(57)【要約】      （修正有）【課題】タンパク質のリガンド-指向性共有的修飾；それをデザインする方法；それの医薬製剤；及び、使用方法の提供。【解決手段】(a)標的タンパク質のリガンド結合部位内又はその近傍にドッキングされた可逆的リガンドの構造モデルを提供する工程と、(b)前記可逆的リガンドが、リガンド結合部位の中又は近傍にドッキングされた場合に、可逆的リガンドから約15Å未満であるリガンド結合部位の中又はその近傍の標的タンパク質のリシン残基を同定する工程と、(c)工程(b)における可逆的リガンド又はそれらの一部、反応性化学部分を含む弾頭、及び任意にテザーを含む工程と、(d)その構造モデルが、工程(b)のリシン残基に、弾頭求電子部分の結合-形成する近傍以内に該リシン残基の側鎖第一級アミン基をもたらす立体配位を容易にさせることを可能にする、リガンド−弾頭化合物を同定する工程と、を含む方法。【選択図】図１
2016195596.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
A)標的タンパク質内のリガンド結合部位内又はその近傍にドッキングされる可逆的リガ
ンドの構造モデルを提供する工程；
B)前記可逆的リガンドが、リガンド結合部位の中又は近傍にドッキングされる場合に、
可逆的リガンドから約15Å未満である、リガンド結合部位の中又は近傍の標的タンパク質
のリシン残基を同定する工程；
C)該リガンド結合部位内又はその近傍にドッキングされる少なくとも1つのリガンド−
弾頭化合物の少なくとも構造モデルを作製する工程であって、該リガンド−弾頭化合物が
、工程B)における可逆的リガンド又はそれらの一部、反応性化学部分を含む弾頭、及び任
意にテザーを含む工程；並びに、
D)その構造モデルが、工程B)のリシン残基に、弾頭求電子部分の結合-形成する近傍内
に、該リシン残基の側鎖第一級アミン基をもたらす立体配位を容易にとらせることを可能
にする、リガンド−弾頭化合物を同定する工程：を含む、標的タンパク質に共有結合する
リガンドをデザインする方法。
【請求項２】
E)リガンドの薬理作用団とリガンド結合部位の間の非共有的相互作用を実質的に維持し
ながら、工程B)で同定されたリシン残基の側鎖第一級アミン基と、工程D)で同定されたリ
ガンド−弾頭化合物内の弾頭求電子部分の間に共有結合を形成することにより、工程D)に
おいて同定されたリガンド−弾頭化合物について、リガンド-タンパク質共有付加物を形
成する工程：を、更に含む、請求項1記載の方法。
【請求項３】
F)得られる立体配位の総エネルギーを分析するか、又はテザーの立体配位のエネルギー
を分析することにより、工程E)で形成された得られるリガンド-タンパク質共有付加物の
立体配位を評価する工程：を、更に含む、請求項2記載の方法。
【請求項４】
前記工程A)−F)が、テザーを変化しながら反復され、かつ得られる立体配位の総エネル
ギーが、先行する反復よりも少ない、請求項3記載の方法。
【請求項５】
F)前記共有結合が、リガンド結合部位の中又はその近傍のリシン残基の側鎖第一級アミ
ン基と弾頭求電子部分の間に形成される場合に、リガンド結合部位が塞がれているかどう
かを決定する工程：を更に含む、請求項2記載の方法。
【請求項６】
前記工程E)において形成された共有結合が、そこで弾頭及びリシン残基の側鎖は可動性
があり、且つリガンド−弾頭化合物の構造の残余とリガンド結合部位は固定されている計
算的方法を用いて形成される、請求項2記載の方法。
【請求項７】
前記工程B)において、可逆的リガンドが、リガンド結合部位の中又はその近傍にドッキ
ングされる場合に、可逆的リガンドから約15Å未満である、標的タンパク質のリガンド結
合部位の中又はその近傍のリシン残基の各々が同定される、請求項1記載の方法。
【請求項８】
前記工程C)が、任意に弾頭と置換可能な位置の間にテザーを伴い、弾頭がリガンド−弾
頭化合物の各モデルにおけるリガンド又はリガンドの一部の異なる置換可能な位置に結合
されている、リガンド−弾頭化合物の複数のモデルを提供することを含む、請求項1記載
の方法。
【請求項９】
前記標的タンパク質が、同定されたタンパク質ファミリーの同定されたメンバーであり
、且つ前記リシン残基が、該タンパク質ファミリーの同定されたメンバーを超えては保存
されない、請求項1記載の方法。
【請求項１０】
前記標的タンパク質が、同定されたタンパク質ファミリーの同定されたメンバーであり
、且つ前記リシン残基が、同定されたタンパク質ファミリーの2つ以上の同定されたメン
バー間で保存される、請求項1記載の方法。
【請求項１１】
前記リシン残基が、該タンパク質ファミリーの同定されたメンバーを超えて保存される
、請求項10記載の方法。
【請求項１２】
前記標的タンパク質が、触媒活性を有する、請求項1記載の方法。
【請求項１３】
前記タンパク質ファミリーが、BCL-2、カルパイン、カスパーゼ、カテプシン、HCV、HD
AC、HSP70、HSP90、IAP、キナーゼ、MDM2、MMP、NHR、PI3K、ホスファターゼ、PARP、及
びHIVプロテアーゼからなる群から選択される、請求項1記載の方法。
【請求項１４】
前記標的タンパク質が、XIAP、cIAP1及びcIAP2、PI3Kβ/γ、PDPK1、及びHCV-NS3から
なる群から選択される、請求項13記載の方法。
【請求項１５】
前記リガンド結合部位が、基質又は補因子のためのリガンド結合部位である、請求項1
記載の方法。
【請求項１６】
前記リシン残基が、触媒的残基ではない、請求項1記載の方法。
【請求項１７】
前記リガンド−弾頭化合物が、式Iの構造を有する、請求項１記載の方法：
【化１】
2016195596.tif 000582
(式中、
スカフォールドは、
a)リガンド結合部位へ又はその近傍へ結合することが可能であるリガンドの水素の除
去から生じるラジカル；又は
b)スカフォールドがリガンド結合部位へ又はその近傍へ結合することが可能であるよ
うに、薬理作用団の切断から生じるリガンドの薬理作用団の一部分：であり；
弾頭は、O、N、及びSから選択された1個以上のヘテロ原子を任意に含む、有機部分であ
り；この有機部分は、分子量約14ダルトン〜約200ダルトンを有し；弾頭は、リシン残基
の側鎖第一級アミン基との反応が可能であり；且つ、弾頭は、テザーを介してスカフォー
ルドに結合されており；並びに
テザーは、空白、結合、又は二価のC1-C15飽和、不飽和、直鎖、分岐鎖、環式、二環式
、三環式のアルキル、アルケニル、アルキニル；架橋した二環式、複素環、ヘテロアリー
ル、又はアリール部分であり；ここで、任意に炭化水素鎖の1個以上のメチレン単位は、-
NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、-C(=S)-、又はC(=NR1)- により、独立して置き
換えられ；任意に1個以上の水素は、ヘテロ原子により独立して置き換えられ；且つ、任
意にC1-C15アルキルの1個以上のメチン基は、存在する場合、独立して
【化２】
2016195596.tif 000583
により置き換えられ；
xは、0、1、又は2であり；
yは、1、2、又は3であり；且つ
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
但し、式Iの化合物は、ウォルトマニン：
【化３】
2016195596.tif 000584
又は、実質的にウォルトマニンと同じ機序を介してリシンを共有的に修飾する公知のウォ
ルトマニン類似体：
【化４】
2016195596.tif 000585
2016195596.tif 000586
2016195596.tif 000587
又は、任意の機序-ベースの不可逆的インヒビターではないことを条件とする。)。
【請求項１８】
前記リガンド−弾頭化合物が、式I'の構造を有する、請求項17記載の方法：
【化５】
2016195596.tif 000588
。
【請求項１９】
前記弾頭が、式I-a、I-b、I-c、I-d、I-e、I-f、I-g、I-h、I-i、I-j、I-k、I-l、I-m
、I-n、I-o、I-p、I-q、I-r、I-s、及びI-tの化合物の水素の除去から生じるラジカルで
ある、請求項18記載の方法：
【化６】
2016195596.tif 000589
(式中、
X1及びX8の各々は、独立して-O-、-S-、又は-NR6-であり；
X2の各々は、独立して-R6、-OR6、又は-NR6R7であり；
X9の各々は、独立して、
【化７】
2016195596.tif 000590
であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8の各々は、独立して水素又はC1-C6アルキルであり；
ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO
2-、又は-C(=S)-により置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基
は、存在する場合、独立して
【化８】
2016195596.tif 000591
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
ここで、任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8のいずれか2つが
、一緒になると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を
形成し；且つ、任意にX2並びにR2、R3、及びR4のいずれか1つが、一緒になると、3-〜8-
員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形成し；
A及びBは、各々独立して、任意に置換された単環式、二環式、又は三環式アリール又は
ヘテロアリールであり；且つ
nは、2〜4の整数であり；n1及びn2の各々は、独立して、0〜2の整数であり；n3は、1〜
2の整数であり；n4は、1〜3の整数であり；並びに、n9、n10、n11、及びn12の各1つは、0
〜1の整数であり；並びに、n13は、0〜2の整数であり、ここで前述のnの整数のいずれか1
つは1よりも大きく、その整数により表された隣接炭素は、単結合又は二重結合を形成す
ることができる。)。
【請求項２０】
式I-b及びI-cの化合物のR2及びR3の少なくとも1つは、水素である、請求項19記載の方
法。
【請求項２１】
前記式I-a、I-d、I-e、I-j、I-k、又はI-lの化合物が、式II-a、II-b、II-c、II-d、II
-e、II-f、II-g、II-h、II-i、II-j、II-k、II-l、II-m、II-n、II-o、II-p、II-q、II-r
、II-s、II-t、II-u、II-v、II-w、II-x、II-y、II-z、II-aa、II-bb、II-cc、II-dd、II
-ee、II-ff、II-gg、II-hh、II-ii、II-jj、II-kk、II-ll、II-mm、II-nn、II-oo、又はI
I-ppの化合物である、請求項19記載の方法；
【化９】
2016195596.tif 000592
(式中、
mの各々は、独立して、0〜4の整数であり；
m5の各々は、独立して、0〜3の整数であり；
m4の各々は、独立して、0〜5の整数であり；
n2の各々は、独立して、0〜2の整数であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、及びR15の各々は、独立
して、水素又はC1-C6アルキルであり；Rzは、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、CF3、又
はニトロであり；ここで
C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又
は-C(=S)-により置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存
在する場合、独立して
【化１０】
2016195596.tif 000593
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；且つ、
任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R1
4、及びR15のいずれか2つは、一緒になると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール
若しくはヘテロアリール基を形成する。)。
【請求項２２】
前記式I-d、又はI-hの化合物が、式III-a、III-b、III-c、III-d、III-e、III-f、III-
g、III-h、又はIII-iの化合物である、請求項19記載の方法；
【化１１】
2016195596.tif 000594
(式中、
n3は、0〜2の整数であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8の各々は、独立して、水素又はC1-C6アルキルであり
；
B1、B2、B4、及びB5の各々は、独立して、CR7又はNであり、且つB3の各々は、NR7、O、
又はSであり；
Rz1、Rz2、Rz3、Rz4、及びRz5の各々は、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、CF3、又は
ニトロであり；
C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又
は-C(=S)-により任意に置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基
は、存在する場合、
【化１２】
2016195596.tif 000595
により独立して置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；且つ
任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8のいずれか2つは、一緒に
なると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形成する
。)。
【請求項２３】
前記式I-hの化合物が、式IV-a、IV-b、IV-c、IV-d、IV-e、IV-f、IV-g、IV-h、又はIV-
iの化合物である、請求項19記載の方法：
【化１３】
2016195596.tif 000596
(式中、化合物の窒素複素環上の置換可能な水素のいずれかは、アルキル、アルコキシ、
アミド、アシル、アシルオキシ、オキソアシル、ハロゲンにより置換されることができる
。)。
【請求項２４】
前記式I-a、I-d、I-k、又はI-mの化合物の水素の除去から生じるラジカルが、式V-a、V
-b、V-c、V-d、V-e、V-f、V-g、V-h、V-i、又はV-jのラジカルである、請求項19記載の方
法；
【化１４】
2016195596.tif 000597
(式中、
m1及びm2は各々独立して、0〜2の整数であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、及びR11の各々は、独立して水素又はC1-C6ア
ルキルであり；
C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又
は-C(=S)-により任意に置き換えられることができ；
C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在する場合、
【化１５】
2016195596.tif 000598
により独立して置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；且つ
任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、及びR11のいずれか
2つは、一緒になると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリー
ル基を形成する。)。
【請求項２５】
前記式I-a、I-b、I-c、I-d、I-e、I-f、I-g、I-h、I-i、I-j、I-k、I-l、I-m、I-n、I-
o、I-p、I-q、I-r、I-s、及びI-tの化合物が、下記からなる群から選択される、請求項19
記載の方法：
【化１６】
2016195596.tif 000599
2016195596.tif 000600
(式中、置換可能な水素のいずれかは、式I-a、I-b、I-c、I-d、I-e、I-f、I-g、I-h、I-i
、I-j、I-k、I-l、I-m、I-n、I-o、I-p、I-q、I-r、I-s、及びI-tにおいてR2-R8により定
義されたもののような置換基により置換され得る。)。
【請求項２６】
前記式I-a、I-d、I-k、又はI-mの化合物の水素の除去から生じるラジカルが、式VI-a、
VI-b、VI-c、VI-d、VI-e、VI-f、VI-g、VI-h、VI-i、VI-j、VI-k、VI-l、VI-m、VI-n、VI
-o、VI-p、又はVI-qのラジカルである、請求項19記載の方法：
【化１７】
2016195596.tif 000601
(式中、Rzzは、水素、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、-CH2
OCH3、及び-CH2CH2OCH3である。)。
【請求項２７】
前記スカフォールドが、式VII、VIII、IX-a、IX-b、XI、XII、XVI、XVII、XVIII、XIX
、XX、XXI、XXII、XXIII、XXXIV、XXV、XXVI、XXVII、XXVIII、XXIX、XXXVI、及びXXXVII
からなる群より選択される、請求項19記載の方法。
【請求項２８】
前記スカフォールドが、式VIIの化合物の1個以上の水素の除去から生じるラジカルであ
る、請求項18記載の方法：
【化１８】
2016195596.tif 000602
(式中、
V及びWは、各々独立して-(CR14R15)qX3(CR16R17)r-であり；
q及びrは、各々独立して、0、1、2、3、又は4であり；
X3は、-CR18R19-、又は-NR20-であり；並びに
Rx、Ry、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、及びR20は、各々独立して水素又
はC1-C6アルキルであり；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-
、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、-C(=S)-、任意に置換されたアリール又はヘテロアリール
基により置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在する場
合、独立して
【化１９】
2016195596.tif 000603
により置き換えられることができ；且つ、R1は、水素又はC1-C8アルキルである。)。
【請求項２９】
前記式VIIの化合物が、式VII-aの化合物である、請求項28記載の方法：
【化２０】
2016195596.tif 000604
(式中、
V及びWは、各々独立して、-(CR14R15)qX3(CR16R17)r-であり；
q及びrは、各々独立して、0、1、2、3、又は4であり；
X3は、-CR18R19-、又は-NR20-であり；
pは、0、1、2、3、又は4であり；
R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、及びR20は、各々独立して、水素又はC1-C6
アルキルであり；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-
、-S-、-SO-、-SO2-、-C(=S)-、任意に置換されたアリール又はヘテロアリール基により
置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在する場合、独立
して、
【化２１】
2016195596.tif 000605
により置き換えられ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；並びに
R23は、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、アミノ、又はニトロであり；ここで、C1-C6
アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S
)-により任意に置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在
する場合、独立して、
【化２２】
2016195596.tif 000606
により置き換えられることができ；且つ
任意にR21及びR23は一緒に、4-〜8-員の炭素環又は複素環を形成することができる。)
。
【請求項３０】
前記式I'の化合物が、式VII-bの化合物である、請求項19記載の方法：
【化２３】
2016195596.tif 000607
(式中、
V及びWは、各々独立して、-(CR14R15)qX3(CR16R17)r-であり；
q及びrは、各々独立して、0、1、2、3、又は4であり；
X3は、-CR18R19-、又は-NR20-であり；
pは、0、1、2、3、又は4であり；
R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、及びR20は、各々独立して、水素又はC1-C6
アルキルであり；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-
、-S-、-SO-、-SO2-、-C(=S)-、任意に置換されたアリール又はヘテロアリール基により
置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在する場合、独立
して、
【化２４】
2016195596.tif 000608
により置き換えられ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；並びに
R23は、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、アミノ、又はニトロであり；ここで、C1-C6
アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S
)-により任意に置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在
する場合、独立して、
【化２５】
2016195596.tif 000609
により置き換えられることができ；且つ
任意にR21及びR23は一緒に、4-〜8-員の炭素環又は複素環を形成することができ；
Tは、テザーであり；且つ
Rwhは、弾頭である。)。
【請求項３１】
前記式VII-bの化合物が、式VII-hの化合物である、請求項30記載の方法；
【化２６】
2016195596.tif 000610
。
【請求項３２】
前記式VII-hの化合物が、式VII-j、VII-k、VII-l、VII-m、VII-n、又はVII-oの化合物
である、請求項31記載の方法；
【化２７】
2016195596.tif 000611
。
【請求項３３】
前記化合物が、下記からなる群より選択される、請求項31記載の方法：
【化２８】
2016195596.tif 000612
2016195596.tif 000613
2016195596.tif 000614
2016195596.tif 000615
2016195596.tif 000616
。
【請求項３４】
前記スカフォールドが、式VIIIの化合物の水素の除去から生じるラジカルである、請求
項19記載の方法：
【化２９】
2016195596.tif 000617
(式中、
X4は、-CR33-又は-N-であり；
s及びpは、各々独立して、0、1、2、3、又は4であり；
R12、R13、R21、R22、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31、R32、及びR33は、各
々独立して、水素又はC1-C6アルキルであり；
R23は、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、アミノ、又はニトロであり；ここで、C1-C6
アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S
)-により任意に置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在
する場合、独立して、
【化３０】
2016195596.tif 000618
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；並びに、
任意にR21及びR23は一緒に、4-〜8-員の炭素環又は複素環を形成することができる。)
。
【請求項３５】
前記式I'の化合物が、式VIII-a又はVIII-bの化合物である、請求項18記載の方法：
【化３１】
2016195596.tif 000619
(式中、
X4は、-CR33-又は-N-であり；
s及びpは、各々独立して、0、1、2、3、又は4であり；
R12、R13、R21、R22、R24、R25、R26、R27、R28、及びR33は、各々独立して、水素又は
C1-C6アルキルであり；
R23は、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、アミノ、又はニトロであり；ここで、C1-C6
アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S
)-により任意に置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在
する場合、独立して、
【化３２】
2016195596.tif 000620
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；並びに
任意にR21及びR23は一緒に、4-〜8-員の炭素環又は複素環を形成することができ；且つ
弾頭は、式I-a、I-b、I-c、I-d、I-e、I-f、I-g、I-h、I-i、I-j、I-k、I-l、I-m、I-n
、I-o、I-p、I-q、I-r、I-s、及びI-tの化合物の水素の除去から生じるラジカルであり：
【化３３】
2016195596.tif 000621
（式中、
X1及びX8の各々は、独立して、-O-、-S-、又は-NR6-であり；
X2の各々は、独立して、-R6、-OR6、又は-NR6R7であり；
X9の各々は、独立して、
【化３４】
2016195596.tif 000622
であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8の各々は、独立して、水素又はC1-C6アルキルであ
り；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-
、-SO2-、又は-C(=S)-により任意に置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上
のメチン基は、存在する場合、独立して、
【化３５】
2016195596.tif 000623
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
ここで任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8のいずれか2つは、
一緒になると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形
成し；且つ、任意にX2並びにR2、R3、及びR4のいずれか1つは、一緒になると、3-〜8-員
の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形成し；
A及びBは、各々独立して、任意に置換された単環式、二環式、又は三環式アリール又は
ヘテロアリールであり；且つ
nは、2〜4の整数であり；n1及びn2の各々は、独立して、0〜2の整数であり；n3は、1〜
2の整数であり；n4は、1〜3の整数であり；並びに、n9、n10、n11、及びn12の各1つは、0
〜1の整数であり；並びに、n13は、0〜2の整数であり、ここで前述のnの整数のいずれか1
つは1よりも大きく、その整数により表された隣接炭素は、単結合又は二重結合を形成す
ることができる。)。
【請求項３６】
前記式VIII-a又はVIII-bの化合物が、下記からなる群より選択される、請求項35記載の
方法：
【化３６】
2016195596.tif 000624
2016195596.tif 000625
。
【請求項３７】
前記スカフォールドが、式IX-a又はIX-bの化合物の水素の除去から生じるラジカルであ
る、請求項19記載の方法：
【化３７】
2016195596.tif 000626
(式中、
X5は、-O-、-CR42R43-、又は-NR42-であり；
R12、R13、R27、R28、R29、R30、R31、R32、R33、R34、R35、R36、R37、R38、R39、R40
、R41、R42、及びR43は、各々独立して、水素又はC1-C6アルキルであり；ここで、C1-C6
アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S
)-により任意に置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在
する場合、独立して、
【化３８】
2016195596.tif 000627
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
D、E、F、G、及びHは、各々独立して、任意に置換されたアリール又はヘテロアリール
であり；ここで、F及びGは、一緒に縮合され、二環式の任意に置換されたアリール又はヘ
テロアリールを形成する。)。
【請求項３８】
前記式I'の化合物が、式IX-c又はIX-dの化合物である、請求項18記載の方法：
【化３９】
2016195596.tif 000628
(式中、
R12、R13、R31は、各々独立して、水素又はC1-C6アルキルであり；ここで、C1-C6アル
キルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S)-に
より任意に置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在する
場合、独立して、
【化４０】
2016195596.tif 000629
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
F、G、及びHは、各々独立して、任意に置換されたアリール又はヘテロアリールであり
；ここで、F及びGは、一緒に縮合され、二環式の任意に置換されたアリール又はヘテロア
リールを形成し；
Tは、テザーであり；
Rwhは、式I-a、I-b、I-c、I-d、I-e、I-f、I-g、I-h、I-i、I-j、I-k、I-l、I-m、I-n
、I-o、I-p、I-q、I-r、I-s、及びI-tの化合物の水素の除去から生じるラジカルである弾
頭であり:
【化４１】
2016195596.tif 000630
ここで、
X1及びX8の各々は、独立して、-O-、-S-、又は-NR6-であり；
X2の各々は、独立して、-R6、-OR6、又は-NR6R7であり；
X9の各々は、独立して、
【化４２】
2016195596.tif 000631
であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8の各々は、独立して、水素又はC1-C6アルキルであ
り；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-
、-SO2-、又は-C(=S)-により置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチ
ン基は、存在する場合、独立して、
【化４３】
2016195596.tif 000632
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
ここで任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8のいずれか2つは、
一緒になると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形
成し；且つ、任意にX2並びにR2、R3、及びR4のいずれか1つは、一緒になると、3-〜8-員
の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形成し；
A及びBは、各々独立して、任意に置換された単環式、二環式、又は三環式アリール又は
ヘテロアリールであり；且つ
nは、2〜4の整数であり；n1及びn2の各々は、独立して、0〜2の整数であり；n3は、1〜
2の整数であり；n4は、1〜3の整数であり；並びに、n9、n10、n11、及びn12の各1つは、0
〜1の整数であり；並びに、n13は、0〜2の整数であり、ここで前述のnの整数のいずれか1
つは1よりも大きく、その整数により表された隣接炭素は、単結合又は二重結合を形成す
ることができる。)。
【請求項３９】
前記式I'の化合物が、式XIの化合物である、請求項18記載の方法：
【化４４】
2016195596.tif 000633
(式中、
pは、0〜4の整数であり、uは、1〜4の整数であり；
B6及びB7は、各々独立してCR7又はNであり；
R69は、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、又は-NH(CO)NR78R79であり
；
R70は、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、アミノ、ニトロであり；
R7、R71、R72、R73、R74、R75、R76、R77、R78、及びR79は、各々独立して、水素又はC
1-C6アルキルであり；R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；ここで、C1-C6アルキルの1
個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S)-により置
き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在する場合、独立し
て、
【化４５】
2016195596.tif 000634
により置き換えられることができ；
任意にR78、及びR79は一緒に、4-〜8-員の炭素環又は複素環を形成し；
Tは、テザーであり；且つ
Rwhは、式I-a、I-b、I-c、I-d、I-e、I-f、I-g、I-h、I-i、I-j、I-k、I-l、I-m、I-n
、I-o、I-p、I-q、I-r、I-s、及びI-tの化合物の水素の除去から生じるラジカルである弾
頭であり:
【化４６】
2016195596.tif 000635
ここで、
X1及びX8の各々は、独立して、-O-、-S-、又は-NR6-であり；
X2の各々は、独立して、-R6、-OR6、又は-NR6R7であり；
X9の各々は、独立して、
【化４７】
2016195596.tif 000636
であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8の各々は、独立して、水素又はC1-C6アルキルであ
り；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-
、-SO2-、又は-C(=S)-により置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチ
ン基は、存在する場合、独立して、
【化４８】
2016195596.tif 000637
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
ここで任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8のいずれか2つは、
一緒になると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形
成し；且つ、任意にX2並びにR2、R3、及びR4のいずれか1つは、一緒になると、3-〜8-員
の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形成し；、
A及びBは、各々独立して、任意に置換された単環式、二環式、又は三環式アリール又は
ヘテロアリールであり；且つ
nは、2〜4の整数であり；n1及びn2の各々は、独立して、0〜2の整数であり；n3は、1〜
2の整数であり；n4は、1〜3の整数であり；並びに、n9、n10、n11、及びn12の各1つは、0
〜1の整数であり；並びに、n13は、0〜2の整数であり、ここで前述のnの整数のいずれか1
つは1よりも大きく、その整数により表された隣接炭素は、単結合又は二重結合を形成す
ることができる。)。
【請求項４０】
前記式XIの化合物が、式XI-a、XI-b、又はXI-cの化合物である、請求項39記載の方法：
【化４９】
2016195596.tif 000638
。
【請求項４１】
前記式XI-a、XI-b又はXI-cの化合物が、式XI-d、XI-e、XI-f、XI-g、XI-h、XI-i、又は
XI-jの化合物である、請求項40記載の方法：
【化５０】
2016195596.tif 000639
。
【請求項４２】
前記式XI-d、XI-e、XI-f、XI-g、XI-h、XI-i、又はXI-jの化合物が、式 XI-k、XI-l、X
I-m、XI-n、XI-o、XI-p、又はXI-qの化合物である、請求項41記載の方法：
【化５１】
2016195596.tif 000640
(式中、
R88、及びR89は、各々独立して、水素又はC1-C6アルキルであり；R1は、水素又はC1-C8
アルキルであり；
C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又
は-C(=S)-により置き換えられることができ；
C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在する場合、独立して、
【化５２】
2016195596.tif 000641
により置き換えられることができ；且つ
n5は、0〜3の整数である。)。
【請求項４３】
前記式XI-d、XI-e、XI-f、XI-g、XI-h、XI-i、又はXI-jの化合物が、式XI-r、XI-s、XI
-t、XI-u、XI-v、XI-w、又はXI-xの化合物である、請求項42記載の方法：
【化５３】
2016195596.tif 000642
。
【請求項４４】
前記式XI-d、XI-e、XI-f、XI-g、XI-h、XI-i、又はXI-jの化合物が、式XI-y、XI-z、XI
-aa、又はXI-bbの化合物である、請求項41記載の方法：
【化５４】
2016195596.tif 000643
。
【請求項４５】
前記式XI-d、XI-e、XI-f、XI-g、XI-h、XI-i、又はXI-jの化合物が、式XI-cc、XI-dd、
XI-ee、又はXI-ffの化合物である、請求項41記載の方法：
【化５５】
2016195596.tif 000644
。
【請求項４６】
前記式XIの化合物が、下記からなる群より選択される、請求項39記載の方法：
【化５６】
2016195596.tif 000645
2016195596.tif 000646
2016195596.tif 000647
2016195596.tif 000648
2016195596.tif 000649
2016195596.tif 000650
2016195596.tif 000651
2016195596.tif 000652
。
【請求項４７】
前記式I'の化合物が、式XIIの化合物である、請求項18記載の方法：
【化５７】
2016195596.tif 000653
(式中、
R1及びR2は、各々独立して、水素又はC1-C8アルキルであり；ここで、C1-C6アルキルの
1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S)-により置
き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在する場合、独立し
て、
【化５８】
2016195596.tif 000654
により置き換えられることができ；
Tは、テザーであり；
Rwhは、式I-a、I-b、I-c、I-d、I-e、I-f、I-g、I-h、I-i、I-j、I-k、I-l、I-m、I-n
、I-o、I-p、I-q、I-r、I-s、及びI-tの化合物の水素の除去から生じるラジカルである弾
頭であり:
【化５９】
2016195596.tif 000655
ここで、
X1及びX8の各々は、独立して、-O-、-S-、又は-NR6-であり；
X2の各々は、独立して、-R6、-OR6、又は-NR6R7であり；
X9の各々は、独立して、
【化６０】
2016195596.tif 000656
であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8の各々は、独立して、水素又はC1-C6アルキルであ
り；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-
、-SO2-、又は-C(=S)-により任意に置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上
のメチン基は、存在する場合、独立して、
【化６１】
2016195596.tif 000657
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
ここで任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8のいずれか2つは、
一緒になると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形
成し；且つ、任意にX2並びにR2、R3、及びR4のいずれか1つは、一緒になると、3-〜8-員
の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形成し；
A及びBは、各々独立して、任意に置換された単環式、二環式、又は三環式アリール又は
ヘテロアリールであり；且つ
nは、2〜4の整数であり；n1及びn2の各々は、独立して、0〜2の整数であり；n3は、1〜
2の整数であり；n4は、1〜3の整数であり；並びに、n9、n10、n11、及びn12の各1つは、0
〜1の整数であり；並びに、n13は、0〜2の整数であり、ここで前述のnの整数のいずれか1
つは1よりも大きく、その整数により表された隣接炭素は、単結合又は二重結合を形成す
ることができる。)。
【請求項４８】
前記式I'の化合物が、式XXXVIの化合物である、請求項18記載の方法：
【化６２】
2016195596.tif 000658
(式中、
Rvは、H、任意に置換されたC1-C3の分岐鎖又は直鎖のアルキル、又は任意に置換された
C1-C3分岐鎖又は直鎖のアシルであり；
Tは、テザーであり；且つ
Rwhは、式I-a、I-b、I-c、I-d、I-e、I-f、I-g、I-h、I-i、I-j、I-k、I-l、I-m、I-n
、I-o、I-p、I-q、I-r、I-s、及びI-tの化合物の水素の除去から生じるラジカルである弾
頭であり:
【化６３】
2016195596.tif 000659
ここで、
X1及びX8の各々は、独立して、-O-、-S-、又は-NR6-であり；
X2の各々は、独立して、-R6、-OR6、又は-NR6R7であり；
X9の各々は、独立して、
【化６４】
2016195596.tif 000660
であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8の各々は、独立して、水素又はC1-C6アルキルであ
り；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-
、-SO2-、又は-C(=S)-により置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチ
ン基は、存在する場合、独立して、
【化６５】
2016195596.tif 000661
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
ここで任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8のいずれか2つは、
一緒になると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形
成し；且つ、任意にX2並びにR2、R3、及びR4のいずれか1つは、一緒になると、3-〜8-員
の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形成し；
A及びBは、各々独立して、任意に置換された単環式、二環式、又は三環式アリール又は
ヘテロアリールであり；且つ
nは、2〜4の整数であり；n1及びn2の各々は、独立して、0〜2の整数であり；n3は、1〜
2の整数であり；n4は、1〜3の整数であり；並びに、n9、n10、n11、及びn12の各1つは、0
〜1の整数であり；並びに、n13は、0〜2の整数であり、ここで前述のnの整数のいずれか1
つは1よりも大きく、その整数により表された隣接炭素は、単結合又は二重結合を形成す
ることができる。)。
【請求項４９】
前記式I'の化合物が、下記からなる群より選択される、請求項18記載の方法：
【化６６】
2016195596.tif 000662
。
【請求項５０】
前記スカフォールドが、式XVI-a、XVI-b、又はXVI-cの化合物の水素の除去から生じる
ラジカルである、請求項19記載の方法：
【化６７】
2016195596.tif 000663
(式中、
R90、R91、R92、R93、R94、R95、R96、R97、R98、R99、R100、R102、R104、R105、R106
、R107、R108、R109、R110、R111、R112、R113、及びR114は、各々独立して、水素又はC1
-C6アルキルであり；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(
O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S)-により任意に置き換えられることができ；
R103は、水素、C1-C6アルキル、又はC2-C8アルケニルであり；
C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在する場合、独立して、
【化６８】
2016195596.tif 000664
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
R101及びR101の各々は、独立して、水素、C1-C6アルキル、C2-C8アルケニル、ハロゲン
、アミノ、ニトロ、任意に置換されたアリール又はヘテロアリールであり；且つ
n6及びn7は、各々独立して、0〜4の整数であり；且つ
n8は、0〜2の整数である。)。
【請求項５１】
前記式I'の化合物が、式XVI-d、XVI-e、又はXVI-fの化合物である、請求項18記載の方
法：
【化６９】
2016195596.tif 000665
(式中、
R90及びR114は、各々独立して、水素又はC1-C6アルキルであり；
R103は、水素、C1-C6アルキル、又はC2-C8アルケニルであり；
R101は、水素、C1-C6アルキル、C2-C8アルケニル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、任意に
置換されたアリール又はヘテロアリールであり；且つ
n6は、0〜4の整数であり；
n8は、0〜2の整数であり；
ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-
SO2-、又は-C(=S)-により任意に置き換えられることができ；且つ
Rwhは、式I-a、I-b、I-c、I-d、I-e、I-f、I-g、I-h、I-i、I-j、I-k、I-l、I-m、I-n
、I-o、I-p、I-q、I-r、I-s、及びI-tの化合物の水素の除去から生じるラジカルである弾
頭であり:
【化７０】
2016195596.tif 000666
ここで、
X1及びX8の各々は、独立して、-O-、-S-、又は-NR6-であり；
X2の各々は、独立して、-R6、-OR6、又は-NR6R7であり；
X9の各々は、独立して、
【化７１】
2016195596.tif 000667
であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8の各々は、独立して、水素又はC1-C6アルキルであり
；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-
SO2-、又は-C(=S)-により置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン
基は、存在する場合、独立して、
【化７２】
2016195596.tif 000668
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
ここで任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8のいずれか2つは、
一緒になると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形
成し；且つ、任意にX2並びにR2、R3、及びR4のいずれか1つは、一緒になると、3-〜8-員
の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形成し；
A及びBは、各々独立して、任意に置換された単環式、二環式、又は三環式アリール又は
ヘテロアリールであり；且つ
nは、2〜4の整数であり；n1及びn2の各々は、独立して、0〜2の整数であり；n3は、1〜
2の整数であり；n4は、1〜3の整数であり；並びに、n9、n10、n11、及びn12の各1つは、0
〜1の整数であり；並びに、n13は、0〜2の整数であり、ここで前述のnの整数のいずれか1
つは1よりも大きく、その整数により表された隣接炭素は、単結合又は二重結合を形成す
ることができ；且つ
Tは、テザーである。)。
【請求項５２】
前記式XVI-d、XVI-e、又はXVI-fの化合物が、式XVI-g、XVI-h、又はXVI-iの化合物であ
る、請求項51記載の方法:
【化７３】
2016195596.tif 000669
。
【請求項５３】
前記式XVI-d、XVI-e、又はXVI-fの化合物が、下記からなる群より選択される、請求項1
8記載の方法：
【化７４】
2016195596.tif 000670
2016195596.tif 000671
2016195596.tif 000672
2016195596.tif 000673
2016195596.tif 000674
2016195596.tif 000675
2016195596.tif 000676
。
【請求項５４】
前記式I'の化合物が、式XXII-a、式XXII-b、又は式XXII-cの化合物である、請求項18記
載の方法：
【化７５】
2016195596.tif 000677
(式中、
式XXII-a及び式XXII-bのn、m、p、及びqは、各々独立して、0、1、2、3であり；但し、
nとqは、同時に0ではなく、且つmとqは、同時に0ではないことを条件とし；
Tは、テザーであり；
Rwhは、弾頭であり、且つ式I-a、I-b、I-c、I-d、I-e、I-f、I-g、I-h、I-i、I-j、I-k
、I-l、I-m、I-n、I-o、I-p、I-q、I-r、I-s、及びI-tの化合物の水素の除去から生じる
ラジカルであり：
【化７６】
2016195596.tif 000678
ここで、
X1及びX8の各々は、独立して、-O-、-S-、又は-NR6-であり；
X2の各々は、独立して、-R6、-OR6、又は-NR6R7であり；
X9の各々は、独立して、
【化７７】
2016195596.tif 000679
であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8の各々は、独立して、水素又はC1-C6アルキルであり
；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-
SO2-、又は-C(=S)-により置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン
基は、存在する場合、独立して、
【化７８】
2016195596.tif 000680
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
ここで任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8のいずれか2つは、
一緒になると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形
成し；且つ、任意にX2並びにR2、R3、及びR4のいずれか1つは、一緒になると、3-〜8-員
の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形成し；
A及びBは、各々独立して、任意に置換された単環式、二環式、又は三環式アリール又は
ヘテロアリールであり；且つ
nは、2〜4の整数であり；n1及びn2の各々は、独立して、0〜2の整数であり；n3は、1〜
2の整数であり；n4は、1〜3の整数であり；並びに、n9、n10、n11、及びn12の各1つは、0
〜1の整数であり；並びに、n13は、0〜2の整数であり、ここで前述のnの整数のいずれか1
つは1よりも大きく、その整数により表された隣接炭素は、単結合又は二重結合を形成す
ることができ；
A2は、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1又は2個のヘテロ原子を有す
る4〜8員の飽和又は部分的不飽和の複素環、又は少なくとも1個の窒素、少なくとも1個の
酸素、及び任意に窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜2個の追加のヘテ
ロ原子を有する5〜10員の飽和又は部分的不飽和の架橋された二環式複素環から選択され
た任意に置換された環であり；
B'は、フェニル、8-〜10-員の二環式アリール環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立
して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する5-〜6-員のヘテロアリール環、又は窒素、酸
素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する8-〜10-員の二環
式ヘテロアリール環から選択された任意に置換された基；又は、-T-Rwhであり；且つ
C2は、水素、或いは3-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の炭素環、7-〜10-員の飽和又は
部分的不飽和の二環式炭素環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜2個
のヘテロ原子を有する4-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の複素環、窒素、酸素、若しくは
硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する7-〜10-員の飽和又は部分的不
飽和の二環式複素環、フェニル、8-〜10-員の二環式アリール環、窒素、酸素、若しくは
硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する5-〜6-員のヘテロアリール環、
又は窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する8-〜
10-員の二環式ヘテロアリール環から選択された任意に置換された環である。)。
【請求項５５】
前記式XXII-a、XXII-b、XXII-cの化合物が、下記からなる群より選択される、請求項54
記載の方法：
【化７９】
2016195596.tif 000681
2016195596.tif 000682
2016195596.tif 000683
2016195596.tif 000684
2016195596.tif 000685
2016195596.tif 000686
。
【請求項５６】
前記式I'の化合物が、式XXIIIの化合物である、請求項18記載の方法：
【化８０】
2016195596.tif 000687
(式中：
Rwhは、式I-a、I-b、I-c、I-d、I-e、I-f、I-g、I-h、I-i、I-j、I-k、I-l、I-m、I-n
、I-o、I-p、I-q、I-r、I-s、及びI-tの化合物の水素の除去から生じるラジカルである弾
頭であり：
【化８１】
2016195596.tif 000688
ここで、
X1及びX8の各々は、独立して、-O-、-S-、又は-NR6-であり；
X2の各々は、独立して、-R6、-OR6、又は-NR6R7であり；
X9の各々は、独立して、
【化８２】
2016195596.tif 000689
であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8の各々は、独立して、水素又はC1-C6アルキルであり
；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-
SO2-、又は-C(=S)-により置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン
基は、存在する場合、独立して、
【化８３】
2016195596.tif 000690
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
ここで任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8のいずれか2つは、
一緒になると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形
成し；且つ、任意にX2並びにR2、R3、及びR4のいずれか1つは、一緒になると、3-〜8-員
の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形成し；
A及びBは、各々独立して、任意に置換された単環式、二環式、又は三環式アリール又は
ヘテロアリールであり；且つ
nは、2〜4の整数であり；n1及びn2の各々は、独立して、0〜2の整数であり；n3は、1〜
2の整数であり；n4は、1〜3の整数であり；並びに、n9、n10、n11、及びn12の各1つは、0
〜1の整数であり；並びに、n13は、0〜2の整数であり、ここで前述のnの整数のいずれか1
つは1よりも大きく、その整数により表された隣接炭素は、単結合又は二重結合を形成す
ることができ；
R201は、水素又はC1-6アルキルであり；
R202は、水素、或いはC1-6アルキル、C1-6アルコキシ、若しくは(C1-6アルキレン)-R20
3から選択された任意に置換された基であるか；又は
R201及びR202は、介在する炭素と一緒に、3-〜7-員の炭素環、又は窒素、酸素、若しく
は硫黄から独立して選択された1〜2個のヘテロ原子を有する4-〜7-員の複素環から選択さ
れた任意に置換された環を形成し；
R203は、3-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の炭素環、7-〜10-員の飽和又は部分的不飽
和の二環式の炭素環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜2個のヘテロ
原子を有する4-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の複素環、窒素、酸素、若しくは硫黄から
独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二
環式複素環、フェニル、8-〜10-員の二環式のアリール環、窒素、酸素、若しくは硫黄か
ら独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する5-〜6-員のヘテロアリール環、又は窒
素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する8-〜10-員
の二環式のヘテロアリール環であり；且つ
環A6は、存在しないか、或いは窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜2
個のヘテロ原子を有する4-〜7-員の複素環、又は窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して
選択された1〜3個のヘテロ原子を有する5-〜6-員のヘテロアリール環から選択された任意
に置換された基である。)。
【請求項５７】
前記式XXIIIの化合物が、下記からなる群より選択される、請求項56記載の方法：
【化８４】
2016195596.tif 000691
2016195596.tif 000692
2016195596.tif 000693
。
【請求項５８】
前記式I'の化合物が、式XXIV-a又は式XXIV-bの化合物である、請求項18記載の方法：
【化８５】
2016195596.tif 000694
(式中：
Rwhは、式I-a、I-b、I-c、I-d、I-e、I-f、I-g、I-h、I-i、I-j、I-k、I-l、I-m、I-n
、I-o、I-p、I-q、I-r、I-s、及びI-tの化合物の水素の除去から生じるラジカルである弾
頭であり：
【化８６】
2016195596.tif 000695
ここで、
X1及びX8の各々は、独立して、-O-、-S-、又は-NR6-であり；
X2の各々は、独立して、-R6、-OR6、又は-NR6R7であり；
X9の各々は、独立して、
【化８７】
2016195596.tif 000696
であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8の各々は、独立して、水素又はC1-C6アルキルであり
；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-
SO2-、又は-C(=S)-により置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン
基は、存在する場合、独立して、
【化８８】
2016195596.tif 000697
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
ここで任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8のいずれか2つは、
一緒になると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形
成し；且つ、任意にX2並びにR2、R3、及びR4のいずれか1つは、一緒になると、3-〜8-員
の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形成し；
A及びBは、各々独立して、任意に置換された単環式、二環式、又は三環式アリール又は
ヘテロアリールであり；且つ
nは、2〜4の整数であり；n1及びn2の各々は、独立して、0〜2の整数であり；n3は、1〜
2の整数であり；n4は、1〜3の整数であり；並びに、n9、n10、n11、及びn12の各1つは、0
〜1の整数であり；並びに、n13は、0〜2の整数であり、ここで前述のnの整数のいずれか1
つは1よりも大きく、その整数により表された隣接炭素は、単結合又は二重結合を形成す
ることができ；
R204は、水素、或いはC1-6脂肪族、-(CH2)m-(3-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の炭素
環)、-(CH2)m-(7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環式炭素環)、-(CH2)m-(窒素、酸
素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜2個のヘテロ原子を有する4-〜7-員の飽和又
は部分的不飽和の複素環)、-(CH2)m-(窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された
1〜3個のヘテロ原子を有する7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環式複素環)、-(CH2)
m-フェニル、-(CH2)m-(8-〜10-員の二環式アリール環)、-(CH2)m-(窒素、酸素、若しくは
硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する5-〜6-員のヘテロアリール環)
、又は-(CH2)m-(窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子
を有する、8-〜10-員の二環式ヘテロアリール環)から選択された任意に置換された基であ
り；
R205及びR206の各々は、独立して、-R"、ハロゲン、-NO2、-CN、-OR"、-SR"、-N(R")2
、-C(O)R"、-CO2R"、-C(O)C(O)R"、-C(O)CH2C(O)R"、-S(O)R"、-S(O)2R"、-C(O)N(R")2、
-SO2N(R")2、-OC(O)R"、-N(R")C(O)R"、-N(R")N(R")2、-N(R")C(=NR")N(R")2、-C(=NR")N
(R")2、-C=NOR"、-N(R")C(O)N(R")2、-N(R")SO2N(R")2、-N(R")SO2R"、又は-OC(O)N(R")2
であり；
R"の各々は、独立して、水素、或いはC1-6脂肪族、3-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の
炭素環、7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環式炭素環、窒素、酸素、若しくは硫黄
から独立して選択された1〜2個のヘテロ原子を有する4-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の
複素環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する
7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環式複素環、フェニル、8-〜10-員の二環式アリー
ル環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する5-
〜6-員のヘテロアリール環、又は窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4
個のヘテロ原子を有する8-〜10-員の二環式ヘテロアリール環から選択された任意に置換
された基であるか；又は
同一窒素上の2個のR"基は、それらが結合した窒素と一緒に、窒素、酸素、若しくは硫
黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する任意に置換された5〜8員の飽和、
部分的不飽和、又は芳香族の環を形成し；
mは、0〜6までを含む整数であり；
式XXIV-a又は式XXIV-bのnの各々は、独立して0、1、又は2であり；且つ
環A5は、1〜2個の窒素を有する、任意に置換された6-員の複素環又はヘテロアリール環
である。)。
【請求項５９】
前記式XXIV-a又は式XXIV-bの化合物が、下記からなる群より選択される、請求項58記載
の方法：
【化８９】
2016195596.tif 000698
。
【請求項６０】
前記式I'の化合物が、式XXVの化合物である、請求項18記載の方法：
【化９０】
2016195596.tif 000699
(式中：
Rwhは、式I-a、I-b、I-c、I-d、I-e、I-f、I-g、I-h、I-i、I-j、I-k、I-l、I-m、I-n
、I-o、I-p、I-q、I-r、I-s、及びI-tの化合物の水素の除去から生じるラジカルである弾
頭であり：
【化９１】
2016195596.tif 000700
ここで、
X1及びX8の各々は、独立して、-O-、-S-、又は-NR6-であり；
X2の各々は、独立して、-R6、-OR6、又は-NR6R7であり；
X9の各々は、独立して、
【化９２】
2016195596.tif 000701
であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8の各々は、独立して、水素又はC1-C6アルキルであり
；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-
SO2-、又は-C(=S)-により置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン
基は、存在する場合、独立して、
【化９３】
2016195596.tif 000702
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
ここで任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8のいずれか2つは、
一緒になると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形
成し；且つ、任意にX2並びにR2、R3、及びR4のいずれか1つは、一緒になると、3-〜8-員
の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形成し；
A及びBは、各々独立して、任意に置換された単環式、二環式、又は三環式アリール又は
ヘテロアリールであり；且つ
nは、2〜4の整数であり；n1及びn2の各々は、独立して、0〜2の整数であり；n3は、1〜
2の整数であり；n4は、1〜3の整数であり；並びに、n9、n10、n11、及びn12の各1つは、0
〜1の整数であり；並びに、n13は、0〜2の整数であり、ここで前述のnの整数のいずれか1
つは1よりも大きく、その整数により表された隣接炭素は、単結合又は二重結合を形成す
ることができ；
R205及びR206の各々は、独立して、-R"、ハロゲン、-NO2、-CN、-OR"、-SR"、-N(R")2
、-C(O)R"、-CO2R"、-C(O)C(O)R"、-C(O)CH2C(O)R"、-S(O)R"、-S(O)2R"、-C(O)N(R")2、
-SO2N(R")2、-OC(O)R"、-N(R")C(O)R"、-N(R")N(R")2、-N(R")C(=NR")N(R")2、-C(=NR")N
(R")2、-C=NOR"、-N(R")C(O)N(R")2、-N(R")SO2N(R")2、-N(R")SO2R"、又は-OC(O)N(R")2
であり；
R"の各々は、独立して、水素、或いはC1-6脂肪族、3-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の
炭素環、7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環式炭素環、窒素、酸素、若しくは硫黄
から独立して選択された1〜2個のヘテロ原子を有する4-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の
複素環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する
7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環式複素環、フェニル、8-〜10-員の二環式アリー
ル環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する5-
〜6-員のヘテロアリール環、又は窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4
個のヘテロ原子を有する8-〜10-員の二環式ヘテロアリール環から選択された任意に置換
された基であるか；又は
任意に、同一窒素上の2個のR"基は、それらが結合した窒素と一緒に、窒素、酸素、若
しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する任意に置換された5〜8員
の飽和、部分的不飽和、又は芳香族の環を形成し；
mは、0〜6までを含む整数であり；
式XXVのnの各々は、独立して0、1、又は2であり；且つ
環A5は、1〜2個の窒素を有する、任意に置換された6-員の複素環又はヘテロアリール環
である。)。
【請求項６１】
前記式XXVの化合物が、下記からなる群より選択される、請求項60記載の方法：
【化９４】
2016195596.tif 000703
。
【請求項６２】
前記式I'の化合物が、式XXVIIの化合物である、請求項18記載の方法：
【化９５】
2016195596.tif 000704
(式中：
Tは、テザーであり；
Rwhは、式I-a、I-b、I-c、I-d、I-e、I-f、I-g、I-h、I-i、I-j、I-k、I-l、I-m、I-n
、I-o、I-p、I-q、I-r、I-s、及びI-tの化合物の水素の除去から生じるラジカルである弾
頭であり：
【化９６】
2016195596.tif 000705
ここで、
X1及びX8の各々は、独立して、-O-、-S-、又は-NR6-であり；
X2の各々は、独立して、-R6、-OR6、又は-NR6R7であり；
X9の各々は、独立して、
【化９７】
2016195596.tif 000706
であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8は各々、独立して、水素又はC1-C6アルキルであり；
ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-
SO2-、又は-C(=S)-により任意に置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上の
メチン基は、存在する場合、独立して、
【化９８】
2016195596.tif 000707
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
ここで任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8のいずれか2つは、
一緒になると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形
成し；且つ、任意にX2並びにR2、R3、及びR4のいずれか1つは、一緒になると、3-〜8-員
の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形成し；
A及びBは、各々独立して、任意に置換された単環式、二環式、又は三環式アリール又は
ヘテロアリールであり；且つ
nは、2〜4の整数であり；n1及びn2の各々は、独立して、0〜2の整数であり；n3は、1〜
2の整数であり；n4は、1〜3の整数であり；並びに、n9、n10、n11、及びn12の各1つは、0
〜1の整数であり；並びに、n13は、0〜2の整数であり、ここで前述のnの整数のいずれか1
つは1よりも大きく、その整数により表された隣接炭素は、単結合又は二重結合を形成す
ることができる。)。
【請求項６３】
前記式XXVIIの化合物が、下記からなる群より選択される、請求項62記載の方法：
【化９９】
2016195596.tif 000708
。
【請求項６４】
前記式I'の化合物が、式XXXVIIの化合物である、請求項18記載の方法：
【化１００】
2016195596.tif 000709
(式中：
Tは、テザーであり；
Rwhは、式I-a、I-b、I-c、I-d、I-e、I-f、I-g、I-h、I-i、I-j、I-k、I-l、I-m、I-n
、I-o、I-p、I-q、I-r、I-s、及びI-tの化合物の水素の除去から生じるラジカルである弾
頭であり：
【化１０１】
2016195596.tif 000710
ここで、
X1及びX8の各々は、独立して、-O-、-S-、又は-NR6-であり；
X2の各々は、独立して、-R6、-OR6、又は-NR6R7であり；
X9の各々は、独立して、
【化１０２】
2016195596.tif 000711
であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8の各々は、独立して、水素又はC1-C6アルキルであり
；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-
SO2-、又は-C(=S)-により置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン
基は、存在する場合、独立して、
【化１０３】
2016195596.tif 000712
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
ここで任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8のいずれか2つは、
一緒になると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形
成し；且つ、任意にX2並びにR2、R3、及びR4のいずれか1つは、一緒になると、3-〜8-員
の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形成し；
A及びBは、各々独立して、任意に置換された単環式、二環式、又は三環式アリール又は
ヘテロアリールであり；且つ
弾頭におけるnは、2〜4の整数であり；n1及びn2の各々は、独立して、0〜2の整数であ
り；n3は、1〜2の整数であり；n4は、1〜3の整数であり；並びに、n9、n10、n11、及びn1
2の各1つは、0〜1の整数であり；並びに、n13は、0〜2の整数であり、ここで前述のnの整
数のいずれか1つは1よりも大きく、その整数により表された隣接炭素は、単結合又は二重
結合を形成することができ；且つ
式XXXVIIのnは各々、0、1、又は2である。)。
【請求項６５】
前記式XXXVIIの化合物が、下記からなる群より選択される、請求項64記載の方法：
【化１０４】
2016195596.tif 000713
。
【請求項６６】
A)標的タンパク質のリガンド結合部位の中又はその近傍にドッキングされる可逆的リガ
ンドの構造モデルを提供する工程であって、ここで可逆的リガンドが、リガンド結合部位
と少なくとも1つの非共有的接触を生じる工程；
B)前記可逆的リガンドがリガンド結合部位の中又は近傍にドッキングされる場合に、可
逆的リガンドに隣接される標的タンパク質のリガンド結合部位の中又は近傍のリシン残基
を同定する工程；
C)前記リガンド結合部位の中又はその近傍にドッキングされた複数のリガンド−弾頭化
合物の構造モデルを作製する工程であって、ここで各リガンド−弾頭化合物が、工程B)に
おいて可逆的リガンドの置換可能な位置に共有結合された弾頭を含み、この弾頭が、反応
性化学部分及び任意にリンカーを含む、工程；
D)工程C)の構造モデルの中で、その構造モデルが、工程B)のリシン残基の側鎖第一級ア
ミン基が弾頭求電子部分の結合距離以内であることを可能にする、少なくとも1つのリガ
ンド−弾頭化合物を同定する工程；並びに
E)工程D)において同定された構造モデルの中で、リガンド結合部位の中又はその近傍の
水素結合ドナー-含有アミノ酸残基を更に同定する工程であって、ここで水素結合ドナー
部分は、弾頭求電子部分の水素結合の距離以内、及び/又は工程D)で同定されたリシン残
基の側鎖第一級アミン基のクーロン相互作用の距離以内にある、工程：を含む、標的タン
パク質のリシン残基に共有結合するリガンドをデザインする方法。
【請求項６７】
F)工程B)において同定されたリシン残基の側鎖第一級アミン基と弾頭求電子部分の間に
共有結合を形成することにより、工程E)において同定されたリガンド−弾頭化合物につい
て、リガンド-タンパク質共有付加物を形成し；且つ、同じく、水素結合ドナー部分と弾
頭求電子部分の間の水素結合；又は、リガンドの薬理作用団とリガンド結合部位の間の非
共有的相互作用を実質的に維持しながら、水素結合ドナー部分と工程D)において同定され
たリシン残基の側鎖第一級アミン基の間の水素結合を形成する工程：を更に含む、請求項
66記載の方法。
【請求項６８】
G)得られる立体配位の総エネルギーを分析することにより、リガンド-タンパク質共有
付加物の得られる立体配位を評価する工程：を更に含む、請求項67記載の方法。
【請求項６９】
前記工程A)〜G)が、リンカーを変化しながら反復され、且つ得られる立体配位の総エネ
ルギーが、先行する反復よりも少ない、請求項68記載の方法。
【請求項７０】
前記水素結合ドナー-含有アミノ酸残基が、水素結合ドナーとして作用することが可能
である任意のアミノ酸残基である、請求項66記載の方法。
【請求項７１】
前記水素結合ドナー-含有アミノ酸残基が、アルギニン、リシン、トレオニン、セリン
、ヒスチジン、及びチロシンからなる群より選択される、請求項66記載の方法。
【請求項７２】
前記水素結合ドナー-含有アミノ酸残基が、アルギニン及びリシンからなる群より選択
される、請求項71記載の方法。
【請求項７３】
前記標的タンパク質が、XIAP、ML-IAP、PDPK1、及びPI3Kβ/γからなる群より選択され
る、請求項66記載の方法。
【請求項７４】
前記標的タンパク質がXIAPであり、且つ同定されたリシンがK297又はK299である、請求
項73記載の方法。
【請求項７５】
前記リガンド−弾頭化合物が、式VII、VIII、IX-a、IX-b、XI、XII、XVI、XVII、XVIII
、XIX、XX、XXI、XXII、XXIII、XXXIV、XXV、XXVI、XXVII、XXVIII、XXIX、XXXVI、及びX
XXVIIからなる群より選択される、請求項66記載の方法。
【請求項７６】
前記弾頭が、式I-a、I-b、I-c、I-d、I-e、I-f、I-g、I-h、I-i、I-j、I-k、I-l、I-m
、I-n、I-o、I-p、I-q、I-r、I-s、及びI-tの化合物の水素の除去から生じるラジカルで
ある、請求項66記載の方法：
【化１０５】
2016195596.tif 000714
(式中、
X1及びX8の各々は、独立して、-O-、-S-、又は-NR6-であり；
X2の各々は、独立して、-R6、-OR6、又は-NR6R7であり；
X9の各々は、独立して、
【化１０６】
2016195596.tif 000715
であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8の各々は、独立して、水素又はC1-C6アルキルであり
；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-
SO2-、又は-C(=S)-により置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン
基は、存在する場合、独立して、
【化１０７】
2016195596.tif 000716
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
ここで任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8のいずれか2つは、
一緒になると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形
成し；且つ、任意にX2並びにR2、R3、及びR4のいずれか1つは、一緒になると、3-〜8-員
の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形成し；
A及びBは、各々独立して、任意に置換された単環式、二環式、又は三環式アリール又は
ヘテロアリールであり；且つ
nは、2〜4の整数であり；n1及びn2の各々は、独立して、0〜2の整数であり；n3は、1〜
2の整数であり；n4は、1〜3の整数であり；並びに、n9、n10、n11、及びn12の各1つは、0
〜1の整数であり；並びに、n13は、0〜2の整数であり、ここで前述のnの整数のいずれか1
つは1よりも大きく、その整数により表された隣接炭素は、単結合又は二重結合を形成す
ることができる。)。
【請求項７７】
前記弾頭が、式I-dの化合物の水素の除去から生じるラジカルであり、且つX2 が-NR6R7
である、請求項76記載の方法。
【請求項７８】
A)リガンド結合部位を有する少なくとも1つのタンパク質を同定する工程；
B)同定されたタンパク質の三次元構造モデルを提供する工程；
C)その構造モデルにおいて同定されたタンパク質のリガンド結合部位の中又はその近傍
に可逆的リガンドをドッキングする工程であり、ここでこの可逆的リガンドはリガンド結
合部位と少なくとも1つの非共有的接触を生じ、これにより同定されたタンパク質のリガ
ンド結合部位に又はその近傍に結合された可逆的リガンドの構造モデルを作り出す工程；
並びに
D)同定されたタンパク質のリガンド結合部位へ又はその近傍へ結合された可逆的リガン
ドの構造モデルにおいて、可逆的リガンドから約15Å未満である同定されたタンパク質の
リガンド結合部位の中又はその近傍の1個以上のリシン残基を同定する工程：を含む、少
なくとも1個の同定されたリシンが、共有的に修飾され得る、少なくとも1つのタンパク質
内の少なくとも1個のリシン残基を同定する方法。
【請求項７９】
構造上相同であるリガンド結合部位を有する複数のタンパク質を同定する工程を含む、
請求項78記載の方法。
【請求項８０】
A)同定されたタンパク質の少なくとも1つの三次元構造モデルを提供する工程；
B)同定されたタンパク質の少なくとも1つのリガンド結合部位の構造モデルの中又はそ
の近傍に可逆的リガンドをドッキングする工程であり、ここでこの可逆的リガンドはリガ
ンド結合部位と少なくとも1つの非共有的接触を生じ、これにより同定されたタンパク質
のリガンド結合部位に又はその近傍に結合された可逆的リガンドの構造モデルを作り出す
工程；並びに
C)同定されたタンパク質のリガンド結合部位へ又はその近傍へ結合された可逆的リガン
ドの構造モデルにおいて、可逆的リガンドから約15Å未満である同定されたタンパク質の
リガンド結合部位の中又はその近傍の1個以上のリシン残基を同定する工程：を含む、請
求項79記載の方法。
【請求項８１】
前記方法が、複数の同定されたタンパク質の2つ以上の相同なリガンド結合部位の三次
元的に同等なアミノ酸位置を比較する工程、及び同定されたタンパク質のリガンド結合部
位の中又はその近傍のリシン残基の出現率を決定する工程を含む、請求項80記載の方法。
【請求項８２】
前記同定されたタンパク質のリガンド結合部位の中又はその近傍のリシン残基の出現率
が、同定されたタンパク質のただ1つにおいてである、請求項81記載の方法。
【請求項８３】
前記同定されたタンパク質のリガンド結合部位の中又はその近傍のリシン残基の出現率
が、同定されたタンパク質の2つ以上においてである、請求項81記載の方法。
【請求項８４】
前記同定されたタンパク質のリガンド結合部位の中又はその近傍のリシン残基の出現率
が、同定されたタンパク質の10％未満においてである、請求項81記載の方法。
【請求項８５】
前記同定されたタンパク質のリガンド結合部位の中又はその近傍のリシン残基の出現率
が、同定されたタンパク質の50％未満においてである、請求項81記載の方法。
【請求項８６】
前記同定されたタンパク質のリガンド結合部位の中又はその近傍のリシン残基の出現率
が、同定されたタンパク質の50％より多くにおいてである、請求項81記載の方法。
【請求項８７】
前記同定されたタンパク質のリガンド結合部位の中又はその近傍のリシン残基の出現率
が、同定されたタンパク質の75％より多くにおいてである、請求項81記載の方法。
