(57)【要約】【課題】製品化の過程および製品の保存期間中における酸化の進行とそれに伴う魚油に特有の生臭い不快な異臭の発現、並びに、このものを摂食した時に魚油に特有の生臭い異臭が官能評価的に許容出る範囲内に抑制された粉末状のω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物と該組成物を含有する食品を提供する。【解決手段】溶存酸素量が１ｍｇ／Ｌ以下であって、過酸化物価が３以下かつ酸価が１以下かつアニシジン価が５以下であって、かつ、吸着剤処理によって過酸化物を除去した高度不飽和脂肪酸（特に、ω３系高度不飽和脂肪酸のエチルエステル）を含む組成物が提供される。好ましくは、高度不飽和脂肪酸を含む組成物は、噴霧乾燥法によって調製される。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
高度不飽和脂肪酸または高度不飽和脂肪酸エステルを含む組成物であって、該組成物は、溶存酸素量が１ｍｇ／Ｌ以下であり、過酸化物価が３以下であり、酸価が１以下であり、かつ、アニシジン価が５以下である、組成物。
【請求項２】
さらに、抗酸化剤を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
さらに、乳化剤を含む、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
前記抗酸化剤が、大豆リン脂質、ビタミンＥ、およびアスコルビン酸パルミテートからなる群から選択される、請求項２に記載の組成物。
【請求項５】
前記乳化剤が、卵黄および卵白からなる群から選択される、請求項３に記載の組成物。
【請求項６】
水分含量が５ｗｔ％以下の噴霧乾燥物である、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
請求項１に記載の組成物を含む、食品。
【請求項８】
α−リノレン酸、ステアリドン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸からなる群から選択される高度不飽和脂肪酸のエステルを４０ｗｔ％〜９９ｗｔ％含有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
前記組成物中の高度不飽和脂肪酸エステルの総含有量が２０ｗｔ％〜６０ｗｔ％である、請求項１に記載の組成物。
【請求項１０】
前記高度不飽和脂肪酸または高度不飽和脂肪酸エステルが、吸着剤処理された高度不飽和脂肪酸または高度不飽和脂肪酸エステルである、請求項１に記載の組成物。
【請求項１１】
請求項１に記載の組成物を固形物換算で、５ｗｔ％〜５０ｗｔ％含む食品。
【請求項１２】
パン類、麺類、菓子類、植物等油脂食品類、大豆たんぱく食品、味噌、乳製品、肉製品、卵製品、魚肉練り製品、および、インスタント食品からなる群から選択される、請求項１１に記載の食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、高度不飽和脂肪酸の酸化の進行を妨げるおよび／または遅らせることを特徴とする、高度不飽和脂肪酸または高度不飽和脂肪酸エステル含有組成物及び該組成物を含有する食品に関する。例えば、本発明の組成物は、溶存酸素量が１ｍｇ／Ｌ以下であって、過酸化物価３以下かつ酸価１以下かつアニシジン価５以下であって、かつ、（例えば、吸着剤処理によって）過酸化物を除去したω３系高度不飽和脂肪酸のエチルエステルと、大豆リン脂質及びビタミンＥ及びアスコルビン酸パルミテートを含む混合物と卵黄の乳化混合物に、更に、卵白を加えて均質化した組成物を噴霧乾燥法により乾燥し、水分含量を５ｗｔ％以下に調整した粉末であることを特徴とするω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物並びに該組成物を含有する食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
魚油、藻類、遺伝子組み換え植物等に含まれるＡＬＡ、ＳＤＡ、ＥＰＡ、ＤＰＡ、ＤＨＡ等のω３系高度不飽和脂肪酸又はそのエチルエステルは循環器系疾患改善、脳神経機能の改善、免疫機能の改善だけでなく、酸化ストレス抑制を介する疾病の予防改善など広範な機能を発揮し、更に、癌の増殖抑制にも有効とされるなど用途の拡大が続いている素材である（非特許文献１および２、ならびに、特許文献１）。
【０００３】
これらω３系脂肪酸はグリセリド体又は遊離型脂肪酸やエチルエステル体としてそのままで、又は、濃縮精製されて食品素材、健康食品素材、化粧品素材、医薬品素材として上市されている。これらのω３系脂肪酸は一般に、真空精密蒸留法、分子蒸留法、クロマト法、低温溶媒分別結晶法、尿素付加法、硝酸銀錯体形成法、などを適時組み合わせて濃縮されている（特許文献２）。
【０００４】
特に、ＥＰＡのエチルエステル体（以下ＥＰＡエチル）はスイッチＯＴＣとして閉塞性動脈硬化症、高脂血症等の治療薬として販売が開始され、医薬品グレードＥＰＡエチルの市場拡大が続いている。
【０００５】
また、グリセリド体としてそのままで、又はエチルエステル体を濃縮精製した後、市販されているものもある。例えば、魚油を出発原料とする時、該グリセリドに含まれるω３系脂肪酸は低温溶媒分別結晶法により濃縮されたり、リパーゼなど酵素処理により濃縮される場合もあるが、商業規模では該ω３系脂肪酸純度は７０％が限界とされている。
【０００６】
ω３系脂肪酸純度が９０ｗｔ％以上のグリセリドは少なくとも９０ｗｔ％以上の当該脂肪酸又はその低級アルコールエステルを出発原料とし、グリセリンとのエステルとすることによって合成される。エステル化反応は一般にリパーゼによる可逆反応、又は酸、アルカリによる化学的合成反応によって得ることが出来る。なお、上記９０ｗｔ％以上の当該脂肪酸又はその低級アルコールエステルは公知の方法によって得ることが出来る（特許文献３、４）。
【０００７】
すなわち、例えば、ＡＬＡ、ＳＤＡ、ＥＰＡ、ＤＰＡ、ＤＨＡ等から選ばれる何れか１種類のω３系高度不飽和脂肪酸を７０ｗｔ％以上の高純度に精製するためには、当該脂肪酸又はその低級アルコールエステルの形であることが好ましい。また、蒸留設備を用いる場合、設備上及び脂肪酸の沸点等の物性上の特徴から、遊離脂肪酸ではなくその低級アルコールエステルの形での濃縮精製が現実的である。
【０００８】
更に、脂肪酸の低級アルコールエステルの場合、食品、医薬品、化粧品等の分野での利用を想定した場合は、そのエチルエステルが最も望ましい。
【０００９】
しかしながら、これらのω３系高度不飽和脂肪酸のグリセリド体又は遊離型脂肪酸やエチルエステル体は１分子当たり３〜６個の不飽和結合を有するため酸化速度が大きく、また、極微量の過酸化物の生成は十分に不快な魚臭を伴う。掛かる問題解決のため、多くの酸化防止技術、魚臭除去技術、マスキング技術が提案されてきた。
【００１０】
抗酸化剤に関しては、ビタミンＥ、アスコルビン酸パルミテート、レシチンを併用する方法（特許文献５）、香辛料抽出物を用いる方法（特許文献６、７）多数の特許文献が見られる。ω３系高度不飽和脂肪酸を多く含む魚油に関しては、大豆リン脂質中のホスファチジルコリンやホスファチジルエタノールアミンなどの含窒素リン脂質のビタミンＥに対する相乗的な抗酸化作用（非特許文献３）、アスコルビン酸パルミテートの有効性（特許文献２）が知られているが、いずれの方法も酸化の進行を完全に妨げることは出来ていない。
【００１１】
掛かる問題点改善のため、植物油脂に含まれる溶存酸素を低減することによる保存安定性向上を目指す技術が公知となっている。すなわち、油脂へのハイドロキノン添加による溶存酸素の低減化（非特許文献４）、油脂中の酸素を含む溶存気体を二酸化炭素置換することによる風味改善方法（特許文献８）、窒素ガス置換によるマヨネーズなどの水中油型乳化物中の溶存酸素低減化と品質の劣化防止に関する方法（特許文献９）などが公知であり有効性が明らかとなっている。
【００１２】
上記の溶存酸素を低減させる工程の有無に拘わらず、一般に、高度不飽和脂肪酸含有のグリセリド脂質類とそのエチルエステル類、並びに、ＡＬＡ、ＳＤＡ、ＥＰＡ、ＤＰＡ、ＤＨＡ等のω３系高度不飽和脂肪酸のエチルエステルを含む脂質類は例えばそのアルキルラジカル（Ｌ・）やペルオキシラジカル（ＬＯＯ・）などの過酸化物や分解物をアルコールやケトン類、アルデヒド類、酸類などの形で含んでおり、これらは官能評価上及び栄養学上の障害になるだけでなく、例えば連鎖反応の誘発などを介して品質の更なる劣化原因となるため除去することが必要である。従って、過酸化物やその分解物の除去は製品の官能評価や栄養学的価値を向上させるだけでなく、過酸化物価（ＰＯＶ）、酸価（ＡＶ）、アニシジン価（ＡｎＶ）の低減化に有効である。
