(57)【要約】【課題】本発明は、天然物由来の素材を原料とする、皮膚細胞に対する賦活作用を有する賦活化剤、医薬組成物、化粧品組成物、飲食品組成物を提供することを目的とする。【解決手段】本発明は、グリセリン酸又はその塩を有効成分として含む、皮膚細胞の賦活化剤、並びにそれを含む医薬組成物、化粧品組成物、飲食品組成物に関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
グリセリン酸又はその塩を有効成分として含む、皮膚細胞の賦活化剤。
【請求項２】
皮膚細胞が皮膚線維芽細胞である、請求項１に記載の賦活化剤。
【請求項３】
グリセリン酸が、Ｄ体、Ｌ体、又はそれらの混合物である、請求項１又は２に記載の賦活化剤。
【請求項４】
グリセリン酸のアルカリ金属塩及びアルカリ土類金属塩から選択される一又は複数の塩を有効成分として含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の賦活化剤。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか１項に記載の賦活化剤を含む、医薬組成物。
【請求項６】
請求項１〜４のいずれか１項に記載の賦活化剤を含む、化粧品組成物。
【請求項７】
請求項１〜４のいずれか１項に記載の賦活化剤を含む、飲食品組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、グリセリン酸又はその塩を有効成分として含む、皮膚細胞の賦活化剤、並びにそれを含む医薬組成物、化粧品組成物、飲食品組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
Ｄ−グリセリン酸は、天然の植物に見出されたフィトケミカルの一種であり、これまでに肝機能の改善効果や、エタノール代謝の促進作用を有すること、またその亜鉛塩が胃液のｐＨを高め過酸分泌を防ぐ作用を有すること等、種々の有用な生理活性を有することが報告されている（特許文献１−２、非特許文献１−４）。
【０００３】
また、本発明者らはこれまでに、グリセリン酸又はその塩が、アルコールで損傷した胃腸粘膜細胞に対して賦活作用を有する一方、アルコールで損傷していない胃腸粘膜細胞に対しては賦活作用を有さないことを報告している（特許文献３）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特表２００６−５０７２６８号公報
【特許文献２】特表２００９−５２４６６９号公報
【特許文献３】特開２０１２−２３２９０２号公報
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Ｓｃｉｅｎｃｅ，１２３，４１５（１９５６）
【非特許文献２】Ｎａｔｕｒｅ，１８４，８１９（１９５９）
【非特許文献３】Ｆｉｔｏｔｅｒａｐｉａ，５７，３０７（１９８６）
【非特許文献４】Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ，５６，８９５（２００７）
【非特許文献５】Ｊ．Ｏｌｅｏ  Ｓｃｉ．，６０，５８５（２０１１）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、天然物由来の素材を原料とする、皮膚細胞に対する賦活作用を有する賦活剤、医薬組成物、化粧品組成物、飲食品組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、グリセリン酸及びその塩が、皮膚細胞に対して賦活作用を有することを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００８】
すなわち、本発明は以下を包含する。
［１］  グリセリン酸又はその塩を有効成分として含む、皮膚細胞の賦活化剤。
［２］  皮膚細胞が皮膚線維芽細胞である、［１］の賦活化剤。
