(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）
【化１】
0003999939.tif 000008
〔式中、Ｒ１はメチル、４−フルオロフェニル、４−クロロフェニル、ｐ−トリルまたは２−ナフチルから選ばれる基を示し、Ｒ２はプロピル、イソプロピルまたはｔｅｒｔ−ブチルを、Ｒ３は水素を示すか、またはＲ２とＲ３は連結して環を形成してシクロペンチリデンまたはシクロヘキシリデンを示し、Ｒ４はイソブチル、ベンジル、シクロヘキシルメチルまたはインドール−３−イルメチルから選ばれる基を示す。〕で表される化合物またはその塩（ただし、４−（Ｎ−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−ロイシナールおよびその塩を除く）。
【請求項２】
Ｒ２がイソプロピルであって、Ｒ３が水素である請求項１記載の化合物またはその塩。
【請求項３】
Ｒ１が４−フルオロフェニル、４−クロロフェニル、ｐ−トリルまたは２−ナフチルである請求項１記載の化合物またはその塩。
【請求項４】
請求項１記載の化合物またはその塩を含有してなる医薬。
【請求項５】
カルパイン阻害剤である請求項４記載の医薬。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、ペプチジルアルデヒド誘導体を有効成分として含有してなるシステインプロテアーゼ阻害剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
生化学的研究により、システインプロテアーゼの異常亢進が種々の疾病に関与していることが判明してきた。たとえば、システインプロテアーゼの一つであるカルパインは生体内に広く分布する細胞質内のタンパク分解酵素の一つであり、カルシウムイオンで活性化される。現在では、このカルパインの異常な活性化が脳卒中、クモ膜下出血、アルツハイマー病、虚血性疾患、筋ジストロフィー、白内障、血小板凝集、関節炎などの種々の疾患に関与していることが明らかとなっている〔Trends in Pharmacological Sciences, １５巻, ４１２頁（１９９４年）〕。一方、カルパイン阻害剤は水晶体培養による実験的白内障モデルにおいて、水晶体の透明維持に効果があり〔Curr. Eye Res., １０巻, ６５７〜６６６頁（１９９４年）〕、白内障治療剤（ＷＯ９３／２３０３２）などとして有用であることが分ってきている。これまで報告されているシステインプロテアーゼ阻害剤としては、エポキシコハク酸ペプチド誘導体（特公平１−５４３４８、特開昭５５−１５３７７８など）、ペプチドハロメタン誘導体（特公平６−２９２２９）、ペプチドジアゾメタン誘導体〔Biochem. J.,２５３巻, ７５１〜７５８頁（１９８８年）、J. Med.Chem.,３５巻, ２１６〜２２０頁（１９９２年）〕、ペプチジルアルデヒド誘導体などが挙げられる。
【０００３】
これらのうち、ペプチジルアルデヒド誘導体は、Streptomycesに属する菌の培養液からロイペプチンが単離されて以来、システインプロテアーゼ阻害活性が強いことなどから、種々のロイペプチン類似体が合成されてきた（特開平２−２６８１４５、特公昭４５−１７１５４、特公昭４６−２２０１２、特開平６−２８７１６７など）。しかし、上記ペプチジルアルデヒド誘導体は、いまだ実用化されておらず、さらに強い阻害活性を有する化合物が求められている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
強力なシステインプロテアーゼ阻害活性を有し、システインプロテアーゼに起因する種々の疾患に有用なペプチジルアルデヒド誘導体を開発することである。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記課題を解決するため鋭意研究を行った。その結果、下記一般式
【化２】
0003999939.tif 000002
【０００６】
〔式中、Ｒ１は炭素数１〜４のアルキル基を示すか、または置換基を有してもよい炭素数６〜１０のアリール基を示し、Ｒ２とＲ３は同一または異なって、水素、炭素数１〜４のアルキル基を示すか、または連結して炭素数３〜７の環を形成してもよく、Ｒ４はアリール基、シクロアルキル基または芳香族複素環残基で置換されていてもよい低級アルキル基を示す。〕で表される化合物またはその塩（ただし、４−（Ｎ−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−ロシナールおよびその塩を除く。）が強いシステインプロテアーゼ阻害活性を有することを見出し本発明を完成した。なお、本発明で使用するアミノ酸に光学異性体が存在する場合、特に明示しなければＬ体を示すものとする。
【発明の実施の形態】
【０００７】
上記一般式（Ｉ）中、Ｒ１で表される炭素数１〜４のアルキル基としては、たとえばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチルなどが挙げられる。好ましくはメチルである。Ｒ１で表される炭素数６〜１０のアリール基としては、たとえばフェニル、ナフチル、ペンタフェニル、インデニル、アズレニルなどが挙げられる。好ましくは、フェニル、ナフチルである。アリール基が有してもよい置換基としてはハロゲン原子（フッ素、塩素など）、炭素数１〜５のアルキル、トリフルオロメチル、炭素数１〜５のアルコキシ、ヒドロキシル、炭素数２〜５のアシルオキシ、カルボキシル及び炭素数２〜５のアシル基が挙げられる。好ましくはハロゲン原子および炭素数１〜５のアルキル基である。より好ましくは、フッ素、塩素、メチルである。Ｒ１で表される置換基を有してもよい炭素数６〜１０のアリール基の好適な具体例としては、４−フルオロフェニル、４−クロロフェニル、ｐ−トリル、２−ナフチルである。
【０００８】
Ｒ２またはＲ３で表される炭素数１〜４のアルキル基としては、たとえばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチルなどが挙げられる。好ましくはプロピル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチルである。より好ましくはイソプロピルである。Ｒ２とＲ３は、好ましくはＲ２またはＲ３の一方が水素であって、他方がプロピル、イソプロピル、イソブチルまたはｔｅｒｔ−ブチルであり、より好ましくは、Ｒ２がプロピル、イソプロピル、イソブチルまたはｔｅｒｔ−ブチルであって、Ｒ３が水素であり、さらに好ましくはＲ２がイソプロピルであって、Ｒ３が水素である。Ｒ２とＲ３が連結して形成してもよい炭素数３〜７の環としては、たとえばシクロプロピリデン、シクロブチリデン、シクロペンチリデン、シクロヘキシリデン、シクロヘプチリデンなどが挙げられる。とりわけシクロペンチリデンおよびシクロヘキシリデンが好ましい。
【０００９】
Ｒ４で表される低級アルキル基としては、直鎖状または分枝状の炭素数１〜６のもの、たとえばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、ヘキシル、４−メチルペンチル、１，１−ジメチルブチル、２，２−ジメチルブチル、３，３−ジメチルブチル、２−エチルブチル、などが挙げられる。好ましくはメチルおよびイソブチルである。Ｒ４で表される、該低級アルキル基が置換されていてもよいアリール基としては、たとえばフェニル、１−ナフチル、２−ナフチルなどが挙げられる。とりわけフェニルが好ましい。Ｒ４で表される、該低級アルキル基が置換されていてもよいシクロアルキル基としては、たとえばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどが挙げられる。とりわけシクロヘキシルが好ましい。Ｒ４で表される、該低級アルキル基が置換されていてもよい芳香族複素環残基としては、酸素、窒素およびイオウ原子で置換された単環式複素環残基および縮合型複素環残基が挙げられる。単環式複素環残基としては、たとえばピロリル、フラニル、チオフェニル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、ピリジルなどが挙げられ、縮合型複素環残基としては、たとえばインドリル、キノリル、ベンゾチオフェニル、ベンゾフラニル、インダゾリル、キナゾリニル、フタラジニル、キノキサリニルなどが挙げられる。とりわけインドリルが好ましい。Ｒ４で表される、アリール基、シクロアルキル基または芳香族複素環残基で置換されていてもよい低級アルキル基の好適な具体例としては、イソブチル、ベンジル、シクロヘキシルメチル、インドール−３−イルメチルである。
