(57)【要約】【課題】  共棲培養によって生成される乳酸菌生産物質の種々の有効成分を高濃度で含有し、摂取しやすい健康食品の製造方法を提供すること。【解決手段】  １６種の乳酸菌を特定の組み合わせでグループ化するグループ作成プロセスと、各グループを組み合わせて共棲培養する１次培養プロセスと、１次培養液を混合して共棲培養する２次培養プロセスと、２次培養液を混合して共棲培養する３次培養プロセスと、３次培養液を希釈して原液を作成する粘度調整プロセスと、原液を噴霧乾燥装置で粉末化する粉末化プロセスとを備えた。【選択図】  図１
2016202139.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｌ．アシドフィラス（Lactobacillus acidophilus）、Ｌ．ブレビス（Lactobacillus brevis）、Ｌ．ジェンセニイ（Lactobacillus jensenii）、Ｌ．パラカゼイ（Lactobacillus paracasei subsp． paracasei）、Ｌ．ガセリー（Lactobacillus gasseri）、Ｌ．ブルガリクス（Lactobacillus delbrueckii subsp．bulgaricus）、Ｌ．ヘルベティカス（Lactobacillus helveticus）、Ｌ．カゼイ（Lactobacillus casei subsp． casei）、Ｌ．ラモナウサス（Lactobacillus rhamnosus）、Ｌ．デルブリッキィ（Lactobacillus delbrueckii subsp． delbrueckii）、Ｓ．サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）、Ｅ．フェシウム（Enterococcus faecium）、Ｌ．ラクチス（Lactococcus lactis）、Ｂ．ロンガム（Bifidobacterium longum）、Ｂ．ビフィダム（Bifidobacterium bifidum）、Ｂ．アドレセンティス（Bifidobacterium adolescentis）の１６種の乳酸菌を用いるとともに、
これらのうち、Ｅ．フェシウムおよびＬ．ヘルベティカスを第１グループ、
Ｅ．フェシウムおよびＬ．アシドフィラスを第２グループ、
Ｅ．フェシウムおよびＬ．ガセリーを第３グループ、
Ｅ．フェシウム、Ｌ．アシドフィラスおよびＬ．ブレビスを第４グループ、
Ｅ．フェシウム、Ｌ．アシドフィラスおよびＬ．ブレビスを第５グループ、
Ｅ．フェシウム、Ｌ．アシドフィラス、Ｌ．ブレビス、Ｌ．パラカゼイを第６グループ、
Ｂ．アドレセンティス単体を第７グループ、
Ｌ．デルブリッキィおよびＬ．ガセリーを第８グループ、
Ｌ．デルブリッキィ単体を第９グループ、
Ｅ．フェシウム、Ｌ．ジェンセニイ、Ｌ．パラカゼイおよびＬ．ブレビスを第１０グループ、
Ｌ．アシドフィラス単体を第１１グループ、
Ｅ．フェシウムおよびＬ．ガセリーを第１２グループ、
Ｌ．パラカゼイ単体を第１３グループ、
Ｌ．ガセリー、Ｅ．フェシウムおよびＢ．ビフィダムを第１４グループ、
Ｂ．ロンガム、Ｓ．サーモフィラスおよびＥ．フェシウムを第１５グループ、
Ｌ．ガセリーを単体で第１６グループ、
Ｌ．ブルガリクスおよびＳ．サーモフィラスを第１７グループ、
Ｌ．ガセリー、Ｌ．ラクチス、Ｌ．ガセリーおよびＥ．フェシウムを第１８グループ、
Ｌ．ガセリー、Ｓ．サーモフィラスおよびＬ．ブルガリクスを第１９グループ、
Ｌ．ラクチスを単体で第２０グループ、
Ｌ．ガセリーおよびＥ．フェシウムを第２１グループ、
Ｌ．ラモナウサスを単体で第２２グループ、
Ｌ．カゼイを単体で第２３グループ、
Ｂ．ロンガムを単体で第２４グループとし、
それぞれのグループ毎に継代培養して共棲状態を維持するグループ作成プロセスと、
上記各グループの培養液のうち、第１，２グループ同士、第３，４グループ同士、第５，６グループ同士、第７，８グループ同士、第９，１０グループ同士、第１１，１２グループ同士、第１３，１４グループ同士、第１５，１６グループ同士、第１７，１８グループ同士、第１９，２０グループ同士、第２１，２２グループ同士、第２３，２４グループ同士で共棲培養する１次培養プロセスと、
