(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ベタイン及びラフィノースを有効成分として含有すること、を特徴とする脂肪肝改善剤。
【請求項２】
ベタイン及びラクチュロースを有効成分として含有すること、を特徴とする肝脂肪蓄積抑制剤。
【請求項３】
ベタイン及びラフィノースを有効成分として含有すること、を特徴とする肝脂肪蓄積抑制剤。
【請求項４】
ベタイン及びラフィノースを有効成分として含有すること、を特徴とする肝障害改善剤。
【請求項５】
ベタイン及びラクチュロースを有効成分として含有すること、を特徴とする肝障害改善剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、肝機能改善剤又は組成物に関するものである。更に詳細には、本発明は、食品素材成分であるアミノ酸を包含する含窒素化合物及び難消化性オリゴ糖を有効成分とする肝機能改善剤又は組成物に関する。
【０００２】
【従来の技術】
近年、我が国は、医療費急増、老齢化などの問題に直面している。また、食生活の変化に伴い、生活習慣病といわれている、心臓病、糖尿病、ガンなどが増加しており、予防医学の重要性が高まっている。食品分野においても、それら疾病予防という観点にたって、特定保健用食品を含め、機能性食品の開発が進められ、一般食品、補助食品による健康維持、治療効果を目指した食品開発が行われている。しかし、それら疾病の率は上昇傾向にあり、積極的なるそれら食品の開発が望まれている。
【０００３】
我が国における疾病、特に、人間ドックにて多く発見される疾病は肝機能障害である。この肝機能障害は、急性肝炎、肝不全、慢性肝炎、脂肪肝、肝硬変などが含まれるが、特に肝臓への脂肪蓄積に伴う疾病（脂肪肝）に起因しているのが多いのが現状である。
【０００４】
脂肪肝とは、肝細胞の脂質代謝の異常により発生する疾病で、肝細胞中に脂肪滴が出現し、異常に多量の脂肪が沈着する状態である。ヒトにおける脂肪肝は、食事におけるカロリーの過剰摂取などによる栄養過多、アルコールの過多なる摂取、高脂血症、更年期障害などが原因として知られている。正常な肝細胞では、大部分の脂肪は、リポタンパク質として存在し、脂肪滴が見られることはない。脂肪肝の状態が長期に経過すると肝硬変に移行する場合が多く、早期の治療が重要であり、生活習慣の改善、すなわち、食事中の栄養バランスとともに適度な運動が奨められている。
【０００５】
しかしながら、これまでは、肝臓機能を改善、または健康に維持するための、これといった処方はなかった。医療の現場では、いろいろな薬剤が使用されているが、副作用を回避するためには、あくまでも食事療法で対処するのが肝要である。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、上記した現状に鑑み、従来未知の新しいタイプの肝機能改善剤又は組成物を開発する目的でなされたものである。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記目的を達成するため各方面から検討の結果、安全性の面からの重要性から、飲食品、飲食品素材、飲食品や同素材を構成する又はその中に含まれる飲食品（素材）成分に着目し、副作用のないこれら成分の中から、肝機能を改善及び／又は維持する素材を探求した。
【０００８】
そこで本発明者らは、最初に、アミノ酸類に注目した。アミノ酸類としては、種々のアミノ酸製剤が、薬剤においては、肝機能に対するアミノ酸により治療は、これまで医療の現揚にて実施されてきた。例えば、アミノレバン（登録商標）、ヘバン（登録商標）などのアミノ酸製剤が肝硬変、肝不全等の改善を目的として使用されている。しかし、これらアミノ酸製剤は、肝疾患を直接、治療・改善するというより、肝疾患の栄養障害を改善するのを目的としているのが多いのが現状である。
