(57)【要約】【課題】洗浄液のｐＨが弱酸性から弱アルカリ性であってもプロテアーゼによるタンパク質を含む汚れの洗浄性が低下しにくい衣料の洗浄方法を提供する。【解決手段】下記（Ａ）成分、（Ｂ）成分及び硬度を有する水を混合して得られた２０℃におけるｐＨが３．５以上８．５以下の洗浄液で衣料を洗浄する、衣料の洗浄方法。（Ａ）成分：炭素数１５以上２４以下の内部オレフィンスルホン酸塩（Ｂ）成分：プロテアーゼ【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記（Ａ）成分、（Ｂ）成分及び硬度を有する水を混合して得られた２０℃におけるｐＨが３．５以上８．５以下の洗浄液で衣料を洗浄する、衣料の洗浄方法。
（Ａ）成分：炭素数１５以上２４以下の内部オレフィンスルホン酸塩
（Ｂ）成分：プロテアーゼ
【請求項２】
（Ａ）成分が、スルホン酸基が２位以上４位以下に存在する炭素数１５以上２４以下の内部オレフィンスルホン酸塩（ＩＯ−１Ｓ）と、スルホン酸基が５位以上に存在する炭素数１５以上２４以下の内部オレフィンスルホン酸塩（ＩＯ−２Ｓ）であり、（ＩＯ−１Ｓ）／（ＩＯ−２Ｓ）の質量比が０．５０以上６．５以下である、請求項１に記載の衣料の洗浄方法。
【請求項３】
（Ａ）成分が、下記（ａ１）成分及び（ａ２）成分から選ばれる１種以上であり、（ａ２）成分と（ａ１）成分の質量比（ａ２）／（ａ１）が０以上１以下である、請求項１又は２記載の衣料の洗浄方法。
（ａ１）成分：炭素数１５以上１６以下の内部オレフィンスルホン酸塩
（ａ２）成分：炭素数１７以上２４以下の内部オレフィンスルホン酸塩
【請求項４】
前記洗浄液中の（Ａ）成分の含有量が５０ｍｇ／ｋｇ以上３０００ｍｇ／ｋｇ以下である、請求項１〜３の何れか１項記載の衣料の洗浄方法。
【請求項５】
洗浄した後の衣料を水で濯ぐ、請求項１〜４の何れか１項記載の衣料の洗浄方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、衣料の洗浄方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、アニオン性界面活性剤、特にアルキルベンゼンスルホン酸塩、炭素数２〜３のオキシアルキレン基を含むノニオン界面活性剤、オレフィンスルホン酸塩、特に二重結合をオレフィン鎖の末端ではなく内部に有する内部オレフィンを原料として得られる内部オレフィンスルホン酸塩は、家庭用及び工業用の洗浄成分として広く用いられている。また、プロテアーゼは衣料に付着した汚れの洗浄性を高める成分として使用されている。プロテアーゼは一般的に至適ｐＨがアルカリ性にあるものが多い。
【０００３】
特許文献１、２には、炭素数１６の内部オレフィンスルホン酸塩及び炭素数１８の内部オレフィンスルホン酸塩を特定比で含有し、ヒドロキシ体／オレフィン体が特定比である、起泡性等に優れた内部オレフィンスルホン酸塩組成物が開示されている。また、プロピレングリコール等の溶解剤を使用することが記載されている。
【０００４】
特許文献３には、β−ヒドロキシ体を２５％以上含有する内部オレフィンスルホン酸塩を含有し、洗浄性に優れた洗浄剤組成物が開示されている。具体例に、内部オレフィンスルホン酸塩とノニオン界面活性剤を含む洗浄剤組成物が記載されている。
【０００５】
特許文献４には、二重結合が２位に存在する割合の合計が２０〜９５％でありかつシス体／トランス体の比率が１／９〜６／４である炭素数８〜３０の内部オレフィンをスルホン化し、中和し、加水分解して得られることを特徴とする内部オレフィンスルホン酸塩を含む洗浄剤組成物が記載されている。処方例１には、内部オレフィンスルホン酸塩と、ポリオキシエチレン基を有するノニオン界面活性剤を含む衣料用粒状洗剤組成物が記載されている。処方例１又は処方例２では酵素が用いられている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開２０１５−２８１２３号公報
【特許文献２】特開２０１４−７７１２６号公報
【特許文献３】欧州特許公開公報３７７２６１号
【特許文献４】特開２００３−８１９３５号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、洗浄液のｐＨが弱酸性から弱アルカリ性であってもプロテアーゼによるタンパク質を含む汚れの洗浄性が低下しにくい衣料の洗浄方法を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、所定の内部オレフィンスルホン酸塩をプロテアーゼに対して併用することで、プロテアーゼがタンパク質を分解する作用が低下するような、弱酸性から弱アルカリ性の洗浄液においても、従来、洗浄成分として知られているアルキルベンゼンスルホン酸塩よりも優れた洗浄作用を有することを見出し、洗浄液のｐＨの選択幅が広がることを見出した。
【０００９】
本発明は、下記（Ａ）成分、（Ｂ）成分及び硬度を有する水を混合して得られた２０℃におけるｐＨが３．５以上８．５以下の洗浄液で衣料を洗浄する、衣料の洗浄方法に関する。
（Ａ）成分：炭素数１５以上２４以下の内部オレフィンスルホン酸塩
（Ｂ）成分：プロテアーゼ
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、洗浄液のｐＨが弱酸性から弱アルカリ性であっても、プロテアーゼによるタンパク質を含む汚れの洗浄性に優れる衣料の洗浄方法を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
＜（Ａ）成分＞
本発明の（Ａ）成分は１５以上２４以下の内部オレフィンスルホン酸塩であり、本発明においては、衣料に付着した汚れの洗浄作用を有する。特に後述する（Ｂ）成分と併用することで、２０℃における洗浄液のｐＨが３．５以上８．５以下の弱酸性から弱アルカリ性の条件下でも、一般的なスルホン酸塩であるアルキルベンゼンスルホン酸塩よりも（Ｂ）成分のタンパク質を含む汚れの洗浄作用が低下することを抑制できる化合物である。
【００１２】
（Ａ）成分における、内部オレフィンスルホン酸塩の炭素数は、スルホン酸塩が共有結合した内部オレフィンの炭素数を表す。（Ａ）成分における、内部オレフィンスルホン酸塩の炭素数は、衣料に付着した汚れの洗浄性がより向上できる観点から、１５以上、好ましくは１６以上、そして、２０℃における洗浄液のｐＨが３．５以上８．５以下の弱酸性から弱アルカリ性の条件下でも、（Ｂ）成分によるタンパク質を含む汚れの洗浄作用の低下を抑制できる観点から、２４以下、好ましくは２２以下、より好ましくは２０以下、更に好ましくは１８以下、より更に好ましくは１７以下であり、より更に好ましくは１６以下又は１６である。
【００１３】
（Ａ）成分は、２０℃における洗浄液のｐＨが３．５以上８．５以下の弱酸性から弱アルカリ性の条件下でも、（Ｂ）成分によるタンパク質を含む汚れの洗浄作用の低下を抑制できる観点から、下記（ａ１）成分及び（ａ２）成分から選ばれる１種以上であり、（ａ２）成分と（ａ１）成分の質量比（ａ２）／（ａ１）が０以上１以下であることが好ましい。
（ａ１）成分：炭素数１５以上１６以下の内部オレフィンスルホン酸塩
（ａ２）成分：炭素数１７以上２４以下の内部オレフィンスルホン酸塩
【００１４】
２０℃における洗浄液のｐＨが３．５以上８．５以下の弱酸性から弱アルカリ性の条件下でも、（Ｂ）成分によるタンパク質を含む汚れの洗浄作用の低下を抑制できる観点から、前記（ａ１）成分は炭素数１６の内部オレフィンスルホン酸塩が好ましく、前記（ａ２）成分は炭素数１８の内部オレフィンスルホン酸塩が好ましい。
【００１５】
（ａ２）成分と（ａ１）成分の質量比（ａ２）／（ａ１）は、２０℃における洗浄液のｐＨが３．５以上８．５以下の弱酸性から弱アルカリ性の条件下でも、（Ｂ）成分によるタンパク質を含む汚れの洗浄作用の低下を抑制できる観点から、好ましくは０以上、そして、好ましくは１以下、好ましくは０．９５以下、より好ましくは０．９以下、更に好ましくは０．８以下、より更に好ましくは０．７以下、より更に好ましくは０．６以下、より更に好ましくは０．５以下、より更に好ましくは０．４以下、より更に好ましくは０．３以下、より更に好ましくは０．２以下、より更に好ましくは０．１以下、より更に好ましくは０．０５以下であり、より更に好ましくは０である。
