(57)【要約】【課題】新規な筋肉エネルギー代謝活性化剤等を提供し、更に、医薬、食品として摂取することができる組成物を提供する。【解決手段】上記課題を解決するための本発明の技術的特徴は以下のとおりである。（１）黒ショウガ及び／又はその抽出物を有効成分とする筋肉細胞における糖輸送体遺伝子発現促進剤。（２）黒ショウガ及び／又はその抽出物を有効成分とする筋肉細胞における乳酸輸送体遺伝子発現促進剤。（３）黒ショウガ及び／又はその抽出物を有効成分とする筋肉細胞における糖取り込み促進剤。（４）黒ショウガ及び／またはその抽出物を有効成分とする筋肉細胞における乳酸取り込み促進剤。  （５）黒ショウガ及び／またはその抽出物を有効成分とする筋肉細胞におけるエネルギー代謝活性化剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
黒ショウガ及び／又はその抽出物を有効成分とする筋肉細胞における糖輸送体遺伝子発現促進剤。
【請求項２】
黒ショウガ及び／又はその抽出物を有効成分とする筋肉細胞における乳酸輸送体遺伝子発現促進剤。
【請求項３】
黒ショウガ及び／又はその抽出物を有効成分とする筋肉細胞における糖取り込み促進剤。
【請求項４】
黒ショウガ及び／またはその抽出物を有効成分とする筋肉細胞における乳酸取り込み促進剤。
【請求項５】
黒ショウガ及び／またはその抽出物を有効成分とする筋肉細胞におけるエネルギー代謝活性化剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規な筋肉エネルギー代謝活性化剤に関するものである。本発明は、飲食品、医薬品、医薬部外品等に広く利用される。
【背景技術】
【０００２】
運動時、筋肉では膨大な量のエネルギーが消費され、そのエネルギー源の大部分は糖（グルコース等）に依存していることが知られている。従って、筋肉における糖の取り込みはエネルギー生産において重要な役割を担っている。従って、筋肉における糖の取り込み量の上昇は運動時のパフォーマンスの向上が期待できる（非特許文献１参照）。
ここで、この糖の筋肉細胞への取り込みに関わっているのが、糖輸送体（GLUT4）である。
【０００３】
また、運動時、筋肉でのエネルギー生産は主に解糖系に依存しており、エネルギー源である糖は大部分が乳酸に代謝され、筋肉中に蓄積する。筋肉における乳酸の蓄積は、運動後の筋肉痛や疲れ、こりなどの症状の原因だと考えられている（乳酸アシドーシス）。しかしながら、最近の研究から乳酸は筋肉において疲労の原因物質ではなく、貴重なエネルギー源であることがわかってきた。従って、筋肉細胞における乳酸の取り込み量の上昇は、持久力の向上や運動後の疲労低減に大きな影響を及ぼす（非特許文献１参照）。ここで、乳酸の筋肉細胞への取り込みに関わっているのが、乳酸輸送体（モノカルビン酸酸輸送体MCT1）である。
【０００４】
また、従来の筋力増強剤は筋肉細胞自体を増加させることにより、筋力を増強させるものであるが、筋肉細胞を増殖させるのみでは、質がよい筋肉を作るのに十分ではなく、さらに質の高い筋肉にするためには筋肉細胞のエネルギー代謝の効率を向上させる必要があった。
【０００５】
【非特許文献１】エネルギー代謝を活かしたスポーツトレーニング
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
このような背景の下、本発明者は、黒ショウガ及びその抽出物に筋肉細胞中における糖輸送体遺伝子及び乳酸輸送体遺伝子の発現を促進し、これにより、筋肉細胞に糖及び乳酸を取り込む作用を向上させ、その結果、筋肉細胞におけるエネルギー代謝を活性化する作用を有することを見出し、本発明を完成した。
即ち、本発明は、新規な筋肉細胞におけるエネルギー代謝活性化剤を提供することにより、優れた質を有する筋肉を生成することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
上記課題を解決するための本発明の技術的特徴は以下のとおりである。
（１）黒ショウガ及び／又はその抽出物を有効成分とする筋肉細胞における糖輸送体遺伝子発現促進剤。
（２）黒ショウガ及び／又はその抽出物を有効成分とする筋肉細胞における乳酸輸送体遺伝子発現促進剤。
（３）  黒ショウガ及び／又はその抽出物を有効成分とする筋肉細胞における糖取り込み促進剤。
（４）黒ショウガ及び／またはその抽出物を有効成分とする筋肉細胞における乳酸取り込み促進剤。
