(57)【要約】【課題】スポットの大きさや形状を維持しつつ、マイクロアレイを製造する際の、生体分子溶液の使用量を低減することが可能なスポットピンを提供する。【解決手段】二つの異なる径を有する段付き軸部２と、段付き軸部２の小径側の端部に設けられ、基板表面に溶液を点着する先端部３と、を備えることを特徴とするスポットピン１を選択する。【選択図】図１
2016118450.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
生体分子が溶解又は分散した生体分子溶液を基板表面に接触させて付着させ、前記基板表面に前記生体分子を配列し固定化するために用いるスポットピンであって、
二つの異なる径を有する段付き軸部と、
前記段付き軸部の小径側の端部に設けられ、前記基板表面に溶液を点着する先端部と、を備えることを特徴とするスポットピン。
【請求項２】
前記先端部が、基端側から先端側に漸次縮径されるとともに先端面を有する円錐台形状であることを特徴とする請求項１に記載のスポットピン。
【請求項３】
前記先端面に、所定量の溶液を保持するとともに溶液の落下を防止する溶液保持機構が設けられていることを特徴とする請求項２に記載のスポットピン。
【請求項４】
前記溶液保持機構が、前記先端面に設けられた環状溝であることを特徴とする請求項３に記載のスポットピン。
【請求項５】
前記溶液保持機構が、前記先端面に設けられた環状突起であることを特徴とする請求項３に記載のスポットピン。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか一項に記載のスポットピンを用いて、生体分子が溶解又は分散した生体分子溶液を、基板表面に付着させて、前記基板表面に前記生体分子を配列し固定化することを特徴とするマイクロアレイの製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、スポットピン及びマイクロアレイの製造方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
生化学分野において、ＤＮＡ、たんぱく質、糖鎖などのバイオ分子や、これらを有する細胞などの対象物を基板上に多数固定した、マイクロアレイの開発が進み、利用されている。具体的には、ＤＮＡを固定化し、それらに相同性のあるＤＮＡ・ＲＮＡを検出・定量するＤＮＡマイクロアレイ（ＤＮＡチップともいう）や、タンパク質を多数固定化し、それに対する反応（低分子化合物や他のタンパク質の結合など）を検出するタンパク質マイクロアレイ（代表的なものとして、抗原を対象とした抗体マイクロアレイ）等が知られている。このようなマイクロアレイにより、多数の対象を一度に網羅的に検査・実験を行うことができる。
【０００３】
ところで、マイクロアレイを製造するためには、生体分子が溶解もしくは分散した生体分子溶液（以下、単に「生体分子溶液」という）を基板の表面に接触させて付着させ、固定化する必要がある。一般的に、基板の表面に生体分子を配列し固定化するためには、スポットピンが用いられる。
【０００４】
ここで、図５は、従来のスポットピンの側面図である。また、図６は、従来のスポットピンの先端面を示す平面図である。図５に示すように、従来のスポットピン１０１は、軸部１０２と、軸部１０２の先端側に設けられた先端部１０３とを備えて概略構成されている。このスポットピン１０１は、軸部１０２の基端側がホルダー５の内側に収納されて使用される。
【０００５】
また、先端部１０３は、基端１０３ａ側から先端１０３ｂ側に向かって漸次縮径されている。すなわち、先端部１０３は、先端１０３ｂに設けられた先端面１０３Ａと側面１０３Ｂとを有する円錐台形状となっている。なお、先端面１０３Ａは、図６に示すように、円形の平坦面となっている。
【０００６】
