(57)【要約】【課題】設備負担を軽減することが可能な植物の大量生産方法を提供する。【解決手段】植物の大量生産方法において、折り畳まれた状態から展開されることにより自立性が生じるように構成された複数の培養袋１のそれぞれに、液体培地１２と植物材料１３とを収容して各培養袋１の開口部を密封し、密封された培養袋１を所定の培養スペース１０に並べる工程と、培養スペース１０に並べられた複数の培養袋１のそれぞれの内部を植物材料の培養に適した環境に維持して各培養袋１内で植物材料を培養する工程とを設ける。【選択図】図３
2017118847.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
折り畳まれた状態から展開されることにより自立性が生じるように構成された複数の培養袋のそれぞれに、液体培地と植物材料とを収容して各培養袋の開口部を密封し、密封された培養袋を所定の培養スペースに並べる工程と、
前記培養スペースに並べられた前記複数の培養袋のそれぞれの内部を前記植物材料の培養に適した環境に維持して各培養袋内で前記植物材料を培養する工程と、
を含んだ植物の大量生産方法。
【請求項２】
前記培養する工程では、前記複数の培養袋のそれぞれの下部から袋内に所定のガスを導入する一方で前記複数の培養袋のそれぞれの上部から排気する請求項１に記載の植物の大量生産方法。
【請求項３】
前記培養する工程は、前記植物材料の茎葉を増殖させる工程を含んでいる請求項１又は２に記載の植物の大量生産方法。
【請求項４】
前記培養する工程は、前記茎葉を増殖させる工程の後に、各培養袋を開封し、前記液体培地を交換して各培養袋の開口部を再密封する工程と、前記再密封する工程後に前記茎葉から塊茎を誘導する工程とをさらに含んでいる請求項３に記載の植物の大量生産方法。
【請求項５】
前記培養する工程は、無作為にカットされた植物片を前記植物材料として用い、前記植物片の芽を誘導し、又は前記植物片を伸長させる工程を含んでいる請求項１又は２に記載の植物の大量生産方法。
【請求項６】
前記並べる工程では、上下方向に複数段に区分された保管棚の各段を前記培養スペースに設置して、前記保管棚の各段に前記複数の培養袋を並べる請求項１〜５のいずれか一項に記載の植物の大量生産方法。
【請求項７】
前記並べる工程に先立って、前記複数の培養袋のそれぞれを滅菌する工程をさらに含み、前記滅菌する工程では、折り畳まれた状態の各培養袋の開口部から隙間形成部材を挿入し、その後、各培養袋を積み重ねるようにして滅菌環境下に配置する請求項１〜６のいずれか一項に記載の植物の大量生産方法。
【請求項８】
前記並べる工程では、前記複数の培養袋のそれぞれに収容される液体培地及び植物材料の合計体積を７リットル以内に設定する請求項１〜７のいずれか一項に記載の植物の大量生産方法。
【請求項９】
所定の培養スペースに並べられた複数の容器内のそれぞれに液体培地と植物材料とを収容して前記植物材料を培養するための植物の大量生産設備であって、
前記複数の容器のそれぞれとして、折り畳まれた状態から展開されることにより自立性が生じるように構成された複数の培養袋が利用され、
前記培養スペースには、上下方向に複数段に区分された保管棚と、前記複数の培養袋のそれぞれに対して所定のガスを導入するガス供給系とが設けられ、
前記複数の容器のそれぞれは、前記保管棚の各段に並べられるとともに、前記ガス供給系と接続され、
さらに、前記複数の容器のそれぞれには、各培養袋から前記ガスを排気する排気ポートが設けられている植物の大量生産設備。
【請求項１０】
液体培地と植物材料とを収容して内部で植物材料を培養するための植物の培養袋であって、折り畳まれた状態から展開されることにより自立性が生じるように構成され、側面にはガスの導入及び排気のためのポートが設けられ、さらに上端の開口部とポートとの間には、一回の密封に必要な最小長に対して２倍以上の長さを有する封止部が設けられている培養袋。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、植物材料を容器内で増殖するといった手法により植物を大量生産する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
植物を大量生産する方法として、容器に培地と植物材料とを収容して容器内で植物を生産する方法が知られている。例えば、培養容器内で植物の茎葉を増殖し、その後、茎葉から塊茎を誘導して種芋等を作製するマイクロチューバー法（例えば特許文献１及び２参照）、あるいは培養容器内で植物の茎葉を増殖し、得られた茎葉を無作為にカットして植物片を作製し、その植物片を出芽、発根させる器官培養法（例えば特許文献３参照）、といった生産方法が知られている。その他にも、植物材料を破砕し、得られた植物片から不定芽を誘導するいわゆるＰＰＲ法、あるいは不定胚を増殖してこれを発芽させる不定胚法も存在する。
【０００３】
上記のような方法にて植物を大量に生産する場合、植物材料と培地とを収容するための多数の容器を用意する必要がある。そのような容器としては、従来、ガラス等を素材とした硬質で開口部が比較的大きい平坦な容器が用いられている（例えば特許文献４参照）。植物細胞を培養して二次代謝産物や組換えたんぱく質医薬品等を製造するためのバイオリアクターとして、最低でも４００リットル程度の容積を有するポリマー製の軟質な袋をフレーム状の支持体内に装着した構造の培養槽も提案されている（例えば特許文献５参照）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特許第２９０４９２４号公報
【特許文献２】特開２００７−２５９７４９号公報
【特許文献３】特許第４１９１２３６号公報
【特許文献４】国際公開第２０１２／１４６８７２号
【特許文献５】特開２０１４−１４３６５号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
多数の硬質容器を用いる従来の生産方法では、設備的な負担が大きいという課題がある。例えば、多数の容器を保管するためには広大なスペースが必要である。また、生産に先立って容器をオートクレーブ装置等で滅菌する必要があるところ、多数の容器を一括して滅菌するためには大規模な滅菌装置が必要である。そのような滅菌装置が利用できないときは、多数の容器を小分けして順次滅菌せざるを得ないが、その場合は滅菌前の容器、及び滅菌後の容器のそれぞれを保管するスペースを確保する必要があり、やはり設備的な負担が大きい。軟質な袋を利用した大型の培養槽を利用する例では、多数の支持体を予め設置する必要があり、同様にスペースの問題が生じる。また、４００リットルを超えるような大型の培養槽を用いると、培養槽が雑菌類やウイルス等で汚染された場合の損失が相当に大きくなるおそれがある。培養に光が必要な茎葉を増殖する場合、上述したような規模の大型の培養槽では、その中心部への光照射量が不足するおそれがある。
【０００６】
そこで、本発明は、植物を大量生産する際の設備負担を軽減することが可能な方法等を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明の一態様に係る植物の大量生産方法は、折り畳まれた状態から展開されることにより自立性が生じるように構成された複数の培養袋（１）のそれぞれに、液体培地（１２）と植物材料（１３）とを収容して各培養袋の開口部を密封し、密封された培養袋を所定の培養スペース（１０）に並べる工程（Ｓ１２、Ｓ２４、Ｓ２７）と、前記培養スペースに並べられた前記複数の培養袋のそれぞれの内部を前記植物材料の培養に適した環境に維持して各培養袋内で前記植物材料を培養する工程（Ｓ１３、Ｓ１５、Ｓ２５、Ｓ２８）と、を含むものである。
【０００８】
上記態様の生産方法によれば、培養袋を展開して自立性を与えることにより、支持手段を用いることなく各培養袋を自立させて培養スペースに効率よく並べることができる。非使用時には培養袋を折り畳んで保管することができるので、保管に必要なスペースを削減することができる。また、培養袋の滅菌時には、袋内が滅菌の雰囲気に触れるように培養袋の開口部を幾らか開口させておけば足りるので、多数の培養袋を積み重ねて限られたスペースで多くの培養袋を一括して滅菌することができる。それにより、植物の大量生産に際して要求される設備負担を軽減することができる。
