(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の一般式の化合物。
Ａ−Ｂ（グループＩ）、
ここで、Ｂは、
0003970317.tif 000061
ｎ＝１又は２；
ｍ＝０、１又は２；
Ｘ＝ＣＨ2、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ2、ＮＨ又はＮＲ1で、Ｒ1は低級アルキル（Ｃ1〜Ｃ6）；
−Ｙ＝−Ｎ、−ＣＨ、又は＝Ｃ（Ａの−ＣＯ基が−ＣＨ＝又は−ＣＦ＝で置き替えられている時）；
Ｒ＝Ｈ、ＣＮ、ＣＨＯ、Ｂ（ＯＨ）2；
Ａは、Ｙに結合している；及び、
（ａ）ＲがＨである時、Ａは、脂肪族Ｃ4−Ｃ10側鎖、又は脂肪族Ｃ4−Ｃ10単環式又は二環式側鎖を持つα−アミノ酸から誘導されるα−アミノ−アシル基、該アシル基の酸素原子は任意に硫黄原子で置き換えられていてもよく、又は次の一般式のβ−アミノ−アシル基である；
0003970317.tif 000062
ここで、ｐは１〜６で、いずれの場合でも、任意に環は不飽和を有し、及び／又は該環における炭素原子はＮ及び／又はＳで置換されていてもよい；
（ｂ）Ｒ＝ＣＮである時、Ａは、（ａ）で定義されたものと同様であるか、又はＩｌｅ、Ｌｙｓ、Ｐｒｏ、又はｔｅｒｔ−ブチル側鎖を持つＬ−α−アミノ酸から誘導されるα−アミノ−アシル基でもよい；そして、
（ｃ）Ｒ＝ＣＨＯ又はＢ（ＯＨ）2である時、Ａは、（ａ）で定義されたβ−アミノ−アシル基である。
【請求項２】
Ｂが５員環であり、ｍが０又は１であり、ＸがＣＨ2又はＳであり、−Ｙが−Ｎであり、ＲがＣＮである、請求項１の化合物。
【請求項３】
次の一般式の化合物。
Ａ−Ｂ（グループＩＩ）又は
0003970317.tif 000063
（グループＩＩＩ）、
グループＩＩの化合物において、Ｂは、
0003970317.tif 000064
ｎ＝１又は２；
ｍ＝０、１又は２；
Ｘ＝ＣＨ2、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ2、ＮＨ又はＮＲ1で、Ｒ1は低級アルキル（Ｃ1〜Ｃ6）；
−Ｙ＝−Ｎ、−ＣＨ、又は＝Ｃ（Ａの−ＣＯ基が−ＣＨ＝又は−ＣＦ＝で置き替えられている時）；
Ｒ＝Ｈ、又はＣＮ；
Ａは、Ｙに結合している；及び
Ａは、
0003970317.tif 000065
であり、ここで、
ａ＝１〜５；
Ｄ＝−Ｇ−（ＣＨ2）b−（Ｒ4）q−Ｒ3；
Ｇ＝Ｏ、ＮＨ又はＮＭｅ；
ｂ＝０〜１２；
ｑ＝０〜５；
Ｄ1は、Ｇ≠Ｏの場合のＤ；
Ｒ4＝Ｚ−ＮＨ−（ＣＨ2）c−又はＮＨ−Ｚ−（ＣＨ2）c−で、ｃ＝１〜１２、及びＺ＝ＣＯ、ＣＨ2又はＳＯ2；
Ｒ3＝ＣＯ2Ｈ又はその低級アルキル、フルオロアルキル又はシクロアルキル（Ｃ1〜Ｃ8）、又は芳香族又はヘテロ芳香族（５又は６員環、単環又は二環）のエステル、ＣＯＮＨ2、ＣＯＮＨＮＨ2、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＣＯＮＨＮＲ5Ｒ6、ＰＯ3Ｈ又はその低級アルキル、フルオロアルキル又はシクロアルキル（Ｃ1〜Ｃ8）、又は芳香族又はヘテロ芳香族（５又は６員環、単環又は二環）のエステル、ＳＯ3Ｈ、ＳＯ2ＮＨ2、ＳＯ2ＮＲ5Ｒ6、ＯＨ、ＯＲ5、置換又は非置換の５員又は６員の単環又は二環のアリール又はヘテロアリール（置換基は、Ｆ、Ｃｌ、Ｉ、Ｂｒ、ＯＨ、ＯＲ5、ＮＯ2、ＳＯ3Ｈ、ＳＯ2ＮＨ2、ＳＯ2ＮＲ5Ｒ6、ＮＨ2、ＮＲ5Ｒ6、ＣＯ2Ｒ5、ＣＦ3、ＣＮ、ＣＯＮＨ2、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＨＣＯ2Ｒ5、ＣＨ（：ＮＲ5）ＮＲ5Ｒ6、ＮＨ−ＣＨ（：ＮＲ5）ＮＲ5Ｒ6及びＲ5から選ばれる）、ＮＨ2、ＮＲ5Ｒ6、ＮＨＣＯ2Ｒ5、ＮＨＳＯ2ＮＲ5Ｒ6、−ＮＨＣＯＲ5、ＮＨ−ＳＯ2Ｒ5、ＮＨ−ＣＨ（：ＮＲ5）ＮＲ5Ｒ6、ＮＨＣＯＮＲ5Ｒ6、エーテル又はグリコシド結合を介して結合されていてもよい糖、ＣＯ−アミノ糖、ＮＨＣＯ−アミノ糖又はＮＨＣＳ−アミノ糖、前記アミノ糖はグルコサミン又はガラクトサミンである；及び
Ｒ5及びＲ6は、独立に、Ｈ及び炭素原子数８までの低級アルキル、フルオロアルキル及びシクロアルキル基、及び炭素原子数１１までのアリール、ヘテロアリール及びアルキルヘテロアリール基から選ばれるか、又は、Ｒ5及びＲ6は、共に（Ｃ3〜Ｃ8）の鎖を含んでもよく、又は、
0003970317.tif 000066
ここで、Ｒ1＝Ｈ又はＭｅ、
Ｅ＝Ｊ−（ＣＨ2）b−（Ｒ4）q−Ｒ3、
Ｊ＝ＣＯ、ＣＨ2又はＳＯ2、そして
ａ、ｂ、ｑ、Ｒ3及びＲ4は、（ｉ）で定義されたものと同じである；又は
0003970317.tif 000067
ここで、Ｒ2＝Ｈ又はＭｅ、そして
Ｌ＝（ＣＨ2）d−［ＣＯ］r−（ＣＨ2）b−（Ｒ4）q−Ｒ3又は（ＣＨ2）e−ＮＲ1−（ＣＨ2）b−（Ｒ4）q−Ｒ3で、
ｒ＝０又は１、
ｄ＝０〜４、
ｅ＝２〜４、そして
ｂ、ｑ、Ｒ3及びＲ4は、（ｉ）で定義されたものと同じであり、
グループＩＩＩの化合物において、
Ａ及びＢは上記定義の通りであり、
εは、ＣＨ2、Ｏ、ＮＨ、ＣＯ、Ｓ、ＳＯ2、Ｐｈ及びＮＭｅから選択されるものであり、
