(57)【要約】【課題】乳酸菌のなかから一次胆汁酸であるコール酸を減少させずに二次胆汁酸であるデオキシコール酸の増加を抑制する性質、及び、既に存在するデオキシコール酸を減少させる性質を有する菌を見出し、当該乳酸菌を有効成分とするデオキシコール酸低減剤を提供することを本発明の課題とした。【解決手段】本発明は、ラクトバチルス・ガセリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｇａｓｓｅｒｉ）に属する乳酸菌菌体及び／又はその培養物を有効成分とするデオキシコール酸低減剤を提供する。ラクトバチルス・ガセリに属する乳酸菌のうちでも、特にラクトバチルス・ガセリＳＢＴ２０５５（ＦＥＲＭ  ＢＰ−１０９５３）が好ましい。さらに本発明は、前記デオキシコール低減剤を含有する栄養組成物、飲食品又は飼料も提供する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ラクトバチルス・ガセリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｇａｓｓｅｒｉ）に属する乳酸菌菌体及び／又はその培養物を有効成分とするデオキシコール酸低減剤。
【請求項２】
コール酸低減作用を有さない請求項１に記載のデオキシコール酸低減剤。
【請求項３】
ラクトバチルス・ガセリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｇａｓｓｅｒｉ）に属する乳酸菌が、ラクトバチルス・ガセリＳＢＴ２０５５（ＦＥＲＭ  ＢＰ−１０９５３）である請求項１または２に記載のデオキシコール酸低減剤。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれかに記載の剤を含有する栄養組成物、飲食品又は飼料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は乳酸菌を有効成分とするデオキシコール酸低減剤に関する。詳しくは、ラクトバチルス属の乳酸菌菌体及び／又はその培養物を有効成分とするデオキシコール酸低減剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
胆汁酸は胆汁の主成分であり、主な役割は、消化管内でミセルの形成を促進し、食物脂肪をより吸収しやすくするというものである。
胆汁酸は、一次胆汁酸と二次胆汁酸からなる。一次胆汁酸は肝臓においてコレステロールから作られ、主に胆汁酸結合タンパクと細胞小胞系とを介して肝細胞から胆道系に分泌される。一次胆汁酸にはコール酸（以下、単にＣＡということがある）、ケノデオキシコール酸などがある。一次胆汁酸は正常ではグリシンまたはタウリンと抱合した状態で胆汁中に存在する。腸内に入ったこれら胆汁酸の一部は、腸内細菌によってグリシンやタウリンが離される（脱抱合）。脱抱合されたコール酸はデオキシコール酸（以下、単にＤＣＡということがある）へ、ケノデオキシコール酸はリトコール酸へと更に変換される。一次胆汁酸から変換されたこれらを二次胆汁酸と呼ぶ（非特許文献１）。
【０００３】
ところで、二次胆汁酸であるデオキシコール酸には大腸がん促進作用が報告されている（非特許文献２）。近年日本において大腸がんが増加している理由として、食生活の欧米化による脂質摂取量の増加と、それに伴う腸内胆汁酸量の増加との関連を指摘する文献もある（非特許文献３）。
【０００４】
