(57)【要約】【課題】凝集誘起発光を示す新たな発蛍光性化合物又はその塩を提供する。また、イオン性化合物の検出剤を提供する。【解決手段】  下記式（１）で表される発蛍光性化合物又はその塩、及びイオン性化合物の検出剤。［化１］2016196447.tif 000017【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（１）で表される発蛍光性化合物又はその塩。
【化１】
2016196447.tif 000016
［式（１）中、Ｒ１はそれぞれ独立に、水素原子又はシアノ基、ハロゲン原子若しくはフェニル基を表し、Ｒ２はそれぞれ独立に、存在しないか又はハロゲン原子、炭素数１〜３のアルキル基、アミノ基若しくは炭素数１〜３のアルコキシ基を表し、Ｒ３はそれぞれ独立に、存在しないか又は−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＣＯ−若しくは−ＣＯＮＨ−で中断されていてもよい炭素数１〜２０のアルキレン基を表し、Ｘはそれぞれ独立に、存在しないか又はカチオン性基若しくはアニオン性基を表し、Ｒ４はそれぞれ独立に、存在しないか又は−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＣＯ−、−ＣＯＮＨ−で中断されていてもよい炭素数１〜２０のアルキル基若しくは炭素数１〜２０のアルコール基若しくは−Ｎ（Ｒ５）２（ここで、Ｒ５はそれぞれ独立に、水素原子又は−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＣＯ−、−ＣＯＮＨ−で中断されていてもよい炭素数１〜２０のアルキル基を表す。）を表す。ｐはそれぞれ独立に０〜４の整数を表し、ｑはそれぞれ独立に１〜５の整数を表し、少なくとも１つのＸはカチオン性基又はアニオン性基である。]
【請求項２】
請求項１に記載の発蛍光性化合物又はその塩を有効成分とする、イオン性化合物の検出剤。
【請求項３】
前記式（１）におけるＸがカチオン性基であり、前記イオン性化合物がアニオン性化合物である、請求項２に記載のイオン性化合物の検出剤。
【請求項４】
溶媒と、被検試料と、請求項１に記載の発蛍光性化合物又はその塩とを含む混合液を調製する工程と、
前記混合液の蛍光を検出する工程と、を備える、被検試料中のイオン性化合物の検出方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、発蛍光性化合物又はその塩、イオン性化合物の検出剤及びイオン性化合物の検出方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
例えば、臨床検査や新薬の開発等における各種生体分子の分析や、河川、水道水、工業用水等の環境水中におけるイオン性化合物の定量・半定量分析等、生体中や環境中において、特定化合物を高感度に微量分析する需要がある。
【０００３】
特定化合物を高感度に微量分析する手段として蛍光分析が用いられており、また、そのための発蛍光性化合物も案出されている。
【０００４】
例えば、シグナル伝達系における情報伝達の制御等生体内で重要な役割を果たすリン酸イオン（リン酸基）を分析するための発蛍光性化合物としては、ルテニウム−ビピリジルポリアザ化合物等が提案されている（例えば、特許文献１及び非特許文献１を参照。）。
【０００５】
また、糖尿病の診断マーカーとして知られているグルコースをはじめとする糖を検出・測定するための発蛍光性化合物として、フェニルボロン酸構造を含有する各種の化合物が案出されている（例えば、特許文献２〜４を参照。）。
【０００６】
また、生体内の多くの酸化還元反応において補酵素として機能するＮＡＤ＋／ＮＡＤＨ及びＮＡＤＰ＋／ＮＡＤＰＨは、酸化還元反応の生成物や酵素活性を調べる等の目的に利用され、例えば、ＮＡＤＨの蛍光が測定されることがある（例えば、特許文献５を参照。）。
【０００７】
上に例示したような特定化合物を検出・測定する従来の発蛍光性化合物の多くは、溶液中の被検出物質の濃度に応じて、その蛍光強度が漸次変化することに基づくものであり、低濃度域では蛍光が無く、一方、高濃度になると凝集体を形成して発光しなくなる（消光する）ことがあることが知られている。
【０００８】
これに対して、最近、凝集にともなって蛍光が増大する凝集誘起発光（Ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｅｍｉｓｓｉｏｎ：ＡＩＥ）という現象が見出されている（例えば、非特許文献２及び３を参照。）。このＡＩＥを利用すれば、これまでにない新しい方式の蛍光分析ができるものと期待されているが、ＡＩＥを示す発蛍光性化合物の例はきわめて少ない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】特許第４１３８３３１号公報
【特許文献２】特許第２７９９８３７号公報
【特許文献３】特許第２８８３８２４号公報
【特許文献４】特許第２８８９４７６号公報
【特許文献５】特開平２−２６５５００号公報
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Beer P. D. and Gale P. A., Anion Recognition and Sensing: The State of the Art and Future Perspectives., Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 40(3), 486-516, 2001.
【非特許文献２】Hong Y., et al., Aggregation-induced emission., Chem. Soc. Rev. 40(11), 5361-5388, 2011.
【非特許文献３】Wu J., et al., New sensing mechanisms for design of fluorescent chemosensors emerging in recent years., Chem. Soc. Rev., 40(7), 3483-3495, 2011.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
そこで、本発明は、凝集誘起発光（ＡＩＥ）を示す新たな発蛍光性化合物を提供することを目的とする。本発明はまた、イオン性化合物の検出剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明は以下の通りである。
［１］下記式（１）で表される発蛍光性化合物又はその塩。
【化１】
2016196447.tif 000002
［式（１）中、Ｒ１はそれぞれ独立に、水素原子又はシアノ基、ハロゲン原子若しくはフェニル基を表し、Ｒ２はそれぞれ独立に、存在しないか又はハロゲン原子、炭素数１〜３のアルキル基、アミノ基若しくは炭素数１〜３のアルコキシ基を表し、Ｒ３はそれぞれ独立に、存在しないか又は−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＣＯ−若しくは−ＣＯＮＨ−で中断されていてもよい炭素数１〜２０のアルキレン基を表し、Ｘはそれぞれ独立に、存在しないか又はカチオン性基若しくはアニオン性基を表し、Ｒ４はそれぞれ独立に、存在しないか又は−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＣＯ−、−ＣＯＮＨ−で中断されていてもよい炭素数１〜２０のアルキル基若しくは炭素数１〜２０のアルコール基若しくは−Ｎ（Ｒ５）２（ここで、Ｒ５はそれぞれ独立に、水素原子又は−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＣＯ−、−ＣＯＮＨ−で中断されていてもよい炭素数１〜２０のアルキル基を表す。）を表す。ｐはそれぞれ独立に０〜４の整数を表し、ｑはそれぞれ独立に１〜５の整数を表し、少なくとも１つのＸはカチオン性基又はアニオン性基である。]
［２］下記式（Ｐ１）で表される、［１］に記載の発蛍光性化合物又はその塩。
【化２】
2016196447.tif 000003
［式（１）中、Ｒ１はそれぞれ独立に、水素原子又はシアノ基、ハロゲン原子若しくはフェニル基を表し、Ｒ２はそれぞれ独立に、存在しないか又はハロゲン原子、炭素数１〜３のアルキル基、アミノ基若しくはアルコキシ基を表し、Ｒ３はそれぞれ独立に−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−で中断されていてもよい炭素数１〜１０のアルキレン基を表し、Ｘはカチオン性基又はアニオン性基を表し、Ｒ４はそれぞれ独立に、存在しないか又は−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＣＯ−、−ＣＯＮＨ−で中断されていてもよい炭素数１〜２０のアルキル基、アルコール基若しくはエチレンオキシド基を表す。ｐはそれぞれ独立に０〜４の整数を表し、ｑはそれぞれ独立に１〜５の整数を表す。]
［３］［１］又は［２］に記載の発蛍光性化合物又はその塩を有効成分とする、イオン性化合物の検出剤。
［４］前記式（１）又は前記式（Ｐ１）におけるＸがカチオン性基であり、前記イオン性化合物がアニオン性化合物である、［３］に記載のイオン性化合物の検出剤。
［５］溶媒と、被検試料と、［１］又は［２］に記載の発蛍光性化合物又はその塩とを含む混合液を調製する工程と、前記混合液の蛍光を検出する工程と、を備える、被検試料中のイオン性化合物の検出方法。
【発明の効果】
【００１３】
本発明により、凝集誘起発光（ＡＩＥ）を示す新たな発蛍光性化合物を提供することができる。また、イオン性化合物の検出剤を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】（ａ）は実験例７の結果を示す写真である。（ｂ）は実験例７の結果を示すグラフである。
【図２】（ａ）及び（ｃ）は実験例８の結果を示すグラフである。（ｂ）及び（ｄ）は実験例８の結果を示す写真である。
【図３】（ａ）及び（ｂ）は、実験例９の結果を示すグラフである。
【図４】（ａ）及び（ｂ）は、実験例１０の結果を示すグラフである。
【図５】実験例１１の結果を示すグラフである。
【図６】実験例１１の結果を示すグラフである。
【図７】（ａ）は実験例１２の結果を示すグラフ及び写真である。（ｂ）は実験例１２の結果を示すグラフである。
【図８】（ａ）は実験例１３の結果を示すグラフ及び写真である。（ｂ）は実験例１３の結果を示すグラフである。
【図９】（ａ）は実験例１４の結果を示すグラフ及び写真である。（ｂ）は実験例１４の結果を示すグラフである。
【図１０】（ａ）及び（ｂ）は、実験例１５の結果を示す写真である。
【図１１】実験例１６の結果を示すグラフである。
【図１２】（ａ）は実験例１７の結果を示す写真である。（ｂ）は実験例１７の結果を示すグラフである。
【図１３】（ａ）は実験例１８の結果を示す写真である。（ｂ）は実験例１８の結果を示すグラフである。
【図１４】（ａ）は実験例１９の結果を示す写真である。（ｂ）は実験例１９の結果を示すグラフである。
【図１５】（ａ）及び（ｂ）は、実験例２０の結果を示すグラフである。
【図１６】（ａ）はＪ−会合体の模式図である。（ｂ）はＨ−会合体の模式図である。
【図１７】（ａ）は実験例２１の結果を示す写真である。（ｂ）は実験例２１の結果を示すグラフである。
【図１８】（ａ）は実験例２２の結果を示す写真である。（ｂ）及び（ｃ）は実験例２２の結果を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
［発蛍光性化合物］
１実施形態において、本発明は、下記式（１）で表される発蛍光性化合物又はその塩を提供する。
【化３】
2016196447.tif 000004
【００１６】
式（１）中、Ｒ１はそれぞれ独立に、水素原子又はシアノ基、ハロゲン原子若しくはフェニル基を表し、Ｒ２はそれぞれ独立に、存在しないか又はハロゲン原子、炭素数１〜３のアルキル基、アミノ基若しくは炭素数１〜３のアルコキシ基を表し、Ｒ３はそれぞれ独立に、存在しないか又は−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＣＯ−若しくは−ＣＯＮＨ−で中断されていてもよい炭素数１〜２０のアルキレン基を表し、Ｘはそれぞれ独立に、存在しないか又はカチオン性基若しくはアニオン性基を表し、Ｒ４はそれぞれ独立に、存在しないか又は−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＣＯ−、−ＣＯＮＨ−で中断されていてもよい炭素数１〜２０のアルキル基若しくは炭素数１〜２０のアルコール基若しくは−Ｎ（Ｒ５）２（ここで、Ｒ５はそれぞれ独立に、水素原子又は−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＣＯ−、−ＣＯＮＨ−で中断されていてもよい炭素数１〜２０のアルキル基を表す。）を表す。ｐはそれぞれ独立に０〜４の整数を表し、ｑはそれぞれ独立に１〜５の整数を表し、少なくとも１つのＸはカチオン性基又はアニオン性基である。
【００１７】
式（１）中、Ｒ３で表されるアルキレン基は分岐鎖を有していてもよい。また、当該分岐鎖の炭素数は１〜１０であってもよい。分岐鎖としては、アミノ酸の側鎖に由来する基が挙げられ、例えば、メチル基、ベンジル基等が挙げられる。
【００１８】
後述する実施例で示すように、本実施形態の発蛍光性化合物又はその塩は、イオン性化合物の存在下で凝集誘起発光（ＡＩＥ）を示し、イオン性化合物の非存在下では蛍光を発しない。
【００１９】
本実施形態の発蛍光性化合物又はその塩において、上記式（１）におけるＸがカチオン性基である場合、アニオン性化合物の存在下でＡＩＥを示し、蛍光を発する。また、上記式（１）におけるＸがアニオン性基である場合、カチオン性化合物の存在下でＡＩＥを示し、蛍光を発する。
【００２０】
