(57)【要約】【課題】一定の観察方向から観察しても、内部に収容された細胞や組織等を複数の異なる角度から観察することができる細胞容器を提供する。【解決手段】細胞を保持する細胞保持部１１と、該細胞保持部１１からの観察光を観察方向Ｄへ透過させる観察面２１とを備えた細胞容器１。観察面２１は、観察方向Ｄに対して傾斜する細胞保持部１１からの観察光Ｌを観察方向Ｄへ屈折させる傾斜角で観察方向Ｄに対して傾斜する屈折面２２を有する。【選択図】図２
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞を保持する細胞保持部と、該細胞保持部からの観察光を観察方向へ透過させる観察面とを備えた細胞容器であって、
前記観察面は、前記観察方向に対して傾斜した前記観察光を前記観察方向へ屈折させる傾斜角で前記観察面に対して傾斜している屈折面を有することを特徴とする細胞容器。
【請求項２】
傾斜面を有する凸部又は凹部を備え、
前記屈折面は、複数の前記凸部又は凹部のそれぞれの互いに平行な前記傾斜面によって構成されていることを特徴とする請求項１に記載の細胞容器。
【請求項３】
前記観察面にプリズムシートが配置され、
前記複数の凸部又は凹部は、前記プリズムシートに形成されていることを特徴とする請求項２に記載の細胞容器。
【請求項４】
前記観察面は、複数の傾斜観察部を備え、
各々の前記傾斜観察部は、前記屈折面を備えることを特徴とする請求項１から請求項３のいずれか一項に記載の細胞容器。
【請求項５】
前記複数の傾斜観察部は、相対的に小さい第１の傾斜角の第１の屈折面を有する第１の傾斜観察部と、相対的に大きい第２の傾斜角の第２の屈折面を有する第２の傾斜観察部とを含むことを特徴とする請求項４に記載の細胞容器。
【請求項６】
前記細胞保持部を有する容器本体と、該容器本体の開口部を閉じる蓋体とを備え、
前記観察面は、前記蓋体の外面、前記蓋体の内面、及び前記容器本体の外面の少なくとも一つであることを特徴とする請求項１から請求項５のいずれか一項に記載の細胞容器。
【請求項７】
前記容器本体と前記蓋体は、それぞれ前記観察方向から見て互いに重なり合う位置に形成された位置合わせ用のマークを有することを特徴とする請求項６に記載の細胞容器。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、細胞や組織等を収容する細胞容器に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来から、植物や細菌等の培養に用いる培養容器やシャーレが知られている（下記特許文献１及び２を参照）。特許文献１に記載された培養容器は、容器本体と、この容器本体の上部開放部を閉止する蓋とを有し、蓋の側面にレンズを設け、このレンズを通じ側面から内部を拡大視し得るようにしている。また、特許文献２に記載されたシャーレは、ふたの天井部に凸レンズを形成することで、培養細菌類を簡単に拡大して観察できるようにしている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】実公平４―７１８号公報
【特許文献２】実用新案登録第３０５３９４５号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
一方、例えば不妊治療や再生医療等の分野において、細胞や組織等を培養したり一時的に収容したりするための細胞容器は、通常、一定の観察方向から顕微鏡等の観察装置によって観察される。そのため、細胞容器の内部に収容された細胞や組織を複数の異なる角度から観察するためには、観察装置を可動式にするか、又は、細胞容器を複数の異なる角度に傾斜させる必要がある。しかし、観察装置を可動式にすると装置の大型化や設備投資の増大を招く虞があり、細胞容器を傾斜させると細胞や組織の観察が困難になる虞がある。
【０００５】
本発明は、前記課題に鑑みてなされたものであり、一定の観察方向から観察しても、内部に収容された細胞や組織等を複数の異なる角度から観察することができる細胞容器を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
前記目的を達成すべく、本発明の細胞容器は、細胞を保持する細胞保持部と、該細胞保持部からの観察光を観察方向へ透過させる観察面とを備えた細胞容器であって、前記観察面は、前記観察方向に対して傾斜する前記観察光を前記観察方向へ屈折させる傾斜角で前記観察面に対して傾斜する屈折面を有することを特徴とする。
