(57)【要約】      （修正有）【課題】新規化合物及びこれらの製造方法の提供。【解決手段】放線菌Nocardia sp.のIFM 10029T株より産生される（１）で表される化合物又はその塩であり（一般名ナブセシン）、抗真菌活性を示し、その組成物は抗真菌剤剤として有用である。2017222617.tif 000015【選択図】図１
2017222617.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（１）：
【化１】
2017222617.tif 000013
で表される化合物又はその塩。
【請求項２】
下記の１）乃至８）の物理化学的性質を示す化合物又はその塩。
１）性質：無色固体；
２）分子式：C22H24N2O9；
３）分子量：m/z 483.1415 [M+Na]+（高分解能エレクトロスプレー質量分析により決定）；
４）赤外線吸収スペクトル（ATR）：νmaxcm-1
ATR法（全反射測定法）で測定した赤外線吸収スペクトルは、次のとおりである：
3347, 1715, 1584, 1058
５）紫外線吸収スペクトル：λmax nm（logε）
メタノール溶液中で測定した紫外線吸収スペクトルは、次のとおりである：
204 (4.8), 241 (4.2), 292 (3.8)
６）1H-核磁気共鳴スペクトル；δ（ppm）
重アセトン溶媒中で測定した1H-核磁気共鳴スペクトル（600 MHz）は、次のとおりである（重アセトンのシグナルを2.17 ppmとする。）：
1.75 (1H, q, J = 12.0), 2.44 (1H, dt, J = 12.0, 4.7), 2.53 (3H, s), 3.74 (1H, t, J = 9.6), 3.82 (1H, t, J = 9.6), 4.16 (1H, m), 5.04 (1H, ddd, J = 12.0, 9.6, 4.7), 5.30 (1H, t, J = 9.6),5.89 (2H, br), 6.75 (1H, d, J = 7.8), 6.77 (1H, d, J = 7.8), 6.96 (1H, ddd, J = 8.0, 2.4, 1.0), 7.24 (1H, t, J = 8.0), 7.29 (1H, t, J = 7.8), 7.35 (1H, ddd, J = 8.0, 1.4, 1.0), 7.41 (1H, dd, J = 2.4, 1.4), 7.65 (1H, d, J = 8.3)
７）13C-核磁気共鳴スペクトル；δ（ppm）
重アセトン溶媒中で測定した13C-核磁気共鳴スペクトル（150 MHz）は、次のとおりである（重アセトンのシグナルを29.2 ppmとする。）
23.4, 34.1, 50.4, 70.3, 74.8, 75.8, 77.6, 115.0, 115.3, 115.8, 118.9, 119.0, 123.4, 130.1, 134.4, 137.4, 141.8, 156.7, 158.3, 162.2, 167.7, 171.0
８）比旋光度；
［α］D21-10.8 (C = 1.0, MeOH)
【請求項３】
式（２）：
【化２】
2017222617.tif 000014
で表される化合物又はその塩。
【請求項４】
下記の１）乃至８）の物理化学的性質を示す化合物又はその塩。
１）性質：無色固体；
２）分子式：C22H24N2O9；
３）分子量：m/z 483.1404 [M+Na]+（高分解能エレクトロスプレー質量分析により決定）；
４）赤外線吸収スペクトル（ATR）：νmaxcm-1
ATR法（全反射測定法）で測定した赤外線吸収スペクトルは、次のとおりである：
3402, 1712, 1335
５）紫外線吸収スペクトル：λmax nm（logε）
メタノール溶液中で測定した紫外線吸収スペクトルは、次のとおりである：
205 (4.7), 242 (4.1), 292 (3.7)
６）1H-核磁気共鳴スペクトル；δ（ppm）
重アセトン溶媒中で測定した1H-核磁気共鳴スペクトル（600 MHz）は、次のとおりである（重アセトンのシグナルを2.17 ppmとする。）：
1.88 (1H, q, J = 12.4), 2.33 (1H, dt, J = 12.4, 4.6), 2.45 (3H, s), 3.57 (1H, t, J = 9.6), 3.83 (1H, t, J = 9.6), 4.55 (1H, m), 4.75 (1H, ddd, J = 12.4, 9.6, 4.6), 5.33 (1H, t, J = 9.6), 5.88 (2H, br), 6.70 (1H, d, J = 8.2), 6.68 (1H, d, J = 8.2), 6.91 (1H, ddd, J = 6.9, 2.8, 0.9), 7.18 (1H, m), 7.19 (1H, m), 7.22 (1H, m), 7.23 (1H, m), 7.62 (1H, d, J = 8.9)
７）13C-核磁気共鳴スペクトル；δ（ppm）
重アセトン溶媒中で測定した13C-核磁気共鳴スペクトル（150 MHz）は、次のとおりである（重アセトンのシグナルを29.2 ppmとする。）：