【０００９】
上記態様の生産方法において、前記培養する工程では、前記複数の培養袋のそれぞれの下部から袋内に所定のガスを導入する一方で前記複数の培養袋のそれぞれの上部から排気してもよい。これによれば、袋内における空気や二酸化炭素といったガスを逐次新しいガスに置き換えて、袋内を植物材料の培養に適した環境に維持することができる。
【００１０】
上記態様の生産方法において、前記培養する工程は、前記植物材料の茎葉を増殖させる工程（Ｓ１３）を含んでもよい。この場合、前記植物材料は少なくともその一部が液体培地に浸漬された状態に維持されることに培養されてよい。これによれば、マイクロチューバー法や器官培養法による植物の生産に上記態様の生産方法を適用して、設備負担を軽減しつつ植物を効率よく大量に生産することができる。
【００１１】
また、前記培養する工程は、前記茎葉を増殖させる工程の後に、各培養袋を開封し、前記液体培地を交換して各培養袋の開口部を再密封する工程（Ｓ１４）と、前記再密封する工程後に前記茎葉から塊茎を誘導する工程（Ｓ１５）とをさらに含んでもよい。これによれば、茎葉の増殖に利用した袋を引き続き利用しつつ液体培地を交換して塊茎を誘導することができるので、マイクロチューバー法による植物の大量生産を効率よく実施することができる。
【００１２】
上記態様の生産方法において、前記培養する工程は、無作為にカットされた植物片を前記植物材料として用い、前記植物片の芽を誘導し、又は前記植物片を伸長させる工程（Ｓ２５、Ｓ２８）を含んでもよい。これによれば、器官培養法やＰＰＲ法による植物の生産に上記態様の生産方法を適用して、設備負担を軽減しつつ植物を効率よく大量に生産することができる。
【００１３】
上記態様の生産方法において、前記並べる工程では、上下方向に複数段に区分された保管棚（１１）の各段を前記培養スペース（１０）に設置して、前記保管棚の各段に前記複数の培養袋を並べてもよい。これによれば、限られた培養スペースにより多くの袋を設置して大量の植物を一度に効率よく生産することができる。
【００１４】
上記態様の生産方法において、前記並べる工程に先立って、前記複数の培養袋のそれぞれを滅菌する工程（Ｓ２）をさらに含み、前記滅菌する工程では、折り畳まれた状態の各培養袋の開口部から隙間形成部材（３１）を挿入し、その後、各培養袋を積み重ねるようにして滅菌環境下に配置してもよい。これによれば、硬質容器を滅菌環境下に並べる場合と比較して、より多くの袋を限られたスペースの滅菌環境下に配置し、それらの袋の内部を滅菌環境に触れさせて効率よく滅菌することができる。
【００１５】
上記態様の生産方法において、前記並べる工程では、前記複数の培養袋のそれぞれに収容される液体培地及び植物材料の合計体積を７リットル以内に設定してもよい。そのように設定することにより、各培養袋を単独の作業者が無理なく袋をハンドリングすることができる。これにより、作業負担を軽減することができる。
【００１６】
本発明の一態様に係る植物の大量生産設備は、所定の培養スペース（１０）に並べられた複数の容器内のそれぞれに液体培地（１２）と植物材料（１３）とを収容して前記植物材料を培養するための植物の大量生産設備であって、前記複数の容器のそれぞれとして、折り畳まれた状態から展開されることにより自立性が生じるように構成された複数の培養袋（１）が利用され、前記培養スペースには、上下方向に複数段に区分された保管棚（１１）と、前記複数の培養袋のそれぞれに対して所定のガスを導入するガス供給系とが設けられ、前記複数の容器のそれぞれは、前記保管棚の各段に並べられるとともに、前記ガス供給系と接続され、さらに、前記複数の容器のそれぞれには、各培養袋から前記ガスを排気する排気ポート（４）が設けられてもよい。
【００１７】
上記態様の生産設備によれば、多数の培養袋を保管棚の各段に並べつつ、各培養袋にガス供給系からガスを導入しつつ各培養袋からガスを排気させることにより、植物材料を比較的少ない設備負担の下で、一括して大量に生産することができる。
