(57)【要約】【課題】  寒天培地などを用いて培養した微生物のコロニーを、効率良く一定量連続して回収することを可能とする。【解決手段】  細長中空で軸方向の両端が開口し、内部に軸方向に挿入される中押し棒の先端部を移動可能に支持する細線状の本体先端部を備えた本体部と、中押し棒の先端が、本体先端部の開口位置から本体先端部内の後方に離れた位置と、開口位置から軸方向に外側に突出した位置又は開口位置と同位置との間で軸方向に移動可能に本体部内に配置される中押し棒とを備え、少なくとも本体先端部及び中押し棒の先端部が金属材料により形成されたコロニー回収器具によりコロニーを回収する。【選択図】  図２
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
細長中空で軸方向の両端が開口し、内部に軸方向に挿入される中押し棒の先端部を移動可能に支持する細線状の本体先端部を備えた本体部と、
前記中押し棒の先端が、前記本体先端部の開口位置から前記本体先端部内の後方に離れた位置と、前記開口位置から軸方向に外側に突出した位置又は前記開口位置と同位置との間で軸方向に移動可能に前記本体部内に配置される前記中押し棒と、を備え、
少なくとも前記本体先端部及び前記中押し棒の先端部が金属材料により形成された
ことを特徴とするコロニー回収器具。
【請求項２】
前記本体先端部の先端が、鋭利なテーパー状に形成されたことを特徴とする請求項１記載のコロニー回収器具。
【請求項３】
前記本体先端部の軸方向後方に、前記本体部の外面から半径方向に外側に延びる伝熱防止部を備えたことを特徴とする請求項１又は２記載のコロニー回収器具。
【請求項４】
前記伝熱防止部の軸方向後方に、前記中押し棒を前記本体部内で支持する支持部を備えたことを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載のコロニー回収器具。
【請求項５】
中空で軸方向の両端が開口し、前記本体部の後端から挿入して固定され、前記中押し棒を内部に挿通して支持すると共に、弾性部材を保持して、前記弾性部材の前端部を支持する弾性部材ホルダと、前記弾性部材と、
前記中押し棒を挿入して固定すると共に、前記弾性部材ホルダの後端から挿入され、前記弾性部材の後端部を支持して、前記中押し棒を軸方向に移動させるキャップと、をさらに備えた
ことを特徴とする請求項１〜４のいずれかに記載のコロニー回収器具。
【請求項６】
前記中押し棒が、前記弾性部材ホルダに係止するストッパを備え、前記弾性部材が伸長して前記ストッパが前記弾性部材ホルダに当接し、前記中押し棒の先端が、前記本体先端部の開口位置から前記本体先端部内の後方に離れた位置に配置されることを特徴とする請求項５記載のコロニー回収器具。
【請求項７】
前記弾性部材ホルダが、前記キャップに当接する当接面を備え、前記弾性部材が圧縮されて前記キャップが前記当接面に当接し、前記中押し棒の先端が、前記本体先端部の開口位置から軸方向に外側に突出した位置又は前記開口位置と同位置に配置されることを特徴とする請求項５又は６記載のコロニー回収器具。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれかに記載のコロニー回収器具における本体先端部を、コロニーが形成された固体培地に突き刺して、コロニーの一部と固体培地の一部を前記本体先端部内に採取し、中押し棒の先端を、前記本体先端部の開口位置から軸方向に外側に突出させて、又は前記開口位置と同位置まで移動させて、コロニーの一部と固体培地の一部を前記本体先端部から押し出して回収することを特徴とするコロニー回収器具の使用方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、細胞培養技術に関し、特に寒天培地などを用いて培養した微生物のコロニーを、効率良く一定量連続して回収できるコロニー回収器具、及びコロニー回収器具の使用方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、カビなどの微生物の同定検査は、環境中や食品等から微生物をサンプリングして寒天培地などで培養し、培地の表面に形成されたコロニーの形態を目視で観察すると共に、コロニーを採取して、微生物のＤＮＡを抽出してその特定の遺伝子をＰＣＲ（polymerase  chain  reaction）法などによって増幅し、得られた遺伝子の増幅産物を用いて電気泳動法やシークエンス法、リアルタイムＰＣＲ法、ＤＮＡチップ法などにより行われている。
