(57)【要約】      （修正有）【課題】生体物質用エンドトキシン除去剤の提供。【解決手段】一般式（１）で表される化合物及び／又は下記一般式（２）で表される化合物と水とを含む生体物質用エンドトキシン除去剤であって、生体物質が糖類、タンパク質及び核酸からなる群か選ばれる少なくとも１種である生体物質用エンドトキシン除去剤。2017222628.tif 0000162017222628.tif 000017［式（１）又は式（２）中、Ａ１Ｏ〜６０はそれぞれ独立にＣ２〜３のアルキレンオキシ基を表し、ｍ１〜６は、Ａ１Ｏ〜６０の平均付加モル数を表し、ｍ１，４は１〜１００、ｍ２，３，５，６は０〜１００の数である。Ｒ１は、それぞれ独立にＨ、ＯＨ基、アルキル基、アルキルエーテル基又はアシルオキシ基を表し、Ｒ２は、それぞれ独立に水Ｈ、アルキル基、アルキルエーテル基又はアシルオキシ基を表し、Ｒ３はアルキル基又はアシル基を表す。］【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（１）で表される化合物（Ａ）及び／又は下記一般式（２）で表される化合物（Ｂ）と水とを含む生体物質（Ｃ）用エンドトキシン除去剤であって、
生体物質（Ｃ）が、糖類、タンパク質及び核酸からなる群から選ばれる少なくとも１種の生体物質である生体物質用エンドトキシン除去剤。
【化１】
2017222628.tif 000014
〔式（１）中、Ａ１Ｏ、Ａ２Ｏ及びＡ３Ｏはそれぞれ独立に炭素数２又は３の アルキレンオキシ基を表し、ｍ１、ｍ２及びｍ３は、Ａ１Ｏ、Ａ２Ｏ及びＡ３Ｏの平均付加モル数を表し、ｍ１は１〜１００の数であり、ｍ２及びｍ３は０〜１００の数である。Ｒ１は、それぞれ独立に水素、ヒドロキシル基、アルキル基、アルキルエーテル基又はアシルオキシ基を表し、Ｒ２は、それぞれ独立に水素、アルキル基、アルキルエーテル基又はアシルオキシ基を表 す。〕
【化２】
2017222628.tif 000015
〔式（２）中、Ａ４Ｏ、Ａ５Ｏ及びＡ６Ｏは、それぞれ独立に炭素数２又は３の アルキレンオキシ基を表し、 ｍ４、ｍ５及びｍ６は、Ａ４Ｏ、Ａ５Ｏ及びＡ６Ｏの平均付加モル数を表し、ｍ４は１〜１００の数であり、ｍ５及びｍ６は０〜１００の数である。Ｒ３はアルキル基又はアシル基を表す 。〕
【請求項２】
生体物質用エンドトキシン除去剤が一般式（１）で表される化合物（Ａ）を含み、
一般式（１）においてＲ１が、アルキルエーテル基又はアシルオキシ基であり、
Ｒ２が、アルキル基、アシルオキシ基 又は水素であり、
Ａ１Ｏ及びＡ３Ｏが、エチレンオキシ基であり、Ａ２Ｏが、プロピレンオキシ基 である請求項１に記載の生体物質用エンドトキシン除去剤。
【請求項３】
生体物質用エンドトキシン除去剤が一般式（２）で表される化合物（Ｂ）を含み、
一般式（２）においてにおいてＲ３が、アルキル基又はアシル基 であり、Ａ４Ｏ及びＡ６Ｏが、エチレンオキシ基であり、Ａ５Ｏが、プロピレンオキシ基 である請求項１又は２に記載の生体物質用エンドトキシン除去剤。
【請求項４】
生体物質用エンドトキシン除去剤が一般式（１）で表される化合物（Ａ）を含み、
一般式（１）においてｍ１が、１〜２０の数であり、ｍ２が、０〜１０の数であり、ｍ３が、０〜１０の数である請求項１〜３のいずれかに記載の生体物質用エンドトキシン除去剤。
【請求項５】
生体物質用エンドトキシン除去剤が一般式（２）で表される化合物（Ｂ）を含み、
一般式（２）においてｍ４が、１〜２０の数であり、ｍ５が、０〜１０の数であり、ｍ６が、０〜１０の数である請求項１〜４のいずれかに記載の生体物質用エンドトキシン除去剤。
【請求項６】
生体物質用エンドトキシン除去剤中に一般式（１）で表される化合物（Ａ）及び／又は一般式（２）で表される化合物（Ｂ）を生体物質（Ｃ）と水との合計重量に基づいて０．０１〜１０重量％含む請求項１〜５のいずれかに記載の生体物質用エンドトキシン除去剤。
【請求項７】
一般式（１）で表される化合物（Ａ）及び一般式（２）で表される化合物（Ｂ）が、ＨＬＢが０〜１２である 請求項１〜６のいずれかに記載の生体物質用エンドトキシン除去剤。
【請求項８】
下記（ａ）及び（ｂ）の工程を含む生体物質（Ｃ）の製造方法であって、工程（ａ）において生体物質（Ｃ）中にエンドトキシンを含有し、生体物質（Ｃ）が、糖類、タンパク質及び核酸からなる群から選ばれる少なくとも１種である生体物質の製造方法。
工程（ａ）  生体物質（Ｃ）と請求項１〜７のいずれかに記載の生体物質用エンドトキシン除去剤とを混合する工程
工程（ｂ）  工程（ａ）後、生体物質（Ｃ）と請求項１〜７のいずれかに記載の生体物質用エンドトキシン除去剤とを分離する工程
【請求項９】
工程（ａ）において一般式（１）で表される化合物（Ａ）及び／又は一般式（２）で表される化合物（Ｂ）を生体物質（Ｃ）と水の合計重量に基づいて０．０１〜１０重量％含む請求項８に記載の生体物質の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生体物質用エンドトキシン除去剤及び生体物質の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
エンドトキシンとはグラム陰性菌の外膜の成分であるリポ多糖であり、生物学的作用としては致死性ショック及び発熱等がある。そのため、生体を対象とした生体物質を利用した技術分野（例えば医薬品分野）においては生体物質からのエンドトキシンの除去が必須となる。従来、多糖や核酸等からエンドトキシンを除去する方法として、二相抽出法（非特許文献１及び特許文献１）が知られている。この方法は、エンドトキシンを含む水溶液を界面活性剤（Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１１４）による抽出を行うことで、水溶液中のエンドトキシン含量を減少させるものである。しかし、その除去効果は十分ではなく、抽出操作を２回以上繰返してもエンドトキシン含量を減少させ得ない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【非特許文献１】Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９９５，Ｖｏｌ．２２５，Ｎｏ．２，Ｐ３２１−３２７
【特許文献１】米国特許第７，５１０，８２６号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
【０００５】
本発明の目的は、生体物質用エンドトキシン除去剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、鋭意研究を重ねてきた結果、本発明に到達した。すなわち、下記一般式（１）で表される化合物（Ａ）及び／又は下記一般式（２）で表される化合物（Ｂ）と水とを含む生体物質（Ｃ）用エンドトキシン除去剤であって、
生体物質（Ｃ）が、糖類、タンパク質及び核酸からなる群から選ばれる少なくとも１種の生体物質である生体物質用エンドトキシン除去剤。
【化１】
2017222628.tif 000002
〔式（１）中、Ａ１Ｏ、Ａ２Ｏ及びＡ３Ｏはそれぞれ独立に炭素数２又は３のアルキレンオキシ基を表し、ｍ１、ｍ２及びｍ３は、Ａ１Ｏ、Ａ２Ｏ及びＡ３Ｏの平均付加モル数を表し、ｍ１は１〜１００の数であり、ｍ２及びｍ３は０〜１００の数である。Ｒ１は、それぞれ独立に水素、ヒドロキシル基、アルキル基、アルキルエーテル基又はアシルオキシ基を表し、Ｒ２は、それぞれ独立に水素、アルキル基、アルキルエーテル基又はアシルオキシ基を表す。〕
【化２】
2017222628.tif 000003
〔式（２）中、Ａ４Ｏ、Ａ５Ｏ及びＡ６Ｏは、それぞれ独立に炭素数２又は３のアルキレンオキシ基を表し、ｍ４、ｍ５及びｍ６は、Ａ４Ｏ、Ａ５Ｏ及びＡ６Ｏの平均付加モル数を表し、ｍ４は１〜１００の数であり、ｍ５及びｍ６は０〜１００の数である。Ｒ３はアルキル基又はアシル基を表す。〕
【発明の効果】
【０００７】
本発明の生体物質用エンドトキシン除去剤は、効率的にエンドトキシン含量の少ない生体物質を製造できる、という効果を奏する。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
