(57)【要約】【課題】香成分を吸着させることができ、更に吸着した香成分の徐放性、持続性および洗濯耐久性に優れる残香性シルクおよびその製造方法、ならびに香成分を含む固形状のシルクから気化する香成分を評価する方法を提供すること。【解決手段】予備凍結され、続いて凍結乾燥されてなる、香成分と、家蚕由来の絹フィブロイン、野蚕由来の絹フィブロイン、家蚕由来の絹フィブロインおよび野蚕由来の絹フィブロインの複合体から選ばれた絹フィブロインとを含む固体状の乾燥シルクからなる残香性シルクおよびその製造方法、ならびにＧＣ-ＭＳを用いる残香性シルク中の香成分の主成分の検出方法。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
予備凍結され、続いて凍結乾燥されてなる、香成分と、家蚕由来の絹フィブロイン、野蚕由来の絹フィブロイン、家蚕由来の絹フィブロインおよび野蚕由来の絹フィブロインの複合体から選ばれた絹フィブロインとを含む固体状の乾燥シルクからなることを特徴とする残香性シルク。
【請求項２】
前記予備凍結により凍結されて固化されてなる香成分と絹フィブロインとの混合物が、この中に含まれる水分が昇華されるように凍結乾燥されてなることを特徴とする請求項１に記載の残香性シルク。
【請求項３】
請求項１または２に記載の残香性シルクに、さらに水を添加してなることを特徴とする残香性シルク。
【請求項４】
香成分と、家蚕由来の絹フィブロイン、野蚕由来の絹フィブロイン、家蚕由来の絹フィブロインおよび野蚕由来の絹フィブロインの複合体から選ばれた絹フィブロインのシルク水溶液とを予備凍結し、続いて凍結乾燥させ、該香成分と該絹フィブロインとを含む固体状の乾燥シルクからなる残香性シルクを製造することを特徴とする残香性シルクの製造方法。
【請求項５】
前記予備凍結により凍結して固化した香成分と絹フィブロインとの混合物を、この中に含まれる水分を昇華するように凍結乾燥することを特徴とする請求項４に記載の残香性シルクの製造方法。
【請求項６】
請求項４または５に記載の製造方法により製造した残香性シルクに水を添加することを特徴とする残香性シルクの製造方法。
【請求項７】
前記絹フィブロインのシルク水溶液の濃度が０．１〜６重量％であり、固体状の乾燥シルクが粉末状の乾燥シルクまたは多孔質体の乾燥シルクであることを特徴とする請求項４〜６のいずれか１項に記載の残香性シルクの製造方法。
【請求項８】
蓋付きの容器内に、香成分と、家蚕由来の絹フィブロイン、野蚕由来の絹フィブロイン、家蚕由来の絹フィブロインおよび野蚕由来の絹フィブロインの複合体から選ばれた絹フィブロインのシルク水溶液とを入れ、これを凍結して固化するように予備凍結し、続いて凍結されて固化された香成分と絹フィブロインとの混合物を、この中に含まれる水分が昇華されるように凍結乾燥させた後、該容器内の上部空隙から気化された香成分を採取し、この採取された香成分をガスクロマトグラフ−質量分析計にかけ、香成分の主要な化合物を検出することを特徴とする香成分の検出方法。
【請求項９】
前記絹フィブロインのシルク水溶液の濃度が０．１〜６重量％であり、前記凍結乾燥させた後に得られた乾燥シルクが粉末状の乾燥シルクまたは多孔質体の乾燥シルクであることを特徴とする請求項８に記載の香成分の検出方法。
【請求項１０】
香成分と、家蚕由来の絹フィブロイン、野蚕由来の絹フィブロイン、家蚕由来の絹フィブロインおよび野蚕由来の絹フィブロインの複合体から選ばれた絹フィブロインとを含むシルク膜からなることを特徴とする残香性シルク。
【請求項１１】
香成分と、家蚕由来の絹フィブロイン、野蚕由来の絹フィブロイン、家蚕由来の絹フィブロインおよび野蚕由来の絹フィブロインの複合体から選ばれた絹フィブロインのシルク水溶液とを基体表面に拡げ、蒸発乾燥固化させ、香成分と該絹フィブロインとを含む残香性シルク膜を製造することを特徴とする残香性シルク膜の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、香成分を包括したシルクからなる残香性シルクおよびその製造方法ならびに残香性シルク中の香成分の検出方法に関わり、さらに詳しくは、絹タンパク質から製造したシルク水溶液に香成分を混合し、所定の処理をしてなる、香成分を包括した残香性シルクであって、各種香成分を安定に吸着し、香の持続性に優れる残香性シルクおよびその製造方法、ならびにガスクロマトグラフ−質量分析計（ＧＣ−ＭＳ）を用いる残香性シルク中の香成分の検出方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
最近、身の回りには香成分が広く満ちており、その香りを楽しむだけでなく、香成分には心身の病を癒す神秘的な力があると信じられ、香成分が商品化されている。香りそのものの心身への効果に関し、一般的に、主成分としてアルコール、ケトン、テルペン、エステルを含む芳香油には鎮静剤的な作用が、アルデヒド、フェノール類、脂肪酸エステルを含む芳香油には興奮剤的な作用があると言われている。
【０００３】
こうした香成分を経済的に、また、効率的に活用するには、少量の香成分をいかに効果的に長期にわたって揮発させるかが重要であり、香成分を包括する有効な素材の探索が行われている。
【０００４】
昆虫生体高分子のシルクの場合、桑の葉を飼料として摂食した蚕が絹糸腺で生合成して体内に蓄え、吐糸して繭糸である絹糸となる。絹糸は、香成分を吸着することができる素材であることが示唆されているが、香成分の適用方法は難しく、解決しなければならない問題が多数ある。
【０００５】
成熟した蚕幼虫が吐糸して作り出すタンパク質繊維が繭繊維（絹糸）である。蚕には、農家が飼育する家蚕および野生タイプの野蚕の二種類がある。この繭繊維表面を覆っている膠着物質のセリシンをアルカリ処理等で除去したものが絹フィブロイン（絹フィブロイン繊維とも称す）である。
【０００６】
野蚕絹糸とは、通常、柞蚕(Antheraea pernyi)、天蚕(Antheraea yamamai)、タサール蚕(Antheraea militta)、ムガ蚕(Antheraea assama)、エリ蚕、シンジュ蚕等が吐糸して作った絹糸のことをいう。
【０００７】
絹タンパク質繊維から絹フィブロイン水溶液を調製するには、家蚕または野蚕由来の生糸、絹糸が用いられ、これらの生糸あるいは絹糸を炭酸ナトリウム等のアルカリ水溶液で煮沸すると絹糸表面を被う膠状のタンパク質であるセリシンが除去でき、絹フィブロイン繊維が調製できる。かくして調製される絹フィブロイン繊維を加熱して濃厚な中性塩水溶液で溶解し、それをセルロース製の透析膜に入れ、水と置換することで純粋な絹フィブロイン水溶液を調製できる。
【０００８】
この絹フィブロイン水溶液をポリエチレン膜等の基質膜上で乾燥固化させると透明な絹フィブロイン膜（シルク膜）ができる。また、絹フィブロイン水溶液を凍結乾燥するとシルクスポンジ（シルク多孔質体）あるいはシルク粉末が製造できる。
【０００９】
家蚕由来の絹フィブロイン繊維を溶解するには、例えば、塩化カルシウム、硝酸カルシウム、臭化リチウム等の一般に知られた中性塩が利用できる。絹糸の溶解性を高め、未変性状態に近い絹フィブロイン繊維を製造するためには、溶解性の高いリチウムイオンの臭化リチウム等が特に好ましく用いられる。
【００１０】
野蚕由来の絹フィブロイン繊維を調製するには、柞蚕あるいは天蚕等から得られる野蚕繭糸の場合、例えば、これらの野蚕繭糸を繭糸重量に対して５０倍量の０．１％過酸化ナトリウム水溶液に浸漬し、９８℃で１時間処理してセリシンを予め除去しておく必要がある。セリシンを除去した野蚕絹フィブロイン繊維をチオシアン酸リチウム等の溶解性の高い中性塩で溶解し、さらにセルロース製透析膜にいれて純水で透析することで野蚕絹フィブロイン水溶液を調製できる。
【００１１】
家蚕絹糸と野蚕絹糸とは、蚕に由来する同じ絹タンパク質であるが、化学構造が全く異なり、絹糸の理化学特性も大きく異なる。こうした特性を活用した工業資材としての広い応用開発が強く望まれている。
【００１２】
絹糸は、分子が引き揃い、優れた結晶性を持つため、香成分を繊維内に充填させることは困難である。そのため、試料表面に香成分を直接付着させるか、香成分を封じ込めた小さい形状のビーズとして繊維製品に付着する方法が考えられる。しかし、こうした方法で製造した残香性繊維には耐久性に問題があり、保存期間中に残香効果が薄らいだり、物理的な刺激で香成分が揮発したりして、残香効果が減衰してしまうという問題が生ずる。
【００１３】
以下、香成分の効用について説明する。香成分は、上記したように、人の心理的・精神的な刺激となり得るものである。ドイツの精神科医テレンバハは、嗅覚は、味覚と同様に、「人間の出会いを最深部で媒介する感覚」であると説明している。におい（香り）は人間の生理や精神活動だけでなく、身体の各種機能にも影響を与えることが知られている。現在、様々な分野で脳波や脳磁波を使った研究が進んでいるが、においの持つ働きや有効性を科学的に証明しようとする研究が始まったのは、１９８０年頃からのことである。
【００１４】
次に、身の回りにある香成分について、成分化合物の名称とその薬理学的効果とを説明する。
【００１５】
香成分の原料となる植物は、学名にofficinalis（薬用の）と付くものが多く、こうした植物から得られる芳香油は、その香りを楽しむだけでなく、心身の病を癒す神秘的な力があると古くから信じられている。香りそのものの心身への効果に関しては、上記したように、一般的に、主成分としてアルコール、ケトン、テルペン、エステルを含む芳香油は鎮静剤的な作用が、アルデヒド、フェノール類、脂肪酸エステルを含む芳香油は興奮剤的な作用があると言われている。（例えば、http://www.jffma-jp.org/learning/base/bionomy. html参照）
【００１６】
フレグランスのなかに含まれる香成分は次のような効果を持つと期待されている。すなわち、（１）気持ちや神経を休ませ、（２）心を和やかに明るくしてくれ、（３）心身を温め、情緒を安定させる効果があるものとされている。
【００１７】
身の回りにある香成分の例を見てみよう。本明細書中では、例えば、ローズマリー油(Rosemary oil)、ストロベリー(Strawberry)等の天然果汁の成分フレーバー、あるいはバニラ油という記載ではなく、主成分としての、シネオール（Cineol）、フラネオール（Furaneol）、バニリン（Vanillin）という成分名で表示することもある。
【００１８】
（１）シネオール
ローズマリー油の香成分でオイル状を呈する。別名ユーカリプトール(eucalyptol)や、８，１−シネオール等とも呼ばれる。料理用のハーブとしておなじみである。水分の滞留解消効果や肌の引き締め効果があるといわれ、美容に使用されることもある。ローズマリー油の精油は大きく分けてシネオール、ベルベノン(verbenone）、カンファー（camphora）の３種類のケモタイプがある。刺激作用や頭脳明晰作用により、記憶力や集中力を高め、また、覚醒作用、食欲抑制作用があるとされている（例えば、「香りの小百科」渡辺洋三著、http://aroma-guide.net/essential/rosemary-cineol.html参照）。
【００１９】
（２）フラネオール
いちご等の香成分で固体状を呈する。フラネオールとは、２，５−ジメチル−４−ヒドロキシ−３（２Ｈ）−フラノン（4-hydroxy-2,5-dimethyl-3(2H)-furanone）の呼称である。最終製品での使用濃度は５．０〜１０．０ｐｐｍ程度とされている（合成香料  化学と商品知識、印藤元一著、化学工業日報社、２００５年）。いちごはバラ科の植物であり、一般的にバラ系の香りは気分を明るくし、鎮静作用効果を持つ薬理効果があるとされている（例えば、http://www.google.com/patents/WO2011055789A1?cl=ja；http://www.paradise- g.jp/ichigo.php参照）。
【００２０】
（３）バニリン
