(57)【要約】【課題】ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤の抗腫瘍効果を増強しうる抗腫瘍効果増強剤、並びに、各種の癌に対し優れた抗腫瘍効果を奏する抗腫瘍剤を提供する。【解決手段】本発明に係る抗腫瘍効果増強剤は、クマリン誘導体またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含有し、ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤の抗腫瘍効果を増強しうる。【選択図】図１７
2016155776.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
クマリン誘導体もしくはその薬学的に許容される塩を有効成分として含有し、ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤の抗腫瘍効果を増強しうることを特徴とする、抗腫瘍効果増強剤。
【請求項２】
前記クマリン誘導体が下記一般式〔ＩＶ〕で表される化合物からなる群より選ばれる１種または２種以上の化合物：
【化１】
2016155776.tif 000026
（式中、Ｒ１８とＲ１９とはそれぞれ独立して水素原子、水酸基またはＣ１−６アルキル基を示す。Ｒ２０とＲ２１とＲ２２とＲ２３とはそれぞれ独立して水素原子または水酸基であり、当該水酸基の水素原子は、Ｃ１−６アルキル基またはβ‐Ｄ−グルコピラノシル基で置換されていてもよい）
であることを特徴とする請求項１に記載の抗腫瘍効果増強剤。
【請求項３】
前記クマリン誘導体が４−メチルウンベリフェロンであることを特徴とする請求項２に記載の抗腫瘍効果増強剤。
【請求項４】
ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤と、請求項１から３のいずれか１項に記載の抗腫瘍効果増強剤とを有効成分として含有することを特徴とする抗腫瘍剤。
【請求項５】
前記ＭＥＫ阻害剤が、下記一般式〔Ｉ〕〜〔ＩＩＩ〕で表される化合物からなる群より選ばれる１種または２種以上の化合物もしくは薬学的に許容されるその塩であることを特徴とする請求項４に記載の抗腫瘍剤：
一般式〔Ｉ〕で表される化合物は、
【化２】
2016155776.tif 000027
［式中、Ｘ１及びＸ２は、同一又は異なって、それぞれ、炭素原子、又は、窒素原子を示し、
【化３】
2016155776.tif 000028
部分は、
【化４】
2016155776.tif 000029
であり、
Ｒ１’、Ｒ２’、及び、Ｒ６は、同一又は異なって、それぞれ、
Ｃ１−６アルキル基、
Ｃ２−６アルケニル基、
（ここで、当該Ｃ１−６アルキル基、及び、Ｃ２−６アルケニル基は、下記グループＡから選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、又は、
【化５】
2016155776.tif 000030
｛ｍは、０又は１乃至４の整数であり、環Ｃｙは、Ｃ３−１２炭素環基、又は、複素環基である。
（ここで、当該複素環基は、炭素原子の他に、酸素原子、窒素原子、及び、硫黄原子から選ばれる１乃至４個のヘテロ原子を有する、飽和、又は、不飽和の環であって、当該Ｃ３−１２炭素環基、及び、複素環基は、下記グループＢから選ばれる１乃至５個の置換基で置換されてもよい。）｝であり、
Ｒ３、Ｒ４、及び、Ｒ５は、同一又は異なって、それぞれ、
水素原子、
ヒドロキシ基、
Ｃ１−６アルキル基、
Ｃ２−６アルケニル基、
（ここで、当該Ｃ１−６アルキル基、及び、Ｃ２−６アルケニル基は、下記グループＡから選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
Ｃ３−１２炭素環基、又は、
複素環基であり、
（ここで、当該複素環基は、炭素原子の他に、酸素原子、窒素原子、及び、硫黄原子から選ばれる１乃至４個のヘテロ原子を有する、飽和又は不飽和の環の基であって、当該Ｃ３−１２炭素環基、及び、複素環基は、下記グループＢから選ばれる１乃至５個の置換基で置換されてもよい。）或いは
Ｒ２’とＲ３とが一緒になってＣ１−４アルキレン基を形成してもよく、またはＲ４とＲ５とが一緒になってＣ１−４アルキレン基を形成してもよい。
｛ここで、グループＡは、
１）ハロゲン原子、
２）ニトロ基、
３）シアノ基、
４）Ｃ１−４アルキル基、
５）−ＯＲＡ１（ここでＲＡ１は、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
６）−ＳＲＡ２（ここでＲＡ２は、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
７）−ＮＲＡ３ＲＡ４（ここでＲＡ３及びＲＡ４は、同一又は異なって、それぞれ、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
８）−ＣＯＯＲＡ５（ここでＲＡ５は、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
９）−ＮＲＡ６ＣＯＲＡ７（ここでＲＡ６は、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基であり、ＲＡ７は、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ３−１２炭素環基、又は、複素環基である。）、
１０）−ＮＲＡ８ＣＯＯＲＡ９（ここでＲＡ８及びＲＡ９は、同一又は異なって、それぞれ、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
１１）Ｃ３−１２炭素環基、及び、
１２）複素環基からなる群であり、
（ここで、当該複素環基は、炭素原子の他に、酸素原子、窒素原子、及び、硫黄原子から選ばれる１乃至４個のヘテロ原子を有する、飽和又は不飽和の環の基であり、
前記４）、ＲＡ１、ＲＡ２、ＲＡ３、ＲＡ４、ＲＡ５、ＲＡ６、ＲＡ７、ＲＡ８、及び、ＲＡ９のＣ１−４アルキル基は、それぞれ、下記グループＣから選ばれる同一又は異なった１乃至３個の置換基で置換されてもよく、
また、前記１１）及びＲＡ７のＣ３−１２炭素環基、１２）及びＲＡ７の複素環基は、それぞれ、下記グループＣから選ばれる同一又は異なった１乃至５個の置換基で置換されてもよい。）
グループＢは、
１）ハロゲン原子、
２）ニトロ基、
３）シアノ基、
４）Ｃ１−８アルキル基、
５）Ｃ２−４アルケニル基、
６）Ｃ２−４アルキニル基、
７）−ＯＲＢ１（ここでＲＢ１は、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
８）−ＳＲＢ２（ここでＲＢ２は、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
９）−ＮＲＢ３ＲＢ４（ここでＲＢ３は、水素原子、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ３−１２炭素環基、又は、複素環基であり、ＲＢ４は、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
１０）−ＮＲＢ５ＣＯＲＢ６（ここでＲＢ５は、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基であり、ＲＢ６は、水素原子、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ３−１２炭素環基、又は、複素環基である。）、
１１）−ＮＲＢ７ＣＯＯＲＢ８（ここでＲＢ７及びＲＢ８は、同一又は異なって、それぞれ、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
１２）−ＮＲＢ９ＣＯＮＲＢ１０ＲＢ１１（ここでＲＢ９、ＲＢ１０及びＲＢ１１は、同一又は異なって、それぞれ、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
１３）−ＮＲＢ１２ＣＯＮＲＢ１３ＯＲＢ１４（ここでＲＢ１２、ＲＢ１３及びＲＢ１４は、同一又は異なって、それぞれ、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
１４）−ＮＲＢ１５ＳＯ２ＲＢ１６（ここでＲＢ１５は、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基であり、ＲＢ１６は、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ３−１２炭素環基、又は、複素環基である。）、
１５）−ＳＯ２−ＲＢ１７（ここでＲＢ１７は、Ｃ１−４アルキル基、又は、複素環基である。）、
１６）−ＳＯ２ＮＲＢ１８ＲＢ１９（ここでＲＢ１８及びＲＢ１９は、同一又は異なって、それぞれ、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
１７）−Ｐ（＝Ｏ）（ＲＢ２０）（ＲＢ２１）（ここでＲＢ２０及びＲＢ２１は、同一又は異なって、それぞれ、Ｃ１−４アルキル基である。）、
１８）−ＣＯＯＲＢ２２（ここでＲＢ２２は、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
１９）−ＣＯＮＲＢ２３ＲＢ２４（ここでＲＢ２３及びＲＢ２４は、同一又は異なって、それぞれ、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
２０）−ＮＲＢ２５ＳＯ２ＮＲＢ２６ＲＢ２７（ここでＲＢ２５、ＲＢ２６及びＲＢ２７は、同一又は異なって、それぞれ、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
２１）−ＮＲＢ２８ＳＯ２ＮＲＢ２９ＣＯＮＲＢ３０ＲＢ３１（ここでＲＢ２８、ＲＢ２９、ＲＢ３０及びＲＢ３１は、同一又は異なって、それぞれ、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
２２）Ｃ３−１２炭素環基、及び、
２３）複素環基
からなる群であり、
（ここで、前記４）の「Ｃ１−８アルキル基」、ＲＢ１乃至ＲＢ３１のＣ１−４アルキル基は、それぞれ、前記グループＡから選ばれる同一又は異なった１乃至３個の置換基で置換されてもよく、
５）のＣ２−４アルケニル基、及び、６）のＣ２−４アルキニル基は、それぞれ、前記グループＡから選ばれる同一又は異なった１乃至３個の置換基で置換されてもよく、
当該複素環基は、炭素原子の他に、酸素原子、窒素原子、及び、硫黄原子から選ばれる１乃至４個のヘテロ原子を有する、飽和又は不飽和の環の基であり、
また、前記２２）、ＲＢ３、ＲＢ６、及び、ＲＢ１６のＣ３−１２炭素環基、前記２３）、ＲＢ３、ＲＢ６、ＲＢ１６、及び、ＲＢ１７の複素環基は、それぞれ、下記グループＣから選ばれる同一又は異なった１乃至５個の置換基で置換されてもよい。）
グループＣは、
１）ハロゲン原子、
２）シアノ基、
３）Ｃ１−４アルキル基、
４）−ＯＲＣ１（ここでＲＣ１は、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
５）−ＮＲＣ２ＲＣ３（ここでＲＣ２及びＲＣ３は、同一又は異なって、それぞれ、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
６）−ＣＯＯＲＣ４（ここでＲＣ４は、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）
及び、
７）オキソ基
からなる群である。｝、
（ただし、
【化６】
2016155776.tif 000031
部分が、
【化７】
2016155776.tif 000032
のとき、条件として、
Ｒ２’はメチル基ではなく、
また、Ｒ２’がフェニル基のとき、Ｒ１’はフェニル基ではない。）］であり、
一般式〔ＩＩ〕で表される化合物は、
【化８】
2016155776.tif 000033
［式中、
Ｒ７、Ｒ８、及びＲ１５は、水素、ハロゲン、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、アジド、−ＯＲ９、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、ＮＲ１０Ｃ（Ｏ）ＯＲ１２、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ９、−ＮＲ１０ＳＯ２Ｒ１２、−ＳＯ２ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ１０Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ１１Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ１１Ｃ（ＮＣＮ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ９Ｒ１０、及びＣ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル、Ｃ２〜Ｃ１０アルキニル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルアルキル、−Ｓ（Ｏ）ｊ（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）、−Ｓ（Ｏ）ｊ（ＣＲ１０Ｒ１１）ｍ−アリール、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、−Ｏ（ＣＲ１０Ｒ１１）ｍ−アリール、−ＮＲ１０（ＣＲ１０Ｒ１１）ｍ−アリール、−Ｏ（ＣＲ１０Ｒ１１）ｍ−ヘテロアリール、−ＮＲ１０（ＣＲ１０Ｒ１１）ｍ−ヘテロアリール、−Ｏ（ＣＲ１０Ｒ１１）ｍ−ヘテロシクリル、及び−ＮＲ１０（ＣＲ１０Ｒ１１）ｍ−ヘテロシクリルからそれぞれ独立に選択され、各アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、及びヘテロシクリル部分は、オキソ、ハロゲン、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、アジド、−ＮＲ１０ＳＯ２Ｒ１２、−ＳＯ２ＮＲ９Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ９、−ＮＲ１０Ｃ（Ｏ）ＯＲ１２、−ＮＲ１０Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ１１Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ１１Ｃ（ＮＣＮ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＯＲ９、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、及びヘテロシクリルアルキルからそれぞれ独立に選択された１個〜５個の基によって任意選択で置換されており、
Ｒ９は、水素、トリフルオロメチル、及びＣ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル、Ｃ２〜Ｃ１０アルキニル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、及びヘテロシクリルアルキルから選択され、各アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、及びヘテロシクリル部分は、オキソ、ハロゲン、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、アジド、−ＮＲ’ＳＯ２Ｒ””、−ＳＯ２ＮＲ’Ｒ”、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、−ＮＲ’Ｃ（Ｏ）ＯＲ””、−ＮＲ’Ｃ（Ｏ）Ｒ”、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ”、−ＳＲ””、−Ｓ（Ｏ）Ｒ””、−ＳＯ２Ｒ’、−ＮＲ’Ｒ”、−ＮＲ’Ｃ（Ｏ）ＮＲ”Ｒ”’、−ＮＲ’Ｃ（ＮＣＮ）ＮＲ”Ｒ”’、−ＯＲ’、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、及びヘテロシクリルアルキルからそれぞれ独立に選択された１個〜５個の基によって任意選択で置換されており；
Ｒ’、Ｒ”、及びＲ”’は、水素、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル、アリール、及びアリールアルキルからそれぞれ独立に選択されており；
Ｒ””は、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル、アリール、及びアリールアルキルから選択されており；或いは
Ｒ’、Ｒ”、Ｒ”’、又はＲ””のうちのいずれか２個は、結合相手の原子と一緒になって、４〜１０員の炭素環、ヘテロアリール環、又は複素環を形成していてよく、これらの環はそれぞれ、ハロゲン、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、アジド、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、及びヘテロシクリルアルキルからそれぞれ独立に選択された１個〜３個の基によって任意選択で置換されており；或いは
Ｒ９及びＲ１０は、結合相手の原子と一緒になって、４〜１０員の炭素環、ヘテロアリール環、又は複素環を形成していてよく、これらの環はそれぞれ、ハロゲン、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、アジド、−ＮＲ’ＳＯ２Ｒ””、−ＳＯ２ＮＲ’Ｒ”、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、−ＮＲ’Ｃ（Ｏ）ＯＲ””、−ＮＲ’Ｃ（Ｏ）Ｒ”、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ”、−ＳＯ２Ｒ””、−ＮＲ’Ｒ”、−ＮＲ’Ｃ（Ｏ）ＮＲ”Ｒ”’、−ＮＲ’Ｃ（ＮＣＮ）ＮＲ”Ｒ”’、−ＯＲ’、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、及びヘテロシクリルアルキルからそれぞれ独立に選択された１個〜３個の基によって任意選択で置換されており；或いは
Ｒ１０及びＲ１１は、それぞれ独立に、水素又はＣ１〜Ｃ６アルキルを表し；或いは
Ｒ１０及びＲ１１は、結合相手の原子と一緒になって、４〜１０員の炭素環、ヘテロアリール環、又は複素環を形成していてよく、これらの環はそれぞれ、ハロゲン、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、アジド、−ＮＲ’ＳＯ２Ｒ””、−ＳＯ２ＮＲ’Ｒ”、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、−ＮＲ’Ｃ（Ｏ）ＯＲ””、−ＮＲ’Ｃ（Ｏ）Ｒ”、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ”、−ＳＯ２Ｒ””、−ＮＲ’Ｒ”、−ＮＲ’Ｃ（Ｏ）ＮＲ”Ｒ”’、−ＮＲ’Ｃ（ＮＣＮ）ＮＲ”Ｒ”’、−ＯＲ’、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、及びヘテロシクリルアルキルからそれぞれ独立に選択された１個〜３個の基によって任意選択で置換されており；
Ｒ１２は、トリフルオロメチル、及びＣ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、及びヘテロシクリルアルキルから選択され、各アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、及びヘテロシクリル部分は、オキソ、ハロゲン、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、アジド、−ＮＲ’ＳＯ２Ｒ””、−ＳＯ２ＮＲ’Ｒ”、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、−ＮＲ’Ｃ（Ｏ）ＯＲ””、−ＮＲ’Ｃ（Ｏ）Ｒ”、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ”、−ＳＯ２Ｒ””、−ＮＲ’Ｒ’、−ＮＲ’Ｃ（Ｏ）ＮＲ”Ｒ”’、−ＮＲ’Ｃ（ＮＣＮ）ＮＲ”Ｒ”’、−ＯＲ’、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、及びヘテロシクリルアルキルからそれぞれ独立に選択された１個〜５個の基によって任意選択で置換されており；
Ｒ１３は、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル、Ｃ２〜Ｃ１０アルキニル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、及びヘテロシクリルアルキルから選択され、各アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、及びヘテロシクリル部分は、オキソ、ハロゲン、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、アジド、−ＮＲ１０ＳＯ２Ｒ１２、−ＳＯ２ＮＲ９Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ９、−ＮＲ１０Ｃ（Ｏ）ＯＲ１２、−ＮＲ１０Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＳＯ２Ｒ１２、−ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ１１Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ１１Ｃ（ＮＣＮ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＯＲ９、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、及びヘテロシクリルアルキルからそれぞれ独立に選択された１個〜５個の基によって任意選択で置換されており；
Ａは、ＯＲ９又はＮＲ１０ＯＲ９から選択されており；
Ｒ１４は、水素、−ＳＣＦ３、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｆ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、アジド、−ＯＲ９、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、−ＮＲ１０Ｃ（Ｏ）ＯＲ１２、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ９、−ＮＲ１０ＳＯ２Ｒ１２、−ＳＯ２ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ１０Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ１１Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ９Ｒ１０、及びＣ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル、Ｃ２〜Ｃ１０アルキニル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルアルキル、−Ｓ（Ｏ）ｊ（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）、−Ｓ（Ｏ）ｊ（ＣＲ１０Ｒ１１）ｍ−アリール、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、−Ｏ（ＣＲ１０Ｒ１１）ｍ−アリール、−ＮＲ１０（ＣＲ１０Ｒ１１）ｍ−アリール、−Ｏ（ＣＲ１０Ｒ１１）ｍ−ヘテロアリール、−ＮＲ１０（ＣＲ１０Ｒ１１）ｍ−ヘテロアリール、−Ｏ（ＣＲ１０Ｒ１１）ｍ−ヘテロシクリル、及び−ＮＲ１０（ＣＲ１０Ｒ１１）ｍ−ヘテロシクリルから選択され、各アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、及びヘテロシクリル部分は、オキソ、ハロゲン、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、アジド、−ＮＲ１０ＳＯ２Ｒ１２、−ＳＯ２ＮＲ９Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ９、−ＮＲ１０Ｃ（Ｏ）ＯＲ１２、−ＮＲ１０Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ１１Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ１１Ｃ（ＮＣＮ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＯＲ９、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、及びヘテロシクリルアルキルからそれぞれ独立に選択された１個〜５個の基によって任意選択で置換されており；
ｍは、０、１、２、３、４、又は５であり；
ｊは、１又は２である］であり、
一般式〔ＩＩＩ〕で表される化合物は、
【化９】
2016155776.tif 000034
［式中、
Ｘ１は、ＣＲ６であり；
Ｘ５は、ＣＲ６であり；
Ｒ３は、水素、ヒドロキシ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたアルコキシ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヒドロキシアルコキシ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたアリールオキシ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロアリールオキシ、アミノ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ１−１０）アルキルアミノ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたアリールアミノ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロアリールアミノ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ１−１０）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたハロ（Ｃ１−１０）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヒドロキシ（Ｃ１−１０）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたアミノ（Ｃ１−１０）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ３−１２）シクロアルキル（Ｃ１−５）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ３−１２）シクロアルキル（Ｃ１−５）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたアリール（Ｃ１−１０）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロアリール（Ｃ１−５）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ９−１２）ビシクロアリール（Ｃ１−５）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ８−１２）ビシクロアリール（Ｃ１−５）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ３−１２）シクロアルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ３−１２）シクロアルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ９−１２）ビシクロアルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ３−１２）ビシクロアルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ４−１２）アリール、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ１−１０）アリール、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ９−１２）ビシクロアリールおよび未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ４−１２）ビシクロアリールからなる群から選択され；
Ｒ５は、水素、ヒドロキシ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたアルコキシ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたアリールオキシ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロアリールオキシ、アミノ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ１−１０）アルキルアミノ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたアリールアミノ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロアリールアミノ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ１−１０）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたハロ（Ｃ１−１０）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたアミノ（Ｃ１−１０）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ３−１２）シクロアルキル（Ｃ１−５）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ３−１２）シクロアルキル（Ｃ１−５）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたアリール（Ｃ１−１０）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロアリール（Ｃ１−５）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ９−１２）ビシクロアリール（Ｃ１−５）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ８−１２）ビシクロアリール（Ｃ１−５）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ３−１２）シクロアルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ３−１２）シクロアルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ９−１２）ビシクロアルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ３−１２）ビシクロアルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ４−１２）アリール、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ１−１０）アリール、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ９−１２）ビシクロアリールおよび未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ４−１２）ビシクロアリールからなる群から選択される；
Ｒ６は、それぞれ独立して、水素、ハロ、シアノ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロアリールオキシ、アミノカルボニル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ１−１０）アルキルアミノカルボニル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたアリールアミノカルボニル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロアリールアミノカルボニル、アミノ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ１−１０）アルキルアミノ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたアリールアミノ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロアリールアミノ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ１−１０）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたハロ（Ｃ１−１０）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたアミノ（Ｃ１−１０）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ３−１２）シクロアルキル（Ｃ１−５）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ３−１２）シクロアルキル（Ｃ１−５）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたアリール（Ｃ１−１０）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロアリール（Ｃ１−５）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ９−１２）ビシクロアリール（Ｃ１−５）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ８−１２）ビシクロアリール（Ｃ１−５）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ３−１２）シクロアルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ３−１２）シクロアルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ９−１２）ビシクロアルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ３−１２）ビシクロアルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ４−１２）アリール、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ１−１０）アリール、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ９−１２）ビシクロアリールおよび未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ４−１２）ビシクロアリールからなる群から選択され；
Ｒ１４ａ、Ｒ１４ｂ、Ｒ１４ｃ、Ｒ１４ｄおよびＲ１４ｅは、それぞれ独立して、水素、ハロ、シアノ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたアルコキシ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ１−３）アルキルおよび未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヒドロキシ（Ｃ１−３）アルキルからなる群から選択され；
グループＡ’は、ハロ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよい（Ｃ１−１０）アルコキシ、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよい（Ｃ４−１２）アリールオキシ、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよいヘテロ（Ｃ１−１０）アリールオキシ、アミノカルボニル、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよい（Ｃ１−１０）アルキルアミノカルボニル、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよいアリールアミノカルボニル、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよいヘテロアリールアミノカルボニル、アミノ、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよい（Ｃ１−１０）アルキルアミノ、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよいアリールアミノ、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよいヘテロアリールアミノ、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよい（Ｃ１−１０）アルキル、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよいハロ（Ｃ１−１０）アルキル、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよいヒドロキシ（Ｃ１−１０）アルキル、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよい（Ｃ３−１２）シクロアルキル（Ｃ１−５）アルキル、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよいヘテロ（Ｃ３−１２）シクロアルキル（Ｃ１−１０）アルキル、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよいアリール（Ｃ１−１０）アルキル、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよいヘテロ（Ｃ１−１０）アリール（Ｃ１−５）アルキル、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよい（Ｃ９−１２）ビシクロアリール（Ｃ１−５）アルキル、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよいヘテロ（Ｃ８−１２）ビシクロアリール（Ｃ１−５）アルキル、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよい（Ｃ３−１２）シクロアルキル、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよいヘテロ（Ｃ３−１２）シクロアルキル、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよい（Ｃ９−１２）ビシクロアルキル、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよいヘテロ（Ｃ３−１２）ビシクロアルキル、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよい（Ｃ４−１２）アリール、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよいヘテロ（Ｃ１−１０）アリール、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよい（Ｃ９−１２）ビシクロアリール及びグループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよいヘテロ（Ｃ４−１２）ビシクロアリールであり；
グループＢ’は、ハロ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、（Ｃ１−１０）アルコキシ、（Ｃ４−１２）アリールオキシ、ヘテロ（Ｃ１−１０）アリールオキシ、アミノカルボニル、アミノ、（Ｃ１−１０）アルキルアミノ、（Ｃ１−１０）アルキル、ハロ（Ｃ１−１０）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１−１０）アルキル、（Ｃ３−１２）シクロアルキル（Ｃ１−５）アルキル、ヘテロ（Ｃ３−１２）シクロアルキル（Ｃ１−１０）アルキル、アリール（Ｃ１−１０）アルキル、ヘテロ（Ｃ１−１０）アリール（Ｃ１−５）アルキル、（Ｃ９−１２）ビシクロアリール（Ｃ１−５）アルキル、ヘテロ（Ｃ８−１２）ビシクロアリール（Ｃ１−５）アルキル、（Ｃ３−１２）シクロアルキル、ヘテロ（Ｃ３−１２）シクロアルキル、（Ｃ９−１２）ビシクロアルキル、ヘテロ（Ｃ３−１２）ビシクロアルキル、（Ｃ４−１２）アリール、ヘテロ（Ｃ１−１０）アリール、（Ｃ９−１２）ビシクロアリール及びヘテロ（Ｃ４−１２）ビシクロアリールである］である。
【請求項６】
前記ｃ−Ｍｅｔ阻害剤が、クリゾチニブ、カボザンチニブおよびカボザンチニブｓ−リンゴ酸塩からなる群より選ばれる１種または２種以上の化合物であることを特徴とする請求項４または５に記載の抗腫瘍剤。
【請求項７】
前記一般式〔Ｉ〕〜〔ＩＩＩ〕で表される化合物からなる群より選ばれる１種または２種以上の化合物が、トラメチニブ、セルメチニブ、およびＴＡＫ−７３３からなる群より選ばれる１種または２種以上の化合物であることを特徴とする請求項５または６に記載の抗腫瘍剤。
【請求項８】
請求項４から７のいずれか１項に記載の抗腫瘍剤と、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ２抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、抗ＣＤ２５抗体、抗ＣＤ３３抗体および抗ＣＤ５２抗体からなる群より選ばれる１種または２種以上の抗体と、を有効成分として含有することを特徴とする抗腫瘍剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗腫瘍効果増強剤および抗腫瘍剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
悪性胸膜中皮腫は、アスベストへの曝露と関連する非常に悪性の高い癌であり、十分な治療法は確立されておらず、診断後の平均余命は９〜１２か月となっている。日本における悪性胸膜中皮腫による死者は、今後４０年間で１０万人に上ると予想されており、今後１０年間でその発生は世界中で増加すると予想されている（例えば、非特許文献１）。
【０００３】
悪性胸膜中皮腫は、外科的療法、細胞毒性を有する化学療法、および放射線療法からなる、現在用いられている積極的集学的療法に強い抵抗性を示す。これまでに、多くの標的を有する抗葉酸剤であるペメトレキセドをシスプラチンと組み合わせた薬剤が、悪性胸膜中皮腫治療の第一選択薬として認可されている（非特許文献２，３）。
【０００４】
ここで、マイトジェン活性化タンパク質（ＭＡＰ）キナーゼ（ＭＡＰＫ）経路は、細胞の増殖、成長、分化および生存に重要な役割を果たしていることが知られている。前記ＭＡＰＫ経路の脱制御は、悪性胸膜中皮腫を含む多くのヒト腫瘍の形成に関与している。ＭＡＰＫ経路の構成成分であるＭＡＰキナーゼ／細胞外シグナル制御キナーゼ（ＥＲＫ）キナーゼ（以下、ＭＥＫと称する）は、新たな治療法の有望な標的として同定されており、いくつかのＭＥＫ阻害剤が開発され、そのうちのいくつかは臨床での効果が確認されている。
【０００５】
トラメチニブは、ＭＥＫ１およびＭＥＫ２の強力かつ選択的なアロステリック阻害剤であり、Ｖ６００ ＢＲＡＦ変異のある転移性黒色腫患者に対し、細胞毒性を有する化学療法を超えた生存を可能にすることが示され、前記患者への使用が承認された薬剤である（特許文献１、非特許文献４）。
【０００６】
トラメチニブは、経口投与され、以前に試されたＭＥＫ阻害剤よりも長い循環半減期を持つ。さらに、トラメチニブは、ＭＥＫのＲａｆによるリン酸化を阻害することによって、ＭＥＫによるＥＲＫのリン酸化のみならず、ＭＥＫ１およびＭＥＫ２の活性化をも阻害する。
【０００７】
一方、ほとんどのヒトの癌で発現レベルが上昇しており、予後不良と関係している物質として、ヒアルロン酸が知られている。ヒアルロン酸は直鎖高分子グリコサミノグリカンであり、Ｎ−アセチルグルコサミンおよびグルクロン酸の二糖繰り返し単位から構成され、ヒアルロン酸合成酵素（ＨＡＳ）１、ＨＡＳ２、およびＨＡＳ３によって合成される。
【０００８】
合成されたヒアルロン酸分子は、ＣＤ４４、ＣＤ１６８／ＲＨＡＭＭ，ＬＹＶＥ−１、ＨＡＲＥ／スタビリン‐２、およびＴｏｌｌ様レセプター２および４等の細胞表面レセプターに結合する。ヒアルロン酸のこれらのレセプターとの相互作用は、細胞内シグナル経路、細胞増殖、細胞の運動性、および腫瘍細胞の侵襲性を調節する（例えば、非特許文献５）。
【０００９】
悪性胸膜中皮腫では、ヒアルロン酸は中皮腫細胞によってのみならず、その周囲の正常な中皮細胞および線維芽細胞によっても産生される。上昇したヒアルロン酸レベルは、悪性胸膜中皮腫細胞の悪性度の増加と関係している。ヒアルロン酸の細胞表面レセプターであるＣＤ４４は悪性胸膜中皮腫をはじめとするあらゆる癌の細胞中に高頻度に発現するが、正常な中皮細胞には発現しない。
【００１０】
４−メチルウンベリフェロン（４−ＭＵ）は、ヒアルロン酸合成阻害剤として知られており、細胞のウリジン二リン酸グルクロン酸（ＵＤＰ）−グルクロン酸の消耗、および、ＨＡＳ２およびＨＡＳ３の発現低下によってヒアルロン酸合成を阻害する（非特許文献６）。４−ＭＵは、経口胆汁分泌薬、抗けいれん薬として長年用いられていた薬剤であり、ヒトに投与した場合の安全性が既に確立されている薬剤である。
【００１１】
近年、４−ＭＵが、黒色腫、骨肉種、食道扁平上皮癌、乳癌、前立腺癌、肝細胞癌および白血病を含むいくつかのタイプの腫瘍細胞の増殖を阻害することを示す研究がなされている（例えば、非特許文献７〜１５）。
【００１２】
また、４−ＭＵをゲムシタビンなどの抗腫瘍物質と組み合わせてなる医薬組成物を膵癌等の治療に用いうることが開示されている文献も存在する（特許文献２）。
【００１３】
一方、前記ＣＤ４４は、ｃ−Ｍｅｔなどのシグナルレセプターと相互作用することが知られている。例えば、該レセプターと物理的に結合することによって補助レセプターとしての機能を果たし、その過程でシグナリングの細胞内仲介物質の会合を促進することが知られている。
【００１４】
さらに、近年、免疫反応および／または炎症反応を抑制するリンパ球（regulatory cells）やマクロファージに発現される抗原であるＣＴＬＡ−４抗原やＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１抗原を標的として、上記リンパ球（抑制性リンパ球）を減少させる抗体が臨床において実用化され始めている（特許文献３，４）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１５】
【特許文献１】ＷＯ２００５／１２１１４２号公報（２００５年１２月２２日公開）
【特許文献２】特開２００６−２９８８９２号公報（２００６年１１月２日公開）
【特許文献３】国際公開２００４／００４７７１号公報（２００４年１月１５日公開）
【特許文献４】特表２００４−５１２００５号公報（２００４年４月２２日公表）
【非特許文献】
【００１６】
【非特許文献１】Robinson BW et. al. Lancet. 2005;366(9483):397-408.
