(57)【要約】【課題】細胞や組織を培養し、これらを生きたままの状態で位相差顕微鏡によって撮像することができるプラスチック製容器を提供する。【解決手段】プラスチック製容器１０は、ウェル１１を２つ以上有するマルチウェルプレートである。ウェル１１の開口の直径Ｒは、０．５ｍｍ以上２ｃｍ未満であり、かつ、ウェル１１の深さＤは、２ｍｍ以上２ｃｍ未満である。ウェル１１の内側面１１ａは撥水性を有し、かつ、ウェル１１の底面１１ｂは親水性を有する。【選択図】図２
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
開口の円相当径が０．５ｍｍ以上２ｃｍ未満、かつ、深さが２ｍｍ以上２ｃｍ未満であるウェルを少なくとも２つ以上有するプラスチック製容器において、
前記ウェルの内側面が撥水性を有し、かつ、前記ウェルの底面が親水性を有するプラスチック製容器。
【請求項２】
前記ウェルの内側面には、フッ素を含む撥水性コートが設けられており、
前記撥水性コートのフッ素含有量が０．０１ｍｇ以上１．５ｍｇ／ｃｍ２未満である請求項１に記載のプラスチック製容器。
【請求項３】
前記ウェルの内側面は、ダイヤモンドライクコーティングが設けられている請求項１に記載のプラスチック製容器。
【請求項４】
前記ウェルの内側面は、純水に対する接触角が７５度以上１００度以下である請求項１〜３のいずれか１項に記載のプラスチック製容器。
【請求項５】
前記ウェルの底面は、純水に対する接触角が０度以上７０度以下である請求項１〜４のいずれか１項に記載のプラスチック製容器。
【請求項６】
前記ウェルの内側面の純水に対する接触角と、前記ウェルの底面の純水に対する接触角との差が、５度以上１１０度以下である請求項１〜５のいずれか１項に記載のプラスチック製容器。
【請求項７】
前記ウェルの内側面は、粗面化されている請求項１に記載のプラスチック製容器。
【請求項８】
前記ウェルの内側面は、気相法による表面処理が施されている請求項１に記載のプラスチック製容器。
【請求項９】
ポリスチレン、ポリエチレンテレフタレート、またはポリカーボネートで形成されている請求項１〜８のいずれか１項に記載のプラスチック製容器。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、細胞や組織を培養し、かつ、培養した細胞や組織を観察するためのプラスチック製容器に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、創薬や再生医療の分野において、染色等をせず、生きたままの細胞や組織（以下、生細胞という）を撮像する技術に注目が集まっている。位相差顕微鏡は、生細胞を撮像するための代表的な装置であり、リングスリットを有する位相差観察用コンデンサと、リング状の位相差板を有する位相差観察用対物レンズとを備える。生細胞はプラスチック製容器に入れられた状態で、位相差観察用コンデンサと位相差観察用対物レンズとの間に配置され、撮像される。近年ではスクリーニングをハイスループット化するために、位相差顕微鏡で用いられるプラスチック製容器は、生細胞を培養するための培養容器を兼ねており、生細胞を培養及び観察するための複数の凹部（以下、ウェルという）を有している。このようなプラスチック製容器は、マイクロプレート、マイクロタイタープレート、マイクロウェルプレート、マルチウェルプレート、または、ウェルプレート等と呼ばれる。
【０００３】
ところで、プラスチック製容器（あるいはウェルの内壁）の培養液に対する性質や、ウェルの開口の大きさによっては、生細胞を培養するための培養液の表面が凹状または凸状に湾曲する場合がある。すなわち、培養液の液面がメニスカスになる場合がある。培養液の液面がメニスカスになっていると、ウェルの壁面付近とウェルの中央付近とで、培養液中を通過する光に位相差が生じる。また、培養液の液面のメニスカスがレンズとして作用してしまう。位相差顕微鏡は、位相差をコントラストに変換して観察するので、培養液液面のメニスカスによって、ウェル内での位置による位相差が生じたりすると、生細胞を正常に撮像できないことや、生細胞を撮像できるとしても、画質が良くない場合がある。このため、ウェルに入れた培養液の液面に、透明な平板を浮かせることにより、培養液の液面を平面化する方法が知られている（特許文献１）。