本発明の生体物質用エンドトキシン除去剤は、下記一般式（１）で表される化合物（Ａ）及び／又は下記一般式（２）で表される化合物（Ｂ）と水とを含む。
【０００９】
本発明における化合物（Ａ）は下記一般式（１）で表される化合物である。
【化１】
2017222628.tif 000004
上記一般式（１）において、Ａ１Ｏ、Ａ２Ｏ及びＡ３Ｏはそれぞれ独立に炭素数２又は３のアルキレンオキシ基である。
炭素数２又は３のアルキレンオキシ基としては、エチレンオキシ基（以下ＥＯと略記）、１，２−プロピレンオキシ基（以下ＰＯと略記）等が挙げられる。なお、ＰＯは分岐していても良い。
このうち、Ａ１Ｏ、Ａ２Ｏ及びＡ３Ｏは、エンドトキシンとの親和性の観点から、ＥＯ又はＰＯが好ましく、さらに好ましい組み合わせは、Ａ１Ｏ及びＡ３Ｏが、ＥＯであり、Ａ２Ｏが、ＰＯであることが好ましい。
【００１０】
上記一般式（１）において、ｍ１、ｍ２及びｍ３は、Ａ１Ｏ、Ａ２Ｏ及びＡ３Ｏの平均付加モル数を表す。ｍ１は１〜１００の数であり、ｍ２及びｍ３は０〜１００の数である。
これらのうち、エンドトキシンとの親和性の観点からｍ１が、好ましくは１〜２０の数であり、ｍ２が、好ましくは０〜１０の数であり、ｍ３が、好ましくは０〜１０の数である。
【００１１】
Ｒ１は、それぞれ独立に水素、ヒドロキシル基、アルキル基、アルキルエーテル基又はアシルオキシ基であり、Ｒ２は、それぞれ独立に水素、アルキル基、アルキルエーテル基又はアシルオキシ基である。
アルキル基としてはオクチル基、ノニル基、デシル基等が挙げられる。
アルキルエーテル基としてはオクチルエーテル基、ノニルエーテル基、デシルエーテル基等が挙げられる。
アシルオキシ基としてはオクタノイルオキシ基、ノナノイルオキシ基、デカノイルオキシ基等が挙げられる。
これらのうち、エンドトキシンとの親和性の観点からＲ１が、アルキルエーテル基又はアシルオキシ基が好ましく、Ｒ２が、アルキル基、アシルオキシ基又は水素であることが好ましい。
【００１２】
本発明における化合物（Ｂ）は下記一般式（２）で表される化合物である。
【化２】
2017222628.tif 000005
【００１３】
上記一般式（２）において、Ａ４Ｏ、Ａ５Ｏ及びＡ６Ｏはそれぞれ独立に炭素数２又は３のアルキレンオキシ基であり、炭素数２又は３のアルキレンオキシ基としては、エチレンオキシ基（以下ＥＯと略記）、１，２−プロピレンオキシ基（以下ＰＯと略記）等が挙げられる。なお、ＰＯは分岐していても良い。
具体的には、上記一般式（１）において、Ａ１Ｏ、Ａ２Ｏ及びＡ３Ｏと同様であり、好ましいＡ１Ｏ、Ａ２Ｏ及びＡ３Ｏも同様である。
【００１４】
上記一般式（２）において、ｍ４、ｍ５及びｍ６は、Ａ４Ｏ、Ａ５Ｏ及びＡ６Ｏの平均付加モル数を表し、ｍ４は１〜１００であり、ｍ５及びｍ６は０〜１００の数である。これらのうち、エンドトキシンとの親和性の観点からｍ４が、１〜２０の数であり、ｍ５が、０〜１０の数であり、ｍ６が、０〜１０の数であることが好ましい。
【００１５】
上記一般式（２）においてＲ３はアルキル基又はアシル基である。
アルキル基としてはオクチル基、ノニル基、デシル基等が挙げられる。
アルキルエーテル基としてはオクチルエーテル基、ノニルエーテル基、デシルエーテル基等が挙げられる。
アシルオキシ基としてはオクタノイルオキシ基、ノナノイルオキシ基、デカノイルオキシ基等が挙げられる。
これらのうち、エンドトキシンとの親和性の観点からＲ３が、アルキル基又はアシル基が好ましい。
【００１６】
本発明の生体物質用エンドトキシン除去剤は、一般式（１）で表される化合物（Ａ）及び／又は一般式（２）で表される化合物（Ｂ）を生体物質（Ｃ）と水との合計重量に基づいて、好ましくは０．０１〜１０重量％であり、さらに好ましくは０．１〜５重量％含む。化合物（Ａ）及び／又は化合物（Ｂ）の含有率が０．０１重量％より少ないと、十分なエンドトキシン除去活性が得られず、１０重量％以上であると化合物（Ａ）及び／又は化合物（Ｂ）と生体物質との分離が困難になる。
【００１７】
化合物（Ａ）及び化合物（Ｂ）の使用にあたっては、上記化合物（Ａ）及び化合物（Ｂ）をそれぞれ単独で用いる以外に、数種類を混合しても良いし、化合物（Ａ）及び化合物（Ｂ）を併用しても良い。
【００１８】
本発明の生体物質用エンドトキシン除去剤において、生体物質は、糖類、核酸及びタンパク質からなる群から選ばれる少なくとも１種の生体物質である。
【００１９】
糖類としては、多糖及びオリゴ糖等が挙げられる。
多糖としては、単糖が３〜１０，０００，０００個結合した多糖等が挙げられ、例えばヒアルロン酸、コンドロイチン、キサンタン、セルロース、ヘパリン、アミロース及びデキストラン等が挙げられる。これらの他にも１種の単糖が結合した多糖、２種以上の単糖がランダム又は交互に結合した多糖等が挙げられる。
オリゴ糖としては、スクロース、ラクトース、トレハロース、マルトース、ラフィノース、パノース、シクロデキストリン、ガラクトオリゴ糖及びフラクトオリゴ糖等が挙げられる。
【００２０】
核酸としては、イノシン一リン酸、アデノシン一リン酸及びグアノシン一リン酸等が挙げられる。
【００２１】
タンパク質としては、酵素｛酸化還元酵素（コレステロールオキシダーゼ、グルコースオキシダーゼ、アスコルビン酸オキシダーゼ及びペルオキシダーゼ等）、加水分解酵素（ヒアルロニダーゼ、リゾチーム、プロテアーゼ、セリンプロテアーゼ、アミラーゼ、リパーゼ、セルラーゼ及びグルコアミラーゼ等）、異性化酵素（グルコースイソメラーゼ等）、転移酵素（プロテインキナーゼＡ、アシルトランスフェラーゼ及びスルホトランスフェラーゼ等）、合成酵素（脂肪酸シンターゼ、リン酸シンターゼ及びクエン酸シンターゼ等）及び脱離酵素（ペクチンリアーゼ及びアルギン酸リアーゼ等）等｝、ホルモンタンパク質｛骨形成因子（ＢＭＰ）、インターフェロンα、インターフェロンβ、インターロイキン１〜１２、成長ホルモン、エリスロポエチン、インスリン、顆粒状コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、組織プラスミノーゲン活性化因子（ＴＰＡ）、ナトリウム利尿ペプチド、血液凝固第ＶＩＩＩ因子、ソマトメジン、グルカゴン、成長ホルモン放出因子、血清アルブミン及びカルシトニン等｝、抗体｛１本鎖抗体、ＩｇＧラージサブユニット、ＩｇＧスモールサブユニット等｝、抗原タンパク質｛Ｂ型肝炎表面抗原等｝、機能性タンパク質｛プロネクチン（登録商標）、不凍ペプチド、抗菌ペプチド等｝、蛍光タンパク質（ＧＦＰ等）、発光タンパク質（ルシェラーゼ等）及びペプチド（特にアミノ酸組成を限定するものではなく、オリゴペプチド、ジペプチド及びトリペプチド等）等が挙げられる。
【００２２】
本発明の生体物質用エンドトキシン除去剤は、一般式（１）で表される化合物（Ａ）及び／又は一般式（２）で表される化合物（Ｂ）が、HLBが、エンドトキシンとの親和性の観点から好ましくは０〜１２であり、さらに好ましくは７〜１２である。
親水性及び疎水性を示す尺度としてＨＬＢが知られている。ＨＬＢの値が高いほど親水性が高いことを意味する。本発明におけるＨＬＢは（数式１）及び（数式２）に基づいて計算される値である。
ＨＬＢ＝２０×（親水性部分の分子量／界面活性剤の分子量）  （数式１）
ＨＬＢ＝７＋１１．７×ｌｏｇ（親水性部分の分子量／親油基の分子量）  （数式２）
【００２３】
一般式（１）で表される化合物（Ａ）及び／又は一般式（２）で表される化合物（Ｂ）は、公知の方法等で製造でき、上記アルキル、アシルエーテル、アルキルエーテル、アルキルアミン又はアルキルアミドとＥＯ又はＰＯを炭酸カリウム及び炭酸ナトリウム等の塩基性触媒の存在下、アルキレンオキサイド付加反応等により製造できる。
【００２４】
本発明の製造方法において、一般式（１）で表される化合物（Ａ）及び／又は一般式（２）で表される化合物（Ｂ）と生体物質（Ｃ）と水とを混合する工程（ａ）後、一般式（１）で表される化合物（Ａ）及び／又は一般式（２）で表される化合物（Ｂ）と生体物質（Ｃ）とを分離する工程（ｂ）を行うことにより、効率的にエンドトキシン含量の少ない生体物質が得られる。
【００２５】
