(57)【要約】【課題】効率的に透過率のよい魚ゼラチンを抽出することができる魚ゼラチンの製造方法を提供する。【解決手段】魚ゼラチンの製造方法は、原料魚皮を準備する工程と、ｐＨを調整する工程と、魚ゼラチンを製造する工程とを含み、前記ｐＨを調整する工程は、前記原料魚皮のｐＨと、前記原料魚皮を第１液体に浸漬し、４５℃以上で加熱することにより抽出された前記原料魚皮に由来する抽出物を含む前記第１液体のｐＨとの差を３以下に調整する工程であり、前記魚ゼラチンを製造する工程は、前記抽出物を含む前記第１液体を濾過して前記魚ゼラチンを得る工程である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
原料魚皮を準備する工程と、
ｐＨを調整する工程と、
魚ゼラチンを製造する工程とを含み、
前記ｐＨを調整する工程は、前記原料魚皮のｐＨと、前記原料魚皮を第１液体に浸漬し、４５℃以上で加熱することにより抽出された前記原料魚皮に由来する抽出物を含む前記第１液体のｐＨとの差を３以下に調整する工程であり、
前記魚ゼラチンを製造する工程は、前記抽出物を含む前記第１液体を濾過して前記魚ゼラチンを得る工程である、魚ゼラチンの製造方法。
【請求項２】
前記抽出物を含む前記第１液体は、前記魚ゼラチンの含有量を１質量％としたときの電気伝導度が３００μＳ／ｃｍ以下である、請求項１に記載の魚ゼラチンの製造方法。
【請求項３】
前記抽出物を含む前記第１液体は、ｐＨが４．５〜６．５である、請求項１または２に記載の魚ゼラチンの製造方法。
【請求項４】
前記ｐＨを調整する工程は、前記原料魚皮を浸漬した前記第１液体を１００〜１４０℃に加熱する、請求項１〜３のいずれかに記載の魚ゼラチンの製造方法。
【請求項５】
前記ｐＨを調整する工程は、前記加熱の温度が５分以上維持される、請求項４に記載の魚ゼラチンの製造方法。
【請求項６】
透過率が８５％以上、エンドトキシン含有量が４０ＥＵ／ｇ以下、パルブアルブミン含有量が１ｐｐｍ以下、かつ電気伝導度が５００μＳ／ｃｍ以下である、魚ゼラチン。
【請求項７】
前記魚ゼラチンは、イミノ酸含有量が１０００残基中２１０残基以下である、請求項６に記載の魚ゼラチン。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、魚ゼラチンの製造方法および魚ゼラチンに関する。
【背景技術】
【０００２】
特開２０００−１８９０６５号公報（特許文献１）、特開２００６−１６０６５４号公報（特許文献２）などに開示されるように、原料魚皮から効率的に魚ゼラチンを得る目的で、ｐＨ１〜４程度の酸性抽出液に原料魚皮を浸漬して魚ゼラチンを抽出することが知られている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２０００−１８９０６５号公報
【特許文献２】特開２００６−１６０６５４号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかし、上記ｐＨで魚ゼラチンを抽出しようとすると原料魚皮が型崩れし、目的物以外の夾雑物が多く混入し、濾過不良を起こす問題がある。濾過不良を起こせば、その結果として効率的に魚ゼラチンを得ることが困難となる。さらに、様々な用途に適するために透過率のよい魚ゼラチンが求められている。
【０００５】
本発明は、上記実情に鑑みてなされ、原料魚皮を不必要に型崩れさせることなく、効率的に透過率のよい魚ゼラチンを製造することができる魚ゼラチンの製造方法および魚ゼラチンを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
上記目的を達成するため、本発明に係る魚ゼラチンの製造方法は、原料魚皮を準備する工程と、ｐＨを調整する工程と、魚ゼラチンを製造する工程とを含み、前記ｐＨを調整する工程は、前記原料魚皮のｐＨと、前記原料魚皮を第１液体に浸漬し、４５℃以上で加熱することにより抽出された前記原料魚皮に由来する抽出物を含む前記第１液体のｐＨとの差を３以下に調整する工程であり、前記魚ゼラチンを製造する工程は、前記抽出物を含む前記第１液体を濾過して前記魚ゼラチンを得る工程である。
【０００７】
上記抽出物を含む上記第１液体は、上記魚ゼラチンの含有量を１質量％としたときの電気伝導度が３００μＳ／ｃｍ以下であることが好ましい。
【０００８】
上記抽出物を含む上記第１液体は、ｐＨが４．５〜６．５であることが好ましい。
上記ｐＨを調整する工程は、上記原料魚皮を浸漬した上記第１液体を１００〜１４０℃に加熱することが好ましい。
【０００９】
上記ｐＨを調整する工程は、上記加熱の温度が５分以上維持されることがさらに好ましい。