（５）黒ショウガ及び／またはその抽出物を有効成分とする筋肉細胞におけるエネルギー代謝活性化剤。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】黒ショウガ抽出物における筋肉細胞内における糖輸送体GLUT4の発現量の評価結果を示すグラフである。
【図２】黒ショウガ抽出物における筋肉細胞内における乳酸輸送体MCT1の発現量の評価結果を示すグラフである。
【図３】黒ショウガ抽出物における筋肉細胞内への糖の取り込み量の結果を示すグラフである。
【図４】筋肉細胞内及び培地内の乳酸量の結果を示すグラフである。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
以下に本発明を詳細に説明する。
本発明の筋肉細胞における糖取り込み促進剤、乳酸取り込み促進剤、及び筋肉細胞におけるエネルギー代謝活性化剤（以下、これらをまとめて「エネルギー代謝活性化剤等」という。）は、黒ショウガ及び／又はその抽出物を有効成分とすることを特徴とする。
本発明に用いる「黒ショウガ」とは、ケンフェリア・パルビフローラ（Ｋａｅｍｐｆｅｒｉａ ｐａｒｖｉｆｌｏｒａ）という学名をもつ植物で、東南アジアに分布しておりショウガ科ケンフェリア属に属する。 
【００１０】
タイやラオスなどの伝承医学において、精力増進、滋養強壮、血糖値の低下、体力回復、消化器系の改善、膣帯下、痔核、痔疾、むかつき、口内炎、関節痛、胃痛の改善などに利用されている。
【００１１】
本発明に使用される黒ショウガは根茎を用いる。黒ショウガの形態は、特に限定するものではなく、未熟根茎、完熟根茎、乾燥根茎等のいずれでもよい。なお、根茎を絞って得られる搾汁液の使用も同様に好ましい。搾汁液の形態は、特に限定するものではなく液状でも濃縮乾燥した粉末状のいずれでもよい。
【００１２】
しかしながら、生の根茎や搾汁液の場合は保管に注意が必要なため、根茎をスライスして乾燥させたものがもっとも好ましい。
【００１３】
スライスした乾燥根茎を使用する場合には、抽出効率を高めるために、あらかじめ根茎を粉砕機等で４０メッシュ程度に粉砕しておくことが好ましい。
【００１４】
抽出に使用する溶媒や温度条件等については、特に限定されるものではなく、任意に選択、設定することができる。抽出溶媒としては、水、酸、塩基等といった非有機溶媒や、親水性溶媒、アセトン等といった有機溶媒を選択することができる。親水性溶媒としては、メチルアルコール、エチルアルコール、ｎ−プロピルアルコール、イソプロピルアルコール及びブチルアルコールからなる低級アルコール群から選択される１種類以上が、操作性、抽出効率の点から好ましい。ただし、有機溶媒による抽出よりもむしろ非有機溶媒による抽出が好ましく、なかでも水、温水や熱水、及びわずかに酸を添加した水、エタノールのいずれかの選択がよい。
【００１５】
このとき使用する酸としては、特に限定するものではない。ただし、入手のしやすさ及び安全性、後処理の観点から、酢酸の使用が好ましい。
【００１６】
さらに、上記の抽出において、抽出残渣に対して再度抽出工程を１回またはそれ以上繰り返すことが好ましく、この方法によれば抽出効率を向上させることができる。この場合の抽出に用いる溶媒は、同じものであっても異なるものであってもよい。
【００１７】
上記の抽出物は、そのままでも使用できるが、濾過、遠心分離及び分留といった処理を行って、不溶性物質及び溶媒を取り除くことがより好ましい。このような処理を行うことで、より純度が高くなり、応用範囲も広くなる。
その後、常法に従って抽出液に希釈、濃縮、乾燥、精製等の処理を施し、エネルギー代謝活性化剤等とする。
なお、精製方法としては、例えば、活性炭処理、樹脂吸着処理、イオン交換樹脂、液−液向流分配等の方法が挙げられるが、食品等に添加する場合には大量に使用するものではないから、未精製のままで使用してもよい。
【００１８】
抽出物及びその画分はそのままで使用することも可能であるが、必要に応じて噴霧乾燥や凍結乾燥等の手段により乾燥粉末化させて使用することも可能である。
【００１９】
本発明のエネルギー代謝活性化剤等は、各種飲食品の素材として使用することができる。飲食品としては、例えば、食用油（サラダ油）、菓子類（ガム、キャンディー、キャラメル、チョコレート、クッキー、スナック、ゼリー、グミ、錠菓等）、麺類（そば、うどん、ラーメン等）、乳製品（ミルク、アイスクリーム、ヨーグルト等）、調味料（味噌、醤油等）、スープ類、飲料（ジュース、コーヒー、紅茶、茶、炭酸飲料、スポーツ飲料等）をはじめとする一般食品や、健康食品（錠剤、カプセル等）、栄養補助食品（栄養ドリンク等）が挙げられる。これらの飲食品に本発明のエネルギー代謝活性化剤等を適宜配合するとよい。
【００２０】