【００１８】
本発明の一態様に係る植物の培養袋（１）は、液体培地（１２）と植物材料（１３）とを収容して内部で植物材料を培養するための植物の培養袋であって、折り畳まれた状態から展開されることにより自立性が生じるように構成され、側面にはガスの導入及び排気のためのポート（３、４）が設けられ、さらに上端の開口部とポートとの間には、一回の密封に必要な最小長（Ｂ）に対して２倍以上の長さ（Ａ）を有する封止部５が設けられたものである。
【００１９】
上記態様の培養袋によれば、上述した態様の生産方法及び生産設備に適した培養袋を提供することができる。封止部の長さが上記の通りに設定されているので、一旦封止された開口部を切開する等して開封した後、同一の培養袋を再封止してさらなる植物材料の培養に利用することができる。これにより、培養袋を再利用可能な容器として機能させ、容器の製造や保管に関する負担を軽減することができる。
【００２０】
なお、以上の説明では本発明の理解を容易にするために添付図面の参照符号を括弧書きにて付記したが、それにより本発明が図示の形態に限定されるものではない。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】本発明の一形態に係る植物の生産方法の概略工程を示す図。
【図２】培養袋の一例を示す図。
【図３】培養袋を用いて植物を生産している状態の一例を示す図。
【図４】使用状態における単一の培養袋の一例を示す図。
【図５】生産設備に設けられるガス供給系の一例を示す図。
【図６】マイクロチューバー法による植物の生産方法の一例を示す工程図。
【図７】培養袋を滅菌する際の前処理の一例を示す図。
【図８】ＰＰＲ法による植物の生産方法の一例を示す工程図。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
まず、図１を参照して、本発明の一形態に係る植物の大量生産方法の概略工程を説明する。なお、本明細書において、「培養」とは、植物材料を所定の環境下で育てることを意味し、植物材料の茎葉を増殖し、又は伸長させ、芽を誘導し、又は伸長させるといったように、植物材料を当初の状態から目的とする状態へと変化させる種々の処理あるいは操作を意味するものである。
【００２３】
本発明の生産方法は、一例として、図１に示す（１）マイクロチューバー法（以下、ＭＴ法と呼ぶことがある。）、（２）器官培養法、あるいは（３）ＰＰＲ法に適用することができる。いずれの方法で植物を生産するかは、植物の種類に応じて適宜に選択される。例えば、ＭＴ法はバレイショの種芋のような塊茎の生産等に利用され、器官培養法はダリア、サツマイモ、ユーカリ、ジャガイモ、イチジク属その他の苗の生産等に利用され、ＰＰＲ法はカーネーション、キク、カランコエ、カスミソウ、ペチュニア、ガーベラ、トマト、サイネリア、レタスその他の芽の生産等に利用される。
【００２４】
いずれの方法においても、まず、所定の培養容器内で植物材料が作出される。植物材料は、増殖の目的に応じて選択される。種苗増殖が目的の場合には、植物材料は無菌環境下で培養されたウイルス及び植物病原菌類にフリーなものが用いられる。物質生産が目的の場合には、遺伝子組換え体や組換えウイルスに感染した植物材料等が用いられることもある。植物材料が提供されると、ＭＴ法では、所定の培養容器内に培地と植物材料とを収容して植物材料の茎葉を増殖させる工程が実施され、その後、培地が交換されて茎葉から塊茎を誘導する工程が実施される。器官培養法でも、培養容器内に培地と植物材料とを収容して植物材料の茎葉を増殖させる工程が実施されるが、その後、増殖させた茎葉を植物体として回収する工程が実施される場合と、茎葉を無作為にカットして植物片を作製し、その植物片を培養して芽を誘導し伸長させる工程が実施される場合とがある。ＰＰＲ法では、植物材料が細断された後、破断された植物片と培地とを培養容器内に収容して植物材料の芽を増殖させる工程が実施され、その後に増殖された芽が回収される。回収された芽は、硬質樹脂製の培養容器に小分けされてさらに培養されることにより、温室等での栽培に向けて馴化される。
