(57)【要約】【課題】本発明は、より効果的かつ安全に歯周組織の再生を促す歯周組織再生剤、この歯周組織再生剤を用いた歯周組織再生方法、歯周組織増殖・活性化剤及び歯周組織アンチエージング剤を提供することを目的とする。【解決手段】ハッカ油、ユリエキス、真珠タンパク質エキス、アロエエキス、グリチルリチン酸二カリウム、カンゾウエキス、イソ吉草酸イソアミル、ウイキョウ油、クエン酸ナトリウム、Ｌ−グルタミン酸塩酸塩、セバシン酸ジエチル、チモール、濃グリセリン、ハチミツ、ヘスペリジン、ペパーミントエッセンス、ベンジルアルコール、Ｄ−マンニトール、メチルセルロース、及びカルバゾクロムからなる群より選択される少なくとも一種を含有する、歯周組織再生剤。【選択図】図１
2016153396.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ハッカ油、ユリエキス、真珠タンパク質エキス、アロエエキス、グリチルリチン酸二カリウム、カンゾウエキス、イソ吉草酸イソアミル、ウイキョウ油、クエン酸ナトリウム、Ｌ−グルタミン酸塩酸塩、セバシン酸ジエチル、チモール、濃グリセリン、ハチミツ、ヘスペリジン、ペパーミントエッセンス、ベンジルアルコール、Ｄ−マンニトール、メチルセルロース、及びカルバゾクロムからなる群より選択される少なくとも一種を含有する、歯周組織再生剤。
【請求項２】
上記歯周組織が、歯茎及び／又は歯根膜である、請求項１記載の歯周組織再生剤。
【請求項３】
上記歯周組織が、歯根膜である、請求項１又は２記載の歯周組織再生剤。
【請求項４】
歯周組織の修復のために用いられる、請求項１〜３のいずれか１項記載の歯周組織再生剤。
【請求項５】
歯周病の治療のために用いられる、請求項１〜４のいずれか１項記載の歯周組織再生剤。
【請求項６】
歯周病により崩壊した歯根膜の治療のために用いられる、請求項５記載の歯周組織再生剤。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか１項記載の歯周組織再生剤を含有する、口腔用組成物。
【請求項８】
請求項１〜６のいずれか１項記載の歯周組織再生剤を含有する、歯周組織再生キット。
【請求項９】
請求項１〜６のいずれか１項記載の歯周組織再生剤を含有する、細胞培養用培地。
【請求項１０】
請求項１〜６のいずれか１項記載の歯周組織再生剤を用いる、歯周組織再生方法。
【請求項１１】
ハッカ油、ユリエキス、真珠タンパク質エキス、アロエエキス、グリチルリチン酸二カリウム、カンゾウエキス、イソ吉草酸イソアミル、ウイキョウ油、クエン酸ナトリウム、Ｌ−グルタミン酸塩酸塩、セバシン酸ジエチル、チモール、濃グリセリン、ハチミツ、ヘスペリジン、ペパーミントエッセンス、ベンジルアルコール、Ｄ−マンニトール、メチルセルロース、及びカルバゾクロムからなる群より選択される少なくとも一種を含有する、歯周組織増殖・活性化剤。
【請求項１２】
ハッカ油、ユリエキス、真珠タンパク質エキス、アロエエキス、グリチルリチン酸二カリウム、カンゾウエキス、イソ吉草酸イソアミル、ウイキョウ油、クエン酸ナトリウム、Ｌ−グルタミン酸塩酸塩、セバシン酸ジエチル、チモール、濃グリセリン、ハチミツ、ヘスペリジン、ペパーミントエッセンス、ベンジルアルコール、Ｄ−マンニトール、メチルセルロース、及びカルバゾクロムからなる群より選択される少なくとも一種を含有する、歯周組織アンチエージング剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、歯周組織再生剤、歯周組織再生方法、歯周組織増殖・活性化剤及び歯周組織アンチエージング剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
歯周病を患うと歯周組織の崩壊が生じ、歯のぐらつきや口臭といったＱＯＬの低下が起こる。また、生活習慣や加齢により歯肉（歯茎）の後退（退縮）が起こることも知られている。上記歯周組織は歯肉（歯茎）と歯槽骨（歯を支える骨組織）、歯根（歯の根元）を覆うセメント質、歯根と歯槽骨をつなぐ歯根膜等からなり、歯を正しい位置にしっかり付着固定するための強固な構造を備えている。しかし、いろいろな理由で歯と歯肉の間に細菌が住み着いて歯垢（デンタルプラーク）がたまると、そこに炎症が引き起こされる。これが歯周病の始まりとなる。歯周病の治療は病状によるが、上記炎症が歯茎の奥深くまで進行し、歯周組織の破壊がひどい場合には、歯周組織を回復させるための歯周組織再生手術が必要となる。この歯周組織再生手術では、歯周組織が破壊されて空洞となった部分に人工の膜を挿入する必要がある。
【０００３】
一方、歯のエナメル質を形成する作用のあるエナメルタンパク質調製物が、歯周組織の誘導・再生にも関わっていることから、このエナメルタンパク質調製物を歯周病治療における歯根膜再生のために使うことが臨床的に行われている。しかし、実際の治療時に歯根膜再生が必ずしも期待されるレベルの結果に達しないケースも少なくないこと、エナメルタンパク質調製物としては、ブタの幼若エナメル質基質からの抽出物が使われるため、未同定ウイルス感染の危険性も指摘されている等の不都合がある。また、上記エナメルタンパク質調製物の一成分であるシースリンタンパクや、それに由来するペプチドに歯周組織再生作用があることが知られている（特開２０１１−２２５５１９号公報参照）。また、インスリン様成長因子−1及びトランスフォーミング成長因子−β１を有効成分として含む組織再生用組成物も知られている（特開２０１４−１５６４１０号公報参照）。しかし、これらの物質の歯周組織再生作用は十分とは言えず、またタンパクやペプチド性の物質であるため動物由来成分の混入等の可能性も指摘され、人に対して用いる場合には安全性面で注意を要する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２０１１−２２５５１９号公報