【００１３】
油脂中の過酸化脂質やその分解物の除去は多数公知となっているが、例えば、分子蒸留法（特許文献１０）、吸着剤処理法（特許文献２、特許文献１１、特許文献１２、特許文献１３）などが知られており、本発明に於いては何れの方法も利用可能である。実験的にはフロリジル（１００／２００メッシュ）カラムを用いた過酸化脂質の除去法が知られている（非特許文献５）。
【００１４】
過酸化脂質及びその分解物の検出は、例えば、シリカゲル６０ＰＦ２５４ＴＬＣプレート（Ｍｅｒｋ社、０．２５ｍｍ厚さ）を用いる薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）法、ケイ酸カラムクロマトグラフィー法、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）法等が知られている（非特許文献５）。また、例えば、シリカゲル薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）で中性脂質用展開溶媒（ｎ−ヘキサン／ジエチルエーテル／酢酸＝８５／１５／１）を用いて定性的に検定した時、原点付近に過酸化物の存在しているか否かによって簡易的に検定することも公知である。
【００１５】
高度不飽和脂肪酸含有油脂類からの脱臭方法に関しては水蒸気蒸留法、分子蒸留法、ケイ酸カラムクロマト法など多数の技術が公知であるが、いずれも十分ではない（非特許文献２）。
【００１６】
マスキング方法に関しては脂溶性ジンジャーフレーバーを用いる方法（特許文献１４）、香辛料抽出物を用いる方法（特許文献６，７）、柑橘系香料やヨーグルト香料を用いる方法（特許文献１５）、羅漢果抽出物を用いる方法（特許文献１６）などの他多数の技術が公開されており、有効性が認められるものもあるが、マスキングに用いるフレーバーの種類により其々の用途が限定されるという欠点が問題となっている。
【００１７】
また、該油脂は常温では液状であるため、通常の工程での他原料との混合の困難、包装、運搬上の困難、酸素との高い接触頻度に伴う酸化に起因する魚臭様の異臭発現などが発生し、食品への用途が限定される。掛かる問題点解決のため、該油脂の粉末化に関する技術が公開されている。
【００１８】
すなわち、ＤＨＡ含有油脂の酵母菌体内への封入によるマイクロカプセル化（特許文献１７）、トランスグルタミナーゼにより硬化されたゼラチンを用いた膜を有するマイクロカプセル（特許文献１８）、モノグリセリドを含む乳化物の粉末化（特許文献１９）、賦形剤として脱脂大豆を用いる方法（特許文献２０），多層構造のマイクロカプセル（特許文献２１）など多数の技術が開示されている。
【００１９】
更に、卵黄、卵白を用いた油脂の粉末化技術として、卵白を賦形剤として用いる方法（特許文献２２，２３）、および、卵黄を用いる方法（特許文献２４）などが公知である。卵黄乾燥品には通常２５ｗｔ％前後の脂質が含まれており、リン脂質の含有量は２８ｗｔ％前後とされている（非特許文献６）が、このものの高度不飽和脂肪酸エステル（特に、ω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル）に対する抗酸化作用を利用した粉末は知られていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００２０】
【特許文献１】特開２０１５−１４７７７０
【特許文献２】特開２０１５−６３６５３
【特許文献３】特開２０００−２１２５８８
【特許文献４】特開平１１−２０９７８６
【特許文献５】特開平９−２７２８９２
【特許文献６】特開平７−２３６４１８
【特許文献７】特開２００７−１６０４５
【特許文献８】特開２０１４−１４０３３２
【特許文献９】特開２００５−１１０６７４
【特許文献１０】特開２００２−２３３３９８
【特許文献１１】特開平７−１８８６９２
【特許文献１２】特開２００２−１０２６９２
【特許文献１３】特表２０１３−５２１００４
【特許文献１４】特開平０６−１８９７１７
【特許文献１５】特開平０８−０９２５８７
【特許文献１６】特開２０１２−２２３１３８
【特許文献１７】特開平０５−２５３４６４
【特許文献１８】特開平０５−２９２８９９
【特許文献１９】特開平０６−１７２７８２
【特許文献２０】特開平０７−３１３０５７
【特許文献２１】特開２０１３−１７７４００
【特許文献２２】特開昭６３−４４８４４
【特許文献２３】特開平８−２３８８１
【特許文献２４】特表２００７−５１６７１１
【非特許文献】
【００２１】
【非特許文献１】万倉三正・鹿山  光、題名「ＡＡ，ＥＰＡ，ＤＨＡの生理機能と利用」、“ＡＡ，ＥＰＡ，ＤＨＡ−高度不飽和脂肪酸（共著）”、鹿山光編、恒星社厚生閣、東京、１９９５、ｐｐ．２０７−２２４
【非特許文献２】万倉三正、西岡功志、加太英明、山主智子、戸谷永生、中本賀寿夫、金行孝雄、高山房子、題名「ＤＨＡ製品の開発と機能性評価」、ジャパンフードサイエンス、４９（１）、４５−５２（２０１０）
【非特許文献３】瀬川丈史・鎌田正純・原節子・戸谷洋一郎、題名「魚油の高度不飽和脂肪酸に対するリン脂質の酸化防止挙動（第３報）」、油化学、４４（１）、３６−４２（１９９５）
【非特許文献４】平野四蔵・黒部森司、題名「油脂中の溶存酸素の定量ならびに溶存酸素量に及ぼす影響」、工業化学雑誌、５７（９）、１４−１６（１９５４）
【非特許文献５】寺尾純二・松下雪郎、題名「過酸化脂質の単離（過酸化脂質実験法」、金田尚志・植田伸夫編）、ｐｐ．２１−３５、医歯薬出版株式会社，東京（１９８３）
【非特許文献６】伊藤敬恵・山中なつみ・小川典子、題名「異なる鶏種の鶏が産卵した卵の卵黄中のホスファチジルコリン含量の比較」、岐阜女子大学紀要、３７、１５−１８（２００８）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２２】
上記の背景技術の存在にも関わらず、製品化の過程および製品の保存期間中における酸化の進行を官能評価的に異臭発現が気にならないレベル以内に保持する技術は未だ開発されていない。それゆえ、本発明は、製品化の過程および製品の保存期間中における酸化の進行を妨げるおよび／または遅らせることを課題とする。より具体的には、以下のとおりである：
ＡＬＡ、ＳＤＡ、ＥＰＡ、ＤＰＡ、ＤＨＡ等のω３系高度不飽和脂肪酸のエチルエステルは酸化速度が大きく、高純度に精製されるほどその速度は大きくなるため、少なくとも１０ｗｔ％以上の該ω３系高度不飽和脂肪酸のエチルエステルを含む混合物を酸化から保護することは従来技術では十分に成されて来なかったため依然として未解決の技術的課題である。また、酸化に伴う各種の分解物、特に、魚臭を伴う不快な酸化臭の発現は未解決の技術的課題である。従って、該エチルエステルの酸化進行を遮断し、魚臭の発現を阻止することが重要であるが、不飽和結合を３個以上有する高度不飽和脂肪酸の物性上の特徴に鑑みて完全な酸化進行防止、魚臭発現阻止は非現実的との観点から、本発明では、製品化の過程および製品の保存期間中における酸化の進行が官能評価的に異臭発現が気にならないレベル以内に保持されることを技術的課題としている。
【００２３】
更に、上記技術的課題の解決のために、本発明ではまた、ω３系高度不飽和脂肪酸のエチルエステルの食品分野での用途拡大を容易にするため、抗酸化性に優れた粉末である高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物及び該組成物を含有する食品を提供する。
【課題を解決するための手段】
【００２４】
抗酸化性に優れた粉末である高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物及び該組成物を含有する食品の提供により課題の解決を図る。
【００２５】
本発明者らは、溶存酸素量が１ｍｇ／Ｌ以下であって、過酸化物価３以下かつ酸価１以下かつアニシジン価５以下である高度不飽和脂肪酸エステル（例えば、ω３系高度不飽和脂肪酸のエチルエステル）を提供することよって、上記課題を解決した。
