(57)【要約】【課題】体液分析によって有用な情報を得る。【解決手段】体液検体を分析可能な検体分析装置であって、体液検体と、界面活性剤を含む希釈液と、核酸を染色する試薬と、を混合して、有核細胞の核酸が染色され、かつ赤血球が溶血した測定試料を調製する調製部３０と、測定試料に含まれる粒子に光を照射し、粒子から発せられた散乱光及び蛍光を受光して検出信号を出力する検出部５０と、検出信号に基づいて、体液検体中の白血球及び真菌を計数する処理部７０と、を備える。【選択図】図１
2016048203.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
体液検体を分析可能な検体分析装置であって、
体液検体と、界面活性剤を含む希釈液と、核酸を染色する試薬と、を混合して、有核細胞の核酸が染色され、かつ赤血球が溶血した測定試料を調製する調製部と、
前記測定試料に含まれる粒子に光を照射し、前記粒子から発せられた散乱光及び蛍光を受光して検出信号を出力する検出部と、
前記検出信号に基づいて、前記体液検体中の白血球及び真菌を計数する処理部と、
を備える検体分析装置。
【請求項２】
前記処理部は、前記検出信号に基づいて、前記体液検体中の白血球より大きい有核細胞を計数する
請求項１に記載の検体分析装置。
【請求項３】
前記処理部は、前記検出信号に基づいて、前記体液検体中の白血球及び白血球より大きい有核細胞を、少なくとも前記検体中の真菌又は細菌から区別し、白血球及び白血球より大きい有核細胞の総数を求める
請求項１又は２に記載の検体分析装置。
【請求項４】
前記処理部は、核酸量を反映する蛍光に基づく第１特徴パラメータを用いて白血球を計数し、前記第１特徴パラメータとは異なり、かつ核酸量を反映する蛍光に基づく第２特徴パラメータを用いて真菌を計数する
請求項１〜３のいずれか一項に記載の検体分析装置。
【請求項５】
前記検出信号は、前記粒子から発せられた蛍光を受光して出力された蛍光信号を含み、
前記第１特徴パラメータは、前記蛍光信号の蛍光パルス面積であり、
前記第２特徴パラメータは、前記蛍光信号の蛍光強度である
請求項４に記載の検体分析装置。
【請求項６】
前記検出部は、第１の検出感度と、前記第１の検出感度よりも高い第２の検出感度とで前記検出信号を出力可能であり、
前記処理部は、前記第１の検出感度で出力された前記検出信号から前記第１特徴パラメータを取得し、前記第２の検出感度で出力された前記検出信号から前記第２特徴パラメータを取得する
請求項４又は５に記載の検体分析装置。
【請求項７】
前記処理部は、前記白血球を、単核白血球及び多形核白血球に分類する
請求項１〜６のいずれか１項に記載の検体分析装置。
【請求項８】
前記処理部は、前記検出信号に基づいて、前記検体中の細菌を計数する
請求項１〜７のいずれか１項に記載の検体分析装置。
【請求項９】
前記検出部は、第１の検出感度と、前記第１の検出感度よりも高い第２の検出感度と、前記第２の検出感度より高い第３の検出感度とで蛍光を検出して前記検出信号を出力可能であり、
前記処理部は、前記第１の検出感度で出力された前記検出信号の特徴パラメータを用いて白血球を計数し、前記第２の検出感度で出力された前記検出信号の特徴パラメータを用いて真菌を計数し、前記第３の検出感度で出力された前記検出信号の特徴パラメータを用いて細菌を計数する
請求項８に記載の検体分析装置。
【請求項１０】
前記調製部は、前記体液検体の他の一部と試薬とを混合して、未溶血の測定試料を調製し、
前記検出部は、未溶血の前記測定試料に含まれる粒子に光を照射し、前記粒子から発せられた散乱光および蛍光を受光して検出信号を出力し、
前記処理部は、前記未溶血の測定試料の前記検出信号に基づいて、前記体液検体中の赤血球を計数する
請求項１〜９のいずれか一項に記載の検体分析装置。
【請求項１１】
前記処理部は、未溶血の前記測定試料の前記検出信号に基づいて、前記体液検体中の結晶を計数する
請求項１０に記載の検体分析装置。
【請求項１２】
前記検体分析装置は、尿を分析する尿分析モードと、血液及び尿以外の体液を分析する体液分析モードと、で動作可能であり、
前記処理部は、前記体液分析モードにおいて、前記尿分析モードとは異なる計数項目に基づいて測定試料中の粒子を分類して計数する
請求項１〜１１のいずれか一項に記載の検体分析装置。
【請求項１３】
前記処理部は、体液検体に含まれる粒子の計数結果に基づいて、髄膜炎、関節炎または体腔膜の炎症に関する判定を行う
請求項１〜１２のいずれか１項に記載の検体分析装置。
【請求項１４】
前記処理部は、複数の種類から前記検体としての体液検体の種類の指定を受け付け、前記体液検体の種類毎に設定された判定条件にしたがって、炎症に関する判定を行う
請求項１〜１２のいずれか１項に記載の検体分析装置。
【請求項１５】
体液検体と、界面活性剤を含む希釈液と、核酸を染色する試薬と、を混合して、有核細胞の核酸が染色され、かつ赤血球が溶血した測定試料を調製し、
前記測定試料に含まれる粒子に光を照射し、前記粒子から発せられた散乱光及び蛍光を受光して検出信号を出力し、
前記検出信号に基づいて、前記体液検体中の白血球及び真菌を計数する、
検体分析方法。
【請求項１６】
尿検体を分析する尿分析モードと、血液及び尿以外の体液検体を分析可能な体液分析モードとで動作可能な検体分析装置であって、
体液検体と試薬とを混合して測定試料を調製する調製部と、
前記測定試料に含まれる粒子に光を照射し、前記粒子から発せられた光を受光して検出信号を出力する検出部と、
前記検出部から出力された検出信号に基づいて、前記体液検体中の白血球を単核白血球及び多形核白血球に分類し、かつ、前記体液検体中の細菌を計数する処理部と、
を備える検体分析装置。
【請求項１７】
尿検体を分析する尿分析モードと、血液及び尿以外の体液検体を分析可能な体液分析モードとで動作可能な検体分析装置であって、
体液検体と試薬とを混合して測定試料を調製する調製部と、
前記測定試料に含まれる粒子に光を照射し、前記粒子から発せられた光を受光して検出信号を出力する検出部と、
前記検出部から出力された検出信号に基づいて、前記体液検体中の白血球を単核白血球及び多形核白血球に分類し、かつ、前記体液検体中の真菌を計数する処理部と、
を備える検体分析装置。
【請求項１８】
血液及び尿以外の体液検体を分析可能な検体分析装置であって、
体液検体と試薬とを混合して測定試料を調製する調製部と、
前記測定試料に含まれる粒子を検出して信号を出力する検出部と、
前記検出部から出力された信号に基づいて、前記体液検体中に含まれる複数種類の粒子の分析を行い、異常値を示した粒子の種類の組み合わせに基づいて、疑われる炎症の判定を行う処理部と、
を備える検体分析装置。
【請求項１９】
血液及び尿以外の体液検体を分析可能な検体分析装置であって、
体液検体と試薬とを混合して測定試料を調製する調製部と、
前記測定試料に含まれる粒子を検出して信号を出力する検出部と、
前記検出部から出力された信号に基づいて、前記体液検体中に含まれる粒子の分析を行う分析処理と、前記体液検体の種類の指示を受け付け、前記体液検体の種類毎に設定された判定条件を用いて、前記分析処理の結果から疑われる炎症の判定を行う判定処理と、を行う処理部と、
を備える検体分析装置。
【請求項２０】
血液及び尿以外の体液検体を分析可能な検体分析装置であって、
前記体液検体から、未溶血の測定試料と、赤血球が溶血され、かつ有核細胞の核酸が染色された第２測定試料とを調製する調製部と、
未溶血の測定試料および赤血球が溶血した測定試料のそれぞれに含まれる粒子を検出して信号を出力する検出部と、
前記検出部から出力された信号に基づいて、未溶血の測定試料に含まれる赤血球と、赤血球が溶血した測定試料に含まれる白血球とを計数し、前記赤血球数が所定数以上である場合に、前記赤血球数に基づいて前記白血球数を補正する処理部と、
を備える検体分析装置。
【請求項２１】
体液検体を分析可能な検体分析装置であって、
体液検体と核酸を染色する試薬と、を混合して測定試料を調製する調製部と、
前記測定試料に含まれる粒子に光を照射し、前記粒子から発せられた光を受光して検出信号を出力する検出部と、
前記検出部から出力された検出信号から複数の特徴パラメータを取得し、粒子の大きさ及び核酸量を反映する複数の特徴パラメータの第１の組み合わせに基づいて前記体液検体中の白血球を少なくとも大型の有核細胞及び真菌から区別し、前記第１の組み合わせとは異なる複数の特徴パラメータの第２の組み合わせに基づいて、白血球を少なくとも単核白血球と多形核白血球とに分類する処理部と、
を備える検体分析装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、検体分析装置及び検体分析方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
特許文献１は、自動血液分析器によって体液中の白血球、赤芽球、及び細菌を計数する方法を開示している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特表２０１１−５２９１８６号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
