(57)【要約】【課題】  適用される癌の対象が広範であり、対象者が被る副作用や負担の少ない手段の提供。【解決手段】  ポルフィリン類含有製剤であって、当該ポルフィリン類含有製剤を対象者に投与した後、マイクロウエーブを当該対象者に照射する用途にて使用されるポルフィリン類含有製剤。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポルフィリン類含有製剤であって、当該ポルフィリン類含有製剤を対象者に投与した後、マイクロウエーブを当該対象者に照射する用途にて使用されるポルフィリン類含有製剤。
【請求項２】
前記照射が、前記対象者の特定部位に対しての少なくとも２以上の複数方向からのマイクロウエーブの照射であり、且つ、前記照射が、前記特定部位にて、前記複数方向からのマイクロウエーブ同士が共振する条件にて実施されるものである、請求項１記載のポルフィリン類含有製剤。
【請求項３】
前記照射が、周波数１．５〜５．０ＧＨｚで、複数回照射するパルス照射である、請求項１又は２記載のポルフィリン類含有製剤。
【請求項４】
前記特定部位が、体表面から０．５ｃｍ以上の深部である、請求項２又は３記載のポルフィリン類含有製剤。
【請求項５】
前記ポルフィリン類が、５‐アミノレブリン酸及びその誘導体、プロトポルフィリンＩＸ及びその誘導体、ヘマトポルフィリン誘導体、ベンゾポルフィリン誘導体、及びタラポルフィン、並びにこれらの重合体から選択される一種以上である、請求項１〜４のいずれか一項記載のポルフィリン類含有製剤。
【請求項６】
前記特定部位が、前記対象者の悪性腫瘍の存在する部位である、請求項２〜５のいずれか一項記載のポルフィリン類含有製剤。
【請求項７】
マイクロウエーブ照射装置であって、ポルフィリン類含有製剤が投与された対象者に対してマイクロウエーブを照射する用途にて使用されるマイクロウエーブ照射装置。
【請求項８】
前記マイクロウエーブ照射装置が、２以上のマイクロウエーブ照射部位を有し、
前記照射が、前記対象者の特定部位に対しての少なくとも２以上の複数方向からのマイクロウエーブの照射であり、且つ、前記照射が、前記特定部位にて、前記複数方向からのマイクロウエーブ同士が共振する条件にて実施されるよう構成されている、請求項７記載のマイクロウエーブ照射装置。
【請求項９】
前記照射が、周波数１．５〜５．０ＧＨｚで、複数回照射するパルス照射である、請求項７又は８記載のマイクロウエーブ照射装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、副作用が少なく、非侵襲的な癌治療のための技術に関する。
【背景技術】
【０００２】
癌の治療には、外科切除、化学療法、放射線療法、骨髄移植等の多数の方法がある。外科切除は、侵襲的な方法であり、患者の身体的負担が非常に大きい。また、多くの場合は、化学療法、放射線療法と併用される。抗癌剤としては、代謝拮抗剤、植物アルカロイド、抗癌性抗生物質、分子標的薬、抗生物質、ホルモン剤及びアルキル化剤等、様々な種類が知られている。多くの抗癌（腫瘍）剤は腫瘍細胞を殺傷することに加えて、正常細胞を損傷し得るものである。これら抗癌剤の副作用としては、悪心、嘔吐、脱毛症及び骨髄機能抑制が代表的である。これら副作用は、患者のＱＯＬの著しい低下を伴うものである場合が多い。
【０００３】
これら副作用の少ない治療として、様々な研究がなされている。例えば、ポルフィリン類を用いたＰＤＴ療法が知られている。ＰＤＴ療法とは、一般的にポルフィリン類を光増感剤として患者に投与した後、レーザー赤色光の強い光線が照射されると、腫瘍細胞をより容易に破壊することができる。このメカニズムは、光励起状態のポルフィリン分子から酸素分子へエネルギーが転移されることにより生成される一重項酸素を介して、癌細胞を細胞死（アポトーシス）に導くものと考えられている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特表２００１−５１２４３３号公報
【特許文献２】特開昭６２−５３９２０号公報
【特許文献３】特開平０９−４８７３３号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、赤色光の透過はその深さがわずか数ミリメートルと限界があることから、ＰＤＴ療法の適用対象は、一部の皮膚癌や開頭手術と併用する脳腫瘍等限定的であった。
【０００６】
そこで、本発明は、適用される癌の対象が広範であり、対象者が被る副作用や負担の少ない手段を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者等は、上記課題を解決すべく鋭意研究を重ねた。その結果、ポルフィリン類含有製剤を患者に対し投与した上で、特定条件を充足するよう少なくとも２以上の複数方向からのマイクロウエーブを患部に照射することにより、本課題を解決できることを見出し、本発明を完成させた。即ち、本発明は以下の通りである。
【０００８】
本発明（１）は、ポルフィリン類含有製剤であって、当該ポルフィリン類含有製剤を対象者に投与した後、マイクロウエーブを当該対象者に照射する用途にて使用されるポルフィリン類含有製剤である。
本発明（２）は、前記照射が、前記対象者の特定部位に対しての少なくとも２以上の複数方向からのマイクロウエーブの照射であり、且つ、前記照射が、前記特定部位にて、前記複数方向からのマイクロウエーブ同士が共振する条件にて実施されるものである、本発明（１）記載のポルフィリン類含有製剤である。
本発明（３）は、前記照射が、周波数１．５〜５．０ＧＨｚで、複数回照射するパルス照射である、本発明（１）又は（２）記載のポルフィリン類含有製剤である。
本発明（４）は、前記特定部位が、体表面から０．５ｃｍ以上の深部である、本発明（２）又は（３）記載のポルフィリン類含有製剤である。
本発明（５）は、前記ポルフィリン類が、５‐アミノレブリン酸及びその誘導体、プロトポルフィリンＩＸ及びその誘導体、ヘマトポルフィリン誘導体、ベンゾポルフィリン誘導体、並びにタラポルフィン、並びにこれらの重合体から選択される一種以上である、本発明（１）〜（４）のいずれか記載のポルフィリン類含有製剤である。
本発明（６）は、前記特定部位が、前記対象者の悪性腫瘍の存在する部位である、本発明（２）〜（５）のいずれか記載のポルフィリン類含有製剤である。
本発明（７）は、マイクロウエーブ照射装置であって、ポルフィリン類含有製剤が投与された対象者に対してマイクロウエーブを照射する用途にて使用されるマイクロウエーブ照射装置である。
本発明（８）は、前記マイクロウエーブ照射装置が、２以上のマイクロウエーブ照射部位を有し、
前記照射が、前記対象者の特定部位に対しての少なくとも２以上の複数方向からのマイクロウエーブの照射であり、且つ、前記照射が、前記特定部位にて、前記複数方向からのマイクロウエーブ同士が共振する条件にて実施されるよう構成されている、本発明（７）記載のマイクロウエーブ照射装置である。
