(57)【要約】【課題】生体利用性が低い茶カテキンや抗酸化フラボノイド等のポリフェノールの生体への吸収及び蓄積の改善を図る。【解決手段】生体利用性が低いカテキン等のポリフェノールを、特定の配合の脂肪及び炭水化物に添加することにより、前記カテキン等のポリフェノールの吸収及び血漿への蓄積を向上することのできる、カテキン類をはじめとするポリフェノールの吸収改善剤及び血中蓄積改善剤を提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリフェノールの吸収改善剤。
【請求項２】
前記ポリフェノールが、カテキンであることを特徴とする、請求項１に記載の吸収改善剤。
【請求項３】
前記カテキンが茶由来のカテキンであることを特徴とする、請求項２に記載の吸収改善剤。
【請求項４】
前記カテキンがエピカテキン及び／又はエピガロカテキンであることを特徴とする、請求項２又は３に記載の吸収改善剤。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか１項に記載の吸収改善剤を含むことを特徴とする、チョコレート。
【請求項６】
血中へのポリフェノールの蓄積改善剤。
【請求項７】
前記ポリフェノールが、カテキンであることを特徴とする、請求項６に記載の蓄積改善剤。
【請求項８】
前記カテキンが茶由来のカテキンであることを特徴とする、請求項７に記載の蓄積改善剤。
【請求項９】
前記カテキンがエピカテキン及び／又はエピカテキン没食子酸エステルであることを特徴とする、請求項７又は８に記載の蓄積改善剤。
【請求項１０】
請求項６〜９のいずれか１項に記載の蓄積改善剤を含むことを特徴とする、チョコレート。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生体利用性が低いカテキン等のポリフェノールを、特定配合の脂肪及び炭水化物に添加することにより、前記カテキン等のポリフェノールの吸収及び血漿への蓄積を向上することのできる、カテキン類をはじめとするポリフェノールの吸収改善剤及び血中蓄積改善剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
これまで、発明者らは、抗酸化フラボノイドによる酸化ストレス抑制を介した廃用性筋萎縮予防の可能性を探索し、茶カテキンを筋管細胞Ｃ２Ｃ１２に作用させることで微重力環境によって誘発される筋萎縮関連遺伝子の発現を抑制すること（非特許文献１）や、抗酸化フラボノイドを尾懸垂モデルマウスに投与すると、重力軽減環境での酸化ストレスを低下させ廃用性筋萎縮を予防すること（非特許文献２）を見出してきた。
【０００３】
しかし、茶カテキンや抗酸化フラボノイド等のポリフェノールは、上述の抗酸化性による効果が期待されるが、生体利用性が低いため、その生体吸収及び生体への蓄積の改善を図る必要がある。
【０００４】
また、茶カテキンを含むカテキン類や、アントシアニン、タンニン、イソフラボン等のフラボノイドをはじめとするポリフェノールは、苦みや渋みといった食味を呈するため、これらポリフェノールのみを経口的に多量に摂食することは通常困難である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Hemdan, D. I., Hirasaka, K., Nakao, R., Kohno, S., Kagawa, S., Abe, T., Harada-Sukeno, A., Okumura, Y., Nakaya, Y., Terao, J., and Nikawa, T. (2009) Polyphenols prevent clinorotation-induced expression of atrogenes in mouse C2C12 skeletal myotubes, J Med Invest 56, 26-32.
