(57)【要約】      （修正有）【課題】ＨＳＰ７０誘導活性を有する神経保護剤、抗ウイルス剤、胃粘膜保護剤、多発性骨髄腫の治療剤、メラニン産生抑制剤等として有用な化合物、及び当該化合物を含む医薬組成物または化粧用組成物の提供。【解決手段】下記のＨＰＨの類縁体、及び該類縁体を用いた医薬組成物、化粧用組成物。2016160223.tif 000020【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式：
【化１】
2016160223.tif 000019
［式中、ＲおよびＲ’は、それぞれ独立して、Ｈ、メチル、ベンジル、ジフェニルメチルまたはトリチルである］
で示される化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、もしくは錯体。
【請求項２】
ＲがＨであり、Ｒ’がＨ、メチル、ベンジル、ジフェニルメチルまたはトリチルである、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、もしくは錯体。
【請求項３】
ＲおよびＲ’が、ともにＨ、メチル、ベンジル、ジフェニルメチルまたはトリチルである、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、もしくは錯体。
【請求項４】
請求項１ないし３のいずれか１項に記載の化合物またはその塩を含む、医薬組成物。
【請求項５】
ＨＳＰ７０誘導剤である、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
抗ウイルス剤である、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項７】
神経保護剤である、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項８】
潰瘍を治療するための、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項９】
多発性骨髄腫を治療するための、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
請求項１ないし３のいずれか１項に記載の化合物またはその塩を含む、化粧用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＨＳＰ７０誘導活性を有する化合物に関する。本発明はまた、当該化合物を含む医薬組成物または化粧用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
代表的な熱ショックタンパク質（ＨＳＰ）であるＨＳＰ７０の細胞内誘導は、様々な疾病の症状軽減や美容に効果があることが知られる。これまで、過酸化水素によるＨＳＰ７０誘導（非特許文献１）などが報告され、活性酸素がＨＳＰ７０を誘導することは広く受け入れられてきた。しかし、過酸化水素を体内に入れることは現実的ではない。
【０００３】
一方、ＨＳＰ７０タンパク質誘導剤としてプロスタグランジンＡ１等が知られている。しかし、プロスタグランジンＡ１は様々な生理活性を有することから、強い副作用が予想される。また、生薬ヤバツイに含まれるユーパリノライドＡおよびＢなどがＨＳＰ７０誘導剤として知られている。しかし、この化合物の構造は非常に複雑で有機合成による生産は現時点ではできないと考えられ、大量生産または安定的な生産はほぼ不可能である。
【０００４】
したがって、細胞内で穏やかに活性酸素を発生させると考えられ、かつ有機合成が容易な化合物が得られれば、そのような化合物によるＨＳＰ７０の細胞内誘導を通じた様々な疾病の症状軽減や美容への応用が期待できる。
【０００５】
大塚らはブレオマイシンの酵素活性化部位の構造を簡略化した金属キレーターＨＰＨ：
【０００６】
【化１】
2016160223.tif 000002
【０００７】
を合成し、この鉄錯体が酸素を活性化することを明らかにした（非特許文献２）。その後、大塚、藤田らは亜鉛キレーターとして働くＨＰＨの誘導体ＨＰＨ−２Ｔｒｔ：
【０００８】
【化２】
2016160223.tif 000003
【０００９】
を合成した（非特許文献３）。梅澤、大塚らは、このＨＰＨ−２Ｔｒｔが膵臓癌細胞ＡｓＰＣ−１にアポトーシスを誘導することを示した（非特許文献４）。非特許文献４においては、ＨＰＨ−２ＴｒｔがＨＰＨよりも金属錯体として強く酸素を活性化することが記載されている。しかしながら、このような化合物がＨＳＰ７０を活性化するかどうかについては報告されていない。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Madamanchi, N.R., et al., Arterioscler Throm. Vasc. Biol., 2001, Vol.21, No.3, p.321-326
【非特許文献２】Otsuka, M. et al., Tetrahedron Lett., 1993, Vol.34, Issue 52, p.8497-8550
【非特許文献３】Otsuka, M., et al., J. Med. Chem., 1994, Vol.37, No.25, p.4267-4269
【非特許文献４】Suginara, R., et al., Jpn. J. Cancer Res., 1998, Vol.89, No.9, p.947-953
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
上記のように、細胞内で穏やかに活性酸素を発生させる化合物、および／または強い副作用を生じることなくＨＳＰ７０の細胞内誘導できる化合物の開発が、様々な疾病の症状軽減や美容への応用の面で求められていた。
【００１２】
本発明は、そのような化合物として、ＨＰＨの類縁体を提供する。また、本発明はＨＰＨの類縁体を含む医薬組成物または化粧用組成物を提供する。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
以上に鑑み、本件の発明者は、ＨＰＨの細胞内での酸素活性化能に注目し、研究を開始した。鋭意検討の結果、特定のＨＰＨ類縁体が細胞内でＨＳＰ７０を誘導することを見いだした。当該知見に基づいて、本発明は完成された。
【００１４】
すなわち、一態様において、本発明は以下のとおりであってよい。
【００１５】