【００１６】
本発明の内部オレフィンスルホン酸塩は、原料として、二重結合が２位以上に存在する炭素数１５以上２４以下の内部オレフィンを含む内部オレフィン（二重結合をオレフィン鎖の内部に有するオレフィン）をスルホン化、中和及び加水分解することにより得られるスルホン酸塩である。
【００１７】
かかる内部オレフィンには、二重結合の位置が炭素鎖の１位に存在する、いわゆるアルファオレフィン（以下、α−オレフィンともいう。）を微量に含有するものも含まれる。
【００１８】
また、内部オレフィンをスルホン化すると、定量的にβ−サルトンが生成し、β−サルトンの一部は、γ−サルトン、オレフィンスルホン酸へと変化し、更にこれらは中和・加水分解工程においてヒドロキシアルカンスルホン酸塩と、オレフィンスルホン酸塩へと転換する（例えば、J. Am. Oil Chem. Soc. 69, 39(1992))。ここで、得られるヒドロキシアルカンスルホン酸塩のヒドロキシ基は、アルカン鎖の内部にあり、オレフィンスルホン酸塩の二重結合はオレフィン鎖の内部にある。また、得られる生成物は、主にこれらの混合物であり、またその一部には、炭素鎖の末端にヒドロキシ基を有するヒドロキシアルカンスルホン酸塩、又は炭素鎖の末端に二重結合を有するオレフィンスルホン酸塩が微量に含まれる場合もある。
【００１９】
本明細書では、これらの各生成物及びそれらの混合物を総称して内部オレフィンスルホン酸塩（（Ａ）成分）という。また、ヒドロキシアルカンスルホン酸塩を内部オレフィンスルホン酸塩のヒドロキシ体（以下、ＨＡＳともいう。）、オレフィンスルホン酸塩を内部オレフィンスルホン酸塩のオレフィン体（以下、ＩＯＳともいう。）という。
【００２０】
なお、（Ａ）成分中の化合物のＨＡＳとＩＯＳの質量比は、高速液体クロマトグラフィー質量分析計（以下、ＨＰＬＣ−ＭＳと省略）により測定できる。具体的には、（Ａ）成分のＨＰＬＣ−ＭＳピーク面積から質量比を求めることができる。
【００２１】
（Ａ）成分の内部オレフィンスルホン酸塩の塩としては、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属（１／２原子）塩、アンモニウム塩又は有機アンモニウム塩が挙げられる。アルカリ金属塩としては、ナトリウム塩、カリウム塩が挙げられる。有機アンモニウム塩としては炭素数２以上６以下のアルカノールアンモニウム塩が挙げられる。内部オレフィンスルホン酸塩の塩は、洗浄性の観点から、好ましくはアルカリ金属塩であり、より好ましくはナトリウム塩である。
【００２２】
（Ａ）成分の内部オレフィンスルホン酸塩のスルホン酸基は、上記の製法から明らかなように、内部オレフィンスルホン酸塩の炭素鎖、すなわちオレフィン鎖又はアルカン鎖の内部に存在し、その一部に炭素鎖の末端にスルホン酸基が存在するものも微量に含まれる場合もある。本発明においては、（Ａ）成分中における、スルホン酸基が２位に存在する内部オレフィンスルホン酸塩の含有量は、衣料に付着したタンパク質を含む汚れの洗浄性の向上の観点から、（Ａ）成分中に、好ましくは１０質量％以上、より好ましくは１５質量％以上、更に好ましくは２０質量％以上、より更に好ましくは２５質量％以上、より更に好ましくは３０質量％以上、より更に好ましくは３５質量％以上、より更に好ましくは４０質量％以上、そして、好ましくは６０質量％以下である。
（Ａ）成分中における、スルホン酸基が１位に存在するオレフィンスルホン酸塩の含有量は、洗浄に用いる水の温度が０℃以上１５℃以下の低温であっても、衣料に付着した汚れの洗浄性をより向上できる観点から、（Ａ）成分中に、好ましくは１０質量％以下、より好ましくは７質量％以下、更に好ましくは５質量％以下、より更に好ましくは３質量％以下、そして、生産コストの低減、及び生産性向上の観点から、好ましくは０．０１質量％以上である。
これらの化合物のスルホン酸基の位置は、オレフィン鎖又はアルカン鎖における位置である。
【００２３】
前記の内部オレフィンスルホン酸塩は、ヒドロキシ体とオレフィン体の混合物であることが出来る。（Ａ）成分中の内部オレフィンスルホン酸塩のオレフィン体の含有量と内部オレフィンスルホン酸塩のヒドロキシ体の含有量との質量比（オレフィン体／ヒドロキシ体）は、０／１００以上、更に５／９５以上、そして、５０／５０以下、更に４０／６０以下、更に３０／７０以下、更に２５／７５以下であることが出来る。
【００２４】
（Ａ）成分中における内部オレフィンスルホン酸塩のヒドロキシ体の含有量と内部オレフィンスルホン酸塩のオレフィン体の含有量との質量比は、（Ａ）成分から、ＨＰＬＣによりヒドロキシ体とオレフィン体を分離した後、実施例に記載の方法により測定することができる。
【００２５】
（Ａ）成分は、原料である炭素数１５以上２４以下の内部オレフィンをスルホン化し、中和し、加水分解することにより製造することができる。
スルホン化は、内部オレフィン１モルに対し三酸化硫黄ガスを１．０〜１．２モル反応させることにより行うことができる。反応温度は、２０〜４０℃で行うことができる。
中和は、スルホン酸基の理論値に対し１．０〜１．５モル倍量の水酸化ナトリウム、アンモニア、２−アミノエタノール等のアルカリ水溶液を反応させることにより行なわれる。
加水分解は、水の存在下９０〜２００℃で３０分〜３時間反応を行えばよい。
これらの反応は、連続して行うことができる。また反応終了後は、抽出、洗浄等により精製することができる。
【００２６】
なお、（Ａ）成分の内部オレフィンスルホン酸塩を製造するにあたり、炭素数１５以上２４以下に分布を有する原料内部オレフィンを用いてスルホン化、中和、加水分解の処理を行ってもよく、単一の炭素数を有する原料内部オレフィンを用いてスルホン化、中和、加水分解の処理を行ってもよく、また必要に応じて予め製造した異なる炭素数を有する複数種の内部オレフィンスルホン酸塩を混合してもよい。
【００２７】
本発明において内部オレフィンとは、上記の如く、二重結合をオレフィン鎖の内部に有するオレフィンをいう。（Ａ）成分の原料である内部オレフィンの炭素数は、１５以上２４以下である。（Ａ）成分に使用される内部オレフィンは１種単独で用いてもよく、２種以上組み合わせて用いてもよい。
【００２８】
原料オレフィン中における二重結合が１位に存在するオレフィン、いわゆるアルファオレフィンの合計含有量は、タンパク質を含む汚れの洗浄性がより向上する観点から、好ましくは１０質量％以下、より好ましくは７質量％以下、更に好ましくは５質量％以下、より更に好ましくは３質量％以下、そして、生産コストの低減、及び生産性向上の観点から、好ましくは０．０１質量％以上である。
【００２９】
（Ａ）成分は、二重結合が１位以上３以下に存在する炭素数１５以上２４以下のオレフィン（ＩＯ−１）と二重結合が５位以上に存在する炭素数１５以上２４以下のオレフィン（ＩＯ−２）とを（ＩＯ−１）／（ＩＯ−２）の質量比が０．５０以上６．５以下で含むオレフィンを原料として得られた内部オレフィンスルホン酸塩であることが好ましい。（ＩＯ−１）／（ＩＯ−２）の質量比は、衣料に付着したタンパク質を含む汚れの洗浄性の向上の観点から、０．５０以上、好ましくは０．６５以上、より好ましくは０．７０以上、更に好ましくは０．８０以上、より更に好ましくは０．８５以上、そして、６．５以下、好ましくは６．０以下である。なお、原料内部オレフィンにおける二重結合の位置の最大値は、炭素数により異なる。
【００３０】
原料オレフィン中における二重結合の分布は、例えば、ガスクロマトグラフ質量分析計（以下、ＧＣ−ＭＳと省略）により測定することができる。具体的には、ガスクロマトグラフ分析計（以下、ＧＣと省略）により炭素鎖長及び二重結合位置の異なる各成分を正確に分離し、それぞれを質量分析計（以下、ＭＳと省略）にかけることで、その二重結合位置を同定することができ、そのＧＣピーク面積から各々の割合を求めることができる。以下に、原料内部オレフィンの二重結合位置の測定方法を示す。