【特許文献２】特開２０１４−１５６４１０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、上述のような状況の中、手術等を要することなく、より効果的に且つ安全に歯周組織の再生を促す歯周組織再生剤、この歯周組織再生剤を用いた歯周組織再生方法、歯周組織増殖・活性化剤及び歯周組織アンチエージング剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
上記課題を解決するために、本発明者が種々検討した結果、従来、保湿作用、美白作用、増粘作用、抗菌作用、抗ウイルス作用等を有する成分として知られており、歯周組織の再生とは何ら無縁であった物質の中に、優れた歯周組織再生能を有するものがあることを初めて見出した。歯周組織とは、歯の周辺組織であり、歯根膜、歯槽骨、歯肉（歯茎）、セメント質、細胞外マトリックスを意味する。本願発明の歯周組織再生剤等は、これらの歯周組織を再生等させるものである。すなわち本発明の要旨は、以下の通りである。
【０００７】
＜１＞ハッカ油、ユリエキス、真珠タンパク質エキス、アロエエキス、グリチルリチン酸二カリウム、カンゾウエキス、イソ吉草酸イソアミル、ウイキョウ油、クエン酸ナトリウム、Ｌ−グルタミン酸塩酸塩、セバシン酸ジエチル、チモール、濃グリセリン、ハチミツ、ヘスペリジン、ペパーミントエッセンス、ベンジルアルコール、Ｄ−マンニトール、メチルセルロース、及びカルバゾクロムからなる群より選択される少なくとも一種を含有する、歯周組織再生剤。
【０００８】
＜２＞上記歯周組織が、歯茎及び／又は歯根膜である、＜１＞記載の歯周組織再生剤。
【０００９】
＜３＞上記歯周組織が、歯根膜である、＜１＞又は＜２＞記載の歯周組織再生剤。
【００１０】
＜４＞歯周組織の修復のために用いられる、＜１＞〜＜３＞のいずれか記載の歯周組織再生剤。
【００１１】
＜５＞歯周病の治療のために用いられる、＜１＞〜＜４＞のいずれか記載の歯周組織再生剤。
【００１２】
＜６＞歯周病により崩壊した歯根膜の治療のために用いられる、＜５＞記載の歯周組織再生剤。
【００１３】
＜７＞＜１＞〜＜６＞のいずれか記載の歯周組織再生剤を含有する、口腔用組成物。
【００１４】
＜８＞＜１＞〜＜６＞のいずれか記載の歯周組織再生剤を含有する、歯周組織再生キット。
【００１５】
＜９＞＜１＞〜＜６＞のいずれか記載の歯周組織再生剤を含有する、細胞培養用培地。
【００１６】
＜１０＞＜１＞〜＜６＞のいずれか記載の歯周組織再生剤を用いる、歯周組織再生方法。
【００１７】
＜１１＞ハッカ油、ユリエキス、真珠タンパク質エキス、アロエエキス、グリチルリチン酸二カリウム、カンゾウエキス、イソ吉草酸イソアミル、ウイキョウ油、クエン酸ナトリウム、Ｌ−グルタミン酸塩酸塩、セバシン酸ジエチル、チモール、濃グリセリン、ハチミツ、ヘスペリジン、ペパーミントエッセンス、ベンジルアルコール、Ｄ−マンニトール、メチルセルロース、及びカルバゾクロムからなる群より選択される少なくとも一種を含有する、歯周組織増殖・活性化剤。
【００１８】
＜１２＞ハッカ油、ユリエキス、真珠タンパク質エキス、アロエエキス、グリチルリチン酸二カリウム、カンゾウエキス、イソ吉草酸イソアミル、ウイキョウ油、クエン酸ナトリウム、Ｌ−グルタミン酸塩酸塩、セバシン酸ジエチル、チモール、濃グリセリン、ハチミツ、ヘスペリジン、ペパーミントエッセンス、ベンジルアルコール、Ｄ−マンニトール、メチルセルロース、及びカルバゾクロムからなる群より選択される少なくとも一種を含有する、歯周組織アンチエージング剤。
【００１９】
＜１３＞ハッカ油、ユリエキス、真珠タンパク質エキス、アロエエキス、グリチルリチン酸二カリウム、カンゾウエキス、イソ吉草酸イソアミル、ウイキョウ油、クエン酸ナトリウム、Ｌ−グルタミン酸塩酸塩、セバシン酸ジエチル、チモール、濃グリセリン、ハチミツ、ヘスペリジン、ペパーミントエッセンス、ベンジルアルコール、Ｄ−マンニトール、メチルセルロース、及びカルバゾクロムからなる群より選択される少なくとも一種を含有する、歯根膜再生剤。
【００２０】
＜１４＞ハッカ油、ユリエキス、真珠タンパク質エキス、アロエエキス、グリチルリチン酸二カリウム、カンゾウエキス、イソ吉草酸イソアミル、ウイキョウ油、クエン酸ナトリウム、Ｌ−グルタミン酸塩酸塩、セバシン酸ジエチル、チモール、濃グリセリン、ハチミツ、ヘスペリジン、ペパーミントエッセンス、ベンジルアルコール、Ｄ−マンニトール、メチルセルロース、及びカルバゾクロムからなる群より選択される少なくとも一種を含有する、歯根膜修復剤。
【００２１】
＜１５＞ハッカ油、ユリエキス、真珠タンパク質エキス、アロエエキス、グリチルリチン酸二カリウム、カンゾウエキス、イソ吉草酸イソアミル、ウイキョウ油、クエン酸ナトリウム、Ｌ−グルタミン酸塩酸塩、セバシン酸ジエチル、チモール、濃グリセリン、ハチミツ、ヘスペリジン、ペパーミントエッセンス、ベンジルアルコール、Ｄ−マンニトール、メチルセルロース、及びカルバゾクロムからなる群より選択される少なくとも一種を含有し、歯周病により崩壊した歯根膜の再生・修復のために用いられる、歯周病の治療及び／又は改善剤。
【発明の効果】
【００２２】
本発明の歯周組織再生剤によると、歯周病や事故等により崩壊した歯根膜を効果的に再生し、手術等を要することなく歯周組織を修復することができる。また、本発明の歯周組織再生剤等は、歯根膜、歯茎等の歯周組織を再生・修復することによって、歯周病等で崩壊した歯周組織を蘇らせる、修繕する、補修する、復活させる、蘇生させる、復元させる、生まれ変わらせる、健康な状態に向けて回復させる、又は治癒させる等の効果を奏する。さらに、本発明の歯周組織再生剤等が有効成分として含む成分は、すでに安全性が確認された成分であるため、人に対して安心して使用することができ、特に日常的な使用に好適である。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１】本発明の実施形態の歯周組織再生剤の歯根膜線維芽細胞増殖効果を示す図である。