【請求項８８】
前記同定されたタンパク質のリガンド結合部位の中又はその近傍のリシン残基の出現率
が、同定されたタンパク質の全てにおいてである、請求項81記載の方法。
【請求項８９】
前記タンパク質が、BCL-2、カルパイン、カスパーゼ、カテプシン、HCV、HDAC、HSP70
、HSP90、IAP、キナーゼ、MDM2、MMP、NHR、PI3Kβ/γ、ホスファターゼ、PARP、及びHIV
プロテアーゼからなる群より選択される、請求項78記載の方法。
【請求項９０】
前記タンパク質が、XIAP、PI3K、PDPK1及びHCV-NS3からなる群より選択される、請求項
89記載の方法。
【請求項９１】
(a)リガンド結合部位を有する少なくとも1つのタンパク質を同定する工程；
(b)同定されたタンパク質の三次元構造モデルを提供する工程；
(c)工程(a)のリガンド結合部位の中又はその近傍の少なくとも1個のリシンの配置を同
定する工程；
(d)少なくとも1個の同定されたリシンの近傍に少なくとも1つの弾頭を提供する工程；
(e)少なくとも1個の同定されたリシンの第一級アミンの結合距離以内に弾頭の求電子性
原子を並置する工程；
(f)弾頭の求電子性原子と少なくとも1個のリシンの第一級アミン間に共有結合を形成す
る工程；
(g)工程(f)の共有結合された弾頭の15Å以内に、同定されたタンパク質のリガンド結合
部位の中の可逆的リガンドをドッキングする工程であり、ここで可逆的リガンドは、リガ
ンド結合部位とのその既知の非共有的相互作用のほとんどを維持している工程；
(h)工程(f)の共有結合された弾頭に、リガンドの最も近い原子を並置し、且つ弾頭とリ
ガンドの間の領域の該タンパク質表面と相補的でもある、リガンドと工程(f)の共有結合
された弾頭の間のテザーのデザインのための幾何学的必要要件を提供する工程：を含む、
タンパク質のリガンド結合部位内の標的リシンに結合する弾頭を選択する方法。
【請求項９２】
A)式Iの化合物を、ポリタンパク質のリガンド結合部位の中又はその近傍のリシン残基
を含むタンパク質と接触させる工程：
【化１０８】
2016195596.tif 000717
B)リシン残基の側鎖第一級アミン基と前記化合物の弾頭の間に共有結合を形成する工程
：を含む、タンパク質のリガンド結合部位の中又はその近傍のリシン残基を共有的に修飾
する方法：
(式中、
スカフォールドは、
a)リガンド結合部位へ又はその近傍へ結合することが可能であるリガンドの水素の除
去から生じるラジカル；又は
b)スカフォールドがリガンド結合部位へ又はその近傍へ結合することが可能であるよ
うに、薬理作用団の切断から生じるリガンドの薬理作用団の一部分：であり；
弾頭は、O、N、及びSから選択された1個以上のヘテロ原子を任意に含む、有機部分であ
り；この有機部分は、分子量約14ダルトン〜約200ダルトンを有し；弾頭は、リシン残基
の側鎖第一級アミン基との反応が可能であり；且つ、弾頭は、テザーを介してスカフォー
ルドに結合されており；並びに
テザーは、空白、結合、又は二価のC1-C15飽和、不飽和、直鎖、分岐鎖、環式、二環式
、若しくは、三環式の炭化水素部分であり；ここで、任意に炭化水素鎖の1個以上のメチ
レン単位は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、-C(=S)-、又はC(=NR1)-により、
独立して置き換えられ；任意に1個以上の水素は、ヘテロ原子により独立して置き換えら
れ；且つ、任意にC1-C15アルキルの1個以上のメチン基は、存在する場合、独立して
【化１０９】
2016195596.tif 000718
により置き換えられ；
xは、0、1、又は2であり；
yは、1、2、又は3であり；且つ
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
ここで、式Iの化合物は、リシンへ共有結合する固有の能力を介してその生物学的作用
を発揮する天然の化合物ではなく；式Iの化合物は、主にアミノ酸ヌクレオシド/ヌクレオ
チド由来の薬剤、単純なリシンアルキル化剤、無水物、ステロイド由来のリシンアルキレ
ーター、又は糖ベースのリシンアルキレーターを基にしている、天然又は合成の化合物で
もなく、
但し、式Iの化合物は、ウォルトマニン：
【化１１０】
2016195596.tif 000719
実質的にウォルトマニンと同じ機序を介してリシンを共有的に修飾する公知のウォルトマ
ニン類似体：
【化１１１】
2016195596.tif 000720
2016195596.tif 000721
2016195596.tif 000722
；及び、任意の機序-ベースの不可逆的インヒビターではないことを条件とする。)。
【請求項９３】
前記式Iの化合物が、式I'の化合物である、請求項92記載の方法：
【化１１２】
2016195596.tif 000723
。
【請求項９４】
前記弾頭が、式I-a、I-b、I-c、I-d、I-e、I-f、I-g、I-h、I-i、I-j、I-k、I-l、I-m
、I-n、I-o、I-p、I-q、I-r、I-s、及びI-tの化合物の水素の除去から生じるラジカルで
ある、請求項93記載の方法：
【化１１３】
2016195596.tif 000724
(式中、
X1及びX8の各々は、独立して、-O-、-S-、又は-NR6-であり；
X2の各々は、独立して、-R6、-OR6、又は-NR6R7であり；
X9の各々は、独立して、
【化１１４】
2016195596.tif 000725
であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8の各々は、独立して、水素又はC1-C6アルキルであり
；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-
SO2-、又は-C(=S)-により置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン
基は、存在する場合、独立して、
【化１１５】
2016195596.tif 000726
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
ここで任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8のいずれか2つは、
一緒になると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形
成し；且つ、任意にX2並びにR2、R3、及びR4のいずれか1つは、一緒になると、3-〜8-員
の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形成し；
A及びBは、各々独立して、任意に置換された単環式、二環式、又は三環式アリール又は
ヘテロアリールであり；且つ
nは、2〜4の整数であり；n1及びn2の各々は、独立して、0〜2の整数であり；n3は、1〜
2の整数であり；n4は、1〜3の整数であり；並びに、n9、n10、n11、及びn12の各1つは、0
〜1の整数であり；並びに、n13は、0〜2の整数であり、ここで前述のnの整数のいずれか1
つは1よりも大きく、その整数により表された隣接炭素は、単結合又は二重結合を形成す
ることができる。)。
【請求項９５】
前記式I-b及びI-cの化合物のR2及びR3の少なくとも1つが、水素である、請求項94記載
の方法。
【請求項９６】
前記式I-a、I-d、I-e、I-j、I-k、又はI-lの化合物が、式II-a、II-b、II-c、II-d、II
-e、II-f、II-g、II-h、II-i、II-j、II-k、II-l、II-m、II-n、II-o、II-p、II-q、II-r
、II-s、II-t、II-u、II-v、II-w、II-x、II-y、II-z、II-aa、II-bb、II-cc、II-dd、II
-ee、II-ff、II-gg、II-hh、II-ii、II-jj、II-kk、II-ll、II-mm、II-nn、II-oo、又はI
I-ppの化合物である、請求項94記載の方法：
【化１１６】
2016195596.tif 000727
(式中、
mの各々は、独立して、0〜4の整数であり；
m5の各々は、独立して、0〜3の整数であり；
m4の各々は、独立して、0〜5の整数であり；
n2の各々は、独立して、0〜2の整数であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、及びR15の各々は、独立
して、水素又はC1-C6アルキルであり；Rzは、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、CF3、又
はニトロであり；ここで、
C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又
は-C(=S)-により置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存
在する場合、独立して、
【化１１７】
2016195596.tif 000728
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；且つ
任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R1
4、及びR15のいずれか2つは、一緒になると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール
若しくはヘテロアリール基を形成する。)。
【請求項９７】
前記式I-d、又はI-hの化合物が、式III-a、III-b、III-c、III-d、III-e、III-f、III-
g、III-h、又はIII-iの化合物である、請求項94記載の方法：
【化１１８】
2016195596.tif 000729
(式中、
n3は、0〜2の整数であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8の各々は、独立して、水素又はC1-C6アルキルであり
；
B1、B2、B4、及びB5の各々は、独立して、CR7又はNであり、且つB3の各々は、NR7、O、
又はSであり；
Rz1、Rz2、Rz3、Rz4、及びRz5の各々は、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、CF3、又は
ニトロであり；
C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又
は-C(=S)-により任意に置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基
は、存在する場合、独立して、
【化１１９】
2016195596.tif 000730
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；且つ
任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8のいずれか2つは、一緒に
なると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形成する
。)。
【請求項９８】
前記式I-hの化合物が、式IV-a、IV-b、IV-c、IV-d、IV-e、IV-f、IV-g、IV-h、又はIV-
iの化合物である、請求項94記載の方法：
【化１２０】
2016195596.tif 000731
(式中、
化合物の窒素複素環上の置換可能な水素のいずれかは、アルキル、アルコキシ、アミド
、アシル、アシルオキシ、オキソアシル、ハロゲンにより置換されることができる。)。
【請求項９９】
前記式I-a、I-d、I-k、又はI-mの化合物の水素の除去から生じるラジカルが、式V-a、V
-b、V-c、V-d、V-e、V-f、V-g、V-h、V-i、又はV-jのラジカルである、請求項94記載の方
法：
【化１２１】
2016195596.tif 000732
(式中、
m1及びm2は、各々独立して、0〜2の整数であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、及びR11の各々は、独立して、水素又はC1-C6
アルキルであり；
C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又
は-C(=S)-により任意に置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基
は、存在する場合、独立して、
【化１２２】
2016195596.tif 000733
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；且つ
任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、及びR11のいずれか
2つは、一緒になると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリー
ル基を形成する。)。
【請求項１００】
前記式I-a、I-b、I-c、I-d、I-e、I-f、I-g、I-h、I-i、I-j、I-k、I-l、I-m、I-n、I-
o、I-p、I-q、I-r、I-s、及びI-tの化合物が、下記からなる群より選択される、請求項94
記載の方法：
【化１２３】
2016195596.tif 000734
2016195596.tif 000735
(式中、置換可能な水素のいずれかは、式I-a、I-b、I-c、I-d、I-e、I-f、I-g、I-h、I-i
、I-j、I-k、I-l、I-m、I-n、I-o、I-p、I-q、I-r、I-s、及びI-tにおいて、R2-R8により
規定されるものとしての置換基により置換され得る。)。
【請求項１０１】
前記式I-a、I-d、I-k、又はI-mの化合物の水素の除去から生じるラジカルが、式VI-a、
VI-b、VI-c、VI-d、VI-e、VI-f、VI-g、VI-h、VI-i、VI-j、VI-k、VI-l、VI-m、VI-n、VI
-o、VI-p、又はVI-qのラジカルである、請求項94記載の方法：
【化１２４】
2016195596.tif 000736
(式中、Rzzは、水素、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、-CH2
OCH3、及び-CH2CH2OCH3である。)。
【請求項１０２】
前記スカフォールドが、式VII、VIII、IX-a、IX-b、XI、XII、XVI、XVII、XVIII、XIX
、XX、XXI、XXII、XXIII、XXXIV、XXV、XXVI、XXVII、XXVIII、XXIX、XXXVI、及びXXXVII
からなる群より選択される、請求項94記載の方法。
【請求項１０３】
式Iの化合物：
【化１２５】
2016195596.tif 000737
(式中、
スカフォールドは、
a)リガンド結合部位へ又はその近傍へ結合することが可能であるリガンドの水素の除
去から生じるラジカル；又は
b)スカフォールドがリガンド結合部位へ又はその近傍へ結合することが可能であるよ
うに、薬理作用団の切断から生じるリガンドの薬理作用団の一部分：であり；
弾頭は、O、N、及びSから選択された1個以上のヘテロ原子を任意に含む、有機部分であ
り；この有機部分は、分子量約14ダルトン〜約200ダルトンを有し；弾頭は、リシン残基
の側鎖第一級アミン基との反応が可能であり；且つ、弾頭は、テザーを介してスカフォー
ルドに結合されており；並びに
テザーは、空白、結合、又は二価のC1-C15飽和、不飽和、直鎖、分岐鎖、環式、二環式
、三環式の炭化水素部分であり；ここで、任意に炭化水素鎖の1個以上のメチレン単位は
、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、-C(=S)-、又はC(=NR1)- により、独立して置
き換えられ；任意に1個以上の水素は、ヘテロ原子により独立して置き換えられ；且つ、
任意にC1-C15アルキルの1個以上のメチン基は、存在する場合、独立して
【化１２６】
2016195596.tif 000738
により置き換えられ；
xは、0、1、又は2であり；
yは、1、2、又は3であり；且つ
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
但し、式Iの化合物は、ウォルトマニン：
【化１２７】
2016195596.tif 000739
実質的にウォルトマニンと同じ機序を介してリシンを共有的に修飾する公知のウォルトマ
ニン類似体：
【化１２８】
2016195596.tif 000740
2016195596.tif 000741
2016195596.tif 000742
；及び、任意の機序-ベースの不可逆的インヒビターではないことを条件とする。)。
【請求項１０４】
前記式Iの化合物が、式I'の化合物である、請求項103記載の化合物：
【化１２９】
2016195596.tif 000743
。
【請求項１０５】
前記弾頭が、式I-a、I-b、I-c、I-d、I-e、I-f、I-g、I-h、I-i、I-j、I-k、I-l、I-m
、I-n、I-o、I-p、I-q、I-r、I-s、及びI-tの化合物の水素の除去から生じるラジカルで
ある、請求項104記載の化合物：
【化１３０】
2016195596.tif 000744
(式中、
X1及びX8の各々は、独立して、-O-、-S-、又は-NR6-であり；
X2の各々は、独立して、-R6、-OR6、又は-NR6R7であり；
X9の各々は、独立して、
【化１３１】
2016195596.tif 000745
であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8の各々は、独立して、水素又はC1-C6アルキルであり
；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-
SO2-、又は-C(=S)-により置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン
基は、存在する場合、独立して、
【化１３２】
2016195596.tif 000746
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
ここで任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8のいずれか2つは、
一緒になると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形
成し；且つ、任意にX2並びにR2、R3、及びR4のいずれか1つは、一緒になると、3-〜8-員
の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形成し；
A及びBは、各々独立して、任意に置換された単環式、二環式、又は三環式アリール又は
ヘテロアリールであり；且つ
nは、2〜4の整数であり；n1及びn2の各々は、独立して、0〜2の整数であり；n3は、1〜
2の整数であり；n4は、1〜3の整数であり；並びに、n9、n10、n11、及びn12の各1つは、0
〜1の整数であり；並びに、n13は、0〜2の整数であり、ここで前述のnの整数のいずれか1
つは1よりも大きく、その整数により表された隣接炭素は、単結合又は二重結合を形成す
ることができる。)。
【請求項１０６】
前記式I-b及びI-cの化合物のR2及びR3の少なくとも1つが、水素である、請求項105記載
の化合物。
【請求項１０７】
前記式I-a、I-d、I-e、I-j、I-k、又はI-lの化合物が、式II-a、II-b、II-c、II-d、II
-e、II-f、II-g、II-h、II-i、II-j、II-k、II-l、II-m、II-n、II-o、II-p、II-q、II-r
、II-s、II-t、II-u、II-v、II-w、II-x、II-y、II-z、II-aa、II-bb、II-cc、II-dd、II
-ee、II-ff、II-gg、II-hh、II-ii、II-jj、II-kk、II-ll、II-mm、II-nn、II-oo、又はI
I-ppの化合物である、請求項105記載の化合物：
【化１３３】
2016195596.tif 000747
(式中、
mの各々は、独立して、0〜4の整数であり；
m5の各々は、独立して、0〜3の整数であり；
m4の各々は、独立して、0〜5の整数であり；
n2の各々は、独立して、0〜2の整数であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、及びR15の各々は、独立
して、水素又はC1-C6アルキルであり；Rzは、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、CF3、又
はニトロであり；ここで、
C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又
は-C(=S)-により置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存
在する場合、独立して、
【化１３４】
2016195596.tif 000748
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；且つ
任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R1
4、及びR15のいずれか2つは、一緒になると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール
若しくはヘテロアリール基を形成する。)。
【請求項１０８】
前記式I-d、又はI-hの化合物が、式III-a、III-b、III-c、III-d、III-e、III-f、III-
g、III-h、又はIII-iの化合物である、請求項105記載の化合物：
【化１３５】
2016195596.tif 000749
(式中、
n3は、0〜2の整数であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8の各々は、独立して、水素又はC1-C6アルキルであり
；
B1、B2、B4、及びB5の各々は、独立して、CR7又はNであり、且つB3の各々は、NR7、O、
又はSであり；
Rz1、Rz2、Rz3、Rz4、及びRz5の各々は、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、CF3、又は
ニトロであり；
C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又
は-C(=S)-により任意に置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基
は、存在する場合、独立して、
【化１３６】
2016195596.tif 000750
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；且つ
任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8のいずれか2つは、一緒に
なると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形成する
。)。
【請求項１０９】
前記式I-hの化合物が、式IV-a、IV-b、IV-c、IV-d、IV-e、IV-f、IV-g、IV-h、又はIV-
iの化合物である、請求項105記載の化合物：
【化１３７】
2016195596.tif 000751
(式中、化合物の窒素複素環上の置換可能な水素のいずれかは、アルキル、アルコキシ、
アミド、アシル、アシルオキシ、オキソアシル、ハロゲンにより置換されることができる
。)。
【請求項１１０】
前記式I-a、I-d、I-k、又はI-mの化合物の水素の除去から生じるラジカルが、式V-a、V
-b、V-c、V-d、V-e、V-f、V-g、V-h、V-i、又はV-jのラジカルである、請求項105記載の
化合物：
【化１３８】
2016195596.tif 000752
(式中、
m1及びm2は、各々独立して、0〜2の整数であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、及びR11の各々は、独立して、水素又はC1-C6
アルキルであり；
C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又
は-C(=S)-により任意に置き換えられることができ；
C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在する場合、独立して、
【化１３９】
2016195596.tif 000753
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；且つ
任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、及びR11のいずれか
2つは、一緒になると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリー
ル基を形成する。)。
【請求項１１１】
前記式I-a、I-b、I-c、I-d、I-e、I-f、I-g、I-h、I-i、I-j、I-k、I-l、I-m、I-n、I-
o、I-p、I-q、I-r、I-s、及びI-tの化合物が、下記からなる群より選択される、請求項10
5記載の化合物：
【化１４０】
2016195596.tif 000754
2016195596.tif 000755
(式中、置換可能な水素のいずれかは、式I-a、I-b、I-c、I-d、I-e、I-f、I-g、I-h、I-i
、I-j、I-k、I-l、I-m、I-n、I-o、I-p、I-q、I-r、I-s、及びI-tにおいて、R2-R8により
規定されるものとしての置換基により置換され得る。)。
【請求項１１２】
前記式I-a、I-d、I-k、又はI-mの化合物の水素の除去から生じるラジカルが、式VI-a、
VI-b、VI-c、VI-d、VI-e、VI-f、VI-g、VI-h、VI-i、VI-j、VI-k、VI-l、VI-m、VI-n、VI
-o、VI-p、又はVI-qのラジカルである、請求項105記載の化合物：
【化１４１】
2016195596.tif 000756
(式中、Rzzは、水素、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、-C
H2OCH3、及び-CH2CH2OCH3である。)。
【請求項１１３】
前記スカフォールドが、式VII、VIII、IX-a、IX-b、XI、XII、XVI、XVII、XVIII、XIX
、XX、XXI、XXII、XXIII、XXXIV、XXV、XXVI、XXVII、XXVIII、XXIX、XXXVI、及びXXXVII
からなる群より選択される、請求項104記載の化合物。
【請求項１１４】
前記スカフォールドが、式VIIの化合物の1個以上の水素の除去から生じるラジカルであ
る、請求項105記載の化合物：
【化１４２】
2016195596.tif 000757
(式中、V及びWは、各々独立して、-(CR14R15)qX3(CR16R17)r-であり；
q及びrは、各々独立して、0、1、2、3、又は4であり；
X3は、-CR18R19-、又は-NR20-であり；且つ
Rx、Ry、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、及びR20は、各々独立して、水素
又はC1-C6アルキルであり；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O
-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、-C(=S)-、又は任意に置換されたアリール若しくはヘテロ
アリール基により置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存
在する場合、独立して、
【化１４３】
2016195596.tif 000758
により置き換えられることができ；且つ
R1は、水素又はC1-C8アルキルである。)。
【請求項１１５】
前記式VIIの化合物が、式VII-aの化合物である、請求項114記載の化合物：
【化１４４】
2016195596.tif 000759
(式中、V及びWは、各々独立して、-(CR14R15)qX3(CR16R17)r-であり；
p、q及びrは、各々独立して、0、1、2、3、又は4であり；
X3は、-CR18R19-、又は-NR20-であり；且つ
R21及びR22は、各々独立して、水素又はC1-C6アルキルであり；
R23は、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、アミノ、又はニトロであり；ここで、C1-C6
アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S
)-により任意に置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在
する場合、独立して、
【化１４５】
2016195596.tif 000760
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；且つ
任意にR21及びR23は一緒に、4-〜8-員の炭素環又は複素環を形成することができる。)
。
【請求項１１６】
前記式I'の化合物が、式VII-bの化合物である、請求項105記載の化合物：
【化１４６】
2016195596.tif 000761
(式中、V及びWは、各々独立して、-(CR14R15)qX3(CR16R17)r-であり；
p、q及びrは、各々独立して、0、1、2、3、又は4であり；
X3は、-CR18R19-、又は-NR20-であり；且つ
R21及びR22は、各々独立して、水素又はC1-C6アルキルであり；
R23は、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、アミノ、又はニトロであり；ここで、C1-C6
アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S
)-により任意に置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在
する場合、独立して、
【化１４７】
2016195596.tif 000762
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；且つ
任意にR21及びR23は一緒に、4-〜8-員の炭素環又は複素環を形成することができ；
Tは、テザーであり；且つ
Rwhは、弾頭である。)。
【請求項１１７】
前記式VII-bの化合物が、式VII-hの化合物である、請求項116記載の化合物：
【化１４８】
2016195596.tif 000763
。
【請求項１１８】
前記式VII-hの化合物が、式VII-j、VII-k、VII-l、VII-m、VII-n、又はVII-oの化合物
である、請求項117記載の化合物：
【化１４９】
2016195596.tif 000764
(式中、
R2、R3、R4、及びR5の各々は、独立して、水素又はC1-C6アルキルであり；
C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又
は-C(=S)-により任意に置き換えられることができ；
C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在する場合、独立して、
【化１５０】
2016195596.tif 000765
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルである。)。
【請求項１１９】
前記式VII-hの化合物が、下記からなる群より選択される、請求項117記載の化合物：
【化１５１】
2016195596.tif 000766
2016195596.tif 000767
2016195596.tif 000768
2016195596.tif 000769
2016195596.tif 000770
。
【請求項１２０】
前記スカフォールドが、式VIIIの化合物の水素の除去から生じるラジカルである、請求
項105記載の化合物：
【化１５２】
2016195596.tif 000771
(式中、
X4は、-CR33-又は-N-であり；
sは、0、1、2、3、又は4であり；且つ
R12、R13、R21、R22、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31、R32、及びR33は、各
々独立して、水素又はC1-C6アルキルであり；
R23は、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、アミノ、又はニトロであり；ここで、C1-C6
アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S
)-により任意に置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在
する場合、独立して、
【化１５３】
2016195596.tif 000772
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；且つ
任意にR21及びR23は一緒に、4-〜8-員の炭素環又は複素環を形成することができる。)
。
【請求項１２１】
前記式I'の化合物が、式VIII-a又はVIII-bの化合物である、請求項104記載の化合物：
【化１５４】
2016195596.tif 000773
(式中、
X4は、-CR33-又は-N-であり；
sは、0、1、2、3、又は4であり；
R12、R13、R21、R22、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31、R32、及びR33は、各
々独立して、水素又はC1-C6アルキルであり；
R23は、水素、C1-C6 アルキル、ハロゲン、アミノ、又はニトロであり；ここで、C1-C6
アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S
)-により任意に置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在
する場合、独立して、
【化１５５】
2016195596.tif 000774
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；且つ
任意にR21及びR23は一緒に、4-〜8-員の炭素環又は複素環を形成することができ；
Tはテザーであり；且つ
Rwhは弾頭である。)。
【請求項１２２】
前記式VIII-a又はVIII-bの化合物が、下記からなる群より選択される、請求項121記載
の化合物：
【化１５６】
2016195596.tif 000775
。
【請求項１２３】
前記スカフォールドが、式IX-a又はIX-bの化合物の水素の除去から生じるラジカルであ
る、請求項105記載の化合物：
【化１５７】
2016195596.tif 000776
(式中、
X5は、-O-、-CR42R43-又は-NR42-であり；
R12、R13、R27、R28、R29、R30、R31、R32、R33、R34、R35、R36、R37、R38、R39、R40
、R41、R42、及びR43は、各々独立して、水素又はC1-C6アルキルであり；ここで、C1-C6
アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S
)-により任意に置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在す
る場合、独立して、
【化１５８】
2016195596.tif 000777
により置き換えられることができ；R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
D、E、F、G、及びHは、各々独立して、任意に置換されたアリール又はヘテロアリール
であり；ここで、F及びGは、一緒に縮合され、二環式の任意に置換されたアリール又はヘ
テロアリールを形成する。)。
【請求項１２４】
前記式I'の化合物が、式IX-c又はIX-dの化合物である、請求項105記載の化合物：
【化１５９】
2016195596.tif 000778
(式中、
R12、R13、及びR31は、各々独立して、水素又はC1-C6アルキルであり；ここで、C1-C6
アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S
)-により任意に置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在す
る場合、独立して、
【化１６０】
2016195596.tif 000779
により置き換えられることができ；R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
F、G、及びHは、各々独立して、任意に置換されたアリール又はヘテロアリールであり
；ここで、F及びGは、一緒に縮合され、二環式の任意に置換されたアリール又はヘテロア
リールを形成し；
Tはテザーであり；且つ
Rwhは弾頭である。)。
【請求項１２５】
前記式I'の化合物が、式XIの化合物である、請求項105記載の化合物：
【化１６１】
2016195596.tif 000780
(式中、
pは、0〜4の整数であり、uは、1〜4の整数であり；
B6及びB7は、各々独立して、CR7又はNであり；
R69は、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、又は-NH(CO)NR78R79であり
；
R70は、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、アミノ、ニトロであり；
R7、R71、R72、R73、R74、R75、R76、R77、R78、及びR79は、各々独立して、水素又はC
1-C6アルキルであり；R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；ここで、C1-C6アルキルの1
個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S)-により置
き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在する場合、独立し
て、
【化１６２】
2016195596.tif 000781
により置き換えられることができ；
任意に、R78、及びR79は、一緒に、4-〜8-員の炭素環又は複素環を形成する。)。
【請求項１２６】
前記式XIの化合物が、式XI-a、XI-b、又はXI-cの化合物である、請求項125記載の化合
物：
【化１６３】
2016195596.tif 000782
(式中、
R70は、-F、-Cl、-Br、又は-Iであり；
Tは、テザーであり；且つ
Rwhは、弾頭である。)。
【請求項１２７】
前記式XI-a、XI-b又はXI-cの化合物が、式XI-d、XI-e、XI-f、XI-g、XI-h、XI-i、又は
XI-jの化合物である、請求項126記載の化合物：
【化１６４】
2016195596.tif 000783
(式中、
R2、R3、R4、R5、R6、R7、R80、R81、R82、R83、R84、R85、R86、及びR87は、各々独立
して、水素又はC1-C6アルキルであり；R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又
は-C(=S)-により置き換えられることができ；
C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在する場合、独立して、
【化１６５】
2016195596.tif 000784
により置き換えられることができる。)。
【請求項１２８】
前記式XI-d、XI-e、XI-f、XI-g、XI-h、XI-i、又はXI-jの化合物が、式XI-k、XI-l、XI
-m、XI-n、XI-o、XI-p、又はXI-qの化合物である、請求項127記載の化合物：
【化１６６】
2016195596.tif 000785
(式中、
X6は、CH2、NH、O、又はSであり；
R88、及びR89は、各々独立して、水素又はC1-C6アルキルであり；R1は、水素又はC1-C8
アルキルであり；
C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又
は-C(=S)-により置き換えられることができ；
C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在する場合、独立して、
【化１６７】
2016195596.tif 000786
により置き換えられることができ；且つ
n5は、0〜3の整数である。)。
【請求項１２９】
前記式XI-d、XI-e、XI-f、XI-g、XI-h、XI-i、又はXI-jの化合物が、式XI-r、XI-s、XI
-t、XI-u、XI-v、XI-w、又はXI-xの化合物である、請求項127記載の化合物：
【化１６８】
2016195596.tif 000787
。
【請求項１３０】
前記式XI-d、XI-e、XI-f、XI-g、XI-h、XI-i、又はXI-jの化合物が、式XI-y、XI-z、XI
-aa、又はXI-bbの化合物である、請求項127記載の化合物：
【化１６９】
2016195596.tif 000788
。
【請求項１３１】
前記式XI-d、XI-e、XI-f、XI-g、XI-h、XI-i、又はXI-jの化合物が、式XI-cc、XI-dd、
XI-ee、又はXI-ffの化合物である、請求項127記載の化合物：
【化１７０】
2016195596.tif 000789
。
【請求項１３２】
前記式XIの化合物が、下記からなる群より選択される、請求項126記載の化合物：
【化１７１】
2016195596.tif 000790
2016195596.tif 000791
2016195596.tif 000792
2016195596.tif 000793
2016195596.tif 000794
2016195596.tif 000795
2016195596.tif 000796
2016195596.tif 000797
。
【請求項１３３】
前記式I'の化合物が、式XIIの化合物である、請求項105記載の化合物：
【化１７２】
2016195596.tif 000798
(式中、
R1及びR2は、各々独立して、水素又はC1-C8アルキルであり；ここで、C1-C6アルキルの
1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S)-により置
き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在する場合、独立し
て、
【化１７３】
2016195596.tif 000799
により置き換えられることができ；
Tは、テザーであり；且つ
Rwhは、弾頭である。)。
【請求項１３４】
前記式I'の化合物が、式XXXVIの化合物である、請求項105記載の化合物： 
【化１７４】
2016195596.tif 000800
(式中、
Rvは、H、任意に置換されたC1-C3分岐鎖若しくは直鎖アルキル、又は任意に置換された
C1-C3分岐鎖若しくは直鎖アシルであり；
Tは、テザーであり；且つ
Rwhは、弾頭である。)。
【請求項１３５】
前記式XXXVIの化合物が、下記からなる群より選択される、請求項134記載の化合物：
【化１７５】
2016195596.tif 000801
。
【請求項１３６】
前記スカフォールドが、式XVI-a、XVI-b、又はXVI-cの化合物の水素の除去から生じる
ラジカルである、請求項105記載の化合物：
【化１７６】
2016195596.tif 000802
(式中、
R90、R91、R92、R93、R94、R95、R96、R97、R98、R99、R100、R102、R104、R105、R106
、R107、R108、R109、R110、R111、R112、R113、及びR114は、各々独立して、水素又はC1
-C6アルキルであり；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(
O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S)-により任意に置き換えられることができ；
R103は、水素、C1-C6アルキル、又はC2-C8アルケニルであり；
C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在する場合、独立して、
【化１７７】
2016195596.tif 000803
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
R101及びR101の各々は、独立して、水素、C1-C6アルキル、C2-C8アルケニル、ハロゲン
、アミノ、ニトロ、任意に置換されたアリール又はヘテロアリールであり；
n6及びn7は、各々独立して、0〜4の整数であり；且つ
n8は、0〜2の整数である。)。
【請求項１３７】
前記式I'の化合物が、式XVI-d、XVI-e、又はXVI-fの化合物である、請求項105記載の化
合物：
【化１７８】
2016195596.tif 000804
(式中、
R90及びR114は、各々独立して、水素又はC1-C6アルキルであり；
R103は、水素、C1-C6アルキル、又はC2-C8アルケニルであり；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
R101は、水素、C1-C6アルキル、C2-C8アルケニル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、任意に
置換されたアリール又はヘテロアリールであり；且つ
n6は、0〜4の整数であり；
n8は、0〜2の整数であり；
ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-
SO2-、又は-C(=S)-により置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン
基は、存在する場合、独立して、
【化１７９】
2016195596.tif 000805
により置き換えられることができ；且つ
R1は、水素又はC1-C8アルキルである。)。
【請求項１３８】
前記式XVI-d、XVI-e、又はXVI-fの化合物が、式XVI-g、XVI-h、又はXVI-iの化合物であ
る、請求項137記載の化合物：
【化１８０】
2016195596.tif 000806
(式中、
R2、R3、R4、及びR5の各々は、独立して、水素又はC1-C6アルキルであり；ここで、C1-
C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(
=S)-により置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在する
場合、独立して、
【化１８１】
2016195596.tif 000807
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
ここで任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8のいずれか2つは、
一緒になると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形
成し；且つ、任意にX2並びにR2、R3、及びR4のいずれか1つは、一緒になると、3-〜8-員
の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形成する。)。
【請求項１３９】
前記式I'の化合物が、下記からなる群より選択される、請求項137記載の化合物：
【化１８２】
2016195596.tif 000808
2016195596.tif 000809
2016195596.tif 000810
2016195596.tif 000811
2016195596.tif 000812
2016195596.tif 000813
2016195596.tif 000814
。
【請求項１４０】
前記式I'の化合物が、式XXII-a、式XXII-b、又は式XXII-cの化合物である、請求項105
記載の化合物：
【化１８３】
2016195596.tif 000815
(式中、
式XXII-aのn、m、p、及びqは、各々独立して、0、1、2、3であり；但し、nとqは同時に
0ではなく、且つmとqは、同時に0ではないことを条件とし；
A2は、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1又は2個のヘテロ原子を有す
る4-8員の飽和又は部分的不飽和の複素環、又は少なくとも1個の窒素、少なくとも1個の
酸素、及び任意に窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜2個の追加のヘテ
ロ原子を有する5-10員の飽和又は部分的不飽和の架橋された二環式複素環から選択された
任意に置換された環であり；
B'は、フェニル、8-〜10-員の二環式アリール環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立
して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する5-〜6-員のヘテロアリール環、又は窒素、酸
素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する8-〜10-員の二環
式ヘテロアリール環から選択された任意に置換された基；又は、-T-Rwhであり；且つ
C2は、水素、或いは3-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の炭素環、7-〜10-員の飽和又は
部分的不飽和の二環式炭素環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜2個
のヘテロ原子を有する4-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の複素環、窒素、酸素、若しくは
硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する7-〜10-員の飽和又は部分的不
飽和の二環式複素環、フェニル、8-〜10-員の二環式アリール環、窒素、酸素、若しくは
硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する5-〜6-員のヘテロアリール環、
又は窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する8-〜
10-員の二環式ヘテロアリール環から選択された任意に置換された環であり；
Tは、テザーであり；且つ
Rwhは、弾頭である。)。
【請求項１４１】
前記式XXII-a、XXII-b、XXII-cの化合物が、下記からなる群より選択される、請求項14
0記載の化合物：
【化１８４】
2016195596.tif 000816
2016195596.tif 000817
2016195596.tif 000818
2016195596.tif 000819
2016195596.tif 000820
2016195596.tif 000821
。
【請求項１４２】
前記式I'の化合物が、式XXIIIの化合物である、請求項105記載の化合物：
【化１８５】
2016195596.tif 000822
(式中：
Rwhは、弾頭であり；
R201は、水素又はC1-6アルキルであり；
R202は、水素、或いはC1-6アルキル、C1-6アルコキシ、若しくは(C1-6アルキレン)-R20
3から選択された任意に置換された基であるか；又は
R201及びR202は、介在する炭素と一緒に、3-〜7-員の炭素環、又は窒素、酸素、若しく
は硫黄から独立して選択された1〜2個のヘテロ原子を有する4-〜7-員の複素環から選択さ
れた任意に置換された環を形成し；
R203は、3-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の炭素環、7-〜10-員の飽和又は部分的不飽
和の二環式炭素環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜2個のヘテロ原
子を有する4-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の複素環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独
立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環
式複素環、フェニル、8-〜10-員の二環式アリール環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独
立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する5-〜6-員のヘテロアリール環、又は窒素、
酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する8-〜10-員の二
環式ヘテロアリール環であり；且つ
環A6は、存在しないか、或いは窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜2
個のヘテロ原子を有する4-〜7-員の複素環、又は窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して
選択された1〜3個のヘテロ原子を有する5-〜6-員のヘテロアリール環から選択された任意
に置換された基である。)。
【請求項１４３】
前記式XXIIIの化合物が、下記からなる群より選択される、請求項142記載の化合物：
【化１８６】
2016195596.tif 000823
2016195596.tif 000824
2016195596.tif 000825
。
【請求項１４４】
前記式Iの化合物が、式XXIV-a又は式XXIV-bの化合物である、請求項105記載の化合物：
【化１８７】
2016195596.tif 000826
(式中、
Rwhは、弾頭であり；
R204は、水素、或いはC1-6脂肪族、-(CH2)m-(3-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の炭素
環)、-(CH2)m-(7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環式炭素環)、-(CH2)m-(窒素、酸
素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜2個のヘテロ原子を有する4-〜7-員の飽和又
は部分的不飽和の複素環)、-(CH2)m-(窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された
1〜3個のヘテロ原子を有する7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環式複素環)、-(CH2)
m-フェニル、-(CH2)m-(8-〜10-員の二環式アリール環)、-(CH2)m-(窒素、酸素、若しくは
硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する5-〜6-員のヘテロアリール環)
、又は-(CH2)m-(窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子
を有する8-〜10-員の二環式ヘテロアリール環)から選択された任意に置換された基であり
；
R205及びR206の各々は、独立して、-R"、ハロゲン、-NO2、-CN、-OR"、-SR"、-N(R")2
、-C(O)R"、-CO2R"、-C(O)C(O)R"、-C(O)CH2C(O)R"、-S(O)R"、-S(O)2R"、-C(O)N(R")2、
-SO2N(R")2、-OC(O)R"、-N(R")C(O)R"、-N(R")N(R")2、-N(R")C(=NR")N(R")2、-C(=NR")N
(R")2、-C=NOR"、-N(R")C(O)N(R")2、-N(R")SO2N(R")2、-N(R")SO2R"、又は-OC(O)N(R")2
であり；
R"の各々は、独立して、水素、或いはC1-6脂肪族、3-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の
炭素環、7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環式炭素環、窒素、酸素、若しくは硫黄
から独立して選択された1〜2個のヘテロ原子を有する4-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の
複素環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する
7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環式複素環、フェニル、8-〜10-員の二環式アリー
ル環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する5-
〜6-員のヘテロアリール環、又は窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4
個のヘテロ原子を有する8-〜10-員の二環式ヘテロアリール環から選択された任意に置換
された基であるか；又は
同一窒素上の2個のR"基は、それらが結合した窒素と一緒に、窒素、酸素、若しくは硫
黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する任意に置換された5〜8員の飽和、
部分的不飽和、又は芳香族の環を形成し；
mは、0〜6までを含む整数であり；
式XXIV-a又は式XXIV-bのnの各々は、独立して0、1、又は2であり；且つ
環A5は、1〜2個の窒素を有する、任意に置換された6-員の複素環又はヘテロアリール環
である。)。
【請求項１４５】
前記式XXIV-a又は式XXIV-bの化合物が、下記からなる群より選択される、請求項144記
載の化合物：
【化１８８】
2016195596.tif 000827
。
【請求項１４６】
前記式I'の化合物が、式XXVの化合物又はそれらの医薬として許容し得る塩である、請
求項105記載の化合物：
【化１８９】
2016195596.tif 000828
(式中、
R205及びR206の各々は、独立して、-R"、ハロゲン、-NO2、-CN、-OR"、-SR"、-N(R")2
、-C(O)R"、-CO2R"、-C(O)C(O)R"、-C(O)CH2C(O)R"、-S(O)R"、-S(O)2R"、-C(O)N(R")2、
-SO2N(R")2、-OC(O)R"、-N(R")C(O)R"、-N(R")N(R")2、-N(R")C(=NR")N(R")2、-C(=NR")N
(R")2、-C=NOR"、-N(R")C(O)N(R")2、-N(R")SO2N(R")2、-N(R")SO2R"、又は-OC(O)N(R")2
であり；
R"の各々は、独立して、水素、或いはC1-6脂肪族、3-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の
炭素環、7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環式炭素環、窒素、酸素、若しくは硫黄
から独立して選択された1〜2個のヘテロ原子を有する4-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の
複素環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する
7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環式複素環、フェニル、8-〜10-員の二環式アリー
ル環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する5-
〜6-員のヘテロアリール環、又は窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4
個のヘテロ原子を有する8-〜10-員の二環式ヘテロアリール環から選択された任意に置換
された基であるか；又は
任意に、同一窒素上の2個のR"基は、それらが結合した窒素と一緒に、窒素、酸素、若
しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する任意に置換された5〜8員
の飽和、部分的不飽和、又は芳香族の環を形成し；
mは、0〜6までを含む整数であり；
nは各々独立して、0、1、又は2であり；
環A5は、1〜2個の窒素を有する、任意に置換された6-員の複素環又はヘテロアリール環
であり；且つ
Rwh は、弾頭である。)。
【請求項１４７】
前記式XXVの化合物が、下記からなる群より選択される、請求項146記載の化合物：
【化１９０】
2016195596.tif 000829
。
【請求項１４８】
前記式I'の化合物が、式XXVIIの化合物又はそれらの医薬として許容し得る塩である、
請求項105記載の化合物：
【化１９１】
2016195596.tif 000830
(式中、
Tは、テザーであり；
Rwhは、弾頭であり；且つ
Rは、H、アルキル、又はアルコキシである。)。
【請求項１４９】
前記式XXVIIの化合物が、下記からなる群より選択される、請求項148記載の化合物：
【化１９２】
2016195596.tif 000831
。
【請求項１５０】
前記式I'の化合物が、式XXXVIIの化合物又はそれらの医薬として許容し得る塩である、
請求項105記載の化合物：
【化１９３】
2016195596.tif 000832
(式中、
Tは、テザーであり；
Rwhは、弾頭である。)。
【請求項１５１】
前記式XXXVIIの化合物が、下記からなる群より選択される、請求項150記載の化合物：
【化１９４】
2016195596.tif 000833
。
【請求項１５２】
式XIIIのタンパク質-修飾因子-リガンド複合体：
【化１９５】
2016195596.tif 000834
(式中、
スカフォールドは、
a)リガンド結合部位へ又はその近傍へ結合することが可能であるリガンドの水素の除
去から生じるラジカル；又は
b)スカフォールドがリガンド結合部位へ又はその近傍へ結合することが可能であるよ
うに、薬理作用団の切断から生じるリガンドの薬理作用団の一部分：であり；
弾頭は、O、N、及びSから選択された1個以上のヘテロ原子を任意に含む、有機部分であ
り；この有機部分は、分子量約14ダルトン〜約200ダルトンを有し；弾頭は、リシン残基
の側鎖第一級アミン基との反応が可能であり；且つ、弾頭は、テザーを介してスカフォー
ルドに結合されており；並びに
テザーは、空白、結合、又は二価のC1-C15飽和又は不飽和の直鎖、分岐鎖、又は環式の
炭化水素部分、アリール部分又はヘテロアリール部分であり、且つ、任意に炭化水素鎖の
1個以上のメチレン単位は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、-C(=S)-、又はC(=N
R1)-により、独立して置き換えられ；且つ、C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在
する場合、独立して
【化１９６】
2016195596.tif 000835
により置き換えられ；
xは、0、1、又は2であり；
yは、1、2、又は3であり；並びに
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；且つ
Y1は、式XIV-a、XIV-b、XIV-c、XIV-d、XIV-e、XIV-f、XIV-g、XIV-h、又はXIV-iのラ
ジカルの水素の除去から生じる二価又は三価の部分であり；
【化１９７】
2016195596.tif 000836
ここで、
X1及びX2の各々は、独立して、-CR2R3R4、-OR2、又は-NR2R3であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8の各々は、独立して、水素又はC1-C6アルキルであ
り；
任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8のいずれか2つは、一緒
に連結し、3-〜8-員の炭素環又は複素環を形成することができ；
C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、
又は-C(=S)-により置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、
存在する場合、独立して、
【化１９８】
2016195596.tif 000837
により置き換えられることができ；且つ
nは、2〜4の整数であり、m4は、1〜2の整数であり；
Mは、"*"と印付けられた位置に接続され；
【化１９９】
2016195596.tif 000838
は、単結合又は二重結合であり；
Aは、任意に置換されたアリール又はヘテロアリールであり；
式XIV-a、XIV-b、XIV-c、XIV-d、XIV-e、XIV-f、XIV-g、XIV-h、又はXIV-iのラジカ
ルの水素は、テザー-スカフォールドにより置換され；且つ
Mは、-NH-又は=N-であり、Mの窒素原子は、該ポリペプチドのリシン残基の側鎖第一
級アミン基由来の窒素である。)。
【請求項１５３】
前記式XIIIの複合体が、式XIII'の複合体である、請求項152記載の複合体：
【化２００】
2016195596.tif 000839
。
【請求項１５４】
前記スカフォールドが、式VII、VIII、IX-a、IX-b、XI、XII、XVI、XVII、XVIII、XIX
、XX、XXI、XXII、XXIII、XXXIV、XXV、XXVI、XXVII、XXVIII、XXIX、XXXVI、及びXXXVII
からなる群より選択される、請求項153記載の複合体。
【請求項１５５】
前記M(CH2)4-タンパク質が、M(CH2)4-K1236-HCV-NS3、M(CH2)4-K2016-HCV-NS3、M(CH2)
4-K2560-HCV-NS3、M(CH2)4-K191-(バキュロウイルスIAP反復配列-含有タンパク質1)、M(C
H2)4-K199-(バキュロウイルスIAP反復配列-含有タンパク質1)、M(CH2)4-K305-(バキュロ
ウイルスIAP反復配列-含有タンパク質2)、M(CH2)4-K291-(バキュロウイルスIAP反復配列-
含有タンパク質3)、M(CH2)4-K297-(バキュロウイルスIAP反復配列-含有タンパク質4)、M(
CH2)4-K299-(バキュロウイルスIAP反復配列-含有タンパク質4)、M(CH2)4-K311-(バキュロ
ウイルスIAP反復配列-含有タンパク質4)、M(CH2)4-K062-(バキュロウイルスIAP反復配列-
含有タンパク質5)、M(CH2)4-K079-(バキュロウイルスIAP反復配列-含有タンパク質5)、M(
CH2)4-K121-(バキュロウイルスIAP反復配列-含有タンパク質7)、M(CH2)4-K135-(バキュロ
ウイルスIAP反復配列-含有タンパク質7)、M(CH2)4-K146-(バキュロウイルスIAP反復配列-
含有タンパク質7)、M(CH2)4-K036-(バキュロウイルスIAP反復配列-含有タンパク質8)、M(
CH2)4-K050-(バキュロウイルスIAP反復配列-含有タンパク質8)、M(CH2)4-K061-(バキュロ
ウイルスIAP反復配列-含有タンパク質8)、M(CH2)4-K776-(ホスファチジルイノシトール-4
,5-ビスリン酸3-キナーゼ触媒サブユニットαアイソフォーム)、M(CH2)4-K802-(ホスファ
チジルイノシトール-4,5-ビスリン酸3-キナーゼ触媒サブユニットαアイソフォーム)、M(
CH2)4-K777-(ホスファチジルイノシトール-4,5-ビスリン酸3-キナーゼ触媒サブユニット
βアイソフォーム)、M(CH2)4-K805-(ホスファチジルイノシトール-4,5-ビスリン酸3-キナ
ーゼ触媒サブユニットβアイソフォーム)、M(CH2)4-K802-(ホスファチジルイノシトール-
4,5-ビスリン酸3-キナーゼ触媒サブユニットγアイソフォーム)、M(CH2)4-K807-(ホスフ
ァチジルイノシトール-4,5-ビスリン酸3-キナーゼ触媒サブユニットγアイソフォーム)、
M(CH2)4-K833-(ホスファチジルイノシトール-4,5-ビスリン酸3-キナーゼ触媒サブユニッ
トγアイソフォーム)、M(CH2)4-K890-(ホスファチジルイノシトール-4,5-ビスリン酸3-キ
ナーゼ触媒サブユニットγアイソフォーム)、M(CH2)4-K086-(3-ホスホイノシチド-依存性
プロテインキナーゼ1)、M(CH2)4-K163-(3-ホスホイノシチド-依存性プロテインキナーゼ1
)、M(CH2)4-K169-(3-ホスホイノシチド-依存性プロテインキナーゼ1)、及びM(CH2)4-K207
-(3-ホスホイノシチド-依存性プロテインキナーゼ1) からなる群より選択される、請求項
153記載の複合体。
【請求項１５６】
前記テザーは、空白、結合、又は二価のC1-C15飽和又は不飽和の直鎖、分岐鎖、又は環
式の炭化水素部分であり、且つ、任意に炭化水素鎖の1個以上のメチレン単位は、-NR1-、
-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、-C(=S)-、又はC(=NR1)-により、独立して置き換えられ
；且つ、C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在する場合、独立して
【化２０１】
2016195596.tif 000840
により置き換えられ；且つ
R1は、水素又はC1-C8アルキルである、請求項153記載の複合体。
【請求項１５７】
前記式XIV-a、XIV-d、XIV-h、又はXIV-iのラジカルの水素の除去から生じる二価又は三
価の部分が、式 XV-a、XV-b、XV-c、XV-d、XV-e、XV-f、又はXV-gの部分である、請求項1
53記載の複合体：
【化２０２】
2016195596.tif 000841
(式中、
m4は、1〜2の整数であり；
R2、R3、R4、R5及びR6の各々は、独立して、水素又はC1-C6アルキルであり；ここで、
任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5及びR6のいずれか2つは、一緒に連結し、3
-〜8-員の炭素環又は複素環を形成することができ；且つ
C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又
は-C(=S)-により置き換えられることができ；
C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在する場合、独立して、
【化２０３】
2016195596.tif 000842
により置き換えられることができ；
Mは、"*"と印付けられたY1の位置に接続され；且つ
テザーは、"**"と印付けられたY1の位置に接続される。)。
【請求項１５８】
前記式XV-a、XV-b、XV-c、XV-d、XV-e、XV-f、又はXV-gの二価の部分が、式XV-h、XV-i
、XV-j、XV-k、XV-l、XV-m、XV-n、XV-o、XV-p、XV-q、XV-r、XV-s、又はXV-tの二価の部
分である、請求項157記載の複合体：
【化２０４】
2016195596.tif 000843
(式中、
Mは、"*"と印付けられたY1の位置に接続され；且つ
テザーは、"**"と印付けられたY1の位置に接続される。)。
【請求項１５９】
XIAPのK297の同等位置に保存されたリシン残基を共有的に修飾することにより、XIAPを
不可逆的に阻害する工程を含む、患者においてXIAP-媒介性障害を治療する方法。
【請求項１６０】
前記K297が、XIAPのK297である、式K297-リンカー-インヒビター部分の複合体。
【請求項１６１】
前記インヒビター部分が、式Aのものである、請求項160記載の複合体：
【化２０５】
2016195596.tif 000844
(式中、
V及びWは、各々独立して、-(CR14R15)qX3(CR16R17)r-であり；
p、q及びrは、各々独立して、0、1、2、3、又は4であり；
X3は、-CR18R19-、又は-NR20-であり；且つ
R21及びR22は、各々独立して、水素又はC1-C6アルキルであり；
R23は、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、アミノ、又はニトロであり；ここで、C1-C6
アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S
)-により任意に置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在
する場合、独立して、
【化２０６】
2016195596.tif 000845
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；且つ
任意に、R21及びR23は一緒に、4-〜8-員の炭素環又は複素環を形成することができる。
)。
【請求項１６２】
前記インヒビター部分が、式Bのものである、請求項160記載の複合体：
【化２０７】
2016195596.tif 000846
(式中、
X4は、-CR33-又は-N-であり；
p及びsは、各々独立して、0、1、2、3、又は4であり；
R12、R13、R21、R22、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31、R32、及びR33は、各
々独立して、水素又はC1-C6アルキルであり；
R23は、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、アミノ、又はニトロであり；ここで、C1-C6
アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S
)-により任意に置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在
する場合、独立して、
【化２０８】
2016195596.tif 000847
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；且つ
任意に、R21及びR23は一緒に、4-〜8-員の炭素環又は複素環を形成することができる。
)。
【請求項１６３】
PDPK1のK169の同等位置に保存されたリシン残基を共有的に修飾することにより、PDPK1
を不可逆的に阻害する工程を含む、患者においてPDPK1-媒介性障害を治療する方法。
【請求項１６４】
PDPK1のK173の同等位置に保存されたリシン残基を共有的に修飾することにより、PDPK1
を不可逆的に阻害する工程を含む、患者においてPDPK1-媒介性障害を治療する方法。
【請求項１６５】
PDPK1のK86の同等位置に保存されたリシン残基を共有的に修飾することにより、PDPK1
を不可逆的に阻害する工程を含む、患者においてPDPK1-媒介性障害を治療する方法。
【請求項１６６】
前記K169が、PDPK1のK169である、式K169-リンカー-インヒビター部分の複合体。
【請求項１６７】
前記K173が、PDPK1のK173である、式K173-リンカー-インヒビター部分の複合体。
【請求項１６８】
前記K86が、PDPK1のK86である、式K86-リンカー-インヒビター部分の複合体。
【請求項１６９】
前記インヒビター部分が、式Cのものである、請求項166〜168記載の複合体：
【化２０９】
2016195596.tif 000848
(式中、
B6及びB7は、各々独立して、CR7又はNであり；
R69は、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、又は-NH(CO)NR78R79であり
；
R70は、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、アミノ、ニトロであり；
R7、R71、R72、R73、R74、R75、R76、R77、R78、及びR79は、各々独立して、水素又はC
1-C6アルキルであり；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基
は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S)-により置き換えられることが
でき；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在する場合、独立して、
【化２１０】
2016195596.tif 000849
により置き換えられることができ；
任意に、R78、及びR79は一緒に、4-〜8-員の炭素環又は複素環を形成し；且つ
pは、0〜4の整数であり、uは、1〜4の整数である。)。
【請求項１７０】
前記インヒビター部分が、式Dのものである、請求項166〜168記載の複合体：
【化２１１】
2016195596.tif 000850
(式中、Rvは、H、任意に置換されたC1-C3分岐鎖又は直鎖アルキル、又は任意に置換され
たC1-C3分岐鎖又は直鎖アシルである。)。
【請求項１７１】
HCV-プロテアーゼ亜型NS3/4AのK136の同等位置に保存されたリシン残基を共有的に修飾
することにより、HCVプロテアーゼを不可逆的に阻害する工程を含む、患者においてHCVプ
ロテアーゼ-媒介性障害を治療する方法。
【請求項１７２】
前記K136が、NS3/4AのK136である、式K136-リンカー-インヒビター部分の複合体。
【請求項１７３】
前記インヒビター部分が、式E、F、又はGのものである、請求項172記載の複合体：
【化２１２】
2016195596.tif 000851
(式中、
R90、R94、R95、R96、R97、R98、R99、R100、R102、R104、R105、R106、R107、R108、R
109、R110、R111、R112、R113、及びR114は、各々独立して、水素又はC1-C6アルキルであ
り；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-
、-SO2-、又は-C(=S)-により任意に置き換えられることができ；
R103は、水素、C1-C6アルキル、又はC2-C8アルケニルであり；
C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在する場合、独立して、
【化２１３】
2016195596.tif 000852
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
R101の各々は、独立して、水素、C1-C6アルキル、C2-C8アルケニル、ハロゲン、アミノ
、ニトロ、任意に置換されたアリール又はヘテロアリールであり；n6は、0〜4の整数であ
り；且つ、n8は、0〜2の整数である。)。
【請求項１７４】
PI3KのK777の同等位置に保存されたリシン残基を共有的に修飾することにより、PI3Kを
不可逆的に阻害する工程を含む、患者においてPI3K-媒介性障害を治療する方法。
【請求項１７５】
前記K777が、PI3KβのK777である、式K777-リンカー-インヒビター部分の複合体。
【請求項１７６】
PI3KのK802の同等位置に保存されたリシン残基を共有的に修飾することにより、PI3Kを
不可逆的に阻害する工程を含む、患者においてPI3K-媒介性障害を治療する方法。
【請求項１７７】
前記K802が、PI3KγのK802である、式K802-リンカー-インヒビター部分の複合体。
【請求項１７８】
PI3KγのK890の同等位置に保存されたリシン残基を共有的に修飾することにより、PI3K
を不可逆的に阻害する工程を含む、患者においてPI3K-媒介性障害を治療する方法。
【請求項１７９】
前記K890が、PI3KγのK890である、式K890-リンカー-インヒビター部分の複合体。
【請求項１８０】
前記インヒビター部分が、式H、J、又はKのものである、請求項175、177、又は179記載
の複合体：
【化２１４】
2016195596.tif 000853
(式中、
n、m、p、及びqは、各々独立して、0、1、2、3であり；但し、nとqは同時に0ではなく
、且つmとqは同時に0ではないことを条件とし；
A2は、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1又は2個のヘテロ原子を有す
る4-8員の飽和又は部分的不飽和の複素環、又は少なくとも1個の窒素、少なくとも1個の
酸素、及び任意に窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜2個の追加のヘテ
ロ原子を有する5-10員の飽和又は部分的不飽和の架橋された二環式複素環から選択された
任意に置換された環であり；
B'は、フェニル、8-〜10-員の二環式アリール環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立
して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する5-〜6-員のヘテロアリール環、又は窒素、酸
素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する8-〜10-員の二環
式ヘテロアリール環から選択された任意に置換された基；又は、-T-Rwhであり；且つ
C2は、水素、或いは3-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の炭素環、7-〜10-員の飽和又は
部分的不飽和の二環式炭素環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜2個
のヘテロ原子を有する4-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の複素環、窒素、酸素、若しくは
硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する7-〜10-員の飽和又は部分的不
飽和の二環式複素環、フェニル、8-〜10-員の二環式アリール環、窒素、酸素、若しくは
硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する5-〜6-員のヘテロアリール環、
又は窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する8-〜
10-員の二環式ヘテロアリール環から選択された任意に置換された環である。)。
【請求項１８１】
前記インヒビター部分が、式L又はMのものである、請求項175、177、又は179記載の複
合体：
【化２１５】
2016195596.tif 000854
(式中、
R204は、水素、或いはC1-6脂肪族、-(CH2)m-(3-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の炭素
環)、-(CH2)m-(7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環式炭素環)、-(CH2)m-(窒素、酸
素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜2個のヘテロ原子を有する4-〜7-員の飽和又
は部分的不飽和の複素環)、-(CH2)m-(窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された
1〜3個のヘテロ原子を有する7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環式複素環)、-(CH2)
m-フェニル、-(CH2)m-(8-〜10-員の二環式アリール環)、-(CH2)m-(窒素、酸素、若しくは
硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する5-〜6-員のヘテロアリール環)
、又は-(CH2)m-(窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子
を有する8-〜10-員の二環式ヘテロアリール環)から選択された任意に置換された基であり
；
R205及びR206の各々は、独立して、-R"、ハロゲン、-NO2、-CN、-OR"、-SR"、-N(R")2
、-C(O)R"、-CO2R"、-C(O)C(O)R"、-C(O)CH2C(O)R"、-S(O)R"、-S(O)2R"、-C(O)N(R")2、
-SO2N(R")2、-OC(O)R"、-N(R")C(O)R"、-N(R")N(R")2、-N(R")C(=NR")N(R")2、-C(=NR")N
(R")2、-C=NOR"、-N(R")C(O)N(R")2、-N(R")SO2N(R")2、-N(R")SO2R"、又は-OC(O)N(R")2
であり；
R"の各々は、独立して、水素、或いはC1-6脂肪族、3-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の
炭素環、7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環式炭素環、窒素、酸素、若しくは硫黄
から独立して選択された1〜2個のヘテロ原子を有する4-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の
複素環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する
7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環式複素環、フェニル、8-〜10-員の二環式アリー
ル環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する5-
〜6-員のヘテロアリール環、又は窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4
個のヘテロ原子を有する8-〜10-員の二環式ヘテロアリール環から選択された任意に置換
された基であるか；又は
同一窒素上の2個のR"基は、それらが結合した窒素と一緒に、窒素、酸素、若しくは硫
黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する任意に置換された5〜8員の飽和、
部分的不飽和、又は芳香族の環を形成し；
mは、0〜6までを含む整数であり；
nの各々は、独立して0、1、又は2であり；且つ
環A5は、1〜2個の窒素を有する、任意に置換された6-員の複素環又はヘテロアリール環
である。)。
【請求項１８２】
前記インヒビター部分が、式Nのものである、請求項175、177、又は179記載の複合体：
【化２１６】
2016195596.tif 000855
(式中、
R201は、水素又はC1-6アルキルであり；
R202は、水素、或いはC1-6アルキル、C1-6アルコキシ、若しくは(C1-6アルキレン)-R20
3から選択された任意に置換された基であるか；又は
R201及びR202は、介在する炭素と一緒に、3-〜7-員の炭素環、又は窒素、酸素、若しく
は硫黄から独立して選択された1〜2個のヘテロ原子を有する4-〜7-員の複素環から選択さ
れた任意に置換された環を形成し；
R203は、3-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の炭素環、7-〜10-員の飽和又は部分的不飽
和の二環式炭素環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜2個のヘテロ原
子を有する4-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の複素環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独