【００１０】
本発明における一般式（Ｉ）で表される化合物の塩としては生理学的に許容される塩が好ましく、たとえば無機塩基との塩、有機塩基との塩、無機酸との塩、有機酸との塩、塩基性または酸性アミノ酸との塩などが挙げられる。無機塩基との塩の好適な例としては、たとえばナトリウム塩、カリウム塩などのアルカリ金属塩；カルシウム塩、マグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩；アルミニウム塩、アンモニウム塩などが挙げられる。有機塩基との塩の好適な例としては、たとえばトリメチルアミン、ピリジン、ピコリン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ，Ｎ−ジベンジルエチレンジアミンなどとの塩が挙げられる。無機酸との塩の好適な例としては、たとえば塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸などとの塩が挙げられる。有機酸との塩の好適な例としては、たとえばギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、フマ−ル酸、シュウ酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸、コハク酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸などとの塩が挙げられる。塩基性アミノ酸との塩の好適な例としては、たとえばアルギニン、リジン、オルニチンなどとの塩が挙げられ、酸性アミノ酸との塩の好適な例としては、たとえばアスパラギン酸、グルタミン酸などとの塩が挙げられる。
【００１１】
本発明の化合物は、たとえば下記反応式
【化３】
0003999939.tif 000003
【００１２】
（式中、各記号は前記と同意義を有する。）により製造することができる。一般式（II）で表されるスルホニルクロリド〔以下、化合物（II）と記載することもある。〕としては、たとえばナフタレンスルホニルクロリド、トルエンスルホニルクロリド、フルオロベンゼンスルホニルクロリド、クロロベンゼンスルホニルクロリド、メタンスルホニルクロリド、ブロモベンゼンスルホニルクロリド、ベンゼンスルホニルクロリドなどが挙げらる。
【００１３】
一般式（III）で表される化合物〔以下、化合物（III）と記載することもある。〕としては、たとえばグリシン、アラニン、バリン、Ｄ−バリン、ノルバリン、ロイシン、イソロイシン、ノルロイシン、ｔｅｒｔ−ロイシン、１−アミノシクロプロパンカルボン酸、１−アミノシクロブタンカルボン酸、１−アミノシクロペンタンカルボン酸、１−アミノシクロヘキサンカルボン酸などが挙げらる。化合物（II）と化合物（III）の反応は、通常知られうる方法、たとえばショッテン−バウマン（Ｓｈｏｔｔｅｎ−Ｂａｕｍａｎｎ）反応などにより行なうことができる。
【００１４】
一般式（IV）で表される化合物とＮ−ヒドロキシコハク酸イミドは、通常使用される有機溶媒（たとえば、テトラヒドロフラン、ジクロロメタン、クロロホルム、酢酸エチルなど）に溶解し、縮合剤で縮合させる。該縮合剤としては、たとえばＮ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミドまたは１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩などが好適に使用される。一般式（VI）で表されるアミノアルコール〔以下、化合物（VI）と記載することもある。〕としては、たとえばバリノール、ロイシノール、Ｄ−ロイシノール、フェニルアラニノール、トリプトファノール、（ｓ）−２−アミノ−３−シクロヘキシル−１−プロパノールなどが挙げられる。
【００１５】
一般式（Ｖ）で表される化合物と化合物（VI）は、たとえばテトラヒドロフラン、ジクロロメタン、クロロホルム、酢酸エチルなどの溶媒に溶解し、塩基（トリエチルアミン、ピリジンなど）の存在下で反応させる。さらに、一般式（VII）で表される化合物を酸化剤（三酸化硫黄ピリジン錯体、オキサリルクロリド、クロム酸−ピリジンなど）で酸化すると、（Ｉ）を製造することができる。反応温度は特に限定されないが、通常は、冷却下、室温または加温下に行われる。後述の実施例によって得られた化合物の構造式を下記に示す。
【００１６】
【表１】
0003999939.tif 000004
【表２】
0003999939.tif 000005
【表３】
0003999939.tif 000006
【００１７】
本発明の一般式（Ｉ）で表される化合物およびその塩は後記試験例に示すように優れたカルパイン阻害活性を有するため、カルパインが関与する種々の疾患、たとえば、哺乳類（例、マウス、ラット、ウサギ、イヌ、ネコ、ウシ、ブタ、ヒトなど）の虚血性疾患、炎症、筋ジストロフィー、白内障、網膜症、免疫疾患、本態性高血圧、アルツハイマー病、クモ膜下出血および骨粗鬆症などの予防または治療薬として有用である。
【００１８】
本発明の一般式（Ｉ）で表される化合物およびその塩を含有する医薬は全身的または局所的に投与される。全身的には経口投与の他、静脈内注射、皮下注射、筋肉内注射などの非経口法で投与される。局所的には皮膚、粘膜、鼻内、眼内などに投与される。上記薬剤組成物の製剤形態のうち、ヒトに経口的に投与される組成物としては、たとえば粉末、顆粒、錠剤、カプセル剤、シロップ剤および液剤などが挙げられる。組成物が粉末、顆粒、錠剤などとして処方される場合、固形組成物を処方するのに好適な任意の製薬担体、たとえば賦形剤（澱粉、ブドウ糖、果糖、白糖など）、滑沢剤（ステアリン酸マグネシウムなど）、崩壊剤（澱粉、結晶セルロースなど）、結合剤（澱粉、アラビアゴムなど）などを用いることができ、コーティング剤（ゼラチン、白糖など）でコーティングされていてもよい。また、組成物がシロップや液剤として処方される場合、たとえば安定剤（エデト酸ナトリウムなど）、懸濁化剤（アラビアゴム、カルメロースなど）、矯味剤（単シロップ、ブドウ糖など）、芳香剤などを適宜に選択して使用することができる。非経口的に処方される組成物としては、注射剤、坐剤などが挙げられる。組成物が注射剤として処方される場合、たとえば溶剤（注射用蒸留水など）、安定化剤（エデト酸ナトリウムなど）、等張化剤（塩化ナトリウム、グリセリン、マンニトールなど）、ｐＨ調整剤（塩酸、クエン酸、水酸化ナトリウムなど）、懸濁化剤（メチルセルロースなど）を用いることができ、坐剤として処方される場合、たとえば坐剤基剤（カカオ脂、マクロゴールなど）などを適宜に選択して使用することができる。外用組成物としては、たとえば軟膏、クリーム剤、ローション剤、点鼻剤および点眼剤などが挙げられる。これら外用組成物には本発明の化合物（Ｉ）に加えて、たとえば軟膏基剤（ワセリン、ラノリンなど）、溶剤（生理食塩水、精製水など）、安定剤（エデト酸ナトリウム、クエン酸など）、湿潤剤（グリセリンなど）、乳化剤（ポリビニルピロリドンなど）、懸濁化剤（ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロースなど）、界面活性剤（ポリソルベート８０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油など）、保存剤（塩化ベンザルコニウム、パラベン類、クロロブタノールなど）、緩衝剤（ホウ酸、ホウ砂、酢酸ナトリウム、クエン酸緩衝剤、リン酸緩衝剤など）、等張化剤（塩化ナトリウム、グリセリン、マンニトールなど）、ｐＨ調整剤（塩酸、水酸化ナトリウムなど）などの公知の化合物を適宜に選択して使用することができる。
【００１９】
本発明の一般式（Ｉ）で表される化合物およびその塩の投与量は対象となる疾患、症状、投与対象、投与方法などにより異なるが、白内障に使用する場合、一回あたりの投与量は、経口投与では通常１〜５００ｍｇ、好ましくは１０〜２００ｍｇ、注射剤では通常０．１〜１００ｍｇ、好ましくは１〜５０ｍｇである。また、局所的に使用する場合には、通常０．００１〜１．０ｗ／ｖ％、好ましくは０．０１〜０．５ｗ／ｖ％に調製した点眼液を、１回２０〜５０μｌ、１日５〜６回点眼するのがよい。
【００２０】
【実施例】
本発明を以下の実施例、試験例、及び製剤例に従いさらに詳細に説明するが、本発明はこれらにより何ら限定されるものではない。
【００２１】
実施例１
Ｎ−（２−ナフタレンスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−ロイシナール
