(57)【要約】【課題】新規な筋肉活性化剤を提供することを主な目的とする。【解決手段】本発明は、コエンドロ抽出物を有効成分として含有する筋肉活性化剤に関するものである。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
コエンドロ抽出物を有効成分として含有する、筋肉活性化剤。
【請求項２】
コエンドロ抽出物がアルコール抽出物または含水アルコール抽出物である、請求項１に記載の筋肉活性化剤。
【請求項３】
アルコールがエタノールである、請求項２に記載の筋肉活性化剤。
【請求項４】
筋肉活性化剤が筋肉増強剤である、請求項１〜３のいずれかに記載の筋肉活性化剤。
【請求項５】
筋肉活性化剤が筋肉減衰予防剤である、請求項１〜３のいずれかに記載の筋肉活性化剤。
【請求項６】
筋肉活性化剤が皮膚改善剤である、請求項１〜３のいずれかに記載の筋肉活性化剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、コエンドロ抽出物を含有する筋肉活性化剤に関するものである。また、本発明は、コエンドロ抽出物を含有する、筋肉増強剤、筋肉減衰予防剤、皮膚改善剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
筋肉は、筋芽細胞が筋管細胞へ分化し、さらに筋管細胞が融合した筋線維から成り立っている。この筋芽細胞を賦活し細胞増殖や筋管形成を促進することにより、筋肉増強又は筋肉減衰の予防に効果が期待できる。このように、筋芽細胞の賦活は、ミオパチーなどの筋肉疾患、老化に伴うサルコペニア（加齢性減弱症）やロコモティブシンドローム（運動器症候群）、長期間のギプス固定や運動不足による廃用性萎縮の予防及び／又は治療、運動時または運動後の筋タンパク合成低下抑制等に有用であると考えられる。さらに、皮膚の下には筋肉があり皮膚全体を支えているが、老化等により筋肉の機能が低下すると皮膚を支える力が弱まり、たるみおよびしわの形成が誘導されると考えられていることから、筋芽細胞の腑活により皮膚改善作用も期待される。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
本発明は、新規な筋肉活性化剤を提供することを主な目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明者は、上記課題を解決すべく検討した結果、コエンドロ抽出物が優れた筋肉活性化作用を有することを見出し、本発明を完成した。
【０００５】
本発明として、下記のものを挙げることができる。
（１）コエンドロ抽出物を有効成分として含有する、筋肉活性化剤。
（２）コエンドロ抽出物がアルコール抽出物または含水アルコール抽出物である、前記（１）に記載の筋肉活性化剤。
（３）アルコールがエタノールである、前記（２）に記載の筋肉活性化剤。
（４）筋肉活性化剤が筋肉増強剤である、前記（１）〜（３）のいずれかに記載の筋肉活性化剤。
（５）筋肉活性化剤が筋肉減衰予防剤である、前記（１）〜（３）のいずれかに記載の筋肉活性化剤。
（６）筋肉活性化剤が皮膚改善剤である、前記（１）〜（３）のいずれかに記載の筋肉活性化剤。
【発明の効果】
【０００６】
本発明に係る筋肉活性化剤は、筋芽細胞の増殖および筋管形成を促進することにより、筋肉増強剤、筋肉減衰予防剤、皮膚改善剤としての効果が期待される。本発明にかかる筋肉活性化剤は、食用植物の成分由来であることから安全性が高いものである。
【図面の簡単な説明】
【０００７】
【図１】コエンドロ抽出物の筋芽細胞腑活作用を示す図である。縦軸はコントロール群を１００としたときの細胞腑活活性（％）を表す。
【図２】コエンドロ抽出物の筋芽細胞腑活作用を示す図である。縦軸はコントロール群を１００としたときの細胞腑活活性（％）を表す。