【非特許文献２】Mukai, R., Nakao, R., Yamamoto, H., Nikawa, T., Takeda, E., and Terao, J. (2010) Quercetin Prevents Unloading-Derived Disused Muscle Atrophy by Attenuating the Induction of Ubiquitin Ligases in Tail-Suspension Mice, J Nat Prod. 73, 1708-1710.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、このような背景技術の元でなされたものであり、ポリフェノールを特定の配合で油脂や糖類と混合することで、経口的に多量に摂食することができる吸収改善剤及び血中蓄積改善剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
上記課題を解決するため、本発明の一つ態様は、ポリフェノールの吸収改善剤に関する。
【０００８】
前記ポリフェノールの吸収改善剤において、ポリフェノールはカテキン、好ましくは茶由来のカテキンであることが好ましい。
【０００９】
前記ポリフェノールの吸収改善剤において、カテキンがエピカテキン及び／又はエピガロカテキンであることが、さらに好ましい。
【００１０】
また、本発明の別の態様は、血中へのポリフェノールの蓄積改善剤に関する。
【００１１】
前記ポリフェノールの蓄積改善剤において、ポリフェノールはカテキン、好ましくは茶由来のカテキンであることが好ましい。
【００１２】
前記ポリフェノールの蓄積改善剤において、カテキンがエピカテキン及び／又はエピカテキン没食子酸エステルであることが、さらに好ましい。
【００１３】
さらに、前記ポリフェノールの吸収改善剤及び前記ポリフェノールの蓄積改善剤は、チョコレート中に含まれていても良い。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】実施例１の摂食試験スケジュール
【図２】（Ａ）標品、（Ｂ）試験食３の摂食１．５時間後の脱抱合処理した血漿サンプル、及び（Ｃ）試験食の摂食前の脱抱合処理した血漿サンプルのＨＰＬＣ分析のクロマトグラム
【図３】血中カテキン総量に対するアグリコンの割合
【図４】（Ａ）試験食３の摂食１５日目及び（Ｂ）試験食の摂食前日の脱抱合処理した血漿サンプルのＨＰＬＣ分析のクロマトグラム
【発明を実施するための形態】
【００１５】
＜材料＞
以下に、本発明のポリフェノールの吸収改善剤及び血中へのポリフェノールの蓄積改善剤の材料を例示する。
【００１６】
本発明のポリフェノールの吸収改善剤及び血中へのポリフェノールの蓄積改善剤に含まれるポリフェノールとしては、以下に限られないが、例えば、フラボノイド、フェノール酸類、リグナン類、エラグ酸、クルクミン、クマリン等を挙げることができる。
【００１７】
上記フラボノイドとしては、例えば、カテキン類、タンニン類、アントシアニン類、イソフラボン類、ルチン等を挙げることができる。
【００１８】
前記カテキン類としては、例えば具体的には、カテキン、カテキン没食子酸エステル、ガロカテキン、ガロカテキン没食子酸エステル、エピカテキン、エピカテキン没食子酸エステル、エピガロカテキン、エピガロカテキン没食子酸エステル等を挙げることができる。また、これらカテキン類の二分子が酸化的に重合したテアフラビン類や、前記テアフラビン類がさらに重合したビステアフラビン類等も、本明細書ではカテキン類として含む。
【００１９】
前記カテキン類を含む植物等又は食品等としては、これらに限られないが例えば、カカオ、茶、紅茶、ウーロン茶、ワイン、リンゴ、ブルーベリー等を挙げることができる。
【００２０】
前記タンニン類としては、例えば具体的には、前記カテキン類が重合した縮合型タンニンや、前記エラグ酸などの芳香族化合物と糖が縮合した加水分解性タンニンが挙げられる。しかし、本明細書ではタンニン類はこれら化学的な意味でのタンニン類のみではなく、食品科学的にタンニンと称される化合物のうち、ポリフェノール構造を有するものを広く含む。
【００２１】