バニラ油の香成分でオイル状を呈する。リラックス効果があり、怒りやフラストレーションや緊張を和らげ、幸せな気分にさせ、そして不眠症にも効果的であるとされている（例えば、http://www.timeless-edition.com/archives/2959；http://www.deodor.co.jp/ kaori/effect.html参照）。
【００２１】
（４）メントール（Menthol）
ミントに含まれる香成分であり、眠気を覚まして、意識をはっきりさせ、そして心を冷静にする効果も有するとされている（例えば、http://matome.naver.jp/odai/2133777182 036211101参照）。
【００２２】
（５）リモネン（Limonene）
レモンに含まれる香成分であり、レモン以外にもかんきつ類に多く含まれる。気分をリフレッシュさせ、意識をはっきりさせて、理解力や集中力を高めるとされている（例えば、http://www.aromatherapy-style.net/Citrus-limon.html参照）。
【００２３】
（６）リナロール（Linalool）
ラベンダーに含まれる香成分であり、リラックス効果、安眠効果、緊張やストレスの緩和に有効とされている（例えば、http://www.gosetsumei.com/lavender.html参照）。
【００２４】
（７）シンナムアルデヒド（Cinnam aldehyde）
シナモンの香成分。気分を高揚させ、気持ちを高ぶらせ、刺激作用があり、そして疲労・衰弱した心に活力を与えるとされている（例えば、http://www.aromatherapy-style. net/cinnamomum-zeylanicum.html参照）。
【００２５】
従来、残香性繊維に関しては次のような技術が知られている。所定の化合物を含む残香性付与剤を活用した残香性繊維に香料を接触させることで繊維に賦香させる技術が知られている（例えば、特許文献１参照）。特許文献１には、具体的には、香料を吸着した無機系多孔質粉体およびシリコーン系化合物を含有する処理液を繊維構造物に付与した後、乾燥・熱処理する耐久性香気処理方法が開示されている。しかし、特許文献１の方法では、香料を含有する繊維からの香成分の徐放性や、安定した持続性および洗濯耐久性等に改善すべき問題点がある。
【００２６】
また、繊維に香料を吸着させる技術として、香成分の徐放性や、安定した持続性および洗濯耐久性等に優れた繊維を提供するために、残香性付与剤、ならびに残香性繊維、香料含有繊維および繊維への賦香方法が提案されている（例えば、特許文献２参照）。すなわち、オルガノシリコネートおよび水を含有する繊維の残香性付与剤、シラノール基を含有するポリオルガノシロキサン架橋体を含む残香性繊維およびその製造方法、ならびに繊維の賦香方法に関する発明が開示されているが、残香性繊維の賦香方法には化学的な技能と知識が提案されていない。
【００２７】
さらに、残香性繊維素材に関して、安定して香料を担持できるか、時間が経過しても香成分が減衰しないか、あるいは香料が変質したり、香料が気化したりして構造破壊が生じないかを満足する技術に関する先行文献は見出されない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００２８】
【特許文献１】特開平１−２４６４７８号公報
【特許文献２】特開２００８−２２３１５６号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２９】
上記したように、色々な香りが私たちの周囲に満ちており、時にはヒトに心理的な安らぎを与えてくれる香りもある。また、食品分野では、香りを封じ込めた食品、調味料が市販されている。香成分や植物に由来するハーブ成分は、一般的には蒸気圧が高いため、標準状態で長く保存すると、保存中に香成分が揮発し、残香効果が減衰してしまうという問題があった。
【００３０】
多くの香成分は揮発し易いため、香成分を長い期間保存すると香成分が減少して揮発量が減り、香りの強度が低下するため、香成分を減少させないような吸着素材や吸着方法を新たに開発する必要がある。そのためには、香成分を素材に吸着させる場合に、素材表面にだけ吸着するような素材では不都合である。通常、香成分を表面だけに吸着した素材は、長い間に香成分の揮発量が減少したり、香成分の悪影響が生じたりする場合がほとんどである。すなわち、通常の有機繊維に香成分を吸着させると香成分の影響で繊維が変色したり、繊維物性が低下したりするため、香成分の包括材としては、有機繊維は適当でないという問題があった。また、香成分を包括した有機繊維を洗濯すると、香成分が繊維から脱離してしまい、香成分の包括材としては適当でないということも問題となっていた。
【００３１】
また、理想的な残香性素材を製造しようとすると、製造コストが高額となるという問題が伴った。どのような素材に香成分を吸着させても継時的には香成分が揮発して香りの強度は低下することが一般的であった。そのため、香成分を必要とする時点で、一旦素材に包括された香成分の強度が増強する機能を持つ包括材料の出現、あるいは、必要とする時点で香成分の揮発量が増すような機能を持つ残香素材の出現が強く望まれている。しかし、効果的な残香素材が見つからないという問題があった。
【００３２】
本発明において、香成分を加えた絹フィブロイン水溶液から水を除去するには凍結乾燥工程が必要であるが、この場合、予備凍結と凍結乾燥の２つの工程が必要である。しかし、香成分を加えた所定濃度の絹フィブロイン水溶液を予備凍結するための経済的で効率的な温度と予備凍結時間は従来技術では明らかになっていない。また、予備凍結に続く、凍結乾燥工程でも、経済的で効率的な凍結乾燥温度と凍結乾燥時間は従来技術では明らかになっていない。こうした最適条件を明らかにする必要があり、さらに有用な溶媒および新規な香成分を検出する簡便な方法についてもいまだ知られていない。
【００３３】
気化し易い香成分を含ませた素材から経時的に香成分が揮発あるいは徐放されるかを調べるには、ガスクロマトグラフ（ＧＣ）あるいはガスクロマトグラフ−質量分析計（ＧＣ−ＭＳ）が便利である。すなわち、ＧＣで素材中の物質を分離し、ＧＣの出口から直接ＭＳに導いて、分離した複数の成分を測定すれば、微量の成分を無駄なく、汚さずに、便利に、高感度に分析できる。測定感度が高感度である検出器を用いれば、市販品でも数十ｆｇ／ｓ（フェムトグラム毎秒）オーダーレベルにまで検出でき、各種の科学分野で微量分析技術として汎用されている。
【００３４】
本発明のように、香成分を含ませた試料から気化する香成分を測定するには、ＧＣ、ＧＣ−ＭＳ測定に先立って気化する香成分を捕集する容器、気化する香成分を取りだす装置、および香成分を吸着させるための充填剤を充填したカラム管が必要であるかどうか、また、ひとたびカラム充填剤に吸着した気体を取り出すためにはどんな溶媒を使用するか、すなわち試料から気化する香成分をＧＣ−ＭＳで測定するための最適条件を探索することが必要である。しかし、このような条件に関する技術は知られていない。
【００３５】
気化し易い香成分を定量するための上記測定には、習熟した化学的な知識を必要とするため、ＧＣ−ＭＳ測定を補完する簡易な方法があることが望まれる。人の臭覚で香成分を評価する官能評価も選択肢の一つである。本発明では、こうした方法を適応することも視野に入れて検討したが、不明な部分が多いという問題がある。
【００３６】
本発明の課題は、上記した従来技術の問題点を解決することにあり、絹フィブロインに香成分を吸着させることができ、更に吸着した香成分の徐放性、持続性に優れる残香性シルクおよびシルク複合体、ならびにシルクおよびシルク複合体への賦香方法を提供することにある。
【００３７】
本発明の課題はまた、上記した従来技術の問題点を解決して、香成分を含む固形状のシルクから気化する香成分や、一定時間経過した試料から気化する香成分の増強方法を評価する科学的な方法、香成分の検出方法、ならびに残香性シルクの製造方法の技術を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００３８】
本発明者らは、家蚕あるいは野蚕絹糸を溶解してなる絹フィブロイン水溶液の新しい利用技術の開発を進めてきた。香成分を含む絹フィブロイン水溶液を予備凍結し、続いて凍結乾燥し、経時的に揮発する香成分の気化量を評価する研究を重ね、残香性シルクを経済的に、効率的に製造する素材開発を進め、香成分の評価についても広範な技術を駆使しながら研究を進めてきた。
【００３９】
本発明者らはまた、絹フィブロイン水溶液に香成分をどのように混合するか、絹フィブロイン水溶液をどのように乾燥させるか、香成分を経済的・効果的にどのように評価するか等の方法を検討し、その結果、香成分の評価法と固体状の乾燥シルクから揮発する香成分の増強方法とを確立した。
【００４０】
本発明者らはさらに、天然タンパク質が、香成分等の分子量が小さい気体を効果的に吸着することに着目し、絹フィブロイン繊維から得られたシルク粉末またはシルクスポンジ（シルク多孔質体）等が香成分を含ませるのに効果的であること、また、水を添加することで一旦吸着した香成分の気化量が増強することを見出した。
【００４１】
絹フィブロイン水溶液としては、家蚕、野蚕に由来するシルクの水溶液を使用することができる。
【００４２】
本発明の残香性シルクによれば、絹フィブロイン水溶液に香成分を添加し、予備凍結し、続いて凍結乾燥することにより、分子構造がランダムコイル状のシルク粉末またはシルクスポンジ等と香成分とが強い相互作用を介して結合されているものが得られ、その結果、長時間経過しても香成分の揮発が防止でき、保存期間中に香成分の香り強度が減少することが防止できる。また、シルク粉末やシルクスポンジ等が香成分と強い相互作用を介して結合されているので、洗濯耐久性も優れている。
【００４３】
本発明の残香性シルクによれば、絹タンパク質の絹フィブロイン水溶液に香成分を添加し、この水溶液を予備凍結し、続いて凍結乾燥させ、絹フィブロイン水溶液中の水分を除去させることで、香成分が絹フィブロイン中に安定して長期間残存することになり、その結果、香成分が安定して長期間保存できるのである。
【００４４】
利用できる絹タンパク質としては、家蚕あるいは野蚕由来の絹フィブロイン繊維がある。残香性シルクの素材として家蚕絹糸や野蚕絹糸、特に野蚕絹糸を使用することで、残香性シルクの機能は増強される。
【００４５】
本発明で利用できる香成分は特に限定されるものではないが、上記した香成分の中でも、例えば、ローズマリー油、ローズ油、バニラ油、ストロベリーフレーバーが好ましく利用できる。
【００４６】
本発明者らは、絹タンパク質繊維（絹フィブロイン繊維）そのものよりも、その繊維の粉末形状またはスポンジ状態等の絹フィブロインが吸着形態として優れていることを見いだした。繊維形状よりは、粉末形状またはスポンジ状態等の吸着形態である絹フィブロインは、香成分を水溶液状態の絹フィブロインに加え、予備凍結し、続いて乾燥凍結させることで製造できる。なお、絹フィブロイン水溶液を凍結乾燥するとシルクスポンジあるいはシルク粉末が製造できる。
【００４７】
以上に鑑みれば、本発明の残香性シルクおよびこの製造方法ならびに香成分の検出方法は、次の通りである。
【００４８】
本発明の残香性シルクは、予備凍結され、続いて凍結乾燥されてなる、香成分と、家蚕由来の絹フィブロイン、野蚕由来の絹フィブロイン、家蚕由来の絹フィブロインおよび野蚕由来の絹フィブロインの複合体から選ばれた絹フィブロインとを含む固体状の乾燥シルクからなることを特徴とする。
【００４９】
本発明の残香性シルクはまた、予備凍結され、続いて凍結乾燥されてなる、香成分と、家蚕由来の絹フィブロイン、野蚕由来の絹フィブロイン、家蚕由来の絹フィブロインおよび野蚕由来の絹フィブロインの複合体から選ばれた絹フィブロインとを含む固体状の乾燥シルクからなる残香性シルクに、さらに水を、好ましくは使用前に添加してなることを特徴とする。
【００５０】
