(57)【要約】【課題】浸液による生体試料の温度低下を効率的に抑制する技術を提供する。【解決手段】浸液保持具１０には、液浸系対物レンズ４を浸す浸液９を蓄える凹部が形成されている。浸液保持具１０は、液浸系対物レンズ４とマウス２の間に配置されたときにマウス２を保温する保温構造２０を備えている。保温構造２０は、光を透過させる構造であり、その一面は、凹部の底面をなしている。【選択図】図２
2016177110.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
対物レンズを浸す浸液を蓄える凹部が形成された液浸保持具であって、
前記液浸保持具が前記対物レンズと試料の間に配置されたときに前記試料を保温する保温構造を備え、
前記保温構造は、光を透過させる構造であり、
前記保温構造の一面は、前記凹部の底面をなす
ことを特徴とする液浸保持具。
【請求項２】
請求項１に記載の液浸保持具において、
前記保温構造は、前記凹部の底面をなす面とは反対の面に、光を透過させる発熱部材を備える
ことを特徴とする液浸保持具。
【請求項３】
請求項２に記載の液浸保持具において、
前記発熱部材は、
光を透過させる基材と、
前記基材表面に形成された導電性を有する導電層であって、光を透過させる導電層と、
前記導電層上に形成された電極と、
前記導電層及び前記電極を覆う保護部材であって、光を透過させる保護部材と、を備える
ことを特徴とする液浸保持具。
【請求項４】
請求項２又は請求項３に記載の液浸保持具において、さらに、
前記試料に固定されるマウント部材を備え、
前記保温構造は、前記マウント部材に着脱自在に固定される
ことを特徴とする液浸保持具。
【請求項５】
請求項２乃至請求項４のいずれか１項に記載の液浸保持具において、
前記保温構造に貫通穴が形成されている
ことを特徴とする液浸保持具。
【請求項６】
請求項２乃至請求項５のいずれか１項に記載の液浸保持具において、
前記保温構造は、観察位置の特定を補助するマークを備える
ことを特徴とする液浸保持具。
【請求項７】
請求項１に記載の液浸保持具において、
前記保温構造は、内部に真空空間が形成された断熱構造を備える
ことを特徴とする液浸保持具。
【請求項８】
請求項７に記載の液浸保持具において、
前記保温構造は、前記凹部の底面をなす面とは反対の面の一部に、遠赤外線を吸収し放射する部材を備える
ことを特徴とする液浸保持具。
【請求項９】
請求項７に記載の液浸保持具において、
前記保温構造は、前記凹部の底面をなす面とは反対の面の一部に、遠赤外線を反射する部材を備える
ことを特徴とする液浸保持具。
【請求項１０】
請求項１乃至請求項９のいずれか１項に記載の液浸保持具を備えることを特徴とする顕微鏡。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、浸液を保持する浸液保持具、及び、顕微鏡の技術に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、脳機能解析のための一手法として、実験動物の脳を生きたまま顕微鏡で観察する手法が採用されている。この手法では、実験動物の脳のような比較的大きな生体試料を深部まで観察するために、長い作動距離（ＷＤ）を有する液浸系対物レンズを備えた多光子励起顕微鏡（例えば、ＭＰＥ−ＬＳＭなど）が使用される。このような顕微鏡は、例えば、特許文献１に記載されている。
【０００３】
長いＷＤの液浸系対物レンズが観察に使用される場合、生体試料と対物レンズの間には多くの浸液が存在するため、浸液によって生体試料が冷えてしまうことがある。生体試料の温度が低下した状態は侵襲度が高く生体試料が過度のダメージを受ける可能性があり、好ましくない。
【０００４】