【０００７】
前記細胞容器は、傾斜面を有する凸部又は凹部を備え、前記屈折面は、前記複数の凸部又は凹部のそれぞれの互いに平行な前記傾斜面によって構成されていてもよい。
【０００８】
前記細胞容器において、前記観察面にプリズムシートが配置され、前記複数の凸部又は凹部は、前記プリズムシートに形成されていてもよい。
【０００９】
前記細胞容器において、前記観察面は、複数の傾斜観察部を備え、各々の前記傾斜観察部は、前記屈折面を備えてもよい。
【００１０】
前記細胞容器において、前記複数の傾斜観察部は、相対的に小さい第１の傾斜角の第１の屈折面を有する第１の傾斜観察部と、相対的に大きい第２の傾斜角の第２の屈折面を有する第２の傾斜観察部とを含んでもよい。
【００１１】
前記細胞容器は、前記細胞保持部を有する容器本体と、該容器本体の開口部を閉じる蓋体とを備えてもよい。この場合、前記観察面は、前記蓋体の外面、前記蓋体の内面、及び前記容器本体の外面の少なくとも一つであることができる。
【００１２】
前記細胞容器において、前記容器本体と前記蓋体は、それぞれ前記観察方向から見て互いに重なり合う位置に形成された位置合わせ用のマークを有してもよい。
【発明の効果】
【００１３】
本発明の細胞容器によれば、観察面を一定の観察方向から観察した場合でも、観察面の屈折面とそれ以外の部分とを介して細胞保持部を観察することで、内部に収容された細胞や組織等を複数の異なる角度から観察することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】本発明の実施形態１に係る細胞容器の斜視図。
【図２】図１に示す細胞容器のII−II線に沿う断面図。
【図３】図１及び図２に示す細胞容器の屈折面の拡大断面図。
【図４】図１に示す細胞容器の観察面の拡大平面図。
【図５】本実施形態の細胞容器の変形例を示す平面図。
【図６】本発明の実施形態２に係る細胞容器を示す図２に相当する断面図。
【図７】本発明の実施形態３に係る細胞容器の容器本体と蓋体の平面図。
【図８】本発明の実施例１に係る細胞容器の写真。
【図９】実施例１の細胞容器のプリズムシートの凸部の形状を示す模式的な断面図。
【図１０】実施例１の細胞容器にプリズムシートを取り付ける前後の拡大写真。
【図１１】本発明の実施例２に係る細胞容器の写真。
【図１２】実施例２の細胞容器の観察面の拡大写真。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
以下、本発明の細胞容器の実施形態について図面を参照して詳細に説明する。
【００１６】
［実施形態１］
図１は、本発明の実施形態１に係る細胞容器１の斜視図である。図２は、図１に示す細胞容器１のII−II線に沿う断面図である。図３は、図１及び図２に示す細胞容器１の屈折面２２の拡大断面図である。
【００１７】
本実施形態の細胞容器１は、例えば不妊治療や再生医療等の分野において、細胞や組織等を培養したり一時的に収容したりするための容器である。細胞容器１は、通常、一定の観察方向Ｄから顕微鏡等の観察装置によって観察される。
【００１８】
詳細については後述するが、細胞容器１は、細胞を保持する細胞保持部１１と、この細胞保持部１１からの観察光Ｌを観察方向Ｄへ透過させる観察面２１とを備えている。細胞容器１は、観察面２１が、観察方向Ｄに対して傾斜した観察光Ｌを観察方向Ｄへ屈折させる傾斜角θで観察面２１に対して傾斜している平面状の屈折面２２を有することを特徴としている。
【００１９】
本実施形態の細胞容器１は、例えば、細胞保持部１１を有する容器本体１０と、容器本体１０の開口部１２を閉じる蓋体２０とを備えたディッシュ型の容器である。なお、細胞容器１は、ディッシュ型に限定されず、例えばフラスコ型の容器であってもよい。本実施形態のディッシュ型の細胞容器１において、屈折面２２を有する観察面２１は、蓋体２０の外面である。より詳細には、観察面２１である蓋体２０の外面は、観察方向Ｄに垂直な蓋体２０の上面である。
【００２０】
なお、ディッシュ型の細胞容器１において、屈折面２２を有する観察面は、蓋体２０の外面、蓋体２０の内面、及び容器本体１０の外面の少なくとも一つであればよい。より詳細には、ディッシュ型の細胞容器１において、観察面となり得る蓋体２０の内面２３は、観察方向Ｄに垂直な蓋体２０の下面である。また、ディッシュ型の細胞容器１において、観察面となり得る容器本体１０の外面は、観察方向Ｄに垂直な容器本体１０の外底面である。