工程（ａ）として、一般式（１）で表される化合物（Ａ）及び／又は一般式（２）で表される化合物（Ｂ）はエンドトキシンを不純物として含む生体物質（Ｃ）と水とを含む溶液に０℃〜４０℃で添加することができる。添加後の混合操作は、冷却下、０〜１０℃が好ましい。
【００２６】
工程（ｂ）として、一般式（１）で表される化合物（Ａ）及び／又は一般式（２）で表される化合物（Ｂ）と生体物質（Ｃ）とを分離する際には、加温下、４０〜５０℃が好ましい。溶液を加温下で濾過や遠心分離等により分離することにより、エンドトキシン含量の少ない溶液が得られる。
【００２７】
本発明の製造方法において、一般式（１）で表される化合物（Ａ）及び／又は一般式（２）で表される化合物（Ｂ）を生体物質（Ｃ）と水との合計重量に基づいて、好ましくは０．０１重量％〜１０重量％含む。
【実施例】
【００２８】
以下、実施例により本発明を更に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
なお、実施例及び比較例で使用した一般式（１）で表される化合物（Ａ）及び一般式（２）で表される化合物（Ｂ）を表１に示す。
【００２９】
＜実施例１＞
注射用水（大塚蒸留水）３６０μＬに１０ｇ／Ｌのヒアルロン酸ナトリウム（和光純薬社製、「ヒアルロン酸ナトリウム、鶏冠製」、分子質量：１０００〜２０００ｋＤａ）を５００μＬ、５００ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）を４０μＬ、１０００ＥＵ／ｍＬの標準エンドトキシン（和光純薬社製）溶液を１００μＬ加えてサンプル溶液１ｍＬを作製した。サンプル溶液１ｍＬに対してＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）をサンプル溶液の重量に基づいて１重量％になるように加えて４℃で５分間攪拌処理を行った。５分後、４０℃で５分間攪拌処理を行った。遠心分離器（４０℃、１０，０００×ｇ、５分）を用いて遠心し、上清を分離回収した。上清１００μＬを下記条件でＨＰＬＣにより分析し、ヒアルロン酸の処理前後のピーク面積を記録した。
＜ＨＰＬＣによる測定条件＞
装置：ＡＣＱＵＩＴＹ  ＵＰＬＣシステム
カラム：Ｓｈｏｄｅｘ  ＯＨｐａｋ  ＳＢ−８０６Ｍ  ＨＱ
移動相：０．１５Ｍ  リン酸緩衝液  ｐＨ７．０
流速：０．５ｍｌ／ｍｉｎ
検出器：ＡＣＱＵＩＴＹ  ＵＰＬＣ  ＲＩＤ検出器
温度：４０℃
ヒアルロン酸ナトリウム（和光純薬社製、「ヒアルロン酸ナトリウム、鶏冠製」、分子質量：２０００ｋＤａ）を０．１５Ｍ  リン酸緩衝液に０．２５ｇ／Ｌ、０．５ｇ／Ｌ、１ｇ／Ｌ及び２ｇ／Ｌの濃度となるようにそれぞれ溶解したヒアルロン酸標準溶液（１）〜（４）を作製し、ＨＰＬＣにより分析したヒアルロン酸のピーク面積を縦軸（ｙ軸）とし、ヒアルロン酸標準溶液（１）〜（４）のヒアルロン酸濃度（ｇ／Ｌ）を横軸（ｘ軸）としてプロットし、線形近似して検量線を作成した。
サンプル溶液における処理前後のサンプル収率をピーク面積から算出したところ、９９．９％であった。
また、上清１００μＬをリムルスカラーＫＹテストワコー（和光純薬社製）を使用した比色法により測定し、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．８ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．４３ＥＵ／ｍｇであった。測定条件はキットに従った。測定結果は表２にまとめた。
【００３０】
＜実施例２＞
実施例１において、「ＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）」に代えて「ＨＬＢ＝１１．７のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−２）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のヒアルロン酸濃度をピーク面積から算出したところ、９９．３％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．８ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．５７ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表２にまとめた。
【００３１】
＜実施例３＞
実施例１において、「ＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）」に代えて「ＨＬＢ＝１１．９のポリオキシエチレンアシルエーテル（Ａ−３）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率をピーク面積から算出したところ、９９．８％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．８ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．７１ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表２にまとめた。
【００３２】
＜実施例４＞
実施例１において、「ＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）」に代えて「ＨＬＢ＝１２．９のポリオキシエチレンジアシルエーテル（Ａ−４）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率をピーク面積から算出したところ、９９．７％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．８ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．６７ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表２にまとめた。
【００３３】
＜実施例５＞
実施例１において、「ＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）」に代えて「ＨＬＢ＝１１．７のポリオキシエチレンアルキルアミン（Ｂ−１）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率をピーク面積から算出したところ、９９．０％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．８ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．６７ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表２にまとめた。
【００３４】
＜実施例６＞
実施例１において、「ＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）」に代えて「ＨＬＢ＝９．４のポリオキシエチレンアルキルアミド（Ｂ−２）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率をピーク面積から算出したところ、９９．２％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．８ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．６９ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表２にまとめた。
【００３５】
＜実施例７＞
実施例１において、「ヒアルロン酸ナトリウム（和光純薬社製、「ヒアルロン酸ナトリウム、鶏冠製」、分子質量：１０００〜２０００ｋＤａ）」に代えて「サメ軟骨由来のコンドロイチン硫酸ナトリウム（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率をピーク面積から算出したところ、９９．９％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．７ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．４８ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表３にまとめた。