このような課題に関連する技術は、例えば、特許文献２に記載されている。特許文献２には、生体試料が配置されている空間を恒温化する技術が記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２０１４−０４８５４９号公報
【特許文献２】特開２００８−２５６９２７号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
特許文献２に記載の技術を用いることで、生体試料の温度の低下を抑制することができるが、マウスのような比較的大きな生体試料の観察に用いるためには、大きな恒温室が必要である。また、浸液から生体試料への熱の流れを抑制するためには、浸液全体を温めて生体試料との温度差を小さくする必要がある。このため、浸液の量が多い場合には効率的ではない。
【０００７】
以上のような実情を踏まえ、本発明では、浸液による生体試料の温度低下を効率的に抑制する技術を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明の第１の態様は、対物レンズを浸す浸液を蓄える凹部が形成された液浸保持具であって、前記液浸保持具が前記対物レンズと試料の間に配置されたときに前記試料を保温する保温構造を備え、前記保温構造は、光を透過させる構造であり、前記保温構造の一面は、前記凹部の底面をなす液浸保持具を提供する。
【０００９】
本発明の第２の態様は、第１の態様に記載の液浸保持具において、前記保温構造は、前記凹部の底面をなす面とは反対の面に、光を透過させる発熱部材を備える液浸保持具を提供する。
【００１０】
本発明の第３の態様は、第２の態様に記載の液浸保持具において、前記発熱部材は、光を透過させる基材と、前記基材表面に形成された導電性を有する導電層であって、光を透過させる導電層と、前記導電層上に形成された電極と、前記導電層及び前記電極を覆う保護部材であって、光を透過させる保護部材と、を備える液浸保持具を提供する。
【００１１】
本発明の第４の態様は、第２の態様又は第３の態様に記載の液浸保持具において、さらに、前記試料に固定されるマウント部材を備え、前記保温構造は、前記マウント部材に着脱自在に固定される液浸保持具を提供する。
【００１２】
本発明の第５の態様は、第２の態様乃至第４の態様のいずれか１つに記載の液浸保持具において、前記保温構造に貫通穴が形成されている液浸保持具を提供する。
【００１３】
本発明の第６の態様は、第２の態様乃至第５の態様のいずれか１つに記載の液浸保持具において、前記保温構造は、観察位置の特定を補助するマークを備える液浸保持具を提供する。
【００１４】
本発明の第７の態様は、第１の態様に記載の液浸保持具において、前記保温構造は、内部に真空空間が形成された断熱構造を備える液浸保持具を提供する。
【００１５】
本発明の第８の態様は、第７の態様に記載の液浸保持具において、前記保温構造は、前記凹部の底面をなす面とは反対の面の一部に、遠赤外線を吸収し放射する部材を備える液浸保持具を提供する。
【００１６】
本発明の第９の態様は、第７の態様に記載の液浸保持具において、前記保温構造は、前記凹部の底面をなす面とは反対の面の一部に、遠赤外線を反射する部材を備える液浸保持具を提供する。
【００１７】
本発明の第１０の態様は、第１の態様乃至第９の態様のいずれか１つに記載の液浸保持具を備える顕微鏡を提供する。
【発明の効果】
【００１８】
本発明によれば、浸液による生体試料の温度低下を効率的に抑制する技術を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】実施例１に係る顕微鏡１の構成を示した図である。
【図２】実施例１に係る浸液保持具１０の構成を示した図である。
【図３】浸液保持具１０が備える発熱部材２２の構成を示した図である。
【図４】パッチクランプ計測のための配線電極５０が取り付けられた浸液保持具１０を示した図である。
