(57)【要約】【課題】生体由来液中のヒストンを効率良く除去することができる、ヒストン吸着材及び生体由来液浄化デバイスを提供する。【解決手段】生体由来液中よりヒストンを除去する吸着材であって、水不溶性であり、水不溶性担体にリガンドが結合されており、リガンドが炭化水素鎖及び／又は環式有機化合物部分を有し、かつ該リガンドの荷電が０以上である、吸着材が提供される。また、生体由来液中よりヒストンを除去する為の生体由来液浄化デバイスであって、生体由来液の入口及び出口を備えたハウジングと、ハウジング内に収容された上記吸着材と、を有し、ハウジング内に生体由来液が流通することにより、生体由来液から前記ヒストンを除去する、生体由来液浄化デバイスが提供される。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
生体由来液中よりヒストンを除去する吸着材であって、水不溶性担体にリガンドが固定化されており、該リガンドが炭素水素鎖及び／又は環式有機化合物部分を有し、かつ該リガンドの荷電が０以上である吸着材。
【請求項２】
前記リガンドの荷電が０である、請求項１に記載の吸着材。
【請求項３】
前記リガンドが陰性荷電を有する官能基を含む、請求項１又は２に記載の吸着材。
【請求項４】
前記リガンドがアミノ酸である、請求項１〜３のいずれかに記載の吸着材。
【請求項５】
前記アミノ酸が、トリプトファン、又はフェニルアラニンである、請求項１〜４のいずれかに記載の吸着材。
【請求項６】
前記水不溶性担体が、ポリビニルアルコールゲルからなる多孔質ビーズの担体である、請求項１〜５のいずれかに記載の吸着材。
【請求項７】
前記ヒストンがヒストンＨ３である、請求項１〜６のいずれかに記載の吸着材。
【請求項８】
生体由来液中よりヒストンを除去する為の生体由来液浄化デバイスであって、前記生体由来液の入口及び出口を備えたハウジングと、前記ハウジング内に収容された請求項１〜７のいずれかに記載の吸着材と、を有し、前記ハウジング内に前記生体由来液が流通することにより、前記生体由来液から前記ヒストンを除去する、生体由来液浄化デバイス。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生体由来液中等のヒストンを吸着する吸着材、及びそれを用いた生体由来液浄化デバイスに関する。
【背景技術】
【０００２】
全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）は、感染等が引き金となりサイトカイン等の物質が過剰に放出され全身の炎症状態が亢進した状態と定義され、有効な治療法が無く、世界的には１８００万人が毎年亡くなっている。
【０００３】
現在までにＳＩＲＳを伴う疾患に対して、過剰に産生された炎症性サイトカインを中和することを目的に抗ＴＮＦ−α抗体、ＩＬ−１Ｒａなどの臨床試験が試みられてきたが、有効性を証明するには至っていない。
【０００４】
単独の炎症性サイトカインをターゲットとした治療の試みが有効な結果を示せてない理由は、ＳＩＲＳの背景及び症状がさまざまであり、またＳＩＲＳを引き起こしているサイトカインは１種類のみではなく、非常に複雑なサイトカインネットワークを形成しているためであると考えられている。
【０００５】
血液中よりこれら病因物質を網羅的に除去する血液濾過等の血液浄化療法が注目され、中分子領域のサイトカインを含むタンパク質を除去する技術が開示されている。
【０００６】
従来、濾過・透析による血液浄化療法により、複雑なサイトカインネットワークに関与するメディエータすべてを除去しようと試みられてきたが、多臓器不全に対するサイトカインのモノクローナル抗体投与とは異なった機序による有効性も考えられているが、除去できる量には限界がある。
【０００７】
そこで、近年これらの炎症性サイトカインを血中から吸着除去することにより、ＳＩＲＳの治療を行うことを目的とした、炎症性サイトカイン吸着材に関しての報告がなされている（例えば、特許文献１参照。）。
【０００８】
さらに最近、ＳＩＲＳの病因物質として新たにヒストンが非常に重要であるとの研究結果が開示されている（例えば、非特許文献１、２参照。）。
【０００９】
このことは、ＳＩＲＳ患者の血中ヒストン濃度は健常人に比較して数十倍〜数百倍のレベルにある事、また、炎症モデルマウスがヒストン抗体の投与により回復したことからも検証できる（例えば、非特許文献３参照。）。
【００１０】
ヒストンは真核生物のクロマチンを構成する主要なタンパクであり、塩基性タンパク質を多く含むため、正電荷を帯び、リン酸基由来の負電荷をもつＤＮＡ鎖が、約二回巻き付き、長いＤＮＡ分子を折り畳んで核内に収納する役割をもつ。ヒストンは、Ｈ２Ａ，Ｈ２Ｂ，Ｈ３，Ｈ４の４種類に分類され、各々２つずつ結合した八量体を形成したヒストン八量体にＤＮＡが巻き付いたものをヌクレオソームと呼ぶ。一方、ヌクレオソーム間のＤＮＡ（リンカーＤＮＡ）に結合するヒストンはリンカーヒストンと呼ばれ、その代表的なものはヒストンＨ１と呼ばれる。
【００１１】
これらヒストンについては、カチオン性であることが知られており、実際、特許文献２、３に開示されている様に、硫酸化セルロースやヒドロキシアパタイト等のアニオン性吸着材による分離精製ターゲットタンパク質の一つである。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１２】
【特許文献１】特表２０１３−５２３７７２
【特許文献２】特開２００７−９２０３４
【特許文献３】特開平８−７１４１２
【非特許文献】
【００１３】
【非特許文献１】Ｘｕ  Ｊ１，  Ｚｈａｎｇ  Ｘ，  Ｐｅｌａｙｏ  Ｒ，  Ｍｏｎｅｓｔｉｅｒ  Ｍ，  Ａｍｍｏｌｌｏ  ＣＴ，  Ｓｅｍｅｒａｒｏ  Ｆ，  Ｔａｙｌｏｒ  ＦＢ，  Ｅｓｍｏｎ  ＮＬ，  Ｌｕｐｕ  Ｆ，  Ｅｓｍｏｎ  ＣＴ、「Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｈｉｓｔｏｎｅｓ  ａｒｅ  ｍａｊｏｒ  ｍｅｄｉａｔｏｒｓ  ｏｆ  ｄｅａｔｈ  ｉｎ  ｓｅｐｓｉｓ」、Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、２００９年１１月、１５，１３１８−１３２１，１
