(57)【要約】【課題】ＧｌｃＮの投与量に対する、糖質摂取量・体重変化量・副作用の発症率等の関係を明らかにし、ごく短期間で体重の減少を繰り返しもたらすと共に、下痢や腹部膨満感などの消化器系の副作用をも改善させる、ＧｌｃＮを用いたより再現性・安全性に優れた抗肥満活性の誘導方法を提供する。【解決手段】現時点で許容し得る糖質摂取量（Ｉｏｇ／重量ｇ）、作用限界係数（Ｅｍａｘ／１０3±１００）、現時点で許容し得るＧｌｃＮの経口投与量（Ｄｐｏ／重量ｇ）、現時点での使用者の体重（Ｘ／重量ｋｇ）、投与限界定数（０．３）、最後の排便時間から現在時間までのＧｌｃＮの累計投与量（Ｅｔ／重量ｇ）、の各値が下記の数式の関係にある事により、前記課題を解決させる事を特徴とする。2017124988.tif 000013【選択図】図１
2017124988.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
現時点で許容し得る糖質摂取量（記号／Ｉｏｇ、単位／重量ｇ）、作用限界係数（記号／Ｅｍａｘ、数量／１０3±１００）、現時点で許容し得るＧｌｃＮの経口投与量（記号／Ｄｐｏ、単位／重量ｇ）、現時点での使用者の体重（記号／Ｘ、単位／重量ｋｇ）、の各値が下記の数１の関係にある事を特徴とした、ＧｌｃＮを用いた抗肥満活性の誘導方法。
【数１】
2017124988.tif 000008
【請求項２】
現時点で許容し得るＧｌｃＮの経口投与量（記号／Ｄｐｏ、単位／重量ｇ）、現時点での使用者の体重（記号／Ｘ、単位／重量ｋｇ）、現時点で許容し得る糖質摂取量（記号／Ｉｏｇ、単位／重量ｇ）、作用限界係数（記号／Ｅｍａｘ、数量／１０3±１００）、の各値が下記の数２の関係にある事を特徴とした、ＧｌｃＮを用いた抗肥満活性の誘導方法。
【数２】
2017124988.tif 000009
【請求項３】
投与限界定数（数量／０.３）、現時点で許容し得るＧｌｃＮの経口投与量（記号／Ｄｐｏ、単位／重量ｇ）、最後の排便時間から現在時間までのＧｌｃＮの累計投与量（記号／Ｅｔ、単位／重量ｇ）、現時点での使用者の体重（記号／Ｘ、単位／重量ｋｇ）、の各値が下記の数３の関係にある事を特徴とした、ＧｌｃＮを用いた抗肥満活性の誘導方法。
【数３】
2017124988.tif 000010
【請求項４】
現時点で許容し得る糖質摂取量（記号／Ｉｏｇ、単位／重量ｇ）、作用限界係数（記号／Ｅｍａｘ、数量／１０3±１００）、現時点で許容し得るＧｌｃＮの経口投与量（記号／Ｄｐｏ、単位／重量ｇ）、現時点での使用者の体重（記号／Ｘ、単位／重量ｋｇ）、投与限界定数（数量／０.３）、最後の排便時間から現在時間までのＧｌｃＮの累計投与量（記号／Ｅｔ、単位／重量ｇ）、の各値が下記の数４の関係にある事を特徴とした、ＧｌｃＮを用いた抗肥満活性の誘導方法。
【数４】
2017124988.tif 000011
【請求項５】
投与限界定数（数量／０.３）、最後の排便時間から現在時間までのＧｌｃＮの累計投与量（記号／Ｅｔ、単位／重量ｇ）、現時点での使用者の体重（記号／Ｘ、単位／重量ｋｇ）、現時点で許容し得るＧｌｃＮの経口投与量（記号／Ｄｐｏ、単位／重量ｇ）、現時点で許容し得る糖質摂取量（記号／Ｉｏｇ、単位／重量ｇ）、作用限界係数（記号／Ｅｍａｘ、数量／１０3±１００）、の各値が下記の数５の関係にある事を特徴とした、ＧｌｃＮを用いた抗肥満活性の誘導方法。
【数５】
2017124988.tif 000012
【請求項６】
生理的に許容される以下の塩類（金属塩・鉱酸塩・有機アミン塩・有機酸塩・アミノ酸塩）から選択される、少なくとも一つ以上の塩からなるＧｌｃＮ誘導体を用いる事を特徴とした、請求項１・２・３・４・５記載の抗肥満活性の誘導方法。
【請求項７】
前記塩類の内で以下の塩（アルカリ金属塩・アルカリ土類金属塩・塩酸塩・硫酸塩・硝酸塩・アンモニウム塩・トリ低級アルキルアミン塩・コハク酸塩・マレイン酸塩・酒石酸塩・メタルスルホン酸塩・アスパラギン酸塩）から選択される、少なくとも一つ以上の塩からなるＧｌｃＮ誘導体を用いる事を特徴とした、請求項１・２・３・４・５記載の抗肥満活性の誘導方法。
【請求項８】
Ｎ−アセチル−２−アミノ−２−デオキシ−Ｄ−グルコース（ＧｌｃＮＡｃ）を用いる事を特徴とした、請求項１・２・３・４・５記載の抗肥満活性の誘導方法。 
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、２−アミノ−２−デオキシ−Ｄ−グルコース（以下、ＧｌｃＮと略す）を、抗肥満用の医薬品として用いる上で要求される、再現性・安全性に優れた使用方法を提供する事に関するものである。 
【背景技術】
【０００２】
