(57)【要約】【課題】フェノール類と糖類とを含有する混合水溶液から効率良くフェノール類を分離回収する方法及び疎水性イオン液体の使用を提供する。【解決手段】フェノール類の分離回収方法は、（ａ）フェノール類と糖類とを含有する混合水溶液を、疎水性イオン液体に接触させることで、フェノール類を疎水性イオン液体相に移行させる工程と、（ｂ）前記工程（ａ）後に得られた疎水性イオン液体相からフェノール類を回収する工程と、を含む。【選択図】図１
2016050192.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）フェノール類と糖類とを含有する混合水溶液を、疎水性イオン液体に接触させることで、フェノール類を疎水性イオン液体相に移行させる工程と、
（ｂ）前記工程（ａ）後に得られた疎水性イオン液体相からフェノール類を回収する工程と、
を含む、
ことを特徴とするフェノール類の分離回収方法。
【請求項２】
前記工程（ｂ）は、前記工程（ａ）後に得られた疎水性イオン液体相に、架橋剤を加えて加熱することで、フェノール類を高分子化させる工程（ｂ’）を含む、
ことを特徴とする請求項１に記載の分離回収方法。
【請求項３】
前記工程（ｂ’）における加熱温度は、１００〜３００℃である、
ことを特徴とする請求項２に記載の分離回収方法。
【請求項４】
前記工程（ｂ’）における加熱時間は、１〜４００分間である、
ことを特徴とする請求項２又は３に記載の分離回収方法。
【請求項５】
前記架橋剤は、パラホルムアルデヒド、ホルムアルデヒド及びこれらの組み合わせからなる群より選択される、
ことを特徴とする請求項２乃至４のいずれか１項に記載の分離回収方法。
【請求項６】
前記工程（ｂ）は、前記工程（ａ）後に得られた疎水性イオン液体相に、貧溶媒を加える工程を含む、
ことを特徴とする請求項１乃至５のいずれか１項に記載の分離回収方法。
【請求項７】
フェノール類と糖類とを含有する混合水溶液からフェノール類を分離回収するための、疎水性イオン液体の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、フェノール類の分離回収方法及び疎水性イオン液体の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
大部分の植物には、フェノール類と糖類とが含まれている。植物中に含まれるフェノール類については、生理活性物質や工業原料への利用が期待され、また、植物中に含まれる糖類については、発酵などを経てバイオエタノールや他のバイオプロダクトの原料として活用されることが期待されている。
【０００３】
植物汁に含まれるフェノール類を分離して回収する方法について、いくつか報告がなされている。
【０００４】
特許文献１には、渋柿に含まれるフェノール類であるタンニンを、限外ろ過膜により糖類と分離し、回収する方法が記載されている。
【０００５】
また、特許文献２及び非特許文献１には、植物汁に含まれるフェノール類を樹脂に吸着させて、アルカリ又は複数種類の有機溶媒で選択的に洗い出す方法が記載されている。
【０００６】
一方、イオン液体は、難燃性、不揮発性等の性質を有するため、環境に優しい溶媒として近年注目されている（非特許文献２）。イオン液体については、電池材料、化学反応場、溶媒等への応用が期待されている。
【０００７】
疎水性イオン液体は、水と混じりあわない性質を有する。この性質を利用して、低分子フェノール類を水から液液抽出する研究が行われている。より具体的には、非特許文献３−５において、水中のフェノール類を、イオン液体を用いて液液抽出する方法が記載されている。
【０００８】
また、親水性イオン液体中に含まれるフェノール類に架橋剤を添加して加熱し、高分子化させる技術が報告されている。より具体的には、非特許文献６−８において、触媒として硫酸を添加したイオン液体又はスルホン酸基を導入したイオン液体を用いて、フェノール標品を高分子化する手法が記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】特開平１０−１５３５８号公報
【特許文献２】特開２００２−３３５９１１号公報
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】木材学会誌５５巻、第５９頁−第６８頁、２００９年
【非特許文献２】イオン液体  −常識を覆す不思議な塩―  北爪智哉、渕上寿雄、沢田秀夫、伊藤敏幸著、コロナ社発行
【非特許文献３】Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．６１，ｐ３２４−３３１，２００８
【非特許文献４】Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｖｏｌ．３８１，ｐ４６４−４７０，２００５
【非特許文献５】Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．３９，ｐ２１５５−２１６９，２００５
【非特許文献６】Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ，Ｖｏｌ．４１，ｐ８５３３−８５３６頁，２００８
【非特許文献７】Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｊｏｕｒｎａｌ，Ｖｏｌ．４３，ｐ４２１−４２４，２０１１
【非特許文献８】第３回イオン液体討論会  要旨集、８０頁、第３回イオン液体討論会実行委員会発行、２０１２年
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
しかしながら、特許文献１に記載の方法では、分子量の違いを利用してフェノール類を分離する。このため、糖類側への低分子のフェノール類の漏出を回避できず、糖類の有効利用が難しい場合があり、また、フェノール類の収率に限界が生じていた。また、膜を使用する分離方法であるため、膜のつまりが生じることが難点であった。