【非特許文献２】射場敏明、村井美和、長岡功、田部陽子、「敗血症におけるｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ  ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｔｒａｐｓ（ＮＥＴｓ），ｄａｍａｇｅ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｐａｔｔｅｒｎｓ（ＤＡＭＰｓ），そして細胞死」、日救急医会誌、２０１３年、２４、８２７−３６
【非特許文献３】伊藤隆史、丸山征郎、科学研究費助成事業（学術研究助成基金助成金）研究成果報告書「敗血症の新規メディエーター“細胞外Ｈｉｓｔｏｎｅ”のダイナミズムの解析」
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
このように、ヒストンは本来生体に必要な機能を有するものであるが、敗血症のような病態においては細胞外に過剰に放出されて病態悪化を引き起こし、生体を死に至らしめる物質である。しかし、ヒストンは真核生物のクロマチンを構成する主要なタンパクであり、ＤＮＡ分子を折り畳んで核内に収納する非常に重要な役割をもっており、細胞内で生体に必要な機能を有することを考えると、ヒストン活性を阻害する薬剤の投与は、生体に重大な副作用を引き起こす懸念がある。つまり、生体に好ましくない細胞外のヒストンを、選択的に体内から除去する手段が望まれる。そこで、体外循環によるヒストン除去が考えられる。
【００１５】
一方、特許文献２及び３に記載の吸着材は、ヒストンをターゲット物質として挙げつつも、血液や血漿など、生体由来液中からの吸着性能を実際に測定した実施例は報告されていない。そこで、本発明者らが特許文献２及び３に記載の吸着材のヒストン吸着能を調べたところ、特許文献２及び３に記載の吸着材は、生体由来液中からのヒストン吸着性が低く、ヒストン吸着材としては不適切であることが分かった。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
そこで本発明者らは、生体由来液中よりヒストンを効率的に吸着除去できる吸着材を提供する為に鋭意検討を行ったところ、上述の特許文献２，３に記載の吸着材が吸着能を示さなかったように、生体由来液中では、ヒストンは、従来ヒストンが吸着されると考えられていた陰性荷電のみを持つ材料には吸着されず、炭化水素鎖及び／又は環式有機化合物部分を有し、該リガンドの荷電が０以上であるリガンドを有する材料により、ヒストンが効率的に吸着除去されることを見出した。
【００１７】
本発明は、以下の（１）〜（８）に示すヒストン吸着材及び生体由来液浄化デバイスである。
（１）生体由来液中よりヒストンを除去する吸着材であって、水不溶性担体に、リガンドが固定化されており、該リガンドが炭化水素鎖及び／又は環式有機化合物部分を有し、かつ該リガンドの荷電が０以上である吸着材。
（２）リガンドの荷電が０である、（１）に記載の吸着材。
（３）リガンドが疎水性原子団と陰性荷電を有する、（１）又は（２）に記載の吸着材。
（４）リガンドがアミノ酸である、（１）〜（３）のいずれかに記載の吸着材。
（５）アミノ酸が、トリプトファン、又はフェニルアラニンである、（１）〜（４）のいずれかに記載の吸着材。
（６）吸着材の水不溶性担体が、ポリビニルアルコールゲルからなる多孔質ビーズの担体である、（１）〜（５）のいずれかに記載の吸着材。
（７）ヒストンがヒストンＨ３である、（１）〜（６）のいずれかに記載の吸着材。
（８）生体由来液中よりヒストンを除去する為の生体由来液浄化デバイスであって、生体由来液の入口及び出口を備えたハウジングと、ハウジング内に収容された（１）〜（７）のいずれかに記載の吸着材と、を有し、生体由来液を流通させることにより、生体由来液からヒストンを除去する、生体由来液浄化デバイス。
【発明の効果】
【００１８】
本発明によれば、ヒストンの吸着材及び生体由来液浄化デバイスが提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】生体由来液浄化デバイスの一実施形態を示す断面図である。
【図２】生体由来液浄化デバイスの別の実施形態を示す断面図である。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
以下、本発明の好適な実施の形態（以下において、「本実施形態」という。）について詳細に説明する。なお以下の示す本実施形態は、この発明の技術的思想を具体化するための装置や方法を例示するものであって、この発明の技術的思想は構成部材の組み合わせ等を下記のものに特定するものではない。
【００２１】
本実施形態に係る吸着材は、生体由来液中よりヒストンを除去する吸着材であって、水不溶性担体にリガンドが固定化されており、リガンドが炭化水素鎖及び／又は環式有機化合物部分を有し、該リガンドの荷電が０以上である吸着材である。また、本実施形態に係る生体由来液浄化デバイスは、生体由来液中よりヒストンを除去する為の生体由来液浄化デバイスであって、生体由来液の入口及び出口を備えたハウジングと、ハウジング内に収容された吸着材であって、水不溶性担体にリガンドが固定化されており、リガンドが炭化水素鎖及び／又は環式有機化合物部分を有し、該リガンドの荷電が０以上である吸着材と、を有し、ハウジング内に生体由来液が流通することにより、生体由来液からヒストンを除去する、生体由来液浄化デバイスである。
【００２２】
（担体）
本実施形態に係る吸着材は、水に不溶性の担体を含む。水に不溶性であることにより、吸着材が血液に接触した際に担体材料が血液中へ溶出することを防止することができる。本明細書中、「水不溶性」とは、２４時間乾燥させた乾燥状態の該吸着材を２４時間、純水に浸漬させ、その後、取り出して、６０℃で２４時間乾燥した後の重量減が１０．０ｗｔ％以下であることをいう。
【００２３】
吸着材の形状は限定されず、粒子状、中空糸状、不織布状、繊維状、シート状、及びスポンジ状のいずれでもよいが、生体由来液との接触表面積の観点で、粒子状であることが望ましい。
