、トリメチロールプロパンエトキシラートトリ（メタ）アクリラート、トリメチロールプロパンプロポキシラートトリ（メタ）アクリラート、Ｎ−［トリス（３−（メタ）アクリルアミドプロポキシメチル）メチル］（メタ）アクリルアミド、ビニルスルホン酸、酢酸ビニル、カルボン酸ビニル（Ｃ３〜Ｃ１０）、Ｎ−ビニルピロリドン、アクリロニトリル、スチレン、ポリエチレングリコールジ（メタ）アクリレート、１，６−ヘキサンジオールジ（メタ）アクリレート、ネオペンチルグリコールジ（メタ）アクリレート、トリプロピレングリコールジ（メタ）アクリレート、ポリプロピレングリコールジ（メタ）アクリレート、２，２−ビス〔４−（（メタ）アクリロキシジエトキシ）フェニル〕プロパン、２，２−ビス〔４−（（メタ）アクリロキシポリエトキシ）フェニル〕プロパン、２，２−ビス〔４−（（メタ）アクリロキシポリプロポキシ）フェニル〕プロパン、エチレングリコールジ（メタ）アクリレート、ジエチレングリコールジ（メタ）アクリレート、トリエチレングリコールジ（メタ）アクリレート、１，３−ブチレングリコールジ（メタ）アクリレート、２，２−ビス〔４−（（メタ）アクリロキシエトキシ）フェニル〕プロパン、２，２−ビス〔４−（（メタ）アクリロキシエトキシジエトキシ）フェニル〕プロパン、２，２−ビス〔４−（（メタ）アクリロキシエトキシポリエトキシ）フェニル〕プロパン、トリメチロールプロパントリ（メタ）アクリレート、テトラメチロールメタントリ（メタ）アクリレート、テトラメチロールメタンテトラ（メタ）アクリレート、ジペンタエリスリトールヘキサ（メタ）アクリレート、Ｎ，Ｎ’−メチレンビス（メタ）アクリルアミド、ジエチレングリコールジアリルエーテル、ジビニルベンゼン、４−（メタ）アクリルアミドベンゾ−１８−クラウン−６−エーテル、アクリロイルアミノベンゾクラウンエーテル、（メタ）アクリロイルアミノベンゾクラウンエーテル、４−ビニルベンゾクラウンエーテル等が挙げられ、これらから選択される１種または２種以上を組み合わせて用いることができる。
【０１２０】
第２のポリマー中におけるＯＨ基を有さないモノマーの含有率は、０．１ｍｏｌ％以上４０ｍｏｌ％以下であるのが好ましく、０．２ｍｏｌ％以上３０ｍｏｌ％以下であるのがより好ましく、０．３ｍｏｌ％以上２０ｍｏｌ％以下であるのがさらに好ましい。
【０１２１】
第２のポリマーは、通常、重合性化合物（モノマー等）に加えて、重合開始剤を反応させることにより得られる。
【０１２２】
重合開始剤としては、例えば、その重合様式によって、適宜選択することができるが、具体的には、過酸化ベンゾイル、過酸化ラウロイル、過酸化水素、過硫酸塩、例えば過硫酸カリウム、過硫酸ナトリウム、過硫酸アンモニウム等、アゾ系開始剤（例えば２，２’−アゾビス（２−アミジノプロパン）二塩酸塩、アゾビスジメチルバレロニトリル、２，２′−アゾビス（２−アミノプロパン）二塩酸塩、２，２′−アゾビス〔２−（５−メチル−２−イミダゾリン−２−イル）プロパン〕二塩酸塩、２，２′−アゾビスイソブチルアミド二水和物、２，２’−アゾビス［Ｎ−（２−カルボキシエチル）−２−メチルプロピオンアミジン］ｎ−ハイドレート、２，２’−アゾビス［２−メチル−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）プロピオンアミド］、２，２’−アゾビス（Ｎ，Ｎ’−ジメチレンイソブチルアミジン）二塩酸塩、２，２’−アゾビス｛２−メチル−Ｎ−〔１，１，−ビス（ヒドロキシメチル）−２−ヒドロキシエチル〕プロピオンアミド｝、２，２’−アゾビス〔２−（２−イミダゾリン−２−イル）プロパン〕二塩酸塩、４，４’−アゾビス（４−シアノ吉草酸）、２，２’−アゾビスイソブチロニトリル、２，２’−アゾビス（２，４’−ジメチルバレロニトリル）等）、ベンゾフェノン、２，２−ジメトキシ−１，２−ジフェニルエタン−１−オン、１−ヒドロキシシクロヘキシルフェニルケトン、２−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニルプロパン−１−オン、２，４，６−トリメチルベンゾイルジフェニルホスフィンオキサイド、１−［４−（２−ヒドロキシエトキシ）−フェニル］−２−ヒドロキシ−２−メチル−１−プロパン−１−オン、２，４−ジエチルチオキサントン、イソプロピルチオキサントン、１−クロロ−４−プロポキシチオキサントン、２−（３−ジメチルアミノ−２−ヒドロキシプロポキシ）−３，４−ジメチル−９Ｈ−チオキサントン−９−オンメソクロライド、２−メチル−１［４−（メチルチオ）フェニル］−２−モルホリノプロパン−１、２−ベンジル−２−ジメチルアミノ−１−（４−モルホリノフェニル）−ブタノン−１、ビス（シクロペンタジエニル）−ビス（２，６−ジフルオロ−３−（ピル−１−イル）チタニウム、ジイソプロピルオキシジカーボネート、１，３−ジ（ｔ−ブチルペルオキシカルボニル）ベンゼン、３，３’，４，４’−テトラ−（ｔ−ブチルペルオキシカルボニル）ベンゾフェノン、ｔ−ブチルペルオキシ−２−エチルヘキサノエート、ｔ−ブチルペルオキシビバレート、ｔ−ブチルペルオキシジイソブチレート等のパーオキシエステル等が挙げられる。また、過酸化水素あるいは過硫酸塩は、例えば、亜硫酸塩、Ｌ−アスコルビン酸等の還元性物質やアミン塩等を組み合わせてレドックス系の開始剤としても使用することができる。
【０１２３】
第２のポリマーは、構成成分として、架橋剤成分を含むものであってもよい。
これにより、第２のポリマーは、架橋構造を有し、三次元的な網目構造を有するものとなる。その結果、刺激応答性ゲルの水の保持力を特に優れたものとすることができ、長期間にわたって安定的に好適なゲル状態を保持することができる。すなわち、刺激応答性ゲルの耐久性が優れたものとなる。
【０１２４】
架橋剤成分としては、重合性官能基を２個以上有する化合物を用いることができ、具体的には、例えば、エチレングリコール、プロピレングリコール、トリメチロールプロパン、グリセリン、ポリオキシエチレングリコール、ポリオキシプロピレングリコール、ポリグリセリン、Ｎ，Ｎ’−メチレンビスアクリルアミド、Ｎ，Ｎ−メチレン−ビス−Ｎ−ビニルアセトアミド、Ｎ，Ｎ−ブチレン−ビス−Ｎ−ビニルアセトアミド、トリレンジイソシアネート、ヘキサメチレンジイソシアネート、アリル化デンプン、アリル化セルロース、ジアリルフタレート、テトラアリロキシエタン、ペンタエリストールトリアリルエーテル、トリメチロールプロパントリアリルエーテル、ジエチレングリコールジアリルエーテル、トリアリルトリメリテート等が挙げられ、これらから選択される１種または２種以上を組み合わせて用いることができる。
【０１２５】
第２のポリマー中における架橋剤成分の含有率は、０．５ｍｏｌ％以上７．０ｍｏｌ％以下であるのが好ましく、０．８ｍｏｌ％以上６．０ｍｏｌ％以下であるのがより好ましく、１．１ｍｏｌ％以上５．０ｍｏｌ％以下であるのがさらに好ましい。
【０１２６】
これにより、第２のポリマーの架橋度をより好適な範囲にすることができ、前述したような効果をより顕著に発揮しつつ、第２のポリマーの柔軟性をより適切なものとすることができる。
【０１２７】
第２のポリマー中におけるＯＨ基を有するモノマーの含有率は、５４ｍｏｌ％以上９９ｍｏｌ％以下であるのが好ましく、６５ｍｏｌ％以上９８．５ｍｏｌ％以下であるのがより好ましく、７６ｍｏｌ％以上９８ｍｏｌ％以下であるのがさらに好ましい。
【０１２８】
これにより、前述したような第２のポリマーがＯＨ基を有することによる効果をより顕著に発揮させつつ、ＯＨ基を有するモノマー以外の成分（架橋剤、ＯＨ基を有さないモノマー等）の効果を十分に発揮させることができる。
【０１２９】
第２のポリマーの水酸基価は、１５ｍｇＫＯＨ／ｇ以上６２０ｍｇＫＯＨ／ｇ以下であるのが好ましく、３４ｍｇＫＯＨ／ｇ以上７８ｍｇＫＯＨ／ｇ以下であるのがより好ましい。
【０１３０】
これにより、前述したような第２のポリマーがＯＨ基を有することによる効果をより顕著に発揮させつつ、刺激応答性ゲルの耐久性を特に優れたものとすることができる。
【０１３１】
刺激応答性ゲル中における第２のポリマーの含有率Ｘ２は、０．０５質量％以上９８質量％以下であるのが好ましく、０．１質量％以上７０質量％以下であるのがより好ましい。
【０１３２】
これにより、前述したような刺激応答性ゲルを構成する樹脂材料がフェニルボロン酸構造とＯＨ基とを有することによる効果がより効果的に発揮されるとともに、刺激応答性ゲルの強度をより優れたものとすることができ、ゲル材料、単球分離用フィルター１、単球分離器具１０の耐久性をより優れたものとすることができる。