さらに、第１，２グループと第３，４グループ、第５，６グループと第７，８グループ、第９，１０グループと第１１，１２グループ、第１３，１４グループと第１５，１６グループ、第１７，１８グループと第１９，２０グループ、第２１，２２グループと第２３，２４グループ同士とで共棲培養する２次培養プロセスと、
さらに、上記各２次培養液を混合して共棲培養する３次培養プロセスと、
上記３次培養プロセスで共棲培養した３次培養液を水で希釈して原液とする粘度調整プロセスと、
粘度調整された原液を噴霧乾燥装置に供給して粉末化する粉末化プロセスと
を備えた健康食品の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この発明は、乳酸菌生産物質を含んだ粉末状の健康食品の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
乳酸菌は、腸内で腸内微生物の生育に大きな影響を与え、腸内環境を良好に保つことが知られている。この乳酸菌は人の腸内に、腸内良性菌いわゆる善玉菌として生息し、上記腸内環境を維持している。従って、この乳酸菌数が低下したり、活性が低下したりすることによって上記腸内環境が崩れる原因になる。
上記腸内環境を整えることによって、免疫力が向上し、様々な病気に罹りにくくなったり、病状が改善されたりすることが知られている。
【０００３】
また、上記のように腸内環境を整える効果が期待される食品として、生の乳酸菌だけでなく、乳酸菌生産物質が有用であることも分かっている。
この種の乳酸菌生産物質として、特許文献１に記載されたものが知られている。
この特許文献１の乳酸菌生産物質は、特定の１６種もの乳酸菌を利用したものである。これら１６種を組み合わせて、共棲培養に適した複数のグループを作り、このグループを基に、豆乳をベースにした培地で１次から３次まで共棲培養を繰り返している。そして３次培養で得られた３次培養液を滅菌後ろ過し、このろ液を食するようにしていた。
【０００４】
このように、上記３次培養液をろ過していたのは、培養液中に含まれる脂肪分が酸化して品質が低下することを懸念し、脂肪分を取り除くためである。
このろ液は、１６種の乳酸菌を培養することによって生産される乳酸菌生産物質中の多種多様の有効成分を含んでいる。
また、上記原液をろ過した際には残渣が残るが、この残渣を圧縮して固形化した後に乾燥して粉末化し、その粉末を上記ろ液に混合した抗腫瘍活性剤もあった（特許文献２）。つまり、上記ろ液だけでなく、残渣にも健康にとって有効な成分が含まれていることが分かっている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特許第４５４０３７６号公報
【特許文献２】特許第４６８３８８１号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
上記特許文献１に示す従来のろ液は、非常に酸味が強く、そのまま飲用にすることが難しいという問題があった。
上記ろ液の酸味が強い理由は次のように考えられる。
通常、乳酸菌が活動すると乳酸菌生産物質として有機酸が生成され、この有機酸が酸味の原因となる。
上記特許文献１の従来の乳酸菌生産物質は、共棲培養に適した乳酸菌のグループを作成して共棲培養を繰り返しているため、特に乳酸菌が活発に活動して多量の乳酸菌生産物質が生成される。その結果、酸味の基となる有機酸も特に多く生成される。
【０００７】
そして、有機酸は水溶性なので原液をろ過すると、この酸味の基となる有機酸がろ液中に抽出される。そのため、特許文献１のような上記ろ液は特に酸味が強くなり、そのまま飲用にすることが難しかったのである。
その結果、特に酸味に弱いユーザーでは、必要な量を継続的に摂取できないという問題があった。
また、上記ろ液だけを飲用とする場合には、残渣に含まれている有効成分を摂取できないという問題もあった。
この発明の目的は、共棲培養によって生成される乳酸菌生産物質の種々の有効成分を高濃度で含有し、摂取しやすい健康食品の製造方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
