(57)【要約】【課題】抗菌スペクトルが広く、様々な微生物に対して良好な抗菌効果を示す抗菌剤を提供すること。【解決手段】グリセルアルデヒド類を含有する抗菌剤を提供する。また、当該グリセルアルデヒド類を含有する抗菌剤を、抗菌対象物全量に対して、グリセルアルデヒド類が０．００５〜２０重量％となるよう添加することを特徴とする、抗菌方法を提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
グリセルアルデヒド類を含有する抗菌剤。
【請求項２】
グリセルアルデヒド類が、Ｄ−グリセルアルデヒド、Ｌ−グリセルアルデヒド、ＤＬ−グリセルアルデヒド、Ｄ−グリセルアルデヒド−３−リン酸、Ｌ−グリセルアルデヒド−３−リン酸およびＤＬ−グリセルアルデヒド−３−リン酸からなる群より選ばれる１種類以上である、請求項１に記載の抗菌剤。
【請求項３】
グリセルアルデヒド類が、Ｄ−グリセルアルデヒド、Ｌ−グリセルアルデヒド、ＤＬ−グリセルアルデヒド、およびＤＬ−グリセルアルデヒド−３−リン酸からなる群より選ばれる１種類以上である、請求項１に記載の抗菌剤。
【請求項４】
さらに、アミノ酸、有機酸およびその塩、無機酸およびその塩、脂肪酸エステル類、フェノール性化合物、ポリカチオン、ポリアニオン、カチオン性高分子、酵素、アルコールならびにバクテリオシンからなる群より選ばれる１種以上の抗菌性成分を含有する、請求項１〜３のいずれかに記載の抗菌剤。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれかに記載の抗菌剤を抗菌対象物に添加する抗菌方法。
【請求項６】
請求項１〜４のいずれかに記載の抗菌剤を、抗菌対象物全量に対して、グリセルアルデヒド類が０．００５〜２０重量％となるよう添加する抗菌方法。
【請求項７】
抗菌対象物が、食品、化粧品、医薬部外品および医薬品から選ばれるいずれかである、請求項５または６に記載の抗菌方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、グリセルアルデヒド類を含有する抗菌剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
食品、化粧品、医薬部外品および医薬品等の分野では、製品の変敗、食中毒および感染症等の原因となる微生物の増殖抑制は極めて重要な課題であり、原料や製造、流通過程において様々な対策がなされている。微生物の増殖抑制方法としては、加熱殺菌や冷凍保存等が挙げられるが、これらの方法は、製品品質への影響が大きく、例えば食品においては、温度変化による風味および栄養成分の損失により、製品の品質低下を招くことが多い。そのため、添加剤による方法が採用されるケースも増加しており、これまでにも、食品、化粧品、医薬部外品および医薬品の品質を維持する目的で、様々な添加剤が提案されている。
【０００３】
特許文献１には、ポリグリセリン脂肪酸エステル、リゾチーム、ε−ポリリジン又はその塩を、グリシン、有機酸及び／又は有機酸塩、無機酸及び／又は無機酸塩のうちから選ばれた１種又は２種以上と併用することを特徴とする食品用保存剤が提案されている。
【０００４】
特許文献２には、ショ糖脂肪酸エステルと、ポリグリセリン脂肪酸エステル、酵素処理レシチンよりなる群より選ばれた少なくとも１種以上と、アルコール類、糖類より選ばれた少なくとも１種以上とを含む静菌剤が提案されている。
【０００５】
特許文献３には、モノエステル含量が６０重量％以上であるショ糖脂肪酸エステルを、化粧品、医薬部外品、または医薬品などの外用剤全体に対して０．００１〜５重量％添加することを特徴とする外用剤の変質防止方法が提案されている。
【０００６】
特許文献４には、水性媒体中に、少なくとも、フェノキシエタノールと、乳酸および／または乳酸塩とが溶解もしくは分散されている水性組成物であって、該水性組成物中におけるＤ-乳酸およびＤ-乳酸塩の含有量が、Ｌ-乳酸およびＬ-乳酸塩の含有量よりも多いことを特徴とする防腐抗菌性が改善された水性組成物が提案されている。
