(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の工程（ｉ）を含む（ａ）ジクロフェナックまたはその薬学的に許容される塩、および２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリン、あるいは（ｂ）ジクロフェナックまたはジクロフェナックの薬学的に許容される塩と、２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンとの包接錯体、あるいは（ａ）と（ｂ）の混合物のいずれかからなる、注射用薬学または獣医学組成物の製造法。
（ｉ）（ａ）ジクロフェナックまたはその薬学的に許容される塩、および２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリン、あるいは（ｂ）ジクロフェナックまたはジクロフェナックの薬学的に許容される塩と、２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンとの包接錯体、あるいは（ａ）と（ｂ）の混合物のいずれかを、生成溶液のｐＨが６．０から８．５となるようなｐＨにリン酸塩緩衝剤の不在下で酸性化した水に溶解して溶液を形成する工程。
【請求項２】
組成物が、（ａ）ジクロフェナックまたはその薬学的に許容される塩、および２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンからなり、ジクロフェナックまたはその薬学的に許容される塩対２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンのモル比が１：１から１：１０である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
組成物が、（ｂ）ジクロフェナックまたはジクロフェナックの薬学的に許容される塩と、２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンとの包接錯体からなり、ジクロフェナックまたはその薬学的に許容される塩対２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンのモル比が１：１から１：１０である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
組成物が、（ｂ）ジクロフェナックまたはジクロフェナックの薬学的に許容される塩と、２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンとの包接錯体からなり、この錯体が、ジクロフェナックまたはその薬学的に許容される塩と、２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンとを混練または粉砕して混合することにより調製されたものである、請求項１から３のいずれかに記載の方法。
【請求項５】
２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンの平均置換度が、シクロデキストリン１分子につき２−ヒドロキシプロピル基が３．９個から５．１個である、請求項１から４のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
溶液が、１ミリリットルにつき１０ｍｇ以上のジクロフェナック濃度を有する、請求項１から５のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
（ａ）ジクロフェナックまたはその薬学的に許容される塩、および２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリン、あるいは（ｂ）ジクロフェナックまたはジクロフェナックの薬学的に許容される塩と、２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンとの包接錯体、あるいは（ａ）と（ｂ）の混合物のいずれかを水性ビヒクル中に含有していて、溶液の形態、または水性ビヒクルを用いて再形成して溶液を得るのに適当な形態であり、溶液が６．０から８．５のｐＨをもち、いかなるリン酸塩緩衝剤も含んでいない、注射用薬学または獣医学組成物。
【請求項８】
組成物が、（ａ）ジクロフェナックまたはその薬学的に許容される塩、および２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンからなり、ジクロフェナックまたはその薬学的に許容される塩対２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンのモル比が１：１から１：１０である、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