Ａ残基中の末端基Ｒ3がεにより置換されている。
【請求項４】
表１−８の実施例１〜１４８及び１５２から選ばれる、化合物。
【請求項５】
請求項４記載の少なくとも１種の化合物を含む、ＤＰ−ＩＶ媒介過程の破壊による病状治療のための、医薬組成物。
【請求項６】
表９の実施例２、７、１１、２０、２３、３５、３８、４４、５９、６６、９７、１１０、１３６及び１４３から選ばれる少なくとも１種の化合物を含む、ＤＰ−ＩＶ媒介過程の破壊による病状治療のための、医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
背景
ＤＰ−ＩＶ（ＥＣ３．４．１４．５）は、或る種のペプチドのＮ−末端からジペプチドを開裂するその能力によって、ネズミの腎臓で最初に同定された膜結合セリンプロテアーゼである（Hopsu-Havu, V.K. and Glenner, G.G.,Histochemie, 1966, 7, 197）。このジペプチドは、Ｘ−Pro又はＸ−Ala（Ｘは任意のアミノ酸）でなければならない。Ｘ−プロリンは、Ｘ−Alaより効率よく開裂する。
ＤＰ−ＩＶは、哺乳動物組織中に広く分布し、腎臓、腸上皮及び胎盤で大量に見出される（Yaron, A. and Naider, F., Critical Reviews in Biochem. Mol. Biol. 1993, 28(1), 31）。人間の免疫系では、この酵素は、酵素が、細胞表面抗原CD26と同義である事が示されているCD4+タイプの活性化T-リンパ球として、専ら表示される。
人間の生理学でのＤＰ−ＩＶの正確な役割は、完全に理解されていないが、最近の研究では、この酵素が、人間の生理学上並びに病態生理学上において主たる役割を明らかに有することが示された。例えば、
（ａ）免疫応答：ＤＰ−ＩＶの発現は、マイトジェン又は抗原刺激で、T-細胞で増加する（Mattern, T. et al., Scand. J. Immunol. 1991, 33, 737）。ＤＰ−ＩＶのインヒビター及びＤＰ−ＩＶに対する抗体は、投与依存法では、マイトジェン及び抗原刺激されたT-細胞の増殖を抑制する（Schon, E. et al., Biol. Chem. Hopper-Seyler, 1991, 372, 305及びその中の参考例）。
サイトカインの産生、ＩＬ−２媒介細胞増殖及びＢ−細胞ヘルパー活性の様なＴ−リンパ球の様々な機能は、ＤＰ−ＩＶ活性に依存することが示されている（Schon, E. et al., Scand. J. Immunol. 1989, 29, 127）。最近、報告された（Flenke, G. R. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1991, 88, 1556）ボロプロリン（boroproline）をベースとしたＤＰ−ＩＶインヒビターは、不安定にも拘わらず、マウスのCD4+T-ヘルパー細胞で、抗原誘発リンパ球増殖及びＩＬ−２産生を抑制するのに効果的であった。その様な硼酸インヒビターは、免疫チャレンジで誘発される抗体産生のマウス起因抑制で、in vivoで有効であることが示された（Kubota, T. et al., Clin. Exp. Immunol. 1992, 89, 192）。その他の最近の論文では、免疫応答でのＤＰ−ＩＶの係わり合いを証明している（例えば、Tanaka, T. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. NY, 1993, 90, 4586；Hegen, M. et al., Cell Immun. 1993, 146, 249;Subramanyan, M. et al., J. Immunol. 1993, 150, 2544）。ＤＰ−ＩＶの重要性は、膜内外ホスファターゼCD45に関するその細胞表面に対する幾人かの研究者によって示される（Torimoto, Y. et al., J. Immunol. 1991, 147, 2514）。CD45-DP-IVの結合は、DP-IVインヒビター又は非活性部位リガンドで、多分分裂される。CD45は、T-細胞を特徴付ける為の複合成分として知られる。
（ｂ）最近、パリのパスツールインスティテュートから発行された新聞（及び、その後に、the 8th Cent. Gardes Meeting, Pris, 25-27th October 1993，でのA. G. Hovanessianの講演）では、ＤＰ−ＩＶが、CD4+T-細胞において、HIV-1及びHIV-2ウイルスの侵入及び感染にとって必須であった事を報告している。フランスのグループは、ＤＰ−ＩＶが、そのウイルスのgp120エンベロープグリコプロテインのV3ループと相互反応し、開裂したことを報告している。彼らは、又、ＤＰ−ＩＶに対するインヒビター又は抗体は、ウイルスの細胞内への侵入を防止した事を報告している。HIV-1に感染した個人由来のT-細胞では、CD26発現の選択的減少が存在すること（Valle-Blazquez, M. et al., J. Immunol. 1992, 149, 3073）、及びHIV-1 Tatタンパク質は、ＤＰ−ＩＶに結合すること（Subramanyam, M. et al., J. Immunol. 1993, 150, 2544）は、以前に知られていた。