ステップ１： バリン（１１．５ｇ）を１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液１００ｍｌに溶解し、さらに精製水２００ｍｌとテトラヒドロフラン１００ｍｌを加え、氷冷下で撹拌しながら、１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液１００ｍｌと２−ナフタレンスルホニルクロリド（１８．５ｇ）のテトラヒドロフラン溶液１００ｍｌを同時に滴下した。この溶液を室温で一昼夜撹拌し、反応させた。反応終了後、反応液をpH２〜３に調整して酢酸エチルで抽出した。抽出液を希塩酸、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで脱水した。酢酸エチルを減圧留去して、残渣をヘキサン−酢酸エチル混液（酢酸エチル１容量に対しヘキサンを約１０〜２０容量の割合で混合した溶液、以下ヘキサン−酢酸エチル混液というときは同様である。）で洗浄し、Ｎ−（２−ナフタレンスルホニル）−Ｌ−バリン１２．８ｇを白色結晶として得た。
【００２２】
ステップ２： Ｎ−（２−ナフタレンスルホニル）−Ｌ−バリン（１２．０ｇ）とＮ−ヒドロキシコハク酸イミド（５．４ｇ）をテトラヒドロフラン２００ｍｌに溶解し、氷冷下で撹拌しながら１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（９．０ｇ）のジクロロメタン溶液２００ｍｌをゆっくりと加えた。この溶液を室温で約４時間撹拌し、反応させた。反応終了後、溶媒を減圧留去して残渣を酢酸エチルに溶解し、希塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで脱水した。酢酸エチルを減圧留去して、残渣をヘキサン−酢酸エチル混液で洗浄し、Ｎ−（２−ナフタレンスルホニル）−Ｌ−バリンＮ−ヒドロキシコハク酸イミドエステル１４．１ｇを白色結晶として得た。
【００２３】
ステップ３： Ｎ−（２−ナフタレンスルホニル）−Ｌ−バリンＮ−ヒドロキシコハク酸イミドエステル（１．８ｇ）とロイシノール（０．６３ｇ）をジクロロメタン１００ｍｌに加え、室温で撹拌しながらトリエチルアミン（０．６８ｇ）を加えた。この溶液を２時間撹拌し、反応させた。反応終了後、希塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで脱水した。ジクロロメタンを減圧留去して、残渣をヘキサン−酢酸エチル混液で洗浄し、Ｎ−（２−ナフタレンスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−ロイシノール１．３ｇを白色結晶として得た。
【００２４】
ステップ４： Ｎ−（２−ナフタレンスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−ロイシノール（１．３ｇ）をジメチルスルホキシド２０ｍｌとジクロロメタン１０ｍｌに溶解しトリエチルアミン（１．９ｇ）を加えた。この溶液を室温で撹拌しながら三酸化硫黄ピリジン錯体（２．０ｇ）のジメチルスルホキシド溶液２０ｍｌを加え、さらに２時間撹拌した。反応終了後、酢酸エチルを加え、希塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで脱水した。溶媒を減圧留去して、残渣をヘキサン−酢酸エチル混液で洗浄し、Ｎ−（２−ナフタレンスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−ロイシナール（化合物１）０．９８ｇを白色結晶として得た。
1H-NMR (DMSO-d6 270MHz) δ: 0.42 (d, 3H, J=6.3Hz), 0.55 (d, 3H, J=6.3Hz), 0.84 (d, 3H, J=6.6Hz), 0.88 (d, 3H, J=6.6Hz), 0.93-1.12 (m, 2H), 1.14-1.28 (m, 1H), 1.82-2.00 (m, 1H), 3.63-3.72 (m, 2H), 7.62-8.40 (m, 9H),9.02 (s, 1H).; Anal. (C21H28N2O4S) C, H, N.
【００２５】
実施例２
Ｎ−（４−クロロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−ロイシナール
実施例１、ステップ１の２−ナフタレンスルホニルクロリドの代わりに４−クロロベンゼンスルホニルクロリドを用い、実施例１と同様の操作をしてＮ−（４−クロロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−ロイシナール（化合物２）を白色結晶として得た。
1H-NMR (DMSO-d6 270MHz) δ: 0.74 (d, 3H, J=5.9Hz), 0.82 (d, 6H, J=6.8Hz), 0.88 (d, 3H, J=6.3Hz), 1.15-1.46 (m, 1H), 3.61 (dd, 1H, J=6.8, 9.3Hz), 3.82-3.90 (m, 1H), 7.56-7.63 (m, 2H), 7.44-7.79 (m, 2H), 8.03 (d, 1H,J=9.3Hz), 8.26 (d, 1H, J=7.3Hz), 9.15 (s, 1H).; Anal. (C17H25ClN2O4S) C, H, N.
【００２６】
実施例３
Ｎ−（４−メチルフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−ロイシナール
実施例１、ステップ１の２−ナフタレンスルホニルクロリドの代わりにｐ−トルエンスルホニルクロリドを用い、実施例１と同様の操作をしてＮ−（４−メチルフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−ロイシナール（化合物３）を白色結晶として得た。
1H-NMR (DMSO-d6 270MHz) δ: 0.72-0.90 (m, 12H), 1.18-1.45 (m, 3H), 1.79-1.91 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 3.57 (t, 1H, J=7.7Hz), 3.77-3.84 (m, 1H),7.32 (d, 2H), 7.62-7.70 (m, 2H), 7.76 (d, 1H, J=8.3Hz), 8.26 (d, 1H, J=6.8Hz), 9.07 (s, 1H).; Anal. (C18H28N2O4S) C, H, N.
【００２７】
実施例４
Ｎ−（２−ナフタレンスルホニル）−Ｌ−ｔｅｒｔ−ロイシル−Ｌ−ロイシナール
実施例１、ステップ１のバリンの代わりにｔｅｒｔ−ロイシンを用い、実施例１と同様の操作をしてＮ−（２−ナフタレンスルホニル）−Ｌ−ｔｅｒｔ−ロイシル−Ｌ−ロイシナール（化合物４）を白色結晶として得た。
1H-NMR (DMSO-d6 270MHz) δ: 0.35 (d, 3H, J=6.4Hz), 0.46 (d, 3H, J=6.4Hz), 0.78-0.95 (m, 2H), 0.95 (s, 9H), 1.08-1.20 (m, 1H), 3.45-3.55 (m, 1H), 3.67 (d, 1H, J=10.3Hz), 7.62-7.72 (m, 2H), 7.82-7.86 (m, 1H), 7.97-8.10 (m, 4H), 8.17 (d, 1H, J=6.4Hz), 8.29 (m, 1H), 8.91 (s, 1H).; Anal. (C22H30N2O4S) C, H, N.
【００２８】
実施例５
Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｄ−バリル−Ｌ−ロイシナール
実施例１、ステップ１の２−ナフタレンスルホニルクロリドの代わりに４−フルオロベンゼンスルホニルクロリドを用い、バリンの代わりにＤ−バリンを用い、実施例１と同様の操作をしてＮ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｄ−バリル−Ｌ−ロイシナール（化合物５）を白色結晶として得た。
1H-NMR (DMSO-d6 270MHz) δ: 0.78 (d, 3H, J=6.3Hz), 0.82 (d, 3H, J=6.9Hz), 0.83 (d, 6H, J=6.3Hz), 1.24-1.50 (m, 3H), 1.80-1.92 (m, 1H), 3.62 (sbr, 1H), 3.84-3.92 (m, 1H), 7.32-7.41 (m, 2H), 7.79 (m, 3H), 8.33 (d, 1H, J=6.9Hz), 8.96 (s, 1H).; Anal. (C22H30N2O4S) C, H, N.
