(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトを除く被検体にアンタゴニストを投与した後、第１の皮膚刺激を与え、前記被検体の体性感覚野における前記第１の皮膚刺激による第１の血流量の変化量を測定する工程と、前記被検体に被検神経作動薬を更に投与した後、第２の皮膚刺激を与え、前記被検体の体性感覚野における前記第２皮膚刺激による第２の血流量の変化量を測定する工程とを含むことを特徴とする、神経作動薬の評価方法。
【請求項２】
前記血液量の第１の変化量と第２の変化量との差を求め、前記差に基づいて前記被検神経作動薬の薬効を評価する工程を更に含むことを特徴とする請求項１に記載の神経作動薬の評価方法。
【請求項３】
前記皮膚刺激が前記被検体の掌への振動刺激であることを特徴とする請求項１又は２に記載の神経作動薬の評価方法。
【請求項４】
前記血液量の第１の変化量及び第２の変化量を、ポジトロンエミッショントモグラフィにより測定することを特徴とする請求項１〜３のいずれか１項に記載の神経作動薬の評価方法。
【請求項５】
前記被検神経作動薬がアセチルコリン神経作動薬であり、前記アンタゴニストが、アセチルコリン神経系に対する遮断薬であることを特徴とする請求項１〜４のいずれか１項に記載の神経作動薬の評価方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、神経作動薬の評価法に関するものであり、より詳しくは体性感覚刺激に対する大脳皮質の血管反応性を用いたアセチルコリン神経作動薬の評価法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
高齢化社会において、アルツハイマー型に基づく、又は血管性の痴呆が大きな社会問題になってきており、痴呆を効果的に治療する薬剤の開発が行われている。係る痴呆治療薬の研究開発において、簡便かつ確実な薬効評価法の開発も又極めて急務となっている。
【０００３】
従来、痴呆患者においては、アセチルコリン系神経の活性が低下していることが知られており、痴呆治療薬の開発の１つの指標としては、上記アセチルコリン系神経を直接的又は間接的に賦活する作用の有無を指標として行われている。係る治療薬の薬効評価法としては、通常実験動物による記憶力の改善を指標として行われてきた。
【０００４】
【発明が解決しょうとする課題】
しかしながら、従来の実験動物による記憶力の改善を指標とした評価法は、実験動物の訓練等に時間がかかり、また熟練を要すること、実験動物の種差が大きいという、簡便性及び確実性の点で問題があった。
【０００５】
本発明は係る従来技術の問題点を解決し、ヒトへの応用を前提とした、痴呆治療薬としての神経作動薬（特にアセチルコリン系）を簡便にかつ確実に評価する方法を提供することを目的とする。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明に係る神経作動薬を簡便にかつ確実に評価する方法は、神経活動（例えば体性感覚刺激）に基づき対応する脳の部分の局所脳血流（regional cerebral blood flow、以下ｒＣＢＦとする）が変化するという知見に基づくものであり、より詳しくは、体性感覚刺激の入力が、大脳皮質体性感覚野の神経細胞の神経活動を増加させ、その情報が特定の神経系（例えばアセチルコリン系）を介して、周囲の血管を拡張して血流量が増加するという知見に基づくものである。すなわち、係るｒＣＢＦの変化（血流量の増加又は抑制）を非侵襲的計測法を用いて、種々の条件下で計測し、抗痴呆薬およびその候補化合物が該神経系（例えばアセチルコリン系）を賦活できるかどうかを判定の指標とするものである。
【０００７】
具体的には、本発明は、ヒトを除く被検体にアンタゴニストを投与した後、第１の皮膚刺激を与え、前記被検体の体性感覚野における前記第１の皮膚刺激による第１の血流量の変化量を測定する工程と、前記被検体に被検神経作動薬を更に投与した後、第２の皮膚刺激を与え、前記被検体の体性感覚野における前記第２皮膚刺激による第２の血流量の変化量を測定する工程とを含むことを特徴とする、神経作動薬の評価方法を提供するものである。
