(57)【要約】      （修正有）【課題】Ｔ細胞悪性疾患、Ｂ細胞悪性疾患、自己免疫障害、及び移植臓器を有する患者における細胞内キナーゼ阻害剤の治療的使用の提供。【解決手段】ＤＫＣ三つ組キナーゼ活性部位に結合する式（ＩＩ）で表されるタンパク質キナーゼ阻害剤であって、（a）キナーゼ活性部位における触媒二つ組のリシンのアミノ基に対し水素結合距離内のキナーゼ活性部位に配置されるプロトン受容体；（b）キナーゼ活性部位における触媒二つ組のアスパラギン酸に隣接する水素結合における引き抜き可能なプロトン；（c）さらなる電子転位によってβ脱離が起こり、それにより阻害剤におけるマイケル受容体が生成される脱離基；（d）キナーゼのヒンジ領域、いくつかの疎水性残基、親水性残基、及びその組み合わせからなる群より選択される、ＡＴＰ結合部位の一部に対する親和性を有するキナーゼ結合部分を含むタンパク質キナーゼ阻害剤。2016040248.tif 000162【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者における、ＨＴＬＶ−１関連Ｔ細胞リンパ腫、結節性末梢Ｔ細胞リンパ腫、結節外末梢Ｔ細胞リンパ腫、中枢神経系リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫（ＣＴＣＬ）、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、急性リンパ性白血病、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性（ｍｙｅｌｏｇｅｎｏｕｓ）白血病、急性骨髄性（ｍｙｅｌｏｉｄ）白血病、慢性骨髄性白血病、慢性リンパ性白血病、Ｔ細胞前リンパ性白血病及び成人Ｔ細胞白血病（ＡＴＬ）からなる群から選択されるＴ細胞悪性疾患を処置するための製剤を製造するためのインターロイキン−２誘導性チロシンキナ−ゼ（ＩＴＫ）阻害剤の使用。
【請求項２】
Ｔ細胞悪性疾患が、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、ＨＴＬＶ−１関連Ｔ細胞リンパ腫、結節性末梢Ｔ細胞リンパ腫、結節外末梢Ｔ細胞リンパ腫、中枢神経系リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫（ＣＴＣＬ）及びＡＩＤＳ関連リンパ腫からなる群から選択されることを特徴とする、請求項１記載の使用。
【請求項３】
Ｔ細胞悪性疾患が、急性リンパ性白血病、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性（ｍｙｅｌｏｇｅｎｏｕｓ）白血病、急性骨髄性（ｍｙｅｌｏｉｄ）白血病、慢性骨髄性白血病、慢性リンパ性白血病、Ｔ細胞前リンパ性白血病及び成人Ｔ細胞白血病（ＡＴＬ）からなる群から選択されることを特徴とする、請求項１記載の使用。
【請求項４】
皮膚Ｔ細胞リンパ腫が菌状息肉腫であることを特徴とする、請求項１記載の使用。
【請求項５】
Ｔ細胞悪性疾患の細胞がＩＴＫを発現することを特徴とする、請求項１記載の使用。
【請求項６】
Ｔ細胞悪性疾患の細胞がブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）を発現することを特徴とする、請求項１記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２００６年５月１８日提出の同時係属中の特許仮出願第６０／８０１，０７４号および２００６年１２月１２日提出の第６０／８６９，６６４号の恩典を主張し、これらは参照により本明細書に組み入れられる。
【０００２】
発明の分野
本発明は、細胞内キナーゼ阻害剤およびそれらの治療的使用に関する。
【背景技術】
【０００３】
発明の背景
細胞内キナーゼは免疫系の細胞において重要な機能をはたす。例えば、インターロイキン−２誘導性チロシンキナ−ゼ（ＩＴＫ）はＴ細胞の発生および分化において重要な役割を果たし；ホスホリパーゼＣγ１（ＰＬＣγ１）および活性化Ｔ細胞核因子（ＮＦＡＴ）を介してＩＬ−２産生を調節し；Ｔｈ２細胞分化を仲介し；Ｔ細胞のリンパ器官への移動および動員を調節する。ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）はＢリンパ細胞の成長および分化を調節するシグナル伝達系路に関与する。ＢＴＫは糖タンパク質ＶＩ／Ｆｃ受容体γ鎖（ＧＰＶＩ−ＦｃＲγ）結合コラーゲン受容体シグナリング経路を調節することにより血小板生理学にも関与する。これらの理由により、細胞内キナーゼの阻害剤は、血液細胞悪性疾患、固形腫瘍を治療するためや、例えば、自己免疫障害または臓器移植の患者において免疫系を抑制するために有用である。細胞内キナーゼ阻害剤は、血栓塞栓症のリスクを予防または軽減するためにも有用である。
【発明の概要】
【０００４】
［請求項１０１］
ＤＫＣ三つ組キナーゼ活性部位に結合するタンパク質キナーゼ阻害剤であって、
（ａ）キナーゼ活性部位における触媒二つ組のリシンのアミノ基に対し水素結合距離内のキナーゼ活性部位に配置されるプロトン受容体；
（ｂ）キナーゼ活性部位における触媒二つ組のアスパラギン酸に隣接する水素結合における引き抜き可能なプロトンであって、引き抜き可能なプロトンの除去により、エノール／エノラートまたはチオール／チオラートまたはエナミンへの電子転位が可能な共役系が生じる引き抜き可能なプロトン；
（ｃ）さらなる電子転位によってβ脱離が起こり、それにより阻害剤におけるマイケル受容体が生成される脱離基であって、阻害剤とキナーゼの少なくとも一つの配座はマイケル受容体部分がシステイン求核体から３〜１０Åの距離内に位置するような配座であり、酵素のマイケル付加物を形成する反応を生じる、脱離基；
（ｄ）キナーゼのヒンジ領域、いくつかの疎水性残基、親水性残基、およびその組み合わせからなる群より選択される、ＡＴＰ結合部位の一部に対する親和性を有するキナーゼ結合部分を含み、
ただし
【０００５】
【化１】
2016040248.tif 000002
【０００６】
ではなく、かつインビトロキナーゼアッセイにおいてＩＴＫを０．０００８５μＭ〜１μＭのＩＣ５０で阻害し、かつ／またはＢＴＫを０．０００７２μＭ〜１μＭのＩＣ５０で阻害する、タンパク質キナーゼ阻害剤。
［請求項１０２］
キナーゼ結合部分が適当な疎水性アリール、ヘテロアリールまたはアルキル基を有するゲートキーパー残基でキナーゼと接触する、請求項１０１記載のタンパク質キナーゼ阻害剤。
［請求項１０３］
キナーゼ結合部分が疎水性アリール、ヘテロアリールまたはアルキル基を有するゲートキーパー残基を回避して内部疎水性部位に接近する、請求項１０１記載のタンパク質キナーゼ阻害剤。
［請求項１０４］
キナーゼ結合部分が、阻害剤のアリールまたはヘテロアリール基にある水素結合受容体および供与体を通じて、主鎖アミド部分への水素結合によりヒンジ領域でキナーゼに接触する、請求項１０１記載のタンパク質キナーゼ阻害剤。
［請求項１０５］
キナーゼ結合部分が少なくとも一つの活性部位疎水性残基と相互作用し、それにより全体の結合エネルギーが高まる、請求項１０１記載のタンパク質キナーゼ阻害剤。
［請求項１０６］
下記の構造式を有する請求項１０１記載のタンパク質キナーゼ阻害剤、またはその薬学的に許容される塩：
【０００７】
【化２】
2016040248.tif 000003
【０００８】
式中、
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は独立して水素または置換されていてもよいＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ９は
【０００９】
【化３】
2016040248.tif 000004
【００１０】
【化４】
2016040248.tif 000005
【００１１】
から選択され；かつ
Ｒ１０は水素、−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、または−ＮＣＯである。
［請求項１０７］
下記の構造式を有する請求項１０１記載のタンパク質キナーゼ阻害剤、またはその薬学的に許容される塩：
【００１２】
【化５】
2016040248.tif 000006
【００１３】
式中、
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は前述の定義のとおりであり；
Ｒ１１およびＲ１２は水素、−ＯＣＨ３、ハロゲン、−ＮＯ２、−ＣＮ、−ＣＦ３、−ＮＣＯＲ’（式中Ｒ’は水素またはＣ１−Ｃ４アルキルである）、フェニルオキシ、−ＯＣＦ３、−ＮＲ’Ｒ’’（式中Ｒ’およびＲ’’は独立に水素またはＣ１−Ｃ４アルキルである）、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、および−ＳＯ２Ｒ’（式中Ｒ’は水素またはＣ１−Ｃ４アルキルである）から独立に選択され；かつ
Ｒ１３は水素、Ｃ１−Ｃ４アルキル、
【００１４】
【化６】
2016040248.tif 000007
【００１５】
である。
［請求項１０８］
下記の構造式を有する請求項１０１記載のタンパク質キナーゼ阻害剤、またはその薬学的に許容される塩：
【００１６】
【化７】
2016040248.tif 000008
【００１７】
式中、Ｒ１およびＲ２は（ａ）独立に水素、置換されていてもよいＣ１−Ｃ６アルキル、ピペリジン、もしくはフラニルであるか；または（ｂ）それらが結合している窒素原子と一緒になって、置換されていてもよいアリールに融合してもしなくてもよい（ｉ）５〜７員の置換されていてもよいアリール、（ｉｉ）５〜７員の置換されていてもよいヘテロアリール、もしくは（ｉｉｉ）５〜７員の置換されていてもよい複素環を形成する。
［請求項１０９］
下記の構造式を有する請求項１０１記載のタンパク質キナーゼ阻害剤：
【００１８】
【化８】
2016040248.tif 000009
【００１９】
式中、
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、およびＲ１１は前述の定義のとおりである。
［請求項１１０］
下記の構造式を有する請求項１０１記載のタンパク質キナーゼ阻害剤、またはその薬学的に許容される塩：
【００２０】
【化９】
2016040248.tif 000010
【００２１】
式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は前述の定義のとおりであり；
Ｒ１４は水素または＝Ｏであり；かつ
ＤはＣＨまたはＮＨである。
［請求項１１１］
下記の構造式を有する請求項１０１記載のタンパク質キナーゼ阻害剤、またはその薬学的に許容される塩：
【００２２】
【化１０】
2016040248.tif 000011
【００２３】
式中、
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は前述の定義のとおりであり；かつ
Ｒ１およびＲ２は独立に水素、Ｃ１−Ｃ４アルキル、
【００２４】
【化１１】
2016040248.tif 000012
【００２５】
（式中Ｒ１５はハロゲンまたはＣ１−Ｃ４アルキルであり、かつＲ１６はＣ１−Ｃ４アルキルである）であるか、またはＲ１およびＲ２はそれらが結合している窒素と一緒になって
【００２６】
【化１２】
2016040248.tif 000013
【００２７】
【化１３】
2016040248.tif 000014
【００２８】
（式中Ｒ１７およびＲ１８は独立に水素または−ＯＣＨ３である）、
【００２９】
【化１４】
2016040248.tif 000015
【００３０】
（式中Ｒ１およびＲ２は独立に水素またはＣ１−Ｃ４アルキルである）、
【００３１】
【化１５】
2016040248.tif 000016
【００３２】
（式中ｎ＝１〜４）、およびハロゲンで置換されていてもよいフェニル−Ｃ１−Ｃ４アルキルから選択されるアリール基を形成する。
［請求項１１２］
下記の構造式を有する請求項１０１記載のタンパク質キナーゼ阻害剤、またはその薬学的に許容される塩：
【００３３】
【化１６】
2016040248.tif 000017
【００３４】
式中、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は前述の定義のとおりである。
［請求項１１３］
下記の構造式を有する請求項１０１記載のタンパク質キナーゼ阻害剤、またはその薬学的に許容される塩：
【００３５】
【化１７】
2016040248.tif 000018
【００３６】
式中、
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は前述の定義のとおりであり；かつ
Ｒ１は水素であり、Ｒ２は
【００３７】
【化１８】
2016040248.tif 000019
【００３８】
である（式中Ｒ１９は水素および
【００３９】
【化１９】
2016040248.tif 000020
【００４０】
から選択される）か；または
Ｒ１およびＲ２はそれらが結合している窒素と一緒になって
【００４１】
【化２０】
2016040248.tif 000021
【００４２】
であり；
ＡはＮまたはＯであり；
Ｒ２０は一つまたは複数のハロゲンで置換されていてもよいフェニル−Ｃ１−Ｃ４アルキル、水素、Ｃ１−Ｃ４アルキル、アミノＣ１−Ｃ４アルキル、
【００４３】
【化２１】
2016040248.tif 000022
【００４４】
であり；
Ｒ１７およびＲ１８は独立に水素または−ＯＣＨ３であり；
Ｒ２１は−ＣＯＮＲ’Ｒ’’、−ＣＯＲ’、
【００４５】
【化２２】
2016040248.tif 000023
【００４６】
であり；かつ
Ｒ’およびＲ’’は水素およびＣ１−Ｃ４アルキルから独立に選択される。
［請求項１１４］
下記の構造式を有する請求項１０１記載のタンパク質キナーゼ阻害剤、またはその薬学的に許容される塩：
【００４７】
【化２３】
2016040248.tif 000024
【００４８】
式中、
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は前述の定義のとおりであり；
Ｒ２２は水素、Ｃ１−Ｃ４アルキル、−ＮＲ’Ｒ’’、−ＣＯＨ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮＲ’Ｒ’’、および−ＣＯＮＨＲ’から選択され；かつ
Ｒ’およびＲ’’は前述の定義のとおりである。
［請求項１１５］
下記の構造式を有する請求項１０１記載のタンパク質キナーゼ阻害剤、またはその薬学的に許容される塩：
【００４９】
【化２４】
2016040248.tif 000025
【００５０】
式中、
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｇ、およびＧ’は前述の定義のとおりであり；
Ｒ２３は水素、−ＮＲ’Ｒ’’Ｃ１−Ｃ４直鎖アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルキル、フェニル−Ｃ１−Ｃ４アルキル、−ＣＯＮＨ２、または−ＣＯＲ’Ｒ’’であり；かつ
Ｒ’およびＲ’’は前述の定義のとおりである。
［請求項１１６］
下記の構造式を有する請求項１０１記載のタンパク質キナーゼ阻害剤、またはその薬学的に許容される塩：
【００５１】
【化２５】
2016040248.tif 000026
【００５２】
式中、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は前述の定義のとおりであり、かつＲ２４は
【００５３】
【化２６】
2016040248.tif 000027
【００５４】
である。
［請求項１１７］
下記の構造式を有する請求項１０１記載のタンパク質キナーゼ阻害剤、またはその薬学的に許容される塩：
【００５５】
【化２７】
2016040248.tif 000028
【００５６】
式中、
Ｌは
【００５７】
【化２８】
2016040248.tif 000029
【００５８】
であり、かつＲ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は前述の定義のとおりである。
［請求項１１８］
下記の構造式を有する請求項１０１記載のタンパク質キナーゼ阻害剤、またはその薬学的に許容される塩：
【００５９】
【化２９】
2016040248.tif 000030
【００６０】
式中、Ｔ、Ｕ、Ｖ、およびＷは水素；ハロゲン；−Ｏ；Ｃ１−Ｃ３アルキル；およびＣ１−Ｃ３アルキルオキシから独立に選択され；かつＲ２５は水素またはＣ１−Ｃ３アルキルである。
［請求項１１９］
下記の構造式を有する請求項１０１記載のタンパク質キナーゼ阻害剤、またはその薬学的に許容される塩：
【００６１】
【化３０】
2016040248.tif 000031
【００６２】
式中、Ｔ、Ｕ、Ｖ、およびＷは水素；ハロゲン；−Ｏ；Ｃ１−Ｃ３アルキル；およびＣ１−Ｃ３アルキルオキシから独立に選択され；かつＲ８は水素またはＣ１−Ｃ３アルキルである。
［請求項１２０］
下記の構造式を有する請求項１０１記載のタンパク質キナーゼ阻害剤、またはその薬学的に許容される塩：
【００６３】
【化３１】
2016040248.tif 000032
【００６４】
式中、Ｔ、Ｕ、Ｖ、およびＷは水素；ハロゲン；−Ｏ；Ｃ１−Ｃ３アルキル；およびＣ１−Ｃ３アルキルオキシから独立に選択され；かつＲ８は水素またはＣ１−Ｃ３アルキルである。
