(57)【要約】【課題】胃全摘出後に食欲改善効果、体重増加作用を示す治療用組成物を提供する。【解決手段】  本発明の治療用組成物は、食前においても血中ｇｌｕｃａｇｏｎ−ｌｉｋｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ  １（ＧＬＰ−１）濃度を低下させる所定濃度のＧＬＰ−１低下剤を含む。このＧＬＰ−１低下剤は、六君子湯、ｇｉｎｇｅｒｏｌ、ｈｅｐｔａｍｅｔｈｏｘｙｆｌａｖｏｎｅ、ｉｓｏｌｉｑｕｉｒｉｔｉｇｅｎｉｎ、ｈｅｓｐｅｒｉｄｉｎ、ｇｉｎｇｅｒｉｄｏｎ、ｓｈｏｇａｏｌ、ｐａｃｈｙｍｉｃ  ａｃｉｄ、ｇｌｙｃｙｃｏｕｍａｒｉｎ、ｉｓｏｌｉｑｕｉｒｉｔｉｇｅｎｉｎ、ｄｅｈｙｄｒｏｄｉｎｇｅｒｄｉｏｎ、ｎｏｂｉｌｅｔｉｎ、ｔａｎｇｅｒｅｔｉｎ、ｎａｒｉｎｇｅｎｉｎ、ｌｉｑｕｉｒｉｔｉｇｅｎｉｎ、ｇｌｙｃｙｃｏｕｍａｒｉｎ、ｈｅｓｐｅｒｅｔｉｎ、ソマトスタチン製剤からなる群の一種を含むことを特徴とする。【選択図】図２
2017122068.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
食前においても血中ｇｌｕｃａｇｏｎ−ｌｉｋｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ−１（ＧＬＰ−１）濃度が高い病態において、前記ＧＬＰ−１を低下させる所定量のＧＬＰ−１低下剤を含む
ことを特徴とする治療用組成物。
【請求項２】
前記ＧＬＰ−１低下剤は、
六君子湯、ｇｉｎｇｅｒｏｌ、ｈｅｐｔａｍｅｔｈｏｘｙｆｌａｖｏｎｅ、ｉｓｏｌｉｑｕｉｒｉｔｉｇｅｎｉｎ、ｈｅｓｐｅｒｉｄｉｎ、ｇｉｎｇｅｒｉｄｏｎ、ｓｈｏｇａｏｌ、ｐａｃｈｙｍｉｃ  ａｃｉｄ、ｇｌｙｃｙｃｏｕｍａｒｉｎ、ｉｓｏｌｉｑｕｉｒｉｔｉｇｅｎｉｎ、ｄｅｈｙｄｒｏｄｉｎｇｅｒｄｉｏｎ、ｎｏｂｉｌｅｔｉｎ、ｔａｎｇｅｒｅｔｉｎ、ｎａｒｉｎｇｅｎｉｎ、ｌｉｑｕｉｒｉｔｉｇｅｎｉｎ、ｇｌｙｃｙｃｏｕｍａｒｉｎ、ｈｅｓｐｅｒｅｔｉｎ、ＧＬＰ−１受容体拮抗薬、ソマトスタチン製剤からなる群の一種を含む
ことを特徴とする請求項１に記載の治療用組成物。
【請求項３】
胃又は食道摘出後の食欲不振病態治療用である
ことを特徴とする請求項１又は２に記載の治療用組成物。
【請求項４】
前記ＧＬＰ−１低下剤は、
胃又は食道摘出の手術後、食事開始時又は手術後３日目から投与される
ことを特徴とする請求項３に記載の治療用組成物。
【請求項５】
前記ＧＬＰ−１低下剤の前記所定量は、
胃又は食道摘出の手術後の血中ＧＬＰ−１濃度が、手術前の食前の血中ＧＬＰ−１濃度と同程度となるように調整された投与量である
ことを特徴とする請求項３又は４に記載の治療用組成物。
【請求項６】
神経性食欲不振症、うつ病、抗癌剤投与患者、ストレス性食欲低下、又は高齢者の食欲低下に対する食欲不振病態治療用である
ことを特徴とする請求項１又は２に記載の治療用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、治療用組成物に係り、特に消化管ホルモンに関連する病態に適用される治療用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
胃癌罹患数の多い我が国では、胃切除（摘出）後の体重減少は深刻な問題である。
特に、胃全摘手術を受けた患者では、平均して約１５％の体重減少があり、患者のＱＯＬ（Ｑｕａｌｉｔｙ  ｏｆ  Ｌｉｆｅ）は著しく低下する。体重は術後１か月で著明に減少し、その後、増加することなく５年以上変化しない。
我が国では、ＢＭＩ（Ｂｏｄｙ  Ｍａｓｓ  Ｉｎｄｅｘ）の低下は循環器疾患、悪性腫瘍を含む様々な疾患による死亡リスクを増加すると報告されている。さらに胃癌に対する胃切除後の１５％以上の体重減少は、補助化学療法の継続性を低下させる。
適切な術後体重を維持することは、患者予後向上のため非常に重要である。
【０００３】
ここで、体重減少を防ぐためには、胃を全て切除する胃全摘後に生じる食欲不振の改善が必要である。食欲回復は摂取エネルギー増加につながり、術後患者のＱＯＬを保つ。胃全摘後の食欲不振は、胃貯留能消失が原因とされてきた。しかし、代用胃を作成しても摂食量の増加はわずかであった。近年、胃全摘後にみられる複数の消化管ホルモンの変動が、食欲を低下させると考えられている。現在まで胃全摘後に上昇するコレシストキニン、セロトニン、術後に低下するグレリンをターゲットとした研究が行われてきた。しかし、残念ながら臨床応用に繋がる成果は、いずれも得られていなかった。
【０００４】
一方、六君子湯（以下、「ＲＫＴ」と記載する。）は、日本独自に発展した漢方薬の一種である。六君子湯は経口内服剤であり、ソウジュツ、ハンゲ、ブクリョウ、カンゾウ、タイソウ、ニンジン、チンピ、ショウキョウの８種類の生薬から構成され、各種の治療効果を示す（例えば、ＲＫＴを含むエキスについて、特許文献１を参照。）。
ＲＫＴ自体の主な作用箇所は「胃」であり、胃排出能の亢進により胃腸症状を改善することが知られている。近年、ＲＫＴが抗癌剤投与により低下するグレリンを回復し、食欲不振を改善することが報告され、食欲改善薬として注目されている（例えば、非特許文献１を参照。）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】国際公開第２００４／００６９４５号
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｔａｋｅｄａ  Ｈ他、Ｒｉｋｋｕｎｓｈｉｔｏ，  ａｎ  ｈｅｒｂａｌ  ｍｅｄｉｃｉｎｅ，  ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ  ｃｉｓｐｌａｔｉｎ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ａｎｏｒｅｘｉａ  ｉｎ  ｒａｔｓ  ｖｉａ  ５−ＨＴ２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ、２００８年、Ｊｕｎ  １３４（７）、ｐｐ．２００４−１３．
【非特許文献２】Ｔａｎａｋａ  Ｋ，  Ｕｒｉｔａ  Ｙ，  Ｎａｒａ  Ｋ，  Ｍｉｕｒａ  Ｏ，  Ｓｕｇｉｍｏｔｏ  Ｍ、Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ  Ｊａｐａｎｅｓｅ  ｍｅｄｉｃｉｎｅ  Ｒｉｋｋｕｎｓｈｉｔｏ  ｏｎ  ｐｏｓｔｐｒａｎｄｉａｌ  ｇｌｕｃｏｓｅ  ａｎｄ  ｌｉｐｉｄ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ．  Ｈｅｐａｔｏｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ、２０１１年、Ｊｕｌ−Ａｕｇ  ５８（１０９）、ｐｐ．１１１２−８．
