(57)【要約】【課題】ジベンゾジオキソシン結合開裂評価試験用のモデル化合物に特有の反応である分子内反転を防止した新規のジベンゾジオキソシン結合開裂評価試験用化合物、及びその製造方法を提供する。【解決手段】〔１〕特定の構造を有する新規のジベンゾジオキソシン結合開裂評価試験用化合物、〔２〕前記ジベンゾジオキソシン結合開裂評価試験用化合物の製造方法、〔３〕特定の構造を有する化合物、及び〔４〕前記化合物の製造方法である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（１）又は一般式（２）で表される、ジベンゾジオキソシン結合開裂評価試験用化合物。
【化１】
2017014122.tif 000027
［式（１）中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５は、それぞれ独立に、−Ｈ又は−Ｏ−ＣＨ３を示し、Ｒ３は、−Ｈ又は−ＣＨ２ＯＨを示し、Ｒ６は、−ＯＨ又は−ＯＸを示す。Ｘは、−ＣＨ３、モノリグノール、又はモノリグノールの誘導体を示す。ｎは、２以上１６以下の整数である。］
【化２】
2017014122.tif 000028
［式（２）中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５は、それぞれ独立に、−Ｈ又は−Ｏ−ＣＨ３を示し、Ｒ３は、−Ｈ又は−ＣＨ２ＯＨを示し、Ｒ６は、−ＯＨ又は−ＯＸを示し、Ｘは、−ＣＨ３、モノリグノール、又はモノリグノールの誘導体を示す。Ｒ７、Ｒ８は、それぞれ独立に、炭素数４以上３０以下の有機基を示す。］
【請求項２】
下記工程ａ及びｈを有する、請求項１に記載のジベンゾジオキソシン結合開裂評価試験用化合物の製造方法。
工程ａ：下記一般式（３）で表される化合物２種を、カップリング反応を用いて反応させて、下記一般式（ａ）で表される化合物を得る工程
【化３】
2017014122.tif 000029
［式（３）中、Ｒ１は、−Ｈ又は−Ｏ−ＣＨ３を示す。］
【化４】
2017014122.tif 000030
［式（ａ）中、Ｒ１、Ｒ２は、それぞれ独立に、−Ｈ又は−Ｏ−ＣＨ３を示す。］
工程ｈ：芳香族炭化水素環に結合した２つの−ＯＨ基と、下記一般式（４）及び（５）から選ばれる１種以上とを、酸化剤の存在下で反応させて、８員環構造を形成する工程
【化５】
2017014122.tif 000031
［式（４）中、Ｒ４、Ｒ５は、それぞれ独立に、−Ｈ又は−Ｏ−ＣＨ３を示し、Ｒ３は、−Ｈ又は−ＣＨ２ＯＨを示し、Ｒ６は、−ＯＨ又は−ＯＸを示し、Ｘは、−ＣＨ３、モノリグノール、又はモノリグノールの誘導体を示す。］
【化６】
2017014122.tif 000032
［式（５）中、Ｒ４、Ｒ５は、それぞれ独立に、−Ｈ又は−Ｏ−ＣＨ３を示し、Ｒ３は、−Ｈ又は−ＣＨ２ＯＨを示し、Ｒ６は、−ＯＨ又は−ＯＸを示し、Ｘは、−ＣＨ３、モノリグノール、又はモノリグノールの誘導体を示す。］
【請求項３】
下記式（Ａ）で表される化合物。
【化７】
2017014122.tif 000033
【請求項４】
下記工程ａ１及びｈ１を有する、請求項３に記載の化合物の製造方法。
工程ａ１：２つのバニリンを、カップリング反応を用いて反応させて、下記式（ａ１）で表される化合物を得る工程
【化８】
2017014122.tif 000034
工程ｈ１：芳香族炭化水素環に結合した２つの−ＯＨ基と、コニフェリルアルコールとを、酸化剤の存在下で反応させて、８員環構造を形成する工程
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ジベンゾジオキソシン結合開裂評価試験用化合物、及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
バイオマスから生産される諸資源は再生可能なものであって、その有効利用が現在強く望まれている。例えば、リグニンは、樹木やイネ科植物等をはじめとする多くの植物に含まれる芳香族高分子であり、例えば、機能性芳香族高分子や芳香族低分子化合物としての利用が可能である。しかし、バイオマス中に含まれるリグニンは、主に製紙業におけるパルプ化の副生物として産出され、三次元に架橋した複雑な構造ゆえに利用が困難であり、大部分が安価な燃料として使用されているのが現状である。
