(57)【要約】【課題】異臭の低減されたホップ酸化反応産物の抽出物の製造方法の提供。【解決手段】ホップ酸化反応産物の水性媒体抽出物を膜処理する工程を含んでなる、異臭の低減されたホップ酸化反応産物の抽出物の製造方法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ホップ酸化反応産物の水性媒体抽出物を膜処理する工程を含んでなる、異臭の低減されたホップ酸化反応産物の抽出物の製造方法。
【請求項２】
ホップ酸化反応産物の水性媒体抽出物と吸着剤とを接触させる工程をさらに含んでなる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
請求項１または２に記載の方法により得られた、異臭の低減されたホップ酸化反応産物の抽出物。
【請求項４】
請求項１または２に記載の方法により得られた、異臭の低減されたホップ酸化反応産物の抽出物を含む飲食品。
【請求項５】
ホップ酸化反応産物の水性媒体抽出物を膜処理する工程を含んでなる、ホップ酸化反応産物の異臭低減方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、異臭の低減されたホップ酸化反応産物の抽出物の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ビール中の苦味成分の起源であるホップは、古くから民間薬としても用いられており、鎮静効果、健胃効果などの様々な健康機能が知られている。このホップから得られる抽出物を飲食品に対して一定量以上配合すると独特の強烈な苦味が生じてしまい、嗜好性を損なう恐れがある。ホップの健康機能に関連して、これまでにホップ由来のイソフムロン類、フムロン類およびルプロン類にＰＰＡＲアゴニスト作用があり、この作用を介して脂質代謝改善機能があることが報告されている（特許文献１）。しかしながら、これらの成分にはホップ同様、強烈な苦味がある。
【０００３】
本発明者らの一部は、ホップを酸化処理することにより、ホップ特有の苦味を抑制しつつ、その脂質代謝改善機能を維持しうることを報告している。さらに、ホップの酸化処理によって生じる異臭は、エタノール等の水性媒体で抽出処理することにより低減しうることを報告している（特許文献２、特許文献３）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特許第４５０３３０２号公報
【特許文献２】ＷＯ２０１２／０８１６７５号公報
【特許文献３】ＷＯ２０１３／１９１２６４号公報
【発明の概要】
【０００５】
しかしながら、ホップ酸化反応産物を酸性飲料に添加した場合、従来の抽出処理では異臭が目立ち快適に摂取することが困難なことが本発明者らの検討により明らかとなった。したがって、本発明は、ホップ酸化反応産物の異臭を効果的に除去する方法を提供することをその目的としている。
【０００６】
本発明者らは、今般、ホップ酸化反応産物を特定の手法により処理すると、安定的に異臭を低減しうることを見出した。本発明はこれらの知見に基づくものである。
【０００７】
本発明によれば、以下が提供される。
（１）ホップ酸化反応産物の水性媒体抽出物を膜処理する工程を含んでなる、異臭の低減されたホップ酸化反応産物の抽出物の製造方法。
（２）前記膜処理が、分画分子量６００〜１０００のナノフィルター膜を用いて行われる、（１）に記載の方法。
（３）ホップ酸化反応産物の水性媒体抽出物をＢｒｉｘ換算で３倍以上に濃縮する、（１）または（２）に記載の方法。
（４）前記ホップ酸化反応産物が、ホップを１００℃以下で加熱して得られたものである、（１）〜（３）のいずれかに記載の方法。
（５）前記ホップ酸化反応産物の抽出物のＨＰＬＣ分析による総ピーク面積に対するイソα酸、α酸およびβ酸のピーク面積の割合が２０％以下である、（１）〜（４）のいずれかに記載の方法。
（６）ホップ酸化反応産物の水性媒体抽出物と吸着剤とを接触させる工程をさらに含んでなる、（１）〜（５）のいずれかに記載の方法。
（７）前記吸着剤が、活性炭、合成吸着樹脂およびゼオライトからなる群から選択される少なくとも1つのものである、（１）〜（６）のいずれかに記載の方法。
