(57)【要約】【課題】回転シャフトの上端部と下端部を、上部回転支持部と下部回転支持部に各々堅固に連結する。【解決手段】少なくとも回転シャフト１３０の下端部１３６は下部回転支持部１３４の支持軸１３４ｂに下部軸受７を介して連結されている。下端部１３６と下部軸受７との間、および支持軸１３４ｂと下部軸受７との間に、嵌合時に潰れて変形した変形リブ８Ａ、８Ｂが設けられている。【選択図】図１１
2016002035.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
培養液を収納する袋本体と、
前記袋本体内に配置され、上端部と下端部とが設けられた回転シャフトと、この回転シャフトに取付けられた撹拌羽根とを有する撹拌器と、
前記回転シャフトを支持するとともに前記袋本体から外方へ突出する上部回転支持部および下部回転支持部とを備え、
前記回転シャフトの前記下端部は、下部軸受を介して前記下部回転支持部に連結され、
前記回転シャフトの前記下端部または前記下部軸受のうち少なくとも一方に、他方に対して嵌合して変形した複数の変形リブが円周状に配置されるか、または、前記下部回転支持部または前記下部軸受のうち少なくとも一方に、他方に対して嵌合して変形した複数の変形リブが円周状に配置されることを特徴とする細胞培養袋。
【請求項２】
前記変形リブは前記下端部または前記下部軸受のうち一方に一体に形成されるか、または前記下部回転支持部と前記下部軸受のうち一方に一体に形成されていることを特徴とする請求項１記載の細胞培養袋。
【請求項３】
培養液を収納する袋本体と、
前記袋本体内に配置され、上端部と下端部とが設けられた回転シャフトと、この回転シャフトに取付けられた撹拌羽根とを有する撹拌器と、
前記回転シャフトを支持するとともに前記袋本体から外方へ突出する上部回転支持部および下部回転支持部とを備え、
前記回転シャフトの前記上端部は、上部軸受を介して前記上部回転支持部に連結され、
前記回転シャフトの前記上端部または前記上部軸受のうち少なくとも一方に、他方に対して嵌合して変形した複数の変形リブが円周状に配置されるか、または、前記上部回転支持部または前記上部軸受のうち少なくとも一方に、他方に対して嵌合して変形した複数の変形リブが円周状に配置されることを特徴とする細胞培養袋。
【請求項４】
前記変形リブは前記上端部または前記上部軸受のうち一方に一体に形成されるか、または前記上部回転支持部と前記上部軸受のうち一方に一体に形成されていることを特徴とする請求項３記載の細胞培養袋。
【請求項５】
開口を有する袋本体を作製する工程と、
前記袋本体に下部回転支持部を取付ける工程と、
前記開口から前記袋本体内に、上端部と下端部とが設けられた回転シャフトと、この回転シャフトに取付けられた撹拌羽根とを有する撹拌器を挿入し、前記回転シャフトの下端部を前記下部回転支持部に嵌合する工程と、
前記袋本体の前記開口を密閉する工程とを備え、
前記回転シャフトの前記下端部は、下部軸受を介して前記下部回転支持部に連結され、
前記回転シャフトの前記下端部または前記下部軸受のうち少なくとも一方に円周状に配置された複数の変形リブが前記回転シャフトの嵌合時に変形するか、または前記下部回転支持部または前記下部軸受のうち少なくとも一方に円周状に配置された複数の変形リブが前記回転シャフトの嵌合時に変形することを特徴とする細胞培養袋の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、シングルユース型細胞培養袋およびその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
抗体医薬やワクチンなどのバイオ医薬品の開発や製造において、シングルユース製品（使い捨て製品）が着実に浸透しつつある。シングルユース製品は洗浄や滅菌の作業が必要ないこと、交叉汚染がないこと、簡易的に無菌環境が得られることなどのメリットがあるため、バイオ医薬品の開発コストを大幅に削減できる場合がある。
【０００３】
近年注目されているシングルユース製品の１つが３Ｄ細胞培養袋である。これはフィルム製袋本体、チューブ、ポート、スパージャー、攪拌器、溶存酸素センサー、ｐＨセンサー、温度センサーなどの様々な材料、部品、機構を有する細胞培養袋である。この細胞培養袋のなかに細胞培養用の培養液（培地ともいう）を充填し、培地へ供給する気体の流量、培地を攪拌する速度、培地の温度などを制御しながら細胞培養を行う。培地へ供給する気体は空気、酸素、窒素、二酸化炭素などであるが、とりわけ酸素の供給が細胞培養に重要である。
【０００４】
ところで細胞培養袋を構成する構成要素のうち、攪拌器は回転シャフトと、撹拌羽根とを有し、上部回転支持部と、下部回転支持部とにより、回転可能に支持されている。このうち上部回転支持部と下部回転支持部は袋本体に取付けられ、また回転シャフトは上部回転支持部および下部回転支持部に軸受を介して支持されている。
【０００５】
