(57)【要約】【課題】コリンエステラーゼ阻害薬であるドネペジル又はその薬学的に許容可能な塩を有効成分とする心筋梗塞発症初期用心筋梗塞縮小薬を提供し、これを心筋梗塞発症後初期の被験体に投与し、再潅流療法と組み合わせることで迷走神経を活性化させ、心臓の機能を改善し、心臓リモデリングを予防し、且つ心筋梗塞領域を縮小させること。【解決手段】ドネペジル又はその薬学的に許容可能な塩を有効成分とする、心筋梗塞発症初期用心筋梗塞縮小薬とする。【選択図】図５
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ドネペジル又はその薬学的に許容可能な塩を有効成分とする、心筋梗塞発症初期用心筋梗塞縮小薬。
【請求項２】
前記有効成分がドネペジル塩酸塩であることを特徴とする、請求項１記載の心筋梗塞発症初期用心筋梗塞縮小薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、心筋梗塞縮小薬に関し、詳しくはコリンエステラーゼ阻害薬を有効成分とする心筋梗塞縮小薬に関する。
【背景技術】
【０００２】
心不全は、慢性の心筋障害により心臓のポンプ機能が低下し、末梢主要臓器の酸素需要量に見合うだけの血液量を拍出できない状態であり、肺・体静脈系にうっ血をきたし、生活機能に障害を生じた病態である。
【０００３】
以前は、心不全は腎臓の機能が低下し体内に水分が貯留する状態と考えられており、治療薬としては利尿薬が利用されていたが、その後心臓のポンプ機能の障害と捉えられるようになり、それを改善する強心薬や血管拡張薬が用いられるようになった。
さらに近年、心不全は神経体液系の疾患と考えられるようになり、現在では交感神経活性の亢進や神経体液系のレニン・アンジオテンシン・アルドステロン系の亢進が心不全の増悪因子であることが明らかにされ、β遮断薬やアンジオテンシン変換酵素阻害薬（ＡＣＥ阻害薬）等が治療薬の中心となってきている。
【０００４】
先に本発明者らは、迷走神経への電気刺激が、心筋梗塞後心不全ラットの心機能を改善し、心臓リモデリングを予防し、長期生存率を改善することを見出した（特許文献１）。
しかし、これを心不全の臨床治療に応用するには、専用の神経刺激装置の開発が必要であること、神経刺激装置の植え込みに伴う患者の負荷が大きいこと、迷走神経に電極を装着する際や長期間経過後に神経を損傷する可能性があること、長期間の治療のためには電池を含む神経刺激装置の交換が必要であること等、実用化が難しいという問題点を有する。
【０００５】
さらに、本発明者らは迷走神経の電気刺激に替わるものとして、迷走神経の神経末端で放出されるアセチルコリンの分解を防ぐコリンエステラーゼ阻害薬を用い、同様に心筋梗塞後心不全ラットの心機能改善、心臓リモデリング予防、長期生存率改善等が示されてきた（特許文献２）。
【０００６】
しかし、特許文献１記載の発明と同様に、特許文献２記載の発明もまた心筋梗塞発症後２週間が経過し、虚血領域のほぼ全体が壊死し大きな心筋梗塞となり将来的に慢性心不全をきたすことが決まってしまってから治療を始めたものであり、心筋梗塞自体が縮小することはなかった。また、特許文献１及び２では、心筋梗塞後、冠動脈は閉塞したままであり、今日行われている心筋梗塞後の冠動脈の閉塞を解除（再潅流、再開通）するという治療法との組み合わせについては検討されてこなかった、という問題点を有する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特許第４１８９４４８号
【特許文献２】特許第４８７２０４４号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、コリンエステラーゼ阻害薬であるドネペジル又はその薬学的に許容可能な塩を有効成分とする心筋梗塞発症初期用心筋梗塞縮小薬を提供し、これを心筋梗塞発症後初期の被験体に投与し、再潅流療法と組み合わせることで迷走神経を活性化させ、心臓の機能を改善し、心臓リモデリングを予防し、且つ心筋梗塞領域を縮小させるものである。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
