(57)【要約】【課題】ＳＫＮ−１又はＮｒｆ２を活性化し、第II相解毒酵素（Ｐ２Ｄ）遺伝子の発現を強く誘導することで体内における抗酸化作用を増強させる、長期間摂取しても高い安全性に懸念のない体内抗酸化亢進剤を提供すること。【解決手段】オリーブエキスから選ばれる一種以上からなる体内抗酸化亢進剤を提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
オリーブエキスからなる体内抗酸化亢進剤。
【請求項２】
請求項１に記載の体内抗酸化亢進剤を有効成分として含有する紫外線による皮膚障害の発症予防用の食品組成物。
【請求項３】
請求項１に記載の体内抗酸化亢進剤を有効成分として含有する肥満防止用の食品組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は体内の抗酸化機能亢進剤に関する。より詳細には、第II相解毒酵素又は抗酸化酵素の転写のＮｒｆ２（ＳＫＮ−１）活性化を増強する組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
生体は常に種々の物質から刺激を受け、その結果、体内に活性酸素種が生じる場合が多い。この活性酸素種は、生体に対して酸化的ストレスを与えることから、癌などの疾患だけでなく、老化症状を促進させるなど、多くの生体障害の原因となっていると考えられている。一方、生体は、活性酸素種などのようなフリーラジカルを除去し、且つ毒性物質を解毒する機構が本来備わっており、かかる酸化的ストレスに対して生体防御を行っていることが知られている。この媒介／解毒機構が損われると、防御機構はこれらの化学物質を完全に媒介及び解毒することができなくなり、疾病の発症を引き起こす可能性がある。
【０００３】
この課題を解決するため、抗酸化物質を摂取し、体内におけるフリーラジカルを減少・消失させ、疾患の発症や進行を予防する提案が数多くなされている。例えば、卵白加水分解物や植物抽出物などを活用する方法（特許文献１、２、３）、ビタミン類と抗酸化物質を併用する方法（特許文献４，５，６）が挙げられる。しかし、この方法で臨床的に有意な効果を得るためには、多量の抗酸化物質の摂取が必要となる場合が多く、多量の摂取により下痢を引き起こしたり、長期間摂取することにより毒性を生じたりするなどのリスクがあり、より安全性が高く、手軽に長期間使用できる効果的な技術の開発が望まれていた。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００８−７４８１６号公報
【特許文献２】特表２００８−１５６３４４号公報
【特許文献３】特開２０１１−２３６１４９号公報
【特許文献４】特開２００５−２１０９８号公報
【特許文献５】特開２００９−６２３３０号公報
【特許文献６】特開２００９−６２３３１号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、ＳＫＮ−１又はＮｒｆ２を活性化し、第II相解毒酵素（Ｐ２Ｄ）遺伝子の発現を強く誘導することで体内における抗酸化作用を増強させる、長期間摂取しても高い安全性に懸念のない体内抗酸化亢進剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、驚くべき事に、特定の植物抽出物に優れたＳＫＮ−１又はＮｒｆ２の活性化効果が存在することを見出し、本発明を完成させるに至った。
【０００７】
すなわち、本発明は例えば以下の項１乃至３に係る体内抗酸化亢進剤を包含する。
項１．オリーブエキスからなる体内抗酸化亢進剤。
項２．請求項１に記載の体内抗酸化亢進剤を有効成分として含有する紫外線による皮膚障害の発症予防用の食品組成物。
項３．請求項１に記載の体内抗酸化亢進剤を有効成分として含有する肥満防止用の食品組成物。
【発明の効果】
【０００８】
本発明の体内抗酸化亢進剤は、古くから食経験がある植物から構成されることから、長期に渡って摂取しても副作用を生じるなどの安全性上の懸念が全くない。この体内抗酸化亢進剤を継続して摂取することにより、ＳＫＮ−１／Ｎｒｆ２が活性化し、その結果、第II相解毒酵素（Ｐ２Ｄ）遺伝子や他のいわゆる抗酸化遺伝子の発現を強く誘導することで、体内に発生するフリーラジカル量を減少し、若しくは消去し、肥満などの生活習慣病や紫外線による皮膚障害の発症予防やこれらの症状の進行を予防する効果を期待することが出来る。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
以下、本発明について、さらに詳細に説明する。
【００１０】
本発明の体内抗酸化亢進剤は、オリーブエキスからなるものである。以下に詳しく説明する。
【００１１】
本発明で使用するオリーブエキスとは、モクセイ科オリーブ属の植物であるオリーブ（Olea  europaea  Linne）やその同属種（例えば、Olea  welwitschii、Olea  paniculataなど）のエキスである。これらは５００を超える品種が存在するが、品種の代表例として、ネバディブロンコ、マンザニロ、ピクアル、ホジブランコ、アルベキナ、カタマラ、コロネイキ、ピッチョリーネ、パラゴン、ワッガベルダル、ミッション、ワシントン、ウエストオーストラリアミッション、サウスオーストラリアベンダル、アザパ、バルネア、コルニカブラ、ゴルダル、フラントイオ、レッチーノ、チプレッシーノ、ルッカ、アスコラーナテレナ、コレッジョッラ、モロイオロ、ブラックイタリアン、コラティーナ、ヘレナ、ロシオーラ、ワンセブンセブン、エルグレコ、ハーディズマンモスなどが挙げられる。抽出に際しては、主に葉また果実を使用する。使用できる抽出溶媒は、特に水、エタノールの単独または混液が好ましく、混液の混合比は例えば水：エタノールの体積比で約１００：１〜約１：２００が好ましく、約２０：１〜１：２０がより好ましく、約１：９〜１：１が最も好ましい。また、抽出時の溶媒の温度は約−４℃〜約２００℃の範囲であればよいが、約３０℃〜約１５０℃が好ましく、約４０℃〜約８０℃がより好ましい。
