(57)【要約】【課題】ベーチェット病であるか否かを簡便に、高い精度で判定することができるベーチェット病の判定を補助する方法、ベーチェット病の活動性を簡便に、高い精度で評価することができるベーチェット病の活動性の評価を補助する方法を提供すること。【解決手段】末梢血中の好中球及びγδＴ細胞の少なくともいずれかにおける、ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合い及びヒストンＨ３リシン２７のトリメチル化の度合いの少なくともいずれかを測定する測定工程と、前記ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合いと、前記ヒストンＨ３リシン２７のトリメチル化の度合いとの比、及び前記ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合いの少なくともいずれかを指標として、被験体がベーチェット病であるか否かの判定を補助する判定補助工程と、を含むベーチェット病の判定を補助する方法などである。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
末梢血中の好中球及びγδＴ細胞の少なくともいずれかにおける、ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合い及びヒストンＨ３リシン２７のトリメチル化の度合いの少なくともいずれかを測定する測定工程と、
前記ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合いと、前記ヒストンＨ３リシン２７のトリメチル化の度合いとの比（ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合い／ヒストンＨ３リシン２７のトリメチル化の度合い）、及び前記ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合いの少なくともいずれかを指標として、被験体がベーチェット病であるか否かの判定を補助する判定補助工程と、を含むことを特徴とするベーチェット病の判定を補助する方法。
【請求項２】
測定工程が、好中球及びγδＴ細胞の少なくともいずれかにおける、ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合い及びヒストンＨ３リシン２７のトリメチル化の度合いを測定し、
判定補助工程が、前記好中球及びγδＴ細胞の少なくともいずれかにおける、前記ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合いと、前記ヒストンＨ３リシン２７のトリメチル化の度合いとの比（ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合い／ヒストンＨ３リシン２７のトリメチル化の度合い）を指標とする請求項１に記載のベーチェット病の判定を補助する方法。
【請求項３】
測定工程が、γδＴ細胞における、ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合いを測定し、
判定補助工程が、前記γδＴ細胞における、前記ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合いを指標とする請求項１に記載のベーチェット病の判定を補助する方法。
【請求項４】
ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合い及びヒストンＨ３リシン２７のトリメチル化の度合いの少なくともいずれかの測定が、フローサイトメトリー法により行われる請求項１から３のいずれかに記載のベーチェット病の判定を補助する方法。
【請求項５】
末梢血中のγδＴ細胞における、ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合い及びヒストンＨ３リシン２７のトリメチル化の度合いの少なくともいずれかを測定する測定工程と、
前記ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合いと、前記ヒストンＨ３リシン２７のトリメチル化の度合いとの比（ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合い／ヒストンＨ３リシン２７のトリメチル化の度合い）、及び前記ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合いの少なくともいずれかを指標として、ベーチェット病の活動性の評価を補助する活動性評価補助工程と、を含むことを特徴とするベーチェット病の活動性の評価を補助する方法。
【請求項６】
測定工程が、γδＴ細胞における、ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合い及びヒストンＨ３リシン２７のトリメチル化の度合いを測定し、
活動性評価補助工程が、前記γδＴ細胞における、前記ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合いと、前記ヒストンＨ３リシン２７のトリメチル化の度合いとの比（ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合い／ヒストンＨ３リシン２７のトリメチル化の度合い）を指標とする請求項５に記載のベーチェット病の活動性の評価を補助する方法。
【請求項７】
測定工程が、γδＴ細胞における、ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合いを測定し、
活動性評価補助工程が、前記γδＴ細胞における、前記ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合いを指標とする請求項６に記載のベーチェット病の活動性の評価を補助する方法。
【請求項８】
ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合い及びヒストンＨ３リシン２７のトリメチル化の度合いの少なくともいずれかの測定が、フローサイトメトリー法により行われる請求項５から７のいずれかに記載のベーチェット病の活動性の評価を補助する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ベーチェット病であるか否かの判定を補助する方法、及びベーチェット病の活動性の評価を補助する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ベーチェット病は、眼病変、粘膜病変、皮膚病変などを主症状とする慢性再発性の全身性炎症性疾患である。ベーチェット病の病因は不明であるが、何らかの遺伝素因に、外因が加わり、白血球の機能が亢進し、炎症を引き起こすと考えられている。
【０００３】
現在のベーチェット病の診断は、眼病変、粘膜病変、皮膚病変などの臨床所見に基づいており、特異的な検査がないため、診断に苦慮することが多いという問題がある。