【０００９】
また、メチル基を有するアミノ酸類、例えば、コリン、ベタイン、メチオニンは脂質代謝に関与し、肝機能に影響していることが、数多くの文献により報告されている。Ａ．Ｊ．Ｂａｒａｋら（ＡＬＣＯＨＯＬ、１３（４）、１９９６）は、リポプロテインの合成に関与するＳ−アデノシルメチオニン合成において、メチル基を有するアミノ酸類の摂取の重要性を報告してはいる。しかしながら、メチオニンは過剰摂取による弊害のある場合が一部指摘されているとともに、コリン、ベタインの投与では顕著な肝機能の維持・改善効果が見出せないのが現実である。ましてや、オリゴ糖、しかもガラクトースを含有するオリゴ糖とを併用する点についての報告もないところ、これらの併用によって極めて顕著な相乗的肝機能改善に成功した点についての知見は全くないのが技術の現状である。
【００１０】
また、近年、我が国が中心となって研究開発されてきた、難消化性オリゴ糖についても、肝疾患の治療効果を有するとの報告が一部なされている。しかしながら、それらのオリゴ糖は、アンモニア低下剤（渡辺ら；Ｐｈａｒｍａ  Ｍｅｄｉｃａ，Ｖｏｌ．１６、Ｎｏ．２、１９９８）としての用途であって、肝機能の維持・改善とは異なる。また、王らは（日本栄養・食糧学会誌、Ｖｏｌ．４８、Ｎｏ．３、１９９５）、ガラクトサミン肝障害発症をモデルとしたラット試験において、各種オリゴ糖の影響を調査し、ガラクトースを含むラクチュロース、ラフィノースがその発癌抑制に効果があることを報告している。しかし、肝毒性投与なしの試験において、また実際のヒトへのオリゴ糖投与が、肝機能の維持・改善に、効果があるという報告はいまだなされていない。ましてや、これらオリゴ糖とメチル基含有アミノ酸類との併用、しかもその併用によって極めて顕著な相乗的肝機能改善に成功した点についての知見は全くないのが技術の現状である。
【００１１】
更にまた、その他の食品素材成分においても、食物繊維、タウリン、グルタチオン、ビタミンＣ、ビタミンＢなどにおいて、肝機能の改善作用があるとの報告はあるものの、これといった効果を本発明者らの研究において確認されてもいないし、また、他の研究者から格別の報告もなされていない。
【００１２】
このような技術的背景のもと、本発明者らは、肝機能改善剤又は組成物を開発するにあたり、安全性の重要さにも鑑み、食品素材成分において肝臓機能を維持及び／又は改善できる素材があれば、ヒトの健康管理上、このうえなく貢献できるものであると確信し、鋭意研究したが、目的とする飲食品素材成分をスクリーニングすることができなかった。そこで本発明者らは、発想を転換して、各成分の単用ではなく、併用に着目し、各成分を広く選択した後、これらを併用してなる各種組み合わせについて広範なスクリーニングを行った。その結果、ベタインとラフィノースの併用の場合に卓越した相乗効果が奏されることをはじめて見出し、この有用新知見に基づき更に研究の結果、本発明の完成に至ったものである。
【００１３】
すなわち、本発明者らは、これまで、メチル基供与体として脂質代謝に関与し、肝機能維持に関わっているメチル基を有するアミノ酸類と、いまだ肝機能との関連において明確な報告がない難消化性オリゴ糖、特にガラクトースを含むオリゴ糖を併用することにより、肝機能の維持・改善に極めて明解なる効果を発揮することを見出し、本発明を完成させたものである。
【００１４】