【００１２】
上記の溶媒を用いて得られたエキスは、さらに適宜精製、濃縮、乾燥などの操作を施して使用することができる。例えば、酸（無機酸、有機酸等）またはアルカリ（水酸化ナトリウム、水酸化カルシウム、アンモニア等）の添加による分解、醗酵処理、微生物を用いた代謝変換処理、イオン交換樹脂や活性炭、ケイ藻土等による成分吸着、クロマトグラフィーを用いた分画、濾紙やメンブランフィルター、限外濾過膜などを用いた濾過、加圧または減圧、加温または冷却、スプレードライ、凍結乾燥、pH調整、脱臭、脱色、長時間の静置保管などが例示でき、これらを任意に選択して組合せた処理を行うことが可能である。  
【００１３】
得られたエキスは、そのまま、または希釈、濃縮もしくは凍結乾燥した後、必要に応じて粉末状またはペースト状などに調製し、適宜製剤化して本発明の生体内抗酸化亢進剤として使用することができる。また、さらに必要により活性炭などを用いて脱臭、脱色等の精製処理を施してから使用することもできる。
【００１４】
本発明の生体内抗酸化亢進剤はそのまま使用でき、必要に応じて、カプセル化、顆粒化し摂取することが出来る。また、所期の効果を損なわない限り、通常の経口組成物に配合することで使用することもできる。前記経口組成物としては、医薬品組成物、医薬部外品組成物および食品組成物が挙げられる。本発明の生体内抗酸化亢進剤を配合したこれらの経口組成物は、生体内のフリーラジカルを減少させることで肥満や紫外線による皮膚障害などの発症予防や症状を緩和させる効果が期待できることから、これらの疾病を発症している人や発症するリスクの高い人用の経口組成物として使用できる。
【実施例】
【００１５】
以下、本発明を具体的に説明するが、本発明は下記の例に限定されるものではない。文中、特に指定がない限り％は質量％を示す。
各種エキスのＮｒｆ２の活性化評価
下記の被検体に対して、Ｎｒｆ２の活性化の度合いを評価した。評価にはNrf2が重要な役割を果たしている血管内皮細胞として、ヒト臍帯静脈血管内皮細胞（HUVEC)を用いた。HUVECは、37℃、5%CO2存在下で、10%FBS、10 mMグルタミン(Gibco社製)、10 nMFGF(科研製薬社製)、100U/mlペニシリン、100μg/mlストレプトマイシン(Gibco社製)を含有するMCDB131培地(Sigma Aldrich社製)にて培養し継代を行った。継代数4のHUVECsをTypeIコラーゲンでコートした12well培養フラスコ(住友ベークライト社製)に3.4×104/wellの濃度で播種した。48時間培養後、Nrf2の応答配列であるAntioxidant  response  element (ARE)を組み込んだホタルルシフェラーゼ発現プラスミド(pGL4.27[NRF2-luc2P/minP/Hygro])0.2μgとウミシイタケルシフェラーゼ発現コントロールプラスミド(pRL-TK)0.05μgをSuperFect  Transfection試薬(QIAGEN社製)を用いて遺伝子導入した。8時間後、細胞を各々の被験体で16時間処理後、ホタル、およびウミシイタケのルシフェラーゼ活性をDual-Luciferase  Reporter  Assay  System(Promega社製)を用いてルミノメーター(GloMax 20/20n、Promega社製)にて測定した。各々の被験体のホタルルシフェラーゼ活性は、ウミシイタケのルシフェラーゼ活性により補正し、コントロールに対するAREルシフェラーゼ活性比を求めた。測定結果を、表１に示す。
なお、評価に供した資料は以下の通りである。なお、括弧内の記載は抽出溶媒の種類を意味する。
オリーブ葉抽出物（８０％エタノール）
オリーブ果実ポリフェノール（水）
イチョウ葉エキス：ギンコロン（水）
ザクロ果実エキス（６０％エタノール）
アーティチョークエキス（水）
マリアアザミエキス（エタノール）
ローズマリーエキス（水）
ヤーコン葉エキス（水）
バレリアナ根エキス（７０％エタノール）
セロリ種子エキス（水）
レッドクローバーエキス（エタノール）
生コーヒー豆エキス（水/エタノール混合液）
ルチン
杜仲エキス（水）
【００１６】
【表１】
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【００１７】
表１に示したとおり、オリーブ葉エキスおよびオリーブ果実ポリフェノール（エキス）は、コントロールに対して５倍以上のＮｒｆ２活性化効果を有することが判った。特に、オリーブ葉エキスはコントロールに対して１０倍以上のＮｒｆ２活性化効果を有することが判った。一方、強い抗酸化力を有することが知られている生コーヒーエキス豆エキス、ルチン、杜仲エキスなどにはＮｒｆ２活性化作用が存在しないことがわかった。