【図３】コエンドロ抽出物の筋管形成促進作用を示す図である。縦軸はＦｕｓｉｏｎ  ｉｎｄｅｘ（％）を表す。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
コエンドロ抽出物
本発明にかかるコエンドロ抽出物（以下、「本発明抽出物」ともいう）は、セリ科コエンドロ属に属する植物の抽出物である。コエンドロ属に含まれる植物としては、コエンドロ（Ｃｏｒｉａｎｄｒｕｍ  ｓａｔｉｖｕｍ  Ｌ．）を挙げることができる。本発明にかかるコエンドロ抽出物には、上記植物の各部位、例えば、葉、茎、根、果実、果皮、種子、種皮、地上部、地下部又は全草の抽出物を用いることができる。好ましくは、葉の抽出物である。
【０００９】
本発明抽出物の製造方法は、特に限定されず、例えば、通常用いられる方法により製造することができる。具体的には、コエンドロの各部位をそのまま又は適当な大きさに切断し、必要に応じて乾燥し、搾汁又は溶媒で抽出することにより製造することができる。
【００１０】
抽出溶媒としては、特に限定されないが、例えば、水、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノール等の低級アルコール、１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等の多価アルコール、エチルエーテル、プロピルエーテル等のエーテル類、酢酸エチル等のエステル類、アセトン、エチルメチルケトン等のケトン類を挙げることができる。また、これらの溶媒を一種又は二種以上混合して用いることもできる。抽出溶媒の中で、特にメタノール、エタノール、含水エタノールが好ましい。エタノール含量が、体積％濃度で４０％以上、５０％以上、６０％以上、７０％以上、８０％以上、９０％以上の含水エタノールが特に好ましい。
【００１１】
抽出に使用する溶媒の量は、抽出条件等により異なるが、重量比で１：２〜１：３０（コエンドロ：溶媒）の範囲内が適当であり、１：３〜１：２０の範囲内が好ましく、１：５〜１：１０の範囲内がより好ましい。抽出時間は、１時間〜１５日の範囲内が適当である。抽出温度は、５〜１００℃の範囲内が適当であり、６０〜１００℃の範囲内が好ましい。抽出方法については特に制限されず、バッチ抽出、カラムを用いた連続抽出等、任意の方法を適用することができる。
【００１２】
得られた抽出物は、そのままの状態で用いることもできるし、必要に応じ、その活性に影響のない範囲内で更に精製処理を加えてもよい。かかる精製処理は、通常の方法によって行えばよく、例えば、抽出物を常法によりろ過することにより行うことができる。また、得られたろ液を減圧濃縮、凍結乾燥またはスプレードライヤーに供することもできる。
【００１３】
筋肉活性化剤、皮膚改善剤
本発明にかかる筋肉活性化剤（以下、「本発明筋肉活性化剤」という。）は、筋芽細胞賦活作用、筋芽細胞増殖促進作用、筋管形成促進作用を有し、筋肉の増量、増強や筋萎縮抑制作用、運動による筋肉損傷からの回復促進作用、運動不足や老化に伴うサルコペニアおよびロコモティブシンドロームの予防および治療等に有用である。また、本発明筋肉活性化剤は、皮膚領域近傍に存在する筋芽細胞を活性化し、その周辺の皮膚のたるみや張り等を改善する皮膚改善効果や、疲労の軽減作用、筋肉疲労緩和による肩こりおよび眼精疲労軽減作用も期待される。
【００１４】
本発明筋肉活性化剤は、上記のようにして得られた本発明抽出物をそのまま又は担体として使用することのできる素材と混合し、次いで、常法により粉末状、塊状、液状などの各種形態に加工することにより製造することができる。
【００１５】
本発明筋肉活性化剤における本発明抽出物の含有量は、特に限定されないが、例えば、０．０１重量％以上であり、好ましくは、０．０５重量％以上である。
【００１６】
