(57)【要約】【課題】ヘパリン又はヘパリン誘導体以外の抗血栓性化合物が金属材料の表面に固定化され、金属材料からの抗血栓性を有する化合物の溶出を防いで、長期間持続的に高い抗血栓性を発揮する金属材料を提供すること。【解決手段】本発明は、ホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体と、ポリマーと、下記化合物に代表される抗血栓性化合物と、を含む被覆材料によって金属材料の表面が被覆され、上記抗血栓性化合物は、上記ポリマー、上記ホスホン酸誘導体又は上記カテコール誘導体と共有結合され、上記ポリマーは、上記ホスホン酸誘導体又は上記カテコール誘導体と共有結合され、上記ホスホン酸誘導体又は上記カテコール誘導体は、自身が有するホスホン酸基又はカテコール基を介して上記金属材料に結合されている、抗血栓性金属材料を提供する。2016220716.tif 000041【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体と、アルキレンイミン、ビニルアミン、アリルアミン、リジン、プロタミン、ジアリルジメチルアンモニウムクロライド、アクリル酸、メタクリル酸、α−グルタミン酸、γ−グルタミン酸、アスパラギン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、グルタル酸、アジピン酸、ピメリン酸、スベリン酸、アゼライン酸、セバシン酸、リンゴ酸、酒石酸及びクエン酸からなる群から選択される化合物を構成モノマーとして含むポリマーと、以下の一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物と、を含む被覆材料によって金属材料の表面が被覆され、
前記抗血栓性化合物は、前記ポリマー、前記ホスホン酸誘導体又は前記カテコール誘導体と共有結合され、
前記ポリマーは、前記ホスホン酸誘導体又は前記カテコール誘導体と共有結合され、
前記ホスホン酸誘導体又は前記カテコール誘導体は、自身が有するホスホン酸基又はカテコール基を介して前記金属材料に結合されている、抗血栓性金属材料。
【化１】
2016220716.tif 000036
［式中、Ｒ１は、エチレングリコール、プロピレングリコール、ビニルピロリドン、ビニルアルコール、ビニルカプロラクタム、酢酸ビニル、スチレン、メチルメタクリレート、ヒドロキシエチルメタクリレート及びシロキサンからなる群から選択される化合物を構成モノマーとして含む親水性ポリマーを表し、Ｒ２は、メトキシベンゼンスルホン酸アミドを表し、Ｒ３は、４−（アミノメチル）ベンゼンカルボキシイミダミド又はベンゼンアミジンを表し、Ａは、任意の共有結合を表す。］
【請求項２】
前記被覆材料は、ベタイン化合物を含む、請求項１記載の抗血栓性金属材料。
【請求項３】
前記ベタイン化合物は、前記ホスホン酸誘導体、前記カテコール誘導体、前記ポリマー及び前記抗血栓性化合物の少なくとも１つと共有結合している、請求項２記載の抗血栓性金属材料。
【請求項４】
前記抗血栓性化合物は、以下の一般式（ＩＩ）〜（Ｖ）で示されるいずれかの化合物である、請求項１〜３のいずれか一項記載の抗血栓性金属材料。
【化２】
2016220716.tif 000037
【化３】
2016220716.tif 000038
【化４】
2016220716.tif 000039
【化５】
2016220716.tif 000040
［式中、ｍ及びｏは０〜４の整数を表し、ｎは３〜１０００の整数を表し、ｎ’＝３〜１０００の整数を表すが、ｎ≧ｎ’であり、Ｘは、水酸基、チオール基、アミノ基、カルボキシル基、アルデヒド基、イソシアネート基及びチオイソシアネート基からなる群から選択される官能基を表す。］
【請求項５】
前記ポリマーは、アルキレンイミン、ビニルアミン、アリルアミン、リジン、プロタミン及びジアリルジメチルアンモニウムクロライドからなる群から選択される化合物を構成モノマーとして含むカチオン性ポリマーとアクリル酸、メタクリル酸、α−グルタミン酸、γ−グルタミン酸及びアスパラギン酸からなる群から選択される化合物を構成モノマーとして含むアニオン性ポリマーが共有結合したコポリマー、又は、アルキレンイミン、ビニルアミン、アリルアミン、リジン、プロタミン及びジアリルジメチルアンモニウムクロライドからなる群から選択される化合物を構成モノマーとして含むカチオン性ポリマーとシュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、グルタル酸、アジピン酸、ピメリン酸、スベリン酸、アゼライン酸、セバシン酸、リンゴ酸、酒石酸及びクエン酸からなる群から選択されるアニオン性化合物が共有結合したコポリマーである、請求項１〜４のいずれか一項記載の抗血栓性金属材料。
【請求項６】
前記ベタイン化合物は、カルボキシベタイン又はスルホベタインである、請求項１〜６のいずれか一項記載の抗血栓性金属材料。
【請求項７】
前記金属材料は、鉄、チタン、アルミニウム、スズ、金、銀、銅、白金、クロム、コバルト、ニッケル、亜鉛、タングステン及びこれらの合金並びにこれらの金属酸化物及び金属水酸化物からなる群から選択される、請求項１〜６のいずれか一項記載の抗血栓性金属材料。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか一項記載の抗血栓性金属材料から製造された、体内留置用の医療器材。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗血栓性金属材料に関する。
【背景技術】
【０００２】
血液と接触する医療器材（医療機器及び医療器具）（より具体的には、人工腎臓、人工肺、人工血管、人工弁、ステント、ステントグラフト、カテーテル、遊離血栓捕獲器具、血管内視鏡、縫合糸、血液回路、チューブ類、カニューレ、血液バッグ及び注射器等）は、血液の凝固による機能低下を防ぐために、高い抗血栓性が求められている。
【０００３】
特に、ステントのような、金属材料で作製された血液に対しては異物認識され易く、血栓を形成し易い。従って、金属材料に抗血栓性を付与するために、安価であり長年実績のある抗凝固薬のヘパリン又はヘパリン誘導体を金属材料の表面に付与する手法が報告されている。ヘパリン又はヘパリン誘導体を金属材料の表面にコーティング又は化学結合させる手法としては、例えば、１）金属材料の表面に導入された官能基と、ヘパリン又はヘパリン誘導体を共有結合させることにより、金属材料に直接ヘパリン又はヘパリン誘導体を固定化する方法（特許文献１〜２）、２）有機カチオン混合物とヘパリン若しくはヘパリン誘導体との間でイオン複合体を形成させ、有機溶媒に溶かして金属材料の表面にコーティングする方法（特許文献３）、３）金属材料の表面に導入された正電荷を帯びたカチオン性化合物と、ヘパリン又はヘパリン誘導体をイオン結合させることにより固定化する方法（特許文献４）等が報告されている。
【０００４】
また、ヘパリン又はヘパリン誘導体以外の抗血栓性を有する化合物を、金属材料の表面に付与する方法も検討されている。例えば、血小板の付着を抑制する高分子化合物として、リン脂質の極性基であるホスホコリルコリンを高分子鎖の側鎖に有するポリ２−メタクリロリルオキシエチルホスホコリン（以下、ＭＰＣポリマー）でステントをコーティングする方法が報告されている（非特許文献１）。また、同じく血小板の付着を抑制する高分子化合物として、ベタイン化合物を金属材料の表面にコーティングする方法が報告されている（特許文献５）。さらに、特許文献６には、金属材料の表面をシラン基、ホスホン酸基、カテコール基等を有する化合物で処理して形成した下塗り層に対してとベタイン化合物を共有結合させ、ベタイン化合物を金属材料の表面に固定化する方法が報告されている（特許文献６）。
【０００５】
一方、血液凝固反応に関与する複数の血液凝固因子、特に一次止血の段階に関与する血小板付着を抑制する性能（抗血小板付着性能）と、血栓形成の段階に関与するトロンビン等の活性化を抑制する性能（抗トロンビン活性化性能）の双方を高分子化合物からなる基材の表面に付与する方法が報告されている。具体的には、抗血小板付着性能を有する化合物と抗トロンビン活性化性能を有する化合物の２種類の化合物を高分子化合物からなる基材の表面に放射線で固定する方法（特許文献７）や、抗血小板付着性能と抗トロンビン活性化性能の双方の性能を併せ持つ１つの化合物を高分子化合物からなる基材の表面に放射線で固定する方法（特許文献８）が報告されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特許第３９３８４１８号公報
【特許文献２】特許第５５７６４４１号公報
【特許文献３】特許第４２７３９６５号公報
【特許文献４】韓国特許出願公開第２０００−００５９６８０号
【特許文献５】特許第４９６１１３３号公報
【特許文献６】特表２０１２−５１０８８０号公報
【特許文献７】ＷＯ２００８／０３２７５８号公報
【特許文献８】ＷＯ２０１２／１７６８６１号公報
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ．２００２  ２３，ｐｐ．１６９７−１７０６
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
しかしながら、特許文献１〜４に記載される、ヘパリン又はヘパリン誘導体を金属材料の表面に付与する手法では、ヘパリン起因性血小板減少症の患者や出血のある患者には使用することができない。
【０００９】
さらに、ヘパリン又はヘパリン誘導体はアンチトロンビンＩＩＩ（以下、「ＡＴＩＩＩ」）と結合することで高い抗血栓性を発現するが、ＡＴＩＩＩが欠乏している血液に対しては抗血栓性が不十分であることがわかっている。
【００１０】
