(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
エレクトロポレーション用のマイクロエマルション製剤であって、前記マイクロエマルションが、（ａ）水相、油相、界面活性剤及び薬物を含有し、（ｂ）その粒子径が０．１ｎｍ〜１００ｎｍの範囲に９０％以上の粒度分布を有し、且つ、（ｃ）エレクトロポレーションの通電を２回以上適用して使用するマイクロエマルションであることを特徴とするエレクトロポレーション用マイクロエマルション製剤。
【請求項２】
上記マイクロエマルションの粒子径が０．１ｎｍ〜５０ｎｍの範囲に９０％以上の粒度分布を有するマイクロエマルションである請求項１に記載のエレクトロポレーション用マイクロエマルション製剤。
【請求項３】
上記マイクロエマルションの水相が水、緩衝液及び塩の水溶液より選択される水相である請求項１又は２に記載のエレクトロポレーション用マイクロエマルション製剤。
【請求項４】
上記マイクロエマルションの油相が、植物油、動物油、飽和脂肪酸エステル、不飽和脂肪酸エステル及び中鎖脂肪酸エステルより選択される油相である請求項１又は２に記載のエレクトロポレーション用マイクロエマルション製剤。
【請求項５】
上記マイクロエマルションの界面活性剤がＨＬＢ３〜７の界面活性剤とイオン性界面活性剤を混合してなるか又はＨＬＢ３〜７の界面活性剤とＨＬＢ１０〜２０の界面活性剤を混合してなる界面活性剤である請求項１又は２に記載のエレクトロポレーション用マイクロエマルション製剤。
【請求項６】
上記マイクロエマルションの薬物が水相に含有されてなるマイクロエマルションである請求項１、２、３、４又は５に記載のエレクトロポレーション用マイクロエマルション製剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は医療の分野において使用されるエレクトロポレーション用マイクロエマルション製剤に関し、より詳しくはエレクトロポレーションとマイクロエマルションとを併用することにより薬物や生理活性物質を生体内へ投与する方法において使用するエレクトロポレーション用マイクロエマルション製剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
エレクトロポレーションは、従来遺伝子の導入に用いられていた方法であり、細胞に対して瞬時に高電圧を負荷し、細胞内へのＤＮＡ等を導入させる方法である。近年、この技術を経皮、経粘膜からの薬物の送達に応用することが試みられている〔特表平３ー５０２４１６号、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９０：１０５０４−１０５０８（１９９３）〕。エレクトロポレーションにおいては皮膚や粘膜に対して新たな可逆的なルートである孔を形成し、この孔を薬物の送達に利用するが、エレクトロポレーションの単独利用では十分な量の薬物を送達することはできなかった。
【０００３】
一方、マイクロエマルションは１９４３年にＨｏａｒ等により初めて得られたもので、粒子径が著しく小さい澄明な液体である。近年、消化管からの吸収が悪いペプチドなどをこのマイクロエマルションに封入し、その吸収を促進させる方法が研究されている（特開平７ー２６８９号）。マイクロエマルションは数ｎｍ〜数百ｎｍ（ｎｍ＝ナノメーター）の径を持つ安定粒子で、その中に薬物を封入することができる薬物キャリヤーである。これによれば皮膚や粘膜を通してある程度の吸収促進効果を有するが、吸収させようとする皮膚や粘膜に孔がなければ吸収されず、皮膚や粘膜から十分な量の薬物を吸収させるには至っていない。
【０００４】
