(57)【要約】【課題】本発明は、肌なじみがよく、良好な使用感をもち、かつ皮膚への刺激が低い皮膚浸透促進剤であって、難水溶性物質に対し高い皮膚促進効果を有する皮膚浸透促進剤、及びこれらを含有する皮膚外用剤を提供することを目的とする。【解決手段】マンノシルエリスリトールリピッドを有効成分として含有する難水溶性物質の皮膚浸透促進剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
マンノシルエリスリトールリピッドを有効成分として含有する難水溶性物質の皮膚浸透促進剤。
【請求項２】
マンノシルエリスリトールリピッドが、マンノシルエリスリトールリピッド−Ａ、マンノシルエリスリトールリピッド−Ｂ又はマンノシルエリスリトールリピッド−Ｃから選ばれる少なくとも１種である、請求項１に記載の皮膚浸透促進剤。
【請求項３】
少なくともマンノシルエリスリトールリピッドおよび難水溶性物質を含有する皮膚外用剤。
【請求項４】
難水溶性物質が、ビタミンＡ、ビタミンＥ、油溶性ビタミンＣ誘導体、フルルビプロフェン、プランルカスト、インドメタシン、メフェナム酸、トルブタミド、グリベンクラミド、フェニトイン、プロブコール、フェニルブタゾン、フロセミド、リスペリドン、カルバマゼピン、ケトプロフェン、フェノフィブラート、ベザフィブラート、アムホテリシン、パクリタキセルおよびベタメゾンからなる群より選ばれる１種以上である、請求項３に記載の皮膚外用剤。
【請求項５】
皮膚外用剤が、スキンケア用化粧料である請求項３又は４に記載の皮膚外用剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、難水溶性物質を皮膚の角質層内に浸透することを促進する難水溶性物質の皮膚浸透促進剤、及びそれらを含む皮膚外用剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚には角質層と呼ばれるバリア層があるため、難水溶性物質を含む多くの物質は角質層を超えて浸透することが困難であり、これまでに様々な浸透促進剤が提案されてきた。例えば、特許文献１では、特定のイミダゾリジノン誘導体等が毛髪化粧料において皮膚浸透促進剤として作用することを報告している。さらに特許文献２では、茶抽出物を有効成分とする浸透促進剤が報告されている。しかしながら、これら浸透促進剤は、使用感、安全性、安定性の面で問題があり、さらにはその難水溶性物質の浸透促進作用に関しては不十分であった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開平１０−１４２６号公報
【特許文献２】特開平２００９−２５９３１８号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明は、肌なじみがよく、良好な使用感をもち、かつ皮膚への刺激が低い皮膚浸透促進剤であって、難水溶性物質に対し高い皮膚促進効果を有する皮膚浸透促進剤、及びこれらを含有する皮膚外用剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らは、酵母が産生する界面活性剤マンノシルエリスリトールリピッドに着目し、マンノシルエリスリトールリピッド自身が皮膚への高い浸透性を有する性質を浸透促進に利用することに想到した。鋭意検討した結果、マンノシルエリスリトールリピッド自身が皮膚へ浸透するだけでなく、難水溶性物質も一緒に皮膚へ取り込むことを見出し、本発明を完成するに至った。なお、本発明によれば、マンノシルエリスリトールリピッドを難水溶性物質と混和するだけで皮膚への浸透性を高めることができ、リポソームの作製といった煩雑な操作が不要である。マンノシルエリスリトールリピッドは化粧料として一般に使用されており安全性が確認された物質であるが、これが皮膚浸透促進剤として作用し、上述した格別の作用効果を発揮することは本発明者の新知見である。
【０００６】
すなわち、本発明は以下に代表される構成からなる。
