(57)【要約】      （修正有）【課題】低コストで安定的に量産でき、十分な炭水化物や脂肪等の栄養を仔稚魚の体内に吸収可能で摂取されやすい国産生物餌料を提供する。【解決手段】強い蛍光物質を含有し、また、海岸に打ち上げられた海藻（アラメやカジメ、アカモク、ワカメ等）と海草（アマモ、タチアマモ）を良く摂取し、無性生殖で切断・再生という過程を繰り返す事によって、驚異的に増殖するイソヒメミミズ（貧毛鋼、イトミミズ目、イソヒメミミズ、Ｐａｃｈｙｄｒｉｌｕｓ  ｎｉｐｐｏｎｉｃｕｓ  Ｙａｍａｇｕｃｈｉ）にドコサヘキサエン酸の栄養強化を目的とした鶏卵を給餌した。【選択図】図２
2017108728.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
水産養殖（魚類、甲殻類、頭足類、無足類）におけるアルテミア（Ａｒｔｅｍｉａ）に代わる新しい餌料系列の生物餌料として、貧毛鋼、イトミミズ目（Ｔｕｂｉｆｉｃｉｄａ）、ヒメミミズ科（Ｅｎｃｈｙｔｒａｅｉｄａｅ）の群から選択されることを特徴とする種苗生産方法。
【請求項２】
水産養殖（魚類、甲殻類、頭足類、無足類）におけるアルテミア（Ａｒｔｅｍｉａ）に代わる新しい餌料系列の生物餌料として、貧毛鋼、イトミミズ目（Ｔｕｂｉｆｉｃｉｄａ）、ヒメミミズ科（Ｅｎｃｈｙｔｒａｅｉｄａｅ）、イソヒメミミズ（Ｐａｃｈｙｄｒｉｌｕｓ  ｎｉｐｐｏｎｉｃｕｓ  Ｙａｍａｇｕｃｈｉ）であることを特徴とする種苗生産方法。
【請求項３】
請求項２の生物餌料が、海岸漂着海藻の再資源化利用として選択されることを特徴とする低コスト・リサイクル生態型餌料生産方法。
【請求項４】
請求項１、２の生物餌料が、タツノオトシゴ類（Ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ）の仔稚魚から成体までの単独給与餌料として選択されることを特徴とする飼育方法。
【請求項５】
請求項１、２の生物餌料に、不飽和脂肪酸であるドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）を栄養強化させることを目的として、鶏卵（ゆで卵黄、乾燥卵黄）、うずら卵（ゆで卵黄、乾燥卵黄）を給餌させることを特徴とする栄養強化方法。
【請求項６】
請求項１、２の生物餌料に、デザイナーエッグ（栄養成分強化鶏卵、免疫強化鶏卵）を給餌させることを特徴とする栄養成分強化と免疫強化方法。
【請求項７】
請求項２の生物餌料に用いられる材料の飼育床に、砂（鉱物の砂）、サンゴ砂、粉砕貝殻、ゼオライト、活性炭、ピートモス、海藻（任意の状態）等の単独か、２種類以上の混合を基質とすることを特徴とする養殖方法。
【請求項８】
請求項７の飼育床にて、床内湿度８０から１００％、温度２２から２６℃、基質の深さ３０ｃｍ以内の環境で飼育することを特徴とする養殖方法。
【請求項９】
請求項７、８の飼育床にて、海藻（任意の状態）、海藻（任意の状態）を餌とすることを特徴とする養殖方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】  本発明は、水産養殖（魚類、甲殻類、頭足類、無足類）における種苗生産の安定化およびコスト削減のため、アルテミア（Ａｒｔｅｍｉａ）に代わる好適な国産生物餌料を見出し、種苗生産における新たな餌料系列に関するものであり、加えて海岸漂着海藻の再資源化利用による、低コスト・リサイクル生態型餌料生産システムである。
【背景技術】
【０００２】  従来の水産養殖（魚類、甲殻類、頭足類、無足類）における種苗生産の餌料系列は、成長にともなってシオミズツボワムシからアルテミア、アルテミアから配合飼料と切り替えていくが、魚類においては仔魚から稚魚への移行期には脂肪や代謝様式が変化しておらず、配合飼料の炭水化物や脂肪を十分に吸収できず、体内への摂取量が不足し、仔稚魚に個体差ができ共食いが多く発生し、その結果、種苗生産の不安定化につながっている。アルテミアは耐久卵の形で２０１０年度通関量では４５．２トン輸入されており、国内では１００ｇを２，０００円前後で販売されている。アルテミア耐久卵は必要な時に孵化させて給餌できることから、計画的な種苗生産を行うためには大変便利で、仔稚魚期における餌料系列の要になっている。