本発明の残香性シルクにおいて、前記予備凍結により凍結されて固化されてなる香成分と絹フィブロインとの混合物が、この中に含まれる水分が昇華されるように凍結乾燥されてなることを特徴とする。
【００５１】
本発明の残香性シルクの製造方法は、香成分と、家蚕由来の絹フィブロイン、野蚕由来の絹フィブロイン、家蚕由来の絹フィブロインおよび野蚕由来の絹フィブロインの複合体から選ばれた絹フィブロインのシルク水溶液とを予備凍結し、続いて凍結乾燥させ、香成分と絹フィブロインとを含む固体状の乾燥シルクからなる残香性シルクを製造することを特徴とする。
【００５２】
本発明の残香性シルクの製造方法はまた、香成分と、家蚕由来の絹フィブロイン、野蚕由来の絹フィブロイン、家蚕由来の絹フィブロインおよび野蚕由来の絹フィブロインの複合体から選ばれた絹フィブロインのシルク水溶液とを予備凍結し、続いて凍結乾燥させ、香成分と絹フィブロインとを含む固体状の乾燥シルクからなる残香性シルクを製造し、次いで、得られた残香性シルクに水を添加することを特徴とする。
【００５３】
本発明の残香性シルクの製造方法において、前記予備凍結により凍結して固化した香成分と絹フィブロインとの混合物を、この中に含まれる水分を昇華するように凍結乾燥することを特徴とする。
【００５４】
前記残香性シルクの製造方法において、絹フィブロインのシルク水溶液の濃度が０．１〜６重量％であり、固体状の乾燥シルクが粉末状の乾燥シルクまたは多孔質体の乾燥シルクであることを特徴とする。
【００５５】
本発明の香成分の検出方法は、蓋付きの容器内に、香成分と、家蚕由来の絹フィブロイン、野蚕由来の絹フィブロイン、家蚕由来の絹フィブロインおよび野蚕由来の絹フィブロインの複合体から選ばれた絹フィブロインのシルク水溶液とを入れ、これを凍結して固化するように予備凍結し、続いて凍結されて固化された香成分と絹フィブロインとの混合物を、この中に含まれる水分が昇華されるように凍結乾燥させた後、該容器内の上部空隙から気化された香成分を採取し、この採取された香成分をガスクロマトグラフ−質量分析計にかけ、香成分の主要な化合物を検出することを特徴とする。
【００５６】
本発明の残香性シルクはさらに、香成分と、家蚕由来の絹フィブロイン、野蚕由来の絹フィブロイン、家蚕由来の絹フィブロインおよび野蚕由来の絹フィブロインの複合体から選ばれた絹フィブロインとを含むシルク膜からなることを特徴とする。
【００５７】
本発明の残香性シルク膜の製造方法はさらに、香成分と、家蚕由来の絹フィブロイン、野蚕由来の絹フィブロイン、家蚕由来の絹フィブロインおよび野蚕由来の絹フィブロインの複合体から選ばれた絹フィブロインのシルク水溶液とを基体表面に拡げ、蒸発乾燥固化させ、香成分と該絹フィブロインとを含む残香性シルク膜を製造することを特徴とする。
【００５８】
前記香成分の検出方法において、絹フィブロインのシルク水溶液の濃度が０．１〜６重量％であり、前記凍結乾燥させた後に得られた乾燥シルクが粉末状の乾燥シルクまたは多孔質体の乾燥シルクであることを特徴とする。
【００５９】
前記した残香性シルクの製造方法および香成分の検出方法において、例えば、予備凍結では−５０℃で１０分間以上実施し、凍結乾燥では−５０℃で１０時間以上実施することが好ましく、また、前記香成分が、ローズマリー油、ローズ油、バニラ油およびストロベリーフレーバーであることが好ましい。上記予備凍結温度および時間ならびに凍結乾燥温度および時間であれば、所期の目的を達成できる。
【発明の効果】
【００６０】
本発明によれば、家蚕もしくは野蚕に由来する絹フィブロインまたは家蚕絹フィブロインと野蚕絹フィブロインとからなる複合絹フィブロインの、シルク粉末あるいはシルクスポンジ（多孔質体）等からなる固体状の乾燥シルクに香成分が担持されているので、香成分は絹フィブロインの固体状の乾燥シルクに安定して強く結合しているため、長期間保存しても香成分は劣化したり、気化したりすることはなく、また、洗濯耐久性にも優れており、香成分は絹フィブロインの固体状の乾燥シルクに安定して含有されている。つまり、香成分を含有する絹フィブロインの固体状の乾燥シルクを保存する期間中でも香成分が変質することはない。香成分を含有する絹フィブロインの固体状の乾燥シルクに水等の溶媒を添加することで、香成分を含む絹フィブロインからの香成分の揮発量を増強することができる。また、本発明によれば、香成分を含んだシルク膜に関しても、残香性があり、水を添加した場合にも、水を添加する前に比べて香気の評価値が増加する。
【図面の簡単な説明】
【００６１】
【図１】予備凍結温度と予備凍結時間との関係を示すグラフ。
【図２】本発明で用いるローズマリー油のガスクロマトグラム。
【図３】本発明で用いるフラネオールのガスクロマトグラム。
【図４】本発明で用いるバニラ油のガスクロマトグラム。
【図５】本発明で用いる気化装置の側面図。
【図６】表９におけるローズマリー油含有乾燥シルクからのシネオールの徐放性（ピーク面積で比較）の結果を示すグラフ。
【発明を実施するための形態】
【００６２】
本発明によれば、香成分を包括するために使用できる固体状の乾燥シルクは、家蚕あるいは野蚕に由来する絹フィブロインからなる。絹フィブロインを製造するための原料としては、簡便には家蚕または野蚕由来の絹糸を用いることができる。絹糸の絹フィブロインとしては、農家が飼育する家蚕(Bombyx mori)幼虫、家蚕の近縁種のクワコ幼虫に由来する絹タンパク質でも利用できる。あるいは、野蚕絹フィブロインとしては、上記したように、例えば、柞蚕(Antheraea pernyi)、天蚕(Antheraea yamamai)、タサール蚕(Antheraea militta)、ムガ蚕(Antheraea assama)、エリ蚕、シンジュ蚕等の幼虫から得られる絹フィブロインを利用することができる。固体状の乾燥シルクとしては、家蚕由来の絹フィブロインと野蚕由来の絹フィブロインとの複合体を予備凍結し、凍結乾燥してなる固体状のシルク複合粉末を用いることで、家蚕由来の粉末状シルクの残香性より優れた残香性素材となる。
【００６３】
家蚕絹糸または野蚕絹糸から、絹フィブロイン水溶液、粉末状の絹フィブロイン（シルク粉末とも称す）、または絹フィブロイン膜を製造する方法は次の通りである。なお、既知の方法に従い、絹フィブロイン水溶液の蒸発速度や調製条件を変えることによって、粉末状にも、膜状にも、多孔質体にも形成できる。
【００６４】
家蚕由来の、絹フィブロイン水溶液、シルク粉末、シルク膜の調製：
蚕が吐糸した家蚕繭糸を炭酸ナトリウム等の中性塩のアルカリ水溶液で煮沸し、セリシンを除去して、家蚕絹糸の本体である絹フィブロイン繊維を製造する。
【００６５】
次いで、この絹フィブロイン繊維を濃厚な中性塩水溶液に溶解し、加熱して絹フィブロイン水溶液を得る。この絹フィブロイン水溶液には絹フィブロインの他に中性塩に基づくイオンが多く含まれているので、セルロース製の透析膜に入れ、両端を縫い糸でくくって、室温の水道水または純水に２〜５日間入れて所定の時間透析処理を行うことにより、純粋な家蚕絹フィブロイン水溶液を製造することができる。この絹フィブロイン水溶液から一部の水を蒸発させて、または水を加えることで、濃度の異なる絹フィブロイン水溶液を調製することができる。この調製法について、以下で、さらに詳細に説明する。
【００６６】
かくして調製された家蚕絹フィブロイン水溶液を凍結乾燥することでシルク粉末が製造できる。あるいは家蚕絹フィブロイン水溶液をポリエチレン膜等の基板上に広げ、室温で蒸発乾燥固化することによりシルク膜を調製することができる。
【００６７】
また、家蚕絹タンパク質繊維（絹糸）を溶解して家蚕絹フィブロイン水溶液を調製する場合には、通常、塩化カルシウム、硝酸カルシウム、臭化リチウム、チオシアン酸リチウム等の濃厚な中性塩水溶液に絹糸を入れ、加熱することにより行われる。中性塩濃度は５〜９Ｍ程度であり、溶解温度は２５〜７０℃程度、好ましくは２５〜６０℃程度であればよい。溶解温度が７０℃を超える高温になると、絹タンパク質の分子量が低下し、材料の高分子性が失われ、その結果、成形性が劣悪となる危険性がある。溶解時間は１〜２０分間程度に設定することが好ましい。家蚕絹タンパク質繊維を良好に溶解するものは、中性塩の中でも、家蚕絹フィブロイン繊維の溶解力に優れたリチウム塩であり、通常、臭化リチウムが好ましい。例えば、８Ｍ以上、好ましくは８．５Ｍ以上の臭化リチウム水溶液であれば、５５℃以上、１５分間以上の処理で家蚕絹タンパク質繊維は溶解する。
【００６８】
野蚕由来の絹フィブロイン水溶液の調製：
柞蚕絹糸または天蚕絹糸等の野蚕絹糸から野蚕絹フィブロイン水溶液を調製するには、まず、野蚕繭糸を、繭糸重量に対して所定量の過酸化ナトリウム水溶液中に浸漬し、所定の時間煮沸処理し、調製された野蚕絹フィブロイン繊維を溶解性の高い中性塩水溶液中で溶解する。次いで、得られた水溶液を家蚕絹糸の場合と同様に透析処理し、純粋な野蚕絹フィブロイン水溶液を調製する。この調製法について、以下、さらに詳細に説明する。
【００６９】
野蚕絹糸を溶解して野蚕絹フィブロイン水溶液を調製するには、野蚕繭糸表面を覆う絹セリシンを家蚕絹セリシンの精練とは異なる方法で除去する必要がある。これは、野蚕絹糸の表面にはセリシン以外にタンニンも付着し、タンニンの架橋作用でセリシンを不溶化させているからである。これらのセリシンおよびタンニンを除去するには、例えば、野蚕繭糸を、繭糸重量に対して５０倍量程度の０．１％過酸化ナトリウム水溶液に浸漬し、９８℃で例えば１時間煮沸処理する必要がある。セリシンやタンニンを予め除去した野蚕絹フィブロイン繊維をチオシアン酸リチウム等の溶解性の高い中性塩水溶液中に溶解する。この野蚕絹フィブロイン繊維の中性塩水溶液をセルロース製透析膜に入れ、両端を縫い糸でくくって、室温の水道水または純水に２〜５日間入れ、リチウムイオンを完全に除くことにより、純粋な野蚕絹フィブロイン水溶液を調製することができる。
【００７０】
かくして調製された野蚕絹フィブロイン水溶液を家蚕絹フィブロイン水溶液の場合と同様に処理することにより、野蚕由来のシルク粉末およびシルク膜等を調製することができる。
【００７１】
家蚕絹フィブロインと野蚕絹フィブロインとの混合絹フィブロイン水溶液の調製：
上記のようにして調製された家蚕絹フィブロイン水溶液と野蚕絹フィブロイン水溶液とを、任意の容量（例えば、５０：５０）で複合させてなる家蚕絹フィブロインと野蚕絹フィブロインとの混合絹フィブロイン水溶液を所定量ビーカー中に入れ、水溶液がゲル化しないように、ガラス棒で注意深く静かに撹拌・混合して、両者が含まれる混合絹フィブロイン水溶液を調製できる。
【００７２】
かくして調製された混合絹フィブロイン水溶液を家蚕絹フィブロイン水溶液の場合と同様に処理することにより、家蚕絹フィブロインおよび野蚕由来絹フィブロインの複合体からなるシルク粉末およびシルク膜等を調製することができる。
【００７３】
上記した家蚕絹フィブロイン水溶液および野蚕絹フィブロイン水溶液の濃度は、予備凍結および凍結乾燥して粉末状のまたは多孔質体の乾燥シルクを製造するためには、それぞれ、０．１〜６重量％程度が好ましく、０．４〜４重量％が特に好ましい。混合絹フィブロイン水溶液の場合には、勿論、適宜、両者の濃度が異なった水溶液を使用しても良い。絹フィブロイン水溶液の濃度が、０．４重量％未満の希薄濃度であると、水溶液中に含まれる絹フィブロイン量が少なく、蒸発させるべき水溶液が多いため蒸発に要する時間が長くなる傾向があり、０．１重量％未満ではその傾向がさらに高まる。そのため、試料を製造する上で効率的ではなく、経済的ではない。濃度が４重量％を超えると、絹フィブロイン水溶液を取り扱う際、フィブロインに機械的な刺激が加わると凝固する危険性が高まり、粒度が細かい粉末状のシルクまたは多孔質体のシルクを製造しにくくなる傾向があり、６重量％を超えるとさらにその傾向が高まる。そのため、０．４〜４重量％が特に好ましい。家蚕絹フィブロインと野蚕絹フィブロインとの複合体を作製する場合、それぞれの濃度は上記した通りでよい。なお、絹フィブロイン濃度が６重量％を超え７重量％になると、絹フィブロイン水溶液を予備凍結および凍結乾燥しても表面積が大きい粉末状態とならず、表面積が小さい固形状（塊状）・ブロック状のフィブロインとなる（比較例２参照）。上記したように４重量％以下では固体状の粉末シルクができ、また、例えば、約５〜６重量％では、多孔質体のシルクができ、7重量％以上では塊状のシルクができる。