ここで、微生物の培養に用いられる寒天培地の厚みは、通常、数ミリメートルであり、コロニーはその表面部分に薄く形成されている。そして、コロニーの採取にあたっては、一般的に白金耳などが用いられている。
【０００３】
ところで、上記のように微生物（特に複数の微生物を）をＤＮＡにもとづき同定する場合には、一定量の微生物を採取して、一定量のＤＮＡを抽出することが望ましい。採取の度に微生物の量がそれぞれ異なって、抽出される量が微生物ごとに異なると、ＰＣＲなどにより各微生物の遺伝子を均等に増幅させることができず、偽陰性が生じるなど、検査の精度が低下する。また、採取量が多すぎたり少なすぎる場合も、ＰＣＲなどによる増幅反応が阻害されたり増幅反応が起こらず、同定が不可能となる。
しかしながら、コロニーの採取にあたって白金耳を用いる方法では、適量の微生物を一定量ずつ採取することは困難であり、また白金耳では回収しづらいコロニーも存在するため回収に時間がかかるという問題があった。
【０００４】
そこで、本発明者らは、ガラス製の細管（直径約１ｍｍ、長さ約２０ｃｍ，以下、ガラス管と称する）を用いて、これをコロニーに対して上方から垂直に寒天培地ごと突き通し、ガラス管内にコロニーの一部を採取することによって、一定量の微生物を採取することを可能にしていた。
【０００５】
ところが、このようなガラス管を用いる方法では、一定量のコロニーを安定して採取することは非常に難しく、熟練者であっても３〜４回に１回は失敗するという問題があった。
具体的には、図１１に示すように、寒天培地３００はやわらかいため、シャーレ２００内において、ガラス管１００をコロニー４００に対して寒天培地３００ごと突き通すと、寒天がつぶれてしまい、コロニーがガラス管内に適切に採取できないことが多くあった。
【０００６】
また、ガラス管内にコロニーを採取できた場合であっても、これをガラス管から取り出すためには、ガラス管にエアーを入れて、その圧力によってコロニーをガラス管から排出する必要があった。しかしながら、このような方法では、ガラス管にエアーを入れたときに、エアーが抜けてしまうような状態でコロニーがガラス管の内面に付着している場合には、コロニーを適切に排出できないという問題があった。また、エアーによる排出では、排出するために必要な圧力の制御が難しく必要以上に強く圧力がかかる場合があり、その場合にはコロニーを回収する容器からコロニーが飛び出してしまう問題もあった。
さらに、コロニーの採取にガラス管を用いる場合、使用後に火炎滅菌を行うとガラス管が変形して再利用できず、採取の度に新しいガラス管を使用する必要があるという問題もあった。
【０００７】
ここで、微生物の検査に関する技術として、例えば特許文献１に記載の方法を挙げることができる。特許文献１には、ヒトの皮膚などから細菌を採取して寒天培地を用いて培養し、形成されたコロニー形態ごとのコロニー数を、コロニー形態と菌種名を対照したアトラスを参照して計数することが記載されている。
また、特許文献２には、喀痰などの粘性試料を採取するためのサンプリング器具が記載されており、これを用いることで、試料を定量的に採取でき、微生物を簡便、迅速且つ効率的に回収できるとされている。また、試料の採取後に、均質化処理が行われ、さらに微生物を培養した後又は培養せずに、微生物の検出が行われる。このサンプリング器具の材料としては合成樹脂などが用いられ、内部を視認できるように筒状体に透明な材料を用いることが好ましいとされている。
【０００８】
【特許文献１】特開２００５−４００２９号公報
【０００９】