23.1, 34.0, 47.9, 72.7, 74.5, 75.9, 78.3, 115.0, 115.2, 115.7, 118.8, 118.9, 123.2, 130.1, 134.3, 137.2, 141.7, 157.3, 158.2, 161.7, 166.9, 171.3
８）比旋光度；
［α］D21＋15.7 (C = 1.0, MeOH)
【請求項５】
請求項１乃至４のいずれか一項に記載の化合物又はその塩を含有する薬剤組成物。
【請求項６】
抗真菌剤である、請求項５に記載の薬剤組成物。
【請求項７】
クリプトコッカス属菌に対する抗真菌剤である、請求項６に記載の薬剤組成物。
【請求項８】
ノカルディア（Nocardia）属に属する、請求項１乃至４のいずれか一項に記載の化合物の産生菌を、培地で培養し、その培養物により、請求項１乃至４のいずれか一項に記載の化合物を回収する、請求項１乃至４のいずれか一項に記載の化合物の製造方法。
【請求項９】
前記産生菌が、ノカルディア（Nocardia）属アブセサス（abscessus）IFM 10029T株である、請求項８に記載の化合物の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は抗真菌剤として有用な新規化合物であるナブセシンA及びナブセシンB又はその塩、これらを含有する薬剤組成物、これらの化合物の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
現在の我々の生活において、天然の動植物、微生物等の体内に含まれる化学物質（以下「天然物」という。）として見出されたもののうち人体に有用な効果をもたらすものは生薬、医薬品の有効成分として使用されている。また、このようなものは更に有用な医薬品を開発するための研究材料としても様々な役割を有しており、非常に重要なものとなっている。
【０００３】
このように、人体に有益な効果をもたらす天然物の探索に関する報告としては、例えば下記非特許文献１に、変形菌からビスインドール化合物、ナフトキノン化合物、グリセリド化合物等を抽出した報告がある。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】石橋正己、“未利用菌類の資源化：変形菌からの天然物探索”、有機合成化学協会誌、２００３年、第６１巻、第２号、１５２〜１６３頁
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら一方で、天然物の探索が多数の者によって行なわれているにもかかわらず、探索の材料として検討、調査されたものは、地球上の全生物種の中で１０％にも満たないといわれている。
本発明は、新規化合物及びこれらの製造方法を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、放線菌Nocardia sp.より産生される二次代謝産物の研究を行い、新規アミノシクリトール型化合物ナブセシンA（nabscessin A）及びナブセシンB（nabscessin B）を単離し、その構造決定、生物活性の評価を行った。
【０００７】
本発明は、以下の事項に関する。
［１］  式（１）：
【化１】
2017222617.tif 000003
で表される化合物又はその塩。
［２］  式（２）：
【化２】
2017222617.tif 000004
で表される化合物又はその塩。
［３］  上記［１］又は［２］に記載の化合物又はその塩を含有する薬剤組成物。
［４］  抗真菌剤である、［３］に記載の薬剤組成物。
［５］  ノカルディア（Nocardia）属に属する、上記［１］又は［２］に記載の化合物の産生菌を、培地で培養し、その培養物により、上記［１］又は［２］に記載の化合物を回収する、上記［１］又は［２］に記載の化合物の製造方法。
【発明の効果】
【０００８】
本発明によれば、新規化合物及びこれらの製造方法を提供できる。本発明によれば、抗真菌剤として有用な新規化合物が提供される。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】ナブセシンA及びナブセシンBの単離についてのスキームの概略を示す図である。
【図２】ナブセシンAの1H-NMRスペクトルを示す図である。
【図３】ナブセシンAの13C-NMRスペクトルを示す図である。
【図４】ナブセシンAのCOSYスペクトルを示す図である。
【図５】ナブセシンAのHMQCスペクトルを示す図である。
【図６】ナブセシンAのHMBCスペクトルを示す図である。
【図７】ナブセシンBの1H-NMRスペクトルを示す図である。
【図８】ナブセシンBの13C-NMRスペクトルを示す図である。
【図９】ナブセシンBのCOSYスペクトルを示す図である。
【図１０】ナブセシンBのHMQCスペクトルを示す図である。
【図１１】ナブセシンBのHMBCスペクトルを示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本明細書において、各用語、略語の意味は以下のとおりである。
ナブセシンA：式（１）で表される化合物