リグニンの有効利用の観点から、リグニンに含まれる各種結合モデル化合物を使用した反応性を解明するための研究が数多くされており、例えば、非特許文献１（Ｆｉｇ．３等）では、リグニン中の分岐型結合として知られるジベンゾジオキソシン結合のモデル化合物を用いた結合開裂挙動について報告されている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００３】
【非特許文献１】Ｊ．  Ａｇｒｉｃ．  Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ．  ２００２，  ５０，  ６５８−６６６
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、非特許文献１では、ジベンゾジオキソシン結合開裂評価試験用に用いたモデル化合物に特有の反応である分子内反転が進行することが記載されている。当該反応は、嵩の低いモデル化合物を使用していることが原因であり、嵩高いリグニン中では同様の反応が進行しないことが予想されるため、リグニン中に含まれるジベンゾジオキソシン結合の開裂能を評価するモデル化合物としては不適格であると考えられる。
したがって、本発明は、ジベンゾジオキソシン結合開裂評価試験用のモデル化合物に特有の反応である分子内反転を防止した新規のジベンゾジオキソシン結合開裂評価試験用化合物、及びその製造方法を提供することに関する。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らは、非特許文献１のジベンゾジオキソシン結合開裂評価試験用に用いたモデル化合物に特有の反応である分子内反転が、嵩の低いモデル化合物を使用していることが原因であると考えた。そこで、分子内反転を抑制した新規のモデル化合物を合成することで、リグニン中に含まれる分岐型の結合であるジベンゾジオキソシン結合の開裂挙動を正確に追跡することが可能になると考え、ジベンゾジオキソシン結合開裂評価試験用化合物の構造を制御することで、当該分子内反転を抑制したジベンゾジオキソシン結合開裂評価試験用化合物、及びその製造方法を見出した。
すなわち、本発明は、下記［１］〜［４］に関する。
［１］下記一般式（１）又は（２）で表される、ジベンゾジオキソシン結合開裂評価試験用化合物。
【０００６】
【化１】
2017014122.tif 000002
【０００７】
［式（１）中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５は、それぞれ独立に、−Ｈ又は−Ｏ−ＣＨ３を示し、Ｒ３は、−Ｈ又は−ＣＨ２ＯＨを示し、Ｒ６は、−ＯＨ又は−ＯＸを示す。Ｘは、−ＣＨ３、モノリグノール、又はモノリグノールの誘導体を示す。ｎは、２以上１６以下の整数である。］
【０００８】
【化２】
2017014122.tif 000003
【０００９】
［式（２）中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５は、それぞれ独立に、−Ｈ又は−Ｏ−ＣＨ３を示し、Ｒ３は、−Ｈ又は−ＣＨ２ＯＨを示し、Ｒ６は、−ＯＨ又は−ＯＸを示し、Ｘは、−ＣＨ３、モノリグノール、又はモノリグノールの誘導体を表す。Ｒ７、Ｒ８は、それぞれ独立に、炭素数４以上３０以下の有機基を示す。］
［２］下記工程ａ及びｈを有する、前記［１］に記載のジベンゾジオキソシン結合開裂評価試験用化合物の製造方法。
工程ａ：下記一般式（３）で表される化合物２種を、カップリング反応を用いて反応させて、下記一般式（ａ）で表される化合物を得る工程
【００１０】
【化３】
2017014122.tif 000004
【００１１】
［式（３）中、Ｒ１は、−Ｈ又は−Ｏ−ＣＨ３を示す。］
【００１２】
【化４】
2017014122.tif 000005
【００１３】
［式（ａ）中、Ｒ１、Ｒ２は、それぞれ独立に、−Ｈ又は−Ｏ−ＣＨ３を示す。］
工程ｈ：芳香族炭化水素環に結合した２つの−ＯＨ基と、下記一般式（４）及び（５）から選ばれる１種以上とを、酸化剤の存在下で反応させて、８員環構造を形成する工程
【００１４】
【化５】
2017014122.tif 000006
【００１５】
