(57)【要約】      （修正有）【課題】鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドが脂肪蓄積予防に優れた効果を発揮することで、メタボリックシンドロームを改善するほか、他の新たな用途にも着目した食品組成物の提供。【解決手段】鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドを主成分とする脂肪蓄積予防用の食品組成物。脂肪蓄積予防に加え、肝臓機能低下抑制、血糖値制御、血圧制御、美白効果向上、又は更年期障害改善のいずれかを用途とする前記食品組成物。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドを主成分とすることを特徴とする脂肪蓄積予防用の食品組成物。
【請求項２】
鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドを主成分とすることを特徴とする肝臓機能低下抑制用および脂肪蓄積予防用の食品組成物。
【請求項３】
鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドを主成分とすることを特徴とする血糖値制御用および脂肪蓄積予防用の食品組成物。
【請求項４】
鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドを主成分とすることを特徴とする血圧制御用および脂肪蓄積予防用の食品組成物。
【請求項５】
鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドを主成分とすることを特徴とする美白効果向上用および脂肪蓄積予防用の食品組成物。
【請求項６】
鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドを主成分とすることを特徴とする更年期障害改善用および脂肪蓄積予防用の食品組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドを主成分とすることを特徴とする脂肪蓄積予防を主な用途とする食品組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来より水産加工において、鮭の筋子からイクラに加工する際に残るスジ（卵巣外皮）は、特に利用されることなく破棄されていた。  
ところで、卵巣外皮の役割は、哺乳動物のプラセンタ（胎盤）と同じように、胎児（魚卵）へ栄養を与え、かつ守ることにあると考えられている。従って、卵巣外皮は、魚類のプラセンタ（胎盤）ともいえる器官であり、その有効活用が望まれていた。
【０００３】
このような要請に応じて、魚卵外皮を構成する収縮蛋白質（ミオシン）を分解する方法が提案されている（例えば、特許文献１参照）。  
また、分解された組成物の用途として、肝臓機能低下の抑制作用を有することが見出されており、この用途に基づいて、前記組成物を健康食品や医薬の調製に活用することも既に提案されている（例えば、特許文献２参照）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特許第３６９１４９７号公報
【特許文献２】特許第４２４７４４４号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドは、その後の最近の研究により、肝臓機能低下の抑制作用だけでなく、特に、メタボリックシンドロームの改善に有効である等と、他にも新たな用途が見出されている。
【０００６】
本発明は、このような最近の研究成果に基づきなされたものであり、鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドが脂肪蓄積予防に優れた効果を発揮することで、メタボリックシンドロームを改善するほか、他の新たな用途にも着目した食品組成物を提供することを目的としている。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
前述した目的を達成するための本発明の要旨とするところは、以下の各項の発明に存する。  
［１］鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドを主成分とすることを特徴とする脂肪蓄積予防用の食品組成物。
本食品組成物によれば、白色脂肪細胞の中性脂肪を燃焼させるタンパク質（UCP-1）の発現が高められる。すなわち、アドレナリンが作用して、ミトコンドリアが白色脂肪細胞（内臓脂肪細胞）を燃やして褐色脂肪細胞に変換する。これにより、メタボリックシンドロームが改善される。
【０００８】
［２］鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドを主成分とすることを特徴とする肝臓機能低下抑制用および脂肪蓄積予防用の食品組成物。
本食品組成物は、さらに抗酸化機能（抗毒性効果）があり、肝機能低下を抑制する。内臓脂肪の多い人の善玉コレステロール（HDL）と悪玉コレステロール（LDL）の割合を変化させる。
【０００９】
［３］鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドを主成分とすることを特徴とする血糖値制御用および脂肪蓄積予防用の食品組成物。
本食品組成物は、血糖値の上昇を抑制することにより、血糖値を安定的に維持する効果がある。
【００１０】
［４］鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドを主成分とすることを特徴とする血圧制御用および脂肪蓄積予防用の食品組成物。
本食品組成物は、ＡＣＥ阻害活性により、ＡＣＥ血圧上昇酵素の働きを阻害して、血圧上昇を防止し、血圧が最適値となるように作用する。
【００１１】
［５］鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドを主成分とすることを特徴とする美白効果向上用および脂肪蓄積予防用の食品組成物。
本食品組成物によれば、肌の保湿に有効であり、肌のくすみに対する改善効果があり、肌の明るさや透明感の改善に有効であり、小さな色素沈着やシミ改善に対しても有効であるため、美白効果を向上させることが可能となる。
【００１２】
［６］鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドを主成分とすることを特徴とする更年期障害改善用および脂肪蓄積予防用の食品組成物。
本食品組成物は、更年期障害として、肌荒れ、不眠、冷え性、生理不順等の症状を改善することも可能である。
【発明の効果】
【００１３】
本発明に係る脂肪蓄積予防用の食品組成物によれば、脂肪蓄積予防によるメタボリックシンドロームの改善だけでなく、肝臓機能低下抑制、血糖値制御、血圧制御用、美白効果向上、それに更年期障害改善にも優れた効能を発揮することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】食品組成物（ＳＯＰ）の成分分析の結果を示す図表である。