＜原料内部オレフィンの二重結合位置の測定方法＞
内部オレフィンの二重結合位置は、ガスクロマトグラフィー（以下、ＧＣと省略）により測定する。具体的には、内部オレフィンに対しジメチルジスルフィドを反応させることでジチオ化誘導体とした後、各成分をＧＣで分離する。結果、それぞれのピーク面積より内部オレフィンの二重結合位置を求める。
尚、測定に使用する装置及び分析条件は次の通りである。
ＧＣ装置「ＨＰ６８９０」（ＨＥＷＬＥＴＴ ＰＡＣＫＡＲＤ社製）、
カラム「Ｕｌｔｒａ−Ａｌｌｏｙ−１ＨＴキャピラリーカラム」（３０ｍ×２５０μｍ×０．１５μｍ、フロンティア・ラボ株式会社製）、
検出器（水素炎イオン検出器（ＦＩＤ））、
インジェクション温度３００℃、
ディテクター温度３５０℃、
Ｈｅ流量４．６ｍＬ／分
【００３１】
（Ａ）成分は、スルホン酸基が２位以上４以下に存在する炭素数１５以上２４以下の内部オレフィンスルホン酸塩（ＩＯ−１Ｓ）と、スルホン酸基が５位以上に存在する炭素数１５以上２４以下のオレフィン（ＩＯ−２Ｓ）とを含む内部オレフィンスルホン酸塩であることが好ましい。（ＩＯ−２Ｓ）は、好ましくは、スルホン酸基が５位以上９位以下に存在する炭素数１５以上２４以下のオレフィンである。（ＩＯ−１Ｓ）／（ＩＯ−２Ｓ）の質量比は、衣料に付着したタンパク質を含む汚れの洗浄性の向上の観点から、好ましくは０．６５以上、より好ましくは０．７０以上、更に好ましくは０．７５以上、より更に好ましくは０．８０以上、より更に好ましくは０．８５以上、そして、好ましくは５．０以下である。なお、内部オレフィンスルホン酸塩におけるスルホン酸基の位置の最大値は、炭素数により異なる。
尚、（Ａ）成分中における、スルホン酸基の位置の異なる各化合物の含有量は、ＨＰＬＣ−ＭＳにより測定できる。本明細書におけるスルホン酸基の位置の異なる各化合物の含有量は、（Ａ）成分の全ＨＡＳ体における、スルホン酸基が各位置にある化合物のＨＰＬＣ−ＭＳピーク面積に基づく質量比として求めるものとする。
【００３２】
＜（Ｂ）成分＞
本発明の（Ｂ）成分はプロテアーゼであり、衣料に付着したタンパク質を含む汚れの洗浄作用を有する。プロテアーゼとしては、好ましくは中性からアルカリ側に至適ｐＨが存在するものであれば如何なる酵素でもよく、またこの条件を満たす複数のプロテアーゼを組合せて使用することが可能である。本発明の（Ａ）成分を（Ｂ）成分と併用することで、アルカリ側に至適ｐＨが存在するプロテアーゼであっても、２０℃における洗浄液のｐＨが３．５以上８．５以下の幅広い洗浄条件であっても、本発明の（Ｂ）成分の洗浄力の変化を抑制することができる。本発明の（Ｂ）成分はバチルス  エスピー（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ＳＰ）に由来するズブチリシンプロテアーゼが好ましく、中でも、バチルス  ハロデュランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  Ｈａｌｏｄｕｒａｎｓ）、バチルス  クラウジ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｌａｕｓｉｉ）に由来するズブチリシンプロテアーゼが好ましい。市販されているアルカリプロテアーゼとしては、ノボザイムズジャパン社から入手できるアルカラーゼ、サビナーゼ、エバラーゼ、エスペラーゼ、カンナーゼ、オボザイム、ジェネンコア・インターナショナル社から入手できるプラフェクト、プロペラーゼなどがある。また特開２００７−６１１０１号公報に記載されたプロテアーゼも好適に使用できる。（Ｂ）成分は、（１）酵素蛋白質を含む液体、（２）酵素蛋白質の乾燥物、及び（３）酵素蛋白質を含む粒子、等の形態で本発明に用いられる洗浄液の調製に用いることができる。
【００３３】
＜水＞
本発明で、（Ａ）成分、（Ｂ）成分と混合して洗浄液を調製する水は、硬度を有する水である。水の硬度は、本発明の効果をより享受できる観点から、ドイツ硬度で、好ましくは１°ｄＨ以上、より好ましくは２°ｄＨ以上、更に好ましくは３．５°ｄＨ以上、より更に好ましくは５°ｄＨ以上、より更に好ましくは７°ｄＨ以上、そして、好ましくは２０°ｄＨ以下、より好ましくは１８°ｄＨ以下、更に好ましくは１５°ｄＨ以下である。ここで、本明細書におけるドイツ硬度（°ｄＨ）とは、水中におけるカルシウム及びマグネシウムの濃度を、ＣａＣＯ３換算濃度で１ｍｇ／Ｌ（ｐｐｍ）＝約０．０５６°ｄＨ（１°ｄＨ＝１７．８ｐｐｍ）で表したものを指す。
このドイツ硬度のためのカルシウム及びマグネシウムの濃度は、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム塩を使用したキレート滴定法で求められる。
本明細書における水のドイツ硬度の具体的な測定方法を下記に示す。
＜水のドイツ硬度の測定方法＞
〔試薬〕
・０．０１ｍｏｌ／ｌ  ＥＤＴＡ・２Ｎａ溶液：エチレンジアミン四酢酸二ナトリウムの０．０１ｍｏｌ／ｌ水溶液（滴定用溶液、0.01 M EDTA-Na2、シグマアルドリッチ（SIGMA-ALDRICH）社製）
・Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  ＢＴ指示薬（製品名：Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  ＢＴ、（株）同仁化学研究所製）
・硬度測定用アンモニア緩衝液（塩化アンモニウム６７．５ｇを２８ｗ／ｖ％アンモニア水５７０ｍｌに溶解し、イオン交換水で全量を１０００ｍｌとした溶液）
〔硬度の測定〕
（１）試料となる水２０ｍｌをホールピペットでコニカルビーカーに採取する。
（２）硬度測定用アンモニア緩衝液２ｍｌ添加する。
（３）Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  ＢＴ指示薬を０．５ｍｌ添加する。添加後の溶液が赤紫色であることを確認する。
（４）コニカルビーカーをよく振り混ぜながら、ビュレットから０．０１ｍｏｌ／ｌ  ＥＤＴＡ・２Ｎａ溶液を滴下し、試料となる水が青色に変色した時点を滴定の終点とする。（５）全硬度は下記の算出式で求める。
硬度（°ｄＨ）＝Ｔ×０．０１×Ｆ×５６．０７７４×１００／Ａ
Ｔ：０．０１ｍｏｌ／ｌ  ＥＤＴＡ・２Ｎａ溶液の滴定量（ｍＬ）
Ａ：サンプル容量（２０ｍＬ、試料となる水の容量）
Ｆ：０．０１ｍｏｌ／ｌ  ＥＤＴＡ・２Ｎａ溶液のファクター
【００３４】
本発明で用いられる洗浄液は、（Ａ）成分、（Ｂ）成分、及びドイツ硬度が１°ｄＨ以上２０°ｄＨ以下の水を混合して得られた洗浄液が好ましい。
【００３５】
＜衣料＞
本発明において衣料とは、後述する疎水性繊維や親水性繊維を用いた織物、編物、不織布等の布帛及びそれを用いて得られたアンダーシャツ、Ｔシャツ、Ｙシャツ、ブラウス、スラックス、帽子、ハンカチ、タオル、ニット、靴下、下着、タイツ等の製品を意味する。
【００３６】
＜繊維＞
前記の衣料を構成する繊維は、疎水性繊維、親水性繊維のいずれでも良い。疎水性繊維としては、例えば、タンパク質系繊維（牛乳タンパクガゼイン繊維、プロミックスなど）、ポリアミド系繊維（ナイロンなど）、ポリエステル系繊維（ポリエステルなど）、ポリアクリロニトリル系繊維（アクリルなど）、ポリビニルアルコール系繊維（ビニロンなど）、ポリ塩化ビニル系繊維（ポリ塩化ビニルなど）、ポリ塩化ビニリデン系繊維（ビニリデンなど）、ポリオレフィン系繊維（ポリエチレン、ポリプロピレンなど）、ポリウレタン系繊維（ポリウレタンなど）、ポリ塩化ビニル／ポリビニルアルコール共重合系繊維（ポリクレラールなど）、ポリアルキレンパラオキシベンゾエート系繊維（ベンゾエートなど）、ポリフルオロエチレン系繊維（ポリテトラフルオロエチレンなど）、ガラス繊維、炭素繊維、アルミナ繊維、シリコーンカーバイト繊維、岩石繊維（ロックファーイバー）、鉱滓繊維（スラッグファイバー）、金属繊維（金糸、銀糸、スチール繊維）等が例示される。親水性繊維としては、例えば、種子毛繊維（綿、もめん、カポックなど）、靭皮繊維（麻、亜麻、苧麻、大麻、黄麻など）、葉脈繊維（マニラ麻、サイザル麻など）、やし繊維、いぐさ、わら、獣毛繊維（羊毛、モヘア、カシミヤ、らくだ毛、アルパカ、ビキュナ、アンゴラなど）、絹繊維（家蚕絹、野蚕絹）、羽毛、セルロース系繊維（レーヨン、ポリノジック、キュプラ、アセテートなど）等が例示される。