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかしながら、グレリンは胃により産生される。このため、胃癌等で胃を失った胃全摘出後において、又は食道を摘出した際、更に他の食欲不振病態について、ＲＫＴが食欲改善効果、体重増加作用を示すかどうかは分かっていなかった。
【０００８】
本発明は、このような状況に鑑みてなされたものであり、上述の課題を解消することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明の治療用組成物は、食前においても血中ｇｌｕｃａｇｏｎ−ｌｉｋｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ−１（ＧＬＰ−１）濃度が高い病態において、前記ＧＬＰ−１を低下させる所定量のＧＬＰ−１低下剤を含むことを特徴とする。
本発明の治療用組成物は、前記ＧＬＰ−１低下剤は、六君子湯、ｇｉｎｇｅｒｏｌ、ｈｅｐｔａｍｅｔｈｏｘｙｆｌａｖｏｎｅ、ｉｓｏｌｉｑｕｉｒｉｔｉｇｅｎｉｎ、ｈｅｓｐｅｒｉｄｉｎ、ｇｉｎｇｅｒｉｄｏｎ、ｓｈｏｇａｏｌ、ｐａｃｈｙｍｉｃ  ａｃｉｄ、ｇｌｙｃｙｃｏｕｍａｒｉｎ、ｉｓｏｌｉｑｕｉｒｉｔｉｇｅｎｉｎ、ｄｅｈｙｄｒｏｄｉｎｇｅｒｄｉｏｎ、ｎｏｂｉｌｅｔｉｎ、ｔａｎｇｅｒｅｔｉｎ、ｎａｒｉｎｇｅｎｉｎ、ｌｉｑｕｉｒｉｔｉｇｅｎｉｎ、ｇｌｙｃｙｃｏｕｍａｒｉｎ、ｈｅｓｐｅｒｅｔｉｎ、ＧＬＰ−１受容体拮抗薬、ソマトスタチン製剤からなる群の一種を含むことを特徴とする。
本発明の治療用組成物は、胃又は食道摘出後の食欲不振病態治療用であることを特徴とする。
本発明の治療用組成物は、前記ＧＬＰ−１低下剤は、胃又は食道摘出の手術後、食事開始時又は手術後３日目から投与されることを特徴とする。
本発明の治療用組成物は、前記ＧＬＰ−１低下剤の前記所定量は、胃又は食道摘出の手術後の血中ＧＬＰ−１濃度が、手術前の食前の血中ＧＬＰ−１濃度と同程度となるように調整された投与量であることを特徴とする。
本発明の治療用組成物は、神経性食欲不振症、うつ病、抗癌剤投与患者、ストレス性食欲低下、又は高齢者の食欲低下に対する食欲不振病態治療用であることを特徴とする。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、食前においても血中ＧＬＰ−１濃度が高い各種の病態において、当該ＧＬＰ−１を低下させる所定量のＧＬＰ−１低下剤を含ませることで、当該病態を治療できる治療用組成物を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１Ａ】本発明の実施例に係るＲＫＴを術後早期投与した際のラットの累積食物摂取量のグラフである。
【図１Ｂ】本発明の実施例に係るＲＫＴを術後早期投与した際のラットの体重のグラフである。
【図２】本発明の実施例に係るラットの血中活性化型ＧＬＰ−１レベルの変化を示すグラフである。
【図３Ａ】本発明の実施例に係る混合飼料負荷試験におけるラットのＧＬＰ−１濃度を示すグラフである。
【図３Ｂ】本発明の実施例に係る混合飼料負荷試験におけるラットのＧＬＰ−１濃度のＡＵＣ分析結果を示すグラフである。
【図４Ａ】本発明の実施例に係るＧＬＰ−１受容体拮抗薬を術後早期投与した際のラットの累積食物摂取量のグラフである。
【図４Ｂ】本発明の実施例に係るＧＬＰ−１受容体拮抗薬を術後早期投与した際のラットの体重のグラフである。
【図５】本発明の実施例に係るパイロット臨床試験におけるヒトの血中総ＧＬＰ−１レベルの変化を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
＜実施の形態＞
上述したように、胃全摘後の食欲不振、体重減少のメカニズムは未だ不明な点が多く、古くからの未解決問題であり、従来は有効な改善策が無かった。このため、本発明者らは鋭意実験と試験を行い、胃を失った胃全摘出等においても、ＲＫＴを投与することで摂食量増加、体重増加を示すことを見いだした。この際、ＲＫＴは、正常状態では食欲増進効果がなく、特に胃全摘出に係る食欲不振、体重減少について効果があることを見いだした。そして、そのメカニズムについて鋭意研究したところ、胃全摘後の食欲抑制ホルモンである腸ホルモンＧｌｕｃａｇｏｎ−ｌｉｋｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ−１（以下、「ＧＬＰ−１」と記載する。）が空腹時及び食後に高値を示すこと、ＲＫＴはこの上昇を著明に抑制することを明らかにし、発明を完成するに至った。
【００１３】
より詳しく説明すると、ＧＬＰ−１は食欲、胃運動等を制御するホルモンである。そして、ＧＬＰ−１は、インクレチン（ｉｎｃｒｅｔｉｎ）と呼ばれる作用のある、代表的な食欲抑制ホルモンである。健常人にＧＬＰ−１を投与すると用量依存性に、食欲と摂取カロリーを低下させる。さらに、２型糖尿病患者にＧＬＰ−１製剤を投与すると、体重減少をもたらすことが報告されている。ＧＬＰ−１は主に下部小腸に存在するＬ細胞が小腸内の食事刺激を直接的、間接的に感知することで血中へ分泌される。
ここで、本発明者らが後述する実施例で示したように、胃全摘後の早期に、空腹時および食後の血中ＧＬＰ−１が上昇し、摂食量低下、体重減少の一因になっていた。この問題解決のため、本発明者らは、血中ＧＬＰ−１濃度を低下させるようＲＫＴの投薬期間や投与量（所定量）について鋭意実験して、本発明の治療用組成物を完成させた。
【００１４】
具体的には、ラット胃全摘後は、摂食量と体重が減少する。これに対して、本発明の後述する実施例で示すように、胃全摘手術後、３日目からＲＫＴを経口投与すると、統計的有意に摂食量と体重が増加し、投与終了後も効果が持続した。すなわち、本実施形態において、ＲＫＴを術後早期に投与することで、胃全摘後の摂食量低下と体重減少を改善することが可能となった。また、胃全摘後、術後６日目、１０日目は常時の血中ＧＬＰ−１濃度が上昇するが、ＲＫＴを投与するとこのＧＬＰ−１上昇が抑制された。そして、術後１０日目の血中ＧＬＰ−１動態を検討すると、胃全摘後は食後だけでなく、空腹時からすでに血中ＧＬＰ−１が高値を示しており、ＲＫＴを投与すると食前及び食後の血中ＧＬＰ−１上昇が強く抑制された。このように、本発明者らは、ＲＫＴの作用メカニズムの一つとして、胃全摘により上昇する血中ＧＬＰ−１の低下作用があることを明らかにして、この知見を基にした治療用組成物としての使用を確立した。すなわち、ＲＫＴを胃全摘後早期に投与することで、血中ＧＬＰ−１の上昇を抑制し、摂食量と体重を増加させることが可能となる。また、後述の実施例で示す初期的な臨床試験により、ヒト胃全摘患者も術後に空腹時の血中ＧＬＰ−１が上昇することが分かった。すなわち、ヒトでも、手術後の食前血中ＧＬＰ−１の上昇は食欲不振、体重減少等の病態の原因となっており、更に、胃切除後の生活の質（以下ＱＯＬ）を著しく低下させている可能性がある。これに対して、ヒトに対しても、ＲＫＴ等を含む本実施形態のＧＬＰ−１低下剤を早期に所定量で投与することで、摂食量と体重を増加させることができると考えられる。
