(57)【要約】      （修正有）【課題】安全で実用性が高い自発活動増強作用を有する組成物の提供。【解決手段】式（１）等で示される３種類のレスベラトロール重合化合物をアルカリ条件下で加熱処理して得られる自発活動増強剤組成物。式（１）：2016069326.tif 000011【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
レスベラトロールをアルカリ条件下で加熱処理して得られることを特徴とする自発活動増強剤組成物。
【請求項２】
式（１）：
【化１】
2016069326.tif 000008
式（２）：
【化２】
2016069326.tif 000009
及び式（３）：
【化３】
2016069326.tif 000010
で示される３種類のレスベラトロール重合化合物を含有する請求項１記載の自発活動増強剤組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、レスベラトロールをアルカリ条件下で加熱処理するまったく新しい方法によって得られる自発活動増強作用を有する組成物に関するものである。
【０００２】
赤ワインに含まれていることで有名なレスベラトロールは１９９７年、高い抗ガン作用があることが報告された（非特許文献１）。この報告によりレスベラトロールに注目が集まり、多くの疾病に効果があることが明らかにされつつある（非特許文献２）。また、レスベラトロールには強制走行試験により持久力向上作用があることが報告されている（特許文献１）。また、レスベラトロールの誘導体であるプテロスチルベンは抗不安作用を有することが報告されている（特許文献２）。
【０００３】
自発活動とは、日常生活で活動する運動のことである。例えば運動を意識していない歩行は自発活動である。この自発活動は動物にとって必須の行動である。しかし、様々なストレスを受けると活動性が低下して自発活動量が減少する。現代社会の日常生活では騒音や心理社会的な精神的ストレスは代表例である。動物がストレスを受けると精神状態が不健康な状態に変化することがある。例えば、不安、脱力感等の行動萎縮症状を示すことがあり、それらがさらに悪化するとうつ病、神経衰弱等の精神性疾患が生ずることがある。
【０００４】
近年は、ストレス環境の増加により、男女とも３０〜４０歳代のうつ病患者が増加して
いる。うつ病等の精神疾患が原因で、働き盛りの労働者が突然社会活動から離脱すること
による社会的・経済的損失は非常に大きく、また、少子・高齢化に伴う労働者人口の減少
に拍車をかけているという問題が生じている。
【０００５】
また、主に高齢者において問題とされているアルツハイマー病では約半数に抑うつ気分が認められ、１０人に１人から２人がうつ病を合併する（非特許文献３）。また、血管性認知症では半数以上にうつ症状が認められ、２７％にうつ病が合併していることが報告されている（非特許文献４）。このように、高齢者のうつ病は認知症に移行する場合があることが報告されていることから、うつ病がアルツハイマー病を始めとする認知症のリスクファクターであることが指摘されている（非特許文献５）。
【０００６】
受けたストレスを効率的に解消するには運動が最も適している。しかしうつ病や神経衰弱等の精神性疾患もしくはそれに近い状態になった場合、活動性自体が低下するため運動を行うこと自体が困難になる。
【０００７】
抗うつ剤は意欲や活動性を向上させる効果を有している。例えば、アミトリプチリン等の三環系化合物、及びミアンセリン等の四環系化合物等が知られている。しかしながら、これらの薬物は、副作用が強く、また、効果が発揮されるまでに時間を要するという問題があった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特許第４７３９１６１号公報
【特許文献２】特表２０１４−５１４３６１号公報
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Ｓｃｉｅｎｃｅ，２７５（１０），ｐ２１８−２２０（１９９７）
【非特許文献２】Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，５，ｐ４９３−５０６（２００６）
【非特許文献３】Ａｍ． Ｊ．  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ，  １４６（５），  ｐ５７７−５８７（１９８９）
