(57)【要約】【課題】優れた光応答性の一重項酸素生成能を有する成分を含有する光応答性消臭抗菌剤、該光応答性消臭抗菌剤を含む光応答性消臭抗菌製品、及び該光応答性消臭抗菌剤を用いた消臭殺菌方法を提供する。また、優れた光応答性の一重項酸素生成能を有する成分を含有する光線力学的療法用の医薬組成物を提供する。【解決手段】藍又は藍の抽出物を含有する光応答性消臭抗菌剤、当該光応答性消臭抗菌剤を含む光応答性消臭抗菌製品、酸素存在下で当該光応答性消臭抗菌剤に光照射する工程を含む該光応答性消臭抗菌剤を用いた消臭殺菌方法、及び藍の抽出物を含有する光線力学的療法用の医薬組成物。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
藍又は藍の抽出物を含有する光応答性消臭抗菌剤。
【請求項２】
光照射により一重項酸素を発生させる、請求項１に記載の光応答性消臭抗菌剤。
【請求項３】
前記光が可視光である、請求項１又は２に記載の光応答性消臭抗菌剤。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか一項に記載の光応答性消臭抗菌剤を含む光応答性消臭抗菌製品。
【請求項５】
前記光応答性消臭抗菌製品が、衣料用品、動物用品、介護用品、医療用品、インテリア用品、又は日用品である、請求項４に記載の光応答性消臭抗菌製品。
【請求項６】
藍の抽出物を含有する光線力学的療法用の医薬組成物。
【請求項７】
酸素存在下で請求項１〜３のいずれか一項に記載の光応答性消臭抗菌剤に光照射する工程
を含む、該光応答性消臭抗菌剤を用いた消臭殺菌方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、光応答性消臭抗菌剤、該光応答性消臭抗菌剤を含む光応答性消臭抗菌製品、及び該光応答性消臭抗菌剤を用いた消臭殺菌方法に関する。また、本発明は、光線力学的療法用の医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
藍はタデ科の一年生の草であり、東南アジアが原産である。染料をとる植物として古くは中国から輸入され、江戸時代には四国を中心に広く栽培されている。藍は天然の青色染料として古くから重宝されており、藍の歴史は古代エジプトにまで遡るとも言われている。
【０００３】
染色に使うには、葉を乾燥させ、つみあげて2〜3ヶ月発酵させて黒い土の塊のようなものにして臼でつきかため玉藍を作る。玉藍にはインジゴ(indigo)が2〜10%含まれている。次に、玉藍に木灰、石灰、ふすまを混ぜて水を加えてかき混ぜ、30〜40℃の温度を保てばインジゴが水に溶ける性質に変わり、これを用いて布を染色する。
【０００４】
しかし、1880年にA. Baeyerがインジゴを初めて合成して工業化して以来、天然藍は駆逐され、合成インジゴが藍染めの主流となっている。
【０００５】
また、藍には抗菌成分が含まれていることが特許文献１〜４で報告されている。
【０００６】
特許文献１では、藍の抽出物に2種類の抗菌活性物質が存在することを見出し、当該物質がアトピー性皮膚炎等の発症原因菌に対して優れた抗菌作用を有することが報告さている。
【０００７】
特許文献２では、藍葉又は沈殿藍からトリプタントリンなどの有用成分をマイクロ波照射下で溶媒抽出することで、有用成分を迅速に抽出できることが報告されている。
【０００８】
特許文献３では、チリ産タデ科植物Muehlenbeckia hastulata又は日本産ヤナギタデ(Persicaria hydropiper)から抽出した成分に、抗インフルエンザ活性を有することが報告されている。
【０００９】
特許文献４では、藍葉のエタノール抽出濃縮物及び多価アルコールを含む混合物から、不純物を除去する工程を含む製造方法で得られた藍葉エキスと、ヨモギエキスとを組み合わせることにより、それぞれ単独では抗菌活性を発揮しない濃度においても高い抗菌活性を発揮し得ることが報告されている。
【００１０】