立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環
式複素環、フェニル、8-〜10-員の二環式アリール環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独
立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する5-〜6-員のヘテロアリール環、又は窒素、
酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する8-〜10-員の二
環式ヘテロアリール環であり；且つ
環A6は、存在しないか、或いは窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜2
個のヘテロ原子を有する4-〜7-員の複素環、又は窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して
選択された1〜3個のヘテロ原子を有する5-〜6-員のヘテロアリール環から選択された任意
に置換された基である。)。
【請求項１８３】
前記インヒビター部分が、式Oのものである、請求項175、177、又は179記載の複合体：
【化２１７】
2016195596.tif 000856
(式中、
R205及びR206の各々は、独立して、-R"、ハロゲン、-NO2、-CN、-OR"、-SR"、-N(R")2
、-C(O)R"、-CO2R"、-C(O)C(O)R"、-C(O)CH2C(O)R"、-S(O)R"、-S(O)2R"、-C(O)N(R")2、
-SO2N(R")2、-OC(O)R"、-N(R")C(O)R"、-N(R")N(R")2、-N(R")C(=NR")N(R")2、-C(=NR")N
(R")2、-C=NOR"、-N(R")C(O)N(R")2、-N(R")SO2N(R")2、-N(R")SO2R"、又は-OC(O)N(R")2
であり；
R"の各々は、独立して、水素、或いはC1-6脂肪族、3-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の
炭素環、7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環式炭素環、窒素、酸素、若しくは硫黄
から独立して選択された1〜2個のヘテロ原子を有する4-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の
複素環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する
7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環式複素環、フェニル、8-〜10-員の二環式アリー
ル環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する5-
〜6-員のヘテロアリール環、又は窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4
個のヘテロ原子を有する8-〜10-員の二環式ヘテロアリール環から選択された任意に置換
された基であるか；又は
任意に、同一窒素上の2個のR"基は、それらが結合した窒素と一緒に、窒素、酸素、若
しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する任意に置換された5〜8員
の飽和、部分的不飽和、又は芳香族の環を形成し；
mは、0〜6までを含む整数であり；
nは各々独立して、0、1、又は2であり；
環A5は、1〜2個の窒素を有する、任意に置換された6-員の複素環又はヘテロアリール環
である。)。
【請求項１８４】
前記インヒビター部分が、式Pのものである、請求項175、177、又は179記載の複合体：
【化２１８】
2016195596.tif 000857
。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
(優先権の主張)
本出願は、2009年12月30日に出願された米国特許仮出願第61/335,043号の利益を主張す
るものであり、その仮出願の開示は、本出願に依拠し、且つその全体が引用により本出願
に組み込まれている。
【０００２】
(発明の分野)
本発明は、酵素インヒビターに関する。より詳細には、本発明は、リシン-含有タンパ
ク質のリガンド-指向性共有的修飾に関する。
【背景技術】
【０００３】
(発明の背景)
酵素などのタンパク質の活性を阻害する化合物は、重要な治療薬である。大部分のイン
ヒビターは、それらの標的タンパク質に可逆的に結合し、その結果それらの標的タンパク
質の活性を可逆的に阻害する。効果的な治療薬である可逆的インヒビターが開発されてい
るが、しかし可逆的インヒビターは、ある欠点を有する。例えば、キナーゼの多くの可逆
的インヒビターは、ATP-結合部位と相互作用する。ATP-結合部位の構造はキナーゼ間で高
度に保存されているので、1種以上の所望のキナーゼを選択的に阻害する可逆的インヒビ
ターを開発することは非常に困難である。加えて可逆的インヒビターは、それらの標的タ
ンパク質から解離されるので、阻害時間は所望よりも短くなることがある。従って、可逆
的インヒビターが治療薬として使用される場合、意図された生物学的作用を達成するため
には、所望の場合よりもより多量及び/又はより頻繁な投薬が必要になることがある。こ
の投薬の必要性は、毒性を生じるか又は他の望ましくない作用を結果として生じることが
ある。
【０００４】
それらの標的タンパク質に共有結合する不可逆的インヒビターが、当該技術分野におい
て説明されている。薬物標的の共有的不可逆的インヒビターは、治療薬としてそれらの可
逆的対応物に勝る数多くの重要な利点を有する。薬物標的の長い抑制は、最大の薬力学作
用に必要であり、且つ不可逆的インヒビターは、存在する薬物標的の活性を永久に排除す
ることにより、この利点を提供することができ、このことは新規標的タンパク質が合成さ
れる場合にのみ回復するであろう。不可逆的インヒビターが投与される場合、標的タンパ
ク質が該インヒビターに短時間曝露され、標的の活性を不可逆的に抑制するのに十分な時
間だけ、不可逆的インヒビターの治療的血漿濃度が達成される必要があり、その後標的タ
ンパク質が不活性化され続ける間は、血漿レベルを急激に下げることができる。この不可
逆的結合は、その濃度で治療的活性が生じる最低血漿濃度を低下し、反復投与の必要性を
最小とし、且つ有効性を損なうことなく長期の血漿半減期の必要性を排除するという潜在
的利点を有する。これらの考えは全て、高い又は延長された血漿レベルで生じ得る何らか
の非特異的なオフターゲット相互作用が原因の毒性を低下し得る。不可逆的インヒビター
は恐らく、2つの方式で薬物耐性の要件を克服するという利点も有するであろう。第一に
、不可逆的インヒビターは、有効性を損なうことなく、長い血漿半減期は必要ではない。
第二に、耐性変異は、非共有的結合を損なうことがあるが、低下した非共有的親和性に直
面しているにもかかわらず、この不活性化機構はタンパク質標的の修飾及び不可逆的阻害
に繋がることが多い。これらの考えは全て、高い又は延長された血漿レベルで生じ得る何
らかの非特異的なオフターゲット相互作用が原因の毒性を低下し得る。不可逆的インヒビ
ターの別の利点は、効力を駆動する不活性化機構は、非共有的阻害を用いて達成される薬
理学的利点及び難点の両方のプロファイルである、非共有的結合の相互作用のみを使用し
て容易に達成されるものと「関連性のない(orthogonal)」選択性プロファイルに繋がるこ
とが多いことである。
【０００５】
多くのタンパク質の可逆的インヒビターが現在公知であり、それに可逆的インヒビター
が結合するタンパク質内のそれらの結合部位の多くが公知である。これらの可逆的インヒ
ビターの結合部位は、時には適切な反応性リガンドによる共有的修飾が可能であるアミノ
酸により占有(populate)される。別の場合、アミノ酸は、適切な反応性リガンドによる共
有的修飾が可能である可逆的インヒビターの結合部位の近くに配置される。共有的修飾が
可能であるアミノ酸は、典型的には、トレオニン、システイン、ヒスチジン、セリン、チ
ロシン、及びリシンなどの側鎖にO、S、又はNなどのヘテロ原子を有するものである。硫
黄は、硫黄の求核性のために、共有的修飾を受け易く、従って関心対象のタンパク質のシ
ステインを修飾するリガンドの例が存在する。しかしリシンなどのアミノ酸は通常十分に
は反応性ではなく、そのリガンドはインビボにおいてリシンとは反応しない。実際にリシ
ン修飾のためには、高度に反応性の無差別的試薬が通常利用される。従ってリシンのリガ
ンド-指向性修飾はこれまで認められていない。この理由や他の理由のために、インヒビ
ターがリシンのリガンド-指向性修飾を介してそれらの生物学的影響を発揮する医薬的に
興味深いタンパク質の不可逆的インヒビターが必要とされている。
【発明の概要】
【０００６】
(I.  発明の要約)
一態様において、本発明は、標的タンパク質に共有結合するリガンドをデザインする方
法を提供する。この方法は、(a)標的タンパク質内のリガンド結合部位内又はその近傍に
ドッキングされる可逆的リガンドの構造モデルを提供する工程、(b)前記可逆的リガンド
が、リガンド結合部位の中又は近傍にドッキングされている場合、可逆的リガンドから約
15Å未満である、リガンド結合部位の中又は近傍の標的タンパク質のリシン残基を同定す
る工程、(c)前記リガンド結合部位の中又はその近傍にドッキングされる少なくとも1つの
リガンド−弾頭化合物の少なくとも構造モデルを作製する工程であって、ここで、該リガ
ンド−弾頭化合物が、工程(b)における可逆的リガンド又はそれらの一部、反応性化学部
分を含む弾頭、及び任意にテザーを含む工程、並びに、(d)その構造モデルが、工程(b)に
おけるリシン残基に、弾頭求電子部分の結合-形成する近傍内に該リシン残基の側鎖第一
級アミン基をもたらす立体配位を容易にとらせることを可能にする、リガンド−弾頭化合
物を同定する工程：を含む。
【０００７】
別の態様において、本発明は、標的タンパク質のリシン残基に共有結合するリガンドを
デザインする方法を提供する。この方法は、(a)標的タンパク質のリガンド結合部位の中
又はその近傍にドッキングされる可逆的リガンドの構造モデルを提供する工程であって、
ここで可逆的リガンドが、リガンド結合部位と少なくとも1つの非共有的接触を生じる工
程；(b)前記可逆的リガンドがリガンド結合部位の中又は近傍にドッキングされている場
合に、可逆的リガンドに隣接する標的タンパク質のリガンド結合部位の中又は近傍のリシ
ン残基を同定する工程；(c)前記リガンド結合部位の中又はその近傍にドッキングされる
複数のリガンド−弾頭化合物の構造モデルを作製する工程であって、ここで各リガンド−
弾頭化合物が、工程(b)における可逆的リガンドの置換可能な位置に共有結合された弾頭
を含み、この弾頭が、反応性化学部分及び任意にリンカーを含む、工程；(d)工程(c)の構
造モデルの中で、その構造モデルが工程(b)のリシン残基の側鎖第一級アミン基が弾頭求
電子部分の結合距離以内であることを可能にする、少なくとも1つのリガンド−弾頭化合
物を同定する工程；並びに、(e)工程(d)において同定された構造モデルの中で、リガンド
結合部位の中又はその近傍の水素結合ドナー-含有アミノ酸残基を更に同定する工程であ
って、ここで水素結合ドナーアミノ酸残基は、弾頭の水素結合の距離以内である、工程：
を含む。
【０００８】
別の態様において、本発明は、共有的に修飾され得る少なくとも1つのタンパク質内の
少なくとも1個のリシン残基を同定する方法を提供する。この方法は、(a)リガンド結合部
位を有する少なくとも1つのタンパク質を同定する工程、(b)同定されたタンパク質の三次
元構造モデルを提供する工程、(c)その構造モデルにおいて同定されたタンパク質のリガ
ンド結合部位の中又はその近傍に可逆的リガンドをドッキングする工程であり、ここでこ
の可逆的リガンドはリガンド結合部位と少なくとも1つの非共有的接触を生じ、これによ
り同定されたタンパク質のリガンド結合部位へ又はその近傍へ結合された可逆的リガンド
の構造モデルを作り出す工程；並びに、(d)同定されたタンパク質のリガンド結合部位へ
又はその近傍へ結合された可逆的リガンドの構造モデルにおいて、可逆的リガンドから約
15Å未満である同定されたタンパク質のリガンド結合部位の中又はその近傍の1個以上の
リシン残基を同定する工程：を含む。
【０００９】
更に別の態様において、本発明は、式Iの化合物：
【化１】
2016195596.tif 000003
(式中、スカフォールド、テザー、弾頭、x及びyは、本明細書において定義されている)を
、タンパク質のリガンド結合部位の中又はその近傍にリシン残基を含むタンパク質と接触
させる工程、及びリシン残基の側鎖第一級アミン基と化合物の弾頭の間に共有結合を形成
させる工程を含む、タンパク質のリガンド結合部位の中又はその近傍のリシン残基を共有
的に修飾する方法を提供する。
【００１０】
別の態様において、本発明は、式Iの化合物を提供する：
【化２】
2016195596.tif 000004
(式中、スカフォールド、弾頭、テザー、x及びyは、本明細書において定義されている。)
。
【００１１】
更なる態様において、本発明は、式XIIIのタンパク質-修飾因子-リガンド複合体を提供
する：
【化３】
2016195596.tif 000005
(式中、スカフォールド、ポリペプチド、テザー、M、Y1、x及びyは、本明細書において定
義されている。)。
【００１２】
本開示の更に別の態様において、タンパク質のリガンド結合部位内の標的リシンに結合
する弾頭を選択する方法が開示されている。この方法は、(a)リガンド結合部位を有する
少なくとも1つのタンパク質を同定する工程、(b)同定されたタンパク質の三次元構造モデ
ルを提供する工程、(c)工程(a)のリガンド結合部位の中又はその近傍の少なくとも1個の
リシンの配置を同定する工程；(d)少なくとも1個の同定されたリシンの近傍に少なくとも
1つの弾頭を提供する工程；(e)少なくとも1個の同定されたリシンの第一級アミンの結合
距離以内に弾頭の求電子性原子を並置する工程；(f)弾頭の求電子性原子と少なくとも1個
のリシンの第一級アミン間に共有結合を形成する工程；(g)工程(f)の共有結合された弾頭
の15Å以内に、同定されたタンパク質のリガンド結合部位の中の可逆的リガンドをドッキ
ングする工程であり、ここで可逆的リガンドは、リガンド結合部位とのその既知の非共有
的相互作用のほとんどを維持している工程；(h)工程(f)の共有結合された弾頭に、リガン
ドの最も近い原子を並置し、且つリガンドと工程(f)の共有結合された弾頭の間のテザー
のための幾何学的必要要件を決定する工程：を含む。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
(II.  図面の簡単な説明)
【図１】図1は、結合されたSmac-模倣リガンドに近接したXIAP内に重要なリシンを持つX-線共結晶構造(2JK7)を示す。
【００１４】
【図２】図2は、Smac-模倣リガンドを武装させている非限定的例を示す。
【００１５】
【図３】図3は、HCV NS3プロテアーゼと接触された化合物XVI-26の質量分光分析を示す。
【００１６】
【図４】図4は、HCV NS3プロテアーゼ(WT)；HCV NS3プロテアーゼ(C159S)；及び、HCV NS3プロテアーゼ(C159S/K136A)で処理された化合物XVI-26の質量分光分析を示す。
【００１７】
【図５】図5は、HCV NS3プロテアーゼ(WT1b)で処理された化合物XVI-1の質量分光分析を示す。
【００１８】
【図６】図6は、XIAPと接触された化合物VII-1の質量分光分析を示す。
【００１９】
【図７】図7は、XIAP(上側)及び化合物VII-1と接触されたXIAP(下側)のキモトリプシン消化の質量分光分析を示す。
【００２０】
【図８】図8は、XIAPと接触された化合物VII-21の質量分光分析を示す。
【００２１】
【図９】図9は、XIAP(上側)及び化合物VII-21と接触されたXIAP(下側)のキモトリプシン消化の質量分光分析を示す。
【００２２】
【図１０】図10は、プローブ化合物XVI-27がNS3/4A C159Sを修飾することを示す。
【００２３】
【図１１】図11は、XVI-26の長い作用持続期間を示す。
【００２４】
【図１２】図12は、PDPK-1(全タンパク質)と接触された化合物XI-27の質量分光分析を示す。
【００２５】
【図１３】図13は、化合物XI-27と接触されたPDPK-1(全タンパク質)のトリプシン消化の質量分光分析を示し、ペプチド
【化４】
2016195596.tif 000006
を同定している。
【００２６】
【図１４】図14は、図13に示された消化に由来するXI-27により修飾されたペプチド
【化５】
2016195596.tif 000007
のMSMS分析を示し、K169をXI-27により修飾されたリシンとして同定している。
【００２７】
【図１５】図15は、PDPK-1(全タンパク質)と接触された化合物XI-21の質量分光分析を示す。
【００２８】
【図１６】図16は、化合物XI-21と接触されたPDPK-1(全タンパク質)のトリプシン消化の質量分光分析を示し、3種のペプチド
【化６】
2016195596.tif 000008
を同定している。
【００２９】
【図１７】図17は、図16に示された消化に由来するペプチド
【化７】
2016195596.tif 000009
のMSMS分析を示し、K169をXI-21により修飾されたリシンとして同定している。
【００３０】
【図１８】図18は、図16に示された消化に由来するペプチド
【化８】
2016195596.tif 000010
のMSMS分析を示し、K173をXI-21により修飾されたリシンとして同定している。
【００３１】
【図１９】図19は、図16に示された消化に由来するペプチド
【化９】
2016195596.tif 000011
のMSMS分析を示し、K86をXI-21により修飾されたリシンとして同定している。
【００３２】
【図２０】図20は、PDPK-1(全タンパク質)と接触された化合物XXXVI-2の質量分光分析を示す。
【００３３】
【図２１】図21は、PDPK-1(全タンパク質)と接触された化合物XXXVI-1の質量分光分析を示す。
【００３４】
【図２２】図22は、PI3Kγ(全タンパク質)と接触された化合物XXII-33の質量分光分析を示す。
【発明を実施するための形態】
【００３５】
(III.  発明の詳細な説明)
(A.  定義)
本発明の化合物は、先に全般的に説明されており、且つ本明細書に開示された部類、下
位部類及び種類により更に例示されているものを含む。本明細書において使用されるよう
に、別段の表示がない限り、以下の定義が適用されるものとする。本発明の目的に関して
、化学元素は、CAS版の「化学と物理のハンドブック(Handbook of Chemistry and Physic
s)」第75版の「元素周期表」に従い特定されている。加えて有機化学の一般的原理は、Th
omas Sorrellの「有機化学(Organic Chemistry)」(University Science Books社、サウサ
リート、1999年)、及び「マーチ最新有機化学(March's Advanced Organic Chemistry」、
第5版、Smith, M.B.及びMarch, J.編集、John Wiley & Sons社、ニューヨーク、2001年に
説明されており、これらの全内容は引用により本明細書中に組み込まれている。生化学の
定義は、「タンパク質科学の構造と機構：酵素触媒とタンパク質フォールディングへの指
針(Structure and Mechanism in Protein Science: A Guide to Enzyme Catalysis and P
rotein Folding)」、Alan Fersht, W. H. Freeman, 1998年、第1版；「酵素反応機構(Enz
ymatic Reaction Mechanisms)」、Perry A. Frey及びAdrian D. Hegeman、Perry A. Frey
(著者)、Oxford University Press社、2007年、第1版、；及び、「生化学(Biochemistry)
」、第6版、Jeremy M. Berg、W. H. Freeman、2007年；に認めることができ、これらの全
内容は引用により本明細書中に組み込まれている。
【００３６】
本明細書に使用される用語「タンパク質」は、最大20種の様々な天然のL-α-アミノ酸
に加え、より少ない一般的アミノ酸で生成された線状ポリマーを意味する。ポリマー内の
アミノ酸は、隣接アミノ酸残基のカルボキシル基とアミノ基の間のペプチド結合により一
緒に連結されている。用語ポリペプチドは、本明細書において用語タンパク質と互換的に
用いることができる。ポリペプチドは、完全長タンパク質に加え、タンパク質の任意の部
分であることができる。本明細書に使用される用語タンパク質及びポリペプチドは、リガ
ンド結合部位を含むタンパク質を説明するために使用される。本明細書において意図され
た任意のタンパク質又はポリペプチドは、フォールディングし且つリガンド結合部位を構
成するのに十分な大きさであろう。
【００３７】
本明細書で使用される用語「脂肪族」又は「脂肪族基」とは、完全に飽和しているか又
は１個以上の不飽和単位を含む直鎖状(すなわち、非分岐状)若しくは分岐状の置換若しく
は非置換の炭化水素鎖、或いは、その分子の残りと単一の結合点を有する完全に飽和して
いるか又は1個以上の不飽和単位を含むが、芳香族ではない、単環式炭化水素又は二環式
炭化水素(本明細書では「炭素環」、「炭素環式」、「脂環式」又は「シクロアルキル」
とも称する)を意味する。別途指定のない限り、脂肪族基は1〜8個の脂肪族炭素原子を含
む。一部の実施態様では、脂肪族基は1〜5個の脂肪族炭素原子を含む。他の実施態様では
、脂肪族基は1〜4個の脂肪族炭素原子を含む。更に他の実施態様では、脂肪族基は1〜3個
の脂肪族炭素原子を含み、更に他の実施態様では、脂肪族基は1〜2個の脂肪族炭素原子を
含む。一部の実施態様では、「炭素環式」(又は「脂環式」若しくは「炭素環」若しくは
「シクロアルキル」）は、その分子の残りと単一の結合点を有する完全に飽和しているか
又は1個以上の不飽和単位を含むが、芳香族ではない、単環式C3-C8炭化水素を指す。適切
な脂肪族基には、直鎖状若しくは分岐状の置換又は非置換アルキル、アルケニル、アルキ
ニル基、及び(シクロアルキル)アルキル、(シクロアルケニル)アルキル又は(シクロアル
キル)アルケニルなどのその組み合わせが含まれるが、これらに限定されるものではない
。
【００３８】
本明細書において使用される用語「架橋した二環式」とは、任意の二環式環系、すなわ
ち炭素環式又は複素環式、飽和又は部分的不飽和の、少なくとも1つの架橋を有するもの
をいう。IUPACに定義されるように、「架橋」とは、2つの橋頭を接続している複数又は単
数の原子又は原子価結合の任意に置換された鎖であり、ここで「橋頭」は、3個以上の主
鎖原子に結合されている環系の任意の主鎖原子(水素を除く)である。一部の実施態様にお
いて、架橋した二環式基は、7-〜12-環員、及び窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して
選択された0〜4個のヘテロ原子を有する。そのような架橋した二環式基は、当該技術分野
において周知であり、且つ、各基が任意の置換可能な炭素原子又は窒素原子で分子の残り
に結合されている、以下に示したものを含む。別途指定のない限り、架橋した二環式基又
は架橋は、脂肪族基について示したように、1個以上の置換基により任意に置換される。
加えて又は或いは、架橋した二環式基の任意の置換可能な窒素は、任意に置換される。架
橋した二環の例は、以下を含む：
【化１０】
2016195596.tif 000012
。
【００３９】
用語「低級アルキル」とは、C1-4直鎖状又は分岐状アルキル基を指す。低級アルキル基
の例は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、及びtert-ブ
チルである。
【００４０】
「低級ハロアルキル」という用語は、1個以上のハロゲン原子で置換されているC1-4直
鎖状又は分岐状アルキル基を指す。
【００４１】
用語「ヘテロ原子」は、酸素、硫黄、窒素、リン又はケイ素(窒素、硫黄、リン又はケ
イ素の任意の酸化形態；任意の塩基性窒素の四級化形態；又は、複素環の置換可能な窒素
、例えばN(3,4-ジヒドロ-2H-ピロリルなどの)、NH(ピロリジニルなどの)又はNR+(N-置換
ピロリジニルなどの)を含む）の１つ又は複数を意味する。
【００４２】
本明細書で使用される用語「不飽和」とは、ある部分が1つ以上の不飽和単位を有する
ことを意味する。
【００４３】
本明細書に使用される用語「二価のC1-8(又はC1-6)飽和若しくは不飽和、直鎖状若しく
は分岐状の炭化水素鎖」は、本明細書で定義するような直鎖状又は分岐状の二価のアルキ
レン、アルケニレンおよびアルキニレン鎖を指す。
【００４４】
「アルキレン」という用語は二価のアルキル基を指す。「アルキレン鎖」は、ポリメチ
レン基、すなわち-(CH2)n-(ここでnは正の整数、好ましくは1〜6、1〜4、1〜3、1〜2、又
は2〜3である)である。置換アルキレン鎖は、1個以上のメチレン水素原子が置換基で置き
換えられたポリメチレン基である。適切な置換基には、置換脂肪族基について以下に説明
するものが含まれる。
【００４５】
「アルケニレン」という用語は、二価のアルケニル基を指す。置換アルケニレン鎖は、
その1個以上の水素原子が置換基で置き換えられている、少なくとも１つの二重結合を含
むポリメチレン基である。適切な置換基には、置換脂肪族基について以下に説明するもの
が含まれる。
【００４６】
本明細書において使用される用語「シクロプロピレニル」は、以下の構造の二価のシク
ロプロピル基を指す：
【化１１】
2016195596.tif 000013
。
【００４７】
用語「ハロゲン」は、F、Cl、Br、又はIを意味する。
【００４８】
単独か、又は「アラルキル」、「アラルコキシ」又は「アリールオキシアルキル」のよ
うなより大きな部分の一部として用いられる「アリール」という用語は、合計5〜14の環
員を有しており、その環系中の少なくとも1つの環が芳香族であり、環系中の各環が3〜7
環員を含む単環式又は二環式の環系を指す。「アリール」という用語は、「アリール環」
という用語と互換的に用いることができる。本発明のいくつかの実施態様では、「アリー
ル」は、非限定的に、フェニル、ビフェニル、ナフチル、アントラシルなどを含み、1つ
以上の置換基を持つことができる芳香環系を指す。インダニル、フタルイミジル、ナフチ
ミジル、フェナントリジニル又はテトラヒドロナフチルなどの芳香環が、1つ以上の非芳
香環と縮合されている基も、やはり本明細書において使用される「アリール」という用語
の範囲に含まれる。
【００４９】
「ヘテロアリール」、及び単独か、又はより大きな部分の一部として用いる「ヘテロア
ル」という用語、例えば「ヘテロアラルキル」又は「ヘテロアラルコキシ」は、5〜10個
の環原子、好ましくは5、6、又は9個の環原子を有し；且つ環状配列中に共有された6、10
、又は14個のπ電子を有し；且つ、炭素原子に加え1〜5個のヘテロ原子を有する基を指す
。本定義において使用される用語「ヘテロ原子」は、窒素、酸素若しくは硫黄を指し、窒
素若しくは硫黄の任意の酸化形態および塩基性窒素の任意の四級化形態を含む。ヘテロア
リール基には、チエニル、フラニル、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、トリアゾリ
ル、テトラゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、オキサジアゾリル、チアゾリル、
イソチアゾリル、チアジアゾリル、ピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル
、インドリジニル、プリニル、ナフチリジニル、及びプテリジニルが含まれるが、これら
に限定されるものではない。本明細書で使用される「ヘテロアリール」及び「ヘテロアル
」という用語は、複素芳香環が1つ以上のアリール、脂環式又はヘテロシクリル環と縮合
されており、そのラジカル又は結合点が複素芳香環上にある基も含む。非限定的な例とし
ては、インドリル、イソインドリル、ベンゾチエニル、ベンゾフラニル、ジベンゾフラニ
ル、インダゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾチアゾリル、キノリル、イソキノリル、
シンノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、キノキサリニル、4H-キノリジニル、カル
バゾリル、アクリジニル、フェナジニル、フェノチアジニル、フェノキサジニル、テトラ
ヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、及びピリド[2,3-b]-1,4-オキサジン-3
(4H)-オンが挙げられる。ヘテロアリール基は、単環式又は二環式であってよい。「ヘテ
ロアリール」という用語は、「ヘテロアリール環」、「ヘテロアリール基」又は「複素芳
香族」という用語(これらの用語のいずれも、任意に置換された環を含む)と互換的に用い
ることができる。「ヘテロアラルキル」という用語は、そのアルキル部分およびヘテロア
リール部分が独立に任意に置換されている、ヘテロアリールで置換されたアルキル基を指
す。
【００５０】
本明細書で使用される「ヘテロ環」、「ヘテロシクリル」、「複素環式ラジカル」およ
び「複素環」という用語は、互換的に用いられ、且つ飽和しているか又は部分的に不飽和
であり、炭素原子に加えて1個以上の、好ましくは1〜4個の上記定義のヘテロ原子を有す
る、安定な5-〜7-員単環式又は7-〜10-員の二環式複素環部分を指す。複素環の環原子の
関連で用いられる場合、「窒素」という用語は置換された窒素を含む。例としては、酸素
、硫黄若しくは窒素から選択される0〜3個のヘテロ原子を有する飽和又は部分的に不飽和
の環において、その窒素は、N(3,4-ジヒドロ-2H-ピロリルなどの)、NH(ピロリジニルなど
の)、又は+NR(N-置換ピロリジニルなどの)であってよい。
【００５１】
複素環は、安定した構造をもたらすヘテロ原子又は炭素原子でそのペンダント基と結合
していてよく、且つその環原子のいずれかは任意に置換されることができる。そうした飽
和又は部分的に不飽和の複素環式ラジカルの例には、テトラヒドロフラニル、テトラヒド
ロチオフェニルピロリジニル、ピペリジニル、ピロリニル、テトラヒドロキノリニル、テ
トラヒドロイソキノリニル、デカヒドロキノリニル、オキサゾリジニル、ピペラジニル、
ジオキサニル、ジオキソラニル、ジアゼピニル、オキサゼピニル、チアゼピニル、モルホ
リニルおよびキヌクリジニルが含まれるが、これらに限定されるものではない。「ヘテロ
環」、「ヘテロシクリル」、「ヘテロシクリル環」、「複素環基」、「複素環部分」及び
「複素環ラジカル」という用語は、本明細書では互換的に用いられ、ヘテロシクリル環が
、そのラジカル又は結合点がヘテロシクリル環上にある、インドリニル、3H-インドリル
、クロマニル、フェナントリジニル又はテトラヒドロキノリニルなどの1つ以上のアリー
ル環、ヘテロアリール環、又は脂環式環と縮合されている基も含む。ヘテロシクリル基は
単環式又は二環式であってよい。「ヘテロシクリルアルキル」という用語は、そのアルキ
ル部分及びヘテロシクリル部分が独立に任意に置換されている、ヘテロシクリルで置換さ
れたアルキル基を指す。
【００５２】
本明細書で用いる「部分的に不飽和」という用語は、少なくとも1つの二重結合又は三
重結合を含む環部分を指す。「部分的に不飽和」という用語は、複数の不飽和部位を有す
る環を包含することを意図するが、本明細書で定義するアリール又はヘテロアリール部分
を含むことは意図しない。
【００５３】
本明細書に説明されたように、本発明の化合物は、「任意に置換された」部分を含んで
よい。概して、用語「置換された」とは、用語「任意に」により先行されるかどうかに関
わらず、指定された部分の1個以上の水素が、好適な置換基により置き換えられることを
意味する。別途指定されない限り、「任意に置換された」基は、基の置換可能な位置の各
々に好適な置換基を有することができ、且つ所与の構造の2つ以上の位置が特定された群
から選択された2つ以上の置換基により置換される場合、この置換基は、位置毎に同じで
あるか又は異なってよい。本発明において想起される置換基の組み合わせは、安定した化
合物又は化学的に実現可能な化合物の形成をもたらすものが好ましい。本明細書において
使用される用語「安定した」とは、本明細書に開示された1つ以上の目的のために、それ
らの生成、検出、並びにいくつかの実施態様においてそれらの回収、精製、及び使用が可
能になる条件に晒された場合に、実質的に変更されない化合物を指す。
【００５４】
「任意に置換された」基の置換可能な炭素原子上の好適な一価の置換基は、独立して、
ハロゲン；-(CH2)0-4R°；-(CH2)0-4OR°；-O(CH2)0-4R°、-O-(CH2)0-4C(O)OR°；-(CH2
)0-4CH(OR°)2；-(CH2)0-4SR°；R°により置換され得る-(CH2)0-4Ph；R°により置換さ
れ得る-(CH2)0-4O(CH2)0-1Ph；R°により置換され得る-CH=CHPh；R°により置換され得る
-(CH2)0-4O(CH2)0-1-ピリジル；-NO2；-CN；-N3；-(CH2)0-4N(R°)2；-(CH2)0-4N(R°)C(
O)R°；-N(R°)C(S)R°；-(CH2)0-4N(R°)C(O)NR°2；-N(R°)C(S)NR°2；-(CH2)0-4N(R
°)C(O)OR°；-N(R°)N(R°)C(O)R°；-N(R°)N(R°)C(O)NR°2；-N(R°)N(R°)C(O)OR°
；-(CH2)0-4C(O)R°；-C(S)R°；-(CH2)0-4C(O)OR°；-(CH2)0-4C(O)SR°；-(CH2)0-4C(O
)OSiR°3；-(CH2)0-4OC(O)R°；-OC(O)(CH2)0-4SR-、SC(S)SR°；-(CH2)0-4SC(O)R°；-(
CH2)0-4C(O)NR°2；-C(S)NR°2；-C(S)SR°；-SC(S)SR°、-(CH2)0-4OC(O)NR°2；-C(O)N
(OR°)R°；-C(O)C(O)R°；-C(O)CH2C(O)R°；-C(NOR°)R°；-(CH2)0-4SSR°；-(CH2)0-
4S(O)2R°；-(CH2)0-4S(O)2OR°；-(CH2)0-4OS(O)2R°；-S(O)2NR°2；-(CH2)0-4S(O)R°
；-N(R°)S(O)2NR°2；-N(R°)S(O)2R°；-N(OR°)R°；-C(NH)NR°2；-P(O)2R°；-P(O)
R°2；-OP(O)R°2；-OP(O)(OR°)2；SiR°3；-(C1-4直鎖状又は分岐状アルキレン)O-N(R
°)2；又は、-(C1-4直鎖状又は分岐状アルキレン)C(O)O-N(R°)2であり、ここで各R°は
、以下に定義されたように置換され得、且つ独立して、水素、C1-6脂肪族、-CH2Ph、-O(C
H2)0-1Ph、-CH2-(5-〜6-員ヘテロアリール環)、又は窒素、酸素、若しくは硫黄から独立
して選択された0〜4個のヘテロ原子を有する、5-〜6-員の飽和、部分的不飽和、又はアリ
ール環であるか、又は先の定義にも拘わらず、R°の2つの独立した出現は、それらの介在
原子と一緒に、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された0〜4個のヘテロ原子を
有する3-〜12-員の飽和、部分不飽和、若しくはアリール単環式若しくは二環式の環を形
成し、これらは以下に定義されたように置換されることができる。
【００５５】
R°(又はそれらの介在原子と一緒に、2つのR°の独立した出現により形成された環)上
の好適な一価の置換基は、独立して、ハロゲン、-(CH2)0-2R●、-(ハロR●)、-(CH2)0-2O
H、-(CH2)0-2OR●、-(CH2)0-2CH(OR●)2；-O(ハロR●)、-CN、-N3、-(CH2)0-2C(O)R●、-
(CH2)0-2C(O)OH、-(CH2)0-2C(O)OR●、-(CH2)0-2SR●、-(CH2)0-2SH、-(CH2)0-2NH2、-(C
H2)0-2NHR●、-(CH2)0-2NR●2、-NO2、-SiR●3、-OSiR●3、-C(O)SR●、-(C1-4直鎖状又
は分岐状アルキレン)C(O)OR●、又は-SSR●であり、ここで各R●は、非置換であるか、又
は「ハロ」により先行される場合1個以上のハロゲンによってのみ置換され、且つC1-4脂
肪族、-CH2Ph、-O(CH2)0-1Ph、又は窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された0
〜4個のヘテロ原子を有する5-〜6-員の飽和、部分不飽和、若しくはアリール環から、独
立して選択される。R°の飽和された炭素原子上の好適な二価の置換基は、=O及び=Sを含
む。
【００５６】
「任意に置換された」基の飽和された炭素原子上の好適な二価の置換基は、=O("オキソ
")、=S、=NNR*2、=NNHC(O)R*、=NNHC(O)OR*、=NNHS(O)2R*、=NR*、=NOR*、-O(C(R*2))2-3
O-、又は-S(C(R*2))2-3S-を含み、ここで独立して出現するR*は各々、水素、以下に定義
されたように置換され得るC1-6脂肪族、又は窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択
された0〜4個のヘテロ原子を有する非置換の5-〜6-員の飽和、部分的不飽和、又はアリー
ル環から選択される。「任意に置換された」基の近位の置換可能な炭素に結合された好適
な二価の置換基は、-O(CR*2)2-3O-を含み、ここで独立して出現するR*は各々、水素、以
下に定義されたように置換され得るC1-6脂肪族、又は窒素、酸素、若しくは硫黄から独立
して選択された0〜4個のヘテロ原子を有する非置換の5-〜6-員の飽和、部分的不飽和、又
はアリール環から選択される。
【００５７】
R●の脂肪族基上の好適な置換基は、ハロゲン、-R●、-(ハロR●)、-OH、-OR●、-O(ハ
ロR●)、-CN、-C(O)OH、-C(O)OR●、-NH2、-NHR●、-NR●2、又は-NO2を含み、ここで各R
●は、非置換であるか、又は「ハロ」により先行される場合1個以上のハロゲンによって
のみ置換され、且つ独立してC1-4脂肪族、-CH2Ph、-O(CH2)0-1Ph、又は窒素、酸素、若し
くは硫黄から独立して選択された0〜4個のヘテロ原子を有する5-〜6-員の飽和、部分不飽
和、若しくはアリール環である。
【００５８】
「任意に置換された」基の置換可能な窒素上の好適な置換基は、-R†、-NR†2、-C(O)R
†、-C(O)OR†、-C(O)C(O)R†、-C(O)CH2C(O)R†、-S(O)2R†、-S(O)2NR†2、-C(S)NR†2
、-C(NH)NR†2、又は-N(R†)S(O)2R†を含み；ここで、各R†は、独立して、水素、以下
に定義されたように置換され得るC1-6脂肪族、非置換の-OPh、又は窒素、酸素、若しくは
硫黄から独立して選択された0〜4個のヘテロ原子を有する非置換の5-〜6-員の飽和、部分
的不飽和、又はアリール環であるか、又は先の定義にも拘わらず、R†の2つの独立した出
現は、それらの介在原子と一緒に、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された0
〜4個のヘテロ原子を有する非置換の3-〜12-員の飽和、部分的不飽和、又はアリールの単
環式-又は二環式の環を形成する。
【００５９】
R●の脂肪族基上の好適な置換基は、独立して、ハロゲン、-R●、-(ハロR●)、-OH、-O
R●、-O(ハロR●)、-CN、-C(O)OH、-C(O)OR●、-NH2、-NHR●、-NR●2、又は-NO2であり
、ここで各R●は、非置換であるか、又は「ハロ」により先行される場合1個以上のハロゲ
ンによってのみ置換され、且つ独立してC1-4脂肪族、-CH2Ph、-O(CH2)0-1Ph、又は窒素、
酸素、若しくは硫黄から独立して選択された0〜4個のヘテロ原子を有する5-〜6-員の飽和
、部分不飽和、若しくはアリール環である。
【００６０】
本明細書において使用される用語「医薬として許容し得る塩」とは、理にかなった医学
的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応などを伴わずにヒト及び下等動物
の組織と接触して使用するのに適し、且つ妥当なベネフィット/リスク比で釣り合ってい
る、それらの塩をいう。医薬として許容し得る塩は、当該技術分野において周知である。
例えば、S. M. Bergeらは、引用により本明細書中に組み込まれている論文J. Pharmaceut
ical Sciences、66、1-19 (1977)において、医薬として許容し得る塩を詳細に説明してい
る。本発明の化合物の医薬として許容し得る塩は、好適な無機及び有機の酸及び塩基から
誘導されたものを含む。医薬として許容し得る無毒の酸付加塩の例は、塩酸、臭化水素酸
、リン酸、硫酸及び過塩素酸などの無機酸と、又は酢酸、シュウ酸、マレイン酸、酒石酸
、クエン酸、コハク酸若しくはマロン酸などの有機酸と形成されたアミノ基の塩、又はイ
オン交換などの当該技術分野において使用される他の方法を使用することによる塩である
。他の医薬として許容し得る塩は、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、ア
スパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、硫酸水素塩、ホウ酸塩、酪酸塩、
ショウノウ酸塩、カンファースルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩
、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルコ
ヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、グルコン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン
酸塩、ヨウ化水素酸塩、2-ヒドロキシ-エタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩
、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスル
ホン酸塩、2-ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸
塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、3-フェニルプロピオン酸塩、
リン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸
塩、チオシアン酸塩、p-トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、吉草酸塩などを含む。
【００６１】
適当な塩基に由来した塩は、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、アンモニウム塩及
びN+(C1-4アルキル)4塩を含む。代表的アルカリ金属塩又はアルカリ土類金属塩は、ナト
リウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムなどを含む。更なる医薬として
許容し得る塩は、適切な場合、ハロゲン化物、水酸化物、カルボン酸塩、硫酸塩、リン酸
塩、硝酸塩、低級アルキルスルホン酸塩及びアリールスルホン酸塩などの対イオンを用い
て形成される、無毒のアンモニウム、第四級アンモニウム、及びアミン陽イオンを含む。
【００６２】
別途指定しない限りは、本明細書に示された構造は、その構造の全ての異性(例えば、
エナンチオ異性、ジアステレオ異性、及び幾何異性(若しくは配座異性))の形態；例えば
、各不斉中心についてのR及びS配置、Z及びE二重結合異性体、並びにZ及びE配座異性体を
含むことも意味する。従って単独の立体化学的異性体に加え、本化合物のエナンチオ異性
体、ジアステレオ異性体、及び幾何異性体(又は配座異性体)の混合物が、本発明の範囲内
である。別途指定しない限りは、本発明の化合物の全ての互変異性形態が、本発明の範囲
内である。加えて別途指定しない限りは、本明細書に示された構造は、1種以上の同位体
濃縮された原子の存在のみが異なる化合物を含むことも意味する。例えば、水素のジュウ
テリウム若しくはトリチウムによる交換、又は炭素の13C-若しくは14C-濃縮された炭素に
よる交換を含む示された構造を有する化合物は、本発明の範囲内である。そのような化合
物は、例えば、分析用ツールとして、生物学的アッセイにおけるプローブとして、又は本
発明における治療薬として有用である。
【００６３】
本明細書において使用される用語「不可逆的」又は「不可逆的インヒビター」とは、実
質的に不可逆的様式で酵素又はそれらの一部に共有結合することができるインヒビター(
すなわち化合物)をいう。すなわち、可逆的インヒビターは、酵素に結合することができ(
しかし一般に、それと共有結合を形成することはできない)、その結果酵素から解離し始
めることができるのに対し、不可逆的インヒビターは、一旦共有結合の形成が生じたなら
ば、酵素に実質的に結合し続けるであろう。不可逆的インヒビターは通常、「時間依存性
」を示し、これにより阻害度は、インヒビターが酵素と接触している時間の長さと共に増
大する。いくつかの実施態様において、不可逆的インヒビターは、一旦共有結合形成が生
じると、酵素に実質的に結合し続け、且つその酵素の寿命よりも長い期間にわたり結合し
続けるであろう。
【００６４】
化合物が不可逆的インヒビターとして作用するかどうかを確定する方法は、当業者に公
知である。そのような方法は、化合物の酵素との阻害プロファイルの酵素反応速度論的分
析、インヒビター化合物の存在下で修飾されたタンパク質薬物標的の質量分析の使用、「
ウォッシュアウト」実験としても公知の断続曝露、及び酵素の共有的修飾を示すための、
放射標識されたインヒビターなどの標識化の使用に加え、当業者に公知の他の方法を含む
が、これらに限定されるものではない。
【００６５】
当業者は、いくつかの反応性官能基は、「弾頭」として作用することができることを認
めるであろう。本明細書において使用される用語「弾頭」又は「弾頭基」とは、本発明の
化合物上に存在する官能基を指し、ここでこの官能基は、標的タンパク質の結合ポケット
の中又は近くに存在するリシンに共有結合し、これによりこのタンパク質を不可逆的に阻
害することが可能である。一部の実施態様において、本明細書に定義され且つ説明された
ように、テザー-弾頭基は、タンパク質を共有的且つ不可逆的に阻害するそのような弾頭
基を提供することは理解されるであろう。
【００６６】
本明細書において使用される用語「インヒビター」は、測定可能な親和性で酵素と結合
及び/又は阻害する化合物として定義される。いくつかの実施態様において、インヒビタ
ーは、約10μM未満、約1μM未満、約100nM未満、又は約10nM未満のIC50及び/又は結合定
数を有する。
【００６７】
本明細書において使用される「測定可能な親和性」及び「測定可能に阻害する」という
用語は、本発明の化合物又はそれらの組成物、並びにXIAP、PI3Kβ/γ、PDPK1及びHCV-NS
3プロテアーゼの少なくとも1つを含む試料と、該化合物又はそれらの組成物を含まないXI
AP、PI3Kβ/γ、PDPK1及びHCV-NS3プロテアーゼの少なくとも1つを含む同等な試料の間の
、例えばXIAP、PI3Kβ/γ、PDPK1及びHCV-NS3プロテアーゼ活性などの、任意のリシン含
有タンパク質(lysing-containing protein)における測定可能な変化を意味する。
【００６８】
2009年9月4日に出願された、「デザインアルゴリズム」という名称の米国特許出願第12
/554,433号の開示は、その全体が引用により対象出願中に組み込まれている。そこに説明
されるように、組み込まれた出願は、タンパク質標的中の1個以上のシステイン残基を修
飾するデザイン方法及びアルゴリズムを説明しており、このデザイン方法及びアルゴリズ
ムは、タンパク質標的中の1個以上のリシン残基の修飾に同等に適用可能である。任意の
構造的及び計算的モデリングに加え、そこで説明されたモデリングの作製に使用されるソ
フトウェアは、リシンの共有的インヒビターの簡単なデザインに同等に有用であり、従っ
て本出願へのそれらの全体の引用により本明細書中に組み込まれている。
【００６９】
(B.  標的化可能なリシン残基を含むタンパク質ファミリー)
概して、任意の標的化されたタンパク質ファミリー内のリガンド結合部位の中又はその
近傍に配置されたリシン残基は、リガンド-指向性リシン修飾のために標的化されること
ができる。例えば、不可逆的インヒビターによるリガンド-指向性修飾のために標的化さ
れたタンパク質ファミリーメンバーのリシン残基は、非限定的に、下記表1にまとめられ
たものを含み、ここで「ファミリー」列は、関心対象のタンパク質ファミリーを指し；「
UniProtAC」列は、UniProt Knowledgebase (UniProtKB)寄託番号に従う特定のタンパク質
の寄託番号識別子を指し(www.uniprot.org)；「配列」列は、関心対象のリシンを含むフ
ァミリーメンバータンパク質のアミノ酸配列の識別断片を指し；「残基数」列は、その配
列において示されたリシン残基の数を指す。しかし、タンパク質ファミリーとしての抗体
は、本発明においては意図されず、従って除外される(例えば、Carlos F. Barbas、IIIら
の文献、Science, 278, 2085-2092 (1997)；Popkovらの文献、Proc Natl Acad Sci USA, 
106、4378-4383 (2009)；Doppalapudiらの文献、Bioorganic & Medicinal Chemistry Let
ters, 17, 501-506 (2007)；Liらの文献、J. Med. Chem.；47, 5630-5640 (2004)；Guoら
の文献、Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 103, 11009-11014 (2006)；Raderらの文献、Proc
Natl Acad Sci USA, 100, 5396-5400, (2003)を参照されたい)。
1. タンパク質ファミリーの表
【表１】
2016195596.tif 000014
2016195596.tif 000015
2016195596.tif 000016
2016195596.tif 000017
2016195596.tif 000018
2016195596.tif 000019
2016195596.tif 000020
2016195596.tif 000021
1 タンパク質データバンク中(PDB；www.pdb.org)：或いは、K136として番号付け
【００７０】
一部の実施態様において、本発明の標的化可能なリシン残基を有するタンパク質ファミ
リーはBCL-2である。他の実施態様において、このタンパク質ファミリーはカルパインで
ある。他の実施態様において、このタンパク質ファミリーはカスパーゼである。他の実施
態様において、タンパク質ファミリーはカテプシンである。他の実施態様において、タン
パク質ファミリーはHCVである。他の実施態様において、タンパク質ファミリーはHDACで
ある。他の実施態様において、タンパク質ファミリーはHSP70である。他の実施態様にお
いて、タンパク質ファミリーはHSP90である。他の実施態様において、タンパク質ファミ
リーはIAPである。他の実施態様において、タンパク質ファミリーはキナーゼである。他
の実施態様において、タンパク質ファミリーはMDM2である。他の実施態様において、タン
パク質ファミリーはMMPである。他の実施態様において、タンパク質ファミリーはNHRであ
る。他の実施態様において、タンパク質ファミリーはPI3Kである。他の実施態様において
、タンパク質ファミリーはホスファターゼである。他の実施態様において、タンパク質フ
ァミリーはトランスチレチンである。他の実施態様において、タンパク質ファミリーはPA
RPである。他の実施態様において、タンパク質ファミリーはHIVプロテアーゼである。
【００７１】
一部の実施態様において、BCL-2タンパク質ファミリーのメンバーは、Bcl-2-様タンパ
ク質13、Bcl-2-関連タンパク質A1、及びBcl-2-関連卵巣キラータンパク質を含む。これら
の実施態様において、標的リシンは、Bcl-2-様タンパク質13におけるK110、K121、及びK1
52；Bcl-2-関連タンパク質A1におけるK046、K050、K077、及びK147；並びに、Bcl-2-関連
卵巣キラータンパク質におけるK122である。
【００７２】
他の実施態様において、カルパインタンパク質ファミリーのメンバーは、カルパイン-3
、カルパイン-5、カルパイン-6、及びカルパイン-9を含む。これらの実施態様において、
標的リシンは、カルパイン3におけるK220、及びK410；カルパイン-5におけるK233；カル
パイン-6におけるK081及びK336；並びに、カルパイン-9におけるK188及びK330である。
【００７３】
一部の実施態様において、カスパーゼタンパク質ファミリーのメンバーは、カスパーゼ
-2、カスパーゼ-3、カスパーゼ-6、カスパーゼ-8、カスパーゼ-9、カスパーゼ-10、カス
パーゼ-14、及び粘膜関連リンパ組織リンパ腫転座タンパク質1を含む。これらの実施態様
において、標的リシンは、カスパーゼ-2におけるK381；カスパーゼ-3におけるK210；カス
パーゼ-6におけるK265；カスパーゼ-8におけるK253、K453、K456、及びK457；カスパーゼ
-9におけるK358及びK394；カスパーゼ-10におけるK298；カスパーゼ-14におけるK096、並
びに、粘膜関連リンパ組織リンパ腫転座タンパク質1におけるK358、K360、K466、及びK51
3である。
【００７４】
一部の実施態様において、カテプシンタンパク質ファミリーのメンバーは、カテプシン
F、カテプシンH、及びカテプシンWを含む。これらの実施態様において、標的リシンは、
カテプシンFにおけるK238、K331、及びK374；カテプシンHにおけるK278；並びに、カテプ
シンWにおけるK267である。
【００７５】
一部の実施態様において、HCVタンパク質ファミリーのメンバーは、ゲノムポリタンパ
ク質(NS3)、ゲノムポリタンパク質(NS5A)、及びゲノムポリタンパク質(NS5B)を含む。こ
れらの実施態様において、標的リシンは、ゲノムポリタンパク質(NS3)におけるK1236；ゲ
ノムポリタンパク質(NS5A)におけるK2016；及び、ゲノムポリタンパク質(NS5B)におけるK
2560である。
【００７６】
一部の実施態様において、HCVタンパク質ファミリーのメンバーは、HCV-NS3、HCV-NS5A
、及びHCV-NS5Bを含む。
【００７７】
一部の実施態様において、HDACタンパク質ファミリーのメンバーは、ヒストンデアセチ
ラーゼ1、ヒストンデアセチラーゼ11、ヒストンデアセチラーゼ2、ヒストンデアセチラー
ゼ3、ヒストンデアセチラーゼ6、及びヒストンデアセチラーゼ8を含む。これらの実施態
様において、標的リシンは、ヒストンデアセチラーゼ1におけるK031；ヒストンデアセチ
ラーゼ11におけるK306；ヒストンデアセチラーゼ2におけるK032；ヒストンデアセチラー
ゼ3におけるK025；ヒストンデアセチラーゼ6におけるK353；及び、ヒストンデアセチラー
ゼ8におけるK033である。
【００７８】
一部の実施態様において、HSP70タンパク質ファミリーのメンバーは、熱ショック70kDa
タンパク質6、及び熱ショック同族体71kDaタンパク質である。これらの実施態様において
、標的リシンは、熱ショック70kDaタンパク質6におけるK058、K073、及びK273；並びに、
熱ショック同族体71kDaタンパク質におけるK061、K071、及びK271である。
【００７９】
一部の実施態様において、HSP90タンパク質ファミリーのメンバーは、熱ショックタン
パク質HSP 90-α、及び熱ショックタンパク質HSP 90-βを含む。これらの実施態様におい
て、標的リシンは、熱ショックタンパク質HSP 90-αにおけるK058；及び、熱ショックタ
ンパク質HSP 90-βにおけるK053である。
【００８０】
一部の実施態様において、IAPタンパク質ファミリーのメンバーは、バキュロウイルスI
AP反復配列含有タンパク質1(NAIP aka BIRC1)、バキュロウイルスIAP反復配列含有タンパ
ク質2(BIRC2 aka C-IAP1 aka API1 aka IAP2 aka MIHB)、バキュロウイルスIAP反復配列
含有タンパク質3(BIRC3 aka C-IAP2 aka API2 aka IAP1 aka MIHC)、バキュロウイルスIA
P反復配列含有タンパク質4(XIAP aka ILP1 aka HILP aka API3 aka BIRC4 aka IAP3)、バ
キュロウイルスIAP反復配列含有タンパク質5(BIRC5 aka サバイビン aka API4 aka IAP4)
、バキュロウイルスIAP反復配列含有タンパク質7(BIRC7 aka ML-IAP aka livin aka K-IA
P)、及びバキュロウイルスIAP反復配列含有タンパク質8(BIRC8 aka ILP2 aka TsIAP)を含
む。これらの実施態様において、標的リシンは、バキュロウイルスIAP反復配列含有タン
パク質1におけるK191及びK199；バキュロウイルスIAP反復配列含有タンパク質2におけるK
305；バキュロウイルスIAP反復配列含有タンパク質3におけるK291；バキュロウイルスIAP
反復配列含有タンパク質4におけるK297、K299、及びK311；バキュロウイルスIAP反復配列
含有タンパク質5におけるK062及びK079；バキュロウイルスIAP反復配列含有タンパク質7
におけるK121、K135、及びK146；並びに、バキュロウイルスIAP反復配列含有タンパク質8
におけるK036、K050、及びK061である。
【００８１】
一部の実施態様において、IAPタンパク質ファミリーのメンバーは、XIAP、cIAP1、cIAP
2、及びML-IAPを含む。
【００８２】
一部の実施態様において、キナーゼタンパク質ファミリーのメンバーは、B-Raf癌原遺
伝子セリン/トレオニン-プロテインキナーゼ、セリン/トレオニン-プロテインキナーゼCh
k2、表皮増殖因子受容体、肝細胞増殖因子受容体、3-ホスホイノシチド依存性プロテイン
キナーゼ1(PDPK1)、癌原遺伝子セリン/トレオニン-プロテインキナーゼPim-1、塩基性線
維芽細胞増殖因子受容体1(FGFR1)、線維芽細胞増殖因子受容体2(FGFR2)、線維芽細胞増殖
因子受容体3(FGFR3)、線維芽細胞増殖因子受容体4(FGFR4)、3-ホスホイノシチド依存性プ
ロテインキナーゼ1(PDPK1)、セリン/トレオニン-プロテインキナーゼB-raf(b-RAF)、RAF
癌原遺伝子セリン/トレオニン-プロテインキナーゼ(RAF1 aka c-RAF)、及びチロシン-プ
ロテインキナーゼSYKを含む。これらの実施態様において、標的リシンは、B-Raf癌原遺伝
子セリン/トレオニン-プロテインキナーゼにおけるK483；セリン/トレオニン-プロテイン
キナーゼChk2におけるK224、K245、K252、及びK349；表皮増殖因子受容体におけるK716、
K728、及びK745；肝細胞増殖因子受容体におけるK1110及びK1161；PDPK1におけるK086、K
163、K169、及びK207；癌原遺伝子セリン/トレオニン-プロテインキナーゼPim-1における
K260；塩基性線維芽細胞増殖因子受容体1(FGFR1)におけるK514、K566；塩基性線維芽細胞
増殖因子受容体2(FGFR2)におけるK517、K569；塩基性線維芽細胞増殖因子受容体3(FGFR3)
におけるK560、K508；塩基性線維芽細胞増殖因子受容体4(FGFR4)におけるK503、K555；3-
ホスホイノシチド依存性プロテインキナーゼ1(PDPK1)におけるK173；セリン/トレオニン-
プロテインキナーゼB-raf(b-RAF)におけるK473；RAF癌原遺伝子セリン/トレオニン-プロ
テインキナーゼ(RAF1 aka c-RAF)におけるK365；RAF癌原遺伝子セリン/トレオニン-プロ
テインキナーゼ(RAF1 aka c-RAF)におけるK375及びK431；並びに、チロシン-プロテイン
キナーゼSYKにおけるK375、K387、及びK458を含む。
【００８３】
一部の実施態様において、PDKタンパク質ファミリーのメンバーは、PDPK1を含む。
【００８４】
一部の実施態様において、MDM2タンパク質ファミリーのメンバーは、E3ユビキチン-タ
ンパク質リガーゼMdm2、タンパク質Mdm4、クロマチンサブファミリーDメンバー1のSWI/SN
F-関連マトリックス結合性アクチン-依存性レギュレーター、クロマチンサブファミリーD
メンバー2のSWI/SNF-関連マトリックス結合性アクチン-依存性レギュレーター、及びクロ
マチンサブファミリーDメンバー3のSWI/SNF-関連マトリックス結合性アクチン-依存性レ
ギュレーターを含む。これらの実施態様において、標的リシンは、E3ユビキチン-タンパ
ク質リガーゼMdm2におけるK051及びK094；タンパク質Mdm4におけるK050及びK093；クロマ
チンサブファミリーDメンバー1のSWI/SNF-関連マトリックス結合性アクチン-依存性レギ
ュレーターにおけるK327；クロマチンサブファミリーDメンバー2のSWI/SNF-関連マトリッ
クス結合性アクチン-依存性レギュレーターにおけるK301；並びに、クロマチンサブファ
ミリーDメンバー3のSWI/SNF-関連マトリックス結合性アクチン-依存性レギュレーターに
おけるK302である。
【００８５】
一部の実施態様において、MMPタンパク質ファミリーのメンバーは、マクロファージメ
タロエラスターゼ、コラゲナーゼ3、マトリックスメタロプロテイナーゼ-14、マトリック
スメタロプロテイナーゼ-15、及びマトリックスメタロプロテイナーゼ-20を含む。これら
の実施態様において、標的リシンは、マクロファージメタロエラスターゼにおけるK233及
びK241；コラゲナーゼ3におけるK150及びK249；マトリックスメタロプロテイナーゼ-14に
おけるK146；マトリックスメタロプロテイナーゼ-15におけるK284；並びに、マトリック
スメタロプロテイナーゼ-20におけるK251を含む。
【００８６】
一部の実施態様において、NHRタンパク質ファミリーのメンバーは、エストロゲン受容
体、エストロゲン受容体β、ペルオキシソーム増殖因子-活性化受容体α、及びプロゲス
テロン受容体を含む。これらの実施態様において、標的リシンは、エストロゲン受容体に
おけるK529；エストロゲン受容体βにおけるK314；ペルオキシソーム増殖因子-活性化受
容体αにおけるK252及びK358；並びに、プロゲステロン受容体におけるK919を含む。
【００８７】
一部の実施態様において、PI3Kタンパク質ファミリーのメンバーは、ホスファチジルイ
ノシトール-4,5-ビスリン酸3-キナーゼ触媒サブユニットαアイソフォーム(PI3K-α aka 
PIK3CA)、ホスファチジルイノシトール-4,5-ビスリン酸3-キナーゼ触媒サブユニットβア
イソフォーム(PI3K-β aka PIK3CB aka PIK3C1)、及びホスファチジルイノシトール-4,5-
ビスリン酸3-キナーゼ触媒サブユニットγアイソフォーム(PI3Kγ aka PIK3CG)を含む。
これらの実施態様において、標的リシンは、ホスファチジルイノシトール-4,5-ビスリン
酸3-キナーゼ触媒サブユニットαアイソフォームにおけるK776及びK802；ホスファチジル
イノシトール-4,5-ビスリン酸3-キナーゼ触媒サブユニットβアイソフォームにおけるK77
7及びK805；並びに、ホスファチジルイノシトール-4,5-ビスリン酸3-キナーゼ触媒サブユ
ニットγアイソフォームにおけるK802、K807、K833、K883、及びK890を含む。
【００８８】
一部の実施態様において、PI3Kタンパク質ファミリーのメンバーは、PI3Kα、PI3Kβ及
びPI3Kγを含む。本明細書において使用される用語PI3Kは、PI3Kに指向された本発明のリ
ガンド-指向性弾頭は、PI3Kβに加えPI3Kγの両方を修飾するので、互換的にPI3Kβ及びP
I3Kγを指す。
【００８９】
一部の実施態様において、ホスファターゼタンパク質ファミリーのメンバーは、白血球
共通抗原、非受容体型タンパク質チロシンホスファターゼ1、非受容体型タンパク質チロ
シンホスファターゼ11、非受容体型タンパク質チロシンホスファターゼ13、非受容体型タ
ンパク質チロシンホスファターゼ14、非受容体型タンパク質チロシンホスファターゼ18、
非受容体型タンパク質チロシンホスファターゼ2、非受容体型タンパク質チロシンホスフ
ァターゼ22、非受容体型タンパク質チロシンホスファターゼ3、非受容体型タンパク質チ
ロシンホスファターゼ4、非受容体型タンパク質チロシンホスファターゼ5、非受容体型タ
ンパク質チロシンホスファターゼ6、非受容体型タンパク質チロシンホスファターゼ7、非
受容体型タンパク質チロシンホスファターゼ9、及び受容体型タンパク質チロシンホスフ
ァターゼβを含む。これらの実施態様において、標的リシンは、白血球共通抗原における
K623及びK759；非受容体型タンパク質チロシンホスファターゼ1におけるK120；非受容体
型タンパク質チロシンホスファターゼ11におけるK260、K280、K364、K366；非受容体型タ
ンパク質チロシンホスファターゼ13におけるK2224、K2244、K2316、及びK2318；非受容体
型タンパク質チロシンホスファターゼ14におけるK918、K919、及びK1018；非受容体型タ
ンパク質チロシンホスファターゼ18におけるK041及びK063；非受容体型タンパク質チロシ
ンホスファターゼ2におけるK038；非受容体型タンパク質チロシンホスファターゼ22にお
けるK032、K039、K136、及びK138；非受容体型タンパク質チロシンホスファターゼ3にお
けるK656、K666、K677、及びK753；非受容体型タンパク質チロシンホスファターゼ4にお
けるK665及びK762；非受容体型タンパク質チロシンホスファターゼ5におけるK329及びK40
7；非受容体型タンパク質チロシンホスファターゼ6におけるK277；非受容体型タンパク質
チロシンホスファターゼ7におけるK126；非受容体型タンパク質チロシンホスファターゼ9
におけるK411；並びに、受容体型タンパク質チロシンホスファターゼβにおけるK1811を
含む。
【００９０】
一部の実施態様において、トランスチレチンタンパク質ファミリーのメンバーは、トラ
ンスチレチン(プレアルブミンaka TBPA aka TTR aka ATTR aka PALB)を含む。これらの実
施態様において、標的リシンは、トランスチレチンにおけるK035である。
【００９１】
一部の実施態様において、PARPタンパク質ファミリーのメンバーは、ポリ[ADP-リボー
ス]ポリメラーゼ1(PARP1 aka ADPRT aka PPOL aka ADPRT)、ポリ[ADP-リボース]ポリメラ
ーゼ3(PARP3 aka ADPRT3 aka ADPRTL3 aka IRT1)、ポリ[ADP-リボース]ポリメラーゼ10(P
ARP10)、ポリ[ADP-リボース]ポリメラーゼ12(PARP12 aka ZC3HDC1)、ポリ[ADP-リボース]
ポリメラーゼ15(PARP15 aka BAL3)、及びタンキラーゼ-1(TNKS aka PARP5A, PARPL aka T
IN1 aka TINF1 aka TNKS1)を含む。これらの実施態様において、標的リシンは、ポリ[ADP
-リボース]ポリメラーゼ1におけるK903；ポリ[ADP-リボース]ポリメラーゼ3におけるK421
；ポリ[ADP-リボース]ポリメラーゼ10におけるK941；ポリ[ADP-リボース]ポリメラーゼ12
におけるK609；ポリ[ADP-リボース]ポリメラーゼ15におけるK566、K579及びK636；並びに
、タンキラーゼ-1におけるK1220及びK1269を含む。
【００９２】
一部の実施態様において、HIVプロテアーゼタンパク質ファミリーのメンバーは、Gag-P
olポリタンパク質(HIVプロテアーゼaka レトロペプシン aka PR)を含む。これらの実施態
様において、標的リシンは、Gag-Polポリタンパク質におけるK535である。
【００９３】
(IV.  標的タンパク質に共有結合するリガンドのデザイン方法)
本開示の一態様は、標的タンパク質に共有結合するリガンドをデザインする方法である
。この方法は、(a)標的タンパク質のリガンド結合部位内又はその近傍にドッキングされ
た可逆的リガンドの構造モデルを提供する工程、(b)前記可逆的リガンドが、リガンド結
合部位の中又は近傍にドッキングされた場合に、可逆的リガンドから約15Å未満であるリ
ガンド結合部位の中又はその近傍の標的タンパク質のリシン残基を同定する工程、(c)前
記リガンド結合部位の内又はその近傍にドッキングされた少なくとも1つのリガンド−弾
頭化合物の少なくとも構造モデルを作製する工程であって、ここでリガンド−弾頭化合物
は、工程(b)における可逆的リガンド又はそれらの一部、反応性化学部分を含む弾頭、及
び任意にテザーを含む工程、並びに(d)その構造モデルが、工程(b)のリシン残基に、弾頭
求電子部分の結合-形成する近傍以内に該リシン残基の側鎖第一級アミン基をもたらす立
体配位を容易にさせることを可能にする、リガンド−弾頭化合物を同定する工程：を含む
。
【００９４】
前述の方法の工程(a)及び(b)の非限定的例を、図1に示している。図1は、結合したSmac
-模倣リガンドに近接したXIAPにおける重要なリシンを示しているX-線共結晶構造(2JK7)
を示す。タンパク質XIAPとの関連においてSmac-模倣リガンドにより占拠される空間を検
証し、リシン299及び297は、Smac-模倣リガンドの部分から各々約5.2Å及び4.5Åである
と同定することを可能にした。図2は、先の同定されたリシンの近傍にあるSmac-模倣リガ
ンドの薬理作用団を基にした化合物の部分に戦略的に位置付けされた標的化されたリシン
に指向されるように、スカフォールド上にインストールされた非限定的リシン-標的化さ
れた弾頭を示している。この反応性弾頭(必要ならばテザーと共に)は、前記工程(c)にお
いて説明されたようなタンパク質結合部位の構造モデル(前記工程(a)において提供された
)におけるリガンドの修飾された薬理作用団のドッキングが、工程(b)の同定されたリシン
に相対している反応性弾頭の空間的配置の決定を可能にするように、インシリコにおいて
位置付けられる。
【００９５】
2009年9月4日に出願された、「デザインアルゴリズム」という名称の米国特許出願第12
/554,433号の開示は、その全体が引用により対象出願中に組み込まれている。そこに説明
されるように、組み込まれた出願は、タンパク質標的中の1個以上のシステイン残基を修
飾するデザイン方法及びアルゴリズムを説明しており、このデザイン方法及びアルゴリズ
ムは、タンパク質標的中の1個以上のリシン残基の修飾に同等に適用可能である。任意の
構造的及び計算的モデリングに加え、そこで説明されたモデリングの作製に使用されるソ
フトウェアは、リシンの共有的インヒビターの簡単なデザインに同等に有用であり、従っ
て本出願へのそれらの全体の引用により本明細書中に組み込まれている。
【００９６】
いくつかの実施態様において、本方法は、工程(e)：リガンドの標的タンパク質への非
共有的結合に必要とされる薬理作用団の結合要素を維持しながら、工程(b)において同定
されたリシン残基の側鎖第一級アミン基と、工程(d)において同定されたリガンド−弾頭
化合物内の弾頭求電子部分の間に共有結合を形成することにより、工程(d)において同定
されたリガンド−弾頭化合物について、リガンド-タンパク質共有付加物を形成する工程
を更に含む。
【００９７】
一部の実施態様において、本方法は、工程(f)：得られる立体配位の総エネルギーを分
析するか、又はテザーの立体配位のエネルギーを分析することにより、工程(e)において
形成された、得られたリガンド-タンパク質共有付加物の立体配位を評価する工程を更に
含む。他の実施態様において、本方法は、代替の工程(f)：共有結合が、リガンド結合部
位の中又はその近傍のリシン残基の側鎖第一級アミン基と弾頭求電子部分の間に形成され
る場合、リガンド結合部位が塞がれているかどうかを決定する工程を含む。
【００９８】
他の実施態様において、工程(a)−(f)を含む本方法は、テザーを変化しながら反復され
、且つ得られる立体配位の総エネルギーは、先行する反復よりも少ない。
【００９９】
いくつかの実施態様において、工程(e)において形成された共有結合は、弾頭及びリシ
ン残基の側鎖は可動性があり、且つリガンド−弾頭化合物の構造の残余とリガンド結合部
位は固定されている計算的方法を用いて形成される。
【０１００】
一部の実施態様において、本方法の工程(b)においては、可逆的リガンドが、リガンド
結合部位の中又はその近傍にドッキングされた場合に、可逆的リガンドから約15Å未満で
ある、標的タンパク質のリガンド結合部位の中又はその近傍のリシン残基の各々が同定さ
れる。
【０１０１】
他の実施態様において、本方法の工程(c)は、任意に弾頭とその置換可能な位置の間に
テザーを伴い、弾頭は、リガンド−弾頭化合物の各モデルにおけるリガンド又はリガンド
の一部の異なる置換可能な位置に結合されている、リガンド−弾頭化合物の複数のモデル
を提供することを更に含む。
【０１０２】
開示された方法のいくつかの実施態様において、標的タンパク質は、同定されたタンパ
ク質ファミリーの同定されたメンバーであり、且つリシン残基は、そのタンパク質ファミ
リーの同定されたメンバーを超えては保存されない。
【０１０３】
本方法の他の実施態様において、標的タンパク質は、同定されたタンパク質ファミリー
の同定されたメンバーであり、且つリシン残基は、同定されたタンパク質ファミリーの2
つ以上の同定されたメンバー間で保存される。
【０１０４】
一部の実施態様において、リシン残基は、タンパク質ファミリーの同定されたメンバー
を超えて保存される。
【０１０５】
本明細書に開示された方法の一部の実施態様において、標的タンパク質は、触媒活性を
有する。
【０１０６】
他の実施態様において、標的タンパク質ファミリーは、BCL-2、カルパイン、カスパー
ゼ、カテプシン、HCV、HDAC、HSP70、HSP90、IAP、キナーゼ、MDM2、MMP、NHR、PI3Kβ/
γ、ホスファターゼ、トランスチレチン、PARP、及びHIVプロテアーゼからなる群より選
択される。
【０１０７】
一部の実施態様において、標的タンパク質ファミリーは、IAP、PI3K、PDPK1、及びHCV
からなる群より選択される。
【０１０８】
他の実施態様において、標的タンパク質は、XIAP、PI3Kβ/γ、PDPK1、及びHCVからな
る群より選択される。
【０１０９】
開示された方法のいくつかの実施態様において、リガンド結合部位は、基質又は補因子
のためのリガンド結合部位である。
【０１１０】
本方法の他の実施態様において、共有的修飾のためのリシン残基は、触媒的残基ではな
い。
【０１１１】
別の態様において、本開示は、標的タンパク質のリシン残基を共有結合するリガンドを
デザインする方法を提供する。この方法は、(a)標的タンパク質のリガンド結合部位の中
又はその近傍にドッキングされた可逆的リガンドの構造モデルを提供する工程であって、
ここで可逆的リガンドが、リガンド結合部位と少なくとも1つの非共有的接触を生じる工
程；(b)可逆的リガンドがリガンド結合部位の中又は近傍にドッキングされた場合に、可
逆的リガンドに隣接する標的タンパク質のリガンド結合部位の中又は近傍のリシン残基を
同定する工程；(c)リガンド結合部位の中又はその近傍にドッキングされた複数のリガン
ド−弾頭化合物の1種以上の構造モデルを作製する工程であって、ここで各リガンド−弾
頭化合物が、工程(b)において可逆的リガンドの置換可能な位置に共有結合された弾頭を
含み、この弾頭が、反応性化学部分及び任意にリンカーを含む、工程；(d)工程(c)の構造
モデルの中で、その構造モデルが、工程(b)のリシン残基の側鎖第一級アミン基が弾頭求
電子部分の結合距離以内であることを可能にする、少なくとも1つのリガンド−弾頭化合
物を同定する工程；並びに、(e)工程(d)において同定された構造モデルの中で、リガンド
結合部位の中又はその近傍の水素結合ドナー-含有アミノ酸残基を更に同定する工程であ
って、ここで水素結合ドナー基は、弾頭の水素結合の距離以内にある、工程：を含む。
【０１１２】
一部の実施態様において、水素結合ドナーアミノ酸は、リガンド−弾頭の弾頭と、タン
パク質の標的化されたリシンの間の化学反応に参加し得る。例えば、水素結合を供与する
アミノ酸がリシン又はアルギニンのいずれかである場合、リシンとリシンの間又はリシン
とアルギニンの間の相互作用は、標的化されたリシンのpKaよりも低い反発相互作用であ
り、従ってその求核性を増強する。別の例において、水素結合供与は、側鎖によるか又は
アミド主鎖によるものであっても、多くの場合、弾頭の求電子性を増強することができる
。そのような水素結合ドナーも正帯電されている場合、クローン引力は、例えばエノレー
トの形成を安定化することにより、その反応を促進することができる。具体的実施態様に
おいて、リガンド−弾頭の弾頭がアクリルアミドを含む場合、弾頭は、リガンド結合部位
の中又はその近傍に、水素結合ドナーアミノ酸残基を必要とし、ここで水素結合ドナー基
は、アクリルアミドを含む弾頭の水素結合距離以内にある。
【０１１３】
いくつかの実施態様において、本方法は、工程(f)：工程(b)において同定されたリシン
残基の側鎖第一級アミン基と弾頭求電子部分の間に共有結合を形成することにより、工程
(e)において同定されたリガンド−弾頭化合物について、リガンド-タンパク質共有付加物
を形成し；且つ、同じく、水素結合ドナー部分と弾頭求電子部分の間の水素結合；又は、
リガンドの薬理作用団とリガンド結合部位の間の非共有的相互作用を実質的に維持しなが
ら、水素結合ドナー部分と工程(d)において同定されたリシン残基の側鎖第一級アミン基
の間の水素結合を形成する工程：を更に含む。
【０１１４】
リガンドをデザインする方法のいくつかの実施態様において、この方法は、工程(g)：
得られる立体配位の総エネルギーを分析することにより、リガンド-タンパク質共有付加
物の得られる立体配位を評価する工程を更に含む。
【０１１５】
本方法の一部の実施態様において、工程(a)から(g)は、リンカーを変化しながら反復さ
れ、且つ得られる立体配位の総エネルギーは、先行する反復よりも少ない。
【０１１６】
本方法の他の実施態様において、水素結合ドナー-含有アミノ酸残基は、水素結合ドナ
ーとして作用することが可能である任意のアミノ酸残基である。本方法の更に別の実施態
様において、水素結合ドナー-含有アミノ酸残基は、アルギニン、リシン、トレオニン、
セリン、ヒスチジン、及びチロシンからなる群より選択される。
【０１１７】
本方法のいくつかの実施態様において、標的タンパク質は、XIAP、PDPK1、PI3Kβ/γ、
及びHCVからなる群より選択される。他の実施態様において、弾頭がアクリルアミド部分
を含む場合、弾頭は、リガンド結合部位の中又はその近傍に水素結合ドナー-含有アミノ
酸残基を必要とし、ここで水素結合ドナー基は、弾頭が標的リシンに共有結合するために
、アクリルアミドを含む弾頭の水素結合距離以内にある。一部の実施態様において、水素
結合ドナー-含有アミノ酸残基はリシンである。修飾され得る少なくとも1つのタンパク質
内の少なくとも1個のリシン残基を同定する方法。
【０１１８】
更に別の態様において、共有的に修飾され得る少なくとも1つのタンパク質内の少なく
とも1個のリシン残基を同定する方法が、明らかにされる。この方法は、(a)リガンド結合
部位を有する少なくとも1つのタンパク質を同定する工程、(b)同定されたタンパク質の三
次元構造モデルを提供する工程、(c)その構造モデルにおいて同定されたタンパク質のリ
ガンド結合部位の中又はその近傍に可逆的リガンドをドッキングする工程であり、ここで
この可逆的リガンドはリガンド結合部位と少なくとも1つの非共有的接触を生じ、これに
より同定されたタンパク質のリガンド結合部位へ又はその近傍へ結合された可逆的リガン
ドの構造モデルを作り出す工程；並びに、(d)同定されたタンパク質のリガンド結合部位
へ又はその近傍へ結合された可逆的リガンドの構造モデルにおいて、可逆的リガンドから
約15Å未満である同定されたタンパク質のリガンド結合部位の中又はその近傍の1個以上
のリシン残基を同定する工程：を含む。
【０１１９】
いくつかの実施態様において、本方法は、構造上相同であるリガンド結合部位を有する
複数のタンパク質を同定する工程を含む。従ってこの方法は、(a)同定されたタンパク質
の少なくとも1つの三次元構造モデルを提供する工程；(b)同定されたタンパク質の少なく
とも1つのリガンド結合部位の構造モデルの中又はその近傍に可逆的リガンドをドッキン
グする工程であり、ここでこの可逆的リガンドはリガンド結合部位と少なくとも1つの非
共有的接触を生じ、これにより同定されたタンパク質のリガンド結合部位に又はその近傍
に結合された可逆的リガンドの構造モデルを作り出す工程；並びに、(c)同定されたタン
パク質のリガンド結合部位へ又はその近傍へ結合された可逆的リガンドの構造モデルにお
いて、可逆的リガンドから約15Å未満である同定されたタンパク質のリガンド結合部位の
中又はその近傍の1個以上のリシン残基を同定する工程：を含む。
【０１２０】
本方法の一部の実施態様において、方法は、複数の同定されたタンパク質の2つ以上の
相同なリガンド結合部位の三次元的に同等なアミノ酸位置を比較する工程、及び同定され
たタンパク質のリガンド結合部位の中又はその近傍のリシン残基の出現率(prevalence)を
決定する工程を含む。
【０１２１】
本方法の他の実施態様において、同定されたタンパク質のリガンド結合部位の中又はそ
の近傍のリシン残基の出現率は、同定されたタンパク質のただ1つにおいてである。
【０１２２】
いくつかの実施態様において、同定されたタンパク質のリガンド結合部位の中又はその
近傍のリシン残基の出現率は、同定されたタンパク質の2つ以上においてである。
【０１２３】
これらの実施態様の一部において、同定されたタンパク質のリガンド結合部位の中又は
その近傍のリシン残基の出現率は、リガンド結合部位の位置でファミリーの同定されたタ
ンパク質の10％未満においてである。他の実施態様において、同定されたタンパク質のリ
ガンド結合部位の中又はその近傍のリシン残基の出現率は、同定されたタンパク質の50％
未満又はより多くにおいてである。50％より多くは、一部の実施態様において、同定され
たタンパク質のリガンド結合部位の中又はその近傍のリシン残基の出現率は、同定された
タンパク質の75％より多くにおいてであるが、他の実施態様において、同定されたタンパ
ク質のリガンド結合部位の中又はその近傍のリシン残基の出現率は、同定されたタンパク
質の全てにおいてである。
【０１２４】
この方法のいくつかの実施態様において、タンパク質は、BCL-2、カルパイン、カスパ
ーゼ、カテプシン、HCV、HDAC、HSP70、HSP90、IAP、キナーゼ、MDM2、MMP、NHR、PI3Kβ
/γ、ホスファターゼ、トランスチレチン、PARP、及びHIVプロテアーゼからなる群より選
択される。
【０１２５】
他の実施態様において、タンパク質は、XIAP、PI3Kβ/γ、PDPK1、及びHCVからなる群
より選択される。
【０１２６】
(V.  タンパク質のリガンド結合部位内の標的リシンに結合する弾頭をデザインする方法)
本開示の更に別の態様において、タンパク質のリガンド結合部位内の標的リシンに結合
する弾頭を選択する方法が開示されている。この方法は、(a)リガンド結合部位を有する
少なくとも1つのタンパク質を同定する工程、(b)同定されたタンパク質の三次元構造モデ
ルを提供する工程、(c)工程(a)のリガンド結合部位の中又はその近傍の少なくとも1個の
リシンの配置を同定する工程；(d)少なくとも1個の同定されたリシンの近傍に少なくとも
1つの弾頭を提供する工程；(e)少なくとも1個の同定されたリシンの第一級アミンの結合
距離以内に弾頭の求電子性原子を並置する工程；(f)弾頭の求電子性原子と少なくとも1個
のリシンの第一級アミンの間に共有結合を形成する工程；(g)工程(f)の共有結合された弾
頭の15Å以内に、同定されたタンパク質のリガンド結合部位の中の可逆的リガンドをドッ
キングする工程であり、ここで可逆的リガンドは、リガンド結合部位との非共有的相互作
用を維持している工程；並びに、(h)工程(f)の共有結合された弾頭に、リガンドの最も近
い原子を並置し、且つリガンドと工程(f)の共有結合された弾頭の間のテザーをデザイン
するために必要な空間的必要要件を提供する工程：を含む。工程(h)において、テザーと
リガンドの間の区域(area)が、弾頭とリガンドの間の領域のタンパク質表面と相補的であ
る場合は、これは利点である。
【０１２７】
(VI.  リシンの共有的修飾の方法)
別の態様において、本方法は、式Iの化合物を、タンパク質のリガンド結合部位の中又
はその近傍にリシン残基を含むタンパク質と接触させ、且つリシン残基の側鎖第一級アミ
ン基と本化合物の弾頭の間に共有結合を形成する工程を含む。この方法は、式Iの化合物
を包含している：
【化１２】
2016195596.tif 000022
(式中、
スカフォールドは、
a)リガンド結合部位へ又はその近傍へ結合することが可能であるリガンドの水素の除
去から生じるラジカル；又は
b)スカフォールドがリガンド結合部位へ又はその近傍へ結合することが可能であるよ
うに、薬理作用団の切断から生じるリガンドの薬理作用団の一部分：であり；
弾頭は、O、N、及びSから選択された1個以上のヘテロ原子を任意に含む、有機部分であ
り、且つ分子量約14ダルトン〜約200ダルトンを有し、弾頭は、リシン残基の側鎖第一級
アミン基との反応が可能であり、且つテザーを介してスカフォールドに結合されており；
テザーは、空白、結合、又は二価のC1-C15飽和、不飽和、直鎖、分岐鎖、環式、二環式
、三環式のアルキル、アルケニル、アルキニル；架橋した二環式、複素環、ヘテロアリー
ル、又はアリール部分であり；ここで、任意に炭化水素鎖の1個以上のメチレン単位は、-
NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、-C(=S)-、又はC(=NR1)-により、独立して置き換
えられ；任意に1個以上の水素は、ヘテロ原子により独立して置き換えられ；且つ、任意
にC1-C15アルキルの1個以上のメチン基は、独立して
【化１３】
2016195596.tif 000023
により置き換えられ；
xは、0、1、又は2であり；
yは、1、2、又は3であり；且つ
R1は、水素又はC1-C8アルキルである。)。
【０１２８】
一部の実施態様において、式Iの化合物は、式I'の化合物である：
【化１４】
2016195596.tif 000024
【０１２９】
リシンを共有的に修飾する固有の能力を介してそれらの生物学的作用を発揮する天然の
化合物は、本開示において意図されず且つ主張もされず、そこで固有のリシン共有的修飾
の機序が実質的に変更されていない化合物の合成的に修飾された類似体も、意図されず且
つ主張もされないことは理解されるべきである。更に単独のアミノ酸を主としてベースに
した化合物、ヌクレオシド/ヌクレオチド誘導された薬物、無水物、イン-オン(yne-one)
を含む化合物も、本発明において意図されない。更に、例えばビガバトリン、又はカルバ
グルコース-6-リン酸(シュード-DL-グルコース、C-6-P)などの機構型不可逆的インヒビタ
ー、すなわち自殺インヒビターである化合物も、同じく本発明において意図されない。(
用語機構型不可逆的インヒビターの定義については、「タンパク質科学の構造及び機構：
酵素触媒及びタンパク質フォールディングの指針(Structure and Mechanism in Protein 
Science: A Guide to Enzyme Catalysis and Protein Folding)」、Alan Fersht, W. H. 