【０００８】
また、本発明は、前記血液量の第１の変化量と第２の変化量との差を求め、前記差に基づいて前記被検神経作動薬の薬効を評価する工程を更に含むことを特徴とする前記記載の神経作動薬の評価方法を提供するものである。
【０００９】
また、本発明は、前記皮膚刺激が前記被検体の掌への振動刺激であることを特徴とする前記記載の神経作動薬の評価方法を提供するものである。
【００１０】
さらに、本発明は、前記血液量の第１の変化量及び第２の変化量を、ポジトロンエミッショントモグラフィにより測定することを特徴とする前記記載の神経作動薬の評価方法を提供するものである。
【００１１】
また、本発明は、前記被検神経作動薬がアセチルコリン神経作動薬であり、前記アンタゴニストが、アセチルコリン神経系に対する遮断薬であることを特徴とする前記記載の神経作動薬の評価方法を提供するものである。
【００１３】
以下、本発明に係る方法を実施の形態に即してより詳しく説明する。
【００１４】
【発明の実施の形態】
図１は、本発明に係る方法による神経作動薬の評価方法の各工程を示すブロック図を示す。本発明によれば、まず被検体に、工程Ｓ１において特定の神経系に対する遮断薬（アンタゴニスト）を投与して被検体の脳への当該アンタゴニストの作用に基づく変化を誘導する。さらに、係る状態で、工程Ｓ２において体性感覚刺激として第１の皮膚刺激を与える。該刺激を与える前のｒＣＢＦと与えた後の条件下でのｒＣＢＦの変化量を工程Ｓ３にて測定する。さらに工程Ｓ４にて、被検体に、評価されるべきで被検神経作動薬を投与する。該投与後、工程Ｓ５において第２の皮膚刺激を与える。工程Ｓ３と同様に該刺激を与える前のｒＣＢＦと与えた後の条件下でのｒＣＢＦの変化量を工程Ｓ６にて測定する。
【００１５】
また、工程Ｓ７において、上記の工程により得られたｒＣＢＦの変化量を比較することにより、被検神経作動薬が、アンタゴニストにより抑制されたｒＣＢＦを回復する効果を判定することにより評価を可能とするものである。
【００１６】
なお、図１には示されていないが、アンタゴニストを投与する工程Ｓ１に先立ち、生理的食塩水を投与した条件で、皮膚刺激の有無によるｒＣＢＦの変化を測定し、コントロール値とすることも可能である。
【００１７】
（被検体）
本発明に係る方法で使用され得る被検体としては特に制限はされない。ヒトに使用する種々の神経作動薬の評価方法で使用される種類の動物種が好ましく使用可能であり、特にヒトにより近い種であることが好ましい。具体的には、ネコ、サル、その他のヒト以外の霊長類が挙げられる。特にサルはヒトに近く好ましい。さらに、本発明は適当な条件下でヒトについても使用可能である。
【００１８】
また、被検体の評価実験条件下で麻酔状態の有無についても特に制限はないが、本発明に係る神経作動薬の評価方法においては、他の薬物の影響を最小限とする目的で、被検体が無麻酔状態の方がより好ましい。この場合、必要ならば、被検体の不要な動きを抑制する目的で、あらかじめ適当な訓練を施しておくことも好ましい。また、被検体をあらかじめ椅子等を用いて固定しておくことも好ましい。
【００１９】
（アンタゴニストおよびその投与方法）
本発明に係るアンタゴニストとして使用され得る薬物は、特定の神経系のある作動部分を遮断する薬物として知られているものであれば特に制限はない。特定の神経系のある作動部分を遮断することで、脳の特定の部分でのｒＣＢＦを抑制させ、次いで被検薬である神経作動薬を投与してそのｒＣＢＦの回復を測定できればよい。具体的には、アセチルコリン神経系に対しては、ムスカリン受容体の遮断薬であるスコポラミンが挙げられる。さらに、アトロピン、ピレンゼピン、ベンズトロピン、オキソトレモリン等も好ましく使用可能である。
【００２０】