【００２４】
粒子状の担体は、その比表面積と生体由来液の流通性を考慮すると、平均粒径５０〜１５００μｍのものが好ましく、全血を通過させる用途の場合には、１００〜１０００μｍのものが更に好ましい。ここで、粒径とは、顕微鏡で観察した場合の担体の輪郭上の任意の２点を結ぶ直線のうち最も長い直線の長さをいう。また、平均粒径とは、無作為に選択した１００個の粒子状担体の粒径の算術平均値をいう。
【００２５】
十分なヒストン吸着性能を確保する観点から、粒子状の担体の表面積は例えば１ｍ2／ｇ以上であり、好ましくは５ｍ2／ｇ以上である。担体の表面積は、後述するように、吸着材からリガンドを除去した後で測定することができる。
【００２６】
担体の表面積は、液体窒素温度（７７Ｋ）における窒素吸着等温線を測定した後に、ＢＥＴ（ＪＩＳ  Ｚ  ８８３０;気体吸着による粉体（固体）の比表面積測定方法）解析法を用いて算出した表面積を指す。窒素吸着等温線の測定法には、セル内に充填した窒素ガスの圧力低下により担体へ吸着した窒素の量を算出する容量法、担体の重量変化を測定する重量法の２種があるが、どちらを用いて測定してもあまり差が無いのが一般的である。測定法によって表面積の測定値に差が生じる場合は、いずれかの測定値が１ｍ2／ｇ以上であれば、十分なヒストン吸着性能が確保できるといえる。また、表面積を測定することができるいずれかの方法によって１ｍ2／ｇ以上の表面積を有すると評価できる場合も同様である。
【００２７】
中空糸状の担体を用いる場合には、中空糸内部に血液を流す観点から、中空糸の内径は１００〜３００μｍが好ましい。
【００２８】
担体が、不織布又は織布の場合、その平均繊維直径は０．３μｍ〜１０μｍとすることができ、０．３μｍ〜３μｍであることが好ましく、０．５μｍ〜１．８μｍであることが更に好ましい。平均繊維直径が０．３μｍ以上である場合、血液を濾過する際の圧力損失が適度となり、また赤血球が溶血しにくくなる傾向にある。
【００２９】
ここで平均繊維直径とは、フィルター担体を構成する不織布又は織布の一部をサンプリングし、電子顕微鏡で観察した写真より測定した平均直径である。
【００３０】
担体の材料の例としては、セルロース系ゲル、デキストラン系ゲル、アガロース系ゲル、ポリアクリルアミド系ゲル、多孔質ガラス、ビニルポリマーゲル等があり、水不溶性であれば全て用いることができるが、リガンドの導入簡便性の観点から、ポリビニルアルコールゲルが好適に用いられる。
【００３１】
これらの担体を例示すると、旭化成マイクロキャリア（旭化成（株）社製）、ＣＭ−セルロファイン（登録商標）ＣＨ（排除限界タンパク質分子量：約３×１０６、生化学工業（株）販売）などのセルロース系担体、特公平１−４４７２５号公報記載の全多孔質活性化ゲルや、ＣＭ−トヨパール（登録商標）６５０Ｃ（排除限界タンパク質分子量：５×１０６、東ソー（株）製）などのポリビニルアルコール系担体、ＣＭ−トリスアクリルＭ（ＣＭ−Ｔｒｉｓａｃｒｙｌ  Ｍ、排除限界タンパク質分子量：１×１０７、スウェーデン国ファルマシア−ＬＫＢ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ−ＬＫＢ）社製）などのポリアクリルアミド系担体、セファロースＣＬ−４Ｂ（ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ−４Ｂ、排除限界タンパク質分子量：２×１０７、スウェーデン国ファルマシア−ＬＫＢ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ−ＬＫＢ）社製）などのアガロース系担体などの有機質担体、及びＣＰＧ−１０−１０００（排除限界タンパク質分子量：１×１０８、平均細孔径：１００ｎｍ、米国エレクトロ−ニュークレオニクス（Ｅｌｅｃｔｒｏ−ｎｕｃｌｅｏｎｉｃｓ）社製）などの多孔性ガラスなどの無機質担体が挙げられる。
【００３２】
担体の組成は、ポリアミド系、ポリエステル系、ポリウレタン系、ポリスルホン系、ポリアクリルニトリル系、ポリメタクリル酸メチル系、及びビニル化合物の重合体等、多孔性構造をとりうる公知の重合体であってよい。またこれらの重合体からなる担体にポリマーがコートされたものにリガンドが固定化されて吸着材を形成してもよい。
【００３３】
（リガンドの固定化）
本明細書中では、「リガンド」とは特定の物質に対して相互作用（結合性）を示す物質又は原子団のことをいい、特定の物質と親和性を有するものであれば構造など特に限定はない。本明細書中では、特にヒストンに対して相互作用を有する物質をリガンドという。
【００３４】
リガンドがヒストンに対して相互作用を有するかどうかは、例えば、濃度が既知のヒストン溶液に、リガンドを固定化した担体を一定時間浸漬させた後、ヒストン溶液中のヒストン濃度を測定することにより、浸漬前後の濃度変化から判定することができる。浸漬前後で、ヒストン溶液のヒストン濃度が１０％以上減少すれば、この物質はヒストンに対して相互作用を示す。
【００３５】
リガンドの担体への固定化方法としては、その様式を問わないが、共有結合を形成する方法が好ましい。例えば、担体がカルボキシル基を有する場合には、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミドと反応させることによって、スクシンイミドオキシカルボニル基に変換し、これに、リガンドがアミノ基を有している場合には、リガンドをアミノ基の部分で反応させる方法（活性エステル法）が挙げられる。担体がアミノ基又はカルボキシル基を有する場合には、ジシクロヘキシルカルボジイミドなどの縮合試薬の存在下で、リガンドがアミノ基又はカルボキシル基を有している場合には、リガンドのカルボキシル基又はアミノ基を縮合反応させる方法（縮合法）、担体とリガンドとをグルタルアルデヒドなどの２個以上の官能基を有する化合物を用いて結合する方法などが挙げられる。また、担体が、水酸基を有する場合には、臭化シアンなどのハロゲン化シアンを担体に作用させ、リガンドのアミノ基の部分で反応させる方法やエピクロロヒドリンなどのエポキシドを担体に作用させ、リガンドのアミノ基の部分や水酸基の部分で反応させる方法等が挙げられる。例えば、リガンドがトリプトファンの場合、エピクロロヒドリンなどのエポキシドを担体に反応させ、トリプトファンのアミノ基と多孔質体のエポキシ基とを反応させることで、トリプトファンを担体に固定化することができる。
