(57)【要約】      （修正有）【課題】ストレスにより誘発されたコルチゾールの過多分泌による症状を予防または緩和する組成物の提供。【解決手段】ラクトビオン酸またはラクトビオン酸の塩を有効成分として含有する抗ストレス用または恒常性維持用組成物。ストレスにより誘発されたコルチゾールの過多分泌による症状を予防または緩和する効果があり、ストレスにより誘発された炎症反応を予防または緩和する組成物。前記技術は、ストレスにより誘発された不安障害を予防又は緩和する組成物を使用する方法。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ラクトビオン酸またはラクトビオン酸の塩を有効成分として含有する抗ストレス用組成物。
【請求項２】
ラクトビオン酸またはラクトビオン酸の塩を有効成分として含有する恒常性維持用組成物。
【請求項３】
前記組成物は、ストレスにより誘発されたコルチゾールの過多分泌による症状を予防または緩和することを特徴とする請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
前記組成物は、炎症反応を予防または緩和することを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載の組成物。
【請求項５】
前記組成物は、不安障害を予防または緩和することを特徴とする請求項１〜４のいずれかに記載の組成物。
【請求項６】
前記ラクトビオン酸またはラクトビオン酸の塩は、組成物の総重量に対して０．０００１〜２０重量％の範囲で含有されたことを特徴とする請求項１〜５のいずれかに記載の組成物。
【請求項７】
前記組成物は薬学的組成物であることを特徴とする請求項１〜６のいずれかに記載の組成物。
【請求項８】
前記組成物は化粧料組成物であることを特徴とする請求項１〜７のいずれかに記載の組成物。
【請求項９】
前記組成物は食品組成物であることを特徴とする請求項１〜８のいずれかに記載の組成物。
【請求項１０】
抗ストレス用組成物の製造のためのラクトビオン酸またはラクトビオン酸の塩の使用。
【請求項１１】
恒常性維持用組成物の製造のためのラクトビオン酸またはラクトビオン酸の塩の使用。
【請求項１２】
前記組成物は、ストレスにより誘発されたコルチゾールの過多分泌による症状の予防または緩和用である、請求項１０または１１に記載の使用。
【請求項１３】
前記組成物は、炎症反応の予防または緩和用である、請求項１０〜１２のいずれかに記載の使用。
【請求項１４】
前記組成物は、不安障害の予防または緩和用である、請求項１０〜１３のいずれかに記載の使用。
【請求項１５】
前記組成物は薬学的組成物である、請求項１０〜１４のいずれかに記載の使用。
【請求項１６】
前記組成物は化粧料組成物である、請求項１０〜１４のいずれかに記載の使用。
【請求項１７】
前記組成物は食品組成物である、請求項１０〜１４のいずれかに記載の使用。
【請求項１８】
前記ラクトビオン酸またはラクトビオン酸の塩は、組成物の総重量に対して０．０００１〜２０重量％の範囲で含有された、請求項１０〜１７のいずれかに記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本明細書には、ラクトビオン酸またはラクトビオン酸の塩を有効成分として含有する抗ストレス用または恒常性維持用組成物が開示される。
【背景技術】
【０００２】
身体に加えられた何らかの外部刺激に対して身体が遂行する一般的且つ非特異的な反応をストレスと言う。医学的な概念では、人体の恒常性（ｈｏｍｅｏｓｔａｓｉｓ）と連関して恒常性を破壊する状態をストレス状態と定義する。ストレスによる身体反応の核心はストレスが各種のホルモンや神経伝達物質の分泌と促進を変化させ、これらの物質を分泌、刺激する大脳に直接影響を及ぼすことであり、これにより、ストレスは身体的な問題だけではなく、精神的な問題も引き起こす可能性がある。
【０００３】
ストレスに露出し続けられると、汎適応症候群という一定の生体反応が生じる。これは生体抵抗力の低下、副腎皮質の肥大、全身のリンパ組織の萎縮などとして発現されることがあり、この状態でストレスに露出し続けられると、生体が消耗して再度様々な症状が現われ、身体に害を与えかねない。
【０００４】