さらに、本発明に係る方法の実施において、アンタゴニストの投与方法についても特に制限はなく、通常公知の種々の投与手段が使用可能である。具体的には、静脈内投与、皮下投与、筋肉内投与、経口投与、経皮投与が挙げられる。さらに、アンタゴニストの投与量についても、アンタゴニストの種類、被検体の体重等に基づいて通常用いられる量を適時選択することが可能である。
【００２１】
（皮膚刺激）
本発明で使用可能な体性刺激としては特に制限はなく、通常の確立された刺激付与手段が好ましく使用可能である。刺激に対応する脳の興味部分（region of interest,以下ＲＯＩとする）が十分大きく、従って、ｒＣＢＦの変化量が大きいことから皮膚刺激を付与することが好ましい。具体的には、手に対する振動刺激が挙げられる。
【００２２】
刺激の種類、刺激の強さ等についても通常の方法に従い適時選択可能である。
【００２３】
（被検神経作動薬およびその投与方法）
本発明に係る方法で評価可能な神経作動試薬には、特に制限はない。アンタゴニストとの組合せにおいて、アンタゴニストによる特定の神経系の特定の部位の遮断作用によるｒＣＢＦの抑制が、該被検薬の投与により回復するものであれば好ましく評価される。
【００２４】
具体的には、コリン神経系に対してのアンタゴニストとしてスコポラミンを用いた場合には、以下の実施例で明らかなように、アセチルコリン神経作動薬としてのフィゾスチグミン、Ｅ２０２０、及びタクリン等が明確に評価され得る。
【００２５】
さらに、該被検神経作動試薬の投与量、投与手段についても特に制限はなく、通常用いられる投与量、投与手段を適時選択することが可能である。
【００２６】
（薬効評価、神経作動薬の評価方法）
本発明に係る方法は、上記説明したアンタゴニストの投与に基づき脳の特定領域のｒＣＢＦを抑制し、その抑制が、適当な被検神経作動薬の投与により回復する程度を測定して比較検討することにより評価するものである。従って、該ｒＣＢＦの変化量の測定手段については特に制限はされない。また、被検体の脳においてｒＣＢＦの変化をどの部分で測定するか（興味のある領域、ＲＯＩ）についても特に制限はない。
【００２７】
係る測定手段として、具体的には、15Ｏ、18Ｆ等を放射活性源として用いるポジトロンエミッショントモグラフィー（ＰＥＴ）、ドップラー血流計、近赤外モニター（ＮＩＲＯ）、シングルフォトンエミッションＣＴ（ＳＰＥＣＴ）、ｆＭＲＩが挙げられる。
【００２８】
本発明においては、特に上記のうちＰＥＴを用いてｒＣＢＦの変化量を測定する方法が好ましい。すなわち、被検体の脳全体を、又は特定の部分における血流量の変化を高分解能で、しかも短時間内で測定することが可能であり、被検体への神経系へ不要な負担を付加することなく、被検神経作動薬の効果を正確に、簡便に評価し得ることとなる。
【００２９】
さらに、ＰＥＴとＭＲＩとの組合せにより、ＲＯＩの位置をより正確に決定することが可能となり、付与される刺激に基づくｒＣＢＦの変化が小さな領域で生じる場合や、ｒＣＢＦの変化量が小さい場合に特に有効である。
【００３０】
また、被検体によっては、測定中に不要な動きにより、頭部が十分に固定されず、ＲＯＩでのｒＣＢＦの測定結果に誤差を生じさせる場合があるが、この場合には、係る動きによる誤差を修正する手段を有するＰＥＴの使用が特に有効である。
【００３１】
さらに、ＰＥＴに基づくｒＣＢＦの変化量の測定データに基づき再構成されたイメージは、目視による比較によっても十分ｒＣＢＦの抑制及びその回復が判断可能な場合が多く、本発明に係る方法をより簡便なものにする。また、係るイメージを適当なデータ処理することにより、容易に２つの実験条件間での差を求めることが可能となり、係る差に基づき被検神経作動薬の評価が極めて正確に行えるようになる。
【００３２】
また、ＰＥＴを使用することにより、多量の被検神経薬を簡便に迅速にスクリーニングするための自動化も可能とする。
【００３３】
以下に本発明に係る方法を実施例に従って説明する。
【００３４】
【実施例】