日本国内では食習慣の欧米化に伴い、ＢＭＩが２５以上の肥満者の人口比率が年々増加しており、公益財団法人生命保険文化センターのＷｅｂページに記載されている、「厚生労働省（国民健康・栄養調査結果の概要）ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｊｉｌｉ．ｏｒ．ｊｐ／ｌｉｆｅｐｌａｎ／ｒｉｃｈ／ｈｅａｌｔｈ／２．ｈｔｍｌ」によると、昭和５１年で１５％程度であった男性肥満者数は、平成２３年では３０．３％にまで上昇している。但し女性の肥満者数は、昭和５１年で２０％前半であったものが、平成２３年においても２１．５％とほぼ横ばい傾向にある。
【０００３】
世界各国の肥満者の人口比率については、以下の通りである。社会実情データ図録というｗｅｂサイトに記載されている、「肥満比率の各国比較（ＯＥＣＤ諸国、２０１０年までの最新年）ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ２．ｔｔｃｎ．ｎｅ．ｊｐ／ｈｏｎｋａｗａ／２２２０．ｈｔｍｌ」によると、ＢＭＩが３０以上の肥満者の人口比率（測定値）が、１０％未満の国は日本・韓国・スイスの３ケ国、２０％未満の国はノルウェー・イタリア・オランダ・スロバキア・オーストリア・フランス・スウェーデン・デンマーク・ベルギー・ドイツ・ポルトガル・ポーランド・イスラエル・スペイン・スロベニア・エストニア・トルコ・ギリシャの１８カ国、３０％未満の国はフィンランド・チェコ・ルクセンブルク・アイルランド・カナダ・オーストラリア・チリ・イギリス・ニュージーランド・ハンガリー・アイスランドの１１カ国、４０％未満の国はメキシコ・アメリカの２カ国である。
【０００４】
但しこの各国肥満者の人口比率は、ＢＭＩが３０以上の肥満者が対象であり、ＢＭＩが２５以上を肥満者とする事が多い日本の基準から見れば、これ以上の肥満者が存在する事が予想される。
【０００５】
ワシントン大学健康指針評価研究所（ＩＨＭＥ）が、世界１８８ケ国を対象にした「世界肥満実態（ＧＢＤ）調査ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｈｅａｌｔｈｄａｔａ．ｏｒｇ／ｎｅｗｓ−ｒｅｌｅａｓｅ／ｎｅａｒｌｙ−ｏｎｅ−ｔｈｉｒｄ−ｗｏｒｌｄ％Ｅ２％８０％９９ｓ−ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ−ｏｂｅｓｅ−ｏｒ−ｏｖｅｒｗｅｉｇｈｔ−ｎｅｗ−ｄａｔａ−ｓｈｏｗ」によると、世界人口の１／３が肥満者であると報告されており、肥満を要因とした糖尿病・心臓病・脳血管障害・癌などの生活習慣病や健康上の問題が、当人のリスクとしてだけでなく、間接的に医療費の増加や生産性の減少などの社会的損失として認知される様になり、深刻な社会問題になっている。
【０００６】
然し、この様な社会的情勢にありながら、肥満を予防・改善し得る確実な技術的手段として、世界各国で承認され、或いは現実に処方されている肥満治療薬の数は極めて少ないのが現状である。また、それら治療薬に特有な技術的な問題点が、肥満者や肥満を懸念する一般大衆への薬物療法の普及を阻んでいる。以下に各国で現在承認されている肥満治療薬の作用・効果・安全性、その問題点を検討する。
【０００７】
非特許文献１に記載のマジンドールは、海外で認可された肥満症患者に対する国内初の抗肥満承認薬である。その作用は、食欲中枢を司る視床下部への直接作用、及びシナプス端末においてノルエピネフリン（ＮＥ）・ドーパミン（ＤＡ）・セロトニン（５−ＨＴ）の再吸収を阻害する事により、食欲を抑制するというものである。その効果は、肥満症の被験者２３３人を対象とした１２週間にわたる二重盲検試験において、マジンドール投与群の体重減少量が４．２ｋｇであったのに対して、プラセボ投与群の体重減少量は１．２ｋｇに留まった事から、マジンドール投与群が有意との結果が示されている。然し、マジンドールの作用が食欲の抑制という形態である以上、その作用のみをもって体重を減少させる事は難しく、非特許文献２の治験データにおいても示されるように、結局は食事療法の補助にしかならないという点に問題が残る。さらに当該治験に示される効果そのものが弱いため、体重の減少に長期間を要する点や、頭痛・睡眠障害・脱力感・眠気・倦怠感・イライラ感などの精神神経系の副作用や、悪心・嘔吐・胃部不快感・腹部膨満感などの消化器系の副作用、及び目眩・動悸などの循環器系の副作用が報告されており、特に口渇・便秘・口中のにがみ感などの副作用が高い頻度で発症する点や、長期投与による依存性が懸念される事から投与期間が３ヶ月までと定められている等の問題点がある。
【０００８】
非特許文献３に記載のシブトラミンは、海外で認可された肥満症患者に対する国内未承認の抗肥満薬である。その作用は、食欲中枢を司る視床下部から投射されるシナプス端末において、ＮＥ・ＤＡ・５−ＨＴの再吸収を阻害する事により、食欲を抑制するというものである。その効果は、肥満症の被験者３４２人を対象とした５２週間にわたる二重盲検試験において、シブトラミン投与群の体重が５．００％減少したのに対して、プラセボ投与群の体重は１．９７％の減少に留まった事から、シブトラミン投与群が有意との結果が示されている。然し、シブトラミンの作用が食欲の抑制という形態である以上、その作用のみをもって体重を減少させる事は難しく、非特許文献４の治験データにおいても示されるように、結局は食事療法の補助にしかならないという点に問題が残る。さらに当該治験に示される効果そのものが弱いため、体重の減少に長期間を要する点や、便秘・口内乾燥・心拍数増加・高血圧・動悸・頻脈などの副作用があり、市販後の調査で心血管性の有害事象が報告されたため、一部の国では使用が禁止されている等の問題点がある。