【図５】実施例２に係る浸液保持具１０ａの構成を示した図である。
【図６】実施例３に係る浸液保持具１０ｂの構成を示した図である。
【図７】浸液保持具１０ｂのマウント部材６０に蓋８０が取り付けられている例を示した図である。
【図８】実施例４に係る浸液保持具１０ｃの構成を示した図である。
【図９】実施例５に係る浸液保持具１０ｄの構成を示した図である。
【発明を実施するための形態】
【実施例１】
【００２０】
図１は、本実施例に係る顕微鏡１の構成を示す図である。顕微鏡１は、液浸系対物レンズ４を備えた二光子励起顕微鏡であり、生体試料である生きたマウス２を眠らせた状態で上方から観察する正立顕微鏡である。
【００２１】
顕微鏡１は、マウス２が置かれるステージ３と、液浸系対物レンズ４が装着されるZ方向に移動可能なノーズピース５と、マウス２に照射される励起光を出射するレーザ光源６と、マウス２からの蛍光が結像して得られる蛍光画像を目視するための接眼部７と、蛍光画像の画像データを生成するためにマウス２からの蛍光を検出して電気信号に変換するディテクタ８を備えている。なお、ステージ３は、液浸系対物レンズ４の光軸に直交するＸＹ方向に移動可能に構成されていて、より好ましくは、さらに、液浸系対物レンズ４の光軸と平行なＺ方向にも移動可能に構成されている。顕微鏡１は、図示しないコンピュータに接続されても良く、コンピュータによって顕微鏡１の各部の制御や画像データの生成などが行われてもよい。
【００２２】
顕微鏡１は、さらに、液浸系対物レンズ４を浸す浸液９を蓄える凹部が形成された浸液保持具１０と、浸液保持具１０に電流を供給する電源１１と、浸液保持具１０と電源１１を接続するリード線１２とを備えている。浸液９は、最も一般的には水であるが、例えば、シリコーンオイルなどの他の浸液が用いられても良い。浸液保持具１０は、眠らせたマウス２に固定される。
【００２３】
図２は、本実施例に係る浸液保持具１０の構成を示した図である。図３は、浸液保持具１０が備える発熱部材２２の構成を示した図である。図２及び図３を参照しながら、浸液保持具１０について詳細に説明する。
【００２４】
浸液保持具１０は、浸液９を載せて下方から支持する保温構造２０と、浸液９を側方から支持する側壁３０を備えている。浸液保持具１０の凹部は、保温構造２０と側壁３０により形成されていて、浸液９は、開口を液浸系対物レンズ４に向けた凹部に保持される。即ち、浸液保持具１０では、保温構造２０の上面（一面）が凹部の底面をなしている。
【００２５】
保温構造２０は、カバーガラス２１と光を透過させる発熱部材２２とを積層した光を透過させる構造を有していて、浸液保持具１０が液浸系対物レンズ４とマウス２の間に配置されたときにマウス２を保温するように構成されている。即ち、保温構造２０は、マウス２の温度が低下してしまうことを抑制する構造を有している。なお、本明細書において保温とは、厳密に温度を保つという意味に限られず、浸液よりも高温な生体試料の温度の低下を抑制するという意味を含んでいる。
【００２６】
カバーガラス２１は、液浸系対物レンズ４側に配置され、カバーガラス２１の上面（液浸系対物レンズ４側の面）が凹部の底面をなしている。発熱部材２２は、マウス２側に配置される。即ち、保温構造２０は、凹部の底面をなす面とは反対の面に発熱部材２２を備える。
【００２７】
発熱部材２２は、複数の部材が積層された構造を有している。具体的には、図３に示されるように、カバーガラス２１側から順に、基材２２ａと、基材２２ａ表面に形成された導電性を有する導電層２２ｂと、導電層２２ｂ上に形成された電極２２ｃと、導電層２２ｂ及び電極２２ｃを覆う保護部材２２ｄとを備えている。なお、基材２２ａを省略して、カバーガラス２１上に導電層２２ｂを形成してもよい。即ち、カバーガラス２１を基材として使用してもよい。
