(57)【要約】【課題】顕著なメラニン産生能を発現する毛髪剤を提供する。【解決手段】有効成分として、フォルスコリン、４−ヒドロキシフェニルアラニン、３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン、ナリンゲニン、ピペリン及びカプサイシンからなる群から選択される少なくとも１種と、キラヤサポニン及びサルササポニンのうちの少なくとも１種とを含む毛髪剤である。有効成分として、さらにミシマサイコ属植物の抽出物を含むことが好ましい。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
有効成分として、フォルスコリン、４−ヒドロキシフェニルアラニン、３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン、ナリンゲニン、ピペリン及びカプサイシンからなる群から選択される少なくとも１種と、キラヤサポニン及びサルササポニンからなる群から選択される少なくとも１種を含むことを特徴とする毛髪剤。
【請求項２】
有効成分として、コレウスフォルスコリ根抽出物、アボガド抽出物、ドーパムクナ抽出物、トマト抽出物、胡椒抽出物及び唐辛子抽出物からなる群から選択される少なくとも１種と、キラヤ樹皮抽出物及びユッカ抽出物のうちの少なくとも１種とを含むことを特徴とする毛髪剤。
【請求項３】
有効成分として、さらにミシマサイコ属植物の抽出物を含むことを特徴とする、請求項１又は２に記載の毛髪剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、白髪を改善し得る毛髪剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、老化（加齢）に伴う白髪化に対し、髪を黒髪へと変化させる方法として、染毛が主として行われてきた。ところが近年、白髪化は、頭皮の毛包中の色素細胞が老化やストレス、栄養不良等により機能が低下することで起こることが分かってきた。そして、白髪化の改善に対して、色素細胞におけるメラニン産生を促進させる天然成分が見出され、そのような成分を用いた白髪防止剤が種々提案されている（特許文献１〜１０参照）。
【０００３】
特許文献１には、オタネニンジン、田七人参、タンジン、ユッカ、ビワ、キンギンカ及びサルサから選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物を主成分とするメラニン産生促進剤が記載されている。
【０００４】
特許文献２には、植物抽出物を有効成分として含んでなるチロシナーゼ活性促進用組成物であって、有効成分が、アキノタムラソウ属（Salvia）、ハナスゲ属（Anemarrhena）及びサツマイモ属（Ipomoea）からなる群より選ばれる属に属する植物由来の抽出物の少なくとも１種からなる組成物を白髪防止組成物として用いる旨が記載されている。
【０００５】
特許文献３には、６−ベンジルアミノプリン及び該物質を有効成分として含んでなるナンバンゲ抽出物が白髪防止組成物として有用な旨記載されている。
【０００６】
特許文献４には、ステルビン及び該物質を有効成分として含んでなるヤーバサンタ及びカワラヨモギ抽出物が白髪防止組成物として有用な旨記載されている。
【０００７】
特許文献５には、ペオノール及び該物質を有効成分として含んでなるボタンピ抽出物がメラニン産生能を有する旨記載されている。
【０００８】
特許文献６には、コレウスフォルスコリ根エキス中に含まれるフォルスコリンに発毛効果があることが記載されており、特許文献７には、同物質と黒砂糖エキス、オレンジエキス、チンピエキス、ウメエキス、ワカメエキスからなる群より選ばれる少なくとも１種の植物エキスから成る組成物が、メラニン色素を生成するメラノサイトの分化増殖に関連するＭＩＴＦの産生を促進する旨が記載されている。
【０００９】
