(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
食物効率を向上させかつ消化管運動性を低下させるためにヒト以外の動物にコレシストキニン（ＣＣＫ）抗体を伝達する方法において、
当該動物にＣＣＫ抗体を含む物質を投与し、該物質は前もってコレシストキニンペプチドで免疫化された産生動物から由来するものであることを特徴とする方法。
【請求項２】
該投与が接種によるものである請求項１記載の方法。
【請求項３】
該投与が給餌によるものである請求項１記載の方法。
【請求項４】
該動物が鳥類である請求項１記載の方法。
【請求項５】
該鳥類が家禽である請求項４記載の方法。
【請求項６】
該動物が哺乳類である請求項１記載の方法。
【請求項７】
該産生動物がブタ、ウシ、ヒツジまたはヤギから選択される請求項１記載の方法。
【請求項８】
該物質が産生動物の副産物から由来するものである請求項１記載の方法。
【請求項９】
該副産物が全血、血清、血漿または乳から選択される請求項８記載の方法。
【請求項１０】
該産生動物がメスの鳥類である請求項１記載の方法。
【請求項１１】
該メスの鳥類が家禽である請求項１０記載の方法。
【請求項１２】
該物質が全卵から由来するものである請求項１０記載の方法。
【請求項１３】
該物質が卵黄から由来するものである請求項１０記載の方法。
【請求項１４】
該ＣＣＫが精製ＣＣＫペプチドである請求項１記載の方法。
【請求項１５】
該ＣＣＫが合成ＣＣＫペプチドである請求項１記載の方法。
【請求項１６】
該ＣＣＫが硫酸化されている請求項１記載の方法。
【請求項１７】
該ＣＣＫが硫酸化されていない請求項１記載の方法。
【請求項１８】
該ＣＣＫがアミドである請求項１記載の方法。
【請求項１９】
該ＣＣＫがキャリヤータンパク質に複合される請求項１記載の方法。
【請求項２０】
該キャリヤータンパク質がキーホールリンペットヘモシアニンである請求項１９記載の方法。
【請求項２１】
該キャリヤータンパク質が牛のガンマグロブリンである請求項１９記載の方法。
【請求項２２】
該キャリヤータンパク質に複合されたＣＣＫが少なくとも８０００ダルトンの分子量を有している請求項１９記載の方法。
【請求項２３】
該家禽がニワトリである請求項５記載の方法。
【請求項２４】
該哺乳類がげっ歯目動物である請求項６記載の方法。
【請求項２５】
該哺乳類が家畜である請求項６記載の方法。
【請求項２６】
該家畜がブタ、ウシ、ヒツジまたはヤギから選択される請求項２５記載の方法。
【請求項２７】
食物効率を向上させかつ消化管運動性を低下させるためにヒト以外の動物にコレシストキニン（ＣＣＫ）抗体を伝達する方法において、
該動物がＣＣＫ抗体を産生するように動物をＣＣＫで免疫化そして該抗体を該動物の子孫に受動的に伝達し、しかして該子孫が向上された食物効率と低減された消化管運動性の免疫応答を示すことを特徴とする方法。
【請求項２８】
該動物が鳥類である請求項２７記載の方法。
【請求項２９】
該動物が哺乳類である請求項２７記載の方法。
【請求項３０】
該鳥類が家禽である請求項２８記載の方法。
【請求項３１】
該家禽がニワトリである請求項３０記載の方法。
【請求項３２】
該ＣＣＫがキャリヤータンパク質に複合される請求項２７記載の方法。
【請求項３３】
該キャリヤータンパク質がキーホールリンペットヘモシアニンである請求項３２記載の方法。
【請求項３４】
該キャリヤータンパク質が牛のガンマグロブリンである請求項３２記載の方法。
【請求項３５】
該キャリヤータンパク質に複合されたＣＣＫが少なくとも８０００ダルトンの分子量を有している請求項３２記載の方法。