このスポットピン１０１を用いる場合、生体分子溶液中に軸部１０２の先端側まで浸かるように先端部１０３を浸漬し、引き上げた後、基板の表面に先端面１０３Ａを接触させる。これにより、基板の表面上に生体分子溶液を付着させたスポットを形成することができる。
【０００７】
マイクロアレイの製造に用いるスポットピンは、これまでに種々の改善がなされている。例えば、特許文献１には、同一形状のスポットを安定して形成することを目的としたスポットピンが開示されている。具体的には、特許文献１に開示されたスポットピンは、生体分子溶液を接触・付着させる側の先端部分を曲面形状とし、かつ、曲面形状の側面部分にも複数の溝または複数の孔の開口部を形成されている。これにより、スポットピンが基板に対して垂直に接触していないような場合でも、安定して同一形状のスポットを形成可能とされている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特開２００４−２０５３６２
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
ところで、マイクロアレイを製造する際には、基板の表面上に例えば千個以上のスポットを形成する必要がある。そのためには、複数のスポットピンを複数回にわたって生体分子溶液と基板との間を往復させる必要が生じる。
【００１０】
しかしながら、図５及び図６に示すような従来のスポットピン１０１や、特許文献１に開示されたスポットピンでは、スポットピンによる生体分子溶液の持ち出し量が多いという課題があった。すなわち、スポットピンには、マイクロアレイを製造する際の、生体分子溶液の使用量を低減することが望まれていた。
【００１１】
本発明は、上記事情に鑑みてなされたものであって、スポットの大きさや形状を維持しつつ、マイクロアレイを製造する際の、生体分子溶液の使用量を低減することが可能なスポットピンを提供することを課題とする。
【００１２】
また、本発明は、スポットの大きさや形状を維持しつつ、生体分子溶液の使用量を低減することが可能なマイクロアレイの製造方法を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
上記の目的を達成するために、本発明は以下の構成を採用した。
［１］本発明のスポットピンは、生体分子が溶解又は分散した生体分子溶液を基板表面に接触させて付着させ、前記基板表面に前記生体分子を配列し固定化するために用いるスポットピンであって、二つの異なる径を有する段付き軸部と、前記段付き軸部の小径側の端部に設けられ、前記基板表面に溶液を点着する先端部と、を備えることを特徴とする。
［２］本発明のスポットピンは、前記先端部が、基端側から先端側に漸次縮径されるとともに先端面を有する円錐台形状であることが好ましい。
［３］本発明のスポットピンは、前記先端面に、所定量の溶液を保持するとともに溶液の落下を防止する溶液保持機構が設けられていることが好ましい。
［４］本発明のスポットピンは、前記溶液保持機構が、前記先端面に設けられた環状溝であってもよい。
［５］本発明のスポットピンは、前記溶液保持機構が、前記先端面に設けられた環状突起であってもよい。
［６］本発明のマイクロアレイの製造方法は、前項１〜５のいずれか一項に記載のスポットピンを用いて、生体分子が溶解又は分散した生体分子溶液を、基板表面に付着させて、前記基板表面に前記生体分子を配列し固定化することを特徴とする。
【発明の効果】
【００１４】
以上説明したように、本発明のスポットピンによれば、二つの異なる径を有する段付き軸部の小径側の端部に先端部が設けられた構成となっており、マイクロアレイを製造する際に先端部及び段付き軸部の小径側を生体分子溶液に浸漬させることになるため、スポットの大きさや形状を維持しつつ、生体分子溶液の使用量を低減することができる。