組成物が、（ｂ）ジクロフェナックまたはジクロフェナックの薬学的に許容される塩と、２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンとの包接錯体からなり、ジクロフェナックまたはその薬学的に許容される塩対２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンのモル比が１：１から１：１０である、請求項７に記載の組成物。
【請求項１０】
モル比が１：１．５から１：２．５である、請求項８または請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンの平均置換度が、シクロデキストリン１分子につき２−ヒドロキシプロピル基が３．９個から５．１個である、請求項７から１０のいずれかに記載の組成物。
【請求項１２】
組成物が、１ミリリットルにつき１０ｍｇ以上のジクロフェナック濃度を有する、請求項７から１１のいずれかに記載の組成物。
【請求項１３】
組成物が、１ミリリットルにつき２５ｍｇのジクロフェナック濃度を有する、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
単位投与量の形態に製剤化され、それぞれの単位投与量がジクロフェナックを１０ｍｇから１５０ｍｇ含む、請求項７から１３のいずれかに記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の背景
本発明は、ジクロフェナックまたはその薬学的に許容される塩および２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリン、あるいはジクロフェナックまたはジクロフェナックの薬学的に許容される塩と２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンとの包接錯体のいずれを含んでなる、注射可能な薬学または獣医学組成物の製造法、およびそのように形成される注射可能な組成物に関する。
【０００２】
ジクロフェナックは、シクロオキシゲナーゼ酵素のアセチル化によるプロスタグランジンの合成を阻止する、非ステロイド系の抗炎症剤である。外傷やさまざまなその他の刺激により放出されるプロスタグランジンは、直接的には痛みの原因にはならないが、発痛物質の影響に対する神経末端の感受性を増して痛覚過敏を引き起こす。
【０００３】
急性の痛みを最大限に軽減したり、術後の痛みを予防するには、薬剤は、投与後、できるだけすぐに全身に行き渡らなければならない。これは、静脈内投与により達成される。
【０００４】
さらに或る場合には、薬剤の経口投与が不可能であるか、または望ましくない。例えば、急性の痛みの症状、例えば偏頭痛、外傷、月経困難症状、腎仙痛および胆石仙痛はしばしば吐き気や嘔吐を伴うので、経口投与は有効ではなくなる。このような症状下では、胃内容排出も手間取る。さらに、手術を受ける患者は、普通、手術前に絶食させられるが、この時の鎮痛剤の投与には非経口経路が望ましい。
【０００５】
したがって、急性の痛みの症状、および術後の患者の両方を治療するための、ジクロフェナックまたはその薬学的に許容される塩を含有する、注射可能な組成物が必要である。
【０００６】
しかしながら、ジクロフェナック、およびそのナトリウム塩の溶解性は、生理学的ｐＨ付近の水溶液においては非常に小さい。したがって、ジクロフェナック、またはジクロフェナックナトリウムの非経口用の、または注射可能な製剤は可溶化剤、例えばプロピレングリコール、の使用を必要とする。市販の製剤は、深筋肉注射に対して厳しい制限をこうむっている。
【０００７】
「ＮＳＡとシクロデキストリンおよびヒドロキシプロピルシクロデキストリン誘導体との相互作用（Interaction of NSA with cyclodextrins and hydroxypropyl cyclodextrin derivatives）」と題された、International Journal of Pharmaceutics, 74 (1991), 85-93中のバッケンスフェルト（Backensfeld)、ミューラー（Muller) およびコルター（Kolter) による論文には、ヒロドキシアルキル化シクロデキストリン誘導体を用いて、ＮＳＡインドメタシン、ジクロフェナックおよびピロキシカムの水溶性、および安定性を高める研究が開示されている。酸素を含む、および含まないジクロフェナック溶液が、ジクロフェナックの安定性試験用に調製された。これらの溶液は、ジクロフェナックナトリウム（６．３ｘ１０-3Ｍ、１ミリリットルにつきジクロフェナックナトリウム２．０ｍｇに相当）とｐＨ７．４のリン酸塩緩衝剤を混合することにより調製され、二倍量（１２．６ｘ１０-3Ｍ）のβ−シクロデキストリン（β−ＣＤ）、またはＭＳが０．３９（シクロデキストリン１分子につきヒドロキシプロピル基が２．７３個である平均置換度（Ｄ．Ｓ．）に相当）であるヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）に溶かされた。それぞれのバッチは０．２２μｍの膜状フィルターを通してろ過され、殺菌した５ｍｌのガラスアンプルに充填された。この研究では、ＣＤ誘導体がジクロフェナック溶液に対してもっとも安定化効果を有すると結論づけているが、短期間の貯蔵中に結晶性のジクロフェナックの沈殿が観察されることから、添加剤の不足している溶液が物理的に不安定であることも見いだされた。このことは、これらの溶液を、注射可能な組成物の調製に不適当なものとする。