非特許文献１に開示されたＭＰＣポリマーを金属ステントの表面にコーティングする方法や、特許文献５に開示されたベタイン化合物を金属材料の表面にコーティングする方法、特許文献６に開示された金属表面に形成した下塗り層にベタイン化合物を共有結合で固定化する方法では、抗血小板付着性能を金属表面に付与することが出来るが、抗トロンビン性能を金属材料に付与することについては検討されていない。
【００１１】
一方、特許文献７及び８に開示された、抗血小板付着性能を有する化合物と抗トロンビン活性化性能を有する化合物の２種類の化合物を高分子化合物からなる基材の表面に放射線で固定する方法や、抗血小板付着性能と抗トロンビン活性化性能の双方の性能を併せ持つ１つの化合物を高分子化合物からなる基材の表面に放射線で固定する方法の場合、共有結合させるための官能基を有していない化合物を高分子化合物からなる基材に固定するため、放射線の照射によって基材の表面に共有結合させている。この場合、放射線の照射量を上げれば、ラジカル発生量の増加に伴って化合物の固定化量は増加するが、化合物の不特定部位でのラジカル発生及び基材と反応することで構造が変化し、主に抗トロンビン活性化性能が低下してしまう。また、各種の高分子材料よりも金属材料は放射線に対して不活性であるため、同様の方法では金属材料の表面に化合物を固定できない可能性がある。
【００１２】
そこで本発明は、ヘパリン又はヘパリン誘導体以外で、抗血小板付着性能と抗トロンビン活性化性能の双方を有する抗血栓性化合物を金属材料の表面に安定的に固定化することで、金属材料からの抗血栓性化合物の溶出を防いで、長期間持続的に高い抗血栓性を発揮する抗血栓性金属材料を提供することを目的としている。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明者らは、上記課題を解決するため鋭意研究を重ねた結果、以下の（１）〜（８）の発明を見出すに至った。
（１）  ホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体と、アルキレンイミン、ビニルアミン、アリルアミン、リジン、プロタミン、ジアリルジメチルアンモニウムクロライド、アクリル酸、メタクリル酸、α−グルタミン酸、γ−グルタミン酸、アスパラギン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、グルタル酸、アジピン酸、ピメリン酸、スベリン酸、アゼライン酸、セバシン酸、リンゴ酸、酒石酸及びクエン酸からなる群から選択される化合物を構成モノマーとして含むポリマーと、以下の一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物と、を含む被覆材料によって金属材料の表面が被覆され、上記抗血栓性化合物は、上記ポリマー、上記ホスホン酸誘導体又は上記カテコール誘導体と共有結合され、上記ポリマーは、上記ホスホン酸誘導体又は上記カテコール誘導体と共有結合され、上記ホスホン酸誘導体又は上記カテコール誘導体は、自身が有するホスホン酸基又はカテコール基を介して上記金属材料に結合されている、抗血栓性金属材料。
【化１】
2016220716.tif 000002
［式中、Ｒ１は、エチレングリコール、プロピレングリコール、ビニルピロリドン、ビニルアルコール、ビニルカプロラクタム、酢酸ビニル、スチレン、メチルメタクリレート、ヒドロキシエチルメタクリレート及びシロキサンからなる群から選択される化合物を構成モノマーとして含む親水性ポリマーを表し、Ｒ２は、メトキシベンゼンスルホン酸アミドを表し、Ｒ３は、４−（アミノメチル）ベンゼンカルボキシイミダミド又はベンゼンアミジンを表し、Ａは、任意の共有結合を表す。］
（２）  上記被覆材料は、ベタイン化合物を含む、（１）記載の抗血栓性金属材料。
（３）  上記ベタイン化合物は、上記ホスホン酸誘導体、上記カテコール誘導体、上記ポリマー及び上記抗血栓性化合物の少なくとも１つと共有結合している、（２）記載の抗血栓性金属材料。
（４）  上記抗血栓性化合物は、以下の一般式（ＩＩ）〜（Ｖ）で示されるいずれかの化合物である、（１）〜（３）のいずれか記載の抗血栓性金属材料。
【化２】
2016220716.tif 000003
【化３】
2016220716.tif 000004
【化４】
2016220716.tif 000005
【化５】
2016220716.tif 000006
［式中、ｍ及びｏは０〜４の整数を表し、ｎは３〜１０００の整数を表し、ｎ’＝３〜１０００の整数を表すが、ｎ≧ｎ’であり、Ｘは、水酸基、チオール基、アミノ基、カルボキシル基、アルデヒド基、イソシアネート基及びチオイソシアネート基からなる群から選択される官能基を表す。］
（５）  上記ポリマーは、アルキレンイミン、ビニルアミン、アリルアミン、リジン、プロタミン及びジアリルジメチルアンモニウムクロライドからなる群から選択される化合物を構成モノマーとして含むカチオン性ポリマーとアクリル酸、メタクリル酸、α−グルタミン酸、γ−グルタミン酸及びアスパラギン酸からなる群から選択される化合物を構成モノマーとして含むアニオン性ポリマーが共有結合したコポリマー、又は、アルキレンイミン、ビニルアミン、アリルアミン、リジン、プロタミン及びジアリルジメチルアンモニウムクロライドからなる群から選択される化合物を構成モノマーとして含むカチオン性ポリマーとシュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、グルタル酸、アジピン酸、ピメリン酸、スベリン酸、アゼライン酸、セバシン酸、リンゴ酸、酒石酸及びクエン酸からなる群から選択されるアニオン性化合物が共有結合したコポリマーである、（１）〜（４）のいずれか記載の抗血栓性金属材料。
（６）  上記ベタイン化合物は、カルボキシベタイン又はスルホベタインである、（１）〜（６）のいずれか記載の抗血栓性金属材料。
（７）  上記金属材料は、鉄、チタン、アルミニウム、スズ、金、銀、銅、白金、クロム、コバルト、ニッケル、亜鉛、タングステン及びこれらの合金並びにこれらの金属酸化物及び金属水酸化物からなる群から選択される、（１）〜（６）のいずれか記載の抗血栓性金属材料。
（８）  上記（１）〜（７）のいずれか記載の抗血栓性金属材料から製造された、体内留置用の医療器材。
【発明の効果】
【００１４】
本発明の抗血栓性金属材料は、ホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体が、自身が有するホスホン酸基又はカテコール基を介して金属表面に結合され、ポリマーがホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体に共有結合され、さらに、ヘパリン又はヘパリン誘導体以外の抗血栓性化合物がポリマー又はホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体と共有結合することにより、金属材料の表面からヘパリン又はヘパリン誘導体以外の抗血栓性化合物が溶出することを防いで、ヘパリン起因性血小板減少症の患者や出血のある患者、ＡＴＩＩＩが欠乏している患者の治療であっても、長期間持続的に高い抗血栓性を発揮できるため、抗血栓性を必要とする金属材料製の医療器材（例えば、ステント、ステントグラフト等）に好適に利用できる。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
本発明の抗血栓性金属材料は、ホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体と、アルキレンイミン、ビニルアミン、アリルアミン、リジン、プロタミン、ジアリルジメチルアンモニウムクロライド、アクリル酸、メタクリル酸、α−グルタミン酸、γ−グルタミン酸、アスパラギン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、グルタル酸、アジピン酸、ピメリン酸、スベリン酸、アゼライン酸、セバシン酸、リンゴ酸、酒石酸及びクエン酸からなる群から選択される化合物を構成モノマーとして含むポリマーと、以下の一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物と、を含む被覆材料によって金属材料の表面が被覆され、上記抗血栓性化合物は、上記ポリマー、上記ホスホン酸誘導体又は上記カテコール誘導体と共有結合され、上記ポリマーは、上記ホスホン酸誘導体又は上記カテコール誘導体と共有結合され、上記ホスホン酸誘導体又は上記カテコール誘導体は、自身が有するホスホン酸基又はカテコール基を介して上記金属材料に結合されていることを特徴としている。
【化６】
2016220716.tif 000007
［式中、Ｒ１は、エチレングリコール、プロピレングリコール、ビニルピロリドン、ビニルアルコール、ビニルカプロラクタム、酢酸ビニル、スチレン、メチルメタクリレート、ヒドロキシエチルメタクリレート及びシロキサンからなる群から選択される化合物を構成モノマーとして含む親水性ポリマーを表し、Ｒ２は、メトキシベンゼンスルホン酸アミドを表し、Ｒ３は、４−（アミノメチル）ベンゼンカルボキシイミダミド又はベンゼンアミジンを表し、Ａは、任意の共有結合を表す。］
【００１６】
本明細書において使用する用語は、特に断りがない限り、下記に示す定義を用いる。
【００１７】
ここで、抗血栓性とは、血液と接触する表面で血液が凝固しない性質であり、例えば、血小板の凝集や、トロンビンに代表される血液凝固因子の活性化等で進行する血液凝固、を阻害する性質を指す。
【００１８】
ここで、抗血栓性金属材料とは、抗血栓性が付与された金属材料のことであり、特に限定されるものではないが、医療器材（医療機器及び医療器具）（より具体的には、ステント、ステントグラフト等）を構成する材料として用いることができる。これらの医療器材は血液と接触するため、医療器材の表面では血液凝固が進行しやすく、抗血栓性金属材料を用いることが必要とされている。
【００１９】