また、ベーチェット病の活動性の指標として、一般的に、Ｃ反応性タンパク、赤血球沈降速度などの炎症反応が用いられているが、ベーチェット病で観られる、好中球やリンパ球の活性化といった白血球機能異常の病態を反映していないという問題もある。前記白血球機能異常を簡便に検出できる方法は、臨床に応用されていないのが現状である。
【０００４】
これまでに、細胞の活性化における遺伝子発現変化には、ヒストン修飾など、エピゲノム変化の関与が大きいことが知られている。
また、アルツハイマー病の状態を決定するための方法として、血液成分を含むサンプルを用い、エピジェネティックマーカーの量を決定する方法（例えば、特許文献１参照）、神経変性疾患を発症するリスクを決定する方法として、脳脊髄液から単離した幹細胞内のＨ３Ｋ２７のメチル化のレベルを決定する工程を含む方法（例えば、特許文献２参照）などが提案されている。
【０００５】
しかしながら、ベーチェット病の診断や活動性の評価に有効な方法は、未だ提供されておらず、その速やかな提供が強く求められているのが現状である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特表２０１２−５２９６５９号公報
【特許文献２】特表２０１３−５２６７０５号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、前記従来における諸問題を解決し、以下の目的を達成することを課題とする。即ち、本発明は、ベーチェット病であるか否かを簡便に、高い精度で判定することができるベーチェット病の判定を補助する方法、ベーチェット病の活動性を簡便に、高い精度で評価することができるベーチェット病の活動性の評価を補助する方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
前記課題を解決するための手段としては、以下の通りである。即ち、
＜１＞  末梢血中の好中球及びγδＴ細胞の少なくともいずれかにおける、ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化（以下、「Ｈ３Ｋ４ｍｅ３」と称することがある）の度合い及びヒストンＨ３リシン２７のトリメチル化（以下、「Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３」と称することがある）の度合いの少なくともいずれかを測定する測定工程と、
前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合いと、前記Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３の度合いとの比（Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い／Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３の度合い）、及び前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合いの少なくともいずれかを指標として、被験体がベーチェット病であるか否かの判定を補助する判定補助工程と、を含むことを特徴とするベーチェット病の判定を補助する方法である。
＜２＞  末梢血中のγδＴ細胞における、Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い及びＨ３Ｋ２７ｍｅ３の度合いの少なくともいずれかを測定する測定工程と、
前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合いと、前記Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３の度合いとの比（Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い／Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３の度合い）、及び前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合いの少なくともいずれかを指標として、ベーチェット病の活動性の評価を補助する活動性評価補助工程と、を含むことを特徴とするベーチェット病の活動性の評価を補助する方法である。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、従来における前記諸問題を解決し、前記目的を達成することができ、ベーチェット病であるか否かを簡便に、高い精度で判定することができるベーチェット病の判定を補助する方法、ベーチェット病の活動性を簡便に、高い精度で評価することができるベーチェット病の活動性の評価を補助する方法を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】図１は、試験例１において、各細胞亜集団におけるＨ３Ｋ４ｍｅ３−ＡＰＣ抗体の平均蛍光強度値を求めた結果を示すグラフである。
【図２】図２は、試験例１において、各細胞亜集団におけるＨ３Ｋ４ｍｅ３−ＡＰＣ抗体の平均蛍光強度値と、Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３−ＦＩＴＣ抗体の平均蛍光強度値との比を求めた結果を示すグラフである。
【図３】図３は、試験例２において、各細胞亜集団におけるＨ３Ｋ４ｍｅ３−ＡＰＣ抗体の平均蛍光強度値を求めた結果を示すグラフである。
【図４】図４は、試験例２において、各細胞亜集団におけるＨ３Ｋ４ｍｅ３−ＡＰＣ抗体の平均蛍光強度値と、Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３−ＦＩＴＣ抗体の平均蛍光強度値との比を求めた結果を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
（ベーチェット病の判定を補助する方法）
本発明のベーチェット病の判定を補助する方法は、測定工程と、判定補助工程とを少なくとも含み、必要に応じて、更にその他の工程を含む。
【００１２】
＜測定工程＞
前記ベーチェット病の判定を補助する方法における測定工程は、末梢血中の好中球及びγδＴ細胞の少なくともいずれかにおける、Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い及びＨ３Ｋ２７ｍｅ３の度合いの少なくともいずれかを測定する工程である。
【００１３】
−好中球及びγδＴ細胞の少なくともいずれか−
前記好中球及びγδＴ細胞の少なくともいずれかは、被験体の末梢血から調製することができる。
前記末梢血の採取方法としては、特に制限はなく、公知の方法を目的に応じて適宜選択することができる。
前記末梢血から好中球及びγδＴ細胞の少なくともいずれかを調製する方法としては、特に制限はなく、公知の方法を適宜選択することができ、例えば、モノ・ポリ分離溶液（ＤＳファーマバイオメディカル株式会社製）を用い、末梢血から、前記好中球及びγδＴ細胞が含まれる末梢血単核球（以下、「ＰＢＭＣｓ」と称することがある）及び顆粒球を分離する方法が挙げられる。