【０００８】
シクロデキストリンとジクロフェナックとの包接錯体に関連して、以下のさらなる先行技術が知られている。
【０００９】
（１）β−シクロデキストリン、および特にヒドロキシアルキルエーテル誘導体が、ジクロフェナックの水溶性を増すと報告されている〔シクロデキストリンおよびシクロデキストリンエーテルによる非ステロイド系リウマチ治療薬の可溶化および安定化（Solubilization and Stabilization of Non-Steroidal Antirheumatics with Cyclodextrins and Cyclodextrin Ethers)、 Backensfeld, T.および Mueller, B.W., Arch. Pharm., 1990, 323, 690〕。
【００１０】
（２）温度とｐＨの関数としての、ジクロフェナックとβ−シクロデキストリンとの相互作用が報告されている〔非ステロイド系抗炎症剤とβ−シクロデキストリンとの包接錯体（Inclusion Complexes between Non Steroidal Antiinflammatory Drugs and  β-Cyclodextrin)、Orienti, I., Fini, A., Bertasi, V.および Zecchi, V., Eur. J. Pharm. Biopharm., 1991, 37, 110-112〕。
【００１１】
上記の研究（１および２）は、さまざまな条件下における、過剰のジクロフェナックナトリウムの溶解性に対するシクロデキストリンの濃度増加効果の測定を含む、相溶解度分析にたよっている。固体の包接錯体の調製、または単離についての記述はない。
【００１２】
（３）β−シクロデキストリンを有するジクロフェナック（酸）錯体の拡散性が報告されている〔ＮＳＡＩＤＨβ−シクロデキストリン包接錯体の利用可能性（Availability of NSAIDH  β-Cyclodextrin Inclusion Complexes)、Orienti, I.,Cavallari, C. および Zecchi, V., Arch. Pharm. (Weinhein) 1989, 322, 207-211 〕。エチルエーテルに溶解した薬剤をシクロデキストリンの水溶液に添加し、２４時間攪拌し、冷却し、生成物を単離し、エチルエーテルで洗浄し、乾燥させることを含む前述の共沈殿法により、錯体を調製した。錯体の特性は明らかにされておらず、また化学量論比は１：１であると仮定しているにすぎない。
【００１３】
（４）ジクロフェナックナトリウムとβ−シクロデキストリンとの包接錯体が、水−有機系からの同時結晶化により調製されている〔オルトフェンおよびインドメタシンと、β−シクロデキストリンとの包接化合物の調製、およびそれらの微分熱重量分析（Preparing the inclusion compounds orthophen and indomethacin with β-cyclodextrin and their derivatographic analysis）、Nekroshus, E.S. および Reshetnyak, V.Y., Farmatsiya Moscow, 1989, 38, 29-34)。微分熱重量分析と薄層クロマトグラフィーの結果から、薬剤とシクロデキストリンとの包接が１：２のモル比であることの証拠が得られる。
【００１４】
（５）ジクロフェナックナトリウムとβ−シクロデキストリンとの包接錯体が、架橋した卵白とヒドロキシプロピルメチルセルロースを用いて、ミクロスフェアとして製剤化された〔アルブミンミクロスフェア、およびジクロフェナックナトリウムを含有するβ−シクロデキストリン包接錯体（Albumin Microspheres and  β-cyclodextrin Inclusion Complex Containing Diclofenac Sodium) 、Devi, S.G.等、Ind. J. Pharm. Sci., 1992, 54, 259-261〕。透析膜を通る薬剤の拡散により測定されるように、この錯体の遊離ジクロフェナックナトリウムの全体的な放出は不良であった。錯体の調製の詳細は記載されておらず、また錯体化したことの証拠をもたらす分析方法も記載されていない。
【００１５】
上記の研究（３および４）では、錯体形成のためのいわゆる共沈殿法が記載されている。共沈殿法は、一般的に錯体の収率が低いことが知られている。〔非ステロイド系抗炎症剤およびその他の水にわずかに可溶な薬剤と、α−およびβ−シクロデキストリンとの粉末状の包接化合物（Inclusion Compounds of Non-Steroidal Antiinflammatory and Other Slightly Water Soluble Drugs with α- and β-Cyclodextrins in Powdered Form)、Kurozumi, M.等, Chem. Pharm. Bull., 1975,  23, 3062-3068) 。
