(57)【要約】【課題】糖尿病性腎症の悪化を抑制できる組成物の提供。【解決手段】イソマルツロースを含有する、糖尿病性腎症悪化抑制用組成物。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
イソマルツロースを含有する、糖尿病性腎症悪化抑制用組成物。
【請求項２】
運動療法に伴う糖尿病性腎症悪化抑制用である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
糖尿病性腎症を発症している患者用である、請求項１又は２に記載の組成物。
【請求項４】
微量アルブミン尿を伴う糖尿病性腎症を発症している患者用である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
食品組成物である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
医薬組成物である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
イソマルツロースを有効成分とする、糖尿病性腎症悪化抑制剤。
【請求項８】
運動療法に伴う糖尿病性腎症悪化抑制用である、請求項７に記載の糖尿病性腎症悪化抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、糖尿病性腎症悪化抑制用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
厚生労働省の調査によれば、日本国内の糖尿病患者数は「糖尿病の可能性を否定できない人」を含めると２２１０万人と推定されている（平成１９年国民健康・栄養調査）。糖尿病が進行すると神経障害、網膜症、腎症等の合併症が進行する。糖尿病患者の血糖コントロールの手段として、食事療法、運動療法等が知られている。
【０００３】
運動療法は、初期段階の糖尿病患者（第１段階）、及び微量アルブミン尿を伴う糖尿病性腎症を発症した糖尿病患者（第２段階、初期段階の腎症）には推奨される。一方、明らかなタンパク尿（顕性蛋白尿）を伴う糖尿病性腎症を発症した患者には、積極的な運動療法は推奨されない。しかし、食事療法のみでは、インシュリン抵抗性の改善効果は、運動療法を併用した場合よりも小さいことが知られている（例えば、非特許文献１）。また、非特許文献１には、降圧剤と運動療法の併用により糖尿病性腎症の悪化が抑制されたことが記載されている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Ａｄｖ．  Ｅｘｅｒｃ．  Ｓｐｏｒｔｓ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．，２０１３年，Ｖｏｌ．１９，Ｎｏ．３，ｐｐ．７３−８１．
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、糖尿病性腎症の悪化を抑制できる組成物の提供を目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、肥満糖尿病と糖尿病性合併症（特に糖尿病性腎症）を発症するモデルラットにおいて、イソマルツロース含有食を与えたラットでは、糖尿病性腎症の悪化が抑制されることを見出した。また、イソマルツロース含有食を与えたラットでは、運動療法を併用した場合でも、糖尿病性腎症の悪化が抑制されることを見出した。本発明はこれらの新規な知見に基づくものである。
【０００７】
すなわち、本発明は、イソマルツロースを含有する、糖尿病性腎症悪化抑制用組成物を提供する。
【０００８】
上記組成物によれば、糖尿病性腎症の悪化を抑制することが可能になる。すなわち、上記組成物を摂取することにより、糖尿病性腎症の進行が抑制される。
【０００９】
上記組成物は、運動療法に伴う糖尿病性腎症悪化抑制用であってもよい。糖尿病性腎症を発症した患者では、運動療法によりメサンギウム領域面積の増加、糸球体基底膜の肥厚等が認められ、糖尿病性腎症が悪化する可能性があるが、上記組成物を摂取することにより、運動療法に伴う糖尿病性腎症の悪化（進行）が抑制される。
【００１０】