【特許文献１】特願１９９１−２０８４９９
【特許文献２】特願２００６−１９７４３３
【特許文献３】特開２００７−５３９６７
【特許文献４】特開２００７−９７４６３
【発明の開示】
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】  我々の発明が解決しようとする課題は、水産養殖（魚類、甲殻類、頭足類、無足類）における種苗生産の餌料系列の要になっているアルテミアにあると考える。アルテミアは供給のすべてを海外からの輸入に頼っており、価格の年変動が大きく品質も様々である。また、アルテミア幼生には海水魚の必須脂肪酸である不飽和脂肪酸のドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）の含有量が少なく、不飽和脂肪酸を含む藻類等を与えて栄養強化するか、輸入冷凍カイアシ類の併用を行っているが。これらの栄養強化が餌料コストを大きく引き上げている。加えて多くの種苗生産現場では作業の軽減化のため生物餌料のアルテミアから可能な限り早く配合飼料に転換させている。本発明の目的は、将来の安定供給や品質が不安視されているアルテミアに代わる国産生物餌料として、低コストで安定的に量産でき、十分な炭水化物や脂肪等の栄養を仔稚魚の体内に吸収可能で摂取されやすい国産生物餌料を見出し、配合飼料への転換時期を遅らせ、種苗生産での最大の減耗要因となっている成長や生残低下を防ぐ新たな餌料系列を提供しなければならない。
【この課題を解決するための手段として】
【０００５】  海浜の潮上帯から潮間帯に潜砂し埋在生活する海浜産の発光ミミズで知られているイソミミズ（Ｐｏｎｔｏｄｒｉｒｌｕｓ  ｍａｔｓｕｓｈｉｍｅｎｓｉｓ）はマルポとよばれ、ベラやカサゴ、コチなどの釣り餌として関係者には周知のことである。本発明に従えば、このイソミミズと共棲する体長１０〜１５ｍｍたらずの小さなイソヒメミミズ（貧毛鋼、イトミミズ目、イソヒメミミズ、Ｐａｃｈｙｄｒｉｌｕｓ  ｎｉｐｐｏｎｉｃｕｓ  Ｙａｍａｇｕｃｈｉ）がイソミミズと同様に強い蛍光物質を含有し、また、海岸に打ち上げられた海藻（アラメやカジメ、アカモク、ワカメ等）と海草（アマモ、タチアマモ）を良く摂取し、無性生殖で切断・再生という過程を繰り返す事によって、驚異的に増殖することを見つけた。また、アルテミアはシストから同調孵化するのでサイズは均一であるが、イソヒメミミズのサイズ組成は広範囲にわたっている。加えてイソヒメミミズは環形動物であるため、水中に溶けた酸素を皮膚呼吸で取り込み、二酸化炭素を皮膚から排出するため、海水にも淡水にも耐性があり、また、イソヒメミミズの近縁種であるイトミミズはウナギ稚魚、観賞魚の好適餌料であるため、イソヒメミミズと他の生物餌料との栄養成分の差異を明らかにし、種苗生産対象魚種の特殊な栄養要求、特に不飽和脂肪酸の要求量（３〜４％）に答えるため、イソヒメミミズの栄養強化試験、培養系の餌料条件を変えてイソヒメミミズの培養試験、各魚種でのイソヒメミミズに対する摂餌選択性等を明らかにし、放流試験のため種苗生産された仔稚魚の耳石への蛍光標識における問題点等を解決し、新たな餌料系列による計画的な種苗生産方法を提供する。
【発明の効果】
【０００６】  本発明に係わるイソヒメミミズは、既に知られているヤマトヒメミミズ（Ｅｎｃｈｙｔｒａｅｕｓ  ｊａｐｏｎｅｎｓｉｓ）と同様に無性生殖と有性生殖の両方を行う珍しい特徴を持つヒメミミズの仲間でサイズ組成も酷似し、ミミズのまわりに砂（鉱物の砂）、サンゴ砂、粉砕貝殻、ゼオライト、活性炭、ピートモス、海藻等の適切な基質が存在すれば、切断と再生という過程を繰り返して増殖するため、１匹が２週間後には１０匹に、４週間後には１００匹に、６週間後には１０，０００匹と驚異的に増殖し、海岸に打ち上がった海藻を餌とする好塩性であるため、海岸漂着海藻の再資源化利用により、海岸の保全、美化につとめ海浜の有機物汚染の浄化に寄与する共益性と、低コスト・リサイクル生態型餌料生産システムを確立可能であり、アルテミア耐久卵の生産システムに対抗し得ると期待できる。加えてヒメミミズの仲間は広食性であるため仔稚魚期における特殊な栄養要求である不飽和脂肪酸の栄養強化が容易であり、新たな餌料系列の提案が期待できる。