【００１６】
（６）Australian Commercial Research and Development LimitedのＰＣＴＷＯ９０／０２１４１は、少なくとも一つのＣ２、Ｃ３またはＣ６ヒドロキシルがＮＨ2 で置換されているアミノシクロデキストリン誘導体からなる包接錯体、およびＣ２、Ｃ３またはＣ６ヒドロキシルが特定のリストから選ばれる基により置換されている少なくとも一つの置換を有するシクロデキストリンからなり、錯体の有効成分が例えばジクロフェナックである包接錯体を教示している。さらにこの文献は、このような包接錯体を含有する経口投与用の薬剤組成物にも言及している。
【００１７】
（７）武田薬品株式会社のヨーロッパ特許出願第５１９４２８号は、例えばジクロフェナックのような水にわずかに可溶な薬剤とシクロデキストリンと水溶性の有機溶剤とを含んでなる、特に注射用の薬剤組成物を教示している。多くの場合、この組成物はシクロデキストリンと包接化合物を形成すると述べられている。シクロデキストリンは、β−シクロデキストリンであってよいとも述べられている。
【００１８】
（８）帝国化学工業株式会社の日本特許出願第５９０８４８２１号は、シクロデキストリンを含有するジクロフェナックの持続放出性製剤を教示している。ジクロフェナックに対するシクロデキストリンのモル比は０．０５〜１．０である。α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、またはγ−シクロデキストリンを用いることができる。この生成物を調製する際には、ジクロフェナックをシクロデキストリンと混合する。水を添加した後、混合物を混練し、乾燥させる。あるいは、ジクロフェナックとシクロデキストリンを水に添加し、良く攪拌する。ろ過した後、ろ液を粉霧乾燥させるか、凍結乾燥させる。
【００１９】
（９）わかもと製薬株式会社の日本特許出願第６０１６５４７号は、ジクロフェナックナトリウム塩と、少なくとも一種の、置換シクロデキストリンである水溶性シクロデキストリンとを含んでなる消炎性目薬を教示している。
【００２０】
（１０）Pharmatech GmbH のドイツ特許出願第４２０７９２２号は、ジクロフェナックナトリウムと、置換度がグルコース１単位につき０．４のメチルβ−シクロデキストリン、置換度が０．６のメチルβ−シクロデキストリン、置換度が０．４２（シクロデキストリン１分子につきヒドロキシプロピル基が２．９４個である平均置換度に相当）のヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンのいずれかとの水溶性包接錯体を教示している。
【００２１】
発明の要約
したがって、本発明の第一の態様によれば、下記の工程を含む（ａ）ジクロフェナックまたはその薬学的に許容される塩、および２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリン、あるいは（ｂ）ジクロフェナックまたはジクロフェナックの薬学的に許容される塩と、２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンとの包接錯体、あるいは（ａ）と（ｂ）の混合物のいずれを含んでなる、注射可能な薬学または獣医学組成物の製造法が提供される。
（ｉ）（ａ）ジクロフェナックまたはその薬学的に許容される塩、および２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリン、あるいは（ｂ）ジクロフェナックまたはジクロフェナックの薬学的に許容される塩と、２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンとの包接錯体、あるいは（ａ）と（ｂ）の混合物のいずれかを、後で得られる溶液のｐＨが６．０から８．５となるようなｐＨにリン酸塩緩衝剤の不在下で酸性化した水に溶解して溶液を形成する工程。
【００２２】
「薬学的に許容される」塩または薬剤は、ヒトへの、または獣医学的使用が可能な塩または薬剤を意味する。
【００２３】
リン酸塩緩衝剤の不在下で、好ましくはナトリウムイオンをほんの少量か、またはまったく存在させずに溶液を調製することにより、ジクロフェナックまたはその塩が結晶として析出しない溶液が得られる。したがって、この溶液は注射可能な組成物としての使用に適する。
【００２４】
本発明の方法は、以下の付加的な工程をいずれか一つ、またはそれより多く含んでよい。
（ｉｉ）例えばマンニトール、デキストロース、またはソルビトールのような薬学的に許容される有機性の重量オスモル濃度（osmolality）調節剤を添加して、溶液の重量モル濃度を調整する。
（ｉｉｉ）溶液を、窒素を用いて脱気する。
（ｉｖ）ろ過により、溶液を殺菌する。
（ｖ）溶液をアンプル、または小瓶に充填する。
（ｖｉ）溶液を凍結乾燥させて、再形成用の凍結乾燥製剤を得る。
【００２５】