［１］  マンノシルエリスリトールリピッドを有効成分として含有する難水溶性物質の皮膚浸透促進剤。
［２］  マンノシルエリスリトールリピッドが、マンノシルエリスリトールリピッド−Ａ、マンノシルエリスリトールリピッド−Ｂ又はマンノシルエリスリトールリピッド−Ｃから選ばれる少なくとも１種である、［１］に記載の皮膚浸透促進剤。
［３］  少なくともマンノシルエリスリトールリピッドおよび難水溶性物質を含有する皮膚外用剤。
［４］  難水溶性物質が、ビタミンＡ、ビタミンＥ、油溶性ビタミンＣ誘導体、フルルビプロフェン、プランルカスト、インドメタシン、メフェナム酸、トルブタミド、グリベンクラミド、フェニトイン、プロブコール、フェニルブタゾン、フロセミド、リスペリドン、カルバマゼピン、ケトプロフェン、フェノフィブラート、ベザフィブラート、アムホテリシン、パクリタキセルおよびベタメゾンからなる群より選ばれる１種以上である、［３］に記載の皮膚外用剤。
［５］  皮膚外用剤が、スキンケア用化粧料である［３］又は［４］に記載の皮膚外用剤。
【発明の効果】
【０００７】
本発明は、マンノシルエリスリトールリピッドを難水溶性物質と混和するだけで皮膚への浸透性を高めることができ、高い皮膚浸透促進効果を有する。また、マンノシルエリスリトールリピッドは化粧品原料としても用いられている生物由来界面活性剤であり、優れた浸透性、肌なじみ感を有するとともに、環境負荷が小さいことから、使用感、安全性、安定性に優れた皮膚浸透促進剤を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】マンノシルエリスリトールリピッド及びカルセインを用いた浸透性試験の結果を示す図である。
【図２】マンノシルエリスリトールリピッド及びフルオレセインを用いた浸透性試験の結果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
マンノシルエリスリトールリピッド（以下「ＭＥＬ」ということがある）は、ウスチラゴ  ヌーダ（Ustilago nuda）とシゾネラ  メラノグラマ（Shizonella melanogramma）から発見された物質である。その後、イタコン酸生産の変異株であるキャンデダ属酵母、キャンデダ  アンタークチカ（Candida antarctica）（現在はシュードザイマ  アンタークチカ（Pseudozyma antarctica）、クルツマノマイセス（Kurtzmanomyces）属等の酵母らによっても生産されることが報告されている。
【００１０】
マンノシルエリスリトールリピッドの構造を一般式（１）に示す。一般式（１）中、置換基Ｒ１は、同一でも異なっていてもよい炭素数４〜２４の脂肪族アシル基である。マンノシルエリスリトールリピッドは、マンノースの４位及び６位のアセチル基の有無に基づいて、ＭＥＬ−Ａ、ＭＥＬ−Ｂ、ＭＥＬ−Ｃ及びＭＥＬ−Ｄの４種類に分類される。
【００１１】
【化１】
2017052701.tif 000002
【００１２】
具体的には、ＭＥＬ−Ａは、一般式（１）中、置換基Ｒ２およびＲ３がともにアセチル基である。ＭＥＬ−Ｂは、一般式（１）中、置換基Ｒ２はアセチル基であり、置換基Ｒ３は水素である。ＭＥＬ−Ｃは、一般式（１）中、置換基Ｒ２が水素であり、置換基Ｒ３はアセチル基である。ＭＥＬ−Ｄは、一般式（１）中、置換基Ｒ２及びＲ３がともに水素である。
【００１３】
上記ＭＥＬ−Ａ〜ＭＥＬ−Ｄにおける置換基Ｒ１の炭素数は、ＭＥＬ生産培地に含有させる油脂類であるトリグリセリドを構成する脂肪酸の炭素数および、使用するＭＥＬ生産菌の脂肪酸の資化の程度によって変化する。また、上記、トリグリセリドが不飽和脂肪酸残基を有する場合、ＭＥＬ生産菌が上記不飽和脂肪酸の二重結合部分まで資化しなければ、置換基Ｒ１として不飽和脂肪酸残基を含ませることも可能である。以上の説明から明らかなように、得られるＭＥＬは、通常、置換基Ｒ１の脂肪酸残基部分が異なる化合物の混合物の形態である。