請求項１に係る発明は、ドネペジル又はその薬学的に許容可能な塩を有効成分とする、心筋梗塞発症初期用心筋梗塞縮小薬に関する。
【００１０】
請求項２に係る発明は、前記有効成分がドネペジル塩酸塩であることを特徴とする、請求項１記載の心筋梗塞発症初期用心筋梗塞縮小薬に関する。
【発明の効果】
【００１１】
請求項１に係る発明によれば、心筋梗塞発症初期用心筋梗塞縮小薬の有効成分をコリンエステラーゼ阻害薬であるドネペジル又はその薬学的に許容可能な塩とすることで、アセチルコリンの分解が抑制され、迷走神経を活性化させることができる。心筋梗塞縮小薬を心筋梗塞発症初期に投与することで迷走神経を活性化させ、且つ心筋梗塞後の冠動脈の閉塞を再潅流させるという治療方法と組み合わせることで、心拍数、心拍出量等の心臓の機能を改善し、心臓リモデリングを予防し、且つ心筋梗塞領域を縮小できる。これはβ遮断薬であるメトプロロールと比較して有利な効果である。
【００１２】
請求項２に係る発明によれば、心筋梗塞発症初期用心筋梗塞縮小薬の有効成分をドネペジル塩酸塩とすることで、より有効な心筋梗塞発症初期用心筋梗塞縮小薬とすることができる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】ＳＤ（Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙ）ラットに無線連続測定装置を植え込み、人為的に心筋梗塞を起こした後、冠動脈の閉塞を再潅流させるまでの工程を示す図である。
【図２】本発明の心筋梗塞発症初期用心筋梗塞縮小薬を、心筋梗塞後冠動脈の閉塞を再潅流させたラットに投与し、解析した過程を、時系列で表わした図である。
【図３】再潅流処置後のラットの心拍数を、非治療群、ドネペジル投与群、及びメトプロロール投与群間で比較した図である。
【図４】投薬開始１０週間後の非治療群、ドネペジル投与群、及びメトプロロール投与群の心臓の横断面をマッソントリクローム染色した図である。
【図５】投薬開始１０週間後の非治療群、ドネペジル投与群、及びメトプロロール投与群の梗塞領域の比率及び心筋細胞周囲の線維化領域の比率を示す図である。
【図６】投薬開始１０週間後の非治療群、ドネペジル投与群、及びメトプロロール投与群の、体重で標準化した心室の重量を示す図である。
【図７】投薬開始１０週間後の非治療群、ドネペジル投与群、及びメトプロロール投与群の、心拍出量及び左室拡張末期圧を示す図である。
【図８】投薬開始１０週間後の非治療群、ドネペジル投与群、及びメトプロロール投与群の、血漿中のＢＮＰ（脳性ナトリウム利尿ペプチド）量を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
本発明で使用されるコリンエステラーゼ阻害薬の具体例としては、ドネペジル（１−ベンジル−４−［（５，６−ジメトキシ−１−インダノン）−２−イル］メチルピペリジン）又はその薬理学的に許容可能な塩が挙げられる。
これらの中では、特にドネペジル塩酸塩（Ｄｏｎｅｐｅｚｉｌ  Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、（２ＲＳ）−２−［（１−ベンジルピペリジン−４−イル）メチル］−５，６−ジメトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−オン  モノヒドロクロライド）が好適に用いられる。ドネペジル塩酸塩の分子量は４１５．９５で、分子式はＣ２４Ｈ２９ＮＯ３・ＨＣｌである。
【００１５】
本発明に利用されるドネペジル塩酸塩は、以下の構造を有するもの又はその鏡像異性体であっても良い。
上記のドネペジル又はその薬学的に許容可能な塩は公知の製造方法により製造することができる。
【００１６】
【化１】
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【００１７】
