(57)【要約】【課題】環境負荷が小さく、少量の薬剤で効率的に蚊の幼虫を駆除することが可能な蚊の幼虫用駆除剤を提供する。【解決手段】微生物、中でもバチルス・チューリンジェンシス（Bacillus thuringiensis）が産生する、蚊の幼虫に対する殺虫性タンパク質と、蚊の幼虫の誘引物質を含有してなることを特徴とする蚊の幼虫用駆除剤。当該駆除剤において、前記誘引物質が、蚊の幼虫の捕食生物の誘引作用を併せ持つ誘引物質であることが好ましい。  当該駆除剤を、蚊の幼虫の生息場所に施用することによって、蚊の幼虫を少量の有効成分で効率的に駆除することができる。【選択図】図２
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
微生物が産生する、蚊の幼虫に対する殺虫性タンパク質と、蚊の幼虫の誘引物質を含有してなることを特徴とする蚊の幼虫用駆除剤。
【請求項２】
前記微生物が、バチルス・チューリンジェンシス（Bacillus thuringiensis）である請求項１に記載の駆除剤。
【請求項３】
前記誘引物質が、蚊の幼虫の捕食生物の誘引作用を併せ持つ誘引物質である請求項１または２に記載の駆除剤。
【請求項４】
前記誘引物質が、オキアミ由来の誘引物質である請求項３に記載の駆除剤。
【請求項５】
発泡性成分を含有する請求項１から４のいずれかに記載の駆除剤。
【請求項６】
請求項１から５のいずれかに記載の駆除剤を、蚊の幼虫の生息場所に施用することを特徴とする蚊の幼虫の駆除方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、蚊の幼虫用駆除剤および蚊の幼虫の駆除方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
世界的に蚊を媒介した感染症は多く発生し、特に熱帯・亜熱帯地域で広く流行している。蚊媒介感染症としては、デング熱、マラリア、ウェストナイル熱などがあるが、治療としては現在のところ対症療法が中心で、蚊に刺されないための対策が何よりも重要となっている。
中でもデング熱は、特に東南アジア、南アジア、中南米、カリブ海諸国で発生しており、全世界では年間約１億人が発症すると推定されている。テング熱は、かつては東南アジアの風土病であったが、地球温暖化に伴い媒介するネッタイシマカやヒトスジシマカの生息域が拡大し、流行する地域も広がっている。
また、ネッタイシマカは排水溝、空き缶や古タイヤなどに溜まった水でも発生するため都市部で流行することも多く、流行地域での急激な人口の増加や密集化が感染者の増加する一因でもある。デング熱には特別な治療法はなく、症状に応じた対症治療が行われるのみである。また、ワクチンや予防する薬もないため、蚊に刺されないようにすることが唯一の予防法である。
【０００３】
蚊の駆除剤として、ピレスロイド系化合物や有機リン系化合物を有効成分とする蚊の駆除剤があり、当該駆除剤を成虫の蚊の生息箇所に散布して使用される。このような駆除剤は、製造コストも比較的低いため、開発途上国においても広く用いられている。
一方、上記駆除剤を散布する方法は、室内等の限られた空間では有効であるが、外界において成虫の蚊を全滅させることは不可能であり、蚊の発生自体を抑制できるものではない。
【０００４】
蚊の発生の抑制をより効率的に行うには、蚊の幼虫（ボウフラ）の段階において駆除することが有効な手段といえる。
蚊の幼虫の防除方法として、ピレスロイド系化合物や有機リン系化合物等の殺虫成分を蚊の幼虫が発生する貯水槽、沼地、河川、水たまり等の水源に散布する方法が挙げられる。しかしながら、このような殺虫成分よって、蚊の幼虫を死滅させるには高濃度で散布する必要があるが、当該薬剤の毒性によって蚊の幼虫以外の生物も死滅するおそれがあり、環境負荷の点から問題があった。
【０００５】
