(57)【要約】【課題】新規なアディポネクチンの産生・分泌促進組成物を提供する。【解決手段】リンゴンベリーエキスとヘマトコッカス藻色素を含み、アディポネクチン産生を促進する作用を有することを特徴とする組成物。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
リンゴンベリーエキスとヘマトコッカス藻色素を含み、アディポネクチン産生を促進する作用を有することを特徴とする組成物。
【請求項２】
１回あたりの有効量としてリンゴンベリーエキス８０〜１６０ｍｇ、ヘマトコッカス藻色素２４０〜４８０ｍｇを含有する請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
経口投与の形態である請求項１又は２に記載の組成物。
【請求項４】
ソフトカプセルに封入された形態である請求項１〜３のいずれかに記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アディポネクチン産生促進作用を有する組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
アディポネクチンは、脂肪細胞から特異的に産生および分泌される善玉アディポサイトカインであり、循環器系疾患、糖尿病、肥満などの生活習慣病と密接に関連することが知られている。血中でのアディポネクチンの産生を促進する成分の研究・開発が進められており、多数の提案が成されている。
【０００３】
アディポネクチンは分子量約３０ｋＤａの、脂肪細胞で最も豊富に発現している善玉アディポサイトカインである。補体のＣ１ｑと構造上の相同性があり、Ｎ末端よりシグナルペプチド、コラーゲン様ドメイン、球状ドメインよりなる。血中では１２−１８量体相当の高分子量アディポネクチン、６量体相当の中分子量アディポネクチン、３量体相当の低分子量アディポネクチンの３種類の多量体を形成している。
肥満や内臓脂肪蓄積に伴って、アディポネクチンの血中レベルが低下する。アディポネクチンは遺伝子の多型など遺伝的要因によっても低下する。アディポネクチン遺伝子欠損マウスは、インスリン抵抗性、耐糖能異常、脂質異常、高血圧などのメタボリックシンドロームの諸徴候を呈する。アディポネクチンの補充は、インスリン抵抗性やメタボリックシンドロームを改善する効果が期待されている。
【０００４】
アディポネクチン産生促進に関し、特許出願が公開されている。特許文献１には、大豆蛋白加水分解物を有効成分とし、特に大豆蛋白加水分解物がジペプチド又は／及びトリペプチドを主成分とするオリゴペプチド混合物であるような組成物が、アディポネクチン分泌促進作用があり、血中アディポネクチン濃度を強く亢進することが開示されている。
特許文献２には、紅麹抽出物およびプロアントシアニジンを有効成分とする、アディポネクチン産生促進剤が開示されている。
特許文献３には、レスベラトロールを有効成分とするアディポネクチン産生促進剤が開示されている。
【０００５】
本出願人も有効なアディポネクチン産生促進作用を有する物質について継続的に探索を行っている。特許文献４はカレープラントから抽出されるヘリピロンＡを有効成分とするアディポネクチン産生促進剤の発明である。特許文献５は、クマツヅラ科の植物から抽出されるカスチシンを有効成分とするアディポネクチン産生促進剤の発明である。
これらの抽出物や化合物を一瞥しても、何が有効なアディポネクチン産生促進剤となりうるのか、統一的な理論につながるものはない。地道な探索の繰り返しのみが新規なアディポネクチン産生促進物質に到達しうる道である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開２００９−２０９０８０号公報
【特許文献２】特開２００９−２４９３４１号公報
【特許文献３】特開２００８−２５５０４０号公報
【特許文献４】特許第５７７０５７６号公報