上記のカチオン性基としては、例えば下記式（２）〜（４）で表される基が挙げられる。
【化４】
2016196447.tif 000005
【００２１】
また、上記のアニオン性基としては、例えばリン酸基、カルボン酸基、硫酸基等が挙げられる。
【００２２】
本実施形態の発蛍光性化合物又はその塩において、上記式（１）で表されるＲ１はシアノ基であることが好ましい。また、上記式（１）で表されるＲ２は存在しないことが好ましい。また、上記式（１）で表されるＸはカチオン性基であることが好ましい。また、上記式（１）で表されるｑは１〜３であることが好ましく、１であることがより好ましい。
【００２３】
本実施形態の発蛍光性化合物の塩の種類は、本発明の効果が得られる限り特に限定されない。具体的には、上記式（１）におけるＸがカチオン性基である場合には、例えば、硫酸、硝酸等の無機酸との塩、例えば塩素、臭素、ヨウ素等のハロゲン原子との塩、例えば酢酸、トリフルオロ酢酸、クエン酸、グルコン酸、プロピオン酸、パントテン酸等の有機酸との塩等が挙げられる。また、上記式（１）におけるＸがアニオン性基である場合には、例えば、アルカリ金属、アルカリ土類金属等の金属との塩、アンモニアとの塩、テトラブチルアンモニウム等の有機アミン若しくは有機アンモニウムとの塩等が挙げられる。
【００２４】
［イオン性化合物の検出剤］
１実施形態において、本発明は、上述した発蛍光性化合物又はその塩を有効成分とする、イオン性化合物の検出剤を提供する。
【００２５】
後述する実施例で示すように、上述した発蛍光性化合物又はその塩は、イオン性化合物の存在下で蛍光を発し、イオン性化合物の非存在下では蛍光を発しない。したがって、本実施形態の検出剤を用いることにより、生体由来試料や環境由来試料中におけるイオン性化合物を検出することができる。
【００２６】
本実施形態の検出剤が検出することができるイオン性化合物としては、アニオン性化合物又はカチオン性化合物が挙げられる。
【００２７】
アニオン性化合物としては、例えば、モノカルボン酸、ジカルボン酸、トリカルボン酸、ポリカルボン酸（フミン酸等）等のカルボン酸系化合物；リン酸、オリゴリン酸、ポリリン酸等のリン酸系化合物；オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチド、デオキシリボ核酸、リボ核酸、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸（酸化型（ＮＡＤＰ＋）又は還元型（ＮＡＤＰＨ））、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（酸化型（ＮＡＤ＋）又は還元型（ＮＡＤＨ））等のヌクレオチド類；ヘパリン、コンドロイチン硫酸、ヒアルロン酸等のアニオン性の多糖類；アニオン性ペプチド、プロテイン等が挙げられる。
【００２８】
一方、カチオン性化合物としては、例えば、ナトリウムイオン、カルシウムイオン等の金属イオン；ポリアミン等のアミン系化合物；カチオン性ペプチド、プロテイン等が挙げられる。
【００２９】
実施例において後述するように、例えば、上記式（１）で表されるＸがカチオン性基である発蛍光性化合物又はその塩を用いることにより、ジカルボン酸、ヌクレオチド、アニオン性多糖類等のアニオン性化合物の検出を行うことができる。
【００３０】
例えば、ジカルボン酸は、クエン酸回路等の代謝経路において生成される中間体でもある。代謝の機能不全により増加した体内ジカルボン酸は、最終的に尿中に排泄される。したがって、尿中の高濃度ジカルボン酸群は、代謝疾患のマーカーとなり、この高濃度ジカルボン酸群をターンオン又はスイッチオン式に検出する発蛍光性化合物（蛍光プローブ、蛍光センサ）を代謝疾患のスクリーニング検査に利用することにより、検査を簡略化することができる。
【００３１】
本明細書において、ターンオン式とは、発蛍光性化合物が、検出対象化合物の濃度依存的に、無蛍光又は無視できるほど微弱な蛍光を発する状態から、発蛍光状態に直線的に切り替わることを意味する。また、スイッチオン式とは、発蛍光性化合物が、検出対象化合物の濃度が所定の閾値以上になった場合に、無蛍光又は無視できるほど微弱な蛍光を発する状態から、発蛍光状態に切り替わることを意味する。
【００３２】
［イオン性化合物の検出方法］
１実施形態において、本発明は、溶媒と、被検試料と、上述した発蛍光性化合物又はその塩とを含む混合液を調製する工程と、前記混合液の蛍光を検出する工程と、を備える、被検試料中のイオン性化合物の検出方法を提供する。
【００３３】
本実施形態の検出方法において、溶媒は、被検試料に由来する液体であってもよく、発蛍光性化合物又はその塩を溶解した液体であってもよく、被検試料、発蛍光性化合物又は蛍光性化合物の塩とは別に用意された液体であってもよい。
【００３４】
また、上記の混合液は、ｐＨ緩衝作用を有していることが好ましい。溶媒のｐＨは目的に応じて適宜調整すればよく、例えば中性であってもよく、例えば酸性であってもよく、例えば塩基性であってもよい。
【００３５】
被検試料としては、特に制限されず、血液、血漿、血清、尿、生体由来組織、培養細胞、培養微生物、培養細胞又は培養微生物の培地等の生体試料；河川から採取された水、水道水、工業用水等の試料等が挙げられる。また、検出対象とするイオン性化合物としては上述したものが挙げられる。
【００３６】
蛍光の検出は、具体的には、上記の混合液に励起光を照射し、発生する蛍光を検出することにより行うことができる。混合液の蛍光の検出は、例えば肉眼で行ってもよいし、例えば分光光度計を用いた測定により行ってもよい。蛍光を肉眼で検出する場合には、例えば、ＵＶハンディーランプ等を光源として励起光の照射を行ってもよい。
【００３７】
実施例において後述するように、例えば、被検試料の非存在下における、発蛍光性化合物又はその塩の蛍光強度と比較して、被検試料の存在下における、発蛍光性化合物又はその塩の蛍光強度が上昇した場合には、被検試料中にイオン性化合物が存在すると判断することができる。また、蛍光強度の上昇の程度により、イオン性化合物の濃度を定量することもできる。
【００３８】
あるいは、実施例において後述するように、被検試料の存在下における、発蛍光性化合物又はその塩の分光学的特徴が、被検試料の非存在下における、発蛍光性化合物又はその塩の分光学的特徴から変化した場合に、被検試料中にイオン性化合物が存在すると判断することができる。分光学的特徴の変化としては、例えば、蛍光波長の変化、吸光特性の変化等が挙げられる。分光学的特徴の変化の検出は、例えば肉眼で行ってもよいし、例えば分光光度計を用いた測定により行ってもよい。
【００３９】
また、実施例において後述するように、分光学的特徴の変化に基づいて、被検試料中のイオン性化合物の種類を特定することもできる。
【実施例】
【００４０】
次に実験例を示して本発明を更に詳細に説明するが、本発明は以下の実験例に限定されるものではない。
【００４１】
［実験例１］
下記合成スキーム１にしたがって、実施例１の発蛍光性化合物（以下、「ＯＰＶ−Ｇ」という場合がある。）を合成した。
【００４２】
【化５】
2016196447.tif 000006
【００４３】
（化合物２の合成）
２−（２−ａｍｉｎｏｅｔｈｏｘｙ）ｅｔｈａｎｏｌ１（１６．０ｇ，１５２ｍｍｏｌ）を乾燥ジクロロメタン（１２０ｍＬ）に溶解し、それにＢｏｃ２Ｏ（３３．２ｇ，１５０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で３時間撹拌した後、溶媒を減圧留去した。粗製物はシリカゲルカラムクロマトグラフで精製し、無色オイル状物として化合物２を２５．６ｇ得た。収率８２％。
【００４４】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ４．９２（ｂｒ−ｓ，１Ｈ），３．７４（ｍ，２Ｈ），３．５６（ｍ，２Ｈ），３．３４（ｍ，２Ｈ），２．１４（ｓ，１Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）．
【００４５】
（化合物３の合成）
化合物２（２５．６ｇ，１２５ｍｍｏｌ）及び四臭化炭素（４１．４ｇ，１２５ｍｍｏｌ）を乾燥ジクロロメタン（２００ｍＬ）に溶解し、それにトリフェニルホスフィン（３２．８ｇ，１２５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で２２時間撹拌した後、溶媒を減圧留去した。粗製物はシリカゲルカラムクロマトグラフで精製し、無色固体として化合物３を２８．６ｇ得た。収率８５％。
【００４６】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ４．９１（ｂｒ−ｓ，１Ｈ），３．７６（ｍ，２Ｈ），３．５５（ｍ，２Ｈ），３．４７（ｍ，２Ｈ），３．３３（ｍ，２Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）．
【００４７】
（化合物４の合成）
ｐ−ヒドロキシベンズアルデヒド（１．８２ｇ，１４．９ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（４．１２ｇ，２９．８ｍｍｏｌ）及び化合物３（４．００ｇ，１４．９ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（２０ｍＬ）に懸濁させ、６５℃で６時間加熱した。室温まで放冷したのち、酢酸エチル（２００ｍＬ）を加え、水、飽和食塩水の順に洗浄した。有機相は無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ液を減圧濃縮した。粗製物はシリカゲルカラムクロマトグラフで精製し、無色オイル状物として化合物４を３．９７ｇ得た。収率８６％。
【００４８】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ９．８９（ｓ，１Ｈ），７．８４（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，２Ｈ），７．０４（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，２Ｈ），４．９６（ｂｒ−ｓ，１Ｈ），４．２１（ｍ，２Ｈ），３．８６（ｍ，２Ｈ），３．６２（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ），３．３５（ｑ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ），１．４４（ｓ，９Ｈ）．
【００４９】
（化合物５の合成）
化合物４（３．９７ｇ，１２．８ｍｍｏｌ）及びｘｙｌｙｌｅｎｅ  ｄｉｃｙａｎｉｄｅ（１．００ｇ，６．４２ｍｍｏｌ）を乾燥エタノール（５０ｍＬ）に溶解した。そこにＢｕ４ＮＯＨ（４０％  ｉｎ  ｗａｔｅｒ）を５滴加え、３時間加熱還流した。得られた沈殿物を回収し、エタノールで洗浄し、黄色固体として化合物５を４．２８ｇ得た。収率９０％。
【００５０】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．９２（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，４Ｈ），７．７２（ｓ，４Ｈ），７．５２（ｓ，２Ｈ），７．０２（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，４Ｈ），４．９６（ｓ，２Ｈ），４．２０（ｍ，４Ｈ），３．８６（ｍ，４Ｈ），３．６３（ｔ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，４Ｈ），３．３６（ｑ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，４Ｈ），１．４５（ｓ，１８Ｈ）．
【００５１】
（化合物６の合成）
化合物５（３．０ｇ，４．０６ｍｍｏｌ）を乾燥ジクロロメタン（１５ｍＬ）に懸濁させ、それにトリフルオロ酢酸（１０ｍＬ，１３０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で２１時間撹拌した後、乾燥ジエチルエーテルを加え、黄色固体として化合物６を２．９９ｇ得た。収率９６％。
【００５２】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ８．０９（ｓ，２Ｈ），８．００（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，４Ｈ），７．８７（ｓ，４Ｈ），７．８４（ｓ，６Ｈ），７．１６（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，４Ｈ），４．２５（ｍ，４Ｈ），３．８４（ｍ，４Ｈ），３．６８（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，４Ｈ），３．０３（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，４Ｈ）．
【００５３】
（化合物７の合成）
化合物６（１．５３ｇ，２．００ｍｍｏｌ）を乾燥ジクロロメタン（２５ｍＬ）に溶解し、それにトリエチルアミン（０．６１ｍＬ，４．４０ｍｍｏｌ）及び１−Ｈ−ｐｙｒａｚｏｌｅ−１−（Ｎ，Ｎ’−ｂｉｓ（ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ））ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｉｎｅ（１．８６ｇ，６．００ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で３日間撹拌した。その後、クロロホルム（１００ｍＬ）を加え、水、飽和食塩水の順に洗浄した。有機相は無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ液を減圧濃縮した。粗製物はシリカゲルカラムクロマトグラフで精製し、黄色固体として化合物７を１．４０ｇ得た。収率６８％。