【００２８】
基材２２ａ、導電層２２ｂ、保護部材２２ｄは、いずれも光を透過させる部材である。基材２２ａ及び保護部材２２ｄは、例えば、ガラス材やＰＥＴフィルムであり、導電層２２ｂは、例えば、ＩＴＯ（酸化インジウムスズ）である。また、電極２２ｃは、導電層２２ｂ上の一部の領域（例えば、両端部）に形成された一対の電極であり、それぞれリード線１２に接続されている。
【００２９】
発熱部材２２にリード線１２を介して電源１１から電力が供給されることで、導電層２２ｂに電流が流れて発熱する。これにより、発熱部材２２がヒータとして機能し、保温構造２０がマウス２、特に、脳２ｃを保温する。
【００３０】
以上のように構成された浸液保持具１０は、シーリング剤４０を用いてマウス２に固定される。マウス２の脳を観察する場合の浸液保持具１０をマウス２に固定する手順は、例えば、次のようなものである。
【００３１】
まず、マウス２の脳２ｃ上方の皮膚２ａを切開し、骨２ｂを露出させる。その後、骨２ｂを薬品で透明化する。さらに、透明になった骨２ｂの上に浸液保持具１０を配置し、浸液保持具１０をシーリング剤４０で骨２ｂに固定する。その際、骨２ｂと浸液保持具１０の間に浸液を流し込み、それらの隙間を満たしてもよい。シーリング剤４０は、例えば、歯科治療用のセメントなどである。また、骨２ｂを透明化する代わりに骨２ｂの一部を取り除いて脳２ｃを露出させてもよい。
【００３２】
浸液保持具１０は、マウス２を温めて保温する保温構造２０を有しているため、マウス２よりも低温な浸液９にマウス２側から熱が流れてもマウス２の温度が過度に低下することがない。また、保温構造２０が光を透過させる構造を有しているため、浸液９とマウス２の間に配置されても保温構造２０越しにマウス２を観察することができる。このため、保温構造２０を浸液９とマウス２の間に配置して、浸液９によって温度の低下が生じてしまうマウス２の部分を直接温めることができる。従って、浸液９による生体試料（マウス２）の温度低下を効率的に抑制することができる。
【００３３】
また、浸液保持具１０では、発熱部材２２は、マウス２側に設けられていて、マウス２を直接温めるように構成されている。この構成は、発熱部材２２を浸液９側に設けて浸液９を温めることでマウス２から浸液９への熱の流れを抑制する構成よりも、生体試料の温度低下を効率的に抑制することができる。液浸系対物レンズ４が長いＷＤを有し、浸液９が比較的多く使用される場合に特に好適である。さらに、ヒータとして機能する発熱部材２２がマウス２と液浸系対物レンズ４の間に配置されているため、対物レンズの切り替えを妨げることがないといった点でも好ましい。
【００３４】
保温構造２０には、パッチクランプ計測用に貫通孔２３が形成されていてもよい。通常時には貫通孔２３は塞がれているが、図４に示すように、パッチクランプ計測時には貫通孔２３に計測用及び／又は刺激用の配線電極５０が挿通される。保温構造２０に貫通孔２３が設けられていることで、パッチクランプ計測を容易に行うことができる。
【実施例２】
【００３５】
図５は、本実施例に係る浸液保持具１０ａの構成を示した図である。浸液保持具１０ａは、観察位置の特定を補助するマーク２４が保温構造２０に設けられている点が、浸液保持具１０とは異なっている。その他の構成は、浸液保持具１０と同様であるので、同一の構成には同一の符号を付して説明を省略する。また、本実施例に係る顕微鏡は、浸液保持具１０の代わりに浸液保持具１０ａを含む点を除き、顕微鏡１と同様である。
【００３６】
マーク２４は、マウス２に近い面に形成されることが望ましく、このため、発熱部材２２に形成されることが望ましい。マーク２４は、液浸系対物レンズ４の視野内に位置するように形成されてもよい。マーク２４は、単一のマークであっても、複数のマークの集合であってもよい。
【００３７】