本発明における金属材料は、特に限定されるものではないが、生体適合性の高い金属であることが好ましく、例えば、鉄、チタン、アルミニウム、スズ、金、銀、銅、白金、クロム、コバルト、ニッケル、亜鉛、タングステン及びこれらの合金、並びにこれらの金属酸化物及び水酸化物からなる群から選択されることが好ましい。この中でも、ＳＵＳ３０４、ＳＵＳ３１６Ｌ、ＳＵＳ４２０Ｊ２、ＳＵＳ６３０等のステンレス、コバルト−クロム合金、ニッケル−チタン合金及び亜鉛−タングステン合金からなる群から選択される合金及び合金の金属酸化物であることが好ましく、ＳＵＳ３０４、ＳＵＳ３１６Ｌ、ＳＵＳ４２０Ｊ２、ＳＵＳ６３０等のステンレス系がより好ましく、ＳＵＳ３０４がさらに好ましい。また、上記金属材料は、特に表面に酸化物又は水酸化物を有していることが好ましい。
【００２０】
被覆材料とは、金属材料の表面の少なくとも一部を被覆する材料のことであり、本発明において被覆材料は、ホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体と、アルキレンイミン、ビニルアミン、アリルアミン、リジン、プロタミン、ジアリルジメチルアンモニウムクロライド、アクリル酸、メタクリル酸、α−グルタミン酸、γ−グルタミン酸、アスパラギン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、グルタル酸、アジピン酸、ピメリン酸、スベリン酸、アゼライン酸、セバシン酸、リンゴ酸、酒石酸及びクエン酸からなる群から選択される化合物を構成モノマーとして含むポリマーと、以下の一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物と、を含んでいる。
【化７】
2016220716.tif 000008
［式中、Ｒ１は、エチレングリコール、プロピレングリコール、ビニルピロリドン、ビニルアルコール、ビニルカプロラクタム、酢酸ビニル、スチレン、メチルメタクリレート、ヒドロキシエチルメタクリレート及びシロキサンからなる群から選択される化合物を構成モノマーとして含む親水性ポリマーを表し、Ｒ２は、メトキシベンゼンスルホン酸アミドを表し、Ｒ３は、４−（アミノメチル）ベンゼンカルボキシイミダミド又はベンゼンアミジンを表し、Ａは、任意の共有結合を表す。］
【００２１】
また、Ａで示される、任意の共有結合の様式は、特に限定されるものではないが、ジスルフィド結合、アミド結合、エステル結合、ウレタン結合及び縮合反応による共有結合が好ましい。ここで、共有結合とは、原子同士で互いの電子を共有することによって生じる化学結合を指し、単結合であっても多重結合であっても構わない。
【００２２】
さらに、上記一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物として、特に下記の一般式（ＩＩ）〜（Ｖ）で示されるいずれかの化合物であることが好ましい。このうち、式中のＸはアミノ基又はカルボキシル基であることが好ましく、Ｘはアミノ基であることがさらにより好ましい。
【化８】
2016220716.tif 000009
【化９】
2016220716.tif 000010
【化１０】
2016220716.tif 000011
【化１１】
2016220716.tif 000012
［式中、ｍ及びｏは０〜４の整数を表し、ｎは３〜１０００の整数を表し、ｎ’＝３〜１０００の整数を表すが、ｎ≧ｎ’であり、Ｘは、水酸基、チオール基、アミノ基、カルボキシル基、アルデヒド基、イソシアネート基及びチオイソシアネート基からなる群から選択される官能基を表す。］
【００２３】
上記一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物としては、金属材料と近接する側に抗血小板付着性能を有する親水性ポリマー（Ｒ１で表される構造）が存在し、血液と接触する側に抗トロンビン活性化性能を有するメトキシベンゼンスルホン酸アミド（Ｒ２で表される構造）並びに４−（アミノメチル）ベンゼンカルボキシイミダミド又はベンゼンアミジン（Ｒ３で表される構造）が存在する方が、トロンビンを捕捉する性能が高くなり、長期間持続的に高い抗血栓性を発現できることを見出した。すなわち、上記ポリマー、上記ホスホン酸誘導体又は上記カテコール誘導体と共有結合させる反応性官能基（上記式中のＸ）は、親水性ポリマーの構造に含まれていることが好ましい。反応性官能基である式中のＸを用いて、上記ポリマー、上記ホスホン酸誘導体又は上記カテコール誘導体と抗血栓化合物は、ジスルフィド結合、アミド結合、エステル結合、ウレタン結合及び縮合反応による結合等をすることができる。
【００２４】
ヘパリン又はヘパリン誘導体以外の抗血栓性を有する化合物を用いて、化合物の溶出を抑えたまま、長期間持続的に高い抗血栓性を発現するなかで、特に抗血小板付着性能をより高めるために、本願発明者らが鋭意検討した結果、上記一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物を構成する親水性ポリマーは、エチレングリコール、プロピレングリコール、ビニルピロリドン、ビニルアルコール、ビニルカプロラクタム、酢酸ビニル、スチレン、メチルメタクリレート、ヒドロキシエチルメタクリレート及びシロキサンからなる群から選択される化合物を構成モノマーとして含むことが重要であることを見出した。
【００２５】
上記一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物を構成する親水性ポリマーは、本発明の効果を妨げない範囲で他のモノマーとの共重合体であってもよく変性体であってもよい。ここでいう変性体とは、親水性ポリマーを構成するモノマーの繰り返し単位は同じであるが、例えば、放射線の照射により、その一部がラジカル分解や再結合等を起こしているものを指す。
【００２６】
上記一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物を構成する親水性ポリマーは、上記の構成モノマーを用いていれば、単独重合体であってもよく、共重合体であってもよい。親水性ポリマーが共重合体である場合には、ランダム共重合体、ブロック共重合体、グラフト共重合体又は交互共重合体のいずれであってもよい。また、上記一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物を構成するポリマーは直鎖状でもよいし、分岐状でもよい。
【００２７】
ここで、単独重合体とは、１種類の構成モノマーを重合して得られる高分子化合物をいい、共重合体とは、２種類以上のモノマーを共重合して得られる高分子化合物をいう。中でもブロック共重合体とは、繰り返し単位の異なる少なくとも２種類以上のポリマーが共有結合でつながり、長い連鎖になったような分子構造の共重合体をいい、ブロックとは、ブロック共重合体を構成する「繰り返し単位の異なる少なくとも２種類以上のポリマー」のそれぞれを指す。
【００２８】
上記一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物中の親水性ポリマーの数平均分子量は、１５００〜２００００が好ましく、２０００〜１００００がより好ましい。数平均分子量が５００以上であれば、抗血小板付着性能の低下を防ぎ、より高い抗血栓性が得やすくなる。また、数平均分子量が２００００以下であれば、上記一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物中の抗トロンビン活性化性能を発現する部位が内包されづらくなり、高い抗血栓性が得やすくなる。上記一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物中の親水性ポリマーの数平均分子量は、例えば、ゲル・パーミエーション・クロマトグラフィー法や、光散乱法等により測定することができる。
【００２９】
また、ヘパリン又はヘパリン誘導体以外の抗血栓性を有する化合物を用いて、化合物の溶出を抑えたまま、長期間持続的に高い抗血栓性を発現するなかで、特に抗トロンビン活性化性能をより高めるために、本願発明者らが鋭意検討した結果、上記一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物を構成するメトキシベンゼンスルホン酸アミド（Ｒ２で表される構造）並びに４−（アミノメチル）ベンゼンカルボキシイミダミド又はベンゼンアミジン（Ｒ３で表される構造）が重要であることを見出した。
【００３０】
上記一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物中の４−（アミノメチル）ベンゼンカルボキシイミダミドとは、より具体的には、以下の一般式（ＶＩ）で示される骨格構造のいずれかであり、ベンゼンアミジンとは、より具体的には、以下の一般式（ＶＩＩ）で示される骨格構造のいずれかであり、メトキシベンゼンスルホン酸アミドとは、より具体的には以下の一般式（ＶＩＩＩ）で示される骨格構造のいずれかである。
【化１２】
2016220716.tif 000013
[式中、Ｒ１は他の骨格構造と連結する部分である。] 
【化１３】
2016220716.tif 000014
[式中、Ｒ２は他の骨格構造と連結する部分である。] 
【化１４】
2016220716.tif 000015
[式中、Ｒ３、Ｒ４は他の骨格構造と連結する部分である。] 
【００３１】
また、抗血栓性化合物の金属材料の表面への被覆量を向上させ、より長期間持続的に高い抗血栓性を発現するため、上記一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物は、アルキレンイミン、ビニルアミン、アリルアミン、リジン、プロタミン、ジアリルジメチルアンモニウムクロライド、アクリル酸、メタクリル酸、α−グルタミン酸、γ−グルタミン酸、アスパラギン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、グルタル酸、アジピン酸、ピメリン酸、スベリン酸、アゼライン酸、セバシン酸、リンゴ酸、酒石酸及びクエン酸からなる群から選択される化合物を構成モノマーとして含むポリマーと共有結合している。上記一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物は、上記ポリマー及びホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体を介して金属材料の表面に結合することで、金属材料の表面に安定して固定化されている。