【００１２】
また、特許文献２及び非特許文献１の方法では、樹脂の劣化が懸念され、また、大量のアルカリ又は有機溶媒を使用するため、コストの点でデメリットを有していた。
【００１３】
また、非特許文献３−５の方法では、水中のフェノール類を抽出することはできるものの、植物汁に糖類とともに含まれるフェノール類を分離して回収するのは困難であった。
【００１４】
また、非特許文献６−８の方法では、液液抽出時において硫酸が水相に流出してしまうこと、及びスルホン酸基を導入したイオン液体は親水性が高くなることから、液液抽出においてフェノール類を効率的に分離できないという課題を有していた。
【００１５】
本発明は、上記事情に鑑みてなされたものであり、フェノール類と糖類とを含有する混合水溶液から効率良くフェノール類を分離回収する方法及び疎水性イオン液体の使用を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
上記目的を達成するため、本発明の第１の観点に係るフェノール類の分離回収方法は、
（ａ）フェノール類と糖類とを含有する混合水溶液を、疎水性イオン液体に接触させることで、フェノール類を疎水性イオン液体相に移行させる工程と、
（ｂ）前記工程（ａ）後に得られた疎水性イオン液体相からフェノール類を回収する工程と、
を含む、
ことを特徴とする。
【００１７】
例えば、前記工程（ｂ）は、前記工程（ａ）後に得られた疎水性イオン液体相に、架橋剤を加えて加熱することで、フェノール類を高分子化させる工程（ｂ’）を含む。
【００１８】
例えば、前記工程（ｂ’）における加熱温度は、１００〜３００℃である。
【００１９】
例えば、前記工程（ｂ’）における加熱時間は、１〜４００分間である。
【００２０】
例えば、前記架橋剤は、パラホルムアルデヒド、ホルムアルデヒド及びこれらの組み合わせからなる群より選択される。
【００２１】
例えば、前記工程（ｂ）は、前記工程（ａ）後に得られた疎水性イオン液体相に、貧溶媒を加える工程を含む。
【００２２】
本発明の第２の観点に係る疎水性イオン液体の使用は、フェノール類と糖類とを含有する混合水溶液からフェノール類を分離回収するための使用である。
【発明の効果】
【００２３】
本発明によれば、フェノール類と糖類とを含有する混合水溶液から効率良くフェノール類を分離回収する方法及び疎水性イオン液体の使用を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１】液液抽出工程から樹脂化工程の各段階における疎水性イオン液体相を吸光光度計によって１９０ｎｍから５００ｎｍまでの波長間で観察した結果を示す図である。
【図２】使用前の疎水性イオン液体と、樹脂様物質回収後の疎水性イオン液体と、を核磁気共鳴装置で観察した結果を示す図である。（ａ）は使用前の疎水性イオン液体の１Ｈ  ＮＭＲによる観察結果を示す図であり、（ｂ）は樹脂様物質回収後の疎水性イオン液体の１Ｈ  ＮＭＲによる観察結果を示す図であり、（ｃ）は使用前の疎水性イオン液体の１３Ｃ  ＮＭＲによる観察結果を示す図であり、（ｄ）は樹脂様物質回収後の疎水性イオン液体の１３Ｃ  ＮＭＲによる観察結果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
まず、本発明によるフェノール類の分離回収方法について詳細に説明する。
【００２６】
本発明によるフェノール類の分離回収方法は、
（ａ）フェノール類と糖類とを含有する混合水溶液を、疎水性イオン液体に接触させることで、フェノール類を疎水性イオン液体相に移行させる工程と、
（ｂ）前記工程（ａ）後に得られた疎水性イオン液体相からフェノール類を回収する工程と、
を含む。
【００２７】
本明細書において、“フェノール類”とは、縮合型タンニン、加水分解型タンニン、ポリフェノール、フラボノイド等をいう。なお、後述するように、“フェノール類と糖類とを含有する混合水溶液”が植物由来のものである場合には、本明細書において、フェノール類を“植物フェノール類”という場合がある。また、“糖類”とは、グルコース、フルクトース、キシロース、アラビノース、ガラクトース、マルトース、スクロース、ラフィノース、デンプン、マルトオリゴ糖、セロオリゴ糖、キシロオリゴ糖等をいう。
【００２８】
上記工程（ａ）における“フェノール類と糖類とを含有する混合水溶液”（以下、単に“混合水溶液”という） とは、植物由来のものが好ましく、例えば、植物の葉、果実、茎、根、種子、樹皮（針葉樹樹皮、広葉樹樹皮等）等から水（熱水を含む）、有機溶媒、水と有機溶媒との混合液等で抽出したもの（本明細書において、これを“植物汁”又は“果汁”という場合がある）；植物を原料とした食品、飲料、医薬品等の製造工程で生じる排出液；リグノセルロースを高温高圧の水、有機溶媒、酸、アルカリ等を用いて分解して得られたリグニン由来のフェノール類と、セルロース、ヘミセルロース由来の糖類と、が水中に混在した液などが挙げられる。なお、“植物汁”については、植物からの抽出に有機溶媒を用いる場合には、抽出後、有機溶媒を留去して、植物フェノール類と糖類とが水に溶解又は分散した状態とする。
【００２９】
例えば、樹皮から“フェノール類と糖類とを含有する混合水溶液”を得る場合には、以下のように調製することができる；樹皮を風乾して粉砕し、含水エタノールで抽出する；得られた抽出液について、エバポレーターを用いて減圧下で加熱してエタノールの大部分を揮発させて除去した後、水を加えて加熱することで内容物を再溶解又は分散させる；その後、この液を冷却して生じた沈殿物をろ紙でろ過することで除去し、濾液を得る；このようにして得られた濾液を、混合水溶液とする。
【００３０】