【００１０】
さらに本発明に係る魚ゼラチンは、透過率が８５％以上、エンドトキシン含有量が４０ＥＵ／ｇ以下、パルブアルブミン含有量が１ｐｐｍ以下、かつ電気伝導度が５００μＳ／ｃｍ以下である。
【００１１】
上記魚ゼラチンは、イミノ酸含有量が１０００残基中２１０残基以下であることが好ましい。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によれば、原料魚皮を不必要に型崩れさせることなく、効率的に透過率のよい魚ゼラチンを製造することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
以下、本発明に係る魚ゼラチンの製造方法および魚ゼラチンについて詳細に説明する。ここで、「魚ゼラチン」とは、魚の皮、鱗および骨などに含有されるコラーゲン組織を由来とするゼラチンをいう。上記の魚には、鮮魚および解凍魚が含まれる。本明細書において「魚ゼラチン」の用語は、魚ゼラチンが溶解している水溶液の状態を含めて用いている。また、本明細書において「Ｘ〜Ｙ」という形式の表記は、範囲の上限下限（すなわちＸ以上Ｙ以下）を意味しており、Ｘにおいて単位の記載がなく、Ｙにおいてのみ単位が記載されている場合、Ｘの単位とＹの単位とは同じである。
【００１４】
≪魚ゼラチンの製造方法≫
本発明に係る魚ゼラチンの製造方法は、原料魚皮を準備する工程と、ｐＨを調整する工程と、魚ゼラチンを製造する工程とを含む。ｐＨを調整する工程は、原料魚皮のｐＨと、原料魚皮を第１液体に浸漬し、４５℃以上で加熱することにより抽出された原料魚皮に由来する抽出物を含む第１液体のｐＨとの差を３以下に調整する工程である。魚ゼラチンを製造する工程は、抽出物を含む第１液体を濾過して魚ゼラチンを得る工程である。すなわち本発明の製造方法は、魚皮から魚ゼラチンを得る方法に係る。
【００１５】
本発明は上記構成を備えることにより、効率的に透過率のよい魚ゼラチンを得ることができる。従来、原料魚皮のｐＨと、原料魚皮に由来する抽出物を含む第１液体のｐＨとの関係を制御することにより、原料魚皮を不必要に型崩れさせることなく、透過率がよい魚ゼラチンを製造する技術は知られていなかった。その一方で、本発明では特に、原料魚皮のｐＨと、原料魚皮に由来する抽出物を含む第１液体のｐＨとの差が３以下に調整することにより、上記効果を得ることに加え、従来の製造プロセスで生成していた塩の発生も抑えることができる。これにより後述する「魚ゼラチンを製造する工程」の後に従来行われていた脱塩工程を不要とすることができる。したがって、脱塩工程を不要としたことによる製造効率の向上を実現することができる。脱塩工程を行なうことによるエンドトキシンのコンタミネーションを防止することも可能となる。
【００１６】
＜原料魚皮を準備する工程＞
本発明は、原料魚皮を準備する工程を含む。本工程では、所定の魚種を解体するなどして魚皮を入手し、原料魚皮を準備する。原料魚皮とは、魚ゼラチンの原料となる魚皮をいう。この魚皮は、コラーゲン組織を含有すれば、その魚種および魚皮の部位などは特に限定されるべきではない。魚皮には鱗のほか、骨、筋肉、内臓の一部が含まれていても構わない。具体的には、魚種として、イズミダイ、ナイルパーチ、コイ、草魚、アカマツダイ、イトヨリダイ、タラ、マグロ、シタビラメ、サケ、マスなどを挙げることができる。鱗が多く含まれ、魚体から分離して回収しやすい魚種の皮が取扱いやすい。鱗に含まれるコラーゲン組織が豊富な魚種、鱗に含まれる不要成分が少ない魚種などが好ましい。本発明に用いる好ましい魚種としては、イズミダイ、タラ、サケなどを挙げることができる。
【００１７】
原料魚皮は、付着している汚れを除去するため、あらかじめ水洗するなどの洗浄工程を前処理として行なうことが望ましい。さらに、脱脂処理を行なって脂分を除いた原料魚皮を用いることが好ましい。
【００１８】
原料魚皮は、水洗し、脱水もしくは乾燥させたものを用いることができる。水洗、脱水および乾燥は、従来公知の方法を用いることができる。
【００１９】
＜ｐＨを調整する工程＞
本発明は、ｐＨを調整する工程を含む。ｐＨを調整する工程は、原料魚皮のｐＨと、原料魚皮を第１液体に浸漬し、４５℃以上で加熱することにより抽出された原料魚皮に由来する抽出物を含む第１液体（以下、単に「抽出物を含む第１液体」と称することもある）のｐＨとの差を３以下に調整する工程である。以下、各構成および用語について説明する。
【００２０】
（原料魚皮のｐＨ）
原料魚皮のｐＨは、４．５〜９．５であることが好ましい。これにより原料魚皮のｐＨと抽出物を含む第１液体のｐＨとの差を３以下に調整することが容易となる。
【００２１】
原料魚皮のｐＨは、次のようにして測定する。すなわち、水洗し、脱水もしくは乾燥させた原料魚皮に対し、質量比で４倍量の純水を添加し、これを１２１℃で２０分間加熱し、ｐＨ測定用の原料魚皮懸濁液を調製する。次に、この懸濁液を１００ｍｌメスシリンダーに１００ｍｌ入れて３０分以上静置した後、その液面より２ｃｍ以内の領域から従来公知のスポイトを用いて１０ｍｌ採取し、これを溶質の濃度が５質量％のｐＨ測定用対象溶液となるように調整する。このｐＨ測定用対象溶液のｐＨを、ＪＩＳ  Ｋ  ６５０３：２００１（にかわ及びゼラチン）に準拠することにより測定し、原料魚皮のｐＨとすることができる。なお、ｐＨ測定用対象溶液の濃度は、ビウレット法により測定することができる。さらに、本実施形態および後述する実施例におけるｐＨの測定は、いずれもｐＨ測定装置（たとえば商品名：「ｐＨメーター」、株式会社堀場製作所製）により行なうことができる。
【００２２】
さらに、原料魚皮は、電気伝導度が３００μＳ／ｃｍ以下であることが好ましい。原料魚皮の電気伝導度はより好ましくは２００μＳ／ｃｍ以下である。これによっても、原料魚皮のｐＨと抽出物を含む第１液体のｐＨとの差を３以下に調整することが容易となる。なお電気伝導度は、魚ゼラチンを製造するプロセスで生成する塩の量の指標となる。
【００２３】
原料魚皮の電気伝導度は、次のようにして測定する。すなわち、上記の原料魚皮のｐＨ測定のために調整したｐＨ測定用対象溶液を、溶質の濃度が１質量％の伝導度測定用対象溶液となるように調整する。続いて、３７℃のウォーターバスに入れて３０分以上静置した後、伝導度測定用対象溶液の電気伝導度を測定し、原料魚皮の電気伝導度とすることができる。なお、伝導度測定用対象溶液の濃度は、ビウレット法により測定することができる。さらに、本実施形態および後述する実施例における電気伝導度の測定は、電気伝導度測定装置（たとえば商品名：「電気伝導率計ＥＳ−５１」、株式会社堀場製作所製）により行なうことができる。
【００２４】
（第１液体）
第１液体は、原料魚皮を浸漬することにより、原料魚皮に含まれるゼラチンを液中に溶出させやすくするための液体である。具体的には、第１液体は、純水に硫酸、塩酸、硝酸、酢酸などの所定の酸を添加し、ｐＨ４．５〜６．５に調整した酸性溶液をいう。このような第１液体を用いることにより、原料魚皮のｐＨと抽出物を含む第１液体のｐＨとの差を３以下に調整することが容易となる。
【００２５】
ｐＨを調整する工程において原料魚皮の浸漬は、原料魚皮を第１液体に浸漬した状態で、１〜２４時間、４〜３０℃の条件で保持することが好ましい。これにより、原料魚皮に含まれるゼラチンを液中に効率よく溶出させることができる。原料魚皮（浸漬前の質量）と第１液体との質量比は、原料魚皮１００質量部あたり第１液体が３００〜１０００質量部であることが好ましい。
【００２６】
ｐＨを調整する工程では、原料魚皮が浸漬している第１液体に対し、４５℃以上で加熱する。この加熱の温度は１００〜１４０℃であることが好ましい。さらに、１００〜１４０℃の加熱の温度が５分以上維持されることがより好ましい。これにより、透過率がよく、電気伝導度が抑えられた魚ゼラチンを高い収率で抽出することができる。
【００２７】
ここで、上記加熱の温度は、１００〜１２１℃であることがさらに好ましい。特に、上記加熱の温度が５分以上維持されることがさらに好ましい。ｐＨを調整する工程は魚ゼラチンの製造効率に直結するため、加熱の温度が４５℃未満であると原料魚皮から十分に魚ゼラチンを抽出することができず、その収率が著しく悪化する。さらに加熱の温度が１００℃未満であると、エンドトキシンの不活性化が不十分となってしまう恐れがある。魚ゼラチンの収率も低下する。加熱の温度を維持する時間が５分未満であっても、エンドトキシンの不活性化が不十分となり、魚ゼラチンの収率も低下する。加熱の温度が１４０℃を超えると物性のコントロールが困難となるので好ましいとはいえない。加熱の温度を維持する時間が６００分以上であっても、得られる効果の向上が見込みづらいので好ましいとはいえない。
【００２８】
ｐＨを調整する工程において、抽出物を含む第１液体には、上述した加熱温度による加熱によって溶出される魚ゼラチンを含む水溶性成分とともに、魚の皮および鱗などに含まれる不溶性成分および皮および鱗自体などが含まれる。このため抽出物を含む第１液体は、全体として水溶性成分と不溶性成分とからなる懸濁液として得られる。そして本発明において抽出物を含む第１液体のｐＨは、原料魚皮のｐＨとの差が３以下となる。原料魚皮のｐＨと抽出物を含む第１液体のｐＨとの差の下限値は０であるが、特に限定されるべきではない。
【００２９】