この発明は、Ｌ．アシドフィラス（Lactobacillus acidophilus）、Ｌ．ブレビス（Lactobacillus brevis）、Ｌ．ジェンセニイ（Lactobacillus jensenii）、Ｌ．パラカゼイ（Lactobacillus paracasei subsp． paracasei）、Ｌ．ガセリー（Lactobacillus gasseri）、Ｌ．ブルガリクス（Lactobacillus delbrueckii subsp．bulgaricus）、Ｌ．ヘルベティカス（Lactobacillus helveticus）、Ｌ．カゼイ（Lactobacillus casei subsp． casei）、Ｌ．ラモナウサス（Lactobacillus rhamnosus）、Ｌ．デルブリッキィ（Lactobacillus delbrueckii subsp． delbrueckii）、Ｓ．サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）、Ｅ．フェシウム（Enterococcus faecium）、Ｌ．ラクチス（Lactococcus lactis）、Ｂ．ロンガム（Bifidobacterium longum）、Ｂ．ビフィダム（Bifidobacterium bifidum）、Ｂ．アドレセンティス（Bifidobacterium adolescentis）の１６種の乳酸菌を用いるとともに、これらのうち、Ｅ．フェシウムおよびＬ．ヘルベティカスを第１グループ、Ｅ．フェシウムおよびＬ．アシドフィラスを第２グループ、Ｅ．フェシウムおよびＬ．ガセリーを第３グループ、Ｅ．フェシウム、Ｌ．アシドフィラスおよびＬ．ブレビスを第４グループ、Ｅ．フェシウム、Ｌ．アシドフィラスおよびＬ．ブレビスを第５グループ、Ｅ．フェシウム、Ｌ．アシドフィラス、Ｌ．ブレビス、Ｌ．パラカゼイを第６グループ、Ｂ．アドレセンティス単体を第７グループ、Ｌ．デルブリッキィおよびＬ．ガセリーを第８グループ、Ｌ．デルブリッキィ単体を第９グループ、Ｅ．フェシウム、Ｌ．ジェンセニイ、Ｌ．パラカゼイおよびＬ．ブレビスを第１０グループ、Ｌ．アシドフィラス単体を第１１グループ、Ｅ．フェシウムおよびＬ．ガセリーを第１２グループ、Ｌ．パラカゼイ単体を第１３グループ、Ｌ．ガセリー、Ｅ．フェシウムおよびＢ．ビフィダムを第１４グループ、Ｂ．ロンガム、Ｓ．サーモフィラスおよびＥ．フェシウムを第１５グループ、Ｌ．ガセリーを単体で第１６グループ、Ｌ．ブルガリクスおよびＳ．サーモフィラスを第１７グループ、Ｌ．ガセリー、Ｌ．ラクチス、Ｌ．ガセリーおよびＥ．フェシウムを第１８グループ、Ｌ．ガセリー、Ｓ．サーモフィラスおよびＬ．ブルガリクスを第１９グループ、Ｌ．ラクチスを単体で第２０グループ、Ｌ．ガセリーおよびＥ．フェシウムを第２１グループ、Ｌ．ラモナウサスを単体で第２２グループ、Ｌ．カゼイを単体で第２３グループ、Ｂ．ロンガムを単体で第２４グループとすることを前提とする。
【０００９】
上記グループを前提とし、この発明は、上記グループ毎に継代培養して共棲状態を維持するグループ作成プロセスと、上記各グループの培養液のうち、第１，２グループ同士、第３，４グループ同士、第５，６グループ同士、第７，８グループ同士、第９，１０グループ同士、第１１，１２グループ同士、第１３，１４グループ同士、第１５，１６グループ同士、第１７，１８グループ同士、第１９，２０グループ同士、第２１，２２グループ同士、第２３，２４グループ同士で共棲培養する１次培養プロセスと、さらに、第１，２グループと第３，４グループ、第５，６グループと第７，８グループ、第９，１０グループと第１１，１２グループ、第１３，１４グループと第１５，１６グループ、第１７，１８グループと第１９，２０グループ、第２１，２２グループと第２３，２４グループ同士とで共棲培養する２次培養プロセスと、さらに、各２次培養液を混合して共棲培養する３次培養プロセスと、３次培養プロセスで共棲培養した３次培養液を水で希釈して原液とする粘度調整プロセスと、粘度調整された原液を噴霧乾燥装置に供給して粉末化する粉末化プロセスとを備えたことを特徴とする。