特許文献１の技術では、体液中の白血球、赤芽球、及び細菌を計数することができるにすぎない。適切な診断及び治療のために、体液分析によって更に有用な情報を得ることが望まれる。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明の一の態様は、体液検体を分析可能な検体分析装置であって、体液検体と、界面活性剤を含む希釈液と、核酸を染色する試薬と、を混合して、有核細胞の核酸が染色され、かつ赤血球が溶血した測定試料を調製する調製部と、測定試料に含まれる粒子に光を照射し、粒子から発せられた散乱光及び蛍光を受光して検出信号を出力する検出部と、検出信号に基づいて、体液検体中の白血球及び真菌を計数する処理部と、を備える検体分析装置である。
【０００６】
本発明の他の態様は、体液検体と、界面活性剤を含む希釈液と、核酸を染色する試薬と、を混合して、有核細胞の核酸が染色され、かつ赤血球が溶血した測定試料を調製し、測定試料に含まれる粒子に光を照射し、粒子から発せられた散乱光及び蛍光を受光して検出信号を出力し、検出信号に基づいて、前記体液検体中の白血球及び真菌を計数する、検体分析方法である。
【０００７】
本発明の他の態様は、尿検体を分析する尿分析モードと、血液及び尿以外の体液検体を分析可能な体液分析モードとで動作可能な検体分析装置であって、体液検体と試薬とを混合して測定試料を調製する調製部と、測定試料に含まれる粒子に光を照射し、粒子から発せられた光を受光して検出信号を出力する検出部と、検出部から出力された検出信号に基づいて、体液検体中の白血球を単核白血球及び多形核白血球に分類し、かつ、体液検体中の細菌を計数する処理部と、を備える検体分析装置である。
【０００８】
本発明の他の態様は、尿検体を分析する尿分析モードと、血液及び尿以外の体液検体を分析可能な体液分析モードとで動作可能な検体分析装置であって、体液検体と試薬とを混合して測定試料を調製する調製部と、測定試料に含まれる粒子に光を照射し、粒子から発せられた光を受光して検出信号を出力する検出部と、検出部から出力された検出信号に基づいて、体液検体中の白血球を単核白血球及び多形核白血球に分類し、かつ、体液検体中の真菌を計数する処理部と、を備える検体分析装置である。
【０００９】
本発明の他の態様は、血液及び尿以外の体液検体を分析可能な検体分析装置であって、体液検体と試薬とを混合して測定試料を調製する調製部と、測定試料に含まれる粒子を検出して信号を出力する検出部と、検出部から出力された信号に基づいて、体液検体中に含まれる複数種類の粒子の分析を行い、異常値を示した粒子の種類の組み合わせに基づいて、疑われる炎症の判定を行う処理部と、を備える検体分析装置である。
【００１０】
本発明の他の態様は、血液及び尿以外の体液検体を分析可能な検体分析装置であって、体液検体と試薬とを混合して測定試料を調製する調製部と、測定試料に含まれる粒子を検出して信号を出力する検出部と、検出部から出力された信号に基づいて、体液検体中に含まれる粒子の分析を行う分析処理と、体液検体の種類の指示を受け付け、体液検体の種類毎に設定された判定条件を用いて、分析処理の結果から疑われる炎症の判定を行う判定処理と、を行う処理部と、を備える検体分析装置である。
【００１１】
本発明の他の態様は、血液及び尿以外の体液検体を分析可能な検体分析装置であって、体液検体から、未溶血の測定試料と、赤血球が溶血され、かつ有核細胞の核酸が染色された第２測定試料とを調製する調製部と、未溶血の測定試料および赤血球が溶血した測定試料のそれぞれに含まれる粒子を検出して信号を出力する検出部と、検出部から出力された信号に基づいて、未溶血の測定試料に含まれる赤血球と、赤血球が溶血した測定試料に含まれる白血球とを計数し、赤血球数が所定数以上である場合に、赤血球数に基づいて白血球数を補正する処理部と、を備える検体分析装置である。
【００１２】
本発明の他の態様は、体液検体を分析可能な検体分析装置であって、体液検体と核酸を染色する試薬と、を混合して測定試料を調製する調製部と、測定試料に含まれる粒子に光を照射し、粒子から発せられた光を受光して検出信号を出力する検出部と、検出部から出力された検出信号から複数の特徴パラメータを取得し、粒子の大きさ及び核酸量を反映する複数の特徴パラメータの第１の組み合わせに基づいて体液検体中の白血球を少なくとも大型の有核細胞及び真菌から区別し、第１の組み合わせとは異なる複数の特徴パラメータの第２の組み合わせに基づいて、白血球を少なくとも単核白血球と多形核白血球とに分類する処理部と、を備える検体分析装置である。
【発明の効果】
【００１３】
本発明によれば、体液分析によって、適切な診断及び治療のための有用な情報が得られる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】検体分析装置の構成図。
【図２】調製部及び光学検出器の構成を示す図。
【図３】光学検出器の構成を示す図。
【図４Ａ】光学信号の強度の説明図。
【図４Ｂ】光学信号のパルス幅の説明図。
【図４Ｃ】光学信号のパルス面積の説明図。
【図５】処理部の構成を示すブロック図。
【図６】体液分析モードにおける検体測定処理を示すフローチャート。
【図７】体液検体の種類の入力するための情報入力画面。
【図８】体液測定試料調製処理を示すフローチャート。
【図９Ａ】シースフローの模式図。
【図９Ｂ】シースフローの模式図。
【図１０】測定データ解析処理を示すフローチャート。
【図１１】蛍光強度−前方散乱光強度領域における赤血球及び結晶の分布図。
【図１２Ａ】蛍光パルス面積−前方散乱光パルス幅領域における白血球、異型細胞、及び上皮細胞の分布図。
【図１２Ｂ】白血球の検出結果の一例を示すスキャッタグラム。
【図１３】側方散乱光強度−前方散乱光強度領域における単核白血球及び多形核白血球の分布図。
【図１４Ａ】単核白血球及び多形核白血球の検出結果を示すスキャッタグラム。
【図１４Ｂ】単核白血球及び多形核白血球の検出結果を示すスキャッタグラム。
【図１４Ｃ】単核白血球及び多形核白血球の検出結果を示すスキャッタグラム。
【図１５Ａ】蛍光強度−前方散乱光強度領域のおける真菌の分布図。
【図１５Ｂ】真菌の検出結果の一例を示すスキャッタグラム。
【図１６】蛍光強度−前方散乱光強度領域における細菌の分布図。
【図１７】各粒子のＤＮＡ量と粒子径との関係を説明するための図。
【図１８Ａ】大型の有形成分から得られる蛍光信号のパルス面積の説明図。
【図１８Ｂ】小型の有形成分から得られる蛍光信号のパルス面積の説明図。
【図１９】分類計数結果の解析・表示処理を示すフローチャート。
【図２０】サスペクトメッセージを含む判定結果表示画面。
【図２１】赤血球補正メッセージを含む判定結果画面。
【図２２】赤血球及び結晶を計数するために用いられるスキャッタグラム。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
以下、本発明の好ましい実施の形態を、図面を参照しながら説明する。
【００１６】
［１．検体分析装置の構成］
図１に示す検体分析装置１００は、検体１１に含まれる有形成分を分析する。検体分析装置１００は、主な構成として、調製部３０と、検出部５０と、処理部７０と、を備えている。調製部３０は、検体１１と試薬とを混合して測定試料を調製する。検出部５０は、測定試料から有形成分の情報を検出する。処理部７０は、検出部５０による検出結果に基づいて処理を行う。
【００１７】
検体分析装置１００は、尿分析モード及び体液分析モードのいずれかで動作可能である。尿分析モードが設定されている場合には、検体分析装置１００は、尿検体を内部に取り込み、尿中の有形成分を分析する。尿中の有形成分とは、赤血球、白血球、上皮細胞、円柱、細菌、真菌（未出芽）、精子、トリコモナス等である。
【００１８】
体液分析モードが設定されている場合には、検体分析装置１００は、体液検体を内部に取り込み、体液中の有形成分を分析する。体液中の有形成分とは、赤血球、結晶、白血球、大型細胞(Ｌａｒｇｅ  Ｃｅｌｌ)、真菌、細菌等である。大型細胞とは、白血球よりも大きい有核細胞である。大型細胞は、体腔内膜又は内臓の腹膜から剥がれることなどにより、体液中に存在する。大型細胞には、例えば、上皮細胞、組織球（Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ）、腫瘍細胞等が含まれる。
【００１９】
体液とは、生体から採取され、細胞を含有する液体を意味する。体液には、髄液、脳脊髄液（Ｃｅｒｅｂｒｏｓｐｉｎａｌ  ｆｌｕｉｄ（ＣＳＦ））、体腔液（胸水、腹水、心嚢液）、関節液（滑液、滑液嚢、腱鞘に存在する液）、眼房液、房水等が含まれる。体液には、腹膜透析（ＣＡＰＤ）の透析液や腹腔内洗浄液なども含まれる。一般的な定義による体液には、血液および尿が含まれるが、本実施形態の説明においては、体液分析モードが対象とする脳脊髄液（ＣＳＦ）や関節液等の体液と、尿および血液とを区別するため、「体液」または「体液検体」という場合、血液及び尿を含まないものとする。特許請求の範囲においては、特に明示しない限り、「体液」とは血液および尿を含む。「検体」とは、血液、尿および体液を含む。
【００２０】
検体分析装置１００の測定部１２は、検体分配部２０と、調製部３０と、検出部５０と、マイクロコンピュータ２１ａと、記憶装置２１ｂと、ＬＡＮアダプタ２１ｃを備える。測定部１２は、ＬＡＮアダプタ２１ｃを介して処理部１３に接続されている。
【００２１】
検出部５０は、光学検出器２２ａ、増幅回路２２ｂ、フィルタ回路２３、Ａ／Ｄコンバータ２４、ディジタル信号処理回路２５及びメモリ２６を備えている。
【００２２】