特許文献８には、胡椒の辛味成分であるピペリンがメラニン産生促進効果を有することが記載されている。また、特許文献９には種々のフラボノイド系ポリフェノール（ルテオリン、ケルセチン等）、特許文献１０にはＬ−ＤＯＰＡ（３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン）が白髪防止効果を有することが記載されている。
【００１０】
一方、特許文献１１には、唐辛子の辛味成分であるカプサイシンがメラニン産生を抑制する旨の記載があり、また、特許文献１２にはフラボノイド系ポリフェノールの一種であるナリンゲニンにメラニン産生を抑制し美白効果があるとの記載がある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１１】
【特許文献１】特開２００１−２８８０９８号公報
【特許文献２】特開平９−２６３５４０号公報
【特許文献３】特開２０１３−１５９５９２号公報
【特許文献４】特開２０１３−１４７４９１号公報
【特許文献５】特開２００５−０１５４７２号公報
【特許文献６】特開平１−２１６９１２号公報
【特許文献７】特開２０１３−１０６９３号公報
【特許文献８】特表２００２−５２０２７５号公報
【特許文献９】特開２００４−２２６４号公報
【特許文献１０】特開昭６２−６３５０９号公報
【特許文献１１】特開平６−２２７９５９号公報
【特許文献１２】特開２００５−２８９８８０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
上記のように公知資料では様々なメラニン産生促進物質、あるいは逆に類似構造を持ちながらメラニン産生を抑制する物質が混在している。しかしながら、メラニン産生抑制物質はもちろんのこと、前記公知資料に記載されたメラニン産生促進物質のいずれもが白髪防止の効果は不十分であり、加齢やストレスにより進行中の白髪化と競合して白髪化を抑制もしくは改善し得るメラニン産生促進能は有しておらず、実質的な白髪改善効果を有する物質もしくは組成物が強く望まれていた。
【００１３】
すなわち、本発明の目的は、白髪を抑制もしくは改善することができる毛髪剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本発明者らは、最も実用系に近い「ヒト皮膚三次元培養細胞モデル」を利用した試験系で鋭意検討したところ、フォルスコリン、４−ヒドロキシフェニルアラニン、３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン、ナリンゲニン、ピペリン及びカプサイシンからなる群から選択される少なくとも１種と、キラヤサポニン及びサルササポニンのうちの少なくとも１種とを併用することにより、白髪化を抑制もしくは改善し得る本発明を完成するに至った。
【００１５】
すなわち、本発明の第１の態様の毛髪剤は、有効成分として、フォルスコリン、４−ヒドロキシフェニルアラニン、３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン、ナリンゲニン、ピペリン及びカプサイシンからなる群から選択される少なくとも１種と、キラヤサポニン及びサルササポニンのうちの少なくとも１種とを含むことを特徴とする。
【００１６】
本発明の第１の態様による毛髪剤は、有効成分たるフォルスコリン、４−ヒドロキシフェニルアラニン、３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン、ナリンゲニン、ピペリン及びカプサイシンからなる群から選択される少なくとも１種の成分（以下、「第１成分」とも呼ぶ。）と、キラヤサポニン及びサルササポニンのうちの少なくとも１種の成分（以下、「第２成分」とも呼ぶ。）とを併用したことにより白髪化を抑制もしくは改善し得る。
【００１７】
本発明の第２の態様の毛髪剤は、有効成分として、コレウスフォルスコリ根抽出物、アボガド抽出物、ドーパムクナ抽出物、トマト抽出物、胡椒抽出物及び唐辛子抽出物からなる群から選択される少なくとも１種と、キラヤ樹皮抽出物及びユッカ抽出物のうちの少なくとも１種とを含むことを特徴とする。
【００１８】