【００１５】
また、本発明のマイクロアレイの製造方法によれば、生体分子溶液を基板表面に付着させて、基板表面に生体分子を配列し固定化する際に、上述したスポットピンを用いるため、スポットの大きさや形状を維持しつつ、生体分子溶液の使用量を低減することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】本発明を適用した一実施形態であるスポットピンの構成を示す側面図である。
【図２】本発明を適用した一実施形態であるスポットピンを構成する先端部の先端面を拡大した平面図である。
【図３】図２中に示すＸ−Ｘ’線に沿った、拡大断面図である。
【図４】本発明のスポットピンの先端面に設けられた溶液保持機構の他の例を示す断面図である。
【図５】従来のスポットピンの側面図である。
【図６】従来のスポットピンの先端面を示す平面図である。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
以下、本発明を適用した一実施形態であるスポットピンについて、これを用いたマイクロアレイの製造方法とともに図面を用いて詳細に説明する。なお、以下の説明で用いる図面は、特徴をわかりやすくするために、便宜上特徴となる部分を拡大して示している場合があり、各構成要素の寸法比率などが実際と同じであるとは限らない。
【００１８】
＜スポットピン＞
先ず、本発明を適用した一実施形態であるスポットピンの構成について説明する。
図１は、本発明を適用した一実施形態であるスポットピンの構成を示す側面図である。図１に示すように、本実施形態のスポットピン１は、生体分子が溶解又は分散した生体分子溶液（以下、単に「生体分子溶液」という）を基板の表面に接触させて付着させて、基板表面に生体分子を配列して固定化するために用いるものである。このスポットピン１は、段付き軸部２と、先端部３と、を備えて概略構成されている。
【００１９】
段付き軸部２は、異なる径（直径）を有する二つの軸部から構成された、円筒状（棒状）の部材である。具体的には、直径Ｄ１を有する大径部２Ａと、直径Ｄ１よりも小さな直径Ｄ２を有する小径部２Ｂと、が同軸上に直列に接合されている。これにより、大径部２Ａと小径部２Ｂとの接合部には、段部２ａが設けられるとともに、１本の軸部材（すなわち、段付き軸部）が構成されている。
【００２０】
大径部２Ａは、段付き軸部２の基端側（すなわち、先端部３と反対側）に設けられている。この大径部２Ａの直径Ｄ１は、従来のスポットピン１０１における軸部１０２の直径Ｄ１’（図６を参照）と同一径であることが好ましい。具体的には、例えば、直径Ｄ１は、２．５〜０．５ｍｍの範囲であればよく、２．０〜１．０ｍｍの範囲が好ましい。直径Ｄ１が上記範囲内であると、生体分子溶液の使用量を効果的に低減することができ、かつ、強度を保持することが可能であるために好ましい。
【００２１】
ここで、大径部２Ａの直径Ｄ１を従来の軸部１０２の直径Ｄ１’と同一の直径とすることにより、従来と同じスポットピン用のホルダー５の内側に、同様に収納することができる。すなわち、本実施形態のスポットピン１を、従来のスポットピン１０１の代替として使用することができる。
【００２２】
また、図１に示すように、大径部２Ａの軸方向の長さＬ１は、大径部２Ａの基端側がホルダー５の内側に収納された際に露出する部分が存在する長さであれば、特に限定されるものではない。すなわち、大径部２Ａの長さＬ１は、ホルダー５の軸方向の長さよりも長いことが好ましい。これにより、スポットピン１をホルダー５にしっかりと取り付けることができる。
【００２３】
さらに、大径部２Ａの長さＬ１は、小径部２Ｂの軸方向の長さＬ２と先端部３の軸方向の長さＬ３との和（Ｌ２＋Ｌ３）よりも長い（すなわち、スポットピン１の全長Ｌの半分（１／２Ｌ）よりも長い）ことがより好ましい。大径部２Ａの長さＬ１をこのように設けることにより、小径部２Ｂを設けた場合であっても段付き軸部２の全体の強度を担保することができる。
