(57)【要約】【課題】本発明は、色調のバリエーションが豊富であり、マルチカラー解析への応用に適したバイオセンサー用ツールを提供することを目的としている。また、本発明は、色調安定性が高く、かつ操作性が向上したバイオセンサー用ツールを提供することも目的としている。【解決手段】本発明の被験物質を検出するための組成物は、アスペクト比（長軸／短軸）が１．００より大きい金ナノロッドを含んでいることを特徴とする。【選択図】図１５
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
金ナノロッドを含む、被験物質を検出するための組成物であって、
前記金ナノロッドのアスペクト比（長軸／短軸）が、１．００より大きいことを特徴とする、組成物。
【請求項２】
前記金ナノロッドのアスペクト比（長軸／短軸）が、３．００以下である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記金ナノロッドのアスペクト比（長軸／短軸）が、２．００以下である、請求項１又は２に記載の組成物。
【請求項４】
前記金ナノロッドの長軸又は短軸の長さが、５〜５００ｎｍである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
前記金ナノロッドの長軸又は短軸の長さが、１０〜２００ｎｍである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
前記金ナノロッドの表面積が、１１８〜１，１７０，０００ｎｍ2の範囲である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
前記金ナノロッドの表面積が、４７２〜１８８，０００ｎｍ2の範囲である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
前記金ナノロッドの体積が、９８．２〜９８，１００，０００ｎｍ3の範囲である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
前記金ナノロッドの体積が、７８６〜６，２８０，０００ｎｍ3の範囲である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
水溶性高分子をさらに含む、請求項１〜９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
前記水溶性高分子が、ポリスチレンスルホン酸、ポリビニルピロリドン、及びチオール末端のポリエチレングリコールから成る群から選択される、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
前記水溶性高分子が、ポリスチレンスルホン酸である、請求項１０又は１１に記載の組成物。
【請求項１３】
前記金ナノロッドが、前記被験物質に対する特異的結合物質を担持している、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１４】
前記被験物質と前記特異的結合物質の組み合わせが、抗原とそれに結合する抗体、抗体とそれに結合する抗原、糖鎖又は複合糖質とそれに結合するレクチン、レクチンとそれに結合する糖鎖又は複合糖質、ホルモン又はサイトカインとそれに結合する受容体、受容体とそれに結合するホルモン又はサイトカイン、タンパク質とそれに結合する核酸アプタマー若しくはペプチドアプタマー、酵素とそれに結合する基質、基質とそれに結合する酵素、ビオチンとアビジン又はストレプトアビジン、アビジン又はストレプトアビジンとビオチン、ＩｇＧとプロテインＡ又はプロテインＧ、プロテインＡ又はプロテインＧとＩｇＧ、及び、第１の核酸とそれに結合する第２の核酸から成る群から選択される、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
請求項１３又は１４に記載の組成物を使用して、前記被験物質を検出する方法であって、
該組成物を該被験物質と混合して、該被験物質と前記特異的結合物質を担持した金ナノロッドとの複合体を形成する工程、及び、
該複合体を検出する工程を含むことを特徴とする、方法。
【請求項１６】
前記複合体の形成を、消光度測定、吸光度測定、濁度測定、粒度分布測定、粒子径測定、ラマン散乱光測定、色調変化の観察、凝集又は沈殿形成の観察、イムノクロマトグラフィー、電気泳動、及び、フローサイトメトリーから成る群から選択される手段によって検出する、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
請求項１〜１２のいずれか一項に記載の組成物中の金ナノロッドに、前記被験物質に対する特異的結合物質を担持させて、請求項１３又は１４に記載の組成物を調製する工程をさらに含む、請求項１５又は１６に記載の方法。
【請求項１８】
請求項１〜１４のいずれか一項に記載の組成物を含む、請求項１５〜１７のいずれか一項に記載の方法に使用するためのキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、金ナノロッド又は被験物質に対する特異的結合物質を担持した金ナノロッドを含む、被験物質を検出するための組成物、及び、それらを利用した被験物質の検出方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
貴金属ナノ粒子ベースの局在表面プラズモン共鳴（Ｌｏｃａｌｉｚｅｄ Ｓｕｒｆａｃｅ Ｐｌａｓｍｏｎ Ｒｅｓｏｎａｎｃｅ：ＬＳＰＲ）由来の光吸収は、先進的なバイオセンシング技術に応用されており、その吸収波長は、当該ナノ粒子の形状や金属の特性などに依存している。この技術分野では種々の金属ナノ粒子が研究されており、金ナノロッドも、感受性の高いバイオセンサーの開発において注目を集めている（特許文献１、非特許文献１）。金ナノロッドは、可視光から近赤外光の領域に最大吸収波長を有し、形状の制御によってその最大吸収波長の位置を操作することができる。また、金ナノロッドを製造するための種々の方法が研究されている（特許文献２〜６、非特許文献２及び３）。
一方、球状の金ナノ粒子（又は金コロイド粒子）及び銀ナノプレートについては、バイオセンサーへの応用開発が進んでいる。最近では、突起を有する球状（金平糖状）の金ナノ粒子が開発され、イムノクロマトグラフィーに応用されている（特許文献７）。また、銀ナノプレートについても、イムノクロマトグラフィーなどの検出方法への応用が研究されている（特許文献８）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特許第４５１２８７６号公報
【特許文献２】国際公開第２００６／０６５７６２号
【特許文献３】特許第４５２９１６０号公報
【特許文献４】特許第４５７３１５３号公報
【特許文献５】特許第４６３６４５４号公報
【特許文献６】特許第４６６５４９９号公報
【特許文献７】国際出願第ＰＣＴ／ＪＰ２０１５／０６５６５８号
【特許文献８】特許第５３５８６４８号公報
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Cao J, et al., Sensors and Actuators B (2014), Vol. 195, pp. 332-351
【非特許文献２】Mehtala JG, et al., Langmuir (2014), Vol. 30, No. 46, pp. 13727-13730
【非特許文献３】Tapan SK, et al., Journal of the American Chemical Society (2004), Vol. 126, pp. 8648-8649
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、金ナノ粒子の最大吸収波長は５３０ｎｍ付近に限られており、マルチカラー解析への応用には適していなかった。上記金平糖状の金ナノ粒子であれば、最大吸収波長の調節が可能ではあるものの、さらなるバイオセンサー用ツールが求められている。また、金被覆銀ナノプレートは、最大吸収波長の調整が可能ではあるが、大気下では酸化されやすい傾向にあり、イムノクロマトグラフィーの検出ラインの色調安定性や、検出試薬を含むコンジュゲートパッドを作製する際の乾燥への耐性が不十分であった。さらに、金被覆銀ナノプレートを遠心分離するためには、約２５０００ｒｐｍという高い回転数が必要であり、操作性が劣っていた。したがって、本発明は、色調のバリエーションが豊富であり、マルチカラー解析への応用に適したバイオセンサー用ツールを提供することを目的としている。また、本発明は、色調安定性が高く、かつ操作性が向上したバイオセンサー用ツールを提供することも目的としている。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意検討した結果、金ナノロッドがバイオセンサー用ツールとして優れていることを見出し、本発明を完成させた。
