(57)【要約】      （修正有）【課題】結果が再現可能で、試料の汚染が生じ難い、試料から少なくとも一種の細胞を分離するための装置を提供する。【解決手段】装置７２は、マイクロ流体デバイス７３に電気的に接続するための電気コネクタ８５と、各々がそれぞれの弁９，１１の一部を構成するように設計されており、各アクチュエータ孔を有するそれぞれのアクチュエータノズル３６を備えている、少なくとも４つの流体力学的アクチュエータと、各々がそれぞれの圧力供給孔６３ａを有している、少なくとも２つの圧力供給ノズル６１，６１ａと、圧力供給孔６３ａにおける圧力を特定するために、圧力供給ノズルに接続された少なくとも１つの第１の圧力装置６４と、アクチュエータノズル３６に接続されており、アクチュエータ孔に吸引をもたらすように少なくとも設計されている、少なくとも１つの第２の圧力装置８７と、を備えている細胞分離装置７２。【選択図】図３
2016039801.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料から少なくとも所定の一種の細胞（Ｃ１）を分離するための装置（７２）であって、前記試料から前記所定種類の前記細胞（Ｃ１）を分離するためのマイクロ流体デバイス（７３）を収容するためのシート（８４）と、前記装置（７２）を前記マイクロ流体デバイス（７３）に電気的に接続するための電気コネクタ（８５）と、前記電気コネクタ（８５）に接続された制御アセンブリ（２３）と、少なくとも４つの流体力学的アクチュエータ（３５）であって、各々がそれぞれの弁（Ｖ；９，１０，１１，１２）の一部を構成するように設計されており、各アクチュエータ孔（３９）を有するそれぞれのアクチュエータノズル（３６）を備えている、少なくとも４つの流体力学的アクチュエータ（３５）と、少なくとも２つの圧力供給ノズル（６１，６１ａ）であって、各々がそれぞれの圧力供給孔（６３，６３ａ）を有している、少なくとも２つの圧力供給ノズル（６１，６１ａ）と、前記圧力供給孔（６３，６３ａ）における圧力を特定するために、前記圧力供給ノズル（６１，６１ａ）に接続された少なくとも１つの第１の圧力装置（６４）と、前記アクチュエータノズル（３６）に接続されており、前記アクチュエータ孔（３９）に吸引をもたらすように少なくとも設計されている、少なくとも１つの第２の圧力装置（８７）と、を備えており、各流体力学的アクチュエータ（３５）は、前記装置（７２）の外部に位置している、前記マイクロ流体デバイスに属しているそれぞれの閉鎖要素（３０）を移動させるように設計されていることを特徴とする装置。
【請求項２】
前記第１および第２の圧力装置（６４，８７）を備える圧力アセンブリ（９０）を備えており、前記圧力アセンブリ（９０）は、少なくとも１つのポンプを備えていることを特徴とする請求項１に記載の装置。
【請求項３】
前記第１の圧力装置（６４）は、第１の圧力ユニット（６５）および第２の圧力ユニット（６５ａ）を備えており、前記第１および第２のユニット（６５，６５ａ）の各々は、それぞれの圧力供給ノズル（６１，６１ａ）に接続されており、前記第１および第２の圧力ユニット（６５，６５ａ）は、個別に操作可能になっており、各々、対応する圧力供給孔（６３，６３ａ）における圧力（該孔を通る空気噴流の圧力）を特定するように設計されていることを特徴とする請求項１または２に記載の装置。
【請求項４】
前記第１の圧力装置（６４）は、少なくとも１つの圧力源（１５，２５）と、前記第１および第２の圧力ユニット（６５，６５ａ）の少なくとも１つであって、前記圧力源（１５，２５）を各圧力供給ノズル（６１，６１ａ）に接続している対応する第１のダクトを備えている、前記第１および第２の圧力ユニット（６５，６５ａ）の少なくとも１つと、前記第１のダクトに沿った圧力を検出するための圧力センサ（２１）と、前記各圧力供給ノズル（６１，６１ａ）に対する圧力の伝達を中断するように設計された第１の阻止装置（２２）と、を備えており、前記制御アセンブリ（２３）は、検出された圧力に応じて前記第１の阻止装置（２２）を操作するために、前記圧力センサ（２１）および前記第１の阻止装置（２２）に接続されていることを特徴とする請求項３に記載の装置。
【請求項５】
前記第１の阻止装置（２２）は、安全弁（２２’）を備えており、該安全弁（２２’）は、前記第１のダクトに沿って配置されており、作動されると、前記第１のダクト内の圧力を外部圧力にするために、前記第１のダクトを外界に連通させるように設計されていることを特徴とする請求項４に記載の装置。
【請求項６】
前記第１の圧力装置（６４）は、少なくとも１つの圧力源（１５，２５）と、前記第１および第２の圧力ユニット（６５，６５ａ）の少なくとも１つであって、前記圧力源（１５，２５）を前記各圧力供給ノズル（６１，６１ａ）に接続している対応する第１のダクトを備えている、前記第１および第２の圧力ユニット（６５，６５ａ）の少なくとも１つと、少なくとも１つの振動装置（１７，１７ａ）であって、前記第１のダクトに沿って配置されており、前記各圧力供給孔（６３，６３ａ）における前記圧力源（１５，２５）によって定められた圧力の周期的な変動をもたらすように設計されている、少なくとも１つの振動装置（１７，１７ａ）と、を備えていることを特徴とする請求項１〜５のいずれか１つに記載の装置。
【請求項７】
前記振動装置（１７，１７ａ）は、ダイアフラムポンプを備えていることを特徴とする請求項６に記載の装置。
【請求項８】
前記第２の圧力装置（８７）は、第１の吸引ユニット、第２の吸引ユニット、第３の吸引ユニット、および少なくとも１つの第４の吸引ユニット（４１）を備えており、各々がそれぞれのアクチュエータノズル（３６）に接続されており、前記第１、第２、第３、および第４の吸引ユニット（４１）は、個別に操作可能になっており、各々、対応するアクチュエータ孔（３９）において少なくとも１つの吸引を定めるようになっていることを特徴とする請求項１〜７のいずれか１つに記載の装置。
【請求項９】
前記第２の圧力装置（８７）は、少なくとも１つの吸引源（４３）を備えており、前記第１、第２、第３、および第４の吸引ユニット（４１）の少なくとも１つは、前記吸引源（４３）を前記各アクチュエータノズル（３６）に接続している第２のダクト（４２）と、前記各アクチュエータノズル（３６）への吸引の伝達を中断するように設計された第２の阻止装置と、を備えていることを特徴とする請求項８に記載の装置。
【請求項１０】
前記第２の阻止装置は、前記第２のダクト（４２）に沿って配置された弁と、前記圧力源（４３）のアクチュエータと、からなる組として選択される要素を備えており、前記アクチュエータは、前記圧力源（４３）を作動させるかまたは停止させるように設計されていることを特徴とする請求項９に記載の装置。
【請求項１１】
前記アクチュエータノズルの少なくとも１つの第１のアクチュエータノズル（３６）は、圧力を各アクチュエータ孔（３９）を通して外方に加えるように設計された対応する第１の機械的圧力要素（３４）を備えていることを特徴とする請求項１〜１０のいずれか１つに記載の装置。
【請求項１２】
前記第１の機械的圧力要素（３４）は、バネと、前記バネの外端に配置されたシール要素（４０）と、を備えていることを特徴とする請求項１１に記載の装置。
【請求項１３】
前記第１のアクチュエータノズル（３６）は、前記第１の機械的圧力要素（３４）を収容するためおよび前記各吸引ユニット（４１）を前記対応するアクチュエータ孔（３９）に接続するための中空要素（３７）を備えており、前記中空要素（３７）は、前記対応するアクチュエータ孔（３９）を有する一端を有していることを特徴とする請求項１１または１２に記載の装置。
【請求項１４】
各アクチュエータノズル（３６）を前記マイクロ流体デバイス（７３）に向かって押圧するための少なくとも１つの第２の機械的圧力要素（４６）を備えていることを特徴とする請求項１〜１３のいずれか１つに記載の装置。
【請求項１５】
各圧力供給ノズルを前記マイクロ流体デバイス（７３）に向かって押圧するための少なくとも１つの第３の機械的圧力要素（５８）を備えていることを特徴とする請求項１〜１４のいずれか１つに記載の装置。
【請求項１６】
前記マイクロ流体デバイス（７３）の少なくとも一部を冷却するように設計された冷却アセンブリ（５０）を備えていることを特徴とする請求項１〜１５のいずれか１つに記載の装置。
【請求項１７】
前記冷却アセンブリ（５０）は、前記マイクロ流体デバイス（７３）の少なくとも一部からの熱を吸収するように設計された作用面（５２）および熱を発散するための放出面（５３）を有している冷却プレート（５１）を備えており、前記作用面（５２）は、前記放出面（５３）よりも小さい寸法を有していることを特徴とする請求項１６に記載の装置。
【請求項１８】
前記冷却アセンブリ（５０）は、ペルチエおよび前記ペルチエに接続された熱交換装置（５５）を備えていることを特徴とする請求項１７に記載の装置。
【請求項１９】
前記冷却アセンブリ（５０）を前記マイクロ流体デバイス（７３）に向かって押圧するための少なくとも１つの第４の機械的圧力要素（６０）を備えていることを特徴とする請求項１６〜１８のいずれか１つに記載の装置。
【請求項２０】
少なくとも１つのさらなるアクチュエータノズルおよび１つのさらなる対応する吸引ユニットを備えていることを特徴とする請求項１〜１９のいずれか１つに記載の装置。
【請求項２１】
前記制御アセンブリ（２３）は、各アクチュエータノズル（３６）および各圧力供給ノズル（６１，６１ａ）における圧力および／または吸引を互いに独立して調整するために、前記第１の圧力装置（６４）および前記第２の圧力装置（８７）に接続されていることを特徴とする請求項１〜２０のいずれか１つに記載の装置。
【請求項２２】
前記所定種類の前記細胞（Ｃ１）の少なくとも一部を含んでいるキャリア液を収集するための取集ユニットを備えていることを特徴とする請求項１〜２１のいずれか１つに記載の装置。
【請求項２３】
前記キャリア液の一滴が前記収集ユニットに入ったときを検出するための検出器を備えていることを特徴とする請求項２２に記載の装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、試料から少なくとも所定の一種の細胞を分離するための装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
所定種類の粒子を分離するためのデバイスが、当技術分野において知られている。このデバイスは、主チャンバであって、オペレータが、ピペットを用いて、試料を主チャンバの孔を通して主チャンバ内に導くようになっている、主チャンバと、回収チャンバであって、オペレータが、ピペットを再び用いて、所定種類の粒子を回収チャンバの孔を通して回収チャンバから引き出すようになっている、回収チャンバと、を備えている。
【０００３】
特許文献１，２は、試料を操作するための複雑なデバイスであって、該デバイス内に完全に組み入れられた複数の弁を備えている、デバイスを開示している。
【０００４】
特許文献３は、粒子を操作するためのシステムのいくつかの態様のみを開示しており、デバイスの構造の詳細およびその操作の詳細は、明確に述べられていない。
【０００５】
周知のデバイスは、分離ステップ中、導入ステップ中、および回収ステップ中の精度に関して種々の問題を有している。さらに、その結果が必ずしも再現可能ではなく、場合によっては、試料の汚染が種々のステップ中に生じ、特別の器用さを有するオペレータの介入が必要とされることがある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】米国特許出願公開第２００３／００７３１１０号明細書
【特許文献２】欧州特許出願公開第１１７９５８５号明細書
【特許文献３】米国特許出願公開第２００４／０２０９３５４号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の目的は、現在の技術の欠点を少なくとも部分的に解消することができ、同時に、容易かつ経済的に製造することができる利点を有する、試料から少なくとも所定の一種の細胞を分離するための装置を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明によれば、試料から少なくとも所定の一種の細胞（Ｃ１）を分離するための装置（７２）であって、前記試料から前記所定種類の前記細胞（Ｃ１）を分離するためのマイクロ流体デバイス（７３）を収容するためのシート（８４）と、前記装置（７２）を前記マイクロ流体デバイス（７３）に電気的に接続するための電気コネクタ（８５）と、前記電気コネクタ（８５）に接続された制御アセンブリ（２３）と、少なくとも４つの流体力学的アクチュエータ（３５）であって、各々がそれぞれの弁（Ｖ；９，１０，１１，１２）の一部を構成するように設計されており、各アクチュエータ孔（３９）を有するそれぞれのアクチュエータノズル（３６）を備えている、少なくとも４つの流体力学的アクチュエータ（３５）と、少なくとも２つの圧力供給ノズル（６１，６１ａ）であって、各々がそれぞれの圧力供給孔（６３，６３ａ）を有している、少なくとも２つの圧力供給ノズル（６１，６１ａ）と、前記圧力供給孔（６３，６３ａ）における圧力を特定するために、前記圧力供給ノズル（６１，６１ａ）に接続された少なくとも１つの第１の圧力装置（６４）と、前記アクチュエータノズル（３６）に接続されており、前記アクチュエータ孔（３９）に吸引をもたらすように少なくとも設計されている、少なくとも１つの第２の圧力装置（８７）と、を備えており、各流体力学的アクチュエータ（３５）は、前記装置（７２）の外部に位置している、前記マイクロ流体デバイスに属しているそれぞれの閉鎖要素（３０）を移動させるように設計されていることを特徴とする装置が提供されることになる。
【０００９】
特に明確に規定されていない限り、本明細書において、以下の用語は、以下に述べる意味を有しているものとする。
【００１０】
断面の「等価直径（equivalent diameter）」は、該断面と同じ面積を有する円の直径と理解されたい。
【００１１】
チャンネルまたはダクトの「断面（cross section）」は、チャンネル（またはダクト）の長手方向に対して、すなわち、チャンネル（またはダクト）内において流体が前進する方向に対して実質的に直交する断面と理解されたい。
【００１２】
孔の「等価直径（equivalent diameter）」は、孔自体の最小寸法の断面と同じ面積を有する円の直径と理解されたい。
【００１３】
「マイクロ流体システム（またはデバイス）（microfluidic system (or device)」は、少なくとも１つのマイクロ流体チャンネル（またはダクト）を備えているシステム（またはデバイス）と理解されたい。
【００１４】
「マイクロ流体チャンネル（またはダクト）（microfluidic channel (or duct)」は、１ｍｍ未満の等価直径の断面を有するチャンネル（またはダクト）と理解されたい。
【００１５】
チャンネルまたはダクトの寸法は、表面形状測定装置を用いる標準的な方法によって測定可能である。
【００１６】
本明細書では、「粒子（particle）」は、５００μｍ未満（有利には、１５０μｍ未満）の最大寸法を有する遊離細胞と理解されたい。粒子の非制限的な例として、細胞、細胞堆積物（特に、細胞断片）、細胞凝集体（例えば、ニューロスフィアまたはマンモスフィアのような幹細胞から派生する細胞の小さい塊）、微生物、リポスフェア、（ポリスチレン微粒子および／または磁気的微粒子）、および細胞に連結された微粒子によって形成される複合ナノ粒子（例えば、１００μｍ以下のナノ粒子）が挙げられる。有利には、粒子は、細胞である。
