(57)【要約】【課題】ブラジルやヨーロッパ南部、中国に分布する熱帯植物であるマンジェリコンを有効成分として含有する抗炎症剤、抗酸化剤及び抗菌剤を提供する。【解決手段】マンジェリコン全草、マンジェリコン抽出物及びマンジェリコン微生物発酵物のいずれかを有効成分とし、関節リウマチ抑制作用、ケモカイン遺伝子発現抑制作用、ＤＰＰＨラジカル消去能、及び歯周病菌に対する抗菌作用を有するものとしている。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
マンジェリコン全草、マンジェリコン抽出物及びマンジェリコン微生物発酵物のいずれかを有効成分とし、関節リウマチ抑制作用を有することを特徴とする抗炎症剤。
【請求項２】
マンジェリコン全草、マンジェリコン抽出物及びマンジェリコン微生物発酵物のいずれかを有効成分とし、ケモカイン遺伝子発現抑制作用を有することを特徴とする抗炎症剤。
【請求項３】
マンジェリコン全草、マンジェリコン抽出物及びマンジェリコン微生物発酵物のいずれかを有効成分とし、ＤＰＰＨラジカル消去能を有することを特徴とする抗酸化剤。
【請求項４】
マンジェリコン全草、マンジェリコン抽出物及びマンジェリコン微生物発酵物のいずれかを有効成分とし、歯周病菌に対する抗菌作用を有することを特徴とする抗菌剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、マンジェリコンを有効成分とする抗炎症剤、抗酸化剤及び抗菌剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
マンジェリコンとは、ブラジルやヨーロッパ南部、中国にも分布する熱帯植物であり、シソやハッカの一種で、全草に芳香があり、草丈は１メートル位まで生長する植物である。
【０００３】
このマンジェリコンは、ブラジルでは肉料理の調味料として一般に用いられているが、古来よりインスリンの分泌を促進する効果や、血糖値を押さえる効果を有するといわれている。
【０００４】
そのため、従来からマンジェリコンを含有した健康食品や医薬品、化粧品などが存在する。その一例として、肥満を防止、予防し、かつ、生活習慣病と言われる高血圧、高脂血症、糖尿病、循環器疾患、心臓疾患などの慢性疾患の予防や改善に有用な健康食品用組成物が存在する。この健康食品用組成物は、食欲抑制作用を有する成分、消化酵素活性阻害作用を有する成分、キトサンからなる成分、食物繊維を有する成分を含有したり、または消化酵素活性阻害作用を有する成分、キノコキトサン複合多糖体成分、及びミネラルバランスを整え、インスリンの産生及びインスリン受容体の活性化作用を有する成分を含有したものとしている。そして、この健康食品用組成物は、これらの成分に加えて、血糖値を上昇させない植物抽出物エキスとして、マンジェリコンを含有したものとしている（特許文献１、２）。
【０００５】
他の例として、天然から産出されたサンゴ化石、または海洋生物から生成した石灰岩中のカルシウムが海中でマグネシウムで置換されて鉱物化してなる海洋生物由来の鉱物を用いたことを特徴とする血糖値低下作用を備えたミネラル含有組成物が存在する。このミネラル含有組成物は、これらの鉱物の他に、マンジェリコンを含む植物群より選ばれる少なくとも１つの植物成分を含有したものとしている（特許文献３）。
【０００６】
さらに他の例として、シミ、ソバカス等の予防または治療に有効であって、優れた美白効果を示すと共に、安定性及び皮膚に対する高い安全性を併せ持つ美白用化粧料組成物が存在する。この美白用化粧料組成物は、天麻、カルケイジャ、柏子仁、地膚子、檳榔子、竹葉、ゲンノショウコ、番瀉葉、ワタフジ、菊花、胡桃仁、マンジェリコン及び細辛の群より選ばれる少なくとも１つの抽出物を有効成分として含有したものとしている（特許文献４）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２００７−３３０１２４号公報
【特許文献２】特開２００６−２０６０６号公報
【特許文献３】特開２００４−４３３３５号公報
