(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
バクチオールを有効成分として含有することを特徴とする美白剤。
【請求項２】
バクチオールを含有する補骨脂有機溶媒抽出物にフロクマリン誘導体およびフラボノイド類を除去する精製処理を施してなるチロシナーゼ阻害物質を有効成分として含有することを特徴とする美白剤。
【請求項３】
請求項１または請求項２のいずれかに記載の美白剤を含有することを特徴とする美白化粧料。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、新規な美白剤および美白作用を有する化粧料に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
人の皮膚の着色、黒化やシミ、ソバカスの増大は、ホルモンの分泌異常や代謝障害等の内的因子によって生じることもあるが、むしろ、太陽光由来の紫外線によって直接または間接的にメラノサイトが刺激され活性化されて生じる場合が圧倒的に多い。すなわち、メラノサイトの活性化により異常産生された生体黒色色素・メラニンが表皮細胞に受け渡されたり皮膚の特定箇所に集中的に蓄えられたりすることによって、皮膚の着色やシミ・ソバカスの増加が進む。
【０００３】
上述のような機構による皮膚の着色、シミ、ソバカス等の増加を防止し白い肌を保つ手段として、従来、メラノサイトにおけるメラニン産生に強くかかわっている酵素・チロシナーゼの活性を阻害する物質の使用が検討され、有効な物質として、ビタミンＣおよびその誘導体、コウジ酸、ハイドロキノン、アルブチン、エラグ酸等が確認されている。
【０００４】
しかしながら、これらの薬剤は皮膚を刺激したりアレルギーの原因となったりすることがあるほか、熱や光に対する安定性、保存安定性などが十分でないこともあり、十分満足できるものではなかった。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
そこで本発明の目的は、紫外線による皮膚の着色、シミ、ソバカス等の増加抑制と防止に有効で保存安定性にも優れ、化粧品、医薬品、医薬部外品等へ容易に配合可能な新規チロシナーゼ阻害物質を安全性が高い植物成分中から見いだし、美白剤および美白化粧料として提供することにある。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
上記目的を達成することに成功した本発明の美白剤は、モノテンペンフェノール誘導体の一種であるバクチオールを有効成分として含有するものである。
バクチオールは下記化１の構造を有する常温で無色油状の化合物である。エタノール、メタノール、アセトン、クロロホルム、塩化メチレン、酢酸エチル等によく溶けるが、水にはほとんど溶けない。
【０００７】
【化１】
0003900388.tif 000002
【０００８】
本発明の美白剤および美白化粧料の有効成分であるバクチオールは、黒色色素メラニンの合成に関与するチロシナーゼの活性を阻害する作用があり、それによりメラニンの生成を抑制し、美白作用を示す。
【０００９】
バクチオールは化学的に合成することも可能であるが、マメ科植物・オランダビユ（Psoralea corylifolia L.）の種子（“補骨脂”の名で生薬として利用されている）に含まれているので、それを上記溶媒で抽出して利用することができる。
【００１０】
但し、補骨脂には光感作作用を有しアレルギーの原因になるフロクマリン誘導体（たとえばプソラレン、イソプソラレン）が含まれていてこれらはバクチオールと共に抽出されて来るので、美白剤中に混入しないよう、抽出物を精製する過程で除去することが望ましい。
【００１１】
補骨脂にはまたフラボノイド類のババキン、ババキニン、イソババキン等が含まれていてこれらはチロシナーゼ活性阻害作用を有することが知られている。これらのフラボノイド類はバクチオールと共に抽出されて来るのでそのまま美白剤構成成分として活用することもできるが、着色物質であるため美白剤の用途を制限することがあり、したがってこれも精製工程で除去することが望ましい。