本発明の第２の態様による毛髪剤は、上記第１の態様における各有効成分の代わりに、当該有効成分を含む植物の抽出物を用いる態様である。具体的には、前記第１成分を含む植物の抽出物として、コレウスフォルスコリ根抽出物、アボガド抽出物、ドーパムクナ抽出物、トマト抽出物、胡椒抽出物及び唐辛子抽出物からなる群から選択される少なくとも１種を用い、前記第２成分を含む植物の抽出物として、キラヤ樹皮抽出物及びユッカ抽出物のうちの少なくとも１種を用いる。
【００１９】
本発明のいずれの態様においても、有効成分として、さらにミシマサイコ属植物の抽出物を含むことが好ましい。当該抽出物を含むことで、白髪化を抑制もしくは改善の効果をより向上することができる。
【００２０】
以上のような本発明の毛髪剤は、白髪を防止するために頭皮に付与する白髪防止用皮膚外用剤、尋常性白斑症治療剤、サンレスタンニング剤などに適用し得る。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
以下、本発明の毛髪剤の好適態様について説明する。
【００２２】
［第１の実施形態］
本発明の第１の実施形態の毛髪剤は、有効成分として、フォルスコリン、４−ヒドロキシフェニルアラニン、３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン、ナリンゲニン、ピペリン及びカプサイシンからなる群から選択される少なくとも１種と、キラヤサポニン及びサルササポニンのうちの少なくとも１種とを含む。以下に、各有効成分について説明する。
【００２３】
フォルスコリンはインド原産の植物であるコレウスフォルスコリの根に多く含まれる物質であり、４−ヒドロキシフェニルアラニン（チロシン）はアボガド、バナナ、豆類等、多くの植物でフェニルアラニンから生合成されるアミノ酸である。３，４−ジヒドロキシフェニルアラニンはＬ―ＤＯＰＡとも呼ばれるアミノ酸で、チロシンのフェノール酸化酵素による酸化によって得られ、天然にはドーパムクナに多く含まれる。ナリンゲニンは、グレープフルーツ、オレンジ、トマト等、多くの果実中に含まれるフラボノイド系ポリフェノールである。ピペリンおよびカプサイシンはそれぞれ、胡椒と唐辛子中に含まれる辛味成分である。
【００２４】
一方、上記有効成分と併用することで相乗効果を発揮するキラヤサポニンおよびサルササポニンはそれぞれ、キラヤの樹皮またはユッカに含まれる天然の界面活性剤であり、工業的に食品添加物として現在、多量に使用されている。
【００２５】
［第２の実施形態］
第２の実施形態は、第１の実施形態で記述した各有効成分を基原植物から高度に分離精製することなく、基原植物の抽出物をそのまま使用するか、簡便な方法で精製したものを用いるものである。本発明で好ましく用いられる有効成分としての第１成分（フォルスコリン、４−ヒドロキシフェニルアラニン、３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン、ナリンゲニン、ピペリンおよびカプサイシン）の基原植物はそれぞれ、コレウスフォルスコリ、アボガド、ドーパムクナ、トマト、胡椒および唐辛子である。また、第２成分（キラヤサポニン、サルササポニン）の基原植物はそれぞれキラヤ樹皮、ユッカである。
【００２６】
上記基原植物から各有効成分の抽出は一般に、水、エタノールもしくは含水エタノールを用い、室温から加熱還流条件下で行うことができる。有効成分の親疎水性により抽出溶媒は適宜選択されるが、８０〜１００％含水エタノールが好ましく用いられる。
【００２７】
以上の第１及び第２の実施形態のいずれにおいても、メラニン産生促進能、ひいては白髪改善効果をより高めるため、さらにミシマサイコ属植物の抽出物を併用することが好ましい。ミシマサイコ属植物中には生理活性物質としてサイコサポニン類が含まれており、特にサイコサポニンｂ２およびサイコサポニンｄにメラニン産生促進能があるためである（特願２０１５−２３４１８５）。ミシマサイコ属植物としては、ミシマサイコ、ツキヌキサイコ、キュウシュウサイコ、マンシュウサイコ、ホソバミシマサイコ、ダフリヤサイコ、トウサイコ等が挙げられ、本発明ではそれらの根、茎、葉、花弁等の抽出物が好ましく用いられる。ミシマサイコ属植物からのサイコサポニン類の抽出は一般に、８０〜９０％含水エタノールが用いられ、例えば、ミシマサイコ葉乾燥粉末１０ｇに対し８０％含水エタノール３００ｍｌを加え、２〜３時間、加熱還流することで効率良く抽出することができる。
