(57)【要約】【課題】緑膿菌等のグラム陰性細菌及びその薬剤耐性菌に対して強い抗菌活性を示し、医薬品として有用な新規な化合物を提供することである。【解決手段】式［１］2016210683.tif 000011で表されるＮ−ヒドロキシ−２−［｛４−［（５Ｅ）−７−ヒドロキシヘプタ−５−エン−１，３−ジイン−１−イル］ベンゾイル｝（メチル）アミノ］−Ｎ’，２−ジメチルプロパンジアミド、又はその薬学的に許容される塩。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式［１］
【化１】
2016210683.tif 000009
で表されるＮ−ヒドロキシ−２−［｛４−［（５Ｅ）−７−ヒドロキシヘプタ−５−エン−１，３−ジイン−１−イル］ベンゾイル｝（メチル）アミノ］−Ｎ’，２−ジメチルプロパンジアミド、又はその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
式［２］
【化２】
2016210683.tif 000010
で表される（２Ｓ）−Ｎ−ヒドロキシ−２−［｛４−［（５Ｅ）−７−ヒドロキシヘプタ−５−エン−１，３−ジイン−１−イル］ベンゾイル｝（メチル）アミノ］−Ｎ’，２−ジメチルプロパンジアミド、又はその薬学的に許容される塩。
【請求項３】
請求項１又は２に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を含有する医薬組成物。
【請求項４】
請求項１又は２に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を含有する抗菌剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、グラム陰性細菌に対して抗菌活性を有する新規なヒドロキサム酸誘導体又はその塩ならびにそれらを有効成分として含有する抗菌剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
グラム陰性菌には、グラム陽性菌には存在しない脂質二重層からなる外膜が存在するため、薬剤透過性の問題からグラム陽性菌と比較して薬剤抵抗性が強い傾向にある。また、グラム陰性菌は複数の薬剤排出蛋白を持つことが知られており、これも薬剤抵抗性に関与していることが知られている（非特許文献１）。更に、外膜の主要な構成成分の一つであるリポポリサッカライド（ＬＰＳ）は、エンドトキシンとして毒性に大きく関与している。
【０００３】
グラム陰性菌の中でも、特に緑膿菌は各種の抗菌薬に自然耐性を示す傾向が強いことが知られている。緑膿菌は自然環境や生活環境中に広く常在するが、健常者には通常病原性を示さない弱毒細菌である。しかし、重篤な基礎疾患を持つ患者や、移植等により免疫抑制剤を使用するいわゆるコンプロマイズドホストといわれる患者、医療用カテーテルや気管挿管、外科手術等の医療行為を行っている患者に対しては、敗血症等の重篤な急性感染症を引き起こす病原菌となるため、緑膿菌は日和見感染症や院内感染症の重要な起因細菌の一つである。さらに近年は、医療現場において、本来緑膿菌に効果が期待される第３世代セフェム系薬、カルバペネム系薬、あるいはアミノ配糖体系薬等に耐性を獲得した緑膿菌がしばしば臨床分離されており（非特許文献２）、さらに前記３系薬全てに耐性を獲得した多剤耐性緑膿菌も分離されている（非特許文献３）。多剤耐性緑膿菌に感染すると有用な治療剤が殆どないことから、難治性の感染症疾患として世界的に大きな問題となっており、新規作用機序を有する薬剤の開発が切望されている。
【０００４】
ＵＤＰ−３−Ｏ−アシル−Ｎ−アセチルグルコサミンデアセチラーゼ（ＬｐｘＣ）は、リピドＡ（外膜の構成成分であるＬＰＳの疎水性アンカー）の合成を担う酵素である。リピドＡ生合成は１０段階の反応からなるが、ＬｐｘＣはその生合成反応の第２段階を触媒し、ＵＤＰ−３−Ｏ−アシル−Ｎ−アセチルグルコサミンのアセチル基を離脱させる（非特許文献４）。リピドＡは外膜形成に必須な成分であり、結果的にグラム陰性菌の生存に必須である（非特許文献５）。ＬｐｘＣは、リピドＡ生合成過程において律速となる重要な酵素の一つであり、リピドＡ生合成に必須な酵素である。従って、ＬｐｘＣの活性を阻害する薬剤は、緑膿菌を含むグラム陰性菌、特に従来薬剤と異なる作用機序を有することから薬剤耐性緑膿菌に対して有効な抗菌剤になり得ることが強く期待される。
【０００５】
これまでに、いくつかのＬｐｘＣ阻害剤が知られているが、アミド構造を有する阻害剤として特許文献１〜７及び非特許文献６〜１０が知られている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】国際公開０４／０６２６０１号パンフレット
【特許文献２】国際公開０７／０６９０２０号パンフレット
