(57)【要約】【課題】免疫力を改善する組成物を提供する。【解決手段】担子菌菌糸体培養液抽出物、フコイダン、乳酸菌及びバンランコンを含む免疫促進剤、ＮＯ産生促進剤及びＩＬ−１２産生促進剤を提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
担子菌菌糸体培養液抽出物、フコイダン、乳酸菌及びバンランコン（板藍根）を含む免疫促進剤。
【請求項２】
免疫応答性向上作用を有する請求項１に記載の免疫促進剤。
【請求項３】
さらに、亜鉛を含む請求項１又は２に記載の免疫促進剤。
【請求項４】
バンランコンが板藍根エキスである請求項１〜３のいずれかに記載の免疫促進剤。
【請求項５】
担子菌菌糸体培養液抽出物を３００重量部、板藍根エキスを１５０重量部、乳酸菌を１５重量部、フコイダンを５重量部及び亜鉛を３．５重量部の割合で含む、請求項４に記載の免疫促進剤。
【請求項６】
担子菌菌糸体培養液抽出物の含有量が、３００〜１０００μｇ／Ｌである請求項１〜５のいずれかに記載の免疫促進剤。
【請求項７】
担子菌菌糸体培養液抽出物、フコイダン、乳酸菌及びバンランコン（板藍根）を有効成分として含むＮＯ産生促進剤。
【請求項８】
担子菌菌糸体培養液抽出物、フコイダン、乳酸菌及びバンランコン（板藍根）を含むＩＬ−１２産生促進剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は免疫促進剤に関する。さらに詳しくは、担子菌菌糸体培養液抽出物、フコイダン、乳酸菌及びバンランコン（板藍根）を含有する免疫促進剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
担子菌菌糸体培養液抽出物は、シイタケ（Lentinula edodes）属に属する担子菌の菌糸体培養液から抽出されたα-グルカンに富んだ植物性多糖体の混合物である。
担子菌菌糸体培養液抽出物は、末梢血樹状細胞数の増加(非特許文献１)、ＩＦＮ−γ産生増強・ＮＫ細胞数増加（非特許文献２）などの効果があることが認められており、免疫力向上、抗がん作用、感染症予防効果、肝障害予防効果、抗酸化作用等が期待されている（非特許文献３〜５）。
【０００３】
他方、古くから漢方薬などとして使用され、通常の使用では人体に悪影響を及ぼさないことが知られ、安全性が実証されている天然物由来の成分が多数知られている。
例えば、本発明に関連する成分として、フコイダン（fucoidan）は、硫酸多糖の一種であって、コンブやワカメ（一部位であるメカブを含む）、モズクなど褐藻類の粘質物に多く含まれる食物繊維である。
【０００４】
また、バンランコン（板藍根）は、主に中国で冬の季節に使用される生薬であり、風邪やインフルエンザ時の熱症状や、のどの痛みなどに対して茶の代わり飲用する方法で広く利用されている。
また、代謝により乳酸を生成する乳酸菌は、健康なヒトの消化管内善玉菌として常在し、他の病原微生物と拮抗することで腸内環境の恒常性維持に寄与していると考えられており、ヨーグルト、乳酸菌飲料、漬物などの発酵に寄与している。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Immunological Effect of Active Hexose Correlated Compound (AHCC) in Healthy Volunteers: A Double-Blind, Placebo-Controlled Trial. Nutr Cancer 2008; 60(5): 643-651
【非特許文献２】Active Hexose Correlated Compound Enhances Tumor Surveillance through Regulating Both Innate and Adaptive Immune Responses. Cancer Immunol Immunother 2005; 55(10): 1258-1266.
