(57)【要約】【課題】動脈硬化症、心血管疾患、脳血管疾患および脂肪肝の予防・治療剤を提供する。【解決手段】マンゴスチン果皮抽出物を活性成分として含んでなる動脈硬化症、心血管疾患、脳血管疾患および脂肪肝の予防・治療剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
マンゴスチン果皮抽出物を活性成分として含んでなる動脈硬化症の予防・治療剤。
【請求項２】
請求項１記載の動脈硬化症の予防・治療剤からなる心血管疾患または脳血管疾患の予防剤。
【請求項３】
マンゴスチン果皮抽出物を活性成分として含んでなる脂肪肝の予防・治療剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、マンゴスチン果皮抽出物を活性成分として含んでなる動脈硬化症、心血管疾患、脳血管疾患および脂肪肝の予防・治療剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
マンゴスチン（ｍａｎｇｏｓｔｅｅｎ、学名：Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ  Ｌ.）は東南アジア原産のオトギリソウ科（Ｇｕｔｔｉｆｅｒａｅ）の常緑小高木である。その果実は世界三大果実の一つで、果実の女王と呼ばれており、東南アジアを代表する高級トロピカルフルーツである。果実の大きさは約５ｃｍ大の球形で、厚い果皮を持つ。果肉は白色でミカンの袋のように分かれており、これを食する。その果皮は黄色色素（キサントン類）を含み、古くから止血、鎮痛、防腐、消炎といった収斂剤として用いられてきており、民間伝承薬物として重要な天然資源である。
【０００３】
マンゴスチン果皮に含まれるキサントン誘導体の主成分はα−マンゴスチン（α−ｍａｎｇｏｓｔｉｎ）およびγ−マンゴスチン（γ−ｍａｎｇｏｓｔｉｎ）である。
【０００４】
【化１】
2017088588.tif 000002
【０００５】
最近になって、α−およびγ−マンゴスチンは、抗菌作用、抗炎症作用、抗アレルギー作用および抗癌作用を有することが報告された。具体的には、抗ＭＲＳＡ（メシチリン耐性黄色ブドウ球菌）活性（非特許文献１）、ヒスタミンおよびセロトニン受容体阻害活性（非特許文献２）、抗酸化活性（非特許文献３）、抗アレルギー活性（非特許文献４）、癌細胞に対するアポトーシス誘導能（非特許文献５）、細胞周期停止（非特許文献６）といった様々な生理活性であり、マンゴスチンの有する多彩な効果がそれらによって説明される。また、α−マンゴスチンまたはγ−マンゴスチンを投与されたマウスおよびヒトでＮＫ活性が上昇することも確認されている（非特許文献７、８）。さらに、マンゴスチンの抽出物であるパナキサントン（α−マンゴスチン７５〜８５％およびγ−マンゴスチン５〜１５％の混合物で、両者の含量総和が９０％以上のもの）がマウス乳癌に対して抗腫瘍効果を有すること（非特許文献９）や、α−マンゴスチンを２０ｍｇ／ｋｇの用量で浸透圧ポンプを用いてマウス乳癌に対して投与すると、生存率の延長やリンパ節転移の抑制が観察されたこと（非特許文献１０、１１）が報告されている。
【０００６】
心血管疾患や脳血管疾患は、その多くが動脈硬化病変を基礎として起こる。動脈硬化病変のプラークの破綻により血栓が形成され、やがて遊離し、血流に乗り、心臓の冠状動脈や脳の血管で塞栓が起り、重大な病態をもたらす。脂肪肝は、動脈硬化症とともに、生活習慣病の一角を形成する病態である。高齢化が進む中、これら疾病の予防・治療に取り組む意義が、ますます重要となっている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  ４８：８６１−８６５，１９９６
【非特許文献２】Ｐｌａｎｔａ  Ｍｅｄ  ６２：４７１−４７２，１９９６
【非特許文献３】Ｊ  Ａｇｒｉｃ  Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ  ５４：２０７７−２０８２，２００６