（８）前記水性媒体が水である、（１）〜（７）のいずれかに記載の方法。
（９）前記ホップ酸化反応産物の抽出物が、経口食品用の添加剤である、（１）〜（８）のいずれかに記載の方法。
（１０）（１）〜（９）のいずれかに記載の方法により得られた、異臭の低減されたホップ酸化反応産物の抽出物。
（１１）（１）〜（９）のいずれかに記載の方法により得られた、異臭の低減されたホップ酸化反応産物の抽出物を含有する飲食品。
（１２）ホップ酸化反応産物の水性媒体抽出物を膜処理する工程を含んでなる、ホップ酸化反応産物の異臭低減方法。
【０００８】
本発明によれば、ホップ酸化反応産物の異臭を簡易な処理で効果的に除去することができる。本発明は、ホップ酸化反応産物を酸性飲料に添加する場合、異臭を防止する上で特に有利である。
【０００９】
異臭の低減されたホップ酸化反応産物の抽出物の製造方法
本発明の製造方法は、ホップ酸化反応産物の水性媒体抽出物を膜処理する工程を含んでなる。
【００１０】
ホップ酸化反応産物
本発明においてホップは、ルプリン部を含有するものであれば任意の形態のものでよく、収穫して乾燥させる前のもの、収穫して乾燥したもの、圧縮したもの、粉砕したもの、またはペレット状に加工したもの等用いてもよいが、好ましくはホップペレットの形態である。ホップペレットは、市販品を使用してもよく、例えば、ホップ毬花を圧縮しペレット状にしたもの（Type90ペレット）、ルプリン部分が選択的に濃縮されたペレット（Type45ペレット）、または異性化処理したホップペレット（例えば、Isomerized Pellets (HopSteiner社)）等が挙げられる。
【００１１】
ホップには、α酸（フムロン類）、β酸（ルプロン類）、イソα酸（イソフムロン類）などの酸性樹脂成分が含まれている。本発明において「フムロン類」は、フムロン、アドフムロン、コフムロン、ポストフムロン、およびプレフムロンを含む意味で用いられる。また、本発明において「ルプロン類」はルプロン、アドルプロン、コルプロン、ポストルプロン及びプレルプロンを含む意味で用いられる。さらに、本発明において「イソフムロン類」は、イソフムロン、イソアドフムロン、イソコフムロン、イソポストフムロン、イソプレフムロン、Rho-イソフムロン、Rho-イソアドフムロン、Rho-イソコフムロン、Rho-イソポストフムロン、Rho-イソプレフムロン、テトラハイドロイソフムロン、テトラハイドロイソアドフムロン、テトラハイドロイソコフムロン、テトラハイドロイソプレフムロン、テトラハイドロイソポストフムロン、ヘキサハイドロイソフムロン、ヘキサハイドロイソアドフムロン、ヘキサハイドロイソコフムロン、ヘキサハイドロイソポストフムロン、ヘキサハイドロイソプレフムロンを含む意味で用いられる。なお、イソフムロン類にはシスおよびトランス立体異性体が存在するが、特に断りがない限りその両者を含む意味で用いられる。
【００１２】
本発明の酸化反応産物は、特許文献３に記載の方法に従い、ホップを酸化処理することにより製造することができる。酸化処理は、好ましくはホップを空気中で加熱することにより行われる。加熱温度は特に限定されないが、好ましい上限は１００℃であり、より好ましい上限は８０℃である。加熱温度を１００℃以下とする場合には異性化よりも酸化を優先的に進行させる上で有利である。また、好ましい加熱温度の下限は６０℃である。加熱温度を６０℃以上とする場合には酸化反応を効率的に進行させる上で有利である。また、反応期間も特に限定されるものではなく、ホップの品種や反応温度により適宜決定することができる。例えば、６０℃であれば４８〜１２０時間、８０℃であれば８〜２４時間が好ましい。酸化反応に付される際のホップの形態は空気中の酸素と接触できれば特に限定されるものではないが、好ましくは粉末状にすることにより、反応時間を短縮できる。
【００１３】
特許文献３によると、ホップを酸化処理に付すことによりα酸、β酸、イソα酸の含有量が低減され、これら以外の成分の含有量が増加する。このようなホップ酸化反応産物の例としては、HPLC総ピーク面積に対するα酸、β酸およびイソα酸のピーク面積の割合が２０％以下、好ましくは１０％以下であるものが挙げられる。
【００１４】