【０００９】
非特許文献５に記載のオルリスタットは、海外で認可された肥満症患者に対する国内未承認の抗肥満薬である。その作用は、消化管内におけるトリアシルグリセロールリパーゼ（ＴＧＬ）のセリン残基と共有結合する事により、食事に含まれるトリアシルグリセロール（ＴＧ）の加水分解を阻害し、その吸収を３０％ほど抑制するというものである。その効果は、肥満に関連した病気の危険性をはらむ４，２００人の被験者を対象とした、２年間にわたる二重盲検試験において、オルリスタット投与群の内で無作為抽出された、５％以上の体重減少が見られた被験者の割合は、それぞれ４５．１％・４３．３％・２５．０％・３４．０％であり、１０％以上の体重減少では２４．８％１８．０％・１６．９％１７．７％であった。これに対してプラセボ投与群の内で無作為抽出された、５％以上の体重減少が見られた被験者の割合は、それぞれ２３．６％・２７．２％・１５．０％・２７．９％に留まり、１０％以上の体重減少においても６．５％・９．５％・３．５％・１１．５％に留まった事から、オルリスタット投与群が有意との結果が示されている。然し、オルリスタットの作用がＴＧの吸収を一部抑制するというだけでは、エネルギー摂取量の低下に伴う生体防御反応（エネルギー消費量の低下・体温の低下・心拍数の低下・代謝速度の低下など）を招いてしまい、継続的に体重を減少させるのが難しくなる事から、非特許文献４の治験データにおいても示されるように、結局は継続的な食事療法を必要とするという点に問題が残る。さらに当該治験に示される効果そのものが弱いため、体重の減少に長期間を要する点や、下痢・脂肪便・便失禁などの消化器系の副作用が顕著に発生するほか、重篤な肝機能障害が報告されている等の問題点がある。
【００１０】
非特許文献６に記載のセチリスタットは、海外に先んじて認可された肥満症患者に対する国内で２例目となる抗肥満承認薬である。その作用は、消化管内においてＴＧＬと共有結合する事により、食事に含まれるＴＧの加水分解を阻害し、その吸収を抑制するというものである。その効果は、２型糖尿病及び脂質異常症を合併する肥満症患者２０６人を対象とした、５２週間にわたる二重盲検試験において、セチリスタット投与群の体重変化率が−２．７８±３．８０％であったのに対して、プラセボ投与群の体重減少率は−１．１０±２．９９％に留まった事から、セチリスタット投与群が有意との結果が示されている。然し、セチリスタットの作用がＴＧの吸収を抑制するというだけでは、エネルギー摂取量の低下に伴う生体防御反応（エネルギー消費量の低下・体温の低下・心拍数の低下・代謝速度の低下など）を招いてしまい、継続的に体重を減少させるのが難しくなる事から非特許文献７の治験データにおいても示されるように、結局は継続的な食事療法を必要とするという点に問題が残る。さらに当該治験に示される効果そのものが弱いため、体重の減少に長期間を要する点や、下痢・脂肪便・便失禁などの消化器系の副作用が顕著に発生するほか、重篤な肝機能障害が発生する恐れがある等の問題点がある。
【００１１】
特許文献１は、関節痛や関節炎の症状を緩和させる事を目的に、世界中で広くサプリメントとして摂取されているＧｌｃＮを、肥満・糖尿病・高血圧症の改善に用いたものである。当該文献には作用機序は記載されていないが、ＢＭＩが２６．４以上の肥満症の被験者１０人を対象とした３ケ月にわたる実施例が記載されている。それによると、ＧｌｃＮを投与した１０人の被験者のＢＭＩの平均値が、試験開始前のＢＭＩの平均値より３．０％減少した事から、ＧｌｃＮによる体重減少の効果が示されている。然し、当該実施例においてはプラセボ投与による対象群が示されていないため、ＧｌｃＮ投与による効果の有意性が判然としないばかりか、ＧｌｃＮ投与に際してオリゴ糖・ヨーグルトパウダー・還元麦芽糖・ビール酵母による組成物を用いているため、当該実施例の効果がこれら要因である可能性を排除できない等の問題点が残る。さらに当該実施例に示される効果そのものが弱いため、体重の減少に長期間を要する等の問題点がある。また、当該実施例には血糖値を低下させる効果が示されている事から、当該発明の作用機序が特許文献２における作用機序と同一でない事は明白である。なお、当該文献には副作用等の問題点は記載されていない。
【００１２】