この場合、回転シャフトが上部回転支持部あるいは下部回転支持部に精度良く、かつ遊びなく連結されていないと、回転シャフトの回転軸がずれたり、上部回転支持部あるいは下部回転支持部から回転軸が外れたりすることが考えられる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特許４９８６６５９号公報
【特許文献２】特開２０１２−１７０３６４号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明はこのような点を考慮してなされたものであり、回転中に撹拌器の回転シャフトの回転軸がぶれることなく、かつ回転シャフトが上部回転支持部あるいは下部回転支持部から外れることがない、細胞培養袋およびその製造方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本実施の形態は、培養液を収納する袋本体と、前記袋本体内に配置され、上端部と下端部とが設けられた回転シャフトと、この回転シャフトに取付けられた撹拌羽根とを有する撹拌器と、前記回転シャフトを支持するとともに前記袋本体から外方へ突出する上部回転支持部および下部回転支持部とを備え、前記回転シャフトの前記下端部は、下部軸受を介して前記下部回転支持部に連結され、前記回転シャフトの前記下端部または前記下部軸受のうち、少なくとも一方に他方に対して嵌合して変形した複数の変形リブが円周状に配置されるか、または前記下部回転支持部または前記下部軸受のうち、少なくとも一方に他方に対して嵌合して変形した複数の変形リブが円周状に配置されることを特徴とする細胞培養袋である。
【０００９】
本実施の形態は、前記変形リブは前記下端部または前記下部軸受のうち一方に一体に形成されるか、または前記下部回転支持部と前記下部軸受のうち一方に一体に形成されていてもよい。
【００１０】
本実施の形態は、培養液を収納する袋本体と、前記袋本体内に配置され、上端部と下端部とが設けられた回転シャフトと、この回転シャフトに取付けられた撹拌羽根とを有する撹拌器と、前記回転シャフトを支持するとともに前記袋本体から外方へ突出する上部回転支持部および下部回転支持部とを備え、前記回転シャフトの前記上端部は、上部軸受を介して前記上部回転支持部に連結され、前記回転シャフトの前記上端部または前記上部軸受のうち、少なくとも一方に他方に対して嵌合して変形した複数の変形リブが円周状に配置されるか、または前記上部回転支持部または前記上部軸受のうち、少なくとも一方に他方に対して嵌合して変形した複数の変形リブが円周状に配置されることを特徴とする細胞培養袋である。
【００１１】
本実施の形態は、前記変形リブは前記上端部または前記上部軸受のうち一方に一体に形成されるか、または前記上部回転支持部と前記上部軸受のうち一方に一体に形成されていてもよい。
【００１２】
本実施の形態は、開口を有する袋本体を作製する工程と、前記袋本体に下部回転支持部を取付ける工程と、前記開口から前記袋本体内に、上端部と下端部とが設けられた回転シャフトと、この回転シャフトに取付けられた撹拌羽根とを有する撹拌器を挿入し、前記回転シャフトの下端部を前記下部回転支持部に嵌合する工程と、前記袋本体の前記開口を密閉する工程とを備え、前記回転シャフトの前記下端部は、下部軸受を介して前記下部回転支持部に連結され、前記回転シャフトの前記下端部または前記下部軸受のうち、少なくとも一方に円周状に配置された複数の変形リブが前記回転シャフトの嵌合時に変形するか、または前記下部回転支持部または前記下部軸受のうち、少なくとも一方に円周状に配置された複数の変形リブが前記回転シャフトの嵌合時に変形することを特徴とする細胞培養袋の製造方法である。
【発明の効果】
【００１３】
本発明によれば、回転中に、回転シャフトの回転軸を一定に定めることができ、かつ回転シャフトが上部回転支持部あるいは下部回転支持部から外れることを防止できる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】図１は本発明によるスパージャーが配置された培養袋を示す全体概略図。
【図２】図２は袋本体を構成するフィルムを示す図。
【図３】図３は袋本体を示す側面図。
【図４】図４（ａ）（ｂ）は袋本体を図３と反対方向からみた側面図。
【図５】図５は袋本体を示す平面図。
【図６】図６（ａ）（ｂ）は袋本体を示す底面図。
【図７】図７は袋本体の上部フィルムを示す詳細図。
【図８】図８は袋本体の側部フィルムを示す詳細図。
【図９】図９は回転シャフトと、上端部と、上部回転支持部の取付構造を示す図。
【図１０】図１０は上端部を示す平面図。
【図１１】図１１は回転シャフトと、下端部と、下部回転支持部の取付構造を示す図。
【図１２】図１２（ａ）（ｂ）はスパージャーの取付構造を示す図。
【図１３】図１３は撹拌用羽根を示す図。
【図１４】図１４は温度センサおよびｐＨセンサの取付構造を示す図。
【図１５】図１５（ａ）は回転シャフトの上端部を示す平面図、図１５（ｂ）はその側面図、図１５（ｃ）はその底面図。
【図１６】図１６（ａ）は回転シャフトの下端部を示す底面図、図１６（ｂ）はその側面図。
【図１７】図１７は回転シャフトを示す側面図。