【０１３３】
また、高分子材料中における第２のポリマーの含有率は、１．０質量％以上９９質量％以下であるのが好ましく、１．５質量％以上９８質量％以下であるのがより好ましい。
【０１３４】
これにより、前述したような刺激応答性ゲルを構成する樹脂材料がフェニルボロン酸構造とＯＨ基とを有することによる効果がより効果的に発揮されるとともに、刺激応答性ゲルの強度をより優れたものとすることができ、ゲル材料、単球分離用フィルター１、単球分離器具１０の耐久性をより優れたものとすることができる。
【０１３５】
刺激応答性ゲル中における第１のポリマーの含有率Ｘ１は、０．０１質量％以上７０質量％以下であるのが好ましく、０．０５質量％以上６５質量％以下であるのがより好ましい。
【０１３６】
これにより、刺激応答性ゲルの柔軟性をより好適なものとすることができ、所定の物質（特定成分）に対する感度をより優れたものとすることができる。
【０１３７】
また、高分子材料中における第１のポリマーの含有率は、１．０質量％以上７０質量％以下であるのが好ましく、２．０質量％以上６５質量％以下であるのがより好ましい。
【０１３８】
これにより、刺激応答性ゲルの柔軟性をより好適なものとすることができ、所定の物質（特定成分）に対する感度をより優れたものとすることができる。
【０１３９】
刺激応答性ゲル中における第１のポリマーの含有率をＸ１［質量％］、第２のポリマーの含有率をＸ２［質量％］としたとき、０．２≦Ｘ１／Ｘ２≦８の関係を満足するのが好ましく、１．３≦Ｘ１／Ｘ２≦１．９の関係を満足するのがより好ましい。
【０１４０】
これにより、刺激応答性ゲルの柔軟性をより適切なものとすることができ、所定の物質（特定成分）に対する感度をより優れたものとすることができる。
【０１４１】
刺激応答性ゲル中には、前述した第１のポリマー、第２のポリマー以外のポリマー（高分子材料）を含むものであってもよい。例えば、分子内に、フェニルボロン酸構造、ＯＨ基のいずれをも有していないポリマーを含むものであってもよい。
【０１４２】
刺激応答性ゲル中における高分子材料の含有率は、０．７質量％以上３６．０質量％以下であるのが好ましく、２．４質量％以上２７．０質量％以下であるのがより好ましい。
【０１４３】
（水）
刺激応答性ゲルが、水を含むものであることにより、前述した高分子材料を好適にゲル化させることができる。
【０１４４】
刺激応答性ゲル中における水の含有率は、３０質量％以上９５質量％以下であるのが好ましく、５０質量％以上９０質量％以下であるのがより好ましい。
【０１４５】
＜粒子＞
刺激応答性ゲル（ゲル材料）は、平均粒径が１０ｎｍ以上１０００ｎｍ以下の粒子（微粒子）を含むものであってもよい。
【０１４６】
これにより、ブラッグ反射による構造色を視認することができる。特に、刺激応答性ゲルの膨張または収縮に伴い、隣り合う当該粒子の距離が変化し、ブラッグ反射による構造色も変化するため、光学的（視覚的）に刺激応答性ゲルの状態（膨張収縮状態、親水性疎水性の状態）を確認することができる。その結果、刺激応答性ゲルから単球が剥離した状態であるか否かを容易に確認することができる。
【０１４７】
刺激応答性ゲル（ゲル材料）が粒子を含むものである場合、粒子の平均粒径は、１０ｎｍ以上１０００ｎｍ以下であるのが好ましいが、２０ｎｍ以上５００ｎｍ以下であるのがより好ましい。
これにより、前述したような効果がより顕著に発揮される。
【０１４８】
平均粒径とは、体積基準の平均粒径を言い、例えば、サンプルをメタノールに添加し、超音波分散器で３分間分散した分散液をコールターカウンター法粒度分布測定器（ＣＯＵＬＴＥＲ  ＥＬＥＣＴＲＯＮＩＣＳ  ＩＮＣ製ＴＡ−ＩＩ型）にて、５０μｍのアパチャーを用いて測定することにより求めることができる。
【０１４９】
微粒子の構成材料としては、シリカ、酸化チタン等の無機材料；ポリスチレン、ポリエステル、ポリイミド、ポリオレフィン、ポリ（メタ）アクリル酸メチル、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリエーテルスルフォン、ナイロン、ポリウレタン、ポリ塩化ビニル、ポリ塩化ビニリデン等の有機材料（ポリマー）等が挙げられるが、微粒子は、シリカ微粒子であるのが好ましい。