【特許文献２】国際公開２００６／１０９６９３号パンフレット
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
しかしながら、特許文献１には、寒天培地に形成されたコロニーにもとづき微生物を同定することは記載されているものの、その技術は、コロニーを採取する方法について工夫されたものではなかった。
また、特許文献２のサンプリング器具は、喀痰などの粘性試料を採取するためのものであり、寒天培地上に形成されたコロニーの採取に利用可能なものではなかった。すなわち、このサンプリング器具は、先端部がプレート状のノズルによって閉塞された略筒状体と、ガスケットと、プランジャとを備え、ノズルから試料を吸引し、また吐出する構成となっている。このため、寒天培地に形成されたコロニーを一定量採取する場合に用いることは難しく、またＤＮＡを抽出するための試料としては採取量が過多になるものであった。また、合成樹脂製であるため、使用後に火炎滅菌することはできないものであった。
【００１１】
そこで、本発明者らは、微生物をＤＮＡにもとづき同定する場合に好適なように、寒天培地などに形成されたコロニーを一定量且つ適量で採取でき、さらに連続して利用できるように火炎滅菌するのに適したコロニー回収器具について鋭意研究し、本発明を完成させた。
すなわち、本発明は、寒天培地などを用いて培養した微生物のコロニーを、効率良く一定量連続して採取することの可能なコロニー回収器具、及びコロニー回収器具の使用方法の提供を目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
上記課題を解決するために、本発明のコロニー回収器具は、細長中空で軸方向の両端が開口し、内部に軸方向に挿入される中押し棒の先端部を移動可能に支持する細線状の本体先端部を備えた本体部と、前記中押し棒の先端が、前記本体先端部の開口位置から前記本体先端部内の後方に離れた位置と、前記開口位置から軸方向に外側に突出した位置又は前記開口位置と同位置との間で軸方向に移動可能に前記本体部内に配置される前記中押し棒とを備え、少なくとも前記本体先端部及び前記中押し棒の先端部が金属材料により形成された構成としてある。
【００１３】
また、本発明のコロニー回収器具の使用方法は、上記のコロニー回収器具における本体先端部を、コロニーが形成された固体培地に突き刺して、コロニーの一部と固体培地の一部を前記本体先端部内に採取し、中押し棒の先端を、前記本体先端部の開口位置から軸方向に外側に突出させて、又は前記開口位置と同位置まで移動させて、コロニーの一部と固体培地の一部を前記本体先端部から押し出して回収する方法としてある。
【発明の効果】
【００１４】
本発明によれば、寒天培地などを用いて培養した微生物のコロニーを、効率良く一定量連続して採取することが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】本発明の実施形態に係るコロニー回収器具の側面及び正面の外観を示す図である。
【図２】本発明の実施形態に係るコロニー回収器具の初期状態（コロニー採取時）とキャップ押下状態（コロニー回収時）を示す側面断面図である。
【図３】本発明の実施形態に係るコロニー回収器具における本体部の側面図及び側面断面図である。
【図４】本発明の実施形態に係るコロニー回収器具における本体先端部の先端の拡大側面図である。
【図５】本発明の実施形態に係るコロニー回収器具を用いて寒天培地上のコロニーを採取するようすを示す図である。
【図６】本発明の実施形態に係るコロニー回収器具における中押し棒の側面図である。
【図７】本発明の実施形態に係るコロニー回収器具における中押し棒の先端の拡大側面図である。
【図８】本発明の実施形態に係るコロニー回収器具を用いて採取したコロニーを回収するようすを示す図である。
【図９】本発明の実施形態に係るコロニー回収器具におけるバネホルダの側面図及び側面断面図である。
【図１０】本発明の実施形態に係るコロニー回収器具におけるキャップの側面断面図及びバネの側面図である。