【００５４】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１１．４９（ｓ，２Ｈ），８．６９（ｂｒ−ｓ，２Ｈ），７．９１（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，４Ｈ），７．７２（ｓ，４Ｈ），７．５２（ｓ，２Ｈ），７．０３（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，４Ｈ），４．２２（ｍ，４Ｈ），３．８９（ｍ，４Ｈ），３．７０（ｍ，８Ｈ），１．５１（ｓ，１８Ｈ），１．４９（ｓ，１８Ｈ）．
【００５５】
（ＯＰＶ−Ｇ（実施例１）の合成）
化合物７（１．２７ｇ，１．２４ｍｍｏｌ）を乾燥ジクロロメタン（１５ｍＬ）に懸濁させ、それにトリフルオロ酢酸（５．０ｍＬ，６５．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１７時間撹拌した後、乾燥ジエチルエーテルを加え、黄色固体としてＯＰＶ−Ｇを１．００ｇ得た。収率９５％。
【００５６】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ８．０９（ｓ，２Ｈ），８．００（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，４Ｈ），７．８７（ｓ，４Ｈ），７．６０（ｓ，２Ｈ），７．１５（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，４Ｈ），４．２３（ｍ，４Ｈ），３．８２（ｍ，４Ｈ），３．５９（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，４Ｈ），３．３２（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，４Ｈ）．
ＭＳ（ＭＡＬＤＩ）：ｍ／ｚ＝６２３．３７（［Ｍ−Ｈ＋−２ＣＦ３ＣＯＯ−］＋）．
ｃａｌｃｄ（％）ｆｏｒ  Ｃ３８Ｈ４０Ｆ６Ｎ８Ｏ８（ＯＰＶ−Ｇ）：Ｃ５３．６５，Ｈ４．７４，Ｎ１３．１７；ｆｏｕｎｄ：Ｃ５３．５１，Ｈ４．８２，Ｎ１３．１１．
【００５７】
［実験例２］
下記合成スキーム２にしたがって、実施例２〜７の発蛍光性化合物を合成した。以下、実施例２〜７の化合物を、それぞれ「ＯＰＶ−Ａ」（実施例２）、「ＯＰＶ−ＩｍＭｅ」（実施例３）、「ＯＰＶ−ＩｍＣ２ＯＭｅ」（実施例４）、「ＯＰＶ−ＩｍＣ２ＯＨ」（実施例５）、「ＯＰＶ−ＩｍＤＥＯ」（実施例６）、「ＯＰＶ−ＩｍＴＥＯ」（実施例７）という場合がある。
【００５８】
【化６】
2016196447.tif 000007
【００５９】
（化合物８の合成）
ｐ−ヒドロキシベンズアルデヒド（４．６９ｇ，３８．４ｍｍｏｌ）及びｘｙｌｙｌｅｎｅｄｉｃｙａｎｉｄｅ（３．００ｇ，１９．２ｍｍｏｌ）を乾燥エタノール（５０ｍＬ）に溶解した。そこに酢酸（３．０ｍＬ）及びピペリジン（５．０ｍＬ）を加え、２０時間加熱還流した。得られた沈殿物を回収した後、エタノールで洗浄し、黄色固体として化合物８を５．８４ｇ得た。収率８３％。
【００６０】
（化合物９の合成）
化合物８（２．００ｇ，５．４９ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（３．００ｇ，２１．７ｍｍｏｌ）及び１，１’−Ｏｘｙｂｉｓ（２−ｂｒｏｍｏｅｔｈａｎｅ）（１２．８ｇ，５５．２ｍｍｏｌ）を乾燥アセトン（５０ｍＬ）に懸濁させ、６５℃で６時間加熱還流した。室温まで放冷した後、固形物をろ別し、ろ液を減圧濃縮した。粗製物はシリカゲルカラムクロマトグラフで精製し、黄色固体として化合物９を１．５７ｇ得た。収率４３％。
【００６１】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．９１（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，４Ｈ），７．７２（ｓ，４Ｈ），７．５２（ｓ，２Ｈ），７．０２（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，４Ｈ），４．２２（ｍ，４Ｈ），３．９３−３．８９（ｍ，８Ｈ），３．５１（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，４Ｈ）．
【００６２】
（ＯＰＶ−Ａ、ＯＰＶ−ＩｍＭｅ、ＯＰＶ−ＩｍＣ２ＯＭｅ、ＯＰＶ−ＩｍＣ２ＯＨ、ＯＰＶ−ＩｍＤＥＯ、ＯＰＶ−ＩｍＴＥＯの合成）
化合物９（３５０ｍｇ，０．５３ｍｍｏｌ）をアセトニトリル‐エタノール（２：１、ｖ／ｖ）の混合溶媒（１５ｍＬ）に溶解し、それに１０等量のアミン化合物あるいはイミダゾール化合物を加えた。反応混合物は２４時間加熱還流した。室温まで放冷した後、析出した固体をろ取し、黄色固体を得た。収率４４〜８４％。
【００６３】
《ＯＰＶ−Ａ（実施例２）》
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ８．０９（ｓ，２Ｈ），７．９９（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，４Ｈ），７．８７（ｓ，４Ｈ），７．１５（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，４Ｈ），５．２７（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，２Ｈ），４．２５（ｍ，４Ｈ），３．９４（ｂｒ−ｓ，４Ｈ），３．８４（ｂｒ−ｔ，８Ｈ），３．６３（ｍ，４Ｈ），３．４８（ｍ，４Ｈ），３．１３（ｓ，１２Ｈ）．
ｃａｌｃｄ（％）ｆｏｒＣ４０Ｈ５２Ｂｒ２Ｎ４Ｏ６（ＯＰＶ−Ａ）：Ｃ５６．８８，Ｈ６．２１，Ｎ６．６３；ｆｏｕｎｄ：Ｃ５６．６２，Ｈ６．１８，Ｎ６．６２．
【００６４】
《ＯＰＶ−ＩｍＭｅ（実施例３）》
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ９．０９（ｓ，２Ｈ），８．０９（ｓ，２Ｈ），７．９９（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，４Ｈ），７．８７（ｓ，４Ｈ），７．７５（ｔ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，２Ｈ），７．７０（ｔ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，２Ｈ），７．１２（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，４Ｈ），４．３９（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，４Ｈ），４．２０（ｍ，４Ｈ），３．８６（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，４Ｈ），３．８４（ｓ，６Ｈ），３．８１（ｍ，４Ｈ）．
ｃａｌｃｄ（％）ｆｏｒＣ４０Ｈ４２Ｂｒ２Ｎ６Ｏ４（ＯＰＶ−ＩｍＭｅ）：Ｃ５７．８４，Ｈ５．１０，Ｎ１０．１２；ｆｏｕｎｄ：Ｃ５７．９４，Ｈ５．１３，Ｎ１０．０４．
【００６５】
《ＯＰＶ−ＩｍＣ２ＯＭｅ（実施例４）》
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ９．１４（ｓ，２Ｈ），８．０９（ｓ，２Ｈ），７．９９（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，４Ｈ），７．８７（ｓ，４Ｈ），７．７７（ｔ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，２Ｈ），７．７６（ｔ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，２Ｈ），７．１２（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，４Ｈ），４．４２（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，４Ｈ），４．３６（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，４Ｈ），４．１９（ｍ，４Ｈ），３．８７（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，４Ｈ），３．８１（ｍ，４Ｈ），３．６８（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，４Ｈ），３．２５（ｓ，６Ｈ）．
ｃａｌｃｄ（％）ｆｏｒＣ４４Ｈ５０Ｂｒ２Ｎ６Ｏ６（ＯＰＶ−ＩｍＣ２ＯＭｅ）：Ｃ５７．５２，Ｈ５．４９，Ｎ９．１５；ｆｏｕｎｄ：Ｃ５７．３２，Ｈ５．４４，Ｎ９．１２．
【００６６】
《ＯＰＶ−ＩｍＣ２ＯＨ（実施例５）》
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ９．１３（ｓ，２Ｈ），８．０９（ｓ，２Ｈ），７．９９（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，４Ｈ），７．８７（ｓ，４Ｈ），７．７６（ｔ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，２Ｈ），７．７５（ｔ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，２Ｈ），７．１２（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，４Ｈ），５．１８（ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，２Ｈ），４．４２（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，４Ｈ），４．２３−４．１９（ｍ，８Ｈ），３．８７（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，４Ｈ），３．８２（ｍ，４Ｈ），３．７２（ｑ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，４Ｈ）．
ｃａｌｃｄ（％）ｆｏｒＣ４２Ｈ４６Ｂｒ２Ｎ６Ｏ６（ＯＰＶ−ＩｍＣ２ＯＨ）：Ｃ５６．６４，Ｈ５．２１，Ｎ９．４４；ｆｏｕｎｄ：Ｃ５６．６６，Ｈ５．２４，Ｎ９．４２．
【００６７】
《ＯＰＶ−ＩｍＤＥＯ（実施例６）》
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ９．１２（ｓ，２Ｈ），８．０８（ｓ，２Ｈ），７．９９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，４Ｈ），７．８７（ｓ，４Ｈ），７．７７（ｔ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，２Ｈ），７．７５（ｔ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，２Ｈ），７．１２（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，４Ｈ），４．４２（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，４Ｈ），４．３５（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，４Ｈ），４．１９（ｍ，４Ｈ），３．８７（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，４Ｈ），３．８１（ｍ，４Ｈ），３．７６（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，４Ｈ），３．５３（ｍ，４Ｈ），３．４０（ｍ，４Ｈ），３．２１（ｓ，６Ｈ）．
ｃａｌｃｄ（％）ｆｏｒＣ４８Ｈ５８Ｂｒ２Ｎ６Ｏ８（ＯＰＶ−ＩｍＤＥＯ）：Ｃ５７．２６，Ｈ５．８１，Ｎ８．３５；ｆｏｕｎｄ：Ｃ５７．２２，Ｈ５．８７，Ｎ８．２１．
【００６８】
《ＯＰＶ−ＩｍＴＥＯ（実施例７）》
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ９．１３（ｓ，２Ｈ），８．０８（ｓ，２Ｈ），７．９９（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，４Ｈ），７．８７（ｓ，４Ｈ），７．７７（ｔ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，２Ｈ），７．７６（ｔ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，２Ｈ），７．１２（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，４Ｈ），４．３９（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，４Ｈ），３．７７（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，４Ｈ），３．５５−３．５３（ｍ，４Ｈ），３．４９−３．４５（ｍ，８Ｈ），３．４２−３．４０（ｍ，４Ｈ），３．２３（ｓ，６Ｈ）．
【００６９】
［実験例３］
