(57)【要約】【課題】  ＤＨＡ摂取量の有効量と摂取上限との問題、および多量の摂取量という問題を解決し、脳機能等へＤＨＡの機能性を発揮させるものであり、安全に摂取できる摂取量で有効に機能し、かつ、１日当たりの摂取量を低減することで長期間摂取しやすいという効果を有する認知機能改善剤を提供する。【解決手段】  ドコサヘキサエン酸と、アスタキサンチンとを含有する認知機能改善剤であって、前記認知機能改善剤を、ヒトに対して、１日当たり２００ｍｇ以上６００ｍｇ以下のドコサヘキサエン酸が、経口投与されるように用いられることを特徴とする認知機能改善剤。【選択図】図７
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）と、アスタキサンチンとを含有する認知機能改善剤であって、
前記認知機能改善剤を、ヒトに対して、１日当たり２００ｍｇ以上６００ｍｇ以下のＤＨＡが、経口投与されるように用いられることを特徴とする認知機能改善剤。
【請求項２】
前記認知機能改善剤がエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）を含有するものであって、前記認知機能改善剤に含有される、ＤＨＡとＥＰＡとの重量比（ＤＨＡ：ＥＰＡ）が２０：１〜５：１であることを特徴とする請求項１記載の認知機能改善剤。
【請求項３】
前記認知機能改善剤が、１錠あたりＤＨＡを３０ｍｇ以上２００ｍｇ以下含有する錠剤であることを特徴とする請求項１または２記載の認知機能改善剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ドコサヘキサンエン酸（以下、「ＤＨＡ」と略記する場合がある。）を含有する認知機能改善剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＤＨＡは、炭素数が２２、不飽和結合が６個のｎ―３系の直鎖の多価不飽和脂肪酸で、魚等に含まれる必須脂肪酸である。生体内では脳や神経組織・精子などに多く含まれる。また、ＤＨＡ源として広く使用される魚油に含まれるエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）は、炭素数が２０、不飽和結合が５個のｎ−３系の直鎖の多価不飽和脂肪酸である。
【０００３】
ＤＨＡは動脈硬化・脂質異常症・認知症・アトピー・アレルギーなどの予防や改善効果が期待されている。また、がんの発生や転移を抑制するともいわれている。妊娠期・授乳期には胎児及び乳児の適切な発育のため、ＤＨＡを適量摂取することが望ましいとされる。食品としては、「中性脂肪が気になる方に適します」という表示でＤＨＡとＥＰＡを関与成分とする特定保健用食品が２００３年に許可を取得し、現在では清涼飲料水やソーセージなどの形態で販売されている（非特許文献１、２）。
【０００４】
記憶学習機能はＤＨＡの生理活性の１つであり、動物試験においてＤＨＡを投与した群が対照群に比べて学習能力の向上が見られた報告や、アルツハイマー病のモデルラットにＤＨＡを投与すると、低下した学習能力が改善することが報告されている。ヒトにおいてはＭＭＳＥ（Mini Mental State Examination；ミニメンタルステート検査）が２７点以上の超軽度のアルツハイマー病患者にＤＨＡとＥＰＡをサプリメントとして６ヶ月間投与すると、認知機能の低下を有意に抑制できることが報告されている。これらのことからＤＨＡは脳に対する効果があると期待されている（非特許文献３〜５）。
【０００５】
食品には、一次機能である栄養、二次機能である味があるが、近年、これに加えた三次機能として健康への影響が注目されている。この三次機能を目的に、ＤＨＡを有効成分として含む機能性食品も検討されている（特許文献１、２）。例えば、特許文献１はＤＨＡやＥＰＡ、アスタキサンチン、レシチン、ビタミンＥ等の種々の抗酸化能力を有する成分を含有する錠剤等に関するものである。また、特許文献２は、患者におけるコレステロールおよびＬＤＬを低下させるための医薬品のためのオキアミ油の使用に関するものであり、オキアミ油にＤＨＡ等が含まれていることが記載されている。さらに、抗酸化物質を加えることも記載されている。
【０００６】
ＤＨＡやＥＰＡは、種々の機能が期待されている一方で、過剰摂取による健康被害の可能性が指摘されている（非特許文献６）。この具体的な摂取量として、成人で１日３ｇ以上摂取すると健康被害の可能性があることが指摘されている。また、米国ＦＤＡの限定的健康表示規格においては、カプセル錠剤等のいわゆるサプリメントからの摂取は、ＤＨＡとＥＰＡとを合わせて、成人で１日２ｇを超えないようにとされている。また、ＤＨＡやＥＰＡを含有するようなサプリメントは主に魚油を用いて製造されているが、その過剰摂取の副作用として、げっぷ、吐き気、鼻血、軟便が報告されている。
【０００７】
厚生労働省は、ＤＨＡとＥＰＡを１日当たり合計１ｇ以上摂取することを推奨しているが、厚生労働省がまとめた資料では、国民のＤＨＡとＥＰＡ摂取量の５０パーセンタイル値はそれぞれ１日０．２６０ｇ、０．１２８ｇの合計０．３８８ｇと推定されている。この値は、平成１７、１８年国民健康栄養調査の脂質の摂取量を基に算出されているが、平成１７年の脂質摂取量は、１日あたり１２．５ｇ（１パーセンタイル値）から１３４．３ｇ（９９パーセンタイル値）と広範囲に及んでおり、国民のＤＨＡ及びＥＰＡ摂取量も個人差が大きいことが考えられる。
【０００８】
一方で、ＤＨＡやＥＰＡの、ヒトに対する具体的な有効量として、１日約１ｇを超えるような摂取量としたときに脳機能への有益な影響が示唆されている。例えば、ＤＨＡ摂取量の少ない健康な若年成人１７６名（１８〜４５歳、試験群８５名、ニュージーランド）を対象とした二重盲検無作為化プラセボ比較試験において、ＤＨＡ１．１６ｇ／日を６ヶ月間摂取させたところ、認知機能検査７項目中２項目でのみ、改善が認められたという報告がある（非特許文献７）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】実用新案登録第３１９２９４８号
【特許文献２】特許第５２２８１８５号
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】健康食品素材の科学的実証データベース  HP：https://www.hfs-data.jp/
【非特許文献２】独立行政法人  国立健康・栄養研究所  「健康食品」の安全性・有効性情報  HP：http://hfnet.nih.go.jp/
【非特許文献３】矢澤一良、影山治夫, 総説 ドコサヘキサエン酸の生理活性、油化学, 1991, 第40巻, 第10号, p974-978
【非特許文献４】Hashimoto M., et al. Chronic administration of docosahexaenoic acid ameliorates the impairment of spatial cognition learning ability in amyloid beta-infused rats. J. Nutr. 2005; 135(3):549-55.
【非特許文献５】Freund-Levi Y., et al. Omega-3 fatty acid treatment in 174 patients with mild to moderate Alzheimer disease: OmegAD study: a randomized double-blind trial. Arch. Neurol. 2006; 63(10):1402-8.