前記好中球及びγδＴ細胞は、精製されていてもよいし、精製されていない混合物であってもよい。前記混合物は、前記好中球及びγδＴ細胞以外の細胞亜集団を含んでいてもよい。
【００１４】
−Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い及びＨ３Ｋ２７ｍｅ３の度合いの少なくともいずれかの測定−
前記好中球及びγδＴ細胞の少なくともいずれかにおける、Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い及びＨ３Ｋ２７ｍｅ３の度合いの少なくともいずれかの測定方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、フローサイトメトリー法、クロマチン免疫沈降法、ウエスタンブロッティング法などが挙げられる。これらの中でも、フローサイトメトリー法が、必要とする細胞数が少ないため患者の負担が軽く、短期間で解析を行うことができ、１個の細胞レベルでの検出が可能であるため検出感度が高い点で、好ましい。
【００１５】
前記フローサイトメトリー法の方法としては、特に制限はなく、公知の方法を適宜選択することができ、例えば、蛍光抗体を用いて染色した細胞をフローサイトメーターにより解析する方法が挙げられる。
【００１６】
前記蛍光抗体としては、好中球及びγδＴ細胞の少なくともいずれかにおける、Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い及びＨ３Ｋ２７ｍｅ３の度合いの少なくともいずれかを測定することができる限り、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００１７】
前記蛍光抗体に用いる蛍光物質としては、特に制限はなく、公知の物質を適宜選択することができ、例えば、フルオレセインイソチオシアネート（以下、「ＦＩＴＣ」と称することがある）、アロフィコシアニン（以下、「ＡＰＣ」と称することがある）、フィコエリトリン（以下、「ＰＥ」と称することがある）、シアニン（以下、「Ｃｙ」と称することがある）色素などが挙げられる。これらは、１種単独で使用してもよいし、２種以上を併用してもよい。
また、蛍光物質の組合せとしても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００１８】
前記好中球を検出する蛍光抗体の具体例としては、ＣＤ６６ｂ、及びＣＤ１６に対する抗体を蛍光標識したものなどが挙げられる。市販品としては、例えば、ＰＥ  Ｍｏｕｓｅ  Ａｎｔｉ−Ｈｕｍａｎ  ＣＤ６６ｂ（ＢＤ社製）、ＰＥ−Ｃｙ５  Ｍｏｕｓｅ  Ａｎｔｉ−Ｈｕｍａｎ  ＣＤ１６（ＢＤ社製）などが挙げられる。
【００１９】
前記γδＴ細胞を検出する蛍光抗体の具体例としては、γ鎖とδ鎖とからなるＴ細胞受容体に対する抗体を蛍光標識したものなどが挙げられる。市販品としては、例えば、ＰＥ  Ｍｏｕｓｅ  Ａｎｔｉ−Ｈｕｍａｎ  ＴＣＲγδ（ＢＤ社製）などが挙げられる。
【００２０】
前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３を検出する蛍光抗体の市販品としては、例えば、Ｔｒｉ−Ｍｅｔｈｙｌ−Ｈｉｓｔｏｎｅ  Ｈ３（Ｌｙｓ４）（Ｃ４２Ｄ８）  Ｒａｂｂｉｔ  ｍＡｂ（Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（Ｒ）  ６４７  Ｃｏｎｊｕｇａｔｅ、ＣＳＴ社製）などが挙げられる。
【００２１】
前記Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３を検出する蛍光抗体の市販品としては、例えば、Ｔｒｉ−Ｍｅｔｈｙｌ−Ｈｉｓｔｏｎｅ  Ｈ３（Ｌｙｓ２７）（Ｃ３６Ｂ１１）  Ｒａｂｂｉｔ  ｍＡｂ（Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（Ｒ）  ４８８  Ｃｏｎｊｕｇａｔｅ、ＣＳＴ社製）などが挙げられる。
【００２２】
前記フローサイトメトリー法における内在性コントロールとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ＩｇＧなどが挙げられる。
前記ＩｇＧを検出する蛍光抗体の市販品としては、例えば、ｒａｂｂｉｔ  ＩｇＧ−ＦＩＴＣ（Ｒａｂｂｉｔ（ＤＡ１Ｅ）  ｍＡｂ  ＩｇＧ  ＸＰ（Ｒ）  Ｉｓｏｔｙｐｅ  Ｃｏｎｔｒｏｌ（Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（Ｒ）  ４８８  Ｃｏｎｊｕｇａｔｅ、ＣＳＴ社製）、ｒａｂｂｉｔ  ＩｇＧ−ＡＰＣ（Ｒａｂｂｉｔ（ＤＡ１Ｅ）  ｍＡｂ  ＩｇＧ  ＸＰ（Ｒ）  Ｉｓｏｔｙｐｅ  Ｃｏｎｔｒｏｌ（Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（Ｒ）  ６４７  Ｃｏｎｊｕｇａｔｅ、ＣＳＴ社製）などが挙げられる。
【００２３】
前記染色の方法としては、特に制限はなく、公知の方法を適宜選択することができる。
【００２４】
前記フローサイトメーターとしては、特に制限はなく、公知の装置を適宜選択することができ、例えば、ＦＡＣＳ  Ｃａｌｉｂｕｒ  ＨＧフローサイトメーター（ＢＤ社製）などが挙げられる。
前記フローサイトメーターによる測定の条件としては、特に制限はなく、公知の条件を適宜選択することができる。
【００２５】
前記フローサイトメトリー法では、前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い及びＨ３Ｋ２７ｍｅ３の度合いは、前記蛍光抗体由来の蛍光強度により求めることができる。
【００２６】
＜判定補助工程＞
前記判定補助工程は、前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合いと、前記Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３の度合いとの比（以下、「Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い／Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３の度合い」と称することがある）、及び前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合いの少なくともいずれかを指標として、被験体がベーチェット病であるか否かの判定を補助する工程である。
【００２７】
−ベーチェット病−
前記ベーチェット病は、眼病変、粘膜病変、皮膚病変などを主症状とする慢性再発性の全身性炎症性疾患である。
【００２８】
−指標−