特許文献２は本件発明者が過去に出願した文献で、ＧｌｃＮを肥満の予防や改善に用いたものである。その作用は、筋肉及び脂肪細胞膜におけるグルコース（Ｇｌｃ）の取り込みを、インスリンによるシグナル伝達経路の段階で阻害すると共に、グルコーストランスポーター４（ＧＬＵＴ４）のトランスロケーションの段階で阻害するというものである。その効果は、肥満症の被験者６人を対象とした２１日間にわたる二重盲検試験において、肥満の予防試験グループの内でプラセボを投与した被験者の体重は１．１ｋｇ体脂肪率にして０．８％増加したのに対して、先行技術の有効量を投与した被験者の体重は１．６ｋｇ体脂肪率にして１．３％増加し、当該発明の有効量を投与した被験者の体重は０．４ｋｇ体脂肪率にして０．３％の増加に留まった事から、当該発明が有意であるとの結果が示された。また、肥満の改善試験グループの内で、当該発明の有効量を投与した被験者の体重は２．９ｋｇ体脂肪率にして２．１％減少したのに対して、先行技術の有効量を投与した被験者の体重は０．９ｋｇ体脂肪率にして０．５％減少し、プラセボを投与した被験者の体重は１．３ｋｇ体脂肪率にして０．９％の減少に留まった事から、当該発明が有意であるとの結果が示された。然し、当該発明においてはＧｌｃＮの糖質に対する閾値が示されていないため、ＧｌｃＮの投与量に過不足が生じてしまい、時に効果を得るまで期間を要したり、時に効果を得られなかったり、時に下痢や腹部膨満感などの消化器系の副作用が発症する等の問題点が残っていた。また、当該発明にはその作用機序の性質上、血糖値を上昇させる副作用があるため、長期間にわたる投与や、糖尿病患者に投与した場合に症状を悪化させる危険性がある等の問題点がある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１３】
【特許文献１】特開２００２−１５４９６９号公報
【特許文献２】特開２００９−２０９１４１号公報
【非特許文献】
【００１４】
【非特許文献１】ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｊｓｔａｇｅ．ｊｓｔ．ｇｏ．ｊｐ／ａｒｔｉｃｌｅ／ｎａｉｋａ１９１３／８４／８／８４＿８＿１２９０／＿ｐｄｆ
【非特許文献２】ｈｔｔｐ：／／ｏｎｌｉｎｅｌｉｂｒａｒｙ．ｗｉｌｅｙ．ｃｏｍ／ｄｏｉ／１０．１００２／ｊ．１５５０−８５２８．１９９５．ｔｂ００２２６．ｘ／ｐｄｆ
【非特許文献３】ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｅｉｓａｉ．ｃｏ．ｊｐ／ｎｅｗｓ／ｎｅｗｓ２００７４６ｐｄｆ．ｐｄｆ
【非特許文献４】ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｊｓｔａｇｅ．ｊｓｔ．ｇｏ．ｊｐ／ａｒｔｉｃｌｅ／ｔｊｅｍ／２０２／３／２０２＿３＿１７３／＿ｐｄｆ
【非特許文献５】ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｍｅｌａｔｏｎｉｎｕｓａ．ｃｏｍ／ｉｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ／ＸＥＮＩＣＡＬ．ｐｄｆ
【非特許文献６】ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｉｎｆｏ．ｐｍｄａ．ｇｏ．ｊｐ／ｄｏｗｎｆｉｌｅｓ／ｐｈ／ＰＤＦ／４００２５６＿３９９９０５ＸＦ１０２１＿１＿０１．ｐｄｆ
【非特許文献７】ｈｔｔｐ：／／ｏｎｌｉｎｅｌｉｂｒａｒｙ．ｗｉｌｅｙ．ｃｏｍ／ｄｏｉ／１０．１０３８／ｏｂｙ．２００９．１５５／ｐｄｆ
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
本発明における課題は、ＧｌｃＮの投与量に対する糖質（本発明における糖質とは、ヒトを含む哺乳動物の各々の種における消化吸収可能な炭水化物の事を指す）の摂取量・体重の変化量・副作用の発症率等の関係を明らかにし、ごく短期間で体重の減少を繰り返しもたらすと共に、下痢や腹部膨満感などの消化器系の副作用をも改善させる、ＧｌｃＮを用いたより再現性・安全性に優れた抗肥満活性の誘導方法を提供する事にある。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
現時点で許容し得る糖質摂取量(記号／Ｉｏｇ、単位／重量ｇ)、作用限界係数(記号／Ｅｍａｘ、数量／１０3±１００）、現時点で許容し得るＧｌｃＮの経口投与量（記号／Ｄｐｏ、単位／重量ｇ）、現時点での使用者の体重（記号／Ｘ、単位／重量ｋｇ）、の各値が下記の数１の関係にある事により、前記課題であるより優れた再現性を実現する。
【数１】
2017124988.tif 000003
【００１７】
現時点で許容し得るＧｌｃＮの経口投与量（記号／Ｄｐｏ、単位／重量ｇ）、現時点での使用者の体重（記号／Ｘ、単位／重量ｋｇ）、現時点で許容し得る糖質摂取量（記号／Ｉｏｇ、単位／重量ｇ）、作用限界係数（記号／Ｅｍａｘ、数量／１０3±１００）、の各値が下記の数２の関係にある事により、前期課題であるより優れた再現性を実現する。
【数２】
2017124988.tif 000004