【非特許文献６】健康食品データベース  第一出版  Pharmacist's Letter/Prescriber's Letterエディターズ  編  （独）国立健康・栄養研究所  監訳
【非特許文献７】Stonehouse W.,et al.DHA supplementation improved both memory and reaction time in healthy young adults: a randomized controlled trial.Am J Clin Nutr. 2013 May;97(5):1134-43.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
ここで、ＤＨＡ１ｇを摂取することが求められるとした場合、そのＤＨＡと同時にＥＰＡも０．５〜１ｇ程度摂取される可能性が高いことから、総量としての摂取量は２ｇや、３ｇを超えないほうが良いとする摂取量上限の考え方との関係で、具体的な摂取量の制御は難しいものとなる。すなわち、従来、脳機能への有効な効果を得るためのＤＨＡやＥＰＡの摂取量としてされている１日あたり１〜３ｇ程度の範囲内でも、できるだけ低い摂取量として制御することが必要と考えられる。
【００１２】
また、この１日あたり１〜３ｇの摂取量は、市販されている一般的なカプセル錠剤（ＤＨＡ含有量約１５０ｍｇ〜１７０ｍｇ／カプセル）を、毎日６〜１８カプセル摂取することが必要な量となる。そして、このような摂取量の範囲は、安全性を担保することができる摂取量（好ましくは２ｇ／日以下）と、機能性を得るための摂取量（約１ｇ／日以上）との範囲が近く、また、一部重複する問題を抱えている。また、ＤＨＡ・ＥＰＡは、魚油を含むことから多少のえぐみが残ることがあり、このような多量のカプセル等を毎日摂取することは現実的ではない。また、前述したとおり、国民のＤＨＡ及びＥＰＡの普段の食事からの摂取量に個人差が大きいことが考えられることから、普段の食生活に加えて１日１ｇ以上のＤＨＡを含有する食品を日常的に摂取することは、慢性的な過剰摂取による健康への悪影響が予想される。
【００１３】
一方、特許文献１や２には、カロテノイド等の抗酸化物質を任意で選択して不飽和脂肪酸等と組み合わせることが提案されているが、それぞれの抗酸化物質との組み合わせについて、具体的に摂取量との関係の検討は十分にはおこなわれていなかった。係る状況下、本願発明は、ＤＨＡを低用量で経口投与されても有効に機能する認知機能改善剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本願発明は、本発明者等により、前述したようなＤＨＡ摂取量の有効量と摂取上限との問題、および多量の摂取量という問題を解決し、脳機能等へＤＨＡの機能性を発揮させるために検討した結果、見出されたものである。
【００１５】
本発明者等は、本願発明を見出すための後述する試験から、ＤＨＡとアスタキサンチンとを混合した製剤の形態で経口投与することで、従来の知見では有効と考えられていなかったＤＨＡの摂取量で、認知機能改善効果を奏することを見出した。
【００１６】
ＤＨＡ、ＥＰＡは大気中及び体内に吸収された後も、酸化の影響を受けやすく、経口摂取したＤＨＡ、ＥＰＡは効率的に機能しにくいと考えられる。この酸化の影響を抑える点から、アスタキサンチンは酸化防止剤として機能することも考えられる。しかしながら、本願発明で見出された効果は、認知機能改善の効果に関する特徴的な結果に基づくものであり、直ちにＤＨＡの機能として提唱されているもの全般に対する改善効果があるとすることができるものでもないことから、単に酸化防止剤として機能し得るものとの混合による付加的な効果からは説明ができないものである。また、本発明の効果は任意の抗酸化剤として適宜選択されたものではなく、アスタキサンチンとの組み合わせとしてはじめて認められた特有の用量に関するものである。
【００１７】
すなわち、本発明は、以下の発明に係るものである。
＜１＞  ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）と、アスタキサンチンとを含有する認知機能改善剤であって、前記認知機能改善剤を、ヒトに対して、１日当たり２００ｍｇ以上６００ｍｇ以下のＤＨＡが、経口投与されるように用いられることを特徴とする認知機能改善剤。
＜２＞  前記認知機能改善剤がエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）を含有するものであって、前記認知機能改善剤に含有される、ＤＨＡとＥＰＡとの重量比（ＤＨＡ：ＥＰＡ）が２０：１〜５：１である前記＜１＞記載の認知機能改善剤。
＜３＞  前記認知機能改善剤が、１錠あたりＤＨＡを３０ｍｇ以上２００ｍｇ以下含有する錠剤である前記＜１＞または＜２＞記載の認知機能改善剤。
【発明の効果】
【００１８】
本発明の認知機能改善剤は、安全に摂取できる摂取量で有効に機能し、かつ、１日当たりの摂取量を低減することで長期間摂取しやすいという効果を有する。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】本発明の認知機能改善剤の一態様として調製されたソフトカプセルの正面図である。
【図２】本発明の認知機能改善剤の一態様として調製されたソフトカプセルの断面図である。
【図３】本発明の実施例における被験者の背景因子をまとめた図である。
【図４】脳機能（単語の記憶試験）の測定値の推移と、摂取前からの変化量を示す図である。
【図５】脳機能（単語の想起試験）の測定値の推移と、摂取前からの変化量を示す図である。
【図６】脳機能（Stroop試験）の変化量を示す図である。
【図７】脳機能（日本版リバーミード行動記憶検査）の測定値の推移と、摂取前からの変化量を示す図である。
【図８】層別解析を行った被験者の背景因子をまとめた図である。
【図９】層別解析を行った脳機能（日本版リバーミード行動記憶検査）の測定値の推移と、摂取前からの変化量を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
以下に本発明の実施の形態を詳細に説明するが、以下に記載する構成要件の説明は、本発明の実施態様の一例（代表例）であり、本発明はその要旨を変更しない限り、以下の内容に限定されない。
【００２１】