なお、上記２，３次培養液は、２，３次培養プロセスにおける共棲培養後の培養液のことである。
【発明の効果】
【００１０】
この発明によれば、共棲培養に適した菌の組み合わせで、１６種の乳酸菌を１〜３次培養することで、健康維持に効果的な多種多様な有効成分の濃度が高く、しかも酸味が強すぎず、摂取し易い健康食品を製造することができる。
この発明の製造方法で製造された粉末状の健康食品は、有機酸が溶解しにくい非水溶性の成分も含まれているため、従来のろ液と比べて有機酸の比率が低くなる。したがって、酸味が際立ったものにはならず、摂取しやすい。
【００１１】
また、乳酸菌の活発な活動で高粘度になった３次培養液を水で粘度調整することによって、噴霧乾燥装置を利用できるようにしたので、粉末化プロセスにおいて低粘度液体を粉末化するときのような賦形剤を用いる必要がない。そのため、製造された粉末には賦形剤が含まれない。賦形剤を用いた場合に製造された粉末は、上記賦形剤の分だけ、原液に含まれていた有効成分の濃度が低くなってしまうが、この発明の製造方法によれば、粉末状の健康食品中の有効成分濃度を高く維持できる。
【００１２】
さらに、粉末化プロセスでは、３次培養液を希釈して粘度を調整した原液を微粒子化して乾燥させることによって、原液中の脂肪分が水分を保ったまま空気に曝される時間を短くできる。そのため、脂肪分が酸化しにくくなって、ろ過によって脂肪分を除去したり、酸化防止剤を添加したりしなくても、酸化による品質の低下を防止できる。このように、ろ過や酸化防止剤添加を省略できる分、製造工程を簡略化することもできる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】この発明の、乳酸菌の培養プロセスを示した図である。
【図２】噴霧乾燥装置の概略図である。
【図３】３次培養プロセス前後の培養液中の成分分析結果を示した表である。
【図４】図３中の有機酸の成分分析結果を示した表である。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
この実施形態の健康食品の製造方法は以下のとおりである。
この実施形態は、ラクトバチルス（Lactobacillus）菌属、ビフィドバクテリウム（Bifidobacterium）菌属、ストレプトコッカス（Streptococcus）菌属の３つの菌属に属する１６の乳酸菌を、２４のグループに分けてグループごとに継代培養して共棲状態を維持するグループ作成プロセスと、作成したグループを基に、共棲培養を繰り返す１〜３次培養プロセスと、３次培養液を水で希釈して原液とする粘度調整プロセスと、上記原液を噴霧乾燥する粉末化プロセスとを備えている。これにより、粉末状の健康食品が製造される。
【実施例】
【００１５】
以下に、具体的な製造方法を説明する。
上記１６種の乳酸菌は、Ｌ．アシドフィラス（Lactobacillus acidophilus）、Ｌ．ブレビス（Lactobacillus brevis）、Ｌ．ジェンセニイ（Lactobacillus jensenii）、Ｌ．パラカゼイ（Lactobacillus paracasei subsp． paracasei）、Ｌ．ガセリー（Lactobacillus gasseri）、Ｌ．ブルガリクス（Lactobacillus delbrueckii subsp．bulgaricus）、Ｌ．ヘルベティカス（Lactobacillus helveticus）、Ｌ．カゼイ（Lactobacillus casei subsp． casei）、Ｌ．ラモナウサス（Lactobacillus rhamnosus）、Ｌ．デルブリッキィ（Lactobacillus delbrueckii subsp． delbrueckii）、Ｓ．サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）、Ｅ．フェシウム（Enterococcus faecium）、Ｌ．ラクチス（Lactococcus lactis）、Ｂ．ロンガム（Bifidobacterium longum）、Ｂ．ビフィダム（Bifidobacterium bifidum）、Ｂ．アドレセンティス（Bifidobacterium adolescentis）である。