図２に示すように、調製部２３０は、検体分配部２０と接続されている。調製部２３０は、検体分配部２０によって分注された検体に試薬を混合して測定試料を調製する。検体分配部２０は、吸引管１９とシリンジポンプとを備える。検体分配部２０は、試験管１０に入った検体１１を、吸引管１９を介して吸引し、調製部３０へ分注する。調製部３０は、第１反応槽３０ｕと第２反応槽３０ｂとを備えている。検体分配部２０は、反応槽３０ｕ及び反応槽３０ｂのそれぞれに定量されたアリコートを分配する。
【００２３】
反応槽３０ｕにおいて、分配されたアリコートは、希釈液としての第１試薬３１ｕ及び染料を含む第３試薬３２ｕと混合される。第３試薬３２ｕに含まれる色素により、検体中の有形成分が染色される。尿分析モードにおいて、反応槽３０ｕにおいて調製された試料は、赤血球、白血球、上皮細胞、円柱等の比較的大きい尿中有形成分を分析するための第１測定試料として使用される。体液分析モードにおいて、反応槽３０ｕにおいて調製された試料は、体液中の赤血球及び結晶を分析するための第３測定試料として使用される。以下では、赤血球、円柱、結晶など、粒子の基本構造として核酸を有さない粒子を無核成分という。
【００２４】
反応槽３０ｂにおいて、分配されたアリコートは、希釈液としての第２試薬３１ｂ及び染料を含む第４試薬３２ｂと混合される。第２試薬３１ｂは、溶血作用を有する。第４試薬３２ｂに含まれる色素により、検体中の有形成分が染色される。尿分析モードにおいて、反応槽３０ｂにおいて調製された試料は、尿中の細菌などを分析するための第２測定試料となる。体液分析モードにおいて、反応槽３０ｂにおいて調製された試料は、体液中の白血球、大型細胞、真菌、及び細菌を分析するための第４測定試料となる。以下、白血球、大型細胞、真菌、細菌など、粒子の基本構造として核酸を有する粒子を有核成分という。
【００２５】
反応槽３０ｕからは、検出部５０が有する光学検出器２２ａのフローセル５１へとチューブが延設されており、反応槽３０ｕにおいて調製された測定試料がフローセル５１へと供給可能となっている。反応槽３０ｕの出口には、電磁弁３３ａが設けられている。反応槽３０ｂからもチューブが延設されており、このチューブが反応槽３０ｕから延びたチューブの途中に連結されている。反応槽３０ｂにおいて調製された測定試料がフローセル５１へと供給可能である。反応槽３０ｕの出口には、電磁弁３３ｂが設けられている。
【００２６】
反応槽３０ｕ，３０ｂからフローセル５１まで延設されたチューブは、フローセル５１の手前で分岐している。チューブの分岐先がシリンジポンプ３４ａに接続されている。シリンジポンプ３４ａと分岐点との間には、電磁弁３３ｃが設けられている。
【００２７】
反応槽３０ｕ，３０ｂのそれぞれから延設されたチューブの接続点から、前記分岐点までの途中で、チューブはさらに分岐している。チューブの分岐先がシリンジポンプ３４ｂに接続されている。シリンジポンプ３４ｂへ延びるチューブの分岐点と、前述の接続点との間には、電磁弁３３ｄが設けられている。
【００２８】
調製部３０には、シース液を収容するシース液収容部３５が設けられている。シース液収容部３５はチューブによってフローセル５１に接続されている。シース液収容部３５にはコンプレッサ３５ａが接続されている。コンプレッサ３５ａが駆動されると、シース液収容部３５に圧縮空気が供給され、シース液収容部３５からフローセル５１へとシース液が供給される。
【００２９】
反応槽３０ｕからのフローセル５１への測定試料の移送は次のようにして行われる。マイクロコンピュータ２１ａは、電磁弁３３ｕ、３３ｄ、３３ｃを開く。この状態で、マイクロコンピュータ２１ａは、シリンジポンプ３４ａを駆動し、反応槽３０ｕの測定試料を電磁弁３３ｄと電磁弁３３ｃの間の流路に充填する。マイクロコンピュータ２１ａは、電磁弁３３ｄ、３３ｃを閉じ、シリンジポンプ３４ｂを駆動し、流路に充填した測定試料をフローセル５１側へ押し出す。これにより、シース液に包まれた測定試料の流れがフローセル５１内に形成される。反応槽３０ｂから測定試料を移送する場合は、電磁弁３３ｕを閉じ、電磁弁３３ｂを開き、反応槽３０ｂ内の測定試料を流路に充填する。それ以降の処理は同様である。マイクロコンピュータ２１ａは、シリンジポンプ３４ｂの押し出し速度を制御することで、単位時間あたりにフローセル５１を流れる測定試料の量を調節することができる。
【００３０】
図３に示すように、光学検出器２２ａは、コンデンサレンズ５２と集光レンズ５４，５６と、を有している。半導体レーザ光源５３は、フローセルを流れる試料流に平行な直線偏光の光を放射する。コンデンサレンズ５２は、半導体レーザ光源５３から放射されたレーザ光をフローセル５１に集光する。集光レンズ５４は、測定試料中の有形成分である粒子から発せられる前方散乱光を前方散乱光受光部５５に集光する。前方散乱光受光部５５は、前方散乱光を検出する。他の集光レンズ５６は、測定試料中の有形成分から発せられる側方散乱光と蛍光とをダイクロイックミラー５７ａに集光する。ダイクロイックミラー５７ａは、側方散乱光をハーフミラー５７ｂ側へ反射し、蛍光を蛍光受光部５９の方へ透過させる。蛍光受光部５９は蛍光を検出する。
【００３１】
ハーフミラー５７ｂは、無偏光タイプである。ハーフミラー５７ｂによって、側方散乱光は２分割される。ハーフミラー５７ｂを透過した側方散乱光は、側方散乱光受光部５８ａにより検出される。ハーフミラー５７ｂにより反射された側方散乱光は、偏光フィルタ５７ｃに入射する。
【００３２】
偏光フィルタ５７ｃは、フローセル５１を流れる測定試料の流れ方向に平行な偏光（半導体レーザ光源５３から放射された光と同じ偏光状態の光）を遮断し、垂直な偏光方向を通過させる。偏光フィルタ５７ｃを通過した側方散乱光を、以下、「偏光解消側方散乱光」と称する。偏光解消側方散乱光受光部５８ｂは、偏光解消側方散乱光を検出する。
【００３３】
前方散乱光受光部５５、側方散乱光受光部５８ａ、偏光解消側方散乱光５８ｂ及び蛍光受光部５９は、受光した光信号を検出信号である電気信号に変換し、それぞれ、前方散乱光信号（ＦＳＣ）、側方散乱光信号（ＳＳＣ）、偏光解消側方散乱光信号（ＰＳＳＣ）、及び蛍光信号（ＦＬ）を出力する。
【００３４】
これらの出力は、図示しないプリアンプにより増幅された後、次段の処理に供される。前方散乱光受光部５５、側方散乱光受光部５８ａ、偏光解消側方散乱光受光部５８ｂ、及び蛍光受光部５９のそれぞれは、駆動電圧を切り替えることにより、低感度出力と高感度出力との切り替えが可能である。この感度の切り替えは、後述のマイクロコンピュータ２１ａにより行われる。
【００３５】
本実施形態では、前方散乱光受光部５５としてフォトダイオードが用いられ、側方散乱光受光部５８ａ、偏光解消側方散乱光受光部５８ｂ及び蛍光受光部５９としてフォトマルチプライヤチューブが用いられている。前方散乱光受光部５５としてフォトマルチプライヤチューブを用いてもよいし、側方散乱光受光部５８ａ、偏光解消側方散乱光受光部５８ｂ、及び蛍光受光部５９としてフォトダイオードを用いてもよい。蛍光受光部５９から出力された蛍光信号（ＦＬ）は、図示しないプリアンプにより増幅された後、分岐する二つの信号チャンネルに与えられる。
【００３６】
蛍光信号（ＦＬ）に関する二つの信号チャンネルは、それぞれ後述する増幅回路２２ｂ（図１参照）に接続されている。一方の信号チャンネルに入力された蛍光信号は、増幅回路２２ｂにより高感度に増幅される。このチャンネルに入力される蛍光信号を第１蛍光信号（ＦＬＨ）と呼ぶ。他方の信号チャンネルに入力された蛍光信号は、増幅回路２２ｂにより低感度に増幅される。このチャンネルに入力される蛍光信号を第２蛍光信号（ＦＬＬ）と呼ぶ。
【００３７】
図１に戻って、増幅回路２２ｂは、光学検出部２２ａから出力されたＦＳＣ、ＳＳＣ、ＰＳＳＣ、ＦＬＨ、ＦＬＬの５種類の信号を増幅する。
【００３８】
フィルタ回路２３は、増幅回路２２ｂによって増幅された信号にフィルタ処理を施す。Ａ／Ｄコンバータ２４は、フィルタ回路によって処理された信号をディジタル信号に変換する。ディジタル信号処理回路２５は、各光学信号から解析用パラメータを抽出する。抽出された特徴パラメータは、測定データとしてメモリ２６に格納される。
【００３９】
ディジタル信号処理回路２５によって抽出される解析用パラメータについて、図４Ａを参照して説明する。
【００４０】
解析用パラメータとしては、各光学信号ＦＳＣ，ＳＳＣ，ＰＳＳＣ，ＦＬＨ，ＦＬＬについて、「強度」、「パルス幅」及び「パルス面積」の３種類がある。強度はＰで表される。パルス幅はＷで表される。パルス面積はＡで表される。上述したように、粒子がフローセル５１を通過する度に、各受光部から出力される電気信号は、粒子の特性に応じてパルス状に変化する。
【００４１】
光学信号の強度は、図４Ａに示すようなパルスのピークの高さＰとして得られる。光学信号のパルス幅は、図４Ｂに示すように、パルスが所定の閾値を超えたときの時刻Ｔ１から閾値を下回った時刻Ｔ２までの間隔Ｗとして得られる。光学信号のパルス面積は、図４Ｃに示すように、信号のパルス波形線Ｌ１と、パルスの両側において光学信号強度が所定の閾値を取るときの時刻を示す直線Ｌ２，Ｌ３と、光学信号強度の値が０を示す直線Ｌ４とで囲まれる領域（図中斜線を付した領域）ＰＡの面積、すなわち、信号強度の時間積分値として得られる。
【００４２】
ここに示した解析用パラメータの抽出方法は一例に過ぎず、異なる抽出方法を用いることができる。パルス面積は、パルスの時間曲線下面積を反映する値であれば近似値であってもよく、時間積分値には限られない。例えば、パルス面積は、パルス幅とピークの高さの積であってもよいし、パルス幅とピークの高さから求めた三角形の面積であってもよい。時間積分値を抽出する形態において、底辺は強度が０の直線でなくてもよく、適宜設定できる。例えば、図４Ｃに示した所定の閾値を底辺としてもよいし、あるいは、シース液のみをフローセル５１に流したときのパルスの値を基準値として、それを底辺としてもよい。