【０１５０】
これにより、微粒子の形状の安定性等を特に優れたものとし、刺激応答性ゲル（ゲル材料）、単球分離用フィルター、単球分離器具の耐久性、信頼性等を特に優れたものとすることができる。また、シリカ微粒子は、粒度分布がシャープなもの（単分散微粒子）として入手が比較的容易であるため、刺激応答性ゲル（ゲル材料）、単球分離用フィルター１、単球分離器具１０の安定的な生産、供給の観点からも有利である。
【０１５１】
微粒子の形状は、特に限定されないが、球状であるのが好ましい。これにより、コロイド結晶による構造色の視認を容易に行うことができる。
【０１５２】
ゲル材料は、異なる複数種の微粒子を含むものであってもよい。
ゲル材料中における微粒子の含有率は、１．６質量％以上３６質量％以下であるのが好ましく、４．０質量％以上２４質量％以下であるのがより好ましい。
【０１５３】
これにより、ゲル材料が微粒子を含むことによる前述したような効果がより顕著に発揮される。
【０１５４】
＜その他の成分＞
刺激応答性ゲル（ゲル材料）は、前述した以外の成分（その他の成分）を含むものであってもよい。
【０１５５】
このような成分としては、例えば、着色剤、スリップ剤（レベリング剤）、防黴剤、防腐剤、酸化防止剤、水以外の溶媒、保湿剤等が挙げられる。
【０１５６】
《単球分離方法》
次に、単球分離方法について説明する。
図３は、単球分離方法の好適な実施形態を示すフローチャートである。
【０１５７】
図３に示すように、本実施形態の単球分離方法は、前述したような単球分離用フィルターに、単球を含有する被処理液を接触させる工程（被処理液接触工程）と、前記被処理液を接触させた前記単球分離用フィルターに、前記刺激応答性ゲルを膨張または収縮させる所定の物質（特定成分）を接触させる工程（特定成分接触工程）とを有する。
【０１５８】
前述したように、特定成分を付与する前においては、刺激応答性ゲルは疎水性の高い状態であり、被処理液接触工程で被処理液を単球分離用フィルターと接触させることにより、被処理液中に含まれる単球を高い選択性で捕捉（吸着）することができる。
【０１５９】
一方、特定成分接触工程で、単球を捕捉（吸着）した単球分離用フィルターに、特定成分を接触させることにより、刺激応答性ゲルは親水性の高い状態になるとともに、体積変化を生じ、単球分離用フィルターに捕捉（吸着）されていた単球は、本工程で、効率よく単球分離用フィルターから剥離される。
【０１６０】
このようなことから、被処理液から効率よく単球を分離・回収することができる。特に、回収された単球に、被処理液中に含まれる他の成分（例えば、リンパ球、顆粒球、赤血球、血小板等）が混入することを効果的に防止、抑制しつつ、高い回収率で単球を回収することができる。
【０１６１】
上記のような単球分離方法は、単球分離用フィルターに対し、直接、被処理液、前記特定成分を付与することにより行ってもよいし、単球分離用フィルターを前述したようなハウジング内に収容した状態（単球分離器具の状態）で流入口から被処理液、前記特定成分を供給してもよい。
【０１６２】
＜被処理液接触工程＞
被処理液接触工程は、前述したような単球分離用フィルターに、単球を含有する被処理液を接触させれば、いかなる方法で行ってもよいが、所定の速度（流速）で被処理液を連続的に供給しつつ行うのが好ましい。
これにより、単球の分離・回収の効率をより優れたものとすることができる。
【０１６３】
また、被処理液のハウジング内の滞留時間は、３秒以上３００秒以下であるのが好ましく、５秒以上１８０秒以下であるのがより好ましい。
【０１６４】
これにより、より短時間で被処理液の処理を行うことができるとともに、単球分離用フィルターによって分離される単球の選択性、単球の回収率をより優れたものとすることができる。
【０１６５】
＜特定成分接触工程＞
特定成分接触工程は、被処理液を接触させた単球分離用フィルターに、特定成分を接触させれば、いかなる方法で行ってもよいが、特定成分を含む液体（例えば、特定成分を含む溶液や分散液等）を単球分離用フィルターに接触させるのが好ましい。
【０１６６】
