(57)【要約】      （修正有）【課題】簡易顕微鏡の観察に用いる器材であるところの、精液を塗布する、疑似卵子突起付き透明シートを提供する。【解決手段】透明シートの片面に対物レンズを接触させて観察する対物レンズ１個からなる簡易顕微鏡専用の、前記透明シートのレンズに接触しない面側に精子に対する障害物となる突起部を設けたことを特徴とする疑似卵子突起付き透明シート。対物レンズ１個からなる簡易顕微鏡用の精液を塗布する疑似卵子突起付き透明シートを提供する事で、携帯端末機等のデジカメを利用して精子の疑似卵子に突入する様子を自分で目視できるようにした事と、それを用いて精子濃度を求められる様にした。【選択図】図２
2017072490.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
透明シートの片面に対物レンズを接触させて観察する対物レンズ１個からなる簡易顕微鏡専用の、前記透明シートのレンズに接触しない面側に精子に対する障害物となる突起部を設けたことを特徴とする疑似卵子突起付き透明シート。
【請求項２】
前記透明シートが透明な袋の一部を形成している請求項１に記載の疑似卵子突起付き透明シート。
【請求項３】
前記突起部の横断面形状が略円形である事を特徴とする請求項１に記載の疑似卵子突起付き透明シート。
【請求項４】
前記突起部の横断面形状が略正方形である事を特徴とする請求項１に記載の疑似卵子突起付き透明シート。
【請求項５】
前記突起部が球形状のビーズである事を特徴の請求項１に記載の疑似卵子突起付き透明シート。
【請求項６】
前期透明シートが透明粘着テープであり、その粘着剤側に球形ビーズを固着した事を特徴とする請求項１に記載の疑似卵子突起付き透明シート。
【請求項７】
前期透明シートが透明粘着テープであり、その粘着剤側に正方形の０．０５〜０．１ｍｍ程度の平板を固着した事を特徴とする請求項１に記載の疑似卵子突起付き透明シート。
【請求項８】
前記請求項１に記載の疑似卵子突起付き透明シートの突起部側に精液を塗布し、その面と反対の面側から対物レンズ１個からなる簡易顕微鏡の対物レンズを接触させて精子の行動を観察する疑似卵子突起付き透明シートを用いた観察方法。
【請求項９】
疑似卵子突起付き透明シートに塗布した精液中の精子が、単位時間当たりに突起部に突入しようとする精子の合計数をその男性の受精能力の指標数値とする疑似卵子突起付き透明シートを用いた観察方法。
【請求項１０】
携帯端末機のデジカメのモニター画面に載せられる大きさの透明シートに、突起部の画像に応じた小さな穴と大きな穴とを、既定比率を持ってモニター画面の枠をはみ出さない大きさで開口した精子数カウント用のテンプレートを利用する事を特徴とする疑似卵子突起付き透明シートを用いた観察方法。
【請求項１１】
前記請求項３ないし４に記載の、疑似卵子突起付き透明シートの横断面を有する突起部の簡易顕微鏡を介しての、携帯端末機等のデジカメのモニター画像の大きさを前記請求項１０のテンプレートの小さい方の穴の大きさと同じにして、簡易顕微鏡と携帯端末機等のデジカメの総合倍率を一定に決めて、その条件を保ちつつ大きい方の穴の精子の数をカウントするための、精子数カウント用のテンプレートを利用する事を特徴とする疑似卵子突起付き透明シートを用いた観察方法。
【請求項１２】
疑似卵子突起付き透明シートの疑似卵子突起物を倍率決定用ゲージと見なし、簡易顕微鏡を介しての、前記ゲージの携帯端末機等のデジカメのモニター画像での大きさを既定面積の図形に合わせる事で、簡易顕微鏡と携帯端末機等のデジカメの総合倍率を一定に決めて、前記既定面積の図形より既定倍大きい図形内の精子数をカウントする事を特徴とする疑似卵子突起付き透明シートを用いた観察方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は簡易顕微鏡による精子の状態を観察する為の精液塗布用の透明シートとそれを用いた観察方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
