(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリ（乳酸／グリコール酸）マトリックス、生物活性物質、及び第四級アンモニウム界面活性剤を含む徐放性組成物。
【請求項２】
該界面活性剤の第四級アンモニウムイオンが、アルキルアンモニウム、ベンザルコニウム、及びピリジニウムイオンよりなる群から選択される、請求項１記載の組成物。
【請求項３】
第四級アンモニウムイオンが、アルキルトリメチルアンモニウム、アルキルジメチルベンジルアンモニウム、ならびにアルキルピリジニウム及びアルキルイミダゾリウムイオンよりなる群から選択される、請求項２記載の組成物。
【請求項４】
第四級アンモニウムイオンが、テトラデシルジメチルベンジルアンモニウムとセチルピリジニウムから選択される、請求項３記載の組成物。
【請求項５】
該ポリ（乳酸／グリコール酸）マトリックスのコポリマーが、４，５００〜５０，０００の重量平均分子量を有する、請求項１〜４のいずれか１項記載の組成物。
【請求項６】
該ポリ（乳酸／グリコール酸）マトリックスのコポリマーが、４，５００〜１８，０００の分子量を有する、請求項１〜４のいずれか１項記載の組成物。
【請求項７】
該第四級アンモニウム界面活性剤を、組成物の０．５〜１５重量パーセント含有する、請求項１〜６のいずれか１項記載の組成物。
【請求項８】
該第四級アンモニウム界面活性剤を、組成物の２〜８重量パーセント含有する、請求項１〜６のいずれか１項記載の組成物。
【請求項９】
該生物活性物質を、組成物の０．１〜２０重量パーセント含有する、請求項１〜８のいずれか１項記載の組成物。
【請求項１０】
該生物活性物質を、組成物の１〜１０重量パーセント含有する、請求項１〜８のいずれか１項記載の組成物。
【請求項１１】
該生物活性物質を、組成物の２〜６重量パーセント含有する、請求項１〜８のいずれか１項記載の組成物。
【請求項１２】
該生物活性物質が、ナファレリン、ナプロキセン、及びケトロラクよりなる群から選択される、請求項１〜１１のいずれか１項記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、徐放型デリバリーシステム、特に生物活性物質の徐放のためのポリ（乳酸／グリコール酸）（ＰＬＧＡ）デリバリーシステムに関する。
【０００２】
【発明の実施の形態】
１つの面で本発明は、ＰＬＧＡマトリックス、生物活性物質、及び第四級アンモニウム界面活性剤を含む徐放性組成物であって、ＰＬＧＡマトリックスからの生物活性物質の放出挙動が、第四級アンモニウム界面活性剤の濃度により制御される徐放性組成物を提供するものである。
【０００３】
ポリ（乳酸／グリコール酸）（ＰＬＧＡ）とは、一般に約５０，０００までの分子量を有する、乳酸（Ｌ）とグリコール酸（Ｇ）のコポリマーをいう。好ましくは、Ｌ：Ｇのモル比は、約１００：０〜約２５：７５である。ポリ（乳酸／グリコール酸）コポリマーの重量平均分子量は、好ましくは約４，５００〜約５０，０００、より好ましくは約４，５００〜約１８，０００である。追加のモノマー及び／又は可塑剤や安定化剤などの添加物は、このような任意に加えてもよい要素がＰＬＧＡマトリックスからの生物活性物質の放出に悪影響を及ぼさない限り、存在してもよい。
【０００４】
生物活性物質とは、生体中に導入されると生物学的効果を示す、合成又は天然化合物である。このような物質としては、急性又は慢性症状の治療を目的とした、高分子及び低分子の両方を含む診断用及び治療用物質が挙げられる。この生物活性物質に関する唯一の限定は、ＰＬＧＡマトリックス中に組み込まれた後の目的とする用途に、この物質が十分な効果を示すということである。
【０００５】