【００１５】
なお、上述の非特許文献１では、ＲＫＴを投与することによる、血中ＧＬＰ−１濃度の変化は未検討である。また、非特許文献２では、健常人にＲＫＴを投与することで、血中ＧＬＰ−１濃度に有意な影響を与えないと記載されている。
これは、健常人ではＲＫＴ投与で血中ＧＬＰ−１濃度に変化はないものの、本実施形態のように「食前においても血中ＧＬＰ−１濃度が高い病態」に対して、術後早期にＲＫＴを投与すると効果的にＧＬＰ−１濃度を低下させるＧＬＰ−１低下剤として機能させることができることを示している。
すなわち、本発明の実施の形態に係る治療用組成物は、胃切除後に上昇する血中ＧＬＰ−１をＲＫＴが抑制し、食欲と体重減少を改善することを示しており、非特許文献１の技術とは対象や目的が大きく異なっている。つまり、本発明の実施の形態に係る治療用組成物は、胃切除後の食前ＧＬＰ−１の異常上昇により、生体が負の影響を受けている状態に対して、ＲＫＴが血中ＧＬＰ−１の正常化に作用することで治療効果を発揮する。また、ＲＫＴは、健常人にはＧＬＰ−１低下剤としての作用をしないことから、血中ＧＬＰ−１低下による過食等の副作用の発生も、効果的に抑えることができる。
【００１６】
以下、本発明の実施の形態に係る治療用組成物の構成及び効果について、具体的且つ詳細に説明する。
【００１７】
本発明の実施の形態に係る治療用組成物は、食前においても血中ＧＬＰ−１濃度が高い病態において、ＧＬＰ−１を低下させる所定量（投与量）のＧＬＰ−１低下剤を含むことを特徴とする。
本発明者らは、下記の実施例で示すように、胃全摘後は、食前であってもＧＬＰ−１が上昇することを示した。すなわち、本発明者らは、胃全摘の手術後１０日目という早期の時点で、胃切除群はＳｈａｍ群と比較して、空腹時および食後の血中ＧＬＰ−１が高値を示すことを明らかにした。「胃全摘」後に、空腹時の血中ＧＬＰ−１が上昇することは、従来は知られておらず、本発明者らが新規に同定したものである。上述したように、ＧＬＰ−１は、摂食を減少させる作用があるため、食前（空腹時）のＧＬＰ−１を低下させる所定量のＧＬＰ−１低下剤を投与することで、食欲を昂進させ、体重減少を抑制させることが可能となる。
【００１８】
本実施形態の治療用組成物の機序について説明する。胃全摘後の再建は、消化管をバイパスしているため、食後は未消化な食事内容が急速に回腸に流れ込み、Ｌ細胞を刺激することで多くのＧＬＰ−１が血中に分泌されるという機序が考えられる。Ｒｏｕｘ  Ｙ  ｇａｓｔｒｉｃ  ｂｙｐａｓｓなどの肥満手術を行うことで食後のＧＬＰ−１が上昇することが分かっており、胃全摘後も同様の機序が当てはまることが推察される。
さらに、胃全摘後は、空腹時（食前）においても、血中ＧＬＰ−１濃度が上昇するが、この機序は不明である。可能性として、胃全摘後に発生した特有のシグナルが、食事の有無に関わらず、Ｌ細胞を刺激し、ＧＬＰ−１が過分泌される機序が考えられる。たとえば、胃はソマトスタチンを産生する内分泌器官であり、胃を失うことで血中ソマトスタチン値は減少する可能性がある。また、胃切除後は血中セロトニン値が上昇するとされる。このようなシグナルの変化によってＬ細胞の活動が高まり、食前の血中ＧＬＰ−１値が上昇する可能性がある。
【００１９】
また、従来、空腹時の血中ＧＬＰ−１の役割については、知られていなかった。
ここで、本発明者らは、後述する実施例において、ラット胃全摘後だけでなく、ヒト胃全摘後においても術後早期に空腹時ＧＬＰ−１が上昇することを明らかにした。このように、食後だけでなく空腹時の内因性ＧＬＰ−１の上昇も摂食量低下、体重減少に関与すると考えられる。
【００２０】
具体的には、下記の実施例で示したように、予備的な臨床試験を行ったところ、ヒト胃全摘後は術後１日目から血中総ＧＬＰ−１が上昇することが分かった。これについては、例数は限られているものの、参加者全員で術前値より上昇しており、信頼性の高い結果と考えられた。測定したＧＬＰ−１は空腹時の値であり、ラットで得られた結果と一致した。
これは、胃全摘術を受けた患者において、術後早期の血中ＧＬＰ−１上昇が食欲不振と体重減少に関与することを示唆している。
これに対して、本実施形態の治療用組成物として、食前の血中ＧＬＰ−１を低下させる所定量のＧＬＰ−１低下剤を投与することで、摂食量を増進させ、体重減少を抑制することができる。すなわち、本実施形態のＧＬＰ−１低下剤を、術後早い時期から内服することにより、血中ＧＬＰ−１低下を介して、治療効果を発揮させることができる。
【００２１】
なお、血中に過分泌されたＧＬＰ−１は２つの経路で摂食を抑制すると考えられる。一つ目の経路は、脳内に対する直接作用である。ＧＬＰ−１は比較的低分子であり、血液脳関門を通過すると言われている。二つ目の経路はＧＬＰ−１が腹部迷走神経求心路を介して、摂食抑制シグナルを中枢へ伝達する経路である。Ｌ細胞から血中に分泌されたＧＬＰ−１はＤｉｐｅｐｔｉｄｙｌ  ｐｅｐｔｉｄａｓｅ−ＩＶにより速やかに不活化されその作用を失うことから、迷走神経求心路の役割が以前から指摘されている。
このため、本実施形態の治療用組成物として、食前の血中ＧＬＰ−１を低下させる所定量のＧＬＰ−１低下剤を投与することで、迷走神経求心路経由又は血液脳関門経由によるＧＬＰ−１の中枢神経系に拮抗して、摂食量を増進させ、体重減少を抑制することが期待できる。
【００２２】
また、本発明の実施の形態に係るＧＬＰ−１低下剤は、ＲＫＴ、ｇｉｎｇｅｒｏｌ、ｈｅｐｔａｍｅｔｈｏｘｙｆｌａｖｏｎｅ、ｉｓｏｌｉｑｕｉｒｉｔｉｇｅｎｉｎ、ｈｅｓｐｅｒｉｄｉｎ、ｇｉｎｇｅｒｉｄｏｎ、ｓｈｏｇａｏｌ、ｐａｃｈｙｍｉｃ  ａｃｉｄ、ｇｌｙｃｙｃｏｕｍａｒｉｎ、ｉｓｏｌｉｑｕｉｒｉｔｉｇｅｎｉｎ、ｄｅｈｙｄｒｏｄｉｎｇｅｒｄｉｏｎ、ｎｏｂｉｌｅｔｉｎ、ｔａｎｇｅｒｅｔｉｎ、ｎａｒｉｎｇｅｎｉｎ、ｌｉｑｕｉｒｉｔｉｇｅｎｉｎ、ｇｌｙｃｙｃｏｕｍａｒｉｎ、ｈｅｓｐｅｒｅｔｉｎ、ＧＬＰ−１受容体拮抗薬、ソマトスタチン製剤からなる群の一種を含む、食前血中ＧＬＰ−１濃度低下剤であることを特徴とする。
【００２３】