皮膚組織でもストレスによる様々な症状が生じかねない。ストレスによって体内コルチゾール濃度が増加すると、皮膚の各組織に様々な影響を与えることで皮膚コンディションを低下させ、また表皮角質細胞などの増殖が抑制されたり、様々な皮膚組織の疾患因子などが増加したりすることが知られている。
【０００５】
皮膚ストレス緩和用化粧料組成物に関する関連先行文献としての韓国登録特許第１０-１３３２２１４号は、蓮華、米及びクソニンジンの複合醗酵抽出物を有効成分とする皮膚ストレス緩和用化粧料組成物を提供している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】韓国登録特許第１０−１３３２２１４号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
一側面において、本明細書に開示された技術は、身体のストレスを軽減させる組成物を提供することを目的とする。
【０００８】
他の側面において、本明細書に開示された技術は、体内恒常性を維持させる組成物を提供することを目的とする。
【０００９】
他の側面において、本明細書に開示された技術は、ストレスにより誘発されたコルチゾール過多分泌による症状を予防または緩和する組成物を提供することを目的とする。
【００１０】
他の側面において、本明細書に開示された技術は、ストレスにより誘発された炎症反応を予防または緩和する組成物を提供することを目的とする。
【００１１】
他の側面において、本明細書に開示された技術は、ストレスにより誘発された不安障害を予防または緩和する組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
一側面において、本明細書に開示された技術は、ラクトビオン酸またはラクトビオン酸の塩を有効成分として含有する抗ストレス用組成物を提供する。
【００１３】
他の側面において、本明細書に開示された技術は、ラクトビオン酸またはラクトビオン酸の塩を有効成分として含有する恒常性維持用組成物を提供する。
【００１４】
一側面において、前記組成物は、ストレスにより誘発されたコルチゾール過多分泌による症状を予防または緩和するものであってよい。
【００１５】
一側面において、前記組成物は、炎症反応を予防または緩和するものであってよい。
【００１６】
一側面において、前記組成物は、不安障害を予防または緩和するものであってよい。
【００１７】
一側面において、前記ラクトビオン酸またはラクトビオン酸の塩は、組成物の総重量に対して０．０００１〜２０重量％の範囲で含有されたものであってよい。
【００１８】
一側面において、前記組成物は薬学的組成物であってよい。
【００１９】
一側面において、前記組成物は化粧料組成物であってよい。
【００２０】
一側面において、前記組成物は食品組成物であってよい。
【００２１】
一側面において、抗ストレス用組成物の製造のためのラクトビオン酸またはラクトビオン酸の塩の使用を提供する。
【００２２】
一側面において、恒常性維持用組成物の製造のためのラクトビオン酸またはラクトビオン酸の塩の使用を提供する。
【００２３】
一側面において、ストレスにより誘発されたコルチゾール過多分泌による症状の予防または緩和用組成物の製造のためのラクトビオン酸またはラクトビオン酸の塩の使用を提供する。
【００２４】
一側面において、炎症反応の予防または緩和用組成物の製造のためのラクトビオン酸またはラクトビオン酸の塩の使用を提供する。
【００２５】
一側面において、不安障害の予防または緩和用組成物の製造のためのラクトビオン酸またはラクトビオン酸の塩の使用を提供する。
【００２６】
一側面において、前記組成物は薬学的組成物であってよい。
【００２７】
一側面において、前記組成物は化粧料組成物であってよい。
一側面において、前記組成物は食品組成物であってよい。
【００２８】
一側面において、前記ラクトビオン酸またはラクトビオン酸の塩は、組成物の総重量に対して０．０００１〜２０重量％の範囲で含有されたものであってよい。
【発明の効果】
【００２９】
一側面において、本明細書に開示された技術は、身体的、精神的ストレスを軽減させる組成物を提供するという効果がある。
【００３０】
他の側面において、本明細書に開示された技術は、体内恒常性を維持させる組成物を提供するという効果がある。
【００３１】
他の側面において、本明細書に開示された技術は、ストレスにより誘発されたコルチゾール過多分泌による症状を予防または緩和する組成物を提供するという効果がある。