［請求項１２１］
下記の構造式を有する請求項１０１記載のタンパク質キナーゼ阻害剤、またはその薬学的に許容される塩：
【００６５】
【化３２】
2016040248.tif 000033
【００６６】
式中、ＤはＳ、Ｏ、またはＮＨである。
［請求項１２２］
下記の構造式を有する請求項１０１記載のタンパク質キナーゼ阻害剤、またはその薬学的に許容される塩：
【００６７】
【化３３】
2016040248.tif 000034
【００６８】
式中、Ｄは前述の定義のとおりである。
［請求項１２３］
下記の構造式を有する請求項１０１記載のタンパク質キナーゼ阻害剤、またはその薬学的に許容される塩：
【００６９】
【化３４】
2016040248.tif 000035
【００７０】
式中、Ｇ’はＮＨまたはＣＨである。
［請求項１２４］
（ａ）薬学的に許容される媒体；および
（ｂ）請求項１０１記載の化合物
を含む組成物。
［請求項１２５］
（ａ）請求項１０１記載の化合物；および
（ｂ）ＤＫＣ三つ組キナーゼドメイン
を含む付加物。
［請求項１２６］
キナーゼ活性を阻害する方法であって、ＤＫＣ三つ組キナーゼを請求項１０１記載の化合物またはその薬学的に許容される塩と接触させ、それによりＤＫＣ三つ組キナーゼのキナーゼ活性が阻害される工程を含む、方法。
［請求項１２７］
接触が無細胞系で起こる、請求項１２６記載の方法。
［請求項１２８］
接触が細胞内で起こる、請求項１２６記載の方法。
［請求項１２９］
細胞がインビトロにある、請求項１２８記載の方法。
［請求項１３０］
細胞が患者内にある、請求項１２９記載の方法。
［請求項１３１］
患者が移植臓器、自己免疫疾患、または血液細胞悪性疾患を有する、請求項１３０記載の方法。
［請求項１３２］
ＤＫＣ三つ組キナーゼに結合している請求項１０１記載のタンパク質キナーゼ阻害剤を含む複合体。
［請求項１３３］
ＤＫＣ三つ組キナーゼがＩＴＫまたはＢＴＫである、請求項１３２記載の複合体。
［請求項１３４］
ＤＫＣ三つ組キナーゼに結合している請求項１０１記載のタンパク質キナーゼ阻害剤からなる、請求項１３２記載の複合体。
［請求項１３５］
ＤＫＣ三つ組キナーゼがＩＴＫまたはＢＴＫである、請求項１３４記載の複合体。
［請求項１３６］
ＤＫＣ三つ組キナーゼがＩＴＫまたはＢＴＫである、請求項１０１記載のタンパク質キナーゼ阻害剤。
［請求項１３７］
ＤＫＣ三つ組キナーゼドメインがＩＴＫまたはＢＴＫキナーゼドメインである、請求項１２５記載の付加物。
［請求項１３８］
ＤＫＣ三つ組キナーゼがＩＴＫまたはＢＴＫである、請求項１２６記載の方法。
［請求項１３９］
ＤＫＣ三つ組キナーゼを阻害するための薬物の調製における、請求項１０１〜１２３のいずれか一項記載の化合物の使用。
［請求項１４０］
ＤＫＣ三つ組キナーゼがＩＴＫまたはＢＴＫである、請求項１３９記載の使用。
発明の詳細な説明
本発明は、本明細書に開示するインビトロキナーゼアッセイにおいて、細胞内キナーゼ、特にＩＴＫおよびＢＴＫを、１μＭ以下のＩＣ５０で阻害する化合物を提供する。本発明は、薬学的組成物および化合物の治療的使用法も提供する。治療することができる患者には、血液細胞悪性疾患、固形腫瘍、自己免疫障害、および移植臓器を有するものが含まれる。
【図面の簡単な説明】
【００７１】
【図１】ＩＴＫキナーゼドメインをバイオセンサー上に固定し、それが小分子に結合および解離する能力について評価した、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）実験の結果を示す図である。
【図２】ヒトＩＴＫ（配列番号：１）およびＢＴＫ（配列番号：２）の配列を示す図である。
【図３】キナーゼドメインの配列を示す図である。太字のアミノ酸＝ヒンジ；太字の下線付きアミノ酸＝ゲートキーパー；イタリック体で太字のアミノ酸＝Ｃｙｓ４４２等価物。
【発明を実施するための形態】
【００７２】
文献および特許データベースの再検討により、ＩＴＫまたはＢＴＫキナーゼを阻害する化合物の存在が明らかとなった。しかし、これらの化合物は、本明細書に開示する化合物とは著しく異なる。いくつかの場合に、化合物はピロロピリジンである（例えば、米国２００５／０２１５５８２号）。他の場合に、化合物は化合物のチアゾリルファミリーに属するジメチル安息香酸メチルである（例えば、米国特許第２００４／００７７６９５号）。すべての場合に、これらの出版物で報告された化合物は、以下のパラメーターに基づき、本明細書に開示する化合物とは異なる：化合物は本出願において示す一般構造に対応しておらず；キナーゼ結合部位で見られ、本明細書に記載の最適な化合物阻害能力に必須のアミノ酸三つ組ＤＫＣを必要とせず；脱離を起こさず；かつキナーゼ結合ポケットに共有結合しない。
【００７３】
ＩＴＫを阻害する本発明の化合物を、例えば、Ｔ細胞悪性疾患を治療するために用いることができる。本発明の好ましい化合物は、ＩＴＫおよびＢＴＫの両方を各酵素について１μＭ以下のＩＣ５０で阻害する。そのような化合物は、例えば、ＴおよびＢ細胞悪性疾患の両方、ならびにＥＧＦＲまたはＨＥＲ陽性腫瘍を治療するために用いることができる。
【００７４】
キナーゼのＴｅｃファミリーはＳｒｃ相同ドメイン２（ＳＨ２）、ＳＨ３および触媒キナーゼドメインからなる共通のサブユニット構造を有する。さらに、これらはＴｅｃ相同領域（ＴＨ）およびプレクストリン相同（ＰＨ）ドメインの存在によって一義的に特定される。キナーゼのＴｅｃファミリーに対して記載される４つの公知の結晶構造がある。これらには（ａ）リン酸化および非リン酸化スタウロスポリン結合ＩＴＫを表す２つの構造（ＰＤＢコード１ＳＭ２、１ＳＮＵ）；（ｂ）ＩＴＫの非リン酸化アポ型の１つの構造（ＰＤＢコード１ＳＮＸ）、および（ｃ）ＢＴＫの非リン酸化アポ型の１つの構造（Ｍａｏ  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．  ２００１，  ２７６，  ４１４３５−４１４４３）が含まれる。説明を明白にするために、本開示はこれらのキナーゼ構造をＡＴＰ結合部位に注目して表し、（ａ）および（ｂ）のほぼ同じＩＴＫ構造のものは参照により本明細書に組み入れられる（Ｂｒｏｗｎ  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．  ２００４，  ２７９，  １８７２７−１８７３２）。統一するために、タンパク質データバンクで表記されているこれらのキナーゼ構造の残基番号を、キナーゼドメインを説明するために本文書の全体を通して組み入れている。ヒトＩＴＫのアミノ酸配列を配列番号：１に示す。ヒトＢＴＫのアミノ酸配列を配列番号：２に示す。他のキナーゼおよび他の原料からの配列における同種の残基は異なる番号がつくこともある。
【００７５】
図２を参照して、ＩＴＫキナーゼドメイン（残基３５７〜６２０）は２つの成分：Ｎ末端ローブ（残基３５７〜４３７）およびＣ末端ローブ（残基４３８〜６２０）に分解することができる。ほとんどのキナーゼと同様、２つのローブの間の連結領域は下記の柔軟なヒンジ領域であり、触媒活性部位の一部を形成する。Ｃヘリックスの規則正しい特性により、Ｇｌｕ４０６、Ｌｙｓ３９１およびＡｓｐ５００の触媒として重要な残基がタンパク質キナーゼの活性型に典型的な配向に並ぶ。キナーゼでよく見られるＧｌｙを多く含むループ（残基３６２〜３７８）は、活性キナーゼに典型的な伸張し、開いた構造をとる。
【００７６】
ＡＴＰ結合部位の境界は下記の残基で区切られている：（ａ）グリシンを多く含むループ（Ｇｌｙ３７０、Ｓｅｒ３７１、Ｇｌｙ３７２、Ｇｌｎ３７３、Ｐｈｅ３７４およびＧｌｙ３７５）；（ｂ）ヒンジ領域（Ｐｈｅ４３５、Ｇｌｕ４３６、Ｐｈｅ４３７、Ｍｅｔ４３８、Ｇｌｕ４３９、Ｈｉｓ４４０、Ｇｌｙ４４１およびＣｙｓ４４２）；ならびに（ｃ）触媒残基Ｌｙｓ３９１およびＡｓｐ５００。加えて、活性部位はＡｌａ３８９、Ｉｌｅ３６９、Ｖａｌ３７７、Ｖａｌ４１９、およびＬｅｕ４８９を含むいくつかの他の疎水性残基ならびに親水性残基Ｓｅｒ４９９も含む。
【００７７】
他のキナーゼと同様に、ＩＴＫのヒンジ領域は、それぞれ水素結合受容体および供与体部位の可能性があるものとして、２つの主鎖カルボニルおよび１つの主鎖アミノ基を含む。同様の主鎖相互作用がキナーゼとＡＴＰのアデニン塩基との相互作用において観察され、いくつかの競合的阻害剤がこの概念に従って設計されている。ヒンジ領域のＮ末端に「ゲートキーパー」残基、Ｐｈｅ４３５がある。この残基は内部疎水性ポケットへの接近を阻止し、同時に芳香族または疎水性基に対して相互作用する可能性がある部位を提供する。この「ゲートキーパー」残基はＩＴＫとＢＴＫとの間の著しい相違である。ＢＴＫとＩＴＫとの間には全配列の強い同一性が見られるが、ＢＴＫの活性部位にはゲートキーパーとして小さいトレオニン残基があることで、後者がＳｒｃ／Ａｂｌ／ＥＧＦＲなどのいくつかのキナーゼの活性部位に対し重要な類似性を示す正当な理由となる。嵩高いＰｈｅゲートキーパーがないことで、これらのキナーゼの内部疎水性ポケットへの接近が可能となり、これはアロステリック阻害剤の設計のため、および疎水性ファーマコフォアの付加を通じてＡＴＰ競合的阻害剤の親和性を改善するために活用されてきた事実である。
【００７８】
定義
「アルキル」は一価の直鎖または分枝飽和炭化水素基であり、置換されていても無置換でもよい。直鎖または分枝アルキルは典型的には１から１２個の間の炭素原子（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２個）を有する。低級アルキル、または「Ｃ１−Ｃ６アルキル」は１から６個の間の炭素原子（例えば、１、２、３、４、５、または６個）を有する。任意の置換基にはハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、Ｎ−アルキルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジアルキルアミノ、アルキルカルバモイル、アリールカルバモイル、アミノカルバモイル、Ｎ−アルキルアミノカルバモイル、Ｎ，Ｎ−ジアルキルアミノカルバモイル、アルキルスルホニルアミノ、アリールスルホニルアミノ、カルボキシ、カルボキシアルキル、Ｎ−アルキルカルボキサミド、Ｎ，Ｎ−ジアルキルカルボキサミド、アルキルチオ、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、トリハロアルキルスルホニルアミノ（例えば、トリフルオロメチルスルホニルアミノ）、アリールチオ、アリールスルフィニル、アリールスルホニル、およびヘテロシクリルが含まれる。直鎖または分枝Ｃ１−Ｃ６アルキルの例は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｓｅｃ−ペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、イソペンチル、フルオロメチル、トリフルオロメチル、ヒドロキシブチル、ジメチルカルボキシアルキル、アミノアルキル、およびベンジルプロピルである。
【００７９】
「アシル」（または「アルキルカルボニル」）は−Ｃ（Ｏ）Ｒ８基であり、式中、Ｒ８は置換されていてもよい低級アルキルである。アシルの例には、アセチル、プロピオニル、ｎ−ブチリル、ｓｅｃ−ブチリル、ｔ−ブチリル、ヨードアセチル、およびベンジルアセチルが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【００８０】
「アシルオキシ」は−ＯＣ（Ｏ）Ｒ８基であり、式中、Ｒ８は置換されていてもよい低級アルキルである。アシルオキシの例には、アセトキシ、プロピオニルオキシ、ブチリルオキシ、トリフルオロアセトキシ、およびジヨードブチリルオキシが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【００８１】
「アルコキシ」は−ＯＲ８基であり、式中、Ｒ８は置換されていてもよい低級アルキルである。アルコキシの例には、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、２−プロポキシ、ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ、フルオロメトキシ、およびヨードエトキシが含まれる。
【００８２】
「アルキルアミノ」は−ＮＲ７Ｒ８基であり、式中、Ｒ７は水素または置換されていてもよい低級アルキルであり、かつＲ８は置換されていてもよい低級アルキルである。アルキルアミノ基の例は、メチルアミノ、エチルアミノ、イソプロピルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、およびトリフルオロメチルアミノである。
【００８３】
「アルキルアミノカルボニル」（または「アルキルカルバモイル」）は−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７Ｒ８基であり、式中、Ｒ７は水素または置換されていてもよい低級アルキルであり、かつＲ８は置換されていてもよい低級アルキルである。アルキルアミノカルボニルの例には、メチルアミノカルボニル、ジメチルアミノカルボニル、ｔ−ブチルアミノカルボニル、ｎ−ブチルアミノカルボニル、イソ−プロピルアミノカルボニル、およびトリフルオロメチルアミノカルボニルが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【００８４】
「アルキルアミノスルホニル」は−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ７Ｒ８基であり、式中、Ｒ７は水素または置換されていてもよい低級アルキルであり、かつＲ８は置換されていてもよい低級アルキルである。アルキルアミノスルホニルの例には、メチルアミノスルホニル、ジメチルアミノスルホニル、およびトリヨードメチルアミノスルホニルが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【００８５】
「アルコキシカルボニル」または「アルキルエステル」は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ８基であり、式中、Ｒ８は置換されていてもよい低級アルキルである。アルコキシカルボニルの例には、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ｓｅｃ−ブトキシカルボニル、イソプロピルオキシカルボニル、およびジフルオロメトキシカルボニルが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【００８６】
「アルキルカルボニルアミノ」は−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）Ｒ８基であり、式中、Ｒ７は水素または置換されていてもよい低級アルキルであり、かつＲ８は置換されていてもよい低級アルキルである。アルキルカルボニルアミノの例には、メチルカルボニルアミノ、イソ−プロピルカルボニルアミノ、およびｔ−ブチルカルボニルアミノが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【００８７】
「アルキルカルボキサミド」は−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７Ｒ８基であり、式中、Ｒ７は水素または置換されていてもよい低級アルキルであり、かつＲ８は置換されていてもよい低級アルキルである。アルキルカルボキサミドの例は、メチルカルボキサミド、エチルカルボキサミド、イソプロピルカルボキサミド、およびｎ−プロピルカルボキサミドである。
【００８８】
「アルキルスルホニル」は−Ｓ（Ｏ）２Ｒ８基であり、式中、Ｒ８は置換されていてもよい低級アルキルである。アルキルスルホニルの例には、メチルスルホニル、トリフルオロメチルスルホニル、およびプロピルスルホニルが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【００８９】
「アルキルスルホニルアミノ」は−ＮＲ７Ｓ（Ｏ）２Ｒ８基であり、式中、Ｒ７は水素または置換されていてもよい低級アルキルであり、かつＲ８は置換されていてもよい低級アルキルである。アルキルスルホニルアミノの例には、メチルスルホニルアミノ、プロピルスルホニルアミノ、およびトリフルオロメチルスルホニルアミノが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【００９０】