【００１７】
いくつかの実施形態によれば、粒子（有利には、細胞および／または細胞堆積物）は、６０μｍ未満の最大寸法を有している。
【００１８】
粒子の寸法は、目盛を刻んだスケール付きの顕微鏡または（粒子が堆積する）目盛を刻んだスライド式スケールと共に用いられる一般的な顕微鏡を用いる標準的な方法によって測定可能である。
【００１９】
本明細書では、粒子の「寸法（dimensions）」は、粒子の長さ、幅、および厚みと理解されたい。
【００２０】
「実質的に選択的（substantially selective）」という用語は、粒子の変位（または移動および／または分離を示す他の同様の用語）を特定するために用いられており、変位および／または分離される粒子の大半は、一種または複数種の粒子である。有利には、実質的に選択的な変位（または移動および／または分離を示す他の同様の用語）は、少なくとも９０％（有利には、９５％）の所定の一種または複数種の粒子を含む粒子の変位を意味している（なお、百分率は、粒子の全数に対する所定の一種または複数種の粒子の数によって定められるものである）。
【００２１】
以下、本発明の実施形態のいくつかの非制限的な例を示す添付の図面を参照して、本発明を説明する。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１】本発明によって構成されているシステムの概略図である。
【図２】本発明によって構成されているシステムの代替的実施形態の概略図である。
【図３】図１のシステムの概略的な側面図である。
【図４】本発明によって構成されているデバイスの分解斜視図である。
【図５】図４のデバイスの構成要素の平面図である。
【図６】図５のデバイスの構成要素を下から見た平面図である。
【図７】図４のデバイスの構成要素の斜視図である。
【図８】図４のデバイスの構成要素の分解斜視図である。
【図９】図８の構成要素の平面図である。
【図１０】明瞭にするために部品が取り外されている、本発明によって構成されている装置の部分斜視図である。
【図１１】明瞭にするために部品が取り外されている、異なる操作位置にある図１０の装置の部分斜視図である。
【図１２】図１０，図１１の装置の細部を下から見た斜視図である
【図１３】明瞭にするために部品が取り外されている、図１０，図１１の装置の一部の平面図である。
【図１４】，
【図１５】２つの異なる操作位置にある図１−３のシステムの細部の部分断面図である。
【図１６】図１−３のシステムの細部の部分断面図である。
【図１７】図１４，図１５に示されている細部の一部の斜視図である。
【図１８】図１７の細部の分解斜視図である。
【図１９】，
【図２０】種々の操作ステップにある図４のデバイスの細部を示す図である。
【図２１】図４のデバイスの平面図である。
【図２２】図１のシステムを用いて行われた試験の写真である。
【図２３】図１，図２の細部の実施形態を拡大して示す図である。
【図２４】図１７に示される部品の変更形態の斜視図である。
【図２５】図２４の変更形態の分解斜視図である。
【図２６】図２４の変更形態の側断面図である。
【図２７】，
【図２８】種々の操作ステップにある図３１のデバイスの細部を示す図である。
【図２９】図３１のデバイスの構成要素の分解斜視図である。
【図３０】図２９の構成要素の平面図である。
【図３１】本発明によって構成されているデバイスの平面図である。
【図３２】図６の構成要素の変更形態、詳細には、図３１のデバイスの構成要素を下から見た平面図である。
【図３３】図３２の細部を拡大して示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
［マイクロ流体システム］
本発明の第１の態様によれば、（図２０に概略的に示されているように）試料から少なくとも所定の一種の粒子Ｃ１を実質的に分離するためのマイクロ流体システム１が提供されている。システム１（図１）は、入口２であって、使用時、試料が該入口２を通ってシステム１内に導かれるようになっている、入口２と、（図２０に概略的に示されているように）所定種類の粒子Ｃ１の少なくとも一部を試料のさらなる粒子Ｃ２から実質的に選択的に分離するように設計された分離ユニット３と、分離ユニット３に接続された出口８であって、具体的には、使用時に、実質的に選択的に分離された所定種類の粒子Ｃ１の少なくとも一部が、該出口８を通ってシステム１から流出するようになっている、出口８と、を備えている。分離ユニット３は、入口２に接続されている。
【００２４】
いくつかの実施形態によれば、システム１は、入口２と分離ユニット３との間（詳細には、入口２と主チャンバ４との間）に配置された弁９と、出口８と分離ユニット３との間に配置された弁１２と、を備えている。詳細には、システム１は、分離ユニット３とシステム１の外側に開いている各開口との間に配置された弁を備えている。
【００２５】
いくつかの実施形態によれば、分離ユニット３は、主チャンバ４および回収チャンバ５を備えており、所定種類の粒子Ｃ１の少なくとも一部を試料のさらなる粒子Ｃ２に対して実質的に選択的に主チャンバ４から回収チャンバ５に移動させるように設計されている。
【００２６】
分離ユニット３は、チャンネル６をさらに備えている。チャンネル６は、チャンバ４，５を互いに接続しており、（すなわち、チャンバ４，５間の流体の移動を可能としており）、チャンバ４，５のいずれの寸法（特に、幅および長さ）よりもかなり小さい寸法（特に、幅および長さ）を有している。
【００２７】
システム１は、出口７であって、試料が主チャンバ４内に自由に流入することを可能とし、従って、通気口として機能するように主チャンバ４に接続されている、出口７と、回収チャンバ５に接続された出口８であって、使用時に、回収チャンバ５内に収集された所定種類の粒子Ｃ１の少なくとも一部が、該出口８を通ってシステム１から流出するようになっている、出口８と、を備えている。
【００２８】
システム１は、主チャンバ４の上流に配置された弁９と、主チャンバ４と出口７との間に配置された弁１０と、回収チャンバ５に接続された弁１１と、回収チャンバ５と出口８との間に配置された弁１２と、をさらに備えている。詳細には、弁１１は、回収チャンバ５とキャリア液体源との間に配置されている。
【００２９】
さらに詳細には、回収チャンバ５は、一方の側の主チャンバ４と他の側の弁１１，１２との間に配置されており、主チャンバ４は、一方の側の回収チャンバ５と他の側の弁９，１０との間に配置されている。
【００３０】
弁９，１０は、主チャンバ４への試料の流入を調整するように設計されている。
【００３１】
弁１１，１２は、キャリア液の回収チャンバ５への流入および所定種類の粒子Ｃ１を伴うキャリア液の回収チャンバ５から出口８への流出を調整するように設計されている。
【００３２】
もし使用時に弁９，１２が閉じており、弁１１，１０が開いているなら、主チャンバ４の洗浄が行われていることになる。換言すれば、このとき、試料のさらなる粒子Ｃ２が主チャンバ４から排出（すなわち、流出）されていることになる。
【００３３】
特定の実施形態によれば、キャリア液は、緩衝液、特に、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）である。
【００３４】
図１に示されている実施形態によれば、システム１は、入口２と弁９との間に配置されたリザーバ１３であって、入口２を通って導かれた試料を収集するように設計されている、リザーバ１３と、キャリア液を収容するためのリザーバ１４であって、回収チャンバ５を満たすように設計されている、リザーバ１４と、を備えている。換言すれば、リザーバ１４は、キャリア液源として機能している。システム１は、リザーバ７’をさらに備えている。リザーバ７’は、出口７に配置されており、主チャンバ４から流入する流体を収集するように設計されている。
【００３５】
弁９は、入口２と主チャンバ４との間、詳細には、リザーバ１３と主チャンバ４との間に配置されており、入口２および主チャンバ４を互いに接続または分離するように設計されている。
【００３６】
有利には、システム１は、圧力源１５をさらに備えている。圧力源１５は、所定圧力を供給する方向においてリザーバ１３と主チャンバ５との間に圧力差をもたらすためのものである。詳細には、圧力源１５は、所定圧力を供給する方向においてリザーバ１３から主チャンバ５に向かって圧力を加えるように設計されている。いくつかの実施形態によれば、リザーバ１３は、圧力源１５と弁９との間に配置されている。
【００３７】
具体的には、リザーバ１３は、圧力源１５と主チャンバ４との間に配置されている。
【００３８】
特定の実施形態によれば、システム１は、ダクト１６を備えている。ダクト１６は、圧力源１５と主チャンバ４との間を接続しており、（すなわち、圧力源１５と主チャンバ４との間の流体の移動を可能にしており）、該ダクト１６に沿って、リザーバ１３および弁９が配置されている。ダクト１６は、２ｍｍ未満の等価直径の断面を有しており、有利には、５０μｍ以上の等価直径の断面を有している。ダクト１６は、０．９ｍｍ以下の等価直径の断面を有する少なくとも１つのストレッチ部を備えている。
【００３９】
システム１は、振動装置１７をさらに備えている。振動装置１７は、少なくとも入口２から主チャンバ４までの領域において、試料に加えられる圧力の周期的な変動を生じさせるように設計されており、圧力源１５とリザーバ１３との間に配置されている。このようにして、リザーバ１３および／またはダクト１６および／または主チャンバ４内に存在する試料の粒子Ｃ１，Ｃ２が振動させられ、試料の粒子Ｃ１，Ｃ２のリザーバ１３から主チャンバ４への流入が改良されることになる。すなわち、粒子Ｃ１，Ｃ２がリザーバ１３および／またはダクト１６および／または主チャンバ４のそれぞれの壁に塊状集積または付着する傾向が小さくなる。主チャンバ４内における粒子Ｃ１，Ｃ２の分散の均一性も改良されることになる。
【００４０】
有利には、振動装置１７は、特にＴジョイント１９によって、ダクト１６に接続された振動ダイアフラム１８を備えている。特定の実施形態によれば、振動ダイアフラムは、入口および出口が短絡しているマイクロポンプ（Thinxxs（登録商標）ＭＤＰ２２０５）である。
【００４１】
（図１に示されていない）いくつかの実施形態によれば、入口２は、圧力源１５（特に、ジョイント１９）とリザーバ１３との間において、ダクト１６に沿って配置されている。
【００４２】
いくつかの実施形態によれば、システム１は、ダクト２０を備えている。ダクト２０は、主チャンバ４と出口７との間に配置されており、ダクト１６の断面よりも小さい断面を有する少なくとも１つのストレッチ部２０’を有している。詳細には、ストレッチ部２０’の断面は、ダクト１６の断面よりも少なくとも１００μｍだけ小さくなっている。有利には、ストレッチ部２０’は、主チャンバ４のすぐ下流に配置されている（すなわち、さらなるストレッチ部または要素を介在させることなく、主チャンバ４の下流に配置されている）。
【００４３】
ストレッチ部２０’は、１５０μｍ未満の幅、１１０μｍ未満の深さ、および２ｍｍを超える長さを有している。有利には、ストレッチ部２０’は、１００μｍを超える幅、３０μｍを超える深さ、および特に、６ｍｍ未満の長さを有している。
【００４４】
いくつかの実施形態によれば、ダクト２０は、ストレッチ部２０’’を備えている。ストレッチ部２０’’は、ストレッチ部２０’と出口７との間に配置されており、ストレッチ部２０’ の等価直径の断面よりも大きい（具体的には、ダクト１６の等価直径の断面と実質的に等しい）等価直径の断面を有している。
【００４５】
概して、種々の実施形態によれば、システム１は、試料がダクト２０に進入し始めたときを直接的または間接的に検出するためのセンサと、主チャンバに向かう試料の流入を阻止するための阻止装置と、センサによって検出されたもの（詳細には、試料がダクト２０に進入し始めたとき）に応じて阻止装置を作動させるために、センサおよび阻止装置に接続された制御アセンブリと、を備えている。
【００４６】
いくつかの特定の実施形態によれば、システム１は、ダクト１６に沿った圧力の変動および/または主チャンバ４における圧力の変動を検出するための圧力センサ２１と、主チャンバ４に向かう試料の流入を阻止するための阻止装置２２と、を備えている。システム１は、検出された圧力の変動に応じて阻止装置２２を作動させるために、圧力センサ２１および阻止装置２２に接続された制御アセンブリ２３をさらに備えている。詳細には、使用時、制御アセンブリ２３は、圧力センサ２１が所定の閾値を超える圧力を検出したとき、阻止装置を作動させるようになっている。
【００４７】
さらに特定の実施形態によれば、システム１は、圧力センサ２１に加えてまたは圧力センサ２１の代替として、以下の要素、すなわち、ストレッチ部２０’の入口に配置された光学センサと、試料の通過の開始に起因する伝導度の変動を検出するために、ストレッチ部２０’の入口に配置された電気伝導度の検出器と、試料の通過の開始に起因する誘電率の変動を検出するために、ストレッチ部２０’の入口に配置された誘電率の検出器と、試料の通過の開始に起因する熱抵抗の変動を検出するために、ストレッチ部２０’の入口に配置された熱抵抗の検出器と、試料の通過の開始に起因する熱容量の変動を検出するために、ストレッチ部２０’の入口に配置された熱容量の検出器と、から選択される１つまたは２つの要素を備えている。これらのいずれにおいても、制御アセンブリ２３は、該１つまたは複数の検出器に接続されており、該１つまたは複数の検出器によって検出された変動に応じて阻止装置２０を作動させるように、設計されている。
【００４８】
いくつかの実施形態によって、光学センサは、集積フォトダイオードまたは（可能であれば、画像拡大システム付きの）外部ビデオカメラである。
【００４９】
図２３を特に参照すると、阻止装置２２は、安全弁２２’を備えており、有利には、圧力源１５とリザーバ１３との間に配置されている。阻止装置２２が作動されるとき、安全弁２２’が操作され、圧力源１５からの空気噴流が外側に放出され、ダクト１６に沿った圧力が低下するようになっている。安全弁２２’は、Ｔジョイント２２’’によってダクト１６に流体力学的に接続されている。
【００５０】
詳細には、阻止装置２２は、ジョイント１９と圧力源１５との間において、特に、主チャンバ４に圧力を供給する方向に関して圧力センサ２１の上流に配置されている。
【００５１】
前述したことから、分離ユニット３内への試料の導入が改善され、これによって、試料のかなりの部分が分離ユニット３を超える危険性が減少することが推察されるだろう。
【００５２】
代替的実施形態によれば、阻止装置２２が設けられておらず、阻止機能は、制御アセンブリ２３に接続された弁によって行われるようになっている。換言すれば、使用時に、制御アセンブリ２３は、圧力センサ２１が所定の閾値よりも高い圧力を検出したとき、弁９を閉じるようになっている。
【００５３】
有利には、制御アセンブリ２３は、弁９，１０，１１，１２に接続されている。
【００５４】
制御アセンブリと他の要素（装置、弁ユニット、など）との間の接続は、既存の電気接続具（導体ケーブル）を介してもたらされてもよいし、または電磁波（例えば、電波、マイクロ波など）を介して、もたらされてもよい。
【００５５】
いくつかの実施形態によれば、システム１は、入口２４を備えている。リザーバ１４は、入口２４と弁１１との間に配置されており、入口２４を通って導かれたキャリア液を収集するように設計されている。