下記合成スキーム３にしたがって、化合物１０ａ、１０ｂ及び１０ｃを出発材料として、それぞれ実施例８〜１０の発蛍光性化合物を合成した。スキーム３中、「＊」は結合手を表す。以下、実施例８〜１０の化合物を、それぞれ「Ｇ２」（実施例８）、「Ｇ４」（実施例９）、「Ｇ６」（実施例１０）という場合がある。各化合物の合成手順は、上述した合成スキーム１と同様であった。より具体的には、化合物１０ａから１１ａ、１２ａ、１３ａを経てＧ２（実施例８）を得た。また、化合物１０ｂから１１ｂ、１２ｂ、１３ｂを経てＧ４（実施例９）を得た。また、化合物１０ｃから１１ｃ、１２ｃ、１３ｃを経てＧ６（実施例８）を得た。
【００７０】
【化７】
2016196447.tif 000008
【００７１】
《Ｇ２（実施例８）》
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ８．０８（ｓ，２Ｈ），７．９９（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，４Ｈ），７．８６（ｓ，４Ｈ），７．６３（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２Ｈ），７．１４（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，４Ｈ），７．１３（ｂｒ−ｓ，８Ｈ），４．１３（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，４Ｈ），３．３０（ｑ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，４Ｈ），１．９７（ｑｕｉｎｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，４Ｈ）．
ＭＳ（ＭＡＬＤＩ）：ｍ／ｚ＝５６３．１［Ｍ−Ｈ＋−２ＣＦ３ＣＯＯ−］＋．
ｃａｌｃｄ（％）ｆｏｒ  Ｃ３６Ｈ３６Ｆ６Ｎ８Ｏ６（Ｇ２）：Ｃ５４．６８，Ｈ４．５９，Ｎ１４．１７；ｆｏｕｎｄ：Ｃ５４．３０，Ｈ４．５５，Ｎ１４．０７．
【００７２】
《Ｇ４（実施例９）》
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ８．０７（ｓ，２Ｈ），７．８６（ｓ，４Ｈ），７．７８（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２Ｈ），７．７７（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２Ｈ），７．７３（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，２Ｈ），７．６１（ｄｄ，Ｊ＝８．８，２．０Ｈｚ，２Ｈ），７．２１（ｂｒ−ｓ，１６Ｈ），７．２０（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），４．１３（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，４Ｈ），４．１０（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，４Ｈ），３．２８（ｍ，８Ｈ），２．００（ｑｕｉｎｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，４Ｈ），１．９８（ｑｕｉｎｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，４Ｈ）．
ＭＳ（ＭＡＬＤＩ）：ｍ／ｚ＝７９３．０［Ｍ−３Ｈ＋−４ＣＦ３ＣＯＯ−］＋．
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ  ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ［Ｍ−ＣＦ３ＣＯＯ−］＋：１１３５．４１５５；ｆｏｕｎｄ：１１３５．４１５７．
【００７３】
《Ｇ６（実施例１０）》
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ８．０９（ｓ，２Ｈ），７．８８（ｓ，４Ｈ），７．８６（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，４Ｈ），７．７５（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），７．４０（ｓ，４Ｈ），７．２５（ｂｒ−ｓ，２４Ｈ），４．０９（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，８Ｈ），４．０５（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，４Ｈ），３．３５（ｑ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，４Ｈ），３．３０（ｑ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，８Ｈ），２．０１（ｑｕｉｎｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，８Ｈ），１．８８（ｑｕｉｎｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，４Ｈ）．
ＭＳ（ＭＡＬＤＩ）：ｍ／ｚ＝１０２３．２［Ｍ−５Ｈ＋−６ＣＦ３ＣＯＯ−］＋．
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ  ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ［Ｍ−ＣＦ３ＣＯＯ−］＋：１５９３．５５０３；ｆｏｕｎｄ：１５９３．５５１０．
【００７４】
［実験例４］
下記合成スキーム４にしたがって、実施例１１の発蛍光性化合物を合成した。スキーム４中、「＊」は結合手を表す。以下、実施例１１の化合物を「ＤＥＯ−ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇ」という場合がある。
【００７５】
【化８】
2016196447.tif 000009
【００７６】
（化合物１４の合成）
アニリン（１．６１ｇ，１７．３ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（９．５６ｇ，６９．２ｍｍｏｌ）、ヨウ化カリウム（１．４３ｇ，８．６５ｍｍｏｌ）及び１−ｂｒｏｍｏ−２−（２−ｍｅｔｈｏｘｙｅｔｈｏｘｙ）ｅｔｈａｎｅ（９．５０ｇ，５１．９ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（５．０ｍＬ）に懸濁させ、８０℃で２４時間加熱した。室温まで放冷したのち、酢酸エチル（２００  ｍＬ）を加え、水、飽和食塩水の順に洗浄した。有機相は無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ液を減圧濃縮した。粗製物はシリカゲルカラムクロマトグラフで精製し、無色オイル状物として化合物１４を４．２７ｇ得た。収率８３％。
【００７７】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．２０（ｄｄ，Ｊ＝８．４，７．６Ｈｚ，２Ｈ），６．７１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），６．６６（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），３．６３−３．５１９（ｍ，１６Ｈ），３．３９（ｓ，６Ｈ）．
【００７８】
（化合物１５の合成）
化合物１４（４．２６ｇ，１４．３ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（５．０ｍＬ）に溶解し、それにオキシ三塩化リン（２．０ｍＬ，２１．５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を６０℃で３時間加熱した。その後、水（１００ｍＬ）、酢酸エチル（２００ｍＬ）を加え、有機相を水、飽和食塩水の順に洗浄した。有機相は無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ液を減圧濃縮した。粗製物はシリカゲルカラムクロマトグラフで精製し、黄色オイル状物として化合物１５を３．４８ｇ得た。収率７５％。
【００７９】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ９．７３（ｓ，１Ｈ），７．７１（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，２Ｈ），６．７６（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，２Ｈ），３．６８（ｍ，８Ｈ），３．６１（ｍ，４Ｈ），３．５２（ｍ，４Ｈ），３．３８（ｓ，６Ｈ）．
【００８０】
（化合物１６の合成）
Ｄｉｅｔｈｙｌ（４−Ｃｙａｎｏｂｅｎｚｙｌ）ｐｈｏｓｐｈｏｎａｔｅ（３．２４ｇ，１２．８ｍｍｏｌ）、水素化ナトリウム（６０％  ｉｎ  ｏｉｌ，６４２ｍｇ，１６．１ｍｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ（１５ｍＬ）に懸濁させ、そこに化合物１５（３．４７ｇ，１０．７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で４時間撹拌した。溶媒を減圧留去した後、水を加え、反応生成物をクロロホルムで抽出した。有機相を水、飽和食塩水の順に洗浄した。有機相は無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ液を減圧濃縮した。粗製物はシリカゲルカラムクロマトグラフで精製し、黄色固体として化合物１６を３．６４ｇ得た。収率８０％。
【００８１】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．５８（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．５１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．３８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．１２（ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，１Ｈ），６．８５（ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，１Ｈ），６．７１（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），３．６８−３．５２（ｍ，１６Ｈ），３．３９（ｓ，６Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１４８．１，１４２．８，１３２．４，１３２．３，１２８．３，１２６．１，１２４．２，１２１．９，１１９．３，１１１．７，１０９．１，７１．９，７０．６，６８．３，５９．１，５０．９．
【００８２】
（化合物１７の合成）
化合物１６（３．６４ｇ，８．５７ｍｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解し、それにＤＩＢＡＬ（１．０Ｍ  ＴＨＦ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ，１７．１ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温で１８時間撹拌した後、１０％酢酸水溶液を加え、反応を停止させた。反応生成物をクロロホルムで抽出し、有機相を水、飽和食塩水の順に洗浄した。有機相は無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ液を減圧濃縮した。粗製物はシリカゲルカラムクロマトグラフで精製し、橙色固体として化合物１７を１．６５ｇ得た。収率４５％。
【００８３】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ９．９６（ｓ，１Ｈ），７．８３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．６０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．４１（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），７．１９（ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，１Ｈ），６．９２（ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，１Ｈ），６．７２（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），３．６８−３．５３（ｍ，１６Ｈ），３．３９（ｓ，６Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１９１．６，１４８．１，１４４．５，１３４．４，１３２．３，１３０．２，１２８．３，１２６．２，１２４．５，１２２．５，１１１．７，７１．９，７０．６，６８．３，５９．１，５０．９．
【００８４】
（化合物１８の合成）
化合物１７（８００ｍｇ，１．８７ｍｍｏｌ）及び化合物２１（６００ｍｇ，１．８７ｍｍｏｌ）を乾燥エタノール（１０ｍＬ）に溶解した。そこにＢｕ４ＮＯＨ（４０％  ｉｎ  ｗａｔｅｒ）を３滴加え、１２時間加熱還流した。得られた沈殿物を回収し、エタノールで洗浄し、橙色固体として化合物１８を１．１１ｇ得た。収率８１％。