【非特許文献４】Ａｒｃｈ． Ｎｅｕｒｏｌ．４４（４），ｐ３８９−３９３（１９８７）
【非特許文献５】Ｊ．Ｎｅｕｒｏｌ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ．，７５，ｐ１６６２−１６６６（２００４）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明者らが発明したレスベラトロールの高機能化技術で得られた組成物の効果を鋭意検討した結果、驚くべきことに本発明品が自発活動を増強する作用を見出すことに成功した。
【００１１】
したがって、本発明は、安全で実用性が高い自発活動増強作用を有する組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明の要旨は、
〔１〕レスベラトロールをアルカリ条件下で加熱処理して得られることを特徴とする自発活動増強剤組成物、
〔２〕式（１）：
【化１】
2016069326.tif 000002
式（２）：
【化２】
2016069326.tif 000003
及び式（３）：
【化３】
2016069326.tif 000004
で示される３種類のレスベラトロール重合化合物を含有する請求項１記載の自発活動増強剤組成物、
に関する。
【発明の効果】
【００１３】
本発明の自発活動増強剤組成物は、食経験のあるブドウ等に含有されているレスベラトロールから作製されるためにレスベラトロール重合化合物を主成分とするために安全性が高く、製造方法も簡便なものであることから実用性が高いため、新規の自発活動増強剤組成物として有用である。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】図１は実施例１で製造した本発明の自発活動増強作用を有する組成物のクロマトグラムを示す。ピークの番号はそれぞれ１：ＵＨＡ４００２、２：ＵＨＡ４００３、３：ＵＨＡ４０２２に対応している。
【図２】図２は実施例２で得られたラットの自発活動量を示すグラフである。図中、「非投与」は非投与群、「対照群」は０．５％レスベラトロール投与群、「０．５％本発明品」０．５％本発明品投与群を示す。また「＊」はt検定において非投与群と有意差（ｐ＜０．０５）を有するものを示し、「＃」はｔ検定においてレスベラトロール投与群と有意差（ｐ＜０．０５）を有するものを示す。
【図３】図３は実施例３で得られたラットの全血から作製した血漿中の血糖値を示すグラフである。図中、「非投与」は非投与群、「対照群」は０．５％レスベラトロール投与群、「０．５％本発明品」０．５％本発明品投与群を示す。また「＊」はt検定において非投与群と有意差（ｐ＜０．０５）を有するものを示し、「＃」はｔ検定においてレスベラトロール投与群と有意差（ｐ＜０．０５）を有するものを示す。
【図４】図４は実施例３で得られたラットの全血から作製した血漿中の中性脂肪値を示すグラフである。図中、「非投与」は非投与群、「対照群」は０．５％レスベラトロール投与群、「０．５％本発明品」０．５％本発明品投与群を示す。また「＊」はt検定において非投与群と有意差（ｐ＜０．０５）を有するものを示す。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
以下、本発明について詳細に説明する。
本発明の自発活動増強作用を有するレスベラトロール加熱処理組成物は、レスベラトロールをアルカリ条件下で加熱処理することで得られることを特徴とする。
【００１６】
本発明において、「自発活動増強剤組成物」とは、ヒト又は非ヒト動物に投与することで、自発的な運動量を向上させることができる組成物という。
なお、ヒト又は非ヒト動物への自発活動増強作用は、具体的には、後述の実施例に記載の方法により測定することで確認することができる。
【００１７】
本発明者らは、鋭意検討した結果、レスベラトロールを加熱処理することで、有害な試薬や工程を必要とせずに自発活動増強作用を有する組成物を効率的で安全に製造することができることを見出した。
【００１８】
本発明では、原料としてレスベラトロールを用いる。
【００１９】
レスベラトロールにはトランス体とシス体の構造異性体が存在するが、加熱や紫外線によってトランス体とシス体の変換が一部生じる。したがって、本発明で使用するレスベラトロールとしては、トランス体でもシス体でも、あるいはトランス体とシス体の混合物であってもよい。
【００２０】
