(57)【要約】【課題】本発明の課題は、より効率的に血清尿酸値を低減できる、血清尿酸低下剤を提供することである。【解決手段】本発明は、米胚乳タンパク質、澱粉、カルシウムを少なくとも含む原料組成物を、加熱処理及び加圧処理に供する工程を経て得られる血清尿酸低下剤を提供する。また、本発明は、米胚乳タンパク質、澱粉、カルシウムを少なくとも含む原料組成物を、加熱処理及び加圧処理に供する工程を含む、血清尿酸低下剤の製造方法も提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
米胚乳タンパク質、澱粉、カルシウムを少なくとも含む原料組成物を、加熱処理及び加圧処理に供する工程を経て得られる血清尿酸低下剤。
【請求項２】
前記加熱処理は、前記原料組成物を５０℃以上２５０℃以下の温度条件にて加熱する工程である、請求項１に記載の血清尿酸低下剤。
【請求項３】
前記加圧処理は、前記原料組成物を０．１ＭＰａ以上の圧力条件にて加圧する工程である、請求項１又は２に記載の血清尿酸低下剤。
【請求項４】
前記原料組成物は、
前記米胚乳タンパク質を前記原料組成物の全体量に対して３０．０質量％以上６５．０質量％以下、
前記澱粉を前記原料組成物の全体量に対して３０．０質量％以上６５．５質量％以下、
前記カルシウムを前記原料組成物の全体量に対して１．００質量％以上５．００質量％以下含む、請求項１から３のいずれかに記載の血清尿酸低下剤。
【請求項５】
請求項１から４のいずれかに記載の血清尿酸低下剤を含む、医薬品。
【請求項６】
請求項１から４のいずれかに記載の血清尿酸低下剤を含む、食品。
【請求項７】
米胚乳タンパク質、澱粉、カルシウムを少なくとも含む原料組成物を、加熱処理及び加圧処理に供する工程を含む、血清尿酸低下剤の製造方法。
【請求項８】
前記加熱処理は、前記原料組成物を５０℃以上２５０℃以下の温度条件にて加熱する工程である、請求項７に記載の製造方法。
【請求項９】
前記加圧処理は、前記原料組成物を０．１ＭＰａ以上の圧力条件にて加圧する工程である、請求項７又は８に記載の製造方法。
【請求項１０】
前記原料組成物は、
前記米胚乳タンパク質を前記原料組成物の全体量に対して３０．０質量％以上６５．０質量％以下、
前記澱粉を前記原料組成物の全体量に対して３０．０質量％以上６５．５質量％以下、
前記カルシウムを前記原料組成物の全体量に対して１．００質量％以上５．００質量％以下含む、請求項７から９のいずれかに記載の製造方法。
【請求項１１】
前記加熱処理及び前記加圧処理の後に、乾燥処理をさらに含む、請求項７から１０のいずれかに記載の製造方法。
【請求項１２】
米胚乳タンパク質の血清尿酸低下作用を亢進する物質のスクリーニング方法であって、
候補物質を、米胚乳タンパク質及びカルシウムとともに併存させ、前記米胚乳タンパク質からのカルシウム遊離の抑制能に基づいて選抜する工程を含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、血清尿酸低下剤及びその製造方法、並びに米胚乳タンパク質の血清尿酸低下作用を亢進する候補物質のスクリーニング方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
尿酸は、ヒトにおいてプリン体の最終代謝産物であり、ＡＴＰの分解や食物中の核酸の代謝で産生され、最終的に尿中に排泄されている。通常、尿酸の産生と排出は均衡しているが、産生量の増加や排出量の減少等の理由で均衡が崩れ血清尿酸値が７ｍｇ／ｄｌを超えると高尿酸血症と定義され、この状態が続くと痛風の発作が起きるリスクが高いとされている。高尿酸血症はかつて日本では稀な病気であったが、食生活の欧米化やアルコール摂取量の増加といった要因によって患者数は年々増加し、現在の患者数は９００万人に達すると推定されている。高尿酸血症は痛風の原因となるだけではなく、痛風腎の原因となることや、心血管・脳血管障害のリスクを上げる可能性があることが指摘されている。高尿酸血症の治療は、痛風発作や合併症を伴わない患者においては食事療法・運動療法が中心となっている。しかし、カロリー制限や運動を継続して行うことは容易なことではない。
【０００３】
また、これまでに、血清尿酸値を低下させる薬剤として、尿酸産生抑制薬のアロプリノールや、尿酸排出促進剤のベンズブロマロン等が実用化されている。しかし、アロプリノールは腎障害を併発している例では副作用のおそれから投与に慎重を要し、尿酸排出促進薬には尿路結石等のリスクが指摘されている。したがって、血中尿酸値を降下させる作用を持ち、普段の食事に簡便にとりいれることができる食品素材があれば、痛風発作や高尿酸血症関連疾患に対する極めて有用な予防・治療法になり得る。
【０００４】
例えば、本発明者らは、米胚乳タンパク質の摂取が血清尿酸値を低下させることを報告した（特許文献１）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】国際公開第２０１５／０９８４７４（Ａ１）号パンフレット