【００２９】
実施例６
Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−ノルロイシル−Ｌ−ロイシナール
実施例１、ステップ１の２−ナフタレンスルホニルクロリドの代わりに４−フルオロベンゼンスルホニルクロリドを用い、バリンの代わりにノルロイシンを用い、実施例１と同様の操作をしてＮ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−ノルロイシル−Ｌ−ロイシナール（化合物７）を白色結晶として得た。
1H-NMR (DMSO-d6 270MHz) δ: 0.74-0.90 (m, 9H), 1.07-1.59 (m, 9H), 3.76(t, 1H, J=5.4Hz), 3.84-3.91 (m, 1H), 7.34-7.45 (m, 2H), 7.79-8.07 (m, 3H), 8.29 (d, 1H, J=7.3Hz), 9.18 (s, 1H).; Anal. (C22H30N2O4S) C, H, N.
【００３０】
実施例７
Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−ノルバリル−Ｌ−ロイシナール
実施例１、ステップ１の２−ナフタレンスルホニルクロリドの代わりに４−フルオロベンゼンスルホニルクロリドを用い、バリンの代わりにノルバリンを用い、実施例１と同様の操作をしてＮ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−ノルバリル−Ｌ−ロイシナール（化合物７）を白色結晶として得た。
1H-NMR (DMSO-d6 270MHz) δ: 0.69-0.85 (m, 9H), 1.14-1.66 (m, 7H), 3.78(t, 1H, J=6.3Hz), 3.84-3.92 (m, 1H), 7.34-7.42 (m, 2H), 7.79-8.02 (m, 3H), 8.28 (d, 1H, J=7.3Hz), 9.18 (s, 1H).; Anal. (C22H30N2O4S) C, H, N.
【００３１】
実施例８
１−（２−ナフタレンスルホニルアミノ）シクロペンタンカルボニル−Ｌ−ロイシナール
実施例１、ステップ１のバリンの代わりに１−アミノシクロペンタンカルボン酸を用い、実施例１と同様の操作をして１−（２−ナフタレンスルホニルアミノ）シクロペンタンカルボニル−Ｌ−ロイシナール（化合物２３）を白色結晶として得た。
1H-NMR (DMSO-d6 270MHz) δ: 0.85 (m, 6H, J=6.5Hz), 1.24-1.99 (m, 11H),3.94-4.01 (m, 2H), 7.64-7.73 (m, 2H), 7.89 (dd, 1H J=2.1, 8.7Hz), 7.97-8.17 (m, 6H, J=1.5Hz), 9.23 (s, 1H); Anal. (C22H28N2O4S) C, H, N.
【００３２】
実施例９
Ｎ−（２−ナフタレンスルホニル）−Ｌ−ｔｅｒｔ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニナール
ステップ１： ｔｅｒｔ−ロイシン（１３．１ｇ）を１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液１００ｍｌに溶解し、さらに精製水２００ｍｌとテトラヒドロフラン１００ｍｌを加え、氷冷下で撹拌しながら、１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液１００ｍｌと２−ナフタレンスルホニルクロリド（２０．４ｇ）のテトラヒドロフラン溶液１００ｍｌを同時に滴下した。この溶液を室温で一昼夜撹拌し、反応させた。反応終了後、反応液をpH２〜３に調整して酢酸エチルで抽出した。抽出液を希塩酸、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで脱水した。酢酸エチルを減圧留去して、残渣をヘキサン−酢酸エチル混液で洗浄し、Ｎ−（２−ナフタレンスルホニル）−Ｌ−ｔｅｒｔ−ロイシン１６．５ｇを白色結晶として得た。
【００３３】
ステップ２： Ｎ−（２−ナフタレンスルホニル）−Ｌ−ｔｅｒｔ−ロイシン（１６．０ｇ）とＮ−ヒドロキシコハク酸イミド（６．９ｇ）をテトラヒドロフラン２００ｍｌに溶解し、氷冷下で撹拌しながら１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（１１．５ｇ）のジクロロメタン溶液２００ｍｌをゆっくりと加えた。この溶液を室温で約１２時間撹拌し、反応させた。反応終了後、溶媒を減圧留去して残渣を酢酸エチルに溶解し、希塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで脱水した。酢酸エチルを減圧留去して、残渣をヘキサン−酢酸エチル混液で洗浄し、Ｎ−（２−ナフタレンスルホニル）−Ｌ−ｔｅｒｔ−ロイシンＮ−ヒドロキシコハク酸イミドエステル１８．３ｇを白色結晶として得た。
【００３４】
ステップ３： Ｎ−（２−ナフタレンスルホニル）−Ｌ−ｔｅｒｔ−ロイシンＮ−ヒドロキシコハク酸イミドエステル（１．８ｇ）とフェニルアラニノール（１．０ｇ）をジクロロメタン５０ｍｌに加え、室温で撹拌しながらトリエチルアミン（０．８６ｇ）を加えた。この溶液を２時間撹拌し、反応させた。反応終了後、希塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで脱水した。ジクロロメタンを減圧留去して、残渣をヘキサン−酢酸エチル混液で洗浄し、Ｎ−（２−ナフタレンスルホニル）−Ｌ−ｔｅｒｔ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニノール１．６ｇを白色結晶として得た。
【００３５】
ステップ４： Ｎ−（２−ナフタレンスルホニル）−Ｌ−ｔｅｒｔ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニノール（１．６ｇ）をジメチルスルホキシド２０ｍｌとジクロロメタン１０ｍｌに溶解し、トリエチルアミン（２．１ｇ）を加え、室温で撹拌しながら三酸化硫黄ピリジン錯体（２．２ｇ）のジメチルスルホキシド溶液１５ｍｌを加えた。この溶液を２時間撹拌し、反応させた。反応終了後、酢酸エチルを加え、希塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで脱水した。溶媒を減圧留去して、残渣をヘキサン−酢酸エチル混液で洗浄し、Ｎ−（２−ナフタレンスルホニル）−Ｌ−ｔｅｒｔ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニナール（化合物８）１．１ｇを白色結晶として得た。
1H-NMR (DMSO-d6 270MHz) δ: 0.86 (s, 9H), 2.26-2.40 (m, 1H), 2.63-2.77(m, 1H), 3.56 (dd, 1H, J=6.8, 13.2Hz), 3.63-3.68 (m, 1H), 6.87-6.90 (m,1H), 6.99-7.03 (m, 1H), 7.11-7.22 (m, 3H), 7.60-7.72 (m, 2H), 7.80-7.87(m, 1H), 7.92-8.19 (m, 4H), 8.35 (d, 1H, J=6.8Hz), 8.40-8.43 (m, 1H), 8.63 (s, 1H).; Anal. (C25H28N2O4S) C, H, N.
【００３６】
実施例１０
Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−フェニルアラニナール
実施例９、ステップ１の２−ナフタレンスルホニルクロリドの代わりに４−フルオロベンゼンスルホニルクロリドを用い、ｔｅｒｔ−ロイシンの代わりにバリンを用い、実施例９と同様の操作をしてＮ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−フェニルアラニナール（化合物９）を白色結晶として得た。
1H-NMR (DMSO-d6 270MHz) δ: 0.76 (d, 3H, J=6.4Hz), 0.77 (d, 3H, J=6.4Hz), 1.69-1.86 (m, 1H), 2.67 (dd, 1H, J=8.8, 14.2Hz), 3.02 (dd, 1H, J=5.1, 14.2Hz), 3.56 (dd, 1H, J=6.4, 9.3Hz), 3.99-4.07 (m, 1H), 7.12-7.29 (m,7H), 7.72-7.84 (m, 2H), 7.92 (d, 1H, J=9.3Hz), 8.44 (d, 1H, J=6.8Hz), 9.07 (s, 1H).; Anal. (C20H23FN2O4S) C, H, N.