【００３７】
＜衣料の洗浄方法＞
本発明の衣料の洗浄方法は、下記（Ａ）成分、（Ｂ）成分及び硬度を有する水を混合して得られた２０℃におけるｐＨが３．５以上８．５以下の洗浄液で衣料を洗浄する方法である。
（Ａ）成分：炭素数１５以上２４以下の内部オレフィンスルホン酸塩
（Ｂ）成分：プロテアーゼ
【００３８】
本発明に用いられる洗浄液中の（Ａ）成分の含有量は、衣料の洗浄に際し、タンパク質を含む汚れの洗浄性がより向上する観点から、好ましくは５０ｍｇ／ｋｇ以上、より好ましくは８０ｍｇ／ｋｇ以上、更に好ましくは１００ｍｇ／ｋｇ以上、より更に好ましくは２００ｍｇ／ｋｇ以上、より更に好ましくは５００ｍｇ／ｋｇ以上、より更に好ましくは７００ｍｇ／ｋｇ以上、そして、好ましくは４０００ｍｇ／ｋｇ以下である。
なお洗浄液に含まれる（Ａ）成分の含有量は、対イオンをナトリウムイオンと仮定して算出した値に基づくものとする。
【００３９】
本発明に用いられる洗浄液中の（Ｂ）成分の含有量は、酵素タンパク量として、好ましくは０．１ｍｇ／ｋｇ以上、より好ましくは０．２ｍｇ／ｋｇ以上、更に好ましくは０．５ｍｇ／ｋｇ以上、より更に好ましくは１ｍｇ／ｋｇ以上、そして、洗浄コストの観点から好ましくは１００ｍｇ／ｋｇ以下、より好ましくは５０ｍｇ／ｋｇ以下、更に好ましくは３０ｍｇ／ｋｇ以下、より更に好ましくは１０ｍｇ／ｋｇ以下である。
なお、本発明において、（Ｂ）成分の酵素タンパク量は、プロテインアッセイラピッドワコー（和光純薬工業（株）製）で測定された値を使用するものとする。
【００４０】
洗浄液の温度は、衣料に付着したタンパク質を含む汚れの洗浄性がより向上できる観点から、好ましくは０℃以上、より好ましくは３℃以上、更に好ましくは５℃以上、そして、洗浄コストの観点から好ましくは６０℃以下、より好ましくは５０℃以下、更に好ましくは４０℃以下、より更に好ましくは３５℃以下である。
【００４１】
洗浄液の２０℃におけるｐＨは、タンパク質を含む汚れの洗浄性がより向上できる観点から、３．５以上、好ましくは４．０以上であり、本発明においては、（Ａ）成分を（Ｂ）成分であるプロテアーゼと併用することで、洗浄液のｐＨがアルカリ側から低下しても、アルキルベンゼンスルホン酸塩よりもプロテアーゼによるタンパク質を含む汚れの洗浄性の低下が抑制できる点で、８．５以下、好ましくは８．０以下、より好ましくは７．５以下である。ｐＨは下記の「ｐＨの測定法」により測定することができる。
＜ｐＨの測定法＞
ｐＨメーター（ＨＯＲＩＢＡ製  ｐＨ／イオンメーター Ｆ−２３）にｐＨ測定用複合電極（ＨＯＲＩＢＡ製 ガラス摺り合わせスリーブ型）を接続し、電源を投入する。ｐＨ電極内部液としては、飽和塩化カリウム水溶液（３．３３モル／Ｌ）を使用する。次に、ｐＨ４．０１標準液（フタル酸塩標準液）、ｐＨ６．８６（中性リン酸塩標準液）、ｐＨ９．１８標準液（ホウ酸塩標準液）をそれぞれ１００ｍＬビーカーに充填し、２５℃の恒温槽に３０分間浸漬する。恒温に調整された標準液にｐＨ測定用電極を３分間浸し、ｐＨ６．８６→ｐＨ９．１８→ｐＨ４．０１の順に校正操作を行う。測定対象となるサンプルを２５℃に調整し、前記のｐＨメーターの電極をサンプルに浸漬し、１分後のｐＨを測定する。
【００４２】
衣料の質量（ｋｇ）と洗浄液の量（リットル）の比で表される浴比の値、すなわち洗浄液の量（リットル）／衣料の質量（ｋｇ）（以下、この比を浴比とする場合もある）の値は、好ましくは２以上、より好ましくは３以上、更に好ましくは４以上、より更に好ましくは５以上、そして、好ましくは１００以下である。
【００４３】
衣料を洗浄する時間は、衣料に付着したタンパク質を含む汚れを落としやすくする観点から、好ましくは１分以上、より好ましくは２分以上、更に好ましくは３分以上、そして、好ましくは１２時間以下、より好ましくは８時間以下、更に好ましくは６時間以下、より更に好ましくは３時間以下、より更に好ましくは１時間以下である。
【００４４】
本発明の衣料の洗浄方法は、衣料を洗浄液に漬け置いて洗浄する方法として好適である。漬け置おいて洗浄する方法とは、衣料を洗浄液に一定時間漬け置く期間がある方法をいう。好ましくは、衣料を洗浄液に漬け置いて洗浄する方法では、洗浄液に一定時間漬け置いた後、任意で手動又は洗濯機などの機械力により、衣料と洗浄液とを混ぜ合わせて攪拌洗浄が行われる。
【００４５】
本発明の衣料を洗浄する方法は、回転式洗浄方法にも適している。回転式洗浄方法とは、回転機器に固定されていない衣料が洗浄液と共に、回転軸の周りに回転する洗浄方法を意味する。回転式洗浄方法は回転式洗濯機により実施できる。回転式の洗濯機としては、具体的には、ドラム式洗濯機、パルセータ式洗濯機又はアジテータ式洗濯機が挙げられる。これらの回転式洗濯機は、それぞれ、家庭用として市販されているものを使用することができる。１回の洗濯に使用する水の量がより低減できる点で、近年、ドラム式洗濯機が急速に普及している、ドラム式洗濯機は、とりわけ洗浄時の水の量を低減できる。
【００４６】
（Ａ）成分と（Ｂ）成分と硬度を有する水を含む洗浄液を得る場合、（Ａ）成分と（Ｂ）成分と硬度を有する水を別々に、容器内に投入してもよく、（Ａ）成分と（Ｂ）成分と硬度を有する水から選ばれる２つを予め投入した投入物と残りの成分とを容器内に投入してもよい。
（Ａ）成分と（Ｂ）成分と硬度を有する水を別々に、容器内に投入する場合、（Ａ）成分と（Ｂ）成分と硬度を有する水は容器内に逐次投入しても良く、同時に投入しても良い。また各成分は一度に全量投入しても良く、分割して投入しても良い。
（Ａ）成分と（Ｂ）成分と硬度を有する水から選ばれる２つを予め投入した投入物と残りの成分とを容器内に投入する場合、投入物と残りの成分は容器内に逐次投入しても良く、同時に投入しても良い。また各成分は一度に全量投入しても良く、分割して投入しても良い。
【００４７】
＜任意成分＞
本発明で用いる洗浄液は、（Ａ）成分、（Ｂ）成分、及び硬度を有する水以外の成分を含有することができる。
〔（Ｃ）成分：（Ａ）成分以外の界面活性剤〕
本発明で用いる洗浄液は、本発明の効果を妨げない範囲で、（Ｃ）成分として（Ａ）成分以外の界面活性剤を使用することが出来る。（Ｃ）成分としては、（Ａ）成分以外のアニオン界面活性剤、及びノニオン界面活性剤から選ばれる１種以上の界面活性剤が挙げられる。（Ｃ）成分として、下記（ｃ１）成分、（ｃ２）成分、（ｃ３）成分及び（ｃ４）成分から選ばれる１種以上のアニオン界面活性剤が挙げられる。
（ｃ１）成分：アルキル又はアルケニル硫酸エステル塩
（ｃ２）成分：ポリオキシアルキレンアルキルエーテル硫酸エステル塩又はポリオキシアルキレンアルケニルエーテル硫酸エステル塩
（ｃ３）成分：スルホン酸塩基を有するアニオン界面活性剤（但し、（Ａ）成分を除く）
（ｃ４）成分：脂肪酸又はその塩
【００４８】
（ｃ１）成分として、より具体的には、アルキル基の炭素数が１０以上１８以下のアルキル硫酸エステル塩、及びアルケニル基の炭素数が１０以上１８以下のアルケニル硫酸エステル塩から選ばれる１種以上のアニオン界面活性剤が挙げられる。洗浄性の向上の観点から、（ｃ１）成分は、アルキル基の炭素数が１２以上１４以下のアルキル硫酸塩から選ばれる１種以上のアニオン界面活性剤が好ましく、アルキル基の炭素数が１２以上１４以下のアルキル硫酸ナトリウムから選ばれる１種以上のアニオン界面活性剤がより好ましい。
【００４９】