【０００７】
この他にも、抗菌性の植物抽出物や植物由来発酵物、新規高分子化合物など、様々な抗菌剤が提案されているが、いずれの抗菌剤も一部の微生物にしか効果を示さない、あるいは、添加する対象によっては抗菌力が低くなる等、効果は十分ではなかった。
【０００８】
したがって、食品、化粧品、医薬部外品および医薬品等の分野での微生物の増殖抑制における諸課題は、未だ解決されておらず、更なる改善が望まれている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】特開平６−２６１７２５号公報
【特許文献２】特開平１０−２２５２８２号公報
【特許文献３】特開２００３−８９６６０号公報
【特許文献４】特開２００２−００３３０６号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明は、抗菌スペクトルが広く、様々な微生物に対し良好な効果を示す抗菌剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究した結果、グリセルアルデヒド類が様々な菌に対し幅広い抗菌効果を示すことを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１２】
すなわち、本発明は、グリセルアルデヒド類を含有する抗菌剤を提供する。
【００１３】
本発明は、また、グリセルアルデヒド類を含有する抗菌剤を、抗菌対象物全重量に対して、グリセルアルデヒド類が０．００５〜２０重量％となるよう添加することを特徴とする抗菌方法を提供する。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
グリセルアルデヒドは、生体内においてフルクトースが解糖系に送られる際、肝臓中では酵素の作用を受けてできる解糖中間体である。また、グリセルアルデヒドは、自然界にも存在し、シロイヌナズナ等の植物に含まれる成分であることが知られている。
【００１５】
本発明の抗菌剤に用いるグリセルアルデヒド類は、合成品でも、植物等から抽出または単離されたものであってもよい。グリセルアルデヒド類として、具体的には、Ｄ−グリセルアルデヒド、Ｌ−グリセルアルデヒド、ＤＬ−グリセルアルデヒド、Ｄ−グリセルアルデヒド−３−リン酸、Ｌ−グリセルアルデヒド−３−リン酸およびＤＬ−グリセルアルデヒド−３−リン酸等が例示されるが、その中でも、Ｄ−グリセルアルデヒド、Ｌ−グリセルアルデヒド、ＤＬ−グリセルアルデヒド、およびＤＬ−グリセルアルデヒド−３−リン酸が好ましい。本発明の抗菌剤において、グリセルアルデヒド類は、１種類のみを用いてもよく、２種類上を併用してもよい。
【００１６】
本発明の抗菌剤に用いるグリセルアルデヒド類は、単独でも十分な抗菌効果が得られるが、他の抗菌性成分と組み合わせることでさらに強い効果を示すため、それら１種類以上と組み合わせてもよい。他の抗菌性成分としては、アミノ酸、有機酸およびその塩類、無機酸およびその塩類、脂肪酸エステル類、フェノール性化合物、ポリカチオン、ポリアニオン、カチオン性高分子、酵素、アルコール、バクテリオシン等が挙げられ、その中でも、添加した際の抗菌効果に優れ、抗菌対象物の物性に与える影響が少ない点で、アミノ酸、有機酸およびその塩類が好ましい。
【００１７】
本発明の抗菌剤において、グリセルアルデヒド類とアミノ酸を組み合せる場合、用いられるアミノ酸としては、アラニン、グリシン、アルギニン等が例示されるが、その中でもグリシンが好ましい。
【００１８】