【特許文献３】国際公開０８／１５４６４２号パンフレット
【特許文献４】国際公開１０／０３１７５０号パンフレット
【特許文献５】国際公開１１／１３２７１２号パンフレット
【特許文献６】国際公開１２／１５４２０４号パンフレット
【特許文献７】国際公開１３／０３９９４７号パンフレット
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ（２００２）Ｍａｒ  １，３４，ｐ．６３４−６４０．
【非特許文献２】Ｊ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．（２００３）Ｊａｎ  １４，５１，ｐ．３４７−３５２．
【非特許文献３】Ｊｐｎ．Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ（２００６），５９（５），ｐ．３５５−３６３．
【非特許文献４】Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．（１９９５）Ｄｅｃ  ２２，２７０，ｐ．３０３８４−３０３９１．
【非特許文献５】Ｊ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ．（１９８７），１６９，ｐ．５４０８−５４１５
【非特許文献６】Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（２００２），４５，ｐ３１１２−３１２９．
【非特許文献７】Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ（２００７），１０４，ｐ１８４３３−１８４３８．
【非特許文献８】Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．（２０１１），１８，ｐ３８−４７．
【非特許文献９】Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（２０１１），１９，ｐ８５２−８６０．
【非特許文献１０】Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．（２０１１），２１，ｐ１１５５−１１６１．
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明の課題は、緑膿菌をはじめとするグラム陰性細菌及びその薬剤耐性菌に対して強い抗菌活性を有し、医薬品として有用な新規化合物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは鋭意研究を進めた結果、下記式［１］
【００１０】
【化１】
2016210683.tif 000002
【００１１】
で表されるＮ−ヒドロキシ−２−［｛４−［（５Ｅ）−７−ヒドロキシヘプタ−５−エン−１，３−ジイン−１−イル］ベンゾイル｝（メチル）アミノ］−Ｎ’，２−ジメチルプロパンジアミド、又はその薬学的に許容される塩がこの目的を達成することを見出し、本発明を完成した。
【発明の効果】
【００１２】
本発明の化合物及びその薬学的に許容される塩は、緑膿菌をはじめとするグラム陰性細菌に強い抗菌活性を有する。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明において、「薬学的に許容される塩」とは、細菌感染症の化学療法及び予防において使用される塩を意味する。それらは例えば、酢酸、プロピオン酸、酪酸、ギ酸、トリフルオロ酢酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、ステアリン酸、コハク酸、エチルコハク酸、マロン酸、ラクトビオン酸、グルコン酸、グルコヘプトン酸、安息香酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、パラトルエンスルホン酸（トシル酸）、ラウリル硫酸、リンゴ酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、アジピン酸、システイン、Ｎ−アセチルシステイン、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸、ヨウ化水素酸、ニコチン酸、シュウ酸、ピクリン酸、チオシアン酸、ウンデカン酸、アクリル酸ポリマー及びカルボキシビニルポリマー等の酸との塩、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩及びカルシウム塩等の無機塩基との塩、モルホリン及びピペリジン等の有機アミン、ならびにアミノ酸との塩を挙げることができる。
【００１４】