活性酸素には、スーパーオキシドアニオンラジカル、ヒドロキシラジカル、過酸化水素、一重項酸素などがある。これらのうち一重項酸素の応用例としては、物理的殺菌方法、排水浄化、空気洗浄器、消臭器、抗癌剤などである。大気中の酸素の大部分を占める三重項酸素から直接一重項酸素を作るには高エネルギーが必要になるが、増感剤と呼ばれる化合物を光で励起し、励起した増感剤が安定な三重項状態にある酸素分子にエネルギーを移動させることにより一重項酸素は生成する。
【００１１】
そして、非特許文献１では、インジゴ及びインジゴ誘導体の光増感特性について調べられており、インジゴやインジゴ誘導体は一重項酸素生成が非常に少ないことから、一重項酸素生成のための増感剤としての作用は不十分であることが報告されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１２】
【特許文献１】特開2004-189732号公報
【特許文献２】特開2009-149596号公報
【特許文献３】特開2010-270098号公報
【特許文献４】特開2013-213018号公報
【非特許文献】
【００１３】
【非特許文献１】ChemPhysChem 2006, 7, 2303-2311
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
このように、藍には、光照射により一重項酸素を顕著に生成することができる優れた増感剤としての機能を有する成分が含まれていることは知られていなかった。
【００１５】
本発明は、優れた光応答性の一重項酸素生成能を有する成分を含有する光応答性消臭抗菌剤、該光応答性消臭抗菌剤を含む光応答性消臭抗菌製品、及び該光応答性消臭抗菌剤を用いた消臭殺菌方法を提供することを目的とする。また、本発明は、優れた光応答性の一重項酸素生成能を有する成分を含有する光線力学的療法用の医薬組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本発明者は、上記目的を達成すべく鋭意研究を重ねた結果、藍の抽出物は、顕著に優れた光応答性の一重項酸素生成能を有しているという知見を得た。この藍の抽出物の光応答性一重項酸素生成能は、藍の染料成分であるインジゴと比べても顕著に優れていた。
【００１７】
本発明は、これら知見に基づき、更に検討を重ねて完成されたものであり、次の光応答性消臭抗菌剤、光応答性消臭抗菌製品、光線力学的療法用の医薬組成物、及び消臭殺菌方法を提供するものである。
【００１８】
項１．藍又は藍の抽出物を含有する光応答性消臭抗菌剤。
項２．光照射により一重項酸素を発生させる、項１に記載の光応答性消臭抗菌剤。
項３．前記光が可視光である、項１又は２に記載の光応答性消臭抗菌剤。
項４．項１〜３のいずれか一項に記載の光応答性消臭抗菌剤を含む光応答性消臭抗菌製品。
項５．前記光応答性消臭抗菌製品が、衣料用品、動物用品、介護用品、医療用品、インテリア用品、又は日用品である、項４に記載の光応答性消臭抗菌製品。
項６．藍の抽出物を含有する光線力学的療法用の医薬組成物。
項７．酸素存在下で項１〜３のいずれか一項に記載の光応答性消臭抗菌剤に光照射する工程
を含む、該光応答性消臭抗菌剤を用いた消臭殺菌方法。
【発明の効果】
【００１９】
藍又は藍の抽出物は、優れた光応答性の一重項酸素生成能を有していることから、抗菌作用、殺菌作用、消臭作用、及び光線力学的療法による治療効果が期待される。
【００２０】
そのため、藍又は藍の抽出物は、光応答性消臭抗菌剤、光応答性消臭抗菌製品、及び光線力学的療法用の医薬組成物の有効成分として有用である。
【００２１】
また、藍は天然物であり、古くから染料や漢方薬原料などとして使用されてきたものであるので、安全性が高いと考えられる。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１】高温処理藍葉、低温処理藍葉、乾燥藍茎、乾燥藍葉、及びインジゴについての光照射による一重項酸素生成量を示すグラフである。
【図２】藍茎から抽出・分離された物についての光照射による一重項酸素生成量を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
以下、本発明について詳細に説明する。
【００２４】
なお、本明細書において「含む、含有する(comprise)」とは、「本質的にからなる(essentially consist of)」という意味と、「からなる(consist of)」という意味をも包含する。
