(57)【要約】【課題】ＲＮＡサンプルの電気泳動を、簡便且つ手軽に行うことができる電気泳動装置、および電気泳動用ゲルの作成の為の器具を提案する。【解決手段】電気泳動槽、電気泳動槽用蓋、電気泳動用ゲル調整用器具等のＲＮＡサンプルが直接的又は間接的にリボヌクレアーゼ（ＲＮａｓｅ）の影響を受ける部位を１６０℃を超えた値から３００℃迄の耐熱性を有する高分子部材で形成されることを特徴とする電気泳動装置及び電気泳動用ゲル器具により、リボヌクレアーゼ（ＲＮａｓｅ）の失活、除去又は阻害下での安定したＲＮＡサンプルの電気泳動を実現する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＲＮＡサンプルが直接的又は間接的にリボヌクレアーゼ（ＲＮａｓｅ）の影響を受ける部位を１６０℃を超えた値から３００℃迄の耐熱性を有する高分子部材で形成する電気泳動装置及び電気泳動用器具。
【請求項２】
ＲＮＡサンプルが直接的又は間接的に影響を与える部位が、電気泳動槽、蓋、又は、電気泳動用ゲル調整器具である請求項１に記載の電気泳動装置及び電気泳動用器具。
【請求項３】
前記電気泳動槽は、サブマリン型簡易電気泳動用であって、泳動用電源ユニットと着脱自在で、装着時一体化する請求項１に記載の電気泳動装置。
【請求項４】
前記耐熱性を有する部材が、長期耐熱性を有する高分子材料である請求項１に記載の電気泳動装置及び電気泳動用器具。
【請求項５】
前記耐熱性を有する高分子部材が、ポリフェニレンスルフィド、PEEK（ポリエーテルエーテルケトン）、ポリエーテルイミド、ポリエーテルスルホン、ポリアミドイミド、エコノール、PTFE（ポリテトラフルオロエチレン(４フッ化)）、 PFA（テトラフルオロエチレン・パーフルオロアルキルビニルエーテル共重合体）、 FEP（テトラフルオロエチレン・ヘキサフルオロプロピレン共重合体(４．６フッ化)）、 PCTFE（ポリクロロトリフルオロエチレン(３フッ化)）、 ETFE（テトラフルオロエチレン・エチレン共重合体）、 ECTFE（クロロトリフルオエチレン・エチレン共重合体）等のフッ素樹脂、ポリスルホン、ＰＰＯ（変性ポリフェニレンエーテル）、ＰＰＳ（ポリフェニレンサルファイド）、シリコン樹脂、エポキシ樹脂、ＭＭＣ、ポリイミド、ウルテム、ＰＰＳＵ樹脂、ＰＥＫＥＫＫ（Polyetherketoneetherketoneketone）、デルリン（登録商標）から選ばれる請求項１に記載の電気泳動装置および電気泳動用器具。
【請求項６】
耐熱温度が、180℃〜２００℃である請求項１に記載の電気泳動装置及び電気泳動用器具。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、電気泳動装置及び電気泳動用器具に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＲＮＡを検出する手法であるノーザンブロット解析、ＲＮＡから逆転写して得られるcDNAライブラリーの構築、RT-PCR、プロテイントランケーションテスト(Protein Truncation Test; PTT)等のアプリケーションにおいて、ＲＮＡサンプルの使用は不可欠であり、その際、単離したRNAサンプルの精製度を高くし、RNAに断片化等がない完全な状態を保っていることが必要となることから、ＲＮＡの断片化の有無や、完全度を確認する為にも、電気泳動装置での確認は、重要であり、簡易的な電気泳動装置がより好適に用いられる。
しかしながらＲＮＡは、ＤＮＡに比べて分解されやすく、特に皮膚、唾液、空気中の細菌やかび等の微生物に存在するリボヌクレアーゼ（ＲＮａｓｅ）によるコンタミは、ＲＮＡを分解させてしまう為に、正確な電気泳動が行われないことから、ＲＮａｓｅを失活、除去又は阻害する為の手法が必要となる。