本発明（９）は、前記照射が、周波数１．５〜５．０ＧＨｚで、複数回照射するパルス照射である、本発明（７）又は（８）記載のマイクロウエーブ照射装置である。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、適用される癌の対象が広範であり、対象者が被る副作用や負担の少ない手段を提供することが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】図１は、マイクロウエーブ照射装置の一実施形態を示す模式図正面図である。
【図２】図２は、マイクロウエーブ照射装置の一実施形態を示す模式図側面図である。
【図３】図３は、マイクロウエーブ照射装置の一実施形態を示す斜視図である。
【図４】図４は、マイクロウエーブ照射装置の駆動手段の一例を示す模式図である。
【図５】図５は、マイクロ電磁波発生部の一実施形態を示す模式図である。
【図６】図６は、マイクロ電磁波発生部の他の実施形態を示す模式図である。
【図７】図７は、ポルフィリン類含有製剤及びマイクロウエーブとのＤＮＡに対する相乗作用の模式図である。
【図８】図８は、ポルフィリン類含有製剤（５−ＡＬＡ）の添加とマイクロウエーブ照射のスケジュールと試料へのマイクロウエーブの照射の配置を表す模式図である。
【図９】図９は、ポルフィリン類含有製剤（５−ＡＬＡ）とマイクロウエーブ照射の併用効果による膵臓癌細胞増殖抑制に対する影響を示すグラフである。
【図１０】図１０は、ポルフィリン類含有製剤（５−ＡＬＡ）単独による膵臓癌細胞増殖抑制に対する５−ＡＬＡの濃度の影響を示すグラフである。
【図１１】図１１は、ポルフィリン類含有製剤（５−ＡＬＡ）とマイクロウエーブ照射の併用効果による膵臓癌細胞増殖抑制に対する５−ＡＬＡの濃度の影響を示すグラフである。
【図１２】図１２は、ポルフィリン類含有製剤（タラポルフィン）とマイクロウエーブ照射の併用効果による膵臓癌細胞増殖抑制効果の比較を示すグラフである。
【図１３】図１３は、ポルフィリン類含有製剤（タラポルフィン）単独による膵臓癌細胞増殖抑制に対するタラポルフィンの濃度の影響を示すグラフである。
【図１４】図１４は、ポルフィリン類含有製剤（５−ＡＬＡ）とマイクロウエーブ照射の併用効果による膵臓癌細胞増殖抑制に対するタラポルフィンの濃度の影響を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本特許請求の範囲及び本明細書において、「体表面」とは、皮膚その他組織等であって、通常の状態において視認できる表面に限られず、消化管や呼吸器等の体腔内の表面部分を含むものとする。また、「深部」は、「特定部位」の端部の前記「体表面」からの深さ（距離）を示すものである。更に、「特定部位」とは、ポルフィリン類が集積する部位、ＣＴ、ＰＥＴ検査、その他の方法によって、腫瘍の存在が確認でき、本発明の効果が期待できる部位である。
【００１２】
また、本特許請求の範囲及び本明細書において、「パルス照射」とは、マイクロウエーブの照射を断続的に（例えば、照射→休止→照射→休止→照射）行う照射方法のことを示す。
【００１３】
本発明の好適な実施形態に係るポルフィリン誘導体又はマイクロウエーブ照射装置に関して、以下の順序にて説明する。
（１−１）ポルフィリン類含有製剤の説明
（１−２）ポルフィリンを含有する製剤の投与方法
（２−１）マイクロウエーブ照射装置の説明
（２−２）マイクロウエーブ照射装置の使用方法
（３）マイクロウエーブとポルフィリンを含有する製剤の相乗効果に関する作用機序
（４）本発明の用途
【００１４】
≪ポルフィリン類含有製剤≫
本実施形態に係るポルフィリン類含有製剤について詳述する。
【００１５】
＜種類＞
本発明に使用できるポルフィリン類含有製剤については、特に限定はされない。本発明の効果を奏する限り、使用することができる。例えば、既にＰＤＴとしては、保険適用のあるポルフィマーナトリウム｛フォトフィリン（登録商標）｝（ヘマトポルフィリン誘導体）、タラポルフィンナトリウム｛レザフィリン（登録商標）｝、及び５‐アミノレブリン酸塩酸塩｛アラグリオ（登録商標））の他、Hexaminolevulinate｛Hexvix（登録商標）｝、methyl aminolevulinate｛Metvix（登録商標）｝、hexylaminolevulinate｛Cevira（登録商標）｝Verteporfin｛Visudyne（登録商標）｝、及びTemoporfin｛Foscan（登録商標）｝等が挙げられる。
【００１６】
本発明のポルフィリン類とは、ポルフィリン、その誘導体、その複合体、その重合体及びその塩類を含むものであり、並びに、それらの前駆体であって、本発明の効果を奏する場合において、ポルフィン骨格を有するものも含むものとする。具体的には、前記のポルフィリン類含有製剤に含有するポルフィリン類等が挙げられる。中でも、プロトポルフィリンＩＸ若しくはその誘導体、その前駆体である５−アミノレブリン酸若しくはその誘導体、ヘマトポルフィリン誘導体、ベンゾポルフィリン誘導体、若しくは植物クロロフィル由来のポルフィリンであるタラポルフィン、又はこれらの重合体が好適であり、更に、ポルフィマー、タラポルフィン又は５‐アミノレブリン酸、若しくは、その誘導体が、特に好適である。これらは、単独で使用されるものであってもよく、又は、複数使用されるものであってもよい。
【００１７】
（ポルフィリン類を含む併用療法）
上述のように、レーザー光と光感受性物質との作用を用いた治療法として保険適用されている。その対象は、早期の肺癌、早期食道癌、胃癌、また、脳腫瘍の開頭手術における腫瘍部位の特定にも用いられている。これは、ポルフィリン類が、１）腫瘍に特異的に集積する、２）光照射によって一重項酸素を効果的に産生できる、という性質を利用するものである。
【００１８】
しかしながら、レーザー光は、その深達度が５〜１０ｍｍ程度であり、皮膚表面の皮膚癌や、手術等の侵襲的手段との併用を余儀なくされる。更に、癌の組織への浸潤度、腫瘍の大きさ、転移等の癌の進行度合により、その適用は限定的である。本発明は、より深部の癌へも適用され、更に、副作用や患者への身体の負担が少ない非侵襲的な手段として非常に有用であると考えられる。
【００１９】
＜製造方法＞
これらのポルフィリン類含有製剤の製造方法としては、特に限定されない。公知の方法で製造することができる。また、これらのポルフィリン類含有製剤は、市販品を購入することによって入手することもできる。
【００２０】
＜ポルフィリン類含有製剤の取り得る形態＞
本実施形態に係るポルフィリン類含有製剤には、酸又は塩基と薬理学的に許容される塩を形成する場合も含まれる。また、それらの溶媒和物及び光学異性体が含まれる。更に、本実施形態において、本実施形態に係るポルフィリン類含有製剤は、結晶でも無結晶でもよく、また、結晶多形が存在する場合には、それらのいずれかの結晶形の単一物であっても混合物であってもよい。
【００２１】