また、レスベラトロールには、薬学的に許容可能な塩も含まれる。薬学的に許容可能な塩としては、例えば、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩；マグネシウム塩、カルシウム塩、バリウム塩等のアルカリ土類金属塩；アルミニウム塩；アルミニウムヒドロキシド塩等の金属ヒドロキシド塩；アルキルアミン塩、ジアルキルアミン塩、トリアルキルアミン塩、アルキレンジアミン塩、シクロアルキルアミン塩、アリールアミン塩、アラルキルアミン塩、複素環式アミン塩等のアミン塩；α−アミノ酸塩、ω−アミノ酸塩等のアミノ酸塩；ペプチド塩又はそれらから誘導される第１級、第２級、第３級若しくは第４級アミン塩等が挙げられる。これらの薬学的に許容可能な塩は、単独で又は２種以上を混合して用いることができる。
【００２１】
前記レスベラトロールは、ブドウ果皮から抽出・精製した天然由来のものであっても、化学合成された純度の高い化成品であってもよい。天然由来のレスベラトロールを用いる場合は、完全に精製されたものである必要はなく、後述のように所望の生成反応が進み最終的に本発明の自発活動増強作用を有する組成物が得られることから、レスベラトロール以外の成分を含む混合物も使用できる。
ただし、有効性を十分に発揮させる組成物を生成させるためには一定量のレスベラトロールが必要なことから、レスベラトロール換算で１重量％以上含有された混合物が原料として望ましい。
前記レスベラトロールを含有する混合物としては、ブドウ果皮、ワイン、ワイン濃縮パウダー、メリンジョ、リンゴンベリー、ピーナッツ、イタドリ根もしくは根茎、パッションフルーツ種子等の原料からの抽出物、これらの抽出物の凍結乾燥品等が挙げられる。
【００２２】
本発明では、レスベラトロールを適切な溶媒に溶解若しくは分散させる。この際、溶媒としては、特に限定はなく、水、水と有機溶媒の混合液、有機溶媒のいずれでもよい。水と有機溶媒の混合液の場合には、その配合比や有機溶媒の種類については特に制限はない。中でも、水やメタノール、エタノールのみの溶媒や、水とメタノール、水とエタノール等の混合液を使用することが、安全性やコスト面から好ましい。前記の加熱反応後に得られる組成物に対して最終的な精製を十分に適用せずにその組成物を医薬品、医薬部外品等に使用する場合には、安全性や法規面から溶媒として水やエタノール、含水エタノールを使用することが望ましい。
【００２３】
前記のようにして得られるレスベラトロールを含有する溶液（以下、レスベラトロール含有溶液ともいう。）中のレスベラトロールの濃度について特に制限はない。レスベラトロールの濃度が高いほど、溶媒使用量が少なくてすむ等のメリットもあるため、レスベラトロールは飽和濃度以上として溶液中において完全に溶解していなくともよい。
【００２４】
次に、前記レスベラトロール含有溶液のｐＨをアルカリ性となるように調整する。調整方法として、例えば、レスベラトロール含有溶液を調製した後にアルカリ化剤を添加してｐＨを調整してもよいし、前記溶液の調製時に前もって溶媒のｐＨを調整しておいてもよい。レスベラトロール含有溶液の加熱開始時のｐＨは８．０以上であれば、効率的に後述のように複数の有用なレスベラトロール重合化合物を生成する反応が進むので好ましく、ｐＨ１３．０を超えると反応と同時に、他の反応や目的化合物の分解も一方で生じるために最終的なレスベラトロール重合化合物群の回収量が低下する傾向がある。したがって、反応開始時のｐＨは８〜１３．０が望ましい。
【００２５】
前記アルカリ化剤としては、特に制限はないが、安全性、効率及びコスト面からは、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム等が望ましい。反応時のｐＨ変化を極力抑える場合が生じた際には、緩衝溶液を用いてもよいが、必ずしも必要な手法ではない。
【００２６】
次に、アルカリ性に調整されたレスベラトロール含有溶液を加熱処理する。この加熱処理により、レスベラトロールどうしを環化反応させることで、有用な化合物が生成する。このような有用な化合物としては、式（１）：
【００２７】
【化４】
2016069326.tif 000005
【００２８】
、式（２）：
【００２９】
【化５】
2016069326.tif 000006
【００３０】
、式（３）：
【００３１】
【化６】
2016069326.tif 000007
【００３２】
で示される種類のレスベラトロール重合化合物が挙げられる。
【００３３】