前記タンニン類を含む植物等としては、これらに限られないが例えば、茶、赤ワイン、柿、バナナ等を挙げることができる。
【００２２】
前記アントシアニン類としては、例えば、ペラルゴニジン、シアニジン、デルフィニジン、オーランチニジン、ルテオリニジン、ペオニジン、マルビジン、ペチュニジン、ヨーロピニジン、ロシニジン等のアントシアニジンが、グルコース、ガラクトース、フルクトース、ラムノース、グルクロン酸等の単糖や、オリゴ糖、又は糖鎖等と配糖体を形成したものが挙げられる。
【００２３】
前記アントシアニン類を含む植物等としては、これらに限られないが例えば、ブドウ、ブルーベリー、紫イモ等を挙げることができる。
【００２４】
前記イソフラボン類としては、例えば具体的には、ゲニステイン、ダイゼイン、ホルモノネチン、ビオカニン、クメステロール、イリソン、イリリン、イリステクトリゲニン、イリゲニン、イリロン、イリスフロレンチン、ロテノン、メディカルピン等が挙げられるが、これらに限られない。
【００２５】
前記イソフラボン類を含む植物等としては、これらに限られないが例えば、大豆、亜麻仁、葛、菖蒲等を挙げることができる。
【００２６】
また、上記ルチンは蕎麦に含まれることが広く知られている。
【００２７】
上記フェノール酸類としては、以下に限られないが、例えば、没食子酸、プロトカテキュ酸等のヒドロキシ安息香酸類や、ｐ−クマル酸、コーヒー酸、フェルラ酸、シナピン酸等のヒドロキシ桂皮酸類が挙げられる。
【００２８】
前記フェノール酸類を含む植物等としては、これらに限られないが例えば、茶、オーク、小豆、インゲン、エンドウ、ソラマメ等の雑豆、トマト、ニンジン、コーヒー豆、ピーナッツ、米、小麦、大麦等を挙げることができる。
【００２９】
上記リグナン類としては、以下に限られないが、例えば、ピノレシノール、ポドフィロトキシン、ステガナシン、ラリシレシノール、セコイソラリシレシノール、マタイレシノール、ヒドロキシマタイレシノール、シリンガレシノール、セサミン、アルクチゲニン、エンテロジオール、エンテロラクトン等が挙げられる。
【００３０】
上記リグナン類を含む植物等としては、これらに限られないが例えば、ゴマ、亜麻仁、小麦、大麦、ライ麦、燕麦等の穀物、大豆等を挙げることができる。
【００３１】
また、上記エラグ酸を含む植物等としては、これらに限られないが例えば、ブラックベリー、ラズベリー、イチゴ、クランベリー、クルミ、ペカン、ザクロ、クコ等を挙げることができる。
【００３２】
また、上記クルクミンを含む植物等としては、ウコンがよく知られている。
【００３３】
また、上記クマリンを含む植物等としては、これらに限られないが例えば、桜の葉、パセリ、人参、桃、藤袴等を挙げることができる。
【００３４】
上記ポリフェノールは、酸化により芳香環上にさらに水酸基を有していてもよく、また前記水酸基が酸化されることで芳香環上にカルボニル基を有していてもよい。また、上記ポリフェノールは、単糖、オリゴ糖、又は糖鎖等と配糖体を形成していてもよい。
【００３５】
上記ポリフェノールは、市販のポリフェノールを用いてもよく、天然由来のポリフェノールを用いても良い。天然由来のポリフェノールを用いる場合、例えば上記ポリフェノールを含む植物等を乾燥、粉末化して用いても良いし、上記ポリフェノールを含む植物等から抽出、精製して用いることもできる。
【００３６】
例えば、上記ポリフェノールを植物等から抽出する場合、抽出溶媒としては、水又はアルコール、エステル、エーテル等の有機溶媒を用いることができる。前記アルコールとしては、例えばメタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール等を用いることができ、前記エステルとしては、例えば酢酸エチル等を用いることができる。また、前記エーテルとしては、ジエチルエーテル、エチレングリコールジメチルエーテル、テトラヒドロフラン、テトラヒドロピラン等を用いることができる。これら抽出物を、減圧乾固又は凍結乾固することにより得たものを直接用いてもよく、また精製し用いても良い。
【００３７】