後述した実施例に示したように、本発明の実施の形態に係るＧＬＰ−１濃度低下剤としては、ＲＫＴが好適に用いられる。ＲＫＴは、複数の生薬を混合した組成物であり、その中の単独の成分、又は、いずれかの成分の組み合わせにより、本実施形態のＧＬＰ−１低下剤として作用する。すなわち、ＲＫＴは、正常状態のヒトのＧＬＰ−１には作用せず、胃全摘等で食前及び食後の血中ＧＬＰ−１濃度が増加する病態の場合のみ本実施形態のＧＬＰ−１低下剤として作用する。この本実施形態のＧＬＰ−１低下剤として作用させるＲＫＴの有効成分としては、ｇｉｎｇｅｒｏｌ、ｈｅｐｔａｍｅｔｈｏｘｙｆｌａｖｏｎｅ、ｉｓｏｌｉｑｕｉｒｉｔｉｇｅｎｉｎ、ｈｅｓｐｅｒｉｄｉｎ、ｇｉｎｇｅｒｉｄｏｎ、ｓｈｏｇａｏｌ、ｐａｃｈｙｍｉｃ  ａｃｉｄ、ｇｌｙｃｙｃｏｕｍａｒｉｎ、ｉｓｏｌｉｑｕｉｒｉｔｉｇｅｎｉｎ、ｄｅｈｙｄｒｏｄｉｎｇｅｒｄｉｏｎ、ｎｏｂｉｌｅｔｉｎ、ｔａｎｇｅｒｅｔｉｎ、ｎａｒｉｎｇｅｎｉｎ、ｌｉｑｕｉｒｉｔｉｇｅｎｉｎ、ｇｌｙｃｙｃｏｕｍａｒｉｎ、ｈｅｓｐｅｒｅｔｉｎ等と、これらの群の一種を含む組み合わせが用いられる。
【００２４】
また、本発明の実施の形態に係るＧＬＰ−１低下剤として、ＧＬＰ−１受容体拮抗薬（アンタゴニスト）を用いることも可能である。後述する実施例では、胃全摘後早期に上昇する血中ＧＬＰ−１が、摂食量と体重にどのような影響を与えるかを検討するため、一例として、ＧＬＰ−１受容体に対し非常に特異性の高い拮抗薬であるＥｘｅｎｄｉｎ（９−３９）を、浸透性ミニポンプにより術後３日目から皮下投与する実験を行っている。この実施例の結果では、胃全摘群と比較して、胃全摘＋Ｅｘｅｎｄｉｎ（９−３９）投与群は、統計的に有意に摂食量と体重が増加した。一方でＳｈａｍ群（コントロール）では、投与の有無で変化を認めなかった。このように、ＧＬＰ−１受容体拮抗薬も、本実施形態の胃全摘後等における食前血中ＧＬＰ−１濃度上昇の作用を低下させる拮抗剤として用いることが可能である。
【００２５】
また、本発明の実施の形態に係るＧＬＰ−１低下剤として、各種ソマトスタチンのアナログを含むソマトスタチン製剤を用いることも可能である。ソマトスタチンは、脳の視床下部、膵臓のランゲルハンス島、消化管等から分泌されるホルモンである。ソマトスタチンは、消化管からのガストリン、血管作動性腸ポリペプチド（ＶＩＰ）に加え、ＧＬＰ−１の分泌を抑えることが知られている。なお、ソマトスタチン製剤は、後述するように、副作用があるため、本実施形態の食前血中ＧＬＰ−１濃度低下剤として用いる場合は、通常のドーズよりも少なく投与されることが好適である。
【００２６】
なお、本実施形態のＧＬＰ−１受容体拮抗薬は、各種化学合成された比較的分子量の少ない化合物でもよいし、ＧＬＰ−１受容体をブロックする抗体等であってもよい。この抗体は、ポリクローナル抗体でも、モノクローナル抗体でも、ＶＨ領域やＶＬ領域のみ合成された抗体、ＶＨ領域や接着部位だけ合成された抗体様ペプチド等であってもよい。
また、本実施形態のＧＬＰ−１濃度低下剤として、ＧＬＰ−１の産生を減少させる各種ヌクレオチド、ＰＮＡ、タンパク等を用いてもよい。
また、本実施形態のＧＬＰ−１濃度低下剤として、上述の小腸Ｌ細胞の刺激を減少させ、ＧＬＰ−１の放出を抑えるような各種化合物を用いることも可能である。
また、胃全摘後におけるＲＫＴの食欲改善効果は腸内細菌叢の変化を介する可能性もある。このため、腸内細菌のバランスを変化させ、結果としてＧＬＰ−１の放出を抑えるような組成物を、本実施形態のＧＬＰ−１濃度低下剤として用いることも可能である。
【００２７】
また、本実施形態のＧＬＰ−１濃度低下剤の早期投与は、後述する実施例に示したように、胃全摘後における空腹時及び食後の血中ＧＬＰ−１上昇を強く抑制することで、摂食量と体重を増加させる。ＲＫＴはＳｈａｍ群の血中ＧＬＰ−１濃度には影響しないことから、Ｌ細胞に対する直接作用というよりはむしろ、胃全摘術により特異的に発生したＬ細胞へのシグナルを調節していることが推察される。この仮説に従うと、ＲＫＴはＧＬＰ−１分泌だけを抑制しているわけではなく、Ｌ細胞から分泌される他のホルモン、例えばＧＬＰ−２やペプチドＹＹ（ＰＹＹ）の分泌も低下させる可能性がある。ＧＬＰ−２は食欲抑制に関与する可能性が報告されている。ＰＹＹは食欲抑制作用、体重減少作用をもち、さらに腸管運動を抑制するとされる。
このため、本実施形態のＧＬＰ−１濃度低下剤として、ＧＬＰ−１に加えてこれら複数の消化管ホルモンに係るシグナルを調節する薬物を選択することで、より効果的に、胃全摘後の食欲不振、体重減少を抑制することができる。
【００２８】
また、本発明の実施の形態に係る治療用組成物の治療対象としては、摂食障害や痩身による体力低下に関する各種疾病の病態に用いることができる。
具体的には、本発明の実施の形態に係る治療用組成物は、胃又は食道全摘出後の食欲不振病態治療用に用いることが可能である。これに加えて、胃部分切除術、食道切除術、その他の消化器外科手術、神経性食欲不振症等で血中ＧＬＰ−１濃度が高値になることが想定されるため、これらの食欲不振、体重減少、消化器症状、嘔気、嘔吐、低血糖症状等の原因となっている疾患についても用いてもよい。また、うつ病、抗癌剤投与患者、ストレス性食欲低下、又は高齢者に対する食欲不振病態治療にも用いることができる。
これら幅広い疾患群に対して本実施形態の治療用組成物を投与することで食前でも高くなっている血中ＧＬＰ−１濃度が調節され、病態を改善させることができる。すなわち、本実施形態の治療用組成物により、術後、抗がん剤使用、高齢者の食欲低下等に伴うＱＯＬ低下を改善することができる。
【００２９】
また、本発明の実施の形態に係る治療用組成物は、ＧＬＰ−１低下剤が胃又は食道の摘出手術後の食欲不振病態治療用に用いられる際、例えば、胃又は食道摘出の手術後、３日目から１４日目の間に投与されることを特徴とする。
具体的には、後述の実施例で示すように、ラットの実験において、胃全摘後は摂食量と体重が減少した。これに対し、術後３日目からＲＫＴを投与すると、有意に摂食量と体重が増加し、投与終了後も効果が持続した。胃全摘後、術後６日目、１０日目は、通常時における血中ＧＬＰ−１が上昇した。一方、ＲＫＴを投与するとこのＧＬＰ−１上昇が抑制された。また、術後１０日目に食事負荷試験を行い、血中ＧＬＰ−１動態を検討すると、胃全摘後は食後だけでなく、空腹時からすでに血中ＧＬＰ−１が高値を示すことが分かった。そして、ＲＫＴを投与するとこのＧＬＰ−１上昇が強く抑制された。さらに胃全摘後、術後３日目からＧＬＰ−１受容体拮抗薬を投与すると、有意に摂食量と体重が増加し、ＲＫＴの効果を模倣した。
【００３０】
