(57)【要約】      （修正有）【課題】オレウロペインの経時安定性に優れ、さらにオレウロペイン由来の強い苦味を消失させた経口組成物の提供。【解決手段】オレウロペインまたはオレウロペイン含有植物抽出物をリポソームに包含させることにより、オレウロペイン由来の苦味を消失させると共に、水溶液中での高温時のオレウロペイン分解抑制効果、特に高温に晒された後のオレウロペインの分解抑制に優れた経口組成物、および、オレウロペインの分解を抑制する方法およびオレウロペイン由来の苦味を抑制する方法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
オレウロペイン若しくはオレウロペインを含有する植物抽出物をリポソームに包含させることを特徴とした経口組成物。
【請求項２】
オレウロペイン若しくはオレウロペインを含有する植物抽出物をリポソームに包含させることを特徴としたオレウロペインを含有する経口組成物の苦味を抑制する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、オレウロペインの経時安定性に優れ、さらにオレウロペイン由来の強い苦味を消失さした経口組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
オレウロペインはオリーブやイボタノキの葉などに含まれるフェノール化合物である。オレウロペインについては、抗菌作用、血糖値上昇抑制作用、LDL酸化抑制作用、抗ウイルス作用など種々の生理活性効果が知られており、これらの効果を期待して食品、医薬品、化粧品、口腔用組成物などへの応用が期待される。しかし、オレウロペインには、強い苦味が存在するだけでなく、経口組成物が水系組成物である場合には、高温時の安定性が悪いという課題があった。
【０００３】
このような課題に対して、特許文献１には、フェノール性水酸基を三つ以上有するポリフェノール化合物とアルコール性水酸基を二つ以上有する化合物とを含有する、変色が防止されたポリフェノール化合物含有組成物が開示されている。
【０００４】
また、特許文献２には、ポリフェノール類およびポリグリセリン多価脂肪酸エステルを含有する、ポリフェノール類を長期安定に保ち、かつポリフェノール類の渋味を感じない耐熱性に優れたポリフェノール類組成物が開示されている。しかしながら、これらの先行技術によってもポリフェノール類の安定化を十分に図ることはできなかった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開平６−２３９７１６号公報
【特許文献２】特開２００１−３０９７６３
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の目的は、オレウロペイン由来の苦味を消失させると共に、高温時のオレウロペイン分解抑制効果、特に高温に晒された後のオレウロペインの分解抑制に優れた経口組成物、および、オレウロペインの分解を抑制する方法およびオレウロペイン由来の苦味を抑制する方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、かかる事情に鑑み鋭意検討を重ねた結果、驚くべきことにオレウロペインまたはオレウロペイン含有植物抽出物をリポソームに包含させることにより所期の効果が得られることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００８】
すなわち、本発明は、項１の経口組成物および項２の方法を提供するものである。
項１．オレウロペイン若しくはオレウロペインを含有する植物抽出物をリポソームに包含させることを特徴とした経口組成物。
項２．オレウロペイン若しくはオレウロペインを含有する植物抽出物をリポソームに包含させることを特徴としたオレウロペインを含有する経口組成物の苦味を抑制する方法。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、組成物に含まれるオレウロペインの水系組成物中における熱安定性が向上することで、オレウロペインを含む組成物の経時安定性の向上を実現させるとともに、オレウロペイン由来の強い苦味を抑制することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