【００２８】
第１及び第２の実施形態のいずれにおいても、各有効成分の含有量は毛髪剤に対して、０．０１〜５質量％とすることが好ましく、０．０３〜３質量％がより好ましい。一方、有効成分と併用する天然界面活性剤のキラヤサポニンおよびサルササポニンの含有量は毛髪剤に対して、０．３〜１０質量％が好ましく、０．５〜７質量％がより好ましい。さらに、第１及び第２の実施形態において、ミシマサイコ属植物の抽出物を併用する場合、その含有量は、０．０３〜３質量％が好ましく、０．０５〜２質量％がより好ましい。
【００２９】
［溶媒］
第１及び第２の実施形態のいずれにおいても、有効成分および天然界面活性剤は後述するナノ分散物とする場合を除き、溶媒に溶解させて用いられる。使用し得る溶媒としては、水、メタノール、エタノール、イソプロパノール、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、１，４−ブチレングリコール等が挙げられるが、水、エタノール、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコールおよび、それらの混合溶媒が好ましく用いられる。
【００３０】
［他の成分］
第１及び第２の実施形態のいずれにおいても、必要に応じて、他の成分として、界面活性剤、浸透促進剤、保湿剤、血行促進剤、抗炎症剤、抗酸化剤、紫外線防止剤、抗菌剤、細胞増殖促進剤、細胞分化誘導剤、香料、油脂、酵素、清涼剤、ビタミン剤、アミノ酸、タンパク質、糖質等を含むことが好ましい。
【００３１】
第１及び第２の実施形態のいずれにおいても、毛髪剤は溶液（例えばトニックやローション）、ジェルまたはクリームの形態で用いられ、溶液の形態で用いられる場合、加圧された容器のノズルから噴霧させても泡状に噴出させてもよい。
【００３２】
［ナノ分散］
以上の第１及び第２の実施形態のいずれにおいても、前記有効成分が水に難溶な場合、当該成分をナノ分散したナノ分散物とすることが好ましい。ナノ分散、すなわち体積平均粒径２００ｎｍ以下に分散することにより毛根からの浸透性が向上し、白髪防止効果をさらに高めることができる。当該ナノ分散物の体積平均粒径としては、１００ｎｍ以下であることが浸透性や吸収性の向上の観点からより好ましい。
【００３３】
ナノ分散する場合、キラヤサポニン又はサルササポニン（キラヤ樹皮抽出物又はユッカ抽出物）が分散剤として働き、安定なナノ分散物を得ることができる。すなわち、キラヤサポニン及びサルササポニンは高い分散性を有する非イオン性界面活性剤であり、前記有効成分を高濃度に溶解もしくはナノ分散するのに適している。
【００３４】
以下に、水に難溶な有効成分をナノ分散する手法について説明する。例えば、フォルスコリンやピペリン、カプサイシン等は水に極めて溶解しにくい化合物であるため、通常の方法では高濃度の含水溶液を調製することは困難である。そこで、本発明においては、高濃度の含水溶液を調製するため、界面活性剤や分散安定剤を用いたナノ分散技術を用いることができる。ナノ分散技術としては、強力な機械的攪拌（ホモジナイザー使用）による従来型の分散技術、再沈法と呼ばれる液・液混合による分散技術、及びマイクロサイズの流路中でのマイクロミキサー（フローマイクロリアクター）を用いた分散技術が代表的な方法として挙げられる。本発明において、ナノ分散物の製造方法に特に制限はないが、フローマイクロリアクターによる製造方法は、小サイズで、粒度分布ピークのシャープな微粒子分散液を与えると同時に、一般に分散安定性、保存安定性に優れた分散液を与えるので好ましい製造方法である。
【００３５】
本発明に用いられるフローマイクロリアクターとしては、複数の液体を混合可能な微小な流路を備える限り特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、基板型フローマイクロリアクターや管継手型のフローマイクロリアクターなどが挙げられる。