すなわち、本発明は、以下に示す被験物質を検出するための組成物、被験物質を検出する方法、及び被験物質を検出するためのキットを提供するものである。
〔１〕金ナノロッドを含む、被験物質を検出するための組成物であって、
前記金ナノロッドのアスペクト比（長軸／短軸）が、１．００より大きいことを特徴とする、組成物。
〔２〕前記金ナノロッドのアスペクト比（長軸／短軸）が、３．００以下である、前記〔１〕に記載の組成物。
〔３〕前記金ナノロッドのアスペクト比（長軸／短軸）が、２．００以下である、前記〔１〕又は〔２〕に記載の組成物。
〔４〕前記金ナノロッドの長軸又は短軸の長さが、５〜５００ｎｍである、前記〔１〕〜〔３〕のいずれか一項に記載の組成物。
〔５〕前記金ナノロッドの長軸又は短軸の長さが、１０〜２００ｎｍである、前記〔１〕〜〔４〕のいずれか一項に記載の組成物。
〔６〕前記金ナノロッドの表面積が、１１８〜１，１７０，０００ｎｍ2の範囲である、前記〔１〕〜〔５〕のいずれか一項に記載の組成物。
〔７〕前記金ナノロッドの表面積が、４７２〜１８８，０００ｎｍ2の範囲である、前記〔１〕〜〔６〕のいずれか一項に記載の組成物。
〔８〕前記金ナノロッドの体積が、９８．２〜９８，１００，０００ｎｍ3の範囲である、前記〔１〕〜〔７〕のいずれか一項に記載の組成物。
〔９〕前記金ナノロッドの体積が、７８６〜６，２８０，０００ｎｍ3の範囲である、前記〔１〕〜〔８〕のいずれか一項に記載の組成物。
〔１０〕水溶性高分子をさらに含む、前記〔１〕〜〔９〕のいずれか一項に記載の組成物。
〔１１〕前記水溶性高分子が、ポリスチレンスルホン酸、ポリビニルピロリドン、及びチオール末端のポリエチレングリコールから成る群から選択される、前記〔１０〕に記載の組成物。
〔１２〕前記水溶性高分子が、ポリスチレンスルホン酸である、前記〔１０〕又は〔１１〕に記載の組成物。
〔１３〕前記金ナノロッドが、前記被験物質に対する特異的結合物質を担持している、前記〔１〕〜〔１２〕のいずれか一項に記載の組成物。
〔１４〕前記被験物質と前記特異的結合物質の組み合わせが、抗原とそれに結合する抗体、抗体とそれに結合する抗原、糖鎖又は複合糖質とそれに結合するレクチン、レクチンとそれに結合する糖鎖又は複合糖質、ホルモン又はサイトカインとそれに結合する受容体、受容体とそれに結合するホルモン又はサイトカイン、タンパク質とそれに結合する核酸アプタマー若しくはペプチドアプタマー、酵素とそれに結合する基質、基質とそれに結合する酵素、ビオチンとアビジン又はストレプトアビジン、アビジン又はストレプトアビジンとビオチン、ＩｇＧとプロテインＡ又はプロテインＧ、プロテインＡ又はプロテインＧとＩｇＧ、及び、第１の核酸とそれに結合する第２の核酸から成る群から選択される、前記〔１３〕に記載の組成物。
〔１５〕前記〔１３〕又は〔１４〕に記載の組成物を使用して、前記被験物質を検出する方法であって、
該組成物を該被験物質と混合して、該被験物質と前記特異的結合物質を担持した金ナノロッドとの複合体を形成する工程、及び、
該複合体を検出する工程を含むことを特徴とする、方法。
〔１６〕前記複合体の形成を、消光度測定、吸光度測定、濁度測定、粒度分布測定、粒子径測定、ラマン散乱光測定、色調変化の観察、凝集又は沈殿形成の観察、イムノクロマトグラフィー、電気泳動、及び、フローサイトメトリーから成る群から選択される手段によって検出する、前記〔１５〕に記載の方法。
〔１７〕前記〔１〕〜〔１２〕のいずれか一項に記載の組成物中の金ナノロッドに、前記被験物質に対する特異的結合物質を担持させて、前記〔１３〕又は〔１４〕に記載の組成物を調製する工程をさらに含む、前記〔１５〕又は〔１６〕に記載の方法。
〔１８〕前記〔１〕〜〔１４〕のいずれか一項に記載の組成物を含む、前記〔１５〕〜〔１７〕のいずれか一項に記載の方法に使用するためのキット。
【発明の効果】
【０００７】
本発明に従えば、アスペクト比（長軸／短軸）が１．００より大きい金ナノロッドを用いることにより、色調のバリエーションを広げることができる。したがって、マルチカラー解析への応用に適したバイオセンサー用ツールを提供することができる。また、前記金ナノロッドは、材質が金であるため酸化に対して安定であり、形状がロッドであるため表面の突起が少なく平面部が多いため抗体などの特異的結合物質の担持性に優れており、遠心分離に必要な回転数が少ないため扱いやすいという特徴を有している。したがって、色調安定性が高く、かつ操作性が向上したバイオセンサー用ツールを提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】金ナノロッド種粒子の水懸濁液の光学特性を示す。
【図２】金ナノロッドＡ（紫色）の水懸濁液の光学特性を示す。
【図３】金ナノロッドＡ（紫色）の透過走査電子顕微鏡（ＳＴＥＭ）観察写真（Ａ）及び走査電子顕微鏡（ＳＥＭ）観察写真（Ｂ）を示す。
【図４】金ナノロッドＢ（シアン）の水懸濁液の光学特性を示す。
【図５】金ナノロッドＢ（シアン）のＳＴＥＭ観察写真（Ａ）及びＳＥＭ観察写真（Ｂ）を示す。
【図６】金ナノロッドＣ（青色）の水懸濁液の光学特性を示す。
【図７】金ナノロッドＣ（青色）のＳＴＥＭ観察写真（Ａ）及びＳＥＭ観察写真（Ｂ）を示す。
【図８】銀ナノプレートの種粒子の水懸濁液の光学特性を示す。
【図９】銀ナノプレートの種粒子のＳＥＭ観察写真を示す。
【図１０】銀ナノプレートの水懸濁液ａの光学特性を示す。
【図１１】金被覆銀ナノプレートＤの水懸濁液の光学特性を示す。
【図１２】金被覆銀ナノプレートＤのＳＥＭ観察写真を示す。
【図１３】球状金ナノ粒子の水懸濁液の光学特性を示す。
【図１４】イムノクロマト試験の手順を示す。
【図１５】イムノクロマト試験の輝度解析の結果を示す。
【図１６】イムノクロマト試験後の乾燥耐性試験の結果を示す。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
以下、本発明をさらに詳細に説明する。
本発明の被験物質を検出するための組成物は、アスペクト比（長軸／短軸）が１．００より大きい金ナノロッドを含むことを特徴としている。
【００１０】
本明細書に記載の「金ナノロッド」とは、形状異方性金ナノ粒子のことをいい、三角柱、四角柱、五角柱、六角柱などの多角柱（角が丸みを帯びた形状を含む）や円柱などのような棒状構造を有している。底面は平面、凸面又は凹面であってもよく、高さ方向の辺は直線であっても直線でなくてもよい。また、粒子の最大長径対最大長径に直交する幅の比（最大長径／最大長径に直交する幅）で定義される指数をアスペクト比といい、これは粒子の形状を表すために用いることができる。本発明の金ナノロッドの最大長径は、その金ナノロッドの高さに相当し、本明細書中では「長軸」ということもある。前記金ナノロッドの最大長径に直交する幅は、その金ナノロッドの底面の直径に相当し、本明細書中では「短軸」ということもある。前記金ナノロッドのアスペクト比（長軸／短軸）は１．００より大きい。高さに直交する幅が高さ以上の長さである粒子は、棒状構造ではなくプレート状構造を有しているといえるため、本発明の金ナノロッドの定義には含まれない。
本発明の金ナノロッドは、アスペクト比（長軸／短軸）が１．００より大きいことによって、球状の金ナノ粒子では達成することのできない色調を示すことができる。前記金ナノロッドは、長軸と短軸との長さが近い寸胴型であってもよい。寸胴型の金ナノロッドは、可視光領域に最大吸収波長を有するので、被験物質の有無を目視で判定する検出方法に有利に使用することができる。例えば、金ナノロッドのアスペクト比（長軸／短軸）が、１．００より大きく３．００以下であると、水分散液中において最大吸収波長を約５３０ｎｍ〜約８００ｎｍの範囲で調節することができ、金ナノロッドのアスペクト比（長軸／短軸）が、１．００より大きく２．００以下であると、水分散液中において最大吸収波長を約５３０ｎｍ〜約６７０ｎｍの範囲で調節することができる。上記の最大吸収波長を有する金ナノロッドの水分散液は赤色、マゼンタ、紫色、紺色、青色、シアン、薄水色の色調を呈し、水分散液中の金ナノロッドの濃度によって色の濃淡を制御することが可能である。