これらの結果から、本実施形態のＧＬＰ−１低下剤は、胃全摘後３日目等の特定期間経過後、又は食事摂取可能になる時点等の「早期」に投与することで、血中ＧＬＰ−１の上昇を抑制し、摂食量と体重を増加することが可能となる。さらに、上述したように、胃癌患者に対する胃全摘後において、食前（空腹時）血中ＧＬＰ−１が上昇することが分かり、本研究でラットから得られた知見は、ヒトへ応用可能である。
近年では、胃全摘後の早期の経口食事摂取は安全に実施できると考えられており、更に、術後合併症を減少させる可能性があることから、術後食の開始時期が早くなる傾向にある。これに従うと、胃全摘術後の最初の食事開始時や、１〜３日目からの「早期」から本実施形態のＧＬＰ−１低下剤を内服することの抵抗感は少ないため、早期投与が可能である。
【００３１】
なお、本発明者らの追加実験（図示せず）においては、胃全摘手術後２４日目の胃全摘群のラットでは、空腹時ばかりでなく食後もＧＬＰ−１の上昇が鈍くなり、Ｓｈａｍ群（コントロール）との有意な差は消失していた。これは、詳細な機序は不明であるが、術後後期になると何らかの代償機転が働いて、ＧＬＰ−１濃度が正常化に向かったものと考えられる。さらに、この時期はＧＬＰ−１の食欲や体重におよぼす影響は減弱している可能性がある。本発明者らの実験によると、術後１７日目からＲＫＴを投与しても食欲や体重の改善がみられなかったが、これは、このタイミングでは、主な治療標的であるＧＬＰ−１の血中濃度が上昇していないことが原因の一つとして考えられる。すなわち、ＲＫＴは胃全摘後の早期にみられる生体内の変化に作用している。
よって、本実施形態のＧＬＰ−１低下剤は、胃全摘後、早期に治療介入として投与し、摂食量低下と体重減少を抑制することで、長期的な予後を向上させることができる。
【００３２】
また、本実施形態のＧＬＰ−１低下剤は、早期投与で効果を発揮した後、投与後のリバウンドがないことを特徴とする。
ここで、後述する実施例で示すように、ＲＫＴは胃全摘後、３日目からという早期投与を行うことで摂食量と体重を増加させることができる。この際、ＲＫＴは、１４日間の投与終了後であっても、最低２週間はリバウンド現象がなく、摂食量増加と体重増加が維持された。
このため、本実施形態のＧＬＰ−１低下剤は、胃全摘等の後、早期に投与することで、より好適に食前ＧＬＰ−１上昇を強く抑制させ、食欲不振病態を改善させ、これを維持することができる。すなわち、本実施形態の治療用組成物を短期間、内服することで、長期的に食欲と体重の回復が維持できることが期待でき、患者にとって、ＱＯＬ向上や寿命延長を含めて大きな利益となる。
【００３３】
また、本発明の実施の形態に係る治療用組成物は、ＧＬＰ−１低下剤が胃又は食道の摘出手術後の食欲不振病態治療用に用いられる場合、ＧＬＰ−１低下剤の所定濃度は、胃又は食道摘出の手術後の血中ＧＬＰ−１濃度が、手術前の食前の血中ＧＬＰ−１濃度と同程度となるように調整された濃度であることを特徴とする。
具体的には、下記の実施例で示すように、本実施形態のＧＬＰ−１低下剤としてＲＫＴを用いる場合、ＲＫＴは生薬であるため、ラットには１．２％ｗｔ／ｖｏｌの濃度で飲用水に混合し、自由に飲むことが可能な状態で投与された。この状態で、術後血中ＧＬＰ−１を低下させることができたため、ヒトにおいても上限を設定せずに適宜投与可能と考えられる。本実施形態のＧＬＰ−１低下剤の投与量の下限としては、手術後の食前血中ＧＬＰ−１濃度が、手術前と同等の水準、例えば、下記の実施例では２０〜３５ｐｍｏｌ／Ｌに近づけるように、適宜調整して投与することが可能である。この際に、採血時に血中ＧＬＰ−１濃度を測定して、適切量を調整してもよい。
【００３４】
また、本実施形態のＧＬＰ−１低下剤として、ソマトスタチン製剤を用いる場合、インスリンや成長ホルモンの分泌抑制及び消化管機能への影響等の副作用があるため、これらが現れないよう、すなわち、通常投与よりも低いドーズで投与することが可能である。また、ソマトスタチン製剤は、皮下注射を継続する必要があるため、浸透性ミニポンプ等を用いて所定の投与量で投与されてもよい。
また、本実施形態のＧＬＰ−１低下剤が神経性食欲不振症、うつ病、抗癌剤投与患者、ストレス性食欲低下、又は高齢者に対する食欲不振病態治療用に用いられる場合は、適宜必要な血中濃度になるように用いられる。この際、血中ＧＬＰ−１上昇に伴う胃運動抑制、腹部膨満、嘔気嘔吐等の改善への適用できる最低限の濃度を用いるように、調整しながら投与することも可能である。
【００３５】
また、本発明の実施の形態に係る治療用組成物を上述の治療に用いるために、投与間隔及び投与量は、疾患の状況、さらに対象の状態などの種々の条件に応じて適宜選択及び変更することが可能である。
つまり、本実施形態に係る治療用組成物の１回の投与量及び投与回数は、投与の目的により、さらに患者の年齢及び体重、症状及び疾患の重篤度などの種々の条件に応じて適宜選択及び変更することが可能である。
投与回数及び期間は、１日１〜３回、約２〜４週間程度投与して状態をモニターし、その状態により再度あるいは繰り返し投与を行ってもよい。
【００３６】
また、本発明の実施の形態に係る治療用組成物の有効成分を時間的に濃度が変化するようにタイミングを調整して提供することも可能である。これにより、患者の意志で任意の間隔で食欲を調整できる。つまり、食事のタイミングを自在に調節して、各種疾病に適宜用いることができる。このため、抗癌剤の副作用等により食欲が低下している患者が、病院食を提供する間隔で食欲がでるように調整することもできる。
このため、本実施形態に係るＧＬＰ−１低下剤は、副作用が少なく、健康食品や動物用飼料としても健康被害がなく用いることも期待できる。
【００３７】
また、本発明の実施の形態に係る治療用組成物は、任意の製剤上許容しうる担体（例えば、生理食塩水、補助薬を含む等張液、例えばＤ−ソルビトール、Ｄ−マンノース、Ｄ−マンニトール、塩化ナトリウム等が挙げられ、適当な溶解補助剤、例えばアルコール、具体的にはエタノール、ポリアルコール、例えばプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、非イオン性界面活性剤、例えばポリソルベート８０（ＴＭ）、ＨＣＯ−５０等を挙げることができるが、それらに限定されない）と共に投与することができる。また、適切な賦形剤等を含んでもよい。
【００３８】
また、本発明の実施の形態に係る治療用組成物は、製剤上許容しうる担体を調製するために、適切な薬学的に許容可能なキャリアを含み得る。
このキャリアとしては、シリコーン、コラーゲン、ゼラチン等の生体親和性材料を含んでもよい。あるいはまた、種々の乳濁液であってもよい。
さらには、例えば、希釈剤、香料、防腐剤、賦形剤、崩壊剤、滑沢剤、結合剤、乳化剤、可塑剤等から選択される群の１種以上の製剤用添加物を含有させてもよい。
