(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも、導入口、白血球除去フィルター、導出口を持ち、これらが連結管により導入口、白血球除去フィルター、導出口の順に連結され、白血球除去フィルターの通気抵抗が２０〜４９００Ｐａであり、導入口から導出口までの長さが約０．５〜３．０ｍの、白血球含有液から白血球除去製剤を調製する装置であって、１）白血球除去フィルターの下流側の連結管中に流速調整用細径部分を有し、２）該流速調整用細径部分は有効断面積の範囲が０．１〜５．０ｍｍ２ 、長さ／有効断面積比の範囲が３〜４００ｍｍ／ｍｍ２ である、ことを特徴とする装置。
【請求項２】
少なくとも、導入口、白血球除去フィルター、導出口を持ち、これらが連結管により導入口、白血球除去フィルター、導出口の順に連結され、白血球除去フィルターの通気抵抗が２０〜４９００Ｐａである、白血球含有液から白血球除去製剤を調製する装置であって、１）白血球除去フィルターの下流側の連結管中に流速調整用細径部分を有し、２）該流速調整用細径部分は有効断面積の範囲が０．１〜５．０ｍｍ２ 、長さ／有効断面積比の範囲が３〜４００ｍｍ／ｍｍ２ である、装置を用い、導入口から導出口までの落差を約０．５〜２．０ｍとし、導入口より粘度が５．５ｍＰａ・ｓ以下の白血球含有液を注入し、導出口より白血球除去フィルターを経た液を回収する、ことからなる白血球除去製剤の調製方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
ここで、本発明で言う「白血球除去製剤」とは、白血球含有液を白血球除去フィルターに通すことによって、得られた白血球を除去した血液製剤である。
本発明は、白血球含有液、特に全血製剤、血小板製剤などの低粘性血液製剤等から、白血球を除去する装置において、白血球除去フィルターの高い白血球除去能を維持することのできる装置、及びその装置を用いて白血球除去製剤を調製する方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
近年、免疫学、輸血学の進歩に伴い、血液製剤中に混入している白血球が原因で輸血後副作用が誘発されることが明らかになってきた。これら副作用のうち、比較的軽微な頭痛、吐き気、悪寒、非溶血性発熱反応などを防止するためには、１回の輸血で受血者に注入される白血球数を約１０8 個以下に抑える必要があるとされており、このためには血液製剤中の白血球残存率が１０-1〜１０-2以下になるまで白血球を除去する必要がある。
また重篤な副作用である移植片対宿主反応（ＧＶＨＲ）やサイトメガロウィルス感染、アロ抗原感作などは、白血球残存率が１０-4〜１０-6以下になるまで白血球を除去することで予防できると期待されている。
【０００３】
そのため、血液製剤においては、不織布や多孔質体等を内蔵してなる白血球除去フィルターを用いて白血球を除去することが一般的になっている。
白血球除去フィルター材は、その上下に血液を流す連結管を接続した白血球除去装置に組み込まれて用いられることが多く、かかる装置は通常は白血球除去フィルターの上流側と下流側にそれぞれ血液の導入口と導出口を有し、これらを連結管により接続させている。このような白血球除去フィルターを組み込んだ白血球除去装置は、主に患者に直接輸血する際に、いわゆるベッドサイドで使用されたり、血液センターで白血球除去製剤を調製する際に使用されている。
ベッドサイドでの白血球除去操作は患者への負荷を軽減するため、血液の流速を通常５〜１０ｍｌ／分程度にコントロールして行われる。一方、血液センター等で白血球除去製剤を調製するための白血球除去操作は、白血球未除去の被処理血液が入っている血液バッグに白血球除去フィルターを組み込んだ白血球除去装置を接続し、フィルターを通して白血球を除去し、回収バッグで回収（バッグ−バッグ濾過）する方法であるため、通常は血液バッグから回収バッグまでの距離（落差）を０．５〜１．５ｍとり、重力による自然落下で白血球除去を行っている。