本発明の認知機能改善剤は、ＤＨＡと、アスタキサンチンと含有する認知機能改善剤であって、前記認知機能改善剤を、ヒトに対して、１日当たり２００ｍｇ以上６００ｍｇ以下のＤＨＡが、経口投与されるように用いられることを特徴とする認知機能改善剤に関するものである。この１日当たりのＤＨＡの摂取量は、４００ｍｇ以上６００ｍｇ以下であることがより好ましい。このような構成とすることで、ＤＨＡの摂取量を継続しても安全に摂取できるような低用量化しても認知機能改善効果を得ることができる。前述したように、ＤＨＡ、ＥＰＡは大気中及び体内に吸収された後も、酸化の影響を受けやすく、経口摂取したＤＨＡ、ＥＰＡは効率的に機能しにくいと考えられ、この酸化の影響を抑える点から、アスタキサンチンは酸化防止剤として機能することも考えられるが、本発明の効果は任意の抗酸化剤として適宜選択されたものではなく、アスタキサンチンとの組み合わせとしてはじめて認められた特有の用量に関するものである。
【００２２】
ＤＨＡ原料は、一般的にＤＨＡと共にＥＰＡを含有することから、この認知機能改善剤として経口投与されるＤＨＡの量が６００ｍｇを超える場合、同時に摂取する蓋然性が高いＥＰＡの量も考慮すると一般的な食生活の通常の食品から摂取しているＤＨＡやＥＰＡ量（３８８ｍｇ（５０パーセンタイル値））と合わせて摂取される量は、健康被害のおそれも生じ始める１ｇを超える。摂取者によってはより多くの量を慢性的に摂取することになり、過剰摂取量となるおそれがある。この認知機能改善剤として経口投与されるＤＨＡの量は、ヒトの１日当たりとして管理されるものであり、厳密な当該ヒトの体重との関係を特定する必要性は低いが、基本的に６０ｋｇ体重のヒトあたりとして管理することもでき、よって、この量から、体重あたりの摂取量として、３．３ｍｇ／ｋｇ体重〜１０ｍｇ／ｋｇ体重、好ましくは６．６ｍｇ／ｋｇ体重〜１０ｍｇ／ｋｇ体重として管理することもできる。
【００２３】
「ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）」
ＤＨＡは、炭素数が２２、不飽和結合が６個、ＥＰＡは、炭素数が２０、不飽和結合が５個のｎ―３系の直鎖の多価不飽和脂肪酸である。ＤＨＡは、魚油に多く含まれることから、魚油や数種の藻を精製したものが広く食品に用いられており、本発明においても、これらの魚油や数種の藻に含まれるＤＨＡの量を管理し、認知機能改善剤に混合して用いることができる。これらの魚油や数種の藻には、一般的には、同時にエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）が含まれていることが多く、魚油や数種の藻からＤＨＡとＥＰＡとをさらに高精度で分離しようとすることは現実的ではない場合もあることから、ＤＨＡとＥＰＡとが含まれる精製された魚油や数種の藻を用いても良い。
【００２４】
本発明の認知機能改善剤に含有される、ＤＨＡとＥＰＡとの重量比（ＤＨＡ：ＥＰＡ）は、２０：１〜５：１であることが好ましく、２０：１〜８：１であることがより好ましい。ＥＰＡは、血液脳関門（脳の働きに大切な神経細胞を有害物質から守る機能）を突破できないと考えられていることから、本発明が目的とする認知機能改善効果に寄与する可能性は低いことが考えられる。一方で、ＥＰＡも過剰摂取による弊害の可能性が指摘されていることから、本発明の認知機能改善剤に積極的に混合する必要性は低い。このような観点から、ＤＨＡおよびＥＰＡが含まれる魚油や数種の藻をＤＨＡ源として使用するとしても、ＥＰＡの混合量が低いものを採用することが好ましい。一般的なＤＨＡを含有する機能性食品等においては、ＥＰＡの血流改善効果等を期待し、ＥＰＡ混合量も比較的多くして、ＥＰＡの比率を高める傾向があるが、この点からも本発明は特有の構成を有するものである。
【００２５】
［アスタキサンチン］
本発明においてアスタキサンチンとは、天然物由来のものまたは合成により得られるものを意味する。天然物由来のものとしては、例えば、エビ、オキアミ、カニなどの甲殻類の甲殻、卵および臓器、種々の魚介類の皮および卵、緑藻ヘマトコッカスなどの藻類、赤色酵母ファフィアなどの酵母類、海洋性細菌、福寿草および金鳳花などの種子植物から得られるものをあげることができる。天然からの抽出物および化学合成品は市販されており、入手は容易である。
【００２６】
アスタキサンチンは、例えば、赤色酵母ファフィア、緑藻ヘマトコッカス、海洋性細菌などを、公知の方法に準拠して、適宜な培地で培養することにより得られる。培養や抽出のしやすさ、アスタキサンチンを最も高濃度で含有することや生産性の高さから緑藻ヘマトコッカスが最も好適である。
【００２７】
アスタキサンチンの使用形態としては、前記方法で得たアスタキサンチンの抽出物およびそれらを含有した粉末や水溶液、または赤色酵母ファフィア、緑藻ヘマトコッカス、海洋性細菌などの乾燥品およびそれらの破砕品を用いることができる。
【００２８】
「ＤＨＡ：アスタキサンチンの重量比」
本発明の認知機能改善剤は、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）と、アスタキサンチンとを含有することを特徴とする。この認知機能改善剤は、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）と、アスタキサンチンとを、重量比（ＤＨＡ：アスタキサンチン）で１０００：１〜１：１で含有することが好ましく、１０００：１〜５０：１であることがより好ましい。この重量比未満では、アスタキサンチンのＤＨＡに与える影響が期待できず、また、一定の重量比を超えてアスタキサンチンが多く含有されていても本発明の認知機能改善剤としての効果に与える影響は少ないと考えられる。その重量比は、８００：１よりもアスタキサンチン比率が多いことがより好ましい。また、１００：１よりもＤＨＡ比率が多いことがより好ましく、２００：１よりもＤＨＡ比率が多いことがより好ましい。このような重量比で混合することで、低用量のＤＨＡ含有量でも有効な機能を得ることができる。このＤＨＡとアスタキサンチンとの混合は、それぞれの成分を含有する粉体や液体、油等をその成分量に応じて混合すればよい。
【００２９】
本発明の認知機能改善剤は、さらに、アラキドン酸、リコピン、フォスファチジルコリン、フォスファチジルセリン、イチョウ葉抽出物、ナイアシン、パンテトン酸、各種ビタミンから成る群から選択される少なくとも１以上の成分を含有することが好ましい。これらの成分は、神経系に影響することが期待されている成分であり、本発明のＤＨＡおよびアスタキサンチンの組み合わせとの相乗効果を奏して、認知機能改善効果を高めることができる。または、ＤＨＡ量を低めに設定しても安定してその効果を得やすい。
【００３０】
「製剤形態」
本発明の認知機能改善剤は、ソフトカプセルや、ハードカプセル、打錠剤等のカプセル型錠剤のような、固形の製剤形態で摂取することができる。また、この他にも、ゼリー状や、液状等の経口投与に適した製剤の剤形に調製して摂取してもよい。この製剤は、１日当たりの経口投与される摂取量を制御しやすく、ＤＨＡ等の臭いや味を抑えるカプセル化等が行いやすい、固形の製剤形態とすることが好ましい。