これら飲食品には、その種類に応じて種々の成分を配合することができ、例えば、ブドウ糖、果糖、ショ糖、マルトース、ソルビトール、ステビオサイド、コーンシロップ、乳糖、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、コハク酸、乳酸、Ｌ−アスコルビン酸、ｄｌ−α−トコフェロール、エリソルビン酸ナトリウム、グリセリン、プロピレングリコール、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル、アラビアガム、カラギーナン、カゼイン、ゼラチン、ペクチン、寒天、ビタミンＢ類、ニコチン酸アミド、パントテン酸カルシウム、アミノ酸類、カルシウム塩類、色素、香料、保存剤等の食品素材を使用することができる。さらに、健康維持機能をもった本エネルギー代謝活性化剤等には、他の抗酸化物質や健康食品素材などの配剤、例えば、抗酸化物質（還元型アスコルビン酸（ビタミンC）、ビタミンE、還元型グルタチン、トコトリエノール、ビタミンＡ誘導体、リコピン、ルテイン、アスタキサンチン、ゼアキサンチン、フコキサンチン、尿酸、ユビキノン、コエンザイムＱ10、葉酸、ニンニクエキス、アリシン、セサミン、リグナン類、カテキン、イソフラボン、カルコン、タンニン類、フラボノイド類、クマリン、イソクマリン類、ブルーベリーエキス）、健康食品素材（V.（ビタミン）A、V.B1、V.B2、V.B6、V.B1２、V.C、V.D、V.E、V.P、コリン、ナイアシン、パントテン酸、葉酸カルシウム、EPA、オリゴ糖、食物繊維、スクアレン、大豆レシチン、タウリン、ドナリエラ、プロテイン、オクタコサノール、卵黄レシチン、リノール酸、ラクトフェリン、マグネシウム、クロム、セレン、カリウム、ヘム鉄、カキ肉エキス、キトサン、キチンオリゴ糖、コラーゲン、コンドロイチン、ウコン、カンゾウ、クコシ、ケイヒ、サンザシ、生姜、霊芝、シジミエキス、カンゾウ、クコシ、ケイヒ、サンザシ、生姜、霊芝、オオバコ、カミツレ、カモミール、セイヨウタンポポ、ハイビスカス、ハチミツ、ボーレン、ローヤルゼリー、ライム、ラベンダー、ローズヒップ、ローズマリー、セージ、ビフィズス菌、フェーカリス菌、ラクリス、小麦胚芽油、ゴマ油、シソ油、大豆油、中鎖脂肪酸、アガリクス、イチョウ葉エキス、ウコン、コンドロイチン、玄米胚芽エキス、レイシ、タマネギ、DHA、 EPA、 DPA、甜茶、冬虫夏草、ニンニク、蜂の子、パパイヤ、プーアル、プロポリス、メグスリの木、ヤブシタケ、ロイヤルゼリー、ノコギリヤシ、ヒアルロン酸、コラーゲン、ギャバ、ハープシールオイル、サメ軟骨、グルコサミン、レシチン、ホスファチジルセリン、田七ニンジン、桑葉、大豆抽出物、エキナセア、エゾウコギ、大麦抽出物、オリーブ葉、オリーブ実、ギムネマ、バナバ、サラシア、ガルシニア、キトサン、セントジョーンズワート、ナツメ、ニンジン、パッションフラワー、ブロッコリー、プラセンタ、ハトムギ、ブドウ種子、ピーナッツ種皮、ビルベリー、ブラックコホシュ、マリアアザミ、月桂樹、セージ、ローズマリー、ラフマ、黒酢、ゴーヤー、マカ、紅花、亜麻、ウーロン茶、花棘、カフェイン、カプサイシン、キシロオリゴ糖、グルコサミン、ソバ、シトラス、食物繊維、プロテイン、プルーン、スピルリナ、大麦若葉、核酸、酵母、椎茸、梅肉、アミノ酸、深海鮫抽出物、ノニ、カキ肉、スッポン、シャンピニオン、オオバコ、アセロラ、パイナップル、バナナ、モモ、アンズ、メロン、イチゴ、ラズベリー、オレンジ、フコイダン、メシマコブ、クランベリー、コンドロイチン硫酸、亜鉛、鉄、セラミド、シルクペプチド、グリシン、ナイアシン、チェストツリー、L-システイン、赤ワイン葉、ミレット、ホーステール、ビオチン、センテラアジアティカ、ハスカップ、ピクノジェノール、フキ、ルバーブ、クローブ、ローズマリー、カテキン、プーアル、クエン酸、ビール酵母、メリロート、ブラックジンガー、ショウガ、ガジュツ、ナットウキナーゼ、ベニコウジ、トコトリエノール、ラクトフェリン、シナモン、韃靼ソバ、ココア、ユズ種子エキス、シソの実エキス、ライチ種子エキス、月見草エキス、黒米エキス、α−リポ酸、ギャバ、生コーヒー豆エキス、フキエキス、キウイ種子エキス、温州みかんエキス、アカショウガエキス、アスタキサンチン、クルミエキス、ニラ種子エキス、赤米エキス、カンカエキス、白キクラゲ多糖体、フコキサンチン、リンゴンベリーエキス、桜の花エキス、マキベリーエキス、ササクレヒトヨタケエキス、米ポリアミン、小麦ポリアミン）なども配合することができる。
【００２１】