【００１４】
本発明の組成物には一般式（２）または一般式（３）に示されている構造を有するマンノシルエリスリトールリピッドが含まれている。尚、一般式（２）中、置換基Ｒ１は同一でも異なっていてもよい炭素数４〜２４の脂肪族アシル基であり、置換基Ｒ２は同一でも異なっていてもよい水素またはアセチル基である。また、一般式（３）中、置換基Ｒ１は同一でも異なっていてもよい炭素数４〜２４の脂肪族アシル基であり、置換基Ｒ２は同一でも異なっていてもよい水素またはアセチル基である。置換基Ｒ１の炭素数は上記範囲内であれば特に限定されないが、８個〜１４個であることがさらに好ましい。
【００１５】
【化２】
2017052701.tif 000003
【００１６】
【化３】
2017052701.tif 000004
【００１７】
また、上記一般式（２）及び一般式（３）中の置換基Ｒ１は、飽和脂肪族アシル基であっても不飽和脂肪族アシル基であってもよく、特に限定されるものではない。不飽和結合を有している場合、例えば、複数の二重結合を有していても良い。炭素鎖は直鎖であっても分岐鎖状であってもよい。また、酸素原子含有炭化水素基の場合、含まれる酸素原子の数及び位置は特に限定されない。
【００１８】
ＭＥＬ以外のＭＡＬ（マンノシルアルジトールリピッド）の構造は一般式（４）に示す（式中、置換基Ｒ２は同一でも異なっていてもよい水素またはアセチル基である）。エリスリトール以外の糖アルコール（アルジトール）としては、マンニトール、アラビトール、リビトール、ソルビトールが付加している(n=４：マンニトール、ソルビトール、n=２：アラビトール、リビトール)。一般式（４）に対応させれば、ＭＡＬはマンノースの２位、３位に炭素数２〜２０、好ましくは炭素数４〜１８、より好ましくは炭素数６〜１４の飽和又は不飽和の直鎖又は分枝を有するアルカノイル基を有する（式中、置換基Ｒ２は同一でも異なっていてもよい水素またはアセチル基である）
【００１９】
【化４】
2017052701.tif 000005
【００２０】
（式中、置換基Ｒ１は同一でも異なっていてもよい炭素数２〜２０、好ましくは炭素数４〜１８、より好ましくは炭素数６〜１４の飽和又は不飽和の直鎖又は分枝を有するアルカノイル基を有し、式中、置換基Ｒ２は同一でも異なっていてもよい水素またはアセチル基である。好ましくは、式中、置換基Ｒ２のどちらもアセチル基である化合物である。）
【００２１】
本発明に好ましく用いられるマンノシルエリスリトールリピッドは、上述で示されるＭＥＬ−Ａ、ＭＥＬ−Ｂ及びＭＥＬ−Ｃである。
【００２２】
なお、マンノシルエリスリトールリピッドは、単独で使用してもよいが、２種以上のマンノシルエリスリトールリピッドを併用することもできる。
【００２３】
マンノシルエリスリトールリピッドの製造方法は特に制限されるものはないが、微生物を用いた発酵方法を任意に選択して行えば良い。例えばマンノシルエリスリトールリピッド (ＭＥＬ−Ａ、ＭＥＬ−Ｂ、ＭＥＬ−Ｃ)の培養生産は常法に従って、Pseudozyma  antarctica、Pseudozyma  sp.等により生産することができる。いずれの微生物でもＭＥＬ混合物が得られることは周知の事実である。ＭＥＬ混合物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて精製し、ＭＥＬ−Ａ、ＭＥＬ−Ｂ及びＭＥＬ−Ｃを単離することが出来る。また、ＭＥＬ−Ｂを生産する菌としては、Pseudozyma antarctica 及びPseudozyma tsukubaensisが知られており、その菌を用いてもよい。ＭＥＬ−Ｃを生産する菌としては、Pseudozyma hubeiensis、Pseudozyma graminicola等が知られており、その菌を用いてもよい。マンノシルエリスリトールリピッドを生産する能力を有する微生物としては特に限定するものではなく、目的に応じて適宜使用することができる。
【００２４】