【特許文献５】特許第５７７０５０４号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の目的は、新規なアディポネクチンの産生・分泌促進組成物を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、アディポネクチン産生促進作用を有する物質を探索する目的で、植物抽出物などを調査分析してきた。そして見いだした有効成分を含む抽出物についてヒト臨床試験を行ってきたが、ヒト臨床試験で有効であるという評価に達したものは少なかった。この検討過程で、天然物からの抽出エキスであるリンゴンベリーエキスとヘマトコッカス藻色素を含む組成物がヒト臨床試験において顕著なアディポネクチン産生促進作用を有することを発見し本発明を完成させた。
【０００９】
本発明は以下の構成である。
（１）リンゴンベリーエキスとヘマトコッカス藻色素を含み、アディポネクチン産生を促進する作用を有することを特徴とする組成物。
（２）１回あたりの有効量としてリンゴンベリーエキス８０〜１６０ｍｇ、ヘマトコッカス藻色素２４０〜４８０ｍｇを含有する（１）に記載の組成物。
（３）経口投与の形態である（１）又は（２）に記載の組成物。
（４）ソフトカプセルに封入された形態である（１）〜（３）のいずれかに記載の組成物。
【発明の効果】
【００１０】
本発明により、ヒトに有効なアディポネクチン産生促進作用を有する組成物が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】ヒト臨床試験における５９名の血中アディポネクチンの変化を示すグラフである。
【図２】血中トリグリセリド濃度が１５０ｍｇ／ｄＬを境界値として層別化した３０名のデータの解析結果を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本発明は、リンゴンベリーエキスとヘマトコッカス藻色素を含み、アディポネクチン産生を促進する作用を有することを特徴とする組成物に係る発明である。
ヒト臨床試験においてリンゴンベリーエキスとヘマトコッカス藻色素を含む組成物に血中アディポネクチン産生促進作用があることはまったく知られていなかった。
本発明の組成物の構成成分について説明する。
【００１３】
リンゴンベリー（通称コケモモ、学名：Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ  ｖｉｔｉｓ−ｉｄａｅａ  Ｌ）は、ツツジ科スノキ属の常緑小低木である。本発明に用いられるリンゴンベリーの抽出物としては、リンゴンベリーの果実（果肉や果皮）の抽出物が最も好ましいが、リンゴンベリーの種、葉、茎、花、根等にも有効成分が含まれているので、これらのうちいずれか１又は２以上の抽出物を使用することもできる。
【００１４】
リンゴンベリーからの有効成分の抽出方法は特に限定されるものではない。溶媒を用いた抽出法が好ましい。抽出を行う際には、リンゴンベリーをそのまま使用することができる。顆粒状や粉末状に粉砕して抽出に供した方が、穏和な条件で短時間に高い抽出効率で有効成分の抽出を行うことができる。抽出温度は特に限定されるものではなく、リンゴンベリーの粉砕物の粒径や溶媒の種類等に応じて適宜設定すればよい。
溶媒の種類は特に限定されるものではない。水、エタノール等の低級アルコール、又はこれらの混合溶媒が好ましい。加熱下で（例えば温水や熱水等の加熱した溶媒を用いて）行ってもよい。
このような抽出操作により、リンゴンベリーから本発明に係る有効成分が抽出され、溶媒に溶け込む。抽出物を含む溶媒は、そのまま使用してもよい。必要に応じて、滅菌、洗浄、濾過、脱色、脱臭等の慣用の精製処理を加えてから使用することが好ましい。さらに、溶媒を全て揮発させて固体状（乾燥物）としてから使用してもよい。該乾燥物を任意の溶媒に再溶解してから使用してもよい。
なお、リンゴンベリーエキスは、オリザ油化株式会社、ＢＧＧ  Ｊａｐａｎ  株式会社、ＤＫＳＨジャパン株式会社等から市販されており、これらを用いることもできる。
また、リンゴンベリーエキスは、本発明の組成物の１回当たりの配合量として１０〜５００ｍｇ、好ましくは５０〜３００ｍｇ、より好ましくは８０〜１６０ｍｇを配合する。