【図１８】図１８（ａ）は下部回転支持部を示す側面図、図１８（ｂ）はその側断面図、図１８（ｃ）はその平面図、図１８（ｄ）はその底面図。
【図１９】図１９は撹拌用羽根を示す図。
【図２０】図２０（ａ）は撹拌用羽根の固定リングを示す平面図、図２０（ｂ）はその側面図。
【図２１】図２１（ａ）（ｂ）は袋本体を構成するフィルムの積層構造を示す図。
【図２２】図２２（ａ）は回転シャフトの上端部に変形リブを設けた状態を示す図であって、図２２（ｂ）は上部軸受の外輪に変形リブを設けた状態を示す図。
【図２３】図２３（ａ）は上部回転支持部の支持軸に変形リブを設けた状態を示す図であって、図２３（ｂ）は上部軸受の内輪に変形リブを設けた状態を示す図。
【図２４】図２４（ａ）は回転シャフトの下端部に変形リブを設けた状態を示す図であって、図２４（ｂ）は下部軸受の外輪に変形リブを設けた状態を示す図。
【図２５】図２５（ａ）は下部回転支持部の支持軸に変形リブを設けた状態を示す図であって、図２５（ｂ）は下部軸受の内輪に変形リブを設けた状態を示す図。
【発明の実施形態】
【００１５】
以下、図面を参照して本発明の実施形態について説明する。
【００１６】
（培養袋）
まず図１により本実施の形態による培養袋（細胞培養袋ともいう）１１０について説明する。
【００１７】
図１に示すように、培養袋１１０は、被培養物１０８ａを含む培養液（培地ともいう）１０８を収容する袋本体１１１と、袋本体１１１内の培養液１０８を撹拌する攪拌器１３０と、を備えている。このうち、袋本体１１１は、複数のフィルム１１１ａをヒートシールして形成されている。フィルム１１１ａに用いる材料としては、可撓性を有するとともに耐ガンマ線滅菌性を有する樹脂材料であれば特に限定されることはない。例えば、フィルム１１１ａには、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ナイロン、エチレンビニルアルコール共重合体（ＥＶＯＨ）、ポリエチレン（ＰＥ）等を用いることができる。
【００１８】
攪拌器１３０は、袋本体１１１に回転自在に設けられた、袋本体１１１の上下方向に延びる回転シャフト１３１と、回転シャフト１３１に設けられ、袋本体１１１内の培養液１０８を撹拌する撹拌用羽根１３２とを有している。また回転シャフト１３１を回転可能に支持し、袋本体１１１から外方（図１において上方）に突出する上部回転支持部１３３と、回転シャフト１３１を回転可能に支持し、袋本体１１１から外方（図６において下方）に突出する下部回転支持部１３４とが、各々袋本体１１１に取付けられている。
【００１９】
このうち、上部回転支持部１３３は、袋本体１１１の上部にヒートシールされている。
【００２０】
回転シャフト１３１は、袋本体１１１内に上下方向に延びており、回転シャフト１３１の上端部１３５は、上部回転支持部１３３まで延びている。回転シャフト１３１の上端部１３５には、後述のように撹拌器側磁石１３５ａが設けられている（図９参照）。この撹拌器側磁石１３５ａが培養システムの撹拌駆動装置１０６と磁気カップリング方式で磁気結合されることにより、撹拌駆動装置１０６から回転シャフト１３１に回転駆動力が伝達されるようになっている。
【００２１】
下部回転支持部１３４は、袋本体１１１の下部にヒートシールされている。回転シャフト１３１の下端部１３６は、袋本体１１１内に配置されており、下部回転支持部１３４は、回転シャフト１３１の下端部１３６を、袋本体１１１内において回転可能に支持している。
【００２２】
袋本体１１１の上部には、培養液１０８を注入する培養液注入部１５０が設けられている。この培養液注入部１５０には、培養システムの培養液供給部から、被培養物１０８ａを含む培養液１０８が供給されて、培養液１０８が袋本体１１１内に注入されるようになっている。また、袋本体１１１の上部には、培養液注入部１５０から袋本体１１１に培養液１０８を注入する際、袋本体１１１内の気体を排出する気体排出部１５１が設けられている。なお、上述した下部回転支持部１３４が、袋本体１１１から培養液１０８を排出する機能を有しており、当該下部回転支持部１３４から、袋本体１１１内の培養液１０８が排出されるようになっている。
【００２３】
袋本体１１１内に、スパージャー（気体供給装置）５０が設けられている。このスパージャー５０は、袋本体１１１内に収容された培養液１０８に空気１０９等の気体を導入するためのものである。スパージャー５０から袋本体１１１の上部を貫通して気体供給チューブ１５３が延びている。この気体供給チューブ１５３は、外方の培養システムの気体供給源１６０からスパージャー５０に空気１０９を供給するためのものである。
【００２４】
袋本体１１１には、温度センサ１５４、ｐＨセンサ１５５およびＤｏ（溶存酸素）センサ１５６が取り付けられている。このうち温度センサ１５４は、培養中の培養液１０８の温度を計測し、ｐＨセンサ１５５は、培養中の培養液１０８のｐＨを計測するためのものである。Ｄｏセンサ１５６は、培養中の培養液１０８の溶存酸素量を計測するためのものである。
【００２５】
また、袋本体１１１に、サンプリングチューブ１５７が取り付けられている。このサンプリングチューブ１５７は、培養中の培養液１０８を取り出し可能になっている。