また、本実施形態において、ポルフィリン類含有錯体を含有するポルフィリン類含有製剤は、生体内で酸化、還元、加水分解等の代謝を受けて本実施形態に係る抗腫瘍性ポルフィリン類含有錯体を生成する化合物をも包含する。
【００２２】
＜副作用＞
ここで、副作用とは、投与時に見られる治療上不必要な作用或いは、臨床上障害となりうる作用をいう。本実施形態に係るポルフィリン類含有製剤の副作用の具体例としては、光線過敏症、呼吸困難、肝機能障害、消化器障害（吐き気、嘔吐、下痢を含む）及び造血障害挙げられる。ポルフィリン類含有製剤単体の投与では、患者のＱＯＬを低下させるような重篤な副作用はないと考えられる。
【００２３】
これに対し、細胞障害性の抗癌剤は、癌細胞だけでなく細胞分裂を盛んに行っている正常細胞に対しても障害を与えるため、癌治療に有効な量を投与できないことが欠点とされている。本実施形態に係るマイクロウエーブを照射する対象者に投与するポルフィリン類含有製剤においては、（１）ポルフィリン類は癌細胞に集積する性質があること、（２）ポルフィリン類は電磁波を照射されることで、強い細胞傷害性を発現すること、（３）本実施形態に係るマイクロウエーブ照射装置は、癌部位でのみ強い照射が行えること、から、副作用の軽減の点で、特に有効であると言える。
【００２４】
＜投与方法＞
本実施形態に係るポルフィリン類含有製剤を使用する場合には、投与経路は特に限定されない。経口若しくは非経口的に投与することができるが、通常、静脈内投与（点滴静注）である。その投与量も本発明の効果を奏する限り、特に限定されない。通常のポルフィリン類含有製剤の投与量は、ポルフィリン類含有製剤の種類、症状の程度、患者の年齢、性別、体重、感受性差、投与方法、投与時期、投与間隔、医薬製剤の性質、調剤及び種類、有効成分の種類等によって異なる。例えば、注射剤としては、タラポルフィンナトリウムとして４０ｍｇ／ｍ２を、ポルフィマーナトリウムとして２ｍｇ／ｋｇを、1回静脈内注射できる。また、例えば、内用剤としては、アミノレブリン酸塩酸塩として２０ｍｇ／ｋｇを経口投与できる。患者が過度の毒性を経験した場合は、投与量の減少が必要となる。投与量及び投与計画は、本発明の併用療法に加えて、１又はそれ以上の追加の化学療法剤が使用される場合に変更してもよい。
【００２５】
（投与される剤型）
本実施形態のポルフィリン類含有製剤は、投与される際の剤型は限定されない。例えば、注射用液剤や凍結乾燥製剤、錠剤等が挙げられる。また、それぞれ市販されている剤型のものを用いることができる。
【００２６】
≪マイクロウエーブ照射装置≫
本実施形態に好適に使用されるマイクロウエーブ照射装置（癌治療・再発防止装置）について図を参照しながら、詳細に説明する。
【００２７】
本実施形態に係るマイクロウエーブ照射装置によれば、治療効果がより向上し、副作用や患者の負担が少なく、自動運転することが可能な、マイクロウエーブ照射装置の作動方法が提供される。
【００２８】
本実施形態に係るマイクロウエーブ照射装置によれば、従来の技術と比較して、治療対象の肉体的及び精神的負担が少なく、且つ高い治療効果が得られる。また、ステントや金属歯を埋め込んだままでも治療が可能であり利便性が高い。本実施形態に係るポルフィリン類含有製剤と、より併用時のリスクが少ないと言える。
【００２９】
以下、図面を参照しながら、本実施形態において好適に使用されるマイクロウエーブ照射装置の一例について、説明する。尚、図面の説明において同一要素には同一符号を付し、重複する説明を省略する。また、図面は理解を容易にするため一部を誇張して描いており、寸法比率は説明のものとは必ずしも一致しない。又、本発明の効果を奏する限り、一般に購入できるマイクロウエーブ照射装置を用いてもよく、また、複数台を用いてもよい。
【００３０】
図１等に示すように、マイクロウエーブ照射装置１００は、一対の相対向するマグネトロン６５（マグネトロンヘッド６１及びマグネトロン本体６０からなる）、マグネトロン６５をその内部に有する筒状の筐体１０、治療対象５の皮膚表面の温度データを取得可能な温度測定手段７５、マグネトロン６５と治療対象５との間の距離データを取得可能な距離測定手段７０、及びマグネトロン６５を筐体１０の内部の壁面に沿って移動させることのできる距離調整手段８０を有するマイクロ電磁波発生部を有する。マイクロ電磁波発生部は、一対のマグネトロン６５が相対向して配置されるようにホルダー９０に取り付けられている。
【００３１】
マイクロウエーブ照射装置１００は、更に治療対象５を載置可能な支持台２０と、支持台２０を当該支持台２０の短手方向に移動させることのできる、ボールスクリューから構成される第１の駆動手段と、支持台２０の長手方向に略平行に配置され、マイクロ電磁波発生部が取り付けられたホルダー９０を支持台２０の長手方向に略平行に移動させることのできる、ボールスクリューから構成される第２の駆動手段とを備える。上記第１の駆動手段を備えることにより、治療対象５を支持台２０に載置した状態で、支持台２０を当該支持台２０の短手方向（図２中、軌道Ｂで表す方向）に移動させることが可能となる。
【００３２】
マイクロウエーブ照射装置は、上記マグネトロンと上記治療対象との間の距離データを取得可能な距離測定手段、及び上記マグネトロンを上記筐体の内部の壁面に沿って移動させることのできる距離調整手段を更に備えていてもよい。
【００３３】
＜駆動手段＞
マイクロウエーブ照射装置１００における第２の駆動手段は、ガイドバー３０、ボールスクリュー４０、モーター５０及びホルダー９０に取り付けられた移動部３５を含む。ガイドバー３０と平行にボールスクリュー４０が配置されており、ボールスクリュー４０はモーター５０に接続されている。モーター５０が回転することにより、移動部３５が、ガイドバー３０及びボールスクリュー４０に沿って移動することができる。これに伴い、ホルダー９０及びこれに取り付けられたマイクロ電磁波発生部が、支持台２０の長手方向に略平行に移動する。モーター５０の回転数を制御することにより、移動距離を制御することができる。
【００３４】
モーター５０の回転運動はボールスクリュー４０により直線運動に変換され、移動部３５が移動する。モーター５０は、正確な位置決め制御を実現できることからパルスモーターであることが好ましい。パルスモーターとボールスクリューを組み合わせることにより、移動部３５を高精度に再現性よく位置決めすることができる。
【００３５】
マイクロウエーブ照射装置１００における第１の駆動手段は、上記第２の駆動手段と同様の構成を備えており、ガイドバー、ボールスクリュー、モーターを含む。モーターはパルスモーターであることが好ましい。モーターが回転することにより、支持台２０が、ガイドバー及びボールスクリューに沿って移動することができる。これに伴い、支持台２０が当該支持台２０の短手方向に移動する。モーターの回転数を制御することにより、支持台２０の移動距離を制御することができる。
【００３６】
