(57)【要約】      （修正有）【課題】グラム陽性細菌及びグラム陰性細菌に対する良好な活性を示すカルバペネム系抗生物質エルタペネムの中間体及びそれを含有する組成物の製造方法の提供。【解決手段】少なくとも９５％の、固体形態における下式２ａで表されるエルタペネムの中間体と、残部としての不純物とを含む組成物。2016000740.tif 000031(Ｎｐは無置換かつ塩酸塩が付加した４級窒素原子又は保護されたカルボキシル基で置換された３級窒素原子；Ｐ１はカルボキシル保護基)【選択図】図１
2016000740.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも９５％の、固体形態における下記の式２ａのエルタペネムの中間体と、残部としての不純物とを含む組成物。
【化１】
2016000740.tif 000022
（式中、Ｎｐは
【化２】
2016000740.tif 000023
を表し、かつ、Ｐ１およびＰ２はカルボキシル保護基を表す）。
【請求項２】
前記式２ａのエルタペネムの中間体が非晶質固体形態である請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記カルボキシル保護基が、アリルまたは置換アリル、ベンジルまたは置換ベンジル、置換エチル、置換シリル、芳香族環によって置換されたメチル、フェニルまたは置換フェニル、アセトニルおよびｔ−ブチルからなる群から選択される、請求項１又は２に記載の組成物。
【請求項４】
前記カルボキシル保護基が、２−クロロアリル、ニトロによって置換されたベンジル、および、メトキシルによって置換されたベンジル、２，２，２−トリクロロエチル、２−ブロモエチル、２−トリメチルシリルエチル、トリメチルシリル、ｔ−ブチル−ジメチルシリル、ｔ−ブチル−ジフェニルシリル、２−メナフチル（ｍｅｎａｐｈｔｈｙｌ）、ベンズヒドリル、トリチル、４−ピリジルメチル、およびｐ−メチルフェニルからなる群から選択される、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
Ｎｐが、
【化３】
2016000740.tif 000024
を表し、Ｐ１およびＰ２がともに、ｐ−ニトロベンジル、ｏ−ニトロベンジ
ル、ｐ−メトキシベンジル、アリル、２，２，２−トリクロロエチル、ベンズヒドリル、トリメチルシリル、又はｔ−ブチルである、請求項１又は２に記載の組成物。
【請求項６】
Ｎｐが、
【化４】
2016000740.tif 000025
を表し、Ｐ１およびＰ２がともにｐ−ニトロベンジルである、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
前記式２ａのエルタペネムの中間体が、図１で示す粉末Ｘ線回折パターンを有する請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
Ｎｐが、
【化５】
2016000740.tif 000026
を表し、かつ、Ｐ１が、ｐ−ニトロベンジル、ｏ−ニトロベンジル、ｐ−メトキシベンジル、アリル、２，２，２−トリクロロエチル、ベンズヒドリル、トリメチルシリル、又はｔ−ブチルを表す、請求項１又は２に記載の組成物。
【請求項９】
Ｎｐが、
【化６】
2016000740.tif 000027
を表し、かつ、Ｐ１が、ｐ−ニトロベンジルを表す、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
請求項１に記載の組成物を調製するための方法であって、
下記の式３のカルバペネム母体核：
【化７】
2016000740.tif 000028
（式中、Ｐ１はカルボキシル保護基を表す）
を下記の式４ａのエルタペネムの側鎖：
【化８】
2016000740.tif 000029
（式中、Ｎｐは
【化９】
2016000740.tif 000030
を表し、かつ、Ｐ２はカルボキシル保護基を表す）
と縮合することを含み、
反応が終了したとき、反応混合物が酸水溶液に注がれることにおいて特徴づけられる方法。
【請求項１１】