【図１１】従来のガラス管を用いて寒天培地上のコロニーを採取するようすを示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
以下、本発明のコロニー回収器具、及びコロニー回収器具の使用方法の好ましい実施形態について、図面を参照しつつ説明する。
まず、本実施形態のコロニー回収器具が好適に用いられる微生物の検査方法について説明する。
【００１７】
本実施形態のコロニー回収器具が好適に用いられる微生物の検査方法は、寒天培地などを用いて培養した際にコロニーを形成する微生物を対象とし、培養した微生物のコロニーを採取して、微生物からＤＮＡを抽出し、抽出されたＤＮＡにもとづき微生物を同定する方法である。
具体的には、抽出されたＤＮＡの特定の遺伝子におけるターゲット領域をＰＣＲ法などにより増幅し、その増幅産物のサイズを電気泳動法などによって調べることにより微生物を同定する場合に好適に用いられる。
また、ＰＣＲ法などにより標識した増幅産物を生成させると共に、上記ターゲット領域に相補的に結合するプローブが固定化されたＤＮＡチップを用いて、増幅産物とプローブをハイブリダイズさせ、ハイブリダイズした増幅産物の標識を検出することで、微生物を同定する場合にも好適に用いられる。
【００１８】
すなわち、これらの微生物の検査方法では、ＰＣＲ法などによって遺伝子におけるターゲット領域の増幅が行われるため、増幅反応に適するＤＮＡ量を抽出することが望ましく、そのために一定量の微生物を採取して、ＤＮＡの抽出を行うことが望ましい。
微生物の回収量が一定でない場合には、目的とするＤＮＡ量が抽出できなかったり、回収量が多すぎたり、あるいは抽出したＤＮＡ量が微生物ごとに大きく異なって、検出精度が低下する。
本実施形態のコロニー回収器具を使用すれば、培養した微生物を適量且つ一定量のサンプリングが可能となり、微生物の同定を高精度でより確実に行うことが可能になる。
【００１９】
次に、図１を参照して、本実施形態のコロニー回収器具、及びコロニー回収器具の使用方法の概略について説明する。図１は、本実施形態のコロニー回収器具の側面及び正面の外観を示している。
本実施形態のコロニー回収器具１の外観は、軸方向に細長中空に形成された細線状の先端部（本体先端部）１１を備えた本体部１０と、本体部１０の後端に挿入されたキャップ５０を備えた構成となっている。なお、本明細書において、図１のコロニー回収器具１の本体先端部１１側（左側）を前方、キャップ５０側（右側）を後方と称する。
【００２０】
本体部１０における本体先端部１１の軸方向後方には、本体部１０の外面から半径方向に延びる伝熱防止部（放熱板、冷却部）１２が形成されている。
また、本体部１０の後方側の外周には、コロニー回収器具１を片手で持つ際のグリップ性を高めるために、ローレット加工が施されたグリップ部が設けられ、グリップ部から伝熱防止部１２までが、略円錐台柱状に形成されている。なお、ローレット加工が施されたグリップ部は、設けなくても良い。また、グリップ部から伝熱防止部１２までの形状は、略円錐台柱状に限定されず、円柱状などその他の形状であっても良い。
【００２１】
本体部１０の後端に挿入されたキャップ５０の後端を前方に押し込むと、キャップ５０が本体部１０内に配置された弾性部材のバネを圧縮しつつ、中押し棒を前方に移動させ、本体先端部１１の開口位置から中押し棒の先端が突出する。あるいは、中押し棒の先端が、本体先端部１１の開口位置と同位置まで移動する。以下、このような状態をキャップ押下状態と称する。
キャップ５０から手を離すと、バネが伸長して、中押し棒が後方に移動し、中押し棒の先端は、本体先端部１１内に収容される。このとき、中押し棒の先端は、本体先端部１１の開口位置から軸方向後方に少し離れた位置に配置される。以下、このような状態を初期状態と称する。
初期状態において中押し棒の先端が配置される位置は、寒天培地の厚みなどに応じて適宜設定することができるが、例えば本体先端部１１の開口位置から軸方向後方に５ｍｍ程度離れた位置とすることができる。
【００２２】