【０００７】  表１に示すように、本発明に係わるイソヒメミミズを、シオミズツボワムシやアルテミアとの栄養成分の差異を明らかにしたところ、高タンパク質で高脂肪、特に黄緑色蛍光物質であるリボフラビンをも高含有している。リボフラビンはビタミンＢ２とも呼ばれ、ビタミンの中で水溶性ビタミンに分類される生理活性物質であり、種苗生産された仔稚魚に投与されれば、抗体の生産、正常な成長と正常な健康状態の維持に不可欠な物質である。また、不飽和脂肪酸であるエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）やイソヒメミミズの食性である海藻の栄養成分であるミネラル、ビタミン類も豊富で、栄養学的観点からシオミズツボワムシやアルテミアよりも優れている。但し、仔稚魚期における特殊な栄養要求の一つである不飽和脂肪酸であるドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）が不足しているため栄養強化しなければならないが、イソヒメミミズは海藻、海草等の特定の餌しか食べない狭食性ではないため栄養強化が容易であると考える。
【０００８】
【表１】
2017108728.tif 000003
【０００９】  表２に示すように、イソヒメミミズは、幼生（体長１〜１．５ｍｍ）から成体（体長１０〜１５ｍｍ）、太さも直径約（５０μｍ〜４００μｍ）とサイズ組成は広範囲にわたっており、加えて幼生は水中で丸くなったり、絡み合って団子状になる習性があり、体長１ｍｍの幼生は約２００μｍの大きさに変化する。このような多様なサイズの生物餌料の給餌により、仔稚魚の摂餌選択性が活発になり、成長と生存に効果的である。加えて水産養殖（魚類、甲殻類、頭足類、無足類）における種苗生産を企業規模で行うためには、シオミズツボワムシやアルテミアの代わりにイソヒメミミズを仔稚魚への単独給与を行い、作業性や生産性を大きく向上させなければならないが、イソヒメミミズにはその可能性が大きく、難種苗生産魚種とも称されているマグロ類、ブリ類、ハタ類、タコ類、ウナギ類、タツノオトシゴ類、甲殻類等の初期生物餌料として期待できる。
【００１０】
【表２】
2017108728.tif 000004
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】  以下、本発明の実施形態を詳細に説明すると。【００１２】  海浜の満潮汀線から前浜と後浜の境界までに堆積するか埋却された海岸漂着海藻に、潜砂し埋在生活するイソヒメミミズを砂と共に１００ｇ採集し、本発明の培養系に使用したさらに培養系を構成する培養器には市販の塩ビ製（口径２０ｃｍ長さ６０ｃｍ）の蓋つきパイプを地面に２０ｃｍの深さに差込み、パイプ内部に水はけのため深さ１０ｃｍほど砂利を轢き、その上から基質として海砂を深さ１５〜２０ｃｍになるように投入して飼育床とし、基質表面から蓋までを１０ｃｍとした。この簡易な培養器を明るい条件下に置き、飼育床内は湿度８０から１００％、温度２２〜２６℃、イソヒメミミズは負の走光性のため暗闇環境下に置いて、乾燥ワカメを水でもどして１週間ごとに適量を給餌し培養を行った。【００１３】  図１で示すように、イソヒメミミズを砂と共に１００ｇ投入してから１ヶ月後には、砂に面した壁面が白い糸くずの様なイソヒメミミズで覆われた。イソヒメミミズの採集方法は、前日給餌した水でもどした乾燥ワカメを水の中で篩いにかけ、イソヒメミミズを洗い落とし、水の中で団子状になったところをスポイトで採取した。イソヒメミミズ生産量は３ヶ月間で５，０００ｃｍ３当たり質重量約４０ｇになり、ワカメの給餌量は乾燥重量４８ｇ（湿重量３８４ｇ）であった。ワムシの平均生産量は４０トン水槽７基で３ヶ月間生産した場合は質重量で約７７０ｋｇになり、給餌量はイースト量とクロレラ海水量はそれぞれ２，４６０ｋｇ、２，８１０ｔであった。