被検体して無麻酔サルを用い、体性感覚刺激として該サルの掌に対する振動刺激を与え、係る体性感覚刺激に対し、スコポラミンをアンタゴニストとして用いて、アセチルコリン神経系賦活剤として知られている種々のアセチルコリン神経作動薬（認識強化剤）（フィソスチグミン、Ｅ２０２０および、タクリン（これらはコリンエステラーゼ阻害する））の薬効を評価した。該サルの体性感覚刺激に対する特定の脳の位置（ＲＯＩ）におけるｒＣＢＦ応答の変化量を、［15Ｏ］Ｈ2Ｏおよび高分解能ＰＥＴを用いて評価した（Brain Research 749,1997,10-17）。さらに、比較のために、従来の脳循環代謝改善薬であって、アセチルコリン神経作用を介した記憶改善作用のないとされているアニラセタムの薬効についても検討した。
【００３５】
被検体
被検体として、４弱齢のオスアカゲザル(Macaca mulatta、6-9kg）を使用した。上記サルは米国ＮＩＨの推奨、および浜松ホトニクス株式会社中央研究所のガイドラインに従い取り扱われた。サルは、３月以上にわたり、１週間に２回椅子に座る訓練が施された。さらに、ＰＥＴ測定の少なくとも一月前にはサル用椅子に固定し、アクリル板を既に記載した方法（Brain Res.,663(1994)191-198）に準じて、麻酔下において頭部に取り付けた。
【００３６】
アセチルコリン神経作働薬
ケタミン塩化水素酸塩（三共株式会社製）、スコポラミン臭化水素酸塩（スコポラミン）、及びスコポラミン臭化ブチル（またはスコポラミンブチルブロミド）は杏林製薬株式会社及び田辺製薬株式会社から購入した。フィゾスチグミン硫酸塩は関東化学株式会社から購入した。
【００３７】
生理学的状態のモニタ
ＰＥＴ測定（ＰＥＴスキャニングの間も含む）の際、該サルの心臓脈拍数、呼吸数、及び体温を生命監視システム(日本光電株式会社製）によりモニタされた。係る生理学的状態に関する結果は、各薬物処理して３０分後に得られた。また、無麻酔サルを使用することからくる技術的な困難性により、二酸化炭素のレベル（ＰaＣＯ2）、血液酸素レベル（ＰaＯ2）、ｐＨ及び動脈血圧を、麻酔中に測定した。脳内血液サンプルを、各薬物をカニューレにより大腿動脈中に投与して３０分後に採取され、またガス分析器(NOVA Biochemical製、USA）を用いてモニタされた。
【００３８】
ＰＥＴ実験
ＰＥＴ測定に基づくデータは、高分解能ＰＥＴスキャナ（SHR-2400、浜松ホトニクス株式会社製、トランスアキシャル分解能：FWHMで3.0mm、中心−中心距離が8mm）を用いて収集した。
【００３９】
上記サルは、軽く筋肉内ケタミン注射（5mg/kg）した後上記サル用椅子に座らせた。サルの鎮静期間内に、上記サルの頭部は椅子に固定され、立体軸調整により眼窩道ラインに平行になるように調整された。また、ケタミンから完全に回復した後は、本実験は薄暗条件で行った。
【００４０】
ｒＣＢＦ測定条件は、既に報告された方法（Neurosci.Lett.,182(1994)279-282)に準じて行った。すなわち、上記サルに対し、生理的食塩水、スコポラミン(1〜500μg/kg)、およびスコポラミン臭化ブチル(100μg/kg、血液−脳障壁を通過できない末梢性抗コリン作用薬）が、ＰＥＴ実験３０分前に静脈注射処理された。
【００４１】
フィゾスチグミン(10μg/kg)等の被検神経作動薬は、スコポラミンとＰＥＴ測定に続いて静脈内に与えられ、さらにＰＥＴ再測定を行う前に３０分待った。
【００４２】
［15Ｏ］Ｈ2０（1.2GBq、3.5ml生理的食塩水中）が、静脈カニューラを通じて、誹腹静脈内に、特別に設計された自動注入装置（浜松ホトニクス株式会社製）を用いて注入された。
【００４３】
体性感覚刺激として、サルの右の掌へ振動刺激を用い、［15Ｏ］Ｈ2０の注入の開始の際に与えた。さらに［15Ｏ］Ｈ2０注入後２０秒、放射活性（radioactivity）が脳に達すると、ＰＥＴ測定（ＰＥＴスキャン）が開始されて１分間データ収集した。ＰＥＴの１８スキャンを一度の測定で実施した。すなわち、上記刺激なし、及び刺激ありの各条件のそれぞれに対して、生理的食塩水、スコポラミンのみ、又はスコポラミンとフィゾスチグミンの各測定である。