これにより、単球分離用フィルター（刺激応答性ゲル）と所定の物質（特定成分）とを効率よく接触させることができ、単球の回収効率をより優れたものとすることができる。
【０１６７】
また、本工程は、特定成分を含む液体を所定の速度（流速）で連続的に供給しつつ行うのが好ましい。
これにより、単球の分離・回収の効率をより優れたものとすることができる。
【０１６８】
また、特定成分を含む液体のハウジング内の滞留時間は、３秒以上６０秒以下であるのが好ましく、５秒以上３０秒以下であるのがより好ましい。
【０１６９】
これにより、より短時間で特定成分を含む液体を用いた処理を行うことができるとともに、単球の回収率をより優れたものとすることができる。
【０１７０】
以上、好適な実施形態について説明したが、これらに限定されるものではない。
例えば、単球分離用フィルター、単球分離器具は、前述した以外の構成を備えるものであってもよい。
【０１７１】
また、前述した実施形態では、単球分離器具のハウジング内の空間に、フェニルボロン酸構造を有するポリマーを含み、所定の物質による刺激により膨張または収縮する刺激応答性ゲルを含む材料で構成された単球分離用フィルターが配されている場合について代表的に説明したが、ハウジングの内表面が前記刺激応答性ゲルを含む材料で構成されたものであってもよい。
【０１７２】
また、単球分離用フィルター、単球分離器具は、構成部材の一部が、交換可能に構成されたものや、取り外しおよび再装着が可能に構成されたものであってもよい。例えば、単球分離器具において、単球分離用フィルターは、交換可能、または、取り外しおよび再装着が可能に構成されたもの（例えば、カートリッジ式のもの等）であってもよい。
【０１７３】
また、前述した実施形態では、単球分離用フィルター、単球分離器具を構成する刺激応答性ゲル材料は、単球の分離、回収の処理を行う前の状態においても、ゲル状態をなすものである場合について代表的に説明したが、刺激応答性ゲル材料は、単球の分離、回収の処理を行う際にゲル状態をなすものであればよく、例えば、単球分離用フィルター、単球分離器具の保存時等においては、ゲル状態をなしていないもの（例えば、乾燥状態のもの）であってもよい。このような場合、例えば、単球の分離、回収の処理に先立ち、水を含む液体等を刺激応答性ゲル材料に付与することにより、ゲル状態をなすものとすることができる。
【実施例】
【０１７４】
以下に実施例を掲げてさらに詳しく説明するが、これら実施例のみに限定されるものではない。
【０１７５】
［１］単球分離用フィルターの製造
（実施例１）
容器中において、フェニルボロン酸構造を有するモノマーとしての３−アクリルアミドフェニルボロン酸の４０質量％エタノール溶液と、Ｎ−ヒドロキシエチルアクリルアミドの１０質量％エタノール溶液と、架橋剤としてのＮ，Ｎ’−メチレンビスアクリルアミドの２質量％エタノール溶液と、重合開始剤としての下記式（１）で表される化合物の５質量％エタノール溶液とを混合し、さらに、ここに、シリカナノ粒子水分散液（シリカ濃度：４０％）を少量ずつ添加、撹拌し、混合液を得た。
【０１７６】
【化１】
2017038567.tif 000002
【０１７７】
次に、前記混合液中に、その液量体積の２分の１のイオン交換樹脂を入れ、構造色がでるまでよく撹拌した。
【０１７８】
次に、構造色が発現した混合液のみをマイクロピペットで採取することにより、イオン交換樹脂と分離し、別の容器へ入れた。
【０１７９】
その後、窒素バブリングにより脱気処理を行った。脱気時間は３００秒、窒素ガス流量は１０ｍＬ／分とした。
【０１８０】
次に、構造色が発現した混合液を、セルロース製の不織布に塗布した。このとき、不織布全体に混合液を均一に付与した。
【０１８１】
次に、混合液が付与された不織布に紫外線（ピーク波長：３６５ｎｍ；ウシオ電機社製ＳＰ−７）を照射し、混合液の重合反応を行い、第１のポリマーを合成した。これにより、不織布を構成する繊維の表面を、第１のポリマーと、水と、微粒子とを含む刺激応答性ゲル（ゲル材料）で被覆し、不織布状の単球分離用フィルターを得た。
【０１８２】
なお、前記の説明において、特に温度の開示のないものは、室温（２５℃）にて行った。
【０１８３】
（実施例２〜５）
