(57)【要約】【課題】高感度の測定ができ、鮮明な判定ラインが得られる標的検査装置を提供することを目的とする。【解決手段】  検査対象液を流すための流路と、標識を有し、前記検査対象液中に標的物質が含まれているときに前記標的物質と結合可能な第一抗体を、前記流路を流れる前記検査対象液に供給する第一抗体供給部と、前記流路の前記第一抗体供給部よりも下流側において、前記検査対象液に溶解可能な水溶性樹脂中に混入され、前記第一抗体、及び前記標的物質の少なくともいずれかと結合可能な第二抗体を含む試薬固定部を有し、前記流路を検査対象液が前記水溶性樹脂を溶解し流路を流れ、試薬固定部に第一抗体が供給された前記検査対象液に供給する第二抗体供給部と、を有する標的検査装置を提供する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
検査対象液を流すための流路と、
標識を有し、前記検査対象液中に標的物質が含まれているときに前記標的物質と結合可能な第一抗体を、前記流路を流れる前記検査対象液に供給する第一抗体供給部と、
前記流路の前記第一抗体供給部よりも下流側において、前記検査対象液に溶解可能な水溶性樹脂中に混入され前記第一抗体、及び前記標的物質の少なくともいずれかと結合可能な第二抗体を含む試薬固定部を有し、前記流路を検査対象液が前記水溶性樹脂を溶解し流路を流れ、試薬固定部に第一抗体が供給された前記検査対象液に供給する第二抗体供給部と、
を有することを特徴とする標的検査装置。
【請求項２】
前記流路が、多孔質である請求項１に記載の標的検査装置。
【請求項３】
前記第二抗体供給部が、前記第二抗体を混入した前記水溶性樹脂の成形体であり、前記成形体が前記流路に接触して配設された請求項１から２のいずれかに記載の標的検査装置。
【請求項４】
請求項１から３のいずれかに記載の標的検査装置を製造するための標的検査装置製造用の転写媒体であって、
支持体と、
前記支持体上に設けられた剥離層と、
前記剥離層上に設けられた試薬固定化層と、を有しており、
前記試薬固定化層の表面は、前記標的物質と反応する試薬が固定されている構造、及び前記標的物質と反応する試薬が混入された水溶性樹脂が固定されている構造のいずれか一方の構造を有することを特徴とする標的検査装置製造用の転写媒体。
【請求項５】
請求項４に記載の標的検査装置製造用の転写媒体の前記試薬固定化層と、流路とを接触させて、前記試薬固定化層を前記流路に転写する工程を含むことを特徴とする検査装置の製造方法。
【請求項６】
請求項１から３のいずれかに記載の標的検査装置と、少なくとも検体を採取するための検体採取手段とを有することを特徴とする標的検査キット。
【請求項７】
標識を有し、検査対象液中に標的物質が含まれているときに前記標的物質と結合可能な第一抗体を、流路を流れる前記検査対象液に供給する第一抗体供給工程と、
前記検査対象液に溶解可能な水溶性樹脂中に混入され、前記第一抗体、及び前記標的物質の少なくともいずれかと結合可能な第二抗体を、前記流路を流れ、前記第一抗体が供給された前記検査対象液に供給する第二抗体供給工程と、
を含むことを特徴とする標的検査方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、標的検査装置、標的検査キット、標的検査方法、転写媒体、及び標的検査装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、血液、ＤＮＡ、食品あるいは飲料などの検体の検査を行う目的で、検体を流すための流路が形成された標的検査装置が用いられている。前記標的検査装置の例としては、検査対象液の受液部としてのサンプルパッド、サンプルパッドから供給された前記検査対象液を反応させるコンジュゲートパッド、前記コンジュゲートパッドから供給された前記検査対象液を流すメンブレン膜から構成されるものが開示されている（特許文献１参照）。前記コンジュゲートパッドは、色素などで抗体を標識した標識抗体を含んでおり、前記サンプルパッドから前記検査対象液が供給されると、前記検査対象液に含まれる抗原（標的物質）と標識抗体とを反応させて、前記メンブレン膜に供給する。一方、前記メンブレン膜の検出部には、前記抗原を捕捉するための抗体（捕捉抗体）が予め塗布されている。前記コンジュゲートパッドから供給された前記検査対象液に含まれる前記抗原は、前記標識抗体と結合した状態で、検出部において捕捉される。これにより前記検出部が呈色するので、呈色の程度を目視あるいは測定することで、前記検査対象液中の前記抗原の定性測定又は定量測定を行うことができる。
【０００３】
ところで、標的検査キットを簡易な体外診断などで用いる場合には、医師や患者などの負担を軽減するために、検査時間を短くすることが要望されている。そこで、前記特許文献１では、前記コンジュゲートパッドを構成する合成繊維の吸水速度を調整し、検査対象液の展開速度を上げることで検査時間を短縮することが開示されている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
従来の標的検査装置において、標識抗体や捕捉抗体などの試薬、標識用指示薬や検出用指示薬などの試薬は、流路部材内部の繊維などに固定されていた。しかしながら人間が色を検知できるのは、流路部材の表層５μｍ程度でしかなく、流路部材（厚み約１００μｍ）に染み込んだ抗体液による５μｍ以上の深さで起こる多くの抗原抗体反応は検出に利用されていないという課題が生じていた。
また、流れの速い流路部材を使用した場合、抗体の溶出速度が速すぎると殆ど反応がでない課題も生じていた。
そこで、本発明は、高感度の測定ができ、鮮明な判定ラインが得られる標的検査装置を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
前記課題を解決するための手段としての本発明の標的検査装置は、検査対象液を流すための流路と、
標識を有し、前記検査対象液中に標的物質が含まれているときに前記標的物質と結合可能な第一抗体を、前記流路を流れる前記検査対象液に供給する第一抗体供給部と、
前記流路の前記第一抗体供給部よりも下流側において、前記検査対象液に溶解可能な水溶性樹脂中に混入され前記第一抗体、及び前記標的物質の少なくともいずれかと結合可能な第二抗体を含む試薬固定部を有し、前記流路を検査対象液が前記水溶性樹脂を溶解し流路を流れ、試薬固定部に第一抗体が供給された前記検査対象液に供給する第二抗体供給部とを有する。
【発明の効果】
【０００６】
本発明によると、従来における諸問題を解決することができ、高感度の測定ができ、鮮明な判定ラインが得られる標的検査装置を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【０００７】
【図１】図１は、本発明の一実施形態に係る標的検査装置の上面図である。
【図２】図２は、本発明の一実施形態に係る標的検査装置の長手方向に平行な断面図である。
【図３】図３は、第一抗体供給部と流路部材との接する部分を説明する部分拡大断面図である。
【図４】図４は、第二抗体供給部と流路部材との接する部分を説明する部分拡大図である。
【図５Ａ】図５Ａは、疎水基を多く含有する両親媒性樹脂からなる樹脂層を含む第三抗体固定部と流路部材との接する部分を説明する部分拡大図である。
【図５Ｂ】図５Ｂは、疎水性樹脂からなる樹脂層を含む第三抗体固定部と流路部材との接する部分を説明する部分拡大図である。
【図６】図６は、標的検査装置に用いられる転写媒体の積層状態を示す断面図である。
【図７】図７は、本発明の一実施形態に係る検査キットの概念図である。
【図８Ａ】図８Ａは、実施例１の標的検査装置のラインを示す部分拡大上面図である。
【図８Ｂ】図８Ｂは、図８Ａのラインの部分を示す長手方向の部分拡大断面図である。
【図９Ａ】図９Ａは、従来の標的検査装置のラインを示す部分拡大上面図である。
【図９Ｂ】図９Ｂは、図９Ａのラインの部分を示す長手方向の部分拡大断面図である。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
（標的検査装置）
本発明の標的検査装置は、流路と、第一抗体供給部と、第二抗体供給部とを有してなり、更に必要に応じてその他の部材を有してなる。
【０００９】
＜流路＞
前記流路としては、基材、及び流路部材などに形成され、検査対象液を流すことができれば、その形状、構造、大きさ、材質などに特に限定はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
前記流路の形状としては、前記検査対象液を流すことができれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
前記流路の構造としては、前記検査対象液を流すことができれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、基材の上面に流路となる溝が形成された構造、前記流路が形成された多孔質の流路部材である構造などが挙げられ、これらの中でも前記流路が形成された多孔質の前記流路部材である構造が好適に挙げられる。
前記流路の大きさとしては、前記検査対象液を流して検査を行うことができる大きさであれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００１０】
＜＜基材＞＞