本発明の金ナノロッドは、従来の金ナノロッドよりも大きいサイズに調製してもよい。サイズを大きくすると、一粒子あたりの吸光度が高くなり、着色力の優れた金ナノロッドを調製することができる。前記金ナノロッドの長軸又は短軸の長さは、例えば５〜５００ｎｍであり、好ましくは１０〜２００ｎｍ、さらに好ましくは２０〜１００ｎｍである。また、前記金ナノロッドの表面積及び体積は、金ナノロッドの形状が円柱であると仮定し、短軸を底面の円の直径、長軸を高さとみなして計算してもよい。この場合の金ナノロッドの表面積は、例えば１１８〜１，１７０，０００ｎｍ2であってもよく、好ましくは４７２〜１８８，０００ｎｍ2であり、さらに好ましくは１，８９０〜４７，１００ｎｍ2である。また、この場合の金ナノロッドの体積は、例えば９８．２〜９８，１００，０００ｎｍ3であってもよく、好ましくは７８６〜６，２８０，０００ｎｍ3であり、さらに好ましくは６，２９０〜７８５，０００ｎｍ3である。なお、このような範囲のサイズの金ナノロッドは、その範囲を超えるサイズの金ナノロッドと比較して、分散安定性が良好である。
本発明の金ナノロッドは、金ナノロッドの分野で採用されている公知の製造方法で製造することができる。例えば、前掲の特許文献１〜６又は非特許文献１〜３などに記載の方法で、金ナノロッドを製造してもよい。
【００１１】
本発明の被験物質を検出するための組成物は、前記金ナノロッドを含んでいる。前記組成物中の金ナノロッドの量は、前記組成物の総質量に対して、例えば、５０質量％以下であってもよく、好ましくは１〜０．００００１５質量％、特に好ましくは０．１〜０．０００１５質量％である。
【００１２】
本発明の金ナノロッドを含む、被験物質を検出するための組成物は、被験物質に対する特異的結合物質、すなわち検出試薬を標識するために用いることができる。換言すると、本発明の金ナノロッドは、被験物質に対する特異的結合物質を担持することができる。本明細書に記載の「担持」とは、共有結合若しくは非共有結合又は直接的若しくは間接的な結合などの様式にかかわらず、金ナノロッドと被験物質に対する特異的結合物質とが結合して複合体を形成していることを意味している。担持の方法としては、通常の担持方法を特に制限なく用いることができ、物理吸着、化学吸着（表面への共有結合）、化学結合（共有結合、配位結合、イオン結合又は金属結合）等を利用して、金ナノロッドと被験物質に対する特異的結合物質とを直接的に結合させる方法や、金ナノロッドの表面に後述の水溶性高分子の一部を結合させて、その水溶性高分子の末端又は主鎖若しくは側鎖に、直接的又は間接的に被験物質に対する特異的結合物質を結合させる方法を採用することができる。例えば、被験物質に対する特異的結合物質が抗体である場合には、本発明の金ナノロッドと抗体の溶液とを混合し、振盪し、遠心分離することで、抗体を担持した金ナノロッド（標識された検出試薬）を沈殿物として得ることができる。また、本発明の金ナノロッドと抗体とを静電吸着により担持させる場合、マイナス電荷を有するポリスチレンスルホン酸で前記金ナノロッド表面を被覆すると、前記抗体の担持効率が向上し得る。
【００１３】
本発明の被験物質に対する特異的結合物質としては、検出の対象である被験物質を、該被験物質との複合体形成により検出できるものであって、金ナノロッドを標識として利用することができるものであれば、特に制限なく用いることができる。被験物質と被験物質に対する特異的結合物質との組み合わせの具体例としては、抗原とそれに結合する抗体、糖鎖又は複合糖質とそれに結合するレクチン、レクチンとそれに結合する糖鎖又は複合糖質、ホルモン又はサイトカインとそれに結合する受容体、受容体とそれに結合するホルモン又はサイトカイン、タンパク質とそれに結合する核酸アプタマー若しくはペプチドアプタマー、酵素とそれに結合する基質、基質とそれに結合する酵素、ビオチンとアビジン又はストレプトアビジン、アビジン又はストレプトアビジンとビオチン、ＩｇＧとプロテインＡ又はプロテインＧ、プロテインＡ又はプロテインＧとＩｇＧ、あるいは、第１の核酸とそれに結合する（ハイブリダイズする）第２の核酸等があげられる。前記第２の核酸は、前記第１の核酸と相補的な配列を含む核酸であってもよい。
【００１４】
被験物質が抗原である場合には、該抗原に対する特異的結合物質は抗体であってもよい。前記抗体は、前記抗原に対して特異的に結合するポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、単鎖抗体又はそれらの断片であってもよく、該断片は、Ｆ（ａｂ）フラグメント、Ｆ（ａｂ’）フラグメント、Ｆ（ａｂ’）2フラグメント又はＦ（ｖ）フラグメントであってもよい。被験物質としての抗原は、コンカナバリンＡ（ＣｏｎＡ）、麦芽アグルチニン及びリシンなどのレクチンであってもよく、インフルエンザウイルス、アデノウイルス、ＲＳウイルス、ロタウイルス、ヒトパピローマウイルス、ヒト免疫不全ウイルス及びＢ型肝炎ウイルスなどのウイルス又はそれらが有する物質（例えば、Ｂ型肝炎ウイルス抗原（ＨＢｓ抗原）又はインフルエンザウイルスのヘマグルチニン）であってもよく、アスペルギルス・フラバス、クラミジア、梅毒トレポネーマ、溶連菌、炭疽菌、黄色ブドウ球菌、赤痢菌、大腸菌、サルモネラ菌、ネズミチフス菌、パラチフス菌、緑膿菌及び腸炎ビブリオ菌などの病原性微生物又はそれらが有する物質（例えば、アスペルギルス・フラバスのアフラトキシン（Ｂ１、Ｂ２、Ｇ１、Ｇ２又はＭ１など）、腸管出血性大腸菌のベロ毒素又は溶連菌のストレプトリジンＯ）であってもよく、免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）、リウマチ因子及びＣ反応性タンパク質（ＣＲＰ）などの血中タンパク質であってもよく、ムチンなどの糖タンパク質であってもよく、インスリン、下垂体ホルモン（例えば、成長ホルモン（ＧＨ）、副腎皮質刺激ホルモン（ＡＣＴＨ）、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）、卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）、黄体形成ホルモン（ＬＨ）、プロラクチン、又はメラニン細胞刺激ホルモン（ＭＳＨ））、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン（ＴＲＨ）、甲状腺ホルモン（例えば、ジヨードサイロニン又はトリヨードサイロニン）、絨毛性ゴナドトロピン、カルシウム代謝調節ホルモン（例えば、カルシトニン又はパラトルモン）、膵ホルモン、消化管ホルモン、血管作動性腸管ペプチド、卵胞ホルモン（例えば、エストロン）、天然又は合成黄体ホルモン（例えば、プロゲステロン）、男性ホルモン（例えば、テストステロン）、及び副腎皮質ホルモン（例えば、コルチゾール）などのホルモンであってもよく、セロトニン、ウロキナーゼ、フェリチン、サブスタンＰ、プロスタグランジン及びコレステロールなどのその他生体内物質であってもよく、前立腺性酸性フォスファターゼ（ＰＡＰ）、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）、アルカリ性フォスファターゼ、トランスアミナーゼ、トリプシン、ペプシノーゲン、α−フェトプロテイン（ＡＦＰ）及び癌胎児性抗原（ＣＥＡ）などの腫瘍マーカーであってもよく、血液型抗原などの糖鎖抗原であってもよく、ヘモグロビン及びトランスフェリンなどの便潜血の検出に用いられるマーカーであってもよく、血液凝固・線溶系において活性型第ＸＩＩＩ因子作用によりクロスリンクを受けた安定化フィブリンがプラスミンによって分解されたフィブリン分解産物の一種であるＤダイマーであってもよい。そして、被験物質である抗原がホルモン又はサイトカインなどの生体内物質である場合には、該生体内物質に対する特異的結合物質は、抗体だけでなく受容体であってもよく、被験物質である抗原が糖鎖又は糖鎖を有する複合糖質である場合には、該糖鎖又は糖鎖を有する複合糖質に対する特異的結合物質は、抗体だけでなくレクチンであってもよい。また、被験物質としての抗原は、ペニシリン及びカドミウムなどのハプテンであってもよい。
【００１５】