【００２６】
本発明はまた、例えば、以下を提供する：
（項目１）
高度不飽和脂肪酸または高度不飽和脂肪酸エステルを含む組成物であって、該組成物は、溶存酸素量が１ｍｇ／Ｌ以下であり、過酸化物価が３以下であり、酸価が１以下であり、かつ、アニシジン価が５以下である、組成物。
（項目２）
さらに、抗酸化剤を含む、項目１に記載の組成物。
（項目３）
さらに、乳化剤を含む、項目１または２に記載の組成物。
（項目４）
前記抗酸化剤が、大豆リン脂質、ビタミンＥ、およびアスコルビン酸パルミテートからなる群から選択される、項目２に記載の組成物。
（項目５）
前記乳化剤が、卵黄および卵白からなる群から選択される、項目３に記載の組成物。
（項目６）
水分含量が５ｗｔ％以下の噴霧乾燥物である、項目１に記載の組成物。
（項目７）
項目１に記載の組成物を含む、食品。
（項目８）
α−リノレン酸、ステアリドン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸からなる群から選択される高度不飽和脂肪酸のエステルを４０ｗｔ％〜９９ｗｔ％含有する、項目１に記載の組成物。
（項目９）
前記組成物中の高度不飽和脂肪酸エステルの総含有量が２０ｗｔ％〜６０ｗｔ％である、項目１に記載の組成物。
（項目１０）
前記高度不飽和脂肪酸または高度不飽和脂肪酸エステルが、吸着剤処理された高度不飽和脂肪酸または高度不飽和脂肪酸エステルである、項目１に記載の組成物。
（項目１１）
項目１に記載の組成物を固形物換算で、５ｗｔ％〜５０ｗｔ％含む食品。
（項目１２）
パン類、麺類、菓子類、植物等油脂食品類、大豆たんぱく食品、味噌、乳製品、肉製品、卵製品、魚肉練り製品、および、インスタント食品からなる群から選択される、項目１１に記載の食品。
【００２７】
本発明はまた、例えば、溶存酸素量が１ｍｇ／Ｌ以下であって、過酸化物価３以下かつ酸価１以下かつアニシジン価５以下である高度不飽和脂肪酸エステル（例えば、ω３系高度不飽和脂肪酸のエチルエステル）と、大豆リン脂質及びビタミンＥ及びアスコルビン酸パルミテートを含む混合物と卵黄の乳化混合物に、更に、卵白を加えて均質化した組成物を噴霧乾燥法により乾燥し、水分含量を５ｗｔ％以下に調整した粉末であることを特徴とするω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物並びに該組成物を含有する食品を提供する。
【００２８】
（用語の定義）
以下に本明細書において特に使用される用語の定義を列挙する。
【００２９】
本明細書において使用される用語「高度不飽和脂肪酸」とは、炭素数が１６以上、かつ分子内に二重結合を２個以上有した不飽和脂肪酸を意味し、代表的には、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）などのオメガ３系脂肪酸のエチルエステルが挙げられる。高度不飽和脂肪酸としては、例えば、ドコサヘキサエン酸（Ｃ２２：６、ＤＨＡ）、エイコサペンタエン酸（Ｃ２０：５、ＥＰＡ）、アラキドン酸（Ｃ２０：４、ＡＡ）、ドコサペンタエン酸（Ｃ２２：５、ＤＰＡ）、ステアリドン酸（Ｃ１８：４、ＳＤＡ）、α−リノレン酸（Ｃ１８：３、ＡＬＡ）、リノール酸（Ｃ１８：２）等が挙げられるがこれらに限定されない。本発明の取得方法で得られる高度不飽和脂肪酸の誘導体とは、脂肪酸が遊離型でないものをいい、例えば、高度不飽和脂肪酸のメチルエステル、エチルエステル等のエステル型誘導体、アミド、メチルアミド等のアミド型誘導体、脂肪アルコール型誘導体、トリグリセライド、ジグリセライド、モノグリセライド等が挙げられるがこれらに限定されない。好ましくは、本発明の精製方法の目的物質は、ドコサペンタエン酸、エイコサペンタエン酸、および、ドコサヘキサエン酸、ならびに、それらの低級アルコール（例えば、メタノールおよびエタノール）とのエチルエステルからなる群から選択されるエチルエステルである。好ましくは、本発明の高度不飽和脂肪酸または高度不飽和脂肪酸エステルは、最終精製オイル中で５０ｗｔ％〜９５ｗｔ％含まれる。
【００３０】
本明細書において使用される用語「酸価」とは、脂肪酸に含まれているカルボン酸の指標であり、試料１ｇ中に含まれている遊離脂肪酸を中和するのに要する水酸化カリウムのｍｇ数をいう。酸価の測定法は、２００３年版基準油脂分析試験法（（社）日本油化学会編纂）に記載されるとおりである。
【００３１】
本明細書において使用される用語「過酸化物価」は「酸価」とは直接的には関係しない。過酸化物価とは、「ＰＯＶ」と互換可能に使用され、油脂の自動酸化の初期に生じる一次生成物である過酸化物の量を表す。混合物（原料油脂）に過酸化物が存在する場合、過酸化物は不安定なため、分解しアルデヒドを生成する。アルデヒドは、一般的に毒性があるため、アルデヒドの発生を抑えることも重要である。「過酸化物価（ＰＯＶ）」は、ヨウ化カリウムを試料と反応させ、油脂中のヒドロペルオキシドによってヨウ化カリウムから遊離するヨウ素を滴定することにより測定することができる。より詳細には、２００３年版基準油脂分析試験法（（社）日本油化学会編纂）に記載されるとおりである。
【００３２】
本明細書において使用される用語「抗酸化剤」とは、生体内、食品、日用品、工業原料において酸素が関与する有害な反応を減弱もしくは除去する物質をいう。代表的には、抗酸化剤としては、トコフェロール、アスコルビン酸パルミテート、レシチン、カテキン、および、ローズマリー抽出物、ならびに、ブチルヒドロキシトルエンが挙げられるがこれらに限定されない。
【００３３】
本明細書で用いる脂肪酸組成分析法の測定法は、周知であり、例えば、２００３年版基準油脂分析試験法（（社）日本油化学会編纂）に記載されるとおりである。
【００３４】
本明細書において使用される用語「真空精密蒸留法」とは、各成分の沸点差を利用して分離する方法をいう。例えば、ＥＰＡの場合、ＥＰＡを含む炭素鎖数が２０の成分は魚油脂肪酸の中で中間の沸点に位置しており、バッチ式の場合、単塔式蒸留装置を用いる事が、連続蒸留の場合、二塔式装置ないしは四塔式装置が必要となる。二塔式であればＣ１９以下の成分（初留）を留出させ、その残留分を第二塔に送りＣ２０成分を（主留）を分取することにより精製を行う。
【００３５】
本明細書において使用される用語「固定層クロマトグラフィー法」とは、カラムに充填剤を詰め、原料を溶離液で通過させることにより目的の成分を含む画分を取り出し、濃縮・精製する方法をいう。好ましい充填剤としては、シリカゲル、逆相シリカゲル、硝酸銀含浸シリカゲルが挙げられるがこの限りではない。
【００３６】
本明細書において使用される用語「ＳＭＢクロマトグラフィー」とは、液体クロマトグラフィーの原理を利用する分離法であって、原料中の特定の成分と、別の特定の成分に対して異なる選択的吸着能力を有する吸着剤が充填された複数の単位充填層を直列に連結するとともに、最下流部の単位充填層と最上流部の単位充填層とを連結し、無端状の循環系を形成した移動層を用いるクロマトグラフィーをいう。本願明細書において、「ＳＭＢクロマトグラフィー」は、「擬似移動層クロマトグラフィー」と互換可能に使用される。
【００３７】
本明細書において使用される用語「ウィンタリング処理」とは、「脱ろう」と互換可能に使用され、油脂を指定した低温に長時間保って融点の高い油脂（例えば、グリセリドまたはアシルグリセロール）を析出される処理をいう。
【００３８】
本発明において使用される吸着剤としては、例えば、活性炭、活性白土、酸性白土、ケイ酸（シリカ）、シリカゲル、アルミナ、酸化マグネシウムなどの吸着剤から選ばれる１種類以上の組み合わせが挙げられるがこれらに限定されない。吸着剤処理によって、濃縮精製されたＥＰＡエチルエステルおよびＤＨＡエチルエステルのような不飽和脂肪酸エチルエステルは、精製中に発生した脂質の過酸化物、着色成分、原料由来の異物などの不純物を含むため、周知の手法に基づき活性炭、活性白土、酸性白土、ケイ酸（シリカ）、シリカゲル、アルミナ、酸化マグネシウムなどの吸着剤から選ばれる１種類以上の組み合わせにより吸着剤処理される。例えば、吸着剤処理によって、ＰＯＶを３以下、望ましくは１以下とすることができる（すなわち、脂質の過酸化物を含む不純物を除去することによって、ＰＯＶを低下させることができる）。
【００３９】