浸液保持具１０ａによれば、マーク２４により観察位置の特定が容易になる。また、試料の変化も捉えやすいため、タイムラプス撮影などで長時間にわたって試料を観察し続ける場合に、特に好適である。なお、本実施例では、マーク２４を浸液保持具１０ａに設ける例を示したが、マーク２４は、例えば、骨２ｂに形成されてもよい。
【実施例３】
【００３８】
図６は、本実施例に係る浸液保持具１０ｂの構成を示した図である。浸液保持具１０ｂは、保温構造２０の代わりに、マウント部材６０及び保温構造７０を備える点が、浸液保持具１０とは異なっている。その他の構成は、浸液保持具１０と同様であるので、同一の構成には同一の符号を付して説明を省略する。また、本実施例に係る顕微鏡は、浸液保持具１０の代わりに浸液保持具１０ｂを含む点を除き、顕微鏡１と同様である。
【００３９】
マウント部材６０は、シーリング剤４０を用いてマウス２に固定される部材である。マウント部材６０は、例えば、筒形状を有し、その内側面に保温構造７０を着脱自在に固定するための構造、例えば、雌螺子が形成された螺子部、を有している。マウント部材６０は、金属部材であってもよく、また、保温構造７０と同様に光を透過させる部材、例えば、ガラス部材であってもよい。
【００４０】
保温構造７０は、カバーガラス７１と光を透過させる発熱部材７２とを積層した光を透過させる構造を有していて、浸液保持具１０ｂが液浸系対物レンズ４とマウス２の間に配置されたときにマウス２を保温するように構成されている。保温構造７０は、カバーガラス７１及び発熱部材７２の外周部にマウント部材６０に着脱自在に固定するための構造、例えば、雄螺子が形成された螺子部、を有している点を除き、カバーガラス２１及び発熱部材２２からなる保温構造２０と同様である。
【００４１】
なお、浸液保保持具１０ｂの側壁３０の外側にはリード線１２を着脱するためのコネクタ１３が配置される。リード線１２は、電源１１から延びているコネクタ１３に着脱自在なリード線１２ａと、側壁３０に形成された図示しない貫通孔を通ってコネクタ１３から発熱部材２２まで繋がっているリード線１２ｂからなる。リード線１２ａをコネクタ１３に接続することで、リード線１２ａとリード線１２ｂが接触し、電源１１から発熱部材２２に電力が供給される。このような構造では、コネクタ１３からリード線１２ａを取り外すことで、マウント部材６０以外の部分（保温構造７０及び側壁３０）をマウント部材６０から取り外す際に、リード線１２が当該部分の回転を妨げることない。このため、マウント部材６０への保温構造７０の着脱を容易に行うことができる。
【００４２】
浸液保持具１０ｂによっても、浸液保持具１０と同様に、浸液９による生体試料（マウス２）の温度低下を効率的に抑制することができる。さらに、浸液保持具１０ｂによれば、次のような効果が得られる。
【００４３】
第１に、浸液保持具１０ｂをマウス２に固定するための手術では、マウント部材６０のみシーリング剤４０で固定すればよい。このため、例えば、実施例１の浸液保持具１０のように、浸液保持具１０全体をまとめてシーリング剤４０でマウス２に固定する場合に比べて、作業が容易になる。
【００４４】
第２に、比較的長い撮影間隔（例えば、２週間間隔など）でタイムラプス撮影を行う場合でも、撮影間に行うべき縫合手術を省略することができる。このため、生体試料の負担が軽減されるため、長時間のタイムラプス撮影を行うことが可能となる。浸液保持具１０のようなマウント部材６０を有しない保持具の場合、撮影間隔が長いときには、一旦保持具全体を取り外して縫合手術が行われる。これに対して、浸液保持具１０ｂでは、マウント部材６０以外の部分（保温構造７０及び側壁３０）をマウント部材６０から取り外して、図７に示すように断熱性の高い材料からなる蓋８０をマウント部材６０に装着すればよい。
【００４５】