【図２】本発明の実施形態の歯周組織再生剤の歯根膜線維芽細胞増殖効果を示す図である。
【図３】本発明の実施形態の歯周組織再生剤の歯根膜線維芽細胞増殖効果を示す図である。
【図４】本発明の実施形態の歯周組織再生剤の歯根膜線維芽細胞増殖効果を示す図である。
【図５】本発明の実施形態の歯周組織再生剤の歯根膜線維芽細胞増殖効果を示す図である。
【図６】本発明の実施形態の歯周組織再生剤の歯根膜線維芽細胞浸潤効果を示す図である。
【図７】本発明の実施形態の歯周組織再生剤の歯根膜線維芽細胞浸潤効果を示す図である。
【図８】本発明の実施形態の歯周組織再生剤の歯根膜線維芽細胞浸潤効果を示す図である。
【図９】本発明の実施形態の歯周組織再生剤の歯根膜線維芽細胞浸潤効果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
以下、本発明について詳細に説明する。
【００２５】
［歯周組織再生剤］
本発明の歯周組織再生剤は、植物抽出エキス、グルタミン酸（Ｌ−グルタミン酸塩酸塩）等の植物由来成分、真珠タンパク質エキス等の動物性成分、Ｄ−マンニトール、濃グリセリン、ベンジルアルコール等の1つ以上の水酸基を有するアルコール類（糖アルコール、芳香族アルコール、多価アルコール）、クエン酸ナトリウム等のｐＨ調整剤、及びカルバゾクロム等の止血剤からなる群より選択される少なくとも１種を有効成分として含む。本発明の歯周組織再生剤は、これらのいずれかを歯周組織再生のための有効成分として含むことで、歯根膜を再生させ、歯周病等により崩壊した歯周組織を再生及び／又は修復することができる。また、本発明の歯周組織再生剤は、歯根膜、歯茎等の歯周組織を再生・修復することによって、歯周病等で崩壊した歯周組織を蘇らせる、修繕する、補修する、復活させる、蘇生させる、復元させる、生まれ変わらせる、健康な状態に向けて回復させる、又は治癒させる等の効果を奏することができる。本発明の歯周組織再生剤は、上記有効成分以外に、本発明の効果を損なわない範囲で、他の任意成分を含んでいてもよい。以下、それぞれの成分について説明する。なお、本発明の歯周組織再生剤は、歯周組織、即ち、歯根膜、歯槽骨、歯肉（歯茎）、セメント質、細胞外マトリックスのいずれかを再生及び／又は修復するという効果を有するものである。本発明の歯周組織再生剤は、歯茎、歯根膜の再生作用に特に優れ、その他の歯周組織については再生作用を有するか、又は歯茎、歯根膜の再生に引き続き起こる二次的な再生作用を有するものである。即ち、歯茎、歯根膜細胞の再生に引き続き起こる細胞外マトリックスの形成等も広く歯周組織再生作用に含まれる。また、本発明の歯周組織再生剤は、特に歯根膜再生剤、歯根膜修復剤、歯根膜・歯茎等の歯周組織を再生・修復するための歯周病の治療及び／又は改善剤としても用いることができる。
【００２６】
（植物由来成分）
本発明の歯周組織再生剤が含む植物由来成分としては、例えば、ウイキョウ油（製造元：山本香料、司生堂製薬、小川香料など）、ハッカ油（製造元：長岡香料、高砂香料、小城製薬、東洋薄荷工業、もしくは日局のもの）、ペパーミントエッセンス（製造元：高砂香料、池田物産など）、カンゾウエキス（抽出方法を限定するものではないが、好ましくはエタノール抽出）、アロエエキス（抽出方法を限定するものではないが、好ましくはエタノール抽出）、ユリエキス（抽出方法を限定するものではないが、好ましくはブチレングリコール抽出）等の植物抽出エキス；イソ吉草酸イソアミル（製造元：井上香料）、チモール（製造元：大阪化成）、ヘスペリジン（製造元：アルプス薬品工業）、グリチルリチン酸二カリウム（製造元：アルプス薬品工業、丸善製薬など）、セバシン酸ジエチル（製造元：日光ケミカルズ、日本精化など）、ハチミツ（製造元：一丸ファルコス、小城製薬、塩野香料、小堺製薬、丸石製薬、日研化成、純正化学など）、メチルセルロース（製造元：信越化学工業）等、グルタミン酸（Ｌ−グルタミン酸塩酸塩）（製造元：協和発酵、味の素、日理科学、旭化成ケミカルズなど）等の植物含有成分が挙げられる。ここで、本明細書において植物由来成分とは、植物から抽出されるエキス、植物から分離・精製される成分、又はこれらを原料として生成される成分のことをいう。
【００２７】
これらのうち、歯周組織再生能に優れる観点から、植物抽出エキス、グリチルリチン酸二カリウム、チモール、メチルセルロース、イソ吉草酸イソアミル、ヘスペリジン、セバシン酸ジエチル、ハチミツ、グルタミン酸（Ｌ−グルタミン酸塩酸塩）が好ましく、中でも、ハッカ油、カンゾウエキス、アロエエキス、ユリエキス、ペパーミントエッセンス、グリチルリチン酸二カリウム、チモール、ハチミツ、セバシン酸ジエチル、メチルセルロース、グルタミン酸（Ｌ−グルタミン酸塩酸塩）がより好ましく、ハッカ油、カンゾウエキス、アロエエキス、ユリエキス、グリチルリチン酸二カリウム、チモール、メチルセルロース、グルタミン酸（Ｌ−グルタミン酸塩酸塩）がさらに好ましい。
【００２８】
植物抽出エキスは、植物からの粗抽出液を用いても、また、粗抽出液から分離精製したものを用いてもよい。その他の植物由来成分は、植物抽出エキスから分離、精製、単離したものを用いても、このようにして得られる物質と同等の物質を化学的に合成して用いてもよい。
【００２９】
植物抽出エキスを得る方法としては、特に限定されず、通常の抽出法が採用される。粗抽出液は、例えば植物の全体あるいはそれらの特定の部位を裁断機・スライサー・カッター・ピーラー等で細断したものを、水、熱水あるいは有機溶媒を単独あるいは組み合わせて得られる溶媒を用いて抽出することにより得ることができる。有機溶媒としては、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール等のアルコール類、酢酸メチル、酢酸エチル等のエステル類、アセトン等のケトン類、ホルムアルデヒド、ジメチルスルホキシド等を挙げることができる。