（ｃ）最近、肺内皮のＤＰ−ＩＶが、肺転移性ラットの乳及び前立腺癌細胞に対する接着分子であることが示された（Johnson, R. C. et al., J. Cell. Biol. 1993, 121, 1423）。ＤＰ−ＩＶは、フィブロネクチンに結合することが知られており、幾つかの転移性腫瘍細胞は、その表面上に、大量のフィブロネクチンを運ぶことが知られている。
（ｄ）ＤＰ−ＩＶは、T-細胞の表面で、酵素アデノシンデアミナーゼ（ADA）と結合することが示されている（Kameoka, J. et al., Science, 1993, 261, 466）。ADA不足は、人間においては、重症複合型免疫不全（severe combined immunodeficiency deisease）（SCID）の原因となる。このADA-CD26相互反応は、SCIDの病態生理学へのクルーを用意するかも知れない。
（ｅ）高水準のＤＰ−ＩＶの発現は、乾癬、慢性関節リウマチ（RA）及び偏平苔蘚患者の人間の皮膚の線維芽細胞において見出されている（raynaud, F. et al., J. Cell. Physiol. 1992, 151, 378）。
（ｆ）高いＤＰ−ＩＶ活性は、良性の前立腺肥大の患者及び前立腺（prostatosome）の組織ホモジェネートにおいて見出されている（Vanhoof, G. et al., Eur. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1992, 30, 333）。
（ｇ）ＤＰ−ＩＶは、N-末端の終わりから２番目にプロリン又はアラニンを持つ循環ペプチド、例えば、物質Ｐ、成長ホルモン放出因子及びグルカゴン／血管作用性腸管ポリペプチドファミリーのメンバーの分解及び不活性化に対して応答可能であることが示されている（Menthein, R. et al., Eur. J. Biochem. 1993, 214, 829）。
（ｈ）高いレベルのＤＰ−ＩＶは、歯根膜炎患者の歯肉において観察されている（Cox, S. W. et al., Arch. Oral. Biol. 1992, 37, 167）。
（ｉ）様々な病理学的条件での高い（或いは時に低い）レベルのＤＰ−ＩＶについて、その他多数の報告も存在する。
上記から、当然、ＤＰ−ＩＶの有力なインヒビターは、人間の病気の治療用薬剤として有用であることになる。その様なインヒビターは、
（ａ）例えば、組織移植における免疫抑制剤；例えば、炎症腸病、多発硬化症、ＲＡの様な様々な自己免疫症でのサイトカイン放出抑制剤、
（ｂ）Ｔ−細胞へのＨＩＶの侵入防止、それによる、ＡＩＤＳの予防及び治療に有用な薬剤、
（ｃ）転移防止、特に乳及び前立腺腫瘍の肺への転移を防止する為の薬剤、
（ｄ）皮膚病、例えば乾癬、偏平苔蘚治療剤、
（ｅ）精子の運動性を抑制する、従って雄の避妊薬として作用する薬剤、
（ｆ）良性の前立腺肥大に有益な薬剤、
として有用である。
ＤＰ−ＩＶのインヒビター
これまでに報告されたＤＰ−ＩＶ酵素活性の唯一の競合インヒビターは、上述の不安定な硼酸
0003970317.tif 000002
であり、（Bachovchin et al., WO91/16339,1991年10月）ＤＰ−ＩＶに対してナノメーター範囲のKi値を有し、単純なアミノ酸ピロリジド又はチアゾリド（Neubert et al., DD 296075 A5, 1991年11月）で、単に穏やかな効能（Ki>0.1μM）を有する。同じドイツ特許でクレームされているアミノ-アシルプロリンアルデヒドは、アルデヒド機能を持つN-末端アミノ基のたやすい分子内縮合によっては合成できない。
ここに、本発明者は、化学的に安定な
0003970317.tif 000003
ＤＰ−ＩＶの、良く効く競合的インヒビター（10-6〜10-10の範囲のKi値を持つ）を開示する。それらは、３つの広いグループの化合物に分けられる（グループＩ、ＩＩ及びＩＩＩ）。
グループＩ
これらは、ＤＰ−ＩＶの活性部位にしっかりと結合し、ＤＰ−ＩＶの表面に結合可能な任意の修飾リガンドの付着の妨害なしに、その蛋白質加水分解活性を抑制する様に設計された分子である。グループＩの化合物は、免疫抑制剤；抗−ＨＩＶ感染性剤；活性化Ｔ−細胞からの、ある種のサイトカイン（例えば、ＩＬ−２、ＩＬ−６、γ−ＩＮＦ）の放出を抑制する為の薬剤として有用である。最初に参照された硼酸及びピロリジドは、この範疇に入る。
グループＩＩ
これらは、グループＩの化合物から展開される。然しながら、これらは、一般構造において、Ａで定義されるアミノ酸の側鎖に長鎖の拡張部分を含む。得られる化合物は、ＤＰ−ＩＶの活性部位にしっかりと結合するが、長鎖の拡張部分は、酵素活性部位から突き出て、ＤＰ−ＩＶの表面に結合可能な任意の他のリガンドの付着を防ぐ働きをする。この化合物は、グループＩの化合物と同じ用途を有するが、更に、ＤＰ−ＩＶと、（ｉ）ＣＤ４５（ｉｉ）ＨＩＶ−１のｇｐ１２０Ｖ３ループ（ｉｉｉ）腫瘍細胞表面フィブロネクチン（ｉｖ）Ｔ−細胞活性化にとって重要な任意の他のリガンドとの相互反応、Ｔ−細胞中へのウイルスの侵入又は腫瘍細胞癒着をブロックすることが出来る。