本明細書において、“疎水性イオン液体”とは、有機又は無機陽イオンと、有機又は無機陰イオンと、の組み合わせからなり、融点が１００℃以下のイオン液体の中で、特に水と相分離して二層を形成するイオン液体のことをいう。疎水性イオン液体として、例えば、以下のものが挙げられる。
［Ｃ８ｍｉｎ］［ＢＦ４］：１−ｍｅｔｈｙｌ−３−ｏｃｔｙｌｉｍｉｄａｚｏｌｉｕｍ  ｔｅｔｒａｆｌｕｏｒｏｂｏｒａｔｅ
［ＤＭＭＡ］［ＮＴｆ２］：Ｎ，Ｎ−Ｄｉｅｔｈｙｌ−Ｎ−ｍｅｔｈｙｌ−Ｎ−（２−ｍｅｔｈｏｘｙｅｔｈｙｌ）ａｍｍｏｎｉｕｍ  Ｂｉｓ（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈａｎｅｓｕｌｆｏｎｙｌ）ｉｍｉｄｅ）
［Ｃ４ｍｉｍ］［ＰＦ６］：１−Ｂｕｔｙｌ−３−ｍｅｔｈｙｌｉｍｉｄａｚｏｌｉｕｍ  Ｈｅｘａｆｌｕｏｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ
［Ｃ６ｍｉｍ］［ＰＦ６］：１−Ｈｅｘｙｌ−３−ｍｅｔｈｙｌｉｍｉｄａｚｏｌｉｕｍ  Ｈｅｘａｆｌｕｏｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ
［Ｃ８ｍｉｍ］［ＰＦ６］：１−Ｍｅｔｈｙｌ−３−ｏｃｔｙｌｉｍｉｄａｚｏｌｉｕｍ  Ｈｅｘａｆｌｕｏｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ
［Ｃ６ｍｉｍ］［ＢＦ４］：１−Ｈｅｘｙｌ−３−ｍｅｔｈｙｌｉｍｉｄａｚｏｌｉｕｍ  Ｔｅｔｒａｆｌｕｏｒｏｂｏｒａｔｅ
［Ｃ８ｍｉｍ］［ＢＦ４］：１−Ｍｅｔｈｙｌ−３−ｏｃｔｙｌｉｍｉｄａｚｏｌｉｕｍ  Ｔｅｔｒａｆｌｕｏｒｏｂｏｒａｔｅ
［ＢＭｐｙｒｒ］［ＰＦ６］：１−Ｂｕｔｙｌ−１−Ｍｅｔｈｙｌｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｉｕｍ  Ｈｅｘａｆｌｕｏｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ
【００３１】
［Ｃ８ｍｉｎ］［ＢＦ４］の化学式を以下に示す。
【００３２】
【化１】
2016050192.tif 000003
【００３３】
上記工程（ａ）で用いられる疎水性イオン液体は、１種類の疎水性イオン液体であってもよく、２又は３種類以上の疎水性イオン液体の混合物であってもよい。２又は３種類以上の疎水性イオン液体の混合物を用いる場合、その配合割合については適宜設定することができる
【００３４】
上記工程（ａ）における“混合水溶液を、疎水性イオン液体に接触させる”ことについて説明する。“混合水溶液を、疎水性イオン液体に接触させる”とは、例えば、混合水溶液に疎水性イオン液体を加えてミキサー等で攪拌することを表す。疎水性イオン液体は、水と相分離して二層を形成する性質を有するため、“混合水溶液を、疎水性イオン液体に接触させる”ことで、疎水性イオン液体相と水相とに二層化される。二層化させる際には、公知の遠心分離の手法を用いて水相と疎水性イオン液体相との二層化を促進させてもよい。“混合水溶液を、疎水性イオン液体に接触させる”ことで、疎水性イオン液体相と水相とに二層化され、混合水溶液中に含まれていたフェノール類は疎水性イオン液体相に移行し、糖類は水相に残存する。水相に残存した糖類については、公知の手法を用いて回収することができる。
【００３５】
なお、本明細書において、上記工程（ａ）を“液液抽出工程”という場合があり、また、上記工程（ａ）を行うことを “液液抽出”という場合がある。
【００３６】
上記工程（ａ）を混合水溶液に対して繰り返し行ってもよい。すなわち、疎水性イオン液体を用いた液液抽出後の水相を、疎水性イオン液体に接触させて再度液液抽出を行ってもよい。このように、液液抽出を２又は３回以上繰り返して行ってもよい。
【００３７】
上記工程（ｂ）、すなわち、工程（ａ）後に得られた疎水性イオン液体相からフェノール類を回収する工程について説明する。工程（ａ）後に得られた疎水性イオン液体相には、前述の通り、混合水溶液中から移行したフェノール類が含まれている。工程（ｂ）は、疎水性イオン液体相からフェノール類を回収する工程である。フェノール類を回収する方法は、特に限定されるものではなく、疎水性イオン液体相からフェノール類を回収することのできる方法であれば適宜採用され得る。疎水性イオン液体相からフェノール類を回収する方法として、例えば、疎水性イオン液体相に、架橋剤を加えて加熱することで、フェノール類を高分子化させて回収する方法；及び疎水性イオン液体相に、貧溶媒を加えて回収する方法等を挙げることができる。以下、各々の方法について説明する。
【００３８】
疎水性イオン液体相に、架橋剤を加えて加熱することで、フェノール類を高分子化させる方法について説明する。つまり、上記工程（ｂ）は、例えば、工程（ａ）後に得られた疎水性イオン液体相に、架橋剤を加えて加熱することで、フェノール類を高分子化させる工程（ｂ’）を含んでいてもよい。工程（ｂ’）によって疎水性イオン液体相に含まれるフェノール類を高分子化させることができるため、疎水性イオン液体相からのフェノール類の回収が容易となる。この場合、疎水性イオン液体相から高分子化されたフェノール類を回収する方法については、特に限定されるものではなく、例えば、貧溶媒を加えて回収する方法（後述）等を挙げることができる。
【００３９】
工程（ｂ’）で用いられる架橋剤は、例えば、パラホルムアルデヒド、ホルムアルデヒド及びこれらの組み合わせからなる群より選択される。疎水性イオン液体中でフェノール類を高分子化させることのできる架橋剤であれば、適宜用いることができる。
【００４０】
工程（ｂ’）における加熱温度は、例えば、１００〜３００℃であり、加熱時間は、例えば、１〜４００分間であるのが好ましく、加熱温度１０５〜１４０℃、加熱時間３〜３６０分間であるのがより好ましい。フェノール類の高分子化は脱水縮合反応によるものであり、疎水性イオン液体相に水分が残存していると反応が起こりにくい場合があることから、反応を促進させるために、減圧条件下で加熱してもよい。加熱時の減圧は、例えば、水流アスピレーターよって行うことができる。