前記レスベラトロール重合化合物において、炭素−炭素２重結合は、トランス体又はシス体であってもよく、シス体とトランス体との混合物を含む。
【００３４】
前記レスベラトロール重合化合物としては、その薬学的に許容可能な塩であってもよい。
【００３５】
前記レスベラトロール重合化合物の薬学的に許容可能な塩としては、例えば、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩；マグネシウム塩、カルシウム塩、バリウム塩等のアルカリ土類金属塩； アルミニウム塩；アルミニウムヒドロキシド塩等の金属ヒドロキシド塩； アルキルアミン塩、ジアルキルアミン塩、トリアルキルアミン塩、アルキレンジアミン塩、シクロアルキルアミン塩、アリールアミン塩、アラルキルアミン塩、複素環式アミン塩等のアミン塩；α−アミノ酸塩、ω−アミノ酸塩等のアミノ酸塩；ペプチド塩又はそれらから誘導される第１級、第２級、第３級若しくは第４級アミン塩等が挙げられる。これらの薬理的に許容し得る塩は、単独で又は２種以上を混合して用いることができる。
【００３６】
本発明において前記レスベラトロール重合体化合物を形成するための環化反応とは、レスベラトロールどうしが重合反応することで６員環を形成する反応をいう。
前記環化反応を効率的に進ませるために、アルカリ性に調整されたレスベラトロール含有溶液の加熱温度は１１０℃以上に調整することが好ましい。また、使用する溶媒の沸点から考え、加圧加熱が望ましい。例えば、開放容器にアルカリ性に調整されたレスベラトロール含有溶液を入れ、溶媒の沸点を超える高温で前記容器を加熱する、密閉容器にアルカリ性に調整されたレスベラトロール含有溶液を入れ、前記容器を加熱する、レトルト装置やオートクレーブを用いて加圧加熱する、超臨界装置やプレッシャークッカー等の装置を用い加圧加熱する等、少なくとも部分的にアルカリ性に調整されたレスベラトロール含有溶液の温度が１１０℃以上に達するように加熱することが好ましい。前記レスベラトロール重合化合物等の回収効率面から、アルカリ性に調整されたレスベラトロール含有溶液の温度が均一に１１０℃〜１５０℃になることが、さらに好ましい。加熱時間も加熱温度と同様に限られたものではなく、効率的に目的の反応が進行する時間条件とすればよい。特に、加熱時間は加熱温度との兼ね合いによるものであり、加熱温度に応じた加熱時間にすることが望ましい。例えば、１３０℃付近で加熱する場合は、３０〜１２０分の加熱時間が望ましい。また、加熱は、一度でもよいし、複数回に分けて繰り返し加熱してもよい。複数回に分けて加熱する場合、蒸発した溶媒を補うために溶媒を新たに追加して行うことが好ましい。
【００３７】
前記加熱処理による前記式（１）〜（３）で表されるレスベラトロール重合化合物等の生成反応の終了は、例えば、後述のようにＨＰＬＣによる成分分析により生成量を確認して判断すればよい。具体的には、前記の生成をクロマトグラム上で確認されているかを評価すればよい。
なお、前記式（１）〜（３）で表されるレスベラトロール重合化合物の生成量については、本発明の自発活動増強作用を有する組成物中に多いほど自発活動量が増えるので好ましいが、具体的には、それぞれの総量が本発明の自発活動増強作用を有する組成物中に１重量％以上であればよい。
また、式（１）、式（２）、式（３）で表されるレスベラトロール重合化合物のそれぞれの含有比率については特に限定はない。
【００３８】
また、風味面での改良やさらなる高機能化を望む場合は、前記反応物を濃縮して式（１）〜（３）で表されるレスベラトロール重合化合物の濃度を高める、あるいは前記反応物を脱塩精製し、式（１）〜（３）で表されるレスベラトロール重合化合物の濃度を高めたものを得ることができる。前記濃縮や精製は、公知の方法で実施可能である。例えば、クロロホルム、酢酸エチル、エタノール、メタノール等の溶媒抽出法や炭酸ガスによる超臨界抽出法等で抽出して式（１）〜（３）で表されるレスベラトロール重合化合物を濃縮できる。また、カラムクロマトグラフィーを利用して濃縮や精製を施すことも可能である。たとえば担体として合成吸着剤を用いて濃縮することが可能である。また、前記濃縮や精製には、再結晶法や限外ろ過膜等の膜処理法も適用可能である。
中でも、合成吸着剤を用いることで、前記式（１）〜（３）で表されるレスベラトロール重合化合物を吸着させ、その後、溶出することで容易に濃縮、精製ができる。前記合成吸着剤としては、例えば、三菱化学株式会社製のダイヤイオン（登録商標）ＨＰシリーズ、セパビーズ（登録商標）ＳＰシリーズ等の芳香族系合成吸着剤、オルガノ株式会社製のアンバーライト（登録商標）ＸＡＤシリーズ等のスチレン系合成吸着剤等が挙げられる。