【００５６】
弁１１は、入口２４と回収チャンバ５との間に配置されており、入口２４および回収チャンバ５を互いに接続または分離するように設計されている。詳細には、弁１１は、リザーバ１４と回収チャンバ５との間に配置されており、リザーバ１４および回収チャンバ５を互いに接続または分離するように設計されている。
【００５７】
いくつかの実施形態によれば、システム１は、リザーバ１４と回収チャンバ５との間に圧力差をもたらすための圧力源２５を備えている。詳細には、圧力源２５は、リザーバ１４から回収チャンバ５に向かって圧力を加えるようになっている。
【００５８】
有利には、リザーバ１４は、圧力源２５と弁１１との間に配置されている。具体的には、システム１は、ダクト２６を備えている。ダクト２６は、圧力源２５と回収チャンバ５とを接続しており、（すなわち、圧力源２５と回収チャンバ５との間の流体の移動を可能としており）、該ダクト２６に沿って、リザーバ１４および弁１３が配置されている。
【００５９】
いくつかの実施形態によれば、入口２４は、ダクト２６に沿って、詳細には、圧力源２５とリザーバ１４との間に配置されている。
【００６０】
図３を特に参照すると、システム１は、振動装置１７ａを備えている。振動装置１７ａは、振動装置１７と同様であり、少なくとも回収チャンバ５の領域において、圧力の周期的な変動を生じさせるように設計されている。このようにして、回収チャンバ５内に存在している所定種類の粒子Ｃ１が振動させられ、回収チャンバ５から出口８に向かう所定種類の粒子Ｃ１の流出が改良されることになる。すなわち、粒子Ｃ１が回収チャンバ５および／または回収チャンバ５を出口８に接続している（すなわち、回収チャンバ５と出口８との間の流体の移動を可能にしている）ダクト２７のそれぞれの壁に塊状集積または付着する傾向が小さくなる。弁１２は、回収チャンバ５と出口８との間に配置されている。
【００６１】
有利には、振動装置１７ａは、特にＴジョイント１９ａによって、ダクト２６に接続されたダイアフラムポンプ１８ａを備えている。
【００６２】
（図示されていない）実施形態によれば、チャンバ５を満たすためのシステムは、チャンバ４を満たすためのシステムと同様である。
【００６３】
従って、前記の場合には、（図示されていない）阻止装置が圧力源２５とリザーバ１４との間に配置されており、さらに、主チャンバ４を参照して前述したものと同様の（図示されていない）１つまたは複数のセンサおよび／または検出器が、ダクト２６の入口または他の適切な位置に配置されている。
【００６４】
（図示されていない）実施形態によれば、システム１は、検出器（特に、光学検出器、インピーダンス検出器、または超音波検出器）を備えている。制御アセンブリ２３に接続された該検出器は、出口８に配置されており、出口８から流出する液体を検出するように設計されている。制御アセンブリ２３は、光学センサによって検出されたものに応じて弁１１および／または弁１２の開口度を調整するように設計されている。詳細には、使用時に、光学センサが（所定種類の粒子Ｃ１の少なくとも一部が存在している）キャリア液の少なくとも一滴を検出すると、制御アセンブリ２３は、安全弁を作動させ、作動圧力をゼロにし、これによって、液体の流れを阻止するようになっている。
【００６５】
付加的または代替的に、光学センサが（所定種類の粒子Ｃ１の少なくとも一部が存在している）キャリア液の少なくとも一滴を検出すると、制御アセンブリ２３は、弁１２および／または弁１１を閉じるようになっている。
【００６６】
このようにして、極めて少量の液体内の粒子Ｃ１を得ることが可能である。これによって、後続の分析ステップが容易になる。
【００６７】
図２は、回収チャンバ５に対するダクト２６の位置に関して図１のシステムと異なっているシステム１の一実施形態を示している。この実施形態では、システム１は、ダクト２８を備えている。ダクト２８は、回収チャンバ５を出口７（または図示されていないさらなる出口）に接続しており、該ダクト２８に沿って、制御アセンブリ２３に接続された弁２９が配置されている。ダクト２６は、ダクト２７，２８間において、回収チャンバ５に接続されている。詳細には、ダクト２６は、チャンネル６の実質的に前方において、回収チャンバ５に接続されている。
【００６８】
図１４，１５を特に参照すると、いくつかの実施形態によれば、弁９，１０，１１，１２の少なくとも１つ（特に、各弁９，１０，１１，１２）は、特定の弁Ｖに関して以下に述べる特定の構造を有している（換言すれば、弁９，１０，１１，１２の１つまたは複数は、以下に述べる弁Ｖの構造を有している）。
【００６９】
本発明の一態様によれば、弁Ｖが設けられている。
【００７０】
弁Ｖは、閉鎖要素３０を備えている。閉鎖要素３０は、実質的に弾性の材料から構成されており（特に、該材料から作製されており）、閉鎖要素３０が各ダクトの２つのストレッチ部３１，３２を分離する（図１４に示されている）阻止位置と、閉鎖要素３０がストレッチ部３１，３２間の流体の移動を可能とするように位置している（図１５に示されている）開位置との間で行き来するように設計されている。
【００７１】
弁Ｖは、２つのストレッチ部３１，３２間に配置されたダイアフラム３３を備えている。閉鎖要素３０が阻止位置に位置するとき、閉鎖要素３０自体が、ストレッチ部３１，３２を互いに分離するために、ダイアフラム３３に接触するようになっている。閉鎖要素３０が開位置に位置するとき、閉鎖要素３０自体が、ストレッチ部３１，３２間の流体の移動を可能にするために、ダイアフラム３３から離れて位置するようになっている。
【００７２】
弁Ｖは、個別の機械的圧力要素３４をさらに備えている。圧力要素３４は、閉鎖要素３０を阻止位置に保持するために、閉鎖要素３０をストレッチ部３１，３２に向かって（詳細には、ダイアフラム３３に向かって）押圧するようになっている。有利には、機械的圧力要素３４は、バネから構成されている（詳細には、バネである）。このバネは、閉鎖要素３４が阻止位置から開位置に移った時に、圧縮され、閉鎖要素３０が開位置から阻止位置に移ったときに、伸張するようになっている。
【００７３】
弁Ｖは、流体力学的アクチュエータ３５を備えている。アクチュエータ３５は、機械的圧力要素３４を収容している中空要素３７を備えるアクチュエータノズル３６を備えている。中空要素３７は、内部チャンネル３８と、閉鎖要素３４に接触して配置された（特に、アクチュエータ孔３９を備える）開端と、を有している。
【００７４】
流体力学的アクチュエータ３５は、シール要素４０を備えている。シール要素４０は、内部チャンネル３８に沿って液密に摺動するように設計されており、機械的圧力要素と接触してアクチュエータ孔３９に対応する位置に配置されている。
【００７５】
流体力学的アクチュエータ３５は、吸引ユニット４１をさらに備えている。吸引ユニット４１は、アクチュエータノズル３６を（図３に示されている）吸引源４３に接続するダクト４２を備えている。
【００７６】
使用時に、吸引ユニット４１が作動されると、シール要素３０が後方に吸引され、シール要素４０を押圧し、このシール要素４０が、機械的圧力要素３４を圧縮するように内部チャンネル３８内で摺動する。その結果、前記負圧が、閉鎖要素３０を開位置に達するまでダイアフラム３３から離れる方に移動させることになる。吸引ユニットが停止すると、機械的圧力要素３４が、シール要素４０を外側に向かってアクチュエータ孔３９内に押圧する。その結果、シール要素４０が、閉鎖要素３０を阻止位置に達するまでダイアフラム３３に対して押圧することになる。
【００７７】
（図７にも示されている）閉鎖要素３０は、薄膜部分４４と、薄膜部分４４の周縁に沿って延在している突起４５と、を有している。換言すれば、閉鎖要素３０は、周辺縁において大きな厚みを有している。これによって、薄膜の機械的な抵抗および閉鎖要素３０とアクチュエータノズル３６（具体的には、中空要素３７）との間の液密性を改良することができる。突起４５は、環状形状を有している。
【００７８】
特定の実施形態によれば、薄膜部分４４は、実質的に円筒状の形状を有しており、この場合、突起４５は、円形リングの形状を有している。
【００７９】
いくつかの実施形態によれば、閉鎖要素３０は、単一のゴム状材料（すなわち、エラストマー）または互いに異なる多数のゴム状材料の組合せ（例えば、混合）によって作製されている。
【００８０】
有利には、エラストマーは、シリコーン、具体的には、シリコーンゴムを含んでいる（特に、シリコーン、具体的には、シリコーンゴムからなっている）。いくつかの実施形態では、シリコーンは、以下の式：
［Ｒ２ＳｉＯ］ｎ
を有している。式中、ｎは、４よりも大きい整数であり、各Ｒは、メチル、エチル、プロピルからなる群から独立して選択されるものとする。
【００８１】
いくつかの実施形態によれば、エラストマーは、一種のみのシリコーン、または代替的に、互いに異なる多数の種類のシリコーンを含んでいる（すなわち、該シリコーンから構成されている）。
【００８２】
いくつかの実施形態によれば、アクチュエータノズル３６の直下に配置されているのは、機械的圧力要素４６（特に、バネ）である。圧力要素４６は、アクチュエータノズル３６を閉鎖要素３０に対して押圧するためのものである。
【００８３】
変更形態によれば、流体力学的アクチュエータ３５は、図２４−２６に示されている構造を有している。この構造において、シール要素４０は、分解可能な２つの構成部品４０’，４０’’を備えている。
【００８４】
弁Ｖの特別の構造が先行技術を上回る著しい利点をもたらすことが、強調されるべきである。
【００８５】
第１の利点は、試料のガス汚染（特に、空気汚染）の危険性が低い点にある。この点に関して、通常、閉鎖要素３０は、ガスに対して部分的に透過性であること、およびここに提案されている解決策では、閉鎖要素３０を阻止位置に保持するために空気噴流を供給する必要がないこと（空気噴流を供給すれば、空気噴流の一部がダクトに進入することになること）に留意されたい。
【００８６】
第２の利点は、吸引源が機能しているとき（多数の部品が高液密をもたらすために嵌合されるとき）の圧力損失が低減される点にある。
【００８７】
図３の実施形態では、弁９，１１は、概略的に示されており、前述した弁Ｖと同じ構造を実質的に有している。この場合、有利には、弁９，１１は、各々、それぞれの吸引源４３に接続されている。
【００８８】
（図示されていない）いくつかの実施形態によれば、システム１は、圧力源１５，２５を備えていない。この場合、弁９および／または弁１１は、単一弁に代わって、ダクト１６および／またはダクト２６に沿って連続して配置された複数の弁を備えている。使用時に、連続して配置されたこれらの弁は、試料および／またはキャリア液を分離ユニット３に供給するために、順次開閉されるようになっている。これによって、連続して配置された弁は、蠕動ポンプと同じように作動することになる。
【００８９】
蠕動ポンプのように作動させるには、通常、連続して配置された少なくとも３つの弁が必要であることに留意されたい。
【００９０】
しかし、いくつかの実施形態によれば、弁９および／または弁１１は、各々、連続して配置された２つの弁を備えている（特に、該２つの弁からなっている）。この場合、前記弁は、蠕動ポンプのように作動させるために、弁１０および／または弁１２と組み合わせて作動されるようになっている。
【００９１】
これらの実施形態は、いくつかの利点を有している。すなわち、これらの実施形態は、煩わしい圧力源を内蔵する必要がなく、分離ユニット３に送給される流体の量を極めて正確に調整することができる。
【００９２】
図３に示されている実施形態によれば、システム１は、電気泳動システムを備えている。分離ユニット３は、電気泳動システムの少なくとも一部を備えている。いくつかの実施形態によれば、分離ユニット３は、電気泳動システム（の全体）を備えている。
【００９３】
詳細には、システム１（特に、電気泳動システム）は、光学センサ４７を備えている。制御アセンブリ２３は、光学センサ４７および分離ユニット３に接続されている。有利には、光学センサ４７は、ビデオカメラ４８を備えている。使用時に、制御アセンブリ２３は、光学センサ４７によって検出されたものに応じて、チャンバ４，５の種々の作動要素を作動させるようになっている。
【００９４】
いくつかの実施形態によれば、分離ユニット３は、オペレータ・インターフェイス４９（人／機械インターフェイス）をさらに備えている。有利には、オペレータ・インターフェイス４９は、パーソナル・コンピュータを備えている。
【００９５】
いくつかの実施形態によれば、電気泳動システムおよび／またはその操作は、特許出願番号ＷＯ００６９５６５、ＷＯ２００７０１０３６７、およびＷＯ２００７０４９１２０の少なくとも１つに記載されている。これらの特許出願の内容は、完全に記載されているようにここに完全に引用されるものとする（および参照することによって、ここに含まれるものとする）。
【００９６】
いくつかの実施形態によれば、システム１（図２）は、冷却アセンブリ５０を備えている。冷却アセンブリ５０は、分離ユニット３の少なくとも一部、特に、主チャンバ４および回収チャンバ５を冷却するように設計されている。
【００９７】
いくつかの実施形態によれば、冷却アセンブリ５０は、ペルチエアセンブリであり、冷却プレート５１を備えている。冷却プレート５１は、分離ユニット３からの熱を吸収するように設計された作用面５２と、熱を発散する放出面５３と、を有している。有利には、作用面５２は、放出面５３よりも小さい面積を有している。
【００９８】
いくつかの実施形態によれば、作用面５２と分離ユニット３との間に配置されているのは、熱伝導性ポリマー材料から作製された（それ自体が知られている）マットである。
【００９９】
冷却アセンブリ５０は、熱交換器として機能する調整回路５５に接続された伝熱プレート５４をさらに備えている。
【０１００】
回路５５は、２つのダクト５６と、２つのダクト５６間に配置されたラジエーター５７と、ラジエーター５７内を流れる調整流体を冷却するための複数のファン５８と、調整流体をダクト５６に沿っておよびラジエーター内に流すポンプ５９と、を備えている。
【０１０１】
図３に示されている実施形態によれば、システム１は、少なくとも１つ（典型的には、４つ）の機械的圧力要素６０（具体的には、バネ）を備えている。圧力要素６０は、冷却アセンブリ５０を主チャンバ４および回収チャンバ５に向かって押圧するためのものである。
【０１０２】
図１６，１８，１３，３を特に参照すると、システム１は、ダクト１６の２つのストレッチ部間およびダクト２６の２つのストレッチ部間にそれぞれ配置された２つの圧力供給ノズル６１，６１ａをさらに備えている。
【０１０３】
圧力供給ノズル６１は、中空体６２を備えている。中空体６２は、圧力装置６４に接続されており、圧力装置６４に対して反対の端に配置された圧力供給孔６３を有している。
【０１０４】
圧力装置６４は、圧力ユニット６５を備えている。圧力ユニット６５は、圧力源１５と、圧力源１５を圧力供給ノズル６１に接続するダクト（特に、ダクト１６の第１のストレッチ部）と、を備えている。
【０１０５】
圧力供給孔６３とダクト１６の第２のストレッチ部との間に配置されているのは、実質的に弾性の材料を含んでいる（特に、該材料からなっている）（図７，１６に示されている）シールリング６６である。
【０１０６】
有利には、上記の実質的に弾性の材料は、閉鎖要素３０に関して前述したように定義されるものである。
【０１０７】
いくつかの実施形態によれば、シールリング６６は、実質的に円形であり、実質的に中心の孔６７と、孔６７の範囲を定めている内側部分と、内側部分よりも大きい厚みを有する周辺部分と、を有している。