［式（４）中、Ｒ４、Ｒ５は、それぞれ独立に、−Ｈ又は−Ｏ−ＣＨ３を示し、Ｒ３は、−Ｈ又は−ＣＨ２ＯＨを示し、Ｒ６は、−ＯＨ又は−ＯＸを示し、Ｘは、−ＣＨ３、モノリグノール、又はモノリグノールの誘導体示す。］
【００１６】
【化６】
2017014122.tif 000007
【００１７】
［式（５）中、Ｒ４、Ｒ５は、それぞれ独立に、−Ｈ又は−Ｏ−ＣＨ３を示し、Ｒ３は、−Ｈ又は−ＣＨ２ＯＨを示し、Ｒ６は、−ＯＨ又は−ＯＸを示し、Ｘは、−ＣＨ３、モノリグノール、又はモノリグノールの誘導体示す。］
［３］下記式（Ａ）で表される化合物。
【００１８】
【化７】
2017014122.tif 000008
【００１９】
［４］下記工程ａ１及びｈ１を有する、前記［３］に記載の化合物の製造方法。
工程ａ１：２つのバニリンを、カップリング反応を用いて反応させて、下記式（ａ１）で表される化合物を得る工程
【００２０】
【化８】
2017014122.tif 000009
【００２１】
工程ｈ１：芳香族炭化水素環に結合した２つの−ＯＨ基と、コニフェリルアルコールとを、酸化剤の存在下で反応させて、８員環構造を形成する工程
【発明の効果】
【００２２】
本発明によれば、ジベンゾジオキソシン結合開裂評価試験用のモデル化合物に特有の反応である分子内反転を防止した新規のジベンゾジオキソシン結合開裂評価試験用化合物を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１】実施例１で得られた式（Ａ）で表される目的化合物を、実施例に記載のＮＭＲ測定にて確認した際の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルである。
【図２】実施例１で得られた式（Ａ）で表される目的化合物を、実施例に記載のＮＭＲ測定にて確認した際の１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルである。
【図３】実施例１で得られた式（Ａ）で表される目的化合物を、ＦＴ−ＩＣＲ−ＭＳ測定にて確認した際に得られた該目的化合物のプロトン付加体に関するマススペクトルである。
【図４】実施例１で得られた式（Ａ）で表される目的化合物を、ＦＴ−ＩＣＲ−ＭＳ測定にて確認した際に得られた該目的化合物のナトリウム付加体に関するマススペクトルである。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
［ジベンゾジオキソシン結合開裂評価試験用化合物］
本発明のジベンゾジオキソシン結合開裂評価試験用化合物は、下記一般式（１）又は（２）で表される。以下、一般式（１）及び（２）について説明する。
【００２５】
＜一般式（１）で表される化合物＞
本発明のジベンゾジオキソシン結合開裂評価試験用化合物の１つは、下記一般式（１）で表され、以下、側鎖環状型ジベンゾジオキソシン結合開裂評価試験用化合物ともいう。
【００２６】
【化９】
2017014122.tif 000010
【００２７】
一般式（１）中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５は、それぞれ独立に、−Ｈ又は−Ｏ−ＣＨ３を示し、Ｒ３は、−Ｈ又は−ＣＨ２ＯＨを示し、Ｒ６は、−ＯＨ又は−ＯＸを示す。当該Ｘは、−ＣＨ３、モノリグノール、又はモノリグノールの誘導体を示す。
ｎは、２以上１６以下の整数である。ｎが２未満の場合である化合物を合成することは困難である。そして、ｎが１６を超える化合物を合成することは、分子内反転を抑制する観点及び試験用化合物を提供する上で経済性の観点から相応しくない。よって、分子内反転の抑制の観点、合成のし易さの観点、及び経済性の観点から、ｎは好ましくは３以上、より好ましくは６以上、更に好ましくは８以上であり、そして、好ましくは１４以下、より好ましくは１３以下、更に好ましくは１２以下である。
モノリグノールとは、ヒドロキシシンナミルアルコール類縁体であり、例えば、コニフェニルアルコール、シナピルアルコール、ｐ−クマリルアルコールが挙げられる。
一般式（１）で表される化合物では、分子内反転を起こすアリール基の側鎖が環状型となって、当該アリール基同士を結合していることによって、分子内反転を抑制することができる。