【００３６】
＜実施例８＞
実施例１において、「ヒアルロン酸ナトリウム（和光純薬社製、「ヒアルロン酸ナトリウム、鶏冠製」、分子質量：１０００〜２０００ｋＤａ）」に代えて「細菌発酵由来のキサンタンガム（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率をピーク面積から算出したところ、９９．２％であった。
また、吸着処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．５ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．６１ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表３にまとめた。
【００３７】
＜実施例９＞
実施例１において、「ヒアルロン酸ナトリウム（和光純薬社製、「ヒアルロン酸ナトリウム、鶏冠製」、分子質量：１０００〜２０００ｋＤａ）」に代えて「植物由来のセルロース（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率をピーク面積から算出したところ、９９．４％であった。
また、吸着処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．８ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．５８ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表３にまとめた。
【００３８】
＜実施例１０＞
実施例１において、「ヒアルロン酸ナトリウム（和光純薬社製、「ヒアルロン酸ナトリウム、鶏冠製」、分子質量：１０００〜２０００ｋＤａ）」に代えて「豚腸粘膜由来のヘパリンナトリウム（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率をピーク面積から算出したところ、９９．８％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．５ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．４９ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表３にまとめた。
【００３９】
＜実施例１１＞
実施例１において、「ヒアルロン酸ナトリウム（和光純薬社製、「ヒアルロン酸ナトリウム、鶏冠製」、分子質量：１０００〜２０００ｋＤａ）」に代えて「トウモロコシ由来のでんぷん（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率をピーク面積から算出したところ、９９．４％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．８ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．５７ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表３にまとめた。
【００４０】
＜実施例１２＞
実施例１において、「ヒアルロン酸ナトリウム（和光純薬社製、「ヒアルロン酸ナトリウム、鶏冠製」、分子質量：１０００〜２０００ｋＤａ）」に代えて「乳酸菌発酵由来のデキストラン（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率をピーク面積から算出したところ、９９．０％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．６ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．５５ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表３にまとめた。
【００４１】
＜実施例１３＞
実施例１において、「ヒアルロン酸ナトリウム（和光純薬社製、「ヒアルロン酸ナトリウム、鶏冠製」、分子質量：１０００〜２０００ｋＤａ）」に代えて「黒酵母発酵由来のプルラン（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率をピーク面積から算出したところ、９９．７％であった。
また、吸着処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．７ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．５１ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表３にまとめた。
【００４２】
＜実施例１４＞
実施例１において、「ヒアルロン酸ナトリウム（和光純薬社製、「ヒアルロン酸ナトリウム、鶏冠製」、分子質量：１０００〜２０００ｋＤａ）」に代えて「植物由来のマルトース（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率をピーク面積から算出したところ、９７．２％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．９ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．３２ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表３にまとめた。
【００４３】
＜実施例１５＞
実施例１において、「ヒアルロン酸ナトリウム（和光純薬社製、「ヒアルロン酸ナトリウム、鶏冠製」、分子質量：１０００〜２０００ｋＤａ）」に代えて「シクロデキストリン（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率をピーク面積から算出したところ、９７．２％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．９ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．４３ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表３にまとめた。
【００４４】
＜実施例１６＞
実施例１において、「ヒアルロン酸ナトリウム（和光純薬社製、「ヒアルロン酸ナトリウム、鶏冠製」、分子質量：１０００〜２０００ｋＤａ）」に代えて「４’−ガラクトシルラクトース（ガラクトオリゴ糖、和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率をピーク面積から算出したところ、９５．２％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．８ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．４９ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表３にまとめた。
【００４５】
＜実施例１７＞
注射用水（大塚蒸留水）３６μＬに１ｇ／Ｌのグルコースオキシダーゼ（シグマ社製、コウジカビ由来）を５０μＬ、５００ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）を４μＬ、１００ＥＵ／ｍＬの標準エンドトキシン（和光純薬社製）溶液を１０μＬ加えてサンプル溶液１００μＬを作製した。サンプル溶液１００μＬに対してＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）をサンプル溶液の重量に基づいて１重量％になるように加えて４℃で５分間攪拌処理を行った。５分後、４０℃で５分間攪拌処理を行った。遠心分離器（４０℃、１０，０００×ｇ、５分）を用いて遠心し、上清を分離回収した。上清１０μＬをＢＣＡプロテインアッセイキット（タカラバイオ社製）によりタンパク質量を測定し、グルコースオキシダーゼの処理前後の収率を算出したところ、８９．１％であった。測定条件はキットに従った。