グループＩＩＩ
このグループは、新規な二量体から成り、ＤＰ−ＩＶのインヒビターに関わる２つの活性部位は、長鎖による一般構造で、Ａで表示されるそれらのアミノ酸残基の側鎖を介して結合される。これらの二量体は、同時に、ＤＰ−ＩＶの２分子を抑制出来、ＤＰ−ＩＶの表面に結合する修飾リガンドを防止する。これらの二量体は、グループＩＩの化合物と同じ用途を有するが、一層効果的である。
本発明は、ＤＰ−ＩＶ媒介過程のインヒビターを提供するもので、インヒビターは、次の一般式を有する。
0003970317.tif 000004
ここで、Ｂは、
0003970317.tif 000005
であり、ｎ＝１又は２；ｍ＝０、１又は２；Ｘ＝ＣＨ2、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ2、ＮＨ又はＮＲ1で、Ｒ1は、低級アルキル（C1〜C8）；
Ａは、Ｙに結合する；
-Y＝-N、-CH、又は=C（Aの-CO基が-CH=又は-CF=で置き替えられる時）；
R＝Ｈ、ＣＮ、ＣＨＯ、Ｂ（OH）2、Ｃ≡C-R7、又はCH=N-R8；
R7＝Ｈ、Ｆ、低級アルキル（C1〜C6）、ＣＮ、ＮＯ2、OR9、CO2R9、又はCOR9；
R8＝Ph、OH、OR9、OCOR9又はOBn；
R9＝低級アルキル（C1〜C6）；及び、ω又は両εの何れかは存在しなくてもよい。
Ａの構造は、部位ＢのＲの性質及び、得られる化合物が属するグループの性質に依存する。
グループＩの化合物
（ａ）Ｒ＝Ｈ
Ａは、環状脂肪族側鎖（例えば、Ｃ4〜Ｃ10、単環又は二環）を持つα−アミノ酸から誘導されるα−アミノ−アシル基で、環状脂肪族側鎖の環は、一種以上のヘテロ原子、例えばＬ−シクロヘキシルグリシン、Ｌ−シクロペンチルグリシン、Ｌ−デカヒドロナフチルグリシン、Ｌ−ピペリジルグリシンを含んでもよい。
又は、
Ａは、次の一般式のβ−アミノ−アシル基である。
0003970317.tif 000006
ここで、ｐ＝１〜６、環は、ＣＨ2単位を置換する一種以上のヘテロ原子を含んでもよい。
上記（ａ）のα及びβ−アミノ−アシル基は、共にその環に或る種の不飽和、例えば、
0003970317.tif 000007
を含んでもよく、又一種以上のヘテロ原子を含んでもよい。
（ｂ）Ｒ＝ＣＮ；Ｃ≡Ｃ−Ｒ7又はＣＨ＝Ｎ−Ｒ8
Ａは、上記（ａ）で定義されたものと同様であるが、更に、親脂性側鎖、例えば、Ｉｌｅを持つ任意のＬ−α−アミノ酸から誘導されてもよい。
（ｃ）Ｒ＝ＣＨＯ又はＢ（ＯＨ）2
Ａは、上記（ａ）で定義されたβ−アミノ−アシル基である。得られるＡ−Ｂ化合物は、穏やかな分子内環化を受ける同じタイプのα−アミノ−アシル誘導体とは違い、安定である。化合物（ｃ）で、Ｂ（ＯＨ）2は、硼酸エステルとして存在してもよい。例えば、
0003970317.tif 000008
これらは、水中において不安定であり、遊離の硼酸を与える。
グループＩＩの化合物
ここで、Ｒ＝Ｈ、ＣＮ、Ｃ≡Ｃ−Ｒ7又はＣＨ＝Ｎ−Ｒ8、Ａはα−アミノ酸誘導体で、その側鎖は官能基を含み、官能基は、種々の基Ｒ3において、長鎖末端を造るために誘導される。Ａは、次の３つのタイプの構造であってもよい。
0003970317.tif 000009
ここで、ａ＝１〜５；Ｄ＝Ｇ-（CH2）b-（R4）q-R3；Ｇ＝Ｏ、ＮＨ又はＮＭｅ；ｂ＝０〜１２；ｑ＝０〜５；Ｄ1は、Ｇ≠Ｏの場合のＤ；
Ｒ4＝Ｚ-ＮＨ-（CH2）C-又はＮＨ-Z-（CH2）C-で、ｃ＝１〜１２、Ｚ＝ＣＯ、ＣＨ2又はＳＯ2；
Ｒ3＝ＣＯ2Ｈ又はそのエステル［（例えば、任意の低級アルキル、フルオロアルキル又はシクロアルキル（Ｃ1〜Ｃ8）、又は芳香族又はヘテロ芳香族（５又は６員環、単環又は二環）エステル）；ＣＯＮＨ2；ＣＯＮＨＮＨ2；ＣＯＮＲ5Ｒ6；ＣＯＮＨＮＲ5Ｒ6；ＰＯ3Ｈ（又は、例えばＣＯ2Ｈについて定義された様なそのエステル）；ＳＯ3Ｈ；ＳＯ2ＮＨ2；ＳＯ2ＮＲ5Ｒ6；ＯＨ；ＯＲ5；アリール又は、ヘテロアリール（５又は６員環、単環又は二環）［Ｆ、Ｃｌ、Ｉ、Ｂｒ、ＯＨ、ＯＲ5、ＮＯ2、ＳＯ3Ｈ、ＳＯ2ＮＨ2、ＳＯ2ＮＲ5Ｒ6、ＮＨ2、ＮＲ5Ｒ6、ＣＯ2Ｒ5、ＣＦ3、ＣＮ、ＣＯＮＨ2、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＨＣＯ2Ｒ5、ＣＨ（：ＮＲ5）ＮＲ5Ｒ6、ＮＨ−ＣＨ（：ＮＲ5）ＮＲ5Ｒ6及びＲ5から選ばれた置換基を持つ置換アリール又はヘテロアリールを含む］；ＮＨ2；ＮＲ5Ｒ6；ＮＨＣＯ2Ｒ5；ＮＨＳＯ2ＮＲ5Ｒ6；ＮＨＣＯＲ5；ＮＨ−ＳＯ2Ｒ5；ＮＨ−ＣＨ（：ＮＲ5）ＮＲ5Ｒ6；ＮＨＣＯＮＲ5Ｒ6；糖（エーテル又はグリコシド結合を介して結合されていてもよい）；ＣＯ−アミノ糖（−ＮＨ2を介して結合される）、例えばグルコサミン又はガラクトサミン；ＮＨＣＯ−アミノ糖又はＮＨＣＳ−アミノ糖。