【００４３】
図２を再び参照して、第１〜第４試薬について詳細に説明する。第１試薬３１ｕは、緩衝剤を主成分とする試薬である。第１試薬３１ｕは、赤血球を溶血させずに安定した蛍光信号を得ることができるように浸透圧補償剤を含有している。第１試薬３１ｕの浸透圧は、分類測定に適するような浸透圧となるよう１００〜６００ｍＯｓｍ／ｋｇに調整されている。第１試薬３１ｕは、尿中の赤血球に対する溶血作用を有していない。
【００４４】
第２試薬３１ｂは、第１試薬３１ｕと異なり、溶血作用を有している。これは、第４試薬３２ｂの真菌及び細菌の細胞膜への通過性を高めて染色を早く進行させるためである。さらに、粘液糸、赤血球破片などの夾雑物を収縮させるためでもある。第２試薬３１ｂは、溶血作用を獲得するために界面活性剤を含む。界面活性剤は、アニオン、ノニオン、カチオンなど種々用いられるが、カチオン系界面活性剤が特に好適である。界面活性剤により真菌及び細菌の細胞膜にダメージを与えることができるため、第４試薬３２ｂが含有する色素により効率よく真菌及び細菌などの有核成分に含まれる核酸を染色することができる。その結果、真菌及び細菌の測定を短時間の染色処理で行うことができる。
【００４５】
第２試薬３１ｂは、界面活性剤ではなく、酸性又は低ｐＨに調整されることで溶血作用を獲得してもよい。低ｐＨとは、第１試薬３１ｕよりもｐＨが低いことをいう。第１試薬３１ｕが中性もしくは弱酸性〜弱アルカリ性の範囲内であるとき、第２試薬３１ｂは酸性又は強酸性である。第１試薬３１ｕのｐＨが６．０から８．０であるとき、第２試薬３１ｂのｐＨは、それよりも低いｐＨであり、好ましくは２．０から６．０である。第２試薬１９ｂは、界面活性剤を含み、かつ、低ｐＨに調整されていてもよい。第２試薬３１ｂは、第１試薬３１ｕよりも低い浸透圧にすることで、溶血作用を獲得してもよい。
【００４６】
第１試薬３１ｕは界面活性剤を含んでいない。第１試薬３１ｕは界面活性剤を含んでもよいが、この場合、赤血球を溶血させないように種類と濃度を調整する必要がある。第１試薬３１ｕは、第２試薬３１ｂと同じ界面活性剤を含まないか、もしくは同じ界面活性剤を含んでいたとしても、第２試薬３１ｂよりも低濃度であることが好ましい。
【００４７】
第３試薬３２ｕは、無核成分を染色するための染色試薬である。第３試薬３２ｕが含む染料としては、核酸よりも細胞膜の脂質及びタンパク質に結合しやすい蛍光色素が選ばれる。このような色素としては、シアニン系、スチリル系、アクリジン系色素のうち赤血球の形態に影響を及ぼさない色素が好ましい。無核有形成分を染色する色素としては、脂溶性カルボシアニン色素が好ましく、特にインドカルボシアニン色素、オキサカルボシアニン色素等が好ましい。
【００４８】
具体的なインドカルボシアニン色素としては、DiI(1,1‘-dioctadecyl-3,3,3’,3‘-tetramethylindocarbocyanine perchlorate), DiD(1,1’-dioctadecyl-3,3,3‘,3’- tetramethylindodicarbocyanine), DiR(1,1’-dioctadecyltetramethyl indotricarbocyanine Iodide)等が挙げられる。オキサカルボシアニン色素としてはDiOC2(3)（3,3′-diethyloxacarbocyanine iodide）, DiOC3(3)（3,3-Dipropyloxacarbocyanine iodide）, DiOC4(3)(3,3′-Dibutyloxacarbocyanine iodide), DiOC5(3)(3,3-Dipentyloxacarbocyanine iodide)等が挙げられる。無核成分を染色する色素としては、DiOC3(3)（3,3-Dipropyloxacarbocyanine iodide）が特に好ましい。
【００４９】
第４試薬３２ｂは、有核成分を染色するための染色試薬である。第４試薬液３２ｂが含む染料としては、脂質及びタンパク質よりも核酸に結合しやすい蛍光色素が選ばれる。より詳細に説明すると、第４試薬３２ｂには、核酸を特異的に染色するためのインターカレータや副溝(minor groove)に結合する色素が含有されている。
【００５０】
インターカレータとしては、シアニン系、アクリジン系、phenanthridium系の公知の色素が挙げられる。例えば、シアニン系のインターカレータとしては、SYBR Green I、Thiazole orangeが挙げられる。アクリジン系のインターカレータとしては、Acridinorangeが挙げられる。phenanthridium系のインターカレータとしてはpropidium Iodide、Ethidium bromideが挙げられる。副溝に結合する色素としてはDAPI、Hoechstの公知の色素が挙げられる。例えば、Hoechetの副溝に結合する色素としては、Hoechst 33342、Hoechst 33258が挙げられる。本実施形態において、シアニン系のインターカレータが好ましく、特に、SYBR GreenI、Thiazole orangeが好ましい。
【００５１】
尿分析モードにおいては、１つの尿検体から、赤血球が形態を維持し、かつ細胞膜が染色された第１測定試料と、有核成分の核酸が染色され、赤血球が溶血された第２測定試料とがそれぞれ調製される。第１測定試料を用いて尿中の赤血球、円柱、結晶が測定される。第２測定試料を用いて尿中の白血球、上皮細胞、異型細胞、真菌、精子、トリコモナス、細菌が測定される。赤血球と真菌はサイズが似ているため、これらの高精度な分類が従来望まれていたが、本実施形態では、真菌は赤血球が溶血された第２測定試料を用いて測定されるため、赤血球の影響を受けることなく真菌を高精度に分類し、計数できる。
【００５２】
体液分析モードにおいては、１つの体液検体から、体液中の赤血球及び結晶を測定するための第３測定試料と、体液中の白血球、大型細胞、真菌及び細菌を測定するための第４測定試料とがそれぞれ調製される。第３測定試料を用いて体液中の赤血球及び結晶が測定される。第４測定試料を用いて体液中の白血球、大型細胞、真菌及び細菌が測定される。赤血球を溶血させた第４測定試料を調製することで、尿分析モードと同様に、赤血球の影響を受けることなく、正確に真菌を測定することができる。
【００５３】
尿分析モードでの尿中有形成分の測定と、体液分析モードでの体液中の赤血球の測定とにおいて、第１試薬３１ｕ及び第３試薬３２ｕが共用化されている。尿分析モードでの細菌の測定と、体液分析モードでの体液中の白血球、大型細胞、真菌及び細菌の測定とにおいて、第２試薬３１ｂ及び第４試薬３２ｕが共用化されている。尿分析モードと体液分析モードとで試薬を共用化することで、専用の試薬を準備する必要がない。
【００５４】
図５は、処理部１３の構成を示すブロック図である。処理部１３は、パーソナルコンピュータによって構成されており、本体４００と、入力部４０８と、表示部４０９とを備えている。本体４００は、ＣＰＵ４０１と、ＲＯＭ４０２と、ＲＡＭ４０３と、ハードディスク４０４と、読出装置４０５と、入出力インターフェース４０６と、画像出力インターフェース４０７と、通信インターフェース４１０とを有する。
【００５５】
ＣＰＵ４０１は、ＲＯＭ４０２に記憶されているコンピュータプログラム及びＲＡＭ４０２にロードされたコンピュータプログラムを実行する。ＲＡＭ４０３は、ＲＯＭ４０２及びハードディスク４０４に記録されているコンピュータプログラムの読み出しに用いられる。また、ＲＡＭ４０３は、これらのコンピュータプログラムを実行するときに、ＣＰＵ４０１の作業領域としても利用される。
【００５６】
ハードディスク４０４には、種々のコンピュータプログラム及びコンピュータプログラムの実行に用いるデータがインストールされている。インストールされたコンピュータプログラムには、オペレーティングシステム及びアプリケーションプログラムなどが含まれる。アプリケーションプログラムには、測定部１２から与えられた測定データを解析し、分析結果を出力するためのコンピュータプログラムが含まれる。
【００５７】
読出装置４０５は、ＣＤドライブ又はＤＶＤドライブ等によって構成されており、記録媒体に記録されたコンピュータプログラム及びデータを読み出すことができる。入出力インターフェース４０６には、マウス及びキーボードからなる入力部４０８が接続されている。ユーザが入力部４０８を使用することにより、処理部１３にデータが入力される。画像出力インターフェース４０７は、液晶パネル等で構成された表示部４０９に接続されており、画像データに応じた映像信号を、表示部４０９に出力する。表示部４０９は、入力された映像信号をもとに、画像を表示する。処理部１３は、通信インターフェース４１０を介して測定部１２に接続されており、通信インターフェース４１０により、測定部１２に対してデータの送受信が行われる。
【００５８】
［２．検体分析装置の動作］
【００５９】
［分析モードの設定］
検体分析装置１００が起動すると、処理部１３のＣＰＵ４０１は、デフォルトで尿分析モードに設定される。ＣＰＵ４０１は、尿分析モードに設定された状態で測定実行指示（後述の図６のＳ５０１）を受け付けると、測定部１２のマイクロコンピュータ２１ａに、尿分析用の検体測定動作を実行させる。尿分析用の検体測定動作において得られた測定データは、処理部１３のＣＰＵ４０１によって解析され、尿分析モード用の計数項目に基づいて粒子の分類および計数が行われる。