第四級アンモニウム界面活性剤は、界面活性を示す一般式Ｒ4 Ｎ+ Ｘ- の、中心の窒素原子が４つの有機基と１つのアニオンに結合している、窒素を含むカチオンの塩である。このような物質は、洗浄剤、湿潤剤、又は乳化剤として類別することができる。第四級アンモニウム界面活性剤では、一般に少なくとも１つのＲ基が、長鎖（炭素原子６個以上）アルキル又はアリール基である。代表的な第四級アンモニウム界面活性剤としては、アルキルアンモニウム、ベンザルコニウム、及びピリジニウム類の界面活性剤が挙げられるが、これらに限定されるわけではない。更に具体的には、第四級アンモニウム界面活性剤は、アルキルトリメチルアンモニウム塩、アルキルジメチルベンジルアンモニウム塩、ならびにアルキルピリジニウム及びアルキルイミダゾリウム塩から選択される。
【０００６】
徐放（又は放出制御）とは、ＰＬＧＡマトリックスから生物活性物質が一定の時間をかけて緩やかに放出されることをいう。初期バースト相（initial burst phase)はあってもよいが、放出は相対的に一定速度で行なわれ、これにより放出される期間にわたって生物活性物質が一定に供給されることが好ましい。放出期間は、生物活性物質とその目的とする用途に応じて、数時間から数ケ月の間で変化させることができる。生物活性物質をマトリックスに過剰に加えて、その結果放出されなかった生物活性物質を無駄にする必要が生じることを回避するため、治療期間にわたるマトリックスからの生物活性物質の累積放出率は相対的に高いことが望ましい。放出の持続時間は、特にマトリックスの量と形態、活性物質の濃度、投与部位、マトリックスの分子量と分子組成、及び本明細書に示されるように、放出挙動調節剤の添加により制御することができる。
【０００７】
生物活性物質と放出調節剤のＰＬＧＡマトリックス中への配合は、当業者に公知の任意の種々の方法により行なうことができる。このような方法としては、米国特許第４，６７５，１８９号と第４，９５４，２９８号に開示されるマイクロカプセル化、本明細書に例示される溶融押出法（melt extrusion processes）、及びJ. Controlled Release, 9:111-122 (1989) に記載される溶融圧縮法（melt pressing)が挙げられるが、これらに限定されるわけではない。マトリックスの形態（例えば、円筒体、ミクロスフェア体、ファイバー）は当然加工法に基づき決まってくるのであって、以降の放出速度に影響を与える；しかし本発明はマトリックスの形態にかかわらず機能することが期待される。
【０００８】
生物活性物質の濃度は、その物質、その目的とする用途（即ち、持続時間の長短）、及び加工の方法に応じて変える。好ましい実施態様において、活性物質の濃度は、約０．１重量％〜約２０重量％、より好ましくは約１重量％〜約１０重量％、最も好ましくは約２重量％〜約６重量％である。第四級アンモニウム界面活性剤の濃度も、その物質、マトリックス、目的とする放出挙動などに応じて変える。好ましい実施態様において、第四級アンモニウム界面活性剤の濃度は、約０．５重量％〜約１５重量％、より好ましくは約２重量％〜約８重量％である。
【０００９】
本発明を例示するために、異なる物理学的特性を有する、以下の３種類の生物活性物質を検討した：中程度の分子量の水溶性ペプチド（分子量＝１，３２２）の酢酸ナファレリン（nafarelin acetate)、低分子量の水不溶性化合物（分子量＝２３０）のナプロキセン、及び低分子量の水溶性化合物（分子量＝３７６）のケトロラクトロメタミン（ketorolac tromethamine）。これらの生物活性物質を、２種類の代表的な第四級アンモニウム界面活性剤（テトラデシルジメチルベンジルアンモニウムクロリド（ＴＤＢＡＣ）とセチルピリジニウムクロリド（ＣＰＣ））と溶融混合した。比較用の生物活性物質含有ＰＬＧＡマトリックスを調製するために、塩化ナトリウムを使用した。