具体的な製法としては、エネルギー代謝活性化剤等を粉末セルロースとともにスプレードライまたは凍結乾燥し、これを粉末、顆粒、打錠または溶液にすることで容易に飲食品（インスタント食品等）に含有させることができる。また、エネルギー代謝活性化剤等を、例えば、油脂、エタノール、グリセリンあるいはこれらの混合物に溶解して液状にし、飲料に添加するか、固形食品に添加することが可能である。必要に応じてアラビアガム、デキストリン等のバインダーと混合して粉末状あるいは顆粒状にし、飲料に添加するか固形食品に添加することも可能である。
【００２２】
本発明のエネルギー代謝活性化剤等を飲食品に適用する場合の添加量としては、健康を維持することが主な目的であるので、飲食品に対して有効成分の含量が合計１〜２０wt％であるのが好ましい。
【００２３】
本発明のエネルギー代謝活性化剤等は、薬品（医薬品および医薬部外品を含む。）の素材として用いてもよい。薬品製剤用の原料に、本発明のエネルギー代謝活性化剤等を適宜配合して製造することができる。本発明のエネルギー代謝活性化剤等に配合しうる製剤原料としては、例えば、賦形剤（ブドウ糖、乳糖、白糖、塩化ナトリウム、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、カカオ脂、硬化植物油、カオリン、タルク等）、結合剤（蒸留水、生理食塩水、エタノール水、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン溶液、カルボキシメチルセルロース、リン酸カリウム、ポリビニルピロリドン等）、崩壊剤（アルギン酸ナトリウム、カンテン、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、デンプン、乳糖、アラビアゴム末、ゼラチン、エタノール等）、崩壊抑制剤（白糖、ステアリン、カカオ脂、水素添加油等）、吸収促進剤（第四級アンモニウム塩基、ラウリル硫酸ナトリウム等）、吸着剤（グリセリン、デンプン、乳糖、カオリン、ベントナイト、硅酸等）、滑沢剤（精製タルク、ステアリン酸塩、ポリエチレングリコール等）などが挙げられる。
【００２４】
本発明によるエネルギー代謝活性化剤等の投与方法は、一般的には、錠剤、丸剤、軟・硬カプセル剤、細粒剤、散剤、顆粒剤、液剤等の形態で経口投与することができるが、非経口投与であってもよい。非経口剤として投与する場合は、溶液の状態、または分散剤、懸濁剤、安定剤などを添加した状態で、ハップ剤、ローション剤、軟膏剤、チンキ剤、クリーム剤などの剤形で適用することができる。
投与量は、投与方法、病状、患者の年齢等によって変化し得るが、大人では、通常、１日当たり有効成分として０．５〜１０００ｍｇ、子供では通常０．５〜５００ｍｇ程度投与することができる。
【実施例】
【００２５】
以下、本発明を実施例に基づいて説明する。
実施例：黒ショウガ抽出物の調製
黒ショウガをスライスして乾燥させ、乾燥物１００ｋｇを得た。この乾燥物１０ｋｇを破砕し、エタノール濃度７０wt％の含水エタノール８０℃で２時間抽出し、エタノール抽出液を乾固させて黒ショウガ抽出物３．２５ｋｇを得た。
なお、黒ショウガ抽出物の含有成分をＨＰＬＣ分析したところ、5,7-ジメトキシフラボン8ｗｔ％以上、総フラボノイド35ｗｔ％以上含有されていた。
【００２６】
試験例１；グルコース輸送体GLUT4遺伝子発現促進作用の評価
マウス筋芽細胞株C2C12（FCS10%含有D‐MEM培地で培養）を24well plateに播種し（1×104 cell/ml）、24時間培養した。その後、培地を分化誘導用の培地（FCS1%含有D‐MEM培地）に交換し、黒ショウガ抽出物（5,7-ジメトキシフラボン含量：10.4%、総フラボノイド含量：36.7%）を終濃度0.1,1,3,10μg/ml（DMSO濃度0.1%（v/v））の濃度になるように加え1週間培養した。また、コントロールにはDMSOを培地に対して0.1%（v/v）の濃度で添加した。１週間培養後、細胞からRNAを抽出した。得られたRNAを定量型RT-PCR法を用いてグルコース輸送体GLUT4のmRNA発現量を定量した。この際、内因性コントロールとしてGAPDHを用いた。その結果を図１に示す。
【００２７】
結果及び試験例１における実施例の効果
図1に示すように、黒ショウガ抽出物を添加し一週間培養したマウス筋芽細胞株（C2C12）における糖輸送体GLUT4の発現を定量した結果、黒ショウガ抽出物の添加により有意に発現量の上昇が認められた。
【００２８】
試験例２；乳酸取り込み輸送体遺伝子発現促進作用の評価