【００１６】
そして、グループ作成プロセスでは、上記乳酸菌を、２４のグループに分け、それらをグループ毎に継代培養するが、そのグループ分けは図１に示す通りである。
なお、図１は、上記グループ作成プロセスから、３次培養プロセスまでの各プロセスを示した図である。そして、図中の「Ｎｏ．」はグループ番号である。
すなわち、第１グループはＥ．フェシウムおよびＬ．ヘルベティカスで構成し、第２グループは、Ｅ．フェシウムおよびＬ．アシドフィラスで構成している。第３グループはＥ．フェシウムおよびＬ．ガセリーで構成し、第４グループは、Ｅ．フェシウム、Ｌ．アシドフィラスおよびＬ．ブレビスで構成している。
【００１７】
第５グループは、Ｅ．フェシウム、Ｌ．アシドフィラスおよびＬ．ブレビスで構成し、第６グループは、Ｅ．フェシウム、Ｌ．アシドフィラス、Ｌ．ブレビス、Ｌ．パラカゼイで構成し、第７グループは、Ｂ．アドレセンティス単体で構成している。
第８グループは、Ｌ．デルブリッキィおよびＬ．ガセリーで構成し、第９グループはＬ．デルブリッキィ単体で構成し、第１０グループは、Ｅ．フェシウム、Ｌ．ジェンセニイ、Ｌ．パラカゼイおよびＬ．ブレビスで構成し、第１１グループは、Ｌ．アシドフィラス単体で構成している。
【００１８】
第１２グループは、Ｅ．フェシウムおよびＬ．ガセリーで構成し、第１３グループは、Ｌ．パラカゼイ単体で構成し、第１４グループは、Ｌ．ガセリー、Ｅ．フェシウムおよびＢ．ビフィダムで構成し、第１５グループは、Ｂ．ロンガム、Ｓ．サーモフィラスおよびＥ．フェシウムで構成している。第１６グループは、Ｌ．ガセリー単体で構成し、第１７グループは、Ｌ．ブルガリクスおよびＳ．サーモフィラスで構成している。
【００１９】
第１８グループは、Ｌ．ガセリー、Ｌ．ラクチス、Ｌ．ガセリーおよびＥ．フェシウムで構成し、第１９グループは、Ｌ．ガセリー、Ｓ．サーモフィラスおよびＬ．ブルガリクスで構成し、第２０グループは、Ｌ．ラクチス単体で構成し、第２１グループは、Ｌ．ガセリーおよびＥ．フェシウムで構成し、第２２グループは、Ｌ．ラモナウサス単体で構成し、第２３グループは、Ｌ．カゼイ単体で構成し、第２４グループは、Ｂ．ロンガム単体で構成している。
【００２０】
それらのグループ毎に継代培養するとともに、それら培養液のうち、第１，２グループ同士、第３，４グループ同士、第５，６グループ同士、第７，８グループ同士、第９，１０グループ同士、第１１，１２グループ同士、第１３，１４グループ同士、第１５，１６グループ同士、第１７，１８グループ同士、第１９，２０グループ同士、第２１，２２グループ同士、第２３，２４グループ同士で共棲培養する。このプロセスが、図１中の（１）〜（１２）に示す、この発明の１次培養プロセスである。
【００２１】
さらに、図１の（１３）〜（１８）の２次培養プロセスで、上記第１，２グループと第３，４グループ、第５，６グループと第７，８グループ、第９，１０グループと第１１，１２グループ、第１３，１４グループと第１５，１６グループ、第１７，１８グループと第１９，２０グループ、第２１，２２グループと第２３，２４グループ同士とで共棲培養をする。
さらに、図１の（１９）の３次培養プロセスで、上記各グループの２次培養液を混合して、共棲培養するのが３次培養プロセスである。
【００２２】
なお、上記グループ作成プロセスで作成した各グループの乳酸菌は次のようにして継代培養したものである。すなわち、各グループのそれぞれの乳酸菌は、それらを継代培養した場合にも、共棲状態を維持できるであろうことを予測しながら集合させたものである。
複数の乳酸菌が共棲状態を維持するとは、複数の種類の乳酸菌が同時に存在し、それぞれが生きていける共棲状態が存在することである。特に、一方が、他方に影響を及ぼしたり、一方だけが生き残ったりする状態ではない。
【００２３】
上記各乳酸菌グループは、様々な菌の組み合わせの中から、共存可能な組み合わせを選択することによって形成している。