「アリール」は１つの個々の芳香環、または縮合環の少なくとも１つが芳香族である２つもしくは３つの縮合環の一価芳香族炭素環基である。アリールは一つまたは複数の環上で、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、Ｎ−アルキルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジアルキルアミノ、アルキルカルバモイル、アリールカルバモイル、アミノカルバモイル、Ｎ−アルキルアミノカルバモイル、Ｎ，Ｎ−ジアルキルアミノカルバモイル、アルキルスルホニルアミノ、アリールスルホニルアミノ、カルボキシ、カルボキシアルキル、Ｎ−アルキルカルボキサミド、Ｎ，Ｎ−ジアルキルカルボキサミド、アルキルチオ、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、トリフルオロメチルスルホニルアミノ、アリールチオ、アリールスルフィニル、アリールスルホニル、ヒドロキシアルキル、アルコキシアルキル、アリールオキサルキル、アミノアルキル、Ｎ−アルキルアミノアルキル、Ｎ，Ｎ−ジアルキルアミノアルキル、アルキルカルバモイルアルキル、アリールカルバモイルアルキル、アミノカルバモイルアルキル、Ｎ−アルキルアミノカルバモイルアルキル  Ｎ，Ｎ−ジアルキルアミノカルバモイルアルキル、アルキルスルホニルアミノアルキル、アリールスルホニルアミノアルキル、アルキルカルボキシ、アルキルカルボキシアルキル、Ｎ−アルキルカルボキサミンドアルキル、Ｎ，Ｎ−ジアルキルカルボキサミンドアルキル、アルキルチオアルキル、アルキルスルフィニルアルキル、アルキルスルホニルアルキル、トリフルオロメチルスルホニルアミノアルキル、アリールチオアルキル、アリールスルフィニルアルキル、およびアリールスルホニルアルキルの一つまたは複数で置換されていてもよい。アリールの例は、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダニル、インダノニル、テトラリニル、テトラロニル、フルオレノニル、フェナントリル、アントリル、およびアセナフチルである。
【００９１】
「アリールアルコキシカルボニル」または「アリールアルキルエステル」は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ８Ｘ基であり、式中、Ｒ８は置換されていてもよい低級アルキルであり、かつＸは置換されていてもよいアリールである。アリールオキシカルボニル基の例には、ベンジルエステル、フェニルエチルエステル、およびジメチルフェニルエステルが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【００９２】
「アリールアルキルカルバモイル」は−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ８Ｘ基であり、式中、Ｒ８は置換されていてもよい低級アルキルであり、かつＸは置換されていてもよいアリールである。アリールアルキルカルバモイルの例には、ベンジルカルバモイル、フェニルエチルカルバモイル、およびシアノフェニルカルバモイルが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【００９３】
「アリールアルキルカルボニル」（または「アラルキルカルボニル」）は−Ｃ（Ｏ）Ｒ８Ｘ基であり、式中、Ｒ８は置換されていてもよい低級アルキルであり、かつＸは置換されていてもよいアリールである。アリールアルキルカルボニル基の例には、フェニルアセチルおよびフルオロフェニルアセチルが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【００９４】
「アリールアミノカルボニル」（または「アリールカルバモイル」）は−Ｃ（Ｏ）ＮＸＸ’基であり、式中、Ｘは置換されていてもよいアリールであり、かつＸ’は水素または置換されていてもよいアリールである。アリールアミノカルボニルの例には、フェニルアミノカルボニル、メトキシフェニルアミノカルボニル、ジフェニルアミノカルボニル、およびジメトキシフェニル−アミノカルボニルが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【００９５】
「アリールアミノスルホニル」は−Ｓ（Ｏ）２ＮＸＸ’基であり、式中、Ｘは置換されていてもよいアリールであり、かつＸ’は水素または置換されていてもよいアリールである。アリールアミノスルホニルの例には、フェニルアミノスルホニル、メトキシフェニルアミノスルホニル、およびトリヨードメチルアミノスルホニルが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【００９６】
「アリールカルボニル」は−Ｃ（Ｏ）Ｘ基であり、式中、Ｘは置換されていてもよいアリールである。アリールカルボニル基の例には、ベンゾイル、ナフトイル、およびジフルオロフェニルカルボニルが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【００９７】
「アリールカルボニルアミノ」は−ＮＨＣ（Ｏ）Ｘ基であり、式中、Ｘは置換されていてもよいアリールである。アリールカルボニルアミノの例には、フェニルカルボニルアミノ、トシルカルボニルアミノ、およびシアノフェニルカルボニルアミノが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【００９８】
「アリールオキシ」は−ＯＸであり、式中、Ｘは置換されていてもよいアリールである。アリールオキシの例には、フェニルオキシ、ナフチルオキシ、テトラヒドロナフチルオキシ、インダニルオキシ、インダノニルオキシ、ビフェニルオキシ、テトラリニルオキシ、テトラロニルオキシ、フルオレノニルオキシ、フェナントリルオキシ、アントリルオキシ、およびアセナフチルオキシが含まれる。
【００９９】
「アリールオキシカルボニル」または「アリールエステル」は−Ｃ（Ｏ）ＯＸ基であり、式中、Ｘは置換されていてもよいアリールである。アリールオキシカルボニル基の例には、フェニルエステル、ナフチルエステル、ジメチルフェニルエステル、およびトリフルオロフェニルエステルが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【０１００】
「アリールスルホニル」は−Ｓ（Ｏ）２Ｘ基であり、式中、Ｘは置換されていてもよいアリールである。アリールスルホニルの例には、フェニルスルホニル、ニトロフェニルスルホニル、メトキシフェニルスルホニル、および３，４，５−トリメトキシフェニルスルホニルが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【０１０１】
「アリールスルホニルアミノ」は−ＮＳ（Ｏ）２Ｘ基であり、式中、Ｘは置換されていてもよいアリールである。アリールスルホニルアミノの例には、フェニルスルホニルアミノ、ナフチルスルホニルアミノ、２−ブトキシフェニルスルホニルアミノ、４−クロロフェニルスルホニルアミノ、２，５−ジエトキシスルホニルアミノ、４−ヘキシルオキシフェニルスルホニルアミノ、４−メチルフェニルスルホニルアミノ、ナフチルスルホニルアミノ、４−メトキシフェニルスルホニルアミノ、Ｎ−メチルフェニルスルホニルアミノ、および４−シアノフェニルスルホニルアミノ、フェニルスルホニルアミノ、４−メチルフェニルスルホニルアミノ、ナフチルスルホニルアミノ、フェニルスルホニルアミノ、および４−メチルフェニルスルホニルアミノが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【０１０２】
「アリールスルホニルオキシ」は−ＯＳ（Ｏ）２Ｘ基であり、式中、Ｘは置換されていてもよいアリールである。アリールスルホニルオキシの例には、ベンゼンスルホニルオキシおよび４−クロロ−ベンゼンスルホニルオキシが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【０１０３】
「シクロアルキル」は、環あたり炭素３から７個の一つまたは複数の環、好ましくは一つからなる一価飽和炭素環基で、ヒドロキシル、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、Ｎ−アルキルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジアルキルアミノ、アルキルカルバモイル、アリールカルバモイル、アミノカルバモイル、Ｎ−アルキルアミノカルバモイル、Ｎ，Ｎ−ジアルキルアミノカルバモイル、アルキルスルホニルアミノ、アリールスルホニルアミノ、カルボキシ、カルボキシアルキル、Ｎ−アルキルカルボキサミド、Ｎ，Ｎ−ジアルキルカルボキサミド、アルキルチオ、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、トリフルオロメチルスルホニルアミノ、アリールチオ、アリールスルフィニル、アリールスルホニル、ヒドロキシアルキル、アルコキシアルキル、アリールオキサルキル、アミノアルキル、Ｎ−アルキルアミノアルキル、Ｎ，Ｎ−ジアルキルアミノ  アルキル、アルキルカルバモイルアルキル、アリールカルバモイルアルキル、アミノカルバモイルアルキル、Ｎ−アルキルアミノカルバモイルアルキル  Ｎ，Ｎ−ジアルキルアミノカルバモイルアルキル、アルキルスルホニルアミノアルキル、アリールスルホニルアミノアルキル、アルキルカルボキシ、アルキルカルボキシアルキル、Ｎ−アルキルカルボキサミンドアルキル、Ｎ，Ｎ−ジアルキルカルボキサミンドアルキル、アルキル  チオアルキル、アルキルスルフィニルアルキル、アルキルスルホニルアルキル、トリフルオロメチルスルホニルアミノアルキル、アリールチオアルキル、アリールスルフィニルアルキル、およびアリールスルホニルアルキルの一つまたは複数で置換されていてもよい。シクロアルキルの例は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、アダマンチル、シクロオクチル、シクロヘプチル、テトラヒドロ−ナフタレン、メチレンシロヘキシル、インダニル、インデニル、およびフルオレニルである。
【０１０４】
「シクロアルキルカルボニル」は−Ｃ（Ｏ）Ｒ基であり、式中、Ｒは置換されていてもよいシクロアルキル基である。シクロアルキルカルボニル基の例には、シクロブタノイル、シクロペンタノイル、シクロヘキサノイル、およびトリフルオロシクロペンタノイルが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【０１０５】
「ハロゲン」にはフッ素、塩素、臭素、およびヨウ素が含まれる。
【０１０６】
「ヘテロアリール」は、窒素、酸素、ケイ素、および硫黄から独立に選択される一つまたは複数のヘテロ原子を含む、環あたり原子４から８個の一つまたは複数の環、好ましくは１から３つの環を有する一価芳香環基である。ヘテロアリールは一つまたは複数の環上で、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、Ｎ−アルキルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジアルキルアミノ、アルキルカルバモイル、アリールカルバモイル、アミノカルバモイル、Ｎ−アルキルアミノカルバモイル、Ｎ，Ｎ−ジアルキルアミノカルバモイル、アルキルスルホニルアミノ、アリールスルホニルアミノ、カルボキシ、カルボキシアルキル、Ｎ−アルキルカルボキサミド、Ｎ，Ｎ−ジアルキルカルボキサミド、アルキルチオ、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、トリフルオロメチルスルホニルアミノ、アリールチオ、アリールスルフィニル、アリールスルホニル、ヒドロキシアルキル、アルコキシアルキル、アリールオキサルキル、アミノアルキル、Ｎ−アルキルアミノアルキル、Ｎ，Ｎ−ジアルキルアミノアルキル、アルキルカルバモイルアルキル、アリールカルバモイルアルキル、アミノカルバモイルアルキル、Ｎ−アルキルアミノカルバモイルアルキル  Ｎ，Ｎ−ジアルキルアミノカルバモイルアルキル、アルキルスルホニルアミノアルキル、アリールスルホニルアミノアルキル、アルキルカルボキシ、アルキルカルボキシアルキル、Ｎ−アルキルカルボキサミンドアルキル、Ｎ，Ｎ−ジアルキルカルボキサミンドアルキル、アルキルチオアルキル、アルキルスルフィニルアルキル、アルキルスルホニルアルキル、トリフルオロメチルスルホニルアミノアルキル、アリールチオアルキル、アリールスルフィニルアルキル、およびアリールスルホニルアルキルの一つまたは複数で置換されていてもよい。
【０１０７】
単環式環系ヘテロアリールの代表例には、アゼチジニル、アゼピニル、アジリジニル、ジアゼピニル、１，３−ジオキソラニル、ジオキサニル、ジチアニル、フリル、イミダゾリル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、イソチアゾリル、イソチアゾリニル、イソチアゾリジニル、イソキサゾリル、イソキサゾリニル、イソキサゾリジニル、モルホリニル、オキサジアゾリル、オキサジアゾリニル、オキサジアゾリジニル、オキサゾリル、オキサゾリニル、オキサゾリジニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピラニル、ピラジニル、ピラゾリル、ピラゾリニル、ピラゾリジニル、ピリジル、ピリミジニル、ピリダジニル、ピロリル、ピロリニル、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチオフェニル、テトラジニル、テトラゾリル、チアジアゾリル、チアジアゾリニル、チアジアゾリジニル、チアゾリル、チアゾリニル、チアゾリジニル、チオフェニル、チオモルホリニル、１，１−ジオキシドチオモルホリニル、チオピラニル、トリアジニル、トリアゾリル、およびトリチアニルが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【０１０８】
二環式環系には、アリール基、シクロアルキル基、またはもう一つのヘテロアリール単環式環系に縮合した任意の前述の単環式環系が含まれる。二環式環系の代表例には、ベンズイミダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチオフェニル、ベンズオキサゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾピラニル、ベンゾチオピラニル、ベンゾジオキシニル、１，３−ベンゾジオキソリル、シンノリニル、インダゾリル、インドリル、インドリニル、インドリジニル、ナフチリジニル、イソベンゾフラニル、イソベンゾチオフェニル、イソインドリル、イソインドリニル、イソキノリル、フタラジニル、ピラノピリジル、キノリル、キノリジニル、キノキサリニル、キナゾリニル、テトラヒドロイソキノリル、テトラヒドロキノリル、およびチオピラノピリジルが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【０１０９】
三環式環系には、アリール基、シクロアルキル基、またはヘテロアリール単環式環系に縮合した任意の前述の二環式環系が含まれる。三環式環系の代表例には、アクリジニル、カルバゾリル、カルボリニル、ジベンゾフラニル、ジベンゾチオフェニル、ナフトフラニル、ナフトチオフェニル、オキサントレニル、フェナジニル、フェノキサチイニル、フェノキサジニル、フェノチアジニル、チアントレニル、チオキサンテニル、およびキサンテニルが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【０１１０】
「ヘテロアリールアミノカルボニル」は−Ｃ（Ｏ）ＮＺＺ’基であり、式中、Ｚは置換されていてもよいヘテロアリールであり、かつＺ’は水素または置換されていてもよいヘテロアリールである。ヘテロアリールアミノカルボニルの例には、ピリジニルアミノカルボニル、およびチエニルアミノカルボニル、フラニルアミノカルボニルが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【０１１１】
「ヘテロアリールアミノスルホニル」は−Ｓ（Ｏ）２ＮＺＺ’基であり、式中、Ｚは置換されていてもよいヘテロアリールであり、かつＺ’は水素または置換されていてもよいヘテロアリールである。ヘテロアリールアミノスルホニルの例には、チエニルアミノスルホニル、ピペリジニルアミノスルホニル、フラニルアミノスルホニル、およびイミダゾリルアミノスルホニルが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【０１１２】
「ヘテロアリールカルボニル」は−Ｃ（Ｏ）Ｚ基であり、式中、Ｚは置換されていてもよいヘテロアリールである。ヘテロアリールカルボニル基の例には、ピリジノイル、３−メチルイソキサゾロイル、イソキサゾロイル、チエノイル、およびフロイルが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【０１１３】
「ヘテロアリールスルホニル」は−Ｓ（Ｏ）２Ｚ基であり、式中、Ｚは置換されていてもよいヘテロアリールである。ヘテロアリールスルホニルの例には、チエニルスルホニル、フラニルスルホニル、イミダゾリルスルホニル、およびＮ−メチルイミダゾリルスルホニルが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【０１１４】
「ヘテロアリールスルホニルオキシ」は−ＯＳ（Ｏ）２Ｚ基であり、式中、Ｚは置換されていてもよいヘテロアリールである。ヘテロアリールスルホニルオキシの一例はチエニルスルホニルオキシである。
【０１１５】