オレウロペインは、フェノール系化合物の配糖体の一種であり、オレウロペイン含有植物抽出物とは、「モクセイ科オリーブ属もしくはモクセイ科イボタノキ属の植物の花、果皮、果実、葉、樹皮、根または種子を水または水性溶媒を用いて抽出することにより得られる植物抽出物」を意味する。モクセイ科オリーブ属の植物としては、例えば、オリーブ（Olea europaea Linne）やその同属種（Olea welwitschii、Olea paniculataなど）が挙げられ、モクセイ科イボタノキ属の植物としては、イボタノキ（別称：疣取木、水蝋樹。学名：Ligustrum Obtusifolium）、トウネズミモチ（別称：唐鼠黐、女貞。学名：Ligustrum lucidum Ait.）、ネズミモチ（別称：鼠黐、タマツバキ。学名：Ligustrum japonicum）、オオバイボタ（別称：大葉水蝋、虫白蝋、いぼた蝋。学名：Ligustrum ovalifolium）、ミヤマボタ（別称：深山水蝋、オクイボタ。学名：Ligustrum Tschonoskii）が挙げられる。また、オリーブには品種が数多く存在する。オリーブの品種の代表例としては、例えば、ネバディブロンコ、マンザニロ、ピクアル、ホジブランコ、アルベキナ、カタマラ、コロネイキ、ピッチョリーネ、パラゴン、ワッガベルダル、ミッション、ワシントン、ウエストオースラリアミッション、サウスオーストラリアベルダル、アザパ、バルネア、コルニカブラ、ゴルダル、フラントイオ、レッチーノ、チプレッシーノ、ルッカ、アスコラーナテレナ、コレッジョッラ、モロイオロ、ブラックイタリアン、コラティーナ、ヘレナ、ロシオーラ、ワンセブンセブン、エルグレコ、ハーディズマンモスなどを挙げることができ、いずれも本願発明のオレウロペインを得る植物として使用できる。植物体の部位としては、葉および小枝が好ましく用いることができる。
【００１１】
本発明の抽出物の製造に使用する水性溶媒としては、水、エチルアルコールのほか、ブタノール、プロパノール、メタノール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、ブチレングリコールおよびこれら溶媒の混合液が挙げられる。このうち、水または水−エタノール混合液が好ましい。水−エタノール混合液の混合比（水：エタノール）は、体積比で好ましくは約１００：１〜約１：２００であり、より好ましくは約２０：１〜約１：２０であり、最も好ましくは約１：９〜１：１である。
【００１２】
抽出方法は植物体の抽出に使用される方法であれば特に限定されない。例えば、溶媒に浸漬し静置条件或いは攪拌条件で放置することで抽出したり、抽出溶媒を循環させる条件で抽出したり、加圧・減圧条件で抽出したり、超臨界状態で抽出する方法、もしくはそれらを組合せた方法を用いることができる。抽出条件については、抽出方法、被抽出物である植物原料の前処理方法や条件、抽出処理時の溶媒温度、植物原料に対する抽出溶媒の質量比率、または抽出時間など多くの項目があるが、処理スケールと処理費用などを考慮して抽出方法を含め、各条件は任意に設定することができる。例えば、抽出時の溶媒温度は約−４℃〜約１３０℃の範囲で設定でき、抽出温度が１００℃を超える場合は加圧条件で行なう。温度や圧力が高ければオレウロペインの収率は高まる傾向にあるが、一方、共雑成分が多く抽出されたり、抽出物の外観や臭気が悪くなる場合が多いことから、抽出時の溶媒温度は、例えば、抽出溶媒が水−エチルアルコールの場合、常圧下で３０℃〜沸点が好ましく、６０〜８０℃程度がより好ましい。また、溶媒が水の場合は、常圧下で抽出温度が６０〜１００℃程度が好ましく、７０〜１００℃℃程度がより好ましい。
【００１３】
抽出に用いる植物は必要に応じて前処理を行うことができる。特に限定するものではないが、例えば、オリーブ葉を用いる場合において、特開２００３−３３５６９３に開示されている方法を用いることができる。すなわち、生葉を常圧または減圧下で６５℃以下または８５℃〜１４５℃の温度で一定時間乾燥し、オリーブ葉中のオレウロペイン含量を高める前処理を行うことができる。また、抽出効率を高める等の目的で植物体を破砕、粉砕、パンチング、裁断や細断などの処理を行っても良い。
【００１４】