前記精製の方法としては、半透膜を用いた透析法やクロマトグラフィーを用いることができる。特に、タンニン等の分子量が大きなポリフェノールの精製には半透膜を用いた方法や分子ふるいクロマトグラフィーを用いた方法が適している。一方、分子量が小さなポリフェノールの精製には、順相又は逆相担体を用いたカラムクロマトグラフィー等を用いることができる。当業者であれば前記ポリフェノールの精製方法以外の公知の精製方法により、上記のポリフェノールを精製することができるであろう。
【００３８】
本発明のポリフェノールの吸収改善剤及び血中へのポリフェノールの蓄積改善剤は、ポリフェノールと脂肪及び炭水化物を同時に経口摂取することで、ポリフェノールの吸収又は血中へのポリフェノールの蓄積を相乗的に改善する。
【００３９】
上記の本発明のポリフェノールの吸収改善剤及び血中へのポリフェノールの蓄積改善剤に用いる脂肪としては、動物性脂肪又は植物性脂肪を挙げることができ、これらを同時に用いてもよい。動物性脂肪としては、例えば、ラード、牛脂、獣脂、魚油、乳脂肪等が挙げられる。植物性脂肪としては、菜種油、オリーブオイル、大豆油、紅花油、ごま油、パームオイル、ひまわり油、ココナッツ油、ココアバター、キャノーラ油、コーン油、綿実油等が挙げられる。上記脂肪は、単独で又は複数を組み合わせて用いることができ、一つ又は複数の動物性脂肪と一つ又は複数の植物性脂肪とを組み合わせて用いても良い。
【００４０】
上記脂肪のうち、乳脂肪は生乳や生クリーム等の液体状で用いられても良く、バターのように常温で固体として用いられても良く、全粉乳のように固形で用いられても良い。これらの中でも、全粉乳が扱いやすさ及び安定性の点から好ましい。また、ココアバターはカカオマスの形で用いられても良く、ココアパウダーの形で用いられても良い。
【００４１】
上記ポリフェノール及び脂肪を同時に含む大豆、ゴマ、カカオ等は、本発明のポリフェノールの吸収改善剤及び血中へのポリフェノールの蓄積改善剤の原料として好ましい。この場合、通常、大豆及びゴマは粉末化して、カカオはカカオマス又はココアパウダーとして用いられるだろう。
【００４２】
上記炭水化物としては、例えば、グルコース、フルクトース、ガラクトース、アラビノース、キシロース、プシコース等の単糖、砂糖、麦芽糖、乳糖、トレハロース等の二糖、フラクトオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖、マンナンオリゴ糖、イヌリン、でんぷん、グリコーゲン等の多糖、キシリトール、マルチトール、ラクチトール、ソルビトール、マンニトール、エリスリトール、還元パラチノース、グリセリン等の糖アルコールが挙げられる。中でも、グルコース及び砂糖が好ましい。上記炭水化物は、単独で又は複数を組み合わせて用いてもよい。
【００４３】
本発明のポリフェノールの吸収改善剤及び血中へのポリフェノールの蓄積改善剤における、上記ポリフェノール、脂肪、及び炭水化物の配合割合は、本発明の改善剤を摂取した時のポリフェノールの吸収及び血中へのポリフェノールの蓄積が、ポリフェノールのみを摂取した時に比べて改善する限りいかなる割合でもよいが、好ましくはポリフェノールと脂肪の重量比が１：１５〜１：３０、より好ましくは１：１９〜１：２５であり、また好ましくはポリフェノールと炭水化物の重量比が１：２５〜１：３５、より好ましくは１：２８〜１：３５である。さらに、Rouraらによりヒトにおいてカテキンを含むカカオパウダーを牛乳と同時に摂取した場合、カカオパウダーを水と同時に摂取した場合よりもカテキンの血中濃度が低下することが報告されているため（Ann Nutr Metab, 2007, 51, 493-498）、脂肪成分中の乳脂肪の割合は、全脂肪分の２０％以下が好ましく、１７％以下がさらに好ましい。
【００４４】
本発明のポリフェノールの吸収改善剤及び血中へのポリフェノールの蓄積改善剤は、特に脂肪の常温における状態に応じて、錠剤、カプセル剤、細粒剤、顆粒剤、液剤、またはシロップ剤などの経口投与剤として調製することができる。また脂肪が常温で固体である場合には、ポリフェノール、炭水化物、及びその他の添加剤を、直接前記脂肪と混練することで調製することもできる。
【００４５】
本発明のポリフェノールの吸収改善剤及び血中へのポリフェノールの蓄積改善剤における添加物としては、例えば賦形剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤、溶剤、溶解補助剤、懸濁化剤、乳化剤、香料等が挙げられる。