前記基材としては、その構造、及び材質などに、特に制限はなく、目的に応じて選択される。
前記基材の構造としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、上面に前記流路となる溝などが形成されている構造、前記基材の上面に前記流路部材が積層されている構造などが挙げられる。
前記基材の材質としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、有機、無機又は金属製のものが挙げられる。また、前記基材は、特に限定されないが、少なくとも１面が疎水性樹脂で覆われていることが好ましい。前記標的検査装置をセンサチップに使用する場合には、軽量で柔軟性があり、かつ、安価である合成樹脂を前記基材として用いることが好ましい。また、プラスチックシートなどの耐久性が高い材質を前記基材として選択できるので、結果として前記標的検査装置の耐久性も向上する。
【００１１】
前記基材としては、例えば、ポリ塩化ビニル、ポリエチレンテレフタレート、ポリプロピレン、ポリスチレン、ポリ酢酸ビニル、ポリカーボネート、ポリアセタール、変性ポリフェニルエーテル、ポリブチレンフタレート、ＡＢＳ樹脂等でできた基材などが挙げられる。これらの中でも、低価格で汎用性が高いことから、ポリエチレンテレフタレート製の前記基材を用いることが特に好ましい。
【００１２】
前記基材の形状としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、シート状が好ましい。
前記基材の平均厚みは、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、０．０１ｍｍ以上０．５ｍｍ以下であることが好ましい。平均厚みが、０．０１ｍｍ以上であると、前記基材としての強度が適正であり、０．５ｍｍ以下であると、フレキシブル性があり、センサとして好適である。
なお、本実施形態において、平均厚みとは、例えば、測定対象物の厚みを長手方向に５箇所、幅方向に３箇所、測定箇所がほぼ均等の間隔となるように合計１５箇所をマイクロメーターで測定したときの厚みの平均値とすることができる。
【００１３】
＜＜流路部材＞＞
前記標的検査装置の前記流路部材としては、前記検査対象液を流すことが可能な部材であれば特に限定されないが、例えば、親水性多孔質材料などが挙げられる。前記親水性多孔質材料によって構成される前記流路部材は、空隙を有しており、前記検査対象液が前記空隙内を流れることによって前記流路が形成される。親水性多孔質材料の内部には、気泡が存在し、前記気泡同士が繋がって連続気泡となっていることが好ましい。なお、前記連続気泡とは、前記気泡同士が繋がっていない独立気泡とは区別されるものである。前記連続気泡においては、前記気泡同士の壁に小さな孔が開いているため、毛細管現象によって液体を吸い込んだり気体を通過させたりする機能を有する。前記流路部材は、前記空隙において、毛細管現象を利用して前記検査対象液を移送するので、ポンプ等の外部駆動装置が不要である。
前記流路部材の展開速度としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、前記展開速度が７５ｓｅｃ／４ｃｍ以上２４０ｓｅｃ／４ｃｍ以下の範囲であることが好ましい。
【００１４】
前記親水性多孔質材料としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、親水性を示し空隙率が高い材質が好適に用いられる。前記親水性多孔質材料とは、水溶液が容易に浸透可能な多孔質材料であり、容易に浸透可能とは、１２０℃で１時間乾燥した板状試験片の表面に純水０．０１ｍＬを滴下する水浸透性の評価試験で、純水０．０１ｍＬが１０分間以内にすべて浸透することを意味する。
【００１５】
前記親水性多孔質材料の空隙率は、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、４０％以上９０％以下が好ましく、６５％以上８０％以下がより好ましい。前記空隙率が、９０％以下であると、前記流路部材としての強度を保つことができ、４０％以上であると、前記検査対象液の浸透性に影響がない。前記空隙率は、例えば、前記親水性多孔質材料の坪量（ｇ／ｍ２）、厚み（μｍ）、組成分比重から、下記の計算式１により求めることができる。
〔計算式１〕
空隙率（％）＝｛１−〔坪量（ｇ／ｍ２）／厚み（μｍ）／組成分比重〕｝×１００
【００１６】
前記親水性多孔質材料としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ろ紙、普通紙、上質紙、水彩紙、ケント紙、合成紙、合成樹脂フィルム、コート層を有する専用紙、布地、繊維製品、フィルム、無機基板、ガラスなどが挙げられる。
【００１７】
前記布地としては、例えば、レーヨン、ベンベルグ、アセテート、ナイロン、ポリエステル、ビニロン等の人造繊維、綿、絹等の天然繊維、これらの混紡繊維、又はこれらの不織布などが挙げられる。
【００１８】
これらの中でも、高い空隙率と良好な親水性を有する点から、前記ろ紙が好ましい。前記標的検査装置をバイオセンサーの目的で使用する際には、前記ろ紙はペーパークロマトグラフィーにおける固定相として好適である。
【００１９】
前記親水性多孔質材料の形状については、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、シート状が好ましい。
前記親水性多孔質材料の平均厚みは、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、０．０１ｍｍ以上０．３ｍｍ以下が好ましい。平均厚みが、０．０１ｍｍ以上であると、前記流路部材としての強度を保つことができ、０．３ｍｍ以下であると、前記検査対象液の必要量を多くする必要がない。なお、本実施形態において、厚みとは、前記基材と前記流路部材との接触面に対して垂直方向の対象物の長さとすることができる。
【００２０】
＜第一抗体供給部＞
前記第一抗体供給部としては、第一抗体を前記流路に供給することができれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、別の装置及び器具を用いて、前記流路に滴下する構造、前記流路上に前記第一抗体を含む樹脂層を積層して前記第一抗体を供給する構造などが挙げられ、これらの中でも、前記流路上に前記第一抗体を含む樹脂層を積層して前記第一抗体を供給する構造が好適に挙げられる。
【００２１】
＜＜樹脂層＞＞
前記樹脂層としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、前記第一抗体などの試薬が前記樹脂層の前記流路に対向する側の面に固定されている構造などが挙げられる。
前記第一抗体が前記樹脂層の前記流路に対向する側の面に固定されている構造とすることにより、前記樹脂層と、前記試薬との相互作用の強さや、前記検査対象液との親和性に応じて、前記第一抗体などの試薬の放出、あるいは固定化を制御することができる。相互作用の強さや、親和性を調整する方法としては、前記樹脂層を構成する樹脂の種類や、樹脂の組成比を、対応する試薬に応じて変更する方法が挙げられる。例えば、前記樹脂層を構成する樹脂において疎水性の割合が多いほど、前記樹脂層は、疎水基を有する試薬を疎水性相互作用により固定化しやすくなる。ここで、疎水性相互作用とは、水中で水になじめない疎水性分子や疎水基が集合する変化の原因（駆動力）を指す。詳細には、前記疎水性分子や前記疎水基を有する分子を水中にいれると、多くの場合、単に溶けないというだけではなく、前記疎水性分子や前記疎水基が互いに接した状態をとり、水分子との接触面積をできるだけ減らそうとする。その結果、疎水性分子種は互いに寄り集まるようになり、分子間に結合力が作用しているようにみえる現象のことを言う。一方、前記樹脂層を構成する樹脂において親水性の割合が多いと、前記樹脂層と、親水性の試薬との相互作用は強くなるが、結合部が親水性の前記検査対象液と接触したときに、前記試薬は前記検査対象液と親和して前記検査対象液中に放出されやすくなると推定している。したがって、前記第一抗体を供給するために、前記樹脂層を構成する樹脂において親水性の割合が多いほうが好ましい。
【００２２】
前記樹脂層を構成する樹脂は、水不溶性樹脂であることが好ましい。これにより、前記樹脂が前記検査対象液に溶解して、前記流路を詰まらせることを防止することができる。主に前記樹脂層を構成する両親媒性樹脂としては、例えば、ポリビニルアルコール類、ポリビニルアセタール樹脂、ポリアクリル酸、アクリル酸−アクリルニトリル共重合体、酢酸ビニル−アクリル酸エステル共重合体、アクリル酸−アクリル酸エステル共重合体、スチレン−アクリル酸共重合体、スチレン−メタクリル酸共重合体、スチレン−メタクリル酸−アクリル酸エステル共重合体、スチレン−α−メチルスチレン−アクリル酸共重合体、スチレン−α−メチルスチレン−アクリル酸−アクリル酸エステル共重合体、スチレン−マレイン酸共重合体、スチレン−無水マレイン酸共重合体、ビニルナフタレン−アクリル酸共重合体、ビニルナフタレン−マレイン酸共重合体、酢酸ビニル−マレイン酸エステル共重合体、酢酸ビニル−クロトン酸共重合体、酢酸ビニル−アクリル酸共重合体、又はこれらの塩などが挙げられる。これらは１種単独で使用してもよく、２種以上を併用してもよい。
