(57)【要約】【課題】  硫酸化ガラクトフカンを主体とした植物成長剤を提供する。【解決手段】  メカブ粉砕成分を含有する溶液を酵素処理することによってタンパク質を加水分解し、その加水分解後の溶液を遠心分離し、その遠心分離後の上清画分を抽出して多糖類抽出液を調整し、その多糖類抽出液を遠心分離して沈殿画分を抽出し、その沈殿画分を陰イオン交換クロマトグラフィーの溶出ピークにしたがってＡＢＣＤの４つの区分に画分し、その区分のうち最も陰イオン度の強いＤ画分（硫酸化ガラクトフカン）を抽出した。【選択図】図３
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
メカブ粉砕成分を含有する溶液を酵素処理することによってタンパク質を低分子へ加水分解し、その加水分解後の溶液を遠心分離し、
その遠心分離後の上清画分抽出して多糖類地湧出液を調整し、
その多糖類抽出液を遠心分離して沈殿画分を抽出し、
その沈殿画分を１．０Ｍまでの食塩濃度勾配法による陰イオン交換クロマトグラフィーによって溶出し、その溶出液をウロン酸及びフコースの溶出ピークに従ってＡＢＣＤの４つの区分に画分し、その区分のうち最も陰イオン度の強いＤ画分を抽出したことを特徴とする植物成長剤。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】  本発明は、海藻であるワカメのメカブから得られた多糖複合体からなる植物成長剤に関する。
【背景技術】
【０００２】  海藻であるワカメの芽株は、ワカメの卵ともいえる遊走子海藻が内在された胞子が密生しており、植物の肥料として土中に投与すると植物成長を促進するなど、多様な機能を備えていることが明らかにされている。
そして、食品化学の世界において、海藻から、アルギン酸、ポリフィランあるいはフコイダン等の興味深い多糖類が分離されている。一方、従来我が国で海藻食は健康をもたらすと信じられてきたが、これらの成分が植物の成長の中で、特に切花の延命について検討した。【０００３】  従来から切花の開花期間の延長に関しては、花瓶や水盤の水に漂白剤を数滴入れる、１０円硬貨を数枚いれる（銅イオンによる殺菌効果）、少量の砂糖を入れる等の方法があるが、要するに花瓶や水盤の水の腐敗を遅らせる事と栄養分の補給が目的で投入するが、現実にはいずれの場合でも数日間の延長しか出来ないのが現実である。
また市販の酵素を利用した切花延命剤もあるが、いずれにしても現在の状況では延命効果は、数日から一週間程度が限度である。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】  本願発明では、褐藻類と紅藻類に含まれる５種類の海藻多糖類抽出液を検出し、エタノール分画により粗精製画分を得て走化活性を測定したところ、限られた褐藻類の高分子多糖類画分にのみ活性が認められた。
そこで、この走化性多糖類を、カラムクロマト法を用いて更に精製し、構成単糖の解析を行った。リガンドが多糖類であることから、既知の走化性リセプターのリガンドとアンタゴニストを文献的に調べるうちに、二種類のラクトースが、エラスチン・ペプチド・リセプターのアンタゴニストであることを想起し、それを手がかりにした実験により、エラスチン・ペプチド・リセプターそのものが走化性多糖類のリセプターであることを明らかにすることが出来た。【０００５】  本願はこの様な研究に基づいてなされたものであり、その目的とするところは、植物成長剤を提供することにある。
【課題を解決する手段】
【０００６】  前記目的を達成するための手段として、請求項１記載の植物成長剤では、メカブ粉砕成分を含有する溶液を酵素処理することによってタンパク質を低分子へ加水分解し、その加水分解後の溶液を遠心分離し、その遠心分離後の上清画分を抽出して多糖類抽出液を調整し、その多糖類抽出液を遠心分離して沈殿画分を抽出し、その沈殿画分を１．０Ｍまでの食塩濃度勾配法による陰イオン交換クロマトグラフィーによって溶出し、その溶出液をウロン酸及びフコースの溶出ピークに従ってＡＢＣＤの４つの区分に画分し、その区分のうち最も陰イオン度の強いＤが分を抽出したことを特徴とする。
【発明の効果】
【０００７】  前期構成を採用したことにより、本発明では次の効果を有する。
本発明の植物成長剤を水盤に生けている切花の水に投与すると、ワカメ胞子（メカブ）に多量に含まれる硫酸化ガラクトフカンが作用して走化させる。
メカブから多糖類抽出液を調整し、その多糖類抽出液を遠心分離して沈殿画分を抽出するので、ワカメのメカブを変質させることなくフコイダン様多糖体を容易に抽出することができる。
そして、本発明のフコイダン様多糖体にはカリウム・カルシウム・リン・鉄等のミネラル類やビタミンＡ・Ｂ１・Ｂ２・ナイアシン・Ｃ等のビタミン類が豊富に含まれ、また、その他微量ではあるが生命の維持及び栄養素として必要なミネラル、即ち、必須微量元素が含まれる。