（ｃ２）成分として、より具体的には、アルキル基の炭素数が１０以上１８以下、アルキレンオキシド平均付加モル数が１以上３以下のポリオキシアルキレンアルキル硫酸エステル塩、及びアルケニル基の炭素数が１０以上１８以下、及びアルキレンオキシド平均付加モル数が１以上３以下のポリオキシアルキレンアルケニルエーテル硫酸エステル塩から選ばれる１種以上のアニオン界面活性剤が挙げられる。洗浄性の向上の観点から、（ｃ２）成分は、エチレンオキシドの平均付加モル数が１以上２．２以下であるポリオキシエチレンアルキル硫酸塩が好ましく、アルキル基の炭素数が１２以上１４以下でかつ、エチレンオキシドの平均付加モル数が１以上２．２以下であるポリオキシエチレンアルキル硫酸塩がより好ましく、さらに、これらのナトリウム塩が更に好ましい。
【００５０】
（ｃ３）成分であるスルホン酸塩基を有するアニオン界面活性剤とは、親水基としてスルホン酸塩を有するアニオン界面活性剤を表す（但し、（Ａ）成分を除く）。
（ｃ３）成分として、より具体的には、アルキル基の炭素数が１０以上１８以下のアルキルベンゼンスルホン酸塩、アルケニル基の炭素数が１０以上１８以下のアルケニルベンゼンスルホン酸塩、アルキル基の炭素数が１０以上１８以下のアルカンスルホン酸塩、α−オレフィン部分の炭素数が１０以上１８以下のα−オレフィンスルホン酸塩、脂肪酸部分の炭素数が１０以上１８以下のα−スルホ脂肪酸塩、及び脂肪酸部分の炭素数が１０以上１８以下であり、エステル部分の炭素数が１以上５以下であるα−スルホ脂肪酸低級アルキルエステル塩、炭素数が１２以上１４以下の内部オレフィンスルホン酸塩から選ばれる１種以上のアニオン界面活性剤が挙げられる。洗浄性の向上の観点から、（ｃ３）成分は、アルキル基の炭素数が１１以上１４以下のアルキルベンゼンスルホン酸塩が好ましく、アルキル基の炭素数が１１以上１４以下のアルキルベンゼンスルホン酸ナトリウムがより好ましい。
【００５１】
（ｃ４）成分である脂肪酸又はその塩としては、炭素数１０以上２０以下の脂肪酸又はその塩が挙げられる。（Ａ）成分による繊維の柔軟化効果をより高める観点から、（ｃ４）成分の炭素数は、１０以上、好ましくは１２以上、より好ましくは１４以上、そして、２０以下、好ましくは１８以下である。
（ｃ１）成分〜（ｃ４）成分であるアニオン界面活性剤の塩としては、アルカリ金属塩が好ましく、ナトリウム塩又はカリウム塩がより好ましく、ナトリウム塩が更に好ましい。
【００５２】
また、他の（Ｃ）成分としては、（ｃ５）成分として、ノニオン界面活性剤、好ましくは水酸基又はポリオキシアルキレン基を有するノニオン界面活性剤が挙げられる。
【００５３】
（ｃ５）成分は、ポリオキシアルキレン基を有するノニオン界面活性剤が好ましい。好ましい（ｃ５）成分は、ポリオキシエチレン基を含みＨＬＢが８以上２０以下のノニオン界面活性剤である。本発明において、（ｃ５）成分のＨＬＢは、プロテアーゼが分解したタンパク質を洗浄液中に分散する効果が高い観点から、好ましくは９以上、より好ましくは１０以上、更に好ましくは１１以上、より更に好ましくは１２以上、より更に好ましくは１３以上、より更に好ましくは１４以上、そして、好ましくは２０以下である。
本発明におけるノニオン界面活性剤のＨＬＢの値は、下記式で算出されるＨＬＢを言う。ポリオキシエチレン基の平均分子量とは、オキシエチレン基の付加モル数が分布を有する場合、平均付加モル数から算出された平均分子量を表す。またノニオン界面活性剤の平均分子量とは、炭化水素基などの疎水基が分布を有する場合やポリオキシエチレン基の付加モル数が分布を有する場合は、平均値で算出される分子量である。
ＨＬＢ＝〔（ポリオキシエチレン基の平均分子量）／〔ノニオン界面活性剤の平均分子量〕〕×２０
尚、以下に具体的なノニオン界面活性剤を例示するが、前記のオキシエチレン基をエチレンオキシ基と称する場合がある。
また、本発明において、ノニオン界面活性剤がポリオキシエチレン基を含まない場合、ノニオン界面活性剤のＨＬＢは、“Journal of Colloid and Interface Science,Vol.107.No.1,September1985”に記載された国枝らの方法に従って測定されたものを言う。この文献には、特定の温度（ＴＨＬＢ）とグリフィン（Griffin）によるＨＬＢ数とが線形関係にあるという知見に基づくＨＬＢの測定法である。
【００５４】
（ｃ５）成分は、ＨＬＢが好ましくは８以上、そして、２０以下であり、且つ下記一般式（Ｃ５−１）で表されるノニオン界面活性剤が好適である。
Ｒ１（ＣＯ）ｍＯ−（Ａ１Ｏ）ｎ−Ｒ２        （Ｃ５−１）
〔式中、Ｒ１は炭素数９以上１６以下の脂肪族炭化水素基であり、Ｒ２は水素原子又はメチル基であり、ＣＯはカルボニル基であり、ｍは０又は１の数であり、Ａ１Ｏ基はエチレンオキシ基及びプロピレンオキシ基から選ばれる１種以上の基であり、ｎは平均付加モル数であって、６以上５０以下の数である。〕
【００５５】
一般式（Ｃ５−１）中、Ｒ１は炭素数９以上１６以下の脂肪族炭化水素基である。Ｒ１の炭素数が長くなるほどＨＬＢの値は低くなり、また短い方がＨＬＢの値が高くなる。繊維に付着した汚れをより落としやすくする点で、Ｒ１の炭素数は、９以上、好ましくは１０以上、より好ましくは１１以上、そして、プロテアーゼが分解したタンパク質を洗浄液中に分散する効果が高い観点から、１６以下、好ましくは１５以下、より好ましくは１４以下である。
Ｒ１の脂肪族炭化水素基としては、アルキル基及びアルケニル基から選ばれる基が好ましい。
【００５６】
一般式（Ｃ５−１）中、Ａ１Ｏ基は、エチレンオキシ基及びプロピレンオキシ基から選ばれる１種以上の基である。エチレンオキシ基及びプロピレンオキシ基を含む場合は、エチレンオキシ基とプロピレンオキシ基は、ブロック型結合でもランダム型結合であっても良い。Ａ１Ｏ基は、プロテアーゼが分解したタンパク質を洗浄液中に分散する効果が高い観点から、エチレンオキシ基を含む基であることが好ましい。Ａ１Ｏ基がエチレンオキシ基の場合、プロピレンオキシ基の場合よりもＨＬＢの値が高くなる。
【００５７】
一般式（Ｃ５−１）中、ｎは平均付加モル数であって、６以上５０以下の数である。ｎの数が大きくなる程ＨＬＢの値は高くなり、小さくなる程ＨＬＢの値は低くなる。ｎは、プロテアーゼが分解したタンパク質を洗浄液中に分散する効果が高い観点から、６以上、好ましくは６．５以上、より好ましくは７以上、更に好ましくは８以上、より更に好ましくは９以上、より更に好ましくは１０以上、より更に好ましくは１２以上、そして、５０以下、好ましくは４５以下である。
【００５８】
〔（Ｄ）成分：アルカリ剤、緩衝剤〕
本発明の衣料の洗浄方法において、洗浄液のｐＨを調整する方法として、（Ｄ）成分としてアルカリ剤や緩衝剤を含有することが出来る。アルカリ剤の具体例として、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、セスキ炭酸ナトリウム及び炭酸水素ナトリウムから選ばれる１種以上の無機のアルカリ剤を挙げることが出来る。無機のアルカリ剤は、炭酸ナトリウム及び炭酸カリウムから選ばれる１種以上のアルカリ剤が好ましく、炭酸ナトリウムがより好ましい。また、他のアルカリ剤として、窒素原子に結合する基のうち、１つ以上、３つ以下が炭素数２以上４以下のアルカノール基であり、残りが炭素数１以上４以下のアルキル基又は水素原子であるアルカノールアミンを挙げることができる。このうちアルカノール基はヒドロキシアルキル基、更にヒドロキシエチル基であるものが好ましい。アルカノール基以外は水素原子、又はメチル基が好ましく、特に水素原子が好ましい。アルカノールアミンとしては、２−アミノエタノール、Ｎ−メチルエタノールアミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルエタノールアミン、Ｎ，Ｎ−ジエチルエタノールアミン、ジエタノールアミン、Ｎ−メチルジエタノールアミン、トリエタノールアミン等のアルカノールアミン類が挙げられる。本発明では、（Ｄ）成分のアルカリ剤として、モノエタノールアミン及びトリエタノールアミンから選ばれるアルカノールアミンが好ましく、モノエタノールアミンがより好ましい。