本発明の酸化反応産物に含まれるα酸、β酸、イソα酸以外の成分は、ＨＰＬＣ等の周知の分析手段により容易に検出することができる。例えば、特許文献２の実施例１と同様の手順で調製されるホップ酸化反応産物には、α酸、β酸およびイソα酸以外の成分が含まれており、この成分に対応するピーク（「Ｓ−フラクション（S-Fr）」ともいう）は生理活性を奏しうる。特許文献３における実施例３の図１Ａにおいて矢印Ａ１およびＡ２で分画される範囲のピーク（α酸、β酸のピークを除く）がこれに該当する。
【００１５】
本発明のホップ酸化反応産物の上記ＨＰＬＣ分析は、特許文献３の記載に準じて、以下の条件により行なうことができる。S-Frの定量値は、特許文献３における図１Ａの矢印Ａ１およびＡ２で分画される範囲のピーク（α酸、β酸のピークを除く）の総ピーク面積値からイソα酸換算値の定量値として算出することができる。
【００１６】
［ＨＰＬＣ構成装置］
ホンプ：LC-10ADvp×3（SHIMADZU）
デガッサー：DGU-20A5（SHIMADZU）
システムコントローラー：CBM-20A（SHIMADZU）
オートサンプラー：SIL-20ACHT（SHIMADZU）
カラムオーブン：CTO-20AC（SHIMADZU）
フォトダイオードアレー検出器：SPD-M20A（SHIMADZU）
波形解析ソフトウェア：LCSolution（SHIMADZU）
［ＨＰＬＣ条件］
カラム：Alltima C18 2.1mm I.D. x 100mm 粒子径3μm
流速：0.6mL/min
溶出溶媒A：水/リン酸、1000/0.2, (v/v)  + EDTA(free) 0.02%(w/v)
溶出溶媒B：アセトニトリル
溶出溶媒C：水
注入量：3μL
カラム温度：40℃
検出波長： 270nm（酸化反応産物、イソα酸、α酸、β酸）
【００１７】
グラジエントプログラム： 
【表１】
2017042141.tif 000002
【００１８】
本発明の製造方法においては、ホップ酸化反応産物の水性媒体抽出物を準備する。水性媒体は通常食品製造に使用されるものであれば特に限定されるものではないが、好ましくは、水またはエタノールであり、より好ましくは水である。また、抽出温度は特に限定されないが、好ましくは６０℃以下であり、抽出効率を勘案すれば、５０〜６０℃がより好ましい。
【００１９】
ホップ酸化反応産物の水性媒体抽出物のBrix値は、特に制限されないが、例えば、３以下であり、好ましくは１．５〜３である。ホップ酸化反応産物の水性媒体抽出物は、デカンテーションまたはろ紙等により不溶性成分を除去してもよい。
【００２０】
本発明の製造方法では、ホップ酸化反応産物の水性媒体抽出物を膜処理する。本発明の一つの態様によれば、上記膜処理は膜濃縮とされる。
【００２１】
また、本発明の膜処理において使用される膜は、本発明の効果を妨げない限り特に限定されないが、好ましくはナノフィルター膜またはウルトラフィルター膜（ＵＦ膜）であり、より好ましくはナノフィルター膜である。
【００２２】
また、本発明においてナノフィルター膜等の分画分子量（カットオフ）は、好ましくは６００ダルトン（Da）以上であり、より好ましくは６００〜１０００ダルトン（Da）である。ナノフィルターの分画分子量は、後述する試験例１で使用されたSynder社のＮＦＧと同様にして決定することができる。
【００２３】
また、上記膜処理において、Ｂｒｉｘ換算で例えば、３倍以上、好ましくは３〜４倍に水性媒体抽出物を濃縮することができる。
【００２４】
また、膜処理された抽出物のBrix値は、特に制限されないが、例えば、４．５以上であり、好ましくは５〜７である。
【００２５】
また、本発明の製造方法は、好ましくは、ホップ酸化反応産物の水性媒体抽出物と吸着剤とを接触させる工程をさらに含んでなる。接触工程は、例えば、抽出物中に吸着剤を添加し、常温で０．５〜２時間程度静置することにより簡易に行うことができる。上記接触工程は、膜処理工程の前、同時または後のいずれであってもよいが、膜処理工程の前に行われることが好ましい。
【００２６】
本発明に用いられる吸着剤は、活性炭、合成吸着樹脂、ゼオライト等が挙げられるが、好ましくは活性炭である。
【００２７】