【００１８】
投与限界定数（数量／０．３）、現時点で許容し得るＧｌｃＮの経口投与量（記号／Ｄｐｏ、単位／重量ｇ）、最後の排便時間から現在時間までのＧｌｃＮの累計投与量（記号／Ｅｔ、単位／重量ｇ）、現時点での使用者の体重（記号／Ｘ、単位／重量ｋｇ）、の各値が下記の数３の関係にある事により、前期課題であるより優れた安全性を実現する。
【数３】
2017124988.tif 000005
【００１９】
現時点で許容し得る糖質摂取量(記号／Ｉｏｇ、単位／重量ｇ）、作用限界係数（記号／Ｅｍａｘ、数量／１０3±１００）、現時点で許容し得るＧｌｃＮの経口投与量（記号／Ｄｐｏ、単位／重量ｇ）、現時点での使用者の体重（記号／Ｘ、単位／重量ｋｇ）、投与限界定数（数量／０．３）、最後の排便時間から現在時間までのＧｌｃＮの累計投与量（記号／Ｅｔ、単位／重量ｇ）、の各値が下記の数４の関係にある事により、前期課題であるより優れた再現性・安全性を実現する。
【数４】
2017124988.tif 000006
【００２０】
投与限界定数（数量／０．３）、最後の排便時間から現在時間までのＧｌｃＮの累計投与量（記号／Ｅｔ、単位／重量ｇ）、現時点での使用者の体重（記号／Ｘ、単位／重量ｋｇ）、現時点で許容し得るＧｌｃＮの経口投与量（記号／Ｄｐｏ、単位／重量ｇ）、現時点で許容し得る糖質摂取量（記号／Ｉｏｇ、単位／重量ｇ）、作用限界係数（記号／Ｅｍａｘ、数量／１０3±１００）、の各値が下記の数５の関係にある事により、前記課題であるより優れた再現性・安全性を実現する。
【数５】
2017124988.tif 000007
【００２１】
生理的に許容される以下の塩類（金属塩・鉱酸塩・有機アミン塩・有機酸塩・アミノ酸塩）から選択される、少なくとも一つ以上の塩からなるＧｌｃＮ誘導体を用いた、００１６・００１７・００１８・００１９・００２０記載の方法により、前記課題であるより優れた再現性・安全性を実現する。
【００２２】
前記塩類の内で以下の塩（アルカリ金属塩・アルカリ土類金属塩・塩酸塩・硫酸塩・硝酸塩・アンモニウム塩・トリ低級アルキルアミン塩・コハク酸塩・マレイン酸塩・酒石酸塩・メタルスルホン酸塩・アスパラギン酸塩）から選択される、少なくとも一つ以上の塩からなるＧｌｃＮ誘導体を用いた、００１６・００１７・００１８・００１９・００２０記載の方法により、前記課題であるより優れた再現性・安全性を実現する。
【００２３】
Ｎ−アセチル−２−アミノ−２−デオキシ−Ｄ−グルコース（ＧｌｃＮＡｃ）を用いた、００１６．００１７・００１８・００１９・００２０記載の方法により、前記課題であるより優れた再現性・安全性を実現する。
【発明の効果】
【００２４】
本発明における効果は、ＧｌｃＮの投与量に対する糖質摂取量・体重変化量・副作用の発症率等の関係が明らかになる事により、ごく短期間で体重の減少を繰り返しもたらすと共に、下痢や腹部膨満感などの消化器系の副作用をも改善させる、ＧｌｃＮを用いたより再現性・安全性に優れた抗肥満活性の誘導方法を提供できる事にある。
【図面の簡単な説明】
【００２５】
【図１】本発明に関わるＧｌｃＮの投与量・糖質摂取量・体重の変化量の関係を表した折れ線グラフである。
【図２】本発明に関わるＧｌｃＮの投与量・副作用の発症率・投与方法の関係を表した棒グラフである。
【図３】本発明に関わるＧｌｃＮの作用機序や糖質及び脂質の代謝経路を表したフローチャートである。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
以下、本発明の実施の形態を図面に基づき詳細に説明する。
【００２７】
図３は本発明の実施の形態に関わり、ＧｌｃＮの作用機序を表すフローチャートである。
【００２８】
筋肉・脂肪細胞膜におけるグルコースの輸送は、通常図３で示すような代謝経路を経る事で達成される。即ち、インスリン（図３の１０）が特定の膜受容体（図３の８）に結合すると、チロシンキナーゼが活性化してＩＲＳのチロシン残基がリン酸化される。リン酸化されたＩＲＳにＰＩ３−キナーゼやＧｒｂ２・ＳＯＳ複合体が結合し、ＰＩ３−キナーゼが活性化される。活性化されたＰＩ３−キナーゼによってホスホイノシチドが増加し、ＰＫＢ／ＡＫＴやＰＤＫ−１に結合する。ホスホイノシチドの結合によりＰＤＫ−１は細胞膜（図３の５）へ移動し、ＰＫＢ／ＡＫＴのセリン及びスレオニン残基をリン酸化する。リン酸化により活性化されたＰＫＢ／ＡＫＴは、細胞膜を離れて複数のタンパク質（ＡＳ１６０など）のセリン及びスレオニン残基をリン酸化する。リン酸化されたタンパク質により、ＧＬＵＴ４小胞（図３の１３）が細胞膜へトランスロケーションし、細胞膜と融合してＧＬＵＴ４（図３の９）を形成する。斯くして細胞内へのグルコース（図３の１４）の輸送が達成される。
【００２９】
本発明に関わるインスリンによるシグナル伝達経路を、ＰＫＢ／ＡＫＴの段階（図３の１１）においてリン酸化される複数のタンパク質（ＡＳ１６０など）の、セリン及びスレオニン残基の水酸基或いはその近傍への、ＧｌｃＮＡｃのΟ−グリコシド結合によって阻害させる。