「複素環」は、窒素、酸素、ケイ素、および硫黄から独立に選択される一つまたは複数の複素原子をそれぞれ含む１、２、または３つの環を有する飽和または部分不飽和炭素環基である。複素環は無置換でもよく、または任意のもしくはすべての環上で、ハロゲン、アリール、ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、Ｎ−アルキルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジアルキルアミノ、アルキルスルホニルアミノ、アリールスルホニルアミノ、アルキルカルバモイル、アリールカルバモイル、アミノカルバモイル、Ｎ−アルキルアミノカルバモイル、Ｎ，Ｎ−ジアルキルアミノカルバモイル、カルボキシ、アルキルカルボキシ、Ｎ−アルキルカルボキサミド、Ｎ，Ｎ−ジアルキルカルボキサミド、アルキルチオ、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、トリフルオロメチルスルホニルアミノ、アリールチオ、アリールスルフィニル、アリールスルホニル、カルボキシアルキル、ヒドロキシアルキル、アルコキシアルキル、アリールオキサルキル、アミノアルキル、Ｎ−アルキルアミノアルキル、Ｎ，Ｎ−ジアルキルアミノアルキル、アルキルカルバモイルアルキル、アリールカルバモイルアルキル、アミノカルバモイルアルキル、Ｎ−アルキルアミノカルバモイルアルキル  Ｎ，Ｎ−ジアルキルアミノカルバモイルアルキル、アルキルスルホニルアミノアルキル、アリールスルホニルアミノアルキル、アルキルカルボキシアルキル、Ｎ−アルキルカルボキサミンドアルキル、Ｎ，Ｎ−ジアルキルカルボキサミンドアルキル、アルキルチオアルキル、アルキルスルフィニルアルキル、アルキルスルホニルアルキル、トリハロアルキルスルホニルアミノアルキル、アリールチオアルキル、アリールスルフィニルアルキル、およびアリールスルホニルアルキルの一つまたは複数で置換されていてもよい。複素環の例には、ピペラジニル、ピペリジニル、ピロリジニル、モルホリニル、チアモルホリニル、ピロリル、フタラミド、スクシナミド、およびマレイミドが含まれる。
【０１１６】
「ヘテロシクリルカルボニル」（または「ヘテロシクロカルボニル」）は−Ｃ（Ｏ）Ｍ’基であり、式中、Ｍ’は置換されていてもよい複素環である。ヘテロシクリルカルボニルの例には、ピペラジノイル、モルホリノイル、およびピロリジノイルが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【０１１７】
「ヘテロシクリルスルホニル」は−Ｓ（Ｏ）２Ｚ’基であり、式中、Ｍ’は置換されていてもよい複素環である。ヘテロシクリルスルホニルの例には、ピペリジニルスルホニルおよびピペラジニルスルホニルが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【０１１８】
「ヘテロシクリルスルホニルオキシ」は−ＯＳ（Ｏ）２Ｍ’基であり、式中、Ｍ’は置換されていてもよい複素環である。ヘテロシクリルスルホヒルオキシには、３，５，ジメチル−イソキサゾールスルホニルオキシおよびピロリジニルスルホニルオキシが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【０１１９】
化合物
本発明は、本明細書に記載の個別のメカニズム上の原理を利用する構造を有する、チロシンキナーゼ、特にＴｅｃ（例えば、ＩＴＫ、ＢＴＫ）、Ｓｒｃ（Ｓｒｃ、Ｌｃｋなど）およびＥＧＦＲキナーゼ（例えば、ＥＧＦＲ１、Ｈｅｒ  ２、Ｈｅｒ  ４）、ならびにＪａｋキナーゼ（例えば、Ｊａｋ３）を阻害する化合物を提供する。このメカニズムは、提唱される阻害化合物を酵素活性部位内で活性化する変換を誘発するために、ＩＴＫ結晶構造において酸塩基対残基Ｌｙｓ３９１およびＡｓｐ５００（本明細書において「触媒二つ組」と呼ぶ）として記載される、キナーゼ触媒機構の利用を提供する。この変換は脱離基を脱離して、活性部位システイン残基と共有結合付加物を形成しうる求電子中間体をインサイチューで生成し、それにより標的酵素の機能を不可逆的に阻害することを含む。このシステイン残基はＩＴＫ結晶構造においてＣｙｓ４４２として特定しうる。ＩＴＫ、ＢＴＫ、ＢＭＸ、Ｔｅｃ、ＴＸＫ、ＢＬＫ、ＥＧＦｒ、Ｈｅｒ  ２、Ｈｅｒ  ４およびＪＡＫ３を含む前述の三つ組を有するキナーゼ群は、ＤＫＣ三つ組キナーゼと呼ぶ。本発明の様々な態様は、このキナーゼ群、その可能性のある下位群、およびその個々の構成員に関連する。
【０１２０】
典型的には求電子マイケル受容体を含むいくつかの化合物は、活性部位に存在する酵素の求核体と共有結合付加物を形成し、標的酵素を不可逆的に阻害することが公知である（Ｓｌｉｃｈｅｎｍｅｙｅｒ，  Ｗ．Ｊ．；  Ｅｌｌｉｏｔｔ，  Ｗ．Ｃ．；  Ｆｒｙ，  Ｄ．Ｗ．  Ｓｅｍｉｎ．  Ｏｎｃｏｌ．  ２００１，  ２８，  ８０−８５；Ｓｈｉｍａｍｕｒａ，  Ｔ．；  Ｊｉ，  Ｈ．；  Ｍｉｎａｍｉ，  Ｙ．；  Ｔｈｏｍａｓ，  Ｒ．  Ｋ．；  Ｌｏｗｅｌｌ，  Ａ．Ｍ．；  Ｓｈａ，  Ｋ．；  Ｇｒｅｕｌｉｃｈ，  Ｈ．；  Ｇｌａｔｔ，  Ｋ．Ａ．；  Ｍｅｙｅｒｓｏｎ，  Ｍ．；  Ｓｈａｐｉｒｏ，  Ｉ．；  Ｗｏｎｇ，  Ｋ．  Ｋ．  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  ２００６，  ６６，  ６４８７−６４９１）。しかし、本発明に記載の化合物は、求電子中間体を生成する変換がインサイチューで、すなわち酵素活性部位内で優先的に起こるという点で独特である。適当な活性部位の外では、これらの化合物がベータ脱離を起こして他のタンパク質と付加物を生成する可能性ははるかに低い。記載の化合物はまず標的キナーゼの活性部位で結合して、脱離基の脱離を有効に誘発するために関連する触媒残基に関して特定の立体配座をとり、それにより付加物生成中間体を露出しなければならない。この中間体は隣接する活性部位システイン残基と共有結合による不可逆的付加物を生成する。いくつかの態様において、反応は段階的に進行し；他の態様において、反応は協奏的である。好ましい態様において、阻害剤分子の別の部分がキナーゼの、特に活性部位の他の部分と相互作用して、好都合な結合親和性および配置を促進する。そのような相互作用は様々な阻害剤の特異性に寄与するため、単一のキナーゼを阻害する阻害剤もあれば、複数のキナーゼを阻害するものもあり、そのＩＣ５０は類似または異なる。発明者らの知るかぎり、これはキナーゼ活性部位において活性阻害剤がインサイチューで生成される初の例である。
【０１２１】
キナーゼドメインとの化合物相互作用
反応の動力学を特定することなく、標的キナーゼの阻害は阻害化合物との付加物を生成するための以下の一連の段階を経て起こる：
（１）触媒リジンＮ−Ｈが、Ｃ＝Ｙ（Ｙ＝Ｏ、Ｓ、ＮＯＲ）官能基の形で存在する化合物中の水素結合受容体Ｙの水素結合距離（約１．８〜４．０オングストローム）内に配置される。Ｃ＝Ｙ結合の分極がＣ＝Ｙ基に対してアルファ位の炭素原子でプロトン（ＨＡ）の酸性度を高める。
（２）触媒二つ組のアスパラギン酸は塩基として作用するため、酸性プロトンＨＡを引き抜いて共役カルバニオンを生じ、これは標準の電子転位を通じてＹ＝Ｏ、エノール、Ｈ−結合エノラートを生成する。Ｙ＝Ｓの場合はチオエノールまたはＨ−結合チオエノラートを生成し、Ｙ＝ＮＯＲの場合はアルコキシ（Ｒ＝アルキル）、アリールオキシ（Ｒ＝アリール）またはヒドロキシ（Ｒ＝Ｈ）エナミンを生成する。
（３）エノール／エノラート／エナミンの生成は、「ベータ脱離」として公知のプロセスにより、Ｃ＝Ｙに対してベータ位の炭素に結合した脱離基の脱離を促進する。プロトン化可能なヘテロ原子Ｚを通じて化合物に結合された脱離基は、任意に化合物の他の部分にさらに連結されていてもよい。
（４）隣接システイン残基のスルフヒドリル基は強い求核種であるため、新しく生成した求電子性の脱離生成物と反応する。この付加反応（チオアルキル化）はキナーゼへの共有結合付加物を生じ、その不可逆的な活性の阻害および抑止を引き起こす。
【０１２２】
この化合物群の選択キナーゼに対する阻害活性は、それらが適当な触媒環境の近くに有効に結合する能力、適当な反応性およびベータ脱離基の脱離を可能にする隣接アルファプロトンを有する分極可能なＣ＝Ｙ基（下記の式（Ｉ）のＣ＝Ｏ）の存在に依存する。
【０１２３】
次に、反応性求電子種を生成する脱離プロセスは、触媒環境におけるＣ＝Ｙ基の十分な配置により促進される引き抜き可能なアルファプロトンの除去を必要とする。生成した求電子マイケル受容体は、次いで、鍵となるシステイン残基の反応距離内に配置される必要がある。キナーゼ結合部位における引き抜き可能なプロトンの適当な配置は、下記を含むファーマコフォア成分を通じて達成される：
（ｉ）引き抜き可能なプロトンの隣接Ｃ−Ｈ結合分極、および触媒対のリシン残基への水素結合の二重の目的に役立つＣ＝Ｙ部分、
（ｉｉ）Ｙから約３〜５Åの距離の結合部位における特定の疎水性残基と相互作用する疎水性アリールまたはヘテロアリール基、
（ｉｉｉ）ヒンジ領域の主鎖と相互作用するいくつか（１から３つ）の疎水性ファーマコフォア、
（ｖｉ）以下に説明する関連するシステインのスルフヒドリル基の反応距離内に配置される、Ｃ＝Ｙ炭素原子からベータ位の炭素原子。
【０１２４】
前述のシステインスルフヒドリル基に対する有効な「反応距離」は、酵素が固定された配座に維持されているＩＴＫ  ＡＴＰ結合部位への阻害剤の結合を試験するコンピューター設計法を用いて、約３〜１０Åの範囲で観察される。固定された系における１０Åの距離は化学反応を起こすには遠すぎるであろうが、酵素の求核部分と阻害剤の求電子部分は、柔軟な阻害剤結合ならびにシステインの側鎖の周りの一連の低エネルギーバリア回転により容易に一緒にすることができる。キナーゼ系にはよくみられる全体の配座変化はいずれも無視することはできないが、容易に測定できるものでもない。そのような配座変化は、コンピューター予測で想定することができ、二つの反応性部分を共有結合形成のために十分近づけるのに妥当である。
【０１２５】
本発明の化合物は下記の構造式を有する：
【０１２６】
【化３５】
2016040248.tif 000036
【０１２７】
式中、
Ａｒは置換されていてもよいアリールまたは置換されていてもよいヘテロアリールであり；
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は独立に水素または置換されていてもよいＣ１−Ｃ６アルキルであり；かつ
Ｒ１およびＲ２は（ａ）独立に水素、置換されていてもよいＣ１−Ｃ６アルキル、ピペリジン、もしくはフラニルであるか；または（ｂ）それらが結合している窒素原子と一緒になって、置換されていてもよいアリールに融合してもしなくてもよい（ｉ）５〜７員の置換されていてもよいアリール、（ｉｉ）５〜７員の置換されていてもよいヘテロアリール、もしくは（ｉｉｉ）５〜７員の置換されていてもよい複素環を形成する。
【０１２８】
いくつかの態様において、Ａｒは下記からなる群より選択される：
【０１２９】
【化３６】
2016040248.tif 000037
【０１３０】
式中、Ａ、Ｂ、Ｅ、およびＱは独立にＣＨ、Ｏ、またはＮであり；かつＤおよびＤ’は独立にＣＨ２、ＮＨ、Ｏ、またはＳである。
【０１３１】
他の態様において、Ａｒは下記からなる群より選択される：
【０１３２】
【化３７】
2016040248.tif 000038
【０１３３】
５〜７員複素環の例には下記が含まれる：
【０１３４】
【化３８】
2016040248.tif 000039
【０１３５】
式中、
ＧはＮ、ＣＨ、またはＳであり；
Ｇ’はＮＨ、ＣＨ、またはＳであり；
ｎ＝０〜２であり；
Ｒ１およびＲ２は前述の定義のとおりであり；かつ
Ｒ７は水素、置換されていてもよいＣ１−Ｃ６アルキル、置換されていてもよいアリール、または置換されていてもよいヘテロアリールである。
【０１３６】
好ましい５〜７員複素環はピペラジニル、ピペリジニル、ピロリジニル、およびモルホリニルである。ピペラジニルの好ましい置換基はＣ１−Ｃ６アルキル、ジアルキルＣ１−Ｃ６アミノアルキル、アリール、アラルキル、シクロアルキル、およびシクロアルキル−アルキルである。ピペリジニルの好ましい置換基はＣ１−Ｃ６アルキルおよびアラルキルである。いくつかの態様において、ピペリジニルはベンゾ縮合してイソキノリニルを形成する。ピロリジニルの好ましい置換基はＣ１−Ｃ６アルキル、アリール、およびアラルキルである。いくつかの態様において、ピロリジニルはベンゾ縮合してイソインドリルを形成する。モルホリニルの好ましい置換基はＣ１−Ｃ６アルキルおよびアリールアルキルである。
【０１３７】
いくつかの化合物は下記の構造式を有する：
【０１３８】
【化３９】
2016040248.tif 000040
【０１３９】
式中、
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は前述の定義のとおりであり；
Ｒ９は
【０１４０】
【化４０】
2016040248.tif 000041
【０１４１】
【化４１】
2016040248.tif 000042
【０１４２】
【化４２】
2016040248.tif 000043
【０１４３】
から選択され；かつ
Ｒ１０は水素、−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、または−ＮＣＯであり、
式中、Ｒ９がナフチルである場合、Ｒ５およびＲ６は両方がメチルではない。
【０１４４】
これらの化合物の例には下記が含まれる：
【０１４５】
【化４３】
2016040248.tif 000044
【０１４６】
【化４４】
2016040248.tif 000045
【０１４７】
【化４５】
2016040248.tif 000046
【０１４８】
【化４６】
2016040248.tif 000047
【０１４９】
他の化合物は下記の構造式を有する：
【０１５０】
【化４７】
2016040248.tif 000048
【０１５１】
式中、
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は前述の定義のとおりであり；
Ｒ１１およびＲ１２は水素、−ＯＣＨ３、ハロゲン、−ＮＯ２、−ＣＮ、−ＣＦ３、−ＮＣＯＲ’（式中Ｒ’は水素またはＣ１−Ｃ４アルキルである）、フェニルオキシ、−ＯＣＦ３、−ＮＲ’Ｒ’’（式中Ｒ’およびＲ’’は独立に水素またはＣ１−Ｃ４アルキルである）、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、および−ＳＯ２Ｒ’（式中Ｒ’は水素またはＣ１−Ｃ４アルキルである）から独立に選択され；かつ
Ｒ１３は水素、Ｃ１−Ｃ４アルキル、
【０１５２】
【化４８】
2016040248.tif 000049
【０１５３】
であり、
ただし式（ＩＩＩ）は下記の化合物を含まない：
【０１５４】
【化４９】
2016040248.tif 000050
【０１５５】
【化５０】
2016040248.tif 000051
【０１５６】
式（ＩＩＩ）の化合物の一例は
【０１５７】
【化５１】
2016040248.tif 000052
【０１５８】
である。
【０１５９】
本発明のいくつかの化合物は下記の構造式を有する：
【０１６０】
【化５２】
2016040248.tif 000053
【０１６１】
式中、
Ｒ１およびＲ２は前述の定義のとおりであるが、
【０１６２】
【化５３】
2016040248.tif 000054
【０１６３】
は例外である。
【０１６４】
そのような化合物の例には下記の構造式を有するものが含まれる：
【０１６５】
【化５４】
2016040248.tif 000055
【０１６６】
式中、
ＧＧは水素、ジメチルアミノアルキル、アリール、Ｃ１−Ｃ６アルキル、シクロヘキシルアルキル、ピリジン、−ＣＯＣＦ３；−ＣＯＮＲ’Ｒ’’、または
【０１６７】
【化５５】
2016040248.tif 000056
【０１６８】
であり；
Ｊは水素、アラルキル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、−ＣＮＨＣＯＯＲ’、またはＮＲ’Ｒ’’であり；
Ｋは水素、ピリジン、アリール、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＲ’Ｒ’’、−ＣＯＨ、または−ＣＮＲ’Ｒ’’であり；
Ｌは水素またはアルキルオキシであり；かつ
Ｒ２は前述の定義のとおりである。
【０１６９】
式（ＩＶ）の他の化合物には下記が含まれる：
【０１７０】
【化５６】
2016040248.tif 000057
【０１７１】
【化５７】
2016040248.tif 000058
【０１７２】
他の化合物は下記の構造式を有する：
【０１７３】
【化５８】
2016040248.tif 000059
【０１７４】
式中、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、およびＲ１０は前述の定義のとおりである。
【０１７５】
他の化合物は下記の構造式を有する：
【０１７６】
【化５９】
2016040248.tif 000060
【０１７７】
式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は前述の定義のとおりであり；かつ
Ｒ１４は水素または＝Ｏであり；
かつＤはＣＨまたはＮＨであるが；
【０１７８】
【化６０】
2016040248.tif 000061
【０１７９】
は例外である。
【０１８０】
他の化合物は下記の構造式を有する：
【０１８１】
【化６１】
2016040248.tif 000062
【０１８２】
式中、
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は前述の定義のとおりであり；かつ