【００３０】
溶媒は、室温又は常温の溶媒を用いることもできるが、加熱溶媒や熱溶媒（溶媒を沸点付近に加熱したもの）を用いることもできる。
【００３１】
植物抽出エキスは、酸、アルカリの条件下で抽出する事もできる。酸としては、塩酸、硫酸、硝酸、リン酸等の無機酸、又は、酢酸、クエン酸、シュウ酸、コハク酸、ギ酸、プロピオン酸等の有機酸が挙げられる。アルカリとしては、アルカリ無機塩が好ましく用いられ、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム等が挙げられる。
【００３２】
また、凍結乾燥粉末化法、高圧法や超高圧法を利用する事も可能である。
【００３３】
粗抽出物の抽出条件の一例を以下に挙げる。抽出溶媒が有機溶媒の場合、溶媒の沸点以下であればよく抽出温度は特に制限はないが、好ましくは１℃〜１００℃、より好ましくは２０℃〜１００℃の範囲で、１時間〜２４時間、好ましくは１時間〜１０時間撹拌しながら行う。また、抽出溶媒が水の場合、抽出時の温度は特に限定されないが、加圧熱水による抽出方法を利用する場合もあるため、０℃〜２００℃が好ましく、２０℃〜１３０℃がより好ましい。また、反応時間も特に限定するものではないが、好ましくは数秒間〜数日間であり、更に好ましくは３０分〜２４時間である。なお、反応温度及び反応時間は、溶媒の種類と濃度により適宜選択することができる。
【００３４】
得られた抽出物を遠心分離してその上清を、抽出液として得る。このように抽出されたものであれば、歯周組織再生能を有する成分を十分に含むことができる。かかる抽出液に水可溶性、酸性可溶性、アルカリ可溶性、あるいは有機溶媒可溶性の多糖画分が含まれる。
【００３５】
粗抽出物から植物抽出エキスを分離精製する方法としては、例えば、塩化セチルピリジニウム等の４級アンモニウム塩を添加し、藻類または植物の抽出物を沈殿させ、アルコール溶液で洗浄する方法やＤＥＡＥセルロース等の陰イオン交換樹脂等を用いたクロマトグラフィーを用いる方法もある。
【００３６】
このように抽出、精製した植物抽出エキスは、そのまま用いることもできる他、稀釈液で希釈したり、濃縮してエキスとして用いることもでき、さらには、凍結乾燥等により乾燥粉末物としたり、ペースト状に調製して用いることもできる。
【００３７】
本発明では、このように抽出、精製した植物抽出エキスとして、そのままの状態で用いることもできるが、有機溶媒が含まれている場合には減圧蒸留等により有機溶媒を除去することが好ましい。また、本発明において、この抽出液は、液状のものを使用してもよいが、必要に応じて、減圧乾燥、凍結乾燥、噴霧乾燥等の乾燥処理を行って液体分を低減又は除去することにより、濃縮液状、半固形状、固形状、又は粉末状にしたものを使用してもよい。
【００３８】
本発明における植物抽出エキスとしては、市販品を用いることもできる。
【００３９】
（動物性成分）
本発明の歯周組織再生剤が含む動物性成分としては、例えば、真珠タンパク質エキス、コラーゲン、ラクトフェリン、ＤＨＡ（ドコサヘキサエン酸）等が挙げられる。ここで、本明細書において動物性成分とは、魚介類等の動物から抽出されるエキス、動物組織やミルク等の動物由来の物質から分離・精製される成分、又はこれらを原料として生成される成分のことをいう。
【００４０】
これらのうち、歯周組織再生能に優れる観点から、真珠タンパク質エキスが好ましい。
【００４１】
真珠タンパク質エキスは、例えば、アコヤ貝の貝殻又は真珠を微細な粉末とし、これを化学的に処理（例えば、酸を加えてカルシウムを除去し、蛋白質を加水分解する等）して得られる蛋白分解物の水抽出液で、種々のアミノ酸とポリペプタイドを含有するものである。
【００４２】
（アルコール類）
本発明の歯周組織再生剤が含むアルコール類としては、例えば、糖アルコール、芳香族アルコール、多価アルコール等が挙げられ、歯周組織再生能に優れる観点から、これらのうち、Ｄ−マンニトール、濃グリセリン、ベンジルアルコールが好ましい。
【００４３】
（ｐＨ調整剤）
本発明の歯周組織再生剤が含むｐＨ調整剤としては、例えば、各種有機酸又はその塩等として、クエン酸、グルコン酸、コハク酸、クエン酸ナトリウム、グルコン酸ナトリウム、コハク酸ナトリウム等が挙げられ、歯周組織再生能に優れる観点から、これらのうち、クエン酸、クエン酸ナトリウムが好ましく、クエン酸ナトリウムがより好ましい。
【００４４】
（その他の成分）
本発明の歯周組織再生剤が含む有効成分としてのその他の成分としては、歯周組織再生能に優れる観点から、例えば止血剤が挙げられ、このうちカルバゾクロム（和光純薬工業）が好ましい。
【００４５】
本発明の歯周組織再生剤中のこれらの有効成分の含有量は、概ね、０．０００００１質量％〜１２質量％であり、歯周組織再生能に優れる観点から、０．０００００１質量％〜５質量％であることが好ましく、０．００００１質量％〜３質量％であることがより好ましく、０．０００１質量％〜２質量％であることがさらに好ましく、０．０００５質量％〜１質量％であることが特に好ましく、０．００１質量％〜０．５質量％であることがより特に好ましい。なお、上述した各有効成分は、１種単独で用いてもよいし、２種以上を組み合わせて用いてもよい。
【００４６】
本発明の歯周組織再生剤は、上記有効成分に加えて、他の任意成分として薬理学的又は生理学的に許容される一種又は二種以上の担体、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、分散剤、界面活性化剤、可塑剤、懸濁剤、乳化剤、希釈剤、緩衝剤、抗酸化剤、細菌抑制剤等を含有していてもよい。さらに必要に応じて他の有効成分を含有していてもよい。
【００４７】
本発明の歯周組織再生剤は、医薬品、医薬部外品、食品等の分野において従来公知の任意の方法により製造することができる。その製造過程において、上記有効成分、その他の任意成分を公知のいかなる方法で添加・混合してもよい。