本発明筋肉活性化剤には、医薬上又は食品上許容される添加物を任意に配合することができる。かかる添加剤としては、例えば、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、分散剤、懸濁剤、乳化剤、緩衝剤、酸化防止剤、賦形剤、界面活性剤、紫外線防止剤、金属イオン封鎖剤、増粘剤、防腐剤、抗菌剤、保湿剤、色素を挙げることができ、これらを１種又は２種以上使用することができる。本発明筋肉活性化剤には、さらに、筋肉増強作用が知られている成分を添加することができる。
【００１７】
本発明筋肉活性化剤は、常法により、錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、液剤、シロップ剤、ドロップ錠、トニック、ローション、軟膏、クリーム等の剤型に適宜調製することができる。
【００１８】
本発明筋肉活性化剤の摂取量は、症状、剤型、投与対象者の年齢、体重等により異なるが、通常、成人１日当り、本発明抽出物の重量として、０．０１〜１００ｇの範囲内とするのが適当であり、０．０３ｇ〜６０ｇの範囲内とするのが好ましいが、必ずしもこの範囲に限られるものではない。かかる１日当りの摂取量は、１回で摂取してもよく、また、２〜４回に分割して摂取してもよい。
【実施例】
【００１９】
以下に、実施例、試験例を掲げて本発明をさらに詳述する。但し、本発明が下記実施例に限定されないことは言うまでもない。
製造例１  コエンドロのメタノール抽出物の製造
コエンドロ乾燥葉２ｇを粉砕後、メタノール１０ｇに７日間浸漬させ、濾過後にロータリーエバポレーターにて濃縮・乾固を行いコエンドロのメタノール抽出物を得た。
製造例２  コエンドロのメタノール抽出物の製造
コエンドロ乾燥葉２ｇを粉砕後、メタノール４０ｇで８０℃、９０分間抽出を行い、濾過後にロータリーエバポレーターにて濃縮・乾固を行いコエンドロのメタノール抽出物を得た。
製造例３  コエンドロの水抽出物の製造
製造例２の方法に準じて、メタノールの代わりに水を使用して、コエンドロの水抽出物を得た。
製造例４  コエンドロの含水エタノール抽出物の製造
製造例２の方法に準じて、メタノールの代わりに、エタノール含量がそれぞれ４０％、６０％、または８０％の含水エタノールを使用して、コエンドロの含水エタノール抽出物（４０％、６０％、または８０％）を得た。
試験例１  本発明コエンドロ抽出物（メタノール）の筋芽細胞賦活活性測定
細胞はマウス筋芽細胞株  （Ｃ２Ｃ１２細胞、ＤＳファーマバイオメディカル社製  ）を用いた。Ｃ２Ｃ１２細胞は、１０％ ＦＢＳ（Ｆｅｔａｌ Ｂｏｖｉｎｅ Ｓｅｒｕｍ、Ｇｉｂｃｏ社製）を含有するＤＭＥＭ （Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｅａｇｌｅ  Ｍｅｄｉｕｍ、Ｇｉｂｃｏ社製）（以下、「１０％  ＦＢＳ／ＤＭＥＭ培地」という。）に分散し、接着系細胞用培養フラスコ（底面積：２５ｃｍ２、日本バイオサイエンス社製）に５．０ × １０−４個播種し、ＣＯ２インキュベーター（三洋電機バイオメディカ社製；ＣＯ２濃度５％， 湿度９０％）を用いて３７℃で３日間培養した。８０％コンフルエントになったことを顕微鏡で確認し、実験に使用した。８０％コンフルエントになったＣ２Ｃ１２細胞をＴｒｙｐｓｉｎ−ＥＤＴＡ（Ｇｉｂｃｏ社製）を用いてフラスコから剥離させ回収した。この細胞を１０％ ＦＢＳ／ＤＭＥＭ培地に懸濁し、３．０×１０−４ ｃｅｌｌｓ／ｍＬの細胞密度で１００μＬずつ９６ ｗｅｌｌ ｐｌａｔｅ（Ｃｏｒｎｉｎｇ社製）に播種した。３７℃、５％ＣＯ２条件下で２４時間培養後、培地をアスピレーターで除去し、２％  ＦＢＳ／ＤＭＥＭ培地で調製したサンプル含有培地２００μＬに置換した。サンプルは、製造例１で調製したメタノール抽出物を終濃度の１０００倍濃度でＤＭＳＯを用いて調整し、その後２％ ＦＢＳ／ＤＭＥＭ培地で１０００倍希釈し、サンプル濃度が５、１０、２０ｐｐｍの培地をそれぞれ調製し、使用した。