ナブセシンB：式（２）で表される化合物
HRESIMS：高分解能エレクトロスプレー質量分析
IR:赤外線吸収スペクトル
UV：紫外線吸収スペクトル
CD：円二色性スペクトル
１H-NMR：1H-核磁気共鳴スペクトル
13C-NMR：13C-核磁気共鳴スペクトル
HMQC：Heteronuclear Multiple Quantum Coherence, 異核間の多量子コヒーレンス
HMBC：Heteronuclear Multiple Bond Coherence, 異核間の多数の結合にわたるコヒーレンス
COSY：COrrelation SpectroscopY, 相関分光法
【００１１】
［ナブセシンA］
式（１）で表される化合物（以下「ナブセシンA」ともいう）は、好ましくは、メタノールに溶解した時のナトリウムD線（波長589nm）に対する21℃における比旋光度が負の値を有する化合物である。
ナブセシンAは、好ましくは、式（１−１）：
【化３】
2017222617.tif 000005
で表される化合物である。
【００１２】
ナブセシンAは、例えば、下記の１）乃至８）の物理化学的性質を示す化合物である。
１）性質：無色固体；
２）分子式：C22H24N2O9；
３）分子量：m/z 483.1415 [M+Na]+（高分解能エレクトロスプレー質量分析により決定）；
４）赤外線吸収スペクトル（ATR）：νmaxcm-1
ATR法（全反射測定法）で測定した赤外線吸収スペクトルは、次のとおりである：
3347, 1715, 1584, 1058
５）紫外線吸収スペクトル：λmax nm（logε）
メタノール溶液中で測定した紫外線吸収スペクトルは、次のとおりである：
204 (4.8), 241 (4.2), 292 (3.8)
６）1H-核磁気共鳴スペクトル；δ（ppm）
重アセトン溶媒中で測定した1H-核磁気共鳴スペクトル（600 MHz）は、次のとおりである（重アセトンのシグナルを2.17 ppmとする。）：
1.75 (1H, q, J = 12.0), 2.44 (1H, dt, J = 12.0, 4.7), 2.53 (3H, s), 3.74 (1H, t, J = 9.6),3.82 (1H, t, J = 9.6),4.16 (1H, m), 5.04 (1H, ddd, J = 12.0, 9.6, 4.7), 5.30 (1H, t, J = 9.6),5.89 (2H, br), 6.75 (1H, d, J = 7.8), 6.77 (1H, d, J = 7.8), 6.96 (1H, ddd, J = 8.0, 2.4, 1.0), 7.24 (1H, t, J = 8.0), 7.29 (1H, t, J = 7.8), 7.35 (1H, ddd, J = 8.0, 1.4, 1.0), 7.41 (1H, dd, J = 2.4, 1.4), 7.65 (1H, d, J = 8.3)
７）13C-核磁気共鳴スペクトル；δ（ppm）
重アセトン溶媒中で測定した13C-核磁気共鳴スペクトル（150 MHz）は、次のとおりである（重アセトンのシグナルを29.2 ppmとする。）
23.4, 34.1, 50.4, 70.3, 74.8, 75.8, 77.6, 115.0, 115.3, 115.8, 118.9, 119.0, 123.4, 130.1, 134.4, 137.4, 141.8, 156.7, 158.3, 162.2, 167.7, 171.0
８）比旋光度；
［α］D21-10.8 (C = 1.0, MeOH)
【００１３】
ナブセシンAは、好ましくは単離又は精製されており、その純度は、例えば95質量％以上である。
【００１４】
［ナブセシンB］
式（２）で表される化合物（以下「ナブセシンB」ともいう）は、好ましくは、メタノールに溶解した時のナトリウムD線（波長589nm）に対する21℃における比旋光度が正の値を有する化合物である。
【００１５】
ナブセシンBは、好ましくは、式（２−１）：
【化４】
2017222617.tif 000006
で表される化合物である。
【００１６】
ナブセシンBは、例えば、下記の１）乃至８）の物理化学的性質を示す化合物である。１）性質：無色固体；
２）分子式：C22H24N2O9；
３）分子量：m/z 483.1404 [M+Na]+（高分解能エレクトロスプレー質量分析により決定）；
４）赤外線吸収スペクトル（ATR）：νmaxcm-1
ATR法（全反射測定法）で測定した赤外線吸収スペクトルは、次のとおりである：
3402, 1712, 1335
５）紫外線吸収スペクトル：λmax nm（logε）
メタノール溶液中で測定した紫外線吸収スペクトルは、次のとおりである：
205 (4.7), 242 (4.1), 292 (3.7)
６）1H-核磁気共鳴スペクトル；δ（ppm）
重アセトン溶媒中で測定した1H-核磁気共鳴スペクトル（600 MHz）は、次のとおりである（重アセトンのシグナルを2.17 ppmとした。）：