前記酸が、無機酸、有機酸、または、それらの組合せから選択されることにおいて特徴づけられる、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記酸が、塩酸、硫酸、亜硫酸、リン酸、リン酸二水素カリウム、リン酸二水素ナトリウム、ギ酸、酢酸、プロパン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、安息香酸、シュウ酸、クロロ酢酸、トリクロロ酢酸、トリフルオロ酢酸から選択されることにおいて特徴づけられる、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記酸が、塩酸、硫酸、リン酸、リン酸二水素ナトリウム、酢酸およびｐ−トルエンスルホン酸から選択されることにおいて特徴づけられる、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
前記酸が塩酸であることにおいて特徴づけられる、請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
前記酸が硫酸であることにおいて特徴づけられる、請求項１１に記載の方法。
【請求項１６】
前記酸がリン酸であることにおいて特徴づけられる、請求項１１に記載の方法。
【請求項１７】
前記酸水溶液のｐＨ値が２〜６であることにおいて特徴づけられる、請求項１１に記載の方法。
【請求項１８】
前記酸水溶液のｐＨ値が２〜５であることにおいて特徴づけられる、請求項１１に記載の方法。
【請求項１９】
前記酸水溶液のｐＨ値が２．５〜４．５であることにおいて特徴づけられる、請求項１１に記載の方法。
【請求項２０】
前記酸水溶液のｐＨ値が２．５〜４であることにおいて特徴づけられる、請求項１１に記載の方法。
【請求項２１】
前記酸水溶液のｐＨ値が３〜４であることにおいて特徴づけられる、請求項１１に記載の方法。
【請求項２２】
少なくとも９６％の式２ａのエルタペネムの中間体と、残部としての不純物とを含む請求項１に記載の組成物。
【請求項２３】
少なくとも９７％の式２ａのエルタペネムの中間体と、残部としての不純物とを含む請求項１に記載の組成物。
【請求項２４】
少なくとも９８％の式２ａのエルタペネムの中間体と、残部としての不純物とを含む請求項１に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、エルタペネムの中間体、エルタペネムを含む組成物およびそれらの調製方法に関連する。
【背景技術】
【０００２】
下記の式（１）のエルタペネムは（４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−３−［（３Ｓ，５Ｓ）−５−［（３−カルボキシフェニル）アミノ］ホルミル］−ピロリジン−３−イル］チオ−６−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−４−メチル−７−オキソ−１−アザビシクロ［３．２．０］ヘプタ−２−エン−２−カルボキシラートの化学名を有し、ＭｅｒｃｋおよびＡｓｔｒａｚｅｎｅｃａによって共同開発された新しいカルバペネム系抗生物質であり、グラム陽性細菌およびグラム陰性細菌に対する良好な抗菌活性を有する。
【化１】
2016000740.tif 000003
【０００３】
エルタペネムは、下記の式（２）のエルタペネムの中間体を脱保護することによって得られる。
【化２】
2016000740.tif 000004
式中、Ｎｐは
【化３】
2016000740.tif 000005
を表す；
Ｐ１およびＰ２はカルボキシル保護基を表す；かつ、Ｐ３は、カルボキシル保護基、ＨまたはＮａを表す。
【０００４】
化合物２は典型的には、カルバペネム母体核３を塩基の存在下でエルタペネムの側鎖４と縮合することによって調製される。この合成経路が下記のスキーム１に示される：
【化４】
2016000740.tif 000006
【０００５】
米国特許第５，４７８，８２０号（Ａ）は、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３がすべてアリルである化合物２、または、Ｐ１およびＰ２がｐ−ニトロベンジル（これは以降、ＰＮＢとして示される）であり、かつ、Ｐ３がアリルである化合物２、ならびに、それらの調製方法を開示する。
【０００６】
米国特許第６５０４０２７号（Ｂ１）は、カルバペネム母体核３（Ｐ１がＰＮＢである）をエルタペネムの側鎖４（ＮＰが
【化５】
2016000740.tif 000007
であり、かつ、Ｐ３がＨである）と縮合すること、および、水素化分解による脱保護を含む、エルタペネムナトリウムを製造するためのワンポットプロセスを提供する。国際公開第０２／０５７２６６号パンフレットおよび国際公開第０３／０２６５７２号パンフレットにより、類似したプロセスが報告された。