上記組成物は、糖尿病性腎症の悪化を抑制することができるため、糖尿病性腎症を発症している患者用であることが好ましい。特に、運動療法が推奨されることから、微量アルブミン尿を伴う糖尿病性腎症を発症している患者用であることがより好ましい。
【００１１】
イソマルツロースは、食品及び医薬品に添加されて摂取された実績が豊富であるため、上記組成物は、食品組成物であってもよく、医薬組成物であってもよい。
【００１２】
本発明はまた、イソマルツロースを有効成分とする、糖尿病性腎症悪化抑制剤ということもできる。上記糖尿病性腎症悪化抑制剤は、運動療法に伴う糖尿病性腎症悪化抑制用であってもよい。
【発明の効果】
【００１３】
本発明によれば、糖尿病性腎症の悪化を抑制できる組成物の提供が可能となる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】各群のラットについて、メサンギウム領域面積、糸球体領域面積、メサンギウム領域面積／糸球体領域面積比、腎重量、糸球体容積、及び基底膜の厚さの測定結果を示すグラフである。
【図２】各群のラットについて、介入前後の尿中総タンパク質排泄量の差、及び介入前後の尿中アルブミン排泄量の差の測定結果を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
以下、本発明を実施するための形態について詳細に説明する。ただし、本発明は以下の実施形態に限定されるものではない。
【００１６】
本実施形態に係る糖尿病性腎症悪化抑制用組成物は、イソマルツロースを含有する。
【００１７】
イソマルツロースは、６−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−フルクトースとも称される化合物である。また、イソマルツロースは、パラチノースとも呼ばれる。なお、「パラチノース／ＰＡＬＡＴＩＮＯＳＥ」は、三井製糖株式会社の登録商標である。
【００１８】
イソマルツロースは、天然において蜂蜜中に見出される。また、細菌や酵母に由来するα−グルコシルトランスフェラーゼ（イソマルチュロースシンターゼ）がショ糖に作用した場合に生じる転移生成物中にも存在する。工業的には、パラチノースは、プロタミノバクター・ルブラム（Ｐｒｏｔａｍｉｎｏｂａｃｔｅｒ  ｒｕｂｒｕｍ）やセラチア・プリムチカ（Ｓｅｒｒａｔｉａ  ｐｌｙｍｕｔｈｉｃａ）等の細菌に由来するα−グルコシルトランスフェラーゼをショ糖に作用させることにより製造される。
【００１９】
イソマルツロースとしては、天然由来のものを用いてもよく、酵素作用等により合成されたものを用いてもよい。また、イソマルツロースとしては、市販されているものを用いてもよい。市販品としては、例えば、結晶パラチノース（商品名「結晶パラチノースＩＣ」、三井製糖株式会社製）、粉末パラチノース（商品名「粉末パラチノースＩＣＰ」、三井製糖株式会社製）、パラチノースシロップ（商品名「パラチノースシロップ−ＩＳＮ」及び「パラチノースシロップ−ＴＮ」、三井製糖株式会社製）等が挙げられる。
【００２０】
糖尿病性腎症は、慢性の高血糖状態により引き起こされる細小血管合併症の一つであり、一定期間の糖尿病罹患の後、蛋白尿（アルブミン尿）、高血圧、腎機能障害が徐々に進行していく病態である。糖尿病性腎症では、病理学的には、糸球体毛細血管基底膜の肥厚、メサンギウム領域の拡大が観察され、終末像として糸球体硬化病変を呈する。
【００２１】
なお、顕性タンパク尿を伴う糖尿病性腎症とは、尿試験紙による検査（重篤度は、−、±、＋、＋＋、＋＋＋の順になる。）で、「＋」以上を呈する病態を意味し、微量アルブミン尿を伴う糖尿病性腎症とは、尿試験紙による検査では、「±」以下を呈する病態を意味する。微量アルブミン尿を伴う糖尿病性腎症は、初期段階の腎症ということもできる。微量アルブミン尿を伴う糖尿病性腎症でも、例えばＥＬＩＳＡ法等、より感度の高い検出手法によれば尿中タンパク質（尿中アルブミン）が検出され得る。
【００２２】
本実施形態に係る組成物は、既に発症した糖尿病性腎症の悪化（進行）を抑制することができるため、糖尿病性腎症悪化（進行）抑制用組成物として好適に用いられる。なお、糖尿病性腎症の発症と、既に発症した糖尿病性腎症の悪化（進行）とは、尿中タンパク質（尿中アルブミン）の検出量により、明確に区別される。
【００２３】