【図２】食品組成物（ＳＯＰ）の成分分析のうちアミノ酸の含有比率を動物由来のプラセンタエキスと比較して示す図表である。
【図３】動物実験Iの結果のうちカロリーの累積量を示すグラフである。
【図４】動物実験Iの結果のうち体重変化を示すグラフである。
【図５】動物実験Iの結果のうち空腹時血糖を示すグラフである。
【図６】動物実験Iの結果のうち中性脂肪を示すグラフである。
【図７】動物実験Iの結果のうち白色脂肪組織中のUCP-1のｍRNA発現を示すグラフである。
【図８】動物実験Iの結果のうち白色脂肪組織中のFASとACC1のｍRNA発現を示すグラフである。
【図９】動物実験Iの結果のうち白色脂肪組織中のACDHとACO1のｍRNA発現を示すグラフである。
【図１０】動物実験IIにおいて被験物質の投与０日目におけるラット初代内臓脂肪細胞の顕微鏡写真である。
【図１１】動物実験IIにおいて被験物質の投与２日目におけるラット初代内臓脂肪細胞の顕微鏡写真である。
【図１２】動物実験IIにおいて被験物質の投与４日目におけるノルエピネフリン添加前のラット初代内臓脂肪細胞の顕微鏡写真である。
【図１３】動物実験IIにおいて被験物質の投与４日目におけるノルエピネフリン添加後のラット初代内臓脂肪細胞の顕微鏡写真である。
【図１４】動物実験IIにおいてノルエピネフリン添加前の褐色脂肪細胞の顕微鏡写真である。
【図１５】動物実験IIにおいてノルエピネフリン添加後の褐色脂肪細胞の顕微鏡写真である。
【図１６】単回摂取試験のスケジュールを示す説明図である。
【図１７】単回摂取試験の評価・観察項目を示す表である。
【図１８】連続摂取試験のスケジュールを示す説明図である。
【図１９】連続摂取試験の結果のうち脂質代謝に関するデータを示すグラフ群である。
【図２０】連続摂取試験の結果のうち肝機能指標に関するデータを示すグラフ群である。
【図２１】連続摂取試験の結果のうち肝機能指標に関するデータを示すグラフ群である。
【図２２】連続摂取試験の結果のうち血糖値とHbA1cに関するデータを示すグラフ群である。
【図２３】連続摂取試験の結果のうち収縮期血圧に関するデータを示すグラフ群である。
【図２４】連続摂取試験の結果のうち拡張期血圧に関するデータを示すグラフ群である。
【図２５】更年期諸症状のモニター試験の結果のうち皮膚の水分に関するデータを示すグラフ群である。
【図２６】更年期諸症状のモニター試験の結果のうち皮膚のかさつきに関するデータを示す図表である。
【図２７】更年期諸症状のモニター試験の結果のうち皮膚の油分に関するデータを示すグラフである。
【図２８】更年期諸症状のモニター試験の結果のうち皮膚の明度に関するデータを示すグラフである。
【図２９】更年期諸症状のモニター試験の結果のうち皮膚のくすみに関するデータを示す図表である。
【図３０】更年期諸症状のモニター試験の結果のうち皮膚のきめに関するデータを示すグラフである。
【図３１】更年期諸症状のモニター試験の結果のうち皮膚のなめらかさ、化粧のり、化粧もちに関するデータを示す図表である。
【図３２】更年期諸症状のモニター試験の結果のうち皮膚の色素沈着（小）に関するデータを示すグラフ群である。
【図３３】更年期諸症状のモニター試験の結果のうち皮膚の色素沈着（大）に関するデータを示すグラフである。
【図３４】更年期諸症状のモニター試験の結果のうち皮膚の毛穴数に関するデータを示すグラフである。
【図３５】更年期諸症状のモニター試験の結果のうち皮膚のしわ数に関するデータを示すグラフである。
【図３６】更年期諸症状のモニター試験における更年期指数の自己採点の結果と評価法を示す図表である。
【図３７】更年期諸症状のモニター試験における更年期指数の変化を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
以下、本発明の具体的な実施の形態について説明する。  
［食品組成物の概要］
本発明の食品組成物は、鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドを主成分とするものであり、本件出願人らによりサーモンオバリーペプチド（Salmon Ovary Peptide）と称されている。オバリー（ovary）とは、卵巣の意味であり、鮭（salmon）の卵巣より抽出した機能性アミノ酸結合物（peptide）という意味から、ＳＯＰ（登録商標）と命名している。
【００１６】
ＳＯＰは、鮭（サケ目サケ科（Salmonidae））の筋子からイクラに加工する際に残るヒモ状のスジ（卵巣外皮）を酵素で加水分解した後、抽出して得られたペプチドのフリーズドライ品である。その性状は、淡黄色ないし黄茶色の粉末で特異なにおいがある。ＳＯＰの分類は、健康食品原料であり、食品原料名称は、サーモン由来プラセンタ様物質（鮭卵巣外皮加水分解抽出物）となる。なお、ＳＯＰを化粧品原料として用いる場合、その名称は、鮭卵巣外皮加水分解抽出物となる。
【００１７】
一般に、動物由来の食品組成物である場合、牛海綿状脳症（ＢＳＥ）、口蹄疫、その他のウィルスや抗生物質等の影響を否定し切れないが、鮭の場合、陸上動物ではないので、これらウィルス等の心配は余りない。魚の卵巣外皮を比較的調達しやすいのは鮭であるが、それでも、鮭は動物と違い何度も出産しないから、一匹のメス鮭から一生かけてとれる量は１ｇ程度にすぎない。原料となる鮭は、日本（北海道）産に限定される。海外からの輸入サーモンまたは養殖のサーモンは、検疫上において内蔵を全て取り除くため使用できないためである。
【００１８】
また、イスラム圏では陸上動物由来の胎盤（プラセンタ）が、宗教上の理由等から敬遠される場合があるが、魚由来であれば食品組成物としても使用することができる。また、哺乳類の胎盤を原料にしている場合に比べれば、魚由来のＳＯＰに違和感を感じる人も少ない。特に、鮭の卵巣外皮は加工食品の筋子として古くからの食習慣があるため、なおさら抵抗がないと言える。
【００１９】
［食品組成物の調製］
ＳＯＰの調製方法としては、例えば、特許文献１に記載された製法を用いると良い。すなわち、鮭の卵巣外皮を脱血してから冷水で洗浄し、洗浄後、好ましくは室温以下のオゾン水で処理する。オゾン水での処理により、付着細菌の除菌および脱脂肪等が行なわれ、さらに、構成蛋白である筋原線維蛋白の収縮蛋白質（ミオシン）の変性が防止される。
【００２０】
オゾン水処理は、洗浄および脱水した卵巣外皮を、冷水を入れたタンク中で撹拌しながら、オゾン発生装置からオゾン濃度0.2〜10ｐｐｍ／Ｌを供給し、５〜３０分間室温以下で処理される。卵巣外皮が分散状態で存在しているオゾン処理液は、溶存しているオゾンを消失させるために、撹拌しながら酵素反応温度３５〜５０℃付近まで加温される。
【００２１】
オゾンが消失した後、酵素で加水分解する。例えば、バチルス属の産生する蛋白分解酵素により、収縮蛋白質（ミオシン）を分解する。この分解液に、直接あるいは分解液中の酵素を温度８０℃以上に加温し、１５分間以上撹拌し酵素を失活させた後、糸状菌の産生する蛋白分解酵素を用いて、さらに低分子化と他種類の魚卵蛋白に由来する苦味やアミノ酸臭等の分解処理を行なう。この両酵素による処理は、卵巣外皮に対し、0.02〜0.2重量％の酵素を用いて、撹拌の下、処理温度５５℃、処理時間５時間、いずれもほぼ同じ条件で行なわれる。