【特許文献４】特開平７−２５７４６号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
そこで、上記健康食品や医薬品、化粧品などに用いられていたマンジェリコンに注目し、このマンジェリコンの全草、抽出物または微生物発酵物が、関節リウマチ抑制作用、ケモカイン遺伝子発現抑制作用、ＤＰＰＨラジカル消去能、及び歯周病菌に対する抗菌作用を有することを見出し、本発明の抗炎症剤、抗酸化剤及び抗菌剤を提供するに至ったものである。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明の抗炎症剤は、マンジェリコン全草、マンジェリコン抽出物及びマンジェリコン微生物発酵物のいずれかを有効成分とし、関節リウマチ抑制作用を有するものとしている。
【００１０】
さらに、本発明の抗炎症剤は、マンジェリコン全草、マンジェリコン抽出物及びマンジェリコン微生物発酵物のいずれかを有効成分とし、ケモカイン遺伝子発現抑制作用を有するものとしている。
【００１１】
また、本発明の抗酸化剤は、マンジェリコン全草、マンジェリコン抽出物及びマンジェリコン微生物発酵物のいずれかを有効成分とし、ＤＰＰＨラジカル消去能を有するものとしている。
【００１２】
さらにまた、本発明の抗菌剤は、マンジェリコン全草、マンジェリコン抽出物及びマンジェリコン微生物発酵物のいずれかを有効成分とし、歯周病菌に対する抗菌作用を有するものとしている。
【発明の効果】
【００１３】
本発明の抗炎症剤は、関節リウマチ抑制作用を有するものとなり、関節リウマチの炎症や痛み、腫れなどを効果的に解消できるものとなった。
【００１４】
さらに、本発明の抗炎症剤は、ケモカイン遺伝子発現抑制作用を有するものとなり、接触性皮膚炎やアトピー性皮膚炎などの炎症の発生、増幅を効果的に解消できるものとなった。
【００１５】
また、本発明の抗酸化剤は、ＤＰＰＨラジカル消去能を有するものとなり、皮膚外用剤や化粧料とすることにより、皮膚の炎症、乾燥、シワ、たるみといったさまざまな症状の防止・改善効果を有するものとなり、さらに飲食に供することにより体内の細胞阻害因子となる活性酸素、フリーラジカルの抑制も促せるなどの効果を発揮するものとなった。
【００１６】
さらにまた、本発明の抗菌剤は、歯周病菌であるポルフィロモナス・ジンジバリス（Porphyromonas gingivalis）、アクチノマイセス‐ネスランディイ（Actinomyces naeslundii）に対する抗菌作用を有するものとなり、歯周病を効果的に解消できるものとなると共に、口臭予防にも効果を発揮するものとなった。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】本発明の抗炎症剤のＴＮＦ‐α値の測定結果を示すグラフである。
【図２】本発明の抗炎症剤のケモカイン遺伝子の発現量の測定結果を示すグラフである。
【図３】本発明の抗酸化剤のＤＰＰＨラジカルの消去能の測定結果を示すグラフである。
【図４】本発明の抗菌剤の歯周病菌に対する阻止帯域の直径の測定結果を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
以下、本発明の抗炎症剤、抗酸化剤及び抗菌剤を実施するための形態について、詳細に説明する。
【００１９】
本発明の抗炎症剤、抗酸化剤及び抗菌剤は、マンジェリコン全草、マンジェリコン抽出物及びマンジェリコン微生物発酵物のいずれかを有効成分として含有する。
【００２０】
本発明におけるマンジェリコンとは、学名をOcimum bacilicumといい、前記したようにブラジルやヨーロッパ南部、中国にも分布する熱帯植物であり、シソやハッカの一種で、全草に芳香があり、草丈は１メートル位まで生長する植物である。
【００２１】
本発明において、マンジェリコン全草とは、葉及び地上茎をさし、生草であっても、乾燥物であってもよい。
【００２２】
本発明において、マンジェリコン抽出物とは、マンジェリコン全草を４〜６０℃未満の冷温水、または６０℃以上の熱水で抽出した抽出物であるが、エタノール及び含水エタノールで抽出した抽出物であってもよい。抽出物の性状としては、特に限定されないが、エキス、スプレードライ、凍結乾燥物などとすることができる。
