(57)【要約】【課題】軟包材からなる培養バッグを用いて細胞等の培養を行う場合において培養バッグの底面を平坦な状態にして培養することを可能とする。【解決手段】培養液が充填された軟包材からなる培養バッグを載置して培養対象物の培養を行うための培養バッグ固定台であって、培養バッグを載置する架台を備え、架台の周縁部に二個以上の固定具が対向して立設され、固定具に凹部が形成された培養バッグ固定台。培養バッグの端部に二個以上の孔が設けられ、培養バッグ固定台の架台上に培養バッグを載置し、培養バッグ固定台の固定具を孔に挿入して孔の周縁部を固定具の凹部に係合し、培養バッグの底面を平坦な状態にして培養バッグを架台に固定する。【選択図】  図２
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
培養液が充填された軟包材からなる培養バッグを載置して培養対象物の培養を行うための培養バッグ固定台であって、
培養バッグを載置する架台を備え、前記架台の周縁部に二個以上の固定具が対向して立設され、前記固定具に凹部が形成された
ことを特徴とする培養バッグ固定台。
【請求項２】
前記凹部が、前記固定具において、前記架台の表面の位置から上方に、培養液が充填された前記培養バッグの厚みの１／２〜３／２の位置に形成されたことを特徴とする請求項１記載の培養バッグ固定台。
【請求項３】
前記凹部が前記固定具に水平面に対して円周状に形成されたことを特徴とする請求項１又は２記載の培養バッグ固定台。
【請求項４】
前記架台の四隅に前記固定具が立設されたことを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載の培養バッグ固定台。
【請求項５】
培養バッグの端部に二個以上の孔が前記固定具に対応して設けられ、前記固定具を前記孔に挿入して前記孔の周縁部を前記凹部に係合したことを特徴とする請求項１〜４のいずれかに記載の培養バッグ固定台。
【請求項６】
培養バッグの端部に二個以上の孔が設けられ、請求項１〜５のいずれかに記載の培養バッグ固定台の架台上に前記培養バッグを載置し、前記培養バッグ固定台の固定具を前記孔に挿入して前記孔の周縁部を前記固定具の凹部に係合し、前記培養バッグの底面を平坦な状態にして前記培養バッグを前記架台に固定する
ことを特徴とする培養バッグ固定台の使用方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、細胞等の培養技術に関し、特に軟包材からなる培養バッグを用いて細胞等の培養を行う場合に使用する培養バッグ固定台、及び培養バッグ固定台の使用方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、医薬品の生産や、遺伝子治療、再生医療、免疫療法等の分野において、細胞や組織、微生物、ウィルス等（以下、細胞等と言う）を人工的な環境下で効率良く大量に培養することが求められている。
このような細胞等の培養では、軟包材からなる培養バッグを好適に用いることができる。軟包材からなる培養バッグを用いることで、培養バッグに優れたガス透過性を付与することができ、閉鎖系の培養システムを構築し易くすることが可能となる。また、培養バッグの容量や培養面積を容易に制御できると共に、細胞等及び培地を含む培養液（以下、細胞等と培地を含むものを培養液と言う）の送液を自動化し易いなどの様々なメリットを得ることが可能である。
【０００３】
一方、培養バッグを架台に載せて培養を行う場合、単に載せるだけでは培養バッグの底面にシワや弛みが生じ、平坦な培養面を得ることができない。このように培養面にシワや弛みが生じると、その部分に細胞等が溜って過度な密度を生じ、また細胞等の移動が制限されるため、細胞等の増殖効率が低下するという問題があった。
また、このような細胞等の溜まった場所は、培養細胞等の回収にあたって、培養バッグ内に細胞等が残存する原因になるという問題もあった。
そこで、このような問題を解消するために、特許文献１に記載の細胞培養装置では、培養バッグの四隅に孔を設けると共に、架台の四隅に固定具を立設し、培養バッグの孔に架台の固定具を通して培養バッグを引っ張ることによって、培養面を平坦にする方法が採られている。
