(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の一般式（１）；
【化１】
0003898328.tif 000007
（式中、Ｒ1は炭素数６〜12の芳香族炭化水素基で置換された炭素数１〜５のアルキル基を示し、Ｒ2は分岐状の炭素数３〜12のアルキル基を示し、Ｒ3はヘテロ原子として窒素原子を1個有する5〜14員の単環又は縮合環からなる複素環式基で置換したメチル基を示す）
で表されるホスホン酸誘導体又はその塩を含有する皮膚老化予防剤。
【請求項２】
Ｒ3がインドリルメチル基である請求項１記載の皮膚老化予防剤。
【請求項３】
Ｒ1がフェニル基で置換された炭素数１〜５のアルキル基である請求項２記載の皮膚老化予防剤。
【請求項４】
Ｒ2がイソブチル基である請求項２又は３記載の皮膚老化予防剤。
【請求項５】
Ｒ1が２−フェニルエチル基であり、Ｒ2がイソブチル基であり、Ｒ3がインドリルメチル基である請求項１記載の皮膚老化予防剤。
【請求項６】
皮膚のしわ予防・改善剤である請求項１〜５のいずれか１項記載の皮膚老化予防剤。
【請求項７】
投与形態が、皮膚外用剤である請求項１〜６のいずれか１項記載の皮膚老化予防剤。
【請求項８】
さらに、紫外線吸収剤又は紫外線防禦剤を含有するものである請求項１〜７のいずれか１項記載の皮膚老化予防剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は皮膚老化予防剤に関し、さらに詳細には皮膚の老化によって生じるしわ、たるみの発生やはりの減少などの外観変化を防止又は改善することのできる皮膚老化予防剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
しわ、たるみの発生、はりの減少などの皮膚の形態的変化については、充分に研究が進んでいるとはいえないのが現状である。例えばコラーゲンを配合した化粧料が用いられているが、充分なしわ発生防止効果は得られていない。
【０００３】
しわなどの発生については、特に紫外線との関連性が強いとされており、紫外線照射により生じた皮膚の老化を光老化と称して、種々研究されている。しかし、未だ紫外線吸収剤又は紫外線防禦剤に代わる化粧料が開発されていないのが現状である。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
従って、本発明の目的はしわに代表される皮膚の老化によって生じる症状を予防又は改善することのできる薬剤又は化粧料を提供することにある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
そこで、本発明者らは、しわの形成とエラスチンとの関係に着目し、種々検討してきたところ、従来、皮膚の老化、特に光老化によって真皮のエラスチンは顕著に増加する〔例えば、J. Inrest. Dermatol., 82：587-590(1984)、同91：158-161(1988)、同103：182-186(1994)〕といわれていることから、エラスチンを減少させることがしわの防止につながると考えられてきた。一方、エラスチン分解酵素としては通常好中球由来のものが用いられており、該好中球由来エラスチン分解酵素に対する阻害剤を用いた実験では、１ＭＥＤ以下の紫外線によるしわの形成に対する防止効果はまたく認められなかった。そこで、この点に関し、研究をした結果、エラスチン分解酵素にはセリンプロテアーゼに属するものと金属プロテアーゼに属するものとがあるが、そのうち、金属依存型のエラスチン分解酵素に対する阻害剤を投与した場合にのみしわの発生が有意に防止できることを見出した。そしてさらに研究を続けた結果、下記のホスホン酸誘導体が優れた金属依存型エラスチン分解酵素阻害作用を有し、かつしわやたるみなどの皮膚の老化により生じる変化を有効に予防し得ることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００６】
すなわち、本発明は次の一般式（１）
【０００７】
【化２】
0003898328.tif 000002
【０００８】
（式中、Ｒ1は炭素数６〜12の芳香族炭化水素基で置換された炭素数１〜５のアルキル基を示し、Ｒ2は分岐状の炭素数３〜12のアルキル基を示し、Ｒ3はヘテロ原子として窒素原子を1個有する5〜14員の単環又は縮合環からなる複素環式基で置換したメチル基を示す）
で表されるホスホン酸誘導体又はその塩を含有する皮膚老化予防剤を提供するものである。
【０００９】
【発明の実施の形態】
上記式（１）中、Ｒ1 、Ｒ2 及びＲ3 で示される置換基を有していてもよい炭化水素基は、飽和炭化水素基及び不飽和炭化水素基のいずれでもよく、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、環状アルキル基、環状アルケニル基、芳香族炭化水素基、アラルキル基等が挙げられる。これらの炭化水素基は、炭素数が１〜２４のもの、特に１〜１８のものが好ましい。
【００１０】