本明細書において使用される用語「アニシジン価」とは、カルボニル化合物を比色定量する方法をいう。発色にｐ−アニシジンを用いる。操作がカルボニル価（ＣＶ）よりも簡便であるため、フライ油の劣化度評価法として、ＥＵ諸国において使用されている。ただし、発色の強度がカルボニル化合物の種類（二重結合の有無や炭素数）によって異なるため、脂肪酸組成が異なる油脂同士を比較することはできない。
【００４０】
本明細書において使用される用語「エステル化」とは、脂肪酸を低級アルコール存在下でエステル化する反応をいう。脂肪酸をエステル化する方法は、当該分野で周知である。例えば、酸触媒存在下で低級アルコールを用いて脂肪酸をエステル化する方法は酸触媒法として周知であり、アルカリ触媒存在下で低級アルコールを用いて脂肪酸をエステル化する方法はアルカリ触媒法として周知である（日本油化学会編、第４版油脂化学便覧、丸善（東京）、２００１年、４５４〜４５６頁；  岡原光男他編、加水分解、エステル化およびエステル交換、改定３版油脂化学便覧（日本油化学会編）、丸善（東京）  ３８８−３８９（１９９０））。また、リパーゼのような酵素を用いる脂肪酸のエチルエステル化もまた酵素法として周知である（特開２００６−２８８２２８号）。本発明においては、必要に応じて２つ以上のエステル化法を組み合わせてもよい。好ましくは、酸触媒法または酵素法によって最初のエステル化を行った後に、アルカリ触媒法によるエステル化を行う。エタノールを利用したエステル化をエチルエステル化という。
【００４１】
本明細書において使用される用語「抗酸化剤」とは、酸化を防止および/または抑制する任意の物質をいう。本発明の抗酸化剤は、好ましくは、製造工程中あるいは製品保管中における酸化の進行に伴う魚油に特有の生臭い不快な魚臭様の異臭などの発現を気にならないレベル以内に保持することが可能である。
【００４２】
抗酸化剤としてはビタミンＥとそのシナージストとして大豆リン脂質及びアスコルビン酸パルミテートが挙げられるがこれらに限定されない。ビタミンＥは合成ビタミンＥ（ｄｌ−α−トコフェロール）、天然ビタミンＥ（ｄ−α−トコフェロール）の他、天然のα−、β−、γ−、δ−トコフェロールの混合品（ミックストコフェロール）も利用可能であるが、経済性、価格に対する抗酸化力の活性比較から勘案して、ミックストコフェロールが最も好ましい。添加量はω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステルに対して０．０１〜３ｗｔ％が望ましいが、経済性を考慮した時、０．０５〜１．０ｗｔ％が最も望ましい。
【００４３】
大豆リン脂質は通常リン脂質を６０ｗｔ％程度含有するペースト（液状）製品とリン脂質を９５％ｗｔ％程度含有する粉末製品が知られている。また、大豆リン脂質を構成する主要な成分であるホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトールなどの何れかを濃縮精製した分画製品も知られている。本発明に於いてはペースト（液状）製品、粉末製品とも利用可能である。分画製品の場合はホスファチジルコリン及びホスファチジルエタノールアミンが利用可能である。いずれの場合も、製品の形状に関わらず、リン脂質分としての添加量はω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステルに対して０．１〜１０ｗｔ％が望ましいが、リン脂質添加に伴う官能評価的な品質の低下を考慮した時、１〜８．０ｗｔ％が最も望ましい。大豆リン脂質を用いた時、本発明で用いる卵黄に含まれるリン脂質との相乗的な有効性も期待される。
【００４４】
アスコルビン酸パルミテートはビタミンＥとの相乗的な抗酸化作用が期待されるため、本発明に於いては、添加量はω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステルに対して０．０１〜１ｗｔ％が望ましいが、油脂に対する溶解度を考慮した時、０．０５〜０．１ｗｔ％が最も望ましい。
【００４５】
本明細書において使用される用語「乳化剤」とは、高度不飽和脂肪酸または高度不飽和脂肪酸エステルを乳化する任意の物質をいう。本発明の乳化剤としては、例えば、卵黄および/または卵白などの鶏卵品が挙げられるがこれらに限定されない。
【発明の効果】
【００４６】
本発明によって、製品化の過程および製品の保存期間中における酸化の進行を妨げるおよび／または遅らせることが可能となる。例えば、本発明にしたがって、製品化の過程および製品の保存期間中における酸化の進行を官能評価的に異臭発現が気にならないレベル以内に保持する技術が提供される。
【発明を実施するための形態】
【００４７】
以下、本発明を説明する。本明細書の全体にわたり、単数形の表現は、特に言及しない限り、その複数形の概念をも含むことが理解されるべきである。また、本明細書において使用される用語は、特に言及しない限り、当該分野で通常用いられる意味で用いられることが理解されるべきである。したがって、他に定義されない限り、本明細書中で使用される全ての専門用語および科学技術用語は、本発明の属する分野の当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。矛盾する場合、本明細書（定義を含めて）が優先する。また、本明細書において「ｗｔ％」は、「質量パーセント濃度」と互換可能に使用される。
【００４８】
（高度不飽和脂肪酸エステルの調製）
本発明の高度不飽和脂肪酸エステルは複数種類脂肪酸エステルの混合物であるため、一般に、真空精密蒸留法、分子蒸留法、クロマト法、尿素付加法、硝酸銀錯体法、低温溶媒分別結晶法などの手法を１種類以上組み合わせて精製し、目的とするω３系脂肪酸を少なくとも９５ｗｔ％以上含む混合物を取得することが出来る（特許文献８）。当然のことながら、これらの精製法そのものは例示の為であって本発明の目的ではないため、エステル化法、濃縮精製法そのものは限定されない。
【００４９】
一般に、高度不飽和脂肪酸含有量が多くヨウ素価も高いエイ肝油やイカ肝油などの魚油は溶存酸素量は其々１．４ｍｇ／Ｌ、５．７ｍｇ／Ｌであり、通常の植物油、例えば大豆油の溶存酸素量７．６ｍｇ／Ｌよりも低いとされている（非特許文献４、特許文献９）。これは高度不飽和脂肪酸を多く含む魚油はその酸化に伴う酸素の消費速度が植物油より大きく、空気中からの酸素の溶解速度を上回っているためであると理解される。本発明においては不飽和度の高いω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステルを用いるため、大半の溶存酸素は過酸化物、あるいはその分解物として存在していると推定される。
【００５０】
ω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステルは未加工の原料油脂の段階からエチルエステル化されるまでの過程で大量の溶存酸素を吸収し、過酸化物やその分解物となって存在しており、後の粉末化工程や保存期間中に魚油に特有の生臭い不快な異臭などの発現の原因となる。従って、溶存酸素を吸収して過酸化物やその分解物となったω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステルを活性炭、活性白土、酸性白土、シリカゲル、フロリジルなどの吸着剤による処理（非特許文献５、特許文献１１）、分子蒸留などの物理的な処理（特許文献１０）、クロマト法による処理（非特許文献５）などで予め除去しておくことが重要であるが、本発明に於いてはその除去方法そのものは制限はないため限定されないが、簡便さ、有効性の高さから見て吸着剤による処理が好ましい。また、吸着剤処理工程は本発明における抗酸化剤混合工程までのいずれの段階に挿入しても良いし、複数回実施してもよい。
【００５１】
また、過酸化脂質及びその分解物の検出は、本発明では先述のいずれの方法も利用可能であるが、例えば、シリカゲル６０ＰＦ２５４ＴＬＣプレート（Ｍｅｒｋ社、０．２５ｍｍ厚さ）を用いる薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）法（非特許文献５）が精度の高さ、簡便さの観点から好ましい。
【００５２】
（エステル化反応）
不飽和脂肪酸のエステル化反応は周知であり、代表的には、酸触媒下でのエステル化反応、アルカリ触媒下でのエステル化反応、および、酵素存在下でのエステル化反応が挙げられるがこれらに限定されない。
【００５３】