【０００４】
【特許文献１】国際公開２００８／１３６３７１号パンフレット
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、この方法によっても、培養バッグに培養液が入った状態では、培養バッグの培養面にシワや弛みが生じ、その部分に細胞等の溜まった場所が生じることによって、細胞等の増殖効率が低下するというという問題があった。
具体的には、例えば図５では、培養液を充填した培養バッグ３００が架台２００に載置され、培養バッグ３００に設けられた孔３０１に固定具１００を挿入して、培養バッグ３００を引っ張るようにしている。しかしながら、このようにしてもなお、培養バッグ３００の底面にはシワや弛みが生じるという問題があった。
【０００６】
そこで、本発明者らは、培養バッグを載置する架台に立設した固定具に凹部を設けて、この凹部に培養バッグに設けた孔を係合させ、凹部の高さで培養バッグの端部を保持することによって、培養バッグの培養面を平坦にすることに成功し、本発明を完成させた。
すなわち、本発明は、軟包材からなる培養バッグを用いて細胞等の培養を行う場合において、培養バッグの底面を平坦な状態にして培養することの可能な培養バッグ固定台、及び培養バッグ固定台の使用方法の提供を目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明に係る培養バッグ固定台は、培養液が充填された軟包材からなる培養バッグを載置して培養対象物の培養を行うための培養バッグ固定台であって、培養バッグを載置する架台を備え、前記架台の周縁部に二個以上の固定具が対向して立設され、前記固定具に凹部が形成された構成としてある。
【０００８】
また、本発明に係る培養バッグ固定台の使用方法は、培養バッグの端部に二個以上の孔が設けられ、上記の培養バッグ固定台の架台上に前記培養バッグを載置し、前記培養バッグ固定台の固定具を前記孔に挿入して前記孔の周縁部を前記固定具の凹部に係合し、前記培養バッグの底面を平坦な状態にして前記培養バッグを前記架台に固定する方法としてある。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、軟包材からなる培養バッグを用いて細胞等の培養を行う場合において、培養バッグの底面を平坦な状態にして培養することが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】本発明の第一実施形態に係る培養バッグ固定台の概略を示す斜視図である。
【図２】本発明の第一実施形態に係る培養バッグ固定台に培養バッグを載置した状態の概略を示す斜視図である。
【図３】本発明の第一実施形態に係る培養バッグ固定台に培養バッグを載置した状態の概略を示す部分拡大側面図である。
【図４】本発明の第二実施形態に係る培養バッグ固定台に培養バッグを載置した状態の概略を示す部分拡大側面図である。
【図５】従来の細胞培養における架台に載置した培養バッグの状態の概略を示す部分拡大側面図である。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
以下、本発明の培養バッグ固定台、及び培養バッグ固定台の使用方法の好ましい実施形態について、図面を参照しつつ説明する。
【００１２】
（第一実施形態）
まず、本発明の第一実施形態に係る培養バッグ固定台、及び培養バッグ固定台の使用方法について、図１〜３を参照して説明する。図１は、本実施形態に係る培養バッグ固定台の概略を示す斜視図である。図２は、本実施形態に係る培養バッグ固定台に培養バッグを載置した状態の概略を示す斜視図であり、図３は、同状態の概略を示す部分拡大側面図である。
【００１３】
図１〜３に示されるように、本実施形態の培養バッグ固定台１は、固定具１０と、固定具１０が四隅に立設された架台２０を備えている。