本発明は、体内でメチル基供与体として働くアミノ酸類とガラクトースを含む難消化性オリゴ糖を主成分とする肝機能改善剤又は組成物に関するものである。それは、メチル基を有するアミノ酸類（コリン、ベタインなど）と共に、ガラクトースを含む難消化性オリゴ糖（ラフィノース、ラクチュロースなど）を併用することにより、顕著な肝機能を維持・改善することを解明し、このアミノ酸類と難消化性オリゴ糖を主成分とする肝機能改善組成物が、肝機能を健康に維持することを新たに見出したことに基づくものである。
【００１５】
本発明において、体内でメチル基供与体として働く含窒素化合物としては、コリン、ベタイン、メチオニン、Ｓ−アデノシルメチオニン（ＳＡＭ）、ビタミンＢ12、葉酸、カルニチン等の少なくともひとつが使用され、また、ガラクトースを含む難消化性オリゴ糖としては、ラフィノース、ラクチュロース、大豆オリゴ糖、ガラクトオリゴ糖、メリビオース、スタキオース等の少なくともひとつが使用される。なお、体内でメチル基供与体として働く含窒素化合物は、アミノ酸を包含するものであるので、以下、これを、メチル基を有するアミノ酸（類）あるいは単にアミノ酸類ということもある。
【００１６】
なお、本発明において、肝機能の維持・改善とは、肝機能を悪化させないということであり、また急性肝炎、肝不全、慢性肝炎、脂肪肝、肝硬変など疾病の治療効果を指し、具体的には、例えば肝臓の脂肪蓄積防止、または、肝機能の臨床検査項目となっているγ−ＧＴＰ、ＧＯＴ、ＧＰＴの上昇抑制を指している。また更には、肝機能低下に伴う、血中中性脂肪、血中ＬＤＬ−コレステロールの上昇の抑制作用も含まれる。
【００１７】
本発明の肝機能改善剤又は組成物は、アミノ酸類と難消化性オリゴ糖を主成分とするものであるが、アミノ酸類においては、一般のアミノ酸と比較し、メチル基を有するアミノ酸類がメチオニン代謝を介して肝機能維持に関与していることは多くの報告、及び本発明者らの研究により裏付けされている。しかし、その効果は、バラツキが多く、また、明確に発揮することはまれである。また、オリゴ糖については、これまで肝性脳症での血中アンモニア低下剤としての機能が主であり、肝機能の維持・改善については報告は少なく、メチル基を有するアミノ酸類、食物繊維素材などとの比較における肝機能への効果は低いというのが、これまでの学会や当業界での認識である。
【００１８】
本発明者らは、各種の飲食品素材成分からの肝機能を維持又は改善できる素材を追求する過程において、上記したように肝機能の維持又は改善に対する明確な有効性が示されていない、メチル基を有するアミノ酸類と、ガラクトースを含有するオリゴ糖にあえて着目し、これらを併用したところ、全く予期せざることに、肝機能の維持・改善に顕著に効果を発揮することを見出し、本発明を完成させたものである。
【００１９】
なぜ本発明に係るアミノ酸とオリゴ糖との混合組成物が肝機能の維持・改善に効果を発揮する点の詳細については、今後の研究にまたねばならないが、現時点においては、肝臓の環境が常に変化している中、メチル基を有するアミノ酸類がメチオニン代謝を介してリポタンパク合成等で肝中の脂質代謝を調整するとともに、オリゴ糖が腸内発酵を介して代謝での副産物（アンモニアなど）を浄化させ、その相乗的効果が肝機能の維持・改善に結びついているものと、一応、推測している。
【００２０】
本発明に係る剤又は組成物は、医薬品又は飲食品として使用することができ、粉末状のままで摂取しても、あるいは水に溶解して水溶液等として摂取しても良い。摂取方法も、経口投与、直腸投与、静脈注射、点滴等の一般的な投与経路を経て投与できる。
【００２１】