【０００７】
国際公開第９８／０２４３９号パンフレットは、カルバペネム母体核３（Ｐ１がＰＮＢである）を、９８％を超える変換率で塩基（例えば、ジイソプロピルアミンなど）の存在下でエルタペネムの側鎖４（Ｐ２がＰＮＢであり、かつ、Ｐ３がＨである）と縮合することを含む、Ｐ１およびＰ２がともにＰＮＢであり、かつ、Ｐ３がＨである化合物２を製造するためのプロセスを提供する。しかし、後処理および得られる生成物が国際公開第９８／０２４３９号パンフレットでは報告されなかった。
【０００８】
国際公開第２００８／０６２２７９号パンフレットは、Ｐ１およびＰ２がともにＰＮＢであり、かつ、Ｐ３がＨまたはＮａ＋である化合物２を製造するためのプロセスを提供する。Ｐ３がＨである化合物２の後処理のために、反応混合物が、緩衝溶液（ｐＨ＝７）または水、あるいは、緩衝溶液（ｐＨ＝７）（または水）と、酢酸エチルとの混合物に注がれ、化合物２がその後の処理の後で得られた。前者の状況については、前者の状況は生成物の接着を容易にもたらし、したがって、生成物の後処理における様々な困難および不良な純度（９０％未満）を生じさせることとなり、一方、後者の状況については、生成物を固体の形態で得ることができず、また、このプロセスは有機溶媒の使用のために環境保護に反した。この特許出願は生成物の物理化学的性質を提供しておらず、また、生成物の構造確認を行っていない。この特許出願はまた、Ｐ３がＮａ＋である化合物２およびその非晶質形態を製造するためのプロセスを報告する。ナトリウム源の導入はその後の反応における無機塩の総量の増大をもたらし、したがって、後処理を容易に行うことができず、このことは生成物の結晶化に不利である。
【０００９】
したがって、Ｐ３がＨである化合物２の物理化学的性質に関して先行技術では何ら報告されておらず、また、Ｐ３がＨである化合物２を先行技術によって高純度で得ることができない。すなわち、先行技術を使用して、Ｐ３がＨである化合物２を得ることができず、したがって、構造確認および物理化学的性質の測定を行うことができない。
【発明の概要】
【００１０】
エルタペネムに関する研究において、本発明者らが、高い純度および良好な貯蔵安定性を有する、非晶質形態における式２ａのエルタペネムの中間体を得たこと、そして、使用された調製方法が工業化のために容易かつ良好であることは驚くべきことである。
【００１１】
したがって、１つの局面において、本発明は、下記の式２ａのエルタペネムの中間体、好ましくは、非晶質形態における下記の式２ａのエルタペネムの中間体を提供する：
【化６】
2016000740.tif 000008
式中、Ｎｐは
【化７】
2016000740.tif 000009
を表し、Ｐ１およびＰ２はカルボキシル保護基を表す。
【００１２】
（発明の詳細な説明）
カルボキシル保護基は、アリルまたは置換アリル、ベンジルまたは置換ベンジル、置換エチル、置換シリル、芳香族環によって置換されたメチル、フェニルまたは置換フェニル、アセトニル、ｔ−ブチル、および、当業者によって知られている他の好適なカルボキシル保護基からなる群から選択される。
【００１３】
好ましくは、置換アリルは２−クロロアリルである。
【００１４】
好ましくは、置換ベンジルは、ニトロによって置換されたベンジル、および、メトキシルによって置換されたベンジルから選択される。
【００１５】
好ましくは、ニトロによって置換されたベンジルはｐ−ニトロベンジルである。
【００１６】
好ましくは、置換エチルは、２，２，２−トリクロロエチル、２−ブロモエチルおよび２−（トリメチルシリル）エチルから選択される。
【００１７】
好ましくは、芳香族環によって置換されたメチルは、２−メナフチル（ｍｅｎａｐｈｔｈｙｌ）、ベンズヒドリル、トリチルおよび４−ピリジルメチルから選択される。
【００１８】
好ましくは、置換シリルは、トリメチルシリル、ｔ−ブチル−ジメチルシリルおよびｔ−ブチル−ジフェニルシリルから選択される。
【００１９】
好ましくは、置換フェニルはｐ−メチルフェニルである。
【００２０】
好ましくは、式２ａのエルタペネムの中間体には、下記の化合物が含まれる：
（４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−３−［（３Ｓ，５Ｓ）−５−［（３−カルボキシフェニル）カルバモイル］−Ｎ−（ｐ−ニトロベンジルオキシカルボニル−ピロリジン−３−イル］チオ−６−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−４−メチル−７−オキソ−１−アザビシクロ［３．２．０］ヘプタ−２−エン−２−カルボン酸ｐ−ニトロベンジル、