［３］  グリセリン酸が、Ｄ体、Ｌ体、又はそれらの混合物である、［１］又は［２］の賦活化剤。
［４］  グリセリン酸のアルカリ金属塩及びアルカリ土類金属塩から選択される一又は複数の塩を有効成分として含む、［１］〜［３］のいずれかの賦活化剤。
［５］  ［１］〜［４］のいずれかの賦活化剤を含む、医薬組成物。
［６］  ［１］〜［４］のいずれかの賦活化剤を含む、化粧品組成物。
［７］  ［１］〜［４］のいずれかの賦活化剤を含む、飲食品組成物。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、皮膚細胞に対する賦活作用を有する賦活化剤、医薬組成物、化粧品組成物、飲食品組成物を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】図１は、正常ヒト皮膚線維芽細胞に対するＤ−グリセリン酸ナトリウム塩の細胞賦活作用を示す。結果は、５検体の平均および平均誤差を示す。＊は、対照に対して有意差（ｐ＜０．０５）を示した区間を示す。
【図２】図２は、正常ヒト皮膚線維芽細胞に対するＤ−グルコシルグリセリン酸ナトリウム塩の細胞賦活作用を示す。結果は、５検体の平均および平均誤差を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明は、グリセリン酸又はその塩を有効成分として含む、皮膚細胞の賦活化剤に関する。皮膚細胞の賦活化剤とは、皮膚細胞の活性を向上させる機能を有し、皮膚細胞に投与／適用することによって、皮膚細胞の生理活動を亢進させる、及び／又は、皮膚細胞の増殖を促進させることができる。このような機能を有する皮膚細胞の賦活化剤は、例えば、創傷治癒の促進や、皮膚における老化の防止（抗シワ、抗タルミ等）等の用途に用いることができる。
【００１２】
本発明において「皮膚細胞」とは、皮膚組織を構成し得る細胞を意味し、表皮細胞、表皮幹細胞、線維芽細胞、真皮幹細胞、より選択される一又は複数の細胞を含む。好ましくは、本発明において「皮膚細胞」とは線維芽細胞である。皮膚細胞は、生体内に存在するものであってもよいし、培養されたもの（生体より取り出されたもの、あるいは、胚性幹細胞、間葉系幹細胞、人工多能性幹細胞から分化誘導して得られたもの等）であってもよい。
【００１３】
「グリセリン酸」は、Ｄ体、Ｌ体、及びそれらの混合物を利用することができる。グリセリン酸の「塩」としては、製薬的に、又は化粧品的に許容可能な塩であればよく、特に限定されないが、アルカリ金属塩（例えば、ナトリウム塩、カリウム塩等）、アルカリ土類金属塩（例えば、カルシウム塩、マグネシウム塩等）、アミン塩（例えば、トリ（ｎ−ブチル）アミン塩、トリエチルアミン塩、ピリジン塩、アミノ酸塩等）が挙げられる。本発明において「グリセリン酸又はその塩」として、これらより選択される一又は複数を利用することができる。
【００１４】
グリセリン酸及びその塩は、公知の手法（例えば、特開２０１２−１５３６５８号公報、特開２０１１−２５４７７８号公報、特開２０１０−１３０９０８号公報、特開２００９−１５９８２６号公報、特開２００９−１５３５０７号公報、特開２００９−０５０２５０号公報、特開平５−３３１１００号公報、特表２００４−５２９８９４号公報等）により製造することができ、化学合成を用いて製造されたものであってもよいし、微生物を用いて製造されたものであってもよい。
【００１５】
本発明の賦活化剤は、有効成分であるグリセリン酸又はその塩からなるものであっても良いし、有効成分であるグリセリン酸又はその塩に加えて、目的とする用途や製品形態に応じたその他の成分（例えば、担体、賦形剤等）を含む組成物の形態であってもよい。
【００１６】
例えば、本発明の賦活化剤は、皮膚細胞に有効成分であるグリセリン酸又はその塩を投与／適用することが可能な形態であればよく、例えば、医薬品、医薬部外品、化粧品、飲食品等の形態とすることができる。
【００１７】