【００１２】
バクチオールを有効成分とする本発明の美白剤には、それが固形剤の場合、セルロース、デキストリン等の糖類；ソルビトール、マンニトール等の糖アルコール；その他無水硫酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、カオリン、白土等の無機化合物を賦形剤として、また液剤の場合は、エタノール、プロピレングリコール、1,3-ブチレングリコール等のアルコール類；各種植物性油脂、鉱物油、ワックス等の油脂類を溶剤として、適宜配合することにより、製剤化作業が容易になると共に製剤も使いやすいものとなる。
【００１３】
本発明の美白剤は、塗布、散布、その他任意の方法で皮膚に適用される医薬品、各種医薬部外品、化粧料等に添加して、皮膚の黒化防止、紅斑防止等のための利用に供することができる。好ましい添加量は、バクチオールとして０.００５〜５.０重量％である。その場合、必要ならば他の美白剤その他任意の薬効成分、生理活性物質等を併せて含有させることができる。
【００１４】
本発明の美白剤と併用して化粧料等に含有させることができる生理活性物質等の例としては、プロゲステロン、コルチコステロン、ハイドロコーチゾン、17β-エストラジオール、エチニルエストラジオール、エストロン等のホルモン類；ヒアルロン酸、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、コンドロイチン、ヘパリン、コンドロイチン硫酸類、キチン、キトサン等のムコ多糖類；グリセロリン脂質、スフィンゴリン脂質、グリセロ糖脂質、スフィンゴ糖脂質等の複合脂質；スーパーオキサイドディスムターゼ、カタラーゼ、β−カロチン、油溶性甘草抽出物、グラブリジン、リコカルコンＡ、バイカリン、バイカレイン、イチョウ抽出物、ソウハクヒ抽出物、クジン抽出物、ハマメリス抽出物その他の活性酸素消去作用を有する物質；アラントイン、グアイヤアズレン、カマアズレン、ステアリルイプシロンアミノカプロン酸、インドメタシン、酸化亜鉛等の抗炎症作用を有する物質；アルニカ抽出物、インチンコウ抽出物、オウゴン抽出物、オウバク抽出物、カミツレ抽出物、カンゾウ抽出物（水抽出物）、サンシシ抽出物、シコン抽出物、シャクヤク抽出物、ボタンピ抽出物、ジュウヤク抽出物、シラカバ抽出物、西洋トチノキ種子抽出物、トウキンセンカ抽出物、ムクロジ抽出物、ローズマリー抽出物、セイヨウノコギリ草抽出物、ヨモギ抽出物、ヨクイニン抽出物、アロエ抽出物、ジオウ抽出物、センキュウ抽出物、サイコ抽出物、ボウフウ抽出物、ヨクイニン抽出物、ヘチマ抽出物等の抗炎症・抗アレルギー作用を有する植物抽出物；コラーゲン、加水分解コラーゲン、エラスチン、ビトロネクチン、フィブロネクチン、プラセンターエキス、ロイヤルゼリー、コンキオリン加水分解物等の動物性抽出物；レチノール、レチナール、レチノイックアシッド、パントテン酸、パンテノール、リボフラビン、ピリドキシン、トコフェロール、アスコルビン酸、葉酸、ニコチン酸等のビタミン類；核酸およびその塩基類；アミノ酸類；コレステロール類；植物ステロール類；リポプロテイン類；ビフィズス菌発酵物、乳酸菌発酵物、酵母抽出物、レイシ菌糸体抽出物等の微生物由来のもの；グリチルリチン酸、グリチルレチン酸、ステアリルグリチルレチン酸等のグリチルレチン酸誘導体；α−ヒドロキシ酸等の有機酸；等がある。
【００１５】
バクチオールを含有させる美白化粧料等としては、液剤、軟膏剤、乳液剤、パック剤、ハップ剤、散布剤、石鹸、クリーム、リンス、浴剤等、任意の剤形のものが可能である。それを製造する場合に使用する助剤にも制限はなく、各種動植物性油脂、ワックス、高級脂肪酸、鉱物油、エタノール、グリセリン、1,3-ブチレングリコール等のアルコール類、界面活性剤、増粘剤、酸化防止剤、防腐剤、香料、着色剤等、通常使用される助剤をいずれも使用することができる。