【００２５】
藍又は藍の抽出物
本発明において、藍の種類は特に限定されないが、好ましくは、タデ科に属する１年生の植物であるタデ藍(Polygonim tinctorium Lour., Syn: Persicaria tinctoria (Aiton) H. Gross)である。タデ藍の種類も特に限定されず、千本等の各種のタデ藍を使用することができる。
【００２６】
本発明で使用する藍の部位は特に限定されず、藍の全体を用いることもできるし、又は葉、茎などの一部を用いることもできる。また、生の状態のもの、乾燥させた状態のもの、発酵させた状態のもの(すくも)等のいずれの状態の藍も本発明において使用することができる。ここで、乾燥方法としては、例えば、天日乾燥、加熱乾燥、凍結乾燥などが挙げられる。また、本発明で使用する藍は、切断や粉砕処理がなされたものであってもよい。
【００２７】
抽出に用いる藍の部位は特に限定されず、藍の全体を用いることもできるし、又は葉、茎などの一部を用いることもできる。また、抽出に用いる藍としては、生の状態のもの、乾燥させた状態のもの、発酵させた状態のもの(すくも)等のいずれの状態の藍も使用することができる。ここで、乾燥方法としては、例えば、天日乾燥、加熱乾燥、凍結乾燥などが挙げられる。また、抽出に用いる藍は、切断や粉砕処理がなされたものであってもよい。
【００２８】
藍の抽出物を製造する際の抽出方法は特に限定されないが、抽出液に浸漬して抽出する方法、二酸化炭素等による超臨界抽出法を用いて抽出する方法などが挙げられる。
【００２９】
藍を抽出液に浸漬して抽出を行う場合に使用する抽出液としては水、有機溶媒又は含水有機溶媒を使用することができ、有機溶媒としては、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、２−メチル−１−プロパノール、２−メチル−２−プロパノール、１−ペンタノール、２−ペンタノール、３−ペンタノール等の炭素数1〜5の低級アルコール、ジエチルエーテル等のエーテル類、酢酸メチル、酢酸エチル等のエステル類、アセトン等のケトン類、酢酸、氷酢酸、プロピオン酸等の有機酸、N,N-ジメチルホルムアミド(DMF)、クロロホルム、ジクロロメタン等が挙げられる。
【００３０】
抽出に使用する抽出液の量は、藍全体を浸漬できる量であれば特に限定されないが、抽出により得られる成分の濃度を高くするためには抽出液の量は少ない方が好ましい。
【００３１】
抽出液による抽出を行う場合、抽出液の温度及び抽出時間は適宜設定されるが、抽出液の温度は通常室温であり、抽出時間は通常12〜24時間である。また、抽出液による抽出は、攪拌下で実施することが好ましい。
【００３２】
回収した抽出液は、ろ過、分液、分別沈殿、遠視分離などの公知の手段により不溶成分の除去を行ってもよい。
【００３３】
具体的には抽出は次のように行うことができる。粉砕処理をした藍20 gにジクロロメタンを150 mL加え室温(20℃)で24時間静置し、濾過してジクロロメタン層を除く。この操作を2回繰り返す。ジクロロメタンを蒸発させた粉末状の藍に、アセトン：水(４：１)を100 mL加え、室温(20℃)で12-24時間静置し、遠心分離で抽出液を得る。
【００３４】
回収した抽出液(必要により不溶成分の除去を行ったものも含む)は、必要に応じて適宜、限外濾過、分子篩クロマトグラフィー(ゲル濾過)、吸着クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、アフィニティクロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー(HPLC)、透析法、これらの組合せなどにより精製を行ってもよい。
【００３５】
また、回収した抽出液(必要に応じて更に精製されたものも含む)は、更に、濃縮や、凍結乾燥、スプレードライ等による乾燥処理を行ってもよい。ここで、濃縮、凍結乾燥及びスプレードライは、常法に従って行うことができる。
【００３６】
本発明の藍の抽出物は、抽出液そのもの(更に精製されたものも含む)、該抽出液を濃縮した濃縮液、及び該抽出液を乾燥させた固形物のいずれであってもよい。