仮にイソヒメミミズを２８０トン飼育床で３ヵ月間生産した場合は質重量で約２，２４０ｋｇとなり、ワムシの約３倍の生産力となる。ワカメの給餌量は乾燥重量２，６８８ｋｇ（湿重量２１、５００ｋｇ）となり、ワムシの給餌量の１３０分１とイソヒメミミズの餌料効率が非常に高かった。イソヒメミミズの年生産量を年４回で単純計算すると湿重量は８，９６０ｋｇとなり、アルテミアの年間輸入量の約２０％に相当する。加えて年給餌量は年４回で単純計算すると湿重量で８６，０００ｋｇとなり、例えるならば、神奈川県全体における年間に埋め立て処分する漂着海藻量は約２，０００〜１０，０００ｔと、イソヒメミミズの必要年給餌量の２３〜１１６倍に相当する膨大な量の海藻が毎年漂着する計算になり、海岸漂着海藻の再資源化利用により、低コスト・リサイクル生態型餌料生産システムの確立が可能である。【００１４】  表３で示すように、培養系の餌料条件を変えてイソヒメミミズの培養試験を行った。培養系を構成する培養器には４個の腰高シャーレーを使用し、深さ約１０ｍｍ、洗浄し２ｍｍ目の篩いにかけ、残った湿気がある粉砕貝殻を基質として轢き、体長１０ｍｍ以上のイソヒメミミズを２０匹各シャーレーに移植した。餌料としてＡシャーレーにはエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）を高含有する乾燥ワカメをＢシャーレーにはドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）ドコサペンタエン酸（ＤＰＡ）、ビタミン、ミネラルを高含有する鶏卵（ゆでた卵黄）を、ＣシャーレーにはビタミンＢ群、ミネラルを高含有する非常に栄養価が高いオートミールを、Ｄシャーレーにはドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）を高含有するハプト藻類のパブロ���を、２日置きに各栄養強化餌料を適量投与し、適温（２４℃）に設定し、保冷庫（照明無し）に収容し２０日間培養を行った。培養開始から１０日目、２０日目と２回、各々のシャーレー内の基質である貝殻を水の中で篩いにかけ、イソヒメミミズを洗い落とし、３０分後浮遊幼生の沈下を待って、水の中で団子状になったイソヒメミミズをスポイトで黒色小型容器に採集して拡大鏡で計数した。結果、Ａ、Ｂ、Ｃシャーレーは共にイソヒメミミズは高い嗜好性を示し広食性であることが確認された。２０日目には無性生殖で切断・再生という過程を繰り返し同じような増殖を行った。Ｄシャーレーでは嗜好性は示さず増殖も殆ど無かった。【００１５】
【表３】
2017108728.tif 000005
2017108728.tif 000006
【００１６】  表４で示すように、鶏卵（ゆでた卵黄）を４日置きに残餌がないようにイソヒメミミズ湿重量４０ｇに対してゆでた卵黄１個（１６ｇ）の割合で２０日間給餌して、栄養強化前後のイソヒメミミズの一般成分と不飽和脂肪酸（ＤＨＡ，ＥＰＡ）を示した。栄養強化による一般成分では栄養強化前に比べて脂質が高くなり、不飽和脂肪酸では栄養強化前には認められなかったＤＨＡが、栄養強化後には高い値で検出され、水産養殖における種苗生産対象魚種の不飽和脂肪酸の要求量（３〜４％）を十分に満たし、仔稚魚期の特殊な栄養要求にも答えられることが明らかになった。【００１７】
【表４】
2017108728.tif 000007
【００１８】  図２で示すように、栄養強化を目的として不飽和脂肪酸であるドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）とエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）を強化した栄養成分強化鶏卵のゆで卵黄をイソヒメミミズに給餌したところ高い嗜好性を示したため、デザイナーエッグと称されているビタミン、ミネラル、脂肪酸、タウリン、ヨード、イソフラボン等の栄養成分強化卵や免疫強化卵を、イソヒメミミズの栄養成分強化及び免疫強化餌料として、仔稚魚期における特殊な栄養要求や免疫強化に答えられる生物餌料の提供が可能である。