【００２３】
これらの中でも、疎水性官能基を有するモノマーと親水性官能基を持つモノマーとの共重合体、疎水性官能基と親水性官能基とを併せ持つモノマーからなる重合体が好ましい。共重合体の形態としては、ランダム共重合体、ブロック共重合体、交互共重合体、グラフト共重合体のいずれの形態でも用いることができる。
【００２４】
本実施形態において、前記樹脂層は前記流路部材上に固定されていることが好ましい。前記樹脂層を固定する方法としては、検査時に前記試薬と前記検査対象液とが接触可能となるような状態で固定化する方法であれば特に限定されない。具体例としては、熱転写プリンタなどを用いて前記樹脂層を構成する樹脂を前記流路部材上に熱転写する方法、ドットインパクトプリンタなどを用いて前記樹脂層を構成する樹脂に圧力を加えて転写する方法、前記樹脂層を構成する樹脂をテープや接着剤、粘着剤などで前記流路部材上に貼り付ける方法などが挙げられる。
【００２５】
＜＜第一抗体＞＞
前記第一抗体としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、検査対象となる標的物質と反応し、更に標識を有する標識抗体が好ましい。
前記樹脂層に固定させる前記第一抗体としては、親水性の部位を有しており、前記標的物質と反応するものであれば特に限定されないが、例えば、金コロイド標識Ａｎｔｉ−ｈｕｍａｎ  ＩｇＧなどの金コロイド標識抗体、各種アレルゲンに対する標識抗体等が挙げられる。その他、抗体を標識する粒子としては、金コロイド以外にも特に限定されることなく、他の金属コロイド、酵素を含有する酵素標識粒子、色素を含有する着色粒子、蛍光物質を含有する蛍光粒子、磁性体を含有する磁性体内包粒子などが挙げられる。
【００２６】
前記第一抗体などの試薬を、前記樹脂層に固定する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、前記試薬を含む溶液を前記樹脂層に塗布した後、急速乾燥する方法や、凍結乾燥する方法などが挙げられる。
【００２７】
＜第二抗体供給部＞
前記第二抗体供給部としては、前記第一抗体、及び前記標的物質の少なくともいずれかと結合可能な第二抗体が、前記検査対象液に溶解可能な水溶性樹脂中に混入され、前記第一抗体が供給された前記検査対象液に供給することができれば、その形状、構造などに、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。なお、前記第二抗体供給部は、複数配置してもよい。
前記第二抗体供給部の形状としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、前記第一抗体、及び前記標的物質の少なくともいずれかと前記第二抗体が結合して捕捉することで、前記第一抗体の標識を検知する観点から、シート状であることが好ましい。また、前記シート状の前記第二抗体供給部の前記シート状の長手方向は、前記流路に直交するように配置されていることが好ましい。
前記第二抗体供給部の構造としては、前記水溶性樹脂中に前記第二抗体が混入されている構造であれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、前記第二抗体供給部が、前記第二抗体を混入した前記水溶性樹脂の成形体であり、前記成形体が前記流路に接触して配設された構造などが挙げられる。
【００２８】
＜＜水溶性樹脂＞＞
前記水溶性樹脂としては、前記検査対象液に溶解可能であれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
前記水溶性樹脂としては、例えば、ポリビニルアルコール、カルボキシル基を有するポリビニルアルコール等の変性ポリビニルアルコール、澱粉又はその誘導体、メトキシセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース等のセルロース誘導体、ポリアクリル酸ソーダ、ポリビニルピロリドン、アクリルアミド−アクリル酸エステル共重合体、アクリルアミド−アクリル酸エステル−メタアクリル酸三元共重合体、スチレン−無水マレイン酸共重合体のアリカリ塩、イソブチレン−無水マレイン酸共重合体のアリカリ塩、ポリアクリルアミド、変性ポリアクリルアミド、メチルビニルエーテル−無水マレイン酸共重合体、カルボキシ変性ポリエチレン、ポリビニルアルコール−アクリルアミドブロック共重合体、メラミン−ホルムアルデヒド樹脂、尿素−ホルムアルデヒド樹脂、アルギン酸ソーダ、ゼラチン、カゼイン、などが挙げられる。これらは、１種単独で使用してもよいし、２種以上を併用してもよい。これらの中でも、ポリビニルピロリドンが好ましい。
【００２９】
＜＜第二抗体＞＞
前記第二抗体としては、前記第一抗体、及び前記標的物質の少なくともいずれかと結合することができる捕捉抗体であれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
前記標的物質だけに結合する前記第二抗体としては、前記第一抗体と同様のものを用いることができる。
前記標的物質と前記第一抗体の両方に結合することができる前記第二抗体としては、前記標的物質及び前記第一抗体に応じて、適宜選択することができる。
なお、前記第二抗体供給部が、流路が形成された基材の上面に形成された場合でも、前記第二抗体により、前記第一抗体と結合している前記標的物質を捕捉し、前記第一抗体の標識により検知させることができるが、前記第二抗体供給部が、多孔質の前記流路部材上に形成される場合において、より顕著な効果を奏する。
前記検査対象液が前記第二抗体供給部の水溶性樹脂を溶かし、前記第二抗体が前記検査対象液中に溶出される。溶出した前記第二抗体は、分子量が大きいため、すぐさま前記第二供給部に面した流路部材の極表層に固定、又は留まることができる。前記第一抗体と結合している前記標的物質は、前記第二抗体供給部と前記第二供給部に面した流路部材の両面において、捕捉されることから、標識を検知しやすくなる。
しかしながら、水溶性樹脂の溶出性が悪いと、充分な量の前記第二抗体が溶出されず上記の効果が得られない。したがって、溶出性の高い水溶性樹脂が望ましい。
【００３０】
＜その他の部材＞
前記その他の部材としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、吸収部材、第三抗体固定部などが挙げられる。
【００３１】
＜＜吸収部材＞＞
前記吸収部材としては、前記検査対象液の液体を吸収するものであれば、特に制限はなく、公知の材料から選択することができる。例えば、前記液体が水の場合は、紙、布などの繊維、カルボキシル基又はその塩を有する高分子化合物、カルボキシル基又はその塩を有する高分子化合物の部分架橋体、多糖類の部分架橋体等が挙げられる。
【００３２】
＜＜第三抗体固定部＞＞
前記第三抗体固定部としては、前記第一抗体とだけ結合する第三抗体を前記流路に接するように固定することができれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、前記流路上に前記第三抗体を含む樹脂層を積層して前記第三抗体を供給する構造などが挙げられる。
なお、前記樹脂層としては、前記第一抗体供給部で用いた樹脂層を好適に用いることができる。
前記第三抗体固定部で用いる第三抗体は疎水性の部位を有している。前記疎水性の部位を有することにより、前記第一抗体供給部の前記第一抗体とは逆に、前記検査対象液に親和せずに固定されたまま前記第一抗体と結合することができる。これにより、前記第一抗体が到達したことを示すコントロールラインとして用いることができるようになる。なお、コントロールラインの滲みを防ぐために、前記第三抗体固定部が含む疎水性樹脂又は疎水基を多く含有する両親媒性樹脂は、それぞれ水溶性樹脂であることが好ましい。
【００３３】
次に、図面を用いて本発明の標的検査装置を詳細に説明する。図１は、本発明の一実施形態に係る標的検査装置の上面図である。図２は、本発明の一実施形態に係る標的検査装置の長手方向に平行な断面図である。図３は、第一抗体供給部と流路部材との接する部分を説明する部分拡大断面図である。図４は、第二抗体供給部と流路部材との接する部分を説明する部分拡大図である。図５Ａは、疎水基を多く含有する両親媒性樹脂からなる樹脂層を含む第三抗体固定部と流路部材との接する部分を説明する部分拡大図である。図５Ｂは、疎水性樹脂からなる樹脂層を含む第三抗体固定部と流路部材との接する部分を説明する部分拡大図である。
図１及び図２に示すように、本発明の標的検査装置１０は、血液、髄液、尿、あるいは検査抽出液（スティック等の検体採取手段により採取した検体を含む液）などのように、親水性の前記検査対象液か、又は標的物質を含む油性の前記検査対象液を流すための前記流路が形成された多孔質の流路部材３０と、流路部材上に設けられた第一抗体供給部４０と、第二抗体供給部５０と、第三抗体固定部６０とを有しており、第一抗体供給部４０における流路部材３０に対向する面には、図３に示すように、検査対象液１２に含まれる標的物質１４と反応する第一抗体１６（試薬の一例）が固定されている。これにより、第一抗体供給部４０と試薬との相互作用の強さを調整できるようになるので、流路部材３０を目的に応じて任意に選択した場合でも、試薬の放出や固定化を制御することができる。また、第三抗体固定部６０における流路部材３０に対向する面には、第一抗体１６と反応する第三抗体１８が固定されている。これにより、第三抗体固定部６０と試薬との相互作用の強さを調整できるようになるので、流路部材３０を目的に応じて任意に選択した場合でも、試薬の放出や固定化を制御することができる。