さらにまた、デオキシコール酸について次のような報告もある（非特許文献４）。すなわち、マウスを用いた実験により、肥満になるとコール酸をもとにデオキシコール酸を合成する腸内細菌が著しく増加していること、デオキシコール酸産生菌を抗生物質投与により死滅させると細胞老化を起こした肝星細胞の数が減少し、肝がんの発症率も著しく低下すること、その際に人工的に合成したデオキシコール酸を同時に投与すると抗生物質による肝がん発症率の低下が認められなくなることを明らかにしている。そして、同様のメカニズムがヒトの肥満に伴う肝がん発症に関与していること、デオキシコール酸産生菌の増殖を抑制することが肝がんの予防につながる可能性について示唆している。
【０００５】
化合物を利用した二次胆汁酸の低減については、特許文献１、２が知られている。
特許文献１には、フマル酸などの電子受容体が、一次胆汁酸の酸化的代謝を促進し、特定の腸内細菌によって行われる一次胆汁酸のへの還元的代謝を抑制できることが記載されている。
特許文献２には、カフェ酸やカテキンなどのポリフェノールを摂取したラットの糞便中のデオキシコール酸が低下していることから、これらに二次胆汁酸低下作用があることが記載されている。
【０００６】
また、乳酸菌による二次胆汁酸の低減については、特許文献３が知られている。特許文献３には、グルコースを駆動力として乳酸菌菌体内に一次胆汁酸であるコール酸を取り込んで菌体外にはコール酸を排出しないという性質を有する乳酸菌を利用する方法が記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２０１１−１８４３１１号公報
【特許文献２】特開２００９−２２７６０９号公報
【特許文献３】特開２００１−０９７８７０号公報
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】シンプル生化学、南江堂、p32-33、1998年
【非特許文献２】Ｈ．Ｂｅｒｎｓｔｅｉｎら、Ｍｕｔａｔ．Ｒｅｓ．、第５８９巻、第４７〜６５頁、２００５年
【非特許文献３】公益社団法人日本生物工学会ホームページ  「研究部会  乳酸菌・腸内細菌工学研究部会講演会 (2010/05/14)  プログラム要旨集」URL  http://www.sbj.or.jp/division/division_ferment_lab_sympo_20100514.html
【非特許文献４】独立行政法人科学技術振興機構（ＪＳＴ）ホームページ  「公益財団法人がん研究会  独立行政法人 科学技術振興機構（ＪＳＴ）平成２５年６月２７日  共同発表」タイトル：肥満に伴う腸内細菌の変化が肝がんの発症を促進する URL  http://www.jst.go.jp/pr/announce/20130627-2/
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
フマル酸を用いた特許文献１に記載の方法では、一次胆汁酸から二次胆汁酸への変換は抑えられるため、二次胆汁酸の増加を抑えつつも有用な一次胆汁酸を減少させない点においては優れている。しかし、すでに存在している二次胆汁酸の低減効果については不明である。
また、乳酸菌菌体を用いた特許文献３の方法では、一次胆汁酸のコール酸を菌体内に取り込むことで、二次胆汁酸であるデオキシコール酸の産生を減らすことが期待されている。ただし、この方法ではコール酸の重要な機能である、消化管内でミセルの形成を促進し、食物脂肪をより吸収しやすくするという、生体内で必要な機能が制限されてしまう恐れがある。また、すでに存在しているデオキシコール酸を低減できるかどうかは不明である。
なお、特許文献２は、二次胆汁酸を抑制するものではあるが、ポリフェノールを有効成分とするものである。