本発明の抗菌剤におけるアミノ酸の割合は、グリセルアルデヒド類１重量部に対し、１０〜１３００重量部程度であることが好ましく、５０〜１２００重量部程度であることがより好ましく、１００〜１１００重量部程度であることがさらに好ましい。例えば、本発明の抗菌剤を食品に添加する場合、アミノ酸の割合がグリセルアルデヒド１重量部に対し、１０重量部未満である場合には、その添加による抗菌効果の向上が得られない場合がある。また、アミノ酸の割合がグリセルアルデヒド１重量部に対し、１３００重量部を超える場合には該アミノ酸に特異的な味が強くなる場合がある。
【００１９】
本発明の抗菌剤において、グリセルアルデヒド類と有機酸およびその塩類を組み合せる場合、用いられる有機酸およびその塩類としては、酢酸、乳酸、フマル酸等とその塩類が例示されるが、その中でも酢酸またはその塩類が好ましい。
【００２０】
本発明の抗菌剤における有機酸およびその塩類の割合は、グリセルアルデヒド類１重量部に対し、１０〜１３００重量部程度であることが好ましく、５０〜１２００重量部程度であることがより好ましく、１００〜１１００重量部程度であることがさらに好ましい。例えば、本発明の抗菌剤を食品に添加する場合、有機酸およびその塩類の割合がグリセルアルデヒド１重量部に対し、１０重量部未満である場合には、その添加による抗菌効果の向上が得られない場合がある。また、有機酸およびその塩類の割合がグリセルアルデヒド１重量部に対し、１３００重量部を超える場合には該有機酸およびその塩類に特異的な酸味が強くなる場合がある。
【００２１】
本発明の抗菌剤において、グリセルアルデヒド類と無機酸およびその塩類を組み合せる場合、用いられる無機酸及びその塩類としては、リン酸、メタリン酸、ピロリン酸、ポリリン酸等とその塩類が例示されるが、その中でもリン酸またはその塩類が好ましい。
【００２２】
本発明の抗菌剤における無機酸およびその塩類の割合は、グリセルアルデヒド類１重量部に対し、１０〜１３００重量部程度であることが好ましく、５０〜１２００重量部程度であることがより好ましく、１００〜１１００重量部程度であることがさらに好ましい。例えば、本発明の抗菌剤を食品に添加する場合、無機酸およびその塩類の割合がグリセルアルデヒド１重量部に対し、１０重量部未満である場合には、その添加による抗菌効果の向上が得られない場合がある。また、無機酸およびその塩類の割合がグリセルアルデヒド１重量部に対し、１３００重量部を超える場合には該無機酸およびその塩類に特異的な味が強くなる場合がある。
【００２３】
本発明の抗菌剤において、グリセルアルデヒド類と脂肪酸エステル類を組み合せる場合、用いられる脂肪酸エステル類としては、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、アスコルビン酸脂肪酸エステル等が例示されるが、その中でもグリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステルが好ましい。
【００２４】
本発明の抗菌剤における脂肪酸エステル類の割合は、グリセルアルデヒド類１重量部に対し、０．１〜５００重量部程度であることが好ましく、０．５〜１００重量部程度であることがより好ましく、１〜５０重量部程度であることがさらに好ましい。例えば、本発明の抗菌剤を食品、化粧品および医薬部外品等に添加する場合、脂肪酸エステル類の割合がグリセルアルデヒド１重量部に対し、０．１重量部未満である場合には、その添加による抗菌効果の向上が得られない場合がある。また、脂肪酸エステル類の割合がグリセルアルデヒド１重量部に対し、５００重量部を超える場合には、例えば、食品等では、該脂肪酸エステル類に特異的な苦味が強くなる傾向があり、化粧品や医薬部外品等では、成分が分離する場合がある。
【００２５】
本発明の抗菌剤において、グリセルアルデヒド類とフェノール性化合物を組み合せる場合、用いられるフェノール性化合物としては、クレゾール、パラヒドロキシ安息香酸エステル等が例示されるが、その中でもパラヒドロキシ安息香酸メチル、パラヒドロキシ安息香酸エチル、パラヒドロキシ安息香酸ブチル、パラヒドロキシ安息香酸プロピルが好ましい。