【００３９】
また、前記濃縮物や生成物を必要に応じて、減圧乾燥や凍結乾燥して溶媒除去することで、粉末状の固形物を得ることができる。
【００４０】
なお、本発明の自発活動増強作用を有する組成物を安全な原料のみを用いて製造した場合には、そのまま食品、医薬品又は医薬部外品に使用することが可能である。例えば、天然由来のレスベラトロールを含水エタノール溶媒に溶解し、水酸化ナトリウムや炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム等のアルカリ化剤を添加して加熱処理した場合には、得られる反応液を食品、医薬品又は医薬部外品の原料の一つとして使用することが可能である。
【００４１】
また、得られた組成物は公知の方法を用いて溶解性を向上させてもよい。たとえばシクロデキストリンを添加する方法等が挙げられるが、特に限定はない。
【００４２】
以上のようにして得られる式（１）〜（３）で表されるレスベラトロール重合化合物を含む本発明の自発活動増強作用を有する組成物は、優れた自発活動増強作用を有する。また、本発明の自発活動増強剤組成物による自発活動が増加するため、運動不足やストレスを解消したり、ストレスが原因で生じるとされるうつ病や神経衰弱等の精神的疾患を未然に予防したりする効果が期待される。さらに、本発明の自発活動増強剤組成物を継続的に摂取することによって、運動量が増えることに付随して体内脂肪の過剰な蓄積を抑えることで、肥満、糖尿病及び循環器系疾患の発症を予防したり、ストレスを軽減することでうつ病のうつ病に由来するアルツハイマー病の発症を予防したりする効果も期待される。
【００４３】
本発明の自発活動増強剤組成物は、有効成分として組成物のみからなるものであってもよいが、前記組成物をエタノール又はエタノール含有水溶液等の溶媒に溶解した液剤としたり、公知の方法で乳剤、懸濁剤としたりしてもよい。液剤、乳剤又は懸濁剤中の本発明の自発活動増強剤組成物の含有量は、固形分として０．００１重量％以上であればよい。
【００４４】
本発明の自発活動増強剤組成物は、医薬品として製剤化してもよい。この製剤形態としては特に限定されず、例えば、注射剤、坐剤、点眼剤、軟膏剤、エアゾール剤等の非経口剤、錠剤、被覆錠剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、カプセル剤、液剤、丸剤、懸濁剤、乳剤、トローチ剤、チュアブル錠、シロップ剤等の経口剤等が挙げられる。製剤化の際には、薬学的に許容される担体、賦形剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤、希釈剤、安定化剤、等張化剤、ｐＨ調整剤、緩衝剤等が用いられる。
【００４５】
担体や賦形剤としては、例えば、乳糖、ショ糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、マルトース、マンニトール、エリスリトール、キシリトール、マルチトール、イノシトール、デキストラン、ソルビトール、アルブミン、尿素、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、ケイ酸、メチルセルロース、グリセリン、アルギン酸ナトリウム、アラビアゴム及びこれらの混合物等が挙げられる。
【００４６】
滑沢剤としては、例えば、精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ砂、ポリエチレングリコール及びこれらの混合物等が挙げられる。
結合剤としては、例えば、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン溶液、ポリビニルアルコール、ポリビニルエーテル、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロース、セラック、メチルセルロース、エチルセルロース、水、エタノール、リン酸カリウム及びこれらの混合物等が挙げられる。
【００４７】
崩壊剤としては、例えば、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、ラミナラン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、デンプン、乳糖及びこれらの混合物等が挙げられる。