【００２２】
酵素処理を終えた処理液は、酵素を失活させた後、８００メッシュの濾布を用いた遠心分離により固形物を、さらに限外濾過法によりコロイド状不純物を除去する。得られたペプチドを含む濾液は適度の濃度に濃縮した後、濾液を凍結乾燥法等により、成分の分解を極力回避する観点から、水分を速やかに除去して粉砕することで、フリーズドライ品となる。なお、フリーズドライ品の性状は、前述したように、淡黄色ないし黄茶色の粉末で特異なにおいがあるが、商品としての包装・梱包に際しては、外観や味に関して識別不能となるように、無臭の白色粉末に調製すると良い。
【００２３】
［食品組成物の成分分析］
得られた食品組成物（以下「ＳＯＰ」）は、成分分析の結果、図１に示す成分を含むことが判明している。また、ＳＯＰに含まれるペプチドを構成するアミノ酸に関しては、成分分析の結果、図２に示すように、動物由来のプラセンタエキスとの比較において、必須アミノ酸の含有比率の比較では、豚プラセンタエキスにはないフェニルアラニンの含有が認められる以外は、必須アミノ酸の構成成分に大きな差はない。
【００２４】
また、それ以外のＳＯＰにおけるアミノ酸の構成上の特徴は、チロシン、プロリン、グリシン、ハイドロキシプロリンが多く、システインが少ない点である。ＳＯＰは、サケの卵巣成熟期における脂肪酸の活用、糖質の活用が特に卵巣で盛んであることから、豚プラセンタエキス同様、ペプチドとして、脂肪酸利用、糖利用に対する特殊な効果を有すると期待できる。
なお、ＳＯＰの原料に関する分析、並びにＳＯＰの成分分析から、残留農薬、その他、毒性のある金属、非鉄金属の含有はなく、有害物質は認められなかった。
【００２５】
［動物実験I］
ＳＯＰをラットに投与し、小動物における安全性試験を実施した結果、ＳＯＰには毒性がなく、安全性に問題は認められなかった。かかる結果を基に、ＳＯＰの機能の一つである脂肪蓄積予防の有効性を判断する目的で、今度はマウスを対象としたメタボリックシンドロームに関する実験を行った。
【００２６】
１．実験方法
（１）使用動物
６週齢のマウスを１５匹使用し、Normal、Control、ＳＯＰの３群に５匹（ｎ＝５）ずつグループ分けした。ここでNormal群は、強制水泳を負荷せず（-）、通常食（CE-2（登録商標））を給餌する群である。Control群は、強制水泳を負荷し（+）、高脂肪食（HFD32（登録商標））を給餌する群である。ＳＯＰ群は、強制水泳を負荷し（+）、高脂肪食（HFD32）を給餌し、さらにＳＯＰを投与する群である。
【００２７】
（２）飼育方法
室温（２３±２℃）、相対湿度５０〜６０％、１２時間の明暗サイクル（７：００〜１９：００）の環境下で、個別のステンレスケージを用いて飼育した。
マウスへの給餌は、通常食として固形飼料（CE-2）、高脂肪食として固形飼料（HFD32）、それに水を、約３ヶ月（１１週）にわたり自由摂取させた。
ＳＯＰは、設定濃度（100mg/kg）になるように生理食塩水で調整後、ＳＯＰ群のマウスに直ちに強制経口投与を行った。
強制水泳について、実施期間中は２８℃の水温で１日１０分間の強制水泳を週３回（原則として月・水・金）負荷した。
なお、実験終了日の解剖に際し、全ての群のマウスで１６時間の絶食を行った。
【００２８】
（３）評価項目
１）摂餌量（カロリー摂取量）、体重、精巣周囲白色脂肪重量、肩甲骨周囲褐色脂肪細胞重量
２）血液生化学検査：空腹時血糖、中性脂肪、総コレステロール、HDL、インスリン、レプチン
３）血中抗酸化活性：抗酸化活性（TEAC）、過酸化脂質（LPOTEAC）量
４）白色脂肪組織  ｍRNA：UCP-1、fattyacidsynthase（FAS）、acetyl-CoA carboxylase1（ACC1）
５）肝臓  ｍRNA：acy1-CoA dehydrogenase（ACDH）、acy1-CoA oxidase1（ACO1）
【００２９】
２．実験結果
（１）カロリー摂取量（摂餌量）
図３は、各群のマウスが実験期間中に摂取したカロリーの１匹あたりの累積量を示している。結果として、通常食を摂取したNormal群に比べ、高脂肪食を摂取したControl群、ＳＯＰ群のカロリー摂取量は高く推移した。
（２）体重変化
図４は、各群のマウスの実験期間中における体重変化の推移を示している。結果として、通常食を給餌したNormal群と比較して、高脂肪食を摂取したControl群およびＳＯＰ群の体重は顕著に増加した。
また、ＳＯＰ群では、Control群に比べて、有意な体重の抑制効果が認められた。
【００３０】
（３）血液生化学検査
１）空腹時血糖
図５は、各群のマウスの実験終了後における空腹時血糖の値を示している。結果として、通常食を給餌したNormal群と比較して、高脂肪食を摂取したControl群およびＳＯＰ群では有意な血糖の上昇を示した。
また、ＳＯＰ群では、Control群に比べて、血糖値を抑える傾向が認められた。
２）中性脂肪
図６は、各群のマウスの実験終了後における中性脂肪の値を示している。結果として、ＳＯＰ群およびControl群では、強制水泳の影響か、高脂肪食による中性脂肪の上昇は認められなかった。
また、ＳＯＰ群では、Normal群やControl群よりも中性脂肪が低下していた。
３）総コレステロール、HDL、インスリン、レプチン
高脂肪食を摂取したControl群およびＳＯＰ群は、Normal群と比較して、有意な上昇が認められたが、これらに関しては、ＳＯＰ付与の効果は認められなかった。
４）血中抗酸化活性  TEACおよびLPOTEAC
これらに関しては、ＳＯＰを投与することにより、Normal群およびControl群と比較して、わずかではあるが抗酸化活性が測定された。
また、Normal群とControl群に差が認められなかったことより、本実験における高脂肪食負荷による酸化ストレスの増大はなかった。
さらに、ＳＯＰの投与は、LPO値には影響を及ぼさなかった。
【００３１】
（４）白色脂肪組織（WAT）  ｍRNA解析  UCP-1
UCP-1は、ミトコンドリア内にあるタンパク質の一種であり、細胞膜の内膜において脂肪を燃焼させ熱を生み出す機能を持つ。肥満動物では、UCP-1 の機能が低下している事が知られている。
図７は、各群のマウスの実験終了後における白色脂肪組織中のUCP-1のｍRNA発現の値を示している。結果として、高脂肪食摂取により、白色脂肪組織中のUCP-1のｍRNA発現が有意に減少した（NormalとControlの比較）。
ＳＯＰ群では、Control群と比較して有意に増加し、Normal群と同じ発現レベルに回復した。
【００３２】
（５）白色脂肪組織（WAT）  ｍRNA解析  FAS、ACC1
FASは、malonyl-CoAとacetyl-CoAから脂肪酸を合成する複活性ドメイン酵素のタンパク質である。ACC1は、acetyl-CoA からmalonyl-CoA を合成する酵素の一種であり、脂肪酸合成と脂肪酸β酸化の制御に関わり、主に肝臓と脂肪組織で発現する。