また、上清１０μＬをリムルスカラーＫＹテストワコー（和光純薬社製）を使用した比色法により測定し、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９．７ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．０６ＥＵ／ｍｇであった。測定条件はキットに従った。測定結果は表４にまとめた。
【００４６】
＜実施例１８＞
実施例１７において、「グルコースオキシダーゼ（シグマ社製、コウジカビ由来）」に代えて「ヒアルロニダーゼ（和光純薬社製、ヒツジ精巣由来）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、８８．３％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９．７ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．０８ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表４にまとめた。
【００４７】
＜実施例１９＞
実施例１７において、「グルコースオキシダーゼ（シグマ社製、コウジカビ由来）」に代えて「リゾチーム（シグマ社製、ニワトリ卵白由来）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、８７．１％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９．６ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．０８ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表４にまとめた。
【００４８】
＜実施例２０＞
実施例１７において、「グルコースオキシダーゼ（シグマ社製、コウジカビ由来）」に代えて「プロテインキナーゼＡ（シグマ社製、ウシ心臓由来）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、７９．４％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９．８ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．０９ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表４にまとめた。
【００４９】
＜実施例２１＞
実施例１７において、「グルコースオキシダーゼ（シグマ社製、コウジカビ由来）」に代えて「クエン酸シンターゼ（シグマ社製、ブタ心臓由来）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、８１．１％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９．７ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．０９ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表４にまとめた。
【００５０】
＜実施例２２＞
実施例１７において、「グルコースオキシダーゼ（シグマ社製、コウジカビ由来）」に代えて「アルギン酸リアーゼ（シグマ社製、フラボバクテリウム菌由来）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、８５．０％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９．７ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．０８ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表４にまとめた。
【００５１】
＜実施例２３＞
実施例１７において、「グルコースオキシダーゼ（シグマ社製、コウジカビ由来）」に代えて「アルブミン（和光純薬社製、ウシ血清由来）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、９９．２％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９．７ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．０６ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表４にまとめた。
【００５２】
＜実施例２４＞
実施例１７において、「グルコースオキシダーゼ（シグマ社製、コウジカビ由来）」に代えて「ポリヒスチジンタグ抗体（クロンテック社製、ウサギ由来）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、９５．３％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９．６ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．０３ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表４にまとめた。
【００５３】
＜実施例２５＞
実施例１７において、「グルコースオキシダーゼ（シグマ社製、コウジカビ由来）」に代えて「プロテインＡ（アナスペック社製、大腸菌由来組換え体）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、９０．４％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９．８ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．０５ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表４にまとめた。
【００５４】
＜実施例２６＞
実施例１７において、「グルコースオキシダーゼ（シグマ社製、コウジカビ由来）」に代えて「ＦＬＡＧペプチド（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、８３．４％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９．７ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．０９ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表４にまとめた。
【００５５】
＜実施例２７＞
注射用水（大塚蒸留水）３６０μＬに１０ｇ／Ｌのイノシン一リン酸（イノシン５’−一リン酸二ナトリウム水和物，東京化成工業社製）を５００μＬ、５００ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）を４０μＬ、１０００ＥＵ／ｍＬの標準エンドトキシン（和光純薬社製）溶液を１００μＬ加えてサンプル溶液１ｍＬを作製した。サンプル溶液１ｍＬに対してＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）をサンプル溶液の重量に基づいて１重量％になるように加えて４℃で５分間攪拌処理を行った。５分後、４０℃で５分間攪拌処理を行った。遠心分離器（４０℃、１０，０００×ｇ、５分）を用いて遠心し、上清を分離回収した。上清１００μＬを下記条件でＨＰＬＣにより分析し、イノシン一リン酸の処理前後のピーク面積を記録した。
＜ＨＰＬＣによる測定条件＞