【０００４】
このようなバッグ−バッグ濾過においては、血液製剤の中でも濃厚血小板製剤等の低粘性の血液製剤の場合、従来の白血球除去装置では濾過する血液の平均流速が７０ｍｌ／分を超えることが頻繁に起こり、白血球がフィルター材に粘着し難くなって白血球除去能が低下してしまい、安定して白血球残存率を１０-4以下とすることが困難であった。
一方、平均流速が遅すぎると白血球除去製剤を調製するために要する時間がかかり過ぎ、多量の血液製剤を処理することが困難となってしまう問題がある。また血液製剤等の生物製剤において流速が遅すぎることは、フィルター材と血球細胞の接触時間が長いことを意味し、血球細胞の活性化に起因する微小凝集物の生成が起こり、得られる白血球除去製剤の質を低下しかねない問題や、有用成分として血小板を回収する場合には、粘着性の高い血小板がフィルター材に粘着し、血小板の回収率が低下する問題が懸念される。更に白血球除去フィルターの上層で白血球が多く粘着し、白血球によるフィルターの目詰まりが起こり、フィルター材の細孔が閉塞され、閉塞された部分の下層にあるフィルター材は有効に白血球を除去する能力を失うことが懸念される。このような白血球による目詰まりが起こったときには、流速の大幅な低下や流れの停止が起こる場合がある。
実開平１−１１７３４８号には、ブドウ糖液やリンゲル液などの、固形物を実質的に含まない薬液を体内に輸注する際に用いられる、流速調整用細径部分を有する輸液セットが開示されている。しかしながら、この輸液セットは血球細胞及び粘性のある血漿成分からなる懸濁状の白血球含有液を処理するために設計されたものではなく、しかも白血球を除去するための流速調整機構への応用も全く示唆していない。
また、ベッドサイド用の白血球除去装置には白血球除去フィルターの上流または下流にローラークランプが設けられているものがある。このローラークランプは、患者への輸血流速を適宜調整するために設けられており、血液の滴下数や重量を測定しつつ徐々に所望の流速に調整する手段であるため、多量の白血球除去製剤を調製する場合には時間がかかる上、ローラークランプのローラーの位置が血液を濾過している間に血液の通過抵抗などによって変化し得るため流速が変動しやすい問題がある。
また、白血球除去装置において落差を小さくすることにより流速をコントロールすることも知られている。しかし、落差を小さくする方法では、必然的に導入口と白血球除去フィルターの距離が短くなるため、フィルター内への空気の混入を防止したり、ゲル状物を除去するチェンバーを白血球除去装置内に装着することが困難となる問題がある。更に落差が小さいと、白血球除去フィルターを床に置いたり、傾けた状態で濾過せざるを得なくなる場合があり、その場合血液の片流れにより白血球除去能が低下したり、バッグの刺し替え操作が困難になる問題が考えられる。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、低粘性の白血球含有液から白血球除去製剤を調製する際に、白血球除去フィルターの白血球除去能を高く維持することのできる流速に制御し、目詰まり等による流速の変動の小さい白血球除去装置を提供すること、及びその白血球除去装置を用いた、取り扱い性に優れる白血球除去製剤の調製方法を提供することにある。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記目的を達成する白血球除去装置及びその白血球除去装置を用いた白血球除去製剤を調製する方法を開発すべく鋭意検討を行った。その結果、白血球除去フィルターの下流側に流速調整用細径部分を設けることによって、簡便かつ安定に流速を制御できることを見いだした。