【００５９】
緩衝剤としては、酢酸緩衝液、クエン酸緩衝液、ＭＯＰＳ緩衝液、リン酸緩衝液、トリス塩酸緩衝液、グリシン−水酸化ナトリウム緩衝液、ホウ酸緩衝液、炭酸緩衝液、またはリン酸−水酸化ナトリウム緩衝液が挙げられる。
【００６０】
〔任意の工程〕
本発明の衣料の洗浄方法では、洗浄した後の衣料を水で濯ぐことが好ましい。濯ぎは、洗浄液から衣料を取り出し、絞って洗浄液を除くか、脱水機を用いて洗浄液を除き、次いで、新しい水〔以下すすぎ水という〕に再度浸漬させる。すすぎ水は、容器などにためた水でも流水でもどちらでも良い。衣料に対するすすぎ水の質量の割合は、好ましくは２倍以上、より好ましくは５倍以上、より好ましくは１０倍以上であり、そして、好ましくは１，０００倍以下、より好ましくは５００倍以下、より好ましくは１００倍以下である。この操作を数回繰り返すことで、衣料に付着した（Ａ）成分の量を少なくすることができる。なお、濯ぎに用いる水は、洗浄液と混合する水と同じ範囲のドイツ硬度のもの又は異なるドイツ硬度のものが使用できる。濯ぎは、複数行うことができる。
【００６１】
本発明は、（Ｂ）成分との併用において（Ａ）成分が洗浄作用を増強させることを見出したものである。従って、本発明は、下記（Ｂ）成分及び硬度を有する水を混合して得られた２０℃におけるｐＨが３．５以上８．５以下の洗浄液で衣料を洗浄する際に、前記洗浄液中に下記（Ａ）成分を存在させる、（Ｂ）成分の洗浄作用の増強方法に関する。
（Ａ）成分：炭素数１５以上２４以下の内部オレフィンスルホン酸塩
（Ｂ）成分：プロテアーゼ
【００６２】
＜本発明の態様＞
以下に、本発明の態様を例示する。これらの態様には、本発明の衣料の洗浄方法で述べた事項を適宜適用することができる。
【００６３】
＜１＞
下記（Ａ）成分、（Ｂ）成分及び硬度を有する水を混合して得られた２０℃におけるｐＨが３．５以上８．５以下の洗浄液で衣料を洗浄する、衣料の洗浄方法。
（Ａ）成分：炭素数１５以上２４以下の内部オレフィンスルホン酸塩
（Ｂ）成分：プロテアーゼ
【００６４】
＜２＞
（Ａ）成分が、スルホン酸基が２位以上４以下に存在する炭素数１５以上２４以下の内部オレフィンスルホン酸塩（ＩＯ−１Ｓ）と、スルホン酸基が５位以上に存在する炭素数１５以上２４以下のオレフィン（ＩＯ−２Ｓ）とを含む内部オレフィンスルホン酸塩である、＜１＞に記載の衣料の洗浄方法。
【００６５】
＜３＞
（ＩＯ−１Ｓ）／（ＩＯ−２Ｓ）の質量比が、好ましくは０．５０以上、より好ましくは０．６５以上、更に好ましくは０．７０以上、より更に好ましくは０．７５以上、より更に好ましくは０．８０以上、より更に好ましくは０．８５以上、そして、好ましくは６．５以下、より好ましくは５．０以下である、＜２＞に記載の衣料の洗浄方法。
【００６６】
＜４＞
（Ａ）成分が、スルホン酸基が２位以上４位以下に存在する炭素数１５以上２４以下の内部オレフィンスルホン酸塩（ＩＯ−１Ｓ）と、スルホン酸基が５位以上に存在する炭素数１５以上２４以下の内部オレフィンスルホン酸塩（ＩＯ−２Ｓ）であり、（ＩＯ−１Ｓ）／（ＩＯ−２Ｓ）の質量比が０．５０以上、好ましくは０．６５以上、より好ましくは０．７０以上、更に好ましくは０．７５以上、より更に好ましくは０．８０以上、より更に好ましくは０．８５以上、そして、６．５以下、好ましくは５．０以下である、＜１＞〜＜３＞の何れかに記載の衣料の洗浄方法。
【００６７】
＜５＞
（ＩＯ−２Ｓ）が、スルホン酸基が５位以上９位以下に存在する炭素数１５以上２４以下のオレフィンである、＜２＞〜＜４＞の何れかに記載の衣料の洗浄方法。
【００６８】
＜６＞
（Ａ）成分が、下記（ａ１）成分及び（ａ２）成分から選ばれる１種以上であり、（ａ２）成分と（ａ１）成分の質量比（ａ２）／（ａ１）が０以上１以下である、＜１＞〜＜５＞の何れかに記載の衣料の洗浄方法。
（ａ１）成分：炭素数１５以上１６以下の内部オレフィンスルホン酸塩
（ａ２）成分：炭素数１７以上２４以下の内部オレフィンスルホン酸塩
【００６９】
＜７＞
前記（ａ１）成分は炭素数１６の内部オレフィンスルホン酸塩であり、前記（ａ２）成分は炭素数１８の内部オレフィンスルホン酸塩である、＜６＞に記載の衣料の洗浄方法。
【００７０】
＜８＞
（ａ２）成分と（ａ１）成分の質量比（ａ２）／（ａ１）が、０．９５以下、より好ましくは０．９以下、更に好ましくは０．８以下、より更に好ましくは０．７以下、より更に好ましくは０．６以下、より更に好ましくは０．５以下、より更に好ましくは０．４以下、より更に好ましくは０．３以下、より更に好ましくは０．２以下、より更に好ましくは０．１以下、より更に好ましくは０．０５以下であり、より更に好ましくは０である、＜６＞又は＜７＞に記載の衣料の洗浄方法。
【００７１】
＜９＞
（Ａ）成分中における、スルホン酸基が２位に存在する内部オレフィンスルホン酸塩の含有量が、（Ａ）成分中に、好ましくは１０質量％以上、より好ましくは１５質量％以上、更に好ましくは２０質量％以上、より更に好ましくは２５質量％以上、より更に好ましくは３０質量％以上、より更に好ましくは３５質量％以上、より更に好ましくは４０質量％以上、そして、好ましくは６０質量％以下である、＜１＞〜＜８＞の何れかに記載の衣料の洗浄方法。
【００７２】
＜１０＞
（Ａ）成分中における、スルホン酸基が１位に存在するオレフィンスルホン酸塩の含有量が、（Ａ）成分中に、好ましくは１０質量％以下、より好ましくは７質量％以下、更に好ましくは５質量％以下、より更に好ましくは３質量％以下、そして、好ましくは０．０１質量％以上である、＜１＞〜＜９＞の何れかに記載の衣料の洗浄方法。
【００７３】
＜１１＞
（Ｂ）成分が、バチルス  エスピー（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ＳＰ）に由来するズブチリシンプロテアーゼである、好ましくはバチルス  ハロデュランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  Ｈａｌｏｄｕｒａｎｓ）又はバチルス  クラウジ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｌａｕｓｉｉ）に由来するズブチリシンプロテアーゼである、＜１＞〜＜１０＞の何れかに記載の衣料の洗浄方法。
【００７４】
＜１２＞
硬度を有する水の硬度が、ドイツ硬度で、好ましくは１°ｄＨ以上、より好ましくは２°ｄＨ以上、更に好ましくは３．５°ｄＨ以上、より更に好ましくは５°ｄＨ以上、より更に好ましくは７°ｄＨ以上、そして、好ましくは２０°ｄＨ以下、より好ましくは１８°ｄＨ以下、更に好ましくは１５°ｄＨ以下である、＜１＞〜＜１１＞の何れかに記載の衣料の洗浄方法。
【００７５】
＜１３＞
前記洗浄液中の（Ａ）成分の含有量が５０ｍｇ／ｋｇ以上４０００ｍｇ／ｋｇ以下である、＜１＞〜＜１２＞の何れかに記載の衣料の洗浄方法。
【００７６】
＜１４＞
前記洗浄液中の（Ａ）成分の含有量が、好ましくは５０ｍｇ／ｋｇ以上、より好ましくは８０ｍｇ／ｋｇ以上、更に好ましくは１００ｍｇ／ｋｇ以上、より更に好ましくは２００ｍｇ／ｋｇ以上、より更に好ましくは５００ｍｇ／ｋｇ以上、より更に好ましくは７００ｍｇ／ｋｇ以上、そして、好ましくは４０００ｍｇ／ｋｇ以下、より好ましくは３０００ｍｇ／ｋｇ以下である、＜１＞〜＜１３＞の何れかに記載の衣料の洗浄方法。
【００７７】
＜１５＞
前記洗浄液中の（Ｂ）成分の含有量が、酵素タンパク量として、好ましくは０．１ｍｇ／ｋｇ以上、より好ましくは０．２ｍｇ／ｋｇ以上、更に好ましくは０．５ｍｇ／ｋｇ以上、より更に好ましくは１ｍｇ／ｋｇ以上、そして、好ましくは１００ｍｇ／ｋｇ以下、より好ましくは５０ｍｇ／ｋｇ以下、更に好ましくは３０ｍｇ／ｋｇ以下、より更に好ましくは１０ｍｇ／ｋｇ以下である、＜１＞〜＜１４＞の何れかに記載の衣料の洗浄方法。
【００７８】
＜１６＞
前記洗浄液の２０℃におけるｐＨが、３．５以上、好ましくは４．０以上であり、そして、８．５以下、好ましくは８．０以下、より好ましくは７．５以下である、＜１＞〜＜１５＞の何れかに記載の衣料の洗浄方法。