【００２８】
＜一般式（２）で表される化合物＞
本発明のジベンゾジオキソシン結合開裂評価試験用化合物の他の１つは、下記一般式（２）で表される。
【００２９】
【化１０】
2017014122.tif 000011
【００３０】
前記一般式（２）中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５は、それぞれ独立に、−Ｈ又は−Ｏ−ＣＨ３を示し、Ｒ３は、−Ｈ又は−ＣＨ２ＯＨを示し、Ｒ６は、−ＯＨ又は−ＯＸを示す。当該Ｘは、−ＣＨ３、モノリグノール、又はモノリグノールの誘導体を示す。
また、前記一般式（２）中のＲ７及びＲ８は、それぞれ独立に、炭素数４以上３０以下の有機基を示す。該Ｒ７又はＲ８が、炭素数４未満の有機基である場合、嵩の低い化合物となり、分子内反転が起こり易くなり、ジベンゾオキソシン結合の開裂を評価するために好ましくない。また、該Ｒ７又はＲ８が、炭素数３０を超える有機基である場合、分子内反転の抑制の観点、合成のし易さの観点、及び経済性の観点から好ましくない。分子内反転の抑制の観点、合成のし易さの観点、及び経済性の観点から、該Ｒ７及びＲ８は、それぞれ独立に、好ましくは５以上、より好ましくは６以上、更に好ましくは８以上であり、そして、好ましくは２４以下、より好ましくは２２以下、更に好ましくは１８以下である。
炭素数４以上３０以下の有機基とは、例えば、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ｎ−ヘキシル基等の炭素数４〜３０のアルキル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基等の炭素数４〜３０のシクロアルキル基、フェニル基、ビフェニル基、ナフチル基、ターフェニル基等の炭素数４〜３０の芳香族炭化水素基といった基が挙げられる。
一般式（２）で表される化合物では、分子内反転を起こすアリール基の側鎖に、嵩高い有機基が結合している。一般式（２）のように、嵩高い側鎖同士、又は側鎖と芳香環との立体反発によって、分子内反転を抑制することができる。
【００３１】
［式（Ａ）で表される化合物］
本発明の化合物は、下記式（Ａ）で表される化合物である。
【化１１】
2017014122.tif 000012
【００３２】
前記式（Ａ）で表される化合物は、ジベンゾジオキソシン結合開裂評価用化合物として有用に用いることができる。
【００３３】
［ジベンゾジオキソシン結合開裂評価試験用化合物の製造方法］
前記ジベンゾジオキソシン結合開裂評価試験用化合物の製造方法は、下記の反応式（Ｉ）で表される。
【００３４】
＜反応式（Ｉ）＞
前記一般式（１）で表される化合物は、例えば、下記の反応式（Ｉ）に記載の方法により合成することができる。
【００３５】
【化１２】
2017014122.tif 000013
【００３６】
反応式（Ｉ）中、Ｒ１〜Ｒ６、及びｎは、それぞれ独立に、前記一般式（１）中のＲ１〜Ｒ６、及びｎと同じである。ｐ及びｑは、それぞれ独立に、０以上の整数であり、好ましくは２以上の整数であり、そして、１４以下の整数であり、好ましくは６以下の整数であり、かつｐ＋ｑは１４以下の整数である。ｐ＋ｑは、好ましくは１以上、より好ましくは４以上、更に好ましくは６以上の整数であり、そして、好ましくは１２以下、より好ましくは１１以下、更に好ましくは１０以下の整数である。反応式（Ｉ）中に記載された各反応について順次説明する。
【００３７】
（反応（ａ））
まず、反応（ａ）では、出発物質となる原料として、反応式（Ｉ）中の一般式（３）で表される３−メトキシ−４−ヒドロキシベンズアルデヒド（「バニリン」ともいう。）又は４−ヒドロキシベンズアルデヒドを用いる。
反応（ａ）では、該出発物質から中間体（ａ）を得るための方法として、酸化カップリングといった方法を用いることができる。例えば、加熱したイオン交換水に溶解させた溶液に、硫酸鉄（ＩＩ）等の還元剤、ペルオキソ二硫酸カリウム等の酸化剤を加えて、加熱環流することにより、中間体（ａ）が得られる。
中間体（ａ）を得る反応（ａ）としては、上記のような還元剤と酸化剤を用いたカップリングの他、例えば、フェリシアン化カリウム等の酸化剤を使用したカップリングや、鈴木−宮浦カップリング等のカップリング反応を用いることもできる。