本発明の賦活化剤を医薬品又は医薬部外品として使用する場合、剤形として、特に限定されないが、例えば散剤、顆粒剤、カプセル剤、丸剤、及び、錠剤等の固形製剤、水剤、懸濁剤、乳剤等の液剤、並びに、軟膏、水剤、ローション剤、クリーム剤、ゲル剤、乳剤、及び貼付剤等の外用剤等が挙げられる。このうち、皮膚細胞に直接投与／適用することができる外用剤が特に好ましい。
【００１８】
これらの製剤には、有効成分であるグリセリン酸又はその塩と共に、医薬品又は医薬部外品に通常用いられる成分を本発明の目的、作用、効果を損なわない範囲で適宜選択して添加して使用することができる。このような成分としては例えば、賦形剤、結合剤、希釈剤、添加剤、香料、緩衝剤、増粘剤、着色剤、安定剤、乳化剤、分散剤、崩壊剤、懸濁化剤、界面活性剤、防腐剤、甘味料、酸味料等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００１９】
本発明の賦活化剤を医薬品又は医薬部外品として使用する場合、当該医薬品又は医薬部外品中には有効成分であるグリセリン酸又はその塩を、乾燥重量にして０．００００１〜５０重量％、特に０．０００１〜５重量％程度となるように含めることができる。医薬品又は医薬部外品の投与量は、皮膚細胞の活性を向上させる効果が得られる範囲で、対象となる症状、投与対象の年齢や体重、投与経路、剤形等の要因に応じて、適宜決定することができる。
【００２０】
本発明の賦活化剤を化粧品として使用する場合、剤形として、特に限定されないが、例えば化粧水、化粧用乳液、化粧用クリーム、化粧用ゲル、パック、ファンデーション、リップクリーム、ハンドクリーム、洗顔剤、ボディソープ等が挙げられる。
【００２１】
これらの化粧品には、有効成分であるグリセリン酸又はその塩と共に、化粧品に通常用いられる成分を本発明の目的、作用、効果を損なわない範囲で適宜選択して添加して使用することができる。このような成分としては例えば界面活性剤、油分、保湿剤、柔軟剤、感触向上剤、油性剤、乳化剤、酸化防止剤、防腐剤、防黴剤、エモリエント剤、ｐＨ調整剤、キレート剤、安定化剤、紫外線吸収剤、アルコール類、シリコン化合物、増粘剤、粘度調整剤、可溶化剤、パール化剤、香料、清涼剤、殺菌剤、抗菌剤、天然抽出物、着色剤、褪色防止剤、精製水その他の溶剤、噴射剤等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２２】
本発明の賦活化剤を化粧品として使用する場合、当該化粧品中には有効成分であるグリセリン酸又はその塩を例えば、乾燥重量にして０．００００１〜５０重量％、特に０．０００１〜５重量％程度となるように含めることができるが、その量は化粧品の形態に応じて適宜選択・決定することができる。
【００２３】
化粧品の用法・用量は、皮膚細胞の活性を向上させる効果が得られる範囲で、対象となる症状、対象となる部位・組織、剤形等の要因に応じて、適宜決定することができる。
【００２４】
本発明の賦活化剤を飲食品として使用する場合、飲食品の形状は、液状、半液体状もしくは固体状にしたもの、ペースト状にしたもののいずれであってもよく、例えば、美容食品・健康食品、機能性食品、特定保健用食品、栄養補助食品、病者用食品等（特にこれらに限定はされない）の形態で提供することができる。
【００２５】
これらの飲食品には、有効成分であるグリセリン酸又はその塩と共に、飲食品等に含有することが認められている各種成分を本発明の目的、作用、効果を損なわない範囲で適宜選択して添加して使用することができる。このような成分としては例えば、結合剤、増粘剤、着色剤、安定剤、乳化剤、分散剤、崩壊剤、懸濁化剤、界面活性剤、防腐剤、甘味料、酸味料等が挙げられる。
【００２６】
本発明の賦活化剤を飲食品として使用する場合、当該飲食品中には有効成分であるグリセリン酸又はその塩を例えば、乾燥重量にして０．００００１〜５０重量％、特に０．０００１〜５重量％程度で含めることができるが、その量は飲食品の形態や、摂取者の年齢や体重に応じて適宜選択・決定することができる。