被験物質が抗体である場合には、該抗体に対する特異的結合物質は抗原であってもよい。前記抗原は、前記抗体に対して特異的に結合する抗原全体又はその断片であってもよく、それらを他の担体と結合した融合物質であってもよい。被験物質としての抗体は、抗環状シトルリン化ペプチド（ＣＣＰ）抗体又は抗リン脂質抗体などの自己抗体であってもよく、抗クラミジア抗体、抗ＨＩＶ抗体又は抗ＨＣＶ抗体などの外来抗原に対する抗体であってもよい。
【００１６】
被験物質が糖鎖である場合には、該糖鎖に対する特異的結合物質はレクチンであってもよい。前記レクチンは、前記糖鎖に特異的に結合するガレクチン、Ｃ型レクチン、マメ科レクチン又はそれらの断片であってもよい。被験物質としての糖鎖は、単糖又は多糖であってもよく、それらがタンパク質又は脂質に結合した複合糖質であってもよい。例えば、被験物質がマンノースを含む糖鎖である場合には、該糖鎖に対する特異的結合物質としてマメ科レクチンのコンカナバリンＡ（ＣｏｎＡ）を使用することができる。
【００１７】
被験物質がレクチンである場合には、該レクチンに対する特異的結合物質は糖鎖であってもよい。前記糖鎖は、前記レクチンに特異的に結合する単糖、多糖、複合糖質又はそれらが他の担体と結合した融合物質であってもよい。被験物質としてのレクチンは、ガレクチン、Ｃ型レクチン又はマメ科レクチンであってもよい。例えば、被験物質がマメ科レクチンのコンカナバリンＡ（ＣｏｎＡ）である場合には、該レクチンに対する特異的結合物質としてマンノースを含む糖鎖を使用することができる。
【００１８】
被験物質と被験物質に対する特異的結合物質との組み合わせが、タンパク質とそれに結合する核酸アプタマー若しくはペプチドアプタマーである場合には、核酸アプタマーは、例えば、炭疽菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ）、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）、Ｄ群赤痢菌・ソンネ赤痢菌（Ｓｈｉｇｅｌｌａ  ｓｏｎｎｅｉ）、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）、ネズミチフス菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）、溶連菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｈｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ）、パラチフス（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｐａｒａｔｙｐｈｉ  Ａ）、ブドウ球菌エンテロトキシンＢ（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃａｌ  ｅｎｔｅｒｏｔｏｘｉｎ  Ｂ）、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、腸炎ビブリオ（Ｖｉｂｒｉｏ  ｐａｒａｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ）等の細菌、ムチン１等の上皮の細胞表面に表れる腫瘍マーカー、若しくはβ−ガラクトシダーゼやトロンビン等の酵素等と結合するＤＮＡアプタマー、又は、ヒト免疫不全ウイルスのＴａｔタンパク質やＲｅｖタンパク質と結合するＲＮＡアプタマーであってもよく、ペプチドアプタマーは、例えば、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）の腫瘍性タンパク質ＨＰＶ１６  Ｅ６と結合するペプチドアプタマーであってもよい。
【００１９】
被験物質がビタミン類である場合には、該ビタミン類に対する特異的結合物質は、ビタミンＤと結合するトランスカルシフェリン及びビタミンＢ１２と結合するトランスコバラミンなどのビタミン結合タンパク質であってもよい。被験物質が抗生物質である場合には、該抗生物質に対する特異的結合物質は、ペニシリンに結合するＰＢＰ１及びＰＢＰ２などのペニシリン結合タンパクであってもよい。
被験物質又は被験物質に結合する物質としての核酸は、例えば、ＤＮＡ、ＲＮＡ、オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチド、又は、それらの増幅物であってもよい。
【００２０】
本発明の被験物質に対する特異的結合物質を担持した金ナノロッドは、対応する被験物質に結合して、それを検出することができる。本発明の被験物質を検出する方法は、本発明の組成物を被験物質と混合して、前記被験物質と前記被験物質に対する特異的結合物質を担持した金ナノロッドとの複合体を形成する工程、及び、その複合体を検出する工程を含む。本発明の被験物質に対する特異的結合物質を担持した金ナノロッドは、本発明の被験物質を検出する方法を実施する直前に調製してもよい。換言すれば、本発明の被験物質を検出する方法は、金ナノロッドに、被験物質に対する特異的結合物質を担持させる工程をさらに含んでもよい。
前記複合体は、被験物質の検出の分野で通常用いられる手段又は凝集物若しくは沈殿物を検出するのに通常用いられる手段を、特に制限なく利用することによって検出することができる。例えば、前記複合体の形成を、消光度測定、吸光度測定、濁度測定、粒度分布測定、粒子径測定、ラマン散乱光測定、色調変化の観察、凝集又は沈殿形成の観察、イムノクロマトグラフィー法、電気泳動、及び、フローサイトメトリーから成る群から選択される手段によって検出してもよい。
【００２１】
吸光度は、平行光線が物体中を透過するときの該物体の光吸収の強さをいうが（狭義の吸光度）、実測にあたっては、該物体の表面での反射又は散乱などによる光の損失も考慮する必要がある（広義の吸光度）。光の吸収、反射及び散乱などのあらゆる要因による光の損失の強度を意味する広義の吸光度を、本明細書では特に消光度という。被験物質とその被験物質に対する特異的結合物質を担持した金ナノロッドとの複合体が形成すると、金ナノロッドの最大吸収波長前後の波長領域における消光度又は吸光度が減少する。
消光度測定又は吸光度測定は、２００〜２５００ｎｍの範囲の波長領域で行ってもよく、４３０〜２０００ｎｍの範囲の金ナノロッドの最大吸収波長において行ってもよい。消光度又は吸光度は、これらの測定のために通常用いられる紫外可視分光光度計（例えば、紫外可視近赤外分光光度計ＭＰＣ３１００ＵＶ−３１００ＰＣ、株式会社島津製作所）などによって測定してもよい。
【００２２】
被験物質とその被験物質に対する特異的結合物質を担持した金ナノロッドとの複合体が形成すると、金ナノロッド同士が前記被験物質を介して架橋され、単独の金ナノロッドよりも粒子径が大きくなる。本発明の組成物中に分散している粒子の粒子径が大きくなると、その組成物に入射する光の吸収、反射又は散乱が増大し、その組成物は濁りを示す。濁りを示す組成物での光の吸収、反射又は散乱は、消光度又は吸光度として測定することができ、このような濁り度合いに依存して上昇する消光度又は吸光度を濁度ともいう。
本発明の組成物においては、被験物質とその被験物質に対する特異的結合物質を担持した金ナノロッドとの複合体が形成することで複数の粒子が隣接して存在する場合、双極子−双極子相互作用により金ナノロッドの最大吸収波長よりも長波長側に、前記複合体の形成に依存して消光度又は吸光度が上昇する波長領域が存在している（Nano Lett., Vol. 4, No. 9, (2004), p.1627-1631）。この波長領域における消光度又は吸光度を濁度として測定することにより、前記複合体を検出してもよい。例えば、金ナノロッドの最大吸収波長が５６０ｎｍである場合には、６６０〜８４０ｎｍの波長領域において濁度測定を行ってもよく、金ナノロッドの最大吸収波長が６２０ｎｍである場合には、７２０〜９００ｎｍの波長領域において濁度測定を行ってもよい。濁度は、その測定のために通常用いられる紫外可視分光光度計（例えば、紫外可視近赤外分光光度計ＭＰＣ３１００ＵＶ−３１００ＰＣ、株式会社島津製作所）又は濁度計などによって測定してもよい。
【００２３】
イムノクロマトグラフィー法では、検出部位（ライン状）に金ナノロッドが集合する。このとき、金ナノロッドが可視域の光を吸収する場合、前記複合体の形成を色として認識することができる。本試験の結果は目視判定と、輝度差解析によって数値化できる。目視判定はイムノクロマト試験後の検出ライン有無を目視によって確認し、検出ラインが確認可能な最低被験物質濃度を検出感度とすることができる。輝度解析では、以下の輝度差１から輝度差２を引いた値の絶対値が２（検出限界輝度差）以上である時の最低被験物質濃度を検出感度とすることができる。