【００３６】
また、担体にリガンドを物理的にコーティングすることによっても、リガンドを固定化することができる。例えば、リガンドを適切な溶媒に溶解させた溶液（リガンド溶液）に担体を一定時間浸漬させる方法、又はリガンド溶液を担体に噴霧する方法、が利用可能である。
【００３７】
リガンドの固定化量は、リガンド固定化反応に用いるためのリガンドを溶解させたリガンド溶液の波長２００ｎｍ〜２８０ｎｍの吸光度スペクトルを測定し、最も高い吸光度を示す波長を用いて、リガンド固定化反応前後のリガンド反応溶液の吸光度の差から担体１ｍＬゲルあたりの固定化量（ｅｑ／ｍＬゲル）として算出する。例えば、リガンドがトリプトファンの場合は、リガンド固定化反応に用いるためのトリプトファン溶液の２７８ｎｍの吸光度を測定し、リガンド固定化反応前後のトリプトファン溶液の吸光度の差から担体１ｍＬゲルあたりの固定化量（ｅｑ／ｍＬゲル）として算出する。
【００３８】
あるいは、リガンド溶液のリガンド固定化反応前後のリガンド溶液の重量の差から１ｍＬゲルあたりの固定化量（ｍｇ／ｍＬ）として算出してもよい。
【００３９】
また、水酸化ナトリウム等の適切な試薬の溶液の波長２００ｎｍ〜２８０ｎｍの吸光度スペクトルを測定した後に、加水分解反応等によりリガンドをこの溶液に溶出させ、得られたリガンド溶出液の波長２００ｎｍ〜２８０ｎｍの吸光度スペクトルを測定する。最も高い吸光度を示す波長を用いて、リガンド溶出前後のリガンド溶出液の吸光度の差から、１ｍＬゲルあたりの固定化量（ｅｑ／ｍＬゲル）として算出する。あるいは、リガンド溶出前後のリガンド溶出液の重量の差から、１ｍＬゲルあたりの固定化量（ｍｇ／ｍＬ）として算出してもよい。
【００４０】
リガンドの構造解析については、リガンド溶出液をサンプルとし、ＨＰＬＣや元素分析、ＮＭＲ等の様々な分析手法により、構造を解析することが可能である。
【００４１】
リガンド固定化の際には、必要に応じて水不溶性担体とリガンドとの間に任意の長さの分子（スペーサー）を導入することもできる。スペーサー分子としては、ポリメチレン鎖、ポリエチレングリコール鎖等が挙げられる。例えば、アガロースの水酸基とヘキサメチレンジイソシアナートの片側のイソシアナート基を反応、結合させ、残ったイソシアナート基とリガンドのアミノ基、水酸基、カルボキシル基等を反応、結合させることができる。
【００４２】
担体に結合したリガンドの量、すなわち、リガンドの保持量（固定化されたリガンドの量）は、担体１ｍＬゲルあたり１０μｍｏｌ〜２００μｍｏｌの範囲であるのが好ましく、より好ましくは１０μｍｏｌ〜１００μｍｏｌの範囲である。保持量が１０μｍｏｌ以上であると、リガンドが担体表面全体を覆うことができるため、血漿が担体表面と直に接する面積が減り、血漿有用成分の非特異吸着が起こり難く、ヒストンをより選択的に吸着できる傾向にあるので好ましい。また、２００μｍｏｌ以下であると、担体表面上のリガンドが密集し過ぎず、リガンドの凝集を抑制することができるため、血漿有用成分の非特異吸着が起こり難く、ヒストンをより選択的に吸着できる傾向にあるので好ましい。
【００４３】
（炭化水素鎖）
本明細書中で述べる炭化水素鎖とは、炭素原子と水素原子からなる分子部分構造のことをいう。
例えば、炭素原子と水素原子からなる分子部分構造の末端の炭素原子が、水素原子以外の原子と共有結合していない場合、例えば、一つの炭素原子と水素から成る分子部分構造は、通常メチル基と呼ばれる炭化水素鎖であり、また、炭素原子と水素原子からなる分子部分構造の末端の炭素原子が、水素原子以外の新たな原子と共有結合している場合、一つの炭素原子と水素から成る分子鎖は、通常メチレン鎖と呼ばれる炭化水素鎖である。
【００４４】
本明細書中で述べる炭化水素鎖は、飽和炭化水素鎖であっても不飽和炭化水素鎖であってもよく、また、飽和炭化水素鎖と不飽和炭化水素鎖が混合していてもよい。
【００４５】
１）飽和炭化水素鎖の場合
炭素原子と炭素原子が２重結合や３重結合で繋がることなく、非環式の飽和炭化水素鎖が分子の末端にある場合は、
−（CnH2n+1）    但し、ｎは1以上の整数
で表すことのできる基であり、例えば、n=1の場合はメチル基、n=2の場合はエチル基である。
また、非環式の飽和炭化水素鎖が分子の途中にある（炭化水素鎖の両端の炭素が水素以外の原子と共有結合している）場合は、
−（CnH2n）−    但し、ｎは1以上の整数
で表すことのできる分子鎖である。尚、非環式の飽和炭化水素鎖は、直線状であっても分枝状であってもよい。
炭素原子が３つ以上の環式飽和炭化水素は、分子の末端にある場合は、
−（CnH2n-1）    但し、ｎは3以上の整数
で表すことのできる基である。
また、分子の途中にある場合は、
−（CnH2n-2）−  但し、ｎは3以上の整数
で表すことのできる分子鎖である。
【００４６】
２）不飽和炭化水素鎖の場合
以下には、例として、二重結合又は三重結合をそれぞれ一つのみ有する場合の式を記載するが、炭化水素鎖には、二重結合又は三重結合が二つ以上の場合も含まれる。
炭素原子と炭素原子の二重結合を有する非環式不飽和炭化水素鎖が、分子の末端にある場合は、
−（CnH2n-1）      但し、ｎは2以上の整数
で表すことのできる基である。
また、非環式不飽和炭化水素鎖が分子の途中にある場合は、
−（CnH2n-2）−    但し、ｎは2以上の整数
で表すことのできる分子鎖である。
炭素原子と炭素原子の三重結合を有し、非環式の不飽和炭化水素鎖が分子の末端にある場合は、
−（CnH2n-3）      但し、ｎは2以上の整数
で表すことのできる基である。
また、分子の途中にある場合は、
−（CnH2n-4）−    但し、ｎは2以上の整数
で表すことのできる分子鎖である。
二重結合をもつ環式不飽和炭化水素鎖は、分子の末端にある場合は、
−（CnH2n-3）    但し、ｎは3以上の整数
で表すことのできる基である。