【００４６】
＜摂取方法＞
本発明のポリフェノールの吸収改善剤及び血中へのポリフェノールの蓄積改善剤の摂取方法としては、本発明の改善剤を摂取した時のポリフェノールの吸収及び血中へのポリフェノールの蓄積が、ポリフェノールのみを摂取した時に比べて改善する限りいかなる摂取方法でもよい。
【００４７】
特に、血中へのポリフェノールの蓄積改善剤の摂取方法としては、ポリフェノールが短時間で生体外へ排泄されるため、ポリフェノールの生理活性機能を発揮するためには長期的なポリフェノールの摂取が重要である。
【００４８】
この場合、例えばエピカテキンであれば、一日当たり少なくとも３８．２ｍｇを摂取することで、血中のエピカテキンの蓄積が改善される。また、例えばエピカテキン没食子酸エステルであれば、一日当たり少なくとも１０．９ｍｇを摂取することで、血中のエピカテキン没食子酸エステルの蓄積が改善される。上述の１日当たりの摂取量は、１日に１回又は複数回摂取することにより得られるポリフェノールの総摂取量である。
【００４９】
驚くべきことに、本発明の血中へのポリフェノールの蓄積改善剤を用いた場合、ポリフェノールは生体外へ排出されやすいにもかかわらず、摂取終了後１週間後においても、依然として血中へのポリフェノールの蓄積改善作用を示すことが分かった。
【００５０】
以下に、具体的な実施例を例示して本発明を説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【００５１】
＜試験食＞
本実施例で用いる試験食は以下の３種類である。
試験食１：２０ｇ（配合を以下の表１に示す。）
試験食２：太陽化学社製「サンフェノンＢＧ−５」（製品中に緑茶ポリフェノールとして８７．６重量％含有（実測値））０．３７５ｇ
試験食３：試験食１（２０ｇ）を試験食２（０．３７５ｇ）に添加したもの
【００５２】
【表１】
2016093143.tif 000002
【００５３】
前記試験食１及び試験食３は、以下に述べる製法で作成した。
【００５４】
＜試験食１の製造＞
表１に示すカカオマス、全粉乳、ココアバター、植物油脂、砂糖を混合・微粒化し、７０〜８０℃で精錬した後、乳化剤、香料を添加してチョコレート生地を製造した。前記チョコレート生地をテンパリングして２８〜２９℃にて型に充填し、１０〜１５℃にて冷却後、デモールドすることにより試験食１を得た。
【００５５】
また、上記試験食１に使用できる原料は、以下の範囲で適宜変更が可能である。カカオマス：１９〜４５重量％、全粉乳：２〜２０重量％、ココアバター：１２〜２０重量％、植物油脂：４〜１０重量％、砂糖：３６〜４４重量％、乳化剤：０．４〜０．５重量％、香料：０．１〜０．３重量％。
【００５６】
＜試験食３の製造＞
上記試験食１の製造方法において、チョコレート生地をテンパリング後、試験食２を０．３７５ｇ混合することをさらに含むほかは、上記試験食１の製造方法と同様の方法で試験食３を得た。
【００５７】
上記方法で得た各試験食に含まれるカテキン量を表２に示す。ここで表２中のｎｄは、各カテキンの含有量が検出限界以下であったことを示す。
【００５８】
また、以下、ＥＧＣはエピガロカテキンを、ＥＧＣｇはエピガロカテキン没食子酸エステルを、ＥＣはエピカテキンを、ＥＣｇはエピカテキン没食子酸エステルを、Ｃはカテキンを、Ｃｇはカテキン没食子酸エステルを、ＧＣはガロカテキンを、ＧＣｇはガロカテキン没食子酸エステルをそれぞれ表す。
【００５９】
【表２】
2016093143.tif 000003
【００６０】
＜被験者＞
５人の被験者はすべて２０代の女性であり、その年齢、身長及び体重を表３に示す。
【００６１】
【表３】
2016093143.tif 000004
【実施例１】
【００６２】
被験者は、図１に示すように試験前日からカテキンを含む食品の摂取を少なく制限し、アルコールの摂取は禁止した。夕食はうどんとし、１８：３０に５名同時に摂取した。試験前日２１：００から試験食摂取日の９：００まで水飲み摂取可能の絶食状態とした。試験食摂取日の８：４５に摂食前（０ｈ）の採血を行った。その後、９：００に常温の飲料水１００ｍｌと一緒に試験食２０ｇを摂取し、１．５時間後（１０：３０）、６時間後（１５：００）に採血を行った。採取した血液はバキュテイナ採血管（日本ベクトンディッキンソン社製  ＲＥＦ３６８８８９）に移し、血漿を得るために遠心分離（２３００ｇ、４℃，１０分間）を行い、−３０℃で冷凍保存した。