本発明者は透明シートに精液を塗布して精子を観察する簡易顕微鏡の製造と販売をしているが、下記非特許文献１の精液中の気泡を精子が卵子と誤解して受精を試みる動画を見て、気泡を前記の透明シートに固定できないかと考えた。しかし、卵子の代わりの気泡を思った様な大きさで発生させて透明シートの常に一定した位置に固定させる事は非常に難しい事なので気泡を形成する気体の代わりに固体状の材質を使う事で本発明を完成させ、更にそれを利用した精子濃度の算出の為の精子数のカウントの一連の方法に関しても特許性があるかと思い本出願を決意した。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００３】
【非特許文献１】https://www.youtube.com/watch?v=fdkcFpfNVNU
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明の根底にある課題は羞恥心等のため早期発見、早期治療が要の不妊治療が遅れてしまい子供を作れなくなってしまうと言った事をなくすために、早期に専門医に相談するきっかけを作る事である。その為には個人で、ある程度不妊症の可能性をおおまかにでも自分で認識できると良い。その為に前記の気泡に突入する自分の精子の様子を簡易顕微鏡で観察できたら大変良いと考えた。そこで本発明は簡易顕微鏡の観察に用いる器材であるところの精液を塗布する、疑似卵子突起付き透明シートを提供する事が一つ目の課題である。
又、従来の不妊症などの指標に用いる精子濃度の算定に際して、自身の簡易顕微鏡と携帯端末機等のデジタル式のカメラ（以後携帯端末機等のデジカメと記述する）を使って精子濃度が求められると良いが、その為に精子の数をカウントする時に簡易顕微鏡の対物レンズ部分をカメラレンズの開口部に取り付けるのであるが、顕微鏡の対物レンズと携帯端末機等のデジカメのレンズとの取り付け距離の違いや機種の違いによって、倍率や視野が異なり、モニター上に写る視野画像の大きさが一定でない。そのために精子数をモニター上の丸い視野フレームの中でカウントしても、各自が所有する携帯端末機等のデジカメから得られる精子のカウント数には一般性がないために他のデータとの比較などができなかった、客観性がないのである。それで、この精子のカウント数の一般化の問題を解決する事が本発明の二つ目の課題である。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明の課題を解決する為に用いる簡易顕微鏡は対物レンズ一個のいわゆるレーウェンフック（レーベンフック）型の極めて焦点距離の短い高倍率の物であり、それによる精子の観察に於いては厚さの薄い透明シートの片面に対物レンズを接触させて、その面の反対面に塗布した精液を観察する物であり、透明シートが透明な袋の一部を形成していて試料をその袋の中にいれて外側に対物レンズを接触させて観察する事もある。
【０００６】
一つ目の課題で提供する本発明の疑似卵子突起付き透明シートは合成樹脂性の厚さの薄い透明シートの片面に精子の運動を妨げる突起部を設けた物である。この突起部の材質は精子に対して毒性が無い物であれば柔らかな物でも硬い物でも良く、形は突起部の横断面形状が円形か正方形であると都合が良い。製作にはこの形状の雌型の金型で一体成型で製作しても良いし、透明粘着テープの粘着剤側に球形ビーズや合成樹脂性シートを円形や正方形にカットして粘着固定しても良いし突起部は複数個もうけても良い。更に、この疑似卵子突起付き透明シートは薄くて柔らかい物なので、しっかりした厚さのある保持板に貼付した構造にすると取扱いが楽になり便利である。
【０００７】
こうして作る疑似卵子突起付き透明シートの突起部側に精液を塗布して、その反対側の面に簡易顕微鏡の対物レンズを接触させて、突起部側に塗布した精液中の精子の様子を肉眼ないし携帯端末機等のデジカメで観察録画して精子の様子を見る。
こうして、観察すると精子は卵子と間違えて突起部に突入しようとする精子が観察できる。中には瞬間的に頭部を三角形に変形するものもある。その様な精子達は受精能力の高い精子であると視認できるが、そのような精子が全くなく、弱々しかったり死んだりしている場合は自分でも、これはまずいときっと痛切に思うだろうから子供が欲しいと本当に望む人なら早期に専門医に相談する気になるはずであり、本発明の根底にある課題を１００％とは言えないまでも、ある程度は達成できる。