装置：ＡＣＱＵＩＴＹ  ＵＰＬＣシステム
カラム：Ｓｈｏｄｅｘ  ＩＥＣ  ＤＥＡＥ−８２５
移動相：０．０１〜０．５Ｍ  ＮａＨ２ＰＯ４・２Ｈ２Ｏ、２０ｖｏｌ％アセトニトリル（ナカライテスク社製）水溶液
流速：１ｍｌ／ｍｉｎ
検出器：ＡＣＱＵＩＴＹ  ＵＰＬＣ  ＵＶ検出器
温度：３５℃
イノシン一リン酸を１００ｍＭリン酸緩衝液に１５ｍＭ、５ｍＭ、１．５ｍＭ及び０．５ｍＭの濃度となるようにそれぞれ溶解したイノシン一リン酸標準溶液（１）〜（４）を作製し、ＨＰＬＣにより分析したイノシン一リン酸のピーク面積を縦軸（ｙ軸）とし、イノシン一リン酸標準溶液（１）〜（４）のイノシン一リン酸濃度（ｍＭ）を横軸（ｘ軸）としてプロットし、線形近似して検量線を作成した。
サンプル溶液における処理前後のサンプル収率をピーク面積から算出したところ、９９．６％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．４ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．３６ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表５にまとめた。
【００５６】
＜実施例２８＞
実施例２７において、「イノシン一リン酸（イノシン５’−一リン酸二ナトリウム水和物，東京化成工業社製）」に代えて「グアノシン一リン酸（グアノシン５’−一リン酸二ナトリウムｎ水和物，和光純薬工業社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率をピーク面積から算出したところ、９９．５％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．６ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．３０ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表５にまとめた。
【００５７】
＜実施例２９＞
実施例２７において、「イノシン一リン酸（イノシン５’−一リン酸二ナトリウム水和物，東京化成工業社製）」に代えて「アデノシン三リン酸（アデノシン５’−三リン酸二ナトリウムｎ水和物，和光純薬工業社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率をピーク面積から算出したところ、９９．８％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．７ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．４２ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表５にまとめた。
【００５８】
＜実施例３０＞
実施例２７において、「イノシン一リン酸（イノシン５’−一リン酸二ナトリウム水和物，東京化成工業社製）」に代えて「ウリジン二リン酸グルコース（ウリジン５’−二リン酸二ナトリウムグルコース，和光純薬工業社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率をピーク面積から算出したところ、９９．９％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．９ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．２６ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表５にまとめた。
【００５９】
＜比較例１＞
実施例１において、「ＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）」に代えて「ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１１４（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、９５．５％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．８ＥＵ／ｍｇ、処理後は１２．３ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表６にまとめた。
【００６０】
＜比較例２＞
実施例７において、「ＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）」に代えて「ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１１４（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、９４．２％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．７ＥＵ／ｍｇ、処理後は１１．２ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表６にまとめた。
【００６１】
＜比較例３＞
実施例８において、「ＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）」に代えて「ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１１４（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、９５．１％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．５ＥＵ／ｍｇ、処理後は１２．０ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表６にまとめた。
【００６２】
＜比較例４＞
実施例９において、「ＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）」に代えて「ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１１４（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、９６．４％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．８ＥＵ／ｍｇ、処理後は９．１ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表６にまとめた。
【００６３】
＜比較例５＞
実施例１０において、「ＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）」に代えて「ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１１４（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、９６．０％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．５ＥＵ／ｍｇ、処理後は１０．３ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表６にまとめた。
【００６４】
＜比較例６＞
実施例１１において、「ＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）」に代えて「ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１１４（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、９５．４％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．８ＥＵ／ｍｇ、処理後は９．５ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表６にまとめた。