Ｒ3の上記定義で、「糖」とは、任意の炭水化物又はオリゴ糖類を意味し、Ｒ5及びＲ6は、独立に、Ｈ及びアルキル、フルオロアルキル及びシクロアルキル基（８原子までの）、アリール、ヘテロアリール及びアルキルヘテロアリール基（１１原子までの）から選ばれるか、又はＲ5及びＲ6は、共に（Ｃ3〜Ｃ8）の鎖を含む。
0003970317.tif 000010
ここで、Ｒ1＝Ｈ、Ｍｅ；環は、また多数のヘテロ原子を含んでもよい；Ｅ＝Ｊ−（ＣＨ2）b−（Ｒ4）q−Ｒ3；Ｊ＝ＣＯ、ＣＨ2又はＳＯ2；ａ、ｂ、ｑ、Ｒ3及びＲ4は、（ｉ）で定義されたものと同じである。
0003970317.tif 000011
ここで、Ｒ2＝Ｈ、Ｍｅ；環は、一種以上のヘテロ原子を含んでもよい；Ｌ＝（ＣＨ2）d−［CO］r−（ＣＨ2）b−（Ｒ4）q−Ｒ3又は（ＣＨ2）e−ＮＲ1−（ＣＨ2）b−（Ｒ4）q−Ｒ3；ｒ＝０又は１；ｄ＝０〜４；ｅ＝２〜４；ｂ、ｑ、Ｒ3及びＲ4は、（ｉ）で定義されたものと同じである。
グループＩＩＩ
グループＩＩＩの化合物は、次の一般式で定義される。
0003970317.tif 000012
ここで、ω＝ＣＨ2、Ｏ、ＮＨ、ＣＯ、Ｓ、ＳＯ2、Ｐｈ又はＮＭｅ、及び独立に、ε＝ＣＨ2、Ｏ、ＮＨ、ＣＯ、Ｓ、ＳＯ2、Ｐｈ又はＮＭｅである。
これらの化合物は、対称的二量体である。これらは、前に定義された様な任意のＢ構造を有してもよい。Ａは、任意のグループＩＩ構造〔（ｉ）、（ｉｉ）又は（ｉｉｉ）〕から選ばれてもよいが、この場合、それぞれのＡ残基中の末端基Ｒ3は削除され、二量体の２つの半分を連結する配分された対称基［ε−ω−ε］で置き換えられる；ωは、存在しなくても良く、その場合、両εは、２つのＡ−Ｂ部位を結合する鎖を構築するために、共に結合する；別に、両εは、存在しなくても良く、その場合、ωは、単独に２つのＡ−Ｂ部位に結合する。
ε−ω−εの構造は、勿論化学的に可能な、例えば、ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ、ＣＯ−ＮＨ−ＣＯ−、ＳＯ2−ＮＭｅ−ＳＯ2でなければならず、構造が、例えば−ＮＨ−ＮＨ−ＮＨ−では在り得ないことは、当業者にとって自明のものである。特に可能な例は、表７で示される。
グループＩＩ及びＩＩＩで記述された様な化合物では、長鎖中に存在する−ＣＨ2−基は、既知のバイオアイソスター（bioisostere）、例えばＤＰ−ＩＶに対して抑制又は結合活性の影響を及ぼさないで、−Ｏ−で置き換えることが出来る。又、−ＣＯＮＨＣＨ2ＣＨ2ＮＨＣＯの様なグループ化が生起するならば、例えば、
0003970317.tif 000013
で置き換える事が出来る。
更に、グループＩ、ＩＩ及びＩＩＩの化合物に対して、Ａ及びＢに結合している任意のアミド結合又はＡ（グループＩＩ及びＩＩＩの）の側鎖中の任意のアミドは、アミドの既知のバイオアイソスター、例えば、
0003970317.tif 000014
で置き換えてもよい。その様な置換についての例として表８を参照。
生化学
全ての化合物は、純粋な人間のＤＰ−ＩＶ（デンマークのコペンハーゲンのＭ＆Ｅから購入した）に対して、in vitroで試験した。ＤＰ−ＩＶの抑制は、蛍光物質Ala-Pro-AFC（Km 0.8μM）を使用して、各インヒビターに対して３つの濃度で決定した。一般的アッセイ（合計容量０．４ｍｌ）は、ナトリウムヘペス８３．３ｍＭ、ＥＤＴＡ１．６７ｍＭ、ＢＳＡ１．５ｍｇ／ｍｌ、ｐＨ７．８、ＤＰ−ＩＶ２５μＵ／ｍｌ、インヒビター（１０ｍＭアセテート中、ｐＨ４．０）を含んでいた。反応は、基体の添加によって開始し、読み取りは、７．５分間、３９５ｎｍの励起、４５０ｎｍ発光で、３０秒毎に行った。Ｋi値は、ディクソンプロット（Dixon plot）を使用して決定した。
化学
合成された152例の化合物は、表１〜８と、その後の図解と、異なる構造タイプの調製の為の実験的詳細によって示される。全ての最終生成物は、ＦＡＢ質量分析法で特定され、逆転相ＨＰＬＣで純粋に評価した。全ての中間体は、1H NMRで特定した。
表９は、異なる構造タイプのインヒビターに対し決定されたＤＰ−ＩＶに対する、選択されたＫi値を示す。
0003970317.tif 000015
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チオアミドは、クラウセン等（K. Clausen et al. Tetrahedron,1981, 37 3635-3639）により記述された方法で調製した。他のアミドバイオアイソスターは、先行文献から調製出来る（A. F. Spatola in“Chemistry and Biochemistry of Amino Acids, Peptides and Proteins”, Vol. III. B. Weinstein Ed., Marcel Dekker, New York, 1983, p. 267）。
特定の実施例の為の実験的詳細
実施例１