混合液の調製に用いる成分の種類、使用量を調整することにより、刺激応答性ゲル（ゲル材料）の構成を表１に示すものとなるようにした以外は、前記実施例１と同様にして単球分離用フィルターを製造した。
【０１８４】
（実施例６）
容器中において、ＯＨ基を有するモノマーとしてのＮ−ヒドロキシエチルアクリルアミドの１０質量％水溶液と、架橋剤としてのＮ，Ｎ’−メチレンビスアクリルアミドの２質量％水溶液と、重合開始剤としての上記式（１）で表される化合物の５質量％水溶液とを混合し、さらに、ここに、シリカナノ粒子水分散液（シリカ濃度：４０％）を少量ずつ添加、撹拌し、第２の混合液（第２のゲル材料調製用混合液）を得た。
【０１８５】
次に、前記第２の混合液中に、その液量体積の２分の１のイオン交換樹脂を入れ、構造色がでるまでよく撹拌した。
【０１８６】
次に、構造色が発現した第２の混合液のみをマイクロピペットで採取することにより、イオン交換樹脂と分離し、別の容器へ入れた。
【０１８７】
その後、窒素バブリングにより脱気処理を行った。脱気時間は３００秒、窒素ガス流量は１０ｍＬ／分とした。
【０１８８】
次に、構造色が発現した第２の混合液を、セルロース製の不織布に塗布した。このとき、不織布全体に混合液を均一に付与した。
【０１８９】
次に、第２の混合液が付与された不織布に紫外線（ピーク波長：３６５ｎｍ；ウシオ電機社製ＳＰ−７）を照射し、第２の混合液の重合反応を行い、第２のポリマーを合成した。これにより、不織布を構成する繊維の表面を、第２のポリマーと、水と、微粒子とを含むゲル状物質（第２のゲル材料）で被覆した。
【０１９０】
上記のようにして得られた繊維が第２のゲル材料で被覆された不織布を、２４時間純水に浸漬した後、前記純水から取り出し、エタノール中に浸漬した。
【０１９１】
その後、繊維が第２のゲル材料で被覆された不織布をエタノール中から取り出し、余分なエタノールを除去した後、ガラス容器に入れた。
【０１９２】
次に、フェニルボロン酸構造を有するモノマーとしての３−アクリルアミドフェニルボロン酸の４０質量％エタノール溶液と、Ｎ−ヒドロキシエチルアクリルアミドの１０質量％エタノール溶液と、架橋剤としてのＮ，Ｎ’−メチレンビスアクリルアミドの２質量％エタノール溶液と、重合開始剤としての上記式（１）で表される化合物の５質量％エタノール溶液とを混合し第１の混合液とし、当該第１の混合液を、別の容器へ入れ、窒素バブリングにより脱気処理を行った。脱気時間は３００秒、窒素ガス流量は１０ｍＬ／分とした。
【０１９３】
脱気処理を施した第１の混合液（３−アクリルアミドフェニルボロン酸を含む混合液）をニードル付きシリンジで吸い取り、ニードルにより、繊維が第２のゲル材料で被覆された不織布上に全量滴下した。
３０分間静置した後、不織布の周囲の余分な第１の混合液を除去した。
【０１９４】
次に、繊維が第２のゲル材料で被覆された不織布および第１の混合液の入ったガラス容器に、紫外線（ピーク波長：３６５ｎｍ；ウシオ電機社製ＳＰ−７）を照射し、前記第１の混合液の重合反応を行い、第１のポリマーを合成した。これにより、第１のポリマー、第２のポリマー、水および微粒子を含む刺激応答性ゲル（ゲル材料）で繊維が被覆された不織布状の単球分離用フィルターを得た。
【０１９５】
なお、前記の説明において、特に温度の開示のないものは、室温（２５℃）にて行った。
【０１９６】
（実施例７〜１０）
第１の混合液、第２の混合液の調製に用いる成分の種類、使用量を調整することにより、刺激応答性ゲル（ゲル材料）の構成を表１に示すものとなるようにした以外は、前記実施例６と同様にして単球分離用フィルターを製造した。
【０１９７】
（比較例１）
厚さ１．１ｍｍのポリウレタン製のスポンジ状多孔質体を直径２６ｍｍの円形に切り抜いて、単球分離用フィルター（単球捕捉フィルター）とした。ポリウレタン製のスポンジ状多孔質体が有する空孔の孔径は、６．２μｍであった。
【０１９８】
なお、前記各実施例および比較例の説明において、特に温度の開示のないものは、室温（２５℃）にて行った。
【０１９９】