【００２５】
本形態の生産方法は、上述した種々の工程のうち、特に茎葉又は芽を大量増殖させる工程、あるいはＭＴ法にて塊茎を誘導する工程において、自立性を備えた軟質樹脂製の培養袋が培養容器として使用されることに特徴を有している。図２は培養袋の一例を示している。培養袋１は、軟質樹脂の一例として、ＰＥＴ（ポチエチレンテレフタレート）及びＣＰＰ（無軸延伸ポリプロピレン）の複合フィルム（厚さは一例として１００μｍ）を素材とし、そのフィルムを縦長でかつ底部にガゼット２が設けられた底ガゼットタイプの袋形状に成形することにより作製される。培養袋１の素材に用いられる樹脂には、植物の培養に必要な光の波長域に対して透過性を有するものが選択される。培養袋１の上端はその全幅に亘って開口部とされ、その開口部分を除く培養袋１の周囲は密封されている。ガゼット２が折り畳まれた状態から培養袋１を展開することにより、培養袋１の底部が一定の大きさに拡大する。それにより、培養袋１には自立性が生じ、支持手段を用いることなく培養袋１を並べ置くことが可能である。また、非使用時にはガゼット２を折り畳むことにより、比較的狭いスペースにて多数の培養袋１を保管することができる。
【００２６】
培養袋１の側面には、単一の下部ポート３と、二つの上部ポート４とが取り付けられている。これらのポート３、４は培養袋１の内部にガスを導入し、あるいは培養袋１からガスを排気するためのものである。ポート３、４は一例としてポリプロピレン樹脂を素材とする成形品を培養袋１に接着することにより設けられる。ポート３、４は例えばチューブ類を接続可能な形状に形成される。さらに、上部ポート４の上端から培養袋１の上端までの領域は、培養袋１内に培地や植物材料を収容した後に培養袋１を密封するための封止部５として機能する。培養袋１を複数回利用することを可能とするため、封止部５の上下方向における寸法Ａは、一回の密封に必要な最小長Ｂの少なくとも２倍以上に設定されている。
【００２７】
培養袋１の素材、及びポート３、４の素材は上記の例に限らない。培養袋１を滅菌するためのオートクレーブ処理に耐え得るものであれば、培養袋１及びポート３、４の材質は適宜に変更可能である。培養袋１の容量は、培地と植物材料とを収容した単一の培養袋１を作業者が持ち上げることができる範囲であれば適宜に設定されてよい。本形態では、培養袋１の容量が最大でも１２Ｌ（リットル）、好ましくは８Ｌに設定され、その内部に収容される培地と植物材料は、両者を合計して培養袋１の容量の６割程度、すなわち、培養袋１の容量が１２Ｌの場合は７Ｌを上限とし、培養袋１の容量が８Ｌの場合は５Ｌを上限として設定される。ポート３、４は例えば内径４ｍｍ程度のチューブが接続可能な大きさに形成される。
【００２８】
次に、図３〜図５を参照して、培養袋１を用いた植物材料の増殖又は誘導の概要を説明する。図３は、植物の生産過程における培養袋１の使用例を示し、図４はその使用状態における単一の培養袋１の一例を示している。図３に示すように、本形態では、所定の培養室１０内に保管棚１１が設置される。培養室１０は、温度、湿度、照明といった植物の培養環境を構成する各種の物理パラメータを管理可能な培養スペースとして区分されている。保管棚１１は上下方向に複数段（図示例では３段）を有するように構築されている。保管棚１１は培養室１０の床面から天井までの範囲で適宜の高さで構築されてよいが、作業時の負担を考慮すれば、最上段の設置面が床面から１．５ｍ程度の高さに収まるように保管棚１１を設置するとよい。
【００２９】