【００１９】  表５で示すように、アクリル水槽（９０ｘ４５ｘ４５）１５７Ｌで上部濾過器、２灯上部ライト、２４℃オートヒーター、エアレーションのフルセット４基で、多種多様な魚種に対してイソヒメミミズによる３０日間の摂餌選択性試験を行った。摂餌量を正立顕微鏡（蛍光）用いて体外から腹部領域を測定可能な透明な体をした魚スカシテンジクダイ（Ｒｈａｂｄａｍｉａ  ｇｒａｃｉｌｉｓ）１０匹（平均体長３ｃｍ）とおよそ魚に見えない外見と、繁殖形態のタツノオトシゴ（Ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ  ｃｏｒｏｎａｔｕｓ）５匹（平均体長３ｃｍ）とクロウミウマ（Ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ  ｋｕｄａ）４匹（平均体長７ｃｍ）、近縁種のオビイシヨウジウオ（Ｃｏｒｙｔｈｏｉｃｈｔｈｙｓ  ａｍｐｌｅｘｕｓ）４匹（平均体長８ｃｍ）無足類のニホンウナギ（Ａｎｇｕｉｌｌａ  ｊａｐｏｎｉｃａ）５匹（平均体長９ｃｍ）、遊泳性が乏しい頭足類のバンダコウイカ（Ｓｅｐｉａ  ｂａｎｄｅｎｓｉｓ  Ａｄａｍ）４匹（平均胴長３ｍｍ）、小型甲殻類のサラサエビ（Ｒｈｙｎｃｈｏｃｉｎｅｔｅｓ  ｕｎｔａｉ）５匹（平均体長２ｃｍ）を選択して試験に供し、３０日間１日１回投餌し、水槽底面には砂は敷かず、絡み合って団子状になるイソヒメミミズを出来るだけ捕食させた。結果、スカシテンジクダイは落ちてくるイソヒメミミズも水槽底面で団子状になったイソヒメミミズも積極的に捕食した。ニホンウナギのシラス稚魚は盛んに水槽底面で団子状になったイソヒメミミズを突きながら捕食した。ふ化した平均胴長３ｍｍのバンダコウイカは水槽底面付近で団子状になった成体、丸くなった幼生を不活発であるが触腕で捕食し３０日目には平均胴長１５ｍｍに成長した。サラサエビは水槽底面で小さな団子状になったイソヒメミミズを積極的に顎脚内肢で捕獲し、岩陰に運び盛んに捕食していた。タツノオトシゴとクロウミウマはアルテミアやイサザアミに対して嗜好性が非常に高く良く捕食したが、イソヒメミミズに対しては嗜好性がやや低く、団子状になった成体や浮遊している幼生を緩慢な動作で選択捕食していた。糞はスカシテンジクダイの黒色に近い糞ではなく、タツノオトシゴ類の消化器官が未発達なためかイソヒメミミズをすり潰した様な白い糞であった。しかし、タツノオトシゴ類の嗜好性はやや低いが、仔稚魚から成体までのイソヒメミミズ単独給与が可能であることを示唆した。オビイシヨウジウオは口径が小さすぎるため、基質である貝殻を水の中で篩いにかけ、イソヒメミミズを洗い落とし、水中で団子状になったイソヒメミミズ成体をスポイトで採集した後、水中に２０〜３０分浮遊しているワムシやアルテミアサイズのイソヒメミミズ幼生を遠���分離機で集め給餌したが、全く嗜好性を示さず、捕食を確認できなかったが、衰弱死が無いということは水槽底部に繁殖した微生物を捕食していたのではないかと推測する。結果、特殊な魚種を除いて、摂餌選択性も良好で好適な国産生物餌料として新たな餌料系列を提供することが期待できることが明らかになった。【００２０】
【表５】
2017108728.tif 000008
【００２１】  図３で示すように、仔稚魚の放流試験のための耳石へ蛍光標識に関しての問題点を解決するため、イソヒメミミズが含有するイソフラビン黄緑色蛍光が体内に蓄積しているかを、イソヒメミミズの給餌期間３０日目でスカシテンジクダイを５匹凍結保存し、摂餌量を正立顕微鏡（蛍光）にて体外から腹部領域を測定したが、蛍光が弱く測定できなかった。そのため、イソヒメミミズを給餌しなかったスカシテンジクダイと３０日間給餌したスカシテンジクダイから耳石をそれぞれ摘出し、二つの検体による蛍光量の相違いを正立顕微鏡（蛍光）にて蛍光量を変えて測定したが、黄緑色蛍光は自家蛍光のみで差異は観察できなかった。イソヒメミミズが含有するイソフラビン黄緑色蛍光は水溶性のため蓄積が出来ないことが考察でき、結果、イソヒメミミズを初期生物飼料として種苗生産された仔稚魚を、放流試験のためテトラサイクリン（ＴＣ）やアリザリンコンプレクソン（ＡＬＣ）等により耳石への蛍光標識を行っても支障がないことが確認できた。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１】  培養器の餌（ワカメ）から壁面に這い上がってきた白い糸くずの様なイソヒメミミズ