【００１５】
本発明においてヘマトコッカス藻色素とは、ヘマトコッカス藻から抽出された色素を含む抽出物をいう。
本発明に使用できるヘマトコッカス藻色素は、具体的には、ヘマトコッカス・プルビアリス（Ｈａｅｍａｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｌｕｖｉａｌｉｓ）、ヘマトコッカス・ラキュストリス（Ｈａｅｍａｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｌａｃｕｓｔｒｉｓ）、ヘマトコッカス・カペンシス（Ｈａｅｍａｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｃａｐｅｎｓｉｓ）、ヘマトコッカス・ドロエバゲンシス（Ｈａｅｍａｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｄｒｏｅｂａｋｅｎｓｉｓ）、ヘマトコッカス・ジンバビエンシス（Ｈａｅｍａｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｚｉｍｂａｂｗｉｅｎｓｉｓ）等の培養物から抽出されたものである。
本発明に使用できるヘマトコッカス藻の培養方法は、特開平８−１０３２８８号公報等に開示された様々な方法を採用することができる。
【００１６】
本発明に使用できるヘマトコッカス藻色素は、上記の原料を、必要に応じて、例えば特開平５−６８５８５号公報等に開示された方法により細胞壁を破砕して、アセトン、エーテル、クロロホルム及びアルコール（エタノール、メタノール等）等の有機溶剤や、超臨界状態の二酸化炭素等の抽出溶剤を加えて抽出することによって得られる。
前記ヘマトコッカス藻色素は、色素純分としてはアスタキサンチンもしくはそのエステル体を含み、エステル体を５質量％以上含むものである。
また、本発明の実施に当たっては市販されているヘマトコッカス藻色素を用いることができる。このようなヘマトコッカス藻色素としては、富士化学工業（株）製のヘマトコッカス色素やＡｌｇａ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社のＡｓｔａＰｕｒｅを例示できる。
また、ヘマトコッカス藻色素は、本発明の組成物の１回当たりの配合量として１００〜１０００ｍｇ、好ましくは１５０〜５００ｍｇ、特に好ましくは２４０〜４８０ｍｇを配合する。
【００１７】
本発明の組成物は、そのままあるいは各種賦形剤を添加して製剤化する。製剤としては顆粒剤、錠剤、ソフトカプセル剤、ハードカプセル剤を例示することができる。
なお製剤化に当たっては、本発明の組成物の目的を阻害しない範囲で使用することができる。具体的には、へミセルロース、リグニン、グアーガム、コンニャクマンナン、イサゴール、アルギン酸、寒天、カラギーナン、キチン、カルボキシメチルセルロース、ポリデキストロースなどの野菜以外からとれる食物繊維や増粘剤、食用油、カルシウム、鉄、ナトリウム、亜鉛、銅、カリウム、リン、マグネシウム、ヨウ素、マンガン、セレンなどのミネラル；ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、ナイアシン、葉酸、パントテン酸などの脂溶性又は水溶性のビタミン群、リセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル、リン脂質、アラビアガム、キサンタンガム、トラガカントガム、ローカストビーンガムなどの乳化剤や分散剤、増量剤、賦形剤、保存料・酸化防止剤、風味調整剤や香料、塩化ナトリウム、グルタミン酸ナトリウム、グリシン、コハク酸、乳酸ナトリウムなどの呈味料、クエン酸、クエン酸ナトリウム、酢酸、アジピン酸、フマル酸、リンゴ酸などの酸味料、マルチトール、アスパルテームなどの低カロリー甘味料、着色剤などである。
本発明の組成物には、必要に応じて甘味料や酸味料、香料などを添加することもできる。
【実施例】
【００１８】