なお、以下の説明においては、前記検査対象液が、血液、髄液、尿、或いは検体抽出液（スティック等の検体採取手段により採取した検体を含む液）等のように親水性の液体である場合について説明をする。
【００３４】
なお、本実施形態では、図１及び図２に示すように、標的検査装置１０において、流路部材３０が基材２０上に設けられており、基材２０及び流路部材３０上の一端において、吸収部材７０が設けられている場合について説明するが、本発明の標的検査装置１０は、このような形態に限定されるものではない。本実施形態において、部材上に設けるとは、標的検査装置１０を配置したときの向きとは関係なく、部材に接して設けることを意味している。なお、第一抗体供給部４０に固定される第一抗体１６を有する試薬及び第三抗体固定部６０に固定される第三抗体１８を有する試薬は、共有結合、水素結合、金属結合などの任意の化学結合、付着、凝着、吸着、ファンデルワールス結合などの任意の相互作用により固定されていればよい。
【００３５】
第一抗体供給部４０は、図３で示すように、樹脂層４２の流路部材３０に対向する面に、第一抗体１６が固定されている。樹脂層４２は、親水基４４を多く有する両親媒性樹脂４８を含有しており、好ましくは主成分（含有量が５０質量％以上）として構成されている。ここで、親水基とは、水分子と水素結合などによる弱い結合を作る原子団であり、水との間に親和性があること意味し、両親媒性とは水及び有機溶媒の両方に親和性があることを意味する。第一抗体１６は、親水性の部位１６ｇを有しており、これにより第一抗体供給部４０の樹脂層４２における流路部材３０に対向する面に固定される。一方で、流路部材３０及び樹脂層４２の対向部に形成される隙間に検査対象液１２が充填されたときには、第一抗体１６の親水性の部位１６ｇと親水性の検査対象液１２とが親和して、両親媒性樹脂４８から、第一抗体１６が放出される。また、検査対象液１２に抗原などの標的物質１４が含まれている場合には、抗原・抗体反応により、放出された第一抗体１６と標的物質１４とが反応して結合する。なお、標的物質と抗体の結合の阻害を防ぐために、両親媒性樹脂４８は、水不溶性樹脂であることが好ましい。本実施形態において水不溶性とは、実質的に水に不溶であることを指す。ここで、実質的に水に不溶であるとは、２５℃下で２４時間、大量の水中に浸漬した後、真空乾燥等の方法によって十分に乾燥した際の、樹脂の質量変化量が１質量％以下であることを意味する。これは樹脂生成物中に含まれる副生成物（モノマー成分など）が水中に溶け出し質量が減少することがあるためである。
【００３６】
第二抗体供給部５０は、図４で示すように、水溶性樹脂５２の内部に第二抗体１７を含んだ構造である。本実施形態においては、水溶性樹脂の内部に第二抗体１７を含んだ構造であり、流路部材３０上に接触して配設されている。また、図１で示すように、本実施形態においては、第二抗体供給部５０は、標的物質１４の有無を判定するためのテストラインとして用いている。
検査対象液１２が流路部材３０の流路を通り、第二抗体供給部５０に到達すると、第二抗体供給部５０は第二抗体１７を含む水溶性樹脂が流路部材３０に接しているため、第二抗体１７と共に流路部材３０内に供給される。供給された第二抗体１７は、検査対象液１２中の標的物質１４と結合し、表層に留まる。第二抗体１７と結合しなかった標的物質１４と結合した第一抗体１６は、下流に流れていく。第一抗体１６と第二抗体１７とが結合した標的物質１４が留まることにより、呈色するので、標的物質１４の有無を判定するためのラインとして用いることができるようになる。また、流路部材３０の極表層に留まるため、ラインの滲みを防ぐという有利な効果を奏する。
【００３７】
第三抗体固定部６０は、図５Ａ及び図５Ｂで示すように、樹脂層６２の流路部材３０に対向する面に、第三抗体１８が固定されている。樹脂層６２は、疎水性樹脂６９（図５Ｂ参照）、又は疎水基５６を多く有する両親媒性樹脂６８（図５Ａ参照）を含有しており、疎水性樹脂６９、又は両親媒性樹脂６８を主成分（含有量が５０質量％以上）として構成されていることが好ましい。ここで、疎水基とは水となじみにくい原子団のことであり、水に対する親和性が低く、水に溶解しにくい、あるいは水と混ざりにくいことを意味する。第三抗体固定部６０における流路部材３０に対向する面には、第三抗体１８の疎水性の部位が分子間力により結合することにより、第三抗体１８が固相化されている。第三抗体１８としては、第一抗体１６を捕捉するものであれば特に限定されないが、例えば、第一抗体１６と特異的に結合する抗体などが挙げられる。これにより、第一抗体１６が固定化されて呈色するので、第三抗体固定部６０を、第一抗体１６が到達したことを示すコントロールラインとして用いることができるようになる。なお、コントロールラインの滲みを防ぐために、疎水性樹脂６９及び両親媒性樹脂６８はそれぞれ、水不溶性樹脂であることが好ましい。
また、第三抗体固定部６０は、第二抗体供給部５０と同じように、水溶性樹脂５２の内部に第三抗体１８を含んだ構造としても良い。
【００３８】
なお、本発明の標的検査装置は、抗原抗体反応を用いたものに限定されない。例えば、標的検査装置は、試薬として、構造変化により色相が変化する試薬を用いることで、前記検査対象液に含まれる特定の成分を検査するものであってもよい。
【００３９】
（転写媒体）
本発明の転写媒体は、本発明の標的検査装置を製造するための標的検査装置製造用の転写媒体であって、前記転写媒体としては、前記流路に転写することで前記第一抗体供給部及び前記第二抗体供給部を形成することができるものであれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、支持体と、剥離層と、試薬固定化層とを有し、必要に応じてその他の層を有してもよい。
【００４０】
＜支持体＞
前記支持体としては、その形状、構造、大きさ、材質等については、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
前記支持体の構造としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、単層構造、及び積層構造などが挙げられる。
前記支持体の大きさとしては、特に制限はなく、前記標的検査装置の大きさ等に応じて適宜選択することができる。
【００４１】
前記支持体の材質としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリエチレンナフタレート（ＰＥＮ）等のポリエステル、ポリカーボネート、ポリイミド樹脂（ＰＩ）、ポリアミド、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリ塩化ビニル、ポリ塩化ビニリデン、ポリスチレン、スチレン−アクリロニトリル共重合体、セルロースアセテート、などが挙げられる。これらは、１種単独で使用してもよいし、２種以上を併用してもよい。これらの中でも、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリエチレンナフタレート（ＰＥＮ）が特に好ましい。
【００４２】
前記支持体の表面には、前記支持体の上に設ける層との密着性を向上させるため、表面活性化処理を行うことが好ましい。前記表面活性化処理としては、例えば、グロー放電処理、コロナ放電処理、などが挙げられる。
【００４３】
前記支持体は、後述する試薬固定化層を前記基材又は前記流路部材などに転写後、そのまま残しておいてもよく、また、前記試薬固定化層を転写後、後述する剥離層で前記支持体などを剥離し除去してもよい。
前記支持体としては、特に制限はなく、適宜合成したものであってもよいし、市販品を使用してもよい。
前記支持体の平均厚みとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、３μｍ以上５０μｍ以下が好ましい。
【００４４】
＜剥離層＞
前記剥離層は、転写の際に、前記支持体と前記試薬固定化層との剥離性を向上させる機能を有する。また、前記剥離層は、サーマルヘッド等の加熱加圧手段で加熱すると熱溶融して低粘度の液体となり、加熱部分と非加熱部分との界面近傍で、前記試薬固定化層の切断を容易にする機能を有する。前記剥離層は、ワックス、及びバインダー樹脂を含有してなり、更に必要に応じて適宜選択した、その他の成分を含んでなる。
【００４５】
前記ワックスとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、蜜ロウ、カルナバワックス、鯨ロウ、木ロウ、キャンデリラワックス、米ぬかロウ、モンタンワックス等の天然ワックス；パラフィンワックス、マイクロクリスタリンワックス、酸化ワックス、オゾケライト、セレシン、エステルワックス、ポリエチレンワックス、酸化ポリエチレンワックス等の合成ワックス；マルガリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、フロイン酸、ベヘニン酸等の高級脂肪酸；ステアリンアルコール、ベヘニルアルコール等の高級アルコール；ソルビタンの脂肪酸エステル等のエステル類；ステアリンアミド、オレインアミド等のアミド類、などが挙げられる。これらは１種単独で使用してもよく、２種以上を併用してもよい。これらの中でも、剥離性に優れている点から、カルナバワックス、ポリエチレンワックスが好ましい。