本実施形態の培養バッグ固定台１において、固定具１０の配置及び個数は、これに限定されず、架台２０の周縁部に２個以上の固定具１０が対向して配置されていれば良い。一般的な培養バッグ３０を用いる場合、固定具１０は架台２０の四隅に立設することが好ましく、比較的サイズの大きな培養バッグを用いる場合には、より多くの固定具１０を立設することも好ましい。また、固定具１０を培養バッグ固定台１の短辺における端部中央にそれぞれ１個ずつ配置することもでき、一方の短辺における端部中央に１個配置し、対向する端部に２個以上配置することもできる。
【００１４】
固定具１０の形状は、特に限定されないが、例えば略円柱状とすることができる。また、凹部１１の上方をドーム状にし、同下方を円柱状や角柱状にすることもできる。
【００１５】
固定具１０には、培養バッグ３０に設けられた孔３１を係合するための凹部１１が形成されている。凹部１１は、固定具１０に水平面に対して円周状に形成することが好ましいが、これに限定されず、培養バッグ固定台１の外側方向に、水平面に対して半円周状や弧状等に形成してもよい。また、凹部１１の水平断面は円形に限定されず、多角形や星形などであってもよい。
【００１６】
また、固定具１０において、凹部１１は、培養液が充填された培養バッグ３０を培養バッグ固定台１に載置したときに、架台２０の表面の位置から上方に、培養バッグ３０の厚みの１／２（ほぼ液深ｄの１／２）の位置に、培養バッグ３０の孔３１の周縁部を係合可能に設けられている。この培養バッグ３０の厚みとは、培養液をいっぱいに充填した時の厚みである。
【００１７】
培養バッグ３０は、軟包材からなり、その四隅に孔３１が設けられている。この孔３１は、軟包材がヒートシールされた端部領域などに設けられ、培養バッグ３０内の密封性が孔３１により損なわれないことは言うまでもない。
また、孔３１の配置及び個数は、これに限定されず、培養バッグ固定台１の固定具１０を挿入可能なように、固定具１０に対応して設けることが好ましい。
【００１８】
培養バッグ３０は、内容物を視認できるように、一部又は全部が透明性を有することが好ましい。また、培養バッグ３０は、細胞等の培養に必要なガス透過性（酸素及び二酸化炭素透過性）を有していることが必要であり、３７℃、５％二酸化炭素濃度の培養環境下で使用することが好ましい。さらに、培養バッグ３０は、高い細胞等の増殖効率を実現するために、低細胞毒性、低溶出性、及び放射線滅菌適性を有することが好ましい。
なお、培養バッグ３０を用いて培養を行う培養対象物は、細胞に限定されず、微生物（カビ、酵母なども含む）やウィルスなど、培養が行われる全ての物を対象とすることができる。
【００１９】
このような条件を満たす培養バッグ３０の材料としては、ポリエチレン系樹脂が好ましい。このポリエチレン系樹脂としては、ポリエチレン、エチレンとα−オレフィンの共重合体、エチレンと酢酸ビニルの共重合体、エチレンとアクリル酸やメタクリル酸共重合体と金属イオンを用いたアイオノマー等が挙げられる。また、ポリオレフィン、スチレン系エラストマー、ポリエステル系熱可塑性エラストマー、シリコーン系熱可塑性エラストマー、シリコーン樹脂等を用いることもできる。
【００２０】
培養バッグ３０には、外部と内容物の移送を行うためのポートが備えられ、ポートにはチューブが接続される。ポートの数は特に限定されず、１個又は２個以上設けることもできる。
【００２１】
培養バッグ３０の四辺はヒートシールにより密封されたものとすることができる。また、培養バッグ３０をブロー成形による一体成型バッグとしてもよい。
培養バッグ３０の形状及びその収容部の形状は、特に限定されないが、例えば長方形状とすることができる。また、培養バッグ３０の収容部の形状を、ポートに向かって次第に狭くなるように構成すれば、培養液の移送の際の細胞等の残留を低減できるため好ましい。
【００２２】
培養バッグ３０を、培養バッグ固定台１の架台２０上に載置し、固定具１０を孔３１に挿入して、孔３１の周縁部を固定具１０の凹部１１に係合させる。これにより、培養バッグ３０の端部は、凹部１１の高さに保持されて、培養バッグ３０の底面を平坦な状態にして培養バッグ３０を架台２０に固定することができる。
そして、このような培養バッグ３０に細胞等及び培地を含む培養液が充填されて細胞等の培養が行われる。培養バッグ３０への培養液の充填は、培養バッグ３０を架台２０に固定する前であっても後であってもよい。
【００２３】