前記各実施例の単球分離用フィルターを構成する刺激応答性ゲル（ゲル材料）の構成を表１にまとめて示す。なお、表１中、モノマーとしての３−アクリルアミドフェニルボロン酸を「Ｂ１」、モノマーとしてのビニルフェニルボロン酸を「Ｂ２」、モノマーとしてのＮ−ヒドロキシエチルアクリルアミドを「Ｈ１」、モノマーとしての２−ヒドロキシエチルメタクリレートを「Ｈ２」、モノマーとしてのＮ−ヒドロキシメチルアクリルアミドを「Ｈ３」、モノマーとしてのＮ−トリス（ヒドロキシメチル）メチルアクリルアミドを「Ｈ４」、架橋剤としてのＮ，Ｎ’−メチレンビスアクリルアミドを「ＢＡ１」で示した。
【０２００】
また、前記実施例６〜１０の単球分離用フィルターを構成する刺激応答性ゲル（ゲル材料）について、顕微鏡による観察を行ったところ、第１のポリマーと第２のポリマーとの相分離が認められず、これらが微視的に一体化していることが確認された。
【０２０１】
また、前記実施例６〜１０と同様にして製造した刺激応答性ゲル（ゲル材料）について、示差走査熱量分析（ＤＳＣ）による融点の吸熱ピークの測定を行ったところ、独立した状態での第１のポリマーの融点のピーク、独立した状態での第２のポリマーの融点のピークが認められず、第１のポリマーの融点のピークおよび第２のポリマーの融点のピークとは異なる温度に、顕著な融点のピークが確認された。
【０２０２】
また、前記実施例６〜１０と同様にして製造した刺激応答性ゲル（ゲル材料）について、第２のポリマーのみを溶解し、第１のポリマーの溶解しない有機溶媒としてのトルエン（第２のポリマーの２５℃における溶解度が１ｇ／１００ｇ以上であり、かつ、第１のポリマーの２５℃における溶解度が０．０１ｇ／１００ｇ以下である）を、刺激応答性ゲル（ゲル材料）：１０ｇに対する添加量が１０００ｇとなるように２５℃で添加し、さらにこの温度で十分に撹拌した後に、フィルターとして、デュラポア（Ｄｕｒａｐｏｒｅ）メンブレンフィルターＨＶＨＰ０４７００（ｍｉｌｉｐｏｒｅ社製）を用いた濾過を行い、理論的な抽出液の総量（ろ過時における溶媒の揮発がないものと仮定した場合の抽出液の総量）が、用いた刺激応答性ゲル（ゲル材料）の２００倍量（質量基準）となるように、前記溶媒で残渣を洗浄した場合に、抽出液中に含まれる前記溶媒に混合された刺激応答性ゲル（ゲル材料）中に含まれる第１のポリマーおよび第２のポリマーのうち前記溶媒に可溶な成分の含有量（Ｗ１［ｇ］）に対する、抽出液中に含まれる第１のポリマーおよび第２のポリマーのうち前記溶媒に可溶な成分の量（Ｗ２［ｇ］）の割合（（Ｗ２／Ｗ１）×１００）は、いずれも、１質量％以下であった。
【０２０３】
これらの結果から、前記実施例６〜１０にかかる刺激応答性ゲル（ゲル材料）中において、第２のポリマーが第１のポリマーの網目に入り込んでいることがわかる。
【０２０４】
【表１】
2017038567.tif 000003
【０２０５】
［２］単球分離器具の製造
前記各実施例および比較例で製造した直径２６ｍｍの円形の単球分離用フィルターを複数枚重ね合わせ、厚さ３０ｍｍ、体積１６ｃｍ３の積層体を得た。
【０２０６】
当該積層体をポリオレフィン製のシート材上に設置した後、当該シート材を２つ折りし、チューブ形状をなす流入口および流出口となるべき部材を設置した上で、シート材を熱融着した。これにより、図１、図２に示すように、ハウジング内に単球分離用フィルターが収容されてなる単球分離器具が得られた。
【０２０７】
ハウジング内の空間（ゲル収容可能空間中）での単球分離用フィルターの充填率（前記各実施例については、刺激応答性ゲルが収縮した状態における充填率）は、いずれも８５％であった。
【０２０８】
［３］評価
［３．１］単球の選択的吸着性
前記［２］で製造した単球分離器具の流入口に軟質ポリ塩化ビニル製チューブを接続し、流出口に２１Ｇ注射針（２１Ｇ）を接続し、この注射針の先端に、ろ過した血液を回収できるように血液回収容器をセットした。なお、流出口から血液回収容器までの落差は１５ｃｍとした。
【０２０９】
最初に、流入口から０．５質量％アルブミン加生理食塩水をハウジング内に導入してプライミングし、次いで、予め各血球成分数（リンパ球、顆粒球、赤血球および血小板）をカウントしたＣＰＤ加新鮮全血（末梢血）１０ｍＬを３ｍＬ／ｍｉｎの流速でろ過し、単球分離用フィルターに単球を捕捉（吸着）させた。その後、３０ｍＬの０．５質量％アルブミン加生理食塩水を流して単球分離用フィルターを洗浄した。
【０２１０】