【００２４】
小径部２Ｂは、段付き軸部２の先端側（すなわち、先端部３側）に設けられている。この小径部２Ｂの直径Ｄ２は、大径部２Ａの直径Ｄ１よりも小さく、かつ後述する先端部３の先端３ｂ（先端面３Ａ）の直径Ｄ３よりも大きければ、特に限定されるものではない。特に、直径Ｄ２は、直径Ｄ１に対して、５０〜９５％の大きさであることが好ましく、５５〜９０％の大きさであることがより好ましく、６０〜８５％の大きさであることがさらに好ましい。ここで、直径Ｄ２の大きさが上記範囲内であると、生体分子溶液の使用量を効果的に低減することができ、かつ、強度を保持することが可能であるため好ましい。
【００２５】
また、小径部２Ｂの軸方向の長さＬ２は、スポットピン１を生体分子溶液に浸漬させる際に大径部２Ａが浸漬しない長さであれば、特に限定されるものではない。一方、上述したように、段付き軸部２の強度の面からは、大径部２Ａの長さＬ１を長くする方が好ましい。したがって、段付き軸部２の大径部２Ａの長さＬ１と小径部２Ｂの長さＬ２は、上記事情を勘案して設定することが好ましい。
【００２６】
先端部３は、基板の表面に生体分子溶液を点着させるために、段付き軸部２の小径部２Ｂ側の端部に設けられている。この先端部３は、図１に示すように、基端３ａ側から先端３ｂ側に向かって漸次縮径されている。そして、先端部３の先端３ｂには、図２に示すように、平面視した際に円形の先端面３Ａが設けられている。この先端面３Ａが、基板の表面に生体分子溶液を点着させる際に、基板の表面との接触面となる。すなわち、先端部３は、図１に示すように、先端３ｂに設けられた先端面３Ａと、基端３ａと先端３ｂとの間に設けられた側面３Ｂとを有する円錐台形状となっている。
【００２７】
先端部３の基端３ａの直径は、特に限定されるものではないが、段付き軸部２の小径部２Ｂの直径Ｄ２と同一であることが好ましい。すなわち、段付き軸部２の小径部２Ｂの側面と、先端部３の側面３Ｂとが、連続面として設けられていることが好ましい。ここで、先端部３の基端３ａの直径と、段付き軸部２の小径部２Ｂの直径Ｄ２とが異なる（すなわち、段付き軸部２の小径部２Ｂの側面と、先端部３の側面３Ｂとが、不連続面である）と、段付き軸部２の小径部２Ｂと先端部３との境界部分に段差が生じ、スポットピン１を生体分子溶液に浸漬させた後に引き上げた際、小径部２Ｂの側面に付着した生体分子溶液が先端部３にスムーズに移行できなくなるために好ましくない。
【００２８】
一方、先端部３の先端３ｂの直径（すなわち、先端面３Ａの直径）直径Ｄ３は、特に限定されるものではなく、用途によって適宜選択することができる。例えば、同じ用途に用いる場合であれば、従来のスポットピン１０１における先端面１０３Ａの直径Ｄ３’（図６を参照）と同一径であることが好ましい。これにより、従来のスポットピン１０１を用いて形成したスポットと同程度の大きさのスポットを形成することができる。具体的には、例えば、直径Ｄ３は、０．１０〜１．０ｍｍの範囲のものが挙げられる。
【００２９】
また、先端部３の軸方向の長さＬ３は、スポットピン１を生体分子溶液に浸漬させる際に先端部３の側面３Ｂと小径部２Ｂの側面とによる生体分子溶液の持ち出し量が十分に確保できる長さであれば、特に限定されるものではない。一方、上述したように、段付き軸部２の強度の面からは、大径部２Ａの長さＬ１を長くする方が好ましい。したがって、段付き軸部２の大径部２Ａの長さＬ１と小径部２Ｂの長さＬ２は、上記事情を勘案して設定することが好ましい。
【００３０】