【００４６】
前記バインダー樹脂としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、エチレン−酢酸ビニル共重合体、部分ケン化エチレン−酢酸ビニル共重合体、エチレン−ビニルアルコール共重合体、エチレン−メタクリル酸ナトリウム共重合体、ポリアミド、ポリエステル、ポリウレタン、ポリビニルアルコール、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、デンプン、ポリアクリル酸、イソブチレン−マレイン酸共重合体、スチレン−マレイン酸共重合体、ポリアクリルアミド、ポリビニルアセタール、ポリ塩化ビニル、ポリ塩化ビニリデン、イソプレンゴム、スチレン−ブタジエン共重合体、エチレン−プロピレン共重合体、ブチルゴム、アクリロニトリル−ブタジエン共重合体、などが挙げられる。これらは１種単独で使用してもよく、２種以上を併用してもよい。
【００４７】
前記剥離層の形成方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ホットメルト塗工法、前記ワックス及び前記バインダー樹脂を溶剤に分散させた塗布液を塗布する方法、などが挙げられる。
前記剥離層の平均厚みは、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、０．５μｍ以上５０μｍ以下が好ましい。
前記剥離層の付着量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、０．５ｇ／ｍ２以上５０ｇ／ｍ２以下が好ましい。
【００４８】
＜試薬固定化層＞
前記試薬固定化層は、前記標的検査装置における前記第一抗体供給部を構成する樹脂、及び前記第二抗体供給部を構成する前記水溶性樹脂のいずれか一方を含んでいれば、その材料などに、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
前記試薬固定化層の形成方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ホットメルト塗工法や、前記第一抗体供給部を構成する樹脂を溶剤に分散させた試薬塗布液を、グラビアコーター、ワイヤーバーコーター、ロールコーターなどの一般的な塗布法により、試薬固定化層塗布液を前記支持体上又は前記剥離層上に塗布し、乾燥することにより形成することができる。
【００４９】
前記試薬固定化層の平均厚みとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、２００ｎｍ以上５０μｍ以下が好ましい。前記試薬固定化層の平均厚みが、２００ｎｍ以上であると、前記成形体の耐久性がよく、摩擦や衝撃などによって前記成形体が破損する恐れがなく、５０μｍ以下であると、サーマルヘッドからの熱が均一に伝わり、鮮明性がよい。
【００５０】
前記試薬固定化層における試薬塗布液の付着量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、０．２ｇ／ｍ２以上５０ｇ／ｍ２以下が好ましい。付着量が、０．２ｇ／ｍ２以上であると、塗布量が十分であり、前記第二抗体固定部に欠損が生じず、５０ｇ／ｍ２以下であると、乾燥に時間がかからず、前記第二抗体固定部にムラなどが生じない。
【００５１】
試薬塗布液を乾燥して前記試薬固定化層が形成された後、前記試薬固定化層の表面に、前記第一抗体を含む溶液及び前記第二抗体を含む前記水溶性樹脂液のいずれか一方を塗布し、均一な塗膜を形成する。続いて、前記塗膜を乾燥させることにより、前記第一抗体を前記試薬固定化層の表面に固定、及び前記第二抗体が混入された前記水溶性樹脂を前記試薬固定化層の表面に固定させることができる。なお、前記塗膜は均一な厚さとなるように塗布されていることが好ましい。乾燥方法としては、通気乾燥、真空乾燥、自然乾燥及び凍結乾燥など、特に限定されないが、減圧下もしくは真空下乾燥させることが望ましい。乾燥温度としては、室温２０℃〜５０℃の下、乾燥時間としては３０分間〜２４時間乾燥させるのが望ましい。乾燥温度が２０℃より高温の場合、乾燥時間を短くすることで生産性が向上し、５０℃より低温の場合、試薬が熱により変性する恐れがない。また、乾燥時間が３０分より長い場合、乾燥が十分であり、２４時間より短い場合、生産性が向上し樹脂の変色を考慮する必要がない。
【００５２】
＜その他の層＞
前記その他の層としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、バック層、アンダー層、保護フィルムなどが挙げられる。
【００５３】
＜＜バック層＞＞
前記バック層としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、前記転写媒体には、前記支持体の前記剥離層側の面とは反対側の面に、前記バック層が設けられていることが好ましい。前記反対側の面には、転写時に、サーマルヘッド等で前記第一抗体供給部の前記樹脂層の形状に合わせて熱が直接印加される。このため、前記バック層は、高熱への耐性、サーマルヘッド等との摩擦への耐性を有することが好ましい。前記バック層は、バインダー樹脂を含有してなり、更に必要に応じてその他の成分を含有してなる。
【００５４】
前記バインダー樹脂としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、シリコーン変性ウレタン樹脂、シリコーン変性アクリル樹脂、シリコーン樹脂、シリコーンゴム、フッ素樹脂、ポリイミド樹脂、エポキシ樹脂、フェノール樹脂、メラミン樹脂、ニトロセルロース、などが挙げられる。これらは１種単独で使用してもよく、２種以上を併用してもよい。
【００５５】
前記その他の成分としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、タルク、シリカ、オルガノポリシロキサン等の無機微粒子、滑剤、などが挙げられる。
【００５６】
前記バック層の形成方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、グラビアコーター、ワイヤーバーコーター、ロールコーター等の一般的な塗布法、などが挙げられる。
前記バック層の平均厚みとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、０．０１μｍ以上、１．０μｍ以下が好ましい。
【００５７】
＜＜アンダー層＞＞
前記アンダー層としては、前記支持体と前記剥離層との間、又は前記剥離層と前記試薬固定化層との間に設けることができる。前記アンダー層は、樹脂を含有し、更に必要に応じてその他の成分を含有してなる。前記樹脂としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、前記試薬固定化層及び前記剥離層で用いた各種樹脂が使用可能である。
【００５８】
＜＜保護フィルム＞＞
前記試薬固定化層上には、貯蔵の際の汚染や損傷から保護するために保護フィルムを設けることが好ましい。前記保護フィルムの材料としては、試薬固定化層１０３から容易に剥がすことができるものであれば特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、シリコーン紙、ポリプロピレン等のポリオレフィンシート、ポリテトラフルオロエチレンシート、などが挙げられる。前記保護フィルムの平均厚みは、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、５μｍ以上１００μｍ以下が好ましく、１０μｍ以上３０μｍ以下がより好ましい。
【００５９】
なお、前記第二抗体供給部及び前記第三抗体固定部の転写媒体については、前記第一抗体供給部と同様なので、説明を省略する。
【００６０】
（標的検査装置の製造方法）
本発明の標的検査装置の製造方法は、前記転写媒体の前記試薬固定化層と、前記流路とを接触させて、前記試薬固定化層を前記流路に転写する工程を含み、更に必要に応じて、その他の工程を含んでなる。
前記試薬固定化層を前記流路に転写する工程としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、前記流路に対して熱転写する方法などが挙げられる。
【００６１】
標的検査装置の製造方法である、試薬固定化層の転写を図面を用いて詳細に説明する。図６は、標的検査装置に用いられる転写媒体の積層状態を示す断面図である。前記試薬固定化層の転写は、前記流路上であれば前記流路の構造などに、特に制限はなく、目的に応じて適宜形成することができるが、ここでは前記流路部材に対して熱転写する方法を説明する。
図６に示すように、転写媒体１００は、支持体１０１、剥離層１０２、試薬固定化層１０３がこの順に積層され、更に支持体１０１の剥離層１０２が積層された面とは逆面にはバック層１０４が設けられている。