Nature,210,953(1966)では、真空下、160度から２００℃で、加熱することで、この酵素を失活させることが記載されている。又、真空中ではなく乾燥空間における加熱処理も用いられているが、ガラス、金属、又はセラミックス等、耐熱性を有する材料に限られた手法である。
その他、ＤＥＰＣ水、過酸化水素水、ＲＮａｓｅ除去剤による浸漬処理によってＲＮａｓｅの失活、除去又は阻害を行う処理が行われているが、ＲＮａｓｅが残留するため十分な除去等ができない場合や、廃液の取り扱いに煩雑性を伴う場合がある。
【０００３】
特開平１０−２８８５９８号公報及び特開平１０−２８８５９７には、耐熱性の材料を用いたサブマリン型の簡易電気泳動装置、及びゲルメーカー器具が開示されている。
これらの先行技術は、いずれもオートクレーブ（120℃）による滅菌処理程度の耐熱性を示すものであり、ＲＮａｓｅの失活、除去又は阻害に必要な加熱を示すには、至っていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開平１０−２８８５９７号公報
【特許文献２】特開平１０−２８８５９８号公報
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Ｎature,210,953(1966)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
電気泳動装置は、上述した様に種々のアプリケーションを利用する上でも必要な分析機器であり、特にＲＮＡサンプルの完全度を測る上でも重要であるが、リボヌクレアーゼ（ＲＮａｓｅ）の汚染を迅速に且つ有効に防止できる電気泳動装置は、未だ提案されていない。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
上記に鑑み本発明は、ＲＮＡサンプルが直接的又は間接的に影響を与える部位を１６０℃を超えた値から３００℃、好ましくは、180℃〜２００℃の耐熱性を有する高分子部材で形成し、乾燥加熱処理を上述した温度範囲で行うことで、完全なリボヌクレアーゼ（ＲＮａｓｅ）の失活を簡便に行う。本発明で示す乾燥加熱は、160℃〜３００℃(好ましくは、１８０℃〜２００℃）で、１８時間以内、好ましくは２時間以内の加熱をする乾熱を含むものである。
本発明におけるＲＮＡサンプルが直接的又は間接的にリボヌクレアーゼ（ＲＮａｓｅ）の影響を受ける部位は、例えば電気泳動槽、電気泳動槽用蓋、及びコーム、ゲルトレイ等の電気泳動用ゲル調整用器具、緩衝液貯留容器等の調整用器具を示すものである。
間接的とは、例えば、一体的な電気泳動装置の場合の泳動用電源ユニットのように電気泳動槽と隣接する部位に存在する機器等、ＲＮＡサンプルとは、直接接触はしないが、リボヌクレアーゼ（ＲＮａｓｅ）が付着しており、電気泳動槽内の緩衝液等に混入するおそれがある場合等が示される。
【０００８】
本発明における耐熱性を有する高分子部材は、例えば、ポリフェニレンスルフィド、ポリエーテルエーテルケトン、ポリエーテルイミド、ポリエーテルスルホン、ポリアミドイミド、エコノール、フッ素樹脂、ポリスルホン、ＰＰＯ、シリコン樹脂、エポキシ樹脂、ポリイミドから選ばれるプラスチック材料又は、これらのプラスチックにガラス繊維、カーボン繊維を含むＦＲＰ、強化プラスチックが示され、長期間有効に耐熱性を維持できるものが、繰り返し利用を行う点で好ましい。熱伝導率は、３．５〜１００（１０-4cal/cm・sec・℃）が例示できるが、熱伝導率をより大きくすることで、短時間の乾燥加熱で、リボヌクレアーゼ（ＲNａｓｅ）の失活、除去又は阻害を行うことができる場合がある。又、乾熱処理をより低温、短時間で行うことができれば、熱伝導率は、これ以上であってもよい場合もある。