糖尿病性腎症の悪化（進行）が抑制されたか否かは、例えば、メサンギウム領域面積の増加が有意に抑制されたか否か、糸球体基底膜の厚みの増加が有意に抑制されたか否かによって判定することができる。
【００２４】
本実施形態に係る組成物は、運動療法に伴う糖尿病性腎症の悪化（進行）を抑制することもできるため、運動療法に伴う糖尿病性腎症悪化（進行）抑制用組成物として好適に用いられる。すなわち、本実施形態に係る組成物は、糖尿病性腎症を悪化させることから運動療法を取り入れられなかった糖尿病患者であっても、糖尿病性腎症を悪化させることなく運動療法を併用することが可能になるため、極めて有用である。
【００２５】
本実施形態に係る組成物は、上述のような作用効果を奏することから、糖尿病性腎症を発症している患者用として好適に用いられる。特に、運動療法が推奨される初期段階の糖尿病性腎症を発症している患者用（微量アルブミン尿を伴う糖尿病性腎症を発症している患者用）として好適に用いられる。
【００２６】
本実施形態に係る組成物は、食品、医薬部外品又は医薬品に使用可能な素材を配合してもよい。食品、医薬部外品又は医薬品に使用可能な素材としては、特に制限されるものではないが、例えば、アミノ酸、タンパク質、炭水化物、油脂、甘味料、ミネラル、ビタミン、香料、賦形剤、結合剤、滑沢剤、崩壊剤、乳化剤、界面活性剤、基剤、溶解補助剤、懸濁化剤等が挙げられる。
【００２７】
タンパク質としては、例えば、ミルクカゼイン、ホエイ、大豆タンパク、小麦タンパク、卵白等が挙げられる。炭水化物としては、例えば、コーンスターチ、セルロース、α化デンプン、小麦デンプン、米デンプン、馬鈴薯デンプン等が挙げられる。油脂としては、例えば、サラダ油、コーン油、大豆油、ベニバナ油、オリーブ油、パーム油等が挙げられる。甘味料としては、例えば、ブドウ糖、ショ糖、果糖、ブドウ糖果糖液糖、果糖ブドウ糖液糖等の糖類、キシリトール、エリスリトール、マルチトール等の糖アルコール、スクラロース、アスパルテーム、サッカリン、アセスルファムＫ等の人工甘味料、ステビア甘味料等が挙げられる。ミネラルとしては、例えば、カルシウム、カリウム、リン、ナトリウム、マンガン、鉄、亜鉛、マグネシウム等、及びこれらの塩類等が挙げられる。ビタミンとしては、例えば、ビタミンＥ、ビタミンＣ、ビタミンＡ、ビタミンＤ、ビタミンＢ類、ビオチン、ナイアシン等が挙げられる。賦形剤としては、例えば、デキストリン、デンプン、乳糖、結晶セルロース等が挙げられる。結合剤としては、例えば、ポリビニルアルコール、ゼラチン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリビニルピロリドン等が挙げられる。滑沢剤としては、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、タルク等が挙げられる。崩壊剤としては、例えば、結晶セルロース、寒天、ゼラチン、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、デキストリン等が挙げられる。乳化剤又は界面活性剤としては、例えば、ショ糖脂肪酸エステル、クエン酸、乳酸、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル、レシチン等が挙げられる。基剤としては、例えば、セトステアリルアルコール、ラノリン、ポリエチレングリコール等が挙げられる。溶解補助剤としては、例えば、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、炭酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム等が挙げられる。懸濁化剤としては、例えば、モノステアリン酸グリセリン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム等が挙げられる。これらは１種単独で、又は２種以上を組み合わせて使用してもよい。
【００２８】
本実施形態に係る組成物は、イソマルツロースを含有しており、イソマルツロースはショ糖の１／２程度ではあるが甘味を有することから、本実施形態に係る組成物は、甘味料として主にイソマルツロースを含むものであってもよい。イソマルツロースはその加水分解速度がスクロースの１／５と遅く、摂取後の血糖値の上昇を抑制することができるため、甘味料として主にイソマルツロースを含むものとすることにより、血糖コントロールが容易になるという効果も得られる。