【００８５】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．８６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．６１（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．５４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．４０（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．３９（ｓ，１Ｈ），７．１２（ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，１Ｈ），６．９９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），６．９１（ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，１Ｈ），６．７２（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），４．９７（ｂｒ−ｓ，１Ｈ），４．１７（ｍ，２Ｈ），３．８５（ｍ，２Ｈ），３．６８−３．５３（ｍ，１８Ｈ），３．３９（ｓ，６Ｈ），３．３６（ｍ，２Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１５９．３，１５５．９，１４７．７，１４０．３，１３９．９，１３２．０，１３０．５，１２９．５，１２８．１，１２７．５，１２７．１，１２６．２，１２４．９，１２３．０，１１８．５，１１５．０，１１１．７，１０９．４，７９．３，７１．９，７０．６，７０．４，６９．３，６８．３，６７．４，５９．１，５０．９，４０．３，２８．４．
ＭＳ（ＭＡＬＤＩ）：ｍ／ｚ＝７５２．７１（［Ｍ＋Ｎａ］＋）．
【００８６】
（化合物１９の合成）
化合物１８（９８０ｍｇ，１．３４ｍｍｏｌ）を乾燥ジクロロメタン（３．０ｍＬ）に懸濁させ、それにトリフルオロ酢酸（２．０ｍＬ，２６．１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で６時間撹拌した後、乾燥ジエチルエーテルを加え、橙色固体として化合物１９を９０４ｍｇ得た。収率９１％。
【００８７】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ７．９０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．８８（ｓ，１Ｈ），７．７３（ｂｒ−ｓ，３Ｈ），７．７１（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．６７（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．４４（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．２８（ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，１Ｈ），７．０９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．０１（ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，１Ｈ），６．７２（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），４．２１（ｍ，２Ｈ），３．８３（ｍ，２Ｈ），３．６７（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ），３．５６−３．４３（ｍ，１６Ｈ），３．２５（ｓ，６Ｈ），３．０２（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１５９．１，１５８．１（ｑ，２Ｊ＝３１Ｈｚ，ＣＦ３ＣＯＯ），１４７．７，１４０．２，１４０．１，１３１．９，１３０．７，１２９．４，１２８．２，１２７．１，１２６．６，１２６．１，１２４．１，１２２．３，１１８．４，１１７．３（ｑ，１Ｊ＝２９８Ｈｚ，ＣＦ３ＣＯＯ），１１５．１，１１１．５，１０８．１，７１．３，６９．７，６８．８，６７．９，６７．２，６６．８，５８．１，５０．２，３８．６．
ＭＳ  （ＭＡＬＤＩ）：ｍ／ｚ＝６３０．６３（［Ｍ−ＣＦ３ＣＯＯ］＋）．
【００８８】
（化合物２０の合成）
化合物１９（８００ｍｇ，１．０８ｍｍｏｌ）を乾燥ジクロロメタン（１０ｍＬ）に溶解し、それにＥｔ３Ｎ（０．２３ｍＬ，１．６２ｍｍｏｌ）及び１−Ｈ−ｐｙｒａｚｏｌｅ−１−（Ｎ，Ｎ−ｂｉｓ（ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌｏｘｙ−ｃａｒｂｏｎｙｌ））ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｉｎｅ（５０３ｍｇ，１．６２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で２０時間撹拌した。その後、クロロホルム（１００ｍＬ）を加え、水、飽和食塩水の順に洗浄した。有機相は無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ液を減圧濃縮した。粗製物はシリカゲルカラムクロマトグラフで精製し、橙色固体として化合物２０を７４５ｍｇ得た。収率７９％。
【００８９】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１１．５（ｓ，１Ｈ），８．６８（ｂｒ−ｔ，１Ｈ），７．８５（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），７．５９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．５３（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），７．４０（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．３９（ｓ，１Ｈ），７．１２（ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，１Ｈ），６．９９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），６．９０（ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，１Ｈ），６．７２（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），４．１９（ｍ，２Ｈ），３．８７（ｍ，２Ｈ），３．７０−３．５３（ｍ，２０Ｈ），３．３９（ｓ，６Ｈ），１．５１（ｓ，９Ｈ），１．４８（ｓ，９Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１６３．５，１５９．４，１５６．３，１５３．０，１４７．７，１４０．２，１３９．８，１３２．０，１３０．５，１２９．５，１２８．１，１２７．４，１２７．１，１２６．２，１２４．９，１２３．１，１１８．５，１１５．１，１１１．７，１０９．５，８３．０，７９．２，７１．９，７０．６，６９．５，６９．３，６８．４，６７．５，５９．１，５０．９，４０．５，２８．３，２８．０．
ＭＳ（ＭＡＬＤＩ）：ｍ／ｚ＝６９４．６５（［（ＤＥＯ−ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇ）−ＣＦ３ＣＯＯＨ＋Ｎａ］＋）．
【００９０】
（ＤＥＯ−ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇ（実施例１１）の合成）
化合物２０（７００ｍｇ，０．８０ｍｍｏｌ）を乾燥ジクロロメタン（３．０ｍＬ）に懸濁させ、それにトリフルオロ酢酸（２．０ｍＬ，２６．１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で４時間撹拌した後、乾燥ジエチルエーテルを加え、赤色固体としてＤＥＯ−ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇを３８１ｍｇ得た。収率６１％。
【００９１】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．９０（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），７．８７（ｓ，１Ｈ），７．７０（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，２Ｈ），７．６６（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），７．５１（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ），７．４４（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，２Ｈ），７．２８（ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，１Ｈ），７．１０（ｂｒ−ｓ，４Ｈ），７．０９（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，２Ｈ），７．０１（ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，１Ｈ），６．７２（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，２Ｈ），４．１８（ｍ，２Ｈ），３．８１（ｍ，２Ｈ），３．６０−３．４３（ｍ，１８Ｈ），３．３３（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２Ｈ），３．２５（ｓ，６Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１５９．１，１５８．６（ｑ，２Ｊ＝３２Ｈｚ，ＣＦ３ＣＯＯ），１５７．１，１４７．７，１４０．２，１４０．１，１３１．９，１３０．７，１２９．４，１２８．１，１２７．１，１２６．６，１２６．１，１２４．１，１２２．３，１１８．４，１１６．７（ｑ，１Ｊ＝２９６Ｈｚ，ＣＦ３ＣＯＯ），１１５．１，１１１．５，１０８．１，７１．３，６９．７，６８．８，６８．６，６７．９，６７．３，５８．１，５０．３，４０．８．
ＭＳ（ＭＡＬＤＩ）：ｍ／ｚ＝６７２．６６（［Ｍ−ＣＦ３ＣＯＯ］＋）．
【００９２】
［実験例５］
上述した合成スキーム４と同様な合成手順にしたがって、下記式（５）で表される実施例１２〜１５の発蛍光性化合物を合成した。
【００９３】
【化９】
2016196447.tif 000010
【００９４】
式（５）中、Ｒ５が−ＣＨ３であるものが実施例１２の化合物であり（以下、「Ｍｅ−ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇ」という場合がある。）、Ｒ５が−ｎ−Ｃ４Ｈ９であるものが実施例１３の化合物であり（以下、「Ｃ４−ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇ」という場合がある。）、Ｒ５が下記式（６）で表される基であるものが実施例１４の化合物であり（以下、「Ｃ４＊−ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇ」という場合がある。）、Ｒ５が−ｎ−Ｃ１２Ｈ２５であるものが実施例１５の化合物である（以下、「Ｃ１２−ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇ」という場合がある。）。
【００９５】
【化１０】
2016196447.tif 000011
［式（６）中、「＊」は結合手を表し、「†」は不斉炭素原子を表す。］
【００９６】
《Ｍｅ−ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇ（実施例１２）》
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ７．９１（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），７．８７（ｓ，１Ｈ），７．７０（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），７．６７（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），７．５２（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ），７．４７（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．３０（ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，１Ｈ），７．１０（ｂｒ−ｓ，４Ｈ），７．０９（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），７．０３（ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，１Ｈ），６．７４（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），４．１９（ｍ，２Ｈ），３．８１（ｍ，２Ｈ），３．５９（ｍ，２Ｈ），３．３３（ｑ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２Ｈ），２．９５（ｓ，６Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１５９．１，１５８．７（ｑ，２Ｊ＝３１Ｈｚ，ＣＦ３ＣＯＯ），１５７．１，１５０．２，１４０．２，１４０．１，１３１．９，１３０．８，１２９．４，１２７．９，１２７．１，１２６．５，１２６．１，１２４．５，１２２．５，１１８．４，１１７．１（ｑ，１Ｊ＝２９８Ｈｚ，ＣＦ３ＣＯＯ），１１５．１，１１２．２，１０８．２，６８．８，６８．６，６７．３，４０．８（Ｏｎｅ  ｐｅａｋ  ｉｓ  ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ  ｉｎｔｏ  ｓｏｌｖｅｎｔ  ｐｅａｋ  ａｔ  ｃａ．４０ｐｐｍ）．
