(57)【要約】【課題】安価で安全性が高く、かつ、メラニン色素抑制効果が高いメラニン色素抑制剤に関する技術を提供することを目的とする。【解決手段】１，５−Ｄ−アンヒドロフルクトースを６０℃〜１５０℃の範囲で３０秒〜１００時間加熱処理された加熱アンヒドロフルクトースとアスコルビン酸との混合物又は加熱アンヒドロフルクトースとアルブチンとの混合物を含有するメラニン色素抑制剤またはメラニン色素抑制剤の製造方法により解決する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
加熱処理された１，５−Ｄ−アンヒドロフルクトースと、
アスコルビン酸及び／又はアルブチンと、
を含有する、メラニン色素抑制剤。
【請求項２】
前記加熱処理が、６０〜１５０℃の範囲内で行われる、請求項１に記載のメラニン色素抑制剤。
【請求項３】
前記加熱処理が、３０秒〜１００時間の範囲内で行われる、請求項１又は２に記載のメラニン色素抑制剤。
【請求項４】
前記１，５−Ｄ−アンヒドロフルクトースのｐＨが３．０〜４．０の範囲内である、請求項１〜３のいずれか１項に記載のメラニン色素抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヒトの皮膚におけるメラニン色素の発生を抑制する効果を有するメラニン色素抑制剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚の色や髪の毛の色を左右するメラニン色素は、生体内に見られる褐色ないし黒色の色素の総称である。その生合成経路は、メラノサイトと呼ばれる色素細胞中のメラノソーム顆粒中で、チロシンがチロシナーゼによって酸化され、何段階もの酸化重合過程を経て合成される。
【０００３】
メラニン色素の生成を抑制する物質としては、アスコルビン酸、アルブチンなどが知られているが、より安全で効果の高いメラニン色素抑制物質を天然物から探索する動きがあり、その成果として、コウジ酸、フェルラ酸、サツマイモ抽出物、味噌抽出物、茶抽出物などにメラニン色素抑制効果が認められたとの報告がある（非特許文献１〜３等）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】間ら，日本食品化学工学会誌，第45巻，第3号，p.205-209，1998年
【非特許文献２】秋保ら，日皮会誌，第101巻，第6号，p.609-613，1991年
【非特許文献３】三嶋ら，皮膚，第36巻，第2号，p.134-150，1994年
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
上記のように、これまでコウジ酸、フェルラ酸、サツマイモ抽出物、味噌抽出物、茶抽出物などがメラニン色素抑制物質として開発された。コウジ酸は優れた美白成分だが、その安定性にやや難があり、フェルラ酸、サツマイモ抽出物、味噌抽出物、茶抽出物は効果が低いという点で課題があった。
【０００６】
そこで本発明は、安価で安全性が高く、かつ、メラニン色素抑制効果が高いメラニン色素抑制剤に関する技術を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、１，５−Ｄ−アンヒドロフルクトースの食品分野への応用を検討していたところ、偶然にも、加熱処理を行った１，５−Ｄ−アンヒドロフルクトースと、アスコルビン酸及び／又はアルブチンとの混合物がメラニン色素の生成を顕著に抑制することを見出した。
【０００８】
本発明は係る知見に基づきなされたものであり、加熱処理された１，５−Ｄ−アンヒドロフルクトースと、アスコルビン酸及び／又はアルブチンと、を含有する、メラニン色素抑制剤を提供するものである。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、１，５−Ｄ−アンヒドロフルクトース、アスコルビン酸、アルブチンという、容易に入手可能な原料により、安全性が高く、効果の優れたメラニン色素抑制剤を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本実施形態で使用する１，５−Ｄ−アンヒドロフルクトースはその製法や含有量に特に制限されず、１，５−Ｄ−アンヒドロフルクトースを１０重量％以上含んでいるものであればよい。好ましくは市販されている１，５−Ｄ−アンヒドロフルクトースを１０〜６０重量％を含有する糖液である。また、加熱装置や加熱条件によって加水をすることで使用する加熱装置や加熱条件などを調整することができる。
【００１１】
本実施形態において、加熱アンヒドロフルクトース（加熱ＡＦ）とは、１，５−Ｄ−アンヒドロフルクトースを６０℃〜１５０℃の範囲で３０秒〜１００時間加熱処理された１，５−Ｄ−アンヒドロフルクトースを意味する。糖度と温度が高い場合は短時間で、糖度と温度が低い場合は長時間で熱処理を行うことができる。好ましくは溶液の糖度が約２０〜３０Ｂｒｉｘのとき１００℃〜１０５℃で１時間〜３時間である。また、加熱温度はその糖溶液の沸点近くの温度で溶液のｐＨが４．０を切る時点を加熱終了の目安とし、３．０以上になるようにする。尚、加熱ＡＦはわずかに着色しているので、活性炭等で脱色したものを用いることもできる。
【００１２】
１，５−Ｄ−アンヒドロフルクトース（ＡＦ）を加熱すると、アスコピロン（Ascopyrone） Ｍ、Ｔ、Ｐ等が生成され、これらの化合物が強いチロシナーゼ阻害活性を示す。