コロニー回収器具１は、初期状態にして、本体先端部１１をコロニーに対して上方から寒天培地ごと突き刺して、コロニーの採取に用いられる。これにより、コロニーが寒天培地と共に切り取られて、本体先端部１１内に保持される。
次に、コロニー回収器具１をキャップ押下状態にして、本体先端部１１内に保持されたコロニーと寒天培地を中押し棒により押し出して、チューブなどに回収する。
【００２３】
このように、コロニー回収器具１によれば、片手で簡単にコロニーを一定量（寒天培地の表面の一定面積）採取できる。また、片手で持ったままキャップ５０を本体部１０の後端に押し込むことで、採取したコロニーを本体先端部１１から簡単に排出することができ、コロニーを容易に回収することが可能となっている。
【００２４】
ある検体の複数のコロニーを回収後、別の検体のコロニーを回収したい場合には、コロニー回収器具１の先端部に火炎滅菌（直火で数秒処理する殺菌）処理を施すことで、コンタミネーションを防ぎながらコロニー回収器具１の連続使用を可能にする。これによって、多くの検体の複数のコロニーを連続して採取することが可能となる。
また、火炎滅菌処理に際し、伝熱防止部１２によって、やけどを防止することが可能である。
【００２５】
火炎滅菌処理によりコロニー回収器具１の先端部の寸法が変わらないように、少なくとも本体先端部１１と中押し棒の先端部は、金属材料により形成することが必要である。
また、本体先端部１１を金属材料により形成することで、本体先端部１１の壁の厚みを薄くでき、さらに本体先端部１１の先端を鋭利なテーパー状に形成することができる。
このため、本体先端部１１を寒天培地に突き刺す際に、寒天培地を適切に切断することが可能となる。
【００２６】
次に、本実施形態のコロニー回収器具の各構成要素について、図１〜図１０を参照して詳細に説明する。
本実施形態のコロニー回収器具１は、図２に示すように、本体部１０、中押し棒２０、バネホルダ３０、バネ４０、及びキャップ５０を備えている。
【００２７】
本体部１０は、細長中空で軸方向の両端が開口し、内部に軸方向に挿入される中押し棒２０の先端部を移動可能に支持する細長中空に形成された細線状の本体先端部１１を備えている。さらに、本体部１０は、図３に示すように、伝熱防止部１２、棒支持部（本体棒支持部）１３、中央部（本体中央部）１４、及び後端部（本体後端部）１５を備えている。
【００２８】
本体先端部１１は、図１〜３において、異なる直径の２つの円筒状部がテーパー部を介して連続して構成されているが、これに限定されず、１つの円筒状部からなるものでも良く、３つ以上の円筒状部がテーパー部を介して連続してなるものでも良く、円筒状部がテーパー部を介することなく連続してなるものでも良い。
【００２９】
本体先端部１１は、図４に示すように、壁の厚みを可能な限り薄く形成することが好ましい。また、本体先端部１１の先端１１１は、鋭利なテーパー状に形成することが好ましい。これにより、本体先端部１１を寒天培地に突き刺す際に、寒天培地を適切に切断することができるため、コロニーを精度良く適量で回収することが可能となる。
【００３０】
具体的には、図５に示すように、シャーレ２００に入れた寒天培地３００に形成されたコロニー４００の上方から本体先端部１１を突き刺すことで、コロニー４００と寒天培地３００を簡単に切断することができる。また、このとき本体先端部１１を周方向に軽く回転させることで、これらを精度良く切断することができる。このため、コロニー４００を一定量且つ適量で効率的に採取することが可能となる。
なお、コロニーを培養する培地は寒天培地に限定されず、その他の固体培地でコロニーを培養する場合にも、本実施形態のコロニー回収器具１は、好適に用いることが可能である。
【００３１】
伝熱防止部１２は、本体先端部１１の軸方向後方に備えられ、本体部１０の外面から半径方向に外側に延びている。
コロニー回収器具１は、コロニーの回収後、先端部に火炎滅菌処理を施して、連続して使用する。火炎滅菌処理を行う際には、火が直接手にあたったり、長時間熱した場合に、やけどの危険があるため、伝熱防止部１２は、このようなやけどを防止するために備えられる。