また、上記２４のグループを構成する乳酸菌の中には、同時に複数のグループに属する菌種も有る。これは、３次培養プロセスまでの共棲培養の過程で共棲状態が維持されることを考慮して菌種を組み合わせたためである。また、同一種の乳酸菌でも、株が異なるものも含まれている。
【００２４】
そして、各乳酸菌グループの培養培地は、日水製薬株式会社製のＧＡＭ半流動高層培地、ＢＬ寒天培地あるいは変法ＧＡＭ寒天培地からなる３種類の培地を、乳酸菌に応じて使い分けるとともに、これらの培地において、３２〔℃〕で１２時間培養した。その後、３７〔℃〕で１２時間培養し、さらに４０〔℃〕で２４時間培養した。グループ化した乳酸菌を上記のようにして継代培養するとともに、その培養液を５〔℃〕で冷蔵保存しておいた。
なお、第２４グループのＢ．ロンガムは、森永乳業株式会社製の菌株である森永ＢＢ５３６を用いた。
【００２５】
このようにして乳酸菌のグループを継代培養するとともに、グループ毎に同定をしたが、その同定試験は社団法人日本食品分析センターに依頼した。そして、その同定試験の概要は、各グループの検体を寒天平板培地に直接接種・培養し、優勢に生育した形状の異なる集落を釣菌してグループ毎に乳酸菌を分離し、この分離菌について形態観察、生理的性状試験および菌体内DNAのGC含有量の測定を行い、次の文献を参考に同定したものである。
【００２６】
１．Sneath,P．H．A.,Mair,N．S.,Sharpe,M．Ｅ． and Holt,J．G． ： “Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology” Vol．2, （1986） Williams & Wilkins．
２．Holt,J．G., Krieg,N．R., Sneath,P．H．A., Staley,J．T． and Williams,S．T． ： “Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology”Ninth Edition（1994）Williams & Wilkins．
３．光岡知足：“腸内菌の世界”,（1984）叢文社．
４．辨野義巳：微生物6,3-14（1990）．
５．厚生省生活衛生局監修：“食品衛生検査指針-微生物編-”（1990）日本食品衛生協会．
６．Schleifer,K．H． and Kilpper-Balz,R. : Int.J.Syst.Bacteriol.,34,31-34（1984）．
【００２７】
上記同定の結果、図１に示すように、上記森永乳業株式会社製のＢ．ロンガム（ＢＢ５３６）以外に３４種類の菌株が特定されるとともに、それらが各グループ内で共棲状態を維持していることが確認された。
上記のようにして継代培養した各グループの培養液を１次培養プロセスで共棲培養した。そして、この１次培養プロセスでは、日水製薬株式会社製のＧＡＭ半流動高層培地、ＢＬ寒天培地あるいは変法ＧＡＭ寒天培地からなる３種類の培地を、１次培養用培地として使用するとともに、これら１次培養用培地を、乳酸菌に応じて使い分けた。
【００２８】
そして、上記３種類のいずれかの１次培養用培地に対して、グループ化した乳酸菌を添加して１次培養を行なったが、例えば、上記のようにグループ化した乳酸菌の培地が、流動性が高い培地の場合であって、しかも、ビフィドバクテリウム菌属の菌を含んでいる場合には、１次共棲培養用培地に対して１０〔％〕の乳酸菌を添加した。ビフィドバクテリウム菌属の菌を含んでいないグループの場合には、同じく１次培養用培地に対して３〔％〕の乳酸菌を添加した。
【００２９】
また、グループ化した乳酸菌の培地が、固形性の高い培地の場合には、白金耳でつり上げた１回の量を１次培養用培地に添加した。
そして、これらの培地において、３７〔℃〕でｐＨ値が４．６になるまで約６〜１２時間培養した。
【００３０】
さらに、２次培養プロセスでは、培地として豆乳にブドウ糖０．５〔％（w/w）〕、酵母エキス０．４〔％（w/w）〕及び既成成分である３次培養液を１〔％（w/w）〕添加した。そして、この培地を３７〔℃〕でｐＨ値が４．５５になるまで約６〜１０時間培養を行なった。
なお、この２次培養プロセスにおいて、その培地や添加要素は、どの菌についても全て同じにした。
