(57)【要約】【課題】多種多様な検体から、液体クロマトグラフィーやガスクロマトグラフィー測定等ための前処理を多検体同時に簡便かつ適確に行うことを可能とするウェルプレートの提供。【解決手段】各ウェルに２種類以上の相互に性質の異なる吸着剤を充填してなる固相抽出クロマトグラフィー用貫通型マルチウェルプレート。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
各ウェルに２種類以上の相互に性質の異なる吸着剤を充填してなる固相抽出クロマトグラフィー用貫通型マルチウェルプレート。
【請求項２】
２種類以上の相互に性質の異なる吸着剤が、２層以上に積層充填又は混合充填してなるものである請求項１記載の固相抽出クロマトグラフィー用貫通型マルチウェルプレート。
【請求項３】
２種類以上の相互に性質の異なる吸着剤が、シリカゲル系吸着剤、合成樹脂系吸着剤、カーボン系吸着剤、アルミナ系吸着剤、ジルコニア系吸着剤、チタニア系吸着剤、硝酸銀系吸着剤、硫酸マグネシウム系吸着剤及び硫酸ナトリウム系吸着剤から選ばれる２種類以上である請求項１又は２記載の固相抽出クロマトグラフィー用貫通型マルチウェルプレート。
【請求項４】
マルチウェルプレートが、９６ウェル〜３８４ウェルである請求項１〜３のいずれか１項記載の固相抽出クロマトグラフィー用貫通型マルチウェルプレート。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、各種固相抽出クロマトグラフィーに使用する貫通型マルチウェルプレートに関する。
【背景技術】
【０００２】
液体クロマトグラフィーやガスクロマトグラフィー等による種々の対象成分の測定において、多数の検体を同時に前処理するため９６ウェル等の固相抽出用ウェルプレートが使用されている。ここで、固相抽出用ウェルプレートを使用する主な理由は、検体中の非測定成分が液体クロマトグラフィーやガスクロマトグラフィー等における測定対象成分の検出や定量を阻害するのを防ぐためであり、シリカゲル系吸着剤等を充填した固相抽出用ウェルプレートを用いて液体クロマトグラフィーやガスクロマトグラフィー等の分析に阻害となる成分を除去もしくは減少させる処理が行なわれる（前処理）。このような前処理を迅速に行うため、予めシリカゲル系吸着剤等が充填された固相抽出用ウェルプレートが市販されている（非特許文献１）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００３】
【非特許文献１】http://www.sigmaaldrich.com/content/dam/sigma-aldrich/docs/SAJ/Brochure/1/saj1608.pdf
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、被測定検体の前処理にあたって、シリカゲル系吸着剤などを充填した固相抽出用ウェルプレートで前処理しても、吸着除去できる成分は限られており、検体種によっては、固相抽出クロマトグラフィーで十分な前処理ができずに、液体クロマトグラフィーやガスクロマトグラフィー等の測定において、測定対象成分の検出を阻害する夾雑成分による妨害が見られるケースが多くなってきた。この原因は、妨害となる夾雑成分が単一でなく検体種によって多種多様であり、その化学特性も大きく異なることから、単一の吸着剤では除去が困難であることが考えられる。
従って、本発明の課題は、固相抽出クロマトグラフィーの前処理を簡便かつ適確に行うことを可能とする固相抽出クロマトグラフィー用貫通型マルチウェルプレートを提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
そこで本発明者は、固相抽出用マルチウェルプレートの各ウェルに、２種類以上の相互に性質の異なる吸着剤を充填した固相抽出用貫通型マルチウェルプレートを予め作製しておけば、一回の前処理で被測定検体中に存在する様々な夾雑成分の除去を可能とし、液体クロマトグラフィーやガスクロマトグラフィー等の測定における測定対象成分に対する妨害物質を除去もしくは減少させ、正確な定量が可能になることを見出し、本発明を完成した。
【０００６】
すなわち、本発明は、次の〔１〕〜〔４〕を提供するものである。