【００３２】
他の側面において、本明細書に開示された技術は、ストレスにより誘発された炎症反応を予防または緩和する組成物を提供するという効果がある。
【００３３】
他の側面において、本明細書に開示された技術は、ストレスにより誘発された不安障害を予防または緩和する組成物を提供するという効果がある。
【図面の簡単な説明】
【００３４】
【図１】ラクトビオン酸のストレス低減による細胞増殖効果を示すグラフである。
【図２】ラクトビオン酸のストレス低減による炎症抑制効果を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００３５】
以下、本発明について詳述する。
【００３６】
一側面において、本明細書に開示された技術は、ラクトビオン酸またはラクトビオン酸の塩を有効成分として含有する抗ストレス用組成物を提供する。
【００３７】
他の側面において、本明細書に開示された技術は、ラクトビオン酸またはラクトビオン酸の塩を有効成分として含有する恒常性維持用組成物を提供する。
【００３８】
他の側面において、本明細書に開示された技術は、抗ストレス用組成物の製造のためのラクトビオン酸またはラクトビオン酸の塩の使用に関する。
【００３９】
他の側面において、本明細書に開示された技術は、恒常性維持用組成物の製造のためのラクトビオン酸またはラクトビオン酸の塩の使用に関する。
【００４０】
他の側面において、本明細書に開示された技術は、ストレスにより誘発されたコルチゾール過多分泌による症状の予防または緩和用組成物の製造のためのラクトビオン酸またはラクトビオン酸の塩の使用に関する。
【００４１】
他の側面において、本明細書に開示された技術は、炎症反応の予防または緩和用組成物の製造のためのラクトビオン酸またはラクトビオン酸の塩の使用に関する。
【００４２】
他の側面において、本明細書に開示された技術は、不安障害の予防または緩和用組成物の製造のためのラクトビオン酸またはラクトビオン酸の塩の使用に関する。
【００４３】
前記ラクトビオン酸またはラクトビオン酸の塩は、ストレスにより誘発されたホルモンまたは神経伝達物質による体内の否定的な変化を緩和させることで体内恒常性を維持させる。
【００４４】
４−Ｏ−β−ガラクトピラノシル−Ｄ−グルコン酸で表される下記の一般式１のラクトビオン酸（ｌａｃｔｏｂｉｏｎｉｃ  ａｃｉｄ）は水溶性の白色結晶質化合物であって、ラクトース中の遊離アルデヒド基の酸化を、触媒的に、化学的に、電気分解的に、または酵素的に行うことでラクトースから合成されていてよい。
【００４５】
塩形態のラクトビオン酸は、ナトリウム塩、カリウム塩などのアルカリ金属系塩；カルシウム塩、マグネシウム塩などのアルカリ土類金属系塩；リシン、アルギニン、ヒスチジンなどの塩基性アミノ酸による塩；トリエタノールアミンなどのアミンまたはアンモニアによる塩；ポリクォータニウム−４,６,７,１０,１１,１６などの陽イオン性ポリマーによる塩；及びラウリルジメチルベンジルアムモニウムクロリド、ステアリルジメチルベンジルアンモニウムクロリドなどの陽イオン性界面活性剤による塩の形態であってよい。
【００４６】
【化１】
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【００４７】
一側面において、前記組成物は、ストレスにより誘発されたコルチゾール過多分泌による症状を予防または緩和するものであってよい。
【００４８】
コルチゾールは、副腎皮質で合成され分泌されるステロイドホルモンの一つであって、ヒドロコルチゾン（ｈｙｄｒｏｃｏｒｔｉｓｏｎｅ）とも呼ばれ、タンパク質からの糖の生成を促進するだけでなく、脂質代謝にも影響を及ぼす必須ホルモンである。すなわち、副腎皮質から分泌されたコルチゾールは、筋肉タンパク質を分解させてアミノ酸を生成し、生成されたアミノ酸が血管を通って肝に吸収されて肝で糖が生成され、肝で生成された糖は身体のエネルギー源として用いられ得る。
【００４９】
コルチゾールは、血液中で適当な数値（６〜２３μｇ／ｄｌ）が維持されるように自動で調節されるが、ストレスなどの原因によって副腎皮質からコルチゾールが過多分泌する場合がしばしば発生し、コルチゾールの濃度が増加した状態が長期間持続すると、様々な症状や副作用が起こり得る。例えば、過多なコルチゾールの分泌は、リンパ球を減少させることで免疫機能を弱化させ、様々な疾病を誘発し、また細胞増殖抑制、炎症反応増加、皮膚損傷、睡眠障害、不安障害、憂鬱病、記憶力減退、学習障害、冷汗などのような閉経の副作用増加、骨密度減少、クッシング症候群などのような症状が発現することがある。