【００２６】
本発明の抗菌剤におけるフェノール性化合物の割合は、グリセルアルデヒド類１重量部に対し、１〜１０００重量部程度であることが好ましく、５〜９００重量部程度であることがより好ましく、１０〜８００重量程度であることがさらに好ましい。例えば、本発明の抗菌剤を化粧品や医薬部外品等に添加する場合、フェノール性化合物の割合がグリセルアルデヒド１重量部に対し、１重量部未満である場合には、フェノール性化合物の添加による抗菌効果の向上が得られない場合がある。また、フェノール性化合物の割合が、グリセルアルデヒド１重量部に対し、１０００重量部を超える場合には該フェノール性化合物が析出する場合がある。
【００２７】
本発明の抗菌剤において、グリセルアルデヒド類とポリカチオン、ポリアニオンおよびカチオン性高分子を組み合せる場合、用いられるポリカチオン、ポリアニオンおよびカチオン性高分子としては、プロタミン、ポリリジン、四級アンモニウム塩、ビグアナイド、キチン、キトサン等が例示されるが、その中でもプロタミン、四級アンモニウム塩、ビグアナイドが好ましい。
【００２８】
本発明の抗菌剤におけるポリカチオン、ポリアニオンおよびカチオン性高分子の割合は、グリセルアルデヒド類１重量部に対し、０．１〜１００重量部程度であることが好ましく、３〜５０重量部程度であることがより好ましく、５〜２５重量部程度であることがさらに好ましい。例えば、本発明の抗菌剤を食品、洗浄剤、化粧品および医薬部外品等に添加する場合、ポリカチオン、ポリアニオンおよびカチオン性高分子の割合がグリセルアルデヒド１重量部に対し、０．１重量部未満である場合には、その添加による抗菌効果の向上が得られない場合がある。また、ポリカチオン、ポリアニオンおよびカチオン性高分子の割合が、グリセルアルデヒド１重量部に対し、１００重量部を超える場合には、例えば、食品等では、該ポリカチオン、ポリアニオンおよびカチオン性高分子に特異的な味が強くなる傾向があり、洗浄剤等では、組成物の安定性が悪くなる傾向があり、化粧品や医薬部外品等では、皮膚への刺激性が強くなったり、本来の目的とする機能に影響を与えたりする等、意図しない効果が出る場合がある。
【００２９】
本発明の抗菌剤において、グリセルアルデヒド類と酵素を組み合せる場合、用いられる酵素としては、リゾチーム、ムラミターゼ等が例示されるが、その中でもリゾチームが好ましい。
【００３０】
本発明の抗菌剤における酵素の割合は、グリセルアルデヒド類１重量部に対し、０．１〜２００重量部程度であることが好ましく、１〜１００重量部程度であることがより好ましく、５〜７０重量部程度であることがさらに好ましい。例えば、本発明の抗菌剤を食品に添加する場合、酵素がグリセルアルデヒド１重量部に対し、０．１重量部未満である場合には、その添加による抗菌効果の向上が得られない場合がある。また、酵素の割合がグリセルアルデヒド１重量部に対し、１００重量部を超える場合には物性への影響が起こる場合がある。
【００３１】
本発明の抗菌剤において、グリセルアルデヒド類とアルコールを組み合せる場合、用いられるアルコールとしては、メタノール、エタノール、２−プロパノール、フェノキシエタノール、プロピレングリコール等が例示されるが、その中でもエタノール、フェノキシエタノール、プロピレングリコールが好ましい。
【００３２】
本発明の抗菌剤におけるアルコールの割合は、グリセルアルデヒド類１重量部に対し、１〜１０００重量部程度であることが好ましく、５〜９００重量部程度であることがより好ましく、１０〜８００重量部程度であることがさらに好ましい。例えば、本発明の抗菌剤を食品、化粧品および医薬部外品等に添加する場合、アルコールの割合がグリセルアルデヒド１重量部に対し、１重量部未満である場合には、その添加による抗菌効果の向上が得られない場合がある。また、アルコールの割合がグリセルアルデヒド１重量部に対し、１０００重量部を超える場合には、例えば、食品等では、アルコールに特異的な苦味が強くなる傾向があり、化粧品や医薬部外品等では、皮膚への刺激性が強くなったり、本来の目的とする機能に影響を与えたりする等、意図しない効果が出る場合がある。