またエステル化反応は、必要に応じてこれらエステル化反応の２つ以上を組み合わせて行ってもよい。好ましくは、酸触媒法または酵素法によって最初のエステル化を行った後に、アルカリ触媒法によるエステル化を行う。
【００５４】
本発明の高度不飽和脂肪酸は食品用途を前提としているためエチルエステル体が望ましい。
【００５５】
（酸触媒下でのエステル化反応）
酸触媒下での低級アルコールによる不飽和脂肪酸のエステル化反応には、周知の反応条件を利用することができる。代表的には、反応条件は、７０〜８０℃での５時間程度の撹拌である。
【００５６】
（アルカリ触媒下でのエステル化反応）
アルカリ触媒下で低級アルコールによる不飽和脂肪酸のエステル化反応には、周知の反応条件を利用することができる。代表的には、反応条件は、７０〜８０℃での１時間程度の撹拌である。
【００５７】
（酵素存在下でのエステル化反応）
酵素処理に際しては、反応時間、温度などに制限はない。当業者は、例えば、特開２００２−６９４７５号公報、特開２０１３−５５８９号公報、および、特開２０１３−１２１３６６号公報などに記載される周知の条件を利用することができる。酵素反応の進行はＡＶ測定により管理できる。出発原料の種類、ＥＰＡ純度、ＤＨＡ純度など目標としている製品の品質により反応を停止するべきＡＶは任意に設定できるが、一般に、３０〜１３０の範囲、望ましくは７０〜１００の範囲で反応を停止する。
【００５８】
（エステル化反応の組み合わせ）
エステル化反応は、必要に応じて任意の２つ以上のエステル化反応を任意の順番で組み合わせて行ってもよい。本願の発明者らは酸価が高い高度不飽和脂肪酸を含む原料（特に、酸価が１０以上）に対してアルカリ触媒法によるエステル化を行った場合に、高度不飽和脂肪酸の鹸化が生じ、その後の反応が適切に進まないことを見出した。それゆえ、酸価が高い原料では、好ましくは、酸触媒法または酵素法によって最初のエステル化を行った後に、アルカリ触媒法によるエステル化を行う。
【００５９】
エステル化反応を組み合わせる場合、好ましくは、最初のエステル化反応に用いた低級アルコールを除去する。除去方法としては、例えば、蒸発が挙げられるがこれに限定されない。低級アルコール除去後に得られる油層は、必要に応じて水性溶媒（例えば、水、湯、緩衝液が挙げられるがこれらに限定されない）で洗浄される。この洗浄は必要に応じて（例えば、ｐＨが中性になるまで）繰り返され、その後、次のエステル化反応に供される。
【００６０】
（溶存酸素の測定法）
油脂中の溶存酸素の測定は、周知の手法によって可能である。エチルエステル混合物中の溶存酸素の測定方法において使用する測定器等に関しては何らの制限も無いが、例えば、特許文献８に準じて、溶存酸素量測定装置（蛍光式溶存酸素計ＦＯＭ−１０００、株式会社オートマチックシステムリサーチ製)を用いて測定できる。
【００６１】
（溶存酸素の低減法）
溶存酸素を低減することによる保存安定性向上を目指す技術が公知となっている。すなわち、油脂へのハイドロキノン添加による溶存酸素の低減化（非特許文献４）、油脂中の酸素を含む溶存気体を二酸化炭素置換することによる風味改善方法（特許文献８）、窒素ガス置換によるマヨネーズなどの水中油型乳化物中の溶存酸素低減化と品質の劣化防止に関する方法（特許文献９）などが公知であり有効性が明らかとなっている。
【００６２】
特許文献８に記載の溶存酸素低減法は、油脂組成物中の溶存気体を油脂組成物中の二酸化炭素以外の気体の溶存量が特定の範囲になるまで二酸化炭素で置換（例えば、８．５ｍＬ／分程度でのバブリングによる置換）する方法である。
【００６３】
特許文献９に記載の溶存酸素低減法は、対象となる組成物を樹脂製容器に充填するに際し、組成物中の溶存酸素量をある一定の濃度範囲まで減じ、かつ樹脂製容器の酸素透過度を特定値以下とし、さらに樹脂製容器に組成物を充填する際には予め容器内を窒素等の不活性ガスで置換しておくことにより、保存中の酸化による劣化を低減する方法である。
【００６４】
高度不飽和脂肪酸（例えば、高度不飽和脂肪酸エチルエステル）を含む溶液中の溶存酸素は例えば窒素バブリング法によって低減化可能である。窒素以外に、二酸化炭素、アルゴンなどの不活性ガスによる置換法も達成できるが、本発明に於いては、溶存酸素の低減化方法そのものは制限されない（特許文献７）。
【００６５】
本発明者らは高度不飽和脂肪酸エチルエステル中の溶存酸素が１ｍｇ／Ｌを超える場合に、後の粉末化工程や保存期間中に魚油に特有の生臭い不快な異臭などの発現の原因となることを確認したため、本発明に於いては、ω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル中の溶存酸素を１ｍｇ／Ｌ以下に制限している。下限は設定していないが、少ない方が高品質であることは言うまでもない。そのため、本発明の高度不飽和脂肪酸または高度不飽和脂肪酸エステルを含む組成物の溶存酸素量は、好ましくは、１ｍｇ／Ｌ以下、０．８ｍｇ／Ｌ以下、０．６ｍｇ／Ｌ以下、０．４ｍｇ／Ｌ以下、０．２ｍｇ／Ｌ以下、０．１ｍｇ／Ｌ以下である。
【００６６】
（過酸化物価の低減法）
過酸化脂質やその分解物の除去によって過酸化物価の低減が可能である。過酸化脂質やその分解物の除去法は多数公知となっている。例えば、分子蒸留法（特許文献１０および特開２０００−３４２２９１号公報）、吸着剤処理法（特許文献２、特許文献１１、特許文献１２、特許文献１３）などが知られており、本発明に於いては何れの方法も利用可能である。実験的にはフロリジル（１００／２００メッシュ）カラムを用いた過酸化脂質の除去法が知られている（非特許文献５）。
【００６７】
分子蒸留法は、例えば、遠心式分子蒸留法、又は、流下薄膜式分子蒸留法によって行うことが出来る。例えば、流下薄膜式分子蒸留の場合、特開２０００−３４２２９１号公報に記載されるように、真空度０．００５ｍｍＨｇ、蒸発面温度２００℃、流速３０ｇ／Ｌの条件で処理を行い、留分として遊離脂肪酸画分、残分としてグリセリド画分を取得できる。流下薄膜式分子蒸留の場合、分子蒸留操作における真空度、蒸発面温度、および／または、フィード量は、装置の型式、原料油の違いにより当業者が適宜変更することができる。
【００６８】
吸着剤処理によって過酸化脂質やその分解物を除去することも可能である。本発明において使用する吸着剤としては、例えば、酸性白土、活性白土、活性炭、ケイ酸、および、アルミナが挙げられるがこれらに限定されない。好ましくは、吸着剤は、活性白土またはシリカゲルである。活性白土は、好ましくは、脱ガスし、窒素置換した活性白土であって、活性白土の添加量は、生成物重量の１〜２０ｗｔ％である。
【００６９】
（酸価の低減法）
該エチルエステル混合物は高度不飽和脂肪酸含有量が多いため、エステル化反応後の各工程を経る過程または保存期間中にエチル基が外れて遊離体となり易い。生成した微量の遊離脂肪酸は酸化速度が大きいため官能評価上の品質の劣化を招くだけでなく、酸価の上昇を伴うため除くことが必要である。酸価低減法としては上記過酸化物の低減方法と同様に、分子蒸留などの物理的手段、吸着剤処理などが有効であるがこれらに限定されない。
【００７０】
（アニシジン価の低減法）
アニシジン価は主に油脂加工工程中に精製したアルデヒド性熱変性物に由来するとされ、官能評価上も重要な指標である。アニシジン価低減法としては上記過酸化物、酸価の低減方法と同様に、分子蒸留などの物理的手段、吸着剤処理などが有効であるがこれらに限定されない。
【００７１】
（過酸化物価、酸価、および、アニシジン価の低減法）
本発明において必要とされる過酸化物価、酸価、および、アニシジン価の低減法は、例えば、単一の方法において同時に実施することも可能である。例えば、脱ガム処理・脱酸処理（小野哲夫・太田静行、題名「食用油脂製造技術」、株式会社ビジネスセンター社（１９９１）、東京）の単一の方法によって同時に実施することも可能である。
【００７２】
（乳化）