本発明において、「抗菌剤」とは、グラム陽性細菌やグラム陰性細菌といった細菌に作用してその生育を抑制又は殺菌する能力を持つ物質を意味する。菌の繁殖を抑えたり、一部の菌を殺してその数を減少させたりするようなものでもよい。グラム陽性細菌としては、例えば、ブドウ球菌属（黄色ブドウ球菌、表皮ブドウ球菌など）、連鎖球菌属（化膿連鎖球菌、Ｂ群連鎖球菌、肺炎球菌など）、腸球菌属（エンテロコッカス・フェカーリス、エンテロコッカス・フェシウムなど）が挙げられる。グラム陰性菌としては、例えば、シュードモナス属（緑膿菌など）、大腸菌属（大腸菌など）、クレブシエラ属（肺炎桿菌、クレブシエラ・オキシトカなど）、ヘモフィルス属（インフルエンザ菌、パラインフルエンザ菌など）、ボルデテラ属（百日咳菌、気管支敗血症菌など）、セラチア属（セラチア・マルセッセンスなど）、プロテウス属（プロテウス・ミラビリスなど）エンテロバクター属（エンテロバクター・クロアカなど）、カンピロバクター属（カンピロバクター・ジェジュニなど）、シトロバクター属、ビブリオ属（腸炎ビブリオ、コレラ菌など）、モルガネラ属（モルガネラ・モルガニなど）、サルモネラ属（チフス菌、パラチフス菌など）、シゲラ属（赤痢菌など）、アシネトバクター属（アシネトバクター・バウマニー、アシネトバクター・カルコアセチカスなど）、レジオネラ属（レジオネラ・ニューモフィラなど）、バクテロイデス属（バクテロイデス・フラジリスなど）、ナイセリア属（淋菌、髄膜炎菌など）、モラキセラ属（モラキセラ・カタラーリスなど）、クラミジア属（クラミジア・トラコマティス、クラミジア・シッタシーなど）及びヘリコバクター属（ヘリコバクター・ピロリなど）が挙げられる。本発明の化合物はグラム陰性細菌への抗菌剤として好ましく使用することができる。
【００１５】
本発明の式［１］で表される化合物には光学異性体が存在しうるが、式［１］で表される化合物には、それら光学異性体、及び光学異性体の混合物が含まれる。また、式［１］で表される化合物、及びその薬学的に許容される塩の各種水和物、及び溶媒和物、並びにそれらの結晶多形も本発明に含まれる。
【００１６】
本発明の好ましい光学異性体は、下記式［２］
【００１７】
【化２】
2016210683.tif 000003
【００１８】
で表される（２Ｓ）−Ｎ−ヒドロキシ−２−［｛４−［（５Ｅ）−７−ヒドロキシヘプタ−５−エン−１，３−ジイン−１−イル］ベンゾイル｝（メチル）アミノ］−Ｎ’，２−ジメチルプロパンジアミドである。
【００１９】
本発明の化合物は、一つ又は二つ以上の医薬的に許容される担体、賦形剤又は希釈剤と組み合せて医薬的製剤とすることができる。上記担体、賦形剤及び希釈剤として、水、乳糖、デキストロース、フラクトース、ショ糖、ソルビトール、マンニトール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、デンプン、ガム、ゼラチン、アルギネート、ケイ酸カルシウム、リン酸カルシウム、セルロース、水シロップ、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン、アルキルパラヒドロキシベンゾソルベート、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、グリセリン、ゴマ油、オリーブ油、大豆油等の各種油等が含まれる。また、上記の担体、賦形剤又は希釈剤に必要に応じて一般に使用される増量剤、結合剤、崩壊剤、ｐＨ調整剤、溶解剤等の添加剤が混合し、常用の製剤技術によって錠剤、丸剤、カプセル剤、顆粒剤、粉剤、液剤、乳剤、懸濁剤、軟膏剤、注射剤、皮膚貼付剤等の経口又は非経口用医薬として調製することができる。
【００２０】
本発明の化合物は、成人患者に対して１回の投与量として１０〜１００００ｍｇを１日１回又は数回に分けて非経口又は経口で投与することが可能である。投与量は治療対象となる疾病の種類、患者の年齢、体重、症状等により適宜増減することが可能である。また、本発明の化合物は、他の薬剤との組み合わせで使用することも可能である。
【実施例】
【００２１】
以下に、実施例及び試験例により本発明をさらに詳細に説明する。本発明化合物の合成法は以下の方法に限定されず、各工程の順序を入れ替える、官能基の保護・脱保護を経る、等の当業者に周知の方法を用いて合成することもできる。
【００２２】
以下の実施例において、高速液体クロマトグラフィーマススペクトル（ＬＣＭＳ）は、ＭＳ（ＥＳＩ）測定は条件１を用いて測定した。データは実測値（ｆｏｕｎｄ）を記載した。通常、分子イオンピークが観測されるが、水酸基（−ＯＨ）を有する化合物の場合、フラグメントピークとしてＨ２Ｏが脱離したピークが観測されることもある。塩の場合は、通常、フリー体の分子イオンピーク若しくはフラグメントイオンピークが観測される。
【００２３】
（条件１）
測定機械：Ａｇｉｌｅｎｔ社  Ａｇｉｌｅｎｔ１２９０及びＡｇｉｌｅｎｔ社  Ａｇｉｌｅｎｔ６１３０
