(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
蕎麦殻を水または有機溶剤単独、またはそれらの混合液で抽出処理して得られるエキスを有効成分とするコレステロール低下剤、中性脂肪低下剤または高脂血症改善剤。
【請求項２】
蕎麦殻を抽出処理して得られるエキスを分画精製した分子量１万以下の成分を有効成分とする請求項１に記載のコレステロール低下剤、中性脂肪低下剤または高脂血症改善剤。
【請求項３】
蕎麦殻を抽出処理して得られるエキスを分画精製したポリフェノール画分を有効成分とする請求項１に記載のコレステロール低下剤、中性脂肪低下剤または高脂血症改善剤。
【請求項４】
請求項１乃至３のいずれかに記載のコレステロール低下剤。
【請求項５】
請求項１乃至３のいずれかに記載の中性脂肪低下剤。
【請求項６】
請求項１乃至３のいずれかに記載の高脂血症改善剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は蕎麦殻より得られるエキス、これを分画精製して得られる分子量１万以下の成分、及びこれをさらに分画して得られるポリフェノール画分を有効成分とする過酸化脂質抑制剤、過酸化脂質抑制剤、コレステロール低下剤、中性脂肪低下剤及び高脂血症改善剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
蕎麦は日本で古くから食用に用いられている最もポピュラーな食品の一つである。また、年越し蕎麦、引っ越し蕎麦として親しまれているように、日本人には蕎麦に対する健康志向が高く、実際、毛細血管を強くし高血圧症に有効な成分としてルチンが知られている。動物実験等においても、高血圧症、動脈硬化症、糖尿病等に効果が認められている（女子栄養大学紀要，２２巻，２５〜３０（1991）等）。蕎麦は、古来より救荒作物として栽培され、種実から得られた胚乳部を粉にし、蕎麦粉として食用とされてきた。この際除かれた種皮（蕎麦殻）は、枕への充填材料などに利用されているが、その殆どは焼却等の廃棄処分となっているのが現状である。また、蕎麦殻に含まれる成分については殆ど有効な利用が行なわれていない。蕎麦には良質なタンパク質、ビタミンＢ群、食物繊維のほかルチン等のフラボノイド類が含まれることが知られている。蕎麦殻については、成分に関する報告はあまり見られないが、蕎麦と同様の成分の他、ポリフェノール類が含まれていると考えられている。
【０００３】
ポリフェノール化合物は植物の２次代謝産物として植物界に普遍的、かつ多種・多量に存在することが知られているが、これらの化合物の中には多彩な生理活性を示す点で古くから、薬学、植物化学の分野などにおいて、また近年、健康食品の分野において注目されている。そのうち、特に茶ポリフェノールについての研究が盛んに行なわれており、茶ポリフェノール、特にカテキン類において、抗菌、抗ウイルス、抗突然変異、抗酸化、血圧上昇抑制、血糖上昇抑制、血中コレステロール低下、抗う蝕、抗アレルギー、腸内フローラの改善、消臭など非常に広範な生理活性を有することが知られている。
【０００４】
今日、成人病、癌、アレルギー、痴呆症などの脳疾患等の患者が増え続けており、特に今後、高齢化社会を迎え、これらの疾患、特に痴呆、アルツハイマー症候群の患者が増えることが指摘されている。これらに関して、生体内で生成する活性酸素種などが関与することが指摘されている。また、食生活の変化より、子供から大人に至る広い年齢層において、最近、脂肪の摂取過多が指摘され、血液中の中性脂肪、コレステロール値が正常範囲を超える、いわゆる高脂血症、高コレステロール血症が増えている。これらの症状は、成人病との関連が指摘されており、脳、心臓、肝臓などの臓器障害、高血圧症、糖尿病等の病因ともなっている。
【０００５】
近年、食品中の有用物質について関心が高まっており、副作用のない、安心して摂取することができる、健康食品がブームとなりつつある。特に高齢者や幼児、子供などについては副作用のない健康食品による治療法、予防法が望まれる。