尚、卵子の大きさは直径約０．１ｍｍ程度の球形であるが本発明の疑似卵子の突起部の輪郭の形（横断面形状）はレンズ側から見て直径ないし一辺が約０．０５〜０．１ｍｍ程度の円形ないし正方形で良く（簡易顕微鏡の対物レンズの倍率による）、一度最適な大きさを決めたら以後すべて同じ大きさと形状に統一して製作する事が良いし突起の数も何個と統一しておく事で、又そうする事によりある単位時間当たりの、疑似卵子突起に突入しようとする精子の合計数を受精能力の指標数値とする事ができる。
【０００８】
又、受精能力の判断の一つの指標である精子濃度を求める為に、簡易顕微鏡と携帯端末機等のデジカメと前記の本発明の疑似卵子突起付き透明シートを用いる事で、精子のカウント数の一般化を図る事ができる。発明が解決しようとする課題の所で述べた様に、簡易顕微鏡と携帯端末機等のデジカメのレンズ部分への取り付け距離と機種の違いによって、モニター画面に表示される丸い視野フレーム内の合焦点の精子数には一般性が無いのであるが、それをあるようにする為の方法が次の本発明の考え方である。
【０００９】
疑似卵子突起付き透明シートの中で面積が未知でも（既知なら尚良い）形状が常に一定している物を倍率設定のゲージと見なす。例えば、前記本発明の疑似卵子突起付き透明シートの突起部をゲージと見なし、簡易顕微鏡を介して携帯端末機等のデジカメのモニター画面に表示させ、その画像の大きさを強制的に既定の面積を持つ一定した形状のテンプレートの図形に合わせてしまう事で、簡易顕微鏡と携帯端末機等のデジカメの総合倍率を決めてしまい、次にそれの既定倍の面積を持つ大きな穴のテンプレートで精子のカウント範囲を決めて、その内側の合焦点の精子だけをカウントする事で精子数の一般化を図る方法である。
そして、これで得た精子数とＷＨＯのガイドラインに基づく精子運動解析システムＣＡＳＡなどでの精子濃度との関係式を多くのデータより求めておけば、本発明の方法で個人でも不妊の度合いをある程度判断できる様になる。
【００１０】
具体的には携帯端末機等のデジカメの開口部に観察用の簡易顕微鏡の対物レンズ部をレンズの画像が携帯端末機の画面の適当な位置にくる様に取り付けて固定する。次に、前記疑似卵子突起付き透明シート（保持板に貼付しておく）に精液を塗布して前記簡易顕微鏡の対物レンズ部に取り付けて、その疑似卵子突起部の画像をモニター画面に表示させ、テンプレートの小さい穴の方をモニター画面に載せて、穴を疑似卵子突起部の画像の上に持ってきて、疑似卵子突起部の画像が穴の中にピッタリ納まる様に図形倍率を拡大ないし縮小させて撮影録画しておき、その後は変化させない様にする。こうすれば簡易顕微鏡の取り付けの際のレンズ間の距離の違いや、機種が違っていても携帯端末機等のデジカメの画像の倍率としては同じになる。
又、前記の疑似卵子突起部の画像が円形か正方形であれば、その画像の直径ないし一辺の長さを市販の物差しで測って強制的に例えば２０ｍｍなら２０ｍｍの既定の長さになるように拡大ないし縮小させて撮影録画しておき、その後は変化させない様にする、これで取り付け距離や機種の違いに関係なく前記の図形のテンプレートを使用しないでも倍率を一定にできる。
次に精液を塗布した疑似卵子突起付き透明シートの位置を移動させるか、別の疑似卵子突起の無い透明シートに精液を塗布して疑似卵子突起部の画像の無い部分の精子を含む精液のみが見える範囲を撮影録画する。この様にして録画した精液の画像の上に大きな穴を開けたテンプレートをモニターの画面に載せて、その穴の内側の合焦点の精子のみをカウントする、要するに小さい穴は倍率を、大きな穴は精子をカウントする範囲を限定する為なのである。この様にすれば携帯端末機等のデジカメに取り付けた簡易顕微鏡の取り付け距離やカメラの機種に依存しない、一般化された精子のカウント数を得ることができて本発明の二つ目の課題が解決できる。尚、ここでも前記の図形のテンプレートの大きな穴を使用したくなければ、前記の既定長さの既定倍の相似な図形をグラフィックスソフトで作図して張り付ければ良いわけである。