一方、蚊を駆除する方法のひとつとして、蚊の幼虫（ボウフラ）に対してのみ殺虫活性を有する殺虫性タンパク質を蚊の幼虫に摂食させる殺虫方法がある（例えば、非特許文献１参照）。このような殺虫性タンパク質は、蚊の幼虫の腸内で、プロテアーゼにより活性化され、蚊の幼虫に対して殺虫活性を示す。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Glare T. R., O'Callaghan M. 1998. Environmental and health impacts of Bacillus thuringiensis israelensis. Report prepared for the New Zealand Ministry of Health. New Zealand Ministry of Health, Wellington, New Zealand.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
非特許文献１で開示された殺虫性タンパク質による殺虫方法は、環境負荷が小さいが、殺虫性タンパク質が高価であり、例えば、沼地や河川など広範囲に使用する場合、十分な殺虫作用を発現する濃度にすることは現実的ではない。
かかる状況下、本発明の目的は、環境負荷が小さく、少量の薬剤で効率的に蚊の幼虫を駆除することが可能な蚊の幼虫用駆除剤及び蚊の幼虫の駆除方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者は、上記課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、下記の発明が上記目的に合致することを見出し、本発明に至った。
【０００９】
すなわち、本発明は、以下の発明に係るものである。
＜１＞  微生物が産生する、蚊の幼虫に対する殺虫性タンパク質と、蚊の幼虫の誘引物質を含有してなる蚊の幼虫用駆除剤。
＜２＞  前記微生物が、バチルス・チューリンジェンシス（Bacillus thuringiensis）である前記＜１＞に記載の駆除剤。
＜３＞  前記誘引物質が、蚊の幼虫の捕食生物の誘引作用を併せ持つ誘引物質である前記＜１＞または＜２＞に記載の駆除剤。
＜４＞  前記誘引物質が、オキアミ由来の誘引物質である前記＜３＞に記載の駆除剤。
＜５＞  発泡性成分を含有する前記＜１＞から＜４＞のいずれかに記載の駆除剤。
＜６＞  前記＜１＞から＜５＞のいずれかに記載の駆除剤を、蚊の幼虫の生息場所に施用する蚊の幼虫の駆除方法。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、蚊の幼虫を少量の有効成分で駆除することが可能な蚊の幼虫用駆除剤及び蚊の幼虫の駆除方法が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】誘引物質のスクリーニングに用いた水槽の模式図である。
【図２】６０分後の蚊の幼虫の移動度を示す図である。
【図３】誘引物質（オキアミ粉）の有無による蚊の幼虫の殺虫効果の比較（死亡率の時間経過）を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
以下、本発明について例示物等を示して詳細に説明するが、本発明は以下の例示物等に限定されるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲において任意に変更して実施できる。
【００１３】
本発明は微生物が産生する、蚊の幼虫に対する殺虫性タンパク質と、蚊の幼虫の誘引物質を含有してなる蚊の幼虫用駆除剤（以下、「本発明の駆除剤」と称す。）に関する。詳しくは後述するが、蚊の幼虫に対する微生物の好適例は、バチルス・チューリンジェンシス（Bacillus thuringiensis）である。
以下、本明細書において、バチルス・チューリンジェンシス（Bacillus thuringiensis）を「ＢＴ」と称し、「微生物が産生する、蚊の幼虫に対する殺虫性タンパク質」を「本発明に係る殺虫性タンパク質」、あるいは単に「殺虫性タンパク質」と称する場合があり、「蚊の幼虫の誘引物質」を「本発明に係る誘引物質」、あるいは単に「誘引物質」と称する場合がある。