【０００６】
蕎麦殻については、極性の異なる溶剤（石油エーテル、酢酸エチル、エタノール）で抽出し、抽出物を脂質に添加した時の脂質過酸化率を測定する方法で抗酸化性を評価し、エタノール抽出物で最も高い活性が認められること、エタノール抽出物中の総ポリフェノール量と脂質過酸化率との間に高い負の相関関係が認められること、蕎麦抽出液の脂質過酸化率はα−トコフェロールの１０分の１乃至２０分の１である旨の報告があるが（日本食品化学工学会誌，４２，６４９（1995））、積極的に医薬乃至健康食品として利用した例はこれまで見られない。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
このように、今後予想される高齢化社会とそれに付随する疾病を治療、予防するにあたり、食品または食品に準ずるものから有効成分を見出す必要がある。そのような中、本発明の課題は、これまで廃棄物として殆どが食品、食品添加物等に利用されていない蕎麦殻中の生理活性成分を有効利用することにある。
【０００８】
【課題を解決する為の手段】
本発明者らは、上記目的に鑑み鋭意検討し、蕎麦殻の中に含まれる生理活性画分の効率的分取法ならびに生理活性ポリフェノールの製造法について検討し、抽出、分離などの操作を行なうことにより得られた抽出物がこれまで知られていなかったような生理活性を有することを動物実験により確認して本発明を完成するに至った。
【０００９】
すなわち、本発明は
１）蕎麦殻を水または有機溶剤単独、またはそれらの混合液で抽出処理して得られるエキスを有効成分とする過酸化脂質抑制剤、コレステロール低下剤、中性脂肪低下剤または高脂血症改善剤、
２）蕎麦殻を抽出処理して得られるエキスを分画精製した分子量１万以下の成分を有効成分とする前記１に記載の過酸化脂質抑制剤、コレステロール低下剤、中性脂肪低下剤または高脂血症改善剤、
３）蕎麦殻を抽出処理して得られるエキスを分画精製したポリフェノール画分を有効成分とする前記１に記載の過酸化脂質抑制剤、コレステロール低下剤、中性脂肪低下剤または高脂血症改善剤、
４）前記１乃至３のいずれかに記載の過酸化脂質抑制剤、
５）前記１乃至３のいずれかに記載のコレステロール低下剤、
６）前記１乃至３のいずれかに記載の中性脂肪低下剤、及び
７）前記１乃至３のいずれかに記載の高脂血症改善剤を提供する。
【００１０】
以下、本発明を詳しく説明する。
本発明における蕎麦殻抽出物、抽出物中の低分子量（分子量１万以下）の活性画分、さらには抽出物を分画、精製することにより得られるポリフェノール画分は、蕎麦殻を水または有機溶媒単独、またはこれらの混合物で抽出し、ろ過、濃縮等の処理を経て得られたエキス、またはこれを吸着、分離、限外ろ過等の処理をしたものである。
【００１１】
抽出に際しては、水、アルコール、または親水性有機溶媒等が用いられる。これらを混合したものを用いても差支えない。好ましい抽出溶媒は水、あるいは水とアルコール等との混合溶媒である。
抽出は、室温抽出、加熱抽出さらには加圧抽出（オートクレーブ等の処理）等にて行なわれる。一般的には室温〜６０℃で行なわれる。抽出処理後、遠心分離等により、固形分と液体を分離し、さらに必要に応じて、ろ過等の処理を行なった後、減圧濃縮等で濃縮する。さらに、真空乾燥、凍結乾燥等により粉末化することもできる。粉末化に際して、適当な賦形剤を加えてもさしつかえない。
【００１２】
活性画分は、膜処理（限外ろ過、逆浸透等）、各種クロマトグラフィーによる分画により得られる。さらには、ポリフェノール画分の精製は抽出物を膜処理  （限外ろ過、逆浸透等）、吸着剤で処理することにより行なわれる。吸着剤としては、スチレン−ジビニルベンゼン系吸着剤、メタクリル酸系吸着剤、親水性ビニールポリマー、修飾デキストランゲル、ポリアクリルアミドゲル、逆相系シリカゲル、イオン交換樹脂等が用いられる。これらの吸着剤を用いる場合には、これに吸着する画分（以下、吸着画分とする。）にポリフェノールが含まれている。この吸着画分を含水アルコール、アルコール、アセトン等で溶出させることにより精製ポリフェノール画分が得られる。