【００２１】
容器本体１０は、上部に開口部１２を有する有底円筒状の形状を有し、内底面１３に細胞保持部１１を有している。本実施形態の細胞容器１において、細胞保持部１１は、複数のマイクロウェル１１ａと、複数のマイクロウェル１１ａを囲む上部が開放された円筒状の隔壁１１ｂを有している。例えば、受精卵等の培養においては、隔壁１１ｂの内側に受精卵を含む培地を配置し、隔壁１１ｂの外側の容器本体１０内部にオイルを収容する。
【００２２】
マイクロウェル１１ａは、単数でも複数でもよい。マイクロウェル１１ａの開口部の形状は、例えば円形である。マイクロウェル１１ａの開口部の直径は、培養する細胞の最大寸法より大きい。本実施形態の細胞容器１により受精卵を培養する場合、胚盤胞の段階まで培養することが望ましいため、マイクロウェル１１ａの開口部の直径は、胚盤胞の段階の細胞の最大寸法より大きいことが望ましい。胚盤胞の段階の細胞の最大寸法は通常１００μｍ〜２８０μｍであることから、マイクロウェル１１ａの開口部の直径は、細胞の種類に依存して異なるが、例えば１００μｍ〜６００μｍ、より好ましくは１００μｍ〜４００μｍである。
【００２３】
また、マイクロウェル１１ａの深さは、細胞をマイクロウェル１１ａ内に保持できるように、細胞の最大径の１／３以上であることが好ましく、１／２以上であることがさらに好ましい。マイクロウェル１１ａが深過ぎると、マイクロウェル１１ａ内に培地や細胞を導入することが難しくなるため、深さの上限をマイクロウェル１１ａの開口部の直径に対して３倍以下とすることができる。さらに、培地の導入を容易にするためには、マイクロウェル１１ａの深さは直径の１倍以下であることが好ましく、１／２以下であることが特に好ましい。細胞の種類によっても異なるが、マイクロウェル１１ａの深さは、５０μｍ〜２００μｍ程度とすることが好ましい。例えば、ウシ受精卵の場合、最大径が２５０μｍ程度であるため、マイクロウェル１１ａの深さは８０μｍ以上、さらに好ましくは１２５μｍ以上とすることができる。
【００２４】
近接するマイクロウェル１１ａ間のピッチは１ｍｍ以下である。ただし、上記ピッチは収容する細胞の種類に依存して異なる。例えば、ウシ受精卵を収容する場合、近接するマイクロウェル１１ａ間のピッチは通常１ｍｍ以下、好ましくは０．７ｍｍ以下、さらに好ましくは０．４５ｍｍ以下である。なお、マイクロウェル１１ａ間のピッチは近接するマイクロウェル１１ａの開口部の中心間の距離である。近接するマイクロウェル１１ａは、１ｍｍ２あたり１個以上、好ましくは４個以上の密度で配置されている。このようなピッチでマイクロウェル１１ａを密に配置することにより、細胞を個別に管理しつつ多くの細胞を同時に培養でき、さらに顕微鏡の一視野に多くの細胞が入るため、一度に多くの細胞の画像を取得することができる。
【００２５】
近接する４個以上のマイクロウェル１１ａは、正方格子状又は最密充填状に配置されていることが好ましい。例えば、２５個のマイクロウェル１１ａを５×５の正方格子状に配置することができる。正方格子状又は最密充填状に配置することにより、細胞容器１の底壁における各マイクロウェル１１ａの位置の特定が容易になり、自動化処理に適用しやすい。また、マイクロウェル１１ａは、合計で好ましくは２４個以上、より好ましくは５０個以上配置されている。細胞容器１の１個あたりに多くのマイクロウェル１１ａを設けることにより、一定数の細胞を培養するのに必要な細胞容器１の数を低減することができ、経済的に有利である。
【００２６】
また、細胞保持部１１は、例えば、受精卵等の細胞の発育を促進するような表面処理又は表面コートがなされていてもよい。細胞保持部１１において、受精卵の発育を促進するために、受精卵と、子宮内膜細胞や卵管上皮細胞等の他の器官の細胞とを共培養する場合、これらの細胞をあらかじめ細胞保持部１１に接着させる必要がある。このような場合に、細胞保持部１１に細胞接着性の材料をコートすると有利である。なお、容器本体１０の内底面１３の全体を細胞保持部１１としてもよい。
【００２７】