【０００４】
この他、上記のように位相差顕微鏡で用いるのに好適なプラスチック製容器ではないが、生物分野や生化学分野では、様々な工夫がされたプラスチック製容器が知られている。例えば、ウェルの内側面を撥水性（疎水性）にし、底面を親水性にすることで、ＤＮＡ（DeoxyriboNucleic Acid）等の親水性溶液をウェルの底面にスムースに誘導するようにしたプラスチック製容器が知られている（特許文献２）。同様に、試薬分析用のプラスチック製容器においても、ウェルの内側面を撥水性にし、底面を親水性にすることで、親水性溶液をウェルの底面にスムースに誘導する場合がある（特許文献３）。ウェルに入れる水溶液を溢れ難くしたり、ウェル間での試料混入による汚染（クロスコンタミネーション）を防止したりするために、ウェルの内側面を撥水性にするプラスチック製容器も知られている（特許文献４，５）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特許第３１３３７８６号
【特許文献２】特開２００２−０６５２９９号公報
【特許文献３】特表２００２−５２５５７３号公報
【特許文献４】特開２００３−０６６０３３号公報
【特許文献５】特開２００４−２１２３５９号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
特許文献１のように、ウェルに入れた培養液の液面に透明な平板を浮かせると、培養液の液面を平面化し、メニスカスを低減することができるが、培養液内の生細胞への酸素の供給路が絶たれてしまう。このため、培養液の液面に透明な平板を浮かせてメニスカスを低減すると、生細胞は死滅し、あるいは、生細胞に多大なストレスを与えてしまうので、この方法で生細胞を撮像し、観察するのは困難である。
【０００７】
すなわち、生細胞を培養し、生きたままの状態で撮像し、観察するためには、ウェルは開口させておくことが必要である。そして、位相差顕微鏡で生細胞を撮像するためには、ウェルを開口させた状態で、培養液の液面に生じるメニスカスを低減する必要がある。
【０００８】
本発明は、細胞や組織を培養し、これらを生きたままの状態で位相差顕微鏡によって撮像することができるプラスチック製容器を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明のプラスチック製容器は、開口の円相当径が０．５ｍｍ以上２ｃｍ未満、かつ、深さが２ｍｍ以上２ｃｍ未満であるウェルを少なくとも２つ以上有するプラスチック製容器において、ウェルの内側面が撥水性を有し、かつ、ウェルの底面が親水性を有する。
【００１０】
ウェルの内側面には、フッ素を含む撥水性コートが設けられており、撥水性コートは、フッ素含有量が０．０１ｍｇ以上１．５ｍｇ／ｃｍ２未満であることが好ましい。
【００１１】
ウェルの内側面は、ダイヤモンドライクコーティングが設けられていることが好ましい。
【００１２】
ウェルの内側面は、純水に対する接触角が７５度以上１００度以下であることが好ましい。
【００１３】
ウェルの底面は、純水に対する接触角が０度以上７０度以下であることが好ましい。
【００１４】
ウェルの内側面の純水に対する接触角と、ウェルの底面の純水に対する接触角との差が、５度以上１１０度以下であることが好ましい。
【００１５】
ウェルの内側面は、粗面化されていることが好ましい。
【００１６】
ウェルの内側面は、気相法による表面処理が施されていることが好ましい。
【００１７】
ポリスチレン、ポリエチレンテレフタレート、またはポリカーボネートで形成されていることが好ましい。
【発明の効果】
【００１８】