【００５０】
一側面において、前記組成物は、炎症反応を予防または緩和するものであってよい。
【００５１】
一側面において、前記組成物は、不安障害を予防または緩和するものであってよい。
【００５２】
一側面において、前記ラクトビオン酸またはラクトビオン酸の塩は、組成物の総重量に対して０．０００１〜２０重量％の範囲で含有されたものであってよい。ラクトビオン酸またはラクトビオン酸の塩を組成物の総重量に対して０．０００１〜２０重量％の範囲で含有することで、抗ストレスまたは体内恒常性維持という効果が僅かであって商品性が劣ったり、含量の増加の割には効果の増加が大きくなくて経済性が劣ったり、過多含量によって否定的な刺激が加えられて安定性が低下したりするなどの問題を予防することができる。
【００５３】
一側面において、前記組成物は薬学的組成物であってよい。前記薬学的組成物は、抗ストレス用または恒常性維持用組成物であって、炎症、睡眠障害、不安障害、憂鬱病、記憶力減退またはクッシング症候群のようなストレスにより誘発されたコルチゾールの過多分泌による症状を予防または緩和することができる。
【００５４】
前記薬学組成物は、経口、非経口、直腸、局所、経皮、静脈内、筋肉内、腹腔内、皮下などに投与されていてよい。
【００５５】
経口投与のための剤形は、錠剤、丸剤、軟質及び硬質カプセル剤、顆粒剤、散剤、細粒剤、液剤、乳濁剤、またはペレット剤であってよいが、必ずしもこれらに制限されるものではない。これらの剤形は、有効成分の他に、希釈剤（例：ラクトース、デキストロース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、セルロース又はグリシン）、滑沢剤（例：シリカ、タルク、ステアリン酸又はポリエチレングリコール）、または結合剤（例：マグネシウムアルミニウムシリケート、澱粉ペースト、ゼラチン、トラガカンス、メチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロース又はポリビニルピロリジン）を含有していてよい。場合に応じて、崩解剤、吸収剤、着色剤、香味剤又は甘味剤等の薬剤学的添加剤を含有していてよい。前記錠剤は、通常的な混合、顆粒化またはコーティング方法により製造されていてよい。
【００５６】
非経口投与のための製剤は、点眼剤、注射剤、点滴剤、ローション、軟膏、ゲル、クリーム、懸濁剤、乳剤、坐剤、パッチまたは噴霧剤であってよいが、必ずしもこれらに制限されるものではない。
【００５７】
なお、前記有効成分は、投与を受ける対象の年齢、性別、体重、病理状態及びその深刻度、投与経路又は処方者の判断に応じて変わるであろう。かかる因子に基づく適用量の決定は当業者の水準内にあり、その１日投与用量は、例えば、０．１ｍｇ／ｋｇ／日〜１００ｍｇ／ｋｇ／日、より具体的には５ｍｇ／ｋｇ／日〜５０ｍｇ／ｋｇ／日とされてよいが、必ずしもこれに制限されるものではない。
【００５８】
一側面において、前記組成物は、化粧料組成物であってよい。前記化粧料組成物は抗ストレス用または恒常性維持用組成物であって、炎症などのようなストレスにより誘発されたコルチゾールの過多分泌による症状を予防または緩和して皮膚損傷を抑制することができる。
【００５９】
前記化粧料組成物の剤形は特に限定されないが、例えば、柔軟化粧水、収斂化粧水、栄養化粧水、栄養クリーム、マッサージクリーム、エッセンス、ゲル、アイクリーム、アイエッセンス、クレンジングクリーム、クレンジングフォーム、クレンジングウォーター、パック、パウダー、ボディーローション、ボディークリーム、ボディーオイル、またはボディーエッセンスなどで剤形化することができる。
【００６０】
前記化粧料組成物は、化粧品学または皮膚科学的に許容し得る媒質または基剤を含有して剤形化することができる。これは、皮膚への適用に適したあらゆる剤形として、例えば、溶液、ゲル、固体、無水ペースト、水相に油相を分散させて得たエマルジョン、懸濁液、マイクロエマルジョン、マイクロカプセル、微細顆粒球、またはイオン性（リポソーム）及び非イオン性の小胞分散剤の形態、またはクリーム、スキン、ローション、パウダー、軟膏、スプレーまたはコンシールスティックの形態で提供されていてよい。また、これらの組成物は、当該分野における通常の方法にて調製されていてよく、フォーム（ｆｏａｍ）の形態、または圧縮された推進剤をさらに含有するエアゾールの形態で提供されていてよい。