【非特許文献２】Vogelzang NJ, et. al. Journal of clinical oncology : official journal of the American Society of Clinical Oncology. 2003;21(14):2636-44.
【非特許文献３】Tsao AS et. al. Journal of clinical oncology : official journal of the American Society of Clinical Oncology. 2009;27(12):2081-90.
【非特許文献４】Flaherty KT, et al. The New England journal of medicine. 2012;367(2):107-14.
【非特許文献５】Toole BP. Clinical cancer research : an official journal of the American Association for Cancer Research. 2009;15(24):7462-8.
【非特許文献６】Kultti A, et al. Experimental cell research. 2009;315(11):1914-23.
【非特許文献７】Edward M, et al. The British journal of dermatology. 2010;162(6):1224-32.
【非特許文献８】Arai E, et al. British journal of cancer. 2011;105(12):1839-49.
【非特許文献９】Twarock S, et al. Molecular cancer. 2011;10:30.
【非特許文献１０】Urakawa H, et al. International journal of cancer Journal international du cancer. 2012;130(2):454-66.
【非特許文献１１】Lokeshwar VB, et al. Cancer research. 2010;70(7):2613-23.
【非特許文献１２】Piccioni F, et al. Glycobiology. 2012;22(3):400-10.
【非特許文献１３】Hiraga T, et al. Cancer research. 2013;73(13):4112-22.
【非特許文献１４】Lompardia SL, et al. Glycobiology. 2013;23(12):1463-76.
【非特許文献１５】Uchakina ON, et al. Leukemia research. 2013;37(10):1294-301.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１７】
しかしながら、非特許文献２，３には、前記第一選択薬を投与した患者の病状が治療から１年以内に進行したことが記載されている。つまり、治療効果が十分な悪性胸膜中皮腫の治療薬は未だ見出されていないのが現状である。また、上述した４−ＭＵ、トラメチニブおよびヒアルロン酸と、悪性胸膜中皮腫の治療との関係についても知見は存在していない。さらに、上述した４−ＭＵの腫瘍細胞増殖阻害のメカニズムは不明である。
【００１８】
特許文献２には、４−ＭＵと抗腫瘍物質との組み合わせによる癌の治療について開示されているが、４−ＭＵがＭＥＫ阻害剤またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤に対してどのように作用するのかということ等については、何れの文献にも何ら開示も示唆もされていない。
【００１９】
一方、上述したように悪性胸膜中皮腫による死者が今後世界中で増加することが予想されていることを鑑みると、効能の高い治療薬の開発はまさに喫緊の課題であると言える。また、当該治療薬は、悪性胸膜中皮腫のみならず、他の癌に対しても抗腫瘍効果を示すことが望ましい。
【００２０】
さらに、例えば前記特許文献１，２に開示の抗体は、従来の治療法では治療困難であった黒色腫などの悪性腫瘍に対して有効であることが証明され、その有効性の増大と、多くの腫瘍への適用の拡大とが期待されている。これらの抗体の奏効率をさらに向上させることができれば、各種の癌に対して非常に治療効果の高い治療薬を提供することができると考えられる。
【００２１】
本発明は、このような問題点に鑑みてなされたものであって、その目的は、ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤の抗腫瘍効果を増強しうる抗腫瘍効果増強剤、悪性胸膜中皮腫をはじめとする各種の癌に対し優れた抗腫瘍効果を奏する抗腫瘍剤、並びに、当該抗腫瘍剤と、抗ＰＤ−１抗体等とを併用する抗腫瘍剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００２２】
中皮腫は、胸水中に大量のヒアルロン酸を産出し、当該ヒアルロン酸がＣＤ４４のリガンドとなることが増殖の一因であると考えられる。また、ＣＤ４４は、乳癌や大腸癌などの固形癌における癌幹細胞マーカーであることが知られており、ＣＤ４４が発現したがん患者では予後が悪化するという知見も存在している。さらに、上述のように、ヒアルロン酸はほとんどのヒトの癌で発現レベルが上昇しており、予後不良と関係している。
【００２３】
そこで、本発明者はまず、ヒアルロン酸と競合阻害する４−ＭＵに着目し、４−ＭＵを用いてヒアルロン酸の合成を阻害し、ヒアルロン酸をリガンドとするＣＤ４４の発現を低下させることによって抗腫瘍効果を得ることができるのではないかと考えた。
【００２４】
しかし、後述する実施例に示すように、４−ＭＵを単独で投与してもＣＤ４４の発現量はあまり低下しなかった。一方で、本発明者は、ＭＥＫ阻害剤によるＥＲＫのリン酸化阻害に基づくＦｒａ−１の発現低下によってＣＤ４４の発現が低下することを見出し、ＭＥＫ阻害剤と４−ＭＵとの併用によってＭＥＫ阻害剤の抗腫瘍効果をさらに増強し得ることを見出した。
【００２５】
さらに、本発明者は、４−ＭＵをｃ−Ｍｅｔ阻害剤と併用することによって、ｃ−Ｍｅｔ阻害剤の抗腫瘍効果を相乗的に高めることができること、ＭＥＫ阻害剤と４−ＭＵとの併用によって、ＰＤ−Ｌ１等の発現を増強させうることを見出して、本発明を完成するに至った。
【００２６】
すなわち、前記の課題を解決するために、本発明に係る抗腫瘍効果増強剤は、クマリン誘導体またはその薬学的に許容される塩（以下、「クマリン誘導体等」と称する場合がある）を有効成分として含有し、ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤の抗腫瘍効果を増強しうることを特徴としている。
【００２７】
また、本発明に係る抗腫瘍効果増強剤は、前記クマリン誘導体が下記一般式〔ＩＶ〕で表される化合物からなる群より選ばれる１種または２種以上の化合物：
【００２８】
【化１】
2016155776.tif 000003
【００２９】
（式中、Ｒ１８とＲ１９とはそれぞれ独立して水素原子、水酸基またはＣ１−６アルキル基を示す。Ｒ２０とＲ２１とＲ２２とＲ２３とはそれぞれ独立して水素原子または水酸基であり、当該水酸基の水素原子は、Ｃ１−６アルキル基またはβ‐Ｄ−グルコピラノシル基で置換されていてもよい）
であることが好ましい。
【００３０】
さらに、本発明に係る抗腫瘍効果増強剤は、前記クマリン誘導体が４−メチルウンベリフェロンであることが好ましい。
【００３１】
後述する実施例には、４−ＭＵが、ＭＥＫ阻害剤の抗腫瘍効果およびｃ−Ｍｅｔ阻害剤の抗腫瘍効果を増強することが示されている。前記クマリン誘導体等および一般式〔ＩＶ〕で表される化合物は、４−ＭＵと基本骨格が共通するため、これらを有効成分して含有する、本発明に係る抗腫瘍効果増強剤は、４−ＭＵを用いる場合と同様に、ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤の抗腫瘍効果を増強する効果を奏することが期待される。
【００３２】
また、４−ＭＵは、古くは利胆剤として用いられていたが、現在は販売が中止されている。前記構成によれば、４−ＭＵおよび４−ＭＵと基本骨格が共通する化合物について、抗腫瘍効果増強剤としての新たな用途を提供することができる点でも有用である。
【００３３】
本発明に係る抗腫瘍剤は、ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤と、本発明に係る抗腫瘍効果増強剤とを有効成分として含有することを特徴としている。
【００３４】
前記構成によれば、ＭＥＫ阻害剤によってＣＤ４４の発現が抑制され、かつ、４−ＭＵをはじめとするクマリン誘導体等によってヒアルロン酸の合成が阻害されるため、ヒアルロン酸とＣＤ４４との結合が大幅に抑制される。その結果、ＭＥＫ阻害剤またはクマリン誘導体等を単独で用いた場合と比べて、相乗的な抗腫瘍効果を得ることができる。
【００３５】
さらに、後述する実施例に示す結果から、前記構成によれば、ｃ−Ｍｅｔ阻害剤の抗腫瘍効果をさらに高め、ｃ−Ｍｅｔ阻害剤またはクマリン誘導体等を単独で用いた場合と比べて、相乗的な抗腫瘍効果を得ることができることが理解される。
【００３６】
したがって、前記構成によれば、各種の癌に対して優れた治療効果を奏する抗腫瘍剤を提供することができる。
【００３７】
本発明に係る抗腫瘍剤は、前記ＭＥＫ阻害剤が、下記一般式〔Ｉ〕〜〔ＩＩＩ〕で表される化合物からなる群より選ばれる１種または２種以上の化合物もしくは薬学的に許容されるその塩であることが好ましい。
【００３８】
一般式〔Ｉ〕で表される化合物は、
【００３９】
【化２】
2016155776.tif 000004
【００４０】
［式中、Ｘ１及びＸ２は、同一又は異なって、それぞれ、炭素原子、又は、窒素原子を示し、
【００４１】
【化３】
2016155776.tif 000005
【００４２】
部分は、
【００４３】
【化４】
2016155776.tif 000006
【００４４】
であり、
Ｒ１’、Ｒ２’、及び、Ｒ６は、同一又は異なって、それぞれ、
Ｃ１−６アルキル基、
Ｃ２−６アルケニル基、
（ここで、当該Ｃ１−６アルキル基、及び、Ｃ２−６アルケニル基は、下記グループＡから選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、又は、
【００４５】
【化５】
2016155776.tif 000007
【００４６】
｛ｍは、０又は１乃至４の整数であり、環Ｃｙは、Ｃ３−１２炭素環基、又は、複素環基である。
（ここで、当該複素環基は、炭素原子の他に、酸素原子、窒素原子、及び、硫黄原子から選ばれる１乃至４個のヘテロ原子を有する、飽和、又は、不飽和の環であって、当該Ｃ３−１２炭素環基、及び、複素環基は、下記グループＢから選ばれる１乃至５個の置換基で置換されてもよい。）｝であり、
Ｒ３、Ｒ４、及び、Ｒ５は、同一又は異なって、それぞれ、
水素原子、
ヒドロキシ基、
Ｃ１−６アルキル基、
Ｃ２−６アルケニル基、
（ここで、当該Ｃ１−６アルキル基、及び、Ｃ２−６アルケニル基は、下記グループＡから選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
Ｃ３−１２炭素環基、又は、
複素環基であり、
（ここで、当該複素環基は、炭素原子の他に、酸素原子、窒素原子、及び、硫黄原子から選ばれる１乃至４個のヘテロ原子を有する、飽和又は不飽和の環の基であって、当該Ｃ３−１２炭素環基、及び、複素環基は、下記グループＢから選ばれる１乃至５個の置換基で置換されてもよい。）或いは
Ｒ２’とＲ３とが一緒になってＣ１−４アルキレン基を形成してもよく、またはＲ４とＲ５とが一緒になってＣ１−４アルキレン基を形成してもよい。
｛ここで、グループＡは、
１）ハロゲン原子、
２）ニトロ基、
３）シアノ基、
４）Ｃ１−４アルキル基、
５）−ＯＲＡ１（ここでＲＡ１は、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
６）−ＳＲＡ２（ここでＲＡ２は、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
７）−ＮＲＡ３ＲＡ４（ここでＲＡ３及びＲＡ４は、同一又は異なって、それぞれ、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
８）−ＣＯＯＲＡ５（ここでＲＡ５は、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
９）−ＮＲＡ６ＣＯＲＡ７（ここでＲＡ６は、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基であり、ＲＡ７は、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ３−１２炭素環基、又は、複素環基である。）、
１０）−ＮＲＡ８ＣＯＯＲＡ９（ここでＲＡ８及びＲＡ９は、同一又は異なって、それぞれ、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
１１）Ｃ３−１２炭素環基、及び、
１２）複素環基からなる群であり、
（ここで、当該複素環基は、炭素原子の他に、酸素原子、窒素原子、及び、硫黄原子から選ばれる１乃至４個のヘテロ原子を有する、飽和又は不飽和の環の基であり、
前記４）、ＲＡ１、ＲＡ２、ＲＡ３、ＲＡ４、ＲＡ５、ＲＡ６、ＲＡ７、ＲＡ８、及び、ＲＡ９のＣ１−４アルキル基は、それぞれ、下記グループＣから選ばれる同一又は異なった１乃至３個の置換基で置換されてもよく、
また、前記１１）及びＲＡ７のＣ３−１２炭素環基、１２）及びＲＡ７の複素環基は、それぞれ、下記グループＣから選ばれる同一又は異なった１乃至５個の置換基で置換されてもよい。）
グループＢは、
１）ハロゲン原子、
２）ニトロ基、
３）シアノ基、
４）Ｃ１−８アルキル基、
５）Ｃ２−４アルケニル基、
６）Ｃ２−４アルキニル基、
７）−ＯＲＢ１（ここでＲＢ１は、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
８）−ＳＲＢ２（ここでＲＢ２は、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
９）−ＮＲＢ３ＲＢ４（ここでＲＢ３は、水素原子、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ３−１２炭素環基、又は、複素環基であり、ＲＢ４は、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
１０）−ＮＲＢ５ＣＯＲＢ６（ここでＲＢ５は、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基であり、ＲＢ６は、水素原子、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ３−１２炭素環基、又は、複素環基である。）、
１１）−ＮＲＢ７ＣＯＯＲＢ８（ここでＲＢ７及びＲＢ８は、同一又は異なって、それぞれ、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
１２）−ＮＲＢ９ＣＯＮＲＢ１０ＲＢ１１（ここでＲＢ９、ＲＢ１０及びＲＢ１１は、同一又は異なって、それぞれ、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
１３）−ＮＲＢ１２ＣＯＮＲＢ１３ＯＲＢ１４（ここでＲＢ１２、ＲＢ１３及びＲＢ１４は、同一又は異なって、それぞれ、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
１４）−ＮＲＢ１５ＳＯ２ＲＢ１６（ここでＲＢ１５は、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基であり、ＲＢ１６は、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ３−１２炭素環基、又は、複素環基である。）、
１５）−ＳＯ２−ＲＢ１７（ここでＲＢ１７は、Ｃ１−４アルキル基、又は、複素環基である。）、
１６）−ＳＯ２ＮＲＢ１８ＲＢ１９（ここでＲＢ１８及びＲＢ１９は、同一又は異なって、それぞれ、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
１７）−Ｐ（＝Ｏ）（ＲＢ２０）（ＲＢ２１）（ここでＲＢ２０及びＲＢ２１は、同一又は異なって、それぞれ、Ｃ１−４アルキル基である。）、
１８）−ＣＯＯＲＢ２２（ここでＲＢ２２は、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
１９）−ＣＯＮＲＢ２３ＲＢ２４（ここでＲＢ２３及びＲＢ２４は、同一又は異なって、それぞれ、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
２０）−ＮＲＢ２５ＳＯ２ＮＲＢ２６ＲＢ２７（ここでＲＢ２５、ＲＢ２６及びＲＢ２７は、同一又は異なって、それぞれ、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
２１）−ＮＲＢ２８ＳＯ２ＮＲＢ２９ＣＯＮＲＢ３０ＲＢ３１（ここでＲＢ２８、ＲＢ２９、ＲＢ３０及びＲＢ３１は、同一又は異なって、それぞれ、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
２２）Ｃ３−１２炭素環基、及び、
２３）複素環基
からなる群であり、
（ここで、前記４）の「Ｃ１−８アルキル基」、ＲＢ１乃至ＲＢ３１のＣ１−４アルキル基は、それぞれ、前記グループＡから選ばれる同一又は異なった１乃至３個の置換基で置換されてもよく、
５）のＣ２−４アルケニル基、及び、６）のＣ２−４アルキニル基は、それぞれ、前記グループＡから選ばれる同一又は異なった１乃至３個の置換基で置換されてもよく、
当該複素環基は、炭素原子の他に、酸素原子、窒素原子、及び、硫黄原子から選ばれる１乃至４個のヘテロ原子を有する、飽和又は不飽和の環の基であり、
また、前記２２）、ＲＢ３、ＲＢ６、及び、ＲＢ１６のＣ３−１２炭素環基、前記２３）、ＲＢ３、ＲＢ６、ＲＢ１６、及び、ＲＢ１７の複素環基は、それぞれ、下記グループＣから選ばれる同一又は異なった１乃至５個の置換基で置換されてもよい。）
グループＣは、
１）ハロゲン原子、
２）シアノ基、
３）Ｃ１−４アルキル基、
４）−ＯＲＣ１（ここでＲＣ１は、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
５）−ＮＲＣ２ＲＣ３（ここでＲＣ２及びＲＣ３は、同一又は異なって、それぞれ、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）、
６）−ＣＯＯＲＣ４（ここでＲＣ４は、水素原子、又は、Ｃ１−４アルキル基である。）
及び、
７）オキソ基
からなる群である。｝、
（ただし、
【００４７】
【化６】
2016155776.tif 000008
【００４８】
部分が、
【００４９】
【化７】
2016155776.tif 000009
【００５０】
のとき、条件として、
Ｒ２’はメチル基ではなく、
また、Ｒ２’がフェニル基のとき、Ｒ１’はフェニル基ではない。）］であり、
一般式〔ＩＩ〕で表される化合物は、
【００５１】
【化８】
2016155776.tif 000010
【００５２】
［式中、
Ｒ７、Ｒ８、及びＲ１５は、水素、ハロゲン、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、アジド、−ＯＲ９、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、ＮＲ１０Ｃ（Ｏ）ＯＲ１２、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ９、−ＮＲ１０ＳＯ２Ｒ１２、−ＳＯ２ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ１０Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ１１Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ１１Ｃ（ＮＣＮ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ９Ｒ１０、及びＣ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル、Ｃ２〜Ｃ１０アルキニル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルアルキル、−Ｓ（Ｏ）ｊ（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）、−Ｓ（Ｏ）ｊ（ＣＲ１０Ｒ１１）ｍ−アリール、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、−Ｏ（ＣＲ１０Ｒ１１）ｍ−アリール、−ＮＲ１０（ＣＲ１０Ｒ１１）ｍ−アリール、−Ｏ（ＣＲ１０Ｒ１１）ｍ−ヘテロアリール、−ＮＲ１０（ＣＲ１０Ｒ１１）ｍ−ヘテロアリール、−Ｏ（ＣＲ１０Ｒ１１）ｍ−ヘテロシクリル、及び−ＮＲ１０（ＣＲ１０Ｒ１１）ｍ−ヘテロシクリルからそれぞれ独立に選択され、各アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、及びヘテロシクリル部分は、オキソ、ハロゲン、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、アジド、−ＮＲ１０ＳＯ２Ｒ１２、−ＳＯ２ＮＲ９Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ９、−ＮＲ１０Ｃ（Ｏ）ＯＲ１２、−ＮＲ１０Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ１１Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ１１Ｃ（ＮＣＮ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＯＲ９、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、及びヘテロシクリルアルキルからそれぞれ独立に選択された１個〜５個の基によって任意選択で置換されており、
Ｒ９は、水素、トリフルオロメチル、及びＣ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル、Ｃ２〜Ｃ１０アルキニル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、及びヘテロシクリルアルキルから選択され、各アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、及びヘテロシクリル部分は、オキソ、ハロゲン、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、アジド、−ＮＲ’ＳＯ２Ｒ””、−ＳＯ２ＮＲ’Ｒ”、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、−ＮＲ’Ｃ（Ｏ）ＯＲ””、−ＮＲ’Ｃ（Ｏ）Ｒ”、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ”、−ＳＲ””、−Ｓ（Ｏ）Ｒ””、−ＳＯ２Ｒ’、−ＮＲ’Ｒ”、−ＮＲ’Ｃ（Ｏ）ＮＲ”Ｒ”’、−ＮＲ’Ｃ（ＮＣＮ）ＮＲ”Ｒ”’、−ＯＲ’、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、及びヘテロシクリルアルキルからそれぞれ独立に選択された１個〜５個の基によって任意選択で置換されており；
Ｒ’、Ｒ”、及びＲ”’は、水素、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル、アリール、及びアリールアルキルからそれぞれ独立に選択されており；
Ｒ””は、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル、アリール、及びアリールアルキルから選択されており；或いは
Ｒ’、Ｒ”、Ｒ”’、又はＲ””のうちのいずれか２個は、結合相手の原子と一緒になって、４〜１０員の炭素環、ヘテロアリール環、又は複素環を形成していてよく、これらの環はそれぞれ、ハロゲン、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、アジド、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、及びヘテロシクリルアルキルからそれぞれ独立に選択された１個〜３個の基によって任意選択で置換されており；或いは
Ｒ９及びＲ１０は、結合相手の原子と一緒になって、４〜１０員の炭素環、ヘテロアリール環、又は複素環を形成していてよく、これらの環はそれぞれ、ハロゲン、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、アジド、−ＮＲ’ＳＯ２Ｒ””、−ＳＯ２ＮＲ’Ｒ”、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、−ＮＲ’Ｃ（Ｏ）ＯＲ””、−ＮＲ’Ｃ（Ｏ）Ｒ”、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ”、−ＳＯ２Ｒ””、−ＮＲ’Ｒ”、−ＮＲ’Ｃ（Ｏ）ＮＲ”Ｒ”’、−ＮＲ’Ｃ（ＮＣＮ）ＮＲ”Ｒ”’、−ＯＲ’、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、及びヘテロシクリルアルキルからそれぞれ独立に選択された１個〜３個の基によって任意選択で置換されており；或いは
Ｒ１０及びＲ１１は、それぞれ独立に、水素又はＣ１〜Ｃ６アルキルを表し；或いは
Ｒ１０及びＲ１１は、結合相手の原子と一緒になって、４〜１０員の炭素環、ヘテロアリール環、又は複素環を形成していてよく、これらの環はそれぞれ、ハロゲン、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、アジド、−ＮＲ’ＳＯ２Ｒ””、−ＳＯ２ＮＲ’Ｒ”、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、−ＮＲ’Ｃ（Ｏ）ＯＲ””、−ＮＲ’Ｃ（Ｏ）Ｒ”、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ”、−ＳＯ２Ｒ””、−ＮＲ’Ｒ”、−ＮＲ’Ｃ（Ｏ）ＮＲ”Ｒ”’、−ＮＲ’Ｃ（ＮＣＮ）ＮＲ”Ｒ”’、−ＯＲ’、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、及びヘテロシクリルアルキルからそれぞれ独立に選択された１個〜３個の基によって任意選択で置換されており；
Ｒ１２は、トリフルオロメチル、及びＣ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、及びヘテロシクリルアルキルから選択され、各アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、及びヘテロシクリル部分は、オキソ、ハロゲン、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、アジド、−ＮＲ’ＳＯ２Ｒ””、−ＳＯ２ＮＲ’Ｒ”、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、−ＮＲ’Ｃ（Ｏ）ＯＲ””、−ＮＲ’Ｃ（Ｏ）Ｒ”、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ”、−ＳＯ２Ｒ””、−ＮＲ’Ｒ’、−ＮＲ’Ｃ（Ｏ）ＮＲ”Ｒ”’、−ＮＲ’Ｃ（ＮＣＮ）ＮＲ”Ｒ”’、−ＯＲ’、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、及びヘテロシクリルアルキルからそれぞれ独立に選択された１個〜５個の基によって任意選択で置換されており；
Ｒ１３は、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル、Ｃ２〜Ｃ１０アルキニル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、及びヘテロシクリルアルキルから選択され、各アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、及びヘテロシクリル部分は、オキソ、ハロゲン、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、アジド、−ＮＲ１０ＳＯ２Ｒ１２、−ＳＯ２ＮＲ９Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ９、−ＮＲ１０Ｃ（Ｏ）ＯＲ１２、−ＮＲ１０Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＳＯ２Ｒ１２、−ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ１１Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ１１Ｃ（ＮＣＮ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＯＲ９、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、及びヘテロシクリルアルキルからそれぞれ独立に選択された１個〜５個の基によって任意選択で置換されており；
Ａは、ＯＲ９又はＮＲ１０ＯＲ９から選択されており；