試薬固定化層１０３を流路部材３０に熱転写する方法としては、転写媒体１００の試薬固定化層１０３と、流路部材３０とを接触させて、試薬固定化層１０３を流路部材３０に転写する工程を含む方法が挙げられる。熱転写に用いられるプリンタとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、シリアルサーマルヘッド、ライン型サーマルヘッド等を有するサーマルプリンタが挙げられる。熱転写における印加エネルギーは、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、０．０５ｍＪ／ｄｏｔ以上０．５ｍＪ／ｄｏｔ以下が好ましい。印加エネルギーが、０．０５ｍＪ／ｄｏｔ以上であると、試薬固定化層１０３の溶融が十分であり、０．５ｍＪ／ｄｏｔ以下であると、試薬が熱により変性する恐れがなく、試薬固定化層１０３以外の転写媒体１００を溶かす恐れがないため、サーマルヘッドを汚すことがない。
【００６２】
＜＜＜標的検査装置の用途＞＞＞
前記標的検査装置の用途としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、血液検査やＤＮＡ検査向けの生化学センサ（センシングチップ）、食品や飲料の品質管理用途などにおける小型の分析機器（化学センサ）などが挙げられる。
【００６３】
生化学の分野の検査に用いる試料（検体）としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、細菌、ウイルス等の病原体、生体から分離された血液、唾液、組織病片等、あるいは糞尿等の排泄物、などが挙げられる。更に、出生前診断を行う場合は、羊水中に存在する胎児の細胞、試験管内での分裂卵細胞の一部などであってもよい。また、これらの試料は、直接、又は必要に応じて遠心分離操作等により沈渣として濃縮した後、例えば、酵素処理、熱処理、界面活性剤処理、超音波処理、これらの組合せ等による細胞破壊処理を予め施されていてもよい。
【００６４】
また、本実施形態の標的検査装置１０は、流路部材３０が固定相として働くため、検査液をクロマトグラフィー（分離、精製）する機能も有する。この場合、内壁が親水性を示す連続気泡を有する流路部材３０が固定相（担体）となる。検査対象液中の各成分は、流路内を浸透する過程で固定相との相互作用の違い、即ち、親疎水性の違いにより流路内を流れる速度に差が生じる。
【００６５】
これは親水性の高い成分ほど、固定相である多孔質部に吸着しやすく、脱吸着を繰り返す回数が多いため、流路内を浸透する速度が遅い。反対に疎水性の高い成分は固定相に吸着することなく浸透するので、流路内をすばやく移動する。検査対象液中の移動速度の差を利用することで、検査対象液１２の対象成分選択的に抽出、反応させることで、標的検査装置１０を高機能な化学あるいは生化学用途のセンサとして用いることができる。
【００６６】
（標的検査方法）
本発明の標的検査方法は、本発明の標的検査装置を用いて検査するための標的検査方法であって、前記標的検査方法としては、特に限定されないが、前記標識を有し、前記検査対象液中に前記標的物質が含まれているときに前記標的物質と結合可能な前記第一抗体を、前記流路を流れる前記検査対象液に供給する第一抗体供給工程と、前記検査対象液に溶解可能な前記水溶性樹脂中に混入され、前記標的物質と結合した前記第一抗体と結合可能な前記第二抗体を、前記流路を流れ、前記第一抗体が供給された前記検査対象液に供給する第二抗体供給工程と、を含むものであってもよい。
【００６７】
具体的な処理としては、まず、標的検査装置１０の流路部材３０に設けられた滴下部８０（図１及び図２参照）に検査対象液１２を滴下して供給する。続いて、供給された検査対象液１２と、第一抗体供給部４０に固定されている第一抗体１６とを接触させ、第一抗体供給部４０から第一抗体１６を放出させる。検査対象液１２に標的物質１４が含まれている場合、第一抗体供給部４０から放出された第一抗体１６は標的物質１４と反応して結合する。
【００６８】
続いて、第一抗体１６及び標的物質１４を含む検査対象液１２は、流路部材３０に沿って展開され第二抗体供給部５０が配置された領域に到達する。第二抗体供給部５０の水溶性樹脂５２に含まれている第二抗体１７は、検査対象液１２が到達することにより、水溶性樹脂５２の溶解と共に、流路部材３０に供給される。供給された第二抗体１７は、分子量の大きさの関係で、すぐさま第二供給部５０に面した流路部材３０の極表層に固定、又は留まる。
第一抗体１６が結合した状態の標識物質１４は、第二抗体供給部５０に存在する第二抗体１７と、第二供給部５０に面した流路部材３０に固定化された第二抗体１７によって捕捉される。このように、両面から捕捉されることでテストラインとして機能する第二抗体供給部５０が明瞭に呈色する。
【００６９】
本実施形態では、第二抗体供給部５０において捕捉されずに通過した第一抗体１６は、流路部材３０に沿って展開され第三抗体固定部６０が配置された領域に到達する。第三抗体固定部６０では、第一抗体１６と第三抗体１８とが結合することにより、捕捉される。第三抗体１８は固定されているため、コントロールラインとして機能する第三抗体固定部６０が明瞭に呈色する。
また、第三抗体固定部６０が第二抗体供給部５０と同じように水溶性樹脂の内部に第三抗体１８を含んだ構造とした場合、第二供給部５０と同様に、第三抗体固定部６０に存在する第三抗体１８と、第三固体固定部６０に面した流路部材３０に固相化された第三抗体１８によって捕捉される。このように、両面から捕捉されることでコントロールラインとして機能する。
【００７０】
（標的検査キット）
本発明の標的検査キットは、本発明の標的検査装置を用いて検査を行うための標的検査キットであって、上記の標的検査方法により検査を行う場合、図７に示したように、標的検査装置１０と、検体を採取するための器具（検体採取手段の一例）、及び、検体を処理するための液体の少なくとも一方と、を有する標的検査キットを用いることができる。図７は、本発明の一実施形態に係る標的検査キット２００の概念図である。検体を採取する器具としては、咽頭あるいは鼻腔等から検体を採取するための滅菌綿棒２０１等の公知の器具が挙げられる。検体を処理するための液体としては、検体を希釈するための希釈液２０２、検体を抽出するための抽出液等の公知の液体が挙げられる。
【００７１】
上記実施形態では、前記第一抗体供給部及び第二抗体供給部から供給される試薬が抗原又は抗体である場合について説明したが、本発明はこの実施形態に限定されるものではない。ケミカルアッセイで用いられる指示薬は溶液の化学的性質を指示する試薬を指す。指示薬としては、特に限定されないが、ｐＨ指示薬、鉛イオン、銅イオン、亜硝酸イオン等の各種イオンと反応して変色する各種イオノフォア、各種農薬と反応して変色する試薬などが挙げられる。
【００７２】
上記実施形態では、転写の際に、転写媒体１００における支持体１０１と試薬固定化層１０３とを熱により剥離する例について説明したが、本発明はこの実施形態に限定されるものではない。例えば、支持体１０１と試薬固定化層１０３とを光によって剥離してもよい。この場合、剥離層１０２に、カーボンブラックなどの光吸収剤を混ぜておいて、それに光を吸収させて熱を生じさせることにより、剥離層１０２を溶融させ、試薬固定化層１０３を剥離してもよい。あるいは、剥離層１０２に、光照射によって変質する材料を混ぜておいて、それに光を吸収させて剥離層１０２を脆くすることにより、試薬固定化層１０３を剥離してもよい。
【００７３】
上記実施形態では、流路部材３０の全体に流路が形成されている例を示したが本発明はこれに限定されない。流路部材３０の一部に流路を形成する方法としては、例えば、公知の方法により、親水性多孔質部材の空隙に、疎水性の材料を充填することにより、流路の外縁となる流壁を形成する方法が挙げられる。
【００７４】
また、本実施形態の検査装置１０において、流路部材３０に手が触れたときの汚染を防ぐ目的で、任意の保護部材を設けてもよい。このような保護部材としては、例えば、検査装置１０の全体を覆うハウジングや、流路部材３０上に設けられるフィルムなどが挙げられる。保護部材を設ける場合、流路部材３０の滴下部８０の上部には開口が設けられていることが好ましい。また、保護部材には、流路内の圧力を開放するための開口が設けられていることが好ましい。
【００７５】
上記実施形態において、前記第三抗体固定部を用いたが、前記第二抗体供給部と同様の構造の別の抗体供給部を配設してコントロールラインとして機能させることもできる。
【実施例】
【００７６】
以下、本発明の実施例を説明するが、本発明は、これらの実施例に何ら限定されるものではない。
【００７７】
〔実施例１〕
＜＜試薬用熱転写媒体の作製＞＞
＜溶液の調製＞
１．バック層塗布液の調製
シリコーン系ゴムのエマルション（信越化学工業株式会社製、ＫＳ７７９Ｈ、固形分３０質量％）１６．８質量部、塩化白金酸触媒０．２質量部、及びトルエン８３質量部を混合し、バック層塗布液を得た。
【００７８】
２．剥離層塗布液の調製
ポリエチレンワックス（東洋アドレ株式会社製、ポリワックス１０００、融点９９℃、２５℃における針入度２）１４質量部、エチレン−酢酸ビニル共重合体（三井デュポンポリケミカル株式会社製、ＥＶ−１５０、重量平均分子量２，１００、ＶＡｃ２１％）６質量部、トルエン６０質量部、及びメチルエチルケトン２０質量部を、平均粒径が２．５μｍとなるまで分散し、剥離層塗布液を得た。
【００７９】
３．試薬固定化層塗布液の調製