本発明に於いては卵黄および/または卵白のような鶏卵品を乳化剤として使用することができる。卵黄は栄養学的にも優れた食品素材であるだけでなく、優れた乳化特性を有し、約５０ｗｔ％の水分を含む。本発明に於いては、代表的には、溶存酸素量が１ｍｇ／Ｌ以下であって、過酸化物価３以下かつ酸価１以下かつアニシジン価５以下であって、かつ、吸着剤処理によって過酸化物を除去したω３系高度不飽和脂肪酸のエチルエステルと、大豆リン脂質及びビタミンＥ及びアスコルビン酸パルミテートを含む混合物に対し、卵黄を重量換算比で０．１〜１０倍量、すなわち、乾燥品換算では０．０５〜５倍量混合することが出来るが、製品であるω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物中のω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステルの割合を最終的に２０ｗｔ％〜５０ｗｔ％に調整するためには、目的とするω３系高度不飽和脂肪酸のエチルエステルの純度、共存する他のω３系高度不飽和脂肪酸のエチルエステルの含量、抗酸化剤使用量、卵黄、卵白、賦形剤等の配合量などにより変化するため、都度調整する必要があることは当然である。
【００７３】
この混合物は乳化機、例えば高速ホモジナイザーを用いて乳化混合できる。高速ホモジナイザーの機種の限定は無いが、ポリトロン（株式会社セントラル科学貿易）やヒスコトロン（株式会社マイクロテック・ニチオン）などが利用できる。乳化時間、乳化温度、回転速度などは機種やスケールによっても異なり、また、混合物の組成によっても都度異なるため本発明では制限はないが、実験室スケールでは氷冷下、５０００〜３００００回転／分で５〜１０分間程度の乳化混合が適切である。
【００７４】
本発明に於いては、上記乳化混合物に卵白を加えて高速撹拌処理を行う。卵白はアルブミンを主成分としているため、脂溶性成分と複合体を形成するだけでなく、乾燥工程を経た後に流動性に優れた粉末とするために有用である。卵白は通常１０〜１３ｗｔ％の固形分と８７〜９０ｗｔ％の水分から構成されているが、本発明では卵白の固形分含量を１２ｗｔ％と仮定した時、ω３系高度不飽和脂肪酸のエチルエステル、大豆リン脂質、ビタミンＥ、アスコルビン酸パルミテートと卵黄から成る上記乳化混合物に対して重量換算比で１〜２０倍量、すなわち、乾燥品換算では０．１２〜２．４倍量混合することが出来るが、製品であるω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物中のω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステルの割合を最終的に２０ｗｔ％〜５０ｗｔ％に調整するためには、卵白配合量を都度調整する必要がある。この混合物は高速攪拌機、例えば高速ホモジナイザーを用いて撹拌混合できる。高速ホモジナイザーの機種の限定は無いが、ポリトロン（株式会社セントラル科学貿易）やヒスコトロン（株式会社マイクロテック・ニチオン）などが利用できる。撹拌時間、撹拌温度、回転速度などは機種やスケールによっても異なり、また、混合物の組成によっても都度異なるため本発明では制限はないが、実験室スケールでは氷冷下、５０００〜３００００回転／分で５〜１０分間程度の混合が適切である。
【００７５】
卵白を混合する上記高速撹拌工程においては、乾燥工程を経た後の最終的な粉末製品の粉末としての流動性、ブロッキング性などの性状改善、酸化安定性の更なる向上を目的として適時、賦形剤を同時に、又は、粉末化工程までに添加混合することが出来る。賦形剤としては例えば、デキストリン、アラビアガム、ゼラチン、寒天、澱粉、ペクチン、カラギーナン、カゼイン、カードラン、アルギン酸類、大豆多糖類、プルラン、セルロース類、キサンタイガム、等々が挙げられるが、本発明では賦形剤の添加の有無は必要な要件ではない。添加量はω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物中のω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステルの割合を最終的に２０ｗｔ％〜５０ｗｔ％に調整するためには、賦形剤を重量換算比で都度調整する必要がある。
【００７６】
新たな溶存酸素の混入防止や混合工程中における空気の混入を防止するため、卵黄、卵白を混合する上記高速撹拌工程は、当然のことながら窒素ガス、アルゴン、二酸化炭素などの不活性ガス環境下で操作されることが望ましい。
【００７７】
以上の工程で取得されたω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステルと抗酸化剤と卵黄と卵白と賦形剤の混合乳化物は、乾燥工程を経て水分含量６ｗｔ％以下の粉末体であるω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物とする。本発明に於いては製品中の水分量の下限は定義していないが、通常は２ｗｔ％以上と見込まれる。乾燥方法としては、噴霧乾燥法、凍結乾燥法を用いることが出来るが、本発明に於いては噴霧乾燥法が望ましい。本発明に於いては、噴霧乾燥法はマイクロカプセル化技術として位置づけている（竹中秀雄、題名「マイクロカプセル化法としての噴霧乾燥法の最近の進歩」、岐阜薬科大学紀要３２、１−１４（１９８３−０６−０３））。すなわち、芯物質は主にω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステルと抗酸化剤、壁物質は主に卵白のような乳化剤および賦形剤から構成される。卵黄成分中の脂溶性物質は主に芯物質側に、水溶性物質は壁物質側に分布するが、乳化剤としての特性からカプセル構造の維持にも関与している。
【００７８】
（粉末化）
本発明の組成物の粉末化には、噴霧乾燥法などの周知の種々の方法を用いることができる。噴霧乾燥法による粉末組成物の製造に際して、噴霧乾燥機の入り口温度、出口温度、送液量などは、原液の物性、混合物の内容、設備操作上の制約等により変動するため、本発明に於いては制限していない。
【００７９】
以上の工程で調製されたω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物はそのまま常温保管しておいても良いし、例えば脱酸素剤存在下にガスバリヤー性の高い包材中に保管しても良いし、冷蔵、冷凍保存しても良いが、例えば６カ月以上の長期間保存が必要な場合には脱酸素剤存在下にガスバリヤー性の高い包材中で冷凍保存する方が良いことは当然である。
【００８０】
ω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物は混合が物理的に許容される全ての食品へ添加可能であるが、一般には、「食料工業」（藤巻正生・三浦洋・大塚謙一・川端俊治・木村進  編、恒星社厚生閣（１９８５））に記載され定義されているパン類、麺類、菓子類、植物等油脂食品類、大豆たんぱく食品、味噌、乳製品、肉製品、卵製品、魚肉練り製品、インスタント食品への添加が可能である。本発明は前出の「マイクロカプセル化法としての噴霧乾燥法の最近の進歩」に定義されている食品の分類に基づく。
【００８１】
（食品への応用）
食品への利用に際して、ω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物に含まれる卵黄、卵白中のたんぱく質の熱変性を伴う場合、特異的な食感を得ることが出来ることも本発明の特徴である。また、食品への使用に際しては都度マスキングフレーバーの使用が可能であることは言うまでもない。
【００８２】
本発明の組成物は、食品中に１ｗｔ％以上、２ｗｔ％以上、３ｗｔ％以上、４ｗｔ％以上、５ｗｔ％以上、６ｗｔ％以上、７ｗｔ％以上、８ｗｔ％以上、９ｗｔ％以上、１０ｗｔ％以上、１５ｗｔ％以上、２０ｗｔ％以上、３０ｗｔ％以上含まれる。また本発明の組成物は、食品中に９０ｗｔ％以下、８０ｗｔ％以下、７０ｗｔ％以下、６５ｗｔ％以下、６０ｗｔ％以下、５５ｗｔ％以下、５５ｗｔ％以下、５０ｗｔ％以下、４０ｗｔ％以下、３０ｗｔ％以下含まれる。例えば、本発明の組成物は、食品中に１ｗｔ％〜７０ｗｔ％、２ｗｔ％〜６５ｗｔ％、３ｗｔ％〜６０ｗｔ％、４ｗｔ％〜５５ｗｔ％、５ｗｔ％〜５０ｗｔ％、７ｗｔ％〜４０ｗｔ％、または、１０ｗｔ％〜３０ｗｔ％含まれる。
【００８３】
本発明の食品は特に限定されることはないが、例えば、パン類、麺類、菓子類、植物等油脂食品類、大豆たんぱく食品、味噌、乳製品、肉製品、卵製品、魚肉練り製品、および/または、インスタント食品が挙げられるがこれらに限定されない。
【００８４】
（本発明の高度不飽和脂肪酸または高度不飽和脂肪酸エステル）
本発明の高度不飽和脂肪酸または高度不飽和脂肪酸エステルを含む組成物の過酸化物価は、３以下、２以下、１以下、０．５以下、０．２以下、０．１以下であるが、これらに限定されない。