Ｒ１４は、水素、−ＳＣＦ３、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｆ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、アジド、−ＯＲ９、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、−ＮＲ１０Ｃ（Ｏ）ＯＲ１２、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ９、−ＮＲ１０ＳＯ２Ｒ１２、−ＳＯ２ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ１０Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ１１Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ９Ｒ１０、及びＣ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル、Ｃ２〜Ｃ１０アルキニル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルアルキル、−Ｓ（Ｏ）ｊ（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）、−Ｓ（Ｏ）ｊ（ＣＲ１０Ｒ１１）ｍ−アリール、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、−Ｏ（ＣＲ１０Ｒ１１）ｍ−アリール、−ＮＲ１０（ＣＲ１０Ｒ１１）ｍ−アリール、−Ｏ（ＣＲ１０Ｒ１１）ｍ−ヘテロアリール、−ＮＲ１０（ＣＲ１０Ｒ１１）ｍ−ヘテロアリール、−Ｏ（ＣＲ１０Ｒ１１）ｍ−ヘテロシクリル、及び−ＮＲ１０（ＣＲ１０Ｒ１１）ｍ−ヘテロシクリルから選択され、各アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、及びヘテロシクリル部分は、オキソ、ハロゲン、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、アジド、−ＮＲ１０ＳＯ２Ｒ１２、−ＳＯ２ＮＲ９Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ９、−ＮＲ１０Ｃ（Ｏ）ＯＲ１２、−ＮＲ１０Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ１１Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ１１Ｃ（ＮＣＮ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＯＲ９、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、及びヘテロシクリルアルキルからそれぞれ独立に選択された１個〜５個の基によって任意選択で置換されており；
ｍは、０、１、２、３、４、又は５であり；
ｊは、１又は２である］であり、
一般式〔ＩＩＩ〕で表される化合物は、
【００５３】
【化９】
2016155776.tif 000011
【００５４】
［式中、
Ｘ１は、ＣＲ６であり；
Ｘ５は、ＣＲ６であり；
Ｒ３は、水素、ヒドロキシ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたアルコキシ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヒドロキシアルコキシ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたアリールオキシ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロアリールオキシ、アミノ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ１−１０）アルキルアミノ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたアリールアミノ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロアリールアミノ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ１−１０）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたハロ（Ｃ１−１０）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヒドロキシ（Ｃ１−１０）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたアミノ（Ｃ１−１０）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ３−１２）シクロアルキル（Ｃ１−５）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ３−１２）シクロアルキル（Ｃ１−５）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたアリール（Ｃ１−１０）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロアリール（Ｃ１−５）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ９−１２）ビシクロアリール（Ｃ１−５）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ８−１２）ビシクロアリール（Ｃ１−５）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ３−１２）シクロアルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ３−１２）シクロアルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ９−１２）ビシクロアルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ３−１２）ビシクロアルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ４−１２）アリール、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ１−１０）アリール、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ９−１２）ビシクロアリールおよび未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ４−１２）ビシクロアリールからなる群から選択され；
Ｒ５は、水素、ヒドロキシ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたアルコキシ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたアリールオキシ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロアリールオキシ、アミノ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ１−１０）アルキルアミノ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたアリールアミノ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロアリールアミノ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ１−１０）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたハロ（Ｃ１−１０）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたアミノ（Ｃ１−１０）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ３−１２）シクロアルキル（Ｃ１−５）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ３−１２）シクロアルキル（Ｃ１−５）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたアリール（Ｃ１−１０）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロアリール（Ｃ１−５）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ９−１２）ビシクロアリール（Ｃ１−５）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ８−１２）ビシクロアリール（Ｃ１−５）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ３−１２）シクロアルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ３−１２）シクロアルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ９−１２）ビシクロアルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ３−１２）ビシクロアルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ４−１２）アリール、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ１−１０）アリール、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ９−１２）ビシクロアリールおよび未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ４−１２）ビシクロアリールからなる群から選択される；
Ｒ６は、それぞれ独立して、水素、ハロ、シアノ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロアリールオキシ、アミノカルボニル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ１−１０）アルキルアミノカルボニル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたアリールアミノカルボニル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロアリールアミノカルボニル、アミノ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ１−１０）アルキルアミノ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたアリールアミノ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロアリールアミノ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ１−１０）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたハロ（Ｃ１−１０）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたアミノ（Ｃ１−１０）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ３−１２）シクロアルキル（Ｃ１−５）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ３−１２）シクロアルキル（Ｃ１−５）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたアリール（Ｃ１−１０）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロアリール（Ｃ１−５）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ９−１２）ビシクロアリール（Ｃ１−５）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ８−１２）ビシクロアリール（Ｃ１−５）アルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ３−１２）シクロアルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ３−１２）シクロアルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ９−１２）ビシクロアルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ３−１２）ビシクロアルキル、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ４−１２）アリール、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ１−１０）アリール、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ９−１２）ビシクロアリールおよび未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヘテロ（Ｃ４−１２）ビシクロアリールからなる群から選択され；
Ｒ１４ａ、Ｒ１４ｂ、Ｒ１４ｃ、Ｒ１４ｄおよびＲ１４ｅは、それぞれ独立して、水素、ハロ、シアノ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたアルコキシ、未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換された（Ｃ１−３）アルキルおよび未置換もしくはグループＡ’から選ばれる１個以上の基で置換されたヒドロキシ（Ｃ１−３）アルキルからなる群から選択され；
グループＡ’は、ハロ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよい（Ｃ１−１０）アルコキシ、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよい（Ｃ４−１２）アリールオキシ、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよいヘテロ（Ｃ１−１０）アリールオキシ、アミノカルボニル、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよい（Ｃ１−１０）アルキルアミノカルボニル、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよいアリールアミノカルボニル、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよいヘテロアリールアミノカルボニル、アミノ、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよい（Ｃ１−１０）アルキルアミノ、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよいアリールアミノ、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよいヘテロアリールアミノ、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよい（Ｃ１−１０）アルキル、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよいハロ（Ｃ１−１０）アルキル、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよいヒドロキシ（Ｃ１−１０）アルキル、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよい（Ｃ３−１２）シクロアルキル（Ｃ１−５）アルキル、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよいヘテロ（Ｃ３−１２）シクロアルキル（Ｃ１−１０）アルキル、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよいアリール（Ｃ１−１０）アルキル、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよいヘテロ（Ｃ１−１０）アリール（Ｃ１−５）アルキル、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよい（Ｃ９−１２）ビシクロアリール（Ｃ１−５）アルキル、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよいヘテロ（Ｃ８−１２）ビシクロアリール（Ｃ１−５）アルキル、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよい（Ｃ３−１２）シクロアルキル、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよいヘテロ（Ｃ３−１２）シクロアルキル、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよい（Ｃ９−１２）ビシクロアルキル、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよいヘテロ（Ｃ３−１２）ビシクロアルキル、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよい（Ｃ４−１２）アリール、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよいヘテロ（Ｃ１−１０）アリール、グループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよい（Ｃ９−１２）ビシクロアリール及びグループＢ’から選ばれる基で置換されていてもよいヘテロ（Ｃ４−１２）ビシクロアリールであり；
グループＢ’は、ハロ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、（Ｃ１−１０）アルコキシ、（Ｃ４−１２）アリールオキシ、ヘテロ（Ｃ１−１０）アリールオキシ、アミノカルボニル、アミノ、（Ｃ１−１０）アルキルアミノ、（Ｃ１−１０）アルキル、ハロ（Ｃ１−１０）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１−１０）アルキル、（Ｃ３−１２）シクロアルキル（Ｃ１−５）アルキル、ヘテロ（Ｃ３−１２）シクロアルキル（Ｃ１−１０）アルキル、アリール（Ｃ１−１０）アルキル、ヘテロ（Ｃ１−１０）アリール（Ｃ１−５）アルキル、（Ｃ９−１２）ビシクロアリール（Ｃ１−５）アルキル、ヘテロ（Ｃ８−１２）ビシクロアリール（Ｃ１−５）アルキル、（Ｃ３−１２）シクロアルキル、ヘテロ（Ｃ３−１２）シクロアルキル、（Ｃ９−１２）ビシクロアルキル、ヘテロ（Ｃ３−１２）ビシクロアルキル、（Ｃ４−１２）アリール、ヘテロ（Ｃ１−１０）アリール、（Ｃ９−１２）ビシクロアリール及びヘテロ（Ｃ４−１２）ビシクロアリールである。］である。
【００５５】
前記構成によれば、後述する実施例において抗腫瘍効果が確認されているトラメチニブ、セルメチニブ、またはＴＡＫ−７３３と基本骨格が共通する化合物と、４−ＭＵと基本骨格が共通する化合物とを併用することになる。それゆえ、各種の癌に対する優れた抗腫瘍効果を奏することができる。
【００５６】
本発明にかかる抗腫瘍剤は、前記ｃ−Ｍｅｔ阻害剤が、クリゾチニブ、カボザンチニブおよびカボザンチニブｓ−リンゴ酸塩からなる群より選ばれる１種または２種以上の化合物であることが好ましい。
【００５７】
前記構成によれば、後述する実施例において抗腫瘍効果が確認されているクリゾチニブ、クリゾチニブと同様にｃ−ＭｅｔとＣＤ４４との結合を阻害しうるカボザンチニブ、カボザンチニブｓ−リンゴ酸塩と、４−ＭＵと基本骨格が共通する化合物とを併用することになる。それゆえ、各種の癌に対して優れた抗腫瘍効果を奏することができる。
【００５８】
本発明に係る抗腫瘍剤は、一般式〔Ｉ〕〜〔ＩＩＩ〕で表される化合物からなる群より選ばれる１種または２種以上の化合物が、トラメチニブ、セルメチニブ、およびＴＡＫ−７３３からなる群より選ばれる１種または２種以上の化合物であることが好ましい。
【００５９】
前記化合物は、後述する実施例に示すように、単独でも優れた抗腫瘍効果を奏するＭＥＫ阻害剤である。したがって、前記構成によれば、クマリン誘導体等と併用することにより、前記化合物を単独で使用する場合よりも一層優れた抗腫瘍効果を奏することができる。
【００６０】
本発明に係る抗腫瘍剤は、本発明に係る前記抗腫瘍剤と、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ２抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、抗ＣＤ２５抗体、抗ＣＤ３３抗体および抗ＣＤ５２抗体からなる群より選ばれる１以上の抗体と、を有効成分として含有することを特徴としている。
【００６１】
後述する実施例に示す結果から、前記抗腫瘍剤は、腫瘍細胞において、前記抗体の抗原の発現を増強することができると考えられる。それゆえ、前記抗体の奏効率を向上させることができると考えられる。したがって、前記抗体の治療効果をさらに高めた抗腫瘍剤を提供することができると期待される。
【発明の効果】
【００６２】
本発明は、有効な治療法が確立されていない悪性胸膜中皮腫をはじめとする各種の癌に対して優れた抗腫瘍効果を奏することができる。したがって、各種の癌に対して高い治療効果を示す薬剤を提供することができるという効果を奏する。
【図面の簡単な説明】
【００６３】
【図１】悪性胸膜中皮腫のセルラインとして、ＮＣＩ−Ｈ２２６細胞、ＮＣＩ−Ｈ２４５２細胞、ＮＣＩ−Ｈ２０５２細胞およびＭＳＴＯ−２１１Ｈ細胞を用いた場合の、トラメチニブの濃度と細胞生存率との関係を示すグラフである。
【図２】図１と同様のセルラインを用いた場合の、４−ＭＵの濃度と細胞生存率との関係を示すグラフである。
【図３】０〜１００００ｎＭのトラメチニブで７２時間処理したＮＣＩ−Ｈ２２６細胞のウエスタンブロット解析結果を示す図である。
【図４】トラメチニブの濃度と、ＮＣＩ−Ｈ２２６細胞におけるＥＲＫのリン酸化の阻害との関係（図４の（ａ））、およびＣＤ４４のタンパク質レベルとの関係（図４の（ｂ））を示す図である。
【図５】２０μＭのトラメチニブでＮＣＩ−Ｈ２２６細胞を０〜７２時間処理した場合の経時変化をウエスタンブロットで解析した結果を示す図である。
【図６】トラメチニブによる処理時間と、ＮＣＩ−Ｈ２２６細胞におけるＥＲＫのリン酸化の阻害との関係（図６の（ａ））、およびＣＤ４４のタンパク質レベルとの関係（図６の（ｂ））を示す図である。
【図７】０〜１０００ｎＭのトラメチニブで７２時間処理したＭＳＴＯ−２１１Ｈ細胞のウエスタンブロット解析結果を示す図である。
【図８】トラメチニブの濃度と、ＭＳＴＯ−２１１Ｈ細胞におけるＥＲＫのリン酸化の阻害との関係（図８の（ａ））、およびＣＤ４４のタンパク質レベルとの関係（図８の（ｂ））を示す図である。
【図９】１μＭのトラメチニブでＭＳＴＯ−２１１Ｈ細胞を０〜７２時間処理した場合の経時変化をウエスタンブロットで解析した結果を示す図である。
【図１０】トラメチニブによる処理時間と、ＭＳＴＯ−２１１Ｈ細胞におけるＥＲＫのリン酸化の阻害との関係（図１０の（ａ））、およびＣＤ４４のタンパク質レベルとの関係（図１０の（ｂ））を示す図である。
【図１１】１０ｎＭ〜１００μＭの４−ＭＵで７２時間処理したＮＣＩ−Ｈ２２６細胞のウエスタンブロット解析結果を示す図である。
【図１２】４−ＭＵの濃度と、ＮＣＩ−Ｈ２２６細胞におけるＥＲＫのリン酸化の阻害との関係（図１２の（ａ））、およびＣＤ４４のタンパク質レベルとの関係（図１２の（ｂ））を示す図である。
【図１３】Ｆｒａ−１の発現と、トラメチニブおよび／または４−ＭＵによる処理との関係などを表すウエスタンブロット解析結果を示す図である。
【図１４】トラメチニブおよび／または４−ＭＵの使用量と、リン酸化されたＥＲＫの発現との関係を示す図である。
【図１５】トラメチニブおよび／または４−ＭＵの使用量と、ＣＤ４４の発現との関係を示す図である。
【図１６】トラメチニブおよび／または４−ＭＵの使用量と、Ｆｒａ−１の発現との関係を示す図である。
【図１７】マウス異種移植モデルにトラメチニブおよび／または４−ＭＵを投与した場合の抗腫瘍効果を経時的に観察した結果を示す図である。
【図１８】薬剤の最終投与の４時間後に回収したＮＣＩ−Ｈ２２６腫瘍組織をウエスタンブロットに供した結果を示す図である。
【図１９】薬剤の最終投与の４日後に回収したＮＣＩ−Ｈ２２６腫瘍組織をウエスタンブロットに供した結果を示す図である。
【図２０】薬剤の最終投与の４時間後に回収したＮＣＩ−Ｈ２２６腫瘍組織と、薬剤の最終投与の４日後に回収したＮＣＩ−Ｈ２２６腫瘍組織とについての免疫組織染色の結果を倍率４０倍で確認した図である。
【図２１】薬剤の最終投与の４時間後に回収したＮＣＩ−Ｈ２２６腫瘍組織と、薬剤の最終投与の４日後に回収したＮＣＩ−Ｈ２２６腫瘍組織とについての免疫組織染色の結果を倍率２００倍で確認した図である。
【図２２】トラメチニブ、４−ＭＵ、または、トラメチニブと４−ＭＵとの組み合わせを経口投与したヌードマウスにおけるＮＣＩ−Ｈ２２６腫瘍の組織中に発現したリン酸化ＥＲＫ陽性細胞の割合を、対照と比較した結果を示す図である。
【図２３】ＴＡＫ−７３３によってＮＣＩ−Ｈ２２６細胞を処理した場合の、ＴＡＫ−７３３の濃度と細胞生存率との関係を示すグラフである。
【図２４】セルメチニブによってＮＣＩ−Ｈ２８細胞を処理した場合の、セルメチニブの濃度と細胞生存率との関係を示すグラフである。
【図２５】セルメチニブによってＭＳＴＯ−２１１Ｈ細胞を処理した場合の、セルメチニブの濃度と細胞生存率との関係を示すグラフである。
【図２６】セルメチニブによってＮＣＩ−Ｈ２２６細胞を処理した場合の、セルメチニブの濃度と細胞生存率との関係を示すグラフである。
【図２７】セルメチニブによってＮＣＩ−Ｈ２０５２細胞を処理した場合の、セルメチニブの濃度と細胞生存率との関係を示すグラフである。
【図２８】セルメチニブによってＮＣＩ−Ｈ２４５２細胞を処理した場合の結果を示す図である。
【図２９】悪性胸膜中皮腫細胞としてＮＣＩ−Ｈ２０５２細胞を用い、クリゾチニブおよび／または４−ＭＵによって処理した場合の細胞生存率を示す図である。
【図３０】悪性胸膜中皮腫細胞としてＮＣＩ−Ｈ２４５２細胞を用い、クリゾチニブおよび／または４−ＭＵによって処理した場合の細胞生存率を示す図である。
【図３１】悪性胸膜中皮腫細胞としてＮＣＩ−Ｈ２２６細胞を用い、クリゾチニブおよび／または４−ＭＵによって処理した場合の細胞生存率を示す図である。
【図３２】悪性胸膜中皮腫細胞としてＮＣＩ−Ｈ２８を用い、クリゾチニブおよび／または４−ＭＵによって処理した場合の細胞生存率を示す図である。
【図３３】薬剤の最終投与の４時間後に回収したＮＣＩ−Ｈ２２６腫瘍組織について、ＰＤ−１，ＰＤ−Ｌ１，ＣＴＬＡ−４の発現を観察した免疫組織染色の結果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００６４】
以下、本発明の実施の形態について、詳細に説明する。範囲を示す、例えば「Ａ〜Ｂ」のような記載は、Ａ以上Ｂ以下であることを示す。なお、本明細書中に記載された特許文献および非特許文献の全てが、本明細書中において参考として援用される。
【００６５】
〔実施の形態１：抗腫瘍効果増強剤〕
本発明に係る抗腫瘍効果増強剤は、クマリン誘導体またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含有し、ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤の抗腫瘍効果を増強しうる。
【００６６】
前記「クマリン誘導体」とは、クマリン分子内の小部分の化学変化によって生成する化合物であり、クマリンの置換体であってもよく、付加体であってもよい。クマリン誘導体としては、例えば下記一般式〔ＩＶ〕で表される化合物からなる群より選ばれる１種または２種以上の化合物を好適に用いることができる。
【００６７】
【化１０】
2016155776.tif 000012
【００６８】
（式中、Ｒ１８とＲ１９とはそれぞれ独立して水素原子、水酸基またはＣ１−６アルキル基を示す。Ｒ２０とＲ２１とＲ２２とＲ２３とはそれぞれ独立して水素原子または水酸基であり、当該水酸基の水素原子は、Ｃ１−６アルキル基またはβ‐Ｄ−グルコピラノシル基で置換されていてもよい）
一般式〔ＩＶ〕で表される化合物としては、例えば４-ヒドロキシクマリン、４-メチルウンベリフェロン（４−ＭＵ）、７-ヒドロキシクマリン（ウンベリフェロン）、７，８-ジヒドロキシクマリン（ダフネチン）、６，７-ジヒドロキシクマリン（エスクレチン）、４-メチル-６，７-ジヒドロキシクマリン（４-メチルエスクレチン）、エスクリン、イソスコポレチン、スコパロン、５，７-ジヒドロキシ-４-メチル-クマリンなどを挙げることができる。２種以上の化合物を用いる場合は、任意の比率で組み合わせて用いることができる。
【００６９】
後述する実施例では、４−ＭＵを、ＭＥＫ阻害剤またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤と併用することによって、ＭＥＫ阻害剤の抗腫瘍効果およびｃ−Ｍｅｔ阻害剤の抗腫瘍効果が増強され、より優れた抗腫瘍効果が得られることが示されている。つまり、４−ＭＵは、ＭＥＫ阻害剤およびｃ−Ｍｅｔ阻害剤の抗腫瘍効果をさらに増強することができると言える。
【００７０】
上述のように、４−ＭＵはかつて利胆剤として用いられていた。しかしながら、より優れた利胆剤が開発されたことから現在は販売が中止され、特に有用な用途が見出されていない、いわゆる過去の薬剤となっている。そのような４−ＭＵがＭＥＫ阻害剤およびｃ−Ｍｅｔ阻害剤の抗腫瘍効果を増強することができるという知見は、本発明によって初めて見出されたことであり、４−ＭＵの新たな有用な用途を提供することができるという意味で非常に有意義であると言える。
【００７１】
本明細書において用語「抗腫瘍効果増強剤」とは、ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤の抗腫瘍効果を増強しうる薬剤であることを意味する。「ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤の抗腫瘍効果を増強しうる」とは、ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤を用いることによって奏される抗腫瘍効果よりも優れた抗腫瘍効果が得られることを意味する。「抗腫瘍効果」とは、腫瘍の増殖を抑制し、減弱させる効果をいう。
【００７２】
以上説明した事項より、４−ＭＵを、本発明に係る抗腫瘍効果増強剤の有効成分として用いうることが理解される。一方、当該有効成分は４−ＭＵに限られるものではない。例えば一般式〔ＩＶ〕で表される化合物に代表されるクマリン誘導体は、置換基は異なるが４−ＭＵと構造が類似するため、前記化合物からなる群より選ばれる１種または２種以上の化合物も、４−ＭＵと同様に、前記有効成分として用いることができると考えられる。