そこで、本発明は、乳酸菌のなかから一次胆汁酸であるコール酸を減少させずに二次胆汁酸であるデオキシコール酸の増加を抑制する性質、及び、既に存在するデオキシコール酸を減少させる性質を有する菌を見出し、当該乳酸菌を有効成分とするデオキシコール酸低減剤を提供することを本発明の課題とした。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明は、前記課題を解決するために鋭意検討した結果、ラクトバチルス・ガセリに属する乳酸菌及び／又はその培養物に一次胆汁酸であるコール酸を減少させることなく、二次胆汁酸であるデオキシコール酸の増加を抑制する性質、および／又はすでに存在するデオキシコール酸を減少させる性質を有することを見出し本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は以下の構成を有する。
＜１＞
ラクトバチルス・ガセリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｇａｓｓｅｒｉ）に属する乳酸菌菌体及び／又はその培養物を有効成分とするデオキシコール酸低減剤。
＜２＞
コール酸低減作用を有さない前記＜１＞に記載のデオキシコール酸低減剤。
＜３＞
ラクトバチルス・ガセリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｇａｓｓｅｒｉ）に属する乳酸菌が、ラクトバチルス・ガセリＳＢＴ２０５５（ＦＥＲＭ  ＢＰ−１０９５３）である前記＜１＞または＜２＞に記載のデオキシコール酸低減剤。
＜４＞
前記＜１＞〜＜３＞のいずれかに記載の剤を含有する栄養組成物、飲食品又は飼料。
【発明の効果】
【００１１】
本発明によれば、ラクトバチルス・ガセリに属する乳酸菌菌体及び／又は乳酸菌培養物を有効成分とするデオキシコール酸低減剤を提供することができる。本発明のラクトバチルス・ガセリに属する乳酸菌菌体及び／又は培養物は消化管内で重要な役割を果たすコール酸を低減することなく、デオキシコール酸を特異的に低減する作用を有することから、従来のコール酸を低減することによって副次的にデオキシコール酸を低減させていた乳酸菌に比べて、有用性が高い。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】ラクトバチルス・ガセリの菌体による反応液中のＣＡもしくはＤＣＡの残存率および、糖質添加による影響を示すグラフである。
【図２】ラクトバチルス・ガセリの菌体による反応液中のＣＡもしくはＤＣＡの残存率の経時変化（０〜２２時間）を示すグラフある。
【図３】ラクトバチルス・ガセリの菌体培養物による反応液中のＣＡもしくはＤＣＡの残存率の経時変化（０〜２２時間）を示すグラフある。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明における乳酸菌としては、ラクトバチルス・ガセリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｇａｓｓｅｒｉ）に属する乳酸菌を用いることを特徴とする。ラクトバチルス・ガセリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｇａｓｓｅｒｉ）に属する乳酸菌としては、ＳＢＴ２０５５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０９５３）、ＳＢＴ１２６５Ｔ（ＦＥＲＭ ＢＰ−１４８２５）、ＳＢＴ１０２３９（ＦＥＲＭ Ｐ−１６６３９）、ＳＢＴ１７０３（ＦＥＲＭ Ｐ−１７７８５）、ＳＢＴ１０２４１（ＦＥＲＭ Ｐ−１７７８６）、ＳＢＴ１０８０１（ＦＥＲＭ Ｐ−１８１３７）、ＳＢＴ２０５６（ＦＥＲＭ Ｐ−１１０３８）、ＳＢＴ０２７４（ＦＥＲＭ Ｐ−１１０３９として寄託）が好ましく、その中でも特に、ラクトバチルス・ガセリＳＢＴ２０５５（ＦＥＲＭ  ＢＰ−１０９５３）が好ましいが、本発明のＤＣＡ低減効果を有するラクトバチルス・ガセリであれば特に限定されるものではない。