1.88 (1H, q, J = 12.4), 2.33 (1H, dt, J = 12.4, 4.6), 2.45 (3H, s),3.57 (1H, t, J = 9.6), 3.83 (1H, t, J = 9.6), 4.55 (1H, m), 4.75 (1H, ddd, J = 12.4, 9.6, 4.6), 5.33 (1H, t, J = 9.6), 5.88 (2H, br), 6.70 (1H, d, J = 8.2), 6.68 (1H, d, J = 8.2), 6.91 (1H, ddd, J = 6.9, 2.8, 0.9), 7.18 (1H, m), 7.19 (1H, m), 7.22 (1H, m), 7.23 (1H, m), 7.62 (1H, d, J = 8.9)
７）13C-核磁気共鳴スペクトル；δ（ppm）
重アセトン溶媒中で測定した13C-核磁気共鳴スペクトル（150 MHz）は、次のとおりである（重アセトンのシグナルを29.2 ppmとした。）：
23.1, 34.0, 47.9, 72.7, 74.5, 75.9, 78.3, 115.0, 115.2, 115.7, 118.8, 118.9, 123.2, 130.1, 134.3, 137.2, 141.7, 157.3, 158.2, 161.7, 166.9, 171.3
８）比旋光度；
［α］D21＋15.7 (C = 1.0, MeOH)
【００１７】
ナブセシンBは、好ましくは単離又は精製されており、その純度は、例えば95質量％以上である。
【００１８】
上記のナブセシンA及びナブセシンBの塩としては、例えば、酸付加塩、塩基付加塩が挙げられる。
酸付加塩としては、無機酸塩、有機酸塩のいずれであってもよい。
無機酸塩としては、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、ヨウ化水素酸塩、硝酸塩、リン酸塩等が挙げられる。
有機酸塩としては、例えば、クエン酸塩、シュウ酸塩、酢酸塩、ギ酸塩、プロピオン酸塩、安息香酸塩、トリフルオロ酢酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、パラトルエンスルホン酸塩等が挙げられる。
【００１９】
塩基付加塩としては、無機塩基塩、有機塩基塩のいずれであってもよい。
無機塩基塩としては、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、アンモニウム塩等が挙げられる。
有機塩基塩としては、例えば、トリエチルアンモニウム塩、トリエタノールアンモニウム塩、ピリジニウム塩、ジイソプロピルアンモニウム塩等が挙げられる。
【００２０】
［製造方法］
ナブセシンA又はナブセシンBは、例えば、ノカルディア（Nocardia）属に属する、ナブセシンA又はナブセシンBの産生菌を、培地で培養し、その培養物により、ナブセシンA又はナブセシンBを回収することで得られる。なお製造方法はこれに限定されず、合成することもできる。
【００２１】
ナブセシンA又はナブセシンBの産生菌としては、例えば、ノカルディア（Nocardia）属アブセサス（abscessus）IFM 10029T株が挙げられる。
培地としては、特に限定されず、各種培地を使用することができ、例えば、BHI（Brain Heart Infusion）培地、BHIA（Brain Heart Infusion Agar）培地、Czapek-Dox培地、改変Czapek-Dox培地、NB（Nutrient Broth）培地、Waksman培地、YMG培地等が挙げられる。これらの培地は、寒天培地であっても、液体培地であってもよい。培養物中のナブセシンA又はナブセシンBの含有量を高める観点から、リン酸二水素カリウムを含有する改変Czapek-Dox培地を使用することが好ましい。
ここで、改変Czapek-Dox培地とは、純水に対して、3質量%のスクロース、0.3質量%の硝酸ナトリウム、0.1質量%のリン酸二水素カリウム、0.05質量%の塩化カリウム、0.05質量%の硫酸マグネシウム七水和物、0.001質量%の硫酸鉄（II）七水和物を含む培地である。
【００２２】
上述の培地には、微生物が同化し得る炭素源、窒素源及び無機塩が含まれる。
炭素源としては、グルコース、フルクトース、マルトース、スクロース、マンニトール、グリセリン、デキストリン、澱粉、オート麦、ライ麦、ジャガイモ、トウモロコシ粉、綿実油、糖蜜、クエン酸、酒石酸等が挙げられる。これらを単独又は２種以上を組合せで用いることができる。炭素源含量は、例えば、培地量全体に対して1質量%以上10質量%以下である。
【００２３】
窒素源としては、蛋白質若しくはその加水分解物を含有する物質又は無機塩を用いることが好ましく、大豆粉、フスマ、落花生粉、カゼイン加水分解物、ファーマミン、魚粉、コーンスチープリカー、ペプトン、肉エキス、イースト、イーストエキス、マルトエキス、ゼラチン、硝酸ナトリウム、硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウム等が挙げられる。これらを単独又は２種以上を組合せで用いることができる。窒素源量は、例えば、培地量全体に対して0.2質量%以上10質量%以下である。
【００２４】