【００２９】
本実施形態に係る組成物は、食品組成物又は医薬組成物として用いることができる。本実施形態に係る食品組成物又は医薬組成物は、例えば、健康食品、特定保健用食品、機能性食品、栄養機能食品、サプリメント、医薬部外品、医薬品等の形態で提供されてもよい。本実施形態に係る食品組成物は、例えば、糖尿病性腎症の悪化（又は進行）を抑制する旨、運動療法に伴う糖尿病性腎症の悪化（又は進行）を抑制する旨の表示が付されたものであってもよい。
【００３０】
本実施形態に係る組成物に含まれるイソマルツロースの含有量は、組成物の形態、使用目的等に応じて適宜設定すればよいが、通常１０ｗ／ｗ％〜７０ｗ／ｗ％である。本発明による効果をより一層顕著に奏する観点から、本実施形態に係る組成物に含まれるイソマルツロースの含有量は、２０ｗ／ｗ％〜６０ｗ／ｗ％であることが好ましく、３０ｗ／ｗ％〜５０ｗ／ｗ％であることがより好ましい。
【００３１】
本実施形態に係る組成物は、非経口投与されてもよいが、経口投与されることが好ましい。具体的な投与量の一例として、例えば、イソマルツロースが１回当たり５ｇ以上となるように投与されるのが好ましく、７ｇ以上となるように投与されるのがより好ましく、１０ｇ以上となるように投与されるのがさらに好ましい。また、イソマルツロースが１日当たり５ｇ以上となるように投与されるのが好ましく、１０ｇ以上となるように投与されるのがより好ましく、２０ｇ以上となるように投与されるのがさらに好ましい。また、イソマルツロースが１回当たり６０ｇ以下となるように投与されるのが好ましく、４０ｇ以下となるように投与されるのがより好ましく、２０ｇ以下となるように投与されるのがさらに好ましい。また、イソマルツロースが１日当たり６０ｇ以下となるように投与されるのが好ましく、５０ｇ以下となるように投与されるのがより好ましく、４０ｇ以下となるように投与されるのがさらに好ましい。
【００３２】
本発明はまた、イソマルツロースを有効成分とする、糖尿病性腎症悪化抑制剤ということもできる。
【００３３】
本実施形態に係る糖尿病性腎症悪化抑制剤は、イソマルツロースを有効成分としているため、既に発症した糖尿病性腎症の悪化（進行）を抑制することができる。また、運動療法に伴う糖尿病性腎症の悪化（進行）を抑制することもできるため、本実施形態に係る糖尿病性腎症悪化抑制剤は、運動療法に伴う糖尿病性腎症悪化抑制用としても好適に用いられる。さらに本実施形態に係る糖尿病性腎症悪化抑制剤は、糖尿病性腎症を発症している患者用、特に初期段階の糖尿病性腎症を発症している患者用（微量アルブミン尿を伴う糖尿病性腎症を発症している患者用）として好適に用いられる。
【００３４】
本実施形態に係る糖尿病性腎症悪化抑制剤は、イソマルツロースを有効成分として含んでいればよく、イソマルツロースのみからなるものであっても、イソマルツロースと他の構成成分との混合物であってもよい。他の構成成分としては、上述した食品、医薬部外品又は医薬品に使用可能な素材が挙げられる。上記混合物中のイソマルツロースの含有量は、通常１０ｗ／ｗ％〜９９．９９ｗ／ｗ％であり、２０ｗ／ｗ％〜９９．９９ｗ／ｗ％であることが好ましい。
【００３５】
本実施形態に係る糖尿病性腎症悪化抑制剤の形状は、イソマルツロースを有効成分として含んでいれば特に限定されないが、フォンダン、顆粒、タブレット、シロップ剤、ドリンク剤、清涼飲料水、ゼリー飲料、粉末飲料等が挙げられる。また、本実施形態に係る糖尿病性腎症悪化抑制剤は、例えば、健康食品、特定保健用食品、機能性食品、栄養機能食品、サプリメント、医薬部外品、医薬品等の形態で提供されてもよい。本実施形態に係る糖尿病性腎症悪化抑制剤は、例えば、糖尿病性腎症の悪化（又は進行）を抑制する旨、運動療法に伴う糖尿病性腎症の悪化（又は進行）を抑制する旨の表示が付されたものであってもよい。
【００３６】
