(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の一般式（Ｉ）
【化１】
0003993647.tif 000003
（ここで、Ｒは式−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ2の基を表わす）のβナフトキノン誘導体又はそれらの製薬上許容できる無機若しくは有機酸との付加塩からなる、内皮細胞の増殖を促進させ且つＮＯシンターゼを抑制するための薬剤。
【請求項２】
β−ナフトキノン誘導体が１，２−ナフトキノン−２−セミカルバゾンである請求項１に記載の薬剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
この発明は、β−ナフトキノン誘導体及びそれらの塩類の新規な用途に関する。
【０００２】
【従来の技術】
フランス医薬特別特許第９２４Ｍ号には、β−ナフトキノン誘導体の薬剤としての使用が記載されている。この特許によれば、これらの誘導体は、止血活性及びビタミン活性を有するものとして示されている。
内皮が全血管系の内側を画成する中胚葉起源の細胞の単一層から構成されていることが知られている。従って、この内皮は、血液と近傍の組織との間の界面を構成している。この局在が血管と血液の一体性の維持するあたって主要な役割を果たしている。
この単一層から非トロンボゲン形成性の内皮細胞が解離するとトロンボゲン形成性の内皮下層（血小板及び白血球付着物）が露出することになる。内皮下層の露出は、ある種の外科的関与、即ち、塞栓切除術、血管形成術、動脈内膜切除術及び人工血管の植込み又はある種の臨床病理学状況（アテローム性動脈硬化症及び脈管炎）において見出される病的状況である。これらの状況の全ては、損なわれていない機能性の内皮表面の迅速な再構成という共通の利益を有する。最近、ポリペプチド成長因子（ＦＧＦ：線維形成成長因子；ＰＤＧＦ：血小板由来の成長因子又はＥＧＦ：表皮成長因子）が血管又は皮膚の病変、即ち潰瘍、焼痂及び熱傷の修復において重要な役割を果たすことが証明された。
【０００３】
本願発明者は、上記のβ−ナフトキノン誘導体についての研究を進行中に、全く予期せずに、これらが内皮細胞の増殖を促進させ且つ構成的なＮＯシンターゼ及び誘発されたＮＯシンターゼを抑制する顕著な活性を示すことを正に発見した。
【０００４】
【発明の概要】
従って、本発明の主題は、次の一般式（Ｉ）
【化２】
0003993647.tif 000002
（ここで、Ｒは式−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ2 の基、式−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ3 の基又はヒドロキシル基を表わす）
のβ−ナフトキノン誘導体並びにそれらの製薬上許容できる無機又は有機酸との付加塩からなる、内皮細胞の増殖を促進させ且つＮＯシンターゼを抑制するための薬剤にある。
【０００５】
【発明の具体的な説明】
ここで、製薬上許容できる無機又は有機酸との付加塩は、例えば下記の酸；塩酸、臭化水素酸、沃化水素酸、硝酸、硫酸、りん酸、プロピオン酸、酢酸、ぎ酸、安息香酸、マレイン酸、フマル酸、琥珀酸、酒石酸、くえん酸、しゅう酸、グリオキシル酸、アスパラギン酸、アスコルビン酸、アルカンモノスルホン酸、例えばメタンスルホン酸、エタンスルホン酸、プロパンスルホン酸、アルキルジスルホン酸、例えばメタンジスルホン酸、α，β−エタンジスルホン酸、アリールモノスルホン酸、例えばベンゼンスルホン酸及びアリールジスルホン酸により形成された塩であってよい。
【０００６】
一般式（Ｉ）のβ−ナフトキノン誘導体のうちでは、特に
・Ｒが式−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ2 の基を表わす式（Ｉ）の化合物並びにそれらの製薬上許容できる無機又は有機酸との付加塩、
・Ｒが式−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ3 の基を表わす式（Ｉ）の化合物並びにそれらの製薬上許容できる無機又は有機酸との付加塩、