本発明のプラスチック製容器は、細胞や組織を培養し、これらを生きたままの状態で位相差顕微鏡によって撮像することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】プラスチック製容器の外観図である。
【図２】プラスチック製容器の断面図である。
【図３】ウェルの内側面に対する純水の接触角を示す説明図である。
【図４】ウェルの底面に対する純水の接触角を示す説明図である。
【図５】培養液の液面を示す説明図である。
【図６】位相差顕微鏡の説明図である。
【図７】比較例のプラスチック製容器における培養液の液面を示す説明図である。
【図８】比較例のプラスチック製容器における培養液の液面を示す説明図である。
【図９】内側面が傾斜したウェルを有するプラスチック製容器である。
【図１０】内側面が傾斜したウェルを有するプラスチック製容器である。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
図１に示すように、プラスチック製容器１０は、生物の細胞や組織等の生細胞を培養する容器であり、かつ、培養した生細胞を位相差顕微鏡で撮像（あるいは観察）するための容器である。また、プラスチック製容器１０は、いわゆるマルチウェルプレートであり、円形に開口された複数のウェル１１を有している。ウェル１１は、培養及び培養後に撮像する生細胞と生細胞を培養するための培養液を入れる凹部である。図１では、一例として、８行１２列の９６個のウェル１１を有する９６ウェルプレートを示しているが、プラスチック製容器１０は、ウェル１１を少なくとも２つ以上有していれば良く、ウェル１１の個数は任意である。９６ウェルプレートの他には、ウェル１１が、６個、２４個、または３８４個のマルチウェルプレートがよく用いられる。
【００２１】
プラスチック製容器１０に好適な材料は、例えば、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ＴＡＣ（トリアセチルセルロース）、ポリイミド（ＰＩ）、ナイロン（Ｎｙ）、低密度ポリエチレン（ＬＤＰＥ）、中密度ポリエチレン（ＭＤＰＥ）、塩化ビニル、塩化ビニリデン、ポリフェニレンサルファイド、ポリエーテルサルフォン、ポリエチレンナフタレート、ポリプロピレン、ウレタンアクリレート等のアクリル系材料、セルロース、ガラス等が挙げられる。また、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリカプロラクタン、もしくはその共重合体のような生分解性ポリマー等の樹脂等を用いることができる。これらなかでも、ポリエチレンテレフタレート、ポリスチレン、ポリカーボネートを好ましく用いることができ、特に、ポリスチレンを好ましく用いることができる。細胞毒性が低いからである。また、プラスチック製容器１０の表面は、任意の表面処理（例えば、プラズマ、コロナ、マイクロウェーブ、電子線および紫外線等の照射等）が施されていても良い。
【００２２】
図２に示すように、ウェル１１は非貫通孔であり、プラスチック製容器１０の表面に開口されている。ウェル１１には、開口から、培養する生細胞１３と生細胞１３を培養するための培養液１２（例えば血清液）とが注入される。プラスチック製容器１０を用いる場合、ウェル１１は開口されているので、ウェル１１に注入された培養液１２は、生細胞１３の培養中及び位相差顕微鏡での撮像時にも常にウェル１１の開口近傍で空気に接触する。このため、培養された生細胞１３は生きたまま位相差顕微鏡によって撮像（観察）される。
【００２３】
プラスチック製容器１０では、ウェル１１は、開口の直径Ｒが０．５ｍｍ以上２ｃｍ未満に形成され、深さＤが２ｍｍ以上２ｃｍ未満に形成されている。ウェル１１の開口の直径Ｒが０．５ｍｍ以上２ｃｍ未満に形成されているのは、同一環境下で培養された生細胞１３の細胞数をばらつきなく収束したデータを取得するために好ましいからである。ウェル１１の開口の直径Ｒは、１ｍｍ以上であることがより好ましい。ウェル１１の開口の直径Ｒが２ｃｍ未満の場合には、培養液１２の液面１２ａのメニスカスが顕著になるので、本発明が特に有用であり、ウェル１１の開口の直径Ｒは１ｃｍ以下である場合に特に好適である。例えば、９６個のウェル１１を有する９６ウェルプレートの場合、ウェル１１の開口の直径は例えば６ｍｍである、３８４個のウェル１１を有する３８４ウェルプレートの場合、ウェル１１の開口の直径は例えば３ｍｍである。