【０１０８】
いくつかの実施形態によれば、システム１は、少なくとも１つの機械的圧力要素６８（特に、バネ）をさらに備えている。圧力要素６８は、圧力供給ノズル６３をシールリング６６に向かって（具体的には、該シールリング６６に対して）押圧するように配置されている。このようにして、圧力のより小さい分散（すなわち、良好なシール）が、圧力供給ノズル６３、シールリング６６、およびダクト１６の第２のストレッチ部の間に得られることになる。機械的圧力要素６８は、生じ得る装置の平面性の欠如を補償し、加えられる接触圧力を調整する重要な機能を有している。
【０１０９】
有利な実施形態によれば、圧力供給ノズル６１ａは、圧力装置６４に接続されている圧力供給ノズル６１と同じ構造を有しており、対応する機械的圧力要素６８ａによって、各シールリング６６ａに向かって押圧されるようになっている。
【０１１０】
システム１は、（図１３に部分的に示されている）シート６９をさらに備えている。シート６９は、図示されていない周知の形式の取外し可能な収集器（例えば、試験管）を収容するように設計されており、出口８に配置されている。
【０１１１】
ダクト２７とシート６９との間に配置されているのは、シールリング７０である。シールリング７０は、ダクト２７とシート６９との間のより小さい分散（すなわち、良好な密封）を確実なものとするように設計されている。シールリング７０は、実質的に弾性の材料を含んでいる（具体的には、該材料からなっている）。
【０１１２】
有利には、上記の実質的に弾性の材料は、閉鎖要素３０に関して前述したように定義されるものである。
【０１１３】
いくつかの実施形態によれば、シールリング７０は、実質的に円形であり、実質的に中心の孔７１と、孔７１の範囲を定めている内側部分と、内側部分よりも大きい厚みを有する周辺部分と、を有している。
【０１１４】
いくつかの実施形態によれば、システム１は、２つの分離可能な部分、すなわち、実質的に固定された装置７２（該装置７２の一実施形態が図１０，１１に部分的に示されている）と、デバイス７３（該デバイス７３の一実施形態の平面図が図２１に示されており、分解図が図４に示されている）と、を備えている。
【０１１５】
本発明の特定の態様によれば、試料から少なくとも所定の一種の粒子Ｃ１を分離するためのマイクロ流体システム１であって、第１の入口２であって、使用時に、試料が該第１の入口２を通ってシステム１内に導かれるようになっている、第１の入口２と、主チャンバ４および回収チャンバ５を備えている分離ユニット３であって、所定種類の粒子Ｃ１の少なくとも一部を試料のさらなる粒子Ｃ２に対して実質的に選択的に主チャンバ４から回収チャンバ５に移動させるように設計されている、分離ユニット３と、主チャンバ４に接続された第１の出口７と、回収チャンバ５に接続された第２の出口８であって、使用時に、回収チャンバ５に収集された所定種類の粒子Ｃ１の少なくとも一部が該第２の出口８を通ってシステム１から流出するようになっている、第２の出口８と、を備えている、マイクロ流体システムにおいて、主チャンバ４の上流に配置された第１の弁９と、主チャンバ４と第１の出口７との間に配置された第２の弁１０と、回収チャンバ５の上流に配置された第３の弁１１と、回収チャンバ５と第２の出口８との間に配置された第４の弁１２と、を備えていることを特徴とするマイクロ流体システムが提供されている。
【０１１６】
いくつかの実施形態によれば、本システムは、本発明の第１の態様および第２の態様に従って前述した特性の１つまたは複数を備えている。
【０１１７】
使用時に、（前述した本発明の態様の１つまたは複数による）システム１は、以下に述べる方法に従って、用いられるようになっている。
【０１１８】
［方法］
本発明の第３の態様によれば、マイクロ流体システムによって、試料から少なくとも所定の一種の粒子Ｃ１を分離するための方法が提供されている。マイクロ流体システムは、システム１またはシステム１と同様のマイクロ流体システムである。有利には、マイクロ流体システムは、本発明の先行する態様の１つによる前述のシステム１である。いずれにしても、方法の説明を簡素化するために、マイクロ流体システムおよびその部品は、システム１および同様または同一の部品を識別するために用いられた参照番号によって識別することにする。
【０１１９】
本方法は、試料をシステム１の入口２を通してシステム１内に導くステップと、分離ステップであって、該ステップ中に、所定種類の粒子Ｃ１の少なくとも一部がシステム１の分離ユニット３内においてさらなる粒子Ｃ２から分離されるようになっている、分離ステップと、分離ステップに少なくとも部分的に先立って行われる第１の供給ステップであって、該ステップ中に、試料の少なくとも一部が分離ユニット３に送給されるようになっている、第１の供給ステップ（該第１の供給ステップは、図１９ｅ−１９ｉに概略的に示されている）と、分離ステップに少なくとも部分的に続く回収ステップであって、該ステップ中に、実質的に選択的に分離された所定種類の粒子Ｃ１の少なくとも一部が分離ユニット３からシステム１の出口８内に流出するようになっている、回収ステップ（該回収ステップは、図２０ｃ，２０ｄに概略的に示されている）と、を含んでいる。
【０１２０】
いくつかの実施形態によれば、システム１は、入口２と分離ユニット３との間に配置された弁９と、出口８と分離ユニット３との間に配置された弁１２と、を備えている。分離ステップ中に、弁９，１２は、閉状態に保持されている。
【０１２１】
詳細には、システム１は、システム１の外側に開いている各開口（例えば、入口および／または出口）と分離ユニット３との間に配置された弁を備えている。分離ステップ中に、これらの弁の各々は、閉状態に保持されている。
【０１２２】
いくつかの実施形態によれば、回収ステップは、分離ステップに完全に続いて行われるようになっている。
【０１２３】
いくつかの実施形態によれば、分離ステップは、第１の供給ステップに完全に続いて行われるようになっている。
【０１２４】
いくつかの実施形態によれば、分離ステップ中に、所定種類の粒子Ｃ１は、試料のさらなる粒子Ｃ２に対して実質的に選択的に分離ユニット３の主チャンバ４から回収チャンバ５に移動するようになっている（分離ステップが終了した状態が、図２０ａに示されている）。
【０１２５】
いくつかの実施形態によれば、図２に記載されているシステムを用いる分離ステップ中に、多数の所定種類の粒子Ｃ１が、主チャンバ４から回収チャンバ５の特定の領域（該回収チャンバの残りからの流体抵抗を介して隔離されている領域）に移動するようになっている。
【０１２６】
システム１の出口７および出口８は、それぞれ、主チャンバ４および回収チャンバ５に接続されている。
【０１２７】
有利には、システム１は、主チャンバ４の上流に配置された弁９と、主チャンバ４の下流に配置された弁１０と、回収チャンバ５の上流に配置された弁１１と、回収チャンバ５の下流に配置された弁１２と、を備えている。分離ステップ中に、詳細には、主チャンバ４および回収チャンバ５を外側に対して隔離するために、弁９，１０，１１，１２は、閉じられている。
【０１２８】
本方法は、分離ステップに少なくとも部分的に先立って行われる第１の供給ステップであって、該ステップ中に、試料の少なくとも一部が主チャンバ４内に送給されるようになっている、第１の供給ステップ（該第１の供給ステップは、図１９ｅ−１９ｉに概略的に示されている）と、分離ステップに少なくとも部分的に先立って行われる第２の供給ステップであって、該ステップ中に、キャリア液が回収チャンバ４に送給されるようになっている、第２の供給ステップ（該第２の供給ステップは、図１９ａ−１９ｄに示されている）と、をさらに含んでいる。
【０１２９】
本方法は、回収ステップであって、該ステップ中に、キャリア液が、所定種類の粒子Ｃ１の少なくとも一部と一緒に、回収チャンバ５から出口８内に流出するようになっている、回収ステップ（該回収ステップは、図２０ｃ，２０ｄに概略的に示されている）をさらに含んでいる。
【０１３０】
いくつかの実施形態によれば、導入ステップ中、試料の少なくとも一部が、システム１のリザーバ１３内に導かれるようになっている。
【０１３１】
有利には、分離ステップは、電気泳動によって行われるようになっている。少なくとも分離ステップ中、分離ユニット３は、冷却されている。
【０１３２】
いくつかの実施形態によれば、第１の供給ステップおよび第２の供給ステップの少なくとも１つまたは両方が、分離ステップに完全に先立って行われるようになっている。
【０１３３】
いくつかの実施形態によれば、第２の供給ステップは、第１の供給ステップに少なくとも部分的に先立って行われるようになっている。有利には、第２の供給ステップは、第１の供給ステップに完全に先立って行われるようになっている。
【０１３４】
いくつかの実施形態によれば、試料を主チャンバに供給するための第１の圧力が設定されるようになっている。
【０１３５】
詳細には、第１の圧力は、試料をリザーバ１３から主チャンバ４に向かって押圧するためのものである。
【０１３６】
いくつかの実施形態によれば、第１の圧力は、第１の供給ステップの少なくとも前または第１の供給ステップ中に加えられるようになっている。
【０１３７】
有利には、回収ステップ中、所定種類の粒子Ｃ１の少なくとも一部に振動、具体的には、周期的に変動する圧力が加えられるようになっている（振動の周波数は、２Ｈｚから８０Ｈｚの間、有利には、５Ｈｚから４０Ｈｚの間である）。有利には、第１の供給ステップ中、システム１の主チャンバ４の上流に配置された弁９、およびシステム１の主チャンバ４と出口７との間に配置された弁１０が開けられている。詳細には、第１の供給ステップ中、試料が弁９を通過している。
【０１３８】
いくつかの実施形態によれば、第１の供給ステップ中に、試料に振動、具体的には、周期的に変動する圧力が加えられるようになっている（振動の周波数は、２Ｈｚから８０Ｈｚの間、有利には、５Ｈｚから４０Ｈｚの間である）。
【０１３９】
特定の実施形態によれば、システム１は、入口２を主チャンバ４に接続するためのダクト１６と、主チャンバ４と出口７との間に配置されたダクト２０であって、ダクト１６の断面よりも小さい、具体的には、少なくとも１００μｍだけ小さい断面を有している、ダクト２０を備えており、第１の供給ステップ中、試料の圧力が、検出され、検出された圧力に応じて、特に、所定値よりも高い圧力が検出されたとき、試料の供給が阻止されるようになっている。
【０１４０】
さらに他の実施形態によれば、圧力の検出に加えてまたは圧力の検出の代替として、以下の検出、すなわち、チャンバ４とダクト２０との間の試料の通過の光学的検出と、チャンバ４とダクト２０との間の接続領域における試料の通過の開始に起因する電気伝導度の変動の検出と、チャンバ４とダクト２０との間の接続領域における試料の通過の開始に起因する誘電率の変動の検出と、チャンバ４とダクト２０との間の接続領域における試料の通過の開始に起因する熱抵抗の変動の検出と、チャンバ４とダクト２０との間の接続領域における試料の通過の開始に起因する熱容量の変動の検出と、の１つまたは複数が行われるようになっている。
【０１４１】
前述したいずれの場合においても、試料がダクト２０に進入し始めたことが検知されたとき、試料の流入が阻止されるようになっている。
【０１４２】
いくつかの実施形態によれば、第２の供給ステップ中、システム１の回収チャンバ５の上流に配置された弁１１および回収チャンバ５と出口８との間に配置された弁１２は、開けられている。
【０１４３】
有利には、キャリア液を回収チャンバ５に供給するための第２の圧力が設定されるようになっている。詳細には、第２の圧力は、キャリア液をシステム１のリザーバ１４から回収チャンバ５に向かって押圧するためのものである。第２の供給ステップ中、キャリア液は、弁１１を通過するようになっている。
【０１４４】
いくつかの実施形態によれば、第２の圧力は、第２の供給ステップの少なくとも前および第２の供給ステップ中に加えられるようになっている。
【０１４５】
回収ステップ中、弁１１，１２は、開けられている。
【０１４６】
いくつかの実施形態によれば、本方法は、分離ステップに少なくとも部分的に続いて、かつ回収ステップに少なくとも部分的に先立って行われる放出ステップであって、該放出ステップ中に、試料のさらなる粒子Ｃ２の少なくとも一部が主チャンバ４から出口７内に流出するようになっている、放出ステップを備えている。該放出ステップは、図２０ｂ，２０ｃに概略的に示されている。有利には、放出ステップは、完全に分離ステップの後および／または完全に回収ステップの前に行われるようになっている。
【０１４７】
放出ステップ中、弁１０，１１は、キャリア液を主チャンバ４に供給するために、開けられている。
【０１４８】
放出ステップを実行することによって、さらなる粒子Ｃ２の一部が回収チャンバ５を通るキャリア液の流れによって主チャンバ４から引き戻され、回収ステップ中に出口８を通過する危険性を低減させることができる。
【０１４９】
実際には、いくつかの実施形態によれば、回収チャンバ５をキャリア液によって満たすために、弁１１，１２が開けられる。この時点で、主チャンバ４を試料によって満たすために、弁９，１０が開けられる。次いで、弁９，１０，１１，１２が閉じられ、所定種類の粒子Ｃ１が実質的に選択的に主チャンバ４から回収チャンバ５に移動する。この時点で、さらなる粒子Ｃ２の少なくとも一部をチャンバ４から流出させるために、弁１０，１１が開けられることになる。
【０１５０】
いくつかの実施形態によれば、所定種類の粒子Ｃ１は、放出ステップ中に、回収チャンバ５内に少なくとも部分的にとどまるように、回収チャンバ５内に位置している。詳細には、所定種類の粒子Ｃ１は、主チャンバ４と回収チャンバ５とを接続させるためのチャンネル６に対して横方向にずれて位置している（すなわち、該チャンネルの前方に位置していない）。具体的には、粒子Ｃ２は、チャンネル６と出口８に接続されているダクト２６との間に位置している。
【０１５１】
いくつかの実施形態によれば、システム１は、弁２９（図２，２７）を備えている。弁２９は、回収チャンバと出口７（または図示されていないさらなる出口）との間に配置されている。チャンバ５は、ダクト２７（従って、弁１２）に流体力学的に接続されている第１の領域５’と、ダクト２８（従って、弁２９）に流体力学的に接続されている第２の領域５’’と、（弁１１に接続されている）ダクト２６の端末ストレッチ部を画定しているさらなる領域と、を備えている。  
【０１５２】
第２の充填ステップ中、弁１２，１１は、弁１２，１１に接続されている回収チャンバ５の第１の領域５’を満たすために、開けられるようになっており、弁１１，２９は、弁１１，２９に接続されている回収チャンバ５の第２の領域５’’を満たすために、開けられるようになっている。
【０１５３】
特定の実施形態によれば、弁１２，１１，２９は、第１の領域５’を満たすために、開けられるようになっている（図２７ｂ，２７ｃ）。この時点で、弁１２が閉じられ、第２の領域５’’が満たされるようになっている（図２７ｄ）。
【０１５４】
分離ステップ中、所定種類の粒子Ｃ１の少なくとも一部および少なくとも第２の所定の一種の粒子Ｃ３の少なくとも一部が、回収チャンバ５（特に、第２の領域５’’）内に移動するようになっている（図２８ａ，２８ｂ）。回収ステップは、第１の回収サブステップを備えており、該サブステップ中、所定種類の粒子Ｃ１の少なくとも一部が、実質的に選択的に第１の領域５’内に運ばれ（図２８ｄ）、続いて、所定種類の粒子Ｃ１の少なくとも一部が、さらなるキャリア液を回収チャンバ５に供給することによって、第１の領域５’から出口８内に流出することになる（図２８ｅ）。