以下に試験例を示し、本発明を具体的に説明する。
以下に本発明の実施例及び試験例を示し、本発明をさらに説明する。
１．組成物を含むソフトカプセル剤の製造
本発明のソフトカプセル剤を製造した。
下記の表１に、本発明の組成物をサプリメントソフトカプセル剤として投与する場合の配合組成を示す。なお表１は、下記臨床試験の１日摂取量（カプセル２粒）当たりの含有量である。
各成分は、表１の組成比で常法に従って、混合し、ゼライス（株）製（ゼラチン）ソフトカプセルに封入した。
【００１９】
【表１】
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【００２０】
２．サプリメントを用いたヒト臨床試験
表１の組成を有するサプリメントソフトカプセル剤（以下「被験食品」）とプラセボ錠（「プラセボ食品」）を試験食品として用いたヒト臨床試験を実施した。
（１）対象者
次の基準沿って被験者候補２６７名から６０名を選択した。
４０歳以上６５歳未満の男女、空腹時血中中性脂肪値が正常高値からやや高め（１２０ｍｇ／ｄＬ以上２００ｍｇ／ｄＬ未満）に近似する者とした。なお以下の項目に適合するものを除外した。
１）脂質異常症と診断され、現在または、直近１年以内に脂質異常症の治療を行ったこ
とがある者
２）現在、治療中の疾患があるまたは、治療が必要と判断される者
３）糖尿病、肝疾患、腎疾患、心疾患などの疾患や、副腎皮質ホルモンの分泌に影響を
及ぼす疾患を有している、あるいは既往症がある者
４）脂質代謝に影響のある医薬品（ＯＴＣを含む）、特定保健用食品、機能性表示食
品、健康食品を常用している者
５）魚を週５日以上、主菜として摂取する習慣のある者
６）ＢＭＩが３０ｋｇ／ｍ２以上の者
７）ホルモン感受性疾患（子宮筋腫、子宮内膜症など）に罹患している者
８）現在、ダイエット（体重の減量）を行っている者
９）試験期間中に生活習慣の大きな変化の予定がある者
１０）過去１か月以内に他のヒト試験に参加した者
１１）その他、試験責任医師により試験に不適格と判断された者
【００２１】
（２）試験デザイン
試験は、無作為化二重盲検プラセボ対照並行群間比較試験とした。被験者候補の最初の来院（スクリーニング検査）時に同意を取得し、被験者ＩＤを付与した。
割付責任者が、乱数表を用いて割付表を作成し、試験食品に割付番号を付与し、摂取開始予定被験者６０名を、無作為に割付した。
試験食品と、日誌、食事記録票を被験者に配布し、試験食品の摂取と、日誌、食事記録票への記録を行わせた。
【００２２】
（３）検査項目
試験期間は１２週間とし、試験開始前、４週目、８週目、１２週目に身体測定、理学測定、医師の問診、血液検査、尿検査、血液特殊検査の測定を行った。
【００２３】
主な測定内容は次のとおりである。
１）身体計測・理学測定
身長（スクリーニング検査のみ）、体重、血圧、脈拍を測定した。
【００２４】
２）血液検査及び尿検査
血液学的検査として赤血球数（ＲＢＣ）、白血球数（ＷＢＣ）、ヘマトクリット値（Ｈｔ）、ヘモグロビン値（Ｈｂ）、血小板数（ＰＬＴ）、血液生化学検査として、総タンパク（ＴＰ）、アルブミン（Ａｌｂ）、ＡＳＴ（ＧＯＴ）、ＡＬＴ（ＧＰＴ）、γ−ＧＴ（γ−ＧＴＰ）、総ビリルビン（Ｔ−Ｂｉｌ）、乳酸脱水素酵素（ＬＤＨ）、アルカリフォスファターゼ（ＡＬＰ）、尿素窒素（ＢＵＮ）、クレアチニン（ＣＲＥ）、中性脂肪（ＴＧ）、総コレステロール（ＴＣ）、ＬＤＬ−コレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）、ＨＤＬコレステロール（ＨＤＬ−Ｃ）、遊離脂肪酸（ＮＥＦＡ）、Ｎａ、Ｋ、Ｃｌ、血糖値（Ｇｌｃ）、ＨｂＡ１ｃ（ＮＧＳＰ）、インスリン（ＩＲＩ）を測定した。
また、尿検査として尿蛋白定性、尿潜血反応、尿糖定性を試験した。
さらに血液特殊検査としてアディポネクチン、高分子量アディポネクチン、高感度ＴＮＦ−α、ｈｓＣＲＰ、ホモシステインを測定した。
【００２５】
３）問診
当日の健康状態の確認、有害事象の有無等を聞き取るため、試験責任医師による問診を行い、自覚症状及び他覚症状の発現状況及び有害事象と試験食品との因果関係の判定を行った。