【００７３】
本発明に係る抗腫瘍効果増強剤は、前記クマリン誘導体等以外に、通常それ自体公知の製薬上許容される担体、賦形剤、希釈剤、増量剤、崩壊剤、安定剤、保存剤、緩衝剤、乳化剤、芳香剤、着色剤、甘味剤、粘稠剤、矯味剤、溶解補助剤、その他添加剤、具体的には水、植物油、アルコール（例えば、エタノール、ベンジルアルコール等）、ポリエチレングリコール、グリセロールトリアセテート、ゼラチン、炭水化物（例えば、ラクトース、デンプン等）、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ラノリン、ワセリン等を含有することができる。
【００７４】
前記抗腫瘍効果増強剤は、前記賦形剤等と混合して、常法により錠剤、丸剤、散剤、顆粒、坐剤、注射剤、点眼剤、液剤、カプセル剤、トローチ剤、エアゾール剤、エリキシル剤、懸濁剤、乳剤、シロップ剤等の形態となすことにより、全身的或いは局所的に、経口若しくは非経口で投与することができる。
【００７５】
前記「薬学的に許容されるその塩」とは、前記クマリン誘導体と無毒の塩を形成するものであればいかなる塩でもよい。例えば、塩酸、硫酸、リン酸、臭化水素酸等の無機酸；シュウ酸、マロン酸、クエン酸、フマル酸、乳酸、リンゴ酸、コハク酸、酒石酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、グルコン酸、アスコルビン酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸等の有機酸；水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウム、水酸化アンモニウム等の無機塩基；メチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリエタノールアミン、エチレンジアミン、トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミン、グアニジン、コリン、シンコニン等の有機塩基；又はリジン、アルギニン、アラニン等のアミノ酸と反応させることにより得ることができる。なお、本発明においては、各化合物の含水物又は水和物及び溶媒和物も包含される。
【００７６】
本発明に係る抗腫瘍効果増強剤は、ＭＥＫ阻害剤の抗腫瘍効果およびｃ−Ｍｅｔ阻害剤の抗腫瘍効果をさらに高めることができるため、それぞれ、ＭＥＫ阻害剤およびｃ−Ｍｅｔ阻害剤と組み合わせて、抗腫瘍剤（本明細書において「抗腫瘍剤（Ａ）」と称する）として用いることができる。そこで、次に本発明に係る抗腫瘍剤（Ａ）について説明する。
【００７７】
〔実施の形態２：抗腫瘍剤（Ａ）〕
（１）有効成分
本発明に係る抗腫瘍剤（Ａ）は、ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤と、本発明に係る抗腫瘍効果増強剤とを有効成分として含有する。抗腫瘍効果増強剤については、実施の形態１で説明したとおりである。そこで、以下ではまずＭＥＫ阻害剤とｃ−Ｍｅｔ阻害剤とについて説明し、次に前記抗腫瘍剤（Ａ）について述べる。
【００７８】
（１−１）ＭＥＫ阻害剤
ＭＥＫ阻害剤とは、細胞増殖シグナル伝達経路（ＭＡＰＫ経路）に存在するリン酸化酵素ＭＥＫの働きを阻害（細胞増殖シグナル伝達を遮断）することによって細胞増殖を阻害する薬剤をいう。Ｒａｓ、Ｒａｆ、ＭＥＫ、ＥＲＫへと続く細胞増殖シグナル伝達経路の活性化は多くの癌腫において認められており、ＭＥＫ阻害剤は、ＭＥＫによるＥＲＫのリン酸化を阻害することによって細胞増殖シグナル伝達を遮断する。
【００７９】
ＭＥＫ阻害剤は、後述する実施例に示すように、ＣＤ４４の発現を減弱させることができる。そして、前記クマリン誘導体等がヒアルロン酸の合成を阻害するため、ヒアルロン酸とＣＤ４４との結合が生じにくくなる。それゆえ、ＭＥＫ阻害剤と前記クマリン誘導体等とを有効成分として用いることによって、ＭＥＫ阻害剤または前記クマリン誘導体等を単独で用いる場合よりも相乗的に優れた抗腫瘍効果を得ることができると考えられる。
【００８０】
ＭＥＫ阻害剤としては、例えば、前記した一般式〔Ｉ〕〜〔ＩＩＩ〕で表される化合物からなる群より選ばれる１種または２種以上の化合物もしくは薬学的に許容されるその塩、を好適に用いることができる。
【００８１】
なお、前記「薬学的に許容されるその塩」とは、ＭＥＫ阻害剤と無毒の塩を形成するものであればいかなる塩でもよい。後述するｃ−Ｍｅｔ阻害剤についても、ｃ−Ｍｅｔ阻害剤と無毒の塩を形成するものであればいかなる塩でもよい。
【００８２】
前記塩は、例えば、塩酸、硫酸、リン酸、臭化水素酸等の無機酸；シュウ酸、マロン酸、クエン酸、フマル酸、乳酸、リンゴ酸、コハク酸、酒石酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、グルコン酸、アスコルビン酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸等の有機酸；水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウム、水酸化アンモニウム等の無機塩基；メチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリエタノールアミン、エチレンジアミン、トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミン、グアニジン、コリン、シンコニン等の有機塩基；又はリジン、アルギニン、アラニン等のアミノ酸と反応させることにより得ることができる。なお、本発明においては、各化合物の含水物又は水和物及び溶媒和物も包含される。
【００８３】
（１−１−１）一般式〔Ｉ〕で表される化合物
一般式〔Ｉ〕で表される化合物は、特許４１６３７３８号公報に記載されている。前記一般式〔Ｉ〕において、「ハロゲン原子」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子又はヨウ素原子であり、グループＡの１）及びグループＣの１）として好ましくはフッ素原子、塩素原子又は臭素原子であり、グループＡの１）として更に好ましくはフッ素原子であり、グループＣの１）として更に好ましくはフッ素原子又は臭素原子であり、グループＢの１）として好ましくはフッ素原子又はヨウ素原子である。
【００８４】
前記「Ｃ１−６アルキル基」とは、炭素数１乃至６の直鎖又は分岐鎖アルキル基であり、具体的にはメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、２，２−ジメチルプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基等が挙げられる。
【００８５】
Ｒ１’、Ｒ２’及びＲ６として好ましくは、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、２，２−ジメチルプロピル基、ブチル基、イソブチル基であり、更に好ましくはメチル基、エチル基であり、特に好ましくはメチル基である。Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５として好ましくは、メチル基、エチル基、プロピル基、イソブチル基であり、更に好ましくはメチル基である。
【００８６】
前記「Ｃ１−４アルキル基」とは、炭素数１乃至４の直鎖又は分岐鎖アルキル基であり、具体的にはメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基等が挙げられる。
【００８７】
グループＡの４）及びグループＣの３）として好ましくは、メチル基、エチル基であり、更に好ましくはメチル基である。ＲＡ１、ＲＡ２、ＲＡ３、ＲＡ４、ＲＡ５、ＲＡ６、ＲＡ７、ＲＡ８及びＲＡ９として好ましくは、メチル基、エチル基、ブチル基であり、更に好ましくはメチル基である。
【００８８】
ＲＢ１乃至ＲＢ３１として好ましくは、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基であり、更に好ましくはメチル基、エチル基、プロピル基である。ＲＣ１、ＲＣ２、ＲＣ３、ＲＣ４及びＲＣ５として好ましくは、メチル基、エチル基であり、更に好ましくはメチル基である。
【００８９】
前記「Ｃ１−８アルキル基」とは、炭素数１乃至８の直鎖又は分岐鎖アルキル基であり、具体的にはメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、１−エチル−１−プロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、３−メチルブチル基、１−プロピル−１−ブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、ヘキシル基、ヘプチル基、オクチル基等が挙げられる。
【００９０】
グループＢの２）として好ましくは、メチル基、エチル基、プロピル基、イソペンチル基、１−エチル−１−プロピル基、３−メチルブチル基、１−プロピル−１−ブチル基であり、更に好ましくはメチル基、エチル基である。
【００９１】
前記「Ｃ２−６アルケニル基」とは、炭素数２乃至６の直鎖又は分岐鎖アルケニル基であり、具体的には、ビニル基、１−プロペニル基、２−プロペニル基、イソプロペニル基、１−ブテニル基、２−ブテニル基、３−ブテニル基、１−メチル−１−プロペニル基、１−メチル−２−プロペニル基、２−メチル−２−プロペニル基、１−エチルビニル基、１−ペンテニル基、２−ペンテニル基、３−ペンテニル基、４−ペンテニル基、１，２−ジメチル−１−プロペニル基、１，２−ジメチル−２−プロペニル基、１−エチル−１−プロペニル基、１−エチル−２−プロペニル基、１−メチル−１−ブテニル基、１−メチル−２−ブテニル基、２−メチル−１−ブテニル基、１−イソプロピルビニル基、２，４−ペンタジエニル基、１−ヘキセニル基、２−ヘキセニル基、３−ヘキセニル基、４−ヘキセニル基、５−ヘキセニル基、２，４−ヘキサジエニル基、１−メチル−１−ペンテニル基等が挙げられる。
【００９２】
Ｒ１’、Ｒ２’、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６として好ましくは、ビニル基、１−プロペニル基、２−プロペニル基であり、更に好ましくは２−プロペニル基である。
【００９３】
前記「Ｃ２−４アルケニル基」とは、炭素数２乃至４の直鎖又は分岐鎖アルケニル基であり、具体的にはビニル基、１−プロペニル基、２−プロペニル基、イソプロペニル基、１−ブテニル基、２−ブテニル基、３−ブテニル基、１−メチル−１−プロペニル基、１−メチル−２−プロペニル基、２−メチル−２−プロペニル基、１−エチルビニル基等が挙げられる。
【００９４】
グループＢの５）として好ましくは、ビニル基、１−プロペニル基であり、更に好ましくはビニル基である。
【００９５】
「Ｃ２−４アルキニル基」とは、炭素数２乃至４の直鎖又は分岐鎖アルキニル基であり、具体的にはエチニル基、１−プロピニル基、２−プロピニル基、イソプロピニル基、１−ブチニル基、２−ブチニル基、３−ブチニル基、１−メチル−１−プロピニル基、１−メチル−２−プロピニル基、２−メチル−２−プロピニル基、１−エチルエチニル基等が挙げられる。
【００９６】
グループＢの６）として好ましくは、エチニル基、１−プロピニル基、１−ブチニル基
であり、更に好ましくはエチニル基である。
【００９７】
Ｒ２’とＲ３とが一緒になって形成してもよい「Ｃ１−４アルキレン基」およびＲ４とＲ５とが一緒になって形成してもよい「Ｃ１−４アルキレン基」とは、炭素数１乃至４の直鎖又は分岐鎖アルキレン基を表し、具体的にはメチレン基、エチレン基、トリメチレン基、２−メチルトリメチレン基、テトラメチレン基等が挙げられる。
【００９８】
Ｒ２’とＲ３とが一緒になって形成してもよい「Ｃ１−４アルキレン基」として好ましくは、メチレン基、エチレン基、トリメチレン基であり、更に好ましくはトリメチレン基である。
【００９９】
Ｒ４とＲ５とが一緒になって形成してもよい「Ｃ１−４アルキレン基」として好ましくは、メチレン基、エチレン基、トリメチレン基であり、更に好ましくはエチレン基である。
【０１００】
ｍとして好ましくは０又は１若しくは２の整数であり、更に好ましくは０である。
【０１０１】
前記「Ｃ３−１２炭素環基」とは、炭素数３乃至１２の飽和若しくは不飽和の環状炭化水素基であり、フェニル基、ナフチル基、Ｃ３−８シクロアルキル基、又はＣ３−８シクロアルキルとベンゼンとの縮合環基を意味する。
【０１０２】
前記「Ｃ３−８シクロアルキル基」とは、炭素数３乃至８の飽和の環状炭化水素基であり、具体的には、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基、シクロオクチル基、ノルボルナニル基等が挙げられ、好ましくはシクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基又はシクロヘキシル基である。
【０１０３】
前記「Ｃ３−８シクロアルキルとベンゼンとの縮合環基」として具体的には、インダニル基、１，２，３，４−テトラヒドロナフチル基（１，２，３，４−テトラヒドロ−２−ナフチル基、５，６，７，８−テトラヒドロ−２−ナフチル基等）等が挙げられ、好ましくは、インダニル基、１，２，３，４−テトラヒドロナフチル基等であり、更に好ましくはインダニル基である。
【０１０４】
Ｒ１’、Ｒ２’、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６として好ましくは、フェニル基、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基であり、更に好ましくはフェニル基、シクロプロピル基である。Ｒ１’として特に好ましくはシクロプロピル基であり、Ｒ２’及びＲ６として特に好ましくはフェニル基である。グループＡの１１）、ＲＡ７、グループＢの２２）、ＲＢ３、ＲＢ６及びＲＢ１６として好ましくは、フェニル基、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基であり、更に好ましくはフェニル基、シクロプロピル基である。
【０１０５】
前記「複素環基」とは、環を構成する原子として、炭素原子の他に、酸素原子、窒素原子、及び、硫黄原子から選ばれる１乃至４個のヘテロ原子を含み、５又は６個の環を構成する原子を有する飽和環の単環、又は、不飽和環の単環、或いは、当該単環とベンゼン環との縮合環、あるいは、これら単環または縮合環と前記のＣ３−１２炭素環とのスピロ環の基であり、これらはそれぞれ１乃至４個、好ましくは１又は２個のオキソ基を有していてもよい。
【０１０６】
飽和環の単環である「複素環基」としては、ピロリジニル基、テトラヒドロフリル基、テトラヒドロチエニル基、イミダゾリジニル基、２−オキソイミダゾリジニル基、２，４−ジオキソイミダゾリジニル基、ピラゾリジニル基、１，３−ジオキソラニル基、１，３−オキサチオラニル基、オキサゾリジニル基、２−オキソオキサゾリジニル基、チアゾリジニル基、ピペリジニル基、ピペラジニル基、２−オキソピペラジニル基、テトラヒドロピラニル基、テトラヒドロチオピラニル基、ジオキサニル基、モルホリニル基、チオモルホリニル基、２−オキソピロリジニル基、２−オキソピペリジニル基、４−オキソピペリジニル基、２，６−ジオキソピペリジニル基、チアジアゾリジニル基（例えば、１，１−ジオキソ−１，２，５−チアジアゾリジン−２−イル基等）等が挙げられる。好ましくはピロリジニル基、ピペリジニル基、ピペラジニル基及びモルホリニル基が挙げられる。
【０１０７】
不飽和環の単環である「複素環基」としては、ピロリル基（例えば、２−ピロリル基等）、フリル基、チエニル基、イミダゾリル基（例えば、４−イミダゾリル基等）、１，２−ジヒドロ−２−オキソイミダゾリル基、ピラゾリル基（例えば、５−ピラゾリル基等）、ジアゾリル基、オキサゾリル基、イソオキサゾリル基、チアゾリル基、イソチアゾリル基、１，２，４−トリアゾリル基、１，２，３−トリアゾリル基、テトラゾリル基、１，３，４−オキサジアゾリル基、１，２，４−オキサジアゾリル基、１，３，４−チアジアゾリル基、１，２，４−チアジアゾリル基、フラザニル基、ピリジル基（例えば、３−ピリジル基等）、ピリミジニル基、３，４−ジヒドロ−４−オキソピリミジニル基、ピリダジニル基、ピラジニル基、１，３，５−トリアジニル基、イミダゾリニル基（例えば、２−イミダゾリニル基等）、ピラゾリニル基、オキサゾリニル基（２−オキサゾリニル基、３−オキサゾリニル基、４−オキサゾリニル基）、イソオキサゾリニル基、チオフェニル基、チアゾリニル基、イソチアゾリニル基、ピラニル基、２−オキソピラニル基、２−オキソ−２，５−ジヒドロフラニル基、１，１−ジオキソ−１Ｈ−イソチアゾリル基などが挙げられる。好ましくは、ピロリル基、チエニル基、イミダゾリル基、ピラゾリル基、オキサゾリル基、イソオキサゾリル基、チオフェニル基、チアゾリル基、イソチアゾリル基及びピリジル基が挙げられる。
【０１０８】
単環とベンゼン環との縮合環である「複素環基」としては、インドリル基（例えば、４−インドリル基、５−インドリル基、６−インドリル基、７−インドリル基等）、イソインドリル基、１，３−ジヒドロ−１，３−ジオキソイソインドリル基、ベンゾフラニル基（例えば、４−ベンゾフラニル基、７−ベンゾフラニル基等）、インダゾリル基、イソベンゾフラニル基、ベンゾチオフェニル基（例えば、４−ベンゾチオフェニル基、５−ベンゾチオフェニル基、７−ベンゾチオフェニル基等）、ベンゾオキサゾリル基（例えば、４−ベンゾオキサゾリル基、７−ベンゾオキサゾリル基等）、ベンズイミダゾリル基（例えば、４−ベンズイミダゾリル基、５−ベンズイミダゾリル基、７−ベンズイミダゾリル基等）、ベンゾチアゾリル基（例えば、４−ベンゾチアゾリル基、７−ベンゾチアゾリル基等）、キノリル基、イソキノリル基、１，２−ジヒドロ−２−オキソキノリル基、キナゾリニル基、キノキサリニル基、シンノリニル基、フタラジニル基、２，３−ジヒドロインドリル基、イソインドリニル基、１，２，３，４−テトラヒドロキノリル基、２−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロキノリル基、ベンゾ［１，３］ジオキソリル基、クロマニル基、イソクロマニル基、
【０１０９】
【化１１】
2016155776.tif 000013
【０１１０】
等が挙げられる。
【０１１１】
前記単環または縮合環と前記のＣ３−１２炭素環とのスピロ環としては、例えば、以下の式で表される基が挙げられる。
【０１１２】
【化１２】
2016155776.tif 000014
【０１１３】
好ましくは、単環の５員或いは６員の複素環とベンゼン環との縮合環基であり、具体的には、インドリル基、インダゾリル基、ベンゾチオフェニル基、ベンズイミダゾリル基、２，３−ジヒドロインドリル基、１，２，３，４−テトラヒドロキノリル基、ベンゾ［１，３］ジオキソリル基等である。
【０１１４】
Ｒ１’、Ｒ２’、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６として好ましくは、ピロリジニル基、ピペリジニル基、ピペラジニル基、モルホリニル基、ピリジニル基、チオフェニル基、チアゾリル基、インドリル基、インダゾリル基、ベンゾチオフェニル基、ベンズイミダゾリル基、２，３−ジヒドロインドリル基、１，２，３，４−テトラヒドロキノリル基及びベンゾ［１，３］ジオキソリル基であり、更に好ましくはピペリジニル基、ピリジニル基、チオフェニル基、チアゾリル基、インドリル基、インダゾリル基、ベンゾチオフェニル基、ベンズイミダゾリル基、２，３−ジヒドロインドリル基、１，２，３，４−テトラヒドロキノリル基、ベンゾ［１，３］ジオキソリル基である。グループＡの１２）、ＲＡ７並びにグループＢの２３）、ＲＢ３、ＲＢ６、ＲＢ１６及びＲＢ１７として好ましくは、ピロリジニル基、ピペリジニル基、ピペラジニル基、モルホリニル基、ピリジル基及びオキサゾリニル基であり、更に好ましくはピロリジニル基、ピペリジニル基、ピペラジニル基及びモルホリニル基である。
【０１１５】
Ｒ１’、Ｒ２’及びＲ６並びにＲ３、Ｒ４及びＲ５の「Ｃ１−６アルキル基」及び「Ｃ２−６アルケニル基」は、グループＡから選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。すなわち、前記定義の「Ｃ１−６アルキル基」及び「Ｃ２−６アルケニル基」は、グループＡから選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよく、無置換の「Ｃ１−６アルキル基」及び無置換の「Ｃ２−６アルケニル基」を含む。
【０１１６】
下記定義のグループＢの４）の前記定義の「Ｃ１−８アルキル基」及びＲＢ１乃至ＲＢ３１の前記定義の「Ｃ１−４アルキル基」は、それぞれ、グループＡから選ばれる同一又は異なった１乃至３個の置換基で置換されてもよい。
【０１１７】
「グループＡ」とは、１）前記定義の「ハロゲン原子」、２）ニトロ基、３）シアノ基、４）前記定義の「Ｃ１−４アルキル基」、５）「−ＯＲＡ１」、６）「−ＳＲＡ２」、７）「−ＮＲＡ３ＲＡ４」、８）「−ＣＯＯＲＡ５」、９）「−ＮＲＡ６ＣＯＲＡ７」、
１０）「−ＮＲＡ８ＣＯＯＲＡ９」、１１）前記定義の「Ｃ３−１２炭素環基」及び１２）前記定義の「複素環基」からなる群であり、ここで、ＲＡ１、ＲＡ２、ＲＡ３、ＲＡ４、ＲＡ５、ＲＡ６、ＲＡ８及びＲＡ９は、同一又は異なって、それぞれ、水素原子、又は、前記定義の「Ｃ1−４アルキル基」を示し、ＲＡ７は、前記定義の「Ｃ１−４アルキル基」、前記定義の「Ｃ３−１２炭素環基」、又は、前記定義の「複素環基」を示す。
【０１１８】
前記「−ＯＲＡ１」としては、ヒドロキシ基、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、イソプロピルオキシ基、ｔｅｒｔ−ブトキシ基等が具体的に挙げられる。
【０１１９】
前記「−ＳＲＡ２」としては、メルカプト基、メチルスルファニル基、エチルスルファニル基、プロピルスルファニル基、イソプロピルスルファニル基、ｔｅｒｔ−ブチルスルファニル基等が具体的に挙げられる。
【０１２０】
前記「−ＮＲＡ３ＲＡ４」としては、アミノ基、メチルアミノ基、エチルアミノ基、プロピルアミノ基、イソプロピルアミノ基、ｔｅｒｔ−ブチルアミノ基、ジメチルアミノ基、ジエチルアミノ基、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ基、Ｎ−メチル−Ｎ−プロピルアミノ基、Ｎ−イソプロピル−Ｎ−メチルアミノ基等が具体的に挙げられる。
【０１２１】
前記「−ＣＯＯＲＡ５」としては、カルボキシル基、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、プロポキシカルボニル基、イソプロポキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基等が具体的に挙げられる。
【０１２２】
「−ＮＲＡ６ＣＯＲＡ７」としては、アセチルアミノ基、プロピオニルアミノ基、ブチリルアミノ基、イソブチリルアミノ基、ピバロイルアミノ基、Ｎ−アセチル−Ｎ−メチルアミノ基、ブチルカルボニルアミノ基等が具体的に挙げられる。
【０１２３】
「−ＮＲＡ８ＣＯＯＲＡ９」としては、カルボキシアミノ基、カルボキシメチルアミノ基、カルボキシエチルアミノ基、メトキシカルボニルアミノ基、メトキシカルボニルメチルアミノ基等が具体的に挙げられる。
【０１２４】
「グループＡ」として好ましくは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、メチル基、エチル基、プロピル基、ヒドロキシ基、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、アミノ基、メチルアミノ基、エチルアミノ基、ジメチルアミノ基、ジエチルアミノ基、カルボキシアミノ基、ブチルカルボニルアミノ基、カルボキシ基、フェニル基、４−モルホリニル基、１−ピロリジニル基、１-ピペリジニル基及び１-ピペラジニル基が挙げられる。
【０１２５】
グループＡとして特に好ましくは、フッ素原子、塩素原子、メチル基、ヒドロキシ基、メトキシ基、アミノ基、ジメチルアミノ基、ジエチルアミノ基、カルボキシアミノ基、ブチルカルボニルアミノ基、カルボキシ基、フェニル基、４−モルホリニル基、１−ピロリジニル基、１-ピペリジニル基及び１-ピペラジニル基が挙げられる。
【０１２６】
好ましい置換基の数は１であり、当該置換基は置換可能な位置であればどこで用いられていてもよい。
【０１２７】
環Ｃｙとしての「Ｃ３−１２炭素環基」及び「複素環基」並びにＲ３、Ｒ４又はＲ５の「Ｃ３−１２炭素環基」及び「複素環基」は、グループＢから選ばれる１乃至５個の置換基で置換されてもよい。すなわち、前記定義の「Ｃ３−１２炭素環基」及び「複素環基」は、グループＢから選ばれる１乃至５個の置換基で置換されてもよく、無置換の「Ｃ３−１２炭素環基」及び無置換の「複素環基」を含む。
【０１２８】
「グループＢ」とは、１）前記定義の「ハロゲン原子」、２）ニトロ基、３）シアノ基、４）前記定義の「Ｃ１−８アルキル基」、５）前記定義の「Ｃ２−４アルケニル基」、６）前記定義の「Ｃ２−４アルキニル基」、７）「−ＯＲＢ１」、８）「−ＳＲＢ２」、９）「−ＮＲＢ３ＲＢ４」、１０）「−ＮＲＢ５ＣＯＲＢ６」、１１）「−ＮＲＢ７ＣＯＯＲＢ８」、１２）「−ＮＲＢ９ＣＯＮＲＢ１０ＲＢ１１」、１３）「−ＮＲＢ１２ＣＯＮＲＢ１３ＯＲＢ１４」、１４）「−ＮＲＢ１５ＳＯ２ＲＢ１６」、１５）「−ＳＯ２−ＲＢ１７」、１６）「−ＳＯ２ＮＲＢ１８ＲＢ１９」、１７）「−Ｐ（＝Ｏ）（ＲＢ２０）（ＲＢ２１）」、１８）「−ＣＯＯＲＢ２２」、１９）「−ＣＯＮＲＢ２３ＲＢ２４」、２０）「−ＮＲＢ２５ＳＯ２ＮＲＢ２６ＲＢ２７」、２１）「−ＮＲＢ２８ＳＯ２ＮＲＢ２９ＣＯＮＲＢ３０ＲＢ３１」、２２）前記定義の「Ｃ３−１２炭素環基」及び２３）前記定義の「複素環基」からなる群であり、ここで、ＲＢ１、ＲＢ２、ＲＢ４、ＲＢ５、ＲＢ７、ＲＢ８、ＲＢ９、ＲＢ１０、ＲＢ１１、ＲＢ１２、ＲＢ１３、ＲＢ１４、ＲＢ１５、ＲＢ１８、ＲＢ１９、ＲＢ２２、ＲＢ２３、ＲＢ２４、ＲＢ２５、ＲＢ２６、ＲＢ２７、ＲＢ２８、ＲＢ２９、ＲＢ３０およびＲＢ３１は、同一又は異なって、それぞれ、水素原子、又は、前記定義の「Ｃ１−４アルキル基」を示し、ＲＢ３及びＲＢ６は、それぞれ、水素原子、前記定義の「Ｃ１−４アルキル基」、前記定義の「Ｃ３−１２炭素環基」、又は、前記定義の「複素環基」を示し、ＲＢ１６は、前記定義の「Ｃ１−４アルキル基」、前記定義の「Ｃ３−１２炭素環基」、又は、前記定義の「複素環基」を示し、ＲＢ１７は、前記定義の「Ｃ１−４アルキル基」、又は、前記定義の「複素環基」を示し、ＲＢ２０及びＲＢ２１は、同一又は異なって、それぞれ、前記定義の「Ｃ１−４アルキル基」を示す。
【０１２９】
「−ＯＲＢ１」としては、ヒドロキシ基、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、イソプロピルオキシ基、ｔｅｒｔ−ブトキシ基等が具体的に挙げられる。
【０１３０】
「−ＳＲＢ２」としては、メルカプト基、メチルスルファニル基、エチルスルファニル基、プロピルスルファニル基、イソプロピルスルファニル基、ｔｅｒｔ−ブチルスルファニル基等が具体的に挙げられる。
【０１３１】
「−ＮＲＢ３ＲＢ４」としては、アミノ基、メチルアミノ基、エチルアミノ基、２−アミノエチルアミノ基、プロピルアミノ基、イソプロピルアミノ基、ｔｅｒｔ−ブチルアミノ基、ジメチルアミノ基、ジエチルアミノ基、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ基、Ｎ−メチル−Ｎ−プロピルアミノ基、Ｎ−イソプロピル−Ｎ−メチルアミノ基、Ｎ−（イミダゾリン−２−イル）アミノ基等が具体的に挙げられる。
【０１３２】
「−ＮＲＢ５ＣＯＲＢ６」としては、アミノ基、ホルミルアミノ基、アセチルアミノ基、ヒドロキシアセチルアミノ基、プロピオニルアミノ基、ブチリルアミノ基、イソブチリルアミノ基、ピバロイルアミノ基、Ｎ−アセチル−Ｎ−メチルアミノ基、３−アミノプロピオニルアミノ基、３−（ペンタノイルアミノ）プロピオニルアミノ基、４−イミダゾリルカルボニルアミノ基、（１−メチルピロール−２−イル）カルボニルアミノ基、４−ピ
ラゾリルカルボニルアミノ基等が具体的に挙げられる。
【０１３３】
「−ＮＲＢ７ＣＯＯＲＢ８」としては、カルボキシアミノ基、カルボキシメチルアミノ基、カルボキシエチルアミノ基、メトキシカルボニルアミノ基、メトキシカルボニルメチルアミノ基等が具体的に挙げられる。
【０１３４】
「−ＮＲＢ９ＣＯＮＲＢ１０ＲＢ１１」としては、アミノカルボニルアミノ基、メチルアミノカルボニルアミノ基、ジメチルアミノカルボニルアミノ基、（メチルアミノカルボニル）（メチル）アミノ基、（ジメチルアミノカルボニル）（メチル）アミノ基、［（２―ヒドロキシエチル）カルバモイル］アミノ等が具体的に挙げられる。
【０１３５】
「−ＮＲＢ１２ＣＯＮＲＢ１３ＯＲＢ１４」としては、メトキシアミノカルボニルアミノ基、（メチルメトキシアミノカルボニル）（メチル）アミノ基、（メチルメトキシアミノカルボニル）アミノ基等が具体的に挙げられる。
【０１３６】
「−ＮＲＢ１５ＳＯ２ＲＢ１６」としては、スルホニルアミノ基、メチルスルホニルアミノ基、エチルスルホニルアミノ基、プロピルスルホニルアミノ基、Ｎ−メチル−Ｎ−スルホニルアミノ基、Ｎ−メチル−Ｎ−メチルスルホニルアミノ基、Ｎ−エチル−Ｎ−スルホニルアミノ基、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルスルホニルアミノ基、３−ピリジルスルホニルアミノ基、モルホリノスルホニルアミノ基、ピペリジノモルホリノスルホニルアミノ基、２−モルホリノエチルスルホニルアミノ基等が具体的に挙げられる。
【０１３７】
「−ＳＯ２−ＲＢ１７」としては、スルホニル基、メチルスルホニル基、エチルスルホニル基、プロピルスルホニル基、ブチルスルホニル基等が具体的に挙げられる。
【０１３８】
「−ＳＯ２ＮＲＢ１８ＲＢ１９」としては、アミノスルホニル基、メチルアミノスルホニル基、ジメチルアミノスルホニル基、エチルメチルアミノスルホニル基等が具体的に挙げられる。
【０１３９】
「−Ｐ（＝Ｏ）（ＲＢ２０）（ＲＢ２１）」としては、ホスフィノイル基、メチルホスフィノイル基、ジメチルホスフィノイル基、エチルホスフィノイル基、ジエチルホスフィノイル基等が具体的に挙げられる。
【０１４０】
「−ＣＯＯＲＢ２２」としては、カルボキシル基、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、プロポキシカルボニル基、イソプロポキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキ
シカルボニル基等が具体的に挙げられる。
【０１４１】