【００１１】
又、カメラの画像の情報をパソコンに入れて解析する場合は前記の方法で録画した既定倍した疑似卵子突起を含む画像で疑似卵子突起部の画像にほぼピッタリ合った大きさの円形ないし正方形の図形をグラフィックスソフトで作図して張り付ける、次にその図形の大と小の穴の面積の前記の既定比率を有する大きさの大きい穴の図形を作図して、前記の方法で撮影録画したパソコンの精液部だけの画像に貼り付けて、その図形内だけの精子をカウントすれば前記のテンプレートとカメラのモニター画面と同じ考えにより一般性を有する数値を得る事が出来る、結局ソフトによるテンプレート図形の操作でも実物のテンプレートによる図形の操作であろうともテンプレートとしての図形には変わりがないのでありパソコン画面でもスマホ等のデジタルカメラの画面でも本発明の思想としては同じ事なのである。
【００１２】
従って本発明の二つ目の課題を解決する方法は、疑似卵子突起付き透明シートの疑似卵子突起物を倍率決定用ゲージと見なし、そのカメラのモニター画面での大きさを、既定面積の図形に合わせる事で簡易顕微鏡とスマホ等のデジカメの総合倍率を一定にして、前記既定面積の図形より既定倍大きい図形内の精子数をカウントする事で精子のカウント数の一般化を図る方法である。
【発明の効果】
【００１３】
従来からＷＨＯのガイドラインに基づく光学顕微鏡による精子濃度の測定に際しては精液試料を載置（塗布）する器具に依って精液の厚さを一定にして測定する必要がある。
例えば、スライドガラスとカバーガラスに依って、あるいはマクラー精子分析カウントチャンバーでも容器底部と上にくるカバーガラスとの二つのパーツで正確に精液の厚さを一定にしている。しかし、高倍率の対物レンズ一個からなる本発明で使用する簡易顕微鏡を用いれば被写界深度が極めて浅い為に厚さを一定にする特別な部材も不要であり、精液を透明シートに塗布して携帯端末機等のデジカメで録画するだけで良いので、とても簡単で安価に精子濃度を求める事が可能になり、本発明の疑似卵子突起付き透明シート及びそれを利用したカウントする精子数の一般化により、羞恥心無く個人で、ある程度自身の不妊症の可能性に関する情報を得る事が出来て、早期の不妊治療を始める事に道を開く効果があり、世界的な不妊症の問題の解決に微々たるものかもしれないが寄与できるものと思われる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】本発明の１実施例の平面略図
【図２】本発明の１実施例の側面略図
【図３】本発明の１実施例の側面略図
【図４】本発明の１実施例の断面略図
【図５】本発明に使用する簡易顕微鏡の説明図
【図６】本発明に使用する簡易顕微鏡の断面略図
【図７】本発明のテンプレートの説明図
【図８】本発明のテンプレートの説明図
【発明を実施するための形態】
【００１５】
本発明で使用する簡易顕微鏡は図５に示す物で対物レンズ６をレンズ保持板５と、開口部９に精液塗布用透明シート８を貼付したシート保持板７とを重ね合わせて対物レンズ６と前記精液塗布用透明シート８を図６の様に面接触させて精子の様子を見る対物レンズ１個から成る簡易顕微鏡であり、観察の際に携帯端末機等のデジカメに固定するのは図５、図６に示すレンズ保持板５の部分であり、透明のシート保持板７は移動と取り付け取り外しが自由にできる物である。
発明を実施するための形態は、図１の符号１に示す様に厚さ約さ０．０５ｍｍ程度で大きさが１５×２０ｍｍか直径２０ｍｍ程度の透明シートに、材質がレンズより柔らかい透明な合成樹脂製の疑似卵子として直径約０．０５〜０．１ｍｍ程度のガラスまたはポリスチレン製の球形のビーズ２を図２の側面図の様に精子の障害物突起として融着あるいは接着ないしは粘着して固定（固着）するか、あるいは図３の側面図の様に前記の透明シートに直径ないし一辺が約０．０５〜０．１ｍｍ程度の円形か正方形の厚さが０．０１ｍｍ程度の精子の障害物突起として光硬化性樹脂で厚さ０．０５ｍｍの基材にナノインプリント技術を用いて成型して製作する物であり、これらの精子に対する障害物突起を設けた物が本発明の疑似卵子突起付き透明シートである。