更に本発明者らは、白血球除去装置を用いて白血球除去製剤を調製する際に、白血球残存率を安定して１０−４以下とし、かつできるだけ短時間で処理を行うためには、流速の変動を少なくし、かつ安定して平均流速を２０〜５０ｍｌ／分に調整すればよいことを見いだした。特に、低粘度の白血球含有液から白血球を除去するに際しては、特定の範囲の有効断面積及び長さ／有効断面積比にある流速調整用細径部分を有する連結管を、白血球除去フィルターの下流側に配置すれば、流速の変動が少なく、かつ所望の平均流速に簡便に制御できる白血球除去装置が得られることを見いだし、本発明を完成したものである。即ち、本発明の目的は下記に示す本発明の白血球除去装置及びその白血球除去装置を用いた白血球除去製剤の調製方法により達成されるものである。
少なくとも、導入口、白血球除去フィルター、導出口を持ち、これらが連結管により導入口、白血球除去フィルター、導出口の順に連結され、白血球除去フィルターの通気抵抗が２０〜４９００Ｐａであり、導入口から導出口までの長さが約０．５〜３．０ｍの、白血球含有液から白血球除去製剤を調製する装置であって、１）白血球除去フィルターの下流側の連結管中に流速調整用細径部分を有し、２）該流速調整用細径部分は有効断面積の範囲が０．１〜５．０ｍｍ２ 、長さ／有効断面積比の範囲が３〜４００ｍｍ／ｍｍ２ である、ことを特徴とする装置。
少なくとも、導入口、白血球除去フィルター、導出口を持ち、これらが連結管により導入口、白血球除去フィルター、導出口の順に連結され、白血球除去フィルターの通気抵抗が２０〜４９００Ｐａである、白血球含有液から白血球除去製剤を調製する装置であって、１）白血球除去フィルターの下流側の連結管中に流速調整用細径部分を有し、２）該流速調整用細径部分は有効断面積の範囲が０．１〜５．０ｍｍ２ 、長さ／有効断面積比の範囲が３〜４００ｍｍ／ｍｍ２ である装置を用い、導入口から導出口までの落差を約０．５〜２．０ｍとし、導入口より粘度が５．５ｍＰａ・ｓ以下の白血球含有液を注入し、導出口より白血球除去フィルターを経た液を回収する、ことからなる白血球除去製剤の調製方法。
【０００７】
本発明で言う連結管とは、導入口、白血球除去フィルター、導出口などを接続し、白血球含有液を流すための中空管であり、血液にダメージを与えないものであれば特に限定はなく各種のものを用いることができる。中でも、塩化ビニル、シリコン、ウレタン、ポリエチレン、ポリスルフォン、ポリアミド、ポリエステル、ポリスチレン、ポリプロピレン、セルロースアセテート、天然ゴムなどの有機材料が加工性に優れるため好ましい。通常、白血球除去装置に用いられる連結管の有効断面積は約５．７〜８．０ｍｍ2 である。
本発明の流速調整用細径部分とは、通常用いられている連結管の有効断面積より小さい有効断面積の範囲にあり、白血球含有液を所望の流速で濾過できるように、実質的な流れ抵抗を付与する特定の範囲の長さ／有効断面積比を有する部分を言う。
流速調整用細径部分の有効断面積とは、流速調整用細径部分を白血球含有液が流れる方向に対して垂直に切断した時に白血球含有液が流れ得る部分の断面積を言う。例えば流速調整用細径部分が円柱状である場合、その内径を直径とした断面積を言う。有効断面積は、流速調整用細径部分を白血球含有液が流れる方向に対して垂直に切断し、その切断面の断面積を画像解析装置を利用して測定する方法、写真に撮って測定する方法、より簡便な方法としては流速調整用細径部分が円柱状である場合には、定規やノギスでその直径を測定して求める方法など様々な方法で求めることができる。
流速調整用細径部分の長さは、有効断面積の測定と同様の方法で測定することができる。流速調整用細径部分の有効断面積が一定である場合には、その一定部分の長さを言う。流速調整用細径部分の断面が白血球含有液の流れ方向に対して徐々に小さくなる場合や大きくなる場合、また突起物がある場合には、有効断面積が所定の範囲にある部分の長さを言う。
流速調整用細径部分の長さを、有効断面積で除した値が本発明で言う、長さ／有効断面積比である。
【０００８】