このように皮膚や粘膜から薬物を送達する場合、エレクトロポレーション単独やマイクロエマルション単独では皮膚や粘膜からの薬物の透過が不十分であり、十分な薬効を得ることはできなかった。本発明者は従来技術におけるこのような事情、問題点に鑑み、各種多方面から実験、検討を進めたところ、薬物や生理活性物質（本明細書中、両者を合わせて適宜「薬物」と指称する）をマイクロエマルションに封入する一方、エレクトロポレーションにより皮膚や粘膜に可逆的な孔を形成し、その孔からマイクロエマルションを送達することにより生体内に薬物を有効に送達する新規且つ有用な方法を見い出した。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
すなわち、本発明はエレクトロポレーションとマイクロエマルションとを併用するに際して使用するエレクトロポレーション用のマイクロエマルション製剤を提供することを目的とし、これによりエレクトロポレーション又はマイクロエマルションをそれぞれ単独に適用する場合に比べて薬物の送達効果を相乗的に増大させることができる。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明は、エレクトロポレーション用のマイクロエマルション製剤であって、マイクロエマルションが水相、油相、界面活性剤及び薬物を含有してなるエレクトロポレーション用マイクロエマルション製剤を提供する。
【０００７】
【発明の実施の形態】
エレクトロポレーションにおいては皮膚や粘膜に対して孔を形成するが、これだけでは皮膚や粘膜透過性の低い薬物に対して透過促進効果が望めず、充分な量を送達することができない。本発明においてはエレクトロポレーションを適用した部位にマイクロエマルション製剤を投与することにより体内への薬物の吸収を格段に増大させるものである。本発明に係るマイクロエマルション製剤の粒子径は、好ましくは０．１ｎｍ〜１００ｎｍの範囲に９０％以上の粒度分布を有し、さらに好ましくは粒子径が０．１ｎｍ〜５０ｎｍの範囲に９０％以上の粒度分布を有する。
【０００８】
すなわち、その粒子径は、大きすぎてもエレクトロポレーションにより形成された孔を透過することができず、逆に小さすぎるとエレクトロポレーションに適したマイクロエマルション化ができないか、或いはマイクロエマルション化していない可能性がある。エレクトロポレーションにより形成される孔のサイズは、適用電圧、適用部位等の如何により異なるが、可逆的に形成される孔径は最大１００ｎｍ程度と考えられる。このためマイクロエマルションの粒子径は０．１〜１００ｎｍ程度であるのが好ましい。また比較的電気刺激の少ない条件下においては形成される孔はさらに小さくなるため、この場合にはマイクロエマルションの粒子径は０．１〜５０ｎｍ程度であるのが好ましい。
【０００９】
本発明のエレクトロポレーション用マイクロエマルション製剤の適用態様としては、（１）皮膚や粘膜に対して少なくとも１回エレクトロポレーションを適用した後、その部位にマイクロエマルション製剤を適用して薬物を吸収させる、（２）皮膚や粘膜に対してマイクロエマルション製剤を適用した後、同じ部位に少なくとも１回エレクトロポレーションを適用して薬物を吸収させる、（３）マイクロエマルションをエレクトロポレーション用の電極と一体とした製剤とし、エレクトロポレーションとマイクロエマルションを同時に適用する等の各種手法により実施することができる。これら（１）〜（３）のいずれの態様の場合にも、その後経時的に何回エレクトロポレーションを適用しても差し支えない。
【００１０】