【請求項３６】
該哺乳類がげっ歯目動物である請求項２９記載の方法。
【請求項３７】
該哺乳類が家畜である請求項２９記載の方法。
【請求項３８】
該家畜がブタ、ウシ、ヒツジまたはヤギから選択される請求項３７記載の方法。
【請求項３９】
有機飼料、および
ＣＣＫと結合する有効量の抗体からなるヒト以外の動物のための給餌物質。
【請求項４０】
該抗体が免疫化された鳥類の卵から由来するものである請求項３９記載の給餌物質。
【請求項４１】
該動物が飼育動物である請求項３９記載の給餌物質。
【請求項４２】
該飼育動物が家禽である請求項４１記載の給餌物質。
【請求項４３】
該家禽がニワトリである請求項４２記載の給餌物質。
【請求項４４】
該飼育動物が哺乳類である請求項４１記載の給餌物質。
【請求項４５】
該哺乳類がブタ、ウシ、ヒツジまたはヤギから選択される請求項４４記載の給餌物質。
【請求項４６】
食物効率を向上させかつ消化管運動性を低下させるためにヒト以外の動物にコレシストキニン（ＣＣＫ）抗体を伝達する方法において、
トリプシン阻害剤を含有する植物物質を給餌するときにトリプシン阻害剤の不都合な作用を拮抗させるのに有効な量のＣＣＫ抗体を含有している飼料を該動物に供給することを特徴とする方法。
【請求項４７】
該植物物質が大豆である請求項４６記載の方法。
【発明の詳細な説明】
発明の分野
本発明は動物に抗体を受動伝達することにより、または給餌時に抗体を含有する物質を与えることにより哺乳動物または家禽類に生物学的応答を引き出すことに関する。特に、本発明はコレシストキニン（ＣＣＫ）に対する抗体を使用して動物とヒトにおいて給餌効率を増加させ、胃腸の運動性を低下させかつ満腹感を減少させることに関する。
発明の背景
数種類の特異化された白血球に基づく免疫系は、外来の巨大分子および細胞を認識し、排除しかつ記憶するという高度に特異性のある防御システムである。それが正しく機能している間は、このシステムは“自己”物質と“非自己”（外来）物質とを識別することができる。たとえば、腫瘍細胞を非自己と見なし、そして、他の侵入巨大分子に対して防御する場合と同様に、ガン誘発性腫瘍細胞に対抗して動物を守る。
抗原は、機能している免疫系を有する動物の体内に導入された時には、上記したような特異的免疫応答を引き出すことができる外来物質である。いったん活性化されると、免疫応答として、とりわけ、その抗原に特異的な抗体を循環系に産生する。免疫グロブリンとも呼ばれている抗体にははっきりと区別される５つの種類がある。最も多いのがIgＧである。他の４つはIgＭ、IgＡ、IgＤおよびIgＥである。これらの抗体は抗原と結合し、動物に入った抗原の作用を中和するかまたはそれに拮抗する。すなわち、抗体が抗原に結合し、それによって抗原を中和し、抗原が他の特定細胞レセプターと結合するのを防止するのである。
免疫系は病原性抗原または有害外来分子と闘うばかりでなく、本来的には起こらない好ましい応答を引き出すためにも操作されうる。たとえば、動物体内の自然産生タンパク質はそのタンパク質に特異的な抗体を導入することによって中和することができ、これによりその動物の系統に及ぼすそのタンパク質の一般的生理学的作用を中和することが可能である。
動物を免疫応答性にする方法はいくつかある。たとえば、ある種の抗体は胎盤を通過して母親の循環系からその母親の胎児まで移動することができる。この結果、その母親の子は誕生前に母親自身の抗体を“受け継ぐ”によって自然の免疫防御を受け取る。