【非特許文献３】「ＡＨＣＣの基礎と臨床，最近の話題」，日本補完代替医療学会誌, 6(1): 1-7 (2009)
【非特許文献４】Decline of T cell-related immune functions in cancer patients and an attempt to restore them through infusion of activated autologous T cells. Mech Ageing Dev. 2009, 130:86-91
【非特許文献５】Slower immune system aging in women versus men in the Japanese population. Immunity & Ageing 2013, 10:19-27
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明者らは、天然物由来の他の成分を担子菌菌糸体培養液抽出物と併用することによる担子菌菌糸体培養液抽出物の機能性の強化について鋭意検討した。その結果、他の成分として、フコイダン、乳酸菌及びバンランコン（板藍根）を共に含む組成物を健常者に一定期間投与した後、被験者の血液を採取し、フローサイトメトリー（ＦＣＭ）での分析及び解析による血液検査（血液一般検査、及び生化学検査）を行ったところ、Ｔ細胞の反応性が向上することを見出した。
【０００７】
また、マクロファージ細胞系の培養媒体に前記４成分を添加したところ、各々の成分単独を添加した場合に比べて、ＮＯ産生能及びＩＬ−１２産生能が相加した値以上に向上することを見出した。
【０００８】
これらの知見に基づいて、本発明は担子菌菌糸体培養液抽出物、フコイダン、乳酸菌及びバンランコンを含む組成物であって、各成分を単独で含む組成物に比べて相乗的効果の認められる免疫促進剤を提供するものである。
【０００９】
すなわち、本発明は以下を提供する。
［１］担子菌菌糸体培養液抽出物、フコイダン、乳酸菌及びバンランコン（板藍根）を含む免疫促進剤。
［２］免疫応答性向上作用を有する［１］に記載の免疫促進剤。
［３］さらに、亜鉛を含む［１］又は［２］に記載の免疫促進剤。
［４］バンランコンが板藍根エキスである［１］〜［３］のいずれかに記載の免疫促進剤。
［５］担子菌菌糸体培養液抽出物を３００重量部、板藍根エキスを１５０重量部、 乳酸菌を１５重量部、フコイダンを５重量部、亜鉛を３．５重量部の割合で含む、［４］に記載の免疫促進剤。
［６］担子菌菌糸体培養液抽出物の含有量が、３００〜１０００μｇ／Ｌである［１］〜［５］のいずれかに記載の免疫促進剤。
［７］担子菌菌糸体培養液抽出物、フコイダン、乳酸菌及びバンランコン（板藍根）を有効成分として含むＮＯ産生促進剤。
［８］担子菌菌糸体培養液抽出物、フコイダン、乳酸菌及びバンランコン（板藍根）を含むＩＬ−１２産生促進剤。
［９］［１］〜［８］の促進剤を含む組成物。
［１０］［１］〜［８］の促進剤を含む機能性食品。
［１１］［１］〜［８］の促進剤を含む健康食品。
【発明の効果】
【００１０】
本発明による、担子菌菌糸体培養液抽出物、フコイダン、乳酸菌及びバンランコン（板藍根）を有効成分として含む免疫促進剤、ＮＯ産生促進剤及びＩＬ−１２産生促進剤は、継続的に摂取することにより免疫応答性を向上し、機能性食品として有用である。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明の免疫促進剤、ＮＯ産生促進剤及びＩＬ−１２産生促進剤（以下、単に「本発明の組成物」ともいう。）は、担子菌菌糸体培養液抽出物、フコイダン、乳酸菌及びバンランコン（板藍根）を含む。
【００１２】
担子菌菌糸体培養液抽出物：
本発明の組成物に含まれる担子菌菌糸体培養液抽出物は、シイタケ（Lentinula edodes）属に属する担子菌の菌糸体培養液から抽出されたα-グルカンに富んだ植物性多糖体の混合物であり、活性化糖類関連化合物（Active Hexose Correlated Compound）とも称される。担子菌菌糸体培養液抽出物は、株式会社アミノアップ化学から入手可能である。