【００１０】
４重量％の濃度の生物活性物質（薬剤）と種々の濃度の界面活性剤を含む円筒体を、有機溶媒を使用することなく溶融押出法により、４，５００〜１８，０００の重量平均分子量を有するＰＬＧＡで調製した。
【００１１】
５０／５０の乳酸／グリコール酸のコポリマー比を有し、各々４，５００、１０，０００及び１８，０００の重量平均分子量を有するＰＬＧＡ（ＰＬＧＡ−４，５００、ＰＬＧＡ−１０，０００及びＰＬＧＡ−１８，０００と略す）を多木化学（株）（Taki Chemical Co, Ltd.）から；テトラデシルジメチルベンジルアンモニウムクロリド（ＴＤＢＡＣ）を日本油脂（株）（Nippon Oil & Fats Co., Ltd.)から；そしてセチルピリジニウムクロリド（ＣＰＣ）を和光純薬工業（Wako Pure Chemical Ind.)から購入した。他の化合物は試薬等級のものであった。
【００１２】
島津（Shimadzu）ＨＰＬＣシステム（６Ａ）〔カラム：ウォーターズ・ウルトラスチラゲル（Waters ultrastyragel）１０2 、１０3 及び１０4 Å；移動相：ＴＨＦ；流速：１．０ml/ 分；波長：２３０nm；標準：ポリスチレン（スペルコ社（Supelco Inc.）、分子量範囲７６０〜９０，０００）〕でＰＬＧＡの分子量を測定した。
【００１３】
【実施例】
実施例１
本実施例は、第四級アンモニウム塩が、ＰＬＧＡマトリックスからの水溶性で中程度の分子量のペプチド薬剤の放出挙動を調節することができることを示すものである。
【００１４】
以下に記載するように、添加物を含まず、２重量％のＴＤＢＡＣ、４重量％のＴＤＢＡＣ、２重量％のＣＰＣ、４重量％のＣＰＣ、２重量％のＮａＣｌ、又は２０重量％のＮａＣｌを含む、ＰＬＧＡ−４，５００中に４重量％の酢酸ナファレリン（シンテックス（Syntex）、パロアルト、カリフォルニア州）を含有する円筒体を調製した。薬剤とＰＬＧＡとの混合物（２００mg）と選択された量の界面活性剤をガラス試験管に入れ、７５℃の溶融温度で加熱して、ポリマーを溶融した。この溶融物を均一に混合し、ポリプロピレンシリンジに充填し、押し出した。直径１．３mmの円筒体を得、長さ５mmに切断し、以下に記載するように高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により、調製工程中のこれらの安定性を確認するために薬剤含有量とＰＬＧＡの分子量を測定した。円筒体からのナファレリンの回収率は９０％以上であり、ＰＬＧＡの分子量はそのまま変わらなかった。
【００１５】
アセトニトリルとリン酸カリウム水溶液の混合溶液（２３：７７）でＰＬＧＡ円筒体からナファレリンを抽出し、ＨＰＬＣ〔カラム：ワコーシル（Wakosil)Ｃ８、４．６mm×２５cm；移動相：０．１M ＮＨ4 Ｈ2 ＰＯ4 −ＣＨ3 ＯＨ−ＣＨ3 ＣＮ（７２：２５：２５）；流速：１．０ml/ 分；波長：２２５nm〕により測定した。
【００１６】
回転ボトル装置を使用して、３７℃で薬剤放出性を試験した。円筒体を０．２M リン酸緩衝液（pH７．０）５mlを含有するガラスボトルに入れた。所定の時間に媒質を新しいものと交換し、上述のものと同じ条件下でＨＰＬＣにより、放出された薬剤を分析した。
【００１７】