Ｒ１およびＲ２は独立に水素、Ｃ１−Ｃ４アルキル、
【０１８３】
【化６２】
2016040248.tif 000063
【０１８４】
（式中Ｒ１５はハロゲンまたはＣ１−Ｃ４アルキルであり、かつＲ１６はＣ１−Ｃ４アルキルである）であるか、またはＲ１およびＲ２はそれらが結合している窒素と一緒になって
【０１８５】
【化６３】
2016040248.tif 000064
【０１８６】
【化６４】
2016040248.tif 000065
【０１８７】
（式中Ｒ１７およびＲ１８は独立に水素または−ＯＣＨ３である）、
【０１８８】
【化６５】
2016040248.tif 000066
【０１８９】
（式中Ｒ１およびＲ２は独立に水素またはＣ１−Ｃ４アルキルである）、
【０１９０】
【化６６】
2016040248.tif 000067
【０１９１】
（ｎ＝１〜４）、フェニル−Ｃ１−Ｃ４アルキル（ハロゲンで置換されていてもよい）から選択されるアリール基を形成するが、
【０１９２】
【化６７】
2016040248.tif 000068
【０１９３】
は例外である。
【０１９４】
他の化合物は下記の構造式を有する：
【０１９５】
【化６８】
2016040248.tif 000069
【０１９６】
式中、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は前述の定義のとおりである。
【０１９７】
他の化合物は下記の構造式を有する：
【０１９８】
【化６９】
2016040248.tif 000070
【０１９９】
式中、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は前述の定義のとおりであり、Ｒ１は水素であり、かつＲ２は
【０２００】
【化７０】
2016040248.tif 000071
【０２０１】
であり、式中Ｒ１９は水素および
【０２０２】
【化７１】
2016040248.tif 000072
【０２０３】
から選択されるか；または
Ｒ１およびＲ２はそれらが結合している窒素と一緒になって
【０２０４】
【化７２】
2016040248.tif 000073
【０２０５】
であり、
ＡはＮまたはＯであり；
Ｒ２０は一つまたは複数のハロゲンで置換されていてもよいフェニル−Ｃ１−Ｃ４アルキル、水素、Ｃ１−Ｃ４アルキル、アミノＣ１−Ｃ４アルキル、
【０２０６】
【化７３】
2016040248.tif 000074
【０２０７】
であり；
Ｒ１７およびＲ１８は独立に水素または−ＯＣＨ３であり；
Ｒ２１は−ＣＯＮＲ’Ｒ’’、−ＣＯＲ’、
【０２０８】
【化７４】
2016040248.tif 000075
【０２０９】
であり；かつ
Ｒ’およびＲ’’は水素およびＣ１−Ｃ４アルキルから独立に選択される。
【０２１０】
他の態様において、化合物は下記の構造式を有する：
【０２１１】
【化７５】
2016040248.tif 000076
【０２１２】
式中、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は前述の定義のとおりであり、かつＲ２２は水素、Ｃ１−Ｃ４アルキル、−ＮＲ’Ｒ’’、−ＣＯＨ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮＲ’Ｒ’’、および−ＣＯＮＨＲ’から選択され、
式中Ｒ’およびＲ’’は前述の定義のとおりである。
【０２１３】
他の態様において、化合物は下記の構造式を有する：
【０２１４】
【化７６】
2016040248.tif 000077
【０２１５】
式中、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｇ、およびＧ’は前述の定義のとおりであり；かつＲ２３は水素、−ＮＲ’Ｒ’’Ｃ１−Ｃ４直鎖アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルキル、フェニル−Ｃ１−Ｃ４アルキル、−ＣＯＮＨ２、および−ＣＯＲ’Ｒ’’であり、
式中Ｒ’およびＲ’’は前述の定義のとおりである。
【０２１６】
他の態様において、化合物は下記の構造式を有する：
【０２１７】
【化７７】
2016040248.tif 000078
【０２１８】
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は前述の定義のとおりであり、かつＲ２４は
【０２１９】
【化７８】
2016040248.tif 000079
【０２２０】
である。
【０２２１】
他の態様において、化合物は下記の構造式を有する：
【０２２２】
【化７９】
2016040248.tif 000080
【０２２３】
式中、Ｌは
【０２２４】
【化８０】
2016040248.tif 000081
【０２２５】
であり、かつＲ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は前述の定義のとおりである。
【０２２６】
いくつかの化合物は下記の構造式を有する：
【０２２７】
【化８１】
2016040248.tif 000082
【０２２８】
式中、Ｔ、Ｕ、Ｖ、およびＷは水素；ハロゲン；−Ｏ；Ｃ１−Ｃ３アルキル；およびＣ１−Ｃ３アルキルオキシから独立に選択され；かつＲ２５は水素またはＣ１−Ｃ３アルキルである。代表的化合物には
【０２２９】
【化８２】
2016040248.tif 000083
【０２３０】
が含まれる。
【０２３１】
他の化合物は下記の構造式を有する：
【０２３２】
【化８３】
2016040248.tif 000084
【０２３３】
式中、Ｔ、Ｕ、Ｖ、およびＷは水素；ハロゲン；−Ｏ；Ｃ１−Ｃ３アルキル；およびＣ１−Ｃ３アルキルオキシから独立に選択され；かつＲ８は水素またはＣ１−Ｃ３アルキルである。
【０２３４】
さらに他の化合物は下記の構造式を有する：
【０２３５】
【化８４】
2016040248.tif 000085
【０２３６】
式中、Ｔ、Ｕ、Ｖ、およびＷは水素；ハロゲン；−Ｏ；Ｃ１−Ｃ３アルキル；およびＣ１−Ｃ３アルキルオキシから独立に選択され；かつＲ８は水素またはＣ１−Ｃ３アルキルである。
【０２３７】
他の化合物は下記の構造式を有する：
【０２３８】
【化８５】
2016040248.tif 000086
【０２３９】
式中、ＤはＳ、Ｏ、またはＮＨであり；すなわち
【化８６】
2016040248.tif 000087
【０２４０】
本発明の他の化合物には下記の構造式を有するものが含まれる：
【０２４１】
【化８７】
2016040248.tif 000088
【０２４２】
式中、Ｄは前述の定義のとおりであり；すなわち
【０２４３】
【化８８】
2016040248.tif 000089
【０２４４】
本発明の他の化合物には下記の構造式を有するものが含まれる：
【０２４５】
【化８９】
2016040248.tif 000090
【０２４６】
式中、Ｇ’はＮＨまたはＣＨであり；すなわち
【０２４７】
【化９０】
2016040248.tif 000091
【０２４８】
本発明は実施例１５および１６において特定される化合物も含む。
【０２４９】
本発明の化合物は不斉中心を有していてもよく、ラセミ体、立体異性体、および互変異性体として存在してもよい。本発明は、可能性があるすべてのラセミ体、互変異性体、立体異性体、およびその混合物を含む。
【０２５０】
本発明の化合物の適当な調製法を以下の代表例により例示する。出発原料は公知の化合物で、有機化学の標準的方法によって得ることができる。
【０２５１】
化合物クレームの条件
本発明の化合物は、好ましくは下記の活性の一つまたは複数を有していない：血管拡張、血圧降下、徐脈、抗うつ、抗不整脈、抗動脈硬化、血清コレステロール低下、トリグリセリドレベル低下、神経弛緩、抗炎症、精神安定、抗痙攣、麻酔、筋弛緩、抗真菌、抗菌、殺虫、燻蒸、駆虫、中枢神経系抑制、鎮静の拮抗、抗頻尿、抗ヒスタミン、抗アレルギー、気管支拡張、鎮痛、鎮痙、ムスカリン拮抗薬、アルツハイマー病に関連する異常にリン酸化された対らせん状フィラメントエピトープの産生を防止または低減、脂質低下、男性避妊、抗殺胞子、酸化窒素産生の阻害、または中枢神経系刺激活性。
【０２５２】
下記の化合物のいずれも新規ではない程度に、出願人らは本化合物および／または組成物クレームに対する権利を留保し、これらは以下の特許請求の範囲から化合物および／またはそれらの薬学的に許容される塩を除外する条件を含む：
ａ．    下記の構造式を有する化合物：
【０２５３】
【化９１】
2016040248.tif 000092
【０２５４】
式中、ｎは０、１、２、または３であり、かつＲ１およびＲ２はそれらが結合している窒素と一緒になって
【０２５５】
【化９２】
2016040248.tif 000093
【０２５６】
であり、かつＹはアルキル、ハロゲン、ハロゲノアルキル、アルキオキシ、アキルチオ、ハロゲノアルキルオキシ、ハロゲノアルキルチオ、シクロアルキル、またはシアン基である；
ｂ．    Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６がそれぞれ水素であり、かつＲ１およびＲ２がそれらが結合している窒素と一緒になって環
【０２５７】
【化９３】
2016040248.tif 000094
【０２５８】
を形成している場合、Ａｒがフェニルである式（Ｉ）の化合物；
ｃ．    下記の構造式を有する化合物：
【０２５９】
【化９４】
2016040248.tif 000095
【０２６０】
式中、Ｐｈは置換されていてもよい単環式炭素環アリール基であり、ＡｌｋはＣ１−Ｃ３低級アルキルであり、かつＡｍは三級アミノ基、その塩、Ｎ−オキシド、または四級アンモニウム誘導体である；
ｄ．    下記の構造式を有する化合物：
【０２６１】
【化９５】
2016040248.tif 000096
【０２６２】
式中、Ｐｈ１およびＰｈ２は単環式カルボン酸アリール基およびその酸付加塩である；
ｅ．    下記の構造式を有する化合物：
【０２６３】
【化９６】
2016040248.tif 000097
【０２６４】
式中、ＲＲは脂肪族、芳香族、およびアリール脂肪族基からなる群より選択され；ＲＲ１は水素、脂肪族、芳香族、およびアリール脂肪族基からなる群より選択され；−Ｎ（ＸＸ）はジアルキルアミンおよび複数のジアルキルアミンからなる群より選択される二級アミンの残基である；
ｆ．    下記の構造式を有する化合物：
【０２６５】
【化９７】
2016040248.tif 000098
【０２６６】
式中、Ｒ１およびＲ２は式（Ｉ）の定義のとおりであり、化合物
【０２６７】
【化９８】
2016040248.tif 000099
【０２６８】
を含む；
ｇ．    下記の構造式を有する化合物：
【０２６９】
【化９９】
2016040248.tif 000100
【０２７０】
式中、Ｒ３０はエチル−、プロピル−、イソプロピル−、ブチル−、もしくはイソブチル基または５〜７個の炭素原子を有するシクロアルキル基である；
ｈ．    下記の構造式を有する化合物：
【０２７１】
【化１００】
2016040248.tif 000101
【０２７２】
式中、Ｍ２は水素、ハロゲン、またはＣ１−Ｃ１２アルコキシであり、Ｍ１は水素またはハロゲンであり、かつＭ３およびＭ４は低級アルキルであるか、またはそれらが結合している窒素原子と一緒になって（ａ）複素環式アミノ基もしくはＮ−低級アルキル四級複素環式アンモニウム基、または（ｂ）トリ低級アルキルアンモニウムである；
ｉ．    下記の構造式を有する化合物またはそのピクリン酸塩：
【０２７３】
【化１０１】
2016040248.tif 000102
【０２７４】
式中、Ｍ５は単純または置換アリール基であり、かつＭ６は単純または置換アミノ基である；
ｊ．    下記の構造式を有する化合物：
【０２７５】
【化１０２】
2016040248.tif 000103
【０２７６】
式中、Ｍ７はチエニル、フェニルまたは置換フェニルである；
ｋ．    下記の構造式を有する化合物：
【０２７７】
【化１０３】
2016040248.tif 000104
【０２７８】
式中、Ｘ１、Ｘ２、およびＸ３はそれぞれ独立に水素またはアルキル基であり、かつＸ５およびＸ４はそれぞれ独立に水素もしくはアルキル基であるか、またはそれらが結合している窒素原子と一緒になって、Ｎに加えてＮ、Ｓ、およびＯから選択されるさらなるヘテロ原子を任意に含む、５、６、もしくは７個の環原子を有する複素環基を形成する；
ｌ．    Ｒ９がフェニルであり、かつＲ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６がそれぞれ水素である、式（ＩＩ）の化合物；
ｍ．    下記の構造式を有する化合物：
【０２７９】
【化１０４】
2016040248.tif 000105
【０２８０】
式中、Ｘ６は窒素原子と一緒になってピロリジン、ピペリジン、モルホリン、ヘキサメチレンイミン、または３−アザビシクロ−３，２，２ノナンを形成し、化合物
【０２８１】
【化１０５】
2016040248.tif 000106
【０２８２】
を含む；
ｎ．    下記の構造式を有する化合物：
【０２８３】
【化１０６】
2016040248.tif 000107
【０２８４】
式中、Ｘ７は水素またはフッ素であり；Ｘ８はＮ（Ｘ９）フェニル（式中フェニルはＣ１−Ｃ８アルコキシ、Ｃ１−Ｃ８アルキル、トリフルオロメチル、またはハロゲンで一置換されていてもよい）、−Ｃ（ＯＨ）（Ｘ９）フェニル（式中フェニルはＣ１−Ｃ８アルコキシ、Ｃ１−Ｃ８アルキル、トリフルオロメチル、またはハロゲンで一置換されていてもよい）、またはフェニル（式中フェニルはＣ１−Ｃ８アルコキシ、Ｃ１−Ｃ８アルキル、トリフルオロメチル、またはハロゲンで一置換されていてもよい）であり；かつＸ９は水素、Ｃ１−Ｃ８アルキル、または低級アルカノイルである；
ｏ．    下記の構造式を有する化合物：
【０２８５】
【化１０７】
2016040248.tif 000108
【０２８６】
式中、Ｘ９およびＸ１０はそれぞれ１から４個の炭素原子を有する飽和または不飽和脂肪族炭化水素であるか、またはそれらが結合している窒素と一緒になってピロリジノ、ピペリジン、ペルヒドロアゼピノ、およびモルホリノから選択される複素環基を形成する；
ｐ．    下記の構造式を有する化合物：
【０２８７】
【化１０８】
2016040248.tif 000109
【０２８８】
式中、Ｘ１１はＣ２−Ｃ３アルキルである；
ｑ．    下記の構造式を有する化合物：
【０２８９】
【化１０９】
2016040248.tif 000110
【０２９０】
式中、Ｘ１１は水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、ニトロ、またはＣ１−Ｃ４二級アミンであり；Ｘ１２は（ＣＨ２）ｎＯＸ１３であり；ｎは２または３であり；かつＸ１３は２つのハロゲン、２つのＣ１−Ｃ４アルキル、ハロゲンとニトロ、ハロゲンとＣ１−Ｃ４アルキル、ハロゲンとＣ１−Ｃ４アルコキシ、またはＣ１−Ｃ４アルコキシとＣ１−Ｃ４アルコイルで二置換されたＣ１−Ｃ４アルコキシフェニル、ニトロフェニル、トリフルオロメチルフェニル、またはフェニルである；
ｒ．    下記の構造式を有する化合物：
【０２９１】
【化１１０】
2016040248.tif 000111
【０２９２】
式中、Ｘ１４、Ｘ１５、およびＸ１６は独立に水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ４アルキル、ハロゲノ−Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、または３〜８個の炭素原子を有するシクロアルキル基であり、かつＸ１４、Ｘ１５、およびＸ１６の２つは一緒になってメチレンジオキシまたはエチレンオキシを形成してもよく；Ｘ１８は水素またはＣ１−Ｃ４アルキルであり；かつＸ１７はピロリジニル、ピペリジニル、モルホリニル、またはアゼピニルである；
ｓ．    下記の構造式を有する化合物：
【０２９３】
【化１１１】
2016040248.tif 000112
【０２９４】
式中、
Ａｒはアリール基であり；かつＸ１９およびＸ２０は（ａ）両方ともＣ１−Ｃ６アルキルであるか、または（ｂ）Ｎ原子と一緒になって飽和複素環基の残りの構成員を形成し、かつＸ２１は−ＯＨ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、またはアリールである；
ｔ．    下記の構造式を有する化合物：
【０２９５】
【化１１２】
2016040248.tif 000113
【０２９６】
式中、Ｒ１およびＲ２は独立にアルキル基であるか；またはＲ１およびＲ２はそれらが結合している窒素原子と一緒になって置換されていてもよい式
【０２９７】
【化１１３】
2016040248.tif 000114
【０２９８】
の複素環基を完成し；Ｒ３は水素またはＣ１−Ｃ４アルキルであり；かつＸ２２、Ｘ２３、およびＸ２４は独立にＣ１−Ｃ４アルキル、ハロゲン、またはハロゲノ−Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、アルキルチオ、ハロゲノ−Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、ハロゲノ−Ｃ１−Ｃ４アルキルチオ、炭素原子３から７個のシクロアルキル、またはシアノである；