【００１３】
【化１】
2017202999.tif 000002
【００１４】
本実施形態に係るメラニン色素抑制剤における加熱アンヒドロフルクトース（加熱ＡＦ）の含有量は、２５０ｐｐｍ以上であることが好ましく、５００ｐｐｍ以上であることがより好ましく、７５０ｐｐｍ以上であればさらに好ましい。加熱アンヒドロフルクトース（加熱ＡＦ）は濃度依存的にメラニン色素抑制効果が向上するが、１０００ｐｐｍ以上は効果が頭打ちになり、また、コストの面を考慮すれば、上限は１０００ｐｐｍ程度である。
【００１５】
本実施形態に係るメラニン色素抑制剤におけるアスコルビン酸の含有量は、５０ｐｐｍ以上であることが好ましく、１５０ｐｐｍ以上であることがより好ましく、２５０ｐｐｍ以上であればさらに好ましい。アスコルビン酸は濃度依存的にメラニン色素抑制効果が向上するが、２５０ｐｐｍ以上は効果が頭打ちになり、また、コストの面を考慮すれば、上限は２５０ｐｐｍ程度である。
【００１６】
本実施形態に係るメラニン色素抑制剤におけるアルブチンの含有量は、１０ｐｐｍ以上であることが好ましく、５０ｐｐｍ以上であることがより好ましく、１００ｐｐｍ以上であればさらに好ましい。アルブチンは濃度依存的にメラニン色素抑制効果が向上するが、１００ｐｐｍ以上は効果が頭打ちになり、また、コストの面を考慮すれば、上限は１００ｐｐｍ程度である。
【００１７】
本実施形態において、アスコルビン酸とアルブチンとは加熱ＡＦと併用することもできる。
【００１８】
本実施形態に係るメラニン色素抑制剤の剤型は特に限定されず、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、液剤、カプセル剤、顆粒剤、錠剤、トローチ剤、経皮吸収型製剤（例えば軟膏、クリーム、乳液、ローション、パック、オイル、浴用剤等）などを挙げることができる。
【００１９】
また、本実施形態に係るメラニン色素抑制剤は、本発明の目的を逸脱しない範囲で、保存剤、抗酸化剤、ｐＨ調節剤などの添加剤を添加することができる。
【００２０】
以下、実施例を挙げて本発明を説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【実施例】
【００２１】
１．１，５−Ｄ−アンヒドロフルクトースの加熱処理
市販されている１，５−Ｄ−アンヒドロフルクトース含有水飴（日本澱粉工業株式会社製、１，５−Ｄ−アンヒドロフルクトース約40%、Brix72）に水を加えた水溶液を用いて水分が蒸発しないように二つ口の丸底フラスコの上部に冷却コンデンサーと温度計を付け蒸発してくる水分を還流できるようにした装置（自社組立品）に１，５−Ｄ−アンヒドロフルクトースを入れ、90℃に加温した温水槽に丸底フラスコを浸け、１，５−Ｄ−アンヒドロフルクトースを85℃で7.5時間加熱した（以下、上記のように調製した１，５−Ｄ−アンヒドロフルクトースを「加熱ＡＦ」という）。
【００２２】
２．メラニン生成抑制作用の検討
（１）試験方法
メラニン生成抑制剤として、上記のように調製した加熱ＡＦと、一般にメラニン生成抑制作用を有することが知られているアスコルビン酸およびアルブチンを使用した。サンプルは、加熱ＡＦ、アスコルビン酸、アルブチンを所望の割合で混合することにより調製した（表１のサンプル１〜２０）。
【００２３】
マウスメラノーマB16細胞を10％ウシ胎児血清（FBS）を含有するEagle MEM培地で継代培養し、5×104個/mlの細胞懸濁液5mlを培養シャーレに播種した。24時間培養後、サンプルを添加した培地と交換し、さらに72時間培養した。その間、再度サンプルを添加した培地で培地交換を行った。培養後、シャーレより細胞を剥離回収し、遠心分離によりペレットを作成した。この細胞ペレットの色をメラニン生成とし、肉眼的に観察した。なお、上記の操作においてサンプルを添加していない区（無添加区）をコントロールとし、以下の判断基準に基づきメラニン色素生成抑制度を判定した。また培養後の細胞数を測定し、細胞生存率を確認した。測定はいずれも3回行い、その平均値を算出した。細胞生存率は、いずれも85％以上であった。
【００２４】
（メラニン色素生成抑制度の判定基準）
−  ：黒色（コントロールと同程度）
１＋：黒色（コントロールより淡い）
２＋：灰色から黒色
３＋：灰色
４＋：白色〜灰色
５＋：白色
【００２５】
（２）試験結果
結果を表１に示す。
加熱ＡＦのみ（サンプル１〜３）、アスコルビン酸のみ（サンプル４、５）、アルブチンのみ（サンプル６、７）の場合は、いずれも黒色又は灰色から黒色であり、メラニン色素抑制効果は認められなかった。
【００２６】
一方、加熱ＡＦにアスコルビン酸を混合したもの（サンプル８〜１３）及び加熱ＡＦにアルブチンを混合したもの（サンプル１４〜１９）は、各成分を単独で使用した場合と比較して、顕著にメラニン色素を抑制することが判明した。
【００２７】
これらの結果から、加熱処理を行った１，５−Ｄ−アンヒドロフルクトース（加熱ＡＦ）は、アスコルビン酸やアルブチンと併用することにより、メラニン色素抑制効果を飛躍的に向上させることが明らかとなった。尚、加熱ＡＦとアスコルビン酸、アルブチンの三種の組み合わせに併用効果があることも確認した（サンプル２０）。また、これらの試料はいずれも水溶性であり皮膚親和性が高く、乳化剤の添加は不要である。
【００２８】
【表１】
2017202999.tif 000003