(57)【要約】      （修正有）【課題】ビタミンＣ又はビルベリーエキスの抗酸化効果が増強された組成物を提供する。【解決手段】ビタミンＣ１質量部に対しぶどうエキス０．０１〜０．４質量部を含む抗酸化組成物。さらにビルベリーエキス０．１質量部以上を配合した抗酸化組成物。ビルベリーエキス１質量部に対しぶどうエキス０．２〜１質量部を含む抗酸化組成物。【選択図】図４
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ビタミンＣ１質量部に対しぶどうエキス０．０１〜０．４質量部を含む抗酸化組成物。
【請求項２】
さらにビルベリーエキス０．１質量部以上を配合した請求項１に記載の抗酸化組成物。
【請求項３】
ビルベリーエキス１質量部に対しぶどうエキス０．２〜１質量部を含む抗酸化組成物。
【請求項４】
ぶどうエキスが黒ぶどう果実由来である請求項１〜３のいずれかに記載の抗酸化組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ビタミンＣ及び／又はビルベリーエキスの抗酸化作用を増強する技術に関する。
【背景技術】
【０００２】
生物にとって酸素は不可欠なものである。しかし体内に取り込まれた酸素の数％が、活性酸素となり細菌などから身体を防御するために使用され、余剰の活性酸素はスーパーオキシドジスムターゼなどの抗酸化酵素や食品中の抗酸化物質により消去されて、健康が維持されている。しかし、紫外線、喫煙、排気ガス、大気汚染、ストレス等の増加要因により抗酸化酵素や抗酸化物質では消去できない過剰の活性酸素が産生されると、生体組織へ酸化的障害を与え、生活習慣病をはじめ、癌、老人性痴呆などを引き起こすといわれている。ある種の疾病と活性酸素は、何らかの因果関係があるといわれている。
活性酸素を消去するために、抗酸化物質を含む食品を摂取することが重要である。食品の持つ抗酸化力を評価する種々の方法が確立されているが、その一つにＯＲＡＣ（Ｏｘｙｇｅｎ  Ｒａｄｉｃａｌ  Ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ  Ｃａｐａｃｉｔｙ：活性酸素吸収能力）と呼ばれる評価手法が知られている（特許文献１段落［０００８］参照）。
【０００３】
ＯＲＡＣは、１９９２年、米国立老化研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｎ  Ａｇｉｎｇ）によって開発された評価手法である。
ＯＲＡＣは、蛍光物質であるＦｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎを蛍光プローブとして使用し、一定の活性酸素の存在下、これにより分解されるＦｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎの蛍光強度を経時的に測定し、その変化を指標として抗酸化力を測定する方法である。この反応系に抗酸化物質が共存するとＦｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎの蛍光強度の減少速度が遅延するため、標準物質存在下のＦｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎの減少速度の遅延度合いと比較して、標準物質に換算した試料の抗酸化力を算出することができる。
なお、ＯＲＡＣは食品の生体内の抗酸化能を評価する指標として有用であるといわれている。
【０００４】
特許文献２には、大豆イソフラボンとポリフェノール類、ビタミン類、カロテノイド類から選択される１種以上とを併用した組成物の抗酸化効果をＯＲＡＣによって評価できることが記載されている。
特許文献３には、ＯＲＡＣによる抗酸化評価を指標として、米糠から抗酸化効果の高い組成物を効率良く抽出するための製造方法が記載されている。このようにＯＲＡＣは、食品原料や食品成分の抗酸化効果を評価する手法として普及している。
【０００５】
食品中の抗酸化物質として代表的なものとしては、ビタミンＣがある。またアントシアニンなどの色素類やフラボノイドにも強い抗酸化効果があることが知られている。またこれらを併用することもしばしば行われている。特許文献４には、アントシアニン色素又はフラボノイド色素を高濃度に含む（ａ）ビルベリーエキス（Vaccinium myrtillus）、アカツメクサ花エキス（Trifolium pratense）、ぶどうエキス（Vitis vinifera）およびティービネンシス（Thea vinensis）よりなる群から選択される少なくとも２つの抽出物、および（ｂ）ビタミンＥおよび／またはビタミンＣを含有する抗酸化剤が記載されている。また、この抗酸化剤は（ａ）／（ｂ）が１／９〜９／１の比率とすることで最適な抗酸化効果を発揮することが記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開２０１５−１６１６３５号公報