【００３０】
本発明に関わるＧＬＵＴ４小胞のトランスロケーションを、複数のタンパク質の段階（図３の１２）においてリン酸化されるＧＬＵＴ４小胞の、セリン及びスレオニン残基の水酸基或いはその近傍への、ＧｌｃＮＡｃのΟ−グリコシド結合によって阻害させる。
【００３１】
なお、ＧｌｃＮ及びその誘導体も投与後の生体内においてＮ−アセチル化されるため、前述の作用機序に準ずる。
【００３２】
以上の様に本発明によれば、筋肉・脂肪細胞膜におけるグルコースの輸送をＧｌｃＮやその誘導体及びＧｌｃＮＡｃを用いて阻害する事により、食事・筋肉・肝臓由来のグルコース（図３の１４）からはグルコース６−リン酸→フルクトース６−リン酸→フルクトース１，６−ビスリン酸の生成、ジヒドロキシアセトンリン酸からはグリセロール３−リン酸の生成、グリセルアルデヒド３−リン酸からは１，３−ビスホスホグリセリン酸→３−ホスホグリセリン酸→２−ホスホグリセリン酸→ホスホエノールピルビン酸→ピルビン酸→アセチル−ＣｏＡ又はオキサロ酢酸→クエン酸→アセチル−ＣｏＡ→マロニル−ＣｏＡ→パルミチン酸→パルミチル−ＣｏＡ→アシル−ＣｏＡが生成される事を阻害し、引いてはこれら脂質のエステル化による１−アシルグリセロール３−リン酸→１，２−ジアシルグリセロールリン酸→１，２−ジアシルグリセロール→トリアシルグリセロールの合成を阻害する事ができる。
【００３３】
またケトン体や遊離脂肪酸の増加によって節約（脂質代謝のフィードバック調節）されたグルコース（図３の１４）や、アミノ酸からの糖新生によるグルコース（図３の１４）、及び血中グリセロール（図３の１５）からの糖新生（脂質代謝のフィードック調節）による、グリセロール３−リン酸→ジヒドロキシアセトンリン酸→フルクトース１，６−ビスリン酸→フルクトース６−リン酸→グルコース６−リン酸→グルコース（図３の１４）などの、血中グルコースからの脂質の再エステル化を阻害する事ができる。
【００３４】
このように血中グルコース（図３の１４）からの脂質のエステル化又は再エステル化が阻害される事により、反対にトリアシルグリセロールから１，２−ジアシルグリセロール→１，２−ジアシルグリセロールリン酸→１−アシルグリセロール３−リン酸の分解が促進され、さらにアシル−ＣｏＡからはパルミチル−ＣｏＡ→パルミチン酸→マロニル−ＣｏＡ→アセチル−ＣｏＡが生成され、グリセロール３−リン酸からはジヒドロキシアセトンリン酸→グリセルアルデヒド３−リン酸→１，３−ビスホスホグリセリン酸→３−ホスホグリセリン酸→２−ホスホグリセリン酸→ホスホエノールピルビン酸→ピルビン酸→オキサロ酢酸が生成されるに至り、これら脂質のクエン酸回路における酸化を促進させて体重を減少させる事ができる。
【００３５】
以上、ＧｌｃＮの作用機序について図面を用いて説明したが、実際に体重減少を誘導する有効量については特許請求の範囲に記載した通りである。またＧｌｃＮのＬＤ５０については「書名／最新版からだに効く栄養成分バイブル 著者／中村丁次 発行／主婦と生活社」に記載されたラットを用いた実験により、体重１ｋｇあたり５ｇである事が確認されている。本発明の投与量は最大でも体重１ｋｇあたり０．３ｇを越える事はない（消化器系の副作用を考慮しない場合は除く）が、安全係数としてＬＤ５０の１／１０以下での投与が好ましい。
【００３６】
ＧｌｃＮの投与方法については、既に医薬品やサプリメントとしてヒトにおける経口投与が一般的に実施されており、固体・粉体・液体などで直接的に経口投与するか、熱に強く加工が容易な性質から、様々な食品・飲料・甘味料などの組成物として経口投与するのが、簡易で理想的な実施形態と言える。但し、ＧｌｃＮ誘導体においては９０℃以上の加熱で風味が損なわれる性質があるため、組成物を製造する際には注意が必要である。
【００３７】
因みに、作用機序は明らかではないが、クエン酸には体重減少が停滞した際に投与すると、再び体重が減少に転じる効果が見られ、これは脂質の摂取量を制限した場合も同様であり、共にＧｌｃＮの持つ抗肥満作用の補助として用いる事ができる。またクエン酸の投与量については、１日あたり０．０３〜０．０６ｇ／体重１ｋｇ程度の投与が好ましく、脂質の摂取量については、糖質摂取量の３０％（重量比率）以下での摂取が好ましい。なお、クエン酸のＬＤ５０については「健栄製薬株式会社 製品安全データシート クエン酸水和物ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｋｅｎｅｉ−ｐｈａｒｍ．ｃｏｍ／ｆｉｌｅ／ｄｏｃｔｏｒ＿ｐｒｏ／ｓａｆｅｔｙ１２９１８８２５５８．ｐｄｆ」に記載されたラットを用いた実験により、６．７３ｇ／体重１ｋｇである事が確認されている。本件の投与量は最大でも０．０６ｇ／体重１ｋｇを越える事はないが、安全係数としてＬＤ５０の１／１０以下での投与が好ましい。
【００３８】
