(57)【要約】【目的】ＩｇＥ産生を抑え、アレルギー炎症の予防または軽減を可能にする、ＩｇＥ産生抑制物の提供。【解決手段】紅藻フノリを酸加熱処理することにより、粘性が低く扱いやすい、ＩｇＥ産生抑制作用を高めた食品を提供する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
紅藻フノリを食品添加物で使用される酸を用いて加熱処理することにより、形質細胞のＩｇＥ産生抑制作用を有する抗アレルギー性物質。
【請求項２】
食品添加物で用いられる酸が、０．１％塩酸であることを特徴とする請求項１記載の抗アレルギー性物質。
【請求項３】
紅藻フノリが、スギノリ目フノリ科（Ｇｉｇａｒｔｉｎａｌｅｓ  Ｅｎｄｏｃｌａｄｉａｃｅａ）に属するフクロフノリ（Ｇｌｏｉｏｐｅｌｔｉｓ  ｆｕｒｃａｔａ）であることを特徴とする請求項目１記載の抗アレルギー性物質。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】  本発明は、ＩｇＥ産生抑制作用を有し、アレルギー炎症の予防または軽減を可能とする、機能性食品あるいは素材として有用なものである。
【背景技術】
【０００２】  我が国のアレルギー疾患患者数は増加の一途をたどっており、国民の２人に１人は何らかのアレルギー疾患を有していると言われている。一般的にアレルギーと呼ばれる花粉症やアトピー性皮膚炎等の１型アレルギーは、多くが直ちに生命を脅かすことはないが、食物アレルギー等の重症患者は、最悪の場合死に至る事もある。【０００３】  １型アレルギーは、マスト細胞から放出される、ロイコトリエンおよびトロンボキサン等に代表される、種々のケミカルメディエーターがアレルギー反応に対し大きな役割を果たしている事が知られている。そしてこのアレルギー反応は免疫グロブリンＥ（ＩｇＥ）抗体がマスト細胞膜上の受容体に結合することで感作する。このような状態においてアレルゲンが体内に侵入した時、アレルゲンがマスト細胞膜上に結合したＩｇＥに架橋することで、マスト細胞は炎症を起こすケミカルメディエーターを放出し、アレルギー疾患を引き起こす。事実アレルギー患者の血清中又は組織中のＩｇＥ抗体の濃度は、健常者の当該濃度に比較して高い値を示すことが知られている。従ってＩｇＥ抗体の産生を抑えることができるならば、アレルギー疾患の予防、又は治療に効果を発揮するものと考えられる。しかしながら、現在、アレルギー疾患の治療薬としてはケミカルメディエーターの一種であるヒスタミンの拮抗薬、およびケミカルメディエーターのマスト細胞からの遊離抑制剤が主流として用いられており、ＩｇＥ抗体の産生抑制によってアレルギー炎症を予防、又は治療する薬剤、食品は未だ実用に供されていない。すなわちＩｇＥ抗体産生抑制作用を持つ物質を得ることができるならば、ケミカルメディエーターの遊離より前の段階を遮断できることとなり、それにより、より原因療法的にアレルギー炎症を予防、治療することが可能になる。【０００４】  紅藻フノリは、物理、科学的な手法を駆使した精製品について化学成分も次第に解明され、医薬部外品や化粧品の素材として利用されている。フノリ原料の熱水抽出液のアルコール沈殿により得られるフノランは循環器疾病や腫瘍治療に対して有効である事が提案されている（特開平７−３３０８０４）。また、フノリ乾燥粉末の所定濃度の水溶液として皮膚に塗ることで、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、湿疹などに有効であるという事が提案されている（特開平８−９９３５）。さらに、フノリ属の抽出物を有効成分とする美白化粧品は、抗原によって誘導される好塩基球やマスト細胞の脱顆粒を抑制する作用、タンパク質糖化抑制作用、抗酸化作用があるとしている（特開２０１２−１２１８６５）。【０００５】  然るに、上記開示されている技術では、いずれもケミカルメディエーターの遊離抑制作用を有する食品や薬剤の製造技術であり、１型アレルギー症状発症経路の上流域に関与するＩｇＥの産生を抑制するものではない。また、工業的に抗アレルギー性物質を生産するには、より簡易な加工工程で、抗アレルギー性物質を高濃度に含有することが望ましい。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開平８−９９３５号公報
【０００７】
【特許文献２】特開２００７−８４５１８号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】  Ｉ型アレルギー反応はＩｇＥ抗体の産生量が増すことで症状が悪化するといえる。本開発の目的はＩｇＥ産生を抑制してアレルギー炎症を予防または軽減を可能にするＩｇＥ産生抑制物質を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００９】  本発明者は、上記課題を解決するために、日本で古来より食されてきた紅藻フノリのＩｇＥ産生抑制能を高める方法を提供するものである。紅藻フノリを食品添加物で用いられる酸により加熱処理を施すことで、ＩｇＥ産生抑制作用を高めたフノリ加工品を製造できることを見出した。【００１０】  本発明で用いるフノリ原料は、乾燥、粉末状にしたものを利用することができ、原料を安定して保存でき、また加工の利便性に富む。【００１１】  本発明では一般的に用いられる酸を使用するため、酵素などと比較して低コストで製造することができる。使用される酸は、塩酸、酢酸、クエン酸を用いるが、好ましくは塩酸である。また、用いられる酸の濃度は０．０１〜１％の希酸を用いる。【００１２】  本発明で行われる加熱処理は、１００℃〜１２１℃で行われるが、好ましくは１２１℃である。