第３に、再利用が容易になる。マウント部材６０以外の部分は、シーリング剤４０で固定されないため部材が傷み難い。このため、ヒータ機能を有する発熱部材２２など比較的高価な部材を容易に再利用することができる。
【００４６】
なお、図６では、マウント部材６０と保温構造７０を螺合して固定する例を示したが、マウント部材６０と保温構造７０の固定方法は螺合に限られない。例えば、マウント部材６０には筒状のマウント部材６０の内周面下端に内側に向かって突出した突出部が形成されても良く、マウント部材６０に嵌めあわされた保温構造７０が突出部に支持されることでマウント部材６０に固定されてもよい。また、浸液保持具１０ｂにも、浸液保持具１０ａと同様に、観察位置の特定を補助するためのマーク２４が形成されても良い。
【実施例４】
【００４７】
図８は、本実施例に係る浸液保持具１０ｃの構成を示した図である。浸液保持具１０ｃは、保温構造２０の代わりに、保温構造９０を備える点が、浸液保持具１０とは異なっている。その他の構成は、浸液保持具１０と同様であるので、同一の構成には同一の符号を付して説明を省略する。また、本実施例に係る顕微鏡は、浸液保持具１０の代わりに浸液保持具１０ｃを含む点、電源１１及びリード線１２を含まない点を除き、顕微鏡１と同様である。
【００４８】
保温構造９０は、その内部に真空空間９６が形成された断熱構造を備えている。また、保温構造９０は、液浸系対物レンズ４の光軸上に光学窓９１及び光学窓９３が配置されることで、光を透過させる構造を実現している。
【００４９】
真空空間９６は、液浸系対物レンズ４の光軸上に光学窓９１を備える部材９２と、液浸系対物レンズ４の光軸上に光学窓９３を備える部材９４と、部材９２と部材９４に挟まれてガスケットとして機能する部材９５に囲まれた空間である。真空空間９６は、熱伝導を十分に抑制し得る気圧であればよく、例えば、１０−３気圧程度であればよい。
【００５０】
部材９２、部材９４、部材９５は、断熱性の高い部材であることが望ましい。例えば、アルミナ（Al2O3）、炭化ケイ素（SiC）、ジルコニア（ZrO2）であり、アルミナ系や炭化ケイ素系の多孔質セラミックスであってもよい。
【００５１】
浸液保持具１０ｃでは、保温構造９０は光を透過させる構造を有しているため、浸液９とマウス２の間に配置されても保温構造９０越しにマウス２を観察することができる。このため、保温構造９０を浸液９とマウス２の間に配置して、マウス２側からより低温な浸液９への熱伝導を真空空間９６によって抑制することができる。従って、浸液保持具１０と同様に、浸液９による生体試料（マウス２）の温度低下を効率的に抑制することができる。
【００５２】
真空空間９６を取り囲む部材に断熱部材を用いることで、真空空間９６を取り囲む部材を介した熱伝導も抑制することができるため、生体試料の温度低下をさらに抑制することができる。また、浸液保持具１０ｃでは、ヒータとして機能する発熱部材を有しないため、実施例１から実施例３の浸液保持具に比べて、より簡単な構成で同様の効果を実現することができる。
【００５３】
以上では、真空空間９６を取り囲む部材に断熱部材を用いる例を示したが、凹部の底面をなす面とは反対の面の一部（例えば、部材９４）には、例えば、アルミ、銅、金、銀などの金属膜、又は、誘電体多層膜などの、遠赤外線を反射する膜が形成されても良い。マウス２に近接する部材９４に遠赤外線を反射する膜を形成することで、熱伝導による伝熱に加えて、マウス２からの輻射よる伝熱も抑制することができる。このため、生体試料の温度低下をさらに抑制することができる。なお、部材９４に遠赤外線を反射する膜を形成する代わりに、部材９４そのものを上記の材料で構成してもよい。
【００５４】