【００３２】
また、伝熱防止部１２は、本体部１０の外面から半径方向に外側に延びることで表面積が大きくなっているため、本体先端部１１から熱を逃がす放熱板や冷却部として機能する。
伝熱防止部１２は、図１〜３では、円盤状に形成されているが、厚みを増した円盤状にしても良く、四角盤やその他の多角盤、円錐台盤などの形状に形成しても良い。伝熱防止部１２の材料としては、プラスチック、ゴム、セラミックなども使用可能であるが、放熱性や冷却性が良いため金属材料が好ましい。
【００３３】
本体棒支持部１３は、その内部において、中押し棒２０を軸方向に移動可能に支持する。この本体棒支持部１３によって、中押し棒２０をより安定的に保持することが可能となる。
なお、中押し棒２０は、本体先端部１１とバネホルダ３０とキャップ５０によっても支持されるため、本体棒支持部１３を省略することもできる。
【００３４】
本体中央部１４は、伝熱防止部１２と本体後端部１５の間に位置し、その内部に中押し棒２０が挿通されている。
また、本体中央部１４の後方側と本体後端部１５の外周に、コロニー回収器具１を手で握るためのローレット加工を施したグリップ部を設けることが好ましい。なお、このようなグリップ部を本体部１０の外周に設けるのではなく、別体のグリップを本体部１０の外周に取り付けても良く、さらに、グリップ部を設けなくても良い。
本体後端部１５は、その後端から内部にバネホルダ３０を挿入して、これを固定して保持する。その固定方法は特に限定されず、例えば接着により行うことができる。
【００３５】
本体先端部１１は、前述の通り、金属材料により形成することが必要である。これにより、本体先端部１１を高強度にすることができ、その壁の厚みを薄くすることができる。また、本体先端部１１の先端１１１を鋭利なテーパー状に加工でき、寒天培地をより切断しやすくすることが可能となる。さらに、本体先端部１１を火炎滅菌処理しても変形せず、連続して再使用可能にすることができる。
また、コロニー回収器具１の先端部を火炎滅菌処理するため、中押し棒２０の先端部も、本体先端部１１と同様に金属材料により形成することが必要である。さらに、本体先端部１１、中押し棒２０の先端部以外のコロニー回収器具１の材料は、プラスチック、ゴム、セラミックなども使用可能であるが、コロニー回収器具１における全ての構成要素を金属材料により形成することも好ましい。
【００３６】
コロニー回収器具１に用いる金属材料の種類は、特に限定されないが、例えば、鉄、鋼、アルミニウム、銅、ニッケル、チタン、マグネシウム、鉛、錫、コバルト、クロム、亜鉛、銀、白金、金、及びこれらの各種合金等、あるいはこれらをメッキした金属、あるいは各種表面処理を施した金属を使用することができる。また、これらの中でも強度が高く、耐食性に優れ、耐炎熱処理性に優れたものが好ましく、ステンレス鋼（ＳＵＳ）を用いることが特に好ましい。また、ステンレス鋼は安価な点でも好ましい。
【００３７】
中押し棒２０は、図６に示すように、その先端部（棒先端部）２１の先端２１１が、本体先端部１１の開口位置（先端１１１の位置）から本体先端部１１内の後方に離れた位置（図２のＡの位置）と、本体先端部１１の開口位置から軸方向に外側に突出した位置（図２のＢの位置）又は本体先端部１１の開口位置と同位置との間で軸方向に移動可能に本体部１０内に配置される。
さらに、中押し棒２０は、図６に示すように、中央部（棒中央部）２２、棒ストッパ２３、バネ被挿入部２４、及び後端部（棒後端部）２５を備えている。
【００３８】
棒先端部２１は、細線状に形成され、本体部１０の本体先端部１１と棒支持部１３内に挿通して、軸方向に移動可能に配置される。
棒先端部２１の先端２１１は、図７に示すように、テーパー加工が施されて丸みを帯び、これによって先端２１１を本体先端部１１から出し易く、また本体先端部１１内に戻し易くなっている。
棒中央部２２は、その前方側において本体部１０の棒支持部１３により支持される。また、棒中央部２２のその他の部分は、本体中央部１４内で壁面に接することなく保持される。