【００３６】
基板型フローマイクロリアクターとしては、本発明の効果を損なわない限り特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、W.Ehrfeld, V.Hessel, H.Lowe著，「マイクロリアクターズ」，第３章（Wiley-VCH社刊）に記載されるフローマイクロリアクター（セグメント型マイクロミキサー）や特開２００５−２８８２５４号公報に開示されたフローマイクロリアクター（中心衝突型マイクロミキサー。H.  Nagasawa,  N.  Aoki  and  K.  Mae,  “Design  of  a  New    Micromixer  for  Instant  Mixing  Based  on  the  Collision  of  Micro  Segments,” Based  on  the  Collision  of  Micro  Segments,”にて性能が報告されている）などが挙げられる。
【実施例】
【００３７】
以下に、実施例により本発明をさらに具体的に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。
【００３８】
［実施例１］
フォルスコリン１００ｍｇをエタノール１ｍｌに加熱溶解し、撹拌しながら、２５％キラヤサポニン溶液（商品名、キラヤニンＤ−１００（丸善製薬製）：キラヤサポニン／水／プロピレングリコール＝２５ｗｔ％／６０ｗｔ％／１５ｗｔ％）４．０ｇを水１００ｍｌに溶かした液にゆっくり加え、透明溶液（試料１）を得た。６ウェルプレートにカルチャースタンドを置き、ＭａｔＴｅｋ社製ヒト皮膚三次元培養モデルカップＭＥＬ−３００Ａ（８ｍｍ）を設置した。培地として１ウェル当たり、ＥＰＩ-１００ＮＭＭを５ｍｌ添加し、皮膚モデルカップに試料１の５０μｌを加え、インキュベーター中、５％二酸化炭素雰囲気下、３７℃で３週間培養した。その間、１日おきに皮膚モデルカップに試料溶液５０μｌを加え、培地を新鮮なもの５ｍｌで交換した。
３週間後、皮膚モデルカップのメンブレンを専用打ち抜き機で取り出し、１Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液０．５ｍｌを加え、９０℃の湯浴中で３時間激しく振とうして細胞を分解した。０．４５μｍのフィルターを通して濾過し、濾液をマイクロプレートリーダーで吸光度測定した（波長：４０５ｎｍ）。４０５ｎｍの吸光度は１．３３であった。
【００３９】
［実施例２］
３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン（Ｌ−ＤＯＰＡ：和光純薬工業製）１００ｍｇをプロピレングリコール１ｍｌおよび水１ｍｌに加熱溶解し、撹拌しながら、２５％キラヤサポニン溶液４．０ｇを水１００ｍｌに溶かした液にゆっくり加え、透明溶液（試料２）を得た。６ウェルプレートにカルチャースタンドを置き、ＭａｔＴｅｋ社製ヒト皮膚三次元培養モデルカップＭＥＬ−３００Ａ（８ｍｍ）を設置した。培地として１ウェル当たり、ＥＰＩ-１００ＮＭＭを５ｍｌ添加し、皮膚モデルカップに試料１の５０μｌを加え、インキュベーター中、５％二酸化炭素雰囲気下、３７℃で３週間培養した。その間、１日おきに皮膚モデルカップに試料溶液５０μｌを加え、培地を新鮮なもの５ｍｌで交換した。
３週間後、皮膚モデルカップのメンブレンを専用打ち抜き機で取り出し、実施例１と同様にして吸光度測定を行ったところ、４０５ｎｍの吸光度は１．３０であった。
【００４０】
［実施例３］
ナリンゲニン（和光純薬工業製）１００ｍｇをプロピレングリコール１ｍｌに加熱溶解し、撹拌しながら、２５％キラヤサポニン溶液４．０ｇを水１００ｍｌに溶かした液にゆっくり加え、透明溶液（試料３）を得た。実施例１と同様な方法で３週間培養、その後、実施例１と同様にして吸光度測定を行ったところ、４０５ｎｍの吸光度は１．２８であった。
【００４１】
［実施例４］