抽出物を含む第１液体のｐＨは、次のようにして測定する。すなわち、上述の抽出物を含む第１液体を１００ｍｌメスシリンダーに１００ｍｌ入れて３０分以上静置した後、その液面より２ｃｍ以内の領域から従来公知のスポイトを用いて１０ｍｌ採取し、これを溶質の濃度が５質量％のｐＨ測定用対象溶液となるように調整する。このｐＨ測定用対象溶液のｐＨを、ＪＩＳ  Ｋ  ６５０３：２００１（にかわ及びゼラチン）に準拠することにより測定し、抽出物を含む第１液体のｐＨとすることができる。ｐＨ測定用対象溶液の濃度の測定は、上述した測定方法により行なうことができる。ｐＨの測定も上述した装置を用いればよい。
【００３０】
抽出物を含む第１液体は、ｐＨが４．５〜６．５であることが好ましい。このようなｐＨの範囲であることにより、透過率がよりよく、電気伝導度がより抑えられた魚ゼラチンを製造することが可能となる。抽出物を含む第１液体のより好ましいｐＨの範囲は、５〜６．５である。
【００３１】
さらに、抽出物を含む第１液体は、魚ゼラチンの含有量を１質量％としたときの電気伝導度が３００μＳ／ｃｍ以下であることが好ましい。より好ましくは、２００μＳ／ｃｍ以下である。このような電気伝導度であれば、塩の生成が十分に抑制されているといえ、後述する「魚ゼラチンを製造する工程」の後の脱塩工程を不要とすることができる。
【００３２】
抽出物を含む第１液体の電気伝導度の測定は、上記の抽出物を含む第１液体のｐＨ測定のために調整したｐＨ測定用対象溶液を、溶質の濃度が１質量％の伝導度測定用溶液となるように調整する。続いて、３７℃のウォーターバスに入れて３０分以上静置した後、伝導度測定用対象溶液の電気伝導度を測定し、抽出物を含む第１液体の電気伝導度とすることができる。伝導度測定用対象溶液の濃度の測定は、上述した測定方法により行なうことができる。電気伝導度の測定も上述した装置を用いればよい。
【００３３】
抽出物を含む第１液体において、魚ゼラチンの含有量を１質量％としたときの電気伝導度が３００μＳ／ｃｍを超えると、後述する「魚ゼラチンを製造する工程」の後の脱塩工程が必要となる場合がある。なお、抽出物を含む第１液体における魚ゼラチン含有量を１質量％としたときの電気伝導度の下限は、理想値としての０μＳ／ｃｍである。
【００３４】
ここで、第１液体に用いられる純水、ならびに原料魚皮のｐＨおよび電気伝導度の測定で用いる純水とは、ＪＩＳ  Ｋ  ６５０３：２００１（にかわ及びゼラチン）に記載されている電気伝導度が２μＳ／ｃｍ（２５℃）以下の蒸留水またはイオン交換水をいう。なお、後述する［実施例］では第１液体の溶媒として超純水を用いている理由は、エンドトキシン含有量が極めて少ないからである。超純水も、電気伝導度が２μＳ／ｃｍ（２５℃）以下の蒸留水またはイオン交換水に該当する。
【００３５】
＜魚ゼラチンを製造する工程＞
本発明は、魚ゼラチンを製造する工程を含む。魚ゼラチンを製造する工程は、抽出物を含む第１液体を濾過して魚ゼラチンを得る工程である。
【００３６】
魚ゼラチンを製造する工程では、従来公知のフィルターを用いて抽出物を含む第１液体を濾過することにより、魚ゼラチンを得ることができる。フィルターとしては、たとえば０．４５μｍなどの細孔を有するフィルター（たとえば商品名：「ＤＵＲＡＰＯＲＥ  Ｍｅｍｂｒａｎｅ  Ｆｉｌｔｅｒ」、メルクミリポア社製）を用いることができる。
【００３７】
本発明により得られる魚ゼラチンは、ｐＨ５〜６、電気伝導度５００μＳ／ｃｍ以下、好ましくは３００μＳ／ｃｍ以下などの特性を有する。本発明では上述のようにｐＨを調整する工程において、原料魚皮のｐＨと、原料魚皮を第１液体に浸漬し、４５℃以上で加熱することにより抽出された原料魚皮に由来する抽出物を含む第１液体のｐＨとの差を３以下に調整することにより、魚ゼラチンの製造過程における塩の生成が抑えられるため、脱塩工程は不要である。
【００３８】
さらに原料魚皮のｐＨと、原料魚皮を第１液体に浸漬し、４５℃以上で加熱することにより抽出された原料魚皮に由来する抽出物を含む第１液体のｐＨとの差を３以下に調整することにより、８５％以上の透過率を得ることができる。上述のように加熱の温度を１００〜１４０℃とし、この加熱の温度を５分以上維持することにより、エンドトキシン含有量が４０ＥＵ／ｇ以下、パルブアルブミン含有量が１ｐｐｍ以下の特性を備えることができる。エンドトキシン含有量は、脱塩工程を不要とすることによっても抑えることができる。
【００３９】
このような魚ゼラチンは、上記の方法により製造することができる。魚ゼラチンの透過率、ｐＨおよび電気伝導度は、次のようにして測定することができる。エンドトキシン含有量などその他の特性を特定するための測定方法は後述する。