マウス筋芽細胞株C2C12（FCS10%含有D‐MEM培地で培養）を24well plateに播種し（1×104 cell/ml）、24時間培養した。その後、培地を分化誘導用の培地（FCS1%含有D‐MEM培地）に交換し、黒ショウガ抽出物（5,7-ジメトキシフラボン含量：：10.4%、総フラボノイド含量：36.7%）を終濃度0.1,1,3,10μg/ml（DMSO濃度0.1%（v/v））の濃度になるように加え1週間培養した。また、コントロールにはDMSOを培地に対して0.1%（v/v）の濃度で添加した。1週間培養した後、細胞を回収し、細胞からRNAを抽出した。得られたRNAを定量型RT-PCR法を用いて乳酸取り込み輸送体MCT1のmRNA発現量を定量した。この際、内因性コントロールとしてGAPDHを用いた。その結果を図２に示す。
【００２９】
図２に示すように、黒ショウガを添加し一週間培養したマウス筋芽細胞株C2C12におけるモノカルビン酸輸送体（乳酸輸送体）MCT1の発現を定量した結果、黒ショウガ抽出物の添加により発現量の上昇が認められた。
【００３０】
試験例３；筋肉細胞における糖の取り込み作用の評価
マウス筋芽細胞株C2C12（FCS10%含有D‐MEM培地で培養）を48well plateに播種し（1×104 cell/ml）、24時間培養した。その後、培地を分化誘導用の培地（FCS1%含有D‐MEM培地）に交換し、黒ショウガ抽出物（5,7-ジメトキシフラボン含量：10.4%、総フラボノイド含量：36.7%）を終濃度0.1,1,3,10μg/ml（DMSO濃度0.1%（v/v））の濃度になるように加え1週間培養した。また、コントロールにはDMSOを培地に対して0.1%（v/v）の濃度で添加した。1週間培養した細胞に対して、2-デオキシグルコース（2-DG）を終濃度1mMになるように添加し、20分間培養した。培養後、PBSで各wellを洗浄した後、10mM Tris-HCl (pH 8.0)もしくはRIPA bufferを加え細胞を回収した。10mM Tris-HCl (pH 8.0)で回収した細胞は、2-Deoxyglucose (2DG) Uptake Measurement Kit（コスモバイオ株式会社，OKP-PMG-K01）を用いて糖の量を調べた（結果ａ）。一方、RIPA bufferで回収した細胞は、氷上で15分間放置した後、遠心分離により上清を回収し、BCA法により総タンパク質量を調べた（結果ｂ）。糖の取り込み能は、糖の量を総タンパク質量で補正した値（結果ｃ＝結果ａ／結果ｂ）を用い、黒ショウガ抽出物による糖の取り込みに及ぼす影響を算出した。その結果を図３に示す。
【００３１】
結果及び試験例３における実施例の効果
図３に示すように、Kitを用いて20分間における2DGの取り込み量を測定した結果、黒ショウガ抽出物の添加によって0.1μg/mlの低濃度から有意に糖の取り込みが活性化していることが分かった。従って、黒ショウガ抽出物は、糖輸送体GLUT4の発現上昇を介して糖の取り込み能を活性化させる作用を有することが確認された。従って、黒ショウガ抽出物は、優れた筋肉細胞における糖取り込み促進剤として用いることができることが確認された。
【００３２】
試験例４；筋肉細胞における乳酸の取り込み作用の評価
マウス筋芽細胞株C2C12（FCS10%含有D‐MEM培地で培養）を96well plateに播種し（1×104 cell/ml）、24時間培養した。その後、培地を分化誘導用の培地（FCS1%含有D‐MEM培地）に交換し、黒ショウガ抽出物（5,7-ジメトキシフラボン含量：10.4%、総フラボノイド含量：36.7%）を終濃度0.1,1,3,10μg/ml（DMSO濃度0.1%（v/v））の濃度になるように加え1週間培養した。また、コントロールにはDMSOを培地に対して0.1%（v/v）の濃度で添加した。
1週間培養した細胞に対して、各wellをPBSで洗浄した後、新しく培地を添加し3時間培養した。3時間後、培地を回収しPBSで各wellを洗浄した。次にL-Lactate Assay Kit (Colorimetric) （Abcam，ab65331）中のbufferもしくはRIPA bufferを加え細胞を回収した。Kit中のbufferで回収した細胞及び培地は、KITを用いて乳酸の量を調べた（結果ａ）。一方、RIPA bufferで回収した細胞は、氷上で15分間放置した後、遠心分離により上清を回収し、BCA法により総タンパク質量を調べた（結果ｂ）。糖の取り込み能は、乳酸の量を総タンパク質量で補正した値（結果ｃ＝結果ａ／結果ｂ）を用い、黒ショウガ抽出物による乳酸の取り込みに及ぼす影響を算出した。その結果を図４に示す。尚、図４のうちＡは、筋肉細胞内の乳酸量を示すグラフであり、Ｂは培地中の乳酸量を示すグラフである。
【００３３】