【００８５】
本発明の高度不飽和脂肪酸または高度不飽和脂肪酸エステルを含む組成物の酸価は、１以下、０．８以下、０．６以下、０．４以下、０．２以下、０．１以下であるが、これらに限定されない。
【００８６】
本発明の高度不飽和脂肪酸または高度不飽和脂肪酸エステルを含む組成物のアニシジン価は、５以下、４以下、３以下、２以下、１以下、０．５以下、０．２以下、０．１以下であるが、これらに限定されない。
【００８７】
本発明の高度不飽和脂肪酸または高度不飽和脂肪酸エステルを含む組成物は、代表的には、溶存酸素量が１ｍｇ／Ｌ以下であって、過酸化物価３以下かつ酸価１以下かつアニシジン価５以下である。好ましくは、本発明の組成物は抗酸化剤および/または乳化剤を含む。好ましくは、本発明の組成物は粉末製品として提供される。
【実施例】
【００８８】
以下に、実施例に基づいて本発明を説明するが、以下の実施例は、例示の目的のみに提供される。従って、本発明の範囲は、上記発明の詳細な説明にも下記実施例にも限定されるものではなく、請求の範囲によってのみ限定される。
【００８９】
（実施例１：過酸化物の除去と溶存酸素除去）
ＤＨＡ純度２５．５ｗｔ％のカツオ原料油（鹿児島県枕崎産）９００ｇに９９％エタノール６００ｍＬ、濃硫酸６２．５ｇを加え、７０〜８０℃で５時間撹拌した。撹拌後、真空度０．１ＭＰａ、蒸発面温度１００℃下でエタノールを除去した。その後、油層を約１５０ｍＬの湯で洗浄し、洗浄湯のｐＨが２以上になるまで繰り返した。その後、加圧濾過により不純物を除去した。加圧濾過後、アルカリアルコール（事前に水酸化ナトリウム４．５ｇを６０％エタノール１８０ｍＬに溶解したもの）を加え、７０〜８０℃で１時間撹拌した。撹拌後、油層を約１５０ｍＬの湯で洗浄し、洗浄湯のｐＨが７以下になるまで繰り返した。その後、真空度０．１ＭＰａ、蒸発面温度１００℃下で溶媒を除去した。その結果、エチルエステル８６０ｇを得た。続けて、上記粗脂肪酸エチルエステル８００ｇを遠心式分子蒸留法により、真空度１．５Ｐａ、蒸発面温度１８０℃で処理し、脂肪酸エチルエステル７６０ｇを留分として取得し、脂肪酸の過酸化物の一部や未反応の脂肪酸等を含む不純物画分は分子蒸留残分側に蒸留残分として分離した。上記脂肪酸エチルエステル７６０ｇは真空精密蒸留法と高速液体クロマトグラフィーを用いる方法（特許文献４）と銀錯体法（特願２０１５−１１１７９３）を用いて、ＤＨＡ純度９０ｗｔ％のエチルエステル混合物１１０ｇを取得した。
【００９０】
上記エチルエステル混合物１００ｇは過酸化物価（ＰＯＶ）４．４、ＡＶ０．１、アニシジン価２．６であって、シリカゲル薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）で中性脂質用展開溶媒（ｎ−ヘキサン／ジエチルエーテル／酢酸＝８５／１５／１）を用いて定性的に確認したところ、原点付近に過酸化物の存在が認められた。また、シリカゲル６０ＰＦ２５４ＴＬＣプレート（Ｍｅｒｋ社、０．２５ｍｍ厚さ）を用いる薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）法（非特許文献５）で検定した時、過酸化物又はその分解物に相当するスポットが検出された。
【００９１】
エチルエステル混合物９５ｇはフロリジル（１００／２００ｍｅｓｈ）カラムにてｎ−ヘキサンで溶出させ、過酸化物をフロジリルに吸着除去し、溶出物からヘキサンを窒素ガス気流化で減圧除去した。続けて、シリカゲル（Ｍｅｒｋ社、シリカゲル６０）カラムにて同様に処理し、製品８０ｇを得た。
【００９２】
続けて、上記脂肪酸エチルエステル８０ｇを窒素バブリング法（特許文献９、特開２００５−１１０６７４）により脱酸素処理し、このものに脱気処理済ｎ−ヘキサン０．４Ｌ、脱気処理済活性白土４ｇ、脱気処理済シリカゲル２ｇを添加して室温遮光下にて窒素ガス環境下で３０分間撹拌し、脂肪酸エチルエステル画分を含むヘキサン層を濾別した後、ｎ−ヘキサンを真空エバポレーターにて除去し、再度窒素バブリング法に依り残余の微量溶存酸素並びにｎ−ヘキサンを除去した。
【００９３】
得られた製品７０ｇの溶存酸素濃度は溶存酸素量測定装置（蛍光式溶存酸素計ＦＤＭ−１０００、株式会社オートマチックシステムリサーチ製）で測定した時０．３ｍｇ／Ｌであって、過酸化物価（ＰＯＶ）０．１、ＡＶ０．１、アニシジン価１．０であって、シリカゲル薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）で中性脂質用展開溶媒（ｎ−ヘキサン／ジエチルエーテル／酢酸＝８５／１５／１）にて定性的に確認したところ、原点付近に過酸化物の存在が認められなかった。更に、シリカゲル６０ＰＦ２５４ＴＬＣプレート（Ｍｅｒｋ社、０．２５ｍｍ厚さ）を用いる薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）法で検定した時、過酸化物およびその分解物に相当するスポットは確認されなかった。また、シリカゲル６０ＰＦ２５４ＴＬＣプレート（Ｍｅｒｋ社、０．２５ｍｍ厚さ）を用いる薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）法（非特許文献５）で検定した時、過酸化物又はその分解物に相当するスポットは検出されなかった。
【００９４】
（実施例２：抗酸化剤混合と乳化と粉末化）
実施例1の方法で調製したＤＨＡ純度９０ｗｔ％の脂肪酸エチルエステル混合物１００ｇに対し、ミックストコフェロール（商品名：理研Ｅオイル、理研ビタミン株式会社）０．３ｇ、大豆レシチン（商品名：ＳＬＰ−ペースト、辻製油株式会社）３．０ｇ、アスコルビン酸パルミテート（商品名：Ｌ−アスコルビン酸パルミチン酸エステル、ディー・エス・エム  ジャパン株式会社）０．０５ｇを混合し、窒素ガスバブリング下３時間撹拌し溶解させ、抗酸化剤含有脂肪酸エチルエステル混合物を得た。この混合物の溶存酸素濃度は０．３ｍｇ／Ｌであって、過酸化物価（ＰＯＶ）０．１、ＡＶ０．１、アニシジン価１．２であって、シリカゲル薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）で中性脂質用展開溶媒（ｎ−ヘキサン／ジエチルエーテル／酢酸＝８５／１５／１）にて定性的に確認したところ、原点付近に過酸化物の存在が認められなかった。
【００９５】
上記抗酸化剤含有脂肪酸エチルエステル混合物１００ｇに対し、卵黄（太陽化学株式会社）２００ｇを混合し、容器のヘッドスペース部分は窒素置換しながら氷冷下ポリトロン（株式会社セントラル科学貿易）にて１００００ｒｐｍで５分間乳化処理した。続けて、卵白（太陽化学株式会社）４００ｇを加えて氷冷下ポリトロンにて１００００ｒｐｍで５分間均質化処理し、乾燥前のω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物を得た。このものの計算上の固形分量は３５．７％（２５０ｇ）と仮定している。
【００９６】
上記混合物２００ｇ（固形分７１．４ｇ含む）をスプレードライヤー（ＧＢ２１０型、ヤマト科学株式会社）を用いて噴霧乾燥しω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物を得た。噴霧乾燥条件は、入口温度１８０℃、出口温度１００℃、送液量３ｍｌ／ｍｉｎ、噴霧圧力１．２Ｋｇ／ｃｍ２とした。
【００９７】
得られたω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物は４３ｇ（固形分回収率６０．２％）であって、水分含量は赤外線水分計で測定した時、３．５％であった。
【００９８】
また、この組成物を５名のパネルにより揮発成分の臭いを官能検査した時、全員が魚油に特有の生臭い異臭は感知せず良好と評価した。さらに、この組成物を摂食した時にも全員が魚油に特有の生臭い異臭は感知せず良好と評価した。このことから、大変品質良好なω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物が取得できたことが証明された。
【００９９】
得られたω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物は使用するまでの期間、ガスバリヤー性の高いアルミ包材に脱酸素剤と共に入れて、−２０℃で保管した。
【０１００】