前記判定補助工程における指標としては、前記好中球及びγδＴ細胞の少なくともいずれかにおける、前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い／Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３の度合い、及び前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合いの少なくともいずれかを用いる。前記指標は、前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い／Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３の度合い、又は前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合いを単独で使用してもよいし、両者を併用してもよい。
前記指標に用いる細胞は、好中球、又はδＴ細胞を単独で使用してもよいし、両者を併用してもよい。
【００２９】
−判定−
前記被験体がベーチェット病であるか否かの判定を補助する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、（１）前記好中球における、前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い／Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３の度合いが健常人と比べて低い場合、（２）前記γδＴ細胞における、前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い／Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３の度合いが健常人と比べて高い場合、及び（３）前記γδＴ細胞における、前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合いが健常人と比べて高い場合の少なくともいずれかの場合には、前記被験体がベーチェット病であると判定することができる。
【００３０】
例えば、前記測定工程を、蛍光抗体を用いたフローサイトメトリー法により行った場合には、（１）前記好中球における、前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３に対する抗体の蛍光強度と、前記Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３に対する蛍光強度との比が、２．３７未満である場合、（２）前記γδＴ細胞における、前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３に対する蛍光強度と、前記Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３に対する抗体の蛍光強度との比が、１．７９を超える場合、及び（３）前記γδＴ細胞における、前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３に対する抗体の蛍光強度が、４３．９を超える場合の少なくともいずれかの場合には、前記被験体がベーチェット病であると判定することができる（後述する試験例１参照）。なお、前記値は、内在性コントロールとして、ＩｇＧに対する蛍光抗体を用いた場合の値である。
【００３１】
前記ベーチェット病の判定を補助する方法は、（１）測定工程が、好中球及びγδＴ細胞の少なくともいずれかにおける、Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い及びＨ３Ｋ２７ｍｅ３の度合いを測定し、判定補助工程が、前記好中球及びγδＴ細胞の少なくともいずれかにおける、前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い／Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３の度合いを指標とする態様、（２）測定工程が、γδＴ細胞における、Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合いを測定し、判定補助工程が、前記γδＴ細胞における、前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合いを指標とする態様が好ましい。
【００３２】
＜その他の工程＞
前記ベーチェット病の判定を補助する方法におけるその他の工程としては、本発明の効果を損なわない限り、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、末梢血から、前記好中球及びγδＴ細胞が含まれる末梢血単核球及び顆粒球を分離する工程などが挙げられる。
前記末梢血から、前記好中球及びγδＴ細胞が含まれる末梢血単核球及び顆粒球を分離する方法としては、特に制限はなく、公知の方法を適宜選択することができる。
【００３３】
（ベーチェット病の活動性の評価を補助する方法）
本発明のベーチェット病の活動性の評価を補助する方法は、測定工程と、活動性評価補助工程とを少なくとも含み、必要に応じて、更にその他の工程を含む。
【００３４】
＜測定工程＞
前記ベーチェット病の活動性の評価を補助する方法における測定工程は、末梢血中のγδＴ細胞における、Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い及びＨ３Ｋ２７ｍｅ３の度合いの少なくともいずれかを測定する工程である。
【００３５】
−γδＴ細胞−
前記γδＴ細胞は、被験体の末梢血から調製することができる。
前記末梢血の採取方法としては、特に制限はなく、公知の方法を目的に応じて適宜選択することができる。
前記末梢血からγδＴ細胞を調製する方法としては、特に制限はなく、公知の方法を目的に応じて適宜選択することができ、例えば、モノ・ポリ分離溶液（ＤＳファーマバイオメディカル株式会社製）を用い、末梢血から、前記γδＴ細胞が含まれる末梢血単核球及び顆粒球を分離する方法が挙げられる。
前記γδＴ細胞は、精製されていてもよいし、混合物であってもよい。前記混合物は、前記γδＴ細胞以外の細胞亜集団を含んでいてもよい。
【００３６】
−Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い及びＨ３Ｋ２７ｍｅ３の度合いの少なくともいずれかの測定−
前記γδＴ細胞における、Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い及びＨ３Ｋ２７ｍｅ３の度合いの少なくともいずれかの測定方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、上記ベーチェット病の判定を補助する方法のＨ３Ｋ４ｍｅ３の度合い及びＨ３Ｋ２７ｍｅ３の度合いの少なくともいずれかの測定の項目に記載した方法と同様にして行うことができる。
【００３７】
＜活動性評価補助工程＞