【００３１】
本発明の認知機能改善剤の好ましい製剤形態を例示すると、ＤＨＡおよびアスタキサンチンを前述した重量比で含有する内容物とし、この内容液を包含するゼラチン等を主とする剤皮を有し、短径６〜９ｍｍ、長径１２〜１８ｍｍの略球状や、先細り楕円形状(一般的にしずく型と呼ばれる形状)、ラグビーボール形状等のソフトカプセルが挙げられる。このソフトカプセルとするときの内容物は、ＤＨＡとして魚油や数種の藻由来の油脂を使用し、この油脂にアスタキサンチンやその他適宜混合される成分を懸濁・溶解させたものを用いることができる。また、香料や甘味料、色素、賦形剤、安定剤、矯味矯臭剤、希釈剤、界面活性剤、乳化剤、可溶化剤、吸収促進剤、増量剤、防腐剤等を加えてもよい。
【００３２】
さらに、ソフトカプセル化するにあたっての剤皮とは、カプセルの皮膜となるものであり、この剤皮で内容液を密封することで、内容液の酸化防止等の品質保持能を奏し、内容液の風味等を知覚しにくいカプセルとして成形できる。この剤皮はゼラチンを主とし、ソフトカプセルとすることが好ましい。この剤皮には、適宜、グリセリンやソルビトール、色素等を加え、さらに成形加工しやすいように水などの溶媒を加える場合がある。この成形にあたっては、ゼラチン等の剤皮による皮膜への薬剤の充填と皮膜としての成形とを同時に行い、カプセルとするものが一般的である。この成形方法として、ロータリー法や二重ノズル法などが挙げられる。特に、ソフトカプセルは比重が高いため粉末や顆粒に比べ飲み込みやすい。
【００３３】
前記認知機能改善剤が、１錠あたりＤＨＡを３０ｍｇ以上２００ｍｇ以下含有するカプセル錠剤として、経口投与されるように用いられることが好ましい。詳細については、後述するように、本発明の認知機能改善剤は、１日当たり２００ｍｇ以上６００ｍｇのドコサヘキサエン酸が、経口投与されるように用いられることを特徴とする。このとき、この量で摂取量を制御するには、１錠あたりＤＨＡを３０ｍｇ以上２００ｍｇ以下含有する錠剤を用いて、その摂取量を制御すると、１日当たりの経口投与数、すなわち飲用する量が摂取者に対する嚥下負担を少なく、かつ、過剰に摂取することを防止することができる量として管理しやすい。
【００３４】
「摂取量（経口投与量）」
本発明の認知機能改善剤は、ヒトに対して、１日当たり２００ｍｇ以上６００ｍｇのＤＨＡが経口投与されるように用いられることを特徴とする。
このような経口投与量は、従来の考え方では有効とは考えられていなかった投与量である。一方で、健康に悪影響を与える可能性が示唆されていた摂取量（例えば、ＦＤＡ推奨値としては２ｇ／日）よりも十分に少ない量のため、安全上も優れた摂取量として管理することができる。
経口投与される量は、前述したように、ヒトに対して、１日当たりのＤＨＡの投与量（摂取量）としてその用量を定めたものである。本発明の認知機能改善剤は、日常生活の中で継続して摂取することから、厳密な体重あたりの摂取量として管理するよりも、成人の総摂取量とすることが一般的である。
【００３５】
この量は、本発明の認知機能改善剤として摂取される量である。すなわち、本発明においては、ＤＨＡと、アスタキサンチンとを混合して固形状やゼリー状、液状等に適宜製剤化されたものとして経口投与され、この混合の効果によって、その経口投与量を制御するものである。よって、この摂取量は、混合物として調製されたものから摂取される量であり、例えば、カプセル剤等として、通常の食事とは別に摂取する量としての設定である。単に食事から摂取されるＤＨＡは、アスタキサンチンと混合されていない状態のため、それらを別々に摂取することによる本発明への影響は少ないと考えられる。
【００３６】
「認知機能改善剤」
本発明の認知機能改善剤は、ヒトの認知機能を改善するものである。認知機能は過去の経験や知識を基に、現状を把握し、最善の行動を選択することを示す。その機能は主に大脳の辺縁皮質が担っていると考えられている。ＤＨＡは、脳内で神経伝達系、膜結合型酵素やイオンチャネル等の活性、遺伝子発現、およびシナプス等に影響していると考えられているがその作用機序については、まだ明らかではない点も多く、具体的な摂取量によっても異なる知見が得られている。本発明の認知機能改善剤は、特に認知機能の必要な学生から、認知機能の低下傾向にある高齢者まで、１０代〜８０代の幅広い世代において有効と考えられる。この認知機能は、例えば、Ｓｔｒｏｏｐ試験やリバーミード行動記憶検査（記憶の障害診断に採用されている検査法）により評価することができる。この認知機能改善とほぼ同義の表現としては、判断力改善、判定能力改善、判断能力改善、学習能力改善等の表現を行う場合がある。
【実施例】
【００３７】
［試験方法］
試験デザイン：無作為化二重盲検プラセボ対照並行群間比較試験で実施した。
摂取開始被験者数：６６名で摂取を開始した。（内訳：被験剤摂取群：３３名、プラセボ剤摂取群：３３名）
割付方法：割付担当者は乱数を用いて割付表を作成し、試験剤に割付番号を付与した。割付表は割付担当者が封緘し、割付表開封時まで密封保管した。解析対象者及びデータ固定後、割付担当者は割付表を開封し情報を開示した。なお、重篤な有害事象が発生し、緊急を要する場合には、必要に応じて割付表を開封し、必要最低限の情報のみを開示することと規定したが、重篤な有害事象は発生しなかった為、割付表の途中開封は行わなかった。
【００３８】
［被験者の選択基準及び除外基準］
次の選択基準に合致し、除外基準に抵触しない者を被験者として選択した。
・選択基準
（１）同意取得時の年齢が５０歳以上７０歳以下の男女
（２）普段の食事由来のｎ―３系脂肪酸量の摂取が比較的少ない者
（３）事前検査の血中中性脂肪値が高めの者を優先して選択する
なお、この選択基準に加えて、試験に大きな影響を与える体質や症状を有する者に対しては、除外基準を設けた。また、この被験者群は、前記選択基準（２）に記載の通り、ｎ−３計脂肪酸量の摂取が比較的少ない者であり、その摂取量は、国民のＤＨＡ摂取量の５０パーセンタイル値である０．２６０ｇ/日よりも少ないと考えられ、０．０５〜０．１５ｇ／日程度と想定される。
【００３９】
［被験者の制限事項（禁止事項）］
試験責任医師及び試験を補助する担当者は、被験者に対し、試験期間中は試験参加前の通常通りの生活を送るとともに、一定の制限事項を守るよう指導した。
【００４０】
［試験剤］
試験剤の種類及び名称
（１）被験剤：ＤＨＡ・ＥＰＡ及びアスタキサンチンその他成分を含有する剤
（２）プラセボ剤：ＤＨＡ・ＥＰＡを含有せず、アスタキサンチンおよびその他成分を含有する剤
【００４１】
試験剤とするソフトカプセル（Ａ）、プラセボ剤とするソフトカプセル（Ｂ）の形状、原材料、関与成分等を以下に示す。
【００４２】
［ソフトカプセル（Ａ）の成形］