前記炭化水素基のうち、アルキル基、環状アルキル基、芳香族炭化水素基又はアラルキル基が好ましい。ここで、アルキル基は直鎖状又は分枝状の炭素数１〜１２のアルキル基が好ましく、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、イソアミル基、ｔｅｒｔ−アミル基、ｎ−ヘキシル基、ｎ−オクチル基、ｎ−デシル基、ｎ−ドデシル基などが挙げられる。環状アルキル基は５〜７員環の脂環状アルキル基が好ましく、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基等が挙げられる。芳香族炭化水素基は、フェニル基、ナフチル基等の炭素数６〜１４の芳香族炭化水素基が好ましい。アラルキル基は炭素数６〜１２の芳香族炭化水素基で置換された炭素数１〜５のアルキル基が好ましく、例えば、フェニルメチル（＝ベンジル）基、２−フェニルエチル（＝フェネチル）基、１−ナフチルメチル基、２−ナフチルメチル基、２−（１−ナフチル）エチル基、２−（２−ナフチル）エチル基、３−フェニルプロピル基などが挙げられる。
【００１１】
また、これらの炭化水素基に置換し得る基は、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、アルコキシル基、アシル基、保護されていてもよいアミノ基、複素環式基等が挙げられる。ここでハロゲン原子は塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子等が挙げられる。アルコキシル基は、炭素数１〜１２のアルコキシル基が好ましく、例えばメトキシ基、エトキシ基、イソプロポキシ基等が挙げられる。アシル基は、炭素数１〜１２のアルカノイル基が好ましく、例えばアセチル基、プロピオニル基、ブチリル等が挙げられる。保護されていてもよいアミノ基は、アミノ基、アシルアミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基等が挙げられる。複素環式基は、ヘテロ原子として窒素原子、酸素原子及び／又は硫黄原子を１〜３個有する５〜１４員の単環又は縮合環の基が好ましく、例えばピリジル基、ピリダジニル基、フリル基、チエニル基、インドリル基、チアゾリル基、イミダゾリル基、ベンゾフリル基、ベンゾチエニル基等が挙げられる。
【００１２】
糖残基は、単糖残基又はオリゴ糖残基が挙げられる。またこれらの糖残基に置換し得る基は、アルキル基、アシル基、アラルキル基等が挙げられる。ここでアルキル基、アシル基、アラルキル基は前記と同様のものが挙げられる。
【００１３】
これらのホスホン酸誘導体（１）の具体例は、次の化合物が挙げられる。
【００１４】
【化３】
0003898328.tif 000003
【００１５】
ホスホン酸誘導体（１）の塩は、ナトリウム塩、カリウム塩のアルカリ金属塩、カルシウム塩、マグネシウム塩等のアルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、アルキルアミン塩等が挙げられる。また、ホスホン酸誘導体（１）は、水和物としても使用できる。
【００１６】
ホスホン酸誘導体（１）又はその塩は、例えば特開平５−１０５６９８号公報に記載の方法によって製造することができる。
【００１７】
かかるホスホン酸誘導体（１）又はその塩は、優れた金属依存型エラスチン分解酵素阻害作用を有し、皮膚老化予防剤の成分として有用である。
【００１８】
本発明の皮膚老化予防剤は、皮膚の老化により生じる形態的変化、例えばしわ、たるみの発生やはりの減少に対して予防又は改善作用を有するが、特にしわに対する予防又は改善作用が優れている。
【００１９】
本発明の皮膚老化予防剤の投与形態は皮膚外用剤、経口剤などが挙げられるが、皮膚外用剤とするのが好ましい。皮膚外用剤とする場合のホスホン酸誘導体（１）又はその塩の配合量は、特に制限されないが、全組成に対し０．００００１〜１０重量％、特に０．０００１〜５重量％とするのが好ましい。
【００２０】
本発明の皮膚老化予防剤には、ホスホン酸誘導体（１）又はその塩以外に紫外線吸収剤、紫外線防禦剤、コラーゲン、保湿剤、抗炎症剤、抗酸化剤等の成分を配合することができるが、特に紫外線吸収剤及び／又は紫外線防禦剤を配合するのが好ましい。
【００２１】
ここで、紫外線吸収剤は、ｐ−メトキシ桂皮酸２−エチルヘキシル、４−ｔ−ブチル−４′−メトキシジベンゾイルメタン等が挙げられる。紫外線防禦剤は、酸化チタン、酸化亜鉛等が挙げられる。保湿剤は、ヒアルロン酸、セラミド類等が挙げられる。また抗炎症剤は、アラントイン、グリチルリチン等が挙げられる。
【００２２】
これらの紫外線吸収剤、紫外線防禦剤、コラーゲン、保湿剤、抗炎症剤、抗酸化剤等は、本発明の皮膚老化予防剤中に０．００１〜９９重量％、特に０．００１〜５０重量％配合するのが好ましい。
【００２３】
本発明の皮膚老化予防剤の具体的な剤型は、クリーム、軟膏、ゲル、ローション、溶液、パック、ファンデーション等が挙げられ、これらの剤型とするにあたって各種油剤、界面活性剤、ゲル化剤、防腐剤、酸化防止剤、溶剤、アルコール、キレート剤、増粘剤、色素、香料、水等を配合することができる。
【００２４】
【実施例】
次に実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。
【００２５】
実施例１    培養ヒト線維芽細胞のエラスターゼ活性抑制試験