【００６５】
＜比較例７＞
実施例１２において、「ＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）」に代えて「ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１１４（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、９７．１％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．６ＥＵ／ｍｇ、処理後は９．０ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表６にまとめた。
【００６６】
＜比較例８＞
実施例１３において、「ＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）」に代えて「ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１１４（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、９４．３％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．７ＥＵ／ｍｇ、処理後は１２．４ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表６にまとめた。
【００６７】
＜比較例９＞
実施例１４において、「ＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）」に代えて「ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１１４（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、９３．１％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．９ＥＵ／ｍｇ、処理後は８．４ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表６にまとめた。
【００６８】
＜比較例１０＞
実施例１５において、「ＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）」に代えて「ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１１４（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、９５．０％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．９ＥＵ／ｍｇ、処理後は８．３ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表６にまとめた。
【００６９】
＜比較例１１＞
実施例１６において、「ＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）」に代えて「ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１１４（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、９４．２％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．８ＥＵ／ｍｇ、処理後は１０．１ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表６にまとめた。
【００７０】
＜比較例１２＞
実施例１７において、「ＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）」に代えて「ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１１４（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、８０．１％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９．７ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．７６ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表７にまとめた。
【００７１】
＜比較例１３＞
実施例１８において、「ＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）」に代えて「ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１１４（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、８５．２％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９．７ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．６４ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表７にまとめた。
【００７２】
＜比較例１４＞
実施例１９において、「ＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）」に代えて「ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１１４（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、８２．２％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９．６ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．８７ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表７にまとめた。
【００７３】
＜比較例１５＞
実施例２０において、「ＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）」に代えて「ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１１４（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、８０．３％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９．８ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．８８ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表７にまとめた。
【００７４】
＜比較例１６＞
実施例２１において、「ＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）」に代えて「ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１１４（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、８１．１％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９．７ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．７８ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表７にまとめた。
【００７５】
＜比較例１７＞