ラクトバチルス・ガセリは、常法に従って培養することができる。培地には、乳培地又は乳成分を含む培地、これを含まない半合成培地など種々の培地を用いることができる。このような培地としては、還元脱脂乳培地などを例示することができる。
得られた培養物から遠心分離などの集菌手段によって分離された菌体をそのまま本発明の有効成分として用いることができる。濃縮、乾燥、凍結乾燥などした菌体を用いることもできるし、加熱乾燥などにより死菌体にしてもよい。
菌体として純粋に分離されたものだけでなく、培養物、懸濁物、その他の菌体含有物や、菌体を酵素や物理的手段を用いて処理した細胞質や細胞壁画分も用いることができる。
培養物などの形態としては、合成培地であるＭＲＳ培地（ＤＩＦＣＯ社製）、還元脱脂乳培地など一般的に乳酸菌の培養に用いられる培地を用いた培養物だけでなく、チーズ、発酵乳、乳製品乳酸菌飲料などの乳製品などを例示することができるが特に限定されるものではない。
さらに、得られた培養物から遠心分離、濾過操作などの方法を用いて、乳タンパク質沈殿や菌体成分を除去することによって調製した培養上清なども用いることができる。固形分が少ない上清であるため、飲食品などへの適用範囲が広くなる。例えば、還元脱脂乳培養物を５，０００ｒｐｍ、１０分間遠心分離することにより培養上清を調製することができる。
【００１４】
本発明におけるＤＣＡ低減作用とは、ＤＣＡの量を減少させる作用である。本発明のＤＣＡ低減剤は、ＤＣＡ低減作用の他に、さらにＣＡについては、その低減作用を有さないかあるいは少なくともＤＣＡの低減作用よりも小さいことを特徴としている。すなわち、本発明のＤＣＡ低減剤は、有用なＣＡを極力低減させることなくＤＣＡを低減させることを特徴としている。
また、本発明のＤＣＡ低減作用は、後述する実施例で示されるように糖類の有無にかかわらず当該作用が発揮されることから、「特開２００１−０９７８７０号公報」に報告されたような炭素源を駆動力とした菌体内への取り込み作用とは異なるメカニズムによる低減作用であると推定できる。
【００１５】
本発明のＤＣＡ低減剤の製剤化に際しては製剤上許可されている賦型剤、安定剤、矯味剤などを適宜混合して濃縮、凍結乾燥するほか、加熱乾燥して死菌体にしてもよい。これらの乾燥物、濃縮物、ペースト状物も含有される。また、ラクトバチルス・ガセリのＤＣＡ低減作用を妨げない範囲で、賦型剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、矯味矯臭剤、懸濁剤、コーティング剤、その他の任意の薬剤を混合して製剤化することもできる。剤形としては、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、粉剤、シロップ剤などが可能であり、これらを経口的に投与することが望ましい。
【００１６】
本発明のＤＣＡ低減剤はどのような飲食品に配合しても良く、飲食品の製造工程中に原料に添加しても良い。飲食品の例としては、チーズ、発酵乳、乳製品乳酸菌飲料、乳酸菌飲料、バター、マーガリンなどの乳製品、乳飲料、果汁飲料、清涼飲料などの飲料、ゼリー、キャンディー、プリン、マヨネーズなどの卵加工品、バターケーキなどの菓子・パン類、さらには、各種粉乳の他、乳幼児食品、栄養組成物などを挙げることができるが特に限定されるものではない。
【００１７】
本発明のＤＣＡ低減剤は、これを有効成分とするがん予防薬として利用することができる。さらに、本発明のＤＣＡ低減剤を飼料に配合することができる。前記飲食品と同様にどのような飼料に配合しても良く、飼料の製造工程中に原料に添加しても良い。
【００１８】