【００７９】
＜１７＞
衣料を洗浄する時間が、好ましくは１分以上、より好ましくは２分以上、更に好ましくは３分以上、そして、好ましくは１２時間以下、より好ましくは８時間以下、更に好ましくは６時間以下、より更に好ましくは３時間以下、より更に好ましくは１時間以下である、＜１＞〜＜１６＞の何れかに記載の衣料の洗浄方法。
【００８０】
＜１８＞
衣料を前記洗浄液に漬け置いて洗浄する、＜１＞〜＜１７＞の何れかに記載の衣料の洗浄方法。
【００８１】
＜１９＞
衣料を前記洗浄液に漬け置いた後、衣料と前記洗浄液とを混ぜ合わせて攪拌洗浄を行う、＜１８＞に記載の衣料の洗浄方法。
【００８２】
＜２０＞
洗浄した後の衣料を水で濯ぐ、＜１＞〜＜１９＞の何れかに記載の衣料の洗浄方法。
【００８３】
＜２１＞
前記洗浄液が、（Ｃ）成分として、（Ａ）成分以外の界面活性剤を含有する、好ましくは水酸基又はポリオキシアルキレン基を有するノニオン界面活性剤を含有する、＜１＞〜＜２０＞の何れかに記載の衣料の洗浄方法。
【００８４】
＜２２＞
（Ｃ）成分が、ＨＬＢが好ましくは８以上、そして、２０以下であり、且つ下記一般式（Ｃ５−１）で表されるノニオン界面活性剤である、＜２１＞に記載の衣料の洗浄方法。
Ｒ１（ＣＯ）ｍＯ−（Ａ１Ｏ）ｎ−Ｒ２        （Ｃ５−１）
〔式中、Ｒ１は炭素数９以上１６以下の脂肪族炭化水素基であり、Ｒ２は水素原子又はメチル基であり、ＣＯはカルボニル基であり、ｍは０又は１の数であり、Ａ１Ｏ基はエチレンオキシ基及びプロピレンオキシ基から選ばれる１種以上の基であり、ｎは平均付加モル数であって、６以上５０以下の数である。〕
【００８５】
＜２３＞
下記（Ｂ）成分及び硬度を有する水を混合して得られた２０℃におけるｐＨが３．５以上８．５以下の洗浄液で衣料を洗浄する際に、前記洗浄液中に下記（Ａ）成分を存在させる、（Ｂ）成分の洗浄作用の増強方法。
（Ａ）成分：炭素数１５以上２４以下の内部オレフィンスルホン酸塩
（Ｂ）成分：プロテアーゼ
【実施例】
【００８６】
〔（Ａ）成分の合成〕
（１）内部オレフィンＡの合成（製造例Ａ）
（Ａ）成分の原料となる内部オレフィンＡを下記の通り合成した。
攪拌装置付きフラスコに1−ヘキサデカノール（製品名：カルコール６０９８、花王株式会社製）７０００ｇ（２８．９モル）、固体酸触媒としてγ−アルミナ（ＳＴＲＥＭ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ社）７００ｇ（原料アルコールに対して１０質量％）を仕込み、攪拌下、２８０℃にて系内に窒素（７０００ｍＬ／ｍｉｎ．）を流通させながら反応時間を製造例Ａ〜Ｃごとにそれぞれ変化させて反応を行った。得られた粗内部オレフィンを蒸留用フラスコに移し、１３６−１６０℃／４．０ｍｍＨｇで蒸留することでオレフィン純度１００％の炭素数１６の内部オレフィンＡを得た。得られた内部オレフィンＡの二重結合分布を表１に示す。
【００８７】
（２）内部オレフィンＢの合成（製造例Ｂ）
前記の製造例Ａにおいて１−オクタデカノール（製品名：カルコール８０９８、花王株式会社製）７０００ｇ（２８．９モル）に置き換えて、（Ｂ）成分の原料となる、炭素数１８の内部オレフィンＢを得た。得られた内部オレフィンＢの二重結合分布を表１に示す。
【００８８】
【表１】
2017214569.tif 000002
【００８９】
内部オレフィンの二重結合分布は、ガスクロマトグラフィー（以下、ＧＣと省略）により測定した。具体的には、内部オレフィンに対しジメチルジスルフィドを反応させることでジチオ化誘導体とした後、各成分をＧＣで分離した。結果、それぞれのピーク面積より内部オレフィンの二重結合分布を求めた。なお、炭素数１６のオレフィンでは、二重結合が７位に存在する内部オレフィンと二重結合が８位に存在する内部オレフィンは構造上区別できないが、スルホン化された場合には区別されるため、便宜的に、二重結合が７位に存在する内部オレフィンの量を２で割った値を、７位、８位のそれぞれの欄に示した。同様に、炭素数１８のオレフィンでは、二重結合が８位に存在する内部オレフィンと二重結合が９位に存在する内部オレフィンは構造上区別できないが、スルホン化された場合には区別されるため、便宜的に、二重結合が８位に存在する内部オレフィンの量を２で割った値を、８位、９位のそれぞれの欄に示した。
尚、測定に使用した装置及び分析条件は次の通りである。ＧＣ装置「ＨＰ６８９０」（ＨＥＷＬＥＴＴ ＰＡＣＫＡＲＤ社製）、カラム「Ｕｌｔｒａ−Ａｌｌｏｙ−１ＨＴキャピラリーカラム」（３０ｍ×２５０μｍ×０．１５μｍ、フロンティア・ラボ株式会社製）、検出器（水素炎イオン検出器（ＦＩＤ））、インジェクション温度３００℃、ディテクター温度３５０℃、Ｈｅ流量４．６ｍＬ／分
【００９０】
（３）炭素数１６の内部オレフィンスルホン酸塩の製造
製造例Ａにより得られた内部オレフィンＡを、外部にジャケットを有する薄膜式スルホン化反応器を使用して三酸化硫黄ガス、反応器外部ジャケットに２０℃の冷却水を通液することでスルホン化反応を行った。スルホン化反応の際のＳＯ３／内部オレフィンのモル比は１．０９に設定した。得られたスルホン化物を、理論酸価に対し１．５モル倍量の水酸化ナトリウムで調製したアルカリ水溶液へ添加し、攪拌しながら３０℃、１時間中和した。中和物をオートクレーブ中で１６０℃、１時間加熱することで加水分解を行い、炭素数１６内部オレフィンスルホン酸ナトリウム粗生成物を得た。該粗生成物３００ｇを分液漏斗に移し、エタノール３００mLを加えた後、１回あたり石油エーテル３００mLを加えて油溶性の不純物を抽出除去した。この際、エタノールの添加により油水界面に析出した無機化合物（主成分は芒硝）も、油水分離操作により水相から分離除去した。この抽出除去操作を３回おこなった。水相側を蒸発乾固することで、炭素数１６内部オレフィンスルホン酸ナトリウムである（ａ−１）を得た。
（ａ−１）は、オレフィン体／ヒドロキシ体の質量比が８／９２であった。オレフィン体／ヒドロキシ体の質量比は、ＨＰＬＣ−ＭＳにより測定した。具体的には、ＨＰＬＣによりヒドロキシ体とオレフィン体を分離し、それぞれをＭＳにかけることで同定した。結果、そのＨＰＬＣ-ＭＳピーク面積から各々の割合を求めた。
尚、測定に使用した装置及び条件は次の通りである。ＨＰＬＣ装置「アジレントテクノロジー１１００」（アジレントテクノロジー社製）、カラム「Ｌ−ｃｏｌｕｍｎＯＤＳ」（４．６×１５０ｍｍ、一般財団法人化学物質評価研究機構製）、サンプル調製（メタノールで１０００倍希釈）、溶離液Ａ（１０ｍＭ酢酸アンモニウム添加水）、溶離液Ｂ（１０ｍＭ酢酸アンモニウム添加メタノール）、グラジェント（０分（Ａ／Ｂ＝３０／７０％）→１０分（３０／７０％）→５５分（０／１００％）→６５分（０／１００％）→６６分（３０／７０％）→７５分（３０／７０％）、ＭＳ装置「アジレントテクノロジー１１００ＭＳＳＬ（Ｇ１９４６Ｄ）」（アジレントテクノロジー社製）、ＭＳ検出（陰イオン検出ｍ／ｚ６０−１６００、ＵＶ２４０ｎｍ）
【００９１】
（４）炭素数１８の内部オレフィンスルホン酸塩の製造
内部オレフィンＢを、外部にジャケットを有する薄膜式スルホン化反応器を使用して三酸化硫黄ガス、反応器外部ジャケットに２０℃の冷却水を通液することでスルホン化反応を行った。スルホン化反応の際のＳＯ3／内部オレフィンのモル比は１．０９に設定した。得られたスルホン化物を、理論酸価に対し１．５モル倍量の水酸化ナトリウムで調製したアルカリ水溶液へ添加し、攪拌しながら３０℃、１時間中和させた。中和物をオートクレーブ中で１６０℃、１時間加熱することで加水分解を行い、各内部オレフィンスルホン酸ナトリウム粗生成物を得た。該粗生成物３００ｇを分液漏斗に移し、エタノール３００mLを加えた後、１回あたり石油エーテル３００mLを加えて油溶性の不純物を抽出除去した。この際、エタノールの添加により油水界面に析出した無機化合物（主成分は芒硝）も、油水分離操作により水相から分離除去した。この抽出除去操作を３回おこなった。水相側を蒸発乾固することで、下記の各内部オレフィンスルホン酸ナトリウムを得た。オレフィン体（オレフィンスルホン酸ナトリウム）／ヒドロキシ体（ヒドロキシアルカンスルホン酸ナトリウム）の各質量比１７／８３である。