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
しかし、より効率的に血清尿酸値を低減できる技術に対するニーズがある。
【０００７】
本発明は、上記事情に鑑みてなされたものであり、その目的は、より効率的に血清尿酸値を低減できる、血清尿酸低下剤を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、米胚乳タンパク質、澱粉、カルシウムを少なくとも含む原料組成物を、加熱処理及び加圧処理に供することで、米胚乳タンパク質による血清尿酸値低下作用をさらに亢進させることができる点を見出し、本発明を完成するに至った。具体的には、本発明は、下記を提供する。
【０００９】
（１）  米胚乳タンパク質、澱粉、カルシウムを少なくとも含む原料組成物を、加熱処理及び加圧処理に供する工程を経て得られる血清尿酸低下剤。
【００１０】
（２）  前記加熱処理は、前記原料組成物を５０℃以上２５０℃以下の温度条件にて加熱する工程である、（１）に記載の血清尿酸低下剤。
【００１１】
（３）  前記加圧処理は、前記原料組成物を０．１ＭＰａ以上の圧力条件にて加圧する工程である、（１）又は（２）に記載の血清尿酸低下剤。
【００１２】
（４）  前記原料組成物は、
前記米胚乳タンパク質を前記原料組成物の全体量に対して３０．０質量％以上６５．０質量％以下、
前記澱粉を前記原料組成物の全体量に対して３０．０質量％以上６５．５質量％以下、
前記カルシウムを前記原料組成物の全体量に対して１．００質量％以上５．００質量％以下含む、（１）から（３）のいずれかに記載の血清尿酸低下剤。
【００１３】
（５）  （１）から（４）のいずれかに記載の血清尿酸低下剤を含む、医薬品。
【００１４】
（６）  （１）から（４）のいずれかに記載の血清尿酸低下剤を含む、食品。
【００１５】
（７）  米胚乳タンパク質、澱粉、カルシウムを少なくとも含む原料組成物を、加熱処理及び加圧処理に供する工程を含む、血清尿酸低下剤の製造方法。
【００１６】
（８）  前記加熱処理は、前記原料組成物を５０℃以上２５０℃以下の温度条件にて加熱する工程である、（７）に記載の製造方法。
【００１７】
（９）  前記加圧処理は、前記原料組成物を０．１ＭＰａ以上の圧力条件にて加圧する工程である、（７）又は（８）に記載の製造方法。
【００１８】
（１０）  前記原料組成物は、
前記米胚乳タンパク質を前記原料組成物の全体量に対して３０．０質量％以上６５．０質量％以下、
前記澱粉を前記原料組成物の全体量に対して３０．０質量％以上６５．５質量％以下、
前記カルシウムを前記原料組成物の全体量に対して１．００質量％以上５．００質量％以下含む、（７）から（９）のいずれかに記載の製造方法。
【００１９】
（１１）  前記加熱処理及び前記加圧処理の後に、乾燥処理をさらに含む、（７）から（１０）のいずれかに記載の製造方法。
【００２０】
（１２）  米胚乳タンパク質の血清尿酸低下作用を亢進する物質のスクリーニング方法であって、
候補物質を、米胚乳タンパク質及びカルシウムとともに併存させ、前記米胚乳タンパク質からのカルシウム遊離の抑制能に基づいて選抜する工程を含む、方法。
【発明の効果】
【００２１】
本発明によれば、より効率的に血清尿酸値を低減できる、血清尿酸低下剤が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１】米胚乳タンパク質が有するプリン体（ＲＮＡ）の吸着能を示す図である。
【図２】米胚乳タンパク質が有する、血清アラントイン値及び血清尿酸値の低下作用等を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
以下、本発明の実施形態について説明するが、本発明は以下の実施形態に限定されるものではない。
【００２４】
［血清尿酸低下剤］
本発明の血清尿酸低下剤は、米胚乳タンパク質、澱粉、カルシウムを少なくとも含む原料組成物を、加熱処理及び加圧処理に供する工程を経て得られる。以下、血清尿酸低下剤の成分やその製造法について詳述する。なお、本発明において、「原料組成物」とは、米胚乳タンパク質、澱粉、カルシウムを少なくとも含み、加熱処理及び加圧処理に供されていない組成物を指す。
【００２５】
（米胚乳タンパク質）
本発明において、「米胚乳タンパク質」とは、米胚乳より抽出された米タンパク質を指す。本発明者らは、米胚乳タンパク質がプリン体（ＲＮＡ等）を吸着し、消化管内でプリン体を不溶化させる機能を有することを特定した。不溶化されたプリン体は、消化酵素による分解を受けにくくなり、その結果、プリン体の体内への吸収が抑制され、プリン体の最終代謝産物である尿酸も生じにくくなり、血清尿酸値の上昇が低減される。したがって、米胚乳タンパク質は、プリン体の吸着及び不溶化を介して、血清尿酸値の上昇を抑制できる。
【００２６】
本発明者らによるさらなる検討の結果、米胚乳タンパク質に加えて、澱粉及びカルシウムを配合した原料組成物を加熱処理及び加圧処理すると、米胚乳タンパク質単独の場合と比較して、より高いプリン体吸着能を有する組成物（すなわち、本発明の血清尿酸低下剤）を得られることを見出した。後述する実施例に示すとおり、原料組成物に対して加熱処理及び加圧処理を行わないと、プリン体吸着能の改善効果は認められなかった。