栄養無機塩としては、ナトリウム、アンモニウム、カルシウム、フォスフェート、サルフェート、クロライド、カーボネート等のイオンを得ることのできる通常の塩類を広く用いることができる。カリウム、カルシウム、コバルト、マンガン、鉄、マグネシウム等の金属も培地に微量含まれ得る。
液体培養に際しては、シリコン油、植物油、界面活性剤等が、消泡剤として使用される。
液体培地のｐＨは、例えば4.0以上7.0以下である。
【００２５】
ナブセシンA又はナブセシンBは、該化合物生産菌を好気的な条件下で培養することにより製造することができる。好気的条件下の培養方法としては、通常当該分野において使用される好気的培養方法であれば特に限定されないが、例えば、固体培養法、振盪培養法、通気撹拌培養法等を挙げることができる。
【００２６】
生産菌の菌株を培養する温度は、例えば15℃以上38℃以下であり、より好適な温度は、30℃以上38℃以下である。菌株の培養は、静置培養により行うことが好ましい。菌株の培養に用いる培地は、BHI寒天培地が好ましい。
生産菌の生育温度は、例えば15℃以上38℃以下であり、好ましくは20℃以上33℃以下である。生産菌の生育は、振盪培養により行うことが好ましい。生産菌の生育に用いる培地はBHI液体培地が好ましい。
生産菌の培養温度は、特に限定されないが、例えば20℃以上33℃以下であり、好ましくは25℃以上30℃以下である。生産菌の培養は、振盪培養により行うことが好ましい。生産菌の培養に用いる培地は、培養物中のナブセシンA又はナブセシンBの含有量を高める観点から、改変Czapek-Dox液体培地が好ましい。
【００２７】
ナブセシンA又はナブセシンBは、例えば、実施例において示すように、上述の培養物から抽出することで、回収することができる。
【００２８】
［用途］
ナブセシンA及びナブセシンB、又はその塩は、例えば、抗真菌剤として用いられ、クリプトコッカス属菌に対する抗真菌剤として好適に用いられる。適用するクリプトコッカス属菌としては、クリプトコッカス・ネオフォルマンス（Cryptococcus neoformans）等が挙げられる。
【００２９】
［薬剤組成物］
ナブセシンA及びナブセシンB、又はその塩は、薬剤組成物に配合して使用される。
薬剤組成物は、例えば、皮膚真菌症治療薬などの外用薬、深在性真菌症治療薬などの内服薬等の医薬組成物として用いられる。薬剤組成物は、例えば、農薬組成物としても用いられる。
【００３０】
薬剤組成物は、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、崩壊抑制剤、固結・付着防止剤、滑沢剤、吸収・吸着担体、溶剤、増量剤、等張化剤、溶解補助剤、乳化剤、懸濁化剤、増粘剤、被覆剤、吸収促進剤、ゲル化・凝固促進剤、光安定化剤、保存剤、防湿剤、乳化・懸濁・分散安定化剤、着色防止剤、脱酸素・酸化防止剤、矯味・矯臭剤、着色剤、起泡剤、消泡剤、無痛化剤、帯電防止剤、緩衝・pH調節剤などの各種医薬品添加物を含む医薬組成物が挙げられる。
薬剤組成物は、さらにこれを含む経口剤（錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、細粒剤、丸剤、懸濁剤、乳剤、液剤、シロップ剤など）、外用剤（軟膏剤、貼付剤など）、注射剤、坐剤として使用することもできる。上記各種薬剤は、通常の方法により製剤化される。
【００３１】
錠剤、散剤、顆粒剤などの経口用固形製剤は、例えば、乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、無水第二リン酸カルシウム、部分アルファ化デンプン、コーンスターチ及びアルギン酸などの賦形剤；単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン溶液、ポリビニルアルコール、ポリビニルエーテル、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロース、セラック、メチルセルロース、エチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、アラビアゴム、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、水及びエタノールなどの結合剤；乾燥デンプン、アルギン酸、かんてん末、デンプン、架橋ポリビニルピロリドン、架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、及びデンプングリコール酸ナトリウムなどの崩壊剤；ステアリルアルコール、ステアリン酸、カカオバター、及び水素添加油などの崩壊抑制剤；ケイ酸アルミニウム、リン酸水素カルシウム、酸化マグネシウム、タルク、無水ケイ酸などの固結防止・付着防止剤；カルナバロウ、軽質無水ケイ酸、ケイ酸アルミニウム、ケイ酸マグネシウム、硬化油、硬化植物油誘導体、胡麻油、サラシミツロウ、酸化チタン、乾燥水酸化アルミニウムゲル、ステアリン酸、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、リン酸水素カルシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、及びポリエチレングリコールなどの滑沢剤；第4級アンモニウム塩、ラウリル硫酸ナトリウム、尿素及び酵素などの吸収促進剤；デンプン、乳糖、カオリン、ベントナイト、無水ケイ酸、含水二酸化ケイ素、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム及びコロイド状ケイ酸などの吸収・吸着担体などの固形製剤化用医薬用添加物を用い、常法に従い調製すればよい。