【００７４】
上記した家蚕由来、野蚕由来、ならびに混合された家蚕および野蚕由来の絹フィブロイン水溶液に、香成分として香料または香料を含む溶媒を添加し、例えば、−５０℃で所定の時間予備凍結させた後、−５０℃に設定した凍結乾燥機で所定の時間乾燥すると、香料を含有する固形状態の絹フィブロインである乾燥シルクを製造できる。
【００７５】
[香りの評価]
予備凍結および凍結乾燥後、香成分として香料を含有する絹フィブロイン試料を大気下で一定時間静置し、この試料を下記の方法で、評価する直前に香りの評価を行い、続いて試料に水を加え、ゆるやかに攪拌したり、一定時間静置したり、時間をかけて固形絹フィブロインを完全に溶解した後、再度香料の香りを評価する。
【００７６】
本発明で使用できる香成分は公知の香料であればいずれも使用できるが、私たちの身の回りにある料理等での馴染みの深い、上記したようなローズマリー油、ローズ油、バニラ油、ストロベリーフレーバーが好ましく利用できる。
【００７７】
香成分と共に、溶解性に優れた溶媒を使用することができ、例えば、ローズマリー油、ローズ油、バニラ油の場合はエタノール、ストロベリーフレーバーの場合はエタノール以外に水でも好ましく利用できる。
【００７８】
本発明では、香りについて次のようにして官能評価を行った。
本発明の固体状の残香性シルクに対して、製造後に所定時間が経過した時点で、４人の評価者が、残香性シルクを入れたバイアル瓶中の香りを、以下述べる４段階の官能香気評価基準に準拠して評価した。更に、香りを評価した後に、バイアル瓶中に所定量（例えば、１０ｍＬ）の蒸留水を添加し、良く撹拌した後、再度、官能香気評価基準に準拠して香りを評価した。
【００７９】
なお、香気の評価は、４人が４段階で評価し、それを数値化することで有意差の検定（１要因分散分析（被験者内計画））を行った。但し、有理数の判定ができない場合は、０．５を加えたり、減らしたりすることにした。すなわち、例えば、「１」や「２」のどちらとも判断できない場合には、「１．５」にした。
【００８０】
本発明では、上記したように、繭糸の精錬工程でセリシンを除いた、家蚕、野蚕等のカイコ由来の繊維状の絹タンパク質であれば種類を問わず利用できる。
【実施例】
【００８１】
次に本発明を実施例により更に詳細に説明する。本発明はこれらの実施例によって限定されるものではない。なお、実施例において示す「％」は「重量％」である。具体的な実施例を説明する前に、まず、以下の実施例において使用する試薬、測定条件等について説明する。
【００８２】
［家蚕由来の絹フィブロイン繊維の作製］
家蚕の繭糸を濃度４％炭酸水素ナトリウム水溶液に入れて１時間煮沸して精錬し、絹セリシンを除去して絹フィブロイン繊維を製造した。
【００８３】
［家蚕由来の絹フィブロイン水溶液の調製］
６５ｇの塩化カルシウムと６０ｍＬのイオン交換水とを入れたビーカーに、２．５ｇの精練処理した絹フィブロイン繊維を加え、グラスウール付きの金網を使用したガスバーナーで５分間加熱処理することで絹フィブロイン繊維を完全に溶解した。これをセルロース製の透析膜（輸入販売元：エーディア株式会社、製品番号UC36-32-100、分画分子量MWCOは14,000）に入れて２日間水道水で置換した後、更にイオン交換水で１日間置換した。透析膜内に残った絹フィブロイン水溶液にイオン交換水を加えることで、所望濃度に調製した絹フィブロイン水溶液を得ることができた。
【００８４】
［香成分］
ローズマリー油：商品名：ローズマリーエッセンシャルオイル；株式会社生活の木製のローズマリーシネオール；Lot#522（以降、ローズマリー油とも略記する。）を用いた。主要成分はシネオールである。
【００８５】
ストロベリーフレーバー：実施例３では乳鉢でよくすり潰した苺をフィルターで濾過し、夾雑物を除去した濾液を用いた。この主要成分はフラネオールである。実施例５以降では、フラネオール(シグマ アルドリッチ ジャパン製、２．５−ジメチル−４−ヒドロキシ−３（２Ｈ）−フラノン、Lot#STBC7913V）を用いた。
【００８６】
バニラ油：バニラエッセンス（商品名：エッセンスバニラ；Meidi-ya製；Lot#2015.522）を用いた。この主要成分はバニリンである。
【００８７】
ローズ油：オイル状を呈するローズエッセンシャルオイル（商品名：Maggie Tisserand、Essential Oil for Aromatherapy；以降、ローズ油と略記する。）を用いた。主要成分はフェネチルアルコールである。このエッセンシャルオイルは、商品名であり、香成分の形状を意味するわけではない。
【００８８】
［使用した絹フィブロイン水溶液］
実施例では、絹フィブロイン水溶液として、上記した家蚕由来の絹フィブロイン水溶液（以下、「家蚕由来シルク水溶液」と称す）、上記した、また、以下の実施例に準じて作製した野蚕由来の絹フィブロイン水溶液、家蚕および野蚕由来の混合絹フィブロイン水溶液、ならびに市販の粉末状シルク（加水分解シルク；一丸ファルコス社製；製品名：エディブルシルク（Edible Silk、Lot#132851）の水溶液を用いた。
【００８９】
［凍結乾燥］
所定濃度の絹フィブロイン水溶液に所定濃度の香成分溶液を添加した。この溶液は、ストロベリーフレーバーの場合は、水を用いて希釈したものであり、それ以外の香料・オイルの場合は、原液１滴（約０．０５ｇ）を蒸留水で２０−５０％に調製したエタノール水溶液を用いて適宜希釈したものである。それを２０ｍＬのゴム栓付きのバイアル瓶（マルエム  バキュームバイアル社製、No.5、84-1354）に入れ、このバイアル瓶を−５０℃の予備凍結槽（EYELA、PFR-1000）に所定の時間（例えば、２０分間）入れ、絹フィブロイン水溶液を凍結させた（予備凍結とは、水溶液状態のシルクを完全に固化させる処理である）。続いて、−５０℃に設定した凍結乾燥機（EYELA、FDU-1200）に入れ、所定の時間（例えば、１５時間）静置することで絹フィブロイン水溶液を凍結乾燥させた（凍結乾燥とは、一旦固化したシルク固形物中の水分を完全に昇華して除去する処理である）。この場合、予備凍結により完全に、確実に凍結した後、試料中の水を除去する通常の温度・時間で凍結乾燥を実施する。すなわち、予備凍結により完全に、確実に凍結されて固化された香成分と絹フィブロインとを、この中に含まれる水分が昇華されるように凍結乾燥を実施する。以下記載する通常の減圧度の凍結乾燥を経て、所望とする固体状の乾燥シルクを製造できる。
【００９０】
使用した予備凍結槽および凍結乾燥機（メーカー名、規格等）、その使用時間、ならびに予備凍結温度および凍結乾燥温度、使用したガラス容器等は、以下の通りである。
予備凍結装置（槽）：EYELA、PFR-1000、使用温度は−５０℃、凍結乾燥機にセットする直前に所定の時間使用。
凍結乾燥機：EYELA、FDU-1200、使用温度は−５０℃、所定の時間使用。
２０ｍＬ容量のガラス容器とその蓋（ゴム栓）：マルエム  バキュームバイアル社製、No.5、84-1354
乾燥材のシリカゲル：（株）三商（商品名：CD:59-1266）
透析膜：輸入販売元：エーディア株式会社、製品番号UC36-32-100、透析膜の透過分子量（MWCO）は１４，０００。
実施例で使用した凍結乾燥機の減圧度は３０Ｐａ以下であった。従来既知の凍結乾燥機の仕様の減圧度であればシルク粉末を製造するには支障がない。一般の凍結乾燥機の仕様（０．１Ｐａ−１１０ｋＰａ）で満足した結果が得られる。例えば、凍結乾燥における減圧度は、通常、１１０ｋＰａ以下、望ましくは３０Ｐａ以下である。
【００９１】
［香気官能評価の方法］
上記したように、香気の官能評価は４人で行い、試料の入ったガラス容器（バイアル瓶）を、蓋を取り外した状態で鼻に近づけて香気を確認した。その強度を以下の基準に従って０．５刻みの評価基準で数値化した。
【００９２】
官能評価基準：
香気が強い：３
香気が普通：２
香気が弱い：１
香気を感じない：０
【００９３】
また、官能評価を行う試料の順番によって評価値に任意性が失われることが無いように、一度香気を確認した試料であっても、順番を変え、複数回香気を確かめ、再現性ある結果となるようにした。
【実施例１】
【００９４】
本実施例では、予備凍結時間および凍結乾燥時間の最適条件を検討した。
本実施例で使用した絹フィブロイン水溶液は、濃度０．５％の家蚕由来シルク水溶液および加水分解シルク（一丸ファルコス社製）水溶液である。これらの水溶液の５ｍＬを、それぞれ、バイアル瓶に入れ、この瓶を−５０℃に設定した予備凍結装置に入れ、異なる時間（３、８、１０、１２分間）予備凍結処理した直後、試料が入ったバイアル瓶を−５０℃に設定した凍結乾燥機に入れ、３、８、１０、１５時間、減圧下で乾燥を行った。試料の乾燥状態を目視で観察した。
【００９５】
［予備凍結による試料の状態］
−５０℃で予備凍結処理を３分間実施した場合、バイアル瓶内部を観察したところ、家蚕由来シルク水溶液および加水分解シルク水溶液の場合とも、試料の一部が凍結しただけであり、凍結しない部位は水溶液状態であった。試料の一部が凍結した試料を−５０℃で減圧度３０Paの凍結乾燥機に取り付けたところ、試料がバイアル瓶から吹き上がってしまい、形態が泡状の試料となり、取り扱いが簡便な乾燥状態のシルク粉末が製造することができなかった。
【００９６】
−５０℃で予備凍結処理を８分間実施した場合のバイアル瓶の内部は、家蚕由来シルク水溶液および加水分解シルク水溶液の場合とも、見かけは凍結状態となったように見えたが、３分間の場合と同じ条件で凍結乾燥機に入れて乾燥したところ、バイアル瓶から試料が泡状に吹き上がることはなかったが、ビン内側の壁面が少し濡れており、試料中の水分を完全には除去することはできなかったことが分かる。
【００９７】
−５０℃で予備凍結処理を１０分間実施した場合のバイアル瓶の内部は、家蚕由来シルク水溶液および加水分解シルク水溶液の場合とも、それぞれ、完全に、確実に凍結状態となっており、３分間の場合と同じ条件で凍結乾燥機に入れて乾燥したところ、いずれのシルクも乾燥状態となった。
【００９８】
−５０℃で予備凍結処理を２０分間実施した場合のバイアル瓶の内部は、家蚕由来シルク水溶液および加水分解シルク水溶液の場合とも、それぞれ、完全に、確実に凍結状態となっており、３分間の場合と同じ条件で凍結乾燥機に入れて乾燥したところ、いずれのシルクも、乾燥状態となった。予備凍結処理１０分間の場合との差異は無かった。
【００９９】
以上の実験から、濃度０．５％の絹フィブロイン水溶液５ｍＬを−５０℃で予備凍結する場合の凍結時間は一般に９分間以上、最適には１０分間以上であり、その後、−５０℃で１０時間の間凍結乾燥した場合、形態が整い、取り扱いに容易なシルク固形物を得ることが可能であった。予備凍結が不十分であると、上記したように、凍結乾燥した時に、試料水分を完全には除去することはできなかった。しかし、予備凍結が十分であれば、凍結乾燥した時に、試料水分を完全に除去することができた。上限時間に関しては特に制限はないが、経済的な観点から適宜の上限、例えば予備凍結温度が−５０℃の場合では９〜１０分間程度以上で実施すればよい。すなわち、各予備凍結温度における予備凍結完了時間（予備凍結で、試料水溶液が完全に凍結して固化するまでの時間をいう）以上で実施すればよい。次いで、−５０℃で凍結乾燥した場合の凍結乾燥時間の最適条件を見つける前に、各種予備凍結温度と予備凍結時間との関係について検討した。
【０１００】