【００２７】
本発明の血清尿酸低下剤が、米胚乳タンパク質単独の場合と比較して、より高いプリン体吸着能を示す理由は下記のように推定される。
【００２８】
まず、米胚乳タンパク質は、水に対して不溶性を示し、カゼインナトリウム等と比較して消化管内での消化が緩やかであることが知られている。また、米胚乳タンパク質の主要成分であるグルテリンは、酸性サブユニットと塩基性サブユニットとから構成されており、後者の等電点は９．４〜１０．３であると報告されている。このような塩基性サブユニットは、弱酸性から中性である消化管内のｐＨ環境下ではプラスに帯電し、マイナスに帯電したプリン体（ＲＮＡ等）と電気的に結合して不溶性の凝集体を形成する。不溶性の凝集体は消化酵素による分解を受けにくいので、凝集したプリン体は消化管から吸収されずに排出され、その結果、体内に吸収されるプリン体量が減少するものと考えられる。実際、後述の実施例（試験２）に示すとおり、米胚乳タンパク質を摂取した動物においては、血清尿酸値及び血清アラントイン（尿酸の代謝物）値の低下と糞中ＲＮＡ量の増加が認められたことから、この作用機序が裏付けられている。
【００２９】
他方、米胚乳タンパク質は水に対して不溶性を示すのに対し、カルシウムは、水に対する溶解性が高く、水溶液中ではプラスに帯電したカルシウムイオンとして存在することが知られている。遊離のカルシウムイオンは、プリン体（ＲＮＡ等）と電気的に結合することができるが、プリン体を不溶化する作用はないため、消化酵素によるプリン体の分解を阻害することはできない。しかし、本発明の血清尿酸低下剤においては、米胚乳タンパク質、澱粉、及びカルシウムが、加熱処理及び加圧処理によって相互に複雑に作用し、米胚乳タンパク質、及び、加熱によって膨化した澱粉の存在下で、カルシウムがプラスへの帯電を維持しながらも、水へのカルシウムの溶解性が抑制され、血清尿酸低下剤全体として水への不溶性を示す。その結果、本発明の血清尿酸低下剤は、（１）米胚乳タンパク質単独と比較して、プリン体（ＲＮＡ等）を吸着する能力が増加している、（２）血清尿酸低下剤とプリン体等との凝集体は不溶性であることから、消化酵素による消化作用を受けにくい、等の特性を備え、プリン体の吸着能が高まっているものと考えられる。
【００３０】
米胚乳タンパク質の由来である米の品種等は、米胚乳タンパク質を抽出できれば特に限定されない。米胚乳タンパク質を抽出しようとする米は、精白米や玄米を利用できる。
【００３１】
米胚乳タンパク質を抽出する方法は、米胚乳からアルカリで抽出する方法、精白米を粉砕した後に澱粉分解酵素処理して残存するタンパク質を回収する方法等を利用できる。
【００３２】
米胚乳からアルカリで米胚乳タンパク質を抽出する場合、抽出に用いるアルカリの濃度は特に限定されないが、アルカリ溶液中、０．１％以上２．０％以下であってもよい。抽出されるタンパク質溶液にはアルカリ可溶性の繊維質が多量に含まれていることから、これを目開きの細かい篩や濾布等を用いて除去することが好ましい。タンパク質溶液に塩酸等の酸を加えてｐＨ５．０〜６．０に調整することにより、凝集するタンパク質を沈殿物として回収することができる。回収したタンパク質凝集体を適宜水洗し、これを気流乾燥、流動層乾燥、凍結乾燥等を用いて乾燥することで、米胚乳タンパク質を得ることができる。中和時に加熱を行うことにより、膨潤したタンパク質凝集物が得られ、この凝集物を乾燥することにより、加熱しない場合に比べて保水性や舌触りに優れた米胚乳タンパク質が得られ、より広い用途に利用することができる。
【００３３】
抽出された米胚乳タンパク質の純度は特に限定されないが、固形分中の純度として、好ましくは３０％以上、より好ましくは５０％以上、さらに好ましくは８０％以上の純度であってもよい。
【００３４】
血清尿酸低下剤中の米胚乳タンパク質の配合量は、特に限定されないが、その下限値は、原料組成物の全体量に対して、好ましくは３０．０質量％以上、より好ましくは４０．０質量％以上である。米胚乳タンパク質の配合量がかかる範囲であると、十分なプリン体吸着能を有する血清尿酸低下剤が得られやすい。血清尿酸低下剤に澱粉及びカルシウムを配合することにより、これらの成分によって米胚乳タンパク質によるプリン体不溶化効果が高まるので、米胚乳タンパク質の配合量が上記下限値付近であっても、プリン体吸着能を高めやすい。
【００３５】
血清尿酸低下剤中の米胚乳タンパク質の配合量の上限値は、原料組成物の全体量に対して、好ましくは６５．０質量％以下、より好ましくは６０．０質量％以下である。米胚乳タンパク質の配合量がかかる範囲であると、血清尿酸低下剤中に十分量の澱粉及びカルシウムを配合でき、米胚乳タンパク質が有するプリン体吸着能を高めやすい。血清尿酸低下剤に澱粉及びカルシウムを配合することにより、これらの成分によって米胚乳タンパク質によるプリン体不溶化効果が高まるので、米胚乳タンパク質の配合量が過度でなくとも、プリン体吸着能を高めやすい。