ピペリン（東京化成製）１００ｍｇをプロピレングリコール１ｍｌに加熱溶解し、撹拌しながら、２５％キラヤサポニン溶液４．０ｇを水１００ｍｌに溶かした液にゆっくり加え、透明溶液（試料４）を得た。実施例１と同様な方法で３週間培養、その後、実施例１と同様にして吸光度測定を行ったところ、４０５ｎｍの吸光度は１．３１であった。
【００４２】
［実施例５］
フォルスコリン１００ｍｇ、３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン１００ｍｇおよびナリンゲニン１００ｍｇをエタノール５ｍｌおよび水０．５ｍｌに加熱溶解し、撹拌しながら、２５％キラヤサポニン溶液５．０ｇを水１００ｍｌに溶かした液にゆっくり加え、透明溶液（試料５）を得た。実施例１と同様な方法で３週間培養、その後、実施例１と同様にして吸光度測定を行ったところ、４０５ｎｍの吸光度は１．４５であった。
【００４３】
［実施例６］
フォルスコリン１００ｍｇ、３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン１００ｍｇ、ナリンゲニン１００ｍｇおよびミシマサイコ葉抽出物（前記の方法で抽出したもの）１００ｍｇをエタノール５ｍｌおよび水０．５ｍｌに加熱溶解し、撹拌しながら、２５％キラヤサポニン溶液５．０ｇを水１００ｍｌに溶かした液にゆっくり加え、透明溶液（試料６）を得た。実施例１と同様な方法で３週間培養、その後、実施例１と同様にして吸光度測定を行ったところ、４０５ｎｍの吸光度は１．６２であった。
【００４４】
［実施例７〜１４］
各実施例において、実施例６と同様な方法で、表１に示す有効成分をプロピレングリコールまたはエタノール１〜２ｍｌに加熱溶解し、撹拌しながら、２５％キラヤサポニン溶液４．０〜５．０ｇまたは７．５％サルササポニン溶液（商品名、丸善製薬製サラキープＡＬＳ：サルササポニン／水／エタノール：７．５ｗｔ％／４２．５ｗｔ％／５０ｗｔ％）１２．０〜１５．０ｇを水１００ｍｌに溶かした液にゆっくり加え、透明溶液（試料７〜１４）を得た。実施例１と同様な方法で３週間培養、その後、実施例１と同様にして吸光度測定を行った。定量結果を表１に記した。
【００４５】
【表１】
2017203012.tif 000002
【００４６】
［比較例１］
フォルスコリン１００ｍｇをエタノール１ｍｌに加熱溶解し、撹拌しながら、ラウリル硫酸ナトリウム（和光純薬製）１．０ｇを水１００ｍｌに溶かした液にゆっくり加え、透明溶液（比較試料１）を得た。実施例１と同様な方法で３週間培養、その後、実施例１と同様にして吸光度測定を行ったところ、４０５ｎｍの吸光度は０．５８であった。
【００４７】
［比較例２］
４−ヒドロキシフェニルアラニン（東京化成製）１００ｍｇをプロピレングリコール１．５ｍｌおよび水０．５ｍｌに加熱溶解し、撹拌しながら、ラウリル硫酸ナトリウム（和光純薬製）１．０ｇを水１００ｍｌに溶かした液に加えて比較試料２を調製した。実施例１と同様な方法で３週間培養、その後、実施例１と同様にして吸光度測定を行ったところ、４０５ｎｍの吸光度は０．４８であった。
【００４８】
［比較例３］
３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン１００ｍｇをプロピレングリコール１．５ｍｌおよび水０．５ｍｌに加熱溶解し、撹拌しながら、ラウリル硫酸ナトリウム（和光純薬製）１．０ｇを水１００ｍｌに溶かした液に加えて比較試料３を調製した。実施例１と同様な方法で３週間培養、その後、実施例１と同様にして吸光度測定を行ったところ、４０５ｎｍの吸光度は０．５５であった。
【００４９】
［比較例４］
ナリンゲニン１００ｍｇをプロピレングリコール１．５ｍｌに加熱溶解し、撹拌しながら、ポリエチレングリコール４００（和光純薬製）１．０ｇを水１００ｍｌに溶かした液に加えて比較試料４を調製した。実施例１と同様な方法で３週間培養、その後、実施例１と同様にして吸光度測定を行ったところ、４０５ｎｍの吸光度は０．５３であった。
【００５０】
［比較例５］