［１］以下の式：
【００１６】
【化３】
2016160223.tif 000004
【００１７】
［式中、ＲおよびＲ’は、それぞれ独立して、Ｈ、メチル、ベンジル、ジフェニルメチルまたはトリチルである］
で示される化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、もしくは錯体。
【００１８】
［２］ＲがＨであり、Ｒ’がＨ、メチル、ベンジル、ジフェニルメチルまたはトリチルである、［１］に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、もしくは錯体。
【００１９】
［３］ＲおよびＲ’が、ともにＨ、メチル、ベンジル、ジフェニルメチルまたはトリチルである、［１］に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、もしくは錯体。
【００２０】
［４］［１］ないし［３］のいずれか１項に記載の化合物またはその塩を含む、医薬組成物。
【００２１】
［５］ＨＳＰ７０誘導剤である、［４］に記載の医薬組成物。
【００２２】
［６］抗ウイルス剤である、［４］に記載の医薬組成物。
【００２３】
［７］神経保護剤である、［４］に記載の医薬組成物。
【００２４】
［８］潰瘍を治療するための、［４］に記載の医薬組成物。
【００２５】
［９］多発性骨髄腫を治療するための、［４］に記載の医薬組成物。
【００２６】
［１０］［１］ないし［３］のいずれか１項に記載の化合物またはその塩を含む、化粧用組成物。
【発明の効果】
【００２７】
本発明の化合物は、ＨＳＰ誘導剤として有用である。本発明の化合物は、細胞内で金属錯体となり穏やかに活性酸素を発生させることによりＨＳＰ７０を誘導すると考えられる。このため、副作用が少ないＨＳＰ誘導剤として有用である。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１】図１は、本発明の化合物の鉄錯体によるＤＮＡ切断活性を示す、電気泳動写真である。
【図２】図２は、本発明の化合物についてＰＣ１２細胞におけるＨＳＰ７０タンパク質の誘導を示す、ウェスタンブロットの結果である。
【図３】図３は、本発明の化合物についてＨＳＣ−Ｆ細胞におけるＨＳＰ７０タンパク質の誘導を示す、ウェスタンブロットの結果である。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
以下に本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。本明細書で特段に定義されない限り、本発明に関連して用いられる科学用語及び技術用語は、当業者によって一般に理解される意味を有するものとする。
【００３０】
化合物
以下の式：
【００３１】
【化４】
2016160223.tif 000005
【００３２】
［式中、ＲおよびＲ’は、それぞれ独立して、Ｈ、メチル、ベンジル、ジフェニルメチルまたはトリチルである］
で示される化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物もしくは錯体が提供される。
【００３３】
別の態様において、ＲはＨであり、Ｒ’はＨ、メチル、ベンジル、ジフェニルメチル、またはトリチルであり；好ましくは、ＲはＨであり、Ｒ’はメチル、ベンジル、ジフェニルメチル、またはトリチルであり；さらに好ましくは、ＲはＨであり、Ｒ’はトリチルである。
【００３４】
また別の態様において、Ｒ及びＲ’は、ともにＨ、メチル、トリチル、ジフェニルメチル、またはベンジルであり；好ましくはＲ及びＲ’はともにメチル、ジフェニルメチル、またはベンジルである。
【００３５】
薬学的に許容可能な塩は、特に限定されないが、塩酸、リン酸、硫酸、硝酸、ホウ酸、臭化水素酸、スルファミン酸等の無機酸から誘導した塩；および、酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パモ酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、スルファニル酸、２−アセトキシ−安息香酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、シュウ酸、イセチオン酸、トリフルオロ酢酸等の有機酸から調製した塩；が挙げられる。
【００３６】
上記の化合物について薬学的に許容可能な塩は、慣用の化学的な手法で合成可能である。一般に、塩は、遊離塩基と、化学量論量若しくは過剰量の無機酸若しくは有機酸とを、適切な溶媒中で反応させることにより調製することができる。
【００３７】
薬学的に許容可能な溶媒和物は、上記の化合物またはその塩と溶媒との間の非共有結合的な分子間力によって結合した化学量論量または非化学量論量の溶媒をさらに含む化合物である。好ましい態様において、溶媒和物は水和物である。
【００３８】
薬学的に許容可能な錯体は、上記の化合物またはその塩もしくは溶媒和物がキレート配位子となり、金属イオンに配位結合した配位した化合物である。配位する金属イオンは特に限定されない。好ましくは薬学的に許容可能な錯体は、鉄錯体、亜鉛錯体、銅錯体、またはコバルト錯体、である。
【００３９】
以下、本明細書において「本発明の化合物」というときには、上記の化合物のほか、その薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、または錯体を包含する化合物を意味するものとする。
【００４０】
本発明の化合物は、例えば、実施例１において後述する方法およびその変法により合成することができる。あるいは、当業者は目的の化合物の特性に応じて、当該技術分野において公知の手法を適用して上記の化合物または薬学的に許容可能なその塩を合成することができる。
【００４１】
ここで、本発明の化合物は、後述の実施例において示すように、神経細胞株であるＰＣ１２細胞やＴ細胞株であるＨＳＣ−Ｆ細胞をはじめとする多くの細胞において、ＨＳＰ７０を誘導した。一方、既知のＨＳＰ７０誘導剤であるゲラニルゲラニルアセトン（ＧＧＡ）は、ＰＣ１２細胞やＨＳＣ−Ｆ細胞においてＨＳＰ７０を誘導しなかった。
【００４２】
医薬組成物／治療方法
本発明の化合物を含む医薬組成物が提供される。
【００４３】
医薬組成物は、本発明の化合物のほかに薬学的に許容可能な賦形剤、ビヒクルおよび／または担体（以下、賦形剤等と記載する）を含んでいてもよい。薬学的に許容可能な賦形剤等は特に限定されず、当該技術分野において既知の賦形剤等から当業者が適宜選択することができる。