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ジイソプロピルエチルアミンを、乾燥ＣＨ2Ｃｌ2（１５ｃｍ3）中のＨ−ＰｒｏＮＨ2．ＨＣｌ（２２５ｍｇ、１．５０ミリモル）の溶液に添加し、ｐＨを９に調整した。BocIleONSuを、一滴添加し、混合物を１６時間、窒素雰囲気下で攪拌した。溶媒を、蒸発させ、残渣を通常の方法で処理した。即ち、残渣を、酢酸エチル（６０ｃｍ3）と０．３ＮＫＨＳＯ4溶液（１０ｃｍ3）の間で分離した。有機層を、更に飽和ＮａＣＨＯ3溶液（１０ｃｍ3）、水（１０ｃｍ3）、及びブライン（５ｃｍ3）で洗浄した。溶液を、乾燥し（Ｎａ2ＳＯ4）、減圧下で蒸発させた。
粗生成物を、シリカゲルの短いプラグに通し、ヘキサン：酢酸エチル（１０：９０〜０：１００）で溶出し、無色の発泡体として、301mg（92%）のBocIleProNH2を得た。
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イミダゾール（84mg、1.24ミリモル）を、乾燥ピリジン（１０ｃｍ3）中のBocIleProNH2の溶液に、窒素雰囲気下で添加した。溶液を、POCl3（0.25cm3、2.48ミリモル）の滴加前に、-35℃まで冷却した。反応を、-30℃〜-20℃で、60分間行った。次いで溶液を蒸発させ、粗残渣を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル）に掛け、無色の油状物として、１８０ｍｇ（９４％）の2-（S）-シアノ-1-［N-（t-ブトキシカルボニル）イソロイシル］ピロリジンを得た。
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脱保護は、60分間、トリフロロ酢酸と共に、攪拌しながら行った。水からの蒸発及び凍結乾燥で、白色の、ふわふわした固体として、60mgの2-（S）-シアノ-1-イソロイシルピロリジン（11）を得た。
FBA質量分析：計算値209.3、実測値（M+H）+=210.2
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実施例２
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ジイソプロピルエチルアミンを、ＣＨ2Ｃｌ2（６ｃｍ3）中のBocGlu（OH）ピロリジド（193ｍｇ、0.64ミリモル）及びPyBop（500ｍｇ、0.96ミリモル）の溶液に添加し、混合物のｐＨを９に調整した。５分間攪拌後、ＣＨ2Ｃｌ2（５ｃｍ3）中のベンジル８−アミノ−オクタノエート（220ｍｇ、0.77ミリモル）溶液を添加した。混合物を１６時間、室温で攪拌した。反応は、実施例１に記載された通常の方法で行った。粗残渣を、カラムクロマトグラフィー（酢酸エチル中１％〜３％メタノール）に掛け、無色の固体として、３４４ｍｇ（９９％）のBocGlu［NH（CH2）7CO2Bn］ピロリジドを得た。
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水素ガスを、木炭（５０ｍｇ）上に１０％のパラジウムを含む、酢酸エチル（１０ｃｍ3）のBocGlu［NH（CH2）7CO2Bn］ピロリジド（230ｍｇ、0.43ミリモル）溶液を通してバブルした。９０分後、反応容器を、窒素でフラッシュし、溶液を、セライト床を通して濾過し、溶媒を蒸発させて、無色油状物として、１８７ｍｇ（９８％）のBocGlu［NH（CH2）7CO2H］ピロリジドを得た。
ジイソプロピルエチルアミンを、ＣＨ2Ｃｌ2（１０ｃｍ3）中のBocGlu［NH（CH2）7CO2H］ピロリジド（125ｍｇ、0.28ミリモル）及びPyBop（221ｍｇ、0.43ミリモル）の溶液に添加し、溶液のｐＨを９に調整した。５分間攪拌後、ZNH（CH2）3NH2.HCl（90ｍｇ、0.37ミリモル）及びジイソプロピルエチルアミン（38ｍｇ、0.37ミリモル）の溶液を一滴添加した。溶液を１８時間攪拌し、次いで、実施例１に記載された通常の方法で処理した。粗残渣を、カラムクロマトグラフィー（酢酸エチル中２％〜１５％メタノール）に掛け、無色の油状物として、１５１ｍｇ（８５％）のBocGlu［NH（CH2）7CONH（CH2）3NHZ］ピロリジドを得た。
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4N塩酸／ジオキサン中のBocGlu［NH（CH2）7CONH（CH2）3NHZ］ピロリジド（14ｍｇ、0.022ミリモル）溶液を、４５分間攪拌した。溶媒を蒸発させ、残渣を水に溶解し、濾過し、凍結乾燥して、無色の油状物として、１３ｍｇ（８５％）のH-Glu-［NH（CH2）7CONH（CH2）3NHZ］ピロリジド（64）を得た。
FBA質量分析：計算値531.3、実測値（M+H）+=532.3
実施例３
0003970317.tif 000050
ZNH（CH2）3CO2NSu（570ｍｇ、1.7ミリモル）を、乾燥ＣＨ2Ｃｌ2中の1-［N-（t-ブトキシカルボニル）リシル］ピロリジン（745ｍｇ、2.2ミリモル）の溶液に一滴添加した。ｐＨを、ジイソプロピルエチルアミンで９に調整し、混合物を６０分間攪拌した。溶媒を蒸発させ、残渣を、実施例１に記載された通常の方法で処理した。カラムクロマトグラフィー（酢酸エチル中、１００％酢酸エチル〜１５％メタノール）で、６２０ｍｇ（６８％）のBocLys［CO（CH2）3NHZ］ピロリジドを得た。