本実施形態に係る糖尿病性腎症悪化抑制剤は、非経口投与されてもよいが、経口投与されることが好ましい。具体的な投与量の一例として、例えば、イソマルツロースが１回当たり５ｇ以上となるように投与されるのが好ましく、７ｇ以上となるように投与されるのがより好ましく、１０ｇ以上となるように投与されるのがさらに好ましい。また、イソマルツロースが１日当たり５ｇ以上となるように投与されるのが好ましく、１０ｇ以上となるように投与されるのがより好ましく、２０ｇ以上となるように投与されるのがさらに好ましい。また、イソマルツロースが１回当たり６０ｇ以下となるように投与されるのが好ましく、４０ｇ以下となるように投与されるのがより好ましく、２０ｇ以下となるように投与されるのがさらに好ましい。また、イソマルツロースが１日当たり６０ｇ以下となるように投与されるのが好ましく、５０ｇ以下となるように投与されるのがより好ましく、４０ｇ以下となるように投与されるのがさらに好ましい。
【００３７】
本発明はまた、糖尿病性腎症に罹患しているヒト対象に、イソマルツロースを含有する組成物を投与することを含む、糖尿病性腎症の悪化（進行）を抑制する方法と捉えることもできる。投与方法、用法・用量、組成物の組成、形状・形態等は、上記で説明したとおりである。
【実施例】
【００３８】
以下、本発明を実施例に基づいてより具体的に説明する。ただし、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。
【００３９】
（試験方法）
〔実験動物〕
大塚製薬（株）徳島研究所から入手したＯＬＥＴＦラット及びＬＥＴＯラットを使用した。ＯＬＥＴＦラットは、コレシストキニンＡ（ＣＣＫ−Ａ）受容体遺伝子が欠失しているため、インスリン抵抗性であり、腹腔内脂肪の蓄積が見られる（Ｊｐｎ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ，２０００年，５０巻，ｐｐ．４４３−４４８）。ＯＬＥＴＦラットは、肥満を伴う糖尿病と糖尿病性合併症（特に腎症）を発症するモデル動物である。ＬＥＴＯラットは、正常対照（コントロール）として用いた。
【００４０】
〔実験プロトコル〕
実験動物は、特定病原体フリーの条件下で、温度（２２．９±０．３℃）、湿度（５８．７％±１．１％）、照明（午前６時〜午後６時）が制御された専用施設で飼育した。ラットは、５〜２４週齢の間、標準的なプラスチックケージ（３６ｃｍ×２６ｃｍ×２０ｃｍ）に１ケージあたり２〜３匹を収容して飼育した。当該飼育期間終了後、１ケージあたり１匹とし、ＯＬＥＴＦラットを無作為に以下の４群に分け、試験を開始した。
ＯＬＥＴＦ−Ｓｅｄ群
ＯＬＥＴＦ−Ｐａｌａ群
ＯＬＥＴＦ−Ｅｘ群
ＯＬＥＴＦ−Ｐａｌａ＆Ｅｘ群
【００４１】
ＯＬＥＴＦ−Ｓｅｄ群、ＯＬＥＴＦ−Ｅｘ群及びＬＥＴＯラット（ＬＥＴＯ−Ｓｅｄ群）には、標準的な粉末状のラット飼料（商品名：ＣＬＥＡ  Ｒｏｄｅｎｔ  Ｄｉｅｔ  ＣＥ−２（飼育繁殖用）、日本クレア株式会社）を与えた。ＯＬＥＴＦ−Ｐａｌａ群及びＯＬＥＴＦ−Ｐａｌａ＆Ｅｘ群には、パラチノース配合飼料を与えた。また、全ての群のラットに水を自由摂取させた。ＯＬＥＴＦ−Ｅｘ群及びＯＬＥＴＦ−Ｐａｌａ＆Ｅｘ群は、毎日回転輪（株式会社シナノ製）で自発的に運動させた。走行距離は毎週記録した。パラチノース配合飼料の組成を表１に示す。
【表１】
2016041661.tif 000002
【００４２】
〔尿中総タンパク質排泄量及び尿中アルブミン排泄量の測定〕
２４週齢（介入前）及び３０週齢（介入後）で、ラットを代謝ケージ（株式会社シナノ製）に入れ、２４時間の間、流動パラフィンを含有する５０ｍＬのシリンダーに尿を収集した。尿量を測定後、尿中総タンパク質排泄量及び尿中アルブミン排泄量の測定まで−２０℃で保存した。尿中総タンパク質排泄量は、ＴＰ  総蛋白−ＨＲＩＩ  Ｗａｋｏ（商品名、和光純薬工業製）を用いてタンパク質量を測定して求めた。また、尿中アルブミン排泄量は、尿アルブミン測定キット（ＩＮＣ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．製）を用いてアルブミン量を測定した。
【００４３】
〔糸球体領域面積、メサンギウム領域面積及び糸球体容積の測定〕