図８は、各群のマウスの実験終了後における白色脂肪組織中のFAS、ACC1のｍRNA発現を示している。結果として、脂肪合成に関与するFASとACC1のｍRNAは、ともに同じ傾向を示し、高脂肪食負荷により、ｍRNAレベルが減少した。
ＳＯＰ群においては、Normal群と同程度か、それ以上のｍRNAレベルを示すことが明らかとなった。
【００３３】
（６）肝臓  ｍRNA解析  ACDH  ACO1
ACDHおよびACO1は、ともに脂質代謝関連酵素の一種であり、脂質代謝（β酸化）に関与している。
図９は、各群のマウスの実験終了後における肝臓中のACDH、ACO1のｍRNA発現を示している。結果として、ＳＯＰ群では、これら酵素のｍRNAレベルが増大した。
【００３４】
以上のように、メタボリックシンドロームに対するＳＯＰの効果を、マウスの高脂肪食負荷モデルで検討した結果、高脂肪食摂取による体重増加や血中の中性脂肪量を減少させることができ、ＳＯＰのメタボリックシンドロームに対する有用性が示唆された。
白色脂肪組織において、UCP-1のｍRNAレベルを、Normalレベルまで回復させたことは、細胞実験での結果を裏付ける結果であった。
メタボリックシンドロームにおいて、内臓脂肪細胞の量的な増加もそうであるが、脂肪細胞が肥大化するという質的な変化が問題視されている。ＳＯＰの投与により、脂肪合成関連酵素（FAS、ACC1）および脂肪分解関連酵素（AC01、ACDH）のｍRNAの発現が上昇したことは、明らかに脂肪の代謝回転が惹起されていると考える。
これにより、ＳＯＰによれば、白色脂肪細胞の中性脂肪を燃焼させるタンパク質（UCP-1）の発現が高められる。すなわち、アドレナリンが作用して、ミトコンドリアが白色脂肪細胞（内臓脂肪細胞）を燃やして褐色脂肪細胞に変換する。これにより、メタボリックシンドロームが改善される。
【００３５】
［動物実験II］
ラット初代内臓脂肪細胞（VAC）を用いて、ＳＯＰのUCP-1遺伝子発現量に対する影響について試験管内で検討を行なった。
１．試験材料
（１）被験物質
ＳＯＰを、内臓脂肪細胞分化メディウム（プライマリーセル，Lot.No.071225）に最終濃度400,100,50μg/mLになるよう添加して使用した。
（２）陰性対照物質
無添加の内臓脂肪細胞分化メディウム（プライマリーセル，Lot.No.071225）を使用した。
（３）使用細胞
内臓脂肪細胞培養キットV-1（初代，ラット，プライマリーセル：Lot.No.GI2A-F）および褐色脂肪細胞培養キットF-1（初代，ラット，プライマリーセル：Lot.No.HCEA-4）を用いた。
（４）ノルエピネフリン（以下ＮＥ）
（-）-Norepinephrine（+）-bitartratesalthydrate（SIGMA：LotNo.103K0979）を使用した。
（５）Celllysateの調製
TRI-Reagent（MolecularResearchCenter：LotNo.3681）を使用した。
【００３６】
２．試験方法
（１）培養操作
１）内臓脂肪細胞（VAC）
内臓脂肪前駆細胞3.0×106cellsを２４穴プレートに播種し（細胞数は1.2×105cells/mL/well）、４日間内臓脂肪分化メディウムにて予備培養を行った。予備培養後（播種後４日目）に陰性対照物質および被験物質を内臓脂肪分化メディウムで規定濃度に調製し、調製済み培地を細胞に添加した。
培地交換は、被験物質添加０，２，４日目（播種４，６，８日目）に行い、回収後は新しい調製済み培地を加えた。最終日は、ＮＥ未処理群についてはそのままRNAの抽出を行い、ＮＥ処理群については被験物質を規定濃度に、RNA抽出の６時間前にＮＥを1×10-6M濃度に内臓脂肪分化メディウムで調製して細胞に添加した。顕微鏡観察は、被験物質添加日およびＮＥ添加前後に行い、代表例についてホフマンモジュールレンズによる写真撮影を行った。
【００３７】
２）褐色脂肪細胞（BAT）
２４穴プレートに播種された褐色脂肪細胞を、増殖用メディウムで３日間培養し、コンフルエントになったのを確認した。分化誘導培地に交換して４８時間培養し、陰性対照物質および被験物質を維持メディウムで規定濃度に調製し、調製済み培地を細胞に添加した。培地交換は、被験物質添加０，２，４，５日目に行い、回収後は新しい調製済み培地を加えた。ＮＥ処理については、VACと同様の処理を維持メディウムで行った。顕微鏡観察は、ＮＥ添加前後に行い、代表例についてホフマンモジュールレンズによる写真撮影を行った。
【００３８】
（２）Celllysateの調製
培養終了後に１ウェル当たり400μLのTRI-Reagentを加えてピペッティングを行い、３ウェル分を１本のエッペンチューブに封入して直ちに−８０℃で凍結保存した。
【００３９】
（３）RNAの抽出
サンプルを解凍した後、室温で１０分間以上インキュベートした。200mLのクロロホルムを加えてよくvortexmixerで３０秒間攪拌した後、20,000×g，１０分間，４℃の遠心により相分離を行った。上清を別の1.5mLチューブに採取し、上清と同量の冷イソプロパノールを加えて攪拌した後、１０分間インキュベートし、20,000×g、１０分間、４℃の遠心によりRNAを析出させた。上清を除去し、1mLの７０%エタノールにて洗浄後、20,000×g，５分間，４℃で遠心分離して上清を除き、風乾させた。これにDEPC処理した精製水を加えて総RNA溶液とした。得られたRNA溶液の濃度は吸光光度計を用いて260nmの吸光度を測定することにより算出した。
【００４０】
（４）TotalRNAの逆転写反応
1stStrandcDNASynthesiskitforRT-PCR（AMV）（Roche）を使用した。抽出・精製したtotalRNA2.5mg分をRNaseFreeWaterで希釈し23.2mLにした。これに10×ReactionBuffer5mL，25mMMgCl210mL，DeoxynucleotideMix5mL，Random  Primer5mLを加え、よく撹拌して、スピンダウンした後６５℃で５分間インキュベートした。RNaseInhibitor1mLとAMVReverseTranscriptase0.8mLを加え、室温で１０分間、次に４２℃で６０分間、つづいて９５℃で５分間インキュベートし、cDNAを合成した。
【００４１】
（５）Real-timePCR
AppliedBiosystems7500RealTimePCRSystem（AppliedBiosystems,Foster  City,CA）を使用し、標準的なTaqManPCRkitプロトコールによりReal-timePCRを行った。
TaqManUniversalPCRMasterMix,rodentGAPDHおよびratucp-1のプライマー・プローブは全てAppliedBiosystemsより購入した。5mLRTproduct，2xTaqManUniversalPCRMasterMix，0.25mMTaqManprobe，0.9mMforwardprimerおよび0.9mMreverseprimerを含有した50mLPCR反応溶液を使用した。９６穴プレート上で反応を行い、反応条件として、９５℃で１０分の後、９５℃で１５秒に続く６０℃で１分のプログラムを４０サイクル行った。