【０１５５】
回収ステップは、第２の回収サブステップを備えており、該サブステップ中、粒子Ｃ３の少なくとも一部が、さらなるキャリア液を回収チャンバ５に供給することによって、回収チャンンバ５から出口８内に流出することになる。
【０１５６】
有利には、第２の回収サブステップ中、粒子Ｃ３の少なくとも一部が、第１の領域５’内に運ばれ（図２８ｅ，２８ｆ）、続いて、粒子Ｃ３の少なくとも一部が、第１の領域５’からから出口８内に流出するようになっている（図２８ｇ）。
【０１５７】
いくつかの実施形態によれば、本方法は、洗浄ステップを備えており、該ステップ中、主チャンバ４内に存在しているさらなる粒子Ｃ２は、チャンネル６から除去されるようになっている。洗浄ステップ中、弁１１，１０は、開けられている（図２８ｃ）。有利には、洗浄ステップ中、弁２９は、閉じられており、粒子Ｃ１，Ｃ３は、第２の領域５’’内に位置している。有利には、洗浄ステップ中、弁１２は、閉じられている。有利には、洗浄ステップ中、弁９は、閉じられている。
【０１５８】
有利には、洗浄ステップは、回収ステップに少なくとも部分的に（特に、完全に）続いて、かつ回収ステップに少なくとも部分的に（特に、完全に）先立って、行われるようになっている。
【０１５９】
いくつかの実施形態によれば、回収ステップ中、出口８から流出するキャリア液の第１の滴が検出されるようになっており、該第１の滴が検出されたとき、回収チャンバ５からの流出が阻止されるようになっている。
【０１６０】
いくつかの実施形態によれば、多数の回収ステップが引き続き行われるようになっており、この場合、少なくとも一滴が検出されるたびに、出口８の近傍に配置されている容器を取り換えることになる。
【０１６１】
いくつかの実施形態によれば、二酸化炭素がシステム１内に送給されるようになっている。これによって、システム１内の酸素の存在が低減または排除されることになる。システム内の酸素の存在は、本方法の種々のステップ中に、泡を生じさせることがある。
【０１６２】
代替的実施形態によれば、キャリア液（および／または可能であれば、試料）は、システム１（または分離ユニット３）内に導かれる前に、超音波によってガスを除く（脱ガスする）ようになっている。
【０１６３】
有利には、試料およびキャリア液は、２０℃よりも高い、特に２５℃よりも高い温度で用いられるようになっている。これによっても、泡が生じる危険性が低減されることになる。
【０１６４】
いくつかの実施形態によれば、本方法は、本発明の第１の態様によって規定されているシステム１を用いて、適用されるようになっている。
【０１６５】
いくつかの実施形態によれば、システム１は、２つの分離可能な部分、すなわち、実質的に固定された装置７２（該装置７２の実施形態は、図１０，１１に示されている）と、デバイス７３（該デバイス７３の実施形態は、図２１の平面図および図４の分解図に示されている）と、を備えている。デバイス７３は、有利には、使い捨て式であり、装置７２に接続されるように設計されている。
【０１６６】
いくつかの実施形態によれば、試料の一部しか主チャンバ４内に運ばれないようになっている。実際には、試料に対して、複数の連続的な部分的分離がなされるようになっている。
【０１６７】
［マイクロ流体デバイス］
本発明の第４の態様によれば、試料から少なくとも所定の一種の粒子Ｃ１を分離するためのデバイス７３が提供されている。デバイス７３は、入口２であって、使用時に、試料が該入口２を通ってデバイス７３内に導かれるようになっている、入口２と、主チャンバ４および回収チャンバ５を備えている分離ユニット３と、を備えている。分離チャンバ３（特に、主チャンバ４）は、入口２に接続されている。詳細には、分離ユニット３は、電気泳動システムの一部を備えている。
【０１６８】
分離ユニット３は、使用時に、デバイス７３が装置７２内に取り付けられるとき、所定種類の粒子Ｃ１の少なくとも一部を試料のさらなる粒子Ｃ２に対して実質的に選択的に主チャンバ４から回収チャンバ５に移動させるように、設計されている。いくつかの実施形態によれば、デバイス７３は、主チャンバ４に接続された出口７と、回収チャンバ５に接続された出口８と、を備えている。
【０１６９】
使用時に、出口８を通って、回収チャンバ５内に収集された所定種類の粒子Ｃ１の少なくとも一部が、デバイス７３から流出されるようになっている。
【０１７０】
出口７は、試料を主チャンバ内に自由に流入させることを可能にするように、従って、通気口として機能するように、設計されている。
【０１７１】
デバイス７３は、（特に、主チャンバ４と入口２との間において）主チャンバ４の上流に配置された弁部分７４と、主チャンバ４と出口７との間に配置された弁部分７５と、をさらに備えている。
【０１７２】
弁部分７４は、弁９の一部を構成するように設計されている。弁７４は、弁１０の一部を構成するように設計されている。
【０１７３】
また、デバイスは、回収チャンバ５に接続された弁部分７６と、回収チャンバ５と出口８との間に配置された弁部分７７と、を備えている。
【０１７４】
詳細には、回収チャンバ５は、一方の側の主チャンバ４と他の側の第３および第４の弁部分７６，７７との間に配置されており、主チャンバ４は、一方の側の回収チャンバ５と他の側の第１および第２の弁部分７４，７５との間に配置されている。
【０１７５】
弁部分７５は、弁１１の一部を構成するように設計されており、弁部分７６は、弁１２の一部を構成するように設計されている。
【０１７６】
いくつかの実施形態によれば、弁部分７４，７５，７６，７７の少なくとも一部は、閉鎖要素３０を備えている。閉鎖要素３０は、閉鎖要素３０がデバイス７３の各チャンネルの２つのストレッチ部を分離するように位置する阻止位置と、閉鎖要素３０が該２つのストレッチ部を互いに接続させるように位置する開位置と、の間で行き来するように設計されている。有利には、各弁部分７４，７５，７６，７７は、それぞれの閉鎖要素３０を備えている。
【０１７７】
有利には、閉鎖要素３０は、システム１に関して前述したように特徴付けられている。詳細には、閉鎖要素３０は、薄膜部分を有している。該薄膜部分は、具体的には、実質的に弾性の材料から作製されている。
【０１７８】
いくつかの実施形態によれば、弁部分７４，７５，７６，７７の少なくとも１つ、特に各々は、デバイス７３のダクトの２つのストレッチ部間に配置されるダイアフラム３３を備えている。阻止位置では、閉鎖要素３０は、ダイアフラム３３に接触しており、開位置では、閉鎖要素３０は、ダイアフラム３３から離れて位置している。
【０１７９】
弁部分７４，７５，７６，７７の少なくとも１つ、特に各々は、デバイス７３のチャンネルに少なくとも１つの孔を備えている。詳細には、各閉鎖要素３０は、対応するチャンネルの２つの個別の孔に対応する箇所に配置されている。前記孔は、それぞれのダイアフラム３３によって互いに分離している。これらの孔の各々は、０．１から０．７ｍｍの範囲内の直径を有している。特定の実施形態によれば、各孔は、略０．５ｍｍの直径を有している。
【０１８０】
いくつかの実施形態によれば、各弁部分７４，７５，７６，７７は、流体力学的アクチュエータ３５を除いた前述の弁Ｖの一部に対応している。
【０１８１】
閉鎖要素３０の少なくとも１つは、デバイス７３の外部のアクチュエータによって作動可能になっている。詳細には、外部アクチュエータは、装置７２の一部を構成している。さらに具体的には、閉鎖要素３０の各々は、デバイス７３の外部のそれぞれのアクチュエータによって作動可能になっている。詳細には、これらの外部アクチュエータは、装置７２の一部を構成している。
【０１８２】
閉鎖要素３０の少なくとも１つ、特に、各々は、少なくとも部分的に露出しており、外方を向いて配置されている。これは、閉鎖要素３０と各外部アクチュエータとの連結およびその相互作用にとって、より便利である。
【０１８３】
いくつかの実施形態によれば、デバイス７３は、入口２と弁部分７４との間に配置されたリザーバ１３であって、入口２を通って導かれた試料を収集するように設計されているリザーバ１３と、リザーバ１３を主チャンバ４に接続しているチャンネル７８であって、該チャンネル７８に沿って、弁部分７４が配置されているチャンネル７８と、をさらに備えている。詳細には、チャンネル７８は、ダクト１６の一部を構成している。
【０１８４】
有利には、チャンネル７８は、０．９ｍｍから５０μｍの範囲内の等価直径の断面を有している。特に、チャンネル７８は、０．７ｍｍから０．１ｍｍの範囲内の幅および１．００ｍｍから０．１５ｍｍの範囲内の深さを有している。特定の実施形態によれば、チャンネル７８は、略０．５ｍｍの幅および略０．２５ｍｍから略０．５ｍｍの深さを有している。チャンネル７８の特定の経路は、空気がデバイス７３に進入する危険の低減に寄与するようになっている。
【０１８５】
有利には、リザーバ１３は、５μＬから１００μＬの容積、特に、３ｍｍから０．８ｍｍの範囲内の幅および１．５ｍｍから０．２５ｍｍの範囲内の深さを有している。
【０１８６】
特定の実施形態によれば、リザーバ１３は、略３５μＬの容積、略１ｍｍの幅、および略０．５ｍｍの深さを有している。
【０１８７】
有利には、弁部分７４は、リザーバ１３と主チャンバ４との間に配置されている。
【０１８８】
いくつかの実施形態によれば、デバイス７３は、供給孔７９を備えている。詳細には、供給孔７９は、入口２に配置されている。リザーバ１３は、供給孔７９と主チャンバ４との間に配置されている。チャンネル７８が、供給孔７９を主チャンバ４に接続している。
【０１８９】
いくつかの実施形態によれば、デバイス７３は、供給孔７９の外側を包囲しているシールリング６６を備えている。
【０１９０】
有利には、シールリング６６は、システム１に関して前述したように特徴付けられており、具体的には、それぞれの圧力供給ノズル６１に連結されるように設計されている。
【０１９１】
いくつかの実施形態によれば、デバイス７３は、（ダクト２０の一部に対応する）チャンネル８０を備えている。チャンネル８０は、主チャンバ４と出口７との間に配置されており、ストレッチ部２０’を備えている。ストレッチ部２０’は、チャンネル７８の断面よりも小さい、具体的には、少なくとも１００μｍだけ小さい断面を有している（ストレッチ部２０’は、図９に明瞭に示されている）。
【０１９２】
有利には、ストレッチ部２０’は、１５０μｍ未満の幅、１１０μｍ未満の深さ、および２ｍｍを超える長さを有している。有利には、ストレッチ部２０’は、１００μｍを超える幅、３０μｍを超える深さ、および特に６ｍｍ未満の長さを有している。
【０１９３】
いくつかの実施形態によれば、デバイス７３は、キャリア液を収容するように設計されたリザーバ１４を備えている。
【０１９４】
有利には、リザーバ１４は、１０ｍＬから１００μＬの範囲内の容積、５ｍｍから０．８ｍｍの範囲内の幅、および１．５ｍｍから０．２５ｍｍの範囲内の深さを有している。
【０１９５】
特定の実施形態によれば、リザーバ１４は、略１５０μＬ、略１ｍｍの幅、および略０．５ｍｍの深さを有している。
【０１９６】
デバイス７３は、リザーバ１４を回収チャンバ５に接続しているチャンネル８１を備えており、該チャンネル８１に沿って、弁部分７６が配置されている。
【０１９７】
特に、チャンネル８１は、ダクト２６の一部を構成している。
【０１９８】
有利には、チャンネル８１は、０．９ｍｍから２００μｍの範囲内の等価直径の断面を有している。詳細には、チャンネル８１は、０．７ｍｍから０．２５ｍｍの範囲内の幅および０．７ｍｍから０．１５ｍｍの範囲内の深さを有している。特定の実施形態によれば、チャンネル８１は、略０．５ｍｍの幅および略０．２５ｍｍの深さを有している。
【０１９９】
チャンネル８１の特定の経路は、空気がデバイス７３に進入する危険の低減に寄与するようになっている。
【０２００】
いくつかの実施形態によれば、弁部分７６は、リザーバ１４と回収チャンバ５との間に配置されている。いくつかの実施形態によれば、デバイス７３は、供給孔８２を備えている。リザーバ１４は、供給孔８２と回収チャンバ５との間に配置されており、チャンネル８１が供給孔８２を回収チャンバ５に接続している。
【０２０１】
いくつかの実施形態によれば、デバイス７３は、供給孔８２の外側を包囲しているシールリング６６ａを備えている。
【０２０２】
有利には、シールリング６６ａは、システム１に関して前述したように特徴付けられており、詳細には、各圧力供給ノズル６１ａに連結されるように設計されている。
【０２０３】
デバイス７３は、デバイス７３を装置７２に電気的に接続するための（図３に示されている）電気コネクタ８３を備えている。有利には、電気コネクタ８３は、少なくとも１つの電気回路、特に、接続電気印刷回路（ＰＣＢ）を備えている（特に、該回路（ＰＣＢ）からなっている）。
【０２０４】
図３１に示されている実施形態によれば、デバイス７３は、弁２９の一部を構成するように設計されたさらなる弁部分２９’を備えている。この場合、弁部分２９’は、回収チャンバ５とデバイス７３の出口（すなわち、システム１の出口）との間に配置されている。前記出口は、前述した出口７，８に対してさらなる出口であってもよいし、出口７または出口８と同じであってもよい（図３１に示されている実施形態では、前記出口は、出口７に対応している）。
【０２０５】
その結果、いくつかの実施形態によれば、デバイス７３は、さらなる出口を備えるようになっており、弁部分２９’は、回収チャンバと該さらなる出口との間に配置されており、任意選択的に、該さらなる出口は、出口７に対応している。
【０２０６】
デバイス７３は、ダクト２８をさらに備えている。ダクト２８は、チャンバ５（特に、第２の領域５’’）をさらなる出口に流体力学的に接続している。弁部分２９’は、ダクト２８に対応する位置に配置されている。
【０２０７】
これらの場合、チャンバ５は、ダクト２７（従って、弁部分７７）に流体力学的に接続された第１の領域５’と、ダクト２８（従って、弁部分２９’）に流体力学的に接続された第２の領域５’’と、（弁部分７６に接続された）チャンネル８１（すなわち、ダクト２６）の端末ストレッチ部を画定しているさらなる領域と、を備えている。
【０２０８】
ダクト２８は、０．９ｍｍから２００μｍの範囲内の等価直径の断面を有している。特に、ダクト２８は、０．７ｍｍから０．２５ｍｍの範囲内の幅および０．７ｍｍから０．１５ｍｍの範囲内の深さを有している。特定の実施形態によれば、ダクト２８は、略０．５ｍｍの幅および略０．２５ｍｍの深さを有している。
【０２０９】
図３１のデバイス７３は、図２に示されているシステム１の一部を構成しており、図２７，２８に示されているように機能するように、設計されている。
【０２１０】
［装置］
本発明の第５の態様によれば、試料から少なくとも所定の一種の粒子Ｃ２を分離するための装置７２が提供されている。
【０２１１】
装置７２は、試料から所定種類の粒子Ｃ１を分離するためのマイクロ流体デバイス（特に、デバイス７３）を収容するための（図１１では開けられており、図１０では閉じられている）シート８４と、装置７２をマイクロ流体デバイスに電気的に接続するための（図３，１３に示されている）電気コネクタ８５と、電気コネクタ８５に接続された制御アセンブリ２３と、を備えている。いくつかの実施形態によれば、装置７２は、電気泳動システムの一部を備えている。
【０２１２】