免疫応答を引き出す第２の方法はある動物に抗原を導入する方法である。これによりその抗原に対する特異性抗体がその動物内にできる。これらの抗体はその動物から単離して第二番目の動物に導入することができ、これによって特定抗原と結合しうる抗体を持った第二の動物が得られる。
発明の要旨
本発明は給餌効率を向上させるために、動物およびヒトにおいて免疫応答を引き出すことに関する。本発明で使用される抗体はペプチドコレシストキニン（ＣＣＫ）に特異性のある抗体である。コレシストキニン抗体（ＣＣＫ抗体）は、動物に導入されると、食物を体重増加に変換する給餌効率を上昇させかつまた消化管の運動性を明らかに低下させ、これによって食餌の効果は向上する。
ＣＣＫペプチドは下記式で示される：
0003884069.tif 000002
さらに、ＣＣＫペプチドは下記の非アミドの形でも存在しうる：
0003884069.tif 000003
ＣＣＫは哺乳類（Gibbs et al., 1973）と鳥類（Savory and Hodgkiss, 1984）の両者において食物摂取に対して不都合に作用して成長を阻害させることが判明しているオクタペプチドである。ＣＣＫ抗体はブタ（Pekas and Trout, 1990；Pekas 1991）及びラット（Maclaughlin et al., 1985）において体内的につくられている。いずれの種においても、食物摂取と体重増加とに及ぼすＣＣＫの不都合な作用はＣＣＫ抗体の体内循環によって防止された。
家禽鶏に対してのＣＣＫの作用はよく知られている（Savory et al., 1981）。ＣＣＫは食物が小腸に達した時に分泌されるポリペプチドホルモンである。腸粘膜にＣＣＫが存在すると消化管（ＧＩ）の運動性が変化する。砂嚢は食物が腸を通過する速度を制御し、そして食餌が消費された後で通常分泌されるＣＣＫは砂嚢収縮を低下させ、そして腸の収縮を増大させる。この結果、腸管内での食物と栄養とが吸収される時間は短くなる。本発明者等はＣＣＫ抗体を家禽に導入すると給餌効率が増加することを見いだした。換言すれば、鳥類は餌１ポンドあたりより多くの体重を利得することができる。
ＣＣＫが存在すると食欲も変化させる。ＣＣＫは、鳥類の食欲を明らかに低下させる生理学的作用である満腹感作用として知られている現象に関与している。抗体がＣＣＫと結合すると、ＣＣＫは中和され、満腹感作用が阻害され、そして消化管の運動性に影響を及ぼす体内ＣＣＫの不都合な作用は回避される。すなわち、鳥において食物の単位摂取量あたりの体重利得が多くなる。これまで、ＣＣＫ抗体が鳥類において機能することあるいは経口的に機能すること、また、ＣＣＫの不都合な作用を実際に解消できることなどは知られてなかった。
ニューロペプチドＹとボンベシンは哺乳類系と鳥類系に対してＣＣＫと類似した生理学的作用を有している。これらの神経ペプチドも腸管内に認められそして食事行動を変化させる。
給餌効率と体重利得についてのＣＣＫ抗体の作用は次の方法で得ることができる。（１）ＣＣＫ抗体を母鳥から子鳥に受動伝達させる（たとえば、繁殖用鶏に注射して雛たちが増加されたレベルのＣＣＫ抗体を持つようにする）；（２）ＣＣＫ抗体の濃度が高い卵黄製品を直接動物に給餌する；（３）ＣＣＫ抗体の濃度の高い物質を直接動物に注射する。
免疫応答を受動的に得る方法は、メス鳥に特定抗原を接種し、そのメス鳥の子に抗体を受動的伝達するものである。家禽の親から子へＣＣＫに対する抗体を受動伝達した結果として食物を体重に転化する給餌効率を高めることができるということは当技術分野において予見されていなかったことである。