ここで、例えば、先端部３の軸方向の長さＬ３を、従来のスポットピン１０１における先端部１０３の軸方向の長さＬ３’（図６を参照）と同一の長さとした場合、本実施形態のスポットピン１における先端部３の側面３Ｂと段付き軸部２の軸方向との間の角度は、従来のスポットピン１０１における先端部１０３の側面１０３Ｂと軸部１０２の軸方向との間の角度よりも狭角（鋭角）となる。これにより、生体分子溶液に浸漬させた後、小径部２Ｂの側面に付着した生体分子溶液を、先端部３の側面３Ｂへ、さらに側面３Ｂから先端面３Ａへと、スムーズに移行させることができる。したがって、本実施形態のスポットピン１は、従来のスポットピン１０１よりも、生体分子溶液の持ち出し量を低減しつつ、効率的に先端面３Ａに生体分子溶液を供給することができる。
【００３１】
これに対して、先端部３の軸方向の長さＬ３を、従来のスポットピン１０１における先端部１０３の軸方向の長さＬ３’（図６を参照）よりも所定の長さ分だけ短くすることにより、本実施形態のスポットピン１における先端部３の側面３Ｂと段付き軸部２の軸方向との間の角度と、従来のスポットピン１０１における先端部１０３の側面１０３Ｂと軸部１０２の軸方向との間の角度とを同じ角度とすることもできる。
【００３２】
すなわち、本実施形態のスポットピン１によれば、小径部２Ｂの直径Ｄ２、小径部２Ｂの軸方向の長さＬ２及び先端部３の軸方向の長さＬ３を適宜選択することにより、生体分子溶液の持ち出し量、連続して形成可能なスポット数、スポットサイズを容易に最適化することができる。
【００３３】
本実施形態のスポットピン１の先端部３における先端面３Ａには、所定量の溶液を保持するとともに溶液の落下を防止するために、溶液保持機構４が設けられている。具体的には、溶液保持機構４は、図２に示すように、先端面３Ａの中心Ｃを中心とした環状の溝部（環状溝）４Ａである。
【００３４】
ところで、従来のスポットピン１０１の先端部１０３における先端面１０３Ａには、図７に示すように、環状の溝部が設けられていなかった。これに対して、本実施形態のスポットピン１によれば、先端面３Ａに溝部を設けることにより、先端面３Ａの表面積が増加するため、同一の直径を有する従来のスポットピン１０１よりも生体分子溶液の保持量を多くすることができるとともに、先端面３Ａからの生体分子溶液の落下を抑制することができる。
【００３５】
また、本実施形態のスポットピン１に設けられた溶液保持機構４は、先端面３Ａの中心Ｃを中心として、環状に（すなわち、不連続な部分がなく、周方向に連続して）設けられている。これにより、マイクロアレイを製造する際に先端面３Ａのいずれかの部分に偏ることなく生体分子溶液を面内均一に保持することができるため、スポットの形状を一定に維持することができる。
【００３６】
図３に示すように、環状溝４Ａの断面形状は、円弧状となっている。ここで、環状溝４Ａの深さｄ及び幅Ｗは、所定量の溶液を保持するとともに溶液の落下を防止するために十分な大きさであれば、特に限定されるものではない。具体的には、環状溝４Ａの幅Ｗとしては、例えば、０．００１〜０．１ｍｍの範囲としてもよく、０．００２〜０．０５ｍｍの範囲とすることが好ましい。また、上記環状溝４Ａは、１つでもよく、径の異なる溝を複数個有していてもよい。
【００３７】
本実施形態のスポットピン１の材料は、上述したような段付き軸部２と、先端面３Ａに溶液保持機構４が設けられた先端部３とを形成することができるものであれば、特に限定されるものではない。このような材料としては、例えば、鉄、ステンレス、クロム、チタン、またはこれらの合金である金属材料や、セラミック等の無機材料の焼結体や、テフロン（登録商標）、アクリル、ポリカーボネート、ポリスチレンまたはこれらを混合させた樹脂材料等が挙げられる。これらの中でも、耐食性、溶接性、機械的性質が良好という観点からステンレスを用いることが好ましい。
【００３８】