【００３２】
また、アルキレンイミン、ビニルアミン、アリルアミン、リジン、プロタミン、ジアリルジメチルアンモニウムクロライド、アクリル酸、メタクリル酸、α−グルタミン酸、γ−グルタミン酸、アスパラギン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、グルタル酸、アジピン酸、ピメリン酸、スベリン酸、アゼライン酸、セバシン酸、リンゴ酸、酒石酸及びクエン酸からなる群から選択される化合物を構成モノマーとして含むポリマーは、カチオン性ポリマーとアニオン性ポリマーが共有結合したコポリマー又はカチオン性ポリマーとアニオン性化合物が共有結合したコポリマーであることが好ましく、具体的には、アルキレンイミン、ビニルアミン、アリルアミン、リジン、プロタミン及びジアリルジメチルアンモニウムクロライドからなる群から選択される化合物を構成モノマーとして含むカチオン性ポリマーとアクリル酸、メタクリル酸、α−グルタミン酸、γ−グルタミン酸及びアスパラギン酸からなる群から選択される化合物を構成モノマーとして含むアニオン性ポリマーが共有結合したコポリマー、又は、アルキレンイミン、ビニルアミン、アリルアミン、リジン、プロタミン及びジアリルジメチルアンモニウムクロライドからなる群から選択される化合物を構成モノマーとして含むカチオン性ポリマーとシュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、グルタル酸、アジピン酸、ピメリン酸、スベリン酸、アゼライン酸、セバシン酸、リンゴ酸、酒石酸及びクエン酸からなる群から選択されるアニオン性化合物が共有結合したコポリマーであることが好ましい。
【００３３】
また、上記ポリマーがカチオン性ポリマーとアニオン性ポリマーが共有結合したコポリマー又はカチオン性ポリマーとアニオン性化合物が共有結合したコポリマーである場合、上記一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物、ホスホン酸誘導体及びカテコール誘導体は、コポリマー中のどの部分と結合していてもよいが、上記一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物は、コポリマー中のアニオン性ポリマー又はアニオン性化合物の部分と共有結合しており、ホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体はコポリマー中のカチオン性ポリマーの部分と共有結合していることが好ましい。
【００３４】
カチオン性ポリマーは、特に限定されるものではないが、分岐状である方がホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体を介して金属材料表面を被覆する量が多くなるため、ポリアルキレンイミンを用いることが好ましい。ポリアルキレンイミンとしては、ポリエチレンイミン（以下、「ＰＥＩ」）、ポリプロピレンイミン及びポリブチレンイミン、さらにはアルコキシル化されたポリアルキレンイミン等が挙げられ、なかでもＰＥＩがより好ましい。
【００３５】
ＰＥＩの具体例としては、“ＬＵＰＡＳＯＬ”（登録商標）（ＢＡＳＦ社製）や“ＥＰＯＭＩＮ”（登録商標）（日本触媒社製）等が挙げられるが、本発明の効果を妨げない範囲で他のモノマーとの共重合体であってもよく変性体であってもよい。
【００３６】
カチオン性ポリマーは、特に限定されるものではないが、上記以外の構成モノマーと共重合体を形成していてもよく、例えば、エチレングリコール、プロピレングリコール、ビニルピロリドン、ビニルアルコール、ビニルカプロラクタム、酢酸ビニル、スチレン、メチルメタクリレート、ヒドロキシエチルメタクリレート及びシロキサン等が例示できる。カチオン性ポリマーと共重合体を形成する構成モノマーは、多すぎると金属材料表面を被覆する量が少なくなるため、１０重量％以下であることが好ましい。
【００３７】
アニオン性ポリマーは、特に限定されるものではないが、アニオン性官能基の重量比率が高い方がホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体を介して金属材料表面を被覆する量が多くなるため、ポリアクリル酸（以下、「ＰＡＡ」）や、ポリメタクリル酸、ポリα−グルタミン酸、ポリγ−グルタミン酸、ポリアスパラギン酸を用いることが好ましく、ＰＡＡがより好ましい。
【００３８】
ＰＡＡの具体例としては、“ポリアクリル酸”（和光純薬工業株式会社製）等が挙げられるが、本発明の効果を妨げない範囲で他のモノマーとの共重合体であってもよく変性体であってもよい。
【００３９】
アニオン性ポリマーは、特に限定されるものではないが、上記以外の構成モノマーと共重合体を形成していてもよく、例えば、エチレングリコール、プロピレングリコール、ビニルピロリドン、ビニルアルコール、ビニルカプロラクタム、酢酸ビニル、スチレン、メチルメタクリレート、ヒドロキシエチルメタクリレート及びシロキサン等が例示できる。アニオン性ポリマーと共重合体を形成する構成モノマーは、多すぎると金属材料の表面を被覆する量が少なくなるため、１０重量％以下であることが好ましい。
【００４０】
アニオン性化合物は、特に限定されるものではないが、アニオン性官能基の重量比率が高い方がホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体を介して金属材料表面を被覆する量が多くなるため、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、グルタル酸、アジピン酸、ピメリン酸、スベリン酸、アゼライン酸、セバシン酸、リンゴ酸、酒石酸及びクエン酸を用いることが好ましく、コハク酸がより好ましい。
【００４１】
カチオン性ポリマーとアニオン性ポリマーが共有結合したコポリマー又はカチオン性ポリマーとアニオン性化合物が共有結合したコポリマーの重量平均分子量は、６００〜２００００００が好ましく、１００００〜１８０００００がより好ましい。重量平均分子量が６００以上であれば、ホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体を介して金属材料表面を被覆する量がより好ましい量となるため、高い抗血栓性が得られ、重量平均分子量が２００００００以下であれば、上記一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物が内包されづらくなり、高い抗血栓性が得やすくなる。カチオン性ポリマーとアニオン性ポリマーが共有結合したコポリマー又はカチオン性ポリマーとアニオン性化合物が共有結合したコポリマーの重量平均分子量は、例えば、ゲル・パーミエーション・クロマトグラフィー法や、光散乱法等により測定することができる。
【００４２】
本発明において、被覆材料を構成するホスホン酸誘導体は、化合物中の炭素原子にホスホン酸基（−ＰＯ３Ｈ２）が結合した有機化合物である。
【００４３】
ホスホン酸誘導体は、化合物中の炭素原子にホスホン酸基（−ＰＯ３Ｈ２）が結合した化合物であれば、特に限定されないが、本発明の被覆材料を構成するポリマーと共有結合することによって被覆を安定化して高い抗血栓性を発揮し、ポリマーの溶出を抑制することができることが特に好ましいので、ポリマーと反応できる反応性の官能基を有していることが好ましい。例えば、カルボキシアルキルホスホン酸やアミノアルキルホスホン酸が好ましく、カルボキシアルキルホスホン酸がより好ましい。
【００４４】
カルボキシアルキルホスホン酸誘導体の炭素原子の数は特に限定されないが、例えば、化合物Ａ（以下の一般式（ＩＸ）の化合物）や化合物Ｂ（以下の一般式（Ｘ）の化合物）があげられる。
【化１５】
2016220716.tif 000016
【化１６】
2016220716.tif 000017
【００４５】
本発明において、被覆材料を構成するカテコール誘導体は、化合物中の炭素原子に以下の一般式（ＸＩ）で示されるカテコール基が結合した有機化合物である。
【化１７】
2016220716.tif 000018
［式中、ｎは１〜５の整数を表す。］
【００４６】
カテコール誘導体は、化合物中の炭素原子に一般式（ＸＩ）で示されるカテコール基が結合した化合物であれば、特に限定されないが、本発明の被覆材料を構成するポリマーと共有結合することによって被覆を安定化して高い抗血栓性を発揮し、ポリマーの溶出を抑制することができることが特に好ましいので、ポリマーと反応できる反応性の官能基を有していることが好ましい。例えば、化合物中の炭素原子にカルボキシル基やアミノ基が結合していることが好ましく、カルボキシル基が結合していることがより好ましい。
【化１８】
2016220716.tif 000019
［式中、ｎは１〜５の整数を表す。］
【００４７】
カテコール誘導体の炭素原子の数は特に限定されないが、例えば、化合物Ｃ（以下の一般式（ＸＩＩ）の化合物）や化合物Ｄ（以下の一般式（ＸＩＩＩ）の化合物）、化合物Ｅ（以下の一般式（ＸＩＶ）の化合物）、化合物Ｆ（以下の一般式（ＸＶ）の化合物）があげられる。
【化１９】
2016220716.tif 000020
【化２０】
2016220716.tif 000021
【化２１】
2016220716.tif 000022
【化２２】
2016220716.tif 000023
【００４８】