１．被験物質を含まない展開液を使用したイムノクロマト試験時の検出ラインと検出ライン以外の部分（対照領域）の輝度差
２．被験物質を含む展開液を使用したイムノクロマト試験時のイムノクロマト担体上の検出ラインと検出ライン以外の部分（対照領域）の輝度差
また、近赤外域の光を吸収する金ナノロッドを使用したイムノクロマト試験においては、試験後に近赤外光を検出部に照射し、そのときの吸光を測定することで検出を確認することができる。
【００２４】
本発明の被験物質を検出する方法に使用するためのキットは、本発明の組成物を含む。本発明のキットは、被験物質の標準品、イムノクロマト試験紙、又は、使用方法を記載した取扱説明書などをさらに含んでもよい。
【００２５】
本発明の組成物は、水溶性高分子をさらに含んでもよい。本明細書に記載の「水溶性高分子」とは、分子量が５００〜１，０００，０００、好ましくは５００〜１００，０００の水溶性物質のことをいう。本明細書に記載の「水溶性」とは、常温常圧下で高分子が水に０．００１質量％以上溶解することをいう。前記水溶性高分子としては、例えば、ポリスチレンスルホン酸、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリエチレングリコール、ポリアクリルアミド、ポリビニルアルコール、ポリアクリル酸、ポリメタクリル酸、ポリアリルアミン、デキストラン、ポリメタクリルアミド、ポリビニルフェノール、ポリ安息香酸ビニル、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、カゼイン、又は、ビス（ｐ−スルホナトフェニル）フェニルホスフィンを使用してもよく、これらは、本発明の金ナノロッドと化学結合する官能基である水酸基、メルカプト基、ジスルフィド基、アミノ基、カルボキシル基などで修飾されていてもよい。好ましくは、前記水溶性高分子は、ポリスチレンスルホン酸、ＰＶＰ、又は、チオール末端のポリエチレングリコールである。これらの水溶性高分子を含有している、塗料やインクなどに用いられる市販の分散剤を、本発明の組成物に配合する水溶性高分子として使用してもよい。
本発明の組成物に含まれる水溶性高分子の種類は、その組成物の用途に応じて選択することができる。例えば、生体実験や細胞実験に使用する場合、生体適合性が良好なポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコールやポリビニルアルコールなどを用いてもよい。
本発明の組成物が水溶性高分子を含む場合には、その組成物中に溶解又は分散している水溶性高分子の濃度（組成物１リットルあたりの水溶性高分子のモル数）は、例えば、５０μＭ以下、好ましくは２５μＭ以下、特に好ましくは１０μＭ以下である。
本発明は、特定の理論に拘束されるものではないが、本発明の組成物に水溶性高分子を配合すると、前記組成物中において金ナノロッドの分散安定性が向上する。また、水溶性高分子の濃度が５０μＭ以下であると、その濃度が５０μＭを超える場合と比較して、例えば、前記被験物質に対する特異的結合物質が金ナノロッドに良好に担持されるか、又は、被験物質に対する特異的結合物質を担持した金ナノロッドが被験物質と安定した複合体を形成するため、結果としてその被験物質の検出感度を高めることができる。
【００２６】
水溶性高分子の濃度の測定方法として、核磁気共鳴分光法（ＮＭＲ）、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）、ゲルろ過クロマトグラフィー（ＧＰＣ）、示唆熱・熱重量測定（ＴＧ−ＤＴＡ）などが挙げられる。
ＮＭＲの場合、本発明の組成物を乾燥させ、得られた固形分を重溶媒で溶解（分散）させて測定する。重溶媒には既知濃度の内部標準物質（例えば、マレイン酸）を予め添加し、得られたスペクトル中の水溶性高分子由来のシグナルの積分値と内部標準物質由来のシグナルの積分値を比較することで水溶性高分子の濃度を算出することができる。
また、ＧＰＣの場合、初めに複数の既知濃度の水溶性高分子水溶液を分析し、得られたチャート中の水溶性高分子由来のピーク面積より検量線を作成する。次に、本発明の組成物を測定し、得られたチャート中の水溶性高分子由来のピーク面積より水溶性高分子の濃度を算出することができる。
さらに、ＴＧ−ＤＴＡの場合、本発明の組成物の乾燥固形分を測定した際の、重量変化から水溶性高分子量を算出することができる。
【００２７】
本発明の組成物は、金ナノロッドへ悪影響を与えない限り任意の成分を含んでいてもよい。任意成分としては、例えば、金ナノロッドを製造する際に用いた試薬（例えば、水素化ホウ素ナトリウムやアスコルビン酸）や、分散剤（例えば、クエン酸三ナトリウム、ヘキサデシルトリメチルアンモニウムブロミド）等があげられる。
【００２８】
以下、実施例により本発明を具体的に説明するが、本発明の範囲はこれら実施例に限定されるものではない。
【実施例】
【００２９】
実施例１
（１）金ナノロッド種粒子水懸濁液の作製
０．１ｍＭのヘキサデシルトリメチルアンモニウムブロミド（ＣＴＡＢ）水溶液３０ｇに、０．０１Ｍの塩化金酸水溶液１ｇ、０．０１Ｍの水素化ホウ素ナトリウム水溶液２．４ｇを撹拌子ながら添加した。得られた溶液をインキュベーター（３０℃）中で１２０分間静置し、金ナノ粒子の種粒子の水懸濁液を作製した。作製した水懸濁液（原液）の光学特性を図１に示す。光学特性の測定は、株式会社島津製作所製の紫外可視近赤外分光光度計ＭＰＣ３１００ＵＶ−３１００ＰＣを用い、光路長：１ｃｍ及び測定波長：１９０−１３００ｎｍの条件下で行われた。
【００３０】
（２）金ナノロッドＡの作製（色調：紫色）
０．０５ＭのＣＴＡＢ水溶液２３８ｇに、０．０１Ｍの塩化金酸水溶液１０ｇ、０．０１Ｍの硝酸銀水溶液１．５ｇ、０．１ＭのＬ−アスコルビン酸水溶液１．６ｇを撹拌しながら添加した。更に（１）で作製した金ナノロッドの種粒子水懸濁液０．０１１ｇを添加した。得られた溶液をインキュベーター（３０℃）中で１００時間静置し、金ナノロッドＡの水懸濁液を作製した。金ナノロッドＡの水懸濁液は紫色を呈した。作製した懸濁液を超純水で４倍容に希釈した水懸濁液の光学特性を図２に示す。最大吸収を示す波長は５９６ｎｍ（消光度０．６６）であった。光学特性の測定は、株式会社島津製作所製の紫外可視近赤外分光光度計ＭＰＣ３１００ＵＶ−３１００ＰＣを用い、光路長：１ｃｍ及び測定波長：１９０−１３００ｎｍの条件下で行われた。金ナノロッドＡ水懸濁液中の金ナノロッドＡをＳＥＭにより観察したところ、金ナノロッドの平均短軸長は６１ｎｍであり、平均長軸長は７５ｎｍでアスペクト比は１．２３であった。また、金ナノロッドＡを円柱状（短軸が底面の円の直径）と見なすと、その表面積は約２０，２１８ｎｍ2であり、体積は約２１９，１８５ｎｍ3であった。超高分解能分析走査電子顕微鏡ＳＵ−７０（株式会社日立製作所製）により、金ナノロッドＡの透過走査電子顕微鏡（ＳＴＥＭ）観察又は走査電子顕微鏡（ＳＥＭ）観察を行った結果を図３に示す。
【００３１】
（３）ＰＳＳ被覆金ナノロッドＡの作製
（２）で作製した金ナノロッドＡの水懸濁液３ｍＬの遠心分離（２，０００×ｇ、３０℃、１０分間）を行い、金ナノロッドＡを沈殿させ、上澄み液２．９ｍＬを除去した。その後、遠沈管底部の金ナノロッドＡを、０．１４ｗｔ％のＰｏｌｙ（ｓｏｄｉｕｍ−ｐ−ｓｔｙｒｅｎｅｓｕｌｆｏｎａｔｅ）（ＰＳＳ）水溶液２．９ｍＬで再分散し、ＰＳＳ被覆金ナノロッド中間体ａ１水懸濁液を作製した。ＰＳＳ被覆金ナノロッド中間体ａ１水懸濁液の遠心分離（２，０００×ｇ、３０℃、１０分間）を行い、ＰＳＳ被覆金ナノロッド中間体ａ１を沈殿させ、上澄み液２．９ｍＬを除去した。その後、遠沈管底部のＰＳＳ被覆金ナノロッド中間体ａ１を、０．１４ｗｔ％のＰＳＳ水溶液２．９ｍＬを添加して再分散させ、ＰＳＳ被覆金ナノロッド中間体ａ２水懸濁液を作製した。ＰＳＳ被覆金ナノロッド中間体ａ２水懸濁液の遠心分離（２，０００×ｇ、３０℃、１０分間）を行い、ＰＳＳ被覆金ナノロッド中間体ａ２を沈殿させ、上澄み液２．９ｍＬを除去した。その後、ＰＳＳ被覆金ナノロッド中間体ａ２を、０．１４ｗｔ％のＰＳＳ水溶液２．９ｍＬを添加して再分散させ、ＰＳＳ被覆金ナノロッドＡ水懸濁液を作製した。ＰＳＳ被覆金ナノロッドＡ懸濁液（以下、懸濁液Ａ）のｐＨは、室温下（２０℃）で６．３であった。ｐＨ測定は株式会社堀場製作所のＴｗｉｎ  ｐＨメータ  Ｂ−２１２（ガラス電極法）を用いた。