【００６１】
また、前記化粧料組成物は、脂肪物質、有機溶媒、溶解剤、濃縮剤、ゲル化剤、軟化剤、抗酸化剤、懸濁化剤、安定化剤、発泡剤（ｆｏａｍｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）、芳香剤、界面活性剤、水、イオン型または非イオン型乳化剤、充填剤、金属イオン封鎖剤、キレート化剤、保存剤、ビタミン、遮断剤、湿潤化剤、必須オイル、染料、顔料、親水性または親油性活性剤、脂質小胞、または通常に用いられる任意の補助剤を含有していてよい。上記補助剤は、化粧品学または皮膚科学分野において一般に用いられる量で含有される。
【００６２】
一側面において、前記組成物は食品組成物であってよい。前記食品組成物は抗ストレス用または恒常性維持用組成物であって、炎症、睡眠障害、不安障害、憂鬱病、記憶力減退、またはクッシング症候群のようなストレスにより誘発されたコルチゾールの過多分泌による症状を予防または緩和することができ、嗜好食品または健康食品組成物を含む。
【００６３】
前記食品組成物の剤形は特に限定されないが、例えば、錠剤、顆粒剤、粉末剤、ドリンク剤のような液剤、キャラメル、ゲル、バーなどで剤形化されていてよい。各剤形の食品組成物は、有効成分の他に当該分野において通常に用いられる成分を剤形または使用目的に応じて当業者が難なく適宜選定して配合することができ、他の原料と同時に適用した場合、相乗効果が奏されることがある。
【００６４】
前記有効成分の投与量の決定は当業者の水準内にあり、その１日投与用量は、例えば、０．１ｍｇ／ｋｇ／日〜５０００ｍｇ／ｋｇ／日、より具体的には、５０ｍｇ／ｋｇ／日〜５００ｍｇ／ｋｇ／日であってよいが、必ずしもこれに制限されるものではなく、投与しようとする対象の年齢、健康状態、合併症などの多様な要因によって変わり得る。
【００６５】
以下、本発明の一側面に係る組成物の剤形例について説明するが、他の様々な剤形に応用することも可能であり、これらは本発明を限定するためのものではなく、単に具体的に説明するために挙げたものに過ぎない。
【００６６】
［剤形例１］健康食品
ラクトビオン酸...................１０００ｍｇ
ビタミン混合物
ビタミンＡアセテート...............７０μｇ
ビタミンＥ.......................１．０ｍｇ
ビタミンＢ１......................０．１３ｍｇ
ビタミンＢ２......................０．１５ｍｇ
ビタミンＢ６......................０．５ｍｇ
ビタミンＢ１２....................０．２μｇ
ビタミンＣ........................１０ｍｇ
ビオチン..........................１０μｇ
ニコチン酸アミド..................１．７ｍｇ
葉酸..............................５０μｇ
パントテン酸カルシウム............０．５ｍｇ
無機質混合物
硫酸第一鉄........................１．７５ｍｇ
酸化亜鉛..........................０．８２ｍｇ
炭酸マグネシウム..................２５．３ｍｇ
第一リン酸カリウム................１５ｍｇ
第二リン酸カルシウム..............５５ｍｇ
クエン酸カリウム..................９０ｍｇ
炭酸カルシウム....................１００ｍｇ
塩化マグネシウム..................２４．８ｍｇ
【００６７】
前記ビタミン及び無機質混合物の組成比は、比較的に健康食品に適合した成分を実施例において混合組成したが、その配合比を任意に変形実施しても構わない。
【００６８】
［剤形例２］健康飲料
ラクトビオン酸.....................１０００ｍｇ
クエン酸...........................１０００ｍｇ
オリゴ糖...........................１００ｇ