また、本実施形態のスポットピン１の製造方法は、特に限定されるものではなく、スポットピン１の材料に応じて適宜選択することができる。具体的には、例えば、スポットピン１の材料として金属材料を使用する場合には、旋盤加工、鋳造等により、製造することができる。また、無機材料の焼結体を用いる場合には、旋盤加工等ことにより、製造することができる。また、樹脂材料を使用する場合には、旋盤加工、射出成型等により、製造することができる。
【００３９】
また、先端部３の先端面３Ａに環状溝４Ａを形成するには、先端部３の先端面３Ａを、回転盤を用いて研磨する際に、形成することができる。なお、金属材料では、エッチングによっても形成することができる。
【００４０】
以上説明したように、本実施形態のスポットピン１によれば、二つの異なる径を有する段付き軸部２の小径部２Ｂの端部に先端部３が設けられた構成となっており、マイクロアレイを製造する際に先端部３及び段付き軸部２の小径部２Ｂを生体分子溶液に浸漬させることになるため、スポットの大きさや形状を維持しつつ、生体分子溶液の使用量を低減することができる。
【００４１】
また、本実施形態のスポットピン１によれば、先端部３の軸方向の長さＬ３が従来のスポットピン１０１における先端部１０３の軸方向の長さＬ３’と同一の長さである場合、先端部３の側面３Ｂと段付き軸部２の軸方向との間の角度が、小径部２Ｂを有さない従来のスポットピン１０１よりも狭角（鋭角）となる。これにより、生体分子溶液に浸漬させた後、小径部２Ｂの側面に付着した生体分子溶液を、先端部３の側面３Ｂへ、さらに側面３Ｂから先端面３Ａへと、スムーズに移行させることができる。したがって、本実施形態のスポットピン１は、生体分子溶液の持ち出し量を低減しつつ、効率的に先端面３Ａに生体分子溶液を供給することができる。
【００４２】
すなわち、本実施形態のスポットピン１によれば、小径部２Ｂの直径Ｄ２、小径部２Ｂの軸方向の長さＬ２及び先端部３の軸方向の長さＬ３を適宜選択することにより、生体分子溶液の持ち出し量、連続して形成可能なスポット数、スポットサイズを容易に最適化することができる。
【００４３】
本実施形態のスポットピン１によれば、環状溝４Ａによって先端面３Ａの表面積が増加するため、同一の直径を有する環状溝を有しないスポットピンよりも生体分子溶液の保持量を多くすることができるとともに、先端面３Ａからの生体分子溶液の落下を抑制することができる。
【００４４】
また、本実施形態のスポットピン１によれば、溶液保持機構４である溝部が先端面３Ａの中心Ｃを中心として環状に（すなわち、不連続な部分がなく、周方向に連続して）設けられている。これにより、マイクロアレイを製造する際に先端面３Ａのいずれかの部分に偏ることなく生体分子溶液を面内均一に保持することができるため、スポットの形状を一定に維持することができる。
【００４５】
＜マイクロアレイの製造方法＞
次に、上述したスポットピン１を用いた本実施形態のマイクロアレイの製造方法について説明する。
本実施形態のマイクロアレイの製造方法では、上述したスポットピン１を用いて、生体分子が溶解又は分散した生体分子溶液を、基板表面に付着させて、前記基板表面に生体分子を配列し、固定化する。
本実施形態のマイクロアレイの製造方法では、液供給工程と、スポットピン接近工程と、スポット形成工程とを含む。
【００４６】
液供給工程は、スポットピン１に生体分子が溶解又は分散した生体分子溶液を供給する工程である。スポットピン１への生体分子溶液の供給は、スポットピン１を生体分子溶液に浸漬することで行うことができる。例えば、スポットピン１を先端部３側から生体分子溶液に浸して、小径部２Ｂの少なくとも一部が生体分子溶液に浸る程度まで、スポットピン１を生体分子溶液に浸した後、生体分子溶液からスポットピン１を引き上げる。これにより、スポットピン１の先端部３の側面３Ｂと小径部２Ｂの一部に生体分子溶液が付着する。
【００４７】