組成物が、ジクロフェナックまたはその薬学的に許容される塩と、２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンとの混合物を含有する場合（オプション（ａ））は、これら二つのモル比は、好ましくは１：１から１：１０、より好ましくは１：１．５から１：２．５、である。
【００２６】
ジクロフェナックまたはその薬学的に許容される塩とヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンとの包接錯体は、ジクロフェナックまたはその薬学的に許容される塩と２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンを、モル比１：１から１：１０、好ましくは１：１．５から１：２．５で、混練、または粉砕等により混合することにより調製できる。
【００２７】
この混合は、少量の水またはアルコール水溶液の存在下でおこなうのが好ましい。
【００２８】
２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンの平均置換度は、シクロデキストリン１分子につき２−ヒドロキシプロピル基が３．９個から５．１個であるのが好ましい。
【００２９】
本発明の第二の態様によれば、（ａ）ジクロフェナックまたはその薬学的に許容される塩、および２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリン、あるいは（ｂ）ジクロフェナックまたはジクロフェナックの薬学的に許容される塩と、２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンとの包接錯体、あるいは（ａ）と（ｂ）の混合物のいずれかを水性ビヒクル中に含有していて、溶液の形態、または水性ビヒクルを用いて再形成して溶液を得るのに適当な形態であり、溶液が６．０から８．５のｐＨをもち、いかなるリン酸塩緩衝剤も含んでいない、注射可能な薬学または獣医学組成物が提供される。
【００３０】
組成物は、好ましくは１ミリリットルにつき１０ｍｇ以上、より好ましくは１ミリリットルにつき約２５ｍｇ、のジクロフェナック濃度をもつ。
【００３１】
組成物は、それぞれの単位服用量がジクロフェナックを１０ｍｇから１５０ｍｇ含む、単位服用量の形態に製剤化することができる。
【００３２】
＜実施態様の説明＞
本発明は、（ａ）ジクロフェナック（Ｉ）、またはジクロフェナックナトリウム（ＩＩ）のようなその薬学的に許容される塩、および２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリン（ＩＩＩ）、あるいは（ｂ）（Ｉ）、または（ＩＩ）のような（Ｉ）の薬学的に許容される塩と（ＩＩＩ）との包接錯体、あるいは（ａ）と（ｂ）の混合物のいずれかからなる、注射可能な薬学的、または獣医学的組成物の製造法に関する。
【００３３】
この方法の主要な工程は、Ｉ、またはＩＩのようなその塩とＩＩＩ、あるいはＩ、またはＩＩのようなその塩とＩＩＩとの包接錯体、あるいはそれらの混合物のいずれかを水に溶解して溶液を形成する工程である。この水は、溶液のｐＨが６．０から８．５となるように、リン酸塩緩衝剤の不在下で予め酸性化しておいたものである。
【００３４】
組成物がＩまたはＩＩとＩＩＩとの混合物を含有する場合は、ＩまたはＩＩ対ＩＩＩのモル比は好ましくは１：１から１：１０であり、より好ましくは１：１．５から１：２．５である。
【００３５】
ＩＩＩのモル質量は、平均置換度（Ｄ．Ｓ．）から、式
ＭＷ  ＝  （１１３５  −  Ｄ．Ｓ．）  ＋  （Ｄ．Ｓ．ｘ  ５９）
により計算される。
【００３６】
Ｉ、またはＩＩのようなその塩がＩＩＩの中に入っている固体の包接錯体は、少量の水またはアルコール水溶液の存在下で、固体を激しく混練または粉砕することにより調製できる。ＩまたはＩＩ対ＩＩＩのモル比は、１：１から１：１０の間で変えることができる。好ましい比は１：１．５から１：２．５である。この混合工程は約３０分から６０分間実施するのが好ましく、その後、生成物を約４０℃の加熱炉中で乾燥させるのが好ましい。得られた生成物を再粉砕し、６０メッシュの篩を通して均質化する。生成物は、粒径が細かく、また水溶性が良好であることを特徴とする。この生成物は、赤外分光分析、およびＤＳＣ分析（差動走査熱量分析）により証明されるように、Ｉ／ＩＩＩまたはＩＩ／ＩＩＩの分子包接錯体からなる。
【００３７】
ＩまたはＩＩとＩＩＩ、あるいはＩ／ＩＩＩまたはＩＩ／ＩＩＩの固体包接錯体、あるいはそれらの混合物を、得られる溶液のｐＨが６．０から８．５となるように実験的に決めたｐＨに０．１Ｎの塩酸で予め酸性化した温水に溶解するのが好ましい。これは、リン酸塩緩衝剤の不在下でおこなわなければならず、またナトリウムイオンまたはカリウムイオンをほんの少量か、またはまったく含まない溶液中でおこなうのが好ましい。
【００３８】
所望ならば、溶液の重量オスモル濃度を、マンニトール、デキストローズ、またはソルビトールのような薬学的に許容される有機性の重量オスモル濃度調節剤を添加することにより、調整することができる。
【００３９】