タウリン...........................１ｇ
精製水.............................残量
【００６９】
通常の健康飲料製造方法によって前記成分を混合してから、約１時間、８５℃で撹拌加熱した後、得られた溶液をろ過して滅菌した。
【００７０】
［剤形例３］錠剤
ラクトビオン酸１００ｍｇ、大豆抽出物５０ｍｇ、葡萄糖１００ｍｇ、紅参抽出物５０ｍｇ、澱粉９６ｍｇ、及びマグネシウムステアレート４ｍｇを混合し、３０％エタノールを４０ｍｇ添加して造粒した後、６０℃で乾燥し、打錠機を利用して錠剤を打錠した。
【００７１】
［剤形例４］顆粒剤
ラクトビオン酸１００ｍｇ、大豆抽出物５０ｍｇ、葡萄糖１００ｍｇ、及び澱粉６００ｍｇを混合し、３０％エタノールを１００ｍｇ添加して造粒した後、６０℃で乾燥して得た顆粒をカプセルに充填した。
【００７２】
［剤形例５］軟膏
下記の組成によって通常の方法にて軟膏を調製した（重量％）。
ラクトビオン酸...........................３．０
グリセリン...............................８．０
ブチレングリコール.......................４．０
流動パラフィン...........................１５．０
βグルカン...............................７．０
カルボマー...............................０．１
カプリリック/カプリック・トリグリセリド..３．０
スクワラン................................１．０
セテアリルグルコシド......................１．５
ソルビタンステアレート....................０．４
セテアリルアルコール......................１．０
ミツロウ..................................４．０
防腐剤、着色料、香料......................適量
精製水....................................残量
【００７３】
以下、実施例を通じて本発明をより詳しく説明することとする。これらの実施例は単に本発明を例示するためのものに過ぎず、本発明の範囲がこれらの実施例によって制限されると解釈されないのは当業界の通常の知識を有する者にとって自明であろう。
【００７４】
試験例１．ストレス低減による細胞増殖効果
ストレス低減効果は、身体がストレス状況である時に分泌され作用すると知られているコルチゾール（ｃｏｒｔｉｓｏｌ、ｈｙｄｒｏｃｏｒｔｉｓｏｎｅ）を用い、細胞に対する影響を、ラクトビオン酸の有無を比較することで確認した。
【００７５】
不滅化したヒト角質形成細胞であるＨａＣａＴ（ＡＴＣＣ）を１０％  ＦＢＳ（Ｆｅｔａｌ  Ｂｏｖｉｎｅ  Ｓｅｒｕｍ）、５０Ｕ／ｍｌペニシリン、５０μｇ／ｍｌストレプトマイシンが添加されたＤＭＥＭ培地を利用し、３７℃、５％  ＣＯ２条件で培養した。培養されたＨａＣａＴ細胞を１．０×１０４濃度で９６ウェルプレートにシディング（ｓｅｅｄｉｎｇ）して一晩中培養した後、細胞培養培地を、ＦＢＳを除去した血清飢餓（ｓｅｒｕｍ  ｓｔａｒｖａｔｉｏｎ）培地に交換し、コルチゾール１００μＭと共にラクトビオン酸を濃度別（０．２５、０．５、１．０ｐｐｍ）に処理した。物質処理して２４時間後にＭＴＴアッセイを行って、物質が細胞増殖に及ぼす影響を評価した。ＭＴＴアッセイの詳細事項は次のとおりである。
【００７６】
ＭＴＴ（３−（４,５−ｄｉｍｅｔｈｙｌｔｈｉａｚｏｌ−２−ｙｌ）−２,５−ｄｉｐｈｅｎｙｌｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅ）パウダーを培養培地に０．５ｍｇ／ｍｌ濃度で溶かし込んでＭＴＴ溶液を調製して細胞に処理し、その後１時間の間インキュベーターで培養した。培養が終わった後に細胞の培地を除去し、ウェル当たり１００μｌのＤＭＳＯを処理してホルマザンを溶かした後、５７０ｎｍでの吸光度を測定した。
【００７７】
その結果、図１に示すように、ストレスホルモンであるコルチゾールが存在する条件では細胞増殖率が減少しており、ラクトビオン酸が処理された場合、ストレスの影響であると見られるコルチゾール影響を減少させ、細胞コンディションを正常に取り戻して細胞増殖を促進することが分かった。