結果及び試験例４における実施例の効果
図４に示されるように、Kitを用いて細胞内及び培地中の乳酸量を定量化した結果、細胞内の乳酸量（乳酸の取り込み）は、有意な差ではなかったが、増加傾向がみられた（図４A）。これは、細胞内に取り込まれた乳酸が速やかに代謝され、エネルギーに変換されたと示唆される。一方で、培地中の乳酸量は濃度依存的に減少していた（図４B）。これにより、培地中の乳酸を積極的に取り込んでいることが確認された。従って、黒ショウガ抽出物は乳酸輸送体MCT1の発現上昇を介して乳酸の取り込み量を増加させ、更には取り込んだ乳酸を素早く代謝させることによりエネルギーに変換させることができることが確認された。以上により、黒ショウガ抽出物は筋肉細胞における乳酸取り込み促進剤及び筋肉細胞におけるエネルギー代謝活性化剤として使用することができることが確認された。
【００３４】
実施例の効果
以上の結果から、黒ショウガ抽出物によって分化誘導した筋芽細胞（Myotube）は、（１）糖の取り込みが活性化しており、（２）乳酸を積極的に取り込み、代謝していることが確認できた。これにより、黒ショウガ抽出物が筋肉細胞自体を増加させることなく質の高い筋肉を作ることができることがわかった。
【００３５】
以下に本発明のエネルギー代謝活性化剤等（黒ショウガ抽出物）の配合例を挙げるが、下記配合例は本発明を限定するものではない。
配合例１：チューインガム
砂糖                                  ５３．０ｗｔ％
ガムベース                            ２０．０
グルコース                            １０．０
水飴                                  １６．０
香料                                    ０．５
黒ショウガ抽出物                        ０．５    
１００．０ｗｔ％
【００３６】
配合例２：グミ
還元水飴                              ４０．０ｗｔ％
グラニュー糖                          ２０．０
ブドウ糖                              ２０．０
ゼラチン                                ４．７
水                                      ９．６８
キウイ果汁                              ４．０
キウイフレーバー                        ０．６
色素                                    ０．０２
黒ショウガ抽出物                        １．０    
１００．０ｗｔ％
【００３７】
配合例３：キャンディー
砂糖                                  ５０．０ｗｔ％
水飴                                  ３３．０
水                                    １４．４
有機酸                                  ２．０
香料                                    ０．２
黒ショウガ抽出物                        ０．４    
１００．０ｗｔ％
【００３８】
配合例４：ヨーグルト（ハード・ソフト）
牛乳                                  ４１．５ｗｔ％
脱脂粉乳                                ５．８
砂糖                                    ８．０
寒天                                    ０．１５
ゼラチン                                ０．１
乳酸菌                                  ０．００５
黒ショウガ抽出物                        ０．４    
香料                                    微量
水                                      残余      
１００．０ｗｔ％
【００３９】
配合例５：清涼飲料
果糖ブドウ糖液糖                      ３０．０ｗｔ％