また、被覆材料を構成するポリマーは、長期間持続的に高い抗血栓性を発現させ、さらに、安全性の観点からも、血液等の体液中に溶出することは好ましくない。そのため、被覆材料を構成するポリマーは、ホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体と共有結合しており、さらにホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体が、自身のホスホン酸基又はカテコール基を介して金属材料の表面に結合することで、金属材料の表面に安定して固定化されている。また、金属材料の表面において、金属とホスホン酸基においては、酸素原子を介して金属原子とリン原子が共有結合（金属−Ｏ−Ｐ）していることが好ましく、金属とカテコール基においては、酸素原子を介して金属原子とベンゼン環中の炭素原子が共有結合（金属−Ｏ−Ｐｈ）していることが好ましい。金属材料とホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体の共有結合の確認は、ポリマーを溶解する溶剤で洗浄しても溶出しないことから判定することができる。
【００４９】
さらに抗血栓性化合物の基材の表面への被覆量を向上させ、より長期間持続的に高い抗血栓性を発現するためには、ベタイン化合物が、上記一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物、上記ポリマー、ホスホン酸誘導体及びカテコール誘導体の少なくとも１つと共有結合していることが好ましい。従来、ベタイン化合物は抗トロンビン活性化性能に大きく影響を与えないと考えられてきたが、本発明においては、被覆材料に上記一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物及びベタイン化合物の両方を含む場合、上記一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物のみを金属材料の表面に結合させた時と比較して、抗血小板付着性能と抗トロンビン活性化性能の両方の性能が大きく向上することを見出した。
【００５０】
上記ポリマーがカチオン性ポリマーとアニオン性ポリマーが共有結合したコポリマー又はカチオン性ポリマーとアニオン性化合物が共有結合したコポリマーである場合、ベタイン化合物は、アニオン性ポリマー又はアニオン性化合物と共有結合していることが好ましい。
【００５１】
また、ベタイン化合物とは、正電荷と負電荷を同一分子内の隣り合わない位置に持ち、正電荷をもつ原子には解離しうる水素原子が結合しておらず、分子全体としては電荷を持たない化合物及びその塩のことを差し、本発明においては、ベタイン化合物を一部に含む化合物であれば特に限定されるものではないが、カルボキシベタイン、スルホベタイン及びホスホベタインが好ましく、特に、以下の一般式（ＸＶＩ）又は（ＸＶＩＩ）に示されるカルボキシベタイン又はスルホベタインであることがより好ましい。また、一般式（ＸＶＩ）又は（ＸＶＩＩ）の式中のＸはアミノ基又はカルボキシル基であることが好ましく、Ｘはアミノ基であることがより好ましい。
【化２３】
2016220716.tif 000024
【化２４】
2016220716.tif 000025
［式中、ｎは１〜４のいずれかを表し、ｍは２〜４の整数を表し、ｎ’は２〜４の整数を表し、ｍ’は２〜４の整数を表し、Ｘは、水酸基、チオール基、アミノ基、カルボキシル基、アルデヒド基、イソシアネート基及びチオイソシアネート基からなる群から選択される官能基を表す。］
【００５２】
具体的に、抗血栓性金属材料の表面における被覆材料を構成する組成物の存在は、飛行時間型２次イオン質量分析法（以下、「ＧＣＩＢ−ＴＯＦ−ＳＩＭＳ」）によって求めることができる。
［測定条件］
装置                      ：ＴＯＦ．ＳＩＭＳ５（ＩＯＮ−ＴＯＦ社製）
１次イオン種              ：Ｂｉ３＋＋
２次イオン極性            ：正又は負
エッチングイオン          ：Ａｒガスクラスターイオン（Ａｒ−ＧＣＩＢ）
質量範囲（ｍ／ｚ）        ：０〜１５００
ラスターサイズ            ：１００μｍ四方
ピクセル数（１辺）        ：１２８ピクセル
後段加速                  ：１０ｋＶ
測定真空度（試料導入前）  ：４×１０−７Ｐａ以下
１次イオン加速電圧        ：３０ｋＶ
パルス幅                  ：７．４ｎｓ
バンチング                ：あり（高質量分解能測定）
帯電中和                  ：あり
【００５３】
超高真空中においた抗血栓性金属材料の表面にパルス化された１次イオンが照射され、抗血栓性金属材料の表面から放出された２次イオンが一定の運動エネルギーを得て飛行時間型の質量分析計へ導かれる。２次イオンの質量に応じて質量スペクトルが得られるため、抗血栓性金属材料表面に存在する有機物や無機物の同定、そのピーク強度から存在量に関する情報が得られる。
【００５４】
抗血栓性金属材料の表面におけるホスホン酸誘導体の存在は、ＧＣＩＢ−ＴＯＦ−ＳＩＭＳにより観測される負２次イオンの３１Ｐ−ピーク、４７ＰＯ−ピーク、６３ＰＯ２−ピーク、７９ＰＯ３−ピーク、９４ＣＨ３ＰＯ３−ピーク、１０７Ｃ２Ｈ４ＰＯ３−ピーク、２６５Ｃ１１Ｈ２２ＰＯ５−ピーク、正２次イオンの６５ＰＨ２Ｏ２＋ピーク、８２ＰＨ３Ｏ３＋ピーク、９６ＣＨ５ＰＯ３＋ピーク、２４９Ｃ１１Ｈ２２ＰＯ４＋ピーク、２７７Ｃ１２Ｈ２２ＰＯ５＋ピーク、からなる群から選択される少なくとも一種類のピークで確認される。
【００５５】
抗血栓性金属材料の表面におけるカテコール誘導体の存在は、ＧＣＩＢ−ＴＯＦ−ＳＩＭＳにより観測される負２次イオンの９８Ｃ４Ｈ４ＮＯ２−ピーク、１１６Ｃ４Ｈ６ＮＯ３−ピーク、１２２Ｃ７Ｈ６Ｏ２−ピーク、１３５Ｃ８Ｈ７Ｏ２−ピーク、２５２Ｃ１２Ｈ１４ＮＯ５−ピーク、正２次イオンの１３７Ｃ８Ｈ９Ｏ２＋ピーク、１５４Ｃ８Ｈ１２ＮＯ２＋ピーク、２０８Ｃ１２Ｈ１８ＮＯ２＋ピーク、２５４Ｃ１２Ｈ１６ＮＯ５＋ピーク、からなる群から選択される少なくとも一種類のピークで確認される。  
【００５６】
また、抗血栓性金属材料の表面におけるエチレングリコール又はプロピレングリコールの骨格構造は、ＧＣＩＢ−ＴＯＦ−ＳＩＭＳにより観測される正２次イオンの４５Ｃ２Ｈ５Ｏ＋ピーク、５９Ｃ３Ｈ７Ｏ＋ピーク、７３Ｃ３Ｈ５Ｏ２＋ピーク、８７Ｃ４Ｈ７Ｏ２＋ピークからなる群から選択される少なくとも一種のピークで確認される。
【００５７】
また、抗血栓性金属材料の表面における４−（アミノメチル）ベンゼンカルボキシイミダミドの骨格構造は、ＧＣＩＢ−ＴＯＦ−ＳＩＭＳにより観測される正２次イオンの１０６Ｃ７Ｈ８Ｎ＋ピーク、１１７Ｃ７Ｈ５Ｎ２＋ピーク、１３４Ｃ８Ｈ１０Ｎ２＋ピーク、１４８Ｃ８Ｈ１０Ｎ３＋ピーク、負２次イオンの１１９Ｃ７Ｈ７Ｎ２−ピークからなる群から選択される少なくとも一種のピークで確認され、ベンゼンアミジンの骨格構造は、ＧＣＩＢ−ＴＯＦ−ＳＩＭＳにより観測される負２次イオンの１１９Ｃ７Ｈ７Ｎ２−ピークで確認され、メトキシベンゼンスルホン酸アミドの骨格構造は、ＧＣＩＢ−ＴＯＦ−ＳＩＭＳにより観測される正２次イオンの１１７Ｃ７Ｈ７ＳＯ３＋ピーク、負２次イオンの６４ＳＯ２−ピーク、１７１Ｃ７Ｈ７ＳＯ３−ピーク、１８６Ｃ７Ｈ８ＳＮＯ３−ピーク、２１２Ｃ９Ｈ１０ＳＮＯ３−ピークからなる群から選択される少なくとも一種のピークで確認される。
【００５８】
抗血栓性金属材料の表面におけるベタイン化合物の存在は、ＧＣＩＢ−ＴＯＦ−ＳＩＭＳにより観測される負２次イオンの９４ＣＨ２ＳＯ３−ピーク、１５０Ｃ４Ｈ８ＮＳＯ３−ピーク、１６６Ｃ５Ｈ１２ＮＳＯ３−ピークからなる群から選択される少なくとも一種類のピークで確認される。
【００５９】
例えば、カチオン性ポリマーがＰＥＩの場合には、抗血栓性金属材料の表面におけるＰＥＩの存在は、ＧＣＩＢ−ＴＯＦ−ＳＩＭＳにより観測される正２次イオンの１８ＮＨ４＋ピーク、２８ＣＨ２Ｎ＋ピーク、４３ＣＨ３Ｎ２＋ピーク、７０Ｃ４Ｈ８Ｎ＋ピーク、負２次イオンの２６ＣＮ−ピーク、４２ＣＮＯ−ピークからなる群から選択される少なくとも一種のピークで確認される。
【００６０】
例えば、アニオン性ポリマーがＰＡＡの場合には、抗血栓性金属材料の表面におけるＰＡＡの存在は、ＧＣＩＢ−ＴＯＦ−ＳＩＭＳにより観測される負２次イオンの７１Ｃ３Ｈ３Ｏ２−ピークで確認される。
【００６１】
本発明の抗血栓性金属の材料は、抗血栓性を必要とする金属材料製の医療器材（医療機器及び医療器具であり、具体的には、体内留置用の医療器材である、ステント及びステントグラフト等）に好適に利用できる。
【００６２】
本発明の抗血栓性金属材料の製造方法を以下に示す。例えば、被覆材料は、ホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体と、アルキレンイミン、ビニルアミン、アリルアミン、リジン、プロタミン、ジアリルジメチルアンモニウムクロライド、アクリル酸、メタクリル酸、α−グルタミン酸、γ−グルタミン酸、アスパラギン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、グルタル酸、アジピン酸、ピメリン酸、スベリン酸、アゼライン酸、セバシン酸、リンゴ酸、酒石酸及びクエン酸からなる群から選択される化合物を構成モノマーとして含むポリマーと、上記一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物の間で、その全て若しくはいずれか一部を予め反応させた後の被覆材料を、金属材料の表面に結合させてもよい。
【００６３】