本発明はさらに、選択された抗原に対して免疫化された鶏の卵から産生された特異性抗体を含有している物質にも関する。この場合、その物質は餌と混合されたあと家禽に給餌され、そして変化された、ただし、向上された生理学的応答が引き出される。ＣＣＫに対する抗体は産卵期のメス鶏の体内で産生され、卵黄に引き渡されうる。この卵黄から抗体を採集することあるいは乾燥卵黄として給餌することができる。そして家禽の給餌効率を向上させるためにえさの添加物として使用することができる。このことも当技術分野で予想検討されなかったことである。
本発明は多くの利点を有する。その１つは商業的食肉産業の各個人が畜産動物または養鶏鳥類等の体重を従来より短期間でかつ少ない量の飼料で市場合格体重に到達させることができ、大幅なコスト削減が達成されることである。
本発明の第２の利点は、ＣＣＫ抗体がＣＣＫを中和するが、しかし公知有害な副作用をまったく有しておらず、食品の品質に影響を及ぼすことも想定されないことである。また、本発明を実施するための費用はたとえ大規模の場合でも比較的安価である。なぜならば、飼料８ポンドにつきわずか０．１乃至１個のＣＣＫ抗体含有卵が必要とされるだけであるからである。
さらに、飼育動物に本抗体を与える方法も比較的労働コストが低い。なぜならば、抗体は簡単に飼料に混ぜることができるからである。各動物に個々に抗体を注射する必要はない。さらにまた、卵から抗体を分離または単離する必要もない。なぜならば、全卵または卵黄は簡単に噴霧乾燥でき、そして直接給餌できるからである。
本発明の他の利点は家禽または家畜に生大豆飼料を供給する場合の不都合を緩和することである。たとえば、典型的な養鶏飼料は４０％の大豆飼料を含有している。しかし、生大豆飼料は家禽には与えることができない。なぜならば、これはトリプシンのタンパク質消化能を阻害するトリプシン阻害剤を含有しているからである。したがって、生大豆飼料はＣＣＫの濃度を高めると同時に給餌効率を低下させる。この作用を抑制するためには、家禽に供給されるべき大豆を熱処理する必要がある。典型的な大豆処理は、大豆を加熱し、油を抽出し、そして残査を養鶏飼料として使用するものである。詳細には、豆は少なくとも１２１℃で約２０乃至４０分間加熱しなければならない。大豆を家禽飼料にするためにはいくつかの問題がある。その１つはトリプシン阻害因子の分解を保証するためにきわめて高温で加熱処理を実施する必要があることである。第２は、加熱は大豆飼料中のタンパク質の品質に悪影響を与え、変性されたタンパク質を消化することが困難になることである。しかし今回、本発明者等はＣＣＫ抗体が、家禽に生大豆を飼料として供給する場合のマイナス作用を防止できることを見いだしたのである。
大豆に限らず、トリプシン阻害剤を含んでいる他の植物は多数存在する。たとえば、小麦、大麦、アオイ豆および各種マメ科植物などである。しかし、ＣＣＫ抗体が、家禽または家畜に、これら小麦、大麦、アオイ豆または他のマメ科植物などから製造された飼料を供給する場合の悪影響をも上記と同様防止するであろうことは容易に予想できることである。
本発明の方法は、現在家禽及び家畜産業で使用されている方法と比較して多くの利点を有している。すなわち、抗生物質が商業的畜産業において給餌効率の向上と体重利得を高めるために現在使用されている。しかしながら、抗生物質は動物組織内に薬剤残留物を残す。したがって、家畜においては”排除時間”を経過させる必要がある。排除時間とは動物組織から抗生物質をきれいに排除させるために十分な時間のことである。人間が家畜を消費するためには、排除時間の間はその動物を屠殺することはできない。さらに、その動物から生産される卵や乳も人間が使用するために使うことはできない。たとえば、ペニシリンの痕跡が含まれているミルクを人間が消費した場合、その人体中で抗生物質に対する耐性が強くなり、場合によっては細菌性病気に対して抗生物質が効かなくなってしまうので予防策が必要である。