【００２６】
なお、上述した培養液注入部１５０、温度センサ１５４等の配置は、図１に示すような配置に限られることはなく、各々の機能を果たすことが可能であれば任意とすることができる。
【００２７】
次に図２乃至図１９により、培養袋１１０について更に述べる。
【００２８】
上述のように、培養袋１１０は複数のフィルム１１１ａをヒートシールすることにより形成された袋本体１１１を有している。この場合、袋本体１１１を構成するフィルム１１１ａは、一対の側部フィルム１１１Ａ、１１１Ｂと、上部フィルム１１１Ｃと、底部フィルム１１１Ｄとからなる（図２参照）。そしてこれら一対の側部フィルム１１１Ａ、１１１Ｂ、上部フィルム１１１Ｃ、底部フィルム１１１Ｄを互いに重ね合せて、互いの周縁をヒートシールすることにより袋本体１１１を得ることができる。
【００２９】
次に図３乃至図８により、袋本体１１１の構成を詳述する。
【００３０】
図３乃至図８に示すように、袋本体１１１の側部フィルム１１１Ａには、温度センサ１５４、ｐＨセンサ１５５、Ｄｏセンサ１５６およびサンプリングチューブ１５７を装着するための開口１５４ａ、１５５ａ、１５６ａ、１５７ａが各々形成されている（図３および図８参照）。
【００３１】
ここで袋本体１１１としては２００Ｌ用袋本体と、５０Ｌ用袋本体がある。２００Ｌ用袋本体１１１は、２００Ｌまで培養液を入れることができるものであり、容量は２００Ｌ以上あり、２００Ｌ以下の培養液、例えば１００Ｌの培養液を入れることもできる（図４（ａ）および図６（ａ）参照）。
【００３２】
一方、５０Ｌ用袋本体１１１は、５０Ｌまで培養液を入れることができるものである（図４（ｂ）および図６（ｂ）参照）。
【００３３】
なお２００Ｌ用袋本体と、５０Ｌ用袋本体としては、共通の部品を用いることができるが、以下の部品の形状が異なる。
【００３４】
回転シャフト１３１の長さ、
後述する回転リング１３２ａの大きさ、
後述する回転リング１３２に使用するねじ１３２ｂの大きさ、
撹拌用羽根１３２の大きさ、
側部フィルム１１１Ａ、１１１Ｂの固定フィルムの数、
底部フィルム１１１Ｄの固定フィルムの配置（向き）、
スパージャー５０の形状、大きさ、
後述する貫通孔２１の数
また図５、図６および図７に示すように、袋本体１１１の上部フィルム１１１Ｃには、上部回転支持部１３３を装着するための開口１３３ａが形成され、また培養液注入部１５０および気体排出部１５１を装着するための開口１５０ａおよび開口１５１ａが各々形成されている。
【００３５】
また、底部フィルム１１１Ｄには、下部回転支持部１３４を装置するための開口１３４ａが形成されている。さらに底部フィルム１１１Ｄの内面には、スパージャー５０を袋本体１１１内に固定するため、スパージャー５０を保持する３つの保持バンド５０ａ、５０ａ、５０ａが取付けられている。
【００３６】
次に図９乃至図１２により、回転シャフト１３１、上部回転支持部１３３および下部回転支持部１３４の構造について詳述する。ここで回転シャフト１３１、上部回転支持部１３３および下部回転支持部１３４は、いずれも合成樹脂製となっている。
【００３７】
図９および図１０に示すように、回転シャフト１３１には、上端部１３５がネジ止めされ、この上端部１３５は上部回転支持部１３３の下方に位置するとともに、上部回転支持部１３３の支持軸１３３ｂに軸受５を介して回転自在に連結されている。また上述のように、回転シャフト１３１の上端部１３５には攪拌器側磁石１３５ａが設けられ、この攪拌器側磁石１３５ａが攪拌駆動装置１０６の駆動磁石１０６ａと磁気カップリング方式で磁気結合される。
【００３８】
この場合、回転シャフト１３１の上端部１３５には６個の攪拌器側磁石１３５ａが設けられ、これら６個の攪拌器側磁石１３５ａはＮ極とＳ極の磁石が交互に配置されている。
【００３９】
なお、図９において、上部回転支持部１３３の側面には、攪拌駆動装置１０６を連結するための連結溝１３３ｃが形成されている。また上部回転支持部１３３は、上部フィルム１１１Ｃの開口１３３ａに装着されるとともに、上部フィルム１１１Ｃの内面にヒートシールされて固着されている。
【００４０】
また、図１１に示すように、回転シャフト１３１には下端部１３６がネジ止めされ、この下端部１３６は下部回転支持部１３４の支持軸１３４ｂにより回転自在に支持されている。
【００４１】
また下端部１３６内には下部回転支持部１３４に対して回転シャフト１３１を回転方向に支持する下部軸受７が設けられ、この下部軸受７は金属Ｃリング１３６ａにより下端部１３６に固定されている。また下部回転支持部１３４は、底部フィルム１１１Ｄの開口１３４ａに装着されているとともに、底部フィルム１１１Ｄの内面にヒートシールされて固着されている。
【００４２】
次に図１５乃至図１８により、回転シャフト１３１、上部回転支持部１３３および下部回転支持部１３４の取付構造の詳細について述べる。
【００４３】