【特許文献２】特開２０１３−１４７４５６号公報
【特許文献３】特開２０１２−２１４４５２号公報
【特許文献４】特表２００５−５３５５６６号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明者は、上記のような背景技術をもとに研究を行い、ビタミンＣ又はビルベリー抽出物にブドウ抽出物を特定の比率で組み合わせた場合、著しいＯＲＡＣを指標とする抗酸化効果が増強されることを見いだし、本発明をなした。
すなわち、本発明の課題は、ビタミンＣ又はビルベリーエキスの抗酸化効果が増強された組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明の主な構成は以下の通りである。
１．ビタミンＣ１質量部に対しぶどうエキス０．０１〜０．４質量部を含む抗酸化組成物。
２．さらにビルベリーエキスを０．１質量部以上配合した１に記載の抗酸化組成物。
３．ビルベリーエキス１質量部に対しぶどうエキス０．２〜１質量部を含む抗酸化組成物。
４．ぶどうエキスが黒ぶどう果実由来である１〜３のいずれかに記載の抗酸化組成物。
【発明の効果】
【０００９】
本発明により、ビタミンＣ又はビルベリーエキスの持つ抗酸化効果が増強された組成物が提供される。本発明の組成物は、食品又は医薬品の原料として適している。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】ＯＲＡＣ法によるブランクのパターンを示す。
【図２】ＯＲＡＣ法によるサンプルの測定パターンを示す。
【図３】ＯＲＡＣ法によるＮｅｔＡＵＣのパターンを示す。
【図４】ビタミンＣの抗酸化作用をぶどうエキスが相乗的に増強していることを示すグラフである。
【図５】ビルベリーエキスの抗酸化作用をぶどうエキスが増強することを示すグラフである。
【図６】ビタミンＣの抗酸化作用をビルベリーエキスとぶどうエキスの併用によって増強することを示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明は、ビタミンＣ１質量部に対しぶどうエキス０．０１〜０．４質量部を含む抗酸化組成物、及びビルベリーエキス１質量部に対し、ぶどうエキス０．２〜１質量部を含む抗酸化組成物に関する。以下、本発明の組成物について説明する。
【００１２】
本発明でいうビタミンＣは、アスコルビン酸又はアスコルビン酸の塩又は誘導体をいう。例えば、アスコルビン酸ナトリウム、アスコルビン酸リン酸エステルナトリウム塩及びアスコルビン酸リン酸エステルマグネシウム塩等のアスコルビン酸リン酸エステル塩、アスコルビン酸テトライソパルミチン酸エステル等のアスコルビン酸脂肪酸エステル、アスコルビン酸エチルエーテル等のアスコルビン酸アルキルエーテル、アスコルビン酸−２−グルコシド等のアスコルビン酸グルコシドおよびその脂肪酸エステル類、アスコルビン酸硫酸エステル、リン酸トコフェリルアスコルビル等のアスコルビン酸誘導体である。生体内においてアスコルビン酸として機能する物質であれば、本発明において使用可能である。この中でもアスコルビン酸またはアスコルビン酸ナトリウムが好ましい。
【００１３】
本発明でいうぶどうエキスとは、ぶどう果実を皮ごと圧搾し、果汁を回収し、これを濃縮乾燥したものをいう。エキスの原料とするぶどうは、いずれの品種であっても使用することができ、例えば、白ぶどう（例えば、マスカット、ネオマスカット、マスカット・オブ・アレキサンドリア、ナイアガラ、ロザリオビアンコ、ピッテロビアンコなど）、赤ぶどう（例えば、デラウエア、ロザリオロッソ、甲斐路、甲州、紅金沢、紅やまびこなど）、黒ぶどう（例えば、巨峰、ピオーネ、ベリーＡ、スチューベン、キャンベルなど）などのそれぞれの品種を例示できる。この中でも特に黒ぶどうに分類される品種のものが好ましい。黒ぶどう由来のぶどうエキスは食品の着色用原料として市販されており、これを購入して使用することもできる。
【００１４】