尚、マイクロウエーブ照射装置は、駆動手段を支持台に取り付け、支持台を当該支持台の長手方向に移動させるものであってもよく、支持台とホルダーの双方を移動させるものであってもよい。治療対象が動くことによる治療効果の低減を回避する観点、及び設置スペースが小さくて済むとの観点から、ホルダー９０を移動させるものである本実施形態のマイクロウエーブ照射装置１００が好ましい。
【００３７】
＜マイクロ電磁波発生部＞
マイクロ電磁波発生部は、筒状の筐体の内部に収容されたマグネトロンを少なくとも一対有しており、当該一対のマグネトロンが相対向するように配置されている。治療対象はこの相対向する一対のマグネトロンの間に配置される。マイクロ電磁波発生部は、温度測定手段も有する。マイクロ電磁波発生部は、更に距離測定手段及び距離調整手段を備えていてもよい。
【００３８】
マグネトロンは二対以上配置されていてもよい。この場合、対となるマグネトロンは相対向するように配置される。又は、９０度等の直角に配置してもよい。また、２台以上のマイクロウエーブ照射装置を使用することもできる。
【００３９】
図５は、マイクロ電磁波発生部の一実施形態を示す模式図である。マイクロ電磁波発生部２００は、筒状の筐体１０、マグネトロン６５、温度測定手段（図示せず）、距離測定手段（図示せず）及び距離調整手段８０を有する。マグネトロン６５は、距離調整手段８０により、マイクロ電磁波の照射軸に沿って移動することができる。
【００４０】
図６は、マイクロ電磁波発生部の他の実施形態を示す模式図である。マイクロ電磁波発生部２１０は、筒状の筐体（図示せず）、マグネトロン６５、温度測定手段７５、距離測定手段７０及び距離調整手段８０を有する。マグネトロン６５は、距離調整手段８０により、マイクロ電磁波の照射軸に沿って移動することができる。この例では、モーターのシャフトとマグネトロン６５とがワイヤーで連結されている。これにより、モーターが回転してワイヤーを巻き取ると、マグネトロン６５をモーター側に移動させることができる。逆にモーターが回転してワイヤーを伸ばすことにより、マグネトロン６５をモーターから離れた方向に移動させることができる。
【００４１】
（マグネトロン）
マグネトロン６５は、マグネトロン本体６０とマグネトロンヘッド６１を有し、マグネトロン本体部６０内に存在するマイクロ電磁波発振部６２で生成させたマイクロ電磁波をマグネトロンヘッド６１から発射する。マイクロ電磁波の周波数は１．００〜５．００ＧＨｚであることが好ましく、２．００〜３．００ＧＨｚであることがより好ましく、２．４５ＧＨｚであることが更に好ましい。マイクロ電磁波の電磁エネルギーは約５００〜１０００Ｗが好適である。
【００４２】
本実施形態に係るマイクロウエーブ照射装置のマイクロ電磁波発生部は、筒状の筐体１０にマグネトロン６５が収容されており、マイクロ電磁波はマグネトロンヘッド６１から発射され、筐体１０の開口部から発射される構成となっている。意外なことに、本実施形態のマイクロ電磁波発生部は、このような構成を採用することにより、より高い治療効果を実現することができる。
【００４３】
（温度測定手段）
温度測定手段７５としては、特に制限されないが、治療対象の皮膚表面の温度データを非接触でリアルタイムに十分な精度で測定できるものが好ましい。このような温度測定手段としては、例えば、放射温度計が例示できる。放射温度計としては、例えば赤外放射温度計が例示できる。
【００４４】
（距離測定手段）
距離測定手段７０としては、特に制限されないが、例えば、超音波、レーザー、赤外線等を発射し、その反射波を受信するまでの時間から距離を測定するもの、カメラ及び画像処理を利用するもの等が使用可能であり、例えば、レーザー測長器であってよい。
【００４５】
（距離調整手段）
距離調整手段８０としては、特に制限されないが、例えば、油圧ジャッキ、モーター、ボールスクリューとモーターとの組み合わせ等が挙げられる。距離調整手段８０は、例えば、上述した第１の駆動手段及び第２の駆動手段と同様に、ガイドバー、ボールスクリュー及びパルスモーターを含むものであってもよい。
【００４６】
＜回転手段＞
本実施形態のマイクロウエーブ照射装置１００は回転板３２を有している。図２及び３に示すように、回転板３２が回転すると、中心点Ｃを中心とする円状の軌道Ａに沿ってホルダー９０が回転する。これにより、相対向するマグネトロン６５を、支持台２０の長手方向に略垂直な平面内で回転させることができる。
【００４７】
マイクロウエーブ照射装置１００には、本発明を逸脱しない範囲で各種改変を加えることができる。
【００４８】
≪マイクロウエーブ照射装置の使用方法≫
本実施形態のマイクロウエーブ照射装置の使用方法としては、例えば、温度測定手段が治療対象の皮膚表面の温度データを取得する温度データ取得工程と、マグネトロンがマイクロ電磁波を照射する照射工程と、第１の駆動手段が、支持台を短手方向に移動させる第１の移動工程と、第２の駆動手段が、マイクロ電磁波発生部を支持台の長手方向に沿って移動させる第２の移動工程と、を有し、マイクロ電磁波発生部が予め設定された位置に到達するまで、温度データ取得工程、照射工程、前記第１の移動工程及び第２の移動工程が実行され、マグネトロンが、温度データ取得工程で取得された温度データの値が第１設定値を超えた場合にマイクロ電磁波の照射を中断し、温度データの値が第２設定値以下に下がった場合にマイクロ電磁波の照射を再開するように動作するものである。
【００４９】
マイクロウエーブ照射装置の作動方法は、距離測定手段が、マグネトロンと治療対象との間の距離データを取得する距離データ取得工程、及び、距離調整手段が、距離データに基づいて、マグネトロンと治療対象との間の距離が予め設定された距離になるようマグネトロンを移動させる距離調整工程を更に備えていてもよい。
【００５０】
＜固形癌の場合＞
例えば、治療対象が腹部に腫瘍（固形癌）を有する場合、マイクロ電磁波発生部がマイクロ電磁波の照射を開始する始点を治療対象の胸部に設定し、上記「予め設定された位置」を下腹部に設定する。このようにして設定された照射対象領域を例えば９分割し、これらの領域に順次マイクロ電磁波を照射する。
【００５１】
より具体的には、まず、第１の移動工程及び第２の移動工程により、マイクロ電磁波発生部を、上記９分割された領域の１つにマイクロ電磁波を照射可能な位置に移動させる。続いて、マイクロ電磁波発生部がマイクロ電磁波を照射する。例えば、１つの領域について、マイクロ電磁波の照射を１回当たり１〜１０秒間、より好ましくは３〜８秒間、特に好ましくは７秒間行い、これを３回以上繰り返す。照射と照射の間の間隔は例えば３秒間である。このようにして、上記９分割された領域の１つへのマイクロ電磁波の照射が終わると、再び第１の移動工程及び第２の移動工程により、マイクロ電磁波発生部を上記９分割された領域のうち、未照射の領域の１つに移動させる。続いて、上記と同様に、マイクロ電磁波発生部がマイクロ電磁波を照射する。以上の工程を９分割された領域の全てについて行う。
【００５２】