ところで、リポソーム化させたマンノシルエリスリトールリピッドに核酸を取り込み、細胞への遺伝子導入担体として利用することも知られている。しかしながら、マンノシルエリスリトールリピッドが高いバリア機能を有する角質層に対して、マンノシルエリスリトールリピッドだけでなく難水溶性物質を一緒に取り込むことは知られていなかった。
【００２５】
難水溶性物質は、特に限定されなく、幅広い各種の難水溶性物質が包含される。例えば、リモネン、シトラール、レモンオイル、オレンジオイル等の香料原料油類、調合香料等の香料、ディート（Ｎ，Ｎ−ジエチル−トルアミド）、ｐ−メンタン−３，８−ジオールなどの油溶性忌避剤、ビタミンＡ、ビタミンＥ、油溶性ビタミンＣ誘導体などの油溶性ビタミン類、トリグリセライド、流動パラフィン、スクワランなどの化粧品原料油類、フルルビプロフェン、プランルカスト、インドメタシン、メフェナム酸、トルブタミド、グリベンクラミド、フェニトイン、プロブコール、フェニルブタゾン、フロセミド、リスペリドン、カルバマゼピン、ケトプロフェン、フェノフィブラート、ベザフィブラート、アムホテリシン、パクリタキセルおよびベタメゾンからなる群より選ばれる少なくとも１種の難水溶性薬剤、ケイ皮酸誘導体およびフラバン誘導体からなる群より選ばれる少なくとも１種の難水溶性食品成分、その他、忌避剤、化粧品や医薬品原料として使用される油溶性の難水溶性物質などが挙げられる。
【００２６】
本発明の皮膚浸透促進剤は、マンノシルエリスリトールリピッド及び難水溶性物質を含有する。本発明の皮膚浸透促進剤においては、マンノシルエリスリトールリピッドが、水性溶媒に分散されていることが好ましい。
【００２７】
本発明の皮膚浸透促進剤は、通常は水性溶媒として水を用いるが、マンノシルエリスリトールリピッドを溶媒中に分散させるために、多価アルコール類及び低級アルコール類等の各種の水溶性有機溶媒を混合することが望ましい。
【００２８】
多価アルコール類としては、プロピレングリコール、ブチレングリコール、ペンチレングリコール、ヘキシレングリコール、ジプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、等の炭素数３〜６のアルコール類が好適である。また、低級アルコールとしては、メタノール、エタノール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコール等の一価アルコールが好ましく用いられる。
【００２９】
本発明の皮膚浸透促進剤における各成分の含有量は、難水溶性物質の種類や目的によって異なり一概にいえないが、通常、次のとおりである。
【００３０】
マンノシルエリスリトールリピッドの含有量は、皮膚浸透性促進剤中０．０１〜１０質量％であることが好ましい。マンノシルエリスリトールリピッドの含有量が０．０１質量％未満では、十分に発揮できない場合がある。また、マンノシルエリスリトールリピッドが１０質量％より多いと、マンノシルエリスリトールが析出したり溶液が濁ってしまう場合がある。マンノシルエリスリトールリピッドの含有量は、皮膚浸透促進剤中０．０５質量％以上がより好ましく、０．１質量％以上がさらに好ましい。また、５質量％以下がより好ましく、１質量％以下がさらに好ましい。
【００３１】
多価アルコール類及び低級アルコール類の含有量は、マンノシルエリスリトーリピッドをきれいに分散できる限り限定はされないが、皮膚浸透促進剤中０．５〜３０質量％であることが好ましく、１〜２０質量％がより好ましく、３〜１０質量％がさらに好ましい。
【００３２】
難水溶性物質の含有量は、剤中０．００００１〜３０質量％であることが好ましい。難水溶性物質の含有量が０．００００１質量％未満では、製品において難水溶性物質の効果を十分に発揮できない場合がある。難水溶性物質が３０質量％より多いと、製品において難水溶性物質を可溶化するために必要な界面活性剤量が多くなり、本発明の浸透促進作用を低下させることが考えられる。難水溶性物質の含有量は、これらの点も考慮し、使用する難水溶性物質の種類等に応じて適宜選択することが望ましい。