図１に、異なる添加物〔各々（Ａ）：ＴＤＢＡＣ、（Ｂ）：ＣＰＣ及び（Ｃ）：塩化ナトリウム〕を含むＰＬＧＡ円筒体（分子量＝４，５００）からのナファレリンのin vitroでの放出挙動を示した。添加物を含まないＰＬＧＡ円筒体からのナファレリン放出は、有意に徐放化され、Higuchi （1963）により示唆されたマトリックス放出メカニズムに従っていた。即ち、放出されたナファレリンの累積百分率は、時間の平方根に比例した（相関係数；ｒ＝０．９８５）。放出試験の２１日間で放出されたナファレリンの全百分率は、４２％にとどまった。しかし、添加物としてＴＤＢＡＣ又はＣＰＣを含むＰＬＧＡ円筒体からのナファレリン放出は、全試験期間についてレベルが下がることなくはるかに一定に近く、使用した添加物の量に依存して速度が速くなった。ＴＤＢＡＣ（２％又は４％）を含む円筒体は、１４日間でナファレリンが完全に放出されたことを示した。一方、ＣＰＣ（２％）を含む円筒体から放出されたナファレリンの百分率は、２１日間で約７５％であった。ＴＤＢＡＣとＣＰＣの分子量は同じくらい（各々３６８と３４０）であるため、ＰＬＧＡマトリックスからのナファレリン放出の速度を速めることに関してＴＤＢＡＣがＣＰＣに勝ると考えられる。ＰＬＧＡ円筒体への塩化ナトリウムの添加（２％又は２０％）は、ナファレリン放出挙動に有意な変化を起こさなかった。
【００１８】
実施例２
本実施例は、第四級アンモニウム塩が、ＰＬＧＡマトリックスからの低分子量で水不溶性の薬剤の放出挙動を調節することができることを示すものである。
【００１９】
以下に記載するように、添加物を含まず、２重量％のＴＤＢＡＣ、４重量％のＴＤＢＡＣ、４重量％のＮａＣｌ、又は８重量％のＮａＣｌを含む、ＰＬＧＡ−１０，０００中に４重量％のナプロキセン（シンテックス（Syntex）、パロアルト、カリフォルニア州）を含有する円筒体を調製した。薬剤とＰＬＧＡとの混合物（２００mg）と選択された量の界面活性剤をガラス試験管に入れ、８０℃の溶融温度で加熱して、ポリマーを溶融した。この溶融物を均一に混合し、ポリプロピレンシリンジに充填し、押し出した。直径１．３mmの円筒体を得、長さ５mmに切断し、以下に記載するように高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により、調製工程中のこれらの安定性を確認するために薬剤含有量とＰＬＧＡの分子量を測定した。円筒体からのナプロキセンの回収率は９０％以上であり、ＰＬＧＡの分子量はそのまま変わらなかった。
【００２０】
アセトニトリルとリン酸カリウム水溶液の混合溶液（２３：７７）でＰＬＧＡ円筒体からナプロキセンを抽出し、ＨＰＬＣ〔カラム：スフェリソルブ（Spherisorb）Ｃ１８、４．６mm×２５cm；移動相：ＣＨ3 ＯＨ−Ｈ2 Ｏ−ＣＨ3 ＣＯＯＨ（５５：４４：１）；流速：０．８ml/ 分；波長：２５４nm〕により測定した。
【００２１】
回転ボトル装置を使用して、３７℃で薬剤放出性を試験した。円筒体を０．２M リン酸緩衝液（pH７．０）５mlを含有するガラスボトルに入れた。所定の時間に媒質を新しいものと交換し、上述のものと同じ条件下でＨＰＬＣにより、放出された薬剤を分析した。
【００２２】
ＴＤＢＡＣと塩化ナトリウムを含むＰＬＧＡ円筒体（分子量＝１０，０００）からのナプロキセンの放出挙動を各々図２（Ａ）と（Ｂ）に示した。図２に示すように、全部の円筒体から９０％以上のナプロキセンが７日間で放出されるのが観察された。しかし、ナプロキセンの放出挙動は、使用した添加物により影響を受けた。添加物を含まないＰＬＧＡ円筒体ではナプロキセンの６４％の初期バースト放出があったが、２％又は４％のＴＤＢＡＣの添加により、ＰＬＧＡ円筒体は、ＴＤＢＡＣ含有量には依存せずに、ナプロキセンを完全に一定に放出することが示された。塩化ナトリウム（４％又は８％）を含むＰＬＧＡ円筒体についてもナプロキセンの高い初期バースト放出が観察されたが、これに続く放出も速くなり、４日間で放出されたナプロキセンの全百分率は約９０％であった。塩化ナトリウムの添加により、低分子量化合物のための水の細孔が形成されたことにより、ＰＬＧＡマトリックスの透過性が増加したと考えられる。