本発明の認知機能改善剤として、ソフトカプセル（Ａ）を調製した。このソフトカプセル（Ａ）の１錠（平均重量４７０ｍｇ）当たりの各成分の平均濃度は以下の通りである。
ＤＨＡ：１３６ｍｇ
ＥＰＡ：１４．８ｍｇ
アスタキサンチン：０．３３ｍｇ
ビタミンＥ：３ｍｇ
リコピン：０．０２ｍｇ
フォスファチジルコリン：０．４０ｍｇ
フォスファチジルセリン：０．１５ｍｇ
なお、上述した成分は、ソフトカプセルを製造するにあたって、精製魚油（マグロ及びカツオ由来）に、アスタキサンチン（ヘマトコッカス藻色素由来）等の上述した成分を混合して得られたソフトカプセル（Ａ）の内容液中に含まれる成分である。また、このソフトカプセル（Ａ）においてはＤＨＡ：アスタキサンチンを、４０８：１としたが、ＤＨＡとアスタキサンチンとの組み合わせによる効果は人体内での効果のため対数的に把握される傾向があると考えられ、錠剤としてはこれらを組み合わせるときの重量比率を変更した場合であっても有効性が維持されやすいと考えられる。
【００４３】
さらに、このソフトカプセル（Ａ）の内容液を、固形分としてゼラチン６８重量部およびグリセリン２４重量部、ミツロウ７重量部、着色料１重量部の割合で混合し、これをシート成形に適した粘度となるように水で希釈して調製した剤皮溶液を用いて成型した剤皮用シートを用いて、公知のロータリー法により包含させることで、図１および図２に示す形状のソフトカプセルに成形した。この成形時の剤皮用シートの厚みは約８００μｍであり、また成形後に常温で乾燥して余分な水分を除去した。このソフトカプセル（Ａ）は、長径ｂ１２．４ｍｍ、短径ａ８．２ｍｍとして成型した。
【００４４】
［ソフトカプセル（Ｂ）の成形］
前述したソフトカプセル（Ａ）の内容液に用いられるＤＨＡおよびＥＰＡ源の魚油にかえ、オリーブ油を用いた以外は、ソフトカプセル（Ａ）の調製に準じて成形した。
【００４５】
［試験剤の摂取量、摂取方法及び摂取期間］
試験剤は、１日に４粒を、十分な量の水またはぬるま湯とともに摂取させた。万が一、摂取し忘れた場合でも、翌日多く摂取しないよう指導した。摂取期間は１２週間とした。
【００４６】
［関与成分摂取量の設定根拠］
被験剤（ソフトカプセル（Ａ））１日４粒（目安量）中には、ＤＨＡ５４４ｍｇ／日、ＥＰＡ５９．２ｍｇ／日であることから、等量を試験剤での摂取量と設定した。
【００４７】
［試験スケジュール］
試験責任医師から委託を受けた試験実施施設の担当者は、同意説明を行い、同意が得られた被験者候補２２２名に対して事前１として生活習慣アンケート、問診（体調確認）及び身体測定（身長、体重）、理学検査、臨床検査、食事調査を実施した。事前１で適格と判断された被験者９６名に対して、事前２として、問診（体調確認）及び改訂長谷川式簡易知能評価スケールを用いた認知機能障害検査を実施した。事前２で適格と判断された被験者８８名に対して、摂取前脳機能検査として問診（体調確認）及び脳機能検査を実施し、脳機能検査後７日間以内に採血検査として問診（体調確認）及び身体測定、理学検査、臨床検査、血流測定、食事調査を実施した。摂取前検査の結果から試験の目的に適った被験者を６６名選択した。試験実施施設は、被験者へ割付けられた試験剤及び摂取期間中の日誌等を配布した。摂取期間中は、試験剤の摂取及び日誌の記載を毎日行わせた。
【００４８】
試験剤の摂取４週目（２９日目）、８週目（５７日目）に各種検査として、問診（体調確認）、身体測定、理学検査、臨床検査を実施した。１２週目（８５日目）には脳機能検査として問診（体調確認）及び脳機能検査を実施し、脳機能検査実施後７日間以内に採血検査として問診（体調確認）及び身体測定、理学検査、臨床検査、血流測定、食事調査を実施した。
【００４９】
［検査日］
計８回の来院時に検査を行った。規定検査日は以下の通りとした。
（１）摂取前検査
採血検査は脳機能検査後７日以内に行った。
（２）摂取４週目、８週目検査
摂取４週目の検査規定日は摂取２９日目、摂取８週目の規定日は摂取５７日目とし、やむを得ず被験者の都合等で規定の検査日に検査ができない場合は、試験責任医師の判断により、規定検査日の前後７日間の範囲で検査日を変更した。
（３）摂取１２週目検査
摂取１２週目検査は、摂取８５〜９２日目の間に実施した。採血検査は脳機能検査後７日以内に行った。遅くとも摂取開始後９２日目までに採血検査を実施した。
（４）再検査及び追跡調査
必要に応じて、再検査及び追跡検査を行った。
【００５０】
［有害事象］
・有害事象の定義
試験剤摂取後に被験者に新たに発現した、あるいは悪化したあらゆる好ましくない医療上のできごと（試験剤摂取後に発現した自覚症状、他覚所見、理学検査及び臨床検査等の異常変動）を有害事象とし、試験剤との因果関係の有無にかかわらないこととした。
・有害事象の判断
被験者の自覚症状、他覚所見としての有害事象は、試験責任医師が判断した。被験者個々の検査値の異常変動（有害事象）については、試験実施医療機関で定める基準値を基にして、日本化学療法学会が定める異常変動の判定基準（Chemotherapy. 58. 484-493 （2010））を参考として、試験責任医師が有害事象の判断を行った。
・重篤な有害事象発現時の報告手順
観察された有害事象が重篤である場合、試験責任医師は発現を知った後、速やかに試験実施医療機関の長に報告し、開発業務受託機関及び試験依頼者に連絡するとともに、重篤な有害事象に関する報告書を作成し、試験実施医療機関の長及び試験依頼者に提出すると規定したが、重篤な有害事象は発現しなかった。
【００５１】
［脳機能検査の手順］
（１）単語の記憶試験
即時的な記憶と短時間の記憶の容量並びにその保持・再生能力を評価するテストである。１０個の単語を一つずつ聞かせた後に復唱させ、１０個目の単語の復唱が終わったらただちにこれらの単語を想起させた（即時想起数）。自発想起ができなかった単語については、語頭音のヒントを与えて想起できた数をＣＵＥ想起数とした。自発想起とＣＵＥ想起させた単語を、干渉課題（単語の想起試験）の施行中も覚えておくように指示し、５分後に自発再生及び語頭音のヒントを与えて再生できたＣＵＥ再生の語数を記録した。摂取前脳機能検査、１２週目脳機能検査の各回で異なる単語を記憶させた。
自発想起数、自発再生数は個数が多い（数値が高い）ほど、記憶力が高いことを示す。
【００５２】
（２）単語の想起試験
記憶の想起能力、すなわち流暢性を評価するテストである。流暢性とは、情報（主に言語情報）を適切に、素早く、数多く処理し出力する能力のことであり、主に前頭葉の働きによるとされている。「あなたの知っている果物の名前をできるだけたくさん言ってください」と教示し、１つ目が挙げられてから６０秒間で列挙できたものを書き取った（想起試験（１））。重複したものは除いて個数を記録した。「「あ」で始まる言葉」（想起試験（２））や「動物の名前」（想起試験（３））についても同様に行った。摂取前脳機能検査、１２週目脳機能検査の各回で同じ試験を実施した。想起数が多い（数値が高い）ほど、想起能力が高いことを示す。