前記活動性評価補助工程は、前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い／Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３の度合い、及び前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合いの少なくともいずれかを指標として、ベーチェット病の活動性の評価を補助する工程である。
【００３８】
−ベーチェット病の活動性−
前記ベーチェット病は、活動期と非活動期とに区別される。
前記活動期のベーチェット病とは、眼病変、粘膜病変、皮膚病変などのベーチェット病に特有の症状のいずれかが認められる状態をいう。
前記非活動期のベーチェット病とは、前記ベーチェット病に特有の症状が認められない状態をいう。
【００３９】
−指標−
前記活動性評価補助工程における指標としては、前記γδＴ細胞における、前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い／Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３の度合い、及び前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合いの少なくともいずれかを用いる。前記指標は、前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い／Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３の度合い、又は前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合いを単独で使用してもよいし、両者を併用してもよい。
【００４０】
−評価−
前記ベーチェット病の活動性の評価を補助する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、（１）前記γδＴ細胞における、前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い／Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３の度合いが健常人と比べて高い場合、及び（２）前記γδＴ細胞における、前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合いが健常人と比べて高い場合の少なくともいずれかの場合には、活動期のベーチェット病であると評価することができる。
【００４１】
例えば、前記測定工程を、蛍光抗体を用いたフローサイトメトリー法により行った場合には、（１）前記γδＴ細胞における、前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３に対する抗体の蛍光強度と、前記Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３に対する蛍光強度との比が、１．８７を超える場合、及び（２）前記γδＴ細胞における、前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３に対する抗体の蛍光強度が、８０．９を超える場合の少なくともいずれかの場合には、活動期のベーチェット病であると評価することができる（後述する試験例２参照）。なお、前記値は、内在性コントロールとして、ＩｇＧに対する蛍光抗体を用いた場合の値である。
【００４２】
前記ベーチェット病の活動性の評価を補助する方法は、（１）測定工程が、γδＴ細胞における、Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い及びＨ３Ｋ２７ｍｅ３の度合いを測定し、活動性評価補助工程が、前記γδＴ細胞における、前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い／Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３の度合いを指標とする態様、（２）測定工程が、γδＴ細胞における、Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合いを測定し、活動性評価補助工程が、前記γδＴ細胞における、前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合いを指標とする態様が好ましい。
【００４３】
＜その他の工程＞
前記ベーチェット病の活動性の評価を補助する方法におけるその他の工程としては、本発明の効果を損なわない限り、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、上記ベーチェット病の判定を補助する方法のその他の工程の項目に記載した工程などが挙げられる。
【実施例】
【００４４】
以下、試験例を挙げて、本発明を説明するが、本発明は、以下の試験例に何ら限定されるものではない。
【００４５】
（試験例１：健常人とベーチェット病患者との比較）
健常人（１２名）、及びベーチェット病患者（１３名）から採取した末梢血を用い、細胞亜集団ごとにおける（１）Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合いと、Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３の度合いとの比（Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い／Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３の度合い）、及び（２）Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合いを、以下のようにして、フローサイトメトリー法にて調べた。
【００４６】
＜末梢血からのＰＢＭＣｓ及び顆粒球の分離＞
前記末梢血の採取には、ベノジェクトＩＩ真空採血管（テルモ株式会社製、ＶＰ−Ｈ１００Ｋ（ヘパリンナトリウム））を用いた。
２本のモノ・ポリ分離溶液（ＤＳファーマバイオメディカル株式会社製、ＤＳＢＮ１００）  ６ｍＬに、それぞれ前記末梢血  ７ｍＬを静かに重層した。次いで、室温で、４００×ｇ（≒１，４３０ｒｐｍ）で４０分間遠心した。
血漿を別のチューブに回収後、リンパ球層と好中球層の混合物を２本のチューブに回収し、ＰＢＳ（−）（ＤＵＬＢＥＣＣＯ’Ｓ  ＰＨＯＳＰＨＡＴＥ  ＢＵＦＦＥＲＥＤ  ＳＡＬＩＮＥ：ＳＡＦＣ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社製、５６０６４Ｃ）液で、それぞれ５０ｍＬとした。次いで、室温で、４００×ｇ（≒１，４３０ｒｐｍ）で１０分間遠心した。
上清を吸引し、沈殿にＡＣＫ  バッファー（Ｌｏｎｚａ社製、１０−５４８Ｅ）を１．５ｍＬずつ加え懸濁後、室温で３分間静置した。その後、１つにまとめ、ＰＢＳ（−）を加え、５０ｍＬとした。次いで、室温で、４００×ｇ（≒１，４３０ｒｐｍ）で１０分間遠心した。