【００４２】
３．試験結果
（１）細胞形態観察顕微鏡写真（VAC）
１）被験物質投与０日目（播種４日目）
内臓脂肪細胞を播種してから４日目に、各被験物質調製済みの培養液1mLを添加し、顕微鏡観察および代表例の写真撮影を行なった。
図１０の顕微鏡写真に示すように、各ウェルの全体を観察したところ、脂肪細胞に脂肪滴が蓄積し始めたのが確認された。
各群間での差異は認められず、試験系が各群同条件で行われていることが確認された。
【００４３】
２）被験物質投与２日目（播種６日目）
図１１の顕微鏡写真に示すように、陰性対照群では、小さな脂肪滴を蓄積した脂肪細胞も見られるが、成熟した脂肪細胞が多く見られた。また、肥大化した脂肪細胞が若干増え始めた。
ＳＯＰ50μg/mL添加群では、陰性対照群と比較し、小さな脂肪滴を蓄積した脂肪細胞が多く、肥大化した脂肪細胞はほとんど認められなかった。
ＳＯＰ100μg/mL添加群では、陰性対照群、50μg/mL添加群と比較して、小さな脂肪滴を蓄積した脂肪細胞の数は同程度であったが、成熟した脂肪細胞および肥大化した脂肪細胞は少なかった。
ＳＯＰ400μg/mL添加群では、陰性対照群、50μg/mL添加群および100μg/mL添加群と比較し、小さな脂肪滴を蓄積した脂肪細胞は多く見られたが、成熟した脂肪細胞の数は更に少なかった。
いずれの群においても、細胞障害の様子は確認されなかった。
【００４４】
３）被験物質投与４日目（播種８日目）ＮＥ添加前
図１２の顕微鏡写真に示すように、陰性対照群では、殆どの脂肪細胞が成熟細胞になり、肥大化している細胞も多くみられた。
ＳＯＰ50μg/mL添加群では、成熟した脂肪細胞が増加した。また、肥大化した脂肪細胞も若干見られたが、陰性対照群と比較して、肥大化した脂肪細胞の数は少なかった。
ＳＯＰ100μg/mL添加群では、50μg/mL添加群よりも小さな脂肪滴を蓄積した脂肪細胞が多く見られ、成熟した脂肪細胞は少なかった。また、肥大化した脂肪細胞の数も少なかった。
ＳＯＰ400μg/mL添加群では、陰性対照群、50μg/mL添加群および100μg/mL添加群と比較し、小さな脂肪滴を蓄積した脂肪細胞が多く見られた。成熟した脂肪細胞や肥大化した脂肪細胞もわずかに見られたが、脂肪細胞の数は少なかった。
いずれの群においても、細胞障害の様子は確認されなかった。
【００４５】
４）被験物質投与4日目（播種8日目）ＮＥ添加後
図１３の顕微鏡写真に示すように、陰性対照群では、脂肪滴が縮小している細胞も認められたが、変化があまりないものや肥大化している細胞も多くみられた。
ＳＯＰ50μg/mL添加群では、脂肪滴の縮小が認められたものも多かったが、肥大化した脂肪滴も陰性対照と同程度認められた。
ＳＯＰ100μg/mL添加群では、50μg/mL添加群よりも脂肪滴が縮小した脂肪細胞が多く見られ、変化しない細胞が少なかった。肥大化した脂肪滴は、50μg/mL添加群よりも若干少なかった。
ＳＯＰ400μg/mL添加群では、100μg/mL添加群よりもさらに脂肪滴が縮小した脂肪細胞が多く見られ、脂肪滴の小さな脂肪細胞が多く観察された。肥大化した脂肪滴は、100μg/mL添加群と同程度認められた。
【００４６】
（２）細胞形態観察顕微鏡写真（BAT）
１）ＮＥ添加前
図１４の顕微鏡写真に示すように、陰性対照群では、殆どの脂肪細胞が成熟細胞になり、肥大化している細胞も多くみられた。
ＳＯＰ400μg/mL添加群では、陰性対照群に比べて小さな脂肪滴を数多く溜めている脂肪細胞が多く見られた。
いずれの群においても、細胞障害の様子は確認されなかった。
２）ＮＥ添加後
図１５の顕微鏡写真に示すように、陰性対照群、ＳＯＰ400μg/mL添加群とも、殆どの脂肪細胞がVACよりも早く反応が起き、形態的にも１時間後には大きな変化を確認できた。
ＳＯＰ400μg/mL添加群では、陰性対照群に比べて形態的変化からは大きな差は確認できなかった。
【００４７】
（３）遺伝子発現解析結果
VACでは、ＮＥ未添加時におけるUCP-1遺伝子発現は検出限界以下であり、被験物質投与群においても、全ての群で検出限界以下であった。
VACのＮＥ処理群では、全ての群でUCP-1遺伝子発現が認められた。
VACのＮＥ処理群において、ＳＯＰ400μg/mL添加群では、コントロールに比べて高いUCP-1遺伝子発現値を示した。
BATでは、ＮＥ処理の有無に関わらずUCP-1遺伝子発現が認められた。
BATのＮＥ未処理群では、コントロールとＳＯＰ400μg/mL添加群のUCP-1遺伝子発現量は、ほぼ同等であった。
BATのＮＥ処理群において、ＳＯＰ400μg/mL添加群では、コントロールに比べてわずかに高いUCP-1遺伝子発現値を示した。
【００４８】
（４）考察
本試験では、脂肪蓄積抑制効果の検討を行なったが、被験物質投与２日目から４日目にかけての脂肪細胞の形態変化を観察すると、ＳＯＰは、肥大化脂肪細胞の数が陰性対照群よりも少ないことから、脂肪蓄積抑制効果よりも、成熟脂肪細胞から肥大化脂肪細胞への移行を抑制する効果が期待できると推察された。
ＳＯＰの高用量群を400μg/mLに設定したが、播種８日目においても細胞毒性が見られなかったことから、ＳＯＰを大量に摂取したとしても、内臓脂肪細胞には害を及ぼさない物質であると推察された。
UCP-1遺伝子発現解析結果より、内臓脂肪細胞、褐色脂肪細胞ともに、ＳＯＰ添加群では、ＮＥ添加時におけるUCP-1遺伝子発現量を増やす傾向が見られたことから、ＳＯＰの添加によって、内臓脂肪細胞の褐色脂肪化、または褐色脂肪細胞のＮＥ反応性向上による熱産生反応促進効果を持つ可能性が示唆された。
以上のことから、ＳＯＰは、過剰摂取をしても体内での脂肪細胞への悪影響は認められず、脂肪細胞の熱産生反応向上による抗肥満効果があると考えられる。
【００４９】
［単回摂取試験］
前述した動物実験の結果を基に、ＳＯＰの機能性食材としての開発の可能性およびヒトにおける安全性を判断することを目的として、健常者を対象とした単回投与試験を実施するに至った。
【００５０】
１．試験方法
健常人男性を被験者として、ＳＯＰ125mg、625mgの２用量群の無作為化オープン並行群間の比較試験により、身体所見および臨床検査値の変化を確認した。
（１）被験者
同意取得時の満年齢が２０歳以上６０歳未満の男性１２名を、年齢、体重、ＢＭＩが均等になるように無作為割付で２群に６人ずつグループ分けした。なお、被験者は、既往歴および現病歴で明確な基礎疾患がないことを条件とした。また、過去に心臓病、脳血管疾患の手術歴、治療歴のある方、肝炎、肝疾患の既往歴、治療歴のある方、精神疾患の既往歴、治療歴のある方は除く等、一定の除外基準を設けた。
（２）試験食
ＳＯＰとして、125mgまたは625mgを含有する白色粉末（外観、味、におい等で識別不可能にしてある）。
【００５１】
（３）試験内容