【００３９】
棒ストッパ２３は、キャップ５０から手を離してバネ４０が伸長した時に、バネホルダ３０に当接して、中押し棒２０を特定の位置に配置させる。具体的には、棒先端部２１の先端２１１が、本体先端部１１の開口位置から本体先端部１１内の後方に離れた位置（図２のＡの位置）に配置するように、中押し棒２０を配置させる。
また、キャップ５０を押し込むと、棒ストッパ２３はバネホルダ３０から離れて軸方向前方に移動する。そして、棒先端部２１の先端２１１は、本体先端部１１の開口位置から軸方向に外側に突出した位置（図２のＢの位置）又は本体先端部１１の開口位置と同位置に配置される。
これにより、図８に示すように、本体先端部１１内に採取されたコロニー４００を寒天培地と共に、棒先端部２１により本体先端部１１から押し出して、チューブ５００に簡単に回収することが可能になる。
【００４０】
このように、コロニー回収器具１は、本体先端部１１を、コロニーが形成された寒天培地に突き刺して、コロニーの一部と寒天培地の一部を本体先端部１１内に採取し、棒先端部２１の先端２１１を、本体先端部１１の開口位置から軸方向に外側に突出させて、又は本体先端部１１の開口位置と同位置まで移動させて、コロニーの一部と寒天培地の一部を本体先端部１１から押し出して回収する方法で、好適に使用することが可能である。
【００４１】
バネ被挿入部２４は、らせん形状のバネ４０の中に挿入される。このようにして、バネ被挿入部２４は、その周囲に弾性部材のバネ４０を保持する。
棒後端部２５は、キャップ５０に挿入されて固定される。その固定方法は特に限定されず、接着でも圧入でも良い。
【００４２】
バネホルダ（弾性部材ホルダ）３０は、中空で軸方向の両端が開口し、本体後端部１５に後端から挿入して固定され、中押し棒２０を内部に挿通して支持すると共に、中押し棒２０を挿入したバネ４０を保持し、バネ４０の前端部を支持する。
バネホルダ３０は、図９の側面断面図に示すように、内径の異なる３つの略筒状体からなり、前方から順に、棒支持部（バネホルダ棒支持部）３１、バネ保持部３２、及びキャップ可動部３３を備えている。
【００４３】
棒支持部３１は、中押し棒２０のバネ被挿入部２４を挿通可能な内径を有し、バネ被挿入部２４を挿通して支持する。
バネ保持部３２は、バネ４０を挿入可能な内径を有し、中押し棒２０を挿入したバネ４０を挿入して保持する。また、バネ４０の前端部は、バネ保持部３２内の前端面のバネ支持面３２１により支持される。
【００４４】
キャップ可動部３３は、キャップ５０を挿入可能な内径を有し、キャップ５０を移動可能に保持する。
キャップ５０をバネホルダ３０に押し込むことにより、バネ４０が圧縮され、キャップ５０の前端がキャップ可動部３３内の前端面のキャップ当接面３３１に当接するまで、キャップ５０がキャップ可動部３３内を前方に移動する。
また、キャップ５０から手を離すと、バネ４０が伸長してキャップ５０の前端がキャップ当接面３３１から離れ、キャップ５０がキャップ可動部３３内を後方に移動して、コロニー回収器具１は初期状態に戻る。
【００４５】
バネ４０は、らせん形状の一般的なものを使用することができる。バネ４０は、中押し棒２０のバネ被挿入部２４を挿入して、バネホルダ３０とキャップ５０により形成された内部空間に保持される。
キャップ５０をバネホルダ３０に押し込むことにより、バネ４０が圧縮され、キャップ５０と共に中押し棒２０が前方に移動して、中押し棒２０の先端２１１が本体先端部１１の開口位置から突出する。あるいは、中押し棒の先端が、本体先端部１１の開口位置と同位置まで移動する。
また、キャップ５０から手を離すと、バネ４０が伸長して、キャップ５０が初期の位置に戻ると共に、中押し棒２０の先端２１１が本体先端部１１内に収容されて本体先端部１１の開口位置から後方に離れた位置に配置される。
バネ４０の材料は、特に限定されず、例えば、硬鋼線、ピアノ線、バネ用シリコンクロム鋼、バネ用ステンレス鋼線等を用いることができる。
【００４６】