ラクトバチルス・ガセリの菌体及び／又は培養物を配合して、ＤＣＡ低減剤あるいは、ＤＣＡ低減用飲食品、栄養組成物、飼料などの素材又はそれら素材の加工品に配合させて使用する場合、ラクトバチルス・ガセリの菌体または培養物の配合割合は特に限定されず、製造の容易性や好ましい一日投与量にあわせて適宜調節すればよい。投与対象者の症状、年齢などを考慮してそれぞれ個別に決定されるが、通常成人の場合、ラクトバチルス・ガセリの菌体培養物を１０〜２００ｇ、あるいは菌体自体を０．１〜５，０００ｍｇ摂取できるように配合量などを調整すればよい。このようにして摂取することにより所望の効果を発揮することができる。
以下、本発明を実施例をもとにさらに詳細に説明するが、本発明は係る実施例に限定して解釈されるものではない。
【００１９】
[試験例１]ＤＣＡ低減菌のスクリーニング
ラクトバチルス属に属する各種の乳酸菌について、ＤＣＡを含む培地で一定期間培養し、ＤＣＡの低減作用がある乳酸菌を選別した。
１．試験方法
（１）供試菌
ラクトバチルス属の下記７株を供試菌とした。
ラクトバチルス  ガセリ（Lactobacillus gasseri）SBT2055（FERM BP-10953）
ラクトバチルス  ヘルベティカス（Lactobacillus helveticus）JCM 1120
ラクトバチルス  アシドフィルス（Lactobacillus acidophilus）JCM 1132
ラクトバチルス  ガセリ（Lactobacillus gasseri）JCM 1131
ラクトバチルス  デルブルッキー  サブスピーシーズ  ブルガリカス（Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus）ATCC 11842
ラクトバチルス  ラムノーサス（Lactobacillus rhamnosus）NBRC 3425
ラクトバチルス  ジョンソニー（Lactobacillus johnsoni）JCM 2012
なお、ＦＥＲＭ  ＢＰ−１０９５３は、独立行政法人産業技術総合研究所特許微生物寄託センターに寄託されている。ＡＴＣＣ１１８４２はAmerican Type Culture Collectionから入手可能である。ＪＣＭ１１２０、１１３２、１１３１、２０１２は独立行政法人理化学研究所から入手可能である。ＮＢＲＣ３４２５は独立行政法人製品評価技術基盤機構から入手可能である。
【００２０】
（２）スクリーニング方法
上記（１）の各供試菌をＭＲＳ培地に植菌し、３７℃にて１６時間静置培養を行った。培養菌体を遠心分離（１，９１２×ｇ，４℃，１５ｍｉｎ）し、上清を廃棄した。菌体はリン酸緩衝液（１００ｍＭ  リン酸カリウム緩衝液ｐＨ７．０、１ｍＭ  ＭｇＳＯ４含有）に再懸濁し、菌体懸濁液としてスクリーニング試験に用いた。
スクリーニング用の反応条件として条件（Ａ）及び（Ｂ）を用意し、反応は３７℃にて一昼夜行った。
条件（Ａ）：菌体懸濁液に１ｍＭデオキシコール酸（ＤＣＡ）を混合
条件（Ｂ）：菌体懸濁液に１ｍＭデオキシコール酸（ＤＣＡ）と０．１３重量％のグルコースを混合
【００２１】
（３）薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）によるＤＣＡ低減効果の確認
反応液を遠心分離（２０，４００×ｇ，４℃，５ｍｉｎ）し、得られた上清を回収した。ＴＬＣ（シリカゲル６０、Ｍｅｒｃｋ）上に反応液を５μＬスポットして乾燥し、酢酸エチル：シクロヘキサン：酢酸＝６９：２１：９の組成を持つ溶媒にて展開した後、乾燥した。その後、１０％モリブドリン酸−エタノール溶液（東京化成）にＴＬＣ表面を浸漬させた。再度、ＴＬＣ表面を乾燥した後、加熱することによりＤＣＡに由来するスポットを検出した。ＴＬＣにおける１ｍＭＤＣＡ標準化合物を添加して展開されたスポットと各反応液のスポットを比較し、ＤＣＡに由来するスポットの減少が認められれば、反応後の上清中に含まれるＤＣＡが低減されたと判断することができる。
【００２２】
２．試験結果