【００３７】
本発明の藍の抽出物における光応答性一重項酸素生成能を担う化合物を特定することは、当該化合物が光照射下で構造変化を起こすことにより困難である。
【００３８】
光応答性消臭抗菌剤
本発明の光応答性消臭抗菌剤は、藍又は藍の抽出物を含有することを特徴とする。
【００３９】
本発明において、消臭抗菌とは、消臭作用と抗菌作用の少なくともいずれか一方の作用が発揮されることを意味する。
【００４０】
また、本発明において、「光応答性」の消臭抗菌とは、光が照射されることにより消臭抗菌作用が発揮されることを意味する。
【００４１】
本発明の光応答性消臭抗菌剤が有効成分とする藍又は藍の抽出物は、光応答性の一重項酸素生成能を有しており、増感剤として機能する。そのため、本発明の光応答性消臭抗菌剤は、光照射により一重項酸素を発生させることができる。当該一重項酸素の作用に基づいて、抗菌作用、殺菌作用、及び消臭作用が発揮されると期待される。すなわち、本発明の光応答性消臭抗菌剤が抗菌作用、殺菌作用、及び消臭作用を発揮するためには、少なくとも酸素と光源が存在していればよく、酸素存在下(例えば、空気中)で本発明の光応答性消臭抗菌剤に光照射することで、殺菌消臭効果を得ることができる。
【００４２】
また、本発明における抗菌作用は、一重項酸素による物理的殺菌であるため、幅広い種類の微生物やウィルスに有効である上に、耐性菌を出すリスクも低い。
【００４３】
ここで、本発明において光応答性を得るために使用される光としては、好ましくは可視光であり、より好ましくは波長が360〜830 nmの光、特に好ましくは波長が400〜600 nmの光である。
【００４４】
また、本発明において光応答性を得るために使用される光源としては、自然光(太陽光)、ハロゲンランプ、高圧水銀灯、低圧水銀灯、エキシマレーザ、重水素ランプ、キセノンランプ、Hg-Zn-Pbランプ、蛍光灯、LEDなどが挙げられるが、自然光(太陽光)及びLEDがエネルギーを使用しない又はエネルギーの使用量が少ないため好ましい。光源としてLEDを使用する場合は、波長が400〜750 nm、特に400〜500 nmであるLEDを使用することが好ましい。
【００４５】
本発明の光応答性消臭抗菌剤は、藍又は藍の抽出物の光応答性の一重項酸素生成能が妨げられない限り、追加の成分を含んでいてもよい。追加の成分を含む場合、光応答性消臭抗菌剤中の藍又は藍の抽出物の割合としては1〜100重量%、特に10〜98重量%を挙げることができる。
【００４６】
本発明の光応答性消臭抗菌剤は、その形態を特に制限するものではないが、例えば、粉末状、顆粒状、錠剤状、ナノパーティクル状、液状、懸濁液状、乳液状などの形態が挙げられる。
【００４７】
本発明の光応答性消臭抗菌剤は、藍又は藍の抽出物の光応答性の一重項酸素生成能に基づいて抗菌、殺菌、及び消臭作用を有するため、各種の消臭抗菌材や消臭抗菌剤の成分として好適に使用することができる。そのような消臭抗菌材や消臭抗菌剤としては、例えば、抗菌性フィルム、抗菌性繊維、抗菌性不織布、抗菌性塗料、抗菌性コーキング材、抗カビ剤、抗菌消臭スプレーなどを挙げることができる。消臭抗菌材料や消臭抗菌剤における本発明の光応答性消臭抗菌剤の配合量は、光応答性の消臭抗菌作用が得られる範囲で適宜決定される。
【００４８】
光応答性消臭抗菌製品
本発明の光応答性消臭抗菌製品は、上記光応答性消臭抗菌剤を含むことを特徴とする。
【００４９】
本発明の光応答性消臭抗菌製品は、光応答性の一重項酸素生成能を有する藍又は藍の抽出物を含んでいるため、光照射により発生する一重項酸素の作用に基づいて、抗菌作用、殺菌作用、及び消臭作用が発揮されると期待される。
【００５０】
本発明の光応答性消臭抗菌製品としては、衣料用品、動物用品、介護用品、医療用品、インテリア用品、日用品などを挙げることができる。
【００５１】
上記衣料用品としては、作業服、運動着、寝間着、帽子、ジーンズ、靴下、靴など、上記動物用品としては、動物用衣類、動物用敷物、動物用飼育小屋、動物用トイレ、水槽など、上記介護用品としては、介護寝間着、オムツなど、上記医療用品としては、包袋、絆創膏、マスクなど、上記寝具用品としては、布団、枕、シーツ、毛布、ベッドなど、上記インテリア用品としては、カーテン、壁紙、カーペット、床材、障子、襖、ランプフード、家具など、上記日用品としては、包装材料、鞄、文房具、プラスチック容器、非常用持ち出し用品、掃除機のフィルター、空気清浄機(エアフィルター)、スリッパ、タオルなどがそれぞれ挙げられる。