【００３６】
血清尿酸低下剤中の米胚乳タンパク質の配合量は、ケルダール法を用いて含まれる窒素量を測定し、窒素換算係数（米胚乳タンパク質の場合５．９５）を乗じて算出する方法で特定される。
【００３７】
（澱粉）
血清尿酸低下剤に配合される澱粉としては、食品や医薬品に通常配合されるものを使用できる。本発明の効果を奏しやすいという観点から、膨化する澱粉を使用することが好ましく、例えば、米澱粉、小麦澱粉、馬鈴薯澱粉、甘藷澱粉、コーンスターチ、タピオカ澱粉、サゴ澱粉等が挙げられる。
【００３８】
血清尿酸低下剤中の澱粉の配合量は、特に限定されないが、その下限値は、原料組成物の全体量に対して、好ましくは３０．０質量％以上、より好ましくは３５．０質量％以上である。澱粉の配合量がかかる範囲であると、米胚乳タンパク質やカルシウムとの相互作用が十分に生じ、本発明の効果を奏しやすい。血清尿酸低下剤中の澱粉の配合量の上限値は、原料組成物の全体量に対して、好ましくは６５．０質量％以下、より好ましくは５０．０質量％以下である。澱粉の配合量がかかる範囲であると、血清尿酸低下剤中に十分量の米胚乳タンパク質及びカルシウムを配合でき、米胚乳タンパク質が有するプリン体吸着能を高めやすい。
【００３９】
血清尿酸低下剤中の澱粉の配合量は、酵素法（例えば、α−アミラーゼを加えて澱粉を完全に加水分解及び可溶化し、アミログルコシダーゼでグルコースに完全に分解し、このグルコース量をグルコースオキシダーゼにより生成した過酸化水素を呈色させ吸光度測定によって求める方法）で特定される。例えば、総澱粉量測定キット（日本バイオコン株式会社製）等を用いることもできる。
【００４０】
（カルシウム）
血清尿酸低下剤に配合されるカルシウムとしては、食品や医薬品に通常配合される形態のものを使用できる。例えば、焼成カルシウム製剤（卵殻焼成カルシウム製剤、貝殻焼成カルシウム製剤、骨焼成カルシウム製剤等）、塩化カルシウム、硫酸カルシウム、炭酸カルシウム、水酸化カルシウム等が挙げられる。焼成カルシウム製剤は主成分として酸化カルシウムを含有しており、酸化カルシウム純度として９５％以上の製剤を使用することが好ましい。
【００４１】
血清尿酸低下剤中のカルシウムの配合量は、特に限定されないが、その下限値は、原料組成物の全体量に対して、好ましくは１．００質量％以上、より好ましくは２．００質量％以上である。澱粉がカルシウムとあわせて配合されていると、このような比較的多量のカルシウムを含有しても、不溶化されたカルシウムが十分に生じ、本発明の効果を奏しやすい。血清尿酸低下剤中のカルシウムの配合量の上限値は、原料組成物の全体量に対して、好ましくは５．００質量％以下、より好ましくは４．００質量％以下である。カルシウムの配合量がかかる範囲であると、血清尿酸低下剤中に十分量の米胚乳タンパク質及び澱粉を配合でき、米胚乳タンパク質が有するプリン体吸着能を高めやすい。上記の範囲であれば、カルシウムの配合量を多くするほど、本発明の効果を奏しやすい。なお、上記のカルシウムの配合量は、純カルシウム量換算した値である。血清尿酸低下剤中に焼成カルシウム製剤等の形態でカルシウムを配合する場合、純カルシウム量換算した値が上記の範囲となるように配合することが好ましい。
【００４２】
血清尿酸低下剤中のカルシウムの配合量は、原子吸光光度法で特定される。
【００４３】
（その他の成分）
原料組成物には、本発明の効果を阻害しない範囲で、上記以外の成分が含まれていてもよい。このような成分としては、多糖類（セルロース、キサンタンガム、キトサン等）が挙げられる。カルシウム製剤と併用して、他のミネラル製剤（マグネシウム等の二価金属を含む製剤）等の食品や医薬品に通常配合される成分を用いてもよい。上記成分の配合量は、得ようとする効果に応じて適宜調整される。上記の他のミネラル製剤は、カルシウム製剤の代わりに使用することができる可能性がある。
【００４４】
（原料組成物の製造方法）
上記の成分を混合及び撹拌等することによって、原料組成物を得ることができる。原料組成物の態様は、特に限定されないが、混合したそのままでもよいし、後述の加熱処理及び加圧処理に供しやすくするために加水して水懸濁物又はドウとして調製してもよいし、ペレットや粉末に調製してもよい。
【００４５】
（加熱処理及び加圧処理）
原料組成物を加熱処理及び加圧処理に供することで、本発明の血清尿酸低下剤が得られる。加熱処理及び加圧処理の順序は特に限定されないが、加熱処理及び加圧処理を同時に行ってもよいし、加熱処理及び加圧処理のいずれかを先に行ってもよい。加熱処理及び加圧処理を同時に行わない場合、各処理の間に別処理（乾燥処理等）を行ってもよい。加熱処理及び加圧処理を複数回行ってもよい。本発明の効果を容易に奏しやすいという観点から、加熱処理及び加圧処理を同時に行うことが好ましい。
【００４６】
加熱処理及び加圧処理は、通常、食品や医薬品の製造において用いる方法を採用でき、二軸エクストルーダーを用いた方法、蒸練機を用いた方法、レトルト装置を用いた方法等が挙げられる。
【００４７】