【００２３】
本発明において、マンジェリコン微生物発酵物とは、マンジェリコン全草を乳酸菌、酢酸菌、納豆菌などの細菌、麹などのカビ、酵母等により醗酵させた発酵物をさす。さらに、このような微生物発酵物を前記したような冷温水、熱水またはエタノール及び含水エタノールで抽出した抽出物としてもよい。
【００２４】
本発明の抗炎症剤、抗酸化剤及び抗菌剤は、錠剤、カプセル剤、内服液、ドリンク剤などとして内服したり、軟膏、クリームなどとして塗布したり、歯磨き粉、口中清涼剤、洗口含嗽剤（うがい剤）などとして口に含んだりして用いることができる。
【００２５】
本発明において、マンジェリコン全草、マンジェリコン抽出物及びマンジェリコン微生物発酵物の含有量としては、内服剤とする場合は０．１〜１０重量％、好ましくは０．５〜５重量％であり、塗布剤とする場合は０．０１〜１０重量％、好ましくは０．０５〜５重量％であり、洗口含嗽剤とする場合は０．０１〜１重量％、好ましくは０．０５〜０．５重量％である。
【００２６】
本発明の抗炎症剤、抗酸化剤及び抗菌剤は、剤形や使用目的に応じて、賦形剤、崩壊剤、結合剤、コーティング剤、溶媒、香料、清涼剤、甘味剤、着色剤、界面活性剤、分散剤、乳化剤、潤滑剤、増粘剤、ｐＨ調整剤、緩衝剤、安定化剤、防腐剤、賦形剤などを含有することができる。
【００２７】
本発明の抗炎症剤、抗酸化剤及び抗菌剤の投与量は、被使用者の症状、使用目的、性別、年齢、体重、医師の判断などに応じて増減することができるが、一般的に０．５〜１００ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ、好ましくは５〜５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙである。
【実施例】
【００２８】
次に、本発明の抗炎症剤、抗酸化剤及び抗菌剤を実施例によって詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例により限定されるものではない。
【００２９】
（実施例１）
〔本発明の抗炎症剤の関節リウマチ抑制作用について〕
本実施例では、マンジェリコン全草（生草）６２５ｍｇ、マンジェリコン抽出物（８５℃の熱水、２時間抽出後乾燥）６２．５ｍｇ、マンジェリコン微生物発酵物（乳酸菌醗酵）６２５ｍｇの３種類をそれぞれ生理食塩水各５０ｍｌに入れホモジェナイズして試料を調製した。
【００３０】
マンジェリコン全草及びマンジェリコン微生物発酵物は、５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ、５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ、０．５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ、マンジェリコン抽出物は、５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ、０．５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ、０．０５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙを、供試動物に週５回、０．１ｍｌを経口投与した。固形飼料（市販品）及び飲水は自由摂取とした。
【００３１】
供試動物であるＭＲＬ／１ｐｒマウス（雌、４週齢）は、１週間の予備飼育後、５週齢でそれぞれ体重が平均化するように１０群に分けた。
【００３２】