クエン酸の投与方法については、既に食品やサプリメントとしてヒトにおける経口投与が一般的に実施されており、固体・粉体・液体などで直接的に経口投与するか、熱に強く加工が容易な性質から、様々な食品・飲料・甘味料などの組成物として経口投与するのが、簡易で理想的な実施形態と言える。 
【実施例１】
【００３９】
作用効果の試験を実施するのは、ＢＭＩの平均が２９．１％の持病のない肥満症の被験者２５名を対象とした。１回の試験期間は７日間とし、各試験間のインターバルを７日間とする事により、計５１回（有効４０回）のべ１７１日間にわたる二重盲検試験を実施した。各試験は被験者を５名づつＡ・Ｂ・Ｃ・Ｄ・Ｅの５つのグループに分けて実施し、グループＡにはプラセボを投与する試験を１日あたりの糖質摂取量（５０ｇ毎）ごとにランダムに実施した。グループＢにはＧｌｃＮを１日あたり０．１ｇ／体重１ｋｇ投与する試験を、１日あたりの糖質摂取量（５０ｇ毎）ごとにランダムに実施した。グループＣにはＧｌｃＮを１日あたり０．２ｇ／体重１ｋｇ投与する試験を、１日あたりの糖質摂取量（５０ｇ毎）ごとにランダムに実施した。グループＤにはＧｌｃＮを１日あたり０．３ｇ／体重１ｋｇ投与する試験を、１日あたりの糖質摂取量（５０ｇ毎）ごとにランダムに実施した。グループＥにはＧｌｃＮを１日あたり０．４ｇ／体重１ｋｇ投与する試験を、１日あたりの糖質摂取量（５０ｇ毎）ごとにランダムに実施した。なお、脂質の摂取量については糖質摂取量の３０％（重量比率）以下での摂取制限を全ての試験で実施し、糖質及び脂質の摂取量の誤差は±１０％（重量比率）未満とした。また、被験者には各試験期間中における運動を一切禁止したが、日常の生活行動については原則自由とした。インターバル間の食事・運動・生活行動については原則自由とし、急な怪我や病気などで必要な場合は除き、不要な薬剤やサプリメント等は一切投与しなかった。試験に用いたＧｌｃＮは、株式会社ヘルシーベストが販売する純度９９．５％以上の植物性粉末を使用し、プラセボには試薬と風味を似せるため、アスパルテームと塩化マグネシウムを適量使用した。投与方法については、ＧｌｃＮ又はプラセボが入った水溶液を各試験の前に協力者（各被験者の家族）に預け、被験者が食事をする度に３０分以内に経口投与する様に指示した。この際、被験者にも協力者にも水溶液の中身については一切伝えなかった。食事は原則的に栄養成分の記載のある調理済みの食品を必要量提供したが、被験者の要望により、栄養成分の記載のない食品を摂取させる場合には、「書名／２０１２食品標準成分表 編集／社団法人全国調理師養成施設協会 発行／株式会社調理栄養教育公社」を参考にした。体重の計測については、オムロンヘルスケア株式会社の体重体組成計、ＫａｒａｄａＳｃａｎ［登録商標］ＨＢＦ−３７５［商品名］を使用し、各試験の初日の朝食前と７日後の朝食前の空腸時に被験者を集めて測定した。なお、急な病気や試薬の飲み忘れ、又は被験者の都合等により試験が実施できなかった回は、当該グループ内の他の被験者の試験結果も含めて無効とした。
【００４０】
図１は前記試験結果をＧｌｃＮの投与量・糖質摂取量・体重の変化量の関係として表した折れ線グラフである。グラフの縦軸は１日あたりの平均体重変化量（単位／重量ｋｇ）を表し、グラフの横軸は１日あたりの糖質摂取量（単位／重量ｇ）を表す。グラフの破線及び×マークは、プラセボを投与したグループＡの１日あたりの体重変化量の平均値を、糖質摂取量（５０ｇ毎）ごとに表したものである。グラフの実線及び◇マークは、ＧｌｃＮを０．１ｇ／体重１ｋｇ投与したグループＢの１日あたりの体重変化量の平均値を、糖質摂取量（５０ｇ毎）ごとに表したものである。グラフの実線及び△マークは、ＧｌｃＮを０．２ｇ／体重１ｋｇ投与したグループＣの１日あたりの体重変化量の平均値を、糖質摂取量（５０ｇ毎）ごとに表したものである。グラフの実線及び□マークは、ＧｌｃＮを０．３ｇ／体重１ｋｇ投与したグループＤの１日あたりの体重変化量の平均値を、糖質摂取量（５０ｇ毎）ごとに表したものである。グラフの実線及び○マークは、ＧｌｃＮを０．４ｇ／体重１ｋｇ投与したグループＥの１日あたりの体重変化量の平均値を、糖質摂取量（５０ｇ毎）ごとに表したものである。
【００４１】
グループＢは、グループＡと比較してグラフの横軸の０〜１００付近の間で有意な体重減少が見られ、ＧｌｃＮ０．１ｇ／体重１ｋｇの糖質摂取量に対する閾値が１００ｇ付近にある事が確認された。グループＣは、グループＡと比較してグラフの横軸の０〜２００付近の間で有意な体重減少が見られ、ＧｌｃＮ０．２ｇ／体重１ｋｇの糖質摂取量に対する閾値が２００ｇ付近にある事が確認された。グループＤは、グループＡと比較してグラフの横軸の０〜３００付近の間で有意な体重減少が見られ、ＧｌｃＮ０．３ｇ／体重１ｋｇの糖質摂取量に対する閾値が３００ｇ付近にある事が確認された。グループＥは、グループＡと比較してグラフの横軸の０〜３００付近の間で有意な体重減少が見られ、ＧｌｃＮ０．４ｇ／体重１ｋｇの糖質摂取量に対する閾値が３００ｇ付近にある事が確認された。なお、本試験とは別に最大で３．０ｇ／体重１ｋｇのＧｌｃＮを投与した結果、４００ｇ±１０％の糖質摂取量でも有意な体重減少を確認する事ができた。以上のように、ＧｌｃＮの投与量に対して糖質摂取量が閾値内であれば、投与後６〜４８時間以内に繰り返し体重が減少し、本発明の課題である再現性の改善効果を確認する事ができる。また、１日あたりの糖質摂取量は閾値内であれば１回で摂取しても複数回に分けて摂取しても同様な結果が得られた。それは特許請求の範囲に記載したＧｌｃＮ誘導体及びＧｌｃＮＡｃを用いても同様な結果であった。