【００４１】
疎水性イオン液体相に、貧溶媒を加える方法について説明する。つまり、上記工程（ｂ）は、工程（ａ）後に得られた疎水性イオン液体相に、貧溶媒を加える工程（ｂ’’）を含んでいてもよい。工程（ｂ’ ’）によって疎水性イオン液体相に含まれるフェノール類を固体として析出させることができるため、フェノール類を固液分離して回収することが可能となる。
【００４２】
工程（ｂ’’）で用いられる貧溶媒として、例えば、アルコール類（メタノール、エタノール、プロパノール、イソプピルアルコール、ｎ−ブタノール、イソブタノール、ターシャリーブタノール等）、ケトン類（アセトン、エチルメチルケトン等）、エーテル類（ジメチルエーテル、ジエチルエーテル等）、エステル類（酢酸エチル等）、ニトリル類（アセトニトリル等）、脂肪族炭化水素類（ペンタン、イソペンタン、ｎーヘキサン等）、芳香族類（ベンゼン、トルエン、キシレン等）、ジクロロメタン等が挙げられる。貧溶媒として、これらのうちいずれか１種を単独で用いてもよいし、２又は３種以上の混合物を用いてもよい（例えば、アセトン：ｎ−ヘキサン＝３：１、エタノール：ベンゼン：アセトン＝１：２：３、ジエチルエーテル：アセトン＝１：１、エタノール：ｎ−ヘキサン＝２：１（いずれも体積比））。疎水性イオン液体と相溶し、フェノール類を固体として析出させることのできる貧溶媒であれば、適宜用いることができる。
【００４３】
工程（ｂ’’）において析出したフェノール類については、ろ過、遠心沈殿等の公知の固液分離手法により回収することができる。また、貧溶媒と疎水性イオン液体相との混合物については、液体として回収することができる。なお、疎水性イオン液体は極めて揮発しにくい性質を有するため、貧溶媒と疎水性イオン液体との混合物については、公知の蒸留などの操作により容易に分離することができ、貧溶媒と疎水性イオン液体とをそれぞれ回収することができる。
【００４４】
なお、工程（ｂ’）と工程（ｂ’’）とを組み合わせることで、より高い収率で疎水性イオン液体相中のフェノール類を回収することができる。すなわち、工程（ｂ’）によって疎水性イオン液体相中のフェノール類を高分子化させた後に、工程（ｂ’’）によって、疎水性イオン液体相に貧溶媒を加えてフェノール類を固体として析出させることで、より効率的にフェノール類を固液分離して回収することが可能となる。なお、このようにして析出した固体のフェノール類を、本明細書において、“樹脂化物質”という場合がある。
【００４５】
本明細書において、工程（ｂ’）と工程（ｂ’’）とを組み合わせた工程を、“樹脂化工程”という場合がある。なお、液液抽出工程から樹脂化工程を経て回収された疎水性イオン液体については、変性や異物残存の可能性が極めて低く、また、疎水性イオン液体のほぼ全量を回収できることから、混合水溶液を用いた液液抽出に再利用することができる。このように、一般的に高価である疎水性イオン液体の再利用が可能であることは、低コスト化の観点からメリットが大きいといえる。
【００４６】
次に、本発明による、フェノール類と糖類とを含有する混合水溶液からフェノール類を分離回収するための、疎水性イオン液体の使用について説明する。
【００４７】
本発明者らは、疎水性イオン液体を、フェノール類と糖類とを含有する混合水溶液からフェノール類を分離回収するために用いることができることを新たに見出した。疎水性イオン液体の使用は、フェノール類と糖類とを含有する混合水溶液からフェノール類を分離回収するためのものである。疎水性イオン液体の詳細、フェノール類と糖類とを含有する混合水溶液の詳細等については、前述同様である。
【００４８】
以上説明したように、本発明の分離回収方法によれば、フェノール類と糖類とを含有する混合水溶液から、フェノール類と糖類とを高分配率で分離することができるため、効率的にフェノール類を分離回収することができる。また、液液抽出後に水相に残存した糖類については、公知の手法を用いて回収することができ、フェノール類の混入が少ない糖類を得ることができる。このように、本発明の分離回収方法によれば、混合水溶液に含まれる糖類及びフェノール類の双方を分離して回収することができ、糖類及びフェノール類の各々の有効活用に資することができる。
【００４９】
また、本発明の分離回収方法によれば、硫酸などの触媒を加えることなく、また、大量の溶媒を用いる必要もないため、低コストでフェノール類と糖類とを分離することができるとともに、フェノール類を高収率で回収することができる。
【実施例】
【００５０】
以下、実施例を挙げて本発明を具体的に説明する。ただし、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【００５１】
（実施例１）
（混合水溶液の調製）
国内の人工林から得られたカラマツ樹皮を風乾して粉砕し、３０℃の含水エタノール（５０：５０、ｖ／ｖ）で１時間抽出した。得られた抽出液について、エバポレーターを用いて減圧下で５０℃に加熱してエタノールの大部分を揮発させて除去した後、脱イオン水を加えて８０℃に加熱して内容物を再溶解又は分散させた。その後、この液を２０〜３０℃程度に冷却して生じた沈殿物をＮｏ．５Ｃのろ紙でろ過することで除去し、濾液を得た。このようにして得られた濾液を、混合水溶液とした。混合水溶液中の植物フェノール類量及びグルコース量を測定した。
【００５２】
植物フェノール類量については、フォーリン・シオカルト試薬（Ｆｏｌｉｎ−Ｃｉｏｃａｌｔｅｕ’ｓ  ｐｈｅｎｏｌ  ｒｅａｇｅｎｔ，  Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）を用いて測定した。（＋）−Ｃａｔｅｃｈｉｎで検量線を作成し、カテキン当量で濃度を測定した。