容器本体１０及び蓋体２０は、例えば、ポリメチルメタクリレート（ＰＭＭＡ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリプロプレン（ＰＰ）、ポリエチレン（ＰＥ）、ポリエチレンナフタレート（ＰＥＮ）、シクロオレフィンポリマー（ＣＯＰ）、シクロオレフィンコポリマー（ＣＯＣ）等の透明な樹脂材料によって製作することができる。また、容器本体１０及び蓋体２０は、可視光を透過する透明な材料であれば、樹脂材料に限定されず、例えば、ガラスや石英等によって製作してもよい。なお、本実施形態の容器本体１０は、細胞培養に適した表面処理を容易にする観点からＰＳ製であることが好ましい。
【００２８】
本実施形態の細胞容器１における観察面２１である蓋体２０の外面は、図３に示すように、観察方向Ｄに対して傾斜した観察光Ｌを観察方向Ｄへ屈折させる傾斜角θで観察方向Ｄに対して傾斜している平面状の屈折面２２を有している。本実施形態の細胞容器１は、傾斜面３１ａを有する凸部３１を備えている。屈折面２２は、複数の凸部３１のそれぞれの互いに平行な傾斜面３１ａによって構成されている。より詳細には、本実施形態の細胞容器１は、観察面２１にプリズムシート３０が配置され、複数の凸部３１は、プリズムシート３０に形成されている。
【００２９】
なお、複数の凸部３１のそれぞれの傾斜面３１ａは、必ずしも互いに完全に平行である必要はなく、複数の傾斜面３１ａによって屈折された細胞保持部１１の像を正確に確認できる程度に互いに平行であればよい。また、見方を変えれば、凸部３１の傾斜面３１ａは、隣り合う凸部３１の間に形成される複数の溝状の凹部の互いに平行な傾斜面３１ａでもある。なお、屈折面２２は、観察面２１に単一の傾斜面３１ａによって形成することも可能である。この場合、屈折面２２が複数の傾斜面３１ａによって構成されている場合と比較して、屈折面２２の観察方向Ｄの寸法が大きくなる。また、屈折面２２は、プリズムシート３０を用いることなく、例えば射出成形によって蓋体２０を成型する際に、直接、蓋体２０に形成することも可能である。
【００３０】
図１に示すように、プリズムシート３０は、例えば、細胞保持部１１の円形の平面形状に対応する円形の平面形状を有している。本実施形態の細胞容器１では、観察方向Ｄにおける細胞保持部１１の平面形状を、細胞保持部１１の直上の蓋体２０の観察面２１に投影した円形の直上領域２４の周囲に４枚の円形のプリズムシート３０が配置され、観察面２１の一部を構成している。４枚の円形のプリズムシート３０の中心は、例えば、円形の直上領域２４の同心円上に、等しい角度間隔で配置されている。
【００３１】
本実施形態の細胞容器１において、観察面２１のプリズムシート３０が配置された部分が、観察面２１を観察方向Ｄから観察したときに、細胞保持部１１を観察方向Ｄに対して傾斜した方向Ｄａから観察するための傾斜観察部２５となっている。すなわち、本実施形態の細胞容器１において、観察面２１は、複数の傾斜観察部２５を備え、各々の傾斜観察部２５は、屈折面２２を備えている。なお、傾斜観察部２５の数、すなわちプリズムシート３０の数は、特に限定されず、４つ以外の複数でもよいし、単数でもよい。
【００３２】
なお、各プリズムシート３０において、複数の凸部３１は、直上領域２４の中心と各プリズムシート３０の中心を結ぶ直線に対して垂直な方向に、観察面２１に沿って延在している。また、傾斜面３１ａは、直上領域２４と反対の方向、すなわち蓋体２０の外縁の方向に、斜め上方を向いている。凸部３１の高さｈやピッチｐは、視認性向上とプリズムシート３０の厚さを低減させる観点から、製造可能な範囲で凸部３１の形状をできる限り小さくすることが好ましい。凸部３１の高さｈは、例えば、５０μｍから２００μｍ程度、凸部３１のピッチｐは、例えば、１００μｍから１０００μｍ程度とすることができる。
【００３３】
ここで、プリズムシート３０の絶対屈折率をＮ１、空気の絶対屈折率をＮ２とし、細胞保持部１１から屈折面２２に入射する観察光Ｌの入射角をα、屈折面２２に入射した観察光Ｌの屈折角をβとすると、以下の式（１）が成立する。
ｓｉｎα／ｓｉｎβ＝Ｎ２／Ｎ１  …（１）
【００３４】
屈折面２２の観察面２１に対する傾斜角θは、屈折面２２に入射する細胞保持部１１からの観察光Ｌを、観察方向Ｄへ向けて屈折させる角度に決定される。すなわち、プリズムシート３０の絶対屈折率をＮ１と空気の絶対屈折率をＮ２から、上記式（１）により、入射角αと屈折角βの関係が定まる。また、屈折面２２で屈折する細胞保持部１１からの観察光Ｌの方向は、観察面２１に垂直な観察方向Ｄに決められている。
【００３５】