【００２４】
ウェル１１の深さＤとは、ウェル１１の底面１１ｂから開口（プラスチック製容器１０の表面）までの高さであり、ウェル１１の深さＤが２ｍｍ以上に形成されているのは、生細胞１３を培養するために十分な培地を確保し、かつ、生細胞１３を培養するために十分な培養液１２の量を確保するためである。ウェル１１の深さＤが２ｃｍ未満に形成されているのは、透過型顕微鏡で観察する場合のケラレによる周辺視野の光量低下を防ぐためである。ウェル１１の深さＤが３ｍｍ以上１ｃｍ以下の範囲内であれば、生細胞１３の培養及び撮像に特に好適である。また、ウェル１１に入れる培養液１２の量は、ウェル１１の深さＤの１／２以下であることが好ましい。
【００２５】
また、ウェル１１の内側面１１ａは、撥水性を有している。図３に示すように、ウェル１１の内側面１１ａには、例えば、フッ素を含む撥水性コート１７が設けられており、純水の微小な液滴１６を滴下した場合に、液滴１６とウェル１１の内側面１１ａとの接触角αが、７５度以上１１０度以下になる撥水性を有する。ウェル１１の内側面１１ａは、純水の液滴１６との接触角αが８０度以上１００度以下になる撥水性を有することがより好ましく、純水の液滴１６との接触角αが８５度以上９５度以下であることが特に好ましい。接触角αは、ウェル１１の内側面１１ａの一部を切り出し、純水の液滴１６を滴下して市販の接触角計によって測定することができる。撥水性コート１７のフッ素含有量は０．０１ｍｇ以上１．５ｍｇ／ｃｍ２未満であることが好ましい。撥水性コート１７のフッ素含有量が０．０１ｍｇ未満の場合、撥水性コート１７にピンホールが形成される、撥水性コート１７の耐久性が低いために溶解するなどの不具合が生じる場合がある。また、撥水性コート１７のフッ素含有量が１．５ｍｇ／ｃｍ２以上の場合、撥水性コート１７が厚くなり、ウェル１１の観察視野が狭くなってしまう場合がある。
【００２６】
ウェル１１の底面１１ｂは、親水性を有する。ウェル１１の底面１１ｂは、例えば、プラズマ処理（ＩＨＩ技報Vol.52 No.4(2012) p.65）やコロナ処理等によって、プラスチック製容器１０の材料の表面に対して親水化処理が施されており、図４に示すように、ウェル１１の底面１１ｂに対する純水の微小な液滴１６の接触角βは、０度以上７０度以下担っている。ウェル１１の底面１１ｂに親水性を持たせているのは、生細胞１３をウェル１１の底面１１ｂに安定的に吸着させ、培養（成長）させるためである。生細胞１３を安定して培養するためには、ウェル１１の底面１１ｂは、純水の液滴１６の接触角βが１０度以上６５度以下になる親水性を有していることが特に好ましい。
【００２７】
プラスチック製容器１０は、上記のように、開口の直径Ｒ及び深さＤが定められ、内側面１１ａが撥水性を有し、かつ、底面１１ｂが親水性を有するウェル１１を備えている。このため、図５に示すように、ウェル１１に生細胞１３と培養液１２を注入すると、ウェル１１の内側面１１ａと培養液１２の液面１２ａのなす角γ１は、概ね９０度になる。培養液１２の成分は、複数あるウェル１１毎に（あるいはウェル１１の内容物を入れ替えた測定毎に）変わることがあるが、何れの場合も培養液１２が水溶液であることに変わりはないので、プラスチック製容器１０を用いれば、透明な平板を培養液１２に浮かせるまでもなく、プラスチック製容器１０を用いるだけで、ウェル１１の内側面１１ａに対する培養液１２の液面１２ａのなす角度γ１は概ね９０度になる。
【００２８】