また、本発明の実施の形態に係る治療用組成物は、特許文献１に記載されたようなエキス製品として提供することも可能である。
【００３９】
本発明の実施の形態に係る食欲亢進剤は、経口投与のための投与に適した投与形態において、当該分野で周知の製剤上許容しうる担体を用いて処方され得る。
本発明の実施の形態に係る医薬組成物の投与経路は、特に限定されないが、経口的又は非経口的に投与することが好ましい。
非経口投与としては、例えば、静脈内、動脈内、皮下、真皮内、筋肉内又は腹腔内の投与が挙げられる。この場合、浸透圧ミニポンプ等を用いて、特定期間投与することも可能である。
【００４０】
本発明の実施の形態に係る治療用組成物は、脊椎動物を治療対象としている。脊椎動物は特に限定されるものではなく、例えば、ヒト、家畜動物種、野生動物を含む。
このため、本発明の実施の形態に係る治療用組成物は、ヒトの治療の他に、動物の治療、家畜の発育増進等の対象とすることができる。
また、疾病の予防や健康増進のため、健康食品のような食物、動物用の飼料、又は食餌に含ませることもできる。
【００４１】
なお、本発明の実施の形態に係る治療用組成物は、他の組成物等と併用することも可能である。また、他の組成物と同時に本発明の組成物を投与してもよく、また間隔を空けて投与してもよいが、その投与順序は特に問わない。
【００４２】
また、本発明の実施の形態において、疾患が改善または軽減される期間は特に限定されないが、一時的な改善または軽減であってもよいし、一定期間の改善または軽減であってもよい。
【実施例】
【００４３】
以下で、本発明の実施の形態に係る治療用組成物について、具体的な実験を基にして、実施例としてさらに具体的に説明する。しかしながら、この実施例は一例にすぎず、これに限定されるものではない。
【００４４】
〔実験手法、材料、方法〕
（動物）
Ｗｉｓｔａｒラット雄、５週齢を納入した（ＣＬＥＡ  Ｊａｐａｎ、東京、日本）。１２時間毎の明暗サイクル（７：３０〜１９：３０）、コントロールされた室温の環境下で飼育した。通常の餌（ＣＥ−２、ＣＬＥＡ  Ｊａｐａｎ、東京、日本）と飲水ボトルで水を自由に（ａｄ  ｌｉｂ）与えた。手術前は１週間の慣らし飼育を行った。手術前には餌の制限はしなかった。自治医科大学の動物実験委員会の承認を得て、実験を行った。
【００４５】
（手術）
６週齢、体重１５５〜２０５ｇのラットに手術を行った。麻酔はａｖｅｒｔｉｎを２ｍｌ／ｂｏｄｙを腹腔内投与した後、適宜追加投与を行った。上腹部正中切開で開腹し、十二指腸を結紮切離し、食道胃接合部で食道を切離後、胃を全摘出した。消化管の再建はＲｏｕｘ−ｅｎ−Ｙ法で行った。なお、Ｒｏｕｘ−ｅｎ−Ｙ法は、ヒトとほぼ同様の手術手技で行うためヒトへの外挿性が高い。トライツ靭帯から２〜３ｃｍの空腸を切離・挙上し、食道空腸吻合を７−０  ＰＤＳ  ｓｕｔｕｒｅ（ＥＴＨＩＣＯＮ社、米国）を用いて、端側結節縫合で行った。Ｙ脚の吻合は７−０  ＰＤＳを用いて食道空腸吻合から４〜５ｃｍ肛門側の空腸に端側結節縫合で行った。腹壁は５−０  ＥＴＨＩＬＯＮ  ｓｕｔｕｒｅ（ＥＴＨＩＣＯＮ社、米国）を用いて２層連続縫合を行って閉腹した。Ｓｈａｍ（偽手術）は、上腹部正中切開で開腹し、胃と小腸を優しく刺激した後閉腹した。術直後から術後２日目までは水のみを与え、術後３日目から通常の餌を与えた。術後に鎮痛剤や抗生剤は使用しなかった。
【００４６】
（ＲＫＴ処理）
六君子湯（ＲＫＴ、Ｔｓｕｍｕｒａ  Ｃｏ．、東京、日本）は８種の生薬（Ａｔｒａｃｔｙｌｏｄｉｓ  ｌａｎｃｅａｅ  ｒｈｉｚｏｍａ、Ｇｉｎｓｅｎｇ  ｒａｄｉｘ、Ｐｉｎｅｌｌｉａｅ  ｔｕｂｅｒ、Ｈｏｅｌｅｎ、Ｚｉｚｙｐｈｉ  ｆｒｕｃｔｕｓ、Ａｕｒａｎｔｉｉ  ｎｏｂｉｌｉｓ  ｐｅｒｉｃａｒｐｉｕｍ、Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａｅ  ｒａｄｉｘ，  ａｎｄ  Ｚｉｎｇｉｂｅｒｉｓ  ｒｈｉｚｏｍｅ）から得られた熱水抽出物をスプレードライヤーで乾燥させ、エキス粉末としたものである。
ＲＫＴは蒸留水に溶解し、１．２％  ｗｅｉｇｈｔ／ｖｏｌｕｍｅに調整し、遮光したボトルで自由に飲水投与し、毎日の用事調整を行った。ラットは、ランダムに４種類のグループ：Ｓｈａｍ（偽手術）群、Ｓｈａｍ＋ＲＫＴ投与群、胃全摘群、胃全摘＋ＲＫＴ投与群に分けられた。投与期間は、術後３日目から１４日間とした。ＲＫＴを投与しないコントロールとしては、蒸留水を投与した。
また、ＲＫＴ投与による体重減少改善率を以下の式（１）で算出した。
体重減少改善率（％）  ＝  （胃全摘＋ＲＫＴ投与群の平均体重  −  胃全摘群の平均体重）／（Ｓｈａｍ群の平均体重  −  胃全摘群の平均体重）＊１００  ……  式（１）
【００４７】
（血漿採取）
６週齢のコントロール用のラットに対し、ａｖｅｒｔｉｎ腹腔内投与で全身麻酔を行い、下大静脈から血液を採取した。各群のラットに対し、術後６日目、尾静脈から採血を行った。術後１０日目は、トリブロモエタノールの腹腔内投与で全身麻酔を行い、下大静脈から血液を採取した。採血前の絶食はせず、明期に採血を行った。採血の前に、食餌は与えなかった。
【００４８】
（食餌負荷テスト）
術後１０日目と２４日目に行った。一晩絶食を行ったラットへ、Ｅｎｓｕｒｅ  Ｈ（６６％  ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ、１７％  ｐｒｏｔｅｉｎ、１７％  ｆａｔ；Ａｂｂｏｔｔ  Ｊａｐａｎ、東京、日本）を０．５ｍｌ／体重１００ｇ（０．７５ｋｃａｌ）胃管を用いて経口投与した。投与前（０分）、投与３０分後、６０分後、１２０分後に尾静脈から血液を採取した。血糖値は、血糖測定器で測定した。実験終了後に、通常食を開始した。
【００４９】
（活性型ＧＬＰ−１、アシル化グレリン、インスリン濃度の測定）
採取した血液はヘパリン添加サンプリングチューブへ入れた後、ｉｃｅ  ｂｏｘに乗せ、速やかに遠心分離器にかけ（１５０００回転、２分）、血漿成分を採取した。活性型ＧＬＰ−１（ＧＬＰ−１（７−３６））用検体には１００μｍｏｌ／Ｌに調整したＤＰＰ４阻害剤（Ｖｉｌｄａｇｌｉｐｔｉｎ）を血漿の１／１０量をいれた。グレリン用検体には血漿の１／１０量のＨＣｌを加えた。検体は測定に供するまで冷凍庫内に−８０℃で保存した。Ａｃｔｉｖｅ  ＧＬＰ−１はＧＬＰ−１（Ａｃｔｉｖｅ）ＥＬＩＳＡ  ＫＩＴ（ＡＫＭＧＰ−０１１、Ｓｈｉｂａｙａｇｉ社、群馬県、日本）を用いて測定した。本キットで使用される抗体はＲａｔ  ＧＬＰ−１（７−３６）に対し１００％の交差性、ＧＬＰ−１（７−３７）に対し＜０．１％の交差性をもつモノクローナル抗体である。アシル化（Ａｃｙｌａｔｅｄ）グレリンはＡｃｔｉｖｅ  グレリン  ＥＬＩＳＡ  ｋｉｔ（Ｍｉｔｓｕｂｉｓｈｉ  Ｋａｇａｋｕ  Ｉａｔｒｏｎ、東京、日本）を用いて測定した。インスリンはＥＬＩＳＡ  ｋｉｔ  （Ｍｏｒｉｎａｇａ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ、横浜、日本）を用いて測定した。