【００５３】
グルコース量については、Ｈｉｙａｍａらの方法（Ｈｉｙａｍａ  Ｒ，  Ｇｉｓｕｓｉ  Ｓ，  Ｈａｒａｄａ  Ａ  （２０１１）  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｗａｓｔｅ  ｍｕｓｈｒｏｏｍ  ｍｅｄｉｕｍ  ｆｒｏｍ  ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｓｈｉｉｔａｋｅ  ｍｕｓｈｒｏｏｍ  （Ｌｅｎｔｉｎｕｌａ  ｅｄｏｄｅｓ）  ａｓ  ｆｅｅｄｓｔｏｃｋ  ｏｆ  ｅｎｚｙｍｉｃ  ｓａｃｃｈａｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ．  Ｊ  Ｗｏｏｄ  Ｓｃｉ  ５７：  ４２９-４３５）に従い、直列に２本のカラム（Ａｍｍｉｎｅｘ  ＨＰＸ−８７Ｐ  ×２，  Ｂｉｏ−Ｒａｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を接続した高速液体クロマトグラフィー（Ｌ２０００  ｓｅｒｉｅｓ；  Ｈｉｔａｃｈｉ  Ｈｉｇｈ−Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を用い、示差屈折分析装置で測定した。カラム温度は８０℃とし、脱イオン水を１ｍＬ／ｍｉｎで流した。
【００５４】
混合水溶液中の植物フェノール類量は３．０５ｇ／Ｌであり、グルコース量０．５３ｇ／Ｌであった（表１）。
【００５５】
【表１】
2016050192.tif 000004
【００５６】
（液液抽出工程）
次に、液液抽出工程を行った。より具体的には、前述で得られた混合水溶液２．５ｍＬを試験管に入れ、疎水性イオン液体である１−ｍｅｔｈｙｌ−３−ｏｃｔｙｌｉｍｉｄａｚｏｌｉｕｍ  ｔｅｔｒａｆｌｕｏｒｏｂｏｒａｔｅ（［Ｃ８ｍｉｎ］［ＢＦ４］）を１．５ｍＬ加え、チューブミキサーにて５秒間程度激しく撹拌し、遠心分離を行った。この際、液液抽出前には着色していた水相の色が、液液抽出後にはほぼ無色透明に変化し、一方、液液抽出前には淡色であった疎水性イオン液体相の色が、液液抽出後には褐色に変化したことが肉眼で観察された。液液抽出後の植物フェノール類量及びグルコース量の水相残存率を表１に示す。
【００５７】
表１より、液液抽出後には、水相の植物フェノール類が４．０％にまで減少しており、液液抽出によって植物フェノール類とグルコースとを高い分離率で分離できたことが示された。また、上述したように、水相及び疎水性イオン液体相の色の変化が観察されたことから、水相中に存在していた植物フェノール類が、液液抽出後に疎水性イオン液体相に移行したことが示唆された。
【００５８】
（樹脂化工程）
次に、樹脂化工程を行った。より具体的には、疎水性イオン液体相に、架橋剤としてパラホルムアルデヒドを４倍モル（約３ｍｇ）加えた後、撹拌子を入れ、加熱温度１０５±２℃にて、水流アスピレーター減圧下で撹拌しながら６時間加熱した。加熱後、室温付近まで冷却させ、貧溶媒（アセトン：ｎ−ヘキサン＝３：１（体積比））を２０ｍＬ程度加えて沈殿を生じさせた。沈殿を１Ｇ  Ｐ１６のガラスフィルターでろ過して乾燥させて、樹脂様の固体（以下、樹脂様物質）を得た。樹脂様物質の重量は１０．０ｍｇであった。
【００５９】
（疎水性イオン液体相の分析）
前述の各段階における疎水性イオン液体相をメタノールで希釈して、吸光光度計（２２８Ａ  Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒ日立）によって１９０ｎｍから５００ｎｍまでの波長間で観察した。結果を図１に示す。
【００６０】
図１に（１）として、疎水性イオン液体を観察した結果を示す。疎水性イオン液体のみを観察すると、２３４ｎｍに単一のピークが見られた。これは疎水性イオン液体のイミダゾリウム環の紫外光の吸光によるものである。
【００６１】
図１に（２）として、液液抽出後の疎水性イオン液体相を観察した結果を示す。植物フェノール類による２８２ｎｍのピークが見られ、植物フェノール類が疎水性イオン液体に溶け込んだ様子がわかる。
【００６２】
図１に（３）として、樹脂化工程においてパラホルムアルデヒドを加えた後の疎水性イオン液体相を観察した結果を示す。図１（２）とピーク形状に大きな変化は見られなかった。
【００６３】
図１に（４）として、樹脂化工程においてパラホルムアルデヒドを加え、加熱した直後の疎水性イオン液体相を観察した結果を示す。加熱後には、疎水性イオン液体相の色が若干濃くなることが肉眼で観察された。
【００６４】
図１に（５）として、樹脂化工程において貧溶媒を加えて沈殿を生じさせ、ろ過により樹脂様物質を除いた後の疎水性イオン液体相を観察した結果を示す。２３４ｎｍのピークに大きな変化は見られなかった一方で、植物フェノール類による２８２ｎｍのピークは、前述の（２）−（４）に比べて大幅に小さくなっていた。
【００６５】
これらのことから、液液抽出前には水相中に存在していた植物フェノール類が、液液抽出後に疎水性イオン液体相に移行したこと、さらに樹脂化工程後には、疎水性イオン液体相に存在していた植物フェノール類の大部分が樹脂様物質として回収されたことが示された。
【００６６】
なお、樹脂化工程後に得られた樹脂様物質の重量は、前述の通り、１０．０ｍｇであった。疎水性イオン液体相に移行した植物フェノール類と添加したパラホルムアルデヒドの量とを基準にすると、収率１２２％と算出された。収率が１００％を超えた理由として、樹脂様物質に貧溶媒及び疎水性イオン液体が取り込まれていることが考えられた。また、樹脂様物質回収後には、濾液の色がごく薄くなったことが目視にて観察されたことから、植物フェノール類の大部分が樹脂様物質として回収されたと考えられた。
【００６７】
（使用前後の疎水性イオン液体の評価）