経口投与の場合には、組成物自体を投与する以外に、医薬上許される担体、賦形剤、希釈剤と共に混合し、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、トローチ剤等として用いても良い。但し固体散剤や錠剤では吸収に時間を要することがあるため、組成物自体の経口投与が望ましい。この場合には、適切な添加剤、例えば塩化ナトリウムのような塩類、ｐＨ調節剤、キレート剤と共に前述した溶液として投与しても良い。注射剤として使用する場合には、適切な緩衝剤や等張剤等を添加し、滅菌蒸留水に溶解したものを用いれば良い。
【００２２】
摂取時期にも格別の制限はなく、任意の時期に摂取すればよく、例えばドリンク剤（清涼飲料、粉末飲料、等の飲食品タイプのほか、医薬品としての飲料等を含む）として摂取すると好適である。
【００２３】
本剤又は組成物は、上記したように、医薬品である肝機能改善剤として投与できるほか、肝機能改善飲食品としても投与できる。飲食品の場合、本組成物をそのまま飲食品として利用できるほか、他の飲食品、それを製造するための飲食品素材、あるいはそれを構成する素材成分の少なくともひとつを混合して用いることもできる。なお、本剤又は組成物は、医薬品、飲食品のいずれの場合においても、アミノ酸類とオリゴ糖を常に同時に服用する必要はなく、別々に服用してもさしつかえない。
【００２４】
本発明に係る肝機能改善剤又は組成物は、天然物由来で格別の毒性は認められないため、その投与量は広範に設定することができ、ヒトの性別、体質、年齢、症状等により異なるが、１日の摂取量としては、成人の場合、次のとおりである：Ｓ−アデノシルメチオニン０．０１〜０．１ｇ、コリン０．２〜１．０ｇ、メチオニン０．２〜１．０ｇ、ベタイン１．０〜６．０ｇ、オリゴ糖２．０〜６．０ｇ。また、アミノ酸類とオリゴ糖の混合ないし併用比率は、適宜定めることができ、例えば、ベタインとラフィノースの場合は、１：１０〜１０：１の範囲で適宜選択できるが、通常、オリゴ糖の使用比率はアミノ酸類と同等又はそれ以上とするのがよい。しかしながら、これらの使用量、使用比率については例示として挙げたものであって、本剤又は組成物はその安全性が高いこととも相まって、上記範囲から逸脱しても構わない。
【００２５】
以下、本発明の実施例について述べる。
【００２６】
【実施例１】
（脂肪蓄積抑制効果）
１）実験方法
４週齢のＳＤ系雄ラット６匹１群を４群用意し、下記表１に示す基本飼料Ａと、該基本飼料Ａにアミノ酸類及び／又はオリゴ糖をそれぞれ以下のように混合して、試験飼料（Ｂ）、（Ｃ）、（Ｄ）をそれぞれ調整した。
（対照区）：基本飼料のみ
（Ｂ）  ：基本飼料９９部＋ベタイン１部
（Ｃ）  ：基本飼料９７部＋ラクチュロース３部
（Ｄ）  ：基本飼料９６部＋ベタイン１部＋ラクチュロース３部
【００２７】
【表１】
0003908513.tif 000002
【００２８】
これらの飼料を用いて、ラットを１２週間飼育した。飼育に当り、飼料と水は特に制限することなく平常給与とし、１２週目に、腹大動脈より採血し、血液分析するとともに、肝臓を摘出して脂質分析に供した。
【００２９】
２）結果
得られた結果を下記表２に示した。なお、値は平均値±標準誤差（ＳＥ）で示した。
【００３０】
【表２】
0003908513.tif 000003
【００３１】
上記の結果から明らかなように、対照区に対して、飼料（Ｂ）区、飼料（Ｄ）区は、肝臓のコレステロール、脂質とも、顕著な低下効果を示し、また、血中中性脂肪値においても同じ効果が示された。その反面、飼料（Ｃ）区のラクチュロース５％添加区は、ややそれらの値が対照区より低い傾向を示すものの明確な効果ではなかった。飼料（Ｂ）区と飼料（Ｄ）区の比較においては、ベタインとラクチュロースを混合した飼料（Ｄ）区が、ベタインのみを混合した飼料（Ｂ）区より、更に明確に肝臓のコレステロール値、及び脂質値の低下作用を示した。