これにより、細胞保持部１１からの観察光Ｌの観察方向Ｄに対する傾斜角γを任意の角度に決定することで、屈折面２２の観察面２１に対する傾斜角θを決定することができる。なお、屈折面２２で屈折させた細胞保持部１１からの観察光Ｌの方向は、必ずしも観察面２１に垂直な観察方向Ｄに一致する必要はなく、顕微鏡等の観察装置による観察が可能な範囲で、観察方向Ｄに対して傾斜していてもよい。すなわち、屈折面２２の傾斜角θは、観察面２１に垂直な観察方向Ｄに対して傾斜した細胞保持部１１からの観察光Ｌを、例えば観察装置によって観察方向Ｄから観察可能な範囲で屈折させることが可能な角度であればよい。
【００３６】
また、観察面２１の複数の傾斜観察部２５は、相対的に小さい第１の傾斜角θ１の第１の屈折面２２を有する第１の傾斜観察部２５と、相対的に大きい第２の傾斜角θ２の第２の屈折面２２を有する第２の傾斜観察部２５とを含むことができる。例えば、図１に示す例において、すべての傾斜観察部２５の屈折面２２の傾斜角θを異ならせてもよいし、２つの傾斜観察部２５の屈折面２２の傾斜角θと他の２つの１つの傾斜観察部２５の屈折面２２の傾斜角θを異ならせてもよいし、３つの傾斜観察部２５の屈折面２２の傾斜角θと他の１つの傾斜観察部２５の屈折面２２の傾斜角θを異ならせてもよい。また、観察面２１の複数の傾斜観察部２５は、異なる屈折率のプリズムシート３０を有してもよい。
【００３７】
以下、本実施形態の細胞容器１の作用について説明する。
【００３８】
細胞容器１は、例えば、容器本体１０の底面及び蓋体２０の観察面２１が概ね水平になるように、顕微鏡等の観察装置に配置される。そして、観察装置によって、観察面２１に垂直な観察方向Ｄから、細胞保持部１１に保持された細胞や組織が、観察面２１を介して観察される。
【００３９】
前述のように、本実施形態の細胞容器１は、細胞を保持する細胞保持部１１と、細胞保持部１１からの観察光Ｌを観察方向Ｄへ透過させる観察面２１とを備えている。そして、観察面２１は、観察方向Ｄに対して傾斜した細胞保持部１１からの観察光Ｌを観察方向Ｄへ屈折させる傾斜角θで観察面２１に対して傾斜している屈折面２２を有している。
【００４０】
そのため、図２及び図３に示すように、観察方向Ｄに対して傾斜した細胞保持部１１からの観察光Ｌは、屈折面２２に入射して観察方向Ｄへ屈折する。これにより、観察方向Ｄから観察面２１の屈折面２２を観察することで、観察方向Ｄに対して傾斜した方向Ｄａから細胞保持部１１を観察することができる。
【００４１】
図４は、図１に示す細胞容器１の観察面２１の直上領域２４とその周囲の傾斜観察部２５の拡大平面図である。直上領域２４においては、細胞保持部１１からの観察方向Ｄの観察光Ｌは、そのまま観察面２１を透過し、観察装置によって観察される。そのため、観察面２１の直上領域２４では、観察装置によって細胞保持部１１を観察面２１に垂直な観察方向Ｄから真っ直ぐに観察することができる。すなわち、観察面２１を介して細胞保持部１１を真上から観察することができる。
【００４２】
一方、観察面２１の傾斜観察部２５においては、観察方向Ｄに対して傾斜した細胞保持部１１からの観察光Ｌは、観察面２１の屈折面２２によって観察方向Ｄへ屈折され、観察装置によって観察される。そのため、観察装置によって観察面２１に垂直な観察方向Ｄから傾斜観察部２５を観察し、細胞保持部１１を観察方向Ｄに対して傾斜した斜め方向Ｄａから見た像を観察することができる。
【００４３】
これにより、細胞容器１を傾斜させたり観察装置を可動式にしたりしなくても、観察面２１に垂直な観察方向Ｄから屈折面２２を観察し、屈折面２２を介して細胞保持部１１を斜め方向Ｄａから観察することができる。したがって、本実施形態の細胞容器１によれば、一定の観察方向Ｄから観察しても、内部に収容された細胞や組織等を複数の異なる角度から観察することができる。
【００４４】
また、細胞容器１が、観察面２１と屈折面２２による複数の観察経路を有することで、仮に観察面２１と屈折面２２のいずれか一方に傷や汚れが付着して観察が妨げられた場合でも、他方の観察経路によって細胞保持部１１に保持された細胞や組織を観察することができる。したがって、観察の冗長性を向上させることができ、不測の事態に対処することが可能になる。
【００４５】