【００４０】
（魚ゼラチンの透過率およびｐＨ）
魚ゼラチンの透過率およびｐＨは、ＪＩＳ  Ｋ  ６５０３：２００１（にかわ及びゼラチン）に準拠することにより測定することができる。魚ゼラチンの透過率の測定は、透過率測定装置（たとえば商品名：「Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒ  Ｕ−２９００」、株式会社日立ハイテクノロジーズ製）により行なうことができる。ｐＨの測定は上述した装置を用いればよい。
【００４１】
（魚ゼラチンの電気伝導度）
魚ゼラチンの電気伝導度は、次のようにして測定する。すなわち、上記魚ゼラチンを製造する工程により得た魚ゼラチン１ｇに対し、純水９９ｍｌを添加し、１質量％濃度のゼラチン溶液を調製する。このゼラチン溶液を、３７℃のウォーターバスに入れて３０分以上静置した後、このゼラチン溶液の電気伝導度を測定し、魚ゼラチンの電気伝導度とすることができる。電気伝導度の測定は上述した装置を用いればよい。
【００４２】
≪魚ゼラチン≫
本発明に係る魚ゼラチンは、透過率が８５％以上、エンドトキシン含有量が４０ＥＵ／ｇ以下、パルブアルブミン含有量が１ｐｐｍ以下、かつ電気伝導度が５００μＳ／ｃｍ以下である。特に、上記魚ゼラチンは、イミノ酸含有量が１０００残基中２１０残基以下であることが好ましい。魚ゼラチンは、透過率が９０％以上であることが、不純物の混入を防ぎ、かつ外観を良好とするという観点から、さらに好ましい。エンドトキシン含有量が２５ＥＵ／ｇ以下であることが、発熱性物質の混入を防ぐという観点から、さらに好ましい。パルブアルブミン含有量が０．５ｐｐｍ以下であることが、アレルギー原因物質の混入を防ぐという観点から、さらに好ましい。電気伝導度が３００μＳ／ｃｍ以下であることが、塩の混入を防ぐという観点から、さらに好ましい。
【００４３】
透過率が８５％未満であると、不純物が混入し、または外観が悪くなるので好ましくない。エンドトキシン含有量が４０ＥＵ／ｇを超えると、発熱性物質の混入リスクが高まるので好ましくない。パルブアルブミン含有量が１ｐｐｍを超えると、アレルギー原因物質の混入リスクが高まるので好ましくない。電気伝導度が５００μＳ／ｃｍを超えると、塩の混入という不都合がある。イミノ酸含有量が１０００残基中２１０残基を超えると、もはや魚類由来のゼラチンではない。
【００４４】
本発明に係る魚ゼラチンは、その透過率の上限値は、理想値としての１００％である。エンドトキシン含有量の下限値は、理想値としての０ＥＵ／ｇである。パルブアルブミン含有量の下限値は、理想値としての０ｐｐｍである。電気伝導度の下限値は、理想値としての０μＳ／ｃｍである。イミノ酸含有量の下限値は、１０００残基中１００残基である。
【００４５】
本発明に係る魚ゼラチンは、上記構成を備えることにより、たとえば、癒着防止膜などの原材料として医療機器分野への適用、安定化剤などの原材料としての医薬品への適用、スキンケアローションなどの原材料としての化粧料分野への適用、冷凍食品などの原材料としての食品分野への適用などを実現することができる。
【００４６】
本発明に係る魚ゼラチンは、たとえば、上述した魚ゼラチンの製造方法により得ることができる。これにより、原料魚皮を不必要に型崩れさせることなく、効率的に透過率のよい魚ゼラチンを抽出することができる。特に、透過率が８５％以上、エンドトキシン含有量が４０ＥＵ／ｇ以下、パルブアルブミン含有量が１ｐｐｍ以下、かつ電気伝導度が５００μＳ／ｃｍ以下であるので、安全かつ幅広い用途で使い勝手のよい魚ゼラチンとして提供することが可能となる。
【００４７】
本発明において、魚ゼラチンの透過率および電気伝導度は、上記の測定方法により測定することができる。エンドトキシン含有量は、エンドトキシン測定用製品（たとえば商品名：「エンドスペシー（登録商標）  ＥＳ−５０Ｍセット」、生化学工業株式会社製）を用いて、日本薬局方の比色法に準拠することにより測定することができる。
【００４８】
パルブアルブミン含有量は、たとえば一次抗体をＡｎｔｉ  Ｇａｄｕｓ  ｍｏｒｈｕａ  ｓｕｂｓｐ  Ｐａｒｖａｌｂｕｍｉｎ  β（Ｆｌａｒｅｂｉｏ  Ｂｉｏｔｅｃｈ  ＬＬＣ社製）とし、二次抗体をペルオキシダーゼ標識ラット抗マウスＩｇＧ（Ｚｙｍｅｄ社製）とし、標準パルブアルブミンとしてＲｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  Ｔｈｅｒａｇｒａ  ｃｈａｌｃｏｇｒａｍｍａ  Ｐａｒｖａｌｂｕｍｉｎ（ＭｙＢｉｏＳｏｕｒｃｅ．ｃｏｍ社製）を用いたＥＬＩＳＡ試験により測定することができる。