【００３１】
また、３次共棲培養プロセスでも、培地として豆乳にブドウ糖０．５〔％（w/w）〕、酵母エキス０．４〔％（w/w）〕及び既成成分である３次共棲培養液を１〔％（w/w）〕添加した。このようにした培地を用いて、最初に３２〔℃〕で２４時間培養し、次に４０〔℃〕で４８時間培養し、さらに３７〔℃〕で２４時間培養した。
なお、上記既成成分である３次培養液とは、当該製造工程より前に同じ方法によって生成した３次培養液のことである。
【００３２】
上記のようにして３次培養プロセスを終了した３次培養液は、粘度が１２３０〔ｍＰａ・ｓ〕であったが、粘度調整プロセスによって水を加えて希釈率５０〔％〕で希釈して粘度を５９０〔ｍＰａ・ｓ〕の原液を作成した。この粘度調整プロセスでは、後で説明する粉末化プロセスで使用する噴霧乾燥装置において、スムーズな送液と、賦形剤を必要としない粉末化が可能な粘度の原液を作成する。
なお、上記の粘度測定は、BROOKFIELD社製の型式LVT粘度計を用いて行なった。
【００３３】
上記のように粘度調整した原液を粉末化プロセスで、EYELA社製のSD-1000型噴霧乾燥装置を用いて噴霧乾燥するが、この噴霧乾燥装置の概略を図２に示す。
この噴霧乾燥装置は、上記原液を噴霧乾燥して粉末化する蒸発管１に、噴霧用ノズル２と、乾燥用エアを供給する温風供給管３、排気管４及び分離容器５を接続している。
そして、図中実線の矢印で液体の流れを示し、破線の矢印でエアの流れを示している。
【００３４】
上記噴霧用ノズル２には、粘度調整済みの原液が入った液体ポット６に接続された送液管７と、図示しない加圧エア供給源に接続された加圧エア供給管８とが接続されている。
上記送液管７には、送液ポンプ９及び送液圧センサ１０が設けられ、噴霧ノズル２には、上記送液ポンプ９によって上記原液が供給されるとともに、上記加圧エア供給管８から加圧エアが供給される。
上記噴霧用ノズル２は、上記原液を加圧エアによって霧化して、上記蒸発管１へ供給する。
【００３５】
また、上記液体ポット６内の原液は、予め高速撹拌機で均一に混合しておくが、粉末化プロセス中も、マグネッチックスターラーなどで撹拌し続けていることが好ましい。
なお、符号１１，１２，１３は、それぞれ、加圧エア供給管８に接続された電磁弁、レギュレータ及び圧力センサである。電磁弁１１は加圧エア供給源との接続又は遮断を制御し、レギュレータ１２は噴霧用ノズル２に供給される加圧エアの圧力を調整し、圧力センサ１３は加圧エアの圧力を検出するものである。
【００３６】
また、蒸発管１に接続された上記温風供給管３には、ヒーター１４と、フィルタを内蔵した吸気口１５とが接続されるとともに、上記ヒーター１４の前後には風量センサ１６と温度センサ１７とが設けられている。
また、排気管４には温度センサ１８を設けるとともに、サイクロン１９が接続され、サイクロン１９の下端には目的の粉末を回収する回収容器２０が取り付けられている。
また、サイクロン１９の上端にはフィルタ２１を介してブロア２２が接続され、このブロア２２によって、上記吸気口１５から温風用のエアが吸い込まれるようにしている。
そして、上記吸気口１５から吸い込まれたエアはヒーター１４で加熱され温風となって蒸発管１へ供給される。
【００３７】
このようにした噴霧乾燥装置では、蒸発管１内に噴霧用ノズル２から噴霧された霧化した原液が、温風供給管３から供給された温風によって乾燥して粉末となる。この粉末は、エア流によって排気管４からサイクロン１９へ搬送され、回収容器２０で回収される。この回収容器２０で回収された粉末が、乳酸菌生産物質を含んだ健康食品である。
【００３８】
図２に示す上記噴霧乾燥装置を用いた噴霧乾燥実験について以下に説明する。
実験条件は、次の通りである。
送液ポンプ９を調整した原液の送液量は３．８０〔ｇ／ｍｉｎ〕、上記レギュレータ１２を調整し、圧力センサ１３で検出される噴霧圧力を１８０〔ｋＰａ〕とする。
また、ブロア２２によって吸気口１５から吸い込まれる風量は、風量センサ１６で０．４５〔ｍ３／ｍｉｎ〕である。
さらに、ヒーター１４によって加熱された温風温度が、温度センサ１７で１０５〔℃〕になるように調整した。その結果、温度センサ１８で検出された蒸発管１の出口温度は６４〔℃〕となった。