【００４４】
別の態様において、本発明の化合物または本発明の医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における疾患を治療する方法が提供される。また別の態様において、対象における疾患の治療に用いるための本発明の化合物が提供される。あるいは、対象における疾患の治療に用いる医薬を製造するための本発明の化合物の使用もまた、提供される。
【００４５】
本発明者らは、本発明の化合物は、細胞においてＨＳＰ７０を誘導することを見出した。上記の化合物は、細胞内で金属錯体となり穏やかに活性酸素を発生させることでＨＳＰ７０を誘導すると考えられる。本発明の化合物がＨＳＰ７０を誘導する細胞は、特に限定されないが、正常細胞であってもよく、ウイルスに感染した細胞、または腫瘍細胞などの異常を有する細胞であってもよい。好ましくは例えば、神経細胞、Ｔ細胞、Ｂ細胞、モノサイト、マクロファージおよびマクロファージ様細胞、脳細胞、胃粘膜上皮細胞、メラノーマ細胞、ケラチノサイト細胞、線維芽細胞、または肝細胞であってもよい。
【００４６】
本明細書においてＨＳＰ７０は、約７０ｋＤａの熱ショックタンパク質ファミリーの各メンバーを含む。具体的なＨＳＰ７０タンパク質の例としては、ｈｓｐ７０、ｈｓｐ７０ｈｏｍ、ｈｓｃ７０、Ｇｒｐ７８／ＢｉＰ、ｍｔ−ｈｓｐ７０／Ｇｒｐ７５などが挙げられる。ＨＳＰ７０ファミリーの機能は、細胞質、ミトコンドリアおよび小胞体でのタンパク質のフォールディング、輸送および会合を助けるシャペロン群である。ＨＳＰ７０は、外界からのストレス（例えば、高温、外的傷害、放射線、紫外線など）に晒された場合に、生体防御システムとしてその発現が誘導されることが知られている。また、近年、ＨＳＰ７０の誘導が、アルツハイマー病をはじめとする神経疾患や、潰瘍性大腸炎など様々な疾患の治療に有効であることが示されてきた。
【００４７】
したがって、本発明の化合物は細胞におけるＨＳＰ７０誘導が治療に有効な疾患を治療するために用いることができる。一態様において、本発明の化合物を含む医薬組成物は、ＨＳＰ７０誘導剤として利用できる。別の態様において本発明の医薬組成物は、神経保護剤（または脳保護剤）、抗ウイルス剤、潰瘍を治療するための剤（または胃粘膜保護剤）、多発性骨髄腫を治療するための剤、であることもできる。
【００４８】
細胞におけるＨＳＰ７０誘導が治療に有効な疾患としては、例えば、脳虚血；アルツハイマー病；ハンチントン病；パーキンソン病；海綿状脳症；球脊髄性筋萎縮、脊髄小脳失調障害および他の神経筋萎縮；家族制筋萎縮性側索硬化症；虚血；発作；低体温；高熱；やけどの外傷；アテローム性動脈硬化症；放射線曝露；緑内障；毒素曝露；機械的損傷；炎症；胃潰瘍；潰瘍性大腸炎；自己免疫疾患；感染症（細菌、ウイルス、真菌または寄生虫の感染）；などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００４９】
本発明の化合物が投与される対象は、哺乳動物、好ましくはヒトである。
【００５０】
本発明の化合物の有効量は、当業者が適宜決定することができる。対象への投与に適した量は、患者群（年齢、性別、体重等）、治療対象となる状態の性質及び重症度、投与する特定の化合物及びその投与経路に応じて当業者、例えばヒトの場合は医師によって、適宜決定することができる。例えば、本願発明の化合物の有効量は、０．１μｇ／ｋｇ／日〜１００μｇ／ｋｇ／日であってもよい。
【００５１】
本発明の化合物は、当該技術分野において既知のいずれの方法で投与してもよい。例えば、経口投与、非経口投与が含まれる。経口投与に適した製剤の例には、錠剤、カプセル剤、丸薬、粉末剤、トローチ剤、エリキシル剤、懸濁剤、シロップ剤及びカシェ剤が含まれる。非経口投与する場合は、例えば、静脈内注射、筋肉内注射及び皮下注射を含む注射剤、ならびに点滴剤、が含まれる。
【００５２】
化粧用組成物
ＨＳＰ７０の誘導は、メラニン産生を抑制する効果があることが知られている。
【００５３】
本発明の化合物は細胞におけるＨＳＰ７０を誘導することから、本発明の化合物を含む化粧用組成物が提供される。好ましい態様において、本発明の化粧用組成物はメラニン産生抑制のために使用するものである。化粧用組成物は、本発明の化合物のほかに化粧品として配合可能なビヒクルおよび／または担体を含んでいてもよい。ビヒクルおよび／または担体は特に限定されず、当該技術分野において既知のものから当業者が適宜選択することができる。
【００５４】
別の態様において、本発明の化合物または本発明の化粧用組成物を対象に適用することを含む、美容方法が提供される。好ましい態様において、当該方法はメラニン産生抑制のための美容方法である。
【００５５】
本発明の化合物を含む化粧用組成物は、化粧水、乳液、クリーム、美容液、パック等の形態であってよい。化粧用組成物中に含まれる本発明の化合物の量は、当業者が適宜決定することができる。例えば、本発明の化粧用組成物は、本願発明の化合物を０．００１ｍｇ／ｍｌ〜０．９ｍｇ／ｍｌの量で含んでいてもよい。
【実施例】
【００５６】
以下、実施例により本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００５７】
実施例１：合成
（ａ）材料と方法
試薬は、Aldrich、Fluka、関東化学株式会社、ナカライテスク株式会社、東京化成工業株式会社、及び和光純薬工業株式会社より購入した。薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）は、プレコートプレート（Merck ＴＬＣシート  シリカ６０  Ｆ２５４および富士シリシア化学株式会社  ＴＬＣシート  クロマトレックスＮＨシリカ）上で行った。クロマトグラフィーは、シリカゲル６０Ｎ（４０〜１００メッシュ）およびＮＨシリカゲルクロマトレックス（ＮＨ、１００〜２００メッシュ）（富士シリシア化学株式会社）で行った。融点は柳本融点測定装置を用い、補正を行わずに決定した。ＮＭＲスペクトル（JEOL JNM-AL300MHz）はＴＭＳを参照として測定した。赤外分光スペクトルは、JASCO FT/IR-410またはJEOL JIR-6500W（パーキンエルマー製／Frontierシリーズ）により記録した。試料は、ＫＢｒディスクもしくはフィルムとして、またはATR法により調製した。マススペクトル（ＥＩ）及び高分解能マススペクトル（ＨＲＭＳ）はJEOL JMSDX303HFによって記録した。ＨＲＭＳは、３−ニトロベンジルアルコール（ＮＢＡ）をマトリックスとする陽イオン高速原子衝撃（ＦＡＢ）を用いて記録した。