【００４９】
イミノ酸含有量は、アミノ酸自動分析法を用いてプロリンおよびハイドロキシプロリンの残基数を測定することにより、特定することができる。
【実施例】
【００５０】
以下、実施例を挙げて本発明をより詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００５１】
＜試料１＞
日本産のスケトウダラの魚皮を入手し、１質量％の苛性ソーダで洗浄した後、水洗し、所定のｐＨ（ｐＨ７．３）となるように調整し、脱水することにより原料魚皮を準備した（原料魚皮を準備する工程）。この原料魚皮１５０ｇに対し、第１液体として超純水を６００ｇおよび６Ｎ塩酸を添加して浸漬した後、高圧蒸気滅菌器（オートクレーブ、商品名：「ＭＣＳ−３０３２Ｓ型」、アルプ株式会社製）に入れ、１２１℃で２０分間加熱することにより、原料魚皮に由来する抽出物を含む第１液体を得た（ｐＨを調整する工程）。その後、この抽出物を含む第１液体を０．４５μｍのフィルター（商品名：「ＤＵＲＡＰＯＲＥ  Ｍｅｍｂｒａｎｅ  Ｆｉｌｔｅｒ」、メルクミリポア社製）を用いて濾過し、公知の方法により乾燥させて魚ゼラチンを得た（魚ゼラチンを製造する工程）。
【００５２】
試料１において原料魚皮のｐＨは、次のとおりに測定した。すなわち、試料１と同じようにして準備した原料魚皮１５０ｇに対し、超純水を６００ｇ添加し、高圧蒸気滅菌器（オートクレーブ、商品名：「ＭＣＳ−３０３２Ｓ型」、アルプ株式会社製）に入れ、１２１℃で２０分間の加熱を行なうことにより、ｐＨ測定用の原料魚皮懸濁液を調製した。次に、この懸濁液を１００ｍｌメスシリンダーに１００ｍｌ入れて３０分以上静置した後、その液面より２ｃｍ以内の領域から従来公知のスポイトを用いて１０ｍｌ採取し、これを溶質の濃度が５質量％のｐＨ測定用対象溶液となるように調整した。このｐＨ測定用対象溶液のｐＨをＪＩＳ  Ｋ  ６５０３：２００１（にかわ及びゼラチン）に準拠することにより測定し、その値を原料魚皮のｐＨとした。ｐＨの測定には上述した装置を用いた。
【００５３】
試料１において原料魚皮の電気伝導度は、次のとおりに測定した。すなわち、上記の原料魚皮のｐＨ測定のために調整したｐＨ測定用対象溶液を、溶質の濃度が１質量％の伝導度測定用対象溶液となるように調整した。続いて、３７℃のウォーターバスに入れて３０分以上静置した後、伝導度測定用対象溶液の電気伝導度を測定し、その値を原料魚皮の電気伝導度とした。電気伝導度の測定には上述した装置を用いた。
【００５４】
試料１において抽出物を含む第１液体のｐＨは、次のとおりに測定した。上述のようにして得た抽出物を含む第１液体を１００ｍｌメスシリンダーに１００ｍｌ入れて３０分以上静置した後、その液面より２ｃｍ以内の領域から従来公知のスポイトを用いて１０ｍｌ採取し、これを溶質の濃度が５質量％のｐＨ測定用対象溶液となるように調整した。このｐＨ測定用対象溶液のｐＨを、ＪＩＳ  Ｋ  ６５０３：２００１（にかわ及びゼラチン）に準拠することにより測定し、その値を抽出物を含む第１液体のｐＨとした。ｐＨの測定には上述した装置を用いた。
【００５５】
試料１において抽出物を含む第１液体の電気伝導度は、次のとおりに測定した。すなわち、上記の抽出物を含む第１液体のｐＨ測定のために調整したｐＨ測定用対象溶液を、溶質の濃度が１質量％の伝導度測定用対象溶液となるように調整した。続いて、３７℃のウォーターバスに入れて３０分以上静置した後、伝導度測定用対象溶液の電気伝導度を測定し、その値を原料魚皮の電気伝導度とした。電気伝導度の測定には上述した装置を用いた。
【００５６】
試料１において得られた魚ゼラチンの透過率およびｐＨは、ＪＩＳ  Ｋ  ６５０３：２００１（にかわ及びゼラチン）に準拠することにより測定した。透過率の測定およびｐＨの測定には、それぞれ上述した装置を用いた。
【００５７】
試料１において得られた魚ゼラチンの電気伝導度は、次のようにして測定した。すなわち、上述のようにして得た魚ゼラチン１ｇに対し、純水９９ｍｌを添加し、１質量％濃度のゼラチン溶液を調製する。このゼラチン溶液を、３７℃のウォーターバスに入れて３０分以上静置した後、このゼラチン溶液の電気伝導度を測定し、その値を魚ゼラチンの電気伝導度とした。電気伝導度の測定には上述した装置を用いた。
【００５８】
＜試料２＞
試料１と同じようにして準備した原料魚皮１５０ｇに対し、超純水を６００ｇ添加し、６Ｎ塩酸を試料１で用いた量から変えて添加し浸漬した。これ以降は試料１と同じ方法により魚ゼラチンを得た。
【００５９】
＜試料３＞
試料１と同じようにして準備した原料魚皮１５０ｇに対し、超純水を６００ｇ添加し、６Ｎ塩酸を試料１で用いた量から変えて添加し浸漬した。これ以降は試料１と同じ方法により魚ゼラチンを得た。