３−１．固定（第三抗体固定部用）
ポリビニルブチラール樹脂（積水化学工業株式会社製、ＢＬ−１０、ブチラール化度７２ｍｏｌ％）５質量部、エタノール９５質量部を混合し、固定用試薬固定化層塗布液を得た。
【００８０】
３−２．放出（第一抗体供給部用、第二抗体供給部）
ポリビニルブチラール樹脂（積水化学工業株式会社製、ＢＬ−１、ブチラール化度６４ｍｏｌ％）５質量部、エタノール９５質量部を混合し、放出用試薬固定化層塗布液を得た。
【００８１】
４．試薬塗布液の調製
４−１．テストライン
Ａｎｔｉ−ｈｕｍａｎ  ＩｇＧ  ａｎｔｉｂｏｄｙ（Ｓｉｇｍａ社製、Ｉ１８８６）に抗体希釈液（シグマ社製、ダルベッコリン酸緩衝生理食塩水Ｄ８６６２）を加え、２．１４ｍｇ／ｍｌになるように第二抗体試薬液を調整した。次に、純水に水溶性樹脂ポリビニルピロリドン（東京化成工業社製、ｋ９０）１０質量部を加えて室温（２０℃）下で溶解して水溶性樹脂液Ａを得た。得られた水溶性樹脂液Ａを試薬液に対して５０質量部加えて充分に混合し、テストライン用試薬塗布液を得た。
【００８２】
４−２．コントロールライン
Ｈｕｍａｎ  ＩｇＧ（Ｓｉｇｍａ社製、Ｉ２５１１−１０ＭＧ）に抗体希釈液を加え、０．９ｍｇ／ｍＬに調整し、コントロールライン用試薬塗布液を得た。
【００８３】
４−３．標識抗体
金コロイド標識Ａｎｔｉ−Ｈｕｍａｎ  ＩｇＧ  ａｎｔｉｂｏｄｙ（ＢＡＷ社製、Ｇｏｌｄ  ４０ｎｍ、ＯＤ＝１５）に、金コロイド塗布液（２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌバッファー（ｐＨ８．２）、０．０５質量％ポリエチレングリコール、５質量％スクロース）、及び精製水により希釈し、ＯＤ＝１０に調整し、標識抗体用試薬塗布液を得た。
【００８４】
＜層形成＞
１．バック層形成
支持体としての平均厚み４．５μｍのポリエステルフィルム（東レ株式会社製、ルミラーＦ５７）片面に、バック層塗布液を塗布し、８０℃で１０秒間乾燥して、平均厚み０．０２μｍのバック層を形成した。
【００８５】
２．剥離層形成
次に、ポリエステルフィルムにおけるバック層が形成された面とは反対側の面に、剥離層塗布液を塗布し、５０℃で１８０秒間乾燥して、平均厚み８５μｍの剥離層を形成した。  
【００８６】
３−１．テストライン用熱転写媒体及びコントロールライン用熱転写媒体
次に、剥離層上に、放出用試薬固定化層塗布液を塗布し、７０℃で６０秒間乾燥して、平均厚み５μｍの試薬固定化層を形成した。更に試薬固定化層上に、テストライン用試薬塗布液を２０μＬ／ｃｍ２となるよう塗布し、２５℃で５時間乾燥した。以上により、テストライン用熱転写媒体を得た。
【００８７】
また、上記と同様の方法により、剥離層上に固定用試薬固定化層塗布液を塗布し、７０℃で６０秒間乾燥して、平均厚み５μｍの試薬固定化層を形成し、更に試薬固定化層上に、コントロールライン用試薬塗布液を１０μＬ／ｃｍ２になるよう塗布し、２５℃で５時間乾燥して、試薬固定化層に試薬を固定させた。以上により、コントロールライン用熱転写媒体を得た。
【００８８】
３−２．標識抗体用熱転写媒体
また、上記の方法によりバック層及び剥離層を形成した後、剥離層上に、放出用試薬固定化層塗布液を塗布し、７０℃で６０秒間乾燥して、平均厚み５μｍの試薬固定化層を形成した。更に試薬固定化層上に、標識抗体用試薬塗布液を１２μＬ／ｃｍ２となるよう塗布し、２５℃で５時間乾燥して、試薬固定化層に標識抗体層を形成した。以上により、標識抗体用熱転写媒体を得た。
【００８９】
＜流路の作製＞
幅４０ｍｍ×長さ８０ｍｍにカットしたＰＥＴフィルム（東レ株式会社製、ルミラーＳ１０、５０μｍ）の上部に熱可塑性樹脂としてポリエステル系ホットメルト系接着剤（東亜合成株式会社製、アロンメルトＰＥＳ３７５Ｓ４０）を、ロールコーターを用いてＰＥＴフィルム上に厚さが５０μｍとなるように、１９０℃に加熱後、塗工して接着剤層を形成した。この塗工物を２時間以上静置した後、接着剤層面にメンブレンフィルター（メルクミリポア製  ニトロセルロース樹脂Ｎｏ．７５  展開速度７５ｓｅｃ／４ｃｍ）を重ね、幅４ｍｍ×長さ８０ｍｍとなるよう切断形成し流路及び基材を得た。
【００９０】
＜試薬の転写＞
１．標識抗体（第一抗体供給部）
流路と試薬用熱転写媒体の試薬が固定化されている側とを対向させて重ね合わせた後、熱転写プリンタを用いて、図１及び図２に示すように、流路の上流端から２０ｍｍ離れた位置に、標識抗体用熱転写媒体を幅３ｍｍ×長さ１０ｍｍのパターン状に転写した。なお、パターンの形成にはドット密度３００ｄｐｉ（ＴＤＫ株式会社製）のサーマルヘッドを用い、印字速度４２ｍｍ／ｓｅｃ、印字エネルギー０．１７ｍＪ／ｄｏｔの評価系システムを構築し、印字評価を行った。
【００９１】
２．テストライン（第二抗体供給部）及びコントロールライン（第三抗体固定部）
図１及び図２に示したように、標識抗体用熱転写媒体の転写位置から１５ｍｍ離れた位置にテストライン用熱転写媒体を幅０．７ｍｍ×長さ４ｍｍのライン状に転写した。更にテストライン用熱転写媒体から５ｍｍ離れた位置にコントロールライン用熱転写媒体を幅０．７ｍｍ×長さ４ｍｍのライン状に転写した。なお、各ラインは、上記と同様の印字条件で形成した。
【００９２】
３．吸収部材
更に、図１及び図２に示すように吸収部材７０（メルクミリポア社製、ＣＦＳＰ２２３０００）を設けた。
【００９３】
４．滴下部
図１及び図２に示すように、流路の上流部に検査対象液を滴下させるための滴下用部材（メルクミリポア社製、ＣＦＳＰ２２３０００）８０を設けた。実施例１のイムノクロマトアッセイを得た。
【００９４】
＜水溶性樹脂の溶出性＞
用いた水溶性樹脂の溶出性については、以下の基準により評価した。結果を表１に示した。
Ａ：易溶解（水１００ｍＬに樹脂を１ｍｇに加えると、１０秒間以内に溶ける。）
Ｂ：溶解（水１００ｍＬに樹脂を１ｍｇ加えると、１分間以内に溶ける）
Ｃ：難溶解（水１００ｍＬに樹脂を１ｍｇ加えると、３分間以内に溶ける。）
Ｄ：不溶（水１００ｍＬに樹脂を１ｍｇ加えて攪拌しても溶けない。）
【００９５】
＜検出感度＞
＜＜評価方法＞＞
１．検査対象液の調製
Ｈｕｍａｎ  ＩｇＧに抗体希釈液（シグマ社製、ダルベッコリン酸緩衝生理食塩水Ｄ８６６２）を加え、５００μｇ／ｍＬに調整し、検査対象液を得た。
【００９６】
２．反応
イムノクロマトアッセイの滴下部８０に検査対象液を１００μＬ滴下し、１０分間経過したところで、イムノクロマトアッセイを目視にて観察した。このうち、テストライン及びコントロールラインの位置に明確に発色が認められたものを◎、問題なくラインとして判定できるものを○とし、かろうじて発色は確認できラインとして判定できるものを△、発色が認められなかったもの、もしくはラインが下流側に流れているものなど、ライン状に発色していないものを×として、検出感度を評価した。結果を表２に示した。
【００９７】
＜判定ラインの鮮明さ＞
判定ラインについては、目視にて、ラインの鮮明さを評価した。ラインの境界が鮮明なものを「鮮明」とし、はっきりとしないものを「ムラあり」とした。結果を表２に示した。
【００９８】
〔実施例２〕
実施例１における流路の作製時に用いたメンブレンフィルターをニトロセルロース樹脂Ｎｏ．１８０（メルクミリポア社製、展開速度１８０ｓｅｃ／４ｃｍ）に変更した以外は、実施例１と同様にして、イムノクロマトアッセイを作製し、評価を行った。結果を表１及び表２に示した。
【００９９】
〔実施例３〕
実施例１における流路の作製時に用いたメンブレンフィルターをニトロセルロース樹脂Ｎｏ．２４０（メルクミリポア社製、展開速度２４０ｓｅｃ／４ｃｍ）に変更した以外は、実施例１と同様にして、イムノクロマトアッセイを作製し、評価を行った。結果を表１及び表２に示した。
【０１００】
〔実施例４〕
実施例１における水溶性樹脂液Ａの替わりに、純水に水溶性樹脂ポリビニルアクリル酸（クラレ社製、ジュリマーＡＣ  １０３ＡＰ）１０質量部を加えて室温（２０℃）下で溶解して得た水溶性樹脂液Ｃを用いてテストライン用試薬塗布液を得た以外は、実施例１と同様にして、イムノクロマトアッセイを作製し、評価を行った。結果を表１及び表２に示した。
【０１０１】
〔実施例５〕
実施例４における流路の作製時に用いたメンブレンフィルターをニトロセルロース樹脂Ｎｏ．１８０（メルクミリポア社製、展開速度１８０ｓｅｃ／４ｃｍ）に変更した以外は、実施例４と同様にして、イムノクロマトアッセイを作製し、評価を行った。結果を表１及び表２に示した。
【０１０２】
〔実施例６〕
実施例４における流路の作製時に用いたメンブレンフィルターをニトロセルロース樹脂Ｎｏ．２４０（メルクミリポア社製、展開速度２４０ｓｅｃ／４ｃｍ）に変更した以外は、実施例４と同様にして、イムノクロマトアッセイを作製し、評価を行った。結果を表１及び表２に示した。
【０１０３】
〔実施例７〕
実施例１における水溶性樹脂液Ａの替わりに、純水にカルボキシメチルセルロース（第一工業製薬社製、セロゲン）５質量部を加えて室温（２０℃）下で溶解して得た水溶性樹脂液Ｄを用いてテストライン用試薬塗布液を得た以外は、実施例１と同様にして、イムノクロマトアッセイを作製し、評価を行った。結果を表１及び表２に示した。
【０１０４】
〔実施例８〕
実施例７における流路の作製時に用いたメンブレンフィルターをニトロセルロース樹脂Ｎｏ．１８０（メルクミリポア社製、展開速度１８０ｓｅｃ／４ｃｍ）に変更した以外は、実施例７と同様にして、イムノクロマトアッセイを作製し、評価を行った。結果を表１及び表２に示した。