「−ＣＯＮＲＢ２３ＲＢ２４」としては、カルバモイル、メチルカルバモイル、ジメチルカルバモイル、エチルカルバモイル、ジエチルカルバモイル、プロピルカルバモイル、ブチルカルバモイル等が具体的に挙げられる。
【０１４２】
「−ＮＲＢ２５ＳＯ２ＮＲＢ２６ＲＢ２７」としては、スルファモイルアミノ基、ジメチルスルファモイルアミノ基等が具体的に挙げられる。
【０１４３】
「−ＮＲＢ２８ＳＯ２ＮＲＢ２９ＣＯＮＲＢ３０ＲＢ３１」としては、｛［（２―ヒドロキシエチル）カルバモイル］（２―ヒドロキシエチル）スルファモイル｝アミノ基等が具体的に挙げられる。
【０１４４】
「グループＢ」として好ましくは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子、ニトロ基、シアノ基、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、ヘキシル基、１−エチルプロピル基、１−プロピルブチル基、ビニル基、１−プロペニル基、エチニル基、１−プロピニル基、１−ブチニル基、ヒドロキシ基、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、イソプロポキシ基、メチルチオ基、エチルチオ基、アミノ基、メチルアミノ基、エチルアミノ基、ジメチルアミノ基、ジエチルアミノ基、エチルメチルアミノ基、メチルカルボニルアミノ基、エチルカルボニルアミノ基、プロピルカルボニルアミノ基、イソプロピルカルボニルアミノ基、（メチルカルボニル）（メチル）アミノ基、エトキシカルボニルアミノ基、メチルアミノカルボニルアミノ基、ジメチルアミノカルボニルアミノ基、メトキシアミノカルボニルアミノ基、メチルスルホニルアミノ基、エチルスルホニルアミノ基、プロピルスルホニルアミノ基、イソプロピルスルホニルアミノ基、フェニルスルホニルアミノ基、（メチルスルホニル）（メチル）アミノ基、メチルスルホニル基、ピペラジン−１−イルスルホニル基、モルホリン−４−イルスルホニル基、ピペリジン−４−イルスルホニル基、ピロリジン−４−イルスルホニル基、アミノスルホニル基、メチルアミノスルホニル基、エチルアミノスルホニル基、ジメチルアミノスルホニル基、ジメチルホスフィノイル基、カルボキシ基、メトキシカルボニル基、カルバモイル基、メチルアミノカルボニル基、エチルアミノカルボニルアミノ基、ジメチルアミノスルホニルアミノ基、シクロプロピル基、シクロヘキシル基、フェニル基、ピペリジニル基、ピロリジニル基、ピペリジニル基、ピペラジニル基及びモルホリニル基が挙げられる。
【０１４５】
「グループＢ」として特に好ましくは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子、ニトロ基、シアノ基、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、１−エチルプロピル基、１−プロピルブチル基、ブチル基、イソブチル基、イソペンチル基、ビニル基、エチニル基、１−プロピニル基、１−ブチニル基、ヒドロキシ基、メトキシ基、プロポキシ基、イソプロポキシ基、メチルチオ基、アミノ基、メチルアミノ基、エチルアミノ基、ジメチルアミノ基、ジエチルアミノ基、エチルメチルアミノ基、メチルカルボニルアミノ基、エチルカルボニルアミノ基、プロピルカルボニルアミノ基、イソプロピルカルボニルアミノ基、（メチルカルボニル）（メチル）アミノ基、エトキシカルボニルアミノ基、メチルアミノカルボニルアミノ基、ジメチルアミノカルボニルアミノ基、メトキシアミノカルボニルアミノ基、メチルスルホニルアミノ基、エチルスルホニルアミノ基、プロピルスルホニルアミノ基、イソプロピルスルホニルアミノ基、フェニルスルホニルアミノ基、（メチルスルホニル）（メチル）アミノ基、メチルスルホニル基、ピペラジン−１−イルスルホニル基、モルホリン−４−イルスルホニル基、ピペリジン−４−イルスルホニル基、ピロリジン−４−イルスルホニル基、アミノスルホニル基、メチルアミノスルホニル基、エチルアミノスルホニル基、ジメチルアミノスルホニル基、ジメチルホスフィノイル基、カルボキシ基、メトキシカルボニル基、カルバモイル基、メチルアミノカルボニル基、エチルアミノカルボニルアミノ基、ジメチルアミノスルホニルアミノ基、シクロプロピル基、フェニル基、ピペリジニル基、ピロリジニル基、ピペリジニル基、ピペラジニル基及びモルホリニル基が挙げられる。
【０１４６】
好ましい置換基の数は１又は２であり、「Ｃ３−１２炭素環基」がフェニル基の場合、環Ｃｙは、好ましくは、２位モノ置換、３位モノ置換、４位モノ置換、２，３位ジ置換、２，４位ジ置換、２，５位ジ置換又は２，６位ジ置換であり、特に好ましくは４位モノ置換又は２，４位ジ置換であり、Ｒ２’は、より好ましくは３位モノ置換であり、Ｒ６は、より好ましくは２，４位ジ置換である。
【０１４７】
前記定義のグループＡの４）の前記定義の「Ｃ１−４アルキル基」、ＲＡ１、ＲＡ２、ＲＡ３、ＲＡ４、ＲＡ５、ＲＡ６、ＲＡ７、ＲＡ８又はＲＡ９の前記定義の「Ｃ１−４アルキル基」は、それぞれ、下記定義の「グループＣ」から選ばれる同一又は異なった１乃至３個の置換基で置換されてもよい。
【０１４８】
グループＡの１１）及びＲＡ７の前記定義の「Ｃ３−１２炭素環基」、並びに１２）及びＲＡ７の前記定義の「複素環基」は、それぞれ、下記定義の「グループＣ」から選ばれる同一又は異なった１乃至５個の置換基で置換されてもよい。
【０１４９】
グループＢの前記２２）、ＲＢ３、ＲＢ６及びＲＢ１６の前記定義の「Ｃ３−１２炭素環基」、並びに前記２３）、ＲＢ３、ＲＢ６、ＲＢ１６及びＲＢ１７の前記定義の「複素環基」は、それぞれ、下記定義の「グループＣ」から選ばれる同一又は異なった１乃至５個の置換基で置換されてもよい。
【０１５０】
「グループＣ」とは、１）前記定義の「ハロゲン原子」、２）シアノ基、３）前記定義の「Ｃ１−４アルキル基」、４）「−ＯＲＣ１」、５）「−ＮＲＣ２ＲＣ３」、６）「−ＣＯＯＲＣ４」及び７）オキソ基からなる群であり、ここで、ＲＣ１、ＲＣ２、ＲＣ３及びＲＣ４は、同一又は異なって、それぞれ、水素原子、又は、前記定義の「Ｃ１−４アルキル基」を示す。
【０１５１】
「−ＯＲＣ１」としては、ヒドロキシ基、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、イソプロポキシ基、ｔｅｒｔ−ブトキシ基等が具体的に挙げられる。
【０１５２】
「−ＮＲＣ２ＲＣ３」としては、アミノ基、メチルアミノ基、エチルアミノ基、プロピルアミノ基、イソプロピルアミノ基、ｔｅｒｔ−ブチルアミノ基、ジメチルアミノ基、ジエチルアミノ基、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ基、Ｎ−メチル−Ｎ−プロピルアミノ基、Ｎ−イソプロピル−Ｎ−メチルアミノ基等が具体的に挙げられる。
【０１５３】
「−ＣＯＯＲＣ４」としては、カルボキシル基、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、プロポキシカルボニル基、イソプロピルオキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基等が具体的に挙げられる。
【０１５４】
「グループＣ」として好ましくは、１）前記定義の「ハロゲン原子」、２）シアノ基、３）前記定義の「Ｃ１−４アルキル基」、４）「−ＯＲＣ１」、５）「−ＮＲＣ２ＲＣ３」、及び、６）「−ＣＯＯＲＣ４」からなる群であり、具体的には、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、シアノ基、メチル基、エチル基、プロピル基、ヒドロキシ基、メトキシ基、エトキシ基、アミノ基、ジメチルアミノ基、ジエチルアミノ基、カルボキシル基及びメトキシカルボニル基が挙げられる。
【０１５５】
「グループＣ」として特に好ましくは、メチル基である。好ましい置換基の数は１であり、置換基は置換可能な位置であればどこで使用されていてもよい。
【０１５６】
Ｒ１’として好ましくは、Ｃ１−６アルキル基（ここで、当該Ｃ１−６アルキル基は、グループＡから選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、又は、
【０１５７】
【化１３】
2016155776.tif 000015
【０１５８】
（各記号は前述の通り。）が挙げられる。
【０１５９】
ここで、ｍとして好ましくは、０であり、環Ｃｙとして好ましくは、Ｃ３−１２炭素環基であり、炭素環基として好ましくは、シクロアルキル基である（ここで、当該「Ｃ３−１２炭素環基」及び「シクロアルキル基」は、グループＢから選ばれる１乃至５個の置換基で置換されてもよい。）。
【０１６０】
具体的には、「Ｒ１’」としては、メチル基、エチル基、２，２，２−トリフルオロエチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、２−プロペニル基、シクロプロピル基、２−メチルシクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、フェニル基、４−クロロフェニル基、４−フルオロフェニル基、ｏ−トリル基、ｍ−トリル基、ｐ−トリル基、４−メトキシフェニル基、チオフェン−３−イル基、シクロプロピルメチル基、２−メトキシエチル、カルボキシメチル、２−ヒドロキシエチル、２−（ジメチルアミノ）エチル及びベンジル基が好ましい。
【０１６１】
更に好ましくは、メチル基、エチル基、２，２，２−トリフルオロエチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、シクロプロピル基、２−メチルシクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、フェニル基、４−クロロフェニル基、４−フルオロフェニル基、ｏ−トリル基、ｍ−トリル基、ｐ−トリル基、４−メトキシフェニル基、チオフェン−３−イル基、２−メトキシエチル、カルボキシメチル、２−ヒドロキシエチル、及び、２−（ジメチルアミノ）エチルが挙げられ、特に好ましくは、メチル基、又は、シクロプロピル基が挙げられる。
【０１６２】
「Ｒ２’」として好ましくは、
【０１６３】
【化１４】
2016155776.tif 000016
【０１６４】
（各記号は前述の通り。）である。ここで、ｍとして好ましくは、０であり、「環Ｃｙ」として好ましくはＣ３−１２炭素環基であり、「炭素環基」として好ましくは、フェニル基である（ここで、当該「Ｃ３−１２炭素環基」及び「フェニル基」は、グループＢから選ばれる１乃至５個の置換基で置換されてもよく、「グループＢ」として好ましくは、「−ＮＲＢ３ＲＢ４」、「−ＮＲＢ５ＣＯＲＢ６」、「−ＮＲＢ７ＣＯＯＲＢ８」、「−ＮＲＢ９ＣＯＮＲＢ１０ＲＢ１１」、「−ＮＲＢ１２ＣＯＮＲＢ１３ＯＲＢ１４」、「−ＮＲＢ１５ＳＯ２ＲＢ１６」、「−ＮＲＢ２５ＳＯ２ＮＲＢ２６ＲＢ２７」及び「−ＮＲＢ２８ＳＯ２ＮＲＢ２９ＣＯＮＲＢ３０ＲＢ３１」である。）。
【０１６５】
具体的には、「Ｒ２’」としては、水素原子、メチル基、エチル基、２，２，２−トリフルオロエチル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、２−プロペニル基、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、フェニル基、４−クロロフェニル基、２−フルオロフェニル基、４−フルオロフェニル基、４−ブロモフェニル基、２，６−ジフルオロフェニル基、ｏ−トリル基、ｍ−トリル基、ｐ−トリル基、２，６−ジメチルフェニル基、２−エチルフェニル基、３−（３−ヒドロキシプロピル）フェニル基、３−（２−カルボキシエチル）フェニル基、３−（３−モルホリン−４−イルプロピル）フェニル基、３−ジメチルアミノプロピルフェニル基、３−ヒドロキシフェニル基、４−ヒドロキシフェニル基、２−メトキシフェニル基、３−メトキシフェニル基、４−メトキシフェニル基、３−ジメチルアミノエトキシフェニル基、３−カルボキシメトキシフェニル基、３−（３−ジメチルアミノプロポキシ）フェニル基、３−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）フェニル基、３−（２−ピロリジン−１−イルエトキシ）フェニル基、３−（２−ピペリジン−１−イルエトキシ）フェニル基、３−（２−ジエチルアミノエトキシ）フェニル基、３−［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）プロポキシ］フェニル基、３−アミノフェニル基、３−メチルアミノフェニル基、３−ジメチルアミノフェニル基、３−（メタンスルホニル）メチルアミノフェニル基、３−メチルカルボニルアミノフェニル基、３−メタンスルホニルアミノフェニル基、４−クロロ−３−メタンスルホニルアミノフェニル基、３−エタンスルホニルアミノフェニル基、３−（プロパン−１−スルホニルアミノ）フェニル基、３−（プロパン−２−スルホニルアミノ）フェニル基、３−クロロメタンスルホニルアミノフェニル基、３−トリフルオロメタンスルホニルアミノフェニル基、３−（２，２，２−トリフルオロエタンスルホニルアミノ）フェニル基、３−（２−メトキシエチル）メチルアミノフェニル基、３−メチルカルボニルアミノフェニル基、３−エチルカルボニルアミノフェニル基、３−プロピルカルボニルアミノフェニル基、３−イソプロピルカルボニルアミノフェニル基、３−エトキシカルボニルアミノフェニル基、３−（ヒドロキシメチルカルボニル）アミノフェニル基、３−（２−ヒドロキシエチルカルボニルアミノ）フェニル基、３−エチルアミノカルボニルアミノフェニル基、３−（２−ジメチルアミノエチルカルボニルアミノ）フェニル基、３−（３−ジメチルアミノプロピルカルボニルアミノ）フェニル基、３−（メトキシメチルカルボニルアミノ）フェニル基、３−（ブチルカルボニルアミノメチルカルボニルアミノ）フェニル基、３−（２−ブチルカルボニルアミノエチルカルボニルアミノ）フェニル基、３−メチルアミノカルボニルアミノフェニル基、３−メトキシアミノカルボニルアミノフェニル基、３−ジメチルアミノカルボニルアミノフェニル基、３−（ジメチルアミノメチルカルボニルアミノ）フェニル基、３−（２−モルホリン−４−イルエチルアミノ）フェニル基、３−（２−ベンジルオキシカルボニルアミノエチル）スルホニルアミノフェニル基、３−（２−アミノエチル）スルホニルアミノフェニル基、３−（２−ブチルカルボニルアミノエチル）スルホニルアミノフェニル基、３−ジメチルアミノスルホニルアミノフェニル基、３−カルボキシフェニル基、３−カルバモイルフェニル基、３−メタンスルホニルフェニル基、４−メタンスルホニルフェニル基、３−エタンスルホニルフェニル基、３−メチルアミノスルホニルフェニル基、３−エチルアミノスルホニルフェニル基、３−ベンゼンスルホニルアミノフェニル基、３−アミノスルホニルフェニル基、３−ジメチルアミノスルホニルフェニル基、４−ジメチルアミノスルホニルフェニル基、３−（４−メチルピペラジン−１−スルホニル）フェニル基、３−（モルホリン−４−スルホニル）フェニル基、３−（ピペリジン−１−スルホニル）フェニル基、３−（ピロリジン−１−スルホニル）フェニル基、３−メチルアミノカルボニルフェニル基、３−モルホリン−４−イルフェニル基、３−ピロリジン−１−イルフェニル基、３−ピペリジン−１−イルフェニル基、３−（４−メチルピペラジン−１−イル）フェニル基、３−（２−オキソピロリジン−１−イル）フェニル基、３−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル基、チオフェン−３−イル基、ピリジン−３−イル基、ベンジル基及び以下の基：
【０１６６】
【化１５】
2016155776.tif 000017
【０１６７】
が好ましく、
更に好ましくは、フェニル基、４−クロロフェニル基、２−フルオロフェニル基、４−フルオロフェニル基、４−ブロモフェニル基、２，６−ジフルオロフェニル基、ｏ−トリル基、ｍ−トリル基、ｐ−トリル基、２，６−ジメチルフェニル基、２−エチルフェニル基、３−（３−ヒドロキシプロピル）フェニル基、３−（２−カルボキシエチル）フェニル基、３−（３−モルホリン−４−イルプロピル）フェニル基、３−ジメチルアミノプロピルフェニル基、３−ヒドロキシフェニル基、４−ヒドロキシフェニル基、２−メトキシフェニル基、３−メトキシフェニル基、４−メトキシフェニル基、３−ジメチルアミノエトキシフェニル基、３−カルボキシメトキシフェニル基、３−（３−ジメチルアミノプロポキシ）フェニル基、３−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）フェニル基、３−（２−ピロリジン−１−イルエトキシ）フェニル基、３−（２−ピペリジン−１−イルエトキシ）フェニル基、３−（２−ジエチルアミノエトキシ）フェニル基、３−［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）プロポキシ］フェニル基、３−アミノフェニル基、３−メチルアミノフェニル基、３−ジメチルアミノフェニル基、３−（メタンスルホニル）メチルアミノフェニル基、３−メチルカルボニルアミノフェニル基、３−メタンスルホニルアミノフェニル基、４−クロロ−３−メタンスルホニルアミノフェニル基、３−エタンスルホニルアミノフェニル基、３−（プロパン−１−スルホニルアミノ）フェニル基、３−（プロパン−２−スルホニルアミノ）フェニル基、３−クロロメタンスルホニルアミノフェニル基、３−トリフルオロメタンスルホニルアミノフェニル基、３−（２，２，２−トリフルオロエタンスルホニルアミノ）フェニル基、３−（２−メトキシエチル）メチルアミノフェニル基、３−メチルカルボニルアミノフェニル基、３−エチルカルボニルアミノフェニル基、３−プロピルカルボニルアミノフェニル基、３−イソプロピルカルボニルアミノフェニル基、３−エトキシカルボニルアミノフェニル基、３−（ヒドロキシメチルカルボニル）アミノフェニル基、３−（２−ヒドロキシエチルカルボニルアミノ）フェニル基、３−エチルアミノカルボニルアミノフェニル基、３−（２−ジメチルアミノエチルカルボニルアミノ）フェニル基、３−（３−ジメチルアミノプロピルカルボニルアミノ）フェニル基、３−（メトキシメチルカルボニルアミノ）フェニル基、３−（ブチルカルボニルアミノメチルカルボニルアミノ）フェニル基、３−（２−ブチルカルボニルアミノエチルカルボニルアミノ）フェニル基、３−メチルアミノカルボニルアミノフェニル基、３−メトキシアミノカルボニルアミノフェニル基、３−ジメチルアミノカルボニルアミノフェニル基、３−（ジメチルアミノメチルカルボニルアミノ）フェニル基、３−（２−モルホリン−４−イルエチルアミノ）フェニル基、３−（２−ベンジルオキシカルボニルアミノエチル）スルホニルアミノフェニル基、３−（２−アミノエチル）スルホニルアミノフェニル基、３−（２−ブチルカルボニルアミノエチル）スルホニルアミノフェニル基、３−ジメチルアミノスルホニルアミノフェニル基、３−カルボキシフェニル基、３−カルバモイルフェニル基、３−メタンスルホニルフェニル基、４−メタンスルホニルフェニル基、３−エタンスルホニルフェニル基、３−メチルアミノスルホニルフェニル基、３−エチルアミノスルホニルフェニル基、３−ベンゼンスルホニルアミノフェニル基、３−アミノスルホニルフェニル基、３−ジメチルアミノスルホニルフェニル基、４−ジメチルアミノスルホニルフェニル基、３−（４−メチルピペラジン−１−スルホニル）フェニル基、３−（モルホリン−４−スルホニル）フェニル基、３−（ピペリジン−１−スルホニル）フェニル基、３−（ピロリジン−１−スルホニル）フェニル基、３−メチルアミノカルボニルフェニル基、３−モルホリン−４−イルフェニル基、３−ピロリジン−１−イルフェニル基、３−ピペリジン−１−イルフェニル基、３−（４−メチルピペラジン−１−イル）フェニル基、３−（２−オキソピロリジン−１−イル）フェニル基及び３−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル基が挙げられる。
【０１６８】
「Ｒ６」として好ましくは、
【０１６９】
【化１６】
2016155776.tif 000018
【０１７０】
（各記号は前述の通り。）である。ここで、ｍとして好ましくは、０であり、「環Ｃｙ」として好ましくはＣ３−１２炭素環基であり、「炭素環基」として好ましくは、フェニル基である（ここで、当該「Ｃ３−１２炭素環基」及び「フェニル基」は、グループＢから選ばれる１乃至５個の置換基で置換されてもよく、ここで、グループＢとして好ましくは、前記定義の「ハロゲン原子」、前記定義の「Ｃ１−８アルキル基」及び前記定義の「Ｃ２−４アルキニル基」である。）。
【０１７１】
具体的には、「Ｒ６」としては、２−メトキシエチル基、２，２−ジメチルプロピル基、３−ジメチルアミノプロピル基、シクロプロピル基、シクロヘキシル基、フェニル基、２−クロロフェニル基、３−クロロフェニル基、４−クロロフェニル基、２，４−ジクロロフェニル基、３，４−ジクロロフェニル基、４−ブロモフェニル基、２−フルオロフェニル基、４−フルオロフェニル基、４−ヨードフェニル基、ｏ−トリル基、ｐ−トリル基、２−エチルフェニル基、４−エチルフェニル基、２−プロピルフェニル基、２−イソプロピルフェニル基、４−イソプロピルフェニル基、２−ブチルフェニル基、４−ブチルフェニル基、２−イソブチルフェニル基、４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル基、２−（３−メチルブチル）フェニル基、４−トリフルオロメチルフェニル基、４−（２−フルオロエチル）フェニル基、４−（２，２−ジフルオロエチル）フェニル基、４−（２，２，２−トリフルオロエチル）フェニル基、４−（１−エチルプロピル）フェニル基、４−（１−プロピルブチル）フェニル基、４−エチニルフェニル基、２，４−ジフルオロフェニル基、２，６−ジフルオロフェニル基、２，４−ジクロロフェニル基、４−ブロモ−２−フルオロフェニル基、４−ブロモ−３−フルオロフェニル基、４−ブロモ−２−クロロフェニル基、４−クロロ−２−フルオロフェニル基、２−フルオロ−４−ヨードフェニル基、２−クロロ−４−メチルフェニル基、４−クロロ−２−メチルフェニル基、４−ブロモ−２−メチルフェニル基、４−ブロモ−３−メチルフェニル基、２−フルオロ−４−メチルフェニル基、２−フルオロ−４−トリフルオロメチルフェニル基、４−ブロモ−２−エチルフェニル基、４−エチル−２−フルオロフェニル基、４−（２−カルボキシエチル）−２−フルオロフェニル基、２−フルオロ−４−プロピルフェニル基、２−フルオロ−４−ビニルフェニル基、４−（２−カルボキシビニル）−２−フルオロフェニル基、４−エチニル−２−フルオロフェニル基、２−フルオロ−４−（プロピ−１−イニル）フェニル基、２−フルオロ−４-（３−ヒドロキシプロピ−１−イニル）フェニル基、２−フルオロ−４
−（３−メトキシプロピ−１−イニル）フェニル基、４−シクロプロピル−２−フルオロフェニル基、２−フルオロ−４−（３−ヒドロキシ−３−メチルブチ−１−イニル）フェニル基、４−（３−ジメチルアミノプロピ−１−イニル）−２−フルオロフェニル基、４−クロロ−２−ジメチルアミノメチルフェニル基、４−ジメチルアミノ−２−メチルフェニル基、４−ヒドロキシフェニル基、２−メトキシフェニル基、４−メトキシフェニル基、４−トリフルオロメトキシフェニル基、４−イソプロポキシフェニル基、２，４−ジメトキシフェニル基、４−メトキシ−２−メチルフェニル基、２−フルオロ−４−メトキシフェニル基、４−ブロモ−２−ヒドロキシフェニル基、４−ブロモ−２−メトキシフェニル基、２−ブロモ−４−メトキシフェニル基、４−メチルチオフェニル基、４−トリフルオロメチルチオフェニル基、２−フルオロ−４−メチルチオフェニル基、４−アミノフェニル基、４−メチルアミノフェニル基、２−ジメチルアミノフェニル基、３−ジメチルアミノフェニル基、４−ジメチルアミノフェニル基、４−エチルアミノフェニル基、４−ジエチルアミノフェニル基、４−エチルメチルアミノ−２−フルオロフェニル基、４−ニトロフェニル基、４−シアノフェニル基、６−アミノピリジン−３−イル基、６−ジメチルアミノピリジン−３−イル基、６−クロロピリジン−２−イル基、４−クロロピリジン−３−イル基、４−カルボキシフェニル基、４−メトキシカルボニルフェニル基、４−エチルアミノフェニル基、４−（メチルカルボニル）メチルアミノフェニル基、４−メタンスルホニルフェニル基、４−トリフルオロメタンスルホニルフェニル基、４−ジメチルアミノ−２−メチルフェニル基、４−ジメチルアミノ−３−メチルフェニル基、４−ジメチルアミノ−３−トリフルオロメチルフェニル基、４−ジメチルアミノ−２−プロピルフェニル基、４−ジメチルアミノ−２−フルオロフェニル基、４−ジメチルアミノ−３−フルオロフェニル基、４−ジメチルホスフィノイルフェニル基、ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル基、１，１’−ビフェニル−４−イル基、４−（ピペリジン−１−イル）フェニル基、４−ベンジルフェニル基、４−（モルホリン−４−イル）フェニル基、１−メチルピペリジン−４−イル基、１−イソプロピルピペリジン−４−イル基、チアゾール−２−イル基、２−ジメチルアミノチアゾール−４−イル基、１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−６−イル基、１Ｈ−インドール−５−イル基、１−メチル−１Ｈ−インドール−５−イル基、１−エチル−１Ｈ−インドール−５−イル基、１−メチル−１Ｈ−インドール−６−イル基、１−メチル−１Ｈ−インドール−７−イル基、１，２−ジメチル−１Ｈ−インドール−５−イル基、１，２，３−トリメチル−１Ｈ−インドール−５−イル基、６−フルオロ−１Ｈ−インドール−５−イル基、１−メチル−１Ｈ−ベンズイミダゾール−５−イル基、１−メチル−１Ｈ−インダゾール−５−イル基、１−メチル−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−５−イル基、ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−イル基、４−クロロベンジル基、２−ブロモベンジル基、３−ブロモベンジル基、４−ブロモベンジル基、５−ブロモ−２−フルオロベンジル基、２−モルホリン−４−イルエチル基及びピリジン−３−イルメチル基が好ましい。
【０１７２】
更に好ましくは、フェニル基、２−クロロフェニル基、３−クロロフェニル基、４−クロロフェニル基、２，４−ジクロロフェニル基、３，４−ジクロロフェニル基、４−ブロモフェニル基、２−フルオロフェニル基、４−フルオロフェニル基、４−ヨードフェニル基、ｏ−トリル基、ｐ−トリル基、２−エチルフェニル基、４−エチルフェニル基、２−プロピルフェニル基、２−イソプロピルフェニル基、４−イソプロピルフェニル基、２−ブチルフェニル基、４−ブチルフェニル基、２−イソブチルフェニル基、４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル基、２−（３−メチルブチル）フェニル基、４−トリフルオロメチルフェニル基、４−（２−フルオロエチル）フェニル基、４−（２，２−ジフルオロエチル）フェニル基、４−（２，２，２−トリフルオロエチル）フェニル基、４−（１−エチルプロピル）フェニル基、４−（１−プロピルブチル）フェニル基、４−エチニルフェニル基、２，４−ジフルオロフェニル基、２，６−ジフルオロフェニル基、２，４−ジクロロフェニル基、４−ブロモ−２−フルオロフェニル基、４−ブロモ−３−フルオロフェニル基、４−ブロモ−２−クロロフェニル基、４−クロロ−２−フルオロフェニル基、２−フルオロ−４−ヨードフェニル基、２−クロロ−４−メチルフェニル基、４−クロロ−２−メチルフェニル基、４−ブロモ−２−メチルフェニル基、４−ブロモ−３−メチルフェニル基、２−フルオロ−４−メチルフェニル基、２−フルオロ−４−トリフルオロメチルフェニル基、４−ブロモ−２−エチルフェニル基、４−エチル−２−フルオロフェニル基、４−（２−カルボキシエチル）−２−フルオロフェニル基、２−フルオロ−４−プロピルフェニル基、２−フルオロ−４−ビニルフェニル基、４−（２−カルボキシビニル）−２−フルオロフェニル基、４−エチニル−２−フルオロフェニル基、２−フルオロ−４−（プロピ−１−イニル）フェニル基、２−フルオロ−４-（３−ヒドロキシプロピ−１−イニル）フェニル基、２−フルオロ−４−（３−メトキシプロピ−１−イニル）フェニル基、４−シクロプロピル−２−フルオロフェニル基、２−フルオロ−４−（３−ヒドロキシ−３−メチルブチ−１−イニル）フェニル基、４−（３−ジメチルアミノプロピ−１−イニル）−２−フルオロフェニル基、４−クロロ−２−ジメチルアミノメチルフェニル基、４−ジメチルアミノ−２−メチルフェニル基、４−ヒドロキシフェニル基、２−メトキシフェニル基、４−メトキシフェニル基、４−トリフルオロメトキシフェニル基、４−イソプロポキシフェニル基、２，４−ジメトキシフェニル基、４−メトキシ−２−メチルフェニル基、２−フルオロ−４−メトキシフェニル基、４−ブロモ−２−ヒドロキシフェニル基、４−ブロモ−２−メトキシフェニル基、２−ブロモ−４−メトキシフェニル基、４−メチルチオフェニル基、４−トリフルオロメチルチオフェニル基、２−フルオロ−４−メチルチオフェニル基、４−アミノフェニル基、４−メチルアミノフェニル基、２−ジメチルアミノフェニル基、３−ジメチルアミノフェニル基、４−ジメチルアミノフェニル基、４−エチルアミノフェニル基、４−ジエチルアミノフェニル基、４−エチルメチルアミノ−２−フルオロフ��ニル基、４−ニトロフェニル基、４−シアノフェニル基、６−アミノピリジン−３−イル基、６−ジメチルアミノピリジン−３−イル基、６−クロロピリジン−２−イル基、４−クロロピリジン−３−イル基、４−カルボキシフェニル基、４−メトキシカルボニルフェニル基、４−エチルアミノフェニル基、４−（メチルカルボニル）メチルアミノフェニル基、４−メタンスルホニルフェニル基、４−トリフルオロメタンスルホニルフェニル基、４−ジメチルアミノ−２−メチルフェニル基、４−ジメチルアミノ−３−メチルフェニル基、４−ジメチルアミノ−３−トリフルオロメチルフェニル基、４−ジメチルアミノ−２−プロピルフェニル基、４−ジメチルアミノ−２−フルオロフェニル基、４−ジメチルアミノ−３−フルオロフェニル基、４−ジメチルホスフィノイルフェニル基、１，１’−ビフェニル−４−イル基、４−（ピペリジン−１−イル）フェニル基、４−ベンジルフェニル基及び４−（モルホリン−４−イル）フェニル基が挙げられる。
【０１７３】
「Ｒ３」として好ましくは、Ｃ１−６アルキル基（ここで、当該Ｃ１−６アルキル基は、グループＡから選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）が挙げられる。
【０１７４】
具体的には、水素原子、メチル基、エチル基、プロピル基、イソブチル基、２−メトキシエチル基、シクロプロピル基、２−ジメチルアミノエチル基及び２−プロペニル基が好ましく、メチル基が特に好ましい。
【０１７５】
「Ｒ４」として好ましくは、Ｃ１−６アルキル基（ここで、当該Ｃ１−６アルキル基は、グループＡから選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）が挙げられる。