【００５０】
（皮下Ｅｘｅｎｄｉｎ（９−３９）投与）
Ｅｘｅｎｄｉｎ（９−３９）（Ａｂｇｅｎｔ社、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、米国）は、ＧＬＰ−１レセプターのアゴニストであり、本実施例で評価に用いた。手術から３日後、食餌を開始する前に、ラットはランダムに４種類のグループ：Ｓｈａｍ群、Ｓｈａｍ＋Ｅｘｅｎｄｉｎ（９−３９）投与群、胃全摘群、胃全摘＋Ｅｘｅｎｄｉｎ（９−３９）投与群に分けられた。Ｅｘｅｎｄｉｎ（９−３９）は、蒸留水で溶解し、浸透圧ミニポンプ（Ａｌｚｅｔ  ｍｉｎｉ−ｏｓｍｏｔｉｃ  ｐｕｍｐ  ｍｏｄｅｌ  ２００２，  Ｄｕｒｅｃｔ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｃｕｐｅｒｔｉｎｏ、カリフォルニア州、米国）に充填した。このポンプは溶液を１４日間、持続投与する。胃全摘群に対し０．４ｍｇのＥｘｅｎｄｉｎ（９−３９）を、Ｓｈａｍ群に対し０．５ｍｇのＥｘｅｎｄｉｎ（９−３９）を各々蒸留水に溶解し、ミニポンプへ充填した。各コントロール群に対し蒸留水をミニポンプへ充填した。術後３日目、餌を与える前に植え込み手術を行った。麻酔はａｖｅｒｔｉｎを１ｍｌ／ｂｏｄｙを腹腔内投与し導入した。後頸部に切開をおき、皮下を剥離してミニポンプを植え込んだ。皮膚は５−０  ＥＴＨＩＬＯＮ  ｓｕｔｕｒｅを用いて連続縫合閉鎖した。手術後に通常食を開始した。
【００５１】
（臨床試験）
自治医科大学附属病院で２０１３年４月から２０１４年１２月まで、胃全摘を行われた患者にこの研究へ参加してもらった。選択基準は（１）胃癌に対して治癒切除が可能な症例（２）胃全摘術を行う症例（３）術前化学療法を行われていない症例（４）年齢が２０〜８０歳である（５）Ｅａｓｔｅｒｎ  Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  Ｇｒｏｕｐ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  Ｓｔａｔｕｓ  ０〜１の症例（６）臓器機能が保たれている症例（７）本研究について本人からインフォームド・コンセントを受けることができる症例とした。除外基準は（１）腫瘍により食事摂取量が減少している症例（２）同時性あるいは異時性重複癌の症例（３）出血傾向のある症例（４）糖尿病で血糖コントロールが不良な症例（５）ステロイド剤を処方されている症例（６）６か月以内に不安定狭心症あるいは心筋梗塞を発症した症例（７）酸素投与を必要とする肺疾患がある症例（８）妊娠中・授乳中あるいは妊娠を予定している女性とした。手術当日朝、術後１日目朝の空腹時に静脈血を採血した。術後３〜４日目に経口摂取を開始した。得られた血液はＥＤＴＡ入りの容器に回収し、遠心分離を１０００Ｇで３０分行い、血漿成分を回収し測定に供するまで冷蔵庫内に−８０℃で保存した。その後、Ｔｏｔａｌ  ＧＬＰ−１をＧｌｕｃａｇｏｎ−Ｌｉｋｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ−１  （ＧＬＰ−１）  Ｔｏｔａｌ  ＥＬＩＳＡ  ＫＩＴ  （ＥＭＤ  Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、米国）で測定した。本キットで使用される抗体は、ＧＬＰ−１（７−３６）と、ＧＬＰ−１（９−３６）とを測定する。この研究は自治医科大学の臨床研究倫理審査委員会の承認を得て行われた（ｐｅｒｍｉｔ  ｎｏ．  Ａ１４−０５２）。参加したすべての患者から署名によるインフォームド・コンセントを得た。この臨床試験はＵＭＩＮ（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｈｏｓｐｉｔａｌ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  Ｎｅｔｗｏｒｋ  Ｃｅｎｔｅｒ、日本）に登録した（ＵＭＩＮ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｔｒｉａｌｓ  Ｒｅｇｉｓｔｒｙ  ｎｕｍｂｅｒ，  ＵＭＩＮ００００１０５６８）。
【００５２】
（統計解析）
すべての測定値は平均値±ＳＥＭで標記した。以下の統計処理を適切な場面で用いた（Ｐａｉｒｅｄ  ｏｒ  ｕｎｐａｉｒｅｄ  ｔｗｏ−ｔａｉｌｅｄ  ｔ−ｔｅｓｔ、Ｏｎｅ−ｗａｙ  ｏｒ  ｔｗｏ  ｗａｙ  ＡＮＯＶＡ  （ｐｏｓｔ−ｈｏｃ  ｔｅｓｔ  ｉｓ  ｔｕｋｅｙ−ｋｒａｍｅｒ））。統計ソフトはＰｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ社）を使用した。Ｐ＜０．０５で有意差ありとした。
【００５３】
〔結果〕
ラットの胃全摘出後に、２１日間の累積食物摂取が測定され、又、手術後の２８日の間の体重も測定された。ＲＫＴ（１．２％の重量（ｗｔ）／体積（ｖｏｌ））が、術後の３日目から１４日の間、飲料用水中に添加された。
図１Ａ、図１Ｂに、この結果を示す。
【００５４】
図１Ａ、図１Ｂとも、横軸は手術後の経過日数（術後日数）を示す。図１Ａの縦軸は、累積食物摂取量（グラム）を示す。図１Ｂの縦軸は、体重（グラム）を示す。
ラット胃全摘後は摂食量と体重が減少する。これに対し、術後３日目からＲＫＴを投与すると、有意に摂食量と体重が増加し、投与終了後も効果が持続した。
【００５５】
具体的には、Ｓｈａｍ群のラットと比較して、胃全摘群のラットは、食物摂取と体重が著しく減少した（Ｐ＜０．０５）。これに対して、胃全摘＋ＲＫＴ投与群は、胃全摘群と比較すると、食物摂取及び体重を著しく増加させた（Ｐ＜０．０５）。しかし、Ｓｈａｍ群とＳｈａｍ＋ＲＫＴ投与群とを比較すると、ＲＫＴは食物摂取及び体重に効果がなかった。
【００５６】
以上をまとめると、
・胃全摘群は、Ｓｈａｍ群と比較して有意に摂食量と体重が低下した。
・胃全摘群に対し術後３日目から１４日間１．２％ｗｔ／ｖｏｌのＲＫＴを飲水投与すると、ＲＫＴ非投与群と比較して、累積食物摂餌量及び体重が有意に増加した。
・Ｓｈａｍ群に対し術後３日目から１４日間１．２％ｗｔ／ｖｏｌのＲＫＴを飲水投与しても、摂餌量と体重は非投与群と比較して変化を認めなかった。
【００５７】