【００６０】
処理部１３のＣＰＵ４０１は、尿分析モードから体液分析モードへのモード切替指示を受け付けることができる。モード切替指示を受け付けると、ＣＰＵ４０１は、体液分析モードに設定される。ＣＰＵ４０１は、測定部１２のマイクロコンピュータ２１ａにプレシーケンスを実行させる。プレシーケンスとは、細胞を含有しないブランク試料としてシース液を測定し、バックグラウンドをチェックすることである。プレシーケンスの結果、バックグラウンドに問題ないことが確認されると、ＣＰＵ４０１は測定実行の指示を受け付け可能な状態になる。ＣＰＵ４０１は、体液分析モードに設定された状態で測定実行指示（後述の図６のＳ５０１）を受け付けると、測定部１２のマイクロコンピュータ２１ａに、体液分析用の測定シーケンスを実行させる。体液分析用の検体測定動作において得られた測定データは、処理部１３のＣＰＵ４０１によって解析され、体液分析モード用の計数項目に基づいて粒子の分類および計数が行われる。
【００６１】
［検体測定動作］
図６を参照して検体測定動作を説明する。尿分析モードにおける検体測定動作と、体液分析モードにおける検体測定動作は、基本的には同じシーケンスで構成されているため、以下では、同じフローチャートを用いて両モードにおける検体測定動作を説明する。
【００６２】
図６のステップＳ５０１において、測定実行の指示が処理部１３の入力部４０８から入力される。体液分析モードにおいては、処理部１３の表示部４０９に、図７の情報入力画面４５０が表示される。ユーザは、この情報入力画面を介して検体ＩＤと体液検体の種類を入力することができる。体液検体の種類の選択肢としては、脳脊髄液、関節液、体腔液・その他、指定なしの４つが表示されている。各選択肢の隣に表示されたラジオボタンを操作することで体液検体の種類を入力することができる。体液検体は緊急で測定することがあるため、操作を急いで誤った入力が行われないように「指定なし」がデフォルトで選択されている。体液検体の種類を指定せずに測定を開始することもできる。ユーザが体液検体の種類を入力してＯＫボタンを操作すると、測定実行の指示がＣＰＵ４０１に与えられる。
【００６３】
この指示を受けて、ＣＰＵ４０１は、ステップＳ５０２において、測定部１３に測定開始を指示する指示データを送信する。ステップＳ５０３において、測定部１３が指示データを受信すると、マイクロコンピュータ２１ａが、ステップＳ５０４の測定試料調製処理と、ステップＳ５０５の無核成分測定処理と、ステップＳ５０６の有核成分測定処理と、を実行する。
【００６４】
図８に示すように、測定試料調製処理Ｓ５０４では、ステップＳ６０１及びＳ６０２において、マイクロコンピュータ２１ａが調製部２を制御して、吸引管１９に試験管１０から検体１１を所定量吸引させ、反応槽３０ｕと反応槽３０ｂとにそれぞれ所定量の検体を分注させる。
【００６５】
ステップＳ６０３及びＳ６０４において、反応槽３０ｕには、検体１１とともに所定量の第１試薬（希釈液）３１ｕ及び第３試薬（染色液）３２ｕが定量されて分注される。ステップＳ６０５及びＳ６０６において、反応槽３０ｂにも同様にして、検体１１とともに所定量の第２試薬（希釈液）３１ｂ及び第４試薬（染色液）３２ｂが定量されて分注される。
【００６６】
反応槽３０ｕ及び反応槽３０ｂは、それぞれ図示しないヒータによって所定温度になるように加温されている。ステップＳ６０７では、加温された状態でプロペラ状の攪拌具（図示せず）により試料の攪拌が行われる。これにより、尿分析モードでは、反応槽３０ｕにおいて無核成分測定用の第１測定試料が調製され、反応槽３０ｂにおいて有核成分測定用の第２測定試料が調製される。体液分析モードでは、反応槽３０ｕにおいて無核成分測定用の第３測定試料が調製され、反応槽３０ｂにおいて有核成分測定用の第４測定試料が調製される。ステップＳ６０７の処理が終了すると、マイクロコンピュータ２１ａは、メインルーチンへ処理をリターンする。
【００６７】
図６に戻り、無核成分測定処理Ｓ５０５では、マイクロコンピュータ２１ａは、コンプレッサ３５ａから圧縮空気をシース液収容部３５へ供給させることで、フローセル５１へシース液を送液させる。マイクロコンピュータ２１ａは、フローセル５１へのシース液供給が継続されている状態で、シリンジポンプ３４ｂを駆動して反応槽３０ｕからフローセル５１へ第３測定試料を供給する。
【００６８】
好ましい実施形態においては、シリンジポンプ３４ｂの単位時間当たりの押し出し量は、尿分析モードと体液分析モードとで異なってもよい。体液分析モードにおける単位時間当たりの押し出し量は、好ましくは、尿分析モードの場合の１／８である。
【００６９】
体液は、尿に比べて赤血球の濃度が高い検体が多い。図９Ａに示すように、体液から調製した測定試料の単位時間当たりの押し出し量が多いと、複数の赤血球がレーザ光を同時に通過することがある。図９Ｂに示すように、単位時間当たりの送り出し量を減らすと、試料流の流径が小さくなる。これにより、赤血球が１つ１つ別々にレーザ光を通過することとなり、計数精度が向上する。
【００７０】
マイクロコンピュータ２１ａは、レーザ光源５３にレーザビームを照射させる。これにより第３測定試料中の粒子の前方散乱光、蛍光、側方散乱光、及び偏光解消側方散乱光が発生する。前方散乱光、蛍光、側方散乱光及び偏光解消側方散乱光のそれぞれは、前方散乱光受光部５５、蛍光受光部５９、側方散乱光受光部５８ａ、及び偏光解消側方散乱光受光部５８ｂにより受光されて、ＦＳＣ、ＦＬＨ、ＦＬＬ、ＳＳＣ、ＰＳＳＣの５種類の光学信号に変換される。
【００７１】
光学検出部２２ａから出力された光学信号は、増幅回路２２ｂにおいて増幅され、フィルタ回路２３によってフィルタ処理が施された後、Ａ／Ｄコンバータ２４によってディジタル信号に変換される。ディジタル信号処理回路２５は、各光学信号から解析用パラメータを抽出する。抽出された特徴パラメータは、測定データとしてメモリ２６に格納される。
【００７２】
有核成分測定処理Ｓ５０６では、マイクロコンピュータ２１ａは、上述の無核成分測定処理と同様に、コンプレッサ３５ａとシリンジポンプ３４ｂを駆動して、シース液が供給されているフローセル５１へ反応槽３０ｂから第４測定試料を供給させる。マイクロコンピュータ２１ａは、レーザ光源５３にレーザビームを照射させる。これにより第４測定試料中の粒子から５種類の光学信号が検出され、各光学信号の解析用パラメータが抽出されてメモリ２６に格納される。
【００７３】
第４測定試料の供給が開始されてから所定時間が経過すると、マイクロコンピュータ２１ａは、前方散乱光受光部５５、側方散乱光受光部５８及び蛍光受光部５９の受光感度を細菌測定用に高感度に設定する。具体的には、ゲインが５倍に設定される。これは、細菌は他の有核細胞に比べてサイズが小さく、蛍光量が有核細胞測定の場合に比べて低いためである。感度を高くすることで、細菌から発せられる微量の光を高精度に検出することができる。
【００７４】
受光感度が切り替えられた後も、フローセル５１へのシース液及び第４測定試料の供給とレーザビームの照射が所定時間継続される。これにより第４測定試料中の粒子から５種類の光学信号が検出され、各光学信号の解析用パラメータが抽出されてメモリ２６に格納される。
【００７５】
ステップＳ５０７において、マイクロコンピュータ２１ａは、無核成分測定処理及び有核成分測定処理によって生成された測定データを処理部１３へ送信し、処理を終了する。
【００７６】
ステップＳ５０９においてＣＰＵ４０１は、測定データの解析処理を実行し、検体の分析結果を生成して、当該分析結果をハードディスク４０４に格納する。ステップＳ５１０において、ＣＰＵ４０１は、分析結果を表示する。
【００７７】
図１０は、ステップＳ５０９の解析処理のサブルーチンを示す。ＣＰＵ４０１は、ステップＳ８０１の無核成分分類処理と、ステップＳ８０２の白血球・大型細胞分類処理と、ステップＳ８０３の真菌検出処理と、ステップＳ８０４の細菌検出処理と、を行う。
【００７８】
尿分析モードの無核成分分類処理Ｓ８０１では、ＣＰＵ４０１は、第１測定試料から得られたＦＳＣ及びＦＬＨを使用して、赤血球と結晶を識別し、計数する。図１１は、赤血球及び結晶の分布を示す図である。図１１の横軸は、ＦＬＨの強度（ＦＬＨＰ）を示し、縦軸はＦＳＣの強度（ＦＳＣＰ）を示している。図１１に示すように、赤血球の分布領域Ｒ１１と、結晶の分布領域Ｒ１２とは、ＦＬＨＰにおいて差異が認められる。これは、結晶と赤血球とで色素による染まり易さが異なるためである。したがって、赤血球と結晶とは、ＦＬＨＰに基づいて分類される。
【００７９】
体液分析モードの無核成分分類処理Ｓ８０１においても、尿分析モードと同様に、第３測定試料から得られたＦＳＣ及びＦＬＨを使用して、赤血球と結晶が識別され、計数される。
【００８０】
無核成分分類処理Ｓ８０１では、図１１に示す領域Ｒ１１に含まれる粒子が赤血球として検出され、計数される。また、図１１に示す領域Ｒ１２に含まれる粒子が結晶として検出され、計数される。
【００８１】
尿分析モードの無核成分分類処理Ｓ８０１では、さらに、第１測定試料から得られたＦＬＬＷとＦＬＬＡを使用して円柱が計数される。体液に円柱は含まれないため、体液分析モードでは、円柱は計数されない。
【００８２】
尿分析モードの白血球・大型細胞分類処理Ｓ８０２では、感度切り替え前に第２測定試料から得られたＦＳＣ及びＦＬＬを使用して、白血球と、上皮細胞と、異型細胞と、が検出され、計数される。散乱光信号は、粒子の大きさを反映する。蛍光信号は、粒子中の核酸量を反映する。白血球、上皮細胞、異型細胞は、真菌及び細菌等よりも核酸量が大きく、蛍光量が大きいため、蛍光信号（ＦＬ）としては、低感度で得られた第２蛍光信号（ＦＬＬ）を用いて検出される。