コントロール群（ｎ＝５）、マンジェリコン全草（５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ、５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ、０．５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ）の３群（各ｎ＝５）、マンジェリコン抽出物（５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ、０．５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ、０．０５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ）の３群（各ｎ＝５）、マンジェリコン微生物発酵物（５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ、５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ、０．５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ）の３群（各ｎ＝５）の計１０群とし、投与期間は５週齢から１０週齢まで経口投与（５日間／週）とした。飼育室は２２±５℃、湿度５０％±１０％、１２時間明暗サイクルの環境下で飼育した。
【００３３】
抗炎症測定の指標は、ＴＮＦ−αとした。ＴＮＦ‐αは、関節リウマチの炎症や痛み、腫れ、さらに骨や軟骨などの関節破壊に関係している炎症系サイトカインとしても働いている。関節リウマチの患者関節液では、ＴＮＦ‐α、ＩＬ−１、ＩＬ−８などが過剰に産生され、炎症が増強されるため測定項目とした。経時的に尾静脈より採取した血清中のＴＮＦ‐αはサンドイッチＥＬＩＳＡ法を用いて測定を行った。５倍希釈した被験マウス血清と反応させ、その後抗体と反応、基質溶液で呈色後、主波長４５０ｎｍ、副波長６２０ｎｍにおける吸光度をマイクロプレートリーダーで測定した。測定結果を図１に示す。図１中、＊は、コントロールに対して有意差が認められることを示す（Ｐ＜０.０５）。
【００３４】
図１に示す測定結果から、ＴＮＦ−α値について、コントロール群を１００％として比較すると、マンジェリコン全草群において抑制率は、０．５ｍｇ群で１７％、５ｍｇ群で３１％、５０ｍｇ群で３６％であった。
【００３５】
マンジェリコン抽出物も同様の傾向を示し、０．０５ｍｇ群で２５％、０．５ｍｇ群で３７％、５ｍｇ群で４４％の抑制率となった。
【００３６】
マンジェリコン微生物発酵物も０．５ｍｇ群で２０％、５ｍｇ群で３６％、５０ｍｇ群で３８％の抑制率となり、マンジェリコンの全草、抽出物、微生物発酵ともに高い抗炎症作用を示した。
【００３７】
（実施例２）
〔本発明の抗炎症剤のケモカイン遺伝子発現抑制作用について〕
本実施例では、マンジェリコン抽出物（８５℃の熱水、２時間抽出の乾燥物）及びマンジェリコン微生物発酵物（乳酸菌醗酵）の抽出物（８５℃の熱水、２時間抽出の乾燥物）を用いて、実施例１と同様にして試料を調製した。
【００３８】
ヒト繊維芽細胞を直径６ｃｍの培養皿で、１０％ウシ胎児血清を含むＤＭＥＭ培地（ダルベッコ変法イーグル培地）でコンフルエントになるまで培養し、被験培地とした。
【００３９】
被験培地に前記マンジェリコン抽出物、マンジェリコン微生物発酵物の抽出物、及びハイドロコルチゾン（陽性対照）を添加した。
【００４０】
マンジェリコン抽出物、マンジェリコン微生物発酵物の抽出物、及びハイドロコルチゾンの終濃度は、それぞれ０．０１％（乾燥重量）及び１０−７ Ｍとした。さらにケモカイン遺伝子発現を促進させることが知られている腫瘍壊死因子ＴＮＦ‐α（１ｎｇ／ｍｌ）を添加し、３７℃で６時間培養した。
【００４１】
次に、常法に従って細胞からＲＮＡを単離し、ｃＤＮＡを合成したのち、定量的ＰＣＲ法（ＴａｑＭａｎ  ＰＣＲ法）により、ＩＬ−８遺伝子の発現量を測定した。内部標準遺伝子としてＧＡＰＤＨ（グリセルアルデヒド３リン酸脱水素酵素）遺伝子を用い、得られたデータを補正したものを、測定結果として図２に示す。
【００４２】
図２に示す測定結果から、ＤＭＳＯのみの発現量は０．４５であったのに対し、マンジェリコン抽出物は０．２７、マンジェリコン微生物発酵物の抽出物は０．２３と、ヒト繊維芽細胞におけるＩＬ−８の遺伝子発現を抑制していることが確認できた。