・Ｒがヒドロキシル基を表わす式（Ｉ）の化合物並びにそれらの製薬上許容できる無機又は有機酸との付加塩
が好ましい。
【０００７】
内皮細胞の増殖を促進させ且つＮＯシンターゼを抑制するための薬剤を製造するのに使用される本発明の好ましい化合物のうちでは、１，２−ナフトキノン−２−セミカルバゾンが特に好ましい。これはナフタゾンという国際的な共通名でよく知られている。実験の部では、この物質をそのＤＣＩ（国際共通名）で示す。
【０００８】
後記の実験の部で示すように、内皮細胞の増殖を促進させ且つＮＯシンターゼを抑制するというこれらの顕著な性質のために、前記の式（Ｉ）のβ−ナフトキノン誘導体並びにそれらの製薬上許容できる無機又は有機酸との付加塩は、血管の領域において、例えば、敗血症に起因するショック、アテローム及び動脈狭窄の再発（血管形成術の後）と関連する低血圧の予防に、血管の保護に、人工血管の植込みにおいて、発作中の大脳の保護に、又は毛細管の透過性を低下させることによる抗浮腫剤として痛みの治療に、脳動静脈シャントを閉じることによる片頭痛の治療に、脈管炎（特に医薬上）におけるような微小循環を伴う病理学的プロセス（眼科学において、糖尿病の研究において）、全ての治癒及び組織修復プロセスにおいて使用することができる。
【０００９】
薬用量は、使用化合物、治療患者及び問題の疾病によって変わるが、例えば成人について経口又は注射投与で１日当たり１ｍｇ〜１００ｍｇであってよい。
【００１０】
相当する製薬組成物は、固体でも液体でもよく、人の医薬として慣用されている製剤形状で、例えば無味の若しくは糖衣錠剤、ゼラチンカプセル、カプセル、顆粒、座薬、注射用調合剤の形状で提供できる。活性成分は、これらの製薬組成物に通常使用される補助剤、例えばタルク、アラビアゴム、ラクトース、でんぷん、ステアリン酸マグネシウム、ココアバター、水性若しくは非水性のビヒクル、動物性若しくは植物性の脂肪物質、パラフィン誘導体、グリコール類、各種の湿潤、分散若しくは乳化剤、保存剤と配合することができる。
【００１１】
式（Ｉ）のβ−ナフトキノン誘導体及びそれらの塩類の製造法は、文献に記載されている。特に、フランス医薬特別特許第９２４Ｍ号又はフランス特許第２１０３５０４号に記載の方法を挙げることができる。
【００１２】
【実施例】
本発明の実施に使用することができる製薬組成物の例をここで示す。もちろん、これらに限定されない。
【００１３】
例１
下記の処方に相当する錠剤を調製した。
・ナフタゾン・・１０ｍｇ
・補助剤・・・・１錠１５０ｍｇとするのに要する量
（補助剤の詳細：ラクトース、でんぷん、タルク、ステアリン酸マグネシウム）
【００１４】
例２
下記の処方に相当する注射用の溶質を調製した。
・ナフタゾン・・・５ｍｇ
・無菌水性補助剤・２ｍｌとするのに要する量
【００１５】
例３
８．６ｇのナフタゾンを２００ｍｌの無水酢酸に導入する。１４０℃で１０時間加熱した後、反応媒体を冷却し、ろ過し、沈殿をクロロホルムで抽出し、次いで蒸発乾固させ、エタノールで溶解し、活性炭で処理し、ろ過し、ゆっくりと結晶化させる。Ｒが−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ3 である式（Ｉ）に相当する化合物を５．１ｇの収量で得た。黄土色微結晶粉末。Ｍｐ＝１３７−１３８℃。
【００１６】
薬理学的研究
Ｉ．ヒト伏在静脈の内皮細胞の増殖のインビトロでの研究
ナフタゾンの有糸分裂誘発性を標準状態での培養においてヒト伏在静脈の内皮細胞について評価した。
１０-5Ｍ〜１０-7Ｍの間の濃度でのナフタゾンは、低濃度で播種された内皮細胞の増殖を、対照例（ナフタゾンを含まない）と比較して最大２倍まで促進させる。
合流すると、細胞密度はわずかに増大したままである（約２０％）。他方、最適濃度の血清の存在下では、対照例と試料との間の細胞濃度の差はそれほど明瞭ではなかった。
結論として、試験条件下では、ナフタゾンの効果は、一般に、ＦＧＦＳにより誘発される効果と同等以下のままであるが、しかし、合流させるとＦＧＦＳ因子の存在下での細胞密度は、対照例と比較して、ナフタゾンにより得られる細胞密度よりも明らかに大きい。