【００３２】
さらに錠剤は、通常の剤皮を施した錠剤、例えば、糖衣錠、ゼラチン被包錠、胃溶性被覆錠、腸溶性被覆錠及び水溶性フィルムコーティング錠とすることができる。
カプセル剤は、上記で例示した各種の医薬品と混合し、硬質ゼラチンカプセル及び軟質カプセルなどに充填して調製することができる。
また、溶剤、増量剤、等張化剤、溶解補助剤、乳化剤、懸濁化剤、増粘剤などの上記した各種の液体製剤化用添加物を用い、常法に従い調製して、水性又は油性の懸濁液、溶液、シロップ、及びエリキシル剤とすることもできる。
【００３３】
ペースト、クリーム、及びゲル形態の軟膏剤は、例えば、白ワセリン、ポリエチレン、パラフィン、グリセリン、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコン、及びベントナイトなどの基剤；パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、パラオキシ安息香酸プロピルなどの保存剤；安定剤；湿潤剤などの医薬品添加物を用い、常法により混合、製剤化すればよい。
【００３４】
貼付剤は、例えば、通常の支持体に、上記軟膏剤などを常法により塗布すればよい。支持体としては、綿、スフ及び化学繊維からなる群から選ばれる少なくとも１種の織布又は不織布；軟質塩化ビニル、ポリエチレン、及びポリウレタンなどのフィルム又は発泡体シートが使用できる。
【００３５】
注射剤は、例えば、水、エチルアルコール、マクロゴール、プロピレングリコール、クエン酸、酢酸、リン酸、乳酸、乳酸ナトリウム、硫酸及び水酸化ナトリウムなどの希釈剤；クエン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム及びリン酸ナトリウムなどのpH調整剤及び緩衝剤；ピロ亜硫酸ナトリウム、エチレンジアミン四酢酸、チオグリコール酸及びチオ乳酸などの安定化剤；食塩、ブドウ糖、マンニトール又はグリセリンなどの等張化剤；カルボキシメチルセルロースナトリウム、プロピレングリコール、安息香酸ナトリウム、安息香酸ベンジル、ウレタン、エタノールアミン、グリセリンなどの溶解補助剤；グルコン酸カルシウム、クロロブタノール、ブドウ糖、ベンジルアルコールなどの無痛化剤；並びに、局所麻酔剤などの液体製剤化用の医薬品添加物を用い、常法に従い調製すればよい。
【００３６】
坐剤は、例えば、ポリエチレングリコール、カカオ油、ラノリン、高級アルコール、高級アルコールのエステル類、ゼラチン、半合成グリセライド及びウィテップゾールなどに適当な吸収促進剤を添加し調製すればよい。
【００３７】
上記医薬組成物の投与方法は、特に限定されないが、製剤の形態、患者の年齢、性別その他の条件、患者の症状の程度に応じて適宜決定される。
ナブセシンA又はナブセシンB、又はその塩の投与量は、用法、患者の年齢、性別、疾患の形態、その他の条件などに応じて適宜選択されるが、通常成人に対して1日0.1〜500mgを1回から数回に分割して投与すればよく、好ましくは、1日40〜500mgを1回から数回に分割して投与すればよい。
【００３８】
本発明の薬剤組成物は、例えば、乳化剤、懸濁剤、展着剤、浸透剤、湿潤剤、増粘剤、安定剤、溶剤などの各種農薬用添加剤を配合して農薬用組成物とすることができ、さらにこれを含む乳剤、液剤、マイクロエマルジョン剤、フロアブル剤、油剤、水和剤、粉剤、粒剤、微粒剤、種子コーティング剤、燻煙剤、錠剤、マイクロカプセル剤、噴霧剤、エアゾール剤、炭酸ガス製剤、蚊取り線香・電気蚊取りマット・液体電気蚊取り等の加熱蒸散剤、ＥＷ剤、軟膏、毒餌、カプセル剤、ペレット剤、注射剤、樹脂製剤、シャンプー製剤等の剤型として使用することもできる。
上記各種剤型は、通常の方法により製剤化される。
【００３９】
乳化剤、展着剤、浸透剤、分散剤等として使用される界面活性剤としては、必要に応じて、石鹸類、ポリオキシエチレンアルキルアリールエーテル類、アルキルベンゼンスルホン酸塩類、ポリオキシエチレンアルキルエーテル類、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンブロックポリマー類、多価アルコールエステル類、アルキルスルホコハク酸塩類、アルキルナフタレンスルホン酸塩類、アルケニルスルホン酸塩類等の非イオン系及びアニオン系界面活性剤が挙げられる。
【００４０】