本発明で用いるビルベリーは、植物学的分類におけるツツジ（Ｅｒｉｃａｃｅａｅ）科、スノキ（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ）属、Ｍｙｔｉｌｌｕｓ節に属する主として北部ヨーロッパ自生する落葉性低木であって、その果実特にその果皮は紫色でアントシアニン色素に富む。このアントシアニンは、シアニジン（Ｃｙａｎｉｄｉｎ）、デルフィニジン（Ｄｅｌｐｈｅｎｉｄｉｎ）、マルビジン（Ｍａｌｖｉｄｉｎ）、ペラルゴニジン（Ｐｅｌａｒｇｏｎｉｄｉｎ）、ペオニジン（Ｐｅｏｎｉｄｉｎ）、ペチュニジン（Ｐｅｔｕｎｉｄｉｎ）、の６種のアントシアニジンに、グルコース（ｇｌｕｃｏｓｅ）、ガラクトース（ｇａｌａｃｔｏｓｅ）、アラビノース（ａｒａｂｉｎｏｓｅ）の３つの糖類がそれぞれ１つずつ結合した配糖体よりなる。
ビルベリーエキスは、果実を圧縮粉砕し、圧縮粉砕されたビルベリー砕体より抽出し、アントシアニジン量を標準化して、２５質量％以上のアントシアニジンを含有する粉体のビルベリーエキスが市販されており、本発明においては、これをビルベリーエキス粉末又はビルベリーエキスの粉末と呼ぶ場合がある。本発明には、このビルベリーエキス粉末を使用することができる。
【００１５】
ビタミンＣの抗酸化効果を高めるためには、ビタミンＣ１質量部に対しぶどうエキスを０．０１〜０．４質量部配合する。好ましくは、ビタミンＣ１質量部に対しぶどうエキス０．０２５〜０．０５質量部である。さらにビルベリーエキスを、ビタミンＣ１質量部に対し０．１質量部以上を配合しても良い。
【００１６】
ビルベリーエキスの抗酸化効果を高めるためには、ビルベリーエキス１質量部あたりぶどうエキスを０．２〜１質量部配合する。
以上のような組成とすることで、それぞれの抗酸化作用を２〜６倍に高めることができる。
【００１７】
本発明の組成物は、そのままあるいは各種賦形剤を添加して製剤化してもよい。製剤としては顆粒剤、錠剤、カプセル剤を例示することができる。
なお製剤化に当たっては、本発明の組成物の目的を阻害しない範囲で各種の賦形剤や活性成分を添加することができる。具体的には、シクロデキストリン、へミセルロース、リグニン、グアガム、コンニャクマンナン、イサゴール、アルギン酸、寒天、カラギーナン、キチン、カルボキシメチルセルロース、ポリデキストロースなどの食物繊維や増粘剤、食用油、カルシウム、鉄、ナトリウム、亜鉛、銅、カリウム、リン、マグネシウム、ヨウ素、マンガン、セレンなどのミネラル；ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、ナイアシン、葉酸、パントテン酸などの脂溶性又は水溶性のビタミン群、リセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル、リン脂質、アラビアガム、キサンタンガム、トラガカントガム、ローカストビーンガムなどの乳化剤や分散剤、増量剤、賦形剤、保存料・酸化防止剤、風味調整剤や香料、塩化ナトリウム、グルタミン酸ナトリウム、グリシン、コハク酸、乳酸ナトリウムなどの呈味料、クエン酸、クエン酸ナトリウム、酢酸、アジピン酸、フマル酸、リンゴ酸などの酸味料、マルチトール、アスパルテームなどの低カロリー甘味料、着色剤などである。
【実施例】
【００１８】
以下に試験例を示し、本発明を説明する。
１．抗酸化効果測定方法
ＯＲＡＣ測定キット（ＣＥＬＬ  ＢＩＯＬＡＢＳ，ＩＮＣ．製）を用いて測定する。
ＯＲＡＣの測定原理は、上記したように蛍光物質であるＦｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎを蛍光プローブとして使用し、一定の活性酸素の存在下、これにより分解されるＦｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎの蛍光強度を経時的に測定し、その変化を指標として抗酸化力を測定する方法である。
図１に示すように、溶媒による蛍光強度（ＲＦＵ）を測定して蛍光強度の変化曲線（Ｂｌａｎｋ）を作成し、ついで図２に示す抗酸化物質の蛍光強度変化曲線（Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ）を作成し、それぞれの曲線の曲線下面積（ＡＵＣ）を計算し、抗酸化物質のＡＵＣ値から溶媒のＡＵＣ値を減じたＡＵＣをＮｅｔ  ＡＵＣ（図３）とする。このＮｅｔ  ＡＵＣを比較することで抗酸化効果を評価する。
【００１９】
２．試験試料
・ビタミンＣ「ビタミンＣ  １００Ｍ」（渡辺ケミカル社）
・ビルベリーエキス「ビルベリーカンソウエキスＥＴ／Ｍ」（Ｉｎｄｅｎａ  Ｓ．ｐ．Ａ．社）
・ぶどうエキス「粉末ぶどうエキスＨＡ」（三栄源エフ・エフ・アイ社）（黒ぶどうを圧搾機にかけ、果皮・果肉・種子全体を搾汁して乾燥させた食品原料）
・「ぶどう果皮エキス（グレープカラーＰ）」（ヤエガキ醗酵技研社）（ぶどう果皮成分のみを抽出した食品添加物色素原料）
・測定キット：「ＯｘｉＳｅｌｅｃｔＴＭ  Ｏｘｙｇｅｎ  Ｒａｄｉｃａｌ  Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ」Ｃａｐａｃｉｔｙ  Ａｓｓａｙ  ＣＥＬＬ  ＢＩＯＬＡＢＳ，ＩＮＣ．社）
・使用機器：蛍光プレートリーダー
【００２０】
３．抗酸化力の測定
下記の表１に示す濃度に調整したビタミンＣ、ビルベリーエキス、ぶどうエキス、ぶどう果皮エキスの抗酸化力をＯＲＡＣ測定キットにより測定した。測定結果を表１に示す。なお測定結果は４ウエルの平均値で示した。
【００２１】
【表１】
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【００２２】
表１に示した抗酸化力の測定結果に基づき、それぞれの試験試料を併用した場合の抗酸化作用の増強を試験した。
【００２３】
４．ビタミンＣの抗酸化効果に対するぶどうエキス、ぶどう果皮エキスの増強効果試験
ビタミンＣ２．５μｇ／ｍＬにぶどうエキス、ぶどう果皮エキスをそれぞれ表２に示す量を添加してビタミンＣに対する各成分の効果を試験した。抗酸化効果のＮｅｔ  ＡＵＣの実測値、表１の測定値に基づくＡＵＣの理論値を表２及び図４に示す。
【００２４】
【表２】
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【００２５】
表２及び図４に示すようにぶどうエキス、ぶどう果皮エキスはいずれもビタミンＣの抗酸化効果を増強することがわかった。特にぶどうエキスはその効果が強く、ビタミンＣ１質量部に対し０．０１〜０．４質量部の範囲で配合すると相乗的に抗酸化効果を向上させることがわかった。
【００２６】
５．ビルベリーの抗酸化効果に対するぶどうエキスの増強効果試験
ビルベリーエキスの抗酸化効果にぶどうエキスを併用した場合、の増強効果を試験するため、表３に示すようにビルベリーエキス０．１２５μｇ／ｍＬにぶどうエキスを０．５〜０．０３１２５μｇ／ｍＬ添加して抗酸化試験を行った。
なお、本試験は測定ごとに感度の絶対値が異なってくるため、改めて理論値のベースとなる単剤のデータを再測定し、表３に示した。
【００２７】
【表３】
2017210572.tif 000005
【００２８】
試験結果を表４及び図５に示す。
【００２９】
【表４】
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【００３０】
表４及び図５に示すように、ビルベリーにぶどうエキスを添加すると、ビルベリーエキスの抗酸化効果が増強されることがわかった。その効果は、ビルベリーエキス１質量部に対し０．２〜１質量部の範囲で特に増強されることがわかった。
【００３１】
６．ビタミンＣの抗酸化効果に対するビルベリーとぶどうエキスを配合した場合の増強効果試験
ビタミンＣ２．５μｇ／ｍＬとビルベリーエキス０．２５μｇ／ｍＬ又は０．１２５μｇ／ｍｌに、ぶどうエキスを表４に示す量を添加してビタミンＣに対する各成分の効果を試験した。抗酸化効果のＮｅｔ  ＡＵＣの実測値、表３の測定値に基づくＡＵＣの理論値を表５及び図６に示す。
【００３２】
【表５】
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【００３３】
表５及び図６に示すように、ビタミンＣとビルベリーエキスに、さらにぶどうエキスを添加すると、ビタミンＣの抗酸化効果が相乗的に増加されることが確認された。ビタミンＣの抗酸化効果を相乗的に増加させるためには、ビタミンＣ１質量部に対してビルベリーエキスを０．１質量部以上配合し、さらにぶどうエキスを０．０１〜０．２質量部配合すると効果的であることがわかった。特に、ぶどうエキスを０．０５質量部配合すると抗酸化効果はさらに特異的に増強されることがわかった。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
2017210572.tif 000011
【図５】
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【図６】
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