【００３３】
本発明の抗菌剤において、グリセルアルデヒド類とバクテリオシンを組み合せる場合、用いられるバクテリオシンとしては、ナイシン、ナタマイシン等が例示されるが、その中でも、ナイシンが好ましい。
【００３４】
本発明の抗菌剤におけるバクテリオシンの割合は、グリセルアルデヒド類１重量部に対し、０．０１〜１００重量部程度であることが好ましく、０．０５〜５０重量部程度であることがより好ましく、０．１〜１０重量部程度であることがさらに好ましい。例えば、本発明の抗菌剤を食品に添加する場合、バクテリオシンの割合がグリセルアルデヒド１重量部に対し、０．０１重量部未満である場合には、その添加による抗菌効果の向上が得られない場合がある。また、バクテリオシンの割合がグリセルアルデヒド１重量部に対し、１００重量部を超える場合には該バクテリオシンに特異的な苦味が強くなる場合がある。
【００３５】
本発明の抗菌剤を適用することが可能な素材は特に限定されず、食品、化粧品、医薬部外品、医薬品、インク、金属加工油、接着剤、工業用水、塗料、洗浄剤、保冷剤、防虫剤、芳香剤、消臭剤、および不織布などに用いることができる。例えば、食品に用いる場合は、かまぼこ、ちくわ、はんぺん、魚肉ハム、魚肉ソーセージなどの水産練り製品類、ハム、ソーセージ、ベーコン、ハンバーグ、ミンチボールなどの畜肉製品類、コロッケ、トンカツ、フライドチキン、魚フライ、唐揚げなどのフライ製品類、チャーハン、炊き込み御飯等の米飯類、中華麺、パスタ、うどん、そば等の麺類、ポテトサラダ、餃子、シュウマイ、卵焼き、煮物、和え物等の惣菜類、カレーパンや中華饅頭の詰め物、サンドイッチの具材等のフィリング類、カスタードクリーム、ホイップクリーム、フラワーペースト等のクリーム類、カステラ、スポンジケーキ、饅頭、餡等の菓子類、ジャム等の果実加工品類、プロセスチーズ等のチーズ類、果実飲料、野菜飲料、炭酸飲料、茶飲料等の清涼飲料類などの種々の食品に使用することが可能である。
【００３６】
本発明の抗菌剤の、抗菌対象物に対する添加量は、抗菌対象物の種類や状態によって得られる抗菌効果が異なるため、希望する効果が得られるように適宜調整すればよいが、一つの態様として、本発明の抗菌剤は、抗菌対象物に対して、グリセルアルデヒド類が０．００５〜２０重量％となるよう添加すればよく、例えば０．０１％〜１５重量％、または０．０２〜１０重量％添加するのが好ましい。
【００３７】
一態様として、本発明の抗菌剤がグリセルアルデヒド類を単独で含む場合、本発明の抗菌剤は、抗菌対象物に対して、グリセルアルデヒド類が０．０１〜２０重量％となるよう添加するのが好ましい。一態様として、本発明の抗菌剤がグリセルアルデヒド類と他の抗菌性成分を組み合わせて含む場合、本発明の抗菌剤は、抗菌対象物に対して、グリセルアルデヒド類が０．００５〜２０重量％、好ましくは、０．００７５〜１０重量％となるよう添加する。
【００３８】
まず、本発明の抗菌剤に使用するグリセルアルデヒド類について、以下の供試菌に対する最少発育阻止濃度（ＭＩＣ）を評価した（試験例１〜５）。
【００３９】
試験例１〜５
最少発育阻止濃度（ＭＩＣ）試験
（試験方法）