【００４８】
本発明の歯周組織再生剤は、歯周組織に対する再生及び／又は修復効果を有する。即ち、本発明の歯周組織再生剤は、歯周組織を構成する細胞を増殖、活性化させることができ、それにより歯周組織を再生及び／又は修復することができる。本発明の歯周組織再生剤は、歯周組織のうち、歯茎、歯根膜に対してより優れた効果を示し、特に歯根膜に対してさらに優れた効果を示す。そのため、本発明の歯周組織再生剤は、歯周病によって崩壊した歯周組織を効果的に再生及び／又は修復することができ、歯周病の治療のために好適に用いられる。特に、歯周病によって崩壊した歯根膜に対する再生及び／又は修復効果に優れるため、歯周病における歯根膜治療により好適に用いることができる。従って、本発明の歯周組織再生剤は、特に歯根膜再生剤、歯根膜修復剤、歯根膜・歯茎等の歯周組織を再生・修復するための歯周病の治療及び／又は改善剤としてより好適に用いることができる。さらに、本発明の歯周組織再生剤は、歯周病が進行し、歯根膜の崩壊が起こっている対象に対して、歯根膜再生剤、歯根膜修復剤、歯根膜・歯茎等の歯周組織を再生・修復するための歯周病の治療及び／又は改善剤として特に優れた効果を奏する。
【００４９】
本発明の歯周組織再生剤の用途は特に限定されないが、例えば、上述のような歯周病治療薬、歯根膜治療薬等の医薬として、また、練歯磨等の歯磨類、洗口剤、マウスウォッシュ等の口腔用洗浄剤、歯茎に適用する美容液、トローチ、チューインガム等、歯周組織を構成する細胞の培養に用いることができる細胞培養用培地等に含有させて用いることができる。また、本発明の歯周組織再生剤の用法等も特に限定されず、例えば、１日数回（例えば、１〜４回程度、好ましくは２〜３回程度）、歯根膜や歯茎等の歯周組織に適量を塗布、塗擦、噴霧等して適用することで用いることができる。
【００５０】
［口腔用組成物］
本発明の歯周組織再生剤を含有する口腔用組成物も本発明の範囲である。本発明の口腔用組成物の形態としては、口中に適用できるものであれば特に制限されず、練り歯磨剤や粉歯磨剤等の歯磨組成物、洗口剤や液状歯磨剤等の液体口腔用組成物等として用いることができる。
【００５１】
口腔用組成物は、本発明の歯周組織再生剤以外に、本発明の効果を阻害しない範囲で、ポリエチレングリコール、１，３-ブチレングリコール、ジプロピレングリコール等のグリセリン以外の湿潤剤；サッカリンナトリウム、スクラロース等の甘味剤；メントール、アネトール等の香料；グリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油等の非イオン性界面活性化剤；ラウリル硫酸ナトリウム等の陰イオン性界面活性化剤；上記有効成分以外のｐＨ調整剤、殺菌剤、抗炎症剤、防腐剤、着色剤、研磨剤、ビタミン剤、溶剤（エタノール等）等の、従来口腔用組成物において用いられる成分を含有することができる。
【００５２】
本発明の口腔用組成物が歯磨組成物である場合、保形性や使いやすさ、保存安定性の観点から粘結剤、増粘性シリカ等を含むことが好ましい。
【００５３】
本発明の口腔用組成物における、植物由来成分、動物性成分等の歯周組織再生能を示す有効成分の最終的な含有量としては、成分毎に至適含有量は異なるものの、概ね、０．０００００１質量％〜１２質量％であり、０．０００００１質量％〜５質量％が好ましく、０．００００１質量％〜３質量％であることが好ましく、０．０００１質量％〜２質量％がより好ましく、０．０００５質量％〜１質量％がより好ましく、０．００１質量％〜０．５質量％が更に好ましい。上記有効成分の含有量が上記範囲内であると、本発明の口腔用組成物は歯周組織再生効果に優れると共に安全性にも優れるため、本発明の口腔用組成物を日常的に使用して、歯周組織を再生し、健康な口腔内環境を実現することが可能となる。
【００５４】
本発明の口腔用組成物は、歯磨組成物、液体口腔用組成物等における従来公知の任意の方法により製造することができる。その製造過程において、上記有効成分、その他の成分を公知のいかなる方法で添加・混合してもよい。
【００５５】
［歯周組織再生キット］
本発明は、本発明の歯周組織再生剤を含有する歯周組織再生キットも含む。歯周組織再生キットは、歯周病によって崩壊した歯周組織を効率的に再生・修復させるために、本発明の歯周組織再生剤を効果的に作用させるべく、複数の基材を予め組合せたものである。この基材としては特に限定されないが、例えば口腔洗浄剤、抗菌剤、薬剤塗布用基材等が挙げられる。また、歯ブラシ、マッサージ用の指サック等のデバイスと組み合わせることができる。
【００５６】
［細胞培養用培地］
本発明は、本発明の歯周組織再生剤を含有する細胞培養用培地も含む。本発明の細胞培養用培地は、歯周組織を構成する細胞の増殖をより促進させることができる。そのため、歯根膜を構成する歯根膜線維芽細胞等をこの培地中で培養して細胞シートとし、歯周病で崩壊した歯根膜の代替として移植することも可能である。本発明の細胞培養用培地は、歯周組織再生剤に加えて、通常の細胞培養用の培地成分と同様の成分を含むことができる。
【００５７】
［歯周組織再生方法］
本発明は、本発明の歯周組織再生剤を用いる歯周組織再生方法も含む。本発明の歯周組織再生方法は、本発明の歯周組織再生剤を用いることで、歯周病等により崩壊した歯根膜等の歯周組織を効率的に再生及び／又は修復することができる。
【００５８】
［歯周組織増殖・活性化剤］
本発明の歯周組織増殖・活性化剤は、植物抽出エキス等の植物由来成分、真珠タンパク質エキス等の動物性成分、Ｄ−マンニトール、クエン酸ナトリウム、Ｌ−グルタミン酸塩酸塩、ベンジルアルコール、カルバゾクロム、濃グリセリン等のその他の成分のいずれかを有効成分として含む。本発明の歯周組織増殖・活性化剤は、これらのいずれかを有効成分として含むことで、歯根膜等の歯周組織を構成する細胞を増殖・活性化させ、歯周病等により損傷を受けた歯周組織を回復させることができる。本発明の歯周組織増殖・活性化剤が含む各成分については、本発明の歯周組織再生剤における説明を適用できる。