【００３３】
水性溶媒の含有量は、他の成分の残部であり、界面活性剤、安定化剤および保存剤などの添加物の組み合わせ・量により一概には言えないが、通常下記の通りである。剤中６０〜９９．４９質量％であることが好ましく、７５〜９８．９５質量％がよりより好ましく、８９〜９６．９質量％がさらに好ましい。
【００３４】
本発明の皮膚浸透促進剤は、定法により、水性溶媒に各成分を溶解することよって得られる。より好ましくは、マンノシルエリスリトールリピッドを多価アルコール類及び低級アルコール類に溶解させた後に、水性媒体、難水溶性物質、防腐剤などのそのほか成分を溶解することが望ましい。
【００３５】
本発明は、さらに難水溶性物質の皮膚浸透性に優れた、少なくともマンノシルエリスリトールリピッド及び難水溶性物質を含有する皮膚外用剤を提供する。
【００３６】
本発明の皮膚外用剤とは、化粧品、医薬部外品および医薬品を含み、通常の整肌、栄養化粧水の他、アストリンゼントローション、シェーブローション、ボディローション、液状パック料等の水系皮膚外用剤等の化粧用ローション、および栄養乳液、ボディ乳液、ネック乳液、ハンド乳液等の乳液類、パック類、ジェル、軟膏などが主なものであり、好ましくはスキンケア用化粧品である。
【００３７】
本発明に係る皮膚外用剤の製造方法において、必要に応じて本発明の効果を損なわない範囲内で、化粧品、医薬部外品、医薬品に使用される成分や添加剤を併用して配合することができる。例えば、油脂類、ロウ類、鉱物油、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、金属セッケン類、ガム質および水溶性高分子化合物類、界面活性剤類、ビタミン類、アミノ酸類、美白剤、保湿剤、育毛剤、動物あるいは植物、生薬の抽出物やエキス、微生物培養代謝物、α−ヒドロキシ酸類、無機顔料、紫外線吸収剤、収斂剤、抗酸化剤、抗炎症剤、殺菌・消毒薬、頭髪用剤、香料、色素・着色剤、甘味料、栄養強化剤、ホルモン類、金属イオン封鎖剤、ｐＨ調整剤、キレート剤、防腐・防バイ剤、清涼剤、安定化剤、乳化剤、動・植物性蛋白質およびその分解物、動・植物性多糖類およびその分解物、動・植物性糖蛋白質およびその分解物、血流促進剤、消炎剤・抗アレルギー剤、細胞賦活剤、角質溶解剤、創傷治療剤、増泡剤、増粘剤、口腔用剤、消臭・脱臭剤、苦味料、調味料、酵素などが挙げられる。
【実施例】
【００３８】
以下に実施例を示して本発明を具体的に説明するが、本発明は実施例に限定されるものではない。
【００３９】
実施例１：  ＭＥＬ−Ａの製造
種菌培養はPseudozyma antarctica NBRC 10736のコロニーを種培地(20ml/500ml坂口フラスコ)に1 loop植菌して実施した。30℃にて一晩培養した。得られた培養液を種菌とした。種培地組成は4% Glucose、0.3% NaNO3、0.02% MgSO4・7H2O、0.02% KH2PO4、0.1% yeast extractであった。培養は上記種菌75mlを生産培地1.5L（５L-jar）に植菌し、30℃、300rpm（攪拌回転）、0.5L/min（Air）の条件で5L-jarを用いて培養した。生産培地組成は、5% オリーブ油、0.02% MgSO4・7H2O、0.02% KH2PO4、0.1% yeast extractであった。培養液250mlを遠心（6500rpm、30min）し、上清を取り除き、沈殿（菌体）を回収した。沈殿に、50mlの酢酸エチルを加え、十分攪拌後、遠心(8500rpm、30min)し、沈殿と上清に分け、上清をエバポーレーターで濃縮した。シリカゲルを用いて、クロロホルム：アセトン＝１：０、クロロホルム：アセトン＝９：１、クロロホルム：アセトン１：１、クロロホルム：アセトン＝３：７、クロロホルム：アセトン＝０：１で溶出しＭＥＬ−Ａ画分を得た。
【００４０】
実施例２：  ＭＥＬ−Ｂの製造