上記のコリンエステラーゼ阻害薬は、単独で、または常法（例えば、日本薬局方記載の方法等）に従って、薬学的に許容される担体を混合した医薬組成物、例えば、錠剤（糖衣錠、フィルムコーティング錠を含む）、フィルム剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、液剤、乳剤、懸濁剤、注射剤、坐剤、徐放剤、貼布剤等として、経口的または非経口的（例、局所、直腸、静脈投与等）に安全に投与することができる。
本発明の心筋梗塞発症初期用心筋梗塞縮小薬の剤形としては、例えば、錠剤（舌下錠、口腔内崩壊錠を含む）、フィルム剤（口腔内崩壊フィルム剤を含む）、カプセル剤（ソフトカプセル、マイクロカプセルを含む）、顆粒剤、散剤、トローチ剤、シロップ剤、乳剤、懸濁剤等の経口剤；及び注射剤（例：皮下注射剤、静脈内注射剤、筋肉内注射剤、腹腔内注射剤、点滴剤）、外用剤（例：経皮製剤、軟膏剤）、坐剤（例：直腸坐剤、膣坐剤）、ペレット、経鼻剤、経肺剤（吸入剤）、点眼剤等の非経口剤が挙げられる。
これらの製剤は、速放性製剤または徐放性製剤等の放出制御製剤（例：徐放性マイクロカプセル）であってもよい。
【００１８】
本発明に利用されるコリンエステラーゼ阻害薬の医薬組成物中の含有量は、剤形、重篤度や目的とする投与量などによって異なるが、経口投与の場合、一般的には組成物全体の約０．５−１０重量％であることが望ましい。
【００１９】
また、本発明の心筋梗塞発症初期用心筋梗塞縮小薬の投与量は、剤形、患者の年齢、体重及び症状、及び処置期間等によって異なり、正確な量は医師により決定されるものであるが、心拍数をおよそ１０％低下させる量を目標とする。通常、成人に対し１日当たりコリンエステラーゼ阻害薬の投与量換算で、経口投与の場合は約３−２０ｍｇを、１回又は数回に分けて投与する。
【００２０】
本発明の心筋梗塞発症初期用心筋梗塞縮小薬は、心筋梗塞発症後できるだけ早い段階で投与されることが望ましく、少なくとも心筋梗塞発症後４８時間以内に投与することが望ましい。何故なら、心筋梗塞発症後４８時間以降に本発明の心筋梗塞発症初期用心筋梗塞縮小薬を投与しても心筋梗塞を縮小することができないため、好ましくない。
【００２１】
また、本発明の心筋梗塞発症初期用心筋梗塞縮小薬の投与は、冠動脈の閉塞を再潅流させるという治療方法と組み合わせることが望ましい。何故なら再潅流と組み合わせることで、心筋の壊死を小範囲にとどめることができ、心筋梗塞発症初期用心筋梗塞縮小薬の投与後の心筋梗塞領域の縮小を促進できるからである。
再潅流の方法は特に限定されず、公知の方法を使用することができる。例えば、細胞が死んでしまう前に血栓を溶かして血流を再開させる血栓溶解療法、風船で血管を拡げるバルーンカテーテル、金属製のパイプで血管を拡げるステント、再狭窄を抑える薬剤を塗布した薬剤溶出性ステント、吸引カテーテルを病変まで深く挿入して血栓を直接吸引し体外に除去する血栓吸引等の方法が挙げられる。
再潅流は心筋梗塞発症後すぐに行えば組織へのダメージを少なく抑えることができるため、心筋梗塞発症後少なくとも３時間後までに行うことが望ましい。
【００２２】
ドネペジル塩酸塩の急性毒性試験及び亜急性毒性試験は、ドネペジル塩酸塩を有効成分とし、アルツハイマー型認知症及びレビー小体型認知症を治療するための薬剤（商品名：アリセプト、エーザイ株式会社製）において行われている。
急性毒性試験はマウス、ラット及びイヌを用いて行われた。経口投与によるＬＤ５０値はマウスではオスで４５．２ｍｇ／ｋｇ、メスで４８．１ｍｇ／ｋｇ、ラットではオスで３６．９ｍｇ／ｋｇ、メスで３２．６ｍｇ／ｋｇであり、イヌでは雌雄ともに１５ｍｇ／ｋｇで死亡例が認められた。静脈投与によるＬＤ５０値はマウスではオスで３．７ｍｇ／ｋｇ、メスで４．８ｍｇ／ｋｇ、ラットではオスで８．０ｍｇ／ｋｇ、メスで７．６ｍｇ／ｋｇであった。