大日本製薬社より市販されている正常ヒト線維芽細胞を１０％牛胎児血清を含むＤＭＥ培地で継代培養し、本試験に供した。ラバーポリスマンを用いてシャーレからはがした細胞を、生理食塩水中に浮遊させ、低速の遠心分離器を使って細胞を集め、生理食塩水で、３回洗浄した。細胞を０．１％  トリトン  Ｘ−１００／０．２Ｍ  トリス−塩酸緩衝液（pH８．０）に浮遊させ、超音波破砕し、酵素液とした。
酵素活性測定の基質には１２５mM  Ｎ−スクシニル  Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｐ−ニトロアニリドを用い、酵素液＋サンプル１００μｌに１μｌ添加し、３７℃で１時間反応させ、５μｌの酢酸を加えて反応を停止させた。生成したニトロアニリン量は分光光度計で、４０５nmにおける吸光度を測定した。
サンプル濃度を変えて、酵素活性抑制率をプロットし、５０％抑制濃度（ＩＣ50）を求めた。結果を表１に示す。
【００２６】
【表１】
0003898328.tif 000004
【００２７】
表１から明らかなように好中球由来のセリンプロテアーゼ型エラスターゼ阻害剤として知られている化合物Ａは、金属依存型エラスターゼであるヒト線維芽細胞由来の酵素に対して抑制作用を示さなかった。これに対し、化合物１及び２は金属依存型エラスターゼを強力に抑制した。
【００２８】
実施例２
ヘアレスマウス（ＨＲ／ＩＣＲ，実験開始時６週齢）の背部に、健康線用ランプ（東芝製、ＳＥ２０）で、１回の照射量が１ＭＥＤ以下となるように調節してＵＶ−Ｂ光の照射を行い、直後にサンプルを含む８０％エタノール溶液を１００μｌを塗布した。この作業を２０週間にわたって行った。照射エネルギー量はＵＶ−Ｒａｄｉｏｍｅｔｅｒ（ＴＯＫＹＯＯＰＴＩＣＡＬ社製、ＵＶＲ−３０５／３６５Ｄ）を用いて測定した。また、コントロールとして８０％エタノールのみを塗布したものをサンプルと同様に試験した。試験終了後、形成されたしわの度数を肉眼により下記の基準（しわ指数）で評価した。
【００２９】
＜しわ指数＞
０：しわが無形成
１：しわがかすかに形成
２：しわが微量形成
３：しわが若干形成
４：しわが強固に形成
【００３０】
【表２】
0003898328.tif 000005
【００３１】
表２から明らかなように、化合物Ａはしわ形成抑制作用を示さなかったが、化合物１及び２は優れたしわ形成抑制作用を示した。
【００３２】
実施例３
皮膚老化予防剤のはりに及ぼす効果を検討するために、以下の方法で皮膚の弾力性を機械的に測定した。（方法）３週令のＳＤ系雄性ラットの両足底を３群に分け、５mM化合物２塗布群、８０％エタノール（溶媒）塗布群、無処理群とした。健康線用ランプ（東芝製ＳＥ２０）を用いて、ＵＶ−Ｂ（１ＭＥＤ以下）照射を特定時刻に１日おきに週３回、６週間行った。塗布は、照射直後及び非照射日は照射日と同時刻に、毎日１０μｌ／片足底行った。
皮膚の弾力性測定はキュートメーターＳＥＳ５７５（クレージュ・カザカ社製）を用い、５００mbで３秒間吸引後、解放し、その後３秒間の計６秒間の変位を測定した。測定は１足底に対して５回ずつ行い、Ｕｅ（瞬間弾性変位）及びＵｆ（最終変位）値を求めた。Ｕｅ値は弾力性の指標、Ｕｆ値は柔軟性の指標であり、いずれも紫外線老化により低下する。結果を表３に示す。
【００３３】
【表３】
0003898328.tif 000006
【００３４】
表３から明らかなように、エラスターゼ阻害活性を有する化合物２は紫外線Ｂによる皮膚の弾力性低下を強く予防する効果が認められ、皮膚のはりを保持することが可能である。
【００３５】
次に、ホスホン酸誘導体（１）を配合した、皮膚老化防止用の外用剤の処方例を示す。
【００３６】
実施例４    クリーム
（成分）                                                （重量％）
化合物１                                                ２
スクワラン                                              ５
ステアリン酸                                            ２
グリセリンモノステアレート                            １０
エタノール                                              ２
パラオキシ安息香酸メチル                                ０．２
セタノール                                              ２
オリーブ油                                              ４
ワセリン                                                ５
グリチルリチン酸                                        １
ビタミンＥ                                              ０．５
セラミド                                                ５