第２に、長期間にわたる抗生物質の使用は、動物に感染する微生物の数を増加させる可能性がある。なぜならば、それらの微生物は常に抗生物質にさらされているため、徐々に耐性を得てしまうからである。したがって、将来細菌病に対する治療が、たとえ不可能ではないにしても、困難になるであろう。
ＣＣＫは哺乳類においてもＧＩ運動性と満腹抑制について同じような増強作用を有する（Pekas and Trout, 1990）。哺乳動物が鳥類と同様に抗体を親から子へ受動伝達することおよび哺乳動物が鳥類と同様にＣＣＫ自動免疫に応答することはよく知られた事実である。また、鳥類においても哺乳類においても、母親の抗体は子に受動伝達された抗体と同じである。また同じく、生大豆飼料は、鳥類におけると同様に、哺乳動物においても同じようにＣＣＫ産生を増加させる（Weller et al., 1990；Chohen et al., 1993；Can J An Sci 73；401）。したがって、上記した事実に基づき、鳥類において観察されたように、哺乳類においても、ＣＣＫにより生じる満腹感と低給餌効率が、能動的に供給されおよび受動的に伝達されたＣＣＫ抗体の作用により防止されると思われる。ウシやブタのごとき各種の家畜にＣＣＫ抗体を使用すると、同量の家畜飼料を使用をしてもきわめて大幅な最終体重の増加がもたらされるであろう。したがって、マーケットサイズの動物を生産するためのコストは低減される。これは家畜産業に多大な利点を与えるものである。
本発明は体重不足の人あるいは体重の維持が困難である人にとってもきわめて有利である。さらに、食事不調の人も本発明から利益を受けるであろう。なぜならば、食物摂取がコントロールできるからでる。
前記したように、動物の食事行動と消化に作用する消化管ペプチドまたはホルモンには他にも種類がある。ＣＣＫの例およびＣＣＫの不都合な作用を防止するためのそのペプチドに対抗するＣＣＫ抗体の用法は、消化管ペプチドまたはホルモンに対して特異性のある他の抗体を使用しても同様な応答が達成されるであろうことを示唆する。たとえば、ガストリンは胃酸分泌を促すものでありそして胃粘膜に対して細胞異常増殖に導く栄養作用を有する。ガストリンに対する抗体は胃潰瘍のある動物または長期の過ガストリン症による胃ＥＬＣ細胞カルチノイド腫瘍のケースにおいて酸分泌を低下させるために使用できる。消化管ソマトスタチンは給餌されている動物の摂食を阻害しかつまた他の多くの消化管活動に作用を示す。ソマトスタチンに対する抗体はその阻害作用を防止できるであろう。ボンベシンはＣＣＫ放出を刺激する。ボンベシンに特異性のある抗体を使用してボンベシン作用を阻害すれば、ＣＣＫに対する特異性抗体と同様な応答が起こるかもしれないと想定できる。ニューロペプチドＹは摂食を刺激するものであると報告されている。このペプチドの作用を阻害すれば、肥満の問題の起きやすい動物において肥満を制御することが可能であるかもしれない。消化管運動性を制御する他のペプチドの生物学的作用ならびに消化管の他の機能的特性は上記した技術を使用すれば調節可能であろう。
一般的に、生化学的、代謝的、生理学的および／または行動にかかわるプロセスを調節するペプチド、ホルモン、サイトカインなどに対する抗体を産生させることによって、身体的異常を補うためまたは正常機能を亢進させるために動物の体系を制御または変更することが可能であろう。
好ましい実施態様の詳細な説明
上記したように、哺乳類または鳥類にＣＣＫに対する免疫応答を引き出す方法