ここで、本実施形態のマイクロアレイの製造方法によれば、先端部３側に従来のスポットピンよりも軸径が小さな小径部２Ｂを有する段付き軸部２を備えたスポットピン１を用いている。このため、液供給工程において、スポットピン１を生体分子溶液に浸した後、生体分子溶液からスポットピン１を引き上げた際に、スポットピン１の先端部３の側面３Ｂと小径部２Ｂの一部に付着する生体分子溶液の量（すなわち、液の持ち出し量）を従来のスポットピンよりも低減することができる。
【００４８】
スポットピン接近工程は、基板にスポットピンを接近させる工程である。マイクロアレイの基板を用意する。次いで、上記液供給工程を経て生体分子溶液の付着したスポットピン１を基板のスポット形成予定位置上方に移動させる。このとき、スポットピン１の先端面３Ａと、スポット形成予定位置である基板表面とが対向するようにスポットピン１を配置させることが好ましい。基板にスポットピンを接近させる方法は、例えば、静止状態の基板に対してスポットピンを移動させてもよく、静止状態のスポットピンに対して基板を移動させてもよい。
【００４９】
スポット形成工程は、生体分子溶液を、基板表面に付着させる工程である。スポットピン１を基板に向けて降下させ、スポットピン１に付着した生体分子溶液を基板に接触させて、スポットピン１に付着した生体分子溶液を基板に移行させ、生体分子を基板表面に付着させる。このとき、スポットピン１を基板に接触させてもよく、生体分子溶液を基板に接触させることが可能であれば、スポットピン１自体を基板に接触させなくともよい。例えば、スポットピン１の先端面３Ａは基板に接触させずに、先端面３Ａに保持させた生体分子溶液を基板に接触させることを行ってもよい。
【００５０】
基板に付着した生体分子は基板に固定化される。例えば、基板表面が生体分子と結合する又は生体分子と親和性の高い親和性物質で修飾された基板使用して、基板上に付着した生体分子を基板に固定することができる。基板上の親和性物質と生体分子との組み合わせは、生体分子の種類に応じて適宜定めればよく、例えば、アビジンとビオチン、Ｎｉ-ＮＴＡ(nickel-nitrilotriacetic acid)とヒスチジン、一級アミノ基と糖鎖、活性エステル（ＡＥＧなど）とアミノ基（抗体等）の組み合わせが挙げられる。
【００５１】
前記基板表面に生体分子を配列する方法は、例えば、複数のスポットピンを予め配列させた状態で集合させたスポットピンの集合体を用い、集合体の各スポットピンのそれぞれに生体分子溶液を付着させ、スポットピンに付着した生体分子溶液を基板に接触させて生体分子溶液を基板表面に付着させ、基板表面に生体分子を配列させることが挙げられる。別の例としては、単一のスポットピンを用い、基板スポットピン１に付着した生体分子溶液を、繰り返し基板に接触させて生体分子を基板表面に付着させ、基板表面に生体分子を配列させることが挙げられる。
【００５２】
以上説明したように、本実施形態のマイクロアレイの製造方法によれば、上述したスポットピン１を用いるため、生体分子溶液を基板表面に付着させて、基板表面に生体分子を配列し固定化する際に、スポットの大きさや形状を維持しつつ、生体分子溶液の使用量を低減することができる。
【００５３】
なお、本発明の技術範囲は上記実施の形態に限定されるものではなく、本発明の趣旨を逸脱しない範囲において種々の変更を加えることが可能である。例えば、上述した実施形態のスポットピン１では、段付き軸部２の大径部２Ａ及び小径部２Ｂの形状がいずれも円筒状である場合を一例として説明したが、大径部２Ａは多角形状であってもよい。
【００５４】
また、上述した実施形態のスポットピン１における溶液保持機構４は、断面視した際の形状（断面形状）が円弧状の環状溝４Ａによって構成される場合を一例として説明したが、これに限定されるものではない。例えば、図４（ａ）に示すように、断面視した際の形状が矩形の環状溝５４Ａによって、溶液保持機構５４が構成されていてもよい。さらには、断面視した際の形状が、三角形等の多角形状の環状溝（図示略）によって溶液保持機構が構成されていてもよい。