保管棚１１の各段には多数の培養袋１が並べて設置される。図４により詳しく示したように、各培養袋１には、フィルタ濾過等により滅菌された培地１２と植物材料１３とが収容され、各培養袋１の上端の開口部はヒートシールといった密封方法を用いて無菌状態で密封されている。培地１２の上方は気相部１４が確保されている。培地１２には、植物材料１３の種類とその生産工程とに応じて、適切な組成の液体培地が適宜に選択して使用される。培養袋１の下部ポート３には通気用のチューブ１５及びフィルタ１６が接続され、一方の上部ポート４にも通気用のチューブ１７及びフィルタ１８が接続され、他方の上部ポート４にはフィルタ１９が接続される。チューブ１５、１７から培養袋１内には所定のガス、例えば空気又は二酸化炭素が導入され、それと引き換えにフィルタ１９から培養袋１内のガスが排気される。ただし、上部ポート４のそれぞれが排気用に利用されてもよい。また、下部ポート３から所定のガスが液体培地中に通気されるよう、培養袋１の底面からの下部ポート３の配置位置と培地量とが調整されることが望ましい。液体培地中に通気されることにより、植物体へ所定のガスが効率的に供給され、さらには液体培地中又は植物体の撹拌効果も期待できる。ガス通気量は植物の種類や増殖法により適宜に選択されてよいが、好ましくは５０〜１００ｍＬ／分である。チューブ１５、１７は、それらの絡み付き等を防ぐために、クリップ２０等を用いて培養袋１の適宜の位置に固定される。
【００３０】
図５は各培養袋１に対するガスの供給系の概要を示している。図５のガス供給系においては、プレフィルタ２１Ａを介してポンプ２２に吸い込まれたガス（一例として空気）が滅菌フィルタ（例えばＨＥＰＡフィルタ）２１Ｂを通過して主管路２３に送り込まれる。ガスとして二酸化炭素を供給する場合には、プレフィルタ２１の上流側に二酸化炭素ボンベといった供給源が配置される。主管路２３には適宜数の分岐管路２４が接続され、各分岐管路２４には保管棚１１の各段に対応付けてマニホールド２５が接続されている。マニホールド２５には多数のチューブ継ぎ手２６が接続され、それらのチューブ継ぎ手２６と培養袋１の例えば下部ポート３とがチューブ１５及びフィルタ１６を介して接続される。それにより、各培養袋１にガスが供給される。上部ポート４がガス供給に利用される場合には、同様にしてチューブ継ぎ手２６と上部ポート４とがチューブ１７を介して接続される。主管路２３及び分岐管路２４の適宜の位置には開閉弁２７が設けられる。開閉弁２７に代えて、又は加えて流量調整弁や圧力調整弁が設けられてもよい。このような供給系によれば、保管棚１１を複数の領域に区分し、培養袋１が設置されている領域のみにガスを供給し、培養袋１が設置されていない領域に対してはガスの供給を遮断することができる。領域は適宜に設定されてよく、領域毎に開閉弁２７が設けられていればよい。図３の例では、保管棚１１の上下方向の柱に沿って分岐管路２４が配置され、その分岐管路２４の基部に開閉弁２７が接続され、各段に対応付けてマニホールド２５が設置されている。ただし、ガス供給系の構成は図示例に限らず、適宜の変形が可能である。
【００３１】
次に、図６〜図８を参照して植物の生産方法における具体的な工程の一例を説明する。図６はＭＴ法による植物の生産工程の一例を示している。ＭＴ法にて植物の塊茎を生産するためには、まず植物材料としての母株を増殖する（ステップＳ１１）。この工程は植物材料としてのウイルスフリー苗を節ごとにカットし、得られた植物片を培養容器内の固体培地に植え継いで増殖させることにより実施される。この段階での培養容器は、図２に示す培養袋１よりも小型で足り、例えばガラス製の硬質容器でよい。増殖は、培養庫内を所定の温度、湿度、照明環境に維持して行われる。
【００３２】
母株の増殖と並行して、培養袋１を作製し（ステップＳ１）、これを滅菌する（ステップＳ２）。培養袋１の作製は、ポート３、４にチューブ１５、１７、フィルタ１６、１８、１９、あるいはクリップ２０を装着し、さらには培養袋１内にエアレーション用のエアストーン３０（図７参照、ただしエアストーン３０は適宜に省略可能である。）を装着する処理である。要するに、茎葉の増殖工程で培養袋１に装着されているべき各種の付属部品を培養袋１に取り付けることにより、培養袋１が作製される。また、培養袋１の滅菌は、作製された多数の培養袋１をオートクレーブ装置に配置し、それらの培養袋１を一括して滅菌することにより行われる。その滅菌は培養袋１のガゼット２を畳んだ状態で行われるが、培養袋１内に蒸気を十分に行き渡らせるため、図７に示すように、培養袋１の内部には、すのこ状の隙間形成部材３１が挿入される。