【００２６】
（４）統計解析
主要検査項目については、摂取１２週後の摂取前値からの変化量を対応のないｔ検定（２標本ｔ検定）で評価した。参考として、摂取４週後及び８週後の摂取前からの変化量と、各検査時点での実測値についても同様に評価した。各群における摂取前からの変化は各項目について、対応のあるｔ検定（１標本ｔ検定）を用いて評価する。ノンパラメトリック変数である場合は、群間比較をＭａｎｎ−ＷｈｉｔｎｅｙのＵ検定、群内比較をＷｌｉｃｏｘｏｎの符号順位検定を行った。
解析ソフトはＪＭＰ  １１．０（ＳＡＳ社製）及びＭｉｃｒｏｓｏｆｔ  Ｅｘｃｅｌ  ２０１０（Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ社製）を使用した。
【００２７】
（５）結果
１）被験者背景
被験者候補２６７名に対して、スクリーニング検査を実施し、被験者６０名を選択した。この６０名をそれぞれ被験食品摂取群、プラセボ食品摂取群に群分けした。被験食品を割り付けた１名が個人的理由のため脱落した、それ以外の全被験者が試験を完了した。５９名の被験者が解析対象となり有効性の解析をした。解析対象の背景は、表２に示した。
両群の背景には有意な差は認められていない。
【００２８】
【表２】
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【００２９】
２）試験前と１２週経過後の血液データの変化
全被験者において、プラセボ食品摂取群と被験食摂取群の間で相違が確認されたものはアディポネクチン量のみであった。
被験食品摂取群は試験開始４週目、８週目、１２週目のいずれの測定日（検査日）においてもプラセボ食品摂取群に対して、その変化量は高値を示した。
結果を図１に示す。
図１の左上段は、投与前後におけるアディポネクチンの変化量、左下段はアディポネクチンの血中濃度の変化を示す。血中濃度は１２週投与後に明らかに増加していた。その変化量は、いずれの時点においても被験食品摂取群が上回っていた。
図１の右上段は、投与前後における高分子量（ＨＭＷ）アディポネクチンの変化量、右下段は高分子量（ＨＭＷ）アディポネクチンの血中濃度の変化を示す。血中高分子量（ＨＭＷ）アディポネクチンは、投与前に比べて投与後８週目、１２週目に有意に増加していた。
【００３０】
３）血中アディポネクチン量の層別解析
被験者を試験前の血中トリグリセライド１５０ｍｇ／ｄＬを境界値として層別した。
この数値以上の被験者について、プラセボ食品摂取群１６名、被験食品摂取群１４名を抽出し、再解析を行った。なおこの３０名の被験者の試験開始前の背景値には有意な差は認められなかった。
解析結果を図２に示す。
図２の左上段は、投与前後におけるアディポネクチンの変化量、左下段はアディポネクチンの血中濃度の変化を示す。血中トリグリセライドの１５０ｍｇ／ｄＬ以上の群に層別化すると血中濃度の変化はより明確化し、１２週投与後は、被験食品摂取群がプラセボ食品摂取群に対してより顕著に増加していることがわかる。変化量は、いずれの時点においても被験食品摂取群が上回っていた。
図２の右上段は、投与前後における高分子量（ＨＭＷ）アディポネクチンの変化量、右下段は高分子量（ＨＭＷ）アディポネクチンの血中濃度の変化を示す。アディポネクチン量と同様に、被験食品摂取群とプラセボ食品摂取群の相違が明確化され、血中高分子量（ＨＭＷ）アディポネクチンは、投与前に比べて投与後８週目に有意に増加していた。
層別解析の結果、被験食は血中トリグリセライド濃度が高値を示す群においてより強い作用示すものと推測される。すなわち本発明の組成物のアディポネクチン増加作用は、特に血中中性脂肪値が高めな層に対して、顕著に作用することが予想される。
【図１】
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【図２】
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