は３種類ある。すなわち、受動伝達、能動的供給および能動的接種である。
受動的に伝達される抗体に関する本発明の実施態様は、産卵期の雌鶏にＣＣＫを注射することである。これにより雌鶏はＣＣＫに対する抗体を産生する。その結果、その抗体がその雌鶏の体内にある卵の卵黄の中に受動伝達される。ひよこの胚は胚発達の過程でそのＣＣＫ抗体を吸収する。このあと、それらＣＣＫ抗体は孵化したひなの血流内を循環すると共に消化管に達する。
精製されたＣＣＫも合成ＣＣＫペプチドも使用できる。分留、クロマトグラフィー、沈殿または抽出のような当技術分野で公知の手段がＣＣＫペプチド精製のために使用できる。しかしながら、抗原として使用するためにはＣＣＫはキャリヤーまたは外来タンパク質と複合させるべきである。ＣＣＫそのものは１５００ダルトン以下の分子量を有する。免疫応答を引き出すためには少なくとも１００００ダルトンの分子量が必要である。したがって、免疫応答を引き出す複合体をつくるためには、ＣＣＫペプチドは約８０００またはそれ以上の分子量を有するキャリヤータンパク質と複合させねばならない。キャリヤーの例としては従来公知の多種の物質があるが、通常使用されるものは牛のガンマグロブリンまたはキーホールリンペットヘモシアニンである。
キャリヤータンパク質と複合されたＣＣＫペプチドは常用アジュバントを使用して対象動物に注射される。ＣＣＫ−キャリヤー複合体は、たとえば、Freund完全アジュバントにエマルジョン化されうる。哺乳類が対象動物である場合には、後続の接種は不完全アジュバントから構成されるべきである。
本発明の別の実施態様はＣＣＫワクチン接種された雌鶏の卵から製造されたＣＣＫ抗体含有物質を経口的に与えるものである。ＣＣＫ抗体含有卵を準備し、そしてこれを動物飼料に混合する。この抗体を含む食餌を消費した鳥類または哺乳類は、間もなくＣＣＫに特異的な満腹感作用が防止されることによって有利な反応を示す。
経口投与のためのＣＣＫ抗体の製造は、卵黄に抗体をつくるための公知の技術を使用して実施することができる。その方法では、キャリヤータンパク質に複合されたＣＣＫを雌鶏に注射する。このＣＣＫ抗原に応答して、これらの雌鶏内の卵は卵黄内に高レベルのＣＣＫ抗体を含有する。このあと、自動化システムで卵黄を分離して、それを噴霧乾燥して粉末する。別の方法として卵黄を凍結乾燥することもできる。この標準技術は別の目的（たとえば、診断、病原菌に対する抵抗など）のために、各種抗体を生産するための当技術分野で良く確立されている技術である。
全卵を使用することも可能であり、この場合には卵黄を卵白から分離する必要がない。一般的には、食餌８ポンドあたり０．１乃至１個のＣＣＫ含有卵が使用される。
鶏は最も好ましい卵の供給源であるが、七面鳥、鵞鳥、あひるなどの卵も使用可能である。
卵が大量の抗体産生のためのロジカルな供給源であるけれども、鶏が鶏肉として処理される場合には、抗体を全血、血漿または血清から集めることも可能である。さらにまた、接種された家畜からの全血、血漿または血清、さらには接種された牛または山羊から得られた乳も抗体の別の供給源となりうる。さらに、抗体生産のための別の供給源として、ハイブリッド技術を使用した細胞融合によるもの、組み替え技術を使用した遺伝学的に変更された細胞の培養によるものなどがある。
本発明の３番目の実施態様は接種による方法である。ＣＣＫ抗体を対象動物に直接注射して、満腹感と向上された食物転化についての望ましい応答を引き出すことができる。
ＣＣＫ抗体を受け入れた対象動物は大きく変わる。家畜、家禽および毛皮動物（たとえば、ミンク、クロテンなど）の如き市販の動物は理想的な候補である。また、体重増加が困難な人間も本発明の範囲内にあると考えられる。