図１は、そのような適用態様のうち特に（１）〜（２）の態様において使用され得るエレクトロポレーション用電極の一例を示す図である。図１中、１は絶縁性高分子フィルム、２は一対の電極であり、図示のとおり両電極間には複数個の細線が交互に間隔を置いて配置されている。その細線の間隔は、一例として図１中拡大図で示すとおり、例えば０．２ｍｍ程度である。本電極の使用に際してはその電極面を皮膚や粘膜に当接させた後、電極間に以下に述べるような電力がかけられる。
【００１１】
本発明の製剤を適用するエレクトロポレーション用の電極としては分極性、非分極性のいずれでもよい。また電圧としては１０〜２０００Ｖ／ｃｍの範囲で適用でき、皮膚に対する電気刺激を考慮すると好ましくは５０〜１０００Ｖ／ｃｍの範囲で適用される。通電パターンとしては特に限定はないが、指数対数型波か矩形型波であるのが好ましい。エレクトロポレーションは１回以上通電すれば効果は見られるが、回数が多いほどその効果は増加する。通電時間は電気刺激感を考慮して指数対数型波の場合はτ値として０．１μ秒〜５秒（τは適用して電圧が約３７％に減衰するまでの時間）、矩形波の場合には０．１μ秒〜１００ｍ秒程度であるのが望ましい。
【００１２】
本発明に係るエレクトロポレーション用マイクロエマルション製剤の適用形態としては、皮膚や粘膜に対してマイクロエマルションを多孔質膜へ含浸させた形で貼付するか、或いは液状のままで乳剤やローション剤のようにして塗布してもよく、さらに図２に示すようにマイクロエマルションをエレクトロポレーション用の電極と一体とした製剤としてもよい。この電極一体型製剤は前記適用態様（１）〜（３）のうち特に（３）の態様で適用する場合に好適に用いられる。
【００１３】
図２中、３は電極、４は粘着層、５はマイクロエマルション保持層である。このマイクロエマルション保持層５としては不織布や各種高分子を材料とする膜（例えば６，６ーナイロン、セルロース、セルロースアセテート、ポリフッ化ビニリデン等）を用いることができ、或いはゼラチン、寒天、ポリビニルアルコールゲル、ポリアクリル酸ナトリウム、カルボキシルメチルセルロースナトリウムその他の高分子ゲルを使用してもよい。これら保持層中に本発明のマイクロエマルションが収容され保持される。
【００１４】
本発明におけるマイクロエマルションは、水相、油相及び数種類の界面活性剤を含有して構成される。界面活性剤の種類としてはＨＬＢが３ー７の非イオン性界面活性剤とイオン性界面活性剤とを組み合わせて用いるか、またはＨＬＢが３ー７の非イオン性界面活性剤とＨＬＢが１０ー２０の非イオン性界面活性剤とを組み合わせて使用する。それら各成分の配合割合としては、水相については０．０００１〜３０％（重量％、以下同じ）、好ましくは１〜２０％、さらに好ましくは５〜１５％の範囲であり、界面活性剤は０．０００１〜２０％の範囲、また油性成分については５０〜９９％の範囲で使用される。
【００１５】
上記水相としては特に限定はないが、好ましくは▲１▼水、▲２▼リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液、炭酸緩衝液、酢酸緩衝液などの緩衝液、▲３▼塩化ナトリウム、塩化カリウム、硫酸ナトリウム等の塩類を含む水溶液を挙げることができ、これらに薬物を溶解させる。また油相としては特に限定はないが、好ましくは大豆油、胡麻油、オリーブ油のような植物油、或いは動物性食用油（脂肪酸グリセリンエステル類）、飽和又は不飽和脂肪酸、中鎖脂肪酸（Ｃ5 〜Ｃ18）のモノ、ジ、トリグリセリンエステル類等を挙げることができる。
【００１６】