加熱処理の条件は、澱粉を膨化や糊化できれば特に限定されず、その効率の観点から、好ましくは５０℃以上、より好ましくは９０℃以上、さらに好ましくは１００℃以上、最も好ましくは１１０℃以上である。また、後述する加圧処理の圧力条件に応じて温度条件は低くすることができる。高温による成分の変性を防ぎ、米胚乳タンパク質と澱粉及びカルシウムとの併存に基づく、プリン体の水への不溶化効果を促進する観点からは、加熱処理の温度条件の上限値は、好ましくは２５０℃以下、より好ましくは２００℃以下、さらに好ましくは１５０℃以下である。加熱処理によって血清尿酸低下剤中の水分含量を調整することもでき、血清尿酸低下剤全体に対して、水分含量を好ましくは１５質量％以下、より好ましくは１０質量％以下、さらに好ましくは５．０質量％以下に調整すると、血清尿酸低下剤のハンドリング性が高まる点で好ましい。上記の範囲であれば、加熱処理の温度を高くするほど、本発明の効果を奏しやすい。
【００４８】
加熱処理の時間は、特に限定されないが、十分な加熱を行う観点から、好ましくは１分以上、より好ましくは１０分以上としてもよい。加熱処理の時間は、成分の過度な変性を抑制する観点から、好ましくは６０分以下、より好ましくは３０分以下としてもよい。加熱処理は、断続的に行ってもよく、連続的に行ってもよい。加熱処理を複数回行う場合、加熱処理の合計時間が上記範囲となるように行ってもよい。
【００４９】
加圧処理の条件は、大気圧よりも高い圧力であるが、圧力によって、米胚乳タンパク質、澱粉、及びカルシウムの相互作用を促進し、水へのカルシウムの溶解性を抑制する作用を高めやすくするという観点から、加圧処理の温度における飽和蒸気圧を超えることが好ましく、具体的には０．１ＭＰａ以上、好ましくは１．０ＭＰａ以上であってもよい。加圧処理の圧力条件は過度でなくてもよく、好ましくは８．０ＭＰａ以下、より好ましくは５．０ＭＰａ以下の圧力条件にて行ってもよい。上記の範囲であれば、加圧処理の圧力を高くするほど、本発明の効果を奏しやすい。
【００５０】
加圧処理の時間は、特に限定されないが、十分な加圧を行う観点から、好ましくは１分以上、より好ましくは１０分以上としてもよい。加圧処理の時間は、成分の過度な変性を抑制する観点から、好ましくは３０分以下、より好ましくは１５分以下としてもよい。加圧処理は、断続的に行ってもよく、連続的に行ってもよい。加圧処理を複数回行う場合、加圧処理の合計時間が上記範囲となるように行ってもよい。
【００５１】
加熱処理及び加圧処理の後、乾燥処理を行ってもよい。乾燥処理により、水分含量の調整された、良好なハンドリング性を有する血清尿酸低下剤が得られる。乾燥処理の時間は十分な乾燥を行う観点から、好ましくは５分以上、より好ましくは３０分以上であってもよい。乾燥時間は、変性等を抑制する観点から、好ましくは１５０℃以下、より好ましくは１００℃以下であってよい。
【００５２】
原料組成物に対する加熱処理及び加圧処理を行った後、本発明の血清尿酸低下剤が得られる。本発明の血清尿酸低下剤の態様としては、加熱処理及び加圧処理を行った後そのままの状態で流通させてもよいし、加工（製剤化、味付け等）を行って医薬品や食品として調製することもできる。
【００５３】
本発明の血清尿酸低下剤を医薬品として調製する場合、本発明の血清尿酸低下剤に公知の可塑剤等を配合して、任意の製剤に調製できる。本発明の効果を奏しやすいという観点から、本発明の血清尿酸低下剤を含む医薬品を、経口投与製剤として調製することが好ましい。
【００５４】
本発明の血清尿酸低下剤を食品として調製する場合、本発明の血清尿酸低下剤に塩味や、だし味等の味付けを施したり、食品に本発明の血清尿酸低下剤を配合したりすることで、任意の食品に利用できる。食品としては、特に限定されないが、菓子（スナック、せんべい等）、乾物、練り製品、ドリンク、サプリメント錠剤等が挙げられる。
【００５５】
（米胚乳タンパク質の血清尿酸低下作用を亢進する候補物質のスクリーニング方法）
上記のとおり、本発明の血清尿酸低下剤においては、米胚乳タンパク質、澱粉、及びカルシウムが、相互に複雑に作用し、その結果、プリン体の吸着及び不溶化を介して、血清尿酸値の上昇を抑制できる。このような作用を奏するためには、米胚乳タンパク質及びカルシウムの存在が特に重要であり、澱粉については代替物質が存在する可能性がある。
【００５６】
澱粉の代替物質は下記のようにスクリーニングできる。すなわち、澱粉の代替となる候補物質、つまり、米胚乳タンパク質の血清尿酸低下作用を亢進する候補物質を、米胚乳タンパク質及びカルシウムとともに併存させ、米胚乳タンパク質からのカルシウム遊離の抑制能に基づいて選抜する工程によって特定することができる。例えば、候補物質に対して、米胚乳タンパク質及びカルシウムの存在下で所定の処理を施し、候補物質の代わりに澱粉を使用した結果と比較して、不溶性ＲＮＡ量が同等であるか又は増加すれば、該候補物質は澱粉の代替物質となり得る。なお、不溶性ＲＮＡ量は実施例に示した方法によって特定する。
【００５７】