【００３８】
（反応（ｂ））
次に、反応（ｂ）では、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルクロロシラン（ＴＢＤＭＳＣｌ）等のトリアルキルクロロシランを用いて中間体（ａ）のヒドロキシ基を保護するためのシリル化反応を行う。例えば、中間体（ａ）を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに懸濁させ、氷浴上で冷却した後、イミダゾール、ｔ−ブチルジメチルクロロシラン（ＴＢＤＭＳＣｌ）を加えた後、室温で攪拌することにより、中間体（ｂ）を得ることができる。
【００３９】
（反応（ｃ））
次に、反応（ｃ）では、中間体（ｂ）からグリニャール反応にて、中間体（ｃ）が得られる。例えば、エーテル溶媒中で有機ハロゲン化合物Ｒ−Ｘに金属マグネシウムを作用させて、グリニャール試薬を生成させるが、有機ハロゲン化合物Ｒ−ＸのＲとしては、炭素数２以上、好ましくは４以上、そして、炭素数１６以下、好ましくは８以下のアルケニル基であり、好ましくは１位に不飽和結合を有する炭素数２以上１６以下のアルケニル基を用いることができる。また、Ｘとしては、臭化物、ヨウ化物又は塩化物を用いることができる。また、反応（ｃ）で用いるエーテル溶媒は、好ましくはテトラヒドロフランである。
【００４０】
（反応（ｄ））
次に、反応（ｄ）では、中間体（ｃ）からトリアルキルシリル基を脱保護するために、酸性条件下又はフッ化物イオンを作用させることで、脱シリル化（脱保護）を行う。例えば、中間体（ｃ）をテトラヒドロフランに溶解させ、氷浴上で冷却した溶液に、テトラブチルアンモニウムフルオリド（ＴＢＡＦ）を滴下して、中間体（ｄ）を得ることができる。
【００４１】
（反応（ｅ））
次に、反応（ｅ）では、メタセシス触媒を用いた閉環メタセシス（ＲＣＭ）反応を行う。例えば、中間体（ｄ）をジクロロメタン等の溶媒に溶解させ、当該溶液にメタセシス触媒を加えた後、加熱還流することにより、中間体（ｄ）中の二重結合がメタセシス反応により閉環し、中間体（ｅ）が得られる。メタセシス触媒としては、公知のメタセシス触媒を用いることができ、市販品としては、ＵｍｉｃｏｒｅＭ１（和光純薬工業（株）製）、グラブス触媒（シグマアルドリッチ社製）等を用いることができる。
【００４２】
（反応（ｆ））
次に、反応（ｆ）は、環状側鎖上の水酸基を脱離させる反応であるが、例えば、上述した中間体（ｅ）の溶液に、トリエチルシラン等のトリアルキルシラン、三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体を滴下し、攪拌して反応させる。反応終了後に、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、ジクロロメタンで分液する。その後、溶媒を除去した後に、ジクロロメタンを加えて溶解させた溶液にジメチルスルホキシドを滴下して、攪拌して、中間体（ｆ）を得ることができる。
【００４３】
（反応（ｇ））
次に、反応（ｇ）では、パラジウム−炭素触媒を用いて、水添反応を行うことで、中間体（ｆ）から中間体（ｇ）を得ることができる。パラジウム−炭素触媒は、市販品を用いることができ、パラジウム−炭素（和光純薬工業（株）製）、パラジウム−炭素（シグマアルドリッチ社製）等を用いることができる。
【００４４】
（反応（ｈ））
反応（ｈ）では、下記一般式（４）及び（５）から選ばれる１種以上の化合物と中間体（ｇ）とをジクロロメタン等の溶媒に溶解させ、酸化銀（Ｉ）等の酸化剤を加えて、一定時間攪拌することにより、前記一般式（１）の化合物を得ることができる。酸化剤としては、例えば、酸化銀（Ｉ）、フェリシアン化カリウム、過マンガン酸カリウム等が挙げられ、酸化銀（Ｉ）を用いることが好ましい。
【００４５】
【化１３】
2017014122.tif 000014
【００４６】
ここで、一般式（４）中、Ｒ３〜Ｒ６は、それぞれ独立に、前記一般式（１）中のＲ３〜Ｒ６と同じである。
【００４７】
【化１４】
2017014122.tif 000015
【００４８】
ここで、一般式（５）中、Ｒ３〜Ｒ６は、それぞれ独立に、前記一般式（１）中のＲ３〜Ｒ６と同じである。