【非特許文献４】Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  １６：４５００−４５０８，２００８
【非特許文献５】Ｊ  Ｎａｔ  Ｐｒｏｄ  ６６：１１２４−１１２７，２００３
【非特許文献６】Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  １３：６０６４−６０６９，２００５
【非特許文献７】Ｉｎｔ．  Ｊ  Ｍｏｌ  Ｓｃｉ  ９：３５５−３７０
【非特許文献８】Ｎｅｗ  Ｆｏｏｄ  Ｉｎｄｕｓｔｒｙ  ５４巻：１９−２９，２００９
【非特許文献９】Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  ２９：２４８５−２４９５，２００９
【非特許文献１０】解剖学雑誌第１１５回総会・全国学術集会抄録号（２０１０年、３月）
【非特許文献１１】ＢＭＣ  ＭＥＤ  ９：６９，２０１１
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、動脈硬化症、心血管疾患、脳血管疾患および脂肪肝の予防・治療剤を提供しようとするものである。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、前記課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、マンゴスチン果皮抽出物を用いることにより上記課題を解決し得ることを見出し、さらに検討を重ねて、本発明を完成した。
【００１０】
すなわち、本発明は、
［１］マンゴスチン果皮抽出物を活性成分として含んでなる動脈硬化症の予防・治療剤、
［２］上記［１］記載の動脈硬化症の予防・治療剤からなる心血管疾患または脳血管疾患の予防剤、
［３］マンゴスチン果皮抽出物を活性成分として含んでなる脂肪肝の予防・治療剤、
である。
【発明の効果】
【００１１】
本発明に係るマンゴスチン果皮抽出物を活性成分として含んでなる予防・治療剤は、動脈硬化症、心血管疾患、脳血管疾患および脂肪肝の予防・治療に有用である。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】試験例１でマンゴスチン果皮抽出物０．３質量％含有飼料を投与した場合において、マウス大動脈の内腔をオイルレッドＯで染色した結果を示す写真である。
【図２】試験例１でマンゴスチン果皮抽出物０．４質量％含有飼料を投与した場合において、マウス大動脈の内腔をオイルレッドＯで染色した結果を示す写真である。
【図３】試験例１でマンゴスチン果皮抽出物０．３質量％含有飼料を投与した場合において、肝臓の凍結切片をオイルレッドＯで染色した結果を示す写真である。
【図４】試験例１でマンゴスチン果皮抽出物０．４質量％含有飼料を投与した場合において、肝臓の凍結切片をオイルレッドＯで染色した結果を示す写真である。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明は、マンゴスチン果皮抽出物を活性成分として含んでなる動脈硬化症、心血管疾患、脳血管疾患および脂肪肝の予防・治療剤である。
【００１４】
＜マンゴスチン果皮抽出物＞
マンゴスチン果皮抽出物とは、マンゴスチンの果皮から、それに含まれるキサントン誘導体（主に、α−マンゴスチン、γ−マンゴスチン）を抽出して調製した抽出物である。その調製は常法により実施でき、特に限定されるものではないが、例えば、以下に示す方法が挙げられる。
【００１５】
（調製方法）
すなわち、マンゴスチンの果皮を乾燥したもの（マンゴスチン乾燥果皮）を５ｍｍ〜２０ｍｍ角程度に粉砕し、その乾燥重量に対して、３〜１０倍量の熱水を加え、８０〜１００℃の条件下、１〜５時間、抽出洗浄を行う。抽出洗浄後の混合物を濾過することにより、マンゴスチン果皮の抽出洗浄物を濾取し、これに、元の乾燥重量に対して、３〜１０倍量の含水アルコール（アルコール含量として３０質量％〜９０質量％、好ましくは５０質量％〜９０質量％）を加え、室温〜５０℃の条件下、１〜２４時間、抽出する。抽出後の混合物を濾過することにより、抽出液を得る。かかる抽出操作は、所望により、さらに１回〜２回繰り返してもよい。