また上記イオン性界面活性剤としては特に限定はないが、例えばジー２ーエチルヘキシルコハク酸ナトリウム、アルキル硫酸ナトリウム（アルキル部分がＣ8 ーＣ20、好ましくはＣ10ーＣ14）等が挙げられる。またＨＬＢが１０〜２０の非イオン性界面活性剤としてはポリオキシエチレン硬化又は非硬化ヒマシ油（ポリオキシエチレン平均付加モル数が３０〜８０）、ポリオキシエチレングリコール高級脂肪酸エステル（脂肪酸が飽和又は不飽和のＣ16〜Ｃ20の脂肪酸であり、エチレングリコールの平均の付加モル数が１０〜４０）、ポリオキシエチレンアルキルエーテル（アルキル部分がＣ8 〜Ｃ14であり、オキシエチレン平均付加モル数が４〜２５）等が挙げられる。
【００１７】
また、ＨＬＢが３〜７の非イオン性界面活性剤としては、モノ又はポリグリセリン脂肪酸エステル（脂肪酸が飽和又は不飽和のＣ18〜Ｃ20の脂肪酸であり、グリセリン１モル当たりの脂肪酸付加モル数が１〜２であり、さらにグリセリンの付加モル数が０〜４）、ソルビタン脂肪酸エステル（脂肪酸が不飽和のＣ16〜Ｃ20であり、その付加モル数が１〜３）、ポリオキシエチレン硬化又は非硬化ヒマシ油（オキシエチレン平均付加モル数が３〜２０）等が挙げられる。
【００１８】
さらに本発明の製剤において用いられる薬物としては、例えばモルヒネ、フェンタニル、ペチジン、コデイン、ブプレノルフィン、ブトルファノール、エプタゾシン、ペンタゾシンなどの中枢性鎮痛薬やインスリン、カルシトニン、カルシトニン関連遺伝子ペプチド、バソプレッシン、デスモプレシン、プロチレリン（ＴＲＨ）、副腎皮質刺激ホルモン（ＡＣＴＨ）、黄体形成ホルモン放出因子（ＬＨーＲＨ）、成長ホルモン放出ホルモン（ＧＲＨ）、神経成長因子（ＮＧＦ）及びその他の放出因子、アンギオテンシン（アンジオテンシン）、副甲状線ホルモン（ＰＴＨ）、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ，サイロトロピン）、卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）、黄体形成ホルモン（ＬＨ）、プロラクチン、血清性性線刺激ホルモン、胎盤性性腺刺激ホルモン（ＨＣＧ）、下垂体性性腺刺激ホルモン（ＨＭＧ）、成長ホルモン、ソマトスタチン、ソマトメジン、グルカゴン、オキシトシン、ガストリン、セクレチン、エンドルフィン、エンケファリン、コレストキニン、エンドセリン、ニュウロテンシン、インターフェロン、インターロイキン、トランスフェリン、エリスロポエチン、スーパーオキサイドデスムターゼ（ＳＯＤ）、顆粒球刺激因子（ＧーＣＳＦ）、腸管血管拡張ペプチド（ＶＩＰ）、ムラミルジペプチド、コルチコトロピン、ウロガストロン、ヒト心房性利尿ペプチド（ｈーＡＮＰ）等のペプチド類、カルマバゼピン、クロルプロマジン、ジアゼパム、ニトラゼパム等の精神安定薬、プレオマイシン、アドレアマイシン、５ーフルオロウラシル、マイトマイシン等の抗悪性腫瘍薬、ジギタリス、ジゴキシン、ジギトキシン等の強心症薬、レセルピン、クロニジン等血圧降下剤、エストラジオール、テストステロン等の性ホルモン等が挙げられるが、これらに限らず、経皮や経粘膜により送達できるものであれば用いられる。
【００１９】
【実施例】
以下、実験例１〜実験例３に基づき本発明の実施例を説明するが、本発明がこれら実施例によって限定されないことは勿論である。実験例１においては、サーモンカルシトニン（ｓＣＴ）の投与を例にして、エレクトロポレーションとマイクロエマルションの併用効果とエレクトロポレーション単独又はマイクロエマルション単独の効果とを比較した。また実験例２においては、平均粒子径が５．９ｎｍのマイクロエマルションにｓＣＴを封入した場合と４．３μｍのエマルションにｓＣＴを封入した場合との薬効を調べた。さらに実験例３においては種々の薬物とマイクロエマルションを組み合わせた処方と製剤の例及びそのときのマイクロエマルションの平均粒子径を示した。
【００２０】
〔実験例１〕
《実施例１ー１》エレクトロポレーションとマイクロエマルションの併用によるｓＣＴの投与（１）