若鶏レグホンの成長におよぼす受動伝達されたＣＣＫ抗体の作用
実施例１
方  法
グルタールアルデヒドを使用してコレシストキニン（ＣＣＫ−８）（硫酸化チロシンつきフラグメント２６−３３アミド）をキーホールリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）に複合しそしてFreund完全アジュバント（１：１）で乳化しそして１１羽のSingle Comb White Leghorn産卵期雌鶏に注射（１００μｇＣＣＫ）した。最初の注射の７日後に、Freund不完全アジュバント中のＣＣＫ−８複合体による２回目の注射を行った。ＣＣＫ注射を受けなかった雌鶏も対照グループとして使用した。雌鶏（対照とＣＣＫ注射鶏）を受精させた（New Hampshire雄鶏から採集した精子を使用して人工的に）。最初の注射後５か月目に集めた受精卵を受動伝達されたＣＣＫ抗体の結果としての鶏の成長具合を調べるために使用した。対照雌鶏の卵からかえった１５羽のひよことＣＣＫ注射を受けた雌鶏の卵からかえった１５羽のひよこをバッテリー保育器に入れてコーン−大豆飼料をベースとした食餌で６週間飼育した。体重増加のデータと食餌消費のデータを集めた。
結  果
ＣＣＫ注射を受けた雌鶏からのひよこは向上された給餌転換率（１ポンドの体重利得についての給餌量がより少なくてすむ）を示し、その数字は対照雌鶏からのひよこより１４％上回っていた。また、摂食量もＣＣＫ鶏のグループで増加がみられた。結果を表Ｉに示す。
0003884069.tif 000004
実施例２
方  法
ＣＣＫ（実施例１記載のもの）で免疫化した雌鶏からの卵と対照雌鶏からの卵とを最初の接種後約１０か月目に集めた。２つの囲いに１３羽ずつのひよこ（対照雌鶏とＣＣＫ免疫化雌鶏との両者を代表する）を入れて受動伝達されたＣＣＫ抗体が実施例１で見られる如く成長具合に影響を及ぼすか否かを調べるためコーン−大豆飼料をベースとした食餌を与えて飼育した。ひよこを４週間育てた。体重増加と食餌消費を測定した。
結  果
ＣＣＫ免疫化された雌鶏からのひよこは、対照雌鶏からのひよこと比較して、給餌転換率が２％向上されていた。結果を表IIに示す。
0003884069.tif 000005
実施例３
方  法
対照雌鶏およびＣＣＫ注肘された雌鶏（実施例１に記載したように免疫化）からの受精卵を最初の接種後約８か月目に集めそしてひよこの成長に及ぼすＣＣＫ免疫化の効果を調べるため使用した。ＣＣＫ注射雌鶏からのひよこ各１７羽を入れた２つの囲いと対照雌鶏からのひよこ各１７羽をいれた２つの囲いをつくり、４週間飼育した。体重と給餌消費量を測定した。
結  果
ＣＣＫ注射雌鶏からのひよこは、対照雌鶏からのひよこと比較して、給餌転換率が５．２％向上されていた。結果を表IIIに示す。
0003884069.tif 000006
実施例４
方  法
この実施例の試験では、ＣＣＫ免疫化された雌鶏からの各１５羽のひよこを２つの囲いに入れ（免疫化は実施例１記載と同様、採卵は最初の接種から７か月後に実施）、対照雌鶏からのひよこ各１２羽を２つの囲いに入れて、５％生大豆を付加したコーン−大豆飼料をベースとした食餌を与えて（生大豆はＣＣＫ産生を刺激するために使用）３週間飼育した。体重と給餌消費量を測定した。
結  果
ＣＣＫ注射雌鶏からのひよこは、対照雌鶏からのひよこと比較して、給餌転換率が１０％向上されていた。結果を表IVに示す。
0003884069.tif 000007
ブロイラー若鶏の成長に及ぼす受動伝達されたＣＣＫ抗体の効果についてのプロトコル
実施例５