３０週齢で各群のラットを屠殺し、腎臓を取り出して、腎重量を測定した。その後、各ラットの左の腎臓を、長手方向に半分に切断し、２０％ホルマリン中で１週間固定し、パラフィンに包埋した。次いで、パラフィン切片を過ヨウ素酸メセナミン銀（ＰＡＳＭ）又はマッソントリクロームのいずれかで染色した（Ｓｔｅｒｅｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄ：Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｍｏｒｐｈｏｍｅｔｒｙ，１９７９年，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｌｏｎｄｏｎ，Ｖｏｌ  １，ｐｐ１−４１５）。染色したパラフィン切片を用いて、顕微鏡に取り付けた自動画像解析装置（ＳＰ−５００、オリンパス社製、ＡＶＩＯ）で、糸球体領域面積及びメサンギウム領域面積を測定した。各ラットについて、ランダムに選択された５０の視野を分析し、平均値を求めた。糸球体容積は、下記式を用いて計算した。
（糸球体容積）＝１．３８×（糸球体領域面積の平均値）３／２／１．１０
【００４４】
〔糸球体基底膜の厚さの測定〕
各ラットの左の腎臓の皮質組織を抽出し、直ちに２％グルタルアルデヒド中で１晩固定した。次いで、組織を約１ｍｍ３の切片に切断し、２％グルタルアルデヒド／０．１Ｍリン酸緩衝液（ＰＢ，ｐＨ７．４）及び１％四酸化オスミウム／０．１Ｍ  ＰＢでそれぞれ固定し、エタノールで段階的に脱水した。次いで、組織をエポキシ樹脂に包埋した。超薄切片を酢酸ウラン及びクエン酸鉛で二重染色し、透過電子顕微鏡（Ｈ−７５００，株式会社日立ハイテクノロジー製）を用いて観察した。各ラットについて、ランダムに選択された少なくとも５つの糸球体毛細血管の画像を得た。糸球体基底膜の厚みは、カラーイメージアナライザーソフトウェア（ＷｉｎＲＯＯＦ，三谷商事株式会社製）を用いて測定した。各画像中、糸球体基底膜の薄い部分を２０領域手動で選択し、糸球体基底膜の湾曲部の接線に対して垂直方向の糸球体基底膜の幅を測定した。各ラットに対して、合計１００回（画像５枚×２０領域）の測定を行い、その平均値を求めて糸球体基底膜の厚さとした。
【００４５】
〔統計解析〕
結果は、平均値±標準誤差（ＳＥ）として示した。データの分析は、Ｄｕｎｎｅｔの多重範囲検定に従い一元配置分散分析法（ｏｎｅｗａｙ  ＡＮＯＶＡ）により行った。ＡＮＯＶＡ法で有意差があった場合、その後の多重比較検定は、フィッシャーのＰＬＳＤ法を使用して行った。各群における処置前後の変数間の有意差の決定には、スチューデントのｔ検定を使用した。相関係数の統計的な判定は、ピアソン検定を使用して行った。全ての統計的検定において、信頼区間９５％を統計的に有意な差があると判断した。
【００４６】
（結果）
図１及び図２に結果を示す。図１及び図２中の「ｎ」は、試験されたラットの個体数を意味する。図１は、各群のラットについて、メサンギウム領域面積、糸球体領域面積、メサンギウム領域面積／糸球体領域面積比、腎重量、糸球体容積、及び基底膜の厚さの測定結果を示すグラフである。ＯＬＥＴＦ−Ｓｅｄ群及びＯＬＥＴＦ−Ｅｘ群と比較して、ＯＬＥＴＦ−Ｐａｌａ群及びＯＬＥＴＦ−Ｐａｌａ＆Ｅｘ群では、メサンギウム領域面積の増加、及び糸球体基底膜の厚さの増加が抑制されており、糖尿病性腎症が悪化（進行）していなかった。
【００４７】
図２は、各群のラットについて、介入前後の尿中総タンパク質排泄量の差（ΔＵＴＰ）、及び介入前後の尿中アルブミン排泄量の差（ΔＵＡｌｂ）の測定結果を示すグラフである。介入前（２４週齡時）の尿中総タンパク質排泄量（ＵＴＰ）及び尿中アルブミン排泄量（Ｕａｌｂ）は、ＯＬＥＴＦ−Ｓｅｄ群、ＯＬＥＴＦ−Ｐａｌａ群、ＯＬＥＴＦ−Ｅｘ群及びＯＬＥＴＦ−Ｐａｌａ＆Ｅｘ群のそれぞれについて、３３．４±２．２、４７．９±１０．４、４１．４±６．５及び６４．２±１５．２ｍｇ／日（ＵＴＰ）、及び１７．８±１．７、２９．４±７．１、２２．７±４．７及び３８．５±１０．６ｍｇ／日（Ｕａｌｂ）であり、いずれにも統計上の有意差はなかった。一方、ＯＬＥＴＦ−Ｓｅｄ群はΔＵＴＰ、ΔＵＡｌｂいずれも有意な上昇を示したものの、ＯＬＥＴＦ−Ｐａｌａ群、ＯＬＥＴＦ−Ｅｘ群及びＯＬＥＴＦ−Ｐａｌａ＆Ｅｘ群は、いずれもやや増加傾向にはあるものの、統計上の有意差はなく、ＯＬＥＴＦ−Ｓｅｄ群の値に比して有意な低値であり、尿中総タンパク質排泄量、及び尿中アルブミン排泄量の増加は認められなかった。
【図１】
2016041661.tif 000003
【図２】
2016041661.tif 000004