プラスチック製容器１０で培養された生細胞１３を培養した後、あるいは生細胞１３の培養の過程で、生細胞１３はプラスチック製容器１０ごと位相差顕微鏡にセットされ、撮像される。例えば、図６に示すように、位相差顕微鏡２０は、照明光を発する光源２１と、位相差観察用コンデンサ２２と、位相差観察用対物レンズ２６と、撮像センサ２９を備え、プラスチック製容器１０は、位相差観察用コンデンサ２２と位相差観察用対物レンズ２６との間に配置される。なお、図６では、位相差観察用対物レンズ２６からの光が直接入射する位置に撮像センサ２９を配置しているが、位相差観察用対物レンズ２６と撮像センサ２９の間には図示しないミラーを配置し、位相差観察用対物レンズ２６からの光をミラーによって９０度曲げて撮像センサ２６に入射するようにしても良い。
【００２９】
位相差観察用コンデンサ２２は、リング上のスリットが設けられたリングスリット２３とコンデンサレンズ２４を有しており、光源２１が発した照明光をリングスリット２３によってリンク状にし、コンデンサレンズ２４によってプラスチック製容器１０の特定のウェル１１を通過させる。位相差観察用対物レンズ２６は、対物レンズ２７とリング状の位相差板２８とを有しており、特定のウェル１１を通過した光を対物レンズ２７によって撮像センサ２９に結像させる。その過程で、位相差板２８によって特定のウェル１１を通過した光の位相差をずらす。ウェル１１に生細胞１３がなければ、全ての光路の光が位相差板２８を通るので、全体が均一な明るさの像が撮像される。
【００３０】
一方、ウェル１１に生細胞１３があると、生細胞１３を通る光と、培養液１２だけを通る光との間には光路長に差が生じる。このため、位相差板２８によって位相を１／４波長進め、または１／４波長遅らせることによって、これらの各光を干渉させることにより、生細胞１３を通る光と培養液１２だけを通る光との位相差がコントラストとして撮像される。すなわち、透明な培養液１２中にあるほぼ透明な生細胞１３が撮像センサ２９によって撮像される。
【００３１】
上記のように、位相差顕微鏡２０でウェル１１中にある生細胞１３を撮像する場合、位相差顕微鏡２０は、生細胞１３による回折光の位相差をコントラストとして撮像するので、培養液１２の液面１２ａがウェル１１の内側面１１ａに対して略垂直であり、培養液１２によって位相差が生じないことが前提となっている。プラスチック製容器１０によれば、ウェル１１の内側面１１ａに対して培養液１２の液面１２ａはほぼ垂直になっているので、生細胞１３の培養容器であるプラスチック製容器１０をそのまま用い、位相差顕微鏡２０で生細胞１３を生きたままの状態で良好な画質で撮像することができる。
【００３２】
例えば図７に示すように、ウェル１１の寸法や内側面１１ａまたは底面１３ｂの特性が上記実施形態の特性を満たさない比較例のプラスチック製容器１１０では、培養液１２の液面１２ａがウェル１１の内側面１１ａとなす角γ２が９０度よりも大きくなって、培養液１２の液面１２ａは凹状のメニスカスになる。同様に、例えば図８に示すように、比較例のプラスチック製容器１２０では、培養液１２の液面１２ａがウェル１１の内側面１１ａとなす角γ３が９０度よりも小さくなって、培養液１２の液面１２ａは凸状のメニスカスになる。これらのように、培養液１２の液面１２ａがメニスカスになると、ウェル１１内の位置によって培養液１２を通過する光路長が違うので、ウェル１１を通過する光にはその分の位相差が生じる。また、培養液１２の液面１２ａのメニスカスによってレンズとして作用してしまう。これらのことから、上記実施形態の特性を満たさない比較例のプラスチック製容器１１０，１２０では、生細胞１３を正しく撮像できなかったり、画質が悪かったりするが、上記実施形態のプラスチック製容器１０によれば、こうした不具合がなく、生細胞１３を生きたままの状態で位相差顕微鏡２０によって正しくかつ高画質で撮像することができる。
【００３３】