この溶液は、硝酸カリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、塩化ベンズアルコニウム、クロロブタノール、キシリトール、またはグルコースのような他の生理学的に相容性のある化合物を含有してもよい。
【００４０】
完成した溶液は窒素を用いて脱気し、またろ過により殺菌するのが好ましい。その後、溶液を、窒素雰囲気下で小瓶やアンプルに無菌状態で移すことができる。あるいは、溶液を凍結乾燥させて、再形成用の凍結乾燥製剤としてもよい。
【００４１】
本発明の注射可能な組成物は、好ましくは１ミリリットルにつき１０ｍｇ以上、より好ましくは１ミリリットルにつき約２５ｍｇのＩ濃度を有する。
【００４２】
本発明の注射可能な組成物は、それぞれの単位投与量がＩを１０ｍｇから１５０ｍｇ含有する、単位投与量の形態に製剤化することができる。
【００４３】
本発明の方法により製造される注射可能な組成物は、偏頭痛、外傷、月経困難症、腎仙痛、胆石仙痛、術後痛、痛風、および関節炎のような、ヒトおよび動物における炎症性の急性の痛みの症状の治療に用いることができる。それに加え、本発明の注射可能な組成物は、手術中、または手術後におけるプロスタグランジンの形成を防いで、手術直後の痛みを軽減するために、予防的に使用することができる。
【００４４】
この注射可能な組成物は、獣医学的目的にも使用することができる。
【００４５】
注射可能な組成物は、静脈注射、または筋肉注射に適している。注射可能な組成物は、Ｙ部投与にも適している。
【００４６】
以下の諸例は、ＩまたはＩＩとＩＩＩとの包接錯体の調製、それらの特性づけ、およびそれらを含有する薬剤組成物に関する。
【００４７】
例中で述べられている緩衝剤は、ソレンソンのリン酸ナトリウム緩衝剤（Flynn, G.L. (1980) J. Parent. Drug Ass. 34 (2), 139-162)、およびヨーロッパ薬局方リン酸カリウム緩衝剤に相当する。
【００４８】
【実施例】
例１
ＩＩに対するＩＩＩの可溶化効果は、図１に示されている等溶解度線（Higuchi, T. および Connors, K.A. (1965) Adv. Anal. Chem. Instr. 4, 117にしたがって作成）により、直接説明することができる。簡単にいえば、濃度をさまざまに変えたＩＩＩの、ｐＨ６．０のＮａＨ2 ＰＯ4 の溶液、または０．１ＮのＨＣｌでｐＨ５．０に酸性化した脱イオン水の溶液を、過剰のＩＩに添加した。この混合物を室温で２４時間振盪し、さらに２４時間平衡化した。サンプルを０．２２μｍのフィルターを通してろ過し、紫外分光測光法でＩＩについて分析した。水溶性増加の根拠は、ホスト（ＩＩＩ）とゲスト（ＩまたはＩＩ）との間の包接錯体の形成である。等溶解度線の初期の勾配から、１：１の化学量論比が仮定されるであろう。錯体の溶解性はｐＨ６．０以上で、特に緩衝剤不在下、ｐＨ７．７で高くできるが、包接錯体の溶液中での安定性は、非イオン化形態（すなわちＩ）を多くすることにより改良できる。括弧中の値は平衡時の最終ｐＨである。
【００４９】
例２
ＩＩ／ＩＩＩ（１：１）の固体錯体を、初めにＩＩＩを７．５０ｇ、３５℃の脱イオン水１０ｍｌに溶解することにより調製する。この溶液に、激しく攪拌しながらＩＩを１．６８ｇ、バッチ方式で添加する。この溶液をさらに１０〜１５分間攪拌し、冷却する。この溶液は透明なままである。凍結乾燥させると、ＨＰＬＣで測定されるように、錯体１グラムにつきＩＩを約１８０ｍｇ含有する非晶質の白色の固体が得られる。この錯体は水に溶解しやすい。
【００５０】
ＤＳＣ分析で、図２に示されているように、ＩＩ、およびＩＩとＩＩＩとの物理的混合物の特徴である２６０℃から２９０℃の間の熱移動がないことから、固体状態の錯体が形成されたことの証拠が得られる。図中、ａ）はジクロフェナックナトリウムであり、ｂ）は２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンであり、ｃ）はａ）とｂ）の物理的混合物であり、またｄ）は溶液中で形成し、凍結乾燥させたａ）とｂ）との包接錯体である。曲線は、パーキン−エルマーＤＳＣ７型器で、毎分１０℃づつ加熱して記録した。
【００５１】
この固体の錯体を、臭化カリウム円板を用いて記録したＩＲスペクトルによりさらに特徴づける。図３に示されているスペクトルは、ＩＩ、およびＩＩとＩＩＩの物理的混合物のスペクトルと相関して、錯体の１５５８ｃｍ-1と１５７６ｃｍ-1におけるカルボキシレートのＣ＝Ｏバンドの強度が減少していることを示す。このパターンは、錯体化の結果として生じる、ＩＩのカルボキシル基とシクロデキストリンのヒドロキシル官能基との間の分子間相互作用によるものであろう（Lin, S.Z., Wouessidjewe, D., Poelman, M.C., Duchene, D., 1991, Int. J.Pharm.,  69, 211-219) 。
【００５２】
水溶液中でＩＩとＩＩＩとの間で形成された包接錯体は、以下に記すプロトン磁気共鳴スペクトルから直接証明できる。
【００５３】
プロトン磁気共鳴による水溶液中での包接錯体化の特性づけ