このような操作の終了後に、ろ液中の各血球成分の数をカウントし、捕捉率を算出した。
【０２１１】
なお、ろ過前後の各血球成分数は、自動血球計算機（ＳｙｓｍｅｘＳＥ−９０００）で測定した。
【０２１２】
また、前記の説明において、特に温度の開示のないものは、室温（２５℃）にて行い、液体としても２５℃のものを用いた。
【０２１３】
各血球成分について、捕捉率が８０％以上のものを「Ａ」、捕捉率が６０％以上８０％未満のものを「Ｂ」、捕捉率が４０％以上６０％未満のものを「Ｃ」、捕捉率が２０％以上４０％未満のものを「Ｄ」、捕捉率が２０％未満のものを「Ｅ」と評価した。
【０２１４】
［３．２］単球の回収性
前記［３．１］で単球を吸着させた単球分離器具について、流入口から０．０５質量％のフルクトース水溶液５０ｍＬをハウジング内に導入し、この際に流出口から流出する液体を回収した。
【０２１５】
このような操作の終了後に、回収された液体中の単球の数をカウントし、前記［３．１］で求めた捕捉率から、単球の回収率を求めた。すなわち、前記［３．１］で求めた捕捉率から求められる単球の捕捉量をＡ［個］、回収された液体中の単球の数をＢ［個］としたとき、Ｂ／Ａ×１００で表される単球の回収率を求めた。
【０２１６】
単球の回収率が９０％以上のものを「Ａ」、単球の回収率が７０％以上９０％未満のものを「Ｂ」、単球の回収率が５０％以上７０％未満のものを「Ｃ」、単球の回収率が３０％以上５０％未満のものを「Ｄ」、単球の回収率が３０％未満のものを「Ｅ」と評価した。
【０２１７】
なお、回収液中に含まれる単球の数は、自動血球計算機（ＳｙｓｍｅｘＳＥ−９０００）で測定した。
【０２１８】
また、前記の説明において、特に温度の開示のないものは、室温（２５℃）にて行い、液体としても２５℃のものを用いた。
【０２１９】
これらの結果を表２にまとめて示す。なお、前記各実施例および比較例での、被処理液のハウジング内での滞留時間、特定成分を含む液体（フルクトース水溶液）のハウジング内での滞留時間は、いずれも２０秒であった。
【０２２０】
【表２】
2017038567.tif 000004
【０２２１】
表２から明らかなように、各実施例では、高い選択性で単球を捕捉、分離できるとともに、被処理液に含まれる他の成分から分離した単球（単球分離用フィルターが捕捉した単球）を、単球分離用フィルターから剥離し、効率よく回収することができた。これに対し、比較例では、満足な結果が得られなかった。具体的には、比較例１では、単球を単球分離用フィルターで捕捉することはできたものの、捕捉した単球を単球分離用フィルターから効率よく分離、回収することができなかった。
【０２２２】
また、前記各実施例では、前記［３．２］で、フルクトース水溶液をハウジング内に導入し、フルクトース（特定成分）と単球分離用フィルターとを接触させた際に、刺激応答性ゲルの色調が変化し、刺激応答性ゲルの状態（膨張収縮状態、親水性疎水性の状態）を確認することができ、その結果、刺激応答性ゲルから単球が剥離した状態であるか否かを容易に判断することができた。これに対し、比較例では、このような色調の変化は認められなかった。
【０２２３】
また、単球の回収に用いる液体として、フルクトース水溶液の代わりに、０．１０質量％の乳酸水溶液、０．１０質量％のマンニトール水溶液を用いた以外は、前記と同様の処理を行ったところ、前記と同様の結果が得られた。
【０２２４】
また、単球分離用フィルターを、刺激応答性ゲルからなる中空糸状のもの、刺激応答性ゲルを含む材料で構成された粒子状のものとした以外は、前記各実施例と同様にして単球分離用フィルター、単球分離器具を製造し、前記と同様の評価を行ったところ、前記と同様の結果が得られた。
【符号の説明】
【０２２５】
１０…単球分離器具（単球分離装置）、１…単球分離用フィルター、２…ハウジング、３…流入口、４…流出口
【図１】
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【図２】
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【図３】
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