【００６３】
酵素溶液の調整は、β−Ｇｌｕｃｕｒｏｎｉｄａｓｅ  Ｔｙｐｅ  VII−Ａ；ｆｒｏｍ  Ｅ  ｃｏｌｉ  ５２９２０００  ｕｎｉｔｓ／Ｇ  ｓｏｌｉｄ  ［シグマ−アルドリッチ社製  Ｇ−７６４６  １００ＫＵ］を５００Ｕ／１００μｌとなるよう０．１Ｍ酢酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．０）に溶解することで行い、氷上保存した。なお、酵素溶液の調整は用時調整とした。
【００６４】
冷凍保存した血漿サンプルを氷上で解凍し、１．５ｍｌ容マイクロチューブにて５０ｍＭのＬ−（＋）−アスコルビン酸溶液（４０μｌ）、前記解凍した血漿サンプル（２００μｌ）、及び前記酵素溶液（１００μｌ）を混和した。その後、３７℃で３０分間インキュベートすることで脱抱合処理を行った。なお、アグリコン量の測定では酵素溶液を０．１Ｍの酢酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．０）（１００μｌ）に置き換えて同様に処理した。インキュベート後の脱抱合処理サンプル及び脱抱合未処理サンプルの両サンプルに、それぞれ内部標準として１０μＭ没食子酸エチルエステル溶液１０μｌを添加し、さらに酢酸エチル７００μｌを添加し、１分間激しく振り混ぜたあと、遠心分離（９０００ｇ，４℃，１０分間）を行うことで３回抽出した。上層の酢酸エチル層を回収し、ロータリーエバポレーターを用いて減圧乾固した。乾固したサンプルの酸化を抑えるために窒素ガスを封入し、−２８℃にて冷凍保存した。分析までの冷凍保存は１時間程度とした。再溶解液（１３％メタノール、２％酢酸、５０ｍＭの酢酸リチウム、及び４２．５ｍＭのＬ−（＋）−アスコルビン酸の水溶液）５０μｌを用いて溶かした。
【００６５】
以下の条件で、上記サンプルを高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により分析した。
検出器：ＥＳＡ  ＣＯＵＬＯＣＨＥＭ  III電気化学検出器（ダイオネクス社製），３００ｍＶ
ポンプ：ＬＣ−２０ＡＤ（島津製作所製）
カラム：ＴＳＫ−ＧＥＬ  ＯＤＳ−８０ＴＳ  １５０×４．６ｍｍ（ＴＯＳＯＨ製）
流速：０．９ｍｌ／ｍｉｎ
カラムオーブン：ＣＴＯ−１０Ａ（島津製作所製）
測定温度：２５℃
デガッサ：ＤＧＵ−２０Ａ５（島津製作所製）
Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ  Ｂｕｓ  Ｍｏｄｕｌｅ：ＣＢＭ−２０Ａ（島津製作所製）
インジェクション量：２０μｌ
移動相：終濃度が５０ｍＭとなるように酢酸リチウムを含む、メタノールと２％酢酸水溶液との混合溶液（１３／８７：ｖ／ｖ）
【００６６】
各試験食の摂取１．５時間後に採血して得られた血漿を脱抱合処理したサンプルを上記ＨＰＬＣ条件で分析したところ、標品のＥＧＣ（１）、ＥＧＣｇ（３）、ＥＣ（４）、ＥＣｇ（６）と同じリテンションタイム（ＲＴ）にピークが検出された（図２Ａ，図２Ｂ）。没食子酸エチルエステル（５）を内部標準とし、標品のピーク面積と比較することにより、それぞれの血中濃度を求めた（表４）。各試験食の摂取６．０時間後に採血して得られた血漿についても、同様に分析を行った。試験食を摂取する前に採血して得られた血漿から抽出したサンプルではこれらのピークは検出されなかったことから（図２Ｃ）、試験食摂取後、これらカテキン類が体内に吸収され、血中にカテキン類が蓄積したことが分かる。
【００６７】
【表４】
2016093143.tif 000005
数値は平均値±標準誤差で示した（ｎ＝５）。本分析条件での血中の各カテキンの検出限界は、ＥＧＣｇとＥＣが０．０００６２５μＭ、ＥＧＣが０．００１２５μＭ、ＥＣｇが０．００６２５μＭであった。
【００６８】