【００８３】
図１２Ａに示すように、ＦＬＬＡ−ＦＳＣＷ空間において、白血球、異型細胞、及び上皮細胞が分布する。図１２Ａの横軸は、ＦＬＬのパルス面積（ＦＬＬＡ）を示す。図１２Ａの縦軸は、ＦＳＣのパルス幅（ＦＳＣＷ）を示している。図１２Ａに示すように、白血球及び上皮細胞と、異型細胞とにはＦＬＬＡにおいて差異が認められる。これは、白血球と上皮細胞とには核酸量に概ね差異がなく、異型細胞の方が白血球及び上皮細胞よりも核酸量が多いためである。
【００８４】
白血球と上皮細胞とは、ＦＳＣＷにおいて差異が認められる。これは、大型細胞である上皮細胞は白血球よりもサイズが大きいためである。したがって、白血球、大型細胞（上皮細胞）、及び異型細胞は、ＦＬＬＡ及びＦＳＣＷに基づいて分類される。白血球・大型細胞分類処理Ｓ８０２では、図１２Ａに示す領域Ｒ２１に含まれる粒子が異型細胞として検出され、計数される。白血球の検出結果の一例を図１２Ｂに示した。図１２Ａに示す領域Ｒ２２に含まれる粒子が白血球として検出され、計数される。図１２Ａに示す領域Ｒ２３に含まれる粒子が上皮細胞として検出され、計数される。
【００８５】
体液分析モードの白血球・大型細胞分類処理Ｓ８０２においても、尿分析モードと同様に、第４測定試料から得られたＦＳＣ及びＦＬＨを使用して、ＦＳＣ及びＦＬＬを使用して、白血球と、上皮細胞と、異型細胞と、が検出され、計数される。上皮細胞と異型細胞は、まとめて大型細胞（ＬＣ）として計数される。計数される大型細胞としては上皮細胞以外に、腫瘍細胞など他の有核細胞を含めてもよい。
【００８６】
体液検体中には、比較的大きな細胞として、白血球のほか、白血球よりも大きい有核細胞として上皮細胞又は腫瘍細胞などが含まれる。散乱光信号のパルス幅（ＦＳＣＷ）と蛍光信号のパルス面積（ＦＬＬＡ）の組み合わせは、大きいサイズの有核細胞に検出に適している。したがって、体液中の白血球数及び大型細胞数それぞれを精度よく計数することができる。
【００８７】
体液分析モードの白血球・大型細胞分類処理Ｓ８０２では、白血球数及び上皮細胞数がそれぞれ計数されるだけでなく、白血球数、上皮細胞（大型細胞）、及び異型細胞を含む有核細胞の総数が、総有核細胞数（ＴＮＣ）として計数される。
【００８８】
ここで、体液分析モードにおいて計数項目となる粒子には、赤血球及び白血球のように、尿分析モードと同様のもの含まれるが、大型細胞数及び総有核細胞数のように、尿分析モードでは計数されないものも含まれる。一方、尿分析モードでは、体液分析モードでは計数されない円柱などが計数される。このように、検体分析装置１００では、尿分析モード及び体液分析モードそれぞれにおいて、特有の計数項目に基づいて分類・計数が行われる。
【００８９】
第４測定試料中に細菌又は真菌が含まれている場合であっても、細菌及び真菌は、白血球に比べて、十分に小さいため、図１２Ａに示す領域Ｒ２２，Ｒ２３を用いると、白血球及び上皮細胞それぞれを、細菌又は真菌から区別することができる。このため、総有核細胞数（ＴＮＣ）は、白血球及び白血球より大きい有核細胞を真菌又は細菌から区別して、白血球及び白血球より大きい有核細胞の総数として求められる。
【００９０】
体液分析モードの白血球・大型細胞分類処理Ｓ８０２では、領域Ｒ２２に含まれるものとして検出された白血球（図１２Ｂ参照）をさらに分類する。ここでは、白血球を、単核白血球（Ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒ  ＷＢＣ（ＭＮ））と、多形核白血球（Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｏｎｕｃｌｅａｒ  ＷＢＣ（ＰＭＮ））とに、２分類する。分類される白血球の種類数は特に限定されず、例えば、白血球をリンパ球、単球、好中球、好酸球、好塩基球の５種類に分類してもよい。体液に含まれる白血球の数は少ないため、白血球を多種類に分類すると、分類された種類毎の白血球数が少なくなり分類精度が低下する場合がある。このため、白血球の分類は２分類が好適である。
【００９１】
白血球の分類では、感度切り替え前に第４測定試料を測定から得られた前方散乱光信号（ＦＳＣ）及び側方散乱光信号（ＳＳＣ）が用いられる。白血球の分類によって、単核白血球及び多形核白血球それぞれが検出され、単核白血球数（ＭＮ＃）と多形核白血球数（ＰＭＮ＃）が計数される。これらの数の比率に基づいて、単核白血球比率（ＭＮ％）と多形核白血球比率（ＰＭＮ％）が算出される。
【００９２】
図１３に示すように、ＳＳＣＰ−ＦＳＣＰ空間において、単核白血球及び多形核白血球が分布する。図１３の横軸は、側方散乱光信号強度（ＳＳＣＰ）を示し、図１３の縦軸は、前方散乱光信号強度（ＦＳＣＰ）を示す。白血球の分類には、蛍光信号強度及び側方散乱光信号強度を用いても良い。
【００９３】
白血球の分類のための検出結果を、図１４Ａから図１４Ｃに示す。図１４Ａは、単核白血球が多く含まれる体液検体についての検出結果としてのスキャッタグラムである。図１４Ｂは、多形核白血球が多く含まれる体液検体についての検出結果としてのスキャッタグラムである。図１４Ｃは、単核白血球及び多形核白血球がともに多く含まれる体液検体についての検出結果としてのスキャッタグラムである。
【００９４】
尿分析モードの白血球・大型細胞分類処理Ｓ８０２では、白血球の分類は行われない。尿中の白血球は体液中の白血球に比べて形態が安定でなく、信頼性の高い分類が困難な場合があるためである。ただし、これはあくまで一実施形態に過ぎず、尿分析モードにおいて、体液分析モードと同様にして白血球分類を行ってもよい。
【００９５】
尿分析モードの真菌検出処理Ｓ８０３では、感度切り替え前に第２測定試料から得られたＦＳＣ及びＦＬＨを使用して、真菌が検出され、計数される。真菌は、白血球及び大型細胞よりも核酸量が小さく、蛍光量が比較的小さいため、蛍光信号（ＦＬ）としては、ＦＬＬより高感度で得られたＦＬＨが用いられる。なお、感度切り替え後に得られたＦＬＨ（後述のＦＬＨ２）と区別するために、感度切り替え前のＦＬＨをＦＬＨ１と呼ぶ。白血球等と真菌とは、核酸量が異なるため、検出感度の異なる蛍光信号ＦＬＬ，ＦＬＨ１とを使いわけることで、白血球等と真菌とを区別して計数することができる。
【００９６】
図１５Ａに示すように、ＦＬＨＰ１−ＦＳＣＰ空間において、真菌が分布する。図１５Ａの横軸は、ＦＬＨ１の強度（ＦＬＨＰ１）を示す。図１５Ａの縦軸は、前方散乱光強度（ＦＳＣＰ）を示している。図１５Ａに示す領域Ｒ４２に含まれる粒子が真菌として検出され、計数される。真菌の検出結果の一例を図１５Ｂに示した。
【００９７】
尿分析モードの無核成分分類処理Ｓ８０１では、さらに、感度切り替え前の第４測定試料から得られたＦＳＣ及びＦＬＨを使用して、領域Ｒ４１および領域４２に含まれる粒子が精子およびトリコモナスとして検出され、計数される。
【００９８】
体液分析モードの真菌検出処理Ｓ８０２においては、尿分析モードと同様に、感度切り替え前に第４測定試料から得られたＦＳＣ及びＦＬＨを使用して、真菌が検出され、計数される。体液には精子およびトリコモナスは含まれないため、これらは体液分析モードでは計数されない。
【００９９】
尿分析モードの細菌検出処理Ｓ８０４では、感度切り替え後に第４測定試料から得られたＦＳＣ及びＦＬＨ２を使用して、細菌が検出され、計数される。ＦＬＨ２は、感度切り替え後に得られたＦＬＨである。細菌は、真菌よりもさらにサイズが小さく、また核酸量も少ないため、蛍光量が真菌よりも小さい。このため、細菌は、最も高感度で得られたＦＬＨ２を用いて検出される。ここで用いられる前方散乱光（ＦＳＣ）も、真菌及び白血球等の検出に用いられた前方散乱光信号（ＦＳＣ）よりも高感度である。
【０１００】
図１６に示すように、ＦＬＨＰ２−ＦＳＣＰ空間において、細菌が分布する。図１６の横軸は、感度切り替え後の高感度蛍光ＦＬＨ２の強度（ＦＬＨＰ２）を示す。図１６の縦軸は、高感度の前方散乱光強度（ＦＳＣＰ）を示す。図１６に示す領域Ｒ５に含まれる粒子が細菌として検出され、計数される。
【０１０１】
体液分析モードの細菌検出処理Ｓ８０４においては、尿分析モードと同様に、感度切り替え後に第４測定試料から得られたＦＳＣ及びＦＬＨ２を使用して、細菌が検出され、計数される。
【０１０２】
図１７は、細菌、真菌、白血球、上皮細胞、異型細胞それぞれの核酸量（ＤＮＡ量）と粒子径を示している。前述したように、検体分析装置１００は、粒子径が非常に小さく核酸量も少ない細菌から、粒子径が大きく核酸量も多い上皮細胞（大型細胞）まで、広範囲に粒径の異なる尿中および体液中の有形成分を、一つの測定試料を用いて分析することができる。
【０１０３】
検体分析装置１００は、同一の光学検出器２２ａを用いても、幅広い範囲で分布する粒子それぞれを精度良く検出できるようにするため、第１の検出感度、第２の検出感度、及び第３の検出感度の３種類の検出感度で、検出部５０から検出信号を得ることができる。第１の検出感度は最も低い感度であり、第２の検出感度は、第１の検出感度よりも高い感度である。第３の検出感度は、第２の検出感度よりも高い。
【０１０４】
本実施形態において、第１の検出感度で得られる検出信号は、感度切り替え前に得られた低感度蛍光信号（ＦＬＬ）である。第２の検出感度で得られる検出信号は、感度切り替え前に得られた高感度蛍光信号（ＦＬＨ１）である。第３の検出感度で得られる検出信号は、感度切り替え後に得られた高感度蛍光信号（ＦＬＨ２）である。