懸濁液Ａの４倍希釈溶液の色調は紫色であった。
懸濁液Ａの金含有率は、懸濁液の総質量に対して０．００７９質量％であった。
【００３２】
実施例２
（１）金ナノロッドＢの作製（色調：シアン）
０．０５ＭのＣＴＡＢ水溶液２３８ｇに、０．０１Ｍの塩化金酸水溶液１０ｇ、０．０１Ｍの硝酸銀水溶液１．５ｇ、０．１ＭのＬ−アスコルビン酸水溶液１．６ｇを撹拌しながら添加した。更に実施例１の（１）で作製した金ナノロッドの種粒子水懸濁液０．１０５ｇを添加した。得られた溶液をインキュベーター（３０℃）中で１００時間静置し、金ナノロッドＢの水懸濁液を作製した。金ナノロッドＢの水懸濁液はシアンを呈した。作製した懸濁液を超純水で４倍容に希釈した水懸濁液の光学特性を図４に示す。最大吸収を示す波長は６２０ｎｍ（消光度０．５７）であった。光学特性の測定は、株式会社島津製作所製の紫外可視近赤外分光光度計ＭＰＣ３１００ＵＶ−３１００ＰＣを用い、光路長：１ｃｍ及び測定波長：１９０−１３００ｎｍの条件下で行われた。金ナノロッドＢ水懸濁液中の金ナノロッドＢをＳＥＭにより観察したところ、金ナノロッドＢの平均短軸長は３４ｎｍであり、平均長軸長は５５ｎｍでアスペクト比は１．６２であった。また、金ナノロッドＢを円柱状（短軸が底面の円の直径）と見なすと、その表面積は約７，６９１ｎｍ2であり、体積は約４９，９３６ｎｍ3であった。超高分解能分析走査電子顕微鏡ＳＵ−７０（株式会社日立製作所製）により、金ナノロッドＢの透過走査電子顕微鏡（ＳＴＥＭ）観察又は走査電子顕微鏡（ＳＥＭ）観察を行った結果を図５に示す。
【００３３】
（２）ＰＳＳ被覆金ナノロッドＢの作製
（１）で作製した金ナノロッドＢの水懸濁液３ｍＬの遠心分離（２，０００×ｇ、３０℃、１０分間）を行い、金ナノロッドＢを沈殿させ、上澄み液２．９ｍＬを除去した。その後、遠沈管底部の金ナノロッドＢを、０．１４ｗｔ％のＰｏｌｙ（ｓｏｄｉｕｍ−ｐ−ｓｔｙｒｅｎｅｓｕｌｆｏｎａｔｅ）（ＰＳＳ）水溶液２．９ｍＬで再分散し、ＰＳＳ被覆金ナノロッド中間体ｂ１水懸濁液を作製した。ＰＳＳ被覆金ナノロッド中間体ｂ１水懸濁液の遠心分離（２，０００×ｇ、３０℃、１０分間）を行い、ＰＳＳ被覆金ナノロッド中間体ｂ１を沈殿させ、上澄み液２．９ｍＬを除去した。その後、遠沈管底部のＰＳＳ被覆金ナノロッド中間体ｂ１を、０．１４ｗｔ％のＰＳＳ水溶液２．９ｍＬを添加して再分散させ、ＰＳＳ被覆金ナノロッド中間体ｂ２水懸濁液を作製した。ＰＳＳ被覆金ナノロッド中間体ｂ２水懸濁液の遠心分離（２，０００×ｇ、３０℃、１０分間）を行い、ＰＳＳ被覆金ナノロッド中間体ｂ２を沈殿させ、上澄み液２．９ｍＬを除去した。その後、ＰＳＳ被覆金ナノロッド中間体ｂ２を、０．１４ｗｔ％のＰＳＳ水溶液２．９ｍＬを添加して再分散させ、ＰＳＳ被覆金ナノロッドＢ水懸濁液を作製した。ＰＳＳ被覆金ナノロッドＢ懸濁液（以下、懸濁液Ｂ）のｐＨ７．０は、室温下（２０℃）でであった。ｐＨ測定は株式会社堀場製作所のＴｗｉｎ  ｐＨメータ  Ｂ−２１２（ガラス電極法）を用いた。
懸濁液Ｂの４倍希釈溶液の色調はシアンであった。
懸濁液Ｂの金含有率は、懸濁液の総質量に対して０．００７９質量％であった。
【００３４】
実施例３
（１）金ナノロッドＣの作製（色調：青色）
０．０５ＭのＣＴＡＢ水溶液２３８ｇに、０．０１Ｍの塩化金酸水溶液１０ｇ、０．０１Ｍの硝酸銀水溶液１．５ｇ、０．１ＭのＬ−アスコルビン酸水溶液１．６ｇを撹拌しながら添加した。更に実施例１の（１）で作製した金ナノロッドの種粒子水懸濁液０．０５３ｇを添加した。得られた溶液をインキュベーター（３０℃）中で１００時間静置し、金ナノロッドＣの水懸濁液を作製した。金ナノロッドＣの水懸濁液は青色を呈した。作製した懸濁液を超純水で４倍容に希釈した水懸濁液の光学特性を図６に示す。最大吸収を示す波長は６１０ｎｍ（消光度０．５９）であった。光学特性の測定は、株式会社島津製作所製の紫外可視近赤外分光光度計ＭＰＣ３１００ＵＶ−３１００ＰＣを用い、光路長：１ｃｍ及び測定波長：１９０−１３００ｎｍの条件下で行われた。金ナノロッドＣ水懸濁液中の金ナノロッドＣをＳＥＭにより観察したところ、金ナノロッドの平均短軸長は３９ｎｍであり、平均長軸長は５８ｎｍでアスペクト比は１．４９であった。また、金ナノロッドＣを円柱状（短軸が底面の円の直径）と見なすと、その表面積は約９，４９５ｎｍ2であり、体積は約６９，２８６ｎｍ3であった。超高分解能分析走査電子顕微鏡ＳＵ−７０（株式会社日立製作所製）により、金ナノロッドＣの透過走査電子顕微鏡（ＳＴＥＭ）観察又は走査電子顕微鏡（ＳＥＭ）観察を行った結果を図７に示す。
【００３５】
（２）ＰＳＳ被覆金ナノロッドＣの作製
（１）で作製した金ナノロッドＣの水懸濁液３ｍＬの遠心分離（２，０００×ｇ、３０℃、１０分間）を行い、金ナノロッドＣを沈殿させ、上澄み液２．９ｍＬを除去した。その後、遠沈管底部の金ナノロッドＣを、０．１４ｗｔ％のＰｏｌｙ（ｓｏｄｉｕｍ−ｐ−ｓｔｙｒｅｎｅｓｕｌｆｏｎａｔｅ）（ＰＳＳ）水溶液２．９ｍＬで再分散し、ＰＳＳ被覆金ナノロッド中間体ｃ１水懸濁液を作製した。ＰＳＳ被覆金ナノロッド中間体ｃ１水懸濁液の遠心分離（２，０００×ｇ、３０℃、１０分間）を行い、ＰＳＳ被覆金ナノロッド中間体ｃ１を沈殿させ、上澄み液２．９ｍＬを除去した。その後、遠沈管底部のＰＳＳ被覆金ナノロッド中間体ｃ１を、０．１４ｗｔ％のＰＳＳ水溶液２．９ｍＬを添加して再分散させ、ＰＳＳ被覆金ナノロッド中間体ｃ２水懸濁液を作製した。ＰＳＳ被覆金ナノロッド中間体ｃ２水懸濁液の遠心分離（２，０００×ｇ、３０℃、１０分間）を行い、ＰＳＳ被覆金ナノロッド中間体ｃ２を沈殿させ、上澄み液２．９ｍＬを除去した。その後、ＰＳＳ被覆金ナノロッド中間体ｃ２を、０．１４ｗｔ％のＰＳＳ水溶液２．９ｍＬを添加して再分散させ、ＰＳＳ被覆金ナノロッドＣ水懸濁液を作製した。ＰＳＳ被覆金ナノロッドＣ懸濁液（以下、懸濁液Ｃ）のｐＨ７．０は、室温下（２０℃）でであった。ｐＨ測定は株式会社堀場製作所のＴｗｉｎ  ｐＨメータ  Ｂ−２１２（ガラス電極法）を用いた。
懸濁液Ｃの４倍希釈溶液の色調は青色であった。
懸濁液Ｃの金含有率は、懸濁液の総質量に対して０．００７９質量％であった。
【００３６】
比較例１
（１）銀ナノプレートの種粒子の作製
２．５ｍＭのクエン酸三ナトリウム水溶液２０ｍＬに、０．５ｇ／Ｌの分子量７０，０００ポリスチレンスルホン酸水溶液１ｍＬと、１０ｍＭの水素化ホウ素ナトリウム水溶液１．２ｍＬとを添加し、次いで、２０ｍＬ／ｍｉｎで攪拌しながら、０．５ｍＭの硝酸銀水溶液５０ｍＬを添加した。得られた溶液をインキュベーター（３０℃）中で６０分間静置し、銀ナノプレートの種粒子の水懸濁液を作製した。作製した水懸濁液（原液）の光学特性を図８に示す。光学特性の測定は、株式会社島津製作所製の紫外可視近赤外分光光度計ＭＰＣ３１００ＵＶ−３１００ＰＣを用い、光路長：１ｃｍ及び測定波長：１９０−１３００ｎｍの条件下で行われた。最大吸収を示す波長は球状銀ナノ粒子のＬＳＰＲ由来の光吸収である３９６ｎｍ（消光度３．３）であった。なお、本発明の消光度とは懸濁液を分光光度計で測定した際の吸光度の値である。また、超高分解能分析走査電子顕微鏡ＳＵ−７０（株式会社日立製作所製）により、走査電子顕微鏡（ＳＥＭ）観察を行った結果を図９に示す。粒子径は主に３ｎｍ以上、１０ｎｍ未満のプレート状粒子であった。
【００３７】
（２）銀ナノプレートの作製
超純水２００ｍＬに、１０ｍＭのアスコルビン酸水溶液４．５ｍＬを添加し、更に（１）で作製した銀ナノプレート種粒子水懸濁液４ｍＬを添加した。得られた溶液に、０．５ｍＭの硝酸銀水溶液１２０ｍＬを３０ｍＬ／ｍｉｎで攪拌しながら添加した。硝酸銀水溶液の添加が終了した４分後に攪拌を停止し、２５ｍＭのクエン酸三ナトリウム水溶液２０ｍＬを添加し、得られた溶液を大気雰囲気下のインキュベーター（３０℃）中で１００時間静置し、銀ナノプレートの水懸濁液ａを作製した。調製した懸濁液を超純水で４倍容に希釈した水懸濁液の光学特性を図１０に示す。最大吸収を示す波長は５２６ｎｍ（消光度１．２）であった。光学特性の測定は、株式会社島津製作所製の紫外可視近赤外分光光度計ＭＰＣ３１００ＵＶ−３１００ＰＣを用い、光路長：１ｃｍ及び測定波長：１９０−１３００ｎｍの条件下で行われた。水懸濁液ａ中の銀ナノプレートをＳＥＭにより観察したところ、銀ナノプレートの平均粒子径は３１ｎｍであり、平均厚さは８ｎｍでアスペクト比は３．８であった。ＳＥＭ観察写真の解析には株式会社日立製作所製の超高分解能分析走査電子顕微鏡ＳＵ−７０を用いた。