Freeman、1998年、第1版；「酵素反応機構(Enzymatic Reaction Mechanisms)」、Perry A
. Frey及びAdrian D. Hegeman、Perry A. Frey(著)、Oxford University Press社、2007
年、第1版を参照されたい)。タンパク質ファミリーとしての抗体は、本発明において意図
されず、従って除外される。(例えば、Carlos F. Barbas, IIIらの文献、 Science 278, 
2085-2092 (1997)；Popkovらの文献、Proc Natl Acad Sci USA, 106, 4378-4383, (2009)
；Doppalapudiらの文献、Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 17, 501-506, (20
07)；Liらの文献、 J. Med. Chem., 47, 5630-5640, (2004)；Guoらの文献、Proc. Natl.
Acad. Sci. USA, 103, 11009-11014, (2006)；Raderらの文献、Proc Natl Acad Sci USA
, 100, 5396-5400, (2003)を参照されたい。)。
【０１３０】
例えば、天然の生成物ウォルトマニンは、タンパク質ホスファチジルイノシトール3-キ
ナーゼ(PI3K)のリシンを共有的に修飾することが知られている。従ってウォルトマニンは
、リシンを共有的に修飾し、且つリシンへ共有結合するその固有の能力を介してその生物
学的作用を発揮することがわかっている天然の化合物である。ウォルトマニンと実質的に
同じ機構を介してリシンを共有的に修飾する公知のウォルトマニン類似体も、本発明から
除外される。そのようなウォルトマニン類似体の例は、以下を含むが、これらに限定され
るものではない：
【化１５】
2016195596.tif 000025
【０１３１】
リシンを共有的に修飾すると考えられ、且つ本発明に包含されない天然の化合物の別の
例は、リファガルである：
【化１６】
2016195596.tif 000026
【０１３２】
本発明に包含されない他の化合物は、Choiらの文献(Nature Chemical Biology、最新電
子版、12月20日(2009))において明らかにされた以下の化合物である：
【化１７】
2016195596.tif 000027
【０１３３】
本発明に包含されない追加の化合物は、Lawateらの文献(J. Med. Chem. 33, 2319, (19
90))に明らかにされた以下の化合物である：
【化１８】
2016195596.tif 000028
【０１３４】
本発明に包含されない他の化合物は、Nangoらの文献(J. Org. Chem. 69, 593-600, (20
04))に明らかにされた以下の化合物である：
【化１９】
2016195596.tif 000029
【０１３５】
FLAG(Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, 19, 6696, (2009))及びビガバト
リン(4-アミノヘキサ-5-エノエート又はビニルGABAとしても公知(Daniela De Biase, D.
らの文献、J. Biol. Chem., 266, 20056, 1991))に結合するチロシン由来のDpaTyr-Ni(II
)錯体などのアミノ酸を主にベースにした化合物も、本発明において意図されない。
【０１３６】
例えば、Statsuk, A. V.らの文献(JACS, 130, 17568, (2008))及びGuillerm, G.らの文
献(J. Med. Chem., 49, 1223, (2006))などに明らかにされたもののようなヌクレオシド/
ヌクレオチド由来の薬物も、本発明において意図されない。
【０１３７】
本発明に包含されない天然の生成物及びそれらの類似体の別の例は、マノアログなどの
、リシンを共有的に修飾すると考えられるマノリド及びその類似体である(Reynolds, L.J
.らの文献、J. Am. Chem. Soc., 1988, 110, 5172-5177)：
【化２０】
2016195596.tif 000030
【０１３８】
本発明に包含されない化合物及びそれらの類似体の更なる例は、未変性のタンパク質中
のリシンを共有的に修飾するネラチニブ(aka HKI-272)である(Wang, J.らの文献、Drug M
etabolism and Disposition, 2010, 38, 1083-1093)：
【化２１】
2016195596.tif 000031
【０１３９】
本発明に包含されない天然の生成物及びそれらの類似体の別の例は、リシンを共有的に
修飾すると考えられるアザフィロン及びその類似体である。アザフィロンの非限定的例示
的例は、以下に説明される：
【化２２】
2016195596.tif 000032
【０１４０】
いくつかの実施態様において、式Iの弾頭は、式I-a、I-b、I-c、I-d、I-e、I-f、I-g、
I-h、I-i、I-j、I-k、I-l、I-m、I-n、I-o、I-p、I-q、I-r、I-s、及びI-tの化合物の水
素の除去から生じるラジカルである：
【化２３】
2016195596.tif 000033
(式中、
X1及びX8の各々は、独立して-O-、-S-、又は-NR6-であり；
X2の各々は、独立して-R6、-OR6、又は-NR6R7であり；
X9の各々は、独立して、
【化２４】
2016195596.tif 000034
であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8の各々は、独立して水素又はC1-C6アルキルであり；
ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO
2-、又は-C(=S)-により置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基
は、存在する場合、独立して
【化２５】
2016195596.tif 000035
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
ここで、任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8のいずれか2つが
、一緒になると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を
形成し；且つ、任意にX2並びにR2、R3、及びR4のいずれか1つが、一緒になると、3-〜8-
員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形成し；
A及びBは、各々独立して、任意に置換された単環式、二環式、又は三環式アリール又は
ヘテロアリールであり；且つ
nは、2〜4の整数であり；n1及びn2の各々は、独立して、0〜2の整数であり；n3は、1〜
2の整数であり；n4は、1〜3の整数であり；並びに、n9、n10、n11、及びn12の各1つは、0
〜1の整数であり；並びに、n13は、0〜2の整数であり、ここで前述のnの整数のいずれか1
つは1よりも大きく、その整数により表された隣接炭素は、単結合又は二重結合を形成す
ることができる。)。
【０１４１】
一部の実施態様において、式I-b及びI-cの化合物のR2及びR3の少なくとも1つは、水素
である。
【０１４２】
他の実施態様において、式I-a、I-d、I-e、I-j、I-k、又はI-lの化合物は、式II-a、II
-b、II-c、II-d、II-e、II-f、II-g、II-h、II-i、II-j、II-k、II-l、II-m、II-n、II-o
、II-p、II-q、II-r、II-s、II-t、II-u、II-v、II-w、II-x、II-y、II-z、II-aa、II-bb
、II-cc、II-dd、II-ee、II-ff、II-gg、II-hh、II-ii、II-jj、II-kk、II-ll、II-mm、I
I-nn、II-oo、又はII-ppの化合物である：
【化２６】
2016195596.tif 000036
(式中、
mの各々は、独立して、0〜4の整数であり；
m5の各々は、独立して、0〜3の整数であり；
m4の各々は、独立して、0〜5の整数であり；
n2の各々は、独立して、0〜2の整数であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、及びR15の各々は、独立
して、水素又はC1-C6アルキルであり；Rzは、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、CF3、又
はニトロであり；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-
、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S)-により置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1
個以上のメチン基は、存在する場合、独立して
【化２７】
2016195596.tif 000037
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；且つ、
任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R1
4、及びR15のいずれか2つは、一緒になると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール
若しくはヘテロアリール基を形成する。)。
【０１４３】
更に別の実施態様において、式I-d又はI-hの化合物は、式III-a、III-b、III-c、III-d
、III-e、III-f、III-g、III-h、又はIII-iの化合物である：
【化２８】
2016195596.tif 000038
(式中、
n3は、0〜2の整数であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8の各々は、独立して、水素又はC1-C6アルキルであり
；
B1、B2、B4、及びB5の各々は、独立して、CR7又はNであり；
B3の各々は、NR7、O、又はSであり；
Rz1、Rz2、Rz3、Rz4、及びRz5の各々は、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、CF3、又は
ニトロであり；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、
-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S)-により任意に置き換えられることができ；C1-C6アルキル
の1個以上のメチン基は、存在する場合、
【化２９】
2016195596.tif 000039
により独立して置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；且つ
任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8のいずれか2つは、一緒に
なると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形成する
。)。
【０１４４】
いくつかの実施態様において、式I-hの化合物は、式IV-a、IV-b、IV-c、IV-d、IV-e、I
V-f、IV-g、IV-h、又はIV-iの化合物である：
【化３０】
2016195596.tif 000040
(式中、
R1、R2、及びR3は、先に式I-hについて定義されたものであり；且つ
化合物の窒素複素環上の置換可能な水素のいずれかは、アルキル、アルコキシ、アミド
、アシル、アシルオキシ、オキソアシル、ハロゲンにより置換されることができる。)。
【０１４５】
他の実施態様において、式I-a、I-d、I-k、又はI-mの化合物の水素の除去から生じるラ
ジカルは、式V-a、V-b、V-c、V-d、V-e、V-f、V-g、V-h、V-i、又はV-jのラジカルである
：
【化３１】
2016195596.tif 000041
(式中、
m1及びm2は各々独立して、0〜2の整数であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、及びR11の各々は、独立して水素又はC1-C6ア
ルキルであり；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、
-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S)-により任意に置き換えられることができ；C1-C6アルキル
の1個以上のメチン基は、存在する場合、
【化３２】
2016195596.tif 000042
により独立して置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；且つ
任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、及びR11のいずれか
2つは、一緒になると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリー
ル基を形成する。)。
【０１４６】
いくつかの例証的実施態様において、式I-a、I-b、I-c、I-d、I-e、I-f、I-g、I-h、I-
i、I-j、I-k、I-l、I-m、I-n、I-o、I-p、I-q、I-r、I-s、及びI-tの化合物は、以下に説
明される：
【化３３】
2016195596.tif 000043
2016195596.tif 000044
【０１４７】
前記化合物aa−oooにおいて、任意の置換可能な水素は、R2-R8により定義されたものの
ような置換基により、置換されてよい。
【０１４８】
いくつかの実施態様において、式I-a、I-d、I-k、又はI-mの化合物の水素の除去から生
じるラジカルは、式VI-a、VI-b、VI-c、VI-d、VI-e、VI-f、VI-g、VI-h、VI-i、VI-j、VI
-k、VI-l、VI-m、VI-n、VI-o、VI-p、VI-q、VI-r、VI-s、又はVI-tである：
【化３４】
2016195596.tif 000045
(式中、Rzzは、水素、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、-CH2
OCH3、及び-CH2CH2OCH3である。)。
【０１４９】
一部の実施態様において、テザーは、空白、結合、又は二価のC1-C15飽和、不飽和、直
鎖、分岐鎖、環式、二環式、三環式のアルキル、アルケニル、アルキニル；架橋した二環
式、複素環、ヘテロアリール、又はアリール部分であり；ここで、任意に炭化水素鎖の1
個以上のメチレン単位は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、-C(=S)-、又はC(=NR
1)-により、独立して置き換えられ；R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；且つ、任意に
1個以上の水素は、ヘテロ原子により独立して置き換えられ；且つ、任意にC1-C15アルキ
ルの1個以上のメチン基は、独立して
【化３５】
2016195596.tif 000046
により置き換えられる。
【０１５０】
いくつかの実施態様において、スカフォールドは、式VII、VIII、IX-a、IX-b、XI、XII
、XVI、XVII、XVIII、XIX、XX、XXI、XXII、XXIII、XXXIV、XXV、XXVI、XXVII、XXVIII、
XXIX、XXXVI、及びXXXVIIからなる群より選択される。
【０１５１】
(VII.  本発明の化合物)
本開示は、タンパク質のリシン残基に共有結合し、これにより該タンパク質の機能を阻
害することが可能である化合物を提供する。式Iの化合物が、本明細書に説明されている
：
【化３６】
2016195596.tif 000047
(式中、スカフォールド、弾頭、テザー、x、yは、先に式Iについて定義されたものであり
、
但し、式Iの化合物は、ウォルトマニン：
【化３７】
2016195596.tif 000048
；実質的にウォルトマニンと同じ機序を介してリシンを共有的に修飾する公知のウォルト
マニン類似体：
【化３８】
2016195596.tif 000049
2016195596.tif 000050
2016195596.tif 000051
下記のようなアザフィロンのコア類似体：
【化３９】
2016195596.tif 000052
；並びに、任意の機序-ベースの不可逆的インヒビターではないことを条件とする。)。
【０１５２】
いくつかの実施態様において、式Iの化合物は、式I'の化合物である：
【化４０】
2016195596.tif 000053
(式中、スカフォールド、弾頭及びテザーは、式Iの実施態様において、先に定義されたも
のである。)。
【０１５３】
いくつかの実施態様において、弾頭は、式I-a、I-b、I-c、I-d、I-e、I-f、I-g、I-h、
I-i、I-j、I-k、I-l、I-m、I-n、I-o、I-p、I-q、I-r、I-s、及びI-tの化合物の水素の除
去から生じるラジカルである：
【化４１】
2016195596.tif 000054
(式中、
X1及びX8の各々は、独立して-O-、-S-、又は-NR6-であり；
X2の各々は、独立して-R6、-OR6、又は-NR6R7であり；
X9の各々は、独立して、
【化４２】
2016195596.tif 000055
であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8の各々は、独立して水素又はC1-C6アルキルであり；
ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO
2-、又は-C(=S)-により置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基
は、存在する場合、独立して
【化４３】
2016195596.tif 000056
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
ここで、任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8のいずれか2つが
、一緒になると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を
形成し；且つ、任意にX2並びにR2、R3、及びR4のいずれか1つが、一緒になると、3-〜8-
員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形成し；
A及びBは、各々独立して、任意に置換された単環式、二環式、又は三環式アリール又は
ヘテロアリールであり；且つ
nは、2〜4の整数であり；n1及びn2の各々は、独立して、0〜2の整数であり；n3は、1〜
2の整数であり；n4は、1〜3の整数であり；並びに、n9、n10、n11、及びn12の各1つは、0
〜1の整数であり；並びに、n13は、0〜2の整数であり、ここで前述のnの整数のいずれか1
つは1よりも大きく、その整数により表された隣接炭素は、単結合又は二重結合を形成す
ることができる。)。
【０１５４】
一部の実施態様において、式I-b及びI-cの化合物のR2及びR3の少なくとも1つは、水素
である。
【０１５５】
他の実施態様において、式I-a、I-d、I-e、I-j、I-k、又はI-lの化合物は、式II-a、II
-b、II-c、II-d、II-e、II-f、II-g、II-h、II-i、II-j、II-k、II-l、II-m、II-n、II-o
、II-p、II-q、II-r、II-s、II-t、II-u、II-v、II-w、II-x、II-y、II-z、II-aa、II-bb
、II-cc、II-dd、II-ee、II-ff、II-gg、II-hh、II-ii、II-jj、II-kk、II-ll、II-mm、I
I-nn、II-oo、又はII-ppの化合物である：
【化４４】
2016195596.tif 000057
(式中、
mの各々は、独立して、0〜4の整数であり；
m5の各々は、独立して、0〜3の整数であり；
m4の各々は、独立して、0〜5の整数であり；
n2の各々は、独立して、0〜2の整数であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、及びR15の各々は、独立
して、水素又はC1-C6アルキルであり；Rzは、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、CF3、又
はニトロであり；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-
、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S)-により置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1
個以上のメチン基は、存在する場合、独立して
【化４５】
2016195596.tif 000058
により置き換えられることができ；任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、
R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、及びR15のいずれか2つは、一緒になると、3-〜8-員
の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形成し；且つ、
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり得る。)。
【０１５６】
更に別の実施態様において、式I-d又はI-hの化合物は、式III-a、III-b、III-c、III-d
、III-e、III-f、III-g、III-h、又はIII-iの化合物である：
【化４６】
2016195596.tif 000059
(式中、
n3は、0〜2の整数であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8の各々は、独立して、水素又はC1-C6アルキルであり
；
B1、B2、B4、及びB5の各々は、独立して、CR7又はNであり、且つB3の各々は、NR7、O、
又はSであり；
Rz1、Rz2、Rz3、Rz4、及びRz5の各々は、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、CF3、又は
ニトロであり；
C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又
は-C(=S)-により任意に置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基
は、存在する場合、
【化４７】
2016195596.tif 000060
により独立して置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；且つ
任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8のいずれか2つは、一緒に
なると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形成する
。)。
【０１５７】
いくつかの実施態様において、式I-hの化合物は、式IV-a、IV-b、IV-c、IV-d、IV-e、I
V-f、IV-g、IV-h、又はIV-iの化合物であり：
【化４８】
2016195596.tif 000061
(式中、R2、R3及びR4は、式I-d又はI-hについて先に定義されており；且つ、式IV-a、IV-
b、及びIV-cの化合物の窒素複素環上の水素は、アルキル、アルコキシ、アミド、アシル
、アシルオキシ、オキソアシル、及びハロゲンにより置換され得る。)。
【０１５８】
他の実施態様において、式I-a、I-d、I-k、又はI-mの化合物の水素の除去から生じるラ
ジカルは、式V-a、V-b、V-c、V-d、V-e、V-f、V-g、V-h、V-i、又はV-jのラジカルである
：
【化４９】
2016195596.tif 000062
(式中、
m1及びm2は各々独立して、0〜2の整数であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、及びR11の各々は、独立して水素又はC1-C6ア
ルキルであり；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、
-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S)-により任意に置き換えられることができ；C1-C6アルキル
の1個以上のメチン基は、存在する場合、
【化５０】
2016195596.tif 000063
により独立して置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；且つ
任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、及びR11のいずれか
2つは、一緒になると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリー
ル基を形成する。)。
【０１５９】
いくつかの実施態様において、式I-a、I-d、I-k、又はI-mの化合物の水素の除去から生
じるラジカルは、式VI-a、VI-b、VI-c、VI-d、VI-e、VI-f、VI-g、VI-h、VI-i、VI-j、VI
-k、VI-l、VI-m、VI-n、VI-o、VI-p、又はVI-qのラジカルである：
【化５１】
2016195596.tif 000064
(式中、
Rzzは、水素、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、-CH2OCH3
、又は-CH2CH2OCH3である。)。
【０１６０】
式Iの化合物の一部の実施態様において、テザーは、空白、結合、又は二価のC1-C15飽
和、不飽和、直鎖、分岐鎖、環式、二環式、三環式のアルキル、アルケニル、アルキニル
；架橋した二環式、複素環、ヘテロアリール、又はアリール部分であり；ここで、任意に
炭化水素鎖の1個以上のメチレン単位は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、-C(=S
)-、又はC(=NR1)-により、独立して置き換えられ；任意に1個以上の水素は、ヘテロ原子
により独立して置き換えられ；且つ、任意にC1-C15アルキルの1個以上のメチン基は、存
在する場合、独立して
【化５２】
2016195596.tif 000065
により置き換えられ；且つ
R1は、水素又はC1-C8アルキルである。
【０１６１】
いくつかの実施態様において、テザーは、空白、結合、又は二価のC1-C15飽和、不飽和
、直鎖、分岐鎖、環式、二環式、三環式のアルキル、アルケニル、アルキニルであり；こ
こで、任意に炭化水素鎖の1個以上のメチレン単位は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、
-SO2-、-C(=S)-、又はC(=NR1)-により、独立して置き換えられ；任意に1個以上の水素は
、ヘテロ原子により独立して置き換えられ；且つ、任意にC1-C15アルキルの1個以上のメ
チン基は、存在する場合、独立して
【化５３】
2016195596.tif 000066
により置き換えられ；且つ
R1は、水素又はC1-C8アルキルである。
【０１６２】
いくつかの実施態様において、スカフォールドは、式VII、VIII、IX-a、IX-b、XI、XII
、XVI、XVII、XVIII、XIX、XX、XXI、XXII、XXIII、XXXIV、XXV、XXVI、XXVII、XXVIII、
XXIX、XXXVi、及びXXXVIIからなる群より選択される。
【０１６３】
(A.  IAPタンパク質スカフォールド)
(1.  式VIIの化合物をベースにした式Iの化合物)
一部の実施態様において、スカフォールドが、式VIIの化合物の1個以上の水素の除去か
ら生じるラジカルである、式Iの化合物が説明されている：
【化５４】
2016195596.tif 000067
(式中、
V及びWは、各々独立して、-(CR14R15)qX3(CR16R17)r-であり；
q及びrは、各々独立して、0、1、2、3、又は4であり；
X3は、-CR18R19-、又は-NR20-であり；
Rx、Ry、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、及びR20は、各々独立して、水素
又はC1-C6アルキルであり；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O
-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S)-、任意に置換されたアリール若しくはヘテロ
アリール基により置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存
在する場合、
【化５５】
2016195596.tif 000068
により独立して置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；且つ
テザー及び弾頭は、式Iの実施態様において先に定義されたものである。)。
【０１６４】
一部の実施態様において、式VIIの化合物は、式VII-aの化合物である：
【化５６】
2016195596.tif 000069
(式中、
V及びWは、各々独立して、-(CR14R15)qX3(CR16R17)r-であり；
q及びrは、各々独立して、0、1、2、3、又は4であり；
X3は、-CR18R19-、又は-NR20-であり；
pは、0、1、2、3、又は4であり；
R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、及びR20は、各々独立して、水素又はC1-C6
アルキルであり；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-
、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S)-、任意に置換されたアリール若しくはヘテロアリール
基により置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在する場
合、
【化５７】
2016195596.tif 000070
により独立して置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；且つ
R23は、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、アミノ、又はニトロであり；ここで、C1-C6
アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S
)-により任意に置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在
する場合、
【化５８】
2016195596.tif 000071
により独立して置き換えられることができ；且つ
任意にR21及びR23は、一緒に、4-〜8-員の炭素環又は複素環を形成することができる。
)。
【０１６５】
他の実施態様において、式I'の化合物は、式VII-bの化合物である：
【化５９】
2016195596.tif 000072
(式中、R12、R13、R21、R22、R23、V、W、pは、式VII-aについて先に定義されたものであ
り、且つT及びRwhは、式Iの実施態様について先に定義されたものである。)。
【０１６６】
いくつかの実施態様において、式VII-bの化合物は、式VII-hの化合物である：
【化６０】
2016195596.tif 000073
(式中、T、Rwh、p、R12、R13、R23、及びpは、式VII-bについて先に説明されたものであ
る。)。
【０１６７】
他の実施態様において、式VII-hの化合物は、式VII-j、VII-k、VII-l、VII-m、VII-n、
又はVII-oの化合物である：
【化６１】
2016195596.tif 000074
(式中、R2、R3、R4、R5、R6、R7は、式Iの実施態様について先に説明されたものであり、
且つR12、R13、R23、及びpは、式VII及びVII-hについて先に説明されたものである。)。
【０１６８】
式VIIの化合物の非限定的例を、以下に示す：
【化６２】
2016195596.tif 000075
2016195596.tif 000076
2016195596.tif 000077
2016195596.tif 000078
2016195596.tif 000079
2016195596.tif 000080
【０１６９】
(2.  式VIIIの化合物ベースの式Iの化合物)
他の実施態様において、スカフォールドが、式VIIIの化合物の水素の除去から生じるラ
ジカルである、式Iの化合物が説明されている：
【化６３】
2016195596.tif 000081
(式中、
X4は、-CR33-又は-N-であり；
p及びsは、各々独立して、0、1、2、3、又は4であり；
R12、R13、R21、R22、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31、R32、及びR33は、各
々独立して、水素又はC1-C6アルキルであり；
R23は、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、アミノ、又はニトロであり；ここで、C1-C6
アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S
)-により任意に置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在
する場合、
【化６４】
2016195596.tif 000082
により独立して置き換えられることができ； 
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；且つ
任意にR21及びR23は、一緒に、4-〜8-員の炭素環又は複素環を形成することができ；且
つ
テザー及び弾頭は、式Iの実施態様において先に定義されたものである。)。
【０１７０】
いくつかの実施態様において、式Iの化合物は、式VIII-a又はVIII-bの化合物である：
【化６５】
2016195596.tif 000083
(式中、X4、p、s、R12、R13、R21、R22、R23、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31
、R32、R33は、式VIIIについて先に定義されたものであり、且つT及びRwhは、式Iの実施
態様において先に定義されたものである。)。
【０１７１】
式VIIIの化合物の非限定的例を、以下に示す：
【化６６】
2016195596.tif 000084
2016195596.tif 000085
【０１７２】
(3.  式IX-a及びIX-bの化合物ベースの式Iの化合物)
他の実施態様において、スカフォールドが、式IX-a又はIX-bの化合物の水素の除去から
生じるラジカルである、式Iの化合物が説明されている：
【化６７】
2016195596.tif 000086
(式中、
X5は、-O-、-CR42R43-又は-NR42-であり；
R12、R13、R27、R28、R29、R30、R31、R32、R33、R34、R35、R36、R37、R38、R39、R40
、R41、R42、及びR43は、各々独立して、水素又はC1-C6アルキルであり；ここで、C1-C6
アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S
)-により任意に置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在す
る場合、
【化６８】
2016195596.tif 000087
により独立して置き換えられることができ；
D、E、F、G、及びHは、各々独立して、任意に置換されたアリール又はヘテロアリール
であり；
ここで、F及びGは、一緒に縮合され、二環式の任意に置換されたアリール又はヘテロア
リールを形成し；且つ
テザー及び弾頭は、式Iの実施態様において先に定義されたものである。)。
【０１７３】
更に別の実施態様において、式Iの化合物は、式IX-c又はIX-dの化合物である：
【化６９】
2016195596.tif 000088
(式中、R12、R13、R31、F、G、及びHは、式IX-a及びIX-bについて先に定義されたもので
あり、且つT及びRwhは、各々、テザー及び弾頭であり、且つ式Iの実施態様において先に
定義されたものである。)。
【０１７４】
(4.  式XVIIの化合物)
一部の実施態様において、式Iの化合物は、式XVIIの化合物により説明されている：
【化７０】
2016195596.tif 000089
(式中、Tはテザーであり、及びRwhは弾頭であり、且つ式Iの実施態様において先に定義さ
れたものである。)。
【０１７５】
式XVIIの化合物の非限定的例を、以下に示す：
【化７１】
2016195596.tif 000090
【０１７６】
(5.  式XVIIIの化合物)
一部の実施態様において、式Iの化合物は、式XVIIIの化合物により説明されている：
【化７２】
2016195596.tif 000091
(式中、Tはテザーであり、及びRwhは弾頭であり、且つ式Iの実施態様において先に定義さ
れたものである。)。
【０１７７】
式XVIIIの化合物の非限定的例を、以下に示す：
【化７３】
2016195596.tif 000092
【０１７８】
(6.  式XIXの化合物、式XIXの化合物)
一部の実施態様において、式Iの化合物は、式XIXの化合物により説明されている：
【化７４】
2016195596.tif 000093
(式中、Tはテザーであり、及びRwhは弾頭であり、且つ式Iの実施態様において先に定義さ
れたものである。)。
【０１７９】
式XIXの化合物の非限定的例を、以下に示す：
【化７５】
2016195596.tif 000094
【０１８０】
(7.  式XX-a及びXX-bの化合物)
一部の実施態様において、式Iの化合物は、式XX-a及び式XX-bの化合物により説明され
ている：
【化７６】
2016195596.tif 000095
(式中、
R1000は、C(H)又はNであり、ここで-T-Rwhは、式XX-a及び式XX-bのヘテロアリール部分
の任意の炭素又はNHに結合することができ；且つ
T及びRwhは、各々、テザー及び弾頭であり、且つ式Iの実施態様において先に定義され
たものである。)。
【０１８１】
式XX-a及び式XX-bの化合物の非限定的例を、以下に示す：
【化７７】
2016195596.tif 000096
【０１８２】
(8.  式XXI-a、XXI-b、及びXXI-cの化合物)
一部の実施態様において、式Iの化合物は、式XXI-a、XXI-b、及びXXI-cの化合物により
説明されている：
【化７８】
2016195596.tif 000097
(式中、T及びRwhは、各々、テザー及び弾頭であり、且つ式Iの実施態様において先に定義
されたものである。)。
【０１８３】
式XXI-a、式XXI-b、及び式XXI-cの化合物の非限定的例を、以下に示す：
【化７９】
2016195596.tif 000098
【０１８４】
(B.  PDPK1タンパク質スカフォールド)
(1.  式XIの化合物)
一部の実施態様において、式Iの化合物は、式XIの化合物により説明されている：
【化８０】
2016195596.tif 000099
(式中、
B6及びB7は、各々独立して、CR7又はNであり；
R69は、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、又は-NH(CO)NR78R79であり
；
R70は、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、アミノ、ニトロであり；
R7、R71、R72、R73、R74、R75、R76、R77、R78、及びR79は、各々独立して、水素又はC
1-C6アルキルであり；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基
は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S)-により置き換えられることが
でき；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在する場合、
【化８１】
2016195596.tif 000100
により独立して置き換えられることができ；
任意にR78、及びR79は一緒に、4-〜8-員の炭素環又は複素環を形成し；
pは、0〜4の整数であり、uは、1〜4の整数であり；且つ
T及びRwhは、各々、テザー及び弾頭であり、且つ式Iの実施態様において先に定義され
たものである。)。
【０１８５】
他の実施態様において、式XIの化合物は、式XI-a、XI-b、又はXI-cの化合物である：
【化８２】
2016195596.tif 000101
(式中、R69、R70、R74、R75、R76、R77、R78、R79、T、Rwh、及びpは、式XIについて先に
定義されたものである。)。
【０１８６】
更に別の実施態様において、式XI-a、XI-b又はXI-cの化合物は、式XI-d、XI-e、XI-f、
XI-g、XI-h、XI-i、又はXI-jの化合物である：
【化８３】
2016195596.tif 000102
(式中、R70及びTは、式XIについて先に定義されたものであり；
R1、R2、R3、R4、R5、R6、R80、R81、R82、R83、R84、R85、R86、及びR87は、各々独立
して、水素又はC1-C6アルキルであり、ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は
、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S)-により置き換えられることがで
き；R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；且つ、C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は
、存在する場合、
【化８４】
2016195596.tif 000103
により独立して置き換えられることができる。)。
【０１８７】
いくつかの実施態様において、式XI-d、XI-e、XI-f、XI-g、XI-h、XI-i、又はXI-jの化
合物は、式XI-k、XI-l、XI-m、XI-n、XI-o、XI-p、又はXI-qの化合物である：
【化８５】
2016195596.tif 000104
(式中、R1-R8、R70、R88、及びR89は、式XI-a、XI-b又はXI-cについて先に定義されたも
のであり；
X6は、CH2、NH、O、又はSであり；且つ
n5は、0〜3の整数である。)。
【０１８８】
一部の実施態様において、式XI-e又はXI-jの化合物は、式XI-r、XI-s、XI-t、XI-u、XI
-v、XI-w、又はXI-xの化合物である：
【化８６】
2016195596.tif 000105
(式中、R2、R3、R4、R5、及びR6は、式XI-d、XI-e、XI-f、XI-g、XI-h、XI-i、及びXI-j
について先に定義されたものである。)。
【０１８９】
他の実施態様において、式XI-e、XI-h、XI-i、又はXI-jの化合物は、式XI-y、XI-z、XI
-aa、又はXI-bbの化合物である：
【化８７】
2016195596.tif 000106
(式中、
R2-R9は、前記式II-aについて先に定義されたものであり；且つ
X6は、前記式XI-tについて先に定義されたものである。)。
【０１９０】
いくつかの実施態様において、式XI-h又はXI-iの化合物は、式XI-cc、XI-dd、XI-ee、
又はXI-ffの化合物である：
【化８８】
2016195596.tif 000107
(式中、R2-R7、R8、R9は、式II-aについて先に定義されたものである。)。
【０１９１】
式XIの化合物の非限定的例を、以下に示す：
【化８９】
2016195596.tif 000108
2016195596.tif 000109
2016195596.tif 000110
2016195596.tif 000111
2016195596.tif 000112
2016195596.tif 000113
2016195596.tif 000114
2016195596.tif 000115
2016195596.tif 000116
。
【０１９２】
(2.  式XIIの化合物)
一部の実施態様において、式Iの化合物は、式XIIの化合物により説明されている：
【化９０】
2016195596.tif 000117
(式中、T及びRwhは、各々、テザー及び弾頭であり、且つ式Iの実施態様において先に定義
されたものであり；
R1及びR2は、各々独立して、水素又はC1-C8アルキルであり；ここで、C1-C6アルキルの
1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S)-により置
き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在する場合、
【化９１】
2016195596.tif 000118
により独立して置き換えられることができる。)。
【０１９３】
(1.  式XXXVIの化合物VERNALIS)
一部の実施態様において、式Iの化合物は、式XXXVIの化合物により説明されている：
【化９２】
2016195596.tif 000119
(式中、
Rvは、H、任意に置換されたC1-C3分岐鎖若しくは直鎖のアルキル、又は任意に置換され
たC1-C3分岐鎖若しくは直鎖のアシルであり；且つ
T及びRwhは、各々、テザー及び弾頭であり、且つ式Iの実施態様において先に定義され
たものである。)。
【０１９４】
式XXXVIの化合物の非限定的例を、以下に示す：
【化９３】
2016195596.tif 000120
【０１９５】
(C.  HCVプロテアーゼ)
(1.  式XVI-a、XVI-b、及びXVI-cの化合物ベースの式Iの化合物)
他の実施態様において、スカフォールドが、式XVI-a、XVI-b、又はXVI-cの化合物の水
素の除去から生じるラジカルである式Iの化合物が説明されている：
【化９４】
2016195596.tif 000121
(式中、
R90、R91、R92、R93、R94、R95、R96、R97、R98、R99、R100、R102、R104、R105、R106
、R107、R108、R109、R110、R111、R112、R113、及びR114は、各々独立して、水素又はC1
-C6アルキルであり；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(
O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S)-により任意に置き換えられることができ；
R103は、水素、C1-C6アルキル、又はC2-C8アルケニルであり；
C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在する場合、
【化９５】
2016195596.tif 000122
により独立して置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
各R101は、独立して、水素、C1-C6アルキル、C2-C8アルケニル、ハロゲン、アミノ、ニ
トロ、任意に置換されたアリール又はヘテロアリールであり；
n6及びn7は、各々独立して0〜4の整数であり；n8は、0〜2の整数であり；且つ
弾頭は、式I-b、I-c、I-e、I-i、I-j、I-k、I-l、I-n、又はI-oの化合物の水素の除去
から生じるラジカルであり；
【化９６】
2016195596.tif 000123
ここで、
X1及びX8の各々は、独立して、-O-、又は-NR6-であり；
X9の各々は、独立して、
【化９７】
2016195596.tif 000124
であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8の各々は、独立して、水素又はC1-C6アルキルであ
り；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-
、-SO2-、又は-C(=S)-により置き換えられることができ；
C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在する場合、独立して、
【化９８】
2016195596.tif 000125
により置き換えられることができ；
任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8のいずれか2つは、一緒に
なると、3-〜8-員の炭素環又は複素環又はアリール若しくはヘテロアリール基を形成し；
A及びBは、各々独立して、任意に置換された単環式、二環式、又は三環式アリール又は
ヘテロアリールであり；
nは、2〜4の整数であり；
n1及びn2の各々は、独立して、0〜2の整数であり；
n3は、1〜2の整数であり；
n4は、1〜3の整数であり；
Tは、テザーであり、且つ空白、結合、又は二価のC1-C15飽和、不飽和、直鎖、分岐鎖
、環式、二環式、三環式のアルキル、アルケニル、アルキニル；架橋した二環式、複素環
、ヘテロアリール、又はアリール部分であり；ここで、任意に炭化水素鎖の1個以上のメ
チレン単位は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、-C(=S)-、又はC(=NR1)-により
、独立して置き換えられ；任意に1個以上の水素は、ヘテロ原子により独立して置き換え
られ、且つ、任意にC1-C15アルキルの1個以上のメチン基は、独立して
【化９９】
2016195596.tif 000126
により置き換えられ；且つ、
R1は、水素又はC1-C8アルキルである。)。
【０１９６】
一部の実施態様において、式Iの化合物は、式XVI-d、XVI-e、又はXVI-fの化合物である
：
【化１００】
2016195596.tif 000127
(式中、
R90、R101、R114、n6、n8、T及びRwhは、式XV-aについて先に定義されたものであり；
且つ
R103は、水素又はC2-C8アルケニルである。)。
【０１９７】
いくつかの実施態様において、式XVI-d、XVI-e、又はXVI-fの化合物は、式XVI-g、XVI-
h、又はXVI-iの化合物である：
【化１０１】
2016195596.tif 000128
(式中、R2、R3、R4、R5、R101、R114は、式XVI-aについて先に定義されたものである。)
。
【０１９８】
式XVI-a、式XVI-b、及び式XVI-cの化合物の非限定的例を、以下に示す：
【化１０２】
2016195596.tif 000129
2016195596.tif 000130
2016195596.tif 000131
2016195596.tif 000132
2016195596.tif 000133
2016195596.tif 000134
2016195596.tif 000135
。
【０１９９】
(D.  PI3Kβ及びPI3Kγタンパク質スカフォールド)
(1.  式XXII-a、式XXII-b、又は式XXII-cの化合物)
一部の実施態様において、式Iの化合物は、式XXII-a、式XXII-b、又は式XXII-cの化合
物である：
【化１０３】
2016195596.tif 000136
(式中、
式XXII-a及び式XXII-bのn、m、p、及びqは、各々独立して、0、1、2、3であり；但し、
n及びqは同時に0ではなく、且つ
m及びqは同時に0ではないことを条件とし；
T及びRwhは、式Iについて定義されたものであり、且つ各Tは、同じ又は異なることがで
き；
A2は、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1又は2個のヘテロ原子を有す
る4〜8員の飽和又は部分的不飽和の複素環、又は少なくとも1個の窒素、少なくとも1個の
酸素、及び任意に窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜2個の追加のヘテ
ロ原子を有する5〜10員の飽和又は部分的不飽和の架橋された二環式複素環から選択され
た任意に置換された環であり；
B'は、フェニル、8-〜10-員の二環式アリール環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立
して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する5-〜6-員のヘテロアリール環、又は窒素、酸
素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する8-〜10-員の二環
式ヘテロアリール環から選択された任意に置換された基；又は、-T-Rwhであり；且つ
C2は、水素、或いは3-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の炭素環、7-〜10-員の飽和又は
部分的不飽和の二環式炭素環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜2個
のヘテロ原子を有する4-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の複素環、窒素、酸素、若しくは
硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する7-〜10-員の飽和又は部分的不
飽和の二環式複素環、フェニル、8-〜10-員の二環式アリール環、窒素、酸素、若しくは
硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する5-〜6-員のヘテロアリール環、
又は窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する8-〜
10-員の二環式ヘテロアリール環から選択された任意に置換された環である。)。
【０２００】
式XXII-a及び式XXII-bの化合物の非限定的例を、以下に示す：
【化１０４】
2016195596.tif 000137
2016195596.tif 000138
2016195596.tif 000139
2016195596.tif 000140
2016195596.tif 000141
2016195596.tif 000142
。
【０２０１】
(2.  式XXIIIの化合物)
一部の実施態様において、式Iの化合物は、式XXIIIの化合物である：
【化１０５】
2016195596.tif 000143
(式中：
Rwhは、弾頭基であり、且つ式Iの実施態様において先に定義されたものであり；
R201は、水素又はC1-6アルキルであり；
R202は、水素、或いはC1-6アルキル、C1-6アルコキシ、若しくは(C1-6アルキレン)-R20
3から選択された任意に置換された基であるか；又は
R201及びR202は、介在する炭素と一緒に、3-〜7-員の炭素環、又は窒素、酸素、若しく
は硫黄から独立して選択された1〜2個のヘテロ原子を有する4-〜7-員の複素環から選択さ
れた任意に置換された環を形成し；
R203は、3-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の炭素環、7-〜10-員の飽和又は部分的不飽
和の二環式の炭素環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜2個のヘテロ
原子を有する4-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の複素環、窒素、酸素、若しくは硫黄から
独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二
環式複素環、フェニル、8-〜10-員の二環式のアリール環、窒素、酸素、若しくは硫黄か
ら独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する5-〜6-員のヘテロアリール環、又は窒
素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する8-〜10-員
の二環式のヘテロアリール環であり；且つ
環A6は、存在しないか、或いは窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜2
個のヘテロ原子を有する4-〜7-員の複素環、又は窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して
選択された1〜3個のヘテロ原子を有する5-〜6-員のヘテロアリール環から選択された任意
に置換された基である。)。
【０２０２】
式XXIIIの化合物の非限定的例を、以下に示す：
【化１０６】
2016195596.tif 000144
2016195596.tif 000145
。
【０２０３】
(3.  式XXIV-a又は式XXIV-bの化合物)
一部の実施態様において、式Iの化合物は、式XXIV-a若しくは式XXIV-bの化合物、又は
それらの医薬として許容し得る塩である：
【化１０７】
2016195596.tif 000146
(式中、
Rwhは、弾頭基であり；
R204は、水素、或いはC1-6脂肪族、-(CH2)m-(3-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の炭素
環)、-(CH2)m-(7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環式炭素環)、-(CH2)m-(窒素、酸
素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜2個のヘテロ原子を有する4-〜7-員の飽和又
は部分的不飽和の複素環)、-(CH2)m-(窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された
1〜3個のヘテロ原子を有する7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環式複素環)、-(CH2)
m-フェニル、-(CH2)m-(8-〜10-員の二環式アリール環)、-(CH2)m-(窒素、酸素、若しくは
硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する5-〜6-員のヘテロアリール環)
、又は-(CH2)m- (窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子
を有する、8-〜10-員の二環式ヘテロアリール環)から選択された任意に置換された基であ
り；
R205及びR206の各々は、独立して、-R"、ハロゲン、-NO2、-CN、-OR"、-SR"、-N(R")2
、-C(O)R"、-CO2R"、-C(O)C(O)R"、-C(O)CH2C(O)R"、-S(O)R"、-S(O)2R"、-C(O)N(R")2、
-SO2N(R")2、-OC(O)R"、-N(R")C(O)R"、-N(R")N(R")2、-N(R")C(=NR")N(R")2、-C(=NR")N
(R")2、-C=NOR"、-N(R")C(O)N(R")2、-N(R")SO2N(R")2、-N(R")SO2R"、又は-OC(O)N(R")2
であり；
R"の各々は、独立して、水素、或いはC1-6脂肪族、3-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の
炭素環、7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環式炭素環、窒素、酸素、若しくは硫黄
から独立して選択された1〜2個のヘテロ原子を有する4-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の
複素環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する
7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環式複素環、フェニル、8-〜10-員の二環式アリー
ル環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する5-
〜6-員のヘテロアリール環、又は窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4
個のヘテロ原子を有する8-〜10-員の二環式ヘテロアリール環から選択された任意に置換
された基であるか；又は
同一窒素上の2個のR"基は、それらが結合した窒素と一緒に、窒素、酸素、若しくは硫
黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する任意に置換された5〜8員の飽和、
部分的不飽和、又は芳香族の環を形成し；
mは、0〜6までを含む整数であり；
式XXIV-a又は式XXIV-bのnの各々は、独立して0、1、又は2であり；且つ
環A5は、1〜2個の窒素を有する、任意に置換された6-員の複素環又はヘテロアリール環
である。)。
【０２０４】
式XXIV-a及びXXIV-bの化合物の非限定的例を、以下に示す：
【化１０８】
2016195596.tif 000147
【０２０５】
(4.  式XXVの化合物)
一部の実施態様において、式Iの化合物は、式XXVの化合物、又はそれらの医薬として許
容し得る塩である：
【化１０９】
2016195596.tif 000148
(式中、
Rwhは、弾頭基であり、
R205及びR206の各々は、独立して、-R"、ハロゲン、-NO2、-CN、-OR"、-SR"、-N(R")2
、-C(O)R"、-CO2R"、-C(O)C(O)R"、-C(O)CH2C(O)R"、-S(O)R"、-S(O)2R"、-C(O)N(R")2、
-SO2N(R")2、-OC(O)R"、-N(R")C(O)R"、-N(R")N(R")2、-N(R")C(=NR")N(R")2、-C(=NR")N
(R")2、-C=NOR"、-N(R")C(O)N(R")2、-N(R")SO2N(R")2、-N(R")SO2R"、又は-OC(O)N(R")2
であり；
R"の各々は、独立して、水素、或いはC1-6脂肪族、3-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の
炭素環、7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環式炭素環、窒素、酸素、若しくは硫黄
から独立して選択された1〜2個のヘテロ原子を有する4-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の
複素環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する
7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環式複素環、フェニル、8-〜10-員の二環式アリー
ル環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する5-
〜6-員のヘテロアリール環、又は窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4
個のヘテロ原子を有する8-〜10-員の二環式ヘテロアリール環から選択された任意に置換
された基であるか；又は
任意に、同一窒素上の2個のR"基は、それらが結合した窒素と一緒に、窒素、酸素、若
しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する任意に置換された5〜8員
の飽和、部分的不飽和、又は芳香族の環を形成し；
mは、0〜6までを含む整数であり；
nの各々は、独立して0、1、又は2であり；且つ
環A5は、1〜2個の窒素を有する、任意に置換された6-員の複素環又はヘテロアリール環
である。)。
【０２０６】
他の非限定的例示的実施態様において、式XXVの化合物を、以下に示す：
【化１１０】
2016195596.tif 000149
【０２０７】
(5.  式XXVIの化合物)
一部の実施態様において、式Iの化合物は、式XXVIの化合物、又はそれらの医薬として
許容し得る塩である：
【化１１１】
2016195596.tif 000150
(式中、
Rwhは、弾頭基であり、且つ式Iの実施態様において先に定義されたものであり；
環A7は、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1又は2個のヘテロ原子を有
する4〜8員の飽和又は部分的不飽和の複素環、又は少なくとも1個の窒素、少なくとも1個
の酸素、及び任意に窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜2個の追加のヘ
テロ原子を有する5〜10員の飽和又は部分的不飽和の架橋された二環式複素環から選択さ
れた任意に置換された環であり；
R207は、R'''、ハロゲン、-O R'''、-CN、-NO2、-SO2 R'''、-SO R'''、-C(O) R''',
-CO2 R'''、-C(O)N(R''')2、-NRC(O) R'''、-NR"'C(O)N(R''')2、-NRSO2 R'''、又は-N(R
''')2であり；
各R"'は、独立して、水素、或いはC1-6脂肪族、アリール、窒素、酸素、若しくは硫黄
から独立して選択された1〜2個のヘテロ原子を有する4-〜7-員の複素環、又は窒素、酸素
、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する5-〜6-員の単環式ヘ
テロアリール環から選択された任意に置換された基であるか、又は；
任意に同一窒素上の2個のR'''基は、それらが結合した窒素原子と一緒に、窒素、酸素
、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する4-〜7-員の飽和、部
分的不飽和、又はヘテロアリールの環を形成し；
環B7は、フェニル、8-〜10-員の二環式アリール環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独
立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する5-〜6-員のヘテロアリール環、又は窒素、
酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する8-〜10-員の二
環式ヘテロアリール環から選択された任意に置換された基であるか；
T7は、共有結合、又は二価の直鎖状若しくは分岐状の、飽和若しくは不飽和のC1-6炭化
水素鎖であり、ここでT7の1個以上のメチレン単位は、-O-、-S-、-N(R''')-、-C(O)-、-O
C(O)-、-C(O)O-、-C(O)N(R''')-、-N(R''')C(O)-、-N(R''')C(O)N(R''')-、-SO2-、-SO2N
(R''')-、-N(R''')SO2-、又は-N(R''')SO2N(R''')-により、任意に交換され；
環C7は、3-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の炭素環、7-〜10-員の飽和又は部分的不飽
和の二環式炭素環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された0〜4個のヘテロ原
子を有する7-〜12-員の飽和又は部分的不飽和の架橋した二環式環、窒素、酸素、若しく
は硫黄から独立して選択された1〜2個のヘテロ原子を有する4-〜7-員の飽和又は部分的不
飽和の複素環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を
有する7-〜10員の飽和又は部分的不飽和の二環式複素環、フェニル、8-〜10-員の二環式
アリール環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有
する5-〜6-員のヘテロアリール環、又は窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択され
た1〜4個のヘテロ原子を有する8-〜10-員の二環式ヘテロアリール環から選択された任意
に置換された環であり；且つ
環D7は、存在しないか、或いは3-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の炭素環、7-〜10-員
の飽和又は部分的不飽和の二環式炭素環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択さ
れた0〜4個のヘテロ原子を有する7-〜12-員の飽和又は部分的不飽和の架橋した二環式環
、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜2個のヘテロ原子を有する4-〜7-
員の飽和又は部分的不飽和の複素環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された
1〜3個のヘテロ原子を有する7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環式複素環、フェニ
ル、8-〜10-員の二環式アリール環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1
〜3個のヘテロ原子を有する5-〜6-員のヘテロアリール環、又は窒素、酸素、若しくは硫
黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する8-〜10-員の二環式ヘテロアリー
ル環から選択された任意に置換された環である。)。
【０２０８】
式XXVIの化合物の非限定的例を、以下に示す：
【化１１２】
2016195596.tif 000151
【０２０９】
(6.  式XXVIIの化合物)
一部の実施態様において、式Iの化合物は、式XXVIIの化合物、又はそれらの医薬として
許容し得る塩である：
【化１１３】
2016195596.tif 000152
(式中：
T及びRwhは、式Iの実施態様において先に定義されたものであり、
Rは、H、アルキル、又はアルコキシである。)。
【０２１０】
式XXVIIの化合物の非限定的例を、以下に示す：
【化１１４】
2016195596.tif 000153
【０２１１】
(7.  式XXVIIIの化合物)
一部の実施態様において、式Iの化合物は、式XXVIIIの化合物、又はそれらの医薬とし
て許容し得る塩である：
【化１１５】
2016195596.tif 000154
(式中、
T及びRwhは、式Iの実施態様において先に定義されたものである。)。
【０２１２】
式XXVIIIの化合物の非限定的例を、以下に示す：
【化１１６】
2016195596.tif 000155
【０２１３】
(8.  式XXIXの化合物)
一部の実施態様において、式Iの化合物は、式XXIXの化合物、又はそれらの医薬として
許容し得る塩である：
【化１１７】
2016195596.tif 000156
(式中、
T及びRwhは、各々、テザー及び弾頭であり、且つ式Iにおいて先に定義されたものであ
り；並びに
A8は、任意に置換されたアリール、ビアリール、又はヘテロアリールである。)。
【０２１４】
式XXIXの化合物の非限定的例を、以下に示す：
【化１１８】
2016195596.tif 000157
【０２１５】
(1.  式XXXVIIの化合物)
一部の実施態様において、式Iの化合物は、式XXXVIIの化合物、又はそれらの医薬とし
て許容し得る塩である：
【化１１９】
2016195596.tif 000158
(式中、
T及びRwhは、各々、テザー及び弾頭であり、且つ式Iにおいて先に定義されたものであ
る。)。
【０２１６】
式XXXVIIの化合物の非限定的例を、以下に示す：
【化１２０】
2016195596.tif 000159
【０２１７】
当業者は、本明細書に定義されたような様々な弾頭基は、リシンへの共有結合に適して
いることを認めるであろう。このようなRwh基は、本明細書に説明され、且つ前掲の式VI-
a〜式VI-t、及びaa〜oooまでに示されているものを含むが、これらに限定されるものでは
ない。これらの弾頭は、リシン残基の第一級アミンへの共有結合に適しているということ
は、以下に実施例50〜54、88、163〜164、及び174〜175に詳述されたプロトコールを使用
し、質量分光的実験を実行することにより決定され、それらの結果は図3〜9、及び12〜22
に示されている。これらの実験は、本明細書に説明された化合物は、HCV-NS3プロテアー
ゼ、XIAP、PI3K、及びPDPK-1中の標的リシン残基を共有的に修飾することを示している。
(VIII.  更なる態様において、本発明は式XIIIのタンパク質-修飾因子-リガンド複合体を
提供する：)
【化１２１】
2016195596.tif 000160
(式中、
スカフォールドは、
a)リガンド結合部位へ又はその近傍へ結合することが可能であるリガンドの水素の除
去から生じるラジカル；又は
b)スカフォールドがリガンド結合部位へ又はその近傍へ結合することが可能であるよ
うに、薬理作用団の切断から生じるリガンドの薬理作用団の一部分：であり；
弾頭は、O、N、及びSから選択された1個以上のヘテロ原子を任意に含む、有機部分であ
り；この有機部分は、分子量約14ダルトン〜約200ダルトンを有し；弾頭は、リシン残基
の側鎖第一級アミン基との反応が可能であり；且つ、弾頭は、テザーを介してスカフォー
ルドに結合されており；並びに
テザーは、空白、結合、又は二価のC1-C15飽和、不飽和、直鎖、分岐鎖、環式、二環式
、三環式のアルキル、アルケニル、アルキニル；架橋した二環式、複素環、ヘテロアリー
ル、又はアリール部分であり；ここで、任意に炭化水素鎖の1個以上のメチレン単位は、-
NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、-C(=S)-、又はC(=NR1)-により、独立して置き換
えられ；任意に1個以上の水素は、ヘテロ原子により独立して置き換えられ；且つ、任意
にC1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在する場合、独立して
【化１２２】
2016195596.tif 000161
により置き換えられ；
xは、0、1、又は2であり；
yは、1、2、又は3であり；且つ
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；且つ
Y1は、式XIV-a、XIV-b、XIV-c、XIV-d、XIV-e、XIV-f、XIV-g、XIV-h、又はXIV-iのラ
ジカルの水素の除去から生じる二価又は三価の部分であり、
【化１２３】
2016195596.tif 000162
ここで、
X1及びX2の各々は、独立して-CR2R3R4、-OR2、又は-NR2R3であり；
R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8の各々は、独立して、水素又はC1-C6アルキルであり
；
任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8のいずれか2つは、一緒に
連結し、3-〜8-員の炭素環又は複素環を形成することができ；
C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又
は-C(=S)-により置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存
在する場合、独立して、
【化１２４】
2016195596.tif 000163
により置き換えられることができ；且つ
nは、2〜4の整数であり、m4は、1〜2の整数であり；
Aは、任意に置換されたアリール又はヘテロアリールであり；
【化１２５】
2016195596.tif 000164
は、単結合又は二重結合であり；
式XIV-a、XIV-b、XIV-c、XIV-d、XIV-e、XIV-f、XIV-g、XIV-h、又はXIV-iのラジカル
の水素は、テザー-スカフォールドにより置換されており；且つ
Mは、「*」と印を付けられた位置に結合され、且つ-NH-又は=N-であり、Mの窒素原子は
、タンパク質のリシン残基の側鎖第一級アミン基の窒素である。)。
【０２１８】
一部の実施態様において、式XIIIの複合体は、式XIII'の複合体である：
【化１２６】
2016195596.tif 000165
。
【０２１９】
一部の実施態様において、スカフォールドは、式VII、VIII、IX-a、IX-b、XI、XII、XV
I、XVII、XVIII、XIX、XX、XXI、XXII、XXIII、XXXIV、XXV、XXVI、XXVII、XXVIII、XXIX
、XXXVI、及びXXXVIIからなる群より選択される。
【０２２０】
他の実施態様において、M(CH2)4-タンパク質は、M(CH2)4-K1236-HCV-NS3、M(CH2)4-K20
16-HCV-NS3、M(CH2)4-K2560-HCV-NS3、M(CH2)4-K191-(バキュロウイルスIAP反復配列含有
タンパク質1)、M(CH2)4-K199-(バキュロウイルスIAP反復配列含有タンパク質1)、M(CH2)4
-K305-(バキュロウイルスIAP反復配列含有タンパク質2)、M(CH2)4-K291-(バキュロウイル
スIAP反復配列含有タンパク質3)、M(CH2)4-K297-(バキュロウイルスIAP反復配列含有タン
パク質4)、M(CH2)4-K299-(バキュロウイルスIAP反復配列含有タンパク質4)、M(CH2)4-K31
1-(バキュロウイルスIAP反復配列含有タンパク質4)、M(CH2)4-K062-(バキュロウイルスIA
P反復配列含有タンパク質5)、M(CH2)4-K079-(バキュロウイルスIAP反復配列含有タンパク
質5)、M(CH2)4-K121-(バキュロウイルスIAP反復配列含有タンパク質7)、M(CH2)4-K135-(
バキュロウイルスIAP反復配列含有タンパク質7)、M(CH2)4-K146-(バキュロウイルスIAP反
復配列含有タンパク質7)、M(CH2)4-K036-(バキュロウイルスIAP反復配列含有タンパク質8
)、M(CH2)4-K050-(バキュロウイルスIAP反復配列含有タンパク質8)、M(CH2)4-K061-(バキ
ュロウイルスIAP反復配列含有タンパク質8)、M(CH2)4-K776-(ホスファチジルイノシトー
ル-4,5-ビスリン酸3-キナーゼ触媒サブユニットαアイソフォーム)、M(CH2)4-K802-(ホス
ファチジルイノシトール-4,5-ビスリン酸3-キナーゼ触媒サブユニットαアイソフォーム)
、M(CH2)4-K777-(ホスファチジルイノシトール-4,5-ビスリン酸3-キナーゼ触媒サブユニ
ットβアイソフォーム)、M(CH2)4-K805-(ホスファチジルイノシトール-4,5-ビスリン酸3-
キナーゼ触媒サブユニットβアイソフォーム)、M(CH2)4-K802-(ホスファチジルイノシト
ール-4,5-ビスリン酸3-キナーゼ触媒サブユニットγアイソフォーム)、M(CH2)4-K807-(ホ
スファチジルイノシトール-4,5-ビスリン酸3-キナーゼ触媒サブユニットγアイソフォー
ム)、M(CH2)4-K833-(ホスファチジルイノシトール-4,5-ビスリン酸3-キナーゼ触媒サブユ
ニットγアイソフォーム)、M(CH2)4-K890-(ホスファチジルイノシトール-4,5-ビスリン酸
3-キナーゼ触媒サブユニットγアイソフォーム)、M(CH2)4-K086-(3-ホスホイノシチド依
存性プロテインキナーゼ1)、M(CH2)4-K163-(3-ホスホイノシチド依存性プロテインキナー
ゼ1)、M(CH2)4-K169-(3-ホスホイノシチド依存性プロテインキナーゼ1)、及びM(CH2)4-K2
07-(3-ホスホイノシチド依存性プロテインキナーゼ1)からなる群より選択される。
【０２２１】
他の実施態様において、式XIV-a、XIV-d、XIV-h、又はXIV-iのラジカルの水素の除去か
ら生じる二価又は三価の部分は、式XV-a、XV-b、XV-c、XV-d、XV-e、XV-f、又はXV-gの部
分である；
【化１２７】
2016195596.tif 000166
(式中、
m4は、1〜2の整数であり；
R2、R3、R4、R5、及びR6の各々は、独立して、水素又はC1-C6アルキルであり；ここで
、
任意に適切であるならば、R2、R3、R4、R5、及びR6のいずれか2つは、一緒に連結し
、3-〜8-員の炭素環又は複素環を形成することができ；且つ
C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、
又は-C(=S)-により置き換えられることができ；
C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在する場合、独立して、
【化１２８】
2016195596.tif 000167
により置き換えられることができ；
Mは、「*」と印を付けられたY1の位置に結合され；且つ
テザーは、「**」と印を付けられたY1の位置に結合される。)。
【０２２２】
一部の実施態様において、式XV-a、XV-b、XV-c、XV-d、XV-e、XV-f、又はXV-gの二価の
部分は、式XV-h、XV-i、XV-j、XV-k、XV-l、XV-m、XV-n、XV-o、XV-p、XV-q、XV-r、XV-s
、又はXV-tの二価の部分である；
【化１２９】
2016195596.tif 000168
(式中、
Mは、「*」と印を付けられたY1の位置に結合され；且つ
テザーは、「**」と印を付けられたY1の位置に結合される。)。
【０２２３】
先に一般に定義されたように、Rwhは弾頭基である。いずれか特定の理論に結びつけら
れることを意図するものではないが、そのようなRwh基、すなわち弾頭基は、例えば、非
限定的にXIAP、PDPK-1、HCVプロテアーゼ、及びPI3Kなどの結合ドメイン内の重要なリシ
ン残基への共有結合に特に適していると考えられる。当業者は、XIAP、PDPK-1、HCVプロ
テアーゼ、及びPI3K、並びにそれらの変異体は、各タンパク質の結合ドメイン内に少なく
とも1個のリシン残基を有することを理解するであろう。
【０２２４】
いくつかの実施態様において、本発明の化合物は、発明の化合物がXIAPのK297リシン残
基を標的化することを特徴とする弾頭基を有する。いくつかの実施態様において、本発明
の化合物は、発明の化合物がPDPK-1のK86リシン残基を標的化することを特徴とする弾頭
基を有する。いくつかの実施態様において、本発明の化合物は、発明の化合物がPDPK-1の
K169リシン残基を標的化することを特徴とする弾頭基を有する。いくつかの実施態様にお
いて、本発明の化合物は、発明の化合物がPDPK-1のK173リシン残基を標的化することを特
徴とする弾頭基を有する。他の実施態様において、本発明の化合物は、発明の化合物がHC
VプロテアーゼのK136リシン残基を標的化することを特徴とする弾頭基を有する。他の実
施態様において、本発明の化合物は、発明の化合物がPI3KβのK777リシン残基を標的化す
ることを特徴とする弾頭基を有する。他の実施態様において、本発明の化合物は、発明の
化合物がPI3KγのK802リシン残基を標的化することを特徴とする弾頭基を有する。他の実
施態様において、本発明の化合物は、発明の化合物がPI3KγのK890リシン残基を標的化す
ることを特徴とする弾頭基を有する。
【０２２５】
従って一部の実施態様において、Rwhは、-T-Rwh部分が、リシン残基に共有結合し、そ
れにより酵素を不可逆的に阻害することが可能であることを特徴としている。
【０２２６】
別の態様に従い、本発明は、K297でインヒビターに共有結合されたXIAP又はそれらの変
異体を含む複合体を提供する。一部の実施態様において、インヒビター部分は、リンカー
部分を介して結合される。いくつかの実施態様において、本発明は、式K297-リンカー-イ
ンヒビター部分の複合体を提供する。当業者は、この「リンカー」基は、本明細書に説明
されたように-T-Rwhに対応することを認めるであろう。従っていくつかの実施態様におい
て、リンカー基は、先に定義され且つ本明細書において部類及び下位部類において説明さ
れた-T-Rwhとして定義された。しかしこのリンカー基は二価であり、従って対応する-T-R
wh基も同じく、弾頭とXIAP又はそれらの変異体のK297との反応の結果として二価であるこ
とが意図されることは理解されるであろう。
【０２２７】
XIAPに関するいくつかの実施態様において、インヒビター部分は、式Aの化合物である
：
【化１３０】
2016195596.tif 000169
(式中、
V及びWは、各々独立して、-(CR14R15)qX3(CR16R17)r-であり；
p、q及びrは、各々独立して、0、1、2、3、又は4であり；
X3は、-CR18R19-、又は-NR20-であり；且つ
R21及びR22は、各々独立して、水素又はC1-C6アルキルであり；
R23は、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、アミノ、又はニトロであり；ここで、C1-C6
アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S
)-により任意に置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在
する場合、独立して、
【化１３１】
2016195596.tif 000170
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；且つ
任意にR21及びR23は一緒に、4-〜8-員の炭素環又は複素環を形成することができる。)
。
【０２２８】
従って、いくつかの実施態様において、本発明は、下記式の複合体を提供する：
【化１３２】
2016195596.tif 000171
(式中、R12、R13、R21、R22、R23、V、W、及びpは、式Aについて先に定義されたものであ
る。)。
【０２２９】
いくつかの実施態様において、インヒビター部分は、式Bの化合物である：
【化１３３】
2016195596.tif 000172
(式中、
X4は、-CR33-又は-N-であり；
p及びsは、各々独立して、0、1、2、3、又は4であり；
R12、R13、R21、R22、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31、R32、及びR33は、各
々独立して、水素又はC1-C6アルキルであり；
R23は、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、アミノ、又はニトロであり；ここで、C1-C6
アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S
)-により任意に置き換えられることができ；C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在
する場合、独立して、
【化１３４】
2016195596.tif 000173
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；且つ
任意にR21及びR23は一緒に、4-〜8-員の炭素環又は複素環を形成することができる。)
。
【０２３０】
従っていくつかの実施態様において、本発明は、下記式の複合体を提供する：
【化１３５】
2016195596.tif 000174
(式中、X4、p、s、R12、R13、R21、R22、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31、R32
、R33、及びR23は、式Bについて先に定義されたものである。)。
【０２３１】
(PDPK-1)
いくつかの実施態様において、本発明の化合物は、発明の化合物がPDPK-1のK86リシン
残基を標的化することを特徴とする弾頭基を有する。いくつかの実施態様において、本発
明の化合物は、発明の化合物がPDPK-1のK169リシン残基を標的化することを特徴とする弾
頭基を有する。いくつかの実施態様において、本発明の化合物は、発明の化合物がPDPK-1
のK173リシン残基を標的化することを特徴とする弾頭基を有する。
【０２３２】
一部の実施態様において、Rwhは、-T-Rwh部分が、リシン残基に共有結合し、それによ
り酵素を不可逆的に阻害することが可能であることを特徴としている。いくつかの実施態
様において、リシン残基は、PDPK-1又はそれらの変異体のK86リシン残基である。
【０２３３】
別の態様に従い、本発明は、K86でインヒビターに共有結合された、PDPK-1又はそれら
の変異体を含む複合体を提供する。一部の実施態様において、インヒビターは、リンカー
部分を介して共有結合される。
【０２３４】
いくつかの実施態様において、本発明は、式K86-リンカー-インヒビター部分の複合体