（４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−３−［（３Ｓ，５Ｓ）−５−［（３−カルボキシフェニル）カルバモイル］−ピロリジン塩酸塩−３−イル）チオ−６−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−４−メチル−７−オキソ−１−アザビシクロ［３．２．０］ヘプタ−２−エン−２−カルボン酸ｐ−ニトロベンジル、
（４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−３−［（３Ｓ，５Ｓ）−５−［（３−カルボキシフェニル）カルバモイル］−Ｎ−（ｏ−ニトロベンジルオキシ）カルボニル−ピロリジン−３−イル］チオ−６−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−４−メチル−７−オキソ−１−アザビシクロ［３．２．０］ヘプタ−２−エン−２−カルボン酸ｏ−ニトロベンジル、
（４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−３−［（３Ｓ，５Ｓ）−５−［（３−カルボキシフェニル）カルバモイル］−Ｎ−（ｐ−メトキシベンジルオキシカルボニル−ピロリジン−３−イル］チオ−６−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−４−メチル−７−オキソ−１−アザビシクロ［３．２．０］ヘプタ−２−エン−２−カルボン酸ｐ−メトキシベンジル、
（４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−３−［（３Ｓ，５Ｓ）−５−［（３−カルボキシフェニル）カルバモイル］−Ｎ−（アリルオキシカルボニル−ピロリジン−３−イル）チオ−６−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−４−メチル−７−オキソ−１−アザビシクロ［３．２．０］ヘプタ−２−エン−２−カルボン酸アリルメチル、
（４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−３−［（３Ｓ，５Ｓ）−５−［（３−カルボキシフェニル）カルバモイル］−Ｎ−（２，２，２−トリクロロエチルオキシカルボニル−ピロリジン−３−イル）チオ−６−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−４−メチル−７−オキソ−１−アザビシクロ［３．２．０］ヘプタ−２−エン−２−カルボン酸２，２，２−トリクロロエチル、
（４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−３−［（３Ｓ，５Ｓ）−５−［（３−カルボキシフェニル）カルバモイル］−Ｎ−（ベンズヒドリルオキシカルボニル−ピロリジン−３−イル）チオ−６−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−４−メチル−７−オキソ−１−アザビシクロ［３．２．０］ヘプタ−２−エン−２−カルボン酸ベンズヒドリル、
（４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−３−［（３Ｓ，５Ｓ）−５−［（３−カルボキシフェニル）カルバモイル］−Ｎ−（トリメチルシリルオキシカルボニル−ピロリジン−３−イル）チオ−６−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−４−メチル−７−オキソ−１−アザビシクロ［３．２．０］ヘプタ−２−エン−２−カルボン酸トリメチルシリル、
（４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−３−［（３Ｓ，５Ｓ）−５−［（３−カルボキシフェニル）カルバモイル］−Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル−ピロリジン−３−イル）チオ−６−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−４−メチル−７−オキソ−１−アザビシクロ［３．２．０］ヘプタ−２−エン−２−カルボン酸ｔ−ブチル。