ＤＬ−グリセルアルデヒド（ナカライテスク株式会社製）、Ｄ−グリセルアルデヒド（ＣＯＭＢＩ−ＢＬＯＣＫＳ社製）、Ｌ−グリセルアルデヒド（ＳＩＧＭＡ  ＡＬＤＲＩＣＨ社製）、ＤＬ−グリセルアルデヒド-３-リン酸（ＳＩＧＭＡ  ＡＬＤＲＩＣＨ社製）及びソルビン酸カリウム（東京化成工業株式会社製）について、日本化学療法学会標準法（微量液体希釈法）に準じ、最小発育阻止濃度（以下、「ＭＩＣ」とも称する）の測定を行った。薬剤濃度１６重量％の薬液を調製し、マイクロタイタープレート（９６ウェル）の端に調製した薬剤１８０μL／ウェル入れ、その隣以降に滅菌水９０μL／ウェルずつ入れ、薬剤の入ったウェルから９０μLを抜き取り隣のウェルに入れ１／２になるように希釈した。この操作をそれぞれ隣のウェルへ順に行い、段階的な希釈を行った。指定濃度の２．２５倍濃度に調製したミューラーヒントン培地（ベクトン・ディッキンソン社製）を滅菌後、マイクロタイタープレートに８０μｌ／ウェルずつ分注した。次に下記供試菌をミューラーヒントン培地にて３０℃で２０時間培養した菌液を１０４ｃｆｕ／ｍｌとなるように生理食塩水で希釈した後、上記で作製した培地注入済みのマイクロタイタープレートに１０μｌ／ウェルずつ接種した。これを３０℃の恒温器内で４８時間培養し、目視にて菌の生育の有無を確認し、ＭＩＣを測定した。
供試菌
Ｅ．ｃｏｌｉ（ＮＩＨＪ−ＪＣ２）
Ｓ．ａｕｒｅｕｓ（ＩＦＯ１３２７６）
Ｂ．ｃｅｒｅｕｓ（ＮＢＲＣ１５３０５）栄養細胞
Ｂ．ｃｅｒｅｕｓ（ＮＢＲＣ１５３０５）芽胞液
Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ（ＮＢＲＣ１０６９）栄養細胞
Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ（ＮＢＲＣ１０６９）芽胞液
Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ（ＡＴＣＣ６２７５） 胞子懸濁液
【００４０】
（結果）
Ｄ−グリセルアルデヒド、Ｌ−グリセルアルデヒド、ＤＬ−グリセルアルデヒド、およびＤＬ−グリセルアルデヒド−３−リン酸は、種々の微生物に対して強い抗菌効果を示した。結果を表１に示す。
【００４１】
【表１】
2017095421.tif 000002
【００４２】
以下、実施例により本発明をさらに説明するが、本発明は、これらの実施例に何ら限定されるものではない。
【実施例】
【００４３】
実施例１〜５および比較例１〜２
ホワイトソースの保存試験（１）
（試験方法）
表２に記載される抗菌剤を、ホワイトソースに対して添加し、撹拌しながら８５℃まで加熱した後、氷冷した。作製したホワイトソースにＢ．ｃｅｒｅｕｓ（ＮＢＲＣ １５３０５) 芽胞液を約１〜３ＣＦＵ/ｇ接種し、３０℃の恒温機内で保存し、経時的にサンプリングを行い、食品添加物公定書に記載の微生物限度試験法（寒天平板混釈法）に従って菌数を測定した。
【００４４】
【表２】
2017095421.tif 000003
【００４５】
（結果）
ＤＬ−グリセルアルデヒドを添加したホワイトソース（実施例１〜５）は、保存中の菌の増殖が抑制されており、比較例の抗菌剤を添加したホワイトソースに比べ、保存性が大幅に改善されていた。結果を表３に示す。
【００４６】
【表３】
2017095421.tif 000004
【００４７】
表３に示した通り、本発明の抗菌剤を添加したホワイトソースは、長時間保存しても外観の変化や異臭の発生がなく、品質が安定に保たれていることが確認された。また、本発明の抗菌剤は、安全性が高く、かつ食中毒菌に対して優れた抗菌効果を有し、食品本来の味や風味を損なうことがなかった。
【００４８】
実施例６および比較例３〜４
カスタードクリームの保存試験
（試験方法）
全卵２０．５ｇを十分に撹拌し、砂糖３０ｇおよび篩っておいたコーンスターチ９．５ｇを加え、さらに撹拌した後、６５℃に温めた牛乳１４０ｇを撹拌しながら加え、混合物を得た。次いで、表４に記載される抗菌剤を得られた混合物に添加した後、撹拌しながら８５℃まで加熱し、８５℃で２分間撹拌した。加熱を止め、１分間撹拌して、カスタードクリームを得た。得られたカスタードクリームを氷冷し、Ｂ．ｃｅｒｅｕｓ（ＮＢＲＣ １５３０５) 芽胞液を約１〜１０ＣＦＵ／ｇ接種し、２０℃の恒温機内で保存して経時的にサンプリングを行い、食品添加物公定書に記載の微生物限度試験法（寒天平板混釈法）に従って菌数を測定した。