また、分子の途中にある場合は、
−（CnH2n-4）−  但し、ｎは3以上の整数
で表すことのできる分子鎖である。
三重結合をもつ環式不飽和炭化水素鎖は、分子中の末端にある場合は、
−（CnH2n-5）    但し、ｎは3以上の整数
で表すことのできる基である。
また、分子の途中にある場合は、
−（CnH2n-6）−  但し、ｎは3以上の整数
で表すことのできる分子鎖である。
【００４７】
炭化水素鎖には、アルキル基、アルケニル基、及びアルキニル基も含まれる。アルキル基の例としては、メチル基、エチル基、プロピル基、ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基、ヘプチル基、オクチル基、ノニル基、デシル基、及びイコシル基等があり、炭素数１以上のアルキル基であれば全て用いることができる。また、直鎖状であっても枝分かれ状であってもよい。これらの官能基は、単独でも組み合わせても採用することができる。
【００４８】
アルケニル基の例としては、エテニル基、プロペニル基、ブテニル基、ペンテニル基、ヘキセニル基、ヘプテニル基、オクテニル基、ノネニル基、デセニル基、及びイコセニル等があり、アルケニル基であれば全て用いることができる。また、直鎖状であっても枝分かれ状であってもよい。これらの官能基は、単独でも組み合わせても採用することができる。
【００４９】
アルキニル基の例としては、エチニル基、プロピニル基、ブチニル基、ペンチニル基、ヘキシニル基、ヘプチニル基、オクチニル基、ノニニル基、及びデシニル基等があり、アルキニル基であれば全て用いることができる。また、直鎖状であっても枝分かれ状であってもよい。これらの官能基は、単独でも組み合わせても採用することができる。
【００５０】
（環式有機化合物部分）
前述の炭素水素鎖に一部含まれるものもあるが、環式有機化合物部分としては、シクロヘキサン、ベンゼン、ナフタレン、アダマンタン、ラクトン、ピリジン、シクロペンタン、チオフェン、チエニルアラニン、チエニルグリシン、チエニルセリン、ポルフィリン、インドール環、トリプタミン、ビタミンＥに代表されるトコフェノール類等があるが、炭素骨格を基本とした環状構造を有する有機化合物であれば全て用いることができ、縮合環、複素環などを含む。リガンドは、環状アルキル基又は（ヘテロ）アリール基を単独で有しても、組み合わせて有してもよく、さらにアルキル基を有してもよい。
【００５１】
（リガンドでの荷電（Ｅ））
リガンドは一分子あたりの荷電（Ｅ）が０以上である。ここでいう荷電（Ｅ）とは、
式：Ｅ＝（該リガンド中の陽性荷電を有する官能基の数）−（該リガンド中の陰性荷電を有する官能基の数）
で定義される。また、リガンドの荷電が大きくなると、すなわち、陽性荷電が多くなり過ぎると、血球の付着や血液凝固が起こりやすくなる傾向にあるので、リガンドの荷電は０であることが、より好ましい。リガンドの一分子あたりの荷電（Ｅ）は、リガンドの化学式から求められる。
【００５２】
（陽性荷電）
本明細書において、「陽性荷電を有する」とは、中性（ｐＨ７．０）の水溶液中でイオン化して陽性の荷電を帯びることをいう。例えば、陽性荷電を有する官能基としては、アミノ基、グアニジル基、及びアミジン基等の官能基が挙げられる。
【００５３】
（陰性荷電）
本明細書において、「陰性荷電を有する」とは、中性（ｐＨ７．０）の水溶液中でイオン化して陰性の荷電を帯びることをいう。例えば、陰性荷電を有する官能基としては、カルボキシル基、及びスルホン基等の官能基が挙げられる。
【００５４】
例えば、リガンドがフェニルアラニンの場合、その分子中にアミノ基とカルボキシ基を含むので、リガンドの荷電（Ｅ）は、Ｅ＝１−１＝０となる。
【００５５】
（陰性荷電を有するリガンド）
フィブリノーゲン吸着抑制の観点より、リガンドは、陰性荷電を有することが好ましい。本明細書中、「陰性荷電を有する」とは、上述の陰性荷電を有する官能基を有することをいう。
上述のように、リガンドの荷電（Ｅ）は０以上であるので、リガンドが陰性荷電を有するためには、リガンドが陰性荷電の数以上に陽性荷電を含む必要がある。陽性荷電と陰性荷電とが一つの炭化水素鎖及び／又は環式有機化合物部分に含まれていてもよいし、複数種の炭化水素鎖及び／又は環式有機化合物部分にそれぞれ含まれていてもよい。
陰性荷電を有する官能基のいずれかを有するリガンドであれば、フィブリノーゲン吸着抑制の効果を奏する。陰性荷電を有するこれらの官能基は、単独でも組み合わせても採用することができる。
【００５６】
（炭化水素鎖及び／又は環式有機化合物部分と陰性荷電を有し、荷電が０以上であるリガンド）
炭化水素鎖及び／又は環式有機化合物部分と陰性荷電を有し、荷電が０以上であるリガンドとしては、フェニルアラニン、トリプトファン、アラニン、アルギニン、リシン、ロイシン、イソロイシン、及びヒスチジン等があるが、担体への固定化簡便性の観点から、アミノ酸が好ましく、特に、フェニルアラニン、及びトリプトファンが好ましい。なお、アミノ酸が担体と共有結合を形成することによりリガンドとなった場合、リガンドは元のアミノ酸から変化した構造になっているが、アミノ酸が縮合等により結合した状態については、本明細書中では「アミノ酸」と称する。
例えば、リガンドがトリプトファンのとき、インドール環の部分が環式有機化合物部分にあたり、カルボキシル基の部分が陰性荷電を有する官能基に当たる。
一般的に、
【化１】
2016077466.tif 000003
で表されるアミノ酸において、Ｒ（側鎖）の部分が炭化水素鎖及び／又は環式有機化合物部分に当たり、アラニンの場合はＣＨ3、ロイシンの場合はＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）2が炭化水素鎖である。ただし、リガンドがアルギニンのとき、側鎖（Ｒ）は、
【化２】
2016077466.tif 000004
であるが、このうち炭素原子と水素原子からなる分子部分構造のことを炭化水素鎖と称するので、−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−の部分が炭化水素鎖である。
【００５７】
（ヒストン）