【００５９】
［歯周組織アンチエージング剤］
本発明の歯周組織アンチエージング剤は、植物抽出エキス等の植物由来成分、真珠タンパク質エキス等の動物性成分、Ｄ−マンニトール、クエン酸ナトリウム、Ｌ−グルタミン酸塩酸塩、ベンジルアルコール、カルバゾクロム、濃グリセリン等のその他の成分のいずれかを有効成分として含む。本発明の歯周組織アンチエージング剤は、これらのいずれかを有効成分として含むことで、歯根膜等の歯周組織を構成する細胞を増殖・活性化させ、老化等により衰えた歯周組織を復活させたり、年齢と共に気になる歯茎下がりを改善して、歯茎のハリやふっくら感を改善したり、それにより歯に食べ物が詰まり易くなる症状を改善したりして、老化を防止したりすることができる。本発明の歯周組織アンチエージング剤が含む各成分については、本発明の歯周組織再生剤における説明を適用できる。
【実施例】
【００６０】
以下に本発明を実施例に基づいて更に詳細に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。なお、各表中の数値の単位は、特に断りがない限り質量％である。
【００６１】
［歯周組織再生剤の調製］
下記の表１に記載の処方に従い、常法にて、実施例１〜２３及び比較例１〜７の歯周組織再生剤を調製した。各歯周組織再生剤について下記試験を行い、評価した。
【００６２】
【表１】
2016153396.tif 000003
【００６３】
［評価］
（１）歯根膜線維芽細胞増殖評価
歯根膜線維芽細胞（Ｈｕｍａｎ  Ｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌ  Ｌｉｇａｍｅｎｔ  Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ：以下ＨＰＤＬＦと略す、ＳｃｉｅｎＣｅｌｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ製）を１０％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ製  Ｐｒｏｄｕｃｔ＃１１９９５−０６５）に懸濁し、９６ウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ製  ＣｅｌｌＢＩＮＤ（登録商標）  Ｐｒｏｄｕｃｔ＃３３００）に５×１０３ｃｅｌｌｓ／ウェルとなるように播種した。３７℃  ５％ＣＯ２で一晩培養し、翌日上清を除き、上記調製した歯周組織再生剤に交換した。３７℃  ５％ＣＯ２で４８〜７２時間培養後、上清を除き、ＦＢＳを含まないＤＭＥＭ（同上）で１度洗浄し、Ｃｅｌｌ  Ｃｏｕｎｔｉｎｇ  Ｋｉｔ−８（Ｄｏｊｉｎｄｏ製  Ｐｒｏｄｕｃｔ＃ＣＫ０４）試薬を１０％含有するＤＭＥＭ（同上）に交換した。３７℃で１時間〜３時間培養後、４５０ｎｍの吸光度を測定した。その結果を図１〜５に示す。
【００６４】
図１より、イソ吉草酸イソアミル、ウイキョウ油、グリチルリチン酸二カリウム、Ｌ−グルタミン酸塩酸塩、セバシン酸ジエチル、チモール、濃グリセリン、ハチミツ、ハッカ油、ヘスペリジン、ペパーミントエッセンス、ベンジルアルコール、Ｄ−マンニトール、メチルセルロース、カルバゾクロムに、口腔の歯根膜線維芽細胞を増殖させる作用を持つことが判明した。
また、図２、図３、図４、図５より、アロエエキス、真珠タンパクエキス、ユリエキス、ハッカ油にも歯根膜線維芽細胞増殖作用があることが分かった。
歯周組織の修復・再生は、歯根膜細胞の増殖から始まり、細胞外マトリックスが形成されていくと考えられるため、上記の素材は歯根膜・歯周組織の修復・再生を促すと考えられる。
【００６５】
（２）歯根膜線維芽細胞浸潤効果の評価
歯根膜線維芽細胞（Ｈｕｍａｎ  Ｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌ  Ｌｉｇａｍｅｎｔ  Ｆｉｂ
ｒｏｂｌａｓｔ：以下ＨＰＤＬＦと略す、ＳｃｉｅｎＣｅｌｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａ
ｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ製）を１０％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇ
ｉｅｓ製  Ｐｒｏｄｕｃｔ＃１１９９５−０６５）に懸濁したものを、３５ｍｍディッシュに０．９×１０６個となるように播種し、３７℃、５％ＣＯ２条件下で２４時間培養を行った。ピペットチップ（ＢＭ  Ｂｉｏ  ＢＭＴ−２００ＲＳ）を用いてディッシュ中央に創傷ライン（創傷部分）を作製し、次いで、同時にコントロール（０．２％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭにＤＭＳＯを１％となるように加えたもの）又は０．２％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭにユリエキスを１％加えたものに交換した。その直後及びそれから３時間ごとに、３７℃、５％ＣＯ２条件下で、タイムラプス（三洋電機株式会社製、ＭＵＬＴＩ  ＣＥＬＬ−ＩＭＡＧＩＮＧ  ＩＮＣＵＢＡＴＯＲ  ＭＣＯＫ−５Ｍ）により、創傷ラインへの細胞の浸潤の撮影を行った。２１時間後に撮影した写真を、以下の図６に示す。また、２１時間後の創傷部分への細胞浸潤率（％）をコントロールと比較したグラフを図７に示す。
【００６６】
図６及び７に示す通り、ユリエキスには創傷ラインへの細胞の浸潤を促進する効果が見られた。
【００６７】