【００４９】
【表４】
2017095421.tif 000005
【００５０】
ＤＬ−グリセルアルデヒドを添加したカスタードクリームは、保存中の菌の増殖が抑制されており、比較例の抗菌剤を添加したカスタードクリームに比べ、保存性が大幅に改善されていた。結果を表５に示す。
【００５１】
【表５】
2017095421.tif 000006
【００５２】
実施例７〜８および比較例５〜６
ホワイトソースの保存試験（２）
（試験方法）
表６に記載される抗菌剤を、ホワイトソースに対して添加し、撹拌しながら８５℃まで加熱した後、氷冷した。作製したホワイトソースにＢ．ｃｅｒｅｕｓ（ＮＢＲＣ １５３０５) 芽胞液を約１〜３ＣＦＵ／ｇ接種し、３０℃の恒温機内で保存し、経時的にサンプリングを行い、食品添加物公定書に記載の微生物限度試験法（寒天平板混釈法）に従って菌数を測定した。
【００５３】
【表６】
2017095421.tif 000007
【００５４】
ＤＬ−グリセルアルデヒドとグリシンからなる抗菌剤（実施例７〜８）を添加したホワイトソースは、保存中の増殖が抑制されており、グリシン単独（比較例５〜６）を添加したホワイトソースに比べ、保存性が大幅に改善されていた。結果を表７に示す。
【００５５】
【表７】
2017095421.tif 000008
【００５６】
実施例９
最少発育阻止濃度（ＭＩＣ）試験（酢酸ナトリウムとの併用（１））
（試験方法）
ＤＬ−グリセルアルデヒド溶液の濃度０．１２重量％となるように滅菌水を用いて調製し、併用剤として酢酸ナトリウムの濃度８重量％となるように滅菌水を用いて調製した。マイクロタイタープレート（９６ウェル）の端にそれぞれ調製した薬剤各１８０μL／ウェル入れ、その隣以降に滅菌水９０μL／ウェルずつ入れ、薬剤の入ったウェルから９０μLを抜き取り隣のウェルに入れ１／２になるように希釈した。この操作をそれぞれ隣のウェルへ順に行い、段階的な希釈を行った。指定濃度の２．２５倍濃度に調製したミューラーヒントン培地（ベクトン・ディッキンソン社製）を滅菌後、マイクロタイタープレートに８０μL／ウェルずつ分注した。次に下記供試菌をミューラーヒントン培地にて３０℃で２０時間培養した菌液を１０４ｃｆｕ／ｍLとなるように生理食塩水で希釈した後、上記で作製した培地注入済みのマイクロタイタープレートに１０μL／ウェルずつ接種した。これを３０℃の恒温器内で４８時間培養し、目視にて菌の生育の有無を確認し、ＭＩＣを測定した。
供試菌
Ｂ．ｃｅｒｅｕｓ（ＮＢＲＣ １５３０５) 芽胞液。
【００５７】
（結果）
ＤＬ−グリセルアルデヒドは、酢酸ナトリウムと併用することにより、グラム陽性の芽胞形成菌に対し、単独（試験例１）の時よりも低容量の添加で抗菌効果を示した。結果を表８に示す。
【００５８】
【表８】
2017095421.tif 000009
【００５９】
実施例１０
最少発育阻止濃度（ＭＩＣ）試験（酢酸ナトリウムとの併用（２））
（試験方法）
ＤＬ-グリセルアルデヒド溶液の濃度０．５重量％となるように滅菌水を用いて調製し、併用剤として酢酸ナトリウムの濃度８重量％となるように滅菌水を用いて調製した。マイクロタイタープレート（９６ウェル）の端にそれぞれ調製した薬剤各１８０μL／ウェル入れ、その隣以降に滅菌水９０μL／ウェルずつ入れ、薬剤の入ったウェルから９０μLを抜き取り隣のウェルに入れ１／２になるように希釈した。この操作をそれぞれ隣のウェルへ順に行い、段階的な希釈を行った。指定濃度の２．２５倍濃度に調製したミューラーヒントン培地（ベクトン・ディッキンソン社製）を滅菌後、マイクロタイタープレートに８０μL／ウェルずつ分注した。次に下記供試菌をミューラーヒントン培地にて３０℃で２０時間培養した菌液を１０４ｃｆｕ／ｍLとなるように生理食塩水で希釈した後、上記で作製した培地注入済みのマイクロタイタープレートに１０μL／ウェルずつ接種した。これを３０℃の恒温器内で４８時間培養し、目視にて菌の生育の有無を確認し、ＭＩＣを測定した。