その中でも、金属材料の表面で長期間持続的に高い抗血栓性を発現させるためには、結合方法としては、第１の被覆工程として、ホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体を金属材料の表面に結合させる工程を行い、第２の被覆工程として、アルキレンイミン、ビニルアミン、アリルアミン、リジン、プロタミン、ジアリルジメチルアンモニウムクロライド、アクリル酸、メタクリル酸、α−グルタミン酸、γ−グルタミン酸、アスパラギン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、グルタル酸、アジピン酸、ピメリン酸、スベリン酸、アゼライン酸、セバシン酸、リンゴ酸、酒石酸及びクエン酸からなる群から選択される化合物を構成モノマーとして含むポリマーをホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体と共有結合させる工程を行い、第３の被覆工程として、上記一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物を上記ポリマーに共有結合させる工程を行う方法がより好ましい。また、第１〜３の被覆工程は、順番が前後していてもよく、また、第２の被覆工程の途中で第１の被覆工程を行なってもよい。結合方法としては、例えば、第２の被覆工程として、上記ポリマーをホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体と共有結合させる工程を行い、第１の被覆工程として、ホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体を金属材料の表面に結合させる工程を行い、第３の被覆工程として、上記一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物を上記ポリマーに共有結合させる工程を行う方法でもよい。
【００６４】
また、被覆材料にベタイン化合物が含まれている場合、第１の被覆工程、第２の被覆工程又は第３の被覆工程のいずれかの工程の前後において、ベタイン化合物をホスホン酸誘導体、上記ポリマー又は上記一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物のいずれかと共有結合させる追加工程を含むことが好ましい。また、追加工程は、第２の被覆工程の途中で行なってもよい。
【００６５】
第１の被覆工程として、ホスホン酸誘導体を金属材料の表面に結合させる方法は、特に限定されるものではないが、例えば以下の方法が用いられる。金属材料を、水、アセトン、メタノールの順で超音波洗浄後、真空乾燥する。ホスホン酸誘導体のテトラヒドロフラン（以下ＴＨＦ）溶液に室温で浸漬後、エバポレータで濃縮した後に真空乾燥する。１２０℃で加熱した後に、放冷後メタノールで超音波洗浄後、水で洗浄してから真空乾燥する。または、洗浄した金属材料をホスホン酸誘導体のエタノール溶液に３７℃で一晩浸漬してから、エタノールと水で洗浄後、真空乾燥する。
【００６６】
第１の被覆工程として、カテコール誘導体を金属材料の表面に結合させる方法は、特に限定されるものではないが、例えば以下の方法が用いられる。金属材料を、水、アセトン、メタノールの順で超音波洗浄後、真空乾燥する。カテコール誘導体のトリス塩酸緩衝液（ｐＨ８．５）溶液に室温で浸漬後、エバポレータで濃縮した後に真空乾燥する。１２０℃で加熱した後に、放冷後水で超音波洗浄してから、真空乾燥する。または、洗浄した金属材料をカテコール誘導体のトリス塩酸緩衝液（ｐＨ８．５）溶液に３７℃で一晩浸漬してから、水で洗浄後、真空乾燥する。
【００６７】
第２の被覆工程として、上記ポリマーとホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体を共有結合させる方法は、特に限定されるものではないが、ホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体が官能基（水酸基、チオール基、アミノ基、カルボキシル基、アルデヒド基、ビニル基、ハロゲン化アルキル基、イソシアネート基及びチオイソシアネート基等）を有する場合、上記ポリマーとホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体を化学反応により共有結合させる方法がある。例えば、ホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体が、カルボキシル基等を有する場合、カルボキシル基等を有するホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体と上記ポリマーを共有結合させる方法等が挙げられる。
【００６８】
第３の被覆工程として、上記一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物と上記ポリマーを共有結合させる方法は、特に限定されるものではないが、抗血栓性化合物が官能基（水酸基、チオール基、アミノ基、カルボキシル基、アルデヒド基、ビニル基、イソシアネート基及びチオイソシアネート基等）を有する場合、ポリマーと化学反応により共有結合させる方法がある。例えば、抗血栓性化合物がアミノ基又はカルボキシル基を有する場合、アミノ基又はカルボキシル基を有する抗血栓性化合物と上記ポリマーを共有結合させる方法等が挙げられる。
【００６９】
また、上記ポリマーが、アルキレンイミン、ビニルアミン、アリルアミン、リジン、プロタミン及びジアリルジメチルアンモニウムクロライドからなる群から選択される化合物を構成モノマーとして含むカチオン性ポリマーとアクリル酸、メタクリル酸、α−グルタミン酸、γ−グルタミン酸及びアスパラギン酸からなる群から選択される化合物を構成モノマーとして含むアニオン性ポリマーが共有結合したコポリマー、又は、アルキレンイミン、ビニルアミン、アリルアミン、リジン、プロタミン及びジアリルジメチルアンモニウムクロライドからなる群から選択される化合物を構成モノマーとして含むカチオン性ポリマーとシュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、グルタル酸、アジピン酸、ピメリン酸、スベリン酸、アゼライン酸、セバシン酸、リンゴ酸、酒石酸及びクエン酸からなる群から選択されるアニオン性化合物が共有結合したコポリマーである場合、それぞれの結合方法は特に限定されるものではない。しかしながら、結合方法としては、例えば、ホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体がカルボキシル基等を有する場合であれば、第２の被覆工程として、カルボキシル基等を有するホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体とカチオン性ポリマーを共有結合させる工程及びアニオン性ポリマー又はアニオン性化合物をカチオン性ポリマーに共有結合させる工程を行い、第３の被覆工程として、上記一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物をアニオン性ポリマー又はアニオン性化合物に共有結合させる工程を行う方法等が挙げられる。
【００７０】
また、上記ポリマーが、カチオン性ポリマーとアニオン性ポリマーが共有結合したコポリマー又はカチオン性ポリマーとアニオン性化合物が共有結合したコポリマーである場合、結合方法としては、例えば、第２の被覆工程として、ホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体とカチオン性ポリマーとを共有結合させる工程を行い、第２の被覆工程の途中での第１の被覆工程として、ホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体を金属材料の表面に結合させる工程を行い、第２の被覆工程として、カチオン性ポリマーにアニオン性ポリマー又はアニオン性化合物を共有結合させて、カチオン性ポリマーとアニオン性ポリマーが共有結合したコポリマー又はカチオン性ポリマーとアニオン性化合物が共有結合したコポリマーを作製する工程を行い、第３の被覆工程として、上記一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物を上記コポリマーに共有結合させる工程を行う方法等が挙げられる。
【００７１】
また、上記ポリマーが、カチオン性ポリマーとアニオン性ポリマーが共有結合したコポリマー又はカチオン性ポリマーとアニオン性化合物が共有結合したコポリマーであり、かつ、被覆材料にベタイン化合物が含まれている場合、第１の被覆工程、第２の被覆工程又は第３の被覆工程のいずれかの工程の前後において、ベタイン化合物を、ホスホン酸誘導体、カテコール誘導体、上記コポリマー又は上記一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物のいずれかと共有結合させる追加工程を含むことが好ましい。また、追加工程は、第２の被覆工程の途中で行なってもよく、追加工程に用いるベタイン化合物は、ベタイン化合物とアニオン性ポリマー又はアニオン性化合物が共有結合した化合物であってもよい。
【００７２】