いくつかの実施形態によれば、装置７２は、ハッチ８６を備えている。図１１では、持上げ位置にあるハッチが示されており、図１０では、押下げ位置にあるハッチ８６が示されている。ハッチ８６の底面が、図１２に示されている。
【０２１３】
装置７２は、少なくとも４つの流体力学的アクチュエータ３５を備えている。各アクチュエータ３５は、それぞれの弁の一部を形成するように設計されており、各アクチュエータ孔３９を有するそれぞれのアクチュエータノズル３６（特に、図１３参照）と、少なくとも２つの圧力供給ノズル６１，６１ａと、を備えている。これらの圧力供給ノズル６１，６１ａは、それぞれ、圧力供給孔６３，６３ａを有している。
【０２１４】
各流体力学的アクチュエータ３５は、装置７２の外部、詳細には、前記マイクロ流体デバイス７３に属しているそれぞれの閉鎖要素３０を移動させるように設計されている。詳細には、各流体力学的アクチュエータ３５は、それぞれの閉鎖要素３０と連結するように（接触するように）設計されている。
【０２１５】
装置は、圧力供給孔６３，６３ａにおける圧力を特定するために、圧力供給ノズル６１に接続された少なくとも圧力装置６４と、アクチュエータノズル３６（図３）に接続された少なくとも１つの圧力装置８７であって、アクチュエータ孔の少なくとも１つ（図１４，１５）に対応する領域に吸引をもたらすように設計されている、少なくとも１つの圧力装置８７と、を備えている。
【０２１６】
ハッチ８６が持上げ位置にあるとき、シート８４が開いており、外側からアクセス可能である（図１１）。詳細には、ハッチ８６が持上げ位置にあるとき、マイクロ流体デバイス（特に、デバイス７３）がハッチ８６の下方に挿入可能である。使用時に、いったんマイクロ流体デバイスがハッチ８６の下方に挿入されたなら、ハッチ８６が押下げられ（図１０）、マイクロ流体デバイスが、シート８４内に組み入れられる。これは、一端にカム輪郭部８９を有するハンドル８８を回転させることによって、行われる。カム輪郭部８９は、回転によって、（図示されていない周知の）バネの抵抗を上回ってハッチ８６を下方に押圧し、ハッチ８６を持上げ位置に保持する傾向にある。
【０２１７】
図１２に示されているように、ハッチ８６は、弁９，１０，１１，１２を点検するための孔８６ａおよびチャンバ４，５を肉眼によって観察可能とするための開口８６ｂを備えている。
【０２１８】
いくつかの実施形態によれば、装置７２は、圧力装置６４，８７を備える圧力アセンブリ９０（図３）を備えている。圧力アセンブリ９０は、少なくとも１つのポンプを備えている。
【０２１９】
いくつかの実施形態によれば、圧力装置６４は、圧力ユニット６５および少なくとも１つの圧力ユニット６５ａを備えている。これらの圧力ユニット６５，６５ａは、それぞれの圧力供給ノズル６１，６１ａに接続されている。圧力ユニット６５，６５ａは、個別に作動可能であり、各々、対応する圧力供給孔６３，６３ａにおける圧力（特に、該孔を通る空気噴流）を特定するように設計されている。
【０２２０】
いくつかの実施形態によれば、圧力装置６４は、少なくとも１つの圧力源１５（および／または２５）を備えている（図１，２，３）。圧力ユニット６５および圧力ユニット６５ａの少なくとも１つは、圧力源１５および／または２５をそれぞれの圧力供給ノズル６１および／または６１ａに接続する対応するダクト（詳細には、圧力ユニットの場合、ダクト１６の第１のストレッチ部、圧力ユニット６５ａの場合、ダクト２６の第１のストレッチ部）を備えている。
【０２２１】
装置７２は、前述のダクトに沿って圧力を検出するための圧力センサ２１と、各圧力供給ノズル６１および／または６１ａへの圧力の伝達を阻止するように設計された阻止装置２２と、を備えている。制御アセンブリ２３は、検出された圧力に応じて阻止装置２２を作動するために、圧力センサ２１および阻止装置２２に接続されている。
【０２２２】
いくつかの実施形態によれば、圧力センサ２１は、圧力装置６４に対応する位置に配置されている。
【０２２３】
有利には、阻止装置２２は、安全弁を備えている。該安全弁は、詳細には、前述のダクト（ダクト１６の第１のストレッチ部および／またはダクト２６の第１のストレッチ部）に沿って配置されている。
【０２２４】
図１，２に示されている実施形態によれば、阻止装置２２は、ダクト１６の第１のストレッチ部に沿って配置されており、圧力センサ２１は、ダクト１６内の圧力を検出するように設計されている。
【０２２５】
（図示されていない）いくつかの実施形態によれば、装置７２は、ダクト２６の圧力を検出するための圧力センサと、阻止装置と、を備えている。これらの圧力センサおよび阻止装置は、圧力センサ２１および阻止装置２２に関して前述したのと同じように特徴付けされており、かつ配置されている。
【０２２６】
いくつかの実施形態によれば、装置７２は、少なくとも１つの振動装置１７および／または１７ａを備えている。該振動装置は、前述のダクト（ダクト１６の第１のストレッチ部および／またはダクト２６の第１のストレッチ部）に沿って配置されており、それぞれの圧力供給孔６３および／または６３ａ（図３）における圧力源１５および／または２５によって特定された圧力の周期的な変動を生じさせるように設計されている。
【０２２７】
有利には、振動装置１７および／または１７ａは、ダイアフラムポンプを備えている。
【０２２８】
有利には、装置７２は、２つの振動装置１７，１７ａを備えている。振動装置１７，１７ａは、それぞれ、ダクト１６の第１のストレッチ部およびダクト２６の第１のストレッチ部に沿って配置されている。振動装置１７，１７ａは、それぞれ、圧力供給孔６３，６３ａにおける対応する圧力源１５，２５によって特定された圧力の周期的な変動を生じさせるように設計されている。
【０２２９】
いくつかの実施形態によれば、圧力装置８７は、少なくとも４つの吸引ユニット４１を備えている。吸引ユニット４１は、各々、それぞれのアクチュエータノズル３６に接続されている。吸引ユニット４１は、別々に作動可能であり、各々、対応するアクチュエータ孔３９において少なくとも１つの吸引操作を行うように設計されている。
【０２３０】
有利には、圧力装置８７は、少なくとも１つの吸引源４３を備えている。吸引ユニット４１の少なくとも１つは、吸引源４３をそれぞれのアクチュエータノズル３６に接続する各ダクト４２と、前記各アクチュエータノズル３６への吸引の伝達を阻止するように設計された（図示されていない周知の）阻止装置と、を備えている。
【０２３１】
有利には、前述の阻止装置は、ダクト４２に沿って配置された弁と、圧力源４３の作動装置であって、圧力源４３を作動または停止するように設計されている、作動装置と、から成る群として選択される要素を備えている。
【０２３２】
いくつかの実施形態によれば、アクチュエータノズル３６の少なくとも１つは、対応する機械的圧力要素３４を備えている（図１４、１５）。圧力要素３４は、圧力を各アクチュエータ孔３９を介して外側に向かって加えるように設計されている。
【０２３３】
有利には、機械的圧力要素３４は、バネを備えており、該バネの外端に、シール要素４０が配置されている。
【０２３４】
有利には、アクチュエータノズル３６の１つまたは複数は、中空要素３７を備えている。中空要素３７は、機械的圧力要素３４を収容するためおよび各吸引ユニット４１を対応するアクチュエータ孔３９に接続するためのものである。中空要素３７は、対応するアクチュエータ孔３９を有する一端を備えている。
【０２３５】
いくつかの実施形態によれば、装置７２は、アクチュエータノズル３６の１つまたは複数をマイクロ流体デバイスに向かって押圧するための少なくとも１つの機械的圧力要素４６を備えている。有利には、機械的圧力要素４６は、バネを備えている（特に、バネから構成されている）。
【０２３６】
有利には、装置７２は、複数の機械的圧力要素４６を備えている。これらの圧力要素４６は、それぞれ、アクチュエータノズル３６をマイクロ流体デバイスに押圧するようになっている。詳細には、各機械的圧力要素４６は、それぞれのアクチュエータノズルを対応する閉鎖要素３０に向かって（対して）押圧するように設計されている。
【０２３７】
いくつかの実施形態によれば、流体力学的アクチュエータ３５の１つまたは複数（特に、全て）が、システム１に対して前述したように特徴付けられている。
【０２３８】
いくつかの実施形態によれば、装置７２は、少なくとも１つの圧力供給ノズル６１および／または６１ａをマイクロ流体デバイスに向かって（特に、対して）押圧するための少なくとも１つの機械的圧力要素６８および／または６８ａを備えている。
【０２３９】
いくつかの実施形態によれば、装置７２は、マイクロ流体デバイスの少なくとも一部を冷却するように設計された冷却アセンブリ５０を備えている。詳細には、熱が吸収される対象となるマイクロ流体デバイスの一部は、分離ユニット３である。
【０２４０】
有利には、冷却アセンブリ５０は、システム１に関して前述したように特徴付けられている。
【０２４１】
詳細には、冷却アセンブリ５０は、マイクロ流体デバイスからの熱を吸収するように意図されている作用面５２および熱を放散するための放出面５３を有している冷却プレート５１を備えている。作用面５２は、放出面５３よりも小さい寸法を有している。
【０２４２】
有利には、冷却アセンブリ５０は、ペルチエおよびペルチエに接続された熱交換装置（具体的には、調整回路５５）を備えている。
【０２４３】
有利には、装置７２は、冷却アセンブリ５０をマイクロ流体デバイスに向かって押圧するための少なくとも１つの機械的圧力要素６０（特に、複数の機械的圧力要素６０）を備えている。
【０２４４】
（図示されていない）一実施形態によれば、装置７２は、少なくとも１つのさらなるアクチュエータノズル３６および１つのさらなる対応する吸引ユニット４１を備えている。
【０２４５】
いくつかの実施形態によれば、制御アセンブリ２３は、各アクチュエータ３６および／または各圧力供給ノズル６１における圧力および／または吸引を互いに独立して調整するために、圧力装置６４，８７に接続されている。
【０２４６】
いくつかの実施形態によれば、装置７２は、所定種類の粒子Ｃ１の少なくとも一部を含んでいるキャリア液を収集するための収集ユニットを備えている。詳細には、収集ユニットは、シート６９（図１３）を備えている。シート６９は、図示されていない周知の取外し可能な収集器（例えば、試験管）を収容するように設計されており、かつ出口８に配置されている。
【０２４７】
有利には、装置７２は、前記キャリア液の一滴が収集ユニットに進入するときを検出するための検出器（例えば、図示されていない周知のビデオカメラ）を備えている。
【０２４８】
前記検出器は、制御アセンブリ２３に接続されている。使用時に、検出器が一滴の通過を検知したとき、制御アセンブリは、回収チャンバ５からのキャリア液の流出を中断するようになっている。
【０２４９】
いくつかの実施形態によれば、デバイス７３および／または装置７２の部品は、個別に記載したいくつかの態様についてのみ、システム１の同様の部品として特徴付けられるものとし、および／またはその逆にシステム１の部分も、個別に記載したいくつかの態様についてのみ、デバイス７３および／または装置７２の同様の部品として特徴付けられるものとする。
【０２５０】
［マイクロ流体デバイス］
本発明のさらに他の態様によれば、試料から少なくとも所定の一種の粒子Ｃ１を実質的に分離するためのデバイス７３が提供されている。デバイス７３は、入口２であって、使用時に、試料が該入口２を通ってデバイス７３内に導かれるようになっている入口２と、所定種類の粒子Ｃ１の少なくとも一部を試料のさらなる粒子Ｃ２から実質的に選択的に分離するように設計された分離ユニット３と、分離ユニット３に接続された出口８であって、使用時に、実質的に選択的に分離された所定種類の粒子Ｃ１の少なくとも一部が、該分離ユニット３を通ってデバイス７３から流出するようになっている出口８と、を備えている。
【０２５１】
デバイス７３は、入口２と分離ユニット３との間に配置された弁部分７４と、出口８と分離ユニット３との間に配置された弁部分７７と、を備えている。詳細には、デバイス７３は、デバイス７３の外側に開いている各開口と分離ユニット３との間に配置された弁部分を備えている。
【０２５２】
いくつかの実施形態によれば、デバイス７３は、個別に記載したいくつかの態様についてのみ、本発明の第４の態様に記載したものとして特徴付けられている。
【０２５３】
［利点］
本発明は、前述したものに加えて、先行技術と比較して、種々の利点を有していることが強調されるべきである。とりわけ、以下の利点が挙げられる。
【０２５４】
分離ユニット３が外部から隔離されている間（弁９，１０が閉じられている間）に、所定種類の粒子Ｃ１を回収チャンバ５内に送ることができる。このようにして、試料の液部分およびキャリア液のいずれの蒸発も実質的に阻止することができる。蒸発を回避することによって、回収チャンバ５から主チャンバ４への（またはその逆への）逆流が生じないので、これによって、粒子Ｃ１および／またはＣ２が制御されずに移動するおそれが低減する（詳細には、回収チャンバ５内に運ばれた粒子Ｃ１は、主チャンバ４内に戻ることがなく、同様に、さらなる細胞Ｃ２は、回収チャンバ５内に戻ることがない）。さらに、蒸発を回避することによって、分離ユニット３内の塩の濃度が増大しない。塩の濃度が増大すると、導電性が増大し、対応する問題（チャンバ４，５内に存在する電極の損傷）を伴う局部的な電力消費が増大することがある。
【０２５５】
種々のステップは、制御アセンブリ２３によって制御されている。これによって、高度の再現性が得られる（先行技術によれば、オペレータが、ピペットによって試料および回収液を導かねばならなかった）。
【０２５６】
試料を装填する前にデバイス７３内に二酸化炭素をもたらすことによって、チャンバ４，５内に泡が生じる危険性が低減する。泡は、分析される試料の容積を低減させ、もし泡がチャンネル６に対応する領域を占有している場合、とりわけ、所定種類の粒子Ｃ１の回収を妨げる可能性がある。  
【０２５７】
試料は、有利には使い捨て式のデバイス７３とのみ接触するようになっている。これによって、システム１の種々の部品を洗浄する必要がなく、一連の試料間の汚染が生じる危険が著しく低減する。これに関して、より複雑でより高価な能動部品の大部分は、使い捨て式ではない装置７２内に配置されていることも強調されるべきである。
【０２５８】
試料が分離ユニット３に極めて近いリザーバ１３内に保持されているという事実のおかげで、システム１は、極めて小さい未使用の容積しか有していない。リザーバ１３，１４は、いずれも、デバイス７３の一部を形成している。
【０２５９】
本特許出願は、２つのイタリア特許出願（具体的には、ＢＯ２００９Ａ０００１５２，ＢＯ２００９Ａ０００１５３）の優先権を主張するものであり、これらの内容は、その全体がここに引用されるものとする。特に、該イタリア特許出願は、参照することによって、ここに含まれるものとする。
【０２６０】
本発明のさらなる特性は、デバイス７３の実施形態およびシステム１の操作のいくつかの単なる例示的な非制限的実施例の以下の記載から明らかになるだろう。
【実施例１】
【０２６１】
この実施例は、分離ユニット３のシリコン基チップ９１の製造について述べるものである。このチップは、図９および図８の分解図により明瞭に示されている。
【０２６２】
チップは、１９．９ｍｍの幅、２４．５ｍｍの長さ、および１．２ｍｍの厚みを有しており、シリコン基板９２（厚み：６００μｍ）と、チャンバ４，５およびチャンネル６の範囲を定めるスペーサ９３（厚み：９０μｍ）と、特にホウケイ酸塩または石英から作製された透明蓋９４（５００μｍ）と、を備えている。