ｕ．    下記の構造式を有する化合物：
【０２９９】
【化１１４】
2016040248.tif 000115
【０３００】
式中、Ａｒは無置換アリールまたはヒドロキシル基、低級アルコキシ基もしくはハロゲンで置換されたアリール、あるいは無置換ベンゾ［ｂ］チエニル基またはヒドロキシル基、低級アルキル基、低級アルコキシ基、アリール基もしくはハロゲンで置換されたベンゾ［ｂ］チエニル基であり；Ｒ５は水素またはＣ１−Ｃ４アルキルであり；かつＸ２５はピペリジン以外の基である；
ｖ．    下記の構造式を有する化合物：
【０３０１】
【化１１５】
2016040248.tif 000116
【０３０２】
式中、Ｌ１およびＬ２は独立にハロゲンまたはアルキルであり；Ｌ６およびＬ７は独立に水素またはアルキルであり；かつＬ３およびＬ４は独立に水素もしくは脂肪族基であるか、またはそれらが結合している窒素と一緒になって環を形成する；
ｗ．    Ｒ３およびＲ４が水素である場合、
【０３０３】
【化１１６】
2016040248.tif 000117
【０３０４】
は
【０３０５】
【化１１７】
2016040248.tif 000118
【０３０６】
ではなく、式中Ｌ８はカルボニル、スルホニル、メチレン、または置換されていてもよいフェニルで置換されたメチレンであり；かつＡｒはアリール基である、式（Ｉ）、（ＩＶ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）、（ＩＸ）、および（ＸＩ）の化合物；
ｘ．    下記の構造式を有する化合物：
【０３０７】
【化１１８】
2016040248.tif 000119
【０３０８】
式中、Ｔ１はＯ、Ｓ、またはＮＴ７であり；Ｔ７は水素、Ｃ１−Ｃ４アルキル、およびＣＨ２ＣＨ２ＣＯＡｒ１であり；Ｔ６は水素、Ｃ１−Ｃ６アルキルであるか、またはＴ６およびアリール基上の置換基は一緒になってＣＨ２、ＣＨ２ＣＨ２、ＣＨ２Ｏ、またはＣＨ２Ｓであって５もしくは６員環を形成し、式中環はＣ１−Ｃ６アルキルまたはフェニルで置換されていてもよく；Ｔ５は水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、または置換されていてもよいフェニルであり；Ｔ２、Ｔ３、およびＴ４は独立に水素またはＣ１−Ｃ６アルキルであり；かつＡｒおよびＡｒ１はアリールまたは置換されていてもよいフェニルである；ならびに
ｙ．    下記の化合物：
【０３０９】
【化１１９】
2016040248.tif 000120
【０３１０】
薬学的製剤
本発明の化合物は当技術分野において周知の方法を用いて医用薬剤として製剤することができる。本発明の薬学的製剤は典型的に、担体と混合し、希釈剤で希釈し、かつ／あるいはカプセル、サシェ、カシェ、紙もしくは他の容器の形の摂取可能な担体により、またはアンプルなどの使い捨て容器により封入またはカプセル化した、少なくとも一つの本発明の化合物を含む。
【０３１１】
担体または希釈剤は固体、半固体または液体材料でありうる。本発明の薬学的組成物において用いうる希釈剤または担体のいくつかの例は、乳糖、デキストロース、ショ糖、ソルビトール、マンニトール、プロピレングリコール、流動パラフィン、白色軟パラフィン、カオリン、微結晶セルロース、ケイ酸カルシウム、シリカポリビニルピロリドン、セトステアリルアルコール、デンプン、アカシアゴム、リン酸カルシウム、カカオ脂、カカオの油、落花生油、アルギナート、トラガカント、ゼラチン、メチルセルロース、モノラウリン酸ポリオキシエチレンソルビタン、乳酸エチル、ヒドロキシ安息香酸プロピル、トリオレイン酸ソルビタン、セスキオレイン酸ソルビタン、およびオレイルアルコールである。
【０３１２】
本発明の薬学的組成物は、通常の混合、溶解、造粒、糖衣錠製造、研和、乳化、カプセル化、捕捉、または凍結乾燥法を含む、当技術分野において周知の方法により製造することができる。
【０３１３】
注射用に、本発明の物質を、好ましくは酢酸塩、ハンクス液、リンゲル液、または生理食塩緩衝液などの生理的に適合する緩衝液中の水溶液に製剤してもよい。好ましくは、溶液は無菌で、発熱物質を含まない。経粘膜投与用に、浸透する障壁に適した浸透剤を製剤中で用いる。そのような浸透剤は一般に当技術分野において公知である。
【０３１４】
経口投与用に、活性化合物を錠剤、丸剤、糖衣錠、カプセル剤、液剤、ゲル剤、シロップ剤、スラリー、懸濁剤などとして製剤することを可能にする薬学的に許容される担体と混合することができる。ゼラチン、糖（例えば、乳頭、ショ糖、マンニトール、またはソルビトール）；セルロース製剤（例えば、トウモロコシデンプン、コムギデンプン、コメデンプン、ジャガイモデンプン、トラガカントゴム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム）；および／またはポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）などの充填剤を用いることもできる。望まれる場合、架橋ポリビニルピロリドン、寒天、またはアルギン酸もしくはアルギン酸ナトリウムなどのその塩などの崩壊剤を加えてもよい。
【０３１５】
糖衣錠の中心は適当なコーティングを施して提供される。このために、濃縮糖溶液を用いてもよく、これは任意にアラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、カルボポールゲル、ポリエチレングリコール、および／または二酸化チタン、ラッカー溶液、ならびに適当な有機溶媒または溶媒混合物を含んでいてもよい。特定のため、または活性化合物用量の異なる組み合わせを特徴づけるために、染料または色素を錠剤または糖衣錠コーティングに加えてもよい。
【０３１６】
経口で用いることができる薬学的製剤には、ゼラチン製のプッシュフィットカプセル、ならびにゼラチンおよびグリセロールまたはソルビトールなどの可塑剤製の密封軟カプセルが含まれる。プッシュフィットカプセルは、活性成分を、乳糖などの充填剤、デンプンなどの結合剤および／またはタルクもしくはステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤、ならびに任意に安定剤との混合物で含むことができる。軟カプセル中で、活性化合物は脂肪油、流動パラフィン、または液状ポリエチレングリコールなどの適当な液体に溶解または懸濁されていてもよい。加えて、安定剤を添加してもよい。経口投与用のすべての製剤は、好ましくはそのような投与に適当な用量である。
【０３１７】
口腔投与用に、組成物は通常の様式で製剤した錠剤またはロゼンジの形であってもよい。
【０３１８】
吸入による投与用に、本発明の薬学的製剤を、適当な噴射剤、例えばジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素、または他の適当なガスを用いて、加圧パックまたはネブライザーからエアロゾルスプレーの形で送達することができる。望まれる場合は、計量された量を送達するためにバルブを用いることもできる。吸入器または注入器で用いるための、例えばゼラチン製のカプセルまたはカートリッジは、化合物および乳糖またはデンプンなどの適当な粉末基剤の粉末混合物を入れて製剤してもよい。
【０３１９】
本発明の化合物は、注射、例えばボーラス注射または持続注入による非経口投与用に製剤することができる。注射用製剤は、例えばアンプルまたは複数回用量容器の単位用量剤形で、保存剤を添加して提供することができる。組成物は、油性または水性媒体中の懸濁剤、液剤または乳剤などの剤形でもよく、かつ懸濁化剤、安定剤および／または分散剤などの製剤用物質を含有していてもよい。
【０３２０】
非経口投与用の薬学的製剤には、活性化合物の水溶液が含まれる。加えて、活性化合物の懸濁剤を、適当な油性注射用懸濁剤として調製してもよい。適当な親油性溶媒または媒体には、ゴマ油などの脂肪油、またはオレイン酸エチルもしくはトリグリセリドなどの合成脂肪酸エステル、またはリポソームが含まれる。水性注射用懸濁剤は、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトール、またはデキストランなどの懸濁剤の粘度を高める物質を含有していてもよい。懸濁剤は、任意に、適当な安定剤または高濃度の溶液を調製できるように化合物の溶解性を高める物質を含有していてもよい。
【０３２１】
または、活性成分は、使用する前に適当な媒体、例えば発熱物質を含まない滅菌水で再構成するための粉末の形でもよい。
【０３２２】
化合物は、例えば、カカオ脂または他のグリセリドなどの通常の坐剤基剤を含む坐剤または保持浣腸剤などの直腸用組成物に製剤してもよい。
【０３２３】
本発明の化合物は、典型的には５０ｍＭ酢酸塩に１０ｍｇ／ｍｌ以上の濃度で可溶かつ安定であり、この緩衝液中で腹腔内および経口送達することができる。いくつかの化合物は、ヒドロキシプロピル−ｂ−シクロデキストリン（ＨＢＰＣＤ、３〜５％）に可溶で、この溶媒中で腹腔内および経口送達することができる。静脈内送達用に、化合物を５％マンニトールに懸濁または溶解することができる。
【０３２４】
前述の製剤に加えて、化合物をデポー製剤として調製することもできる。そのような長期間作用製剤は移植（例えば、皮下または筋肉内）または筋肉注射によって投与してもよい。したがって、例えば、化合物は、適当なポリマー材料もしくは疎水性材料（例えば、許容される油中の乳剤として）またはイオン交換樹脂を用いて、あるいは難溶性の誘導体、例えば難溶性の塩として製剤してもよい。
【０３２５】
薬学的組成物は適当な固相またはゲル相の担体または賦形剤を含んでいてもよい。そのような担体または賦形剤の例には、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、様々な糖、デンプン、セルロース誘導体、ゼラチン、およびポリエチレングリコールなどのポリマーが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【０３２６】
前述の一般的な剤形に加えて、本発明の化合物は、Ａｌｚａ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから入手可能なＡＬＺＥＴ（登録商標）浸透圧ポンプを含む、制御放出手段および／または送達装置によって投与してもよい。適当な送達装置は米国特許第３，８４５，７７０号；第３，９１６，８９９号；第３，５３６，８０９号；第３，５９８，１２３号；第３，９４４，０６４号および第４，００８，７１９号に記載されている。
【０３２７】
治療法
特定された化合物をヒト患者に、単独または適当な担体もしくは賦形剤と混合した薬学的組成物中のいずれかで、血液関連の癌（例えば、リンパ腫および白血病）および自己免疫障害を治療または改善するための用量で投与することができる。移植前、移植中および／または移植後に移植患者の免疫系を抑制するために、細胞内キナーゼ活性の低下も有用である。
【０３２８】
リンパ腫は、ホジキンリンパ腫および非ホジキンリンパ腫を含む、リンパ系におけるＢまたはＴ細胞の悪性成長である。非ホジキンリンパ腫には皮膚Ｔ細胞リンパ腫（例えば、セザリー症候群および菌状息肉腫）、びまん性大細胞型リンパ腫、ＨＴＬＶ−１関連Ｔ細胞、リンパ腫、結節性末梢Ｔ細胞リンパ腫、結節外末梢Ｔ細胞リンパ腫、中枢神経系リンパ腫、およびＡＩＤＳ関連リンパ腫が含まれる。
【０３２９】
白血病には、リンパ性および骨髄性白血病両方の急性および慢性型（例えば、急性リンパ性またはリンパ芽球性白血病、急性骨髄性（ｍｙｅｌｏｇｅｎｏｕｓ）白血病、急性骨髄性（ｍｙｅｌｏｉｄ）白血病、慢性骨髄性白血病、慢性リンパ性白血病、Ｔ細胞前リンパ性白血病、成人Ｔ細胞白血病、およびヘアリーセル白血病）が含まれる。
【０３３０】
自己免疫障害には、全身性紅斑性狼蒼、抗リン脂質抗体症候群、多発性硬化症、潰瘍性大腸炎、クローン病、関節リウマチ、喘息、橋本甲状腺炎、ライター症候群、シェーグレン症候群、ギラン−バレー症候群、重症筋無力症、大血管脈管炎、中血管脈管炎、結節性多発性動脈炎、尋常天疱瘡、強皮症、グッドパスチャー症候群、糸球体腎炎、原発性胆汁性肝硬変、グレーブス病、膜性腎症、自己免疫肝炎、セリアックスプルー、アジソン病、多発性筋炎、皮膚筋炎、単クローン性高ガンマグロブリン血症、第ＶＩＩＩ因子欠損症、クリオグロブリン血症、末梢神経障害、ＩｇＭ多発性神経障害、慢性神経障害、自己免疫溶血性貧血、自己免疫血小板減少性紫斑病、悪性貧血、強直性脊椎炎、脈管炎、炎症性腸疾患、およびＩ型真性糖尿病が含まれる。自己免疫疾患はＴリンパ球、Ｂリンパ球、肥満細胞、または樹状細胞などの分泌細胞に関与していることがある。本発明の化合物は、タンパク質置換療法を受ける患者および置換に対する抗体を発生する患者を治療するために用いることもできる。
【０３３１】
投与経路
本発明の薬学的製剤は、局所または全身投与することができる。適当な投与経路には、経口、肺、直腸、経粘膜、腸、非経口（筋肉内、皮下、髄内経路を含む）、結節内、くも膜下腔内、直接脳室内、静脈内、腹腔内、鼻内、眼内、経皮、局所、および膣経路が含まれる。詳細に前述したとおり、剤形には錠剤、トローチ、分散剤、懸濁剤、坐剤、液剤、カプセル剤、クリーム、パッチ、ミニポンプなどが含まれるが、それらに限定されるわけではない。標的指向送達システムを用いることもできる（例えば、標的特異的抗体でコーティングしたリポソーム）。
【０３３２】
用量
本発明の薬学的組成物は、少なくとも一つの活性成分を治療上有効な量で含む。「治療上有効な量」は、患者に投与した場合に、治療中の疾患の特徴における測定可能な改善（例えば、検査値の改善、症状の発現の遅延、症状の重症度の軽減、ＣＤ２５ａまたはＩＬ２などの生体マーカーのレベルの改善）をもたらす、活性物質の量である。改善は治療上有効な量の１回投与後に明らかとなりうる。通常、最適な効果を得る、または維持するために、複数回投与を用いる。好ましい態様において、投与頻度は１ヶ月に２回から１週間に１回、１日に数回、例えば１日に１〜４回までの範囲でありうる。別の態様において、投与は徐放性製剤、または長期もしくは持続注入によるものでありうる。投与頻度は一定期間にわたりあらかじめ決めたレベル以上の全身または局所濃度が得られるように選択することができる。期間は投与から投与までの間隔のすべて、もしくはかなりの部分であるか、または徐放もしくは注入の期間を含むことができる。いくつかの態様において、治療スケジュールは、化合物濃度を一定期間（例えば、数日または１週間）維持し、次いで一定期間（例えば、１、２、３、または４週間）投与を停止することにより減衰させることが必要となりうる。
【０３３３】
治療上有効な量の決定は当業者の能力の範囲内である。治療上有効な用量は最初はインビトロ酵素アッセイ、細胞培養アッセイおよび／または動物モデルから推定することができる。例えば、用量を動物モデルで、インビトロ酵素アッセイまたは細胞培養でもとめたＩＣ５０（すなわち、ＩＴＫまたはＢＴＫ活性の最大阻害の半分を達成する試験化合物の濃度）を含む範囲の循環濃度を達成するよう計画することができる。そのような情報はヒトにおける有用な用量をより正確に決定するために用いることができる。
【０３３４】