乳化剤                                  ０．５
黒ショウガ抽出物                        ０．０５
香料                                    適量
精製水                                  残余      
１００．０ｗｔ％
【００４０】
配合例６：ソフトカプセル
米胚芽油                              ８７．０ｗｔ％
乳化剤                                １２．０
黒ショウガ抽出物                        １．０    
１００．０ｗｔ％
【００４１】
配合例７：錠剤
乳糖                                  ５４．０ｗｔ％
結晶セルロース                        ３０．０
澱粉分解物                            １０．０
グリセリン脂肪酸エステル                ５．０
黒ショウガ抽出物                        １．０    
１００．０ｗｔ％
【００４２】
配合例８：顆粒内服剤（医薬品）
黒ショウガ抽出物                              １．０ｗｔ％
乳糖                                        ３０．０
コーンスターチ                              ６０．０
結晶セルロース                                ８．０
ポリビニールピロリドン                        １．０
１００．０ｗｔ％
【００４３】
配合例９：錠菓
砂糖                                  ７６．４ｗｔ％
グルコース                            １９．０
ショ糖脂肪酸エステル                    ０．２
黒ショウガ抽出物                        ０．５
精製水                                  ３．９      
１００．０ｗｔ％
【００４４】
配合例１５：キャットフード
とうもろこし                        ３４．０ｗｔ％
小麦粉                              ３５．０
ミートミール                        １５．０
牛脂                                  ８．９
食塩                                  １．０
かつおエキス                          ４．０
黒ショウガ抽出物                      １．０
タウリン                              ０．１
ビタミン類                            ０．５
ミネラル類                            ０．５
１００．０ｗｔ％
【００４５】
配合例１６：ドッグフード
とうもろこし                          ３０．０ｗｔ％
肉類（チキン）                        １５．０
脱脂大豆                              １０．０
小麦粉                                ２５．０
糟糠類                                  ５．０
黒ショウガ抽出物                        ５．０
動物性油脂                              ８．９
オリゴ糖                                ０．１
ビタミン                                ０．５
ミネラル                                ０．５
１００．０ｗｔ％
【産業上の利用可能性】
【００４６】
以上、説明したように、本発明は、黒ショウガ抽出物を用いることにより、安全であり、副作用が少ない筋肉細胞のエネルギー代謝活性化剤等を提供することができる。
【図１】
2016124832.tif 000002
【図２】
2016124832.tif 000003
【図３】
2016124832.tif 000004
【図４】
2016124832.tif 000005