【図２】  鶏卵（ゆで卵黄）に群れるイソヒメミミズ
【図３】  少し厚みのある耳石Ａと厚みのない耳石Ｂを同じ蛍光量で測定したが差異は無かった。
【図１】
2017108728.tif 000009
【図２】
2017108728.tif 000010
【図３】
2017108728.tif 000011
【手続補正書】
【提出日】平成28年10月14日(2016.10.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項５】
請求項１，２の生物餌料に対して、不飽和脂肪酸であるＤＨＡ，ＥＰＡを栄養強化させることを目的に、鶏卵の卵黄レシチンが持つ乳化作用を利用して卵黄と魚油を混合した餌料製造方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００７】ミミズの栄養価について検討を行った。伊藤らの家禽会誌２１巻（１９８４）によればミミズの粗蛋白質は魚粉の（６０．１％）とほぼ同等の値（５９．６％）を示し、アルテミアは（５５％）と低い値であった。粗脂肪においては（１１．３％）とアルテミアの（１０％）、魚粉の（９．４％）より高値を表１で示した。ミミズの粗繊維や粗灰分はミミズの消化管内の不消化分に由来しているが、それぞれ１．５８％、および８．７９％と低かった。また、ミミズはＤＨＡを含有しておらずＥＰＡ値も低く栄養強化の必要性が明らかになった。無機物ではカルシウム含量が少なく、他の動物性餌料などと大きな差が見られるが、これはミミズに骨格がないことを反映している。アミノ酸組成は、含硫アミノ酸含量が低いほかは、特に問題は無く、魚類仔稚魚期の餌料資源としてミミズの仲間であるイソヒメミミズは有望であると考えられる。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００８】
【表１】
2017108728.tif 000012
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】ＤＨＡは、淡水魚ではα・リノレン酸からの転換が可能であるが、海水魚では不可能であり、海水魚では淡水魚よりもＤＨＡを強く要求する。種苗の遊泳異常や脊椎の異常は、ＤＨＡの不足が原因の一つと想定されているためイソヒメミミズへの栄養強化を行った。栄養強化方法は、ゆでた鶏卵の卵黄のみを３日間供与したＡと、ゆでた鶏卵の卵黄にフィシュオイル（ＤＨＡ：４６％、ＥＰＡ：３％）を卵黄レシチンが持つ乳化作用を利用して混合させ、３日間供与したＢ，このＡとＢの脂肪酸組成を分析した結果、イソヒメミミズはＤＨＡ，ＥＰＡを取り込み、蓄積することが明らかになった。餌料中のＤＨＡ，ＥＰＡ濃度は、イソヒメミミズ中に蓄積されたＤＨＡ，ＥＰＡ量と、直線的な比例関係となることが表４に示された。栄養強化アルテミアとの栄養素成分の差異は、近畿大学での（２００５年）クロマグロの初期餌料の開発に関する研究中間成果報告でのアルテミア栄養素分析値と比較して考察した。イソヒメミミズの総アミノ酸含量（約１０３９．ｍｇ／ｇ）はアルテミアの総アミノ酸含量（約５２９．７ｍｇ／ｇ）より約２倍も高かった。加えて、アルテミアの必須アミノ酸含量は５０％前後であったが、イソヒメミミズは約６０％前後と高い値を表４で示した。また、卵黄にはリン脂質、アミノ酸、ビタミン、ミネラルが豊富で、加えて不飽和脂肪酸が豊富なフィシュオイルを混合し、栄養強化した餌を供与したイソヒメミミズは、海産魚類仔稚魚期の栄養要求多様性に十分に対応可能な生物餌料と考える。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１７】
【表４】
2017108728.tif 000013