を提供する。いくつかの実施態様において、本発明は、式K169-リンカー-インヒビター部
分の複合体を提供する。いくつかの実施態様において、本発明は、式K173-リンカー-イン
ヒビター部分の複合体を提供する。当業者は、この「リンカー」基は、本明細書に説明さ
れたように-T-Rwhに対応することを認めるであろう。従っていくつかの実施態様において
、リンカー基は、先に定義され且つ本明細書において部類及び下位部類において説明され
た-T-Rwhとして定義される。しかしこのリンカー基は二価であり、従って対応する-T-Rwh
基も同じく、弾頭とPDPK-1又はそれらの変異体のK86、K169、又はK173との反応の結果と
して二価であることが意図されることは理解されるであろう。
【０２３５】
PDPK-1に関するいくつかの実施態様において、インヒビター部分は、式Cの化合物であ
る：
【化１３６】
2016195596.tif 000175
(式中、
B6及びB7は、各々独立して、CR7又はNであり；
R69は、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、又は-NH(CO)NR78R79であり
；
R70は、水素、C1-C6アルキル、ハロゲン、アミノ、ニトロであり；
R7、R71、R72、R73、R74、R75、R76、R77、R78、及びR79は、各々独立して、水素又はC
1-C6アルキルであり；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-
、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、又は-C(=S)-により置き換えられることができ；C1-C
6アルキルの1個以上のメチン基は、存在する場合、独立して、
【化１３７】
2016195596.tif 000176
により置き換えられることができ；
任意にR78及びR79は一緒に、4-〜8-員の炭素環又は複素環を形成し；且つ
pは、0〜4の整数であり、uは、1〜4の整数である。)。
【０２３６】
従っていくつかの実施態様において、本発明は、下記式の複合体を提供する：
【化１３８】
2016195596.tif 000177
(式中、B6、B7、R69、R70、R7、R71、R72、R73、R74、R75、R76、R77、R78、R79、R1及び
pは、式Cについて先に定義されたものであり、且つKxxxは、K86、K169、又はK173である
。)。
【０２３７】
一部の実施態様において、Kxxxは、PDPK-1のK86である。
【０２３８】
一部の実施態様において、Kxxxは、PDPK-1のK169である。
【０２３９】
一部の実施態様において、Kxxxは、PDPK-1のK173である。
【０２４０】
PDPK-1に関するいくつかの実施態様において、インヒビター部分は、式Dの化合物であ
る：
【化１３９】
2016195596.tif 000178
(式中、Rvは、H、任意に置換されたC1-C3分岐鎖若しくは直鎖アルキル、又は任意に置換
されたC1-C3分岐鎖若しくは直鎖アシルである。)。
【０２４１】
従っていくつかの実施態様において、本発明は、下記式の複合体を提供する：
【化１４０】
2016195596.tif 000179
(式中、Rvは、式Dについて先に定義されたものである。)。
【０２４２】
従っていくつかの実施態様において、本発明は、下記式の複合体を提供する：
【化１４１】
2016195596.tif 000180
(式中、Rvは、式Dについて先に定義されたものである。)。
【０２４３】
従っていくつかの実施態様において、本発明は、下記式の複合体を提供する：
【化１４２】
2016195596.tif 000181
(式中、Rvは、式Dについて先に定義されたものである。)。
【０２４４】
(HCVプロテアーゼ)
いくつかの実施態様において、本発明の化合物は、発明の化合物がHCVプロテアーゼのK
136リシン残基を標的化することを特徴とする弾頭基を有する。
【０２４５】
一部の実施態様において、Rwhは、-T-Rwh部分が、リシン残基に共有結合し、それによ
り酵素を不可逆的に阻害することが可能であることを特徴としている。いくつかの実施態
様において、リシン残基は、HCVプロテアーゼ又はそれらの変異体のK136リシン残基であ
る。
【０２４６】
別の態様に従い、本発明は、K136でインヒビターに共有結合されたHCVプロテアーゼ又
はそれらの変異体を含む複合体を提供する。一部の実施態様において、インヒビターは、
リンカー部分を介して共有結合される。
【０２４７】
いくつかの実施態様において、本発明は、式K136-リンカー-インヒビター部分の複合体
を提供する。当業者は、この「リンカー」基は、本明細書に説明されたように-T-Rwhに対
応することを認めるであろう。従っていくつかの実施態様において、リンカー基は、先に
定義され且つ本明細書において部類及び下位部類において説明された-T-Rwhとして定義さ
れる。しかしこのリンカー基は二価であり、従って対応する-T-Rwh基も同じく、弾頭とHC
Vプロテアーゼ又はそれらの変異体のK136との反応の結果として二価であることが意図さ
れることは理解されるであろう。
【０２４８】
HCVプロテアーゼに関するいくつかの実施態様において、インヒビター部分は、E、F、
又はGの化合物である：
【化１４３】
2016195596.tif 000182
(式中、
R90、R94、R95、R96、R97、R98、R99、R100、R102、R104、R105、R106、R107、R108、R
109、R110、R111、R112、R113、及びR114は、各々独立して、水素又はC1-C6アルキルであ
り；ここで、C1-C6アルキルの1個以上のメチレン基は、-NR1-、-O-、-C(O)-、-S-、-SO-
、-SO2-、又は-C(=S)-により任意に置き換えられることができ；
R103は、水素、C1-C6アルキル、又はC2-C8アルケニルであり；
C1-C6アルキルの1個以上のメチン基は、存在する場合、独立して、
【化１４４】
2016195596.tif 000183
により置き換えられることができ；
R1は、水素又はC1-C8アルキルであり；
R101の各々は、独立して、水素、C1-C6アルキル、C2-C8アルケニル、ハロゲン、アミノ
、ニトロ、任意に置換されたアリール又はヘテロアリールであり；n6は、0〜4の整数であ
り；且つ、n8は、0〜2の整数である。)。
【０２４９】
従っていくつかの実施態様において、本発明は、下記式の複合体を提供する：
【化１４５】
2016195596.tif 000184
(式中、R1、R90、R94、R95、R96、R97、R98、R99、R100、R101、R102、R103、R104、R105
、R106、R107、R108、R109、R110、R111、R112、R113、R114、n6、及びn8は、式Eについ
て先に定義されたものである。)。
【０２５０】
従っていくつかの実施態様において、本発明は、下記式の複合体を提供する：
【化１４６】
2016195596.tif 000185
(式中、R1、R90、R94、R95、R96、R97、R98、R99、R100、R101、R102、R103、R104、R105
、R106、R107、R108、R109、R110、R111、R112、R113、R114、n6、及びn8は、式Fについ
て先に定義されたものである。)。
【０２５１】
従っていくつかの実施態様において、本発明は、下記式の複合体を提供する：
【化１４７】
2016195596.tif 000186
(式中、R1、R90、R94、R95、R96、R97、R98、R99、R100、R101、R102、R103、R104、R105
、R106、R107、R108、R109、R110、R111、R112、R113、R114、n6及びn8は、式Gについて
先に定義されたものである。)。
【０２５２】
(PI3K)
いくつかの実施態様において、本発明の化合物は、発明の化合物がPI3KβのK777リシン
残基を標的化することを特徴とする弾頭基を有する。いくつかの実施態様において、本発
明の化合物は、発明の化合物がPI3KγのK802リシン残基を標的化することを特徴とする弾
頭基を有する。いくつかの実施態様において、本発明の化合物は、発明の化合物がPI3Kγ
のK890リシン残基を標的化することを特徴とする弾頭基を有する。
【０２５３】
一部の実施態様において、Rwhは、-T-Rwh部分が、リシン残基に共有結合し、それによ
り酵素を不可逆的に阻害することが可能であることを特徴としている。いくつかの実施態
様において、リシン残基は、PI3Kβ又はそれらの変異体のK777リシン残基である。
【０２５４】
別の態様に従い、本発明は、K777でインヒビターに共有結合された、PI3Kβ又はそれら
の変異体を含む複合体を提供する。一部の実施態様において、インヒビター部分は、リン
カー部分を介して結合される。
【０２５５】
いくつかの実施態様において、本発明は、式K777-リンカー-インヒビター部分の複合体
を提供する。いくつかの実施態様において、本発明は、式K802-リンカー-インヒビター部
分の複合体を提供する。いくつかの実施態様において、本発明は、式K890-リンカー-イン
ヒビター部分の複合体を提供する。当業者は、この「リンカー」基は、本明細書に説明さ
れたように-T-Rwhに対応することを認めるであろう。従っていくつかの実施態様において
、リンカー基は、先に定義され且つ本明細書において部類及び下位部類において説明され
た-T-Rwhとして定義される。しかしこのリンカー基は二価であり、従って対応する-T-Rwh
基も同じく、弾頭とPI3KβのK777との反応から、若しくは弾頭とPI3Kγ又はそれらの変異
体のK802又はK890との反応の結果として二価であることが意図されることは理解されるで
あろう。
【０２５６】
PI3Kに関するいくつかの実施態様において、インヒビター部分は、式H、J又はKの化合
物である：
【化１４８】
2016195596.tif 000187
(式中、
n、m、p、及びqは、各々独立して、0、1、2、3であり；但し、n及びqは同時に0ではな
く、且つm及びqは同時に0ではないことを条件とし；
A2は、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1又は2個のヘテロ原子を有す
る4〜8員の飽和又は部分的不飽和の複素環、又は少なくとも1個の窒素、少なくとも1個の
酸素、及び任意に窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜2個の追加のヘテ
ロ原子を有する5〜10員の飽和又は部分的不飽和の架橋された二環式複素環から選択され
た任意に置換された環であり；
B'は、フェニル、8-〜10-員の二環式アリール環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立
して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する5-〜6-員のヘテロアリール環、又は窒素、酸
素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する8-〜10-員の二環
式ヘテロアリール環から選択された任意に置換された基；又は、-T-Rwhであり；且つ
C2は、水素、或いは3-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の炭素環、7-〜10-員の飽和又は
部分的不飽和の二環式炭素環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜2個
のヘテロ原子を有する4-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の複素環、窒素、酸素、若しくは
硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する7-〜10-員の飽和又は部分的不
飽和の二環式複素環、フェニル、8-〜10-員の二環式アリール環、窒素、酸素、若しくは
硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する5-〜6-員のヘテロアリール環、
又は窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する8-〜
10-員の二環式ヘテロアリール環から選択された任意に置換された環である。)。
【０２５７】
従っていくつかの実施態様において、本発明は、下記式の複合体を提供する：
【化１４９】
2016195596.tif 000188
(式中、m、n、o、p及びB'は、式Hについて先に定義されたものであり、且つKxxxは、PI3K
βのK777、又はPI3KγのK802若しくはK890である。)。
【０２５８】
一部の実施態様において、Kxxxは、PI3KβのK777である。
【０２５９】
一部の実施態様において、Kxxxは、PI3KγのK802である。
【０２６０】
他の実施態様において、Kxxxは、PI3KγのK890である。
【０２６１】
従っていくつかの実施態様において、本発明は、下記式の複合体を提供する：
【化１５０】
2016195596.tif 000189
(式中、B'及びA2は、式Jについて先に定義されたものであり、且つKxxxは、PI3KβのK777
、又はPI3KγのK802若しくはK890である。)。
【０２６２】
一部の実施態様において、Kxxxは、PI3KβのK777である。
【０２６３】
一部の実施態様において、Kxxxは、PI3KγのK802である。
【０２６４】
他の実施態様において、Kxxxは、PI3KγのK890である。
【０２６５】
従っていくつかの実施態様において、本発明は、下記式の複合体を提供する：
【化１５１】
2016195596.tif 000190
(式中、A2及びC2は、式Kについて先に定義されたものであり、且つKxxxは、PI3KβのK777
、又はPI3KγのK802若しくはK890である。)。
【０２６６】
一部の実施態様において、Kxxxは、PI3KβのK777である。
【０２６７】
一部の実施態様において、Kxxxは、PI3KγのK802である。
【０２６８】
他の実施態様において、Kxxxは、PI3KγのK890である。
【０２６９】
PI3Kに関するいくつかの実施態様において、インヒビター部分は、式L又はMの化合物で
ある：
【化１５２】
2016195596.tif 000191
(式中、
R204は、水素、或いはC1-6脂肪族、-(CH2)m-(3-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の炭素
環)、-(CH2)m-(7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環式炭素環)、-(CH2)m-(窒素、酸
素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜2個のヘテロ原子を有する4-〜7-員の飽和又
は部分的不飽和の複素環)、-(CH2)m-(窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された
1〜3個のヘテロ原子を有する7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環式複素環)、-(CH2)
m-フェニル、-(CH2)m-(8-〜10-員の二環式アリール環)、-(CH2)m-(窒素、酸素、若しくは
硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する5-〜6-員のヘテロアリール環)
、又は-(CH2)m-(窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子
を有する、8-〜10-員の二環式ヘテロアリール環)から選択された任意に置換された基であ
り；
R205及びR206の各々は、独立して、-R"、ハロゲン、-NO2、-CN、-OR"、-SR"、-N(R")2
、-C(O)R"、-CO2R"、-C(O)C(O)R"、-C(O)CH2C(O)R"、-S(O)R"、-S(O)2R"、-C(O)N(R")2、
-SO2N(R")2、-OC(O)R"、-N(R")C(O)R"、-N(R")N(R")2、-N(R")C(=NR")N(R")2、-C(=NR")N
(R")2、-C=NOR"、-N(R")C(O)N(R")2、-N(R")SO2N(R")2、-N(R")SO2R"、又は-OC(O)N(R")2
であり；
R"の各々は、独立して、水素、或いはC1-6脂肪族、3-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の
炭素環、7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環式炭素環、窒素、酸素、若しくは硫黄
から独立して選択された1〜2個のヘテロ原子を有する4-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の
複素環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する
7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環式複素環、フェニル、8-〜10-員の二環式アリー
ル環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する5-
〜6-員のヘテロアリール環、又は窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4
個のヘテロ原子を有する8-〜10-員の二環式ヘテロアリール環から選択された任意に置換
された基であるか；又は
同一窒素上の2個のR"基は、それらが結合した窒素と一緒に、窒素、酸素、若しくは硫
黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する任意に置換された5〜8員の飽和、
部分的不飽和、又は芳香族の環を形成し；
mは、0〜6までを含む整数であり；
nの各々は、独立して0、1、又は2であり；且つ
環A5は、1〜2個の窒素を有する、任意に置換された6-員の複素環又はヘテロアリール環
である。)。
【０２７０】
従っていくつかの実施態様において、本発明は、下記式の複合体を提供する：
【化１５３】
2016195596.tif 000192
(式中、R204、R205、R206、n、及びA5は、式Lについて先に定義されたものであり、且つK
xxxは、PI3KβのK777、又はPI3KγのK802若しくはK890である。)。
【０２７１】
一部の実施態様において、Kxxxは、PI3KβのK777である。
【０２７２】
一部の実施態様において、Kxxxは、PI3KγのK802である。
【０２７３】
他の実施態様において、Kxxxは、PI3KγのK890である。
【０２７４】
従っていくつかの実施態様において、本発明は、下記式の複合体を提供する：
【化１５４】
2016195596.tif 000193
(式中、R204、R205、R206、n、及びA5は、式Mについて先に定義されたものであり、且つK
xxxは、PI3KβのK777、又はPI3KγのK802若しくはK890である。)。
【０２７５】
一部の実施態様において、Kxxxは、PI3KβのK777である。
【０２７６】
一部の実施態様において、Kxxxは、PI3KγのK802である。
【０２７７】
他の実施態様において、Kxxxは、PI3KγのK890である。
【０２７８】
PI3Kに関するいくつかの実施態様において、インヒビター部分は、式Nの化合物である
：
【化１５５】
2016195596.tif 000194
(式中、
R201は、水素又はC1-6アルキルであり；
R202は、水素、或いはC1-6アルキル、C1-6アルコキシ、若しくは(C1-6アルキレン)-R20
3から選択された任意に置換された基であるか；又は
R201及びR202は、介在する炭素と一緒に、3-〜7-員の炭素環、又は窒素、酸素、若しく
は硫黄から独立して選択された1〜2個のヘテロ原子を有する4-〜7-員の複素環から選択さ
れた任意に置換された環を形成し；
R203は、3-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の炭素環、7-〜10-員の飽和又は部分的不飽
和の二環式の炭素環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜2個のヘテロ
原子を有する4-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の複素環、窒素、酸素、若しくは硫黄から
独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二
環式複素環、フェニル、8-〜10-員の二環式のアリール環、窒素、酸素、若しくは硫黄か
ら独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する5-〜6-員のヘテロアリール環、又は窒
素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する8-〜10-員
の二環式のヘテロアリール環であり；且つ
環A6は、存在しないか、或いは窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜2
個のヘテロ原子を有する4-〜7-員の複素環、又は窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して
選択された1〜3個のヘテロ原子を有する5-〜6-員のヘテロアリール環から選択された任意
に置換された基である。)。
【０２７９】
従っていくつかの実施態様において、本発明は、下記式の複合体を提供する：
【化１５６】
2016195596.tif 000195
(式中、R201、R202、R203及びA6は、式Nについて先に定義されたものであり、且つKxxxは
、PI3KβのK777、又はPI3KγのK802若しくはK890である。)。
【０２８０】
一部の実施態様において、Kxxxは、PI3KβのK777である。
【０２８１】
一部の実施態様において、Kxxxは、PI3KγのK802である。
【０２８２】
他の実施態様において、Kxxxは、PI3KγのK890である。
【０２８３】
PI3Kに関するいくつかの実施態様において、インヒビター部分は、式Oの化合物である
：
【化１５７】
2016195596.tif 000196
(式中、
R205及びR206の各々は、独立して、-R"、ハロゲン、-NO2、-CN、-OR"、-SR"、-N(R")2
、-C(O)R"、-CO2R"、-C(O)C(O)R"、-C(O)CH2C(O)R"、-S(O)R"、-S(O)2R"、-C(O)N(R")2、
-SO2N(R")2、-OC(O)R"、-N(R")C(O)R"、-N(R")N(R")2、-N(R")C(=NR")N(R")2、-C(=NR")N
(R")2、-C=NOR"、-N(R")C(O)N(R")2、-N(R")SO2N(R")2、-N(R")SO2R"、又は-OC(O)N(R")2
であり；
R"の各々は、独立して、水素、或いはC1-6脂肪族、3-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の
炭素環、7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環式炭素環、窒素、酸素、若しくは硫黄
から独立して選択された1〜2個のヘテロ原子を有する4-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の
複素環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する
7-〜10-員の飽和又は部分的不飽和の二環式複素環、フェニル、8-〜10-員の二環式アリー
ル環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する5-
〜6-員のヘテロアリール環、又は窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4
個のヘテロ原子を有する8-〜10-員の二環式ヘテロアリール環から選択された任意に置換
された基であるか；又は
任意に、同一窒素上の2個のR"基は、それらが結合した窒素と一緒に、窒素、酸素、若
しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する任意に置換された5〜8員
の飽和、部分的不飽和、又は芳香族の環を形成し；
mは、0〜6までを含む整数であり；
nの各々は、独立して0、1、又は2であり；且つ
環A5は、1〜2個の窒素を有する、任意に置換された6-員の複素環又はヘテロアリール環
である。)。
【０２８４】
従っていくつかの実施態様において、本発明は、下記式の複合体を提供する：
【化１５８】
2016195596.tif 000197
(式中、R205、R206、n及びA5は、式Oについて先に定義されたものであり、且つKxxxは、P
I3KβのK777、又はPI3KγのK802若しくはK890である。)。
【０２８５】
一部の実施態様において、Kxxxは、PI3KβのK777である。
【０２８６】
一部の実施態様において、Kxxxは、PI3KγのK802である。
【０２８７】
他の実施態様において、Kxxxは、PI3KγのK890である。
【０２８８】
PI3Kに関するいくつかの実施態様において、インヒビター部分は、式Pの化合物である
：
【化１５９】
2016195596.tif 000198
【０２８９】
従っていくつかの実施態様において、本発明は、下記式の複合体を提供する：
【化１６０】
2016195596.tif 000199
(式中、Kxxxは、PI3KβのK777、又はPI3KγのK802若しくはK890である。)。
【０２９０】
一部の実施態様において、Kxxxは、PI3KβのK777である。
【０２９１】
一部の実施態様において、Kxxxは、PI3KγのK802である。
【０２９２】
他の実施態様において、Kxxxは、PI3KγのK890である。
【０２９３】
本明細書において使用される用語「インヒビター部分」とは、タンパク質の活性部位に
結合するスカフォールド基をいう。そのようなスカフォールド基は、当該技術分野におい
て周知であり、且つ例えば、非限定的に、式VII、VIII、IX-a、IX-b、XI、XII、XVI、XVI
I、XVIII、XIX、XX、XXI、XXII、XXIII、XXXIV、XXV、XXVI、XXVII、XXVIII、XXIX、XXXV
I、及びXXXVIIに記載されたものを含む。
【０２９４】
当業者は、本明細書において説明された特定の化合物は、可逆的インヒビターであるこ
とを認めるであろう。いくつかの実施態様において、そのような化合物は、アッセイ比較
(assay comparator)化合物として有用である。一部の実施態様において、そのような可逆
的化合物は、本明細書に開示されたタンパク質又はそれらの変異体のインヒビターとして
有用であり、従って本明細書に説明された1種以上の障害の治療に有用である。一部の実
施態様において、提供される化合物は、提供された不可逆的インヒビターの可逆的対応物
である。
【０２９５】
(A.  薬理作用団の切断)
一部の実施態様において、薬理作用団が切断される場合、標的タンパク質への非共有的
結合に必要とされる薬理作用団の重要な要素は保持される。薬理作用団の重要な要素が結
合のために保持されるかどうかは、スカフォールドにより付与される非共有的親和性が、
リガンドの選択的結合、同じく共有結合をも更に付与するのに十分である場合に実証され
る。
【０２９６】
(1.  薬理作用団はGDC-0941である)
本開示に説明されたように、薬理作用団の切断に由来したスカフォールドの非限定的例
は、式XXX、XXXI、XXXII、XXXIII、XXXIV、及びXXXVにおいて以下に示されている。
【０２９７】
式XXX、XXXI、及びXXXIIにおいて、スカフォールドは、薬理作用団GDC-0941の切断を基
にしている：
【化１６１】
2016195596.tif 000200
(式中、矢印は、切断の可能な部位を示している。)。
【０２９８】
GDC-0941の切断形の非限定的例のひとつは、式XXXにより説明される：
【化１６２】
2016195596.tif 000201
(式中、
R200は、切断部位に配置され、且つ-テザー-Rwhであり、ここでテザー及びRwhは、式I
について定義されたものであり；且つ
環B'は、フェニル、8-〜10-員の二環式アリール環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独
立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する5-〜6-員のヘテロアリール環、又は窒素、
酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する8-〜10-員の二
環式ヘテロアリール環から選択された任意に置換された基である。)。
【０２９９】
前記式XXXのスカフォールドの非限定的例を、以下に示す：
【化１６３】
2016195596.tif 000202
。
【０３００】
本発明の開示に記載されたような切断されているスカフォールドの別の非限定的例は、
下記式XXXIに示されている：
【化１６４】
2016195596.tif 000203
(式中、
R200は、切断部位に配置され、且つ-テザー-RWHであり、ここでテザー及びRwhは、式I
に定義されたものであり；且つ
環B'は、フェニル、8-〜10-員の二環式アリール環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独
立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する5-〜6-員のヘテロアリール環、又は窒素、
酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する8-〜10-員の二
環式ヘテロアリール環から選択された任意に置換された基である。)。
【０３０１】
前記式XXXIのスカフォールドの非限定的例を、以下に示す：
【化１６５】
2016195596.tif 000204
【０３０２】
本開示に記載されたような切断されているスカフォールドの別の非限定的例は、下記式
XXXIIに示されている：
【化１６６】
2016195596.tif 000205
(式中、
R200は、切断部位に配置され、且つ-テザー-RWHであり、ここでテザー及びRwhは、式I
の実施態様に先に定義されたものであり；
T2は、共有結合、又は二価の直鎖状若しくは分岐状の飽和若しくは不飽和のC1-6炭化水
素鎖であり、ここでT2の1個以上のメチレン単位は、-O-、-S、-N(R1)-、-C(O)-、-OC(O)-
、-C(O)O-、-C(O)N(R1)-、-N(R1)C(O)-、-N(R1)C(O)N(R1)-、-SO2-、-SO2N(R1)-、-N(R1)
SO2-、又は-N(R1)SO2N(R1)-により任意に交換され；
C2は、水素、或いは3-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の炭素環、7-〜10-員の飽和又は
部分的不飽和の二環式炭素環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜2個
のヘテロ原子を有する4-〜7-員の飽和又は部分的不飽和の複素環、窒素、酸素、若しくは
硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する7-〜10-員の飽和又は部分的不
飽和の二環式複素環、フェニル、8-〜10-員の二環式アリール環、窒素、酸素、若しくは
硫黄から独立して選択された1〜3個のヘテロ原子を有する5-〜6-員のヘテロアリール環、
又は窒素、酸素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する8-〜
10-員の二環式ヘテロアリール環から選択された任意に置換された環であり；且つ
B'は、フェニル、8-〜10-員の二環式アリール環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立
して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する5-〜6-員のヘテロアリール環、又は窒素、酸
素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する8-〜10-員の二環
式ヘテロアリール環から選択された任意に置換された基である。)。
【０３０３】
前記式XXXIIのスカフォールドの非限定的例は、以下を含む：
【化１６７】
2016195596.tif 000206
【０３０４】
(2.  ジヒドロイミダゾキナゾリンの切断を介した式XXXIIIのスカフォールド)
別の実施態様において、式XXXIIIにより説明されたスカフォールドは、薬理作用団ジヒ
ドロイミダゾキナゾリンの切断を基にしている：
【化１６８】
2016195596.tif 000207
(式中、矢印は、切断が可能である部位を示している。)。
【０３０５】
本発明の開示に記載されたような切断されているスカフォールドの別の非限定的例は、
下記式XXXIIIに示されている：
【化１６９】
2016195596.tif 000208
(式中、
R200は、切断部位であり、且つ-テザー-RWHであり、ここでテザー及びRwhは、先に定義
されたものであり；
X10は、水素、アルコキシ、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルコキシであり；
X11は、フェニル、8-〜10-員の二環式アリール環、窒素、酸素、若しくは硫黄から独立
して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する5-〜6-員のヘテロアリール環、又は窒素、酸
素、若しくは硫黄から独立して選択された1〜4個のヘテロ原子を有する8-〜10-員の二環
式ヘテロアリール環から選択された任意に置換された基である。)。
【０３０６】
(3.  SM-337及びSM-122の切断を介した式XXXIV及び式XXXVのIAPスカフォールド)
別の実施態様において、式XXXIV及び式XXXVにより説明されたスカフォールドは、薬理
作用団SM-337及びSM-122の切断を基にしている：
【化１７０】
2016195596.tif 000209
(式中、矢印は、切断が可能である部位を示し；且つ
R**は、フェニルアセトアミドである。)。
【０３０７】
SM-337の切断形の化合物は、式XXXIVにより説明される：
【化１７１】
2016195596.tif 000210
(式中、R**は、フェニルアセトアミドであり、且つ矢印は、-T-RWHの結合の部位を示し、
その両方共本明細書に説明されているものである。)。
【０３０８】
SM-122の切断形の化合物は、式XXXVにより説明される：
【化１７２】
2016195596.tif 000211
(式中、矢印は、-T-RWHの結合の部位を示し；ここで、Tはテザーであり；且つ、Rwhは弾
頭であり、その両方共本明細書に説明されているものである。)。
【０３０９】
(B.  使用方法)
(I.  IAP)
X-連鎖アポトーシス阻害タンパク質(XIAP)は、アポトーシス阻害タンパク質(IAP)ファ
ミリーの一員である。他のIAPファミリーメンバーは、cIAP1、cIAP2及びML-IAPを含む。I
APは、最初にバキュロウイルスにおいて同定されたが、XIAPは、哺乳動物において発見さ
れた相同タンパク質のひとつである。これは、X染色体上の273塩基対部位により最初に発
見されたので、このように称される。
【０３１０】
XIAPの脱制御は、癌、神経変性障害、及び自己免疫を生じ得る。高い割合のXIAPは、腫
瘍マーカーとして機能することができる。肺癌NCI-H460の発達において、XIAPの過剰発現
は、カスパーゼを阻害するのみではなく、シトクロムcのアポトーシス活性も停止する(ア
ポトーシス)。XIAPは、前立腺癌の発達において、前立腺上皮において過剰発現された4種
のIAPのひとつであり、これは全てのIAPを阻害する分子が効果的治療に必要であることを
示している。
【０３１１】
XIAP脱制御に関連した疾患及び障害の中には、急性骨髄性白血病(AML)、アジソン病、
副腎白質ジストロフィー(ALD)、アルコール依存症、アレキサンダー病、円形脱毛症(alop
ecia greata)、アルパーズ病、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症(ルー・ゲーリッ
ク病)、脈管炎、強直性脊椎炎、抗リン脂質抗体症候群、毛細血管拡張性運動失調、自閉
症、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性肝炎、バッテン病(シュピールマイヤー-フォーク
ト-シェーグレン-バッテン病としても公知)、ベーチェット症候群、バージャー病、牛海
綿状脳症(BSE)、水疱性類天疱瘡、カナバン病、心筋症、シャーガス病、慢性疲労症候群(
CFS、CFIDS)、慢性炎症性多発性ニューロパシー、慢性閉塞性肺疾患、チャーグ・ストラ
ウス症候群、コケーン症候群、セリアック病、大脳皮質基底核変性症、CREST症候群、ク
ロイツフェルト・ヤコブ病、クローン病(突発性炎症性腸疾患又はIBDの2型のひとつ)、皮
膚筋炎、1型糖尿病、子宮内膜症、致死性家族性不眠症、線維筋痛、巨細胞性動脈炎、前
頭側頭葉変性症、グッドパスチャー症候群、グレーヴス病、ギランバレー症候群(GBS)、
橋本甲状腺炎、汗腺膿瘍、HIV関連認知症、ハンチントン病、特発性肺線維症、特発性血
小板減少性紫斑病(ITP)、特発性血小板減少性紫斑病、IgA腎症、間質性膀胱炎、川崎病、
ケネディ病、クラッベ病、乳酸アシドーシス・脳卒中(MELAS)、レヴィー小体認知症、扁
平苔癬、肺癌、紅斑性狼瘡、マチャド・ジョセフ病(脊髄小脳性運動失調症3型)、悪性リ
ンパ腫、悪性神経膠腫、メニエール病、ミトコンドリア脳症、混合性結合組織病、限局性
強皮症、多系統萎縮症、多発性硬化症、重症筋無力症、発作性睡眠、神経ボレリア症、神
経ミオトニー、ニーマン・ピック病、パーキンソン病、ペリツェウス・メルツバッハー病
、尋常性天疱瘡、悪性貧血、ピック病、結節性多発性動脈炎、リウマチ性多発性筋痛、多
発性筋炎、原発性胆汁性肝硬変症、原発性側索硬化症、プリオン病、乾癬、乾癬性関節炎
、レイノー病、レフサム病、ライター症候群、再発性多発性軟骨炎、進行性核上麻痺、リ
ウマチ熱、関節リウマチ(RA)、サンドホフ病、サルコイドーシス、シルダー病、統合失調
症、強皮症、シェーグレン症候群、シュピールマイアー−フォークト−シェーグレン−バ
ッテン病(バッテン病としても公知)、脊髄性筋萎縮症、脊髄小脳失調症(様々な特徴を持
つ多型)、スティール・リチャードソン・オルゼウスキー症候群、スティッフパーソン症
候群、悪性貧血に随伴する脊髄亜急性連合変性症、脊髄癆、側頭動脈炎(巨細胞性動脈炎
としても公知)、中毒性脳症及びX-連鎖性リンパ組織増殖性疾患(XLP)、潰瘍性大腸炎(特
発性炎症性腸疾患又はIBDの2型のひとつ)、ブドウ膜炎、血管炎、白斑、及びヴェーゲナ
ー肉芽腫症を含むが、これらに限定されるものではない。
【０３１２】
一部の実施態様において、本発明は、増殖性障害又は自己免疫疾患の治療又は予防に有
用な組成物を提供する。本組成物は、内服に適しており、且つ癌、神経変性障害、及び自
己免疫の治療又は予防に有用な有効量のIAPインヒビター及び生理的に許容し得る担体又
は媒介物を含有している。
【０３１３】
XIAPインヒビターは、対象における増殖性障害の治療又は予防又は重症度の軽減に有効
である量で投与することができる。増殖性障害は、悪性リンパ腫、悪性神経膠腫、X-連鎖
性リンパ組織増殖性疾患(XLP)、急性骨髄性白血病(AML)、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫
、軟骨肉腫、骨原性肉腫、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮腫
、滑液腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、脳腫瘍、結腸癌、結腸直
腸癌、腎癌、肝癌、膵癌、骨癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、食道癌、胃癌、口腔癌、鼻腔
癌、咽喉癌、頭頸部癌、扁平上皮癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、脂腺癌、乳頭状癌、乳
頭腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支癌、腎細胞癌腫、肝細胞癌、胆管癌、絨毛癌、精上皮
腫、胎生期癌、ウィルムス腫瘍、子宮頸癌、子宮癌、睾丸癌、小細胞肺癌、膀胱癌、肺癌
、中枢神経系癌、上皮癌、皮膚癌、メラノーマ、神経芽細胞腫、及び網膜芽細胞腫などの
固形腫瘍の癌を含むが、これらに限定されるものではない。
【０３１４】
一部の実施態様において、本発明は、自己免疫疾患の治療又は予防に有用なIAPインヒ
ビターの組成物を提供する。自己免疫疾患は、自己免疫性血液疾患(例えば、溶血性貧血
、再生不良性貧血、真正赤血球性貧血及び特発性血小板減少症)、全身性紅斑性狼瘡、関
節リウマチ、多発性軟骨炎、強皮症、ヴェゲナー肉芽腫症、皮膚筋炎、慢性活動性肝炎、
重症筋無力症、スティーブンス・ジョンソン症候群、特発性スプルー、急性膵炎、自己免
疫性炎症性腸疾患(例えば、潰瘍性大腸炎及びクローン病)、内分泌性眼障害、グレーヴス
病、サルコイドーシス、肺胞炎、慢性過敏性肺炎、多発性硬化症、原発性胆汁性肝硬変症
、ブドウ膜炎(前部及び後部)、乾性角結膜炎及び春季カタル、間質性肺線維症、乾癬性関
節炎及び糸球体腎炎(例えば特発性ネフローゼ症候群又は微小変化腎症を含む、ネフロー
ゼ症候群随伴性又は非随伴性)を含むが、これらに限定されるものではない。
【０３１５】
XIAPインヒビターは、対象における自己免疫疾患の治療又は予防に有効である量で投与
することができる。本発明の方法に従い治療することができる神経変性疾患は、アルツハ
イマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、及び脳虚血、並びに
外傷、グルタミン酸神経毒性及び低酸素症により引き起こされた神経変性疾患を含むが、
これらに限定されるものはない。
【０３１６】
cIAPインヒビターは、対象における増殖性障害の治療又は予防又は重症度の軽減に有効
である量で投与することができる。増殖性障害は、非ホジキンリンパ腫の一部分をなす粘
膜関連リンパ組織リンパ腫(MALTリンパ腫)、乳癌、前立腺癌、膵癌、肺癌、卵巣癌、結腸
癌、悪性神経膠腫、及び急性骨髄性白血病(AML)を含むが、これらに限定されるものでは
ない。
【０３１７】
(II.  PI3Kβ/γ)
ホスファチジルイノシトール3-キナーゼ(「PI3Kβ/γ」)経路は、細胞周期進行、増殖
、運動性、代謝及び生存を含む多くの細胞機能に対しその作用を発揮する中心的シグナル
伝達経路である(Maroneらの文献、Biochim. Biophys. Acta (2008) 1784: 159-185)。ク
ラスIA PI3K症例における受容体チロシンキナーゼの活性化、又はクラスIB PI3Kγ症例に
おけるG-タンパク質の活性化は、ホスファチジルイノシトール-(4,5)-二リン酸のリン酸
化を引き起こし、膜結合されたホスファチジルイノシトール-(3,4,5)-三リン酸を生じる
。後者は、ホスファチジルイノシトール-(3,4,5)-三リン酸が該キナーゼのプレクストリ
ン-相同(PH)ドメインへ結合することにより、様々なプロテインキナーゼの細胞質から細
胞膜への移行を促進する。
【０３１８】
PI3Kの下流標的であるキナーゼは、ホスファチジルイノシチド-依存型キナーゼ1(PI3K)
及びAkt(プロテインキナーゼB又はPKBとしても公知)を含む。そのようなキナーゼのリン
酸化は、次にGSK3、mTOR、PRAS40、FKHD、NF-κB、BAD、カスパーゼ-9、その他などのメ
ディエーターが関与する多くの他の経路の活性化又は不活性化を可能にする。これらの経
路は、細胞周期進行、細胞生存及びアポトーシス、細胞増殖、転写、翻訳、代謝、脱顆粒
、及び細胞運動などの多くの細胞プロセスに関与している。
【０３１９】
PI3K経路に関する重要な負のフィードバック機構は、ホスファチジルイノシトール-(3,
4,5)-三リン酸のホスファチジルイノシトール-(4,5)-二リン酸への脱リン酸化を触媒する
ホスファターゼPTENである。全ての固形腫瘍の60％以上で、PTENは非活性型に変異され、
PI3K経路の構成的活性化を可能にしている。多くの癌は固形腫瘍であるので、そのような
知見は、PI3K経路におけるPI3Kそれ自身又は個々の下流キナーゼの標的化は、多くの癌に
おいて脱制御を緩和するか又は無効にさえし、その結果正常な細胞の機能又は挙動を回復
するための有望なアプローチを提供することの証拠を提供している。
【０３２０】
PI3Kの機能の調節により治療可能である疾患及び障害は、患者における癌、神経線維腫
症、眼血管新生、脳卒中、糖尿病、肝腫大、心臓血管疾患、アルツハイマー病、嚢胞性線
維症、ウイルス疾患、自己免疫疾患、アテローム性動脈硬化症、再狭窄、乾癬、アレルギ
ー疾患、炎症、神経障害、血管新生障害、ホルモン-関連疾患、臓器移植の随伴状態、免
疫不全の障害、破壊的骨障害、増殖性障害、感染症、細胞死の随伴状態、トロンビン-誘
導性血小板凝集、慢性骨髄性白血病(CML)、肝臓疾患、T細胞活性化に関連した病的免疫状
態、及びCNS障害を含むが、これらに限定されるものではない。そのような増殖性疾患/障
害は、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨原性肉腫、脊索腫、血管肉腫、内皮
肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮腫、滑液腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、
横紋筋肉腫、脳腫瘍、結腸癌、結腸直腸癌、腎癌、肝癌、膵癌、骨癌、乳癌、卵巣癌、前
立腺癌、食道癌、胃癌、口腔癌、鼻腔癌、咽喉癌、頭頸部癌、扁平上皮癌、基底細胞癌、
腺癌、汗腺癌、脂腺癌、乳頭状癌、乳頭腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支癌、腎細胞癌、
肝細胞癌、胆管癌、絨毛癌、精上皮腫、胎生期癌、ウィルムス腫瘍、子宮頸癌、子宮癌、
睾丸癌、小細胞肺癌、膀胱癌、肺癌、中枢神経系の癌、上皮癌、皮膚癌、メラノーマ、神
経芽細胞腫、及び網膜芽細胞腫などの固形腫瘍の癌を含むが、これらに限定されるもので
はない。
【０３２１】
PI3Kインヒビターは、対象における増殖性障害の治療又は予防又は重症度の軽減に有効
である量で投与することができる。より詳細には、本発明の化合物は、良性若しくは悪性
腫瘍、脳、腎臓、肝臓、胆管、副腎、膀胱、乳房、食道、胃、胃腫瘍(gastric tumors)、
卵巣、結腸、直腸、前立腺、膵臓、肺(小細胞肺癌、非小細胞肺癌及び気管支肺胞癌を含
む)、胃、膣、子宮内膜、子宮、頸部及び外陰部、睾丸、尿生殖路、喉頭、皮膚、骨又は
甲状腺の癌腫、肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、多発性骨髄腫及びリンパ腫、消化管癌
、特に結腸癌又は結腸直腸腺腫、頭頸部腫瘍、中枢神経系の癌、上皮過増殖、乾癬、前立
腺肥大、新生物形成、上皮特性を持つ新生物形成、腺腫、腺癌、角化棘細胞腫、類表皮癌
、大細胞癌、非小細胞肺癌、リンパ腫、ホジキン病、乳癌、濾胞状癌、未分化癌、乳頭状
癌、精上皮腫、メラノーマ、又は白血病(ALL及びCMLを含む)から選択された増殖性疾患の
治療において有用である。他の疾患は、カウデン症候群、レルミット−デュドス病及びバ
ンナヤン−ゾーナーナ症候群、又はPI3K/PKB経路が異常に活性化されている疾患を含む。
【０３２２】
PI3Kインヒビターは、対象における神経変性疾患/障害の治療又は予防又は重症度の軽
減に有効である量で投与することができる。本発明の方法に従い治療することができる神
経変性疾患は、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン
病、及び脳虚血、並びに外傷、グルタミン酸神経毒性及び低酸素症により引き起こされた
神経変性疾患を含むが、これらに限定されるものではない。
【０３２３】
PI3Kインヒビターは、対象における自己免疫疾患の治療又は予防に有効である量で投与
することができる。自己免疫疾患は、自己免疫性血液疾患(例えば、溶血性貧血、再生不
良性貧血、真正赤血球性貧血及び特発性血小板減少症)、全身性紅斑性狼瘡、関節リウマ
チ、多発性軟骨炎、強皮症、ヴェゲナー肉芽腫症、皮膚筋炎、慢性活動性肝炎、重症筋無
力症、スティーブンス・ジョンソン症候群、特発性スプルー、急性膵炎、自己免疫性炎症
性腸疾患(例えば、潰瘍性大腸炎及びクローン病)、内分泌性眼障害、グレーヴス病、サル
コイドーシス、肺胞炎、慢性過敏性肺炎、多発性硬化症、原発性胆汁性肝硬変症、ブドウ
膜炎(前部及び後部)、乾性角結膜炎及び春季カタル、間質性肺線維症、乾癬性関節炎及び
糸球体腎炎(例えば特発性ネフローゼ症候群又は微小変化腎症を含む、ネフローゼ症候群
随伴性又は非随伴性)を含むが、これらに限定されるものではない。
【０３２４】
いくつかの実施態様において、本発明は、I型神経線維腫症(NF1)、II型神経線維腫症(N
F2)、シュワン細胞新生物(例えばMPNST)、又は神経鞘腫を予防、治療、又は重症度を軽減
するために、開示された化合物を使用する方法を提供する。
【０３２５】
更に、本明細書に開示された化合物は、PI3Kに関連した炎症性又は閉塞性気道疾患を予
防、治療、又は重症度を軽減するために有用である。本発明が適用可能である炎症性又は
閉塞性気道疾患は、内因性(非アレルギー性)喘息及び外因性(アレルギー性)喘息の両方、
軽度喘息、中等度喘息、重度喘息、気管支喘息、運動誘発性喘息、職業性喘息及び細菌感
染後に誘発された喘息を含む、あらゆる種類又は起源の喘息を含む。喘息の治療は、例え
ば、喘鳴症状を示し、且つ「乳幼喘鳴児」として診断された若しくは診断可能である4歳
又は5歳未満の対象、大きい医学的懸念のある及び初期若しくは早期喘息患者として現時
点で確定されることが多い確立された患者カテゴリーの対象の治療も包括するものとして
理解されるべきである。
【０３２６】
喘息の治療における予防有効性は、例えば急性喘息患者の症候性発作又は気管支収縮発
作の頻度又は重症度の低下、肺機能の改善、又は改善された気道過敏により証明されるで
あろう。これは、例えば抗炎症薬又は気管支拡張薬などの、症候性発作が発生した時の発
作の制限若しくは中断のための療法又はこれらを意図した療法などの、他の対症療法に関
する必要性の低下により更に証明され得る。喘息における予防的恩恵は、「モーニングデ
ィップ」の傾向がある対象において特に明らかである。「モーニングディップ」は、喘息
患者のかなりの割合に共通して認められる喘息症候群であり、且つ例えばほぼ午前4時か
ら6時の数時間の間に、すなわち通常何らかの先に投与された喘息対症療法からかなり離
れた時点での、喘息発作により特徴付けられるる。
【０３２７】
更に別の実施態様において、本発明の化合物は、非限定的に急性肺外傷(ALI)、成人/急
性呼吸窮迫症候群(ARDS)、慢性気管支炎若しくはそれに関連した呼吸困難を含む慢性閉塞
性肺、気道又は胸部疾患(COPD、COAD又はCOLD)、気腫、更には他の薬物療法、特に他の吸
入薬療法の結果としての気道過敏の増悪を含むPI3Kに関連した他の炎症性又は閉塞性気道
疾患及び状態の予防、治療、又は重症度の軽減のために使用することができる。本発明は
、非限定的に、急性、アラキジン性、カタル性、クループ性、慢性又は結核様気管支炎を
含む、いかなる型又は起源であっても、気管支炎の治療に適用可能である。本発明が適用
可能である更なる炎症性又は閉塞性気道疾患は、例えば、アルミニウム沈着症、炭粉沈着
症、石綿症、石粉症、ダチョウじん肺症、鉄沈着症、珪肺、煙草症及び綿肺症を含む、あ
らゆる型又は起源の塵肺症(慢性又は急性のいずれかの気道閉塞が頻繁に随伴し、且つ粉
塵の繰り返しの吸入により誘発される、肺の炎症性、通常閉塞性の疾患)を含む。
【０３２８】
それらの抗炎症活性に関して、特に好酸球活性化の阻害との関係に関して、本明細書に
開示された方法を使用し、PI3Kに関連した好酸球関連障害、例えば好酸球増加症(eosinso
philia)、特にこれは気道及び/又は肺に影響を及ぼすので超好酸球増加症を含む気道の好
酸球関連障害(例えば、肺組織への病的好酸球浸潤)を、更には例えば、レフラー症候群、
好酸球性肺炎、寄生性(特に後生動物)感染症(熱帯性好酸球増加症を含む)、気管支肺アス
ペルギルス症、結節性多発性動脈炎(チャーグ・ストラウス症候群を含む)、好酸球性肉芽
腫の結果として又はそれらと同時に起こる気道の好酸球関連障害を、並びに薬物反応によ
り引き起こされる気道に影響を及ぼす好酸球関連障害を治療することができる。
【０３２９】
PI3Kは炎症及びアレルギーに関与しているので、本明細書に開示された方法は、乾癬、
接触性皮膚炎、アトピー性皮膚炎、円形脱毛症、多形性紅斑、疱疹状皮膚炎、強皮症、白
斑、過敏性血管炎、じんま疹、水疱性類天疱瘡、全身性紅斑性狼瘡、天疱瘡(pemphisus)
、後天性表皮水疱症、及び他の皮膚の炎症性若しくはアレルギー性状態の予防、治療、又
は重症度の軽減においても有用である。
【０３３０】
更に、異常なPI3Kにより引き起こされた炎症成分を有する疾患又は状態も、本明細書に
開示された方法により予防するか、治療するか、又は重症度を軽減するために使用するこ
とができる。これらの疾患及び障害は、結膜炎、乾性角結膜炎、及び春季結膜炎などの眼
の疾患及び状態、アレルギー性鼻炎を含む鼻を冒す疾患、並びに自己免疫性血液疾患(例
えば、溶血性貧血、再生不良性貧血、真正赤血球性貧血及び特発性血小板減少症)、全身
性紅斑性狼瘡、関節リウマチ、多発性軟骨炎、強皮症、ヴェゲナー肉芽腫症、皮膚筋炎、
慢性活動性肝炎、重症筋無力症、スティーブンス・ジョンソン症候群、特発性スプルー、
急性膵炎、自己免疫性炎症性腸疾患(例えば、潰瘍性大腸炎及びクローン病)、内分泌性眼
障害、グレーヴス病、サルコイドーシス、肺胞炎、慢性過敏性肺炎、多発性硬化症、原発
性胆汁性肝硬変症、ブドウ膜炎(前部及び後部)、乾性角結膜炎及び春季カタル、間質性肺
線維症、乾癬性関節炎及び糸球体腎炎(例えば特発性ネフローゼ症候群又は微小変化腎症
を含む、ネフローゼ症候群随伴性又は非随伴性)を含む、自己免疫反応が自己免疫成分又
は病因に関与しているか若しくは有する炎症疾患を含むが、これらに限定されるものでは
ない。
【０３３１】
本発明の方法に従い予防、治療されるか、又は重症度の軽減のために使用され得る心臓
血管疾患は、再狭窄、心臓肥大、アテローム性動脈硬化症、心筋梗塞、虚血性脳卒中及び
うっ血性心不全を含むが、これらに限定されるものではない。
【０３３２】
一実施態様において、本発明は、患者における癌、神経線維腫症、眼血管新生、脳卒中
、糖尿病、肝腫大、心臓血管疾患、アルツハイマー病、嚢胞性線維症、ウイルス疾患、自
己免疫疾患、アテローム性動脈硬化症、再狭窄、乾癬、アレルギー疾患、炎症、神経障害
、血管新生障害、ホルモン-関連疾患、臓器移植の随伴状態、免疫不全の障害、破壊的骨
障害、増殖性障害、感染症、細胞死の随伴状態、トロンビン-誘導性血小板凝集、慢性骨
髄性白血病(CML)、肝臓疾患、T細胞活性化に関連した病的免疫状態、及びCNS障害を治療
又は予防するのに有用な組成物を提供する。
【０３３３】
PI3Kは血管新生促進性であるので(Grauperaらの文献、Nature (2008) 453(7195):662-6
)、本発明の方法は、例えば、対象化合物の局所性投与による眼球血管新生に関連した眼
疾患の治療のための、血管新生の阻害に利点があり得る。本発明の化合物は、局所的投与
などのために製剤することができる。例えば本不可逆的インヒビターは、喘息を治療する
ための肺への局所送達(例えば、乾燥散剤又は液体製剤などのエアゾール)のため、乾癬の
治療のための皮膚への局所塗布のためのクリーム、軟膏、ローションなどとして、又は眼
球疾患の治療のための眼への局所適用のための眼科用製剤として製剤することができる。
そのような製剤は、対象インヒビター及び医薬として許容し得る担体を含有するであろう
。保存剤、及び天然又は合成ポリマーなどの製剤の粘度を増大する物質などの追加成分も
、存在することができる。眼科用製剤は、液剤、軟膏、ヒドロゲル又は散剤などの任意の
好適な形状であることができる。本発明の化合物は、抗-VEGF薬、例えば、VEGFAに結合す
る抗体のFab断片であるラニビズマブ、又は以下に更に説明される他の抗-血管新生化合物
などの、別の治療薬と一緒に投与されることができる。
【０３３４】
(III.  PDPK1)
3-ホスホイノシチド依存性キナーゼ1(PDPK1)は、プロテインキナーゼB(PKB；Aktとも称
される)、血清及び糖質コルチコイド-誘導型キナーゼ、プロテインキナーゼCアイソフォ
ーム、及びp70リボソームのS6キナーゼを含む、AGCキナーゼスーパーファミリーの多数の
タンパク質セリン/トレオニンキナーゼの活性化ループをリン酸化する。ホスホイノシチ
ド3-キナーゼ/3-ホスホイノシチド依存性キナーゼ1(PDPK1)/Aktシグナル伝達経路は、癌
細胞の増殖、生存、及び腫瘍血管新生において重要な役割を果たし、且つ抗癌剤の有望な
標的を示している。
【０３３５】
増殖性障害は、それを必要とする対象への有効量のPDPK1インヒビターの投与により、
予防され、治療され、又は重症度が軽減され得る。有効量のPDPK1インヒビターの投与に
より、予防され、治療され、又は重症度が軽減され得る増殖性障害は、癌、子宮筋腫、良
性前立腺肥大、家族性腺腫性ポリポーシス、神経線維腫症、アテローム性動脈硬化症、肺
線維症、関節炎、乾癬、糸球体腎炎、血管形成術又は血管手術に続発する再狭窄、肥厚性
瘢痕形成、炎症性腸疾患、移植拒絶反応、内毒素性ショック、真菌感染、アポトーシス欠
損-関連状態、又はPDPK1活性に左右される増殖性疾患を含むが、これらに限定されるもの
ではない。
【０３３６】
PDPK1はPI3Kの下流標的であるので、PI3Kにより調節される疾患及び障害は、異常なPDP
K1機能にも関与している。従ってPDPK1活性を調節することにより治療可能な疾患は、患
者における癌、神経線維腫症、眼血管新生、脳卒中、糖尿病、肝腫大、心臓血管疾患、ア
ルツハイマー病、嚢胞性線維症、ウイルス疾患、自己免疫疾患、アテローム性動脈硬化症
、再狭窄、乾癬、アレルギー疾患、炎症、神経障害、血管新生障害、ホルモン-関連疾患
、臓器移植の随伴状態、免疫不全障害、破壊的骨障害、増殖性障害、感染症、細胞死の随
伴状態、トロンビン-誘導性血小板凝集、慢性骨髄性白血病(CML)、肝臓疾患、T細胞活性
化に関連した病的免疫状態、及びCNS障害を含むが、これらに限定されるものではない。
そのような増殖性疾患/障害は、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨原性肉腫
、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮腫、滑液腫、中皮腫、ユー
イング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、脳腫瘍、結腸癌、結腸直腸癌、腎癌、肝癌、膵癌
、骨癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、食道癌、胃癌、口腔癌、鼻腔癌、咽喉癌、頭頸部癌、
扁平上皮癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、脂腺癌、乳頭状癌、乳頭腺癌、嚢胞腺癌、髄様
癌、気管支癌、腎細胞癌、肝細胞癌、胆管癌、絨毛癌、精上皮腫、胎生期癌、ウィルムス
腫瘍、子宮頸癌、子宮癌、睾丸癌、小細胞肺癌、膀胱癌、肺癌、中枢神経系の癌、上皮癌
、皮膚癌、メラノーマ、神経芽細胞腫、及び網膜芽細胞腫などの固形腫瘍の癌を含むが、
これらに限定されるものではない。
【０３３７】
PDPK1インヒビターは、対象における増殖性障害の治療又は予防又は重症度の軽減に有
効である量で投与することができる。より詳細には、本発明の化合物は、良性若しくは悪
性腫瘍、脳、腎臓、肝臓、胆管、副腎、膀胱、乳房、食道、胃、胃腫瘍、卵巣、結腸、直
腸、前立腺、膵臓、肺(小細胞肺癌、非小細胞肺癌及び気管支肺胞癌を含む)、胃、膣、子
宮内膜、子宮、頸部及び外陰部、睾丸、尿生殖路、喉頭、皮膚、骨又は甲状腺の癌腫、肉
腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、多発性骨髄腫及びリンパ腫、消化管癌、特に結腸癌又は
結腸直腸腺腫、頭頸部腫瘍、中枢神経系の癌、上皮過増殖、乾癬、前立腺肥大、新生物形
成、上皮特性を持つ新生物形成、腺腫、腺癌、角化棘細胞腫、類表皮癌、大細胞癌、非小
細胞肺癌、リンパ腫、ホジキン病、乳癌、濾胞状癌、未分化癌、乳頭状癌、精上皮腫、メ
ラノーマ、又は白血病(ALL及びCMLを含む)から選択された増殖性疾患の治療において有用
である。他の疾患は、カウデン症候群、レルミット−デュドス病及びバンナヤン−ゾーナ
ーナ症候群、又はPI3K/PKB経路が異常に活性化されている疾患を含む。
【０３３８】
PDPK1インヒビターは、対象における神経変性疾患/障害の治療又は予防又は重症度の軽
減に有効である量で投与することができる。本発明の方法に従い治療することができる神
経変性疾患は、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン
病、及び脳虚血、並びに外傷、グルタミン酸神経毒性及び低酸素症により引き起こされた
神経変性疾患を含むが、これらに限定されるものではない。
【０３３９】
PDPK1インヒビターは、対象における自己免疫疾患の治療又は予防に有効である量で投
与することができる。自己免疫疾患は、自己免疫性血液疾患(例えば、溶血性貧血、再生
不良性貧血、真正赤血球性貧血及び特発性血小板減少症)、全身性紅斑性狼瘡、関節リウ
マチ、多発性軟骨炎、強皮症、ヴェゲナー肉芽腫症、皮膚筋炎、慢性活動性肝炎、重症筋
無力症、スティーブンス・ジョンソン症候群、特発性スプルー、急性膵炎、自己免疫性炎
症性腸疾患(例えば、潰瘍性大腸炎及びクローン病)、内分泌性眼障害、グレーヴス病、サ
ルコイドーシス、肺胞炎、慢性過敏性肺炎、多発性硬化症、原発性胆汁性肝硬変症、ブド
ウ膜炎(前部及び後部)、乾性角結膜炎及び春季カタル、間質性肺線維症、乾癬性関節炎及
び糸球体腎炎(例えば特発性ネフローゼ症候群又は微小変化腎症を含む、ネフローゼ症候
群随伴性又は非随伴性)を含むが、これらに限定されるものではない。
【０３４０】
異常なPDPK1発現に関与している血液由来の癌は、急性リンパ芽球性白血病、急性リン
パ芽球性B-細胞白血病、急性リンパ芽球性T-細胞白血病、急性骨髄芽球性白血病、急性前
骨髄球性白血病、急性単芽球性白血病、急性赤白血病、急性巨核芽球性白血病、急性骨髄
単球性白血病、急性非リンパ性白血病、急性未分化白血病、慢性骨髄性白血病("CML")、
慢性リンパ球性白血病("CLL")、ヘアリーセル白血病、及び骨髄腫を含むが、これらに限
定されるものではない。
【０３４１】
PDPK1が関与しているリンパ腫はホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワ
ルデンストレームマクログロブリン血症、重鎖病、及び真性一次性赤血球増加症を含むが
、これらに限定されるものではない。
【０３４２】
異常なPDPK1が発現しているCNS及び脳の癌は、神経膠腫、毛様細胞性星状細胞腫、星状
細胞腫、未分化星状細胞腫、多形性膠芽腫、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣細胞腫、松果体腫
、血管芽細胞腫、聴神経腫瘍、乏突起膠腫、髄膜腫、前庭神経鞘腫、腺腫、転移性脳腫瘍
、及び髄膜腫を含むが、これらに限定されるものではない。
【０３４３】
ウイルス媒介性癌も、PDPK1の過剰発現に関与されている。そのようなウイルスは、子
宮頸癌に繋がり得るヒトパピローマウイルス(例えば、Hernandez-Avilaらの文献、Archiv
es of Medical Research (1997) 28:265-271参照)；リンパ腫に繋がり得るエプスタイン
・バーウイルス(EBV)(例えば、Herrmannらの文献、J Pathol (2003) 199(2): 140-5参照)
；肝癌に繋がり得るB型又はC型肝炎ウイルス(例えば、El-Seragの文献、J Clin Gastroen
terol (2002) 35(5 Suppl 2):S72-8参照)；T細胞白血病に繋がり得るヒトT細胞白血病ウ
イルス(HTLV)-I(例えば、Mortreuxらの文献、Leukemia, (2003) 17(1):26-38参照)；カポ
ジ肉腫に繋がり得るヒトヘルペスウイルス-8感染(例えば、Kadowらの文献、Curr Opin In
vestig Drugs (2002) 3(11): 1574-9参照)；及び、免疫不全の結果癌に繋がり得るヒト免
疫不全ウイルス(HIV)感染(例えば、Dal Masoらの文献、Lancet Oncol (2003) 4(2):110-9
参照)を含む。
【０３４４】
本発明は、PDPK1インヒビターの有効量をそのような治療又は予防を必要とする対象へ
投与することを含む、これら前述の癌、障害及び疾患を治療又は予防する方法を提供する
。
【０３４５】
(IV.  HCV)
HCVは、そのゲノムが、約3000個のアミノ酸のポリタンパク質をコードしているプラス
鎖RNAウイルスである。この前駆体タンパク質は、少なくとも10種のウイルス構造タンパ
ク質及び非構造タンパク質へとプロセッシングされる：C、E1、E2、p7、NS2、NS3、NS4A
、NS4B、NS5A、及びNS5B(Blight, K.J.らの文献、Antiviral Ther. 3, Suppl. 3: 71-81,
1998)。HCVの非構造(NS)タンパク質は、このポリタンパク質のタンパク質分解性の切断
により誘導され、且つウイルス複製に必須の触媒機構を提供すると推測される。
【０３４６】
NS3は、約68KDaタンパク質であり、且つN-末端セリンプロテアーゼドメイン及びそのC-
末端のRNA-依存性ATPaseドメインの両方を有する。NS4Aタンパク質は、NS3のセリンプロ
テアーゼ活性の補因子として働くことが示されている。NS3は、HCV複製に必要な他の非構
造タンパク質を遊離する部位を切断するタンパク質分解酵素として機能し、且つ抗ウイル
ス薬化学療法のための立証された治療的標的である。
【０３４７】
ワクチンは、HCVに利用可能ではなく、インターフェロン治療の確立された療法が、患
者のわずかに15〜20％において効果があり(Weiland, O.の文献、FEMS Microbiol. Rev. 1
4: 279-88, 1994)、且つ著しい副作用を有する(Walker, M.A.らの文献、DDT 4: 518-29, 
1999；Moradpour, D.らの文献、Eur. J. Gastroenterol. Hepatol. 11: 1199-1202, 1999
)。目下の標準療法であるペグ化インターフェロンαのリバビリンとの組み合わせが、よ
り効果的であり、且つHCVに関連した肝硬変の患者における肝細胞癌を減少するように見
える(Hung, C.H.らの文献、J Viral Hepatitis, 13(6): 409-414, 2006)が、この治療は
、甲状腺機能障害などの副作用を生じることも示されている(Huang, J.F.らの文献、J Vi
ral Hepatitis, 13(6): 396-401, 2006)。
【０３４８】
HCV感染症の症状は、急性又は慢性のいずれかであることができる。急性症状は、低下
した食欲、疲労、腹痛、黄疸、そう痒、及びインフルエンザ様症状を含む。急性症状を伴
うHCV感染症と診断されたほとんどの患者は、最終的には疲労、インフルエンザ様症状、
関節痛、そう痒、睡眠障害、食欲の変化、悪心、及びうつ病を含む慢性症状を発症する。
慢性HCV感染症は、最終的には、肝臓の炎症、線維症、そして遂には肝硬変へと繋がり、
これらは全て肝機能の低下、最終的には肝不全へと繋がる。慢性C型肝炎は、晩発性皮膚
ポルフィリン症、クリオグロブリン血症(小血管血管炎の形)及び糸球体腎炎(腎臓の炎症)
、具体的には膜性増殖性糸球体腎炎(MPGN)などのHCVの存在に随伴する肝臓外の症状発現
にも関連している。
【０３４９】
一実施態様において、本発明は、HCV感染症を治療又は予防するのに有用な組成物を提
供する。本組成物は、内服に適しており、且つ有効量のHCVインヒビター及び生理的に許
容し得る担体又は媒介物を含有している。
【０３５０】
HCVインヒビターは、対象におけるHCV感染症の治療又は予防又は重症度の軽減に有効で
ある量で投与することができる。
【０３５１】
治療されるべき特定の状態又は疾患に応じて、その状態を治療するために通常投与され
る追加の治療薬が、本発明の化合物及び組成物と一緒に投与されてよい。本明細書におい
て使用されるように、特定の疾患又は状態を治療するために通常投与される追加の治療薬
は、「治療されるべき疾患又は状態に好適である」として知られている。
【０３５２】
いくつかの実施態様において、提供された化合物又はそれらの組成物は、HCVプロテア
ーゼ又はそれらの変種の別のインヒビターと組み合わせて投与される。一部の実施態様に
おいて、提供された化合物又はそれらの組成物は、別の抗ウイルス薬と組み合わせて投与
される。そのような抗ウイルス薬は、α-、β-、及びγ-インターフェロン、ペグ化され
誘導体化されたインターフェロン-α化合物、及びチモシンなどの免疫調節薬；リバビリ
ン、アマンタジン、及びテルビブジンなどの他の抗ウイルス薬；C型肝炎プロテアーゼの
他のインヒビター(NS2-NS3インヒビター及びNS3-NS4Aインヒビター、例えばBILN 2061及
びVX-950)；ヘリカーゼ及びポリメラーゼインヒビターを含む、HCV生活環の他の標的のイ
ンヒビター；内部リボソーム進入のインヒビター；IMPDHインヒビター(例えばミコフェノ
ール酸及びそれらの誘導体)などの、広範な-スペクトルのウイルスインヒビター；又は、
前記のいずれかの組み合わせを含むが、これらに限定されるものではない。
【０３５３】
いくつかの実施態様において、2種以上の抗ウイルス薬の組み合わせが投与されてよい
。いくつかの実施態様において、3種以上の抗ウイルス薬種以上の抗ウイルス薬の組み合
わせが投与されてよい。一部の実施態様において、抗ウイルス薬は、リバビリン又はイン
ターフェロンから選択される。他の実施態様において、抗ウイルス薬はα-インターフェ
ロンである。
【０３５４】
本発明のインヒビターと組み合わせてもよい薬剤の他の例は、非限定的に、以下を含む
：アルツハイマー病の治療のための、Aricept(登録商標)及びExcelon(登録商標)など；HI
Vの治療のための、リトナビルなど；パーキンソン病の治療のための、L-DOPA/カルビドパ
、エンタカポン、ロピニロール、プラミペキソール、ブロモクリプチン、ペルゴリド(per
golide)、トリヘキセフェンジル、及びアマンタジンなど；多発性硬化症(MS)治療のため
の薬剤、例えばインターフェロンβ(例えばAvonex(登録商標)及びRebif(登録商標))、Cop
axone(登録商標)及びミトキサントロンなど；喘息の治療のための、アルブテロール及びS
ingulair(登録商標)など；統合失調症の治療薬、例えばジプレキサ、リスパダール、セロ
クエル、及びハロペリドールなど；抗炎症薬、例えばコルチコステロイド、TNF遮断薬、I
L-1 RA、アザチオプリン、シクロホスファミド、及びスルファサラジンなど；免疫調節及
び免疫抑制薬、例えばシクロスポリン、タクロリムス、ラパマイシン、ミコフェノレート
・モフェチル、インターフェロン、コルチコステロイド、シクロホスファミド、アザチオ
プリン、及びスルファサラジンなど；神経栄養因子、例えばアセチルコリンエステラーゼ
阻害薬、MAO阻害薬、インターフェロン、抗けいれん薬、イオンチャンネル遮断薬、リル
ゾール、及び抗パーキンソン病薬など；心臓血管疾患の治療薬、例えばβ-遮断薬、ACE阻
害薬、利尿薬、硝酸塩、カルシウムチャネル遮断薬、及びスタチンなど；肝疾患の治療薬
、例えばコルチコステロイド、コレスチラミン、インターフェロン、及び抗ウイルス薬な
ど；血液障害の治療薬、例えばコルチコステロイド、白血病治療薬、及び増殖因子など；
薬物動態を延長及び改善する薬剤、例えばシトクロムP450インヒビター(すなわち、代謝
的分解のインヒビター)及びCYP3A4インヒビター(例えば、ケトコナゾール及びリトナビル
)など、並びに免疫不全症の治療薬、例えばガンマグロブリンなど。
【０３５５】
いくつかの実施態様において、本発明の化合物又はそれらの医薬として許容し得る組成
物は、モノクローナル抗体又はsiRNA治療薬と組み合わせて投与される。
【０３５６】
これらの追加の薬剤は、反復投薬計画の一部として、本発明の化合物を含有する組成物
とは個別に投与されてよい。或いはこれらの薬剤は、単独の組成物中において本発明の化
合物と一緒に混合された単回剤形の一部であることができる。反復投薬計画の一部として
投与される場合、これらの2つの活性物質は、同時に、連続して、又は他方から一定時間
以内、通常他方から5時間以内に投与されることができる。
【０３５７】
(V.  用量)
本発明の方法は、癌、自己免疫疾患、神経変性障害若しくは神経障害、統合失調症、骨
関連障害、肝疾患、又は心疾患の予防、治療、又は重症度の軽減のために使用されること
ができる。必要とされる正確な量は、対象の種、年齢、及び全身の状態、感染症の重症度
、特定の物質、その投与様式などに応じ、対象毎に変動するであろう。本発明の化合物は
、投与の容易さ及び用量の均一性のために、単位剤形で製剤されることが好ましい。本明
細書において使用される「単位剤形」の表現は、治療されるべき患者に適した物質の物理
的に個別の単位を指す。しかし、本発明の化合物及び組成物の総一日量は、妥当な医学的
判断の範囲内で主治医により決定されることは理解されるであろう。任意の特定の患者又
は生物に関する具体的有効量レベルは、治療される障害及び障害の重症度；使用される具
体的化合物の活性；使用される具体的組成物；患者の年齢、体重、全身の健康状態、性別
及び食事；使用される具体的化合物の投与時間、投与経路、及び排泄率；治療期間；使用
される具体的化合物と組み合わせて又は同時に使用される薬物、及び同様の医学分野にお
いて周知の要因を含む、様々な要因によって決まるであろう。本明細書において使用され
る用語「患者」は、動物、好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒトをいう。
【０３５８】
本明細書に記載のインヒビター又は医薬活性物質の投与は、治療薬に関する任意の投与
様式により達成され得る。これらの様式は、経口、経鼻、非経口、経真皮、皮下、経膣、
口腔内、経直腸又は局所投与様式などの、全身的又は局部的投与を含む。一部の場合にお
いて、投与は、本明細書に記載のインヒビター又は医薬活性物質の、血流への放出を生じ
るであろう。
【０３５９】
一実施態様において、本明細書に記載のインヒビター又は医薬活性物質は、経口的に投
与される。
【０３６０】
意図された投与様式に応じて、本組成物は、好ましくは単位用量内で且つ従来の医薬実
践との整合性のある、例えば、注射剤、錠剤、坐剤、丸剤、時限放出型カプセル剤、エリ
キシル剤、チンキ剤、乳剤、シロップ剤、散剤、液剤、懸濁剤などの、固形、半固形、又
は液体の剤形であることができる。同様に、これらは、静脈内(ボーラス又は輸液の両方)
、腹腔内、皮下又は筋肉内の形状でも投与されることができ、使用される形状は全て、医
薬分野の業者に周知である。
【０３６１】
経口投与のための液体剤形は、医薬として許容し得る乳剤、マイクロエマルジョン、液
剤、懸濁剤、シロップ剤及びエリキシル剤を含むが、これらに限定されるものではない。
本液体剤形は、活性化合物に加え、例えばエチルアルコール、イソプロピルアルコール、
炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコー
ル、1,3-ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油分(特に、綿実油、ラッカセイ
油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油、及びゴマ油)、グリセロール、テ
トラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコール及びソルビタンの脂肪酸エス
テル、並びにそれらの混合物などの、水又は他の溶媒、可溶化剤並びに乳化剤などの当該
技術分野において常用される不活性希釈剤を含んでよい。経口組成物は、不活性希釈剤に
加え、湿潤剤、乳化剤及び懸濁化剤、甘味剤、矯味矯臭剤、及び香料などの補助剤も含有
することができる。
【０３６２】
注射用調製品、例えば、滅菌注射用水性又は油性懸濁剤は、可溶化剤又は好適な分散剤
若しくは湿潤剤及び懸濁化剤を使用し、公知の技術に従い製剤されることができる。滅菌
注射用調製品は、例えば1,3-ブタンジオール中の溶液のように、無毒の非経口的に許容し
得る希釈剤若しくは溶媒中の滅菌注射用液剤、懸濁剤又は乳剤であることもできる。中で
も使用することができる許容し得る媒介物及び溶媒は、水、水性デキストロース、グリセ
ロール、エタノール、リンゲル液、米局方及び等張の塩化ナトリウム溶液である。加えて
、無菌の不揮発性油は、溶媒又は懸濁媒体として慣例的に利用される。この目的のために
、合成モノ-又はジグリセリドを含む、任意の無刺激性の不揮発性油を利用することがで
きる。加えて、オレイン酸などの脂肪酸が、注射用調製品において使用される。
【０３６３】
注射用製剤は、例えば、細菌保持性フィルターを通す濾過によるか、又は使用前に滅菌
水若しくは他の滅菌注射用媒体中に溶解若しくは分散することができる無菌固形組成物の
形状中の滅菌剤の混入により、滅菌されることができる。
【０３６４】
本発明の化合物の作用を延長するために、皮下又は筋肉内注射からの化合物の吸収を遅
延することが望ましいことが多い。これは、水への溶解度が低い結晶質又は非晶質の物質
の懸濁液の使用により達成することができる。次にこの化合物の吸収率は、その溶解率に
より左右され、これは次に結晶サイズ及び結晶形態により左右される。或いは、非経口投
与される化合物の形状の遅延された吸収は、油性媒介物中の化合物の溶解又は懸濁により
達成される。注射用デポ剤は、ポリラクチド-ポリグリコリドなどの生分解性ポリマー中
に化合物のマイクロカプセルマトリックスを形成することにより、製造される。化合物の
ポリマーに対する比及び使用される特定のポリマーの性質に応じて、化合物の放出速度を
制御することができる。他の生分解性ポリマーの例には、ポリ(オルトエステル)及びポリ
(アンヒドリド)が挙げられる。デポ型注射用製剤は、体組織と適合性があるリポソーム又
はマイクロエマルジョン中に化合物を閉じ込めることによっても調製される。
【０３６５】
直腸又は膣投与のための本明細書に記載のインヒビター又は医薬活性物質の組成物は、
外界温度では固体であるが、体温では液体であり、従って直腸又は膣腔内で溶融し活性化
合物を放出するカカオバター、ポリエチレングリコール又は坐薬用ワックスなどの好適な
非刺激性賦形剤又は担体と、本発明の化合物を混合することにより調製することができる
坐薬が好ましい。
【０３６６】
経口投与のための固形剤形は、カプセル剤、錠剤、丸剤、散剤、及び顆粒剤を含む。そ
のような固形剤形において、活性化合物は、クエン酸ナトリウム若しくはリン酸二カルシ
ウムなどの少なくとも1種の不活性の医薬として許容し得る賦形剤又は担体、並びに/又は
a)デンプン、乳糖、ショ糖、グルコース、マンニトール、セルロース、サッカリン、グリ
シン、及びケイ酸などの、充填剤若しくは増量剤若しくは希釈剤、b)例えば、ケイ酸アル
ミニウムマグネシウム、デンプンノリ、トラガカント、カルボキシメチルセルロース、メ
チルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリジノン、炭酸マグネシウム
、天然糖、トウモロコシ甘味料、ショ糖、ワックス、及びアカシアゴムなどの天然若しく
は合成ゴムなどの、結合剤、c)グリセロールなどの、保湿剤、d)アガー-アガー、炭酸カ
ルシウム、ジャガイモ若しくはタピオカでんぷん、アルギン酸、ある種のケイ酸塩、及び
炭酸ナトリウムなどの、崩壊剤、e)パラフィンなどの、溶解遅延剤、f)第4級アンモニウ
ム化合物、デンプン、寒天、メチルセルロース、ベントナイト、キサンタンガム、アルギ
ン酸(algiic acid)、及び発泡混合物などの、吸収促進剤若しくは崩壊剤、g)例えば、セ
チルアルコール及びグリセロールモノステアレートなどの、湿潤剤、h)カオリン及びベン
トナイトクレイなどの、吸収剤、並びにi)タルク、シリカ、ステアリン酸、ステアリン酸
カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、オレイン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化
ナトリウム、固形ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウムなどの、滑沢剤、並
びにそれらの混合物と混合される。カプセル剤、錠剤及び丸剤の場合、剤形は、緩衝剤も
含有することができる。
【０３６７】
同様の型の固形組成物は、充填剤として、乳糖若しくはミルクシュガーのような賦形剤
に加え、高分子量ポリエチレングリコールなどを使用する、充填式ソフト及びハードゼラ
チンカプセル剤においても使用することができる。錠剤、糖衣錠、カプセル剤、丸剤、及
び顆粒剤の固形剤形は、腸溶性コーティング及び医薬製剤分野において周知の他のコーテ
ィングなどの、コーティング及びシェルを伴い調製することができる。これらは、任意に
不透明化剤を含んでよく、且つ活性成分を、任意に遅延された様式で、腸管のある部分に
おいてのみ放出するか、又はそこで優先的に放出する組成物であることもできる。使用す
ることができる包埋組成物の例は、高分子物質及びワックスを含む。同様の型の固形組成
物は、充填剤として、乳糖若しくはミルクシュガーのような賦形剤に加え、高分子量ポリ
エチレングリコールなどを使用する、充填式ソフト及びハードゼラチンカプセル剤におい
ても使用することができる。
【０３６８】
この活性化合物は、前述の1種以上の賦形剤と一緒にマイクロカプセル封入された形状
であることもできる。錠剤、糖衣錠、カプセル剤、丸剤及び顆粒剤の固形剤形は、腸溶性
コーティング、放出制御コーティング及び医薬製剤分野において周知の他のコーティング
などの、コーティング及びシェルを伴い調製することもできる。そのような固形剤形にお
いて、活性化合物は、ショ糖、乳糖又はデンプンなどの、少なくとも1種の不活性希釈剤
と混合することができる。そのような剤形は、通常の実践のように、不活性希釈剤以外の
追加の物質、例えばステアリン酸マグネシウム及び微晶質セルロースのような打錠滑沢剤
及び他の打錠助剤も含有することができる。カプセル剤、錠剤及び丸剤の場合、これらの
剤形は、緩衝剤も含有することができる。これらは任意に、不透明化剤を含有することが
でき、且つ活性成分を、任意に遅延された様式で、腸管のある部分においてのみ放出する
か、又はそこで優先的に放出する組成物であることもできる。使用することができる包埋
組成物の例には、高分子物質及びワックスが挙げられる。
【０３６９】
本明細書に記載のインヒビター又は医薬活性物質は、小型単層小胞、大型単層小胞及び
多重膜小胞などの、リポソーム送達システムの形状で投与されることもできる。リポソー
ムは、コレステロール、ステアリルアミン又はホスファチジルコリンを含む、様々なリン
脂質から形成することができる。一部の実施態様において、米国特許第5,262,564号に開
示されているように、脂質成分のフィルムは、薬物の水溶液により水和され、薬物をカプ
セル封入している脂質層を形成する。
【０３７０】
本明細書に記載のインヒビター又は医薬活性物質は、それに本明細書に記載のインヒビ
ター又は医薬活性物質が組み合わされている個別の担体として、モノクローナル抗体を使
用することによっても、送達することができる。本明細書に記載のインヒビター又は医薬
活性物質は、標的化可能な薬物担体として、可溶性ポリマーと組み合わせることもできる
。そのようなポリマーは、ポリビニルピロリドン、ピランコポリマー、ポリヒドロキシプ
ロピルメタクリルアミド-フェノール、ポリヒドロキシエチルアスパナミドフェノール、
又はパルミトイル残基により置換されたポリエチレンオキシドポリリシンを含むことがで
きる。更に本明細書に記載のインヒビター又は医薬活性物質は、例えば、ポリ乳酸、ポリ
イプシロンカプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール
、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアクリレート及び架橋型又は両親媒性のヒドロゲルブ
ロックコポリマーなどの、薬物の制御放出を実現するのに有用である生分解性ポリマーの
部類に組み合わせることもできる。
【０３７１】
非経口注射用物質投与は、皮下、筋肉内又は静脈内注射及び輸液のために使用すること
ができる。注射用物質は、液体の溶液若しくは懸濁液又は注射前に液体に溶解するのに適
した固形物形状のいずれかの、従来の形状で、調製されることができる。
【０３７２】
非経口的投与に関する一実施態様は、引用により本明細書中に組み込まれている米国特
許第3,710,795号に従う、遅延放出又は持続放出システムの移植を利用する。
【０３７３】
これらの組成物は、滅菌されるか、又は保存剤、安定化剤、湿潤剤若しくは乳化剤、溶
解促進剤、浸透圧調節のための塩類、pH緩衝剤などの補助剤、並びに非限定的に酢酸ナト
リウム若しくはオレイン酸トリエタノールアミンを含む他の物質を、無毒の量含有するこ
とができる。加えてこれらは、他の治療上価値がある物質も含有することができる。
【０３７４】
本発明の化合物の局所投与又は経真皮投与のための剤形は、軟膏剤、泥膏剤、クリーム
剤、ローション剤、ゲル剤、散剤、液剤、スプレー剤、吸入剤又は貼付剤を含む。本活性
成分は、無菌条件下で、医薬として許容し得る担体及び必要に応じ任意の必要とされる保
存剤又は緩衝液と混合される。眼科用製剤、点耳薬、及び点眼薬も、本発明の範囲内であ
ることが意図されている。加えて本発明は、化合物の体への制御された送達の提供に更な
る利点を有する経真皮貼付剤の使用を意図している。そのような剤形は、本化合物を好適
な媒体中に溶解又は分散することにより製造することができる。本化合物の皮膚を超えた
流入を増大するために、吸収増強剤も使用することができる。この速度は、速度制御膜の
提供又は本化合物のポリマーマトリックス又はゲル内への分散のいずれかにより制御する
ことができる。
【０３７５】
組成物は、各々、慣例的混合、造粒又はコーティングの方法に従い調製することができ
、且つ本医薬組成物は、本明細書に記載のインヒビター又は医薬活性物質を、約0.1％〜
約99重量又は容量％、好ましくは約1％〜約70重量又は容量％含有することができる。
【０３７６】
本明細書に記載のインヒビター又は医薬活性物質を利用する投薬計画は、対象の種類、
種、年齢、体重、性別及び医学的状態；治療される状態の重症度；投与経路；対象の腎機
能又は肝機能；並びに、使用される本明細書に記載された特定のインヒビター又は医薬活
性物質を含む、様々な要因に従い選択することができる。当業者は、増殖性障害の治療又
は予防に有用な薬物の有効量を容易に決定し且つ処方することができる。
【０３７７】
本明細書に記載のインヒビター又は医薬活性物質の有効な用量は、対象に投与される場
合、1日当たり本明細書に記載のインヒビター又は医薬活性物質約0.05〜約1000mgの範囲
である。インビボ又はインビトロ使用に関して組成物は、本明細書に記載のインヒビター
を約0.5、1.0、2.5、5.0、10.0、15.0、25.0、50.0、100.0、250.0、500.0又は1000.0mg
含むことができる。一実施態様において、本組成物は、割線入り錠剤の形状である。本明
細書に記載のインヒビター又は医薬活性物質の有効血漿レベルは、1日当たり体重1kgにつ
き約0.002mg〜約50mgの範囲であることができる。癌の治療又は予防に有効である本明細
書に記載のインヒビター又は医薬活性物質の量は、当業者に公知である臨床技術により決
定することができる。加えて、インビトロ及びインビボアッセイを、至適用量範囲の確定
を補助するために、任意に使用することができる。使用されるべき正確な投与量は、投与
経路、及び治療される増殖性障害の重篤度よっても左右され、且つ例えば公表された臨床
試験を考慮し、一般開業医の判断及び各対象の状況に従い決定され得る。しかし好適な有
効な用量は、ほぼ4時間毎に約10μg〜約5gの範囲であることができが、これらは典型的に
は4時間毎に約500mg以下である。一実施態様において、有効量は、4時間毎に約0.01mg、0
.5mg、約1mg、約50mg、約100mg、約200mg、約300mg、約400mg、約500mg、約600mg、約700
mg、約800mg、約900mg、約1g、約1.2g、約1.4g、約1.6g、約1.8g、約2.0g、約2.2g、約2.