低粘性の白血球含有液から白血球を除去するに際しては、本発明の流速調整用細径部分の有効断面積の範囲は０．１〜５．０ｍｍ2 である。流速調整用細径部分の有効断面積が０．１ｍｍ2 未満であると白血球含有液の平均流速が２０ｍｌ／分を下回る可能性が高いため、濾過時間がかかりすぎる点や、白血球の付着が起こり流速の変動が大きくなる点から相応しくない。有効断面積が５．０ｍｍ2 を超えると白血球含有液の平均流速が５０ｍｌ／分を超え、白血球除去率が低下する可能性があるため相応しくない。より好ましくは０．２〜３．５ｍｍ2 、更に好ましくは０．５〜１．８ｍｍ2 の有効断面積である。
また、長さ／有効断面積比の範囲は３〜４００ｍｍ／ｍｍ2 である。長さ／有効断面積比の値が３ｍｍ／ｍｍ2 未満であると、平均流速が５０ｍｌ／分を超える可能性があり、４００ｍｍ／ｍｍ2 を超えると平均流速が２０ｍ／分未満となる可能性があるため相応しくない。好ましい範囲は１０〜４００ｍｍ／ｍｍ2 、より好ましくは２０〜３００ｍｍ／ｍｍ2 、更に好ましくは８０〜２５０ｍｍ／ｍｍ2 である。
特に、白血球含有液の粘度が約２．０〜５．５ｍＰａ・ｓである場合には、流速調整用細径部分の有効断面積の範囲は０．８〜５．０ｍｍ2 、長さ／有効断面積比の範囲は３〜１００ｍｍ／ｍｍ2 であることが望ましい。この場合、流速調整用細径部分が長さ１０〜２００ｍｍの円柱状中空管からなることが好ましい。また、白血球含有液の粘度が２．０ｍＰａ・ｓ以下、特に約１．０〜２．０ｍＰａ・ｓである場合には、流速調整用細径部分の有効断面積の範囲は０．１〜３．５ｍｍ2 であることが望ましい。この場合、流速調整用細径部分が長さ５０〜２００ｍｍの円柱状中空管からなることが好ましい。
【０００９】
図３〜７に、本発明の流速調整用細径部分の模式図を示す。図３は円柱状中空管からなる流速調整用細径部分である。図４は有効断面積が徐々に小さくなる流速調整用細径部分である。図５は複数の小さな有効断面積の円柱状中空管からなる流速調整用細径部分である。図６は連結管の片側が流速調整用細径部分となっている模式図である。図７は楕円状中空管からなる流速調整用細径部分である。本発明の流速調整用細径部分は、所定の有効断面積、及び長さ／有効断面積比の範囲にある中空管を連結管中に挿入したものであってもよいし、あらかじめそのような中空管として成型された連結管を用いても良い。あるいは外部から適当な器具により連結管を圧縮変形させ、所定の有効断面積及び長さ／有効断面積比の範囲になるように調整したものでも良い。
中空管からなる流速調整用細径部分を連結管中に挿入する場合、該中空管は連結管と同じ素材でもまた異なる素材でも構わない。挿入方法としては、該中空管と連結管を別々に成型し、適当な接続器具を用いて該中空管と連結管を接続する方法等がある。
具体的には、内径が０．４〜２．５ｍｍ、好ましくは０．５〜２．１ｍｍ、より好ましくは０．８〜１．５ｍｍで均一な断面を有し、長さが１０〜２００ｍｍ、好ましくは５０〜２００ｍｍ、より好ましくは５０〜１５０ｍｍ程度の円柱状中空管を、連結管中に挿入する。挿入する中空管の長さ／有効断面積比の値は３〜４００ｍｍ／ｍｍ2 、好ましくは１０〜４００ｍｍ／ｍｍ2 である。
外部から適当な器具により連結管を圧縮変形させ、所定の有効断面積、長さ／有効断面積比の範囲に調整する場合、具体的な例としては板クランプが挙げられる。板クランプは連結管を所定の厚みの板クランプに挟み込むだけの操作で所定の流速調整用細径部分を簡便かつ短時間に調整できるため、好ましい器具である。板クランプの例を示す模式図を図８〜１０に、図８の板クランプで連結管を圧縮変形させたときの模式図を図１１に示す。
【００１０】
本発明の白血球除去装置は、例えば所定の有効断面積、長さ／有効断面積比の範囲にある中空管を連結管中にあらかじめ有する装置、あるいは板クランプのような適当な器具により所定の流速調整用細径部分を設定する装置である。例えば、ローラークランプを用いる場合のように、白血球含有液を濾過しながら滴下数や重量を測定しつつ徐々に所望の流速に調整した結果、連結管中に所定の流速調整用細径部分を有するような装置は本発明の白血球除去装置には含まれない。