【００２７】
飲食品の摂取量は、皮膚細胞の活性を向上させる効果が得られる範囲で、対象となる症状、投与対象の年齢や体重等の要因に応じて、適宜決定することができる。
【００２８】
本発明の医薬品又は医薬部外品、化粧品、及び飲食品は本発明の賦活化剤を含有することから、これらを投与／適用／摂取することによって、皮膚細胞の活性を向上させる効果を得ることができる。
【００２９】
以下に実施例を示して、本発明をさらに具体的に説明するが、本発明の範囲は実施例の範囲に限定されるものではない。
【実施例】
【００３０】
実施例１．正常ヒト皮膚線維芽細胞に対するＤ−グリセリン酸ナトリウム塩の細胞賦活作用
Ｄ−グリセリン酸ナトリウム塩は、Ｄ−グリセリン酸カルシウム塩（Ｓｉｇｍａ）を陰イオン交換樹脂（Ｃｌ−形、ダウエックス；ダウケミカル）を用いてナトリウム塩に変換して調製し、以下の実験に使用した。
【００３１】
正常ヒト皮膚線維芽細胞（エーセル）を、１％ウシ胎児血清（ＦＢＳ；インビトロジェン）を添加したダルベッコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ；ナカライテスク）に、５×１０３個／１００μＬの濃度で播種し、３７℃、５％ＣＯ２下にて２４時間培養した（細胞は５０％コンフルエントに達した）。次いで、培地を新しい培養培地（ＤＭＥＭ＋１％ＦＢＳ）に交換し、そこにＤ−グリセリン酸ナトリウム塩を０．０７８ｍＭ、０．７８ｍＭ、７．８ｍＭ、７８ｍＭ、又は１５６ｍＭとなるようにそれぞれ添加して２４時間培養した。対照には、Ｄ−グリセリン酸ナトリウム塩を添加しなかった。
【００３２】
培養後、生細胞数をＣｅｌｌ  Ｃｏｕｎｔ  Ｒｅａｇｅｎｔ  ＳＦ（ナカライテスク）を用いて測定し、正常ヒト皮膚線維芽細胞に対するＤ−グリセリン酸ナトリウム塩の細胞賦活作用を評価した。
【００３３】
結果を図１に示す。結果は、対照における生細胞数を１００％とする相対値にて示す。
【００３４】
培地にＤ−グリセリン酸ナトリウム塩を０．０７８ｍＭ、０．７８ｍＭ、７．８ｍＭ、７８ｍＭとなる濃度にて添加した条件において、正常ヒト皮膚線維芽細胞の細胞賦活性が上昇することが確認できた。特に、培地にＤ−グリセリン酸ナトリウム塩を０．７８ｍＭとなる濃度にて添加した条件において、高い細胞賦活性が示され、対照に対して４５％生細胞数が増加することが確認できた。一方、培地にＤ−グリセリン酸ナトリウム塩を１５６ｍＭとなる濃度にて添加した条件においては、生細胞が観測されなかった。
【００３５】
実施例２．正常ヒト皮膚線維芽細胞に対するＤ−グルコシルグリセリン酸ナトリウム塩の細胞賦活作用
上記実施例１において、Ｄ−グリセリン酸ナトリウム塩に代えて、配糖体であるＤ−グルコシルグリセリン酸ナトリウム塩を０．０３４ｍＭ、０．３４ｍＭ、３．４ｍＭ、３４ｍＭ、又は６８ｍＭとなる濃度にて培地に添加した以外は、上記実施例１と同様の条件にて培養を行い、培養後の生細胞数をＣｅｌｌ  Ｃｏｕｎｔ  Ｒｅａｇｅｎｔ  ＳＦ（ナカライテスク）を用いて測定し、正常ヒト皮膚線維芽細胞に対するＤ−グルコシルグリセリン酸ナトリウム塩の細胞賦活作用を評価した。
【００３６】
結果を図２に示す。結果は、対照における生細胞数を１００％とする相対値にて示す。
【００３７】
培地にＤ−グルコシルグリセリン酸ナトリウム塩を添加した条件下における生細胞数は、対照における生細胞数と比べて有意差は認められなかった。すなわち、正常ヒト皮膚線維芽細胞に対するＤ−グルコシルグリセリン酸ナトリウム塩の細胞賦活作用は確認されなかった。
【００３８】
以上の結果より、正常ヒト皮膚線維芽細胞に対してＤ−グリセリン酸ナトリウム塩は、濃度依存的に細胞賦活作用を示すことが明らかとなった。
【図１】
2016003209.tif 000002
【図２】
2016003209.tif 000003