【００５２】
本発明の光応答性消臭抗菌剤を上記のような製品に適用する手段としては、製品の素材等の性質に応じて、当業者に公知の方法を採用することができる。例えば、製品表面に塗布する方法、製品表面に噴霧する方法、製品に含浸させる方法、製品に配合する方法などが挙げられる。また、本発明の光応答性消臭抗菌剤を予め含浸させた繊維等を使用して製品を製造する方法も挙げることができる。また、光応答性消臭抗菌剤の成分として藍を使用する場合は、例えば、藍の茎から生成されたパルプを原料とした紙を使用して製品を製造することもできる。上記のような製品における本発明の光応答性消臭抗菌剤の使用量は、光応答性の消臭抗菌作用が得られる範囲で適宜決定される。
【００５３】
本発明の光応答性消臭抗菌剤の有効成分である藍又は藍の抽出物は長い間、衣料の染色に使用されてきたものなので、肌と直接接する可能性のある製品に使用したとしても安全であると考えられる。また、自然光を利用できるため、本発明の光応答性消臭抗菌剤は、屋外で設置又は使用される装置に使用することが好ましい。しかしながら、屋内で設置又は使用される製品であっても、人工光源を使用することで消臭抗菌作用を発揮させることが可能である。例えば、水槽のガラス面に本発明の光応答性消臭抗菌剤を塗布しておき、水槽を照らすLED照明が当該ガラスに照射されることで、消臭殺菌効果が得られると考えられる。
【００５４】
医薬組成物
本発明の光線力学的療法用の医薬組成物は、藍の抽出物を含有することを特徴とする。
【００５５】
医薬組成物として調製する場合、藍の抽出物をそのまま使用するか、又は医薬品において許容される無毒性の担体、希釈剤若しくは賦形剤とともに、タブレット(素錠、糖衣錠、発泡錠、フィルムコート錠、チュアブル錠、トローチ剤などを含む)、カプセル剤、丸剤、粉末剤(散剤)、細粒剤、顆粒剤、液剤、懸濁液、乳濁液、シロップ、ペースト、注射剤(使用時に、蒸留水又はアミノ酸輸液や電解質輸液等の輸液に配合して液剤として調製する場合を含む)などの形態に調製して、医薬用の製剤にすることが可能である。
【００５６】
本発明の医薬組成物における藍の抽出物の含量は、医薬組成物全量中0.0001〜100重量%、好ましくは0.001〜99重量%の範囲から適宜選択することが可能である。
【００５７】
本発明の医薬組成物の投与方法は特に限定されず、例えば、動脈内投与、静脈内投与、口腔内投与、直腸投与、経皮投与、経腸投与、経口投与などにより行うことができる。
【００５８】
本発明の医薬組成物は、ヒトを含む哺乳動物に対して投与される。
【００５９】
本発明の医薬組成物の投与量は、患者の体重、年齢、性別、症状などの種々の条件に応じて適宜決定することができる。
【００６０】
本発明の医薬組成物は、光線力学的療法(photodynamic therapy: PDT)に有用である。
【００６１】
光線力学的療法とは、光感受性物質と低出力レーザーとの併用療法であり、光感受性物質を患者に投与した後、病巣部にレーザー光を照射することにより光感受性物質が励起されて活性酸素が生成して抗腫瘍効果が得られる。
【００６２】
本発明の医薬組成物は、例えば癌に対して治療効果を有すると考えられる。本発明の医薬組成物により治療可能な癌の種類としては、胃癌、直腸癌、結腸癌、肝臓癌、膵臓癌、肺癌、咽頭癌、食道癌、腎癌、胆のう・胆管癌、頭頸部癌、膀胱癌、前立腺癌、乳癌、子宮癌、卵巣癌、脳腫瘍等が挙げられる。
【００６３】
本発明の医薬組成物が有効成分とする藍の抽出物は、光応答性の一重項酸素生成能を有しているので、本発明の医薬組成物を患者に投与後に、励起波長のレーザー光を癌等の治療部位に照射することで治療部位において一重項酸素が生成され、癌細胞等の細胞を死滅させることができると期待される。そのため、目的とする癌細胞のみを効果的に死滅させることが可能となり、副作用の軽減が期待できる。
【実施例】
【００６４】