上述のように、回転シャフト１３１の上端には、上部回転支持部１３３側へ延びる上端部１３５がネジ止めにより取付けられている。ここで図１５（ａ）（ｂ）（ｃ）に示すように、上端部１３５は攪拌機側磁石１３５ａを収納するための磁石収納部１３５Ａと、上部軸受５を収納するための軸受収納部１３５Ｂを有している。また、上端部１３５の下方には、回転シャフト１３１の外ネジ１３１ａが係合する内ネジを有する連結部１３５Ｄが形成されている（図１７参照）。
【００４４】
また回転シャフト１３１の下端には、下部回転支持部１３４に支持される下端部１３６がネジ止めにより取り付けられている。ここで図１６（ａ）（ｂ）に示すように、下端部１３６には、下部軸受７を収納するための軸受収納部１３６Ａを有している。また下端部１３６の上方には、回転シャフト１３の外ネジ１３１ｂが係合する内ネジを有する連結部１３６Ｄが形成されている（図１７参照）。
【００４５】
また図１８（ａ）（ｂ）（ｃ）に示すように、下部回転支持部１３４は、回転シャフト１３１の下端部１３６を回転自在に支持している。また下部回転支持部１３４は底部フィルム１１１Ｄにヒートシールされるシール板１３８を有しており、さらに袋本体１１１内側に位置する排出口１３８ａを有している。
【００４６】
図１８（ａ）（ｂ）（ｃ）（ｄ）において、袋本体１１１内の培養液１０８は、排出口１３８ａから下部回転支持部１３４の内側通路１３８ｂ内に入る。次に培養液１０８は、下部回転支持部１３４の内側通路１３８ｂに接続された排出ライン１３８ｃに入り、次に排出ライン１３８ｃに取付られた閉止弁１３８ｄを開くことにより、外方へ排出される。
【００４７】
次に図９、および図１１、図１５乃至図１８、および図２２乃至図２５により、回転シャフト１３１に設けられた上端部１３５と上部回転支持部１３３の取付構造、および回転シャフト１３１に設けられた下端部１３６と下部回転支持部１３３の取付構造について更に述べる。
【００４８】
まず、図９、図１５、図２２および図２３により上端部１３５と上部回転支持部１３３の取付構造について述べる。上端部１３５は、上述のように上部軸受５を介して上部回転支持部１３３に回転自在に連結されている。具体的には、上端部１３５の軸受収納部１３５Ｂ内に上部軸受５が配置されている。この場合、上部軸受５は、上端部１３５側の外輪５ａと、上部回転支持部１３３の支持軸１３３ｂ側の内輪５ｂと、外輪５ａと内輪５ｂとの間に配置されたボール５ｃとを有している。
【００４９】
次に上端部１３５と、上部回転支持部１３３の支持軸１３３ｂと、上部軸受５の構造を図２２（ａ）（ｂ）および図２３（ａ）（ｂ）により説明する。
【００５０】
まず上端部１３５は上部軸受５の外輪５ａに、緩みなく堅固に嵌込まれている。
【００５１】
本実施の形態によれば、図２２（ａ）に示すように、上端部１３５の内周面に、複数、例えば６個の変形リブ６Ａが円周方向に沿って設けられている。このため上端部１３５を上部軸受５の外輪５ａに嵌合する際、この変形リブ６Ａが潰れて変形する。このようにして上端部１３５と外輪５ａを緩みなく堅固に嵌合することができる。
【００５２】
図２２（ａ）において、上端部１３５は後述のように高密度ポリエチレン（Ｈｉｇｈ  Ｄｅｎｓｉｔｙ  Ｐｏｌｙｅｔｈｌｅｎ：以下「ＨＤＰＥ」とも言う）により形成され、変形リブ６Ａはこの上端部１３５に一体に形成されている。また上部軸受５もＨＤＰＥ製となっている。
【００５３】
なお、変形リブ６Ａは必ずしも上端部１３５側に設ける必要はなく、変形リブ６Ａを上部軸受５の外輪５ａ側に設けてもよい（図２２（ｂ）参照）。
【００５４】
図２２（ｂ）に示すように、上端部１３５を上部軸受５の外輪５ａに嵌合する際、変形リブ６Ａが潰れて変形し、このことにより上端部１３５と外輪５ａを緩みなく堅固に嵌合することができる。
【００５５】
同様に上部回転支持部１３３の支持軸１３３ｂは上部軸受５の内輪５ｂに、緩みなく堅固に嵌込まれている。
【００５６】
本実施の形態によれば、図２３（ａ）に示すように、上部回転支持部１３３の支持軸１３３ｂの外周面に、複数、例えば６個の変形リブ６Ｂが設けられている。このため支持軸１３３ｂを上部軸受５の内輪５ｂに嵌合する際、この変形リブ５Ｂが潰れて変形する。このようにして、支持軸１３３ｂと内輪５ｂを緩みなく堅固に嵌合することができる。
【００５７】
図２３（ａ）において、支持軸１３３ｂを含む上部回転支持部１３３は、全体としてＨＤＰＥから形成されている。また、変形リブ６Ｂはこの支持軸１３３ｂに一体に形成されている。
【００５８】
なお、変形リブ６Ｂは必ずしも支持軸１３３ｂ側に設ける必要はなく、変形リブ６Ｂを上部軸受５の内輪５ｂ側に設けてもよい（図２３（ｂ）参照）。
【００５９】
図２３（ｂ）に示すように、支持軸１３３ｂを上部軸受５の内輪５ｂに嵌合する際、変形リブ６Ｂが潰れて変形し、このことにより支持軸１３３ｂと内輪５ｂを緩みなく堅固に嵌合することができる。
【００６０】
次に図１１、図１６乃至図１８、図２４および図２５により回転シャフト１３１に設けられた下端部１３６と下部回転支持部１３４の取付構造について述べる。下端部１３６は、上述のように上部軸受７を介して下部回転支持部１３４に回転自在に連結されている。具体的には、下端部１３６の軸受収納部１３６Ａ内に下部軸受７が配置されている。この場合、下部軸受７は、下端部１３６側の外輪７ａと、下部回転支持部１３４の支持軸１３４ｂ側の内輪７ｂと、外輪７ａと内輪７ｂとの間に配置されたボール７ｃとを有している。