特に、細胞保持部１１に隔壁１１ｂやマイクロウェル１１ａを有する場合には、細胞を複数の観察方向から観察することが必要になる場合が多いため、細胞保持部１１の観察時の作業効率が著しく向上する。また、観察面２１に垂直な観察方向Ｄにおいて、細胞保持部１１の直上から観察面２１の直上領域２４を観察しても、隔壁１１ｂの側面は、観察することができない。しかし、観察面２１に屈折面２２を有することで、屈折面２２を介して隔壁１１ｂの側面の状態を観察することが可能になる。これにより、隔壁１１ｂの側面の汚れの有無などを容易に確認することができる。
【００４６】
また、本実施形態の細胞容器１は傾斜面を有する凸部３１を備え、屈折面２２は、複数の凸部３１の互いに平行な傾斜面３１ａによって構成されているため、観察方向Ｄにおける傾斜面３１ａの寸法を小さくすることができる。また、本実施形態の細胞容器１は、観察面２１にプリズムシート３０が配置され、複数の凸部３１は、プリズムシート３０に形成されている。そのため、傾斜面３１ａを、例えば蓋体２０や容器本体１０と一体成型する必要がなく、成形を容易にして、細胞容器１の製造を容易にすることができる。
【００４７】
また、本実施形態の細胞容器１において、観察面２１は、複数の傾斜観察部２５を備え、各々の傾斜観察部２５は、屈折面２２を備えている。そのため、細胞容器１は、複数の傾斜観察部２５によって、観察面２１に複数の観察経路を有することになり、観察の作業効率及び冗長性をより向上させることができる。
【００４８】
また、複数の傾斜観察部２５は、相対的に小さい第１の傾斜角θ１の第１の屈折面２２を有する第１の傾斜観察部２５と、相対的に大きい第２の傾斜角θ２の第２の屈折面２２を有する第２の傾斜観察部２５とを含むことができる。これにより、観察面２１に垂直な観察方向Ｄから、観察面２１の第１の傾斜観察部２５と第２の傾斜観察部２５を介して、細胞保持部１１に保持された細胞や組織を、観察方向Ｄに傾斜した異なる角度で観察することができる。
【００４９】
なお、第１の傾斜観察部２５と第２の傾斜観察部２５は、任意の２つの傾斜観察部２５の相対的な関係を示すものである。すなわち、傾斜観察部２５が３つ以上ある場合には、任意に選択された２つの傾斜観察部２５における相対的な関係を示すものである。したがって、傾斜観察部２５が３つ以上ある場合には、様々な組み合わせの角度で細胞保持部１１を観察することができ、観察の作業効率及び冗長性をより向上させることができる。
【００５０】
また、本実施形態の細胞容器１は、細胞保持部１１を有する容器本体１０と、容器本体１０の開口部１２を閉じる蓋体２０とを備えたディッシュ型の容器であり、観察面２１は、蓋体２０の外面である。そのため、観察面２１に容器本体１０に収容された培地やオイル等が付着するのを防止することができる。
【００５１】
なお、細胞容器１がディッシュ型である場合には、屈折面２２を有する観察面は、蓋体２０の外面、蓋体２０の内面２３、及び容器本体１０の外面の少なくとも一つであることができる。例えば、屈折面２２を有する観察面が蓋体２０の内面２３である場合には、外部の機器や器具との衝突による傷等の損傷を防止することができる。
【００５２】
また、細胞容器１は、蓋体２０の外面と内面２３の双方に屈折面２２を有してもよい。この場合、観察方向Ｄに対して傾斜した細胞保持部１１からの観察光Ｌを、蓋体２０の外面と内面２３の双方の屈折面２２によって、より大きな角度で観察方向Ｄへ屈折させることができる。したがって、細胞保持部１１を観察方向Ｄに対してより大きな角度で傾斜した方向Ｄａから観察することが可能になる。
【００５３】
以上説明したように、本実施形態の細胞容器１によれば、観察面２１を一定の観察方向Ｄから観察した場合でも、観察面２１の屈折面２２とそれ以外の部分とを介して細胞保持部１１を観察することで、内部に収容された細胞や組織等を複数の異なる角度から観察することができる。
【００５４】
なお、細胞容器１の形状及び観察面２１の屈折面２２を有する傾斜観察部２５の形状、位置、大きさは、本実施形態の細胞容器１の構成に限定されない。以下、本実施形態の変形例を例示する。
【００５５】
図５において、（ａ）から（ｄ）は、それぞれ、本実施形態の細胞容器１の変形例を示す平面図である。
【００５６】
図５において（ａ）に示すように、観察面２１の屈折面２２を有する傾斜観察部２５は、単数でもよい。傾斜観察部２５の位置は、中央でもよいし、周縁部でもよい。傾斜観察部２５を中央に配置することで、容器本体１０の二点鎖線で囲まれた領域を観察方向Ｄに傾斜した方向から観察することができ、蓋体２０を回転させることで、斜めから観察できる細胞保持部１１の位置を移動させることができる。
【００５７】