この間、温度データ取得工程により、治療対象の皮膚表面の温度データをリアルタイムでモニターし、取得された温度データの値が第１設定値を超えた場合には、マイクロ電磁波の照射を中断し、温度データの値が第２設定値以下に下がった場合にマイクロ電磁波の照射を再開する。第１設定値は、４０〜４３℃であることが好ましく、特に４１．５℃であることが好ましい。治療対象の皮膚表面の温度がこの温度に達すると、治療対象が熱さに耐えられなくなる。そして、取得された温度データの値が第２設定値以下に下がった場合にマイクロ電磁波の照射を再開する。第２設定値は、マイクロ電磁波の照射を開始する直前の治療対象の皮膚表面の温度に設定することが好ましい。マイクロ電磁波の照射中に、治療対象の皮膚表面の温度データが第１設定値を超えたことにより、マイクロ電磁波の
照射を中断後、再開する場合、例えば、照射予定であった残りの時間、マイクロ電磁波を照射するとよい。
【００５３】
以上の作動方法により、腫瘍形成部（腹部）のみならず腫瘍から離れた遠部（胸部〜下腹部）に亘って広範囲にマイクロ電磁波を照射することが可能となる。
【００５４】
（フォーカス照射）
また、本実施形態に使用されるマイクロウエーブ照射装置は、１台以上の電磁波発振器と焦点合わせ（フォーカス）手段を用いて、２以上の複数方向から電磁波を照射し、特定の部位において、複数方向からのマイクロウエーブ波同士が共振点を作ることができ、より癌部位にフォーカスして、患部を熱することが可能である。
【００５５】
ここで、ポルフィリン類は、癌部位に集積することが知られている。このようなマイクロウエーブ照射装置においては、ポルフィリン類含有製剤の投与後の照射において、本発明のポルフィリン類やポルフィリン代謝物等が癌部位に集積した時点で、この癌部位にフォーカスして、照射することができる。よって、他の正常細胞への影響をより最小限に抑えることができ、効率的な治療が可能となる。
【００５６】
このマイクロウエーブをフォーカスして照射した場合の癌患部は、後述するマイクロウエーブ照射と後述するポルフィリン類に起因する活性酸素の発生やＰＡＲＰを介したＤＮＡ破壊の促進及びマイクロウエーブとによる細胞死の相乗作用が顕著となるからである。
【００５７】
また、上記作動方法において、距離測定手段が、マグネトロンと治療対象との間の距離データを取得する距離データ取得工程、及び、距離調整手段が、距離データに基づいて、マグネトロンと前記治療対象との間の距離が予め設定された距離になるようマグネトロンを移動させる距離調整工程、が行われてもよい。
【００５８】
＜液性癌の場合＞
治療対象が液性癌を有する場合、上記始点を頭頂部に設定し、上記「予め設定された位置」を足の指先に設定する。これにより、マイクロ電磁波を全身に照射することが可能となり、抗癌剤等の併用がなくても液性癌に対して高い治療効果を得ることができる。
【００５９】
このようにして設定された照射対象領域全体に順次マイクロ電磁波を照射する。より具体的には、まず、第１の移動工程及び第２の移動工程により、マイクロ電磁波発生部を、上記始点に移動させる。続いて、マイクロ電磁波発生部がマイクロ電磁波を照射する。この場合、マイクロ電磁波発生部はマイクロ電磁波を照射し続け、この間に第１の移動工程及び第２の移動工程が連続的に治療対象の照射対象部位を移動させてもよい。また、第１の移動工程及び第２の移動工程に、後述する回転工程を更に組み合わせてもよい。マイクロ電磁波を治療対象の全身に照射するのに要する時間は、約５分間である。
【００６０】
上記工程を実行している間、温度データ取得工程により、治療対象の皮膚表面の温度データをリアルタイムでモニターする。そして、取得された温度データの値が第１設定値を超えた場合には、マイクロ電磁波の照射、第１の移動工程及び第２の移動工程を中断する。ここで、回転工程を行っている場合には、回転工程も中断する。そして、温度データの値が第２設定値以下に下がった場合にマイクロ電磁波の照射、第１の移動工程及び第２の移動工程を再開する。ここで、回転工程を行っている場合には、回転工程も再開する。第１設定値及び第２設定値は、上述した固形癌の場合と同様である。
【００６１】
以下、各工程を説明する。
【００６２】
＜温度データ取得工程＞
温度データ取得工程では、温度測定手段７５が、治療対象５の皮膚表面の温度データを取得する。上記したように、一実施形態において、温度測定手段７５は放射温度計である。
【００６３】
＜距離データ取得工程＞
距離データ取得工程では、距離測定手段７０が、マグネトロン６５又はマグネトロンヘッド６１と治療対象５との間の距離データを取得する。上記したように、一実施形態において、距離測定手段７０はレーザー測長器である。レーザー測長器は、レーザー発射器とレーザー受信器とを有する。レーザー測長器は、レーザー発射器からレーザーを発射する。続いて、レーザー受信器がレーザーを受信する。この結果に基づいて、マグネトロン６５又はマグネトロンヘッド６１と治療対象５との間の距離データが取得される。
【００６４】
＜距離調整工程＞
距離調整工程では、距離調整手段８０が、距離データ取得工程で得られた距離データに基づいて、マグネトロン６５と治療対象５との間の距離が予め設定された距離になるようマグネトロンを移動させる。
【００６５】
マグネトロン６５と治療対象５との間の距離が離れすぎていると、マイクロ電磁波を照射した効果が得られにくい傾向にある。また、マグネトロン６５と治療対象５との間の距離が短すぎると、治療対象５が熱さに耐えられなくなる等の問題が生じる場合がある。マグネトロン６５と治療対象５との間の距離は、次の（１）〜（３）のいずれかであることが好ましい。これにより、治療効果が顕著に向上する。
（１）マグネトロンと、治療対象の患部（癌）との間の距離が２０〜３０ｃｍ
（２）マグネトロンと治療対象の皮膚表面との間の距離が２０〜３０ｃｍ
（３）一対の相対向するマグネトロン間の距離が４０〜６０ｃｍ
【００６６】
上記（１）のマグネトロンと治療対象の患部（癌）との間の距離は、より正確には、マグネトロンのマイクロ電磁波発振部と治療対象の患部（癌）との間の距離である。マグネトロンヘッドと治療対象の患部（癌）との間の距離としては、１０〜３０ｃｍとなる。この場合、治療対象の皮膚表面から患部（癌）までの距離は、予めＣＴ画像、ＰＥＴ画像又はＭＲＩ画像に基づいて求めておき、マグネトロンヘッドと治療対象の患部（癌）との間の距離が１０〜３０ｃｍとなるように調整する。
【００６７】
上記（２）のマグネトロンと治療対象の皮膚表面との間の距離は、より正確には、マグネトロンのマイクロ電磁波発振部と治療対象の皮膚表面との間の距離である。マグネトロンヘッドと治療対象の皮膚表面との間の距離としては、１０〜３０ｃｍとなる。
【００６８】
上記（３）の一対の相対向するマグネトロン間の距離とは、より正確には、一対の相対向するマグネトロンのマイクロ電磁波発振部間の距離である。一対の相対向するマグネトロンヘッド間の距離としては、２０〜６０ｃｍとなる。
【００６９】
マグネトロンと治療対象との間の距離を上記（１）又は（２）に設定する場合、距離データ取得工程で得られた距離データに基づいて、距離調整工程によりマグネトロンと治療対象との間の距離が調整される。また、マグネトロンと治療対象との間の距離を上記（３）に設定する場合、マグネトロンは、筒状の筐体の所定の位置に固定された状態に保たれる。