ピペリン１００ｍｇをプロピレングリコール１ｍｌに加熱溶解し、撹拌しながら、ポリエチレングリコール４００（和光純薬製）１．０ｇを水１００ｍｌに溶かした液に加えて比較試料５を調製した。実施例１と同様な方法で３週間培養、その後、実施例１と同様にして吸光度測定を行ったところ、４０５ｎｍの吸光度は０．５５であった。
【００５１】
［比較例６］
カプサイシン（和光純薬製）１００ｍｇをプロピレングリコール１ｍｌに溶解し、撹拌しながら、ポリエチレングリコール４００（和光純薬製）１．０ｇを水１００ｍｌに溶かした液に加えて比較試料６を調製した。実施例１と同様な方法で３週間培養、その後、実施例１と同様にして吸光度測定を行ったところ、４０５ｎｍの吸光度は０．５３であった。
【００５２】
[比較例７]
ペオノール（特開２００５−０１５４７２号公報に記載の化合物）１００ｍｇをプロピレングリコール１ｍｌに溶解し、撹拌しながら、ラウリル硫酸ナトリウム（和光純薬製）１．０ｇを水１００ｍｌに溶かした液に加えて比較試料７を調製した。実施例１と同様な方法で３週間培養、その後、実施例１と同様にして吸光度測定を行ったところ、４０５ｎｍの吸光度は０．５８であった。
【００５３】
[比較例８]  
６−ベンジルアミノプリン（特開２０１３−１５９５９２号公報に記載の化合物）１００ｍｇをプロピレングリコール１ｍｌに溶かし、撹拌しながら、ラウリル硫酸ナトリウム（和光純薬製）１．０ｇを水１００ｍｌに溶かした液に加えて比較試料８を調製した。実施例１と同様な方法で３週間培養、その後、実施例１と同様にして吸光度測定を行ったところ、４０５ｎｍの吸光度は０．５９であった。
【００５４】
実施例１〜１４および比較例１〜８より、本発明の有効成分をキラヤサポニンまたはサルササポニンと併用すると、キラヤサポニンまたはサルササポニンを使用しない比較試料と比較して、メラニン産生促進能が顕著に向上することが分かる。特に、複数の有効成分を同時に使用し、キラヤサポニンまたはサルササポニンと併用すると、さらにメラニン産生促進能が向上することが分かる。
【００５５】
［実施例１５〜１６、比較例９〜１０］
（ヒト試験）
＜ヘアートニックの調製＞
（１）フォルスコリン１００ｍｇ、３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン１００ｍｇ、ナリンゲニン１００ｍｇおよびサイコサポニンｄ（フナコシ製）３０ｍｇをエタノール１０ｍｌおよび水１ｍｌに加熱溶解し、撹拌しながら、２５％キラヤサポニン溶液５．０ｇを水１００ｍｌに溶かした液にゆっくり加えて透明溶液を得、ヘアートニックＡとした。
（２）フォルスコリン１００ｍｇ、３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン１００ｍｇおよびナリンゲニン１００ｍｇおよびサイコサポニンｄ、３０ｍｇをエタノール１０ｍｌおよび水１ｍｌに加熱溶解し、撹拌しながら、ラウリル硫酸ナトリウム１．０ｇを水１００ｍｌに溶かした液にゆっくり加えて透明溶液を得、ヘアートニックＢとした。
【００５６】
頭髪全体の１／５〜１／３が白髪化した４０〜６０歳の男女各１０名を５名ずつの４つのグループに分けた。実施例１５においては男性５名に対して前記ヘアートニックＡを用い、実施例１６においては女性５名に対して前記ヘアートニックＡを用いた。また、比較例９においては男性５名に対して前記ヘアートニックＢを用い、比較例１０においては女性５名に対して前記ヘアートニックＢを用いた。
各実施例および比較例において、毎日、入浴後就寝前と起床後の２回／日、各ヘアートニックを１ｍｌ／回、３ヶ月間、頭髪の一定部位に塗布、マッサージし、頭皮に浸透させた。
【００５７】
効果は、試験前後のヘアートニック塗布部の写真撮影を行い、分光測色計で測色した結果を白髪グレースケールと照合して白髪率を算出した。有効性の判定は、２０％以上白髪率が減少した時は◎、１０〜２０％減少した時は○、１０％未満の場合は×とした。
【００５８】
【表２】
2017203012.tif 000003
【００５９】
表２より、本発明の有効成分をキラヤサポニンと併用した毛髪剤はヒト試験においても明確な白髪改善効果を有することが認められた。また、男女間で有意な差は認められなかった。