この場合の追加工程を含む結合方法としては、例えば、ホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体がカルボキシル基等を有する場合であれば、第１の被覆工程として、カルボキシル基等を有するホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体を金属材料の表面に結合させる工程を行い、第２の被覆工程として、カルボキシル基等を有するホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体とカチオン性ポリマーを共有結合させる工程を行い、第２の被覆工程の途中での追加工程として、ベタイン化合物とアニオン性ポリマーが共有結合した化合物をカチオン性ポリマーに共有結合させる工程を行い、第２の被覆工程として、アニオン性ポリマーをカチオン性ポリマーに共有結合させる工程を行い、第３の被覆工程として、上記一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物をアニオン性ポリマーに共有結合させる工程を行う方法等が挙げられる。また、別の結合方法としては、例えば、ホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体がカルボキシル基等を有する場合であれば、第２の被覆工程として、カルボキシル基等を有するホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体とカチオン性ポリマーを共有結合させる工程を行い、第２の被覆工程の途中の第１の被覆工程として、ホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体を金属材料の表面に結合させる工程を行い、第２の被覆工程の途中の追加工程として、アニオン性ポリマーとベタイン化合物が共有結合した化合物をカチオン性ポリマーに共有結合させる工程を行い、第２の被覆工程として、カチオン性ポリマーにアニオン性ポリマー又はアニオン性化合物を共有結合させて、カチオン性ポリマーとアニオン性ポリマーが共有結合したコポリマー又はカチオン性ポリマーとアニオン性化合物が共有結合したコポリマーを作製する工程を行い、第３の被覆工程として、上記一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物を上記コポリマーに共有結合させる方法等が挙げられる。
【００７３】
第２の被覆工程において、上記ポリマーとホスホン誘導体又はカテコール誘導体を共有結合させる方法、第３の被覆工程として、上記ポリマーと上記一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物を共有結合させる方法、追加工程として、ベタイン化合物とホスホン酸誘導体又はカテコール誘導体、上記ポリマー又は上記一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物を共有結合させる方法としては、特に限定されないが、例えば脱水縮合剤等を用いて縮合反応させる方法がある。
【００７４】
用いられる脱水縮合剤の種類は、特に限定されるものではないが、例えば、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド、Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド、１−エーテル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、１−エーテル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（以下、「ＥＤＣ」）、１，３−ビス（２，２−ジメチルー１，３−ジオキソランー４−イルメチル）カルボジイミド、Ｎ−｛３−（ジメチルアミノ）プロピル−｝−Ｎ’−エチルカルボジイミド、Ｎ−｛３−（ジメチルアミノ）プロピル−｝−Ｎ’−エチルカルボジイミドメチオダイド、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ’−エチルカルボジイミド、Ｎ−シクロヘキシル−Ｎ’−（２−モルフォィノエチル）カルボジイミド  メソ−ｐ−トルエンスルフォネート、Ｎ，Ｎ’−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルカルボジイミド又はＮ，Ｎ’−ジ−ｐ−トリカルボジイミド等のカルボジイミド系化合物や、４（−４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルフォリニウムクロリドｎ水和物（以下、「ＤＭＴ−ＭＭ」）等のトリアジン系化合物が挙げられる。
【００７５】
脱水縮合剤は、脱水縮合促進剤と共に用いてもよい。用いられる脱水縮合促進剤は、特に限定されるものではないが、例えば、ピリジン、４−ジメチルアミノピリジン（以下、「ＤＭＡＰ」）、トリエチルアミン、イソプロピルアミン、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール又はＮ−ヒドロキシコハク酸イミドが挙げられる。
【００７６】
ホスホン酸誘導体、カテコール誘導体、上記ポリマー、上記一般式（Ｉ）で示される抗血栓性化合物、ベタイン化合物、脱水縮合剤及び脱水縮合促進剤は、混合水溶液にして反応させてよいし、順番に添加して反応を行なってもよい。
【実施例】
【００７７】
以下、実施例及び比較例を挙げて本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００７８】
（実施例１）
金属材料としてＳＵＳ３０４の板材（縦：１ｃｍ、横０．５ｃｍ）を用いた。ＳＵＳ３０４を水、アセトン、メタノールの順で超音波洗浄後、真空乾燥した。洗浄したＳＵＳ３０４を１ｍＭの化合物Ａ（以下の一般式（ＩＸ）の化合物）エタノール溶液に３７℃で一晩浸漬してから、エタノールと水で洗浄後、真空乾燥した（第１の被覆工程）。
【化２５】
2016220716.tif 000026
【００７９】
次いでＳＵＳ３０４を、０．５重量％ＤＭＴ−ＭＭ（和光純薬工業株式会社製）、被覆材料の一部である５．０重量％ＰＥＩ（ＬＵＰＡＳＯＬ（登録商標）  Ｐ；ＢＡＳＦ社製）の水溶液に浸漬し、３０℃で２時間反応させて化合物ＡにＰＥＩを縮合反応により共有結合させた（第２の被覆工程）。反応後の水溶液を除去し、蒸留水で洗浄した。
【００８０】
さらに、ＳＵＳ３０４を、０．５重量％ＤＭＴ−ＭＭ、０．５重量％ＰＡＡ（和光純薬工業株式会社製）の水溶液に浸漬し、３０℃で２時間反応させた（第２の被覆工程）。反応後の水溶液を除去し、炭酸ナトリウム水溶液や蒸留水で洗浄した。
【００８１】
最後に、被覆材料の一部である１．０重量％化合物Ｇ（以下の一般式（ＸＶＩＩＩ）の化合物）、化合物Ｇに対して２モル等量の水酸化ナトリウム（和光純薬工業株式会社製）と３モル等量のＤＭＴ−ＭＭ（和光純薬工業株式会社製）の水溶液に浸漬し、３０℃で２時間反応させて、ＳＵＳ３０４の表面に化合物Ｇを固定化した（第３の被覆工程）。反応後の水溶液を除去し、蒸留水で洗浄した。さらに、３７℃で１０分間蒸留水に浸漬して、蒸留水中に抗血栓性化合物が溶出物しないことを確認した。
【化２６】
2016220716.tif 000027
【００８２】
ヒト全血液試験による評価を実施した。結果を表１に示す。表１に示すとおり、ヒト全血液試験による評価での抗トロンビン性能は、（＋＋）であり、抗血小板性能は、（＋＋）であった。
【００８３】
（実施例２）
第１の被覆工程において、化合物Ａを化合物Ｂ（以下の一般式（Ｘ）の化合物）に変更した以外は、実施例１と同様の操作を行い、ＳＵＳ３０４の表面に化合物Ｇを固定化した。さらに、３７℃で１０分間蒸留水に浸漬して、蒸留水中に抗血栓性化合物が溶出物しないことを確認した。
【化２７】
2016220716.tif 000028
【００８４】
ヒト全血液試験による評価を実施した。結果を表１に示す。表１に示すとおり、ヒト全血液試験による評価での抗トロンビン性能は、（＋＋）であり、抗血小板性能は、（＋＋）であった。
【００８５】
（実施例３）
第２の被覆工程において、０．５重量％ＰＡＡ水溶液を４０重量％無水コハク酸（和光純薬工業株式会社製）ジメチルアセトアミド（和光純薬工業株式会社製）溶液に、３０℃で２時間反応を５０℃で１７時間反応に、炭酸ナトリウム水溶液や蒸留水での洗浄をメタノールや蒸留水での洗浄に変更した以外は、実施例２と同様の操作を行い、ＳＵＳ３０４の表面に化合物Ｇを固定化した。さらに、３７℃で１０分間蒸留水に浸漬して、蒸留水中に抗血栓性化合物が溶出物しないことを確認した。
【００８６】
ヒト全血液試験による評価を実施した。結果を表１に示す。表１に示すとおり、ヒト全血液試験による評価での抗トロンビン活性化性能は、（＋）であり、抗血小板性能は、（＋）であった。
【００８７】
（実施例４）
第２の被覆工程において、０．５重量％ＰＡＡ水溶液を、０.５重量％化合物Ｈ（以下の一般式（ＸＩＸ）の化合物）に変更した以外は、実施例１と同様の操作を行って、第２の被覆工程の途中での追加工程を実施した。
【００８８】
【化２８】
2016220716.tif 000029
[式中、ｎ＝０．４を表す。]
【００８９】
次に、ＳＵＳ３０４を、０．５重量％ＤＭＴ−ＭＭ、０．５重量％ＰＡＡ（和光純薬工業株式会社製）の水溶液に浸漬し、３０℃で２時間反応させた（第２の被覆工程）。反応後の水溶液を除去し、炭酸ナトリウム水溶液や蒸留水で洗浄した。
【００９０】
最後に、被覆材料の一部である１．０重量％化合物Ｇ、化合物Ｇに対して２モル等量の水酸化ナトリウム（和光純薬工業株式会社製）と３モル等量、ＤＭＴ−ＭＭ（和光純薬工業株式会社製）の水溶液に浸漬し、３０℃で２時間反応させて、ＳＵＳ３０４の表面に化合物Ｇを固定化した（第３の被覆工程）。反応後の水溶液を除去し、蒸留水で洗浄した。さらに、３７℃で１０分間蒸留水に浸漬して、蒸留水中に抗血栓性化合物が溶出物しないことを確認した。
【００９１】
ヒト全血液試験による評価を実施した。結果を表１に示す。表１に示すとおり、ヒト全血液試験による評価での抗トロンビン活性化性能は、（＋＋＋）であり、抗血小板性能は、（＋＋＋）であった。
【００９２】
（実施例５）
第２の被覆工程の途中での追加工程において、０.５重量％化合物Ｈを０.５重量％化合物Ｉ（以下の一般式（ＸＸ）の化合物）に変更した以外は、実施例４と同様の操作を行って、ＳＵＳ３０４の表面に化合物Ｇを固定化した。さらに、３７℃で１０分間蒸留水に浸漬して、蒸留水中に抗血栓性化合物が溶出物しないことを確認した。
【００９３】
【化２９】
2016220716.tif 000030
[式中、ｎ＝０．８７を表す。]
【００９４】