方  法
実施例１に記載したプロトコルを使用してＫＬＨに複合したＣＣＫでブロイラー鶏を免疫化した。これらの鶏は床に放し飼いされていたので、受精卵は自然な交尾の結果として産まれた。合計１０羽の雌鶏をＣＣＫ免疫化し（抗原はレグホンの場合の実施例１と同様に調製）、そして合計１０羽の雌鶏を対照として使用した。最初の接種後約２１乃至３０日目に対照雌鶏とＣＣＫ免疫化雌鶏から受精卵を集めた。対照雌鶏の卵からブロイラーひよこ７羽をそしてＣＣＫ注射した雌鶏の卵からブロイラーひよこ７羽をかえしバッテリー保育器に入れて３週間飼育した。体重と給餌消費量を測定した。
結  果
ＣＣＫ免疫化雌鶏からのブロイラーひよこは、対照雌鶏からのブロイラーひよこと比較して、給餌転換率が２０％そして体重が８％向上されていた。結果を表Ｖに示す。
0003884069.tif 000008
実施例６
方  法
実施例５に記載した最初の接種の７週間後にＣＣＫ免疫化ブロイラー鶏の卵からかえった各６羽のひよこを２つの囲いに入れ、そして対照雌鶏の卵からかえったひよこ各６羽を２つの囲いに入れ３週令まで標準ブロイラータイプ食餌を与えて飼育した。体重と給餌消費量を測定した。
結  果
ＣＣＫ免疫化雌鶏からのブロイラーひよこは、対照雌鶏からのブロイラーひよこと比較して、体重増加が１６％多く、餌の転化は１２．５％でありより効率的なものであった。結果を表VIに示す。
0003884069.tif 000009
対照雌鶏およびＣＣＫ免疫化雌鶏からの卵黄の給餌
実施例７
方  法
実施例１に記載したように対照およびＣＣＫ免疫化雌鶏を準備した。一次接種後少なくとも２１日目に対照雌鶏とＣＣＫ免疫化雌鶏から卵を採取した。これらの卵から卵黄を集め（卵白は捨てる）、そして対照卵黄と抗ＣＣＫ卵黄とを別々にプールし、凍結し、そのあと凍結乾燥した。乾燥した対照卵黄とＣＣＫ抗体卵黄をすりつぶして標準コーン−大豆飼料ベース食餌に加えた。添加量（重量％）は０．５％，１．０％、５％の３種類とし、これにより３種の対照処置と３種の抗ＣＣＫ処置ができるようにした。９羽のレグホン種ひなを２つの囲いに入れ、各処置食餌を４週間給餌した。体重増加、給餌消費量および給餌転換率を測定した。
結  果
抗ＣＣＫ卵黄の含有レベルが高くなるにつれて、対照卵黄を供与されたものと比較して、体重の利得は増加した。抗ＣＣＫ卵黄の各添加レベルにおいて給餌転換率は対照卵黄を供与されたものよりも向上していた。結果を表VIIに示す。
0003884069.tif 000010
生大豆給餌の不都合な作用を防止する点における食餌効率に及ぼす受動伝達されたＣＣＫ抗体の効果
実施例８
方  法
免疫化雌鶏（レグホン）を実施例１と同様に準備した。これら雌鶏を人工的に受精させ、卵を採取して養卵した。ひよこ（Single comb White Leghorn X New Hampshire）がかえり、それらのひよこ各１２羽を２つの囲いに入れ、４種の処置をそれぞれ割り当てた。処置には２つのソースのひな（対照雌鶏の系統とＣＣＫ免疫化雌鶏の系統）を使用し、２種のえさ（その分の食餌を減らして生大豆を５％または１０％添加）は工場で調製した。これらのひなにそれらの食餌を与えて４週間飼育して、体重と給餌消費量を測定した。
結  果
ＣＣＫ免疫化雌鶏からのひなは、それぞれ対応する対照食餌に比較して、給餌転換率が向上した（１１％乃至１９％）。食餌中の生大豆の添加レベルが高くなるにつれて、給餌転換率は悪化した（対照のひなでは１２％悪化したがＣＣＫ注射した雌鶏からのひなのグループではわずか６％の悪化にとどまる）。結果を表VIIIに示す。
0003884069.tif 000011