【００４４】
データ解析
ｒＣＢＦの変化量は、それぞれのＰＥＴスキャンのデータから最構成されたイメージからのすべての切片に基づき決められ、係る値はその日の実験のすべてのデータをノーマライズするために使用された。さらに、上記イメージはそれぞれのピクセルに隣接する４ピクセルをメジアンフィルタによりスムーズ化処理した。また、３０分以内にされた刺激下実験及びコントロール実験を一組とした。上記刺激実験からコントロール実験を差し引いて得たイメージを、コアｒ＝２のメジアンフルタによりスムーズ化処理し。平均ピクセル値及び標準偏差を、上記差し引かれたイメージそれぞれの切片のすべてのピクセルに基づき計算した。さらに統計的有意性（two-tailed、Ｐ＜0.05、Z値1.96以上）を満たすピクセル値を、同じ対象のＭＲＩ（磁気共鳴イメージ）（TOSHIBA 製、MRT-50A/II(0.5T)により収集した）と重ね合わせた。ＰＥＴ及びＭＲＩの立体的位置の調整は、特別に設計された頭部フォルダとＯＭラインに基づいて行った。各測定条件間のデータを統計的に比較するために、Ｚ値1.96以上に対応するcontralatral 体性感覚刺激皮質における興味領域（region of interest,ＲＯＩ）を、生理食塩水のみ投与の測定で得られたイメージを差し引くことにより得た。実際のＲＯＩのサイズは７６から８４mm2の範囲であった。ＲＯＩを左右に対称的に及びcontralateral and ipsilateral 体性感覚刺激皮質領域に設け、［15Ｏ］Ｈ2Ｏによる平均カウント数を両方域で決定した。同じＲＯＩを各異なった条件での測定で使用した。係るＲＯＩ領域において得られたｒＣＢＦの比（contralateral/ipsilateral)を統計的に解析した。
【００４５】
結果
被件体サルへの生理学的指標に対する影響
表１及び表２には、上記ＰＥＴ測定実施中において、被検体サルの生理学的状態が薬物の投与によっては大きく変化していないことを示すものであり、本発明に係る方法による評価方法の信頼性が高いことを示す。すなわち、表１に示したように、スコポラミン(50μg/kg)のみ、または、スコポラミンとフィゾスチグミン(10μg/kg)の投与は、被検体サルの心拍速度、呼吸速度または体温のような生理学的指標に有意の変化をもたらさなかった。これらの結果は、薬物導入後３０分後に得たものであるが、さらにＰＥＴ実験の間及びＰＥＴ実験間の心拍速度、呼吸速度または体温も安定していた。本実施例では、無麻酔であり意識のあるサルを用いた技術的困難性のため、ＰａＣＯ2、ＰａＯ2、ｐＨおよび動脈血圧はＰＥＴスキャニング中はモニタしなかった（本実施例と同じプロトコルにおける麻酔動物において、ＰａＣＯ2、ＰａＯ2、ｐＨおよび動脈血圧はスコポラミンおよびフィソスチグミンによっては変化しなかった）。
【００４６】
0003944278.tif 000002
【００４７】
同様に表２に示したように、スコポラミン(50μg/kg)のみ、または、スコポラミンと生理的食塩水、フィゾスチグミン(1μg/kg)、Ｅ２０２０(10μg/kg)、タクリン(100μg/kg)の投与の条件下でも、被検体サルの心拍速度、体温のような生理学的指標に有意の変化をもたらさなかった。これらの結果は、薬物導入後３０分後に得たものであるが、さらに心臓（心拍／分）と体温はＰＥＴスキャンの間に測定され、他は麻酔下で測定された。ＰＥＴ実験の間及びＰＥＴ実験間の心拍速度、体温は安定していた。本実施例では、無麻酔であり意識のあるサルを用いた技術的困難性のため、ＰａＣＯ2、ＰａＯ2、ｐＨおよび動脈血圧はＰＥＴスキャニング中はモニタしなかった（本実施例と同じプロトコルにおける麻酔動物において、ＰａＣＯ2、ＰａＯ2、ｐＨおよび動脈血圧はスコポラミンおよびフィソスチグミンによっては変化しなかった）。
【００４８】