上記の所定の処理としては、（１）上述した加熱処理及び／又は加圧処理、（２）酵素（ペプシン、パンクレアチン等）処理、（３）動物への投与試験（糞に基づく分析を行う）、（４）プリン体の存在下における上記（１）から（３）のいずれかの処理等が挙げられる。これらのうち、プリン体の吸着及び不溶化の効果が効率的に確認できる観点から、（１）又は（４）が最も好ましい。
【実施例】
【００５８】
以下、実施例を示し、本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【００５９】
［米胚乳タンパク質の調製］
国産精白米由来の米粉（製品名「パウダーライスＤＫ」、新潟製粉株式会社製）５０ｋｇを、２００Ｌの０．２％水酸化ナトリウム溶液に懸濁して２０℃で一夜放置した。得られた懸濁液を、遠心分離機（製品名「Ｈ−１３０Ｉ」、株式会社コクサン製）に、流速約５Ｌ／分で給液し、回転数１，４００ｒｐｍで遠心分離した。流出する遠心上清を集め、これを再度同一条件にて遠心分離を行うことにより澱粉粒が除去されたタンパク質抽出液を得た。この抽出液に６Ｎ塩酸を添加してｐＨを５．５に調整した。タンパク質の凝集体を上記の条件で遠心分離により回収し、１００Ｌの水に懸濁した後に、同様の遠心分離操作をもう１度実施して湿タンパク質を得た。これを３０Ｌの水に懸濁し、８０℃で３０分加熱殺菌後にホモジナイズを行い、噴霧乾燥することにより米タンパク質粉末（タンパク質純度９０％）を得た。該米タンパク質粉末が米胚乳タンパク質に相当する。
【００６０】
［試験１：プリン体（ＲＮＡ）の吸着試験］
米胚乳タンパク質が有するプリン体の吸着能を、ペプシン及びパンクレアチンを用いた人工消化試験によって評価した。この試験系では、ペプシン及びパンクレアチンによってプリン体であるＲＮＡを米胚乳タンパク質の存在下で消化した後で、不溶性のプリン体量を測定することで米胚乳タンパク質のプリン体（ＲＮＡ）の吸着能を評価する。不溶性のプリン体量（本例では、不溶性ＲＮＡ量）が多いほど、プリン体への米胚乳タンパク質の吸着量が多いことを示し、プリン体の吸着能が高いことを意味する。
【００６１】
具体的には、上記で得られた米胚乳タンパク質、対照物質（カゼインナトリウム、又は精製大豆タンパク質）それぞれ１００ｍｇに、ＲＮＡ溶液（酵母ＲＮＡ  １００ｍｇを０．３Ｎ  ＫＯＨを１ｍＬに溶解後、２ｍＭ  ＭｇＣｌ２を含む０．１Ｍ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ６．８）を１ｍＬ添加した溶液）２ｍＬ、蒸留水を８ｍＬ添加して混合し、３ＮのＨＣｌを加えてｐＨ２．０に調整した。この溶液にペプシン（牛胃粘膜由来ペプシン、シグマ  アルドリッチ社製）を２ｍｇ添加し３７℃、３０分処理し、その後２０％ＮａＯＨを用いてｐＨ５．５に調整した。得られた反応液にパンクレアチン（牛膵臓由来パンクレアチン、シグマ  アルドリッチ社製）を２０ｍｇ添加し３７℃で６０分間、反応を行った。パンクレアチンの処理前、反応３０分後、反応６０分後の各時点において１００μＬずつ反応液を回収し、蒸留水を５００μＬ添加及び撹拌して小型遠心分離機（製品名「ＣＴ１５ＲＥ」、株式会社日立製作所製）を用いて２１，５００×ｇ、３分間遠心分離を行い、遠心上清を除去した後、０．５Ｎ  ＫＯＨを２４０μＬ添加し３７℃、６０分処理してヌクレオチドを抽出した。これに１．５２Ｎの過塩素酸溶液を３６０μＬ添加して混合し、小型遠心分離機を用いて上記同様の条件にて遠心分離を行い、遠心上清を適宜希釈して、分光光度計（製品名「ＵＶ−３１００ＰＣ」、株式会社島津製作所製）で、吸光度２６０ｎｍで測定を行い、ヌクレオチド量を測定し、不溶性ＲＮＡ率を求めた。その結果を図１に示す。なお、不溶性ＲＮＡ率は下式に基づき算出した。
不溶性ＲＮＡ率（％）＝ヌクレオチド量（ｍｇ）／酵素処理前のＲＮＡ量（１００ｍｇ）×１００
【００６２】
図１から理解されるとおり、不溶性ＲＮＡ量は共存するタンパク質の種類によって大きく変化し、米胚乳タンパク質の存在下では相対的に多量のＲＮＡが不溶性を示したのに対して、カゼインナトリウムや精製大豆タンパク質の存在下では不溶性ＲＮＡの比率は低かった。したがって、米胚乳タンパク質はプリン体の吸着能が高いことが理解できる。
【００６３】
［試験２：プリン体の吸着能に関する動物試験］
試験１で認められた米胚乳タンパク質のプリン体の吸着能を、ｉｎ  ｖｉｖｏで確認するために、血清及び糞の分析に基づく下記試験を行った。この試験系では、血清中の尿酸及びその代謝物であるアラントインの量と、糞中のＲＮＡ（プリン体）量とを検討することで、米胚乳タンパク質のプリン体の吸着能を間接的に評価できる。例えば、血清中の尿酸及びその代謝物であるアラントインの量が低く、糞中のＲＮＡ量が高ければ、米胚乳タンパク質に吸着されたプリン体が、体内に吸収されずに体外に排出されたものと理解できる。
【００６４】