【０００７】
〔１〕各ウェルに２種類以上の相互に性質の異なる吸着剤を充填してなる固相抽出クロマトグラフィー用貫通型マルチウェルプレート。
〔２〕２種類以上の相互に性質の異なる吸着剤が、２層以上に積層充填又は混合充填してなるものである〔１〕記載の固相抽出クロマトグラフィー用貫通型マルチウェルプレート。
〔３〕２種類以上の相互に性質の異なる吸着剤が、シリカゲル系吸着剤、合成樹脂系吸着剤、カーボン系吸着剤、ジルコニア系吸着剤、チタニア系吸着剤、硝酸銀系吸着剤及び硫酸ナトリウム系吸着剤等から選ばれる２種類以上である〔１〕又は〔２〕記載の固相抽出クロマトグラフィー用貫通型マルチウェルプレート。
〔４〕マルチウェルプレートが、９６ウェル〜３８４ウェルである〔１〕〜〔３〕のいずれかに記載の固相抽出クロマトグラフィー用貫通型マルチウェルプレート。
【発明の効果】
【０００８】
本発明の固相抽出クロマトグラフィー用貫通型マルチウェルプレートを用いれば、多くの夾雑物を含む検体の前処理が簡便かつ迅速になり、その後の液体クロマトグラフィーやガスクロマトグラフィー等の測定の定量性や再現性が格段に向上する。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
本発明の固相抽出クロマトグラフィー用貫通型マルチウェルプレートは、各ウェルに、２種類以上の相互に性質の異なる吸着剤を充填してなる。
【００１０】
２種類以上の相互に性質の異なる吸着剤としては、例えば、シリカゲル系吸着剤、合成樹脂系吸着剤、カーボン系吸着剤、アルミナ系吸着剤、ジルコニア系吸着剤、チタニア系吸着剤、硝酸銀系吸着剤、硫酸マグネシウム系吸着剤、硫酸ナトリウム系吸着剤等が挙げられ、これらから２種類以上を選択して用いる。この際、相互に性質の異なる２種類を選択して用いるのが好ましい。
【００１１】
具体的には、シリカゲル系吸着剤とカーボン系吸着剤の組み合わせ、合成樹脂系吸着剤とカーボン系吸着剤の組み合わせ、シリカゲル系吸着剤と合成樹脂系吸着剤の組み合わせ、ジルコニア系吸着剤とシリカゲル系吸着剤の組み合わせ、シリカゲル系吸着剤とカーボン系吸着剤の組み合わせ、官能基の異なるシリカゲル系吸着剤の組み合わせ、細孔設計やグラファイト率の異なるカーボン系充填剤の組み合わせ等が挙げられる。これらの組み合わせのうち、シリカゲル系吸着剤とカーボン系吸着剤の組み合わせ、合成樹脂系吸着剤とカーボン系吸着剤の組み合わせがより好ましい。
【００１２】
ここで、シリカゲル系吸着剤の例としては、シリカゲル、ケイ酸マグネシウムの他、各種官能基（オクタデシル基、オクチル基、エチレンジアミン-N-プロピル基、アミノプロピル基、エチレンジアミン−Ｎ−プロピル基、フェニル基、ジヒドロキシプロピル基、カルボキシル基、トリメチルアミノプロピル基、スルホン酸基もしくはベンゼンスルホンサン基、酸化ジルコニウム、酸化チタン、酸化アルミニウム等）を化学結合したシリカゲル等が挙げられる。
【００１３】
また、合成樹脂系吸着剤としては、スチレン系合成吸着剤、スチレン−ジビニルベンゼン系合成吸着剤、アクリルエステル系合成吸着剤、ポリメタクリレート系合成吸着剤等が挙げられる。
【００１４】
カーボン系吸着剤としては、グラファイトカーボンブラック、グラファイトカーボン、活性炭、カーボンモレキュラーシーブ等が挙げられる。
【００１５】
これらの吸着剤の充填手段は、各ウェルに２層以上に積層又は混合する手段が挙げられるが、２層以上に積層するのが吸着特性の点で特に好ましい。なお、積層する場合は、２種の吸着剤のいずれが上でもよいが、カーボン系吸着剤やシリカ系充填剤は、吸着容量が大きいため、多量の夾雑成分の除去を目的として上に充填すると、下に充填する吸着剤の特性を確保できるため望ましい。
【００１６】
これらの吸着剤を２種類積層又は混合する場合、各吸着剤の重量比は、吸着特性を考慮し、１：１０〜１０：１が好ましく、１：５〜５：１がより好ましく、１：３〜３：１がさらに好ましい。
【００１７】
固相抽出クロマトグラフィー用積層又は混合充填の貫通型マルチウェルプレートのプレート形状としては、一般に用いられている固相抽出クロマトグラフィー用と同等形状の１２ウェル〜３８４ウェルプレートが挙げられるが、４８〜３８４ウェルプレートがより好ましく、９６〜３８４ウェルプレートがさらに好ましく、９６ウェルプレートがさらに好ましい。９６ウェルプレートを用いれば、９６ウェルプレート用の市販のハードウェアが利用でき、多検体前処理の自動化が可能である。