【００３７】
実施例１１
Ｎ−（２−ナフタレンスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−フェニルアラニナール実施例９、ステップ１のｔｅｒｔ−ロイシンの代わりにバリンを用い、実施例９と同様の操作をしてＮ−（２−ナフタレンスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−フェニルアラニナール（化合物１０）を白色結晶として得た。
1H-NMR (DMSO-d6 270MHz) δ: 0.63 (d, 3H, J=6.6Hz), 0.76 (d, 3H, J=6.6Hz), 1.68-1.82 (m, 1H,), 2.40-2.92 (m, 1H), 3.64 (dd, 1H, J=6.6, 9.2Hz),3.97-3.87 (m, 1H), 6.95-7.02 (m, 2H), 7.10-7.23 (m, 3H), 7.62-7.82 (m, 3H), 7.94-8.10 (m, 4H), 8.36-8.43 (m, 2H), 8.86 (s, 1H).; Anal. (C24H26N2O4S) C, H, N.
【００３８】
実施例１２
Ｎ−（４−クロロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−フェニルアラニナール
実施例９、ステップ１の２−ナフタレンスルホニルクロリドの代わりに４−クロロベンゼンスルホニルクロリドを用い、ｔｅｒｔ−ロイシンの代わりにバリンを用い、実施例９と同様の操作をしてＮ−（４−クロロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−フェニルアラニナール（化合物１１）を白色結晶として得た。1H-NMR (DMSO-d6 270MHz) δ: 0.77 (d, 3H, J=6.8Hz), 0.79 (d, 3H, J=6.8Hz), 1.70-1.87 (m, 1H), 2.67 (dd, 1H, J=8.8, 14.2Hz), 3.01 (dd, 1H, J=5.4, 14.2Hz), 3.60 (dd, 1H, J=6.4, 9.3Hz), 4.00-4.07 (m, 1H), 7.12-7.32 (m,5H), 7.50-7.60 (m, 2H), 7.68-8.00 (m, 2H), 7.98 (d, 1H, J=9.3Hz), 8.44(d, 1H, J=6.8Hz), 9.09 (s, 1H).; Anal. (C20H23ClN2O4S) C, H, N.
【００３９】
実施例１３
Ｎ−（４−メチルフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−フェニルアラニナール
実施例９、ステップ１の２−ナフタレンスルホニルクロリドの代わりにｐ−トルエンスルホニルクロリドを用い、ｔｅｒｔ−ロイシンの代わりにバリンを用い、実施例９と同様の操作をしてＮ−（４−メチルフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−フェニルアラニナール（化合物１２）を白色結晶として得た。
1H-NMR (DMSO-d6 270MHz) δ: 0.74 (d, 6H, J=6.4Hz), 1.71-1.81 (m, 1H),2.33 (s, 3H), 2.65 (dd, 1H, J=8.8, 14.2), 2.99 (dd, 1H, J=5.4, 14.2), 3.55 (dd, 1H, J=6.4, 9.3Hz), 3.97-4.05 (m, 1H), 7.11-7.37 (m, 7H), 7.59-7.66 (m, 2H), 7.73 (d, 1H, J=9.3Hz), 8.41 (d, 1H, J=6.8Hz), 8.99 (s, 1H).;Anal. (C21H26N2O4S) C, H, N.
【００４０】
実施例１４
１−（２−ナフタレンスルホニルアミノ）シクロヘキサンカルボニル−Ｌ−フェニルアラニナール
実施例９、ステップ１のｔｅｒｔ−ロイシンの代わりに１−アミノシクロヘキサンカルボン酸を用い、実施例９と同様の操作をして１−（２−ナフタレンスルホニルアミノ）シクロヘキサンカルボニル−Ｌ−フェニルアラニナール（化合物１３）を白色結晶として得た。
1H-NMR (DMSO-d6 270MHz) δ: 1.12 (s br, 6H), 1.65 (s br, 4H), 2.28 (dd, 1H, J=8.6, 14.2Hz), 3.06 (dd, 1H, J=5.3, 14.2Hz), 4.07-4.14 (m, 1H), 7.16-7.29(m, 5H), 7.63-7.72 (m, 2H), 7.86-7.72 (m, 2H), 7.98-8.15 (m, 4H), 8.41 (s, 1H), 9.29 (s, 1H).; Anal. (C26H28N2O4S) C, H, N.
【００４１】
実施例１５
１−（２−ナフタレンスルホニルアミノ）シクロペンタンカルボニル−Ｌ−フェニルアラニナール
実施例９、ステップ１のｔｅｒｔ−ロイシンの代わりに１−アミノシクロヘキサンカルボン酸を用い、実施例９と同様の操作をして１−（２−ナフタレンスルホニルアミノ）シクロペンタンカルボニル−Ｌ−フェニルアラニナール（化合物２４）を白色結晶として得た。
1H-NMR (DMSO-d6 270MHz) δ: 1.17-1.18 (m, 4H), 1.72-1.87 (m, 4H), 2.88(dd, 1H, J=8.4, 14.1Hz), 3.01 (dd, 1H, J=5.1, 13.8Hz), 4.24(m, 1H), 7.17-7.29(m, 5H), 7.63-7.73 (m, 2H), 7.86(dd, 1H, J=1.8, 8.9Hz), 8.02-8.16(m, 6H), 8.43 (d, 1H, J=1.8Hz), 9.38 (s, 1H).; Anal. (C25H26N2O4S) C, H,N.
【００４２】
実施例１６
Ｎ−（４−クロロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−トリプトファナール
ステップ１： バリン（１３．１ｇ）を１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液１００ｍｌに溶解し、さらに精製水２５０ｍｌとテトラヒドロフラン１００ｍｌを加え、氷冷下で撹拌しながら１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液１００ｍｌと４−クロロベンゼンスルホニルクロリド（１９．０ｇ）のテトラヒドロフラン溶液１００ｍｌを５回に分けて交互に加えた。この溶液を室温で一昼夜攪拌し、反応させた。反応終了後、反応液をpH２〜３に調整して酢酸エチルで抽出した。抽出液を希塩酸、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで脱水した。酢酸エチルを減圧留去して、残渣をヘキサン−酢酸エチル混液で洗浄し、Ｎ−（４−クロロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリン１３．６ｇを白色結晶として得た。
【００４３】
ステップ２： Ｎ−（４−クロロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリン（１３．５ｇ）とＮ−ヒドロキシコハク酸イミド（６．４ｇ）をテトラヒドロフラン２００ｍｌに溶解し、氷冷下で撹拌しながら１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（１０．６ｇ）のジクロロメタン溶液２００ｍｌをゆっくりと加えた。この溶液を室温で約１２時間撹拌し、反応させた。反応終了後、溶媒を減圧留去して残渣を酢酸エチルに溶解し、希塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで脱水した。酢酸エチルを減圧留去して、残渣をヘキサン−酢酸エチル混液で洗浄し、Ｎ−（４−クロロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリンＮ−ヒドロキシコハク酸イミドエステル１４．３ｇを白色結晶として得た。
【００４４】
ステップ３： Ｎ−（４−クロロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリンＮ−ヒドロキシコハク酸イミドエステル（１．５ｇ）とＬ−トリプトファノール（０．８８ｇ）をジクロロメタン１００ｍｌに加え、室温で撹拌しながらトリエチルアミン（１．２ｇ）を加えた。この溶液を２時間撹拌し、反応させた。反応終了後、溶媒を減圧留去し、残渣を酢酸エチルに溶解して、希塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで脱水した。酢酸エチルを減圧留去して、残渣をヘキサン−酢酸エチル混液で洗浄し、Ｎ−（４−クロロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−トリプトファノール１．６ｇを白色結晶として得た。
【００４５】
ステップ４： Ｎ−（４−クロロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−トリプトファノール（１．５ｇ）をジメチルスルホキシド２０ｍｌとジクロロメタン１５ｍｌに溶解しトリエチルアミン（２．０ｇ）を加え、室温で撹拌しながら三酸化硫黄ピリジン錯体（２．１ｇ）のジメチルスルホキシド溶液２０ｍｌを加え、さらに１時間撹拌した。反応終了後、酢酸エチルを加え、希塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで脱水した。溶媒を減圧留去して、残渣をＴＬＣプレート〔展開溶媒：ヘキサン−酢酸エチル（１：１）〕を用いて精製し、Ｎ−（４−クロロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−トリプトファナール（化合物１４）０．１０ｇを白色結晶として得た。
1H-NMR (DMSO-d6 270MHz) δ: 0.81 (d, 3H, J=6.8Hz), 0.82 (d, 3H, J=6.4Hz), 1.77-1.91(m, 1H), 2.82 (dd, 1H, J=7.8, 15.1Hz), 3.07 (dd, 1H, J=5.9,15.1Hz), 3.65 (dd, 1H, J=6.8, 9.3Hz), 4.06-4.14 (m, 1H), 6.96-7.69 (m,9H), 7.99 (d, 1H, J=9.8Hz), 8.41 (d, 1H, J=6.4Hz), 9.21 (s, 1H), 10.92 (s, 1H).; Anal. (C22H24ClN3O4S) C, H, N.