また、上記接触工程は、所望により、吸着剤に加えて、珪藻土をはじめとする公知の濾過助剤を添加して実施してもよい。吸着剤および濾過助剤は、濾過等の公知精製処理により、抽出物から除去することができる。
【００２８】
本発明の製造方法によれば、異臭の低減されたホップ酸化反応産物の抽出物が提供される。かかる抽出物における異臭の有無は、後述する試験例２に記載の方法に基づき決定することができる。
【００２９】
本発明の異臭の低減された抽出物は、所望により、殺菌（例えば、９０℃、１〜４時間程度）、乾燥等の工程に付することができる。
【００３０】
本発明の異臭の低減された抽出物の形態は、特に限定されず、液状であってもよく、半固体状または固体状のいずれに調整してもよいが、液状が好ましい。
【００３１】
本発明の異臭の低減された抽出物は、広範な経口製品に添加して摂取することができる。したがって、本発明の好ましい態様によれば、本発明の方法は、の異臭の低減された抽出物を経口製品に添加する工程をさらに含んでなる。
【００３２】
経口製品が飲料の場合、異臭の低減された抽出物の添加量は、特に限定されないが、S-Fr濃度に換算して、例えば、５０〜２００ppmであり、好ましくは７０〜１２０ppmである。
【００３３】
また、飲料のｐＨは、特に限定されないが、例えば、ｐＨ２．５〜７．０であり、好ましくはｐＨ２．５〜５．０であり、より好ましくはｐＨ２．５〜３．５である。本発明の抽出は飲料のｐＨが酸性の場合、異臭を防止する上で特に有利である。
【００３４】
本発明の異臭の低減された抽出物は、膜処理される前の抽出物と同様、脂肪蓄積抑制機能を有するＳ−フラクション（S-Fr）を含有しうる。したがって、本発明の抽出物は、好ましくは脂肪蓄積抑制剤（特に皮下脂肪蓄積抑制剤）および体重増加抑制剤として用いられる。また、本発明の抽出物は、好ましくは肥満の予防および／または治療に用いられる。
【００３５】
また、本発明の抽出物にはフムロン類やイソフムロン類のような強烈な苦味がなく、従来問題となっていた異臭も大幅に低減されているため、経口製品に好適に添加することができる。本発明の抽出物は上記のような生理活性作用を期待しつつ、苦味および異臭のマスキング手段を講じずにそのまま利用できる点で有利である。したがって、本発明の1つの態様によれば、上記抽出物は、経口製品用の添加剤である。
【００３６】
本発明の抽出物は、人類が飲食品として長年摂取してきたホップを原料とするものであり、毒性も低く、それを必要とする哺乳動物（例えば、ヒト、マウス、ラット、ウサギ、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ブタ、サル等）に対し安全に用いることができる。したがって、本発明の1つの態様によれば、本発明の抽出物の有効量を哺乳動物に摂取させることを含んでなる、脂肪蓄積または体重増加の抑制方法が提供される。本発明の抽出物は医薬と共に摂取することができる。したがって、本発明の好ましい態様によれば、上記抑制方法は、治療的方法である。また、本発明の抽出物は食事と共に摂取することができる。したがって、発明の別の好ましい態様によれば、上記抑制方法は、非治療的方法である。
【００３７】
本発明の抽出物の摂取量は、受容者、受容者の年齢および体重、症状、摂取時間、剤形、摂取方法の組み合わせ等に依存して決定できる。例えば、本発明の抽出物を経口摂取させる場合、体重６０ｋｇの成人１人１日当たりイソフムロン類換算で１０〜６００ｍｇ、好ましくは２０〜２００ｍｇ、非経口投与する場合は１〜１００ｍｇ、好ましくは３〜３０ｍｇの範囲となるように、１日１〜３回に分けて摂取させることができる。
【００３８】
また、本発明の別の態様によれば、脂肪蓄積抑制剤または体重増加抑制剤の製造のための異臭の低減された抽出物の使用が提供される。
【００３９】
また、本発明のさらに別の態様によれば、ホップ酸化反応産物の水性媒体抽出物を膜処理する工程を含んでなる、ホップ酸化反応産物の異臭低減方法が提供される。本発明の異臭低減方法は、上述の異臭の低減されたホップ酸化反応産物の抽出物の製造方法と同様の手順により実施することができる。
【実施例】
【００４０】