上記一般式（４）又は（５）で表される化合物の例としては、モノリグノール、又はその誘導体が挙げられ、例えば、コニフェニルアルコール、シナピルアルコール、ｐ−クマリルアルコールが挙げられる。入手が容易である観点から、一般式（４）で表される化合物が好ましい。
【００４９】
また、前記一般式（２）で表される本発明の化合物は、前記反応式（Ｉ）に記載の方法中、反応（ｃ）にて用いるグリニャール試薬の有機ハロゲン化合物Ｒ−ＸのＲを、炭素数３以上２９以下の有機基（アルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、アリール基等）を用いること、並びに反応（ｅ）及び反応（ｇ）を行わないことにより得ることができる。
【実施例】
【００５０】
以下の実施例において、ジベンゾジオキソシン結合開裂評価試験用化合物（目的化合物）及びその中間体の同定は、以下の測定装置及び測定条件を用いて行った。
（１）ＨＰＬＣ測定
高速液体クロマトグラフ（（株）島津製作所製、製品名：「Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ」）を用いて、以下の条件で測定した。
カラム：Ｕｎｉｓｏｎ  ＵＫ−Ｐｈｅｎｙｌ  内径４．６ｍｍ×長さ１５０ｍｍ＋ガードカラム（Ｉｍｔａｋｔ社製）、移動相Ａ：１０ｍＭ蟻酸アンモニウム水溶液、移動相Ｂ：アセトニトリル、検出器：ダイオードアレイ（波長レンジ：２００〜５００ｎｍ）、流速：１ｍｌ／ｍｉｎ、グラジエント：３分（Ｂ  ３０％）、５０分（Ｂ  ８０％）、６０分（Ｂ  ８０％）、６２分（Ｂ  ３０％）、７５分（Ｂ  ３０％）
（２）ＮＭＲ測定
ＪＥＯＬ社製６００ＭＨｚ  ＮＭＲ（製品名：「ＥＣＡ  ６００」）を用いて測定を行った。
試料はＤＭＳＯ−ｄ６に溶解させ、測定温度は３０３Ｋ（３０℃）にて測定を行った。
１Ｈ−ＮＭＲ測定及び１３Ｃ−ＮＭＲ測定は、サンプリングポイント：３２０，７６８、１Ｈパルス遅延時間：５秒、１３Ｃパルス遅延時間：２秒、積算回数：１Ｈは６４回、１３Ｃは１０，０００回、の条件で行った。
（３）質量分析（ＦＴ−ＩＣＲ−ＭＳ）
フーリエ変換イオンサイクロトロン共鳴質量分析装置（ＦＴ−ＩＣＲ−ＭＳ、ブルカー・ダルトニクス社製）を用いて、以下の条件で測定した。
試料は、測定溶媒（アセトニトリル９０％、０．１％濃度のギ酸水１０％）に溶解させ、イオン化法：ＥＳＩ−ＭＳ（インフュージョン分析）、イオン化モード：ポジティブイオンモード、流速１２０μｌ／ｍｉｎ、の条件で測定した。
【００５１】
実施例１
＜側鎖環状型ジベンゾジオキソシン結合開裂評価試験用化合物の合成例＞
（反応（ａ１）：６，６’−ジヒドロキシ−５，５’−ジメトキシ−［１，１’−ビフェニル］−３，３’−ジカルバルデヒドの合成）
バニリン５ｇ、（３３ｍｍｏｌ、和光純薬工業（株）製）を８０℃に加熱したイオン交換水２００ｍｌに溶解させた。この溶液に硫酸鉄（ＩＩ）２００ｍｇ（０，７２ｍｍｏｌ、和光純薬工業（株）製）、ペルオキソ二硫酸カリウム５ｇ（１９ｍｍｏｌ、和光純薬工業（株）製）を加え、１２０℃で１時間加熱還流させた。
反応終了後、未反応のバニリンを熱時ろ過によって取り除き、中間体（ａ１）を得た（収率９７％）。
【００５２】
【化１５】
2017014122.tif 000016
【００５３】
（反応（ｂ１）：６，６’−ビス（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−５，５’−ジメトキシ−［１，１’−ビフェニル］−３，３’−ジカルバルデヒドの合成）
中間体（ａ１）３．０ｇ（９．９ｍｍｏｌ）を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（脱水）２０ｍｌ（和光純薬工業（株）製）に懸濁させ、氷浴上で冷却した。イミダゾール２．０ｇ（３０ｍｍｏｌ、３ｅｑｕｉｖ．、和光純薬工業（株）製）、ｔ−ブチルジメチルクロロシラン３．６ｇ（２４ｍｍｏｌ、２．４ｅｑｕｉｖ．、東京化成工業（株）製）を加えた後、室温で１時間攪拌した。
反応終了後、この溶液を酢酸エチルで分液し、溶媒を濃縮した後、カラムによって精製し、下記の中間体（ｂ１）を得た（白色結晶、収率７３％）。
【００５４】
【化１６】
2017014122.tif 000017
【００５５】