【００４６】
実施例１７
Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−トリプトファナール
実施例１６、ステップ１の４−クロロベンゼンスルホニルクロリドの代わりに４−フルオロベンゼンスルホニルクロリドを用い、実施例１６と同様の操作をしてＮ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−トリプトファナール（化合物１５）を白色結晶として得た。
1H-NMR (DMSO-d6 270MHz) δ: 0.80 (d, 3H, J=6.8Hz), 0.81 (d, 3H, J=6.8Hz), 1.76-1.88 (m, 1H), 2.82 (dd, 1H, J=8.1, 15.1Hz), 3.06 (dd, 1H, J=6.1, 15.1Hz), 3.63 (dd, 1H, J=6.8, 9.3Hz) 4.04-4.12 (m, 1H), 6.98-7.56 (m,7H), 7.68-7.76 (m, 2H), 7.93 (d, 1H, J=9.3Hz), 8.41 (d, 1H, J=6.4Hz), 9.19 (s, 1H), 10.92 (s, 1H).; Anal. (C22H24FN3O4S) C, H, N.
【００４７】
実施例１８
１−（２−ナフタレンスルホニルアミノ）シクロヘキサンカルボニル−Ｌ−トリプトファナール
実施例１６、ステップ１の４−クロロベンゼンスルホニルクロリドの代わりに２−ナフタレンスルホニルクロリドを用い、バリンの代わりに１−アミノシクロヘキサンカルボン酸を用い、実施例１６と同様の操作をして１−（２−ナフタレンスルホニルアミノ）シクロヘキサンカルボニル−Ｌ−トリプトファナール（化合物１６）を白色結晶として得た。
1H-NMR (DMSO-d6 270MHz) δ: 1.17 (s br, 6H), 1.72 (s br, 4H), 2.97-3.16 (m, 2H), 4.10-4.17 (m, 1H), 6.95-7.22 (m, 3H), 7.33 (d, 1H, J=8.3Hz),7.48 (d, 1H, J=7.6Hz), 7.61-7.72 (m, 2H), 7.83-8.14 (m, 6H), 8.41 (s, 1H), 10.89 (s, 1H).; Anal. (C28H29N3O4S) C, H, N.
【００４８】
実施例１９
Ｎ−（２−ナフタレンスルホニル）−Ｌ−ｔｅｒｔ−ロイシル−Ｌ−トリプトファナール実施例１６、ステップ１の４−クロロベンゼンスルホニルクロリドの代わりに２−ナフタレンスルホニルクロリドを用い、バリンの代わりにｔｅｒｔ−ロイシンを用い、実施例１６と同様の操作をしてＮ−（２−ナフタレンスルホニル）−Ｌ−ｔｅｒｔ−ロイシル−Ｌ−トリプトファナール（化合物１７）を白色結晶として得た。
1H-NMR (DMSO-d6 270MHz) δ: 0.89 (s, 9H), 2.43 (dd, 1H, J=6.8, 15.1Hz), 2.68 (dd, 1H, J=7.3, 15.1Hz), 3.64-3.75 (m, 2H), 6.93-7.16 (m, 3H), 7.19 (d, 1H, J=7.8Hz), 7.32 (d, 1H, J=8.3Hz), 7,58-7.67 (m, 2H), 7.76-7.80(m, 2H), 7.88-8.01 (m, 3H), 8.05-8.09 (m, 1H), 8.37 (d, 1H, J=6.4Hz), 8.43 (m, 1H), 8.83 (s, 1H), 10.80 (s, 1H).; Anal. (C27H29N3O4S) C, H, N.
【００４９】
実施例２０
Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−シクロヘキシルアラニナール
ステップ１： バリン（１１．５ｇ）を１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液１００ｍｌに溶解し、さらに精製水２００ｍｌとテトラヒドロフラン１００ｍｌを加え、氷冷下で撹拌しながら１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液１００ｍｌと４−フルオロベンゼンスルホニルクロリド（１７．５ｇ）のテトラヒドロフラン溶液１００ｍｌを同時に滴下した。この溶液を室温で一昼夜撹拌し、反応させた。反応終了後、反応液をpH２〜３に調整して酢酸エチルで抽出した。抽出液を希塩酸、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで脱水した。酢酸エチルを減圧留去して、残渣をヘキサン−酢酸エチル混液で洗浄し、Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリン１５．５ｇを白色結晶として得た。
【００５０】
ステップ２： Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリン（１２．０ｇ）とＮ−ヒドロキシコハク酸イミド（７．６ｇ）をテトラヒドロフラン２００ｍｌに溶解し、氷冷下で撹拌しながら１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（１２．６ｇ）のジクロロメタン溶液２００ｍｌをゆっくりと加えた。この溶液を室温で約４時間撹拌し、反応させた。反応終了後、溶媒を減圧留去して残渣を酢酸エチルに溶解し、希塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで脱水した。酢酸エチルを減圧留去して、残渣をヘキサン−酢酸エチル混液で洗浄し、Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリンＮ−ヒドロキシコハク酸イミドエステル１４．１ｇを白色結晶として得た。
【００５１】
ステップ３： Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリンＮ−ヒドロキシコハク酸イミドエステル（１．５ｇ）と（Ｓ）−２−アミノ−３−シクロヘキシル−１−プロパノール塩酸塩（１．５ｇ）をジクロロメタン８０ｍｌに加え、室温で撹拌しながらトリエチルアミン（２．０ｇ）を加えた。この溶液を２時間撹拌し、反応させた。反応終了後、溶媒を減圧留去し、残渣を酢酸エチルに溶解して、希塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで脱水した。酢酸エチルを減圧留去して、残渣をヘキサン−酢酸エチル混液で洗浄し、Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−シクロヘキシルアラニノール１．４ｇを白色結晶として得た。
【００５２】
ステップ４： Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−シクロヘキシルアラニノール（１．３ｇ）をジメチルスルホキシド２０ｍｌ溶液とジクロロメタン１０ｍｌに溶解しトリエチルアミン（１．９ｇ）を加えた。この溶液を室温で撹拌しながら三酸化硫黄ピリジン錯体（２．０ｇ）のジメチルスルホキシド溶液１０ｍｌを加え、さらに１時間撹拌を続けた。反応終了後、酢酸エチルを加え、希塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで脱水した。溶媒を減圧留去して、残渣をＴＬＣプレート〔展開溶媒：ヘキサン−酢酸エチル（１：１）〕を用いて精製し、イソプロピルエーテルで結晶化を行い、Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−シクロヘキシルアラニナール（化合物１８）０．３７ｇを白色結晶として得た。
1H-NMR (DMSO-d6 270MHz) δ: 0.74-1.61 (m, 13H), 0.82 (d, 3H, J=10.9Hz), 0.84 (d, 3H, J=10.9Hz), 1.80-1,93 (m, 1H), 3.53-3.66 (m, 1H), 3.77-3.85 (m, 1H), 7.32-7.42 (m, 2H), 7.79-7.87 (m, 2H), 7.96 (d, 1H, J=8.9Hz),8.29 (d, 1H, J=6.6Hz), 9.10 (s, 1H).; Anal. (C20H29FN2O4S) C, H, N.