以下の例に基づいて本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらの例に限定されるものではない。なお、本明細書において特段の記載がない限り、発明の実施の詳細については、日本工業規格（ＪＩＳ）の規定に従う。
【００４１】
試験例１
ホップ酸化反応産物の調製・固液分離
ハラタウペルレ種（HPE種）のホップペレットミルで粉砕し、得られたホップ粉砕物を大気下で攪拌しながら６０℃で１２０時間程度加熱した。得られた加熱済みホップ（熟成ホップペレット）に、固形分濃度５％w/vとなるように水に添加し、５０℃で３０分間抽出処理を行った。得られた抽出液をデカンテーションにより固液分離し、固液分離液（Brix 約２）を得た。
【００４２】
活性炭処理工程
得られた固液分離液に、活性炭（Ｙ１８０Ｃ、味の素ファインケミカル社製）；対固液分離液0.5w/v%）およびポリビニルポリピロリドン（ポリクラール１０、          ISPジャパン社製：対固液分離液０．４w/v％）を添加して２時間静置した。得られた混合液に濾過助剤（珪藻土）を添加し、濾過処理を行い、濾液（Brix値 約１．５）を得た。
【００４３】
得られた濾液について、特許文献２の記載に従い、上述の条件にてＨＰＬＣ分析を行い、生理活性を有するS−Frの濃度(%)を測定した。
【００４４】
膜処理工程
得られた上記濾液について膜処理を行い、濃縮液（Brix 約６）を得た。試験区１ではＲＯ膜（製品名：ＲＯ９９、会社名：Alfa Laval社）、試験区２では分画分子量１５０−３００（Ｄａ）のナノフィルター膜（製品名：ＮＦＸ、会社名：Synder社）、試験区３では分画分子量６００−８００（Ｄａ）のナノフィルター膜（製品名：ＮＦＧ、会社名：Synder社）および試験区４では分画分子量１,０００（Ｄａ）のナノフィルター膜（製品名：ＮＴＲ７４５０、会社名：日東電工）を用いた。得られた透過液についてＨＰＬＣ分析を行ってS-Fr濃度(%)を測定し、S-Frの透過率〔＝透過液中のS-Fr濃度(%)／濾液中のS-Fr濃度(%)）〕を測定した。また、透過液における異臭の有無について、訓練されたパネラー３名により評価を行った。ここで、異臭は、脂肪酸様の汗臭い、蒸れた臭いを意味する。
結果は、以下の表２に示される通りであった。
【００４５】
【表２】
2017042141.tif 000003
【００４６】
試験区３および４では、透過液中のS-Frはほとんど確認されない一方で、透過液の脂肪酸様の異臭は確認された。このことから、試験区３および４の濃縮液ではS-Frが保持されている一方で、異臭原因物質は濾過により除去されたと考えられる。
また、試験区１および２では、透過液中のS-Frは実質的に確認されず、かつ透過液の異臭は確認も確認されなかった。このことから、試験区１および２の濃縮液ではS-Frが保持され、かつ、異臭原因物質も除去されなかったと考えられる。
【００４７】
試験例２：異臭低減効果の検討
以下の手順に従い、試験区５〜７のエキスサンプルを調製した。
試験区５：試験例１の手法に従い固液分離処理までを行い、活性炭処理および膜処理を行っていない抽出物を得た。
試験区６：試験例１の手法に従い活性炭処理までを行い、膜処理を行っていない抽出物を得た。
試験区７：試験例１の手法に従い活性炭処理および膜処理を行った抽出物を得た。
【００４８】
次に、試験区５〜７について、S-Fr濃度 ７０ｐｐｍとなるように添加してｐＨ４．７、ｐＨ３．０の水ベース飲料を得た。得られた飲料の香気を訓練されたパネラー５名により、以下の指標に基づき平均値を算出して比較評価を行った。
【００４９】
４：強く異臭を感じる
３：異臭を感じる
２：やや異臭を感じる。
１：ほとんど異臭を感じない
０：異臭を感じない
【００５０】
結果は、以下の表３に示される通りであった。
【表３】
2017042141.tif 000004
【００５１】
試験区５では、活性炭処理及び膜処理を行わなかった結果、ｐＨ４．７、ｐＨ３．０の飲料のいずれでも異臭は確認された。
試験区６では、活性炭処理までを行った結果、ｐＨ４．７の飲料では異臭が確認されなかったものの、ｐＨ３．０の飲料では異臭が確認された。
試験区７では、活性炭処理および膜処理を行った結果、ｐＨ４．７、ｐＨ３．０の飲料のいずれでも異臭は確認されなかった。