亜急性毒性試験及び慢性毒性試験はラット及びイヌを用いて行われた。主な所見は筋線維束性攣縮、縮瞳、自発運動の低下、流涎、流涙、尿中電解質の変化であり、これらの所見はドネペジル塩酸塩の薬理作用に基づく変化と考えられる。
また、ラットでは１３週間投与で顎下腺の腺房細胞肥大、前胃粘膜下浮腫、下垂体中間部の肥大が、１２カ月投与では唾液腺重量の増加が認められ、前胃の変化は休薬後に回復傾向が、その他の所見は回復性が認められた。イヌでは１３週間投与試験において、８ｍｇ／ｋｇ群で死亡及び切迫屠殺例が認められ、心内膜下出血、肺の出血・水腫等の所見から死因はアセチルコリンエステラーゼ阻害作用による呼吸抑制と推察された。無毒性量はラットでは３ｍｇ／ｋｇ／日（１３週間、１２カ月）、イヌでは３ｍｇ／ｋｇ／日（１３週間）、５ｍｇ／ｋｇ／日（１２カ月）であった。
【実施例１】
【００２３】
本発明の心筋梗塞発症初期用心筋梗塞縮小薬の有効性を、以下のラット心筋梗塞後心不全モデルによる薬理試験によって確認した。
【００２４】
＜試験方法＞
図１は、ＳＤ（Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙ）ラットに無線連続測定装置を植え込み、人為的に心筋梗塞を起こした後、冠動脈の閉塞を再潅流させるまでの工程を示す図であり、図２は、本発明の心筋梗塞発症初期用心筋梗塞縮小薬を、心筋梗塞後冠動脈の閉塞を再潅流させたラットに投与し、解析した過程を、時系列で表わした図である。
本実施例ではコリンエステラーゼ阻害薬として、ドネペジル塩酸塩を用いた。血圧・心拍数又は心拍数を計測するために、生後８週齢のオスのＳＤラットに、１．５％ハロセン麻酔下で、埋め込み型の血圧テレメトリ（ＰＡ−Ｃ４０、データサイエンスインターナショナル社製）又は心電図テレメトリ（ＣＡ−Ｆ４０、データサイエンスインターナショナル社製）を手術により埋め込んだ。
【００２５】
術後１週間回復させてから、同様の麻酔下で、これらのラットの左冠状動脈の基部を閉塞器で閉塞し、左心室の約５０％を占める部分を虚血とした。３０分後に閉塞を解除し、再潅流した。
左冠状動脈の閉塞及び解除時に頻繁に発生する心室頻拍と心室細動は、心臓マッサージで可能な限り回復させた。
【００２６】
生存したラットを無作為に非治療群（ｎ＝１８）、ドネペジル投与群（ｎ＝１９、飲み水にドネペジル塩酸塩を溶かして５０ｍｇ／Ｌの濃度で投与、飲水量から計算して５ｍｇ／ｋｇ／日になる）とβ遮断薬であるメトプロロール投与群（ｎ＝１１、飲み水にメトプロロール酒石酸塩を溶かして０．７ｇ／Ｌの濃度で投与、飲水量から計算して７０ｍｇ／ｋｇ／日になる）の３群に分けて、手術当日から飲水させて薬物を投与した。
【００２７】
１０週間の投与治療の後に、非治療群、ドネペジル投与群およびメトプロロール投与群のラットに再度麻酔をかけ、カテ先血圧計、超音波血流計などを用いて心拍数、左心室拡張末期圧、心拍出量などの血行動態を測定した。結果を図３及び図７に示す。
その後、頚動脈から採血し、最後に心臓を摘出して氷冷リン酸バッファで洗浄し、両心室の重量を測定した。結果を図６に示す。
左心室を基部から心尖部まで、４枚の心臓断片を作成し、各断片を４％パラホルムアルデヒドで固定して、パラフィン包埋心臓ブロックを作成した。各心臓ブロックから得られた心臓切片をマッソントリクローム染色し、心臓組織検査を行い、心筋梗塞面積、心筋細胞周囲の繊維化を評価した。結果を図４及び５に示す。
血中のＢＮＰ濃度はＥＬＩＳＡ法で測定した。結果を図８に示す。
【００２８】
＜結果１．心拍数の比較＞
図３は、再潅流処置後のラットの心拍数を、非治療群、ドネペジル投与群、及びメトプロロール投与群間で比較した図である。
図３からも明らかなように、ドネペジル投与群はメトプロロール投与群と同様に、非治療群と比較して心拍数が低かった。
つまり、図３は、ドネペジルが、メトプロロールと同程度に、心拍数の上昇を抑える効果があったことを示す。
【００２９】
＜結果２．梗塞領域と心筋細胞周囲の線維化の比較＞