イオン化法：エレクトロスプレーイオン化法（Ｅｌｅｃｔｒｏｓｐｒａｙ Ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ： ＥＳＩ）
【００２４】
ＮＭＲスペクトルはプロトンＮＭＲを示し、内部基準としてテトラメチルシランを用いて、δ値をｐｐｍで示した。OH型シリカゲルクロマトグラフィー及びＮＨ型シリカゲルクロマトグラフィーにおける担体は、グレースジャパン株式会社製ＲＥＶＥＬＥＲＩＳＴＭなどのパックドカラムを用いた。
【００２５】
また、実施例中の略号を以下に示す。
ＡｃＯＥｔ：酢酸エチル
ＣｕＩ：ヨウ化銅
ＤＭＳＯ−ｄ６：６重水素化ジメチルスルホキシド
ＥＳＩ：エレクトロスプレーイオン化法
Ｅｔ：エチル
ＩＰＡ：イソプロピルアルコール
ＩＰＥ：ジイソプロピルエーテル
ＬＣ：液体クロマトグラフィー
Ｍｅ：メチル
ＮＢＳ：Ｎ−ブロモこはく酸イミド
Ｐｄ（ｄｂａ）２：ビス(ジベンジリデンアセトン)パラジウム
ＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２：ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド
ｐ−ＴｓＯＨ・Ｈ２Ｏ：ｐ−トルエンスルホン酸一水和物
ＴＥＡ：トリエチルアミン
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＴＨＰ：テトラヒドロピラニル
ｓ：シングレット
ｂｒ．ｓ．：ブロードシングレット（幅広いシングレット）
ｄ：ダブレット
ｄｄ：ダブルダブレット
ｄｔ：ダブルトリプレット
ｍ：マルチプレット
ｔ：トリプレット
ｑ：カルテット
【００２６】
実施例１
（２Ｓ）−Ｎ−ヒドロキシ−２−［｛４−［（５Ｅ）−７−ヒドロキシヘプタ−５−エン−１，３−ジイン−１−イル］ベンゾイル｝（メチル）アミノ］−Ｎ’，２−ジメチルプロパンジアミド（化合物１）
【００２７】
【化３】
2016210683.tif 000004
【００２８】
（１）窒素雰囲気下、特許（ＷＯ２０１１／１３２７１２）記載の方法で得られた（２Ｓ）−２−［（４−ヨードベンゾイル）（メチル）アミノ］−Ｎ，２−ジメチル−Ｎ’−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）プロパンジアミド（１９．２ｇ）のＴＨＦ（２００ｍＬ）懸濁液に室温でヨウ化銅（０．２９９ｇ）、ＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２（０．５５１ｇ）およびＴＥＡ（１０．９ｍＬ）を加えた。その後、トリメチルシリルアセチレン（５．０１ｇ）を５分間かけて加え、室温で２時間撹拌した。反応混合物をＮＨ型シリカゲル（クロロホルム／メタノール＝９５／５）でろ過、濃縮して得られた残渣をＯＨ型シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１００／０→０／１００）で精製して得られた淡橙色固体をＩＰＥで洗浄、乾燥して（２Ｓ）−Ｎ，２−ジメチル−２−（メチル｛４−［（トリメチルシリル）エチニル］ベンゾイル｝アミノ）−Ｎ’−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）プロパンジアミド（１７．６ｇ、無色固体、９７％）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）：４８２（Ｍ＋Ｎａ）＋，４５８（Ｍ−Ｈ）−
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 0.26 (9 H, s), 1.48 - 1.90 (6 H m), [1.80], 1.81 (3 H , s), 2.82 - 2.87 (3 H, m), [3.13], 3.15 (s, 3 H), 3.50 - 3.69 (1 H, m), 3.82 - 4.05 (1 H, m), 4.92 - 5.01 (1 H, m), 7.41 - 7.48 (2 H, m), 7.48 - 7.54 (2 H, m), [6.99], 7.62 (1 H, br. s.), [10.06], 10.47 (1 H, s)
【００２９】
【化４】
2016210683.tif 000005
【００３０】