【０１０５】
第１の検出感度で得られた低感度蛍光信号（ＦＬＬ）に基づく第１特徴パラメータＦＬＬＡは、図１２Ａに示すように白血球・大型細胞分類処理Ｓ８０２に用いられる。第２の検出感度で得られた高感度蛍光信号（ＦＬＨ１）に基づく第２特徴パラメータＦＬＨＰ１は、図１５Ａに示すように、真菌検出処理Ｓ８０３に用いられる。第３の検出感度で得られた高感度蛍光信号（ＦＬＨ２）に基づく第３特徴パラメータＦＬＨＰ２は、図１６に示すように、細菌検出処理Ｓ８０４に用いられる。
【０１０６】
白血球・大型細胞分類処理Ｓ８０２では、特徴パラメータとして、蛍光パルス面積（ＦＬＬＡ）が用いられ、真菌検出処理Ｓ８０３及び細菌検出処理Ｓ８０４では、特徴パラメータとして、蛍光強度（ＦＬＨＰ１，ＦＬＨＰ２）が用いられる。蛍光パルス面積と蛍光強度とを使い分ける理由は次のとおりである。
【０１０７】
本実施形態では光源５３によって形成されるビームスポットの試料の流れ方向の径Ｗは約４〜７μｍである。これに対し、上皮細胞、異型細胞、及び白血球は、核径がビームスポットの径Ｗよりも大きい。真菌の核、細菌は、ビームスポットの径Ｗより小さい。
【０１０８】
図１８Ａに示すように、大型の細胞ＬＣの核Ｎ１は、ビームスポットの径Ｗよりも大きいので、ビームスポット中に大型の細胞ＬＣの核Ｎ１は収まらない。蛍光信号の強度は、照射された核の一部の核酸量しか反映していない。一方、蛍光信号強度を時間で積分した面積値ＬＡ１は、核全体の核酸量を反映した値と考えることができる。大型の細胞ＬＣについては、核全体の核酸量を反映するパラメータとして、蛍光信号強度を時間で積分した蛍光パルス面積値ＬＡ１が適している。
【０１０９】
真菌などの小型の細胞ＳＣでは、図１８Ｂに示すように、核Ｎ２がビームスポットの径Ｗよりも小さいので、ビームスポット中に細胞ＬＣの核Ｎ２全体が収まる。真菌や細菌のような特に小型の細胞は、粒子全体がビームスポット中に納まる。進行方向に細胞ＳＣが進行すると、核Ｎ２がビームスポットに入ってから外に出るまでの間、核Ｎ２の全体が照射され続ける。このため、小型の細胞ＳＣの核酸量を反映するパラメータとして蛍光信号強度を時間で積分した面積値ＬＡ２を用いると、見かけの値が実際の核酸量よりも大きな値となってしまう。一方、蛍光信号強度は、核の実際の核酸量を反映した値と考えることができる。よって、小型の細胞ＳＣについては、核酸量を反映するパラメータとして、蛍光強度が適している。
【０１１０】
白血球は直径が約１０〜１５μｍであり、真菌（未出芽の真菌）は直径が約３〜８μｍである。白血球と真菌は似たようなサイズを有しているため、白血球と真菌との区別は必ずしも容易ではないが、本実施形態では、白血球と真菌を区別して両者を計数することが可能である。本実施形態では、白血球と真菌とで、検出感度の異なる蛍光信号ＦＬＬ，ＦＬＨ１とを使いわけるとともに、白血球については蛍光パルス面積を用い、小型細胞である真菌については蛍光強度を用いることで、核酸量の違いに基づいて白血球と真菌との区別を容易にしている。
【０１１１】
図６に戻って、尿分析モードにおける分類計数結果の解析・表示処理ステップＳ５１０では、ＣＰＵ４０１は、尿中有形成分の分類計数結果とスキャッタグラムを含む計数結果画面を表示部４０９に表示させる。計数結果画面に表示される計数結果は、赤血球、白血球、円柱、上皮細胞、細菌、真菌、精子、トリコモナス、異型細胞の数を含む。
【０１１２】
体液分析モードにおける分類計数結果の解析・表示処理ステップＳ５１０では、ＣＰＵ４０１は、例えば、図１９に示す処理を実行する。この処理では、体液中に含まれる複数種類の粒子の分析結果（計数結果）に基づき判定が行われる。具体的には、異常値を示した粒子の種類の組み合わせに基づいて、疑われる炎症の判定が行われる。
【０１１３】
ステップＳ８５１において、ＣＰＵ４０１は、受け付けた体液検体の種類を判定する。体液の種類が脳脊髄液である場合には、Ｓ８５２において、脳脊髄液用の判定条件に従って炎症判定が行われる。体液の種類が関節液である場合には、Ｓ８５３において、関節液用の判定条件に従って炎症判定が行われる。体液の種類が体腔液である場合には、Ｓ８５４において、体腔液用の一又は複数の判定条件に従って、炎症判定が行われる。体液の種類が指定されていない場合には、Ｓ８５５において、Ｓ８５２〜Ｓ８５４において用いられる判定条件のいずれかに該当するかを判定する。Ｓ８５２〜Ｓ８５４のそれぞれの判定条件は、ハードディスク４０４に設定されている。
【０１１４】
Ｓ８５２の脳脊髄液についての炎症判定で用いられる複数の判定条件は、例えば、次の条件Ａ１からＡ４である。以下に示す条件はあくまで一例であって、各判定条件に含まれる閾値はユーザが適宜設定することができる。
【０１１５】
細菌性髄膜炎の疑いを判定するための第１条件Ａ１：
（白血球数が１０００個／μＬ以上）かつ（多形核白血球数が優勢）かつ（細菌数が１０００個／μＬ以上）
【０１１６】
真菌性髄膜炎の疑いを判定するための第２条Ａ２：
（白血球数が１００個／μＬ以上）かつ（単核白血球数が優勢）かつ（真菌数が１００個／μＬ以上）
【０１１７】
ウィルス性髄膜炎の疑いを判定するための第３条件Ａ３：
（白血球数が１０個／μＬ以上）かつ（単核白血球数が優勢）かつ（第１条件Ａ１および第２条件Ａ２のいずれの条件も充足しない）
【０１１８】
腫瘍性髄膜炎の疑いを判定するための第４条件Ａ４：
（異型細胞が１０個／μＬ以上）
【０１１９】
多形核白血球数および単核白血球数に関して「優勢」とは、総白血球数に占める比率が高い方をいう。つまり、単核白血球の割合（ＭＮ％）と多形核白血球の割合（ＰＭＮ％）を比べたとき、ＭＮ％＞ＰＭＮ％であれば単核白血球が優勢であり、ＭＮ％≦ＰＭＮ％であれば多形核白血球が優勢である。正常な髄液に含まれる白血球のほとんど（約９８％）は単核白血球であるが、細菌性髄膜炎の場合には多形核白血球が優勢になる。
【０１２０】
Ｓ８５３の関節液についての炎症判定で用いられる複数の判定条件は、例えば、次の条件Ｂ１およびＢ２である。
【０１２１】
化膿性関節炎の疑いを判定するための第２条件Ｂ１：
（白血球数が１０００個／μＬ以上）かつ（（細菌数が１０００個／μＬ以上）または（真菌数が１０００個／μＬ以上））
【０１２２】
結晶誘発性関節炎の疑いを判定するための第１条件Ｂ２：
（白血球数が１００個／μＬ以上）かつ（結晶数が１００００個／μＬ以上）
【０１２３】
Ｓ８５４の体腔液についての炎症判定で用いられる複数の判定条件は、例えば、次の条件Ｃ１からＣ３である。
【０１２４】
細菌性炎症の疑いを判定するための第１条件Ｃ１：
（白血球数が１０００個／μＬ以上）かつ（多形核白血球数が優勢）かつ（細菌数が１０００個／μＬ以上）
【０１２５】
真菌性炎症の疑いを判定するための第２条件Ｃ２：
（白血球数が１００個／μＬ以上）かつ（単核白血球数が優勢）かつ（真菌数が１００個／μＬ以上）
【０１２６】
腫瘍性炎症の疑いを判定するための第３条件Ｃ３：
（異型細胞数が１０個／μＬ以上）
【０１２７】
ＣＰＵ４０１は、Ｓ８５６において、炎症の疑いがあるか否かを判定する。炎症の疑いがあれば、ＣＰＵ４０１は、Ｓ８５７において判定結果にサスペクトメッセージを付加する。体液検体の種類が「指定なし」である場合であって、いずれかの判定条件を充足した場合には、サスペクトメッセージに代えて、充足した判定条件の情報が付加される。
【０１２８】
ＣＰＵ４０１は、Ｓ８５８において、以下の条件Ｄ１に基づいて出血の疑いがあるか否かを判定する。出血の疑いを判定するための条件Ｄ１：
（赤血球が１０００個／μＬ以上）
【０１２９】
出血の疑いがあれば、ＣＰＵ４０１は、Ｓ８５９において、判定結果に赤血球補正を促す赤血球補正メッセージを付加する。
【０１３０】
ＣＰＵ４０１は、Ｓ８６０において、分類計数結果を含む計数結果画面と、判定結果を含む判定結果画面を表示部４０９に表示させる。計数結果画面は、尿分析モードと同様に、計数結果とスキャッタグラムを含む。体液分析モードにおいて計数結果画面に表示される計数結果は、赤血球、白血球、単核白血球（ＭＮ）、多形核白血球（ＰＭＮ）、有核細胞（ＴＮＣ）、大型細胞（ＬＣ）、細菌、真菌、異型細胞の数を含む。画面は、さらに単核白血球比率（ＭＮ％）および多形核白血球比率（ＰＭＮ％）を含む。
【０１３１】
Ｓ８５７において判定結果にサスペクトメッセージが付加されている場合、ＣＰＵ４０１は、サスペクトメッセージを含む判定結果画面をさらに表示する。図２０は、この判定結果表示画面の例である。
【０１３２】
図２０に示される通り、判定結果画面は、検体ＩＤと、体液の種類と、Ｓ８５２〜Ｓ８５４における判定の結果として得られたサスペクトメッセージと、その判定の根拠となった分類計数結果とを含む。この例では、サスペクトメッセージとして、細菌性髄膜炎が疑われることを示す「細菌性髄膜炎？」が表示されている。さらに、判定の根拠となった白血球数、白血球比率、細菌数もあわせて表示されている。これによりオペレータが分類計数結果を基に炎症の疑いを判定する作業を補助できる。
【０１３３】
Ｓ８５９において判定結果に赤血球補正メッセージが付加されている場合、ＣＰＵ４０１は、赤血球補正メッセージを含む判定結果画面をさらに表示する。図２１はこの判定結果表示画面の例である。
【０１３４】
図２１示されるとおり、判定結果画面は、検体ＩＤと、体液の種類と、赤血球数と、白血球数と、補正を促すメッセージとを含む。判定結果画面は、さらに補正の許可を受け付けるＹＥＳボタンと、補正の棄却を受け付けるＮＯボタンとを含む。