【００９２】
スルホン酸基が結合している内部オレフィンスルホン酸塩の含有割合は、高速液体クロマトグラフィー／質量分析計（ＨＰＬＣ−ＭＳ）により測定した。具体的には、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によりスルホン酸酸基が結合しているヒドロキシ体を分離し、それぞれを質量分析計（ＭＳ）にかけることで同定した。結果、そのＨＰＬＣ-ＭＳピーク面積から各々の割合を求めた。本明細書においては、ピーク面積から求めた各々の割合を質量割合として算出した。
尚、測定に使用した装置及び条件は次の通りである。ＨＰＬＣ装置「ＬＣ−２０ＡＳＸＲ」（（株）島津製作所製）、カラム「ＯＤＳ  Ｈｙｐｅｒｓｉｌ（登録商標）」（４．６×２５０ｍｍ、粒子サイズ：３μｍ、サーモフィッシャーサイエンティフィック社製）、サンプル調製（メタノールで１０００倍希釈）、溶離液Ａ（１０ｍＭ酢酸アンモニウム添加水）、溶離液Ｂ（１０ｍＭ酢酸アンモニウム添加  メタクリロニトリル／水＝９５／５（ｖ／ｖ）溶液）、グラジェント（０分（Ａ／Ｂ＝６０／４０）→１５．１〜２０分（３０／７０）→２０．１〜３０分（６０／４０）、ＭＳ装置「ＬＣＭＳ−２０２０」（（株）島津製作所製）、ＥＳＩ検出（陰イオン検出ｍ／ｚ：３４９．１５（炭素数１８の（Ａ）成分）、３２１．１０（炭素数１６の（Ａ）成分）、カラム温度（４０℃）、流速（０．５ｍＬ／ｍｉｎ）、インジェクション容量（５μＬ）。
また、得られた（ａ−１）、（ａ−２）のスルホン酸基が結合した炭素の位置分布を表２に示す。
【００９３】
【表２】
2017214569.tif 000003
【００９４】
＜配合成分＞
〔（Ａ）成分〕
（ａ−１）：内部オレフィンＡから得られた内部オレフィンスルホン酸ナトリウム塩、内部オレフィンスルホン酸ナトリウム中のオレフィン体（オレフィンスルホン酸ナトリウム）／ヒドロキシ体（ヒドロキシアルカンスルホン酸ナトリウム）の質量比は８／９２。
（ａ−２）：内部オレフィンＢから得られた内部オレフィンスルホン酸ナトリウム塩
内部オレフィンスルホン酸ナトリウム中のオレフィン体（オレフィンスルホン酸ナトリウム）／ヒドロキシ体（ヒドロキシアルカンスルホン酸ナトリウム）の質量比は１７／８３。
【００９５】
〔（Ａ’）成分：（Ａ）成分の比較化合物〕
（ａ’−１）：アルキルベンゼンスルホン酸ナトリウム（ネオペレックスＧ−１５、花王（株)製）
【００９６】
〔（Ｂ）成分〕
（ｂ−１）成分：プロテアーゼ製剤（花王（株）製）
（ｂ−２）成分：Ｓａｖｉｎａｓｅ１６Ｌ酵素製剤（ノボザイム社製）
【００９７】
〔（Ｃ）成分〕
（ｃ−１）：ポリオキシエチレンラウリルエーテル（オキシエチレン基の平均付加モル数４０モル）
〔水〕
イオン交換水の硬度を、塩化カルシウムと塩化マグネシウムを、塩化カルシウム／塩化マグネシウム＝８／２（質量比）で用いて、１０°ｄＨに調整した水
【００９８】
〔洗浄試験１〕
硬度が１０°ｄＨ（硬度成分の質量比は塩化カルシウム：塩化マグネシウム＝８：２）の水を、１０ｍＭトリス塩酸を用いてｐＨ７．５（２０℃）に調整した。この水に、（Ａ）成分又は（Ａ’）成分、任意の（Ｃ）成分を洗浄液中の最終濃度の合計が表３の比率で２５００ｍｇ／ｋｇになるように添加した。そこへ、タンパク質濃度が２．４ｍｇ／ｋｇ又は６ｍｇ／ｋｇになるように（Ｂ）成分を添加し、洗浄液を調製した。酵素製剤中のタンパク質濃度は、プロテインアッセイラピッドワコー（和光純薬工業（株）製）を用いて測定した。尚、洗浄液のｐＨは前記のｐＨの測定方法に従って測定した。
調製した洗浄液５ｍＬに、人工汚染布ＣＦＴ  ＡＳ−１０（ＣＦＴ社製、ミルク／落花生油／色素汚れ）を１ｃｍ×１ｃｍ角に裁断したものを投入し、２５℃で、３０分間つけおいた。浴比は９０である。その後、水道水によるすすぎを行ない、風乾させた。色彩色差計（ＭＩＮＯＬＴＡ、ＣＭ３５００ｄ）を用いて明度を測定し、洗浄前後における明度の変化から下記の式で洗浄率を算出した。
また、１０ｍＭトリス塩酸を用いてｐＨを９に調整した水を用いて、同様に洗浄を行い、洗浄率を算出した。
結果を表３に示す。
洗浄率（％）＝（Ｌ２−Ｌ１）／（Ｌ０−Ｌ１）×１００
Ｌ０：汚染布の原布の明度
Ｌ１：洗浄前の汚染布の明度
Ｌ２：洗浄後の汚染布の明度
【００９９】
【表３】
2017214569.tif 000004
【０１００】
表３の結果により、洗浄液のｐＨが９の時の洗浄率と洗浄液のｐＨが７．５の時の洗浄力を比較すると、一般的なスルホン酸塩であるアルキルベンゼンスルホン酸塩とプロテアーゼを併用した洗浄方法よりも、本発明の（Ａ）成分とプロテアーゼを併用する洗浄方法が、ｐＨが低下することによる洗浄率の低下度合が低く、洗浄力がより維持できていることが判る。また、一般的なスルホン酸塩であるアルキルベンゼンスルホン酸塩とプロテアーゼを併用した洗浄方法よりも、本発明の（Ａ）成分とプロテアーゼを併用する洗浄方法が、洗浄力が高いことが判る。
【０１０１】
〔洗浄試験２〕
硬度が１０°ｄＨ（硬度成分の質量比は塩化カルシウム：塩化マグネシウム＝８：２）の水を、１０ｍＭトリス塩酸を用いてｐＨ７．５（２０℃）に調整した。この水に、（Ａ）成分又は（Ａ’）成分を最終濃度が２５０、５００、１０００、２０００、４０００ｍｇ／ｋｇになるように添加した。ここで、（Ａ）成分は（ａ−１）を、（Ａ’）成分は（ａ’−１）を用いた。そこへ、（ｂ−２）のＳａｖｉｎａｓｅ１６Ｌ酵素製剤（ノボザイム）をタンパク質濃度が６ｍｇ／ｋｇになるように添加した洗浄液を調製した。酵素製剤中のタンパク質濃度は、プロテインアッセイラピッドワコー（和光純薬工業（株）製）を用いて測定した。尚、洗浄液のｐＨは前記のｐＨの測定方法に従って測定した。
調製した洗浄液５ｍＬに、人工汚染布ＣＦＴ  ＡＳ−１０（ＣＦＴ社製、ミルク／落花生油／色素汚れ）を１ｃｍ×１ｃｍ角に裁断したものを投入し、２５℃で、３０分間つけおいた。浴比は９０である。その後、水道水によるすすぎを行ない、風乾させた。以下、洗浄試験１と同様に洗浄率を算出した。結果を表４に示す。
【０１０２】
【表４】
2017214569.tif 000005
【０１０３】
表４の結果により、洗浄液中の（Ａ）成分の濃度が変わっても、一般的なスルホン酸塩であるアルキルベンゼンスルホン酸塩とプロテアーゼを併用した洗浄方法よりも、本発明の（Ａ）成分とプロテアーゼを併用する洗浄方法が、洗浄力が高いことが判る。
【０１０４】
〔洗浄試験３〕
硬度が１０°ｄＨ（硬度成分の質量比は塩化カルシウム：塩化マグネシウム＝８：２）の水を、１０ｍＭトリス塩酸を用いて、７．０、７．５、８．０、８．５、又は９．０に調整した。それぞれの水に、（Ａ）成分又は（Ａ’）成分を最終濃度が１０００ｍｇ／ｋｇになるように添加した。ここで、（Ａ）成分は（ａ−１）を、（Ａ’）成分は（ａ’−１）を用いた。そこへ、タンパク質濃度が６ｍｇ／ｋｇになるように（Ｂ）成分を添加し、洗浄液を調製した。酵素製剤中のタンパク質濃度は、プロテインアッセイラピッドワコー（和光純薬工業（株）製）を用いて測定した。尚、表５の洗浄液のｐＨは、（Ａ）成分又は（Ａ’）成分、及び（Ｂ）成分を含む洗浄液のｐＨである。
調製した洗浄液５ｍＬに、人工汚染布ＣＦＴ  ＡＳ−１０（ＣＦＴ社製、ミルク／落花生油／色素汚れ）を１ｃｍ×１ｃｍ角に裁断したものを、洗浄液５ｍＬに投入し、２５℃で、３０分間つけおいた。浴比は９０である。その後、水道水によるすすぎを行ない、風乾させた。以下、洗浄試験１と同様に洗浄率を算出した。結果を表５に示す。
【０１０５】
【表５】
2017214569.tif 000006
【０１０６】
表５の結果により、洗浄液のｐＨが変わっても、一般的なスルホン酸塩であるアルキルベンゼンスルホン酸塩とプロテアーゼを併用した洗浄方法よりも、本発明の（Ａ）成分とプロテアーゼを併用する洗浄方法が、洗浄力が高いことが判る。