（２）実施例１−（１）で得られた化合物（１７．１ｇ）のメタノール（２５０ｍＬ）溶液に氷冷下でＫ２ＣＯ３（５．１４ｇ）を加え、同温で５０分間撹拌後、室温に昇温して１時間撹拌した。反応混合物を、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（１．０Ｌ）とクロロホルム（１．０Ｌ）の混合物に加えて有機層を分離し、水層をクロロホルム（０．５Ｌ）で抽出した。  有機層を合わせて、乾燥（ＭｇＳＯ４）、ろ過、濃縮して得られた粗精製物をＯＨ型シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝８０／２０→０／１００）で精製して得られた淡橙色固体をＩＰＥで洗浄、乾燥して（２Ｓ）−２−［（４−エチニルベンゾイル）（メチル）アミノ］−Ｎ，２−ジメチル−Ｎ’−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）プロパンジアミド（１２．４ｇ、無色固体、８６％）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）：４１０（Ｍ＋Ｎａ）＋，３８６（Ｍ−Ｈ）−
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.49 - 1.91 (6 H, m), [1.80], 1.81 (3 H, s), 2.83 - 2.87 (3 H, m), 3.12 - 3.19 (1 H, m), [3.14], 3.16 (3 H, s), 3.53 - 3.69 (1 H, m), 3.83 - 4.05 (1 H, m), 4.93 - 5.01 (1 H, m), 7.44 - 7.51 (2 H, m), 7.52 - 7.57 (2 H, m), [6.98], 7.62 (1 H, br. s.), [10.06], 10.47 (1 H, s)
【００３１】
【化５】
2016210683.tif 000006
【００３２】
（３）ＮＢＳ（６．６２ｇ）とトリフルオロ酢酸銀（３４２ｍｇ）のアセトン（５０ｍＬ）混合物に氷冷下で、実施例１−（２）で得られた化合物（１２．０ｇ）のアセトン（１５０ｍＬ）混合物を滴下し、同温で１．５時間撹拌した。反応混合物を飽和重曹水（６００ｍＬ）に加えて０．５時間撹拌後、クロロホルム（６００ｍＬ）を加えて不溶物をろ過し、有機層を分離した。水層をクロロホルム（１００ｍＬ）で抽出し、有機層を合わせて、乾燥（ＭｇＳＯ４）、ろ過、濃縮した。得られた残渣に水（５００ｍＬ）を加えた懸濁液を１．５時間撹拌後、ろ過、洗浄（水、５００ｍＬ）した。得られた淡橙色固体をクロロホルム（５００ｍＬ）に溶解し、水（２００ｍＬ）で洗浄した有機層を乾燥（ＭｇＳＯ４）、ろ過、濃縮して得た淡橙色固体をＯＨ型シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール＝１００／０→９０／１０）で精製後、再結晶（ＡｃＯＥｔ／ＩＰＥ）して（２Ｓ）−２−｛［４−（ブロモエチニル）ベンゾイル］（メチル）アミノ｝−Ｎ，２−ジメチル−Ｎ’−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）プロパンジアミド（８．０２ｇ、５６％）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）：４８８（Ｍ＋Ｎａ）＋，４６４（Ｍ−Ｈ）−
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.46 - 1.90 (6 H, m), [1.80], 1.81 (3 H, s), 2.82 - 2.87 (3 H, m), [3.14], 3.16 (3 H, s), 3.52 - 3.68 (1 H, m), 3.82 - 4.04 (1 H, m), 4.92 - 5.01 (1 H, m), 7.42 - 7.53 (4 H, m), [6.97], 7.61 (1 H, br. s.), [10.05], 10.47 (1 H, s)
【００３３】
【化６】
2016210683.tif 000007
【００３４】
（４）窒素雰囲気下、ヨウ化銅（６．１ｍｇ）とＰｄ（ｄｂａ）２（１８．５ｍｇ）のＣＨ３ＣＮ（１０ｍＬ）混合物に室温でトリエチルアミン（０．２６９ｍＬ）と（Ｅ）−ペント−２−エン−４−イン−１−オール（１５８ｍｇ）を加えて５分間撹拌後、実施例１−（３）で得た化合物（３００ｍｇ）のＣＨ３ＣＮ（５ｍＬ）溶液を加え、室温で終夜撹拌した。反応混合物に珪藻土を加えて濃縮して得た残渣をＯＨ型シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝８０／２０→０／１００→クロロホルム／メタノール＝１００／０→９０／１０）で精製して（２Ｓ）−２−［｛４−［（５Ｅ）−７−ヒドロキシヘプタ−５−エン−１，３−ジイン−１−イル］ベンゾイル｝（メチル）アミノ］−Ｎ，２−ジメチル−Ｎ’−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）プロパンジアミド（１６８ｍｇ、淡黄白色固体、５６％）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）：４９０（Ｍ＋Ｎａ）＋，４６６（Ｍ−Ｈ）−