香料                                                  残量
色素                                                  微量
精製水                                                残量      
計                                                １００．０
【００３７】
実施例５    スキンローション
（成分）                                                （重量％）
化合物２                                                １
グリセリンモノステアレート                              １
エタノール                                            １５
プロピレングリコール                                    ４
イソプロピルパルミテート                                ３
ラノリン                                                １
パラオキシ安息香酸メチル                                ０．１
セラミド                                                １
香料                                                  微量
色素                                                  微量
精製水                                                残量      
計                                                １００．０
【００３８】
実施例６    パック剤
（成分）                                                （重量％）
化合物１                                                ３
ポリビニルアルコール                                  ２０
グリセリン                                              ５
エタノール                                            １６
香料                                                  微量
色素                                                  微量
精製水                                                残量      
計                                                １００．０
【００３９】
実施例７    ファンデーション
（成分）                                                （重量％）
化合物１                                                １
球状シリカビース                                      ２０
シリカ被覆セリサイト                                  ４５
超微粒子酸化チタン                                    １０
黄酸化鉄                                                ３
タルク                                                  ５
マイカ                                                  ５
ベンガラ                                                １
グンジョウ                                              １
パラベン                                                ０．２
流動パラフィン                                          ４．８
スクワラン                                              ４      
計                                                １００．０
【００４０】
【発明の効果】
本発明によれば、しわ、たるみの発生、はりの減少などの皮膚の老化に伴なう形態的変化を防止又は改善することができる。