供試菌
Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ（ＡＴＣＣ６２７５） 胞子懸濁液。
【００６０】
（結果）
ＤＬ−グリセルアルデヒドは、酢酸ナトリウムと併用することにより、カビに対し、単独（試験例１）の時よりも低容量の添加で抗菌効果を示した。結果を表９に示す。
【００６１】
【表９】
2017095421.tif 000010
【００６２】
実施例１１
最少発育阻止濃度（ＭＩＣ）試験（酢酸ナトリウムとの併用（３））
（試験方法）
ＤＬ-グリセルアルデヒド溶液の濃度０．１８重量％となるように滅菌水を用いて調製し、併用剤として酢酸ナトリウムの濃度４重量％となるように滅菌水を用いて調製した。マイクロタイタープレート（９６ウェル）の端にそれぞれ調製した薬剤各１８０μL／ウェル入れ、その隣以降に滅菌水９０μL／ウェルずつ入れ、薬剤の入ったウェルから９０μLを抜き取り隣のウェルに入れ１／２になるように希釈した。この操作をそれぞれ隣のウェルへ順に行い、段階的な希釈を行った。指定濃度の２．２５倍濃度に調製したミューラーヒントン培地（ベクトン・ディッキンソン社製）を滅菌後、マイクロタイタープレートに８０μL／ウェルずつ分注した。次に下記供試菌をミューラーヒントン培地にて３０℃で２０時間培養した菌液を１０４ｃｆｕ／ｍLとなるように生理食塩水で希釈した後、上記で作製した培地注入済みのマイクロタイタープレートに１０μL／ウェルずつ接種した。これを３０℃の恒温器内で４８時間培養し、目視にて菌の生育の有無を確認し、ＭＩＣを測定した。
供試菌
Ｐｒｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ（ＮＢＲＣ１３７３６）。
【００６３】
（結果）
ＤＬ−グリセルアルデヒドは、酢酸ナトリウムと併用することにより、グラム陰性菌に対し、抗菌効果を示した。結果を表１０に示す。
【００６４】
【表１０】
2017095421.tif 000011
【００６５】
実施例１２
最少発育阻止濃度（ＭＩＣ）試験（グリシンとの併用）
（試験方法）
ＤＬ-グリセルアルデヒド溶液の濃度０．１２重量％となるように滅菌水を用いて調製し、併用剤としてグリシンの濃度４重量％となるように滅菌水を用いて調製した。マイクロタイタープレート（９６ウェル）の端にそれぞれ調製した薬剤各１８０μL／ウェル入れ、その隣以降に滅菌水９０μL／ウェルずつ入れ、薬剤の入ったウェルから９０μLを抜き取り隣のウェルに入れ１／２になるように希釈した。この操作をそれぞれ隣のウェルへ順に行い、段階的な希釈を行った。指定濃度の２．２５倍濃度に調製したミューラーヒントン培地（ベクトン・ディッキンソン社製）を滅菌後、マイクロタイタープレートに８０μL／ウェルずつ分注した。次に下記供試菌をミューラーヒントン培地にて３０℃で２０時間培養した菌液を１０４ｃｆｕ／ｍLとなるように生理食塩水で希釈した後、上記で作製した培地注入済みのマイクロタイタープレートに１０μL／ウェルずつ接種した。これを３０℃の恒温器内で４８時間培養し、目視にて菌の生育の有無を確認し、ＭＩＣを測定した。
供試菌
Ｂ．ｃｅｒｅｕｓ（ＮＢＲＣ１５３０５） 芽胞液。
【００６６】
（結果）
ＤＬ−グリセルアルデヒドは、グリシンと併用することにより、グラム陽性の芽胞形成菌に対し、単独（試験例１）の時よりも低容量の添加で抗菌効果を示した。結果を表１１に示す。
【００６７】
【表１１】
2017095421.tif 000012
【００６８】
実施例１３
化粧水の製造
（試験方法）
表１２に記載される配合で化粧水を製造した。該化粧品は、本発明の抗菌剤を添加することを特徴とする抗菌方法で製造された化粧品の一形態である。
【００６９】
【表１２】
2017095421.tif 000013