【００５８】
（ｂ）４−ジメチルアミノピコリンアルデヒド（化合物２）の合成
【００５９】
【化５】
2016160223.tif 000006
【００６０】
アルゴン雰囲気下、４−ジメチルアミノピリジン（化合物１）（３ｇ、２４．５７ｍｍｏｌｌ）を蒸留ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）（１６０ｍｌ）中に溶解した。ＢＦ３・ＯＥｔ２（４．６ｍｌ、３６．８４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を０℃で１時間撹拌した。ｔ−ＢｕＬｉ（２６ｍｌ、４９．１２ｍｍｏｌ）を−７８℃で滴下して加えた。ＤＭＦ（ジメチルホルムアミド）（５．０ｍｌ、９８．２４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を−７８℃で４時間撹拌した後、一晩かけて−７８℃から室温にした。Ｈ２Ｏ飽和水性ＮａＨＣＯ３の溶液（１：１、１００ｍｌ）を加え、過剰のＴＨＦを減圧下で留去した後、ＤＣＭ（ジクロロメタン）（５０ｍｌ×５）、次いでブライン（５０ｍｌ）で抽出した。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣を、さらなる精製を行わずに次の工程に使用した。化合物２の同定のための純粋な試料は、フラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ）によって粘稠性のある黄色の油状物として得た。（J. Org. Chem. 2012, 77, 9915-9920）
1H NMR (300 MHz, CDCL3) δ 9.95 (s, 1H), 8.34 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.62 (dd, J = 5.9, 2.8 Hz, 1H), 3.03 (s, 6H).
FAB-MS (m/z): 151 [M+H]+.
（ｃ）２−（ジエトキシメチル）−Ｎ，Ｎ−ジメチルピリジン−４−アミン（化合物３）の合成
【００６１】
【化６】
2016160223.tif 000007
【００６２】
蒸留ＥｔＯＨ（１４０ｍｌ）中の化合物２（粗精製物）の溶液に、オルトギ酸トリエチル（７．５ｍｌ、４４．１８ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（６．７２ｇ、３５．３４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を、アルゴン雰囲気下、４８時間灌流し、真空中で濃縮した。Ｈ２Ｏ飽和水性ＮａＨＣＯ３の溶液（１：１、６０ｍｌ）を加え、ＤＣＭ（５０ｍｌ×５）、次いでブライン（５０ｍｌ）で抽出した。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲル上のクロマトグラフィーにかけ（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝３０：１から５：１で溶出）、茶色の油状物として化合物３を得た（３．０９ｇ、２工程で５６％）。
【００６３】
1H NMR (300 MHz, CDCL3) δ 8.18 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.42 (dd, J = 6.0, 2.7 Hz, 1H), 5.33 (s, 1H), 3.72 (dq, J = 9.5, 7.1 Hz, 2H), 3.59 (dq, J = 9.5, 7.0 Hz, 2H), 2.99 (s, 6H), 1.24 (t, J = 7.1 Hz, 6H). 13C NMR (75 MHz, CDCL3) δ 158.52, 155.35, 149.23, 106.57, 103.71, 103.37, 62.61, 39.24, 15.26. 
HRMS (FAB). C12H21N2O2について、計算値: 224.1525、実測値: 224.1608.
（ｄ）６−（ジエトキシメチル）−４−（ジメチルアミノ）ピコリンアルデヒド（化合物４）の合成
【００６４】
【化７】
2016160223.tif 000008
【００６５】
アルゴン雰囲気下、蒸留ＴＨＦ（１６ｍｌ）中に化合物３を溶解した。ＢＦ３・ＯＥｔ２（０．３ｍｌ、２．４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を０℃で１時間撹拌した。ｔ−ＢｕＬｉ（２．５ｍｌ、４．７２ｍｍｏｌ）を−７８℃で滴下して加えた。ＤＭＦ（０．３３ｍｌ、６．４８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を−７８℃で４時間撹拌した後、一晩かけて−７８℃から室温にした。Ｈ２Ｏ飽和水性ＮａＨＣＯ３の溶液（１：１、６０ｍｌ）を加え、過剰のＴＨＦを減圧下で留去した後、ＤＣＭ（３０ｍｌ×５）、次いでブライン（３０ｍｌ）で抽出した。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲル上のクロマトグラフィーにかけ（ｎ−ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝１：１で溶出）、薄い黄色の固体として化合物４を得た（３２１ｍｇ、５８％）。
【００６６】
1H NMR (300 MHz, CDCL3) δ 9.99 (s, 1H), 7.12 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 6.97 (d, J= 2.6 Hz, 1H), 5.41 (s, 1H), 3.80 - 3.69 (m, 2H), 3.66 - 3.55 (m, 2H), 3.06 (s, 6H), 1.25 (t, J = 7.1 Hz, 6H).
13C NMR (75 MHz, CDCl3) δ 15.2, 39.4, 62.6, 103.1, 104.2, 106.8, 152.6, 155.6, 159.2, 194.7.
FAB-MS (m/z): 253 [M+H]+.