ＩＩ、ＩＩＩ、および例２に記載したように調製した凍結乾燥錯体の純粋なサンプル２０ｍｇを、それぞれＤ2 Ｏ（０．５ｍｌ）に溶解した。ブルカーＡＭＸ５００ＮＭＲ分光器を用い、プローブ温度を３０３Ｋにコントロールして、プロトン磁気共鳴実験をおこなった。ＩＩとＩＩＩの構造、およびプロトン表示は図４に示す通りである。
【００５４】
シグナルの多重度、および二次元相関分光法から、ＩＩの共鳴の明瞭な帰属を行うことができた。ＩＩＩは不均質組成物であるために、すべてのプロトンについての明瞭な帰属は不可能であった。それにもかかわらず、アノマー（Ｃ1 ）プロトン、および２−ヒドロキシプロピルプロトンは、ケミカルシフト、およびシグナルの強度を基に帰属がなされた。その他のプロトンの共鳴は、未置換β−シクロデキストリンについての実験値に対応して帰属がなされた。
【００５５】
β−シクロデキストリンの３プロトンと５プロトンは空洞の中心に向かって配向しており、一方、１、２、４および６プロトンは空洞の外側に配向しているということは良く知られている。分子の包接は、ゲストプロトンとシクロデキストリンの３および５プロトンとの間の、距離に依存した磁化伝達により直接証明できるであろう。錯体の二次元回転フレームオーバーハウザー強化分光（ＲＯＥＳＹ）スペクトルは、図５に示されているように、ＩＩのｂ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇおよびｈプロトンと、ＩＩＩの３および５プロトンとの間の空間でのカップリングを示す。同じ実験を、ＩＩと未置換β−シクロデキストリンの１：１．５モル／モル凍結乾燥錯体を用いておこなったところ、似たような結果が得られ、また３および５プロトンに帰属される交差ピークが確認された。この場合、このピークは、よりはっきりと分解された多重線であった。交差ピークの強度は分子間のプロトン間の距離と関係があり、したがって包接相互作用の特性は、図６ａおよび６ｂに示されているようにモデル化することができる。モル比１：１のＩＩとＩＩＩが存在するにもかかわらず、両方の芳香族環が包接をおこなえることは明らかである。
【００５６】
結果から、モル比１：２のＩＩとＩＩＩは、水溶液中での両方の芳香族環の同時包接に有利であることが示唆される。純粋なＩＩの値に対するプロトンｅ、ｆおよびｈの有意なシフトが０．０２７から０．０５２ｐｐｍの範囲にあり、一方他の芳香族プロトンのシフトが０．０１０ｐｐｍ未満であることから、ＩＩの両方の芳香族環と、内部に配向しているＩＩＩの３および５プロトンとの相互作用についてのさらなる証拠が得られた。
【００５７】
例３
逆浸透により精製した水（３５０ｍｌ）を、０．１ＮのＨＣｌでｐＨ５に調整し、３５℃に加熱する。置換度（Ｄ．Ｓ．）が４．７の２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリン（７５．００ｇ）を、攪拌しながら添加する。この溶液を５分間攪拌し、激しく攪拌しながら、ジクロフェナックナトリウム（１２．５０ｇ）をゆっくり添加する。溶液を３５℃で３０分間攪拌する。サンプルをとって冷却し、重量オスモル濃度を測定する。必要ならば、激しく攪拌しながら、ソルビトール（最終体積５００ｍｌでの溶液のオスモル濃度を２８０〜３００ｍＯｓｍ／ｌとする、計算により得られた量）をゆっくり添加する。加熱を止め、室温に達するまで攪拌を続ける。最終体積を水で調節し、１５分間攪拌する。平衡状態でのｐＨは７．４±０．４である。この溶液を、初めに任意の工程として０．４５ミクロンのフィルターを通してろ過し、窒素で脱酸素するか、あるいは脱酸素して、最後に、窒素雰囲気下かつ無菌状態で、予め殺菌した琥珀のアンプル中に０．２２ミクロンの膜状フィルターを通して入れる。このアンプルを窒素下で密封する。溶液は、有効なＨＰＬＣでの測定によれば、ジクロフェナックナトリウムを２５．０±０．８ｍｇ／ｍｌ含有している。
【００５８】
例４
逆浸透により精製した水（５００ｍｌ）を、０．１ＮのＨＣｌでｐＨ４．５に調整する。酸性化した水のうち３５０ｍｌを３５℃に加熱し、Ｄ．Ｓ．が４．６９の２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリン（１０２ｇ）を、攪拌しながら添加する。この溶液を５分間攪拌し、激しく攪拌しながら、ジクロフェナックナトリウム（１２．５０ｇ）をゆっくり添加する。溶液を３５℃で３０分間攪拌する。加熱を止め、室温に達するまで攪拌を続ける。酸性化した水の残りで体積を５００ｍｌとし、１５分間攪拌する。平衡状態でのｐＨは７．４±０．６である。この溶液を窒素で脱酸素して、窒素雰囲気下かつ無菌状態で、予め殺菌したアンバーのアンプル中に０．２２ミクロンの膜状フィルターを通して入れる。このアンプルの充填体積は３．３ｍｌである。アンプルを窒素下で密封する。溶液は、有効なＨＰＬＣでの測定によれば、ジクロフェナックナトリウムを２５．０±０．７ｍｇ／ｍｌ含有している。溶液の重量オスモル濃度は２８０から３２０ｍＯｓｍ／ｋｇに相当する。４５℃で１２週間貯蔵したアンプル、および室温（２０〜２５℃）で１２ヵ月貯蔵したアンプルはそれぞれ、結晶化の目に見える徴候、またはｐＨや容量モル濃度の有意な逸脱を示さず、また安定性を示すＨＰＬＣで測定されるように、元の含有量の１００％±５％のジクロフェナックナトリウムを含有しており、ダイオード配列検出により証明されるように、いかなる分解化合物も存在していない。