（反応（ｃ１）：１，１’−（６，６’−ビス（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−５，５’−ジメトキシ−［１，１’−ビフェニル］−３，３’−ジイル）ビス（ヘプタ−６−エン−１−オール）の合成）
マグネシウム６２４ｍｇ（削り屑状、和光純薬工業（株）製）に、テトラヒドロフラン（脱水）２０ｍｌ（和光純薬工業（株）製）を加え、６−ブロモ−１−ヘキセン２．７ｍｌ（２０ｍｍｏｌ、東京化成工業（株）製）をゆっくりと滴下し、１．０Ｍのグリニャール試薬を調製した。室温で１時間攪拌した後に静置し、溶液の上澄み９．８ｍｌ（２．６ｅｑｕｉｖ．）を氷浴上で冷却した中間体（ｂ１）２ｇ（３．８ｍｍｏｌ）のトルエン溶液３０ｍｌ（和光純薬工業（株）製）に滴下した。１時間攪拌した後に、ジエチルエーテル２０ｍｌ（和光純薬工業（株）製）、飽和クエン酸水溶液５０ｍｌ（和光純薬工業（株）製）を滴下することで反応を終了した。
この溶液を酢酸エチルで分液し、溶媒を濃縮した後、カラムによって精製して、下記の中間体（ｃ１）を得た。（白色結晶、収率７２％）
【００５６】
【化１７】
2017014122.tif 000018
【００５７】
（反応（ｄ１）：５，５’−ビス（１−ヒドロキシヘプタ−６−エン−１−イル）−３，３’−ジメトキシ−［１，１’−ビフェニル］−２，２’−ジオールの合成）
中間体（ｃ１）２．８９ｇ（４．１ｍｍｏｌ）を、テトラヒドロフラン３０ｍｌ（和光純薬工業（株）製）に溶解させ、氷浴上で冷却した。この溶液にテトラブチルアンモニウムフルオリド（約１ｍｏｌ／Ｌ  テトラヒドロフラン溶液）を８．２ｍｌ（１ｅｑｕｉｖ．、東京化成工業（株）製）を滴下した。３０分間攪拌した後に、エバポレーターによって溶媒を濃縮し、カラムによって精製して、下記の中間体（ｄ１）を得た。（白色結晶、収率８６％）
【００５８】
【化１８】
2017014122.tif 000019
【００５９】
（反応（ｅ１）及び反応（ｆ１）：中間体（ｅ１）及び中間体（ｆ１）の合成）
中間体（ｄ１）０．９ｇ（１．９ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（脱酸素）４５０ｍｌ（和光純薬工業（株）製）に溶解させた。この溶液にＵｍｉｃｏｒｅＭ１  ８８ｍｇ（０．０５ｅｑｕｉｖ．、和光純薬工業（株）製）を加えた後、６０℃で３時間加熱還流した。反応終了後、氷浴上で冷却した（中間体（ｅ１））。この溶液にトリエチルシラン４．１ｍｌ（２０ｅｑｕｉｖ．、東京化成工業（株）製）、三フッ化ホウ素・エチルエーテル錯体４．０ｍｌ（１０ｅｑｕｉｖ．、東京化成工業（株）製）を滴下し、１時間攪拌した。反応終了後、飽和炭酸水素ナトリウム（和光純薬工業（株）製）水溶液を加え、ジクロロメタンで分液した。溶媒を除去した後、ジクロロメタン（脱水）２０ｍｌ（和光純薬工業（株）製）を加えて溶解させた。
この溶液に、ジメチルスホキシド０．６８ｍｌ（ＵｍｉｃｏｒｅＭ１に対して１００ｅｑｕｉｖ．、和光純薬工業（株）製）を滴下し、１２時間攪拌した。反応終了後、溶媒を濃縮し、カラムによって精製を行って、下記の中間体（ｆ１）を得た（白色結晶、収率７３％）。
【００６０】
【化１９】
2017014122.tif 000020
【００６１】
（反応（ｇ１）：中間体（ｇ１）の合成）
中間体（ｆ１）０．７ｇ（１．７ｍｍｏｌ）を、酢酸エチル１５ｍｌに溶解させ、パラジウム−炭素０．１４ｇ（ｅｘｔｅｎｔ  ｏｆ  ｌａｂｅｌｉｎｇ：１０ｗｔ．％  ｌｏａｄｉｎｇ（ｄｒｙ  ｂａｓｉｓ）、ｍａｔｒｉｘ：ｃａｒｂｏｎ  ｐｏｗｄｅｒ、ｗｅｔ  ｓｕｐｐｏｒｔ、シグマ アルドリッチ ジャパン（株）製）を加え、常温常圧で水添を１２時間行った。反応終了後、パラジウム炭素をセライトろ過によって除去し、ろ液を濃縮した後、カラムによって精製して、下記の中間体（ｇ１）を得た（白色結晶、収率９３％）。
【００６２】
【化２０】
2017014122.tif 000021
【００６３】
（反応（ｈ１）：中間体（ｈ１）の合成）