農薬用途において使用する溶剤としては、例えば、水、アルコール類（例えば、メチルアルコール、エチルアルコール、n-プロピルアルコール、イソプロピルアルコール、ベンジルアルコール、エチレングリコール等）、ケトン類（例えば、アセトン、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトン、シクロヘキサノン等）、エーテル類（例えば、テトラヒドロフラン、エチレングリコールモノメチルエーテル、ジエチレングリコールモノメチルエーテル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、プロピレングリコールモノメチルエーテル等）、脂肪族炭化水素類（例えば、ケロシン、灯油、燃料油、機械油等）、芳香族炭化水素類（例えば、トルエン、キシレン、ソルベントナフサ、メチルナフタレン等）、ハロゲン化炭化水素類（例えば、ジクロロメタン、クロロホルム、四塩化炭素等）、酸アミド類（例えば、Ｎ，Ｎ-ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ-ジメチルアセトアミド、Ｎ-メチルピロリドン、Ｎ-オクチルピロリドン等）、エステル類（例えば、酢酸エチル、酢酸ブチル、脂肪酸グリセリンエステル、γ-ブチロラクトン等）、ニトリル類（例えば、アセトニトリル、プロピオニトリル等）、カーボネート類（例えば、炭酸プロピレン等）、植物油（例えば、なたね油、綿実油等）等の溶媒が挙げられる。
【００４１】
また、ナブセシンA及びナブセシンB、又はその塩と、他の農薬活性成分、例えば、殺虫剤、殺ダニ剤、マシンオイル、殺線虫剤、除草剤、植物ホルモン剤、植物成長調節物質、殺菌剤、共力剤、誘引剤、忌避剤、薬害軽減剤、色素、肥料、動物用飼料、動物用医薬品、動物用栄養剤等とを配合し、適宜使用することも可能である。
【００４２】
農薬組成物におけるナブセシンA及びナブセシンB、又はその塩の含有割合は、農薬組成物全量に対して、通常、0.1〜80質量％、好ましくは、1〜20質量％である。
【実施例】
【００４３】
［測定機器］
NMRスペクトルは、内部標準を用いて重溶媒中で、ECZ600及びECA600（日本電子株式会社製）にて測定した。
質量分析は、AccuTOF LC-plus JMS-T100LP (日本電子株式会社製)にて測定した。
IRスペクトルは、FT/IR-4700 spectrophotometer(日本分光株式会社製，ATR法)にて測定した。
UVスペクトルは、UV mini-1240 spectrometer(株式会社島津製作所製)にて測定した。
旋光度は、P-2200 polarimeter(日本分光株式会社製)にて測定した。
【００４４】
［ナブセシンA、及びナブセシンBの回収］
56歳男性患者における膝人工関節全置換術後の関節内膿瘍より分離され、千葉大学真菌医学研究センターにおいて凍結乾燥状態で保存されていたNocardia abscessus IFM 10029T株を、以下に示すBHI+寒天培地で3日間（30 ℃で2日間，37 ℃で1日間）静置培養した。菌が増殖した培地部分を切り取り、三角フラスコ中の以下に示すBHI+液体培地に切片を入れて28 ℃で5日間振盪培養した。その後、以下に示す改変Czapek-Dox液体培地に上記の前培養した培養液を播種し、三角フラスコを用いて28 ℃で7日間振盪培養した。培養後、得られた培養液2.5 Lを遠心分離し、上清と菌体に分離した。菌体をメタノールで抽出し、抽出物を乾燥させて上清と合わせ、酢酸エチル/水系で液液分配を行った。得られた酢酸エチル層を乾燥し再度酢酸エチルに溶解させたところ、酢酸エチル可溶部と不要部に分離し、それぞれを116.3 mg，143.9 mg得た。酢酸エチル可溶部をSilica gel 60N（関東化学株式会社製）を担体とするカラム（φ 25×300 mm）に付し、クロロホルム-メタノール（100/0−0/100 (v/v)）を用いて溶出し、溶出順にフラクション1A-1Lを得た。フラクション1I（23.7 mg）の一部（16.7 mg）をSilica gel 60N（関東化学株式会社製）を担体とするカラム（φ 15×100 mm）に付し、クロロホルム-メタノール（100/0−0/100 (v/v)）を用いて溶出し、溶出順にフラクション2A-2Iを得た。さらにフラクション2F-2H（7.4 mg）をまとめてCOSMOSIL 5C18-AR-IIカラム（φ 10.0×250 mm、ナカライテスク株式会社製）に付し、40%メタノール水溶液を用いて溶出し、保持時間5.8分にナブセシンA（2.7 mg、純度＞95質量％）を得た。また、フラクション1J（25.0 mg）の一部（15.8 mg）をSilica gel 60N（関東化学株式会社製）を担体とするカラム（φ 15×100 mm）に付し、クロロホルム-メタノール（100/0−0/100 (v/v)）を用いて溶出し、ナブセシンB（純度＞95質量％）を得た。
以上の操作を図1に示す。
【００４５】
〔「BHI+寒天培地」、「BHI+液体培地」の組成（単位：質量％）〕
(1) BactoTM Brain Heart Infusion（Becton, Dickinson and Company社製） 3.7%
0.77% Calf brains, infusion from 200 g
0.98% Beef heart, infusion from 250 g
1% Proteose peptone