【００６１】
次に下端部１３６と、下部回転支持部１３４の支持軸１３４ｂと、下部軸受７の構造を図２４（ａ）（ｂ）および図２５（ａ）（ｂ）により説明する。
【００６２】
まず下端部１３６は下部軸受７の外輪７ａに、緩みなく堅固に嵌込まれている。
【００６３】
本実施の形態によれば、図２４（ａ）に示すように、下端部１３６の内周面に、複数、例えば６個の変形リブ８Ａが円周方向に沿って設けられている。このため下端部１３６を下部軸受７の外輪７ａに嵌合する際、この変形リブ８Ａが潰れて変形する。このようにして下端部１３６と外輪７ａを緩みなく堅固に嵌合することができる。
【００６４】
図２４（ａ）において、下端部１３６は後述のように高密度ポリエチレン（Ｈｉｇｈ  Ｄｅｎｓｉｔｙ  Ｐｏｌｙｅｔｈｌｅｎ：以下「ＨＤＰＥ」とも言う）により形成され、変形リブ８Ａはこの下端部１３６に一体に形成されている。また下部軸受７もＨＤＰＥ製となっている。
【００６５】
なお、変形リブ８Ａは必ずしも下端部１３６側に設ける必要はなく、変形リブ８Ａを下部軸受７の外輪７ａ側に設けてもよい（図２４（ｂ）参照）。
【００６６】
図２４（ｂ）に示すように、下端部１３６を下部軸受７の外輪７ａに嵌合する際、変形リブ８Ａが潰れて変形し、このことにより下端部１３６と外輪７ａを緩みなく堅固に嵌合することができる。
【００６７】
同時に下部回転支持部１３４の支持軸１３４ｂは下部軸受７の内輪７ｂに、緩みなく堅固に嵌込まれている。
【００６８】
本実施の形態によれば、図２５（ａ）に示すように、下部回転支持部１３４の支持軸１３４ｂの外周面に、複数、例えば６個の変形リブ８Ｂが設けられている。このため支持軸１３４ｂを下部軸受７の内輪７ｂに嵌合する際、この変形リブ８Ｂが潰れて変形する。このようにして、支持軸１３４ｂと内輪７ｂを緩みなく堅固に嵌合することができる。
【００６９】
図２５（ａ）において、支持軸１３４ｂを含む下部回転支持部１３４は、全体としてＨＤＰＥから形成されている。また、変形リブ８Ｂはこの支持軸１３４ｂに一体に形成されている。
【００７０】
なお、変形リブ８Ｂは必ずしも支持軸１３４ｂ側に設ける必要はなく、変形リブ８Ｂを下部軸受７の内輪７ｂ側に設けてもよい（図２５（ｂ）参照）。
【００７１】
図２５（ｂ）に示すように、支持軸１３４ｂを下部軸受７の内輪７ｂに嵌合する際、変形リブ８Ｂが潰れて変形し、このことにより支持軸１３４ｂと内輪７ｂを緩みなく堅固に嵌合することができる。
【００７２】
次に図１２（ａ）（ｂ）によりスパージャー５０の取付構造について述べる。スパージャー５０は後述のように軟質チューブ１０と、硬質コネクタ４３とを備えている。このようなスパージャー５０は、袋本体１１１の底部フィルム１１１Ｄ内面に、３つの合成樹脂製保持バンド５０ａ、５０ａ、５０ａにより固定されている。
【００７３】
図１２（ａ）（ｂ）に示すように、３つの保持バンド５０ａ、５０ａ、５０ａのうち２つの保持バンド５０ａ、５０ａは軟質チューブ１０を保持し、残りの保持バンド５０ａは硬質コネクタ４３を保持している。各保持バンド５０ａは底部フィルム１１１Ｄ内面において、円周状に互いに１２０°ずつの間隔をおいて離間して配置されている。そして保持バンド５０ａの両端部が底部フィルム１１１Ｄに接着され、中央の非接着部が軟質チューブ１０および硬質コネクタ４３を外周から覆って保持している。
【００７４】
次に図１３、図１９および図２０により撹拌用羽根１３２について述べる。図１３および図１９に示すように、撹拌用羽根１３２は、回転シャフト１３１の軸線方向にわずかにずれて配置された３つの扇形状羽根１３２Ａを有し、各羽根１３２Ａは略１２０°の扇形状をなし、かつ１２０°ずつ円周方向に離間している。
【００７５】
各羽根１３２Ａは、各々独立した固定リング１３２ａに取付けられている。この場合、各羽根１３２Ａは、固定リング１３２ａとの当接面１３２Ｂを有し、この当接面１３２Ｂ側を固定リング１３２ａ内に挿入し、羽根１３２Ａと固定リング１３２ａとをネジ孔１３２Ｄに挿入したネジにより堅固に固定する。このようにして、各羽根１３２Ａは固定リング１３２ａに取付けられる。次に図２０（ａ）（ｂ）を用いて各羽根１３２Ａの固定リング１３２ａについて述べる。
【００７６】
固定リング１３２ａは回転シャフト１３１が挿入される開口１３２ｄを有するとともに、固定リング１３２ａを固定するためのネジ１３２ｂが挿入される開口１３２ｅを有している。
【００７７】
次に温度センサ１５４、ｐＨセンサ１５５およびＤｏセンサ１５６の取付構造について図１４により述べる。
【００７８】
ここでｐＨセンサ１５５およびＤｏセンサ１５６の取付構造は略同一であるため、図１４においてはｐＨセンサ１５５および温度センサ１５４の取付構造を説明する。
【００７９】