ＭＳ（ＭＡＬＤＩ）：ｍ／ｚ＝４９６．４８（［Ｍ−ＣＦ３ＣＯＯ］＋）．
【００９７】
《Ｃ４−ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇ（実施例１３）》
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ７．９０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．８５（ｓ，１Ｈ），７．７０（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），７．６５（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．４９（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），７．４２（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），７．２５（ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，１Ｈ），７．１０（ｂｒ−ｓ，４Ｈ），７．０８（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），６．９７（ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，１Ｈ），６．６６（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），４．１９（ｍ，２Ｈ），３．８１（ｍ，２Ｈ），３．６０（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），３．３３（ｑ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），３．３０（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，４Ｈ），１．５２（ｑｕｉｎｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，４Ｈ），１．３３（ｓｅｘｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，４Ｈ），０．９３（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，６Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１５９．０，１５８．３（ｑ，２Ｊ＝３２Ｈｚ，ＣＦ３ＣＯＯ），１５７．１，１４７．７，１４０．１３，１４０．１１，１３１．７，１３０．８，１２９．３，１２８．１，１２７．０，１２６．６，１２６．０，１２３．７，１２２．０，１１８．３，１１６．８（ｑ，１Ｊ＝２９７Ｈｚ，ＣＦ３ＣＯＯ），１１５．１，１１１．６，１０８．１，６８．７，６８．６，６７．３，４９．９，４０．８，２９．０，１９．６，１３．７．
ＭＳ（ＭＡＬＤＩ）：ｍ／ｚ＝５８０．５７（［Ｍ−ＣＦ３ＣＯＯ］＋）．
【００９８】
《Ｃ４＊−ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇ（実施例１４）》
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ７．９０（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），７．８７（ｓ，１Ｈ），７．７０（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），７．６５（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），７．５５（ｂｒ−ｓ，１Ｈ），７．４２（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），７．２６（ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，１Ｈ），７．１０（ｂｒ−ｓ，４Ｈ），７．０９（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），６．９８（ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，１Ｈ），６．６８（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），４．１９（ｍ，２Ｈ），３．８１（ｍ，２Ｈ），３．５９（ｍ，２Ｈ），３．４０−３．２９（ｍ，４Ｈ），３．０７（ｄｄ，Ｊ＝１５Ｈｚ，８．０Ｈｚ，２Ｈ），１．８０（ｍ，２Ｈ），１．４０（ｍ，２Ｈ），１．１０（ｍ，２Ｈ），０．８８（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，６Ｈ），０．８４（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，６Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１５９．０，１５８．４（ｑ，２Ｊ＝３１Ｈｚ，ＣＦ３ＣＯＯ），１５７．１，１４８．０，１４０．１２１４０．１１，１３１．７，１３０．７，１２９．３，１２７．９，１２７．０，１２６．５，１２５．９，１２３．５，１２２．０，１１８．３，１１７．１（ｑ，１Ｊ＝２９８Ｈｚ，ＣＦ３ＣＯＯ），１１５．１，１１２．２，１０８．１，６８．７，６８．６，６７．３，５７．６，４０．８，３２．４，２６．４，１６．７，１１．２．
ＭＳ（ＭＡＬＤＩ）：ｍ／ｚ＝６０８．６２（［Ｍ−ＣＦ３ＣＯＯ］＋）．
【００９９】
《Ｃ１２−ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇ（実施例１５）》
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ７．９０（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．８７（ｓ，１Ｈ），７．７０（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），７．６５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．５０（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），７．４２（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．２６（ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，１Ｈ），７．１０（ｂｒ−ｓ，４Ｈ），７．０９（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），６．９７（ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，１Ｈ），６．６４（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），４．１９（ｍ，２Ｈ），３．８１（ｍ，２Ｈ），３．５９（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），３．３３（ｑ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），３．２９（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，４Ｈ），１．５１（ｂｒ−ｑｕｉｎｔ，４Ｈ），１．３０−１．２４（ｍ，３６Ｈ），０．８５（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１５９．０，１５８．８（ｑ，２Ｊ＝３２Ｈｚ，ＣＦ３ＣＯＯ），１５７．１，１４７．６，１３９．９，１３９．８，１３１．８，１３０．５，１２９．４，１２８．０，１２６．９，１２６．５，１２５．９，１２３．７，１２１．９，１１８．３，１１６．８（ｑ，１Ｊ＝２９６Ｈｚ，ＣＦ３ＣＯＯ），１１５．０，１１１．３，１０８．０，６８．７，６８．６，６７．２，５０．２，４０．８，３１．４，２９．２４，２９．１９，２９．０，２８．９，２６．９，２６．５，２２．２，１３．８．（Ｔｗｏ  ｃａｒｂｏｎ  ｐｅａｋｓ  ｏｆ  ｄｏｄｅｃｙｌ  ｇｒｏｕｐ  ｗｅｒｅ  ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ．）
ＭＳ（ＭＡＬＤＩ）：ｍ／ｚ＝８０４．９４（［Ｍ−ＣＦ３ＣＯＯ］＋）．
【０１００】
［実験例６］
下記合成スキーム５にしたがって、実施例１６の発蛍光性化合物を合成した。以下、実施例１６の化合物を「ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇ」という場合がある。
【０１０１】
【化１１】
2016196447.tif 000012
【０１０２】
（化合物２１の合成）
４−ヒドロキシベンジルシアニド（２．４８ｇ，１８．６ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（５．１４ｇ，３７．２ｍｍｏｌ）及び化合物３（５．００ｇ，１８．６ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（２０ｍＬ）に懸濁させ、６５℃で５時間加熱した。室温まで放冷したのち、酢酸エチル（２００ｍＬ）を加え、水、飽和食塩水の順に洗浄した。有機相は無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ液を減圧濃縮した。粗製物はシリカゲルカラムクロマトグラフで精製し、無色固体として化合物２１を４．２５ｇ得た。収率７１％。
【０１０３】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．２３（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），６．９３（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），４．９５（ｂｒ−ｓ，１Ｈ），４．１２（ｍ，２Ｈ），３．８２（ｍ，２Ｈ），３．６１（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），３．３５（ｑ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），１．４４（ｓ，９Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１５８．４，１５５．９，１２９．０，１２２．１，１１８．１，１１５．２，７９．２，７０．４，６９．３，６７．４，４０．２，２８．４，２２．８．
ＭＳ（ＭＡＬＤＩ）：ｍ／ｚ＝３４２．７１（［Ｍ＋Ｎａ］＋）．
【０１０４】
（化合物２２の合成）
化合物２１（２．００ｇ，６．２４ｍｍｏｌ）及びテレフタルアルデヒド（４１９ｍｇ，３．１２ｍｍｏｌ）を乾燥エタノール（２０ｍＬ）に溶解した。そこにＢｕ４ＮＯＨ（４０％  ｉｎ  ｗａｔｅｒ）を３滴加え、３時間加熱還流した。得られた沈殿物を回収し、エタノールで洗浄し、黄色固体として化合物２２を１．０３ｇ得た。収率４５％。
【０１０５】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．９６（ｓ，４Ｈ），７．６４（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，４Ｈ），７．４４（ｓ，２Ｈ），７．０１（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，４Ｈ），４．９５（ｂｒ−ｓ，２Ｈ），４．１８（ｍ，４Ｈ），３．８５（ｍ，４Ｈ），３．６３（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，４Ｈ），３．３６（ｑ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，４Ｈ），１．４５（ｓ，１８Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１５９．８，１５５．９，１３８．６，１３５．３，１２９．５，１２７．４，１２６．９，１１７．９，１１５．１，１１２．２，７９．３，７０．５，６９．３，６７．５，４０．３，２８．４．
ＭＳ（ＭＡＬＤＩ）：ｍ／ｚ＝７６０．９２（［Ｍ＋Ｎａ］＋）．
【０１０６】
（化合物２３の合成）