【００１３】
一般的に低分子量の成分の方が生体内に吸収されやすいことから、限外ろ過等により分画を行なったところ、分子量が１万以下の画分に高い活性が認められた。さらにまた、抽出の際に酵素処理等を行なうことにより活性な抽出物を得ることもできる。
【００１４】
本発明に従って製造される上記蕎麦殻抽出処理物及び分画物は、マウスに投与することにより、脳、心臓、血液ならびにその他の臓器において、活性酸素種が原因となって引き起こされる生体内物質の酸化的変性に起因する疾患が抑制される。また、特にこれらのうち、過酸化脂質の生成を抑制する作用を示す。またマウスに投与することにより、高脂肪食（オリーブオイルならびにコレステロールを高含有食）摂取により上昇した血清コレステロールならびに中性脂肪を低下させることが確認された。
【００１５】
従って、本発明による蕎麦殻抽出物及び分画物は過酸化脂質抑制剤、コレステロール低下剤、中性脂肪低下剤または高脂血症改善剤として有用である。
さらに、生体内において生成する過酸化物質は老化に結びつく退行性変化の一つの原因となっており、過酸化脂質の生成を抑制すること、つまり、生体内において抗酸化作用を発揮することは、臟器等の障害、老化を防ぐこととなる。特に高齢化社会に伴い、近年脳の老化からくる、痴呆症等の脳機能障害が増えているがこれらに対しても有効である。
【００１６】
また、これらの相乗的作用により、脳疾患すなわち脳卒中、脳痴呆、アルツハイマー症、脳梗塞、脳血管障害、記憶障害等の改善、予防効果が期待される。また、その他、血液系においても、成人病すなわち高コレステロール血症、高脂血症、動脈硬化症、高血圧症、虚血性疾患などの心疾患、さらには各種臓器障害についての改善ならびに予防が期待される。
【００１７】
なお、本発明による蕎麦殻より得られるエキス、これを分画精製して得られる分子量１万以下の成分、及びこれをさらに分画して得られるポリフェノール画分には毒性は認められず、医薬品として十分安全に使用できることが確認された。
【００１８】
本発明による蕎麦殻より得られるエキス、これを分画精製して得られる分子量１万以下の成分、及びこれをさらに分画して得られるポリフェノール画分を上記の目的で用いるには、通常、全身的または局所的に、経口または非経口の形で投与されるが、経口投与が好ましい。
投与量は、年齢、体重、症状、治療効果、投与方法、処理時間等により異なるが、通常、成人一人当たり、一回につき、１００ｍｇから６００ｍｇの範囲である。
本発明化合物を投与する際には、経口投与のための固体組成物、液体組成物及びその他の組成物、非経口投与のための注射剤等として用いられる。
経口投与のための固体組成物には、錠剤、丸剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、シロップ剤等が含まれる。
【００１９】
【実施例】
次に抽出成分の製造実施例及び試験例を挙げ、本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれらの範囲内に限定されるものではない。
製造例：蕎麦殻エキスの製造法とその分画物の製造法
北海道産蕎麦種子より蕎麦粉を得た後の蕎麦殻１ｋｇに水４リットル、エタノール４リットルを加え、５０℃で４時間抽出処理を行なった。得られた抽出液をろ過したのち、減圧下濃縮、乾固し、蕎麦殻抽出エキス60.5ｋｇを得た。
このうち、エキス１０ｋｇを水５００ｍｌに溶解し、限外ろ過膜（アドバンテックウルトラフィルターＱ１００、分画分子量10000 ）にて適宜水を加えて分画し、分子量１万以上の画分を除いたのち、得られた画分を減圧濃縮し、3.5 ｇの分画物を得た。
また、このエキス１０ｇを水２０ｍｌに溶解し、Ｓｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０（フォルマシア社製、修飾デキストランゲル）で分画し、これに吸着したポリフェノール画分3.8 ｇを得た。それぞれ得られたエキスならびに分画物を以下の試験に用いた。