図１６は試験のスケジュールを示し、図１７は試験の評価・観察項目を示している。
図１６に示すように、被験者に試験内容の説明を行い同意を取得した後（検査(1））、被験者は試験前日より入院する。入院１日目の１２時間前（検査(2））に採血等を行い、２１時以降は絶食、０時以降は飲料の摂取も控えるものとした。被験者は入院２日目に試験食を１回だけ摂取し、その直後の０時（検査(3））、２時間後（検査(4））、６時間後（検査(5））、１２時間後（検査(6））に、それぞれ採血を行った。
【００５２】
（４）評価項目
１）臨床検査値の異常：試験開始前に対する投与中、投与終了後の臨床検査値の変化量、変化率を求め評価した。ここでの臨床検査値は、図１７の検査項目に関するものである。
２）血圧、心拍数：試験開始前に対する投与中、投与終了後の血圧、心拍数の変化量、変化率を求め評価した。
【００５３】
２．試験結果
１）安全性
試験食の摂取開始前の身体所見について、摂取後２４時間までの調査においては有害事象、特記すべき症状の変化は、低用量群（125mg）、高用量群（625mg）のいずれについても認めなかった。
２）試験食の効果
高用量群では、摂取後に低用量群に比して、γ-GTPの低下が認められた。γ-GTPは肝細胞の解毒過程における細胞の過剰負荷状態において、肝細胞膜透過性が亢進することで血中に遊離するとされる。
臨床医学的には、肝臓解毒機能の指標と考えられている。アルコール性肝臓障害、脂肪肝等での血中γ-GTPの上昇が報告されている。
本試験の結果により、ＳＯＰは肝機能低下を抑制する機能を備えるものと判断できる。
【００５４】
［連続摂取試験］
メタボリックシンドロームの判定基準のいずれかに該当する等の被験者を対象として、ＳＯＰ入りドリンクを引用することによる長期の安全性の確認を目的とし、連続摂取試験を実施した。
【００５５】
１．試験方法
ＳＯＰによるメタボリックシンドロームの諸指標に対する効果を探索すると共に、肝機能の改善効果についても副次評価項目として検討した。
（１）被験者
同意取得時の満年齢が２０歳以上６０歳未満の男女２８名を、２群に１４人ずつグループ分けし、一方をＳＯＰ群、他方をブラセボ群（Ｂ群）とした。なお、対象者は、既往歴および現病歴で明確な基礎疾患がないことを条件とした。また、過去に心臓病、脳血管疾患の手術歴、治療歴のある方、肝炎、肝疾患の既往歴、治療歴のある方、精神疾患の既往歴、治療歴のある方は除く等、一定の除外基準を設けた。
（２）試験ドリンク
ＳＯＰとして500mgを含有するドリンク（50ml）、またはブラセボドリンク（ＳＯＰを含有しない）。
【００５６】
（３）試験内容
図１８は、試験のスケジュールを示している。
図１８に示すように、先ず被験希望者に試験内容の説明を行い同意を取得した後、エントリーした者に対して予備試験を行った。予備試験の結果、適格性確認した男女２８名を、年齢、体重、ＢＭＩが均等になるように、無作為割付で２群に１４人ずつグループ分けした。
１２週間の試験期間中にわたり毎日、ＳＯＰ群では、ＳＯＰ500mgを含有するドリンク（50ml）を、ブラセボ群では、ブラセボドリンク（50ml）を、それぞれ早朝または朝食時に１本摂取した。かかる試験期間中において、試験開始時（０週）、６週目、１２週目に、それぞれ採血、採尿等を行った。
【００５７】
（４）評価項目
１）臨床検査値の異常：試験開始時（０週）、６週目、１２週目における臨床検査値の変化量、変化率を求め評価した。
２）血圧、心拍数：試験開始時（０週）、６週目、１２週目における血圧、心拍数の変化量、変化率を求め評価した。
３）特に、下記の項目を副次的評価項目として検討した。
・脂質指標の変化（中性脂肪、LDL・HDLコレステロール）
・肝機能指標の変化（γ-GTP、AST、ALT）
・血糖指標の変化（血糖値、HbA1c）
・血圧の変化（収縮期血圧、拡張期血圧）
【００５８】
２．試験結果
（１）安全性
ＳＯＰ群の被験者に関しては、１２週間にわたる連続摂取において、有害事象の特記すべき症状の変化は認められず、安全性が確認された。
（２）副次的評価項目について
１）脂質代謝
臨床検査値に関し、中性脂肪、LDL・HDLコレステロールの実測値については、群間で明確な傾向は見られなかったので、図１９に示すように階層解析を行った。
図１９（ａ）に示すように、摂取前中性脂肪150ml/dL以上においては、有意差は認められなかったが、ＳＯＰ群で実測値および変化量とも減少傾向が見られた。従って、中性脂肪高値の人の場合には、中性脂肪値の改善効果が推測される。
図１９（ｂ）に示すように、摂取前中性脂肪140ml/dL未満においては、変化量では、ＳＯＰ群の方がブラセボ群より、LDLコレステロールの上昇が抑制された。従って、LDLコレステロールがやや高値の人の場合には、その上昇抑制効果があると推測される。
２）肝機能指標（γ-GTP、AST、ALT）
図２０は、被験者のうち群別、男女別に、γ-GTPの分布と変化量の推移（ａ）、ASTの分布と変化量の推移（ｂ）、ALTの分布と変化量の推移（ｃ）を示している。各グラフ中の「ＰＭ」はブラセボ群の男性、「ＰＦ」はブラセボ群の女性、「ＳＯＰＭ」はＳＯＰ群の男性、「ＳＯＰＦ」はＳＯＰ群の女性の略である。
図２１は、はずれ値（２人分）を除く、γ-GTPの分布と変化量の推移（ａ）、ASTの分布と変化量の推移（ｂ）、ALTの分布と変化量の推移（ｃ）を示している。
これら図２０，図２１に示す結果のように、明確な有意差は見られなかったが、全て減少傾向にあった。さらに、AST、ALTにおいては、ＳＯＰ群がより低下傾向であった。従って、ＳＯＰは、肝機能低下を抑制して肝機能の改善に効果がある可能性も考えられる。
【００５９】
３）血糖値、HbA1c
図２２は、被験者の群別における血糖値の観察時点ごとの推移と変化量の推移（ａ）、同じく群別におけるHbA1cの観察時点ごとの推移と変化量の推移（ｂ）を示している。
この図２２に示す結果のように、ＳＯＰ群は、ブラセボ群より血糖値の上昇が抑えられる傾向にあった。また、ＳＯＰ群では、HbA1cが低値に抑えられる傾向にあった。
HbA1cは、赤血球の中に含まれるヘモグロビンにブドウ糖が結合したもので、検査日から過去１〜２ヵ月間の平均血糖値を反映する血糖コントロールの指標といわれており、ＳＯＰの摂取により、血糖値を安定的に維持する効果があったと考えられる。
【００６０】
４）血圧（収縮期血圧、拡張期血圧）
図２３は、収縮期血圧の被験者全体（ａ）、男性（ｂ）、女性（ｃ）別の観察時点ごとの推移と変化量の推移を示している。
図２４は、拡張期血圧の被験者全体（ａ）、男性（ｂ）、女性（ｃ）別の観察時点ごとの推移と変化量の推移を示している。
これら図２３、図２４に示す結果により、収縮期血圧に関しては、いずれの群でも低下傾向にあり、拡張期血圧に関しては、ブラセボ群のみが低下傾向であった。
ＳＯＰには、試験管内での試験ではＡＣＥ阻害作用が認められており、この作用により収縮期血圧が低下したことが考えられる。なお、ブラセボ群で、収縮期血圧および拡張期血圧がともに減少したことの原因は不明である。
【００６１】
［更年期諸症状の改善作用のモニター試験］