凍結乾燥時間の最適条件を検討する前に、予備凍結により試料シルク水溶液を完全に、確実に氷結、すなわち凍結せしめるための予備凍結温度と予備凍結時間との関係について検討した。予備凍結条件（温度および時間）は、試料シルク水溶液の溶液量によっても変化するが、試料シルク水溶液が完全に、確実に凍結する温度および時間であれば良く、例えば、溶液量が２〜１０ｍＬの場合、予備凍結温度が−１０℃〜−８０℃であり、予備凍結時間が６０分〜２分であれば良い。図１に予備凍結温度と予備凍結時間との関係を示す。図１から明らかなように、予備凍結温度が低いほど、予備凍結時間は短く、予備凍結温度が高いほど、予備凍結時間は長い。例えば、−８０℃で２分間以上、−５０℃で９分以上、−２０℃で３０分以上、−１０℃で６０分以上であれば、試料シルク水溶液は完全に、確実に凍結する。一度、予備凍結され固化した試料であれば、通常の減圧下（例えば、０．１Ｐａ−１１０ｋＰａ）、通常の温度（例えば、−５０℃）、通常の時間（例えば、９時間以上）に晒される凍結乾燥で、固化したまま水分が昇華する。凍結乾燥は、予備凍結処理で一旦完全に、確実に凍結した固形状態の試料の水分が昇華する温度・時間の条件であれば良く、例えば、予備凍結により完全に、確実に凍結されて固化された絹フィブロインを、この中に含まれる水分が昇華されるように通常の条件で実施すればよい。例えば、−５０℃で１０時間以上凍結乾燥処理すれば、凍結状態のまま固化試料から試料水分が完全に蒸発し。その結果、所望の粉末状のシルクを製造できる。
【０１０１】
上記したように、予備凍結条件は、凍結乾燥条件以上に重要であり、試料水溶液が確実に氷結、すなわち確実に凍結されていることが必要不可欠な条件である。例えば、所定の予備凍結温度における予備凍結完了時間以上の条件で予備凍結して、試料水溶液を確実に凍結せしめ、次いで凍結状態の固化試料を所定の減圧下に晒す凍結乾燥により、試料中に含まれる水分を昇華せしめ、所望の粉末状の乾燥シルクを得ることができる。
【０１０２】
次いで、凍結乾燥時間についてさらに検討する。シルク水溶液に対して予備凍結を−５０℃で１０分間行い、凍結乾燥を、予備凍結完了時間以上の条件で予備凍結した後に行った。
【０１０３】
予備凍結を−５０℃で１０分間以上という予備凍結完了時間以上の条件で予備凍結した後、以下記載するように、確実に凍結されて固化された香成分と絹フィブロインとの中に含まれる水分を完全に昇華するように凍結乾燥させた。
【０１０４】
予備凍結を−５０℃で１０分間行い、予備凍結により完全に、確実に凍結されて固化された香成分と絹フィブロインとを、この中に含まれる水分が昇華されるように凍結乾燥（例えば、−５０℃で１０時間凍結乾燥）させた。家蚕由来シルク水溶液および加水分解シルク水溶液の場合とも、凍結乾燥機からバイアル瓶を取り出し、静置した場合、固形状態を維持し、目的の形態が整い、取り扱いに容易なシルク固形物を得ることができた。凍結時間が短いと、予備凍結で凍結状態であっても、静置しておくと試料が溶解してしまう傾向があり、目的の形態が整い、取り扱いに容易なシルク固形物を得ることができない可能性がある。所定の時間（例えば、９時間以上）であれば、静置しておいても、目的の形態が整い、取り扱いに容易なシルク固形物を得ることができた。上限時間に関しては、特に制限はないが、経済的な観点から一般に９時間以上、最適には１０時間以上で実施すればよい。
【０１０５】
以上の実験から、予備凍結を、例えば、−５０℃で１０分間以上という予備凍結完了時間以上の除条件で行い、凍結乾燥を所定の時間・温度（例えば、−５０℃で９乃至１０時間以上）で行う場合、家蚕由来シルク水溶液および加水分解シルク水溶液の場合とも、凍結乾燥機から取り出しても溶解することは無く、固形状態を維持し、目的の形態が整い、取り扱いに容易なシルク固形物を得ることができた。
【０１０６】
以上の実験は、予備凍結時間と凍結乾燥時間の最適条件を明らかにするための実験であり、試料に香成分を入れないで行ったものである。香成分を所定量入れた絹フィブロイン水溶液を上記したように予備凍結し、その後、凍結乾燥した場合でも、試料に香成分を入れないで行った上記絹フィブロイン水溶液の結果と同じであった。
【０１０７】
以上の実験から、例えば、濃度０．５％絹フィブロイン水溶液を−５０℃で予備凍結するには、１０分間以上処理することが、また、−５０℃で凍結乾燥するには、１０時間以上処理することが、本発明における香成分を含んだ固形状の乾燥シルクを得るための好ましい１つの条件であることが分かった。
【０１０８】
以下の実施例では、念のため−５０℃の予備凍結を２０分間行うこと、−５０℃の凍結乾燥を１５時間行うことにした。
【実施例２】
【０１０９】
本実施例では、ローズマリー油を添加した家蚕由来の絹フィブロインに対する香りの官能評価を行った。
【０１１０】
ＧＣ−ＭＳは、香成分の定量には極めて有効な分析手段であるが、取扱いには装置の機能を熟知し、化学的な知識と技能を必要とする。そのため、本実施例では、ＧＣ−ＭＳ分析装置を使用する代わりに複数の人が試料から揮発する香成分の香気を官能的に評価することにより、本発明の残香性シルクの香成分の揮発量を評価することにした（以下の実施例３〜４、１２の場合も同じ）。
【０１１１】
実験方法は次の通りである。濃度０．１％、０．３％および０．５％の家蚕由来の絹フィブロイン水溶液に、それぞれ、ローズマリー油溶液（ローズマリー油原液１滴（０．０５ｇ）を蒸留水で２０％に調整したエタノール水溶液を用いて１００倍希釈したもの）を０．５ｇあるいは１．０ｇ添加し、−５０℃の予備凍結槽（EYELA、PFR-1000）に２０分間入れて絹フィブロイン水溶液を凍結させた。続いて−５０℃に設定した凍結乾燥機（EYELA、FDU-1200）を用いて１５時間処理することで、香成分含有絹フィブロイン水溶液を凍結乾燥させた。凍結乾燥後、所定の放置時間（２４時間（２４ｈ）、３週間（３ｗ）、６週間（６ｗ））が経過した後、香気の官能評価を行い、得られた結果を表１に示す。上記所定の放置時間経過後、試料に水を加えて固形絹フィブロインを完全に溶解した後、再度、香気の官能評価を行い、得られた結果を表２に示す。表１および２において、「シルク０．１％、０．３％、０．５％」は、使用した絹フィブロイン水溶液の濃度（ｗｔ％）を示す。
【０１１２】
【表１】
2017002251.tif 000003
【０１１３】
【表２】
2017002251.tif 000004
【０１１４】
表１から明らかなように、ローズマリー油を含んだ絹フィブロインを乾燥状態で放置すると、放置時間（２４時間、３週間、６週間）が経過するにつれて、絹フィブロインの濃度が変化しても、また、初期に仕込んだローズマリー油の濃度が変わっても、官能評価によるローズマリー油の香気の評価値の低下は少なく、評価値が増加する場合もある。一方、従来の香成分含有素材（比較例１および２記載の香成分含有素材）の場合、放置しておくと、香成分吸着試料からの香成分は、３週間の放置期間中に殆どが揮発してしまった。かくして、従来の香成分含有素材の場合、香成分の揮発と共に、香気は大きく低下していくが、本発明の香成分含有素材の場合、香気がほぼ維持されるか、または増加するという効果が得られる。
【０１１５】
一方、表２では、ローズマリー油を含んだ絹フィブロインを凍結乾燥状態で所定時間（２４時間、３週間、６週間）放置した後、香気評価の直前に所定量の水（１０ｍＬ）を添加し、絹フィブロインが均一に溶解するまでよく撹拌してから各試料の香気を官能評価した。その結果、水を添加した系では、ローズマリー油を含んだ絹フィブロインの乾燥状態の香気評価値と比べると、放置時間の経過に伴う香気評価値は、ほぼ増加する傾向が見られた。また、同じ放置時間の乾燥状態の試料における香気評価値と比較すると、水を加えた系では、香気評価値は増加する傾向があった。なお、この場合の水添加量は、特に制限はなく、例えば、３ｍＬ〜１０ｍＬで十分効果があり、１０ｍＬを超えた量の水を添加しても香気評価の結果には、影響を与えない。
【０１１６】
また、従来の香成分含有素材（比較例１および２記載の香成分含有素材）の場合、水を添加した系では、香気評価値は増加することは無く軽微なままであった。従来の香成分吸着試料では、本発明の乾燥シルクの場合と比べると、水を加えても残香性は極めて微弱であり、本発明の乾燥シルクが示した優れた残香性はなく、劣悪であった。
【０１１７】
この結果は、ローズマリー油の香気は、絹フィブロインと混合した状態では、放置時間が長くなっても、その強さは維持されるか、または増加する。しかし、従来の香成分含有素材（比較例１および２記載の香成分含有素材）の場合、放置しておくと、香成分の揮発と共に香気は大きく低下していく。これに対して、本発明の香成分含有素材の場合、上記したように、香気は維持される。また、従来の香成分含有素材（比較例１および２記載の香成分含有素材）の場合、水を加えても、残香性は良好にならないが、本発明の香成分含有素材の場合、水を加えることで香気の強さが増加（増強）することが示唆される。
【０１１８】
(比較例１)
絹フィブロイン繊維０．７ｇを実施例１で使用したバイアル瓶に入れ、繊維に直接不均一にふれないように（繊維に香成分が直接不均一に触れると、繊維の残香性が正しく評価できなくなることが懸念されるため、香成分が繊維に均一に接触するように配慮した）、実施例２で用いたローズマリー油溶液０．１ｇを入れ室温で４時間密閉しながら放置した。試料を取り出し、更に３週間放置してから、絹フィブロイン繊維（「香成分吸着試料」とも略記）の残香性を香気官能評価により行ったところ、香成分吸着試料からの香気の揮発量は、本発明の乾燥シルクの場合よりは極めて軽微であり、ほとんどゼロに近かった。３週間の放置期間中に殆どの香成分が揮発してしまったためである。かくして、香成分を含んだ絹フィブロイン繊維は、本発明の香成分を含んだ乾燥シルクの残香性よりは劣悪であったことが確認できた。
【０１１９】
続いて、バイアル瓶中の香成分吸着試料に水を加え、前記した方法で再度香気の官能評価を行ったところ、香気評価値は増加することは無く軽微なままであった。香成分を含んだ絹フィブロイン繊維は、放置しても残香性は長期間維持されず、水を加えても残香性は極めて微弱であり、本発明の乾燥シルクが示した優れた残香性はなく、劣悪であった。
【０１２０】
（比較例２）
７％濃度の家蚕絹フィブロイン水溶液を実施例１で使用したバイアル瓶に入れ、実施例２と同様に、ローズマリー油溶液０．５ｇを添加し、−５０℃の予備凍結装置に２０分間入れて確実に凍結させた。その後、−５０℃で１５時間凍結乾燥させたところ、本発明の乾燥シルクが粉末状を呈したのとは違って、絹フィブロインは粉末状態にはならず、表面積が小さい塊状・ブロック状の絹フィブロインとなった。これは、使用した家蚕絹フィブロイン水溶液の濃度が７％と高かったためである。このローズマリー油を含んだ塊状絹フィブロインを乾燥状態で３週間放置した残香性は、臭気官能評価によると、本発明の香成分を含んだ乾燥シルクの残香性より有意に低下した。塊状絹フィブロインの残香性は、本発明の乾燥シルクの残香性に比べて劣悪であった。
【０１２１】
続いて、香成分を含む塊状・ブロック状絹フィブロインに水を加え、前記した方法で再度香気の官能検査を行ったところ、香気評価値は増加することが無く、極めて微弱であった。
【０１２２】
かくして、香成分を含んだ絹フィブロイン塊状物は、放置しても残香性は長期間維持されず、水を加えても残香性は極めて微弱であり、本発明の乾燥シルクが示した優れた残香性は確認できなかった。
【実施例３】
【０１２３】
本実施例では、ストロベリーフレーバー（イチゴの天然果汁）を添加した家蚕由来の絹フィブロインの香りの官能評価を行った。
【０１２４】
濃度０．１％、０．３％および０．５％の絹フィブロイン水溶液にストロベリーフレーバー（天然果汁）を０．５ｇあるいは１．０ｇ添加した。続いて、実施例２と同様に、−５０℃で２０分間の予備凍結を行い、続いて−５０で１５時間の凍結乾燥処理を行った。凍結乾燥後、所定の時間（２４時間、３週間）放置したのち、試料の香気の官能評価を行い、得られた結果を表３に示す。表３において、「シルク０．１％、０．３％０．５％」は使用した絹フィブロイン水溶液の濃度（ｗｔ％）を示す。
【０１２５】
上記において、放置時間として２４時間および３週間の時点でのみ評価を行ったのは、実験条件を簡素化するためである。