【００２１】
より好ましくは、式２ａのエルタペネムの中間体には、
（４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−３−［（３Ｓ，５Ｓ）−５−［（３−カルボキシフェニル）カルバモイル］−Ｎ−（４−ニトロベンジルオキシカルボニル−ピロリジン−３−イル］チオ−６−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−４−メチル−７−オキソ−１−アザビシクロ［３．２．０］ヘプタ−２−エン−２−カルボン酸ｐ−ニトロベンジル、および、
（４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−３−［（３Ｓ，５Ｓ）−５−［（３−カルボキシフェニル）カルバモイル］−ピロリジン塩酸塩−３−イル］チオ−６−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−４−メチル−７−オキソ−１−アザビシクロ［３．２．０］ヘプタ−２−エン−２−カルボン酸ｐ−ニトロベンジル
が含まれる。
【００２２】
別の局面において、本発明は、式２ａのエルタペネムの中間体、具体的には、非晶質形態における式２ａのエルタペネムの中間体を調製するための方法を提供する。本発明の方法は、式３のカルバペネム母体核を式４ａのエルタペネムの側鎖と縮合することを含み、反応が終了したとき、反応混合物が、式２ａの化合物を固体として生じさせるために酸水溶液に注がれることにおいて特徴づけられる。
【００２３】
本発明による式４ａのエルタペネムの側鎖は下記の構造を有する：
【化８】
2016000740.tif 000010
式中、Ｎｐは
【化９】
2016000740.tif 000011
を表し、かつ、Ｐ２はカルボキシル保護基を表す。
【００２４】
カルバペネム母体核３の調製が、例えば、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．、１９８０、１０２、６１６１〜６１６３において開示される（これは参照によって本明細書中に組み込まれる）。
【００２５】
エルタペネムの側鎖４ａの調製は、例えば、国際公開第９８／０２４３９号パンフレット、および、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ、２００２、６７、４７７１〜４７７６において開示される（これは参照によって本明細書中に組み込まれる）。
【００２６】
酸が、無機酸、有機酸、または、それらの任意の組合せから選択され、この場合、酸は任意の好適な濃度で存在する。
【００２７】
好ましくは、無機酸は、塩酸、硫酸、亜硫酸、リン酸、リン酸二水素カリウム、リン酸二水素ナトリウムまたはそれらの任意の組合せから選択される。
【００２８】
より好ましくは、無機酸は、塩酸、硫酸、リン酸、リン酸二水素ナトリウムまたはそれらの任意の組合せから選択される。
【００２９】
１つの好ましい実施形態において、無機酸は塩酸である。
【００３０】
１つの好ましい実施形態において、無機酸は硫酸である。
【００３１】
１つの好ましい実施形態において、無機酸はリン酸である。
【００３２】
好ましくは、有機酸は、ギ酸、酢酸、プロパン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、安息香酸、シュウ酸、クロロ酢酸、トリクロロ酢酸、トリフルオロ酢酸またはそれらの任意の組合せから選択される。
【００３３】
より好ましくは、有機酸は、酢酸、ｐ−トルエンスルホン酸またはそれらの任意の組合せから選択される。
【００３４】
酸水溶液のｐＨ値が２〜６である。
【００３５】
好ましくは、酸水溶液のｐＨ値が２〜５である。
【００３６】
より好ましくは、酸水溶液のｐＨ値が２．５〜４．５である。
【００３７】
さらに好ましくは、酸水溶液のｐＨ値が２．５〜４である。
【００３８】
最も好ましくは、酸水溶液のｐＨ値が３〜４である。
【００３９】
さらなる局面において、本発明は、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％の、式２ａのエルタペネムの中間体、好ましくは、非晶質形態における式２ａのエルタペネムの中間体と、残部としての不純物とを含む組成物を提供する。不純物には、未反応の式４ａのエルタペネムの側鎖、原料および分解生成物などが含まれる。
【００４０】