【００５３】
（３）Ｓｔｒｏｏｐ試験
脳へ同時に入ってくる２つの異なる情報（言語情報と色覚情報）の識別・処理能力を評価するテストであり、高次の脳機能を評価することができる。このテストは、４つのステップ（ステップ１、２、３、４）のサブテストからなり、ステップが進むに従ってより複雑な情報処理能力が要求されるために、難解度は段階的に増す。
【００５４】
（４）日本版リバーミード行動記憶検査
認知機能の評価として、日本版リバーミード行動記憶検査（綿森淑子, 原寛美, 宮森孝史, ほか: 日本版リバーミード行動記憶検査, 千葉テストセンター, 2002. (Wilson BA., Cockburn JM., Baddeley AD.: The Rivermead Behavioral Memory Test (RBMT)．Suffolk ; Thames Valley Test Company : 1985.)）を使用した。下位項目は姓名、持ち物、約束、絵、物語、顔写真、道順、用件、見当識と日付の９項目であり、得点化は、下位検査ごとの素点を記録し、標準プロフィール点（０〜２）に換算し、スクリーニング点（１点または０点）を算出した。
いずれも数値が高いほど記憶機能が高いことを示す。
【００５５】
［有効性の評価］
［有効性の解析対象者］
所定の試験スケジュールや試験内容をすべて終了した被験者のうち、一定の基準に該当する被験者を除外した者を有効性の解析対象とした。
【００５６】
［有効性の評価項目］
（１）主要評価項目：脳機能（単語の記憶試験、単語の想起試験、Ｓｔｒｏｏｐ試験）
（２）副次評価項目：脳機能（日本語リバーミード行動記憶検査（スクリーニング点、標準プロフィール点））
（３）評価方法
いずれの項目も、摂取前と摂取後各時点の変化量について群間比較にて評価した。脳機能の各項目は、摂取１２週目の摂取前から変化量を、プラセボ剤摂取群と被験剤摂取群について２標本ｔ検定を用いて比較した。また、各群それぞれにおいて摂取後各時点の摂取前からの変化量を１標本ｔ検定を用いて評価した。
【００５７】
［数値の表示及び有意水準］
数値は平均値±標準偏差で示し、検定の有意水準は両側５％とした。
【００５８】
［結果］
［被験者の分類と内訳］
事前検査、摂取前検査の結果に基づき、選択基準に該当し、除外基準に該当しない６６名（Ｐ群３３名、Ａ群３３名）を適格な被験者として選択した。身長、体重及び脈拍数はいずれも標準範囲内、もしくは正常域内の値であった。
割付表開封前に試験責任医師が有効性の解析に影響を及ぼすと判断した１１名（Ｐ群６名、Ａ群５名）を除外した結果、有効性の解析は５４名（Ｐ群２６名、Ａ群２８名）を対象として行った。安全性の評価は、有害事象は試験期間中に一度でも試験剤を摂取した被験者６６名（Ｐ群３３名、Ａ群３３名）を、測定値・検査値は、所定の試験スケジュール及び検査内容を完遂した６５名（Ｐ群３２名、Ａ群３３名）を対象に行った。試験剤の摂取率は８６．８〜１０１．１％であった。この被験者の背景因子をまとめたものを図３に表で示す。
【００５９】
［被験者の背景因子］
２群間の比較は、性別はχ2検定、その他の項目は２標本ｔ検定で行った。Ｐ群の平均年齢は５９．１歳（男性１５名、女性１１名）、Ａ群の平均年齢は５７．４歳（男性１３名、女性１５名）であった。また、身体測定値、理学検査値、ｎ−３系脂肪酸摂取量、血中中性脂肪値について、いずれも群間で不均衡は見られなかった。
【００６０】
［有効性の評価］
［主要評価項目：脳機能（単語の記憶試験）］
即時自発想起数、即時自発想起数＋ＣＵＥ想起数、５分後自発再生数、５分後自発再生数＋ＣＵＥ再生数について、測定値の推移と、摂取前からの変化量を図４にそれぞれ図示した。
（１）即時自発想起数
摂取前はＡ群で５．２±１．６個、Ｐ群で４．８±１．３個であり、群間に有意な差はなかった。摂取前後の変化量はＡ群が０．３±２．０個、Ｐ群が０．７±１．６個であり、群間に有意な差はなかった。また摂取前と比較してＰ群で得点の有意な増加が認められた（ｐ＜０．０５）。
（２）即時自発想起数＋ＣＵＥ想起数
摂取前はＡ群で２．８±１．５個、Ｐ群で３．２±１．６個であり、群間に有意な差はなかった。摂取前後の変化量はＡ群が−０．１±２．１個、Ｐ群が０．７±１．７個であり、群間に有意な差はなかった。また摂取前と比較してＰ群で得点の有意な低下が認められた（ｐ＜０．０５）。
（３）５分後自発再生数
摂取前はＡ群で４．９±２．３個、Ｐ群で４．２±１．８個であり、群間に有意な差はなかった。摂取前後の変化量はＡ群が−０．２±２．６個、Ｐ群が−０．２±２．３個であり、群間に有意な差はなかった。摂取前後の比較でも有意な変化はなかった。
（４）５分後自発再生数+ＣＵＥ再生数
摂取前はＡ群で２．５±１．６個、Ｐ群で２．５±１．１個であり、群間に有意な差はなかった。摂取前後の変化量はＡ群が−０．５±２．１個、Ｐ群が−０．３±１．７個であり、群間に有意な差はなかった。摂取前後の比較でも有意な変化はなかった。
【００６１】
［主要評価項目：脳機能（単語の想起試験）］
想起試験（１）、想起試験（２）、想起試験（３）について、測定値の推移と、摂取前からの変化量を図５にそれぞれ図示した。
（１）想起試験（１）
摂取前はＡ群で１３．３±３．０個、Ｐ群で１２．５±２．６個であり、群間に有意な差はなかった。摂取前後の変化量はＡ群が−０．４±２．５個、Ｐ群が０．２±２．９個であり、群間に有意な差はなかった。摂取前後の比較でも有意な変化はなかった。
（２）想起試験（２）
摂取前はＡ群で１２．７±４．１個、Ｐ群で１１．８±４．７個であり、群間に有意な差はなかった。摂取前後の変化量はＡ群が１．４±２．３個、Ｐ群が２．０±３．４個であり、群間に有意な差はなかった。また摂取前と比較して両群とも得点の有意な増加が認められた（ｐ＜０．０１）。
（３）想起試験（３）
摂取前はＡ群で１７．７±４．７個、Ｐ群で１８．０±４．８個であり、群間に有意な差はなかった。摂取前後の変化量はＡ群が０．９±３．４個、Ｐ群が１．２±２．９個であり、群間に有意な差はなかった。摂取前後の比較でも有意な変化はなかった。
【００６２】
［主要評価項目：脳機能（Ｓｔｒｏｏｐ試験）］
ステップ１の秒数、ステップの２秒数、ステップ３の誤数及び秒数、ステップ４の誤数及び秒数について、変化量を図６にそれぞれ図示した。ステップ１及び２の誤数については、変化量が両群とも０だった為、図を省略した。
【００６３】
（１）ステップ１
誤数について、摂取前はＡ群で０．０±０．０個、Ｐ群で０．０±０．２個であり、群間に有意な差はなかった。両群とも摂取前後での変化はなかった。