なお、図３には、培養バッグ３０の一方の端部が固定具１０の凹部１１の高さに保持されているようすが示されているが、当該端部に対向する端部も同様に固定具１０の凹部１１の高さに保持される。後述する図４についても同様である。
【００２４】
このような本実施形態の培養バッグ固定台、及び培養バッグ固定台の使用方法によれば、培養バッグ３０の底面を平坦な状態に維持することができ、培養面をシワや弛みのない状態にすることができる。このため、培養バッグ３０の培養面積を最大にすることが可能になる。
また、培養バッグ３０の底面を平坦な状態にすることにより、培養バッグ３０内において細胞等を均一に分布（分散）させることができる。このため、細胞等の培養における培養条件の最適化を図ることができ、細胞等の増殖効率を一層向上させることが可能となっている。
【００２５】
（第二実施形態）
次に、本発明の第二実施形態に係る培養バッグ固定台、及び培養バッグ固定台の使用方法について、図４を参照して説明する。図４は、本実施形態に係る培養バッグ固定台に培養バッグを載置した状態の概略を示す部分拡大側面図である。
【００２６】
図４に示されるように、本実施形態の培養バッグ固定台１ａは、固定具１０ａと、固定具１０ａが四隅に立設された架台２０ａを備えている。
固定具１０ａにおいて、凹部１１ａは、培養液が充填された培養バッグ３０を培養バッグ固定台１ａに載置したときに、架台２０ａの表面の位置から上方に、培養バッグ３０の厚みの３／４（ほぼ液深ｄの３／４）の位置に、培養バッグ３０の孔３１の周縁部を係合可能に設けられている。
【００２７】
本実施形態によれば、培養バッグ３０を、培養バッグ固定台１ａの架台２０ａ上に載置し、固定具１０ａを孔３１に挿入して、孔３１の周縁部を固定具１０ａの凹部１１ａに係合させることができる。これにより、培養バッグ３０の端部は、凹部１１ａの高さに引っ張り上げられて保持され、培養バッグ３０の底面を平坦な状態にして培養バッグ３０を架台２０ａに固定することができる。
このため、本実施形態によれば、培養バッグ３０の底面を平坦な状態に維持して、培養面をシワや弛みのない状態にすることができ、培養面積を最大にすることができるなど、第一実施形態と同様の効果を得ることが可能である。
【００２８】
このように、本実施形態によれば、培養バッグ３０における対向する端部を、凹部１１ａの高さに引っ張り上げることで、培養バッグ３０の底面を平坦な状態にすることができる。このような効果は、凹部１１ａの位置が、架台２０ａの表面の位置から上方に、培養バッグ３０の厚みよりもやや上方の位置にあっても同様に得ることができる。
このような観点から、固定具に凹部を形成する位置を、架台の表面の位置から上方に、培養液が充填された培養バッグの厚みの１／２〜３／２の範囲とすることが好ましく、１／２〜１の範囲とすることがより好ましく、１／２〜３／４の範囲とすることがさらに好ましい。
【００２９】
本実施形態における固定具１０ａの配置、個数、及び形状、凹部１１ａの形状、培養バッグ３０の特徴などその他の点については、第一実施形態と同様のものとすることができる。
【００３０】
以上、本発明について、好ましい実施形態を示して説明したが、本発明は、前述した実施形態に限定されるものではなく、本発明の範囲で種々の変更実施が可能であることは言うまでもない。
例えば、固定具の形状は実施形態に限定されず、凹部を備えることにより実施形態と同様の効果が得られる限り、例えば略直方体などその他の形状にしても良い。また、架台を振動させることによって、培養バッグ内の培養液を攪拌可能にするなど適宜変更することが可能である。
【産業上の利用可能性】
【００３１】
本発明は、培養容器を用いて、閉鎖系で細胞を大量に培養する遺伝子治療、免疫療法、再生医療や抗体医薬生産などにおいて好適に利用することが可能である。
【符号の説明】
【００３２】
１，１ａ  培養バッグ固定台
１０，１０ａ  固定具
１１，１１ａ  凹部
２０，２０ａ  架台
３０  培養バッグ
３１  孔
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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