また、凹部の底面をなす面とは反対の面の一部（例えば、部材９４）は、例えば、Al2O3、SiO2、MgO、ZrO2、3Al2O3・2SiO2（ムライト）、ZrO2・SiO2（ジルコン）、2MgO・2Al2O3・5SiO2（コージェライト）からなるセラミックス材などの、遠赤外線を吸収し放射する部材からなっていてもよい。マウス２に近接する部材９４に遠赤外線を吸収し放射する部材を用いることで、マウス２からの輻射熱でマウス２を温めることができるため、生体試料の温度低下をさらに抑制することができる。
【実施例５】
【００５５】
図９は、本実施例に係る浸液保持具１０ｄの構成を示した図である。浸液保持具１０ｄは、保温構造２０の代わりに、保温構造１００を備える点が、浸液保持具１０とは異なっている。その他の構成は、浸液保持具１０と同様であるので、同一の構成には同一の符号を付して説明を省略する。また、本実施例に係る顕微鏡は、浸液保持具１０の代わりに浸液保持具１０ｄを含む点を除き、顕微鏡１と同様である。
【００５６】
保温構造１００は、実施例４の保温構造９０のマウス２側に発熱部材９７を備えた構造を有している。発熱部材９７は、実施例１から実施例３の発熱部材（発熱部材２２、発熱部材７２）と同様の発熱部材であってもよい。また、発熱部材９７は、光を透過させるものに限られないため、シリコンラバーヒータ、アルミ箔ヒータなどであってもよい。
【００５７】
発熱部材９７が光を透過させるものではない場合には、図９に示すように、発熱部材９７は、断熱部材９４上に積層されていて、光学窓９３上に形成されない。一方、発熱部材９７が光を透過させるものである場合には、断熱部材９４に加えて光学窓９３上にも形成されてもよい。これにより、保温構造１００も、保温構造９０と同様に、光を透過させる構造を有する。
【００５８】
浸液保持具１０ｄでは、保温構造１００は、真空空間９６によりマウス２側から浸液９への熱伝導を抑制する保温構造９０と、マウス２を温める発熱部材９７とを備えている。従って、浸液９による生体試料（マウス２）の温度低下を効率的に抑制することができる。
【００５９】
上述した各実施例は、発明の理解を容易にするために具体例を示したものであり、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。液浸保持具、及び、顕微鏡は、特許請求の範囲により規定される本発明の思想を逸脱しない範囲において、さまざまな変形、変更が可能である。この明細書で説明される個別の実施例の文脈におけるいくつかの特徴を組み合わせて単一の実施例としてもよい。
【符号の説明】
【００６０】
１・・・顕微鏡、２・・・マウス、２ａ・・・皮膚、２ｂ・・・骨、２ｃ・・・脳、３・・・ステージ、４・・・液浸系対物レンズ、５・・・ノーズピース、６・・・レーザ光源、７・・・接眼部、８・・・ディテクタ、９・・・浸液、１０、１０ａ、１０ｂ、１０ｃ、１０ｄ・・・浸液保持具、１１・・・電源、１２、１２ａ、１２ｂ・・・リード線、１３・・・コネクタ、２０、７０、９０、１００・・・保温構造、２１、７１・・・カバーガラス、２２、７２、９７・・・発熱部材、２２ａ・・・基材、２２ｂ・・・導電層、２２ｃ・・・電極、２２ｄ・・・保護部材、２３・・・貫通孔、２４・・・マーク、３０・・・側壁、４０・・・シーリング剤、５０・・・配線電極、６０・・・マウント部材、８０・・・蓋、９１、９３・・・光学窓、９２、９４、９５・・・部材、９６・・・真空空間
【図１】
2016177110.tif 000003
【図２】
2016177110.tif 000004
【図３】
2016177110.tif 000005
【図４】
2016177110.tif 000006
【図５】
2016177110.tif 000007
【図６】
2016177110.tif 000008
【図７】
2016177110.tif 000009
【図８】
2016177110.tif 000010
【図９】
2016177110.tif 000011