（ｅ）４−（ジメチルアミノ）ピリジン−２，６−ジカルバルデヒド（化合物５）の合成
【００６７】
【化８】
2016160223.tif 000009
【００６８】
化合物５の合成は、Tetrahedron Lett., Vol.34, p.8497, 1993の記載に従って行った。具体的には、以下の手順で合成した。ＥｔＯＨ（１ｍｌ）中の化合物４（２３０ｍｇ、０．９１ｍｍｏｌ）の溶液に６Ｎ  ＨＣｌを加え、そしてアルゴン雰囲気下で４時間灌流した後、真空中で濃縮した。Ｈ２Ｏ飽和水性ＮａＨＣＯ３の溶液（１：１、６０ｍｌ）を加え、そしてＥｔＯＡｃ（５０ｍｌ×３）、次いでブライン（３０ｍｌ）で抽出した。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、真空中で濃縮し、黄色の固体として化合物５を得た（１５９ｍｇ、９８％）。
【００６９】
1H NMR (300 MHz, CDCL3) δ 10.06 (s, 2H), 7.31 (s, 2H), 3.13 (s, 6H).
13C NMR (75 MHz, CDCL3) δ 194.06, 155.72, 146.91, 107.50, 39.62.
（ｆ）（Ｓ）−メチル  ２−（（（６−（ジエトキシメチル）−４−（ジメチルアミノ）ピリジン−２−イル）メチル）アミノ）−３−（１Ｈ−イミダゾール−４−イル）プロパノエート（化合物７）の合成
【００７０】
【化９】
2016160223.tif 000010
【００７１】
Ｈ−Ｈｉｓ−ＯＭｅの塩酸塩を飽和Ｎａ２ＣＯ３水溶液およびＣＨＣｌ３を用いて抽出し、中性のヒスチジンメチルエステル（１７５ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ）を得た。次いでこれを３ｍｌのＤＣＥ（ジクロロエタン）に溶解し、そして化合物４（２６０ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ）を加えた。ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（２５０ｍｇ、１．１８ｍｇ）を加え、そして混合物を、アルゴン雰囲気下、室温で２４時間撹拌した。飽和水性ＮａＨＣＯ３の溶液（５ｍｌ）を加え、そして有機層を分離した。水層をＤＣＭ（１０ｍｌ×３）で抽出した。有機層を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をＮＨシリカゲル上のクロマトグラフィーにかけ（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝３０：１で溶出）、黄色の油状物として化合物７を得た（１４５ｍｇ、３５．８％）。
【００７２】
1H NMR (300 MHz, CDCL3) δ 7.65 (s, 1H), 6.79 (d, J = 0.7 Hz, 1H), 6.73 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 6.37 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 5.41 (s, 1H), 4.00 (d, J = 13.9 Hz, 1H), 3.77 (d, J= 13.9 Hz, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.71 - 3.56 (m, 5H), 3.10 (dd, J = 15.3, 3.8 Hz, 1H), 3.01 (s, 6H), 2.93 (dd, J = 15.3, 7.9 Hz, 1H), 1.23 (t, J = 7.1 Hz, 6H).
13C NMR (75 MHz, CDCL3) δ 174.49, 158.85, 158.29, 155.89, 135.95, 130.00, 121.60, 104.94, 102.81, 102.67, 62.17, 61.99, 60.65, 52.71, 52.16, 39.37, 15.28, 28.70.
IR (Film) 3570, 2977, 2886, 1733, 1608, 1549, 1509, 1441, 1391, 1173, 1110, 1060, 734 cm-1;
MS (FAB) m/z 406 (M+H)+.
HRMS (FAB). C20H32N5O4について、計算値：406.2454. 実測値: 406.2484. 
（ｇ）（Ｓ）−メチル  ２−（（（４−ジメチルアミノ）−６−ホルミルピリジン−２−イル）メチル）アミノ）−３−（１Ｈ−イミダゾール−４−イル）プロパノエート（化合物８）の合成
【００７３】
【化１０】
2016160223.tif 000011
【００７４】
ＭｅＯＨと水性０．４Ｎ  ＨＣｌの混合溶媒（２：１、１２ｍｌ）中の化合物７の溶液を加熱し、１．５時間灌流した。室温まで冷却した後、反応溶液をＤＣＭ（１０ｍｌ×２）で洗浄した。水層を、飽和水性Ｎａ２ＣＯ３でｐＨ８に調整し、そしてＤＣＭ（２０ｍｌ×３）で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、そして真空中で濃縮した。残渣をさらなる精製を行わずに次の工程に使用した。
【００７５】
（ｈ）（Ｓ）−メチル  ２−（（（６−（（（（Ｓ）−３−（１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−１−メトキシ−１−オキソプロパン−２−イル）アミノ）メチル）−４−（ジメチルアミノ）ピリジン−２−イル）メチル）アミノ）−３−（１−トリチル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）プロパノエート（化合物１０／ＨＰＨ−１Ｔｒｔ）の合成
【００７６】
【化１１】
2016160223.tif 000012
【００７７】
１０ｍｌ  ＤＣＥ中の化合物８（３４５ｍｇ、粗精製物）の溶液に、化合物９（４５２ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）およびＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（２６６ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を、アルゴン雰囲気下、室温で４８時間撹拌した。飽和水性ＮａＨＣＯ３の溶液（１０ｍｌ）を加え、有機層を分離した。水層をＤＣＭ（２０ｍｌ×３）で抽出した。有機層を合わせてＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をＮＨシリカゲル上のクロマトグラフィーにかけ（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝１００：１で溶出）、薄い黄色の固体として化合物１０（ＨＰＨ−１Ｔｒｔ）を得た（４１３ｍｇ、２工程で５２％）。
【００７８】
1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.55 (d, J= 1.1Hz, 1H), 7.35 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 7.34 - 7.08 (m, 15H), 6.82 (s, 1H), 6.67 (d, J= 1.4 Hz, 1H), 6.53 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.52 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 3.76 (dd, J = 14.2, 4.4 Hz, 2H),3.72 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 3.34 - 3.29 (m, 4H), 2.95 (s, 6H), 3.01 - 2.88 (m, 4H).