【０１２６】
【表３】
2017002251.tif 000005
【０１２７】
表３から明らかなように、ストロベリーフレーバーを含んだ絹フィブロインを乾燥状態で放置すると、放置時間（２４時間、３週間）が経過するにつれて、絹フィブロインの濃度が変化しても、また、初期に仕込んだストロベリーフレーバーの濃度が変わっても、官能評価によるストロベリーフレーバーの香気の強度は、本発明の香成分含有素材の場合、維持または増加する傾向があった。一方、従来の香成分含有素材（比較例１及び２の香成分含有素材）の場合、上記したように、香成分の揮発と共に香気は大きく低下し、ゼロに近づく。なお、１０ｍＬの水を添加した場合でも、従来の香成分含有素材と比べて香気が大きく低下してゼロになることはなかった。
【実施例４】
【０１２８】
本実施例では、バニラ油を添加した家蚕由来の絹フィブロインの香りの官能評価を行った。すなわち、実施例３で使用したストロベリーフレーバーの代わりにバニラ油を使用して実施例３と同様の香りの評価を行った。得られた結果を表４および５に示す。表４および５において、「シルク０．１％、０．３％、０．５％」は、使用した絹フィブロイン水溶液の濃度（ｗｔ％）を示す。
【０１２９】
【表４】
2017002251.tif 000006
【０１３０】
【表５】
2017002251.tif 000007
【０１３１】
表４より、バニラ油を含んだ絹フィブロインを凍結乾燥状態で放置すると、放置時間（２４時間、３週間）が経過するにつれて、絹フィブロインの濃度が増加した場合も、また、初期に仕込んだバニラ油の濃度が増加した場合も、官能評価によるバニラ油の香気強度は、増加するかまたは維持される傾向が見られた。上記したように、従来の香成分含有素材（比較例１及び２の香成分含有素材）の場合、放置時間が経過するにつれて、香成分の揮発と共に香気は大きく低下していくが、本発明の香成分含有素材の場合、香気は増加するか維持されるという格別な効果がえられた。
【０１３２】
一方、表５より、バニラ油を含んだ絹フィブロインを乾燥状態で所定時間（２４時間、３週間）放置した後、１０ｍＬの水を添加し、絹フィブロインが均一に溶解するまでよく撹拌してから各試料の香気を官能評価したところ、バニラ油を含んだ絹フィブロインを乾燥状態で放置してからの香気評価値と比べて、水を加えた系では、評価値は、放置時間が長くなると、若干増加するか、維持される傾向が見られた。上記したように、従来の香成分含有素材（比較例１及び２の香成分含有素材）の場合、放置時間が経過するにつれて、香成分の揮発と共に香気は大きく低下していき、ゼロに近づくが、本発明の香成分含有素材の場合、香気は増加するか維持されるという格別な効果が得られた。
【実施例５】
【０１３３】
本実施例では、ＧＣ−ＭＳによる香成分の検出を行った。
クロマトグラフの一種であるガスクロマトグラフ−質量分析計（ＧＣ−ＭＳ）は、本発明の対象である香成分を同定したり定量したりするためにも利用できる分析機器である。サンプルと移動相が気体であることが特徴であり、各種の科学分野で微量分析技術として用いられている。使用機器は、島津製作所ＧＣＭＳ−ＱＰ５０５０Ａである。
【０１３４】
［測定・分析方法］
安定したＧＣ−ＭＳの分析結果を得るための条件：ヘリウムをキャリアガスとして流量２０ｍＬ／ｍｉｎ、カラム入口圧１００ｋＰａで流入させることで、香成分試料の分析を行った。また、カラムオーブンを５０℃、試料気化室とインターフェースの温度を５０℃まで加熱した。この状態で６時間、装置を稼働し続け、ＭＳ部の真空度を十分に高めておくとよい。
【０１３５】
３０Ｐａという十分な高真空状態であることが確認された後、試料気化室温度を２５０℃、インターフェース温度を２００℃まで加熱し、試料の分析を開始した。カラムオーブン温度は１０℃／ｍｉｎの速度で２００℃まで上昇させるものとし、溶媒溶出時間を３分間、分析の維持時間を２０分間に設定した。分析試料は２μＬを装置に導入した。
【０１３６】
[分析試料]
以下の３種の香成分試料をそれぞれアセトンで１００倍に希釈したものをＧＣ−ＭＳ分析した。
（１）ローズマリー油（株式会社生活の木製、ローズマリーシネオール、LOT#522)
（２）フラネオール（シグマ アルドリッチ ジャパン社製、２．５−ジメチル−４−ヒドロキシ−３（２Ｈ）−フラノン、Lot#STBC7913V）
（３）バニラ油（Meidi-ya製、商品名： エッセンスバニラ、Lot#2015.522）
【０１３７】
[分析結果]
各種の香成分をＧＣ−ＭＳで分析し、得られたＧＣ−ＭＳスペクトル（ガスクロマトグラム）を図２〜４に示す。図２は、ローズマリー油を対象にした分析結果であり、図３は、フラネオールを対象にした分析結果であり、図４はバニラ油を対象にした分析結果である。各図において、面積が最も大きなピーク、すなわち試料中に最も多く含まれる成分に対応したピークに矢印を付けた。ガスクロマトグラムの横軸は保持時間（retention time：分）、縦軸はトータルイオンクロマトグラム（ＴＩＣ）である。
【０１３８】
香成分の濃度は、以下のwebページ等を参考に、今回の実験に当てはめて評価した。
https://www.lasoft.co.jp/chromdoc/chrom.asp?sub=chromat6
【０１３９】
図２に示すＧＣ−ＭＳスペクトルから明らかなように、最も面積が大きいピークに対応する保持時間が６．９３９分であることから判断して、ローズマリー油に含まれる主要な香成分はシネオールであり、図３に示すＧＣ−ＭＳスペクトルから明らかなように、最も面積が大きいピークに対応する保持時間が７．６２５分であることから判断して、フラネオールに含まれる主要な香成分は２，５−ジメチル−４−ヒドロキシ−３（２Ｈ）−フラノンであり、そして図４に示すＧＣ−ＭＳスペクトルから明らかなように、最も面積が大きいピークに対応する保持時間が１３．５７５分であることから判断して、バニラ油の主要な香成分はバニリンである。図２〜４の結果から明らかなように、ＧＣ−ＭＳスペクトルから主要なピークの保持時間を調べることで、香成分を特定することが可能である。
【実施例６】
【０１４０】
本実施例では、ローズマリー油、ストロベリーフレーバー（フラネオール）、バニラ油およびローズ油を用い、カラム充填剤使用による香成分の分析実験を行った。
【０１４１】
これらの香成分を担持させた、上記実施例に準じて予備凍結・凍結乾燥させて得られた家蚕絹フィブロインから徐放される香成分のＧＣ−ＭＳによる定量を行うに先立ち、最適な実験条件を得るための予備実験を行った。この予備実験は、図５に示す気化装置を用いて行った。
【０１４２】
４種の試料のそれぞれを、蒸留水で５０％に調整したエタノール水溶液で５０倍に希釈したものを、それぞれ２ｍＬずつバイアル瓶に入れ、蓋を取り外した状態で２００ｍＬ用シリンジ１内に設置した。シリンジ内管２を数ｃｍ外管に差し込んで固定し、シリンジ先端にはゴムチューブを取り付けてピンチコックで留めることで、シリンジ内の気体が出入りすることのないようにした。６時間の静置後、シリンジ先端に取り付けたゴムチューブに吸着充填剤（Grace Davison Discovery Science社製、商品名：Porapak Q；粒径：８０／１００、バッチ（Batch）#168）０．１ｇを充填した吸着カラム３を接続してピンチコックをはずし、シリンジ内の気体を速度１ｍＬ／ｓｅｃで１５０ｍＬ押し出して吸着剤に吸着させた。図５は、吸着充填剤Ａを封入した吸着カラム３に被検用の気体を導入した状態を示す。
【０１４３】
その後、吸着充填剤にアセトン１ｍＬを流して吸着物質を溶出させ、この溶液をＧＣ−ＭＳに導入した。この方法を通常法とする。
【０１４４】
用いた香成分は以下の通りであった。
（１）ローズマリー油（株式会社生活の木製、ローズマリーシネオール、Lot#522）
（２）フラネオール（シグマ アルドリッチ ジャパン社製、２．５−ジメチル−４−ヒドロキシ−３（２Ｈ）−フラノン、Lot#STBC7913V）
（３）バニラ油（Meidi-ya製、エッセンスバニラ、Lot#2015.522）
（４）ローズ油（Maggie Tisserand、Essential Oil for Aromatherapy）
【０１４５】
［カラム充填剤への吸着］
ＧＣ−ＭＳスペクトルの測定結果によれば、ローズマリー油原液１滴（０．０５ｇ）を蒸留水で５０％に調整したエタノール水溶液を用いて５０倍希釈したものを用いた時には、ガスクロマトグラムには、実施例５におけるシネオールの保持時間にほぼ一致するピークが見られた。しかし、フラネオールおよびバニラ油原液１滴（０．０５ｇ）を蒸留水で５０％に調整したエタノール水溶液を用いて５０倍希釈したものを用いたときには、それぞれの主要成分に対応するピークが見られなかった。
【０１４６】
この結果を受け、成分が検出されなかったフラネオールおよびバニラ油を用いた試料に対して、以下の２つの方法を用いて香成分の気化を促し、ＧＣ−ＭＳでの検出が可能かどうかを検討した。
（１）通常法（２４時間静置）：前述した通常法において、２００ｍＬ用シリンジ内に静置する時間を６時間から２４時間に延長した。
（２）加熱法：２００ｍＬ用シリンジ内に静置する時間を２４時間とし、さらに最初の１時間にシリンジの外側からドライヤーで約６０℃程度の加熱を行った。
【０１４７】
しかし、これらの方法によっても、フラネオールおよびバニラ油を用いた試料ではやはり成分の検出に至らなかった。
【０１４８】
そこで、新たな香成分としてローズ油（Maggie Tisserand、Essential Oil for Aroma- therapy）を用いてＧＣ−ＭＳでの検出を試みた。通常法では試料に含まれる成分が検出されなかったが、加熱法では検出強度はごく小さいものの、成分が検出された。
以上の結果を以下の表６に示す。
【０１４９】
【表６】
2017002251.tif 000008
【０１５０】
ＧＣ−ＭＳ測定で検出が可能かどうかを検討するために、表６に記載した評価は以下のような意味である。
○：検出可能を意味する。
△：検出は可能だが、検出強度が非常に小さい。
×：検出は可能ではない。
−：実験をしていない。
【０１５１】
以上の結果より、シネオールおよびフェネチルアルコールはフラネオールやバニリンに比べ、ＧＣ−ＭＳによる検出がしやすい物質である可能性がある。そのため、以降の実施例７では、香成分としてローズマリー油およびローズ油を用いて試料を作製することとした。
【実施例７】
【０１５２】
本実施例では、カラム充填剤使用の通常法と加熱法とにより、ＧＣ−ＭＳ分析を行った。
次の香成分を用いて通常法と加熱法で検討した。
（１）ローズマリー油（株式会社生活の木、ローズマリーシネオール、Lot#522）
（２）ローズ油（Maggie Tisserand、Essential Oil for Aromatherapy）
【０１５３】
［ＧＣ−ＭＳ測定用の試料の調製］
エタノールと蒸留水とを１：１で混合したもの（５０％エタノール）を希釈液として使用した。先ず、調製した濃度０．５％または１．５％の絹フィブロイン水溶液を２ｍＬずつバイアル瓶に滴下した。香成分原液１滴（０．０５ｇ）を希釈液で５０倍に希釈し、絹フィブロイン水溶液に１ｍＬずつ添加し、−５０℃で２０分間予備凍結した後、−５０℃で１５時間凍結乾燥した。
【０１５４】
［ＧＣ−ＭＳの測定条件］
バイアル瓶の蓋を取り外して所定時間放置した試料を、バイアル瓶ごと２００ｍＬシリンジ内に入れ６時間静置した。気体を速度１ｍＬ／ｓｅｃで１５０ｍＬ押し出し、充填剤入りのカラムに通した。カラムにアセトン１ｍＬを流し込み、出てきた液体を捕集した。ＧＣ−ＭＳを用いて各成分の定量を行った。また、上記乾燥状態の試料分析後、試料に水を添加して同様に気体の捕集・分析を行った。
【０１５５】
種々の香成分を含む予備凍結・凍結乾燥した絹フィブロインを実施例６に記載した図５に示す気化装置内に入れ、６〜２４時間静置した後、吸着充填剤（Porapak Q）に吸着させ、その後、アセトンで溶出させたアセトン溶出物をＧＣ−ＭＳに導入してＧＣ−ＭＳで香成分の主要な化合物が検出できるか検討した。これを通常法とする。