【００４８】
希釈剤としては、例えば、水、エチルアルコール、マクロゴール、プロピレングリコール、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類及びこれらの混合物等が挙げられる。
安定化剤としては、例えば、ピロ亜硫酸ナトリウム、エチレンジアミン四酢酸、チオグリコール酸、チオ乳酸及びこれらの混合物等が挙げられる。
【００４９】
等張化剤としては、例えば、塩化ナトリウム、ホウ酸、ブドウ糖、グリセリン及びこれらの混合物等が挙げられる。
【００５０】
ｐＨ調整剤及び緩衝剤としては、例えば、クエン酸ナトリウム、クエン酸、酢酸ナトリウム、リン酸ナトリウム及びこれらの混合物等が挙げられる。
【００５１】
さらに本発明の自発活動増強剤組成物は、増量剤、可溶化剤、分散剤、懸濁剤、乳化剤、抗酸化剤、細菌抑制剤、着色剤、矯味剤、矯臭剤等を含んでいてもよい。
【００５２】
また、錠剤、丸剤、顆粒剤、顆粒を含有するカプセル剤の顆粒は、必要により、ショ糖等の糖類、マルチトール等の糖アルコールで糖衣を施したり、ゼラチン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース等でコーティングを施したりすることもできる。また、胃溶性又は腸溶性物質のフィルムで被覆してもよい。また、製剤の溶解性を向上させるために、公知の可溶化処理を施すこともできる。
【００５３】
本発明の自発活動増強剤組成物を使用する場合、例えば、本発明の自発活動増強剤組成物の摂取量は、所望の効果が得られるような量であれば特に制限されず、通常その態様、患者の年齢、性別、体質その他の条件、疾患の種類並びにその程度等に応じて適宜選択されるが、例えば、成人１日当たり、固形分として約０．１ｍｇ〜１，０００ｍｇ／ｋｇ程度とするのがよく、これを１日に１〜４回に分けて摂取することができる。
【００５４】
また、本発明の自発活動増強剤組成物を医薬部外品の形態に製剤化してもよい。医薬部外品としては特に限定されないが、例えば、ドリンク剤等の栄養補助医薬部外品が好ましい。この場合、有効成分であるエキスの医薬部外品における含有量は、固形分として０．００１〜３０重量％程度であればよい。
【００５５】
また、本発明の自発活動増強剤組成物は、安全性に優れたものである。したがって、非ヒト動物、例えば、ラット、マウス、モルモット、ウサギ、ヒツジ、ブタ、ウシ、ウマ、ネコ、イヌ、サル、チンパンジー等の哺乳類、鳥類、両生類、爬虫類等の治療剤又は飼料に配合してもよい。飼料としては、例えばヒツジ、ブタ、ウシ、ウマ、ニワトリ等に用いる家畜用飼料、ウサギ、ラット、マウス等に用いる小動物用飼料、ウナギ、タイ、ハマチ、エビ等に用いる魚介類用飼料、イヌ、ネコ、小鳥、リス等に用いるペットフードが挙げられる。
【実施例】
【００５６】
次に、本発明を実施例に基づいて詳細に説明するが、本発明はかかる実施例にのみ限定されるものではない。
【００５７】
（実施例１：レスベラトロールアルカリ加熱処理組成物の調製）
レスベラトロールアルカリ加熱処理組成物を以下の手順で行った。トランス−レスベラトロール（（株）ＴＥＣＮＯ  ＳＣＩＥＮＣＥ社製）４０ｇに、１０％炭酸ナトリウム（和光純薬工業（株）社製）水溶液を４００ｍＬ加えて、レスベラトロール含有水溶液（ｐＨ９．９）を得た。このレスベラトロール含有溶液を圧力鍋（ゼロ活力なべ、アサヒ軽金属工業株式会社製）にて１２８℃、１２０分間加熱し、レスベラトロール重合化合物含有溶液を調製した。
【００５８】
次いで、レスベラトロール重合化合物含有溶液を４．０ｋｇの合成吸着剤ダイヤイオン（登録商標）ＨＰ−２０（三菱化学株式会社製）に全量供した。前記合成吸着剤を蒸留水２４Ｌで洗浄後、１００％エタノール１６Ｌで溶出させ、得られた溶出液から減圧乾燥にて溶媒を除去し、固体状のレスベラトロールアルカリ加熱処理組成物２２ｇを得た。
【００５９】
得られたレスベラトロールアルカリ加熱処理組成物を２ｍｇ／ｍＬの濃度でメタノールに溶解させ、そのうち１０μＬをＨＰＬＣにより分析した。
【００６０】
ＨＰＬＣ分析は下記の条件にて行った。
カラム：ＣＡＰＣＥＬＬ  ＰＡＫ  ＵＧ８０カラム（４．６ｍｍＩ．Ｄ.×２５０ｍｍ、資生堂株式会社製）
移動相Ａ：０．１％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ、和光純薬株式会社製）／Ｈ２Ｏ