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.49 - 1.89 (6 H, m), [1.80], 1.81 (3 H, s), 2.82 - 2.87 (3 H, m), [3.14], 3.17 (3 H, s), 3.52 - 3.69 (1 H, m), 3.82 - 4.04 (1 H, m), 4.28 (3 H, dd, J=4.6, 2.1 Hz), 4.92 - 5.01 (1 H, m), 5.90 (1 H, dt, J=16.0, 2.1 Hz), 6.47 (1 H, dt, J=16.0, 4.6 Hz), 7.44 - 7.57 (4 H, m), [6.97], 7.62 (1 H, br. s.), [10.04], 10.47 (1 H, s)
【００３５】
【化７】
2016210683.tif 000008
【００３６】
（５）実施例１−（４）で得た化合物（１．８６ｇ）のメタノール（４０ｍＬ）と１，４−ジオキサン（４０ｍＬ）の混合溶液に室温でトシル酸１水和物（７５．７ｍｇ）を加えて室温で１．５時間撹拌した。反応溶液に重曹水（４．０ｍＬ、１．０Ｍ）を加えて２０分間撹拌後、ＯＨ型シリカゲル（ｃａ．１９ｇ）を加えて濃縮した。得られた残渣をＯＨ型シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール＝１００／０→９０／１０）で精製して得た淡黄色固体をジエチルエーテル（２０ｍＬ）で洗浄、乾燥して、（２Ｓ）−Ｎ−ヒドロキシ−２−［｛４−［（５Ｅ）−７−ヒドロキシヘプタ−５−エン−１，３−ジイン−１−イル］ベンゾイル｝（メチル）アミノ］−Ｎ’，２−ジメチルプロパンジアミド（化合物１）（淡黄白色固体、９７７ｍｇ、５８％）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）：３８２（Ｍ−Ｈ）−
1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.61 (3 H, s), 2.64 (3 H, d, J=5.0 Hz), 2.98 (3 H, s), 4.06 - 4.12 (2 H, m), 5.09 (1 H, t, J=5.6 Hz), 5.93 (1 H, dt, J=16.0, 2.4 Hz), 6.58 (1 H, dt, J=16.0, 4.1 Hz), 7.52 - 7.68 (4 H, m), 8.44 - 8.56 (1 H, m), 8.95 (1 H, br. s.), 10.95 (1 H, br. s.)
【００３７】
本発明化合物の作用は以下の薬理試験により確認された。
【００３８】
試験例１  抗菌活性評価試験
最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）測定はＣＬＳＩ（クリニカル  アンド  ラボラトリー  スタンダーズ  インスティテュート）標準法に準じ、下記に示す微量液体希釈法を用いた。
細菌として、緑膿菌ＴＳ８８株（臨床分離株）を用いた。ハートインフュージョン寒天培地で１晩培養した被検菌体を掻き取り，マクファーランド  ０．５相当に懸濁し、これを１０倍に希釈して接種菌液とした。接種菌液０．００５ｍＬを、被検化合物を含む、カチオン調整ミューラーヒントン培地、または終濃度が５％となるようにヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）を添加したカチオン調整ミューラーヒントン培地に接種し、３５℃にて１８時間培養した。菌の発育が肉眼的に認められない最小の薬剤濃度をもってＭＩＣとした。化合物１のＭＩＣはカチオン調整ミューラーヒントン培地では、０．１２μｇ／ｍＬであり、ＨＳＡを添加したカチオン調整ミューラーヒントン培地では、４μｇ／ｍＬであった。
【００３９】
試験例２  感染動物における薬理効果試験
細菌として、緑膿菌ＴＳ８８株（臨床分離株）を用いた。ハートインフュージョン寒天培地で１晩培養した菌体を掻き取り、生理食塩液に懸濁してマクファーランド  ３.５相当となるように調製した。これを３  ｗ／ｖ％  ムチン含有生理食塩液にて約６ｘ１０５ ＣＦＵ／ｍＬとなるよう希釈し、接種菌液とした。マウス（ＩＣＲ系、雄性、４．５週齢）に接種菌液０．５ ｍＬを腹腔内接種して感染させ、接種１時間後に化合物１（６．２５ ｍｇ／ｋｇ）または媒体（１１  ｗ／ｖ％  カプチゾル（商品名））を静脈内投与した。化合物１投与群での接種３日後における生存率は１００％（８例中８例生存）、媒体投与群での生存率は０％（８例全例死亡）であった。
【産業上の利用可能性】
【００４０】
本発明の化合物及びその薬学的に許容される塩は、緑膿菌をはじめとするグラム陰性細菌に強い抗菌活性を有し、医薬品として利用することができる。