【０１７６】
具体的には、水素原子、メチル基、プロピル基及びヒドロキシ基が好ましく、メチル基が特に好ましい。
【０１７７】
「Ｒ５」としては、水素原子及びメチル基が好ましく、水素原子が特に好ましい。
【０１７８】
一般式（Ｉ）で表される化合物は、例えば特許４１６３７３８号公報に記載された方法に従って製造することができる。
【０１７９】
一般式（Ｉ）で表される化合物としては、例えばトラメチニブを特に好適に用いることができる。トラメチニブは、下記の構造式で表される化合物である。
【０１８０】
【化１７】
2016155776.tif 000019
【０１８１】
トラメチニブは、ＢＲＡＦ Ｖ６００ＥまたはＶ６００Ｋ遺伝子変異陽性の切除不能または転移性メラノーマに対する治療薬として米国食品医薬品局（ＦＤＡ）の承認が取得されたＭＥＫ阻害剤であり、ＭＥＫ阻害剤として世界で初めて承認を取得した医薬品である。また、悪性黒色腫に対する、Ｒａｆ阻害剤とトラメチニブとの併用も認可されている。
【０１８２】
（１−１−２）一般式〔ＩＩ〕で表される化合物
一般式〔ＩＩ〕で表される化合物は、特許４０９３９６６号公報に記載されている。一般式〔ＩＩ〕で表される化合物の式中の記号については上述したとおりであるが、当該化合物としては、Ｒ１３がＣ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、又はＣ３〜Ｃ７シクロアルキルアルキルであり、これらがそれぞれ、オキソ、ハロゲン、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、アジド、−ＮＲ１０ＳＯ２Ｒ１２、−ＳＯ２ＮＲ９Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ９、−ＳＯ２Ｒ９、−ＮＲ１０Ｃ（Ｏ）ＯＲ１２、−ＮＲ１０Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ１１Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ１１Ｃ（ＮＣＮ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＯＲ９、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、及びヘテロシクリルアルキルからそれぞれ独立に選択された１〜３個の基によって任意選択で置換されていてもよい。
【０１８３】
また、一般式〔ＩＩ〕で表される化合物としては、Ｒ１４が−ＯＣＦ３、−Ｂｒ、又は−Ｃｌであり、Ｒ８が水素であり、Ｒ７が低級アルキル又はハロゲンである化合物；Ｒ１５が水素又はハロゲンである化合物；または、Ａが−ＯＲ９であるときＲ９が水素又は低級アルキルであり、Ａが−ＮＲ１０ＯＲ９であるときＲ１０が水素である化合物、であってもよい。
【０１８４】
一般式〔ＩＩ〕で表される化合物は、Ｒ７、Ｒ１３、Ｒ１４、及びＲ１５が一般式〔ＩＩ〕について上で規定したとおりであり、Ａが−ＯＲ９又は−ＮＲ１０ＯＲ９であり、Ｒ９及びＲ１０が一般式〔ＩＩ〕について上で規定したとおりである次の一般式〔ＩＩ〕ａに示される化合物であってもよい。
【０１８５】
【化１８】
2016155776.tif 000020
【０１８６】
一般式〔ＩＩ〕ａに示される化合物は、Ｒ１３がＣ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、又はＣ３〜Ｃ７シクロアルキルアルキルであり、これらがそれぞれ、オキソ、ハロゲン、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、アジド、−ＮＲ１０ＳＯ２Ｒ１２、−ＳＯ２ＮＲ９Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ９、−ＳＯ２Ｒ９、−ＮＲ１０Ｃ（Ｏ）ＯＲ１２、−ＮＲ１０Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ１１Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ１１Ｃ（ＮＣＮ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＯＲ９、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、及びヘテロシクリルアルキルからそれぞれ独立に選択された１〜３個の基によって任意選択で置換されていてもよい。
【０１８７】
また、一般式〔ＩＩ〕ａに示される化合物は、Ｒ１４が−ＯＣＦ３、−Ｂｒ、又は−Ｃｌであり、Ｒ７が低級アルキル又はハロゲンである化合物；Ｒ１５がフルオロ又はクロロである化合物；または、Ａが−ＯＲ９であるときＲ９が水素又は低級アルキルであり、Ａが−ＮＲ１０ＯＲ９であるときＲ１０が水素である化合物、であってもよい。
【０１８８】
一般式〔ＩＩ〕および一般式〔ＩＩ〕ａにおける記号に関して、用語「Ｃ１〜Ｃ１０アルキル」、「アルキル」、及び「低級アルキル」とは、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、２−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、２−ヘキシル、３−ヘキシル、３−メチルペンチル、ヘプチル、オクチルなど、１〜１０個の炭素原子を有する線状又は分子鎖状のアルキル基を意味する。好ましいアルキル基は、Ｃ１〜Ｃ６アルキルであり、より好ましいアルキル基は、Ｃ１〜Ｃ３アルキルである。
【０１８９】
また、用語「Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル」、「低級アルケニル」、及び「アルケニル」とは、２〜１０個の炭素原子と少なくとも１個の二重結合とを有する線状及び分子状の炭化水素基を意味し、これには、エテニル、プロペニル、１−ブタ−３−エニル、１−ペント−３−エニル、１−ヘキサ−５−エニルなどが含まれる。最も好ましいものは、３〜５個の炭素原子を有する低級アルケニルである。
【０１９０】
「Ｃ２〜Ｃ１０アルキニル」、「低級アルキニル」、及び「アルキニル」とは、２〜１０個の炭素原子と少なくとも１種の三重結合とを有する線状及び分枝状の炭化水素基を意味し、これには、エチニル、プロピニル、ブチニル、ペンチン−２−イルなどが含まれる。より好ましいものは、３〜５個の炭素原子を有するアルキニルである。
【０１９１】
一般式〔ＩＩ〕および一般式〔ＩＩ〕ａにおける記号に関して、用語「ハロゲン」とは、一般式〔Ｉ〕と同様に、フッ素原子、塩素原子、臭素原子又はヨウ素原子を意味する。
【０１９２】
また、「アリール」とは、例えばハロゲン、低級アルキル、低級アルコキシ、トリフルオロメチル、アリール、ヘテロアリール、及びヒドロキシによって任意選択で一、二、若しくは三置換されている、少なくとも１個が芳香族である単環（例えばフェニル）、多環（例えばビフェニル）、又は縮合多環（例えば、１，２，３，４−テトラヒドロナフチル、ナフチル）を有する芳香族炭素環基を意味する。
【０１９３】
用語「ヘテロアリール」とは、５、６、若しくは７員環からなる１種又は複数の芳香族環系を意味し、これには、窒素、酸素、又は硫黄から選択された少なくとも１個かつ最多で４個のヘテロ原子を含む５〜１０個の原子からなる縮合環系（そのうちの少なくとも１個が芳香族である）が含まれる。ヘテロアリール基の例は、ピリジニル、イミダゾリル、ピリミジニル、ピラゾリル、トリアゾリル、ピラジニル、テトラゾリル、フリル、チエニル、イソキサゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、イソチアゾリル、ピロリル、キノリニル、イソキノリニル、インドリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾフラニル、シンノリニル、インダゾリル、インドリジニル、フタラジニル、ピリダジニル、トリアジニル、イソインドリル、プテリジニル、プリニル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、チアジアゾリル、フラザニル、ベンゾフラザニル、ベンゾチオフェニル、ベンゾチアゾリル、ベンズオキサゾリル、キナゾリニル、キノキサリニル、ナフチリジニル、及びフロピリジニルである。スピロ部分も本発明の範囲内に含まれる。ヘテロアリール基は、例えばハロゲン、低級アルキル、低級アルコキシ、ハロアルキル、アリール、ヘテロアリール、及びヒドロキシによって任意選択で一、二、若しくは三置換されている。
【０１９４】
一般式〔ＩＩ〕および一般式〔ＩＩ〕ａにおける記号に関して、用語「炭素環」、「カルボシクリル」、「シクロアルキル」、又は「Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル」とは、３個〜１０個の炭素原子を有する飽和炭素環基を指す。シクロアルキルは、単環式でも、多環式縮合系でもよく、芳香族の環に縮合していてよい。そのような基の例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、及びシクロヘキシルが含まれる。シクロアルキル基は、本明細書では、非置換であるか、又は指定のとおりに１箇所又は複数の置換可能な位置が様々な基で置換されている。例えば、そのようなシクロアルキル基は、例えば、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、モノ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルアミノ、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルコキシ、アミノ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、モノ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルアミノ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、又はジ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルアミノ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルによって任意選択で置換されていてもよい。
【０１９５】
一般式〔ＩＩ〕および一般式〔ＩＩ〕ａにおける記号に関して、用語「炭素環」又は「ヘテロシクリル」とは、５、６、若しくは７員環からなる１種又は複数の炭素環系を意味し、これには、窒素、酸素、又は硫黄から選択された少なくとも１個かつ最多で４個のヘテロ原子を含み、但し、その基の環が、２個の隣接するＯ又はＳ原子を含まない、４〜１０個の原子からなる縮合環系が含まれる。縮合系は、芳香族基に縮合した複素環としてよい。
【０１９６】
好ましい複素環には、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、ジヒドロフラニル、テトラヒドロチエニル、テトラヒドロピラニル、ジヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、ピペリジノ、モルホリノ、チオモルホリノ、チオキサニル、ピペラジニル、ホモピペラジニル、アゼチジニル、オキセタニル、チエタニル、ホモピペリジニル、オキセパニル、チエパニル、オキサゼピニル、ジアゼピニル、チアゼピニル、１，２，３，６−テトラヒドロピリジニル、２−ピロリニル、３−ピロリニル、インドリニル、２Ｈ−ピラニル、４Ｈ−ピラニル、ジオキサニル、１，３−ジオキソラニル、ピラゾリニル、ジチアニル、ジチオラニル、ジヒドロピラニル、ジヒドロチエニル、ジヒドロフラニル、ピラゾリジニルイミダゾリニル、イミダゾリジニル、３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサニル、３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタニル、アザビシクロ［２．２．２］ヘキサニル、３Ｈ−インドリル、及びキノリジニルが含まれるがこれに限らない。
【０１９７】
スピロ部分もこの規定の範囲に含まれる。前述の基は、上で挙げたその基から誘導される限り、それが可能であれば、Ｃに結合していても、Ｎに結合していてもよい。例えば、ピロールから誘導された基は、ピロル−１−イル（Ｎ結合型）でもピロル−３−イル（Ｃ結合型）でもよい。また、イミダゾールから誘導された基は、イミダゾール−１−イル（Ｎ結合型）でも、イミダゾール−３−イル（Ｃ結合型）でもよい。２個の環上炭素原子がオキソ（＝Ｏ）部分で置換されている複素環基の例は、１，１−ジオキソ−チオモルオリニルである。複素環基は、一般式〔ＩＩ〕および一般式〔ＩＩ〕ａで表される化合物では、非置換であるか、又は指定のとおりに１箇所又は複数の置換可能な位置が様々な基で置換されている。
【０１９８】
例えば、そのような複素環基は、例えばＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、モノ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルアミノ、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルコキシ、アミノ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、モノ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルアミノ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、又はジ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルアミノ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルによって任意選択で置換されていてよい。
【０１９９】
用語「アリールアルキル」とは、（上で規定したような）１個又は複数のアリール部分で置換された（これも上で規定したような）アルキル部分を意味する。より好ましいアリールアルキル基は、アリール−Ｃ１〜Ｃ３−アルキルである。例えば、ベンジル、フェニルエチルなどが含まれる。
【０２００】
用語「ヘテロアリールアルキル」とは、（上で規定したような）ヘテロアリール部分で置換された（これも上で規定したような）アルキル部分を意味する。より好ましいヘテロアリールアルキル基は、５若しくは６員ヘテロアリール−Ｃ１〜Ｃ３−アルキルである。例えば、オキサゾリルメチル、ピリジルエチルなどが含まれる。
【０２０１】
用語「ヘテロシクリルアルキル」とは、（上で規定したような）ヘテロシクリル部分で置換された（これも上で規定したような）アルキル部分を意味する。より好ましいヘテロシクリルアルキル基は、５若しくは６員ヘテロシクリル−Ｃ１〜Ｃ３−アルキルである。例えば、テトラヒドロピラニルメチルが含まれる。
【０２０２】
用語「シクロアルキルアルキル」とは、（上で規定したような）シクロアルキル部分で置換された（これも上で規定したような）アルキル部分を意味する。より好ましいヘテロシクリル基は、５若しくは６員シクロアルキル−Ｃ１〜Ｃ３−アルキルである。例えば、シクロプロピルメチルが含まれる。
【０２０３】
一般式〔ＩＩ〕および一般式〔ＩＩ〕ａで表される化合物は、例えば特許４０９３９６６号公報に記載された方法に従って製造することができる。
【０２０４】
一般式〔ＩＩ〕および一般式〔ＩＩ〕ａで表される化合物としては、例えばセルメチニブを特に好適に用いることができる。セルメチニブは、下記の構造式で表される化合物である。
【０２０５】
【化１９】
2016155776.tif 000021
【０２０６】
セルメチニブは、過剰増殖性疾患の治療に有用であり、癌の治療に用いることができることが前記公報に記載されている。また、ヨード不応性の進行甲状腺癌においてヨードの取り込みを回復させることができることも知られている（N. Engl. Med. 2013; 368: 623-632）。
【０２０７】
（１−１−３）一般式〔ＩＩＩ〕で表される化合物
一般式〔ＩＩＩ〕で表される化合物は、特許５５１３１２７号公報に記載されている。一般式〔ＩＩＩ〕で表される化合物の式中の記号については上述したとおりである。
【０２０８】
一般式〔ＩＩＩ〕で表される化合物の式中の記号に関して、「置換されたもしくは未置換の」とは、所定の部分が、利用可能な原子価にわたって水素置換基のみからなってもよいこと（未置換の）、あるいは、利用可能な原子価にわたって一個以上の非水素置換基（所定の部分の名称によって別段特定されていない）を更に含んでいてもよいこと（置換された）を意味する。例えば、イソプロピルは、−ＣＨ３によって置換されたエチレン部分の例である。
【０２０９】
一般式〔ＩＩＩ〕で表される化合物の式中の記号に関して、単独で表される「アルキル」は、炭素原子鎖を有する、直鎖又は分枝鎖の、飽和の、脂肪族基を意味する。（ＣＸ）アルキル及び（ＣＸ−Ｙ）アルキルが典型的に用いられ、ここでＸ及びＹは鎖中の炭素原子の数を示す。例えば、（Ｃ１−６）アルキルには、１乃至６個の炭素の鎖を有するアルキル（例、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル等）が含まれる。
【０２１０】
別の基と共に表されるアルキル（例、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル等の場合）は、示された数の原子を有する、直鎖又は分枝鎖の、飽和の脂肪族の二価の基を意味するか、又は、原子が示されていない場合には結合を意味する（例、（Ｃ６−１０）アリール（Ｃ１−３）アルキルには、ベンジル、フェネチル、１−フェニルエチル、３−フェニルプロピル等が含まれる）。
【０２１１】
一般式〔ＩＩＩ〕で表される化合物としては、例えば、以下からなる群から選択される化合物を挙げることができる：
５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−３，８−ジメチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−３−（２−ヒドロキシエチル）−８−メチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−３，６，８−トリメチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；（Ｓ）−３−（２，３−ジヒドロキシプロピル）−５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−８−メチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；（Ｒ）−３−（２，３−ジヒドロキシプロピル）−５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−８−メチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；（Ｓ）−６−クロロ−３−（２，３−ジヒドロキシプロピル）−５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−８−メチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；（Ｒ）−３−（２，３−ジヒドロキシプロピル）−５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−６，８−ジメチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；（Ｓ）−５−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−３−（２，３−ジヒドロキシプロピル）−６，８−ジメチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；（Ｒ）−５−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−３−（２，３−ジヒドロキシプロピル）−６，８−ジメチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；５−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−３−（２−ヒドロキシエチル）−６，８−ジメチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−６，８−ジメチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；（Ｓ）−３−（２，３−ジヒドロキシプロピル）−５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−６，８−ジメチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−３−（２−ヒドロキシエチル）−６，８−ジメチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；５−（２−フルオロフェニルアミノ）−３−（２−ヒドロキシエチル）−６，８−ジメチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；６−フルオロ−５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−３−（２−ヒドロキシエチル）−８−メチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；（Ｒ）−３−（２，３−ジヒドロキシプロピル）−６−フルオロ−５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−８−メチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；（Ｓ）−３−（２，３−ジヒドロキシプロピル）−６−フルオロ−５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−８−メチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；（Ｒ）−５−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−３−（２，３−ジヒドロキシプロピル）−６−フルオロ−８−メチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；３−（１，３−ジヒドロキシプロパン−２イル）−５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−８−メチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；３−（１，３−ジヒドロキシプロパン−２イル）−６−フルオロ−５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−８−メチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−３−（２−ヒドロキシエトキシ）−８−メチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；（Ｒ）−３−（２，３−ジヒドロキシプロポキシ）−５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−８−メチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；（Ｒ）−３−（２，３−ジヒドロキシプロポキシ）−６−フルオロ−５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−８−メチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；（Ｒ）−５−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−６−クロロ−３−（２，３−ジヒドロキシプロピル）−８−メチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；６−クロロ−５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−３−（２−ヒドロキシエチル）−８−メチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−３−（３−ヒドロキシプロピル）−８−メチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；６−クロロ−５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−３−（３−ヒドロキシプロピル）−８−メチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；５−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−３−（３−ヒドロキシプロピル）−８−メチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；５−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−６−クロロ−３−（３−ヒドロキシプロピル）−８−メチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；５−（４−ブロモ−２−クロロフェニルアミノ）−３−（３−ヒドロキシプロピル）−８−メチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；５−（４−ブロモ−２−クロロフェニルアミノ）−６−クロロ−３−（３−ヒドロキシプロピル）−８−メチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；３−（２−（ジメチルアミノ）エチル）−５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−８−メチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−３−（２−ヒドロキシプロピル）−８−メチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；（Ｓ）−３−（２，４−ジヒドロキシブチル）−５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−８−メチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；６−クロロ−５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−３−（２−ヒドロキシプロピル）−８−メチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；（Ｓ）−５−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−３−（２，３−ジヒドロキシプロピル）−６−フルオロ−８−メチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；３−ベンジル−５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−８−メチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン；および３−（１，３−ジヒドロキシプロパン−２−イル）−５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−６，８−ジメチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン。
【０２１２】
一般式〔ＩＩＩ〕で表される化合物としては、例えば、以上例示した化合物のうち１種を用いてもよいし、２種以上を用いてもよい。２種以上用いる場合、それぞれの化合物の使用比率は任意でよい。一般式〔ＩＩＩ〕で表される化合物は、例えば特許５５１３１２７号公報に記載の方法によって製造することができ、市販品を用いてもよい。
【０２１３】
中でも、（Ｒ）−３−（２，３−ジヒドロキシプロピル）−６−フルオロ−５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−８−メチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン（ＴＡＫ−７３３）を特に好適に用いることができる。セＴＡＫ−７３３は、下記の構造式で表される化合物である。
【０２１４】
【化２０】
2016155776.tif 000022
【０２１５】
（１−２）ｃ−Ｍｅｔ阻害剤
ｃ−Ｍｅｔは、主に上皮細胞に存在し、肝臓や腎臓に多く発現する受容体型チロシンキナーゼである。ｃ−Ｍｅｔは、これらの臓器や細胞において、肝細胞増殖因子（ＨＧＦ）による増殖、運動、器官形成などのシグナルを伝達する作用を有している。また、ｃ−Ｍｅｔは細胞が成熟すると発現しなくなるが、がん化した細胞では再活性化され、がん細胞の増殖や浸潤、転移に関与する。さらに、前述のように、ＣＤ４４がｃ−Ｍｅｔと結合することによって相互作用することが知られている。
【０２１６】
ｃ−Ｍｅｔ阻害剤は、ｃ−Ｍｅｔのキナーゼ活性を阻害することによって細胞増殖シグナルを抑制する薬剤である。前記阻害によって、ＣＤ４４とｃ−Ｍｅｔとの結合も阻害されるため、ＣＤ４４の発現も減弱すると考えられる。
【０２１７】
後述する実施例に示すように、ｃ−Ｍｅｔ阻害剤であるクリゾチニブと、クマリン誘導体である４−ＭＵとを併用して悪性胸膜中皮腫細胞を処理することによって、クリゾチニブまたは４−ＭＵを単独で用いた場合よりも顕著に前記細胞の生存率が低下した。この結果は、ＣＤ４４の発現が上述のように減弱し、かつ、４−ＭＵがヒアルロン酸の合成を阻害することによってヒアルロン酸とＣＤ４４との結合が生じにくくなったことによると考えられる。それゆえ、ｃ−Ｍｅｔ阻害剤と前記クマリン誘導体等とを有効成分として用いることによって、ｃ−Ｍｅｔ阻害剤または前記クマリン誘導体等を単独で用いる場合よりも相乗的に優れた抗腫瘍効果を得ることができると考えられる。