【００１６】
【実施例】
バクチオール抽出・精製例１
補骨脂１kgを１０リットルの無水エタノールに浸漬し、２時間還流下に加熱した。その後、濾過し、残渣は再び１０リットルの無水エタノールに浸漬し、同様に処理した。上記２回の処理で得られた抽出液を合わせて減圧下に濃縮、乾燥し、１４０.８ｇの抽出物を得た。
【００１７】
この抽出物に水５００mlとクロロホルム５００mlを加え、液−液向流分配によりクロロホルム層を得た。水層にはさらに５００mlのクロロホルムを加え、同様に２回処理した。クロロホルム層を合わせて減圧下に濃縮し乾燥した結果、１２７.２ｇの抽出物を得た（以下、この抽出物を抽出物Ａという）。
【００１８】
抽出物Ａ全量を４リットルのシリカゲルカラムに載せ、ヘキサン：酢酸エチル＝２：１の混合溶剤７リットルを通液し、通過液を減圧下に濃縮し、固形物３０.４ｇを得た（以下、これを抽出物Ｂという。バクチオールと共に抽出されたフラボノイド類はここまでの精製で除去された。）。
【００１９】
抽出物Ｂ２８.７ｇを５リットルのシリカゲルカラムに載せ、ヘキサン：酢酸エチル＝７：１の混合溶剤５リットルを通液したのちカラムを洗浄した（バクチオールと共に抽出されたフロクマリン誘導体はここまでの精製で除去された）。次いで、ヘキサン：酢酸エチル＝６：１の混合溶剤５リットルを通液し、通過液を減圧下に濃縮し、淡褐色油状のバクチオール画分８.６ｇを得た（以下、これをバクチオール画分▲１▼という。）。
【００２０】
バクチオール抽出・精製例２
補骨脂２００ｇを９０重量％エタノール水溶液２リットルに浸漬し、還流下に２時間加熱した。濾過後、残渣を再び９０重量％エタノール水溶液２リットルに浸漬、同様に操作した。得られた抽出液を合わせて減圧下に濃縮し、３７.３ｇの抽出物を得た。この抽出物に５０重量％エタノール水溶液を５００ml加え、十分に撹拌溶解したのちケイソウ土を濾過助材に用いて濾過し、澄明液を得た。これを、合成高分子吸着体（ダイヤイオンＨＰ−２０；三菱化学株式会社製品）５００mlを充填したカラムにＳＶ＝１で通液し、次にカラムを５０重量％エタノール水溶液２.５リットルで洗浄した（バクチオールと共に抽出されたフロクマリン誘導体およびフラボノイド類はここまでの精製で除去された）。
【００２１】
この後、カラムに８５重量％エタノール水溶液３リットルを通液し、通過液を減圧下に濃縮して、褐色のペースト状物を得た（収量８.３ｇ；以下、バクチオール画分▲２▼という）。
【００２２】
上記各例の抽出物およびバクチオール画分について、高速液体クロマトグラフィーによりバクチオールおよびプソラレンの定量分析を行なった。分析結果を表１に示す。
【００２３】
【表１】
0003900388.tif 000003
【００２４】
バクチオール画分▲１▼の一部はさらに精製して、純度９９.８％の精製バクチオールを得た。
【００２５】
実施例１
前記各例によるバクチオール画分▲１▼，▲２▼および精製バクチオールについて、下記の試験法でチロシナーゼに対する阻害活性を調べた。その結果は表２のとおりであった。
【００２６】
チロシナーゼ阻害活性試験法：０.０５％チロシン溶液に試料を溶解した試料溶液０.５ml、チロシナーゼ溶液〔シグマ社製チロシナーゼ製剤（力価3,400unit/mg）の濃度60μg/mlの溶液〕０.７ml、および1/15Ｍリン酸緩衝液（pＨ６.８）１.８mlを混合し、３７℃で１時間反応させ、４７５nmにおける吸光度Ａ1を測定する。吸光度Ａ1は、チロシンから生成したメラニン等一連の着色成分の濃度に比例する。試料無添加の場合についても同様に操作して、４７５nmにおける吸光度Ａ0を測定し、下記の式からチロシナーゼ阻害率を算出する。
チロシナーゼ阻害率（％）＝（１−Ａ1／Ａ0）×１００
【００２７】
試料溶液の試料濃度を段階的に変更して上記阻害率を測定し、阻害率が５０％を示す試料濃度を内挿法により求め、それをＩＣ50として表示する。