【００３８】
（３）金被覆銀ナノプレートＤの作製（色調：マゼンタ）
（２）で作製した銀ナノプレート水懸濁液１２０ｍＬに、０．１２５ｍＭのポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）（分子量：４０，０００）の水溶液９．１ｍＬを添加し、０．５Ｍのアスコルビン酸水溶液１．６ｍＬを添加した後、０．１４ｍＭの塩化金酸水溶液９．６ｍＬを０．５ｍＬ／ｍｉｎで攪拌しながら添加した。得られた溶液をインキュベーター（３０℃）中に２４時間静置し、銀ナノプレートの表面が金で被覆された金被覆銀ナノプレートＤの水懸濁液（以下、懸濁液ｄ）を作製した。
懸濁液ｄの主要分散媒は水であった。
懸濁液ｄに含まれる金被覆銀ナノプレートＤは、主面の最大長（粒子径）の平均が３１ｎｍの三角形状を含む多角形状、円形状であるプレートの混合物であり、厚さの平均は８ｎｍであった。また、懸濁液ｄに含まれる金被覆銀ナノプレートＤにおける金の厚さの平均は０．３０ｎｍであった。
懸濁液ｄのｐＨは、室温下（２０℃）で４．０であった。ｐＨ測定は株式会社堀場製作所のＴｗｉｎ  ｐＨメータ  Ｂ−２１２（ガラス電極法）を用いた。
懸濁液ｄの銀含有率は、懸濁液の総質量に対して０．００１６質量％であった。
【００３９】
（４）懸濁液ｄのｐＨ調整
（３）で得られた懸濁液ｄの１．９５ｍＬに２００ｍＭのＰＢＳ緩衝液０．０５ｍＬおよび１９０ｍＭの炭酸ナトリウム水溶液０．０２５ｍＬを攪拌しながら添加し、ｐＨ調整された金被覆ナノプレートＤ懸濁液（以下、懸濁液Ｄ）を作製した。調製した懸濁液を超純水で３倍容に希釈した水懸濁液の光学特性を図１１に示す。最大吸収を示す波長は５３１ｎｍ（消光度１．２）であった。光学特性の測定は、株式会社島津製作所製の紫外可視近赤外分光光度計ＭＰＣ３１００ＵＶ−３１００ＰＣを用い、光路長：１ｃｍ及び測定波長：１９０−１３００ｎｍの条件下で行われた。
懸濁液Ｄの主要分散媒は水であった。
懸濁液Ｄに含まれる金被覆銀ナノプレートは、三角形状を含む多角形状であるプレートと円形状であるプレートとの混合物であり、主面の最大長の平均は３１ｎｍで、厚さの平均は８ｎｍであった。また、金被覆銀ナノプレートのすべてが円形状のプレートであると仮定したときの表面積は２，２８９ｎｍ2、体積は６，０３８ｎｍ3であった。
また、懸濁液Ｄに含まれる金被覆銀ナノプレートにおける金の厚さの平均は０．３０ｎｍであった。超高分解能分析走査電子顕微鏡ＳＵ−７０（株式会社日立製作所製）により、走査電子顕微鏡（ＳＥＭ）観察を行った結果を図１２に示す。
懸濁液Ｄの３倍希釈溶液の色調はマゼンタであった。
懸濁液ＤのｐＨは、室温下（２０℃）で７．３であった。
懸濁液Ｄの銀含有率は、懸濁液の総質量に対して０．００１５質量％であった。
【００４０】
比較例２
（１）ＰＶＰ安定化球状金ナノ粒子懸濁液（懸濁液ｅ）の調製
市販の球状金ナノ粒子（粒子径：４０ｎｍ、濃度：０．００６８ｗｔ％）１２ｍＬに０．１２５ｍＭのポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）（分子量：４０，０００）の水溶液０．９１ｍＬを攪拌しながら添加した。得られた溶液をインキュベーター（３０℃）中に２４時間静置し、ＰＶＰ安定化球状金ナノ粒子懸濁液（以下、懸濁液ｅ）を作製した。
【００４１】
（２）懸濁液ｅのｐＨ調整
（１）で得られた懸濁液ｅの１．９５ｍＬに２００ｍＭのＰＢＳ緩衝液０．０５ｍＬおよび１９０ｍＭの炭酸ナトリウム水溶液０．０２５ｍＬを攪拌しながら添加し、ｐＨ調整されたＰＶＰ安定化球状金ナノ粒子懸濁液Ｅ（以下、懸濁液Ｅ）を作製した。調製した懸濁液を超純水で３．８倍容に希釈した水懸濁液の光学特性を図１３に示す。最大吸収を示す波長は５２２ｎｍ（消光度０．３８）であった。光学特性の測定は、株式会社島津製作所製の紫外可視近赤外分光光度計ＭＰＣ３１００ＵＶ−３１００ＰＣを用い、光路長：１ｃｍ及び測定波長：１９０−１３００ｎｍの条件下で行われた。
懸濁液Ｅの主要分散媒は水であった。
懸濁液Ｅに含まれる球状金ナノ粒子は、平均粒子径が４０ｎｍであった。
懸濁液Ｅの色調は赤色であった。
懸濁液ＥのｐＨは、室温下（２０℃）で７．０であった。
懸濁液Ｅの金含有率は、懸濁液の総質量に対して質量０．００６１質量％であった。
【００４２】
試験例１
実施例及び比較例の各懸濁液を下記手順のイムノクロマト試験を用いて、試験結果を評価した。
（１）イムノクロマト試験に使用する展開液の作製（ＰＳＳ被覆金ナノロッドへの特異的結合物質の担持（検出試薬の標識））
１ｍＭのＰＢＳ（−）緩衝液中における濃度５０μｇ／ｍＬのＢ型肝炎ウイルス抗原（ＨＢｓ抗原）に対する抗体（品名：Ｇｏａｔ  ａｎｔｉ  ＨＢｓＡｇ、製造元：Ａｒｉｓｔａ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．）（イムノクロマト法における検出抗体）の溶液０．２ｍＬと、ＰＳＳ被覆金ナノロッド懸濁液（懸濁液Ａ、Ｂ、又はＣ）１．８ｍＬを混合し、得られた混合物を室温下で６０分間振とうした。次いで、１ｍＭのＰＢＳ（−）緩衝液中における濃度０．８ｍＭの末端がチオール基で修飾されたポリエチレングリコールであるＳＵＮＢＲＩＧＨＴ  ＭＥ−０２０ＳＨ（分子量：２，０００、ＮＯＦ  ＣＯＲＰＯＲＡＴＩＯＮ製）の溶液０．０４４ｍＬを添加し、得られた懸濁液を室温下で３０分間振とうした。次いで、１ｍＭのＰＢＳ（−）緩衝液中における濃度０．５ｍＭのウシ血清アルブミン（品名：Ｂｏｖｉｎｅ  Ｓｅｒｕｍ  Ａｌｂｕｍｉｎ、略称：ＢＳＡ、分子量：６６ｋＤａ、製造元：Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）の溶液０．１００ｍＬを添加し、得られた懸濁液を室温下で３０分間振とうした。次いで、遠心分離（２，０００×ｇ、３０℃、１０分間）を行い、抗体−ＰＳＳ被覆金ナノロッド複合体を沈殿させ、上澄み液１．９０ｍＬを除去した。その後、抗体−ＰＳＳ被覆金ナノロッド複合体を、４．９μＭのＢＳＡを含有する０．４０ｍＬの１ｍＭ  ＰＢＳ（−）緩衝液を添加して再分散させ、株式会社島津製作所製の紫外可視近赤外分光光度計ＭＰＣ３１００ＵＶ−３１００ＰＣを使用して消光度（Ｅｘｔｉｎｃｔｉｏｎ）２．０になるように調整し、展開液を作製した。
【００４３】
使用したＰＳＳ被覆金ナノロッド懸濁液と作製された展開液、及びその色調との関係を、次の表１に示す。
【表１】
2017095744.tif 000003
【００４４】
（２）イムノクロマト試験に使用する展開液の作製（金被覆銀ナノプレートへの特異的結合物質の担持（検出試薬の標識））
１ｍＭのＰＢＳ（−）緩衝液中における濃度５０μｇ／ｍＬのＢ型肝炎ウイルス抗原（ＨＢｓ抗原）に対する抗体（品名：Ｇｏａｔ  ａｎｔｉ  ＨＢｓＡｇ、製造元：Ａｒｉｓｔａ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．）（イムノクロマト法における検出抗体）の溶液０．２ｍＬと、金被覆銀ナノプレート懸濁液Ｄ  １．８ｍＬを混合し、得られた混合物を室温下で６０分間振とうした。次いで、１ｍＭのＰＢＳ（−）緩衝液中における濃度０．８ｍＭの末端がチオール基で修飾されたポリエチレングリコールであるＳＵＮＢＲＩＧＨＴ  ＭＥ−０２０ＳＨ（分子量：２，０００、ＮＯＦ  ＣＯＲＰＯＲＡＴＩＯＮ製）の溶液０．０４４ｍＬを添加し、得られた懸濁液を室温下で３０分間振とうした。次いで、１ｍＭのＰＢＳ（−）緩衝液中における濃度０．５ｍＭのウシ血清アルブミン（品名：Ｂｏｖｉｎｅ  Ｓｅｒｕｍ  Ａｌｂｕｍｉｎ、略称：ＢＳＡ、分子量：６６ｋＤａ、製造元：Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）の溶液０．１００ｍＬを添加し、得られた懸濁液を室温下で３０分間振とうした。次いで、遠心分離（２６，０００×ｇ、３０℃、１０分間）を行い、抗体−金被覆銀ナノプレート複合体を沈殿させ、上澄み液１．９０ｍＬを除去した。その後、抗体−金被覆銀ナノプレート複合体を、４．９μＭのＢＳＡを含有する１．９０ｍＬの１ｍＭ  ＰＢＳ（−）緩衝液を添加して再分散させ、株式会社島津製作所製の紫外可視近赤外分光光度計ＭＰＣ３１００ＵＶ−３１００ＰＣを使用して消光度（Ｅｘｔｉｎｃｔｉｏｎ）２．０になるように調整し、展開液Ｄ（色調：マゼンタ）を作製した。