オートクレーブ装置内には、隙間形成部材３１が挿入されて開口部が幾らか開かれた多数の培養袋１が積み重ねられて収容される。その状態の培養袋１はガラス等によって形成された硬質容器と比較して体積が十分に小さいので、滅菌処理に必要なオートクレーブ装置の大型化を抑え、かつ滅菌前後における培養袋１の保管に必要なスペースも削減できる。滅菌後の培養袋１は所定の無菌環境下で保管される。なお、図７では上部ポート４にフィルタ１９のみを装着した例を示しているが、上部ポート４にはチューブ１７が適宜に接続されてよい。
【００３３】
母株の増殖及び培養袋１の滅菌が終わると、次に、滅菌済の多数の培養袋１のそれぞれに液体培地を収容し、増殖させた母株をその液体培地内に分注して培養袋１を密封する（ステップＳ１２）。それらの処理は無菌環境下で実施される。培養袋１の密封は、例えばヒートシールによって実施される。培養袋１の開口部を複数回に亘って折り返し、その折り返し部分を密閉具で挟み込むことにより、培養袋１が密封されてもよい。その後、各培養袋１を培養室１０の保管棚１１に並べ、チューブ１５等をガス供給系に接続する。以上により茎葉の増殖に必要な準備が完了する。培養袋１は、その内容物が上限５Ｌ程度の比較的コンパクトな構成であり、かつ袋自体が自立性を有しかつ適度な柔軟性を有している。したがって、多数の培養袋１を保管棚１１に効率よく並べることができる。しかも、培養袋１は縦長であるため、設置スペースの削減を図ることもできる。
【００３４】
次に、培養袋１に対してガス供給系から、ガスの一例としての空気を送り込みつつ培養袋１内で茎葉を増殖する（ステップＳ１３）。下部ポート３から空気が供給されることにより、液体培地は徐々に蒸発して減少する。増殖中、培養室１０内の温度、湿度、照明は茎葉の増殖に適した状態に維持される。例えば、バレイショの茎葉を増殖させる場合、培養室１０は、室内が明所となるように照明が調整され、温度は室温に維持される。茎葉が十分に伸長すると、次に、培地交換を行う（ステップＳ１４）。その工程は、無菌環境下で培養袋１の上端密封部を開封し、内部に残った液体培地を廃棄して、マイクロチューバーの誘導に必要な液体培地を新たに培養袋１に投入し、その後に培養袋１の開口部を再度密封することにより実施される。この際、培養袋１内の茎葉は袋内に収容したままでよい。培養袋１が比較的コンパクトでかつ柔軟性を有しているため、培地交換作業の負担も比較的小さくて済む。
【００３５】
培地交換後は、培養室１０にて再び培養袋１を保管棚１１に並べ、培養袋１をガス供給系に接続する。その後、培養袋１に空気を送り込みつつ培養袋１内の茎葉から塊茎を誘導する（ステップＳ１５）。この場合も、下部ポート３からガスが供給されることにより液体培地は徐々に減少する。培養室１０の温度、湿度、照明は塊茎の誘導に適した状態に維持される。例えば、バレイショの塊茎を誘導する場合、培養室１０が暗所となるように照明が消灯される。塊茎が十分に誘導されると、その後、培養袋１を開封し、内部の塊茎を収穫する（ステップＳ１６）。得られた塊茎は、乾燥、選別といった作業を経て所定の出荷形態に梱包され、その後に出荷される。
【００３６】
図８は、ＰＰＲ法による植物の生産工程の一例を示している。ＰＰＲ法にて植物を生産するためには、まず植物材料としての母株を増殖する（ステップＳ２１）。この工程は、図６のステップＳ１１と概ね同様である。次に、増殖させた植物材料を培養容器内の固体培地に植え付け、暗所にてさらに植物を培養する（ステップＳ２２）。この処理は、植物材料を２節以上の長さにカットして固体培地に植え付けてさらに伸長させるものである。
暗所増殖した植物材料がある程度の長さまで育つと、それらの植物材料を無作為にカットして増殖の材料を作製する（ステップＳ２３）。これらの工程と並行して、図６と同様に培養袋１の作製（ステップＳ１）、及び培養袋１の滅菌（ステップＳ２）が行われる。ただし、本形態では、容量が異なる複数種類の培養袋１が用いられるので、培養袋１の作製及び滅菌は袋の種類毎に実施される。