また、簡便かつ安価な工業的規模で植物成長剤を製造する方法が提供されるため、これにより植物類に限らず他の生物に対しても、高い成長剤が提供される。
さらに、この発明によって海藻類の漁獲から加工に至る間に大量に発生する海藻未利用物を有効利用でき、廃棄物を削減できる。また海藻未利用物の有益な分解処理方法が提出される。
そして、多糖類抽出液のうち最も陰イオン度の強いＤ画分を抽出し、切花の延命剤の植物成長剤が精製される。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】以下、本発明の形態について、実施例に基づき説明する。
【実施例】
【０００９】  ワカメの胞子である芽株（メカブ）部分を純水で洗浄後、風乾させ、グラインダーにより微粒子化した。
パウダーを純水で膨張させた後、オートクレープで１２０℃、２０分間加熱し、細胞壁を破壊すると共に蛋白質を変性させた。冷却後、ＮａＯＨを添加してｐＨ７．０にあわせた後、密度を１００ｍｇ乾燥重量／ｍｌに調整し、乾燥重量で１／１００量のＡｃｔ  ｉｎａｓｃ  ＡＳを添加して５０℃で一晩処理し蛋白質を加水分解した。３．０００ｒｐｍで２５分間遠心処理して上清を回収し、多糖類抽出液とした、これを凍結乾燥した。
凍結乾燥粉末を純水に再溶解後、５℃下で純エタノールを加えて、最終濃度を７５％とし、５℃で６時間静置した後３．０００ｒｐｍで２５分間の遠心処理により、沈殿画分と上清画分を得た。
沈殿画分は、９０％および純エタノールで洗浄した後、凍結乾燥し、使用まで−２０℃で保存した。上清画分は、エバポレーターで濃縮した後、凍結乾燥し、使用まで−２０℃で保存した。海藻の７５％エタノール沈殿及び上清画分の凍結乾燥標品の供与を受けた。それらを秤量後リン酸バッファー化生食水に溶解して、走化性実験に用いた。【００１０】  メカブの７５％エタノール沈殿画分乾燥粉末を１２．５ｍｇ／ｍｌになるように２０ｍＭトリス塩酸バッファー（ｐＨ７．０）で溶解し、その２０ｍｌを４℃下に、同バッファーで平衡化したトヨパールＤＥＡＥ−６５０Ｓカラムに投与した。同バッファーでカラムを洗浄した後、１．０Ｍまでの食塩濃度勾配方により吸着分子を順次溶出し、６ｍｌごとに画分した。各画分の糖密度を測定したしころ、多糖の溶出パターンは４つのピークを示したので、それに基づいて各画分をプールし、それぞれのプールをＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄの画分とした。これらの４画分を４℃で純水に対して透析した後、凍結乾燥した。これらを秤量後、リン酸バッファー化生食水に溶解して、走化活性測定に用いた。【００１１】  上記のＤ画分凍結乾燥標品を酢酸ナトリュウムバッファー（ｐｈ５．８）で、１ｍｇ／ｍｌの濃度に溶解し、３７℃で６０分間、最終濃度１０ｍｕ／ｍｌのエンドβガラクトシダーゼで処理した。対照としては、エンドβガラクトシダーゼの代わりにその溶液のみを加えたＤ画分溶液及び１０ｍｕ／ｍｌのエンドβガラクトシダーゼのみの溶液を、それぞれ３７℃で６０分間温置した。これらの試料をリン酸バッファー化生食水により、少なくとも３０倍希釈して、走化性実験に用いた。【００１２】  Ｄ画分の主要な単糖はガラクトースとフコースでおおよそ１対１の割合で含まれていたが、グルコース、マンノース及びウロン酸は存在しなかった。また、多量の硫酸基が認められた。このことは、Ｄ画分の多糖がほぼ単一の分子種であることを支持しており、その分子は硫酸化ガラクトフカンという事になる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】海藻多糖類７５％エタノール画分の単球走化性を示す図である。
【図２】メカブ沈殿画分の遊走活性が走化活性であることを示す図である。
【図３】陰イオン交換クロマトグラフィーによる分離状態を示す図である。
【産業上の利用可能性】
【００１４】  Ｄ画分の硫酸化ガラクトフカンを切花の延命実験に用いた。花瓶に１リッターの水道水を入れ硫酸化ガラクトフカンの３０倍希釈液を更に約１．０００倍程度に希釈して、その希釈液約１０ｃｃを投入した。花は真紅のバラの切花で通常、夏季の室内で３乃至５日程度の開花期間が２週間の開花が確認できた。
また、ナス、キューリの開花時に硫酸化ガラクトフカンの３０倍希釈液を更に約１．０００倍程度に希釈して開花中の花本体に噴霧器により噴霧した。収穫したナス、キューリの結実は通常の倍以上の大きさの野菜を収穫することが出来た。
これにより、切花の延命及び各種の野菜の収量の増加に寄与出来ることを確信した。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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