また、得られたオレウロペインを含有する植物抽出物は、さらに適宜精製、濃縮、乾燥などの処理を行うことができる。例えば、酸（無機酸、有機酸等）またはアルカリ（水酸化ナトリウム、水酸化カルシウム、アンモニア等）の添加による分解、醗酵処理、微生物を用いた代謝変換処理、イオン交換樹脂や活性炭、ケイ藻土等による成分吸着、クロマトグラフィーを用いた分画、濾紙やメンブランフィルター、限外濾過膜などを用いた濾過、加圧または減圧、加温または冷却、スプレードライ、凍結乾燥、ｐＨ調整、脱臭、脱色、長時間の静置保管などが例示でき、これらを任意に選択して組み合わせた処理も行うことができる。
【００１５】
より一層オレウロペインの含有量を高めたり、外観や臭気を改善する目的で、さらに精製工程を行うこともできる。これらの工程は公知の方法を適宜選択して使用することができる。例えば、得られた抽出物（粗抽出液）の溶媒を留去させた後、スチレンジビニルベンゼン重合樹脂（ダイアイオンＨＰ２０：三菱化学）、アンバーライトＸＡＤ樹脂：ロームアンドハース社、デュオライトＳ樹脂：ダイアモンドシャムロック社などの樹脂カラムに通し、減圧下で濃縮し、高温乾燥させ、高濃度のオレウロペインを含有する抽出物を得ることができる。
【００１６】
得られたオレウロペインを含有する植物抽出物を固体化させる場合は、必要に応じて水溶性の粉体を賦形剤として使用することもできる。具体的には、濃縮後、凍結乾燥、噴霧乾燥、造粒乾燥などの通常用いられている手段を用い、必要に応じてデキストリンなどの賦形剤を使用してエキス末を得ることができる。これらは、そのまま粉末で用いてもよく、さらに造粒し、顆粒、細粒にして用いることもできる。なお、固体化させる場合に賦形剤等を添加した場合、本願においては、添加した賦形剤等もオレウロペイン含有植物抽出物の構成成分とみなす。
【００１７】
オレウロペインを含有する植物抽出物は、オリーブ葉乾燥エキス（粉末：アスク薬品（株）社製）、オリーブ葉エキス（オレウロペイン含量約３５％、タマ生化学（株）社製）、オピエース（オレウロペイン含量約３５％：エーザイフードケミカル(株)社製）、オリーブ葉抽出液（日本粉末薬品（株）社製）、オリーブ葉エキス末（４０）（オレウロペイン含量約４０％、バイオフロンテ（株）社製）、オリーブ葉エキスパウダー（日本粉末薬品（株）社製）、オリーブ葉エキス（オレウロペイン含量約２６％、バイオアクティブズジャパン（株）社製）、オリーブ葉エキス（（株）ヤマヒサ社製）などから商業的に入手することもできる。オレウロペイン含有植物抽出物中のオレウロペイン含有量は、乾燥物質量換算で植物抽出物全量に対して通常８質量％程度が好適に使用できるが、１５質量％以上が好ましく、２０質量％以上がより好ましく、３０質量％以上が最も好ましい。
【００１８】
前記方法を使用して得られるオレウロペイン含有植物抽出物は、組成物に配合する前にリポソームに包含させることで、オレウロペインの経時安定性を向上させたり、オレウロペイン由来の強い苦味を抑制したりすることができる。リポソームとは、リン脂質を主体とした脂質を十分量の水で水和することにより形成される二分子膜を有する脂質小胞体である。リポソームは脂質分子膜層の数に基づいて分類され、具体的には、多重膜リポソーム（ＭＬＶ）と一枚膜リポソーム（ＳＬＶ）に分類される。また、一枚膜リポソームは、脂質小胞体の大きさに応じて更に分類されることがあり、具体的には、大きさの小さいほうから順に、ＳＵＶ（small unilamella vesicle）、ＬＵＶ（large nilamellavesicle）、ＧＵＶ（giant unilamella vesicle）に分類される。本発明のリポソームは、これらのいずれであってもよい。好ましいのはＭＬＶである。本発明では、リポソームの大きさは、平均粒子系として通常30〜1000nm、好ましくは30〜600nm、より好ましくは50〜300nmである。また本願において、「リポソームに包含させる」とは、前記脂質小胞体の構成成分として存在させることを意味し、より具体的には、脂質分子膜の表面上に存在させたり、脂質分子膜の構成成分として存在させたり、あるいは脂質小胞体の中に存在する連続層中に存在させることを意味する。
【００１９】