具体的には、まず、標準精製飼料（製品名「ＡＩＮ−９３Ｇ」、オリエンタル酵母工業株式会社製）、又は該標準精製飼料中のカゼインを米胚乳タンパク質に置き換えた飼料に、酵母由来ＲＮＡ（ＭＰ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌｓ社製）を３質量％添加混合した飼料を準備した。５週齢のウィスター系雄ラットを１週間馴化し、上記の飼料で５日間飼育した（７匹／群）。飼育４日目から５日目の糞を回収した。また、飼育５日目に頸静脈より血液を採取し、遠心分離により血清を回収した。得られた各サンプルについて下記分析を行った。
【００６５】
（血清尿酸値）
ウリカーゼ・ＨＭＭＰＳ法にて、生化学自動分析装置（製品名「ＡＵ４００」、ベックマン・コールター・バイオメディカル株式会社製）を用いて血清尿酸値を測定した。その結果を図２（Ａ）に示す。
【００６６】
（血清アラントイン値）
ＢＯＲＣＨＥＲＳの方法（ＡＮＡＬＹＴＩＣＡＬ  ＢＩＯＣＨＥＭＩＳＴＲＹ  ７９，６１２−６１３  （１９７７））に従い、血清アラントイン値を測定した。その結果を図２（Ｂ）に示す。
【００６７】
（糞中ＲＮＡ排出量）
ＳＴＳ法（ＦＬＥＣＫ    ＆  ＭＵＮＲＯ、ＢＩＯＣＨＩＭＩＣＡ  ＥＴ  ＢＩＯＰＨＹＳＩＣＡ  ＡＣＴＡ  ５５，  ５７１−５８３  （１９６２））の方法に従い、糞中ＲＮＡ量の濃度を測定した。次いで、下式に基づき、糞中ＲＮＡ排出量を算出した。その結果を図２（Ｃ）に示す。
糞中ＲＮＡ排出量（ｍｇ）＝１日の糞の総重量（ｍｇ）×糞中ＲＮＡ量の濃度（ｍｇ／ｍｇ）
【００６８】
米胚乳タンパク質を含む飼料で飼育したラットにおいては、カゼインを含む飼料で飼育したラットと比較して、血清尿酸値及び血清アラントイン値が低かったが（図２（Ａ）及び（Ｂ））、糞中ＲＮＡ量が高かった（図２（Ｃ））。これらの結果から、米胚乳タンパク質は、ＲＮＡ（プリン体）の吸収を抑制して糞中に排出させる作用があること、及び、その作用はカゼインと比較して高いことが理解できる。
【００６９】
［試験３：血清尿酸低下剤の評価−１］
上記で得られた米胚乳タンパク質１００ｇと、米澱粉（製品名「ファインスノウ」、上越スターチ株式会社製）１００ｇと、焼成カルシウム製剤（製品名「シェルパウダー［ホタテ２２］」、カワイマテリアル株式会社製）と、を使用し、組成物を調製した。焼成カルシウム製剤は、純カルシウム量換算で、原料組成物の全体量に対して表１の「Ｃａ量」の項に示す数値となるように配合した。以下、表中の米胚乳タンパク質、米澱粉、カルシウムの配合量は、乾燥重量で示した。
【００７０】
得られた各原料組成物に、２．５Ｌ加水し、表１の「処理条件」の項に示す処理を行い、各標品（血清尿酸低下剤に相当する。）を得た。
標品Ａについては、密閉容器中で、原料組成物を１００℃で５分間加熱した後に、真空乾燥機を用いて乾燥させることで得た。
標品Ｂについては、密閉容器中で、原料組成物を１００℃で１０分間加熱した後に、真空乾燥機を用いて乾燥させることで得た。
標品Ｃについては、密閉容器中で、原料組成物を、０．２ＭＰａで加圧しながら１２０℃で１０分間加熱した後に、真空乾燥機を用いて乾燥させることで得た。
標品Ｄについては、開放容器中で、原料組成物を、１５０℃のオーブンで６０分間加熱（焼成）した後に、真空乾燥機を用いて乾燥させることで得た。
標品Ｅ及びＦについては、原料組成物を、加熱及び加圧を行わずに、真空乾燥機を用いて乾燥させることで得た。
標品Ｇについては、米澱粉を配合せず、米胚乳タンパク質及び焼成カルシウム製剤を含む原料組成物を、密閉容器中で、０．２ＭＰａで加圧しながら１２０℃で１０分間加熱した後に、真空乾燥機を用いて乾燥させることで得た。
標品Ｈについては、米澱粉及びカルシウムを配合せず、米胚乳タンパク質のみを含む原料組成物を、密閉容器中で、０．２ＭＰａで加圧しながら１２０℃で１０分間加熱した後に、真空乾燥機を用いて乾燥させることで得た。
標品Ｃが本発明の血清尿酸低下剤に相当する。
【００７１】
得られた各標品を、ミルを用いて粉末化し、上記［試験１：プリン体（ＲＮＡ）の吸着試験］と同様の方法により、ペプシン反応３０分後、及びパンクレアチン反応６０分後のそれぞれの不溶性ＲＮＡ量を定量した。その結果を表１に示す。
【００７２】
【表１】
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【００７３】
表１から理解されるとおり、いずれの標品においても、不溶性ＲＮＡの形成が認められたものの、米胚乳タンパク、米澱粉及び焼成カルシウム製剤を含み、かつ、加熱処理及び加圧処理を経て得られた標品Ｃは、不溶性ＲＮＡを顕著な割合で形成し、高いＲＮＡ（プリン体）吸着能を有していた。
【００７４】
標品Ｃと、標品Ｅとの比較から、加圧処理及び加熱処理を行わないと、ＲＮＡ（プリン体）吸着能は十分に高まらないことがわかった。なお、標品Ｅと標品Ｆとの比較から、加圧処理及び加熱処理を行わない場合は、焼成カルシウム製剤の配合の有無は大きな影響を及ぼさないことが理解できる。
【００７５】
標品Ｃと、標品Ａ、Ｂ及びＤとの比較から、加圧処理を行わず、加熱処理のみを行っても、ＲＮＡ（プリン体）吸着能は十分に高まらないことが示唆された。
【００７６】
標品Ｃと、標品Ｇとの比較から、加圧処理及び加熱処理を行っても、米澱粉を配合していないと、ＲＮＡ（プリン体）吸着能は十分に高まらないことが示唆された。