ヒト全血液試験による評価を実施した。結果を表１に示す。表１に示すとおり、ヒト全血液試験による評価での抗トロンビン活性化性能は、（＋＋＋）であり、抗血小板性能は、（＋＋＋）であった。
【００９５】
（実施例６）
第１の被覆工程において、化合物Ａを化合物Ｃ（以下の一般式（ＸＩＩ）の化合物）に変更して、洗浄したＳＵＳ３０４を１ｍＭの化合物Ｃトリス塩酸緩衝液（ｐＨ８．５）溶液に３７℃で一晩浸漬してから、水で洗浄後、真空乾燥した（第１の被覆工程）。第１の被覆工程以外は、実施例１と同様の操作を行い、ＳＵＳ３０４の表面に化合物Ｇを固定化した。さらに、３７℃で１０分間蒸留水に浸漬して、蒸留水中に抗血栓性化合物が溶出物しないことを確認した。
【化３０】
2016220716.tif 000031
【００９６】
ヒト全血液試験による評価を実施した。結果を表１に示す。表１に示すとおり、ヒト全血液試験による評価での抗トロンビン性能は、（＋＋）であり、抗血小板性能は、（＋＋）であった。
【００９７】
（実施例７）
第１の被覆工程において、化合物Ｃを化合物Ｄ（以下の一般式（ＸＩＩＩ）の化合物）に変更した以外は、実施例６と同様の操作を行い、ＳＵＳ３０４の表面に化合物Ｇを固定化した。さらに、３７℃で１０分間蒸留水に浸漬して、蒸留水中に抗血栓性化合物が溶出物しないことを確認した。
【化３１】
2016220716.tif 000032
【００９８】
ヒト全血液試験による評価を実施した。結果を表１に示す。表１に示すとおり、ヒト全血液試験による評価での抗トロンビン性能は、（＋＋）であり、抗血小板性能は、（＋＋）であった。
【００９９】
（実施例８）
第１の被覆工程において、化合物Ｃを化合物Ｅ（以下の一般式（ＸＩＶ）の化合物）に変更した以外は、実施例６と同様の操作を行い、ＳＵＳ３０４の表面に化合物Ｇを固定化した。さらに、３７℃で１０分間蒸留水に浸漬して、蒸留水中に抗血栓性化合物が溶出物しないことを確認した。
【化３２】
2016220716.tif 000033
【０１００】
ヒト全血液試験による評価を実施した。結果を表１に示す。表１に示すとおり、ヒト全血液試験による評価での抗トロンビン性能は、（＋＋）であり、抗血小板性能は、（＋＋）であった。
【０１０１】
（実施例９）
第１の被覆工程において、化合物Ｃを化合物Ｆ（以下の一般式（ＸＶ）の化合物）に変更した以外は、実施例６と同様の操作を行い、ＳＵＳ３０４の表面に化合物Ｇを固定化した。さらに、３７℃で１０分間蒸留水に浸漬して、蒸留水中に抗血栓性化合物が溶出物しないことを確認した。
【化３３】
2016220716.tif 000034
【０１０２】
ヒト全血液試験による評価を実施した。結果を表１に示す。表１に示すとおり、ヒト全血液試験による評価での抗トロンビン性能は、（＋＋）であり、抗血小板性能は、（＋＋）であった。
【０１０３】
（実施例１０）
第１の被覆工程において、化合物Ｂを化合物Ｅに変更して、洗浄したＳＵＳ３０４を１ｍＭの化合物Ｅトリス塩酸緩衝液（ｐＨ８．５）溶液に３７℃で一晩浸漬してから、水で洗浄後、真空乾燥した（第１の被覆工程）。第１の被覆工程以外は、実施例３と同様の操作を行い、ＳＵＳ３０４の表面に化合物Ｇを固定化した。さらに、３７℃で１０分間蒸留水に浸漬して、蒸留水中に抗血栓性化合物が溶出物しないことを確認した。
【０１０４】
ヒト全血液試験による評価を実施した。結果を表１に示す。表１に示すとおり、ヒト全血液試験による評価での抗トロンビン活性化性能は、（＋）であり、抗血小板性能は、（＋）であった。
【０１０５】
（実施例１１）
第１の被覆工程において、化合物Ａを化合物Ｅに変更して、洗浄したＳＵＳ３０４を１ｍＭの化合物Ｅトリス塩酸緩衝液（ｐＨ８．５）溶液に３７℃で一晩浸漬してから、水で洗浄後、真空乾燥した（第１の被覆工程）。第１の被覆工程以外は、実施例４と同様の操作を行い、ＳＵＳ３０４の表面に化合物Ｇを固定化した。さらに、３７℃で１０分間蒸留水に浸漬して、蒸留水中に抗血栓性化合物が溶出物しないことを確認した。
【０１０６】
ヒト全血液試験による評価を実施した。結果を表１に示す。表１に示すとおり、ヒト全血液試験による評価での抗トロンビン活性化性能は、（＋＋＋）であり、抗血小板性能は、（＋＋＋）であった。
【０１０７】
（実施例１２）
第１の被覆工程において、化合物Ａを化合物Ｅに変更して、洗浄したＳＵＳ３０４を１ｍＭの化合物Ｅトリス塩酸緩衝液（ｐＨ８．５）溶液に３７℃で一晩浸漬してから、水で洗浄後、真空乾燥した（第１の被覆工程）。第１の被覆工程以外は、実施例５と同様の操作を行い、ＳＵＳ３０４の表面に化合物Ｇを固定化した。さらに、３７℃で１０分間蒸留水に浸漬して、蒸留水中に抗血栓性化合物が溶出物しないことを確認した。
【０１０８】
ヒト全血液試験による評価を実施した。結果を表１に示す。表１に示すとおり、ヒト全血液試験による評価での抗トロンビン活性化性能は、（＋＋＋）であり、抗血小板性能は、（＋＋＋）であった。
【０１０９】
（比較例１）
ＳＵＳ３０４を１．０重量％化合物Ｇの水溶液に浸漬し、５ｋＧｙのγ線を照射（ＪＳ−８５００型コバルト６０γ線照射装置；ノーディオン・インターナショナル社製）した。反応後の水溶液を除去し、Ｔｒｉｔｏｎ（登録商標）−Ｘ１００（シグマ−アルドリッチ社製）、生理食塩水や蒸留水で洗浄した。
【０１１０】
ヒト全血液試験による評価を実施した。結果を表１に示す。表１に示すとおり、ヒト全血液試験による評価での抗トロンビン活性化性能は、（−）であり、抗血小板性能は、（−）であった。
【０１１１】
（比較例２）
第２の被覆工程と第１の追加工程を実施しなかった以外は、実施例１と同様の操作を行って、ＳＵＳ３０４表面に化合物Ｇを固定化した。
【０１１２】
ヒト全血液試験による評価を実施した。結果を表１に示す。表１に示すとおり、ヒト全血液試験による評価での抗トロンビン活性化性能は、（−）であり、抗血小板性能は、（＋）であった。
【０１１３】
（比較例３）
第３の被覆工程を実施しなかった以外は、実施例１と同様の操作を行って、ＳＵＳ３０４表面を被覆した。
【０１１４】
ヒト全血液試験による評価を実施した。結果を表１に示す。表１に示すとおり、ヒト全血液試験による評価での抗トロンビン活性化性能は、（−）であり、抗血小板性能は、（＋）であった。
【０１１５】
（比較例４）
第１の被覆工程において、化合物Ａを化合物Ｅに変更して、洗浄したＳＵＳ３０４を１ｍＭの化合物Ｅトリス塩酸緩衝液（ｐＨ８．５）溶液に３７℃で一晩浸漬してから、水で洗浄後、真空乾燥した（第１の被覆工程）。第１の被覆工程以外は、比較例２と同様の操作を行って、ＳＵＳ３０４の表面に化合物Ｇを固定化した。
【０１１６】
ヒト全血液試験による評価を実施した。結果を表１に示す。表１に示すとおり、ヒト全血液試験による評価での抗トロンビン活性化性能は、（−）であり、抗血小板性能は、（＋）であった。
【０１１７】
（比較例５）
第１の被覆工程において、化合物Ａを化合物Ｅに変更して、洗浄したＳＵＳ３０４を１ｍＭの化合物Ｅトリス塩酸緩衝液（ｐＨ８．５）溶液に３７℃で一晩浸漬してから、水で洗浄後、真空乾燥した（第１の被覆工程）。第１の被覆工程以外は、比較例３と同様の操作を行って、ＳＵＳ３０４表面を被覆した。
【０１１８】
ヒト全血液試験による評価を実施した。結果を表１に示す。表１に示すとおり、ヒト全血液試験による評価での抗トロンビン活性化性能は、（−）であり、抗血小板性能は、（＋）であった。
【０１１９】
本発明の抗血栓性金属材料が有する抗トロンビン活性化性能と抗血小板性能について、ヒト全血液試験による評価方法を下記に示す。
【０１２０】
（評価１：ヒト全血液試験）
被覆材料で被覆された抗血栓性金属材料（例えばＳＵＳ３０４）を１．０×０．５ｃｍのサイズにカットし、被覆材料で被覆されない同種の金属材料（陽性対照）を１．０×０．５ｃｍのサイズにカットし、生理食塩水で３７℃、３０分間洗浄してから２ｍＬのマイクロチューブに入れた。ヒト新鮮血に０．４Ｕ／ｍＬとなるようにヘパリンナトリウム注（味の素製薬株式会社製）を添加した後、このヒト血液を２ｍＬ添加し、３７℃で２時間インキュベートした。インキュベート後にＳＵＳ３０４を取り出し、血液中のトロンビン−アンチトロンビン複合体（以下ＴＡＴ）の濃度とベータ−トロンボグロブリン（以下β−ＴＧ）の濃度を測定した。以下の式１と式２に示すように、抗トロンビン活性化性能と抗血小板性能をそれぞれ算出した。
抗トロンビン活性化性能  ＝  Ｃｔ（ＴＡＴ）／Ｃｐｒｅ（ＴＡＴ）  ・・・式１
Ｃｔ（ＴＡＴ）  ：  サンプルをインキュベートした後のＴＡＴ測定濃度（ｎｇ／ｍＬ）
Ｃｐｒｅ（ＴＡＴ）  ：  サンプルをインキュベートする前のＴＡＴ測定濃度（ｎｇ／ｍＬ）
抗血小板性能  ＝  Ｃｔ（β−ＴＧ）／Ｃｐｒｅ（β−ＴＧ）  ・・・式２
Ｃｔ（β−ＴＧ）  ：  サンプルをインキュベートした後のβ−ＴＧ測定濃度（ＩＵ／ｍＬ）
Ｃｐｒｅ（β−ＴＧ）  ：  サンプルをインキュベートする前のβ−ＴＧ測定濃度（ＩＵ／ｍＬ）
【０１２１】
式１で算出した抗トロンビン活性化性能が、５００以上であれば抗トロンビン活性化性能は弱いとして（−）、２５０以上５００未満であれば抗トロンビン活性化性能は強いとして（＋）、１５０以上２５０未満であれば抗トロンビン活性化性能はより強いとして（＋＋）、１５０未満であれば抗トロンビン活性化性能はさらにより強いとして（＋＋＋）と判定した。
【０１２２】
式２で算出した抗血小板性能が、２０以上であれば抗血小板性能は弱いとして（−）、１５以上２０未満であれば抗血小板性能は強いとして（＋）、８以上１５未満であれば抗血小板性能はより強いとして（＋＋）、８未満であれば抗血小板性能はさらにより強いとして（＋＋＋）と判定した。
【０１２３】
【表１】
2016220716.tif 000035
【産業上の利用可能性】
【０１２４】
本発明の抗血栓性金属材料は、医療分野において、長期間持続的に高い抗血栓性を必要とする医療器材（医療機器及び医療器具）に用いることができ、特に体内留置用の医療器材である、ステント及びステントグラフト等に好適に用いることができる。