上記工程を繰り返して得られたω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物１００ｇからクロロホルム−メタノール法で全脂質７２ｇを抽出した。このものに含まれるＤＨＡエチルエステルは５９．５ｗｔ％であって、ＰＯＶ１．８、アニシジン価０．９であった。ＡＶ、溶存酸素、過酸化物などは大豆レシチンなどの抗酸化剤に由来する成分により影響されるため分析は行わなかった。
【０１０１】
以上の結果から、上記ω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物中のＤＨＡエチルエステル含量は４２．８ｗｔ％となった。
【０１０２】
（実施例３：賦形剤）
実施例２で得られた乾燥前のω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物２００ｇに対して、賦形剤としてデキストリン（商品名：パインフロー、松谷化学工業株式会社）３０ｇと水１００ｍｌを加えて、氷冷下ポリトロンにて３０００ｒｐｍで５分間均質化処理した。このものの計算上の固形分量は３０．７％（１０１ｇ）と仮定している。
【０１０３】
上記混合物２００ｇ（固形分６１．４ｇ含む）を実施例２と同一条件にて噴霧乾燥条した。得られたω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物は４９ｇ（固形分回収率７９．８％）であって、水分含量は赤外線水分計で測定した時、３．５％であった。このことから、賦形剤を用いることにより噴霧乾燥に際しての粉末の流動性が改善され、回収率が向上することが確認された。
【０１０４】
また、このものを５名のパネルにより揮発成分の臭いを官能検査した時、全員が魚油に特有の生臭い異臭は感知せず良好と評価した。さらに、このものを摂食した時にも全員が魚油に特有の生臭い異臭は感知せず良好と評価した。このことから、大変品質良好なω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物が取得できたことが証明された。得られた上記ω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物は使用するまでの期間、ガスバリヤー性の高いアルミ包材に脱酸素剤と共に入れて、−２０℃で保管した。
【０１０５】
上記工程を繰り返して得られたω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物１００ｇからクロロホルム−メタノール法で全脂質５０ｇを抽出した。このものに含まれるＤＨＡエチルエステルは６１．０ｗｔ％であって、ＰＯＶ１．５、アニシジン価０．６であった。ＡＶ、溶存酸素、過酸化物などは大豆レシチンなどの抗酸化剤に由来する成分により影響されるため分析は行わなかった。
【０１０６】
以上の結果から、上記ω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物中のＤＨＡエチルエステル含量は３０．５ｗｔ％となった。
【０１０７】
（実施例４：うどん）
麺類として、うどんへのω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物添加試験を行った。うどん麺は引用文献８（柴田茂久著、４−１  生めん類、乾燥めん類、食料工業、藤巻正生他編、ｐｐ５９−７４（１９８５）、恒星社厚生閣（東京））及び「新版  てがるにできる加工食品」（峰下雄・津久井亜紀夫  編、ｐｐ１２０−１２１、建帛社（１９９１）、東京）に準じて試作した。
【０１０８】
原料は小麦中力粉３８０ｇ、食塩２０ｇ、水１８０ｍＬ、打ち粉（適量）とした。すなわち、中力粉３８０ｇに１８０ｍＬの水に溶かした食塩２０ｇ、及び、実施例２で調製したω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物１００ｇ（ＤＨＡエチルエステル含量４２．８ｗｔ％）を加えて混和、圧延、切り出し、煮沸、水洗工程を経てうどんゆで麺を調整した。本実施例に於いては上記うどんの乾物重量は５００ｇ、ＤＨＡエチルエステル含量は乾物換算で８．６ｗｔ％となるように設計したものである。
【０１０９】
上記生うどんを市販のうどんの汁に合わせて５名のパネルによって官能検査した。その結果、揮発成分の臭いを官能検査した時、全員が魚油に特有の生臭い異臭は感知せず良好と評価した。さらに、このものを摂食した時にも全員が魚油に特有の生臭い異臭は感知せず良好と評価した。このことから、大変品質良好なω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物が取得できたことが証明された。
【０１１０】
（実施例５：インスタント味噌汁）
味噌及びインスタント食品へのω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物添加試験を行った。即席みそ汁（商品名「あさげ」、株式会社永谷園）１食分のペースト状味噌１６．３ｇ（固形分含量４０％と仮定）に熱湯１６０ｍＬ、実施例２で調製したω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物１ｇ（ＤＨＡエチルエステル含量４２．８ｗｔ％）を加えて混和した。同様に、実施例２で調製したω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物２ｇ、３ｇ、４ｇを加えて混合した試験区も作成し、共に官能検査に供した。
【０１１１】
本実施例に於いては上記のペースト状味噌の乾物重量はω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物１ｇ加えて混和した区では７．５２ｇ、２ｇ加えて混和した区では８．５２ｇ、３ｇ加えて混和した区では９．５２ｇ、４ｇ加えて混和した区では１０．５２ｇであり、ω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物の添加量は、それぞれ１３．３ｗｔ％、２３．５ｗｔ％、３１．５ｗｔ％、３８．０ｗｔ％である。従って、本即席味噌汁一杯に含まれるＤＨＡエチルエステルはそれぞれ、５．７ｗｔ％、１０．０ｗｔ％、１３．５ｗｔ％、１６．３ｗｔである。
【０１１２】
その結果として得られた味噌汁から立ち上る揮発成分の臭いを官能検査した時、ω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物１ｇ、２ｇ、３ｇを加えた試験区に関しては、全ての試験区について全員が魚油に特有の生臭い異臭は感知せず良好と評価した。さらに、このものを摂食した時にも全ての試験区について全員が魚油に特有の生臭い異臭は感知せず良好と評価した。このことから、大変品質良好なω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物が取得できたことが証明された。
【０１１３】
さらに、ω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物４ｇを加えた試験区に関しては、全員が魚臭を感知したが、魚油に特有の生臭い不快な異臭は感知せず良好と評価した。さらに、このものを摂食した時にも全員が魚臭を感知したが、魚油に特有の生臭い異臭は感知せず良好と評価した。このことから、味噌及び即席（インスタント）味噌汁に対して大変品質良好なω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物が取得できたことが証明された。
【０１１４】
また、味噌汁は本来カツオだし、イリコだしなどの魚介系風味と相性が良いことから、ω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物を加えた全ての試験区に関して、全員がブランク（ω３系高度不飽和脂肪酸エチルエステル含有組成物無添加の味噌汁）よりもコクがあっておいしいと評価したことは本発明の特記すべき効果である。
【産業上の利用可能性】
【０１１５】
本発明によって、製品化の過程および製品の保存期間中における高度不飽和脂肪酸または高度不飽和脂肪酸エステルの酸化の進行を妨げるおよび／または遅らせることが可能となる。本発明によって、製品化の過程および製品の保存期間中における酸化の進行を官能評価的に異臭発現が気にならないレベル以内に保持する技術が提供される。