投与終了日の１７日目において、上述の式（１）で示す体重減少改善率は３４．２％、投与終了２週間後の３１日目において、３４．８％と同じ値を示した。これは、ＲＫＴによる体重回復が、ＲＫＴ投与の終了後も少なくとも２週間継続したことを示す。
なお、ＲＫＴの投与開始を２週間遅らせる実験を行い、その効果についても検討した（図示せず）。すると、胃全摘群ラットの手術後１７日目から１４日間１．２％ｗｔ／ｖｏｌのＲＫＴを飲水投与しても、摂餌量と体重は、非投与群と比較して変化を認めなかった。
以上のデータから、手術後の早い期間にＲＫＴを連日投与することで、胃切除後のラットの摂食量と体重が有意に回復すること、更に、投与終了後も治療効果が持続することが分かった。
【００５８】
次に、ＲＫＴの作用機序を解明するため、まず本発明者らは食物が適宜与えられたａｄ  ｌｉｂの条件下で手術後６日目及び１０日目に血液検体を採取し、小腸ホルモンであるＧＬＰ−１の血中（血漿中）濃度（レベル）を測定した。
この結果を図２に示す。
【００５９】
図２によると、胃全摘群（胃全摘）は、術後６日目、１０日目にかけて活性化型（Ａｃｔｉｖｅ）ＧＬＰ−１（ｐｇ／ｍＬ）は、上昇した。具体的には、血中活性型ＧＬＰ−１レベルは、手術前のレベルと比較すると、胃切除の後６日目及び１０日目に増加した。
一方、胃全摘＋ＲＫＴ投与群（胃全摘ＲＫＴ）では、術後のＧＬＰ−１値の上昇は観察されず、手術前とほぼ同じ値（同程度）であった。術後１０日目でみると、胃全摘群と比較して胃全摘＋ＲＫＴ投与群は、血中活性型ＧＬＰ−１のレベルが有意に低値であった（Ｐ＜０．０５）。
【００６０】
これらのデータは、適宜食物が与えられた胃切除後のラットに対して、食欲を抑制する働きをもつホルモンである血中活性型ＧＬＰ−１増加をＲＫＴが抑えることを示す。つまり、胃全摘後は、随時の血中ＧＬＰ−１が上昇し、ＲＫＴはその上昇を著明に抑制することが分かった。
【００６１】
次に、本発明者らは、血中活性型ＧＬＰ−１のレベルに対するＲＫＴの影響をさらに詳細に検討するために、混合飼料負荷試験を行なった。
この結果を図３Ａ、図３Ｂに示す。
【００６２】
図３Ａは、手術後１０日目（ＲＫＴ投与開始後７日目）に、血中活性型ＧＬＰ−１を測定した結果である。横軸は、時間（分）を示し、縦軸は血漿中の活性型ＧＬＰ−１の濃度（ｐｇ／ｍＬ）を示す。
図３Ａによると、胃全摘群（胃全摘）ラットの血中活性型ＧＬＰ−１レベルは、空腹状態（０ｍｉｎ）でＳｈａｍ群（Ｓｈａｍ）と比較して有意に高値であった（Ｐ＜０．０５）。また、胃全摘＋ＲＫＴ投与群（胃全摘ＲＫＴ）は、胃全摘群より有意に低値であった（Ｐ＜０．０５）。
また、図３Ａによると、混合飼料負荷後、３０分と６０分で、血中活性型ＧＬＰ−１のレベルは、わずかに増加した。一方、胃全摘群  ＲＫＴは負荷後の上昇はなく、胃全摘群と比較して有意に低値であった（Ｐ＜０．０５）。また、図３Ａによると、Ｓｈａｍ群とＳｈａｍ＋ＲＫＴ投与群では、変化はなかった。
【００６３】
（ＡＵＣ分析）
また、図３Ｂは、曲線下面積（Ａｒｅａ  Ｕｎｄｅｒ  ｔｈｅ  Ｃｕｒｖｅ、ＡＵＣ）分析の結果を示す。血中活性型ＧＬＰ−１について、Ｓｈａｍ群（Ｓｈａｍ）とＳｈａｍ＋ＲＫＴ投与群（Ｓｈａｍ  ＲＫＴ）とでは変化は認めなかったが、胃全摘＋ＲＫＴ投与群（胃全摘ＲＫＴ）と胃全摘群（胃全摘）とでは有意差があった（Ｐ＜０．０５）。
【００６４】
なお、手術後２４日目、ＲＫＴ投与から７日目において、血中活性型ＧＬＰ−１レベル及びそれらのＡＵＣの混合飼料負荷試験中の値については、４群中で統計的有意差を示さなかった（図示せず）。
また、１０日目にすべてのグループにおいて、血漿インスリン及び血糖のＡＵＣレベルには、有意な変化はなかった。この結果は、ＲＫＴは血漿インスリン値と血糖値に対して副作用がないことを示唆する。
【００６５】
これらのデータは、空腹時及び食後の血中活性型ＧＬＰ−１のレベルは、胃全摘後の早期に増加するものの、ＲＫＴは、この血中活性型ＧＬＰ−１のレベルの増加を強く抑制することが可能であることを示す。
【００６６】
胃全摘後早期の血中ＧＬＰ−１が摂食量や体重に与える影響を調べるため、手術後３日目から、ＧＬＰ−１受容体拮抗薬（アンタゴニスト）であるＥｘｅｎｄｉｎ（９−３９）を、ミニポンプを用いて持続皮下投与した。コントロール群は蒸留水を投与した。累積食物摂取量及び体重が、９日間測定された。
この結果を、図４Ａ、図４Ｂに示す。
【００６７】
図４Ａ、図４Ｂとも、横軸は手術後の経過日数を示す。図４Ａの縦軸は、累積食物摂取量（グラム）を示す。図４Ｂの縦軸は、体重（グラム）を示す。
図４Ａ及び図４Ｂによると、胃全摘＋Ｅｘｅｎｄｉｎ（９−３９）投与群（胃全摘＋Ｅｘｅｎｄｉｎ  ９−３９）は、胃全摘群（胃全摘）と比較して、術後１２日目では有意に摂食量及び体重が増加した。一方、Ｓｈａｍ＋Ｅｘｅｎｄｉｎ（９−３９）投与群（Ｓｈａｍ＋Ｅｘｅｎｄｉｎ  ９−３９）は、Ｓｈａｍ群と比較して、摂食量と体重に変化を認めなかった。
これらのデータは、胃全摘後早期に上昇する血中ＧＬＰ−１の作用が、胃全摘後の摂食量低下、体重減少の一因になっていることを示す。
【００６８】
次に、ラットで観察されたように、ヒト血中ＧＬＰ−１レベルが胃切除の後に高まるかどうか調べるためにパイロット臨床研究を行なった。４名の患者がこの試験に参加した。血液サンプルは手術当日朝空腹時、及び胃切除の手術後１日目朝に患者から集められた。また、血漿中の合計ＧＬＰ−１が測定された。
このパイロット臨床研究の結果を、図５に示す。
【００６９】
図５は、手術当日朝空腹時、手術後１日目朝の血中の総ＧＬＰ−１濃度（ｐｍｏｌ／Ｌ）の結果を示す。４名すべてにおいて、術後値は、術前値と比較して上昇した。
すなわち、全ての患者は、胃切除後に血中総ＧＬＰ−１濃度の増加を示しており（図５）、統計的有意差（Ｐ＜０．０５）があった。
【００７０】
本実施例において、本発明の発明者らは、ヒト胃全摘後においても、手術後早期に空腹時の血中ＧＬＰ−１が上昇することを示した。
これは、胃切除の後の血中ＧＬＰ−１レベルに関するラットの結果がヒト血中ＧＬＰ−１レベルに適用できる可能性を示す。
【００７１】
なお、上記実施の形態の構成及び動作は例であって、本発明の趣旨を逸脱しない範囲で適宜変更して実行することができることは言うまでもない。
【産業上の利用可能性】
【００７２】
本発明によれば、胃又は食道摘出後等の食欲不振病態に対応した治療用組成物の提供が可能となるため、産業上利用可能である。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図５】
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