【００３２】
以上の実施例１より、オリゴ糖単独、またはアミノ酸類単独の投与より、本発明のアミノ酸類とオリゴ糖を組成物が、より顕著に、肝臓中の脂質蓄積上昇を抑制することが認められた。
【００３３】
【実施例２】
（脂肪肝改善効果）
１）実験方法
４週齢のＳＤ系雄ラット６匹一群を７群用意し、前記表１に示した基本飼料Ｂを８週間投与した後、１群を腹大動脈よりの採血と肝臓の脂質分析に供した。残りの７群に、該基本飼料Ａ（飼料（Ａ））のみ、及び、該基本飼料Ａにアミノ酸類及び／又はオリゴ糖をそれぞれ以下のように混合して、飼料（Ｂ）、（Ｃ）、（Ｄ）、（Ｅ）、（Ｆ）をそれぞれ調整した。
【００３４】
（Ａ）：基本飼料Ａのみ
（Ｂ）：基本飼料Ａ９９部＋ベタイン１部
（Ｃ）：基本飼料Ａ９９部＋メチオニン１部
（Ｄ）：基本飼料Ａ９７部＋ラフィノース３部
（Ｅ）：基本飼料Ａ９６部＋ベタイン１部＋ラフィノース３部
（Ｆ）：基本飼料Ａ９６部＋メチオニン１部＋ラフィノース３部
【００３５】
これらの飼料を用いて、ラットを８週間飼育した。飼育に当り、飼料と水は特に制限することなく平常給与とし、８週目に、腹大動脈より採血し、血液分析するとともに、肝臓を摘出して脂質分析に供した。
【００３６】
２）結果
得られた結果を下記表３、表４に示した。なお、値は平均値±標準誤差（ＳＥ）で示した。
【００３７】
【表３】
0003908513.tif 000004
【００３８】
【表４】
0003908513.tif 000005
【００３９】
その結果、基本飼料Ｂを６週間投与した１群は、高い肝臓中のコレステロール及び脂質の蓄積を示した。また、その後、飼料（Ａ）〜（Ｆ）を投与した群は、飼料中にラードが含まれないため、血中脂質の上昇は示さなかった。しかし、飼料（Ａ）を与えた一群に対して、ベタインとラフィノースを混合した飼料（Ｅ）、及びメチオニンとラフィノースを混合した飼料（Ｆ）の群が、肝臓のコレステロール、脂質とも、顕著な低下効果を示し、また、血中中性脂肪値においても同じ効果が示された。アミノ酸類を単独混合した飼料（Ｂ）及び飼料（Ｃ）の群は、肝臓中のコレステロール及び脂質の低下作用を示すものの、顕著な効果ではなかった。なお、ラフィノースを単独混合した飼料（Ｄ）の群は、飼料（Ａ）を与えた群とほぼ同じの低下作用であった。
【００４０】
以上の実施例２から明らかなように、肝臓中に蓄積した脂質に対して、オリゴ糖単独、またはアミノ酸類単独の投与より、本発明のアミノ酸類とオリゴ糖を一緒に投与する方が、肝脂質の低減効果が顕著であることが認められた。
【００４１】
【実施例３】
（飼料交換による脂肪蓄積抑制効果）
１）実験方法
４週齢のＳＤ系雄ラット６匹１群を４群用意し、１群と２群には表１に示す基礎飼料Ｂを、３群と４群には表１に示すベタインとラフィノースが３％配合された試験飼料Ｃを６週間給与した。６週目に１群と３群は腹大動脈よりの採血と肝臓の脂質分析に供した。その後、２群と４群には、給与飼料を交換し引き続いて、２群には試験飼料Ｃ、４群には基木飼料Ｂを６週間給与した。試験終了１２週目に、２群と４群は、腹大動脈より採血し、血液分析に供するとともに、肝臓を摘出して脂質分析に供した。
【００４２】
２）結果
得られた結果を下記表５に示した。なお、値は平均値±標準誤差（ＳＥ）で示した。
【００４３】
【表５】
0003908513.tif 000006
【００４４】