歯根膜線維芽細胞（Ｌｏｎｚａ製）を１０％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ製  Ｐｒｏｄｕｃｔ＃１１９９５−０６５）に懸濁したものを９６ウェルプレート（ｃｏｓｔａｒ３３００）に３．２×１０４個となるように播種し、３７℃、５％ＣＯ２条件下で２４時間培養を行った。ウェル中央に創傷ラインを作製し、次いでコントロール（ＤＭＳＯを０．１％となるよう０．２％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭに添加したもの）またはハッカ油（ＤＭＳＯで１０％溶液となるよう溶解し、０．２％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭに最終濃度が０．００４％となるよう添加したもの）に交換した。この時点で０時間の画像をＩｍａｇｅ  Ｘｐｒｅｓｓ  Ｍｉｃｒｏ  ＸＬを用いて撮影し（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ）、３７℃、５％ＣＯ２条件下で１８時間培養した後、更に撮影を行った。画像はＷｉｎＲＯＯＦを用いて解析を行った。
【００６８】
図８及び９に示す通り、ハッカ油には創傷ラインへの細胞の浸潤を促進する効果が見られた。
【００６９】
本発明の歯周組織再生剤、口腔用組成物、歯周組織増殖・活性化剤、及び歯周組織アンチエージング剤の製剤実施例を以下に示す。
【００７０】
（製剤実施例１：口腔用軟膏剤）
Ａ
マクロゴール４００                      残量
マクロゴール４０００                  ２５ｇ
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０      １ｇ
トコフェロール酢酸エステル              ２ｇ
Ｂ
セチルピリジニウム塩化物水和物    ０．０５ｇ
アラントイン                        ０．３ｇ
グリチルリチン酸ジカリウム          ０．４ｇ
カルバゾクロム                    ０．０２ｇ
Ｃ
ハッカ油                                １ｇ
メントール                              １ｇ
ヒノキチオール                      ０．１ｇ
チモール                            ０．１ｇ
合計                                １００ｇ
先ず、８０℃で上記Ａ成分を混合・溶解する。その溶解後、上記Ｂ成分を添加し、撹拌混合し十分に分散させ、冷却する。５０℃まで冷却してから上記Ｃ成分を添加し、撹拌混合して冷却することにより、本発明の口腔用軟膏剤を調製できる。
【００７１】
（製剤実施例２：口腔用軟膏剤）
Ａ
ワセリン                                残量
パラフィン                              １０ｇ
サラシミツロウ                          １０ｇ
セタノール                              １０ｇ
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０        １ｇ
トコフェロール酢酸エステル                ２ｇ
Ｂ
濃グリセリン                              １ｇ
パンテノール                          ０．３ｇ
Ｃ
セチルピリジニウム塩化物水和物        ０．１ｇ
アラントイン                          ０．３ｇ
グリチルリチン酸ジカリウム            ０．４ｇ
メチルセルロース                      ０．８ｇ
Ｄ
ハッカ油                                  １ｇ
ヒノキチオール                        ０．１ｇ
合計                                  １００ｇ
先ず、８０℃で上記Ａ成分を混合・溶解する。別途、上記Ｂ成分を混合しておく。溶解後のＡ成分に、Ｂ成分の混合物及び上記Ｃ成分を添加し、撹拌混合して十分に分散させ、冷却する。その後５０℃まで冷却してから上記Ｄ成分を添加し、撹拌混合し冷却することにより、本発明の口腔用軟膏剤を調製できる。
【００７２】
（製剤実施例３：口腔用軟膏剤）
Ａ
流動パラフィン                          残量
ポリエチレン末                          ６ｇ
パルミチン酸デキストリン                １ｇ
マイクロクリスタリンワックス            ７ｇ
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０      １ｇ
Ｂ
セチルピリジニウム塩化物水和物    ０．０５ｇ
アラントイン                        ０．３ｇ
グリチルリチン酸ジカリウム          ０．４ｇ
カルボキシビニルポリマー                ２ｇ
ヒプロメロース                          １ｇ
軽質無水ケイ酸                          ２ｇ
Ｃ
ウイキョウ油                            １ｇ
ヒノキチオール                      ０．１ｇ
合計                              １００ｇ
先ず、１００℃で上記Ａ成分を混合・溶解する。その溶解後に上記Ｂ成分を添加し、撹拌混合して十分に分散させ、冷却する。その後５０℃まで冷却してから上記Ｃ成分を添加し、撹拌混合して冷却することにより、本発明の口腔用軟膏剤を調製できる。
【００７３】
（製剤実施例４：歯磨組成物）
Ａ
精製水                              残量