4g、約2.6g、約2.8g、約3.0g、約3.2g、約3.4g、約3.6g、約3.8g、約4.0g、約4.2g、約4.
4g、約4.6g、約4.8g、及び約5.0gである。同等な用量が、非限定定期に、約2時間毎、約6
時間毎、約8時間毎、約12時間毎、約24時間毎、約36時間毎、約48時間毎、約72時間毎、
約1週間毎、約2週間毎、約3週間毎、約1ヶ月毎、及び約2ヶ月毎を含む、様々な時間間隔
にわたり投与されることができる。本明細書に記載された有効用量は、投与される総量を
いい；すなわち、本明細書に記載のインヒビター又は医薬活性物質の2種以上が投与され
る場合、有効用量は、投与される総量に相当する。
【０３７８】
本明細書に記載のインヒビター又は医薬活性物質を利用する投薬計画は、対象の種類、
種、年齢、体重、性別及び医学的状態；治療される増殖性障害の重症度；投与経路；対象
の腎機能又は肝機能；並びに、使用される本明細書に記載された特定のインヒビター又は
医薬活性物質を含む、様々な要因に従い選択することができる。当業者は、増殖性障害の
予防、進行の退行又は停止に必要な薬物の有効量を容易に決定し且つ処方することができ
る。
【０３７９】
本明細書に記載のインヒビター又は医薬活性物質は、単回1日量で投与されることがで
きるか、又は総1日量が、一日につき2、3又は4回の分割量で投与されることができる。更
に、本明細書に記載のインヒビター又は医薬活性物質は、好適な鼻腔内媒介物の局所使用
により、鼻腔内形状で、又は当業者に周知の経真皮的皮膚貼付剤のそれらの形状を使用す
る、経真皮経路で、投与されることができる。経真皮送達システムの形状で投与されるた
めに、用量の投与は、投薬計画を通じて間欠的であるよりもむしろ連続的であることがで
きる。他の例証的局所用調製品は、クリーム剤、軟膏剤、ローション剤、エアゾールスプ
レー及びゲル剤を含み、ここでは本明細書に記載のインヒビター又は医薬活性物質の濃度
は、約0.1％〜約15％w/w又はw/vの範囲である。
【０３８０】
(VI.  併用)
治療されるべき特定の状態、疾患に応じて、その状態を治療するために通常投与される
追加の治療薬が、本発明の化合物及び組成物と組み合わせて投与されてよい。本明細書に
おいて使用されるように、特定の疾患、又は状態を治療するために通常投与される追加の
治療薬は、「治療される疾患、又は状態に適している」ことが知られている。本明細書に
記載のインヒビターと追加の治療薬の組み合わせにおいて、追加の治療薬は、この組み合
わせにおいて使用されるインヒビターのための標的タンパク質内の活性結合部位への競合
的結合剤ではない。
【０３８１】
いくつかの実施態様において、本明細書に提供されるインヒビター若しくは医薬活性物
質又はそれらの組成物は、別の医薬活性物質又はそれらの変種と組み合わせて投与される
。一部の実施態様において、提供される化合物又はそれらの組成物は、1種以上の追加の
医薬活性物質と組み合わせて投与される。そのような追加の医薬活性物質は、Aricept(登
録商標)及びExcelon(登録商標)などの、アルツハイマー病の治療；リトナビルなどの、HI
Vの治療；L-DOPA/カルビドパ、エンタカポン、ロピニロール、プラミペキソール、ブロモ
クリプチン、ペルゴリド、トリヘキセフェンジル、及びアマンタジンなどの、パーキンソ
ン病の治療；インターフェロンβ(例えば、Avonex(登録商標)及びRebif(登録商標))、Cop
axone(登録商標)及びミトキサントロンなどの、多発性硬化症(MS)治療薬；アルブテロー
ル及びSingulair(登録商標)などの、喘息の治療；ジプレキサ、リスパダール、セロクエ
ル、及びハロペリドールなどの、統合失調症の治療薬；コルチコステロイド、TNF遮断薬
、IL-1 RA、アザチオプリン、シクロホスファミド、及びスルファサラジンなどの、抗炎
症薬；シクロスポリン、タクロリムス、ラパマイシン、ミコフェノレート・モフェチル、
インターフェロン、コルチコステロイド、シクロホスファミド、アザチオプリン、及びス
ルファサラジンなどの、免疫調節薬及び免疫抑制薬；アセチルコリンエステラーゼ阻害薬
、MAO阻害薬、インターフェロン、抗けいれん薬、イオンチャンネル遮断薬、リルゾール
、及び抗パーキンソン病薬などの、神経栄養因子；β遮断薬、ACE阻害薬、利尿薬、硝酸
塩、カルシウムチャネル遮断薬、及びスタチンなどの、心臓血管疾患の治療薬；コルチコ
ステロイド、コレスチラミン、インターフェロン、及び抗ウイルス薬などの、肝疾患の治
療薬；コルチコステロイド、白血病治療薬、及び増殖因子などの、血液障害の治療薬；シ
トクロムP450インヒビター(すなわち、代謝的分解のインヒビター)及びCYP3A4インヒビタ
ー(例えば、ケトコナゾール及びリトナビル)などの、薬物動態を延長又は改善する薬剤；
並びにガンマグロブリンなどの、免疫不全障害の治療薬を含むが、これらに限定されるも
のではない。
【０３８２】
いくつかの実施態様において、本発明の化合物又はそれらの医薬として許容し得る組成
物は、モノクローナル抗体又はsiRNA治療薬と組み合わせて投与される。
【０３８３】
これらの追加の薬剤は、反復投薬計画の一部として、本発明の化合物を含有する組成物
とは個別に投与されてよい。或いは、これらの薬剤は、単独の組成物中において本発明の
化合物と一緒に混合された単回剤形の一部であることができる。反復投薬計画の一部とし
て投与される場合、これら2つの活性物質は、同時に、連続して、又は他方から一定時間
以内、通常他方から5時間以内で提供されることができる。
【０３８４】
本明細書において使用される用語「組み合わせ」、「組み合わせられた」及び関連用語
は、本発明に従う治療薬の同時又は連続した投与をいう。例えば本発明の化合物は、個別
の単位剤形中で、又は単独の単位剤形中で一緒に、別の治療薬と同時若しくは連続して投
与されることができる。従って本発明は、本発明の化合物、追加の治療薬、及び医薬とし
て許容し得る担体、補助剤、又は媒介物を含有する単独単位剤形を提供する。
【０３８５】
単独剤形を製造するために担体物質と組み合わせることができる本発明の化合物及び追
加の治療薬(先に説明された追加の治療薬を含有するそれらの組成物中において)の両方の
量は、治療される宿主及び特定の投与様式によって左右されるであろう。好ましくは、本
発明の組成物は、1日につき体重1kg当たり本発明のもの0.01〜100mgの間の用量で投与さ
れることができるように製剤されなければならない。
【０３８６】
追加の治療薬を含有するこれらの組成物において、その追加の治療薬及び本発明の化合
物は、相乗的に作用することができる。従って、そのような組成物中の追加の治療薬の量
は、その治療薬のみを使用する単剤療法において必要とされる量よりも少ないであろう。
そのような組成物において、1日につき体重1kg当たり追加の治療薬0.01〜100mgの間の用
量が、投与され得る。
【０３８７】
本発明の組成物中に存在する追加の治療薬の量は、その治療薬を唯一の活性物質として
含有する組成物中で通常投与される量を超えないであろう。好ましくは、現在開示された
組成物中の追加の治療薬の量は、唯一の治療的活性物質としてその物質を含有する組成物
中に通常存在する量の約50％〜100％の範囲であろう。
【０３８８】
一部の実施態様において、本組成物は、ある量の本明細書に記載された抗癌性インヒビ
ター、例えばXIAPインヒビター、及び一緒に癌を治療又は予防する効果がある別の抗癌剤
を含有する。別の実施態様において、本明細書に記載された抗癌性インヒビター及び別の
抗癌剤の量は、その組成物の組み合わせた併用化学療法剤の少なくとも約0.01重量％であ
る。経口投与が意図される場合、この量は、組成物の約0.1％〜約80重量％までを変動す
ることができる。一部の経口組成物は、本明細書に記載された抗癌性インヒビター及び別
の抗癌剤を約4％〜約50％含有することができる。本発明の他の組成物は、非経口単位用
量が、組成物の約0.01％〜約2重量％であるように調製される。
【０３８９】
癌の治療又は予防を必要とする対象においてそれを治療又は予防するための本方法は、
別の予防薬又は治療薬を、本明細書に記載された抗癌性インヒビターが投与される対象へ
投与することを更に含むことができる。一実施態様において、他の予防薬又は治療薬は、
有効量で投与される。他の予防薬又は治療薬は、抗炎症薬、腎不全治療薬、糖尿病治療薬
、心臓血管疾患治療薬、制吐薬、造血性コロニー刺激因子、抗不安薬、及びオピオイド又
は非オピオイド鎮痛薬を含むが、これらに限定されるものではない。
【０３９０】
更なる実施態様において、本明細書に記載の抗癌性インヒビターは、制吐薬の前に、同
時に、若しくは後に、又は同日に、又は互いに1時間、2時間、12時間、24時間、48時間若
しくは72時間以内に、投与されることができる。
【０３９１】
別の実施態様において、本明細書に記載の抗癌性インヒビターは、造血性コロニー刺激
因子の前に、同時に、若しくは後に、又は同日に、又は互いに1時間、2時間、12時間、24
時間、48時間、72時間、1週間、2週間、3週間若しくは4週間以内に、投与されることがで
きる。
【０３９２】
更に別の実施態様において、本明細書に記載の抗癌性インヒビターは、オピオイド又は
非オピオイド鎮痛薬の前に、同時に、若しくは後に、又は同日に、又は互いに1時間、2時
間、12時間、24時間、48時間、若しくは72時間以内に、投与されることができる。
【０３９３】
更に別の実施態様において、本明細書に記載の抗癌性インヒビターは、抗不安薬の前に
、同時に、若しくは後に、又は同日に、又は互いに1時間、2時間、12時間、24時間、48時
間、若しくは72時間以内に、投与されることができる。
【０３９４】
他の治療薬の有効量は、当業者に周知である。しかし他の治療薬の至適有効量の範囲を
決定することは、当業者の権限(perview)内である。本発明の一実施態様において、別の
治療薬が対象に投与される場合、本明細書に記載の抗癌性インヒビターの有効量は、他の
治療薬が投与されない場合のその有効量よりも少ない。この場合、理論に結びつけられる
ものではないが、本明細書に記載の抗癌性インヒビター及び他の治療薬は、癌を治療又は
予防するために相乗的に作用すると考えられる。
【０３９５】
本発明の方法において有用な制吐薬は、メトクロプロミド、ドンペリドン、プロクロル
ペラジン、プロメタジン、クロルプロマジン、トリメトベンズアミド、オンダンセトロン
、グラニセトロン、ヒドロキシジン、アセチルロイシンモノエタノールアミン、アリザプ
リド、アザセトロン、ベンズキナミド、ビエタナウチン(bietanautine)、ブロモプリド、
ブクリジン、クレボプリド、シクリジン、ジメンヒドリナート、ジフェニドール、ドラセ
トロン、メクリジン、メタラタール、メトピマジン、ナビロン、オキシペルンジル、ピパ
マジン、スコポラミン、スルピリド、テトラヒドロカンナビノール、チエチルペラジン、
チオプロペラジン、及びトロピセトロンを含むが、これらに限定されるものではない。
【０３９６】
本発明の方法において有用な造血性コロニー刺激因子は、フィルグラスチム、サルグラ
モスチム、モルグラモスチム及びエポイエチンαを含むが、これらに限定されるものでは
ない。
【０３９７】
本発明の方法において有用なオピオイド鎮痛薬は、モルヒネ、ヘロイン、ヒドロモルフ
ォン、ヒドロコドン、オキシモルホン、オキシコドン、メトポン、アポモルフィン、ノル
モルフィン、エトルフィン、ブプレノルフィン、メペリジン、ロペラミド、アニレリジン
、エトヘプタジン、ピミニジン、ベータプロジン、ジフェノキシレート、フェンタニル、
スフェンタニル、アルフェンタニル、レミフェンタニル、レボルファノール、デキストロ
メトルファン、フェナゾシン、ペンタゾシン、シクラゾシン、メサドン、イソメサドン及
びプロポキシフェンを含むが、これらに限定されるものではない。
【０３９８】
本発明の方法において有用な非オピオイド鎮痛薬は、アスピリン、セレコキシブ、ロフ
ェコキシブ、ジクロフェナク、ジフルシナール、エトドラク、フェノプロフェン、フルル
ビプロフェン、イブプロフェン、ケトプロフェン、インドメタシン、ケトロラク、メクロ
フェナメイト、メフェナム酸、ナブメトン、ナプロキセン、ピロキシカム及びスリンダク
を含むが、これらに限定されるものではない。
【０３９９】
本発明の方法において有用な抗不安薬は、ブスピロン、並びにジアゼパム、ロラゼパム
、オキサゼパム、クロラゼプ酸、クロナゼパム、クロルジアゼポキシド及びアルプラゾラ
ムなどのベンゾジアゼピンを含むが、これらに限定されるものではない。
【０４００】
本発明は、活性部位に存在するリシン残基を有する標的ポリペプチドへ共有結合するリ
ガンドの対象への投与を簡便化することができるキットを包含している。
【０４０１】
本発明の典型的キットは、活性部位に存在するリシン残基を有する標的ポリペプチドへ
共有結合するリガンドの単位剤形を含む。一実施態様において、この単位剤形は、活性部
位に存在するリシン残基を有する標的ポリペプチドへ共有結合するリガンドの有効量及び
生理的に許容し得る担体又は媒介物が入っている滅菌することができる容器である。この
キットは更に、癌を治療又は予防するために活性部位に存在するリシン残基を有する標的
ポリペプチドへ共有結合するリガンドの使用を指示している、ラベル又は印刷された指示
書を備えることができる。このキットは更に、別の予防薬又は治療薬の単位剤形、例えば
、別の予防薬又は治療薬又は別の抗癌剤の有効量を備える容器も含むことができる。一実
施態様において、本キットは、活性部位に存在するリシン残基を有する標的ポリペプチド
へ共有結合するリガンドの有効量、及び別の予防薬又は治療薬の有効量が入っている容器
を備える。他の予防薬又は治療薬及び他の抗癌剤の例は、先に列挙されたものを含むが、
これらに限定されるものではない。
【０４０２】
(C.  プローブ化合物)
本発明の化合物は、検出可能な部分に係留される(tether)ことができる。当業者は、検
出可能な部分は、好適な置換基を介して提供された化合物へ結合され得ることを認めるで
あろう。本明細書において使用される用語「好適な置換基」とは、検出可能な部分への共
有結合が可能である部分をいう。そのような部分は、当業者に周知であり、且つ、いくつ
か例を挙げると、例えばカルボキシラート部分、アミノ部分、チオール部分、又はヒドロ
キシル部分を含む基を含む。そのような部分は、提供された化合物へ直接、又は二価の飽
和若しくは不飽和の炭化水素鎖などのテザー基を介して結合され得ることは認められるで
あろう。一部の実施態様において、そのような部分は、クリック化学を介して結合され得
る。一部の実施態様において、そのような部分は、任意に銅触媒の存在下で、アジドのア
ルキンとの1,3-付加環化を介して結合され得る。クリック化学を使用する方法は、当該技
術分野において公知であり、且つRostovtsevらの文献、Angew. Chem. Int. Ed. 2002, 41
, 2596-99、及びSunらの文献、Bioconjugate Chem., 2006, 17, 52-57に説明されたもの
を含む。
【０４０３】
本明細書において使用される用語「検出可能な部分」は、用語「標識」及び「リポータ
ー」と互換的に使用され、且つ例えば一次標識及び二次標識など、検出されることが可能
である任意の部分に関連している。検出可能な部分の存在は、試験下のシステム中の検出
可能な部分を定量する(絶対項、近似項又は相対項で)方法を用いて測定することができる
。一部の実施態様において、そのような方法は、当業者に周知であり、且つレポーター部
分(例えば、標識、色素、光架橋剤、細胞傷害性化合物、薬物、親和性標識、光親和性標
識、反応性化合物、抗体又は抗体断片、生体材料、ナノ粒子、スピン標識、発蛍光団、金
属含有部分、放射性部分、量子ドット、新規官能基、他の分子と共有的又は非共有的に相
互作用する基、ホトケージ(photocaged)部分、化学線励起部分、リガンド、光異性化部分
、ビオチン、ビオチン類似体(例えば、ビオチンスルホキシド)、重原子取り込み部分、化
学的に切断可能な基、光切断可能な基、レドックス-活性物質、同位体標識された部分、
生物物理学的プローブ、発リン光基、化学発光基、高電子密度基、磁気を帯びた基、イン
ターカレーション基、発色団、エネルギー転移物質、生物学的活性物質、検出可能な標識
、及び前記のものの任意の組み合わせ)を定量するいずれかの方法を含む。
【０４０４】
プローブ化合物の非限定的例が、以下に示される。
【化１７３】
2016195596.tif 000212
2016195596.tif 000213
【０４０５】
放射性同位体(例えば、トリチウム、32P、33P、35S、14C、123I、124I、125I、又は131
I)、非限定的に安定した同位体を含む質量タグ(例えば、13C、2H、17O、18O、15N、19F、
及び127I)、陽電子放射同位体(例えば、11C、18F、13N、124I、及び15O)、並びに蛍光標
識などの一次標識は、更に修飾せずに検出することができるシグナルを発生するレポータ
ー基である。検出可能な部分は、非限定的に蛍光法、ポジトロン放出断層撮影法、SPECT
医学造影法、化学発光法、電子スピン共鳴法、紫外/可視吸収分光法、質量分析法、核磁
気共鳴法、磁気共鳴法、フローサイトメトリー、オートラジオグラフィー、シンチレーシ
ョンカウント、リン光造影法、及び電気化学的方法を含む方法により分析することができ
る。
【０４０６】
本明細書において使用される用語「二次標識」とは、検出可能なシグナルの発生に二次
中間体の存在が必要である、ビオチンと様々なタンパク質抗原などの部分をいう。ビオチ
ンに関する二次中間体は、ストレプトアビジン-酵素複合体を含むことができる。抗原標
識に関して、二次中間体は、抗体-酵素複合体を含むことができる。一部の蛍光基は、非
放射性蛍光共鳴エネルギー転移(FRET)の過程において、エネルギーを別の基に転移し、且
つ第二の基が検出されたシグナルを発生するので、それらは二次標識として作用する。
【０４０７】
本明細書において使用される用語「蛍光標識」、「蛍光色素」及び「発蛍光団」は、規
定された励起波長で光エネルギーを吸収し、且つ異なる波長で光エネルギーを放出する部
分をいう。蛍光標識の例は、Alexa Fluor色素(Alexa Fluor 350、Alexa Fluor 488、Alex
a Fluor 532、Alexa Fluor 546、Alexa Fluor 568、Alexa Fluor 594、Alexa Fluor 633
、Alexa Fluor 660及びAlexa Fluor 680)、AMCA、AMCA-S、BODIPY色素(BODIPY FL、BODIP
Y R6G、BODIPY TMR、BODIPY TR、BODIPY 493/503、BODIPY 530/550、BODIPY 558/568、BO
DIPY 564/570、BODIPY 576/589、BODIPY 581/591、BODIPY 630/650、BODIPY 650/665)、
カルボキシローダミン6G、カルボキシ-X-ローダミン(ROX)、カスケードブルー、カスケー
ドイエロー、クマリン343、シアニン色素(Cy3、Cy5、Cy3.5、Cy5.5)、ダンシル、ダポキ
シル(Dapoxyl)、ジアルキルアミノクマリン、4',5'-ジクロロ-2',7'-ジメトキシ-フルオ
レセイン、DM-NERF、エオシン、エリスロシン、フルオレセイン、FAM、ヒドロキシクマリ
ン、IRDyes(IRD40、IRD700、IRD800)、JOE、リサミンローダミンB、マリーナブルー、メ
トキシクマリン、ナフトフルオレセイン、オレゴングリーン488、オレゴングリーン500、
オレゴングリーン514、Pacific Blue、PyMPO、ピレン、ローダミンB、ローダミン6G、ロ
ーダミングリーン、ローダミンレッド、Rhodol Green、2',4',5',7'-テトラ-ブロモスル
ホン-フルオレセイン、テトラメチル-ローダミン(TMR)、カルボキシテトラメチルローダ
ミン(TAMRA)、テキサスレッド、テキサスレッド-X、5(6)-カルボキシフルオレセイン、2,
7-ジクロロフルオレセイン、N,N-ビス(2,4,6-トリメチルフェニル)-3,4:9,10-ペリレンビ
ス(ジカルボキシイミド、HPTS、エチルエオシン、DY-490XL MegaStokes、DY-485XL MegaS
tokes、Adirondack Green 520、ATTO 465、ATTO 488、ATTO 495、YOYO-1,5-FAM、BCECF、
ジクロロフルオレセイン、ローダミン110、ローダミン123、YO-PRO-1、SYTOX Green、ナ
トリウムグリーン、SYBR Green I、Alexa Fluor 500、FITC、Fluo-3、Fluo-4、フルオロ-
エメラルド、YoYo-1 ssDNA、YoYo-1 dsDNA、YoYo-1、SYTO RNASelect、Diversa Green-FP
、Dragon Green、EvaGreen、Surf Green EX、スペクトラムグリーン、NeuroTrace 500525
、NBD-X、MitoTracker Green FM、LysoTracker Green DND-26、CBQCA、PA-GFP(活性化後)
、WEGFP(活性化後)、FlASH-CCXXCC、アザミグリーンモノマー、アザミグリーン、緑色蛍
光タンパク質(GFP)、EGFP(Campbell Tsien 2003)、EGFP(Patterson 2001)、Kaede Green
、7-ベンジルアミノ-4-ニトロベンズ-2-オキサ-1,3-ジアゾール、Bexl、ドキソルビシン
、Lumio Green、及びSuperGlo GFPを含むが、これらに限定されるものではない。
【０４０８】
本明細書において使用される用語「質量タグ」とは、質量分析(MS)検出技術を用いて、
その質量の特性により独自に検出されることが可能である任意の部分をいう。質量タグの
例は、N-[3-[4'-[(p-メトキシテトラフルオロベンジル)オキシ]フェニル]-3-メチルグリ
セロニル]イソニペコチン酸、4'-[2,3,5,6-テトラフルオロ-4-(ペンタフルオロフェノキ
シル)]メチルアセトフェノン、及びそれらの誘導体などのエレクトロホア(electrophore)
放出タグを含む。これらの質量タグの合成及び利用は、米国特許第4,650,750号、第4,709
,016号、第5,360,8191号、第5,516,931号、第5,602,273号、第5,604,104号、第5,610,020
号、及び第5,650,270号に説明されている。質量タグの他の例は、変動する長さ及び塩基
組成のヌクレオチド、ジデオキシヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、オリゴペプチド、
オリゴ糖、並びに長さ及びモノマー組成が変動する他の合成ポリマーを含むが、これらに
限定されるものではない。適当な質量範囲(100〜2000ダルトン)の中性及び帯電したの両
方の非常に様々な有機分子(生体分子又は合成化合物)も、質量タグとして使用することが
できる。安定した同位体(例えば、13C、2H、17O、18O、及び15N)も、質量タグとして使用
することができる。
【０４０９】
本明細書において使用される用語「化学発光基」とは、熱の添加を伴わずに化学反応の
結果として光を放出する基をいう。一例として、ルミノール(5-アミノ-2,3-ジヒドロ-1,4
-フタラジンジオン)は、励起状態の生成物(3-アミノフタル酸エステル、3-APA)を作製す
るために塩基及び金属触媒の存在下で、過酸化水素(H2O2)のようなオキシダントと反応す
る。
【０４１０】
本明細書において使用される用語「発色団」とは、可視波長、UV波長又はIR波長の光を
吸収する分子をいう。
【０４１１】
本明細書において使用される用語「色素」とは、発色団を含む、可溶性の着色物質をい
う。
【０４１２】
本明細書において使用される用語「高電子密度基」とは、電子線が照射された場合に、
電子を散乱する基をいう。そのような基は、モリブデン酸アンモニウム、次硝酸ビスマス
、ヨウ化カドミウム、カルボヒドラジド、塩化第二鉄六水和物、ヘキサメチレンテトラミ
ン、三塩化インジウム無水物、硝酸ランタン、酢酸鉛三水和物、クエン酸鉛三水和物、硝
酸鉛、過ヨウ素酸、リンモリブデン酸、リンタングステン酸、フェリシアン化カリウム、
フェロシアン化カリウム、ルテニウムレッド、硝酸銀、プロテイン銀(Agアッセイ：8.0〜
8.5％)、「Strong」、銀テトラフェニルポルフィン(S-TPPS)、塩化金酸ナトリウム、タン
グステン酸ナトリウム、硝酸タリウム、チオセミカルバジド(TSC)、酢酸ウラニル、硝酸
ウラニル、及び硫酸バナジルを含むが、これらに限定されるものではない。
【０４１３】
本明細書において使用される用語「エネルギー転移物質」とは、別の分子からエネルギ
ーを供与するか又は受容するかのいずれかである分子をいう。単に例示を目的として、蛍
光共鳴エネルギー転移(FRET)は、蛍光ドナー分子の励起状態のエネルギーが、励起されな
いアクセプター分子に非放射性に転移され、これは次に、より長い波長で供与されたエネ
ルギーを蛍光発光する、双極子間カップリングプロセスである。
【０４１４】
本明細書において使用される用語「重原子取り込み部分」とは、通常炭素よりも重い原
子のイオンを取り込んでいる基をいう。一部の実施態様において、そのようなイオン又は
原子は、ケイ素、タングステン、金、鉛、及びウランを含むが、これらに限定されるもの
ではない。
【０４１５】
本明細書において使用される用語「光親和性標識」とは、光に曝露された時、それに対
し標識が親和性をもつ分子との連結を形成する基を伴う標識をいう。
【０４１６】
本明細書において使用される用語「ホトケージ部分」とは、特定の波長が照射された時
、他のイオン又は分子と共有的又は非共有的に結合する基をいう。
【０４１７】
本明細書において使用される用語「光異性化部分」とは、光の照射時に、1つの異性体
型から別のものへ変化する基をいう。
【０４１８】
本明細書において使用される用語「放射性部分」とは、その核が、α粒子、β粒子、又
はγ粒子などの核放射線を自発的に発する基をいい；ここでα粒子はヘリウム核であり、
β粒子は電子であり、且つγ粒子は高エネルギー光子である。
【０４１９】
本明細書において使用される用語「スピン標識」とは、一部の実施態様においては電子
スピン共鳴分光法により検出され、且つ他の実施態様において別の分子に結合される不対
電子スピン(すなわち安定した常磁性基)を示す原子又は原子群を含む分子をいう。そのよ
うなスピン標識分子は、ニトリルラジカル及びニトロオキシドを含むが、これらに限定さ
れるものではなく、且つ一部の実施態様において、単一スピン標識又は二重(double)スピ
ン標識である。
【０４２０】
本明細書において使用される用語「量子ドット」とは、一部の実施態様において近赤外
において検出され、且つ極めて高い量子収率を有する(すなわち、中等度の照射で非常に
明るい)、コロイド状半導体ナノ結晶をいう。
【０４２１】
当業者は、検出可能な部分は、好適な置換基を介して提供された化合物に結合され得る
ことを認めるであろう。本明細書において使用される用語「好適な置換基」とは、検出可
能な部分への共有結合が可能である部分をいう。そのような部分は、当業者に周知であり
、且つ、いくつか例を挙げると、例えばカルボキシラート部分、アミノ部分、チオール部
分、又はヒドロキシル部分を含む基を含む。そのような部分は、提供された化合物へ直接
、又は二価の飽和若しくは不飽和の炭化水素鎖などのテザー部分を介して、結合され得る
ことは認められるであろう。
【０４２２】
一部の実施態様において、検出可能な部分は、クリック化学を介して提供された化合物
へ結合される。一部の実施態様において、そのような部分は、任意に銅触媒の存在下で、
アジドのアルキンとの1,3-付加環化を介して結合され得る。クリック化学を使用する方法
は、当該技術分野において公知であり、且つRostovtsevらの文献、Angew. Chem. Int. Ed
. 2002, 41, 2596-99、及びSunらの文献、Bioconjugate Chem., 2006, 17, 52-57に説明
されたものを含む。一部の実施態様において、クリックレディインヒビター部分が提供さ
れ、クリックレディ-Tp-Rp部分と反応される。本明細書に使用される「クリックレディ」
とは、クリック化学反応において使用するためのアジド又はアルキンを含む部分をいう。
一部の実施態様において、クリックレディインヒビター部分は、アジドを含む。いくつか
の実施態様において、クリックレディ-Tp-Rp部分は、銅-非含有クリック化学反応におい
て使用するために拘束された(strained)シクロオクチンを含む(例えば、Baskinらの文献
、 Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2007, 104, 16793-16797に説明された方法を使用)。
【実施例】
【０４２３】
(IX.  例証)
本開示は、下記実施例により更に例示されるが、これは本開示を、本明細書に説明され
た具体的手順の範囲又は精神に限定するものとして構築されるものではない。これらの実
施例は、いくつかの実施態様を例示するために提供され、且つこれにより本開示の精神の
限定を意図しないことは理解されるべきである。手段(resort)は、本開示の精神及び/又
は添付された特許請求の範囲から逸脱することなく、当業者自身示唆し得る様々な他の実
施態様、それらの変更及び同等物を有することができることは更に理解されるべきである
。
【０４２４】
(A.  XIAPの不可逆的インヒビターのデザイン)
(実施例1)
(3S,6S,10aR)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソ-N-((R)-1,2,3,4-テ
トラヒドロナフタレン-1-イル)デカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-3-カルボキサミド(化
合物A)は、XIAPの可逆的インヒビター(Ki26nM)である(Sunらの文献、J. Med. Chem. 52, 
593-596 (2009))。本明細書に記載された構造-ベースのデザインアルゴリズムを用い、化
合物Aを、可逆的インヒビターから、XIAPの強力且つ不可逆的インヒビターである化合物V
II-1へ変換した。化合物Aの化合物VII-1への変換プロセスを以下に説明する。
【化１７４】
2016195596.tif 000214
【０４２５】
化合物Aの関連化合物である化合物Bと複合体化されたXIAPのX-線結晶構造が、報告され
ており(Sun, H.らの文献、J. Med. Chem. 51, 7169-7180 (2008))、タンパク質データバ
ンクから得られた(www.rcsb.orgにおけるpdbcode 2JK7)。本明細書に記載のデザインアル
ゴリズムを用い、XIAPの共有的インヒビターをデザインするために、XIAPに結合した化合
物BのX-線錯体を使用した。
【化１７５】
2016195596.tif 000215
化合物Bの三次元構造は、Discovery Studio(www.accelrys.com)においてCDOCKER法を使用
し、XIAPリガンド結合部位にドッキングさせた(docked)。XIAPのリガンド結合部位を、参
照リガンドの周囲半径7.5Åを有する球形を用いて定義した。このドッキングの結果は、
インヒビター化合物Aは、XIAPへ結合された化合物BのX-線複合体において認められるもの
と同様の方式で、XIAPに結合されたことを明らかにした。XIAPのリガンド結合部位におけ
る化合物Bのドッキング後に、XIAP−化合物B複合体内の15Å以内のXIAPの全てのリシン残
基(Lys)が、同定された：Lys281、Lys297、Lys299、Lys311、Lys322、Lys328及びLys334
。
【０４２６】
化合物Aのモデル化された配位を使用し、鋳型Xにおいて以下に示されたA1位置(オルト-
、メタ-及びパラ-)、A2位置及びA3位置の各々に、アクリルアミド弾頭を構築することに
より、仮想の共有的インヒビターのライブラリーを作製した。
【化１７６】
2016195596.tif 000216
【０４２７】
弾頭位置と側鎖位置の柔軟性をサンプリングするために、弾頭位置とXIAP側鎖位置の分
子動力学シミュレーションを実行し、且つ解析し、弾頭は、結合部位の任意のLys残基の6
Å以内であるかどうかを決定した。加えて、弾頭と残基の間の可能性のある立体衝突(ste
ric clashe)の分析を行った。分子動力学シミュレーションに関して、Merck Molecular F
orce Field並びにDiscovery Studio(www.accelrys.com)のStandard Dynamics Cascade Si
mulationsプロトコールにおいて、標準の設定を用いた。非弾頭位置とLys主鎖原子の配位
は、分子動力学シミュレーションの間は固定し続けた。このモデリングは、VII-1(A1＝メ
タ-置換されたアクリルアミド)は、XIAPのLys297に、同じくLys299にも近いことを明らか
にした。VII-1はこれらのLys残基のいずれかと結合を形成することができることを確認す
るために、XIAPとLys297又はLys299の間の反応生成物のモデルを構築した。両方の場合に
おいて、反応生成物は、モデルの幾何配置においていかなる有意な変化も伴わずに形成さ
れ、これにより結合の形成が裏付けられた。
【０４２８】
次に、VII-1を合成し、これはKi161nMでXIAPを阻害したのに対し(下記表2参照)、不活
性対照化合物である化合物VII-2は、Ki＞10,000nMを示した。XIAPとインキュベーション
されたVII-1の反応生成物の質量分光分析は、VII-1はXIAPを共有的に修飾することを明ら
かにした(下記実施例50及び51参照)。
【化１７７】
2016195596.tif 000217
【０４２９】
(B.  XIAPインヒビター合成実施例)
(実施例1A)
【化１７８】
2016195596.tif 000218
(3S,6S,10aS)-N-(3-アクリルアミドベンジル)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミ
ド)-5-オキソデカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-3-カルボキサミド：表題化合物を、下記
に説明されたような工程及び中間体に従い、調製した。
【化１７９】
2016195596.tif 000219
【０４３０】
(S)-2-ベンジル 1-tert-ブチル 5-オキソピロリジン-1,2-ジカルボキシラート(1a)
【化１８０】
2016195596.tif 000220
【０４３１】
無水ジクロロメタン(1.0L)中のL-ピログルタミン酸(75g, 0.58mol)及びN,N-ジイソプロ
ピル-エチルアミン(87.3g, 0.676mol)の攪拌溶液へ、0℃で、臭化ベンジル(98.84g, 0.58
mol)を滴加した。この反応混合物を、還流下で5時間加熱し、室温へ冷却し、且つNaH2PO4
水溶液で洗浄した。水層をCH2Cl2で抽出し；一緒にした有機層を、ブラインで洗浄し、Na
2SO4上で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。次に得られた残渣を、アセトニトリル(1.5
L)中に投入し、且つ4-ジメチルアミノピリジン(7.09g, 58.0mmol)及びBoc-無水物(150.0g
, 0.688mol)を添加し、且つ室温で3時間攪拌した。この反応混合物を濃縮し；得られた残
渣を、水で処理し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル層を、NaH2PO4水溶液及びブライ
ンで洗浄し、Na2SO4上で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、淡黄色の粘稠な油状物を生じ
た。これを、酢酸エチル-石油エーテルで結晶化させ、1a(150g, 80.8％)を淡黄色固形物
として生じた。
【０４３２】
(2S)-2-ベンジル 1-tert-ブチル 5-ヒドロキシピロリジン-1,2-ジカルボキシラート(1b
)
【化１８１】
2016195596.tif 000221
【０４３３】
THF(1000mL)中の1a(100.0g, 313.1mmol)の攪拌溶液へ、-78℃、窒素下で、スーパーヒ
ドリド(登録商標)(THF中1M, 469mL, 469mmol)をゆっくり添加し、この混合物を、-78℃で
2時間攪拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液(300mL)を添加し、この反応混合物を0℃
で30分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、THFをほとんど除去し、残渣を酢酸エチルで抽
出した。一緒にした有機抽出液を、Na2SO4上で乾燥し、濾過し、且つ減圧下で濃縮し、1b
(100g, 99.3％)を無色の油状物として得た。これを、更に精製することなく次工程に供し
た。
【０４３４】
(2S)-2-ベンジル 1-tert-ブチル 5-メトキシピロリジン-1,2-ジカルボキシラート(1c)
【化１８２】
2016195596.tif 000222
【０４３５】
メタノール(1000mL)中の1b(100g, 311.1mmol)の攪拌溶液へ、p-トルエンスルホン酸一
水和物(5.89g, 30.96mmol)を添加し、室温で16時間攪拌した。飽和炭酸水素ナトリウム溶
液(500mL)を添加し、次に減圧下で濃縮し、メタノールをほとんど除去した。残渣をMTBE
で抽出し、一緒にしたMTBE抽出物を、ブラインで洗浄し、Na2SO4上で乾燥し、濾過し、減
圧下で濃縮し、1c(88g, 84.3％)を無色の油状物として得た。これは、更に精製すること
なく次工程に供した。
【０４３６】
(2S)-2-ベンジル 1-tert-ブチル 5-アリルピロリジン-1,2-ジカルボキシラート(1d)
【化１８３】
2016195596.tif 000223
【０４３７】
ジクロロメタン(250mL)中の1c(25g, 74.4mmol)の攪拌溶液へ、-78℃で、三フッ化ホウ
素ジエチルエーテル(9.2mL, 74.5mmol)をゆっくり添加し、この溶液を、-78℃で1時間攪
拌した。アリルトリブチルスズ(28mL, 90.3mmol)をゆっくり添加し、この反応混合物を-7
8℃で3時間更に攪拌した。脱イオン水(300mL)を添加し、この溶液を室温まで温めさせた
。これをセライトを通して濾過し、層を分離し、水層をジクロロメタンで抽出した。一緒
にした有機抽出液を、水及びブラインで洗浄し、Na2SO4上で乾燥し、濾過し、減圧下で濃
縮し、粗物質を得た。得られた粗生成物を、カラムクロマトグラフィー(SiO2、酢酸エチ
ル：石油エーテル、8:92)により精製し、1d(15g, 58.3％)を無色の油状物として得た。
【０４３８】
(2S)-ベンジル 5-アリルピロリジン-2-カルボキシラート(1e)
【化１８４】
2016195596.tif 000224
【０４３９】
ジクロロメタン(300mL)中の1d(30g, 86.7mmol)の攪拌溶液へ、0℃で、トリフルオロ酢
酸(45mL)をゆっくり添加し、この溶液を室温で2時間、窒素下で攪拌した。反応混合物を
減圧下で濃縮し、得られた残渣をジクロロメタン-水(2:1, 150mL)に投入し、激しく攪拌
し、トリエチルアミン(50mL, 356.4mmol)を添加した。攪拌を、室温で2時間継続した。相
を分離し、且つ水相をジクロロメタンで抽出した。一緒にした有機抽出液を、Na2SO4上で
乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、1e(20g, 93.9％)を淡黄色油状物として得、これを更
に精製することなく次工程に供した。
【０４４０】
(2S)-ベンジル 5-アリル-1-((S)-2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)ペンタ-4-エノイ
ル)ピロリジン-2-カルボキシラート(1f)
【化１８５】
2016195596.tif 000225
【０４４１】
DMF(110mL)中の1e(11g, 44.9mmol)の攪拌溶液へ、(S)-2-(tert-ブトキシカルボニルア
ミノ)ペンタ-4-エン酸(9.65g, 44.9mmol)、EDC・HCl(12.87g, 67.35mmol)、HOBt(2.42g, 
17.96mmol)及びDIPEA(11.63mL, 67.35mmol)を添加した。この反応混合物を、室温で18時
間、窒素大気下で攪拌した。これを、冷水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。一緒にした
有機抽出液を、水及びブラインで洗浄し、Na2SO4上で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、
残渣を得た。得られた粗生成物を、別の同様のバッチから得られた粗物質と混合し、カラ
ムクロマトグラフィー(SiO2、石油エーテル中15〜20％酢酸エチル)により精製し、1f(25g
, 62.9％)を淡黄色油状物として得た。
【０４４２】
(3S,6S,10aR,Z)-ベンジル 6-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-5-オキソ-1,2,3,5,6,7
,10,10a-オクタヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-3-カルボキシラート(1g)
【化１８６】
2016195596.tif 000226
【０４４３】
ジクロロメタン(500mL)中の1f(25g, 56.49mmol)の溶液へ、ビス(トリシクロヘキシルホ
スフィン)ベンジリデンルテニウム(IV)ジクロリド(グラブス触媒)(9.3g, 11.29mmol)を添
加し、還流温度で24時間攪拌した。室温まで冷却し、減圧下で濃縮し、残渣をMTBE中に投
入し、セライトを通して濾過し、濾液を減圧下で濃縮し、1g(50g)を暗緑色残渣として得
た。これを、更に精製することなく次工程に供した。
【０４４４】
(3S,6S,10aR,Z)-ベンジル 6-アミノ-5-オキソ-1,2,3,5,6,7,10,10a-オクタヒドロピロ
ロ[1,2-a]アゾシン-3-カルボキシラート(1h)
【化１８７】
2016195596.tif 000227
【０４４５】
ジクロロメタン(500mL)中の1g(〜50g、粗物質)の攪拌溶液へ、0℃で、トリフルオロ酢
酸(50mL)をゆっくり添加し、この溶液を室温で2時間窒素下で攪拌した。この反応混合物
を減圧下で濃縮し、得られた残渣を水に溶かした。これをMTBEで洗浄し；水層を、10％Na
OH溶液により塩基性とし、酢酸エチルで抽出した。一緒にした酢酸エチル抽出液を、水及
びブラインで洗浄し、Na2SO4上で乾燥し、濾過し、且つ減圧下で濃縮し、1h(9g、2工程で
の収率50.7％)を黄色油状物として得、これは十分に純粋であることがわかった。
【０４４６】
(3S,6S,10aR,Z)-ベンジル 6-((S)-2-(tert-ブトキシカルボニル(メチル)アミノ)プロパ
ンアミド)-5-オキソ-1,2,3,5,6,7,10,10a-オクタヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-3-カルボ
キシラート(1i)
【化１８８】
2016195596.tif 000228
【０４４７】
ジクロロメタン(150mL)中の1h(7.3g, 23.22mmol)の攪拌溶液へ、(R)-2-(tert-ブトキシ
カルボニル(メチル)アミノ)プロパン酸(4.71g, 23.22mmol)、EDC・HCl(6.59g, 34.5mmol)
、HOBt(1.55g, 11.5mmol)及びDIPEA(5.96mL, 34.5mmol)を添加し、且つ室温で18時間、窒
素大気下で攪拌した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣を水に溶かし、酢
酸エチルで抽出した。一緒にした有機抽出液を、水及びブラインで洗浄し、Na2SO4上で乾
燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、残渣を得た。これを、カラムクロマトグラフィー(SiO2
、クロロホルム中1〜2％メタノール)により精製し、1i(10g, 86.2％)を淡色油状物として
得た。
【０４４８】
(3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(tert-ブトキシカルボニル(メチル)アミノ)プロパンアミド)-5
-オキソデカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-3-カルボン酸(1j)
【化１８９】
2016195596.tif 000229
【０４４９】
エタノール(100mL)中の1i(2.5g, 5.01mmol)の溶液へ、炭素上に担持された10％パラジ
ウム(1.0g)を添加し、水素バルーンを使用し、室温で6時間攪拌した。この反応混合物を
、セライトを通して濾過し、濾液を減圧下で濃縮し、残渣を得た。これをジクロロメタン
に溶解し、セライトを通して濾過し、あらゆる溶解していない物質を除去し、濾液を減圧
下で濃縮し、1j(1.8g, 87.8％)を白色固形物として得た。
【化１９０】
2016195596.tif 000230
【０４５０】
(S)-1-((3S,6S,10aS)-3-(3-アミノベンジルカルバモイル)-5-オキソデカヒドロピロロ[
1,2-a]アゾシン-6-イルアミノ)-1-オキソプロパン-2-イル(メチル)カルバミン酸tert-ブ
チル(1k)
【化１９１】
2016195596.tif 000231
【０４５１】
アセトニトリル(16mL)中の1j(488mg)、3-アミノベンジルアミン(173mg)、EDC・HCl(272
mg)、HOBt(192mg)、N-メチルモルホリン(0.39mL)の混合物を、室温で一晩攪拌した。減圧
下で濃縮した後、残渣を、カラムクロマトグラフィー(SiO2、イソプロパノール：ジクロ
ロメタン、7:93)により直接精製し、所望のアニリン1kの420mgを白色固形物として供した
。
【化１９２】
2016195596.tif 000232
【０４５２】
(3S,6S,10aS)-N-(3-アクリルアミドベンジル)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミ
ド)-5-オキソデカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-3-カルボキサミド(VII-1)
【化１９３】
2016195596.tif 000233
【０４５３】
無水ジクロロメタン(2mL)中のアニリン1k(60mg)及びトリエチルアミン(80μl)の混合物
へ、塩化アクリロイル(19μl)を0℃で滴加した。0℃で10分間攪拌した後、トリフルオロ
酢酸(1mL)を、この反応混合物へ添加し、室温で10分間攪拌した。この反応混合物を濃縮
し、残渣を半分取HPLC(TFAモディファイア)を用いて精製し、白色固形物(VII-1)をTFA塩
として生じた。
【化１９４】
2016195596.tif 000234
【０４５４】
(実施例2)
【化１９５】
2016195596.tif 000235
(S)-1-((3S,6S,10aS)-3-(3-アクリルアミドベンジルカルバモイル)-5-オキソデカヒド
ロピロロ[1,2-a]アゾシン-6-イルアミノ)-1-オキソプロパン-2-イル(メチル)カルバミン
酸tert-ブチル：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い調製した
。
【０４５５】
無水ジクロロメタン(2mL)中のアニリン1k(60mg)及びトリエチルアミン(80μl)の混合物
へ、塩化アクリロイル(19μl)を0℃で滴加した。この反応混合物を濃縮し、残渣を半分取
HPLC(TFAモディファイア)を用いて精製し、白色固形物を生じた。LCMS: m/e 470.3 (M+1-
tBu)。
【０４５６】
(実施例3)
【化１９６】
2016195596.tif 000236
(3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソ-N-(3-((S)-5-オキ
ソテトラヒドロフラン-2-カルボキサミド)ベンジル)デカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-3
-カルボキサミド：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い調製し
た。
【０４５７】
ジクロロメタン(1mL)中のアニリン1k(19.8mg)、(S)-5-オキソ-2-テトラヒドロフランカ
ルボン酸(6mg)、EDC・HCl(12mg)、HOBt(9mg)、N-メチルモルホリン(20μl)の混合物を、
室温で一晩攪拌した。0℃で10分間攪拌した後、トリフルオロ酢酸(0.3mL)を反応混合物へ
添加し、室温で10分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を半分取HPLC(TFAモディファ
イア)を用いて精製し、TFA塩として白色固形物を生じた。LCMS: m/e 528.3 (M+1)。
【０４５８】
(実施例4)
【化１９７】
2016195596.tif 000237
(3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソ-N-(3-((S)-4-オキ
ソアゼチジン-2-カルボキサミド)ベンジル)デカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-3-カルボ
キサミド：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い調製した。
【０４５９】
ジクロロメタン(1mL)中のアニリン1k(24.5mg)、(S)-4-オキソ-2-アゼチジンカルボン酸
(6.6mg)、EDC・HCl(12mg)、HOBt(9mg)、N-メチルモルホリン(20μl)の混合物を、室温で
一晩攪拌した。0℃で10分間攪拌した後、トリフルオロ酢酸(0.3mL)を反応混合物に添加し
、室温で10分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を半分取HPLC(TFAモディファイア)
を用いて精製し、TFA塩として白色固形物を生じた。LCMS: m/e 513.3 (M+1)。
【０４６０】
(実施例5)
【化１９８】
2016195596.tif 000238
(3S,6S,10aS)-N-(3-(2-イソプロポキシ-3,4-ジオキソシクロブタ-1-エニルアミノ)ベン
ジル)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソデカヒドロピロロ[1,2-a]アゾ
シン-3-カルボキサミド：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い
調製した。
【０４６１】
ジクロロメタン(1mL)中のアニリン1k(37.7mg)、3,4-ジイソプロピル-3-シクロブテン-1
,2-ジオン(16mg)、トリエチルアミン(20μl)の混合物を、室温で一晩攪拌した。0℃で10
分間攪拌した後、トリフルオロ酢酸(0.3mL)を反応混合物に添加し、室温で10分間攪拌し
た。反応混合物を濃縮し、残渣を半分取HPLC(TFAモディファイア)を用いて精製し、TFA塩
として白色固形物を生じた。LCMS: m/e 554.2 (M+1)。
【０４６２】
(実施例6)
【化１９９】
2016195596.tif 000239
(3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソ-N-(3-(3-オキソブ
タンアミド)ベンジル)デカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-3-カルボキサミド：表題化合物
を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い調製した。
【０４６３】
ジオキサン(1mL)中のアニリン1k(20mg)、2,2,4-トリメチル-6-ケト-1,3-ジオキシン(10
μl)の混合物を、80℃で一晩攪拌した。この混合物を濃縮し、且つジクロロメタン(1mL)
で希釈した。トリフルオロ酢酸(0.3mL)を反応混合物に添加し、室温で10分間攪拌した。
反応混合物を濃縮し、残渣を半分取HPLC(TFAモディファイア)を用いて精製し、TFA塩とし
て白色固形物を生じた。LCMS: m/e 500.3 (M+1)。
【０４６４】
(実施例7)
【化２００】
2016195596.tif 000240
(3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソ-N-(3-(4,4,4-トリ
フルオロ-3-オキソブタンアミド)ベンジル)デカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-3-カルボ
キサミド：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い調製した。
【０４６５】
トルエン(1mL)中のアニリン1k(12mg)、4,4,4-トリフルオロアセト酢酸エチル(100μl)
の混合物を、80℃で2時間攪拌した。この混合物を濃縮し、且つジクロロメタン(1mL)で希
釈した。トリフルオロ酢酸(0.3mL)を反応混合物に添加し、室温で10分間攪拌した。反応
混合物を濃縮し、残渣を半分取HPLC(TFAモディファイア)を用いて精製し、TFA塩として白
色固形物を生じた。LCMS: m/e 554.2 (M+1)。
【０４６６】
(実施例8)
【化２０１】
2016195596.tif 000241
(3S,6S,10aS)-N-(3-((E)-4-(ジメチルアミノ)ブタ-2-エナミド)ベンジル)-6-((S)-2-(
メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソデカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-3-カルボキ
サミド：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い調製した。
【０４６７】
無水ジクロロメタン(1mL)中のアニリン1k(12.7mg)及びジイソプロピルエチルアミン(10
0μl)の混合物へ、(E)-4-(ジメチルアミノ)ブタ-2-エノイルクロリド(20μl)を0℃で滴加
した。0℃で10分間攪拌した後、トリフルオロ酢酸(1mL)を反応混合物に添加し、室温で10
分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を半分取HPLC(TFAモディファイア)を用いて精
製し、TFA塩として白色固形物を生じた。LCMS: m/e 527.3 (M+1)。
【０４６８】
(実施例9)
【化２０２】
2016195596.tif 000242
(3S,6S,10aS)-N-(3-メタクリルアミドベンジル)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンア
ミド)-5-オキソデカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-3-カルボキサミド：表題化合物を、下
記に説明されたような工程及び中間体に従い調製した。
【０４６９】
無水ジクロロメタン(1mL)中のアニリン1k(10mg)及びジイソプロピルエチルアミン(50μ
l)の混合物へ、塩化メタクリロイル(20μl)を0℃で滴加した。0℃で10分間攪拌した後、
トリフルオロ酢酸(1mL)を反応混合物に添加し、室温で10分間攪拌した。反応混合物を濃
縮し、残渣を半分取HPLC(TFAモディファイア)を用いて精製し、TFA塩として白色固形物を
生じた。LCMS: m/e 484.4 (M+1)。
【０４７０】
(実施例10)
【化２０３】
2016195596.tif 000243
(3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-N-(3-(3-メチルブタ-2-エナ
ミド)ベンジル)-5-オキソデカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-3-カルボキサミド：表題化
合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い調製した。
【０４７１】
無水ジクロロメタン(1mL)中のアニリン1k(10mg)及びジイソプロピルエチルアミン(50μ
l)の混合物へ、3-メチルブタ-2-エノイルクロリド(20μl)を0℃で滴加した。0℃で10分間
攪拌した後、トリフルオロ酢酸(1mL)を反応混合物に添加し、室温で10分間攪拌した。反
応混合物を濃縮し、残渣を半分取HPLC(TFAモディファイア)を用いて精製し、TFA塩として
白色固形物を生じた。LCMS: m/e 498.3 (M+1)。
【０４７２】
(実施例11)
【化２０４】
2016195596.tif 000244
VII-16は、下記に説明されたような工程及び中間体に従い調製した。
【０４７３】
ジクロロメタン(1mL)中のアニリン1k(13.2mg)、アクリル酸-d4(1.7μl)、EDC・HCl(8mg
)、HOBt(6mg)、N-メチルモルホリン(13μl)の混合物を、室温で一晩攪拌した。0℃で10分
間攪拌した後、トリフルオロ酢酸(0.3mL)を反応混合物に添加し、室温で10分間攪拌した
。反応混合物を濃縮し、残渣を半分取HPLC(TFAモディファイア)を用いて精製し、TFA塩と
して白色固形物を生じた。LCMS: m/e 473.2 (M+1)。
【０４７４】
(実施例12)
【化２０５】
2016195596.tif 000245
(3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソ-N-(3-((R)-5-オキ
ソテトラヒドロフラン-2-カルボキサミド)ベンジル)デカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-3
-カルボキサミド：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い調製し
た。
【０４７５】
ジクロロメタン(1mL)中のアニリン1k(8.1mg)、(R)-5-オキソ-2-テトラヒドロフランカ
ルボン酸(2.4mg)、EDC・HCl(5mg)、HOBt(4mg)、N-メチルモルホリン(10μl)の混合物を、
室温で一晩攪拌した。0℃で10分間攪拌した後、トリフルオロ酢酸(0.3mL)を反応混合物に
添加し、室温で10分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を半分取HPLC(TFAモディファ
イア)を用いて精製し、TFA塩として白色固形物を生じた。LCMS: m/e 528.3 (M+1)。
【０４７６】
(実施例13)
【化２０６】
2016195596.tif 000246
(3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソ-N-(3-(ビニルスル
ホンアミド)ベンジル)デカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-3-カルボキサミド：表題化合物
を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い調製した。
【０４７７】
無水ジクロロメタン(1mL)中のアニリン1k(30mg)及びジイソプロピルエチルアミン(50μ
l)の混合物へ、2-クロロ-1-エタンスルホニルクロリド(5μl)を0℃で滴加した。0℃から
室温で30分間攪拌した後、トリフルオロ酢酸(1mL)を反応混合物に添加し、室温で10分間
攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を半分取HPLC(TFAモディファイア)を用いて精製し
、TFA塩として白色固形物を生じた。LCMS: m/e 506.2 (M+1)。
【０４７８】
(実施例14)
【化２０７】
2016195596.tif 000247
(3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソ-N-(3-((4R)-4,7,7-
トリメチル-3-オキソ-2-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタン-1-カルボキサミド)ベンジル)デ
カヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-3-カルボキサミド：表題化合物を、下記に説明されたよ
うな工程及び中間体に従い調製した。
【０４７９】
ジクロロメタン(1mL)中のアニリン1k(8.0mg)、(1S)-(-)-カンファン酸(6.0mg)、EDC・H
Cl(8mg)、HOBt(6mg)、N-メチルモルホリン(10μl)の混合物を、室温で2日間攪拌した。0
℃で10分間攪拌した後、トリフルオロ酢酸(0.3mL)を反応混合物に添加し、室温で10分間
攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を半分取HPLC(TFAモディファイア)を用いて精製し
、TFA塩として白色固形物を生じた。LCMS: m/e 596.4 (M+1)。
【０４８０】
(実施例15)
【化２０８】
2016195596.tif 000248
(3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソ-N-(3-((4S)-4,7,7-
トリメチル-3-オキソ-2-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタン-1-カルボキサミド)ベンジル)デ
カヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-3-カルボキサミド：表題化合物を、下記に説明されたよ
うな工程及び中間体に従い調製した。
【０４８１】
ジクロロメタン(1mL)中のアニリン1k(8.1mg)、(1R)-(+)-カンファン酸(12mg)、EDC・HC
l(16mg)、HOBt(12mg)、N-メチルモルホリン(10μl)の混合物を、室温で3日間攪拌した。0
℃で10分間攪拌した後、トリフルオロ酢酸(0.3mL)を反応混合物に添加し、室温で10分間
攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を半分取HPLC(TFAモディファイア)を用いて精製し
、TFA塩として白色固形物を生じた。LCMS: m/e 596.3 (M+1)。
【０４８２】
(実施例16)
【化２０９】
2016195596.tif 000249
(3S,6S,10aS)-N-(3-(1-アセチルシクロプロパンカルボキサミド)ベンジル)-6-((S)-2-(
メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソデカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-3-カルボキ
サミド：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い調製した。
【０４８３】
ジクロロメタン(1mL)中のアニリン1k(14.2mg)、1-アセチルシクロプロパンカルボン酸(