【００５９】
例５
例３にしたがって２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリン（ＨＰＢ）を用いて製剤化したジクロフェナックナトリウム７５ｍｇ／３ｍｌを筋肉内（ｉ．ｍ．）および静脈内（ｉ．ｖ．）に投与した場合の相対的な生物学的利用性を、参照製剤である市販のジクロフェナックナトリウム注射液７５ｍｇ／３ｍｌをｉ．ｍ．投与した場合と比較するために、６名のボランティア〔ＦＡＲＭＯＶＳ１９／９４、Institute for Clinical Pharmacology and Drug Development、オレンジ自由州立大学、ブロエンフォンテイン、南アフリカ] について二重盲検交差任意試験をおこなった。この試験で得られた主な薬物動力学的データは表１に示す通りである。ジクロフェナックナトリウム−ＨＰＢ（ｉ．ｖ．およびｉ．ｍ．）、および市販のジクロフェナックナトリウム（ｉ．ｍ．）についての、血漿ジクロフェナック濃度対時間の曲線を図７に示す。
【００６０】
【表１】
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【００６１】
薬物動力学的結果は、ｉ．ｍ．投与した後に吸収されるジクロフェナックに関しては、二つの製剤は生物学的に同等であることを示す。しかしながら、ジクロフェナックナトリウム−ＨＰＢは、ｉ．ｍ．投与した市販のジクロフェナックナトリウムよりも短い時間（ｔ1/2 2 ）で、より高い最高濃度（Ｃmax ）に達した。ｉ．ｖ．投与したジクロフェナックナトリウム−ＨＰＢと比較した場合、ｉ．ｍ．投与したジクロフェナックナトリウム−ＨＰＢの絶対的な生物学的利用率は１００％に近い。処置期間の終わりに被験者６名のうち２名にみられた、血清アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ作用の僅かだが可逆的な増加以外は、臨床的に有意な悪影響、または臨床化学的変化は、試験中観察されなかった。両被験者には、市販のジクロフェナックナトリウムを最後にｉ．ｖ．投与した。したがって、この知見は、ジクロフェナックナトリウム−ＨＰＢの効果というよりは、交差目的でなされた筋肉内注射により生じた局所的な反応に関係していたという可能性が大きい。このように、本発明によるジクロフェナックの調製剤は、ｉ．ｍ．かｉ．ｖ．のいずれかの経路の投与により、効果的に使用することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】さまざまなｐＨ値の２５℃の水溶液中におけるジクロフェナックナトリウムの溶解性に対する、２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンの濃度の増加効果を示すグラフである。
【図２】ジクロフェナックナトリウム、および２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンのＤＳＣ熱分析の結果を示すチャートである。
【図３】ジクロフェナックナトリウム、およびヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンのＦＴＩＲ分析の結果を示すチャートである。
【図４】ＮＭＲデータの説明に用いた構造、および表示を示す図である。
【図５】ジクロフェナックナトリウムと２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンのプロトンの間の空間相関関係を示す、ジクロフェナックナトリウムと２−ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンの錯体のＤ2 Ｏ溶液の２−Ｄ  ＲＯＥＳＹスペクトルの一部分である。
【図６】（ａ）ジクロフェナックとヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンとの間で形成された水性包接錯体の、プロトン磁気共鳴に基づく分子モデルを示す図である。二つの斜視図が示されているが、ジクロフェナックを太線で示し、また簡潔にするためにヒドロキシプロピル基は省略してある。（ｂ）  ジクロフェナックの芳香族環と疎水性シクロデキストリンの空洞との間の相互作用を表すためにＺ軸を一部切り欠いた、図６ａの空間充填モデルを示す図である。
【図７】６名の正常なボランティアに交差投与した後の、市販のジクロフェナックナトリウム（ｉ．ｍ．）とジクロフェナックナトリウム−ＨＰＢ（ｉ．ｍ．およびｉ．ｖ．）の、平均血漿ジクロフェナック濃度対時間の曲線のグラフである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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