上記実施形態では、プラスチック製容器１０の表面及び裏面に対して、ウェル１１の内側面１１ａが略垂直であるが、ウェル１１は、図９に示すプラスチック製容器２１０のように、内側面２１１ａが傾斜し、開口から底面２１１ｂにかけて窄まる形状のウェル２１１にしても良い。また、図１０に示すプラスチック製容器２２０のように、内側面２２１ａが傾斜し、開口から底面２２１ｂにかけて拡がる形状のウェル２２１にしても良い。プラスチック製容器２１０，２２０のように、内側面が傾斜したウェルを形成する場合も、ウェルの内側面の傾斜が数度程度であれば、上記実施形態のプラスチック製容器１０のウェル１１と同様に形成すれば、培養液１２の液面１２ａを略水平にすることができる。
【００３４】
また、図１０に示すプラスチック製容器２２０のように、開口から底面２２１ｂにかけて拡がる形状のウェル２２１を形成する場合、プラスチック製容器２２０の成形方法は射出一体成型でも良く、ウェル２２１の内側面２２１ａを形成する孔を設けた第１プレート２３１と、ウェル２２１の底面２２１ｂを形成する第２プレート２３２とをそれぞれ別々に成形し、これらを貼合成形しても良い。もちろん、上記実施形態のプラスチック製容器１０や図９に示すプラスチック製容器２１０を作製する場合も、ウェルの内側面を形成する孔を設けた第１プレートと、ウェルの底面を形成する第２プレートとを別々に作成し、これらを貼合しても良い。
【００３５】
上記実施形態では、ウェル１１は円形に開口しているが、ウェル１１の開口形状は任意であり、四角形等、任意の形状に開口していても良い。この場合、上記実施形態におけるウェル１１の開口の直径Ｒとは、開口の面積を円に換算した場合の直径（以下、円相当径という）である。例えば、１辺が長さｐの正方形の場合、Ｒ＝２（ｐ２／π）１／２である。
【００３６】
上記実施形態では、ウェル１１の内側面１１ａは、撥水性コート１７を設けることによって撥水性を有しているが、撥水性コート１７を設ける代わりに、ウェル１１の内側面１１ａをサンドブラスト等により粗面化し、表面に細かい凹凸を設けることにより撥水性を持たせても良い。また、大気圧プラズマ処理や紫外線照射処理等の気相法による表面処理によって、ウェル１１の内側面１１ａに撥水性を持たせても良い。
【００３７】
上記実施形態では、フッ素を含む撥水性コート１７（いわゆるフッ素コーティング）によってウェル１１の内側面１１ａに撥水性を持たせているが、シリコーン樹脂をコーティングすることによってウェル１１の内側面１１ａに撥水性を持たせても良い。
【００３８】
上記実施形態では、フッ素を含む撥水性コート１７によってウェル１１の内側面１１ａに撥水性を持たせているが、フッ素を含む撥水性コート１７の代わりに、ダイヤモンドライクコーティングを設けることにより、ウェル１１の内側面１１ａに撥水性を持たせても良い。ダイヤモンドライクコーティングは、例えば、大気圧プラズマ処理とカーボンコーティングの組み合わせによって形成される。この場合に形成されるダイヤモンドライクコーティングは、ダイヤモンドライクカーボン（Diamond‐Like Carbon）である。カーボンコーティングの代わりにシリコン（Ｓｉ）を用いてダイヤモンドライクコーティングを形成することができる。ダイヤモンドライクコーティングを用いる場合、培養液１２の液面１２ａのメニスカス形状の経時安定性に特に優れ、環境安全性も高い。
【００３９】
また、フッ素を含む撥水性コート１７を設ける代わりに、プラスチック製容器１０の基材をウェル１１の内側面１１ａに露呈させておくことで、ウェル１１の内側面１１ａに撥水性を持たせても良い。プラスチック製容器１０をポリスチレンで形成する場合、プラズマ処理やコロナ処理等によって親水化処理を施すと、ポリスチレンに対する純水の液滴１６の接触角αは７０度以下になるが、こうした親水化処理を行わなければ、ポリスチレンに対する純水の液滴１６の接触角αは約９１度である。したがって、親水化処理を行っていないポリスチレンをウェル１１の内側面１１ａに露呈させておけば、ウェル１１の内側面１１ａに上記実施形態と同様の撥水性を持たせることができる。
【００４０】