上清を除去し、ＰＢＳ（−）を１ｍＬ加え、細胞数を数えた。
以上により、末梢血から、ＰＢＭＣｓ及び顆粒球を分離した。
【００４７】
＜染色＞
フローサイトメトリー法に用いる測定用試料として、以下の６種類を調製した。なお、蛍光抗体を用いた染色の方法は、後述のとおりである。
（１）  測定用試料−１  ：
細胞表面マーカー染色用抗体  ・・・  ＣＤ４−ＰＥ、及びＣＤ８−ＰＥ−Ｃｙ５
細胞内染色用抗体  ・・・  Ｒａｂｂｉｔ−ＩｇＧ−ＦＩＴＣ、及びＲａｂｂｉｔ−ＩｇＧ−ＡＰＣ
（２）  測定用試料−２  ：
細胞表面マーカー染色用抗体  ・・・  ＣＤ４−ＰＥ、及びＣＤ８−ＰＥ−Ｃｙ５
細胞内染色用抗体  ・・・  Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３−ＦＩＴＣ、及びＨ３Ｋ４ｍｅ３−ＡＰＣ
（３）  測定用試料−３  ：
細胞表面マーカー染色用抗体  ・・・  ＣＤ６６ｂ−ＰＥ、及びＣＤ１６−ＰＥ−Ｃｙ５
細胞内染色用抗体  ・・・  Ｒａｂｂｉｔ−ＩｇＧ−ＦＩＴＣ、及びＲａｂｂｉｔ−ＩｇＧ−ＡＰＣ
（４）  測定用試料−４  ：
細胞表面マーカー染色用抗体  ・・・  ＣＤ６６ｂ−ＰＥ、及びＣＤ１６−ＰＥ−Ｃｙ５
細胞内染色用抗体  ・・・  Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３−ＦＩＴＣ、及びＨ３Ｋ４ｍｅ３−ＡＰＣ
（５）  測定用試料−５  ：
細胞表面マーカー染色用抗体  ・・・  ＴＣＲγδ−ＰＥ
細胞内染色用抗体  ・・・  Ｒａｂｂｉｔ−ＩｇＧ−ＦＩＴＣ、及びＲａｂｂｉｔ−ＩｇＧ−ＡＰＣ
（６）  測定用試料−６  ：
細胞表面マーカー染色用抗体  ・・・  ＴＣＲγδ−ＰＥ
細胞内染色用抗体  ・・・  Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３−ＦＩＴＣ、及びＨ３Ｋ４ｍｅ３−ＡＰＣ
【００４８】
前記蛍光抗体を用いた、細胞表面マーカー染色、及び細胞内染色は、以下のようにして行った。
前記分離した末梢血単核球及び顆粒球を、１．５ｍＬチューブあたり１×１０６細胞となるようにし、そこに、ＰＢＳ（−）を１ｍＬ加えた。次いで、４℃で、３００×ｇ（２，０００ｒｐｍ）で１０分間遠心した。
上清を除去し、５０μＬのＰＢＳ（−）と、細胞表面マーカー（抗原）に対する抗体とを加え、遮光条件下、氷上で３０分間静置した。
【００４９】
前記細胞表面抗原に対する抗体は、以下のとおりである。
（１）  ＣＤ４−ＰＥ（Ａｎｔｉ−Ｈｕｍａｎ  ＣＤ４  ＰＥ、ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ社製、１２−００４９−４２）  ・・・  ３μＬ
前記ＣＤ４−ＰＥは、蛍光物質であるＰＥで標識された抗ヒトＣＤ４抗体であり、ＣＤ４陽性Ｔ細胞を検出するために用いる。
（２）  ＣＤ８−ＰＥＣｙ５（Ａｎｔｉ−Ｈｕｍａｎ  ＣＤ８ａ  ＰＥ−Ｃｙａｎｉｎｅ５、ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ社製、１５−００８８−４２）  ・・・  ３μＬ
前記ＣＤ８−ＰＥＣｙ５は、蛍光物質であるＰＥ−Ｃｙａｎｉｎｅ５で標識された抗ヒトＣＤ８ａ抗体であり、ＣＤ８陽性Ｔ細胞を検出するために用いる。
（３）  ＣＤ６６ｂ−ＰＥ（ＰＥ  Ｍｏｕｓｅ  Ａｎｔｉ−Ｈｕｍａｎ  ＣＤ６６ｂ、ＢＤ社製、５６１６５０）  ・・・  ５μＬ
前記ＣＤ６６ｂ−ＰＥは、蛍光物質であるＰＥで標識されたマウス抗ヒトＣＤ６６ｂ抗体であり、好中球を検出するために用いる。
（４）  ＣＤ１６−ＰＥＣｙ５（ＰＥ−Ｃｙ５  Ｍｏｕｓｅ  Ａｎｔｉ−Ｈｕｍａｎ  ＣＤ１６、ＢＤ社製、５６１７２５）  ・・・  ５μＬ
前記ＣＤ１６−ＰＥＣｙ５は、蛍光物質であるＰＥ−Ｃｙ５で標識されたマウス抗ヒトＣＤ１６抗体であり、好中球を検出するために用いる。
（５）  ＴＣＲγδ−ＰＥ（ＰＥ  Ｍｏｕｓｅ  Ａｎｔｉ−Ｈｕｍａｎ  ＴＣＲγδ、ＢＤ社製、５６１９９４）  ・・・  ６μＬ
前記ＴＣＲγδ−ＰＥは、蛍光物質であるＰＥで標識されたマウス抗ヒトＴＣＲγδ抗体であり、γδＴ細胞を検出するために用いる。
【００５０】
前記静置後、ＰＢＳ（−）  １ｍＬで洗浄した。次いで、４℃で、３００×ｇ（２，０００ｒｐｍ）で１０分間遠心した。
上清を吸引し、沈殿をボルテックスミキサーで懸濁した。次いで、Ｆｉｘａｒｉｏｎ／Ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ（ＢＤ社製、５５４７２２）を２５０μＬ加え、遮光条件下、４℃で２０分間静置し、固定及び透過処理を行った。
前記静置後、１×Ｐｅｒｍ／Ｗａｓｈ  ｂｕｆｆｅｒ  １ｍＬで洗浄した。なお、前記１×Ｐｅｒｍ／Ｗａｓｈ  ｂｕｆｆｅｒは、１０×Ｐｅｒｍ／Ｗａｓｈ  ｂｕｆｆｅｒ（ＢＤ社製、５５４７２３）を滅菌水で１：１０に希釈したものを用いた。
次いで、４℃で、６，０００ｒｐｍで１０分間遠心した。この洗浄操作は、２回行った。
【００５１】
前記遠心後、沈殿に１×Ｐｅｒｍ／Ｗａｓｈ  ｂｕｆｆｅｒ  ５０μＬと、細胞内染色用抗体（ヒストン抗体、又はアイソタイプ  コントロール  ＩｇＧ抗体）を加え、遮光条件下、氷上で３０分間静置した。
【００５２】
前記ヒストン抗体、又はアイソタイプ  コントロール  ＩｇＧ抗体は、以下のとおりである。
（１）  Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３−ＦＩＴＣ（Ｔｒｉ−Ｍｅｔｈｙｌ−Ｈｉｓｔｏｎｅ  Ｈ３（Ｌｙｓ２７）（Ｃ３６Ｂ１１）  Ｒａｂｂｉｔ  ｍＡｂ（Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（Ｒ）  ４８８  Ｃｏｎｊｕｇａｔｅ、ＣＳＴ社製、＃５４９９Ｓ）  ・・・  ４μＬ
前記Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３−ＦＩＴＣは、蛍光物質であるＦＩＴＣで標識されたラビットモノクローナル抗体であり、Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３を検出するために用いる。
（２）  Ｈ３Ｋ４ｍｅ３−ＡＰＣ（Ｔｒｉ−Ｍｅｔｈｙｌ−Ｈｉｓｔｏｎｅ  Ｈ３（Ｌｙｓ４）（Ｃ４２Ｄ８）  Ｒａｂｂｉｔ  ｍＡｂ（Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（Ｒ）  ６４７  Ｃｏｎｊｕｇａｔｅ、ＣＳＴ社製、＃１２０６４Ｓ）  ・・・  ４μＬ
前記Ｈ３Ｋ４ｍｅ３−ＡＰＣは、蛍光物質であるＡＰＣで標識されたラビットモノクローナル抗体であり、Ｈ３Ｋ４ｍｅ３を検出するために用いる。
（３）  ｒａｂｂｉｔ  ＩｇＧ−ＦＩＴＣ（Ｒａｂｂｉｔ（ＤＡ１Ｅ）  ｍＡｂ  ＩｇＧ  ＸＰ（Ｒ）  Ｉｓｏｔｙｐｅ  Ｃｏｎｔｒｏｌ（Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（Ｒ）  ４８８  Ｃｏｎｊｕｇａｔｅ）、ＣＳＴ社製、＃２９７５Ｓ）  ・・・  ２μＬ