0003944278.tif 000003
【００４９】
（アンタゴニスト投与前）
生理的食塩水のみを投与して、サルの掌に振動刺激を与えると、刺激を受けた掌の半球対側体性感覚皮質においてのｒＣＢＦは大きく増加した。この増加はコントロールの２８．６％に達した。図２には、このｒＣＢＦの変化量をＰＥＴ再構成画像（ＰＥＴイメージ）で示した。上記部分において特徴的に強いｒＣＢＦ応答の増加が観測された。
【００５０】
スコポラミン投与によるｒＣＢＦ消失
一方、スコポラミンのみを腓腹内に投与して、サルの掌に振動刺激を与えると、刺激を受けた掌の半球対側体性感覚皮質においてのｒＣＢＦ応答は減少した。スコポラミンを１から５０μg/kgの範囲の投与により上記ｒＣＢＦはその量に依存して減少し、５０μg/kgの投与ではｒＣＢＦは完全に消失した。この変化は、図３に示した投与量依存性から明らかなように、ＰＥＴイメージにおいて上記特定の領域のｒＣＢＦ増加が５０μg/kgの投与で実質的に消失したことからわかる。
【００５１】
被検神経作動薬投与によるｒＣＢＦの回復
スコポラミンの50μg/kg投与により完全に消失した振動刺激に対するｒＣＢＦ応答が、被検神経作動薬を投与することによりどの程度回復するか、及びその回復がどの程度持続するかを、フィソスチグミン、Ｅ２０２０およびタクリンを用いて検討した。フィソスチグミンの投与量は１から１０μg/kg、Ｅ２０２０の投与量は１０から１００μg/kg、タクリンの投与量は１００から１０００μg/kgの範囲で検討した。
【００５２】
スコポラミンを投与しない条件では、神経作動薬自体を同量投与しても、振動刺激により誘導されたｒＣＢＦに対し大きくは影響しなかった（図４（ｃ）、図５（ｃ）、図６（ｃ）参照）。ここでｒＣＢＦの(contralateral/ipsilateral)比は、振動刺激なしのコントロール条件下で約１であった。
【００５３】
また、測定された全ての神経作動薬（フィソスチグミン、Ｅ２０２０およびタクリン）において、図４（ａ）及び（ｂ）、図５（ａ）及び（ｂ）、及び図６（ａ）及び（ｂ）に示されるようにスコポラミンにより消失したｒＣＢＦ応答が、該作動薬の投与により回復した。
【００５４】
また、係る回復は、図７、８、９にそれぞれ示したように、投与量依存的に回復した。
【００５５】
さらに、ｒＣＢＦ応答回復への持続性測定では、図１０にまとめたように、Ｅ２０２０では４時間以上持続することが示され、次いでフィソスチグミンおよびタクリンがより短い時間持続することがわかった。
【００５６】
比較として、図１１には、血液−脳障壁を透過しない抗コリン作用薬であるスコポラミンブチルブロミド（100μg/kg）の投与のＰＥＴイメージを示した。明らかに、該薬物の投与によっては、スコポラミンにより消失したｒＣＢＦの回復増加は見られなかった。
【００５７】
さらに、他の被検神経作動薬であるＦＫ９６０についても、同様の条件で評価し、ｒＣＢＦ応答が回復することが確認された。
【００５８】
比較例
比較として、スコポラミンの50μg/kg投与により完全に消失した振動刺激に対するｒＣＢＦ応答が、アニラセタム（従来の脳循環代謝改善薬であって、アセチルコリン神経作用を介した記憶改善作用のないとされている）の投与によりどの程度回復するかを調べた。
【００５９】
図１２に示されるようにアニラセタムを10000μg/kg投与した場合においても有意の差のｒＣＢＦ応答の回復は見られなかった。
【００６０】
【発明の効果】
本発明に係る方法は、ヒトに近い霊長類であるサルを無麻酔状態で用い、アンタゴニストの投与により、ｒＣＢＦの応答が実質的に消失するというヒトの痴呆状態を誘導し、該消失したｒＣＢＦの被検神経作動薬の投与による回復に基づいて該被検神経作動薬を評価可能とする。すなわち、抗痴呆薬およびその候補化合物を、最も種差の少ない条件下で評価することが可能となり、従来の記憶力を指標とした評価法に比較して簡便かつ定量的な評価法となる。
【図面の簡単な説明】