関連する疾患の適当な動物モデルは当技術分野において公知である。例えば、Ｅｘｐ  Ｈｅｍａｔｏｌ．  ３４，  ２８４−８８，  ２００６（進行性全身性肥満細胞症および肥満細胞白血病）；Ｌｅｕｋ．  Ｌｙｍｐｈｏｍａ．  ４７，  ５２１−２９，  ２００６（急性骨髄性白血病）；Ｌｅｕｋ．  Ｌｙｍｐｈｏｍａ．  ７，  ７９−８６，  １９９２（播種性ヒトＢ系統急性リンパ芽球性白血病および非ホジキンリンパ腫）；Ｊ．  Ｖｉｒｏｌ．  ７９，  ９４４９−５７，  ２００６（成人Ｔ細胞白血病）；Ｎｅｏｐｌａｓｉａ  ７，  ９８４−９１，  ２００５（リンパ腫）；Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ  １５，  ８５−９３，  ００５（リンパ腫）；Ｔｒａｎｓｆｕｓ．  Ａｐｈｅｒ．  Ｓｃｉ．  ３２，  １９７−２０３，  ２００５（皮膚Ｔ細胞リンパ腫）；Ｎａｔｕｒｅ  １７，  ２５４−５６，  １９９１（濾胞性リンパ腫およびびまん性大細胞リンパ腫）；Ｃｅｌｌ．  Ｍｏｌ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  ２，  ４６１−６５，  ２００５（重症筋無力症）；Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ  １０２，  １１８２３−２８，  ２００５（Ｉ型糖尿病）；Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍ．  ５０，  ３２５０−５９，  ２００４（紅斑性狼蒼）；Ｃｌｉｎ．  Ｅｘｐ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  ９９，  ２９４−３０２，  １９９５（グレーブス病）；Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｉｎｖｅｓｔ．  １１６，  ９０５−１５，  ２００６（多発性硬化症）；Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｒｅｓ．  ｅ−ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ  Ｆｅｂ．  １，  ２００６（潰瘍性大腸炎）；Ｊ．  Ｐａｔｈｏｌ，  ｅ−ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ  Ｍａｒｃｈ  ２１，  ２００６（クローン病）；Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｉｎｖｅｓｔ．  １１６，  ９６１−９７３，  ２００６（関節リウマチ）；Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．  １４７，  ７５４−６１，  ２００６（喘息）；Ｅｘｐ  Ｍｏｌ  Ｐａｔｈｏｌ．  ７７，  １６１−６７，  ２００４（橋本甲状腺炎）；Ｊ．  Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．  Ｓｕｐｐｌ．  １１，  １１４−１７，  １９８３（ライター症候群）；Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．  ３２，  １０７１−７５，  ２００５（シェーグレン症候群）；Ｂｒａｉｎ  Ｐａｔｈｏｌ．  １２，  ４２０−２９，  ２００２（ギラン−バレー症候群）；Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｉｎｖｅｓｔ．  １１０，  ９５５−６３，  ２００２（血管脈管炎）；Ｖｅｔ．  Ｐａｔｈｏｌ．  ３２，  ３３７−４５，  １９９５（結節性多発性動脈炎）；Ｉｍｍｕｎｏｌ．  Ｉｎｖｅｓｔ．  ３，４７−６１，  ２００６（尋常天疱瘡）；Ａｒｃｈ．  Ｄｅｒｍａｔｏｌ．  Ｒｅｓ．  ２９７，  ３３３−４４，  ２００６（強皮症）；Ｊ．  Ｅｘｐ．  Ｍｅｄ．  １９１，  ８９９−９０６，  ２０００（グッドパスチャー症候群）；Ｊ．  Ｖｅｔ．  Ｍｅｄ．  Ｓｃｉ．  ６８，  ６５−６８，  ２００６（糸球体腎炎）；Ｌｉｖｅｒ  Ｉｎｔ．  ２５，  ５９５−６０３，  ２００５（原発性胆汁性肝硬変）；Ｃｌｉｎ．  Ｅｘｐ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  ９９，  ２９４−３０２，  １９９５（グレーブス病）；Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｉｎｖｅｓｔ．  ９１，  １５０７−１５，  １９９３（膜性腎症）；Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １６９，  ４８８９−９６，  ２００２（自己免疫肝炎）；Ｉｓｒ．  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｓｃｉ．  １５，  ３���８−５５，  １９７９（セリアックスプルー）；Ｓｕｒｇｅｒｙ  １２８，  ９９９−１００６，  ２０００（アジソン病）；Ｊ．  Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｌ  ９８，  １３０−３５，  １９９９（多発性筋炎）；Ａｍ．  Ｊ．  Ｐａｔｈｏｌ．  １２０，  ３２３−２５，  １９８５（皮膚筋炎）；Ｂｏｎｅ  ２０，  ５１５−２０，  １９９７（単クローン性高ガンマグロブリン血症）；Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｉａ  １１，  ２２７−３２，  ２００５（第ＶＩＩＩ因子欠損症）；Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ  ９４，  ２３３−３６，  １９９７（クリオグロブリン血症）；Ｐａｉｎ  １１０，  ５６−６３，  ２００４（末梢神経障害）；Ａｎｎ．  Ｎｅｕｒｏｌ．  ４９，  ７１２−２０，  ２００１（ＩｇＭ多発性神経障害）；Ｊ．  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．  Ｒｅｓ：  ４４，  ５８−６５，  １９９６（慢性神経障害）；Ｅｕｒ．  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  ３２，  １１４７−５６，  ２００２（自己免疫溶血性貧血）；Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｉｃａ  ８８，  ６７９−８７，  ２００３（自己免疫血小板減少性紫斑病）；Ｃｕｒｒ．  Ｔｏｐ．  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  ２９３，  １５３−７７，  ２００５（悪性貧血）；Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １７５，  ２４７５−８３，  ２００５（強直性脊椎炎）；Ｉｎｆｌａｍｍ．  Ｒｅｓ．  ５３，  ７２−７７，  ２００４（脈管炎）；Ｖｅｔ．  Ｐａｔｈｏｌ．  ４３，  ２−１４，  ２００６（炎症性腸疾患）；およびＪ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．  ２７６，  −１３８２１，  ２００１（抗リン脂質抗体症候群）を参照されたい。
【０３３５】
ＬＤ５０（集団の５０％に対して致死的となる用量）およびＥＤ５０（集団の５０％で治療上有効な用量）は細胞培養物および／または実験動物における標準の薬学的方法によって決定することができる。細胞培養アッセイまたは動物試験から得たデータを用いてヒトの初期用量を決定することができる。当技術分野において公知のとおり、用量は用いる剤形および投与経路に応じて変動しうる。
【０３３６】
周知の通り、ＦＤＡガイドライン文書「Ｇｕｉｄａｎｃｅ  ｆｏｒ  Ｉｎｄｕｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｒｅｖｉｅｗｅｒｓ  Ｅｓｔｉｍａｔｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｓａｆｅ  Ｓｔａｒｔｉｎｇ  Ｄｏｓｅ  ｉｎ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｔｒｉａｌｓ  ｆｏｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  ｉｎ  Ａｄｕｌｔ  Ｈｅａｌｔｈｙ  Ｖｏｌｕｎｔｅｅｒｓ」（ＨＦＡ−３０５）は、インビボ動物試験に基づきヒト等価用量（ＨＥＤ）を計算する際に用いるための式を提供している。以下の実施例１６に記載する試験に基づき、ヒト等価用量は１．５ｍｇ／ｋｇから８ｍｇ／ｋｇの間の範囲であるが、いくつかの化合物はＨＥＤにより見積もったものよりも低用量または高用量でかなりの有効性を示す。したがって、全身投与のためのヒト用量は、例えば、１．５ｍｇ／ｋｇから３ｍｇ／ｋｇ；２ｍｇ／ｋｇから４ｍｇ／ｋｇ；５ｍｇ／ｋｇから７ｍｇ／ｋｇ；および４ｍｇ／ｋｇから８ｍｇ／ｋｇの範囲でありうる。投与する組成物の量は、当然のことながら、治療中の被験者、被験者の体重、障害の重症度、投与様式および医師の判断に依存する。
【０３３７】
本開示において引用するすべての特許、特許出願、および参照文献は特に参照により本明細書に組み入れられる。前述の開示は本発明を一般的に記載している。以下の具体的実施例を参照することでより完全な理解を得ることができるが、これらの実施例は例示のために示すにすぎず、本発明の範囲を限定する意図はない。
【実施例】
【０３３８】
実施例１
１−ナフタレン−２−イル−プロパ−２−エン−１−オールの調製
【０３３９】
【化１２０】
2016040248.tif 000121
【０３４０】
ナフトアルデヒド（５．０ｇ、３２．０ｍｍｏｌｅ）を無水テトラヒドロフランに溶解し、−７８℃、Ｎ２（ｇ）雰囲気下で撹拌した。混合物に臭化ビニルマグネシウム（５０ｍｌ、ＴＨＦ中１Ｍ溶液）を加え、反応混合物を室温まで加温して終夜撹拌した。水で反応停止し、ＥｔＯＡｃと水との間で分配した。有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧下で濃縮して、所望の生成物を黄色油状物で得た（５．０ｇ、８５％）。ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  １８５  （Ｍ＋Ｈ）＋．
【０３４１】
実施例２
１−ナフタレン−２−イル−プロペノンの調製
【０３４２】
【化１２１】
2016040248.tif 000122
【０３４３】
ジクロロメタン（３０ｍｌ）中の１−ナフタレン−２−イル−プロパ−２−エン−１−オール（１．３ｇ、７．０ｍｍｏｌｅ）の溶液にクロロクロム酸ピリジニウム（１．５ｇ、７．０ｍｍｏｌｅ）を加えた。混合物を室温で酸化が完了するまで撹拌した。溶液をセライトを通してろ過し、溶媒を減圧下で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃに再度溶解し、水および食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧下で濃縮した。残渣をＨＰＬＣで０〜１００％ＥｔＯＡｃ−Ｈｘ勾配を用いて精製し、所望の生成物を黄色油状物で得た（２８０ｍｇ、２２％）。ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  １８３  （Ｍ＋Ｈ）＋．
【０３４４】
実施例３
１−ナフタレン−２−イル−３−ピペリジン−１−イル−プロパン−１−オンの調製
【０３４５】
【化１２２】
2016040248.tif 000123
【０３４６】
１−ナフタレン−２−イル−プロペノン（１０ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌｅ）を９６穴ポリプロピレンプレートの１つのウェル中のＤＭＳＯ（１００μｌ）に溶解した。混合物にピペリジン（１２μｌ、０．１０ｍｍｏｌｅ）およびジイソプロピルエチルアミン（１７μｌ、０．１ｍｍｏｌｅ）を加えた。完了後、生成物をＨＰＬＣを用いて精製し、所望の生成物を得た（５０ｍｍ×１０ｍｍ  Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  ＧＥＭＩＮＩ（商標）カラムで３０〜１００％アセトニトリル−水勾配を用いて）。ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ２６８  （Ｍ＋Ｈ）＋．
【０３４７】
実施例４
１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン７−オキシドの調製
【０３４８】
【化１２３】
2016040248.tif 000124
【０３４９】
７−アザインドール（１０ｇ、８４．７ｍｍｏｌ）をエーテル（３００ｍＬ）に室温で溶解した。Ｍ−ＣＰＢＡ（２９．１ｇ、１．５当量）を分割して加え、手動で撹拌した。すべての酸化剤を加えた後、混合物を室温でさらに３時間撹拌した。ＬＣ／ＭＳにより完全な変換が見られた。混合物をろ過し、固体をエーテル（４０ｍＬ×３）で洗浄し、風乾した。この固体のｄ６−ＤＭＳＯ中でのＮＭＲ分析により、生成物はほとんどが１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン７−オキシドのメタ−クロロ安息香酸塩であることが判明した（オフホワイト、１７．９ｇ）；ＭＳ：  ｍ／ｚ  １３５．３  ［ＭＨ＋］．
【０３５０】
実施例５
４−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの調製
【０３５１】
【化１２４】
2016040248.tif 000125
【０３５２】
１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン７−オキシドのｍ−ＣＢＡ塩（９ｇ）をＰＯＣｌ３（４６ｍＬ、７．５当量）に溶解した。混合物を９０℃で１５時間と、１０６℃でさらに４時間加熱した。混合物を室温まで冷却し、ＰＯＣｌ３のほとんどを高減圧下で蒸留した。残渣をＣＨ３ＣＮ（１０ｍＬ）に溶解した。水（２０ｍＬ）をゆっくり加えて反応を停止した。得られた混合物を１０Ｎ  ＮａＯＨを用いてｐＨ約９に調節した。固体をろ過した。粗製固体をＴＨＦ（数ｍｌ）に再度溶解し、０〜１０％ＭｅＯＨ−ＤＣＭを用いてコンビフラッシュにかけ、４−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンをわずかに帯黄色の固体で得た（４ｇ）。ＭＳ：  ｍ／ｚ  １５４．９  ［ＭＨ＋］．
【０３５３】
実施例６
１−［４−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−フェニル］−エタノンの調製
【０３５４】
【化１２５】
2016040248.tif 000126
【０３５５】
４−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（５００ｍｇ、３．２７ｍｍｏｌ）をジオキサン（１１ｍＬ）に溶解した。４−アセチルフェニルボロン酸（８０２ｍｇ、４．９ｍｍｏｌ、１．５当量）、ｄｐｐｆＰｄＣｌ２（４１ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ、０．０１当量）およびＮａ２ＣＯ３（２Ｎ水溶液、８．６ｍＬ）を加えた。混合物を減圧し、Ｎ２を流し、１６０℃で１５分間マイクロ波にかけた。この同じ反応を６バッチ行った。粗製混合物を集め、ＤＣＭ（４０ｍＬ）と水（２０ｍＬ）との間で分配した。残渣をヘキサン／ＥｔＯＡｃ（０％から１００％）を用いてコンビフラッシュにかけ、遊離塩基アザインドール誘導体をわずかに帯黄色の固体で得た。固体をＤＣＭ（２０ｍＬ）に再度溶解し、氷浴中で撹拌した。エーテル中の２Ｍ  ＨＣｌ溶液（１０ｍＬ）を滴下した。沈澱をろ過し、乾燥して、１−［４−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−フェニル］−エタノン（２．５ｇ、４８％）を得た。ＭＳ：  ｍ／ｚ  ２３７．３  ［ＭＨ＋］．
【０３５６】
実施例７
１−［３−（２−クロロ−ピリジン−４−イル）−フェニル］−エタノンの調製
【０３５７】
【化１２６】
2016040248.tif 000127
【０３５８】
２−クロロピリジン−４−ボロン酸（１１．０ｇ、６９．９ｍｍｏｌ）、３−ブロモアセトフェノン（１１．２ｍＬ、８３．９ｍｍｏｌ、１．２当量）、Ｎａ２ＣＯ３（３５ｍＬ、２４４．６５ｍｍｏｌ、３．５当量）およびｄｐｐｆＰｄＣｌ２（５７２ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ、０．０１当量）をＴＨＦ（２００ｍＬ）中で混合した。混合物を加熱還流し、この温度で６時間続けた。次いで、冷却し、減圧下で濃縮した。残渣をＤＣＭと水（１００ｍＬ／４０ｍＬ）との間で分配した。層を分離し、水層をＤＣＭ（２×４０ｍＬ）でさらに洗浄した。合わせた有機層を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過した。ろ液を濃縮し、残渣をヘキサン／ＥｔＯＡｃ（１／１）を用いてクロマトグラフィにかけ、１−［３−（２−クロロ−ピリジン−４−イル）−フェニル］−エタノンを白色固体で得た（９．５ｇ、５８％）。ＭＳ：  ｍ／ｚ  ２３２．１  ［ＭＨ＋］．
【０３５９】
実施例８
Ｎ−［４−（３−アセチル−フェニル）−ピリジン−２−イル］−ベンズアミドの調製
【０３６０】
【化１２７】
2016040248.tif 000128
【０３６１】
ジオキサン（１２ｍＬ）中の１−［３−（２−クロロ−ピリジン−４−イル）−フェニル］−エタノン（５００ｍｇ、２．１６ｍｍｏｌ）、ベンズアミド（５２３ｍｇ、４．３２ｍｍｏｌ、２当量）、キサントホス（１２０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ、０．１当量）、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（２４ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ、０．０５当量）、Ｋ２ＣＯ３（４４８ｍｇ、３．２４ｍｍｏｌ、１．５当量）の脱気混合物を１５０℃で１時間マイクロ波照射した。ＬＣ／ＭＳ制御。変換は出発原料の消失によりほぼ１００％であった。二量体（Ｍ＋：３９２）が主たる副生成物であった。この時点で出発原料がいくらかでも未反応であれば、キサントホスおよびＰｄ（ＯＡｃ）２をさらに追加して、混合物をさらに３０分間マイクロ波にかけてもよい。次いで、混合物をＤＣＭと水（２０ｍＬ／１０ｍＬ）との間で分配した。層を分離し、水層をＤＣＭ（２×２０ｍＬ）でさらに洗浄した。合わせた有機層を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過した。ろ液を濃縮し、残渣をヘキサン／ＥｔＯＡｃ（１／１）を用いてクロマトグラフィにかけ、Ｎ−［４−（３−アセチル−フェニル）−ピリジン−２−イル］−ベンズアミドを白色固体で得た（３７５ｍｇ、５５％）。ＭＳ：  ｍ／ｚ  ３１７．１  ［ＭＨ＋］．