【０１５６】
上記通常法で検出ができなかった場合、上記香成分を含む予備凍結・凍結乾燥した絹フィブロインを気化装置に入れ、気化装置の外側からドライヤーで１時間、装置内部温度をおよそ６０℃程度まで加熱した。加熱時間を含めて２４時間放置した後、気化する香成分を吸着充填剤（Porapak Q）の充填された吸着カラムに通して吸着させた後、吸着充填剤にアセトンを流して吸着物質を溶出させた。それをＧＣ−ＭＳに導入してＧＣ−ＭＳで検出できるか検討した。これを加熱法とする。
【０１５７】
香成分としてローズマリー油、ローズ油を用いて通常法あるいは加熱法でＧＣ−ＭＳ分析を行った結果を表７に示す。
【０１５８】
【表７】
2017002251.tif 000009
【０１５９】
ＧＣ−ＭＳ測定（通常法）で検出が可能かどうかを検討するために、表７に記載した評価は次のようにして行った。
○：検出可能を意味する。
×：検出は可能ではない。
−：実験はしてない。
【０１６０】
ローズマリー油およびローズ油の香成分を含む予備凍結・凍結乾燥した絹フィブロインを用いた場合、通常法および加熱法のいずれの方法でもＧＣ−ＭＳでは評価できなかった。
【実施例８】
【０１６１】
本実施例では、カラム充填剤を使用しないで、香成分を直接ＧＣ−ＭＳに導入する実験を検討した。
【０１６２】
カラム充填剤あるいは一旦カラム充填剤に吸着した香成分とカラム充填剤から流出するための溶出溶媒の組み合わせに不具合がある可能性が考えられる。そこで、次に、カラム充填剤を使用しないでバイアル瓶上部空間の気体を直接ＧＣ−ＭＳに導入することにした。
【０１６３】
使用する香成分および試料の調製方法は、実施例７と同様に行った。
【０１６４】
［ＧＣ−ＭＳの測定条件］
バイアル瓶の蓋を取り外して所定時間放置した試料を、バイアル瓶の蓋を閉じて６時間静置した。実施例７と異なり、カラム充填剤を入れた吸着カラムを用いることなく、ガラス製のバイアル瓶のゴム蓋に注射針を直接入れて瓶の上部空隙（ヘッドスペース）から５ｍＬの気体を採取した。注射器を用いてこの気体を１ｍＬ／秒で押し出し、ＧＣ−ＭＳに導入した。
【０１６５】
ローズマリー油では、ＧＣ−ＭＳで分析が可能であった。主要成分であるシネオールを示すピークの面積は６．７９×１０６であった。ローズ油では微小ながらフェネチルアルコールに対応するピークが検出された。
【０１６６】
バイアル瓶に封入したローズマリー油溶液を含有する、予備凍結・凍結乾燥したシルクを、上記実験の後、バイアル瓶のゴム蓋を完全に取り外して室温で３日間静置した。放置後、バイアル瓶にゴム蓋を取り付け密閉した状態で６時間静置してから、バイアル瓶のゴム蓋に注射針を挿入し、瓶の上部空隙から５ｍＬの気体を注射筒に採取した。採取した気体を注射筒から１ｍＬ／秒の速度で押し出しＧＣ−ＭＳに導入した。
【０１６７】
ＧＣ−ＭＳ測定結果によると、ガスクロマトグラムに現れる主要なピークは、対応する保持時間から、シネオールによるものであった。
【０１６８】
更に、ローズマリー油溶液を含有する、予備凍結・凍結乾燥した絹フィブロインを封入したバイアル瓶のゴム蓋を完全に取り外して室温で３日間静置した後、バイアル瓶に２ｍＬの蒸留水を添加し、固形状態の絹フィブロインが完全に溶解するまでよく撹拌し、ゴム蓋を取り付けて密閉した状態で６時間静置した。バイアル瓶のゴム蓋に注射針を直接入れて、瓶の上部空隙から５ｍＬの気体を注射筒で採取した。注射器を用いてこの気体を１ｍＬ／秒で押し出しＧＣ−ＭＳに導入した。
【０１６９】
ＧＣ−ＭＳ測定結果によると、ガスクロマトグラムに現われる主要なピークは、対応する保持時間からシネオールのピークによるものであった。ゴム蓋を外して大気中に放置しなかった場合、または３日間放置後蒸留水を添加せずに分析した場合よりも、ローズマリー油溶液を含有する予備凍結・凍結乾燥したシルクを封入したバイアル瓶のゴム蓋を完全に取り外して室温で３日間静置した後、バイアル瓶に２ｍＬの蒸留水を添加し固形状態のシルクが完全に溶解するまでよく撹拌し、ゴム蓋を取り付けて密閉した状態で６時間静置させてからバイアル瓶内の気体を採取し分析したとき、シネオールに対応するピーク面積は増大した。ピーク面積は２０．２２×１０６であった。
【０１７０】
水を加えることでバイアル瓶中の気体に含まれるシネオールに対応するピークの面積が増加していることが確かめられた。
【０１７１】
以下の表８は、ローズマリー油溶液含有の、予備凍結・凍結乾燥したシルク試料を封入したバイアル瓶中の上部空隙の気体をＧＣ−ＭＳで分析した際の、主要成分シネオールに対応するピークに関するデータである。
【０１７２】
瓶の蓋を開放する前後における気体をＧＣ−ＭＳで分析した結果を表８に示す。
【０１７３】
【表８】
2017002251.tif 000010
【０１７４】
表８においての試料と記号は次のことを意味する。
「開放後、水添加」とは、ゴム栓を３日間開放した後、瓶中の絹フィブロインに水を添加した瓶の上部空間から採取した気体；
Ｔ１：  ＧＣ−ＭＳ分析におけるピークの保持時間（分）；
Ｔ２：  ＧＣ−ＭＳ分析におけるピークの開始時間（分）；
Ｔ３：  ＧＣ−ＭＳ分析におけるピークの終了時間（分）；
Ａｒｅａ:  ピークの面積；
Ｈｅｉｇｈｔ：  ピークの高さ。
【０１７５】
ローズマリー油溶液を含有する、予備凍結・凍結乾燥した絹フィブロイン試料を封入したバイアル瓶のゴム蓋を取り外し、３日間開放状態を保った後、ローズマリー油溶液を含有する予備凍結・凍結乾燥した絹フィブロイン試料に蒸留水を添加すると、徐放される香成分に対応するガスクロマトグラムのピーク面積が増加し、水添加で凍結乾燥した絹フィブロインから徐放される香成分が急激に増大することが確認された。
【０１７６】
このことは、ローズマリー油溶液を含有する予備凍結・凍結乾燥した絹フィブロイン試料に水を添加した試料に対する官能検査で得られた実施例の結果の正当性をＧＣ−ＭＳでも確認できたことを意味し、本発明の残香性シルクの進歩性を実証するものである。
【実施例９】
【０１７７】
本実施例では、家蚕由来の乾燥シルクから徐放される香成分のＧＣ−ＭＳによる定量化について検討した。
【０１７８】
使用した香成分：ローズマリー油（シネオール）（株式会社生活の木製、Lot# 522）。この香成分の希釈液としてエタノールと蒸留水とを１：１で混合したもの（５０％エタノール水溶液)を使用した。
【０１７９】
試料は、濃度０．５％または１．５％に調製した家蚕由来のシルク水溶液を２ｍＬずつバイアル瓶に滴下し、香成分原液１滴（０．０５ｇ）を希釈液で５０倍に希釈し、この希釈した香成分溶液をシルク水溶液に１ｍＬずつ添加して作製した。この水溶液を−５０℃で２０分間予備凍結し、続いて、−５０℃で１５時間凍結乾燥した。
【０１８０】
[実験方法]
（１）バイアル瓶のゴム栓を開けて所定時間（２４ｈ、１ｗ、３ｗ、６ｗ）放置した。
（２）ゴム栓を閉じ、６時間静置した。
（３）注射器の針先をバイアル瓶内に差し込んで、試料上方の気体５ｍＬを採取した。
（４）採取した気体をＧＣ−ＭＳに導入して各香成分の定量を行った。
乾燥状態の試料の分析後、水を添加して湿潤状態とし、同様に気体の捕集・分析を行った。
【０１８１】
[実験結果]
異なる放置時間におけるローズマリー油（シネオール）含有試料を用いてＧＣ−ＭＳ分析を行い、シネオールのピーク面積を求めた。得られた結果を表９に纏めた。
【０１８２】
【表９】
2017002251.tif 000011
【０１８３】
表９において、“Cineol”は「シネオール」を、 “Silk 0.5%”は「濃度０．５％のシルク水溶液」を、“Silk 1.5%”は「濃度１．５％のシルク水溶液」を「−」は検出ができなかったことを、そして「乾燥」および「湿潤」は、それぞれ、乾燥状態の試料および水を添加した湿潤状態の試料を示す。
【０１８４】
表９に示すローズマリー油含有乾燥シルクからのシネオールの徐放性（ピーク面積で比較）の結果を、それぞれ、図６に示す。
【０１８５】
図６において、記号は以下の通りである。
○：シルク０．５％、乾燥
●：シルク０．５％、湿潤
□：シルク１．５％、乾燥
■：シルク１．５％、湿潤
【０１８６】
表９および図６から次のことが明らかとなった。ローズマリー油を含有する凍結乾燥シルクからのシネオールの徐放量をＧＣ−ＭＳ測定によるピーク面積で比較すると、３週間静置した乾燥状態の、０．５％、１．５％のシルク水溶液から得られた凍結乾燥シルクでは、シネオールの残香性はほぼ維持されており、従来の香成分含有素材（比較例１および２の香成分含有素材）の場合の大きな減少と比べて、効果があるものと判断される。また、ローズマリー油を含有する０．５％、１．５％のシルク水溶液から得られた凍結乾燥シルクに水を添加すると、湿潤状態の試料からのシネオールの徐放量は、大きな値となった。つまり、シネオールを含む０．５％、１．５％のシルク水溶液から得られた凍結乾燥シルクに水を加えると、シネオールの徐放量が特異的に増加することが確かめられた。このように、水を添加した場合も、シネオールの残香性はほぼ維持されており、従来の香成分含有素材（比較例１および２の香成分含有素材）の場合の大きな減少と比べて、効果があるものと判断される。
【実施例１０】
【０１８７】
本実施例では、予備凍結・凍結乾燥した状態の家蚕由来の絹フィブロインからのシネオールの徐放量を測定した。
【０１８８】
２ｍＬの０．５％、１．０％、１．５％絹フィブロイン水溶液に、エタノールと蒸留水とを容積比５０：５０で混合してなる希釈溶液によってシネオールを５０倍希釈した溶液１ｍＬを添加したものを、実施例７の場合と異なって、カラム充填剤を入れた吸着カラムを用いることなく、ゴム栓付きのバイアル瓶に詰め、−５０℃で２０分間予備凍結した後、−５０℃で１５時間凍結乾燥した。次いで、バイアル瓶のゴム栓を開封し、所定時間（２４時間、１週間、３週間、６週間）放置し、その後、ゴム栓でバイアル瓶を閉じた状態で６時間静置し、注射筒に注射針を付けてバイアル瓶に差し込み、粉末状試料上の、すなわち、バイアル瓶の上部空隙内の気体５ｍＬを採取し、ＧＣ−ＭＳによりこの気体中に含まれる成分の定量を行った。このように乾燥状態の試料を分析した後、続いて、所定の時間経過後、この乾燥試料に２ｍＬの水を添加し、注射針を付けてバイアル瓶に差し込み、粉末状試料上の、すなわち、バイアル瓶の上部空隙内の気体５ｍＬを捕集し、気体成分の定量を行った。
【０１８９】
その結果、０．５％絹フィブロイン水溶液の実験では、試料が乾燥状態であるとき、ＧＣ−ＭＳ測定でのピーク面積によれば、試料から徐放したシネオールの量は開放直後からすでに極めて微量であった。６週間放置すると、ＧＣ−ＭＳでの検出が困難なほど徐放量が減少した。乾燥試料に水を加えた場合、試料から徐放するシネオールはやや増加する程度であった。しかし、ＧＣ−ＭＳ測定におけるピーク面積によれば、絹フィブロイン水溶液の濃度が１．５％の場合において、乾燥状態である試料からのシネオールの徐放量は、上記０．５％絹フィブロイン水溶液による結果と同程度であったが、水を加えた場合は、試料からのシネオールの徐放量は、乾燥試料からのシネオールの徐放量の数十倍程度大きな値となった。このことは、乾燥状態の試料からのシネオールの徐放量は微量であるが、絹フィブロイン水溶液濃度が１％以上では、水を加えた場合、シルクと接するシネオールが試料から切り離されて多量に徐放することを意味している。また、１．０％絹フィブロイン水溶液を用いた場合については、表１０に示された結果から明らかなように、同様な結果が得られた。さらに、上記結果は、所定の時間放置した場合もほぼ維持され、残香性があることが分かった。なお、絹フィブロイン水溶液濃度が０．４〜４重量％の場合に良好な結果を得ることができる。
【実施例１１】
【０１９０】