ＳＯＰを用いて、更年期症状があるが治療を受けるほどではない、という女性１７名に４週間、８名（うちプラセボ４名）に、６週間（２週間延長）ＳＯＰ500mg配合ドリンクを毎朝試飲させた。試飲前、１週間後、４週間後、（１週間中断の後）５週間後、６週間後において、ロボスキンアナライザー（登録商標）を用い肌状態の変化を測定した。また、試飲前、４週間後、（１週間中断の後）５週間後、６週間後に採血を実施し、生化学的手法を用いて体内の変化を調査した。また、更年期指数や肌状態変化を、アンケート回答というかたちで調査した。
【００６２】
その結果、肌に関しては、「かさつき」、「くすみ」、「なめらかさ」、「化粧のり」、「化粧もち」、「シミの改善」、「毛穴ひきしめ」という項目における有効性が示唆された。多くが１週間以内に肌状態の改善を自覚しており、また。一時中断した時点でほぼ全員において状態が一時悪化、ＳＯＰ再開群は再び改善、一方プラセボ群は悪化したままという興味深い結果も得られた。これは、ＳＯＰの肌改善効果を裏付ける結果である。
【００６３】
血液検査の結果では、ビタミン群等の変化に一定の規則性は発見できなかったが、女性ホルモンのバランスを調整している可能性が示唆された。また、中性脂肪値も改善するモニターが多かったことから、脂質代謝の改善に寄与する可能性も示唆された。
自覚変化としては、「疲労回復」、「睡眠の質改善」、「寝つき改善」、「イライラ解消」に対し、多くのモニターが１週間以内の改善を訴えた。更年期指数変化を追っても、１週間ごとに全員の指数が改善しており、更年期女性への症状緩和の効果もみられた。
【００６４】
今回の試験において、「ＳＯＰ500mg」の女性の更年期症状の緩和や肌状態の改善に、効果があることが示唆された。肌や体への改善効果を、ほぼ全員が開始後１週間以内に自覚していたことから、この成分の即効性も確認できた。
内側から有効成分を摂取することが定着している今、美肌や疲労、更年期対策ドリンクとして期待できる。
【００６５】
１．試験方法
１７名のモニターについて、ＳＯＰ試飲前、試飲１週間後、試飲４週間後のうち、２〜３回、測定を行った＜試験I＞。
さらに、４名のモニターでは４週間の試飲後、１週間の中断期間を設け（５週間後として測定）、再度1週間の試飲を再開した（６週間後として測定）。別の４名のモニターでは、４週間の試飲後、１週間の中断期間を設け（５週間後として測定）、再度１週間のプラセボの試飲を行った（６週間後として測定）＜試験II＞。
＜試料＞
ＳＯＰ500mg配合ドリンク
＜モニター＞
下記の条件に当てはまる者１７名
・３５〜５５歳の閉経前後の女性。
・加齢に伴い、肌荒れ、不眠（眠りが浅い）、疲れやすい、肩凝りがひどい、等の更年期症状がある。
・更年期指数が２５〜５５点（症状は気になるが未だ治療を必要としない程度）。
・ピルやHRT等のホルモン治療歴がない。
・現在何らかの病気をお持ちで他の薬を飲んでいない。ただし、過去に心臓病、脳血管疾患の手術歴、治療歴のある方、肝炎、肝疾患の既往歴、治療歴のある方、精神疾患の既往歴、治療歴のある方は除く。
・他の健康食品およびサプリメントを服用していない。健康食品、ビタミン剤等を長期にわたり服用している方は除く。
・なお、他の臨床試験に参加している方も除く。
【００６６】
（１）肌の測定について
＜試験I＞に関しては、試飲前・試飲１週間後・試飲４週間後の３回、ロボスキンアナライザーを用いて顔面の測定を行った。
＜試験II＞に関しては、上記と同様に行った。
測定は、石鹸で洗顔後１５分間放置してから行った。
ロボスキンアナライザーRSA-100（インフォワード社）（以下「ロボスキン」）は、散乱光を発する撮影ボックス内に顔面を固定し、内部に設置した高解像度カメラで顔全体を撮影し、デジタル画像として取り組み画像処理用パソコンで解析を行う。計測された数値は、効果判定の客観的な評価に用いることができる。
（計測可能な項目）
・顔面水分・油分評価
・顔面色素沈着部位評価（数・面積）
・顔面毛孔部位評価（数・面積）
・顔面しわ評価（下眼ちりめんしわ本数計測）
・顔面きめ評価
・顔面明るさ評価
【００６７】
（２）血液検査について
＜試験I＞に関しては、試飲前・試飲４週間後の２回、採血をして成分分析を行った。
＜試験II＞に関しては、上記と同様に行った。
血液検査については、総タンパク、ビタミン各群、亜鉛、鉄、アミノ酸、基礎代謝、ストレス指数、中性脂肪等の量を測定・そのバランス等を数値に基づいて分析した。
（３）モニター自己申告の変化について
・更年期指数：試飲当日より最終日まで毎日記入
・肌アンケート：必要項目において、ポイント（１〜５）制で回答
・自覚変化：肌および体調への変化について、具体的に回答
【００６８】
２．試験結果と考察
肌の状態について、ロボスキン結果および自己申告により、以下の如く評価した。
（１）水分（実測値・ランク）
水分量が多いほど、みずみずしく潤いのある肌であると判断される自覚症状の「かさつき」と同等と考えられる。
図２５は、ロボスキンによる評価結果を示している。
図２５中の棒グラフに示すように、試飲前と試飲１週間後、４週間後とも、数値ならびにランクにほとんど変化はみられなかった。試飲前はまだ気候が暖かかったこと、試飲４週間後は急に寒くなり空気が非常に乾燥している時期であることを考慮すると、試飲前と４週間後との間で変化のなかったことは、肌が冬でも乾燥していないことを意味しており、試飲による効果が考えられた。
【００６９】
図２６は、「かさつき」に関する４〜６週間の自己評価を示している。
自覚症状としての「かさつき」は、試験Iの４週間の試飲で１７名中１６名において改善している。１名は普遍であり、悪化している例は１名もなかった。また１２名では、試飲１週間後から「かさつき」の改善を自覚している。
さらに、試験IIに継続参加し１週間の試飲中断を行った８名中６名で、中断時（５週間後）の「かさつき」は悪化していた。２名は不変であった。ＳＯＰ再開した４名中３名は再開後（６週間後）の「かさつき」は改善していた。１名は不変であった。一方、プラセボ試飲の４名中３名では「かさつき」の改善は認められず、悪化したままであった。１名は不変であった。
以上の結果より、ＳＯＰ試飲１週間で「かさつき」の改善が認められ、肌の保湿に対して有効であると考えられた。
【００７０】
（２）油分（ランク）
皮膚の油分量は多すぎても少なすぎてもならない。多すぎると油っぽくべたべたした感じになり、少なすぎるとかさつく。年齢によってふさわしい量があり、より皮膚にとってふさわしい量であるほどランクの数が多くなる（１〜５段階）。
図２７は、ロボスキンによる評価結果を示している。
試験Iにおいて、試飲前に比べ、試飲１週間後、４週間後ともに若干の数値の低下が見られたが、有意差はなかった。試飲４週間後は、急に寒くなり空気が非常に乾燥している時期であったために、油分量の低下が若干みられたと思われる。
【００７１】
（３）明度（ランク）
明度は、皮膚の全体的な明るさを示す。ランクや数値が高いほど明るく、低いほど暗い。ここで肌の明るさは、自覚症状の「くすみ」と同等と考えられる。
図２８は、ロボスキンによる評価結果を示している。