撥水性コート１７の厚さは、０．００１μｍ以上１０００μｍ以下であることが好ましい。同様に、撥水性コート１７の代わりに上記各種処理等をウェル１１の内側面１１ａに施す場合も同様であり、撥水性を有する層や撥水性を持たせるための各種処理を施す層（撥水処理層）の厚さは、０．００１μｍ以上１０００μｍ以下であることが好ましい。撥水性コート１７等の厚さが０．００１μｍ未満の場合、撥水性コート１７等が薄すぎてその他の条件が満たされていても必要な撥水性が得られない場合があり、１０００μｍよりも厚いと、ウェル１１の視野が狭窄されてしまうからである。また、撥水性コート１７が十分な連続性を有するためには、撥水性コート１７の厚さは０．０２μｍ以上であることが好ましい。さらに、撥水性コート１７が十分な耐擦性を有し、実用上、すぐに撥水性が低下してしまうのを防ぎ、繰り返しの利用に耐え得るようにするためには、撥水性コート１７の厚さは０．５μｍ以上であることが特に好ましい。
【００４１】
撥水性コート１７や撥水性コート１７の代わりに施す各種処理等は、ウェル１１の内側面１１ａの全部に施されている必要はない。ウェル１１の内側面１１ａは、少なくとも培養液１２の液面がウェル１１の内側面１１ａに接触し得る範囲において、撥水性コート１７等による撥水性を有していれば良い。
【００４２】
なお、上記実施形態では、ウェル１１の内側面１１ａの撥水性と底面１１ｂの親水性は、それぞれ別々に設定することができるが、生細胞１３の培養と位相差顕微鏡２０による観察を両立させるためには、ウェル１１の内側面１１ａの撥水性と底面１１ｂの親水性のバランスが重要である。このため、例えば、ウェル１１の内側面１１ａに対する純水の液滴１６の接触角αと、ウェル１１の底面１１ｂに対する純水の液滴１６の接触角βの差（｜α−β｜）は、５度以上１１０度以下であることが好ましく、１０度以上８０度以下であることがより好ましい。
【００４３】
なお、位相差顕微鏡２０で生細胞１３を撮像して得た画像は、例えば、画像処理により培養した生細胞１３の細胞数を取得するために用いることができる。生細胞１３の細胞数は、例えば、Ｏｔｓｕ法をはじめとする閾値分離の方法、Level Set法をはじめとする機械学習を用いた方法などによって画像から細胞を検出し、その個数を計数することによって取得することができる。
【００４４】
また、上記実施形態のプラスチック製容器１０を用いれば、生細胞１３を生きたままの状態で位相差顕微鏡２０によって撮像することができるので、位相差顕微鏡２０による撮像後、生細胞１３の培養を継続した後に再び位相差顕微鏡２０によって同じウェル１１を位相差顕微鏡２０で撮像することができる。このため、培養と撮像を繰り返すことにより得た複数の画像を用いて画像処理をすることにより、細胞系統樹を取得することができる。細胞系統樹の取得方法は、カーネギーメロン大Kanadeらの方法（“Cell Image Analysis: Algorithms, System and Applications” 2011 IEEE Workshop on Applications of Computer Vision, WACV 2011など）でもよいし、Kurokawaらの方法（”Software for precise tracking of cell proliferation” Biochemical and Biophysical Research Communications 417 (2012) 1080-1085）でもよい。
【００４５】
なお、上記実施形態では、プラスチック製容器１０を用いて位相差顕微鏡２０で生細胞１３を撮像しているが、透過顕微鏡等、他の顕微鏡等を用いた撮像や観察にもプラスチック製容器１０は好適である。
【符号の説明】
【００４６】
１０  プラスチック製容器
１１  ウェル
１１ａ  内側面
１１ｂ  底面
１２  培養液
１６  純水の液滴
【図１】
2016067322.tif 000003
【図２】
2016067322.tif 000004
【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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