【００１４】
本発明の駆除剤は、蚊の幼虫の生息場所に施用した際に、当該駆除剤に含有される殺虫性タンパク質及び誘引物質が溶出する。幼虫を誘引する効果を有する誘引物質によって駆除剤の近傍に蚊の幼虫を引きよせ、殺虫性タンパク質によって蚊の幼虫を殺虫する。このように、蚊の幼虫の誘引物質と殺虫性タンパク質との相乗効果により、単にこれらの誘引物質と殺虫性タンパク質をそれぞれを使用したとき以上の効果を得ることができ、そのため、少量の薬剤でも効率的に蚊の幼虫の駆除を行うことができる。
【００１５】
以下、本発明の駆除剤の構成成分について、より詳細に説明する。
【００１６】
（殺虫性タンパク質）
本発明の駆除剤が含有する殺虫性タンパク質は、微生物が産生する、蚊の幼虫に対する殺虫性タンパク質である。微生物としては、蚊の幼虫に対する殺虫性タンパク質を産生できる微生物であればよく、例えば、土壌細菌の一種であるBacillus thuringiensis（ＢＴ）や、Bacillus sphaericusが挙げられ、BTが好適である。
【００１７】
本発明に係る殺虫性タンパク質は、微生物、例えば、ＢＴが、栄養細胞中に胞子を形成する際、胞子に隣接して結晶性のタンパク質を産生し、このタンパク質は特定の昆虫の腸内で、プロテアーゼにより活性化され、特定の昆虫に対して殺虫活性を示す。
ＢＴはその血清型（亜種）の違いにより殺虫活性が異なっており、双翅目昆虫である蚊（幼虫含む）に対する殺虫性タンパク質を産生できるＢＴとして、鱗翅目、双翅目昆虫に活性を示す血清型（亜種）クルスタキー（ｋｕｒｓｔａｋｉ）およびアイザワイ（ａｉｚａｗａｉ）、双翅目昆虫に活性を示すイスラエレンシス（ｉｓｒａｅｌｅｎｓｉｓ）が挙げられる。この中でも、ｉｓｒａｅｌｅｎｓｉｓが好ましい。
駆除対象となる蚊（幼虫含む）としては、特に限定はなく、ナガハシカ属、イエカ属、ヤブカ属、ハマダラカ属などが挙げられ、テング熱の原因であるネッタイシマカやヒトスジシマカも好適な駆除対象である。また、オオチョウバエやユスリカ等の蚊以外の双翅目昆虫（幼虫含む）も駆除対象となりうる。
【００１８】
殺虫性タンパク質としては、BTが産生する、蚊の幼虫に対する殺虫性タンパク質を含有する市販品の発泡性錠剤「ＭｏｓＫｉｌｌｅｒ」（株式会社九州メディカル）を好適な一例に挙げることができる。
【００１９】
（誘引物質）
本発明の駆除剤が含有する誘引物質としては、蚊の幼虫に対する誘引作用を有する物質であれば、天然物でも合成物でもよい。一方で、環境負荷を少なくする点では、天然物由来の誘引物質が好ましく、天然物由来の誘引物質の原料としては、オキアミ、トウガラシ、シシトウ、ピーマン等が挙げられる。これらの誘引物質は単独でも、２種以上を任意の割合で組み合わせて用いることができる。
【００２０】
誘引物質は、その誘引作用を失わない限りは、原料を未加工で使用しても、乾燥物や抽出物等の加工物として使用してもよい。具体的には、未加工原料は、細断、すり潰された形態、乾燥物は、粉砕して粉末化された形態、抽出物は液状物として駆除剤に配合される。なお、「抽出物」とは、対象となる原料、又はこれを必要に応じて乾燥、細切したものを、圧搾又は溶媒抽出するなどして、有効成分の含有量を高めた形態のものを総括した概念である。具体的には上記誘引物質の原料として得られる、抽出液、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、又はこれらの粗精製物若しくは精製物のいずれもが含まれる。なお、抽出液を乾燥して得られる乾燥物も、抽出物に該当するものとする。
【００２１】
また、本発明に係る誘引物質は、蚊の幼虫の捕食生物の誘引作用を併せ持つ誘引物質であることが好ましい。このような捕食生物として、例えば、小型の魚類、カエル等の両性類、トンボの幼生等の昆虫類、等が挙げられる。