また、コントロールにはＤＭＳＯを、陽性対照には、筋芽細胞賦活作用が知られているＩＧＦ−１（Ｉｎｓｕｌｉｎ−ｌｉｋｅ  Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ−１、ＬｉｆｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社製）を同様のサンプル調製法により０．０５ｐｐｍで調整し、実験に用いた。サンプル添加の４８時間後に１００μＬの無血清ＤＭＥＭ培地に交換し、そこにＷＳＴ−１試薬（ロシュ・ダイアグノスティックス社製）を１０μＬ添加した。３０分間培養を行った後、４５０ｎｍの吸光値をマイクロプレートリーダー（ＣＯＲＯＮＡ  ＥＬＥＣＴＲＩＣ 社製、ＭＴＰ−３００）で測定することにより細胞賦活活性を求めた。結果を図１に示す。
【００２０】
薬剤を添加しないコントロール群の細胞賦活作用を１００％とした場合と比較してコエンドロ抽出物添加群では５、１０、２０ｐｐｍにおいてそれぞれ１３０、１５５、１５０％程度の細胞賦活作用が認められた。
試験例２  本発明コエンドロ抽出物（含水エタノール、メタノール）の筋芽細胞賦活活性測定
試験例１の方法に準じて、製造例２および４で調整した抽出エキスを１０ｐｐｍの濃度で添加した。コントロール群には薬剤を添加しなかった。その結果を図２に示す。
図２から明らかなように、コントロール群と比べて４０％、６０％または８０％含水エタノール抽出物群、メタノール抽出物群については、賦活作用が認められた。
試験例３  本発明コエンドロ抽出物（メタノール）の筋管形成促進活性の検討
Ｃ２Ｃ１２細胞を１０％ ＦＢＳ／ＤＭＥＭ培地に懸濁し、１．０×１０−５ｃｅｌｌｓ／ｍＬの密度で６ｗｅｌｌ ｐｌａｔｅ（Ｃｏｒｎｉｎｇ社製）に１ｍＬ／ｗｅｌｌ播種した。播種して２４時間後に２％ＨＳ （Ｈｏｒｓｅ  Ｓｅｒｕｍ、Ｇｉｂｃｏ社製）を含むＤＭＥＭ培地（以下、「２％ ＨＳ／ＤＭＥＭ」という。）に交換した。さらに１回目の培地交換から４８時間後に再度２％ ＨＳ／ＤＭＥＭに交換した。培地交換の２４時間後にさらに２％ ＨＳ／ＤＭＥＭ培地で調製したサンプル含有培地２ｍＬに置換した。サンプルは、製造例１で調製したメタノール抽出物を終濃度の１０００倍濃度でＤＭＳＯを用いて調整し、その後２％ＦＢＳ／ＤＭＥＭで１０００倍希釈し、サンプル濃度が１０ｐｐｍの培地を作製し、使用した。また、コントロールにはＤＭＳＯを、陽性対照には筋管形成促進作用が知られているＩＧＦ−１（Ｉｎｓｕｌｉｎ−ｌｉｋｅ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ−１、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社製）を同様のサンプル調製法により０．１ｐｐｍで調整し実験に用いた。サンプル添加の４８時間後にメタノールでの細胞固定およびギムザ染色を行い細胞の染色を行った。染色後、Ｆｕｓｉｏｎ  ｉｎｄｅｘ（（筋管細胞内核数／総核数）×１００）を計測することで筋管形成度を測定した。その結果を図３に示す。
【００２１】
薬剤を添加しないコントロール群のＦｕｓｉｏｎ  Ｉｎｄｅｘを１００とした場合、本発明にかかるコエンドロのメタノール抽出物投与群は約１３０であり、Ｆｕｓｉｏｎ  Ｉｎｄｅｘの有意な上昇が認められた。従って、本発明抽出物は筋管形成の促進作用を有することが明らかとなった。
【産業上の利用可能性】
【００２２】
本発明筋肉活性化剤は、優れた筋肉活性化作用を有するため、例えば、運動不足や老化等に伴うサルコペニア、様々な環境（ギプス固定等）による廃用性委縮、又はロコモティブシンドロームの予防および改善、運動による筋肉増強の強化、皮膚の老化（皮膚の弾力低下、しわやたるみ等）の抑制等に用いることができる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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