【００４５】
（３）イムノクロマト試験に使用する展開液の作製（球状金ナノ粒子への特異的結合物質の担持（検出試薬の標識））
１ｍＭのＰＢＳ（−）緩衝液中における濃度５０μｇ／ｍＬのＢ型肝炎ウイルス抗原（ＨＢｓ抗原）に対する抗体（品名：Ｇｏａｔ  ａｎｔｉ  ＨＢｓＡｇ、製造元：Ａｒｉｓｔａ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．）（イムノクロマト法における検出抗体）の溶液０．２ｍＬと、球状金ナノ粒子ＰＶＰ安定化懸濁液Ｅ  １．８ｍＬを混合し、得られた混合物を室温下で６０分間振とうした。次いで、１ｍＭのＰＢＳ（−）緩衝液中における濃度０．８ｍＭの末端がチオール基で修飾されたポリエチレングリコールであるＳＵＮＢＲＩＧＨＴ  ＭＥ−０２０ＳＨ（分子量：２，０００、ＮＯＦ  ＣＯＲＰＯＲＡＴＩＯＮ製）の溶液０．０４４ｍＬを添加し、得られた懸濁液を室温下で３０分間振とうした。次いで、１ｍＭのＰＢＳ（−）緩衝液中における濃度０．５ｍＭのウシ血清アルブミン（品名：Ｂｏｖｉｎｅ  Ｓｅｒｕｍ  Ａｌｂｕｍｉｎ、略称：ＢＳＡ、分子量：６６ｋＤａ、製造元：Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）の溶液０．１００ｍＬを添加し、得られた懸濁液を室温下で３０分間振とうした。次いで、遠心分離（４２００×ｇ、３０℃、１０分間）を行い、抗体−球状金ナノ粒子複合体を沈殿させ、上澄み液１．９０ｍＬを除去した。その後、抗体−球状金ナノ粒子複合体を、４．９μＭのＢＳＡを含有する１．９０ｍＬの１ｍＭ  ＰＢＳ（−）緩衝液を添加して再分散させ、株式会社島津製作所製の紫外可視近赤外分光光度計ＭＰＣ３１００ＵＶ−３１００ＰＣを使用して消光度（Ｅｘｔｉｎｃｔｉｏｎ）２．０になるように調整し、展開液Ｅ（色調：赤色）を作製した。
【００４６】
（４）イムノクロマト試験
図１４に示す手順により、Ｂ型肝炎ウイルス抗原（ＨＢｓ抗原）を被験物質としたイムノクロマト試験を、抗ＨＢｓ抗体（捕獲抗体）を直線状（図１４の検出ライン）に固定化したイムノクロマト試験紙を用いて行った。
イムノクロマト試験紙はイムノクロマト試験紙の受託作製会社（有限会社バイオデバイステクノロジー）より購入したものを使用した。捕獲抗体を直線状に固定する際、捕獲抗体を５ｍＭ  ＰＢＳ（−）緩衝液で濃度１ｇ／ｍＬに調整したものを使用した。
第１展開液（図１４（ａ）で用いる展開液）は、１ｍＭのＰＢＳ（−）緩衝液中におけるＨＢｓ抗原（品名：ＨＢｓＡｇ  Ｐｒｏｔｅｉｎ（Ｓｕｂｔｙｐｅ  ａｄｒ）、製造元：Ｆｉｔｚｇｅｒａｌｄ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｃ．）の溶液であった。第１展開液として、ＨＢｓ抗原の濃度が６．０μＭ、０．６μＭ、０．０６μＭ、０．００６μＭ、０Ｍ（ブランク）の溶液を用意した。
第２展開液は１ｍＭのＰＢＳ（−）緩衝液であった。
第３展開液（図１４（ｃ）で用いた展開液）は、上述の展開液Ａであった。
具体的な試験手順は以下の通りであった。
イムノクロマト試験紙に、第１展開液１５μＬを展開させた（図１４（ａ））。第１展開液の展開により、ＨＢｓ抗原が試験紙の検出ライン上に固定化された捕獲抗体によって捕獲される（図１４（ｂ））。
次いで、第２展開液３０μＬを展開させて、イムノクロマト試験紙上の余剰抗原の洗浄を行った。
最後に、第３展開液６０μＬを展開させた（図１４（ｃ））。第３展開液の展開により、試験紙の検出ライン上で捕獲されたＨＢｓ抗原へ検出抗体（抗体−ＰＳＳ被覆金ナノロッド複合体）が結合する（図１４（ｄ））。
同一の手順をＨＢｓ濃度の異なる各第１展開液を用いて繰り返した。
【００４７】
（５）イムノクロマト試験の目視判定による評価
第３展開液展開後の検出ラインにおけるＰＳＳ被覆金ナノロッドの着色（懸濁液の色調、すなわち、展開液Ａを使用した際は紫色、展開液Ｂ、及びＣを使用した際は青色）を目視で確認することにより、ＨＢｓ抗原の有無を判定した。結果を次の表２に示す。
【表２】
2017095744.tif 000004
＋：検出ラインにおける着色を確認できた。
−：検出ラインにおける着色を確認できなかった。
【００４８】
（６）イムノクロマト試験の輝度解析による評価
第３展開液展開後のイムノクロマト試験紙をスキャニング（装置名：Ｃａｎｏ  Ｓｃａｎ  ＬｉＤＥ５００Ｆ、製造元：キヤノン株式会社）し、検出ライン（捕獲抗体の固定化部分）の最低輝度と、検出ライン以外の部分（対照領域）の最低輝度とを画像解析ソフト（Ｉｍａｇｅ−Ｊ：アメリカ国立衛生研究所でＷａｙｎｅ  Ｒａｓｂａｎｄが開発したオープン・ソースで公有の画像処理ソフトウェア（ｈｔｔｐ：／／ｉｍａｇｅｊ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｉｊ／））を用いて数値化した。最低輝度は、検出ラインと対照領域における異なる５箇所の輝度をそれぞれ１回ずつ測定し、得られた数値の中央値を採用した。輝度差（検出ラインの最低輝度−対照領域の最低輝度）を計算し、結果を次の表３及び図１５に示す。なお、図１５中のＡ〜Ｅは、それぞれ展開液Ａ〜Ｅを意味する。
【表３】
2017095744.tif 000005
各展開液の欄の数値は輝度差を示す。
【００４９】
（７）イムノクロマト試験後の乾燥耐性試験
第１展開液中のＨＢｓ抗原濃度が６．０μＭであり、第３の展開液展開後のイムノクロマト試験紙を温度２０℃、湿度５０％の室内で乾燥させた。乾燥開始時（０時間）、乾燥開始後２４時間、４８時間、１６８時間、７２０時間、７２０時間、２１６０時間経過時にイムノクロマト試験紙をスキャニング（装置名：Ｃａｎｏ  Ｓｃａｎ  ＬｉＤＥ５００Ｆ、製造元：キヤノン株式会社）し、得られた画像をビットマップ画像編集ソフトウェアのＡｄｏｂｅ  Ｐｈｏｔｏｓｈｏｐで取り込み、検出ライン、及び対象領域（検出ライン又は検出ライン以外の部分）のＣＩＥＬＡＢ  Ｄ５０を測定した。検出ラインと対象領域の色差（ΔＥ）を、次の式１より算出した。
（式１）色差算出式
ΔＥ＝√（ΔＬ2＋Δａ2＋Δｂ2）
ΔＬ＝Ｌ1−Ｌ2
Δａ＝ａ1−ａ2
Δｂ＝ｂ1−ｂ2
（補色空間の一種であるＬａｂ色空間において、Ｌ値は明度を示し、ａ値及びｂ値は色味の強弱を示す。ａ値がプラスのときは赤味を示し、マイナスのとき緑味を示す。ｂ値がプラスのときは黄味を示し、マイナスのときは青紫味を示す。式１中、Ｌ1は検出ラインのＬ値、Ｌ2は対照領域のＬ値、ａ1は検出ラインのａ値、ａ2は対照領域のａ値、ｂ1は検出ラインのｂ値、そして、ｂ2は対照領域のｂ値をそれぞれ意味する。）
【００５０】
色差算出結果を次の表４及び図１６に示す。なお、図１６中のＡ〜Ｅは、それぞれ展開液Ａ〜Ｅを意味する。
【表４】
2017095744.tif 000006
【００５１】
実施例１〜３、比較例１、及び２で作製した懸濁液中の金属ナノ粒子の物性、及び評価結果を次の表５にまとめる。
【表５】
2017095744.tif 000007
【００５２】
抗体を担持していない金ナノロッドを含む第３展開液を使用しても輝度差は生じなかった（データは掲載せず）のに対して、抗体を担持した金ナノロッドを含む第３展開液を使用すると、目視で判定可能な明瞭なラインが観察され、顕著な輝度差も測定された。これは、上記抗ＨＢｓ抗体を担持した金ナノロッドが、検出ラインの捕捉抗体に捕捉されたＨＢｓ抗原と複合体を形成したことによるものである。金ナノロッドをイムノクロマトグラフィーに応用しても、金被覆銀ナノプレート又は球状金ナノ粒子と同等の感度で、被験物質を検出できることがわかった。そして、球状金ナノ粒子では一色の検出試薬しか調製できないが、アスペクト比（長軸／短軸）が１．００より大きい金ナノロッドを用いることにより、複数種の色の検出試薬を調製することができ、色調のバリエーションを広げることができた。また、前記金ナノロッドは、乾燥（酸化）に対して安定であり、遠心分離に必要な遠心力も弱かった。したがって、本発明によって、マルチカラー解析への応用に適しており、色調安定性が高く、かつ操作性が向上したバイオセンサー用ツールを提供することが可能となった。
【図１】
2017095744.tif 000008
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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