以下、本発明を更に詳しく説明するため実施例を挙げる。しかし、本発明はこれら実施例等になんら限定されるものではない。
【００６５】
試験例１
タデ科の藍の一種である千本(学名：Polygonim tinctorium Lour., Syn: Persicaria tinctoria (Aiton) H. Gross)という品種の藍の葉を高温処理(80℃、48時間)して酵素を失活させた葉(高葉)と、対象として低温処理(60℃、48時間)した葉(低葉)、乾燥茎(茎)、及び未処理の乾燥葉(千本)の4種類の試料をシリカゲルデシケーターで乾燥させた。乾燥試料0.3 gを4.5 mLのDMF (ジメチルホルムアミド)に24時間浸し振盪抽出を行った。抽出液を遠心処理(1000×g)して得られたDMF試料溶液100μLに、スピントラップ剤であるTPC (2,2,5,5-tetramethyl-3-pyrroline-3-carboxamide)のDMF溶液(1M) 10μLを加え、更にDMFで全量を1 mLとした。
【００６６】
得られた溶液をガラス製キャピラリー(Drummond社製10μL)3本に取り、蛍光灯(日本グローバル照明社製、パールボール 電球形蛍光灯EFS13C-P、照度30,000ルクス)の光を3分間照射した後、電子スピン共鳴(Electron Paramagnetic Resonance: EPR)装置で一重項酸素によるTPC由来ラジカル種を測定した。各測定は3回ずつ行い、測定条件は、測定磁場3505±100ガウス、磁場変調100kHz、±1ガウス、時定数81.92 msec、変換時間117 msec、周波数9.819GHz、出力10 mWであった。また、一重項酸素の特異的な消去剤であるアジ化ナトリウム(NaN3)を最終濃度が50 mMになるように添加し、同様に光を照射して測定した。
【００６７】
測定原理は、TPCに一重項酸素が作用すると、TPCがラジカル化して、特異的な3本線からなるEPRシグナルを呈することを利用するものである。結果を図１に示す。
【００６８】
図１に示す様に、同一重量の試料から高温処理葉、低温処理葉、乾燥茎、乾燥葉でほぼ同じ強度のTPCラジカルが発生したのに対し、一重項酸素の特異的阻害剤であるアジ化ナトリウムが共存すると、いずれもTPCラジカルの生成が大きく減弱した。一方、藍の青色色素成分であるindigo (1 mM)は、既報の通りほとんど一重項酸素を生成しなかった。また、TPC自身も光照射によってごくわずかEPRシグナルを呈したが、今回の実験結果に影響を与えるものでは無かった。
【００６９】
試験例２
タデ科の藍の一種である千本(上記)の乾燥茎をハンマーミル(吉田製作所社製、卓上型高速ハンマーミル  型式：1018-ST)で粉砕し、その粉末20 gにジクロロメタンを150 mL加え1日静置し、上清(ジクロロメタン層)を除いた。この操作をもう一度繰り返しクロロフィルを除去したあと、ジクロロメタンを蒸発・除去し、残った茎の粉末にアセトン：水(４：１)混合溶液を100 mL加え攪拌後、上清を回収した。この上清をエバポレーターで減圧下濃縮し、濃茶色の試料を得た。
【００７０】
この試料をTLC (メルク社製、シリカゲル60、20×20cm)にスポットし、展開溶媒(クロロホルム：メタノール＝８５：１５)で展開した。その結果、上端から緑１(Rf=0.82)、青(Rf=0.73)、赤(Rf=0.65)、緑２(Rf=0.45)の4つのスポットが得られたので、それらを回収し、展開溶媒で抽出して窒素気流下乾燥させ、試料とした。個々の試料を6 mg/mLのDMF溶液とし、これに最終濃度が10 mMになるようにTPCを加え、試料溶液を3本のキャピラリー(Drummond社製10μL)に充填し、青色のLED(中心波長453 nm、50,000ルクス)を3分間照射して試験例１と同様の方法によりEPRを測定した。結果を図２に示す。
【００７１】
図２に示すよう、得られた4つの有色試料全てで光照射によるTPCラジカルの生成が観察された。このことから、藍の茎には一重項酸素生成を促進する増感物質が少なくとも４種類含まれている事が明らかとなった。
【図１】
2017154985.tif 000002
【図２】
2017154985.tif 000003