図５において（ｂ）に示すように、蓋体２０及び容器本体１０の形状は矩形又はその他の多角形にすることができる。また、傾斜観察部２５を矩形又はその他の多角形にしてもよい。蓋体２０及び容器本体１０の形状を矩形又はその他の多角形にすることで、蓋体２０と容器本体１０を所定の角度で相対的に回転させ、傾斜観察部２５によって観察する方向を所定の角度で変更することができる。
【００５８】
図５において（ｃ）に示すように、傾斜観察部２５は、観察面２１の周縁部に、観察面２１の外縁に沿う形状で配置することができる。これにより、容器本体１０の中央部に位置する細胞保持部１１のより広い範囲を観察方向Ｄに傾斜した方向から観察することが可能になる。
【００５９】
図５において（ｄ）に示すように、容器本体１０の周縁部に細胞保持部１１がある場合には、傾斜観察部２５は、観察面２１の中央部に細胞保持部１１に対応する形状で形成することができる。これにより、傾斜観察部２５によって細胞保持部１１のより広い範囲を観察することができ、観察の作業効率を向上させることができる。
【００６０】
［実施形態２］
次に、本発明の細胞容器の実施形態２について、図３を援用し、図６を用いて説明する。図６は、本発明の実施形態２に係る細胞容器１Ａを示す図２に相当する断面図である。
【００６１】
本実施形態の細胞容器１Ａは、容器本体１０Ａの外面である外底面に屈折面２２を形成するプリズムシート３０が配置され、蓋体２０の外面と内面には屈折面２２を有しない。また、本実施形態の細胞容器１Ａは、前述の実施形態１の細胞容器１よりも容器本体１０Ａの底壁１４が厚くされ、容器本体１０Ａの内底面１３の全体が細胞保持部１１とされ、マイクロウェル１１ａや隔壁１１ｂを有しない。本実施形態の細胞容器１Ａのその他の点は、前述の実施形態１の細胞容器１と同様であるため、同一の部分には同一の符号を付して説明を省略する。
【００６２】
本実施形態の細胞容器１Ａは、例えば、倒立顕微鏡等の観察装置によって、細胞容器１Ａの観察面１５である容器本体１０Ａの外底面を介して細胞保持部１１の中央部が観察される。ここで、容器本体１０Ａの外底面である観察面１５に屈折面２２を形成するプリズムシート３０が配置されている。
【００６３】
そのため、前述の実施形態の細胞容器１と同様に、細胞容器１Ａを傾斜させたり観察装置を可動式にしたりすることなく、観察面１５に垂直な観察方向Ｄから屈折面２２を観察し、屈折面２２を介して細胞保持部１１の中央部を観察方向に対して傾斜した斜め方向Ｄａから観察することができる。したがって、本実施形態の細胞容器１Ａによれば、一定の観察方向Ｄから観察しても、内部に収容された細胞や組織等を複数の異なる角度から観察することができる。
【００６４】
［実施形態３］
次に、本発明の細胞容器の実施形態３について、図３を援用し、図７を用いて説明する。図７は、本発明の実施形態３に係る細胞容器１Ｂの容器本体１０Ｂと蓋体２０Ｂの平面図である。
【００６５】
本実施形態の細胞容器１Ｂは、容器本体１０Ｂの内底面１３に隔壁１６ａ，１６ｂ，１６ｃによって囲まれた円形の３つの細胞保持部１１を有し、観察面２１である蓋体２０Ｂの上面に各細胞保持部１１に対応する傾斜観察部２５が設けられている。また、容器本体１０Ｂと蓋体２０Ｂは、それぞれ、観察面２１に垂直な観察方向Ｄから見て互いに重なり合う位置に形成された位置合わせ用のマークＭを有する。本実施形態の細胞容器１Ｂのその他の点は、前述の実施形態１の細胞容器１と同様であるため、同一の部分には、同一の符号を付して説明を省略する。
【００６６】
本実施形態の細胞容器１Ｂは、容器本体１０Ｂの開口部１２を蓋体２０Ｂによって閉じ、蓋体２０Ｂの上面の観察面２１を介して細胞保持部１１を観察する際に、観察面２１に垂直な観察方向Ｄから見て蓋体２０Ｂに設けられたマークＭと容器本体１０Ｂに設けられたマークＭとが重なり合うように、容器本体１０Ｂと蓋体２０Ｂの位置を調整する。これにより、各細胞保持部１１に対して、各傾斜観察部２５を所定の位置に配置することができる。なお、蓋体２０ＢのマークＭは、例えば、蓋体２０Ｂの観察面２１と容器本体１０Ｂの外底面に形成することができる。
【００６７】
本実施形態の細胞容器１Ｂによれば、前述の実施形態１の細胞容器１と同様の効果が得られるだけでなく、位置合わせ用のマークＭによって、細胞保持部１１と屈折面２２との位置関係を所定の位置関係に調整することができる。
【００６８】