13C NMR (75 MHz, CD3OD) δ 175.93, 175.86, 159.49, 157.62, 143.77, 139.57, 137.94, 136.37, 131.00, 129.48, 129.39, 121.38, 104.87, 104.77, 76.85, 62.29, 62.04, 53.74, 53.66, 52.32, 52.29, 39.38, 32.69.
IR (KBr)  3201, 1736, 1604, 1550, 1442, 1392, 1169, 995, 829, 756, 702 cm-1.
MS (FAB) m/z 727.3 (M+H)+.
HRMS (FAB). C42H47N8O4について、計算値: 727.3720. 理論値: 727.3721.
（ｉ）（２Ｓ，２’Ｓ）−ジメチル  ２，２’−（（（４−（ジメチルアミノ）ピリジン−２，６−ジイル）ビス（メチレン））ビス（アザンジイル））ビス（３−（１−トリチル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）プロパノエート）（化合物１１／ＨＰＨ−２Ｔｒｔ）の合成
【００７９】
【化１２】
2016160223.tif 000013
【００８０】
化合物１１（ＨＰＨ−２Ｔｒｔ）の合成は、J. Med. Chem., Vol.38, p.3264, 1995の記載に従って行った。具体的には、以下の手順で合成した。
【００８１】
２０ｍｌのＤＣＥ中の化合物９（１．０３２ｇ、２．５１ｍｍｏｌ）の溶液に、化合物５（２２５ｍｇ、１．２６ｍｍｏｌ）およびＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（１．１ｇ、５．０２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を、アルゴン雰囲気下、室温で４８時間撹拌した。飽和水性ＮａＨＣＯ３の溶液（２０ｍｌ）を加え、有機層を分離した。水層をＤＣＭ（２５ｍｌ×３）で抽出した。有機層を合わせてＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をＮＨシリカゲル上のクロマトグラフィーにかけ（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝１００：１で溶出）、黄色の固体として化合物１１を得た（２６９ｍｇ、２２％）。
【００８２】
（ｊ）（２Ｓ，２’Ｓ）−ジメチル  ２，２’−（（（４−（ジメチルアミノ）ピリジン−２，６−ジイル）ビス（メチレン））ビス（アザンジイル））ビス（３−（１Ｈ−イミダゾール−４−イル）プロパノエート）（化合物１２／ＨＰＨ）の合成
【００８３】
【化１３】
2016160223.tif 000014
【００８４】
化合物１２（ＨＰＨ）は、Tetrahedron Lett., Vol.34, p.8497, 1993の記載に従って行った。具体的には、以下の手順で合成した。
【００８５】
９０％水性ＡｃＯＨ（１０ｍｌ）中の化合物１１（１３０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）の溶液を、６０℃で１．５時間加熱した。室温まで冷却した後、反応混合物を飽和水性Ｎａ２ＣＯ３でｐＨ８に調整し、ＤＣＭ（１５ｍｌ×３）で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をＮＨシリカゲル上のクロマトグラフィーにかけ（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝２０：１で溶出）、茶色の油状物として化合物１２を得た（２０ｍｇ、３１．８％）。
【００８６】
（ｋ）（２Ｓ，２’Ｓ）−ジメチル  ２，２’−（（（４−（ジメチルアミノ）ピリジン−２，６−ジイル）ビス（メチレン））ビス（アゼンジイル））ビス（３−（１−ベンジル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）プロパノエート）（化合物１４／ＨＰＨ−２Ｂｚｌ）の合成
【００８７】
【化１４】
2016160223.tif 000015
【００８８】
１０ｍｌのＤＣＥ中の化合物１３（４５８ｍｇ、１．７７ｍｍｏｌ）の溶液に、化合物５（１５７ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）およびＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（７５０ｍｇ、３．５４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を、アルゴン雰囲気下、室温で２４時間撹拌した。飽和水性ＮａＨＣＯ３の溶液（１０ｍｌ）を加え、有機層を分離した。水層をＤＣＭ（１５ｍｌ×３）で抽出した。有機層を合わせてＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をＮＨシリカゲル上のクロマトグラフィーにかけ（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝１００：１で溶出）、茶色の油状物として化合物１４を得た（０．１８ｇ、３０．７％）。
【００８９】
1H NMR (300 MHz, CDCL3) δ 7.34 (s, 2H), 7.29 - 7.19 (m, 6H), 7.10 - 6.98 (m, 4H), 6.62 (s, 2H), 6.37 (s, 2H), 4.94 (s, 4H), 3.76 (d, J = 14.1 Hz, 2H), 3.59 (dd, J = 14.4, 7.8 Hz, 4H), 3.52 (s, 6H), 2.90 (d, J= 6.6 Hz, 4H), 2.86 (s, 6H), 2.60 (bs, 2H).
13C NMR (75 MHz, CDCL3) δ 175.12, 158.97, 155.65, 138.95, 136.98, 136.47, 128.98, 128.20, 127.27, 116.94, 103.22, 61.12, 53.58, 51.53, 50.65, 39.16, 32.23.
IR (ATR) 2947, 1730, 1599, 1498, 1392, 1163, 984, 820, 727, 692 cm-1.
MS (FAB) m/z 665.4 (M+H)+.
HRMS (FAB). C37H45N8O4について、計算値: 665.3564. 実測値: 665.3569.