10mg)、HATU(20mg)、ジイソプロピルエチルアミン(10μl)の混合物を、室温で一晩攪拌し
た。0℃で10分間攪拌した後、トリフルオロ酢酸(0.3mL)を反応混合物に添加し、室温で10
分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を半分取HPLC(TFAモディファイア)を用いて精
製し、TFA塩として白色固形物を生じた。LCMS: m/e 526.3 (M+1)。
【０４８４】
(実施例17)
【化２１０】
2016195596.tif 000250
(3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソ-N-(3-((S)-5-オキ
ソピロリジン-2-カルボキサミド)ベンジル)デカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-3-カルボ
キサミド：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い調製した。
【０４８５】
ジクロロメタン(1mL)中のアニリン1k(8mg)、(S)-2-ピロリジン-5-カルボン酸(5mg)、ED
C・HCl(10mg)、HOBt(7mg)、ジイソプロピルエチルアミン(10μl)の混合物を、室温で一晩
攪拌した。0℃で10分間攪拌した後、トリフルオロ酢酸(0.3mL)を反応混合物に添加し、室
温で10分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を半分取HPLC(TFAモディファイア)を用
いて精製し、TFA塩として白色固形物を生じた。LCMS: m/e 527.2 (M+1)。
【０４８６】
(実施例18)
【化２１１】
2016195596.tif 000251
(3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソ-N-(3-((R)-5-オキ
ソピロリジン-2-カルボキサミド)ベンジル)デカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-3-カルボ
キサミド：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い調製した。
【０４８７】
ジクロロメタン(1mL)中のアニリン1k(8mg)、(R)-2-ピリリジン(pyrrlidine)-5-カルボ
ン酸(5mg)、EDC・HCl(10mg)、HOBt(7mg)、ジイソプロピルエチルアミン(10μl)の混合物
を、室温で一晩攪拌した。0℃で10分間攪拌した後、トリフルオロ酢酸(0.3mL)を反応混合
物に添加し、室温で10分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を半分取HPLC(TFAモディ
ファイア)を用いて精製し、TFA塩として白色固形物を生じた。LCMS: m/e 527.2 (M+1)。
【０４８８】
(実施例19)
【化２１２】
2016195596.tif 000252
(3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソ-N-(3-(2-オキソテ
トラヒドロフラン-3-カルボキサミド)ベンジル)デカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-3-カ
ルボキサミド:表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い調製した。
【０４８９】
ジクロロメタン(1mL)中のアニリン1k(8mg)、2-オキソ-3-テトラヒドロフランカルボン
酸(10mg)、EDC・HCl(10mg)、HOBt(7mg)、ジイソプロピルエチルアミン(10μl)の混合物を
、室温で一晩攪拌した。0℃で10分間攪拌した後、トリフルオロ酢酸(0.3mL)を反応混合物
に添加し、室温で10分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を半分取HPLC(TFAモディフ
ァイア)を用いて精製し、TFA塩として白色固形物を生じた。LCMS: m/e 528.3 (M+1)。
【０４９０】
(実施例20)
【化２１３】
2016195596.tif 000253
(3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソ-N-(3-(5-オキソテ
トラヒドロフラン-3-カルボキサミド)ベンジル)デカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-3-カ
ルボキサミド：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い調製した。
【０４９１】
ジクロロメタン(1mL)中のアニリン1k(8mg)、2-オキソ-4-テトラヒドロフランカルボン
酸(10mg)、EDC・HCl(10mg)、HOBt(7mg)、ジイソプロピルエチルアミン(10μl)の混合物を
、室温で一晩攪拌した。0℃で10分間攪拌した後、トリフルオロ酢酸(0.3mL)を反応混合物
に添加し、室温で10分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を半分取HPLC(TFAモディフ
ァイア)を用いて精製し、TFA塩として白色固形物を生じた。LCMS: m/e 528.3 (M+1)。
【０４９２】
(実施例21)
【化２１４】
2016195596.tif 000254
(3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソ-N-(3-((R)-4-オキ
ソアゼチジン-2-カルボキサミド)ベンジル)デカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-3-カルボ
キサミド：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い調製した。
【０４９３】
ジクロロメタン(1mL)中のアニリン1k(16mg)、(R)-4-オキソ-2-アゼチジンカルボン酸(1
2mg)、EDC・HCl(20mg)、HOBt(14mg)、ジイソプロピルエチルアミン(20μl)の混合物を、
室温で一晩攪拌した。0℃で10分間攪拌した後、トリフルオロ酢酸(0.3mL)を反応混合物に
添加し、室温で10分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を半分取HPLC(TFAモディファ
イア)を用いて精製し、TFA塩として白色固形物を生じた。LCMS: m/e 513.3 (M+1)。
【０４９４】
(実施例22)
【化２１５】
2016195596.tif 000255
(S)-1-((3S,6S,10aS)-3-(3-(2,4-ジオキソペンタン-3-イル)ベンジルカルバモイル)-5-
オキソデカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-6-イルアミノ)-1-オキソプロパン-2-イル(メチ
ル)カルバミン酸tert-ブチル：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に
従い調製した。
【０４９５】
アセトニトリル(10mL)中の1j(250mg)、3-ヨードベンジルアミン(97μl)、EDC・HCl(152
mg)、HOBt(99mg)、N-メチルモルホリン(0.20mL)の混合物を、室温で一晩攪拌した。減圧
下で濃縮した後、残渣を、カラムクロマトグラフィー(SiO2、イソプロパノール：ジクロ
ロメタン、7:93)により直接精製し、所望のヨウ化物300mgを得た。LCMS: m/e 527.2 (M+1
-tBu)。
【０４９６】
DMSO(1mL)中の調製したヨウ化物(32mg)に、ヨウ化銅(1.0mg)、L-プロリン(1.2mg)、炭
酸セシウム(66mg)及びアセチルアセトン(10μl)を添加し、90℃で2時間攪拌した。この反
応混合物を濾過し、濾液を半分取HPLC(TFAモディファイア)を用いて精製し、固形物を生
じた。LCMS: m/e 499.2 (M+1-tBu)。
【０４９７】
(実施例23)
【化２１６】
2016195596.tif 000256
(3S,6S,10aS)-N-(3-(2,4-ジオキソペンタン-3-イル)ベンジル)-6-((S)-2-(メチルアミ
ノ)プロパンアミド)-5-オキソデカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-3-カルボキサミド：表
題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い調製した。
【０４９８】
ジクロロメタン(1mL)中の(S)-1-((3S,6S,10aS)-3-(3-(2,4-ジオキソペンタン-3-イル)
ベンジルカルバモイル)-5-オキソデカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-6-イルアミノ)-1-オ
キソプロパン-2-イル(メチル)カルバミン酸tert-ブチル(VII-7)(7mg)へ、トリフルオロ酢
酸(0.3mL)を添加し、室温で10分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を半分取HPLC(TF
Aモディファイア)を用いて精製し、TFA塩として白色固形物を生じた。LCMS: m/e 499.2 (
M+1)。
【０４９９】
(実施例24)
【化２１７】
2016195596.tif 000257
(3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソ-N-(3-((S)-2-オキ
ソテトラヒドロフラン-3-イルカルバモイル)ベンジル)デカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン
-3-カルボキサミド：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い調製
した。
【化２１８】
2016195596.tif 000258
【０５００】
(S)-3-(2-オキソテトラヒドロフラン-3-イルカルバモイル)ベンジルカルバミン酸tert-
ブチル(2a)
【化２１９】
2016195596.tif 000259
【０５０１】
アセトニトリル(2mL)中の3-((tert-ブトキシカルボニルアミノ)メチル)安息香酸(100mg
)、(S)-3-アミノジヒドロフラン-2(3H)-オン塩酸塩(55mg)、EDC・HCl(92mg)、HOBt(64mg)
、N-メチルモルホリン(0.13mL)の混合物を、室温で一晩攪拌した。減圧下で濃縮した後、
残渣をカラムクロマトグラフィー(SiO2、ヘプタン：酢酸エチル、10:90)により直接精製
し、所望のアニリン2aの120mgを白色固形物として得た。
【化２２０】
2016195596.tif 000260
【０５０２】
【化２２１】
2016195596.tif 000261
(3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソ-N-(3-((S)-2-オキ
ソテトラヒドロフラン-3-イルカルバモイル)ベンジル)デカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン
-3-カルボキサミド
【０５０３】
無水ジクロロメタン(1mL)中のラクトン2a(40mg)へ、トリフルオロ酢酸(0.3mL)を室温で
滴加した。室温で10分間攪拌した後、反応混合物を、減圧下で完全に濃縮した。無水ジク
ロロメタン(1mL)中のこの残渣2bへ、1j(12mg)、EDC・HCl(5.6mg)、HOBt(4.3mg)、N-メチ
ルモルホリン(9.6μl)を添加し、且つ得られた混合物を、室温で一晩攪拌した。トリフル
オロ酢酸(0.3mL)を、この反応混合物へ添加し、室温で10分間攪拌した。反応混合物を濃
縮し、残渣を半分取HPLC(TFAモディファイア)を用いて精製し、白色固形物VII-13をTFA塩
として生じた。
【化２２２】
2016195596.tif 000262
【０５０４】
(実施例25)
【化２２３】
2016195596.tif 000263
(3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソ-N-(3-(6-オキソテ
トラヒドロ-2H-ピラン-2-カルボキサミド)ベンジル)デカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-3
-カルボキサミド：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い調製し
た。
【０５０５】
無水ジクロロメタン(1mL)中の3-(6-オキソテトラヒドロ-2H-ピラン-2-カルボキサミド)
ベンジルカルバミン酸tert-ブチル(20mg)へ、トリフルオロ酢酸(0.3mL)を室温で滴加した
。室温で10分間攪拌した後、反応混合物を減圧下で完全に濃縮した。無水ジクロロメタン
(1mL)中のこの残渣へ、1j(12mg)、EDC・HCl(20mg)、HOBt(14mg)、N-メチルモルホリン(20
μl)を添加し、得られた混合物を室温で一晩攪拌した。トリフルオロ酢酸(0.3mL)を、反
応混合物へ添加し、室温で10分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を半分取HPLC(TFA
モディファイア)を用いて精製し、白色固形物をTFA塩として生じた。LCMS: m/e 542.3 (M
+1)。
【０５０６】
(実施例26)
【化２２４】
2016195596.tif 000264
4,4-ジメチル-2-オキソテトラヒドロフラン-3-イル 3-(((3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチ
ルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソデカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-3-カルボキサミ
ド)メチル)ベンゾエート：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い
調製した。
【０５０７】
無水ジクロロメタン(1mL)中の4,4-ジメチル-2-オキソテトラヒドロフラン-3-イル 3-((
tert-ブトキシカルボニルアミノ)メチル)ベンゾエート(40mg)へ、トリフルオロ酢酸(0.3m
L)を室温で滴加した。室温で10分間攪拌した後、反応混合物を減圧下で完全に濃縮した。
無水ジクロロメタン(1mL)中のこの残渣に、1j(12mg)、EDC・HCl(5.6mg)、HOBt(4.3mg)、N
-メチルモルホリン(9.6μl)を添加し、得られた混合物を室温で一晩攪拌した。トリフル
オロ酢酸(0.3mL)を反応混合物に添加し、室温で10分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、
残渣を半分取HPLC(TFAモディファイア)を用いて精製し、白色固形物をTFA塩として得た。
LCMS: m/e 557.3 (M+1)。
【０５０８】
(実施例27)
【化２２５】
2016195596.tif 000265
2-オキソテトラヒドロフラン-3-イル 3-(((3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロ
パンアミド)-5-オキソデカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-3-カルボキサミド)メチル)ベン
ゾエート：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い調製した。
【０５０９】
無水ジクロロメタン(1mL)中の2-オキソテトラヒドロフラン-3-イル 3-((tert-ブトキシ
カルボニルアミノ)メチル)ベンゾエート(40mg)へ、トリフルオロ酢酸(0.3mL)を室温で滴
加した。室温で10分間攪拌した後、反応混合物を減圧下で完全に濃縮した。無水ジクロロ
メタン(1mL)中のこの残渣に、1j(12mg)、EDC・HCl(5.6mg)、HOBt(4.3mg)、N-メチルモル
ホリン(9.6μl)を添加し、得られた混合物を室温で一晩攪拌した。トリフルオロ酢酸(0.3
mL)を反応混合物へ添加し、室温で10分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を半分取H
PLC(TFAモディファイア)を用いて精製し、白色固形物をTFA塩として生じた。LCMS: m/e 5
29.3 (M+1)。
【０５１０】
(実施例28)
【化２２６】
2016195596.tif 000266
(3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソ-N-(3-(2-オキソテ
トラヒドロフラン-3-イルオキシ)ベンジル)デカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-3-カルボ
キサミド：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い調製した。
【０５１１】
無水ジクロロメタン(1mL)中の3-(3-(アミノメチル)フェノキシ)ジヒドロフラン-2(3H)-
オン(10mg)へ、1j(12mg)、EDC・HCl(5.6mg)、HOBt(4.3mg)、N-メチルモルホリン(9.6μl)
を添加し、得られた混合物を室温で一晩攪拌した。トリフルオロ酢酸(0.3mL)を反応混合
物へ添加し、室温で10分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を半分取HPLC(TFAモディ
ファイア)を用いて精製し、白色固形物をTFA塩として生じた。LCMS: m/e 501.3 (M+1)。
【０５１２】
(実施例29)
【化２２７】
2016195596.tif 000267
(3S,6S,10aS)-N-(3-(アクリルアミドメチル)ベンジル)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロ
パンアミド)-5-オキソデカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-3-カルボキサミド：表題化合物
を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い調製した。
【０５１３】
無水ジクロロメタン(1mL)中の1,3-フェニレンジメタンアミン(0.1mL)へ、1j(12mg)、ED
C・HCl(5.6mg)、HOBt(4.3mg)、N-メチルモルホリン(9.6μl)を添加し、得られた混合物を
室温で一晩攪拌した。0℃で塩化アクリロイルを添加し、0℃で10分間攪拌した。トリフル
オロ酢酸(0.3mL)を反応混合物へ添加し、室温で10分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、
残渣を半分取HPLC(TFAモディファイア)を用いて精製し、白色固形物をTFA塩として生じた
。LCMS: m/e 484.3 (M+1)。
【０５１４】
(実施例30)
【化２２８】
2016195596.tif 000268
(3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-N-(3-(3-メチルブタ-2-エノ
イル)ベンジル)-5-オキソデカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-3-カルボキサミド：表題化
合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い調製した。
【０５１５】
無水ジクロロメタン(1mL)中の3-(3-メチルブタ-2-エノイル)ベンジルカルバミン酸tert
-ブチル(40mg)へ、トリフルオロ酢酸(0.3mL)を室温で滴加した。室温で10分間攪拌した後
、反応混合物を減圧下で完全に濃縮した。無水ジクロロメタン(1mL)中のこの残渣へ、1j(
28mg)、EDC・HCl(17.3mg)、HOBt(12.2mg)、N-メチルモルホリン(25μl)を添加し、得られ
た混合物を室温で一晩攪拌した。トリフルオロ酢酸(0.3mL)を反応混合物へ添加し、室温
で10分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を半分取HPLC(TFAモディファイア)を用い
て精製し、白色固形物をTFA塩として得た。LCMS: m/e 483.3 (M+1)。
【０５１６】
(実施例31)
【化２２９】
2016195596.tif 000269
(3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソ-N-(3-((1S,4S)-3-
オキソ-2-オキサ-5-アザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-5-カルボニル)ベンジル)デカヒドロピ
ロロ[1,2-a]アゾシン-3-カルボキサミド：表題化合物を、下記に説明されたような工程及
び中間体に従い調製した。
【０５１７】
無水ジクロロメタン(1mL)中の3-((1S,4S)-3-オキソ-2-オキサ-5-アザビシクロ[2.2.1]
ヘプタン-5-カルボニル)ベンジルカルバミン酸tert-ブチル(55mg)へ、トリフルオロ酢酸(
0.3mL)を室温で滴加した。室温で10分間攪拌した後、反応混合物を減圧下で完全に濃縮し
た。無水ジクロロメタン(1mL)中のこの残渣へ、1j(28mg)、EDC・HCl(17.3mg)、HOBt(12.2
mg)、N-メチルモルホリン(25μl)を添加し、得られた混合物を室温で一晩攪拌した。トリ
フルオロ酢酸(0.3mL)を反応混合物へ添加し、室温で10分間攪拌した。反応混合物を濃縮
し、残渣を半分取HPLC(TFAモディファイア)を用いて精製し、白色固形物をTFA塩として生
じた。LCMS: m/e 540.3 (M+1)。VII-20。
【０５１８】
(実施例32)
【化２３０】
2016195596.tif 000270
(3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソ-N-(3-((S)-5-オキ
ソテトラヒドロフラン-3-イルカルバモイル)ベンジル)デカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン
-3-カルボキサミド：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い調製
した。
【０５１９】
無水ジクロロメタン(1mL)中の(S)-3-(5-オキソテトラヒドロフラン-3-イルカルバモイ
ル)ベンジルカルバミン酸tert-ブチル(20mg)へ、トリフルオロ酢酸(0.3mL)を室温で滴加
した。室温で10分間攪拌した後、反応混合物を減圧下で完全に濃縮した。無水ジクロロメ
タン(1mL)中のこの残渣に、1j(20mg)、EDC・HCl(17.3mg)、HOBt(12.2mg)、N-メチルモル
ホリン(50μl)を添加し、得られた混合物を室温で一晩攪拌した。トリフルオロ酢酸(0.3m
L)を反応混合物へ添加し、室温で10分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を半分取HP
LC(TFAモディファイア)を用いて精製し、白色固形物をTFA塩として生じた。LCMS: m/e 52
8.3 (M+1)。
【０５２０】
(実施例33)
【化２３１】
2016195596.tif 000271
(3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソ-N-(3-((1R,4R)-3-
オキソ-2-オキサ-5-アザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-5-カルボニル)ベンジル)デカヒドロピ
ロロ[1,2-a]アゾシン-3-カルボキサミド：表題化合物を、下記に説明されたような工程及
び中間体に従い調製した。
【０５２１】
無水ジクロロメタン(1mL)中の3-((1R,4R)-3-オキソ-2-オキサ-5-アザビシクロ[2.2.1]
ヘプタン-5-カルボニル)ベンジルカルバミン酸tert-ブチル(30mg)へ、トリフルオロ酢酸(
0.3mL)を室温で滴加した。室温で10分間攪拌した後、反応混合物を減圧下で完全に濃縮し
た。無水ジクロロメタン(1mL)中のこの残渣へ、1j(11.5mg)、EDC・HCl(17mg)、HOBt(12mg
)、N-メチルモルホリン(10μl)を添加し、得られた混合物を室温で一晩攪拌した。トリフ
ルオロ酢酸(0.3mL)を反応混合物へ添加し、室温で10分間攪拌した。反応混合物を濃縮し
、残渣を半分取HPLC(TFAモディファイア)を用いて精製し、白色固形物をTFA塩として生じ
た。LCMS: m/e 540.3 (M+1)。
【０５２２】
(実施例34)
【化２３２】
2016195596.tif 000272
(3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソ-N-(3-((R)-2-オキ
ソテトラヒドロフラン-3-イルカルバモイル)ベンジル)デカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン
-3-カルボキサミド：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い調製
した。
【０５２３】
無水ジクロロメタン(1mL)中の(R)-3-(5-オキソテトラヒドロフラン-3-イルカルバモイ
ル)ベンジルカルバミン酸tert-ブチル(37mg)へ、トリフルオロ酢酸(0.3mL)を室温で滴加
した。室温で10分間攪拌した後、反応混合物を減圧下で完全に濃縮した。無水ジクロロメ
タン(1mL)中のこの残渣へ、1j(10mg)、EDC・HCl(17.3mg)、HOBt(12.2mg)、N-メチルモル
ホリン(10μl)を添加し、得られた混合物を室温で一晩攪拌した。トリフルオロ酢酸(0.3m
L)を反応混合物へ添加し、室温で10分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を半分取HP
LC(TFAモディファイア)を用いて精製し、白色固形物をTFA塩として生じた。LCMS: m/e 52
8.3 (M+1)。
【０５２４】
(実施例35)
【化２３３】
2016195596.tif 000273
3-(((3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソデカヒドロピロ
ロ[1,2-a]アゾシン-3-カルボキサミド)メチル)ベンジル 3-オキソブタノエート：表題化
合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い調製した。
【０５２５】
無水ジクロロメタン(1mL)中の(3-(アミノメチル)フェニル)メタノール(10mg)へ、1j(13
.7mg)、EDC・HCl(7mg)、HOBt(5.0mg)、N-メチルモルホリン(10μl)を添加し、得られた混
合物を、半分取HPLC(TFAモディファイア)を用いて精製した。ジメトキシエタン(1mL)中の
単離された生成物(5mg)、2,2,4-トリメチル-6-ケト-1,3-ジオキシン(10μl)の混合物を、
80℃で一晩攪拌した。この混合物を濃縮し、ジクロロメタン(1mL)で希釈した。トリフル
オロ酢酸(0.3mL)を反応混合物へ添加し、室温で10分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、
残渣を半分取HPLC(TFAモディファイア)を用いて精製し、白色固形物をTFA塩として生じた
。LCMS: m/e 515.2 (M+1)。
【０５２６】
(実施例36)
【化２３４】
2016195596.tif 000274
(3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソ-N-(3-(2-オキソモ
ルホリン-4-カルボニル)ベンジル)デカヒドロピロロ[1,2-a]アゾシン-3-カルボキサミド
：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い調製した。
【０５２７】
無水ジクロロメタン(1mL)中の3-(2-オキソモルホリン-4-カルボニル)ベンジルカルバミ
ン酸tert-ブチル(20mg)へ、トリフルオロ酢酸(0.3mL)を室温で滴加した。室温で10分間攪
拌した後、反応混合物を減圧下で完全に濃縮した。無水ジクロロメタン(1mL)中のこの残
渣へ、1j(10mg)、EDC・HCl(10mg)、HOBt(7mg)、N-メチルモルホリン(10μl)を添加し、得
られた混合物を室温で一晩攪拌した。トリフルオロ酢酸(0.3mL)を反応混合物へ添加し、
室温で10分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を半分取HPLC(TFAモディファイア)を
用いて精製し、白色固形物をTFA塩として生じた。LCMS: m/e 528.3 (M+1)。
【０５２８】
(実施例37)
【化２３５】
2016195596.tif 000275
(3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソ-N-(3-(((S)-5-オキ
ソテトラヒドロフラン-2-カルボキサミド)メチル)ベンジル)デカヒドロピロロ[1,2-a]ア
ゾシン-3-カルボキサミド：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従
い調製した。
【０５２９】
無水ジクロロメタン(1mL)中の(S)-3-((5-オキソテトラヒドロフラン-2-カルボキサミド
)メチル)ベンジルカルバミン酸tert-ブチル(10mg)へ、トリフルオロ酢酸(0.3mL)を室温で
滴加した。室温で10分間攪拌した後、反応混合物を減圧下で完全に濃縮した。無水ジクロ
ロメタン(1mL)中のこの残渣へ、1j(10mg)、EDC・HCl(10mg)、HOBt(7mg)、N-メチルモルホ
リン(10μl)を添加し、得られた混合物を室温で一晩攪拌した。トリフルオロ酢酸(0.3mL)
を反応混合物へ添加し、室温で10分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を半分取HPLC
(TFAモディファイア)を用いて精製し、白色固形物をTFA塩として生じた。LCMS: m/e 542.
3 (M+1)。
【０５３０】
(実施例38)
【化２３６】
2016195596.tif 000276
(3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソ-N-(3-(((R)-5-オキ
ソテトラヒドロフラン-2-カルボキサミド)メチル)ベンジル)デカヒドロピロロ[1,2-a]ア
ゾシン-3-カルボキサミド：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従
い調製した。
【０５３１】
無水ジクロロメタン(1mL)中の(R)-3-((5-オキソテトラヒドロフラン-2-カルボキサミド
)メチル)ベンジルカルバミン酸tert-ブチル(10mg)へ、トリフルオロ酢酸(0.3mL)を室温で
滴加した。室温で10分間攪拌した後、反応混合物を減圧下で完全に濃縮した。無水ジクロ
ロメタン(1mL)中のこの残渣へ、1j(10mg)、EDC・HCl(10mg)、HOBt(7mg)、N-メチルモルホ
リン(10μl)を添加し、得られた混合物を室温で一晩攪拌した。トリフルオロ酢酸(0.3mL)
を反応混合物へ添加し、室温で10分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を半分取HPLC
(TFAモディファイア)を用いて精製し、白色固形物をTFA塩として生じた。LCMS: m/e 542.
3 (M+1)。
【０５３２】
(実施例39)
【化２３７】
2016195596.tif 000277
(3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソ-N-(3-(((R)-5-オキ
ソテトラヒドロフラン-2-イル)メチルカルバモイル)ベンジル)デカヒドロピロロ[1,2-a]
アゾシン-3-カルボキサミド：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に
従い調製した。
【０５３３】
無水ジクロロメタン(1mL)中の(R)-3-((5-オキソテトラヒドロフラン-2-イル)メチルカ
ルバモイル)ベンジルカルバミン酸tert-ブチル(20mg)へ、トリフルオロ酢酸(0.3mL)を室
温で滴加した。室温で10分間攪拌した後、反応混合物を減圧下で完全に濃縮した。無水ジ
クロロメタン(1mL)中のこの残渣へ、1j(10mg)、EDC・HCl(20mg)、HOBt(14mg)、N-メチル
モルホリン(20μl)を添加し、得られた混合物を室温で一晩攪拌した。トリフルオロ酢酸(
0.3mL)を反応混合物へ添加し、室温で10分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を半分
取HPLC(TFAモディファイア)を用いて精製し、白色固形物をTFA塩として得た。LCMS: m/e 
542.3 (M+1)。
【０５３４】
(実施例40)
【化２３８】
2016195596.tif 000278
(3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソ-N-(3-(((S)-5-オキ
ソテトラヒドロフラン-2-イル)メチルカルバモイル)ベンジル)デカヒドロピロロ[1,2-a]
アゾシン-3-カルボキサミド：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に
従い調製した。
【０５３５】
無水ジクロロメタン(1mL)中の(S)-3-((5-オキソテトラヒドロフラン-2-イル)メチルカ
ルバモイル)ベンジルカルバミン酸tert-ブチル(20mg)へ、トリフルオロ酢酸(0.3mL)を室
温で滴加した。室温で10分間攪拌した後、反応混合物を減圧下で完全に濃縮した。無水ジ
クロロメタン(1mL)中のこの残渣へ、1j(10mg)、EDC・HCl(20mg)、HOBt(14mg)、N-メチル
モルホリン(20μl)を添加し、得られた混合物を室温で一晩攪拌した。トリフルオロ酢酸(
0.3mL)を反応混合物へ添加し、室温で10分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を半分
取HPLC(TFAモディファイア)を用いて精製し、白色固形物をTFA塩として生じた。LCMS: m/
e 542.3 (M+1)。
【０５３６】
(実施例41)
【化２３９】
2016195596.tif 000279
(3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソ-N-(3-(3-オキソ-2-
オキサ-5-アザビシクロ[2.2.2]オクタン-5-カルボニル)ベンジル)デカヒドロピロロ[1,2-
a]アゾシン-3-カルボキサミド：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体
に従い調製した。
【０５３７】
無水ジクロロメタン(1mL)中の3-((1S,4S)-3-オキソ-2-オキサ-5-アザビシクロ[2.2.2]
オクタン-5-カルボニル)ベンジルカルバミン酸tert-ブチル(20mg)へ、トリフルオロ酢酸(
0.3mL)を室温で滴加した。室温で10分間攪拌した後、反応混合物を減圧下で完全に濃縮し
た。無水ジクロロメタン(1mL)中のこの残渣へ、1j(10mg)、EDC・HCl(20mg)、HOBt(14mg)
、N-メチルモルホリン(20μl)を添加し、得られた混合物を室温で一晩攪拌した。トリフ
ルオロ酢酸(0.3mL)を反応混合物へ添加し、室温で10分間攪拌した。反応混合物を濃縮し
、残渣を半分取HPLC(TFAモディファイア)を用いて精製し、白色固形物をTFA塩として生じ
た。LCMS: m/e 544.3 (M+1)。
【０５３８】
(実施例42)
【化２４０】
2016195596.tif 000280
(3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソ-N-(3-((1S)-7-オキ
ソ-6-オキサ-2-アザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-カルボニル)ベンジル)デカヒドロピロロ
[1,2-a]アゾシン-3-カルボキサミド：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中
間体に従い調製した。
【０５３９】
無水ジクロロメタン(1mL)中の3-((1R,5S)-7-オキソ-6-オキサ-2-アザビシクロ[3.2.1]
オクタン-2-カルボニル)ベンジルカルバミン酸tert-ブチル(18mg)へ、トリフルオロ酢酸(
0.3mL)を室温で滴加した。室温で10分間攪拌した後、反応混合物を減圧下で完全に濃縮し
た。無水ジクロロメタン(1mL)中のこの残渣に、1j(10mg)、EDC・HCl(20mg)、HOBt(14mg)
、N-メチルモルホリン(20μl)を添加し、得られた混合物を室温で一晩攪拌した。トリフ
ルオロ酢酸(0.3mL)を反応混合物に添加し、室温で10分間攪拌した。反応混合物を濃縮し
、残渣を半分取HPLC(TFAモディファイア)を用いて精製し、白色固形物をTFA塩として生じ
た。LCMS: m/e 554.3 (M+1)。
【０５４０】
(実施例43)
【化２４１】
2016195596.tif 000281
(3S,6S,10aS)-6-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)-5-オキソ-N-(3-(7-オキソ-6-
オキサ-2-アザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-カルボニル)ベンジル)デカヒドロピロロ[1,2-
a]アゾシン-3-カルボキサミド：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体
に従い調製した。
【０５４１】
無水ジクロロメタン(1mL)中の3-((1S,5R)-7-オキソ-6-オキサ-2-アザビシクロ[3.2.1]
オクタン-2-カルボニル)ベンジルカルバミン酸tert-ブチル(9.0mg)へ、トリフルオロ酢酸
(0.3mL)を室温で滴加した。室温で10分間攪拌した後、反応混合物を減圧下で完全に濃縮
した。無水ジクロロメタン(1mL)中のこの残渣へ、1j(10mg)、EDC・HCl(10mg)、HOBt(7mg)
、N-メチルモルホリン(10μl)を添加し、得られた混合物を室温で一晩攪拌した。トリフ
ルオロ酢酸(0.3mL)を反応混合物へ添加し、室温で10分間攪拌した。反応混合物を濃縮し
、残渣を半分取HPLC(TFAモディファイア)を用いて精製し、白色固形物をTFA塩として生じ
た。LCMS: m/e 554.3 (M+1)。
【０５４２】
(実施例44)
【化２４２】
2016195596.tif 000282
(S)-N-(3-アクリルアミドベンジル)-1-((S)-3,3-ジメチル-2-((S)-2-(メチルアミノ)プ
ロパンアミド)ブタノイル)ピロリジン-2-カルボキサミド：表題化合物を、下記に説明さ
れたような工程及び中間体に従い調製した。
【化２４３】
2016195596.tif 000283
【０５４３】
(S)-1-((S)-2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-3,3-ジメチルブタノイル)ピロリジン
-2-カルボン酸ベンジル(3a)
【化２４４】
2016195596.tif 000284
【０５４４】
DMF(10mL)中のプロリンベンジルエステル(1.0g)、Boc-Tle-OH(1.05g)、HATU(1.73g)、
ジイソプロピルエチルアミン(0.5mL)の混合物を、室温で一晩攪拌した。減圧下で濃縮し
た後、残渣を、EtOAc及び飽和炭酸水素ナトリウムで分配した。有機層を硫酸ナトリウム
上で乾燥し、濾過した。残渣を、カラムクロマトグラフィー(SiO2、ヘプタン：酢酸エチ
ル、60:40)により精製し、所望の3aを白色固形物として供した。LCMS: m/e 319.1 (M+1-t
Bu)。
【０５４５】
(S)-1-((S)-2-((S)-2-(tert-ブトキシカルボニル(メチル)アミノ)プロパンアミド)-3,3
-ジメチルブタノイル)ピロリジン-2-カルボン酸ベンジル(3b)
【化２４５】
2016195596.tif 000285
【０５４６】
無水ジクロロメタン(2mL)中の3a(110mg)へ、トリフルオロ酢酸(1mL)を室温で滴加した
。室温で10分間攪拌した後、混合物を減圧下で濃縮した。無水ジクロロメタン(3mL)中の
残渣を、Boc-N-Me-Ala-OH(59mg)、EDC・HCl(61mg)、HOBt(39mg)、ジイソプロピルエチル
アミン(0.10mL)で処理し、得られた混合物を室温で一晩攪拌した。反応混合物を、EtOAc
へ分配し、飽和炭酸水素ナトリウムで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾
過した。残渣を、カラムクロマトグラフィー(SiO2、ヘプタン：酢酸エチル、40:60)によ
り精製し、所望の3bを無色の油状物として生じた。
【化２４６】
2016195596.tif 000286
【０５４７】
(S)-1-((S)-1-((S)-2-(3-アミノベンジルカルバモイル)ピロリジン-1-イル)-3,3-ジメ
チル-1-オキソブタン-2-イルアミノ)-1-オキソプロパン-2-イル(メチル)カルバミン酸ter
t-ブチル(3c)
【化２４７】
2016195596.tif 000287
【０５４８】
無水メタノール(10mL)中のベンジルエステル3b(100mg)を、炭素上に担持されたパラジ
ウム(10％、湿潤型)の存在下で、2時間水素化した。混合物を濾過し、濾液を減圧下で濃
縮した。無水ジクロロメタン(3mL)中の残渣を、3-アミノベンジルアミン(30mg)、EDC・HC
l(61mg)、HOBt(39mg)、ジイソプロピルエチルアミン(0.10mL)で処理し、得られた混合物
を室温で一晩攪拌した。反応混合物をEtOAcへ分配し、飽和炭酸水素ナトリウムで洗浄し
た。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過した。残渣をカラムクロマトグラフィー(S
iO2、ジクロロメタン：イソプロパノール、90:10)により精製し、所望の3cを無色の油状
物として生じた。1H NMR (400 MHz, CDCl3): LCMS: m/e 418.2 (M+1-tBu)。
【０５４９】
【化２４８】
2016195596.tif 000288
(S)-N-(3-アクリルアミドベンジル)-1-((S)-3,3-ジメチル-2-((S)-2-(メチルアミノ)プ
ロパンアミド)ブタノイル)ピロリジン-2-カルボキサミド
【０５５０】
無水ジクロロメタン(1mL)中のアニリン3c(14mg)及びトリエチルアミン(20μl)の混合物
へ、塩化アクリロイル(10μl)を0℃で滴加した。0℃で10分間攪拌した後、トリフルオロ
酢酸(0.3mL)を反応混合物へ添加し、室温で10分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣
を半分取HPLC(TFAモディファイア)を用いて精製し、白色固形物4をTFA塩として生じた。
【化２４９】
2016195596.tif 000289
【０５５１】
(実施例45)
【化２５０】
2016195596.tif 000290
(S)-1-((S)-1-((S)-2-(3-アクリルアミドベンジルカルバモイル)ピロリジン-1-イル)-3
,3-ジメチル-1-オキソブタン-2-イルアミノ)-1-オキソプロパン-2-イル(メチル)カルバミ
ン酸tert-ブチル：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い調製し
た。
【０５５２】
無水ジクロロメタン(1mL)中のアニリン3c(14mg)及びトリエチルアミン(20μl)の混合物
へ、塩化アクリロイル(10μl)を0℃で滴加した。0℃で10分間攪拌した後、反応混合物を
濃縮し、残渣を半分取HPLC(TFAモディファイア)を用いて精製し、白色固形物4を生じた。
LCMS: m/e 472.2 (M+1-tBu)。
【０５５３】
(実施例46)
【化２５１】
2016195596.tif 000291
(S)-1-((S)-3,3-ジメチル-2-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)ブタノイル)-N-(3
-((R)-5-オキソテトラヒドロフラン-2-カルボキサミド)ベンジル)ピロリジン-2-カルボキ
サミド：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い調製した。
【０５５４】
ジクロロメタン(1mL)中のアニリン3c(12mg)、(R)-5-オキソ-2-テトラヒドロフランカル
ボン酸(6mg)、EDC・HCl(10mg)、HOBt(7mg)、ジイソプロピルエチルアミン(10μl)の混合
物を、室温で一晩攪拌した。0℃で10分間攪拌した後、トリフルオロ酢酸(0.3mL)を反応混
合物へ添加し、室温で10分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を半分取HPLC(TFAモデ
ィファイア)を用いて精製し、白色固形物をTFA塩として生じた。LCMS: m/e 530.3 (M+1)
。
【０５５５】
(実施例47)
【化２５２】
2016195596.tif 000292
(S)-1-((S)-3,3-ジメチル-2-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)ブタノイル)-N-(3
-((R)-4-オキソアゼチジン-2-カルボキサミド)ベンジル)ピロリジン-2-カルボキサミド：
表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い調製した。
【０５５６】
ジクロロメタン(1mL)中のアニリン3c(12mg)、(R)-4-オキソ-2-アゼチジンカルボン酸(6
mg)、EDC・HCl(10mg)、HOBt(7mg)、ジイソプロピルエチルアミン(10μl)の混合物を、室
温で一晩攪拌した。0℃で10分間攪拌した後、トリフルオロ酢酸(0.3mL)を反応混合物へ添
加し、室温で10分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を半分取HPLC(TFAモディファイ
ア)を用いて精製し、白色固形物をTFA塩として生じた。LCMS: m/e 515.3 (M+1)。
【０５５７】
(実施例48)
【化２５３】
2016195596.tif 000293
(S)-1-((S)-3-アクリルアミド-2-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)プロパノイル
)-N-(3-アクリルアミドベンジル)ピロリジン-2-カルボキサミド：表題化合物を、下記に
説明されたような工程及び中間体に従い調製した。
【化２５４】
2016195596.tif 000294
【０５５８】
(S)-1-((S)-3-(ベンジルオキシカルボニルアミノ)-2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ
)プロパノイル)ピロリジン-2-カルボン酸ベンジル(4a)
【化２５５】
2016195596.tif 000295
【０５５９】
DCM(10mL)中のプロリンベンジルエステル(0.66g)、Boc-Dap(Z)-OH(1.1g)、EDC・HCl (0
.58g)、HOBt(370mg)、ジイソプロピルエチルアミン(1.0mL)の混合物を、室温で一晩攪拌
した。減圧下で濃縮した後、残渣をEtOAc及び飽和炭酸水素ナトリウムへ分配した。有機
層を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過した。残渣を、カラムクロマトグラフィー(SiO2、
ヘプタン：酢酸エチル、60:40)により精製し、所望の4aを白色泡状物として供した。LCMS
: m/e 426.2 (M+1-tBu)。
【０５６０】
(S)-1-((S)-3-(ベンジルオキシカルボニルアミノ)-2-((S)-2-(tert-ブトキシカルボニ
ル(メチル)アミノ)プロパンアミド)プロパノイル)ピロリジン-2-カルボン酸ベンジル(4b)
【化２５６】
2016195596.tif 000296
【０５６１】
無水ジクロロメタン(10mL)中の4a(1.15g)へ、トリフルオロ酢酸(3mL)を室温で滴加した
。室温で10分間攪拌した後、混合物を減圧下で濃縮した。無水ジクロロメタン(10mL)中の
残渣を、Boc-N-Me-Ala-OH(489mg)、EDC・HCl(505mg)、HOBt(325mg)、ジイソプロピルエチ
ルアミン(0.60mL)で処理し、得られた混合物を室温で一晩攪拌した。反応混合物をEtOAc
へ分配し、飽和炭酸水素ナトリウムで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾
過した。残渣を、カラムクロマトグラフィー(SiO2、ヘプタン：酢酸エチル、40:60)によ
り精製し、所望の4bを白色固形物として得た。LCMS: m/e 511.2 (M+1-tBu)。
【０５６２】
(S)-1-((S)-3-(ベンジルオキシカルボニルアミノ)-1-((S)-2-3-アミノベンジルカルバ
モイル)ピロリジン-1-イル)-1-オキソプロパン-2-イルアミノ)-1-オキソプロパン-2-イル
(メチル)カルバミン酸tert-ブチル(4c)
【化２５７】
2016195596.tif 000297
【０５６３】
水(3mL)中の4b(540mg)へ、メタノール3mL中の水酸化リチウム74mgを0℃で添加した。30
分後、混合物を1N HClを用いてpH3.0まで酸性とし、酢酸エチルへ分配した。有機層を硫
酸ナトリウム上で乾燥した。混合物を濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。無水ジクロロメ
タン(10mL)中の残渣を、3-アミノベンジルアミン(130mg)、EDC・HCl(204mg)、HOBt(131mg
)、ジイソプロピルエチルアミン(0.60mL)で処理し、得られた混合物を室温で一晩攪拌し
た。反応混合物をEtOAcへ分配し、飽和炭酸水素ナトリウムで洗浄した。有機層を硫酸ナ
トリウム上で乾燥し、濾過した。残渣をカラムクロマトグラフィー(SiO2、ジクロロメタ
ン：イソプロパノール、90:10)により精製し、所望の4cを白色固形物として生じた。1H N
MR (400 MHz, CDCl3): LCMS: m/e 625.3 (M+1).
【０５６４】
(S)-1-((S)-3-アミノ-1-((S)-2-(3-アミノベンジルカルバモイル)ピロリジン-1-イル)-
1-オキソプロパン-2-イルアミノ)-1-オキソプロパン-2-イル(メチル)カルバミン酸tert-
ブチル(4d)
【化２５８】
2016195596.tif 000298
【０５６５】
無水メタノール(5mL)中の4b(30mg)を、炭素上に担持されたパラジウム(10％、湿潤型)
の存在下で2時間水素化した。混合物を濾過し、濾液を減圧下で濃縮し、4dを提供した。L
CMS: m/e 491.3 (M+1)。
【０５６６】
(S)-1-((S)-3-アクリルアミド-2-((S)-2-(メチルアミノ)プロパンアミド)プロパノイル
)-N-(3-アクリルアミドベンジル)ピロリジン-2-カルボキサミド(VIII-5)
【化２５９】
2016195596.tif 000299
【０５６７】
無水ジクロロメタン(1mL)中のアニリン4d(14mg)及びトリエチルアミン(20μl)の混合物
に、塩化アクリロイル(10μl)を0℃で滴加した。0℃で10分間攪拌した後、トリフルオロ
酢酸(0.3mL)を反応混合物に添加し、室温で10分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣
を半分取HPLC(TFAモディファイア)を用いて精製し、白色固形物VIII-5をTFA塩として生じ
た。LCMS: m/e 499.2 (M+1)。
【０５６８】
(実施例49)
【化２６０】
2016195596.tif 000300
(S)-1-((S)-3-アクリルアミド-1-((S)-2-(3-アクリルアミドベンジルカルバモイル)ピ
ロリジン-1-イル)-1-オキソプロパン-2-イルアミノ)-1-オキソプロパン-2-イル(メチル)
カルバミン酸tert-ブチル：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従
い調製した。
【０５６９】
無水ジクロロメタン(1mL)中のアニリン4d(14mg)及びトリエチルアミン(20μl)の混合物
へ、塩化アクリロイル(10μl)を0℃で滴加した。0℃で10分間攪拌した後、反応混合物を
濃縮し、残渣を半分取HPLC(TFAモディファイア)を用いて精製し、白色固形物を生じた。L
CMS: m/e 499.2 (M+1-tBu)。
【０５７０】
(C.  XIAP生物学的データ)
(実施例50)
XIAP、cIAP-1及びML-IAPβ、BIR3ドメインへ結合する化合物の親和性評価のための均一
系(homogeneous)蛍光偏光競合結合アッセイプロトコール
R&D Systems社からの組み換えヒトXIAP；BIR3ドメイン(895-XB)、組み換えヒトcIAP-1 
(818-IA)又は組み換えヒトML-IAPβ(818-IA)、並びに蛍光偏光(FP)アッセイトレーサー(A
tto-647タグ付きIAPインヒビタープローブ化合物)の1×ストック液を、25mMトリス-HCl(p
H7.5)(Sigma社)、10mM NaCl2(Sigma社)、1mM DTT(Fluka社)及び0.005％トリトンX-100(Pi
erce社)を含有するアッセイ緩衝液中に調製した。IAPタンパク質及びトレーサーは、暗所
において周囲温度で平衡化しながら(30〜60分間)、被験化合物の100×ストック液を、50
％DMSO：H2O中に調製し、連続希釈し、384-ウェル平底ポリプロピレン製黒色アッセイプ
レート(Greiner社#781209)の2つ組ウェル内にスポットした(0.5L/ウェル)。各タンパク質
に関して使用した量は以下の通りであった：[XIAP]＝120nM、[アッセイトレーサー]＝20n
M(トレーサー：タンパク質 Kd＝83〜61nM；0〜3時間)；[cIAP-1]＝30nM、[アッセイトレ
ーサー]＝10nM(トレーサー：タンパク質Kd＝37〜14nM；0〜1時間)；及び、[ML-IAPβ]＝1
00nM、[アッセイトレーサー]＝15nM(トレーサー：タンパク質Kd＝43〜55nM；0〜3時間)。
被験化合物とアッセイトレーサーの間の競合結合は、予め平衡にしたIAPタンパク質とア
ッセイトレーサーの50L/ウェルの添加により開始した。アッセイトレーサーの置換は、Bi
oTek社(Winooski, VT)のSynergyプレートリーダーにおいて、660nmハーフサイズの二色性
ミラー(dicroich mirror)及びS/P偏光フィルターを通し、λex620/λem680で、30分毎に3
時間測定した(Huang, X.の文献、Journal of Biomolecular Screening, 8, 2003参照)。
得られた化合物の用量反応データは、GraphPad Software社(サンディエゴ、CA)からのGra
phPad Prismにおいて、一部位結合Kiモデルに当てはめた。
【０５７１】
表2は、Ki(XIAP)、Ki(c-IAP-1、3時間)、及びKi(ML-IAP、2時間)アッセイにおける、本
発明の選択された化合物の活性を示している。「A」と指定された活性を有する化合物は
、IC50≦10nMを提供し；「B」と指定された活性を有する化合物は、＞10nM及び≦100nMの
IC50を提供し；「C」と指定された活性を有する化合物は、＞100nM及び≦1000nMのIC50を
提供し；「D」と指定された活性を有する化合物は、＞1000nM及び＜10,000nMのIC50を提
供し；且つ、「E」と指定された活性を有する化合物は、≧10,000nMのIC50を提供する。
【表２】
2016195596.tif 000301
2016195596.tif 000302
2016195596.tif 000303
2016195596.tif 000304
2016195596.tif 000305
【０５７２】
(D.  発明の化合物と接触されたXIAPの質量分光分析)
(実施例51)
未変性のXIAPを、タンパク質に対し10-倍過剰なVII-1と18時間インキュベーションした
。試料の3μlアリコートを、0.1％TFA 10μlで希釈し、その後脱着マトリックスとしてシ
ナピン酸(Sinapinic acid)を使用し(0.1％TFA：アセトニトリル50:50中10mg/mL)、直接MA
LDI標的上でマイクロC4 ZipTippingした。図6の上側パネルは、未変性のXIAPタンパク質(
m/z 13,096Da)の質量分光的追跡を示す。図6の下側パネルは、VII-1(mw＝469.59)と18時
間インキュベートされたXIAP(m/z 13,513)の質量分光的追跡であり、これは、m/z 13,096
の存在しない、417Daの質量シフトを示し、このことは18時間以内でのXIAPのVII-1による
完全な修飾を指摘している。
【０５７３】
(実施例52)
未変性のXIAPを、タンパク質に対し10-倍過剰なVII-1と18時間インキュベーションした
。インキュベーション後、低容積ZEBA脱塩カラムを用い、タンパク質を洗浄し、次に同量
の1mM DTT含有0.2M炭酸水素アンモニウムで希釈した。その後タンパク質を、56℃で45分
間加熱することにより、還元した。インキュベーション後、この試料を室温まで冷却させ
、1.9μg/μLヨードアセトアミド溶液を添加し、室温で30分間インキュベートし、システ
イン残基をアルキル化した。配列決定等級のトリプシン(Promega社)を、1：20(プロテア
ーゼ：タンパク質)の比で添加し、37℃で16時間インキュベートした。次にペプチドを精
製し、且つC4パックドピペットチップ(Millipore社)を用いて濃縮し、マトリックスとし
てα-シアノ-4-ヒドロキシ-ケイヒ酸(0.1％TFA：アセトニトリル50:50中10mg/mL)を使い
、MALDI標的プレート上に直接スポットした。
【０５７４】
図7の上側パネルは、対照XIAP消化物の質量領域の質量分光的追跡を示し、図7の下側パ
ネルは、VII-1と共にインキュベートしたXIAPの消化物の質量分光的追跡を示す。m/z 1,8
26Daを持つペプチドは、XIAP＋VII-21消化物において同定されるが、対照XIAP消化におい
ては認められず、これは、一つのVII-1修飾を含むXIAPに由来するペプチドアミノ酸287-2
99(AGFYALGEGDKVK)の質量に相当している。このペプチドの修飾は、リシンK297で生じる
が、K299では生じず、その理由は、修飾がK299で生じる場合、トリプシン消化は、その位
置では起こらないからであり、このことはVII-1はXIAPのK297へ結合することを示してい
る。
【０５７５】
(実施例53)
未変性のXIAPを、タンパク質に対し10-倍過剰なVII-21と18時間インキュベーションし
た。試料の3μlアリコートを、0.1％TFA 10μlで希釈し、その後脱着マトリックスとして
シナピン酸を使用し(0.1％TFA：アセトニトリル50:50中10mg/mL)、直接MALDI標的上でマ
イクロC4 ZipTippingした。結果：図8の上側パネルは、未変性のXIAPタンパク質(m/z 12,
994Da)の質量分光的追跡を示す。図8の下側パネルは、VII-21(mw＝572.62)と18時間イン
キュベートされたXIAP(m/z 13,513)の質量分光的追跡を示し、これは、m/z 12,994Daの存
在しない、522Daの質量シフトを示し、このことは18時間以内でのXIAPのVII-21による完
全な修飾を指摘している。
【０５７６】
(実施例54)
未変性のXIAPを、タンパク質に対し10-倍過剰なVII-21と18時間インキュベーションし
た。インキュベーション後、低容積ZEBA脱塩カラムを用い、タンパク質を洗浄し、次に同
量の1mM DTT含有100mMトリスHCl、10mM CaCl2(pH7.8)で希釈した。その後タンパク質を、
56℃で45分間加熱することにより、還元した。インキュベーション後、この試料を室温ま
で冷却させ、1.9μg/μLヨードアセトアミド溶液を添加し、室温で30分間インキュベート
し、システイン残基をアルキル化した。最後に、キモトリプシン(Roche社)を、1：20(プ
ロテアーゼ：タンパク質)の比で添加し、室温で16時間インキュベートした。次にペプチ
ドを精製し、且つC4パックドピペットチップ(Millipore社)を用いて濃縮し、マトリック
スとしてα-シアノ-4-ヒドロキシ-ケイヒ酸(0.1％TFA：アセトニトリル50:50中10mg/mL)
を使いMALDI標的プレート上に直接スポットした。
【０５７７】
図9の上側パネルは、対照XIAP消化物の分子量の質量領域の質量分光的追跡を示し、図9
の下側パネルは、VII-21と共にインキュベートしたXIAPの消化物の質量分光的追跡を示す
。対照XIAP消化物において存在しないm/z 1,750Daを持つペプチドが、XIAP＋VII-21消化
物において同定される。このペプチドは、一つのVII-21修飾及びシステインアルキル化さ
れたヨードアセトアミドを含むXIAPに由来するペプチドアミノ酸291-301(ALGEGDKVKCF)の
質量に相当している。
【０５７８】
(C.  HCVプロテアーゼ合成例)
(実施例55)
【化２６１】
2016195596.tif 000306
(5S)-1-((S)-2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-5-オキソ-5-((1R,4R)-3-オキソ-2-
オキサ-5-アザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-5-イル)ペンタノイル)-5-((1R,2S)-1-(シクロプ
ロピルスルホニルカルバモイル)-2-ビニルシクロプロピルカルバモイル)ピロリジン-3-イ
ル 4-フルオロイソインドリン-2-カルボキシラート：表題化合物を、下記に説明されたよ
うな工程及び中間体に従い調製した。
【０５７９】
【化２６２】
2016195596.tif 000307
アセトニトリル10mL中の(1R,2S)-1-アミノ-2-ビニルシクロプロパンカルボン酸エチル
エステルトルエンスルホン酸(0.33g, 1.0mmol)及び(2S,4R)-1-(tert-ブトキシカルボニル
)-4-(4-フルオロイソインドリン-2-カルボニルオキシ)ピロリジン-2-カルボン酸(0.4g, 1
.0mmol)の溶液へ、攪拌しながら、HATU(0.44g, 1.2mmol)を添加し、次にDIEA(0.46mL, 2.