図１４に示すように、ｐＨセンサ１５５は、円筒状のセンサ本体１５５Ａと、側部フィルム１１１Ａの開口１５５ａに装着されたポートディスク１５５ｂと、先端にｐＨセンサチップ１５５Ｂが取付けられたセンサホルダ１５５ｃとを有している。またセンサ本体１５５Ａとポートディスク１５５ｂとは結束バンド１５５ｄにより連結され、センサ本体１５５Ａとセンサホルダ１５５ｃも、結束バンド１５５ｄにより連結されている。
【００８０】
また図１４に示すように、温度センサ１５４は、円筒状のセンサ本体（チューブ）１５４Ａと、側部フィルム１１１Ａの開口１５４ａに装着されたポートディスク１５４ｂと、センサホルダ１５４ｃとを有している。またセンサ本体１５４Ａとポートディスク１５４ｂとは結束バンド１５４ｄにより連結され、センサ本体１５４Ａとセンサホルダ１５４ｃも、結束バンド１５４ｄにより連結されている。
【００８１】
またセンサホルダ１５４ｃ内には温度センサ１５４Ｂが配置され、温度センサ１５４Ｂには信号ライン１５４ｌが接続され、この信号ライン１５４ｌは外方まで延びている。
【００８２】
次に各構成部材の材料について述べる。
【００８３】
袋本体１１１を構成するフィルム１１１ａとしては、上述した材料の他、ナイロン／ＥＶＯＨ／ポリプロピレン（ＰＰ）系接着剤／ＰＥからなる総厚みが１５０〜３５０μｍのインフレフィルムが用いられる（図２１（ａ）参照）。あるいはフィルム１１１ａとして、１２〜２５μ厚の（ＰＥＴ）／１２〜２５μｍ厚のナイロン／１２〜３０μｍ厚のエチレンビニルアルコール共重合体（ＥＶＯＨ）／３０〜１５０μｍ厚のポリエチレン（ＰＥ）からなるドライラミネーションフィルムを用いることもできる（図２１（ｂ）参照）。
【００８４】
この場合、各フィルム間の接着剤としては、ポリウレタン系の接着剤を用いることができる。
【００８５】
またスパージャー５０を保持する保持バンド５０ａは底部フィルム１１１Ｄに設けられ、この保持バンド５０ａはフィルム１１１ａと同様の材料を用いることができる。
【００８６】
さらに上部回転支持部１３３および下部回転支持部１３４は、上述のようにいずれも高度ポリエチレン（Ｈｉｇｈ  Ｄｅｎｓｉｔｙ  Ｐｏｌｙｅｔｈｌｅｎｅ：以下「ＨＤＰＥ」とも言う）を射出成型または切削加工することにより得られる。
【００８７】
また、温度センサ１５４、ｐＨセンサ１５５、Ｄｏセンサ１５６、サンプリングチューブ１５７、接着注入部１５０、および気体排出部１５１を袋本体１１１に取付けるためポートディスク１５４ｂ、１５５ｂ等が設けられており、これらポートディスクとしてはＰＥ系樹脂の射出成型品を用いることができる。
【００８８】
さらに回転シャフト１３１の上端部１３５としては、ＨＤＰＥの射出成形品を用いることができる。さらに上端部１３５内に設けられた上部軸受５はＨＤＰＥ製となっており、この上部軸受５は金属Ｃリングにより上端部１３５に固定されている。
【００８９】
また上端部１３５内には、６個の撹拌機側磁石１３５ａが設置されており、これらの撹拌機側磁石１３５ａは、上端部１３５の磁石収納部１３５Ａ内に接着剤を用いて固定されている。
【００９０】
また、回転シャフト１３１の下端部１３６としては、ＨＤＰＥの射出成形品を用いることができる。また下端部１３６内に設けられた下部軸受７はＨＤＰＥ製となっており、金属Ｃリング１３６ａにより固定されている。
【００９１】
さらに回転シャフト１３１はポリカーボネート（ＰＣ）の削り出し材からなり、両端部に外ネジ１３１ａ、１３１ｂが形成されている。
【００９２】
また撹拌用羽根１３２の固定リング１３２ａはＰＣの削り出し材からなっており、更に各羽根１３２ＡはＰＣの射出成型品からなる。
【００９３】
次に細胞培養袋の製造方法について説明する。まず図２に示すように複数のフィルム１１１ａをヒートシールすることにより、袋本体１１１を作製する。この場合、複数のフィルム１１１ａの全周を完全に密閉することなく、一部開口を残しておく。
【００９４】
次に上部フィルム１１１ｃの開口１３３ａに上部回転支持部１３３を装着して固定し、底部フィルム１１１Ｄの開口１３４ａに下部回転支持部１３４を装着して固定する。
【００９５】
次に袋本体１１１の開口から、上端部１３５と下端部１３６を有する回転シャフト１３１と、撹拌羽根１３２とを有する撹拌器１３０を挿入する。
【００９６】
次に上端部１３５を上部回転支持部１３３に上部軸受５を介して連結する。
【００９７】
この場合、上端部１３５内には予め上部軸受５が装着されており、上部軸受５の外輪５ａと上端部１３５との間には変形リブ６Ａが介在されている。このため上端部１３５を外輪５ａに嵌合する際、変形リブ６Ａが潰れて変形する。このため上端部１３５を外輪５ａに堅固に嵌合することができる。
【００９８】
次に上部軸受５の内輪５ｂ内に上部回転支持部１３３の支持軸１３３ｂを挿入する。この際、上部軸受５の内輪５ｂと上部回転支持部１３３の支持軸１３３ｂとの間には変形リブ６Ｂが介在されている。このため内輪５ｂ内に支持軸１３３ｂを嵌合する際、変形リブ６Ｂが潰れて変形する。このため支持軸１３３ｂを内輪５ｂに堅固に嵌合することができる。
【００９９】
次に下端部１３６を下部回転支持部１３４に下部軸受７を介して連結する。