図４は、投薬開始１０週間後の非治療群、ドネペジル投与群、及びメトプロロール投与群の心臓の横断面をマッソントリクローム染色した図であり、図５は、投薬開始１０週間後の非治療群、ドネペジル投与群、及びメトプロロール投与群の梗塞領域の比率及び心筋細胞周囲の線維化領域の比率を示す図である。
マッソントリクローム染色では、生細胞からなる組織は赤く染色され、一方、膠原線維化された梗塞領域の組織は染色されないため青く観察される。よって、図４に示す青く染色された領域の面積を、心臓切片全体の面積で割ったものを梗塞領域として算出し、グラフ化したのが図５（Ａ）である。
図５（Ａ）からも明らかなように、非治療群及びメトプロロール投与群に比べて、ドネペジル投与群は梗塞領域の比率が小さかった。つまり、図５（Ａ）はドネペジルを投与すると、非治療群及びメトプロロール投与群に比べて、心筋梗塞領域が縮小したことを示す。
また、心筋細胞周囲の線維化した細胞の比率を示しているのが図５（Ｂ）である。図５（Ｂ）からも明らかなように、線維化した細胞の比率はドネペジル投与群において最も小さかった。
【００３０】
＜結果３．心室の重量の比較＞
図６は、投薬開始１０週間後の非治療群、ドネペジル投与群、及びメトプロロール投与群の、体重で標準化した心室の重量を示す図である。
図６からも明らかなように、非治療群及びメトプロロール投与群に比べて、ドネペジル投与群は心室の重量が小さかった。
つまり、ドネペジルを投与すると、心筋梗塞によって引き起こされる心肥大（心臓リモデリング）を抑えることができたと考えられる。
【００３１】
＜結果４．心拍出量と左室拡張末期圧の比較＞
図７は、投薬開始１０週間後の非治療群、ドネペジル投与群、及びメトプロロール投与群の、心拍出量及び左室拡張末期圧を示す図である。
図７から明らかなように、非治療群及びメトプロロール投与群に比べて、ドネペジル投与群は心拍出量が大きく、左室拡張末期圧が低かった。
心拍出量は心臓が押し出す血液量を示しており、図７（Ａ）は非治療群及びメトプロロール投与群に比べて、ドネペジル投与群は心筋梗塞による心臓のポンプ機能の低下が抑えられたことを示している。
また、左室拡張末期圧は左心室への負荷を示す指標の1つであり、左室拡張末期圧が高いと左房，肺静脈に圧力がかかり、肺うっ血をきたす。よって、図７（Ｂ）は、非治療群及びメトプロロール投与群に比べて、ドネペジル投与群は左心室への負荷が低かったことを示している。
【００３２】
＜結果５．血漿ＢＮＰ量の比較＞
図８は、投薬開始１０週間後の非治療群、ドネペジル投与群、及びメトプロロール投与群の、血漿中のＢＮＰ（脳性ナトリウム利尿ペプチド）量を示す図である。
図８からも明らかなように、非治療群及びメトプロロール投与群に比べて、ドネペジル投与群は血漿ＢＮＰ量が低かった。
ＢＮＰは心臓の負荷が増えたり、心筋の肥大が起こると増加するため、心不全の生化学的マーカーとして広く臨床現場で用いられている。よって、図８は非治療群及びメトプロロール投与群に比べて、ドネペジル投与群は心臓への負担が小さかったことを示している。
【００３３】
以上より、ラット心筋梗塞後心不全モデルにおいて、心筋梗塞後すぐに再潅流治療を行い、ドネペジルを１０日間投与したドネペジル投与群は、非投与群及びβ遮断薬であるメトプロロール投与群と比較して、心臓の機能（心拍数、心拍出量等）を改善し、心臓リモデリングを予防し、且つ心筋梗塞領域を縮小できることが明らかになった。また、再潅流治療と組み合わせたことによる悪影響は特に観察されなかった。
【産業上の利用可能性】
【００３４】
本発明に係る心筋梗塞発症初期用心筋梗塞縮小薬は、心筋梗塞の治療に好適に利用され、再潅流治療と組み合わせて、心筋梗塞発症後できるだけ早い段階で心筋梗塞発症初期用心筋梗塞縮小薬を投与することで、心臓の機能（心拍数、心拍出量等）を改善し、心臓リモデリングを予防し、且つ心筋梗塞領域を縮小できるという効果を奏する。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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