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水素ガスを、１分子当量の２Ｎ塩酸を含むメタノール（１０ｃｍ3）中のBocLys［CO（CH2）3NHZ］ピロリジド（620ｍｇ、1.16ミリモル）と木炭上に１０％のパラジウムの混合物を通してバブルした。６０分後、反応を、窒素でフラッシュし、セライトを通して濾過し、溶媒を蒸発させて、２８２ｍｇ（４９％）のBocLys［CO（CH2）3NH2.HCl］ピロリジドを得た。この生成物を、窒素雰囲気下で、ＣＨ2Ｃｌ2（１０ｃｍ3）に溶解し、攪拌した。ジイソプロピルエチルアミンを、ペンタフルオロベンゼンスルホニルクロライド（45ｍｇ、0.17ミリモル）の導入前に添加し、pHを９に調整した。この混合物を１６時間攪拌し、溶媒を蒸発させ、粗物質を、実施例１に記載された通常の方法で処理した。カラムクロマトグラフィー（酢酸エチル中、１００％酢酸エチル〜１０％メタノール）で、無色の油状物として、３３ｍｇ（３１％）のBocLys［CO（CH2）3NHSO2Pfp］ピロリジドを得た。
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この生成物をトリフルオロ酢酸（１０ｃｍ3）中で、30分間攪拌した。溶媒を蒸発させ、残渣を水に溶解し、濾過、凍結乾燥して、30mgのH-Lys［CO（CH2）3NHSO2Pfp］Prl（110）を得た。
FBA質量分析：計算値514.2、実測値（M+H）+=515.2
実施例４
0003970317.tif 000053
ピロリジン（0.88ｇ、12.4ミリモル）を、乾燥ＣＨ2Ｃｌ2（３０ｃｍ3）中のBocThrONSu(3.0ｇ、9.5ミリモル)の溶液に、窒素雰囲気下で添加した。反応を、室温で、60分間行った。溶媒を蒸発させ、残渣を、実施例１に記載された通常の方法で処理した。残渣を、カラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル、30：70）に掛け、無色の油状物として、2.50ｇ（96％）の1-［N-（t-ブトキシカルボニル）トレオニル］ピロリジンを得た。
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水素化ナトリウム（17mg、0.70ミリモル）を、乾燥THF中の1-［N-（t-ブトキシカルボニル）トレオニル］ピロリジン溶液に、０℃で、窒素雰囲気下で添加した。
混合物を、ｎ−ヘキシルヨージド（200mg、0.94ミリモル）の導入前に、０℃で、１５分間攪拌した。次いで、反応を、室温で、16時間、攪拌しながら行った。
溶媒を蒸発させ、残渣を、実施例１に記載された通常の方法で処理した。粗生成物を、カラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル、40：60）に掛け、25mg（10％）のBocThr［（CH2）5CH3］ピロリジド（143）を得た。
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BocThr［（CH2）5CH3］ピロリジド（20ｍｇ、0.06ミリモル）を、4N塩酸／ジオキサン（５ｃｍ3）中で60分間攪拌した。溶媒を蒸発させ、残渣を水に溶解し、濾過し、凍結乾燥して、オレンジ色の油状物として、HThr［（CH2）5CH3］ピロリジド（20mg）を得た。この生成物を、逆転相HPLCで精製し、無色の油状物として、15mgの（143）を得た。
FBA質量分析：計算値256.2、実測値（M+H）+=257.3
実施例５
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１．６Ｎのｎ−ブチルリチウム（0.50cm3、0.76ミリモル）を、乾燥THF（６ｃｍ3）中のシクロペンチルトリフェニルホスホニウムブロマイド（287ｍｇ、0.69ミリモル）の攪拌溶液に、窒素雰囲気下で、-30℃に温度を維持しながら添加した。60分間攪拌後、溶液を更に-50℃まで冷却し、次いで、乾燥THF（４ｃｍ3）中のN-（t-ブトキシカルボニル）-L-イソロイシナール（125ｍｇ、0.58ミリモル、フェーレンツ及びカストロの方法（Fehrentz and Castro, Synthesis,1983, 676）で調製した）の溶液を滴加した。最終添加後、反応を、3.5時間かけて、ゆっくりと室温まで戻した。反応を、飽和塩化アンモニウム溶液（２ｃｍ3）で急冷した。これを、水（１０ｃｍ3）で希釈し、ジエチルエーテル（３ｘ２０ｃｍ3）で抽出した。一緒にしたエーテル層を、水（１０ｃｍ3）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ2ＳＯ4）、蒸発させて、187mg（>100%）の粗生成物を得た。カラムクロマトグラフィー（90；10、ヘキサン：ジエチルエーテル）で、無色の油状物として、53mg（34％）のBoc-Ile-Ψ［CH=CH］ピロリジドを得た。