また、本実施形態のコロニー回収器具１において、バネ４０に変えて、その他の弾性部材を用いても良い。その他の弾性部材としては、例えばゴム、クッション材、スプリング等を用いることができる。
その他の弾性部材を用いる場合も、バネ４０の場合と同様に、バネホルダ３０とキャップ５０により形成された内部空間に弾性部材を保持して、弾性部材の先端部をバネホルダ３０内のバネ支持面３２１により支持し、且つ弾性部材の後端部をキャップ５０のバネ保持部５２により支持することで、同様の効果を得ることが可能である。
【００４７】
キャップ５０は、中押し棒２０を挿入して固定すると共に、バネホルダ３０の後端から挿入され、バネ４０の後端部を支持する。そして、キャップ５０は、バネ４０を圧縮しつつ軸方向前方に移動して、中押し棒２０を前方に移動させる。
キャップ５０は、図１０に示すように、軸方向に同心円状に配置された２つの略筒状体からなり、内径の小さい部分から順に、棒固定部５１、及びバネ保持部５２を構成している。
【００４８】
棒固定部５１には中押し棒２０の棒後端部２５が挿入されて固定される。
バネ保持部５２は、バネ４０を挿入して、バネ４０の後端部を支持する。キャップ後端５４を押してキャップ５０をバネホルダ３０に押し込むことにより、バネ保持部５２の前端のホルダ当接部５３がバネホルダ３０のキャップ当接面３３１に当接するまで、バネ保持部５２はバネ４０を前方に押して圧縮する。また、キャップ後端５４から手を離すと、バネ４０が伸長して、ホルダ当接部５３がキャップ当接面３３１から離れて、キャップ５０は後方に移動し、コロニー回収器具１は初期状態に戻る。
【００４９】
本実施形態のコロニー回収器具１は、本体部１０、中押し棒２０、バネホルダ３０、バネ４０、及びキャップ５０の５つの部品で構成されているが、本実施形態の変形例として、これらの一部を別体に又は一体に構成しても良い。
例えば、本体部１０を前半部分と後半部分に分離可能に構成すると共に、本体部１０とバネホルダ３０を一体に構成しても良い。
【００５０】
本実施形態のコロニー回収器具１のサイズは、特に限定されないが、片手で操作し易い大きさであることが好ましい。このような観点からコロニー回収器具１のサイズは、例えば、全長を１００〜１５０ｍｍ、本体先端部１１の外径を０．５〜１．５ｍｍ、伝熱防止部１２、本体中央部１４及び本体後端部１５の外径を５〜３０ｍｍ、キャップ５０の押し込み可能距離（中押し棒２０の移動距離）を３〜１５ｍｍ、中押し棒２０の先端が本体先端部１１の開口位置から突出する距離を０〜３ｍｍとすることが好ましい。
【００５１】
以上、本発明について、好ましい実施形態を示して説明したが、本発明は、前述した実施形態に限定されるものではなく、本発明の範囲で種々の変更実施が可能であることは言うまでもない。
例えば、本体部のグリップ部において、指を挿入してグリップ部を保持可能にする保持部を設けたり、伝熱防止部を二重に設けるなど適宜変更することが可能である。
【産業上の利用可能性】
【００５２】
本発明は、固体培地からコロニーを迅速に採取するために、好適に利用することが可能である。
【符号の説明】
【００５３】
１  コロニー回収器具
１０  本体部
１１  先端部（本体先端部）
１１１  先端
１２  伝熱防止部
１３  棒支持部（本体棒支持部）
１４  中央部（本体中央部）
１５  後端部（本体後端部）
２０  中押し棒
２１  先端部（棒先端部）
２１１  先端
２２  中央部（棒中央部）
２３  棒ストッパ
２４  バネ被挿入部
２５  後端部（棒後端部）
３０  バネホルダ
３１  棒支持部（バネホルダ棒支持部）
３２  バネ保持部
３２１  バネ支持面
３３  キャップ可動部
３３１  キャップ当接面
４０  バネ（弾性部材）
５０  キャップ
５１  棒固定部
５２  バネ保持部
５３  ホルダ当接部
５４  キャップ後端
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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