化合物２２（９００ｍｇ，１．２２ｍｍｏｌ）を乾燥ジクロロメタン（５．０ｍＬ）に懸濁させ、それにトリフルオロ酢酸（３．０ｍＬ，３９．２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で７時間撹拌した後、乾燥ジエチルエーテルを加え、黄色固体として化合物２３を８７６ｍｇ得た。収率９４％。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ８．０４（ｓ，４Ｈ），７．９９（ｓ，２Ｈ），７．７９（ｂｒ−ｓ，６Ｈ），７．７５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，４Ｈ），７．１２（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，４Ｈ），４．２２（ｍ，４Ｈ），３．８３（ｍ，４Ｈ），３．６８（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，４Ｈ），３．０２（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，４Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１５９．５，１５８．１（ｑ，２Ｊ＝３２Ｈｚ，ＣＦ３ＣＯＯ），１３９．４，１３５．４，１２９．３，１２７．４，１２６．１，１１７．９，１１７．３（ｑ，１Ｊ＝２９８Ｈｚ，ＣＦ３ＣＯＯ），１１５．２，１１０．９，６８．８，６７．３，６６．９，３８．６．
ＭＳ（ＭＡＬＤＩ）：ｍ／ｚ＝５３８．８２（［Ｍ−Ｈ−２ＣＦ３ＣＯＯ］＋）．
【０１０７】
（化合物２４の合成）
化合物２３（７８２ｍｇ，１．０２ｍｍｏｌ）を乾燥ジクロロメタン（１０ｍＬ）に溶解し、それにＥｔ３Ｎ（０．４３ｍＬ，３．０６ｍｍｏｌ）及び１−Ｈ−ｐｙｒａｚｏｌｅ−１−（Ｎ，Ｎ’−ｂｉｓ（ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌｏｘｙ−ｃａｒｂｏｎｙｌ））ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｉｎｅ（９５０ｍｇ，３．０６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で２０時間撹拌した。その後、クロロホルム（１００ｍＬ）を加え、水、飽和食塩水の順に洗浄した。有機相は無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ液を減圧濃縮した。粗製物はシリカゲルカラムクロマトグラフで精製し、黄色固体として化合物２４を４７９ｍｇ得た。収率４６％。
【０１０８】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１１．４８（ｓ，２Ｈ），８．６７（ｂｒ−ｓ，２Ｈ），７．９６（ｓ，４Ｈ），７．６３（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，４Ｈ），７．４３（ｓ，２Ｈ），７．０１（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，４Ｈ），４．２１（ｍ，４Ｈ），３．８８（ｍ，４Ｈ），３．７０（ｍ，８Ｈ），１．５１（ｓ，１８Ｈ），１．４８（ｓ，１８Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１６３．５，１５９．９，１５６．３，１５３．０，１３８．５，１３５．４，１２９．５，１２７．４，１２６．９，１１７．９，１１５．２，１１２．２，８３．０，７９．３，６９．６，６９．２，６７．６，４０．５，２８．３，２８．０．
ＭＳ（ＭＡＬＤＩ）：ｍ／ｚ＝６４４．８８（［（ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇ）＋Ｎａ−２ＣＦ３ＣＯＯＨ］＋）．
【０１０９】
（ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇ（実施例１６）の合成）
化合物２４（４００ｍｇ，０．３９ｍｍｏｌ）を乾燥ジクロロメタン（５．０ｍＬ）に懸濁させ、それにトリフルオロ酢酸（３．０ｍＬ，３９．２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１０時間撹拌した後、乾燥ジエチルエーテルを加え、黄色固体としてＯＰＶ−ＣＮ−Ｇを３００ｍｇ得た。収率９０％。
【０１１０】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ８．０４（ｓ，４Ｈ），７．９９（ｓ，２Ｈ），７．７５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，４Ｈ），７．５７（ｂｒ−ｓ，２Ｈ），７．１３（ｂｒ−ｓ，８Ｈ），７．１１（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，４Ｈ），４．２０（ｍ，４Ｈ），３．８１（ｍ，４Ｈ），３．５９（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，４Ｈ），３．３３（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，４Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１５９．５，１５８．７（ｑ，２Ｊ＝３１Ｈｚ，ＣＦ３ＣＯＯ），１５７．４，１３９．４，１３５．４，１２９．３，１２７．４，１２６．１，１１７．９，１１７．１（ｑ，１Ｊ＝２９７Ｈｚ，ＣＦ３ＣＯＯ），１１５．２，１１０．９，６８．８，６８．６，６７．４，４０．８．
ＭＳ（ＭＡＬＤＩ）：ｍ／ｚ＝６２２．９４（［Ｍ−Ｈ−２ＣＦ３ＣＯＯ］＋）．
【０１１１】
［実験例７］
実施例１の発蛍光性化合物（ＯＰＶ−Ｇ）について、ジカルボン酸に対する蛍光特性を検討した。
【０１１２】
ＯＰＶ−Ｇに、ジカルボン酸として、Ｌ−酒石酸又はｍｅｓｏ−酒石酸を加えて蛍光を測定した。測定条件は以下のとおりであった。
【０１１３】
（測定条件）
ＯＰＶ−Ｇの濃度：１０μＭ、ＨＥＰＥＳバッファー（１０ｍＭ、ｐＨ７．４）中。
Ｌ−酒石酸及びｍｅｓｏ−酒石酸の濃度：５．０ｍＭ。
励起波長λｅｘ：３８８ｎｍ
測定装置：Ｐｅｒｋｉｎ−ＥｌｍｅｒＬＳ５５
測定温度：２５℃
測定セル：１ｍｍ石英セル
【０１１４】
測定結果を図１に示す。図１（ａ）に示されるように、実施例１の発蛍光性化合物は酒石酸に対して蛍光を発することが肉眼で観察された。また、図１（ｂ）に示されるように、同じ測定条件にも関わらず、Ｌ−酒石酸添加時の蛍光強度は、ｍｅｓｏ−酒石酸添加時のそれよりも、２．５倍強い蛍光強度を与えることが認められた。
【０１１５】
［実験例８］
実施例１の発蛍光性化合物（ＯＰＶ−Ｇ）について、その特性を更に検討した。ＯＰＶ−ＧにＬ−酒石酸を添加して紫外可視吸収スペクトルを測定したところ、３７０ｎｍの吸収最大ピークが減少し且つ新たな吸収ピークが４２５ｎｍに認められた（図２（ａ）を参照。）。このことは、Ｊ−会合体の形成を示唆している。その水性分散液の蛍光顕微鏡観察によって、ファイバー状の凝集体形成が認められた（図２（ｂ）を参照。）。これに対して、ｍｅｓｏ−酒石酸の添加に対しては、３７０ｎｍの吸収最大ピークが大きく減少し且つ３４２ｎｍに短波長シフトした（図２（ｃ）を参照。）。このことは、Ｈ−会合体が形成されていることを示唆している。その水性分散液の蛍光顕微鏡観察によって、粒子状の凝集体形成が認められた（図２（ｄ）を参照。）。
【０１１６】
ここで、Ｊ−会合体及びＨ−会合体について説明する。図１６（ａ）は、Ｊ−会合体の一例を示す模式図である。図１６（ａ）は、後述する、ＯＰＶ−Ｇ（２０）のカチオン性基２１とヒアルロン酸１０の負電荷１１との相互作用により、ＯＰＶ−Ｇ（２０）がＪ−会合体１００を形成し発蛍光している様子を示す。また、図１６（ｂ）は、Ｈ−会合体の一例を示す模式図である。図１６（ｂ）は、後述する、ＯＰＶ−Ｇ（２０）のカチオン性基２１とヘパリン３０の負電荷３１との相互作用により、ＯＰＶ−Ｇ（２０）がＨ−会合体２００を形成し発蛍光している様子を示す。
【０１１７】
図１６（ａ）及び（ｂ）に示すように、Ｊ−会合体では、発蛍光性化合物が、分子の長軸方向に滑りながら積み重なっている（ｓｌｉｐ−ｓｔａｃｋｅｄ  ｆａｓｈｉｏｎ）。これに対し、Ｈ−会合体では、発蛍光性化合物が、分子の長軸方向に対して垂直方向に密に積み重なっている。
【０１１８】
［実験例９］
実施例１の発蛍光性化合物（ＯＰＶ−Ｇ）について、その特性を更に検討した。ＯＰＶ−Ｇ（濃度：１０μＭ）に、ジカルボン酸としてＬ−酒石酸又はｍｅｓｏ−酒石酸を逐次添加して蛍光滴定試験を行った。測定条件は、実験例７と同様であった。
【０１１９】
結果を図３に示す。図中、Ｆ０はジカルボン酸が存在しない場合の蛍光強度を表し、Ｆはジカルボン酸が存在する場合の蛍光強度を表し、△Ｆ＝Ｆ−Ｆ０である。したがって、△Ｆ／Ｆ０は蛍光強度の変化の度合いを意味することになる。
【０１２０】
図３（ａ）に示されるように、Ｌ−酒石酸の添加に対しては、濃度の増加に対して２５０μＭから蛍光（λｅｍ：５１８ｎｍ）が観測され、最大で４５倍の蛍光増大を示した。これに対して、ｍｅｓｏ−酒石酸の添加に対しては、５０μＭから蛍光（λｅｍ：５１８ｎｍ）が観測され、最大で１８倍の蛍光増大が認められた。図３（ｂ）は図３（ａ）の低濃度域を拡大したものである。この結果から、ＯＰＶ−Ｇは酒石酸の立体構造（Ｌ−体、ｍｅｓｏ−体）に依存した蛍光応答を与えていることが認められた。
【０１２１】
［実験例１０］
実施例１の発蛍光性化合物（ＯＰＶ−Ｇ）について、その特性を更に検討した。ＯＰＶ−Ｇ（濃度：１０μＭ）に、ジカルボン酸としてフマル酸又はマレイン酸を逐次添加して蛍光滴定試験を行った。測定条件は、実験例７と同様であった。
【０１２２】
結果を図４に示す。図４（ａ）に示されるように、フマル酸の添加に対しては、濃度の増加に対して２００μＭから蛍光（λｅｍ：５２０ｎｍ）が観測され、最大で５４倍の蛍光増大を示した。これに対して、マレイン酸の添加に対しては、１００μＭから蛍光（λｅｍ：５１４ｎｍ）が観測され、最大で２０倍の蛍光増大が認められた。図４（ｂ）は図４（ａ）の低濃度域を拡大たものである。この結果から、ＯＰＶ−Ｇはフマル酸、マレイン酸の位置異性体構造（ｔｒａｎｓ−体、ｃｉｓ−体）に依存した蛍光応答を与えていることが認められた。
【０１２３】
［実験例１１］
実施例１の発蛍光性化合物（ＯＰＶ−Ｇ）について、その特性を更に検討した。ＯＰＶ−Ｇ（濃度：１０μＭ）に、ジカルボン酸として、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、グルタル酸又はアジピン酸を逐次添加して蛍光滴定試験を行った。測定条件は、実験例７と同様であった。
【０１２４】
結果を図５及び図６に示す。図５に示されるように、モノカルボン酸として酢酸を逐次添加した場合、蛍光が観測されなかった。これに対して、上記ジカルボン酸の添加に対しては、濃度の増加に対して蛍光（λｅｍ：５１５ｎｍ）が観測された。図６に示されるように、蛍光強度が観測される濃度（濃度閾値）と蛍光強度は、ジカルボン酸構造に特有のものであることが認められる。
【０１２５】
実験例６〜８の結果に示されるように、実施例１の発蛍光性化合物を用いると、一定のジカルボン酸濃度においてターンオン又はスイッチオン式にジカルボン酸を検出し得ることが明らかとなった。さらに、ジカルボン酸の化学構造情報が蛍光応答の閾値、蛍光強度、及び蛍光波長に変換・増幅されることで、ジカルボン酸を識別し得ることが明らかとなった。
【０１２６】
［実験例１２］
実施例１の発蛍光性化合物（ＯＰＶ−Ｇ）について、その特性を更に検討した。ＯＰＶ−Ｇ（濃度：１０μＭ）に、ポリカルボン酸としてポリアクリル酸（平均分子量５０００）を逐次添加して蛍光滴定試験を行った。測定条件は、実験例７と同様であった。
【０１２７】
結果を図７に示す。図７（ａ）に示されるように、ポリアクリル酸の添加に対しては、濃度の増加に対してターンオン又はスイッチオン式に蛍光（λｅｍ：５２０ｎｍ）が観測された。また、図７（ｂ）に示されるように、蛍光強度は０．１ｐｐｍから観測され、１．３ｐｐｍで飽和に達した。
【０１２８】
このように、実施例１の発蛍光性化合物を用いると、濃度範囲０．１から１．３ｐｐｍにおいて、ポリアクリル酸濃度を蛍光強度から測定し得ることが明らかとなった。
【０１２９】
［実験例１３］
実施例３の発蛍光性化合物（ＯＰＶ−ＩｍＭｅ）について、その特性を検討した。ＯＰＶ−ＩｍＭｅ（濃度：２０μＭ）に、ポリカルボン酸としてポリアクリル酸（平均分子量５０００）を逐次添加して蛍光滴定試験を行った。測定条件は、実験例７と同様であった。
【０１３０】
結果を図８に示す。図８（ａ）に示されるように、ポリアクリル酸の添加に対しては、濃度の増加に対してターンオン又はスイッチオン式に蛍光（λｅｍ：５１５ｎｍ）が観測された。また、図８（ｂ）に示されるように、蛍光強度は０．１ｐｐｍから観測され、４．０ｐｐｍで飽和に達した。
【０１３１】
このように、実施例３の発蛍光性化合物を用いると、濃度範囲０．１から４．０ｐｐｍにおいて、ポリアクリル酸濃度を蛍光強度から測定し得ることが明らかとなった。
【０１３２】
［実験例１４］
実施例６の発蛍光性化合物（ＯＰＶ−ＩｍＤＥＯ）について、その特性を検討した。ＯＰＶ−ＩｍＤＥＯ（濃度：６０μＭ）に、ポリカルボン酸としてポリアクリル酸（平均分子量５０００）を逐次添加して蛍光滴定試験を行った。測定条件は、実験例７と同様であった。
【０１３３】
結果を図９に示す。図９（ａ）に示されるように、ポリアクリル酸の添加に対しては、濃度の増加に対してターンオン又はスイッチオン式に蛍光（λｅｍ：５１３ｎｍ）が観測された。また、図９（ｂ）に示されるように、蛍光強度は０．１ｐｐｍから観測され、１５ｐｐｍで飽和に達した。
【０１３４】
このように、実施例６の発蛍光性化合物を用いると、濃度範囲０．１から１５ｐｐｍにおいて、ポリアクリル酸濃度を蛍光強度から測定し得ることが明らかとなった。
【０１３５】
［実験例１５］