【００７７】
［試験４：血清尿酸低下剤の評価−２］
上記で得られた米胚乳タンパク質１ｋｇと、米澱粉（製品名「ファインスノウ」、上越スターチ株式会社製）１ｋｇと、焼成カルシウム製剤（製品名「シェルパウダー［ホタテ２２］」、カワイマテリアル株式会社製）と、を使用し、原料組成物を調製した。焼成カルシウム製剤は、純カルシウム量換算で、原料組成物の全体量に対して表２の「Ｃａ量」の項に示す数値となるように配合した。
【００７８】
得られた各原料組成物を、二軸エクストルーダー（製品名「ＫＥＩ−４５−２５」、株式会社幸和工業製）を用いて、各標品（血清尿酸低下剤に相当する。）を得た。二軸エクストルーダーの吐出部の温度及び圧力の条件は、表２の「吐出部の温度・圧力」の項に示すとおりである。
標品Ｉ、Ｊ、Ｋ、及びＭが本発明の血清尿酸低下剤に相当する。
【００７９】
得られた各標品を、ミルを用いて粉末化し、上記［試験１：プリン体（ＲＮＡ）の吸着試験］と同様の方法により、ペプシン反応３０分後、及びパンクレアチン反応６０分後のそれぞれの不溶性ＲＮＡ量を定量した。その結果を表２に示す。
【００８０】
【表２】
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【００８１】
表２から理解されるとおり、米胚乳タンパク、米澱粉及び焼成カルシウム製剤を含み、かつ、加熱処理及び加圧処理を経て得られた標品Ｉ、Ｊ、Ｋ、及びＭは、不溶性ＲＮＡを顕著な割合で形成し、高いＲＮＡ（プリン体）吸着能を有することがわかった。
【００８２】
標品Ｉ、Ｊ及びＫの比較から、焼成カルシウム製剤の濃度が高いほど、血清尿酸低下剤のＲＮＡ（プリン体）吸着能が高まる傾向にあった。
【００８３】
標品Ｉ及びＭの比較から、加熱処理の温度条件を高くし、加圧処理の圧力条件を高くするほど、血清尿酸低下剤のＲＮＡ（プリン体）吸着能が高まる傾向にあった。
【００８４】
なお、データは示していないが、米澱粉及びカルシウムを配合せず、米胚乳タンパク質のみを含む原料組成物を用いて、二軸エクストルーダーによる処理を行っても、得られた標品にはＲＮＡ（プリン体）の吸着効果の向上が認められなかった。
【００８５】
［試験５：血清尿酸低下剤の評価−３］
上記で得られた米胚乳タンパク質５０部と、米澱粉（製品名「ファインスノウ」、上越スターチ株式会社製）５０部と、焼成カルシウム製剤（製品名「シェルパウダー［ホタテ２２］」、カワイマテリアル株式会社製）と、を使用し、原料組成物を調製した。焼成カルシウム製剤は、純カルシウム量換算で、原料組成物の全体量に対して表３の「Ｃａ量」の項に示す数値となるように配合した。
【００８６】
得られた原料組成物を、二軸エクストルーダー（製品名「ＫＥＩ−４５−２５」、株式会社幸和工業製）を用いて、各標品（血清尿酸低下剤に相当する。）を得た。二軸エクストルーダーの吐出部の温度及び圧力の条件は、表３の「吐出部の温度・圧力」の項に示すとおりである。標品Ｎについては、原料組成物を二軸エクストルーダーに供さず、そのまま下記試験を行った。
標品Ｎが本発明の血清尿酸低下剤に相当する。
【００８７】
各標品を、ミルを用いて粉末化し、粉末１ｇに対して蒸留水を５ｍＬ添加して室温で３０分間保温した。遠心分離機（ベックマン・コールター株式会社製）を用いて１０，０００×ｇで１０分間遠心分離を行った後、遠心上清を除去し、残った固形分を回収した。
【００８８】
（カルシウム遊離率の算出）
得られた各固形分について、電熱器（６００Ｗ）で予備灰化の後、マッフル炉で５５０℃、５時間灰化を行った。放熱したのち、６Ｎ  ＨＣｌを５ｍＬ添加し、電熱器（３００Ｗ）で乾固させた。再度６Ｎ  ＨＣｌを５ｍＬ添加し、５分間加熱を行った。放熱後、ろ紙（Ｎｏ．５、株式会社アドバンテック製）でろ過を行い、原子吸光（製品名「偏光ゼーマン原子吸光光度計Ｚ−５３００」、株式会社日立製作所製）でカルシウム量を測定し、下式のように各標品のカルシウム配合量を除算し、カルシウム遊離率を測定した。
カルシウム遊離率（％）＝（全カルシウム量（ｍｇ）−水洗後の不溶性カルシウム量（ｍｇ））／全カルシウム量（ｍｇ）×１００
【００８９】
【表３】
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【００９０】
表３から理解されるとおり、加熱及び加圧を行って得られた標品Ｏについては、カルシウム遊離率が低く、カルシウムの溶解性が抑制されていた。カルシウムはプラスに帯電しており、マイナスに帯電したプリン体と結合するものの、水に溶解している状態のカルシウムとプリン体とが結合しても、体内でのプリン体の吸収抑制は生じにくいと予測される。しかし、加熱及び加圧を行うことにより、カルシウムの溶解性が抑制されると、水に溶解している状態のカルシウム量が減少し、その結果プリン体の吸着能力が高まると考えられる。
【図１】
2017186289.tif 000005
【図２】
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