尚、上記プラスチック材料に２０％〜４０％のガラス繊維の添加により、耐熱性、熱伝導率の向上を行っても良く、電気泳動槽として好適に用いられる場合もある。
【０００９】
その他、無機質フィラー、炭素繊維、アルミナ繊維、金属繊維を添加した繊維強化プラスチックにすることで、熱伝導率、耐熱性の向上を図っても良い場合もある。
電気泳動用器具とは、電気泳動用ゲル、緩衝液、その他、使用時に、ＲＮＡサンプルに接触し得る範囲の部材を示すものであって、例えば、電気泳動用ゲル調整用のトレー、スタンド、コーム、その他、緩衝液供給用容器等が示されるが、これらに限らず、備品的なものなど、ＲＮＡサンプルを取り扱う場合に、リボヌクレアーゼ（ＲＮａｓｅ）の間接的又は直接的に汚染の可能性があるものは、当該器具に含まれる。
【発明の効果】
【００１０】
本発明は、電気泳動槽、電気泳動用ゲル作成用器具、蓋等を、１６０℃を超えた値から３００℃迄（好ましくは１８０℃〜２００℃）で使用可能な耐熱性及び熱伝導率を有する高分子部材で形成することで、リボヌクレアーゼ（ＲNａｓｅ）の失活、失活又は阻害を早く、手軽に行うことができる。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】図１は本発明の実施例を説明する為の図である。
【図２】図２は本発明の実施例を説明する為の図である。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本発明は、少なくとも電気泳動装置の泳動槽、蓋、ゲル調整用トレー等、ＲＮＡサンプルにコンタミ（汚染）が生じ得る部位を、１６０℃を超えた値から３００℃迄好ましくは１８０℃〜２００℃の耐熱性を有する高分子部材で形成すればよい。
【００１３】
又電気泳動用ゲル調整用トレイ等の付随する器具であって、少なくともＲＮＡサンプルを取り扱う際にコンタミが懸念される部材に当該高分子材を用いても良い。
電気泳動装置は、ＲＮＡの状態の確認の為の使用等で用いる場合も多く、手軽で、より簡易的な電気泳動装置が求められ、サブマリン電気泳動装置であって、電気泳動用電源ユニットと着脱可能に一体化される構成が、全体がきわめてコンパクトに構成されており、使用時、蓋と泳動槽に乾熱処理を施してリボヌクレアーゼ（ＲＮａｓｅ）失活、除去又は阻害処理後、泳動用電源を接続して使用可能な状態を容易に形成できる構成が好ましい。
【００１４】
その場合の電気泳動用電源ユニットの筐体も耐熱性を有する上述した高分子部材で形成し、内部の電気回路を、もう一つの筐体内に収容されているか筐体と、装着分離が自在になっていることが、好ましい場合もある。又、内部に断熱材を入れて、電気部品、基板、リード線を断熱保護するものであれば、そのまま乾熱処理を行う場合もある。
又、電気泳動槽が、電気泳動用電源ユニットを全部又は一部を覆うように装着可能な形態、構成を持つものであっても良い。
【００１５】
即ち、簡易型で、一体型の電気泳動装置は、電気泳動用電源ユニットと電気泳動槽、及び電気泳動用蓋が、装着時近接した状態となる為、リボヌクレアーゼ（ＲＮａｓｅ）が、使用者や大気に関連して存在することから、電気泳動用電源の外側筐体を乾熱処理して使用することが好ましい場合もある。
乾熱処理の時間は、耐熱プラスチック材の熱伝導率を高くすることで、装置及び器具全体について、リボヌクレアーゼ（ＲＮａｓｅ）が失活する目標の温度へ達成する時間を短くしてより短時間の処理で済ますことができる場合もある。
電気泳動槽等を乾熱乾燥させる場合、アルミ泊等の金属シートに包む等することで、効率よくリボヌクレアーゼ（ＲＮａｓｅ）の失活等を行うことができる。