【００１６】
得られた抽出液（含水アルコールエキス）から、減圧条件下、溶媒を留去して、ブリックス（Ｂｒｉｘ）値が１０〜４０％に調整された濃縮物を得る。なお、ブリックス値は、ブリックス屈折計（例えば、（株）アタゴ製の「ポケット糖度計ＰＡＬ−１」）により測定される値である。得られた濃縮物を、フリーズドライまたはスプレードライにより乾燥固化して、マンゴスチン果皮抽出物（１）を得ることができる。
【００１７】
あるいは、該濃縮物に、さらに含水アルコール（アルコール含量として、１０質量％〜９０質量％、好ましくは１０質量％〜５０質量％）を加えて再結晶し、得られた結晶を遠心分離し、乾燥することにより、マンゴスチン果皮抽出物（２）を得ることができる。
【００１８】
上記で用いるアルコールとしては、例えば、低級アルコールが挙げられ、より具体的には炭素数が１〜４のもの、好ましくはエタノールが挙げられる。
【００１９】
（果皮抽出物）
本発明において、マンゴスチン果皮抽出物は粉末であり、その色は、茶褐色〜黄褐色、好ましくは黄色〜淡黄色である。該マンゴスチン果皮抽出物において、αおよびγ−マンゴスチンの含量は１５質量％以上であることが好ましく、より好ましくは５０質量％以上、さらに好ましくは９０質量％以上である。αおよびγ−マンゴスチンの含量が１５質量％以上である場合において、α−マンゴスチンの含量は１０質量％以上かつγ−マンゴスチンの含量は３質量％以上であることがより好ましい。また、αおよびγ−マンゴスチンの含量が９０質量％以上である場合において、α−マンゴスチンの含量は７５〜８５質量％かつγ−マンゴスチンの含量は５〜１５質量％であることがより好ましい。
【００２０】
マンゴスチン果皮抽出物（１）の好ましい具体例としては、以下の性状を有するものが挙げられる。
【００２１】
【表１】
2017088588.tif 000003
【００２２】
マンゴスチン果皮抽出物（２）の好ましい具体例としては、以下の性状を有するものが挙げられる。
【００２３】
【表２】
2017088588.tif 000004
【００２４】
かくして得られたマンゴスチン果皮抽出物は、動脈硬化症、心血管疾患、脳血管疾患および脂肪肝に対し、優れた予防・治療効果を有することから、これら疾患の予防剤または治療剤として使用することができる。その投与対象は、ヒトのみならず、ヒト以外の哺乳動物（例えば、ウマ、ウシ、イヌ、ネコ、ブタ、サルなど）に対しても使用することができる。
【００２５】
マンゴスチン果皮抽出物は、それ自体で、あるいは、適宜の薬理学的に許容される賦形剤、希釈剤などと混合して、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤などに製剤化して経口的に投与するか、または非経口的に投与することができる。
【００２６】
これらの製剤は、賦形剤（例えば、乳糖、白糖、ブドウ糖、マンニット、ソルビットのような糖誘導体；トウモロコシデンプン、馬鈴薯デンプン、α−デンプン、デキストリン、カルボキシメチルデンプンのようなデンプン誘導体；結晶セルロース、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、内部架橋カルボキシメチルセルロースナトリウムのようなセルロース誘導体；アラビアゴム；デキストラン；プルラン；軽質無水珪酸、合成珪酸アルミニウム、メタ珪酸アルミン酸マグネシウムのような珪酸塩誘導体；リン酸カルシウムのようなリン酸塩誘導体；炭酸カルシウムのような炭酸塩誘導体；硫酸カルシウムのような硫酸塩誘導体等）、結合剤（例えば、前記の賦形剤；ゼラチン；ポリビニルピロリドン；マクロゴール等）、崩壊剤（例えば、前記の賦形剤；クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム、架橋ポリビニルピロリドンのような化学修飾された、デンプン、セルロース誘導体等）、滑沢剤（例えば、タルク；ステアリン酸；ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウムのようなステアリン酸金属塩；コロイドシリカ；ビーガム、ゲイロウのようなワックス類；硼酸；グリコール；フマル酸、アジピン酸のようなカルボン酸類；安息香酸ナトリウムのようなカルボン酸ナトリウム塩；硫酸ナトリウムのような硫酸類塩；ロイシン；ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸マグネシウムのようなラウリル硫酸塩；無水珪酸、珪酸水和物のような珪酸類；前記の賦形剤におけるデンプン誘導体等）、安定剤（例えば、メチルパラベン、プロピルパラベンのようなパラオキシ安息香酸エステル類；クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェニルエチルアルコールのようなアルコール類；塩化ベンザルコニウム；フェノール、クレゾールのようなフェノール類；チメロサール；無水酢酸；ソルビン酸等）、矯味矯臭剤（例えば、通常使用される、甘味料、酸味料、香料等）、懸濁化剤（例えば、ポリソルベート８０、カルボキシメチルセルロースナトリウム等）、希釈剤、製剤用溶剤（例えば、水、エタノール、グリセリン等）等の添加物を用いて周知の方法で製造される。
【００２７】
マンゴスチン果皮抽出物の投与量は、マンゴスチン果皮抽出物の精製状態、投与対象の年齢、体重、症状、並びに、投与形態および投与回数等によって異なる。例えば、上記表２に示されたマンゴスチン果皮抽出物を用いる場合、通常、成人（体重６０ｋｇ）に対して、１日当たり１０〜５０００ｍｇ、好ましくは５０〜５０００ｍｇ、より好ましくは１００〜５０００ｍｇ、より好ましくは１００〜４０００ｍｇ、より好ましくは１００〜３０００ｍｇ、より好ましくは１００〜２０００ｍｇ、より好ましくは１００〜１０００ｍｇ程度、より好ましくは１００〜５００ｍｇ程度であり、これを１回、または、数回に分けて投与するのが好ましい。
【実施例】
【００２８】
本発明を実施例に基づいて説明するが、本発明は、実施例にのみ限定されるものではない。
【００２９】
＜マンゴスチン果皮抽出物の調製＞
マンゴスチンの果皮を乾燥したもの（マンゴスチン乾燥果皮）を５ｍｍ〜２０ｍｍ角程度に粉砕し、その乾燥重量に対して、７倍量の熱水を加え、８０℃の条件下、２時間、抽出洗浄を行った。抽出洗浄後の混合物を濾過することにより、マンゴスチン果皮の抽出洗浄物を濾取した。
【００３０】
これに、元の乾燥重量に対して、１０倍量の含水エタノール（アルコール含量として５０質量％）を加え、４０℃の条件下、２４時間、抽出した。抽出後の混合物を濾過することにより、抽出液を得た。かかる抽出操作を、２回繰り返した。
【００３１】
各抽出操作で得られた抽出液（含水アルコールエキス）を合わせたのち、該抽出液から、減圧条件下、溶媒を留去して、濃縮物を得た。該濃縮物のブリックス値は３０％であった。なお、ブリックス値は、ブリックス屈折計（（株）アタゴ製の「ポケット糖度計ＰＡＬ−１」）により測定された値である。
【００３２】
該濃縮物を、さらに含水アルコール（アルコール含量として３０質量％）で再結晶し、得られた結晶を遠心分離し、乾燥することにより、マンゴスチン果皮抽出物を得た。該マンゴスチン果皮抽出物におけるα−マンゴスチンの含量は８４質量％、および、γ−マンゴスチンの含量は７質量％であった。
【００３３】
試験例１
＜アポＥノックアウト（ＡｐｏＥ−ＫＯ）マウス試験＞
上記で調製したマンゴスチン果皮抽出物を粉末飼料（「ＣＬＥＡ  Ｒｏｄｅｎｔ  Ｄｉｅｔ  ＣＥ−２」、日本クレア（株）から入手）中に混じ、アポＥノックアウトマウス（雄、７週齢）に自由摂取させた（投与群）。マンゴスチン果皮抽出物を混じた飼料としては、０．３質量％混じた飼料（０．３質量％含有飼料）と０．４質量％混じた飼料（０．４質量％含有飼料）の二種を用いた。対照群には飼料のみを与えた。なお、０．３質量％含有飼料を用いた場合は、投与群および対照群とも各群８匹のマウスを用いて実験を行った。一方、０．４質量％含有飼料を用いた場合は、投与群および対照群とも、各群６匹のマウスを用いて実験を行った。但し、０．４質量％含有飼料投与群（全６匹）のうち、１匹は不正咬合により死亡したため、そのデータは除外した。評価結果は、各群の平均値として示す。