【００７８】
試験例２．ストレス低減による炎症抑制効果
前記試験例１と同様、コルチゾール（ｃｏｒｔｉｓｏｌ、ｈｙｄｒｏｃｏｒｔｉｓｏｎｅ）を用い、細胞に対するラクトビオン酸の影響を、炎症抑制の面においてラクトビオン酸の有無を比較することで確認した。
【００７９】
試験例１と同法にてラクトビオン酸を処理した後、培養が終わった試験群の培養培地を回収して細胞から培地に排出された炎症因子の変化を測定した。詳細試験法は次のとおりである。
【００８０】
回収した培地を１２、０００ｒｐｍで３分間遠心分離した後、上層液だけを回収して培地中の不純物を除去した。精製された培地はＭｏｓａｉｃＴＭ  ＥＬＩＳＡ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ＵＳＡ）試薬とＬＡＳ３０００（ＦｕｊｉＦｉｌｍ、Ｊａｐａｎ）機器を利用して、培地中の炎症因子の変化をイメージ化し、Ｍｕｌｔｉ  Ｇａｕｇｅ３．０（ＦｕｊｉＦｉｌｍ、Ｊａｐａｎ）イメージ分析プログラムを利用してデータを定量化した。ＭｏｓａｉｃＴＭ  ＥＬＩＳＡの詳細方法は製造メーカが提供したプロトコルに従った。
【００８１】
その結果、図２に示すように、ストレスホルモンであるコルチゾールが存在する条件では炎症誘発因子が増加しており、さらに、ラクトビオン酸が処理された場合、ストレス影響であると見られるコルチゾール影響を減少させ、細胞コンディションを正常に取り戻して炎症反応を抑制することが分かった。
【００８２】
試験例３．全身性ストレス低減効果
表１に表された組成に従ってラクトビオン酸を含有する実施例１と比較例１のエマルジョン剤形を次のように製造した。
【００８３】
実施例１の製造方法を見てみると、先ず、水相にグリセリン（溶媒）とブチレングリコール、フェノキシエタノールをを添加した後、７０℃に加温して溶解させた。別途の油相には、ハイドロジェネイテッドＣ６−１４オレフィンポリマー（ハイドロジェネイテッドポリデセン）、セチルオクタノエートのオイルにステアリン酸、セテアリルアルコールと乳化剤であるポリソルベート６０、ソルビタンステアレート、香料を添加して油相を調製した。油相も７０℃に加温してゆっくり溶解させた。水相パーツと油相パーツが用意されると、７０℃で非常に高速のミキサー（Ｈｏｍｏｇｅｎｉｚｅｒ）を利用して、５分間７０００ｒｐｍで混合した後、カルボマーを添加して粘増及び安定化し、ラクトビオン酸を投入してよく混ぜ込み、完全に混合されると、冷却しながらゆっくり掻き混ぜた。比較例１は、ラクトビオン酸の代りに水を同量で用いたことを除いては、前記実施例１と同法にて調製した。また、別途に実施した安全性の評価でも、前記組成物はヒトに対する安全性に優れていると示された。
【００８４】
【表１】
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【００８５】
実施例１及び比較例１の皮膚改善効果を調べるために、３０代の女性２０名（実施例１：１０名、比較例１：１０名）に対し、朝、夕方の毎日２回ずつ４週間にわたって顔面に塗布するようにした。また、全身性のストレス低減効果を、被験者に対するアンケート評価にて確認した。
【００８６】
試験対象者に対し、実施例１及び比較例１の一般的な評価、効能性評価などと共にストレス程度に関するアンケート評価を行った結果、皮膚が改善し、且つ皮膚だけではなく全体的にストレスが低減したという意見が、実施例１を使用したグループの方が比較例１を使用したグループよりも約３５％程度高いと調査された。すなわち、ラクトビオン酸はストレスを低減し且つ体内恒常性を維持させ、ストレスにより誘発されたコルチゾールの過多分泌により発現する症状である細胞損傷、炎症、憂鬱病、不安障害などを緩和する効果があることが分かった。
【００８７】
以上、本発明内容の特定の部分を詳しく記述したところ、当業界の通常の知識を有する者にとって、このような具体的な技術は単に好適な実施態様であるに過ぎず、これらによって本発明の範囲が制限されるものではない点は明白であろう。よって、本発明の実質的な範囲は、請求項とそれらの等価物によって定義されるといえよう。
【図１】
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【図２】
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