〈マイクロエマルションの調製〉
サーモンカルシトニン（ｓＣＴ、ＮＯＶＡ）１ｍｇを牛血清アルブミン（１％ＢＳＡ）の水溶液５０μｌに溶解させてｓＣＴ溶液を調製した。一方、スルホコハク酸型アニオン界面活性剤（ペレックスＯＴＰ、花王社製、商品名）１４０ｍｇにジグリセリンモノオレイン酸エステル（ＤＧＭＯ、日光ケミカル社製、商品名）１００ｍｇ及び中鎖脂肪酸トリグリセライド（パナセート８１０、日本油脂社製、商品名）１７６０ｍｇを混合し界面活性剤油液を調製した。こうして得たｓＣＴ溶液２０μｌと界面活性剤油液９８０μｌを混合しｓＣＴ封入マイクロエマルションを調製した。マイクロエマルションの粒子径をレーザー光散乱法（使用装置＝レーザー光散乱粒度分布測定装置、大塚電子社製ＤＬＳー７０００型、Ａｒレーザー出力７５ｍＷ、以下同じ）により測定した。
【００２１】
〈吸収実験〉
ＳＤラットをウレタン麻酔下、バリカンとシェイバーにより腹部除毛後、腹部に生理食塩水２００μｌを滴下し、図１に示す電極を使用して２回通電（１ＫＶ／ｃｍ、２５μＦＤ）した。通電後、直ちに生理食塩水を拭き取り、上記のとおり調製したｓＣＴ封入マイクロエマルションの２００μｌを該腹部に適用した。マイクロエマルションの適用後、経時的に頸静脈から採血し、遠心分離して血清を得た。次いで、市販のカルシウム測定キット（カルシウムＣテストワコー、和光純薬社製、商品名）を用いて吸光度法（ＵＶ：５７０ｎｍ）により血清中のカルシウム濃度を測定し、薬物投与前の血清中のカルシウム濃度と比較した。
【００２２】
《実施例１ー２》エレクトロポレーションとマイクロエマルションの併用によるｓＣＴの投与（２）
〈マイクロエマルションの調製〉
サーモンカルシトニン（ｓＣＴ、ＮＯＶＡ）１ｍｇを牛血清アルブミンを含むｐＨ３のクエン酸緩衝液（１％ＢＳＡ／ＣＢ緩衝液）５０μｌに溶解させｓＣＴ溶液を調製した。一方、ポリオキシエチレン（平均付加モル数＝２０）モノオレイン酸ソルビタン（日光ケミカルズ社製）８０ｍｇにジグリセリンモノオレイン酸エステル（ＤＧＭＯ、日光ケミカル社製、商品名）１６０ｍｇ及び中鎖脂肪酸トリグリセライド（パナセート８１０、日本油脂社製、商品名）１７６０ｍｇを混合して界面活性剤油液を調製した。こうして得たｓＣＴ溶液２０μｌと界面活性剤油液９８０μｌを混合してｓＣＴ封入マイクロエマルションを調製した。このマイクロエマルションの粒子径をレーザー光散乱法により測定したところ、平均粒子径３０．５ｎｍであった。
【００２３】
〈吸収実験〉
ＳＤラットをウレタン麻酔下、バリカンとシェイバーにより腹部除毛後、腹部に生理食塩水２００μｌを滴下し、図１に示す電極を使用して２回通電（１ＫＶ／ｃｍ、２５μＦＤ）した。通電後、直ちに生理食塩水を拭き取り、上記ｓＣＴ封入マイクロエマルションの２００μｌを該腹部に適用した。マイクロエマルションの適用後、経時的に頸静脈から採血し、遠心分離して血清を得た。次いで、市販のカルシウム測定キット（カルシウムＣテストワコー、和光純薬社製、商品名）を用いて吸光度法（ＵＶ：５７０ｎｍ）により血清中のカルシウム濃度を測定し、薬物投与前の血清中のカルシウム濃度と比較した。
【００２４】
《比較例１ー１》マイクロエマルションによるｓＣＴの投与
〈吸収実験〉
ＳＤラットをウレタン麻酔下、バリカンとシェイバーにより腹部除毛後、腹部に生理食塩水２００μｌを滴下し、直ちに生理食塩水を拭き取り、実施例１ー１で調製したｓＣＴ封入マイクロエマルション２００μｌを該腹部に適用した。マイクロエマルション適用後、経時的に頸静脈から採血し、遠心分離して血清を得た。血清中のカルシウム濃度の測定を実施例１ー１〜実施例１ー２と同様に行った。
【００２５】
《比較例１ー２》エレクトロポレーションによるｓＣＴの投与