ＴＬＣにおけるスポットの目視観察の結果、ラクトバチルス・ガセリＳＢＴ２０５５及びJCM 1131の反応液において、グルコースの添加の有無に関わらずＤＣＡに由来するスポットの減少が認められた。したがって、ラクトバチルス・ガセリの菌体にＤＣＡ低減作用が認められた。
【実施例１】
【００２３】
（乳酸菌菌体の調整）
共試菌であるラクトバチルス・ガセリＳＢＴ２０５５をＭＲＳ液体培地にて３７℃、１６時間静置培養した。菌体を遠心回収後（１０，０００×ｇ，４℃，１５ｍｉｎ）、リン酸緩衝液（１００ｍＭ  リン酸カリウム緩衝液ｐＨ７，含１ｍＭ  ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ）で３回洗浄した。得られた洗浄菌体をリン酸緩衝液に再懸濁し、Ｏ．Ｄ．６００＝４．５に調整した。
【００２４】
［試験例２］ラクトバチルス・ガセリ菌体によるＤＣＡ低減効果の検証（１）
実施例１で得られたラクトバチルス・ガセリ菌体についてＤＣＡおよびＣＡの低減効果並びに当該効果に及ぼす各糖質添加の影響について検証した。
１．試験方法
ＣＡおよびＤＣＡの低減における糖質の効果
組成として、終濃度で上記実施例１の菌体懸濁液（Ｏ．Ｄ．６００＝４）、基質（１ｍＭ）、糖質（０．６５％）を含む反応液を調製し、３７℃で１８時間静置した。基質にはＣＡおよびＤＣＡを使用した。糖質にはグルコース、ガラクトース又はラクトースを使用した。反応液は回収後、速やかに冷却して遠心分離（２０，４００×ｇ，４℃，１０ｍｉｎ）し、上清を回収した。反応液中のＣＡおよびＤＣＡは総胆汁酸テストワコー（和光純薬）を用いて、添付文書のプロトコールに従って定量し、添加した初期濃度を１００（％）として残存率（％）を算出した。
【００２５】
２．試験結果
各種条件における反応液中のＣＡもしくはＤＣＡの残存率を図１に示した。ＣＡの減少は殆ど認められなかった一方で、ＤＣＡは顕著な減少が認められた。また、ラクトバチルス・ガセリの菌体は糖質の有無に関係なく２０〜３０％程度のＤＣＡを低減可能であった。
【００２６】
［試験例３］ラクトバチルス・ガセリ菌体によるＤＣＡ低減効果の検証（２）
実施例１で得られたラクトバチルス・ガセリ菌体によるＤＣＡ及びＣＡの低減の経時変化について検証した。
１．試験方法
グルコースなどの糖質を無添加とし、試験例２と同様に試験した。反応液中のＣＡおよびＤＣＡを０，０．２５，０．５，１，２，４，６，１２，１４，１６，１８，２０，２２時間において定量した。
【００２７】
２．試験結果
各種条件における反応液中のＣＡもしくはＤＣＡの残存率を図２に表示した。
その結果、ＣＡ濃度がほぼ一定に保たれている一方で、ＤＣＡは経時的に低減されていることを確認した。また、ＤＣＡの低減においては反応１２時間辺りで低減効果が平衡に達していた。
以上のように、ラクトバチルス・ガセリ菌体は、糖質を必要とせずに、ＣＡを低減させることなくＤＣＡのみを低減可能であることが明らかとなった。
【実施例２】
【００２８】
（乳酸菌培養物の調整）
ラクトバチルス・ガセリＳＢＴ２０５５菌体をＭＲＳ液体培地（Ｄｉｆｃｏ社）にて培養した。対数増殖期にある各培養液を、０．３％の酵母エキスを添加した１０％還元脱脂乳（１１５℃、２０分滅菌）に１％接種し、各々マザーカルチャーを作製した。これに１０％の還元脱脂乳を添加して、１００℃にて１０分間加熱したヨーグルトミックスに２．５％添加して調製した。３７℃で発酵を行い、乳酸酸度０．８５に到達した時点で冷却し、発酵を終了させた。得られた発酵乳を凍結乾燥してラクトバチルス・ガセリＳＢＴ２０５５菌体培養物の粉末を得た。得られた菌体培養物をリン酸緩衝液に再懸濁し、１×１０９  ｃｅｌｌｓ／ｍｌに調整した。
【００２９】
[試験例４] ラクトバチルス・ガセリ菌体培養物によるＤＣＡ低減効果の検証
実施例２で得られたラクトバチルス・ガセリの菌体培養物を用いてＤＣＡおよびＣＡの低減効果を検証した。