【００２０】
試験例１：上記抽出エキスならびに分画物の脳ならびにその他の臓器における抗酸化作用
ｄｄＹ系雄マウス８周齢を一群５匹として、コントロール、蕎麦殻抽出エキス、分画分子量１万以下の画分、及びポリフェノール画分の４群に分割した。コントロールについては通常食を、その他のものについては各々１％の比率で餌に混合したもの１週間投与した。投与開始から８日間にマウスを解剖し、血液、脳ならびに心臓を摘出しサンプルとした。各々のサンプルについて、過酸化脂質量及び酸化変性物質量を測定した。
【００２１】
過酸化脂質量は、各サンプルを２−チオバルビツール酸（以下、ＴＢＡと略す。）と反応する過酸化脂質量を求める方法により測定した。
すなわち、試験管に生理食塩水１ｍｌ、血液0.05ｍｌまたは臓器をホモジェナイズしたサンプル１００μｌを入れ、3000ｒｐｍで１０分間遠心分離した。この上清0.5 ｍｌにＮ／１２硫酸4.0 ｍｌを加え撹拌し、これに１０％リンタングステン酸水溶液0.5 ｍｌを加え撹拌した後５分間放置した。これを3000ｒｐｍで１０分間遠心分離し、生じた沈殿に再びＮ／１２硫酸2.0 ｍｌを加え撹拌し、これに１０％リンタングステン酸水溶液0.3 ｍｌを加え撹拌した後、これを3000ｒｐｍで１０分間遠心分離し沈殿を得た。この沈殿に水4.0 ｍｌを加え、懸濁させた後ＴＢＡ試薬（２−チオバルビツール酸3.35ｍｇ／ｍｌ、酢酸8.8 ｍｏｌ／ｌ）1.0 ｍｌを加え、沸騰水浴上で６０分間加熱した後、流水で冷却した。得られた反応物にｎ−ブタノール5.0 ｍｌを加え、よく混合して、反応生成物をブタノール層に抽出して、3000ｒｐｍで１０分間遠心分離を行ない、上層のブタノール層について励起波長５１５ｎｍ、蛍光波長５５３ｎｍにて蛍光を測定した。蕎麦殻抽出エキス、分画分子量１万以下の画分、ポリフェノール画分、及びコントロールの各サンプルについての測定結果を図１〜図３に示す。図中の縦軸は蛍光強度であり、コントロールとの相対的強度が分かるよう任意目盛で示している。図１は血液中の過酸化脂質とＴＢＡ試薬の反応生成物の蛍光強度、図２は脳中の過酸化脂質とＴＢＡ試薬の反応生成物の蛍光強度、図３は心臓中の過酸化脂質とＴＢＡ試薬の反応生成物の蛍光強度を示す。
【００２２】
図１〜図３から明らかなごとくコントロール群に比較し、蕎麦殻エキス投与群、分画分子量１万以下投与群、ならびにポリフェノール画分投与群は、いずれも血液、脳、心臓において過酸化脂質の生成を制御した。特に、血液ならびに脳において顕著に認められた。
また、酸化変性物質量はＢｌｉｇｈ−Ｄｙｅｒ法を用いて測定した。Ｂｌｉｇｈ−Ｄｙｅｒ法は生体内で活性酸素種により酸化的変性を受け生成した脂溶性の蛍光物質を抽出し、直接その蛍光強度を測定する方法である。すなわち、各サンプルをリン酸バッファーでホモジェナイズしたのち、蛍光物質を抽出し、妨害物質を除去したのち、得られた酸化変性物質を蛍光法を用いて求めるものである。
【００２３】
脳及び心臓のサンプルについては重量比で４倍量のリン酸バッファー（ｐＨ7.4 ）を加えた。また、血液サンプルは血液５０μｌに生理食塩水2450μｌを加え、混合したのち3000ｒｐｍで１０分間遠心分離し、得られた沈殿部に蒸留水１ｍｌを加えたものを用いた。臓器ホモジェナイズ液２００μｌ及び血液サンプル全量に、クロロホルム−メタノール混合溶液（１：２）４ｍｌを加えて、3000ｒｐｍで１０分間遠心分離した。この上清3.5 ｍｌ採取し、さらにクロロホルム３ｍｌ、蒸留水６ｍｌを加え、混合し3000ｒｐｍで１０分間遠心分離し、下層を採取し、蒸留水３ｍｌを加え、混合し3000ｒｐｍで１０分間遠心分離し、さらに１分間紫外線を照射したのち、下層について励起波長３５７ｎｍ、蛍光波長４２８ｎｍにて蛍光を測定した。結果を図４〜図６に示す。図中の縦軸は図１〜３と同様にコントロールとの相対的強度が分かるよう任意目盛で示した蛍光強度である。図４は血液中の酸化変性物質の蛍光強度、図５は脳中の酸化変性物質の蛍光強度、図６は心臓中の酸化変性物質の蛍光強度を示す。