【０１０５】
〔実施例９〕
実施例７における流路の作製時に用いたメンブレンフィルターをニトロセルロース樹脂Ｎｏ．２４０（メルクミリポア社製、展開速度２４０ｓｅｃ／４ｃｍ）に変更した以外は、実施例７と同様にして、イムノクロマトアッセイを作製し、評価を行った。結果を表１及び表２に示した。
【０１０６】
〔比較例１〕
実施例１における水溶性樹脂液Ａの替わりに、酢酸ビニル分散液（日信化学工業社製、ビニブラン１００２）を純水で希釈し、固形分濃度２０質量％にして分散体Ｅを得て、試薬塗布液の調整に分散液Ｅを用いてテストライン用試薬塗布液を得た以外は、実施例１と同様にして、イムノクロマトアッセイを作製し、評価を行った。結果を表１及び表２に示した。
【０１０７】
〔比較例２〕
比較例１における流路の作製時に用いたメンブレンフィルターをニトロセルロース樹脂Ｎｏ．１８０（メルクミリポア社製、展開速度１８０ｓｅｃ／４ｃｍ）に変更した以外は、比較例１と同様にして、イムノクロマトアッセイを作製し、評価を行った。結果を表１及び表２に示した。
【０１０８】
〔比較例３〕
比較例１における流路の作製時に用いたメンブレンフィルターをニトロセルロース樹脂Ｎｏ．２４０（メルクミリポア社製、展開速度２４０ｓｅｃ／４ｃｍ）に変更した以外は、比較例１と同様にして、イムノクロマトアッセイを作製し、評価を行った。結果を表１及び表２に示した。
【０１０９】
〔比較例４〕
実施例１における水溶性樹脂液Ａの替わりに、純水にエチルセルロース（関東化学工業社製、４５ＣＰ）１０質量部を加えて混合し、室温（２０℃）下で超音波分散を１時間行うことで分散液Ｆを得て、試薬塗布液の調製に分散液Ｆを用いてテストライン用試薬塗布液を得た以外は、実施例１と同様にして、イムノクロマトアッセイを作製し、評価を行った。結果を表１及び表２に示した。
【０１１０】
〔比較例５〕
比較例４における流路の作製時に用いたメンブレンフィルターをニトロセルロース樹脂Ｎｏ．１８０（メルクミリポア社製、展開速度１８０ｓｅｃ／４ｃｍ）に変更した以外は、比較例４と同様にして、イムノクロマトアッセイを作製し、評価を行った。結果を表１及び表２に示した。
【０１１１】
〔比較例６〕
比較例４における流路の作製時に用いたメンブレンフィルターをニトロセルロース樹脂Ｎｏ．２４０（メルクミリポア社製、展開速度２４０ｓｅｃ／４ｃｍ）に変更した以外は、比較例４と同様にして、イムノクロマトアッセイを作製し、評価を行った。結果を表１及び表２に示した。
【０１１２】
〔比較例７〕
実施例１における試薬塗布液の調製及びテストライン用熱転写媒体の形成を以下のようにして行った以外は、実施例１と同様にして、イムノクロマトアッセイを作製し、評価を行った。結果を表１及び表２に示した。
【０１１３】
１．試薬塗布液の調製
Ａｎｔｉ−ｈｕｍａｎ  ＩｇＧ  ａｎｔｉｂｏｄｙ（Ｓｉｇｍａ社製、Ｉ１８８６）に抗体希釈液（シグマ社製、ダルベッコリン酸緩衝生理食塩水Ｄ８６６２）を加え、２．１４ｍｇ／ｍＬになるように試薬液を調製し、テストライン用試薬塗布液を得た。
【０１１４】
２．テストライン用熱転写媒体
剥離層上に、放出用試薬固定化層塗布液を塗布し、これを７０℃で６０秒間乾燥して、平均厚み５μｍの試薬固定化層を形成した。更に試薬固定化層上に、水溶性樹脂Ａを１０μＬ／ｃｍ２になるように塗布し２５℃で１時間乾燥した後、その上にテストライン用試薬塗布液を１０μＬ／ｃｍ２になるよう塗布した。これを２５℃で５時間乾燥して、試薬固定化層に試薬固定部を形成した。以上により、テストライン用熱転写媒体を得た。
【０１１５】
〔比較例８〕
実施例１における試薬塗布液の調製及びテストライン用熱転写媒体の形成を以下のようにして行った以外は、実施例１と同様にして、イムノクロマトアッセイを作製し、評価を行った。結果を表１及び表２に示した。
【０１１６】
１．試薬塗布液の調製
Ａｎｔｉ−ｈｕｍａｎ  ＩｇＧ  ａｎｔｉｂｏｄｙ（Ｓｉｇｍａ社製、Ｉ１８８６）に抗体希釈液（シグマ社製、ダルベッコリン酸緩衝生理食塩水Ｄ８６６２）を加え、２．１４ｍｇ／ｍＬになるように試薬液を調製し、テストライン用試薬塗布液を得た。
【０１１７】
２．テストライン用熱転写媒体
剥離層上に、放出用試薬固定化層塗布液を塗布し、これを７０℃で６０秒間乾燥して、平均厚み５μｍの試薬固定化層を形成した。更に試薬固定化層上に、テストライン用試薬塗布液を１０μＬ／ｃｍ２になるよう塗布し２５℃で１時間乾燥した後、その上に水溶性樹脂Ａを１０μＬ／ｃｍ２になるように塗布した。これを２５℃で５時間乾燥して、試薬固定化層に試薬固定部を形成した。以上により、テストライン用熱転写媒体を得た。
【０１１８】
【表１】
2016161299.tif 000003
【０１１９】
【表２】
2016161299.tif 000004
【０１２０】
表１及び表２の結果から、実施例１〜９は、検出感度が総て△以上であった。また、ラインも総て鮮明であった。
一方、比較例１〜６は、検出感度が×であった。比較例７〜８は、検出感度が△であったが、ラインにムラが出てしまった。
なお、実施例１の標的検査装置では、図８Ａに示すようにラインが鮮明であり、更に図８Ｂに示すように流路部材の表層に第二抗体が留まっているのがわかる。しかしながら、図９Ａに示すように、従来の標的検査装置では、図９Ａに示すようにラインが不明確であり、図９Ｂに示すように第二抗体が流出してしまっているのがわかる。
【０１２１】
本発明の態様は、例えば、以下のとおりである。
＜１＞  検査対象液を流すための流路と、
標識を有し、前記検査対象液中に標的物質が含まれているときに前記標的物質と結合可能な第一抗体を、前記流路を流れる前記検査対象液に供給する第一抗体供給部と、
前記流路の前記第一抗体供給部よりも下流側において、前記検査対象液に溶解可能な水溶性樹脂中に混入され、前記第一抗体、及び前記標的物質の少なくともいずれかと結合可能な第二抗体を含む試薬固定部を有し、前記流路を検査対象液が前記水溶性樹脂を溶解し流路を流れ、試薬固定部に第一抗体が供給された前記検査対象液に供給する第二抗体供給部と、
を有することを特徴とする標的検査装置である。
＜２＞  前記流路が、多孔質である前記＜１＞に記載の標的検査装置である。
＜３＞  前記第二抗体供給部が、前記第二抗体を混入した前記水溶性樹脂の成形体であり、前記成形体が前記流路に接触して配設された前記＜１＞から＜２＞のいずれかに記載の標的検査装置である。
＜４＞  前記＜１＞から＜３＞のいずれかに記載の標的検査装置を製造するための標的検査装置製造用の転写媒体であって、
支持体と、
前記支持体上に設けられた剥離層と、
前記剥離層上に設けられた試薬固定化層と、を有しており、
前記試薬固定化層の表面は、前記標的物質と反応する試薬が固定されている構造、及び前記標的物質と反応する試薬が混入された水溶性樹脂が固定されている構造のいずれか一方の構造を有することを特徴とする標的検査装置製造用の転写媒体である。
＜５＞  前記＜４＞に記載の標的検査装置製造用の転写媒体の前記試薬固定化層と、流路とを接触させて、前記試薬固定化層を前記流路に転写する工程を含むことを特徴とする検査装置の製造方法である。
＜６＞  前記＜１＞から＜３＞のいずれかに記載の標的検査装置と、少なくとも検体を採取するための検体採取手段とを有することを特徴とする標的検査キットである。
＜７＞  標識を有し、検査対象液中に標的物質が含まれているときに前記標的物質と結合可能な第一抗体を、流路を流れる前記検査対象液に供給する第一抗体供給工程と、
前記検査対象液に溶解可能な水溶性樹脂中に混入され、前記第一抗体、及び前記標的物質の少なくともいずれかと結合可能な第二抗体を、前記流路を流れ、前記第一抗体が供給された前記検査対象液に供給する第二抗体供給工程と、
を含むことを特徴とする標的検査方法である。
【符号の説明】
【０１２２】
１０      標的検査装置
１２      検査対象液
１４      標的物質
１６      第一抗体（試薬の一例）
１７      第二抗体（試薬の一例）
２０      基材
３０      流路部材
４０      第一抗体供給部
５０      第二抗体供給部
１００      転写媒体（転写媒体の一例）
１０１      支持体
１０２      剥離層
１０３      試薬固定化層
１０４      バック層
２００      標的検査キット
２０１      滅菌綿棒
２０２      希釈液
【先行技術文献】
【特許文献】
【０１２３】
【特許文献１】特開２０１０−２５６３０９号公報
【図１】
2016161299.tif 000005
【図２】
2016161299.tif 000006
【図３】
2016161299.tif 000007
【図４】
2016161299.tif 000008
【図５Ａ】
2016161299.tif 000009
【図５Ｂ】
2016161299.tif 000010
【図６】
2016161299.tif 000011
【図７】
2016161299.tif 000012
【図８Ａ】
2016161299.tif 000013
【図８Ｂ】
2016161299.tif 000014
【図９Ａ】
2016161299.tif 000015
【図９Ｂ】
2016161299.tif 000016