【００２３】
実施例３
本実施例は、第四級アンモニウム界面活性剤が、ＰＬＧＡマトリックスからの低分子量で水溶性の薬剤の放出挙動を調節することができることを示すものである。
【００２４】
以下に記載するように、添加物を含まず、２重量％のＴＤＢＡＣ、４重量％のＴＤＢＡＣ、４重量％のＮａＣｌ、又は８重量％のＮａＣｌを含む、ＰＬＧＡ−１８，０００中に４重量％のケトロラクトロメタミン（シンテックス（Syntex）、パロアルト、カリフォルニア州）を含有する円筒体を調製した。薬剤とＰＬＧＡとの混合物（２００mg）と選択された量の界面活性剤をガラス試験管に入れ、９５℃の溶融温度で加熱して、ポリマーを溶融した。この溶融物を均一に混合し、ポリプロピレンシリンジに充填し、押し出した。直径１．３mmの円筒体を得、長さ５mmに切断し、以下に記載するように高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により、調製工程中のこれらの安定性を確認するために薬剤含有量とＰＬＧＡの分子量を測定した。円筒体からのケトロラクの回収率は９０％以上であり、ＰＬＧＡの分子量はそのまま変わらなかった。
【００２５】
アセトニトリルとリン酸カリウム水溶液の混合溶液（２３：７７）でＰＬＧＡ円筒体からケトロラクを抽出し、ＨＰＬＣ〔カラム：スフェリソルブ（Spherisorb）Ｃ１８、４．６mm×２５cm；移動相：ＣＨ3 ＯＨ−Ｈ2 Ｏ−ＣＨ3 ＣＯＯＨ（５５：４４：１）；流速：０．８ml/ 分；波長：２５４nm〕により測定した。
【００２６】
回転ボトル装置を使用して、３７℃で薬剤放出性を試験した。円筒体を０．２M リン酸緩衝液（pH７．０）５mlを含有するガラスボトルに入れた。所定の時間に媒質を新しいものと交換し、上述のものと同じ条件下でＨＰＬＣにより、放出された薬剤を分析した。
【００２７】
図３に、ＴＤＢＡＣと塩化ナトリウム〔各々（Ａ）：ＴＤＢＡＣと（Ｂ）：塩化ナトリウム〕を含むＰＬＧＡ円筒体（分子量＝１８，０００）からのケトロラクの放出挙動を示した。ケトロラクが低分子量であり、水への高い溶解性を有するにもかかわらず、添加物を含まないＰＬＧＡ円筒体では薬剤がほとんど放出されないラグタイムが観察された。７日間のラグタイムの後、続く７日間でケトロラクの急速な放出が観察され、放出量は約７０％に達した。添加物を含む円筒体では、塩化ナトリウムはケトロラクの放出に影響を与えなかったが、ＴＤＢＡＣの量を増加すると放出挙動におけるラグタイムが短縮され、放出の完了までの放出速度が一定に近づいた。この結果は、高分子量（１８，０００）ＰＬＧＡマトリックスは密につまりすぎて水の適切な透過をさせにくくしていたが、ＴＤＢＡＣの添加によりその透過性が改善されたことを示した。
【００２８】
前記実施例は、説明目的でのみ示すものであり、本発明をいかようにも制限するものと解釈してはならない。
【図面の簡単な説明】
【図１】異なる量の添加物：（Ａ）ＴＤＢＡＣ；（Ｂ）ＣＰＣ；（Ｃ）ＮａＣｌを含むＰＬＧＡ−４，５００円筒体からの酢酸ナファレリンの放出挙動を示す。それぞれの値は、平均±標準偏差（ｎ＝３）で示した。
【図２】異なる量の添加物：（Ａ）ＴＤＢＡＣ；（Ｂ）ＮａＣｌを含むＰＬＧＡ−１０，０００円筒体からのナプロキセンの放出挙動を示す。それぞれの値は、平均±標準偏差（ｎ＝３）で示した。
【図３】異なる量の添加物：（Ａ）ＴＤＢＡＣ；（Ｂ）ＮａＣｌを含むＰＬＧＡ−１８，０００円筒体からのケトロラクトロメタミンの放出挙動を示す。それぞれの値は、平均±標準偏差（ｎ＝３）で示した。
【図１】
0003977463.tif 000002
【図２】
0003977463.tif 000003
【図３】
0003977463.tif 000004