以上、図面を用いて本発明の実施の形態を詳述してきたが、具体的な構成はこの実施形態に限定されるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲における設計変更等があっても、それらは本発明に含まれるものである。
【００６９】
以下、本発明の実施例について説明する。
【００７０】
［実施例１］
図８は、本発明の実施例１に係る細胞容器の写真である。本実施例の細胞容器の容器本体の内底面には、中央部の円筒状の隔壁と、中央部の隔壁から容器本体の径方向に延びて中央部の隔壁の周囲を３つの領域に区画する放射状の隔壁とが設けられている。容器本体の直径は３５ｍｍであり、蓋体を含めた細胞容器の高さは１１ｍｍである。
【００７１】
図９は、実施例１の細胞容器に取り付けられるプリズムシートの凸部の形状を示す模式的な断面図である。本実施例のプリズムシートの凸部は、延在方向に垂直な断面において、頂角が９０°、一方の底角が３０°、他方の底角が６０°の直角三角形の断面形状を有している。凸部のピッチは２００μｍである。
【００７２】
ＰＥＴフィルム上に屈折率が１．５５の紫外線硬化樹脂によって、図９に示す凸部を形成してプリズムシートを作製した。そして、作製したプリズムシートを細胞容器の蓋体の上面の観察面に取り付ける前後で、株式会社キーエンス製のマイクロスコープVHX-5000を用い、観察面に垂直な方向から写真撮影を行った。
【００７３】
図１０は、細胞容器の観察面にプリズムシートを取り付ける前後の拡大写真である。図１０の上の写真は、観察面にプリズムシートを取り付ける前に、容器本体の内底面の中央部の円筒状の隔壁と放射状の隔壁との接合部近傍を観察面に垂直な方向から撮影した写真である。図１０の下の写真は、観察面にプリズムシートを取り付けた後に、同じ個所を同じ方向から撮影した写真である。図１０に示すように、観察面にプリズムシートを取り付けることによって、複数の凸部の傾斜面によって観察光が屈折され、斜め上方から観察したのと同様の画像が得られることが分かる。
【００７４】
［実施例２］
図１１は、本発明の実施例２に係る細胞容器の写真である。本実施例の細胞容器の容器本体の内底面には、中央部の円筒状の隔壁と、周縁部に配置された４つの円筒状の隔壁が形成されている。中央部の隔壁の内側には、マイクロウェルが形成されている。
【００７５】
この細胞容器の蓋体の外面の観察面の半分に、実施例１と同じプリズムシートを取り付け、容器本体の内底面の中央部の円筒状の隔壁の近傍を、実施例１と同様に真上から撮影した。
【００７６】
図１２は、実施例２の細胞容器の観察面の拡大写真である。図１２に示すように、観察面にプリズムシートを取り付けていない領域では、容器本体の内底面の中央部の隔壁及びマイクロウェルを真上から観察した状態の拡大写真が得られた。一方、観察面にプリズムシートを取り付けた領域では、容器本体の内底面の中央部の隔壁及びマイクロウェルを斜め上方から観察した状態の拡大写真が得られた。
【００７７】
なお、プリズムシートを取り付けた領域にみられる筋状の線は、プリズムシートの凸部を形成する凹凸の谷や頂点であるため、凹凸の成形精度を上げるか、ピッチを広げればより目立たなくすることができる。また、観察する倍率が高倍率であれば、ピッチ幅が狭くても、筋は目立たなくなる。倍率が高くなれば、相対的に狭い視野を見ることになるので、視野中の凹凸の山と谷の数が減るためである。
【符号の説明】
【００７８】
１      細胞容器
１Ａ    細胞容器
１Ｂ    細胞容器
１０    容器本体
１０Ａ  容器本体
１０Ｂ  容器本体
１１    細胞保持部
１２    開口部
１５    観察面（外面）
２０    蓋体
２０Ｂ  蓋体
２１    観察面（外面）
２２    屈折面
２３    内面
２５    傾斜観察部
３０    プリズムシート
３１    凸部
３１ａ  傾斜面
Ｄ      観察方向
Ｌ      観察光
Ｍ      マーク
θ      傾斜角
【図１】
2017123818.tif 000003
【図２】
2017123818.tif 000004
【図３】
2017123818.tif 000005
【図４】
2017123818.tif 000006
【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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