【０２６３】
基板９２は、ＣＭＯＳ（相補型金属酸化膜半導体）標準技術を用いて、得られている。感光性ポリマー（Dryresist（登録商標）、特に、Ordyl SY300、Elga Europe）の層（厚み：９０μｍ）が、基板９２上に垂直に積層される。次いで、感光性ポリマーの層は、フォトリソグラフィックマスク（２４０００ＤＰＩの現像液によって印刷された透明スライド）によって部分的に保護され、１５秒間紫外線照射（１５０Ｗ）され、これによって、感光性ポリマー層の露出している（すなわち、マスクの暗部によって覆われていない）領域が重合される。選択的な重合が完了した時点で、積層基板を現像液（ＢＭＲ現像液―キシレンと２−ブトキシエチルアセテートとの混合物、異性体の混合物）内に浸漬することによって、非重合部分が除去される。
【０２６４】
この時点で、このようにして得られた対応するスペーサ要素９３を有する基板９２は、乾燥のために、５０℃の炉内に１時間置かれる。
【０２６５】
（ガラスから作製された）蓋９４（厚み：５００μｍ）が、フライス加工によって得られている。蓋９４の孔は、７００μｍの直径の底部および１２００μｍの直径の上部を有する切頭円錐形状を有している。
【０２６６】
蓋９４が、９５°の温度で８０分間、スペーサ要素９３に押圧され、これによって、スペーサ要素９３との熱接合が得られる。
【実施例２】
【０２６７】
この実施例は、図４の斜視図によって部分的に示されているＰＣＢ（印刷回路基板）９５について述べるものである。
【０２６８】
ＰＣＢ９５は、周知のフォトリソグラフィー技術（例えば、前述の実施例参照）を用いて作製された４つの銅層を備えている。
【０２６９】
ＰＣＢ９５は、エポキシポリマーとガラス繊維との複合材料から作製された主要構造体を有している。図４に示されているＰＣＢ９５の形状は、該主要構造体をフライス加工することによって得られたものである。
【０２７０】
銅層は、主要構造体内に埋設されており、４００個のパッドが外方に露出している。４００個のパッドは、（図４において）、上方を向いており（すなわち、チップ９１の方を向いており）、ＰＣＢ９５の開口９８の両側に配置されている（具体的には、２００個のパッドが、矢印９６によって示されている領域に配置されており、２００個のパッドが、矢印９７によって示されている領域に配置されている）。
【０２７１】
これらのパッドは、（図４において）下方を向いているさらなる４００個のパッドに電気的に接続されている。具体的には、２００個のさらなるパッドは、矢印９９によって示されている領域におけるＰＣＢの一端に配置されており、２００個のさらなるパッドは、矢印１００によって示されている領域におけるＰＣＢ９５の一端に対応する位置に配置されている。
【０２７２】
領域９６，９７に配置されているパッドは、ＰＣＢ９５をチップ９１に電気的に接続することを意図して、金によって被覆されている。
【０２７３】
領域９８，９９に配置されているパッドは、金によって被覆されており、デバイス７３を装置７２、特に、制御アセンブリ２３に電気的に接続するための電気コネクタとして機能するようになっている。
【０２７４】
ＰＣＢ９５は、略１．６ｍｍの厚みを有している。
【実施例３】
【０２７５】
この実施例は、チップ９１とＰＣＢ９５との接続について述べるものである。
【０２７６】
チップ９１は、「ピック＆プレース（pick & place）」装置を用いてＰＣＢ９５の中心に位置合せされ、接着剤によってＰＣＢ９５に接着される。
【０２７７】
領域９６，９７に配置されているＰＣＢ９５の４００個のパッドは、アルミニウムワイヤを用いる周知のワイヤボンディング技術によって、チップ９１に接続される。アルミニウムワイヤは、各々、それぞれのパッドをチップ９１の片側１０１または１０１ａに接続することになる。次いで、これらのワイヤは、ワイヤ自体を保護するために、エポキシ樹脂によって被覆され、重合される。
【０２７８】
この時点で、１μＬの銀含有塗料が、蓋９４の（図８，９では１０３の番号によって示されている）４つの孔を介して、チップ９１のコーナに配置された４つの空所１０２（図９）の各々内に導入される。この塗料は、シリコン基板９２と蓋９４との電気接続をもたらすために用いられる。
【０２７９】
図２９，３０は、チップ９１の変更形態を示している。前記変更形態は、図１−３に示されているのと同じように製造され、かつ組み立てられることが可能であり、これによって、図３１に示されているデバイス７３を得ることができる。
【実施例４】
【０２８０】
この例は、ＰＭＭＡ製の中間プレート１０４、プレキシガラス製の上プレート１０５、およびプレキシガラス製の支持プレート１０５と、の製造について述べるものである（図４）。
【０２８１】
プレート１０４，１０５，１０６は、略１ｍｍの厚みを有しており、フライス加工によって得られている。フライス加工の後、フライス加工によって生じたバリを除くために、サテン仕上げが行われている。次いで、プレート１０４，１０５，１０６は、超音波槽によって洗浄されている。
【０２８２】
プレート１０４は、上面図が図５に示されており、下から見た平面図が図６に示されている。容易に分かるように、プレート１０４（図５）の上面には、デバイス７３のチャンネルの一部（例えば、７８，８０，８１）、リザーバの一部（例えば、１３，７’，１４）、および孔の一部（例えば、７９，８２，１０７，１０７’，１０７’’，１０８）が得られている。孔１０７は、プレート１０４の全厚みを横断する貫通孔であり、対になって、弁部分７４，７５，７６，７７の構成要素をなしている（図２１）
【０２８３】
孔１０８は、出口８に配置されている。使用時に、孔１０８を通って、キャリア液が粒子Ｃ２と一緒に流出することになる。孔１０７’，１０７’’は、チップ９１への接続用の貫通孔である。
【０２８４】
プレート１０４の底面では、空洞１０９が、それぞれ、孔１０７の各対の周囲および孔１０８の周囲に配置されている。各空洞は、環状の形状を有しており、略０．５ｍｍの直径および略０．２５ｍｍの深さを有している。空洞１０９の存在によって、閉鎖要素３０およびシールリング７０が液密接触を維持するために押圧しなければならない面積（閉鎖要素３０の場合、孔１０７を閉鎖しなければならない面積）が、低減されることになる。
【０２８５】
プレート１０４，１０５，１０６は、それぞれの貫通孔１０９を有している。デバイス７５の組立中、プレート１０４，１０５，１０６は、固定式の線状ロッドがこれらの孔１１０を貫通するように配置されている。このようにして、プレート１０４，１０５，１０６を真っ直ぐに並べることが可能である。プレート１０４，１０５，１０６は、それぞれの中心開口を有しており、いったんデバイス７３が組み立てられると、これらの中心開口を通して、チャンバ４，５の内容物を観察することが可能である。
【０２８６】
プレート１０６は、開口１１１を有している。いったんデバイス７３が組み立てられると、これらの開口１１１によって、閉鎖要素３０およびシールリング６６，７０が外方に露出することになる。各開口１１１の周囲に配置されているのは、それぞれの環状空洞である。これらの空洞によって、閉鎖要素３０およびシールリング６６，７０のそれぞれの良好な位置決めおよび良好な密封が可能になる。実際には、前記空洞は、閉鎖要素３０およびシールリング６６，７０用のハウジングとして機能している。
【０２８７】
前述のチャンネル、リザーバ、空洞、開口、および孔も、微細フライス加工によって得られている。
【０２８８】
図３２，３３は、プレート１０４の変更形態を示している。この場合、各空洞１０９は、周辺チャンネル１１９を有している。周辺チャンネル１１９は、具体的には、実質的に円形である。各弁部分７４，７５，７６，７７に対して、１つの孔１０７が、チャンネル１１９に対応する位置に配置されており、１つの孔１０７がチャンネル１１９の外側の空洞１０９に配置されている。この特定の構成によって、弁Ｖ（図１４，１５）の開弁中、摂動（具体的には、流体の運動−吸引）を低減させることができる。弁Ｖの開弁動作は、比較的穏やかになり、開弁中に弁Ｖに生じる負圧が比較的小さくなる。
【実施例５】
【０２８９】
閉鎖要素３０、シールリング６６，７０、および接続要素１１２は、周知の射出成形技術を用いて、得られている。用いられた材料は、Elastosil（登録商標）である。この材料は、閉鎖要素３０の場合にはショア硬度６０、およびシールリング６６，７０および接続要素１１２の場合にはショア硬度５０が得られるように、処理されている。
【０２９０】
接続要素１１２は、中心開口１１３および貫通孔１１４を有しており、デバイス７３が組み立てられたとき、チップ９１をプレート１０４に接続させるようになっている。具体的には、孔１１４は、孔１０７’を基板９２の孔１１５に接続させ、孔１０７’’を基板９２の孔１１６に接続させている。
【実施例６】
【０２９１】
この実施例は、デバイス７３を得るための前述した種々の構成要素の組立について述べるものである。前述したように、種々の構成要素を真っ直ぐに並べるために、固定式の線状ロッドが用いられている。
【０２９２】
プレート１０４，１０５は、エタノール接着によって互いに接続されている。両面接着層１１７（Elcom  S. p. A製のDuplobond（登録商標、厚み：０．３２５ｍｍ）が、プレート１０６の上面に接着されている。適切に形作られた（具体的には、孔１１０に対応する中心開口および孔を有する）両面接着層１１７は、例えば、レーザまたは突切り機によって切断された連続テープから得られている。
【０２９３】
閉鎖要素３０、シールリング６６，７０、および接続要素１１２は、プレート１０６上に取り付けられている。この時点において、有機シラン層が、プレート１０４の底面に堆積され、必要な箇所のみを接合するために、プラズマによって選択的に除去されるようになっている（シリコーン要素とＰＭＭＡ−ポリメチルメタクリレートとを選択的に接合する方法は、イタリア特許出願第ＢＯ２００７０００５８８に記載されている。この特許出願の内容は、完全に記載されているようにここに完全に引用されるものとする）。具体的には、有機シランは、供給孔７９，８２および孔１０７，１０７’，１０７’’に対応する領域では、除去されるかまたは付着されないようになっている。閉鎖要素３０、シールリング６６，７０、および接続要素１１１は、プラズマによって活性化される。次いで、プレート１０４，１０６が、互いに接触され、かつ押圧されることになる。
【０２９４】
この時点で、さらなる両面接着層１１８（Lohmann S. p. A製のDuplobond（登録商標）、厚み：０．３２５ｍｍ）が、プレート１０６の底面に付着される。
【０２９５】
次いで、プレート１０６は、ＰＣＢ９５の（チップ９１がすでに取り付けられている）上面に対して押圧されることになる。
【実施例７】
【０２９６】
この実施例は、システム１の操作を最適化するために行われる試験について述べるものである。
【０２９７】
粒子Ｃ１および／またはＣ２の沈降は、リザーバ１３および／またはダクト７８内の粒子の付着の原因の１つである。
【０２９８】
通常、試料がチャンバ４内に導かれる前に、該試料は、かなり長い時間（具体的には、３０分）、リザーバ１３内に保持されている。この期間中、粒子Ｃ１およびＣ２は、リザーバの底面に沈殿している。これらの粒子を該底面から引き離すために、通常、強力な力が必要である。さらに、粒子Ｃ１およびＣ２は、一般的に、チャンバ４内において、試料の液部分よりもかなり緩慢に移動する。その結果、粒子Ｃ１およびＣ２は、チャンバ４がすでに試料の液部分によって少なくとも部分的に占められたときに、チャンバ４に入ることになり、チャンバ４の中心部分にのみ不均一に分散しようとする（すなわち、粒子Ｃ１およびＣ２は、チャンバ４の周辺のコーナ部分に到達しない傾向にある）。また、全ての粒子Ｃ１およびＣ２がチャンバ４に到達しないおそれが著しく生じることにも留意されたい。
【０２９９】
チャンバ４内の粒子Ｃ１およびＣ２の不均一な分散によって、粒子Ｃ２からの粒子Ｃ１の分離および粒子Ｃ１のチャンバ５内への移動により大きな問題が生じることになる。
【０３００】
このようなことから、チャンバ４の充填に関して、２つの試験を行った。（マイクロポンプ：Thinxxs（登録商標）MDP2205短絡回路型を備える）振動装置１７を第１の試験中では停止させておき、第２の試験中に（３０Ｈｚの周波数で）作動させた。
【０３０１】
ＤＡＰＩによって標識化されたＫ５６２細胞培養（試料の濃度：略１２５０粒子／μＬ）を用いて、試料を準備した。
【０３０２】
振動装置１７を作動させていない試験の結果が、図２２の左列の写真に示されている。振動装置１７を作動させている試験の結果が、図２２の右列の写真に示されている。これらの写真は、種々の光学条件下で撮られたものである。
【０３０３】
容易に分かるように、振動装置１７が作動しているとき、粒子Ｃ１およびＣ２がチャンバ４のコーナにおいてもより均一に分布しており、これによって、未使用空間が著しく小さくなっている。
以下に本発明の実施形態を示す。
［実施形態１］
試料から少なくとも所定の一種の粒子（Ｃ１）を分離させるためのマイクロ流体デバイス（７３）であって、装置（７２）に接続されるように設計されており、前記デバイス（７３）を前記装置に接続するための電気コネクタと、第１の入口（２）であって、使用時に、前記試料が該第１の入口（２）を通って前記マイクロ流体デバイス（７３）内に導かれるようになっている、第１の入口（２）と、前記第１の入口（２）に接続された分離ユニット（３）であって、主チャンバ（４）および回収チャンバ（５）を備えており、前記所定種類の前記粒子（Ｃ１）の少なくとも一部を前記試料のさらなる粒子（Ｃ２）に対して選択的に前記主チャンバ（４）から前記回収チャンバ（５）に移動させるように設計されている、分離ユニット（３）と、前記主チャンバ（４）に接続された第１の出口（７）と、  前記回収チャンバ（５）に接続された第２の出口（８）であって、使用時に、前記回収チャンバ（５）内に収集された前記所定種類の前記粒子（Ｃ１）の少なくとも一部が、該第２の出口（８）を通って前記マイクロ流体デバイス（７３）から流出するようになっている、第２の出口（８）と、を備えている、マイクロ流体デバイス（７３）において、第１の弁（９）の一部を構成するように設計された第１の弁部分（７４）であって、前記主チャンバ（４）の上流、すなわち、前記第１の入口（２）と前記主チャンバ（４）との間に配置されている、第１の弁部分（７４）と、第２の弁（１０）の一部を構成するように設計された第２の弁部分（７５）であって、前記主チャンバ（４）と前記第１の出口（７）との間に配置されている、第２の弁部分（７５）と、第３の弁（１１）の一部を構成するように設計された第３の弁部分（７６）であって、前記回収チャンバ（５）に接続されている、第３の弁部分（７６）と、第４の弁（１２）の一部を構成するように設計された第４の弁部分（７７）であって、前記回収チャンバ（５）と前記第２の出口（８）との間に配置されている、第４の弁部分（７７）と、を備えており、前記回収チャンバ（５）は、一方の側における前記主チャンバ（４）と他の側における前記第３および第４の弁部分（７６，７７）との間に配置されており、前記主チャンバ（４）は、一方の側における前記回収チャンバ（５）と他の側における前記第１および第２の弁部分（７４，７５）との間に配置されており、前記弁部分（７４，７５，７６，７７）の少なくとも１つは、閉鎖要素（３０）を備えており、前記閉鎖要素（３０）は、前記閉鎖要素（３０）が前記マイクロ流体デバイス（７３）のそれぞれのチャンネルの２つのストレッチ部（３１，３２）を分離するように位置している阻止位置と、前記閉鎖要素（３０）が前記２つのストレッチ部（３１，３２）を互いに接続させるように位置している開位置と、の間で行き来するように設計されており、前記閉鎖要素（３０）の少なくとも１つは、前記マイクロ流体デバイス（７３）の外部に位置している、前記装置（７２）に属しているそれぞれのアクチュエータによって操作可能になっていることを特徴とするマイクロ流体デバイス。