オレウロペイン含有植物抽出物をリポソームに包含させる方法としては、公知の方法を用いることができ、通常は水溶液中にリポソームが分散している状態、すなわちリポソーム懸濁液として得ることができる。リポソーム懸濁液の製造方法は特に限定されないが、（１）リン脂質、リポソームに内包する成分、その他酸化防止剤などを均質に混合した後、ｐＨ調整剤、多価アルコール、糖類などを含む水溶液で水和し、リポソームを形成させる方法。（２）リン脂質、リポソームに内包する成分、その他酸化防止剤などをアルコール、多価アルコールなどに溶解し、ｐＨ調整剤、多価アルコール、糖類などを含む水溶液で水和し、リポソームを調製する方法。（３）超音波、フレンチプレスやホモジナイザーを用いて、リン脂質、リポソームに内包する成分、その他酸化防止剤などを水中で複合化させ、リポソームを調製する方法。（４）エタノールにリン脂質、リポソームに内包する成分、その他酸化防止剤などを混合溶解し、このエタノール溶液を塩化カリウム水溶液に添加した後にエタノールを除去しリポソームを調製する方法などが利用できる。オレウロペイン含有植物抽出物が粉末や顆粒などの固体状である場合には、そのまま使用するか、少量の水または水系溶媒に予め溶解させた後に使用する。ペースト状や液状の場合はそのまま使用することができる。
【００２０】
本発明に使用するリン脂質としては、大豆レシチン、ナタネレシチン、コーンレシチン、綿実油レシチン、ひまわりレシチン、卵黄レシチン、卵白レシチン、ピーナッツレシチンなどが例示される。レシチンはホスファチジルコリン又は１，２−ジアシルグリセロール ３−ホスホコリンとも称され、一般的に、グリセロールの１位及び２位に脂肪酸が結合している。本発明では、上記例示のレシチンに加えて、１位及び２位の両方又は片方に炭素数１２〜２４の不飽和脂肪酸が結合しているレシチンを使用することが好ましく、１位に炭素数１２〜２４の飽和脂肪酸、２位に炭素数１２〜２４の不飽和脂肪酸が結合しているレシチンを使用することが特に好ましい。ここで、飽和脂肪酸及び不飽和脂肪酸は直鎖状及び分枝状のいずれでもよい。また、レシチンに代えて又は加えて、レシチン誘導体を用いることもできる。レシチン誘導体としては、水素添加レシチンや、前記例示のレシチン中のリン脂質にポリエチレングリコール、アミノグリカン類等を導入した化合物が例示できる。このうち、大豆レシチン、卵黄レシチン、水素添加大豆レシチン、水素添加卵黄レシチンが好ましく、特に大豆レシチン、卵黄レシチンが好ましい。また、レシチン中に存在するリン脂質（例えばホスファチジルコリン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルグリセロール、スフィンゴミエリン等）の純度を高めた精製レシチンも好ましく使用することができる。これらレシチン又はレシチン誘導体は１種または２種以上を組み合わせて使用することができる。本発明で使用するレシチンは、例えばＳＬＰ−ＰＣ３５（フォスファチジルコリン（以下ＰＣと略することがある）含量３５％）、ＳＬＰ−ＰＣ７０（ＰＣ含量７０％）、（ＳＬＰ−ホワイトリゾ（リゾレシチン）（以上、辻製油（株）社製）；卵黄レシチンＬＰＬ−２０Ｓ、２０Ｗ（リゾリン脂質含量約２０％）、卵黄レシチンＰＬ−３０Ｓ（フォスファチジルコリン含量約３０％）（以上、キューピー（株）社製）；大豆レシチン、卵黄レシチン、フォスファチジルコリン、フォスファチジルセリン、グリセロホスホコリン（以上、Ｈホススタイン社製）；Ｌｅｃｉｇｒａｎ（粉末レシチン）、Ｍｅｔａｒｉｎ（分画レシチン）、Ｌｅｃｉｍｕｌｔｈｉｎ（粉末リゾレシチン）（以上、Ｃａｒｇｉｌｌ社製）；レシオンＰ（リン脂質含量９０％以上）、レシオンＬＰ−１（レシチン含量約７０％）、レシマール（酵素分解レシチン、リン脂質含量５０％）（以上、理研ビタミン社製）；ニチユＰＳ２５（ホスファチジルセリン含量約２５％）、ニチユＰＳ５０（ホスファチジルセリン含量約５０％）；、サンレシチンＡ−１（酵素分解大豆レシチン、レシチン含量約３０％）などから商業的に入手することもできる。
【００２１】