〈ｓＣＴ溶液の調製〉
サーモンカルシトニン（ｓＣＴ、ＮＯＶＡ）１ｍｇを牛血清アルブミン（１％ＢＳＡ）の水溶液５０μｌに溶解させてｓＣＴ溶液を調製した。これらｓＣＴ溶液２０μｌと１％ＢＳＡ溶液９８０μｌとを混合してｓＣＴ溶液を調製した。
〈吸収実験〉
ＳＤラットをウレタン麻酔下、バリカンとシェイバーにより腹部除毛後、腹部に生理食塩水２００μｌを滴下し、図１に示す電極を使用して２回通電（１ＫＶ／ｃｍ、２５μＦＤ）した。通電後直ちに生理食塩水を拭き取り、ｓＣＴ溶液を２００μｌを腹部に適用した。投与後、経時的に頸静脈から採血し、遠心分離して血清を得た。血清中のカルシウム濃度の測定を実施例１ー１〜実施例１ー２と同様に行った。
【００２６】
＜試験結果＞
図３は実施例１ー１で調製したマイクロエマルションの粒度分布を示す図である。前記のとおり比較例１ー１でも同じマイクロエマルションを使用している。図３のとおり実施例１ー１及び比較例１ー１で用いたマイクロエマルションの平均粒子径は５．９ｎｍであり、１．５〜２０．３ｎｍの範囲に１００％の粒度分布を持っていた。次に、図４は吸収実験の結果である。図４のとおりエレクトロポレーションとマイクロエマルションを併用した実施例１ー１及び実施例１ー２においては、血清中カルシウム濃度はともに２時間経過時までに投与前の６９％まで低下している。これに対して、比較例１ー１すなわちマイクロエマルション単独では７７％、比較例１ー２すなわちエレクトロポレーション単独では８４％までしか低下しなかった。これはエレクトロポレーションとマイクロエマルションの併用により、エレクトロポレーション単独又はマイクロエマルション単独に比べて、ｓＣＴの吸収が相乗的に促進されたためである。
【００２７】
〔実験例２〕
《実施例２ー１》前記実施例１ー１の結果を用いた。ここで使用したマイクロエマルションの平均粒子径は５．９ｎｍである。
《比較例２ー１》エレクトロポレーションと粒径の大きいマイクロエマルションの併用によるｓＣＴの投与（３）
〈マイクロエマルションの調製〉
サーモンカルシトニン（ｓＣＴ、ＮＯＶＡ）１ｍｇを牛血清アルブミンを含むｐＨ３のクエン酸緩衝液（１％ＢＳＡ／ＣＢ緩衝液）５０μｌに溶解させてｓＣＴ溶液を調製した。このｓＣＴ溶液２０μｌにジグリセリンモノオレイン酸エステル（ＤＧＭＯ、日光ケミカル社製、商品名）を８０ｍｇを加え、さらに中鎖脂肪酸トリグリセライド（パナセート８１０、日本油脂社製、商品名）８８０ｍｇを混合した後、超音波を５分間適用し、ｓＣＴ封入マイクロエマルションを調製した。マイクロエマルションの粒子径をレーザー光散乱法により測定した結果、平均粒子径４．３μｍであった。
【００２８】
〈吸収実験〉
ＳＤラットをウレタン麻酔下、バリカンとシェイバーにて腹部除毛後、腹部に生理食塩水２００μｌを滴下し、図１に示す電極を用いて２回通電（１ＫＶ／ｃｍ、２５μＦＤ）した。通電後、直ちに生理食塩水を拭き取り、上記ｓＣＴ封入マイクロエマルション（平均粒子径４．３μｍ）２００μｌを腹部に適用した。このマイクロエマルション適用後、経時的に頸静脈から採血し、遠心分離後血清を得た。次いで、市販のカルシウム測定キット（カルシウムＣテストワコー、和光純薬社製）を使用して吸光度法（ＵＶ：５７０ｎｍ）により血清中のカルシウム濃度を測定し、薬物投与前の血清中カルシウム濃度と比較した。図５はその結果である。
【００２９】
＜試験結果＞