実施例２２において、「ＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）」に代えて「ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１１４（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、８４．２％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９．７ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．９１ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表７にまとめた。
【００７６】
＜比較例１８＞
実施例２３において、「ＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）」に代えて「ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１１４（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、９９．４％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９．７ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．３２ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表７にまとめた。
【００７７】
＜比較例１９＞
実施例２４において、「ＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）」に代えて「ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１１４（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、９３．３％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９．６ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．３０ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表７にまとめた。
【００７８】
＜比較例２０＞
実施例２５において、「ＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）」に代えて「ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１１４（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、８９．９％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９．８ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．６５ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表７にまとめた。
【００７９】
＜比較例２１＞
実施例２６において、「ＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）」に代えて「ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１１４（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、７１．３％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９．７ＥＵ／ｍｇ、処理後は０．７８ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表７にまとめた。
【００８０】
＜比較例２２＞
実施例２７において、「ＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）」に代えて「ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１１４（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、９９．５％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．４ＥＵ／ｍｇ、処理後は１２．０ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表８にまとめた。
【００８１】
＜比較例２３＞
実施例２８において、「ＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）」に代えて「ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１１４（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、９９．３％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．６ＥＵ／ｍｇ、処理後は１３．１ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表８にまとめた。
【００８２】
＜比較例２４＞
実施例２９において、「ＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）」に代えて「ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１１４（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、９９．０％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．７ＥＵ／ｍｇ、処理後は１４．３ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表８にまとめた。
【００８３】
＜比較例２５＞
実施例３０において、「ＨＬＢ＝１０．５のポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ａ−１）」に代えて「ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１１４（和光純薬社製）」を用いる以外は同様にして、サンプル溶液における処理前後のサンプル収率を算出したところ、９９．８％であった。
また、処理前後のエンドトキシン濃度を算出したところ、処理前は９９．９ＥＵ／ｍｇ、処理後は１２．４ＥＵ／ｍｇであった。測定結果は表８にまとめた。
【表１】
2017222628.tif 000006
【表２】
2017222628.tif 000007
【表３】
2017222628.tif 000008
【表４】
2017222628.tif 000009
【表５】
2017222628.tif 000010
【表６】
2017222628.tif 000011
【表７】
2017222628.tif 000012
【表８】
2017222628.tif 000013
【００８４】
実施例１〜３０の結果からエンドトキシン及び生体物質（Ｃ）を含む水溶液に化合物（Ａ）又は／及び化合物（Ｂ）を作用させた後、化合物（Ａ）又は／及び化合物（Ｂ）を生体物質（Ｃ）を含む水溶液から分離することで、比較例１〜２５と比較してエンドトキシン含量の少ない生体物質を得られることがわかる。
【産業上の利用可能性】
【００８５】
本発明の生体物質用エンドトキシン除去剤は、効率的にエンドトキシン含量の少ない生体物質を製造できる。したがって、本発明の生体物質用エンドトキシン除去剤は生体を対象とした技術分野（医療・医薬品分野等）及び研究試験用試薬等に有用である。