【００１８】
固相抽出クロマトグラフィー用積層又は混合充填の貫通型マルチウェルプレートのプレート別の形状として、固相抽出用ウェルプレートを反転させても何れの向きからでも汎用の装置で利用できる製品とすることもできる。このウェルプレートの形状としては、一般に用いられている固相抽出クロマトグラフィー用ウェルプレートとは異なり、両端をオス型ルアーチップ９６ウェルプレートとして、各ウェルに固相抽出用吸着剤を積層もしくは、混合充填する形状である。この際、別に用意する片面ルアーチップメス型９６ウェルリザーバープレートと連結すると、市販のハードウェアが利用できる固相抽出クロマトグラフィー用９６ウェルプレートと同様の形状となる。また、両端オス型ルアーチップ固相抽出クロマトグラフィー用９６ウェルプレートは反転しても片面ルアーチップメス型９６ウェルプレートと連結でき、通常の固相抽出クロマトグラフィー用９６ウェルプレートの形状と異なり、固相抽出クロマトグラフィー用９６ウェルプレートをどちらの向きからでも市販のハードウェアで利用することができる。この事により、この形状の固相抽出クロマトグラフィー用積層又は混合充填の貫通型マルチウェルプレートは、試料を添加、洗浄した後、９６ウェルプレートを反転して抽出できることから、試料中の目的化合物の回収に有効である。なお、本発明における９６ウェルプレートのルアーチップ形状は、両端メス型ルアーチップの９６ウェル固相抽出クロマトグラフィー用積層もしくは、混合充填の貫通型マルチウェルプレートと、それに接続する片面ルアーチップオス型９６ウェルリザーバープレートの組み合わせでも良い。また、ここに示したリザーバープレートに吸着剤を充填して、反転型マルチウェルプレートと連結して積層しても良い。
【００１９】
本発明の固相抽出クロマトグラフィー用貫通型マルチウェルプレートを用いれば、液体クロマトグラフィー測定やガスクロマトグラフィー測定などに妨害となる夾雑成分を多検体同時に簡便な操作で除去可能である。
【実施例】
【００２０】
次に実施例を挙げて本発明を詳細に説明する。
【００２１】
実施例１
平成１７年１月２４日付け食安発第0124001号厚生労働省医薬食品局食品安全部長通知（http://www.mhlw.go.jp/stf/seisakunitsuite/bunya/kenkou_iryou/shokuhin/zanryu/zanryu3/index.html）の「食品に残留する農薬、飼料添加物又は動物用医薬品の成分である物質の試験法」、「第２章  一斉試験法」、「３．試薬・試液：試薬・試液の別紙［３０８ＫＢ］」に示される「グラファイトカーボン／アミノプロピルシリル化シリカゲル積層ミニカラム（５００mg／５００mg）」に準じ、貫通型９６ウェルプレートの各ウェルにグラファイトカーボンとアミノプロピルシリル化シリカゲルを２５mg／２５mg積層し、本発明の固相抽出クロマトグラフィー用貫通型マルチウェルプレートを作製した。これを用いて、試料添加量や試験液濃縮量を通知法の１／２０に調整して前処理を実施したところ、通知法と同等の前処理が短時間で９６検体同時に処理できた。
【００２２】
実施例２
貫通型９６ウェルプレートの各ウェルに酸化ジルコニウム結合シリカゲル２０mgと、オクタデシルシリル化シリカゲル５０mgを混合して、本発明の固相抽出クロマトグラフィー用貫通型マルチウェルプレートを作成した。これを用いてオレンジ抽出物を本発明の固相抽出クロマトグラフィー用貫通型マルチウェルプレートに添加し、アセトニトリル０．５mL ２回で溶出したところ、既存製品の方法と同等の前処理が短時間で９６検体同時に処理できた。
【００２３】
実施例３
貫通型９６ウェルプレートの各ウェルに、異なる表面積のカーボンモレキュラーシーブを２０mg/２０mg積層し、本発明の反転可能な固相抽出クロマトグラフィー用貫通型マルチウェルプレートを作製し、試料添加量や試験液濃縮量を既存製品の方法の1/5に調整して前処理を実施すれば、既存製品の方法と同等の前処理が短時間で９６検体同時に処理が可能である。