ヒストンとは、生体由来液中に存在するＤＮＡ結合タンパクであり、ヒストンＨ１，ヒストンＨ２Ａ，ヒストンＨ２Ｂ，ヒストンＨ３，ヒストンＨ４が挙げられるが、ＳＩＲＳ等の治療を目的とする場合は、生体由来液中からヒストンＨ３及びヒストンＨ４が除去されることが好ましく、特にヒストンＨ３を除去することが好ましい。
【００５８】
（生体由来液）
生体由来液は、生体に由来する液体を全て包含し、具体的には血液、血漿、血清、腹水などの体液や、細胞培養液などを含む。
【００５９】
（デバイス）
図１はデバイスの一実施形態を示す断面図である。図１において、デバイス１００は、血液体外循環回路に接続するモジュールである。円筒１１０の一端開口部に、内側にフィルター１２０を張ったパッキン１３０を介して入口ポート１４０を有するキャップ１５０をネジ嵌合し、円筒１１０の他端開口部に内側にフィルター１２０’を張ったパッキン１３０’を介して出口ポート１６０を有するキャップ１７０をネジ嵌合して容器を形成し、フィルター１２０及び１２０’の間隙に吸着材を充填保持させてヒストン吸着材層１８０を形成している。
【００６０】
ヒストン吸着材層１８０には、本実施形態に係る吸着材を単独又は組み合わせて充填してもよく、他の担体を混合又は積層してもよい。他の担体としては、例えばサイトカイン等の他の悪性物質の吸着材や、幅広い吸着能を有する活性炭等を用いることができる。これにより担体の相乗効果による広範な臨床効果が期待できる。ヒストン吸着材層１８０の容積は、５ｍＬ〜３０００ｍＬとすることができるが、ヒストン吸着容量と血液の体外循環の際の体外血液量の観点から、５０ｍＬ〜１０００ｍＬが好ましく、１００ｍＬ〜５００ｍＬがより好ましい。
【００６１】
血液体外循環回路に接続するモジュールは、血液体外循環回路に、治療対象の生体由来液と接触するように配置され、全身炎症性疾患治療用途等で利用可能である。
【００６２】
図２はデバイスの別の実施形態を示す断面図である。図２において、デバイス２００は、血液体外循環回路に接続するモジュールである。円筒２１０の両端に、上記の担体（中空糸）２２０がポッティング剤２３０によって保持されている。中空糸の両端面は、開口している。入口ポート２４０を有するキャップ２５０及び出口ポート２６０を有するキャップ２５０’を円筒２１０に嵌合し、担体（中空糸）２２０を充填保持させている。また、円筒２１０の側面には、透析液導入口２７０と透析液導出口２８０が具備されている。
【００６３】
血液体外循環による血液浄化法に使用する際には、治療対象の体内から導出させた血液を入口ポート２４０から導入させ、中空糸状の吸着材２２０を通過させ、出口ポート２６０を通して、治療対象の体内へと戻すことで、血液体外循環による血液浄化法を行うことができる。担体が中空糸の場合はその際に、透析液導入口２７０から透析液を導入させ、透析液導出口２８０から透析液を導出して、デバイス２００内の透析液を循環させることによって、血液体外循環中に透析を行うことができる。また、この透析液の循環は行わなくてもよく、透析液導入口２７０、透析液導出口２８０を開放してもよい。この場合、血液の濾過が行われる。また、透析液導入口２７０と透析液導出口２８０を栓等で塞ぐことによって、血液の濾過を抑制して血液体外循環による血液浄化法を行うこともできる。  
【００６４】
上記の吸着材及びデバイスは、ヒストンが介在する疾患において、臓器炎症を抑制又は治療するために有効に使用することができる。具体的な疾患名としては、敗血症、敗血症性ショック、毒素ショック症候群、虚血再還流障害、成人呼吸促進症候群（ＡＲＤＳ）、パジェット病、骨粗鬆症、多発性骨髄腫、急性及び慢性骨髄性白血病、膵臓β細胞破壊、炎症性腸疾患、乾癬、クローン病、潰瘍性大腸炎、アナフィラキシー、接触性皮膚炎、喘息、筋変性症、悪液質、ライター症候群、Ｉ型及びＩＩ型糖尿病、骨吸収症、移植片対宿主反応、アテローム性動脈硬化、脳外傷、多発性硬化症、大脳マラリア、発熱、並びに感染による筋肉痛等が挙げられる。
【００６５】
本実施態様に係るヒストン吸着材を、生体由来液等と一定時間接触させる時、処理前後のヒストンの吸着率は以下の式により算出される。
ヒストン吸着率（％）＝（Ｃ0−Ｃ）／Ｃ0×１００
Ｃ0  ：  処理前溶液中のヒストン濃度
Ｃ  ：  処理後溶液中のヒストン濃度
【００６６】
本実施態様に係る吸着材のヒストン吸着率を評価するために、生体由来液等と接触させる方法としては、健常ボランティアから採血した血液に、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）由来のリポポリサッカライド（ＬＰＳ）を添加し、振とう機を用いて振とうさせ、遠心機を用いて遠心し、上清を血漿サンプルとして取得し、取得した血漿サンプルと、吸着材をポリプロピレン（ＰＰ）製のチューブ内で混合し、振とう機を用いて振とうさせる方法が挙げられる。
【００６７】
また、健常ボランティアから採血した血液に、Ｅ．ｃｏｌｉ由来のリポポリサッカライドを添加し、振とう機を用いて振とうさせた血液を、吸着材を内径９ｍｍの２．５ｍＬ容量のラボラトリーカラム（モビテック）に充填し作成した吸着材充填カラムに、シリンジポンプを用いて通液させる方法が挙げられる。
【００６８】
さらに、製品と同じスケールのフルモジュールと接触させる方法としては、健常ボランティアから採血した血液に、Ｅ．ｃｏｌｉ由来のリポポリサッカライドを添加し、振とう機を用いて振とうさせた血液を、吸着材を充填した図１のようなデバイスに、ペリスタポンプを用いて循環させる方法などが挙げられる。この際、使用する血液量を少なくするために、デバイスを含めた循環回路全体の容量を少容量化することが好ましい。
【００６９】
以下、実施例を挙げて具体的に説明するが、本発明は何らこれに限定されるものではない。
【００７０】
＜実施例１＞
（吸着材作製及び評価）