5mmol)を添加した。この混合物を、室温で2時間攪拌した。出発材料が完全に消費された
後、反応混合物を蒸発させた。残渣を、酢酸エチル30mL中に溶解し、水及びブラインで2
回洗浄し、Na2SO4上で乾燥した。溶媒の除去後、粗生成物を、シリカゲル上のクロマトグ
ラフィー(ヘキサン：EtOAc＝1:1)に供した。表題化合物0.35gを得た：MS m/z: 532.0 (ES
+)。
【０５８０】
【化２６３】
2016195596.tif 000308
THF/MeOH(1:1)5mL中の工程1aの生成物(0.35g, 0.66mmol)の溶液へ、1N LiOH水溶液(2mL
, 2.0mmol)を添加した。室温で10時間攪拌した後、反応混合物を、1.0N HClで中和した。
有機溶媒を真空下で蒸発させ、残留する水相を、1.0N HClを用いてpH〜3まで酸性とし、E
tOAcで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウム上で乾燥した。溶媒
の除去後、表題化合物0.3gを得た：MS m/z: 526.2 (M+Na+)。
【０５８１】
【化２６４】
2016195596.tif 000309
DCM 10mL中の工程1bの生成物(0.30g, 0.6mmol)の溶液へ、CDI(0.16g, 1.0mmol)を添加
し、得られた溶液を40℃で1時間攪拌した。反応混合物へ、シクロプロピルスルホンアミ
ド(0.18g, 1.5mmol)及びDBU(0.16g, 1.0mmol)を添加した。この混合物を、40℃で更に10
時間攪拌した。次に溶媒を除去し、残渣をEtOAcで希釈し、水性NaOAc緩衝液(pH〜5、2×1
0mL)、NaHCO3溶液及びブラインで洗浄した。Na2SO4上で乾燥し且つ溶媒を除去した後、残
渣を、シリカゲル上、ヘキサン/EtOAc(1:1〜1:2)を使用するクロマトグラフィーに供した
。合計0.30gの表題化合物を得た：Rf 0.1 (EtOAc：ヘキサン＝1:1)、MS m/z: 605.0 (ES-
)。
【０５８２】
【化２６５】
2016195596.tif 000310
工程1cの生成物(0.25g, 0.41mmol)を、ジオキサンを溶媒とする4N HCl中に溶解した。
この混合物を室温で1時間攪拌した。溶媒の除去後、DCMの10mL部分を注ぎ、引き続き蒸発
乾固させた。このDCM添加、それに続く蒸発のプロセスを、4回繰り返し、残渣の固形物を
生じ、これを直接次工程に使用した：MS m/z: 507.0 (M+H+)。
【０５８３】
【化２６６】
2016195596.tif 000311
DCM 1mL中の213mgの(1R, 4R)-3-オキソ-2-オキサ-5-アザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-5-
カルボン酸tert-ブチルエステル(213mg, 1mmol)の攪拌溶液へ、ジオキサンを溶媒とする4
M HCl 2.0mLを添加した。得られた混合物を、室温で30分間攪拌し、蒸発乾固させ、所望
のHCl塩を生じ、これを次工程で直接使用した。
【０５８４】
【化２６７】
2016195596.tif 000312
DCM 2mL中の1-ベンジル-N-Boc-L-グルタミン酸(170mg, 0.5mmol)、0.5mmolの中間体1e
、及びヒューニッヒ塩基250μlの攪拌混合液へ、DCMを溶媒とする0.5M 2-クロロ-1,3-ジ
メチル-イミダゾリジウムクロリド溶液1.5mLを添加した。得られた混合物を室温で30分間
攪拌し、濃縮した。残渣を、EtOAc、1N水性HClによる通常の後処理に供し、無水硫酸ナト
リウム上で乾燥した。濾過及び濃縮後、生成物を、シリカゲル上、ヘプタン/EtOAcの1/4
によるフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し、無色の油状物146mg(67％)を
生じた。LC-MS: 333.2 (ES+, M-Boc)。
【０５８５】
【化２６８】
2016195596.tif 000313
先の工程から得たベンジルエステル140mgを、無水MeOH中での触媒としてPd(OH)2 20mg
を使う水素化に供した。室温で1時間経過後、LC-MSは、ベンジル基の除去が完了したこと
を示した。反応混合物を、セライトを通して濾過し、濃縮し、所望の酸を泡状固形物とし
て生じた。LC-MS: 243.2 (ES+, M-Boc)。
【０５８６】
【化２６９】
2016195596.tif 000314
中間体1hを、中間体1e製造工程における出発材料としてエナンチオマーの二環ラクトン
を使用し、中間体1gの調製と同じ方法で合成した。
【０５８７】
【化２７０】
2016195596.tif 000315
中間体1iを、中間体1f製造のための1-ベンジル-N-boc-L-グルタミン酸の代わりに、1-
ベンジル-N-Boc-アスパラギン酸を使用し、中間体1gの調製と同じ方法で合成した。
【０５８８】
【化２７１】
2016195596.tif 000316
中間体1jを、中間体1f製造のための1-ベンジル-N-boc-L-グルタミン酸の代わりに、1-
ベンジル-N-Boc-L-アスパラギン酸を使用し、中間体1hの調製と同じ方法で合成した。
【０５８９】
【化２７２】
2016195596.tif 000317
(5S)-1-((S)-2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-5-オキソ-5-((1R,4R)-3-オキソ-2-
オキサ-5-アザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-5-イル)ペンタノイル)-5-((1R,2S)-1-(シクロプ
ロピルスルホニル-カルバモイル)-2-ビニルシクロプロピルカルバモイル)ピロリジン-3-
イル 4-フルオロイソインドリン-2-カルボキシラート(XVI-16)：DMA 1mL中の15mgの中間
体1d、8mgの中間体1g、及びヒューニッヒ塩基20μlの混合物へ、HATU 20mgを添加した。
室温で20分間攪拌した後、得られた混合物をPrep-HPLCにより精製し、XVI-16を生じた。L
C-MS: 829.2 (ES-)。
【０５９０】
(実施例56)
【化２７３】
2016195596.tif 000318
(5S)-1-((S)-2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-5-オキソ-5-((1S,4S)-3-オキソ-2-
オキサ-5-アザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-5-イル)ペンタノイル)-5-((1R,2S)-1-(シクロプ
ロピルスルホニルカルバモイル)-2-ビニルシクロプロピルカルバモイル)ピロリジン-3-イ
ル 4-フルオロイソインドリン-2-カルボキシラート：表題化合物を、下記に説明されたよ
うな工程及び中間体に従い調製した。
【０５９１】
(5S)-1-((S)-2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-5-オキソ-5-((1S,4S)-3-オキソ-2-
オキサ-5-アザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-5-イル)ペンタノイル)-5-((1R,2S)-1-(シクロプ
ロピルスルホニルカルバモイル)-2-ビニルシクロプロピルカルバモイル)ピロリジン-3-イ
ル 4-フルオロイソインドリン-2-カルボキシラート(XVI-17)：表題化合物を、最終工程で
中間体1gの代わりに、中間体1hを使用し、XVI-16と同じ方法で調製した。LC-MS: 829.2 (
ES-)。
【０５９２】
(実施例57)
【化２７４】
2016195596.tif 000319
(5S)-1-((S)-2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-4-オキソ-4-((1S,4S)-3-オキソ-2-
オキサ-5-アザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-5-イル)ブタノイル)-5-((1R,2S)-1-(シクロプロ
ピルスルホニルカルバモイル)-2-ビニルシクロプロピルカルバモイル)ピロリジン-3-イル
4-フルオロイソインドリン-2-カルボキシラート：表題化合物を、下記に説明されたよう
な工程及び中間体に従い調製した。
【０５９３】
(5S)-1-((S)-2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-4-オキソ-4-((1S,4S)-3-オキソ-2-
オキサ-5-アザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-5-イル)ブタノイル)-5-((1R,2S)-1-(シクロプロ
ピルスルホニルカルバモイル)-2-ビニルシクロプロピルカルバモイル)ピロリジン-3-イル
4-フルオロイソインドリン-2-カルボキシラート(XVI-15)：表題化合物を、最終工程で中
間体1gの代わりに、中間体1iを使用し、XVI-16と同じ方法で調製した。LC-MS: 815.3 (ES
-)。
【０５９４】
(実施例58)
【化２７５】
2016195596.tif 000320
(5S)-1-((S)-2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-4-オキソ-4-((1R,4R)-3-オキソ-2-
オキサ-5-アザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-5-イル)ブタノイル)-5-((1R,2S)-1-(シクロプロ
ピルスルホニルカルバモイル)-2-ビニルシクロプロピルカルバモイル)ピロリジン-3-イル
4-フルオロイソインドリン-2-カルボキシラート：表題化合物を、下記に説明されたよう
な工程及び中間体に従い調製した。
【０５９５】
(5S)-1-((S)-2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-4-オキソ-4-((1R,4R)-3-オキソ-2-
オキサ-5-アザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-5-イル)ブタノイル)-5-((1R,2S)-1-(シクロプロ
ピルスルホニルカルバモイル)-2-ビニルシクロプロピルカルバモイル)ピロリジン-3-イル
4-フルオロイソインドリン-2-カルボキシラート(XVI-14)：表題化合物を、最終工程で中
間体1gの代わりに、中間体1jを使用し、XVI-16と同じ方法で調製した。LC-MS: 815.3 (ES
-)。
【０５９６】
(実施例59)
【化２７６】
2016195596.tif 000321
(5S)-5-((1R,2S)-1-(シクロプロピルスルホニルカルバモイル)-2-ビニルシクロプロピ
ルカルバモイル)-1-((S)-5-オキソテトラヒドロフラン-2-カルボニル)ピロリジン-3-イル
4-フルオロイソインドリン-2-カルボキシラート(XVI-23)：表題化合物を、中間体1dを(2
S)-5-オキソ-テトラヒドロ-フラン-2-カルボン酸とのカップリングに使用し、XVI-16の調
製と同じ化学で合成した。LC-MS: 617.2 (ES-)。
【０５９７】
(実施例60)
【化２７７】
2016195596.tif 000322
(5S)-5-((1R,2S)-1-(シクロプロピルスルホニルカルバモイル)-2-ビニルシクロプロピ
ルカルバモイル)-1-((R)-5-オキソテトラヒドロフラン-2-カルボニル)ピロリジン-3-イル
4-フルオロイソインドリン-2-カルボキシラート(XVI-22)：表題化合物を、中間体1dを(2
R)-5-オキソ-テトラヒドロ-フラン-2-カルボン酸とのカップリングに使用し、XVI-16の調
製と同じ化学で合成した。LC-MS: 617.2 (ES-)。
【０５９８】
(実施例61)
【化２７８】
2016195596.tif 000323
(5S)-5-((1R,2S)-1-(シクロプロピルスルホニルカルバモイル)-2-ビニルシクロプロピ
ルカルバモイル)-1-(2-((S)-5-オキソテトラヒドロフラン-2-カルボキサミド)アセチル)
ピロリジン-3-イル 4-フルオロイソインドリン-2-カルボキシラート：表題化合物を、下
記に説明されたような工程及び中間体に従い調製した。
【０５９９】
【化２７９】
2016195596.tif 000324
アセトニトリル4.0mL中の中間体1d(0.12g, 0.22mmol)及びN-Boc-グリシン(0.054g, 0.3
1mmol)の溶液へ、HATU(133mg, 0.35mmol)及びDIEA(0.12mL, 0.66mmol)を、室温で攪拌し
ながら添加した。この反応混合物を2時間攪拌した。LC-MS及びTLC分析は、カップリング
反応が完了したことを示した。EtOAc 20mLを注ぎ、この混合物を、緩衝液(pH〜4、AcONa/
AcOH)、NaHCO3及びブラインで洗浄し、Na2SO4上で乾燥した。溶媒の除去後、粗生成物を
、シリカゲル上のクロマトグラフィー(溶離液：EtOAc/ヘキサン)に供した。合計0.10gの
表題化合物を得た：Rf 0.2 (EtOAc)；MS m/z: 664.0 (M+H+)。
【０６００】
【化２８０】
2016195596.tif 000325
中間体2a(0.10g, 0.15mmol)を、ジオキサンを溶媒とする4N HCl 2mL中に溶解し、この
反応物を室温で1時間攪拌した。溶媒の除去後、DCMの3mL部分を注ぎ、引き続き蒸発乾固
させた。このDCM添加、それに続く蒸発のプロセスを、3回繰り返し、表題化合物の中間体
2bをそのHCl塩として生じた(0.10g)。MS m/z: 564.0 (M+H+)。
【０６０１】
(実施例62)
【化２８１】
2016195596.tif 000326
(5S)-5-((1R,2S)-1-(シクロプロピルスルホニルカルバモイル)-2-ビニルシクロプロピ
ルカルバモイル)-1-(2-((S)-5-オキソテトラヒドロフラン-2-カルボキサミド)アセチル)
ピロリジン-3-イル 4-フルオロイソインドリン-2-カルボキシラート(XVI-13)：表題化合
物を、中間体2bを(2S)-5-オキソ-テトラヒドロ-フラン-2-カルボン酸とのカップリングに
使用し、XVI-23の調製と同じ化学で合成した。LC-MS: 676.2 (ES+), 674.1 (ES-)。
【０６０２】
(実施例63)
【化２８２】
2016195596.tif 000327
(5S)-5-((1R,2S)-1-(シクロプロピルスルホニルカルバモイル)-2-ビニルシクロプロピ
ルカルバモイル)-1-(2-((R)-5-オキソテトラヒドロフラン-2-カルボキサミド)アセチル)
ピロリジン-3-イル 4-フルオロイソインドリン-2-カルボキシラート(XVI-12)：表題化合
物を、中間体2bを(2R)-5-オキソ-テトラヒドロ-フラン-2-カルボン酸とのカップリングに
使用し、XVI-13の調製と同じ化学で合成した。LC-MS: 676.2 (ES+), 674.1 (ES-)。
【０６０３】
(実施例64)
【化２８３】
2016195596.tif 000328
(5S)-1-((S)-2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-3-((S)-5-オキソテトラヒドロフラ
ン-2-カルボキサミド)プロパノイル)-5-((1R,2S)-1-(シクロプロピルスルホニルカルバモ
イル)-2-ビニルシクロプロピルカルバモイル)ピロリジン-3-イル 4-フルオロイソインド
リン-2-カルボキシラート：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従
い調製した。
【０６０４】
【化２８４】
2016195596.tif 000329
DMF 5.0mL中の中間体1d(0.16g, 0.28mmol)及びN-Boc-3-(Fmoc)アミノ-L-アラニン(0.15
g, 0.35mmol)の溶液へ、HATU(125mg, 0.33mmol)及びDIEA(130mg, 1.0mmol)を室温で攪拌
しながら添加した。TLC分析は、カップリング反応の完了が1時間後に生じたことを示した
。EtOAcの20mL部分を注ぎ、混合物を、緩衝液(pH〜4、AcONa/AcOH)、NaHCO3及びブライン
で洗浄し、MgSO4上で乾燥した。溶媒の除去後、粗油状生成物を、シリカゲル上のクロマ
トグラフィーに供した(溶離液：EtOAc/ヘキサン)。合計0.14gの表題化合物が得られた。L
C-MS: 915.9 (ES+)。
【０６０５】
【化２８５】
2016195596.tif 000330
12％ピペリジンを含むDMF 1mL中の中間体3a生成物0.10gの溶液を、1.5時間、室温で攪
拌し、その後高真空下で蒸発乾固させた。残渣を、ヘキサン/エーテル(4:1)で摩砕し、表
題化合物70mgを生成した。LC-MS: 693.2 (ES+), 691.2 (ES-)。
【０６０６】
(実施例65)
【化２８６】
2016195596.tif 000331
(5S)-1-((S)-2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-3-((S)-5-オキソテトラヒドロフラ
ン-2-カルボキサミド)プロパノイル)-5-((1R,2S)-1-(シクロプロピルスルホニルカルバモ
イル)-2-ビニルシクロプロピルカルバモイル)ピロリジン-3-イル 4-フルオロイソインド
リン-2-カルボキシラート(XVI-21)：表題化合物を、中間体3bを(2S)-5-オキソ-テトラヒ
ドロ-フラン-2-カルボン酸とのカップリングに使用し、XVI-23の調製と同じ化学で合成し
た。LC-MS: 803.2 (ES-)。
【０６０７】
(実施例66)
【化２８７】
2016195596.tif 000332
(5S)-1-((S)-2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-3-((R)-5-オキソテトラヒドロフラ
ン-2-カルボキサミド)プロパノイル)-5-((1R,2S)-1-(シクロプロピルスルホニルカルバモ
イル)-2-ビニルシクロプロピルカルバモイル)ピロリジン-3-イル 4-フルオロイソインド
リン-2-カルボキシラート(XVI-20)：表題化合物を、中間体3bを(2R)-5-オキソ-テトラヒ
ドロ-フラン-2-カルボン酸とのカップリングに使用し、XVI-21の調製と同じ化学で合成し
た。LC-MS: 803.2 (ES-)。
【０６０８】
(実施例67)
【化２８８】
2016195596.tif 000333
(5S)-1-((S)-2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-3-((S)-N-メチル-5-オキソテトラヒ
ドロフラン-2-カルボキサミド)プロパノイル)-5-((1R,2S)-1-(シクロプロピルスルホニル
カルバモイル)-2-ビニルシクロプロピルカルバモイル)ピロリジン-3-イル 4-フルオロイ
ソインドリン-2-カルボキシラート：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中
間体に従い調製した。
【０６０９】
【化２８９】
2016195596.tif 000334
CH2Cl2 50mLの中の(S)-3-アミノ-2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)プロパン酸(2.04
g, 10mmol)、TEA(4.5mL, 30mmol)の溶液へ、ニトロベンゼンスルホニルクロリド(2.9g, 1
3.0mmol)を室温で添加した。この混合物を、室温で10時間攪拌した。溶媒を真空下で除去
し、引き続きEtOAc 100mLを添加した。有機層を、1N HCl(〜pH3)、水及びブラインで洗浄
した。有機層をNa2SO4上で乾燥し、濾過し、且つ溶媒を除去し、粗中間体4a(4.0g)を得た
。
【０６１０】
【化２９０】
2016195596.tif 000335
粗中間体4a(2.0g)、K2CO3(1.5、4当量)を、DMF 10mL中に溶解した。MeI(0.8mL, 4当量)
をこの反応物に室温で添加した。得られた混合物を20時間攪拌した。DMFをほとんど真空
下で除去し、EtOAc 100mLを添加し、混合物を水及びブラインで洗浄した。有機層をNa2SO
4上で乾燥した。溶媒の除去後、粗生成物を、短いシリカゲルカラム(溶離液：EtOAc/ヘキ
サン)に供し、1.62gの中間体4bを生成した。MS m/z: 439.9 (M+Na+)。
【０６１１】
【化２９１】
2016195596.tif 000336
THF/MeOH(1:1)10mL中の中間体4b(1.6g, 3.8mmol)の溶液へ、1N LiOH水溶液(5.8mL, 5.8
mmol)を添加した。室温で10時間攪拌した後、反応混合物を1.0N HClで中和した。有機溶
媒を真空下で蒸発させ、残留する水相を、1.0N HClを用いてpH〜3まで酸性とし、EtOAcで
抽出した。有機層をブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥した。溶媒の除去後
、1.5gの中間体4cを得た。MS m/z: 402.0 (ES-)。
【０６１２】
【化２９２】
2016195596.tif 000337
無水アセトニトリル5.0mL中の中間体1d(0.12g, 0.20mmol)及び中間体4c(0.12g, 0.3mmo
l)の溶液へ、HATU(0.11g, 0.3mmol)及びDIEA(0.14mL, 0.9mmol)を室温で攪拌下で添加し
た。TLC分析及びLC-MSは、1時間後にカップリング反応が完了したことを示した。EtOAcの
20mL部分を注ぎ、混合物を緩衝液(pH〜4、AcONa/AcOH)、NaHCO3及びブラインで洗浄した
。有機層を、Na2SO4上で乾燥した。溶媒の除去後、粗生成物を、シリカゲル上のクロマト
グラフィー(溶離液：EtOAc/ヘキサン)に供した。合計0.10gの中間体4dを得た：Rf 0.1 (E
tOAc)；MS m/z: 891.8 (M+H+)。
【０６１３】
【化２９３】
2016195596.tif 000338
DMF 3mL中の中間体4d(0.10g, 0.11mmol)の溶液へ、フェニルチオール(30mg, 0.26mmol)
及びK2CO3(40mg, 0.3mmol)を添加した。得られた混合物を、室温で20時間攪拌した。EtOA
c 30mLを添加し、混合物を水及びブライン及び水で洗浄した。有機層をNa2SO4上で乾燥し
た。溶媒の除去後、粗生成物を、シリカゲル上のクロマトグラフィー(溶離液：EtOAc/ヘ
キサン)に供し、0.1gの粗中間体4eを生成した。MS m/z: 706.9 (M+H+)。
【０６１４】
(実施例68)
【化２９４】
2016195596.tif 000339
(5S)-1-((S)-2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-3-((S)-N-メチル-5-オキソテトラヒ
ドロフラン-2-カルボキサミド)プロパノイル)-5-((1R,2S)-1-(シクロプロピルスルホニル
カルバモイル)-2-ビニルシクロプロピルカルバモイル)ピロリジン-3-イル 4-フルオロイ
ソインドリン-2-カルボキシラート(XVI-19)：表題化合物を、中間体3bの代わりに中間体4
eを(2R)-5-オキソ-テトラヒドロ-フラン-2-カルボン酸とのカップリングに使用し、XVI-2
1の調製と同じ化学で合成した。LC-MS: 817.2 (ES-)。
【０６１５】
(実施例69)
【化２９５】
2016195596.tif 000340
(5S)-1-((S)-2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-3-((R)-N-メチル-5-オキソテトラヒ
ドロフラン-2-カルボキサミド)プロパノイル)-5-((1R,2S)-1-(シクロプロピルスルホニル
カルバモイル)-2-ビニルシクロプロピルカルバモイル)ピロリジン-3-イル 4-フルオロイ
ソインドリン-2-カルボキシラート(XVI-18)：表題化合物を、中間体3bの代わりに中間体4
eを(2S)-5-オキソ-テトラヒドロ-フラン-2-カルボン酸とのカップリングに使用し、XVI-2
0の調製と同じ化学で合成した。LC-MS: 817.2 (ES-)。
【０６１６】
(実施例70)
【化２９６】
2016195596.tif 000341
(5S)-1-((S)-2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-4-((S)-5-オキソテトラヒドロフラ
ン-2-カルボキサミド)ブタノイル)-5-((1R,2S)-1-(シクロプロピルスルホニルカルバモイ
ル)-2-ビニルシクロプロピルカルバモイル)ピロリジン-3-イル 4-フルオロイソインドリ
ン-2-カルボキシラート：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い
調製した。
【０６１７】
【化２９７】
2016195596.tif 000342
中間体5aを、N-Boc-3-(Fmoc)アミノ-L-アラニンの代わりに(S)-4-(((9H-フルオレン-9-
イル)メトキシ)カルボニルアミノ)-2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)ブタン酸を使用
し、中間体3bと同じ方法で調製した。LC-MS: 707.2 (ES+)。
【０６１８】
(実施例71)
【化２９８】
2016195596.tif 000343
(5S)-1-((S)-2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-4-((S)-5-オキソテトラヒドロフラ
ン-2-カルボキサミド)ブタノイル)-5-((1R,2S)-1-(シクロプロピルスルホニルカルバモイ
ル)-2-ビニルシクロプロピルカルバモイル)ピロリジン-3-イル 4-フルオロイソインドリ
ン-2-カルボキシラート(XVI-11)：表題化合物を、中間体4eの代わりに中間体5aを(2S)-5-
オキソ-テトラヒドロ-フラン-2-カルボン酸とのカップリングに使用し、XVI-19の調製と
同じ化学で合成した。LC-MS: 817.2 (ES-)。
【０６１９】
(実施例72)
【化２９９】
2016195596.tif 000344
(5S)-1-((S)-2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-4-((R)-5-オキソテトラヒドロフラ
ン-2-カルボキサミド)ブタノイル)-5-((1R,2S)-1-(シクロプロピルスルホニルカルバモイ
ル)-2-ビニルシクロプロピルカルバモイル)ピロリジン-3-イル 4-フルオロイソインドリ
ン-2-カルボキシラート(XVI-10)：表題化合物を、中間体4eの代わりに中間体5aを(2S)-5-
オキソ-テトラヒドロ-フラン-2-カルボン酸とのカップリングに使用し、XVI-18の調製と
同じ化学で合成した。LC-MS: 817.2 (ES-)。
【０６２０】
(実施例73)
【化３００】
2016195596.tif 000345
(2S)-1-((2S)-2-((1R,2S)-1-(シクロプロピルスルホニルカルバモイル)-2-ビニルシク
ロプロピルカルバモイル)-4-(6-メトキシイソキノリン-1-イルオキシ)ピロリジン-1-イル
)-1,5-ジオキソ-5-((1S,4S)-3-オキソ-2-オキサ-5-アザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-5-イル
)ペンタン-2-イルカルバミン酸tert-ブチル：表題化合物を、下記に説明されたような工
程及び中間体に従い調製した。
【０６２１】
【化３０１】
2016195596.tif 000346
中間体6aを、WO 2006086381に公開された手順に従い調製した。
【０６２２】
【化３０２】
2016195596.tif 000347
中間体6bを、中間体1eの調製における(1R, 4R)-3-オキソ-2-オキサ-5-アザ-ビシクロ[2
.2.1]ヘプタン-5-カルボン酸 tert-ブチルエステルの代わりに、出発材料として(1S,4S)-
3-オキソ-2-オキサ-5-アザビシクロ[2.2.2]オクタン-5-カルボン酸tert-ブチルを使用し
、中間体1gの調製と同じ方法で合成した。LC-MS: 355.1 (ES-)。
【０６２３】
【化３０３】
2016195596.tif 000348
中間体6cを、中間体1eの調製における(1R, 4R)-3-オキソ-2-オキサ-5-アザ-ビシクロ[2
.2.1]ヘプタン-5-カルボン酸tert-ブチルエステルの代わりに、(1S, 5S)-6-オキサ-2-ア
ザ-ビシクロ[3.2.1]オクタン-7-オンを使用し、中間体1gの調製と同じ方法で合成した。L
C-MS: 355.1 (ES-)。
【０６２４】
(実施例74)
【化３０４】
2016195596.tif 000349
(2S)-1-((2S)-2-((1R,2S)-1-(シクロプロピルスルホニルカルバモイル)-2-ビニルシク
ロプロピルカルバモイル)-4-(6-メトキシイソキノリン-1-イルオキシ)ピロリジン-1-イル
)-1,5-ジオキソ-5-((1S,4S)-3-オキソ-2-オキサ-5-アザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-5-イル
)ペンタン-2-イルカルバミン酸tert-ブチル(XVI-9)：表題化合物を、中間体1dの代わりに
出発材料として中間体6aを使用し、XVI-17と同じ方法で合成した。LC-MS: 825.3 (ES+), 
823.2 (ES-)。
【０６２５】
(実施例75)
【化３０５】
2016195596.tif 000350
(2S)-1-((2S)-2-((1R,2S)-1-(シクロプロピルスルホニルカルバモイル)-2-ビニルシク
ロプロピルカルバモイル)-4-(6-メトキシイソキノリン-1-イルオキシ)ピロリジン-1-イル
)-1,5-ジオキソ-5-((1R,4R)-3-オキソ-2-オキサ-5-アザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-5-イル
)ペンタン-2-イルカルバミン酸tert-ブチル(XVI-8)：表題化合物を、出発材料として中間
体1dの代わりに中間体6aを使用し、XVI-16と同じ方法で合成した。LC-MS: 825.3 (ES+), 
823.2 (ES-)。
【０６２６】
(実施例76)
【化３０６】
2016195596.tif 000351
(2S)-1-((2S)-2-((1R,2S)-1-(シクロプロピルスルホニルカルバモイル)-2-ビニルシク
ロプロピルカルバモイル)-4-(6-メトキシイソキノリン-1-イルオキシ)ピロリジン-1-イル
)-1,4-ジオキソ-4-((1S,4S)-3-オキソ-2-オキサ-5-アザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-5-イル
)ブタン-2-イルカルバミン酸tert-ブチル(XVI-7)：表題化合物を、出発材料として中間体
1dの代わりに中間体6aを使用し、XVI-15と同じ方法で合成した。LC-MS: 811.2 (ES+), 80
9.1 (ES-)。
【０６２７】
(実施例77)
【化３０７】
2016195596.tif 000352
N1-((2S)-1-((2S)-2-((1S,2R)-1-(シクロプロピルスルホニルカルバモイル)-2-ビニル
シクロプロピルカルバモイル)-4-(6-メトキシイソキノリン-1-イルオキシ)ピロリジン-1-
イル)-1,5-ジオキソ-5-((1S,4S)-3-オキソ-2-オキサ-5-アザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-5-
イル)ペンタン-2-イル)-N5-(15-オキソ-19-((3aS,4S,6aR)-2-オキソヘキサヒドロ-1H-チ
エノ[3,4-d]イミダゾール-4-イル)-4,7,10-トリオキサ-14-アザノナデシル)グルタルアミ
ド(XVI-27)：無水DCM 100uL中のXVI-7 2mgの溶液へ、TFA 50uLを添加した。室温で1時間
攪拌した後、溶媒を減圧下で除去し、残渣を真空中で2時間乾燥した。その後無水アセト
ニトリル0.5mLを添加し、引き続きヒューニッヒ塩基50uL、5,21-ジオキソ-25-((3aS,4S,6
aR)-2-オキソヘキサヒドロ-1H-チエノ[3,4-d]イミダゾール-4-イル)-10,13,16-トリオキ
サ-6,20-ジアザペンタコサン-1-酸5mg、及びHATU 6mgを添加した。この反応混合物を室温
で1時間乾燥し、その後分取HPLCにより精製し、凍結乾燥後に所望のツール化合物(tool c
ompound)XVI-27を白色粉末として生じた。LC-MS: 1267.5 (ES+), 1265.6 (ES-)。
【０６２８】
(実施例78)
【化３０８】
2016195596.tif 000353
(2S)-1-((2S)-2-((1R,2S)-1-(シクロプロピルスルホニルカルバモイル)-2-ビニルシク
ロプロピルカルバモイル)-4-(6-メトキシイソキノリン-1-イルオキシ)ピロリジン-1-イル
)-1,4-ジオキソ-4-((1R,4R)-3-オキソ-2-オキサ-5-アザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-5-イル
)ブタン-2-イルカルバミン酸tert-ブチル(XVI-6)：表題化合物を、出発材料として中間体
1dの代わりに中間体6aを使用し、XVI-14と同じ方法で合成した。LC-MS: 811.2 (ES+), 80
9.1 (ES-)。
【０６２９】
(実施例79)
【化３０９】
2016195596.tif 000354
(2S)-1-((2S)-2-((1R,2S)-1-(シクロプロピルスルホニルカルバモイル)-2-ビニルシク
ロプロピルカルバモイル)-4-(6-メトキシイソキノリン-1-イルオキシ)ピロリジン-1-イル
)-1,5-ジオキソ-5-((1S,4S)-3-オキソ-2-オキサ-5-アザビシクロ[2.2.2]オクタン-5-イル
)ペンタン-2-イルカルバミン酸tert-ブチル(XVI-3)：表題化合物を、中間体1hのカップリ
ング酸として中間体6bを使用し、XVI-9と同じ方法で合成した。LC-MS: 839.3 (ES+), 837
.3 (ES)。
【０６３０】
(実施例80)
【化３１０】
2016195596.tif 000355
(2S)-1-((2S)-2-((1R,2S)-1-(シクロプロピルスルホニルカルバモイル)-2-ビニルシク
ロプロピルカルバモイル)-4-(6-メトキシイソキノリン-1-イルオキシ)ピロリジン-1-イル
)-1,5-ジオキソ-5-((1R,5S)-7-オキソ-6-オキサ-2-アザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-イル
)ペンタン-2-イルカルバミン酸tert-ブチル(XVI-2)：表題化合物を、中間体6bのカップリ
ング酸として中間体6cを使用し、XVI-3と同じ方法で合成した。LC-MS: 839.3 (ES+), 837
.3 (ES-)。
【０６３１】
(実施例81)
【化３１１】
2016195596.tif 000356
(2S)-1-((2S)-2-((1R,2S)-1-(シクロプロピルスルホニルカルバモイル)-2-ビニルシク
ロプロピルカルバモイル)-4-(7-メトキシ-2-フェニルキノリン-4-イルオキシ)ピロリジン
-1-イル)-1,5-ジオキソ-5-(2-オキソアゼチジン-1-イル)ペンタン-2-イルカルバミン酸te
rt-ブチル：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体に従い調製した。
【０６３２】
【化３１２】
2016195596.tif 000357
中間体7aを、WO2006086381に公開された手順に従い調製した。
【０６３３】
【化３１３】
2016195596.tif 000358
無水THF 5mL中のアゼチジン-2-オン(36mg, 0.5mmol)の攪拌溶液へ、n-BuLi(1.6M, 0.31
mL)を-78℃で添加した。この溶液を-78℃で0.5時間攪拌し、室温まで温めた。その後この
溶液を、ジクロロメタン5mL中の(S)-5-(ベンジルオキシ)-4-(tert-ブトキシカルボニルア
ミノ)-5-オキソペンタン酸(0.25g, 0.75mmol)及びDCC(0.16g, 0.75mmol)(予め10分間攪拌
したもの)の攪拌溶液に移した。次にこの混合物へ、DIEA(0.55mmol)及びDMAP(0.2mmol)を
添加し、この溶液を室温で10時間攪拌した。溶媒を除去し、粗物質を、シリカゲル上のヘ
プタン/EtOAc(1:1)によるフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し、中間体7b
として白色固形物30mg(20％)を得た。LC-MS: 291.1 (ES+, M-Boc)。
【０６３４】
【化３１４】
2016195596.tif 000359
中間体7b(30mg)を、酢酸エチル(H2、Pd/C、1時間)中で水素化し、脱保護されたカルボ
ン酸30mg(100％)を生じた。LC-MS: 299.1 (ES-)。
【０６３５】
(実施例82)
【化３１５】
2016195596.tif 000360
(2S)-1-((2S)-2-((1R,2S)-1-(シクロプロピルスルホニルカルバモイル)-2-ビニルシク
ロプロピルカルバモイル)-4-(7-メトキシ-2-フェニルキノリン-4-イルオキシ)ピロリジン
-1-イル)-1,5-ジオキソ-5-(2-オキソアゼチジン-1-イル)ペンタン-2-イルカルバミン酸te
rt-ブチル(XVI-26)：表題化合物を、XVI-16について説明された化学により、中間体7a及
び中間体7cを用いて合成した。LC-MS: 859.3 (ES+)。
【０６３６】
(実施例83)
【化３１６】
2016195596.tif 000361
(S)-1-((2S,4R)-2-((1R,2S)-1-(シクロプロピルスルホニルカルバモイル)-2-ビニルシ
クロプロピルカルバモイル)-4-(6-メトキシイソキノリン-1-イルオキシ)ピロリジン-1-イ
ル)-1,5-ジオキソ-5-(2-オキソアゼチジン-1-イル)ペンタン-2-イルカルバミン酸tert-ブ
チル(XVI-1)：表題化合物を、反応物として中間体6a及び中間体7cを使用し、XVI-26に類
似した方法で合成した。LC-MS: 783.3 (ES+)。
【０６３７】
(実施例84)
【化３１７】
2016195596.tif 000362
(5S)-1-((S)-2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-3-((2R,3S)-2-メチル-4-オキソオキ
セタン-3-イルカルバモイルオキシ)プロパノイル)-5-((1R,2S)-1-(シクロプロピルスルホ
ニルカルバモイル)-2-ビニルシクロプロピルカルバモイル)ピロリジン-3-イル 4-フルオ
ロイソインドリン-2-カルボキシラート：表題化合物を、下記に説明されたような工程及
び中間体に従い調製した。
【０６３８】
【化３１８】
2016195596.tif 000363
中間体8aを、中間体1dをN-Boc-L-セリンと共に使用し、HATUカップリング反応により調
製した。LC-MS: 692.2 (ES-)。
【０６３９】
(実施例85)
【化３１９】
2016195596.tif 000364
(5S)-1-((S)-2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-3-((2R,3S)-2-メチル-4-オキソオキ
セタン-3-イルカルバモイルオキシ)プロパノイル)-5-((1R,2S)-1-(シクロプロピルスルホ
ニルカルバモイル)-2-ビニルシクロプロピルカルバモイル)ピロリジン-3-イル 4-フルオ
ロイソインドリン-2-カルボキシラート(XVI-25)：中間体8aを、DCM中の2当量のホスゲン
により、0℃で1時間処理した。得られた混合物を、減圧下で蒸発させた。アセトニトリル
中の1当量の(3S,4R)-3-アミノ-4-メチルオキセタン-2-オン及び2当量のヒューニッヒ塩基
を添加し、得られた混合物を室温で1時間攪拌した。濃縮後、得られた残渣を、分取HPLC
精製に供し、所望のXVI-25を生じた。LC-MS: 843.1 (ES+, M+Na)。
【０６４０】
(実施例86)
【化３２０】
2016195596.tif 000365
(2S)-1-((2S)-2-((1R,2S)-1-(シクロプロピルスルホニルカルバモイル)-2-ビニルシク
ロプロピルカルバモイル)-4-(7-メトキシ-2-フェニルキノリン-4-イルオキシ)ピロリジン
-1-イル)-1-オキソ-3-((S)-5-オキソテトラヒドロフラン-2-カルボキサミド)プロパン-2-
イルカルバミン酸tert-ブチル：表題化合物を、下記に説明されたような工程及び中間体
に従い調製した。
【０６４１】
【化３２１】
2016195596.tif 000366
中間体9aを、中間体1dの代わりに中間体7aから出発し、中間体3bと同じ方法で調製した
。LC-MS: 763.3 (ES+)。
【０６４２】
(実施例87)
【化３２２】
2016195596.tif 000367
(2S)-1-((2S)-2-((1R,2S)-1-(シクロプロピルスルホニルカルバモイル)-2-ビニルシク
ロプロピルカルバモイル)-4-(7-メトキシ-2-フェニルキノリン-4-イルオキシ)ピロリジン
-1-イル)-1-オキソ-3-((S)-5-オキソテトラヒドロフラン-2-カルボキサミド)プロパン-2-
イルカルバミン酸tert-ブチル(XVI-24)：表題化合物を、中間体3bの代わりに中間体9aを
使用し、XVI-21と同じ方法で製造した。LC-MS: 875.3. (ES+)。
【０６４３】
(HCV-NS3生物学的データ)
表3は、NS3/4A_App(nM)、MS_HCVNS3_INTACT_NS3 WT 1b 1HR、MS_HCVNS3_INTACT_C139S_
3HR、MS_HCVNS3_INTACT_K136A_3HRアッセイにおける、本発明の選択された化合物の活性
を示している。「A」と指定された活性を有する化合物は、≦1nMのIC50を提供し；「B」
と指定された活性を有する化合物は、＞1nM及び≦10nMのIC50を提供し；「C」と指定され
た活性を有する化合物は、＞10nM及び≦100nMのIC50を提供し；「D」と指定された活性を
有する化合物は、＞100nM及び＜1000nMのIC50を提供し；且つ、「E」と指定された活性を
有する化合物は、≧1000nMのIC50を提供する。
【０６４４】
「F」と指定された活性を有する化合物は、完全な修飾を提供し；「G」と指定された活
性を有する化合物は、＞70％の修飾を提供し；「H」と指定された活性を有する化合物は
、＞50％及び≦70％の修飾を提供し；「I」と指定された活性を有する化合物は、＞30％
及び≦50％の修飾を提供し；且つ、「K」と指定された活性を有する化合物は、≦30％の
修飾を提供する。
【表３】
2016195596.tif 000368
2016195596.tif 000369
【０６４５】
化合物XVI-1、XVI-8、XVI-17、XVI-16、及びXVI-26などの一部のHCVプロテアーゼイン
ヒビターは、HCVプロテアーゼ又はそれらの変異体の＞70％の修飾を提供する。化合物XVI
-6、XVI-7、XVI-9、XVI-14、XVI-15、XV-16、及びXVI-26などの一部のHCVプロテアーゼイ
ンヒビターは、HCVプロテアーゼ又はそれらの変異体の＞50％及び≦70％までの修飾を提
供する。化合物XVI-14などの一部のHCVプロテアーゼインヒビターは、HCVプロテアーゼ又
はそれらの変異体の＞30％及び≦50％の修飾を提供する。化合物XVI-1、XVI-2、XVI-3、X
VI-4、XVI-5、XVI-9、XVI-19、XVI-24、及びXVI-25などの一部のHCVプロテアーゼインヒ
ビターは、HCVプロテアーゼ又はそれらの変異体の≦3f30％の修飾を提供する。
【０６４６】
(E.  発明の化合物と接触されたHCVプロテアーゼの質量分光分析)
(実施例88)
未変性のHCV(プロテアーゼ)1bWTを、タンパク質に対し10-倍過剰なXVI-26と1時間イン
キュベーションした。試料の3μlアリコートを、0.1％TFA 10μlで希釈し、その後脱着マ
トリックスとしてシナピン酸を使用し(0.1％TFA：アセトニトリル50:50中10mg/mL)、直接
MALDI標的上でマイクロC4 ZipTippingした。図3の上側パネルは、未変性のHCV 1bWTタン
パク質(m/z 24,529Da)の質量分光的追跡である。図3の中央パネルは、HCV 1bWTがXVI-26(
mw＝858.9)と一緒にインキュベートされた場合の、質量分光的追跡を示す。質量中心(m/z
＝25,340Da)は、約811Daの正のシフトを示し、このことはXVI-26によるHCV 1bWTの修飾を
指摘している。恐らくタンパク質精製時のタンパク質ミスフォールディングのために、ミ
スフォールドされたごく一部のタンパク質は、修飾されなかった。
【０６４７】
このタンパク質の修飾がリシンで起こるかどうかを決定するために、前記実験のpHを7.
4から10.0へ上昇させた。化合物のリシン付加物はアミドであるので、何らかのpHの上昇
は、修飾されたタンパク質に最小の作用を有するであろう。しかし修飾がシステインで起
こる場合、得られるチオエステル結合は不安定であり、この化合物はこのタンパク質を加
水分解除去するであろう。図3の下側パネルは、XVI-26と一緒にpH7.4で1時間、引き続きp
H10で2時間インキュベートされたHCV 1bWT反応の質量分光的追跡を示し、XVI-26は、この
タンパク質から離れず(not come off)、これは付加物がリシン上に生じたことを暗示して
いる。
【０６４８】
未変性のHCV(プロテアーゼ)1bWT、C159S、及びC159S/K136Aを、タンパク質に対し10-倍
過剰なXVI-26と1時間インキュベーションした。試料の3μlアリコートを、0.1％TFA 10μ
lで希釈し、その後脱着マトリックスとしてシナピン酸を使用し(0.1％TFA：アセトニトリ
ル50:50中10mg/mL)、直接MALDI標的上でマイクロC4 ZipTippingした。図4の第一のパネル
は、未変性のHCV 1bWTタンパク質(m/z 24,460Da)の質量分光的追跡を示す。図4の第二の
パネルは、HCV 1bWTがXVI-26(mw＝858.9)とインキュベートされた場合の、質量分光的追
跡を示し、その質量中心(m/z＝25,320Da)は、約860Daの正のシフトを示し、このことはXV
I-26によるHCV 1bWTの修飾を指摘している。図4の第三のパネルは、HCV C159S変異体がXV
I-26とインキュベートされた場合の質量分光的追跡を示し、その質量中心(m/z＝25,237Da
)は、770Daの正のシフトを示し、これはXVI-26によるHCV C159Sの修飾を指摘している。
図4の第四のパネルは、HCV C159S/K136A二重変異体がXVI-26とインキュベートされた場合
の質量分光的追跡を示し、その質量中心(m/z＝24,412Da)は、未修飾のHCV C159S/K136Aの
質量と一致し、このことはXVI-26によるHCV C159S/K136Aの修飾はないことを指摘してい
る。このデータは、K136がXVI-26により修飾されるアミノ酸であることを示している。
【０６４９】
未変性のHCV(プロテアーゼ)1bWTを、タンパク質に対し10-倍過剰なXVI-1(mw＝782.87)
と1時間インキュベーションした。試料の3μlアリコートを、0.1％TFA 10μlで希釈し、
その後脱着マトリックスとしてシナピン酸を使用し(0.1％TFA：アセトニトリル50:50中10
mg/mL)、直接MALDI標的上でマイクロC4 ZipTippingした。図5の上側パネルは、HCV NS3タ
ンパク質(m/z 24,550Da)の質量分光的追跡を示し、図5の下側パネルは、1時間時点を示し
(m/z 24,611及び25,372)、これは+755の質量シフト(〜72％変換)を示し、このことはXVI-
1がHCV NS3 WT1bを修飾したことを指摘している。タンパク質精製時の一部のタンパク質
のミスフォールディングのために、このタンパク質のフォールディングされていない部分
は、XVI-1と反応することはできない。
【０６５０】
(実施例89)
(一本鎖HCVプロテアーゼ(wt)ペプチド発現及び精製)
一本鎖タンパク質分解性ドメイン(NS4A21-32-GSGS-NS33-631)を、pET-14b(Novagen社、
マジソン、WI)へクローニングし、且つDH10B細胞(Invitrogen社)へ形質転換した。得られ
たプラスミドを、タンパク質発現及び精製のために、大腸菌BL21(Novagen社)に移入した
。簡単に述べると、培養物を、アンピシリン100μg/mlを含有するLB培地において、600nm
での光学密度(OD600)が1.0に到達するまで、37℃で増殖させ、且つイソプロピル-β-D-チ
オガラクトピラノシド(IPTG)を1mMまで添加することにより誘導した。18℃で20時間の追
加のインキュベーションした後、6,000×gで10分間の遠心分離により、細菌を収集し、50
mM Na3PO4(pH8.0)、300mM NaCl、5mM 2-メルカプトエタノール、10％グリセロール、0.5
％Igepal CA630、並びに1mMフッ化フェニルメチルスルホニル、0.5μg/mlロイペプチン、
ペプスタチンA、及び2mMベンズアミジンからなるプロテアーゼインヒビターカクテルを含
有する溶解緩衝液中に再浮遊させた。細胞を、凍結及び解凍、それに続く超音波処理によ
り溶解した。細胞デブリを、12,000×gで30分間の遠心分離により除去した。上清を、0.4
5-μmフィルター(Corning社)を通過させることにより更に清浄とし、その後NiSO4を充填
したHiTrapキレーティングカラム(Amersham Pharmacia Biotech社)上に装加した。結合し
たタンパク質を、イミダゾール溶液の100mMから500mMまでの直線勾配で溶離した。選択さ
れた画分を、Ni2+カラムクロマトグラフィー上を流し、10％ドデシル硫酸ナトリウム(SDS
)-ポリアクリルアミドゲル上で分析した。精製したタンパク質を、12％SDS-PAGEゲルでの
電気泳動により分解し、その後ニトロセルロースメンブレン上に移した。このタンパク質
を、NS3に対するモノクローナル抗体を使用するウェスタンブロット分析により分析した
。タンパク質は、二次抗体としてホースラディッシュペルオキシダーゼ-複合ヤギ抗-マウ
ス抗体(Pierce社)を使う化学発光キット(Roche社)を使用することにより、可視化した。
タンパク質はアリコートに分け、-80℃で貯蔵した。
【０６５１】
(実施例90)
(HCVプロテアーゼA156S、A156T、D168A、D168V薬物耐性変異体及びC159S変種のクローニ
ング及び発現)
NS4A/NS3の変異体DNA断片を、PCRにより作製し、且つpET発現ベクターへクローニング
した。BL21コンピテント細胞への形質転換後、その発現をIPTGにより2時間誘導した。His
-タグ付き融合タンパク質を、アフィニティカラム、引き続きサイズ排除クロマトグラフ
ィーを用いて精製した。
【０６５２】
(実施例91)
(Lysウォッシュアウトに使用したプラスミド及び共有的プローブ)
図10は、NS3/4A C159Sを修飾するリシン共有的プローブ化合物XVI-27を示している。pC
I-Neo-FLAG-NS3/4a-WTプラスミドを、Accuprime Pfx(Invitrogen社)を製造業者の指示に
従い使用し、pFK-I389-luc-ubi-neo-NS3-3'ETベクターからのNS3及び4a配列を、5'末端に
NheI部位及びFLAGエピトープタグ及び3'末端にXbaI部位を加えたプライマーにより増幅す
ることにより構築した。
【０６５３】
【化３２３】
2016195596.tif 000370
【０６５４】
その後得られたPCR産物を、NheI及びXbaIで消化し、pCI-Neoベクター(Invitrogen社)の
同じ部位にライゲーションした。次にこのWT構築体を、Quickchange II部位特異的突然変
異誘発キット(Qiagen社)及びK136R又はC159S変異を含むプライマー(下記)を使用する部位
特異的突然変異誘発の鋳型として使用した。
【化３２４】
2016195596.tif 000371
【０６５５】
(実施例92)
(延長された作用持続期間(ウォッシュアウト)の実証)
図11は、XVI-26により延長された作用持続期間を示している。親Huh-7細胞を、10％FBS
を含む培地中に、100mmディッシュ1枚につき1.75×106個細胞の密度で播種した。翌日細
胞を、プラスミド28μg及びLipfectamine 2000(Invitrogen社)112μlを製造業者の指示に
従い用い、OptiMEMへトランスフェクションした。このトランスフェクション複合体と共
に、4時間インキュベーションした後、培地をレプリコンアッセイ培地(5％FBS、1×非必
須アミノ酸及びペニシリン/ストレプトマイシン(pen/strep)を補充したRPMI)に変更した
。翌朝、細胞をトリプシン処理し、カウントし、且つレプリコン培地(Replicon Media)に
、12ウェルプレート(1遺伝子型につき4ウェル)に密度20,000個細胞/ウェルで再度播種し
た。細胞をプレートに接着させ、次に培地を除去し、XVI-26(1化合物につき3ウェル)及び
0.02％DMSOを含有する培地1mlと交換し、一晩インキュベーターに戻した。16時間後、各
遺伝子型から1つの処理ウェル(0時間試料)及び1つの非処理ウェルを、PBSで洗浄し、次に
溶解し、細胞抽出緩衝液(Biosource社、カマリロ、CA)30μlに完全プロテアーゼインヒビ
ター(Roche社、インディアナポリス、IN)を加えたものへ掻き取った。残りのウェルは、P
BSで2回洗浄し、次にレプリコン培地を供給し、インキュベーターに戻した。古い培地を
除去し且つこれを新鮮な培地と交換することにより、細胞を1時間毎に洗浄し、溶解し、
且つ初回収集の1時間及び6時間後に収集した。溶解液を、標準免疫ブロット法を用いて分
解し、NS3自己-切断活性を評価し、未処理試料に対し定量化した。
【０６５６】
(実施例93)
(共有的プローブを使用するリシン修飾の実証)
図11に図示されたように、総細胞溶解液200μgを、各々NS3/4A WT、C159S又はK136Rの
いずれかに使用した。溶解液を、1μMのビオチニル化された共有的プローブ、XVI-27で1
時間処理し、抗-NS3抗体(マウス)により免疫沈降させた。免疫ブロットを、ストレプトア
ビジン及び抗-NS3抗体(ヤギ)によりプロービングした。共有的プローブによりうまくいっ
た修飾を評価し、且つWT NS3に対して定量化した。
【０６５７】
(実施例94)
アッセイ緩衝液：2％CHAPS、50mMトリス(pH7.5)、50％グリセロール、2μM M-2235基質
(Bachem社)。反応液50μl中、アッセイ緩衝液49μl、(1U)HCVセリンプロテアーゼ(Bioenz
a社)1μlを添加した。20分間室温でインキュベートした。プレートは、蛍光マイクロ-プ
レートリーダー上で350/460nm(励起/発光)で読み取るか、又は反応速度曲線が完成するま
で1分間隔でモニタリングした。
【０６５８】
この酵素は、1％DMSO及び2％メタノールを忍容した。化合物を試験する実験において、
純粋なDMSO中の化合物は、20％メタノールにより10回希釈した(10％DMSO及び20％メタノ
ール)。この化合物溶液を、反応液に添加した(最終反応容積の10％を超えない)。有機溶
媒の最終濃度は、1％DMSO及び2％メタノールであった。
【０６５９】
(実施例95)
(WT及び変異型NS3/4A 1b酵素のHCVプロテアーゼFRETアッセイ(IC50_APP))
下記プロトコールを使用し、以下の表6に示されたように、「見かけ」のIC50(IC50_APP
)値を生じた。いずれか特定の理論に結びつけられることを意図するものではないが、IC5
0値とは対照的に、IC50_APPは、時間-依存型の阻害のより有用な指標をもたらし、結果的
により典型的な結合親和性をもたらすことができると考えられる。本プロトコールは、HC
V NS3/4A 1bプロテアーゼ酵素の野生型及びC159S、A156S、A156T、D168A、D168V、R155K
変異体に対し、化合物効力、順位序列及び抵抗性プロファイルを評価するために開発され
た、改変されたFRET-ベースアッセイ(v_03)であり、以下のものである：Bioenza社(マウ
ンテンビュー、CA)のNS3/4Aプロテアーゼ酵素の10×ストック液、及びAnaspec社(サンノ
ゼ、CA)の1.13×5-FAM/QXL(商標)520 FRETペプチド基質を、50mMトリス-HCl、pH7.5、5mM
DTT、2％CHAPS及び20％グリセロール中に調製した。50％DMSO容量0.5μL及び50％DMSO中
に調製した連続希釈した化合物をスポットした後、各酵素5μLを、Corning社の(#3575)38
4-ウェル黒色マイクロタイタープレート(Corning社、NY)に添加した。プロテアーゼ反応
を、FRET基質45μLの添加により、酵素添加後直ちに開始し、且つBioTek社(ウィノースキ
ー、VT)のSynergy プレートリーダーにおいてλex485/λem520で、60〜90分間モニタリン
グした。各アッセイの終結時に、各ウェルからのプログレス曲線を、線形反応速度及びフ
ィット統計(R2、95％信頼区間、絶対平方和)について調べた。各反応からの初速度(0分か
ら15＋分)を、相対蛍光単位、対、時間(分)のプロットの勾配から決定し、次に無インヒ
ビター対照及び無酵素対照の割合として、インヒビター濃度に対してプロットし、log[イ
ンヒビター]対反応から見かけのIC50を概算した(GraphPad Software社(サンディエゴ、CA
)のGraphPad Prismの可変勾配モデル)。
【０６６０】
(F.  PI3キナーゼインヒビター(Lys)合成例)
(実施例96)
【化３２５】
2016195596.tif 000372
1-(4-((2-(1H-インダゾール-4-イル)-4-モルホリノチエノ[3,2-d]ピリミジン-6-イル)
メチル)ピペラジン-1-イル)プロパ-2-エン-1-オン：表題化合物を、下記に説明されたよ
うな工程及び中間体に従い調製した。
【化３２６】
2016195596.tif 000373
【０６６１】
(工程1a：4-(2-クロロチエノ[3,2-d]ピリミジン-4-イル)モルホリン(中間体1a))
【化３２７】
2016195596.tif 000374
MeOH 30mL中の2,4-ジクロロチエノ[3,2-d]ピリミジン(2.0g, 9.7mmol)の溶液へ、モル
ホリン1.9mLを添加した。室温で1時間攪拌した後、反応混合物を濾過し；固形物を水及び
メタノールで洗浄し、表題化合物2.0gを供した。
【化３２８】
2016195596.tif 000375
【０６６２】
(工程1b：2-クロロ-4-モルホリノチエノ[3,2-d]ピリミジン-6-カルボアルデヒド(中間体1
b))
【化３２９】
2016195596.tif 000376
THF 30mL中の中間体1a(1.02g, 4.0mmol)の懸濁液へ、-78℃で、LiHMDS(1.0N, 6.0mL, 6
.0mmol)をゆっくり添加した。この反応混合物を-78℃で1時間攪拌し、DMF(0.5mL)を添加
し、反応混合物を2時間かけて室温まで温めた。反応をNH4Cl水溶液によりクエンチし、TH
Fを真空下で除去した。EtOAcの50mL部分を添加し、この混合物をNaHCO3水溶液及びブライ
ンで洗浄した。有機層を分離し、Na2SO4上で乾燥した。溶媒の除去後、粗生成物を、シリ
カゲル上のクロマトグラフィー(溶離液：EtOAc/ヘキサン)に供した。合計0.6gの表題化合
物を得た(60％)。MS m/z: 284.2 (ES+, M+1)。
【０６６３】
(工程1c：4-((2-クロロ-4-モルホリノチエノ[3,2-d]ピリミジン-6-イル)メチル)ピペラジ
ン-1-カルボン酸tert-ブチル(中間体1c))
【化３３０】
2016195596.tif 000377
中間体1b(0.40g, 1.5mmol)、ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル及び酢酸0.2mLを、
ジクロロエタン12mL中に溶解した。この混合物を室温で2時間攪拌した。NaBH(OAc)3(0.54
g, 2.5mmol)を反応混合物へ添加し、得られた混合物を室温で10時間攪拌した。NaHCO3水
溶液20mL及びDCM 10mLを添加した。有機層を分離し、Na2SO4上で乾燥した。溶媒の除去後
、粗生成物を、シリカゲル上のクロマトグラフィー(溶離液：EtOAc/ヘキサン3:7)に供し
た。合計0.30gの表題化合物を得た。MS m/z: 454.2 (ES+, M+1)。
【０６６４】
(工程1d： 4-((2-(1H-インダゾール-4-イル)-4-モルホリノチエノ[3,2-d]ピリミジン-6-
イル)メチル)ピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(中間体1d))
【化３３１】
2016195596.tif 000378
中間体1c(0.14g, 0.31mmol)、4-(トリメチルスタンニル)-1H-インダゾール(0.10g, 0.3
7mmol)及びテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(35mg, 0.03mmol)を、トルエ
ン5mLに溶解した。この溶液を脱気し、N2でフラッシュした。反応混合物を、密封したバ
イアル内で135℃で40時間加熱した。溶媒を真空下で除去し、残渣をシリカゲル上のクロ
マトグラフィー(溶離液：EtOAc/ヘキサン5:5)により精製した。合計0.10gの表題化合物を
得た。MS m/z: 536.1 (M+1)。
【０６６５】
或いは、中間体1dは、下記の鈴木カップリング手法により調製することができる：中間
体1c(70mg, 0.15mmol)、4-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)-1H-
インダゾール(56mg, 0.23mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(10mg, 0.015mmol)及び炭酸ナトリウム(60
mg, 0.56 mmoL)を、トルエン/エタノール/水(2.5mL/1.5mL/0.7mL)中に溶解した。この溶
液を脱気し、アルゴンでフラッシュした。反応混合物を、密封したバイアル内で125℃で1
0時間加熱した。その後酢酸エチル10mLを添加することにより、反応物を後処理し、水及
びブラインで洗浄した。有機層を分離し、Na2SO4上で乾燥した。溶媒の除去後、粗生成物
を、シリカゲル上のクロマトグラフィー(溶離液：EtOAc/ヘキサン1:1から4:1)に供し、表
題化合物を生じた。MS m/z: 536.1 (M+1)。
【０６６６】
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膀藩ꂴ胣ꖋ臣辁臣ꮡ믩㲄甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰讁苣겋ꯧ鞁臣뢁諦閁苣龁鲀讀臣颃菣궃軥邭苣覜臣讂ⴴ胣㞜ꆓ臣붣鋥袏臣ꢃ裥蒚룤붣鋥꺁⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢ꓨꂴ鋧膀ꫧꂴ胣뢅듧膀诨鞁臣꾁ꇧ蒻臣覂诧讫臣ꚁ臩麊臣貂臣㆟胣㎜胥꺁菣蚃菣龎귥銂鳦馁苣㲋甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㜾鲀〱ꆓ臣붣鋥袏臣ꢃ裥蒚룤붣鋥꺁뫤낒볥螤듧낒胣閃苣讃菣膀ⴸ胣㆜ⴰ鏥꺁뫤낒볥ꊂ菣벃⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢菣낒胣銪듧��膀藩ꂴ胣ꖋ臣辁臣ꮡ믩讁苣겋ꯧ鞁臣뢁諦閁苣龁鲀讀臣颃菣궃軥邭苣覜臣讂ⴵ⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣㚜ꆓ臣颃菣궃苣ꪃ菣ꮃ鋧膀迥꾁ꫧꂴ胣뢅듧膀诨鞁臣꾁ꇧ蒻臣覂诧讫臣ꚁ臩麊臣貂臣㆟胣㒜⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胥꺁菣蚃菣龎귥銂鳦馁苣㢋鲀〱ꆓ臣貺鋧込菣蚃菣ꊂ菣벃菣낒臣覂臩麊臣貂臣뮻蓦ꮁ뷧鮏⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢臣貂臣몟臣芁苣讁볯袏臣㲯甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰‾貐룤銪듧誸臣㊮胥꺁≒鿥꾁胣鶁苣覂臣邵郥鞁臣銪듧ꢁ룤銷臣膀ꫧꂴ胣뢅듧膀诨鞁臣꾁ꇧ㲫甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰蒻臣覂诧讫臣ꚁ臩麊臣貂臣㆟胣㒜胥꺁菣蚃菣龎귥銂鳦馁苣뮻蓦ꮁ뷧鮏臣貂臣㖟胣㢜鏥꺁ꏩ貒胣㲁甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ꢃ裥蒚룤붣鋥膀迥꾁諨馦韦꺁鋧銂뷥邈臣鮼⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢†꾁胣め胣㚜臣ꞁ苣ꮐ苣뒕闦ꞁ臣誂볯㲛甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰‾込塘噉愭迥꾁볥墏䥘ⵖ꺁꺁郥薀臣膀诧讫臣ꚁ膀膀迥꾁ꞁ臣誂볯钸臣㲤甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰‾낒㱁甯㰾畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㔾⼼㹵⼼畳㹰甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰꾁胣ㆁ胣㊜胥꺁ꫧꂴ苣覜臣讂胣뮻蓦ꮁ뷧鮏臣貂臣㚟ꆓ臣螤듧낒迥꾁菣蚃菣ꊂ菣벃菣낒⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢臣芁苣芀芀⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢볯讧裦閼볯覼⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢†觥風볥墏䥘ⵖ袏臣込塘噉戭臣隌郥ꦉ臣膀룤風臣覂臣讂뻧袂苣뢁諦閁苣讂胣讧裦㖐꺁雦閳⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢볯㲚甯㰾牢ਾ䐼噉邀賥隼볯閼胣㲑䐯噉ਾ䐼噉㰾⁡牨晥∽〲㘱㤱㔵㘹琮晩㸢〲㘱㤱㔵㘹琮晩ꃂ〰㤰㘹⼼㹡⼼䥄㹖ਊ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰芀⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢볯讧裦隼볯覼⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢†觥風볥䦏꺁賥袐觧貁胣込塘꺁賥袐觧ꞁ臣讂胣讧裦㆐꺁雦閳볯㲚甯㰾牢ਾ䐼噉邀賥隼볯隼胣㲑䐯噉ਾ䐼噉㰾⁡牨晥∽〲㘱㤱㔵㘹琮晩㸢〲㘱㤱㔵㘹琮晩ꃂ〰㤰㜹⼼㹡⼼䥄㹖ਊ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰⠾볥궸볯㲚甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰‾删⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵桷⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰꾁胣込ⵉ膀ⵉ膀ⵉ膀ⵉ膀ⵉ膀ⵉ膀ⵉ膀ⵉ膀ⵉ膀ⵉ膀ⵉ膀ⵉ膀ⵉ膀ⵉ㱮甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰膀ⵉ膀ⵉ膀ⵉ膀ⵉ膀ⵉ膀迥뎁ⵉ꺁賥袐觧꺁냦ꂴ臣꒙軥讁苣龔臣讂菣뢂苣ꮃ臣芁苣뺼⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢ꃩꞁ臣誂볯㲚甯㰾牢ਾ䐼噉邀賥隼볯鞼胣㲑䐯噉ਾ䐼噉㰾⁡牨晥∽〲㘱㤱㔵㘹琮晩㸢〲㘱㤱㔵㘹琮晩ꃂ〰��㠹⼼㹡⼼䥄㹖ਊ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰鎁臣ꞁ胣㲁甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰‾堠⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰱甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢迥뎁㱘甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㠾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰꺁郥薀臣膀诧讫臣ꚁ胣ⶁⵏ胣ⶁⵓ胣袏臣⶯剎⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰶甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢ꞁ臣誂볯㲛甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰‾堠⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰲甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢臣蒐胣꾁胣겋ꯧ鞁臣膀刭⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰶甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣ⶁ剏⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰶甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣袏臣⶯剎⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰶甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㜾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ꞁ臣誂볯㲛甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰‾堠⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰹甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢臣蒐胣꾁胣겋ꯧ鞁臣膀⼼㹵戼㹲㰊䥄㹖胣隌볯醼볯醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖愼栠敲㵦㈢㄰ㄶ㔹㤵⸶楴≦㈾㄰ㄶ㔹㤵⸶楴쉦゠〰㤹㰹愯㰾䐯噉ਾ㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢臣芁苣鮼⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢†㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㈾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰膀㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㌾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰膀㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㐾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰膀㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㔾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰膀㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㘾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰膀㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㜾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰膀迥뎁㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㠾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰꺁郥薀臣膀诧讫臣ꚁ胣뒰듧袏臣䎯⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰱甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢䌭⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰶甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢苣ꮃ苣ꮃ臣芁苣㲊甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰鮼臣鎁臣膀㱃甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼ㄾ⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ⴾ㱃甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㘾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ꊂ菣궂菣꺁讀믤誸臣ꆃ菣것菣몟臣膀中㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼ㄾ⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ⴾ胣ⶁⵏ胣ⶁ⡃⥏膀匭膀匭ⵏ胣ⶁ⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷��潰朮⹯灪㸢体⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰲甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢膀迥꾁䌭㴨⥓ꮁ苣誂뷧趁迦袁苣貂苣鎁臣貁臣趁볯䎛⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰱甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢䌭⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰶甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢苣ꮃ苣ꮃ臣ㆮ胥ꖻ룤꺁菣膃菣㲳甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰몟臣膀귥ꢜ臣讂ꃥ袐胣겋ꯧ鞁臣膀⼼㹵戼㹲㰊䥄㹖胣隌볯醼볯醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖愼栠敲㵦㈢㄰ㄶ㔹㤵⸶楴≦㈾㄰ㄶ㔹㤵⸶楴쉦゠㄰〰㰰愯㰾䐯噉ਾ㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢臣袂苣꺽臣鮏臣覂苣讂臣ꢁ臣ꞁ臣鮼⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢†㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼ㄾ⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰꾁胣뒰듧袏臣䎯⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰱甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢䌭⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰸甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢苣ꮃ苣ꮃ臣芁苣鮼⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢†臣鎁臣뮻蓦ꮁ臩螈臣芁苣ꪁ苣낁胣劁⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰲甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣劁⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰳甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣劁⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰴甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣劁⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰵甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣劁⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰶甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣劁⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰷甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣誏臣劳⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰸甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢臣蒁臣貂臣㊋臣꾁胣㲁甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰肸럧ꮁ臣讂臣膀ⴳ胣㢜ꆓ臣궂듧낒迥꾁ꓨꂴ鋧袏臣ꊂ菣벃菣ꖋ臣辁臣颃菣궃苣ꪃ菣ꮃ鿥銂뷥㲢甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰邈臣鮼룤ꒁ胣뮻蓦ꮁ㱘甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㈾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ꚸ臣ꮁ㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㈾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰膀㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㌾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰膀迥뎁㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㐾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰꺁臣骁苣讁ꒁ臣膀룤銷臣ꪁ苣ꢁ胣㎁鲀ⴸ鏥㲡甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰꺁苧ꂴ鋧袏臣螤듧낒迥꾁苣ꪃ菣ꮃ诨鞁臣꾁菣蚃菣ꊂ菣벃菣몟苣ꊽ裦鞁볯㲛甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰‾䄠迥뎁꾁胣蒐胣겋ꯧ鞁臣膀믤辄臣꺽迦閁苣龁跥낒볥��膀뫤낒볥膀迥꾁룤낒볥ꊂ菣벃菣袏臣㲯甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰颃菣궃苣ꪃ菣ꮃ臣芁苣鮼룤ꒁ⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢†꾁胣㊁胣㒜臣뒕闦ꞁ臣誂볯溛⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰱甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢迥뎁㱮甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㈾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰꺁郥薀臣膀诧讫臣ꚁ胣め胣㊜臣뒕闦ꞁ臣誂볯溛⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰳甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢臣膀鲀⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢꺁闦낕臣芁苣鮼㱮甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㐾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰꾁胣ㆁ胣㎜臣뒕闦ꞁ臣誂볯ꚸ臣ꮁ胣溁⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰹甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣溁⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵〱⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰膀㱮甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼ㄾ㰱甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣誏臣溳⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㈱⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰꺁郥ㆄ臣꾁胣め⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣㆜臣뒕闦ꞁ臣誂볯ꚸ臣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貂臣ꎚ軦궂듧꾁胣颍뗧袐迥꾁뫤趇뗧袐苣ꊽ裦馁⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢苣鎁臣貁臣趁苣芀芀⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢볯讧裦馼볯覼⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢†觥風볥䦏戭迥뎁ⵉ꺁賥袐觧꺁㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㈾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰誏臣劳⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰳甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢臣醰臣辁臣节ꒁ臣膀냦ꂴ臣芁苣膀꟦邈㐹臣릖돦㲕甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰芀⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢볯讧裦馼볯覼⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢†觥風볥䦏愭胣䦁搭胣䦁攭胣䦁樭胣䦁欭胣袏臣䦯氭臣隌郥ꦉ臣膀볥䦏ⵉ膀䥉戭胣䦁ⵉ膀䥉搭胣䦁㱉甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ⴾ膀䥉昭胣䦁ⵉ膀䥉栭胣䦁ⵉ膀䥉樭胣䦁ⵉ膀䥉氭胣䦁ⵉ膀䥉渭胣䦁ⵉ膀䥉瀭胣䦁ⵉ膀䥉爭⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣䦁ⵉ膀䥉琭胣䦁ⵉ膀䥉瘭胣䦁ⵉ膀䥉砭胣䦁ⵉ膀䥉稭胣䦁ⵉ慡胣䦁ⵉ扢胣䦁ⵉ捣胣䦁ⵉ摤胣䦁㱉甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ⴾ敥胣䦁ⵉ晦胣䦁ⵉ杧胣䦁ⵉ桨胣䦁ⵉ楩胣䦁ⵉ橪胣䦁ⵉ歫胣䦁ⵉ汬胣䦁ⵉ浭胣䦁ⵉ湮胣䦁ⵉ潯胣袏臣䦯⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢ⵉ灰臣隌郥ꦉ臣芁苣膀꟦邈㐹臣릖돦骼⼼㹵戼㹲㰊䥄㹖胣隌볯钼볯醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖愼栠敲㵦㈢㄰ㄶ㔹㤵⸶楴≦㈾㄰ㄶ㔹㤵⸶楴쉦゠㄰㈰㰵愯㰾䐯噉ਾ㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢込룤膀⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢†꺁郥薀臣膀诧讫臣ꚁ胣め胣㒜臣뒕闦ꞁ臣誂볯㲛甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰‾洠⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰��瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰵甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢臣蒐胣꾁胣겋ꯧ鞁臣膀鲀꺁闦낕臣芁苣鮼⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢†㱭甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㐾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰꺁郥薀臣膀诧讫臣ꚁ胣め胣㖜臣뒕闦ꞁ臣誂볯㲛甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰‾渠⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰲甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢臣蒐胣꾁胣겋ꯧ鞁臣膀鲀꺁闦낕臣芁苣鮼⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢†㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㈾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰膀㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㌾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰膀㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㐾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰膀㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㔾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰膀㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㘾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰膀㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㜾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰膀㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㠾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰膀㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㤾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰膀㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼ㄾ㰰甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣劁⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵ㄱ⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰膀㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼ㄾ㰲甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣劁⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㌱⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰膀㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼ㄾ㰴甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣誏臣劳⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㔱⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰꺁郥薀臣膀诧讫⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢臣ꚁ胣뒰듧袏臣䎯⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰱甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢䌭⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰶甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢苣ꮃ苣ꮃ臣芁苣鮼㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼稾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰꾁胣뒰듧膀㱃甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼ㄾ⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ⴾ㱃甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㘾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ꊂ菣궂菣膀菣궃苣뎃胣䎁㱆甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㌾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰膀迥㲈甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰꾁菣袃菣ꞁ臣誂볯鎁臣ꞁ胣㲁甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰‾䌠⼼㹵猼扵��汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰱甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢䌭⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰶甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢苣ꮃ苣ꮃ臣ㆮ胥ꖻ룤꺁菣膃菣뎃鿥꾁胣ⶁ剎⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰱甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢膀伭膀䌭伨⴩胣ⶁⵓ胣ⶁ体膀匭㱏甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㈾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ⴾ胣袏⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢臣⶯⡃匽⴩臣袂苣꺽臣鮏臣覂苣讂臣ꢁ臣ꞁ臣鮼㱃甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼ㄾ⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ⴾ㱃甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㘾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ꊂ菣궂菣꺁讀믤誸臣ꆃ菣뎃鿥꾁胣颭⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢鳥馁苣뒠郥膀诧讫臣ꚁ胣㲁甯㰾牢ਾ䐼噉邀賥隼볯鎼胣㲑䐯噉ਾ䐼噉㰾⁡牨晥∽〲㘱㤱㔵㘹琮晩㸢〲㘱㤱㔵㘹琮晩ꃂ〰〱㘲⼼㹡⼼䥄㹖ਊ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ꮁ苣誂뷧趁迦袁苣貂苣鎁臣貁臣趁볯㲛甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰‾删⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰱甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢臣膀냦ꂴ迥꾁㱃甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼ㄾ⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ⴾ㱃甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㠾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ꊂ菣궂菣ꞁ臣誂볯钸臣㲤甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰‾뮻蓦ꮁ臩螈臣芁苣ꪁ苣낁胣劁⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰲甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣劁⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰳甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣劁⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰴甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣劁⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰵甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣劁⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰶甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣劁⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰷甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣劁⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰸甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣劁⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰹甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣劁⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵〱⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰膀㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼ㄾ㰱甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣劁⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㈱⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰膀㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼ㄾ㰳甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣劁⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰱甯㰾猯扵㰾牢ਾ猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰴��㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣誏臣劳⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㔱⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰꺁臣骁苣讁ꒁ臣膀룤銷臣ꪁ苣ꢁ胣㎁鲀ⴸ鏥꺁苧ꂴ鋧袏臣螤듧낒迥꾁苣ꪃ菣ꮃ⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢诨鞁臣꾁菣蚃菣ꊂ菣벃菣몟苣ꊽ裦馁苣芀芀⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢볯讧裦馼볯覼⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢†觥風볥䦏搭胣袏臣䦯栭臣隌郥ꦉ臣膀볥䦏䥉愭胣䦁䥉戭胣䦁䥉挭胣䦁䥉搭胣䦁䥉攭胣䦁䥉昭胣䦁䥉㰭甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰朾胣䦁䥉栭胣袏臣䦯䥉椭臣隌郥ꦉ臣芁苣膀꟦邈㐹臣릖돦骼⼼㹵戼㹲㰊䥄㹖胣隌볯钼볯醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖愼栠敲㵦㈢㄰ㄶ㔹㤵⸶楴≦㈾㄰ㄶ㔹㤵⸶楴쉦゠㄰㈰㰷愯㰾䐯噉ਾ㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢込룤膀⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢†㱮甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㌾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰꾁胣め胣㊜臣뒕闦ꞁ臣誂볯㲛甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰‾删⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰲甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣劁⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰳甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣劁⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰴甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣劁⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰵甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣劁⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰶甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣劁⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰷甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣誏臣劳⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰸甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢臣蒐胣꾁胣겋ꯧ鞁臣膀냦ꂴ迥꾁㱃甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼ㄾ⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ⴾ㱃甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㘾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ꊂ菣궂菣ꞁ臣誂⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢볯㲛甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰‾䈠⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰱甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣䊁⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰲甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣䊁⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰴甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣誏臣䊳⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰵甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢臣蒐胣꾁胣겋ꯧ鞁臣膀剃⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰷甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢迥꾁ꞁ臣誂胣钸臣䊤⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰳甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢臣蒐胣꾁胣亁㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㜾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢��㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰膀膀⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢迥꾁ꞁ臣誂볯㲛甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰‾删⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵ㅺ⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭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中刨⤢⡃⥏⡎≒㰩甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㈾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰膀中刨⤢体⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰲甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢⡎≒㰩甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㈾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰膀中刨⤢体⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰲甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢≒胣袏臣⶯䍏伨丩刨⤢⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰲甯㰾猯扵㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ꞁ臣誂볯㲛甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰‾删꺁郥薀臣膀诧讫臣ꚁ胣뒰듧膀裦蒁臣䎯⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵ⴱ㰶甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢蓨ꪂ韦膀ⴳ胣㞜ꆓ臣붣鋥袏臣ꢃ裥蒚룤붣鋥꺁⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢苧ꂴ鋧膀ⴷ胣㆜ⴰ鏥꺁ꏩ貒迥꾁菩蚈髧趸ꏩ貒臣貺鋧込苧ꂴ鋧膀ꫧꂴ胣뢅듧膀诨鞁臣꾁ꇧ蒻⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢臣覂诧讫臣ꚁ臩麊臣貂臣㆟胣㊜胥꺁菣蚃菣龎귥銂鳦馁苣㒋鲀ⴷ鏥꺁ꏩ貒迥꾁菩蚈髧趸ꏩ貒臣㲮甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰螤듧낒胣銪듧膀藩ꂴ胣ꖋ臣辁臣ꮡ믩讁苣겋ꯧ鞁臣뢁諦閁苣龁鲀讀臣颃菣궃軥邭苣覜臣讂⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢ⴷ胣㆜ⴰ鏥꺁ꏩ貒迥꾁菩蚈髧趸ꏩ貒臣貺鋧込ꓨꂴ鋧膀菣Ꞃ菣ꮃ胣㢁鲀〱ꆓ臣貺鋧込苣ꪃ菣㲼甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ꮃ鋧膀ꫧꂴ胣뢅듧膀诨鞁臣꾁ꇧ蒻臣覂诧讫臣ꚁ臩麊臣貂臣㆟胣㎜胥꺁菣蚃菣龎귥銂鳦馁苣㖋㰭甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰鲀ⴶ鏥꺁菣蚃菣ꊂ菣벃菣낒胣袏臣銪듧膀藩ꂴ胣ꖋ臣辁臣ꮡ믩讁苣겋ꯧ鞁臣뢁諦閁苣龁鲀㰴甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰讀臣颃菣궃軥邭苣覜臣讂ⴸ胣㆜ⴰ鏥꺁뫤낒볥颃菣궃苣ꪃ菣ꮃ鋧讁苣뢁諦閁苣龁믤辄臣꺽迦㲛甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰閁苣龁鿥ꞁ臣��讂臣鮼迥꾁⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢†郥肸ꫧꂴ룤꺁讀臣劮몟臣膀臣貂苣貁뗧袐臣龁ꫧꂴ臣肸럧ꮁ胣銪듧膀藩ꂴ胣ꖋ臣辁臣ꮡ⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢믩讁苣겋ꯧ鞁臣뢁諦閁苣龁鲀讀臣颃菣궃軥邭苣覜臣讂믤辄臣꺽迦閁苣龁鲀ꆓ臣붣鋥膀⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢菩蚈髧趸ꏩ貒胣袏臣뎊ꛩ辗臣낒苣ꊽ裦鞁볯㲛甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰‾洠臣膀鲀뺁臣銂郥肂闦낕臣芁苣鮼⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢†꺁郥薀臣膀诧讫臣ꚁ膀膀迥꾁ꞁ臣誂볯钸臣㲤甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰‾낒㱁甯㰾畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㔾⼼㹵⼼畳㹰甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰꾁胣ㆁ胣㊜胥꺁ꫧꂴ苣覜臣讂胣뮻蓦ꮁ뷧鮏臣貂臣㚟ꆓ臣螤듧낒迥꾁菣蚃菣ꊂ菣벃菣낒⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢臣芁苣芀芀⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢볯讧裦醼볯銼볯㲉甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰‾趉꣨ꒂ菣銃菣뾂菣ꢃ裥貁胣込꺁苣꺁臣芁苣膀꟦邈㜱膀㜱膀迥꾁㜱꺁ꓨ袐뷤骼⼼㹵戼㹲㰊䥄㹖胣隌볯钼볯醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖愼栠敲㵦㈢㄰ㄶ㔹㤵⸶楴≦㈾㄰ㄶ㔹㤵⸶楴쉦゠㄰㔱㰳愯㰾䐯噉ਾ㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢込룤膀⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢†㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㈾㄰⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰꾁胣뒰듧袏臣䎯⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵ⴱ㰶甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢苣ꮃ苣ꮃ臣芁苣鮼⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢†㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㈾㈰⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰꾁胣뒰듧膀裦蒁臣䎯⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵ⴱ㰶甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢苣ꮃ苣ꮃ胣䎁⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵ⴱ㰶甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢苣ꮃ苣궂苣膀诨鞁臣꾁䌨⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵ⴱ㰶甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢苣ꮃ苣것菣⦳刭⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵〲⼼㹵⼼畳㹢戼㹲㰊畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㌾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰讁苣뢁諦閁苣龁믤辄臣꺽迦閁苣龁鿥ꞁ臣讂臣鮼迥꾁⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢†㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㈾㄰⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰誏臣劳⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵〲㰲甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢臣膀믤ꢜ臣讂苧ꂴ臣肸럧ꮁ胣㎁鲀ⴷ鏥꺁苧ꂴ鋧膀迥꾁ꫧꂴ胣뢅듧膀诨鞁臣㲏甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰꾁ꇧ蒻臣覂诧讫臣ꚁ臩麊臣貂臣㆟胣㊜��꺁菣蚃菣龎귥銂鳦馁苣㒋鲀ⴷ鏥꺁ꓨꂴ鋧讁苣뢁諦閁⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢苣龁믤辄臣꺽迦閁苣龁鋧銂뷥邈臣鮼⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢†㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㈾㌰⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰꾁胣㎁鲀ⴷ鏥꺁ꏩ貒迥꾁菩蚈髧趸ꏩ貒臣궂듧낒胣㞁鲀〱ꆓ臣붣鋥袏臣ꢃ裥蒚룤붣⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢鋥꺁뫤낒볥궂듧낒胣銪듧膀藩ꂴ胣ꖋ臣辁臣ꮡ믩讁苣겋ꯧ鞁臣뢁諦閁苣龁鲀讀臣颃菣궃軥㲟甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰邭苣覜臣讂ⴴ胣㞜ꆓ臣붣鋥袏臣ꢃ裥蒚룤붣鋥꺁ꓨꂴ鋧膀ꫧꂴ胣뢅듧膀诨鞁臣꾁ꇧ蒻臣覂诧㲬甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰讫臣ꚁ臩麊臣貂臣㆟胣㎜胥꺁菣蚃菣龎귥銂鳦馁苣㞋鲀〱ꆓ臣붣鋥袏臣ꢃ裥蒚룤붣鋥꺁뫤낒⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢볥螤듧낒胣閃苣讃菣膀ⴸ胣㆜ⴰ鏥꺁뫤낒볥ꊂ菣벃菣낒胣銪듧膀藩ꂴ胣ꖋ臣辁臣ꮡ믩讁苣겋⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢ꯧ鞁臣뢁諦閁苣龁鲀讀臣颃菣궃軥邭苣覜臣讂ⴵ胣㚜ꆓ臣颃菣궃苣ꪃ菣ꮃ鋧膀迥꾁ꫧꂴ胣㲁甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰뢅듧膀诨鞁臣꾁ꇧ蒻臣覂诧讫臣ꚁ臩麊臣貂臣㆟胣㒜胥꺁菣蚃菣龎귥銂鳦馁苣㢋鲀〱ꆓ臣貺⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢鋧込菣蚃菣ꊂ菣벃菣낒臣芁苣鮼룤ꒁ⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢†鋧䆰⼼㹵猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰶甯㰾猯灵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢臣膀귥ꢜ臣ꪁ臣讁胣隈臣꾁ꫧꂴ胣뢅듧膀诨鞁臣꾁ꇧ蒻臣覂诧讫臣ꚁ臩麊臣貂臣㆟胣㊜⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胥꺁菣蚃菣龎귥銂鳦馁苣㒋鲀ⴷ鏥꺁ꓨꂴ鋧膀迥꾁ꫧꂴ胣뢅듧膀诨鞁臣꾁ꇧ蒻臣覂诧讫臣ꚁ⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢臩麊臣貂臣㆟胣㎜胥꺁菣蚃菣龎귥銂鳦馁苣㖋鲀ⴶ鏥꺁菣蚃菣ꊂ菣벃菣낒臣覂臩麊臣貂臣뮻蓦㲏甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ꮁ뷧鮏臣貂臣몟臣芁苣芀芀⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢볯讧裦醼볯鎼볯㲉甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰‾趉꣨ꒂ菣銃菣뾂菣ꢃ裥貁胣込꺁苣꺁臣芁苣膀꟦邈㜱膀㜱膀迥꾁㜱꺁ꓨ袐뷤骼⼼㹵戼㹲㰊䥄㹖胣隌볯钼볯醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖愼栠敲㵦㈢㄰ㄶ㔹㤵⸶楴≦㈾㄰ㄶ㔹㤵⸶楴쉦゠㄰㔱㰴愯㰾䐯噉ਾ㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢込룤膀⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢†㱒甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㈾㔰⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰誏臣劳⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵〲㰶甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢臣蒐胣꾁胣��겋ꯧ鞁臣膀刭膀菣궃苣뎃胣ⶁ低⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰲甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣ⶁ乃胣ⶁ剏膀匭≒胣ⶁ⡎≒㰩甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㈾⼼㹵⼼畳㹢戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣ⶁ⡃⥏≒胣ⶁ佃⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰲甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢≒胣ⶁ⡃⥏⡃⥏≒胣ⶁ⡃⥏䡃⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰲甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢⡃⥏≒胣ⶁ⡓⥏≒胣ⶁ⡓⥏⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰲甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢≒胣ⶁ⡃⥏⡎≒㰩甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㈾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰膀⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢匭㱏甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㈾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰举刨⤢⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰲甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣ⶁ䍏伨利膀中刨⤢⡃⥏≒胣ⶁ⡎≒丩刨⤢⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰲甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢胣ⶁ⡎≒䌩㴨剎⤢⡎≒㰩甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㈾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰膀䌭㴨剎⤢㱎甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰⠾≒㰩甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㈾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰膀䌭丽剏膀中刨⤢⡃⥏⡎≒㰩甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㈾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰膀中刨⤢体⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰲甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢⡎≒㰩甯㰾畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢甼㈾⼼㹵⼼畳㹢甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰膀中刨⤢体⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰲甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢≒胣袏臣⶯䍏伨丩刨⤢⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵㰲甯㰾猯扵㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ꞁ臣誂볯㲛甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰‾删꺁郥薀臣膀诧讫臣ꚁ胣뒰듧膀裦蒁臣䎯⼼㹵猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㰾㹵ⴱ㰶甯㰾猯扵㰾⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢蓨ꪂ韦膀ⴳ胣㞜ꆓ臣붣鋥袏臣ꢃ裥蒚룤붣鋥꺁⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢苧ꂴ鋧膀ⴷ胣㆜ⴰ鏥꺁ꏩ貒迥꾁菩蚈髧趸ꏩ貒臣貺鋧込苧ꂴ鋧膀ꫧꂴ胣뢅듧膀诨鞁臣꾁ꇧ蒻⼼㹵戼㹲㰊⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢臣覂诧讫臣ꚁ臩麊臣貂臣㆟胣㊜胥꺁菣蚃菣龎귥銂鳦馁苣㒋鲀ⴷ鏥꺁ꏩ貒迥꾁菩蚈髧趸ꏩ貒臣㲮甯㰾牢ਾ甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰螤듧낒胣銪듧膀藩ꂴ胣ꖋ臣辁臣ꮡ믩讁苣겋ꯧ鞁臣뢁諦閁苣龁鲀讀臣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