【０２１８】
ｃ−Ｍｅｔ阻害剤としては、特に限定されるものではないが、クリゾチニブ、カボザンチニブおよびカボザンチニブｓ−リンゴ酸塩からなる群より選ばれる１種または２種以上の化合物を特に好適に用いることができる。クリゾチニブは下記の構造式で表される化合物である。
【０２１９】
【化２１】
2016155776.tif 000023
【０２２０】
また、カボザンチニブは、下記の構造式で表される化合物である。
【０２２１】
【化２２】
2016155776.tif 000024
【０２２２】
さらに、カボザンチニブｓ−リンゴ酸塩は下記の構造式で表される化合物である。
【０２２３】
【化２３】
2016155776.tif 000025
【０２２４】
ｃ−Ｍｅｔ阻害剤を２種以上用いる場合のそれぞれの化合物の使用比率は任意である。クリゾチニブは、例えば、特許４１６７２９５号公報に記載の方法によって製造することができ、市販品を用いてもよい。カボザンチニブ、カボザンチニブｓ−リンゴ酸塩は例えばＥＰ２２１３６６１ Ａ１号公報に記載の方法によって製造することができ、市販品を用いてもよい。
【０２２５】
（２）抗腫瘍剤（Ａ）
本発明に係る抗腫瘍剤（Ａ）は、ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤と、本発明に係る抗腫瘍効果増強剤とを有効成分として含有する。すなわち、本発明に係る抗腫瘍剤（Ａ）は、ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤と、クマリン誘導体等とを有効成分として含有し、ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤と、クマリン誘導体等とを併用することによって、前記有効成分を単独で用いた場合よりも相乗的に優れた抗腫瘍効果を奏するものである。
【０２２６】
前記抗腫瘍剤（Ａ）における、ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤と、クマリン誘導体等との使用比率（重量比）は、最小比率が１：２００以上、１：２２５以上、１：２５０以上であることが好ましく、最大比率が１：１５００以下、１：１０００以下であることが好ましい。
【０２２７】
前記最小比率は、マウスを用いた抗腫瘍効果の確認結果（例えば、実施例５）から好適であると考えられる。前記最大比率は、ヒトに対する４−ＭＵの薬剤としての最大承認量が３ｇ／ｂｏｄｙ／ｄａｙであること、および、ヒトへのトラメチニブの最大使用可能量が、dabrafenib（ＢＲＡＦ阻害剤）との併用試験での結果（Georgina V. Long et al. The New England Journal of Medicine (N Engl J Med) 2014; 371:1877-1888）を考慮すると２ｍｇ／ｂｏｄｙ／ｄａｙと考えられることから好適であると考えられる。なお、後述する図３，４，７，８に示すように、前記抗腫瘍剤（Ａ）を生体に投与した場合の血中濃度は、１０ｎＭ以上であることが好ましいと考えられる。
【０２２８】
本発明に係る抗腫瘍剤（Ａ）は、ＭＥＫ阻害剤とｃ−Ｍｅｔ阻害剤とを、一方のみ含んでいてもよいし、両方含んでいてもよい。両方を含む場合、ＭＥＫ阻害剤とｃ−Ｍｅｔ阻害剤との使用比率は任意でよく、ＭＥＫ阻害剤とｃ−Ｍｅｔ阻害剤との合計と、クマリン誘導体等との使用比率が前記範囲にあることが好ましい。
【０２２９】
本発明に係る抗腫瘍剤（Ａ）は、ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤と、本発明に係る抗腫瘍効果増強剤の有効成分であるクマリン誘導体等とが混合されている組成物であってもよい。一方、ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤と、クマリン誘導体等とは、混合されておらず別々に存在していてもよい。
【０２３０】
つまり、有効成分としてＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤と、クマリン誘導体等とが用いられる限り、ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤と、クマリン誘導体等とが混合されていなくても、本発明に係る抗腫瘍剤（Ａ）の範囲に含まれる。
【０２３１】
例えば、ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤と、クマリン誘導体等とを、患者に対し、ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤を先に投与した後にクマリン誘導体等を投与する、というように別々に投与する場合であっても、ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤と、クマリン誘導体等とを有効成分として併用しているため、ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤と、クマリン誘導体等とを有効成分として含有する本発明に係る抗腫瘍剤（Ａ）に該当する。ただし、投与の順序はこれに限られるものではなく、クマリン誘導体等を患者に投与した後にＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤を投与してもよいし、ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤と、クマリン誘導体等とを同時に患者に投与してもよい。
【０２３２】
本発明に係る抗腫瘍剤（Ａ）の有効成分（ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤と、クマリン誘導体等）の投与量は、患者の年齢、症状等により異なるため一概には言えないが、通常、成人一人当たり、ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤は１回の投与量が４００〜１０００ｍｇとなるように１日３回投与することが好ましい。また、クマリン誘導体等は、１回の投与量が２ｍｇとなるように１日１回投与することが好ましい。
【０２３３】
以上述べた事項より、本発明にかかる抗腫瘍剤（Ａ）をヒトまたは哺乳動物に投与することによって、癌を治療する方法も本発明の範囲に含まれると言える。癌の種類については特に限定されるものではなく、例えば後述する各種の癌に適用可能である。中でも、本発明にかかる抗腫瘍剤（Ａ）は、有効な治療法が確立されていない悪性胸膜中皮腫の治療に非常に有効である。
【０２３４】
〔実施の形態３：抗腫瘍剤（Ｂ）〕
本発明に係る抗腫瘍剤（以下、「抗腫瘍剤（Ｂ）」と称する）は、本発明に係る抗腫瘍剤（Ａ）と、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ２抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、抗ＣＤ２５抗体、抗ＣＤ３３抗体および抗ＣＤ５２抗体からなる群より選ばれる１種または２種以上の抗体と、を有効成分として含有する。
【０２３５】
抗腫瘍剤（Ａ）については、実施の形態２で説明したとおりである。抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ２抗体については、特許文献３に詳述されている。特許文献３に記載されているように、ヒトＰＤ−１のｃＤＮＡは、ＥＭＢＬ／ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃ．Ｎｏ．ＮＭ＿００５０１８に示される塩基配列で構成され、マウスＰＤ−１のｃＤＮＡは、Ａｃｃ．Ｎｏ．Ｘ６７９１４に示される塩基配列で構成され、それらの発現は、胸腺細胞においてはＣＤ４−ＣＤ８−からＣＤ４＋ＣＤ８＋細胞に分化する際に認められる（Ｉｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９６年，第１８巻，第５号，ｐ．７７３〜７８０、Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．２０００年、第１９１巻、第５号、ｐ．８９１〜８９８）。
【０２３６】
末梢におけるＰＤ−１の発現は、抗原レセプターからの刺激により活性化したＴ細胞、Ｂ細胞（Ｉｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９６年，第１８巻，第５号，ｐ．７６５〜７７２）または活性化マクロファージを含む骨髄細胞に認められることが報告されている。また、ＰＤ−１は、抗原レセプター（ＴＣＲ）シグナルを抑制するシグナルを伝達していることも知られている。
【０２３７】
ＰＤ−Ｌ１は、ＰＤ−１のリガンドであり、腫瘍細胞の他、活性化した単球や樹状細胞などのいわゆる抗原提示細胞に発現している（Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．２０００年、第１９１巻、第７号，ｐ．１０２７〜１０３４）。特許文献３に記載されているように、ヒトＰＤ−Ｌ１のｃＤＮＡは、ＥＭＢＬ／ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃ．Ｎｏ．ＡＦ２３３５１６、マウスＰＤ−Ｌ１のｃＤＮＡはＮＭ＿０２１８９３で示される塩基配列で構成される。
【０２３８】
これらの細胞は、Ｔリンパ球細胞に対して、さまざまな免疫誘導シグナルを誘導する相互作用分子を提示しており、ＰＤ−Ｌ１は、ＰＤ−１による抑制シグナルを誘導する分子の１つである。
【０２３９】
つまり、Ｔ細胞の表面に発現したＰＤ−１に、腫瘍細胞の表面に発現したＰＤ−Ｌ１が結合すると、Ｔ細胞の活性が抑制される。ＰＤ−１に代表される共役抑制分子からの抑制シグナルは、抗原レセプター（ＴＣＲ）および共役刺激分子によるポジティブなシグナルを適性に制御するメカニズムによって、リンパ球の発生または成熟過程での免疫寛容や自己抗原に対する異常な免疫反応を制御していると考えられている。
【０２４０】
特許文献３に記載されているように、ＰＤ−Ｌ２は、ＰＤ−１の２番目のリガンドとして同定されたが、その発現および機能はＰＤ−Ｌ１とほぼ同じであることが報告されている。なお、ヒトＰＤ−Ｌ２のｃＤＮＡはＥＭＢＬ／ＧｅｎＢａｎｋ  Ａｃｃ．Ｎｏ．ＮＭ＿０２５２３９、マウスＰＤ−Ｌ２のｃＤＮＡはＮ Ｍ＿０２１８９６で示される塩基配列で構成される（Ｎａｔｕｒｅ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２００１年，第２巻，第３号，ｐ．２６１〜２６７）。
【０２４１】
抗ＣＴＬＡ−４抗体については、例えば特開２００７−２７７２４２号公報に記載されている。ＣＴＬＡ−４とは、細胞傷害性Ｔリンパ球関連抗原４（ＣＤ１５２）のことであり、特開２００７−２７７２４２号公報に記載されているように、ＣＴＬＡ−４がその天然のリガンドであるＢ７．１（ＣＤ８０）およびＢ７．２（ＣＤ８６）と結合すると、負の制御シグナルがＴ細胞に送達され、この負のシグナルを遮断すると動物モデルでＴ細胞の免疫機能および抗腫瘍活性が亢進する（ＴｈｏｍｐｓｏｎおよびＡｌｌｉｓｏｎ、Ｉｍｍｕｎｉｔｙ、７、４４５〜４５０頁（１９９７）；ＭｃＣｏｙおよびＬｅＧｒｏｓ、Ｉｍｍｕｎｏｌ．＆Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．７７：１〜１０頁（１９９９））。
【０２４２】
抗体を使用してＣＴＬＡ−４を遮断すると、Ｔ細胞が媒介する腫瘍の死滅が亢進し、抗腫瘍性免疫を誘導できることが示されている（例えば、Ｌｅａｃｈら、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２７１：１７３４〜１７３６頁（１９９６）など）。なお、ヒトＣＴＬＡ−４のｃＤＮＡの完全な配列はＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号Ｌ１５００６に記載されている。
【０２４３】
ＣＤ２５は、分子量５５ｋＤａの単鎖糖タンパクで、成人Ｔ細胞性白血病細胞の表面抗原として知られている。ＣＤ３３は、急性骨髄性白血病細胞の表面抗原として知られており、ＣＤ５２は、Ｂ細胞性慢性リンパ性白血病細胞の表面抗原として知られている。
【０２４４】
後述する実施例に示すように、悪性胸膜中皮腫細胞を移植後に、本発明に係る抗腫瘍剤（Ａ）を投与したマウスの腫瘍組織を観察したところ、ＰＤ−１，ＣＴＬＡ−４，およびＰＤ−Ｌ１の発現の増強が見られ、中でもＰＤ−Ｌ１の発現が著しく増強されていた。一方、肺がん患者の臨床試験において、抗ＰＤ−１抗体を単独で患者に投与したところ、ＰＤ−Ｌ１が強く発現している患者の方が、ＰＤ−Ｌ１の発現が弱い患者よりも抗ＰＤ−１抗体の奏効率が高いという知見がある（First-line nivolumab (anti-PD-1; BMS-936558, ONO-4538) monotherapy in advanced NSCLC: Safety, efficacy, and correlation of outcomes with PD-L1 status, American Society of Clinical Oncology (ASCO2014) J Clin Oncol 32:5s, 2014 (suppl; abstr 8024)）。
【０２４５】
この知見と、前記抗腫瘍剤（Ａ）がＰＤ−Ｌ１の発現を著しく増強させるという本願実施例の結果とを鑑みると、抗腫瘍剤（Ａ）が抗ＰＤ−１抗体の奏効率を大幅に向上させうることが十分に期待できる。また、実施例の結果から、抗腫瘍剤（Ａ）が抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−Ｌ２抗体、および抗ＣＴＬＡ−４抗体の奏効率を向上させうることも十分に期待できる。
【０２４６】
さらに、抗腫瘍剤（Ａ）が、悪性胸膜中皮腫細胞におけるＰＤ−Ｌ１等の発現を増強したことから、抗腫瘍剤（Ａ）は腫瘍、腫瘍細胞環境、免疫細胞に働きかけ、ＩＬ−２、インターフェロンガンマ等のサイトカイン分泌に影響を与え、それらが抗原発現に影響すると考えられる。それゆえ、抗腫瘍剤（Ａ）は、腫瘍細胞の表面抗原であるＣＤ２５，ＣＤ３３，ＣＤ５２の発現をも増強させることができることが十分に期待できるため、抗ＣＤ２５抗体、抗ＣＤ３３抗体、抗ＣＤ５２抗体の奏効率を向上させうることも期待できる。
【０２４７】
したがって、抗腫瘍剤（Ｂ）は、急性骨髄性白血病、Ｂ細胞性慢性リンパ性白血病、成人Ｔ細胞性白血病の治療のために有効に作用する可能性があると考えられる。
【０２４８】
以上のことから、抗腫瘍剤（Ａ）と、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ２抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、抗ＣＤ２５抗体、抗ＣＤ３３抗体および抗ＣＤ５２抗体からなる群より選ばれる１以上の抗体と、を有効成分として含有する抗腫瘍剤（Ｂ）は、前記抗体の奏効率を向上させ、その結果、抗腫瘍剤（Ａ）と前記抗体とを併用しない場合と比べて、相乗的に優れた抗腫瘍効果を奏すると考えられる。
【０２４９】
抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ２抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、抗ＣＤ２５抗体、抗ＣＤ３３抗体、抗ＣＤ５２抗体は、それぞれ、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ２、ＣＴＬＡ−４、ＣＤ２５、ＣＤ３３、ＣＤ５２による免疫抑制シグナルを阻害するものであれば、ヒト由来抗体、マウス由来抗体、ラット由来抗体、ウサギ由来抗体またはヤギ由来抗体などのいずれの抗体でもよく、さらにそれらのポリクローナル若しくはモノクローナル抗体、完全型若しくは短縮型（例えば、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂ’、ＦａｂまたはＦｖ断片。これらを以下、「抗体断片」ともいう。）抗体、キメラ化抗体、ヒト化抗体または完全ヒト型抗体のいずれのものでもよい。
【０２５０】
これらの抗体は、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ２、ＣＴＬＡ−４、ＣＤ２５、ＣＤ３３またはＣＤ５２の細胞外領域の部分タンパク質を抗原として、公知の抗体または抗血清の製造法に従って製造することができる。市販品を用いても構わない。細胞外領域の部分タンパク質は、公知のタンパク質発現ならびに精製法によって調製することができる。
【０２５１】
ポリクローナル抗体は、公知の方法によって製造することができる。例えば、抗原タンパク質あるいはそれとキャリアータンパク質との混合物で、適当な動物に免疫を行ない、その免疫動物から抗原タンパク質に対する抗体含有物を採取して、抗体の分離精製を行うことにより製造することができる。
【０２５２】
用いられる動物としては、マウス、ラット、ヒツジ、ヤギ、ウサギ、モルモットが一般的に挙げられる。抗体産生能を高めるため、完全フロイントアジュバントや不完全フロイントアジュバントを抗原タンパク質と共に投与することができる。投与は、通常約２週毎に１回ずつ、計約３〜１０回程度行うのが一般的である。
【０２５３】
ポリクローナル抗体は、上記の方法で免疫された動物の血液、腹水などから採取することができる。抗血清中のポリクローナル抗体価の測定は、ＥＬＩＳＡ法によって測定することができる。
【０２５４】
ポリクローナル抗体の分離精製は、例えば、抗原結合固相あるいはプロテインＡあるいはプロテインＧなどの活性吸着剤を用いた精製法、塩析法、アルコール沈殿法、等電点沈殿法、電気泳動法、イオン交換体による吸脱着法、超遠心法、ゲルろ過法などの免疫グロブリンの分離精製法に従って行うことができる。
【０２５５】
前記抗体としては、モノクローナル抗体あるいはその修飾体がより好ましい。特許文献３に記載されているように、モノクローナル抗体産生細胞の作製は、抗原で免疫された動物から抗体価の認められた個体を選択し、最終免疫の２〜５日後に脾臓またはリンパ節を採取し、それらに含まれる抗体産生細胞を同種または異種動物の骨髄腫細胞と融合させ、継代培養可能なモノクローナル抗体産生ハイブリドーマを作製することにより行うことができる。
【０２５６】
前記「１以上の抗体」は、前記群より選ばれる抗体であれば、いくつ用いてもよい。２種以上の抗体を用いる場合、使用量の比は任意である。
【０２５７】
前記抗腫瘍剤（Ｂ）における、抗腫瘍剤（Ａ）と前記抗体との使用比率（重量比）は、抗腫瘍剤（Ａ）と前記抗体との副作用が重複しないことを鑑みると、最大１：１であることが好ましいと考えられる。
【０２５８】
本発明に係る抗腫瘍剤（Ｂ）は、抗腫瘍剤（Ａ）と、前記抗体とが混合されている組成物であってもよい。一方、抗腫瘍剤（Ａ）と、前記抗体とが混合されておらず、別々に存在していてもよい。さらに、抗腫瘍剤（Ａ）は、前述したように、ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤と、クマリン誘導体等とが混合されている組成物であってもよいし、ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤と、クマリン誘導体等とが、混合されておらず別々に存在していてもよい。
【０２５９】
つまり、有効成分として抗腫瘍剤（Ａ）と、前記抗体とが用いられる限り、抗腫瘍剤（Ａ）と、前記抗体とが混合されていない場合、並びに、ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤と、クマリン誘導体等と、前記抗体とが混合されていない場合でも、本発明に係る抗腫瘍剤（Ｂ）の範囲に含まれる。
【０２６０】
例えば、ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤と、クマリン誘導体等と、前記抗体とを、混合せずに患者に投与する場合であっても、ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤と、クマリン誘導体等と、前記抗体とを有効成分として併用しているため、抗腫瘍剤（Ａ）と、前記抗体とを有効成分として含有する本発明に係る抗腫瘍剤（Ｂ）に該当する。ただし、投与の順序はこれに限られるものではない。
【０２６１】
以上述べた事項より、本発明にかかる抗腫瘍剤（Ｂ）をヒトまたは哺乳動物に投与することによって、癌を治療する方法も本発明の範囲に含まれると言える。
【０２６２】
〔実施の形態４：抗腫瘍剤の用途等〕
本願明細書において、「抗腫瘍剤」とは、抗癌剤を含み、抗腫瘍効果を有する化合物を意味する。本願明細書における抗腫瘍剤（Ａ）、抗腫瘍剤（Ｂ）とも、当該「抗腫瘍剤」に含まれる。「腫瘍」は悪性腫瘍を含む。
【０２６３】
本発明に係る抗腫瘍剤（Ａ）は、乳癌や大腸癌などの固形癌における癌幹細胞マーカーであるＣＤ４４の発現を強く抑制する効果を奏する。また、抗腫瘍剤（Ｂ）は、腫瘍組織において、抗ＰＤ−１抗体等の奏効率を向上させることができると考えられる。
【０２６４】
そのため、本発明に係る抗腫瘍剤（Ａ）および抗腫瘍剤（Ｂ）は、各種の腫瘍、具体的には、中皮腫（悪性胸膜中皮腫等）、脳腫瘍（悪性星細胞腫、乏突起膠腫成分を有する神経膠腫等）、食道癌、胃癌、肝臓癌、膵臓癌、大腸癌（結腸癌、直腸癌等）、肺癌（非小細胞肺癌、小細胞肺癌、原発性及び転移性扁平上皮癌等）、腎臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、皮膚癌、神経芽細胞腫、肉腫、骨・軟部腫瘍、骨腫瘍、骨肉腫、精巣腫瘍、性腺外腫瘍、睾丸腫瘍、子宮癌（子宮頸癌、子宮体癌等）、頭頸部腫瘍（上顎癌、喉頭癌、咽頭癌、舌癌、口腔癌等）、多発性骨髄腫、悪性リンパ腫（最網肉腫、リンパ肉腫、ホジキン病等）、真性多血症、白血病（急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、急性リンパ性白血病、慢性リンパ性白血病等）、甲状腺癌、腎盂癌、尿管腫瘍、膀胱腫瘍、胆のう癌、胆管癌、絨毛癌、悪性黒色腫、小児腫瘍（ユーイング肉腫ファミリー、ウイルムス腫瘍、横紋筋肉腫、血管肉腫、睾丸胎児性癌、神経牙腫、網膜牙腫、肝牙腫、腎牙腫等）等の治療に好適に使用することができる。
【０２６５】
本発明に係る抗腫瘍剤（Ａ）および抗腫瘍剤（Ｂ）は、前記有効成分以外に、通常それ自体公知の製薬上許容される担体、賦形剤、希釈剤、増量剤、崩壊剤、安定剤、保存剤、緩衝剤、乳化剤、芳香剤、着色剤、甘味剤、粘稠剤、矯味剤、溶解補助剤、その他添加剤、具体的には水、植物油、アルコール（例えば、エタノール、ベンジルアルコール等）、ポリエチレングリコール、グリセロールトリアセテート、ゼラチン、炭水化物（例えば、ラクトース、デンプン等）、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ラノリン、ワセリン等を含有することができる。
【０２６６】
また、本発明に係る抗腫瘍剤（Ａ）および抗腫瘍剤（Ｂ）は、前記賦形剤等と混合して、常法により錠剤、丸剤、散剤、顆粒、坐剤、注射剤、点眼剤、液剤、カプセル剤、トローチ剤、エアゾール剤、エリキシル剤、懸濁剤、乳剤、シロップ剤等の形態となすことにより、全身的或いは局所的に、経口若しくは非経口で投与することができる。前記抗腫瘍剤の投与形態は、従来公知の方法（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｅａｓｔｏｎ、Ｐａ．第１５版、１９７５等）を用いて適宜決定すればよい。
【０２６７】
また、本発明にかかる抗腫瘍剤（Ａ）および抗腫瘍剤（Ｂ）の投与形態としては、例えば、腹腔内、静脈内、動脈内、経皮、舌下、筋肉内、経直腸、経頬、鼻腔内、リポソーム、吸入経由、膣、眼内、局所送達経由（例えば、カテーテル又はステントによる）、皮下、脂肪内、関節内、またはくも膜下腔内への投与であってよい。
【０２６８】
本発明は上述した各実施形態に限定されるものではなく、請求項に示した範囲で種々の変更が可能であり、異なる実施形態にそれぞれ開示された技術的手段を適宜組み合わせて得られる実施形態についても本発明の技術的範囲に含まれる。
【実施例】
【０２６９】
以下、実施例により、本発明をさらに詳細に説明する。なお、本発明は、以下の実施例に限定されるものではない。
【０２７０】
まず、実施例において用いた材料および実験方法について説明する。
【０２７１】
〔材料および方法〕
（１）セルライン
悪性胸膜中皮腫のセルラインとして、ＮＣＩ−Ｈ２２６、ＮＣＩ−Ｈ２４５２、ＮＣＩ−Ｈ２０５２、ＭＳＴＯ−２１１Ｈ、ＮＣＩ−Ｈ２８（American Type Culture Collectionより取得）を用いた。細胞は、American Type Culture Collectionの教示に従った方法で増殖させ、保存した。細胞は１０％ウシ胎児血清（Cell Culture Bioscience製）を含有するＲＰＭＩ−１６４０培地（Sigma-Aldrich製）中で、３７℃、５％ＣＯ２雰囲気下で培養した。
【０２７２】
（２）試薬
トラメチニブは LC Laboratoriesから購入し、４−ＭＵはSigma-Aldrichから購入したものを用いた。トラメチニブおよび４−ＭＵのストックはＤＭＳＯ（和光純薬製）中で調製した。本実施例で用いた全ての抗体はCell Signaling Technologyから購入した。ウサギモノクローナル抗体としては、phospho-MEK1/2 (Ser221) (#2338), phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (#4370), phospho-Akt (Ser473) (#4060), phospho-Stat3 (Ser727) (#9134), phospho-B-Raf (Ser445) (#2696) および β‐Actin (#4970)に対する抗体を用いた。マウスモノクローナル抗体としては、MEK1/2 (#4694), p44/42 MAP Kinase (#4696), Akt (pan) (#2920), Stat3 (#9139), FRA1 (#5281)および CD44 (#3570) に対する抗体を用いた。なお、前記の「(#2338)」等の番号は、Cell Signaling Technologyのコード番号である。
【０２７３】
（３）細胞生存率アッセイ
悪性胸膜中皮腫細胞（５×１０３個／well）を９６穴マイクロプレートに播種し、３７℃、５％ＣＯ２雰囲気下で培養した。前記細胞は、トラメチニブ（０〜１００μＭ）および４−ＭＵ（０〜１ｍＭ）を前記マイクロプレートに加えて７２時間処理した。細胞生存率はＷＳＴ−８アッセイ（Cell Counting kit-8、Dojindo Molecular Technologies 製）を用い、メーカーのプロトコルに従って決定した。吸光度はSpectraMax Plus 384（Molecular Devices製）を用いて４５０ｎｍで測定した。
【０２７４】
（４）ウエスタンブロット解析
細胞可溶化物は、ホスファターゼ阻害剤（ナカライテスク製）を含有するＲＩＰＡバッファー（ナカライテスク製）を用いて調製した。ウエスタンブロット解析は標準的なプロトコルに従って行った。ペルオキシダーゼに基づく化学発光は、ＥＣＬ（ＧＥヘルスケア・ライフサイエンス製）を添加することによって発生させた。タンパク質のバンドはImageQuant LAS 4010（ＧＥヘルスケア・ライフサイエンス製）を用いて検出し、ImageQuant TL（ＧＥヘルスケア・ライフサイエンス製）を用いて定量した。
【０２７５】
（５）腫瘍異種移植の検討
４〜５週齢のメスのヌードマウス（BALB/cA Jci-nu/nu）は日本クレア（株）より入手した。研究のプロトコルは兵庫医科大学の動物実験委員会により承認されたものを実行した。ＮＣＩ−Ｈ２２６細胞（５×１０６個／０．１ｍＬ）を前記ヌードマウスの側背に皮下注射し、腫瘍異種移植片として成長させた。薬剤の投与は、腫瘍が直径約１００〜２００ｍｍ３に成長したことが検出された日である、移植７日後（移植した日を０日として、その日から７日後）に開始した。
【０２７６】
トラメチニブおよび４−ＭＵは、０．５ｗ／ｖ％のメチルセルロース４００溶液（和光純薬製）に溶解させた。１日に体重１ｋｇあたり１ｍｇまたは３ｍｇ（１ｍｇまたは３ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ）のトラメチニブを１日１回経口投与し、１日に体重１ｋｇあたり２２５ｍｇ（２２５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ）となるように、４−ＭＵを１日２回経口投与することを３２日間続けた。
【０２７７】
トラメチニブと４−ＭＵとを組み合わせて用いる場合、トラメチニブの投与量は１ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙとし、４−ＭＵの投与量は２２５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙとした。トラメチニブおよび４−ＭＵの１回目の経口投与は略同時に行い、４−ＭＵの２回目の経口投与は１回目の経口投与の６〜８時間後に行った。４−ＭＵを単独で投与する場合、トラメチニブと４−ＭＵとを組み合わせて用いる場合のいずれも、４−ＭＵの１回目の経口投与量は１１２．５ｍｇ／ｋｇ、２回目の経口投与量は１１２．５ｍｇ／ｋｇとし、合計２２５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙとなるようにした。
【０２７８】
結果は、４〜５匹のマウスの集団の腫瘍の平均体積として求めた。腫瘍は１週間に２回、ノギスを用いて測定し、およその体積を以下の式１を用いて算出した。
腫瘍の体積（ｍｍ３）＝〔腫瘍の長さ×（腫瘍の幅）２〕×０．５・・・（１）
統計解析は、GraphPad Prism 6 software for Windows（登録商標）, Version 6.03 (GraphPad Software)を用い、Tukey検定により行った。
【０２７９】
異種移植されたＮＣＩ−Ｈ２２６腫瘍の組織中におけるリン酸化ＥＲＫの発現は、前記phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (#4370)を用い、メーカーのプロトコルに従って、ウエスタンブロット解析および免疫組織染色によって確認した。異種移植されたＮＣＩ−Ｈ２２６腫瘍組織は、トラメチニブおよび／または４−ＭＵの最終投与の４時間後、１日後、および４日後に回収した。切開した腫瘍組織はホスファターゼ阻害剤を含有するＲＩＰＡバッファーに溶解させ、ウエスタンブロット解析に供した。腫瘍組織は１０％ホルマリン中に２４時間固定し、免疫組織染色に先立つパラフィン包埋を行う前にエタノール中に移した。リン酸化ＥＲＫ陽性の細胞を、腫瘍あたり１０か所のランダムな視野において倍率４００倍にて観察して計数し、各腫瘍に観察されたリン酸化ＥＲＫ陽性細胞の総数の割合として表した。統計解析は、GraphPad Prism 6 software for Windows（登録商標）, Version 6.03 (GraphPad Software)を用い、１元配置分散分析により行った。