試験食の摂取１．５時間後における血中の総カテキン量を１００％としたときのアグリコンの割合を算出した（図３）。図中、黒色のバーは試験食２の、白色のバーは試験食３の結果を表している。試験食３と試験食２のＥＧＣｇのアグリコンの割合は、それぞれ６８．０％と８５．１％であり、試験食３は試験食２と比較して有意に低下した（図３）。そのほかのＥＣ、ＥＧＣ、ＥＣｇにおいては、試験食３と試験食２のアグリコンの割合に差はなかった（図３）。各カテキンのアグリコンの割合をみてみると、試験食３と試験食２のＥＣのアグリコンの割合はそれぞれ４．１％と２．５％、ＥＧＣではそれぞれ１３．６％と１２．２％であった。これに対し、ＥＧＣｇではそれぞれ６８．０％と８５．１％、ＥＣｇではそれぞれ７０．０％と７１．７％であり、ＥＣおよびＥＧＣと比較すると高い値を示した（図３）。
【００６９】
試験食２及び３に含まれる各カテキンを物質量で表すと、前記試験食にはＥＧＣが０．３５１ｍｍｏｌ、ＥＧＣｇが０．２２１ｍｍｏｌ、ＥＣが０．１３１ｍｍｏｌ、及びＥＣｇが０．２４６ｍｍｏｌ含まれている。表４に示すように、試験食２を摂取して１．５時間後のカテキン類の血中濃度は、ＥＧＣ（０．６８７μＭ）、ＥＧＣｇ（０．１９５μＭ）、ＥＣ（０．４０６μＭ）、ＥＣｇ（０．０６３μＭ）であり、試験食３を摂取して１．５時間後のカテキン類の血中濃度は、ＥＧＣ（０．８１０μＭ）、ＥＧＣｇ（０．１２３μＭ）、ＥＣ（０．５５９μＭ）、ＥＣｇ（０．０２９μＭ）であった。このように、本発明のポリフェノール吸収改善剤は、ＥＧＣ及びＥＣに関しては、ＥＧＣ及びＥＣのみを摂取する場合に比べて、吸収を有意に改善することが分かった。以上のことから、本発明のポリフェノール吸収改善剤は、ポリフェノールの吸収を改善する働きを有する。
【実施例２】
【００７０】
被験者は、１４日間連続して実施例１で用いた試験食１又は試験食３を摂取した。試験食を摂取する前日を試験１日目とし、試験食摂取終了日の翌日を試験１５日目、さらにその１週間後を試験２２日目とした。試験期間中の試験食の摂取は、実施例１と同様の方法で行い、試験開始から２２日目の採血終了後までは緑茶、試験食以外のチョコレートの摂取を禁止した。採血は、試験１日目、１５日目、２２日目の合計３回、各日の９：００に行った。
【００７１】
前記採血後、血漿サンプルの調製及びＨＰＬＣの分析条件は、実施例１に示した方法で行った。試験１５日目に得た試験食３を摂取した被験者の血漿を、上記ＨＰＬＣ条件で分析したところ、ＥＧＣｇ（１）、ＥＣ（２）、ＥＣｇ（３）のピークが検出された（図４Ａ）。試験食を摂取する前に採血して得られた血漿から抽出したサンプルではこれらのピークは検出されなかった（図４Ｂ）ことから、本発明の血中へのポリフェノールの蓄積改善剤の働きにより、カテキン類が血中に蓄積していることが分かる。
【００７２】
試験期間中のカテキン濃度（抱合体代謝物とアグリコンの合計の濃度）の変化を分析し、表５に示した。試験食３を摂取した場合、１日目の被験者５人を平均した血中濃度はそれぞれＥＣが１．９ｎＭ、ほかのＥＧＣ、ＥＧＣｇ、ＥＣｇは検出限界以下であった。１５日目の血中濃度はそれぞれＥＧＣが４．５ｎＭ、ＥＣが１７．５ｎＭ、ＥＣｇが１０．６ｎＭ、ＥＧＣｇは検出限界以下であり、２２日目の血中濃度はそれぞれＥＧＣｇが０．４ｎＭ、ＥＣが８．５ｎＭ、ＥＧＣとＥＣｇは検出限界以下であった。一方、試験食１を摂取した場合、１５日目の血中濃度はそれぞれＥＧＣが４．９ｎＭ、ＥＧＣｇが０．４ｎＭ、ＥＣが１０．７ｎＭであり、ＥＣｇが検出限界以下であった。２２日目の血中濃度はそれぞれＥＣが５．７ｎＭであり、ＥＧＣ、ＥＧＣｇ及びＥＣｇが検出限界以下であった。試験１５日目のＥＣとＥＣｇの血中濃度は試験食３を摂取した場合、試験食１を摂取した場合と比較して有意に高かった。
【００７３】
【表５】
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数値は平均値±標準誤差で示した（ｎ＝５）。＊は試験食１の値に対応した試験食３の値がｐ＜０．０５で有意に差がある場合を示した。（スチューデントｔ検定を行った。）本分析条件での血中の各カテキンの検出限界は、ＥＧＣが０．４１７ｎＭ、ＥＧＣｇとＥＣが０．２０８ｎＭ、ＥＣｇが２．０８３ｎＭであった。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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