【００２４】
図４〜図６から明らかなごとく、コントロール群に比較し、蕎麦殻エキス投与群、分画分子量１万以下投与群、ならびにポリフェノール画分投与群は、いずれの画分においても血液、脳、心臓において酸化変性物質の生成を抑制した。特に、血液ならびに脳において顕著に認められた。
【００２５】
試験例２：血清中コレステロール低下作用及び中性脂肪低減作用
ｄｄＹ系雄マウス８周齢を一群５匹として、コントロール、蕎麦殻抽出エキス、分画分子量１万以下の画分、ならびにポリフェノール画分の４群に分割した。まず、全ての群について、オリーブオイルならびにコレステロールを餌に混ぜたもの（高脂肪食）を２週間投与したのち、コントロールについては通常食を餌としたものを、その他のものについては各々１％の比率で通常食餌に混合したものを１週間投与した。サンプル投与開始から８日目にマウスを解剖し、血液を採取し、血清コレステロール値（総コレステロール）ならびに中性脂肪量（トリグリセライド）を測定した。蕎麦殻抽出エキス、分画分子量１万以下の画分、ポリフェノール画分、及びコントロールの各サンプルについての測定結果（濃度：ｍｇ／ｍｌ）を図７及び図８に示す。図７は血液中コレステロールの量を、図８は血液中トリグリセライドの量を示す。
【００２６】
図７ならびに図８から明らかなように、蕎麦殻抽出エキス投与群、分画分子量１万以下画分投与群ならびにポリフェノール画分投与群には、上昇したコレステロールの量を低下させる作用が認められる。
【００２７】
【発明の効果】
本発明は、従来、殆どが廃棄され食品ならびに食品添加物として利用されていなかった蕎麦殻を抽出処理したエキスならびに適宜分画した画分を有効成分とする過酸化脂質抑制剤、コレステロール低下剤、中性脂肪低下剤及び高脂血症改善剤を提供するものである。
製造原料の蕎麦殻については、安定供給が可能であり、未利用資源の活用という新たな用途開発とあいまって、本発明は産業に著しく貢献するものである。
本発明により、蕎麦殻から優れた酸化変性抑制、脂質過酸化抑制等の効果を示すエキスを多量に生産できる。本発明によるエキスは、食品、健康食品、食品添加物として安全に利用できる。
【図面の簡単な説明】
【図１】  蕎麦殻抽出エキス、分画分子量１万以下の画分、及びポリフェノール画分を投与したマウスについて血液中の過酸化脂質とＴＢＡ試薬との反応生成物の蛍光強度を比較したグラフである。
【図２】  蕎麦殻抽出エキス、分画分子量１万以下の画分、及びポリフェノール画分を投与したマウスについて脳中の過酸化脂質とＴＢＡ試薬との反応生成物の蛍光強度を比較したグラフである。
【図３】  蕎麦殻抽出エキス、分画分子量１万以下の画分、及びポリフェノール画分を投与したマウスについて心臓中の過酸化脂質とＴＢＡ試薬との反応生成物の蛍光強度を比較したグラフである。
【図４】  蕎麦殻抽出エキス、分画分子量１万以下の画分、及びポリフェノール画分を投与したマウスについて血液中の酸化変性物質の蛍光強度を比較したグラフである。
【図５】  蕎麦殻抽出エキス、分画分子量１万以下の画分、及びポリフェノール画分を投与したマウスについて脳中の酸化変性物質の蛍光強度を比較したグラフである。
【図６】  蕎麦殻抽出エキス、分画分子量１万以下の画分、及びポリフェノール画分を投与したマウスについて心臓中の酸化変性物質の蛍光強度を比較したグラフである。
【図７】  蕎麦殻抽出エキス、分画分子量１万以下の画分、及びポリフェノール画分を投与したマウスについて血液中コレステロールの量（ｍｇ／ｍｌ）を比較したグラフである。
【図８】  蕎麦殻抽出エキス、分画分子量１万以下の画分、及びポリフェノール画分を投与したマウスについて血液中トリグリセライドの量（ｍｇ／ｍｌ）を比較したグラフである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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