（ｌ）（Ｓ）−メチル  ２−（（（６−（（（（Ｓ）−３−（１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−１−メトキシ−１−オキソプロパン−２−イル）アミノ）メチル）−４−（ジメチルアミノ）ピリジン−２−イル）メチル）アミノ）−３−（１−ベンジル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）プロパノエート（化合物１８／ＨＰＨ−１Ｂｚｌ）の合成
【００９０】
【化１５】
2016160223.tif 000016
【００９１】
２０ｍＬのＤＣＥ中の化合物１７（１９５ｍｇ，０．７５ｍｍｏｌ）の溶液に、化合物８（１９９ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）およびＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（４５０ｍｇ、２．１２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を、アルゴン雰囲気下、室温で４８時間撹拌した。飽和水性ＮａＨＣＯ３の溶液（１０ｍｌ）を加え、有機層を分離した。水層をＤＣＭ（２０ｍｌ×３）で抽出した。有機層を合わせてＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をＮＨシリカゲル上のクロマトグラフィーにかけ（ＥｔＯＨ：ＭｅＯＨ＝１０：１で溶出）、黄色の油状物として化合物１８を得た（４０ｍｇ、１１．６％）。
【００９２】
1H NMR (300 MHz, CDCL3) δ 7.51 (d, J= 0.9 Hz, 1H), 7.44 (d, J= 1.3 Hz, 1H), 7.37 - 7.29 (m, 3H), 7.15 - 7.09 (m, 2H), 6.82 (s, 1H), 6.67 (d, J= 1.1 Hz, 1H), 6.44 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 6.28 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.02 (s, 2H), 3.92 (d, J= 13.7 Hz, 1H), 3.87 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 3.74 - 3.60 (m, 4H), 3.72 (s, 3H), 3.61 (s, 3H), 3.08 (dd, J= 15.0 Hz, 4.0 Hz, 1H), 3.03 - 2.88 (m, 3H), 2.96 (s, 6H).
13C NMR (75 MHz, CDCL3) δ 175.17, 174.62, 159.13, 158.64, 155.70, 138.78, 137.12, 136.36, 135.38, 129.12, 128.39, 127.42, 117.09, 103.90, 103.69, 61.26, 60.54, 53.75, 53.07, 52.03, 51.72, 50.82, 39.24, 32.22.
IR (ATR) 3079, 2931, 1731, 1602, 1548 cm-1.
MS (FAB) m/z 575.5 (M+H)+.
HRMS (FAB). C30H39N8O4について、計算値: 575.3094. 実測値: 575.3065.
（ｍ）（２Ｓ，２’Ｓ）−ジメチル  ２，２’−（（（４−（ジメチルアミノ）ピリジン−２，６−ジイル）ビス（メチレン））ビス（アザンジイル））ビス（３−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）プロパノエート）（化合物２３／ＨＰＨ−２−Ｍｅ）の合成
【００９３】
【化１６】
2016160223.tif 000017
【００９４】
２０ｍＬのＤＣＥ中の化合物２１（３３１ｍｇ、１．８１ｍｍｏｌ）の溶液に、化合物５（１８７ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）およびＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（７５０ｍｇ、３．５４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を、アルゴン雰囲気下、室温で７２時間撹拌した。飽和水性ＮａＨＣＯ３の溶液（１５ｍｌ）を加え、有機層を分離した。水層をＤＣＭ（２５ｍｌ×３）で抽出した。有機層を合わせてＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をＮＨシリカゲル上のクロマトグラフィーにかけ（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝１００：０から３０：１で溶出）、茶色の油状物として化合物２３を得た（５５ｍｇ、１０．２％）。
【００９５】
1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.49 (s, 2H), 6.86 (s, 2H), 6.65 (s, 2H), 3.86 (dd, J = 15.2, 2.6 Hz, 2H), 3.72 (dd, J = 15.2, 2.6 Hz, 2H),3.65 (s, 12H), 3.60 (t, J= 6.7 Hz, 2H), 3.08 (s, 6H), 2.94 (dd, J = 14.4, 6.7 Hz, 2H), 2.86 (dd, J = 14.4, 6.7 Hz, 2H).
13C NMR (75 MHz, CD3OD) δ 175.97, 158.54, 156.66, 156.57, 139.06, 138.60, 119.89, 104.96, 62.10, 52.33, 51.46, 39.75, 33.60, 32.47. IR (ATR) 2918, 1728, 1601, 1547 cm-1.
MS (FAB) m/z 513.5 (M+H)+.
HRMS (FAB). C25H37N8O4: について計算値: 513.2938. 実測値: 513.2928.
（ｎ）（Ｓ）−メチル  ２−（（（６−（（（（Ｓ）−３−（１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−１−メトキシ−１−オキソプロパン−２−イル）アミノ）メチル）−４−（ジメチルアミノ）ピリジン−２−イル）メチル）アミノ）−３−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）プロパノエート（化合物２２／ＨＰＨ−１−Ｍｅ）の合成
【００９６】
【化１７】
2016160223.tif 000018
【００９７】
１５ｍＬのＤＣＥ中の化合物２１（１８０ｍｇ、０．９８ｍｍｏｌ）の溶液に、化合物８（１５２ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）およびＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（７５０ｍｇ、３．５４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を、アルゴン雰囲気下、室温で４８時間撹拌した。飽和水性ＮａＨＣＯ３の溶液（１０ｍｌ）を加え、有機層を分離した。水層をＤＣＭ（１５ｍｌ×３）で抽出した。有機層を合わせてＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をＮＨシリカゲル上のクロマトグラフィーにかけ（ＥｔＯＨ：ＭｅＯＨ＝５：１で溶出）、薄い黄色の油状物として化合物２２を得た（１７．７ｍｇ、７．７％）。
【００９８】
1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.56 (d, J= 1.1 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 6.85 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 6.84 (s, 1H), 6.54 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.52 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 3.76 (dd, J = 14.3, 4.2 Hz, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.64 (s, 3H), 3.64 (s, 3H), 3.61 - 3.56 (m, 4H), 3.00 (s, 6H), 2.98-2.81 (m, 4H).
13C NMR (75 MHz, CD3OD) δ 176.01, 175.95, 159.37, 159.34, 157.64, 139.00, 138.58, 136.39, 119.86, 104.90, 62.01, 53.58, 52.28, 52.25, 39.34, 33.58, 32.59. IR (ATR) 3212, 2950, 1731, 1606 cm-1.