１．試験方法
実施例２で得られたラクトバチルス・ガセリ培養物粉末を用い、試験例３と同様に試験して反応液中のＣＡおよびＤＣＡを定量した。
【００３０】
２．試験結果
各種条件における反応液中のＣＡもしくはＤＣＡの残存率を図３に表示した。
その結果、ＣＡ濃度がほぼ一定に保たれている一方で、ＤＣＡは経時的に低減されていることを確認した。
以上のように、ラクトバチルス・ガセリ菌体培養物は、ＣＡを低減させることなくＤＣＡのみを低減可能であることが明らかとなった。
【実施例３】
【００３１】
（乳酸菌菌体の調製）
ラクトバチルス・ガセリＳＢＴ２０５５をＭＲＳ液体培地に植菌し、３７℃にて１６時間静置培養を行った。培養物を、４℃、７０００ｒｐｍで１５分間遠心分離した後、滅菌水による洗浄と遠心分離を３回繰り返して行い、洗浄菌体を得た。この洗浄菌体を凍結乾燥処理して菌体粉末を得た。
【実施例４】
【００３２】
（錠剤の製造）
実施例３にて調製した菌体粉末１部に脱脂粉乳４部を混合し、この混合粉末を打錠機により１ｇずつ常法により打錠して、本発明のラクトバチルス・ガセリＳＢＴ２０５５の菌体２００ｍｇを含む錠剤をそれぞれ調製した。
【実施例５】
【００３３】
（散剤の製造）
ラクトバチルス・ガセリＳＢＴ２０５５をＭＲＳ液体培地（Ｄｉｆｃｏ社）５Ｌに摂取後、３７℃、１８時間静置培養を行った。培養終了後、７０００ｒｐｍで１５分間遠心分離を行い、培養液の１／５０量の濃縮菌体を得た。次いで、この濃縮菌体を、脱脂粉乳１０重量％、グルタミン酸ソーダ１重量％を含む分散媒と同量混合し、ｐＨ７に調整後、凍結乾燥を行った。得られた凍結乾燥物を６０メッシュのふるいで整粒化し、凍結乾燥菌末を製造した。第１３改正日本薬局方解説書製剤総則「散剤」の規定に準拠し、この凍結乾燥菌末１ｇにラクトース（日局）４００ｇ、バレイショデンプン（日局）６００ｇを加えて均一に混合し、散剤を得た。
【実施例６】
【００３４】
（カプセル剤の製造）
表１に示した配合により原料を混合し、造粒により顆粒状とした後、空カプセルに１０ｍｇずつ充填して、カプセル剤を製造した。
【００３５】
【表１】
2017066086.tif 000003
【実施例７】
【００３６】
（スティック状健康食品の製造）
実施例１で得られたラクトバチルス・ガセリＳＢＴ２０５５の粉末３０ｇに、ビタミンＣとクエン酸の等量混合物４０ｇ、グラニュー糖１００ｇ、コーンスターチと乳糖の等量混合物６０ｇを加えて混合した。混合物をスティック状袋に詰め、スティック健康食品を製造した。
【実施例８】
【００３７】
（飲料の製造）
表２に示した配合により原料を混合し、容器に充填した後、加熱殺菌して、果汁飲料を製造した。
【表２】
2017066086.tif 000004
【産業上の利用可能性】
【００３８】
本発明によれば、ラクトバチルス・ガセリに属する乳酸菌菌体及び／又は乳酸菌培養物を有効成分とするデオキシコール酸低減剤を提供することができる。また、当該デオキシコール酸低減剤を含む栄養組成物、飲食品又は飼料を長期的に摂取することにより、報告されているような肝がんや大腸がんの予防になりうる。
【受託番号】
【００３９】
[寄託生物材料への言及]
ラクトバチルス・ガセリＳＢＴ２０５５
イ  当該生物材料を寄託した寄託機関の名称及び住所
独立行政法人  産業技術総合研究所  特許生物寄託センター
日本国茨城県つくば市東１丁目１番地１中央第６（郵便番号３０５−８５６６）
ロ  イの寄託機関に生物材料を寄託した日付
平成８年３月２７日
ハ  イの寄託機関が寄託について付した受託番号
ＦＥＲＭ  ＢＰ−１０９５３
【図１】
2017066086.tif 000005
【図２】
2017066086.tif 000006
【図３】
2017066086.tif 000007