0.2mlのPseudozyma tsukubaensisのコロニーを20mlのYM培地/500ml容坂口フラスコに植菌し、26℃、180rpm、１晩培養させ、種種菌とした。0.2mlの種種菌を再度、20mlのYM種培地/500ml容坂口フラスコに植菌し、26℃、180rpm、１晩培養させ、種菌とした。20mlの種菌を2LのYM培地/５L Jarに植菌し、26℃  300rpm（１／４VVM、0.5L air /min）で８日間培養した。培養液を7,900rpm 60min 4℃で遠心し、菌体（ＭＥＬ−Ｂを含む）と上清に分離した。菌体画分にそれぞれ80mlの酢酸エチルを加え、菌体が十分懸濁するように上下に攪拌した後、7,900rpm  30min  4℃で遠心した。得られた上清に等量の飽和食塩水を加え攪拌し酢酸エチル層を得た。酢酸エチル層に無水硫酸Ｎａを適量加え、３０分間精置させた後、エバポレートしＭＥＬ−Ｂ粗精製品を得た。得られたＭＥＬ−Ｂ粗精製品をシリカゲルカラムを用いて、ヘキサン：アセトン＝５：１、ヘキサン：アセトン＝１：１で溶出しＭＥＬ−Ｂ画分精製品を得た。
【００４１】
実施例３：  ＭＥＬ−Ｃの製造
0.2mlのPseudozyma hubeiensis及びPseudozyma graminicolaフローズンストックを20mlのYM培地/500ml容坂口フラスコに植菌し、26℃、180rpm、１晩培養させ、種種菌とした。0.2mlの種種菌を再度、20mlのYM種培地/500ml容坂口フラスコに植菌し、26℃、180rpm、１晩培養させ、種菌とした。20mlの種菌を2LのYM培地/５L Jarに植菌し、26℃  300rpm（１／４VVM、0.5L air /min）で８日間培養した。培養液を7,900rpm 60min 4℃で遠心し、菌体（ＭＥＬ−Ｃを含む）と上清に分離した。菌体画分にそれぞれ80mlの酢酸エチルを加え、菌体が十分懸濁するように上下に攪拌した後、7,900rpm  30min  4℃で遠心した。得られた上清に等量の飽和食塩水を加え攪拌し酢酸エチル層を得た。酢酸エチル層に無水硫酸Ｎａを適量加え、３０分間精置させた後、エバポレートしＭＥＬ−Ｃ粗精製品を得た。得られたＭＥＬ−Ｃ粗精製品をシリカゲルカラムを用いて、ヘキサン：酢酸エチル＝１：１、ヘキサン：酢酸エチル＝１：３、酢酸エチルで溶出しＭＥＬ−Ｃ画分精製品を得た。
【００４２】
実施例４：  カルセインを用いた浸透性試験
1,3-ブタンジオールに溶解したMELに0.006%カルセイン水溶液を添加し、試験液(0.2% MEL、0.0058% カルセイン、3% BG)を調製した。3次元皮膚モデル（テストスキン、東洋紡)に試験液を添加し、CO2インキュベーター内で17時間静置させた後、リザーバー液に透過したカルセイン量を分光蛍光光度計 (日立ハイテクノロジーズ：F-4500、Ex：490nm、Em：515nm)により算出した。その結果、カルセイン単独で塗布した場合と比較して、カルセインの透過率が8倍に向上することが確認された(図1)。
【００４３】
実施例５：  フルオレセインを用いた浸透性試験
1,3-ブタンジオールに溶解したMELに0.2%フルオレセイン水溶液を添加し、試験液(0.2% MEL、0.194% フルオレセイン、3% BG)を調製した。3次元皮膚モデル（テストスキン、東洋紡)に試験液を添加し、CO2インキュベーター内で4時間静置させた後、リザーバー液に透過したフルオレセイン量を分光蛍光光度計 (日立ハイテクノロジーズ：F-4500、Ex：480nm、Em：510nm)により算出した。その結果、フルオレセイン単独で塗布した場合と比較して、フルオレセインの透過量が3倍に向上することが確認された(図2)。
【産業上の利用可能性】
【００４４】
本発明により、化粧品をはじめ皮膚外用剤において、皮膚浸透が困難な難水溶性物質を配合することが可能になり、さまざまな機能性付与をされた皮膚外用剤が利用可能となる。
【図１】
2017052701.tif 000006
【図２】
2017052701.tif 000007