【０３６２】
実施例９
Ｎ−｛４−［３−（３−モルホリン−４−イル−プロピオニル）−フェニル］−ピリジン−２−イル｝−ベンズアミドの調製
【０３６３】
【化１２８】
2016040248.tif 000129
【０３６４】
Ｎ−［４−（３−アセチル−フェニル）−ピリジン−２−イル］−ベンズアミド（２００ｍｇ、０．６３２ｍｍｏｌ）、モルホリンＨＣｌ塩（７８ｍｇ、０．６３２ｍｍｏｌ、１当量）およびパラホルムアルデヒド（１９ｍｇ、０．６３２ｍｍｏｌ、１当量）をマイクロ波チューブ内のジオキサン（２ｍＬ）中で混合した。これを１８０℃で１５分間照射した。混合物をＤＣＭ／水（１０ｍＬ／５ｍＬ）との間で分配した。水層をＤＣＭ（２×１０ｍＬ）でさらに洗浄した。合わせた有機層を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過した。ろ液を濃縮し、残渣をＤＣＭ／ＭｅＯＨ（２０／１）を用いてクロマトグラフィにかけ、Ｎ−｛４−［３−（３−モルホリン−４−イル−プロピオニル）−フェニル］−ピリジン−２−イル｝−ベンズアミドをわずかに帯黄色の固体で得た（１００ｍｇ、３８％）。ＭＳ：  ｍ／ｚ  ４１６．３  ［ＭＨ＋］．
【０３６５】
実施例１０
１−［３−（２−アミノ−ピリジン−４−イル）−フェニル］−３−モルホリン−４−イル−プロパン−１−オンの調製
【０３６６】
【化１２９】
2016040248.tif 000130
【０３６７】
Ｎ−｛４−［３−（３−モルホリン−４−イル−プロピオニル）−フェニル］−ピリジン−２−イル｝−ベンズアミド（１００ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）をＨＣｌ（２ｍＬ、６Ｎ）中に溶解した。混合物を１４０℃で３０分間マイクロ波照射した。混合物をＤＣＭ（２０ｍＬ）で希釈し、ＮａＯＨでｐＨ約９まで中和した。層を分離し、水層をＤＣＭ（２×１５ｍＬ）でさらに洗浄した。合わせた有機層を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過した。ろ液を濃縮し、残渣を精製して、１−［３−（２−アミノ−ピリジン−４−イル）−フェニル］−３−モルホリン−４−イル−プロパン−１−オン（ＴＦＡ塩）を白色固体で得た（８４ｍｇ、７８％）。ＭＳ：  ｍ／ｚ  ３１２．３［ＭＨ＋］．
【０３６８】
実施例１１
Ｎ−［４−（３−アセチル−フェニル）−ピリジン−２−イル］−４−ｔｅｒｔ−ブチル−ベンズアミドの調製
【０３６９】
【化１３０】
2016040248.tif 000131
【０３７０】
Ｎ−［４−（３−アセチル−フェニル）−ピリジン−２−イル］−ベンズアミドの調製と同じ方法に従い、Ｎ−［４−（３−アセチル−フェニル）−ピリジン−２−イル］−４−ｔｅｒｔ−ブチル−ベンズアミド（１３０ｍｇ、８１％、わずかな不純物）を１−［３−（２−クロロ−ピリジン−４−イル）−フェニル］−エタノン（１００ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）および４−ｔｅｒｔ−ブチルベンズアミド（１５３ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）から得た。ＭＳ：  ｍ／ｚ  ３７３．１  ［ＭＨ＋］．
【０３７１】
実施例１２
４−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−｛４−３−（３−モルホリン−４−イル−プロピオニル）−フェニル］−ピリジン−２−イル｝−ベンズアミドの調製
【０３７２】
【化１３１】
2016040248.tif 000132
【０３７３】
１−［３−（２−アミノ−ピリジン−４−イル）−フェニル］−３−モルホリン−４−イル−プロパン−１−オンの調製と同じ方法に従い、４−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−｛４−３−（３−モルホリン−４−イル−プロピオニル）−フェニル］−ピリジン−２−イル｝−ベンズアミド（１２ｍｇ、３０％）をＮ−［４−（３−アセチル−フェニル）−ピリジン−２−イル］−４−ｔｅｒｔ−ブチル−ベンズアミド（３６ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）から得た。ＭＳ：  ｍ／ｚ  ４７２．３  ［ＭＨ＋］．
【０３７４】
実施例１３
Ｎ−［４−（３−アセチル−フェニル）−ピリジン−２−イル］−アセトアミドの調製
【０３７５】
【化１３２】
2016040248.tif 000133
【０３７６】
Ｎ−［４−（３−アセチル−フェニル）−ピリジン−２−イル］−ベンズアミドの調製と同じ方法に従い、Ｎ−［４−（３−アセチル−フェニル）−ピリジン−２−イル］−アセトアミド（５０ｍｇ、５０％、わずかな不純物）を１−［３−（２−クロロ−ピリジン−４−イル）−フェニル］−エタノン（１００ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）およびアセトアミド（２６ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）から得た。ＭＳ：  ｍ／ｚ  ２５５．１  ［ＭＨ＋］．
【０３７７】
実施例１４
Ｎ−｛４−［３−（３−モルホリン−４−イル−プロピオニル）−フェニル］−ピリジン−２−イル｝−アセトアミドの調製
【０３７８】
【化１３３】
2016040248.tif 000134
【０３７９】
１−［３−（２−アミノ−ピリジン−４−イル）−フェニル］−３−モルホリン−４−イル−プロパン−１−オンの調製と同じ方法に従い、Ｎ−｛４−［３−（３−モルホリン−４−イル−プロピオニル）−フェニル］−ピリジン−２−イル｝−アセトアミド（１０ｍｇ、２０％）をＮ−［４−（３−アセチル−フェニル）−ピリジン−２−イル］−アセトアミド（５０ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）から得た。ＭＳ：  ｍ／ｚ  ３５４．３  ［ＭＨ＋］．
【０３８０】
実施例１５
インビトロアッセイ
ＩＬ−２産生の測定
ヒトＴ細胞株を、抗ＣＤ３モノクローナル抗体であらかじめコーティングした９６穴プレートに播種した。ウェルを未処理のままにするか、または抗ＣＤ２８で２日間処理した。上清を回収し、ヒトＩＬ−２  ＥＬＩＳＡアッセイを用いて、試験化合物存在下または非存在下でのＩＬ−２産生を試験した。
【０３８１】
Ｔ細胞増殖アッセイ
ヒトＴ細胞株を、抗ＣＤ３モノクローナル抗体であらかじめコーティングした９６穴プレートに播種した。ウェルを未処理のままにするか、または抗ＣＤ２８で２日間処理した。細胞増殖を、市販のＣＥＬＬＴＩＴＥＲ−ＧＬＯ（商標）アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を用い、試験化合物存在下または非存在下で測定した。
【０３８２】
インビトロキナーゼアッセイ
化合物をＨＩＴＨＵＮＴＥＲ（商標）酵素断片相補法（Ｄｉｓｃｏｖｅｒｘ）を用いてスクリーニングした。簡単に言うと、組換えにより生成したＮ−末端Ｈｉｓ標識ＩＴＫキナーゼドメイン（アミノ酸３５２〜６１７）を様々な濃度の個々の化合物と共にインキュベートした。ＡＴＰおよび基質を加え、キナーゼ反応を２〜１６時間進行させた。市販の検出試薬を加え、２〜４時間反応させた。反応を発光により評価した。初期結果を全長組換えＩＴＫタンパク質を用いて確認した。
【０３８３】
同様に、ＨＩＴＨＵＮＴＥＲ（商標）などの市販の試薬を用いて、別のキナーゼの活性に対する化合物の効果を評価した。組換え精製タンパク質をこれらの試験に用いたため、ＢＴＫ、ＬＣＫおよびＥＲＫのキナーゼドメインを発現させた。
【０３８４】
表１の化合物を試験し、１μＭ未満のＩＣ５０でＩＬ−２産生を阻害すること、Ｔ細胞増殖を阻害すること、およびＩＴＫを阻害することが判明した。
【０３８５】
【表１−１】
2016040248.tif 000135
【０３８６】
【表１−２】
2016040248.tif 000136
【０３８７】
【表１−３】
2016040248.tif 000137
【０３８８】
表２〜５の化合物をインビトロキナーゼアッセイで試験した。
【０３８９】
【表２−１】
2016040248.tif 000138
【０３９０】
【表２−２】
2016040248.tif 000139
【０３９１】
【表２−３】
2016040248.tif 000140
【０３９２】
【表２−４】
2016040248.tif 000141
【０３９３】
【表２−５】
2016040248.tif 000142
【０３９４】
【表２−６】
2016040248.tif 000143
【０３９５】
【表３−１】
2016040248.tif 000144
【０３９６】
【表３−２】
2016040248.tif 000145
【０３９７】
【表４−１】
2016040248.tif 000146
【０３９８】
【表４−２】
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【０３９９】
【表４−３】
2016040248.tif 000148
【０４００】
【表４−４】
2016040248.tif 000149
【０４０１】
【表５−１】
2016040248.tif 000150
【０４０２】
【表５−２】
2016040248.tif 000151
【０４０３】
【表５−３】
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【０４０４】
【表５−４】
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【０４０５】
【表５−５】
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【０４０６】
【表５−６】
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【０４０７】
【表５−７】
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【０４０８】
【表５−８】
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【０４０９】
実施例１６
インビボ試験
いくつかの代表的化合物を、マウスインビボ腫瘍モデルにおける有効性について評価した。ＮＯＤ／ＳＣＩＤマウスにＴ細胞白血病／リンパ腫細胞を腹腔内に移植した。１つの群は媒体だけで治療し（模擬治療）、その一方で他の群はいくつかの小分子阻害剤により腹腔内経路で治療した。腫瘍の成長を、腹腔内洗浄およびＦＡＣＳ分析により評価した。表６に媒体のみで治療した模擬群に対する腫瘍成長の阻害パーセントをまとめている。本試験で評価した化合物の用量は最大耐容量よりも低く、極めて低い毒性しか示さなかった。
【０４１０】
表６の化合物を試験し、示した濃度で腫瘍成長を少なくとも５０％阻害した。
【０４１１】
【表６−１】
2016040248.tif 000158
【０４１２】
【表６−２】
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【０４１３】
実施例１７
化合物活性メカニズム
この化合物クラスはＴｅｃおよびＥＧＦＲなどのキナーゼファミリー、ならびに少数の他のキナーゼのキナーゼドメインと選択的に相互作用する。この化合物のクラスは、脱離基のインサイチューでの脱離による反応性アミノエチルＣ＝Ｙ弾頭部の露出を含むメカニズムを通して、キナーゼ結合ドメインのＡＴＰ結合部位で不可逆的に反応することを示す証拠がある。化合物はＣ＝Ｙ基に隣接する引き抜き可能なプロトンを含み、これは対象となるキナーゼの活性部位で適当な触媒環境に曝された後、ベータ−アミノ官能基の脱離を促進する。この脱離によって反応性求電子種（一般にはマイケル受容体部分と呼ばれる）が生じ、これはキナーゼ活性部位に隣接するシステイン残基があることで、このシステイン残基とインサイチューで生じた求電子種との間の共有結合付加物を速やかに生成する。キナーゼと求核性システインに極めて近い触媒環境との組み合わせは、この作用メカニズムを説明する重要で独特の条件である。下記のデータは、インサイチューでの脱離が本発明で示す化合物の阻害活性を増進することを裏付けている。脱離を妨げる様式で化合物を修飾すると、化合物は阻害活性を示すことができない。
【０４１４】
【表７】
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【０４１５】
実施例１８
キナーゼを選択するための共有結合
関連するシステインの近くでの脱離の結果、化合物とキナーゼドメインとの間で共有結合付加物が生成する。後に続く不可逆的結合は、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）および化合物とキナーゼとの共沈を含むいくつかの方法によって示すことができる。
【０４１６】
ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）はＳＰＲに基づくタンパク質相互作用アプローチで、これによりキナーゼをセンサーチップに固定し、小分子溶液をキナーゼと反応させる。小分子／キナーゼ相互作用の検出は実時間で行い、ＳＰＲ反応の差として検出する。図１は、ＩＴＫキナーゼドメインをバイオセンサー上に固定し、それが小分子に結合および解離する能力について評価した、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）実験を示している。データは本出願で示す化合物がＩＴＫキナーゼドメインに不可逆的に結合することを示している。
【０４１７】
共沈アッセイにおいて、１〜１０ｍＭの標識化合物をキナーゼ発現細胞またはキナーゼ欠損細胞いずれかからの細胞溶解物と共にインキュベートする。次いで、標識を用いて化合物および任意の結合タンパク質を沈澱させる。混合物をＳＤＳ−ＰＡＧＥで分離し、タンパク質をウェスタンブロッティングおよび／または質量分析により同定する。
【０４１８】
実施例１９
システイン４４２の付加物生成への寄与
本明細書に示す化合物がＴｅｃおよびＥＧＦＲキナーゼのキナーゼドメインと相互作用するメカニズムを確認するために、発明者らはＩＴＫキナーゼドメインの点突然変異を作成し、それにより鍵となるアミノ酸、すなわちＣ４４２をアラニンに変異させた。タンパク質を市販のバキュロウイルス発現系で製造元者の一般的プロトコルを用いて発現させた（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、ｐＢｌｕｅＢａｃ）。タンパク質を標準の技術を用いて発現および精製した。野生型（ＷＴ）ＩＴＫキナーゼドメインおよびＣ４４２Ａキナーゼドメインはいずれもキナーゼ活性を示した。ＷＴ−ＩＴＫの活性は本出願に示す化合物によって阻害されたが、同じ化合物はＣ４４２Ａ突然変異型キナーゼドメインには活性を示さなかった。
【０４１９】
【表８】
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【図２】
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【図１】
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【図３】
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【配列表】
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【手続補正書】
【提出日】平成27年9月25日(2015.9.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
血液細胞悪性疾患を処置するためのインターロイキン−２誘導性チロシンキナ−ゼ（ＩＴＫ）阻害剤の使用。
【請求項２】
血液細胞悪性疾患を処置するための製剤を製造するためのインターロイキン−２誘導性チロシンキナ−ゼ（ＩＴＫ）阻害剤の使用。
【請求項３】
血液細胞悪性疾患がリンパ腫であることを特徴とする、請求項１又は２記載の使用。
【請求項４】
リンパ腫がホジキンリンパ腫であることを特徴とする、請求項３記載の使用。
【請求項５】
リンパ腫が非ホジキンリンパ腫であることを特徴とする、請求項３記載の使用。
【請求項６】
非ホジキンリンパ腫が皮膚Ｔ細胞リンパ腫、びまん性大細胞型リンパ腫、ＨＴＬＶ−１関連Ｔ細胞リンパ腫、結節性末梢Ｔ細胞リンパ腫、結節外末梢Ｔ細胞リンパ腫、中枢神経系リンパ腫、又はＡＩＤＳ関連リンパ腫であることを特徴とする、請求項５記載の使用。
【請求項７】
血液細胞悪性疾患が白血病であることを特徴とする、請求項１又は２記載の使用。
【請求項８】
白血病が急性リンパ性白血病、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性（ｍｙｅｌｏｇｅｎｏｕｓ）白血病、急性骨髄性（ｍｙｅｌｏｉｄ）白血病、慢性骨髄性白血病、慢性リンパ性白血病、Ｔ細胞前リンパ性白血病、成人Ｔ細胞白血病又はヘアリーセル白血病であることを特徴とする、請求項７記載の使用。
【請求項９】
血液細胞悪性疾患が肥満細胞悪性疾患であることを特徴とする、請求項１又は２記載の使用。