【００３９】
上記の条件によって、上記噴霧乾燥装置を３０分間運転したところ、回収容器２０に、粉末状の健康食品を得ることができた。この粉末は、ほとんど水分を含まない流動性のよいものであった。
ただし、上記分離容器５には、べたべたした糊状の原液が少量付着していた。これは、蒸発管１で乾燥しきれなかった原液によるものである。
【００４０】
上記の製造方法で製造した粉末状の健康食品は、上記した従来のろ液と比べて酸味が弱く、そのまま摂取することができた。
また、この製造方法では、３次培養液の成分をろ過などで分離することなく、全てを粉末化しているので、１６種の乳酸菌を用いた３次培養プロセスによって生成された種々多様な有効成分を全て含んだ健康食品を得ることができる。
【００４１】
なお、この製造方向で製造された粉末状の健康食品が、従来のろ液と比べて酸味が弱くなったのは、水溶性の有機酸が選択的に抽出されるろ液ではなく、酸味が弱い成分も混合されているからである。ただし、この製造方法における１〜３次培養プロセスでは、特に乳酸菌の活動が活発であって、生成された３次培養液には有機酸を含有した多くの乳酸菌生産物質が含まれることは、従来と同じである。
この点を確認するため、上記３次培養プロセスにおける共棲培養前後の培養液を分析したので、その分析結果を図３，４に示す。
【００４２】
図３、４の「３次培養前」とは３次培養開始前のことで、複数のグループの２次培養液を混合した培養液のことである。一方、「３次培養後」は、上記３次培養プロセス終了後の培養液、すなわち上記３次培養液のことである。
図３に示すように、各培養液１００〔ｇ〕を成分分析したところ、３次培養によって有機酸の量が大幅に増え、約４８０〔％〕になっていることが分かった。
また、図４は、上記有機酸の分析結果であるが、この結果から、上記有機酸中にはヒドロキシ酸が多く、このヒドロキシ酸が３次共棲培養によって２３００〔％〕以上に増えていることが分かる。このヒドロキシ酸は有機酸の中でも特に酸味が強い酸である。
【００４３】
以上のことから、この実施形態の１〜３次培養プロセスでは、有機酸、特に酸味が強いヒドロキシ酸が多く生成されていることがわかった。
このように、酸味成分が特に多く生成された３次培養液は濾過すると、従来のろ液と同じで、酸味が強すぎてそのまま摂取することは困難である。しかし、この実施形態の製造方法によれば、３次培養液の成分を全て含み、酸味も抑えた健康食品を製造することができる。
【００４４】
また、例えば、特許文献２のように、ろ過したときの残渣を粉末化して用いる場合には、脂肪分を多く含んだ残渣を固形化して乾燥する過程で、脂肪分の酸化が進み、品質が低下するようなことがあるため、酸化防止剤の添加が必要であった。
これに対し、この実施形態では、酸化防止剤を添加してないが、脂肪分の酸化による変質も認められなかった。このように脂肪分が酸化しなかったのは、原液を霧化することによって、原液を微粒子化して短時間で乾燥させることができるようになったためである。原液中の脂肪分が、水分と酸素とに曝される時間が短くなったことで、脂肪分が酸化しにくくなったものと考えられる。
【００４５】
このように、この実施形態の製造方法では、酸化防止剤の添加が不要なので、無添加で、有効成分濃度が高い健康食品を製造できる。
また、この製造方法で製造された粉末状の健康食品は、そのまま摂取することはもちろん、他の食品と混合して用いることも可能である。
【産業上の利用可能性】
【００４６】
乳酸菌生産物質を含んだ健康食品の製造に適用できる。
【符号の説明】
【００４７】
１    蒸発管
２    噴霧用ノズル
３    温風供給管
４    排気管
６    液体ポット
７    送液管
８    加圧エア供給管
９    送液ポンプ
１４    ヒーター
１９    サイクロン
２０    回収容器
２２    ブロア
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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