【実施例１】
【００１６】
本発明は、電気泳動装置におけるＲＮＡサンプルに影響がある部位のリボヌクレアーゼ（ＲＮａｓｅ）の失活、除去又は阻害を必要とする部位、例えば、電気泳動槽、及び電気泳動槽の上部を覆う泳動槽用の別体又は一体化された蓋、及び電気泳動用ゲルを作成するトレイやコーム類を耐熱性のプラスチック部材で形成したものである。耐熱性のプラスチック、又は樹脂とは、具体的には、１６０℃を超えた値から３００℃迄、好ましくは１８０℃〜２００℃の耐熱性を有する高分子部材であって、例えば、ポリフェニレンスルフィド、PEEK（ポリエーテルエーテルケトン）、ポリエーテルイミド、ポリエーテルスルホン、ポリアミドイミド、エコノール、PTFE（ポリテトラフルオロエチレン(４フッ化)）、 PFA（テトラフルオロエチレン・パーフルオロアルキルビニルエーテル共重合体）、 FEP（テトラフルオロエチレン・ヘキサフルオロプロピレン共重合体(４．６フッ化)）、 PCTFE（ポリクロロトリフルオロエチレン(３フッ化)）、 ETFE（テトラフルオロエチレン・エチレン共重合体）、 ECTFE（クロロトリフルオエチレン・エチレン共重合体）等のフッ素樹脂、ポリスルホン、ＰＰＯ（変性ポリフェニレンエーテル）、ＰＰＳ（ポリフェニレンサルファイド）、シリコン樹脂、エポキシ樹脂、ＭＭＣ、ポリイミド、ウルテム、ＰＰＳＵ樹脂、ＰＥＫＥＫＫ（Poly ether ketone ether ketone ketone）、デルリン（登録商標）等の樹脂から選ばれるプラスチック材料が示される。  
【００１７】
又、ＰＰＳガラス繊維含有樹脂、ＰＥＥＫガラス繊維含有樹脂等のＦＲＰで示される、ガラス繊維、カーボン繊維等を含むプラスチックであってもよい。
この中で好ましくは、実施例としてPTFE（フッ素樹脂テフロン（登録商標））又はPEEK（ポリエーテルエーテルケトン）を示す。
これらの耐熱性プラスチックは、長期使用可能な温度が２５０℃〜２６０℃前後で、しかも加工の容易性、耐薬品性を備えている点で好ましく、１６０℃〜２００℃、又は２００℃以上で2時間以内の乾熱処理によりリボヌクレアーゼ（ＲＮａｓｅ）を失活させることができる。
【００１８】
図1及び図２は、本実施例に基づいて形成される簡易電気泳動装置及び電気泳動用ゲル調整用の器具の一例を示す。
図１は、電気泳動装置構成、図２はゲルメーカー器具のそれぞれの一例を示している。
図１で示す電気泳動装置は、泳動用電源ユニット１３と泳動槽１２が一体的に組み合わせられたサブマリン型の電気泳動装置を示す。泳動用電源ユニット１３は、半波整流、全波整流、パルス出力を行うための電気回路を内蔵している。泳動用電源ユニット１３は、リボヌクレアーゼ（ＲＮａｓｅ）の失活等の対象となる場合は、外側の筐体に対し、内部電気回路が内部の別の筐体に収容され、カセット式で分離可能とし、外側筐体を乾熱処理する際、内部電気回路を分離し、処理後、装着可能な構成であってもよい。
【００１９】
１３１は、操作部であり、プッシュ型電源スイッチ、泳動出力切り替え用スライドスイッチ、蓋部１１が泳動槽１２上に装着されると、接触、又は非接触で状態を検出する検出部が形成されている。
１３２は、泳動用電源ユニット１３と内部電気回路が装着と分離を可能とする装着分離部であり、内部電気回路が引き抜き分離可能な状態としてもよく、乾熱処理の際、装着分離部１３２の部分を引き抜くと、内部の電源回路が取り外され、泳動用電源ユニットの筐体を乾熱可能とする。
装着分離部１３２は、泳動用電源ユニット１３を乾熱処理の対象とする場合に設けられる場合がある。
【００２０】
又、泳動槽１２が、泳動用電源ユニット１３に一部を覆われて装着可能な構成にしてもよく、例えば、図１の点線で示したカバー部１２１が示される。