【００６０】
試料３において得た魚ゼラチンに対し、エンドトキシン含有量およびパルブアルブミン含有量を上述した装置および方法により測定した。
【００６１】
＜試料４＞
試料１と同じようにして準備した原料魚皮１５０ｇに対し、超純水を６００ｇ添加し、６Ｎ塩酸を試料１で用いた量から変えて添加し浸漬するとともに、高圧蒸気滅菌器（オートクレーブ、商品名：「ＭＣＳ−３０３２Ｓ型」、アルプ株式会社製）に入れ、１２１℃で１０分間の加熱を行なった。これ以降は試料１と同じ方法により魚ゼラチンを得た。
【００６２】
試料４において得た魚ゼラチンに対しても、エンドトキシン含有量およびパルブアルブミン含有量を上述した装置および方法により測定した。
【００６３】
＜試料５＞
試料１と同じようにして準備した原料魚皮１５０ｇに対し、超純水を６００ｇ添加し、６Ｎ塩酸を試料１で用いた量から変えて添加し浸漬するとともに、高圧蒸気滅菌器（オートクレーブ、商品名：「ＭＣＳ−３０３２Ｓ型」、アルプ株式会社製）に入れ、１２１℃で５０分間加熱することにより、抽出物を含む第１液体を得た。これ以降は試料１と同じ方法により魚ゼラチンを得た。
【００６４】
試料５において得た魚ゼラチンに対しても、エンドトキシン含有量およびパルブアルブミン含有量を上述した装置および方法により測定した。さらに、試料５において得た魚ゼラチンに対しては、イミノ酸含有量を上述した方法により測定した。
【００６５】
＜試料６＞
試料１と同じようにして準備した原料魚皮１５０ｇに対し、超純水を６００ｇ添加し、６Ｎ塩酸を試料１で用いた量から変えて添加し浸漬するとともに、高圧蒸気滅菌器（オートクレーブ、商品名：「ＭＣＳ−３０３２Ｓ型」、アルプ株式会社製）に入れ、１００℃で６０分間加熱することにより、抽出物を含む第１液体を得た。これ以降は試料１と同じ方法により魚ゼラチンを得た。
【００６６】
試料６において得た魚ゼラチンに対しても、エンドトキシン含有量およびパルブアルブミン含有量を上述した装置および方法により測定した。
【００６７】
＜試料７＞
試料１と同じようにして準備した原料魚皮１５０ｇに対し、超純水を６００ｇ添加し、６Ｎ塩酸を試料１で用いた量から変えて添加し浸漬した。これ以降は試料１と同じ方法により魚ゼラチンを得た。
【００６８】
＜試料８＞
試料１と同じようにして準備した原料魚皮１５０ｇに対し、超純水を６００ｇ添加し、６Ｎ塩酸を試料１で用いた量から変えて添加し浸漬した。これ以降は試料１と同じ方法により魚ゼラチンを得た。
【００６９】
＜試料９＞
試料１と同じようにして準備した原料魚皮１５０ｇに対し、超純水を６００ｇ添加し、６Ｎ水酸化ナトリウムを添加して調製した。これ以降は試料１と同じ方法により魚ゼラチンを得た。
【００７０】
＜試料１０＞
試料１と同じようにして準備した原料魚皮１５０ｇに対し、超純水を６００ｇ添加し、６Ｎ塩酸を試料１で用いた量から変えて添加し浸漬するとともに、高圧蒸気滅菌器（オートクレーブ、商品名：「ＭＣＳ−３０３２Ｓ型」、アルプ株式会社製）に入れ、８０℃で６０分間加熱することにより、抽出物を含む第１液体を得た。これ以降は試料１と同じ方法により魚ゼラチンを得た。
【００７１】
試料１０において得た魚ゼラチンに対し、エンドトキシン含有量およびパルブアルブミン含有量を上述した装置および方法により測定した。
【００７２】
＜試料１１＞
日本産のスケトウダラの魚皮を入手し、１質量％の苛性ソーダで洗浄した後、水洗し、試料１とは異なる原料魚皮のｐＨ（ｐＨ８．８）とする調整をし、脱水することにより原料魚皮を準備した（原料魚皮を準備する工程）。この原料魚皮１５０ｇに対し、超純水を６００ｇ添加し、６Ｎ塩酸を試料１で用いた量から変えて添加し浸漬するとともに、高圧蒸気滅菌器（オートクレーブ、商品名：「ＭＣＳ−３０３２Ｓ型」、アルプ株式会社製）に入れ、１２１℃で２０分間加熱することにより、原料魚皮に由来する抽出物を含む第１液体を得た。これ以降は試料１と同じ方法により魚ゼラチンを得た。
【００７３】
＜試料１２＞
日本産のスケトウダラの魚皮を入手し、１質量％の苛性ソーダで洗浄した後、水洗し、試料１および試料１１とは異なる原料魚皮のｐＨ（ｐＨ９．０）とする調整をし、脱水することにより原料魚皮を準備した（原料魚皮を準備する工程）。この原料魚皮１５０ｇに対し、超純水を６００ｇ添加し、６Ｎ塩酸を試料１で用いた量から変えて添加し浸漬するとともに、高圧蒸気滅菌器（オートクレーブ、商品名：「ＭＣＳ−３０３２Ｓ型」、アルプ株式会社製）に入れ、４５℃で１２０分間加熱することにより、原料魚皮に由来する抽出物を含む第１液体を得た。これ以降は試料１と同じ方法により魚ゼラチンを得た。