但し、板クランプなどのような器具で外部から連結管を圧縮変形させて、連結管の有効断面積を小さくする方法は、圧縮変形する操作が新たに必要となるため、操作の簡便性を重視する場合は、あらかじめ所定の流速調整用細径部分を有する連結管を白血球除去装置、好ましくはあらかじめ所定の中空管からなる流速調整用細径部分を連結管中に挿入した白血球除去装置を使用することが好ましい。特に、該中空管をあらかじめ挿入する場合には、成型のし易さ、及び成型精度の高さより円柱状の中空管を使用するのが好ましい。
白血球除去フィルターの下流側の連結管は、有効断面積が０．１〜５．０ｍｍ2 の範囲にある流速調整用細径部分を、一箇所だけに、または複数箇所に有していても良い。流速調整用細径部分を複数箇所に有する場合には、各箇所の長さ／有効断面積比の総和が３〜４００ｍｍ／ｍｍ2 の範囲になれば良い。但し、白血球除去装置を作成する手間をできるだけ少なくするためには、流速調整用細径部分は一箇所である方が好ましい。
【００１１】
本発明において、白血球含有液に混入している可能性のあるゲル状物や微小凝集物による流速調整用細径部分の閉塞を防止するために、流速調整用細径部分は白血球除去フィルターの下流側に配置されていることが必要である。白血球除去フィルターによりゲル状物や微小凝集物は除去されるため、流速調整用細径部分の閉塞を防止することができ、その結果流速の変動を小さくすることができる。
また白血球除去フィルターの上流側の連結管中に、有効断面積が０．１〜５．０ｍｍ2 の範囲にある部分を有する場合でも、該部分の長さ／有効断面積比の値が流速調整用細径部分の長さ／有効断面積比の値の１．０倍未満であれば、本発明の白血球除去装置に含まれるものである。例え白血球除去フィルターの上流側の連結管中に、有効断面積が０．１〜５．０ｍｍ2 の範囲にある部分を有していても、その長さ／有効断面積比の値が流速調整用細径部分の長さ／有効断面積比の値より小さければ、白血球含有液の流速は流速調整用細径部分によって制御されるためである。白血球除去フィルターの上流側におけるそのような部分の長さ／有効断面積比は、流速調整用細径部分の長さ／有効断面積比の０．８倍以下であることが好ましく、０．５倍以下であることがより好ましい。但し、有効断面積が５．０ｍｍ2 以下であると、低粘性白血球含有液に実質的な流れ抵抗が生ずるため、白血球除去フィルターの上流側の連結管の有効断面積は５．０ｍｍ2 より大きいことが好ましい。実質的な流れ抵抗が白血球除去フィルターの上流側にある連結管中で生ずると、白血球含有液の白血球除去フィルターへの導入速度が小さくなり、白血球除去フィルター中に空気が残留してしまい、その結果、片流れを起こし、白血球除去能が低下することが懸念されるためである。
【００１２】
本発明で言う導入口とは、白血球含有液入りのバッグや瓶に本発明の白血球除去装置を接続し、白血球含有液を白血球除去装置に導入するための手段であり、一般に用いられている血液製剤用のプラスチック針、金属針などを用いることができる。導入口は１本だけでなく複数本設けておくと、複数個の白血球含有液入りバッグを接続することができ、便利である。同様に、本発明で言う導出口とは、白血球を除去した製剤を回収バッグなどに導出するための手段である。
本発明の白血球除去装置に組み込む白血球除去フィルターとは、白血球含有液中の白血球を捕捉するが、輸血に必要な他の血液成分は捕捉し難い構造を有するフィルターであり、フィルター材として、繊維状媒体、スポンジ状構造物、粒子状媒体などを充填したものである。例えば、セパセルR ＰＬＳ（旭メディカル（株）製）、ＬＲＰTM（ポール（株）製）、イムガードR ＩＩＩ−ＰＬ（テルモ（株）製）等が挙げられる。
低粘性の白血球含有液を所定の流速調整用細径部分を有する白血球除去装置で濾過するに際しては、フィルターの通気抵抗は２０〜４９００Ｐａである必要がある。
【００１３】