本実施例では、柞蚕由来の絹フィブロインを用いた残香性実験を行った。実施例９で使用した家蚕由来の絹フィブロインの代わりに、野蚕である柞蚕の濃度０．５％絹フィブロイン水溶液を用い、ローズマリー油の原液１滴（約０．０５ｇ）を蒸留水で５０％に調製したエタノール水溶液で５０倍希釈したものを加えた混合物をゴム栓付きのガラス製のバイアル瓶に入れ、−５０℃で２０分間予備凍結した後、−５０℃に設定した凍結乾燥機で１５時間乾燥させた。カラム充填剤を入れた吸着カラムを用いることなく、ガラス製のバイアル瓶のゴム蓋に注射針を直接入れて瓶の上部空隙から５ｍＬの気体を採取した。ＧＣ−ＭＳでの分析によると、バイアル瓶中の気体に含まれるローズマリー油の主要成分であるシネオールを示すピーク面積が実施例１０の場合よりも大きなピーク面積となった。シネオールを含む柞蚕絹フィブロインからのシネオールの徐放量が、家蚕絹フィブロインの場合よりも増大することが明らかとなった。このことから、柞蚕由来の絹フィブロインの場合に、家蚕由来の絹フィブロインの場合と同様に水を加えたものに対し上記評価をすれば、ピーク面積は家蚕由来の絹フィブロインの場合よりも増大するものと考えられる。さらに、上記結果は、所定の時間放置した場合もほぼ維持され、残香性があることが分かった。
【０１９１】
以上の結果から、野蚕由来の絹フィブロインの方が、家蚕由来の絹フィブロインよりも香成分に対する残香性機能が高いことが分かった。これは、野蚕由来の絹フィブロインの構造特性と関連があるように考えられる。すなわち、野蚕由来の絹フィブロインの結晶構造は、アラニンの連鎖からなるポリＬ−アラニンから構成されており、分子間、分子内の水素結合をしっかりと取った緻密な構造が特徴である。このため、野蚕由来のシルク繊維の熱分解温度が３５５℃であるのに対して、家蚕由来のシルク繊維の熱分解温度は３１０℃と相違する。緻密な構造を取る野蚕絹フィブロインに香成分が強い相互作用をもって結合すると、香成分を含む野蚕絹フィブロイの残香性は優れることになる。野蚕絹フィブロインの粉末あるいは膜状試料の主な分子構造は、ランダムコイルとαへリックスであり、アルコール処理でβ構造への転換が明瞭に起こるため、構造転移の特性を活用することで野蚕絹フィブロインは香成分分子の担体として好ましく利用できるものと考えられる。
【実施例１２】
【０１９２】
本実施例では、家蚕由来と野蚕（柞蚕）由来との絹フィブロインの混合素材を用いた残香性実験を行った。
【０１９３】
実施例９で使用した家蚕由来の絹フィブロイン水溶液の代わりに、それぞれの濃度が同じ０．５ｗｔ％、１ｗｔ％である家蚕由来の絹フィブロイン水溶液と野蚕由来の絹フィブロイン水溶液とを容量比５０：５０で複合させてなる家蚕絹フィブロインと野蚕絹フィブロインとの混合水溶液（２種類の混合水溶液）を用い、これに１ｍＬのローズマリー油溶液（ローズマリー油の原液１滴（約０．０５ｇ）を蒸留水で５０％に調整したエタノール水溶液で５０倍希釈したもの）を加えた混合物をゴム栓付きのガラス製バイアル瓶に入れ、−５０℃で２０分間予備凍結した後、−５０℃に設定した凍結乾燥機で１５時間乾燥させた。カラム充填剤を入れた吸着カラムのガラス管を用いることなく、ガラス製のバイアル瓶のゴム蓋に注射針を直接入れて瓶の上部空隙から５ｍＬの気体を採取した。ＧＣ−ＭＳでの分析によると、バイアル瓶中の気体に含まれるローズマリー油の主要成分であるシネオールを示すピーク面積が、両者とも実施例１０の場合よりも大きなピーク面積となった。シネオールを含む家蚕と野蚕との絹フィブロインの混合素材からのシネオールの徐放量が、家蚕単独よりも、また、野蚕単独よりも増大することが明らかとなった。水を加えた場合も同様であると考えられる。さらに、上記結果は、所定の時間放置した場合もほぼ維持され、残香性があることが分かった。
【実施例１３】
【０１９４】
家蚕由来の０．５ｗｔ％のシルク水溶液に、香成分として、ローズマリー油（シネオール）を添加したシルク水溶液１０ｍＬを調製した。この場合、実施例１０に準じて、香成分の希釈液としてエタノールと蒸留水とを１：１で混合したもの（５０％エタノール水溶液）を１ｍＬ使用した。かくして調製した香成分を含むシルク水溶液を基体（ポリスチレン板）表面に拡げ、室温で一昼夜かけて水溶液を蒸発乾燥固化させ香成分を含む透明なシルク膜を調製した。さらに、かくして調製したシルク水溶液に希薄酢酸を添加し、ｐＨを３．５に調整し、６時間放置後、−５０℃で２０分間予備凍結し、続いて−５０℃で１５時間凍結乾燥させることで香成分含有のスポンジ状のシルク多孔質体を製造した。
【０１９５】
香成分を含む透明なシルク膜、シルク多孔質体を、それぞれ、バイアル瓶に入れ、２５℃で１０％ＲＨの標準状態で所定時間（２４時間、３週間、６週間）が経過した直後、４人の評価者により４段階の官能香気評価基準に準拠してバイエル瓶中の香気の官能評価を行った。上記所定の放置時間経過後、試料に１０ｍＬの蒸留水を添加し、良く撹拌した後、再度、香気の官能評価を行った。
【０１９６】
シネオールを含有するシルク膜とシルク多孔質体では、放置時間が経過しても香気の評価値の低下は見られ難く、かつ蒸留水１０ｍＬを添加すると、水を添加する前に比べて香気の評価値が増加することが認められた。さらに、上記結果は、所定の時間放置した場合もほぼ維持され、残香性があることが分かった。
【０１９７】
これらの結果から、粉末状のシルクに加えて、シルク膜ならびにシルク多孔質体でも同様に残香性があることが分かった。
【実施例１４】
【０１９８】
濃度１．０％に調製した家蚕由来のシルク水溶液にローズマリー油原液１滴（０．０５ｇ）を蒸留水で５０％に調整したエタノール水溶液を用いて５０倍希釈したものを３ｍＬ添加したシルク水溶液、およびローズマリー油を全く含まない濃度１．０％の家蚕由来のシルク水溶液を、−５０℃の予備凍結槽（EYELA、PFR-1000）に２０分間入れてシルク水溶液を凍結させた。続いて−５０℃に設定した凍結乾燥機（EYELA、FDU-1200）を用いて１５時間乾燥処理することで、香成分を含有する乾燥シルクあるいは香成分を含まない乾燥シルクを製造した。上記、予備凍結乾燥と凍結乾燥はいずれもバイアル瓶を使用した。なお、香成分を全く含まないシルク水溶液の場合、製造された乾燥シルクに対して、上記ローズマリー油を希釈したものを添加した。
【０１９９】
乾燥状態のシルクが得られた後、所定の放置時間後、上記実施例の方法に準じて、バイアル瓶内の香成分の定量をＧＣ−ＭＳ測定で評価した。さらに、上記所定の放置時間経過後、バイアル瓶内の試料に１０ｍＬの蒸留水を加えて固形絹フィブロインを完全に溶解した後、上記実施例の方法に準じてバイアル瓶内の香成分の定量をＧＣ−ＭＳ測定で評価した。得られた結果を表１０に纏めた。
【０２００】
【表１０】
2017002251.tif 000012
【０２０１】
表１０中で、「−」はシネオールが検出できなかったことを示す。また、Ｓｉｌｋ １．０%は、濃度１．０％のシルク水溶液を意味する。
【０２０２】
表１０から、凍結乾燥前に香成分を添加した場合、家蚕由来のシルク水溶液を用いたローズマリー油の徐放実験により次のことが分かった。家蚕由来のシルクを徐放坦体として使用したとき、シネオールを含んだ乾燥状態のシルクに水を添加すると、試料からのシネオールの徐放量はさらに顕著に増大し、また、３週間放置後の香成分の香気は、大きな減少もなく、ほぼ維持されていた。なお、乾燥状態におけるシネオールを含んだ家蚕由来のシルクの放置時間２４時間でのシネオールの徐放量は、上記と同様に実施したシネオールを含んだ乾燥状態における加水分解シルクに比べて、ピーク面積比で前者の方が約４倍程度大きな値となり、また、放置時間２４時間後に１０ｍＬの水を加えたシネオールを含んだ家蚕由来のシルクからのシネオールの徐放量は、１０ｍＬの水を加えたシネオールを含んだ加水分解シルクに比べて、１．６倍ほど大きな値となった。
【０２０３】
また、表１０から、凍結乾燥後に香成分を添加した場合、すなわち、シネオールを含まない凍結乾燥シルクに所定量の香成分を添加後、２４時間静置してＧＣ−ＭＳ測定を行ったところ、ピーク面積は大きく、多量のシネオールの徐放が見られた。さらに、シネオールを含まない凍結乾燥シルクに所定量の香成分を添加後、３週間静置した時には、試料から多量のシネオールの徐放が起こり、シネオールの残存量が大きく低下することが分かった。また、１０ｍＬの水を加えた場合も、同様な傾向があった。
【０２０４】
かくして、表１０から明らかなように、香成分は、凍結乾燥前にシルク水溶液に添加すべきであり、凍結乾燥後に添加すると、放置時間の経過と共にシネオールの徐放が顕著となり、残存量が減少する。
【実施例１５】
【０２０５】
上記実施例で使用した家蚕由来のシルクの代わりに、重合度２０００、ケン化度９９．１ｍｏｌ％のポリビニルアルコール（ＰＶＡ）を用いて、シネオールを含んだ試料からのシネオールの徐放量をＧＣ−ＭＳ測定で評価した。ＧＣ−ＭＳ測定の結果の比較から、家蚕由来のシルクとＰＶＡとにおけるシネオールのピーク面積は、それぞれ、８３．７４×１０６、５１．６２×１０6であり、家蚕由来のシルクが優れた徐放基材であることが分かった。
【実施例１６】
【０２０６】
本実施例では、家蚕由来の絹フィブロイン膜の親水・疎水特性を検討した。
３０ｍｇの家蚕由来のシルクと、その比較試料として使用した市販品の３０ｍｇの加水分解シルク（一丸ファルコス社製）とを別々に２ｍＬの蒸留水に入れてシルクを完全に溶解した後、この水溶液を厚さ０．２ｍｍのポリプロピレン膜（株式会社カインズ製、商品名：クリアフォルダーＡ４）の表面に拡げた。
【０２０７】
なお、家蚕由来のシルクと加水分解シルクとを、それぞれ、蒸留水に入れて溶解して得られた水溶液の色調変化を観察したところ、家蚕由来のシルクを蒸留水に溶解させるとすべての試料は速やかに溶解し、水溶液は若干半透明となった。加水分解シルクを蒸留水に溶解させるとすべての試料がきれいに溶解し、水溶液は透明状態となったが、若干着色していた粉末色素のため薄黄色に変化した。
【０２０８】
家蚕由来のシルクと加水分解シルクとを、それぞれ、蒸留水に溶解させ、室温で３日間、静置し、試料中の水分を徐々に蒸発させることで、ポリプロピレン膜上には固形状のシルク膜が製造できた。得られた絹フィブロイン膜の形状を調べた。
【０２０９】
家蚕由来のシルクの場合は、直径５ｃｍの円状で厚さ２０μｍとなり、透明なシルク薄膜であり、かつ透明で柔軟性に富むシルク薄膜が得られた。
【０２１０】
一方、加水分解シルクを使用すると、円形のシルク膜となり、その直径は８ｍｍ（厚さ１ｍｍ）であった。加水分解シルクで得られるシルク固形物は透明であるが脆く膜強度は、家蚕由来のシルクよりは低い値となった。
【０２１１】
以上のことから、家蚕由来のシルクの分子量が相当に高いこと、加水分解シルクでは低分子化していることが示唆された。従って、分子量が高い家蚕由来の絹フィブロインから得られた乾燥シルクの場合、加水分解シルクの場合と比べて、残香性が高い。
【実施例１７】
【０２１２】
本実施例では、シルク水溶液（家蚕由来の絹フィブロイン水溶液）のゲル化について検討した。
【０２１３】
上記実施例と同じ家蚕由来のシルクと加水分解シルクとを、それぞれ、５ｍＬの蒸留水に３０ｍｇ入れて完全に溶解した。室温で２日間静置すると家蚕由来のシルクを溶解させた水溶液は完全にゲル化（固まる状態）したが、加水分解シルクでは、溶解後１６日経過しても水溶液状態であり、水溶液が不透明となり、ゲル化することは無かった。家蚕由来のシルクは、分子量が高いことが示唆された。
【産業上の利用可能性】
【０２１４】
本発明によれば、香成分を含んだ、香徐放性、香気持続性、および洗濯耐久性等に優れた残香性シルクおよびその製造方法、ならびに簡便な香成分の検出方法を提供できるので、食品分野、衣料分野、インテリア分野、風呂の入浴剤等の産業分野で利用可能である。
【符号の説明】
【０２１５】
１  シリンジ                              ２  シリンジ内管
３  吸着カラム                            Ａ  吸着充填剤
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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