【００７０】
上記（１）〜（３）のうち、最も治療効果が期待できるのは（１）の場合である。しかしながら、上記（１）の場合、患部（癌）から離れた遠部において、マグネトロンと治療対象との間の距離をどのように設定すべきかの判断が困難な場合がある。また、予め治療対象の体内のどの位置に患部（癌）が存在するかがわかっている必要がある。このような場合には、マグネトロンと治療対象との間の距離を上記（２）に設定することが簡便であり、この場合においても、上記（１）には及ばないものの、ある程度の治療効果が期待できる。また、治療効果は上記（１）、（２）には及ばないものの、状況に応じて上記（３）に設定してもよい。
【００７１】
＜照射工程＞
照射工程では、マグネトロン６５がマイクロ電磁波を一定時間照射する。マイクロ電磁波発生部は、対をなすマグネトロン６５が相対向するように配置されているため、対をなすマグネトロンから照射されたマイクロ電磁波が互いに干渉し、より強い電磁エネルギーが得られる。また、マイクロウエーブの照射にあたっては、対をなすマグネトロンから照射されるマイクロ電磁波の成す角度として、ポルフィリン集積部位（腫瘍部位）において共振する角度であれば、特に限定はされない。患部の深さや照射するマイクロウエーブの強度や照射装置の距離によっても異なるが、例えば、３０度〜１８０度が好ましく、９０度〜１８０度が好ましい。
【００７２】
（パルス照射）
本発明に係るマイクロウエーブの照射方法としては、パルス照射が好適である。このパルス照射の照射条件としては、マグネトロン６５が照射するマイクロ電磁波の周波数は、好ましくは１．５〜５．０ＧＨｚであり、より好ましくは、２．００〜３．００ＧＨｚである。
【００７３】
このパルス照射の照射サイクルとしては、癌の種類、部位等により変更可能であるが、例えば、３〜１０秒照射後、１〜１０秒休止する。このサイクルを３〜１０回程度繰り返すことが好ましい。
【００７４】
マイクロ電磁波の照射時間は、マグネトロン６５と治療対象５との間の距離によっても変化する。より具体的には、マグネトロン６５と治療対象５との間の距離が上記した（１）〜（３）のいずれかである場合、１〜１０秒間であることが好ましく、２〜８秒間であることがより好ましい。照射時間が上位範囲内であれば、治療対象が「熱さ」を感じる頻度が少なく、高い治療効果を得ることができるうえ、ＨＳＰ（ヒートショックプロテイン）の発現が抑制され、短期間で繰り返し治療を行うことも可能となる。例えば、１日に２回治療を行ってもよい。
【００７５】
また、照射と照射の間の休止期間としては、ヒートショックプロテインの生成やフォーカス部位以外での正常細胞へ傷害を抑えられる期間であれば、特に限定されないが、例えば、１〜１０秒が好ましく、３〜５秒であることがより好ましい。
【００７６】
（フォーカス照射とパルス照射）
このように共振作用（フォーカス照射）とパルス照射を用いることで、より強いエネルギーのマイクロウエーブを患部に集中して照射することができる。従って、より短時間で効率的な効果を奏することができる。つまり、ポルフィリン集積部位（腫瘍部位）において後述するポルフィリンとマイクロウエーブによる相乗的なアポトーシスを誘導し、同時にポルフィリン集積部位以外においては、細胞傷害性等の好ましくない作用を最小限に抑えることができる。
【００７７】
フォーカス照射とパルス照射の組み合わせによって、本実施形態に係るマイクロウエーブ波が共振されることにより、高い照射効果を発揮できると考えられる深さ（深達度）は、体表面から２〜１５．０ｃｍ程度であると考えられる。
【００７８】
＜移動工程＞
第１の移動工程では、第１の駆動手段が、支持台２０を短手方向に移動させる。また、第２の移動工程では、第２の駆動手段が、マイクロ電磁波発生部を支持台２０の長手方向に沿って移動させる。
【００７９】
＜回転工程＞
一実施形態において、マイクロウエーブ照射装置の作動方法は、回転工程を更に含んでもよい。回転工程では、上記回転手段（回転板３２）が、マイクロ電磁波発生部を支持台２０の長手方向に略垂直な平面内で所定の角度回転させる。これにより、治療対象５に異なる角度からマイクロ電磁波を照射することが可能となり、更に治療効果を高めることができる。
【００８０】
本実施形態のマイクロウエーブ照射装置の作動方法では、マイクロ電磁波発生部が予め設定された位置に到達するまで、温度データ取得工程、照射工程、第１の移動工程及び第２の移動工程、並びに場合により距離データ取得工程、距離調整工程及び回転工程を実行する。
【００８１】
温度データ取得工程は、マイクロウエーブ照射装置の作動中継続的に実行してもよく、照射工程が実行されている間のみ（マイクロ電磁波の照射が中断されている間を含む）実行してもよい。また、照射工程、第１の移動工程及び第２の移動工程、並びに、存在する場合、距離データ取得工程、距離調整工程及び回転工程は、本発明の効果が得られる限り、任意の順序で実行してもよい。
【００８２】
また、照射工程、温度データ取得工程、第１の移動工程及び第２の移動工程、並びに、存在する場合、距離データ取得工程、距離調整工程及び回転工程は、マイクロウエーブ照射装置の作動中継続的に実行してもよい。
【００８３】
＜自動運転＞
マイクロウエーブ照射装置は、各治療対象に応じた治療ルーチンをプログラムすることにより、自動運転により作動させることができる。
【００８４】
＜照射開始時期＞
本実施形態においてポルフィリン類含有製剤を投与後、マイクロウエーブの照射を開始する時期としては、併用するポルフィリン類含有製剤によって異なる。例えば、ポルフィリン類投与中、又は投与０．５〜１０時間後が好ましく、１〜８時間後がより好ましい。ポルフィリン類が癌部位に集積した後の方が、マイクロウエーブの照射がより効果的であり、正常細胞への副作用の回避の点からも望ましいからである。
【００８５】
≪マイクロウエーブとポルフィリン類含有製剤の相乗効果に関する作用機序≫
本実施形態のポルフィリン類含有製剤の作用機序について、主に、マイクロウエーブとの相乗効果に関し、以下詳細に説明する。
【００８６】
＜ポルフィリン類含有製剤の作用機序＞
ポルフィリン類含有製剤の作用機序は、細胞中に入ったポルフィリン類含有製剤が、癌等のＤＮＡの構成塩基であるグアニン、アデニンのＮ−７位に結合することによる。二本のＤＮＡ鎖にポルフィリン類含有のような重原子が結合することにより架橋が形成され、ＤＮＡの複製が阻害されるのである。又、アポトーシスが誘導されるために、抗癌活性が発現されると考えられている。
【００８７】
＜マイクロウエーブの癌細胞殺傷作用の機序＞