【００２８】
【表２】
0003900388.tif 000004
【００２９】
実施例２
美白剤として前記バクチオール画分▲２▼を用いた下記処方の本発明クリームおよびバクチオール画分▲２▼を添加しないほかは同様組成の対照品を常法により製造した（数値は重量％)。
【００３０】
0003900388.tif 000005
【００３１】
次に、上記クリームＡ，Ｂについて下記の方法により美白作用の試験を行なった。
【００３２】
試験法：褐色モルモットの背部を除毛し、そこに０.１％のオクソラレンを塗布し、３０分後にＰＵＶＡを１J/cm2照射する。ＰＵＶＡを照射した領域の一部を２cm×２cmの３区画に区切り、そのうちの二つの区画には上記クリームＡ，Ｂのいずれか一方をＰＵＶＡ照射直後と１２時間後に塗布する。１区画には何も塗布しない。照射２４時間後、生じた紅斑の濃度を肉眼観察により判定する。さらに、上記ＰＵＶＡ照射領域のうち上記紅斑抑制効果確認試験に用いなかった部分で１週間後に色素の沈着が認められた部位を２cm×２cmの３区画に区切り、二つの区画に上記クリームＡ，Ｂのいずれか一方を朝夕各１回、７日間連続で塗布する（１区画には何も塗布しない）。クリームの塗布開始から７日後、各区画について色素沈着による着色増加度を肉眼観察で比較し、クリーム塗布開始後も進行する色素沈着がクリームにより抑制された程度を判定する。
【００３３】
試験結果は下記のとおりであった。
紅斑抑制効果：
無塗布≦クリームＢ≪クリームＡ
色素沈着抑制効果：
無塗布≦クリームＢ≪クリームＡ
【００３４】
実施例３
下記の原料を乳液製造の常法により均一に乳化させて、美白作用を有する乳液を製造した（数値は製品に対する重量％)。
ステアリン酸                  ２.０
セタノール                    １.５
ワセリン                      ３.０
ラノリンアルコール            ２.０
流動パラフィン              １０.０
ポリオキシエチレンモノオレイン酸エステル  ２.０
1.3-ブチレングリコール        ３.０
グリセリン                    ２.０
トリエタノールアミン          １.０
ポリエチレングリコール2000    ２.０
パラオキシ安息香酸エステル    ０.１
バクチオール画分▲１▼            ０.０５
グリチルリチン酸ステアリル    ０.１
香料                          ０.１
精製水                        残量
【００３５】
対照品として、バクチオール画分▲１▼を配合しないほかは同じ組成の乳液を製造した。
【００３６】
上記本発明実施例品および対照品について、下記の方法によりヒト皮膚への使用試験を行なった。試験結果を表３に示す。
【００３７】
試験法：２０〜４５歳の健康な被験者１５名を選び、２日間連続で１日２時間、左右上腕部に直射日光を受けさせた。その後、毎日朝夕の２回、左腕日光照射部の一定区画に本発明品を、右腕日光照射部の一定区画に対照品を、一カ月間塗布させた（この間、試験部位は直射日光を受けないよう衣服で覆わせた。）。
この後、乳液を塗布した区画とその周辺の乳液非塗布部を肉眼観察で比較し、乳液による色素沈着抑制効果を下記の判定基準により評価した。
【００３８】
◎：色素沈着がほとんどない。
○：非塗布部と比べると色素沈着がかなり少ない。
△：非塗布部と比べると色素沈着がやや少ない。
×：非塗布部と比べて色素沈着に差がない。
【００３９】
【表３】
0003900388.tif 000006
【００４０】
バクチオールを配合した本発明品は明らかに色素沈着抑制効果が優れていた。なお、一カ月間の連続塗布によりかゆみ等の皮膚刺激やアレルギー等の症状を訴えた被験者はなく、塗布面皮膚における外観異常も全く観察されなかった。