【００５３】
実施例２１
Ｎ−（２−ナフタレンスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−シクロヘキシルアラニナール
実施例２０、ステップ１の４−フルオロベンゼンスルホニルクロリドの代わりに２−ナフタレンスルホニルクロリドを用い、実施例２０と同様の操作をしてＮ−（２−ナフタレンスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−シクロヘキシルアラニナール（化合物１９）を白色結晶として得た。
1H-NMR (DMSO-d6 270MHz) δ: 0.52-0.82 (m, 13H), 0.82 (d, 3H, J=6.6Hz),0.84 (d, 3H, J=5.6Hz), 1.81-1.99 (m, 1H), 3.63-3.69 (m, 2H), 7.80 (dd,1H, J=1.9, 8.8Hz), 8.00-8.11(m, 4H), 8.26 (d, 1H, J=6.6Hz), 8.39 (m, 1H), 8.96 (s, 1H).; Anal. (C24H32N2O4S) C, H, N.
【００５４】
実施例２２
Ｎ−（４−クロロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−シクロヘキシルアラニナール
実施例２０、ステップ１の４−フルオロベンゼンスルホニルクロリドの代わりに４−クロロフェニルスルホニルクロリドを用い、実施例２０と同様の操作をしてＮ−（４−クロロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−シクロヘキシルアラニナール（化合物２０）を白色結晶として得た。
1H-NMR (DMSO-d6 270MHz) δ: 0.74-1.61 (m, 13H), 0.82 (d, 3H, J=10.2Hz), 0.85 (d, 3H, J=10.5Hz), 1.89-1.93 (m, 1H), 3.58-3.63 (m, 1H), 3.77-3.85 (m, 1H), 7.58-7.63 (m, 2H), 7.75-7.80 (m, 2H), 8.05 (d, 1H, J=7.3Hz),8.40 (d, 1H, J=6.6Hz), 9.11 (s, 1H).; Anal. (C20H29ClN2O4S) C, H, N.
【００５５】
実施例２３
Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｄ−バリル−Ｄ−ロイシナール
ステップ１： Ｄ−バリン（６．６ｇ）を１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液５０ｍｌに溶解し、さらに精製水２００ｍｌとテトラヒドロフラン１００ｍｌを加え、氷冷下で撹拌しながら１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液１００ｍｌと４−フルオロベンゼンスルホニルクロリド（９．７ｇ）のテトラヒドロフラン溶液５０ｍｌを同時に滴下した。この溶液を室温で一昼夜撹拌し、反応させた。反応終了後、反応液をpH２〜３に調整して酢酸エチルで抽出した。抽出液を希塩酸、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで脱水した。酢酸エチルを減圧留去して、残渣をヘキサン−酢酸エチル混液で洗浄し、Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリン８．３ｇを白色結晶として得た。
【００５６】
ステップ２： Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリン（８．０ｇ）とＮ−ヒドロキシコハク酸イミド（４．４ｇ）をテトラヒドロフラン１５０ｍｌに溶解し、氷冷下で撹拌しながら１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（７．３ｇ）のジクロロメタン溶液１５０ｍｌをゆっくりと加えた。この溶液を室温で約１２時間撹拌し、反応させた。反応終了後、溶媒を減圧留去して残渣を酢酸エチルに溶解し、希塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで脱水した。酢酸エチルを減圧留去して、残渣をヘキサン−酢酸エチル混液で洗浄し、Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｄ−バリンＮ−ヒドロキシコハク酸イミドエステル９．６ｇを白色結晶として得た。
【００５７】
ステップ３： Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｄ−バリンＮ−ヒドロキシコハク酸イミドエステル（１．８ｇ）とＤ−ロイシノール（０．７４ｇ）をジクロロメタン８０ｍｌに加え、室温で撹拌しながらトリエチルアミン（１．５ｇ）を加えた。この溶液を２時間撹拌し、反応させた。反応終了後、溶媒を減圧留去し、残渣を酢酸エチルに溶解して、希塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで脱水した。酢酸エチルを減圧留去して、残渣をヘキサン−酢酸エチル混液で洗浄し、Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｄ−バリル−Ｄ−ロイシノール１．６ｇを白色結晶として得た。
【００５８】
ステップ４： Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｄ−バリル−Ｄ−ロイシノール（１．５ｇ）をジメチルスルホキシド溶液２０ｍｌとジクロロメタン１０ｍｌに溶解し、トリエチルアミン（２．４ｇ）を加え、室温で撹拌しながら三酸化硫黄ピリジン錯体（２．６ｇ）のジメチルスルホキシド２０ｍｌを加え、さらに１時間撹拌し、反応させた。反応終了後、酢酸エチルを加え、希塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで脱水した。溶媒を減圧留去して、残渣をＴＬＣプレート〔展開溶媒：ヘキサン−酢酸エチル（１：１）〕を用いて精製し、Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｄ−バリル−Ｄ−ロイシナール（化合物２１）１．０ｇを白色結晶として得た。
1H-NMR (DMSO-d6 270MHz) δ: 0.74 (d, 3H, J=6.3Hz), 0.82 (d, 6H, J=6.3Hz), 0.87 (d, 3H, J=6.9Hz), 1.15-1.45 (m, 3H), 1.81-1.93 (m, 1H), 3.59 (t, 1H, J=6.8Hz), 3.80-3.88 (m, 1H), 7.33-7.42 (m, 2H), 7.79-7.86 (m, 2H),7.95 (d, 1H, J=6.9Hz), 8.26 (d, 1H, J=6.9Hz), 9.14 (s, 1H).; Anal. (C22H30N2O4S) C, H, N.
【００５９】
実施例２４
Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｄ−ロイシナール
実施例２３、ステップ１のＤ−バリンの代わりにバリンを用い、実施例２３と同様の操作をしてＮ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｄ−ロイシナール（化合物２２）を白色結晶として得た。
1H-NMR (DMSO-d6 270MHz) δ: 0.78 (d, 3H, J=6.3Hz), 0.82 (d, 3H, J=6.6Hz), 0.83 (d, 6H, J=6.3Hz), 1.18-1.50 (m, 3H), 1.79-1.92 (m, 1H), 3.61-3.63 (m, 1H), 3.84-3.92 (m, 1H), 7.33-7.44 (m, 2H), 7.80-7.96 (m, 3H), 8.22 (d, 1H, J=6.9Hz), 8.96 (s, 1H).; Anal. (C20H29FN2O4S) C, H, N.