【００１７】
II. 血管内皮細胞の構成的ＮＯシンターゼの抑制の研究
ナフタゾンが、ＣＤラット（２００〜２５０ｇ、チャールズリバー社、フランス）の腹部大動脈のリング（長さ３〜５ｍｍ）及びニュウージーランドウサギ（２〜２．５ｋｇ、チャールズリバー社、フランス）の大腿静脈のリングについて行われた研究の主題であった。
各リングをクレブス−リンガー溶液中の器官室（２５ｍｌ、リムプ社、フランス）に入れる。この溶液をｐＨ７．４０で３７℃にサーモスタット制御された９５％Ｏ2 −５％ＣＯ2 のガス状混合物により持続的な圧力測定に付す。各リングによって発生された等張力を張力センサー（リムプ社、フランス）により測定する。各リングを、４０ｍＭのＫＣｌを使用して反復刺激することによって張力−長さ関係の最適点までもたらす。洗浄し、次いで４５分間の平行時間の後に薬理学的研究を行う。容器の薬理学的応答を内皮を使用しないで研究するときは、内皮は解剖用鉗子を使用して容器の内部をこすることにより除去する。内皮の不存在は、１０-7ＭのＮＡＤにより収縮された後に１０-6ＭのＡＣｈにより誘発される容器の弛緩の不存在により証明される。収縮は６０ｍＭのＫＣｌによる最大収縮の％として表わされ、弛緩は１０-5ＭのＮＡＤ又は１０-7ＭのＰＧＦ２による収縮の％として表わされる。
【００１８】
下記の薬理学的性質が観察された。
１．ナフタゾン（１０-6Ｍ〜１０-4Ｍ）は、ラットの大動脈リング及びウサギの大腿静脈の基底張力を有意に増大させる。
２．ナフタゾン（１０-6Ｍ〜１０-4Ｍ）は、ラットの大動脈についてＮＡＤ（１０-9Ｍ〜１０-5Ｍ）及び５ＨＴ（１０-9Ｍ〜１０-5Ｍ）により得られる収縮を有意な且つ薬量に依存する態様で潜在化させる。この潜在化は、内皮の不存在下に消失する。
３．ＮＡＤ（１０-5Ｍ）により収縮された大動脈リングについては、ナフタゾン（１０-6Ｍ〜１０-4Ｍ）は、ＡＣｈ（１０-9Ｍ〜１０-5Ｍ）による弛緩を有意な且つ薬量に依存する態様で抑制する。
この抑制はＡＣｈ（１０-5Ｍ）により得られる弛緩についてナフタゾン（１０-5Ｍ）では６０〜８０％に達する。この抑制は、Ｎ−ニトロ−Ｌ−アルギニン（１０-6Ｍ）（ＮＯシンターゼの強力な抑制剤）により得られる抑制よりも速度的にも、大きさにおいても匹敵できるものである。
インドメタシン（１０-5Ｍ）及びケタンセリン（１０-5Ｍ）の存在下にＰＧＦ２（２×１０-6Ｍ）により収縮された大動脈リングについては、ナフタゾン（１０-6Ｍ〜１０-4Ｍ）は、５ＨＴ（１０-9Ｍ〜１０-5Ｍ）により得られれる弛緩を有意な且つ薬量に依存する態様（１０-6Ｍ〜１０-4Ｍ）で抑制する。
４．インドメタシン（１０-5Ｍ）の存在下にＮＡＤ（１０-7Ｍ）又はＰＧＦ２（２×１０-6Ｍ）により収縮された大動脈リングについては、ナフタゾンは、カルシウムイオノフォールＡ２３１８７（１０-9Ｍ〜１０-6Ｍ）により得られれる弛緩を有意な且つ薬量に依存する態様（１０-6Ｍ〜１０-4Ｍ）で抑制する。
５．ナフタゾン（１０-5Ｍ）により得られるＡＣｈ、５ＨＴ及びＡ２３１８７に依存する内皮弛緩の抑制は、Ｌ−アルギニン（９×１０-4Ｍ）により完全に除去される。
６．ナフタゾン（１０-5Ｍ）は、ラットの大動脈リングをリポ多糖類Ｅ．ｃｏｌｉ  ０１１Ｂ４（１０μｍ／ｍｌ）の存在下に３時間インキュベートした後に得られるＮＡＤ（１０-9Ｍ〜１０-5Ｍ）による反応性低下を有意に抑制する。この効果は、Ｎ−ニトロ−Ｌ−アルギニン（１０-5Ｍ）により得られるものと匹敵できる。
７．ナフタゾン（１０-5Ｍ）は、ウサギの大腿静脈のリングについて得られるＮＡＤ（１０-9Ｍ〜１０-5Ｍ）による収縮を潜在化させ、ＡＣｈ（１０-9Ｍ〜１０-5Ｍ）による弛緩を抑制する。
【００１９】
結論として、基底張力の増大、ノルアドレナリン、セロトニンの血管作働性効果の潜在化、アセチルコリン、セロトニン及びカルシウムイオノフォールＡ２３１８７に依存する内皮弛緩の抑制、Ｌ−アルギニンに依存する内皮弛緩の抑制の除去、細菌内毒素により誘発されるノルアドレナリンによる反応性低下の抑制から、ナフタゾンは構成的ＮＯシンターゼ及び誘発されたＮＯシンターゼの抑制剤として分類される。