ここで、白血球除去フィルターの通気抵抗とは、約１．５リットル／分の流速の空気を２０〜３０秒間、２０〜２５℃の室温下で白血球除去フィルターに通気した時の圧力損失である。通気抵抗が２０Ｐａ未満であると、白血球除去フィルターに充填しているフィルター材の細孔が大きい、または充填しているフィルター材の量が少ないことを意味し、白血球除去能が不足することが懸念されるため相応しくない。通気抵抗が４９００Ｐａを超えると、フィルター材の細孔が小さい、または充填しているフィルター材の量が多いことを意味し、目詰まりや流速の低下を招く恐れがあるため相応しくない。好ましい通気抵抗は５０〜２９００Ｐａ、より好ましくは１５０〜２５００Ｐａである。
本発明の所定の流速調整用細径部分を有する白血球除去装置は、粘度が５．５ｍＰａ・ｓ以下、好ましくは約１．０〜２．０ｍＰａ・ｓの低粘性の白血球含有液中に混入している白血球を、０．５〜２．０ｍ、好ましくは０．５〜１．５ｍ、より好ましくは０．７〜１．３ｍの落差でバッグ−バッグ濾過により除去する際に好都合に使用される。
本発明で言う粘度とは、３５〜３７℃、ずり速度２３０ｓ-1で測定した粘度である。
粘度が５．５ｍＰａ・ｓ以下の白血球含有液とは、より具体的には全血製剤（ＷＢ）、濃厚血小板製剤（ＰＣ）、多血小板血漿製剤（ＰＲＰ）、乏血小板血漿製剤（ＰＰＰ）、新鮮凍結血漿製剤（ＦＦＰ）などの血漿製剤などを言う。特にＰＣ、ＰＲＰ、ＰＰＰ、ＦＦＰなどの粘度が２ｍＰａ・ｓ以下の血液製剤に混入している白血球をバッグ−バッグ濾過により除去する際に、本発明の所定の流速調整用細径部分を有する白血球除去装置は好適に用いられるものである。
【００１４】
本発明で言う平均流速とは、白血球含有液を濾過するに要した時間で、回収した白血球除去製剤の量を除した値である。即ち、白血球除去製剤を回収する容器に白血球除去製剤が導出された時点から白血球含有液を入れている容器中に白血球含有液がなくなるまでの時間を濾過時間とし、その間に回収した白血球除去製剤の量を濾過時間で除した値である。
また、本発明の白血球除去装置にチェンバーやロバートクランプを装着しても良い。チェンバーは白血球除去フィルターの上流側に設ければ、該フィルター内に空気が入るのを防止する効果があり、更にメッシュを内蔵したチェンバーは白血球含有液中のゲル状物をメッシュで除去し、白血球除去フィルターのゲル状物による目詰まりを軽減することができる。ロバートクランプは、白血球除去装置内の白血球含有液の流れを一時的に停止することのできるクランプであり、バッグの刺し替え操作を行うなどの際に用いることができる。
本発明の白血球除去装置及びその装置を用いた白血球除去製剤を調製する方法は血液センターなどでバッグ−バッグ濾過を行う際に主として用いられるが、無菌的に白血球除去製剤を調製できるクローズドシステムにおいても用いることができる。
本発明の白血球除去装置を用いると、５．５ｍＰａ・ｓ以下の低粘性の白血球含有液を、簡便な操作で２０〜５０ｍｌ／分の平均流速に制御して濾過を行うことができ、かつ流速の変動を小さくすることができ、その結果白血球残存率を安定して１０-4以下にすることができる。また、本発明の白血球除去装置は、落差が０．５〜２．０ｍとなるように導入口から導出口までの長さが十分にあるため、バッグの刺し替え操作が行い易く、またチェンバーを装着することができるため、あるいは白血球除去フィルターを床に置いたり傾けた状態で濾過を行う必要がないため、白血球含有液の片流れの危険が小さく、その結果、白血球除去フィルターの白血球除去能力を十分に発揮させることができる。
【００１５】
【発明の実施の形態】
以下に記載した実施例及び比較例により、本発明の白血球除去装置及びその装置を用いた白血球除去製剤を調製する方法についてより詳細に説明するが、以下の実施例は本発明の範囲を限定するものではない。
【００１６】
【実施例１〜５、比較例１〜４】
図１に示すような導入口（１）、白血球除去フィルター（２）、導出口（６）、連結管（３）及び（３′）、メッシュ入りチェンバー（４）およびロバートクランプ（５）を有する装置を用いて濾過時間、平均流速及び白血球残存率を測定した。連結管（３′）のＡの部分に内径及び長さの異なる円柱状の中空管を挿入し、その他の連結管部分は内径２．９ｍｍの中空管を使用した。白血球含有液として、ＣＰＤ加保存液を添加した濃厚血小板製剤（血液粘度は１．３ｍＰａ・ｓ、血液量は４００ｍｌ、３日保存血）を用い、この白血球含有液を含む血液バッグ（７）を上記装置を介して回収バッグ（８）と接続し、室温下、落差１ｍで自然落下によるバッグ−バッグ濾過を行った。