上記結果から明らかなように、試験開始６週目で、基本飼料Ｂを与えた１群は、肝臓のコレステロール及び脂質、そして血中中性脂肪とも、顕著な上昇を示したのに対し、ベタインとラフィノースを３％混合配合した試験飼料Ｃを与えた３群は、上昇抑制作用を示した。また、６週目で飼料を交換し、試験飼料Ｂからベタインとラフィノースを３％混合配合した試験飼料Ｃに切り替えた３群は、肝臓のコレステロール及び脂質、そして血中中性脂肪の値において、６週目の１群より顕著な低下作用を示した。また、６週目で試験飼料Ｃから試験飼料Ｂに切り換えた４群は、６週目の３群のそれらの値より高い値であった。
【００４５】
以上の実施例３より、本発明のアミノ酸類とオリゴ糖の混合物（ベタインとラフィノース混合）は、肝脂質の上昇を抑制するとともに蓄積した肝脂質を低減する、肝脂質調整作用を有することが認めれた。
【００４６】
【実施例４】
（ヒトによる肝機能改善作用−１）
脂肪肝及びアルコール性肝障害をもつ下記被験者１〜６（男４名、女２名、３６〜５８歳）に、本発明肝機能改善剤（ベタイン：ラフィノース＝２：１の混合粉末）を１回３グラムを１日３回経口的に服用させた。投与期間は２ヶ月間とし、その期間、薬剤の併用は中止し、食事や、アルコールの摂取などは日常通りとした。
【００４７】
被験者１；３６歳、女性、肥満（脂肪肝）
被験者２；４９歳、女性、肥満（脂肪肝）
被験者３；５２歳、男性、肥満（脂肪肝）
被験者４；３９歳．男性、アルコール性肝障害
被験者５；５８畿、男性、アルコール性肝障害
被験者６；４３歳、男性、アルコール性肝障害
【００４８】
下記表６、表７に、各被験者についての血液生化学データを示す。これらの表は、投与開始１週間前に、投与２ヶ月後のデータを比較したものである。
【００４９】
【表６】
0003908513.tif 000007
【００５０】
【表７】
0003908513.tif 000008
【００５１】
上記結果から明らかなように、本発明肝機能改善剤の投与により、被験者によってバラツキはあるものの、肝機能（γ−ＧＴＰ、ＧＯＴ、ＧＰＴ）の平均においては改善され、特に高い値を示す被験者においては、顕著な効果を示した。また、血中総コレステロールには変化がなかったが、血清中性脂肪においてはすべての被験者で顕著な低下を示した。いずれについても、悪化した例は見られなかった。
【００５２】
【実施例５】
（ヒトによる肝機能改善作用−２）
アルコール性肝障害によると思われる肝機能（γ−ＧＴＰ）が低下している被験者（男１０名、４３〜５８歳）を２チームに分け、１チームには、本発明肝機能改善剤（ベタイン：ラクチュロース＝１：１の混合粉末）を１回３グラムを１日３回経口的に服用させた。また、他のチームには、プラセボとしてグルコースを服用させた。投与期間は２ヶ月間とし、その期間、薬剤の併用は中止し、食事や、アルコールの摂取などは日常通りとした。
【００５３】
各被験者についての血液中のγ−ＧＴＰのデータを表８として示した。この表は、投与開始１週間前と、投与２ヶ月後のデータを比較した表である。その結果、本発明肝機能改善剤の投与により、すべての被験者が肝機能（γ−ＧＴＰ）が統計的に有意差をもって改善されたが、プラセボを投与したチームにおいては、γ−ＧＴＰの値に変化は見られなかった。
【００５４】
【表８】
0003908513.tif 000009
【００５５】
【実施例６】
（急性毒性）
ベタインとラフィノースの等量混合物をラットに対して５００ｍｇ／日経口投与した。その結果、１０日間経過後においても急性毒性は認められなかった。
【００５６】
【発明の効果】
本発明の剤又は組成物は、食品素材成分よりなり、副作用がなく、急性肝炎、肝不全、慢性肝炎、脂肪肝、肝硬変などの肝疾患の治療ならびに予防することができる優れた肝機能改善剤又は組成物である。