試験Iにおいて、試飲前に比べ、試飲４週間後では若干の数値の上昇がみられ、肌の明るさが若干改善していると考えられたが、有意差は認められなかった。
図２９は、「くすみ」に関する４〜６週間の自己評価を示している。
自覚症状としての肌の「くすみ」は、試験Iにおいて１週間後で改善８名、４週間後で改善６名、不変３名、悪化０名であった。さらに、試験IIに継続参加のため、１週間の試飲中断を行った８名中５名で、中断時（５週間後）の「くすみ」は悪化していた。３名は不変であった。ＳＯＰ再開した４名中３名は再開後（６週間後）の「くすみ」が改善していた。１名は不変であった。一方、プラセボ試飲の４名中３名では「くすみ」の改善は認められず、悪化もしくは不変のままであった。
以上の結果より、ＳＯＰにより、肌のくすみに対する改善効果があり、肌の明るさや透明感の改善に有効であると考えられる。
【００７２】
（４）きめ（ランク）
きめは、ランクが高いほど、きめ細かな肌であることを示す。きめは、自覚症状の「なめらかさ」、「化粧のり」、「化粧もち」に相当すると考えられる
図３０は、ロボスキンによる評価結果を示している。
試飲前に比べ、試飲１週間後では若干の数値の上昇が見られ、その効果は４週間後も同等であった。有意差は認められなかったものの、試飲１週間後という早い段階で、肌のきめが改善される傾向があると考えられた。
【００７３】
図３１は、「なめらかさ」、「化粧のり」、「化粧もち」それぞれに関する４〜６週間の自己評価を示している。
試験Iにおいて、「なめらかさ」は、試飲１週間後で９名、４週間後で７名に改善が認められた。１名は不変であった。
「化粧のり」は、試飲１週間後で９名、４週間後で６名に改善が認められた。２名は不変であった。
「化粧もち」は、試飲１週間後で１１名、４週間後で２名に改善が認められた。
4名は不変であった。
さらに、試験IIに継続参加のため、１週間の試飲中断を行った８名中６名で、中断時（５週間後）の「なめらかさ」、「化粧のり」、「化粧もち」のいずれも悪化していた。１名は「化粧のり」、「化粧もち」が悪化し、「なめらかさ」は不変、もう１名は不変であった。
ＳＯＰ再開した４名中３名は再開後（６週間後）の「なめらかさ」、「化粧のり」、「化粧もち」のいずれも改善しているのが１名、「化粧のり」、「化粧もち」のみ改善が１名、「なめらかさ」のみの改善が１名、不変が１名であった。プラセボ群は、ＳＯＰ再開群に比べて、明らかに改善の効果が劣っていると考えられた。
【００７４】
なお、自覚症状で「肌のキメ」という項目があるが、キメの自覚はなかなか難しく、「なめらかさ」、「化粧のり」、「化粧もち」の３項目が具体的な内容として、キメの状態を表していると判断した。
以上の結果より、ＳＯＰ試飲１週間により、きめの改善効果が認められ、肌のなめらかさ、化粧のり、化粧もちに有効であると考えられる。
【００７５】
（５）色素沈着
１）色素沈着（小）（実測値・ランク）
図３２は、ロボスキンによる評価結果の実測値（ａ）とランク（ｂ）を示している。
顔全体に見られる小さな色素沈着の数ならびにその面積は、試飲前に比べ試飲１週間後、４週間後とも有意差をもって数値の減少がみられた。
よって、ＳＯＰは、小さな色素沈着に有効であると考えられる。
【００７６】
２）色素沈着（大）（実測値）
図３３は、ロボスキンによる評価結果の実測値を示している。
いわゆるシミに関して、試験Iでは、試飲前に比べ試飲１週間後、４週間後ともに、若干の数値の減少が見られたが、有意差は無かった。
前記１），２）より、シミ対策の特別な外用等を行わずに試飲のみで、大小のしみの数が減少していることは、シミ改善に対する有効性があると考えられる。
【００７７】
（６）毛穴数（実測値）
図３４は、ロボスキンによる評価結果の実測値を示している。
目立つ毛穴の数は、試飲前に比べ試飲１週間後、４週間後では若干の数値の低下が見られた。目立つ毛穴数が減っていることより、毛穴を引き締め目立たなくする効果が期待できると考えられる。
【００７８】
（７）しわ数（実測値）
図３５は、ロボスキンによる評価結果の実測値を示している。
目の下のちりめんじわの数は、試飲前に比べ試飲１週間後、４週間後とも若干のしわの数の減少が見られたが、有意差はなかった。しわに対する効果は、現時点では困難であると考えられる。
【００７９】
（８）自己申告による更年期指数の変化と具体的変化について
１）更年期指数
図３６は、更年期指数の自己採点の結果と評価法を示している。
更年期指数を試験実施期間中毎日チェックさせたが、試験Iにおいて１週間後では、１７名中１６名、２週間後は１７名中１７名、３週間後は１７名中１５名、４週間後には１７名中１７名において、試飲前と比較して指数が減少しており、最大で−４８という者もいた。
さらに、試験IIに継続参加のため、１週間の試飲中断を行った８名中８名において、中断時（５週間後）の更年期指数は悪化していた。ＳＯＰ再開した４名中４名において、再開後（６週間後）更年期指数が改善していた。一方、プラセボ試飲の４名中２名において、改善が見られた。２名は不変で、悪化した状態のままであった。
図３７は、試飲期間における更年期指数の変化を示すグラフである。
この結果より、ＳＯＰ試飲１週間で更年期指数の改善が認められ、更年期症状の緩和に有効である可能性が示唆された。
【００８０】
２）具体的自覚症状の変化
１週間以内からモニターは、更年期障害として、肌荒れ、不眠、冷え性、生理不順等の症状において、ＳＯＰの効果による改善を実感することができた。目に見える効果があることから、飲み続ける安心感も生まれ、４週間を全員が心身共に元気にさせることが分かった。疲れを感じにくくなることで、体が軽くなり精神的にも安定するようになったのかもしれない。
逆に、中断することで精神的安定剤がなくなったこと、ＳＯＰの効果を得られないことから、試飲前の状態に戻ってしまう者もいた。この落差が、ＳＯＰを試飲したことでの肌や体調への効果を実証していると考えられる。その証拠に、試飲を再開することで肌や体調は数日で回復が見られた。プラセボ群においては、体調が試飲前と同様な状態に逆戻りしてしまった。飲み続けることで効果を得られるということの裏づけにもなると考えられる。
【００８１】
以上、本発明の実施の形態を図面によって説明してきたが、具体的な構成はこれらの実施の形態に限られるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲における変更や追加があっても本発明に含まれる。例えば、本発明は食品組成物のほか、サプリメントとしても考えられるものである。
【産業上の利用可能性】
【００８２】
本発明である脂肪蓄積予防用の食品組成物は、前述したような優れた用途、特に脂肪蓄積予防の特性を有し、かつ毒性を有するものではないので、健康食品産業や医薬業界で、それらの原料として、広く利用される可能性の高いものである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【図３７】
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