回収バッグ（８）に回収した白血球除去製剤の重量（ｇ）を１．０３０で除した値を濾過時間（分）で除して平均流速を求めた。回収した白血球除去製剤の重量を１．０３０で除すのは、濃厚血小板製剤の比重が約１．０３０であるためである。
白血球除去フィルター（２）として、血液の入口と出口を有する容器にポリエチレンテレフタレートからなる不織布を充填した。通気抵抗が２４５Ｐａのフィルターを用いた。このフィルターにヒドロキシエチルメタクリレート（ＨＥＭＡ）とジメチルアミノエチルメタクリレート（ＤＭ）の共重合体（ＨＥＭＡとＤＭのモル含量はそれぞれ９７モル％、３モル％）をコーティングし、実験に供した。
白血球含有液の白血球濃度は、チュルク液で白血球を染色し、光学顕微鏡を用いて測定した。
白血球除去製剤の白血球濃度は、アクリジンオレンジ液で白血球を染色し、蛍光顕微鏡を用いて測定した。
このようにして測定した白血球含有液及び白血球除去製剤の白血球濃度と血液量及び回収量より、下記の式に従って白血球残存率を求めた。
白血球残存率＝｛（白血球除去製剤の白血球濃度×回収量）／（白血球含有液の白血球濃度×血液）｝
実施例１〜５及び比較例１〜４の結果を表１に示す。
【００１７】
【表１】
0003889093.tif 000002
【００１８】
【比較例５】
実施例３の流速調整用細径部分として用いた円柱状中空管を白血球除去フィルターの上流側に配置した以外は実施例３と同様の装置。方法で濾過時間、平均流速及び白血球残存率を測定した。
その結果、濾過時間は３１．１分であった。流速は濾過の開始から徐々に低下し、平均流速は１２．０ｍｌ／分となった。また、白血球残存率は１０-2.8であった。濾過中に白血球含有液に含まれていた微小凝集物が細径部分で徐々に詰まり、流速の低下を招いたものと考えられる。また、上流側に細径部分があるため、白血球除去フィルター内に空気が残り、片流れを起こしたため白血球残存率が１０-4を超えたものと考えられる。
【００１９】
【実施例６】
図２に示すような導入口（１１）、白血球除去フィルター（１２）、導出口（１６）、連結管（１３）及び（１３′）、メッシュ入りチェンバー（１４）、ロバートクランプ（１５）、図８に示す板クランプ（１９）を有する装置に血液バッグ（１７）と回収バッグ（１８）とを連結し、濾過時間、平均流速及び白血球残存率を測定した。連結管（１３）及び（１３′）は内径２．９ｍｍの中空管を使用し、落差は１ｍとした。板クランプ（１９）を用いた以外は実施例１〜５と同様の方法でバッグ−バッグ濾過を行った。
板クランプで圧縮された部分の有効断面積は０．３７ｍｍ2、長さ／有効断面積比は１６．２ｍｍ／ｍｍ2であった。
以上の結果、濾過時間は１１．１分、平均流速は３３．５ｍｌ／分、白血球残存率は１０-4.2であった。
【００２０】
【実施例７】
図１に示すような装置に白血球除去フィルターとしてセパセルRＰＬＳ５Ｎ（旭メディカル（株）製）を組み込み、濾過時間、平均流速及び白血球残存率を測定した。
連結管（３′）のＡ部分には有効断面積が０．５ｍｍ2、長さ／有効断面積比が１００ｍｍ／ｍｍ2の円柱状中空管を挿入し、その他の連結管部分は内径２．９ｍｍの中空管を使用した。白血球含有液として、ＣＰＤ加保存液を添加した濃厚血小板製剤（血液粘度は１．３ｍＰａ・ｓ、血液量は２００ｍｌ、２日保存血）を用い、室温下、落差１ｍで自然落下によるバッグ−バッグ濾過を行った。
以上の結果、濾過時間は６．４分、平均流速は２７．８ｍｌ／分、白血球残存率は１０-4.3であった。
【００２１】
【実施例８】
図１に示すような装置に白血球除去フィルターとしてＬＲＰ６TM（ポール（株）製）を組み込み、濾過時間、平均流速及び白血球残存率を測定した。