【実施例２】
【００４２】
副作用の試験を実施するのは、持病のない健康な被験者３０名を対象とした。１回の試験期間は７日間とし、各試験間のインターバルを７日間とする事により、合計１１回（有効１０回）のべ８４日間にわたる二重盲検試験を実施した。各試験は被験者を１０名づつＦ・Ｇ・Ｈ３つのグループに分けて実施し、グループＦにはプラセボを投与する試験を、プラセボの投与量（０．１ｇ／体重１ｋｇ毎）ごとにランダムに実施した。グループＧにはＧｌｃＮを１日あたりの累計として投与する試験を、ＧｌｃＮの投与量（０．１ｇ／体重１ｋｇ毎）ごとにランダムに実施した。グループＨにはＧｌｃＮを排泄間（最後の排便時間から次の排便時間まで）の累計として投与する試験を、ＧｌｃＮの投与量（０．１ｇ／体重１ｋｇ毎）ごとにランダムに実施した。また、各試験期間及びインターバル間の食事・運動・生活行動については原則自由とし、急な怪我や病気などで必要な場合は除き、不要な薬剤やサプリメント等は一切投与しなかった。各試験に用いたＧｌｃＮは実施例１に記載したものと同一であるが、プラセボについては主にグルコースを用いたほか、試薬と風味を似せるため塩化マグネシウムを適量用いた。投与方法については、ＧｌｃＮ又はプラセボの入った水溶液を各試験の前に協力者（各被験者の家族）に預け、被験者が食事をする度に３０分以内に経口投与する様に指示した。この際、被験者にも協力者にも、水溶液の中身については一切伝えなかった。なお、急な病気や試薬の飲み忘れ、又は被験者の都合等により試験が実施できなかった回は、当該グループ内の他の被験者の試験結果も含めて無効とした。
【００４３】
図２は前期試験結果を、プラセボ及びＧｌｃＮの投与量・副作用の発症率・投与方法（１日あたりの累計投与・排泄間の累計投与）の関係として表した棒グラフである。グラフの縦軸は、下痢・腹部膨満感などの消化器系の副作用の発症率（単位／数量％、試験日数に対する副作用の発症回数の比率）を表し、グラフの横軸はプラセボ又はＧｌｃＮの投与量（重量ｇ／体重１ｋｇ）を表す。グラフの各棒線の左はプラセボを投与したグループＦの副作用の発症率を、プラセボの投与量（０．１ｇ／体重１ｋｇ毎）ごとに表したものである。グラフの各棒線の中央はＧｌｃＮを排泄間の累計として投与したグループＧの副作用の発症率を、ＧｌｃＮの投与量（０．１ｇ／体重１ｋｇ毎）ごとに表したものである。グラフの各棒線の右はＧｌｃＮを１日あたりの累計として投与したグループＨの副作用の発症率を、ＧｌｃＮの投与量（０．１ｇ／体重１ｋｇ毎）ごとに表したものである。
【００４４】
グループＨは、グループＦ及びグループＧと比較してグラフの横軸の全域で１４．２〜４６．３％ほど高い副作用の発症率が見られた。グループＧは、グループＦと比較してグラフの横軸の全域で７．３〜４３．５％ほど高い副作用の発症率が見られるものの、グループＨと比較するとグラフの横軸の０．１〜０．３付近の間で６．９〜３２．２％ほど有意な副作用の発症率の低下が見られ、本発明の課題である副作用の発症率の改善効果が確認された。然し、グラフの横軸の０．４付近においては有意差は見られず、ＧｌｃＮの排泄間累計投与量の副作用に対する閾値が０．３ｇ／体重１ｋｇ付近にある事が確認された。なお、ＧｌｃＮの投与量は閾値内であれば１回で投与しても複数回で投与しても同様な結果が得られた。それは特許請求の範囲に記載したＧｌｃＮ誘導体及びＧｌｃＮＡｃを用いても同様な結果であった。
【産業上の利用可能性】
【００４５】
本発明は、ヒト及び哺乳動物に対する抗肥満用の薬剤・サプリメント・食品・飲料・甘味料などを製造・販売する産業分野で利用する事ができる。
【符号の説明】
【００４６】
１   脂肪細胞
２   ミトコンドリア
３   肝細胞
４   血液
５   脂肪細胞膜
６   ミトコンドリア膜
７   肝細胞膜
８   インスリン受容体
９   ＧＬＵＴ４
１０ インスリン
１１ ＧｌｃＮの作用段階１
１２ ＧｌｃＮの作用段階２
１３ ＧＬＵＴ４小胞
１４ 血中グルコース
１５ 血中グリセロール
【図１】
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【図２】
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【図３】
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