【００５５】
また、本発明のスポットピンにおける溶液保持機構は、先端部の先端面に環状に設けられていればよく、環状の溝に限定されるものではない。具体的には、本発明のスポットピンにおける溶液保持機構としては、例えば、図４（ｂ）に示すように、断面視した際の形状が円弧状の環状突起６４Ｂによって構成される溶液保持機構６４であってもよいし、図４（ｃ）に示すように、断面視した際の形状が矩形状の環状突起７４Ｂによって構成される溶液保持機構７４であってもよい。さらには、断面視した際の形状が、三角形等の多角形状の環状突起（図示略）によって溶液保持機構が構成されていてもよい。
【００５６】
すなわち、本発明のスポットピンにおける溶液保持機構は、先端部の先端面の中央を中心とする環状の溝部（凹部）又は突起部（凸部）のいずれか一つを有していればよい。換言すると、本発明のスポットピンにおける溶液保持機構は、先端部の先端面の中央を中心として同心円状に設けられている限りにおいて、断面視した際の形状及び直径がそれぞれ異なる環状溝と、断面視した際の形状及び直径がそれぞれ異なる環状突起とを組み合わせたものであってもよい。
【実施例】
【００５７】
以下、実施例及び比較例に基づいて本発明をより具体的に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。
【００５８】
（実施例１）
図１及び図２に示すように、小径部あり、環状溝有りのピン（図１中に示すＬ：２６．７５ｍｍ、Ｌ１：１５ｍｍ、Ｌ２：９．４５ｍｍ、Ｌ３：２．３ｍｍ、Ｄ１：１．５ｍｍ、Ｄ２：１．０ｍｍ、Ｄ３：０．２ｍｍ）を用いて、スポッティング液に蛍光色素を添加した溶液（２０μｌ）を基板上に２００点スポットした。
その後、マイクロアレイスキャナを用いて蛍光量を測定した（レーザ励起共焦点集光方式やエバネッセント波励起型蛍光検出など）。
蛍光量の測定結果、及び、２００点スポットを行った後のスポット溶液の残量を、下記の表１に示す。
【００５９】
（比較例１）
図５及び図６に示すように、小径部なし、環状溝なしのピン（図５中に示すＬ：２６．７５ｍｍ、Ｌ１’：２４．４５ｍｍ、Ｌ３’：２．３ｍｍ、Ｄ１’：１．５ｍｍ、Ｄ３’：０．２ｍｍ）を用いて、スポッティング液に蛍光色素を添加した溶液（２０μｌ）を基板上に２００点スポットした。
その後、マイクロアレイスキャナを用いて蛍光量を測定した（レーザ励起共焦点集光方式やエバネッセント波励起型蛍光検出など）。
蛍光量の測定結果、及び、２００点スポットを行った後のスポット溶液の残量を、下記の表１に示す。
【００６０】
【表１】
2016118450.tif 000003
【００６１】
表１に示すように、基板上に２００点スポットした結果、比較例１のスポットピン（従来のスポットピン）に対して実施例１のスポットピンでは、小径部があることでスポット液の使用量を減量することができ、環状溝があることでスポットの固定化量を多くできることが確認できた。
【符号の説明】
【００６２】
１・・・スポットピン
２・・・段付き軸部
２Ａ・・・大径部
２Ｂ・・・小径部
２ａ・・・段部
３・・・先端部
３Ａ・・・先端面
３Ｂ・・・側面
３ａ・・・基端
３ｂ・・・先端
４，５４，６４，７４・・・溶液保持機構
４Ａ，５４Ａ・・・環状溝
６４Ｂ，７４Ｂ・・・環状突起
【図１】
2016118450.tif 000004
【図２】
2016118450.tif 000005
【図３】
2016118450.tif 000006
【図４】
2016118450.tif 000007
【図５】
2016118450.tif 000008
【図６】
2016118450.tif 000009