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4N塩酸／ジオキサンで、３５分間のこの生成物の処理で、Boc-保護基を除去した。この反応を蒸発させ、残渣を水に溶解し、濾過し、凍結乾燥して、発泡性固体として、24mg（63%）のH-ILe-Ψ［CH=CH］ピロリジド（149）を得た。
FBA質量分析：計算値167.2、実測値（M+H）+=168.2
実施例６及び７
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N-（t-ブトキシカルボニル）-L-イソロイシナール（2.40ｇ、11.2ミリモル）と、ハウス及びバベットの方法（H. O. House and H. Babed, J. Org. Chem., 1963, 28, 90）で調製した2-オキシ-1-トリフェニル-ホスホランシクロペンタン（4.61ｇ、13.4ミリモル）を、窒素雰囲気下、トルエン中で還流で加熱した。15時間後、混合物を冷却し、溶媒を蒸発した。粗残渣のカラムクロマトグラフィー（80；20、ヘキサン：酢酸エチル）で、無色の油状物として、2.33ｇ（74％）のBoc-Ile-Ψ［CH=CH］ピロリジン-2-オンを得た。
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ジエチルシアノホスホノアセテート（0.30cm3、1.92ミリモル）を、乾燥DMF（２cm3）中のBoc-Ile-Ψ［CH=CH］ピロリジン-2-オン（180mg、0.64ミリモル）とLiCN（DMF中で0.5M、3.84cm3、1.92ミリモル）の溶液に、窒素雰囲気下で添加した。反応を、室温で、３０分間攪拌し、この混合物を水（２０cm3）で希釈し、次いで酢酸エチル（２ｘ３０cm3）で抽出した。一緒にした有機層を、水（５ｘ１０cm3）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ2ＳＯ4）、蒸発させて、360mg（>100%）の粗生成物を得た。この粗シアノ-ホスホネート（284mg、0.64ミリモル）の一部を乾燥THFに溶解し、窒素下で攪拌した。t-ブタノール（47mg、0.64ミリモル）を添加し、次いでサマリウム（II）ヨージド（THF中で0.1M、19.2cm3、1.92ミリモル）の溶液を滴加した。最終添加後、反応を、2N塩酸（２０cm3）の添加前に更に30分間攪拌した。混合物を、ジエチルエーテル（３ｘ３０cm3）で抽出した。一緒にしたエーテル層を、１０％Na2S2O3溶液（１０cm3）、水（２ｘ１０cm3）及びブライン（２ｘ１０cm3）で洗浄した。溶液を乾燥し（Ｎａ2ＳＯ4）、蒸発させて、粗残渣をカラムクロマトグラフィー（90；10、ヘキサン：酢酸エチル）に掛け、無色の油状物として、122mg（66％）のBocIle［2-（RS）-シアノ-Ψ（CH=CH）ピロリジン］のジアステレオマー性混合物（diastereomic mixture）を得た。
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4N塩酸／ジオキサンで、６０分間のこのジアステレオマー性混合物の処理で、保護基を除去した。溶媒を蒸発させ、次いでこの残渣の逆転相ＨＰＬＣで、２つの純粋なジアステレオマーを得た。
（150）（47mg、60%）FAB質量分析法：計算値192.2、実測値（M+H）+=193.2
（151）（28mg、36%）FAB質量分析法：計算値192.2、実測値（M+H）+=193.2
表１〜８及び１〜７の実施例に関して記述された調製方法は、本発明の一部を構成する。
略称
Boc          t-ブチルオキシカルボニル
Bn           ベンジル
BSA          ボビン血清アルブミン
nBu          n-ブチル
Ch           シクロヘキシル
DMF          ジメチルホルムアミド
DMP          デス-マーチン-ピリオダン（Dess-Martin-Periodane）
EDTA         エチレンジアミン四酢酸
FAB          高速原子衝撃（Fast atom bombardment）
Gua          グアニジニル
HPLC         高性能液体クロマトグラフィー
nHx          n-ヘキシル
Mass Spec    質量分析法
mCPBA        メタ-クロロ過安息香酸
Mol Wt       分子量
ONSu         N-O-スクシンイミド
Pfp          ペンタフルオロフェニル
Ph           フェニル
Pip          ピペリジル
Pri          ピロリジド
Py           ピリジン
PyBop        ベンゾトリアゾール-1-イル-オキシ-トリス-ピロリジノ-ホスホニウム-ヘキサフルオロホスフェート
WSCD         水溶性カルボジイミド
Z            ベンジルオキシカルボニル