秒数について、摂取前はＡ群で４７．０±１０．７秒、Ｐ群で４８．９±１４．６秒であり、群間に有意な差はなかった。摂取前後の変化量はＡ群が−４．５±７．２秒、Ｐ群が−６．４±１２．１秒であり、群間に有意な差はなかった。また摂取前と比較して両群とも秒数の有意な低下が認められた（Ａ群：ｐ＜０．０１、Ｐ群：ｐ＜０．０５）。
（２）ステップ２
誤数について、摂取前はＡ群で０．０±０．２個、Ｐ群で０．０±０．０個であり、群間に有意な差はなかった。両群とも摂取前後での変化はなかった。
秒数について、摂取前はＡ群で４５．３±１０．１秒、Ｐ群で４６．１±９．２秒であり、群間に有意な差はなかった。摂取前後の変化量はＡ群が−３．６±６．０秒、Ｐ群が−４．７±７．７秒であり、群間に有意な差はなかった。また摂取前と比較して両群とも秒数の有意な低下が認められた（ｐ＜０．０１）。
（３）ステップ３
誤数について、摂取前はＡ群で０．１±０．４個、Ｐ群で０．０±０．０個であり、群間に有意な差はなかった。摂取前後の変化量はＡ群が−０．１±０．４個、Ｐ群が０．２±０．５個であり、Ｐ群と比較して、Ａ群の低下量が有意に大きかった（ｐ＜０．０５）。また摂取前と比較してＰ群で誤数の有意な増加が認められた（ｐ＜０．０５）。
秒数について、摂取前はＡ群で４９．９±１７．９秒、Ｐ群で４５．６±７．８秒であり、群間に有意な差はなかった。摂取前後の変化量はＡ群が−５．２±１１．０秒、Ｐ群が−１．０±６．８秒であり、群間に有意な差はなかった。また摂取前と比較してＡ群で秒数の有意な低下が認められた（ｐ＜０．０５）。
（４）ステップ４
誤数について、摂取前はＡ群で０．２±０．５個、Ｐ群で０．１±０．３個であり、群間に有意な差はなかった。摂取前後の変化量はＡ群が０．２±１．４個、Ｐ群が０．０±０．４個であり、群間に有意な差はなかった。摂取前後の比較でも有意な変化はなかった。
秒数について、摂取前はＡ群で５７．６±１１．０秒、Ｐ群で５９．０±６．６秒であり、群間に有意な差はなかった。摂取前後の変化量はＡ群が−２．６±１０．２秒、Ｐ群が−２．７±９．４秒であり、群間に有意な差はなかった。摂取前後の比較でも有意な変化はなかった。
【００６４】
［副次評価項目：脳機能（日本版リバーミード行動記憶検査）］
標準プロフィール点、スクリーニング点について、測定値の推移と、摂取前からの変化量を図７にそれぞれ図示した。
（１）標準プロフィール点
摂取前はＡ群で２０．６±２．２点、Ｐ群で１９．１±２．９点であり、Ａ群がＰ群と比べて有意に高値だった。摂取前後の変化量はＡ群が０．６±２．７点、Ｐ群が１．９±２．９点であり、群間に有意な差はなかった。また摂取前と比較してＰ群で得点の有意な増加が認められた（ｐ＜０．０１）。
（２）スクリーニング点
摂取前はＡ群で９．７±１．３点、Ｐ群で８．７±１．９点であり、Ａ群がＰ群と比べて有意に高値だった。摂取前後の変化量はＡ群が０．３±１．８点、Ｐ群が１．０±２．１点であり、群間に有意な差はなかった。また摂取前と比較してＰ群で得点の有意な増加が認められた（ｐ＜０．０５）。
【００６５】
［層別解析］
日本版リバーミード行動記憶検査について、標準プロフィール点とスクリーニング点はそれぞれ年齢に応じてカットオフ得点があり、各得点の前後が記憶障害を疑ってよいかどうかの判定目安となる。４０〜５９歳、６０歳以上でカットオフ得点が異なることから、５０歳代の被験者層、６０歳代の被験者層について、それぞれ日本版リバーミード行動記憶検査の評価を行った。
被験者背景因子を図８に示した。各被験者層について、一部の項目で群間に不均衡が見られたので、詳細を以下に記載する。
５０歳代の被験者層では、収縮期血圧について、Ｐ群がＡ群と比べて有意に高値だった。また有意な群間差はなかったが、ｎ−３系脂肪酸摂取量について、Ｐ群が２．０１±０．５２ｇ／日、Ａ群が１．７９±０．３７ｇ／日であり、Ｐ群が高値（ｐ＝０．１９２）、血中中性脂肪値について、Ｐ群が１２７．０±４２．４ｍｇ／ｄＬ、Ａ群が１５２．９±６７．０ｍｇ／ｄＬであり、Ａ群が高値だった（ｐ＝０．２４５）。６０歳代の被験者層では、収縮期血圧及び脈拍数について、Ａ群がＰ群と比べて有意に高値だった。またｎ−３系脂肪酸摂取量について、Ｐ群が１．７３±０．４３ｇ／日、Ａ群が２．２１±０．５３ｇ／日であり、Ａ群が有意に高値だった。血中中性脂肪値については、有意な群間差はなかったが、Ｐ群が１４２．５±５１．５ｍｇ／ｄＬ、Ａ群が１１８．２±２９．０ｍｇ／ｄＬであり、Ｐ群が高値だった（ｐ＝０．１９３）。
【００６６】
日本版リバーミード行動記憶検査の測定値の推移と、摂取前からの変化量を図９に示した。
（１）標準プロフィール点
５０歳代の被験者層について、摂取前はＡ群で２１．１±２．１点、Ｐ群で１９．０±３．３点であり、Ａ群がＰ群と比べて有意に高値だった。摂取前後の変化量はＡ群が０．２±２．５点、Ｐ群が２．４±２．９点であり、Ｐ群がＡ群と比べて有意に大きかった（ｐ＜０．０５）。また摂取前と比較してＰ群で得点の有意な増加が認められた（ｐ＜０．０５）。
６０歳代の被験者層について、摂取前はＡ群で１９．９±２．３点、Ｐ群で１９．１±２．７点であり、群間に有意差はなかった。摂取前後の変化量はＡ群が１．５±２．８点、Ｐ群が１．４±３．０点であり、群間に有意差はなかった。摂取前後での比較でも有意な変化はなかった。
（２）スクリーニング点
５０歳代の被験者層について、摂取前はＡ群で９．９±１．２点、Ｐ群で８．６±２．０点であり、Ａ群がＰ群と比べて有意に高値だった。摂取前後の変化量はＡ群が−０．１±１．８点、Ｐ群が１．５±２．０点であり、Ｐ群がＡ群と比べて有意に大きかった（ｐ＜０．０５）。また摂取前と比較してＰ群で得点の有意な増加が認められた（ｐ＜０．０５）。
６０歳代の被験者層について、摂取前はＡ群で９．２±１．４点、Ｐ群で８．７±１．９点であり、群間に有意差はなかった。摂取前後の変化量はＡ群が１．１±１．５点、Ｐ群が０．６±２．１点であり、群間に有意な差はなかった。また摂取前と比較してＡ群で得点の有意な増加が認められた（ｐ＜０．０５）。
【００６７】
［安全性の評価］
［有害事象］
試験剤に起因する有害事象（副次作用）はないと結論づけられた。
［測定値・検査値変動］
血液学的検査、血液生化学検査、尿検査の推移について、試験剤との関連性は「なし」と判定された。
【００６８】
［考察］
本試験では、５０歳以上７０歳以下の中高齢男女を対象に、ＤＨＡ及びＥＰＡを含む剤（ＤＨＡ・ＥＰＡ含有剤）を１２週間連続摂取させ、脳機能に対する影響を、無作為化二重盲検プラセボ対照並行群間比較にて、検討した。
【００６９】