使用前の疎水性イオン液体と、樹脂様物質回収後の疎水性イオン液体と、を核磁気共鳴装置（ＪＮＭ−ＥＣＳ４００、日本電子、以下、ＮＭＲ）で観察した結果を図２に示す。図２（ａ）は使用前の疎水性イオン液体の１Ｈ  ＮＭＲによる観察結果であり、図２（ｂ）は樹脂様物質回収後の疎水性イオン液体の１Ｈ  ＮＭＲによる観察結果である。また、図２（ｃ）は使用前の疎水性イオン液体の１３Ｃ  ＮＭＲによる観察結果であり、図２（ｄ）は樹脂様物質回収後の疎水性イオン液体の１３Ｃ  ＮＭＲによる観察結果である。１Ｈ  ＮＭＲ及び１３Ｃ  ＮＭＲのいずれの観察結果においても、使用前の疎水性イオン液体と、樹脂様物質回収後の疎水性イオン液体と、の間でチャートに変化は見られなかった。したがって、液液抽出工程から樹脂化工程を経た疎水性イオン液体については、変性や異物残存の可能性は極めて低いと考えられた。
【００６８】
また、樹脂様物質回収後の、貧溶媒と混合した状態での疎水性イオン液体相について、エバポレーターを用いて、貧溶媒と疎水性イオン液体とに分離して回収した。回収した疎水性イオン液体の重量は、液液抽出工程後の疎水性イオン液体を基準にすると、収率１００．６％と算出された。このことから、液液抽出工程及び樹脂化工程を経た疎水性イオン液体については、全量回収可能であることが示された。
【００６９】
以上より、液液抽出工程及び樹脂化工程を経た疎水性イオン液体については、回収して液液抽出工程に再利用できることが示された。
【００７０】
（実施例２）
樹脂化工程における加熱条件について検証した。
【００７１】
実施例１にて調製した混合水溶液について、実施例１と同様に疎水性イオン液体を用いて液液抽出した後、疎水性イオン液体相にパラホルムアルデヒドを加え、水流アスピレーター減圧下で撹拌しながら、加熱温度１０５℃、１２０℃又は１４０℃にて、各々、加熱時間０分、３分、１０分、３０分、１２０分、１８０分、２４０分、３００分又は３６０分の条件下で加熱した（表２）。加熱後、実施例１と同様に操作して、得られた樹脂様物質の重量を測定し、疎水性イオン液体相に移行した植物フェノール類及び添加したパラホルムアルデヒドの量を基準にして、実施例１と同様に収率を求めた。
【００７２】
結果を表２に示す。表２において、“○”は９０％以上の収率、“△”は８０〜９０％の収率、及び“×”は８０％未満の収率であったことを表す。なお、“−”で表した加熱条件については、試験を行っていない。
【００７３】
【表２】
2016050192.tif 000005
【００７４】
表２より、植物フェノール類の十分な回収には、加熱温度１０５℃では３６０分、加熱温度１２０℃では１２０分以上、及び加熱温度１４０℃では３０分以上加熱するのが好ましいことが示された。
【００７５】
（実施例３）
樹脂化工程における圧力条件について検証した。
【００７６】
実施例１にて調製した混合水溶液について、実施例１と同様に疎水性イオン液体を用いて液液抽出した後疎水性イオン液体相にパラホルムアルデヒドを加え、減圧を行わずに加熱温度１２０℃にて２時間で加熱した。加熱後、実施例１と同様に操作して得られた樹脂様物質の重量を測定し、疎水性イオン液体相に移行した植物フェノール類及び添加したパラホルムアルデヒドの量を基準にして、実施例１と同様に収率を求めた。
【００７７】
その結果、樹脂化工程において減圧しない場合の収率は１４７％であり、実施例１において減圧した場合の収率と差がなかった。なお、収率が１００％を超えた理由として、樹脂様物質に貧溶媒及び疎水性イオン液体が取り込まれていることが考えられた。したがって、減圧をしなくても樹脂化工程を行うことができることが示された。
【００７８】
（実施例４）
樹脂化工程で用いる架橋剤について検証した。
【００７９】
実施例１にて調製した混合水溶液について、実施例１と同様に疎水性イオン液体で液液抽出した後、疎水性イオン液体相に、架橋剤としてパラホルムアルデヒドの代わりに等モルのホルムアルデヒド３７％水溶液（ホルマリン）を加え、撹拌子を入れ、加熱温度１４０℃にて、水流アスピレーター減圧下で撹拌しながら３０分間加熱した。加熱後、実施例１と同様に操作して、得られた樹脂様物質の重量を測定し、疎水性イオン液体相に移行した植物フェノール類及び添加したパラホルムアルデヒドの量を基準に実施例１と同様に収率を求めた。
【００８０】
その結果、架橋剤としての代わりにホルムアルデヒドを用いた場合の収率は１２４％であり、実施例１でのパラホルムアルデヒドを用いた場合の収率と差がなかった。なお、収率が１００％を超えた理由として、樹脂様物質に貧溶媒及び疎水性イオン液体が取り込まれていることが考えられた。したがって、架橋剤としてホルムアルデヒドを用いた場合でも樹脂化工程を行うことができることが示された。
【００８１】
（実施例５）
オノエヤナギの樹皮に本実施例の方法が適用可能か否か検証した。
【００８２】
北海道内で採取されたオノエヤナギの樹皮を、常圧での沸騰温浴（１００℃）にて（環流装置を使用）熱水抽出した後、室温程度に冷却した。冷却して生じた沈殿物をＮｏ．５Ｃのろ紙でろ過することで除去し、濾液を得た。このようにして得られた濾液を、混合水溶液とした。この混合水溶液について、実施例１と同様に［Ｃ８ｍｉｎ］［ＢＦ４］を加えて液液抽出を行った。液液抽出後、樹脂化工程実施群と、樹脂化工程非実施群と、に分けた。
【００８３】
樹脂化工程実施群では、液液抽出後の疎水性イオン液体相に、架橋剤としてパラホルムアルデヒドを４倍モル（約３ｍｇ）加えた後、撹拌子を入れ、加熱温度１０５℃にて、水流アスピレーター減圧下で撹拌しながら６時間加熱した。加熱後、室温付近まで冷却させ、貧溶媒（アセトン：ｎ−ヘキサン＝３：１）を加えて実施例１と同様に操作を行い、樹脂様物質を得た。
【００８４】
樹脂化工程非実施群では、液液抽出後の疎水性イオン液体相を、加熱温度１０５℃にて、水流アスピレーター減圧下で撹拌しながら６時間加熱した。加熱後、室温付近まで冷却させ、貧溶媒（アセトン：ｎ−ヘキサン＝３：１）を加えて実施例１と同様に操作を行い、固形分を得た。