本発明による方法については、後処理において、使用される溶媒が水であり、その結果、有機溶媒が避けられ、したがって、本発明による方法は経済的であり、かつ、環境に優しい；生成物が遊離酸の形態で得られ、それにより、無機塩の導入を減らし、したがって、後続反応の処理のために良好である；生成物が非晶質形態であり、固体は高い純度を有し、易流動性であり、直ちに貯蔵可能であり、また、その後の脱保護反応の処理のために良好である。
【図面の簡単な説明】
【００４１】
【図１】本発明の実施例１で得られる化合物２ａの粉末Ｘ線回折パターンである。
【発明を実施するための形態】
【００４２】
本発明が、下記の実施例との組合せでさらに記載される。しかしながら、下記の実施例は本発明を限定しない。
【００４３】
装置および試験条件：
１．粉末Ｘ線分析
装置：Ｒｉｇａｋｕ  Ｄ／ＭＡＸ２５５０  Ｘ線回折計
走査条件：５°〜８０°／ステップ長：０．０２°／消費時間：０．１２秒、Ｃｕ（４０ＫＶ、１５０ｍＡ）、Ｉ（最大）２８２（最強ピークに対するピーク強度Ｉ＝２８２）（カウント／秒）。
【００４４】
２．ＨＰＣＬ分析
装置：Ａｇｉｌｅｎｔ１１００シリーズ
カラム：Ｇｅｍｉｎｉ  Ｃ１８（５μ、２５０×４．６ｍｍ）
試験条件：波長：２３０ｎｍ；移動相：０．０５％リン酸塩水溶液／アセトニトリル＝４０：６０（ｖ／ｖ）。
【００４５】
３．Ｈ−ＮＭＲ分析
装置：ＢＲＵＫＥＲ  ＡＶＡＮＣＥ  ＩＩ  ５００ＭＨｚ  ＮＭＲ分析計
溶媒：ＤＭＳＯ−ｄ６
【００４６】
４．ＭＳ分析
装置：Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ  ＡＰＩ４０００  ＬＣ−ＭＳ
試験条件：陽イオンのＡＬＬＳＡＣＡＮ  ＭＯＤＥ（ＥＳＩイオン源）、ＭＷ範囲：１００〜１５００ａｍｕ、カーテンガス（ＣＵＲ）：２５Ｌ／分、シースガス（Ｇｓ１）：３５Ｌ／分、補助ガス（Ｇｓ２）：４５Ｌ／分、イオン源（ＩＳ）電圧：５０００Ｖ、イオン源温度：５００℃、脱クラスター化電位（ＤＰ）：４０Ｖ、および、衝突室進入電位（ＥＰ）：１０Ｖ。
移動相：０．５％のギ酸：メタノール（５０：５０、ｖ／ｖ）を含有する２ｍＭ酢酸アンモニウム水溶液。
【００４７】
具体的に示されない限り、上記試験を製造者の推奨プログラムに従って行った。
【００４８】
実施例１：Ｎｐが
【化１０】
2016000740.tif 000012
を表し、かつ、Ｐ１およびＰ２がともにＰＮＢである化合物２ａの調製
３６．０ｇ（０．０６０５ｍｍｏｌ）のカルバペネム母体核３（Ｐ１がＰＮＢである）を３００ｍｌのＤＭＦに溶解し、その後、２６．７ｇ（０．０５９９ｍｏｌ）のエルタペネムの側鎖４ａ（Ｐ２がＰＮＢである）を加えた。反応混合物に、９．４ｇ（０．０７２７ｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを−３５℃でゆっくり加えた。反応を撹拌下で行った。反応が完了したとき、反応混合物をＨＣｌ水溶液（ｐＨ＝４）に注ぎ、ろ過し、４６．６ｇの固体を白色または灰白色の粉末として得た。純度：９８．２％（ＨＰＬＣによる）。収率：９８．５％。得られた固体を粉末Ｘ線回折によって分析した。結果は、固体が非晶質形態であったことを示した。図１は生成物の粉末Ｘ線回折パターンである。Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：  δ１．１８（ｄ，  ３Ｈ）；  １．２０（ｄ，  ３Ｈ）；  １．９５（ｍ，  １Ｈ）；  ２．８１（ｍ，  １Ｈ）；  ３．１８−３．４７（ｍ，  ３Ｈ）；  ３．６０−４．５０（ｍ，  ６Ｈ）；  ５．０４−５．４４（ｍ，  ５Ｈ）；  ７．３０−８．３０（ｍ，  １２Ｈ）；  １０．２７（ｄ，  １Ｈ）。ＭＳ：  ７８８．９（Ｍ−１），  ８１２．７（Ｍ＋Ｎａ）．
【００４９】
実施例２：Ｎｐが
【化１１】
2016000740.tif 000013
を表す化合物２ａの調製
式３のカルバペネム母体核（Ｐ１がＰＮＢを表す）およびエルタペネムの側鎖４ａ（Ｎｐが
【化１２】
2016000740.tif 000014
を表す）を反応物として使用したことを除いて、実施例１の調製方法を使用した。白色または灰白色の粉末としての３８．４ｇの固体を得た。純度：９８．０％（ＨＰＬＣによる）。収率：９８．３％。得られた固体を粉末Ｘ線回折によって分析した。結果は、固体が非晶質形態であったことを示した。ＭＳ：６４５．２（Ｍ−１）、６６９．１（Ｍ＋Ｎａ）。
【００５０】