【０１００】
この場合、下端部１３６内には予め下部軸受７が装着されており、下部軸受７の外輪７ａと下端部１３６との間には変形リブ８Ａが介在されている。このため下端部１３６を外輪７ａに嵌合する際、変形リブ８Ａが潰れて変形する。このため下端部１３６を外輪７ａに堅固に嵌合することができる。
【０１０１】
次に下部軸受７の内輪７ｂ内に下部回転支持部１３４の支持軸１３４ｂを挿入する。この際、下部軸受７の内輪７ｂと下部回転支持部１３４の支持軸１３４ｂとの間には変形リブ８Ｂが介在されている。このため内輪７ｂ内に支持軸１３４ｂを嵌合する際、変形リブ６Ｂが潰れて変形する。このため支持軸１３４ｂを内輪７ｂに堅固に嵌合することができる。
【０１０２】
その後袋本体１１１のヒートシールすることなく残った開口をヒートシールして袋本体１１１を密閉する。
【０１０３】
このようにして細胞培養袋１１０を得ることができる。
【０１０４】
本実施の形態におよれば、回転シャフト１３１の上端部１３５を上部軸受５を介して上部回転支持部１３３に堅固に連結することができ、下端部１３６を下部軸受７を介して下部回転支持部１３４に堅固に連結することができる。
【０１０５】
このため、袋本体１１１内で撹拌器１３０を回転させる際、回転シャフト１３１の回転軸がぶれることを防止し、また撹拌器１３０の回転中に回転シャフト１３１が上部回転支持部１３３あるいは下部回転支持部１３４から外れてしまうことが防止される。
【０１０６】
なお、上記実施の形態において、回転シャフト１３１の上端部１３５と上部回転支持部１３３との間に上部軸受５を介在させ、上端部１３５と上部軸受５との間に変形リブ６Ａを設けるとともに、上部軸受５と上部回転支持部１３３の支持軸１３３ｂとの間に変形リブ６Ｂを設けた例を示したが、変形リブ６Ａのみを設けてもよく、あるいは変形リブ６Ｂのみを設けてもよい。
【０１０７】
また、上記実施の形態において、回転シャフト１３１の下端部１３６と下部回転支持部１３４との間に下部軸受７を介在させ、下端部１３６と下部軸受７との間に変形リブ８Ａを設けるとともに、下部軸受７と下部回転支持部１３４の支持軸１３４ｂとの間に変形リブ８Ｂを設けた例を示したが、変形リブ８Ａのみを設けてもよく、あるいは変形リブ８Ｂのみを設けてもよい。
【０１０８】
さらにまた回転シャフト１３１の上端部１３５と、上部回転支持部１３４と、上部軸受５との間に変形リブ６Ａ、６Ｂを設け、下端部１３６と、下部回転支持部１３６と、下部軸受７との間に変形リブ８Ａ、８Ｂを設けた例を示したが、上端部１３５と、上部回転支持部１３４と、上部軸受５との間に変形リブ６Ａ、６Ｂを設け、下端部１３６と、第２回回転支持部１３６と、下部軸受７との間に変形リブ８Ａ、８Ｂを設けなくてもよく、上端部１３５と、上部回転支持部１３４と、上部軸受５との間に変形リブ６Ａ、６Ｂを設けることなく、下端部１３６と、下部回転支持部１３６と、下部軸受７との間に変形リブ８Ａ、８Ｂを設けてもよい。
【符号の説明】
【０１０９】
５  上部軸受
５ａ  外輪
５ｂ  内輪
５ｃ  ボール
６Ａ  変形リブ
６Ｂ  変形リブ
７  下部軸受
７ａ  外輪
７ｂ  内輪
７ｃ  ボール
８Ａ  変形リブ
８Ｂ  変形リブ
１０  軟質チューブ
５０  スパージャー
１０８  培養液（培地）
１１０  培養袋
１１１  袋本体
１３０  撹拌器
１３１  回転シャフト
１３３  上部回転支持部
１３３ｂ  支持軸
１３４  下部回転支持部
１３４ｂ  支持軸
１３５  上端部
１３６  下端部
【図１】
2016002035.tif 000003
【図２】
2016002035.tif 000004
【図３】
2016002035.tif 000005
【図４】
2016002035.tif 000006
【図５】
2016002035.tif 000007
【図６】
2016002035.tif 000008
【図７】
2016002035.tif 000009
【図８】
2016002035.tif 000010
【図９】
2016002035.tif 000011
【図１０】
2016002035.tif 000012
【図１１】
2016002035.tif 000013
【図１２】
2016002035.tif 000014
【図１３】
2016002035.tif 000015
【図１４】
2016002035.tif 000016
【図１５】
2016002035.tif 000017
【図１６】
2016002035.tif 000018
【図１７】
2016002035.tif 000019
【図１８】
2016002035.tif 000020
【図１９】
2016002035.tif 000021
【図２０】
2016002035.tif 000022
【図２１】
2016002035.tif 000023
【図２２】
2016002035.tif 000024
【図２３】
2016002035.tif 000025
【図２４】
2016002035.tif 000026
【図２５】
2016002035.tif 000027