その結果、Ｓｔｒｏｏｐ試験の「ステップ３誤数」が、プラセボ剤摂取群は有意に増加したが、被験剤摂取群は若干低下し、変化量において有意な群間差が認められた。Ｓｔｒｏｏｐ試験は脳へ同時に入ってくる２つの異なる情報（言語情報と色覚情報）の識別・処理能力を評価する検査であり、前頭前野機能（認知機能）の評価検査として用いられる。本試験は脳機能を評価する試験としては３ヵ月間と比較的短期間の試験であることから、さらに長期摂取させることで、その差がより顕著になる可能性がある。
【００７０】
脳機能検査として、単語の記憶試験、想起試験も行ったが、いずれも有意な群間差は認められなかった。記憶機能は、「記銘：情報を記憶すること」、「保持：記銘された情報を保持すること」、「再生：情報を再生すること」の３段階から成り立つとされている（今村陽子, 臨床高次脳機能評価マニュアル2000, 改訂第2版、新興医学出版社, 2001）。記憶力評価の検査では、練習効果による改善が見られるが、本試験でも両群とも即時自発想起数が増加し、１２週目の得点は両群とも平均５．５個であった。即時自発想起数以外の、その他の単語の記憶試験、単語の想起試験の各項目についても１２週目の得点が同程度であることから、両群とも練習効果により改善する上限に達し、群間差が見られなかったと推測された。
【００７１】
日本版リバーミード行動記憶検査は、全般的な記憶力や認知機能障害の評価検査として用いられており、特に日常生活に類似した状況下の記憶を測定することが特徴である。同等の難易度が確認された４種の並行検査が用意され、練習効果を排除して記憶障害を継続的に評価できる検査内容となっているが、本試験ではプラセボ剤摂取群で標準プロフィール点、スクリーニング点ともに有意に増加し、練習効果を完全には排除できなかった。１２週目の得点は両群ともほぼ同値であり、単語の記憶試験、想起試験と同様、得点の増加が上限に達したと考えられた。
【００７２】
日本版リバーミード行動記憶検査は、４０〜５９歳以下、６０歳以上で記憶障害の可能性を判断する目安となるカットオフ得点が示されている。年代によって効果が変わる可能性があることから、年齢が５０歳代、６０歳代での層別解析を行い、日本版リバーミード行動記憶検査の評価を行った。
【００７３】
その結果、６０歳代の被験者層では、ＤＨＡ・ＥＰＡ含有剤摂取群においてスクリーニング点が有意に増加した。１２週目の測定値について、ＤＨＡ・ＥＰＡ含有剤摂取群は標準プロフィール点、スクリーニング点ともに５０歳代の被験者層の測定値と同程度まで増加し、プラセボ剤摂取群と比べて練習効果を超えた増加を示した。高年齢で得点の増加が見られたことに関連して、ＤＨＡ・ＥＰＡ含有剤の吸収性について、年齢が高い方が、中性脂肪中ＤＨＡ濃度の有意な増加、リン脂質中ＤＨＡ濃度の高い増加傾向が認められたことが示されている。
【００７４】
本試験に使用したＤＨＡ・ＥＰＡ含有剤には強い抗酸化力を有するカロテノイドの１つであるアスタキサンチンが含まれている。この為、被験剤は、ＤＨＡを単体で摂取するより、抗酸化作用によるＤＨＡの保護効果が高いと考えられる。体内の抗酸化作用は加齢と共に低下することから、年齢の高い被験者層では、アスタキサンチンの抗酸化作用がより顕著に現れたことが考察されている。
【００７５】
本研究は、既報の脳機能試験で摂取させているＤＨＡ・ＥＰＡ量と比べて１／２程度の摂取量でありながら、６０歳代の被験者層において得点が改善した。この理由として、アスタキサンチンが含まれることでＤＨＡの吸収性が高まったことが考えられる。なお、５０歳代の被験者層において、標準プロフィール点、スクリーニング点ともに有意な群間差が認められた。これについて、プラセボ剤摂取群の摂取前の標準プロフィール点、及びスクリーニング点が、被験剤摂取群と比べて有意に低値であり、両群とも得点の増加の上限に達した為、見かけ上、プラセボ剤摂取群で改善したと考えられた。
【００７６】
安全性に関して、有害事象はＰ群で１名発現した眼周囲軽度発赤（痂疲なし）について、試験責任医師により試験剤との関連性は「多分なし」と判定された。有害事象の発現率は、Ｐ群が１８．２％、Ａ群が４２．４％であり、Ａ群の方が高かったが、他試験と比べて特に高い発現率ではなく、個々の有害事象の検討でも、いずれも試験剤との関連性は「なし」と判断されており、安全性において問題はないと考えられた。また、プラセボ剤摂取群の血液検査では、血小板数、Ｎａ、Ｋ、収縮期血圧、拡張期血圧について有意な上昇、ＡＬＴ（ＧＰＴ）、γ−ＧＴ（γ−ＧＴＰ）、Ｎａ、ＣＬについて有意な低下が見られた。ＤＨＡ・ＥＰＡ含有剤摂取群では、アルブミン、クレアチニン、総コレステロール、ＡＳＴ（ＧＯＴ）、ＡＬＴ（ＧＰＴ）、Ｎａ、Ｋ、体重、ＢＭＩ、収縮期血圧、拡張期血圧ついて有意な上昇、ＣＬ、血糖について有意な低下が見られたが、いずれも軽微な変動であり、試験責任医師より臨床上問題はないと判断された。以上より、本試験条件下において、ＤＨＡ・ＥＰＡ含有剤は安全に摂取できると結論づけられた。
【産業上の利用可能性】
【００７７】
本発明の認知機能改善剤を用いれば、ヒトの認知機能を改善することができる。さらに、過剰摂取のおそれを低減し、安全に継続して摂取することができる。
【符号の説明】
【００７８】
１  内容液
２  剤皮
１０  ソフトカプセル
【図１】
2017078030.tif 000003
【図２】
2017078030.tif 000004
【図３】
2017078030.tif 000005
【図４】
2017078030.tif 000006
【図５】
2017078030.tif 000007
【図６】
2017078030.tif 000008
【図７】
2017078030.tif 000009
【図８】
2017078030.tif 000010
【図９】
2017078030.tif 000011
【手続補正書】
【提出日】平成28年6月17日(2016.6.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）と、アスタキサンチンとを含有する認知機能改善剤であって、
前記認知機能改善剤を、ヒトに対して、１日当たり４００ｍｇ以上６００ｍｇ以下のＤＨＡが、経口投与されるように用いられることを特徴とする認知機能改善剤。（ただし、前記認知機能改善剤にグリセロリン脂質が含有される場合、および、前記認知機能改善剤をヒトに対してアラキドン酸が１日当たり２４０ｍｇ以上経口投与されるように用いられる場合を除く。）
【請求項２】
前記認知機能改善剤がエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）を含有するものであって、前記認知機能改善剤に含有される、ＤＨＡとＥＰＡとの重量比（ＤＨＡ：ＥＰＡ）が２０：１〜５：１であることを特徴とする請求項１記載の認知機能改善剤。
【請求項３】
前記認知機能改善剤が、１錠あたりＤＨＡを３０ｍｇ以上２００ｍｇ以下含有する錠剤であることを特徴とする請求項１または２記載の認知機能改善剤。