グリチルリチン酸二カリウム    ０．０５ｇ
Ｌ−グルタミン酸塩酸塩          ０．５ｇ
カルボキシメチルセルロース          １ｇ
濃グリセリン                        ５ｇ
香料                          ０．２５ｇ
ソルビトール液                    ３０ｇ
Ｂ
イソプロピルメチルフェノール    ０．１ｇ
酢酸トコフェロール              ０．１ｇ
プロピレングリコール              １０ｇ
ハッカ油                        ０．５ｇ
Ｃ
シリカ                              ８ｇ
ラウレス硫酸酸ナトリウム            ２ｇ
合計                          １００ｇ
先ず、上記Ａ成分を撹拌・溶解後、６０℃で加熱溶解した上記Ｂ成分を投入する。その後、上記Ｃ成分を投入し撹拌することにより、本発明の歯磨組成物を調製できる。
【００７４】
（製剤実施例５：洗口剤（洗口液））
Ａ
精製水                                残量
グリチルリチン酸二カリウム      ０．０５ｇ
酢酸トコフェロール              ０．０５ｇ
濃グリセリン                        １０ｇ
クエン酸                          ０．１ｇ
クエン酸ナトリウム              ０．２５ｇ
フェノキシエタノール              ０．３ｇ
香料                              ０．１ｇ
ハチミツ                        ０．０１ｇ
Ｂ
イソプロピルメチルフェノール      ０．０５ｇ
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０  ２．５ｇ
チモール                          ０．０１ｇ
ｌ−メントール                      ０．５ｇ
合計                              １００ｇ
上記Ａ成分を溶解後、６０℃で加熱溶解した上記Ｂ成分を上記Ａ成分に添加し撹拌することにより、本発明の洗口剤を調製できる。
【００７５】
（製剤実施例６：洗口剤(洗口液)）
Ａ
精製水                                残量
塩化セチルピリジニウム          ０．０５ｇ
ε−アミノカプロン酸            ０．０５ｇ
ポリエチレングリコール              １０ｇ
Ｄ−マンニトール                  ０．５ｇ
クエン酸                          ０．１ｇ
クエン酸ナトリウム              ０．２５ｇ
メチルパラベン                    ０．２ｇ
香料                              ０．１ｇ
ペパーミントエッセンス          ０．０５ｇ
アロエエキス                      ０．１ｇ
カンゾウエキス                  ０．０１ｇ
合計                            １００ｇ
上記各成分の全量を撹拌溶解することにより、本発明の洗口剤を調製できる。
【００７６】
（製剤実施例７：歯茎マッサージジェル）
Ａ
精製水                                  残量
グリチルリチン酸二カリウム        ０．０３ｇ
ソルビトール                          １０ｇ
濃グリセリン                          １０ｇ
エタノール                              ５ｇ
クエン酸                          ０．０５ｇ
クエン酸ナトリウム                  ０．２ｇ
香料                                ０．４ｇ
真珠タンパク質エキス              ０．０５ｇ
ユリエキス                        ０．０５ｇ
加水分解コラーゲン                ０．０１ｇ
Ｂ
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０      ２ｇ
イソプロピルメチルフェノール    ０．００５ｇ
酢酸トコフェロール                ０．０１ｇ
ハッカ油                            ０．１ｇ
ｌ−メントール                      ０．２ｇ
Ｃ
ポリエチレングリコール４００          １０ｇ
キサンタンガム                          １ｇ
ヒアルロン酸ナトリウム            ０．０５ｇ
合計                              １００ｇ
上記Ａ成分を溶解後、５０℃で加熱溶解した上記Ｂ成分を添加して撹拌溶解させる。その後、上記Ｃ成分を撹拌分散したものを添加して撹拌することにより、本発明の歯茎マッサージジェルを調製できる。
【図１】
2016153396.tif 000004
【図２】
2016153396.tif 000005
【図３】
2016153396.tif 000006
【図４】
2016153396.tif 000007
【図５】
2016153396.tif 000008
【図６】
2016153396.tif 000009
【図７】
2016153396.tif 000010
【図８】
2016153396.tif 000011
【図９】
2016153396.tif 000012