【０１３５】
髄液や関節液は、体内に穿刺針を穿刺して採取するため、穿刺時に血液（末梢血）が混入することがある。混入した血液には白血球が含まれているため、混入した血液中の白血球を差し引かなければ、体液中の白血球数を正確に計数できないことがある。そこで、赤血球数が閾値を超えて多量に含まれている場合には、赤血球の数に基づいて白血球数を補正することで、正確な白血球数を求める。
【０１３６】
ＣＰＵ４０１は、Ｓ８６１として図２１におけるＹＥＳが選択されると、Ｓ８６２において赤血球数に基づいて白血球数を補正する。補正式は以下のとおりである。
ＷＢＣ＊＝ＷＢＣ−（ＲＢＣ／Ｆ）
【０１３７】
上記式において、ＷＢＣ＊は補正後の白血球数である。Ｆはユーザが任意に設定できる値であり、末梢血液中に含まれる白血球１個に対する赤血球の数を示す値が用いられる。好適にはＦ＝４８０〜１１００である。
【０１３８】
被検者の末梢血液中の赤血球数（ＲＢＣＢｌ）および末梢血中の白血球数（ＷＢＣＢｌ）が判明している場合には、それらの入力を受け付けることで赤血球補正を行ってもよい。この場合、以下の補正式を用いることができる。
ＷＢＣ＊＝ＷＢＣ−（ＷＢＣＢｌ／ＲＢＣＢｌ）×ＲＢＣ
【０１３９】
ＣＰＵ４０１は、Ｓ８６３において、計数結果画面に赤血球補正後の白血球数を追加表示し、処理を終了する。
【０１４０】
判定結果の表示後においても、ＣＰＵ４０１は、ユーザから、体液検体の種類の変更を受け付けることができる。例えば、ユーザが誤って体液検体の種類として体腔液を選択し、表示された判定結果を見て種類の誤りに気づいた場合に、ユーザは体液検体の種類を訂正することができる。この操作は計数結果のバリデーション前にのみ行うことができる。ユーザが体液検体の種類を訂正すると、再びＳ８５１の処理が実行され、訂正後の体液種類に基づいて炎症の判定が行われる。
【０１４１】
体液中の白血球と真菌を計数できる検体分析装置は従来存在しなかったが、本実施形態の検体分析装置１００によれば、体液中の白血球および真菌を１台の装置で計数できる。これにより、例えば髄液中の白血球および真菌が高値である場合には、ユーザは真菌性髄膜炎（クリプトコッカス髄膜炎）を疑うことができる。
【０１４２】
本実施形態の検体分析装置１００は、体液中の赤血球が溶血された測定試料から白血球および真菌を計数する。真菌と赤血球はサイズが似ているうえ、体液は尿に比べて多量の赤血球を含むことがあるが、本実施形態によれば、赤血球を溶血させることで赤血球の影響を受けずに真菌を高精度に計数することができる。
【０１４３】
本実施形態の検体分析装置１００によれば、体液中の白血球、真菌および細菌を１台の装置で計数できる。これにより、例えば髄液を分析したときに白血球数が高値である場合には、あわせて細菌数および真菌数を確認することで、被検者が細菌性髄膜炎であるか、真菌性髄膜炎であるかの診断を補助できる。
【０１４４】
本実施形態の検体分析装置１００によれば、体液中の白血球を単核白血球と多形核白血球とに分類できる。体液検査では、白血球の数だけでなく、単核白血球および多形核白血球のいずれが優勢であるかが臨床的に重要である。本実施形態によれば、白血球の分類により体液検査に有用な情報を提供できる。
【０１４５】
本実施形態の検体分析装置１００によれば、白血球を分類しつつ、細菌および真菌を計数できる。髄液検査により類別される代表的な髄膜炎は、細菌性髄膜炎、真菌性髄膜炎、ウイルス性髄膜炎である。これらのうち、細菌性髄膜炎は、白血球数の著明増多および単核球の減少により、他の髄膜炎と区別できる。一方、真菌性髄膜炎とウイルス性髄膜炎は、いずれも白血球数の増多を認めるものの、白血球比率で区別することは難しい。しかし、本実施形態によれば、白血球とともに真菌を計数することができるため、真菌性髄膜炎か否かの判断において真菌の数を考慮することができる。真菌の数が少なければ、ウイルス性髄膜炎を疑うことができる。また、細菌性髄膜炎に関しても、白血球数および白血球比率に加え、細菌数を提供することでより正確な診断に貢献できる。よって、本実施形態によれば、１台の検体分析装置で髄膜炎の診断に有用な情報を一度に提供することができる。
【０１４６】
［赤血球及び結晶計数方法の他の例］
体液中の赤血球数と結晶数とを計数する他の方法について、図２２を参照して説明する。上記の実施形態では図１９に示すようにＦＬＨとＦＳＣを用いて赤血球と結晶を識別したが、偏光解消散乱光ＰＳＳを用いて赤血球と結晶を識別してもよい。
【０１４７】
処理部１３のＣＰＵ４０１は、図２２（ａ）に示すように、Ｓ５０５の無核成分測定処理によって得た特徴パラメータに基づいて、前方散乱光信号のパルス幅（ＦＳＣＷ）と前方散乱光信号強度（ＦＳＣＰ）を２軸とする第１スキャッタグラム上に粒子をプロットする。そして、第１スキャッタグラムにおいて固定の領域Ａ１１が設定される。
【０１４８】
図２２（ａ）において、領域Ａ１１は、第１又は第３測定試料に含まれる赤血球と結晶に対応する領域であり、領域Ａ１１以外の領域は、測定試料に含まれるごみや細菌等に対応する領域である。ＣＰＵ４０１は、第１スキャッタグラム上の領域Ａ１１に含まれる粒子を抽出する。
【０１４９】
ＣＰＵ４０１は、図２２（ｂ）に示すように、領域Ａ１１から抽出した粒子を、偏光解消側方散乱光信号強度（ＰＳＳＣＰ）と前方散乱光信号強度（ＦＳＣＰ）を２軸とする第２スキャッタグラム上にプロットする。そして、第２スキャッタグラムにおいて固定の領域Ａ２１、Ａ２２が設定される。
【０１５０】
図２２（ｂ）において、横軸のＰＳＳＣＰは、粒子から生じる側方散乱光のうち、照射光に対して垂直に偏光した光の量、つまり偏光解消の度合いを示す。赤血球に比べて、結晶は偏光解消を生じやすく、ＰＳＳＣＰの値が大きい領域に分布することになる。図２２（ｂ）の領域Ａ２１、Ａ２２は、それぞれ、赤血球と結晶に対応する。ＣＰＵ４０１は、領域Ａ２１に含まれる粒子を赤血球数として計数し、領域Ａ２２に含まれる粒子を結晶として計数する。
【０１５１】
赤血球と結晶は、何れも核を有さず、同様の大きさを有しているため、結晶が多量に含まれる検体の場合、結晶が赤血球の分類精度を低下させる可能性がある。偏光解消側方散乱光を用いると、赤血球は偏光解消をほとんど生じず、結晶は異方性を有するため偏光解消を生じるため、偏光解消側方散乱光を用いて赤血球と結晶とを精度良く識別することができる。よって、結晶を多量に含む尿検体であっても赤血球を高精度に計数できる。また、関節液は結晶を含むことがあるが、関節液の採取時には血液が混入することがあるため、赤血球と結晶の分類精度を向上することで関節液の正確な診断を補助することができる。
【０１５２】
［他の実施形態］
上記実施形態における体液分析モードによる粒子計数機能、体液中の成分に基づく炎症の判定機能、赤血球数に基づく白血球の補正機能は、血球計数器による体液分析に適用されてもよい。
【０１５３】
測定部１２と処理部１３は一体型であってもよい。例えば処理部１３を測定部１２に組み込んでもよい。
【符号の説明】
【０１５４】
１１  検体
３１ｕ  第１試薬
３１ｂ  第２試薬
３２ｕ  第３試薬
３２ｂ  第４試薬
３０  調製部
５０  検出部
７０  処理部
１００  検体分析装置
【図６】
2016048203.tif 000003
【図７】
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【図８】
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【図１０】
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【図１３】
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【図１７】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
2016048203.tif 000016
【図４Ｃ】
2016048203.tif 000017
【図５】
2016048203.tif 000018
【図９Ａ】
2016048203.tif 000019
【図９Ｂ】
2016048203.tif 000020
【図１１】
2016048203.tif 000021
【図１２Ａ】
2016048203.tif 000022
【図１２Ｂ】
2016048203.tif 000023
【図１４Ａ】
2016048203.tif 000024
【図１４Ｂ】
2016048203.tif 000025
【図１４Ｃ】
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【図１５Ａ】
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【図１５Ｂ】
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【図１６】
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【図１８Ａ】
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【図１８Ｂ】
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【図２２】
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