【発明の効果】
【００１３】  本発明のフノリ酸加熱処理物は、高いＩｇＥ産生抑制効果を示し、アレルギー炎症の予防または治療に有用である。
【実施例】
【００１４】（１）試料の調製
塩酸、クエン酸、酢酸を０．０５％、０．０７５％、０．１％、０．２％、０．３％濃度に調整し、乾燥粉末状フクロフノリを５％量添加した。１２１℃、１５分で加熱処理し、１０Ｍ水酸化ナトリウムを用いてｐＨ７．０に調整した。１２０００ｒｐｍ、５分、遠心分離をし、上清を回収し、ＩｇＥ産生阻害活性の測定に用いた。【００１５】（２）細胞の調製
細胞はＩｇＥ産生ヒト骨髄由来Ｕ２６６細胞を使用した。Ｕ２６６細胞の培養にはＲＰＭＩ−１６４０培地を用い、以下の様に調製した。ＲＰＭＩ−１６４０培地１Ｌに対し、１０％炭酸ナトリウム溶液を適量添加してｐＨ７．０に調整した。さらに１００ｍｌのウシ胎児血清、１０ｍｌのペニシリン（１００ｕｎｉｔ／ｍｌ）、１０ｍｌのストレプトマイシン（１００μｇ／ｍｌ）、またＬ−グルタミンを０．３ｇ添加した。３７℃、５％ＣＯ２−９５％ａｉｒ環境下で３日ごとに継代培養した。【００１６】（３）ＩｇＥ産生抑制試験
（１）で調整したフノリ酸加熱処理物を滅菌水で２００μｇ／ｍｌに調整し、細胞実験用４８−ｗｅｌｌプレートに３００μｌずつ分注した。その中に、２×１０５ｃｅｌｌｓ／ｍｌに調整したＵ２６６細胞を、３００μｌ添加した。フノリ酸加熱処理物を分注した４８−ｗｅｌｌプレートに、２×１０５ｃｅｌｌｓ／ｍｌの細胞培養液を３００μｌずつ添加し、２４時間、３７℃、５％ＣＯ２−９５％ａｉｒ環境下でインキュベートした。２４時間後、４８−ｗｅｌｌプレートごとプレートシェイクし、９００ｒｐｍ、５分、遠心した。培養上清をＩｇＥの測定試験に用い、残る細胞培養液を細胞毒性試験に用いた。【００１７】（４）細胞毒性試験
細胞毒性試験にはトリパンブルー色素排除法を用いた。０．４％トリパンブルー（ＳＩＧＭＡ−ＡＲＤＲＩＣＨ）溶液を細胞培養液量に対して１０％量添加し、すみやかに懸濁した。懸濁液中の総細胞数と青く染色された死細胞数を血球計算盤で計測し、コントロールと比較することで細胞増殖抑制作用と細胞毒性の有無を調べた。
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【００１８】（５）ＩｇＥ産生量の測定
ＩｇＥ量の測定はＨｕｍａｎ  ＩｇＥ  ＥＬＩＳＡ  Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎ  Ｓｅｔを用いて測定した。コントロール区のＩｇＥ産生量を１００％として、サンプル添加区のＩｇＥ産生率を以下の式を用いて算出した。
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【実施例の効果】
【００１９】  図１にＵ２６６細胞によるＩｇＥ産生抑制結果を示す。図１に示したように、酸加熱処理により、フノリのＩｇＥ産生抑制作用が上昇した。特に０．１％塩酸によるフノリ酸加熱処理物は、高いＩｇＥ産生抑制作用を示した。細胞毒性はいずれの酸、酸濃度においても認められなかった。
【００２０】  図２にＵ２６６細胞による０．１％塩酸加熱処理フノリの、加熱温度によるＩｇＥ産生抑制能の変化を示す。図２に示したように、０．１％塩酸によるフノリ酸加熱処理物は、より高温で加熱処理をした方が高いＩｇＥ産生抑制能を示した。細胞毒性はいずれの温度においても認められなかった。
【００２１】  図３にＵ２６６細胞による０．１％塩酸加熱処理フノリの添加濃度によるＩｇＥ産生抑制能の変化を示す。図３に示したように、０．１％塩酸によるフノリ酸加熱処理物は、濃度依存性を示した。細胞毒性はいずれの０．１％塩酸加熱処理フノリ添加濃度においても認められなかった。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１】フノリ酸加熱処理時の酸濃度とＩｇＥ産生抑制の関係
【図２】フノリの０．１％塩酸加熱処理時の温度とＩｇＥ産生抑制の関係
【図３】０．１％塩酸加熱処理フノリの濃度とＩｇＥ産生抑制の関係
【図１】
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【図２】
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【図３】
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