【００８５】
液液抽出前のオノエヤナギ樹皮由来の混合水溶液中のグルコース量及び植物フェノール類量を実施例１と同様の方法により測定した結果、グルコースを０．４２ｇ／Ｌ、植物フェノール類をカテキン当量で３．０ｇ／Ｌ含んでいた。液液抽出後の水相残存率は、グルコース９８％、植物フェノール類７．５％であった。このことから、オノエヤナギ樹皮由来の混合水溶液を液液抽出した場合でも、カラマツ樹皮由来の混合水溶液を液液抽出した場合（実施例１）と同様に、植物フェノール類とグルコースとを高い分離率で分離できることが示された。
【００８６】
また、樹脂化工程実施群において、樹脂化工程において最終的に得られた樹脂様物質の重量を測定し、疎水性イオン液体相に移行した植物フェノール類及び添加したパラホルムアルデヒドの量を基準にして、実施例１と同様に収率を求めたところ、収率は１５８％であった。収率が１００％を超えた理由として、実施例１と同様に樹脂様物質に貧溶媒及び疎水性イオン液体が取り込まれていることが考えられた。また、樹脂様物質回収後には、ろ液の色がごく薄くなったことが目視にて観察されたことから、植物フェノール類の大部分が樹脂様物質として回収されたと考えられた。なお、樹脂化工程非実施群において、貧溶媒を加えて植物フェノール類を析出させ、得られた固形分の重量を測定し、疎水性イオン液体相に移行した植物フェノール類の量を基準にして、実施例１と同様に収率を求めたところ、収率は７４．５％であった。樹脂化工程を行わない場合でも完全ではないが大部分の植物フェノール類が回収できることが示された。
【００８７】
以上より、本実施例の方法によれば、オノエヤナギ樹皮由来の混合水溶液を用いた場合でも、植物フェノール類を効率良く分離できることが示された。
【００８８】
（実施例６）
樹皮以外の植物の部位であるマスカット種子に本実施例の方法が適用可能か否か検証した。
【００８９】
山梨県産マスカット種子をボールミルで粉砕し、実施例５と同様の方法で熱水抽出した後、室温程度に冷却した。冷却して生じた沈殿物をＮｏ．５Ｃのろ紙でろ過することで除去し、濾液を得た。このようにして得られた濾液を、混合水溶液とした。この混合水溶液について、実施例１と同様に［Ｃ８ｍｉｎ］［ＢＦ４］を加えて液液抽出を行った。
【００９０】
次に、樹脂化工程を行った。より具体的には、液液抽出後の疎水性イオン液体相に、架橋剤としてパラホルムアルデヒドを４倍モル（約３ｍｇ）加えた後、撹拌子を入れ、加熱温度１０５℃にて、水流アスピレーター減圧下で撹拌しながら６時間加熱した。加熱後、室温付近まで冷却させ、貧溶媒（アセトン：ｎ−ヘキサン＝３：１）を加えて実施例１と同様に操作を行い、樹脂様物質を得た。
【００９１】
液液抽出前のマスカット種子由来の混合水溶液中のグルコース量及び植物フェノール類量を実施例１と同様の方法により測定した結果、グルコースを０．３７ｇ／Ｌ、植物フェノール類をカテキン当量で４．１５ｇ／Ｌ含んでいた。また、液液抽出後の水相残存率は、グルコース１００．９％、植物フェノール類１２．２％であった。グルコースの回収率が１００％を超え、定量に若干精度を欠いた可能性があるが、水相中にグルコースをほぼ１００％残存させることができたと考えられる。このことから、マスカット種子由来の混合水溶液を液液抽出した場合でも、カラマツ樹皮由来の混合水溶液を液液抽出した場合（実施例１）と同様に、植物フェノール類と糖類（グルコース）とを高い分離率で分離できることが示された。
【００９２】
また、樹脂化工程において最終的に得られた樹脂様物質の重量を測定し、疎水性イオン液体相に移行した植物フェノール類及び添加したパラホルムアルデヒドの量を基準にして、実施例１と同様に収率を求めた。収率は、１４０％であった。実施例１及び実施例５と同様に収率が１００％を超えたが、植物フェノール類の大部分が樹脂様物質として回収されたと考えられた。
【００９３】
以上より、本実施例の方法によれば、樹皮以外の植物の部位であるマスカット種子由来の混合水溶液を用いた場合でも、植物フェノール類を効率良く分離できることが示された。
【００９４】
（実施例７）
ブドウ果汁に本実施例の方法が適用可能か否か検証した。
【００９５】
市販品である北海道富良野産１００％ブドウ果汁に対して、実施例１と同様に疎水性イオン液体として［Ｃ８ｍｉｎ］［ＢＦ４］を加えて液液抽出を行った。
【００９６】
液液抽出前の果汁中のグルコース量及び植物フェノール類量を実施例１と同様の方法により測定した結果、グルコースを６０．５ｇ／Ｌ、植物フェノール類をカテキン当量で１．６ｇ／Ｌ含んでいた。また、液液抽出後の水相残存率は、グルコース１０７．８％、植物フェノール類３３．１％であった（つまり、植物フェノール類の６６．９％が疎水性イオン液体相に移行した）。グルコースの収率が実施例６と同様に１００％をやや上回り、若干測定精度を欠いた可能性も考えられたが、ほぼ１００％のグルコースが水相に残存したものと考えられた。
【００９７】
液液抽出後の水相について、疎水性イオン液体として［Ｃ８ｍｉｎ］［ＢＦ４］を用いて上記同様に２回目の液液抽出を行ったところ、植物フェノール類の水相への残存率は２４．６％となった。２回目の液液抽出後の水相について、疎水性イオン液体として［Ｃ８ｍｉｎ］［ＢＦ４］を用いて上記同様に３回目の液液抽出を行ったところ、植物フェノール類の水相への残存率は２４．０％となった（合計３回の液液抽出により、疎水性イオン液体相に回収された植物フェノール類は７６．０％となった）。
【００９８】
以上より、本実施例の方法によれば、市販品の果汁を用いた場合でも、植物フェノール類を効率良く分離できることが示された。
【００９９】
（実施例８）
試薬の（＋）−カテキン一水和物とＤ（＋）−グルコースとを水に溶かして混合調製液を作製し、実施例１と同様に疎水性イオン液体を用いて液液抽出処理を行った。