【００３７】
暗所増殖を経た植物材料を無作為にカットした後、滅菌済の多数の培養袋１のそれぞれに液体培地を収容し、カットした植物材料をその液体培地内に分注して培養袋１を密封する（ステップＳ２４）。それらの処理は無菌環境下で実施される。培養袋１の密封は、図６と同様に実施すればよい。その後、各培養袋１を培養室１０の保管棚１１に並べ、チューブ１５等をガス供給系に接続する。以上により茎葉の増殖に必要な準備が完了する。ここで用いる培養袋１は、図６の例よりもさらに小容量のもので足りる。
【００３８】
次に、培養袋１に対してガス供給系から、ガスの一例としての二酸化炭素を送り込みつつ培養袋１内で植物材料を増殖する（ステップＳ２５）。この場合、培養室１０は、室内が明所となるように照明が調整され、温度は室温に維持される。植物材料が十分に伸長すると、次に、無菌環境下で培養袋１の上端密封部を開封し、伸長した植物を取り出して無作為にカットする（ステップＳ２６）。その後、滅菌済の多数の培養袋１のそれぞれに幼芽誘導用の液体培地を収容し、カットした植物材料をその液体培地内に分注して培養袋１を密封する（ステップＳ２７）。ここで用いる培養袋１はステップＳ２４で用いるそれよりも容量が大きく、概ね図６のステップＳ１２で用いる培養袋１と同等である。
【００３９】
培養袋１の密封後は、各培養袋１を培養室１０の保管棚１１に並べ、チューブ１５等をガス供給系に接続する。以上により幼芽の誘導に必要な準備が完了する。次に、培養袋１に対してガス供給系から、ガスの一例としての空気を送り込みつつ培養袋１内で植物の幼芽を誘導する（ステップＳ２８）。この工程でも、培養室１０内の温度、湿度、照明は茎葉の増殖に適した状態に維持される。例えば、培養室１０は、室内が明所となるように照明が調整され、室温は常温に維持される。幼芽が十分に誘導されると、その後、培養袋１を開封し、内部の幼芽を回収する（ステップＳ２８）。得られた幼芽は、脱水等の作業を経て硬質樹脂製の培養容器に小分けされてさらに培養される。それにより、幼芽が温室等での栽培に向けて馴化され、その後に所定の出荷形態で出荷される。
【００４０】
なお、器官培養法を利用して植物を生産する場合には、上述したＭＴ法のステップＳ１３までの処理と同様に母株を増殖してその茎と培地とを培養袋１に収容して植物の茎を明所又は暗所で増殖させ、得られた植物体を回収、利用することができる。あるいは、暗所で増殖させ、得られた植物体を無作為にカットし、そのカットされた植物片をさらに培養して芽を誘導し、伸長させるといった工程も採用される。本法を利用した植物の生産では、さらに、母株をＭＴ法やＰＰＲ法のものに代えて、生産すべき植物の分化全能性細胞を植物材料として利用し、その不定胚を増殖させた後に、不定胚と培地とを培養袋１に収容して不定胚から芽を誘導するといった工程が採用されることもある。
【００４１】
本発明は上述した形態に限定されることなく、折り畳まれた状態から展開されることによって自立性が生じるように構成された袋を容器として利用し、その袋内に培地と植物材料とを収容して袋内で植物を培養させる限りにおいて適宜の変形、変更が可能である。例えば培養袋１は、底部に加えて側面にもガゼットが設けられた構成であってもよい。その他にも培養袋は目的に応じて適宜の変形が施されてよい。生産工程も適宜の追加、削除が可能である。
【符号の説明】
【００４２】
１  培養袋
２  ガゼット
３  下部ポート
４  上部ポート
５  封止部
１０  培養室（培養スペース）
１１  保管棚
１２  培地
１３  植物材料
３１  隙間形成部材
【図１】
2017118847.tif 000003
【図２】
2017118847.tif 000004
【図３】
2017118847.tif 000005
【図４】
2017118847.tif 000006
【図５】
2017118847.tif 000007
【図６】
2017118847.tif 000008
【図７】
2017118847.tif 000009
【図８】
2017118847.tif 000010