【００１３】
本発明の組成物中の担子菌菌糸体培養液抽出物の含有量は、所望の作用を奏する限り特に限定されないが、好ましくは、３００〜１０００μｇ／Ｌである。
【００１４】
バンランコン（板藍根）：
本発明の組成物に含まれるバンランコンは、アブラナ科のホソバタイセイの根を乾燥させた生薬である。清熱解毒、涼血利咽の作用を持つと言われ、感染症による発熱、のぼせや充血等の症状の改善効果がある。本発明では温水、アルコール等で乾燥根から抽出したエキスを使用してもよい。
【００１５】
フコイダン：
本発明の組成物に含まれるフコイダンは、褐藻類の粘質物に多く含まれる含硫多糖の一種であり、硫酸化フコースを構成糖として含む硫酸化多糖類であればよく、特に制限はない。該褐藻類としては、例えばコンブ目、ナガマツモ目、ヒバマタ目などに属する海藻類が挙げられ、具体的には、ガゴメコンブ、トロロコンブ、ワカメ、クロメ、アラメ、カジメ、ジャイアントケルプ、レッソニア  ニグレセンス、モズク、オキナワモズク、ヒバマタ、アスコフィラム  ノドサムなどが挙げられ、中でもオキナワモズク、ワカメ（芽株）、メカブなどが好ましい。本発明に用いられるフコイダンは、効果が高く、安価であることから、メカブ由来のフコイダンが好ましい。褐藻類（メカブ等）からフコイダンを抽出する方法は、特に制限されることはないが、例えば、メカブを酢酸又は希塩酸の水溶液に懸濁させ、抽出を行う酸抽出法等、公知の方法を用いることができる。
【００１６】
乳酸菌：
本発明の組成物に用いられる乳酸菌は、テトラジェノコッカス属、ペディオコッカス属又はラクトバチルス属の乳酸菌であることが好ましい。その中でも、テトラジェノコッカス・ハロフィラスＫＫ２２１株（受託番号ＦＥＲＭ  ＢＰ−１０９８７；以下、「ＫＫ２２１」という。）は、免疫促進能が特に高いことから好ましい。
【００１７】
一態様において、本発明の組成物は、上記の成分に加えてさらに亜鉛を含んでいてもよい。
【００１８】
本発明の組成物は、上記の各成分を、任意の割合で、均一に混合して製造することができる。
一態様において、好ましくは、本発明の組成物は、担子菌菌糸体培養液抽出物を３００重量部、板藍根エキスを１５０重量部、乳酸菌を１５重量部及びフコイダンを５重量部の割合で含み、さらに亜鉛を含む場合には、これに加えて亜鉛を３．５重量部の割合で含む。
【００１９】
本発明の組成物の投与方法は特に限定されないが、経口投与が簡便であり好ましい。投与量は、後述の実施例の記載を参照して、摂取者の状態に応じて適宜調整することができる。
【００２０】
本発明の組成物は、それ自体を機能性食品及び健康食品として用いることもできる。また、機能性食品及び健康食品の原料として用いることもできる。本発明はまた、このような機能性食品及び健康食品にも関する。
【００２１】
本発明の組成物は、免疫促進作用、ＮＯ産生促進作用及び／又はＩＬ−１２産生促進作用を有する。これらの作用を有することは、例えば後述の実施例に記載のように、本発明の組成物の投与前後で血液免疫指標を測定し、また、血液検査を実施し、これらの作用に関連する評価指標の分析をすることで確認することができる。
本発明の組成物は、免疫応答性向上作用を有してもよい。免疫応答性向上作用は、例えば後述の実施例に記載のように、本発明の組成物の投与前と比較して投与後の血液中のナイーブＴ細胞の増加により確認することができる。
【実施例】
【００２２】
健常中年女性を対象に、被験サンプルを２８日間継続摂取することによって、血液免疫指標にどのような影響を及ぼすかを観察し、処方としての安全性および有効性（免疫賦活作用）を検証する実験を行った。
試験方法
被験サンプルとして、担子菌菌糸体培養液抽出物（ＡＨＣＣ-α-αＦＤ、株式会社アミノアップ化学製、３００ｍｇ）、板藍根エキス(１５０ｍｇ)、乳酸菌(テトラジェノコッカス・ハロフィラスＫＫ２２１株、受託番号ＦＥＲＭ  ＢＰ−１０９８７、１５ｍｇ)、メカブフコイダン (５ｍｇ)および亜鉛(３．５ｍｇ)の混合物を使用した。４０歳から７０歳までの健常中年女性１１例に、１日１回、２８日間連続で被験サンプルを経口摂取させた。