【００６０】
実施例２５
Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニナール
実施例２０のステップ１および２と同じ操作をして得た、Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリンＮ−ヒドロキシコハク酸イミドエステル（２．６ｇ）とＬ−アラニノール（０．６９ｇ）をジクロロメタン１５０ｍｌに加え、室温で撹拌しながらトリエチルアミン（２．１ｇ）を加えた。この溶液を一昼夜撹拌し、反応させた。反応終了後、希塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで脱水した。酢酸エチルを減圧留去して、残渣をイソプロピルエーテル−酢酸エチル混液で洗浄し、Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニノール１．２ｇを白色結晶として得た。
【００６１】
次いで、Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニノール（１．１ｇ）をジメチルスルホキシド２０ｍｌとジクロロメタン１０ｍｌに溶解しトリエチルアミン（１．９ｇ）を加えた。室温で撹拌しながら、三酸化硫黄ピリジン錯体（２．２ｇ）のジメチルスルホキシド溶液１０ｍｌを加え、さらに３０分撹拌した。反応終了後、酢酸エチルを加え、希塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで脱水した。酢酸エチルを減圧留去して、残渣をＴＬＣプレート〔展開溶媒：ヘキサン−酢酸エチル（１：１）〕を用いて精製し、Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニナール（化合物２５）６５ｍｇを白色結晶として得た。
1H-NMR (DMSO-d6 270MHz) δ: 0.84 (d, 3H, J=6.6Hz), 0.85 (d, 3H, J=6.6Hz), 0.99 (d, 3H, J=7.2Hz), 1.76-1.88 (m, 1H), 3.48-3.56 (m, 1H), 3.70-3.80(m, 1H), 7.35-7.43 (m, 2H), 7.79-7.85 (m, 2H), 8.00 (s, 1H), 8.39 (d, 1H, J=6.3Hz), 9.10 (s, 1H).; Anal. (C14H19FN2O4S) C, H, N.
【００６２】
実施例２６
Ｎ−メチルスルホニル−Ｌ−バリル−Ｌ−ロイシナール
ステップ１： バリン（１４．１ｇ）を１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液１２０ｍｌに溶解し、さらに精製水２４０ｍｌとテトラヒドロフラン１２０ｍｌを加え、氷冷下で撹拌しながら１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液１２０ｍｌとメタンスルホニルクロリド（１４．０ｇ）のテトラヒドロフラン溶液１２０ｍｌを同時に滴下した。撹拌を室温で一昼夜続けた。反応終了後、反応液をpH２〜３にして酢酸エチルで抽出した。抽出液を希塩酸、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで脱水した。有機層を減圧留去して、残渣をヘキサン−酢酸エチル混液で加熱洗浄し、Ｎ−メチルスルホニル−Ｌ−バリン９．１ｇを白色結晶として得た。
【００６３】
ステップ２： Ｎ−メチルスルホニル−Ｌ−バリン（９．１ｇ）とＮ−ヒドロキシコハク酸イミド（６．９ｇ）をテトラヒドロフラン１５０ｍｌに溶解し、氷冷下で撹拌しながら１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（１１．５ｇ）のジクロロメタン１９０ｍｌ溶液をゆっくりと加えた。この溶液を室温で一昼夜撹拌し、反応させた。反応終了後、溶媒を減圧留去して残渣を酢酸エチルに溶解し、希塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで脱水した。酢酸エチルを減圧留去して、残渣をイソプロピルエーテル−酢酸エチル混液で加熱洗浄し、Ｎ−メチルスルホニル−Ｌ−バリンＮ−ヒドロキシコハク酸イミドエステル６．６ｇを白色結晶として得た。
【００６４】
ステップ３： Ｎ−メチルスルホニル−Ｌ−バリンＮ−ヒドロキシコハク酸イミドエステル（２．９ｇ）とＬ−ロイシノール（１．５ｇ）をジクロロメタン１２０ｍｌに加え、室温で撹拌しながらトリエチルアミン（３．０ｇ）を加えた。この溶液を一昼夜撹拌し、反応させた。反応終了後、希塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで脱水した。酢酸エチルを減圧留去して、残渣をイソプロピルエーテル−酢酸エチル混液で洗浄し、Ｎ−メチルスルホニル−Ｌ−バリル−Ｌ−ロイシノール１．０ｇを白色結晶として得た。
【００６５】
ステップ４： Ｎ−メチルスルホニル−Ｌ−バリル−Ｌ−ロイシノール（０．８９ｇ）をジメチルスルホキシド２０ｍｌとジクロロメタン１０ｍｌに溶解しトリエチルアミン（１．８ｇ）を加えた。室温、撹拌下、ここへ三酸化硫黄ピリジン錯体（２．２ｇ）のジメチルスルホキシド溶液１０ｍｌを加え、さらに３０分撹拌した。反応終了後、酢酸エチルを加え、希塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで脱水した。酢酸エチルを減圧留去して、残渣をヘキサン−酢酸エチル混液で洗浄後、さらにイソプロピルアルコールで再結晶してＮ−メチルスルホニル−Ｌ−バリル−Ｌ−ロイシナール（化合物２６）３０ｍｇを白色結晶として得た。
1H-NMR (DMSO-d6 270MHz) δ: 0.85-0.94 (m, 12H), 1.39-1.69 (m, 3H), 1.88-1.99 (m, 1H), 2.83 (s, 3H), 3.65 (t, 1H, J=7.5Hz), 4.15-4.22 (m, 1H), 7.32 (d, 1H, J=8.7Hz), 8.47 (d, 1H, J=7.2Hz), 9.43 (s, 1H).; Anal. (C12H24N2O4S) C, H, N.
【００６６】
（試験例１）
カルパイン阻害活性の測定
μーカルパイン（ナカライテスク社）の活性は文献〔Anal. Biochem. vol. 208, 387-392 (1993）〕に記載された方法に準じて測定した。即ち、０.５ｍｇ／ｍｌカゼイン、５０ｍＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７.４）、２０ｍＭジチオスレイトール、０.０３酵素単位μ−カルパインを含む反応液２００μｌに種々の濃度の被験薬を含むジメチルスルホキシド溶液２.５μｌと２０ｍＭ ＣａＣｌ2水溶液５０μｌを添加し、反応を開始した。３０℃、６０分間反応させた後、反応液１００μｌを別の容器に移し、精製水５０μｌと５０％クマシーブリリアントブルー溶液１００μｌを加えて室温で１５分間放置した後、５９５ｎｍで吸光度を測定した。被験薬を含まないジメチルスルホキシド溶液２.５μｌを添加し、同様に処理した後測定したものをコントロール値、２０ｍＭ ＣａＣｌ2 の代わりに１ｍＭ−ＥＤＴＡを添加したものをブランク値とし、以下の式により阻害率を計算し、５０％阻害に必要な量（ＩＣ50）を求めた。
阻害率＝｛1-(測定値−ブランク値)/(コントロール値−ブランク値) ｝×100その結果を表４に示した。本願の化合物は、優れたカルパイン阻害活性を示すことが分かった。
【００６７】
【表４】
0003999939.tif 000007
【００６８】
（製剤例１）
錠剤
化合物１                      ３０ｍｇ
乳糖                          ８０ｍｇ
デンプン １７ｍｇステアリン酸マグネシウム ３ｍｇ以上の成分を１錠分の材料として、常法により錠剤を成形する。必要に応じて糖衣を付してもよい。
【００６９】
（製剤例２）
注射剤
化合物１４                    ２．５ｍｇ
塩化ナトリウム                ９００ｍｇ
１Ｎ水酸化ナトリウム            適量
注射用蒸留水           全量  １００ｍｌ
以上の成分を常法により混和して注射剤とする。
【００７０】
【発明の効果】
本発明の一般式（Ｉ）で表される化合物は、優れたカルパイン阻害活性を有しているため、筋ジストロフィー、筋萎縮症、心筋梗塞、脳卒中、アルツハイマー病、頭部外傷時の意識障害や運動障害、多発性硬化症、末梢神経のニューロパシー、白内障、炎症、アレルギー、劇症肝炎、高カルシウム血症、乳癌、前立腺癌、前立腺肥大、骨粗鬆症などの治療薬として、あるいは癌の増殖抑制、転移予防薬、血小板の凝集阻害薬として用いることができる。