【００７４】
試料１２において得た魚ゼラチンに対し、エンドトキシン含有量およびパルブアルブミン含有量を上述した装置および方法により測定した。
【００７５】
＜試料１３＞
試料１と同じようにして準備した原料魚皮１５０ｇに対し、超純水を６００ｇ添加し、６Ｎ塩酸を試料１で用いた量から変えて添加し浸漬するとともに、高圧蒸気滅菌器（オートクレーブ、商品名：「ＭＣＳ−３０３２Ｓ型」、アルプ株式会社製）に入れ、１２１℃で２０分間加熱することにより、原料魚皮に由来する抽出物を含む第１液体を得た。これ以降は試料１と同じ方法により魚ゼラチンを得た。試料１３については原料魚皮のｐＨと、原料魚皮に由来する抽出物を含む第１液体のｐＨとの差を３以下に調整する工程を行なわなかったため、その差が大きくなった（Δ４．２）。これに起因して試料１３において得た魚ゼラチンは、電気伝導率が極めて高かった（１０５０μＳ／ｃｍ）。さらに、酸性下で抽出されたことで型崩れが起こって濾過不良が生じたため、試料１３の魚ゼラチンに対しては、その透過率を測定しなかった。
【００７６】
＜試料１４＞
試料１と同じようにして準備した原料魚皮１５０ｇに対し、超純水を６００ｇ添加し、６Ｎ塩酸を試料１で用いた量から変えて添加し浸漬した。これ以降は試料１と同じ方法により魚ゼラチンを得た。
【００７７】
＜試料１５＞
日本産のスケトウダラの魚皮を入手し、１質量％の苛性ソーダで洗浄した後、水洗し、試料１、試料１１および試料１２とは異なる原料魚皮のｐＨ（ｐＨ１０．１）とする調整をし、脱水することにより原料魚皮を準備した（原料魚皮を準備する工程）。この原料魚皮１５０ｇに対し、超純水を６００ｇ添加し、６Ｎ塩酸を試料１で用いた量から変えて添加し浸漬するとともに、高圧蒸気滅菌器（オートクレーブ、商品名：「ＭＣＳ−３０３２Ｓ型」、アルプ株式会社製）に入れ、１２１℃で２０分間加熱することにより、抽出物を含む第１液体を得た。ただし、試料１５については抽出物を含む第１液体の電気伝導度が高かったため（５２０μＳ／ｃｍ）、それ以降の工程を行なわなかった。
【００７８】
試料１〜１５の原料魚皮のｐＨおよび電気伝導度、抽出物を含む第１液体のｐＨおよび電気伝導度、得られた魚ゼラチンの透過率、電気伝導度、エンドトキシン含有量およびパルブアルブミン含有量、イミノ酸含有量などを上述した測定方法により測定した。その結果を表１および表２に示す。
【００７９】
なお、試料１〜１５の原料魚皮として用いた魚種はいずれもスケトウダラであるので、試料５においてのみイミノ酸含有量を測定し、その他の試料のイミノ酸含有量は試料５のものと同じであると推定した。さらに、試料１、２、３、７、８、９、１１、１３および１４の加熱条件はいずれも同一であるため、試料３においてのみエンドトキシン含有量およびパルブアルブミン量を測定し、これらの試料のエンドトキシン含有量およびパルブアルブミン量は試料３のものと同じであると推定した。
【００８０】
【表１】
2017214295.tif 000002
【００８１】
【表２】
2017214295.tif 000003
【００８２】
＜考察＞
表１、２から理解されるように、試料１〜１１の魚ゼラチンの製造方法に沿って得られた魚ゼラチンは、原料魚皮のｐＨと抽出物を含む第１液体のｐＨとの差が３以下に調整されていることから、透過率がよく、電気伝導度も抑えられていることが分かる。特に、抽出物を含む第１液体における魚ゼラチンの含有量を１質量％としたときの電気伝導度が３００μＳ／ｃｍ以下であること、抽出物を含む第１液体のｐＨが４．５〜６．５であること、および加熱の温度が１００〜１４０℃であって加熱の温度が５分以上維持されることのいずれかの要件を満たすことにより、透過率がよりよく、電気伝導度もより抑えられることが分かった。さらに、エンドトキシン含有量、パルブアルブミン含有量も非常に低くかった。
【００８３】
一方で、試料１２〜１５の魚ゼラチンの製造方法に沿って得られた魚ゼラチンは、原料魚皮のｐＨと抽出物を含む第１液体とのｐＨとの差が３以下に調整されなかったため、透過率および電気伝導度の少なくとも一方が、試料１〜１１に比べて劣るものとなった。
【００８４】
以上のように本発明の実施の形態および実施例について説明を行なったが、上述の各実施の形態および実施例の構成を適宜組み合わせることも当初から予定している。
【００８５】
今回開示された実施の形態および実施例はすべての点で例示であって制限的なものではないと考えられるべきである。本発明の範囲は上述した説明ではなくて特許請求の範囲によって示され、特許請求の範囲と均等の意味および範囲内でのすべての変更が含まれることが意図される。