【０２８０】
〔実施例１：トラメチニブおよび４−ＭＵによる悪性胸膜中皮腫細胞の細胞生存阻害〕
前記「（３）細胞生存率アッセイ」に記載したように、トラメチニブによって悪性胸膜中皮腫細胞を処理した結果、該細胞の生存数はトラメチニブの濃度依存的に減少した。ＩＣ５０の値は０．１５μＭ〜１２．７μＭであった。
【０２８１】
図１は、悪性胸膜中皮腫のセルラインとして、ＮＣＩ−Ｈ２２６細胞、ＮＣＩ−Ｈ２４５２細胞、ＮＣＩ−Ｈ２０５２細胞およびＭＳＴＯ−２１１Ｈ細胞を用いた場合の、トラメチニブの濃度と細胞生存率との関係を示すグラフである。図１において、横軸はトラメチニブの濃度、縦軸は細胞生存率を示す。なお、本願実施例において、細胞生存率は、薬剤（この場合トラメチニブ）で処理する前の細胞数を１．０とし、これに対する、薬剤で処理した後の細胞数の割合として表している。
【０２８２】
ＩＣ５０は、ＮＣＩ−Ｈ２２６細胞が１１．５μＭ、ＮＣＩ−Ｈ２４５２細胞が１１．２μＭ、ＮＣＩ−Ｈ２０５２細胞が１２．７μＭ、ＭＳＴＯ−２１１Ｈ細胞が０．１５μＭであり、ＭＳＴＯ−２１１Ｈ細胞は、他のセルラインよりも、トラメチニブによって誘導された生細胞数の減少が著しかった。
【０２８３】
図２は、図１と同様のセルラインを用いた場合の、４−ＭＵの濃度と細胞生存率との関係を示すグラフである。
【０２８４】
ＩＣ５０は、ＮＣＩ−Ｈ２４５２、ＮＣＩ−Ｈ２０５２およびＮＣＩ−Ｈ２２６において１８６μＭ〜１．５２ｍＭの値を示した。一方、図２の（ｄ）に示すように、ＭＳＴＯ−２１１細胞は、本実施例で供試した濃度の４−ＭＵによる生存阻害を受けなかった。
【０２８５】
〔実施例２：トラメチニブによるＥＲＫのリン酸化のブロック、およびＣＤ４４発現の阻害〕
細胞内シグナル伝達におけるトラメチニブ単独の効果を調べるために、悪性胸膜中皮腫細胞のウエスタンブロット解析を行った。すなわち、〔材料および方法〕の（３）に記載したように培養したＮＣＩ−Ｈ２２６細胞およびＭＳＴＯ−２１１Ｈ細胞を、種々の濃度のトラメチニブで７２時間処理し、Ｒａｆ−ＭＥＫ−ＥＲＫおよびＰｌ３Ｋ−Ａｋｔ経路のリン酸化の状態を解析した。さらに、ＮＣＩ−Ｈ２２６細胞およびＭＳＴＯ−２１１Ｈ細胞を、それぞれ２０μＭおよび１μＭのトラメチニブで処理し、経時変化の解析に供した。
【０２８６】
図３は、０〜１００００ｎＭのトラメチニブで７２時間処理したＮＣＩ−Ｈ２２６細胞のウエスタンブロット解析結果を示す図である。また、図４は、トラメチニブの濃度と、前記ＮＣＩ−Ｈ２２６細胞におけるＥＲＫのリン酸化の阻害との関係（図４の（ａ））、および、トラメチニブの濃度とＣＤ４４のタンパク質レベルとの関係（図４の（ｂ））を示す図である。図４において、横軸はトラメチニブの濃度を表し、縦軸（Volume）はウエスタンブロッティングメンブレンにおけるバンドボリュームを表している。以下、図６，８，１０，１２，１４〜１６，１８の（ｂ）、１９の（ｂ）の縦軸も同じである。
【０２８７】
図３、４に示すように、ＥＲＫのリン酸化は、トラメチニブの濃度が１ｎＭである場合から既に抑制され、前記濃度が１０ｎＭ以上の場合はほぼ完全に抑制されていることが分かる。また、ＣＤ４４の発現も、トラメチニブの濃度に依存して減少していることが分かる。
【０２８８】
図５は、２０μＭのトラメチニブでＮＣＩ−Ｈ２２６細胞を０〜７２時間処理した場合の経時変化をウエスタンブロットで解析した結果を示す図である。また、図６は、トラメチニブによる処理時間と、前記ＮＣＩ−Ｈ２２６細胞におけるＥＲＫのリン酸化の阻害との関係（図６の（ａ））、およびＣＤ４４のタンパク質レベルとの関係（図６の（ｂ））を示す図である。図６の横軸は２０μＭのトラメチニブによる処理時間を表している。
【０２８９】
図５、図６の（ａ）に示すように、ＥＲＫのリン酸化は、トラメチニブによる処理開始から１時間以内にほぼ検出不可能なレベルにまで抑制されていることが分かる。また、トラメチニブによるＥＲＫのリン酸化抑制に続いてＣＤ４４の発現も阻害されることが、トラメチニブによる処理開始４８時間〜７２時間後の結果に表れている（図６の（ｂ））。
【０２９０】
図７は、０〜１０００ｎＭのトラメチニブで７２時間処理したＭＳＴＯ−２１１Ｈ細胞のウエスタンブロット解析結果を示す図である。また、図８は、トラメチニブの濃度と、前記ＭＳＴＯ−２１１Ｈ細胞におけるＥＲＫのリン酸化の阻害との関係（図８の（ａ））、およびＣＤ４４のタンパク質レベルとの関係（図８の（ｂ））を示す図である。図８において、横軸はトラメチニブの濃度を表している。
【０２９１】
図７、８に示すように、ＭＳＴＯ−２１１Ｈ細胞を用いた場合も、ＥＲＫのリン酸化は、トラメチニブの濃度依存的に抑制される傾向が見られ、ＣＤ４４の発現も、トラメチニブの濃度に依存して減少していることが分かる。
【０２９２】
図９は、１μＭのトラメチニブでＭＳＴＯ−２１１Ｈ細胞を０〜７２時間処理した場合の経時変化をウエスタンブロットで解析した結果を示す図である。また、図１０は、トラメチニブによる処理時間と、前記ＭＳＴＯ−２１１Ｈ細胞におけるＥＲＫのリン酸化の阻害との関係（図１０の（ａ））、およびＣＤ４４のタンパク質レベルとの関係（図１０の（ｂ））を示す図である。図１０の横軸は１μＭのトラメチニブによる処理時間を表している。
【０２９３】
図９、図１０の（ａ）に示すように、ＭＳＴＯ−２１１Ｈ細胞を用いた場合も、ＥＲＫのリン酸化は、トラメチニブによる処理開始から１時間以内にほぼ検出不可能なレベルにまで抑制されていることが分かる。また、トラメチニブによるＥＲＫのリン酸化抑制に続いてＣＤ４４の発現も阻害されることが、トラメチニブによる処理開始４８時間〜７２時間後の結果に表れている（図１０の（ｂ））。
【０２９４】
〔実施例３：細胞内シグナル経路における４−ＭＵの効果〕
細胞内シグナル経路における４−ＭＵ単独の効果を調べるために、悪性胸膜中皮腫細胞のウエスタンブロット解析を行った。すなわち、〔材料および方法〕の（３）に記載したように培養したＮＣＩ−Ｈ２２６細胞を、１０ｎＭ〜１００μＭの４−ＭＵで７２時間処理し、Ｒａｆ−ＭＥＫ−ＥＲＫおよびＰｌ３Ｋ−Ａｋｔ経路のリン酸化の状態を解析した。
【０２９５】
図１１は、１０ｎＭ〜１００μＭの４−ＭＵで７２時間処理したＮＣＩ−Ｈ２２６細胞のウエスタンブロット解析結果を示す図である。また、図１２は、４−ＭＵの濃度と、前記ＮＣＩ−Ｈ２２６細胞におけるＥＲＫのリン酸化の阻害との関係（図１２の（ａ））、およびＣＤ４４のタンパク質レベルとの関係（図１２の（ｂ））を示す図である。図１２において、横軸は４−ＭＵの濃度を表している。
【０２９６】
数種類の腫瘍細胞では、ヒアルロン酸とヒアルロン酸レセプターとの間の相互作用が、ＭＡＰＫおよびＰｌ３Ｋ−Ａｋｔ経路を含む種々の下流シグナル伝達経路を活性化することが知られている（例えば、非特許文献５を参照）。
【０２９７】
しかしながら、図１１、図１２の（ａ）に示すように、本実施例では、ＥＲＫのリン酸化は、４−ＭＵが高濃度の場合にわずかに阻害されたのみであった。また、図１１、図１２の（ａ）に示すように、４−ＭＵの濃度が１００ｎＭまでの低濃度の場合は、ＥＲＫのリン酸化はむしろ増加傾向にあった。さらに、図１１、図１２の（ｂ）に示すように、４−ＭＵ処理によって、ＣＤ４４のタンパク質発現レベルの大幅な減少は見られないという結果が得られた。
【０２９８】
〔実施例４：ＣＤ４４の発現と、ＥＲＫ依存性のＦｒａ−１の発現との関係〕
転写因子であるアクチベータータンパク質１（ＡＰ−１）は、アスベストによって誘導されるシグナル伝達経路の主要なターゲットである。Ramos-Nino ME らは、ラットの胸膜中皮腫細胞において、ＡＰ−１の主成分であるＦｒａ−１の発現がＥＲＫの活性化に依存していること、および、ＣＤ４４の誘導がＦｒａ−１の発現と相関していることを報告している（Ramos-Nino ME, et. al. Cancer research. 2002;62(21):6065-9.、Ramos-Nino ME, et. al. Cancer research. 2003;63(13):3539-45.）。さらに、Ramos-Nino ME らは、Ｆｒａ−１が、ヒト悪性中皮腫細胞において、ＥＲＫ、Ｓｒｋ、およびＰ１３Ｋ経路によって制御されることも報告している（Ramos-Nino ME, et. al. Molecular cancer. 2007;6:81.）。
【０２９９】
本実施例では、リン酸化されたＥＲＫの発現とＣＤ４４との間の関係について検討するために、Ｆｒａ−１の発現を解析した。すなわち、〔材料および方法〕の（３）に記載したように培養したＮＣＩ−Ｈ２２６細胞を、図１３〜１６に示した濃度のトラメチニブ；４−ＭＵ；またはトラメチニブと４−ＭＵとの組み合わせ、によって７２時間処理し、ＥＲＫのリン酸化、Ｆｒａ−１の発現、ＣＤ４４の発現等について検討した。
【０３００】
図１３は、Ｆｒａ−１の発現と、トラメチニブおよび／または４−ＭＵによる処理との関係などを表すウエスタンブロット解析結果を示す図である。
【０３０１】
また、図１４はトラメチニブおよび／または４−ＭＵの使用量と、リン酸化されたＥＲＫの発現との関係を示す図、図１５はトラメチニブおよび／または４−ＭＵの使用量と、ＣＤ４４の発現との関係を示す図、図１６はトラメチニブおよび／または４−ＭＵの使用量と、Ｆｒａ−１の発現との関係を示す図である。
【０３０２】
図１４〜１６は、それぞれ図１３の「ｐＥＲＫ」、「ＣＤ４４」、「Ｆｒａ−１」に示す結果と対応している。図１４〜１６の横軸において「Ｔ」はトラメチニブ、「Ｍ」は４−ＭＵをそれぞれ示し、数字は濃度（μＭ）を示しており、図１３に示した濃度と対応している。「（−）」は投与を行っていないことを示す。
【０３０３】
図１３〜１６より、リン酸化されたＥＲＫおよびＣＤ４４の発現が阻害される傾向と一致して、Ｆｒａ−１の発現も、トラメチニブ単独、４−ＭＵ単独、および、トラメチニブと４−ＭＵとの組み合わせによって、これらの薬剤の濃度依存的に阻害されたことが分かる。図１３〜１６に示す結果は、ＣＤ４４の発現が、悪性胸膜中皮腫細胞において、ＥＲＫ依存性のＦｒａ−１の発現と相関していることを示唆している。つまり、リン酸化されたＥＲＫの発現が前記薬剤によって減弱することに伴ってＦｒａ−１の発現が減弱し、Ｆｒａ−１の発現の減弱に伴ってＣＤ４４の発現が減弱することが示唆される。
【０３０４】
〔実施例５：マウス異種移植モデルにおけるトラメチニブおよび４−ＭＵの抗腫瘍効果〕
本実施例では、ＮＣＩ−Ｈ２２６細胞を移植したマウス異種移植モデルにおけるトラメチニブおよび／または４−ＭＵの抗腫瘍効果について検討した。方法は〔材料および方法〕の（５）に示したとおりである。図１７は、前記マウス異種移植モデルにトラメチニブおよび／または４−ＭＵを投与した場合の抗腫瘍効果を経時的に観察した結果を示す図である。横軸はＮＣＩ−Ｈ２２６細胞を移植した日からの日数を示し、例えば「ｄａｙ７」であれば、移植した日を０日として、その日から７日後であることを示す。縦軸は移植したＮＣＩ−Ｈ２２６細胞の体積を示す。
【０３０５】
図１７に示すように、トラメチニブを１ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ投与した場合、および、４−ＭＵを２２５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ投与した場合のいずれも、薬剤を投与しない対照と比較して有意に腫瘍の増殖を抑制していた。
【０３０６】
また、トラメチニブ（１ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ）と４−ＭＵ（２２５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ）とを組み合わせて投与した場合（図中のCombination treatment）は、トラメチニブを１ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ投与した場合と比較してＰ＜０．０１、４−ＭＵを２２５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ投与した場合と比較してＰ＜０．０００１、対照と比較してＰ＜０．０００１でそれぞれ有意差が示された。
【０３０７】
つまり、トラメチニブまたは４−ＭＵを単独で投与するよりも、これらを組み合わせて投与することによって、明らかに相乗的な抗腫瘍効果が得られることが見出された。
【０３０８】
次に、トラメチニブ、４−ＭＵ、およびこれらの組み合わせが、in vivoにおけるＥＲＫの活性化に与える影響について検討した。図１８は、薬剤の最終投与の４時間後に回収したＮＣＩ−Ｈ２２６の腫瘍組織をウエスタンブロットに供した結果を示す図である。図１８の（ａ）はウエスタンブロットの解析結果を、図１８の（ｂ）はトラメチニブ、４−ＭＵ、またはこれらの組み合わせによる処理と、ＮＣＩ−Ｈ２２６細胞におけるＥＲＫのリン酸化の阻害との関係をそれぞれ示している。
【０３０９】
図１８の（ａ）において、「ＥＲＫ」はリン酸化されたＥＲＫとリン酸化されていないＥＲＫとの合計の発現を示し、「ｐＥＲＫ」はリン酸化されたＥＲＫの発現を示す。また、図１８の（ａ）（ｂ）において「ＣＴＲＬ  ｄａｙ０」は薬剤の投与を開始した日のＮＣＩ−Ｈ２２６の腫瘍組織を解析した結果を示す。
【０３１０】
図１８に示すように、トラメチニブを投与した場合は、投与量が１ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙおよび３ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの何れの場合も、ＥＲＫのリン酸化が強く阻害されていた。さらに、トラメチニブと４−ＭＵとを組み合わせて投与した場合は、トラメチニブを単独で投与した場合と同程度の結果が得られた。
【０３１１】
図１９は、薬剤の最終投与の４日後に回収したＮＣＩ−Ｈ２２６腫瘍組織をウエスタンブロットに供した結果を示す図である。図１９の（ａ）はウエスタンブロットの解析結果を、図１９の（ｂ）はトラメチニブ、４−ＭＵ、またはこれらの組み合わせによる処理と、ＮＣＩ−Ｈ２２６細胞におけるＥＲＫのリン酸化の阻害との関係をそれぞれ示している。
【０３１２】
図１９を図１８と比較すると、薬剤投与によって阻害されていたＥＲＫのリン酸化が、トラメチニブを投与した場合、トラメチニブと４−ＭＵとを組み合わせて投与した場合の何れにおいても回復していることが分かる。
【０３１３】
図２０，２１は、薬剤の最終投与の４時間後に回収したＮＣＩ−Ｈ２２６の腫瘍組織（図中、「Immediately after cessation of treatment」と記載）と、薬剤の最終投与の４日後に回収したＮＣＩ−Ｈ２２６の腫瘍組織（図中、「4 days after cessation of treatment」と記載）とについての免疫組織染色の結果を、それぞれ倍率４０倍、２００倍で確認した図である。図２２は、トラメチニブ、４−ＭＵ、または、トラメチニブと４−ＭＵとの組み合わせを経口投与した前記ヌードマウスにおけるＮＣＩ−Ｈ２２６の腫瘍組織中に発現したリン酸化ＥＲＫ陽性細胞の割合を、対照と比較した結果を示す図である。
【０３１４】
図２０，２１には、トラメチニブ（１ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ）と４−ＭＵ（２２５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ）とを組み合わせて投与した場合（図中の「combination treatment」」）が、茶色に染色された細胞、すなわちリン酸化ＥＲＫ陽性細胞が最も少ないことが示されている。
【０３１５】
図２２に示すように、トラメチニブ１ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙを投与した場合、トラメチニブ３ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙを投与した場合、４−ＭＵ２２５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙを投与した場合はいずれも、対照と比較して有意にＥＲＫのリン酸化を阻害した（それぞれＰ＜０．０００１、Ｐ＜０．０００１、Ｐ＜０．００１）。
【０３１６】
トラメチニブ（１ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ）と４−ＭＵ（２２５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ）とを組み合わせて投与した場合（図中の「combination treatment」」）は、トラメチニブ（１ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ）を投与した場合に対してＰ＜０．０１、トラメチニブ（３ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ）を投与した場合に対してＰ＜０．０５、４−ＭＵ（２２５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ）を投与した場合に対してＰ＜０．０００１、対照に対してＰ＜０．０００１で、それぞれ有意にＥＲＫのリン酸化を阻害した。
【０３１７】
〔実施例６：ＭＥＫ阻害剤としてＴＡＫ−７３３，セルメチニブを用いた場合の悪性胸膜中皮腫細胞の細胞生存阻害〕
本実施例では、ＭＥＫ阻害剤として、実施例１〜５で用いたトラメチニブの代わりにＴＡＫ−７３３（#S2617, Selleck Chemicals）またはセルメチニブ（#S-4490, LC Laboratories）を０〜１０００μＭ用い、悪性胸膜中皮腫のセルラインとしてＮＣＩ−Ｈ２８をさらに用いたことの他は、実施例１と同様の方法を行い、悪性胸膜中皮腫細胞の細胞生存率について検討した。
【０３１８】
図２３〜２８は、供試したＭＥＫ阻害剤の濃度と細胞生存率との関係を示すグラフであり、それぞれ、ＴＡＫ−７３３によってＮＣＩ−Ｈ２２６細胞を処理した場合（図２３）、セルメチニブによってＮＣＩ−Ｈ２８細胞を処理した場合（図２４）、セルメチニブによってＭＳＴＯ−２１１Ｈ細胞を処理した場合（図２５）、セルメチニブによってＮＣＩ−Ｈ２２６細胞を処理した場合（図２６）、セルメチニブによってＮＣＩ−Ｈ２０５２細胞を処理した場合（図２７）、セルメチニブによってＮＣＩ−Ｈ２４５２細胞を処理した場合（図２８）の結果を示す図である。
【０３１９】
各図の横軸はＭＥＫ阻害剤の濃度、縦軸は細胞生存率を表す。図２３〜２８に示されるように、各ＭＥＫ阻害剤は、１００μＭ〜１０００μＭの濃度で悪性胸膜中皮腫細胞に対して顕著な増殖抑制効果を示すことが明らかとなった。
【０３２０】
〔実施例７：４−ＭＵによるクリゾチニブの抗腫瘍効果の増強〕
本実施例では、ＭＥＫ阻害剤の代わりにｃ−Ｍｅｔ阻害剤であるクリゾチニブを用い、クリゾチニブおよび／または４−ＭＵによって処理した場合の悪性胸膜中皮腫細胞の細胞生存率について検討した。
【０３２１】
すなわち、種々の濃度のクリゾチニブ；４−ＭＵ；またはクリゾチニブと４−ＭＵとの組み合わせ（それぞれの濃度は図２９〜３２の（ａ）〜（ｃ）に示す）を用い、〔材料および方法〕の（３）に記載した方法で悪性胸膜中皮腫細胞を処理した。
【０３２２】
図２９〜３２は、それぞれ、悪性胸膜中皮腫細胞としてＮＣＩ−Ｈ２０５２、ＮＣＩ−Ｈ２４５２、ＮＣＩ−Ｈ２２６、ＮＣＩ−Ｈ２８を用い、クリゾチニブおよび／または４−ＭＵによって処理した場合の細胞生存率を示す図である。
【０３２３】
図２９〜３２において、（ａ）〜（ｃ）は、それぞれ、クリゾチニブで処理した場合、４−ＭＵで処理した場合、クリゾチニブと４−ＭＵとの組み合わせによって処理した場合の結果である。縦軸は細胞生存率を示し、横軸はクリゾチニブおよび／または４−ＭＵの濃度を示す。前記（ｃ）における横軸は、上段が４−ＭＵの濃度、下段がクリゾチニブの濃度を示している。
【０３２４】
図２９〜３２から分かるように、セルラインによって多少の違いはあるが、クリゾチニブまたは４−ＭＵの濃度依存的に悪性胸膜中皮腫細胞の生存率は低下し、クリゾチニブと４−ＭＵとを組み合わせた場合は、クリゾチニブまたは４−ＭＵを単独で用いた場合よりも顕著に前記生存率が低下した。つまり、４−ＭＵと併用することによって、クリゾチニブの抗腫瘍効果を顕著に向上させることができたことが示された。
【０３２５】
〔実施例１〜７の結果について〕
本発明に係る抗腫瘍剤は、上述したように、ＭＥＫ阻害剤および／またはｃ−Ｍｅｔ阻害剤と、クマリン誘導体等とを有効成分として併用するものである。実施例１、５、６、７に示すように、トラメチニブ、セルメチニブ、ＴＡＫ−７３３またはクリゾチニブを単独で（前記併用を行わずに）用いた場合、あるいは４−ＭＵを単独で用いた場合も、悪性胸膜中皮腫細胞に対する抗腫瘍効果は得られているが、前記併用を行った場合は、併用を行わない場合と比較して顕著に優れた、相乗的な抗腫瘍効果を得ることができた（図１７、２９〜３２）。
【０３２６】
トラメチニブ、セルメチニブ、ＴＡＫ−７３３またはクリゾチニブは、濃度依存的に悪性胸膜中皮腫細胞の生存を阻害した（図１、２３〜２８、２９〜３２）。ウエスタンブロットでは、トラメチニブがＮＣＩ−Ｈ２２６細胞およびＭＳＴＯ−２１１Ｈ細胞でＥＲＫのリン酸化を強く阻害することが示された（図３〜１０）。マウスの異種移植モデルでは、トラメチニブが腫瘍の増殖を有意に抑制し、ＥＲＫのリン酸化を強く阻害することが示された（図１７，１８）。
【０３２７】
さらに、実施例２の結果から、ＣＤ４４の発現がトラメチニブによって阻害されることも示された（図３〜１０）。一方、実施例３（図１１、図１２の（ｂ））に示すように、４−ＭＵ処理によって、ＣＤ４４のタンパク質発現レベルの大幅な減少は見られなかった。
【０３２８】
ヒアルロン酸は、ＣＤ４４などの細胞表面レセプターと結合することによって、種々の下流のシグナル伝達経路を活性化し、その結果、細胞の増殖、生存、運動性、侵入性および化学的抵抗性を亢進させることが知られている（Edward M, et al. The British journal of dermatology. 2010;162(6):1224-32.等）。
【０３２９】
ヒアルロン酸の過剰発現は悪性胸膜中皮腫の多くの症例で見られるため、発明者は、ヒアルロン酸合成阻害剤である４−ＭＵを用いることによってＣＤ４４の発現が抑制されると考えていたが、実施例３、４の結果から、リン酸化されたＥＲＫの発現が本発明に係る抗腫瘍剤によって減弱することに伴ってＦｒａ−１の発現が減弱し、Ｆｒａ−１の発現の減弱に伴ってＣＤ４４の発現が減弱することが示唆された。そして、ＣＤ４４の発現の減弱と、４−ＭＵによるヒアルロン酸合成阻害とにより、ヒアルロン酸とＣＤ４４との結合は、トラメチニブを単独で用いる場合よりもより一層抑制されることになるため、実施例５に示されるような相乗的な抗腫瘍効果が得られたものと考えられる。
【０３３０】
実施例６では、ＴＡＫ−７３３、セルメチニブを単独で悪性胸膜中皮腫細胞に作用させた結果を示しているが、ＴＡＫ−７３３およびセルメチニブは、いずれもトラメチニブと同様にＭＥＫ阻害剤であるため、ＥＲＫのリン酸化、Ｆｒａ−１の発現、およびＣＤ４４の発現を減弱させることができ、４−ＭＵと併用することによって、ＴＡＫ−７３３、セルメチニブを単独で用いる場合よりも優れた抗腫瘍効果を奏することができると考えられる。
【０３３１】
また、構造の類似性を鑑みれば、トラメチニブ、セルメチニブ、ＴＡＫ−７３３のみならず、一般式〔Ｉ〕〜〔ＩＩＩ〕で表される化合物からなる群より選ばれる１種または２種以上の化合物を用いた場合、および、４−ＭＵのみならず、一般式〔ＩＶ〕で表される化合物からなる群より選ばれる１種または２種以上の化合物を用いた場合、並びに、ＭＥＫ阻害剤および前記クマリン誘導体等を用いた場合も、前記抗腫瘍効果を奏することができると考えられる。
【０３３２】
実施例７に示すように、ｃ−Ｍｅｔ阻害剤であるクリゾチニブを用いた場合も、４−ＭＵと併用することによって相乗的な抗腫瘍効果が得られた。実施例７の結果を鑑みれば、クリゾチニブの代わりに、ｃ−Ｍｅｔ阻害剤であるカボザンチニブ、カボザンチニブｓ−リンゴ酸塩または薬学的に許容されるこれらの塩を用いた場合；４−ＭＵの代わりに、一般式〔ＩＶ〕で表される化合物からなる群より選ばれる１種または２種以上の化合物を用いた場合も、実施例７に示されるような抗腫瘍効果を奏することができると考えられる。さらに、クリゾチニブと４−ＭＵとの組み合わせ等に限らず、ｃ−Ｍｅｔ阻害剤および前記クマリン誘導体等を用いた場合であれば、実施例７に示されるような抗腫瘍効果を奏することができると考えられる。
【０３３３】
また、４−ＭＵは図１７に示すように、ＭＥＫ阻害剤およびｃ−Ｍｅｔ阻害剤の抗腫瘍効果を増強することができるため、ＭＥＫ阻害剤およびｃ−Ｍｅｔ阻害剤に対する抗腫瘍効果増強剤の有効成分として用いることができる。そして、４−ＭＵとの構造の類似性を鑑みれば、一般式〔ＩＶ〕で表される化合物からなる群より選ばれる１種または２種以上の化合物、および、前記クマリン誘導体等も前記有効成分として用いうると考えられる。
【０３３４】
〔実施例８：４−ＭＵおよびトラメチニブによるＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１およびＣＴＬＡ−４の発現増強〕
ＮＣＩ−Ｈ２２６腫瘍の組織におけるリン酸化ＥＲＫの発現を確認することに代えて、前記組織におけるＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１およびＣＴＬＡ−４の発現を確認したことの他は、前記〔材料および方法〕の項の（５）に記載した方法に従って免疫組織染色を行った。なお、抗体としてはphospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (#4370)の代わりに、抗ＰＤ−１抗体（R and D systems : AF1086）、抗ＰＤ−Ｌ１抗体（Cell Signaling Technology :13684）、および抗ＣＴＬＡ−４抗体（Santa Cruz : sc-376016）を用いた。
【０３３５】
図３３は、薬剤の最終投与の４時間後に回収したＮＣＩ−Ｈ２２６腫瘍組織について、ＰＤ−１，ＰＤ−Ｌ１，ＣＴＬＡ−４の発現を観察した免疫組織染色の結果を示す図である。倍率は２００倍である。図３３の（ａ）〜（ｃ）は、それぞれＰＤ−１，ＰＤ−Ｌ１，ＣＴＬＡ−４の発現を観察した結果を示す。なお、前記発現が陽性の細胞を定量的に計数する場合は、倍率４００倍の視野で観察し、計数すればよい。
【０３３６】
図３３において「Control」は対照、「４−ＭＵ」は４−ＭＵを２２５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ投与した場合、「Trametinib 1mg/kg/day」はトラメチニブ１ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙを投与した場合、「Trametinib 3mg/kg/day」はトラメチニブ３ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙを投与した場合、「Combination treatment」はトラメチニブ（１ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ）と４−ＭＵ（２２５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ）とを組み合わせて投与した場合の結果を示す。
【０３３７】
図３３の「Combination treatment」に示すように、茶色に染色された細胞、すなわち（ａ）ではＰＤ−１，（ｂ）ではＰＤ−Ｌ１，（ｃ）ではＨＴＬＡ−４をそれぞれ発現した細胞は、４−ＭＵまたはトラメチニブを単独で投与した場合よりも、４−ＭＵとトラメチニブとを組み合わせて投与した場合に多く観察された。前記組み合わせによって、対照ではいずれも弱い発現であったのが、ＰＤ−１およびＣＴＬＡ−４は中程度の発現まで増強され、ＰＤ−Ｌ１は著しく発現が増強された。
【０３３８】
この結果から、４−ＭＵとトラメチニブとを組み合わせて投与することによって、ＰＤ−１，ＰＤ−Ｌ１およびＣＴＬＡ−４の発現を増強することができることが明らかとなった。そして、この結果を鑑みると、当該発現の増強によって、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体の奏効率を高めることができることが推測される。
【産業上の利用可能性】
【０３３９】
本発明は、各種の癌の治療に有効に利用することができる。したがって、医薬およびこれに関連する分野において広く利用することができる。
【図１】
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【図２】
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【図４】
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【図６】
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【図８】
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【図１０】
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【図１２】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３】
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【図５】
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【図７】
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【図９】
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【図１１】
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【図１３】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図３３】
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