【００３４】
＜総コレステロール値およびトリグリセライド値の測定＞
投与開始後、８週目および１７週目に、尾静脈より採血（前日夕刻より絶食）を行い、血漿中の総コレステロール値およびトリグリセライド（ＴＧ）値を測定した。
【００３５】
＜剖検＞
投与開始後１７週目に全生存動物を屠殺・剖検に付した。まず、動物を麻酔下にてリン酸緩衝生理食塩水で潅流し、放血・安楽死させた。その後、大動脈（上行大動脈〜大動脈弓〜下行大動脈）を摘出し、ホルマリン固定の後、内腔を暴露させ、動脈硬化病変をオイルレッドＯで染色し、実体顕微鏡下でデジタル撮影を行い、画像解析ソフトを用い、オイルレッドＯで陽性に染まった部位（動脈硬化巣）の面積を計測した。次に、肝臓について、脂肪肝の程度を見るために、肝臓の凍結切片を作製し、オイルレッドＯで染色し、顕微鏡を用いて観察した。
【００３６】
＜結果＞
（総コレステロール値およびＴＧ値）
結果を表３に示す。０．３質量％含有飼料投与群では、対照群に比べて、総コレステロール値が、８週目および１７週目でより低下していた。また、０．４質量％含有飼料群では、対照群に比べて、総コレステロール値およびトリグリセライド値が、８週目および１７週目でより低下していた。
【００３７】
【表３】
2017088588.tif 000005
【００３８】
（動脈内腔のオイルレッドＯ染色）
結果を図１および図２に示す。０．３質量％含有飼料投与群（０．３％ ＭＧ抽出物）では、対照群（コントロール）に比較して、オイルレッドＯにて赤く染まった動脈硬化巣は少ない傾向にあった（図１）。０．４質量％含有飼料投与群（０．４％ ＭＧ抽出物）では、対照群（コントロール）に比較して、動脈硬化巣はさらに少ない傾向にあった（図２）。
【００３９】
次に、動脈内腔の全面積に対する染色された動脈硬化病変の面積の比率を算出した。結果を表４に示す。動脈硬化病変の面積率は、二つの投与群において、対照群に比較し抑制されていた。
【００４０】
【表４】
2017088588.tif 000006
【００４１】
更に、マウス１匹当たりの動脈硬化病変の数、および、該動脈硬化病変を、初期病変、進行性病変、複合病変に分類し、それぞれの数を数えた。ここで、初期病変、進行性病変および複合病変は、それぞれ独立に定義されるものであるため、重複してカウントされることはない。また、これら病変は、初期病変、進行性病変、そして複合病変へと進展するものであり、最終的には、複合病変の破綻により、脳梗塞や心筋梗塞が発症する。結果を表５に示す。マウス１匹当たりの動脈硬化病変の数は、いずれの分類においても、二つの投与群において、対照群との比較でより減少していた。
【００４２】
【表５】
2017088588.tif 000007
【００４３】
（肝凍結切片のオイルレッドＯ染色）
結果を図３および図４に示す。肝細胞内の溜まった脂肪はオイルレッドＯ染色により陽性に赤く染まる。０．３質量％含有飼料投与群（０．３％ ＭＧ抽出物）では強陽性を示すものは１例も観察されなかったが、その対照群（コントロール）では８例中の５例が強陽性を示した（図３）。また、０．４質量％含有飼料投与群（０．４％ ＭＧ抽出物）では５例中の１例が強陽性を示すにすぎなかったが、その対照群（コントロール）では６例中の５例が強陽性を示した（図４）。
【００４４】
（その他）
実験期間中、投与群では、対照群に比較して、体重増加の抑制が観察された。その程度は、０．３質量％含有飼料投与群では７〜９％の減少であり、０．４質量％含有飼料投与群では１１〜１９％減少であった。但し、マウスの一般状態は極めて良好であった。
【産業上の利用可能性】
【００４５】
本発明によれば、マンゴスチン果皮抽出物を活性成分として含んでなる動脈硬化症、心血管疾患、脳血管疾患および脂肪肝の予防・治療剤を提供することができる。
【図１】
2017088588.tif 000008
【図２】
2017088588.tif 000009
【図３】
2017088588.tif 000010
【図４】
2017088588.tif 000011