実施例１の発蛍光性化合物（ＯＰＶ−Ｇ）及び実施例８の発蛍光性化合物（Ｇ２）について、ヌクレオチドに対する蛍光特性検討した。具体的には、ＯＰＶ−Ｇ及びＧ２に、ヌクレオチドとして、ＡＴＰ、ＮＡＤＰＨを添加して蛍光を測定した。以下に、ＡＴＰ及びＮＡＤＰＨの化学式を示す。
【０１３６】
【化１２】
2016196447.tif 000013
【０１３７】
測定条件は、実験例７と同様であった。ただし、溶媒には、ＥｔＯＨ／ＨＥＰＥＳバッファー（１０ｍＭ、ｐＨ７．４）（１：９  ｖ／ｖ）を用いた。測定結果を図１０（ａ）及び（ｂ）に示す。ＡＴＰ又はＮＡＤＰＨを発蛍光性化合物に添加したところ、図１０（ａ）に示すように、ＯＰＶ−Ｇは、ＡＴＰ及びＮＡＤＰＨの両者に対して同程度の蛍光応答を示した。一方、図１０（ｂ）に示すように、Ｇ２では、ＡＴＰとＮＡＤＰＨとで明瞭な蛍光強度の差異が認められた。
【０１３８】
上述した実験例７及び８の結果から推察されるように、Ｇ２は、ＡＴＰとＪ−会合体を形成し強い発蛍光を示すのに対し、ＮＡＤＰＨとはＨ−会合体を形成するため、より弱い蛍光強度を示すものと考えられた。
【０１３９】
実験例１５の結果から、ＯＰＶ−Ｇは、ヌクレオチド類を非特異的に検出することができ、Ｇ２は、ヌクレオチド類の中からＡＴＰを選択的に検出できることが明らかとなった。
【０１４０】
［実験例１６］
実施例８（Ｇ２）と実施例１０（Ｇ６）の発蛍光性化合物について、発蛍光に対する塩濃度の影響を検討した。より具体的には、Ｇ２及びＧ６に、塩として塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）を逐次添加して蛍光滴定試験を行った。測定条件は、実験例７と同様であった。
【０１４１】
測定結果を図１１に示す。図１１に示されるように、Ｇ２は、塩化ナトリウムの添加により蛍光を発することが認められた。これに対し、Ｇ６では、塩化ナトリウムの添加による発蛍光は認められなかった。
【０１４２】
実験例１６の結果に示されるように、Ｇ２は、塩濃度の存在下で自己会合して蛍光を発するのに対し、Ｇ６は、生理的塩濃度（約１５０ｍＭ）条件下でも蛍光を発しない、すなわち、自己会合しないことが明らかとなった。
【０１４３】
［実験例１７］
実施例１０の発蛍光性化合物（Ｇ６）について、その特性を更に検討した。具体的には、生理的塩濃度条件下（ＮａＣｌ：１２５ｍＭ、ＫＣｌ：５ｍＭ、ＣａＣｌ２：１ｍＭ、ＭｇＣｌ２：０．５ｍＭ）において、Ｇ６に、ヌクレオチドとして、ＡＭＰ、ＡＤＰ又はＡＴＰを添加して蛍光滴定試験を行った。測定条件は、実験例７と同様であった。
【０１４４】
測定結果を図１２（ａ）及び（ｂ）に示す。図１２（ａ）に示されるように、Ｇ６は、ＡＴＰに対して選択的に発蛍光を示すことが肉眼で観察された。また、図１２（ｂ）に示されるように、Ｇ６は、ヌクレオチドの中でもＡＴＰに選択的に蛍光応答を示すことが明らかとなった。
【０１４５】
実験例１６〜１７の結果に示されるように、Ｇ６を用いると、生理的塩濃度条件下において、ターンオン又はスイッチオン式にＡＴＰを選択的に検出し、且つＡＴＰの濃度を蛍光強度から測定できることが明らかとなった。したがって、Ｇ６はＡＴＰ検出剤であるということができる。
【０１４６】
［実験例１８］
実施例１１の発蛍光性化合物（ＤＥＯ−ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇ）について、アニオン性多糖類に対する蛍光特性を検討した。具体的には、ＤＥＯ−ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇに、アニオン性多糖類として、ヘパリン、コンドロイチン硫酸又はヒアルロン酸を添加して蛍光滴定試験を行った。以下に、ヘパリン、コンドロイチン硫酸及びヒアルロン酸の化学式を示す。
【０１４７】
【化１３】
2016196447.tif 000014
【０１４８】
測定条件は以下のとおりであった。
（測定条件）
ＤＥＯ−ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇの濃度：３０μＭ、ＨＥＰＥＳバッファー（１０ｍＭ、ｐＨ７．４）中。
励起波長λｅｘ：４００ｎｍ
測定装置：Ｐｅｒｋｉｎ−ＥｌｍｅｒＬＳ５５
測定温度：２５℃
測定セル：１ｍｍ石英セル
【０１４９】
測定結果を図１３（ａ）及び（ｂ）に示す。図１３（ａ）に示されるように、ＤＥＯ−ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇにアニオン性多糖類を添加すると、赤色蛍光の強度増大が観察された。また、図１３（ｂ）に示されるように、ＤＥＯ−ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇは、アニオン性多糖類の濃度増加に対して直線的な蛍光応答を与えることが明らかとなった。
【０１５０】
実験例１８の結果に示されるように、ＤＥＯ−ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇを用いると、一定のアニオン性多糖類濃度においてターンオン又はスイッチオン式にアニオン性多糖類、特に、ヘパリンを選択的に検出することができ、且つアニオン性多糖類の濃度を蛍光強度から測定できることが明らかとなった。したがって、ＤＥＯ−ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇは、アニオン性多糖類検出剤、又はヘパリン検出剤であるということができる。
【０１５１】
［実験例１９］
実施例１の発蛍光性化合物（ＯＰＶ−Ｇ）について、アニオン性多糖類に対する蛍光特性を検討した。具体的には、ＯＰＶ−Ｇに、アニオン性多糖類として、ヘパリン、コンドロイチン硫酸又はヒアルロン酸を添加して蛍光滴定試験を行った。測定条件は、実験例７と同様であった。
【０１５２】
測定結果を図１４（ａ）及び（ｂ）に示す。図１４（ａ）に示されるように、ＯＰＶ−Ｇにアニオン性多糖類を添加すると、ヒアルロン酸添加に対して最も強い蛍光強度を与えた。また、図１４（ｂ）に示されるように、ＯＰＶ−Ｇは、アニオン性多糖類の濃度増加に対して直線的な蛍光応答を与えることが明らかとなった。
【０１５３】
［実験例２０］
実施例１の発蛍光性化合物（ＯＰＶ−Ｇ）について、その特性を更に検討した。具体的には、ＯＰＶ−Ｇにヒアルロン酸及びヘパリンを添加して紫外可視吸収スペクトルを測定した。
【０１５４】
その結果、図１５（ａ）に示すように、ヒアルロン酸の添加により、３７０ｎｍの吸収最大ピークが減少し且つ新たな吸収ピークが４３０ｎｍに認められた。このことは、Ｊ−会合体が形成されたことを示唆している。図１６（ａ）にＪ−会合体の模式図を示す。図１６（ａ）においては、ＯＰＶ−Ｇ（２０）のカチオン性基２１とヒアルロン酸１０の負電荷１１との相互作用により、ＯＰＶ−Ｇ（２０）がＪ−会合体１００を形成し発蛍光している。
【０１５５】
一方、図１５（ｂ）に示すように、ヘパリンの添加により、３７０ｎｍの吸収最大ピークが大きく減少した。このことは、Ｈ−会合体が形成されたことを示唆している。図１６（ｂ）にＨ−会合体の模式図を示す。図１６（ｂ）においては、ＯＰＶ−Ｇ（２０）のカチオン性基２１とヘパリン３０の負電荷３１との相互作用により、ＯＰＶ−Ｇ（２０）がＨ−会合体２００を形成し発蛍光している。
【０１５６】
実験例１９及び２０の結果に示されるように、ＯＰＶ−Ｇを用いると、一定のアニオン性多糖類濃度においてターンオン又はスイッチオン式にアニオン性多糖類を検出できることが明らかとなった。また、ＯＰＶ−Ｇは、アニオン性多糖類中最も電荷数の小さいヒアルロン酸の存在下でＪ−会合体を形成することで、ヒアルロン酸を選択的に検出することができ、且つヒアルロン酸の濃度を蛍光強度から測定できることが明らかとなった。したがって、ＯＰＶ−Ｇは、アニオン性多糖類検出剤、又はヒアルロン酸検出剤であるということができる。
【０１５７】
［実験例２１］
実施例１の発蛍光性化合物（ＯＰＶ−Ｇ）について、その特性を更に検討した。具体的には、終濃度１０μＭのＯＰＶ−Ｇに、アニオン性多糖類として、ヘパリン（終濃度２．５ｐｐｍ）、コンドロイチン硫酸（終濃度５．５ｐｐｍ）又はヒアルロン酸（終濃度８．５ｐｐｍ）を添加して蛍光を測定した。測定条件は、溶液のｐＨを１．５とした点以外は実験例７と同様であった。
【０１５８】
図１７（ａ）は、実験結果を示す写真である。また、図１７（ｂ）は、図１７（ａ）の各試料の蛍光強度を測定した結果を示すグラフである。その結果、図１７（ａ）及び（ｂ）に示されるように、ｐＨ１．５の条件下でＯＰＶ−Ｇにアニオン性多糖類を添加すると、コンドロイチン硫酸の添加により最も強い蛍光強度を与えた。
【０１５９】
実験例２１の結果に示されるように、ＯＰＶ−Ｇを用いると、酸性条件において、ターンオン又はスイッチオン式にアニオン性多糖類、特に、コンドロイチン硫酸を選択的に検出し得ることが明らかとなった。したがって、ＯＰＶ−Ｇは、アニオン性多糖類検出剤、又はコンドロイチン硫酸検出剤であるということができる。
【０１６０】
実験例１８〜２１の結果から、発蛍光性化合物の化学構造や溶液条件を適切に調整することにより、アニオン性多糖類に対する選択性をコントロールできることが明らかとなった。
【０１６１】
［実験例２２］
実施例１６の発蛍光性化合物（ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇ）について、ジカルボン酸に対する蛍光特性を検討した。具体的には、ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇに、ジカルボン酸として、Ｌ−酒石酸又はｍｅｓｏ−酒石酸を添加して蛍光を測定した。測定条件は以下のとおりであった。
【０１６２】
（測定条件）
ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇの濃度：１０μＭ、ＤＭＳＯ／ＨＥＰＥＳバッファー（１０ｍＭ、ｐＨ７．４）中（１：２  ｖ／ｖ）。
Ｌ−酒石酸及びｍｅｓｏ−酒石酸の濃度：３．０ｍＭ。
励起波長λｅｘ：３６５ｎｍ（ＵＶハンディーランプ）
【０１６３】
測定結果を図１８（ａ）〜（ｃ）に示す。図１８（ａ）は、実験結果を示す写真である。また、図１８（ｂ）及び（ｃ）は、各試料の分光学的特徴を測定した結果を示すグラフである。図１８（ａ）に示されるように、ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇは酒石酸の化学構造により異なる蛍光色を発することが肉眼で観察された。具体的には、ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇ単独では青色であるのに対し、Ｌ−酒石酸の存在下では緑色の蛍光を示し、ｍｅｓｏ−酒石酸の存在下では黄色の蛍光を示した。また、図１８（ｂ）及び（ｃ）に示されるように、ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇは、ジカルボン酸の化学構造に対応した分光学的特徴を有することが明らかとなった。
【０１６４】
実験例２２の結果に示されるように、ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇを用いると、ジカルボン酸の化学構造を、発光色の違いにより肉眼で、又は分光光度計を用いて分光学的に識別できることが明らかとなった。
【０１６５】
［実験例２３］
上記式（１）において、Ｒ３で表されるアルキレン基がアミノ酸に由来するスペーサーを含む、実施例１７の発蛍光性化合物（以下、「ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇ＊」という場合がある。）を合成した。下記式（７）にＯＰＶ−ＣＮ−Ｇ＊の化学式を示す。式（７）中、「‡」で示す基はアミノ酸（アラニン）に由来する基である。また、「†」は不斉炭素原子を表す。
【０１６６】
【化１４】
2016196447.tif 000015
【０１６７】
ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇ＊に紫外線を照射して蛍光を肉眼で観察した結果、ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇ＊は、固体状態と溶媒（ＤＭＳＯ）に溶解した状態とで異なる波長の蛍光を発することが明らかとなった。この結果は、ＯＰＶ−ＣＮ−Ｇ＊が凝集形態の変化に応じて異なる波長の蛍光を発することを示す。
【産業上の利用可能性】
【０１６８】
本発明により、凝集誘起発光（ＡＩＥ）を示す新たな発蛍光性化合物を提供することができる。また、イオン性化合物の検出剤を提供することができる。
【符号の説明】
【０１６９】
１０…ヒアルロン酸、１１，３１…負電荷、２０…ＯＰＶ−Ｇ、２１…カチオン性基、３０…ヘパリン、１００…Ｊ−会合体、２００…Ｈ−会合体。
【図３】
2016196447.tif 000018
【図４】
2016196447.tif 000019
【図５】
2016196447.tif 000020
【図６】
2016196447.tif 000021
【図１１】
2016196447.tif 000022
【図１５】
2016196447.tif 000023
【図１６】
2016196447.tif 000024
【図１】
2016196447.tif 000025
【図２】
2016196447.tif 000026
【図７】
2016196447.tif 000027
【図８】
2016196447.tif 000028
【図９】
2016196447.tif 000029
【図１０】
2016196447.tif 000030
【図１２】
2016196447.tif 000031
【図１３】
2016196447.tif 000032
【図１４】
2016196447.tif 000033
【図１７】
2016196447.tif 000034
【図１８】
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