又、前記疑似卵子突起付き透明シートはそれだけであると薄いために取扱いが難しいので、図４の断面略図に示す様に透明シート保持板４（図面５の符号７と同じである）に貼付して使う。
以下本発明の詳細について図面を引用して説明する。
【実施例１】
【００１６】
図１は本発明の疑似卵子突起付き透明シートの１実施例の平面略図で疑似卵子として直径０．０７ｍｍのガラス製の球形ビーズ２を図２の側面略図の様に厚さが０．０５ｍｍのポリエステル製の透明粘着テープに固着させた物である。
【実施例２】
【００１７】
図３は厚さが０．０５ｍｍの０．１×０．１ｍｍの正方形のポリエチレンフィルムを厚さが０．０５ｍｍのポリエステル製の透明粘着テープに固着させた本発明の疑似卵子突起付き透明シートの１実施例である。又この実施例の物は厚さが０．０１ｍｍで直径ないし一辺が約０．０５〜０．１ｍｍ程度の円形ないし正方形のエンボス状の突起を基材である厚さ０．０５ｍｍの透明なＰＥＴ製シートにナノインプリント技術を用いて、光硬化性樹脂で成型してもできる。尚、エンボスの側面は透明シート１の面に対して直角にすると、簡易顕微鏡の倍率が異なって、焦点位置が変わっても簡易顕微鏡の対物レンズの像側の断面形状が一定しているので一定な面積を有するゲージとして使用できる。
【実施例３】
【００１８】
図４は前記の図２で示す本発明の疑似卵子突起付き透明シート１を透明シート保持板４の開口部９に貼付した物であり、こうする事で疑似卵子突起付き透明シートの取扱いと、突起部の破損を防ぎ実用性が一段と増す様になる。又使用に際しては観察する精液は開口部９から塗布して、簡易顕微鏡の対物レンズは透明シート１の精液塗布面の反対側の面に面接触させて図６の断面の様にして観察する。
【実施例４】
【００１９】
図７と図８は簡易顕微鏡と携帯端末機のカメラ機能を使った精子濃度の算定の基となる精子数のカウントの際に使用する、穴を開けたテンプレートの１実施例の図であるが、図中の１０は１００×７０ｍｍの長方形の厚さが０．２ｍｍの透明塩ビシートであり、それに円形１１あるいは正方形１１２の穴を開け、その穴に対応する同形で９倍の面積を有する穴の１２あるいは１２２を設けたテンプレートを示している。即ち、小さい丸穴と大きい丸穴を開けた１枚の透明シート、あるいは小さい正方形の穴と大きい正方形の穴を開けた１枚の透明シートを図示したのが図７で、それぞれの穴を別の透明シートに開けたのが図８である。
そして、小の穴は本発明の疑似卵子突起付き透明シートの突起部を簡易顕微鏡の対物レンズを介して携帯端末機等のデジカメで撮影した場合のモニター画面の丸い画像が、例えば、図７，８中の１１０である場合は、その画像より大きな面積図形の丸穴１１と同一になる様に拡大ないし縮小して合わせるか、又は、正方形の穴１１２に内接円となる様に合わせても良いし、突起部の横断面形状が正方形であれば穴１１２に合わせる。小さい穴のテンプレートでの面積は市販される、ほとんどの携帯端末機での疑似卵子突起部の画像に等しくなるか又はそれ以上の大きな穴を開けておく。
【産業上の利用可能性】
【００２０】
本発明を病院で推奨する様になれば、自宅から携帯端末機で画像を病院に送り診察等を受ける事も可能になり男性の羞恥心を和らげられる。
【符号の説明】
【００２１】
１は透明シート
２は球形ビーズ
３は円形ないし正方形の板状体またはエンボス加工による突起を示す。
４は疑似卵子突起付き透明シートの保持板
５はレンズ保持板
６は対物レンズ
７は透明シート保持板
８は透明シート
９は開口部
１０は透明なシート
１１は小さい丸穴
１２は大きな丸穴
１１０は円形の疑似卵子突起部の携帯端末機の画像
１１２は正方形の小さい穴
１２２は正方形の大きな穴
【図１】
2017072490.tif 000003
【図２】
2017072490.tif 000004
【図３】
2017072490.tif 000005
【図４】
2017072490.tif 000006
【図５】
2017072490.tif 000007
【図６】
2017072490.tif 000008
【図７】
2017072490.tif 000009
【図８】
2017072490.tif 000010