［実施形態２］
前記主チャンバ（４）および前記回収チャンバ（５）を互いに接続しているチャンネル（６）を備えていることを特徴とする実施形態１に記載のデバイス。
［実施形態３］
前記閉鎖要素（３０）は、少なくとも部分的に露出しており、前記デバイスの外側を向いて配置されており、前記デバイスは、前記主チャンバ（４）および前記回収チャンバ（５）を互いに接続しているチャンネル（６）であって、前記主チャンバ（４）および前記回収チャンバ（５）のそれぞれの寸法よりも小さい寸法を有している、チャンネル（６）を備えていることを特徴とする実施形態１に記載のデバイス。
［実施形態４］
前記分離ユニット（３）は、電気泳動システムの少なくとも一部を備えていることを特徴とする実施形態１〜３のいずれか１つに記載のデバイス。
［実施形態５］
前記閉鎖要素（３０）は、弾性の材料を含んでいることを特徴とする実施形態１〜４のいずれか１つに記載のデバイス。
［実施形態６］
前記閉鎖要素（３０）は、薄膜部分（４４）を有しており、該薄膜部分（４４）は、弾性の材料を含んでいることを特徴とする実施形態１〜５のいずれか１つに記載のデバイス。
［実施形態７］
前記弁部分（７４，７５，７６，７７）の少なくとも１つは、前記マイクロ流体デバイス（７３）のチャンネルの２つのストレッチ部（３１，３２）間に配置されたダイアフラム（３３）を備えており、前記阻止位置において、前記閉鎖要素（３０）は、前記ダイアフラム（３３）に接触しており、前記開位置において、前記閉鎖要素（３０）は、前記ダイアフラム（３３）から離れて位置していることを特徴とする実施形態１〜６のいずれか１つに記載のデバイス。
［実施形態８］
前記弁部分（７４，７５，７６，７７）の少なくとも１つは、前記マイクロ流体デバイス（７３）のチャンネルに少なくとも１つの孔を備えていることを特徴とする実施形態１〜７のいずれか１つに記載のデバイス。
［実施形態９］
第１のリザーバ（１３）であって、前記第１の入口（２）と前記第１の弁部分（７４）との間に配置されており、前記第１の入口（２）を通って導かれた前記試料を収集するように設計されている、第１のリザーバ（１３）と、前記第１のリザーバ（１３）を前記主チャンバ（４）に接続している第１のチャンネル（７８）であって、前記第１のチャンネル（７８）に沿って、前記第１の弁部分（７４）が配置されている、第１のチャンネル（７８）と、を備えている実施形態１〜８のいずれか１つに記載のデバイス。
［実施形態１０］
第１の供給孔（７９）を備えており、前記第１のリザーバ（１３）は、前記第１の供給孔（７９）と前記主チャンバ（４）との間に配置されており、前記第１のチャンネル（７８）は、前記第１の供給孔（７９）を前記主チャンバ（４）に接続していることを特徴とする実施形態９に記載のデバイス。
［実施形態１１］
弾性材料を含んでいる、第１のシールリング（６６）を備えており、前記シールリング（６６）は、前記第１の供給孔（７９）の外側を包囲しており、各圧力供給ノズル（６１）と連結するように設計されていることを特徴とする実施形態９または１０に記載のデバイス。
［実施形態１２］
第２のチャンネル（８０）を備えており、前記第２のチャンネル（８０）は、前記主チャンバ（４）と前記第１の出口（７）との間に配置されており、前記第１のチャンネル（７８）の断面よりも小さい、少なくとも１００μｍだけ、小さい断面を有していることを特徴とする実施形態９〜１１のいずれか１つに記載のデバイス。
［実施形態１３］
前記第１のチャンネル（７８）は、０．９ｍｍから５０μｍの範囲内の等価直径の断面を有しており、前記第２のチャンネル（８０）は、１５０μｍ未満の幅、１１０μｍ未満の深さ、および２ｍｍを超える長さを有していることを特徴とする実施形態１２に記載のデバイス。
［実施形態１４］
前記第２のチャンネル（８０）は、１００μｍを超える幅、３μｍを超える深さ、および６ｍｍ未満の長さを有していることを特徴とする実施形態１３に記載のデバイス。
［実施形態１５］
キャリア液を含むように設計された第２のリザーバ（１４）と、前記第２のリザーバ（１４）を前記回収チャンバ（５）に接続している第３のチャンネル（８１）であって、該第３のチャンネル（８１）に沿って、前記第３の弁部分（７６）が配置されている、第３のチャンネル（８１）と、を備えていることを特徴とする実施形態１〜１４のいずれか１つに記載のデバイス。
［実施形態１６］
第２の供給孔（８２）を備えており、前記第２のリザーバ（１４）は、前記第２の供給孔（８２）と前記回収チャンバ（５）との間に配置されており、前記第３のチャンネル（８１）は、前記第２の供給孔（８２）を前記回収チャンバ（５）に接続していることを特徴とする実施形態１５に記載のデバイス。
［実施形態１７］
第２のシールリング（６６ａ）を備えており、該第２のシールリング（６６ａ）は、弾性材料を含んでおり、前記第２の供給孔（８２）の外側を包囲しており、各さらなる圧力供給ノズル（６１ａ）に連結するように設計されていることを特徴とする実施形態１５または１６に記載のデバイス。
［実施形態１８］
第３の出口と、第５の弁（２９）の一部を構成するように設計された第５の弁部分（２９’）と、を備えており、前記弁部分（２９’）は、前記回収チャンバ（５）と前記第３の出口とに間に配置されており、任意選択的には、前記第３の出口は、前記第１の出口に対応していることを特徴とする実施形態１〜１７のいずれか１つに記載のデバイス。
［実施形態１９］
前記マイクロ流体デバイス（７３）を前記分離ユニット（３）を管理するように設計された制御アセンブリ（２３）を備えている装置（７２）に電気的に接続するために、電気回路を有する電気コネクタ（８３）を備えていることを特徴とする実施形態１〜１８のいずれか１つに記載のデバイス。
［実施形態２０］
試料から少なくとも所定の一種の細胞（Ｃ１）を分離するための装置（７２）であって、前記試料から前記所定種類の前記細胞（Ｃ１）を分離するためのマイクロ流体デバイス（７３）を収容するためのシート（８４）と、前記装置（７２）を前記マイクロ流体デバイス（７３）に電気的に接続するための電気コネクタ（８５）と、前記電気コネクタ（８５）に接続された制御アセンブリ（２３）と、少なくとも４つの流体力学的アクチュエータ（３５）であって、各々がそれぞれの弁（Ｖ；９，１０，１１，１２）の一部を構成するように設計されており、各アクチュエータ孔（３９）を有するそれぞれのアクチュエータノズル（３６）を備えている、少なくとも４つの流体力学的アクチュエータ（３５）と、少なくとも２つの圧力供給ノズル（６１，６１ａ）であって、各々がそれぞれの圧力供給孔（６３，６３ａ）を有している、少なくとも２つの圧力供給ノズル（６１，６１ａ）と、前記圧力供給孔（６３，６３ａ）における圧力を特定するために、前記圧力供給ノズル（６１，６１ａ）に接続された少なくとも１つの第１の圧力装置（６４）と、前記アクチュエータノズル（３６）に接続されており、前記アクチュエータ孔（３９）に吸引をもたらすように少なくとも設計されている、少なくとも１つの第２の圧力装置（８７）と、を備えており、各流体力学的アクチュエータ（３５）は、前記装置（７２）の外部に位置している、前記マイクロ流体デバイスに属しているそれぞれの閉鎖要素（３０）を移動させるように設計されていることを特徴とする装置。
［実施形態２１］
前記第１および第２の圧力装置（６４，８７）を備える圧力アセンブリ（９０）を備えており、前記圧力アセンブリ（９０）は、少なくとも１つのポンプを備えていることを特徴とする実施形態２０に記載の装置。
［実施形態２２］
前記第１の圧力装置（６４）は、第１の圧力ユニット（６５）および第２の圧力ユニット（６５ａ）を備えており、前記第１および第２のユニット（６５，６５ａ）の各々は、それぞれの圧力供給ノズル（６１，６１ａ）に接続されており、前記第１および第２の圧力ユニット（６５，６５ａ）は、個別に操作可能になっており、各々、対応する圧力供給孔（６３，６３ａ）における圧力（該孔を通る空気噴流の圧力）を特定するように設計されていることを特徴とする実施形態２０または２１に記載の装置。
［実施形態２３］
前記第１の圧力装置（６４）は、少なくとも１つの圧力源（１５，２５）と、前記第１および第２の圧力ユニット（６５，６５ａ）の少なくとも１つであって、前記圧力源（１５，２５）を各圧力供給ノズル（６１，６１ａ）に接続している対応する第１のダクトを備えている、前記第１および第２の圧力ユニット（６５，６５ａ）の少なくとも１つと、前記第１のダクトに沿った圧力を検出するための圧力センサ（２１）と、前記各圧力供給ノズル（６１，６１ａ）に対する圧力の伝達を中断するように設計された第１の阻止装置（２２）と、を備えており、前記制御アセンブリ（２３）は、検出された圧力に応じて前記第１の阻止装置（２２）を操作するために、前記圧力センサ（２１）および前記第１の阻止装置（２２）に接続されていることを特徴とする実施形態２２に記載の装置。
［実施形態２４］
前記第１の阻止装置（２２）は、安全弁（２２’）を備えており、該安全弁（２２’）は、前記第１のダクトに沿って配置されており、作動されると、前記第１のダクト内の圧力を外部圧力にするために、前記第１のダクトを外界に連通させるように設計されていることを特徴とする実施形態２３に記載の装置。
［実施形態２５］
前記第１の圧力装置（６４）は、少なくとも１つの圧力源（１５，２５）と、前記第１および第２の圧力ユニット（６５，６５ａ）の少なくとも１つであって、前記圧力源（１５，２５）を前記各圧力供給ノズル（６１，６１ａ）に接続している対応する第１のダクトを備えている、前記第１および第２の圧力ユニット（６５，６５ａ）の少なくとも１つと、少なくとも１つの振動装置（１７，１７ａ）であって、前記第１のダクトに沿って配置されており、前記各圧力供給孔（６３，６３ａ）における前記圧力源（１５，２５）によって定められた圧力の周期的な変動をもたらすように設計されている、少なくとも１つの振動装置（１７，１７ａ）と、を備えていることを特徴とする実施形態２０〜２４のいずれか１つに記載の装置。
［実施形態２６］
前記振動装置（１７，１７ａ）は、ダイアフラムポンプを備えていることを特徴とする実施形態２５に記載の装置。
［実施形態２７］
前記第２の圧力装置（８７）は、第１の吸引ユニット、第２の吸引ユニット、第３の吸引ユニット、および少なくとも１つの第４の吸引ユニット（４１）を備えており、各々がそれぞれのアクチュエータノズル（３６）に接続されており、前記第１、第２、第３、および第４の吸引ユニット（４１）は、個別に操作可能になっており、各々、対応するアクチュエータ孔（３９）において少なくとも１つの吸引を定めるようになっていることを特徴とする実施形態２０〜２６のいずれか１つに記載の装置。
［実施形態２８］
前記第２の圧力装置（８７）は、少なくとも１つの吸引源（４３）を備えており、前記第１、第２、第３、および第４の吸引ユニット（４１）の少なくとも１つは、前記吸引源（４３）を前記各アクチュエータノズル（３６）に接続している第２のダクト（４２）と、前記各アクチュエータノズル（３６）への吸引の伝達を中断するように設計された第２の阻止装置と、を備えていることを特徴とする実施形態２７に記載の装置。
［実施形態２９］
前記第２の阻止装置は、前記第２のダクト（４２）に沿って配置された弁と、前記圧力源（４３）のアクチュエータと、からなる組として選択される要素を備えており、前記アクチュエータは、前記圧力源（４３）を作動させるかまたは停止させるように設計されていることを特徴とする実施形態２８に記載の装置。
［実施形態３０］
前記アクチュエータノズルの少なくとも１つの第１のアクチュエータノズル（３６）は、圧力を各アクチュエータ孔（３９）を通して外方に加えるように設計された対応する第１の機械的圧力要素（３４）を備えていることを特徴とする実施形態２０〜２９のいずれか１つに記載の装置。
［実施形態３１］
前記第１の機械的圧力要素（３４）は、バネと、前記バネの外端に配置されたシール要素（４０）と、を備えていることを特徴とする実施形態３０に記載の装置。
［実施形態３２］
前記第１のアクチュエータノズル（３６）は、前記第１の機械的圧力要素（３４）を収容するためおよび前記各吸引ユニット（４１）を前記対応するアクチュエータ孔（３９）に接続するための中空要素（３７）を備えており、前記中空要素（３７）は、前記対応するアクチュエータ孔（３９）を有する一端を有していることを特徴とする実施形態３０または３１に記載の装置。
［実施形態３３］
各アクチュエータノズル（３６）を前記マイクロ流体デバイス（７３）に向かって押圧するための少なくとも１つの第２の機械的圧力要素（４６）を備えていることを特徴とする実施形態２０〜３２のいずれか１つに記載の装置。
［実施形態３４］
各圧力供給ノズルを前記マイクロ流体デバイス（７３）に向かって押圧するための少なくとも１つの第３の機械的圧力要素（５８）を備えていることを特徴とする実施形態２０〜３３のいずれか１つに記載の装置。
［実施形態３５］
前記マイクロ流体デバイス（７３）の少なくとも一部を冷却するように設計された冷却アセンブリ（５０）を備えていることを特徴とする実施形態２０〜３４のいずれか１つに記載の装置。
［実施形態３６］
前記冷却アセンブリ（５０）は、前記マイクロ流体デバイス（７３）の少なくとも一部からの熱を吸収するように設計された作用面（５２）および熱を発散するための放出面（５３）を有している冷却プレート（５１）を備えており、前記作用面（５２）は、前記放出面（５３）よりも小さい寸法を有していることを特徴とする実施形態３５に記載の装置。
［実施形態３７］
前記冷却アセンブリ（５０）は、ペルチエおよび前記ペルチエに接続された熱交換装置（５５）を備えていることを特徴とする実施形態３６に記載の装置。
［実施形態３８］
前記冷却アセンブリ（５０）を前記マイクロ流体デバイス（７３）に向かって押圧するための少なくとも１つの第４の機械的圧力要素（６０）を備えていることを特徴とする実施形態３５〜３７のいずれか１つに記載の装置。
［実施形態３９］
少なくとも１つのさらなるアクチュエータノズルおよび１つのさらなる対応する吸引ユニットを備えていることを特徴とする実施形態２０〜３８のいずれか１つに記載の装置。
［実施形態４０］
前記制御アセンブリ（２３）は、各アクチュエータノズル（３６）および各圧力供給ノズル（６１，６１ａ）における圧力および／または吸引を互いに独立して調整するために、前記第１の圧力装置（６４）および前記第２の圧力装置（８７）に接続されていることを特徴とする実施形態２０〜３９のいずれか１つに記載の装置。
［実施形態４１］
前記所定種類の前記細胞（Ｃ１）の少なくとも一部を含んでいるキャリア液を収集するための取集ユニットを備えていることを特徴とする実施形態２０〜４０のいずれか１つに記載の装置。
［実施形態４２］
前記キャリア液の一滴が前記収集ユニットに入ったときを検出するための検出器を備えていることを特徴とする実施形態４１に記載の装置。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図２２】
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