１２１は、カバー部であり、泳動用電源ユニット１３が装着された際、上部を泳動槽１２と同一の部材で形成することが好ましい。カバー部１２１は、上部だけでなく、泳動用電源ユニット１３の全部又は、側面１３３等の一部を覆う状態であっても良い。
尚、その際、泳動用電源ユニット１３の上部に形成された電源スイッチ、出力切り替えスイッチ、蓋部１１との係合部等の操作部１３１と同一の機能をするための伝達部１２２を備えていても良い。伝達部１２２は、例えば、伝達部１２２の電源スイッチに相当する部位を上から押すと、泳動用電源ユニット１３の電源スイッチを押した変形状態が伝達して、押圧状態を形成したり、泳動用電源ユニット１３のスライド状のスイッチも、伝達部１２２のスライド部をスライドさせると、泳動用電源ユニット１３上のスライドスイッチも連動してスライドする状態の機構を備えても良い。
【００２１】
又、カバー部１２１が上面のみの場合は、開放された泳動槽の部位、例えば泳動用電源ユニット１３の側面１３３に電源スイッチ類を配置した泳動用電源ユニットで合っても良い。この側面１３３に相当する泳動槽１２の部位もカバー部材で覆われる場合は、その他の開放部位に泳動用電源ユニットの操作用スイッチ類を配置したものであってもよい  。
【００２２】
カバー部１２１を形成する場合は、泳動用電源ユニット１３の筐体に耐熱性が無くても良い場合もある。
泳動槽１２は、中央に底面から所定の高さを備え、底面と平行な平面な状態の電気泳動用ゲルを置く為の栽置部１２ａを持ち、栽置部１２ａを中心として両側面に線状又は棒状で白金、プラチナ等の電極１２ｂが平行に設置されている構成を備え、泳動槽１２の上面を蓋部１１で覆い使用される。
一体型で簡易型の電気泳動装置は、泳動用電源ユニット１３も乾熱処理をするように構成したり、泳動用電源ユニットの一部又は、全部を覆うカバー部１２１を形成することで、泳動用電源ユニット１３が直接的に関連するリボヌクレアーゼ（ＲＮａｓｅ）のコンタミから、泳動槽内を保護できる。
カバー部１２１及び装着分離部１３２は、電気泳動槽１２と泳動用電源ユニット１３が隣接するために、泳動用電源ユニット１３がリボヌクレアーゼ（ＲＮａｓｅ）によるコンタミと関連性がある場合、どちらか一方、又は両方を備えることが好ましい。
【００２３】
図２は、電気泳動用ゲル作成用の器具で、サンプルを供給する凹部をゲル表面に形成する櫛歯状のコーム２１、シート状の電気泳動用ゲルを調整する時に使用される電気泳動用ゲル調整用トレー２２、スタンド２３を示す。
使用前、図１で示す蓋部１１、泳動槽１２及び図２で示すコーム２１、電気泳動用ゲル調整用トレー２２，スタンド２３を例えばアルミシート等の金属シートで包み、乾熱滅菌器で、160℃〜300℃、好ましくは180℃〜200℃で好ましくは２時間以内の加熱を行う。
乾熱処理を行うことで、リボヌクレアーゼ（ＲＮａｓｅ）を失活、除去又は阻害をおこなうことができ、ＲＮＡサンプルの電気泳動を安定して行うことができる。
【産業上の利用可能性】
【００２４】
本発明は、簡易型の電気泳動装置におけるＲＮＡサンプルの安定した定量評価を行うことを可能とし、関連する様々なアプリケーションの作業効率を高め、生体高分子に関連する産業での効率的利用が図られる。
【符号の説明】
【００２５】
１１  蓋部          
１２  泳動槽
１３  泳動用電源ユニット
２１  コーム
２２  電気泳動用ゲル調整用トレー
２３  スタンド
【図１】
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【図２】
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