【００４３】
ハイドロコルチゾンは抑制効果が強いが、ステロイドホルモンであるため、炎症、組織障害、潰瘍形成等の副作用が引き起こされる可能性がある。これに対しマンジェリコン抽出物及び微生物発酵物の抽出物はこのような副作用がないため長期連用が可能である。
【００４４】
接触性皮膚炎、アトピー性皮膚炎などの炎症部位に好中球や好酸球等の炎症細胞が遊走、活性化し、炎症の発生、増幅に関与していると考えられている。皮膚の角化細胞、繊維芽細胞などの細胞からインターロイキン−８（ＩＬ−８，ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−８）等のケモカインが産生されることが知られている。炎症性異常角化疾患である乾癬ではその皮膚患部にＩＬ−８が多量に存在していることも知られている。
【００４５】
したがって、ＩＬ−８等のケモカインの発現を抑制することは炎症性あるいはアレルギー性の疾患症状の改善や予防に有効であると考えられる。
【００４６】
（実施例３）
〔本発明の抗酸化剤のＤＰＰＨラジカルの消去能について〕
本実施例では、マンジェリコン抽出物（８５℃の熱水、２時間抽出の乾燥物）、マンジェリコン抽出物（４０℃の温水、１晩抽出の乾燥物）、エタノール抽出物もしくは７０％含水エタノール抽出物、マンジェリコン微生物発酵物の抽出物（８５℃の熱水、２時間抽出の乾燥物）、エタノール抽出物若しくは７０％含水エタノール抽出物を用いて、実施例１と同様にして試料を調製した。
【００４７】
ＤＰＰＨラジカル消去能は、１００μＭのＤＰＰＨ（１，１−Ｄｉｐｈｅｎｙｌ−２−ｐｉｃｒｙｌｈｙｄｒａｚｙｌ）をエタノールに溶解したエタノール溶液を１ｍｌとり、そこに各試料を２０μｌずつ個別に加えて撹拌し、室温、暗所で３０分間放置して得た各試料を、分光光度計５１７ｎｍの吸光度を測定し、ＤＰＰＨラジカルの減少を測定した。測定結果を図３に示す。
【００４８】
図３に示す測定結果から、マンジェリコン抽出物（熱水、温水）、マンジェリコン微生物発酵物の抽出物（熱水）におけるＤＰＰＨラジカル消去能は低かったが、抗酸化作用は確認された。
【００４９】
さらに、マンジェリコンエタノール抽出物、７０％含水エタノール抽出物、微生物発酵物のエタノール抽出物、７０％含水エタノール抽出物のＤＰＰＨラジカル消去能は高く、濃度依存的に高い抗酸化作用が確認された。
【００５０】
（実施例４）
〔本発明の抗菌剤の歯周病菌に対する発育阻止、抗菌作用について〕
本実施例では、マンジェリコン抽出物（８５℃の熱水、２時間抽出の乾燥物）、マンジェリコン微生物発酵物の抽出物（８５℃の熱水、２時間抽出の乾燥物）を用いて、実施例１と同様にして調製した試料について、歯周病菌であるポルフィロモナス・ジンジバリス（Porphyromonas gingivalis）、アクチノマイセス‐ネスランディイ（Actinomyces naeslundii）に対する抗菌作用を確認した。
【００５１】
純水に、前記マンジェリコン抽出物、マンジェリコン微生物発酵物の抽出物を各１％になるように添加、溶解した。１０ｍｌＧＡＭ寒天（１．５％）で平板培地を作成し、その上に各２００μｌ供試菌液（前記２種類）／１５ｍｌＧＡＭ寒天（１％）を重層した。
【００５２】
硬化した培地に５〜７か所、滅菌した器具にて２ｍｍ角の穴をあける。その穴にマンジェリコン抽出物の１％溶液、マンジェリコン微生物発酵物の抽出物の１％溶液を添加した。
【００５３】
３７℃で２４時間、好気または嫌気培養を行い、発育後の阻止帯域の直径を測定した。測定結果を図４に示す。
【００５４】
図４に示す測定結果から、二種類の歯周病菌ではあるが、マンジェリコン抽出物、マンジェリコン微生物発酵物の抽出物の発育阻止、抗菌作用を確認できた。これら歯周病菌に対する抗菌作用が確認できたことから、本発明の抗菌剤は、口臭予防にも効果があるものと推測される。
【図１】
2017001960.tif 000002
【図２】
2017001960.tif 000003
【図３】
2017001960.tif 000004
【図４】
2017001960.tif 000005