リポソーム懸濁液には、高分子、蛋白質及びその加水分解物、ムコ多糖類などを配合することができる。リポソーム懸濁液に配合する高分子としては、例えばカルボキシビニルポリマー、キサンタンガム、アルギン酸ナトリウムなどが例示できるが、これらに限定されるものでもない。カルボキシビニルポリマー、キサンタンガムが好ましく、特にキサンタンガムが好ましい。これら高分子等は１種または２種以上を組み合わせて使用できる。高分子の配合量は特に限定しないが、０．００１〜２０％、好ましくは ０．０１〜１０％、特に好ましくは ０．０５〜５％である。蛋白質及びその加水分解物としては、コラーゲン、エラスチン、ケラチン、カゼイン、それらの加水分解物、加水分解物の塩、加水分解物のエステル、あるいは酵素処理されたものが挙げられるが、特にアテロコラーゲンが好ましい。蛋白質及びその加水分解物の配合量は特に限定しないが、０．００１〜５％、好ましくは０．０１〜１％である。ムコ多糖としては、コンドロイチン硫酸、ヒアルロン酸、デルマタン硫酸、ヘパラン硫酸、ムコイチン硫酸、ヘパリンとその誘導体、及びそれらの塩類などが挙げられるが、特にコンドロイチン硫酸、ヒアルロン酸及びこれらのナトリウム塩が好ましい。ムコ多糖の配合量は特に限定しないが、 ０．０００５〜５％、好ましくは０．００１〜１％である
【００２２】
本願発明のオレウロペインを含有する植物抽出物を包含したリポソームは、液体若しくは液状、粘稠体、ゼリー、固形ゲル、粉末、顆粒、ブロックなど種々の形態の製剤に配合することができる。この中でも、飲料として摂取できる形態、例えば液体、液状、粉末、顆粒の形態は、オレウロペイン由来の苦味を強く感じやすい剤形であるため、本願効果を実感し易いことから好ましい。また、０．１％質量％以上のオレウロペインが含有する程度に組成物に配合する場合もオレウロペイン由来の強い苦味が出るため、本願効果を実感し易いことから好ましい。
【実施例】
【００２３】
以下、本発明を具体的に説明するが、本発明は下記の例に限定されるものではない。なお、以下特に断りのない限り「％」は「質量％」を示す。
【００２４】
オレウロペイン由来の苦味抑制効果およびオレウロペイン安定性
無水クエン酸１１．９ｇ及びクエン酸三ナトリウム９．８ｇを精製水に溶解し正確に１０００ｍｌとし、ｐＨ３．８のクエン酸緩衝液を調製した。
次いで、表１の処方に基づき、被検体を調製した。調製は以下の手順に基づいて行った。処方１、２及び４については、エチルアルコールにフォスファチジルコリンを９０質量％以上含有する精製大豆レシチンＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ ９０ (Lipoid社製)およびオレウロペイン約３５％を含有するオリーブ葉エキス末を分散し、スターラーで攪拌しつつクエン酸緩衝液を添加し溶解する。次いで、高圧乳化機（スターバーストミニHJP-25001（（株）スギノマシン社製））で１５０Ｍｐ、１０パスの条件で処理し、リポソーム懸濁液を調製した。
苦味のマスキング効果の評価は、専門パネルによる官能評価にて実施した。評価は被検体約０．５ｍｌを口に含み、数秒間口腔内に保持した後に吐出し、吐出後の苦味感を５段階で評価した。この際、処方１の評価を「非常に苦い  ５」とし、処方２の評価を「全く苦くない  １」としたときの相対評価とした。評価結果は単純平均を算出した。結果を表１に示す。
オレウロペインの安定性は、前記で調製された各被検体を、15ml容量ポロプロピレンチューブに6mlずつ分注し、合成樹脂性の蓋で密封した状態で、４０℃及び５℃の恒温室にて放置した。オレウロペインの含有量は、放置４週間後に測定した。オレウロペインの含有量の測定は、被検体０．３５ｇを秤取し、０．１質量％のアスコルビン酸を含有する６０質量％含水メチルアルコールを用いて５ｍｌにメスアップした。その後、良く攪拌した後に遠心分離処理（１３０００ｒ.ｐ.ｍ.、５分）を行い、得られた上澄の吸光度（２８０ｎｍ）を測定することで行った。オレウロペインを含有する植物抽出物をリポソームに包含させた状態のオレウロペインの安定性は処方２と処方３の結果より算出した。算出式を書きに示す。また、得られた結果を表１に示す。
処方３の算出式
[（処方３の４０℃の測定値）-（処方２の４０℃の測定値）]*１００
（      処方３の５℃の測定値）-（処方２の５℃の測定値）
【００２５】
【表１】
2016132630.tif 000002
【００２６】
表１に示したとおり、リポソームに包含させる事により、オレウロペイン由来の苦味を消失させることができ、また水系組成物におけるオレウロペインの高温安定性も向上させることがわかった。