実施例３〜９；Ｎｐが
【化１３】
2016000740.tif 000015
を表し、かつ、Ｐ１およびＰ２が他のカルボキシル保護基を表す化合物２ａの調製
カルバペネム母体核３およびエルタペネムの側鎖４ａ（Ｎｐが
【化１４】
2016000740.tif 000016
を表す）を反応物として使用したことを除いて、実施例１の調製方法を使用した。ただし、Ｐ１およびＰ２がともに、ｏ−ニトロベンジル、ｐ−メトキシルベンジル、アリル、２，２，２−トリクロロエチル、ベンズヒドリル、トリメチルシリルおよびｔ−ブチルである。結果を表１に示す。
【表１】
2016000740.tif 000017
【００５１】
結論：本発明の調製方法を使用する場合、様々な保護基を有するカルバペネム母体核３およびエルタペネムの側鎖４ａの縮合により、非晶質形態における固体を得ることができる。
【００５２】
実施例１０〜１７：生成物に対する酸の濃度の影響
ＨＣｌ水溶液のｐＨ値を、２、２．５、３、３．５、４．５、５、５．５および６に変化させたことを除いて、実施例１の調製方法を使用した。実験の結果を表２に示す。
【表２】
2016000740.tif 000018
【００５３】
結論：生成物の収率および純度がともに９７％を超えるので、ＨＣｌ水溶液の２〜５のｐＨ値が酸の好ましい濃度である。ＨＣｌ水溶液のｐＨ値が２．５〜４．５の範囲にあるとき、生成物の収率および純度がともに９８％を超える。
【００５４】
実施例１８〜２２  生成物に対する酸の種類の影響
硫酸、リン酸、リン酸二水素ナトリウム、酢酸およびｐ−トルエンスルホン酸が塩酸の代わりに使用されたことを除いて、実施例１の調製方法を使用した。結果を表３に示す。
【表３】
2016000740.tif 000019
【００５５】
結論：種々の種類の無機酸および有機酸を本発明において使用することができ、得られた生成物の収率および純度がともに９６％を超える。
【００５６】
比較例：関連特許の国際公開第２００８０６２２７９号パンフレットにおける化合物２ａ（Ｐ１およびＰ２がともにＰＮＢである）の様々な例の実験結果
比較例１：国際公開第２００８０６２２７９号パンフレットの実施例１の実験結果
８．３ｇのエルタペネムの側鎖４ａ（Ｎｐが
【化１５】
2016000740.tif 000020
を表し、かつ、Ｐ２がＰＮＢである）を３０ｍＬのＤＭＦに溶解し、これに１０ｇのカルバペネム母体核３（Ｐ１がＰＮＢである）を加えた。反応混合物に、５．４ｇのジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）を−３０℃で加え、撹拌した。反応が完了したとき、反応混合物を６０ｍＬのＴＨＦにより希釈し、緩衝溶液（ｐＨ＝７）と、３００ｍＬの酢酸エチルとの混合物に注いだ。有機層を分離し、ろ液をＮａＣｌ水溶液により洗浄し、活性炭により処理した。溶媒を４０℃における減圧下での濃縮によって除いた。残渣を５０ｍＬの酢酸エチルとともに撹拌した。固体が何ら沈殿しなかった。
【００５７】
比較例２：国際公開第２００８０６２２７９号パンフレットの実施例３の実験結果
８．３ｇのエルタペネムの側鎖４ａ（Ｎｐが
【化１６】
2016000740.tif 000021
を表し、かつ、Ｐ２がＰＮＢである）を３０ｍＬのＤＭＦに溶解し、これに１０ｇのカルバペネム母体核３（Ｐ１がＰＮＢである）を加えた。反応混合物に、５．４ｇのジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）を−３０℃で加え、撹拌した。反応が完了したとき、反応混合物を水に注ぎ、撹拌した。生成物が接着して、球状化した。減圧下でろ過した後、得られた固体は洗浄が困難であった。固体を乾燥し、純度を求めた。純度は（ＨＰＬＣにより）８６％であった。再結晶を、１種類またはそれ以上の溶媒系（例えば、エステル、ケトン、ハロ炭化水素、アルカン、芳香族炭化水素、アルコール、エーテル、非プロトン性溶媒および水など）を使用して行った。固体が何ら沈殿しなかった。
【００５８】
結論：国際公開第２００８０６２２７９号パンフレットの実施例１および実施例３に開示される調製方法によって、固体を何ら得ることができなかったか、または、得られた固体は、貯蔵には適していない不良な純度を有し、構造確認のために使用することができないことが、比較例１および比較例２の結果から理解することができる。
【図１】
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