前記ｒａｂｂｉｔ  ＩｇＧ−ＦＩＴＣは、蛍光物質であるＦＩＴＣで標識されたラビットモノクローナル抗体であり、内在性コントロールとして用いる。
（４）  ｒａｂｂｉｔ  ＩｇＧ−ＡＰＣ（Ｒａｂｂｉｔ（ＤＡ１Ｅ）  ｍＡｂ  ＩｇＧ  ＸＰ（Ｒ）  Ｉｓｏｔｙｐｅ  Ｃｏｎｔｒｏｌ（Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（Ｒ）  ６４７  Ｃｏｎｊｕｇａｔｅ）、ＣＳＴ社製、＃２９８５Ｓ）  ・・・  ４μＬ
前記ｒａｂｂｉｔ  ＩｇＧ−ＡＰＣ蛍光物質であるＡＰＣで標識されたラビットモノクローナル抗体であり、内在性コントロールとして用いる。
【００５３】
前記静置後、１×Ｐｅｒｍ／Ｗａｓｈ  ｂｕｆｆｅｒ  １ｍＬで洗浄した。
次いで、４℃で、６，０００ｒｐｍで１０分間遠心した。この遠心は、２回行った。
上清を取り除き、沈殿にＰＢＳ（−）を５００μＬ加え、測定用試料とした。
【００５４】
＜測定＞
前記測定用試料をＦＡＣＳチューブ（Ｆａｌｃｏｎ社製、３５２０５４）へ移し、ＦＡＣＳ  Ｃａｌｉｂｕｒ  ＨＧフローサイトメーター（ＢＤ社製、４カラータイプ、レーザー：４８８ｎｍアルゴンレーザー、６３５ｎｍ赤色半導体レーザー）を用いて測定し、平均蛍光強度（ＭＦＩ）値を求めた。
前記ＭＦＩ値は、以下のように補正して求めた。
Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３−ＦＩＴＣ抗体のＭＦＩ値は、Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３−ＦＩＴＣ抗体由来の蛍光強度を、コントロールであるＲａｂｂｉｔ−ＩｇＧ−ＦＩＴＣ由来の蛍光強度で除した値を平均した値である。
Ｈ３Ｋ４ｍｅ３−ＡＰＣ抗体のＭＦＩ値は、Ｈ３Ｋ４ｍｅ３−ＡＰＣ抗体由来の蛍光強度を、コントロールであるＲａｂｂｉｔ−ＩｇＧ−ＡＰＣ由来の蛍光強度で除した値を平均値したである。
なお、前記測定用試料−２のコントロールは、前記測定用試料−１であり、前記測定用試料４のコントロールは、前記測定用試料−３であり、前記測定用試料−６のコントロールは前記測定用試料−５である。
【００５５】
−Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い−
図１に各細胞亜集団におけるＨ３Ｋ４ｍｅ３−ＡＰＣ抗体のＭＦＩ値を示す。
図１中、横軸は細胞亜集団を示し、各細胞亜集団の項目における、「Ａ」は健常人由来の末梢血を用いた場合の結果を示し、「Ｂ」はベーチェット病患者由来の末梢血を用いた場合の結果を示す。
図１の結果から、ベーチェット病患者では、γδＴ細胞において、Ｈ３Ｋ４ｍｅ３−ＡＰＣ抗体のＭＦＩ値が、健常人と比較して有意（Ｐ＜０．０５）に上昇していた。
また、γδＴ細胞におけるカットオフ値は、４３．９であった。
したがって、γδＴ細胞におけるＨ３Ｋ４ｍｅ３の度合いを指標とすることにより、被験体がベーチェット病であるか否かを判定することができることが示された。
【００５６】
−Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い／Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３の度合い−
図２に各細胞亜集団における、Ｈ３Ｋ４ｍｅ３−ＡＰＣ抗体のＭＦＩ値と、Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３−ＦＩＴＣ抗体のＭＦＩ値との比（Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い／Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３の度合い）を示す。
図２中、横軸は細胞亜集団を示し、各細胞亜集団の項目における、「Ａ」は健常人由来の末梢血を用いた場合の結果を示し、「Ｂ」はベーチェット病患者由来の末梢血を用いた場合の結果を示す。
図２の結果から、ベーチェット病患者では、Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い／Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３の度合いが、γδＴ細胞においては、健常人と比較して有意（Ｐ＜０．０５）に上昇していた。また、好中球においては、健常人と比較して有意（Ｐ＜０．０１）に減少していた。
また、γδＴ細胞におけるカットオフ値は、１．７９であり、好中球におけるカットオフ値は、２．３７であった。
したがって、好中球及びγδＴ細胞の少なくともいずれかにおける、Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い／Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３の度合いを指標とすることにより、被験体がベーチェット病であるか否かを判定することができることが示された。
【００５７】
（試験例２：活動期のベーチェット病患者と非活動期のベーチェット病患者との比較）
活動期のベーチェット病患者（６名）、及び非活動期のベーチェット病患者（７名）から採取した血液を用いた以外は、試験例１と同様にして、細胞亜集団ごとにおける（１）Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い／Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３の度合い、及び（２）Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合いを、フローサイトメトリー法にて調べた。
前記活動期のベーチェット病患者とは、眼病変、粘膜病変、皮膚病変などのベーチェット病に特有の症状のいずれかが認められる患者である。
【００５８】
−Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い−
図３に各細胞亜集団におけるＨ３Ｋ４ｍｅ３−ＡＰＣ抗体のＭＦＩ値を示す。
図３中、横軸は細胞亜集団を示し、各細胞亜集団の項目における、「Ｃ」は非活動期のベーチェット病患者由来の末梢血を用いた場合の結果を示し、「Ｄ」は活動期のベーチェット病患者由来の末梢血を用いた場合の結果を示す。
図３の結果から、活動期のベーチェット病患者では、γδＴ細胞において、Ｈ３Ｋ４ｍｅ３−ＡＰＣ抗体のＭＦＩ値が、非活動期のベーチェット病患者と比較して有意（Ｐ＜０．０５）に上昇していた。
また、γδＴ細胞におけるカットオフ値は、８０．９であった。
したがって、γδＴ細胞におけるＨ３Ｋ４ｍｅ３の度合いを指標とすることにより、ベーチェット病が、活動期であるか、又は非活動期であるかを評価することができることが示された。
【００５９】
−Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い／Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３の度合い−
図４に各細胞亜集団における、Ｈ３Ｋ４ｍｅ３−ＡＰＣ抗体のＭＦＩ値と、Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３−ＦＩＴＣ抗体のＭＦＩ値との比（Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い／Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３の度合い）を示す。
図４中、横軸は細胞亜集団を示し、各細胞亜集団の項目における、「Ｃ」は非活動期のベーチェット病患者由来の末梢血を用いた場合の結果を示し、「Ｄ」は活動期のベーチェット病患者由来の末梢血を用いた場合の結果を示す。
図４の結果から、活動期のベーチェット病患者では、γδＴ細胞において、Ｈ３Ｋ４ｍｅ３の度合い／Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３の度合いが、非活動期のベーチェット病患者と比較して有意（Ｐ＜０．０５）に上昇していた。
また、γδＴ細胞におけるカットオフ値は、１．８７であった。
したがって、γδＴ細胞におけるＨ３Ｋ４ｍｅ３の度合い／Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３の度合いを指標とすることにより、ベーチェット病が、活動期であるか、又は非活動期であるかを評価することができることが示された。
【００６０】
本発明の態様としては、例えば、以下のものなどが挙げられる。
＜１＞  末梢血中の好中球及びγδＴ細胞の少なくともいずれかにおける、ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合い及びヒストンＨ３リシン２７のトリメチル化の度合いの少なくともいずれかを測定する測定工程と、
前記ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合いと、前記ヒストンＨ３リシン２７のトリメチル化の度合いとの比（ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合い／ヒストンＨ３リシン２７のトリメチル化の度合い）、及び前記ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合いの少なくともいずれかを指標として、被験体がベーチェット病であるか否かの判定を補助する判定補助工程と、を含むことを特徴とするベーチェット病の判定を補助する方法である。
＜２＞  測定工程が、好中球及びγδＴ細胞の少なくともいずれかにおける、ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合い及びヒストンＨ３リシン２７のトリメチル化の度合いを測定し、
判定補助工程が、前記好中球及びγδＴ細胞の少なくともいずれかにおける、前記ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合いと、前記ヒストンＨ３リシン２７のトリメチル化の度合いとの比（ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合い／ヒストンＨ３リシン２７のトリメチル化の度合い）を指標とする前記＜１＞に記載のベーチェット病の判定を補助する方法である。
＜３＞  測定工程が、γδＴ細胞における、ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合いを測定し、
判定補助工程が、前記γδＴ細胞における、前記ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合いを指標とする前記＜１＞に記載のベーチェット病の判定を補助する方法である。
＜４＞  ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合い及びヒストンＨ３リシン２７のトリメチル化の度合いの少なくともいずれかの測定が、フローサイトメトリー法により行われる前記＜１＞から＜３＞のいずれかに記載のベーチェット病の判定を補助する方法である。
＜５＞  末梢血中のγδＴ細胞における、ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合い及びヒストンＨ３リシン２７のトリメチル化の度合いの少なくともいずれかを測定する測定工程と、
前記ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合いと、前記ヒストンＨ３リシン２７のトリメチル化の度合いとの比（ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合い／ヒストンＨ３リシン２７のトリメチル化の度合い）、及び前記ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合いの少なくともいずれかを指標として、ベーチェット病の活動性の評価を補助する活動性評価補助工程と、を含むことを特徴とするベーチェット病の活動性の評価を補助する方法である。
＜６＞  測定工程が、γδＴ細胞における、ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合い及びヒストンＨ３リシン２７のトリメチル化の度合いを測定し、
活動性評価補助工程が、前記γδＴ細胞における、前記ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合いと、前記ヒストンＨ３リシン２７のトリメチル化の度合いとの比（ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合い／ヒストンＨ３リシン２７のトリメチル化の度合い）を指標とする前記＜５＞に記載のベーチェット病の活動性の評価を補助する方法である。
＜７＞  測定工程が、γδＴ細胞における、ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合いを測定し、
活動性評価補助工程が、前記γδＴ細胞における、前記ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合いを指標とする前記＜６＞に記載のベーチェット病の活動性の評価を補助する方法である。
＜８＞  ヒストンＨ３リシン４のトリメチル化の度合い及びヒストンＨ３リシン２７のトリメチル化の度合いの少なくともいずれかの測定が、フローサイトメトリー法により行われる前記＜５＞から＜７＞のいずれかに記載のベーチェット病の活動性の評価を補助する方法である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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