上述したように、マイクロウエーブでは短時間、間歇的に温度を上げるため、ＨＳＰ（ヒートショックプロテイン）ができにくく、癌細胞を殺傷する。通常の温熱療法ではゆっくりと温まるために熱耐性を得るＨＳＰが増加しやすい。従って、ＨＳＰができないために癌細胞が熱耐性を持つことができず、熱による細胞死が促進される。更にマイクロウエーブ照射の作用機序としては、直接的にＤＮＡを損傷するほかに、ＡＫＴ−ｍＴＯＲタンパクを阻害し、４Ｅ−ＢＰ１及びｐ７０Ｓ６キナーゼのリン酸化を介したｍＲＮＡの翻訳、オートファジーの抑制、リボソームの生合成、そしてミトコンドリアの代謝や脂肪生成につながる転写活性化を抑制し、アポトーシスを起こすものである。
【００８８】
＜マイクロウエーブとポルフィリン類含有製剤の相乗作用の原理＞
マイクロウエーブとポルフィリン類含有製剤の相乗作用について、以下詳細に説明する。
【００８９】
上述のように、マイクロウエーブ単独では２８％程度の癌細胞殺傷率であり、本実施形態に好適に用いられる５−ＡＬＡ及びタラポルフィン単独でも、癌細胞阻害作用は認められている。この作用機序として、マイクロウエーブ単独での作用はＡＫＴ−ｍＴＯＲ系のアポトーシスが認められている（Motomura, T., et al.(2010), Evaluation of systemic external microwave hyperthermia for treatment of pleural metastasis in orthotopi lung cancer model. Oncology Reports 24:591-598.）。他方、まず、ポルフィリン類は癌細胞集積性の強い物質である（Taraporfin インタビューフォーム、及び、アミノレブリン酸 インタビューフォーム）。また、マイクロウエーブ照射によるプロトポルフィリンの活性化が起こり、一重項活性酸素等の活性酸素ＲＯＳが産生され、癌細胞のアポトーシスを起こすことが知られている（中島進  他, et al.(1982),microwave波によるsuperoxideの発生と癌細胞破壊効果, 医学の歩み 122, 256-260）。
【００９０】
更には、マイクロウエーブ照射は、細胞内に存在するＺｎやＣｕ等の重金属をポルフィリン類へキレート化して取りこみを促進し（Pineiro,M., (2014), Microwave-Assisted Synthesis and Reactivity of Porphyrins., Current Organic Synthesis, 11, 89-109.）、それらがＣａｐａｓｅ−３、 Ｃａｓｐａｃｅ−８等を阻害する（Signe B., et al. (2005), Metalloporphyrins inactivate caspase-3 and -8., FASEB J., 19, 1272-1279.）ことが知られている。このＣａｓｐａｓｅ３、８はＤＮＡを修復する酵素であるＰＡＲＰを活性化させる働きを持っている。よって、マイクロウエーブ照射は、ポルフィリン類を介して、このＣａｓｐａｓｅ３、８の働きを阻害することで、ＰＡＲＰのＤＮＡ修復の阻害にも寄与することとなる（Weaver A.N., (2013), Beyond DNA-repair : additonal functions of PARP1 in cancer., Frontiers in Oncology, 3, 1-11.、  Murai J., et al. (2012), Trapping of PARP1 and PARP2 by Clinical PARP inhibitors, Cancer Research 72, 5588-5599.、及び、Tuli R., et al., (2014), Radiosensitization of Pancreatic Cancer Cells In vitro and In vivo through Poly (ADP-ribose) Polymerase Inhibition with ABT 888., Translational Oncology, 7, 439-445.）。
【００９１】
即ち、マイクロウエーブ照射が、（１）直接的な腫瘍細胞のアポトーシス、（２）ポルフィリン類への相乗作用としての活性酸素での直接的なＤＮＡ損傷、及び、（３）ＤＮＡ損傷を修復するためのＰＡＲＰの活性阻害、の効果を奏することにより、全体として、ポルフィリン類との極めて大きい相乗作用が認められると考えられる。
【００９２】
＜適用される腫瘍部位の深さ＞
本発明によれば、従来のＰＤＴ療法よりも深部における癌に対しても適用することができる。マイクロウエーブの深達度は、組織の脂肪分等によっても異なるが、例えば、体表面から０．５ｃｍ以上であってもよく、更に１．０ｃｍ以上であってもよい。即ち、体表面から腫瘍部位の端部までが０．５ｃｍ以上、更に言えば１．０ｃｍ以上である場合にもその効果が期待できるものである。
【００９３】
＜用途＞
対象とする癌については、特に限定されないが、上述した深達度及び周辺の正常細胞への傷害性の低さから、ＰＤＴ療法で適用がない種類の癌又は肉腫であっても対象とすることができる。例えば、頭頚部癌、胃癌、結腸癌、直腸癌、大腸癌、肝臓癌、胆のう・胆管癌、膵臓癌、肺癌、乳癌、膀胱癌、前立腺癌、子宮癌、咽頭癌、食道癌、腎癌、卵巣癌、精巣癌、脂肪肉腫等が挙げられる。特に結腸癌、直腸癌、乳癌、食道癌、胃癌、頭頚部癌、脂肪肉腫に対しても高い効果が期待できる。
【実施例】
【００９４】
次に、本実施形態を実施例及び比較例により、更に具体的に説明するが、本発明は、これらの例によって何ら限定されるものではない。
【００９５】
ポルフィリン類含有製剤投与後のマイクロウエーブの照射による効果について調べるため、ＭＩＡＰａＣａ−２膵臓癌細胞を対象として、細胞増殖抑制についてｉｎ ｖｉｔｒｏ試験を行った。本試験には、以下の材料及び機器を使用した。
【００９６】
≪試験例１≫
使用製剤：ポルフィリン類含有製剤（製品名：５−アミノレブリン酸（５−ａｍｉｎｏｌｅｖｕｌｉｎｉｃ ａｃｉｄ、５−ＡＬＡ）１．５g／バイアル、ノーベルファーマ社製）
細胞：
（１）細胞株（ＭＩＡＰａＣａ−２膵臓癌細胞（ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ−１４２０TM）
（２）起源・由来：ヒト膵臓癌由来細胞株
（３）供給源：ＡＴＣＣ（American Type Culture Collection）
培養用プレート：セルカルチャープレート（１２穴）（型番：３５３０４３、ファルコン社製）
使用機器：名称（マイクロウエーブ治療器、株式会社テクノリンク社製）
【００９７】
＜実施例１＞
培養用プレートの１２のウェル内で、Dulbecco's Modified Eagle's Medium（ＤＭＥＭ）培地（１．０ｍＬ）に細胞株（５×１０４細胞／ｍＬ）を播種し、１８時間後（以後、細胞播種後の時間として記載する）、５−ＡＬＡの濃度を１．０μｍｏｌ／ｍＬとした試験液を１．０ｍＬ、それぞれに添加した。２４時間後（即ち、５−ＡＬＡ投与後４時間後）に図８に示すような機器の配置（プレートの中心とマグネトロンヘッドとの距離を３０ｃｍ）により、２．４５ＧＨｚの周波数でＭＷ（マイクロウエーブ）による第１回目の照射を行った。以降４８時間、７２時間後に第２〜３回のＭＷによる照射を行った。それぞれのＭＷ照射１回に付き、７秒照射、２秒休止、７秒照射、２秒休止、７秒照射で行った（図８）。その後、７４時間経過後に染色測定を行った。