被験サンプル投与前(Initial)及び投与２８日後(Final)に各被験者から血液を採取し、以下の評価を行った。
・免疫力測定検査（血液免疫指標） フローサイトメトリー（ＦＣＭ）による分析および解析
・血液検査（血液一般・生化学検査）
【００２３】
試験結果
【００２４】
【表１】
2016069285.tif 000002
【００２５】
ＦＣＭ分析値（％）は、測定時にＦＳＣ／ＳＳＣでリンパ球にGatingし、更に、リンパ球共通抗原（CD45）陽性細胞にGatingし上記陽性率を算出する（T cell, B cell, CD4 T cell, CD8 T cell, NK cell (%) についてはリンパ球全体が分母となる）。CD4 naive, memory（％）は、CD4陽性細胞中の各亜集団の陽性率を示し、同様に、CD8+CD28+（％）は、ＣＤ８陽性細胞中のCD28陽性細胞の陽性率を示す。ＦＣＭ解析値（μl）は、血算・白血球分画データより、白血球数にリンパ球分画百分率（％）をかけ、リンパ球数を算出した。リンパ球数に上記分析値の各陽性率をかけて、各リンパ球亜集団の細胞数を算出した。
【００２６】
【表２】
2016069285.tif 000003
【００２７】
ＦＣＭ解析によって得られたリンパ球の数や機能７項目（Ｔ細胞数・ＣＤ８+ＣＤ２８+Ｔ細胞数・ＣＤ４／ＣＤ８Ｔ細胞比・ナイーブT細胞数・ナイーブ/メモリT細胞数・Ｂ細胞数・ＮＫ細胞数）の各数値を株式会社健康ライフサイエンスによるデータベースに基づき、３段階に分け（１〜３のスコアを与え）、そのスコアを合計した点数を免疫力スコア（最大値２１）とする。免疫力スコアをさらに５段階に分け、免疫グレードとする。Ｔリンパ球年齢はＣＤ８+ＣＤ２８+Ｔ細胞数と年齢の相関性を利用して算定する。
【００２８】
１）免疫力評価（総合評価）、項目スコア
投与前に比べ、免疫グレード、Ｔ細胞スコア、及びナイーブＴ細胞のいずれも、投与後に比べ、高い評価値を示した。ＦＣＭ分析の結果をもとに算出した免疫力評価（総合評価）では、被験サンプルを摂取することで、免疫力グレード（Ｉ〜Ｖ）のスコア（平均値）が上昇した。Ｔ細胞数スコア（０〜３）およびナイーブT細胞数スコア（０〜３）についても平均値が上昇した。
【００２９】
２）Ｔリンパ球年齢、ＣＤ８+ＣＤ２８+Ｔ細胞数
Ｔリンパ球年齢は、摂取前と比較した結果、摂取後は有意に減少した。また、表１から、Tリンパ球年齢を算出する因子であるＣＤ８+ＣＤ２８+Ｔ細胞数は、上昇傾向であった。
【００３０】
３）ＣＤ４+ Ｔ細胞
表１から、ＦＣＭ分析および解析データにおいて、ＣＤ４+Ｔ細胞の比率は、摂取前と比較して摂取後の値は有意な上昇を示した。一方、ＣＤ４+Ｔ細胞数は摂取前と比較して摂取後の平均値は上昇したものの統計学的に有意ではなかった。
【００３１】
４）ナイーブＴ細胞数
表１から、ＦＣＭ解析データにおいて、ナイーブＴ細胞数は、摂取前と比較して摂取後の値は上昇傾向を示した。
【００３２】
ＦＣＭを用いた各種血液免疫指標による免疫力評価および各項目スコアの結果では、被験サンプルを継続的に摂取することで、「免疫グレード」・「Ｔ細胞数スコア」・「ナイーブＴ細胞数スコア」を上昇させ、総合評価において免疫力を向上させることを示唆した。本試験では、実年齢とともに減少するとされるＣＤ８+ＣＤ２８+ Ｔ細胞を上昇させ、Ｔリンパ球年齢（算出値）を若返らせた。ＣＤ８+ＣＤ２８+ Ｔ細胞は、Ｔ細胞の増殖性と相関があり、上昇傾向を示したことは、Ｔ細胞の反応性を高めたことを示唆する。さらに、ＣＤ４+Ｔ細胞の比率が統計学的に有意な上昇を示しており、免疫反応を調節する作用において重要な役割を担っている、いわゆるヘルパーＴ細胞の上昇が示唆された。中でも、未感作状態であるナイーブＴ細胞が統計学的に有意な上昇を示しており、これから起こりうる抗原刺激に対し、免疫応答性を高める可能性が期待できる。