白血球除去フィルターが異なる以外は実施例７と同様の装置、方法でバッグ−バッグ濾過を行った。
以上の結果、濾過時間は５．７分、平均流速は３１．９ｍｌ／分、白血球残存率は１０-4.1であった。
【００２２】
【実施例９、比較例６】
図１に示すような装置を用いて濾過時間、平均流速、流速の経時変化及び白血球残存率を測定した。連結管（３′）のＡ部分に内径及び長さの異なる円柱状の中空管を挿入し、その他の連結管部分は内径２．９ｍｍの中空管を使用した。白血球含有液は６３ｍｌのＣＰＤを加えて調整した全血製剤（血液粘度は４．０ｍＰａ・ｓ、血液量は５１３ｍｌ、２０時間保存）を用い、室温下、落差１．３ｍで自然落下によるバッグ−バッグ濾過を行った。
回収した白血球除去製剤の重量（ｇ）を１．０５２で除した値を濾過時間（分）で除して平均流速を求めた。また、５分間隔で回収した白血球除去製剤の量を測定し、流速の経時変化も測定した。回収した白血球除去製剤の重量を１．０５２で除すのは、全血製剤の比重が約１．０５２であるためである。
白血球除去フィルター（２）として、血液の入口と出口を有する容器にポリエチレンテレフタレートからなる不織布を充填した。通気抵抗が５３９Ｐａのフィルターを用いた。
白血球含有液の白血球濃度は実施例１〜５と同様の方法で測定した。白血球除去製剤の白血球濃度はナジェット法によって求めた。
実施例９及び比較例６の結果を表２及び表３に示す。
表３に示すように、比較例６は流速の経時変化が実施例９よりも大きく、白血球除去フィルター上層部分で白血球による目詰まりが生じている可能性が高い。
【００２３】
【表２】
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【００２４】
【表３】
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【００２５】
【実施例１０、１１】
実施例１０は図１に示すような連結管（３′）の部分に実施例９と同様の流速調整用細径部分を挿入した装置を用い、実施例１１は図２に示すような板クランプ（１９）を有す装置を用いて平均流速の安定性を評価した。白血球含有液、白血球除去フィルターは実施例９と同様のものを用い、落差１．３ｍで自然落下によるバッグ−バッグ濾過を行った。濾過は各実施例とも３回づつ行った。結果を表４に示す。
表４から明らかなように実施例１０、１１ともに２０〜５０ｍｌ／分の平均流速に３回とも制御することができた。
【００２６】
【表４】
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【００２７】
【発明の効果】
本発明の白血球除去装置及びその装置を用いた白血球除去製剤を調製する方法は、粘度が５．５ｍＰａ・ｓ以下の低粘性の白血球含有液を落差０．５〜２．０ｍでバッグ−バッグ濾過する際に用いられる。本発明の装置及び方法は、白血球除去フィルターの白血球除去性能を高く安定化することができ、血液センターなどで好適に用いることができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】〜
【図２】本発明の白血球除去装置の基本構成の例を示す模式図である。
【図３】〜
【図７】>中空管からなる流速調整用細径部分の例を示す模式図である。
【図８】〜
【図１０】板クランプの例を示す模式図である。
【図１１】板クランプにより圧縮変形された連結管の例を示す模式図である。
【符号の説明】
１，１１  導入口
２，１２  白血球除去フィルター
３，１３  連結管
３´，１３´  連結管
４，１４  チェンバー
５，１５  ロバートクランプ
６，１６  導出口
７，１７  血液バッグ
８，１８  回収バッグ
１９  板クランプ
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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