MS (FAB) m/z 499.4 (M+H)+.
HRMS (FAB). C24H35N8O4について、計算値: 499.2781. 実測値: 499.2798.
実施例２：鉄錯体によるＤＮＡ切断活性
本発明の化合物に含まれるＨＰＨ（化合物１２）、ＨＰＨ−１Ｍｅ（化合物２２）、ＨＰＨ−２Ｍｅ（化合物２３）、ＨＰＨ−１Ｂｚｌ（化合物１８）、ＨＰＨ−２Ｂｚｌ（化合物１４）、ＨＰＨ−１Ｔｒｔ（化合物１０）、及びＨＰＨ−２Ｔｒｔ（化合物１１）について、これらの化合物の鉄（Fe(II)）錯体によるＤＮＡ切断活性について検討した。
【００９９】
プラスミドベクターｐＵＣ１９（２μｇ）、化合物（３０μＭ）、硫酸鉄（３０μＭ）、過酸化水素（３０μＭ）、およびアスコルビン酸ナトリウム（３０μＭ）を１０ｍＭトリスホウ酸バッファー中で混合し、３７℃で９０分間インキュベーションした。その後、エチジウムブロマイドを含むアガロースゲルで電気泳動を行い、ＵＶ照射してＤＮＡの移動度を調べた。コントロール（−）には、上記化合物以外のすべてが含まれる。
【０１００】
結果を図１に示す。ＨＰＨ−２Ｔｒｔの鉄錯体は、プラスミドＤＮＡを完全に分解した。これに対し、ＨＰＨ−１Ｔｒｔの鉄錯体は、プラスミドＤＮＡをある程度分解した。ＨＰＨ、ＨＰＨ−１Ｍｅ、ＨＰＨ−２Ｍｅ、ＨＰＨ−１Ｂｚｌ、ＨＰＨ−２Ｂｚｌの鉄錯体は、プラスミドＤＮＡを分解しなかった。
【０１０１】
これらの結果は、ＨＰＨ−１ＴｒｔおよびＨＰＨ−２Ｔｒｔの鉄錯体は、ＤＮＡを切断可能な程度に酵素を活性化することを示すものである。
【０１０２】
実施例３：神経系細胞におけるＨＳＰ７０タンパク質の誘導
ＨＰＨ（化合物１２）、ＨＰＨ−１Ｍｅ（化合物２２）、ＨＰＨ−２Ｍｅ（化合物２３）、ＨＰＨ−１Ｂｚｌ（化合物１８）、ＨＰＨ−２Ｂｚｌ（化合物１４）、ＨＰＨ−１Ｔｒｔ（化合物１０）、及びＨＰＨ−２Ｔｒｔ（化合物１１）について、神経系細胞におけるＨＳＰ７０タンパク質の誘導について検討した。
【０１０３】
２４穴プレートに２．５×１０５細胞／０．３ｍｌ／ウェルのＰＣ１２細胞（ラット副腎髄質由来の褐色細胞種より樹立した神経系細胞株）を撒き、１０μＭの化合物を加えて３７℃で４時間インキュベーションした。その後に細胞を溶解して、抗ＨＳＰ７０抗体（Santa Cruz Biotechnology, HSP70/HSC70 (W27)）および抗β−アクチン抗体（Sigma-Aldrich, monoclonal anti-β-actin clone AC-15）を用いてウエスタンブロット解析を行った。比較のため、既知のＨＳＰ誘導剤であるゲラニルゲラニルアセトン（ＧＧＡ）についても同様に、上記の細胞におけるＨＳＰ７０タンパク質の誘導を検討した。
【０１０４】
結果を図２に示す。ＨＰＨ−１Ｍｅ（化合物２２）、ＨＰＨ−２Ｍｅ（化合物２３）、ＨＰＨ−１Ｂｚｌ（化合物１８）、ＨＰＨ−２Ｂｚｌ（化合物１４）、及びＨＰＨ−１Ｔｒｔ（化合物１０）は、ＰＣ１２細胞においてＨＳＰ７０タンパク質を誘導した。特にＨＰＨ−１Ｔｒｔ（化合物１０）は、ＰＣ１２細胞においてＨＳＰ７０タンパク質を顕著に誘導した。
【０１０５】
一方、既知のＨＳＰ７０誘導剤であるＧＧＡは、ＰＣ１２細胞においてＨＳＰ７０タンパク質を誘導しなかった。
【０１０６】
実施例４：Ｔ細胞におけるＨＳＰ７０タンパク質の誘導
ＰＣ１２細胞でのＨＳＰ７０タンパク質を誘導する効果が特に高いことが確認されたＨＰＨ−１Ｔｒｔ（化合物１０）を用いて、Ｔ細胞におけるＨＳＰ７０タンパク質の誘導について検討した。
【０１０７】
ＰＣ１２細胞の代わりにＨＳＣ−Ｆ細胞（カニクイザル由来のＴ細胞株）を用いた他は、実施例３と同様にしてＨＳＰ７０タンパク質の誘導を解析した。また、既知のＨＳＰ誘導剤であるゲラニルゲラニルアセトン（ＧＧＡ）についても、Ｔ細胞におけるＨＳＰ７０タンパク質の誘導について検討した。
【０１０８】
結果を図３に示す。ＨＰＨ−１Ｔｒｔ（化合物１０）は、ＨＳＣ−Ｆ細胞においてＨＳＰ７０タンパク質を誘導した。一方、既知のＨＳＰ７０誘導剤であるＧＧＡは、ＨＳＣ−Ｆ細胞においてＨＳＰ７０タンパク質を誘導しなかった。
【産業上の利用可能性】
【０１０９】
本発明の化合物は、副作用が少ないＨＳＰ誘導剤として有用である。
【図１】
2016160223.tif 000021
【図２】
2016160223.tif 000022
【図３】
2016160223.tif 000023