ポリ酢酸ビニル製の球状の多孔質体（旭硝子（株）、平均粒径１００μｍ、排除限界分子量約１００万以上、樹脂１ｍＬに充填できる分子量４万のプルランの量が０．２０ｍＬ／ｍＬ以上）１００ｇを、ジメチルスルフォキシド（和光純薬株式会社製）１Ｌに投入し、水酸化ナトリウム（和光純薬株式会社製）１２０ｇ、エピクロルヒドリン（和光純薬株式会社製）７８０ｍＬ、水素化ホウ素ナトリウム（和光純薬株式会社製）７５０ｍｇを用いて３０℃で５時間反応させてエポキシ基を導入した。反応後、メタノール（和光純薬株式会社製）で洗浄し、その後、純水で洗浄して活性化多孔質体を得た。次に、ｐＨ９．８の炭酸緩衝液中で、多孔質体湿潤状態での容積１ｍＬあたり１２ｍｇのトリプトファンを反応させ、トリプトファンのアミノ基と多孔質体のエポキシ基とを結合させて吸着材Ａを得た。元素分析法を用いてトリプトファンの固定化量を算出したところ、５５μｍｏｌ／ｍＬｇｅｌであった。
【００７１】
（血漿ヒストン  Ｈ３吸着試験）
健常ボランティアから採血した血液に、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ ０１２７：Ｂ８由来のリポポリサッカライド（ＬＰＳ）（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社製）を０．１μｇ／ｍＬ濃度になるように添加し、振とう機を用いて２４時間、３９℃で振とうさせた。その後、遠心機を用いて２０００ｇで１０分間遠心し、上清を血漿サンプルとして取得した。取得した血漿サンプル３ｍＬと、吸着材Ａ  ０．５ｍＬをポリプロピレン（ＰＰ）製のチューブ内で混合し、振とう機を用いて１時間、３９℃で振とうさせた。振とうさせた後のＰＰ製チューブを、遠心機を用いて２０００ｇで１分間遠心し、上清を吸着材接触後血漿サンプルとして取得した。
【００７２】
（ヒストン  Ｈ３除去性能評価）
取得した吸着材接触後血漿サンプルを用いて、処理後のヒストンＨ３吸着率についてそれぞれ算出した。ヒストンＨ３吸着率算出式を以下に示す。ヒストンＨ３の濃度は、ＥｐｉＱｕｉｋ（登録商標）  Ｔｏｔａｌ  Ｈｉｓｔｏｎｅ  Ｈ３  Ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  Ｋｉｔ（ＥＰＩＧＥＮＴＥＫ社製）を用いて、添付の取扱説明書に従い測定した。結果を表１に示す。
【数１】
2016077466.tif 000005
【００７３】
＜実施例２＞
（吸着材作製及び評価）
実施例１と同様にして、活性化多孔質体を得た。ｐＨ９．８の炭酸緩衝液中で、多孔質体湿潤状態での容積１ｍＬあたり６ｍｇのフェニルアラニンを反応させ、フェニルアラニンのアミノ基と多孔質体のエポキシ基とを結合させて吸着材Ｂを得た。元素分析法を用いて固定化量を算出したところ、２４μｍｏｌ／ｍＬｇｅｌであった。吸着材Ｂを用いて、実施例１と同様の吸着試験を行った結果を、表１に示す。
【００７４】
＜実施例３＞
（吸着材作製及び評価）
実施例１と同様にして、活性化多孔質体を得た。ｐＨ９．８の炭酸緩衝液中で、多孔質体湿潤状態での容積１ｍＬあたり１２ｍｇのフェニルアラニンを反応させ、フェニルアラニンのアミノ基と多孔質体のエポキシ基とを結合させて吸着材Ｃを得た。元素分析法を用いて固定化量を算出したところ、５０μｍｏｌ／ｍＬｇｅｌであった。吸着材Ｃを用いて、実施例１と同様の吸着試験を行った結果を、表１に示す。
【００７５】
＜実施例４＞
（吸着材作製及び評価）
実施例１と同様にして、活性化多孔質体を得た。ｐＨ９．８の炭酸緩衝液中で、多孔質体湿潤状態での容積１ｍＬあたり１２ｍｇのアラニンを反応させ、アラニンのアミノ基と多孔質体のエポキシ基とを結合させて吸着材Ｄを得た。元素分析法を用いて固定化量を算出したところ、５５μｍｏｌ／ｍＬｇｅｌであった。吸着材Ｄを用いて、実施例１と同様の吸着試験を行った結果を、表１に示す。
【００７６】
＜実施例５＞
（吸着材作製及び評価）
実施例１と同様にして、活性化多孔質体を得た。ｐＨ９．８の炭酸緩衝液中で、多孔質体湿潤状態での容積１ｍＬあたり１２ｍｇのアルギニンを反応させ、アルギニンのアミノ基と多孔質体のエポキシ基とを結合させて吸着材Ｅを得た。元素分析法を用いて固定化量を算出したところ、５５μｍｏｌ／ｍＬｇｅｌであった。吸着材Ｅを用いて、実施例１と同様の吸着試験を行った結果を、表１に示す。
【００７７】
＜実施例６＞
（吸着材作製及び評価）
ポリ酢酸ビニル製の球状の多孔質体（旭硝子（株）、平均粒径１００μｍ、排除限界分子量約１００万以上、樹脂１ｍＬに充填できる分子量４万のプルランの量が０．２０ｍＬ／ｍＬ以上）を１ｇ（約８ｍＬｇｅｌ相当）秤量し、ファルコンチューブに加え、ＤＭＳＯ（１０ｍＬ）で膨潤させた。そこに、ヨウ化メチル（１０ｇ、７０ｍｍｏｌ）、水素化ホウ素ナトリウム（５．０ｍｇ）、水酸化ナトリウム水溶液（１．２ｇ／１．８ｍＬ）を加え、３０℃で５時間振とうして反応させた。樹脂をろ過し、ＭｅＯＨ、続いて水で洗浄し、吸着材Ｆを得た。元素分析法を用いて固定化量を算出したところ、４５μｍｏｌ／ｍＬｇｅｌであった。吸着材Ｆを用いて、実施例１と同様の吸着試験を行った結果を、表１に示す。
【００７８】
＜実施例７＞
（吸着材作製及び評価）
ポリ酢酸ビニル製の球状の多孔質体（旭硝子（株）、平均粒径１００μｍ、排除限界分子量約１００万以上、樹脂１ｍＬに充填できる分子量４万のプルランの量が０．２０ｍＬ／ｍＬ以上）を１ｇ（約８ｍＬｇｅｌ相当）秤量し、ファルコンチューブに加え、ＤＭＳＯ（１０ｍＬ）で膨潤させた。そこに、ヨウ化メチル（２０ｇ、１４０ｍｍｏｌ）、水素化ホウ素ナトリウム（１０．０ｍｇ）、水酸化ナトリウム水溶液（２．４ｇ／３．６ｍＬ）を加え、３０℃で５時間振とう反応。樹脂をろ過しＭｅＯＨ、続いて水で洗浄し、吸着材Ｇを得た。元素分析法を用いて固定化量を算出したところ、８１μｍｏｌ／ｍＬｇｅｌであった。吸着材Ｇを用いて、実施例１と同様の吸着試験を行った結果を、表１に示す。
【００７９】
＜実施例８＞
（吸着材作製及び評価）
ポリ酢酸ビニル製の球状の多孔質体（旭硝子（株）、平均粒径１００μｍ、排除限界分子量約１００万以上、樹脂１ｍＬに充填できる分子量４万のプルランの量が０．２０ｍＬ／ｍＬ以上）を１ｇ（約８ｍＬｇｅｌ相当）秤量し、ファルコンチューブに加え、ＤＭＳＯ（１０ｍＬ）で膨潤させた。そこに、臭化ベンジル（１２ｍＬ，１０１ｍｍｏｌ）、水素化ホウ素ナトリウム（５．０ｍｇ）、水酸化ナトリウム水溶液（１．２ｇ／１．８ｍＬ）を加え、３０℃で５時間振とうして反応させた。樹脂をろ過し、ＭｅＯＨ、続いて水で洗浄し吸着材Ｈを得た。元素分析法を用いて固定化量を算出したところ、３４μｍｏｌ／ｍＬｇｅｌであった。吸着材Ｈを用いて、実施例１と同様の吸着試験を行った結果を、表１に示す。