移動相Ｂ：０．１％ＴＦＡ／アセトニトリル（和光純薬株式会社製）
勾配（容量％）：１００％Ａ／０％Ｂから０％Ａ／１００％Ｂまで３３分、０％Ａ／１００％Ｂを７分（すべて直線）
【００６１】
得られたクロマトグラムを図１に示す。レスベラトロールアルカリ加熱処理組成物中にはレスベラトロールのピーク（溶出時間１５分）とは異なる複数のピークが検出できた。
【００６２】
次に、得られた反応物のうち、図１の「１」、「２」、「３」に示されるピークに含まれる化合物を分取ＨＰＬＣにより単離し、常法により乾燥したところ、「１」、「２」に示されるピークに含まれる化合物は淡褐色粉末状の物質、「３」に示されるピークに含まれる化合物は褐色粉末状の物質となった。
【００６３】
次いで、前記３種類の化合物の分子量を、特開２０１１−２５１９１４号公報の実施例２に記載の方法に従って、高分解能Ｎｅｇａｔｉｖｅ−ＦＡＢ−ＭＳ（高速原子衝撃質量分析）にて測定し、核磁気共鳴（ＮＭＲ）測定を行った結果、「１」のピークに含まれる化合物は、前記式（１）で表される化合物（以下、ＵＨＡ４００２という。）、「２」のピークに含まれる化合物は前記式（２）で表される化合物（以下、ＵＨＡ４００３という。）、「３」のピークに含まれる化合物は前記式（３）で表される化合物（以下ＵＨＡ４０２２という。）であることがわかった。
したがって、実施例１で得られたレスベラトロールアルカリ加熱処理組成物は、前記式（１）、（２）、（３）で表される化合物を含んでいることがわかる。
【００６４】
（実施例２：自発活動増強作用の検討）
実施例１で得られたレスべラトロールアルカリ加熱処理組成物（以下、本発明品という）の自発活動増強作用を調べた。
本発明品の自発活動増強作用の検証には、ＳＤラット雄（日本クレア株式会社製）を用いた。具体的には、７週齢のＳＤラットを１４日間の予備飼育（飼料：通常食）を行った後、各群の平均体重がほぼ等しくなるように各群８匹として３群（非投与群、対照群、０．５％本発明品群）に分け、それぞれに試験飼料を８週間摂取させた。その後、回転式運動量測定装置（夏目製作所社製）の回転車に拘束し、ラットが２時間で回した回転数を測定した。統計解析はＥｘｃｅｌのｔ−ｔｅｓｔを用いて実施し、有意水準５％にて検定した。結果を図２に示す。
【００６５】
図２の結果で示されるように、ラットの自発活動量が本発明品によって有意に増加した。これは対照品であるレスベラトロールには認められない効果であり、本発明品は新たな自発活動増強剤組成物として有用であるといえる。また自発活動の増強によるうつ病等の精神性疾患の改善に効果が期待される。
【００６６】
（実施例３：血糖値及び中性脂肪値への作用評価）
本発明品の血糖値及び中性脂肪値への作用の検証には、実施例２で使用した動物を用いて評価した。詳しくは、実施例２で使用した動物に対して本発明品をさらに２週間投与（合計１０週間投与）し、全血採取して血清を作製した。得られた血漿よりグルコーステストワコー及びトリグリセリドテストワコー（共に和光純薬社製）を用いて血糖値及び中性脂肪値を測定した。測定方法はキット付属のプロトコールに準じて実施した。統計解析はＥｘｃｅｌのｔ−ｔｅｓｔを用いて実施し、有意水準５％にて検定した。血糖値の結果を図３に、中性脂肪値の結果を図４に示す。
【００６７】
図３及び図４の結果より、本発明品を投与したラットでは、血糖値及び中性脂肪値が有意に減少したことから自発活動量が有意に増強されていることがわかった。これは対照品であるレスベラトロールには認められない効果である。
したがって、本発明品を用いることで、ヒトや非ヒト動物において自発活動を促し、運動不足やストレスを解消し、またストレスが原因で生じるとされるうつ病や神経衰弱等の精神的疾患を未然に予防する効果が期待される。
また、本発明の自発活動増強剤組成物を継続的に摂取することによって、運動量が増えることに付随して体内脂肪の過剰な蓄積を抑えることで、肥満、糖尿病及び循環器系疾患の発症を予防したり、ストレスを軽減することでうつ病のうつ病に由来するアルツハイマー病の発症を予防したりする効果も期待される。
【００６８】
なお、実施例２、３で本発明品を投与したラットには、異常行動、副作用と思われる症状は全く見られなかったことから安全性にも優れることがわかる。
【図１】
2016069326.tif 000012
【図２】
2016069326.tif 000013
【図３】
2016069326.tif 000014
【図４】
2016069326.tif 000015