このような誘引物質であれば、蚊の幼虫を誘引するのみならず、蚊の幼虫の捕食生物も誘引することになり、上記殺虫性タンパク質による殺虫作用のみならず、捕食生物によって蚊の幼虫が捕食されるため、蚊の幼虫が相乗的に駆除されるという利点がある。
蚊の幼虫の誘引作用と、捕食生物の誘引作用を併せ持つ誘引物質のうち、好適な一例として、オキアミを由来とする誘引物質が挙げられる。
オキアミは、また食用や釣り餌などにも利用されている非常に安全な原材料であり、安価なため、製品の価格上昇も抑えられる。
オキアミを由来とする誘引物質は、小型の魚類を誘引する集魚効果が高く、蚊の幼虫以外の生物への悪影響も小さい。
【００２２】
上記殺虫性タンパク質と誘引物質との割合は、殺虫性タンパク質：誘引物質で、通常、１：０．０１〜１０（質量比）、好ましくは１：０．１〜５（質量比）である。
【００２３】
（駆除剤の形態）
本発明の駆除剤は、その有効量を担体とともに配合し、固形製剤又は液状製剤とすることができる。剤形は、蚊の幼虫の生息箇所に施行できるかぎり、どのような剤形でもよい。具体的には、固形製剤として、粉末剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、液状製剤としては懸濁剤、乳剤等が例示される。
【００２４】
本発明の駆除剤による駆除作用を持続させることができる点では、有効成分（殺虫性タンパク質と誘引物質）の徐放が可能な固形製剤が好適である。
固形製剤において、上記殺虫性タンパク質と誘引物質に加えて、賦形剤、結合剤、崩壊剤、潤沢剤、矯味剤、安定化剤などの補助剤を用いてもよい。殺虫性タンパク質と誘引物質と補助剤の比率は目的に応じて適宜選択される。
【００２５】
特に固形製剤からの有効成分の放出性を高めることができる点で、本発明の駆除剤には、発泡性成分を含むことが好ましい。発泡性分としては、従来公知の発泡成分を使用することができ、例えば、クエン酸、フマル酸、酒石酸、アジピン酸及びコハク酸等の有機酸と、炭酸塩からなる発泡成分が挙げられる。炭酸塩としては、例えば、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム等が挙げられる。
【００２６】
これらの製剤には、本願発明の目的を損なわない範囲で、害虫の駆除剤、防除剤、忌避剤に用いられる任意の成分を含んでいてもよい。
【００２７】
また、製剤形態にもよるが、製剤全重量に対する上記殺虫性タンパク質と誘引物質の合計量として、通常、０．０１〜５０重量％、好ましくは０．１〜１０重量％、より好ましくは１〜５重量％含有する。
【００２８】
製剤の製造は、従来公知の方法で行うことができる。例えば、（１）上記殺虫性タンパク質と誘引物質とを、固体担体、液体担体等と混合し、必要であればその他の製剤用補助剤を添加・加工する方法や、（２）上記殺虫性タンパク質、誘引物質及び基材を混合した後に成形加工する方法、などが挙げられる。
【００２９】
（駆除方法）
本発明の蚊の幼虫の駆除方法は、上述した本発明の駆除剤を蚊の幼虫の生息場所に施用することを特徴とする。
蚊の幼虫の生息場所としては、貯水槽、沼地、河川、水たまり等の水源が挙げられる。上述の通り、本発明の駆除剤は、有効成分（殺虫性タンパク質と誘引物質）を徐放でき、長期間にわたって効果を持続できるので、沼地、河川等のゆるやかな水の流れがある水源においても有効に蚊の発生を抑制することができる。
【００３０】
駆除対象となる蚊としては、特に限定はなく、ナガハシカ属、イエカ属、ヤブカ属、ハマダラカ属などが挙げられ、テング熱の原因であるネッタイシマカやヒトスジシマカも好適な駆除対象である。また、オオチョウバエやユスリカ等の蚊以外の双翅目昆虫（幼虫含む）も駆除対象となりうる。
【００３１】
本発明の駆除剤の施用量や、施用頻度などは、目的とする水源に応じて適宜選択される。例えば、好適な市販品の一例である、株式会社九州メディカル製ＭｏｓＫｉｌｌｅｒを使用する場合、きれいな水源では、深さ１ｍ程度で表面積が１平方メートル当たり１錠を目安に投与する。汚れの多い水源、幼虫の数が多い水源また幼虫の生育段階が進んだ水源では、必要に応じて使用量を増やす。施用頻度としては、幼虫の残存数に応じて頻度を調整する。