【０１００】
混合調製液中のグルコース量及び植物フェノール類量を実施例１と同様の方法により測定した結果、グルコース及びカテキンの濃度はそれぞれ１．３ｇ／Ｌ及び２．９ｇ／Ｌであった。混合調製液に対して、実施例１と同様に疎水性イオン液体として［Ｃ８ｍｉｎ］［ＢＦ４］を加えて液液抽出を行った。液液抽出後、水相へのグルコース及びカテキンの残存率はそれぞれ９６．２％及び３．６％であった。
【０１０１】
以上より、本実施例の方法によれば、高分子が混在する植物フェノール類だけでなく低分子のカテキンについても効率良く分離できることが示された。
【０１０２】
（実施例９）
液液抽出工程で使用可能な疎水性イオン液体について検証した。
【０１０３】
（混合水溶液の調製）
国内の人工林から得られたカラマツ樹皮を風乾して粉砕して粉末とし、液比２０倍で水を加えた（カラマツ樹皮粉末の乾燥重量１ｇに対して水２０ｍＬとなる割合で水を加えた）。カラマツ樹皮粉末の入った水を還流して、１００℃で１時間半抽出した。Ｎｏ．２のろ紙でろ過し、濾液を得た。このようにして得られた濾液を、混合水溶液とした。混合水溶液中の植物フェノール類量及びグルコース量を実施例１と同様に測定したところ、植物フェノール類が３８９５ｍｇ／Ｌ、グルコースが６３８ｍｇ／Ｌ含まれていた。
【０１０４】
（液液抽出工程）
前述の通り得られた混合水溶液２．５ｍｌを試験管に入れ、表３に示す各種の疎水性イオン液体を１．５ｍＬ加え、ミキサーにて５秒程度激しく撹拌し、遠心分離を行った。液液抽出後の植物フェノール類量及びグルコース量の水相残存率を表３に示す。
【０１０５】
【表３】
2016050192.tif 000006
【０１０６】
表３中の略号については、以下の通りである。なお、表３中の“疎水性イオン液体”の欄の“％”は、２種類の疎水性イオン液体の混合比（ｗ／ｗ）を表す（例えば、実験番号６の「［Ｃ８ｍｉｍ］［ＢＦ４］８０％、［ＢＭｐｙｒｒ］［ＰＦ６］２０％」とは、［Ｃ８ｍｉｍ］［ＢＦ４］を８０％（ｗ／ｗ）及び［ＢＭｐｙｒｒ］［ＰＦ６］を２０％（ｗ／ｗ）含む混合液を表す）。
［ＤＭＭＡ］［ＮＴｆ２］：Ｎ，Ｎ−Ｄｉｅｔｈｙｌ−Ｎ−ｍｅｔｈｙｌ−Ｎ−（２−ｍｅｔｈｏｘｙｅｔｈｙｌ）ａｍｍｏｎｉｕｍ  Ｂｉｓ（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈａｎｅｓｕｌｆｏｎｙｌ）ｉｍｉｄｅ
［Ｃ４ｍｉｍ］［ＰＦ６］：１−Ｂｕｔｙｌ−３−ｍｅｔｈｙｌｉｍｉｄａｚｏｌｉｕｍ  Ｈｅｘａｆｌｕｏｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ
［Ｃ６ｍｉｍ］［ＰＦ６］：１−Ｈｅｘｙｌ−３−ｍｅｔｈｙｌｉｍｉｄａｚｏｌｉｕｍ  Ｈｅｘａｆｌｕｏｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ
［Ｃ８ｍｉｍ］［ＰＦ６］：１−Ｍｅｔｈｙｌ−３−ｏｃｔｙｌｉｍｉｄａｚｏｌｉｕｍ  Ｈｅｘａｆｌｕｏｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ
［Ｃ６ｍｉｍ］［ＢＦ４］：１−Ｈｅｘｙｌ−３−ｍｅｔｈｙｌｉｍｉｄａｚｏｌｉｕｍ  Ｔｅｔｒａｆｌｕｏｒｏｂｏｒａｔｅ
［Ｃ８ｍｉｍ］［ＢＦ４］：１−Ｍｅｔｈｙｌ−３−ｏｃｔｙｌｉｍｉｄａｚｏｌｉｕｍ  Ｔｅｔｒａｆｌｕｏｒｏｂｏｒａｔｅ
［ＢＭｐｙｒｒ］［ＰＦ６］：１−Ｂｕｔｙｌ−１−Ｍｅｔｈｙｌｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｉｕｍ  Ｈｅｘａｆｌｕｏｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ
【０１０７】
表３に示すように、実験番号５の［Ｃ６ｍｉｍ］［ＢＦ４］を用いた場合では、実施例１の［Ｃ８ｍｉｍ］［ＢＦ４］を用いた場合と同程度の高い分離率が得られた。また、実験番号６〜８の、［Ｃ８ｍｉｍ］［ＢＦ４］（実施例１で高い分離率が得られた）に、異なる疎水性イオン液体を２割程度混合させたものを用いた場合でも、比較的高い分離率が得られた。
【０１０８】
以上より、本実施例の液液抽出工程において、種々の疎水性イオン液体が使用可能であり、また２種以上の疎水性イオン液体を混合したものについても使用可能であることが示された。
【０１０９】
（実施例１０）
樹脂化工程で使用可能な貧溶媒について検証した。
【０１１０】
実施例１と同様に調製した混合水溶液に対して、実施例１と同様に液液抽出を行った。液液抽出後、疎水性イオン液体相に、実施例１と同様にパラホルムアルデヒドを加えて加熱し、室温付近まで冷却させた後、表４に示す種々の貧溶媒を２０ｍＬ程度加えて沈殿を生じさせた。なお、表４において、溶媒の混合割合（体積比）が数値にて示される（例えば、“エタノール：ｎ−ヘキサン＝２：１”とは、エタノールとｎ−ヘキサンとを体積比２：１で混合したものである）。
【０１１１】
貧溶媒を加えた後、析出の様子を目視にて観察した結果を表４に示す。なお、表４の“結果”において、“○”は、上澄みが淡色になり固形分が多量に見られたものであり、“△”は、上澄みがある程度淡色になり固形分が見られたものである。樹脂化工程においては、実施例１等で用いたアセトン：ｎ−ヘキサン＝３：１の他、酢酸エチル、エタノール：ベンゼン：アセトン＝１：２：３、ジエチルエーテル：アセトン＝１：１、アセトニトリル、ジクロロメタン、エタノール：ｎ−ヘキサン＝２：１といった貧溶媒についても使用可能であることが示された。
【０１１２】
【表４】
2016050192.tif 000007
【０１１３】
以上より、本実施例の樹脂化工程において、種々の貧溶媒が使用可能であることが示された。
【図１】
2016050192.tif 000008
【図２】
2016050192.tif 000009