0.2% Dextrose
0.5% Sodium chloride
0.25% Disodium phosphate
(2) グルコース1%
(3) グリセロール1%（寒天培地の場合は，寒天1.5%も含む）
【００４６】
〔「改変Czapek-Dox液体培地」の組成（単位：質量％）〕
(1) スクロース3%
(2) 硝酸ナトリウム0.3%
(3) リン酸二水素カリウム0.1%
(4) 塩化カリウム0.05%
(5) 硫酸マグネシウム七水和物0.05%
(6) 硫酸鉄（II）七水和物0.001%
【００４７】
［ナブセシンA］
《化学構造》
ナブセシンAの物理化学的性質を表１に示した。
【００４８】
【表１】
2017222617.tif 000007
【００４９】
ナブセシンAは、無色非結晶固体として得られた。ESI-MSにてm/z 483.1415 [M+Na]+が観測されたこと、及び1H-NMR，13C-NMR，HMQCの解析より、分子式がC22H24N2O9であることが判明した。
acetone-d6中にて測定した1H-NMRより7個の芳香族水素原子（σH 7.41-6.75），5個のメチン（σH 5.30-3.74），1個のメチレン（σH 2.44-1.75），1個のメチル基（σH 2.53）のピークの他、2個のブロードしたシグナル（σH 7.65, 5.89）が観測された。13C-NMRにおいては、22個のピークが観測され、1H-NMR，HMQCスペクトルにより7個の芳香族メチン炭素、8個の四級炭素、5個のメチン炭素、1個のメチレン炭素、1個のメチル炭素に分類した。
COSY，HMQC，HMBCスペクトルの詳細な解析より各プロトンシグナル及び各炭素シグナルを帰属し（表2）、本化合物は、下記に示すアミノシクリトール構造を有する新規化合物（nabscessin A）であると判明した。図2〜図6には、ナブセシンAの各種スペクトルを示した。
【００５０】
【化５】
2017222617.tif 000008
【００５１】
【表２】
2017222617.tif 000009
【００５２】
《抗菌活性試験》
単離したナブセシンAについて、クリプトコッカス属菌（Cryptococcus neoformans）に対する抗真菌活性を検討した。上記の真菌についてIC50（50%生育阻害濃度）を測定した結果、ナブセシンAはIC50 32 μg/mLでCryptococcus neoformansの増殖を阻害することが判明した。
【００５３】
［ナブセシンB］
《化学構造》
ナブセシンBの物理化学的性質を表3に示した。
【００５４】
【表３】
2017222617.tif 000010
【００５５】
ナブセシンBは、無色非結晶固体として得られた。ESI-MSにてm/z 483.1404 [M+Na]+が観測されたこと、及び1H-NMR，13C-NMR，HMQCの解析より、分子式がC22H24N2O9であることが判明した。
acetone-d6中にて測定した1H-NMRより7個の芳香族水素原子（σH 7.23-6.68）、5個のメチン（σH 5.33-3.57）、1個のメチレン（σH 2.33-1.88）、1個のメチル基（σH 2.45）のピークの他、2個のブロードしたシグナル（σH 7.62, 5.88）が観測された。13C-NMRにおいては、22個のピークが観測され、1H-NMR，HMQCスペクトルにより7個の芳香族メチン炭素、8個の四級炭素、5個のメチン炭素、1個のメチレン炭素、1個のメチル炭素に分類した。
COSY，HMQC，HMBCスペクトルの詳細な解析より各プロトンシグナル及び各炭素シグナルを帰属し（表4）、本化合物は、下記に示すアミノシクリトール構造を有する新規化合物（nabscessin B）であると判明した。図7〜図11には、ナブセシンBの各種スペクトルを示した。
【００５６】
【化６】
2017222617.tif 000011
【００５７】
【表４】
2017222617.tif 000012
【００５８】
《抗菌活性試験》
単離したナブセシンBについて、クリプトコッカス属菌（Cryptococcus neoformans）に対する抗真菌活性を検討した。上記の真菌についてIC50（50%生育阻害濃度）を測定した結果、ナブセシンBはIC50 16 μg/mLでCryptococcus neoformansの増殖を阻害することが判明した。
【産業上の利用可能性】
【００５９】
本発明によれば、抗真菌剤として有用な新規化合物が提供される。
【図１】
2017222617.tif 000016
【図２】
2017222617.tif 000017
【図３】
2017222617.tif 000018
【図４】
2017222617.tif 000019
【図５】
2017222617.tif 000020
【図６】
2017222617.tif 000021
【図７】
2017222617.tif 000022
【図８】
2017222617.tif 000023
【図９】
2017222617.tif 000024
【図１０】
2017222617.tif 000025
【図１１】
2017222617.tif 000026