【００９８】
＜実施例２＞
添加する５−ＡＬＡの濃度５．０μｍｏｌ／ｍＬとした以外は、実施例１と同様に試験を行った。
【００９９】
＜比較例１＞
マッコイ５ａ培地に細胞株を播種し、７４時間経過させた（コントロール）。
【０１００】
＜比較例２＞
５−ＡＬＡを添加しない以外は実施例１と同様に（即ち、ＭＷ照射のみ）試験を行った。
【０１０１】
＜比較例３＞
ＭＷ照射を行わない以外は、実施例１と同様に試験を行った。
【０１０２】
＜比較例４＞
ＭＷ照射を行わない以外は、実施例２と同様に試験を行った。
【０１０３】
表１に上述した条件を纏めて示した。
【０１０４】
【表１】
2017124994.tif 000002
【０１０５】
試験の結果を表２及び図９に示した。プレート中心部（ＮＯ６、７）でのマイクロウエーブ照射によるＭＩＡＰａＣａ−２膵臓癌細胞生存率はコントロール（ＭＷ非照射群)を１００％とした場合、ＭＷ単独照射では７２．０９％であり、２８％の生存率の減少率であった。５−ＡＬＡ１μｍｏｌ／ｍＬのみを添加した場合を１００％とすると、ＭＷ照射では４７．４８％と半減した。また、５−ＡＬＡ５μｍｏｌ／ｍＬでもＭＷ照射により５１．３７％と生存率は１／２まで減少し、明らかに相互作用が認められた。
【０１０６】
【表２】
2017124994.tif 000003
【０１０７】
また、ＩＣ５０を算出したところ、５−ＡＬＡのみの場合、ＩＣ５０は７．０７８μｍｏｌ／ｍＬであった（図１０）が、ＭＷ照射により、５−ＡＬＡのＩＣ５０は０．６７８μｍｏｌ／ｍＬであり（図１１）、ＭＷ非照射と比較して１０倍以上の差があり、ＩＣ５０の面からも相乗効果が認められた。結果を図１０、１１及び表３に示す。尚、ＩＣ５０の算出方法については、５−ＡＬＡの濃度に対して、ＭＩＡＰａＣａ−２膵臓癌細胞生存率の自然対数を取り、回帰直線を引くことにより算出した。
【０１０８】
【表３】
2017124994.tif 000004
【０１０９】
≪試験例２≫
使用製剤：ポルフィリン類含有製剤（製品名：レザフィリン（タラポルフィンナトリウム）４０ｍｇ／ｍＬ、Ｍｅｉｊｉ  Ｓｅｉｋａファルマ株式会社製）
細胞：
（１）細胞株（ＭＩＡＰａＣａ−２膵臓癌細胞（ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ−１４２０TM）
（２）起源・由来：ヒト膵臓癌由来細胞株
（３）供給源：ＡＴＣＣ（American Type Culture Collection）
使用機器：名称（マイクロウエーブ治療器、株式会社テクノリンク社製）
【０１１０】
＜実施例３＞
使用するポルフィリン類含有製剤をタラポルフィンとし、添加するタラポルフィンの濃度を３０μｇ／ｍＬとした試験液を添加した以外は、実施例１と同様に試験を行った。
【０１１１】
＜実施例４＞
添加するタラポルフィンの濃度を１００μｇ／ｍＬとした以外は、実施例３と同様に試験を行った。
【０１１２】
＜比較例５＞
ＭＷ照射を行わない以外は、実施例３と同様に試験を行った。
【０１１３】
＜比較例６＞
ＭＷ照射を行わない以外は、実施例４と同様に試験を行った。
【０１１４】
表４に上述した条件を纏めて示した。
【０１１５】
【表４】
2017124994.tif 000005
【０１１６】
試験の結果を表５及び図１２に示した。プレート中心部（ＮＯ．６、７）でのマイクロウエーブ照射によるＭＩＡＰａＣａ−２膵臓癌細胞生存率（平均値）は、タラポルフィン３０μｇ／ｍＬのみを添加した場合を１００％とすると、ＭＷ照射を併用した場合では４９．６０％と半減した。また、癌細胞生存率（平均値）は、タラポルフィン１００μｇ／ｍＬではＭＷ照射により２６．０２％と生存率は１／４まで減少し、明らかに相乗作用が認められた。
【０１１７】
【表５】
2017124994.tif 000006
【０１１８】
更に、ＩＣ５０を算出したところ、タラポルフィンのみの場合、ＩＣ５０は４４．４５７μｇ／ｍＬであったが、ＭＷ照射により、タラポルフィンのＩＣ５０は１５．１６２μｇ／ｍＬと、ＭＷ非照射と比較して約３倍の差があり、相乗作用が認められた。結果を図１３、１４及び表６に示す。尚、ＩＣ５０の算出方法については、タラポルフィンの濃度に対して、ＭＩＡＰａＣａ−２膵臓癌細胞生存率の自然対数を取り、回帰直線を引くことにより算出した。
【０１１９】
【表６】
2017124994.tif 000007
【０１２０】
≪試験例３≫
マイクロウエーブ波のフォーカス照射による、ポルフィリン類製剤との相乗作用を確認するため、図８に示す１２穴プレートのプレート孔６及び７以外におけるＭＩＡＰａＣａ−２の膵臓癌細胞生存率を以下の表７に示す条件において算出（プレート孔１〜５、８〜１２における数値の平均値として算出）した。プレート中心部（プレート孔６、７）から外れた位置以外は、表７のカッコ内に示す実施例及び比較例のそれぞれと同様の条件で測定を行った。ＭＩＡＰａＣａ−２膵臓癌細胞生存率及びその標準偏差の結果を表７に示す。
【０１２１】
【表７】
2017124994.tif 000008
【０１２２】
表７に示されるように、マイクロウエーブ波の共振点を外れた部位においては、マイクロウエーブ波によるポルフィリン類製剤との相乗作用は確認できなかった。このことから、フォーカス照射部位の外側（即ち照射対象の正常部位に相当）においては、マイクロウエーブ照射による細胞傷害は最小限に抑えられることがわかった。更に、これらの結果から、マイクロウエーブ波が共振する部位のみ、例えば照射対象の深部において、本発明の顕著な相乗効果が発揮されることが推認された。
【符号の説明】
【０１２３】
５・・・治療対象、１０・・・筐体、２０・・・支持台、３０・・・ガイドバー、３２・・・回転板、３５・・・移動部、４０・・・ボールスクリュー、５０・・・モーター、６０・・・マグネトロン本体部、６１・・・マグネトロンヘッド、６２・・・マイクロ電磁波発振部、６５・・・マグネトロン、７０・・・距離測定手段、７５・・・温度測定手段、８０・・・距離調整手段、９０・・・ホルダー、１００・・・マイクロウエーブ照射装置、２００，２１０・・・マイクロ電磁波発生部、Ａ，Ｂ・・・軌道、Ｃ・・・中心点。
【図１】
2017124994.tif 000009
【図２】
2017124994.tif 000010
【図３】
2017124994.tif 000011
【図４】
2017124994.tif 000012
【図５】
2017124994.tif 000013
【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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