前記のとおり実施例２ー１で用いたマイクロエマルションの平均粒子径は５．９ｎｍであり、他方比較例２ー１で使用したマイクロエマルションは白濁しており、その平均粒子経は４．３μｍである。図５のとおり、このように粒子径が異なるマイクロエマルションを用いた吸収実験の結果、実施例２ー１すなわちエレクトロポレーションとマイクロエマルション（平均粒子径：５．９ｎｍ）とを併用した場合には、血清中カルシウム濃度は２時間経過時までに投与前の６９％まで低下した。これに対して、比較例２ー１すなわちエレクトロポレーションとエマルション（平均粒子径：４．３μｍ）の併用では、血清中カルシウム濃度は２時間経過時までに投与前の９０％までしか低下しなかった。
【００３０】
この事実は、粒子径の小さいマイクロエマルションの場合には、エレクトロポレーションにより形成された非常に小さい孔を透過することができ、そこに封入されたｓＣＴがＳＤラット体内に吸収されるために血清中のカルシウム濃度が低下するが、粒子径のやや大きいエマルションを用いるとエレクトロポレーションによる形成された孔を透過させることができないため、ｓＣＴも吸収されず、血清中のカルシウム濃度もほとんど低下しないことを示している。本実験例によりエレクトロポレーションと組み合わされるマイクロエマルションの粒子径の重要性が確認された。
【００３１】
〔実験例３〕
以下に示す処方でマイクロエマルション製剤を調製した。マイクロエマルションの粒子径は実施例１ー１と同様に測定した。
《実施例３ー１》
下記表１の各成分を混合してマイクロエマルションを得た。このマイクロエマルションの平均粒子径は２５ｎｍであった。図２のマイクロエマルション保持層として不織布を使用し、そこにマイクロエマルションを含浸させてエレクトロポレーション用製剤を調製した。
【表    １】
0003898250.tif 000002
【００３２】
《実施例３ー２》
下記表２の各成分を混合してマイクロエマルションを得た。このマイクロエマルションの平均粒子径は３０ｎｍであった。図２のマイクロエマルション保持層としてカルボキシルメチルセルロースナトリウムゲルを用い、そこにマイクロエマルションを分散させてエレクトロポレーション用マイクロエマルション製剤を調製した。
【表    ２】
0003898250.tif 000003
【００３３】
《実施例３ー３》
下記表３の各成分を混合してマイクロエマルションを得た。このマイクロエマルションの平均粒子径は４５ｎｍであった。図２のマイクロエマルション保持層としてセルロースアセテート膜を用い、そこにマイクロエマルションを含浸させてエレクトロポレーション用マイクロエマルション製剤を調製した。
【表    ３】
0003898250.tif 000004
【００３４】
【発明の効果】
本発明は、エレクトロポレーションにより皮膚や粘膜に透過ルートの孔を生じさせ、そこから吸収性のよい粒子径の小さいマイクロエマルションに封入した薬物を吸収させることにより、従来技術に比べ高い薬効を得ることができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】エレクトロポレーション用電極の例を示す図。
【図２】エレクトロポレーション用マイクロエマルション製剤の使用態様を示す例。
【図３】実施例１ー１（比較例１ー１も同じ）で調製したマイクロエマルションの粒度分布を示す図。
【図４】実験例１における薬物投与前の血清中カルシウム濃度に対する薬物投与後の血清中カルシウムの割合（％）を示す図。
【図５】実験例２における薬物投与前の血清中カルシウム濃度に対する薬物投与後の血清中カルシウムの割合（％）を示す図。
【符号の説明】
１  絶縁性高分子フィルム
２  電極
３  電極
４  粘着層
５  マイクロエマルション保持層
【図１】
0003898250.tif 000005
【図２】
0003898250.tif 000006
【図３】
0003898250.tif 000007
【図４】
0003898250.tif 000008
【図５】
0003898250.tif 000009