【００８０】
＜実施例９＞
（吸着材作製及び評価）
ポリ酢酸ビニル製の球状の多孔質体（旭硝子（株）、平均粒径１００μｍ、排除限界分子量約１００万以上、樹脂１ｍＬに充填できる分子量４万のプルランの量が０．２０ｍＬ／ｍＬ以上）を１ｇ（約８ｍＬｇｅｌ相当）秤量し、ファルコンチューブに加え、ＤＭＳＯ（１０ｍＬ）で膨潤させた。そこに、臭化ベンジル（２４ｍＬ，２０２ｍｍｏｌ）、水素化ホウ素ナトリウム（１０．０ｍｇ）、水酸化ナトリウム水溶液（２．４ｇ／  ３．６ｍＬ）を加え、３０℃で５時間振とう反応。樹脂をろ過しＭｅＯＨ、続いて水で洗浄し吸着材Ｉを得た。元素分析法を用いて固定化量を算出したところ、６３μｍｏｌ／ｍＬｇｅｌであった。吸着材Ｉを用いて、実施例１と同様の吸着試験を行った結果を、表１に示す。
【００８１】
＜比較例１＞
（吸着材作製及び評価）
実施例１と同様にして、活性化多孔質体を得た。活性化多孔質体５ｍＬに対して、１０％亜硫酸ナトリウム水溶液２ｍＬを加え、８０℃、２時間、振とう機を用いて振とうさせ、亜硫酸ナトリウムのスルホン基と多孔質体のエポキシ基を結合させて吸着材Ｊを得た。元素分析法を用いて固定化量を算出したところ、２０μｍｏｌ／ｍＬｇｅｌであった。吸着材Ｊを用いて、実施例１と同様の吸着試験を行った結果を、表１に示す。
【００８２】
＜比較例２＞
（吸着材作製及び評価）
実施例１と同様にして、活性化多孔質体を得た。活性化多孔質体５ｍＬに対して、１０％亜硫酸ナトリウム水溶液４ｍＬを加え、８０℃、２時間、振とう機を用いて振とうさせ、亜硫酸ナトリウムのスルホン基と多孔質体のエポキシ基を結合させて吸着材Ｋを得た。元素分析法を用いて固定化量を算出したところ、４０μｍｏｌ／ｍＬｇｅｌであった。吸着材Ｋを用いて、実施例１と同様の吸着試験を行った結果を、表１に示す。
【００８３】
＜比較例３＞
（吸着材作製及び評価）
実施例１と同様にして、活性化多孔質体を得た。活性化多孔質体５ｍＬに対して、１０％亜硫酸ナトリウム水溶液９ｍＬを加え、８０℃、２時間、振とう機を用いて振とうさせ、亜硫酸ナトリウムのスルホン基と多孔質体のエポキシ基を結合させて吸着材Ｌを得た。元素分析法を用いて固定化量を算出したところ、８８μｍｏｌ／ｍＬｇｅｌであった。吸着材Ｌを用いて、実施例１と同様の吸着試験を行った結果を、表１に示す。
【００８４】
＜比較例４＞
（吸着材作製及び評価）
ポリ酢酸ビニル製の球状の多孔質体（旭硝子（株）、平均粒径１００μｍ、排除限界分子量約１００万以上、樹脂１ｍＬに充填できる分子量４万のプルランの量が０．２０ｍＬ／ｍＬ以上）を１ｇ（約８ｍＬｇｅｌ相当）秤量し、ＤＭＳＯ（１０ｍＬ）で膨潤させた。そこに、クロロ酢酸水溶液（９．５ｇ／１０ｍＬ）、水素化ホウ素ナトリウム（５．０ｍｇ）、水酸化ナトリウム水溶液（１．２ｇ／１．８ｍＬ）を加え、３０℃で５時間振とう反応させ、吸着材Ｍを得た。元素分析法を用いて固定化量を算出したところ、１４０μｍｏｌ／ｍＬｇｅｌであった。吸着材Ｍを用いて、実施例１と同様の吸着試験を行った結果を、表１に示す。
【表１】
2016077466.tif 000006
【００８５】
表１の結果から、リガンドが炭化水素鎖及び／又は環式有機化合物部分を有し、該リガンドの荷電が０以上である、吸着担体Ａ、Ｂ，Ｃ、Ｄ、Ｅ，Ｆ，Ｇ、Ｈ，Ｉが、ヒストンＨ３を除去することは明らかである。特に、トリプトファンを固定化していることを特徴する吸着材Ａにおいて、ヒストンＨ３を好適に除去できる。一方で、リガンドが陰性荷電のみを有する、吸着担体Ｊ、Ｋ，Ｌ、Ｍは、ヒストンＨ３を全く除去しなかった。
【産業上の利用可能性】
【００８６】
本発明の吸着担体及び生体由来液浄化デバイスは、生体由来液中より例えばヒストンＨ３を効率よく除去でき、ＳＩＲＳに代表されるヒストンが介在して発症または悪化する疾患の治療用途等に有用である。
【００８７】
この生体由来液浄化用デバイスにより、ヒストンを原因とするＳＩＲＳ等の治療に使用できる。本発明の吸着材を生体由来液と接触させることにより、生体由来液中のヒストンが該吸着材に効率良く吸着され、生体由来液からヒストンを除去することができ、生体に好ましくない細胞外のヒストンを除去することができるので、ヒストンが介在する疾患において、全身炎症を抑制又は治療するために有効に使用することができる。具体的な疾患名としては、敗血症、敗血症性ショック、毒素ショック症候群、虚血再還流障害、成人呼吸促進症候群（ＡＲＤＳ）、パジェット病、骨粗鬆症、多発性骨髄腫、急性及び慢性骨髄性白血病、膵臓β細胞破壊、炎症性腸疾患、乾癬、クローン病、潰瘍性大腸炎、アナフィラキシー、接触性皮膚炎、喘息、筋変性症、悪液質、ライター症候群、Ｉ型及びＩＩ型糖尿病、骨吸収症、移植片対宿主反応、アテローム性動脈硬化、脳外傷、多発性硬化症、大脳マラリア、発熱、並びに感染による筋肉痛等が挙げられる。特に、敗血症など全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ：ｓｙｓｔｅｍｉｃ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）の病態を改善させる用途に好適に用いられる。
【００８８】
ヒストンは細胞障害性を有することが報告されており、この生体由来液浄化用デバイスは、細胞培養液中から細胞障害性を持つヒストンを除去する用途に好適に使用することができる。なお、本発明の産業上の利用可能分野は、上記に限られないことはもちろんである。
【符号の説明】
【００８９】
１００，２００…デバイス、１１０，２１０…円筒、１２０，１２０’…フィルター、１３０，１３０’…パッキン、１４０，２４０…入口ポート、１５０，１７０，２５０，２５０’…キャップ、１６０，２６０…出口ポート、１８０…臓器炎症抑制用担体層、２２０…担体（吸着担体）、２３０…ポッティング剤、２７０…透析液導入口、２８０…透析液導出口。
【図１】
2016077466.tif 000007
【図２】
2016077466.tif 000008