【図１】図１は、本発明に係る神経作動薬を評価する方法を示すブロック図である。
【図２】図２は、生理的食塩水(saline)を投与した正常状態（コントロール）で体性感覚刺激を与えた場合のｒＣＢＦ応答を示す、ディスプレイ上に表示した中間調画像の写真である。
【図３】図３は、アセチルコリン神経系受容体のアンタゴニストで血液脳関門を通過して脳組織内に入るスコポラミンを用量を段階的に変化させて投与し、同一の体性感覚刺激に対する大脳皮質体性感覚野におけるｒＣＢＦ応答のＰＥＴイメージを示す、ディスプレイ上に表示した中間調画像の写真である。
【図４】図４（ａ）は、スコポラミン投与によりｒＣＢＦが消失したことを示すＰＥＴイメージを示す、ディスプレイ上に表示した中間調画像の写真である。図４（ｂ）は、スコポラミン投与により消失したｒＣＢＦが、フィゾスチグミンの投与により回復することを示すＰＥＴイメージを示す、ディスプレイ上に表示した中間調画像の写真である。図４（ｃ）は、フィゾスチグミン自体の投与ではｒＣＢＦの増加には影響しないことを示すＰＥＴイメージを示す、ディスプレイ上に表示した中間調画像の写真である。
【図５】図５（ａ）は、スコポラミン投与によりｒＣＢＦが消失したことを示すＰＥＴイメージを示す、ディスプレイ上に表示した中間調画像の写真である。図５（ｂ）は、スコポラミン投与により消失したｒＣＢＦが、Ｅ２０２０の投与により回復することを示すＰＥＴイメージを示す、ディスプレイ上に表示した中間調画像の写真である。図５（ｃ）は、Ｅ２０２０自体の投与ではｒＣＢＦの増加には影響しないことを示すＰＥＴイメージを示す、ディスプレイ上に表示した中間調画像の写真である。
【図６】図６（ａ）は、スコポラミン投与によりｒＣＢＦが消失したことを示すＰＥＴイメージを示す、ディスプレイ上に表示した中間調画像の写真である。図６（ｂ）は、スコポラミン投与により消失したｒＣＢＦが、タクリン（Tacrine)投与により回復することを示すＰＥＴイメージを示す、ディスプレイ上に表示した中間調画像の写真である。図６（ｃ）は、タクリン自体の投与ではｒＣＢＦの増加は影響しないことを示すＰＥＴイメージを示す、ディスプレイ上に表示した中間調画像の写真である。
【図７】図７は、スコポラミン投与により消失したｒＣＢＦが、フィゾスチグミンの投与量依存的に回復することを示す図である。
【図８】図８は、スコポラミン投与により消失したｒＣＢＦが、Ｅ２０２０の投与量依存的に回復することを示す図である。
【図９】図９は、スコポラミン投与により消失したｒＣＢＦが、タクリンの投与量依存的に回復することを示す図である。
【図１０】図１０は、スコポラミン投与により消失したｒＣＢＦが、フィゾスチグミン、Ｅ２０２０、及びタクリンの投与によるｒＣＢＦの回復の時間変化を示す図である。
【図１１】図１１（ａ）は、生理的食塩水を投与した場合のｒＣＢＦ応答を示す、ディスプレイ上に表示した中間調画像の写真である。図１１（ｂ）は、脳組織に入らないアンタゴニストであるスコポラミンブチルブロミドの投与は、同一投与量でも、ｒＣＢＦ応答の抑制は見られないことを示すＰＥＴイメージを示す、ディスプレイ上に表示した中間調画像の写真である。
【図１２】図１２は、スコポラミン投与により消失したｒＣＢＦが、アニラセタムの投与では回復しないことを示す図である。
【図１】
0003944278.tif 000004
【図２】
0003944278.tif 000005
【図３】
0003944278.tif 000006
【図４】
0003944278.tif 000007
【図５】
0003944278.tif 000008
【図６】
0003944278.tif 000009
【図７】
0003944278.tif 000010
【図８】
0003944278.tif 000011
【図９】
0003944278.tif 000012
【図１０】
0003944278.tif 000013
【図１１】
0003944278.tif 000014
【図１２】
0003944278.tif 000015