中間体（ｇ１）０．４２ｇ（１．０ｍｍｏｌ）、コニフェリルアルコール０．３６ｇ（２ｍｍｏｌ、２ｅｑｕｉｖ．、和光純薬工業（株）製）を、ジクロロメタン４０ｍｌ（和光純薬工業（株）製）に溶解させ、酸化銀（Ｉ）０．３５ｇ（１．５ｍｍｏｌ、１．５ｅｑｕｉｖ．、和光純薬工業（株）製）を加えて室温で２日間攪拌した。反応終了後、酸化銀（Ｉ）をセライトろ過によって除去し、ろ液を濃縮した後、カラムによって精製して、下記の中間体（ｈ１）を得た（白色結晶、収率３２％）。
【００６４】
【化２１】
2017014122.tif 000022
【００６５】
（目的化合物の合成）
中間体（ｈ１）０．２ｇ（０．３４ｍｍｏｌ）を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（脱水）１０ｍｌ（和光純薬工業（株）製）に溶解させ、炭酸カリウム７０ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ、１．５ｅｑｕｉｖ．、和光純薬工業（株）製）、ヨードメタン０．２１ｍｌ（１０ｅｑｕｉｖ．、和光純薬工業（株）製）を加えて１２時間攪拌した。反応終了後、この溶液を酢酸エチルで分液し、溶媒を濃縮した後、カラムによって精製して、下記式（Ａ）の目的化合物（側鎖環状型ジベンゾジオキソシン結合開裂評価試験用化合物）を得た（白色結晶、収率９３％）。
【００６６】
【化２２】
2017014122.tif 000023
【００６７】
得られた上記式（Ａ）の目的化合物について、１Ｈ−ＮＭＲ測定、１３Ｃ−ＮＭＲ測定及び質量分析（ＦＴ−ＩＣＲ−ＭＳ）の測定を行った。得られた１Ｈ−ＮＭＲスペクトル及び１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを、それぞれ、図１及び図２に示す。
また、当該１Ｈ−ＮＭＲ測定及び１３Ｃ−ＮＭＲ測定結果の帰属シグナルを、下記表１に示す。
【００６８】
【表１】
2017014122.tif 000024
【００６９】
なお、上記表１中の帰属位置については、下記式（Ａ）の目的化合物上に示す炭素又は該炭素上に結合する水素の位置を表す。例えば、表１中で、「Ａ１」とは、下記式（Ａ）の目的化合物上に示したベンゼン環構造Ａを構成する炭素で「１」と付した位置を表し、「Ａ５，Ｂ５，Ｃ５」とは、ベンゼン環構造Ａ、ベンゼン環構造Ｂ、及びベンゼン環構造Ｃを構成する炭素で「５」と付した各位置を表す。また、「Ａｒ−ＯＣＨ３」とは、ベンゼン環構造に結合した−ＯＣＨ３基中の炭素に結合した各水素を表し、「Ａｒ−ＯＣＨ３」とは、ベンゼン環構造に結合した−ＯＣＨ３基中の炭素を表す。
【００７０】
【化２３】
2017014122.tif 000025
【００７１】
また、得られた上記式（Ａ）の目的化合物の質量分析（ＦＴ−ＩＣＲ−ＭＳ）結果のマススペクトルを、図３及び図４に示す。
図３からわかるように、得られた化合物のプロトン付加体のピークが、ｍ／ｚ＝６０５．３４５００の位置に検出された。また、図４からわかるように、得られた化合物のナトリウム付加体のピークが、ｍ／ｚ＝６２７．３３０２６の位置に検出された。
以上の測定結果から、得られた化合物が、上記式（Ａ）で表される目的化合物であることを確認した。
【００７２】
上記の通り得られた式（Ａ）の目的化合物（側鎖環状型ジベンゾジオキソシン結合開裂評価試験用化合物）を用いて、ジベンゾジオキソシン結合の開裂を評価したところ、当該目的化合物は、ジベンゾジオキソシン結合開裂評価試験用化合物特有の反応である分子内反転が抑制された結果、ジベンゾジオキソシン結合の開裂挙動を正確に追跡することを可能にすることができることがわかった。
一方、非特許文献１のジベンゾジオキソシン結合開裂評価試験用化合物（比較化合物）を用いた場合は、ジベンゾジオキソシン結合の開裂挙動確認試験時に、分子内反転に由来すると推定される７員環生成率も増加していることがわかった。嵩の低い化合物を使用していることが原因であり、嵩高いリグニン中で同様の反応が進行しないことが予想され、リグニン中に含まれるジベンゾジオキソシン結合の開裂能を評価するモデル化合物としては不適格であると考えられる。
【００７３】
【化２４】
2017014122.tif 000026
【図１】
2017014122.tif 000035
【図２】
2017014122.tif 000036
【図３】
2017014122.tif 000037
【図４】
2017014122.tif 000038