【実施例】
【００３２】
以下に実施例を挙げて本発明をより具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００３３】
（評価１：誘引物質のスクリーニング）
誘引物質の候補として、イカミール、オキアミ粉、スキムミルク、トウモロコシ粉、小麦粉、トウガラシ粉、トウガラシ、シシトウ、ピーマン、ローリエを使用した。
イカミール、オキアミ粉、スキムミルク、トウモロコシ粉、小麦粉、トウガラシ粉については２０％（w/w）の濃度になるように水に懸濁し、遠心分離し夾雑物を取り除いたのち上清を得た。得られた上清をペーパーディスクに１００μL浸み込ませて試験に用いた。トウガラシ、シシトウ、ピーマン、ローリエについては３ｍｍ程度に切り取り細断試料とした。
評価には、４区画を設定した水槽を使用した。図１に誘引物質のスクリーニングに用いた水槽の模式図を示す。
図１に模式図を示す４区画を設定した水槽に水（３００ｍＬ）を入れ、水槽の第１の区画に７〜１１匹のネッタイシマカの幼虫を入れ、第４の区画に試料を浸み込ませたペーパーディスクまたは細断試料３ｍｍ×３ｍｍを入れた。光の影響を防ぐため、水槽にはアルミ缶をかぶせ光が入らないようにした。６０分後に幼虫がどの区画まで移動したかを数値で表した。投入した幼虫が全て第１区画にいた場合を０％、全て第４区画に移動していた場合を１００％とし、６０％未満を「誘引効果ほぼなし」、６０％以上を「誘引効果あり」とし、７０％以上を「誘引効果が特にあり」とした。図２に誘引物質のスクリーニング結果を示す。
【００３４】
（評価２：オキアミ粉の誘引濃度の決定）
評価１の結果より、蚊の幼虫の誘引作用に特に優れる誘引物質としてオキアミ粉を選択した。
円形水槽に２Ｌの水を入れたのち、ネッタイシマカの幼虫を５０匹入れた。０．８ｍｇのオキアミ粉を不織布に入れ、水槽の水面に浸かる程度に設置した。
対照として、何も入れていない不織布をオキアミ粉入りの不織布と対称の位置に設置した。光の影響を防ぐため、水槽には暗幕をかぶせ光が入らないようにした。６０分後に水槽の半分よりオキアミ粉側にいる幼虫の数を数えた。毎回汲み置き水と幼虫を交換しながら、繰り返し試験を行った。
オキアミ粉側に寄った割合は、７２．１％±７．０％で、対照に比べ有意に高かった（有意水準１％の片側検定）。したがって、２Ｌの水に対して０．８ｍｇのオキアミ粉で、すなわち１００Ｌの水に対して４０ｍｇのオキアミ粉で、蚊の幼虫に対して誘引効果があることがわかった。
【００３５】
（評価３：誘引物質の有無による幼虫の殺虫効果の比較）
Bacillus thuringiensis  Ｄ１４２株由来の殺虫タンパク質を含有する、発泡性錠剤「ＭｏｓＫｉｌｌｅｒ」（株式会社九州メディカル）（以下、「試料錠剤」と称す。）を使用した。
【００３６】
実施例の駆除剤として、試料錠剤を粉状にし、オキアミ粉を１％混合した。水槽（５００ｍＬ）にネッタイシマカの幼虫を５０匹入れ、オキアミ粉を混合した粉状にした試料錠剤をなるべく水面に広がらないように入れた。対照（比較例）として、別の水槽にはオキアミ粉を混ぜていない粉状にした試料錠剤を入れた。経時的に幼虫の死亡個体数を数えた。図３に結果をしめす。
オキアミ粉を添加した実施例の駆除剤の方が、殺虫効果が高いことが分かった。LT50（50% lethal time）は、試作品が１７７分であったのに対して、オキアミ粉混合試作品は１１９分であった。この結果から、オキアミ粉を添加した実施例の駆除剤の方が、殺虫効果が高いことが分かった。
【産業上の利用可能性】
【００３７】
本発明の駆除剤によれば、蚊の幼虫を少量の有効成分で駆除することが可能であるため、蚊の発生を効率的に行うことができる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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